FI70023B

FI70023B - Foerfarande foer framstaellning av nya vid behandling av sockersjuka eller galaktosemi laempliga 1'-substituerad-spiro(imidazolin-4,3'-indolin)-2,2',5-trioner

Info

Publication number: FI70023B
Application number: FI803539A
Authority: FI
Inventors: David Robert Brittain; Robin Wood
Original assignee: Ici Ltd
Priority date: 1979-11-13
Filing date: 1980-11-12
Publication date: 1986-01-31
Also published as: ES8301992A1; IL61426A; FI803539L; ES496811A0; PT72056A; PL227789A1; NO154842C; KR850001228B1; ZW27380A1; ES8205803A1; ATE9697T1; YU289080A; FI70023C; IE50332B1; ES8305765A1; ES507616A0; EP0028906A1; PL129212B1; AU532110B2; NO154842B

Description

70023

Menetelmä uusien, sokeritaudin tai galaktosemian hoitoon soveltuvien 1'-substituoitu-spiro^imidatsolidiini-4, 3 1 -indol.iin.i7-2,2 ' , 5-tr.ion.ien valmistamiseksi 5 Tämä keksintö koskee menetelmää uusien sokeritau din tai galaktosemian hoitoon soveltuvien 1'-substituoitu-spiroTimidatsolidiini-4,3 ' -indoli.in.i7-2,2 ' , 5-trionien valmistamiseksi , joiden kaava on 10 o hnAnh

-1-k I

A I

15 lO^N>0 R1 20 jossa R on (1-12C)alkyyli, fenyyli tai naftyylimetyyli, tai kinnamyyli, joka voi olla substituoitu 1 tai 2 halogeenillä, tai bentsyyli, joka voi olla substituoitu 1, 2 tai 3 halogeenillä, (1-4C)alkyylillä, (1-4C)alkoksilla tai nitrolla, tai yhdellä trifluorimetyylillä, syanolla tai 25 hydroksilla, ja bentseenirenkaassa A on valinnaisesti 1 tai 2 halogeenia, (1-4C)alkyyliä tai nitroa, tai yksi hydr- oksi tai (1-4C)alkoksi; lukuunottamatta yhdisteitä, joissa 1 R on metyyli-, etyyli- tai n-propyyl.iryhmä tai substitu-oimaton bentsyyliryhmä, ja bentseenirengas A on substitu-30 oimaton, sekä näiden yhdisteiden farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojen, kuten alkalimetalli-, maa-alkalimetall.i- , aluminium- tai ammoniumsuolan, tai orgaanisen emäksen kanssa muodostetun suolan valmistamiseksi.

70023 2

Aldoosi-reduktaasi aiheuttaa aldoosien, esimerkiksi glukoosin ja galaktoosin, muuttumisen katalyyttisesti vastaaviksi alditoleiksi, esimerkiksi sorbitoliksi ja vastaavasti galaktitoliksi. Alditolit tunkeutuvat huonosti so-5 lukalvojen läpi, ja muodostuttuaan niillä ei ole taipumusta poistua muuten kuin aineenvaihdunnan kautta. Tästä johtuen alditolit pyrkivät kerääntymään soluihin, joissa ne ovat muodostuneet, aiheuttaen sisäisen osmoottisen paineen kohoamisen, mikä vuorostaan voi tuhota tai heikentää itse solu-10 jen toimintaa. Lisäksi kohonnut alditolipitoisuus voi aiheuttaa aineenvaihduntatuotteidensa määrän epänormaalin kohoamisen, jotka samoin voivat häiritä tai tuhota solun toimintaa. Aldoosi-reduktaasin affiniteetti substraattiin on kuitenkin suhteellisen vähäinen, toisin sanoen se tehoaa 15 ainoastaan suhteellisen suurten aldoosikonsentraatioiden läsnäollessa. Tällaisia suuria aldoosikonsentraatioita esiintyy sairaustilojen, kuten sokeritaudin (ylimäärin glukoosia) ja galaktosemian (ylimäärin galaktoosia) yhteydessä. Tästä syystä aldoosi-reduktaasin inhibiittorit ovat käyttökelpoi-20 siä vähennettäessä tai estettäessä pitkittyneestä sokeritaudista tai galaktosemiasta aiheutuvien komplikaatioiden kehittymistä, jotka voivat olla osasyyllisiä sorbitolin ja vastaavasti galaktitolin keräytymiseen. Sellaisia komplikaatioita ovat esimerkiksi, macular oedema, kaihi, verkkokalvo-25 sairaus tai heikentynyt hermojohtokyky.

Tiedetään, että tietyt spiro-sidoksiset hydanto-iinit (spiro-sidoksiset imidatsolidiini-2,5-dionit), jotka ovat erilaisten bisyklisten ketonien johdannaisia, ovat aldoosi-reduktaasin inhibiittoreita, kuten esimerkiksi yh-30 disteet, joiden kaava on 3 70023 N—-f J \ 06 jossa Z on happi, rikki, sulfinyyli, sulfonyyli, metyleeni tai suora sidos, ja Y merkitsee erilaisia valinnaisia subs-tituentteja, joita on selitetty suomalaisessa patenttijul-10 kaisussa n:o 62 307. Nyt on keksitty, että uusilla kaavan I mukaisilla spiro-sidoksisilla hydantoiineilla, jotka ovat 1-substituoitu-indoliini-2,3-dionien johdannaisia, on voimakkaita aldoosi-reduktaasia ehkäiseviä ominaisuuksia. Tämä havainto on yllättävä otettaessa huomioon erilaiset kemial-15 liset eroavuudet, esimerkiksi amidikarbonyyliryhmän sijainti Ct-asemassa spiro-hiiliatomiin nähden, jossa asemassa aikaisemmin tunnetuissa aldoosi-reduktaasia inhiboivissa spi-ro-hydantoiineissa on aina ollut metyleeniryhmä. Eräät näitä lähellä olevat spiro-hydantoiinit, jotka ovat 1-substi-20 tuoitu-indoliini-2,3-dionien johdannaisia, ovat tunnettuja. Erityisesti 1'-metyyli-, 1'-allyyli- ja 1'-bentsyyli-spiro-/imidatsolidiini-4,3'-indoliini7-2,21,5-trioneja on selittänyt Otomasu et ai., artikkeleissa Chem. Pharm. Bull., 1975, 23, 1431 - 1435 ja Jap. Kokai, julkaisu n:o 50-137976, mutta 25 ei ole mainittu niillä olevan farmakologisesti arvokkaita ominaisuuksia.

