FI82938C

FI82938C - Foerfarande foer framstaellning av penicillansyraderivat med debromering.

Info

Publication number: FI82938C
Application number: FI842253A
Authority: FI
Inventors: Paul Douglas Weeks; Donald Klein Pirie
Original assignee: Pfizer
Priority date: 1983-06-06
Filing date: 1984-06-05
Publication date: 1991-05-10
Also published as: HU193931B; AU551236B2; DK275684D0; FI842253A; IL72004A; PH20990A; HUT34204A; ES533149A0; IL72004A0; EP0129360B1; DK275684A; IE841392L; FI82938B; ES8602807A1; FI842253A0; PL143370B1; CA1210388A; PL248046A1; AU2907984A; IE57561B1

Description

1 82938

Menetelmä penisillaanihappojohdannaisen valmistamiseksi debromauksella

Keksintö koskee menetelmää penisillaanihappojohdan-5 naisen valmistamiseksi poistamalla bromia 6-monobromi- tai 6,6-dibromipenisillaanihaposta tai niiden johdannaisesta bisulfiittisuolan avulla. Tämän keksinnön menetelmällä valmistetuille debromatuille yhdisteille löytyy erilaisia käyttötarkoituksia, kuten β-laktamaasi-inhibiittoreina tai 10 välituotteina syntetisoitaessa muita käyttökelpoisia 6-laktaami-yhdisteitä, joita on mainittu seuraavassa tekstissä.

Samanlaisia bromin poistamisia on suoritettu aikaisemmin trialkyyli- tai triaryylitinahydridien avulla. 15 Esimerkiksi eurooppalaisessa patenttihakemuksessa 0 013 617 selostetaan bentsyyli-6-6-bromipenisillanaatin muuttamista bentsyylipenisillanaatiksi tributyylitinahyd-ridin ja atsobisisobutyronitriilin vaikutuksen alaisena kiehuvassa bentseenissä; 6,6-dibromipenisillanaatin eri-20 laisten esterien muuttamista vastaavaksi 6-6-bromipenisil- lanaatiksi samoilla reagensseilla; bentsyyli-6,6-dibromi-penisillanaatti-1,1-dioksidin muuttamista bentsyyli-6-α-ja -6-6-bromipenisillanaattien seokseksi samalla reagens-silla; ja bentsyyli- tai pivaloyylioksimetyyli-6,6-dibro-25 mipenisillanaattien muuttamista vastaavien 6-a- ja 6-6- bromiesterien seokseksi käyttämällä tributyylitinahydridin asemesta trifenyylitinahydridiä.

Samassa eurooppalaisessa patenttihakemuksessa selostetaan edelleen metyylilitiumin käyttöä -78°C:ssa, minkä 30 jälkeen reaktio sammutetaan etikkahapolla, jolloin pivaloyylioksimetyyli-6, 6-dibromipenisillanaatti saadaan muutetuksi alhaisin saannoin vastaavaksi 6-6-bromiesteriksi.

Pratt, US-patentti 4 180 506, selostaa 6,6-dibro-mipenisillaanihapon katalyyttistä hydrausta Pd/C-kata-35 lyytillä, jolloin saadaan valmistetuksi 6-a- ja 6-6-bromi-penisillaanihapon seosta. Clayton, J. Chem. Soc. (C), s.

2 82938 2123-2127 (1969), selostaa metyyli-6,6-dibromipenisilla-naatln hydrausta Pd/CaC03-katalyytiliä, jolloin saadaan valmistetuksi metyyli-6-a-bromipenisillanaattia ja metyy-lipenisillanaattia; ja 6,6-dibromipenisillaanihapon hyd-5 rausta samalla katalyytillä, jolloin saadaan valmistetuksi penisillaanihappoa.

GB-patenttihakemuksessa 2 051 046 selostetaan 6,6-dibromipenisillaanihapposuolojen muuttamista 6-B-bromipe-nisillaanihapoksi ja pivaloyylioksimetyyli-6,6-dibromipe-10 nisillanaatin muuttamista pivaloyylioksimetyyli-6-B-bromi- penisillanaatiksi NaBH4:n tai NaCNBH3:n ollessa reagenssi- na.

Keksintö koskee menetelmää penisillaanihappojohdan-naisen valmistamiseksi, jolla on kaava 15 (f N ''"COOR8 jossa n on 0 tai 2, A on vety, bromi, metoksiaminometyyli 25 tai etoksiaminometyyli ja R8 on vety, etyyli, bentsyyli tai pivaloyylioksimetyyli, jolle menetelmälle on tunnusomaista, että bromiyhdistettä, jolla on kaava

Br (O) 30 ς n ^CH3 A 3 CT N ^""^OOR8 35 jossa n, A ja R8 merkitsevät samaa kuin edellä, käsitellään oleellisesti yhdellä mooliekvivalentilla bisulfiittisuolaa 3 82938 reaktion suhteen inertissä vesipitoisessa liuottimessa 0-100eC:ssa.

Tämä menetelmä on käyttökelpoinen mm. valmistettaessa monobromi-yhdistettä, jolla on kaava 5 H <°>n CH3

Br"'" (I) #/"' COOR8 10 jossa n on 0 tai 2 ja R8 on vety, etyyli, bentsyyli tai pivaloyylioksimetyyli, jolloin dibromi-yhdistettä, jolla on kaava 15

Br (0)_ _/S^/CH3 r+H T^CH. (II) (f ""COOR8 20 jossa n ja R8 ovat aikaisemmin määriteltyjä, käsitellään mooliekvivalentilla bisulfiittisuolaa reaktion suhteen inertissä vesipitoisessa liuottimessa 0-100°C:ssa. Ensisi-25 jäinen lämpötila-alue, erityisesti R8:n ollessa pivaloyylioksimetyyli, on 0-40°C. Tässä alemmassa lämpötila-alueessa reaktionopeuden lisäämiseksi voidaan käyttää ylimäärin bisul£iittia menettämättä merkittävästi toista bromia.

Tämän keksinnön menetelmä on käyttökelpoinen myös 30 valmistettaessa bromitonta yhdistettä, jolla on kaava ...· ,_/Sr 3 :* Γ"'Η CH3 (lii) 35 J-N -\ r & 'COOR0 4 82938 jossa n on edellä määritelty ja R6 on vety, etyyli tai bentsyyli, jolloin a- tai β-bromiyhdistettä, jolla on kaava (0,n CH,

Br^v,-u^sNc^ 3 nö hcHn (IV)

J-N-V

CT '"COOR6 10 jossa n on R6 ovat edellä määriteltyjä, käsitellään ainakin yhdellä mooliekvivalentilla bisulfiittisuolaa reaktion suhteen inertissä vesipitoisessa liuottimessa 50-100°C:s-sa.

15 Kaavan (III) mukainen bromiton yhdiste voidaan vaihtoehtoisesti valmistaa dibromiyhdisteestä, jolla on kaava ΒΓ (°)n 20 Bc—__^S^/CH3 Ί L ΊΝη3 (v) ff ^COOR6 25 jossa n ja R6 ovat edellä määriteltyjä, käsittelemällä sitä ainakin kahdella mooliekvivalentilla bisulfiittisuolaa edellä mainituissa olosuhteissa.

Tämän keksinnön menetelmä on käyttökelpoinen myös valmistettaessa 6-a- ja 6-B-yhdisteiden seosta, joilla on 30 kaava ·:. o2 • ronhch2^-foY-CcHH33 ,VI, 35 <f " Voor6 5 82938 jossa R on metyyli tai etyyli ja R6 on vety, etyyli tai bentsyyli, jolloin bromiyhdistettä, jolla on kaava 5

Br °2 CH3 RONHCH 2^J [- J_N-I*3 , •VH) (f '''COOR6 10 jossa R ja R6 ovat aikaisemmin määriteltyjä, käsitellään ainakin yhdellä mooliekvivalentilla bisulfiittisuolaa reaktion suhteen inertissä vesipitoisessa liuottimessa 50-15 100°C:ssa.

Bisulfiitti-anioniin liittyneen kationin luonteella ei ole ratkaisevaa merkitystä tämän keksinnön kannalta, joskin yleensä alkalimetallia, erityisesti natriumia, pidetään ensisijaisena.

20 Lukuun ottamatta tapausta, jolloin R8 on pivaloyyli- oksimetyyli, tämän keksinnön menetelmä suoritetaan ensisijaisesti lievästi emäksisen puskuroivan aineen läsnäollessa. Tähän tarkoitukseen soveltuu erityisen hyvin yksi -kolme mooliekvivalenttia natriumvetykarbonaattia.

25 Tässä käytettynä sanonta "reaktion suhteen inertti liuotin" määritellään liuottimeksi, joka ei ole vuorovaikutuksessa lähtöaineiden, reagenssien, välituotteiden tai tuotteiden kanssa siten, että halutun tuotteen saanto merkittävästi vähenisi. Hyvin sopiva tämän keksinnön menetel-30 män kannalta on vesi, ensisijaisesti yhdistelmänä suhteellisen alhaalla kiehuvan, veden kanssa sekoittuvan orgaanisen liuottimen kuten tetrahydrofuraanin kanssa.

Kaavan (III) mukaiset yhdisteet, joissa n on 2 ja R6 on vety, ovat B-laktamaasi-inhibiittoreita, jotka ovat 35 käyttökelpoisia lääkehoidossa yhdistelmänä β-laktaami-an- 6 82938 tibioottien kanssa (katso Barth, US-patentti 4 234 579). Muissa suhteissa kaavan (III) mukaiset yhdisteet, joissa n on 0 ja/tai R6 on etyyli tai bentsyyli, ovat ensisijaisesti käyttökelpoisia syntetisoitaessa kaavan (III) mukaisia yh-5 disteitä, joissa n on 2 ja/tai R6 on vety, hapettamalla rikki (n=0) perhapolla ja/tai hydrogenolysoimalla etyyli tai bentsyyliryhmä penisilliini-alalla hyvin tunnettujen menetelmien mukaisesti.

