FI86888C - Foerfarande foer konstruering av arsenresistenta plasmider - Google Patents

Foerfarande foer konstruering av arsenresistenta plasmider Download PDF

Info

Publication number
FI86888C
FI86888C FI843515A FI843515A FI86888C FI 86888 C FI86888 C FI 86888C FI 843515 A FI843515 A FI 843515A FI 843515 A FI843515 A FI 843515A FI 86888 C FI86888 C FI 86888C
Authority
FI
Finland
Prior art keywords
plasmid
arsenic
recombinant plasmid
resistant
restriction enzyme
Prior art date
Application number
FI843515A
Other languages
English (en)
Swedish (sv)
Other versions
FI86888B (fi
FI843515A0 (fi
FI843515L (fi
Inventor
Douglas Eric Rawlings
David Randle Woods
Original Assignee
Gen Mining Union Corp
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Gen Mining Union Corp filed Critical Gen Mining Union Corp
Publication of FI843515A0 publication Critical patent/FI843515A0/fi
Publication of FI843515L publication Critical patent/FI843515L/fi
Publication of FI86888B publication Critical patent/FI86888B/fi
Application granted granted Critical
Publication of FI86888C publication Critical patent/FI86888C/fi

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C22METALLURGY; FERROUS OR NON-FERROUS ALLOYS; TREATMENT OF ALLOYS OR NON-FERROUS METALS
    • C22BPRODUCTION AND REFINING OF METALS; PRETREATMENT OF RAW MATERIALS
    • C22B3/00Extraction of metal compounds from ores or concentrates by wet processes
    • C22B3/18Extraction of metal compounds from ores or concentrates by wet processes with the aid of microorganisms or enzymes, e.g. bacteria or algae
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K14/00Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/195Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/74Vectors or expression systems specially adapted for prokaryotic hosts other than E. coli, e.g. Lactobacillus, Micromonospora
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02PCLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P10/00Technologies related to metal processing
    • Y02P10/20Recycling
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10STECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215Microorganisms
    • Y10S435/822Microorganisms using bacteria or actinomycetales
    • Y10S435/848Escherichia
    • Y10S435/849Escherichia coli

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Manufacturing & Machinery (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Environmental & Geological Engineering (AREA)
  • General Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Geochemistry & Mineralogy (AREA)
  • Geology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Mechanical Engineering (AREA)
  • Metallurgy (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Inorganic Compounds Of Heavy Metals (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)

