FI70019B - Analogifoerfarande foer framstaellning av terapeutiskt anvaendbara och isynnerhet vid behandling av psoriasis laempliga poycykliska foereningar och mellanprodukter som anvaends vi d oerfarandet - Google Patents

Description

7001 9

Analogiamenetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten ja erityisesti psoriasiksen hoitoon soveltuvien polysyklisten yhdisteiden valmistamiseksi ja menetelmässä käytettävät välituotteet 5

Keksinnön kohteena on menetelmä, uusien, terapeuttisesti käyttökelpoisten ja erityisesti psoriasiksen hoitoon soveltuvien polysyklisten yhdisteiden valmistamiseksi, joilla on yleinen kaavan (I) 10 R1 .

... .f ... Ί

| A 1 1 H M

2 N - R . ' i ^ ' 'Di

i I

15 CE^ C2H5 CH. O / 2

3 O

r,-r, (I) /’ V . q ^ CH O /' . - „

O

CH,a 20 3

1 2 1 jossa R on metoksi tai halogeeni ja R on vety tai R

2 on vety ja R on halogeeni, sekä niiden happoadditio-suolojen valmistamiseksi. Lisäksi keksintö koskee menetelmässä käytettäviä välituotteita, jotka ovat uusia 25 yhdisteitä, ja joilla on yleinen kaava (II) 0 j H (II) K2 30 HO-H C · ;"·· .. ' 12 jossa R ja R tarkoittavat samaa kuin edellä, tai niiden happoadditiosuoloja.

Yleisten kaavojen (I) ja (II) mukaiset yhdisteet ovat siis uusia yhdisteitä.

35 Näitä yhdisteitä rakenteellisesti lähinnä olevia tunnettuja yhdisteitä ovat 11-metoksiapovinkaminoli (nimitetään myös apovinkinoliksi) tai sen trimetoksibentso-aatti. Näiden yhdisteiden valmistus luonnon vinkiinistä 2 70019 ja niiden selektiivinen verisuonia laajentava vaikutus aivoihin on selitetty HU-patentissa 170 888 ( = US-pa- tenttijulkaisu 4 065 458 = DE-kuulutusjulkaisu 2 674 789).

Nämä tunnetut yhdisteet ovat yhdisteitä, joilla yleisis- 1 2 5 sä kaavoissa (I) ja (II) R on vety ja R metoksi.

Yhdiste, jolla on yleinen kaava (II), jossa R^ 2 on metoksi ja R on vety, voidaan valmistaa 10-metoksi- apovinkamiinista. 10-metoksi-apovinkamiini selostettiin ensimmäisen kerran DE-hakemusjulkaisussa 2 458 164, toisen 10 menetelmän sen valmistamiseksi keksi Gy. Kalaus muiden muassa ,/Heterocycles 6 (3) (1977) 32Γ/.

Yleisen kaavan (II) mukaisia yhdisteitä, joissa 1 2 R on halogeeni ja R on vety (tai päinvastoin), voidaan valmistaa 10- tai 11-halogeeni-apovinkamiinista.

15 10- ja 11-halogeeni-apovinkamiinit ovat yhdistei tä, joita todellisuudessa ei tähän mennessä vielä ole valmistettu, vaikka ne kuuluvatkin DE-hakemusjulkaisun 2 458 164 suojapiiriin. Niiden valmistus ja fysikaaliset ominaisuudet on esitetty tämän selityksen esimerkeissä 20 3 ja 6.

Sekä HU-patenttijulkaisussa 170 888 että DE-hakemus julkaisuissa 2 458 164 kuvataan yhdisteitä, jotka vaikuttavat verisuonien tilaan. Keksinnön mukaisissa yhdisteissä sen sijaan on kysymys aineista, jotka estävät 25 entsyymin fosfodiesteraasi aktiivisuuden ja joita ensisijassa käytetään sairaalloiseen solulisäkasvuun liittyvien ihotautien parantamiseen tai näiden sairauksien uu-delleenesiintymisen torjumiseen.

Keksinnön mukaiselle menetelmälle uusien kaavan 30 (I) mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi on tunnusomais ta, että saatetaan yhdiste, jolla on yleinen kaava (II)

Rl I ' : f' - R2 . ^ H N (II) 35 /"N v r·'"' i ] i

L - .1 J

HO-H C .·· · C2H5 3 70019 1 2 jossa R ja R tarkoittavat samaa kuin edellä, tai sen suolaa reagoimaan 3,4,5-trimetoksibentsoehapon tai tämän hapon asyloimisreaktioon pystyvän johdannaisen kanssa ja haluttaessa saatu tuote muutetaan happoadditiosuolaksi.

