FI90777B

FI90777B - Menetelmä sytostaattisesti aktiivisten -rodomysinonijohdannaisten valmistamiseksi

Info

Publication number: FI90777B
Application number: FI881610A
Authority: FI
Inventors: Peter Hermentin; Cenek Kolar; Manfred Gerken; Hans Peter Kraemer; Dieter Hoffmann
Original assignee: Behringwerke Ag
Priority date: 1987-04-11
Filing date: 1988-04-07
Publication date: 1993-12-15
Also published as: DK192388A; EP0286926A2; FI881610A; AU614954B2; JP2672965B2; ES2067452T3; KR880012624A; FI881610A0; ATE116991T1; FI90777C; EP0286926B1; EP0286926A3; GR3015231T3; DE3712350A1; DK192388D0; PT87193B; DE3852711D1; AU1446888A; CA1340690C; JPS63267775A

Description

90777

Menetelmä sytostaattisesti aktiivisten β-rodomysinonijohdannaisten valmistamiseksi

Keksintö koskee menetelmää uusien sytostaattisesti 5 aktiivisten yhdisteiden valmistamiseksi, joilla on kaava (I) H 0 HO OR4 10 OH 0 HO OR2 ja niiden epäorgaanisten ja orgaanisten happojen kanssa 15 muodostamien suolojen valmistamiseksi, jossa kaavassa 2 R on vety tai radikaali, jolla on kaava (II) ch3 20 ..<f> r7^S8 4

ja R on vety tai kaavan II mukainen radikaali, ja kaa-25 vassa II

R^ on vety, hydroksi tai bentsyylioksi, R7 on NH2, NH-asyyli (C1-C8), N(alkyyli)2 (C1-C8), NH(CH^CN) tai hydroksi ja 8 ^ R on vety tai jodi, 30 ja kaavan II mukainen radikaali kuuluu hiilihydraattien L- 2 4 sarjaan, lukuunottamatta yhdisteitä, joissa R = R = H, 4 2 R = H ja R = a-L-danuosaminyyli tai a-L-rodosaminyyli 2 4 tai 4'-asyyli-a-L-rodosaminyyli, R = R = a-L-rodosami- 2 4 nyyli tai 4'-asyyli-α-L-rodosaminyyli tai R * H ja R 35 α-L-rodosaminyyli tai a-L-daunosaminyyli.

2

Monilla antrasykliineillä on sytostaattista vaikutusta ja joitakin niistä käytetään kasvaimien hoitoon.

β-rodomysiinijohdannaisia tunnetaan julkaisuista Naturwissenschaft 37 (1950) s. 492 ja 42 (1955) s. 154, 5 US-patenttijulkaisusta 4 612 371 ja suomalaisesta patenttihakemuksesta 875353. Tällaisia tunnettuja yhdisteitä ovat β-rodomysiinit (kaavan I mukaiset rakenteet), joissa asema 7 ja asema 10 ovat liittyneet L-rodosamiiniin a-gly-kosidisesti tai joissa vain asema 7 on liittynyt a-glyko-10 sidisesti L-rodosamiiniin tai L-daunosamiiniin, samoin kuin B-iso-rodomysiinit (muuten kaavan I mukaiset rakenteet, mutta tetrasyklisen rungon 1-asemassa on H:n sijasta OH), joissa asema 7 ja asema 10 ovat kumpikin liittyneet α-L-rodosamiiniin, samoin kuin näiden L-rodosamiiniglyko-15 sidien fotolyyttiset mono-demetylointituotteet sekä B-ro-domysinoni, jossa on oligosakkaridisivuketjut asemassa 7 tai 10 tai asemissa 7 ja 10 ja joita nimitetään sytoro-diineiksi. Aikakauslehdestä Journal of Antibiotics 33 (1980) s. 1331 on tunnettua sellaisen trisakkaridin mik-20 robiaalinen glykosidointi, joka koostuu L-rodosamiinista, L-desoksifukoosista ja sineruloosi A:sta, B-rodomysinonin 7-asemassa.

Tähän asti ei ole kuvattu mitään kemiallista glyko-sidointimenetelmää β-rodomysinonille. B-rodomysinonin 25 (kaavan I mukainen rakenne, jossa R3 = H) A-renkaassa olevien kolmen hydroksyyliryhmän moninkertaisten glykosidoin-timahdollisuuksien johdosta ovat selektiiviset glykosi-doinnit paljon vaikeampia.

Havaittiin, että B-rodomysinoni on glykosidoitavis-30 sa selektiivisesti käyttämällä määrättyjä suojaryhmiä ase missa 7, 9 ja 10 ja näin saaduilla glykosideilla, erityisesti 7-0-a-L-akosaminyyli-B-rodomysinonilla ja 7-0-(3'-N,N-dimetyyli-a-L-akosaminyyli)-B-rodomysinonilla on sytostaattista tehoa, joka on verrattavissa adriamysiinin te-35 hoon.

90777 3

Esillä olevan keksinnön tehtävänä oli siten aikaansaada biologisen menetelmän avulla saatavista B-rodomysi-noneista uusia mono- ja bis-glykosyyli-B-rodomysinoneja, joille on ominaista hyvä sytostaattinen vaikutus ja jotka 5 soveltuvat sen vuoksi kasvaimien käsittelyyn.

Tämä tehtävä ratkaistaan keksinnön mukaisesti valmistamalla edellä määriteltyjä kaavan I mukaisia yhdisteitä seuraavassa kuvatulla menetelmällä, joka on tämän keksinnön kohteena ja jolle on tunnusomaista, että 10 a) yhdiste, jolla on kaava

O HO OH

15 °H

OH 0 HO OH

suojataan selektiivisesti 7- ja 9-asemissa rakenteella 20 (III) \

X III

jossa X on hiilihydraattikemiassa tavallinen kaksihampai-25 nen suojaryhmä, edullisesti alkyyliboronyyli, fenyylibo-ronyyli, orto-alkyyli-karboksyylihapon alkyyliesteri, edullisesti ortomuurahaishapon metyyliesteri tai orto-etikkahapon etyyliesteri, ketaali tai asetaali, edullisesti isopropylideeni tai bentsylideeni, minkä jälkeen 30 bx) glykosidoidaan 10-asema reaktiolla funktiona-

lisoidun hiilihydraatin kanssa, jolla on yleinen kaava V tai VI

CH3 CH3 .*0

·?Ή· v ^ VI

4 joissa

O

R merkitsee samaa kuin edellä, R^1 on vety, suojattu hydroksi tai bentsyylioksi, R^ on NH-asyyli (C1-C8), Nfalkyyli^ (C1-C8) tai suojattu 5 hydroksi, ja g R on hapen välityksellä sitoutunut asyyli, kuten ali-faattinen asyylioksi (C1-C8), bentsoyylioksi tai substi-tuoitu bentsoyylioksi, tai b2) suojataan 10-asemassa oleva hydroksiryhmä 10 asyyli-, trimetyylisilyyli- tai tetrahydropyranyyliryh- mällä, c) poistetaan suojaryhmä 7- ja 9-asemista, d) glykosidoidaan 7-asema reaktiolla edellä määritellyn kaavan V tai VI mukaisen funktionalisoidun hiili- 15 hydraatin kanssa, e) poistetaan 10-asemassa oleva asyyli-, trimetyylisilyyli- tai tetrahydropyranyyliryhmä, f) vaiheessa e saadun yhdisteen 10-asema glykosidoidaan reaktiolla edellä määritellyn kaavan V tai VI mu- 20 kaisen funktionalisoidun hiilihydraatin kanssa, ja 6 Σ 71 g) mikäli R ja/tai R' on suojattu hydroksi, poistetaan tämän ryhmän suojaus, jolloin haluttaessa kaavan I mukainen yhdiste, jossa on kaavan II mukainen radikaali ainoastaan 7-asemassa, suo-25 ritetaan edellä mainitut menetelmävaiheet a, b2, c, d, e ja g; haluttaessa kaavan I mukainen yhdiste, jossa on kaavan II mukainen radikaali ainoastaan 10-asemassa, suoritetaan edellä mainitut menetelmävaiheet a, b2, cjag; ja haluttaessa kaavan I mukainen yhdiste, jossa on kaavan II mukai-30 nen radikaali sekä 7- että 10-asemassa, suoritetaan edellä mainitut menetelmävaiheet a, bx, c, d ja g tai menetelmä-vaiheet a, b2, c, d, e, f ja g; ja haluttaessa 7 hydrolysoidaan NH-asyyliryhmä R kaavan I mukaisen 7 35 yhdisteen saamiseksi, jossa R on ja 7 5 90777 alkyloidaan NH9-ryhmä R kaavan I mukaisen yhdis-z 7 teen saamiseksi, jossa R on N(alkyyli)9; tai 7 Δ muutetaan Nl^-ryhmä R reaktiolla jodiasetoninit-5 rillin tai bromiasetonitriilin kanssa sopivan emäksen läsnäollessa ryhmäksi NHfCI^CN).

Edellä mainitussa menetelmävaiheessa a lähtöaine saatetaan reagoimaan sopivassa orgaanisessa liuottimessa, kuten tolueenissa tai DMF:ssa tai näiden seoksissa, käytit) täen katalysaattoria, kuten mineraali-, karboksyyli- tai sulfonihappoa, lämpötilassa, joka on 0 °C:n ja liuottimen kiehumislämpötilan välissä, boronihapon, kuten fenyylibo-ronihapon, tai ketonin, kuten asetonin, tai ketaalin, kuten 2,2-dimetoksipropaanin, tai asetaalin, kuten bentsal-15 dehydidimetyyliasetaalin kanssa samalla kun mahdollisesti lisätään vedensitojaa, kuten 4A-molekyyliseulaa, jolloin saadaan vastaava yhdiste, jossa 7- ja 9-asemien happiatomit ovat liittyneet toisiinsa kaavan III mukaisella liitoksella. Saatu yhdiste eristetään suodattamalla ja pois-20 tamalla liuotin ja kiteytetään orgaanisesta liuottimesta, kuten petrolieetteristä. Tämän jälkeen saadun yhdisteen 10-asemassa oleva hydroksiryhmä glykosidoidaan edellä mainitulla menetelmällä bx tai suojataan edellä mainitulla menetelmällä b2.

25 10-asemassa olevan hydroksiryhmän suojaus menetel mällä b2 voidaan suorittaa asyloimalla karboksyylihappo-anhydridillä, kuten etikkahappoanhydridillä, trifluori-etikkahappoanhydridillä tai fenyylikarboksyylihappoanhyd-ridillä tai karboksyylihappohalogenidilla tai reaktiolla 30 tri f luorimetaanisulfonihappo-trimetyylisilyyliesterin kanssa sopivassa orgaanisessa liuottimessa, kuten kloroformissa, dikloorimetaanissa tai tolueenissa tai näiden seoksissa, lämpötilassa, joka on -40 °C:n ja liuottimen kiehumispisteen välillä, ja samalla kun läsnä on emästä, 35 kuten trietyyliamiinia tai pyridiiniä, jolloin saadaan 6 vastaava yhdiste, jossa 7- ja 9-asemien happiatomit ovat liittyneet toisiinsa kaavan III mukaisella liitoksella ja 10-aseman happiatomiin on liittynyt asyyli tai trimetyyli-silyyli.

