FI70234C - Foerfarande foer framstaellning av amino-funktionaliserade akrylkopolymerer - Google Patents
Foerfarande foer framstaellning av amino-funktionaliserade akrylkopolymerer Download PDFInfo
- Publication number
- FI70234C FI70234C FI823906A FI823906A FI70234C FI 70234 C FI70234 C FI 70234C FI 823906 A FI823906 A FI 823906A FI 823906 A FI823906 A FI 823906A FI 70234 C FI70234 C FI 70234C
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- formula
- monomer
- weight
- ester
- process according
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08F—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED BY REACTIONS ONLY INVOLVING CARBON-TO-CARBON UNSATURATED BONDS
- C08F220/00—Copolymers of compounds having one or more unsaturated aliphatic radicals, each having only one carbon-to-carbon double bond, and only one being terminated by only one carboxyl radical or a salt, anhydride ester, amide, imide or nitrile thereof
- C08F220/02—Monocarboxylic acids having less than ten carbon atoms; Derivatives thereof
- C08F220/52—Amides or imides
- C08F220/54—Amides, e.g. N,N-dimethylacrylamide or N-isopropylacrylamide
- C08F220/56—Acrylamide; Methacrylamide
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08F—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED BY REACTIONS ONLY INVOLVING CARBON-TO-CARBON UNSATURATED BONDS
- C08F220/00—Copolymers of compounds having one or more unsaturated aliphatic radicals, each having only one carbon-to-carbon double bond, and only one being terminated by only one carboxyl radical or a salt, anhydride ester, amide, imide or nitrile thereof
- C08F220/02—Monocarboxylic acids having less than ten carbon atoms; Derivatives thereof
- C08F220/52—Amides or imides
- C08F220/54—Amides, e.g. N,N-dimethylacrylamide or N-isopropylacrylamide
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J39/00—Cation exchange; Use of material as cation exchangers; Treatment of material for improving the cation exchange properties
- B01J39/08—Use of material as cation exchangers; Treatment of material for improving the cation exchange properties
- B01J39/16—Organic material
- B01J39/18—Macromolecular compounds
- B01J39/20—Macromolecular compounds obtained by reactions only involving unsaturated carbon-to-carbon bonds
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J39/00—Cation exchange; Use of material as cation exchangers; Treatment of material for improving the cation exchange properties
- B01J39/26—Cation exchangers for chromatographic processes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/04—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length on carriers
- C07K1/042—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length on carriers characterised by the nature of the carrier
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08F—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED BY REACTIONS ONLY INVOLVING CARBON-TO-CARBON UNSATURATED BONDS
- C08F8/00—Chemical modification by after-treatment
- C08F8/30—Introducing nitrogen atoms or nitrogen-containing groups
- C08F8/32—Introducing nitrogen atoms or nitrogen-containing groups by reaction with amines
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Addition Polymer Or Copolymer, Post-Treatments, Or Chemical Modifications (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Compositions Of Macromolecular Compounds (AREA)
- Dental Preparations (AREA)
- Graft Or Block Polymers (AREA)
- Polymerisation Methods In General (AREA)
- Separation Of Suspended Particles By Flocculating Agents (AREA)
- Cosmetics (AREA)
- Manufacture Of Macromolecular Shaped Articles (AREA)
Description
1 70234
Menetelmä amino-funktionalisoitujen akryylikopolymeerien valmistamiseksi - Förfarande för framställning av amino-funktionaliserade akrylkopolymerer Tämän keksinnön kohteena on uusien amino-funktionalisoitujen akryylikopolymeerien valmistusmenetelmä.
Keksinnön mukaisella menetelmällä saadut uudet polymeerit ovat peräisin hakija suomalaisessa patenttihakemuksessa 823905 kuvatuista yhdisteistä funktionalisoimalla etyleenidiamiinin avulla. Aikaisemman hakemuksen kattamat kopolymeerit, jotka on merkitty symboleilla A tai P-COR3, jossa R3 = H tai -CH3, saatiin kopolymeroimalla seuraavat kolme monomeeriä: a) 30 - 90 paino-% monomeeriä (matriisi), joka vastaa N-akryloyylipolymetyleeni-imiiniä, jonka kaava on ch2 = c — c — n ^l H V y O 1_ jossa Rj = H tai -CH3 Z = —(CH2)ni- jossa nj = 4, 5 tai 6 tai — (ch2)2—x—(ch2)2— jossa X = 0 tai N—CH3 tai N-akryloyylidialkyyliamidi, jonka kaava on: f1 /R2 CH2 = c — C — N 2
Il \ - O r2 2 70234 jossa Ri tarkoittaa samaa kuin edellä ja R2 = —CH3 tai —C2H5 b) 2 - 50 paino-% monomeeriä (sideaine), joka vastaa N,N'-diakryloyylidiaminoalkaania, jonka kaava on
CH2 = CH—C — NH— (CH2 ) m — NH—C—CH = CHo Δ II z n2 H
O O 3 jossa n2 = 1 tai 2 c) 2 - 65 paino-% monomeeriä (funktionalisoiva aine), joka vastaa akryloyy1iaminohappoa tai esteriä tai rasemaattia, jonka kaava on: CH2 = C—C—N— ( CH2 ) n-j-C—OR3 4 I II I 3 II -
Rl O H O
jossa Ri on kuten edellä R3 on kuten Ri ja Π3 = 1, 2, 3 tai 5 tai kaavan 5 mukainen, L-sarjan asymmetrinen N-akryloyyli- aminohappo (tai esterit) * CH2 = C — C — NH—CH—C—OR3 5
I II I II J
Rl O R4 O
jossa Ri ja R3 tarkoittava samaa kuin edellä ja I! 3 70234 R* = ~ch3 —CH = (CH3)2 — CH2—CH = (CH3)2 ~CH2~ —ch2—ch2— s— ch3 — (CH2)^-- NH2 tai lisäksi kaavan 6 mukainen N-akryloyyli-L-proliini tai sen metyyliesteri:
_ O
II
\ / ? ί CH0 = C—C—N 1 I II <*3 R1 0 jossa Rj ja tarkoittavat samaa kuin edellä.
