FI90412B

FI90412B - Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten 3,5-dihydroksikarboksyylihappojohdannaisten valmistamiseksi

Info

Publication number: FI90412B
Application number: FI883248A
Authority: FI
Inventors: Ernold Granzer; Gerhard Beck; Wilhelm Bartmann; Guenther Wess
Original assignee: Hoechst Ag
Priority date: 1987-07-10
Filing date: 1988-07-07
Publication date: 1993-10-29
Also published as: PT87928B; PT87928A; NO883071L; FI883248A; PH27496A; NO167795C; NZ225343A; HU199768B; FI90412C; AU1888188A; ES2031959T3; FI883248A0; KR890001941A; IL87035A0; HUT47237A; JPS6445337A; AU606712B2; GR3004588T3; ZA884920B; DE3722807A1

Description

ί 1 90412

Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten 3,5-dihydrok-sikarboksyylihappojohdannaisten valmistamiseksi

Entsyymi 3-hydroksi-3-metyyliglutaryyli-koentsyy-5 mi-A-reduktaasi (HMG-CoA-reduktaasi) katalysoi mevaloni-hapon muodostumista 3-hydroksi-3-metyyliglutaryyli-koe-ntsyymi A:sta (HMG-CoA). Tällä reaktiolla on keskeinen merkitys kolesterolin biosynteesissä. 3-hydroksi-3metyy-liglutaarihapon (HMG) ja mevalonihapon johdannaisia on 10 kuvattu kolesterolibiosynteesin estäjinä. (M.R. Boots et ai., J. Pharm. Sei. 69, 306 (1980), F.M. Singer et ai., Proc. Soc. Exper. Biol. Med. 102, 270 (1959), H. Feres, Tetrahedron Lett. 24 3769 (1983)). 3-hydroksi3-metyyli-glutaarihapolla itsellään on rotilla ja ihmisillä suori-15 tetuissa kokeissa todettu olevan merkittävä kolesteroliarvoja alentava vaikutus (Z.Beg. Experientia 23, 380 (1967), ibid. 24, 15 (1968), P.J. Lupien et ai., Lencet 1978, 1, 283).

Nyt todettiin, että yleisen kaavan I mukaiset di-20 hydroksikarboksyylihapot sekä vastaavat kaavan II mukaiset laktonit ovat HMG-CoA-reduktaasin estäjiä.

Keksintö koskee tämän johdosta 3,5-dihydroksikar-boksyylihappojen ja niiden johdannaisten valmistamista, joilla on yleinen kaava I, 25

R1 Oi OH

: 30 jolloin yleisessä kaavassa I A-B on CH-CH tai C=C, 3 5 X-Y on CH2-CH2 tai HC=CH, 2 90412 R1 ja R2 ovat samanlaisia tai erilaisia ja merkitsevät fe-nyyliryhmää, jolloin aromaattiset ryhmät voivat olla 1 -3 kertaa ytimeen substituoituja halogeenilla, alkyylillä tai alkoksilla, joissa on kulloinkin 1-6 C-atomia, 5 R3 on korkeintaan 8 C-atomia sisältävä alkyyliryhmä tai sykloalkyyliryhmä, jossa on 3 - 7 C-atomia, R4 on vety, 1-8 C-atomia sisältävä alkyyliryhmä tai 2,3-dihydroksipropyyliryhmä.

Yleisissä kaavoissa I ja II on edullisesti seuraa-10 vat merkitykset: A-B on CH-CH tai c=c,

X-Y on CH2-CH2 tai HC=CH

R1 ja R2 ovat samanlaisia tai erilaisia ja merkitsevät fenyyliryhmää, joka voi olla 1-3 kertaa substituoi-15 tu ytimeen halogeenilla, alkyylillä tai alkoksilla, jois sa on kulloinkin 1-4 C-atomia, R3 on 1-8 C-atomia sisältävä alkyyliryhmä, tai on 5-6 C-atomia sisältävä sykloalkyyliryhmä, R4 on vety, 1-6 C-atomia sisältävä alkyyli, metallikationi, ammoniumioni, fenyyli tai bentsyyli.

20 Erityisen edullisesti yleisissä kaavoissa I ja II

A-B on C=C, X-Y on HC=CH, R1 ja R2 ovat samanlaisia tai erilaisia ja merkitsevät fenyyliryhmää, joka voi olla 1-3 kertaa ytimeen - 25 substituoitu halogeenilla, alkyylillä tai alkoksilla, joissa on kulloinkin 1-4 C-atomia.

R3 on 1-8 C-atomia C-atomia sisältävä alkyyliryhmä tai 5-6 C-atomia sisältävä sykloalkyyliryhmä, R4 on vety tai 1-8 C-atomia sisältävä alkyyliryh- 30 mä.

Kaavan I mukaisia yhdisteitä pidetään edullisina. Keksintö koskaa puhtaita enantiomeerejä sekä kaavan I mukaisia rasemaatteja ja näiden seoksia, siis rase-maatteja, joilla on absoluuttinen konfiguraatio: 3 90412 3R/5S tai 35/5R jolloin X-Y on HC=CH ja 3R/5R tai 3S/5S jolloin X-Y on H2C-CH2 sekä puhtaita enantiomeereja 3R/5S jolloin X-Y on HC=CH ja 5 3R/5R jolloin X-Y on CH2-CH2.

Keksintö koskee edelleen puhtaita enantiomeereja sekä yleisen kaavan II mukaisia rasemaatteja, jotka saavat alkunsa edellä mainituista, yleisen kaavan I mukaisista stereoisomeerisistä, avoinketjuisista dihvdroksi-10 karboksyylihapoista. Yksityiskohtaisesti esitettynä niitä ovat rasemaatit, joilla on absoluuttiset koniiguraatiot: 3R/5S tai 3S/5R jolloin X-Y on HC=CH ja 3R/5R tai 3S/5S jolloin X-Y on CH2-CH2 sekä puhtaat enantiometrit 15 3R/5S jolloin X-Y on HC=CH ja 3R/5R jolloin X-Y on CH2-CH2

Keksinnön mukaiselle menetelmälle on tunnusomaista että, a) vastaavasti substituoidut aldehydit, joilla on 20 kaava III,

A X CHO III

R2 B

R3

25 R

jossa A-B, X-Y, R1, R2 ja R3 merkitsevät samaa kuin edellä, muutetaan yleisen kaavan IV mukaisiksi vastaaviksi hydroksiketoestereiksi, 30 R1 OH 0 4 ^ ΛΛ/“ζ'

R B Y IV

I R R5 35 4 90412 jolloin A-B, X-Y, R1, R2 ja R3 merkitsevät samaa kuin edellä ja R4 on 1 - 8 C-atomia sisältävä alkyyli, b) kaavan IV mukaiset hydroksiketoesterit muutetaan vastaaviksi kaavan I mukaisiksi 3,5-dihydroksiyhdis-5 teiksi, R1 OH OH 4

R2^ Y

10 jolloin A-B, X-Y, R1, R2 ja R3 merkitsevät samaa kuin kaavassa I on ilmoitettu, ja R4 on 1 - 8 C-atomia sisältävä alkyyli ja saatu yhdiste mahdollisesti saippuoidaan kaa-15 van I mukaiseksi yhdisteeksi, jossa R4 on metallikationi, tästä vapautetaan mahdollisesti vapaa happo (R4 = vety).

Kaavan III mukaisten yhdisteiden muuttaminen kaavan IV mukaisiksi yhdisteiksi tapahtuu kulloinkin aina tilanteiden ja vaatimusten mukaan eri vaihtoehtoja käyt- 20 täen, kuten esim.

1. Asetetikkaesterien dianionin reaktio kaavan III mukaisten aldehydien kanssa johtaa liuottimissa, kuten THF:ssä -78 °C:een ja huoneen lämpötilan välisessä lämpötilassa kaavan IV mukaisiin raseemisiin yhdisteisiin. Asetetik-25 kaesterien dianioneja voidaan valmistaa käyttäen eri emäksiä, edullisesti natriumhydridiä ja litiumdiisopropyy-liamidia (LDA) , edullisesti THE:ssä -40 °C:seen ja huoneen lämpötilan välisessä lämpötilassa. 2. Akiraalisten etikkahappoesterien, kuten esim. etyylitai propyylieste-30 rien enolaattien, - joita valmistetaan käyttäen vahvoja emäksiä, edullisesti LDA:ta, THF:ssä-, ja kaavan III mukaisten aldehydien välinen reaktio johtaa liuottimissa, kuten esimerkiksi THF:ssä -78 °C:een ja 0 °C:een välisessä lämoötilassa kaavan V mukaisiin raseemisiin yhdistei-35 siin, 5 90412 r1. oh

a X. I /CO-.R6 V

5 R2 ^ B ^ Y 3 2 1 Ä3 jolloin Rs on akiraalinen happosuojaryhmä, kuten esim.

10 etyyli- tai propyyliryhmä. Reaktio jonkin muun etikkahap-poesterienolaatin kanssa johtaa liuottimissa, kuten esim. THF:ssa -78 °CM:een ja huoneen lämpötilan välisessä lämpötilassa, kaavan IV mukaisiin raseemisiin yhdisteisiin.

3. Kaavan III mukaisten aldehydien reaktio optisesti ak-15 tiivisten etikkahappoesterien litium-, natrium-, kalium-tai magnesiumenolaattien kanssa johtaa liuottimissa, kuten THF:ssä -78 °C:seen ja 0 °C:seen välisessä lämpötilassa kaavan V mukaisiin optisesti aktiivisiin adduktei-hin. Tässä tapauksessa R6 on sopiva optisesti aktiivinen 20 happsuojaryhmä, joka vaikuttaa stereokemiaan 3-C:ssä. Edullisesti käytetään tällöin ryhmää, Q o 25

OH UjjJJ

josta saadaan tulokseksi M Braun'in ja R. Devant'in mukaan (Tetrahedron Lett 25. 5031 (1984)) 3 R konfiguraatio 30 ja jota valmistetaan L-(+)-mantelihaposta. Mutta tarkoitukseen soveltuvat myös muut kiraaliset, optisesti aktiiviset ryhmät. Nyt optisesti aktiiviset, kaavan V mukaiset yhdisteet muutetaan akiraalisilla etikkahappoesterien-olaateilla vaihtoehdon 2. mukaan joko suoraan nyt opti-35 sesti aktiivisiksi, kaavan IV mukaisiksi yhdisteiksi tai 6 90412 sen jälkeen kun primääriset adduktit on muutettu vastaaviksi alkyyliestereiksi, edullisesti metyyliestereiksi.