5 Kaavan (I) mukaisia yhdisteitä valmistetaan kaavan (II) mukaisista yhdisteistä, joita voidaan saada 10-metok-si-apovinkamiinista /Heterocycyles 6 (3) (1977) 321/ tai 10- tai 11-bromi-apovinkamiinista (valmistettu esimerkkien 3 ja 6 mukaisesti) selektiivisesti pelkistämällä. Selek-10 tiivisenä pelkistimenä voidaan käyttää kompleksisia me-tallihydridejä, edullisesti litiumaluminiumhydridiä tai natriumdihydro-bis(2-metoksietoksi)aluminaattia.

Saadut yleisen kaavan (II) mukaiset yhdisteet saatetaan reagoimaan 3,4,5-trimetoksibentsoehapon tai 15 tämän hapon asyloimisreaktioon pystyvän johdannaisen kanssa.

Asyloiminen tapahtuu orgaanisessa liuottimessa. Sopivia ovat bentseeni ja bentseeni-homologit, klooratut hiilivedyt, alifaattiset ketonit sekä pyridiini. Jos 20 asylointi tapahtuu 3,4,5-trimetoksibentsoehapon haloge-nidilla, niin vapautuvan halogeenivetyhapon sitomiseksi lisätään ekvivalentin määrä tai pieni ylimäärä haponsito-misainetta. Happoakseptoreiksi sopivat esimerkiksi alkali-karbonaatit, aikaiivetykarbonaatit ja orgaaniset emäkset, 25 esim. pyridiini. Jos asyloidaan suoraan 3,4,5-trimetoksi-bentsoehapolla, lisätään reaktioseokseen katalyyttinen määrä jotakin happoa, edullisesti kloorivetyhappoa tai rikkihapppoa tai karboksyyliryhmiä aktivoivaa ainetta ja/tai vettä poistavaa ainetta. Karboksyyli-ryhmiä ak-30 tivoivana aineena voidaan käyttää esimerkiksi halogenoi-tua fenolia, edullisesti pentakloorifenolia, ja vettä poistavana aineena esimerkiksi N,N'-disykloheksyylikar-bodi-imidiä. Asvloiraislämpötila on -20°C:n ja reaktioseok-sen kiehumapisteen välillä, edullisesti 20-60°C.

35 Reaktioseoksesta yhdiste eristetään uuttamalla ja/tai haihduttamalla.

4 70019

Haluttaessa voidaan saaduista yleisen kaavan (I) yhdisteistä valmistaa fysikologisesti siedettävä happo-additiosuola. Epäorgaanisista happoadditiosuoloista on hydrokloridilla, sulfaatilla ja fosfaattina ja orgaa-5 nisistä suoloista vetytartraatilla, sukkinaatilla, sit-raatilla ja askorbaatilla edulliset ominaisuudet. Suolan muodostusta varten alkoholiin, dietyylieetteriin tai asetoniin liuotettu happo saatetaan kosketukseen yleisen kaavan (I) mukaiseen yhdisteen kanssa. Suolanmuodostus-10 reaktiossa pH on 3-6.

Kuten jo edellä todettiin, estävät kaavan (I) mukaiset yhdisteet entsyymin fosforiesteraasi aktiivisuuden ja niitä käytetään ensisijassa sairaalloiseen so-lulisäkasvuun liittyvien ihotautien parantamiseen tai 15 näiden sairauksien uudelleenesiintymisen torjumiseen.

Orvaskeden sairaalloiseen lisäkasvuun liittyvät ihotaudit ovat suhteellisen yleisiä ja niitä esiintyy muutamalla prosentilla kokonaisväestöstä. Nämä sairaudet voivat olla joko hyvänlaatuisia tai pahanlaatuisia, 20 esimerkkeinä mainittakoot psoriasis atopias dermatitis, primaarinen kosketus-dermatitis, allerginen kosketus-dermatitis, baso- ja väkäsolusyöpä, suomutauti, prema-ligni liikasarveistuminen, valolla aiheutettu sarveis-tuma akne ja tali-ihottuma. Tietyt tautimuodot esiin-25 tyvät vain ihmisillä, muut ihmisillä ja eläimillä.

Koska osa sairaalloiseen solulisäkasvuun liittyvistä ihotaudeista, esimerkiksi proriasis, ei esiinny eläimillä, voidaan yhdisteiden proriasiksen vastainen vaikutus eläinkokeilla vain epäsuorasti tehdä uskotta-30 vaksi.

Voorhees totesi muiden joukossa /Ärch. Derm. 104 (1971) 359-365/, että sairaalloiseen solulisäkasvuun liittyy c-AMP-tason (c-AMP: syklinen adenosiini-monofos-faatti) aleneminen. On tunnettua, että c-AMP syntyy 35 adenyylisyklaasin vaikutuksesta ja hajoaa fosfodieste-raasin vaikutuksesta. Voorhees'in onnistui vaikuttaa menestyksellisesti psoriaasisprosessiin aineilla, jotka 5 70019 kiihottavat adenyylisyklaasin toimintaa (esim. norepi-nefriini) tai estävät fosfodiesteraasin toiminnan (esim. papaveriini).