Keksinnön mukaisten kopolymeerien valmistamiseksi tapahtuvassa funktionalisoinnissa laajennetaan yhdistettä A amidoimalla etyleeniamiinin kanssa, jolloin saadaan yhdiste B
C—OR Q_c—NH—(CH2)2—NH2 O ^
A B
Tämä amidointi voidaan suorittaa jotakin seuraavaa tietä: 4 70234 a) Lähtemällä happofunktiosta (A, = H) ja liittämällä yhden kirjallisuudessa normaalisti käytetyn reagenssin: disykloheksyy1ikarbodi-imidi (DCC) kanssa aktivointiaineen, kuten 1-hydroksi-bentsotriatsolin (HOBt), BOP-reagenssin jne. läsnäollessa.
b) Lähtemällä esteri funktiosta (A, R = CH^) sekoittamalla huoneen lämpötilassa hartsi vedettömän etyleenidiamiinin ylimäärän kanssa.
Toisen menetelmän koeolosuhteiden systemaattinen tutkimus on johtanut sekundääristen sillanmuodostusreaktioiden pienenemiseen samalla, kun alkuperäisestä funktionalisoitumisasteesta on säilytetty 90 %.
Vuonna 1962 kehitetty kiinteän faasin peptidisynteesimenetelmä, jossa pääasiassa käytetään polystyreenityyppisiä tukiaineita (Merrifie Id’in hartsi, bentshydryyliamiinihartsi, alkoksibentsyy-lihartsi, PAM-hartsi jne.), on yleisesti tunnettu ja sitä on huomattavasti kehitetty (esimerkiksi: Erickson ja Merrifield, teoksessa Neurath ja Hill, The Proteins, Voi. 2, Academic Press, 1976, s. 255; Birr, Aspects of the Merrifield Peptide Synthesis, Springer, 1978; Barany ja Merrifield, teoksessa Gross ja Meienhofer, The Peptides: Analysis, Synthesis,
Biology, Vol. 2, osa A, Academic Press, 1980, s. 1). Sopivasti funktionalisoitu hartsi esteröidään tai amidoidaan N-suojatulla aminohapolla, joka sijaitsee syntetisoitavan peptidin C-termi-naa 1 iasemassa . Aminory hmiin suojauksen poistamisen jälkeen suodatetaan liittäminen käyttämällä jotakin monesta kirjallisuudessa kuvatusta menetelmästä käyttäen N-suojattua aminohappoa, joka sijaitsee syntetisoidun sekvenssin viimeisessä asemassa. Nämä toimenpiteet toistetaan, kunnes hartsiin saadaan haluttu peptidisekvenssi. Viimeisessä vaiheessa erotetaan peptidi tukiaineestaan.
Tällä menetelmällä on tiettyjä etuja verrattuna liuoksessa tapahtuvaan synteesiin: Erityisesti menetelmä on erittäin
II
70234 yksinkertainen ja nopea (jokaisen liitännän jälkeen ei ole enää tarpeen eristää ja puhdistaa peptideitä). Ylimääräiset reagenssit ja epäpuhtaudet voidaan helposti poistaa suodattamalla ja pesemällä tukiaine, ja rasemisoitumista ei tapahdu lainkaan tai vain hyvin vähän. Menetelmällä on kuitenkin eräänä haittana se, että jokaisessa liitäntäreaktiossa tehon on oltava käytännöllisesti katsoen kvantitatiivinen, sillä jokainen epätäydellinen reaktio johtaa katkenneiden reaktio-sekvenssien, jotka kontaminoivat lopullista tuotetta, kerääntymiseen. Tämä merkitsee, että reagensseja on käytettävä merkittävät ylimäärät ja että jokainen liitäntäreaktio on toistettava, kunnes sopiva analyyttinen testi (esimerkiksi ninhydriini) osoittaa, että hartsista ovat hävinneet kaikki vapaat NH2~funktiot. Nämä koeolosuhteet kuitenkin jonkin verran estävät menetelmän käyttöä, jos synteesissä on käytettävä luonnossa esiintymättömiä aminohappoja, jotka kaikki voivat olla harvinaisia ja kalliita.
Jotta saavutettaisiin homogeenisessa faasissa tapahtuvien reaktioiden maksimaaliset edut, on ehdotetu, että käytetään liukoisia polymeerejä (Mutter ja Mayer, teoksessa Gross ja Meienhofer, The Peptides: Analysis, Synthesis, Biology,
Voi. 1, osa A, Academic Press, 1980, s. 285), ja erityisesti polyetyleeniglykolia. Tätä tekniikkaa ei ole kuitenkaan laajasti käytetty, luultavasti johtuen seuraavien seikkojen aiheuttamista kokeellisista ongelmista: - Pienempi liukoisuus, joka voi liittyä peptidisekvenssin pitenemiseen.
- Tukiaineen eristäminen jokaisen 1iitäntäreaktion jälkeen, mikä vaatii ultrasuodatusvaihetta (Mutter, Hagenmaier ja Bayer, Angew. Chem, Int, Ed, 10 (1971) 811; Bayer, Gatfield, Mutter and Mutter, Tetrahedron 34 (1978) 1829) tai kiteyttämistä eetteriisäyksen jälkeen, minkä jälkeen tarvittaessa 6 70234 poistetaan liuotin (Bayer ja Mutter, Chero. Ber, 107 (1974) 1344; Mutter, Uhmann ja Bayer, Ann. Chem. (1975) 901; Gorring ja Jung, Ann. Chem. 1975, 1965 ja 1776).