Kaavan IV mukaisten yhdisteiden muuttaminen kaavan I mukaisiksi yhdisteiksi tapahtuu esimerkiksi vastaavasti 5 kuten kirjallisuudesta tunnetussa menetelmässä (K. Nara-saka und H.C. Pai, Chemistry Lett. 1980 1415). Ensiksi annetaan reagoida trialkyyliboraanin, edullisesti trie-tyyliboraanin kanssa THF:ssa huoneen lämpötilassa ja sitten -78 °C:ssa - 0 °C:ssa pelkistetään natriumboorihydri-10 dillä mahdollisesti lisäten metanolia. Tällä tavalla saadaan edellä olevissa suorituksissa kuvatut stereokemial-liset olosuhteet.

Kaavojen I ja II mukaiset raseemiset yhdisteet voidaan erottaa sinänsä tunnettujen rasemaattilohkaisun 15 menetelmien mukaisesti puhtaiksi enantiomeereiksi. Yleisen kaavan I mukaisten yhdisteiden suoloja ja happoja saadaan yleisesti tunnettujen menetelmien mukaisesti.

Kuvattu menetelmä käsittää lopputuotteiden ja välituotteiden valmistuksen, jolloin A-B on CH-CH ja C=C 20 sekä X-Y on CH2-CH2 ja HC=CH. Mahdolli sesti esiintyvien kaksoissidosten hydraus voidaan suorittaa mahdollisesti joko välituotteissa tai lopputuotteissa tavanomaisten menetelmien mukaan.

Kaavan I mukaisia yhdisteitä, joissa A-B on CH-CH 25 ja X-Y on CH2-CH2, saadaan esim. katalyyttisellä hydrauk-sella kaavan I mukaisista yhdisteistä, joissa A-B on CH-CH ha X-Y on HC=CH. Hydraus suoritetaan liuottimissa, kuten metanolissa, etanolissa tai etikkaesterissä käyttäen katalysaattoreja, kuten Pd/C:tä normaalipaineessa tai 30 kohotetussa paineessa.

Kaavan II mukaisia laktoneja saadaan samoin tunnettu jenmenetelmien mukaisesti esimerkiksi lohkaisemalla vesi avoimista kaavan I mukaisista dihydroksikarboksyyli-hapoista, - joissa R4 on H-, bentseenissä, heksaanissa 7 90412 tai tolueenissa lisäten p-tolueenisulfonihappoa, huoneen lämpötilassa - paluujäähdytyslämpötilassa.

Kaavan III mukaisia aldehydeja saadaan esim. kaavan VI mukaisista nitriileistä.

5 R1

^ A X CN

R2 """ Y VI

10 R3

Kaavan VI mukaisten nitriilien, - joissa A-B, X-Y, R1, R2 ja R3 merkitsevät samaa kuin kaavassa I ja di-iso-15 butyylialuminiumhydridin (DIBAH) välinen reaktio THF:ssä -10 °C:ssa - 50 °C:ssa johtaa hydrolyysin jälkeen suoraan kaavan III mukaisiin aldehydeihin.

Kaavan VI mukaisia nitriilejä saadaan kaavan VII mukaisista aldehydeista, 20 R1

^ A CHO

R2' B ^ 25 13 R5 jolloin A-B, R1 ja R3 merkitsevät samaa kuin edellä, ja 30 nimittäin antamalla reagoida syanometaanifosfonaattien, erityisesti syanometaanifosfonihappodi-isopropyyliesterin kanssa liuottimissa, kuten THFtssä emäksen, edullisesti natriumhydridin läsnä ollessa, -20 °C:een ja huoneen lämpötilan välisessä lämpötilassa. Tällöin muodostuu etupää-35 ssä E-isomeerejä.

8 90412

Kaavan VII mukaisia aldehydeja saadaan hapettamalla kaavan VIII mukaiset alkoholit, R1

5 ^ A CH50H

R B

1·^ VIII

R' 10 jolloin A-B, R1, R2 ja R3 merkitsevät samaa kuin edellä.

Hapetus suoritetaan edullisesti pyridiniumkloro-kromaatilla (PCCrllä) dikloorimetaanissa huoneen lämpötilassa .

Kaavan VIII mukaisia alkoholeja muodostuu pelkis- 15 tämällä kaavan IX mukaisista estereistä R1 0 R \ '

A C

20 „2^ ^B^

i _ IX

RJ

jolloin A-B, R1, R2 ja R3 merkitsevät samaa kuin edellä.

25 R7 on sopiva happosuojaryhmä, edullisesti alkyyli, jossa on 1-5 C-atomia. Pelkistäminen kaavan VIII mukaisiksi yhdisteiksi suoritetaan edullisesti DIBAH:illa dikloorimetaanissa tai litiumaluminiumhydridillä eetterissä tai THFissa -40 °C:een ja huoneenlämpötilan välisessä lämpö- 30 tilassa.

Kaavan IX mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi lähdetään kaavan X mukaisista ketoneista,

R1 X

35 0 R2 g 90412 jolloin R1 ja R2 merkitsevät samaa kuin edellä. Niiden annetaan reagoida seuraavan kaavan XI mukaisten karbok-syylihappoesterien sooivien enolaattien kanssa, 5

HpC-C05R7 XI

* * c R^ jolloin R3 merkitsee samaa kuin edellä ja R7 on suojaryh- 10 mä, erityisesti 1-5 C-atomia sisältävä alkyyli. Enolaat-teja valmistetaan edullisesti käyttäen LDA:ta THF:ssä -78 °C:een lämpötilassa. Reaktioseosta saadaan tulokseksi kaavan XII mukaisia additiotuotteita, 15 1

R1 OH

. C — CH — C0~R7 YTT

O S » -Z ^ Ali R^ R5 20 jolloin R1, R2, R3 ja R7 merkitsevät samaa kuin edellä.

Veden eliminointi edullisesti p-tolueenisulfoni-hapolla tolueenissa kohotetussa lämpötilassa - paluujääh-dytyslämpötilassa johtaakaavan IX mukaisiintyydyttymät-tömiin estereihin, joissa A-B on C=C.

25 Muutettaessa kaavan XII mukaiset yhdisteet kaavan IX mukaisiksi yhdisteiksi, jolloin A-B on C=C, muodostuu diastereomeerejä, jos R1 on erilainen kuin R2. Nämä erotetaan vaiheessa IX esimerkiksi suorittamalla välähdys-kromatografiointi tai HPLC.

30 Määrätyissä tapauksissa erottaminen tapahtuu vasta myöhäisemmässävaiheessa tai loppuvaiheessa.

Kaavan IX mukaisia tyydytettyjä yhdisteitä, joissa A-B on CH-CH, saadaan esimerkiksi katalyyttisellä hyd- 10 90 41 2 rauksella tyydyttymättömistä yhdisteistä, joissa A-B = C=C, edullisesti käyttäen Pd/C:tä liuottimissa, kuten me-tanolissa, etanolissa tai jääetikassa kohotetussa paineessa .

5 Lähtöaineina käytettyjä kaavan XI mukaisia karbok- syylihappoeetereitä voidaan saada helposti. Käytetyt ke-tonit X ovat ainoastaan osittain kaupallisesti saatavia. Yleinen menetelmä niiden vlamistamiseksi on tunnettu siitä, että Grignard-reagenssin R'-MgHal annetaan reagoida 10 aldehydin R2-CHO kanssa (Houben-Weyl, Methoden der Or- ganischen Chemie, Bamd 6/la/2, s. 928, 1980) , jolloin R1 ja R2 merkitsevät samaa kuin edellä, kaavan XIII mukaisiksi yhdisteiksi,

15 OH

R1 - CH - R2 XIII

Kaavan XIII mukaiset alkoholit hapetetaan sitten kaavan X mukaisiksi ketoneiksi, edullisesti pyridinium-20 klorokromaatilla (PCC:llä) dikloorimetaanissa huoneen lä.mpötilassa. Toinen menetelmä kaavan X mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi on tunnettu Friedel-Craftsasyloin-nista (Houben-Weyl, Methoden der Organischen Chemie Band 7/2a, sivu 15, 1973) .

25 Välituotteiden puhdistus tapahtuu tarvittaesea tislaamalla, kiteyttämällä, suorittamalla välähdys-kro-matografiointi tai HPLC.

Esimerkkejä kuvattujen yhdisteiden lisäksi voidaan keksinnön mukaista menetelmää käyttäen valmistaa seuraa-30 via yhdisteitä: 11 9041 2

OH OH

^ X \ CO,R4 R2' 1 2 r3 r4 = Na 5 R1_R^_r3 A-B x~y 4- f luorifenyyli 4- fluorifenyyli metyyli C=C H=Cfi « n etyyli " " „ „ t-butyyli" 10 i)_ fluori—3-metyylife- 4-fluori-3-metvylifenyyli metyyli nyyll n it etyyli " " ti " isobutyyli " " il " t-butyyli " " 4- fluori-2-metyylife- 4- f luori-2-metyylifenyyli metyyli " " nyyli n n etyyli •j 5 n ti isobutyyli" " 1’ t-butyyli " 4- fluori-3-metyylife- 4- metoksifenyyli metvyli " " n nyyl1 I. etyyli : : n " isopropyyli " " " " isobutyyli" 20 " " t-butyyli " " 4- metoksifenyyli 4-fluori-3-metyylifenyyli metyyli " n etyyli " " n π iscpropyyli" " n n isobutyyli" " " " t-butyyli " 25 4- fluori-2-met^life- 4-metbksifenyyli metyyli " " n n etvyli " " n n isoprqpyyli" " n n isobutyyli" " n n t-butyyli " " i2 9041 2

R1__f_ R3_A-D X-Y

4- metoksifenyyli 4- fluori-2-metyylifenyyli metyyli C=C HC=CH

n n etyyli " " ti n isopropyyli " " n ii isobutyyli " " 5 n ii t-butyyli " " 3,^,5-.trimetyylioksi- 4-fluorifenyyli metyyli " " „ fenyyli „ etyyli n „ isopropyyli " ii n isobutyyli " " 4_fluorifenyyli 3,4j5_trimetoksifenyyli metyyli " " 10 " '1 etyyli n ii isopropyyli " " n n isobutyyli " 4-fluori-2-metv^life- 3,4,5- trimetoksifenyyli metyyli " " ii n etyyli " " n n isopropyyli " " 15 n n isobutyyli " " 3.4.5- trimetoksifenyyli 4-fluori-2-metyylifenyyli metyyli " " ii 11 etyyli n n isopropyyli " n n isobutyyli " " 3.4.5- trimetoksifenyyli 4- fluori-3-metyylifenyyli metyyli " " 20 ” " etyyli n 11 isopropyyli " " n n isobutyyli " " 4- fluori-3-met^life- 3,4,5-trimetoksifenyyli metyyli " " " '' etvyli " n isopropyyli " " 2 ^ " " isobutyyli " " i3 90 41 2