Kaavojen (I) ja (VI) mukaisten yhdisteiden ensisi-10 jäinen käyttö on käyttö välituotteina syntetisoitaessa B-laktamaasi-inhibiittoreita, joilla on kaava (VIII) tai (IX) H o2 RONHCH^I_ 15 | H r^CH. (VIII) J--N-VoOR1 H °2 ,n h2nch2«J /s^/CH3 Γ” Ych3 (1X) /-N»or1 joissa R on metyyli tai etyyli; ja R1 on vety tai pivaloyy-25 lioksimetyyli; niiden farmaseuttisesti hyväksyttäviä ka-tionisia suoloja Rl:n ollessa vety; ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttäviä happoadditiosuoloja.

Farmaseuttisesti hyväksyttäviä kationisia suoloja ovat mm. suolat natriumin, kaliumin, kalsiumin, Ν,Ν'-di-30 bentsyylietyleenidiamiinin, N-metyyliglukamiinin (meglu-miini) ja dietanoliamiinin kanssa. Farmaseuttisesti hyväksyttäviä happoadditiosuoloja ovat mm. suolat, joiden muodostamisessa on käytetty happoja HC1, H2S04, HN03, CH3S02h ja p-CH3C6H4S03H.

35 Kaavan (IX) mukaiset yhdisteet ovat Barth'in US- patenttijulkaisun No. 4 452 796 kohteena (jätetty lokakuun |: 7 82938 21 päivänä 1982, otsikkona "6-Aminoalkylpenicillanic Acid 1,1-Dioxides as beta-Lactamase Inhibitors"). Menetelmiä kaavan (IX) mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi, joissa käytetään näitä välituotteita, on kuvattu seuraavassa 5 tekstissä ja samanaikaisesti jätetyssä Barth'in Fl-pa- tenttihakemuksessa 842 252.

Kaavan (VIII) mukaiset yhdisteet ja menetelmät niiden valmistamiseksi käyttämällä edellä valmistettuja välituotteita, ovat samanaikaisesti jätetyn Pirie’n, Volk-10 mann'in ja Kleinman'in FI-patenttihakemuksen 842 255 kohteena. Näitä erilaisia menetelmiä on valaistu myös seuraavassa tekstissä.

Tämän keksinnön mukainen menetelmä on helposti suoritettavissa menetelmien mukaisesti, jotka on esitetty 15 yhteenvetona edellä ja yksityiskohtaisesti seuraavissa spesifisissä esimerkeissä.

Tässä menetelmässä tarvittavat lähtöaineet ovat joko tunnettuja yhdisteitä (joista useita on selostettu edellä mainituissa viitteissä), tai niitä valmistetaan 20 seuraavassa tekstissä esimerkkeinä ja yksityiskohdittain esitettyjen spesifisten valmistusten mukaisesti.

Kuten edellä on mainittu, kaavojen (VIII) ja (IX) mukaisia β-laktamaasia inhibioivia yhdisteitä syntetisoidaan mukavasti tämän keksinnön menetelmällä valmistetuista yh-25 disteistä, joista on poistettu bromia. Esimerkiksi yhdisteissä (I), R8:n ollessa hapon (tai suolan) muodossa, tuo ryhmä muutetaan hydrogenolysoituvaksi tai hydrolysoituvaksi esteriksi, käyttämällä, kummassakin tapauksessa, penisilliini-alalla hyvin tunnettuja menetelmiä (katso esim. US-30 patentteja 4 234 579, 4 287 181 ja 4 348 264). Lisäksi kaavan (I) mukaiset yhdisteet, joissa n on 0, hapetetaan ainakin kahdella ekvivalentilla perhappoa (mukavasti m-klooriperbentsoehapolla) reaktion suhteen inertissä liuot-timessa kuten etyyliasetaatissa 0-50*C:ssa. Saatu kaavan 35 (I) mukainen yhdiste, jossa R8 on etyyli, bentsyyli tai pivaolyylioksimetyyli ja n on 2, muutetaansitten -50 ...

8 82938 -100*C:ssa eetteriliuottimessa (kuten THF/eetteri-seokses-sa) yksinkertaisen Grignard-reagenssin kuten CH3MgBr:n vaikutuksen alaisena 6-a-Grignard-reagenssiksi: 5 TT 02 H S yCH3

BrMg ////)1--si 4 'p-CH3 (X) J-N -l"«COOR5 10 jossa R5 on edellä Re:n osalta määritelty hydrogenolysoitu-va tai hydrolysoituva esteriryhmä.

15 Grignard-reagenssin (X) annetaan reagoida eristä mättä formaldehydi-O-alkyyli- tai -O-bentsyylioksiimin kanssa BF3:n läsnäollessa, jolloin saadaan yhdiste, jolla on kaava 20 ronhch2J|—r'V'”! «χι> ; N ^COOR5 25 jossa R ja R5 ovat edellä määriteltyjä. Kun R5 on hydrolysoituva esteri, ts. pivaloyylioksi, metyyli, yhdisteet (XI) vastaavat edellä mainittuja yhdisteitä (VIII), joissa 30 R1 on vastaava hydrolysoituva esteri. Yhdisteet (XI), joissa R5 on hydrolysoituva esteri, voidaan vaihtoehtoisesti hydrolysoida lievästi emäksisessä emäksen vesiliuoksessa kaavan (VIII) mukaisiksi yhdisteiksi, joissa R1 on vety. On kuitenkin suositeltavampaa valmistaa kaavan (VIII) mukai-35 siä yhdisteitä, joissa R1 on vety, hydrogenolysoimalla jalometalli-katalyytillä kaavan (XI) mukaisia yhdisteitä, i 9 82938 joissa R5 merkitsee hydrogenolysoituvaa esteriryhmää, ts. etyyliä tai bentsyyliä.

Vaihtoehtoisesti Grignard-reagenssien (X) annetaan reagoida in situ bentsyyli-N-(asetoksimetyyli)karbamaatin 5 kanssa toisen CH3MgBr-ekvivalentin läsnäollessa, jolloin saadaan yhdiste, jolla on kaava H 02 10 C6H5OCON„CH2,,J-rSYcH3 ,XII, J_N-1 _ cr ^coor5 15 jossa R5 on edellä määritelty. Kun R5 on hydrogenolysoituva ryhmä, hydrogenolysoimalla jalometalli-katalyyteillä yhdisteitä (XII) saadaan yhdisteitä (IX), joissa R1 on vety. R5:n ollessa hydrolysoituva ryhmä (ensisijaisesti hydroge-20 nolyysin kestävä), saadaan yhdisteitä (IX), joissa R1 on in vivo hydrolysoituva esteriryhmä.

Yhdisteitä (IX) saadaan myös hydraamalla Raney-nik-keli-katalyyttiä käyttäen yhdisteitä (XI) tai (VIII). Kun substraatissa R1 on vety tai R5 on hydrogenolysoituva ryh-25 mä, R1 on tuotteessa vety; kun R5 on hydrolysoituva ryhmä (ensisijaisesti sellainen, jolla ei ole taipumusta hydro-genolysoitua), R1 säilyy tuotteessa in vivo hydrolysoituvana ryhmänä.

Tällä menetelmällä saatu edellä mainittu seostuote 30 (VI) (ennen jalometallilla tai Raney-nikkelillä katalysoitua hydrogenolyysiä tai sen jälkeen R6:n ollessa esteri) on helposti muutettavissa erillisiksi 6-a-epimeereiksi (VIII) ja (IX), joissa R1 on vety, antamalla 1,5-diatsabisyklo- [4.3.0]non-5-eenin vaikuttaa siihen.

35 Eräillä edellä esitettyjen kaavojen (VIII) ja (IX) mukaisilla yhdisteillä, yleensä yhdisteillä, joissa R1 on 10 82938 vety, on bakteerien vastainen vaikutus in vitro. Sellainen aktiivisuus osoitetaan määrittämällä pienimmät inhibioivat konsentraatiot (MIC-arvot) yksikköinä mikrogramma/ml erilaisia mikro-organismeja vastaan. Seurattu menetelmä on 5 menetelmä, jota suosittelee International Collaborative Study on Antibiotic Sensitivity Testing (Ericcson ja Sherris, Acta. Pathologica et Microbiologia, Scandinav, Supp. 217, Section B: 64-68 [1971]), ja jossa käytetään aivo-sydän-ruiskutus (BHI)agaria ja rokotteen lisäyslaitetta. 10 Yön ajan elätetyt putkilot laimennetaan 100-kertaisesti käytettäväksi standardi-istutteena (20 000-10 000 solua noin 0,002 mlrssa pannaan agarin pinnalle; 20 ml BHI-aga-ria/lasimalja). Käytetään kahtatoista 2-kertaista koeyh-disteen laimennusta, koerohdoksen alkukonsentraation ol-15 lessa 200 mikrogrammaa/ml. Yksityisiä kolonioita ei huomioida tutkittaessa levyt 18 tunnin ajan 37°C:ssa olon jälkeen. Koeorganismin alttiudeksi (MIC) hyväksytään pienin yhdisteen konsentraatio, joka pystyy aiheuttamaan kasvun täydellisen estymisen paljaalla silmällä arvioiden.

20 Kaavojen (VIII) ja (IX) mukaiset yhdisteet, jotka omaavat mainitun bakteerien vastaisen vaikutuksen in vitro, ovat täten käyttökelpoisia teollisuuteen soveltuvina mikrobien vastaisina aineina, esimerkiksi veden käsittelyssä, liman kontrolloinnissa, maalien suojauksessa ja 25 puun suojauksessa, samoin kuin paikallisesti sovellettuna desinfioivana aineena. Siinä tapauksessa, että näitä yhdisteitä käytetään paikallisena sovellutuksena, aktiivinen aineosa on usein edullista sekoittaa toksittoman kantajan, kuten kasvis- tai mineraaliöljyn tai pehmennysvoiteen 30 joukkoon. Samalla tavalla sitä voidaan liuottaa tai dis-pergoida nestemäisiin laimentimiin tai liuottimiin kuten veteen, alkanoleihin, glykoleihin tai niiden seoksiin. Useimmissa tapauksissa on tarkoituksenmukaista käyttää aktiivisen aineosan konsentraatioita, jotka ovat välillä 35 noin 0,1 - noin 10 paino-%, koko seoksen painosta laskien.