Description

86888
Menetelmä arseeniresistenttien plasmidien muodostamiseksi Tämä keksintö kohdistuu Thiobacillus ferrooxidans -bakteerin yhdistelmä-DNA-plasmidien vektoreihln, jotka sisältävät arseeni-resistenssin geenit ja jotka kykenevät replikoitumaan sekä T. ferrooxidans- että Escherichia coli -bakteereissa.
Arseno-pyriittimalmien biologista uuttoa on tähän saakka rajoittanut prosessissa toimivien organismien herkkyys prosessissa vapautuneelle arseenille.
Vaikka muille bakteereille onkin muodostettu arseeniresistenttejä plasmideja, niin hakijan tietojen mukaan julkaisuja ei ole T. ferrooxidans -bakteerin sellaisten plasmidien muodostamisesta, jotka kykenevät replikoitumaan myös E. colissa.
Tämän keksinnön mukaisesti muodostetaan sellainen plasmidi, joka sisältää arseeniresistenssin geenit ja kykenee replikoitumaan T. ferrooxidans -bakteerissa. Nämä plasmidit voidaan transformoida T. ferrooxidans -bakteeriin, jolloin vastaanottajan arseeni-resistenssi paranee. Keksinnön oleelliset tunnusmerkit on esitetty oheisissa patenttivaatimuksissa.
Tämä menetelmä toteutetaan mieluiten siten, että T. ferrooxidans-kannasta peräisin oleva kryptinen DNA-plasmidi ja toinen plasmidi pilkotaan samalla restriktioentsyymillä, ligatoidaan plasmidit yhdistelmäplasmidin muodostamiseksi, poistetaan yhdistelmäplasmi-dista E. colin replikaation alkamiskohta vajaan yhdistelmäplasmidin muodostamiseksi, kolmannesta plasmidista poistetaan arseeniresistenssin geenit restriktioentsyymillä pilkkomalla, ja geenit istutetaan vajaaseen yhdistelmäplasmidiin samalla restriktioentsyymillä pilkkomalla, täten arseeniresistenttien plasmidien synnyttämiseksi.
Tämä keksintö kohdistuu samoin arseeniresistenttiin plasmidiin pDR416, jonka koko on noin 16,5 kb ja joka restriktioentsyymillä Pvul jaetaan viiteen fragmenttiin, jotka kooltaan ovat 4,4 kb, 3,6 kb, 3,4 kb, 2,8 kb ja 2,3 kb, vastaavasti.
8 6 c 8 8 2
Edelleen keksintö kohdistuu arseeniresistenttiin plasmidiin pDR420, jonka koko on noin 13,3 kb, ja joka restriktioentsyy-millä Pvul jaetaan neljään fragmenttiin, jotka kooltaan ovat 4.4 kb, 4,2 kb, 3,6 kb ja 1,1 kb, vastaavasti.
Keksinnön mukaisia plasmideja voidaan käyttää malmien uuttamiseen, erityisesti kullan talteenoton menetelmissä.
Keksinnön eräs esimerki kuvataan oheisessa oleviin piirustuksiin viitaten, joissa: kuva 1 esittää plasmidien pTF-FC2 ja pDR401 restriktiokartto- ja, ja kuva 2 esittää plasmidien pDR403, pDR404, pDR416 ja pDR420 ja erään R46-fragmentin restriktiokarttoja.
FI-patenttihakemuksessa 843386 esitetään muun muassa plasmi-din pDR401 muodostaminen.
12.4 kiloemäksen (kb) kryptinen plasmidi, pTF-FC2, uutettiin T. ferrooxidansin FC-kannasta, joka oli eristetty kaivoksen Fairview Mine, General Mining Union Corporation Limited, Ete-lä-Afrikka, happamasta uuttonesteestä. pTF-FC2:n restriktio-kartasta voidaan nähdä, että sillä on ainoastaan yksi Pstl, Xhol, Kpnl, EcoRl, Apal, Clal-restriktiokohta, ja kaksi Pvul-restriktiokohtaa, katso kuvaa 1.
Yhdistelmäplasmidi pDR401 muodostettiin istuttamalla E. coli -plasmidi pBR325 pTF-FC2:n Pstl-kohtaan. pBR325 sisältää am- pisilliini (AP)-, kloramfenikoli (Cm)- ja tetrasykliini (Te)- resistenssin geenit. Pst2-kohdan kloonaus inaktivoi Ap -gee-
R R S
nin istuttamisesta johtuen, ja tyypiltään Cm , TC ja Ap olevat E. coli -transformantit eristettiin. Yhdistelmäplasmidi pDR401 (noin 17,8 kb) uutettiin E. coli -tranformanteista ja sen ominaisuudet selvitettiin restriktioanalyysin avulla.
£ Tämä uusi yhdistelmäplasmidi sisältää ominaisuuksien Cm ja £
Te geenit, ja se kykenee replikoituinaan bakteereissa T. fer-rooxidans ja E. coli.
86 8 88 3
Kuitenkin plasmidin pBR325 istuttamisen suuntauksesta riippuen on mahdollista muodostaa plasmidi pDR401 (17,8 kb) tai plasmidi pDR403 (17,8 kb), joiden restriktiokartta on esitetty kuvassa 2. (Tässä vaiheessa olisi korostettava sitä, että muita sopivia plasmideja voitaisiin mahdollisesti käyttää pBR325:n sijasta.) Tämän keksinnön mukaisesti E. colin replikaation alkamiskohta poistetaan plasmidista pDR403 vajaan yhdistelmäplasmidin pDR404 (9 kb) muodostamiseksi (katso kuva 2).
Plasmidi R46 on kuvattu artikkelissa A.M.C. Brown ja S. Willets, A Physical and Genetic Map of the IncN Plasmid R46, Plasmid 5, 188-201 (1981).
Arseeniresistenssin geenit poistetaan plasmidista R46 7,5
R R
kb:n fragmenttina, joka sisältää geenit As ja Te , ja joka on IncN-plasmidin R46 EcoRl:llä aikaansaatu pilkkoutumistuote (Brown & Willets 1981). Tämä suoritetaan pilkkomalla R46-plasmidi restriktioentsyymillä EcoRl. Arseeniresistenssin geenit istutetaan plasmidiin pDR404 samalla restriktioentsyymillä EcoRl pilkkoen, arseeniresistenssin plasmidien pDR416 ja pDR420 muodostamiseksi.
Kummankin plasmidin pDR4l6 (16,5 kb) ja pDR420 (13,3 kb) ominaisuudet selvitettiin endonukleolyyttisellä pilkkomisella restriktioentsyymiä Pvul käyttäen.
Täten plasmidi pDR416 pilkkoutuu viiteen fragmenttiin, jotka ovat kooltaan 4,4 kb, 3,6 kb, 3,4 kb, 2,8 kb ja 2,3 kb, vastaavasti .
Plasmidi pDR420 pilkotaan samalla entsyymillä neljään fragmenttiin, jotka ovat kooltaan 4,4 kb, 4,2 kb, 3,6 kb ja 1,1 kb, vastaavasti.
Niitä T. ferrooxidans -kantoja, joihin tämän keksinnön mukaiset plasmidit transformoidaan, käytetään arseno-pyriittimal- 4 86888 mien uuttamisessa, ja malmin mineraalien tuloksena olevassa parantuneessa uuttamisessa.
Eräässä tunnetussa prosessissa kultamalmi saatetaan kosketukseen arsenopyriitin kanssa, ja kullan vapautuessa uuttoon arseeni joutuu liuokseen. Arseenipitoisuus kasvaa, ja tämä häiritsee organismien toimintaa, jolloin uuton tehokkuus pienenee. Vaikeudesta päästään eroon seostamalla arseeni säännöllisin väliajoin ja jatkamalla prosessia tuoretta liuosta käyttäen. Vaikeus on siinä, että prosessi on aikaa vievä ja kallis.
Tämän keksinnön mukaiset plasmidit ovat arseeniresistenttejä, ja T. Ferrooxidans -kantoihin transformoituna ne tekevät malmien nopeutetun uuttamisen mahdolliseksi. Tämä johtuu siitä, että ajanjakso ennen välttämätöntä arseenin saostamista kasvaa, mikäli arseenin saostaminen yleensäkään on välttämätöntä.