_r]_R2_*3 A~B X-Y

4- fluorifenyyli 4- fluorifenyyli metyyli HC-CH HC*CH

„ n etyyli „ n t-butyyli " " 5 H_ fluori-3-metjglife- i}_fluori-3-metyylifenyyli metvyli " " n n etyyli n n isobutyyli " " „ n t-butyyli 4-fluori-2-metyylife- 4- fluori-2-metyylifenyyli metyyli „ nyyli ,, etyyli IQ „ n isobutyyli " „ „ t-butyyli 4- fluori-3-metyylife- 4- metoksifenyyli metyyli „ ^11 ,. etyyli n n isopropyyli " " m n isobutyyli " " ^ 5 n » t-butyyli H- metoksifenyyli 4- fluori-3-metyylifenyyli metyyli " ” II » etyyli „ n isopropyyli " ... n n isobutyyli " " : · n n t-butyyli " " pn 4- fluori-2-metyylife- 4- metoksifenyyli metyyli " " : ; „ W11 „ etyyli : : |t isopropyyli " - n it isobutyyli " " „ „ t-butyyli 4-metoksifenyyli 4- fluori-2-metyylifenyyli metyyli " " n n etyyli " " 25 . ......

n ii isopropyyli „ „ isobutyyli " " n n t-butyyli " " i4 90 41 2

R1_r2_R3 Λ-B X-Y

3)4,5- trimetoksifenyyli 4-fluorifenyyli metyyli HC-CH CH=C’I

n » etyyli „ .. isopropyyli " „ „ isobutyyli " 5 4- fluorifenyyli 3,4 ,5-^imstoksifenyyli metyvli " " n n etyyli " " n n isopropyyli " " n it isopropyyli " " 4-_f luori-2-metyyli- 3,4,5- trimetoksifenyyli metyyli " " „ fenyyli „ etyyli „ „ isopropyyli " ^ „ „ isobutyyli " 3,4,5-trimetoksifenwli 4-fiuori-2-metyylifenyyli metyyli " " it ti etyyli " " ti n isopropyyli " " „ n isobutyyli " " 3^,5- trimetoksifenyyli 4-fluori-3-metyylifenyyli metyyli " " ti tt etyyli " " „ „ isopropyyli „ „ isobutyyli " 4-fluori-3-metyylifenyyli3,4,5- teisetoksifenvyli metyyli n n etyyli tt n isopropyyli ” ” 2 0 „ „ isobutyyli " " 4_ fluoriferyyli 4- fluorifenyyli metvvli HC-CH H2C-CH2 n n etyyli " " „ Il butyyli 4- fluori-3-metyylife- 4-f luori-3-metvylifenyyli metyyli " " nyyll * . , . „ „ n π etyyli 2 5 " " isobutyyli " „ „ t-butyyli 4- fluori-2-metyylife- 4- fluori-2-metyylifenyyli metyyli „ nyyli „ etvvli „ n isobutyyli " „ n t-butyyli i5 90 41 2

R1_j£_R3 Λ-B- X-Y

4-fluori-3-metwlife- 4- metoksifenyyli metyyli HC-CH H^C-Cr^ m 1 i> etyyli „ „ isopropyyli " n ti isobutyyli " " 5 n n t-butyyli " " 4- metoksifenyyli 4-fluori-3-tnetyyj.jfe- metyyli " tt n etyyli " " t, tt isopropyyli " „ π isobutyyli " " „ „ t-butyyli " 10 4- fluori-2-metyylife- 4.metoksifenyyli metyyli " " ^11 „ etyyli „ ,1 isopropyyli " „ isobutyyli " " „ „ t-butyyli " 4- metoksifenyyli 4-fluori-2-metyylife- • · nyyli metyyli -.---)5 " " etyyli n n isopropyyli " " - ‘ n '1 isobutyyli " " ti n t-butyyli " " ie 9041 2 n1 p2 3

R R R A-B X-Y

3,^.5- trimetoksifenyyli' ^-fluorifenyyli metyyli HC-CH H^C-CH-, n π etyyli n il isopropyyli " " n n isobutyyli " " 5 4_ fluorifenyyli 3>^>5--trijnet°ksifenyyli metyyli " " ti m etyyli " " n n isopropyyli " " " n isobutyyli " " 4- fluori-2-metvylife- 3>i)>5_ trimetoksifenyyli metyyli " " , etyyli 10 " " isopropyyli " " n n isobutyyli " 3)¾>5- trimetoksifenyyli 4- fluori-2-metyylife- metyyli " " n „ nVyli etyyli n „ isopropyyli " n n isobutyyli " " 1 5 3,^>5-trimetoksifenyyli l|-fluori-3-metyylifenyyli metyyli " " it n etyyli " " n „ isopropyyli " " „ „ isobutyyli " " 4_fluori-3-metyylifenyyli3)H>5-trinptoksifenyyli metyyli " " li n etyyli . £ q " " isopropyyli " " n n isobutyyli " " i7 9041 2

Entsyymi HMG-CoA-reduktaasi on luonnossa laajalle levinnyt. Se katalysoi mevalonihapon muodostumista HMG-CoAista. Tämä reaktio on keskeinen vaihe kolesterolin biosynteesissä (I.R. Sabine: 3-hydroksi-3-metyyligluta-5 ryyli-koentyymi-A-reduktaasi, CRC Press, 1983). Veren korkean kolesterolipitoisuuteen liittyy lukuisia sairauksia kuten esim. sepelvaltimotauti tai ateroskleroosi eli valtimoiden kovettuminen niiden seinämien rasvakerrostumi-en takia. Tämän johdosta terapeuttisen päämääränä pidetään 10 kohonneiden veren kolesteroliarvojen alentamista tällaisten sairauksien ennaltaehkäisemiseksi ja hoitamiseksi. Edellytyksenä on endogeenisen kolesterolisynteesin estäminen tai alentaminen. HMG-CoA-reduktaasin estoaineet salpaavat kolesterolin biosynteesin jo varhaisessa vai-15 heessa. Tämän johdosta ne soveltuvat veren kohoneen kolesterolipitoisuuden aiheuttamien sairauksien ennaltaehkäisyyn ja hoitoon. Endogeenisen synteesin alentaminen tai vähentäminen johtaa lisääntyneeseen kolesterolin imeytymiseen plasmasta soluihin. Parempi vaikutus voidaan saa-20 vuttaa antamalla samanaikaisesti sappihappoja sitovia aineita kuten anionienvaihtajia. Kohonnut sappihappojen eritys johtaa voimistuneeseen uudelleen synteesiin ja täten lisääntyneeseen kolesterolin hajoamiseen (M.S. Brown, P.T. Kovanen, J.L. Goldstein, Science 212, 628 (1981); M.S.

25 Brown, J.L. Goldstein, Spektrum der Wissenschaften 1985 (1),96). Keksinnön mukaiset yhdisteet ovat HMG-CoA-reduk-taasin estoaineita. Ne soveltuvat tämän johdosta estämään tai vähentämään kolesterolin biosynteesiä ja täten veren kohonneesta kolesterolipitoisuudesta johtuvien sairauksien, 30 erityisesti sepelvaltimotaudin , aterosklerooin eli valtimoiden kovetustaudin, hyperkolesterolemian eli lisääntyneen veren kolesterolipitoisuuden, hyperlipoproteine-mian eli veren runsaan liproteiinipitoisuuden ja vastaavien sairauksien ennaltaehkäisyyn ja hoitoon.

ie 9041 2

Keksintö koskee tämän johdosta myös farmaseuttisia valmisteita» joiden perustana ovat kaavan I tai kaavan II mukaiset yhdisteet sekä näiden yhdisteiden käyttöä lääkeaineina, erityisesti veren kohoneen kolesterolipi-5 toisuuden hoitamiseksi.

Kaavojen I ja II mukaisia yhdisteitä annostellaan eri annostusmuotoja käyttäen, edullisesti suun kautta tabletteina, kapseleina tainesteinä. Päivittäinen annos on kulloinkin aina poltilaan painon ja rakenteen mukaan 10 3 mg - 2500 mg, edullisesti kuitenkin 10 - 500 mg. Keksin nön mukaisia yhdisteitä voidaan käyttää liuotettuina tai suspensoituina farmakologisesti hyväksyttäviin orgaanisiin liuottimiin, kuten yksi- tai useampiarvoisiin alkoholei-hin, kuten esim. etanoliin tai glyseroliin, triasetiiniin, 15 öljyihin, kuten esim. auringonkukkäöljyyn , kalanmaksaöljyyn, eettereihin, kuten esim. dietyleeniglykolidimetyylieette-riin tai myös polyeettereihin, kuten esim. polyetyleeni-glykoliin, tai myös muiden farmakologisesti hyväksyttävien polymeerikantaja-aineiden, kuten esim. polyvinyylipyrro-20 lidonin läsnä ollessa, tai muiden farmaseuttisesti käyttökelpoisten lisäaineiden, kuten tärkkelyksen, syklodekstrii-nin tai polysakkaridien läsnä ollessa. Edelleen keksinnön mukaisia yhdisteitä voidaan käyttää yhdistelmänä sellaisten lisäaineiden kanssa, jotka sitovat sappihappoja, eri-25 tyisesti ei-toksisten, emäksisten anionienvaihtohartsien kanssa, jotka sitovat sappihapot mahalaukun ja ohutsuolen alueella imeytymättömässä muodossa.

Dihydroksikarboksyylihappojen suoloja voidaan annostella myös vesipitoisina liuoksina.