Kaavojen (VIII) ja (IX) mukaisilla yhdisteillä on 11 82938 vielä erityisesti arvoa tehokkaina mikrobi-B-laktamaasien inhibittoreina. Tämän mekanismin ansiosta ne lisäävät B-laktaami-antibiootin (penisilliinien ja kefalosporiinien) bakteerien vastaista tehokkuutta monia mikro-organismeja, 5 erityisesti β-laktamaasia tuottavia mikro-organismeja vastaan. Näiden yhdisteiden kykyä lisätä B-laktaami-antibioo-tin tehokkuutta voidaan arvioida viittaamalla kokeisiin, joissa määritetään pelkän antibiootin ja pelkän kaavan (VIII) tai (IX) mukaisen yhdisteen (jossa R1 on vety) MIC-10 arvot. Näitä MIC-arvoja verrataan sitten MIC-arvoihin, jotka on saatu tietyn antibiootin ja kaavan (VIII) tai (IX) mukaisen yhdisteen, jossa R1 on vety, yhdistelmällä. Kun yhdistelmän bakteerinvastainen teho on merkittävästi suurempi kuin olisi odotettavissa yksityisten yhdisteiden 15 tehokuuksien perusteella, tämän katsotaan merkitsevän aktiivisuuden lisääntymistä. Yhdistelmien MIC-arvot määritetään käyttämällä menetelmää, jota Barry ja Sabath ovat selostaneet julkaisussa "Manual of Clinical Microbiology", toimittanut Lenette, Spaulding ja Truant, 2. laitos, 1974, 20 American Society for Microbiology.

Kaavojen (VIII) ja (IX) mukaiset yhdisteet lisäävät B-laktaami-antibioottien bakteerien vastaista tehokkuutta in vivo. Se on, ne alentavat antibiootin määrää, joka tarvitaan suojaamaan hiiriä muuten tappavaa tietty-25 jen β-laktamaasia tuottavien bakteerien istutetta vastaan. Sellaista aktiivisuutta määritettäessä hiiriin aiheutetaan äkillisiä koeinfektioita istuttamalla hiiriin vatsaontelon sisäisesti standardisoitua koeorganismin viljelmää suspen-doituna 5 %:iseen sian mahalimaan. Infektion vakavuus 30 standardisoidaan siten, että hiiret saavat tappavan annoksen organismia (tappava annos on pienin organismin istute, joka tarvitaan jatkuvasti tappamaan 100 % infektoiduista, käsittelemättömistä kontrollieläimistä). Antibioottia annetaan erilaisin annosmäärin, p.o. tai i.p., infektoiduil-35 le hiiriryhmille. Kokeen päätyttyä seoksen aktiivisuus arvioidaan laskemalla eloon jääneiden lukumäärä tietyllä i2 82938 annosmäärällä käsitellyistä eläimistä. Aktiivisuus ilmaistaan prosenttina eläimistä, jotka ovat elossa tietyn annoksen saatuaan, tai lasketaan PDS0-arvoksi (annos, joka suojaa 50 % eläimistä infektiolta).

5 Vaihtoehtoisesti kaavan (VIII) ja (IX) mukaisten yhdisteiden käyttökelpoisuus arvioidaan määrittämällä pitoisuudet veressä suun kautta tai parenteraalisesti antamisen jälkeen. Rotat ovat tavallisena tähän tarkoitukseen käytettävänä eläinmallina. Annostuksen tapahtuessa in vivo 10 hydrolysoituvana esterinä, pitoisuus veressä määritetään emoyhdisteenä, jossa R1 on vety. Pitoisuus vedessä määritetään sarjalaimennus-biomääritystekniikalla käyttämällä

Pasturella multocida'n kaltaista mikro-organismia, joka on erityisen herkkä emoyhdisteelle.

15 Kaavojen (VIII) ja (IX) mukaisten yhdisteiden kyky lisätä β-laktaamiantibiootin tehokkuutta β-laktamaasia tuottavia bakteereita vastaan tekee ne arvokkaiksi annettaviksi yhdessä β-laktaami-antibioottien kanssa hoidettaessa nisäkkäiden, erityisen ihmisen bakteeri-infektioi-20 ta. Bakteeri-infektion hoidossa kaavan (VIII) tai (IX) mukainen yhdiste voi olla sekoitettuna yhdessä β-laktaamiantibiootin kanssa, ja täten näitä kahta ainetta annetaan samanaikaisesti. Vaihtoehtoisesti yhdistettä (VIII) tai (IX) voidaan antaa erillisenä aineena B-laktaami-antibioo-25 tiliä tapahtuvan käsittelyn aikana. Eräissä tapauksissa voi olla edullista antaa potilaalle esiannoksena kaavan (VIII) tai (IX) mukaista yhdistettä ennen β-laktaami-anti-biootilla tapahtuvan hoidon aloittamista.

Käytettäessä kaavan (VIII) tai (IX) mukaista yhdis-30 tettä lisäämään B-laktaami-antibiootin tehokkuutta, yhdisteen (VIII) tai (IX) seosta β-laktaamiantibiootin kanssa annetaan ensisijaisesti seosmuotona tavanomaisten farmaseuttisten kantajien tai laimentimien kanssa. Farmaseuttisessa yhdistelmässä, joka sisältää farmaseuttisesti hy-35 väksyttävää kantajaa, β-laktaamiantibioottia ja kaavan (VIII) tai (IX) mukaista yhdistettä, on tavallisesti noin i3 82938 5 - noin 80 paino-% farmaseuttisesti hyväksyttävää kantajaa.

Käytettäessä kaavan (VIII) tai (IX) mukaisia yhdisteitä muun β-laktaamiantibiootin yhdistelmänä, mainittuja 5 yhdisteitä voidaan antaa suun kautta tai parenteraalises-ti, s.o. lihaksensisäisesti, ihonalaisesti tai vatsaonte-lonsisäisesti. Vaikkakin hoidon määräävä lääkäri viime kädessä päättää ihmispotilaan osalta käytettävän annostuksen, päivittäiset yhdisteiden (VIII) tai (IX) ja β-laktaa-10 mi-antibiootin annokset ovat painoprosentteina rajoissa noin 1:3 - 3:1. Lisäksi käytettäessä kaavan (VIII) tai (IX) mukaisia yhdisteitä muun β-laktaamiantibiootin yhteydessä, päivittäinen kummankin komponentin suun kautta annettava annosmäärä on normaalisti rajoissa noin 10 - noin 15 200 mg kehon painon kiloa kohden ja päivittäinen kummankin komponentin parenteraalisesti annettava annos on normaalisti noin 10 - noin 40 mg kehon painon kiloa kohden. Nämä päivittäiset annokset ovat tavallisesti jaettuina osa-annoksiksi. Eräissä tapauksissa hoidon määräävä lääkäri voi 20 määrätä tarpeellisiksi näiden raja-arvojen ulkopuolisia annostuksia.

Kuten alan asiantuntijalle on täysin selvää, eräät β-laktaami-yhdisteet tehoavat annettuina suun kautta tai parenteraalisesti, toisten tehotessa ainoastaan parente-25 raalisesti annettuina. Kun kaavan (VIII) tai (IX) mukaista yhdistettä on käytettävä samanaikaisesti (s.o. yhteen sekoitettuna) β-laktaami-antibiootin kanssa, joka tehoaa ainoastaan parenteraalisesti annettuna, edellytetään pa-renteraaliseen käyttöön soveltuvaa yhdistelmä-seosmuotoa. 30 Kun kaavan (VIII) tai (IX) mukaista yhdistettä on käytettävä samanaikaisesti (yhteen sekoitettuna) β-laktaamiantibiootin kanssa, joka tehoaa suun kautta tai parenteraalisesti annettuna, voidaan valmistaa yhdistelmiä, jotka soveltuvat joko suun kautta tai parenteraalisesti annetta-35 viksi. Lisäksi kaavan (VIII) tai (IX) mukaisia yhdisteitä sisältäviä valmisteita voidaan antaa suun kautta, antamal- n 82938 la samanaikaisesti parenteraalisesti muuta β-laktaami-an-tibioottia; ja mahdollista on myös antaa kaavan (VIII) tai (IX) mukaisia yhdisteitä sisältäviä valmisteita parenteraalisesti, antamalla samanaikaisesti suun kautta muuta β-5 laktaami-antibioottia.

Tätä keksintöä valaistaan seuraavin esimerkein, joista esimerkit 1 ja 3-6 kuvaavat keksinnön mukaista de-bromausmenetelmää ja esimerkit 2 ja 7-25 debromatun tuotteen käyttöä välituotteena syntetisoitaessa kaavojen 10 (VIII) ja (IX) mukaisia yhdisteitä. Ellei toisin ole erityisesti mainittu, kaikki työvaiheet suoritettiin ympäristön lämpötiloissa; kaikki lämpötilat ovat Celsiusasteita, kaikki liuosten kuivaukset tapahtuivat vedettömällä Na2S04:lla; kaikki liuottimien haihdutukset suoritettiin 15 vakuumissa; ja kaikki pnmr (proton nuclear magnetic re sonance )- spektrit olivat kohdalta 60 MHz. N,N-dimetyyli-formamidista, trietyyliamiinista, tetrahydrofuraanista ja dimetyylisulfoksidista on käytetty vastaavia lyhenteitä DMF, TEA, THF ja DMSO.

20 Esimerkki 1 6-a-bromipenisillaanihappo-l,1-dioksidi 6,6-dibromipensillaanihappo-l,1-dioksidin (117,3 g, 0,3 moolia) joukkoon, jota sekoitettiin H20:n (600 ml) ja etyyliasetaatin (400 ml) seoksessa, lisättiin annoksittain 25 NaHC03:a (75,6 g, 0,9 g, 0,9 moolia) ja sitten NaHS03:a (37,5 g, 0,36 moolia). Tunnin sekoittamisen jälkeen pH säädettiin väkevällä HCl:lla arvosta 3,7 arvoon 1,5. Vesi-kerros erotettiin ja uutettiin kerran 400 ml:11a tuoretta etyyliasetaattia. Yhdistetyt orgaaniset kerrokset pestiin 30 takaisin suolaliuoksella, kuivattiin ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin otsikon tuotetta kiinteänä aineena; 72 g (76,7 %); sp. 136-137°, pnmr/D20-NaHC03/delta: 1,48 (s, CHj), 1,62 (s, CH3), 4,28 (s, C.3-H), 5,12 (d, J=l,7, C.6-H), 5,37 (d, J=1,7, C,5-H).