Mallikokeita suunniteltaessa lähdettiin siitä, 5 että Voorhees'in toteamus on myös kääntäen oikea: kun jollekin yhdisteelle voidaan osoittaa, että se estää fosfodiesteraasin toiminnan, niin tehdään siten epäsuoralla tavalla uskottavaksi, että yhdiste on sopiva psoriasiksen tai muiden sairaalloiseen soluiisäkasvuun 10 liittyvien tautien parantamiseen. Tämä olettamus vahvistettiin myös myöhemmin: yhdisteet, joilla in vitro oli fosfodiesteraasia estävä vaikutus, osoittautuivat myös kliinisissä kokeissa sopiviksi proriasiksen hoitoon .

15 Mallikokeet tehtiin eläinkehokudoksesta eriste tyllä fosfodiesteraasilla. Entsyymin eristäminen (rotan aivoista, naudan aivoista ja naudan sydämestä) suoritettiin H.V. Richenberg'in menetelmän mukaisesti /Biochem. Biophys. Acta 302 (1973) 507, eristetty ent-20 syymi puhdistettiin J.G. Hardman*in ja E. W. Sutherland * in menetelmän mukaisesti /J. Biol. Chem. 240 (1965) 3704/ ja puhdistetun entsyymin aktiviteetti mitattiin lopuksi G. Pöch'in radioisotooppimenetelmän mukaan /N.S. Arch. Pharmacol. 268 (1971) 272/. Tähän käytetään ylimäärää 25 hierrettyä c-AMP (10,1 mmoolia c-AMP substraattina, 3-H-c-AMP 2,59 K Bq), ja entsyymin aktiivisuus mitattiin 20 minuutin inkubointiajän kuluttua sekä ilman estoai-netta että tutkittavan yhdisteen läsnäollessa. Yhdisteestä valmistettiin vesipitoisella kloorivetyhapolla tai 30 dimetyylisulfoksidilla 1-millimoolinen kantaliuos, ja tästä lisättiin inkuboituihin entsyymi-preparaattei-hin erilaisia määriä, niin että inkuboiduissa näytteissä _7 _ g _ c yhdisteen väkevyys oli 5 x 10 , 1 x 10 , 1 x 10 , -5 -5 5 x 10 ja 10 moolia/litra. Samalla tavalla suori-35 tettiin myös rinnakkaiskokeita käyttäen papaveriinia vertailuaineena.

6 70019

Ilman estoainetta inkuboidun entsyymin aktiivisuus katsottiin 100 %:ksi ja yleisen kaavan (I) mukaisia yhdisteitä tai papaveriinia sisältävien liuosten aktiivisuudet ilmaistiin prosenttina verrokista. Naudan sydämestä 5 eristetyn entsyymin mittauksista saatiin seuraavat tulokset .

Tutkittu yhdiste Entsyymiaktiivisuus prosenttei- 10 (entsyymi-inhi- na verrokista eri väkevyyksillä biittori)__5xl0~6 lxl0~'5 5xlQ~5 mol/1 10-metoksi-apovinkami-noli-3',4'5'-trimetoksi- bentsoaatti (DMS0:ssa) 59,1 40,3 23,3 15 10-bromi-apovinkaminoli-3',4'5'-trimetoksibentso- aatti (DMSO:ssa) 67,8 61,8 (-)-11-bromi-apovink -aminoli-3',4',5'-tri- 20 metoksibentsoaat- ti‘HCl (vedessä) 31,9 21,8 21,8 papaveriini·HC1 (vedessä tai DMSO:ssa) 91,3 82,7 43,7 25

Taulukosta näkyy, että kaikkien kolmen tutkitun yhdisteen entsyymiä estävä vaikutus on olennaisesti parempi kuin tunnetulla papaveriinilla.

Ensimmäiset kliiniset kokeet suoritettiin erilai-^ silla ulkonaiseen käyttöön sopivilla valmisteilla (salva, voide, liuos, tinktuura, pasta, aeroseoli). Koevoi-teet sisälsivät 2 %, 1 %, 0,5 %, 0,25 % tai 0,1 % yleiseen kaavan (I) yhdisteitä.

Koehenkilöt valittiin psoriasiksesta kärsivien 35 potilaiden joukosta. Koehenkilöiden valinnassa oli pe- 7 70019 rustavana seikkana, että tutkitut potilaat eivät samanaikaisesti saaneet pääsairauttaan vastaan käytettyä systemaattista (immunosupressiivista, sytostaattista tai glukokordikoidi-)hoitoa.