5 10-asemassa olevan hydroksiryhmän suojaus tetrahyd- ropyranyyliryhmällä (menetelmässä b2) voidaan suorittaa saattamalla vaiheessa a saatu yhdiste reagoimaan 3,4-di-hydro-2H-pyraanin kanssa sopivassa orgaanisessa liuotti-messa, kuten kloroformissa, dikloorimetaanissa, DMF:ssä 10 tai tolueenissa, katalysaattorin, kuten para-tolueenisul-fonihapon, ja kuivausaineen, kuten 4A-molekyyliseulan läsnäollessa, lämpötilassa, joka on -30 °C:n ja liuottimen kiehumislämpötilan välillä, jolloin syntyy vastaava yhdiste, jossa 7- ja 9-asemien happiatomit ovat liittyneet toi-15 siinsa kaavan III mukaisella liitoksella ja 10-aseman happiatomiin on liittynyt tetrahydropyranyyliryhmä.

Menetelmässä bx saatetaan vaiheessa a saatu yhdiste reagoimaan kaavan V tai VI mukaisen yhdisteen. Näissä yh-

disteissä suojattu hydroksiryhmä R° tai vastaavasti R

20 voi olla alifaattinen asyylioksi (C1-C8), bentsoyylioksi tai substituoitu bentsoyylioksi, kuten para-nitrobentso- yylioksi, alkyylioksi (C1-C8), allyylioksi, bentsyylioksi tai substituoitu bentsyylioksi. Substituoitu bentsyyliok-g siryhmä R kaavan V mukaisessa yhdisteessä voi olla esi-25 merkiksi para-nitrobentsoyylioksi. Reaktio saatetaan ta pahtumaan käyttäen mukana orgaanista liuotinta, kuten kloroformia, dikloorimetaania, tolueenia, eetteriä, DMF, asetonia, asetonitrliliä tai nitrometaania tai näiden seoksia, katalysaattoria, kuten para-tolueenisulfonihappoa tai 30 trifluorimetaanisulfonihappo-trialkyylisilyyliesteriä ja

mahdollisesti haponsitojaa ja kuivausainetta, kuten mole-kyyliseulaa, välillä -70 °C - +30 °C olevassa reaktiolämpö-tilassa suojakaasuatmosfäärin, kuten typen tai argonin alaisena, jolloin saadaan vastaava yhdiste, jossa 7- ja 35 9-asemien happiatomit ovat liittyneet toisiinsa kaavan III

il 90777 7 mukaisella liitoksella ja 10-aseman happiatomiin on liittynyt kaavan II mukainen rakenne, jossa symboleilla

fi Q

R - R on edellä mainitut merkitykset lukuunottamatta merkityksiä hydroksi, NH2, NH(CH2CN) ja NH(CH2CN).

5 Menetelmävaiheessa c poistetaan suojaus (rakenne III) vaiheessa ba tai vastaavasti b2 saadun yhdisteen 7- ja 9-asemista. Suojaus voidaan poistaa siten, että tämä yhdiste saatetaan reagoimaan sopivassa orgaanisessa liuotti-messa, kuten kloroformissa, dikloorimetaanissa, DMF:ssä 10 tolueenissa tai metanolissa katalysaattorin, kuten karb-oksyylihapon tai para-tolueenisulfonihapon laimeiden vesiliuosten, ja mahdollisesti diolin, kuten 2-metyyli-2,4--pentaanidiolin kanssa lämpätilassa, joka on 0 °C:n ja liuottimen kiehumislämpötilan välissä, jolloin saadaan yh-15 diste, jonka 7- ja 9-asemissa on vapaa hydroksiryhmä.

Menetelmävaihe d, so. 7-aseman glykosidointi kaavan V tai VI mukaisella yhdisteellä, voidaan suorittaa olosuhteissa, jotka on kuvattu edellä menetelmävaiheelle ba. Tämä glykosidointi voidaan suorittaa myös reaktiolla kaavan VI

20 mukaisen yhdisteen kanssa, jossa R®1 on asyylioksi, alkyy- 71 lioksi, allyylioksi tai bentsyylioksi ja R on asyylioksi, alkyylioksi, allyylioksi, bentsyylioksi, NH-asyyli tai N(alkyyli)2, orgaanisen liuottimen, kuten kloroformin, dikloorimetaanin, tolueenin, eetterin, asetonin ja aseto-25 nitriilin tai näiden seosten läsnäollessa N-jodisukkinimi-din ja mahdollisesti kuivausaineen, kuten molekyyliseulan avulla, välillä -40 °C - +40 °C olevassa lämpötilassa suo-jakaasuatmosfäärin, kuten typen tai argonin, alaisena,

O

jolloin saadaan yhdiste, jossa R on jodi.

30 Menetelmävaiheessa e asyyli- tai tetrahydropyranyy- liryhmä voidaan poistaa 10-asemasta hiilihydraattikemiassa tavallisissa olosuhteissa selektiivisesti sinänsä tunnetulla tavalla epäorgaanisten tai orgaanisten emästen, kuten alkalimetalli- tai maa-alkalimetallihydroksidien, nat-35 riumkarbonaatin ja trietyyliamiinin avulla liuottimessa, kuten vedessä, metanolissa, etanolissa tai THF:ssä tai 8 näiden seoksissa, jolloin syntyy vastaava yhdiste, jossa 4 R on vety. Trimetyylisilyyliryhmä poistetaan reaktiolla tetrabutyyliammoniumfluoridin kanssa orgaanisessa liuot-timessa, kuten THF:ssä, dietyylieetterissä, dioksaanissa 5 tai näiden seoksissa lämpötiloissa, jotka ovat -40 °C:n ja liuottimen kiehumislämpötilan välillä.

Menetelmävaihe f, so. vaiheessa e saadun yhdisteen 10-asema glykosidoidaan samoin kuin edellä on kuvattu me-netelmävaiheen bj osalta.

10 Menetelmävaiheessa g suoritettava hydroksiryhmän suojauksen poisto voidaan suorittaa samoin kuin edellä esitettiin asyyli- tai tetrahydropyranyyliryhmän poistamisen osalta vaiheessa e.

7

Saatu kaavan I mukainen yhdiste, jossa R on 15 NH-asyyli, voidaan haluttaessa muuttaa kaavan I mukaiseksi 7 yhdisteeksi, jossa R on NI^, poistamalla asyyliryhmä me-netelmävaiheen e yhteydessä kuvatulla tavalla. Edelleen 7 kaavan I mukainen yhdiste, jossa R on NR-, voidaan muut- ^ 7 taa kaavan I mukaiseksi yhdisteeksi, jossa R on N(alkyy-20 li>2* sinänsä tunnetuissa pelkistävän aminoinnin olosuhteissa, tai se voidaan muuttaa kaavan I mukaiseksi yhdis- 7 teeksi, jossa R on ryhmä NHiCf^CN), reaktiolla jodiaseto-nitriilin tai bromiasetonitriilin kanssa sopivassa liuot-timessa, esimerkiksi dimetyyliformamidissa, sopivan emäk-25 sen, kuten trietyyliamiinin läsnäollessa.

7

Kaavan I mukaiset yhdisteet, joissa R on NI^, N(alkyyli>2 (C1-C8) tai NHiCi^CN), voidaan muuttaa suoloiksi epäorgaanisen tai orgaanisen hapon kanssa.

Kaavan I mukaisia yhdisteitä tai niiden suoloja 30 epäorgaanisten happojen, kuten HCl:n, tai orgaanisten happojen, kuten glutamiinihapon tai glukoronihapon kanssa voidaan käyttää aktiivisina aineina lääkkeissä.

Tällaisesta yhdisteestä voidaan valmistaa yhdessä tavallisten farmaseuttisten valmistus- ja/tai laimennus-35 aineiden kanssa lääkeainetta, jota voidaan käyttää erityisesti syövän hoidossa.

I) 90777 9

Annostus- ja käyttötapa vastaa tällöin oleellisesti niitä, joita käytetään tunnetuille antrasykliineille, kuten adriamysiinille, daunomysiinille tai aklasinomysiinil-le.

5 Tällä tavoin valmistetut lääkeaineet voivat sisäl tää lisäksi vielä muita vailkutusaineita, sikäli kuin nämä yhdessä keksinnön mukaisesti valmistettujen yhdisteiden kanssa eivät aikaansaa mitään ei-toivottuja sivuvaikutuksia.

10 Keksinnön mukaisesti valmistettujen yhdisteiden sytostaattista vaikutusta tutkittiin käyttämällä hiiren L1210-leukemiasoluja. Tätä tarkoitusta varten seurattiin L1210-leukemiasolujen pesäkkeenmuodostusta agarlevyillä. Tämän menetelmän tarkoituksena on osoittaa koeaineiden 15 vaikutusta solujen kasvukäyttäytyrniseen yhden tunnin pituisen tai useampia sukupolvia käsittävän inkuboinnin jälkeen. Solusykliajan ollessa 10 - 12 tuntia tällöin tarkkailtiin 7 päivän pituisena koeaikana noin 14 toisiaan seuraavaa sukupolvea. Keksinnön mukaisesti valmistetut 20 sytostaattisesti vaikuttavat aineet aikaansaavat tässä kokeessa havaittavan pesäkeluvun pienenemisen käsittelemättömään vertailunäytteeseen verrattuna. Koemenetelmän yksityiskohdat käyvät ilmi seuraavasta menettelytavasta pesäkkeenmuodostuksen selvittämiseksi.

25 Menettelytapa L1210-leukemiasolujen pesäkkeenmuo dostuksen selvittämiseksi pehmeässä agarissa 500 leukemiasolua levyä kohti inkuboitiin koeaineen eri suuruisten konsentraatioiden kanssa yhden tunnin ajan 37 °C:ssa. Tämän jälkeen solut pestiin kahdesti McCoy5A-30 väliaineella ja lopuksi ne kaadettiin petrimaljoihin sen jälkeen kun niihin oli lisätty 0,3 % agaria. Vertailunäyt-teitä inkuboitiin ainoastaan tuoreen kasvualustan kanssa. Tunnin pituisen inkuboinnin sijasta sekoitettiin monissa tapauksissa eri suuruisia konsentraatioita ja koeaineita 35 ylempään agarkerrokseen, jotta olisi saavutettu solujen jatkuva altistuminen koko inkubointiajan kuluessa. Agarin 10 jähmetyttyä levyjä inkuboitiin lämpökaapissa 7 päivää 37 °C:ssa (5 tilavuus-% CO2, ilman suhteellinen kosteus 95 %). Tämän jälkeen laskettiin niiden syntyneiden pesäkkeiden lukumäärä, joiden halkaisija oli suurempi kuin 60 pm. 5 Tulokset ilmoitettiin pesäkeiden lukumäärinä käsitellyissä agarlevyissä %:ina käsittelemättömien vertailukokeiden pesäkkeiden lukumääristä. Näin saadusta annos-vaikutuskäy-rästä saatiin IC50-arvo mittana aineen teholle. Tulokset tutkituille kaavan I mukaisille yhdisteille verrattuna 10 adriamysiiniin on koottu seuraavaan taulukkoon 1.

Taulukko 1

Aine nro Kestoinkubointi 1 tunnin inkubointi (esimerkki ) IC50 (pm/ml) IC50 (pm/ml) 15 _

Adriamysiini 0,02 0,04 10 0,9 6,5 11 0,5 >1 14 0,004 0,02 20 15 0,006 0,02 16 0,004 0,09 23 >10 >1 24 0,5 >1 26 >1 >1 25 27 0,026 0,09 29 >1 >1 31 0,85 >1 32 0,29 33 0,11 30 35 0,095 36 >1 37 0,1 38 0,4 0,68 39 0,66 35 40 0,04 0,05 li 90777 11

Esimerkkejä

Valmistettujen yhdisteiden rakenteet selvitettiin XH- ja 13C-spektroskopian avulla käyttämällä mukana kaksiulotteisia NMR-menetelmiä ja muita multi-pulssi-mene-5 telmiä samoin kuin MS- ja IR-spektroskopiaa. Reaktioiden kulkua samoin kuin tuloksena saatuja yhdisteitä tutkittiin ohutkerroskromatograafisesti tai HPLC-tekniikan avulla.

