FI70215C - Foerfarande foer framstaellning av nya terapeutiskt anvaendbara apovinkaminolderivat och farmaceutiskt godtagbara syraadditionssalter daerav - Google Patents

Description

7021 5

Menetelmä uusien terapeuttisesti käyttökelpoisten apovinka-minolijohdannaisten ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävien happoadditiosuolojen valmistamiseksi 5 Keksintö koskee menetelmää uusien terapeuttisesti käyttökelpoisten kaavan I mukaisten yhdisteiden R1 10 rί 'Γη^ν 5*2 C_H_ (I) ,0 ^ 3 CHo0 r 3 15 II J 0

ch30 T

0ch3 1 2 jossa joko molemmat R ja R ovat vety tai toinen symboleista 1 2 R ja R on vety ja toinen nitroryhmä, ja niiden farmaseutti-20 sesti hyväksyttävien happoadditiosuolojen valmistamiseksi.

Keksinnön mukaisella menetelmällä valmistetaan kaavan Ia mukainen apovinkaminoli-3',4',5'-trimetoksibentsoaatti tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävä happoadditiosuola/ 25 Λ Γ [Π“ϊ! h ' U Jl A ? .-n.

'i ^ CH-—(Ia) 0 C2H5 CH-,0 r-· ^ 3 3 0 - (! l o CH30 - 0CH3 kaavan Ib mukainen 9-nitroapovinkaminoli-31,41,5’-trimetoksi-35 bentsoaatti tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävä happo-additiosuola, 2 7021 5 no2 f^Sj—

L Jl 1 H XL

5 jjA^Äs (Ib) ^2 C-Ης 0 2 5 ^3° . c-' fT Yo ίο

CH30 I

ch30 tai kaavan Ie mukainen ll-nitroapovinkaminoli-3’,4’,5'-tri-metoksibentsoaatti tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävä 15 happoadditiosuola

Ori0> * J33 20 O " 2 C2H5 CH O C ^ (Ic) CH30 !

CH.JD

25

Keksinnön mukaiselle menetelmälle kaavan I mukaisten uusien terapeuttisesti käyttökelpoisten apovinkaminolijohdannaisten ja näiden farmaseuttisesti hyväksyttävien happoaddi-tiosuolojen valmistamiseksi on tunnusomaista, että apovinka-30 minolin tai sen happoadditiosuolan annetaan reagoida 3,4,5-trimetoksibentsoehapon tai sen asylointia aikaansaavan reaktiivisen johdannaisen kanssa ja erotetaan kaavan Ia mukainen yhdiste tai muunnetaan se farmaseuttisesti hyväksyttäväksi happoadditiosuolaksi tai mikäli halutaan nitrataan kaavan 35 Ia mukainen yhdiste ja erotetaan näin saadun kaavojen Ib ja Ie mukaisten yhdisteiden seoksen molemmat komponentit, ja jos halutaan, muunnetaan näin saatu kaavan Ib tai Ie mukai- 7021 5 nen yhdiste farmaseuttisesti hyväksyttäväksi happoadditio-suolaksi.

Keksinnön mukainen menetelmä suoritetaan edullisesti orgaanisen liuottimen läsnäollessa, erityisesti klooratussa 5 hiilivedyssä tai alifaattisessa ketonissa tai pyridiinissä, erityisesti metyleenikloridissa, kloroformissa tai asetonissa. Jos asylointiaineena käytetään 3,4,5-trimetoksibentso-yylihalogenidia, suoritetaan reaktio käyttäen mukana happoa sitovaa ainetta ekvimolaarisena määränä tai pienenä yli-10 määränä. Tähän tarkoitukseen voidaan käyttää esim. alkali- karbonaattia, aikaiivetykarbonaattia tai orgaanista amiinia. Jos asylointiaineena käytetään 3,4,5-trimetoksibentsoehappoa, suoritetaan reaktio käyttäen katalyyttistä määrää happoa (sopiva happo on kloorivetyhappo tai rikkihappo) tai karbok-15 syyliryhmän aktivoivan aineen ja/tai dehydroivan aineen läsnäollessa. Karboksyyliryhmää voidaan aktivoida halogenoidul-la fenolilla, edullisemmin pentakloorifenolilla. Dehydroiva-na aineena voidaan käyttää esim. N,N'-disykloheksyylikarbo-di-imidiä. Asylointi voidaan suorittaa lämpötilassa, joka 20 on -20°C:n ja reaktioseoksen kiehumapisteen välillä, edullisimmin 20-60°C:ssa.

