FI90412C - Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten 3,5-dihydroksikarboksyylihappojohdannaisten valmistamiseksi - Google Patents

Description

ί 1 90412

Menetelmå terapeuttisesti kSyttOkelpoisten 3,5-dihydrok-sikarboksyylihappojohdannaisten valmistamiseksi

Entsyymi 3-hydroksi-3-metyyliglutaryyli-koentsyy-5 mi-A-reduktaasi (HMG-CoA-reduktaasi) katalysoi mevaloni-hapon muodostumista 3-hydroksi-3-metyyliglutaryyli-koe-ntsyymi A:sta (HMG-CoA). Talla reaktiolla on keskeinen merkitys kolesterolin biosynteesisså. 3-hydroksi-3metyy-liglutaarihapon (HMG) ja mevalonihapon johdannaisia on 10 kuvattu kolesterolibiosynteesin eståjina. (M.R. Boots et al., J. Pharm. Sci. 69, 306 (1980), F.M. Singer et al., Proc. Soc. Exper. Biol. Med. 102, 270 (1959), H. Feres, Tetrahedron Lett. 24 3769 (1983)). 3-hydroksi3-metyyli-glutaarihapolla itsellaan on rotilla ja ihmisilla suori-15 tetuissa kokeissa todettu olevan merkittåva kolestero-liarvoja alentava vaikutus (Z.Beg. Experientia 23, 380 (1967), ibid. 24, 15 (1968), P.J. Lupien et al., Lencet 1978, 1, 283).

Nyt todettiin, etta yleisen kaavan I mukaiset di-20 hydroksikarboksyylihapot seka vastaavat kaavan II mukaiset laktonit ovat HMG-CoA-reduktaasin estajia.

Keksinto koskee tSman johdosta 3,5-dihydroksikar-boksyylihappojen ja niiden johdannaisten valmistamista, joilla on yleinen kaava I, 25

R1 OH OH

: 30 jolloin yleisessa kaavassa I A-B on CH-CH tai C=C, 3 5 X-Y on CH2-CH2 tai HC=CH, 2 90412 R1 ja R2 ovat samanlaisia tai erilaisia ja merkitsevåt fenyyliryhmåå, jolloin aroroaattiset ryhmåt voivat olla 1 -3 kertaa ytimeen substituoituja halogeenilla, alkyylillå tai alkoksilla, joissa on kulloinkin 1-6 C-atomia, 5 R3 on korkeintaan 8 C-atomia sisåltåvå alkyyliryhmå tai sykloalkyyliryhmå, jossa on 3 - 7 C-atomia, R4 on vety, 1-8 C-atomia sisaltåva alkyyliryhmå tai 2,3-dihydroksipropyyliryhmå.

Yleisisså kaavoissa I ja II on edullisesti seuraa-10 vat merkitykset: A-B on CH-CH tai c=c,

X-Y on CH2-CH2 tai HC=CH

R1 ja R2 ovat samanlaisia tai erilaisia ja merkit-sevåt fenyyliryhmåå, joka voi olla 1-3 kertaa substituoi-15 tu ytimeen halogeenilla, alkyylillå tai alkoksilla, jois sa on kulloinkin 1-4 C-atomia, R3 on 1-8 C-atomia sisål-tåvå alkyyliryhmå, tai on 5-6 C-atomia sisaltåva sykloal-kyyliryhmå, R4 on vety, 1-6 C-atomia sisåltåvå alkyyli, metallikationi, ammoniumioni, fenyyli tai bentsyyli.

20 Erityisen edullisesti yleisisså kaavoissa I ja II

A-B on C=C, X-Y on HC=CH, R1 ja R2 ovat samanlaisia tai erilaisia ja merkit-sevåt fenyyliryhmåå, joka voi olla 1-3 kertaa ytimeen - 25 substituoitu halogeenilla, alkyylillå tai alkoksilla, joissa on kulloinkin 1-4 C-atomia.

R3 on 1-8 C-atomia C-atomia sisåltåvå alkyyliryhmå tai 5-6 C-atomia sisåltåvå sykloalkyyliryhmå, R4 on vety tai 1-8 C-atomia sisåltåvå alkyyliryh- 30 må.

Kaavan I mukaisia yhdisteitå pidetåån edullisina. Keksinto koskaa puhtaita enantiomeerejå sekå kaavan I mukaisia rasemaatteja ja nåiden seoksia, siis rase-maatteja, joilla on absoluuttinen konfiguraatio: 3 90412 3R/5S tai 35/5R jolloin X-Y on HC=CH ja 3R/5R tai 3S/5S jolloin X-Y on H2C-CH2 seka puhtaita enantiomeereja 3R/5S jolloin X-Y on HC=CH ja 5 3R/5R jolloin X-Y on CH2-CH2.

Keksinto koskee edelleen puhtaita enantiomeereja seka yleisen kaavan II mukaisia rasemaatteja, jotka saa-vat alkunsa edella mainituista, yleisen kaavan I mukai-sista stereoisomeerisistå, avoinketjuisista dihvdroksi-10 karboksyylihapoista. Yksityiskohtaisesti esitettynå niitå ovat rasemaatit, joilla on absoluuttiset konfiguraatiot: 3R/5S tai 3S/5R jolloin X-Y on HC=CH ja 3R/5R tai 3S/5S jolloin X-Y on CH2-CH2 seka puhtaat enantiometrit 15 3R/5S jolloin X-Y on HC=CH ja 3R/5R jolloin X-Y on CH2-CH2

Keksinnon mukaiselle menetelmålle on tunnusomaista ettå, a) vastaavasti substituoidut aldehydit, joilla on 20 kaava III,

A X CHO III

R2 B

R3

25 R

jossa A-B, X-Y, R1, R2 ja R3 merkitsevåt samaa kuin edella, muutetaan yleisen kaavan IV mukaisiksi vastaaviksi hydroksiketoestereiksi, 30 R1 OH 0 4 ΛΛ/“ζ'

R B Y IV

I R R5 35 4 90412 jolloin A-B, X-Y, R1, R2 ja R3 merkitsevat samaa kuin edellå ja R4 on 1 - 8 C-atoinia sisaltåva alkyyli, b) kaavan IV mukaiset hydroksiketoesterit muute-taan vastaaviksi kaavan I mukaisiksi 3,5-dihydroksiyhdis-5 teiksi, R1 OH OH 4

R2^ Y

10 jolloin A-B, X-Y, R1, R2 ja R3 merkitsevat samaa kuin kaa-vassa I on ilmoitettu, ja R4 on 1 - 8 C-atomia sisaltava alkyyli ja saatu yhdiste mahdollisesti saippuoidaan kaa-15 van I mukaiseksi yhdisteeksi, jossa R4 on metallikationi, tasta vapautetaan mahdollisesti vapaa happo (R4 = vety).

Kaavan III mukaisten yhdisteiden muuttaminen kaavan IV mukaisiksi yhdisteiksi tapahtuu kulloinkin aina tilanteiden ja vaatimusten mukaan eri vaihtoehtoja kayt- 20 tåen, kuten esim.

1. Asetetikkaesterien dianionin reaktio kaavan III mukaisten aldehydien kanssa johtaa liuottimissa, kuten THF:ssa -78 °C:een ja huoneen låmpotilan valisesså lampotilassa kaavan IV mukaisiin raseemisiin yhdisteisiin. Asetetik-25 kaesterien dianioneja voidaan valmistaa kayttaen eri em-åksiå, edullisesti natriumhydridiå ja litiumdiisopropyy-liamidia (LDA) , edullisesti THE:ssa -40 °C:seen ja huoneen lampdtilan valisesså låmpdtilassa. 2. Akiraalisten etikkahappoesterien, kuten esim. etyylitai propyylieste-30 rien enolaattien, - joita valmistetaan kayttaen vahvoja emåksiå, edullisesti LDA:ta, THFisså-, ja kaavan III mukaisten aldehydien vålinen reaktio johtaa liuottimissa, kuten esimerkiksi THFrsså -78 °C:een ja 0 °C:een vålises-så låmootilassa kaavan V mukaisiin raseemisiin yhdistei-35 siin, 5 90412 r1. oh a X. I /CO-.R6 v 5 R2 ^ B ^ Y 3 2 1 A3 jolloin Rs on akiraalinen happosuojaryhmå, kuten esim.

10 etyyli- tai propyyliryhmå. Reaktio jonkin muun etikkahap-poesterienolaatin kanssa johtaa liuottimissa, kuten esim. THF:ssa -78 °CM:een ja huoneen lampotilan vålisessa låm-potilassa, kaavan IV mukaisiin raseemisiin yhdisteisiin.

3. Kaavan III mukaisten aldehydien reaktio optisesti ak-15 tiivisten etikkahappoesterien litium-, natrium-, kalium-tai magnesiumenolaattien kanssa johtaa liuottimissa, kuten THF:ssa -78 °C:seen ja 0 °C:seen valisesså låmpoti-lassa kaavan V mukaisiin optisesti aktiivisiin adduktei-hin. Tassa tapauksessa R6 on sopiva optisesti aktiivinen 20 happsuojaryhma, joka vaikuttaa stereokemiaan 3-C:ssa. Edullisesti kaytetaan talloin ryhmåå, Q o 25

OH UjjJJ

josta saadaan tulokseksi M Braun'in ja R. Devant'in mu-kaan (Tetrahedron Lett 25. 5031 (1984)) 3 R konfiguraatio 30 ja jota valmistetaan L-(+)-mantelihaposta. Mutta tarkoi-tukseen soveltuvat myos muut kiraaliset, optisesti aktii-viset ryhmat. Nyt optisesti aktiiviset, kaavan V mukaiset yhdisteet muutetaan akiraalisilla etikkahappoesterien-olaateilla vaihtoehdon 2. mukaan joko suoraan nyt opti-35 sesti aktiivisiksi, kaavan IV mukaisiksi yhdisteiksi tai 6 90412 sen jaikeen kun primååriset adduktit on muutettu vastaa-viksi alkyyliestereiksi, edullisesti metyyliestereiksi.

Kaavan IV mukaisten yhdisteiden muuttaminen kaavan I mukaisiksi yhdisteiksi tapahtuu esimerkiksi vastaavasti 5 kuten kirjallisuudesta tunnetussa menetelmassa (K. Nara-saka und H.C. Pai, Chemistry Lett. 1980 1415). Ensiksi annetaan reagoida trialkyyliboraanin, edullisesti trie-tyyliboraanin kanssa THF:ssa huoneen låmpotilassa ja sit-ten -78 °C:ssa - 0 °C:ssa pelkistetåån natriumboorihydri-10 dills mahdollisesti lisaten metanolia. Taiia tavalla saa-daan edelia olevissa suorituksissa kuvatut stereokemial-liset olosuhteet.