Claims (7)

  1. 5 86838
  2. 1. Menetelmä Thiobacillus ferrooxidans -bakteerin ar-seeniresistenttien vektoreiden muodostamiseksi, tunnettu siitä, että menetelmä käsittää seuraavat vaiheet: a) pilkotaan T. ferrooxidans -kannasta kryptinen DNA-plasmidi ensimmäisellä restriktioentsyymillä, pilkotaan plasmidi PBR325, joka sisältää E. colin replikaation alkamiskohdan, samalla ensimmäisellä restriktioentsyymillä ja ligatoidaan plasmidit rekombinanttiplasmidin muodostamiseksi, b) transformoidaan E. coli -solut mainitulla rekombi-nanttiplasmidilla ja selektoidaan transformantit, c) poistetaan E. colin replikaation alkamiskohta mainitusta rekombinanttiplasmidista deletoidun rekombinanttiplasmidin muodostamiseksi, d) poistetaan vähintään yksi arseeniresistentti geeni plasmidista R46 pilkkomalla plasmidi R46 toisella restriktioentsyymillä, pilkotaan deletoitu rekombinanttiplasmidi samalla toisella restriktioentsyymillä ja ligatoidaan mainittu arseeniresistentti geeni deletoituun rekombinantti-plasmidiin arseeniresistentin rekombinanttiplasmidin muodostamiseksi, e) transformoidaan T. ferrooxidans -solut arseeniresis-tentillä rekombinanttiplasmidilla ja selektoidaan transformant it, ja f) eristetään mainittu arseeniresistentti rekombinanttiplasmidi .
  3. 2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että kryptinen DNA-plasmidi on pTF-FC2, jonka koko on 12,4 kb. (kuva 1)
  4. 3. Patenttivaatimuksen 1 tai 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että rekombinanttiplasmidi on pDR403, joka on kooltaan 17,9 kb. (kuva 2) 1 Minkä tahansa patenttivaatimuksen 1-3 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että vajaa rekombinanttiplasmidi on , 86838 pDR404, jonka koko on 9 kb. (kuva 2)
  5. 5. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että plasmidi R46 pilkotaan EcoRl-restriktioentsyy-millä.
  6. 6. Arseeniresistentti plasmidi pDR4l6, joka on eristetty patenttivaatimuksen 1 vaiheessa (f) ja joka on tun nettu siitä, että sen koko on noin 16,5 kb ja se on jaettu viiteen fragmenttiin, kooltaan 4,4 kb, 3,6 kb, 3,4 kb, 2,8 kb ja 2,3 kb, vastaavasti, restriktioentsyymillä Pvul. (kuva 2)
  7. 7. Arseeniresistentti plasmidi pDR420, joka on eristetty patenttivaatimuksen l vaiheessa (f) ja joka on tunnettu siitä, että sen koko on noin 13,3 kb ja se on jaettu neljään fragmenttiin, kooltaan 4,4 kb, 4,2 kb, 3,6 kb ja 1,1 kb, vastaavasti, restriktioentsyymillä Pvul. (kuva 2)
FI843515A 1983-09-09 1984-09-07 Foerfarande foer konstruering av arsenresistenta plasmider FI86888C (fi)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
ZA8306690 1983-09-09
ZA836690 1983-09-09