Kaavan Ia mukainen tuote voidaan erottaa reaktioseok-sesta uuttamalla ja/tai haihduttamalla.

Tällä tavalla saatu tuote voidaan muuntaa farmaseut-25 tisesti hyväksyttäväksi happoadditiosuolaksi. Suolanmuodos-tus voidaan suorittaa käyttämällä epäorgaanista tai orgaanista happoa (esim. kloorivetyhappoa, rikkihappoa tai fos-forihappoa tai viinihappoa, meripihkahappoa, sitruunahappoa tai askorbiinihappoa). Suolanmuodostus suoritetaan perintei-30 sesti tunnetuilla menetelmillä. On edullista menetellä niin, että emäsliuokseen lisätään happoliuos etyylieetterissä tai asetonissa. Suolanmuodostus tapahtuu täydellisesti pH-arvo-sa 3-6.

Tällä tavoin saatu kaavan Ia mukainen yhdiste voidaan 35 haluttaessa nitrata. Nitraus voidaan edullisesti suorittaa väkevän typpihapon avulla. Edullisimmat reaktio-olosuhteet saadaan käyttämällä jääetikkaa reaktioympäristönä. On edul- 4 70215 lista suorittaa nitraus jäähdyttäen noin 0°C:seen. Kun reaktio on saatettu loppuun, neutraloidaan happoylimäärä ja kaavojen Ib ja Ie mukaisten yhdisteiden seos erotetaan reaktio-seoksesta uuttamalla ja/tai haihduttamalla.

5 Näin saadusta isomeeriseoksesta voidaan erottaa sen kaksi komponenttia. On edullisinta suorittaa isomeerien erotus kromatografisin menetelmin.

Kaavojen Ib ja Ie mukaiset yhdisteet voidaan muuntaa niiden farmaseuttisesti hyväksytyiksi suoloiksi, mikäli ha-10 lutaan, menetelmillä, joita on kuvattu kaavan Ia mukaisen yhdisteen happoadditiosuolojen valmistuksen yhteydessä.

On tunnettua, että apovinkaminolilla ja sen asetaa-tilla on vaikutusta sepelvaltimoon (FR-patenttijulkaisu 2 035 784). On myös tunnettua, että apovinkaminolibentsoaa-15 tiliä on yleisiä verisuonia laajentavia ominaisuuksia (HU-patenttijulkaisu 166476; CA 83, 129279 v (1975)) ja apovin-kaminolin esterit, jotka muodostuvat 3-12 hiiliatomisten alkaanikarboksyylihappojen kanssa, osoittavat aivojen verisuonia laajentavaa vaikutusta (HU-patenttijulkaisu 171662, 20 vastaava US-patenttijulkaisu 4 108 996 ja DE-patenttijulkaisu 26 32 118).

Kaikki apovinkaminolin tunnetut esterit osoittavat siis verisuonia laajentavia vaikutuksia. Toisaalta tämän keksinnön uudet yhdisteet estävät fosfodiesteraasin ent-25 syymiaktiviteettiä ja niitä voidaan etupäässä käyttää ihotautien hoitoon, joihin liittyy solujen sairaalloisen nopea jakautuminen sekä sellaisten tautien uusiutumisen ehkäisyyn.