Kaavojen I ja II mukaiset raseemiset yhdisteet voidaan erottaa sinånså tunnettujen rasemaattilohkaisun 15 menetelmien mukaisesti puhtaiksi enantiomeereiksi. Ylei-sen kaavan I mukaisten yhdisteiden suoloja ja happoja saadaan yleisesti tunnettujen menetelmien mukaisesti.

Kuvattu menetelma kasittaa lopputuotteiden ja vS-lituotteiden valmistuksen, jolloin A-B on CH-CH ja C=C 20 seka X-Y on CH2-CH2 ja HC=CH. Mahdolli sesti esiintyvien kaksoissidosten hydraus voidaan suorittaa mahdollisesti joko vaiituotteissa tai lopputuotteissa tavanomaisten menetelmien mukaan.

Kaavan I mukaisia yhdisteita, joissa A-B on CH-CH 25 ja X-Y on CH2-CH2, saadaan esim. katalyyttisella hydrauk-sella kaavan I mukaisista yhdisteista, joissa A-B on CH-CH ha X-Y on HC=CH. Hydraus suoritetaan liuottimissa, kuten metanolissa, etanolissa tai etikkaesterissS kSytta-en katalysaattoreja, kuten Pd/C:ta normaalipaineessa tai 30 kohotetussa paineessa.

Kaavan II mukaisia laktoneja saadaan samoin tun-nettujenmenetelmien mukaisesti esimerkiksi lohkaisemalla vesi avoimista kaavan I mukaisista dihydroksikarboksyyli-hapoista, - joissa R4 on H-, bentseenisså, heksaanissa 7 90412 tai tolueenissa lisåten p-tolueenisulfonihappoa, huoneen låmpotilassa - paluujååhdytyslåmpotilassa.

Kaavan III mukaisia aldehydeja saadaan esim. kaa-van VI mukaisista nitriileistå.

5 R1

^ A X CN

R2 """ Y VI

10 R3

Kaavan VI mukaisten nitriilien, - joissa A-B, X-Y, R1, R2 ja R3 merkitsevåt samaa kuin kaavassa I ja di-iso-15 butyylialuminiumhydridin (DIBAH) vålinen reaktio THF:sså -10 °C:ssa - 50 °C:ssa johtaa hydrolyysin jålkeen suoraan kaavan III mukaisiin aldehydeihin.

Kaavan VI mukaisia nitriilejå saadaan kaavan VII mukaisista aldehydeista, 20 R1

^ A CHO

R^ B ^ 25 13 R5 jolloin A-B, R1 ja R3 merkitsevåt samaa kuin edellå, ja 30 nimittåin antamalla reagoida syanometaanifosfonaattien, erityisesti syanometaanifosfonihappodi-isopropyyliesterin kanssa liuottimissa, kuten THFtsså emåksen, edullisesti natriumhydridin låsnå ollessa, -20 °C:een ja huoneen låm-potilan vålisesså låmpotilassa. Tålloin muodostuu etupåå-35 sså E-isomeerejå.

8 90412

Kaavan VII mukaisia aldehydeja saadaan hapettamal-la kaavan VIII mukaiset alkoholit, R1

5 ^ A CH50H

R B

• VIII

R' 10 jolloin A-B, R1, R2 ja R3 merkitsevåt samaa kuin edella.

Hapetus suoritetaan edullisesti pyridiniumkloro-kromaatilla (PCCrllå) dikloorimetaanissa huoneen låmpo-tilassa.

Kaavan VIII mukaisia alkoholeja muodostuu pelkis- 15 tamalla kaavan IX mukaisista estereistå R1 0

A C

20 „2^ ^B^ X0R7

I, IX

RJ

jolloin A-B, R1, R2 ja R3 merkitsevåt samaa kuin edella.

25 R7 on sopiva happosuojaryhma, edullisesti alkyyli, jossa on 1-5 C-atomia. Pelkiståminen kaavan VIII mukaisiksi yhdisteiksi suoritetaan edullisesti DIBAH:illa dikloorimetaanissa tai litiumaluminiumhydridilla eetterissa tai THFissa -40 °C:een ja huoneenlåmpotilan valisesså låmpo- 30 tilassa.

Kaavan IX mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi lahdetaan kaavan X mukaisista ketoneista,

R1 X

35 0 R2 g 90412 jolloin R1 ja R2 merkitsevåt samaa kuin edella. Niiden annetaan reagoida seuraavan kaavan XI mukaisten karbok-syylihappoesterien sooivien enolaattien kanssa, 5

HpC-C05R7 XI

* * c R^ jolloin R3 merkitsee samaa kuin edella ja R7 on suojaryh- 10 må, erityisesti 1-5 C-atomia sisåltåvå alkyyli. Enolaat-teja valmistetaan edullisesti kåyttåen LDA:ta THF:sså -78 °C:een låmpotilassa. Reaktioseosta saadaan tulokseksi kaavan XII mukaisia additiotuotteita, 15 1

R1 OH

. C — CH — C0~R7 YTT

O S » -Z ^ All R^ R5 20 jolloin R1, R2, R3 ja R7 merkitsevåt samaa kuin edella.

Veden eliminointi edullisesti p-tolueenisulfoni-hapolla tolueenissa kohotetussa låmpotilassa - paluujååh-dytyslåmpotilassa johtaakaavan IX mukaisiintyydyttymåt-tomiin estereihin, joissa A-B on C=C.

25 Muutettaessa kaavan XII mukaiset yhdisteet kaavan IX mukaisiksi yhdisteiksi, jolloin A-B on C=C, muodostuu diastereomeerejå, jos R1 on erilainen kuin R2. Nåmå ero-tetaan vaiheessa IX esimerkiksi suorittamalla vålåhdys-kromatografiointi tai HPLC.

30 Mååråtyisså tapauksissa erottaminen tapahtuu vasta myohåisemmåssåvaiheessa tai loppuvaiheessa.

Kaavan IX mukaisia tyydytettyjå yhdisteitå, joissa A-B on CH-CH, saadaan esimerkiksi katalyyttisellå hyd- 10 90 41 2 rauksella tyydyttymåttomistå yhdisteistå, joissa A-B = C=C, edullisesti kayttaen Pd/C:ta liuottimissa, kuten me-tanolissa, etanolissa tai jåaetikassa kohotetussa painee-ssa.

5 Lahtoaineina kaytettyja kaavan XI mukaisia karbok- syylihappoeetereitå voidaan saada helposti. Kåytetyt ke-tonit X ovat ainoastaan osittain kaupallisesti saatavia. Yleinen menetelmå niiden vlamistamiseksi on tunnettu sii-tå, ettå Grignard-reagenssin R'-MgHal annetaan reagoida 10 aldehydin R2-CHO kanssa (Houben-Weyl, Methoden der Or- ganischen Chemie, Bamd 6/la/2, s. 928, 1980) , jolloin R1 ja R2 merkitsevåt samaa kuin edella, kaavan XIII mukai-siksi yhdisteiksi,

15 OH

R1 - CH - R2 XIII

Kaavan XIII mukaiset alkoholit hapetetaan sitten kaavan X mukaisiksi ketoneiksi, edullisesti pyridinium-20 klorokromaatilla (PCC:lla) dikloorimetaanissa huoneen la.mpotilassa. Toinen menetelma kaavan X mukaisten yhdis-teiden valmistamiseksi on tunnettu Friedel-Craftsasyloin-nista (Houben-Weyl, Methoden der Organischen Chemie Band 7/2a, sivu 15, 1973) .

25 Valituotteiden puhdistus tapahtuu tarvittaesea tislaamalla, kiteyttamålla, suorittamalla valåhdys-kro-matografiointi tai HPLC.

Esimerkkeja kuvattujen yhdisteiden lisåksi voidaan keksinnon mukaista menetelmaa kayttaen valmistaa seuraa-30 via yhdisteitS: 11 9041 2

OH OH

^ X \ CO,R4 R2' B Y 2 r3 r4 = Na 5 R1_R^_r3 A-B x~y 4- f luorifenyyli 4- fluorifenyyli metyyli C=C H=Cfi « π etyyli " " „ „ t-butyyli" 10 1)_ f luori—3-metyylife- 4-fluori-3-metvylifenyyli metyyli nyyll il it etyyli " " ti " isobutyyli " " ii " t-butyyli " " 4- fluori-2-metyylife- 4- fluori-2-metyylifenyyli metyyli " " nyyli i i. etyyli 15» II isobutyyli" " » t-butyyli " 4- fluori-3-metyylife- 4- metoksifenyyli metvyli " " i. nyyl1 i. etyyli : : Ί " isopropyyli " " " " isobutyyli" 20 " " t-butyyli " " 4- metoksifenyyli 4-fluori-3-metvylifenyyli metyyli " ii etyyli " " ii π iscpropyyli" " •i ii isobutyyli" " " " t-butyyli " 25 4- fluori-2-met^life- 4-metbksifenyyli metyyli " " ii ii etvyli " " ti i· isoprqpyyli" " ii ii isobutyyli" " ti ii t-butyyli " " 12 9041 2

R1__f_ R3_A-D X-Y

i)- metoksifenyyli 4- fluori-2-metyylifenyyli metyyli C=C HC=CH

n ii etyyli " " ti ii isopropyyli " " i ii isobutyyli " " 5 ii ii t-butyyli " " 3,^,5-.trimetyylioksi- 4-fluorifenyyli metyyli " " „ fenyyli „ etyyli i „ isopropyyli " 'i ii isobutyyli " " 4_fluorifenyyli 3,4j5_trimetoksifenyyli metyyli " " 10 " 'i etyyli ii ii isopropyyli " " ii ii isobutyyli " 4- f luori-2-metv^life- 3,4,5- trimetoksifenyyli metvyli " " 'i 11 etyyli " " 11 11 isopropyyli " " 15 11 11 isobutyyli " " 3.4.5- trimetoksifenyyli 4-fluori-2-metyylifenyyli metyyli " " ii 11 etyyli i, i, isopropyyli " 11 11 isobutyyli " " 3.4.5- trimetoksifenyyli 4- fluori-3-metyylifenyyli metyyli " " 20 ” " etyyli 11 11 isopropyyli " " 11 ,1 isobutyyli " " 4- fluori-3-met^life-· 3,4,5-trimetoksifenyyli metyyli " " " '' etvyli " 11 isopropyyli " " 2 ^ " " isobutyyli " " 13 .90 41 2