30 Kaavojen III, IV, VI, VII, VIII, IX ja XII mu kaiset yhdisteet ovat uusia ja esimerkiksi arvokkaita välituotteita kaavan I mukaisten yhdisteiden valmistuksessa. Keksintö koskee tämän johdosta myös kaavojen III, IV, VI, VII, VIII, IX ja XII mukaisia yhdisteitä sekä menetel-35 miä niiden valmistamiseksi.

i9 90 41 2 HMG-CoA-reduktaasi-aktiviteetti määritettiin seu-raavien testisysteemejä käyttäen: 1) HMG-CoA-reduktaasi-aktiviteetin estyminen rotan maksan mikrosomeista saaduissa liukenevaan muotoon saatuissa 5 entsyymivalmisteissa HMG-CoA-reduktaasi-aktiviteetti mitattiin rottien maksan mikrosomeista saaduista, liukenevaan muotoon saatetuista entsyymivalmisteista, jolloin indusoituminen tapah- tui kolestyramiinin ( Cuemid) vaikutuksesta päivä-yö-ryt- 1 4 10 min muuttamisen jälkeen/ Substraattina toimi (S,R) C-HMG-

CoA, NaDPH:n konsentraatio säilytettiin inkuboinnin ajan 1 4 uudistuvalla systeemillä. C-mevalonaatin erottaminen 1 4 substraatista ja muista tuotteista (esim. C-HMG) tapahtui suorittamalla pylväseluointi, jolloin jokaisen yksit-15 täisen näytteen eluointiprofiili määritettiin. Tällöin luo-vuttiin H-mevalonaatin jatkuvasta käyttämisestä, koska määrityksessä on kyse estovaikutuksen suhteellisesta arvosta. Yhdessä koesarjassa käsiteltiin kulloinkin entsyy-mivapaata kontrollinäytettä, entsyymiä sisältävää normaali-20 näytettä (=100 %) ja sellaista näytettä, johon oli lisätty valmisteita. Jokainen yksittäinen arvo muodostui kolmesta rinnakkaisnäytteestä saatuna keskiarvona. Valmistetta sisältämättömien ja valmistetta sisältävien näytteiden keskiarvoissa esiintyvien arvojen merkitsevyys arvioi-25 tiin t-testillä. Edellä kuvatun menetelmän mukaisesti määritettiin keksinnön mukaisista yhdisteistä esimerkiksi seu-raavat estoarvot HMG-CoA-reduktaasiin nähden. (IC^Q-arvo M =seyhdisteen molaarinen konsentraatio, joka tarvitaan 50 %:seen estoon).

30 Yhdiste IC^^-arvo (M) esimerkistä;_ 11a 7,0 x 10"9 11c 2,0 x 10~8 11n 1,3 x 10-8 2o 9041 2 2) Testi, jossa tutkitaan kolesterolin biosynteesin estymistä soluviljelmissä lisäämällä ^-radioaktiivista esiastetta kolesteroliin

Menetelmän periaate:

5 Lipoproteiinivapaassa elatusaineessa olevien HEP

G2-solujen yksinkertaisia kerroksia esi-inkuboitiin 1 tunnin ajan käyttäen vastaavia konsentraatioita testiaineita; sen jälkeen kun oli lisätty 4C-merkattua esiastetta *C-natriumasetaattia inkubointia jatkettiin vielä 3 tunnin 10 ajan. Tämän jälkeen osa soluista saippuoitiin alkalisesti lisäten sitä ennen kuitenkin ^H-kolesterolin sisäistä standardia. Saippuoitujen solujen lipidit uutettiin klorofor-mi-metanolilla. Tämä lipidiseos erotettiin preparatiivi-sesti ohutkerroskromatografiaa käyttäen sen jälkeen kun 15 oli lisätty kantaja-aine-kolesterolia; kolesterolibandit eristettiin, senjälkeen kun ne oli tehty näkyviksi jodi- 14 14 höyryllä ja C-esiasteesta muodostunut C-kolesteroli- määrä määritettiin skintigrafisesti (käyttäen radioaktiivisen aineen avulla tuotettua kuvaa). Solujen tasaosassa mää-20 ritettiin soluproteiini siten, että voitiin laskea yhden aikayksikön aikana/mg soluproteiinia 4C-esiasteesta muo-1 4 dostunut C-kolesteroli-määrä.Lisätyn testivalmisteen estovaikutuksen vertaamiseksi käytettiin liuotinkontrollia, ; jotta voidaan suoraan ilmoittaa kolesterolin biosyntee- . 25 s in estyminen käytettäessä määrättyä molaarista konsent- raatiota testivalmistetta väliaineessa. Soluviljelmän tasaosa osuuksissa arvioitiin morfologisesta (valomikros-koopilla) soluviljelmän vahingoittumattomuus sekä solujen vaurioitumattomuus valmisteiden vaikutuksesta. Seuraa-30 vassa taulukossa on ilmoitettu suhteellinen vaikutuksen voimakkuus mevinoliiniin nähden, joka testattiin samalla tavalla.

2i 9041 2

Yhdiste suhteellinen vaikutuksen esimerkistä voimakkuus mevinoliiniin nähden / %_/ 11a 100 5 11c 50 11n 30

Esimerkki 1

Yleinen ohje kaavan XIII mukaisten yhdisteiden valmista-10 miseksi 1 mooliin magnesium-lastuja 100 ml :ssa kuivaa eetteriä lisätään 0,1 moolia vastaavasti substituoitua bromibentseeniä. Reaktio käynnistetään mahdollisesti lisäämällä hieman jodia, dibromietaania tai lämmittämällä.

15 Reaktion käynnistyttyä tiputetaan loput bromibentseenistä 200 mlrssa eetteriä ja vielä siten, että eetteri kiehuu. Lisäyksen päätyttyä keitetään vielä 1 tunnin ajan paluu- jäähdyttäen. Jäällä jäähdyttäen lisätään tipoittain lopuk- 2 si 0,9 moolia vastaavasti substituoitua aldehydxa R -CHO 20 500 ml :ssa eetteriä. Annetaan lämmetä huoneen lämpötilaan ja sekoitetaan vielä 1 tunti. Lopuksi keitetään 2 tunnin ajan paluujäähdyttäen. Seos kaadetaan kyllästettyyn, vesipitoiseen ammoniumkloridiliuokseen. Vesipitoinen faasi uutetaan eetterillä (2 x) ja yhdistetyt orgaaniset faasit 25 pestään kerran kyllästetyllä vesipitoisella natriumvety-karbonaattiliuoksella. Kuivaamalla MgSO^ :llä ja poistamalla liuotin tislaamalla vakuumissa saadaan tulokseksi kaavan XIII mukaisia yhdisteitä kiinteinä aineina tai öljyinä, jotka puhdistetaan mahdollisesti uudelleenkiteyttä-30 mällä tai suorittamalla välähdys-kromatografiointi. Useimmissa tapauksissa ei ole kuitenkaan tarpeellista suorittaa erillistä puhdistusta.

22 90 41 2

Taulukko 1 OH

H1 - CH - R2 XIII

5

Esimerkki Brorriibentseeni_Aldehydi_Tuote__ h3c OH ch3 1 a r^vBr r^TCH0 ΛΛΑ

,ο aac„ JQC Xj XX

1U F ^ CH3 f'v'cHj F

0CH3 H3CO OH

- rXT vTSr·»'!^5

15 CH3 X I S^F

3 CH3 ch3 h3c oh ,c rr (VCH0 jVrr™3

F -V H3C"^ CH3 H AA y F

20 CH3 3 UM3

OH

r^VBr ^vcho c«3 ,d rU rV rXpXXr .· 25 CH3 CH3 CH3 23 9041 2

Esimerkki 2

Yleinen ohje kaavan X mukaisten yhdisteiden valmistamiseki

Suspensioon, jossa on 0,06 moolia pyridinium-klorokromaattia (PCC) 200 ml:ssa kuivaa metyleenikloridia 5 kaadetaan huoneen lämpötilassa 0,05 moolia kaavan XIII

mukaista alkoholia 40 ml:ssa metyleenikloridia. Sekoitetaan 3-5 tuntia huoneen lämpötilassa ja lisätään 3 tila-vuusosaa eetteriä. Suodattamalla silikageelillä ja poistamalla liuotin tislaamalla vakuumissa saadaan tuloksek- 10 si kaavan X mukaisia yhdisteitä, useimmiten riittävän puhtaina. Erillinen puhdistus tapahtuu mahdollisesti uu-delleenkiteyttämällä, tislaamalla tai suorittamalla vä-lähdys-kromatografiointi.

Taulukko 2 15 0

R1 - C - R2 X

1 2

Esim._R_R_Lähtöaine_ 20

H,C H3C

“ ,ύ M

V 25 ?CH3 *'·Χγ ',ct$r CH3 30 - H3C;0r Ä f'V h3c ^ν^Ν:Η3 :,,i? ,0 ch3 CH3 24 90 41 2

Esimerkki 3 (Kaavan XII mukaisten yhdisteiden valmistus) a) 3-hydroksi-3,3-di(4-fluorifenyyli)-2-isopropyylipropio- nihappo-etyyliesteri 5 50,7 ml (0,361 moolia) di-isopropyyliamiinia lisättiin 250 ml:aan kuivaa tetrahydrofuraania (THF) typpiatmosfäärissä. 0°C:ssa tiputettiin 195 ml (0,314 moolia) n-BuLi:a (heksaani). 36,2 ml (0,241 moolia) isovale-riaanahappoetyyliesteriä lisättiin tipoittain. Sen jäl-10 keen kun oli pidetty 1 tunnin ajan -70°C:ssa tiputettiin tässä lämpötilassa 50 g (0,229 moolia) 4,4-difluoribentso-fenonia 200 ml:ssa THFsää. 1,5 tunnin kuluttua kaadettiin 1n vesipitoiseen suolahappoon. Uutettiin eetterillä (3x) ja yhdistetyt orgaaniset faasit pestiin kerran kylläste-15 tyllä vesipitoisella natriumvetykarbonaattiliuoksella.

Kuivaamalla magnesiumsulfaatilla ja poistamalla liuotin tislaamalla vakuumissa saatiin tulokseksi 74,9 g (0,215 moolia, 94 %) esimerkkiä 3a, jonka annettiin reagoida suoraan edellen ilman eri puhdistusta.

20 MS (DCI), C20H22F202 : 333 (M+H+), 331 H-NMR (60 MHa, CDCl^): 6* 7,60 - 6,60(m,8H), 4,05(q,2H), 3f39(ä,1H), 1,90 (mf1H), 1,20-0,80 (m,9H)

Vastaavasti kuten esimerkissä 3a saatiin taulukossa 3 esitettyjä yhdisteitä.