5 Valitut potilaat tutkittiin viiden hengen ryhmis sä ns. Plaque-menetelmän mukaisesti. Symmetrisesti järjestyneistä ihon muutoksista käsiteltiin kulloinkin toista puolta vaikutusainepitoisella voiteella ja toista tehottomalla voiteella (placebo). Muissa ko. ihon koh-10 dissa saivat potilaat muita ulkonaisia käsittelyjä, muiden muassa myös vertailuna käytettyjä ja proriasiksen hoitoon levitettynä käytettyä voidetta, joka vaikutus-aineena sisälsivät flumetasoni-pivalaattia ja salisyylihappoa .

15 Tutkimus aloitettiin voiteella, jolla oli suurin vaikutusainepitoisuus ja jatkettiin alenevalla pitoisuudella. Pienimmän vielä tehokkaan annoksen sisältävällä voiteella käsiteltiin muita potilaita. Voidetta levitettiin päivittäin 2-3 kertaa sairastuneille ihon alueille, 20 vaivojen häviämiseen tai vaimentumiseen asti (yleensä 1-6 viikkoa).

Vaikutus arvioitiin tarkkailemalla kolmea oiretta - tulehdusta, tiivistymistä, hilseilyä. Yksittäisten oireiden voimakkuus arvioitiin luvuilla 1-3 ja lasket-25 tiin kokonaispisteluku, joka toimi oireiden heikkenemisen mittana. Tulokset tulkittiin matemaattisesti tilastollisin menetelmin.

Tulokset osoittivat yksiselitteisesti, että yleisen kaavan (I) mukaisia yhdisteitä sisältäviä val-30 misteita voidaan käyttää tuloksellisesti psoriasiksen hoitoon. Vahingollisia sivuvaikutuksia ei havaittu missään tapauksessa.

Yleisen kaavan (I) mukaista yhdisteistä ja niiden happoadditiosuoloista voidaan valmistaa lääkeval-3 5 misteita, jotka mahdollisten muiden farmakologisesti vaikuttavien aineiden lisäksi sisältävät kanto- ja apuaineita.

8 70019 Lääkevalmisteet sisältävät vaikutusainetta 0,1-8 %, edullisesti 0,2-2,0 %. Lääkevalmisteet sisältävät mahdollisesti muita farmaseuttisesti vaikuttavia aineita, esimerkiksi antibiootteja, solun kasvua ehkäi-5 seviä aineita, prostaglandiineja, ditranolia, salisyli-happoa, tervaa, tulehdusta estäviä aineita, immunosupres-siivisia aineita, glukokortikoideja ja ruoansulatuskanavan ulkopuolisen antamisen ollessa kysymyksessä myös paikallispuudutusaineita. Glukokortikoidina käytetään 10 edullisesti triamsinoloniasetonidia. Edullisesti valitaan ulkonaista käyttöä varten tarkoituksenmukaisia lääkeainemuotoja, kuten voide, salva, liuos, hyytelö, aerosoli, aerosolivaahto, laastari jne.

Vaikutusainetta käytetään tarkoituksenmukaises-15 ti vaoaan emäksen muodossa, kuitenkin voidaan käyttää myös happoadditiosuoloja, esimerkiksi tartraattia.

Eräs edullinen voidetyyppi on poispestävä voide.

Voiteen valmistamiseksi liuotetaan vaikutusaine alkoholiin, esimerkiksi propyleeni- tai dipropyleeni-20 glykoliin tai niiden seokseen, jossa on vähän vettä ja saatu liuos sekoitetaan hyvin siveltävien, ihon-sukuisten rasvafaasien kanssa. Rasvafaasi voi sisältää esimerkiksi setyyli-, stearyyli- ja setostearyy-lialkoholia, parafiiniöljyä, glyseriinimonostearaattia 25 jne. Lisäksi voi voide sisältää myös emulgaattoreja, edullisesti polyoksietyleenisorbitaani-monolauraattia tai monostearaattia ja säilöntäaineena erilaisia bentsoehappo-johdannaisia, edullisesti p-hydroksibentsoe-happo-metyyliesteriä.

30 Edullisesti voide sisältää 0,25-2,0 % vaikutusai netta, 45-50 % glykolia, 23-27 %· parafiiniöljyä, 11-15 % stearyylialkoholia ja mahdollisesti edellä mainittuja apuaineita tai joitakin niistä.

Vaikutusaine voidaan myös yhdistää suoraan ras-35 vafaasiin; tässä tapauksessa saadaan voide, jota ei vedellä voi pestä pois.