Taudit, joihin liittyy orvaskeden nopea jakautuminen, ovat suhteellisen tavallisia ja esiintyvät muutamalla pro-30 sentillä väestöstä. Nämä taudit voivat olla luonteeltaan sekä hyvän- että pahanlaatuisia kuten hilseilytauti, kutiseva taiveihottuma, allerginen kosketussekseema, tyvisolu-ja oksasolusyöpä, kalasuomutauti, pahanlaatuisen keratoosin esiaste, valon aiheuttama keratoosi, finnitauti ja talikehnä-35 tauti. Toiset taudit esiintyvät vain ihmisillä, toiset sekä ihmisillä että eläimillä.

Il 5 70215

Koska eräät ihotaudit, joihin liittyy solujen sairaalloisen nopea lisääntyminen (esim. hilseilytauti), eivät esiinny elämillä, voidaan yhdisteiden vaikutus psoriasista vastaan arvioida eläinkokeista vain epäsuorasti.

5 Voorhess et ai. (Arch. Derm. 104 (1971) 359-365) ovat havainneet, että solujen sairaalloisen nopeaan jakautumiseen liittyy alenemista syklisen adenosiinimonofosfaatin (c-AMP) tasossa. Tiedetään, että c-AMP muodostuu adenyylisyklaasin vaikutuksesta ja hajoaa fosfodiesteraasin vaikutuksesta.

10 Voorhees'in onnistui vaikuttamaan hilseilytaudin yhdisteillä, jotka kiihottavat adenyylisyklaasin toimintaa (kuten norepinefriini) tai estävät fosforiesteraasin toimintaa (esim. papaveriini).

Suunnitellessamme testiä mallikokeeksi lähdimme siitä 15 olettamuksesta, että Voorheesin väittämä pitää myös kääntäen paikkansa. Siis, jos voidaan osoittaa, että määrätty yhdiste estää fosfodiesteraasin toimintaa, voidaan epäsuorasti olettaa, että mainittu yhdiste on sopiva ihotautien hoitoon, joihin liittyy solujen sairaalloisen nopeaa jakautumista.

20 Tämä olettamus osoittautui oikeaksi: ne yhdisteet, joilla oli fosfodiesteraasia estävä vaikutus in vitro-ko-keissa, osoittautuivat myös kliinissä kokeissa vaikuttaviksi hilseilytaudin hoidossa.

Mallikokeemme suoritetaan fosforiesteraasin avulla, 25 jota eristetään eläinten ruumiinkudoksista (rotan aivoista, härän aivoista, härän sydämestä). Entsyymi eristetään J. Schröderin ja H.V. Richenbergin menetelmän mukaan (Biochem. Biophys. Acta 302 (1973) 50), eristetty fosfodiesteraasi puhdistetaan J.G. Hardmanin ja E.W. Sutherlandin menetelmällä 30 (J. Biol. Chem. 240 (1965) 3704) ja lopuksi mitataan puhdis tetun entsyymin aktiviteetti G. Pöchin radioisotooppimenetel-män mukaan 10,1 millimoolia c-AMP-substraattia kohti ylimää- 3 rän tritioidun c-AMP:n läsnäollessa, josta H-c-AMP on 2,59 Bq (inkubointisysteemissä, ensin ilman inhibiittoria ja sen jäl-35 keen apovinkaminoli-341,51-trimetoksibentsoaattijohdannaisen ollessa läsnä inhibiittorina 20 minuutin inkuboinnin jälkeen (N.S. Arch. Pharmacol. 268 (1979) 272). Koeyhdisteestä / 7021 5 valmistetaan 1 millimolaarinen kantaliuos ja inkuboitavaan entsyymivalmisteeseen lisätään eri määriä mainitusta kanta- liuoksesta siten, että koeyhdisteen pitoisuus inkuboidussa “7 — 6 — 6 näytteessä on vastaavasti 5 x 10 , 1 x 10 , 5 x 10 , -5 -5 -4 5 1 x 10 , 5 x 10 ja 10 moolia/litra. Vertailuun käyte tyn yhdisteen (papaveriini) vesiliuos lisätään entsyymiin, joka on valmistettu samalla tavalla.

Kontrollilla mitattu aktiivisuus (entsyymiliuos, joka ei sisällä inhibiittoria) merkitään 100 %:ksi ja kaavan I 10 mukaista yhdistettä sisältävien liuosten aktiivisuus ilmaistaan prosentteina kontrollista. Tulokset, jotka on mitattu rotan aivoista eristetyllä entsyymillä, on koottu seuraavaan taulukkoon.