- Peptidin erottaminen tukianeestaan (Tjoeng, Tong ja Hodges, J. Org. Chem. 43 (1978) 4190; Tjoeng ja Hodges, Tetrahedron Letters (1979) 1273; Mutter, Bayer ja Gatfield, J. Org. Chem. 45 (1980) 5364).
Samoja vaikeuksia esiintyy käytettäessä polysytreenialustaan liukoisia tukiaineita, jotka ovat hieman verkostettuja tai verkostamattomia, jolloin geeli on suodatettava (Birr, Peptides 1972, North Holland Pubi., 1973, s. 72; Andrhatta ja Rink, Helv. Chim. Acta 56 (1973) 1205) tai saostettava alkoholilla (Narita, Bull. Chem. Soc. Japan, 51 (1978) 1477).
Nestemäisen faasin ja kiinteän faasin vuorotekniikkaa (Frank, Meyer and Hagenmaier, Chem. Zeit, 101 (1977) 185) ei ole kovin paljoa kehitetty.
Polyakryylitukiaineiden, kuten Walter'in PAP-hartsin (J. Amer. Chem. Soc. 101 (1979) 5383) ja Sheppard'in hartsin (JCS Perkin I (1981) s. 529 ja 538), jotka turpoavat paljon suuremmassa liuotinjoukossa kuin styreenipolymeerit, ylivoimaisuus on äskettäin selvästi osoitettu (Atherton, Gait, Sheppard ja Williams, Biorq. Chem. 8 (1979) 774). Näitä etuja ovat polypeptidin ja sen tukiaineen helpompi erottaminen synteesin lopussa ja suurempi yhteensopivuus tukiaineen ja kasvavien peptidiosien 1iuotinvaatimusten välillä, mikä pienentää poikkeavaa lyhenemistä ja liittymistä. Hartsin ja peptidin liuottimien yhteensopivuuden suotuisa vaikutus 1iitäntäreaktion saantoihin on osoitettu (Atherton, Woolley ja Sheppard, Chem. Comm. (1980) 970). Polystyreenihartsien yhteydessä jo tehdyt kommentit, jotka koskevat huomattavien reagenssiy1imäärien (suuruusluokkaa 2,5 kertaa) käyttämistä
II
70234 ja sitä, että jokainen liitäntäreaktio on yleensä toistettava useita kertoja, ovat yhä voimassa. Tässä suhteessa on merkittävää, että uusimmassa, pitkien polypeptidisekvenssien synteesissä yhä käytetään liuosmenetelmää (esimerkiksi Kenner, Rakage ja Sheppard, Tetrahedron 35 (1979) 2767, Nagaraj ja Balaran, Tetrahedron 37 (1981) 1263? Fujii ja Yajima, JCS Perkin I (1981) s. 789, 787 ja 804).
Edellä mainittujen, matriisin ja kasvavan polypeptidisek-venssin erilaisten liuotinvaatimusten vaikutusten tasaamiseksi on äskettäin ehdotettu käytettäväksi uutta polyakryyliamidi-geeliä (R. Epton ja A. Williams, Int. J. Biol, Macromol (1981) 334). Tässä geelissä funktionalisointiaineena käytetään fenoli johdosta, joka muodostaa pääosan matriisista. Tämä geeli käyttäytyy sen vuoksi fysikaalisesti pseudoliuoksena.
Hartsin fenoliosassa tapahtuu myös amino-happo-1iitosreak-tioita. SteerisistM esteistä johtuen nämä liitosreaktiot eivät ole kvantitatiivisia, ja kussakin vaiheessa sivureaktioiden välttämiseen tarvitaan asetylointia. Steerinen estyneisyys on sellaista, että tämän tyyppistä hartsia voidaan soveltaa vain lyhyiden peptidien synteesiin. Viimeiseen suojauksen poistoon tarvitaan lopuksi pitkä käsittelyaika (useita päiviä) booritrifluoridillä.
Seuraavasta tullaan havaitsemaan, että tämän keksinnön mukaiset tukiaineet huomattavasti yksinkertaistavat ja parantavat kiinteässä faasissa tapahtuvan peptidisynteesin olosuhteita.
Keksinnön mukaisen peptidisynteesin suorittamiseksi hartsi modifioidaan käyttämällä reversiibeliä ankkurointisysteemiä. Eräs ei-rajoittava esimerkki on, että on mahdollista käyttää C-tyyppistä reagenssia (Mitchell, Erickson, Ryabstew, Hodges ja Merrifield, J. Amer. Chem. Soc. (1976) Stahl, Walter ja Smith, J. Amer. Chem. Soc. 101 (1979) 5383; Atherton, Logan 8 70234 ja Sheppard, JCS Perkin I (1981) s. 538; Atherton, Hubschier,
Sheppard ja Woolley, 2. Physiol. Chem. (1981) 362, 833) c
jossa X = Cl, Br tai OH
Y voi olla -CH2-0-ryhmä tai -CH2~ryhmä.
Yhdisteiden B ja X välinen reaktio, josta saadaan yhdiste D: ©-C-NH- (CH2 ) 2-NH-C-Y^{==^--CH2X
O O
D
voidaan suorittaa käytännöllisesti katsoen kvantitatiivisesti käyttämällä jotakin aikaisemmin mainittua liitäntäainetta tai antamalla monomeerin II vaikuttaa monomeerin III aktivoituun esteriin (valmistettu käyttämällä trikloori-2,4,5-fenolia, pentakloorifenoli,...) katalyytin (HOBT,...) läsnäollessa tai ilman.