Publications (4)

Publication Number Publication Date
FI843515A0 FI843515A0 (fi) 1984-09-07
FI843515L FI843515L (fi) 1985-03-10
FI86888B FI86888B (fi) 1992-07-15
FI86888C true FI86888C (fi) 1992-10-26

Family

ID=25576906

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
FI843515A FI86888C (fi) 1983-09-09 1984-09-07 Foerfarande foer konstruering av arsenresistenta plasmider

Country Status (13)

Country Link
US (1) US4748118A (fi)
JP (1) JPS60102189A (fi)
AT (1) AT391144B (fi)
AU (1) AU583797B2 (fi)
BE (1) BE900538A (fi)
BR (1) BR8404443A (fi)
CA (1) CA1226539A (fi)
DE (1) DE3432997A1 (fi)
FI (1) FI86888C (fi)
FR (1) FR2551767B1 (fi)
GB (1) GB2149798B (fi)
SE (1) SE463422B (fi)
ZA (1) ZA846735B (fi)

Families Citing this family (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3937497A (en) * 1974-05-15 1976-02-10 Studer Altee C Drain jointing system
NO140752C (no) * 1977-08-29 1979-11-07 Rieber & Son As Kombinert forme- og tetningselement til bruk i en muffeende i termoplastroer
CA1226538A (en) * 1983-08-29 1987-09-08 Douglas E. Rawlings Construction of selectable shuttle cloning vectors for thiobacillus ferrooxidans
JPS63209591A (ja) * 1987-02-27 1988-08-31 Dowa Mining Co Ltd チオバチルス属菌のための組換えプラスミド、水銀耐性ベクタ−プラスミドおよびそれらの作製法
US4987081A (en) * 1987-07-10 1991-01-22 Gb Biotech Inc. Chemical/biological process to oxidize multimetallic sulphide ores
ZW8788A1 (en) * 1987-07-10 1989-08-09 Giant Bay Biotech Inc Chemical/biological process to oxidize multimetallic sulphide ores
US4888293A (en) * 1987-07-10 1989-12-19 Giant Bay Biotech Inc. Adapting bacteria to low pH and high arsenic concentration for use in oxidizing sulfide ores
US5089412A (en) * 1987-07-10 1992-02-18 Gb Biotech Inc. Bacteria for oxidizing multimetallic sulphide ores
US5132221A (en) * 1989-05-10 1992-07-21 The United States Of America As Represented By The United States Department Of Energy Lysogenic bacteriophage isolated from acidophilium
USH1074H (en) 1990-02-27 1992-07-07 The United States Of America As Represented By The United States Department Of Energy Bacterio-electric leaching of metals
US5221327A (en) * 1991-02-22 1993-06-22 Metallurgical And Biological Extraction Systems, Inc. Biological processes for recovering heavy metals
JPH0589007U (ja) * 1992-05-06 1993-12-03 関東自動車工業株式会社 タイヤ取付用台車