Koeyhdiste (entsyymi- Koeyhdisteen pitoisuus moolia/litra inhibiittori) _ ,.6 Ί ,.-5 _ ,.-5 _'_5 x 10_1 x 10_5 x 10 (Vaikutus entsyymiaktiviteettiin, % kontrollista)

Apovinkaminoli-3',4',5'- trimetoksibentsoaatti . HCl 64,5 49,2 47,2 20 (-)-11-nitroapovinkami- noli-3',4',5'-trimetoksibentsoaatti . HCl 53,6 44,4 37,3 (-)-9-nitroapovinkami-noli-3',4',5'-trimetoksibentsoaatti . HCl 62,9 61,6 37,7 25 Papaveriini 91,2 89,7 60,5

Tulokset entsyymillä, jota on eristetty härän aivoista ja härän sydämestä, mitataan samalla tavalla. Saatuja tuloksia käyttäen tulostetaan entsyymiaktiivisuus entsyymi-inhibiittoripitoisuuden (ilmaistuna ^umooleina) logaritmia 30 kohti. Entsyymi-inhibiittoripitoisuus, joka vähentää entsyy miaktiivisuutta 50 %:lla (I^q) luetaan käyrästä. Saadut tulokset on yhdistetty seuraavaan taulukkoon.

7021 5

Koeyhdiste l50~arvot, .umooleina fosfori- esteraasientsyymillä, joka on eristetty _härän sydämestä rotan aivoista

Apovinkaminoli-3',4',5'-tri- 5 metoksibentsoaatti . HCl 1,5 10 (-)-11-nitroapovinkaminoli-3 1 ,4',5'-trimetoksibentso- aatti· HCl 1 8 (-)-9-nitroapovinkaminoli-3',4',5'-trimetoksibentso- 10 aatti · HCl 1 15

Papaveriini · HCl 50 70

Edellä olevasta taulukosta ilmenee, että härän sydämestä ja rotan aivoista eristetyllä entsyymillä kyseisen keksinnön uudet yhdisteet ovat 33-50 ja vastaavasti 4,5-9 15 kertaa aktiivisempia kuin vertailuyhdisteenä käytetty papaveriini .

Ensimmäiset kliiniset kokeet suoritettiin paikalliskäyttöön soveltuvilla vaikuttavaa yhdistettä sisältävillä koostumuksilla (voide, emulsiovoide, liuos, tinktuura, pasta, 20 aerosoli). Käytettiin emulsiovoiteita, jotka kukin sisälsivät 2 %, 1 %, 0,5 %, 0,25 % ja 0,1 % (-)-9-nitro- tai (-)-ll-nitroapovinkaminoli-3',4',51-trimetoksibentsoaattia.

Käsiteltiin potilaita, jotka sairastivat proriaasista. Toinen olennainen valintaperuste oli se seikka, että potilaat 25 eivät samanaikaisesti saaneet systeemistä hoitoa perustaudilleen (eli immunosuppressiivistä, sytostaattista tai gluko-kortikoidista hoitoa).

Viiden potilaan ryhmiä tutkittiin nk. täplämenetel-mällä. Toinen puoli symmetrisestä vaurioituneesta ihoaluees-30 ta käsiteltiin vaikuttavaa yhdistettä sisältävällä emulsiovoiteella samalla kun toinen puoli käsiteltiin plasebolla. Potilaan muita vaurioituneita ihoalueita käsiteltiin muilla paikallismenetelmillä, mm. voiteella, jota yleisesti käytetään hilseilytaudin hoitoon ja joka sisältää flumetasoni-35 pivalaattia ja salisyylihappoa, käyttäen mainittua voidetta vertailuaineena.