25 90 41 2

Taulukko 3

R1 OH

X C - CH - CO-CrjHj-5 ,, 2 2 5 R R"5

Esimerkki R1_j*f_R^_Moolimassa_ 10 3, ό 0 -CH2CH(CH3>2 °21H26°3’ 326 3c ¢) φ -CH2CH(CHj)2 C21H24F203, 362,4

15 F F

3d φ φ φ C2JH2803, 352 20 ;·; 3e (φ) (φ) -(CH2)3CH3 C21H24F2°3’ 562,4

F F

25 3f ό φ ό C23H26r2°3· 388’4

F F

30 3g H3C'C^^Ch3 ^γ^€Η3 “ch(CH3)2 C24H31F04, 402,5

F

h3cyVCH3 A

35 5h l|^J V^CH -CH(CH3)2 C24H31 f03’ 586,5 ch3 f 3 26 9041 2

Taulukko 3 (jatkoa)

Esimerkki R_R^___R^_ Moolimassa_ 3i ^ -0H(CH3)2 C22H26r20,, 376,4

F F

10 ^γΟΗ3 Γίί^γΟΗ3 33 LJJ Ιγϋ -CH(CH3)2 C22H26P203, 376,4

F F

1 5 Esimerkki 4 (Kaavan IX mukaisten yhdisteiden valmistus, jolloin A-B on C=C).

a) 3,3-di-(4-fluorifenyyli)-2-isopropyyliakryylihappo-etyyliesteri 20 74,8 g (0,215 moolia) esimerkin 3a mukaista yh distettä liuotettiin 800 ml:aan tolueenia , lisättiin 7,5 g (0,04 moolia) p-tolueenisulfonihappoa ja kuumennettiin 2 tunnin ajan vedenerottamisessa paluujäähdyttäen. Jäähdyttämisen jälkeen liuos pestiin kaksi kertaa '25 kyllästetyllä, vesioitoisella natriumvetykarbonaatti- liuoksella ja kuivattiin (MqSO^). Poistamalla liuotin tislaamalla vakuumissa saatiin tulokseksi 70,8 g (0,214 moolia, 99 %) esimerkkiä 4a , jota käytettiin suoraan seu-raavaan vaiheeseen ilman eri puhdistusta.

30 MS. C20H20F2O2 : 330 (M+), 301 27 90 41 2

Taulukko 4 R1 ΟΟ,Ο,Ης v. / 2 2 3

/C = C

2 v 3 5 n

Esimerkki R^_R^_R^_Moolimassa_ 10 4b Λ (S -ch2ch(ch3)2 c21h24o2 308(M+) , 265 4c LJ (j -ch2ch(ch3)2 c21h22r2o2 15 T T 344(M+), 301

F F

4d (^) 0 C23H26°2’ 334(M+), 305 20 4e (^j] l^j] -(CH2)3CH3 C20H20F2°2 F F 330(M+), 299, 287 4f Ö 0 0 C25H24F2°2 I ' 370(M+), 341

F F

3^ 4g 'ΪχίΧ -ch(ch,)2 c2 h fo „3c^ch3 V^ch3 5 3§4(h-),3353 r 35 4h UL· H3XXh -CHCCH3i2 C24H29rOj I 3 3 Ch3 384(M+), 353

F

28 90 41 2

Taulukko 4 (jatkoa)

Es<mprvn' R1_?!_£_Moolimassa- 5 H3C CH3 41 V -ch(ch3>2 c24h29po2 CH3 F 368(M+) H3CV^Vch3 10 4:1 VV V -ch(ch3)2 c24h29po2

T CH3 X «8(MO

411 0L OLh -CH<CH,’2 ®22«24t2°2 15 X 3 ^ CH3 358(M+), 329 ch3 a^ych3 41 kj kj -CH(CH3)2 C22H24P202 'f f 358(M+), 329 . 20

Esimerkki 4 (Kaavan IX mukaisten yhdisteiden valmistus, jolloin A-B on CH-CH) a) 3,3-di-(4-fluorifenyyli)-2-sykloheksyylipropioni-25 happoetyyliesteri 4,81 g (13 mmol) esimerkin 4f yhdistettä hyd-rattiin 120 ml:ssa etanolia käyttäen 500 mg Pd/C:tä (10 %) 96 tunnin ajan 150 bar'in paineessa. Vedynoton päätyttyä katalysaattori suodatettiin erilleen, liuo-30 tin poistettiin tislaamalla ja jäännös kromatografioi- tiin silikageelillä (käyttäen sykloheksaani/etikkaeste-riä = 19:1).

Saanto: 4,78 g (12,8 mmol, 98 %)

Rf (sykloheksaani/etikkaesteri =19:1) : 0,37.

29 90 4 1 2 MS, C25H26F202: 372 (M+), 289, 203 H-NMR (CDClj, 60 MHz) :ί-·7,50-6,60 (m ,8H), 4,30 (d,1H), 3,90 (q,2H), 3,90 (m,1H), 3,20 (m,1H), 2,40-0,60 (m,13H) 5 Esimerkki 5 (Kaavan VIII mukaisten yhdisteiden valmistus) a) 3,3-di-(4—fluorifenyyli)-2-isopropyylipropenoli 3,2 g:aan (9,7 mmol) esimerkin 4a yhdistettä 10 tiputettiin 100 mlrssa dikloorimetaania 0°C:ssa argon-atmosfäärissä 24,3 ml (29,1 mmol) di-isobutyylialumini-umhydridiliuosta (tolueeni). Sen jälkeen kun oli pidetty 1 tunnin ajan 0°C:ssa tiputettiin 2 ml metanolia ja lopuksi 20 ml 1n vesipitoista suolahappoa. Laimennettiin 15 eetterillä ja 1n suolahapolla, kunnes faasien erottuminen tapahtui. Vesipitoinen faasi uutettiin kerran eetterillä ja yhdistetyt faasit pestiin kyllästetyllä natrium-kloridiliuoksella (1x) ja kuivattiin (MgS04:llä) . Poistamalla liuotin tislaamalla vakuumissa saatiin tulokseksi 20 2,7 g (9,4 mol, 97 %) esimerkkiä 5a, jota käytettiin suoraan seuraavaan vaiheeseen ilman eri puhdistusta.

Rf (sykloheksaani/etikkaesteri =2:1) : 0,42 MS, Cl8Hl8F20 : 288(M+), 270, 257, 245 25 H-NMR (60 MHz, CDClg): 6= 7,30-6,70 (m,8H), 4,05 (s,2H), 2,70 (sept.lH), 1,30 (leveä 1H), 1,03 (d,6H)

Vastaavasti kuten esimerkissä 5a saatiin taulukon 5 esimerkkejä .

30 90 4 1 2

Taulukko 5

R1 CH20H

""""a - B"^ 2^ 1 3 5 R^

Esimerkk'i r^ r^ r3 Moolimassa

A-B on C=C

10 5b ITS -CH2CH(CH3)2 C19H220, 266 (Ϊ4+), 209 5c O O -ch2ch(ch3)2 c19h20p2o 15 TT 302(M+)

F F

53 ö 0 ö C2'H^° ^ ^ 292(M+)274, :·: 20 261, 209 5e 0 0 -(CH2)3CH3 C19H20P20 y ]. 302(M+), 245 5f O ό O C21*22F20’ T 328(M+),310,

F F

297,245 ; 3» Hh”ÄCB3 0WC«(CV2 3i 90 41 2

Taulukko 5 (jatkuu) 1 2 3

Esim. R R R Moolimassa 5h 0^ch3 H.d^X:H3 -ch(ch3)2 c22h2?fo2 p 3 342(M+)

H3C v/W ^3 rU

5 i Xj UI -CH(CH )2 C22H27F0 10 . T OT3 326 (M+) ch3 f 15 5 3 ÖL·*20tjr0113 -ch(ch3)2 c22h27fo 15 Ych, T 326(M+) F CT 3 5k _CH (CH^ )2 C20H22F2° ^:^3 J 3 316 (M+)

20 F

51 (fiT™3 Λ'™3 C20H22F2° 316(M+)

F F

25

A-B on HC-CH

5m 0 0 0 C21H24F2°* V τ 330(M+), 312, 30 F F 294, 278, 203 32 90 41 2

Esimerkki 6 (Kaavan VII mukaisten yhdisteiden valmistus) a) 3,3-di-(4-fluorifenyyli)-2-isopropyylipropenaali

Suspensioon, jossa on 3,03 g (14,1 mmol) PCC:tä 5 100 ml:ssa dikloorirvetaania kaadettiin huoneen lämpöti lassa 2,7 g (9,4 mmol) esimerkin 5a yhdistettä 40 ml:ssa dikloorimetaania. Sen jälkeen kun oli sekoitettu 3 tunnin ajan huoneen lämpötilassa lisättiin 3 tilavuusosaa eetteriä ja suodatettiin silikageelin kautta. Poistamalla 10 liuotin tislaamalla vakuumissa saatiin tulokseksi 2,53 g (8,8 mmol, 94 $ ) esimerkkiä 6a.

Sp.: 69°C

Rf (sykloheksaani/etikkaesteri = 3:1): 0,56 MS, C18H16F20: 286(M+), 271, 257 15 H-NMR (60 MHz): 6= 9,40 (d, 1H), 720-6,80 (m,8H), 2,80 (m, 1 H), 1,20 (d,6H).

Vastaavat! kuten esimerkissä 6a saatiin taulukon 6 esimerkkejä.