_r]_R2_*3 A~B X-Y

4- fluorifenyyli 4- fluorifenyyli metyyli HC-CH HC*CH

„ ti etyyli „ ti t-butyyli " " 5 H_ fluori-3-met5glife- i}_fluori-3-metyylifenyyli metvyli " " ti ii etyyli ti ii isobutyyli " " „ ii t-butyyli 4-fluori-2-metyylife- 4- fluori-2-metyylifenyyli metyyli „ nyyli ,, etyyli 1 0 „ ii isobutyyli " „ „ t-butyyli 4- fluori-3-metyylife- 4- metoksifenyyli metyyli „ W11 i. etyyli ii ii isopropyyli " " μ ii isobutyyli " " ^ 5 .i " t-butyyli metoksifenyyli 4- fluori-3-metyylifenyyli metyvli " ” II » etyyli „ ii isopropyyli " ... ii ii isobutyyli " " : · ii ii t-butyyli " " pn 4- fluori-2-metyylife- 4-metoksifenyyli metwli " " : ; „ Wli „ etyyli : : |t isopropyyli " - ii it isobutyyli " " „ ii t-butyyli 4-metoksifenyyli 4- fluori-2-metyylifenyyli metyyli " " i ii etyyli " " 25 . ......

i ii isopropyyli „ ,i isobutyyli " " it ii t-butyyli " " 14 90 41 2

R1_r2_R3 Λ-B X-Y

3)^,5- trimetoksifenyyU 4-fluorifenyyli metyyli HC-CH CH=C’I

ii » etyvli „ .. isoprcpyyli " „ „ isobutyyli " 5 4- fluorifenyyli 3,4 ,5-^imstoksifenyyli metyvli " " ii it etvyli " " ti ii isopropyyli " " i' 'i isoprcpyyli " " 4-.f luori-2-metyyli- 3,4,5- trimetoksifenyyli rnetvyli " " „ fenyyli „ etvyli „ „ isopropyyli " ^ „ „ isobutyyli " 3,4,5- trimetoksifenwli 4- fluori-2-metyylifenyyli metvyli " " n ri etyyli " " i it isopropyyli " " ,i ii isobutyyli " " 3}li,5- trimetoksifenyyU 4-fluori-3-metyylifenyyli metyyli " " ii ii etyyli " " „ „ isopropyyli „ „ isobutyyli " 4-fluori-3-metyylifenyyli3,4,5- trjætoksifenyyli metyyli i' " etyyli ii π isopropyyli ” ” 2 0 „ „ isobutyyli " " 4_ fluor i fenyyli 4- fluorifenyyli metwli HC-CH h2c-ch2 ii ii etyyli " " „ II butyyli 4- fluori-3-metyylife- 4-fluori-3-metvylifenyyli metyvli " " nyyj.l * . , . „ „ ii ,1 etyyli 2 5 " " isobutyyli " „ ii t-butyy li 4- fluori-2-metyylife- 4- fluori-2-metyylifenyyli metvyli „ nyyli „ etvyli „ ii isobutyyli " „ ii t-butvvli 15 90 41 2

R1_j£_R3 A-B- X-Y

4-fluori-3-rnetwlife- 4- metoksifenyyli metyyli HC-CH H^C-Cr^ m 1 i> etyyli „ „ isopropyyli " it ii isobutyyli " " 5 it » t-butyyli " " 4- metoksifenyyli 4-fluori-3-tnetyyj.jfe- metyyli " ii ii etyyli " " ii ii isopropyyli " „ π isobutyyli " " i, i, t-butyyli " 10 4- fluori-2-metyylife- 4.metoksifenyyli metyyli " " ^11 „ etyyli „ ,1 isopropyyli " „ isobutyyli " " „ „ t-butyyli " 4-metoksifenyyli 4-f luori-2-metyylife- • · nyyli metyyli -.---)5 " " etyyli 11 Ί isopropyyli " " - ‘ i' 'i isobutyyli " " ti it t-butyyli " " 16 90 41 2 η1 ρ2 3

R R R A-B X-Y

3,^.5- trimetoksifenyyli' ^-fluorifenyyli metyyli HC-CH HpC-CH-, ii π etyyli ii ii isopropyyli " " n ii isobutyvli " " 5 4_ fluorifenyyli 3>^>5--trijnetoksifenyyli metvyli " " ii μ etyyli " " ii it isopropyyli " " " 'i isobutyvli " " 4- fluori-2-metvylife- 3>i)>5_ trimetoksifenyyli metyyli " " , etyyli 10 " " isopropyyli " " ii ii isobutyyli " 3)¾>5- trimetoksifenyyli 4- fluori-2-metyylife- metyyli " " i· „ nVYli etyyli ,1 „ isopropyyli " it it isobutyyli " " 1 5 3,4,5-trimetoksifenyyli 4-fluori-3-metyylifenyyli metyyli " " it n etyyli " " ii „ isopropyyli " " „ „ isobutyyli " " 4_fluori-3-metyylifenyyli3,4,5. trinptoksifenyyli metvyli " " i' i' etyyli . £ q " " isopropyyli " " ii ii isobutyyli " " 17 9041 2

Entsyymi HMG-CoA-reduktaasi on luonnossa laajalle levinnyt. Se kataly&oi mevalonihapon muodostumista HMG-CoAista. Tama reaktio on keskeinen vaihe kolesterolin biosynteesissa (I.R. Sabine: 3-hydroksi-3-metyyligluta-5 ryyli-koentyymi-A-reduktaasi, CRC Press, 1983)· Veren korkean kolesterolipitoisuuteen liittyy lukuisia sairauk-sia kuten esim. sepelvaltimotauti tai ateroskleroosi eli valtimoiden kovettuminen niiden seinåmien rasvakerrostumi-en takia. Taman johdosta terapeuttisen påamåårånå pidetaan 10 kohonneiden veren kolesteroliarvojen alentamista tallais-ten sairauksien ennaltaehkaisemiseksi ja hoitamiseksi. Edellytyksena on endogeenisen kolesterolisynteesin esta-minen tai alentaminen. HMG-CoA-reduktaasin estoaineet salpaavat kolesterolin biosynteesin jo varhaisessa vai-15 heessa. Taman johdosta ne soveltuvat veren kohoneen koles-terolipitoisuuden aiheuttamien sairauksien ennaltaehkai-syyn ja hoitoon. Endogeenisen synteesin alentaminen tai vahentaminen johtaa lisaantyneeseen kolesterolin imeyty-miseen plasmasta soluihin· Parempi vaikutus voidaan saa-20 vuttaa antamalla samanaikaisesti sappihappoja sitovia ai-neita kuten anionienvaihtajia. Kohonnut sappihappojen eri-tys johtaa voimistuneeseen uudelleen synteesiin ja taten lisSåntyneeseen kolesterolin hajoamiseen (M.S. Brown, P.T. Kovanen, J.L. Goldstein, Science 212, 628 (1981); M.S.

25 Brown, J.L. Goldstein, Spektrum der Wissenschaften 1985 (1),96). Keksinnon mukaiset yhdisteet ovat HMG-CoA-reduk-taasin estoaineita. Ne soveltuvat taman johdosta estamaan tai vahentamaan kolesterolin biosynteesia ja taten veren kohonneesta kolesterolipitoisuudestajohtuvien sairauksien, 30 erityisesti sepélvaltimotaudin , aterosklerooin eli valtimoiden kovetustaudin, hyperkolesterolemian eli lisaan-tyneen veren kolesterolipitoisuuden, hyperlipoproteine-mian eli veren runsaan liproteiinipitoisuuden ja vas-taavien sairauksien ennaltaehkåisyyn ja hoitoon.

le 9041 2

Keksinto koskee taman johdosta myos farmaseut-tisia valmisteita» joiden perustana ovat kaavan I tai kaa-van II mukaiset yhdisteet seka naiden yhdisteiden kayttda laåkeaineina, erityisesti veren kohoneen kolesterolipi-5 toisuuden hoitamiseksi.

Kaavojen I ja II mukaisia yhdisteita annostel-laan eri annostusmuotoja kayttaen, edullisesti suun kaut-ta tabletteina, kapseleina tainesteinå. PaivittSinen annos on kulloinkin aina poltUaan painon ja rakenteen mukaan 10 3 mg - 2500 mg, edullisesti kuitenkinIO - 500 mg. Keksin- ηδη mukaisia yhdisteita voidaan kayttaa liuotettuina tai suspensoituina farmakologisesti hyvaksyttaviin orgaanisiin liuottimiin, kuten yksi- tai useampiarvoisiin alkoholei-hin, kuten esim. etanoliin tai glyseroliin, triasetiiniin, 15 oljyihin, kuten esim. auringonkukkå.61 jyyn , kalanmaksaoljyyn , eettereihin, kuten esim. dietyleeniglykolidimetyylieette-riin tai myos polyeettereihin, kuten esim. polyetyleeni-glykoliin, tai myos muiden farmakologisesti hyvaksyttavien polymeerikantaja-aineiden, kuten esim. polyvinyylipyrro-20 lidonin lasna ollessa, tai muiden farmaseuttisesti kaytto-kelpoisten lisaaineiden, kuten tarkkelyksen , syklodekstrii-nin tai polysakkaridien lasna ollessa. Edelleen keksinnon mukaisia yhdisteita voidaan kayttaa yhdistelmana sellais-ten lisaaineiden kanssa, jotka sitovat sappihappoja, eri-25 tyisesti ei-toksisten, emaksisten anionienvaihtohartsien kanssa, jotka sitovat sappihapot mahalaukun ja ohutsuolen alueella imeytymattomassa muodossa.

Dihydroksikarboksyylihappojen suoloja voidaan an-nostella myos vesipitoisina liuoksina.

30 Kaavojen III, IV, VI, VII, VIII, IX ja XII mu kaiset yhdisteet ovat uusia ja esimerkiksi arvokkaita valituotteita kaavan I mukaisten yhdisteiden valmistukses-sa. Keksinto koskee taman johdosta myos kaavojen III, IV, VI, VII, VIII, IX ja XII mukaisia yhdisteita seka menetel-35 mia niiden valmistamiseksi.