____ Τ' ~ 7021 5

Koe oli aloitettu käyttämällä emulsiovoiteita, joissa vaikuttavan aineen pitoisuus oli suuri, ja muita potilaita hoidettiin emulsiovoiteella, jossa vaikuttavan aineen pitoisuus oli alhaisin ollen kuitenkin aktiivinen. Hoitoa 5 jatkettiin kaksi viikkoa kahdesti päivässä ilman sidettä.

Vaikutus arvioitiin tarkkailemalla kolmea erilaista oiretta - tulehdusta, solukertymää ja hilseilemistä. Oireiden voimakkuutta ilmaistiin seuraavalla asteikolla 0-3.

0 = ei oireita 2 = voimakkaita oireita 10 1 = lieviä oireita 3 = hyvin voimakkaita oireita

Oireet arvioitiin ennen hoidon aloittamista (I), seitsemän päivän hoidon jälkeen (II) ja neljäntoista päivän hoidon jälkeen. Seuraavassa taulukossa esitetään pistemääräkeski-arvot (pisteiden summa jaettuna potilaiden lukumäärällä).

15 Käytettiin emulsiovoidetta, joka sisälsi 2 % vaikuttavaa yhdistettä .

Koeyhdiste Keskimääräinen pisteiden lukumäärä

Solukertymä Tulehdus Hilseily

_I II III I II III I II III

20

Kaavan Ia mukainen yhdiste 1,8 0,6 0,5 1,8 1,3 0,75 1,2 0,4 0

Kaavan Ib mukainen yhdiste 2,2 1 0,7 2,5 2,5 1,3 1,5 0,5 0

Kaavan Ie mukainen yhdiste 2,4 1,8 1,3 2,2 1,3 1,3 1,6 1,20,8 25

Keksinnön mukaisesti valmistettuja yhdisteitä voidaan käyttää farmaseuttisissa koostumuksissa, joilla on fosfodi-esteraasia estävä vaikutus ja jotka ovat pääasiassa käyttökelpoisia ihotautien hoitoon, joihin liittyy solujen sairaalloisen 30 nopea jakautuminen, sekä tällaisten tautien uusiutumisen ehkäisyyn, jolloin mainitut koostumukset koostuvat vaikuttavasta yhdisteestä, joka on kaavan I mukainen yhdiste tai tämän farmaseuttisesti hyväksyttävä happoadditiosuola ja valinnaisesti muista lääkinnällisesti vaikuttavista yhdisteistä sekoi-35 tuksessa tavanomaisten farmaseuttisten kantajien ja/tai lai-mennusaineiden kanssa.

9 70215

Vaikuttavan aineosan sopiva pitoisuus koostumuksessa on 0,1-0,8 %, edullisesti 0,2-2,0 %. Koostumukset voivat valinnaisesti sisältää muita farmaseuttisesti ja lääkinnällisesti vaikuttavia yhdisteitä, kuten antibiootteja, sytos-5 taatteja, prostaglandiineja, ditranolia, salisyylihappoa, tervaa, anti-inflammatorisia aineita, immunosupressantteja, glukokortikoideja ja, parenteraaliseen antoon soveltuvien koostumusten ollessa kyseessä, paikallispuudutusaineita. Glukokortikoidina on edullista käyttää triaminoloniaseto-10 nidia. On edullista valmistaa vaikuttavaa yhdistettä sisältävä koostumus paikalliskäyttöön sopivaksi, kuten emulsiovoiteiksi, voiteiksi, liuoksiksi, geeleiksi, suihkeiksi, vaahdokkeiksi, kiinnelaastareiksi jne.

Vaikuttava aineosa sopii hyvin käytettäväksi emäs-15 muodossa, mutta voidaan yhtä hyvin käyttää happoadditio-suoloja.

On edullista sisällyttää vaikuttava aineosa emulsiovoiteeseen, joka voidaan poistaa pesemällä.

Emulsiovoiteet voidaan valmistaa liuottamalla vaikut-20 tava aineosa alkoholityyppiseen liuottimeen, etupäässä pro-pyleeniglykoliin tai etyleeniglykoliin tai näiden pienen vesimäärän kanssa muodostettuun seokseen ja lisäämällä näin saatu liuos helposti levitettävään rasvafaasiin, joka sopii iholle.