9 70019 Näillä vaikutusaineilla, edullisesti niiden hap-poadditiosuoloilla, voidaan valmistaa myös liuoksia, jotka liuottimena sisältävät esimerkiksi 20-40 % pro-pyleeniglykolia tai dipropyleeniglykolia, 40-50 % 5 96-%:sta etanolia ja loput tislattua vettä. Aerosolik si muokkaamista varten sekoitetaan vaikutusaineen pro-pyleeniglykolilla valmistettu liuos tarkoituksenmukaisesti jonkun rasva, edullisesti isopropyylimyristaatin kanssa ja ponneaineena käytetään edullisesti Freon1 ia. 10 Aerosolivaahdon valmistamiseksi voidaan vaiku tusaineen alkoholi-liuos lisätä esimerkiksi seokseen, jossa on 0,5-1,5 % setostearyylialkoholia, 1-3 % bentsyylialkoholia, 15-20 % polyoksietyleenisorbi-taani-mono-oleaattia tai -monostearaattia ja 25-30 % 15 vettä, sekä ponnekaasuksi Freon'ia.

Ruoansulatuskanavan ulkopuolista, edullisesti ihonalaista tai ihonsisäistä antamista varten voidaan valmistaa injektio-liuoksia. Tätä tarkoitusta varten liuotetaan vaikutusaine suolansa muodossa 0,72-%:seen 20 vesipitoiseen keittosuolaliuokseen ja pH-arvo asetetaan 5 reen.

Keksintöä valaistaan lähemmin seuraavin suoris-esimerkein.

Esimerkki 1 25 10-metoksi-apovinkaminoli 0,6 g (1,64 mmoolia) 10-metoksi-apovinkamiinia liuotetaan 18 ml:aan vedetöntä bentseeniä. Liuokseen lisätään huoneen lämpötilassa jatkuvasti sekoittaen 0,8 ml natriumhydro-bis(2-metoksietoksi)aluminaattia 30 ja sekoitetaan vielä yhden tunnin ajan. Reaktion päätyttyä lisätään 2 ml etyyliasetaattia ja reaktioseos haihdutetaan tyhjössä. Haihdutusjäännös liuotetaan 15 mlraan 2,5-%:sta rikkihappoa ja liuoksen pH-arvo asetetaan ulkoisesti jäähdyttämällä 40-%:sella 35 NaOHrlla 10 reen. Sitten uutetaan dikloorimetaanilla (15 ml, 10 ml, 5 ml). Orgaaninen faasi kuivataan 7001 9 10 magnesiumsulfaatilla, suodatetaan ja haihdutetaan tyhjössä. öljymäinen jäännös kiteytetään uudelleen aseto-nitriilistä. Saadaan 0,45 g (81,2 %) tuotetta. Sulamispiste: 148-150°C.

5 Summakaava M = 338,45 21 26 2 2 _1

Ir-kirjo (KBr):Λ 1642, 1603 cm (=C=C) XH-NMR-kirjo (deuterokloroformissa): f - 0,94 (t, 3H, CH3CH2~) , 2,90 (s, 1H, HO-), 3,84 (s, 3H, CH-jO-) , 4,10 (s, 1H, optinen-H), 4,55-4,75 (q, 2H, HO-CH2)-, 5,03 10 (s, 1H, =C=CH-), 6,81-7,56 (m, 3H, H aromaattinen)

Massakirjo: 338/26, 309/89, 307/5, 290/8, 268/100, 266/38, 237/21, 208/10, 115/9, 77/14, 43/64, 30/14.

Esimerkki 2 10-metoksi-apovinkaminoli-31,4',51-trimetoksibentsoaatti 15 0,45 g (1,33 mmoolia) 10-metoksi--apovinkaminolin liuotetaan 10 ml:aan vedetöntä dikloorimetaania. Liuokseen lisätään 0,45 g vedetöntä natriumkarbonaattia ja 0,34 g (1,48 mmoolia) 3,4,5-trimetoksibentsoyylikloridia. Reaktioseosta sekoitetaan huoneen lämpötilassa 24 tun-20 tia ja lisätään sitten 15 ml vettä. Orgaaninen faasi erotetaan ja vesipitoista faasia ravistellaan vielä kahdesti kulloinkin 5 ml :11a dikloorimetaania. Yhdistetyt orgaaniset faasit kuivataan magnesiumsulfaatilla, suodatetaan ja haihdutetaan tyhjössä. Haihdutusjäännös 25 kiteytetään metanolista. Saadaan 0,45 g (63,1 %) tuotetta, joka sulaa 167-168°C:ssa.

Summakaava: C..H..N„0. M = 532,63 31 36 2 6 _i IR-kirjo (KBr) : ,\ 1725 cm (=C=0), 1655 cm (=C=C) ^ max h-NMR-kirjo (deuterokloroformissa): S = 30 0,97 (t, 3H, CH3CH2-), 3,73 (s, 6H, CH 0-), 3,83 (s, 6H, CH30), 4,17 (s, 1H, aptinen-H), 5,23 (s, 1H, =C=CH-), 5,27-5,45 (q, 2H -OCH2~), 6,70-7,52 (m, 5H, H aromaattinen) Massakirjo (m/e): 532/33, 501/100, 462/91, 322/20, 307/8, 292/85, 252/50.