35 Esimerkki 2

Bentsyyli-6-a-bromipenisillanaatti-l,1-dioksidi is 82938

Edellisen esimerkin tuotteen joukkoon (24,3 g, 0,0779 moolia), joka oli 75 ml:ssa DMF:a, lisättiin TEA:ta (7,87 g, 0,0779 moolia) ja bentsyylibromidia (13,32 g, 0,0779 moolia). Seosta sekoitettiin 16 tuntia, kaadettiin 5 250 ml:aan H20:ta ja uutettiin 2 x 200 ml:11a etyyliase taattia. Yhdistetyt orgaaniset kerrokset pestiin kyllästetyllä NaHC03:lla, H20:lla ja suolaliuoksella, kuivattiin, haihdutettiin kuiviin ja jäännös kiteytettiin etyyliase-taatti/heksaani-seoksesta; 28,8 g (92 %); sp. 72-74°; 10 pnmr/CDClj/delta (ppm): 1,27 (s, CH3), 1,53 (s, CH3), 4,53 (s, C.3H), 4,8 (d, J=1,7, C.6-H), 5,27 (d, J=l,7, C.5-H), 5,3 (d, CH2), 7,5 (s, C6H5).

Esimerkki 3

Etyyli-6-a-bromipenisillanaatti 15 Liuokseen, jossa oli etyyli-6,6-dibromipenisilla- naattia (3,87 g, 0,01 moolia) THF:ssa (50 ml), lisättiin H20:ta (50 ml), NaHC03:a (1,68 g, 0,02 moolia) ja NaHS03:a (1,04 g, 0,01 moolia). Seosta sekoitettiin 20 tuntia ja sitten laimennettiin 100 ml:11a etyyliasetaattia. Orgaa-20 ninen kerros erotettiin, pestiin H20:lla ja sitten suolaliuoksella, kuivattiin ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin otsikon tuotetta kiinteänä aineena, 2,5 g; pnmr/ CDCl3/TMS/delta (ppm) 1,30 (3H, t), 1,49 (3H, s), 1,62 (3H, s), 4,23 (2H, q), 4,51 (1H, s), 4,78 (1H, d, J=l,5 Hz), 25 5,38 (1H, d, J=1,5 Hz).

Esimerkki 4

Penisillaanihappo-1,1-dioksidi

Seosta, jossa oli 6,6-dibromipenisillaanihappo-l,1-dioksidia (3,92 g, 0,01 moolia), NaHC03 (5,04 g, 0,06 moo-30 lia) ja NaHS03:a (2,5 g, 0,024 moolia) 30 ml:ssa H20:ta, lämmitettiin 90°:ssa 2 tuntia. Reaktioseos jäähdytettiin, tehtiin happameksi pH-arvoon 1,2 laimealla HClrlla ja uutettiin etyyliasetaatilla. Uute kuivattiin ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin tunnettua otsikon tuotetta, 35 180 mg; tie Rf 0,1 verrattuna lähtöaineen arvoon 0,4 (etyyliasetaatin ja etikkahapon suhde 19:1); pnmr/D20 1,45 16 82938 (s, 3H), 1,58 (s, 3H), 3,47 (m, 2H), 4,22 (s, 1H), 4,97 (m, 1H).

Esimerkki 5

Bentsyyli-6-α- ja -6-8-(etoksiaminometyyli)penisil-5 lanaatti-1,1-dioksidin seos

Bentsyyli-6-8-bromi-6-a-(etoksiaminometyyli)-penisillanaatti-1,1-dioksidia (1,0 g, 0,0021 moolia), NaHC03:a (177 mg, 0,0021 moolia) ja NaHS03:a (220 mg, 0,0021 moolia) yhdistettiin ja sekoitettiin 25 ml:ssa 10 THF/H20-seosta 3:2 3 päivää, jonka ajan kuluessa tie osoitti reaktion tapahtuneen suunnilleen 50 %:isesti täydellisestä. Sitten reaktioseosta lämmitettiin 90°:ssa 24 tuntia. THF tislattiin pois ja vesipitoinen kiinteätä ainetta sisältävä jäännös uutettiin CHCl3:lla. Uute haihdutettiin 15 hartsiksi, joka kromatografioitiin silikageelillä CHCl3:n ollessa eluenttina, jolloin saatiin otsikon seosta suhteessa noin 1:1; 270 mg; pnmr/CDCl3 1,08 (t, 3H), 1,28 (s, 3H), 1,53 (s, 3H), 3,43 (d, 2H), 3,78 (m, 3H), 4,55 (o-C3H), 4,6 (8-C3H), 4,78 (m, a- ja 8-CsH), 5,32 (d, 2H), 20 7,52 (s, 5H), tie Rf 0,42 (CH3C13:etyyliasetaatti = 4:1).

Esimerkki 6

Pivaloyylioksimetyyli-6-a-bromipenisillanaatti-l, 1- dioksidi

Pivaloyylioksimetyyli-6,6-dibromipenisillanaatti-25 1,1-dioksidia (505 mg, 1 mmooli) ja NaHS03:a (208 mg) (2 mmoolia) yhdistettiin 15 ml:ssa THF/H20-seosta 2:1. Tunnin kuluttua THF poistettiin haihduttamalla ja vesipitoinen jäännös uutettiin CH2Cl2:lla. Uute kuivattiin ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin otsikon tuotetta, 300 mg; 30 pnmr-huiput identtiset alla esitetyn valmistuksen 6 tuot-‘ teen huippujen kanssa; epäpuhtautena esiintyi kuitenkin lähtöainetta. Sellainen epäpuhtaus on vältettävissä pidentämällä reaktioaika noin 4:ksi - 6:ksi tunniksi.

i 35 i7 82938

Esimerkki 7

Bentsyyli-6-α- (bentsyylioksikarbonyyliaminometyy- li)penisillanaatti-l,1-dioksidi

Seos, jossa oli bentsyyli-6-a-bromipenisillanaatti-5 1,1-dioksidia (0,804 g, 2,0 mmoolia) 30 ml:ssa kuivaa

THF:a, jäähdytettiin -78°:seen. 3 minuutin kuluessa lisättiin CH3MgBr:n eetteriliuosta (2,8 mol., 1,43 ml, 4,0 mmoolia) ja sekoittamista jatkettiin 7 minuuttia -78°:ssa, jolloin muodostui vastaavaa 6-a-bromimagnesium-Grignard-rea-10 genssia. Sitten lisättiin liuos, jossa oli bentsyyli-N-(asetoksimetyyli)karbamaattia (0,57 g, 2,0 mmoolia) 5 ml:ssa kuivaa THF:a. Kun oli sekoitettu 5 minuuttia -78°:ssa, reaktioseos sammutettiin lisäämällä 0,5 ml CH3C02H:ta, liuotin haihdutettiin pois ja jäännös liuotet-15 tiin CHCl3:iin, pestiin H20:lla, kyllästetyllä NaHC03:lla ja suolaliuoksella, kuivattiin ja haihdutettiin viskoosi-seksi öljyksi (1,1 g), öljy kromatografioitiin 40 grammalla silikageeliä eluoimalla etyyliasetaatti/kloroformi-seoksella 1:19 20 ml:n fraktioin. Fraktiot 5-8 yhdistet-20 tiin, haihdutettiin öljyksi (0,55 g), joka kiteytyi raaputettaessa 10 ml:ssa eetteriä; 0,32 g; pnmr/CDCl3/delta/TMS

1,20 (3H, s), 1,49 (3H, s), 3,65 (3H, m), 4,32 (1H, s), 4,59 (1H, m), 5,07 (2H, s), 5,14 (2H, q), 5,30 (1H, br), 7,32 (10H, s).

25 Esimerkki 8 6-a-( aminometyyli)penisillaanihappo-l,1-dioksidi

Yhdistettiin esimerkin 7 tuotetta (1,7 g), THF:a (35 ml), H20:ta (35 ml) ja 10 %:ista Pd/C:tä (1,7 g) ja hydrattiin tunti 345 kPa:n (50 psig) paineessa. Katalyytti 30 otettiin talteen suodattamalla ja THF poistettiin suodok-sesta vakuumissa. Vesikerros pestiin 30 ml:11a etyyliasetaattia, ja vesikerros konsentroitiin, jolloin saatiin kiteistä otsikon tuotetta; 0,7 g; pnmr/250 MHz/D20/DSS 1,44 (3H, s), 1,59 (3H, s), 3,63 (2H,d, J=5,5 Hz), 4,07 (1H, 35 td, J-2, 5,5 Hz), 4,31 (1H, s), 5,06 (1H, d, J«2).

i8 82 938

Esimerkki 9 R- ja S-l-(etoksikarbonyylioksiJetyyli-ö-a-bromi- penisillanaatti-l, 1-dioksidi 6-a-bromipenisillaanihappoa (31 g) liuotettiin 500 5 ml:aan CH2Cl2:a ja laimennettiin 200 ml:11a H20:ta. Lisättiin NaHC03:a (9,3 g), minkä jälkeen lisättiin annoksittain tetrabutyyliammoniumvetysulfaattia (37,6 g) pitämällä pH välillä 7,5-8,0 2-norm. Na0H:lla. Orgaaninen kerros erotettiin, pestiin suolaliuoksella, kuivattiin ja haihdutet-10 tiin kuiviin, jolloin saatiin tetrabutyyliammonium-6-α-bromipenisillanaattia öljynä (57,8 g).

öljy ja a-klooridetyylikarbonaattia (25,3 ml) liuotettiin 500 ml:aan asetonia ja sekoitettiin pimeässä Na2:n suojaamana 36 tuntia. Reaktioseos haihdutettiin toiseksi 15 öljyksi ja kromatografioitiin 1 kg:11a silikageeliä eluoi-malla heksaani/CHCl3-seoksella 1:4 ja keräämällä 20 ml:n fraktioita. Fraktiot 33-100 yhdistettiin ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin raakaa l-(etoksikarbonyylioksi)-etyyli-6-a-bromipenisillanaattia kolmantena öljynä (41 g). 20 Viimeksi mainittu ja m-klooriperbentsoehappoa (30 g) liuotettiin 500 ml:aan etyyliasetaattia, sekoitettiin N2:n suojaamana 20 tuntia, pestiin peräkkäin 3 x 50 ml:11a kyllästettyä NaHS03:a, 3 x 100 ml:11a kyllästettyä NaHC03:a ja 1 x 100 ml:11a suolaliuosta, kuivattiin ja haihdutet-25 tiin kuiviin. Saatu jäännös kromatografioitiin 1 kg:11a tuoretta silikageeliä, kehitettiin 3 litralla heksaani/-CHClj-seosta 1:1 ja sitten eluoitiin CHCl3:lla 25 ml:n fraktioin.