Seuraavat esimerkit valaisevat lähemmin keksinnön 10 mukaista menetelmää kaavan I mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi sekä menetelmässä käytettyjen lähtöaineiden ja välituotteiden valmistusta. Lähtöaineiden ja välituotteiden substituenttien osalta yhdisteiden nimien yhteydessä viitataan seuraavaan kaavaan (Iv) 15 H 0 HO OR41 (Iy) 20 ^ 21 OH 0 HO OR 1 ja siinä esiintyviin substituentteihin.

Esimerkki 1 7,9-0-fenyyliboronyyli-B-rodomysinoni (1) 25 (Kaavan Iv mukainen yhdiste, jossa R41 = H, R21 ja R31 = X = f enyyliboronyyli)

Liuosta, joka sisälsi β-rodomysinonia (740 mg = 192 mmol) ja fenyyliboronihappoa (360 mg * 2,95 mmol) toluee-nissa (150 ml), kuumennettiin yhdessä aktivoidun 4A-mole-30 kyyliseulan (3 g) kanssa 9 tuntia palautustislausolosuh-teissa, jolloin reaktiota seurattiin ohutkerroskromatograafisesti (eluentti: tolueeni/metanoli = 10:1).

Liuoksen jäähdyttyä se suodatettiin ja liuotin tislattiin pois suurtyhjössä. Sakka liuotettiin kloroformiin 35 ja kiteytettiin petrolieetteristä.

Saanto: 800 mg (1,7 mmol = 88 %) 12

Esimerkki 2 7.9- 0-isopropylideeni-B-rodomysinoni (2) (Kaavan Iv mukainen yhdiste, jossa R41 = H, R21 ja R31 * X = isopropylideeni) 5 Liuokseen, joka sisälsi B-rodomysinonia (300 mg= 0,78 nunol) 30 ml:ssa kuivaa N,N-dimetyyliformamidia (130 ml) ja 2,2-dimetoksipropaania (36 ml), lisättiin para-to-lueenisulfonihappoa (150 mg) ja seosta sekoitettiin 60 tuntia 50 °C:ssa ja 320 mbar:n paineessa kiertohaihdutti-10 messa, jolloin lisättiin lisää 2,2-dimetoksipropaania (35 ml). Liuoksen haihdutuksen jälkeen jäännös otettiin di-kloorimetaaniin, ravisteltiin natriumvetykarbonaatin vesi-liuoksen kanssa, kuivattiin ja haihdutettiin. Pylväskroma-tograafisen erotuksen jälkeen (eluentti: kloroformi/aseto-15 ni/etikkahappo/vesi/trietyyliamiini = 95:5:1:0,25:0,1) saatiin tuote kiteisenä.

Saanto: 150 mg (0,35 mmol = 45 %)

Esimerkki 3 7.9- 0-bentsylideeni-B-rodomysinoni (3) 20 (Kaavan Iv mukainen yhdiste, jossa R41 = H, R21 ja R31 = X = bentsylideeni)

Liuokseen, joka sisälsi B-rodomysinonia (30 mg = 0,08 mmol) seoksessa, jossa oli kuivaa N,N-dimetyyliformamidia (5 ml) ja bentsaldehydidimetyyliasetaalia (2 ml), 25 lisättiin para-tolueenisulfonihappoa (10 mg) ja seosta sekoitettiin tunnin ajan 50 °C:ssa ja 50 mbar:n paineessa kiertohaihduttimessa. Liuoksen haihdutuksen jälkeen jäännös otettiin dikloorimetaaniin, ravisteltiin natriumvetykarbonaatin vesiliuoksen kanssa, kuivattiin ja haihdutet- 30 tiin.

Saanto: 35 mg (0,07 mmol = 90 %)

Kaksi ekso/endo-isomeeriä voidaan erottaa kromato-graafisesti (eluentti: tolueeni/metanoli = 10:1).

90777 13

Esimerkki 4 10-0-trifluoriasetyyli-B-rodomysinoni (4) (Kaavan IT mukainen yhdiste, jossa R21 = R31 = H, R41 = trifluoriasetyyli) 5 Liuokseen, joka sisälsi 7,9-0-fenyyliboronyyli-B- rodomysinonia (yhdiste 1) (230 mg = 0,49 mmol) kuivassa dikloorimetaanissa (50 ml), lisättiin O °C:ssa trifluori-etikkahappoanhydridiä (4 ml = 283 mmol) ja trietyyliamii-nia (0,2 ml) ja seosta sekoitettiin 30 minuuttia O °C:ssa.

10 Liuottimen poishaihdutuksen ja tolueenin kanssa useita kertoja suoritetun haihdutuksen jälkeen liuotettiin jäännös metanoliin ja liuos säädettiin suolahapolla pH -arvoon 2,5, jolloin tuote saostui 4 tuntia kestäneen sekoittamisen jälkeen. Sakka liuotettiin dikloorimetaa-15 niin, pestiin vedellä ja kuivatuksen jälkeen haihdutettiin orgaaninen faasi.

Saanto: 150 mg (0,31 mmol = 63 %)

Esimerkki 5 10-tetrahydropyranyy1i-β-rodomysinoni (5) 20 (Kaavan I, mukainen yhdiste, jossa R21 = R31 = H, R41 = tetrahydropyranyyli)

Liuokseen, joka sisälsi 7,9-0-fenyyliboronyyli-B-rodomysinonia (500 mg = 1,06 mmol) ja 3,4-dihydro-2H-py-raania (2,5 ml) kuivassa dikloorimetaanissa (125 ml), jo-25 hon oli lisätty 4A-molekyyliseulaa, lisättiin katalyyttinen määrä para-tolueenisulfonihappoa (20 mg) ja seosta sekoitettiin 1/5 tuntia huoneen lämpötilassa. Molekyyli-seula erotettiin suodattamalla, minkä jälkeen suodos pestiin natriumvetykarbonaatin vesiliuoksella, kuivattiin 30 natriumsulfaatin avulla ja liuotin tislattiin pois.

Raakatuote kuivattiin suurtyhjössä ja sen jälkeen se lisättiin liuokseen, joka sisälsi 2-metyyli-2,4-pentaa-nidiolia (5 ml) kuivassa dikloorimetaanissa (40 ml), ja seosta sekoitettiin katalyyttisen määrän kanssa jääetikkaa 35 (0,2 ml) 48 tuntia huoneen lämpötilassa.

14 Tämän jälkeen ravisteltiin natriumvetykarbonaatin vesiliuoksen kanssa ja veden kanssa ja kuivattiin natrium-sulfaatin avulla. Pylväskromatograafinen erotus (eluent-ti: tolueeni/metanoli = 10:1) antoi puhtaan tuotteen.

5 Saanto: 210 mg (0,45 mmol = 42 %)

Esimerkki 6 10-0-trimetyylisilyyli-B-rodomysinoni (6) (Kaavan Iv mukainen yhdiste, jossa R21 = R31 = H, R41 = trimetyylisilyyli) 10 Liuokseen, joka sisälsi 7,9-0-fenyyliboronyyli- β-rodomysinonia (100 mg 0,21 mmol) ja pyridiiniä (85/ul) kuivassa dikloorimetaanissa ja 4A-molekyyliseulaa, lisättiin -40 °C:ssa trifluorimetaanisulfonihappotrimetyylisi-lyyliesteriä (110 μΐ) ja seosta sekoitettiin 1,5 tuntia. 15 Reaktioseos suodatettiin, ravisteltiin natriumvety karbonaatin vesiliuoksen kanssa, kuivattiin natriumsulfaa-tin avulla ja haihdutettiin.

Raakatuote liuotettiin boronyy lies terin lohkaisemi-seksi kuivaan dikloorimetaaniin (10 ml), joukkoon lisät-20 tiin 2-metyyli-2,4-pentaanidiolia (0,55 ml) ja jääetikkaa (0,1 ml) ja seosta sekoitettiin 48 tuntia huoneen lämpötilassa. Reaktioseosta ravisteltiin veden kanssa, kuivattiin natriumsulfaatin avulla, haihdutettiin ja erotettiin pylväskromatograaf isesti (eluentti: dikloorimetaani/etikka- 25 happo/muurahaishappo = 20:1:0,1).

Saanto: 57 mg (0,11 mmol * 52 %)

Esimerkki 7 10-0- (4-0-para-nitrobentsoyyli-3-N-trif luoriasetyy- li-a-L-akosaminyyli )-7,9-0-fenyyliboronyyli-B-rodomysinoni 30 (7) (Kaavan I„ mukainen yhdiste, jossa R21 ja R31 = fe-nyyliboronyyli, R41 * rakenne II * a-L-akosaminyyli, jossa R6 = OpNBz, R7 = NHTFA ja R8 = H)

Liuokseen, joka sisälsi 7,9-0-fenyyliboronyyli-B-35 rodomysinonia (yhdiste 1) (100 mg = 0,21 mmol) kuivassa

II

90777 15 dikloorimetaanissa (8 ml) ja 4A-molekyyliseulaa, lisättiin liuos, joka sisälsi 1,5-anhydro-4-0-para-nitrobentso-yyli-2,3, 6-tridesoksi-3-N-trifluoriasetyyli-L-arabinoheks- 1-eniittiä (87 mg = 0,23 mmol) kuivassa dikloorimetaanissa 5 (4 ml), ja joukkoon lisättiin -40 °C:ssa suojakaasuatmos- fäärin (argon) alaisena trifluorimetaanisulfonihappo-tri-metyylisilyyliesteriä (40 μΐ = 0,22 mmol). -20 °C:seen lämmittämisen jälkeen seosta sekoitettiin vielä 4 tuntia tässä lämpötilassa ja tämän jälkeen reaktio keskeytettiin 10 lisäämällä liuokseen trietyyliamiinia (80 μΐ). Suodatuksen jälkeen liuos pestiin natriumvetykarbonaatin vesiliuoksella, kuivattiin natriumsulfaatin avulla, haihdutettiin ja tislattiin useita kertoja tolueenin kanssa.

Raakatuotteen saanto: 180 mg (kvantitatiivinen tu- 15 los).

Esimerkki 8 10-0- (4-0-para-nitrobentsoyyli-3-N-trif luoriasetyy-li-a-L-akosaminyyli)-8-rodomysinoni (8) (Kaavan IT mukainen yhdiste, jossa R21 = R31 = H, R41 20 = rakenne II = a-L-akosaminyyli, jossa R6 = OpNBz, R7 = NHTFA ja R8 = H)

Liuosta, joka sisälsi yhdisteen 7 raakaseosta (180 mg = 0,21 mmol) kuivassa dikloorimetaanissa (20 ml), sekoitettiin 2-metyyli-2,4-pentaanidiolin (3,2 ml) ja jää-25 etikan (0,2 ml) kanssa 24 tuntia huoneen lämpötilassa.

Jatkokäsittelyä varten seos tislattiin useita kertoja tolueenin kanssa ja dietyylieetteri/petrolieetteri-seoksesta kiteytettiin 150 mg raakatuotetta, joka puhdistettiin pyl-väskromatograafisesti (eluentti: dikloorimetaani/aseto- 30 ni/muurahaishappo = 20:1:0,2).