Toinen reversiibeli ankkurointisysteemi voidaan saada käyttämällä E-tyyppistä reaktiivista ainetta (R * H tai CH) (Mizoguchi, Shigezan ja Takamura, Chem. Pharm. 18 (1970), 1465; Wang, J. Org. Chem. 41 (1976) 3258), joka kondensoidaan yhdisteen B kanssa yhdisteeksi F.
@-C-NH-(CH2)2-NH2 -} P-C-NH-(CH2)2-NH-C-CH-Br 8 H02C-CH-Br I Sj,
B R E F
Tämän tyyppinen ankkurointi, jota jo on käytetty polystyreeni-hartseilla (Mizoguchi, Shigezan ja Takamura, Chem. Pharm.
Bull. 18 (1970) 1465; Wang J. Org. Chem. 41 (1976) 3258), on uutta polyakryyli-tukiaineen tapauksessa.
C-terminaalisen aminohapon kiinnittäminen ensimmäisessä
II
• ‘ 9 70234 vaiheessa ja peptidin lopullinen irroittaminen tukiaineestaan suoritetaan samoissa olosuhteissa kuin edellä.
Näin funktionalisoitujen ja peptidisynteesissä käytettyjen hartsien funktiona1isointiaste on välillä 0,2 ja 5 milliekvi-valenttia/gramma, parhaiten välillä 1,0 ja 1,2 milliekviva-lenttia/gramma kuivaa tukiainetta.
C-terminaalisen aminohapon, jossa Nl^ on suojattu esimerkiksi hapon kestävällä t-butyy1ioksikarbonyy1iryhmälla (Boc) tai emäksen kestävällä fluorenyylimetyylioksikarbonyyliryhmällä (Fmoc), kiinnittäminen hartsiin voidaan toteuttaa monella tavalla: - Cesium-suola-välituotteen kautta, kun X = Cl tai Br.
- Disykloheksyylikarbodi-imidin (DCC) vaikutuksesta katalyyttinä käytetyn dimetyy1iamino-4-pyridiinin (DMAP) läsnäollessa, kun X = OH.
- Ja vielä siinä tapauksessa, että X = OH, valmistetaan suoraan N-suojatun aminohapon symmetrinen anhydridi ja antamalla reagoida yhdisteen D kanssa DMAP-katalyytin läsnäollessa.
Peptidin lopullinen irroittaminen tukiaineestaan suoritetaan: - Mineraaliemäksen laimealla liuoksella, kun Y on metyleeni-ryhmä, tai kun käytetään yhdistettä F; tai käyttämällä systeemiä NH^/CH^OH on mahdollista saada C-terminaalinen amidi, tai - laimean orgaanisen hapon (trifluorietikkahappo,... ) liuoksen vaikutuksesta, kun Y on -CH^-O-ryhmä.
Peptidisynteesin suo^riJLustapa
Keksinnön kattamilla tukiaineilla on ominaisuutena, että permeabiliteetti ja turpoaminen ovat hyvät erityisen suurella joukolla proottisia ja aproottisia liuottimia sekä pH-arvoltaan 70234 10 erilaisissa puskuroiduissa vesiliuoksissa.
Liitosreaktion aikana näissä olosuhteissa hartsi, jossa on N-Boc tai C-terminaalinen aminohappo N-Fmoc (tai valmistettava peptidi, joka on sopivasti suojattu) käyttäytyy "pseudo-liuoksena", ja näin muodostettua geeliä ei voida suodattaa. Tämä tekee olosuhteet erityisen suotuisiksi peptidi-sidoksen muodostumiselle, lähelle homogeenisen faasin olosuhteita. Kun reaktio on tapahtunut loppuun kolmannen liuottimen (eetteri, THF, dioksaani,...) lisääminen edistää liuottimen työntymistä hartsiin ja hartsin saostumista muodossa, joka on helposti ja nopeasti suodatettavissa, mitä ei tapahdu tunnettuja tekniikoita käytettäessä.
Keksinnön mukaisten hartsien nämä spesifiset erityisominaisuudet nopeuttavat merkittävästi (vähintään tekijällä kolme tunnettuihin menetelmiin verrattuna) liitäntäreaktioita ja lisäävät niiden saantoa. Kussakin yksittäisessä liitäntäreaktiossa on näin mahdollista huomattavasti pienentää suhdetta: N-suojatun aminohapon moolimäärä/tukiaineen funktionalisointiaste (1,1 -1,2, kun taas nykyiset normaalit arvot ovat suuruusluokkaa 2,5). Lisäksi välivaiheessa tapahtuvien suodatusten aikana ei tapahdu pylvään tukkeutumista.
Puolihomogeenisessa faasissa tapahtuvan liitäntäreaktion ja tukiaineen saostamisen vuorottaisuus on siten uusi menetelmä, joka yksinkertaistaa ja parantaa peptidisynteesiä kiinteässä faasi ssa.