Polaarittomammat fraktiot 81-160 yhdistettiin ja 30 haihdutettiin valkeaksi vaahdoksi (15,8 g), joka kiteytyi yhdistettäessä 50 ml:n kanssa eetteriä ja raaputettaessa, jolloin saatiin S-stereokemiallista muotoa vastaavaa otsikon tuotetta; 5,2 g; sp. 140-143°; tie (1,99 etyyliasetaatti: CHC13) Rf 0,65; pnmr/CDCl3/TMS/delta (ppm): 1,27 (3H, 35 t, J-7Hz), 1,46 (3H, s), 1,55 (3H, s), 1,58 (3H, d, J=5,5 i i9 82938

Hz), 4,20 (2H, q, J=7 Hz), 4,35 (1H, s), 4,65 (1H, d, J=2 Hz), 5,09 (1H, d, J-2 Hz), 6,67 (1H, q, J=5,5).

Analyysi, laskettu yhdisteelle C13H1808NSBr: C, 36,45; H, 4,23; N, 3,27; 5 saatu: C, 36,47; H, 4,30; N, 3,31.

Polaarisemmat fraktiot 161-200 yhdistettiin ja haihdutettiin toiseksi vaahdoksi (4,1 g), joka myöskin kiteytyi yhdistettäessä 50 ml:n kanssa eetteriä ja raaputettaessa, jolloin saatiin R-stereokemiallista muotoa vastaa-10 vaa otsikon tuotetta; 2,8 g; sp. 114-114,5°; tie (etyyliasetaatti: CHC13 = 1:9) Rf 0,55; pnmr/CDCl3/TMS/delta (ppm): 1,32 (3H, t, J-7 Hz), 1,45 (3H, s), 1,59 (3H, d, J=5,5), 1,62 (3H, s), 4,21 (2H, q, J-7 Hz), 4,41 (1H, s), 4,63 (1H, d, J=2 Hz), 5,11 (1H, d, J-2 Hz), 6,77 (1H, q, 15 J-5,5).

Analyysi, laskettu yhdisteelle C13H1808NSBr: C, 36,45; H, 5,23; N, 3,27; saatu: C, 36,48; H, 4,26; N, 3,28.

Esimerkki 10 20 S-l-(etoksikarbonyylioksi)etyyli-6a-(bentsyylioksi- karbonyyliaminometyyli )penisillanaatti-l, 1-dioksidi S-l-(etoksikarbonyylioksi)etyyli-6-a-bromipenisil-lanaatti-1,1-dioksidia (16,8 g, 0,0392 moolia) liuotettiin 150 ml:aan kuivaa THF:a ja jäähdytettiin -78°C:seen. 5 mi-25 nuutin aikana lisättiin CH3MgBr:n eetteriliuosta (2,9 mol., 24,3 ml, 0,0706 moolia) (Grignard-reagenssiväliyhdisteen muodostamiseksi), ja sen jälkeen liuos, jossa oli bentsyy-li-N-(asetoksimetyyli)karbamaattia (8,75 g, 0,0392 moolia) 20 ml:ssa kuivaa THF:a. 30 minuutin ajan -78°C:ssa sekoit-30 tamisen jälkeen reaktioseos sammutettiin 8,5 ml:11a CH3C02H:ta, haihdutettiin kuiviin ja jäännös kromatogra-.. fioitiin 600 grammalla silikageeliä eluoimalla etyyliase- taatti/CHCl3-seoksella 1:19, hylkäämällä ensimmäiset 800 ml, minkä jälkeen koottiin 25 ml:n fraktioita. Fraktioista 35 54-113 saatiin otsikon tuotetta (9,9 g). Keskimmäisistä jakeista 71-95 saatiin erittäin puhdasta tuotetta; 4,4 g; 20 82938 pnmr/CDClj/TMS/delta (ppm): 1,30 (3H, t, J=7 Hz), 1,40 (3H, s), 1,52 (3H, s), 1,56 (3H, d, J=5,5), 3,71 (3H, br. m), 4,22 (2H, q, J=7 Hz), 4,32 (1H, s), 4,65 (1H, br. s), 5,10 (2H, s), 5,39 (1H, t, NH), 6,75 (1H, q, J«5,5), 7,33 (5H, 5 s).

Esimerkki 11 S-1 - (etoksikarbonyy 1 ioksi) etyyli - 6 -a- (aminometyy -li)penisillanaatti-l,1-dioksidi-hydrokloridi Seosta, jossa oli Pd/C:ltä (10 %:ista, 3 g) lietet-10 tynä 30 mitään H20:ta, hydrattiin 4 ilmakehän paineessa 15 minuuttia. pH putosi arvosta 9,2 arvoon 4,5. Lisättiin edellisen esimerkin otsikon tuotetta (3,3 g) 50 mltssa THF:a ja hydrausta 4 ilmakehän paineessa jatkettiin 15 minuuttia. Lisättiin Pd/C:ltä (10 %:ista, 2 g) ja hydrausta 15 jatkettiin vielä 15 minuuttia. Katalyytti otettiin talteen suodattamalla piimään läpi käyttämällä pesuun seosta 30 ml HjO/70 ml THF. THF haihdutettiin pois yhdistetyistä suodok-sesta ja pesunesteestä. Vesipitoinen jäännös yhdistettiin 75 ml:n kanssa etyyliasetaattia, pH säädettiin 0,5-norm. 20 NaOH:lla arvosta 6,2 arvoon 8,0, ja orgaaninen kerros erotettiin. Orgaaninen kerros yhdistettiin 50 ml:n kanssa tuoretta H20:ta, pH säädettiin arvoon 4,0 0,5-norm. HClrlla ja vesikerros erotettiin ja kylmäkuivattiin, jolloin saatiin otsikon tuotetta; 1,05 g; pnmr/D20/DSS/delta (ppm): 25 1,28 (3H, t, J-7 Hz), 1,48 (3H, s), 1,58 (3H, d, J=5,5

Hz), 1,60 (3H, s), 3,65 (2H, m), 4,07 (1H, m), 4,26 (2H, q, J=7 Hz), 4,78 (1H, s), 5,13 (1H, d, J=2 Hz), 6,80 (1H, q, J-5,5).

Esimerkki 12 30 R-l-(etoksikarbonyylioksi)etyyli-6-a-(bentsyyliok- sikarbonyyliaminometyyli)penisillanaatti-l,1-diok-sidi R-1-(etoksikarbonyy1ioksi)etyyli-6-α-bromipeni si1-lanaatti-1,1-dioksidin (10,2 g, 0,0238 moolia) annettiin 35 reagoida ja tuote eristettiin esimerkin 10 mukaisesti. Raaka tuote kromatografioitiin 700 grammalla silikageeliä, i 2i 82 938 kehitettiin 1000 ml :11a etyyliasetaatti/CHCl3-seosta 1:19 ja sitten eluoitiin etyyliasetaatti/CHCl3-seoksella 1:9 keräämällä 25 ml:n fraktioita. Fraktioista 101-136 saatiin otsikon tuotetta (6,8 g). Keskimmäisistä jakeista 111-136 5 saatiin puhtainta otsikon tuotetta; 3,8 g; pnmr/CDCl3/TMS/-delta (ppm): 1,30 (3H, t, J-7 Hz), 1,38 (3H, s), 1,54 (3H, d, J«5,5 Hz), 1,56 (3H, s), 3,71 (3H, br. m), 4,21 (2H, q, J-7 Hz), 4,37 (1H, s), 4,64 (1H, br. s), 5,09 (2H, s), 5,45 (1H, t, NH), 6,77 (1H, q, J-5,5 Hz), 7,30 (5H, s).

10 Esimerkki 13 R-l-( etoksikarbonyylioksi )etyyli-6-a-( aminometyy-li)penisillanaatti-l,1-dioksidi-hydrokloridi Edellisen esimerkin otsikon tuote (3,8 g) muutettiin esimerkin 4 menetelmällä tämän otsikon tuotteeksi; 15 0,8 g; pnmr/D20/DSS/delta (ppm): 1,27 (3H, t, J*7 Hz), 1,45 (3H, s), 1,58 (3H, d, J=5,5 Hz), 1,61 (3H, s), 3,64 (2H, m), 4,04 (1H, m), 4,13 (2H, q, J-7 Hz), 4,76 (1H, s), 5,12 (1H, d, J=2 Hz), 6,78 (1H, q, J=5,5).

Esimerkki 14 20 Bentsyyli-6-a-(metoksiaminometyyli)-penisillanaat- ti-1,1-dioksidi

Bentsyyli-6a-bromipenisillanaatti-l,1-dioksidia (4,02 g, 0,01 moolia) sekoitettiin kuivassa THF:ssa (75 ml) -75°:ssa N2:n suojaamana. 3 minuutin aikana, pitämällä 25 lämpötila -67°:n alapuolella, lisättiin tiputtamalla metyy-limagnesiumbromidia (2,98-mol. eetteriliuosta; 3,35 ml, 0,01 moolia). Seos, jossa oli formaldehydi-O-metyylioksii-mia (0,59 g, 0,01 moolia) THF:ssa (25 ml), jäähdytettiin -70°:seen, ja lisättiin BF3-eteraattia (1,42 g, 0,01 moo-30 lia). Muodostunut kompleksin liuos lisättiin edellä mainittuun Grignard-liuokseen -70°:ssa ja seosta sekoitettiin tunnin ajan -70 - -76°:ssa. 3 minuutin kuluessa lisättiin etikkahappoa (2 ml) ja reaktioseos lämmitettiin ja haihdutettiin kuiviin. Jäännös jaettiin 50 ml:aan H20:ta ja 100 35 ml:aan etyyliasetaattia liukeneviin osiin. Vesikerroksen pH oli 1,7. Etyyliasetaattikerros erotettiin, pestiin kyl- 22 82938 lästetyllä NaHC03:lla (75 ml) ja sitten suolaliuoksella, kuivattiin ja haihdutettiin hartsiksi (3,58 g). Kromato-grafioimalla silikageelillä, eluoimalla CHCl3/etyyliase-taatti-seoksella 4:1, saatiin puhdistettua otsikon tuotet-5 ta hartsina; 1,88 g; tie Rf 0,3 (CHC13:etyyliasetaatti = 3:1) pnmr/CDCl3/delta (ppm): 1,3 (s, CH3), 1,57 (3, CH3), 3,47 (m, NCH2), 3,58 (s, 0CH3), 4,0 (m, C.6-H), 4,52 (s, C.3-H), 4,82 (d, J-1,7, C.5-H), 5,33 (d, 0CH2), 7,57 (s, C6H5).