Saanto: 120 mg (0,16 mmol = 75 %)

Esimerkki 9 10-0- (4-0-para-nitrobentsoyyli-3-N-trif luoriasetyy-li-a-L-daunosaminyyli)-8-rodomysinoni (9) 35 (Kaavan Iv mukainen yhdiste, jossa R21 = R31 * H, R41 16 = rakenne II = α-L-daunosaminyyli, jossa R6 = OpNBz, R7 = NHTFA ja R8 = H)

Esimerkin 7 ohjetta vastaavasti saatettiin 7,9-0-fenyyliboronyyli-B-rodomysinoni (yhdiste 1) (150 mg = 5 0,318 mmol) ja 1,4-di-0-para-nitrobentsoyyli-3-N-trifluo- riasetyyli-L-daunosamiini (190 mg = 0,35 mmol) reagoimaan tri f luor ime t aani sul f onihappo-trimetyylisilyy lies terin (0,11 ml = 0,61 mmol) kanssa.

Tällöin syntyneestä raakatuotteesta poistettiin 10 suojaus boronihappoesterin lohkaisemiseksi esimerkin 8 ohjeen mukaisesti.

Saanto: 180 mg (0,24 mmol = 75 %)

Esimerkki 10 10-0-a-L-akosaminyyli-B-rodomysinoni (10) 15 (Kaavan I mukainen yhdiste, jossa R2 = H, R4 = ra kenne II = α-L-akosaminyyli, jossa R6 = OH, R7 = NH2 ja R8 = H)

Liuosta, joka sisälsi yhdistettä 8 (36 mg = 47 μπιοί) seoksessa, jossa oli metanolia (2 ml) ja 0,5-n nat-20 ronlipeää (2 ml), sekoitettiin 30 minuuttia huoneen lämpötilassa ja sen jälkeen sen pH säädettiin suolahapolla arvoon 2,5. Tämän jälkeen ravisteltiin useita kertoja kloroformin kanssa. Vesifaasi neutraloitiin natriumvetykarbo-naattiliuoksella ja ravisteltiin useita kertoja kloroform-25 in kanssa. Tämä kloroformifaasi kuivattiin natriumsulfaa-tin avulla ja haihdutettiin.

Saanto: 17,5 mg (34 μπιοί = 72 %)

Esimerkki 11 10-0- (3-N, N-dimetyyli-a-L-akosaminyyli) -8-rodomysi-30 noni (11) (Kaavan I mukainen yhdiste, jossa R2 = H, R4 = rakenne 11= α-L-akosaminyyli, jossa R5 = CH3, R6 = OH, R7 = N(CH3)2 ja R8 = H)

Liuosta, joka sisältää yhdistettä 10 (23 mg = 42 35 pmol) metanolissa (2 ml), sekoitetaan natriumsyanoboori- hydridin (16 mg = 250 μπιοί) ja formaldehydin (63 μΐ, 11 90777 17 37-%:inen = 860 μπιοί) kanssa 2 tuntia huoneen lämpötilassa. Tämän jälkeen neutraloidaan suolahapolla ja puhdistetaan kromatograafisesti (eluentti: kloroformi/metanoli/-etikkahappo/vesi/trietyyliamiini = 80:20:10:4:0,2).

5 Saanto: 15 mg (28 μπιοί 67 %)

Esimerkki 12 7-0-(4-0-para-nitrobentsoyyli-3-N-trifluoriasetyy-li-a-L-akosaminyyli )-10-0-trifluoriasetyyli-B-rodomysinoni (12) 10 (Kaavan Iv mukainen yhdiste, jossa R31 = H, R41 = trifluoriasetyyli, R21 = rakenne II = a-L-akosaminyyli, jossa R6 = OpNBz, R7 = NHTFA ja R8 = H)

Yhdiste 4 (90 mg = 0,19 mmol) saatettiin reagoimaan esimerkissä 7 esitetyissä olosuhteissa. Raakatuotteen 15 saanto: 150 mg (0,18 mmol = 95 %).

Esimerkki 13 7-0-(4-0-para-nitrobentsoyyli-3-N-trifluoriasetyy-li-a-L-akosaminyyli)-S-rodomysinoni (13) (Kaavan IT mukainen yhdiste, jossa R31 = R41 = H, R21 20 = rakenne II = α-L-akosaminyyli, jossa R6 = OpNBz, R7 = NHTFA ja R8 = H)

Liuos, joka sisälsi yhdistettä 12 (100 mg = 0,12 mmol) metanolissa (5 ml), säädettiin 0,1-n natronlipeällä pH-arvoon 10 ja sekoitettiin 10 minuuttia.

25 Reaktioseos neutraloitiin laimealla suolahapolla ja liuotin tislattiin pois. Jäännös otettiin dikloorimetaa-niin, pestiin vedellä, kuivattiin natriumsulfaatin avulla ja haihdutettiin.

Raakatuotteen saanto: 85 mg (0,11 mmol = 92 %) 30 Esimerkki 14 7-0-a-L-akosaminyyli-e-rodomysinoni (14) (Kaavan I mukainen yhdiste, jossa R4 * H, R2 * rakenne II = α-L-akosaminyyli, jossa R6 * OH, R7 - NH2 ja R8 - H) 35 Esimerkissä 10 esitettyjen olosuhteiden mukaisesti 18 poistettiin suojaus yhdisteestä 13 (27 mg = 35 μιηοΐ) ja tuote käsiteltiin valmiiksi.

Saanto: 15 mg (29/umol = 83 %)

Esimerkki 15 5 7-0-(3-N,N-dimetyyli-a-L-akosaminyyli)-B-rodomysi- noni (15) (Kaavan I mukainen yhdiste, jossa R4 = H, R2 = rakenne II = a-L-akosaminyyli, jossa R6 = OH, R7 = N(CH3)2 ja R® = H) 10 yhdiste 14 (15 mg = 29 pmol) saatettiin reagoimaan esimerkin 11 olosuhteiden mukaisesti.

Saanto: 13 mg (24 pmol * 83 %).

Esimerkki 16 7-0-(3-N-syaanimetyyli-a-L-daunosaminyyli)-β-rodo-15 mysinoni (16) (Kaavan I mukainen yhdiste, jossa R4 = H, R2 * rakenne II = a-L-daunosaminyyli, jossa R6 = OH, R7 = NH(CH2CN) ja R8 * H) 7-0-a-L-daunosaminyyli-B-rodomysinonia (200 mg = 20 0,39 mmol) liuotettiin kuivaan N,N-dimetyyliformamidiin (30 ml), ja sen jälkeen kun siihen oli lisätty trietyyli-amiinia (0,16 ml) ja jodiasetonitriiliä (0,283 ml), sitä sekoitettiin huoneen lämpötilassa 15 tuntia. Tämän jälkeen reaktioseos haihdutettiin suurtyhjössä ja puhdistettiin 25 pylväskromatograafisesti käyttämällä 50 g piihappogeeliä (eluentti: dikloorimetaani/asetoni/etikkahappo * 5:2:1) . Saanto: 157 mg (0,28 mmol = 73 %); MS: M + H* = 555

Esimerkki 17 7-0-(4-0-para-nitrobentsoyyli-3-N-trifluoriasetyy-30 li-a-L-daunosaminyyli)-10-0-trifluoriasetyyli-B-rodomysi- noni (17) (Kaavan Iv mukainen yhdiste, jossa R31 = H, R41 = trifluoriasetyyli, R21 * rakenne II = a-L-daunosaminyyli, jossa R6 - OpNBz, R7 = NHTFA ja R8 * H) 35 10-0-trifluoriasetyyli-B-rodomysinonia (500 mg = li 90777 19 1,03 mmol) liuotettiin seokseen, joka sisälsi dikloorime-taania ja asetonia (1:1; 40 ml). Liuokseen lisättiin mole-kyyliseulaa (4A, kuivattua jauhetta, 500 mg) ja l,4-di-0-para-nitrobentsoyyli-3-N-trifluoriasetyyli-Ldaunosamiinia 5 (1,1 g - 2,05 mmol) ja jäähdytettiin -30 °C:seen samalla kun ilmankosteuden luoksepääsy estettiin. Suspensioon lisättiin tipoittain ja samalla sekoittaen trifluorimetaani-sulfonihappo-trimetyylisilyyliesteriä (0,9 ml = 5,15 mmol). Kahden tunnin kuluttua lisättiin trietyyliamiinia 10 (0,8 ml). Seos suodatettiin huoneen lämpötilassa ja suodos pestiin kolmasti jäävedellä. Orgaaninen faasi kuivattiin natriumsulfaatin avulla ja haihdutettiin vesisuihkupumpun avulla aikaansaadussa tyhjössä. Saatu raakatuote puhdistettiin pylväskromatograafisesti (piihappogeeli 60/35-70, 15 toiminimi Amicon, eluentti: dikloorimetaani/petrolieette-ri/asetoni = 5:5:1).

Saanto: 750 mg (0,88 mmol - 85 %)

Esimerkki 18 7-0-(4-0-para-nitrobentsoyyli-3-N-trifluoriasetyy-20 li-a-L-daunosaminyyli)-B-rodomysinoni (18) (Kaavan Iv mukainen yhdiste, jossa R31 = R41 = H, R21 = rakenne II = α-L-daunosaminyyli, jossa R6 = OpNBz, R7 = NHTFA ja R8 = H)

Yhdistettä 17 (660 mg = 0,77 mmol) liuotettiin 30 25 ml:aan seosta, joka sisälsi kloroformia ja metanolia suhteessa 1:1. Tämän jälkeen lisättiin tipoittain 0,01-n nat-riumhydroksidin vesiliuosta (30 ml) (pH 7,5). 3 tunnin kuluttua liuos neutraloitiin O,1-n suolahapon vesiliuoksella ja haihdutettiin tyhjössä. Ohutkerroskromatograafi-30 sesti yhtenäinen tuote puhdistettiin pylväskromatograafi sesti käyttämällä 200 g piihappogeeliä 60/35-70, toiminimi Amicon (eluentti: dikloorimetaani/asetoni = 15:1 - 5:1). Saanto: 570 mg (75 mmol * 97 %).

20

Esimerkki 19 7-0-( 3,4-di-0-asetyyli-2,6-didesoksi-2-jodi-a-L-talopyranosyyli) -10-0-tetrahydropyranyyli-B-rodomysinoni (19) 5 (Kaavan Iv mukainen yhdiste, jossa R31 = H, R21 = rakenne II = 2,6-didesoksi-a-L-talopyranosyyli, jossa R6 = R7 = OAc ja R8 = I; R41 tetrahydropyranyyli)

Liuokseen, joka sisälsi yhdistettä 5 (30 mg = 0,06 mmol) ja 3,4-di-0-asetyyli-l,5-anhydro-2,6-didesoksi-L-10 lykso-heks-l-eniittiä (26 mg = 0,12 mmol) 3 mlrssa kuivaa asetonitriiliä ja aktivoitua 3A-molekyyliseulaa, lisättiin suojakaasuatmosfäärin (argon) alaisena N-jodisukkinimidiä (36 mg · 0,16 mmol) -10 °C:ssa ja 4 päivän pituisen reak-tioajan aikana lämpötila kohotettiin huoneen lämpötilaan. 15 Suodatuksen jälkeen laimennettiin dikloorimetaanilla ja orgaanista faasia ravisteltiin ensiksi natriumtiosulfaatin vesiliuoksen kanssa, sen jälkeen natriumvetykarbonaatti-liuoksen kanssa ja sen jälkeen veden kanssa, kuivattiin ja puhdistettiin kromatograafisesti (eluentti: tolueeni/meta-20 noli = 10:1).