Liittämistapahtuman järjestys voi olla esimerkiksi seuraava: 1. Lisätään inerttiä liuotinta, kuten CHCl^, CH^C^, DMF C-terminaalisen N-Boc aminohapon (tai sopivasti suojatun peptidin) hartsitukiaineen turvottamiseksi ; 2. Pestään suoraketjuisen eetterin tai syklisen eetterin, kuten etyylieetterin, isopropyylieetterin, tetrahydrofuraanin 11 70234 h tai dloksaanin avulla; 3. Lisätään liuottimeen trifluorietikkahappoa NT^-suojauksen poistamiseen; 4. Seostetaan hartsi lisäämällä kohdassa 2 esitetynlaista eetteriä ; 5. Suodatetaan ja pestään neljä kertaa kohdassa 2 esitetynlai-sella eetterillä; 6. Neutraloidaan lisäämällä inerttiin liuottimeen di-isopropyy-lietyyliamiinia; 7. Pestään neljä kertaa kohdassa 2 esitetynlaisella eetterillä ja kuivataan typpivirrassa; 8. Liitetään N-Boc aminohapon symmetrinen anhydridi (valmistettu välittömästi) sekoittamalla ja liuottamalla klooriliuottimeen; 9. Saostetaan lisäämällä kohdassa 2 esitetynlaista eetteriä ja suodattamalla; 10. Pestään neljä kertaa kohdassa 2 esitetyllä eetterillä.
Tämä uusi menetelmä on testattu menestyksellisesti tällä hetkellä biologisesti hyödyllisten peptidien synteesissä, esimerkiksi undekapeptidin Ac-Gly-Gly-Lys-Gly-Gly-Ala-Arg-Lys-Val-Leu-Homo Ser synteesissä.
Esimerkki - Peptidisynteesi Ac-Gly-Gly-Lys-Gly-Gly-Ala-Arq-Lys-Va1-Leu-Homo Ser
Peptidi syntetisoidaan akryy1ihart silie, joka on saatu kopo-lymeroimalla N-akry1 oyy1ipyrrolidiini, etyleenibisakryy1iamidi ja aminokapronihapon metyyliesterin N-akryylijohdos. Sen jälkeen tukiaine funktionalisoidaan seuraavasti: 32 ml uudelleen i2 70234 tislattua etyleenidiamiinia lisätään 1 g:aan hartsia (funktio-nalisoitu C02CH3:lla) ja seosta sekoitetaan yksi yö huoneen lämpötilassa. Sen jälkeen seos suodatetaan, pestään deminerali-soidussa vedessä neutraaliksi ja sen jälkeen pestään etanolissa ja eetterissä. Lopuksi hartsia kuivataan alipaineessa 24 tuntia. Tällöin se sisältää 1 milliekvivalenttia NH2/gramma kuivaa polymeeriä.
Käytettiin 2 g hartsia, so. 2 milliekvivalenttia NH2· Aminohapon hartsiin kiinnittämiseen tarvittava toimintajakso on seuraava:
Tilavuus Aika
Liuotin tai reaktiivinen aine n;o Reaktio_(ml)_(min.)
Vedetön dietyylieetteri 1 huuhtelu 75 2 ----------------------- 2 -------- ----------------------- 3 -------- ----------------------- 4 --------
Trifluorietikkahappo/- 5 suojauksen CH2C12 [30:70 (t/t)] poisto 50 2 ----------------------- 6 ---------- 50 30
Vedetön dietyylieetteri 7 huuhtelu 75 2 ----------------------- 8 -------- ----------------------- 9 -------- ----------------------- 10 --------
Di-isopropyylietyyli- amiini/CH2Cl2 [10:90 (t/t)] 11 neutralointi 50 2 ----------------------- 12 --------
Vedetön dietyylieetteri 13 huuhtelu ----------------------- 14 -------- ----------------------- 15 -------- ----------------------- 16 --------
Liitäntäreaktiota varten lisätään aminohapon symmetristä anhydridiä 50 mlsssa CH2CI2 17 liitäntä 50 60
Vedetön dietyylieetteri 18 sekoitus 75 2 ----------------------- 19 --------
II
13 70234
Tilavuus Aika
Liuotin tai reaktiivinen aine n:o Reaktio_(ml)_(min. ) ----------------------- 20 -------- ----------------------- 21 --------
Di-isopropyylietyyli- amiini/CH2Cl2 [10:90 (t/t)] 22 neutralointi 50 2 ----------------------- 23 -------- — 30
Vedetön dietyylieetteri 24 huuhtelu 75 2 ----------------------- 25 -------- ----------------------- 26 -------- ----------------------- 27 --------
Liitäntäreaktiota varten lisätään aminohapon symmetristä anhydridiä 50 mlrssa CH2CI2 28 liitäntä 50 30
Vedetön dietyylieetteri 29 huuhtelu 75 2 ----------------------- 30 -------- ----------------------- 31 -------- ----------------------- 32 --------
Liittymisreaktio tarkistetaan Kaiser'in ninhydriinitestillä.
Kuten koemenetelmässä on kuvattu, kutakin käytettyä aminohappoa kohti tehdään kaksi liitosreaktiota. Liitosreaktio saadaan aikaan käyttämällä symmetrisiä anhydridejä, jotka valmistetaan seuraavasti: 1 millimooli suojattua aminohappoa liuotetaan 2 ml:aan vedetöntä metyleenikloridia. Liuos jäähdytetään 0°C:een ja liuokseen lisätään 0,5 millimoolia disykloheksyylikarbodi-imidiä 10 ml:ssa metyleenikloridia. 20 minuutin pituisen reaktion jälkeen 0°C:ssa huuhdellaan disykloheksyy1ikarbodi-imidi-sakka 20 ml:lla metyleenikloridia ja liuokset sekoitetaan ja saatetaan reaktorissa kosketukseen hartsin kanssa.