11 7001 9

Esimerkki 3 10-bromi-apovinkaminoli 1,50 g (3,61 mmoolia) 10-bromi-apovinkamiinia liuotetaan 45 mlraan vedetöntä bentseeniä ja liuokseen lisätään 5 tiptutaen huoneen lämpötilassa jatkuvasti sekoittaen 4,5 ml natriumhydro-bis(2-metoksietoksi)aluminaattia (REDAL). Seosta sekoitetaan kahden tunnin ajan. Reaktion loputtua seokseen lisätään 10 ml etyyliasetaattia ja haihdutetaan tyhjössä. Jäännös liuotetaan 150 mitään 2,5-%:sta rikkihappoa ja 10 liuos tehdään ulkopuolisesti jäähdyttämällä emäksiseksi pH 10 teen 40-%tsella natriumhydroksidi-liuoksella. Liuosta uutetaan sitten 120, 110 ja 100 ml tila dikloorimetaania. Orgaaninen faasi kuivataan magnesiumsulfaatilla, suodadetaan ja haihdutetaan sitten tyhjössä, öljymäinen jäännös (1,8 g) 15 kiteytetään 10 mltsta metanolia. Saadaan 1,10 g (78,4 %) tuo tetta, joka sulaa 178-180°Ctssa.

Alkuaineanalyysi ^Q^^Br^O:lie (M = 388,33):

Laskettu: C 61,86 % H 6,23 % N 7,22 % Löydetty: C 61, 92% H 6,43 % N 6,82 %.

20 Infrapunakirjo (KBr) λ 1630 cm ^ (=C=C=).

/> max H-NMR-kirjo (deuterokloroformissa) : ri = 0,96 (m, 3H, CH3CH2-) , 2,0 (s, 1H, -OH), 4,12 (s»lH, optinen-H), 4,56-4,75 (m, 2H, HO-O^-), 5,12 (s, 1H, -C=), 7,24-7,56 (m, 3H, Haromaattinen).

25 Massakirjo (m/e): 386/47, 388/48, 369/2, 371/3, 359/95, 339/8, 341/6, 316/100, 318/88, 237/13.

Lähtöaine 10-bromi-apovinkamiini valmistetaan seuraavasti.

4,60 g (10,6 mmoolia) 10-bromi-vinkamiinia ja 92 ml 30 asetanhydridiä keitetään 20 tuntia palautusjäähdyttäen.

Tummanruskea reaktioseos haihdutetaan tyhjössä, jäljelle jäänyt öljy sekoitetaan 150 ml:n kanssa vettä ja tehdään jäähdyttäen 40-%:sella Na0H:lla alkaliseksi pH-arvoon 11. Seosta ravistellaan 80, 70 ja 60 ml:n kanssa dikloorimetaa-35 nia, yhdistetyt uutteet kuivataan magnesiumsulfaatilla, 12 7001 9 suodatetaan ja haihdutetaan tyhjössä. Haihdustusjäännös kiteytetään 15 ml:sta metanolia. Saadaan 3,60 g (81,7 %) 10-bromi-vinkamiinia, joka sulaa 163-165°C:ssa.

Alkuaineanalyysi ^1^2361^^1^ = 415,33): 5 Laskettu: C 60,73 % H 5,58 % N 6,75 % Löydetty: C 60,74 % H 5,54 % N 6,69 %.

IR-kirjo (KBr): \ 1718 cm-1 (=C=0), 1620 cm"1 (=C=C=) J Λ max 1H-NMP-kirjo (DMS0-d6): Λ = 0,94 (t, 3H, CH^CH9-), 1,85 (q 2H, CH CH,-), 3,89 (s, 3H, 10 6 Δ s δ -0CH3), 4,05 (s, 1H, optinen-H), 618 (s, 1H, =C=CH-), 7,17-7,57 (m, 3H, Haromaattinen)

Massakirjo (m/e): 417/35, 415/36, 388/100, 386/99, 347/90, 345/95, 331/8, 329/9, 306/9, 187/6.

15 Esimerkki 4 10-bromi-apovinkaminoli-3',4',5'-trimetoksibentsoaatti 0,50 g (1,29 mmoolia) 10-bromi-apovinkaminolia liuotetaan 15 ml:aan vedetöntä pyridiiniä ja liuokseen lisätään 0,4 g (1,74 mmoolia) 3,4,5-trimetoksibentsoyylikloridia.

20 Reaktioseoksen annetaan seistä huoneen lämpötilassa 24 tun tia ip haihdutetaan sitten tyhjössä. Jäännöstä hierretään 5-%:sella vesipitoisella natriumvetykarbonaatti-liuoksella (30 ml). Jähmettyvä aine suodatetaan erilleen, pestään 15 ml:11a vettä ja kiteytetään uudelleen 5 ml:sta metanolia. 25 Saadaan 0,55 g (73,5 %) tuotetta, joka sulaa 121-122°C:ssa.