19 90 41 2 HMG-CoA-reduktaasi-aktiviteetti måaritettiin seu-raavien testisysteemejå kåyttåen: 1) HMG-CoA-reduktaasi-aktiviteetin estvminen rotan maksan mikrosomeista saaduissa liukenevaan muotoon saatuissa 5 entsyymivalmisteissa HMG-CoA-reduktaasi-aktiviteetti mitattiin rottien maksan mikrosomeista saaduista, liukenevaan muotoon saate- tuista entsyymivalmisteista, jolloin indusoituminen tapah- tui kolestyramiinin ( Cuemid) vaikutuksesta påivå-yo-ryt- 1 4 10 min muuttamisen jålkeen, Substraattina toimi (S,R) C-HMG-

CoA, NaDPH:n konsentraatio såilytettiin inkuboinnin ajan 1 4 uudistuvalla systeemillå. C-mevalonaatin erottaminen 1 4 substraatista ja muista tuotteista (esim. C-HMG) tapah-tui suorittamalla pylvåseluointi, jolloin jokaisen yksit-15 tåisen nåytteen eluointiprofiili mååritettiin. Tålloin luo-vuttiin H-mevalonaatin jatkuvasta kåyttåmisestå, koska måårityksesså on kyse estovaikutuksen suhteellisesta ar-vosta. Yhdesså koesarjassa kasiteltiin kulloinkin entsyy-mivapaata kontrollinåytettå, entsyymiå sisåltåvåa normaali-20 naytettå (=100 %) ja sellaista nåytetta, johon oli lisåt-ty valmisteita. Jokainen yksittåinen arvo muodostui kol-mesta rinnakkaisnåytteestå saatuna keskiarvona. Valmis-tetta sisåltåmåttomien ja valmistetta sisaltåvien nåyttei-den keskiarvoissa esiintyvien arvqjen merkitsevyys arvioi-25 tiin t-testillå. Edella kuvatun menetelmån mukaisesti mååritettiin keksinnon mukaisista yhdisteistå esimerkiksi seu-raavat estoarvot HMG-CoA-reduktaasiin nåhden. (IC^Q-arvo M =seyhdisteen molaarinen konsentraatio, joka tarvitaan 50 %: seen estoon).

30 Yhdiste IC^^-arvo (M) esimerkistå;_ 11a 7,0 x 10"9 11c 2,0 x 10"8 11n 1,3 x 10-8 20 90 4 1 2 2) Testi, jossa tutkitaan kolesterolin biosynteesin esty-mistå soluviljelmisså lisååmållå ^4-radioaktiivista esiastetta kolesteroliin

Menetelmån periaate:

5 Lipoproteiinivapaassa elatusaineessa olevien HEP

G2-solujen yksinkertaisia kerroksia esi-inkuboitiin 1 tun-nin ajan kåyttåen vastaavia konsentraatioita testiaineita; sen jålkeen kun oli lisåtty 4C-merkattua esiastetta *C-natriumasetaattia inkubointia jatkettiin viela 3 tunnin 10 ajan. Taman jålkeen osa soluista saippuoitiin alkalisesti lisåten sitå ermen kuitenkin ^H-kolesterolin sisåista stan-dardia. Saippuoitujen solujen lipidit uutettiin klorofor-mi-metanolilla. Tåmå lipidiseos erotettiin preparatiivi-sesti ohutkerroskromatografiaa kayttaen sen jalkeen kun 15 oli lisåtty kantaja-aine-kolesterolia; kolesterolibandit eristettiin, senjålkeen kun ne oli tehty nåkyviksi jodi- 14 14 hoyryllå ja C-esiasteesta muodostunut C-kolesteroli- måårå mååritettiin skintigrafisesti (kåyttåen radioaktiivi- sen aineen avulla tuotettua kuvaa). Solujen tasaosassa måå- 20 ritettiin soluproteiini siten, ettå voitiin laskea yhden aikayksikon aikana/mg soluproteiinia 4C-esiasteesta muo-1 4 dostunut C-kolesteroli-måårå.Lisåtyn testivalmisteen estovaikutuksen vertaamiseksi kåytettiin liuotinkontrollia, ; jotta voidaan suoraan ilmoittaa kolesterolin biosyntee- .25 sin estyminen kåytettåesså mååråttyå molaarista konsent-raatiota testivalmistetta våliaineessa. Soluviljelmån tasaosa osuuksissa arvioitiin morfologisesti (valomikros-koopilla) soluviljelmån vahingoittumattomuus sekå solujen vaurioitumattomuus valmisteiden vaikutuksesta. Seuraa-30 vassa taulukossa on ilmoitettu suhteellinen vaikutuksen voimakkuus mevinoliiniin nåhden, joka testattiin samalla tavalla.

2i 9041 2

Yhdiste suhteellinen vaikutuksen esimerkista voimakkuus mevinoliiniin nahden / %_/ 11a 100 5 11c 50 11n 30

Esimerkki 1

Yleinen ohje kaavan XIII mukaisten yhdisteiden valmista-10 miseksi 1 mooliin magnesium-lastuja 100 ml :ssa kuivaa eetteria lisåtaan 0,1 moolia vastaavasti substituoitua bromibentseenia. Reaktio kåynnistetåån mahdollisesti li- saamalla hieman jodia, dibromietaania tai lammittamalla.

15 Reaktion kaynnistyttya tiputetaan loput bromibentseenista 200 mlrssa eetteriå ja vielå siten,ettå eetteri kiehuu.

LisSyksen paatyttyS keitetaan viela 1 tunnin ajan paluu- jaahdyttaen. Jåalla jaahdyttåen lisataån tipoittain lopuk- 2 si 0,9 moolia vastaavasti substituoitua aldehydxa R -CHO 20 500 ml :ssa eetteriå. Annetaan lammeta huoneen lampotilaan ja sekoitetaan vielå 1 tunti. Lopuksi keitetaan 2 tunnin ajan paluujaahdyttåen. Seos kaadetaan kyllåstettyyn, vesi-pitoiseen ammoniumkloridiliuokseen. Vesipitoinen faasi uutetaan eetterilla (2 x) ja yhdistetyt orgaaniset faasit 25 peståan kerran kyllåstetyllå vesipitoisella natriumvety-karbonaattiliuoksella. Kuivaamalla MgSO^ :11a ja poista-malla liuotin tislaamalla vakuumissa saadaan tulokseksi kaavan XIII mukaisia yhdisteitå kiinteinå aineina tai ol-jyinå, jotka puhdistetaan mahdollisesti uudelleenkiteyttå-30 mållå tai suorittamalla vålåhdys-kromatografiointi. Useim-missa tapauksissa ei ole kuitenkaan tarpeellista suorit-taa erillistå puhdistusta.

22 90 41 2

Taulukko 1 OH

R1 - CH - R2 XIII

5

Esimerkki Brorriibentseeni_Aldehydi_Tuote__ h3c OH ch3 1 a r^vBr r^TCH0 ΛΛΑ

,ο aac„ JQC Xj XX

1U p ^ CH3 f'v'cHj *=-F^f

0CH3 H3CO OH

lb rXT

15 CH3 X I S^F

3 CH3

ch3 h3c OH

,c rr (VCH0 jVrr™3

F -V H3c-^ CIi3 H AA y F

20 CH3 3 UM3

OH

r^VBr ^vcho CH3 ,d rM rV rXpXXr .· 25 CH3 CH3 CH3 23 9041 2

Esimerkki 2

Yleinen ohje kaavan X mukaisten yhdisteiden valmistamiseki

Suspensioon, jossa on 0,06 moolia pyridinium-klorokromaattia (PCC) 200 ml:ssa kuivaa metyleenikloridia 5 kaadetaan huoneen lampdtilassa 0,05 moolia kaavan XIII

mukaista alkoholia 40 ml:ssa metyleenikloridia. Sekoite-taan 3-5 tuntia huoneen IMmpdtilassa ja lisåtåan 3 tila-vuusosaa eetteriå. Suodattamalla silikageelilla ja pois-tamalla liuotin tislaamalla vakuumissa saadaan tuloksek- 10 si kaavan X mukaisia yhdisteita, useimmiten riittåvån puhtaina. Erillinen puhdistus tapahtuu mahdollisesti uu-delleenkiteyttamalla, tislaamalla tai suorittamalla va-lahdys-kromatografiointi.

Taulukko 2 15 0

R1 - C - R2 X

1 2

Esim._R_R_Lahtpaine_ 20

H,C H3C

“ ,jjr rj0r V 25 ?CH3 -"ICr "·'-<]r CH3 30 - H3C;0r Æ f'V h3c ^ν^Ν:Η3 ch3 CH3 24 90 41 2

Esimerkki 3 (Kaavan XII mukaisten yhdisteiden valmistus) a) 3-hydroksi-3,3-di(4-fluorifenyyli)-2-isopropyylipropio- nihappo-etyyliesteri 5 50,7 ml (0,361 moolia) di-isopropyyliamiinia lisattiin 250 ml:aan kuivaa tetrahydrofuraania (THF) typpiatmosfaarissa. 0°C:ssa tiputettiin 195 ml (0,314 moolia) n-BuLi:a (heksaani). 36,2 ml (0,241 moolia) isovale-riaanahappoetyyliesteria lisattiin tipoittain, Sen jal-10 keen kun oli pidetty 1 tunnin ajan -70°C:ssa tiputettiin tåsså lampotilassa 50 g (0,229 moolia) 4,4-difluoribentso-fenonia 200 ml:ssa THFsåa. 1,5 tunnin kuluttua kaadettiin 1n vesipitoiseen suolahappoon. Uutettiin eetterilla (3x) ja yhdistetyt orgaaniset faasit pestiin kerran kyllåste-15 tylla vesipitoisella natriumvetykarbonaattiliuoksella.

Kuivaamalla magnesiumsulfaatilia ja poistamalla liuotin tislaamalla vakuumissa saatiin tulokseksi 74,9 g (0,215 moolia, 94 %) esimerkkia 3a, jonka annettiin reagoida suo-raan edellen ilman eri puhdistusta.

20 MS (DCI), C20H22F202 : 333 (M+H+), 331 H-NMR (60 MHa, CDCl^): 6* 7,60 - 6,60(m,8H), 4,05(q,2H), 3,39(d,1H), 1,90 (mf1H), 1,20-0,80 (m,9H)

Vastaavasti kuten esimerkissa 3a saatiin taulu-kossa 3 esitettyja yhdisteita.