Ei-optimoitu saanto: 10 mg (0,013 mmol = 20 %)

Esimerkki 20 7-0-(3,4-di-0-asetyyli-2,6-didesoksi-2-jodi-a-L-mannopyranosyyli]-10-0-tetrahydropyranyyli-fi-rodomysinoni 25 (20) (Kaavan Iv mukainen yhdiste, jossa R31 = H, R21 = rakenne II = 2,6-didesoksi-a-L-mannopyranosyyli, jossa R6 = R7 = OAc ja R8 = I; R41 tetrahydropyranyyli) Yhdiste 5 (70 mg = 0,15 mmol) saatettiin reagoimaan esimerkin 19 30 mukaisesti 3,4-di-0-asetyyli-l,5-anhydro-2,6-didesoksi-L-arabinoheks-l-eniitin kanssa ja tuote käsiteltiin valmiiksi.

Ei-optimoitu saanto: 45 mg (0,056 mmol = 37 %).

90777 21

Esimerkki 21 7-0-( 3,4-di-0-asetyyli-2,6-didesoksi-2-jodi-a-L-mannopyranosyyli)-B-rodomysinoni (21) (Kaavan I, mukainen yhdiste, jossa R31 = R41 « H, R21 5 = rakenne II = 2,6-didesoksi-a-L-mannopyranosyyli, jossa R6 * R7 OAc ja R8 * I)

Liuokseen, joka sisälsi yhdistettä 20 (34 mg = 0,04 mmol) 2 mlrssa metanolia, lisättiin hapanta ioninvaihtajaa (Dowex 50 WX8) ja seosta sekoitettiin 24 tuntia. Ionin-10 vaihtajan suodatuksen jälkeen puhdistettiin kromatograafi-sesti (eluentti: dikloorimetaani/asetoni/muurahaishappo = 20:1:0,1).

Ei-optimoitu saanto: 13 mg (0,018 mmol = 45 %)

Esimerkki 22 15 7,10-di-0-(4-0-para-nitrobentsoyyli-3-N-trifluori- asetyyli-a-L-daunosaminyyli)-B-rodomysinoni (22) (Kaavani, mukainen yhdiste, jossa R31 * H, R21 = R41 - rakenne II = a-L-daunosaminyyli, jossa R6 = OpNBz, R7 = NHTFA ja R8 = H)

Yhdiste 9 saatettiin reagoimaan esimerkin 7 mukai-20 sesti1,4-di-0-para-nitrobentsoyyli-3-N-trifluoriasetyyli- L-daunosamiinin ja trifluorimetaanisulfonihappo-trimetyy-lisilyyliesterin kanssa ja tuote käsiteltiin valmiiksi.

Esimerkki 23 7.10- di-0-a-L-daunosaminyyli-B-rodomysinoni (23) 25 (Kaavan I mukainen yhdiste, jossa R2 = R4 * rakenne II = a-L-daunosaminyyli, jossa R6 = OH, R7 = NH2 ja R8 = H)

Yhdisteestä 22 poistettiin suojaus yhdisteen 10 yhteydessä esitettyjen olosuhteiden mukaisesti ja tuote käsiteltiin valmiiksi.

30 Esimerkki 24 7.10- 0-di-(3-N-syaanimetyyli-a-L-daunosaminyyli )-β-rodomysinoni (24) (Kaavan I mukainen yhdiste, jossa R2 = R4 = rakenne II = α-L-daunosaminyyli, jossa R6 = OH, R7 = NH(CH2CN) ja 35 R8 = H)

Otsikossa esitettyä yhdistettä valmistettiin lähte- 22 mällä yhdisteestä 23 (132 mg = 0,2 mmol) ja jodiasetonit-riilistä (0,15 ml) edellä esimerkissä 16 kuvatun menetelmän mukaisesti.

Saanto: 76,6 mg (0,11 mmol = 53 %). MS: M + H* = 723 5 Esimerkki 25 7.10- di-0-(4-0-para-nitrobentsoyyli-3-N-trifluori-asetyyli-a-L-akosaminyyli)-β-rodomysinoni (25) (Kaavan Iv mukainen yhdiste, jossa R31 « H, R21 = R41 = rakenne II = α-L-akosaminyyli, jossa R6 = OpNBz, R7 = 10 NHTFA ja R8 = H)

Yhdiste 8 saatettiin reagoimaan esimerkin 7 mukaisesti ja tuote käsiteltiin valmiiksi.

Esimerkki 26 7.10- di-0-a-L-akosaminyyli-S-rodomysinoni (26) 15 (Kaavan I mukainen yhdiste, jossa R2 = R4 = rakenne II = α-L-akosaminyyli, jossa R6 » OH, R7 = NH2 ja Rfl = H)

Yhdisteestä 25 poistettiin suojaus yhdisteen 10 yhteydessä esitettyjen olosuhteiden mukaisesti.

Esimerkki 27 20 7,10-di-0-(3-N,N-dimetyyli-a-L-akosaminyyli)-B-ro- . domysinoni (27) (Kaavan I mukainen yhdiste, jossa R2 = R4 = rakenne II, jossa R6 = OH, R7 = N(CH3)2 ja R8 = H)

Yhdiste 26 saatettiin reagoimaan esimerkin 11 olo-25 suhteiden mukaisesti.

Esimerkki 28 7-0-(4-0-para-nitrobentsoyyli-3-N-trifluoriasetyy-li-a-L-akosaminyyli)-10-0-(4-0-para-nitrobensoyyli-3-N-trifluoriasetyyli-a-L-daunosaminyyli)-β-rodomysinoni (28) 30 (Kaavan Iw mukainen yhdiste, jossa R31 = H, R21 = rakenne II * α-L-akosaminyyli, jossa R6 = OpNBz, R7 NHTFA ja R8 = H? R41 = rakenne II = a-L-daunosaminyyli, jossa R6 = OpNBz, R7 = NHTFA ja R8 - H)

Yhdiste 9 saatettiin reagoimaan esimerkin 7 mukai-35 sesti ja tuote käsiteltiin valmiiksi.

Il 90777 23

Esimerkki 29 7-0-a-L-akosaminyyli-10-0-a-L-daunosaminyyli-B-ro-domysinoni (29) (Kaavan I mukainen yhdiste, jossa R2 = rakenne II = 5 a-L-akosaminyyli, jossa R6 « OH, R7 * NH2 ja R8 = H; R4 = rakenne II * α-L-daunosaminyyli, jossa R6 = OH, R7 = NH2 ja R8 = H)

Yhdisteestä 28 poistettiin suojaus yhdisteen 10 yhteydessä selostettujen olosuhteiden mukaisesti ja tuote 10 käsiteltiin valmiiksi.

Esimerkki 30 7-0-(4-0-bentsoyyli-a-L-rodosaminyyli ) -10-0- (4-0-para-nitrobentsoyyli-3-N-trifluoriase tyyli-a-L-akosaminyyli )-β-rodomysinoni (30) 15 (Kaavan Iv mukainen yhdiste, jossa R31 * H, R21 « rakenne II » α-L-rodosaminyyli, jossa R6 OBz, R7 = N(CH3)2 ja R8 = H; R4 * rakenne II = α-L-akosaminyyli, jossa R6 = OpNBz, R7 = NHTFA ja R8 = H) 7-0-(4-0-bentsoyyli-a-L-rodosaminyyli)-B-rodomysi-20 noni saatettiin reagoimaan esimerkin 7 mukaisesti ja tuote käsiteltiin valmiiksi.

Esimerkki 31 10-0-a-L-akosaminyyli-7-0-a-L-rodosaminyyli-β-rodomysinoni (31) 25 (Kaavan I mukainen yhdiste, jossa R2 * rakenne II - α-L-rodosaminyyli, jossa R6 * OH, R7 = N(CH3)2 ja R8 = H; R4 = rakenne II = α-L-akosaminyyli, jossa R6 = OH, R7 = NH2 ja R8 = H)

Yhdisteestä 30 poistettiin suojaus yhdisteen 10 30 yhteydessä esitettyjen olosuhteiden mukaisesti ja tuote käsiteltiin valmiiksi.

Esimerkki 32 7-0-(3-N-trifluoriasetyyli-a-L-akosaminyyli)-β-rodomysinoni (32) 35 (Kaavan I mukainen yhdiste, jossa R4 H; R2 = ra- 24 kenne II = α-L-akosaminyyli, jossa R6 = OH, R7 = NHTFA ja R® = H)

Liuosta, joka sisälsi yhdistettä 12 (27 mg = 32 pmol) seoksessa, jossa oli kuivaa metanolia (2 ml) ja 2 5 tippaa natriummetanolaatin metanoliliuosta (33-%:inen), sekoitettiin tunnin ajan huoneen lämpötilassa, neutraloitiin happamalla ioninvaihtajalla (Dowex WX8), suodatettiin, haihdutettiin ja puhdistettiin kromatograafisesti (eluentti: dikloorimetaani/metanoli/muurahaishappo 10 10:1:0,2). Saanto: 15 mg (25 mmol = 78 %)

Esimerkki 33 7-0-a-L-ristosaminyyli-B-rodomysinoni (33) (Kaavan I mukainen yhdiste, jossa R4 = H, R2 = rakenne II = a-L-ristosaminyyli, jossa R6 = OH, R7 = NH2 ja R® 15 = H)

Yhdiste 4 saatettiin reagoimaan esimerkin 7 yhtey dessä selostetuissa olosuhteissa 1,5-anhydro-4-0-para-nit-robentsoyyli-2,3,6-tridesoksi-3-N-trifluoriasetyyli-L-ri-boheks-l-eniitin kanssa ja suojaus poistettiin esimerkissä 20 10 esitetyissä olosuhteissa. Sulamispiste: 217 °C. MS: M+H* = 516.

Esimerkki 34 7-0- (3-N-trif luoriasetyyli-a-L-ristosaminyyli ) -B-rodomysinoni (34) 25 (Kaavan I mukainen yhdiste, jossa R4 = H, R2 = ra kenne II = α-L-ristosaminyyli, jossa R® * OH, R7 = NHTFA ja R® * H)

Yhdiste 4 saatettiin reagoimaan esimerkin 7 yhteydessä esitetyissä olosuhteissa 1,5-anhydro-4-0-para-nitro-30 bentsoyyli-2,3,6-tridesoksi-3-N-trifluoriasetyyli-L-ribo- heks-l-eniitin kanssa ja suojaus poistettiin esimerkissä 32 esitetyissä olosuhteissa. Sulamispiste: 178 °C. MS: M+H* = 612.

Il (35) 25 90777

Esimerkki 35 7-0-( 4-O-bentsyyli-a-L-akosaminyyli)-B-rodomysinoni (Kaavan I mukainen yhdiste, jossa R4 = H, R2 = ra-5 kenne II = a-L-akosaminyyli, jossa R6 = OBn, R7 = NH2 ja R8 = H)

Yhdiste 4 saatettiin reagoimaan esimerkin 7 yhteydessä esitetyissä olosuhteissa 1,5-anhydro-4-0-bentsyyli- 2,3, 6-tridesoksi-3-N-trifluoriasetyyli-L-arabino-heks-l-10 eniitin kanssa ja suojaus poistettiin esimerkissä 10 esitetyissä olosuhteissa. MS: M+H* = 506.