33 9 0 41 2

Taulukko 6

R1 CHO

\ /

A - B

5

Esimerkki r1_R^_R^_Massaspektri _A-B on C=C_ 10 i 6b (Tj -CH2CH(CH3)2 CigH200, 264(M+) 15 6 c (φ) (φ) -CH2CH(CH3)2 CigH18F20, 300(M+)

F F

6d Q) ¢) Λ C21H220, 290(M+) .-.-.20 6 e Cj) Lj) -(CH2)3CH3 C19H18F20' T ' 300(M+), 269 ''.'25 F F 257, 244 6 f ö 0 ö C2,H20F2° T p 326(M+)f 308, .30 295 6e ’XX, CL C22H25P02 h3c «3 T % 340(H+) 34 90 41 2

Taulukko 6 (jatkuu)

Esimerkki R1 R2 R3 Massaspektri 6 h C^3h3c^Xh3 -CH(CH3)2 C22H25F02 F 340(M+) 10 H3c ch3 6i IIJ V^ch3 -ch(ch3)2 c22h25fo ot3 f 324(M+) 15 H3C yV^3 6 j -CH(CH3)2 C22H25F0 F 3 CH3 324(M+) 20 6i C^CH Q-CH, C20H20r2° 1^3 l 3 31 4 (M+)

F

61 Uj V1 -ch(ch3)2 c20h20f20 25 J f 314(M+)

A-B on HC-CH

30 6 m (S ή] Λ C21H22F20' 328 (M+ ),245,203

F F

35 9041 2

Esimerkki 7 (Kaavan VI mukaisten yhdisteiden valmistus) a) 4 ,4-di-(4-fluorifenyyli)-3-isopropyylibutadienyyli-syanidi 5 590 mgrsta (12,3 mmol) natriumhydridiä poistet tiin argonatmosfäärissä valkoöljy ja pantiin 30 ml:aan THF:ää. 0°C:ssa ruiskutettiin 2,0 ml (10,3 mmol) syano-metaanifosfonihappodi-isopropyyliesteriä. Kaasunkehitty-misen päätyttyä (noin 30 min.) tiputettiin 2,52 g 10 (8,8 mmol) esimerkin 6a yhdistettä 50 ml:ssa THF:ää ja sekoitettiin 3 tunnin ajan 10-15°C:ssa. Seos kaadettiin kyllästettyyn NaCl-liuokseen ja uutettiin eetterillä (3x). Yhdistetyt orgaaniset faasit pestiin kerran kyllästetyllä NaCl-liuoksella ja kuivattiin (MgSO^rllä). Pois-15 tamalla liuotin tislaamalla vakuumissa saatiin tulokseksi pentaanista kiteyttämisen jälkeen 1,27 g esimerkkiä 7a. Kromatogfafroimalla emäliuos silikageelillä (käyttäen sykloheksaani/etikkaesteriä = 19:1) saatiin edelleen 1,09 g.

20 Saanto: 2,36 g (7,6 mmol, 86 %) .

Sp.: 108°C.

Rf (sykloheksaani/etikkaesteri = 19:1) : 0,23.

MS, C20H17F2N: 309,1 (M+) 1H-NMR (60 MHz, CDCI3): 6- 7f20-6,80 (m,9H), 25 5f40 (d, * 16 Hz,1H), 3,00 (sept.,1H), 1,08 (d,6H)

Vastaavasti kuten esimerkissä 7a. saatiin taulukon 7. esimerkkejä.

36 90 41 2

Taulukko 7 CN

R1 _/

V A - B

5 o ^ ' ·=5 1 p ·*

Esimerkki R_R__R^_Massaspektri

A—B on C=C

10 ---— 7b Cj^ -CH2CH(CH3)2 C21H21N, 287(M+) ?b Ö 0 "CH2CH(CH3)2 C21H21N’ 287(M+) 7C ö O -CH2CH(CH3^2 C21H19F2N’ p J 323(M+) 20 7d 0 0 ό C23H23N· 313(μ+>· -· 270,256 7e φ V -(CV3CH3 C21H19F2N' F F 323(M+),280,266 30 7f 0 0 0 C25H2lr2N' J ^ 349(M+) 7Η/°ή -CH(CH )2 C24H26FN0, :..35 'h3c^ch3 Y^ch3 5 2 24 26 Γ 37 9041 2

Taulukko 7 (jatkuu) 1 2 3

Esimerkki R R R Massaspektri 5 7h 0-¾ Le ÖL -Mlctya C24H26™· F 3 3 3 363(M+), 10 V UL· C24H26™· 10 1 13 347(M+) ch3 f H3C Y^Ych3 73 UL V -0H(CH5)2 C24H26M· 15 pT^3 CH3 347(M+)

7k O-ru VL -CH(CH3}2 C22H21F2N

y ch3 y 337(m+) . . 20

71 Λ LjTCH3-CH(CH3)2 C22H21F2N

F f 337(M+) 2 5 -

A-B on HC-CH

7 " Ö 0 C23H23P2N

30 F F 551(M+) 38 90 4 1 2

Esimerkki 8 (Kaavan III mukaisten yhdisteiden valmistus) a ) 5,5-di- (4-fluorifenyyli)-4-isopropyylipentadienaali 1,26 g:aan (4,1 mmol) esimerkkiä 7a 30 ml:ssa 5 THF:ää ruiskutettiin 0°C:ssa 6,85 ml (8,2 mmol) di-iso- butyylialuminiumhydridi-liuosta (tolueeni). Sen jälkeen kun oli pidetty 4 tunnin ajan 10°C:ssa hydrolysoitiin varovasti 1n suolahapolla ja uutettiin etyyliase-taatilLa (3x) . Yhdistetyt orgaaniset faasit pestiin kerran 10 kyllästetyllä natriumvetykarbonaattiliuoksella ja kuivat tiin (MgSO^:llä). Poistamalla liuotin tislaamalla vakuu-missa ja suorittamalla välähdyskromatografiointi silika-geelillä (käyttäen sylkoheksaani/etikkaesteriä =9:1 +1 % NEt^) saatiin tulokseksi 980 mg (3,14 mmol, 77 %) esimerk-15 kiä 8a.

Sp. 80-82°C

Rf (sykloheksaani/etikkaesteri = 5:1) 0,38.

MS, C20H18F20 : 312 (M+), 297, 269 H-NMR: 9,23 (d,J« 7Hz,1H), 7,30-6,70 (m,9H), 6,24 20 (dd, J] = 16Hz, J2* 7Hz,1H), 2,90 (sept.,1H)f 1,08 (d,6H).

Vastaavasti kuten esimerkissä 8a saatiin taulukon 8 esimerkkejä.

39 9041 2

Taulukko 8

1 CHO

R / \ 5 A - Ϊ5 2 '3

R RP

1 2 3

Esimerkki R_R_R__Massa-spektri 10 A-B on C=C_

Bb (^j) (Q) -CH2CH(CH3)2 C21H220, 290(M+), 247, 233, 205 15 4 8C ΓΊ) |Tj -CH2CH(CH3)2 C21H20F20, IT 326(M+), 283,269

«r F

: 20 ea ¢) (^) ό c„h24o. 316CM*) 88 O O -lC«ZhCh C21B20P20· 25 I T 326(M+), 283,269

F F

40 90 41 2

Taulukko 8 (jatkuu)

Esimerkki R R R-' Massaspektri 8f Λ 0 Λ C23H22F2°* ^ Τ' ^ 352 (Μ+), 349,269

f F

10 86 h'c^chj φ·α,3 'ch(ciV2 c24h27fo2, 366(«+)

F

8h Qo), -CH(CH,)2 C H P02, 366(i*) 15 J 3 3 0,3 8i XT “CH(CH,)2 C24H27F0, 350(M+) | CH-3 f 20 λ H C i 8 j 3 ']j^J'CH3 -CH(CH3)2 C24H27F0, 350(M+) F 3 CH3 25 ek O^CH OXh 'CH(CV2 C22H22P2°- 340(14+) F 3 F 3 ^yCH 3 /V“3 8 1 U*J -CH(CH3)2 C22H22F20, 340(M+)

30 f F

A-B on HC-CH

'· ¢1 φ C23H24P20· 554(M+)

F F

41 9041 2

Esimerkki 9 (Kaavan IV mukaisten yhdisteiden valmistus) a) 9,9-di-(4-fluorifenyyli)-5-hydroksi-3-okso-8-isopro-pyyli-6,8-nonadieenihappoetyyliesteri 5 240 mg (5 mmol) natriumhydridiä, josta on pois tettu valkoöljy, lisättiin argon-atmosfäärissä 15 ml *aan THFiää. 0°C:ssa ruiskutettiin 597,ui (4,7 mmol) asetetik-

O

kahappoetyyliesteriä ja sekoitettiin 15 minuuttia 0 C:ssa. Lopuksi ruiskutettiin 2,8 ml (4,6 mmol) n-BuLi:tä (hek-10 saani) 0°C:ssa. 15 minuutin kuluttua tiputettiin -70°C:ssa 975 mg (3,1 mmol) esimerkin 8a mukaista yhdistettä 40 ml:ssa THF:ää ja sekoitettiin 2,5 tunnin ajan -70°C':ssa. Annettiin lämmetä 0°C:een, hydrolysoitiin kylmällä 2n suolahapolla ja uutettiin eetterillä (3x) .

15 Yhdistetyt orgaaniset faasit pestiin kerran kylläste tyllä keittosuolaliuoksella ja kuivattiin (MgSO^ :llä). Poistamalla liuotin tislaamalla saatiin tulokseksi 1,41 g esimerkkiä 10a.

Rf (sykloheksaani/etikkaesteri = 2j1)i 0,22.

20 MS, C26H2gF204 i 442 (M+), 424

Esimerkkien 9a - 9m yhdisteitä käytettiin ilman eri puhdistustaja karakterisointia seuraavaan vaiheeseen.

Vastaavasti kuten esimerkissä 9a saatiin tau-25 lukon 9. esimerkkejä.

Taulukko 9 OH 0 H1 C02C2H5 30 T?' H3

Esimerkki R3_Moolimassa_

A-B on C=C

35 —:---T : 9b (Tp -CH2CH(CH3)2 C27H3204, 420 42 90 41 2

Taulukko 9 (jatkuu) 1 2 3

RsiirorHf-j R_R_R_Moni imagea__ 5 9c j^) -CH2CH(CH5)2 C27H?0P204, 456

F F

93 Ö ö 0 C29H34°4· 446 10 9 e _(CH2)-jCH^ ^27^30F284r 4·^

F F

15 9f φ 0 ö C29H32F2°4’ 482

F F

9 « h3C^CH3 ¢^3 -CH(CH3)2 C30H37F05* 496

F

25 A. h3co 9h V^CH HC-C^CH "CH<CH,)2 C30H37r05' 496 F 3 3 3 30 φς -ch(ch3)2 c30H37ro4, 480 CH3 f 3 H3C>^sT-CH3 9 3 LA -CH(CH3)2 C30H37F04, 480 35 F 3 ch3 43 90 41 2

Taulukko 9 (jatkuu) 1 ? 3

Esimerkki R_H__ R_Moolimassa 9 k (^j)^ ~CH^CH5^2 C28H32F2°4’ 470 10 9 1 φΤ™3 Ö" 3-CH(CH3)2 C28H32F204, 470

F F

_A-B on HC-CH_ 15 i 9 m C29H34F2°4’ 484

F F

20 Esimerkki 10 . . (Kaavan I mukaisten yhdisteiden valmistus) a) 9 ,9-di-(4-fluorifenyyli)-3,5-dihydroksi-8-isopropyy-li-6 ,8-nonadieenihappoetyyliesteri 1,4 g:aan (3,1 mmol) esimekin 9a mukaista yh-25 distettä lisättiin argon-atmosfäärissä 20 ml:ssa kuivaa THF:ää 5,0 ml (5 mmol) trietyyliboraaniliuosta (THF) ja sekoitettiin 10 minuutin ajan huoneen lämpötilassa. -70°C:ssa lisättiin sitten 240 mg (6,2 mmol) natrium-boorihydridiä kiinteänä. Lopuksi ruiskutettiin hitaasti 30 3 ml metanolia. Sen jälkeen kun oli pidetty 3 tunnin ajan -70°Cissa seos kaadettiin varovasti jäähdytettyyn liuokseen, jossa oli 5 ml 35 %:sta vetyperoksidia 100 mljssa vettä. 5 minuutin kuluttua uutettiin etikka-esterillä (3x). Yhdistetyt orgaaniset faasit pestiin 35 kyllästetyllä natriumvetykarbonaattiliuoksella (2x) 44 90 41 2 ja kyllästetyllä keittosuolaliuoksella (1x) ja kuivattiin (MgS04:llä). Poistamalla liuotin tislaamalla va-kuumissa ja suorittamalla välähdySkromatografiointi si-likageelillä (käyttäen svkloheksaani/etikkaesteriä 5 = 3:2 + 0,5 % Et^Niää) saatiin tulokseksi 720 mg (1,62 mmol, 52 %) kahden vaiheen kautta) esimerkkiä 10a.