Tämä menetelmä on sallinut meidän valmistaa symmetrisiä anhydridejä seuraavista: Boc Gly OH, Ne Z Net Boc Lys OH,
Boc Vai OH, Boc Leu OH, Boc Met OH ja Ac Gly OH. NG NO2,
Nc< Boc Arg OH: n tapauksessa tuote liuotetaan mahdollisimman 14 70234 pieneen määrään dimetyyliformamidia ja tilavuus saatetaan 20 ml:ksi kuivalla metyleenikloridillä. Tällöin tapahtuu reaktio edellä kuvatulla tavalla. Viimeisen aminohapon liittämisen jälkeen hartsi kuivataan alipaineessa 24 tuntia fosfori-pentoksidin läsnäollessa ja sen jälkeen suspendoidaan 50 ml:aan trifluorietikkahappoa. Sen jälkeen liuoksen läpi kuplitetaan 2 tunnin ajan hidas, kuiva HBR-virta. Tämän jälkeen seos huuhdellaan runsaalla määrällä ja Et20.
Tämä asidolyysi suojaa lysiinisivuketjut.
Saatu oranssinpunainen jauhe suspendoidaan 100 ml:aan 2 M trifluorietikkahappoa ja lisätään 5 g jauhemaista sinkkiä. Sekoitetaan 2 tuntia huoneen lämpötilassa, minkä jälkeen reaktioseos pestään hyvin suolahapolla (2N), vedellä, etanolilla ja lopuksi vedettömällä dietyylieetterillä. Tämä hydrogenolyysi irroittaa nitroryhmän arginiinin guanidiniumryhmästä.
Hartsi kuivataan 12 tunnin aikana alipaineessa ja fosforipen-toksidin läsnäollessa, jolloin saadaan 1 g polymeeriä, joka käsitellään 2,5 g:lla syanibromidia 70 ml:ssa propionihappoa. Annetaan reagoida 24 tuntia huoneen lämpötilassa, minkä jälkeen liuos lyofilisoidaan ja haluttu peptidi otetaan talteen 45 % saannolla.
Il
Claims (2)
1. Förfarande för framställning av amino-funktionaliserade akrylkopolymerer, kännetecknat därav, att följande tre komponenter kopolymeras: a) 30 - 90 vikt-% monomer (matris), som motsvarar N-akryloylpolymetylenimin med formeln CH2 = C — C — N Z Il V._^ o där Ri = H eller -CH3 Z = —(CH2)ni~ där nl ~ 4r 5 tai 6 eller — (CH2)2—X—(CH2)2— där X = 0 tai N—CH3 eller N-akryloyldialkyliamid med formeln Rl R2 ch2 = c — c — n Il \ O r2 där Ri avser samma som ovan och R2 = —CH3 eller —C2H5 b) 2-50 vikt-% monomer (bindemedel), som motsvarar Ν,Ν'-diakryloyldiaminoalkan med formeln CH2 = CH—C--NH-- (CH2 ) n2”NH"c"CH = CH2 O O där n2 = 1 eller 2 li 19 702 34 c) 2 - 65 vikt-% monomer (funktionaliserande ärtine) , som motsvarar akryloylaminosyra eller ester eller racemat med formeln CHo = C—C—N—(CH2)ni"C—OR3 I II I 3 II Rl O H O där Ri = H eller -CH3 R3 = H eller -CH3 Π3 = 1, 2 , 3 tai 5 eller asymmetrisk N-akryloylaminosyra (eller ester) (L-serie) med formeln * CH2 = C — C — NH — CH — C — OR3 I H I 11 Rj O R4 O där R3 är samma som ovan, R4 = —ch3 --ch2— —CH (CH3
) 2 —CH2—OH —CH2-CH=(CH3)2 —CH2—CH2—S—CH3 -(CH2)4—NH2 eller N-akryloyl-(L)-prolin eller dess metylester med formeln O * " \ s --c CH2 = C—C—N JU 1. ii 0R3 R1 o
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB8134861 | 1981-11-19 | ||
| GB8134861 | 1981-11-19 |
Publications (4)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI823906A0 FI823906A0 (fi) | 1982-11-15 |
| FI823906L FI823906L (fi) | 1983-05-20 |
| FI70234B FI70234B (fi) | 1986-02-28 |
| FI70234C true FI70234C (fi) | 1986-09-15 |
Family
ID=10525991
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI823905A FI70233C (fi) | 1981-11-19 | 1982-11-15 | Foerfarande foer framstaellning av nya akrylkopolymerer |
| FI823906A FI70234C (fi) | 1981-11-19 | 1982-11-15 | Foerfarande foer framstaellning av amino-funktionaliserade akrylkopolymerer |
Family Applications Before (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI823905A FI70233C (fi) | 1981-11-19 | 1982-11-15 | Foerfarande foer framstaellning av nya akrylkopolymerer |
Country Status (15)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US4436874A (fi) |
| EP (2) | EP0081408B1 (fi) |
| JP (2) | JPS5891703A (fi) |
| KR (2) | KR860000526B1 (fi) |
| AT (2) | ATE28468T1 (fi) |
| AU (2) | AU553982B2 (fi) |
| CA (2) | CA1199449A (fi) |
| DE (2) | DE3276811D1 (fi) |
| DK (2) | DK162532C (fi) |
| FI (2) | FI70233C (fi) |
| MX (2) | MX169477B (fi) |
| NO (2) | NO161977C (fi) |
| NZ (2) | NZ202538A (fi) |
| PL (2) | PL137653B1 (fi) |
| ZA (2) | ZA828369B (fi) |
Families Citing this family (27)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4631327A (en) * | 1982-12-29 | 1986-12-23 | Polaroid Corporation | β-Elimination polymers useful for providing diffusion control layers in diffusion transfer photographic products |
| US4683292A (en) * | 1983-08-12 | 1987-07-28 | Immunetech, Inc. | Immunotherapeutic polypeptide agents which bind to lymphocyte immunoglobulin FC receptors |