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4340674A (en) * 1980-05-05 1982-07-20 The Upjohn Company Cointegrate plasmids and their construction from plasmids of Escherichia and Streptomyces
DE3116648A1 (de) * 1981-04-27 1982-11-18 Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V., 3400 Göttingen "plasmide mit einem gen fuer kobalt-resistenz, mikroorganismen, die ein derartiges plasmid transformiert enthalten, verfahren zur herstellung von kobalt-resistenten mikroorganismen und verfahren zum abtrennen von kobalt aus kolbalthaltigen loesungen"
FR2512058A1 (fr) * 1981-08-25 1983-03-04 Centre Nat Rech Scient Nouveaux plasmides destines a ameliorer les capacites d'oxydation des thiobacillus, souches transformees et application a l'oxydation des metaux
CA1226538A (en) * 1983-08-29 1987-09-08 Douglas E. Rawlings Construction of selectable shuttle cloning vectors for thiobacillus ferrooxidans

Also Published As

Publication number Publication date
US4748118A (en) 1988-05-31
SE462496B (sv) 1990-07-02
AT391144B (de) 1990-08-27
FI86888B (fi) 1992-07-15
JPS60102189A (ja) 1985-06-06
AU3259884A (en) 1985-03-14
SE463422B (sv) 1990-11-19
AU583797B2 (en) 1989-05-11
GB2149798A (en) 1985-06-19
ATA276884A (de) 1990-02-15
FR2551767B1 (fr) 1988-09-16
DE3432997A1 (de) 1985-03-28
SE8404500L (sv) 1985-03-10
ZA846735B (en) 1985-04-24
FR2551767A1 (fr) 1985-03-15
BR8404443A (pt) 1985-07-30
CA1226539A (en) 1987-09-08
GB8422595D0 (en) 1984-10-10
FI843515A0 (fi) 1984-09-07
DE3432997C2 (fi) 1991-09-12
GB2149798B (en) 1988-07-13
BE900538A (fr) 1985-01-02
SE8404500D0 (sv) 1984-09-07
FI843515L (fi) 1985-03-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
FI86888C (fi) Foerfarande foer konstruering av arsenresistenta plasmider
Greenleaf et al. Yeast RPO41 gene product is required for transcription and maintenance of the mitochondrial genome.
US4885249A (en) Aspergillus niger transformation system
EP0258067B1 (en) Yeast promoter
US4418149A (en) Fused hybrid gene
EP0080848A2 (en) Stabilizing & selecting cells
Schümperli et al. Efficient expression of Escherichia coli galactokinase gene in mammalian cells.
AU2008203185B2 (en) Plasmids for transforming bacteria of the Acidithobacillus spp. Genus, and transformation method
EP0317254B1 (en) Yeast expression system
Allen et al. A family of vectors that facilitate transposon and insertional mutagenesis of cloned genes in yeast
US4711849A (en) Construction of selectable shuttle cloning vectors for Thiobacillus ferrooxidans
EP0109560A2 (en) Yeast plasmid vector capable of induced expressing and method of using said plasmid
EP0399455A2 (en) Albumin gene-containing plasmid, transformant carrying same, production of such transformant and production of albumin
JP2595205B2 (ja) 発現カセット
EP0174585A2 (en) Promoters and the use thereof in the expression of unfused procaryotic or eucaryotic proteins in yeast
EP0181213B1 (en) Cephalosporium acremonium transformed with an aminoglycoside resistance marker
CA1318868C (en) Production of foreign proteins in yeast
Woods et al. Molecular genetic studies on the thiobacilli and the development of improved biomining bacteria
WO2011124463A1 (de) Verfahren zur herstellung süsser proteine
Thuault et al. Mitochondrial DNA of the basidiomycete Polyporus ciliatus: I. Physical map, localization of specific genes and cloning of an autonomously replicating sequence (ars)
CA1270216A (en) Processes for the preparation of obligate methylotrophic bacteria which express foreign dna, and plasmids and host organisms suitable for these
JP2000116392A (ja) 新規ベクタ―
JP3612559B2 (ja) 酵母染色体に外来遺伝子を挿入する方法
CN113528566A (zh) 一种酵母菌重组表达载体及其构建方法与应用
EP0180958A1 (en) Recombinant plasmid and microbial strain transformed by said plasmid

Legal Events

Date Code Title Description
MM Patent lapsed
MM Patent lapsed

Owner name: GENERAL MINING UNION CORPORATION LIMITED