Esimerkki 36 7-0-(4-0-bentsyyli-3-N-trifluoriasetyyli-a-L-akos-aminyyli)-B-rodomysinoni (36) 15 (Kaavan I mukainen yhdiste, jossa R4 = H, R2 = ra kenne II = α-L-akosaminyyli, jossa R6 = OBn, R7 = NHTFA ja R® = H)

Yhdiste 4 saatettiin reagoimaan esimerkin 7 yhteydessä esitetyissä olosuhteissa 1,5-anhydro-4-0-bentsyyli-20 2,3,6-tridesoksi-3-N-trifluoriasetyyli-L-arabino-heks-l- eniitin kanssa ja suojaus poistettiin esimerkissä 32 esitetyissä olosuhteissa.

Esimerkki 37 7-0-(2,6-didesoksi-2-jodi-a-L-mannopyranosyyli)-B-25 rodomysinoni (37) (Kaavan I mukainen yhdiste, jossa R4 = H, R2 = rakenne II - 2,6-didesoksi-a-L-mannopyranosyyli, jossa R6 = OH, R7 = OH ja ,R® = I)

Yhdiste 21 liuotettiin seokseen, jossa oli kuivaa 30 metanolia ja 2 tippaa natriummetanolaatin metanoliliuosta (33-%:inen), liuosta sekoitettiin 2 tuntia huoneen lämpötilassa, neutraloitiin happamalla ioninvaihtajalla (Dowex WX8), suodatettiin ja haihdutettiin. Sulamispiste: 158 °C.

26

Esimerkki 38 7,lO-di-O-(4-0-bentsyyli-a-L-akosaminyyli)-B-rodo-mysinoni (38) (Kaavan I mukainen yhdiste, jossa R2 = R4 = rakenne 5 II = α-L-akosaminyyli, jossa R® = OBn, R7 = NH2 ja R® = H)

Yhdiste 1 saatettiin reagoimaan esimerkin 7 mukaisesti 1,5-anhydro-4-0-bentsyyli-2,3,6-tridesoksi-3-N-tri-fluoriasetyyli-L-heks-l-eniitin kanssa, sen jälkeen poistettiin suojaus esimerkin 8 mukaisesti aglykonista ja gly-10 kosidoitiin uudelleen esimerkin 7 mukaisesti 1,5anhydro- 4-0-bentsyyli-2,3,6-tridesoksi-3-N-trifluoriasetyyli-L-heks-l-eniitin kanssa ja suojaus poistettiin esimerkin 10 mukaisesti. MS: M+H* = 826.

Esimerkki 39 15 7-0-( 4-desoksi-3-N-trif luoriasetyyli-a-L-daunosami- nyyli)-B-rodomysinoni (39) (Kaavan I mukainen yhdiste, jossa R2 = R4 = rakenne 11= α-L-daunosaminyyli, jossa R6 = H, R7 = NHTFA ja R® = H)

Yhdiste 4 saatettiin reagoimaan esimerkissä 7 esi-20 tetyissä olosuhteissa l-O-para-nitrobentsoyyli-4-desoksi- 3-N-trifluoriasetyyli-L-daunosamiinin kanssa ja suojaus poistettiin esimerkissä 32 esitetyissä olosuhteissa.

Esimerkki 40 7-0-( 4-desoksi-a-L-daunosaminyyli )-B-rodomysinoni 25 (40) (Kaavan I mukainen yhdiste, jossa R2 = R4 = rakenne II = α-L-daunosaminyyli, jossa R6 = H, R7 = NH2 ja R® = H)

Yhdiste 4 saatettiin reagoimaan esimerkissä 7 esitetyissä olosuhteissa l-0-para-nitrobentsoyyli-4-desoksi-30 3-N-trifluoriasetyyli-L-daunosamiinin kanssa ja suojaus poistettiin esimerkissä 10 esitetyissä olosuhteissa.

Seuraaviin taulukoihin 2 ja 3 on koottu eräiden edellä esitettyjen uusien yhdisteiden 1-39 ^-NMR-tiedot.

li

Taulukko 2 27 90777

Kaavan I mukaisten yhdisteiden ja niiden valmistuk-5 sessa muodostuneiden välituotteiden 1H-NMR-tietoja

Ensimmäisen rivin ainenumerot vastaavat kulloinkin kysymyksessä olevia esimerkkinumeroita. Kemiallinen siirtymä on ilmoitettu miljoonasosissa, jolloin tetrametyyli-silaani toimii sisäisenä standardina. Mikäli toisin ei ole 10 ilmoitettu, spektri on mitattu liuottimena käytetyssä CDC13: ssa.

Lyhenteet: s: singletti d: dupletti 15 t: tripletti q: kvartetti m: multipletti dd: dupletin dupletti ddd: dupletin dupletin dupletti 20 dq: kvartetin dupletti a) mitattu arvolla 300 mHz b) B-fenyyli 7,4 - 7,27 m c) mitattu arvolla 270 MHz d) yhdiste 3a ja 3b ovat ekso-endo-isomeerejä 25 e) bentsylideeni-CH 5,41s, aromaatt.bentsyli- deeni 7,36 - 7,20 m f) bentsylideeni-CH 6,13 s, aromaatt.bentsyli-deeni 7,36 - 7,17 m g) tetrahydropyranyylirengas H-l 4,91 m ja 4,99 30 m, rengasprotonit 4,0-3,1 m, koska aine esiintyy diastereomeeriseoksena (R/S kohdassa THP-rengas C-l), esiintyvät eräät signaalit kaksinkertaisina h) mitattu arvolla 400 mHz 35 i) O-trimetyylisilyyli 0,13 s 28 k) B-fenyyli 7,35 - 7,17 m

l) liuotin CDC13 + CD3OD

m) liuotin CDC13 + d6-DMSO

n) N(CH3)2 2,086 s 5 o) tetrahydropyranyyli H-l 5,09 dd, OAc 2,03 s, 2,09 s p) tetrahydropyranyyli H-l 5,04 dd; rengaspro-tonit 4,2 - 3,0 m, OAc 2,03 s, 2,01 s q) OAc 2,04 s, 2,01 s 10 s) mitattu arvolla 200 MHz t) bentsyyli CH2 4,77 d, 4,66 d, aromaatt. bent-syyli 7,37 m u) bentsyyli CH2 4,46 d, 4,33 d, aromaatt. bentsyyli 7,29 - 7,12 m 15 v) mitattu arvolla 90 MHz

Taulukko 2 - osa 1 90777 29 η a,b) 2c) 3aa,de) 3ba,d'f^ H-1 7.90^dd 7 . 8 2 1 d 7;35dd 7,82dd H - 2 7 , 6 9 S r , 6 4 5 t 7 . 6 " t ~ . 6 4 : H-5 7,774dd 7 f 2 6 2 d 7f29dd 7,23dd H-7 5,672: S,279t 5;67dd 5,54t H-Sa 2 ,2 9 5 dd 2„39dd 2,51dd 2.67dd H-8b 2119dd 2,15dd 1,79dd 2.16 dd H-1 0 4,97 3d 4;782d 4,94d 4 ,84d H-13a 2 , 22 - 1 , 79m 1T95m 1,98-1,Tim 1,99-1,89m H -1 3 ’o 2 , 22 - 1 ,79m 1,76m 1 ,98-1 f 71 m 1,99-1;89n H-- 14 T,236r 1 , 0481 1 , 07: 1,11: H -1 ’ - - - - H-2a’ - - - H-2e ’ - - - H - 3 ’ - - H-4’ - - H-5’ - - H.-6’ - - - OH-4 12,145s 12,151s 12,09s 11,96s OH - 6 1 2,785 1 2 r 6 S 3 s 12,67s 1 2,66 s OH-11 1 3 , 5 7 5 s 13,498s 13,70s 15,51s OH-7 - - OH-9 - -- H -1 0 2,6 8 d 3, 18d 2,80d NHTFA - - pNB: 30

Taulukko 2 - osa 2 4a) sc»g) 6h,i) 7a-k) H -1 7 ,90 2 dd 7.7Sd 7.391dd 7,7~d H-: 7,745: 7. 64t 7 , 71 5t 7 , 5 99 : H-5 7; 54 7dd 7,24d 7,312dd ",~0dd H - ’ 5 , 34 5 dt 5,19dd/'5,14dd 5 7 2 3 1 t 5.680 H - 8 a 2 ,4 OSdt 2,30dd 2,22Sdd 2,45dd H-Sb 2,0 5 4 ddd 2.0 5 d 2.146dt 2.18d H-10 6f 544d 4,945 /4,8 1 5 4 ; 8 2 2d 4 f 9 5 6 s H-15a 1f75m 1,75m 1,718m 1,85m H-15b l,56m 117 5 m . 1 ,713m 1,85m H-- 14 1 , 103t 1,03t 1 , 075t 1 , 1 St H-1 ’ - - 5 ?64d H-2a* - - - l,83m H-2e’ - - - 2.12m H-3 ’ - - - 4,44m H-4’ - - 4.7S61 t H-5’ - - 4 , 18dq H- -6’ - - - 1 - 2”d o ‘ OH-4 12,0105 11r97s 12 f106 s 1 2.03 2 s OH-6 1 2,806 s 12,81s 1 2,897s 12 %7l4s OH-11 1 5 T 3 4 5 d 13,66s/15.6s 1 3 6 2 6 s 1 3 ^ 6 9 4 s OH-' 5; 4 5 2d 5; 478d OH-9 3 , 7 5 6 s 3,14Ss OH - 10 - NHTrA - 6,45d 6,44d pNB: - 8,2S-8,08m 8,34-8,15m

Taulukko 2 - osa 3 31 90777 8C) gh) ΙΟ3,1-* H-1 7,91d d 7,90 5 dd 7,774d H-: 7 , 731 7,7 26 t "f621t H-3 7,34dd 7,344dd 7,209d H-7 5,31d 5 f 2 7 91 5 f08"d H-3a 2 f 36 dd 2,308dd 2f1S4d H-Sb 2 7 2 2d 2,195d 2,06d H-10 4 ,98s 5,020s 4^87s H-13a 1T95-1 T“2m 1;88-1,38m 1,82m H-13'c 1,95-1,^2^ 1 , 88-1,33m 1(82m H-- 14 1 . 16t 1 , 155t 1 .O 21 J f f f H-1’ 5,3"d 5 f 6 5 9 d 5,31d H - 2 a’ 1 , Sm 2 , 16-1 fS9m 1 ,49m H-2e’ 2r09dd 2.16-118 9m 2,09m H-3’ 4 . 4 S d 4,495m 2,87m H-4’ 4 , 8 21 5,409s 2,87m H-5’ 4,21dq 4,314q 3,66dq H--6 ’ 1 T2Sd 1 , 228d 1 ,236d OH-4 12 j O6S 12 f 041 s OH-6 12 , 89s 12 f 894s OH-11 13 r 72s 1 3 7735s OH-7 5;54d 3,4 91 d OH-9 3 f 34 s 3f 248s