Rf Sykloheksaani/etikkaesteri = 2:1) : 0,11 MS, C26H50F204 : 444 (M+) 426,408 10 H-NMR (270 MHz, CDCl^) : te 7r10-6,80 (m8H), 6,15 (d, J= 16Hz, 1H), 5,53 (dd,=16Hz,J2*7,2 Hz, 1H), 4,30 (m,1H), 4,17 (q,2H), 4,10 (m,1H) 2,83 (sept.,1H), 2,43 (m,2H), 1,52 (m,1 H) 1,37 (m, 1H) 1,28 (t,3H), 1f09 (d, 6H).

Taulukko 10 15 “ — p1

\ OH OH

,/^ΛΛ/ C°2C2H5 A? 20 4 o ·* Karakteriset

Esimerkki R n analyyttiset arvot _A-B on C=C_ 25 1°b A r^S WS’ C27H34°4: 422(^),404,387 H-NMR (270 MHz, CDCl^ te 7,35-7,05 (m,10H), 6,40 (a, J1=16Hz,1H), 5,75 (dd, Ji=16Hz, J2= ®z,1H), 4,33 (m,1H), 4,20 30 (m,1H), 4,15 (q,2H), 2,43 (m,2H), 2,24 (d,2H), 1,85 (m,1H), 1,70 (m,1H), 1,65 (m,1H), 1,24 (t,3H), 0,73 (d,6H).

45 90 4 1 2

Taulukko 10 (jatkuu)

Esimerk- Karakteriset 5 R1 p2 r3 analyyttiset —---’_____arvot___ 10c -CHpCHiCH,)^ MS, C?7H,pF?04: 458(1^),441,423 V H-NMR (270 MHz), CDClj): F F 6= 7,15-6,92 (m,8H), 6,48 (d, 1 0 J]= 16Hz,1H), 5,79 (dd, Ji«16Hz, J2= 7,6Hz,1H), 4,39 (m,1H), 4,24 (m,1H), 4,19 (q,2H), 3,64 ja 3,07 (leveä kulloinkin 1H), 2,49 (m,2H), 2,27 (d,2H), 1,88 15 (m,1H), 1,72 (m,1H), 1,50 (m,1H), 1,29 (t,3H), 0,78 (d,6H) 10« ό 0 ό C29H3604: 448(^),431,413 20 ^ ^ v H-NMR (270 MHz), CDC15): 6= 7.35- 7,00 (m,10H), 6,17 (d, j,=l6Hzf1H), 5,46 (dd,j,=l6Hz, j2= 7,2Hz,1H), 4,23 (m,1H), 4,18 (q,2H), 4;06 (m,1H), 2,55-2,31 (b.3H), 1,75-1,40 1.35- 1,20 ja 1,10 (kulloinkin m, yhdessä 15H)· 46 90 41 2 r

Taulukko 10 (jatkuu)

Esimerk- Karakteriset ki R1 r2 R3 analyyttiset - - , ---arvot- 10 e (Tj Lj) -CH2)3CH5 MS, C27H52F204 : 458(M+) ,440,422 ' H-NMR (270 MHz, CDCl^): 6= F 7,10-6,90 (m,8H), 6,31 (d, J-| = 16Hz, 1H), 5,80 (dd,J-| = 16Hz, J2=6,4Hz,1H), 4,40 (m, 1 H), 4.25 (m,1H), 4,18 (q,2H), 2,48 (m,2H), 2,27 (t,2H), 1,72 (m,1 H), 1,60 (m,1H), 1,45 (m,2H), 1,28 (t,3H), 1.25 (m,2H), 0,82 (t,3H).

10 f (Tj (M) Q MS, CggH^F^: 484(M+),466 ΊΓ H-NMR (270 MHz, CDCl^): 6= F F 7,15-6,80 (m,8H), 6,16 (d,

Jl=l6Hz,1H), 5-48 (dd,J-,= 16Hz, J2= 7,4Hz,1H), 4,28 (n,1H), 4,18 (q,2H), 4,10 (m,1H), 2,53-2,34 (m,3H), 1,80-1,00 (m,15H) H3CO X. MS, C30H39FO5: 498 (M+), 480 10 g Jk jl f jl ”^^3^2 DC (dikloorimetaani/metanoli=4 :1) H3c/VCH3 Rf = 0,40 X H^CO 1 .

10 h fl Π -CH(CH,), «S. C30H39FO5; 498 (M ) , 480 1^CH3 H3CTi!%:^CH DC (dikloorimetaani/metanoli=5:1) : F Rf = 0,40 47 90 41 2

Taulukko 10 (jatkuu) 1 2 3

Esim. R R R Karakteristiset analyyt- ---_----tiset arvot___ VJv®: A, «S, C30H39FO4: 482 (M I, «4 5 io i T Γ' jl -CH(CH^)2 DC(diklcorimetaani/metanoli= 5:1): ιΓ Τ™3 Rf = 0.32

ch3 F

10 ,η 1 Λ) ) MS' C30H39ro4: 482 <«*>' 464 ^ Ikjk 5^2 DC (dikloorimetaani/metanoli 5:1)

CH *3 T

P J CH3 Rf *= 0,32

15 A. MS, m (M*), i»5H

10k Lj]^ -01(0113)2 DC(dikloorimetaani/metanolr ^:1) *.

Rf= 0,39 2o 101 lY^3 ^ C28H34F2°4: 472 (Wf)’ 454 DC(clikloorimetaani/metaroli" M: 1); _F_F_Rf= 0,39_ _A-B on _

Ali MS, C^HjgFjO,: 486 W), 468 10m | (1 f I Γ 3 DC (diklaorimetaani/metaiolF 4:1): V t ^ “* °'H2 48 90 41 2

Esimerkki 1Qn: (Kaavan I mukaisen yhdisteen valmistus, jolloin A-B on C=C, X-Y on H2C-CH2) n) 3,5-dihydroksi-9,9-di(4-fluorifenyyli)-8-isopropyy-5 li-8-noneenihappoetyyliesteri 240 mg (0,55 mmol) esimerkin 10a mukaista yhdistettä hydrattiin 10 ml:ssa etanolia käyttäen 100 mg:aa palladiumia hiilen pinnalla (10 %) huoneen lämpötilassa ja normaalipaineessa. 2 tunnin kuluttua oli H2~otto päät-10 tynyt ja suodatettiin katalysaattorista erilleen ja haih dutettiin. Kromatografroimalla silikageelillä (käyttäen sukloheksaani/etikkaesteriä = 2:1) saatiin tulokseksi 100 mg esimerkkiä 10n.

MS (FAB), C26H32F2O4: 469 (M + Na+), 447,429 15 H-NMR (270 MHz,CDC13): 6= 7,15-6,90(m,8H), 4f20-4,05(m,3H), 3,60(m,lH) 2#76(sept.,lH), 2f40(m,2H), 2,26-2,00(m,2H), 1,56-1,16(m,7H), 1,01 (dd,6H)

Esimerkki 11 (Kaavan I mukaisten yhdisteiden valmistus) 20 ä) 9,9-di-(4-fluorifenyyli)-3,5-dihydroksi-8-isopropyy- li-6,8-nonadieenihapon natriumsuola 445 mg (1,0 mmol) esimerkin 10a yhdistettä liuotettiin 20 ml:aan etanolia ja lisättii 10 ml (1 mmol) 0,1 n natronlipeätä. Sen jälkeen kun oli pidetty 1 tun-25 nin ajan huoneen lämpötilassa liuotin poistettiin tislaa malla vakuumissa lisäten useita kertoja tolueenia. Kiinteä jäännös pestiin useita kertoja n-pentaanilla ja kuivattiin korkeavakuumissa.

49 90 41 2

Rf (CHCl^/MeOH= 7:5):0,45 H-NMR (270 MHz, D20): 6= 7,0-6,7 (m,8H), 6,04 (d, J1=16Hz,1H), 5)38 (dd, J1= 16Hz, J2=8Hz,1H), 4,02 (m,1H), 3,65 (m,1H), 2,61 (sept.,1H), 2,16 (m,2H), 1,50 (m,1H), 1,25 (m,1H), 0,90 (d,2H)

Vastaavasti kuten esimerkissä 11a saatiin taulukon 11 esimerkit.