Analyysi C30H33BrN2®5: lie ( M = 581,49)

Laskettu: C 61,96 % H 5,72 % N 4,82 % Löydetty: C 62,07 % H 5,81 % N 4,90 % IR-kirjo (KBr): > 1705 cm 1 (=C=0), 1640 cm 1 (=C=C=).

1 max 30 ^H-NMR-kirjo (deutrerokloroformissa):λ = 1,00 (t, 3H, CH3CH2-), 3,73 (s, 6H, 2x -OCH-j), 3,86 (s, 3H, -0CH3), 4,16 (s, 1H, optinen-H), 5,2-5,5 (m, 3H, -0CH-- + —CH=), 7,1-7,6 (m, 5H, H ... ).

2 ιιιι^ιι aromaattinen

Massakirjo (m/e): 580/39, 582/38, 551/100, 553/98, 510/86, 35 512/79, 370/19, 372/14, 340/33, 342/25, 300/23, 302/19, 281/26, 212/23, 207/20 13 7001 9

Esimerkki 5 10-bromi-apovinkaminoli-3',41,51-trimetoksibentsoaatti- vetytartraatti_

Esimerkin 4 mukaisesti saatu tuote liuotkaan dietyyli-5 eetteriin. Liuokseen lisätään D-viinihapolla kyllästettyä dietyylieetteriä kunnes saostuminen on täydellinen. Saatu suola suodatetaan erilleen ja kuivataan. Se sulaa 118-120°C:ssa.

M = 731, 58 .

IR-kirjo (KBr): > 1710 cm ^ (=C=0).

'max 10 Esimerkki 6 (-)-11-bromi-apovinkaminoli 0,40 g:sta (0,88 mmoolia) (+)-11-bromi-apovinkamiini-hydrokloridia vapautetaan emäs kaksivaihe-systeemissä, jossa on 5 ml dikloorimetaania ja 5-%:sta vesipitoista natriumkar-15 bonaatti-liuosta. Orgaaninen faasi erotetaan, kuivataan magnesiumsulfaatilla, suodatetaan ja haihdutetaan tyhjössä. Jäännös liuotetaan 5 ml:aan vedetöntä tetrahydrofuraania.

Tähän liuokseen lisätään huoneen lämpötilassa jatkuvasti sekoittaen suspensio, jossa on 0,10 g litiumaluminiumhydridiä 20 10 ml:ssa vedetöntä tetrahydrofuraania. Seosta sekoitetaan vielä kahden tunnin ajan, sitten pelkistimen ylimäärä hajotetaan lisäämällä 2,5 ml etyyliasetaattia. Epäorgaaninen sakka suodatetaan pois ja suodos haihdutetaan tyhjössä kuiviin. Jäännös liuotetaan 15 ml:aan 2,5-%:sta rikkihappoa, 25 liuos tehdään emäksiseksi pH 8:aan väkevällä ammoniakilla ja uutetaan 3x5 ml:11a dikloorimetaania. Yhdistetyt orgaaniset faasit kuivataan magnesiumsulfaatilla, suodatetaan ja liuotin poistetaan tislaamalla. Tuote käytetään ilman lisäpuhdistusta jatkoreaktioihin. Saanto: 0,26 g (76,5 %) 30 Massakirjo (m/e %) : 386 (M+, C^H^^OBr, 100) 385/53, 371/89, 357/80, 330/31, 329/26, 328/25, 327/16, 316/23, 300/16, 286/27, 271/12, 249/10.

I~B\7 = -120,3°; = -144,2° (c = 1,07, dikloorime- D 546 .

taani).

14 7 001 9 Lähtöaine tätä esimerkkiä varten valmistetaan seuraa-valla tavalla.

1,00 g (2,21 mmoolia) (+)-ll-bromi-14-okso-15-hyd-roksi-imino-E-homoeburnaanihvdrokloridia (valmistettu 5 GB-patenttijulkaisun 2 036 721 mukaan) kuumennetaan seoksessa, jossa on 37,2 ml vedetöntä metanolia ja 13,5 ml väkevää rikkihappoa, hauteella, jonka ulkoinen lämpötila on 125°C, 8 tunnin ajan. Sitten reaktioseos kaadetaan 20 ml:aan jäävettä, liuos asetetaan väkevällä ammoniakilla pH 8:aan 10 ja uutetaan 3x8 ml :11a dikloorimetaania. Yhdistetyt or gaaniset faasit kuivataan magnesiumsulfaatilla, suodatetaan ja haihdutetaan tyhjössä. Jäännös (0,88 g) liuotetaan 3 ml:aan asetonia, liuoksen pH asetetaan kloorivetyhappo-pitoisella asetonilla 4:ään ja liuotin tislataan pois tyh-15 jössä. Jäännös kiteytetään 3 ml:sta asetonia. Saadaan 0,60 g (60 %) (+)-11-bromi-apovinkamiini-hydrokloridia, joka ase tonista uudelleenkiteytettynä sulaa 228°C:ssa.