25 Mainittu rasvafaasi voi olla setyylialkoholi, stea- ryylialkoholi, setostearyylialkoholi, parafiiniöljy, glyse-riinimonostearaatti jne.

Emulsiovoide voi myös sisältää emulgointiaineen, edullisesti polyoksietyleenisorbitaanin mono-oleaattia tai 30 monostearaattia, ja säilöntäaineen kuten bentsoehapon johdannaiset, edullisesti metyyli-p-hydroksibentsoaattia.

Emulsiovoiteet voivat edullisesti sisältää 0,25-2,0 % vaikuttavaa ainetta, 45-50 % glykolia, 23-27 % parafiiniöljyä, 11-15 % stearyylialkoholia ja valinnaisesti jopa 35 100 % muita apuaineita.

Vaikuttava yhdiste voidaan myös formuloida voide-muotoon, jota ei voida poistaa vedellä pesemällä, liittä- 7021 5 10 mällä vaikuttava yhdiste suoraan rasvataasiin.

Vaikuttava yhdiste voidaan myös formuloida liuos-tai tinktuuramuotoon, joka voi sisältää esim. 20-40 % pro-pyleeniglykolia tai dipropyleeniglykolia, 40-55 % 95-pro-5 senttistä etanolia ja jopa 100 % tislattua vettä.

Suihkekoostumukset voidaan valmistaa lisäämällä vaikuttavan yhdisteen propyleeniglykoliliuokseen rasvainen aine, esim. myristaatti, ja ponnekaasu (esim. freoni).

Injisoitavia liuoksia parenteraaliseen antoon, edul-10 lisesti ihonalaiseen tai ihonsisäiseen antoon, voidaan valmistaa liuottamalla vaikuttavan yhdisteen suolaa 0,72-pro-senttiseen vesipitoiseen natriumkloridiliuokseen ja säätämällä liuoksen pH-arvo 5 reen.

Farmaseuttiset koostumukset voidaan valmistaa farma-15 seuttisen teollisuuden tunnetuilla menetelmillä. Voidaan edetä sekoittamalla vaikuttava yhdiste ja valinnaisesti muita lääkinnällisesti vaikuttavia yhdisteitä sopiviin inert-tisiin, myrkyttömiin, tunnettuihin farmaseuttisiin kantajiin ja/tai apuaineisiin ja formuloida näin saatu seos lääkinnäl-20 lisesti sopivaan muotoon.

Keksintö esitetään yksityiskohtaisemmin seuraavien esimerkkien avulla.

Esimerkki 1 (-)-apovinkaminoli-3',415'-trimetoksibentsoaatin 25 valmistus 3,10 g (10,1 millimoolia (-)-apovinkaminolia liuotetaan 60 ml:aan vedetöntä dikloorimetaania, jonka jälkeen liuokseen lisätään 3,10 g vedetöntä natriumkarbonaattia ja 2,50 g (10,9 millimoolia) 3,4,5-trimetoksibentsoyyliklori-30 dia ja reaktiosesta sekoitetaan huoneen lämpötilassa 24 tuntia. Reaktioseosta laimennetaan 100 ml:11a vettä, orgaaninen faasi erotetaan ja vesipitoinen faasi uutetaan kahdesti 20 ml:11a dikloorimetaania. Yhdistetyt dikloorimetaanifaasit kuivataan magnesiumsulfaatilla, suodatetaan ja suodos 35 haihdutetaan vakuumissa kuiviin. Näin saadaan 4,50 g otsi kon mukaista tuotetta, saannon ollessa 89,1 %.

Il 7021 5

Yhdisteen kaava ^30^34^2^5' molekyylipaino 502,61 IR-spektri (filminä) : y maks 1725 cm ^ (-C = 0) ; 1620 cm ^ (=C=0) ^H-NMR-spektri (deuterokloroformissa) : <| : 1,01 (t, 3H, CH3CH0-) ; /: 3,72 (s, 6H, 2 kpl -OCH3) ; .·{ : 3,05 (s, 3H, -OCH3); / : 4,25 (s, 1H, rengasprot); <·Γ : 5,29 (s, 1H, -CH=) ; ^:5,4 (m, 2H, -OCH2-);d^: 7,0-7,8 (m, 6H, aromaattiset). MS-spektri: (m/e): 502(53), 432(100), 290(17), 261(41), 212(18) , 195 (35) .