Taulukko 11 10 -— R1 \ OH OH „ H2" 15 '3

Esimerkki p1 ^3 Moolimassa

A-B on C=C

20 11b -CH2CH(CH3)2 C25H2904Na,4l6,5 25 11c [j^| -CH2CH(CH5)2 C25H27F204Na,452,4

F F

1!d (^j) (^} C27H3104Na,442,5 so 9041 2

Taulukko 11 (jatkuu)

Esimerkki R1 R2 R3 Moolimassa

5 A-B on C=C

11e “(CH2 )^CH^ ^25^27^2^4^8,’ 452,4

F F

10 11ί φ φ φ C27H29F204Na, 478,5

F F

l1g h3cXXch3 0Uh3 -CH(Ch3)2 C28H34F05Na, 492,5

F

20 11h Φ^Η 7XK -ch(ch3 )2 C28H34F05Na, 492,5

F

1,1 X? CXch 'CH<C“5 )2 ^28^34^4Na< 4^6 (5 25 ch3 f 3 11J ÖL ¥0·“! -CH(CH^ C28H34I’°4Na· 476l5 F 3 “3 30 "* (Xu Φα,3 * 3^2 ^26^29^2^4^8’ 466,5 F 3 F 3 35 r^N-^ f^Y ^3 111 Uji φφ -CH(CH3)2 C26H29F204Na, 466,5 si 9041 2

Taulukko 11 (jatkuu)

Esimerkki r! r3 Moolimassa^ 5 ~ :

A-B on HC-CH

,0 llm 0 φ 0 C27H3lWa> ^-5

F F

Esimerkki 11n:

Vastaavalla tavalla kuten esimerkissä 11a ku-15 vattiin, saadaan esimerkin 10n yhdisteestä 3,5-dihyd- roksi-9,9-di(4-fluorifenyyli)-8-isopropyyli-8-noneeni-hapon natriumsuola.

Kaavan I mukainen yhdiste, A-B on C=C, X-Y on R^=R^=4 f luorifenyyli, R^ = isopropyyli, R^ = Na.

20 24H27F2°4Na' 440 '4‘

Optisesti aktiivisen yhdisteen synteesi, vastaten esimerkkiä 11a.

Esimerkki 12: (3S , (1'S)-7,7-di-(4-fluorifenyyli)-3-hydroksi-6-isopro-25 pyyli-4,6-heptadieenihappo-1 ',2',21-trifenyyli-1',2'- etaanidioli-1'-esteri LDA-liuokseen, joka on valmistettu 0°C:ssa 506^ul:sta (3,6 mmol) di-isopropyyliamiinia ja 2,26 ml:sta N-BuLi:a (heksaani) 5 ml:ssa THFrää, lisättiin 30 -78°C:ssa argonatmosfäärissä 340 mg (1,02 mmol) (S)- 1,2,2-trifenyyli-1,2-etaanidioli-1-asetaattia (Tetrahedron Lett. 25, 5031 (1984)). Annettiin lämpötilan kohota -20°C:seen, kunnes kaikki oli liuennut ja sitten jäähdytettiin jälleen -78°C:een. Tähän liuokseen tipu-35 tettiin 318 mg (1,02 mmol) esimerkkiä 8a pienessä 52 9041 2 määrässä THF:ää. Sen jälkeen kun oli annettu seistä 2 tunnin ajan -78°C:ssa kaadettiin kyllästettyyn, vesipitoiseen ammoniumkloridilluokseen ja uutettiin eetterillä (3x). Yhdistetyt orgaaniset faasit kuivattiin 5 (MgSO^rllä) ja liuotin poistettiin. Jäännös kromatogra- fioitiin silikageelillä (käyttäen sykloheksaani/etikka-esteriä =2:1 % NEt^ta). Edelleen diastereomeerien erottaminen onnistuu käyttäen HPLCrtä, DC:tä (sykloheksaani/ etikkaesteri = 3:1): Rf = 0,13.

1 0 Esimerkki 13 : (3S)-7,7-di-(4-fluorifenyyli)-3-hydroksi-6-isopropyyli-4 ,6-heptadieenihappometyyliesteri 77 mg (0,12 mmol) esimerkin 12 mukaista hydrok-siesteriä liuotettiin 3 ml:aan metanolia ja lisättiin 15 liuos, jossa oli 2,7 mg (0,12 mmol) natriumia 1,35 ml:ssa metanolia ja sekoitettiin huoneen lämpötilassa. Reaktion päätyttyä liuotin poistettiin vakuumissa ja jäännös kro-matografioitiin silikageelillä (käyttäen sykloheksaani/ etikkaesteriä = 3:1 + 1 % NET^ :a) .

20 MS, C23H24F2°3: 386' 369*

Esimerkki 14: (5 S)-9,9-di-(4-fluorifenyyli)-5-hydroksi-3-okso~8-isopropyyli-6,8-nonadieenihappo-7-butyyliesteri LDA-liuokseen, joka oli valmistettu 0,260 ml:sta 25 (1/86 mmol) di-isopropyyliamiinia ja 1,16 ml:sta n-BuLi:a (heksaani) 3 ml :ssa THF :ää, tiputettiin -78°C:ssa argonatmosfäärissä 250^ul (1,86 mmol) etikkahappo-7- butyyliesteriä. Sen jälkeen kun oli pidetty 30 minuutin ajan -78°C.'ssa, tiputettiin 120 mg (0,310 mmol) esimer-30 kin 13 mukaista yhdistettä pienessä määrässä THF:ää ja sekoitettiin 3 tunnin ajan -30°C:ssa - -40°C:ssa. Reak-tioliuos kaadettiin kyllästettyyn, vesipitoiseen ammo-niumkloridiliuokseen ja uutettiin eetterillä (3x). Kuivaamalla magnesiumsulfaatilla ja poistamalla liuotin tis-35 laamalla saatiin tulokseksi esimerkki 14 , jota ei enää puhdistettu erikseen.

53 9041 2 DC (sykloheksaani/etikkaesteri = 3*1): kehitetty useita kertoja.

Esimerkki 15 (3R),(5S)-9,9-di(4—fluorifenyyli)-3,5-dihydroksi-8-5 isopropyyli-6,8-nonadieenihappo-t-butyyliesteri

Vastaavasti kuten esimerkissä 10a saatiin esimerkin 15 mukaista yhdistettä esimerkin 14 mukaisesta yhdisteestä.

DC (sykloheksaani/etikkaesteri = 2:1) :Rf = 0,23 (15) , 10 RF = 0,39 (14) .

MS, C2gH3404F2: 472(M+), 455,437

Esimerkki 16: 15 (3R) ,(5S)-9,9-di(4-fluorifenyyli)-3,5-dihydroksi-8- isopropyyli-6,8-nonadieenihapon natriumsuola (optisesti aktiivinen 11a)

Vastaavasti kuten esimerkissä 11a saatiin optisesti aktiivista 11a:ta esimerkin 15 mukaisesta yhdis-20 teestä.

Claims

54 90 4 1 2 Patenttivaatimus Menetelmä uusien terapeuttisesti käyttökelpoisten 3,5-dihydroksikarboksyylihappojen ja niiden johdannaisten 5 valmistamiseksi, joilla on yleinen kaava I, R1 I OH OH .Λ. /CO R4 R2 B ^ ^ Y '5^3^! i 10 r3 jolloin yleisessä kaavassa I A-B on CH-CH tai C=C,
15 X-Y on CH2-CH2 tai HC=CH, R1 ja R2 ovat samanlaisia tai erilaisia ja merkitsevät fe-nyyliryhmää, jolloin aromaattiset ryhmät voivat olla 1-3 kertaa ytimeen substituoituja halogeenilla, alkyylillä tai alkoksilla, joissa on kulloinkin 1-6 C-atomia,
20 R3 on korkeintaan 8 C-atomia sisältävä alkyyliryhmä tai sykloalkyyliryhmä, jossa on 3 - 7 c-atomia, R4 on vety, 1-8 C-atomia sisältävä alkyyliryhmä tai 2,3-dihydroksipropyyliryhmä, tunnettu siitä, että a) vastaavasti substituoidut aldehydit, joilla on 25 kaava III, ^Η0 111 R B y
30 R^ jossa A-B, X-Y, R1, R2 ja R3 merkitsevät samaa kuin edellä, muutetaan yleisen kaavan IV mukaisiksi vastaaviksi hydrok- siketoestereiksi, 55 90 41 2 Ri OH 0 . ?, R3 jolloin A-B, X-Y, R1, R2 ja R3 merkitsevät samaa kuin edellä ja R4 on 1 - 8 C-atomia sisältävä alkyyli, 10 b) kaavan IV mukaiset hydroksiketoesterit muutetaan vastaaviksi kaavan I mukaisiksi 3,5-dihydroksiyhdisteiksi, R1 OH OH .
15 A^^c°2R 1 R2^ Y jolloin A-B, X-Y, R1, R2 ja R3 merkitsevät samaa kuin kaavassa I on ilmoitettu, ja R4 on 1 - 8 C-atomia sisältävä 20 alkyyli ja saatu yhdiste mahdollisesti saippuoidaan kaavan I mukaiseksi yhdisteeksi, jossa R4 on metallikationi, tästä vapautetaan mahdollisesti vapaa happo (R4 = vety). 56 90 41 ? Förfarande för framställning av nya terapeutiskt användbara 3,5-dihydroxikarboxylsyror och derivat av des-5 sa, med den allmänna formeln I, R1 I OH OH A. X /CO R4 R2 B ^ ^ Y I I
10 R3 varvid i den allmänna formeln I A-B är CH-CH eller C=C,
15 X-Y är CH2-CH2 eller HC=CH, Rl och R2 är likadana eller olika och betecknar fenylgrup-per, varvid de aromatiska grupperna kanvara substituerade 1-3 ganger i kärnan med halogen, alkyl eller alkoxi, innehällande vardera 1-6 C-atomer,
20 R3 är en högst 8 C-atomer innehällande alkylgrupp eller cykloalkylgrupp, innhällande 3-7 C-atomer, R4 är väte, en 1 - 8 C-atomer innehällande alkylgrupp eller 2,3-dihydroxipropylgrupp, kännetecknat därav, att 25 a) pä motsvarande sätt substituerade aldehyder med formeln III, R1 X CHO III 30 0 /" ,/-' \ R2 B Y R3 väri A-B, X-Y, R1, R2 och R3 betecknar samma som ovan, om-35 vandlas tili motsvarande hydroxiketoestrar med formel IV, 57 9041 2 „ι OH O . B ϊ IV R3 varvid A-B, X-Y, R1, R2 och R3 betecknar samma som ovan, och R4 är en 1 - 8 C-atomer innehällande alkyl, 10 b) hydroxiketoestrarna med formel IV omvandlas tili motsvarande 3,5-dihydroxiföreningar med formeln I, R1 OH OH 4 '"'a J^K^C°2R r
15 K2'' Y varvid A-B, X-Y, Rl, R2 och R3 betecknar samma som angivits i formel I, och R4 är en 1 - 8 C-atomer innehällande alkyl, 20 och den erhällna föreningen förtvälas eventuellt tili en förening med formeln I, väri R4 är en metallikatjon, härur frigöres eventuellt den fria syran (R4 = väte).