10 Esimerkki 15 6-0-(metoksiaminometyyli)penisillaanihappo-l,1-dioksidi

Edellisen esimerkin otsikon tuotetta (4,7 g, 0,0123 moolia), joka oli 150 ml:ssa THF/H20-seosta 10:1, hydrat-15 tiin 3,5 grammalla 10 %:sta Pd/C:tä (kosteutena 50 % vettä) 4 ilmakehän H2-paineessa 2 tuntia, tie:n avulla tarkkailemalla. Katalyytti poistettiin suodattamalla, ja suo-dos haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin tämän otsikon tuotetta tahmeana kiinteänä aineena; tie Rf 0,70 (asetoni: 20 CH3C02H:H20 = 6:1:1). Koko erä käytettiin seuraavassa esi merkissä.

Esimerkki 16

Natrium-6-a-(metoksiaminometyyli Jpenisillanaatti- 1,1-dioksidi 25 Liuottamalla H20/asetoni-seokseen 10:1, säätämällä pH-arvoon 7 yhdellä ekvivalentilla NaHC03:a ja kylmäkuivaa-malla edellisen esimerkin otsikon tuote kokonaisuudessaan muutettiin tämän otsikon tuotteeksi; 3,2 g; pnmr/D20/delta (ppm): 1,43 (s, CH3), 1,57 (s, CH3), 3,42 (m, CH2), 3,53 (s, 30 0CH3), 3,86 (m, C.6-H), 4,2 (s, C.3-H), 4,95 (d, J=l,7, C.5-H); ir (KBr) 1777, 1621 cm'1.

Esimerkki 17 6-a- ( aminometyyli)penisillaanihappo-l,1-dioksidi Esimerkin 14 otsikon tuotetta (0,5 g, 0,0013 moo-35 lia) hydrattiin THF/H20-seoksessa 3:1 (20 ml) 500 mg: 11a Raney-nikkeli-katalyyttiä 4 ilmakehän vetypaineessa 2 tun- i 23 8 2 9 3 8 tia, tarkkailemalla tic:n avulla. Reaktioseos suodatettiin ja suodos haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin otsikon tuotetta valkeana kiinteänä aineena, joka oli kaikissa suhteissa identtinen autenttisen materiaalin kanssa; 5 pnmr/D20/delta (ppm): 1,42 (s, CH3), 1,57 (s, CH3)' 3,55 (m, CH2), 3,97 (m, C.6-H), 4,22 (s, C.3-H), 4,98 (d, J=l,7, C.5-H); tie Rf 0,3 (asetoni: CH3C02H:H20 = 6:1:1).

Esimerkin 24 otsikon tuote (0,28 g) muutettiin samalla menetelmällä samaksi otsikon tuotteeksi, jota puh-10 distettiin edelleen liuottamalla H20:hon, pesemällä etyyliasetaatilla, käsittelemällä aktiivihiilen kanssa ja haihduttamalla kuiviin THF:n kanssa; 0,08 g.

Esimerkki 18

Bentsyyli-6-a-(etoksiaminometyyli)penisillanaatti-15 1,1-dioksidi

Esimerkin 2 otsikon tuote (80,6 g, 0,20 moolia) jäähdytettiin 800 ml:ssa kuivaa THF:a -70°:seen. 40 minuutin aikana lisättiin CH3MgBr:a (69 ml 2,9-mol. eetteri-liuosta, 0,20 moolia), pitämällä lämpötila samana lisäys-20 nopeuden avulla. Sillä välin erillisessä pullossa oleva seos, jossa oli formaldehydi-O-etyylioksiimia (16,3 g, 0,22 moolia) ja BF-eteraattia (31,2 g, 26,9 ml, 0,22 moolia) 100 ml:ssa kuivaa THF:a, jäähdytettiin -70°C:seen. Heti CH3MgBr-lisäyksen päätyttyä jälkimmäinen liuos lisät-25 tiin kaikki kerrallaan edelliseen liuokseen. Lämpötila, joka kohosi -60°:seen, alennettiin -70°:seen ja seosta sekoitettiin tunnin ajan. CH3C02H:ta (28,6 ml, 0,5 moolia) lisättiin 15 minuutin kuluessa, pitämällä lämpötila -60°:n alapuolella. Seos haihdutettiin vaahdoksi, joka jaettiin 30 700 ml:aan CH2Cl2:a ja 400 ml:aan H20:ta liukeneviin osiin ja pH säädettiin kyllästetyllä NaHC03:lla arvoon 8. Muodostunut emulsio katkaistiin lisäämällä etyyliasetaattia. Orgaaninen kerros erotettiin, pestiin suolaliuoksella, kuivattiin ja haihdutettiin öljyksi, öljy kromatografioitiin 35 lyhyessä silikageelikolonnissa eluoimalla ensin polaarit-tomammat epäpuhtaudet pois CHCl3:lla ja eluoimalla sitten 24 82938 raakatuote etyyliasetaatilla. Jälkimmäinen eristettiin toisena öljynä, joka kromatografioitiin uudelleen 500 grammalla silikageeliä eluoimalla etyyliasetaatti/CHCl3-seoksella 1:19, tlc:n avulla tarkkailemalla. Puhtaat tuo-5 tefraktiot yhdistettiin ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin puhdistettua otsikon tuotetta öljynä, 13,9 g; tie Rf 0,4 (CHC13:etyyliasetaatti * 4:1).

Esimerkki 19 6-a-(aminometyyli)penisillaanihappo-l,1-dioksidi 10 Edellisen esimerkin otsikon tuotetta (13,9 g) hyd- rattiin esimerkin 17 menetelmällä Raney-nikkelillä. Suodattamalla tapahtuneen katalyytin poistamisen jälkeen THF poistettiin haihduttamalla ja epäpuhtaudet uutettiin pois etyyliasetaatilla, jolloin muodostui puhdasta, otsikon 15 tuotteen vesiliuosta, jota käytettiin suoraan seuraavassa esimerkissä; tie Rf 0,3 (asetoni: CH3C02H: H20 = 6:1:1). Vaihtoehtoisesti otsikon tuote eristetään haihduttamalla edelleen tai kylmäkuivaarnalla, jolloin saadaan tuotetta, joka on identtinen esimerkin 8 tuotteen kanssa.

20 Esimerkki 20

6-a-(bentsyylioksikarbonyyliaminometyyli)-penisil-laanihappo-1,1-dioksidi Menetelmä A

Edellisen esimerkin otsikon tuotteen vesiliuos ko-25 konaisuudessaan laimennettiin 150 ml:11a THF:a ja sekoitettiin 5°:ssa. pH säädettiin arvoon 8 25 %:isella NaOH:lla ja pidettiin välillä 8-8,5 10 minuutin reaktion ajan, joka tapahtui bentsyyliklooriformiaatin (6,05 g, 0,35 moolia) lisäämisen jälkeen. THF poistettiin haihduttamalla ja ve-30 sipitoinen jäännös uutettiin eetterillä. Vesikerroksen päälle kaadettiin etyyliasetaattia ja pH säädettiin arvoon 1,5 6-norm. HCl:lla. Vesikerros uutettiin tuoreella etyyliasetaatilla. Etyyliasetaattikerrokset yhdistettiin, kuivattiin ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin otsikon 35 tuotetta; 7,08 g (50,7 % kahdessa vaiheessa); pnmr/CDCl3/ I: 25 82938 TMS 1,40 (3H, s), 1,55 (3H, s), 3,70 (3H, m), 4,31 (1H, S), 4,58 (1H, m), 5,04 (2H, s), 7,24 (5H, s).

Menetelmä B

Esimerkin 8 tai 17 otsikon tuotetta (3,0 g, 11,45 5 mmoolia) liuotettiin 100 ml:aan H20/metanoli-seosta 1:1. pH säädettiin ja pidettiin välillä 8,3-8,7 lisättäessä tiputtamalla usean minuutin kuluessa bentsyyliklooriformi-aattia (1,79 g, 12,59 mmoolia). Lyhyen sekoitusjakson jälkeen pH säädettiin arvoon 6,0 1-norm. HCl:llä ja THF pois-10 tettiin tislaamalla vakuumissa. Vesipitoinen jäännös uutettiin 30 ml:11a etyyliasetaattia ja uute heitettiin pois. Lisättiin tuoretta etyyliasetaattia (50 ml) ja pH säädettiin arvoon 1,8 1-norm. HCl:llä. Vesikerros uutettiin 50 ml:11a tuoretta etyyliasetaattia. Yhdistetyt or-15 gaaninen kerros ja uute pestiin kerran 50 ml:11a kyllästettyä NaCl-liuosta, kuivattiin (Na2S04) ja haihdutettiin kuiviin vakuumissa, jolloin saatiin otsikon tuotetta vaahtona, 3,7 g, jonka pnmr oli identtinen otsikon tuotteen pnmr:n kanssa, jota oli saatu juuri edellä esitetyn mene-20 telmän A mukaisesti.