IR-kirjo (KBr): 1730 (esteri-CO), 1638 (C=C), 1610 cm"1 (aromaattinen).

20 Massakirjo m/e (%) : 414 (M+, C2iH23N2^2Br' 385 (100), 356 (9,2), 342 (13), 329 (10), 306 (13), 265 (13), 204 (8,6), 191 (9,8).

/cj\ 1 = +37,6° /¾ 7 = +46,2° (c = 0,35, dikloorimetaani) .

D "546 25 Esimerkki 7 (-)-11-bromi-apovinkaminoli-3',4',51 -trimetoksibentsoaatti-hydrokloridi_ 0,15 g (0,39 mmoolia) (-)-11-bromi-apovinkaminolia liuotetaan 2 ml:aan vedetöntä pyridiiniä ja liuokseen lisätään 30 0,10 g (0,43 mmoolia) vastatislattua 3,4,5-trimetoksi-bentso- yylikloridia. Reaktioseokeen annetaan seistä yksi päivä huoneen lämpötilassa. Sitten seosta sekoitetaan, sen jälkeen kun on lisätty 0,2 ml vettä, 30 minuutin ajan. Liuotin poistetaan tyhjössä ja jäännös jaetaan 5 ml:n dikloorimetaania 35 ja 3 ml:n 5-%:sta soodaliuosta kesken. Orgaaninen faasi erotetaan, kuivataan magnesiumsulfaatilla ja haihdutetaan kuiviin tyhjössä suodattamisen jälkeen. Jäännös (0,22 g) liuotetaan 1 ml:aan asetonia, liuoksen pH-arvo asetetaan 15 7001 9 kloorivetyhappopitoisella metanolilla 4 tään ja saostunut kiteinen aine suodatetaan erilleen. Saadaan 0,15 g (62,6 %) edellä mainittua tuotetta. Sulamispiste: 157-159°C (asetonista).

5 IR-kirjo (KBr): 1712 (esteri-CO), 1645 (C=C), 1585 cm ^ (aromaattinen)

Massakirjo m/e (%): 580 (M+, C3oH22N2°5Br' ^ 565 (0,8), 551 (100), 510 (78), 369 (14), 339 (35), 299 (17), 256 (13), 255 (13), 212 (19).

10 Hydrokloridista vapautetun emäksen spesifinen kier- tokyky: /rv/ = -53,5° /'i</ = -62,5° (C 0,78 dikloorimetaani) .

Claims (6)

16 7001 9

1. Analogiamenetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten, erityisesti psoriasiksen hoidossa käyttökelpoisten polysyklis-5 ten yhdisteiden valmistamiseksi, joilla on yleinen kaava (I) '‘O’ 10 .tv. X ) CH~ C-Hk Λ 2 2 5 /ΤΛ o O (I) tl ,-"' CH,0 _ ,v c Ύ r 15 ch3o ' i CH-jO 1 i 2 1 jossa R on metoksi tai halogeeni ja R on vety tai R on 2 vety ja R on halogeeni, sekä niiden happoadditiosuolojen 20 valmistamiseksi, tunnettu siitä, että saatetaan yhdiste, jolla on yleinen kaava (II) Rl ν’ν,Γ'Ί 25 r2 ' '“'X-'-'''·->;· " "· N‘ (II) Λν. CH'~ ^ C2H5 HO 1 b 1 2 jossa R ja R tarkoittavat samaa kuin edellä, tai sen suola 30 reagoimaan 3,4,5-trimetoksibentsoehapon tai tämän hapon asy-loimisreaktioon pystyvän johdannaisen kanssa ja haluttaessa saatu tuote muutetaan happoadditiosuolaksi.

2- Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että reagoivana aineena käytetään 3,4,5-35 trimetoksibentsoyylikloridia. 17 70019

3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että reaktio saatetaan tapahtumaan orgaanisessa liuottimessa.

4. Yhdisteet, joilla on yleinen kaava (II): 5 Il 1 ’ I L j 'i H I R N X ! j m .-kv A J (II)

10 CH„ -X^ HCT" C2H5 1 2 1 jossa R on halogeeni tai metoksi ja R on vety tai R on 2 vety ja R on halogeeni, sekä näiden yhdisteiden happoaddi-15 tiosuolat. 5. 10-metoksi-apovinkaminoli. 6. 10-bromi-apovinkaminoli. 7. (-)-11-bromi-apovinkaminoli. 7001 9 18