OH- 1 O

NHTFA

pNB n· 32

Taulukko 2 - osa 4 -h,n) h) h) h,m) 11 12 13 14 H- 1 " , 8 2 1 d 7f908d 7,S00d 7 r 7 8 d H-2 ^ ,644t 7 , 7 38t 7,6221 '.6-t H- 3 7,24 5 d 7 j 554d 7,:29d ~,2 1 d H-7 5,16'd 5,2 461 5 f 063t 4.993* H-8a 2(. 2-2,09m 2,40dd 2,24-1,99m 2,105m H-3b 2,2-2,09171 2; 4 5 d 2,.24 -1,99m 2,105m H - 1 0 4,908s 6,414 d 4f854d 4.70s H-13a 1 , 85 -1, 66 m 1,7 5m 1,86-1,69m 1,75-1,6Om H - 1 5 b 1 . 3 5 - 1 . 6 6 m 1,75m 1 , 8 6 - 1 ,6 9 m 1.75-K60m H3-14 1f 05 91 1 , 1 251 1 , 07 31 0,99t H-1 ’ 5,41'd 5,52 Od 5,41 9 5,29d H-2 a ’ 1 ,489ddd 1}86ddd 2,24-1,99m 1(.49m H-2e ’ 2, 194ddd 2,01ddd 2,24-1 ,99m l,94m H-3’ 2(602ddd 4,3m 4,38m 2,8m H-4 ’ 3,01 21 4 . 841 4.89U 2 . 8m H-3’ 3,699dq 4,3m 4,278dq 3,77dq H,-6’ 1,2 6 8 d 1 f 3 3 0 d 1 .2 3 8 d 1,23d OH-4 12,002s 12,023s OH-6 12.813s 1 2 ,796 s OH-11 13,380s 13^551 s OH-' OH-9 3.819s 3.575s « t OH-10 - 3,615d NHTFA - 6,4 7d pNBz - 8f 25-8,9m 8,22-8,09m

II

Taulukko 2 - osa 5 90777 33 lS*> 1^ li"·1’ H-1 7.-9dd 7,74d 7;70d H- 2 7,6 341 7}65t 7 ,6 21 H-5 7 ? 2 2 9dd 7,22d 7,l7d H-7 5,059dd 5 j 2 5 d 5,06s H-8a 2 , 2 2 - 2 , 0 2m 2,47d 2 ,1 3m H-Sb 2,2 2 -2,02n 2.08dd 2,15m H-10 4 , S 5 7 d 6 , 53 s 4f78s H-15a 1,90-l752m 1,77m 1,88m H-13 b 1 j 9 0 - 1.5 2 m 1,55m 1,68m H - - 1 4 1 ,0541 1 ,1 01 1 , 05t H-1’ 5,4 7 2 d 5 ^ 6 3 s 5,53s H-2 a ’ 1,90-1 f52m 1,90ddd H-2e ’ 2,22 -2,02m 2f13m H-3’ 2 , 5 7 8 ddd 4,48m 4,54m H-4’ 3 , 101t 5 j 4 9 s 5,42s H-5’ 3,8 5 7dq 4,48m 4,44q H.-6’ 1 . 32 Od 1 ,27d 1 , 16d OH-4 11 f84s OH-6 12,68s OH-11 13,22s OH-7 - - - OH-9 3.881 s 3 ,85 s OH- 10 NHTFA - 6f61d pNB; - 8f25m 8,23m

Taulukko 2 - osa 6 34 - l9h.°) 20h.P) 2ia,q) H-1 7 , 8 8 d 7 ; 90d 7;83d H-2 7,6 91 7 , 691 7 , 691 H-3 7,50d 7;51d ",2Sd H-7 5 T 1 21 3,071 5 , 02dd H-Sa 2,22d H-3b 2,11dd H - 10 4 j 9 8 s 5.04s 4f88s H- 1 3 a 1,91-1,7 Om H-15b 1 ,91-1 , 7Om H--14 1 , 13t 1 .17t 1 ,1Ot H-1 ’ 5 , 79s 5,3 7 s 5 f 71d H- 2 a ’ - H-2e ’ 4f56dd 4,61dd 4,66dd H-3’ 4,2 7 d 4,2 9dd 4 , 3 2 dd H-4 ’ 4; 86 s 5r16t 5,18t H-5 ’ 4,08q 4,04dq 4,17dq H--6 ’ 1,21d 1 .24d 1,29d OH-4 12 γ12 s 12 , 12 s 12,04s OH-6 12,89 s 12,90s 12 , 7 9 s OH-11 1 3,78s 13 j 81 s 13(51 s OH- 7 - OH-9 3,37 s OH -10 - - 2,80s NHTFA - pNBd - I! 35

Taulukko 2 - osa 7 90777 - s) - a) a) 32 33 34 H-l 7,80d 7,75dd 7,88d H-2 7,69t 7,64t 7,73t H-3 7;24d 7,15dd 7,32d H-7 5.02t 4,87m 4,96d H-8a 2,20m 2,08m H-8b 2 f 20m 2.08m H-10 4f82m 4,60s 4f81s H-13a 1.72m l,78m H-13b l,72m 1,78m H3-14 1,06t l,04t 1f 09t H-l’ 5,35d 5,42d 5,35s H-2a’ 2120m 2,08m H-2e’ 2r 20m 2,08m H-3’ 3,80m 3,66m 4,39ddd H-4’ 3,16t 3,52dd 3,50dd H-5’ 3,96dq 4,14dq 4,15dq H3-6’ 1,32d 1j 37d l,34d 0H-4 12 r 08s 0H-6 12,79s OH-11 13,59s 0H-7 - 0H-9 OH-10 NHTFA 7.75d - 8,Old pNBz -

Taulukko 2 - osa 8 36 35 a» t) 36h-u) 37 a) 39'v> H-l 7 T 88d 7 f 86d 7,91dd 7,92dd H-2 7;72t 7,70t 7,76t 7,71t H-3 7;32d 7,31d 7,35dd 7,28dd H-7 5,13m 5,24s 5,07d 5,12t H-8a 2,22d 2.37d H-8b 2.16dd 2.10m / * H-10 4 j 91 s 5;09s 4,81d 4,95d H-13a 1f 9—1,5m 1,98m 1 ? 7m H-13b 1,9-1,5m lf98rr, 1 f 7m H3-14 l,llt l,03t 1f 08t l,13t H-l’ 5,43d 5 j 27d 5f71s 5,52d H-2a’ 2,2-1,5m 2,10m H-2e’ 2,2-1r5m 2;19ddd 4,45dd H-3’ 3,. 09ddd 3f93m 3,97dd 4,2m H-4’ 2 ? 911 3,09t H-5’ 3 j98dq 3,39dq 4,2m H3-6’ 1,41 d 0f98d 1, 38d l,28d OH-4 12,lls 12,18s 12,14s OH-6 12 f 88s 12,93s 12.77s OH-11 13f65s 13,72s 13,52s OH-7 - - OH-9 OH-IO 2,68d NHTFA 6 j 09d 5,92d pNBz

II

90777 37

Taulukko 3

Kaavan I mukaisten yhdisteiden ja niiden valmistuksessa muodostuneiden välituotteiden 1H-NMR-tietoja

Ensimmäisen rivin ainenumerot vastaavat kulloin-5 kin kysymyksessä olevia esimerkin numeroita. Kemiallinen siirtymä on ilmoitettu miljoonasosina, jolloin tetrametyy-lisilaani toimii sisäisenä standardina. Mikäli toisin ei ole ilmoitettu, spektrit on mitattu liuottimena käytetyssä CDCl3:ssa.

10 Lyhenteet s: singletti d: dupletti t: tripletti q: kvartetti 15 n: multipletti dd: dupletin dupletti ddd: dupletin dupletin dupletti dq: kvartetin dupletti

Yhdellä pilkulla varustetut hiilihydraattiprotonit 20 (H-l' jne) tarkoittavat hiilihydraatteja radikaalina R2, kahdella pilkulla varustetut hiilihydraattiprotonit (H-l" jne) tarkoittavat hiilihydraatteja radikaalina R4 yleisessä kaavassa I.

a) mitattu arvolla 270 MHz 25 c) mitattu arvolla 300 MHz e) mitattu arvolla 400 MHz f) liuotin C0C13 + d6-DMS0 h) liuotin D20 i) N(CH3)2 2,10 s, 2,07 s 30 k) OBz 7,72 - 7,56 m; N(CH3)2 2,28 s

Taulukko 3 - osa 1 38 22a) 23S'f) H - 1 7 . 7 9 5 d 7 . 7 4 d H - 2 7.6 51 t 7.5?* H - 3 7.24 1 d 7 . 1 Sd H - 7 5.1 5 71 4.961 H-Sa 2.24 -1 .94m 1 .69-K4Sm H-8b 2.24 - 1. 9 4 t, 1.69-1 . 4S:nr.

H-10 5.071s 4.785 H-13a 1 .85 - 1 .66m 1 .69-1 .4Sm H -13 b 1 .35 - 1 .66ai 1 .69-1 .4Sm H - -14 1 . 107t 0.92t H -1 ’ 5.431db) 5.25db) H-2a ’ 1 .35 -1 .66m 1 .69-1 .48n H-2e ’ 2.24 - 1 .94m 1 .69-1 . 4Sm H-3 ’ 4 .47-4 ,42m K-4 ’ 5.595sb) 3.2 9 sb' H-5 ’ 4.47-4.42mb) H--6’ 1 .232dfc' 1 . 16db- H-1” 5.547db3 5 .19 db ^ H-2 a ’ ’ 1 .85-1 .66m 1 .69-1 .48m H-2e ’ ’ 2 .24 -1 .94m 1.69-1 .48m H-3” 4 . 47 -4 . 42m H-4” 5 . 5 8 9 s b ^ 3.26sb·* H-5” 4 .309qb ^ 3.79qb' H--6 ” 1 ·14 7db ^ 1 . 12db^ OH- 4 1 1 .90 2 s OH-6 12.804s OH-11 13.683s .

OH-9 5 . 2S7s NHTFA 6.29d/6.24d pNB: 8.30-8.18m I!

Taulukko 3 - osa 2 39 90777 25C) 26e'h) 273'f';) H -1 ” . S 5 d "7.50ά 7.Sdd H- 2 7 . 6 ό t 7 . 5 51 7.6-t H - 3 7 . 27d 7 .09d 7.2-idd H - 7 5.15m 5.0 t H-Sa 2.29m 1 .83 -1 ,39m H-Sb 2 .29r. 1.83 -1 . 39m H- 1 0 4 . 9S S 4 . 92 s H-13a 1.93-1 .68m 1.83 - 1. 3 9 m H-13 b 1 .93-1 . 6Sm 1 .83- 1 .39m H--U 1 . 15 r 1 . 03: 1 .04t H-1 ’ 5 .4 5 d 5 .4-db'' 5.46051 H- 2 a ’ 1 . S5ddd 1 .83 -1 .3 9τπ H-2e’ 2.35ddd 1 .83 -1 ,39m H-3 ’ 4 .28m 2.8-2 .5ru H - 4 ’ 4.83t 3.09tbj k ·) H - 5 ’ 4.50dq 5 . S 5 d q “ '

K M

‘ H3-6’ 1 .2 7d 1 .33d“' 1 .51d ' H-1” 5 .50d 5.35db1 S.42db) H - 2 a ’ ’ 1 . 76ddd 1 .83 -1 .39m H - 2 e ’ ’ 2.0 2 ddd 1 .83 -1 ,39n H - 3 ’ ’ 4.34m 2.8-2.3m H - 4 ’ ’ 4 .7 41 3.01tbj H-5” 4 . 1 2dq 3."0dqb' H.-6’ * 1 .23d 1 -33db) 1,27dbl OH-4 12.01s 12 . 0 7 s OH-6 12.84s 12.84s OH-11 13.71s 13.60s OH-9 3.30s 3.53s NHTFA 6.39d/6.33d pNBz 8. 02-8.36m