25 90 41 2

Taulukko 3

R1 OH

X C - CH - CO-CrjHj-5 ,, 2 2 5 R R"5

Esimerkk i R1_j*f_R^_Moolimassa_ 10 3, φ φ °21H26°3· 326 3c ¢) φ -CH2CH(CHj)2 C21H24F203, 362,4

15 F F

3d φ φ φ C2JH2803, 352 20 ;·; 3e (φ) (φ) -(CH2)3CH3 C21H24F2°3’ 562,4

F F

25 3f ό φ ό C23H26r2°3· J88’4

F F

30 3g H3C'C^^Ch3 ^γ^€Η3 “ch(CH3)2 C24H31F04, 402,5

F

h3cyVCH3 A

35 5h l|^J V^CH -CH(CH3)2 C24H31 f03’ 586,5 ch3 f 3 26 9041 2

Taulukko 3 (jatkoa)

Esimerkki R_R^___R^_ Moolimassa_ 3i ^ -0H(CH3)2 C22H26r20,, 376,4

F F

10 ^γΟΗ3 Γίί^γΟΗ3 33 LJJ Ιγϋ -CH(CH3)2 C22H26P203, 376,4

F F

1 5 Esimerkki 4 (Kaavan IX mukaisten yhdisteiden valmistus, jolloin A-B on C=C).

a) 3,3-di-(4-fluorifenyyli)-2-isopropyyliakryylihappo-etyyliesteri 20 74,8 g (0,215 moolia) esimerkin 3a mukaista yh- distetta liuotettiin 800 ml:aan tolueenia , lisattiin 7,5 g (0,04 moolia) p-tolueenisulfonihappoa ja kuumen-nettiin 2 tunnin ajan vedenerottamisessa paluujåahdyttå-en. Jaahdyttamisen jalkeen liuos pestiin kaksi kertaa '25 kyllåstetvllå, vesioitoisella natriumvetykarbonaatti- liuoksella ja kuivattiin (MqSO^). Poistamalla liuotin tislaamalla vakuumissa saatiin tulokseksi 70,8 g (0,214 moolia, 99 %) esimerkkia 4a , jota kaytettiin suoraan seu-raavaan vaiheeseen ilman eri puhdistusta.

30 MS. C20H20F2O2 : 330 (M+), 301 27 90 41 2

Taulukko 4 R1 ΟΟ,Ο,Ης v. / 2 2 3

/C = C

2 v 3 5 π

Esimerkki R^_R^_R^_Moolimassa_ 10 4b Λ (S -ch2ch(ch3)2 c21h24o2 308(M+) , 265 4c LJ O -ch2ch(ch3)2 c21h22r2o2 15 T T 344(M+), 301

F F

4d (^) 0 C23H26°2’ 334(M+), 305 20 4e (^j] l^j] -(CH2)3CH3 C20H20F2°2 F F 330(M+), 299, 287 4f 0 0 0 C25H24F2°2 I ' 370(M+), 341

F F

3^ 4g 'ΪχίΧ -ch(ch,)2 c2 h fo „3c^ch3 V^ch3 5 3§4(h-),3353 r 35 4h UL· H3XXh -CHCCH3i2 C24H29rOj I 3 3 Ch3 384(M+), 353

F

28 90 41 2

Taulukko 4 (jatkoa)

Es<mprvn' R1_?!_£_Moolimassa- 5 H3C CH3 41 V -ch(ch3>2 c24h29po2 CH3 F 368(M+) H3CV^Vch3 10 4:1 VV XJ -ch(ch3)2 c24h29po2 T CH3 X 568(M+) 411 0-ch3 OLh -CH<CH,’2 ®22«24t2°2 15 X 3 ^ CH3 358(M+), 329 ch3 a^ych3 41 kJ* U1 -CH(CH3)2 C22H24P202 'f f 358(M+), 329 . 20

Esimerkki 4 (Kaavan IX mukaisten yhdisteiden valmistus, jolloin A-B on CH-CH) a) 3,3-di-(4-fluorifenyyli)-2-sykloheksyylipropioni-25 happoetyyliesteri 4,81 g (13 mmol) esimerkin 4f yhdistetta hyd-rattiin 120 mltssa etanolia kayttaen 500 mg Pd/C:ta (10 %) 96 tunnin ajan 150 bar'in paineessa. Vedynoton påatyttya katalysaattori suodatettiin erilleen, liuo-30 tin poistettiin tislaamalla ja jaann5s kromatografioi- tiin silikageelilla (kayttaen sykloheksaani/etikkaeste-ria = 1 9 :1 ) .

Saanto: 4,78 g (12,8 mmol, 98 %)

Rf (sykloheksaani/etikkaesteri = 19:1) : 0,37.

29 90 4 1 2 MS, C25H26F202: 372 (M+), 289, 203 H-NMR (CDClj, 60 MHz) :ί-·7,50-6,60 (m ,8H), 4,30 (d,1H), 3,90 (q,2H), 3,90 (m,1H), 3,20 (m,1H), 2,40-0,60 (m,13H) 5 Esimerkki 5 (Kaavan VIII mukaisten yhdisteiden valmistus) a) 3,3-di-(4—fluorifenyyli)-2-isopropyylipropenoli 3,2 g:aan (9,7 mmol) esimerkin 4a yhdistettM 10 tiputettiin 100 mlrssa dikloorimetaania 0°C:ssa argon-atmosfaarissa 24,3 ml (29,1 mmol) di-isobutyylialumini-umhydridiliuosta (tolueeni). Sen jalkeen kun oli pidetty 1 tunnin ajan 0°C:ssa tiputettiin 2 ml metanolia ja lo-puksi 20 ml 1n vesipitoista suolahappoa. Laimennettiin 15 eetterilla ja 1n suolahapolla, kunnes faasien erottumi-nen tapahtui. Vesipitoinen faasi uutettiin kerran eetterilla ja yhdistetyt faasit pestiin kyllastety11a natrium-kloridiliuoksella (lx) ja kuivattiin (MgS04 :11a). Poista-malla liuotin tislaamalla vakuumissa saatiin tulokseksi 20 2,7 g (9,4 mol, 97 %) esimerkkia 5a, jota kaytettiin suoraan seuraavaan vaiheeseen ilman eri puhdistusta.

Rf (sykloheksaani/etikkaesteri = 2:1) : 0,42 MS, Cl8Hl8F20 : 288(M+), 270, 257, 245 25 H-NMR (60 MHz, CDC13): 6= 7,30-6,70 (m,8H), 4,05 (s,2H), 2,70 (sept.lH), 1,30 (levea 1H), 1,03 (d,6H)

Vastaavasti kuten esimerkissa 5a saatiin taulu-kon 5 esimerkkeja .

30 90 4 1 2

Taulukko 5

R1 CH20H

""""a - B"^ 2^ 1 3 5 R^

Esimerkk'i r^ r^ r3 Moolimassa

A-B on C=C

10 5b ITS -CH2CH(CH3)2 C19H220, 266 (Ϊ4+), 209 5c O O -ch2ch(ch3)2 c19h20p2o 15 T I 302(M+)

F F

53 ό 0 O C2'H24° ^ ^ 292(M+)274, :·: 20 261, 209 5e O O -(CH2)3CH3 C19H20P20 y ]. 302(M+), 245 5f |fj) Cj) O C21*22F20’ T 328(M+),310,

F F

297,245 ; 30 Ow-<cv2 s;°2 3i 90 41 2

Taulukko 5 (jatkuu) 1 2 3

Esim. R R R Moolimassa 5h 0^ch3 H.d^X:H3 -ch(ch3)2 c22h2?fo2 p 3 342(M+) 5 i ULch -CH(CH )2 C22H27F0 10 . T ct3 326 (M+) ch3 f 15 5 3 CjL -CH(CH )2 C22H27F0 15 YcH, T 326(M+) F CT3 5k _CH (CH^ )2 C20H22F2° ^3 J 3 316 (M+)

20 F

51 (fiT™3 Λ'™3 -CH(CV2 C20H22F2° 31 6(M+)

F F

25

A-B on HC-CH

5m ό 0 U C21H24F2°* T T 330(M+), 312, 30 F F 294, 278, 203 32 90 41 2

Esimerkki 6 (Kaavan VII mukaisten yhdisteiden valmistus) a) 3 ,3-di-(4-fluorifenyyli)-2-isopropyylipropenaali

Suspensioon, jossa on 3/03 g (14,1 mmol) PCC:ta 5 100 ml:ssa dikloorirvetaania kaadettiin huoneen lampoti- lassa 2,7 g (9,4 mmol) esimerkin 5a yhdistetta 40 ml:ssa dikloorimetaania. Sen jalkeen kun oli sekoitettu 3 tun-nin ajan huoneen låmpotilassa lisattiin 3 tilavuusosaa eetteriS ja suodatettiin silikageelin kautta. Poistamalla 10 liuotin tislaamalla vakuumissa saatiin tulokseksi 2,53 g (8,8 mmol, 94 $ ) esimerkkiå 6a.

Sp.: 69°C

Rf (sykloheksaani/etikkaesteri = 3:1): 0,56 MS, C18H16F20: 286(M+), 271, 257 15 H-NMR (60 MHz): 6= 9,40 (d, 1H), 720-6r80 (mr8H), 2,80 (m,1H), 1,20 (d,6H).

Vastaavati kuten esimerkissa 6a saatiin taulu- kon 6 esimerkkeja.