| JPS60235638A (ja) * | 1984-05-07 | 1985-11-22 | Mitsui Toatsu Chem Inc | 吸着・分離方法 |
| DE3578383D1 (de) * | 1984-05-28 | 1990-08-02 | Mitsui Toatsu Chemicals | Mittel fuer die absorption und entweichung von wasserdampf. |
| US4788288A (en) * | 1985-07-30 | 1988-11-29 | Air Products And Chemicals, Inc. | Self-and Hydroxyl reactive formaldehyde-free cyclic hemiamidal and hemiamide ketal crosslinking monomers |
| US4691026A (en) * | 1985-07-30 | 1987-09-01 | Air Products And Chemicals, Inc. | Self- and hydroxyl reactive formaldehyde-free cyclic hemiamidal and hemiamide ketal crosslinking monomers |
| US4663410A (en) * | 1985-08-06 | 1987-05-05 | Air Products And Chemicals, Inc. | Polymers of self- and hydroxyl reactive formaldehyde-free cyclic hemiamidal and hemiamide ketal crosslinking monomers |
| US5175254A (en) * | 1988-09-24 | 1992-12-29 | Societe D'expansion Scientifque Expansia | Solid phase peptide synthesis using a polyacrylic support in aqueous solution |
| GB8822502D0 (en) * | 1988-09-24 | 1988-10-26 | Expansia Sa | New peptide synthesis method |
| US5280093A (en) * | 1989-06-29 | 1994-01-18 | Rhone-Poulenc Chimie | Chiral polymers for the synthesis of pure enantiomers of amino acids |
| US6031074A (en) * | 1989-08-25 | 2000-02-29 | National Institutes Of Health | Automated Peptide design and synthesis |
| FR2652581B1 (fr) * | 1989-10-02 | 1991-12-13 | Rhone Poulenc Chimie | Procede de solubilisation de peptides et procede de synthese de peptides. |
| US20020042377A1 (en) * | 1995-06-07 | 2002-04-11 | Steiner Joseph P. | Rotamase enzyme activity inhibitors |
| US7056935B2 (en) * | 1995-06-07 | 2006-06-06 | Gpi Nil Holdings, Inc. | Rotamase enzyme activity inhibitors |
| US20040221844A1 (en) * | 1997-06-17 | 2004-11-11 | Hunt Peter John | Humidity controller |
| FR2791582B1 (fr) * | 1999-04-02 | 2001-06-08 | Expansia Sa | Utilisation d'un support polymerique acrylique en catalyse supportee |
| AR021155A1 (es) | 1999-07-08 | 2002-06-12 | Lundbeck & Co As H | Tratamiento de desordenes neuroticos |
| FR2802121A1 (fr) * | 1999-12-14 | 2001-06-15 | Expansia Sa | Supports polymeriques organiques possedant des ligands mono- ou bi-dentates et leur utilisation en catalyse supportee |
| US6620939B2 (en) * | 2001-09-18 | 2003-09-16 | General Electric Company | Method for producing bisphenol catalysts and bisphenols |
| US7112702B2 (en) * | 2002-12-12 | 2006-09-26 | General Electric Company | Process for the synthesis of bisphenol |
| US7098253B2 (en) * | 2004-05-20 | 2006-08-29 | 3M Innovative Properties Company | Macroporous ion exchange resins |
| US7683100B2 (en) * | 2005-12-21 | 2010-03-23 | 3M Innovative Properties Company | Method of making macroporous cation exchange resins |
| US7674835B2 (en) * | 2005-12-21 | 2010-03-09 | 3M Innovative Properties Company | Method of making macroporous anion exchange resins |
| US7674836B2 (en) * | 2006-07-28 | 2010-03-09 | 3M Innovative Properties Company | Method of making macroporous cation exchange resins |
| JP2015214592A (ja) * | 2012-09-11 | 2015-12-03 | 味の素株式会社 | 温度応答性ポリマー及びその製造方法 |
| JP7135284B2 (ja) * | 2017-09-29 | 2022-09-13 | 株式会社リコー | 組成物、硬化物、収容容器、像形性装置、及び像形成方法 |
| CN110128589B (zh) * | 2019-05-31 | 2021-12-03 | 上海纳米技术及应用国家工程研究中心有限公司 | 一种氨基酸改性微球的制备方法及其产品 |
Family Cites Families (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US2845408A (en) | 1954-08-04 | 1958-07-29 | Rohm & Haas | Linear polymeric amides and methods of making them |
| US3069390A (en) * | 1959-07-17 | 1962-12-18 | Borden Co | Polymeric amides from polymeric acrylic acid esters and n-aminoalkyl alkanol amines and reaction products therefrom |
| BE627745A (fi) * | 1962-01-31 | |||
| GB1108383A (en) * | 1965-12-23 | 1968-04-03 | Kodak Ltd | Acrylic polymers and light sensitive materials containing them |
| JPS4948668B1 (fi) | 1971-06-26 | 1974-12-23 | ||
| US3814732A (en) * | 1971-10-21 | 1974-06-04 | Hoffmann La Roche | Modified solid supports for solid phase synthesis |
| NL7311320A (fi) * | 1972-09-01 | 1974-03-05 | ||
| FR2205538A1 (en) * | 1972-11-06 | 1974-05-31 | Ceskoslovenska Akademie Ved | Acrylate or methacrylate copolymer - useful as support for solid phase peptide synthesis |
| DE2430128C3 (de) * | 1974-06-22 | 1981-11-05 | Röhm GmbH, 6100 Darmstadt | Verfahren zur Herstellung trägergebundener Polypeptide |
| US3965070A (en) | 1974-10-07 | 1976-06-22 | Rohm And Haas Company | Crosslinked vinylcarbonyl resins having α-amino acid functionality |