Taulukko 3 - osa 3 40 28e) 29 H -1 7,94jd 7,9 0 dc H - 2 7f76t; 7 , 7 1 t H-3 7,3ödd 7,52dd H-7 5 j 221 5 , 1 On H-Sa H-Sb H-10 S , 1 2 s 4 ; 96 s H- 1 3 a 2 ,08-1, 79171 H-15b 2,08-1 , 79m H.-14 1,21t 1,09t H-1 ’ 5,53db) 5,38 s b' H-2a’ 2,08-1 ?79m H-2e’ 2,08 - 1 .79m H-3’ 4 ,55 -4,52n 2,"Sr, H-4’ 4.95Γ 2 r 921 H-5’ 4 .55 -4,32m 3,83dq H--6’ 1 ,37dUj 1 ,34 dw" H-1” 5 ,4 5 db ^ 5f37sb} H-2 a’’ 2,08-1 , 79m H-2 e’’ 2,08- 1,79m H-3” 4,55-4 . 3 2 m 3,04m H-4” 5,71 s 3 ,37 s H-5” 4,55-4,32m 3,96 q H- -6 ’ ’ 1 ,28db^ 1 ,28db) OH - 4 12 , 09 s OH-6 12 , 93s OH-Π 13,83s OH-9 3,41s NHTFA 6,S4d/6,25d pNBc 8 . 36-8 , 2m

II

Taulukko 3 - osa 4 41 90777 30e'k) 31e) H - 1 7 7 8 :d 7 , 8 9 d H-: 7,46t 7 .71t H-5 7,3 1 d 7 ,3 2 d H-7 5 ,23s 5,13t H-8a 2,05-2 f 02m 1,9-1 , 65m H-8b 2 , 0 5 - 2,0 2τπ 1 ,9-1 ,65m H- 1 0 4 799 s 4,95 s H-13 a 1,95-1 <74m 1 .9-1,65m H-13b 1 ,95-1 , 74m 1,9-1 ,65m H- -14 1 ,15l 1 f 091 H-1’ 5,54a 5,46db H-2a’ 1 193-1,74m H-2e ’ 2,21 m H - 3’ 2,6 9ddd H-4’ 5 j54s 3,67s H-5’ 4 r 2 7q 4,02q H- -6 ’ 1 ,26d 1 ,5701^

H-1” 5 .6 8 d S,37dDJ

H-2a’’ 1 , 93-1 ,74m H-2e” 2,21m H-3’’ 4,44ddd 2,76m H-4’’ 4 7 79t 2,85t H-5” 4,16dq H3-6’ ’ 1,21d 1 f50db) OH-4 12,07s OH - 6 12 ; 88 s OH-11 13,7S s OH-9 NHTFA 6,58d pNBz 8^27-8 } 08m

Claims

42 Patenttivaatimus Menetelmä sytostaattisesti aktiivisten yhdisteiden valmistamiseksi, joilla on kaava (I) 5 H 0 HO OR4 ^ I 1 io OH 0 HO 0R* ja niiden epäorgaanisten ja orgaanisten happojen kanssa muodostamien suolojen valmistamiseksi, jossa kaavassa 2 15. on vety.tai radikaali, jolla on kaava (II) ch3 X· 4 ja R on vety tai kaavan II mukainen radikaali, ja kaavassa II
25 R^ on vety, hydroksi tai bentsyylioksi, R7 on NH2, NH-asyyli (C1-C8), N(alkyyli)2 (C1-C8), NH(CH„CN) tai hydroksi ja 8 ^ R on vety tai jodi, ja kaavan II mukainen radikaali kuuluu hiilihydraattien L- 2 4 30 sarjaan, lukuunottamatta yhdisteitä, joissa R = R = H, 4 2 R = H ja R = a-L-daunosaminyyli tai a-L-rodosaminyyli 2 4 tai 4'-asyyli-a-L-rodosaminyyli, R = R = a-L-rodosaminy- 2 4 yli tai 4'-asyyli-a-L-rodosaminyyli tai R = H.ja R = α-L-rodosaminyyli tai a-L-daunosaminyyli, 35 tunnettu siitä, että II 90777 43 a) yhdiste, jolla on kaava
0 HO OH OH O HO OH 10 suojataan selektiivisesti 7- ja 9-asemissa rakenteella (III) \ X III / 15 jossa X on hiilihydraattikemiassa tavallinen kaksihampai-nen suojaryhmä, edullisesti alkyyliboronyyli, fenyylibo-ronyyli, orto-alkyyli-karboksyylihapon alkyyliesteri, edullisesti ortomuurahaishapon metyyliesteri tai orto-etikkahapon etyyliesteri, ketaali tai asetaali, edulli-20 sesti isopropylideeni tai bentsylideeni, minkä jälkeen bi) glykosidoidaan 10-asema reaktiolla funktiona-lisoidun hiilihydraatin kanssa, jolla on yleinen kaava V tai VI
25 CH3 ch3 "it-’. '‘ö « R S8 R 30 joissa Q R merkitsee samaa kuin edellä, R^ on vety, suojattu hydroksi tai bentsyylioksi, R71 on NH-asyyli (C1-C8), N(alkyyli)2 (C1-C8) tai suo-35 jattu hydroksi, ja 44 g R on hapen välityksellä sitoutunut asyyli, kuten ali-faattinen asyylioksi (C1-C8), bentsoyylioksi tai substi-tuoitu bentsoyylioksi, tai 5 b2) suojataan 10-asemassa oleva hydroksiryhmä asyyli-, trimetyylisilyyli- tai tetrahydropyranyyliryh-mällä, c) poistetaan suojaryhmä 7- ja 9-asemista, d) glykosidoidaan 7-asema reaktiolla edellä määri-10 tellyn kaavan V tai VI mukaisen funktionalisoidun hiilihydraatin kanssa, e) poistetaan 10-asemassa oleva asyyli-, trimetyylisilyyli- tai tetrahydropyranyyliryhmä, f) vaiheessa e saadun yhdisteen 10-asema glykosi-15 doidaan reaktiolla edellä määritellyn kaavan V tai VI mukaisen funktionalisoidun hiilihydraatin kanssa, ja g) mikäli ja/tai R^* on suojattu hydroksi, poistetaan tämän ryhmän suojaus, jolloin haluttaessa kaavan I mukainen yhdiste, jossa on 20 kaavan II mukainen radikaali ainoastaan 7-asemassa, suoritetaan edellä mainitut menetelmävaiheet a, b2, c, d, e ja g; haluttaessa kaavan I mukainen yhdiste, jossa on kaavan II mukainen radikaali ainoastaan 10-asemassa, suoritetaan edellä mainitut menetelmävaiheet a, bx, c ja 25 g; ja haluttaessa kaavan I mukainen yhdiste, jossa on kaavan II mukainen radikaali sekä 7- että 10-asemassa, suoritetaan edellä mainitut menetelmävaiheet a, blf c, d ja g tai menetelmävaiheet a, b2, c, d, e, f ja g; ja haluttaessa 7 30 hydrolysoidaan NH-asyyliryhmä R kaavan I mukaisen 7 yhdisteen saamiseksi, jossa R on ΝΗ~; ja 7 z alkyloidaan NH_-ryhmä R kaavan I mukaisen yhdis-Δ 7 teen saamiseksi, jossa R on N(alkyyli),; tai 7 z muutetaan Nl^-ryhmä R reaktiolla jodiasetonitrii-35 Iin tai bromiasetonitriilin kanssa sopivan emäksen läsnäollessa ryhmäksi NHiCI^CN). il 90777 45 Förfarande för framställning av cytostatiskt aktiva föreningar med formeln (I) 5 H 0 HO OR4 io ' H ' ^ 2 OH 0 HO OR^ och salter som bildats av dessa föreningar med oorganiska och organiska syror, i vilken formel 2 R är väte eller en radlkal med formeln (II) 15 ch3 Vv. II
20 R^H8 4 och R är väte eller en radikal med formeln II och i formeln II är R^ väte, hydroxi eller bensyloxi,
25 R7 NH2, NH-acyl (C1-C8), N(alkyl)2 (C1-C8), NH(CH2CN) eller hydroxi och R® väte eller jod, och radikalen med formeln II hör tili L-serien av kol- 2 4 hydrater, med undantag av föreningar, i vilka R = R = H, 4 2
30 R = H och R * a-L-daunosaminyl eller a-L-rodosaminyl 2 4 eller 4'-acyl-a-L-rodosaminyl, R * R = a-L-rodosaminyl 2 4 eller 4'-acyl-a-L-rodosaminyl eller R = H och R * a-L-rodosaminyl eller a-L-daunosaminyl, kännetecknat därav, att 46 a) en förening med formeln O HO OH 5 OH O HO OH skyddas selektivt i 7- och 9-ställningar med en struktur 10 (III) ^X III väri X är en i kolhydratkemin vanlig tvätandad skydds-15 grupp, företrädesvis alkylboronyl, fenylboronyl, en alkyl- ester av en ortoalkylkarboxylsyra, företrädesvis ortomyr-syras metylester eller ortoättiksyras etylester, en ketal eller en acetal, företrädesvis isopropyliden eller bensy-liden, varefter 20 bx) 10-ställning glykosideras medelst en reaktion med ett funktionaliserat kolhydrat med den allmänna formeln V eller VI CH-i
25 CH3 _ v ^ VX
715 R R R 30 väri Q R betecknar samma som ovan, är väte, skyddad hydroxi eller bensyloxi, R^ är NH-acyl (C1-C8), N(alkyl (C1-C8) eller skyddad hydroxi och g
35 R är en genom syre bunden acyl, säsom alifatisk acyloxi (C1-C8), bensoyloxi eller substituerad bensoyloxi, eller II 90777 47 b2) en hydroxigrupp i 10-ställning skyddas med en acyl-, trimetylsilyl- eller tetrahydropyranylgrupp, c) skyddsgruppen avlSgsnas frän 7- och 9-ställ- ningar, 5 d) 7-ställning glykosideras medelst en reaktion med ett ovan definierat funktionaliserat kolhydrat med formeln V eller VI, e) en acyl-, trimetylsilyl- eller tetrahydropyranylgrupp som befinner sig i 10-ställning avlägsnas, 10 f) 10-ställning i den i steg e erhällna föreningen glykosideras medelst en reaktion med ett ovan definierat funktionaliserat kolhydrat med formeln V eller VI, och g) ifall R och/eller R' är skyddad hydroxi, avlägsnas skyddet frän denna grupp, 15 varvid ovan nämnda förfarandesteg a, b2, c, d, e och g ut-förs dä man önskar en förening med formeln I med en radi-kal med formeln II endast i 7-ställning; ovan nämnda förfarandesteg a, blf c och g utförs dä man önskar en förening med formeln I med en radikal med formeln II endast i 20 10-ställning; och ovan nämnda förfarandesteg a, bt, c, d och g eller förfarandesteg a, b2, c, d, e, f och g utförs dä man önskar en förening med formeln I med en radikal med formeln II bäde i 7- och i 10-ställning; och om sä önskas n 25 hydrolyseras en NH-acylgrupp R för erhällande av 7 en förening med formeln I, väri R är NH0; och 7 z alkyleras en NH_-grupp R för erhällande av en fö-z 7 rening med formeln I, väri R är N(alkyl)9; eller 7 z omvandlas en Nl^-grupp R medelst en reaktion med 30 jodacetonitril eller bromacetonitril i närvaro av en lämp-lig bas tili en grupp NHiC^CN).