33 9 0 41 2

Taulukko 6

R1 CHO

\ /

A - B

5

Esimerkki r1_R^_R^_Massaspektri _A-B on C=C_ 10 i 6b (Tj -CH2CH(CH3)2 CigH200, 264(M+) 15 6 c (φ) (φ) -CH2CH(CH3)2 CigH18F20, 300(M+)

F F

6d Q) ¢) Λ C21H220, 290(M+) .-.-.20 6e Cj) Lj) -(CH2)3CH3 C19H18F20' T ' 300(M+), 269 ''.'25 F F 257, 244 6f U] ό O C21H20F20 T p 326(M+)f 308, .30 295 6« ’XX, OL -CH(C«3>2 C22H25P02 H3C «3 T ch3 340(H+) 34 90 41 2

Taulukko 6 (jatkuu)

Esimerkki R1 R2 R3 Massaspektri 6h C^3h3c^Xh3 -CH(CH3)2 C22H25F02 F 340(M+) 10 H3c ch3 6 i IIJ V^ch3 -ch(ch3)2 c22h25fo ot3 F 324(M+) 15 H3C yV^3 6 j -CH(CH3)2 C22H25F0 Γ 3 CH3 324(M+) 20 6i C^CH Q- CH, -CHtGH )2 C20H20r20 1^3 I 3 31 4 (M+)

F

61 kJ kJ -ch(ch3)2 c20h20f20 25 J p 314(M+)

A-B on HC-CH

30 6 m (S ή] Λ C21H22F20' 328 (M+ ),245,203

F F

35 9041 2

Esimerkki 7 (Kaavan VI mukaisten yhdisteiden valmistus) a) 4 ,4-di-(4-fluorifenyyli)-3-isopropyylibutadienyyli-syanidi 5 590 mgrsta (12,3 mmol) natriumhydridia poistet- tiin argonatmosfaarissa valkodljy ja pantiin 30 ml:aan THF:aa. 0°C:ssa ruiskutettiin 2,0 ml (10,3 mmol) syano-metaanifosfonihappodi-isopropyyliesteriå. Kaasunkehitty-misen paatyttya (noin 30 min.) tiputettiin 2,52 g 10 (8,8 mmol) esimerkin 6a yhdistetta 50 ml:ssa THF:aa ja sekoitettiin 3 tunnin ajan 10-15°C:ssa. Seos kaadettiin kyllastettyyn NaCl-liuokseen ja uutettiin eetterilla (3x). Yhdistetyt orgaaniset faasit pestiin kerran kyllas-tetylla NaCl-liuoksella ja kuivattiin (MgSO^rlla). Pois-15 tamalla liuotin tislaamalla vakuumissa saatiin tulokseksi pentaanista kiteyttamisen jalkeen 1,27 g esimerkkia 7a. Kromatogtafioimalla emSliuos silikageelilla (kayttaen sykloheksaani/etikkaesteria = 19;1) saatiin edelleen 1,09 g.

20 Saanto: 2,36 g (7,6 mmol, 86 %).

Sp.: 108°C.

Rf (sykloheksaani/etikkaesteri = 19:1) : 0,23.

MS, C20H17F2N: 309,1 (M+) 1H-NMR (60 MHz, CDCI3): 6- 7f20-6,80 (m,9H), 25 5f40 (d, * 16 Hz,1H), 3,00 (sept.,1H), 1,08 (d,6H)

Vastaavasti kuten esimerkissa 7a. saatiin taulukon 7. esimerkkeja.

36 90 41 2

Taulukko 7 CN

R1 _/

V A - B

5 o ^ ' ·=5 1 p Tt

Esimerkki R_R__R^_Mass aspektri

A—B on C=C

10 ---— 7b Cj^ -CH2CH(CH3)2 C21H21N, 287(M+) ?b O 0 "CH2CH(CH3)2 C21H21N’ 287(M+) 7C O O -CH2CH(CH3^2 C21H19F2N’ p J 323(M+) 20 7d 0 0 ό C23H23N· 313(μ+>· -· 270,256 7e φ V -(CV3CH3 C21H19F2N' F F 323(M+),280,266 30 7f 0 0 0 C25H2lr2N' J ^ 349(M+) 7Η/°ή -CH(CH )2 C24H26FN0, :.. 35 'H3C^CH3 y^CH3 5 2 24 26 Γ 37 9041 2

Taulukko 7 (jatkuu) 1 2 3

Esimerkki R R R Massaspektri 5 7h -cb(ch3,2 c24h26™· F 3 3 3 363(M+), 10 V UL· C24H26™· 10 1 13 347(M+) ch3 f H3C Y^Ych3 73 LiL V -0H(CH5)2 C24H26M· 15 pT^3 CH3 347(M+)

7k Qs^ 0>H -CH(CH3}2 C22H21F2N

y ch3 y 337(m+) . . 20

71 Λ LjTCH3-CH(CH3)2 C22H21F2N

F F 337(M+) 2 5 -

A-B on HC-CH

7 " 0 0 0 C23H23P2N

30 F F 551(M+) 38 90 4 1 2

Esimerkki 8 (Kaavan III mukaisten yhdisteiden valmistus) a ) 5,5-di- (4-fluorifenyyli)-4-isopropyylipentadienaali 1,26 g:aan (4,1 mmol) esimerkkia 7a 30 ml:ssa 5 THF:aa ruiskutettiin 0°C:ssa 6,85 ml (8,2 mmol) di-iso- butyylialuminiumhydridi-liuosta (tolueeni). Sen jal-keen kun oli pidetty 4 tunnin ajan 10°C:ssa hydrolysoi-tiin varovasti 1n suolahapolla ja uutettiin etyyliase-taatilLa (3x) . Yhdistetyt orgaaniset faasit pestiin kerran 10 kyllastetylla natriumvetykarbonaattiliuoksella ja kuivat- tlin (MgSO^:lla). Poistamalla liuotin tislaamalla vakuu-missa ja suorittamalla valahdyskromatografiointi silika-geelilla (kayttaen sylkoheksaani/etikkaesteria = 9:1 + 1 % NEt^) saatiin tulokseksi 980 mg (3,14 mmol, 77 %) esimerk-15 kia 8a.

Sp. 80-82°C

Rf (sykloheksaani/etikkaesteri = 5:1) 0,38.

MS, C20H18F20 : 312 (M+)f 297, 269 H-NMR: 9,23 (d.J- 7Hz,1H), 7,30-6,70 (m,9H), 6,24 20 (dd, J] = 16Hz, J2* 7Hz,1H), 2,90 (sept.JH), 1,08 (d,6H).

Vastaavasti kuten esimerkissa 8a saatiin taulukon 8 esimerkkeja.

39 9041 2

Taulukko 8

1 CHO

R / \ 5 A - li 2 '3

R RP

1 2 3

Esimerkkj R_R_R__Massaepektri 10 A-B on C=C_

Bb (^j) (Q) -CH2CH(CH3)2 C21H220, 290(M+), 247, 233, 205 15 4 8 C ΓΊ) |Tj -CH2CH(CH3)2 C21H20F20, IT 326(M+), 283,269

r F

: 20 ed ¢) (^) ό c„h24o, 316CM*) 86 O O -lC«ZhCh C21B20P20· 25 I T 326(M+), 283,269

F F

40 90 41 2

Taulukko 8 (jatkuu)

i ? T

Esimerkki R R R-' Massaspektri 8f Λ 0 Λ C23H22F2°* ^ Τ' ^ 352 (Μ+), 349,269

F F

10 86 h'c^chj φ·α,3 'ch(ciV2 c24h27fo2, 366(«+)

F

8h C2 Η F02, 366(Μ+) 15 J 3 3 0,3 8 i XT Λ. -CH<CH5>2 C24H27F0’ 350(M+)

CH-, F

20 λ h C i 8 j [Q^ 3 ']j^J'CH3 -CH(CH3)2 C24H27F0, 350(M+) F 3 CH3 25 ek O^CH OXh 'CH(CV2 C22H22F20, 34004+) F 3 F 3 ^yCH 3 3 8 1 U*J -CH(CH3)2 C22H22F20, 340(M+)

30 f F

A-B on HC-CH

8m φ) φ C23H24P20· 554(M+)

F F

41 9041 2

Esimerkki 9 (Kaavan IV mukaisten yhdisteiden valmistus) a) 9,9-di-(4-fluorifenyyli)-5-hydroksi-3-okso-8-isopro- pyyli-6,8-nonadieenihappoetyyliesteri 5 240 mg (5 mmol) natriumhydridia, josta on pois- tettu valkooljy, lisattiin argon-atmosfaarisså 15 ml *aan THF:aa. 0°C:ssa ruiskutettiin 597,ul (4,7 mmol) asetetik- o kahappoetyyliesteria ja sekoitettiin 15 minuuttia 0 C:ssa. Lopuksi ruiskutettiin 2,8 ml (4,6 mmol) n-BuLi:ta (hek-10 saani) 0°C:ssa. 15 minuutin kuluttua tiputettiin -70°C:ssa 975 mg (3,1 mmol) esimerkin 8a mukaista yh-distetta 40 ml:ssa THF:aS ja sekoitettiin 2,5 tunnin ajan -70°C':ssa. Annettiin lammeta 0°C:een, hydrolysoitiin kylmalla 2n suolahapolla ja uutettiin eetterilla (3x) .

15 Yhdistetyt orgaanieet faasit pestiin kerran kyllaste- tylla keittosuoialiuoksella ja kuivattiin (MgSO^ :11a). Poistamalla liuotin tislaamalla saatiin tulokseksi 1,41 g esimerkkiå 10a.

Rf (sykloheksaani/etikkaesteri = 2:1): 0,22.

20 MS, C26H2gF204 i 442 (M+), 424

Esimerkkien 9a - 9m yhdisteita kaytettiin il-man eri puhdistustaja karakterisointia seuraavaan vai-heeseen.

Vastaavasti kuten esimerkissa 9a saatiin tau-25 lukon 9. esimerkkeja.

Taulukko 9 OH 0 R1 C02C2H5 30 T?' H3

Esimerkki R3_Moolimassa_

A-B on C=C

35 —:---T : 9b (Tp -CH2CH(CH3)2 C27H3204, 420 42 90 41 2

Taulukko 9 (jatkuu) 1 2 3

RsiirorHf-j R_R_R_Mon! imaccj__ 5 9c j^) -CH2CH(CH5)2 C27H?0P204, 456

F F

93 (^) 0 ό C29H34°4· 446 10 9 e _(CH2)-jCH^ ^27^30F284r 4·^

F F

15 9f φ 0 ό C29H32F2°4’ 482

F F

9 « h3C^CH3 ¢^3 -CH(CH3)2 C30H37F05* 496

F

25 A. h3co 9h V^CH HC-C^CH "CH<CH,)2 C30H37r05' 496 F 3 3 3 30 9 1 H3C X^T™3 -CH(CH,)2 C,0H37r04, 480 CH3 F 3 H3C>^st-CH3 9 3 LA -CH(CH3)2 C30H37F04, 480 35 F 3 ch3 43 90 41 2

Taulukko 9 (jatkuu) 1 ? 3

Esimerkki R_H__ R_Moolimassa 9k ~CH^CH5^2 C28H32F2°4’ 470 10 9 1 φΤ™3 3-CH(CH3)2 C28H32F204, 470

F F

_A-B on HC-CH_ 15 i 9 m C29H34F2°4’ 484

F F

20 Esimerkki 10 . . (Kaavan I mukaisten yhdisteiden valmistus) a) 9 ,9-di-(4-fluorifenyyli)-3,5-dihydroksi-8-isopropyy-li-6 ,8-nonadieenihappoetyyliesteri 1,4 g:aan (3,1 mmol) esimekin 9a mukaista yh-25 distettå lisattiin argon-atmosfaarissa 20 ml:ssa kuitfaa THF:aa 5,0 ml (5 mmol) trietyvliboraaniliuosta (THF) ja sekoitettiin 10 minuutin ajan huoneen lampotilassa. -70°C:ssa lisattiin sitten 240 mg (6,2 mmol) natrium-boorihydridiå kiinteånå. Lopuksi ruiskutettiin hitaasti 30 3 ml metanolia. Sen jalkeen kun oli pidetty 3 tunnin ajan -70°Cissa seos kaadettiin varovasti jaahdytettyyn liuokseen, jossa oil 5 ml 35 %:sta vetvperoksidia 100 mljssa vetta. 5 minuutin kuluttua uutettiiin etikka-esterilla (3x). Yhdistetyt orgaaniset faasit pestiin 35 kyllåstetylla natriumvetykarbonaattiliuoksella (2x) 44 90 41 2 ja kyllastetylla keittosuolaliuoksella (1x) ja kuivat-tiin (MgS04:lla). Poistamalla liuotin tislaamalla va-kuumissa ja suorittamalla valahdyékromatografiointi si-likageelillå (kayttåen svkloheksaani/etikkaesteriå 5 = 3:2 + 0,5 % Et^Niaa) saatiin tulokseksi 720 mg (1,62 mmol, 52 %) kahden vaiheen kautta) esimerkkia 10a.