Esimerkki 21 P i va 1 oyy 1 i oks ime tyy 1 i - 6 - a- (bent syy 1 ioksikarbonyy 1 i -aminometyyli)-penisillanaatti-l,1-dioksidi Edellisen esimerkin otsikon tuotetta (6,75 g, 17 25 mmoolia) ja N,N-di-isopropyylietyyliamiinia (3,34 ml, 18,7 mmoolia) liuotettiin dimetyyliformamidiin (50 ml), lisättiin kloorimetyylipivalaattia (2,72 ml, 18,7 mmoolia), ja seosta sekoitettiin ympäristön lämpötilassa 20 tuntia. Reaktioseos laimennettiin etyylieetterillä (300 ml), pes-30 tiin vedellä (2 x 100 ml) kuivattiin (Na2S04) ja haihdutettiin vakuumissa öljyksi. Öljy liuotettiin 100 ml:aan eetteriä, pestiin 3 kertaa 50 ml:11a H20:ta, kuivattiin (Na2S04) ja haihdutettiin kuiviin vakuumissa, jolloin saatiin puhdistettua otsikon tuotetta viskoosisena öljynä; 35 4,4 g; pnmr/CDCl3/TMS 1,20 (9H, s), 1,34 (3H, s), 1,51 (3H, 26 82938 s), 3,64 (3H, m), 4,31 (1H, s), 4,60 (1H, d), 5,04 (2H, S), 5,71 (2H, q), 7,24 (5H, s).

Esimerkki 22

Pivaloyylioksimetyyli-6-a-(aminometyyli)penisilla-5 naatti-1,1-dioksidin p-tolueenisulfonaattisuola

Menetelmä A

Edellisen esimerkin otsikon tuotetta (1,8 g, 3,53 mmoolia) hydrattiin THF:n (40 ml) ja H20:n (20 ml) seoksessa 1,8 grammalla 10-%:sta Pd/C:ltä pyridinium-p-tolueeni-10 sulfonaatin (1,77 g, 7,06 mmoolia) läsnäollessa 4 ilmakehän paineessa 1,5 tuntia. Katalyytti otettiin talteen suodattamalla piimään läpi ja suodoksesta poistettiin THF vakuumissa, jona aikana otsikon tuote kiteytyi; 1,2 g; sp. 214-215°C (hajoten); pnmr/DMS0-d6/TMS 1,16 (9H, s), 1,32 15 (3H, s), 1,48 (3H, s), 2,28 (3H, s), 3,34 (2H, m), 3,82 (1H, m), 4,60 (1H, s), 5,14 (1H, d, J«2Hz), 5,7 (2H, ABq), 7,23 (4H, ABq).

Analyysi, laskettu yhdisteelle C15H2407N2S*C7H7S03H: C, 48,16; H, 5,88; N, 5,11; 20 saatu: C, 48,31; H, 6,11; N, 5,08.

Menetelmä B

Edellisen esimerkin tuote (5,28 g, 10,35 mmoolia) lisättiin 70 ml:ssa THF:a lietteeseen, jossa oli 10 %:sta Pd/C:ltä (2,5 g), jota oli esihydrattu 70 ml:ssa H20:ta. 25 Seosta hydrattiin 30 minuuttia 50 psig:n paineessa. Katalyytin talteenoton jälkeen suodokseen lisättiin p-toluee-nisulfonihappoa (2,16 g) 5 mlrssa H20:ta ja otsikon kanssa identtinen tuote otettiin talteen suodattamalla, 4,08 g (71,9 %).

30 Esimerkki 23

Bentsyyli-6-a-( bentsvylioksiaminometyyli )penisil- lanaatti-1,1-dioksidi

Esimerkin 14 menetelmän mukaisesti, reaktioajan ollessa 1 tunti -70°:ssa BF3/formaldehydi-O-bentsyylioksii-35 min lisäämisen jälkeen, bentsyyli-6-a-bromipenisillanaat- 27 8 2 9 3 8 ti-l,1-dioksidi (5,8 g, 0,014 moolia) muutettiin tämän otsikon tuotteeksi. Aluksi suoritetun sammutetun reaktio-seoksen kuiviin haihduttamisen jälkeen jäljelle jäänyt öljy liuotettiin 100 ml:aan etyyliasetaattia, pestiin 2 x 5 50 ml :11a kyllästettyä NaHC03-liuosta ja kerran 50 ml :11a suolaliuosta, kuivattiin ja haihdutettiin uudelleen toiseksi öljyksi, joka muuttui kiinteäksi trituroitaessa CCl4:n ja eetterin kanssa, jolloin saatiin raakaa otsikon tuotetta, 2,16 g. Viimemainittu kromatografioitiin 90 10 grammalla silikageeliä eluoimalla sykloheksaani/etyyliase-taattiseoksella 2:1, jolloin saatiin puhdistettua otsikon tuotetta; 0,3 g; tie Rf 0,5 (CHC13:etyyliasetaatti = 3:1); pnmr/CDCl3/TMS/delta (ppm): 1,27 (s, 3H), 1,53 (s, 3H), 3,33 (m, 2H), 3,93 (m, 1H), 4,5 (s, 1H), 4,75 (s, 2H), 15 5,27 (s, 2H), 7,45 (s, 5H), 7,48 (s, 5H).

Esimerkki 24

Pivaloyylioksimetyyli-6-a-(etoksiaminometyyli )peni- sillanaatti-1,1-dioksidi

Pivaloyylioksimetyyli-6-a-bromipenisillanaatti-l, 1-20 dioksidi (5,0 g, 0,0118 moolia) jäähdytettiin 160 ml:ssa THF:a -100°:seen nestemäisen N2:n ja eetterin muodostamassa hauteessa. Samanaikaisesti seos, jossa oli formaldehydi-O-etyylioksiimia (1,1 g, 0,0147 moolia) 100 ml:ssa THF:a, jäähdytettiin erillisessä pullossa -75°:seen. Ensimmäiseen 25 liuokseen lisättiin 2 minuutin kuluessa CH3MgBr:a (6,45 ml 2,28-mol. eetteriliuosta, 0,0147 moolia), samalla kun BF3-eteraattia (1,8 ml, 2,1 g, 0,0147 moolia) lisättiin toiseen liuokseen. Toinen liuos lisättiin heti yhtenä eränä ensimmäiseen liuokseen; lämpötila kohosi -80°:seen. Reak-30 tioseosta sekoitettiin 10 minuuttia -90°:ssa, 20 minuuttia -75°:ssa ja 40 minuuttia -65°:ssa, reaktio sammutettiin lisäämällä jälkimmäisessä lämpötilassa 1,6 ml CH3C02H:ta, lämmitettiin ja haihdutettiin öljyksi, jota käsiteltiin etyyliasetaatin kanssa, öljy jaettiin 100 ml:aan etyyli-35 asetaattia ja 50 ml:aan H20:ta liukeneviin osiin. Orgaani- 28 82 938 nen kerros erotettiin, pestiin 2 x 50 ml:11a H20:ta ja kerran 50 mlilla ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 4,8 g jäännöstä. Viimeksi mainittu kromatografioitiin si-likageelillä eluoimalla heksaani/etyyliasetaatti-seoksella 5 2:1 50 ml:n fraktioin. Fraktiot 21-31 yhdistettiin ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin otsikon tuotetta; 0,82 g; pnmr/CDCl3/TMS/delta (ppm): 1,18 (t, 3H), 1,23 (s, 9H), 1,45 (s, 3H), 1,62 (s, 3H), 3,48 (m, 2H), 3,87 (q, 2H), 4,1 (m, 1H), 4,51 (s, 1H), 4,83 (d, 1H, J - 1,8 Hz), 10 5,98 (q, 2H).

Esimerkki 25

Pivaloyylioksimetyyli-6-a-(aminometyyli)penisilla-naatti-1,1-dioksidin p-tolueenisulfonaattisuola Edellisen esimerkin otsikon tuotetta (0,6 g) hyd-15 rattiin Raney-nikkelillä esimerkin 17 menetelmän mukaises ti ja tämän otsikon tuote eristettiin esimerkin 22 menetelmän B mukaisesti. Saanto: 360 mg, identtinen esimerkin 22 tuotteen kanssa.

Valmistus 1 20 Bentsyyli-6-a-bromipenisillanaatti-l,1-dioksidi

Seokseen, jossa oli esimerkin 1 otsikon tuotetta (24,3 g, 0,0779 moolia) 75 ml:ssa DMF:a, lisättiin TEA:ta (7,87 g, 0,0779 moolia) ja bentsyylibromidia (13,32 g, 0,0779 moolia). Seosta sekoitettiin 16 tuntia, kaadettiin 25 250 ml:aan H20:ta ja uutettiin 2 x 200 ml:lla etyyliase taattia. Yhdistetyt orgaaniset kerrokset pestiin kyllästetyllä NaHC03:lla, H20:lla ja suolaliuoksella, kuivattiin, haihdutettiin kuiviin ja jäännös kiteytettiin etyyliasetaatti /heksaani- seoksesta; 28,8 g (92 %); sp. 72-74°; 30 pnmr/CDCl3/delta (ppm): 1,27 (s, CH3), 1,53 (s, CH3), 4,53 (s, C.3H), 4,8 (d, J = 1,7, C.6-H), 5,27 (d, J = 1,7, C.5-H), 5,3 (d, CH2), 7,5 (s, C6H5).

Valmistus 2

Bentsyyli-6,6-dibromipenisillanaatti-l, 1-dioksidi 35 Edellisen valmistuksen menetelmällä 6,6-dibromi- 29 82 938 penisillaanihappo-l,1-dioksidi (39,2 g) muutettiin tämän otsikon tuotteeksi; 37 g (77 %); sp. (raaka) 134-136°, (uudelleen kiteytetty) 146-148°; pnmr/CDCl3/delta (ppm): 1,27 (s, CH3), 1,55 (s, CH3), 4,62 (s, C.3-H), 5,13 (s, 5 C.5-H), 5,3 (d, CH2), 7,46 (s, C6H5).

Valmistus 3

Bentsyyli-6-B-bromi-6-a-(metoksiaminometyyli)peni- sillanaatti-1,1-dioksidi

Edellisen valmistuksen otsikon tuote (26,17 g, 10 0,0544 moolia) muutettiin esimerkin 15 menetelmällä tämän otsikon tuotteeksi (27,7 g raakaa tuotetta), puhdistettiin silikageelillä kromatografioimalla käyttämällä eluenttina CHCl3/etyyliasetaatti-seosta 17:3; 10,7 g (42,5 %); sp.