-
1982
- 1982-11-10 US US06/440,440 patent/US4436874A/en not_active Expired - Lifetime
- 1982-11-10 US US06/440,441 patent/US4439545A/en not_active Expired - Lifetime
- 1982-11-15 ZA ZA828369A patent/ZA828369B/xx unknown
- 1982-11-15 ZA ZA828370A patent/ZA828370B/xx unknown
- 1982-11-15 FI FI823905A patent/FI70233C/fi not_active IP Right Cessation
- 1982-11-15 FI FI823906A patent/FI70234C/fi not_active IP Right Cessation
- 1982-11-16 CA CA000415706A patent/CA1199449A/fr not_active Expired
- 1982-11-16 CA CA000415705A patent/CA1199448A/fr not_active Expired
- 1982-11-17 NZ NZ202538A patent/NZ202538A/en unknown
- 1982-11-17 NZ NZ202539A patent/NZ202539A/en unknown
- 1982-11-18 AU AU90677/82A patent/AU553982B2/en not_active Ceased
- 1982-11-18 DK DK513382A patent/DK162532C/da not_active IP Right Cessation
- 1982-11-18 MX MX007920A patent/MX169477B/es unknown
- 1982-11-18 MX MX007921A patent/MX166906B/es unknown
- 1982-11-18 NO NO823865A patent/NO161977C/no not_active IP Right Cessation
- 1982-11-18 DK DK513282A patent/DK162651C/da not_active IP Right Cessation
- 1982-11-18 AU AU90678/82A patent/AU556992B2/en not_active Ceased
- 1982-11-18 PL PL1982239100A patent/PL137653B1/pl unknown
- 1982-11-18 PL PL1982239101A patent/PL138979B1/pl unknown
- 1982-11-18 NO NO823864A patent/NO161978C/no not_active IP Right Cessation
- 1982-11-19 JP JP57203541A patent/JPS5891703A/ja active Pending
- 1982-11-19 JP JP57203540A patent/JPS5896615A/ja active Granted
- 1982-11-19 AT AT82402109T patent/ATE28468T1/de not_active IP Right Cessation
- 1982-11-19 AT AT82402110T patent/ATE14890T1/de active
- 1982-11-19 KR KR8205234A patent/KR860000526B1/ko active
- 1982-11-19 KR KR8205233A patent/KR860000559B1/ko active
- 1982-11-19 DE DE8282402109T patent/DE3276811D1/de not_active Expired
- 1982-11-19 EP EP82402109A patent/EP0081408B1/fr not_active Expired
- 1982-11-19 DE DE8282402110T patent/DE3265458D1/de not_active Expired
- 1982-11-19 EP EP82402110A patent/EP0079842B1/fr not_active Expired
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| FI70234C (fi) | Foerfarande foer framstaellning av amino-funktionaliserade akrylkopolymerer | |
| CA2265900C (en) | Improved solid-phase peptide synthesis and agent for use in such synthesis | |
| US4897445A (en) | Method for synthesizing a peptide containing a non-peptide bond | |
| ES2352204T3 (es) | Método de síntesis peptídica en fase sólida. | |
| CA1307623C (en) | Method for synthesizing a peptide containing a non-peptide bond | |
| EP0687691A2 (en) | Resin for solid-phase peptide synthesis and methods of making it | |
| Tam et al. | Design and synthesis of multidetachable resin supports for solid-phase peptide synthesis | |
| EP0142231B1 (en) | Process for producing sequential polyamino acid resin | |
| US5545698A (en) | Polyethylene glycol derivatives for solid-phase applications | |
| KR101046846B1 (ko) | 고체상 합성법을 이용한 펩타이드의 제조방법 | |
| Furlán et al. | Selective detachment of Boc-protected amino acids and peptides from Merrifield, PAM and Wang resins by trimethyltin hydroxide | |
| EP0273895A2 (en) | Solid phase peptide synthesis | |
| RU2036200C1 (ru) | Способ получения производных пептидамидов или их физиологически совместимых ацетатов или гидрохлоридов | |
| PL184205B1 (pl) | Nowe Nalfa-2-(4-nitrofenylosulfonylo)etoksykarbonyloaminokwasy i sposób wytwarzania nowych Nalfa-2-(4-nitrofenylosulfonylo) etoksykarbonyloaminokwasów | |
| NO148373B (no) | Fremgangsmaate ved fremstilling av et harpikspeptid | |
| US4133805A (en) | Cyclic undecapeptides related to somatostatin and intermediates therefor | |
| KR100418962B1 (ko) | 2-(4-나이트로페닐설포닐)에톡시카르보닐-아미노산류를사용하여 펩티드를 고수율 및 고순도로 제조하는 방법 | |
| Renil et al. | Tetraethyleneglycol diacrylate (TTEGDA)-crosslinked polystyrene resin as an efficient solid support for gel phase peptide synthesis | |
| CN110551178B (zh) | 一种含脯氨酸的首尾环肽合成方法 | |
| Varkey et al. | Solid phase synthesis of hydrophobic peptides on 1, 6‐hexanediol diacrylate cross‐linked polystyrene resin | |
| WO2003093301A2 (en) | Process for the synthesis of peptides | |
| US4879371A (en) | Solid phase peptide synthesis | |
| NZ230712A (en) | Solid phase peptide synthesis on polyacrylic resins characterised by the use of aqueous washes | |
| CN116655765A (zh) | 一种芋螺毒素的液相合成方法 | |
| CN113227115A (zh) | 肽的合成方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM | Patent lapsed |
Owner name: SOCIETE D'EXPANSION SCIENTIFIQUE |