Rf Sykloheksaani/etikkaesteri = 2:1) : 0,11 MS, C26H50F204 : 444 (M+) 426,408 10 H-NMR (270 MHz, CDCl^) : te 7r10-6,80 (m8H), 6,15 (d, J-16Hz, 1H), 5,53 (dd,^=16Hz,J2*7,2 Hz, 1H), 4,30 (m,1H), 4,17 (q,2H), 4,10 (m,1H) 2,83 (sept.,1H), 2,43 (m,2H), 1,52 (m,1H) 1,37 (m, 1H) 1,28 (t,3H), 1f09 (d, 6H).

Taulukko 10 15 “ — p1

\ OH OH

r2xA\ ,/^ΛΛ/ C°2C2H5 ή? 20 4 o ·* Karakteriset

Esimerkki R n analyyttiset arvot _A-B on C=C_ 25 1°b A C27H34°4: 422(^),404,387 H-NMR (270 MHz, CDCl^ te 7,35-7,05 (m,10H), 6,40 (d, J1=16Hz,1H), 5,75 (dd, Ji=16Hz, J2= æz,1H), 4,33 (m,1H), 4,20 30 (m,1H), 4,15 (q,2H), 2,43 (m,2H), 2,24 (d,2H), 1,85 (m,1H), 1,70 (m,1H), 1,65 (m,1H), 1,24 (t,3H), 0,73 (d,6H).

45 90 4 1 2

Taulukko 10 (jatkuu)

Esimerk- Karakteriset 5 R1 p2 r3 analyyttiset —---’_____arvot___ 10c fy fy] -CHpCHiCH,)^ MS, C?7H,pF?04: 458(1^),441,423 V H-NMR (270 MHz), CDClj): F F 6= 7,15-6,92 (m,8H), 6,48 (d, 1 0 J]= 16Hz,1H), 5,79 (dd, Ji«16Hz, J2= 7,6Hz,1H), 4,39 (m,1H), 4,24 (m,1H), 4,19 (q,2H), 3,64 ja 3,07 (levea kulloinkin 1H), 2,49 (m,2H), 2,27 (d,2H), 1,88 15 (m,1H), 1,72 (m,1H), 1,50 (m,1H), 1,29 (t,3H), 0,78 (d,6H) 10« ό 0 ό æ, C29H3604: 448(^),431,413 20 ^ ^ v H-NMR (270 MHz), CDC15): 6= 7.35- 7,00 (π,10H), 6,17 (d, j^Ifflz.lH), 5,46 (dd,J1=l6Hz, j2= 7,2Hz,1H), 4,23 (m,1H), 4,18 (q,2H), 4;06 (m,1H), 2,55-2,31 (b.3H), 1,75-1,40 1.35- 1,20 ja 1,10 (kulloinkin m, yhdessa 15H)· 46 90 41 2 r

Taulukko 10 (jatkuu)

Esimerk- Karakteriset ki R1 R2 R3 analyyttiset - - , ---arvot- 10 e (Tj Lj) -CH2)3CH5 MS, C27H52F204 : 458(M+),440,422 ' H-NMR (270 MHz, CDCl^): 6= F 7,10-6,90 (m,8H), 6,31 (d, J-| = 16Hz, 1H), 5,80 (dd,J-| = 16Hz, J2=6,4Hz,1H), 4,40 (m,1H), 4.25 (m,1H), 4,18 (q,2H), 2,48 (m,2H), 2,27 (t,2H), 1,72 (m,1H), 1,60 (m,1H), 1,45 (m,2H), 1,28 (t,3H), 1.25 (m,2H), 0,82 (t,3H).

10 f (Tj (M) Q MS, CggH^F^: 484(M+),466 ΊΓ H-NMR (270 MHz, CDCl^): 6= F F 7,15-6,80 (m,8H), 6,16 (d,

Jl=l6Hz,1H), 5-48 (dd,J-,= 16Hz, J2= 7,4Hz,IH), 4,28 (m,1H), 4,18 (q,2H), 4,10 (m,1H), 2,53-2,34 (m,3H), 1,80-1,00 (m,15H) H3C0 X. MS, C30H39FO5: 498 (M+), 480 10 g jC jl f jl ”^^^3^2 DC (diklcx3rimetaani/metanoli=4 :1) H3c/VCH3 Rf = 0,40 X H^CO 1 .

10 h fil Til -CH(CH,), «S. C30H39FO5; 498 (M ) , 480 1^CH3 H3CTi!%:^CH DC (dikloorimetaani/metanoli=5:1) : F Rf = 0,40 47 90 41 2

Taulukko 10 (jatkuu) 1 2 3

Esim. R R R Karakteristiset analyyt- ---_----tiset arvot___ VJv®: A, MS, C30H39FO4: 482 (Μ I, «4 5 -jo i |j T Γ' jl -CH(CH^)2 Ix:(diklcoriiætaani/metanQli= 5:1): ιΓ Τ™3 Rf = 0.32

ch3 F

10 ln , A) HjC A%, C30H39ro4: 482 <«*>. "64 ^ Ikjk 5^2 DC (diklærimetaani/metanDli 5:1)

CH *3 T

P J CH3 Rf = 0,32

15 A. MS, m (Mk, H5H

10k Lj]^ -CH( 01^)2 DC(diklc>oriiTietaani/metariolr Al): ^^3 Rf= 0,39 2o 101 (CT3 [Y^3 "CH(CH3)2 MS’ C28H34F2°4: 472 (Wf)’ 454 DC(clikloorimetaani/metanoli' M:l): _F_F_Rf= 0,39_ _A-B on _ ,,, MS, C^HjgFjCy 486 m, 468 10m I (1 ( I Γ 3 SC (diklaorimetaani/metÆolf 4:1): V t ^ “* °'H2 48 90 41 2

Esimerkki 1Qn: (Kaavan I mukaisen yhdisteen valmistus, jolloin A-B on C=C, X-Y on H2C-CH2) n) 3,5-dihydroksi-9,9-di(4-fluorifenyyli)-8-isopropyy-5 li-8-noneenihappoetyyliesteri 240 mg (0,55 mmol) esimerkin 10a mukaista yh-distettå hydrattiin 10 ml:ssa etanolia kayttaen 100 mg:aa palladiumia hiilen pinnalla (10 %) huoneen lampotilassa ja normaalipaineessa. 2 tunnin kuluttua oli H2~otto paat-10 tynyt ja suodatettiin katalysaattorista erilleen ja haih- dutettiin. Kromatografioimalla silikageelillå (kayttaen sukloheksaani/etikkaesteria = 2:1) saatiin tulokseksi 100 mg esimerkkia 10n.

MS (FAB), C26H32F2O4: 469 (M + Na+), 447,429 15 H-NMR (270 MHz,CDC13): 6= 7,15-6,90(m,8H), 4,20-4,05(m,3H), 3,60(m,lH) 2,76(sept.,lH), 2f40(m,2H), 2,26-2,00(m,2H), 1,56-1,l6(m,7H), 1,01 (dd,6H)

Esimerkki 11 (Kaavan I mukaisten yhdisteiden valmistus) 20 a) 9,9-di-(4-fluorifenyyli)-3,5-dihydroksi-8-isopropyy- li-6,8-nonadieenihapon natriumsuola 445 mg (1,0 mmol) esimerkin 10a yhdistetta liuo-tettiin 20 ml:aan etanolia ja lisattii 10 ml (1 mmol) 0,1n natronlipeatå. Sen jalkeen kun oli pidetty 1 tun-25 nin ajan huoneen lampotilassa liuotin poistettiin tislaa- malla vakuumissa lisaten useita kertoja tolueenia. Kiin-tea jåannos pestiin useita kertoja n-pentaanilla ja kui-vattiin korkeavakuumissa.

49 90 41 2

Rf (CHCl^/MeOH= 7:5):0,45 H-NMR (270 MHz, D20): 6= 7,0-6,7 (m,8H), 6,04 (d, J1=16Hz,1H), 5)38 (dd, J1= 16Hz, J2=8Hz,1H), 4,02 (m,1H), 3,65 (m,1H), 2,61 (sept.,1H), 2,16 (m,2H), 1,50 (m,1H), 1,25 (m,1H), 0,90 (d,2H)

Vastaavasti kuten esimerkissa 11a saatiin tau-lukon 11 esimerkit.