O c /jX,7D = “2 2,0° (c = 0,7; dikloorimetaani) 10 Esimerkki 2 (-)-apovinkaminoli-3’,4’,5 ‘-trimetoksibentsoaattivety-tartraatin valmistus

Esimerkin 1 mukaan valmistettu yhdiste liuotetaan di- etyylieetteriin. Liuokseen lisätään D-viinihapon kyllästetty 15 dieetteriliuos kunnes vetytartaatti on täysin saostunut.

Suola suodatetaan erilleen ja kuivataan. Sp. 120-121°C.

IR-spektri (KBr) : , 1730 cm ^ (-C=0) ; 1640-1655 cm ^ (=C =C=) y ma K s / -X/ p = -8,5° (c = 1; pyridiini). Molekyylipaino 652,7. Esimerkki 3 20 (-)-9-nitroapovinkaminoli-31,41,51-trimetoksibentso- aatin ja (-)-ll-nitroapovinkaminoli-3',4',5'-trimetoksibent-soaatin valmistus 5 g (-)-apovinkaminoli-31,4',5'-trimetoksibentsoaattia liuotetaan 50 ml:aan jääetikkaa. Saatuun liuokseen lisätään 25 0°C:ssa ja sekoittaen seos, jossa on 20 ml jääetikkaa ja 10 ml väkevää typpihappoa (d = 1,52). Reaktioseos kaadetaan 350 ml:aan jääkylmää vettä ja pH säädetään arvoon 9 lisäämällä 25-prosenttista vesipitoista ammoniumhydroksidiliuosta. Emäksinen liuos uutetaan ensin 250 ml :11a ja sen jälkeen kah-30 desti 200 ml:11a dikloorimetaania. Yhdistetyt orgaaniset faasit kuivataan vedettömällä natriumsulfaatilla, suodatetaan ja suodos haihdutetaan kuiviin alipaineessa.

Tällä tavalla saatu isomeeriseos erotetaan kahdeksi komponentiksi kromatografisesti käyttäen silikageeliä (Kie-35 selgel 60) adsorbenttinä ja eluenttina bentseenin ja asetonin 10:2 seosta. Näissä olosuhteissa 9-nitrojohdannaisen 7021 5 12 R^-arvo on suurempi kuin 11-nitrojohdannaisen R^-arvo. Näin saatiin 1,7 g 9-nitrojohdannaista ja 1,8 g 11-nitrojohdannaista.

(_)-9-nitroapovinkaminoli-31,41,5'-trimetoksibentso-aatin fysikaaliset suureet ovat seuraavat:

Sp. 77-78°C. / ,χ/0 = -78,5° (c = 1; kloroformi). 1H-NMR-spektri (CDCl-j):^: 3,8 (s, 6H, 2 kpl 3,91 (s, 3H, 1 kpl CH30-) : 3,7 (d, 1H, H12) ;: 7,96 (d, 1H, Ηη) ? rV- : 8,1 (d, 1H, H^q) .

(-)-ll-nitroapovinkaminoli-31,4',5'-trimetoksibent-soaatin fysikaaliset suureet ovat seuraavat:

Sp. 72-73°C. /·Χ./0 = -134,3° (c = 1, kloroformi). 1H-NMR-spektri (CDC13):J : 3,8 (s, 6H, 2kpl CHjOJyrf: 3,9 (S, 3H, 1 kpl CH30-);c/': 7,56 (d, 1H, H 9) ; : 8,1 (d, 1H, Η10);λ/": 8,9 (d, 1H, H^) .