107-109°; tie Rf 0,52 (CC13:etyyliasetaatti = 17:3); pnmr 15 (250 MHz)/CDCl3/delta (ppm): 1,28 (s, CH3), 1,59 (s, CH3, ) 3,54 (s, 0CH3), 3,6 (oktetti, NCH2), 4,54 (s, C.3-H), 4,95 (s, C.5-H), 5,26 (q, 0CH2), 5,99 (q, NH), 7,39 (s, C6H5).

Valmistus 4

Bentsyyli-6-8-bromi-6-a- (etoksiaminometyyli )peni-20 sillanaatti-1,1-dioksidi

Menetelmä A

Seos, jossa oli valmistuksen 2 otsikon tuotetta (27,5 g, 0,057 moolia) 900 ml:ssa kuivaa THF:a, jäähdytettiin -75°:seen. Lisättiin tiputtamalla 11 minuutin kuluessa 25 CH3MgBr:a (19 ml 2,9-mol. eetteriliuosta, 0,057 moolia) pitämällä lämpötila -70°: n alapuolella. Tähän lisättiin liuos, jossa oli formaldehydi-O-etyylioksiimia (4,2 g, 0,057 moolia) ja BF3.eteraattia (8,1 g, 0,057 moolia) 125 ml:ssa -75°: seen esi jäähdytettyä THF: a. Sen jälkeen kun oli 30 sekoitettu tunnin ajan -75°:ssa lisättiin tiputtamalla CH3C02H:ta (11 ml) ja seosta haihdutettiin ja THF karkoi-tettiin etyyliasetaatin kanssa. Jäännös jaettiin 500 ml:n eriin H20:ta ja etyyliasetaattia liukeneviin osiin ja pH säädettiin 2,8:sta l,5:een 6-norm. HCl:llä. Orgaaninen 35 kerros pestiin 50 ml:11a tuoretta H20:ta. Yhdistetyt vesi- 30 82938 kerrokset pestiin takaisin 25 ml:11a etyyliasetaattia. Yhdistetyt orgaaniset kerrokset pestiin kerran 50 ml:11a kyllästettyä NaHC03:a, kerran 50 ml:11a H20:ta ja kerran 50 ml:11a suolaliuosta, kuivattiin, väri poistettiin aktiivi-5 hiilellä, haihdutettiin kuiviin (25,4 g) ja kromatogra-fioitiin silikageelillä eluoimalla etyyliasetaatti/CHCl3-seoksella 1:19 ja tarkkailemalla tie:n avulla. Puhtaat tuotefraktiot yhdistettiin ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin otsikon tuotetta; 9,7 g (35,9 %); pnmr/CDCl3/ 10 TMS 1,1 (5, 3H), 1,27 (s, 3H), 1,55 (s, 3H), 3,62 (m, 2H), 3,85 (q, 2H), 4,62 (s, 1H), 5,08 (s, 1H), 5,32 (d, 2H), 7,52 (s, 5H).

Menetelmä B

Seos, jossa oli valmistuksen 2 otsikon tuotetta (60 15 g, 0,125 moolia) 400 ml:ssa kuivaa THF:a, jäähdytettiin -91°:seen. 5 minuutin aikana lisättiin CH3MgCl:a (68,5 ml 2-mol. eetteriliuosta, 0,136 moolia), pitämällä lämpötila -85°:n alapuolella ulkopuolelta nestemäisellä N2:lla jäähdyttäen. Kun oli sekoitettu 45 minuuttia -70°:ssa tai tätä 20 alemmassa lämpötilassa, lisättiin formaldehydi-O-etyyliok-siimia (10,02 g, 0,137 moolia) ja sitten heti BF3.eteraat-tia (19,5 g, 0,137 moolia). Kun oli sekoitettu tunnin ajan -70°:ssa reaktio sammutettiin 24 ml:11a CH3C02H:ta, sitten laimennettiin etyyliasetaatilla (650 ml), lämmitettiin, 25 pestiin 3 x 400 ml:11a H20:ta ja haihdutettiin 150 ml:ksi. Muodostunut kiteinen otsikon tuote otettiin talteen suodattamalla; 23,1 g; sp. 130-135°; pnmr kuten edellä menetelmässä A; röntgensäde-kiderakenneanalyysi vahvisti tämän tuotteen rakenteen.

30 Valmistus 5

Bent syyli - 6 - B-bromi - 6 - a- (bentsyy 1 ioksiaminometyy -' li)penisillanaatti-l,1-dioksidi

Valmistuksen 2 otsikon tuotteen (9,6 g, 0,02 moolia) annettiin reagoida metyylimagnesiumbromidin (6,7 ml 35 2,98-mol., 0,02 moolia) kanssa 15 minuuttia -50° - 60°:ssa, i ai 82938 ja sitten BF3.eteraatin (2,5 ml, 0,02 moolia)/formaldehydi- O-bentsyyllokslimin (2,7 g, 0,02 moolia) kanssa -50°:ssa esimerkin 16 menetelmän mukaisesti. Sen jälkeen kun seos oli ollut 30 minuuttia -60°:ssa ja lämmitetty -20°:seen 20 5 minuutin kuluessa, se sammutettiin 1 ml:11a CH3C02H:tä ja liuotin poistettiin. Jäännös liuotettiin 100 ml:n eriin kyllästettyä NaHC03:a ja etyyliasetaattia ja muodostunut emulsio katkaistiin NaCl:lla, ja vesikerros uutettiin 2 x tuoreella etyyliasetaatilla. Orgaaniset kerrokset yhdis-10 tettiin, pestiin takaisin 2 kertaa kyllästetyllä NaHC03:lla ja sitten suolaliuoksella, kuivattiin, haihdutettiin kuiviin, ja jäännös kromatografioitiin 300 grammalla silika-geeliä käyttämällä eluenttina etyyliasetaatti/heksaani-seosta 1:5 ja suorittamalla tarkkailu tlc:n avulla. Puh-15 taat tuotefraktiot yhdistettiin ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin otsikon tuotetta; 4,31 g; tie Rf 0,28 (bentseeni: etyyliasetaatti = 3:1); pnmr/CDCl3/TMS/delta (ppm) 1,22 (s, 3H), 1,52 (s, 3H), 3,53 (m, 2H), 5,05 (s, 2H), 5,27 (s, 2H), 7,47 (s, 10H).

20 Valmistus 6

Pivaloyylioksimetyyli-6-a-bromipenisillanaatti-l, 1-dioksldi 6-a-bromipenisillaanihappo-l,1-dioksidia (30 g, 0,096 moolia) liuotettiin DMF:iin (100 ml). Lisättiin tri-25 etyyliamiinia (9,68 g, 0,096 moolia) ja kloorimetyylipi-valaattia (14,57 g, 0,096 moolia) ja seosta sekoitettiin päivän ajan, sitten laimennettiin 400 ml:11a H20:ta ja 140 ml:11a etyyliasetaattia ja pH säädettiin arvosta 3,4 arvoon 1,5 laimealla HCl:lla. Vesikerros uutettiin 2 x 140 30 ml:11a tuoretta etyyliasetaattia. Orgaaniset kerrokset yhdistettiin, pestiin kerran 100 ml:11a kyllästettyä NaHC03:a, kerran 100 ml:11a H20:ta ja kerran 100 ml:11a suolaliuosta ja haihdutettiin kuiviin. Jäljelle jäänyttä öljyä trituroitiin heksaanin kanssa, liuotettiin CH2Cl2:iin 35 ja haihdutettiin uudelleen kuiviin, jolloin saatiin otsi- 32 8 2 9 3 8 kon tuotetta kiinteänä aineena; 10,5 g; sp. 94-97°; pnmr/ CDCl3/TMS/delta (pptn): 1,25 (s, 9H), 1,45 (s, 3H), 1,62 (s, 3H), 4,57 (s, 1H), 4,85 (d, 1H, J - 1,7 Hz), 5,3 (d, 1H, J - 1,7 Hz), 6,0 (q, 2H).

5 Valmistus 7

Pivaloyylioksimetyyli-6,6-dibromipenisillanaatti- 1,1-dioksidi 6,6-dibromipenisillaanihappo-l,1-dioksidi (98 g, 0,025 moolia) muutettiin edeltävän valmistuksen menetel-10 mällä tämän otsikon tuotteeksi. Aluksi eristetty tuote puhdistettiin edelleen kromatografioimalla silikageelillä käyttämällä eluenttina heksaani/etyyliasetaatti-seosta 9:1, jolloin saatiin otsikon tuotetta hartsina, joka muuttui kiinteäksi oaikoillaan ollessaan; 25 g; pnmr/CDCl3/ 15 TMS/delta (ppm) 1,23 (s, 9H), 1,43 (s, 3H), 1,6 (s, 3H), 4,63 (s, 1H), 5,13 (s, 1H), 5,93 (q, 2H).

1;

Claims

33 82938 Patenttivaatimus Menetelmä penisillaanihappojohdannaisen valmistamiseksi, jolla on kaava 5 Ϊ (s’n/CH3 A#«ll-if ISi T^ch3 10 cr N ^"coor8 jossa n on 0 tai 2, A on vety, bromi, metoksiaminometyyli 15 tai etoksiaminometyyli ja R8 on vety, etyyli, bentsyyli tai pivaloyylioksimetyyli, tunnettu siitä, että bromi-yhdistettä, jolla on kaava 20 ΒΓ (r"/CH3 *—f» J_N-L cr '"'Coor8 25 jossa n, A ja R8 merkitsevät samaa kuin edellä, käsitellään oleellisesti yhdellä mooliekvivalentilla bisulfiittisuolaa reaktion suhteen inertissä vesipitoisessa liuottimessa 0-30 100eC:ssa. 34 82938 Förfarande för framställning av ett penicillansyra-derivat med formeln 5 § CHo a»'jH<hsy;H3
10 A ^ o σ *coorö väri n är 0 eller 2, A är väte, brom, metoxiaminometyl el-15 ler etoxiaminometyl och R8 är väte, etyl, bensyl eller pi-valoyloximetyl, kännetecknat därav, att man behandlar en bromförening med formeln
20 Br (0)n 's'VC"3 A f*» J-N -% 8 (J "COOR8 25 väri n, A och R8 betecknar samma som ovan med väsentligen en molekvivalent av ett bisulfitsalt i ett reaktionsinert vattenhaltigt lösningsmedel vid 0-100eC.