Taulukko 11 10 -— R1 \ OH OH „ a i R2" 15 r5

Esimerkki p1 ^3 Moolimassa

A-B on C=C

20 11b -CH2CH(CH3)2 C25H2904Na,4l6,5 25 11c [j^| -CH2CH(CH5)2 C25H27F204Na,452,4

F F

1!d (^j) (^} C27H3104Na,442,5 so 9041 2

Taulukko 11 (jatkuu)

Esimerkki R1 R2 R3 Moolimassa

5 A-B on C=C

11e “(CH2 )^CH^ ^25^27^2^4^^ 452,4

F F

10 11ί φ φ φ C27H29F204Na, 478,5

F F

l1g ^cX^CHj 0Uh3 -CH(Ch3)2 C28H34F05Na, 492,5

F

20 11h Φ^Η 7XK -ch(ch3 )2 C28H34F05Na, 492,5

F

H3C 013 1,1 X? CXch 'CH<C“5 )2 ^28^34^^4Na« 476,5 25 ch3 f 3 11J 0L -ch(ch5)2 C28H34I’°4Na· 476l5 F 3 “3 30 m (Xu Φα,3 -CH<M 5)2 ^26^29^2^4^3’ 466,5 F 3 F 3 35 f^Y ^3 111 Uji φφ -CH(CH3)2 C26H2gF204Naf 466,5 si 9041 2

Taulukko 11 (jatkuu)

Esimerkki pi p2 p3 Moolimassa^ 5 ~ :

A-B on HC-CH

,0 llm 0 φ 0 C27H3lWa> ^-5

F F

Esimerkki 11n:

Vastaavalla tavalla kuten esimerkissa 11a ku-15 vattiin, saadaan esimerkin 10n yhdisteesta 3,5-dihyd- roksi-9,9-di(4-fluorifenyyli)-8-isopropyyli-8-noneeni-hapon natriumsuola.

Kaavan I mukainen yhdiste, A-B on C=C, X-Y on R^=R^=4 f luorifenyyli, R^ = isopropyyli, R^ = Na.

20 24H27F2°4Na' 440 '4‘

Optisesti aktiivisen yhdisteen synteesi, vas- taten esimerkkia 11a.

Esimerkki 12: (3S , (1'S)-7,7-di-(4-fluorifenyyli)-3-hydroksi-6-isopro-25 pyyli-4,6-heptadieenihappo-1 ',2',21-trifenyyli-1',2' - etaanidioli-1'-esteri LDA-liuokseen, joka on valmistettu 0°C:ssa 506^ul:sta (3,6 mmol) di-isopropyyliamiinia ja 2,26 ml:sta N-BuLi:a (heksaani) 5 ml:ssa THFraa, lisattiin 30 -78°C:ssa argonatmosfåarisså 340 mg (1,02 mmol) (S)- 1,2,2-trifenyyli-1,2-etaanidioli-1-asetaattia (Tetrahedron Lett. 25, 5031 (1984)). Annettiin låmpotilan ko-hota -20°C:seen, kunnes kaikki oli liuennut ja sitten jaahdytettiin jålleen -78°C:een. Tåhån liuokseen tipu-35 tettiin 318 mg (1,02 mmol) esimerkkia 8a pienesså 52 9041 2 måarasså THF:åå. Sen jålkeen kun oli annettu seistå 2 tunnin ajan -78°C:ssa kaadettiin kyllåstettyyn, vesi-pitoiseen ammoniumkloridiliuokseen ja uutettiin eette-rillå (3x). Yhdistetyt orgaaniset faasit kuivattiin 5 (MgSO^rllå) ja liuotin poistettiin. Jåånnos kromatogra- fioitiin silikageelillå (kåyttåen sykloheksaani/etikka-esteriå =2:1 % NEt^ta). Edelleen diastereomeerien erot-taminen onnistuu kåyttåen HPLCrtå, DC:tå (sykloheksaani/ etikkaesteri = 3:1): Rf = 0,13.

1 0 Esimerkki 13 : (3S)-7,7-di-(4-fluorifenyyli)-3-hydroksi-6-isopropyyli-4 ,6-heptadieenihappometyyliesteri 77 mg (0,12 mmol) esimerkin 12 mukaista hydrok-siesteriå liuotettiin 3 ml:aan metanolia ja lisåttiin 15 liuos, jossa oli 2,7 mg (0,12 mmol) natriumia 1,35 ml:ssa metanolia ja sekoitettiin huoneen låmpotilassa. Reaktion pååtyttyå liuotin poistettiin vakuumissa ja jåånnos kro-matografioitiin silikageelillå (kåyttåen sykloheksaani/ etikkaesteriå = 3:1 + 1 % NET^ :a) .

20 MS, C23H24F2°3: 386' 369*

Esimerkki 14: (5 S)-9,9-di-(4-fluorifenyyli)-5-hydroksi-3-okso~8-isopropyyli-6,8-nonadieenihappo-7-butyyliesteri LDA-liuokseen, joka oli valmistettu 0,260 ml:sta 25 (1,86 mmol) di-isopropyyliamiinia ja 1,16 ml:sta n-BuLi:a (heksaani) 3 ml :ssa THF :åå, tiputettiin -78°C:ssa argonatmosfåårisså 250^ul (1,86 mmol) etikkahappo-7- butyyliesteriå. Sen jålkeen kun oli pidetty 30 minuutin ajan -78°C.'ssa, tiputettiin 120 mg (0,310 mmol) esimer-30 kin 13 mukaista yhdistettå pienesså mååråsså THF:åå ja sekoitettiin 3 tunnin ajan -30°C:ssa - -40°C:ssa. Reak-tioliuos kaadettiin kyllåstettyyn, vesipitoiseen ammoniumkloridiliuokseen ja uutettiin eetterillå (3x). Kui-vaamalla magnesiumsulfaatilla ja poistamalla liuotin tis-35 laamalla saatiin tulokseksi esimerkki 14 , jota ei enåå puhdistettu erikseen.

53 9041 2 DC (sykloheksaani/etikkaesteri = 3*1): kehitetty useita kertoja.

Esimerkki 15 (3R),(5S)-9,9-di(4—fluorifenyyli)-3,5-dihydroksi-8-5 isopropyyli-6,8-nonadieenihappo-t-butyyliesteri

Vastaavasti kuten esimerkissa 10a saatiin esi-merkin 15 mukaista yhdistetta esimerkin 14 mukaisesta yhdisteesta.

DC (sykloheksaani/etikkaesteri = 2:1) :Rf = 0,23 (15) , 10 RF = 0,39 (14) .

MS, C2gH3404F2: 472(M+), 455,437

Esimerkki 16: 15 (3R) ,(5S)-9,9-di(4-fluorifenyyli)-3,5-dihydroksi-8- isopropyyli-6,8-nonadieenihapon natriumsuola (optises-ti aktiivinen 11a)

Vastaavasti kuten esimerkissa 11a saatiin opti-sesti aktiivista 11a:ta esimerkin 15 mukaisesta yhdis-20 teesta.

Claims (9)

1. 54 90 4 1 2 Patenttivaatimus Menetelmå uusien terapeuttisesti kåyttokelpoisten 3,5-dihydroksikarboksyylihappojen ja niiden johdannaisten 5 valmistamiseksi, joilla on yleinen kaava I, R1 I OH OH .Λ. /CO R4 R2 B ^ ^ Y '5^3^! i 10 r3 jolloin yleisessa kaavassa I A-B on CH-CH tai C=C,
2. 15 X-Y on CH2-CH2 tai HC=CH, R1 ja R2 ovat samanlaisia tai erilaisia ja merkitsevåt fe-nyyliryhmåå, jolloin aromaattiset ryhmåt voivat olla 1-3 kertaa ytimeen substituoituja halogeenilla, alkyylillå tai alkoksilla, joissa on kulloinkin 1-6 C-atomia,
3. 20 R3 on korkeintaan 8 C-atomia sisaltava alkyyliryhma tai sykloalkyyliryhmå, jossa on 3 - 7 c-atomia, R4 on vety, 1-8 C-atomia sisaltava alkyyliryhma tai 2,3-dihydroksipropyyliryhmå, tunnettu siitå, ettå a) vastaavasti substituoidut aldehydit, joilla on 25 kaava III, ^Η0 111 R B Y
4. 30 R^ jossa A-B, X-Y, R1, R2 ja R3 merkitsevåt samaa kuin edellå, muutetaan yleisen kaavan IV mukaisiksi vastaaviksi hydrok- siketoestereiksi, 55 90 41 2 Ri OH O . ?, R3 jolloin A-B, X-Y, R1, R2 ja R3 merkitsevat samaa kuin edella ja R4 on 1 - 8 C-atomia sisaltSva alkyyli, 10 b) kaavan IV mukaiset hydroksiketoesterit muutetaan vastaaviksi kaavan I mukaisiksi 3,5-dihydroksiyhdisteiksi, R1 OH OH .
5. 15 A^^c°2R 1 R2^ Y jolloin A-B, X-Y, R1, R2 ja R3 merkitsevat samaa kuin kaa-vassa I on ilmoitettu, ja R4 on 1 - 8 C-atomia sisaltava 20 alkyyli ja saatu yhdiste mahdollisesti saippuoidaan kaavan I mukaiseksi yhdisteeksi, jossa R4 on metallikationi, tastå vapautetaan mahdollisesti vapaa happo (R4 = vety). 56 90 41 ? Forfarande for framstållning av nya terapeutiskt anvåndbara 3,5-dihydroxikarboxylsyror och derivat av des-5 sa, med den allmånna formeln I, R1 I OH OH X Jt O R4 R2 B ^ ^ Y i I
6. 10 R3 varvid i den allmanna formeln I A-B ar CH-CH eller C=C,
7. 15 X-Y år CH2-CH2 eller HC=CH, Rl och R2 år likadana eller olika och betecknar fenylgrup-per, varvid de aromatiska grupperna kanvara substituerade 1-3 gånger i kårnan med halogen, alkyl eller alkoxi, innehållande vardera 1-6 C-atomer,
8. 20 R3 år en hogst 8 C-atomer innehållande alkylgrupp eller cykloalkylgrupp, innhållande 3-7 C-atomer, R4 år våte, en 1 - 8 C-atomer innehållande alkylgrupp eller 2,3-dihydroxipropylgrupp, kånnetecknat dårav, att 25 a) på motsvarande sått substituerade aldehyder med formeln III, R1 X CHO III 30 0 ^ \ R2 B Y R3 var i A-B, X-Y, R1, R2 och R3 betecknar samma som ovan, om-35 vandlas till motsvarande hydroxiketoestrar med formel IV, 57 9041 2 „i OH O , B ϊ IV R3 varvid A-B, X-Y, R1, R2 och R3 betecknar samma som ovan, och R4 ar en 1 - 8 C-atomer innehållande alkyl, 10 b) hydroxiketoestrarna med formel IV omvandlas till motsvarande 3,5-dihydroxiforeningar med formeln i, R1 OH OH 4 '"'a J^K^C°2R r
9. 15 K2'' Y varvid A-B, X-Y, Rl, R2 och R3 betecknar samma som angivits i formel I, och R4 Mr en 1 - 8 C-atomer innehållande alkyl, 20 och den erhållna foreningen fortvålas eventuellt till en forening med formeln I, vari R4 ar en metallikatjon, harur frigores eventuellt den fria syran (R4 = vate).