Esimerkki 4 9-nitroapovinkaminoli-3',41,51-trimetoksibentsoaatti-vetykloridin ja ll-nitroapovinkaminoli-3',4',5'-trimetoksi-bentsoaattivetykloridin valmistus

Esimerkin 3 mukaan valmistettu 9-nitro- tai ll-nitroapovinkaminoli-3 ',4',5'-trimetoksibentsoaatti liuotetaan metanoliin ja liuoksen pH säädetään lisäämällä kloorivedyn ja metanolin liuos. Muodostunut vetykloridisuola suodatetaan erilleen, pestään ja kuivataan. 9-nitrojohdannaisen vety-kloridi sulaa 144-150°C:ssa, kun taas 11-nitrojohdannaisen vetykloridi sulaa 141-144°C:ssa.

Claims (14)

7021 5 13

1. Menetelmä uusien terapeuttisesti käyttökelpoisten kaavan I mukaisten yhdisteiden 5 R1 ifSr-·© J 10 0-CH2 C2H5 (I! CH3° . C"' " li 'vf^ |! XJ 0 CH-xO γ i,CH3 1 2 15 jossa joko molemmat R ja R ovat vety tai toinen symboleis-1 2 ta R ja R on vety ja toinen nitroryhmä, ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävien happoadditiosuolojen valmistamiseksi, tunnettu siitä, että annetaan apovinkaminolin tai sen happoadditiosuolan reagoida 3,4,5-trimetoksibentsoehapon tai 20 sen asylointia aikaansaavan reaktiivisen johdannaisen kanssa ja erotetaan kaavan Ia mukainen yhdiste tai Dj© 25 I I ! da) CH3° C "° ' ‘ C2»5 jif II c„3o V 0 30 1 och3 muunnetaan se farmaseuttisesti hyväksyttäväksi happoaddi-tiosuolaksi tai mikäli halutaan, nitrataan kaavan Ia mukainen yhdiste ja erotetaan näin saadun kaavojen Ib ja Ie 35 mukaisten yhdisteiden seoksen molemmat komponentit ja mikäli halutaan, muunnetaan näin saatu kaavan Ib tai Ie mukainen yhdiste farmaseuttisesti hyväksyttäväksi happoadditiosuolaksi. 14 ho2 7021 5 i f N 1: H 1 'N -n -, 5 «Λ-Ά 6" 2 C2H5 <Ib> CH,0 ' "(f s r ί [I ^ I o CH^O-

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan kaavan Ia mukainen apo-vinkaminoli-3’,4',5'-trimetoksibentsoaatti tai sen farmaseut-25 tisesti hyväksyttävä happoadditiosuola. OvÄ

30. I i (Ia) O' 2 C H CH-0 c- JU ° 35 “3° i 0CH3 7021 5

2 LXJ 15 ,CH2 C,H, <ICl ch3o c'° - li π ! ° CH3° Ϊ CH.,0 20 3

3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan kaavan Ib mukainen 9-nit-roapovinkaminoli-3',4',5'-trimetoksibentsoaatti tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävä happoadditiosuola.

3 I

10 CH30 ArAi

4. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tun nettu siitä, että valmistetaan kaavan Ie mukainen 11-nitroapovinkaminoli-3',4',5'-trimetoksibentsoaatti tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävä happoadditiosuola. 20 r—ί °2n I i j nil" - ^ >2 C0H,- O 2 5 CH^O c" 25. f| v'f O <Ic> CH-jO J ί ch30

5. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, t u n - 30. e t t u siitä, että käytetään asylointiaineena 3,4,5- trimetoksibentsoyylikloridia.

5 N02 rVf- CU,'> o C”2 ^2H5 CH-,0 C (Ib) 0° ch7o i CH30

6. Patenttivaatimuksen 1 tai 5 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että asylointi suoritetaan orgaanisen liuottimen läsnäollessa.

7. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tun nettu siitä, että nitraus suoritetaan jääetikan läsnäollessa . 16 7021 5

8. Patenttivaatimuksen 1 tai 5 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että nitraus suoritetaan noin 0°C:n lämpötilassa. Il 7 n 9 1 c; Patentkrav ' U ^ ' D 17