Kaavan I mukaiset yhdisteet ovat spiro(imidatso-lidiini-4,31-indoliinin) johdannaisia, jossa numerointi on seuraava: 30 4' 3 1 4 5 5» ' f-- T> D 3' 1

35 7' H

4 70023

Kaavan I mukaisissa yhdisteissä on ainakin 1 asymmetrinen hiiliatomi, nimittäin spiro-sidoksinen hiiliatomi. Ne ovat eristettävissä raseemisina ja optisesti aktiivisina muotoina. Optisesti aktiviisia muotoja voidaan valmistaa 5 tunnetulla tavalla hajottamalla raseeminen muoto, tai syntetisoimalla optisesti aktiivisista lähtöaineista. Aldoosi-reduktaasia inhiboivat ominaisuudet ovat määritettävissä tässä alla selostetuin standardikokein.

R merkitsee edullisesti metyyli-, etyyli-, n-prop-10 yyl.i, n-butyyli, n-pentyyli, n-heksyyli, n-nonyyli tai n-dekyyliryhmää.

Erityisen arvokkaita substituentteja, joita voi ol- la edellä määritellyssä bentseenirenkaassa A tai R :n aryy-liosassa ovat esimerkiksi: 15 halogeeni, kuten fluori, kloori, bromi tai jodi; (1-4C)alkyyli, kuten metyyli tai etyyli; ja (1-4C)alkoksi, kuten metoksi tai etoksi.

Renkaassa A voi olla 4'-kloori-, 5'-fluori-, 5'-kloori-, 5'-bromi-, 5'-metyyli-, 5'-metoksi-, 5'-hydroksi-, 20 5'-nitro-, 6'-kloori-, 7'-fluori-, 7'-kloori-, 7’-metyyli-, 7'-etyyli-, 5',6'-difluori-, 5',61-dikloori-, 5',6'-dimetyy- li-, 5'-bromi-7'-nitro- tai 51-kloori-7'-metyyli-substitu-entti.

R voi olla lisäksi fenyyli-, kinnamyyli-, 3,4-di-25 kloorisinnamyyli-, bentsyyli-, 3,4-diklooribentsyyli-, 2-fluori-4-bromibentsyyli-, 4-metyylibentsyyli-, 2-fluori-4-jodibentsyyli-, 3-kloor.i-4-brom.ibentsyyli-, 4-klooribents-yyli-, 4-bromibentsyyli-, 3,4-d.imetoksibentsyyli- , 3-(tri-fluorimetyyli)bentsyyli-, 2-syanobentsyyli-, 4-syanobents-30 yyli-, 2-fluori-4-bromi-5-nitrobentsyyli-, 4-nitrobentsyy- li-, 3,5-dikloori-4-brom.ibentsyyli-, 2,4-diklooribentsyy li-, 4-hydroks.ibentsyyli- tai 3,5-diklooribentsyyliryhmä.

5 70023

Erikoisen edullisia kaavan I mukaisia yhdisteitä ovat seuraavat: a) R on (1-12C)alkyyli- tai substituoimaton bents-yyliryhmä; ja bentseenirenkaassa A on ainakin 1 halogeeni- 5 substituentti; b) R on fenyyli-, sinnamyyli- tai naftyyli-metyyliryhmä, jonka aromaattisissa renkaissa on valinnaisesti 1 tai 2 halogeeniryhmää; ja bentseenirengas A on substituoimaton tai siinä on ainakin 1 halogeenisubstituentti; ja 10 c) R on bentsyyliryhmä, jossa on 1, 2 tai 3 subs- tituenttia, jotka toisistaan riippumatta ovat halogeeni, trifluorimetyyli, syano, hydroksi, nitro, metyyli ja metok- si; ja bentseenirengas A on substituoimaton tai siinä on 1 tai 2 edellä määriteltyä substituenttia; sekä kunkin ryhmän 15 farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat.

Erikoisen edullisia yhdisteitä ovat ne kaavan I

mukaiset yhdisteet, joissa R on 3,4-diklooribentsyyli-, 2-fluori-4-bromibentsyyli-, 3-kloori-4-bromibentsyyli- tai 2-fluori-4-jodibentsyyliryhmä ja bentseenirengas A on subs-20 tituoimaton tai siinä on 5'-fluori-, 5'-kloori-, 5'-bromi-, 51,61-difluori- tai 5',6'-dikloorisubstituentteja; sekä niiden farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat.

Spesifisiä keksinnön mukaisesti valmistettavia yhdisteitä on mainittu seuraavissa esimerkeissä. Erityisen 25 mielenkiintoisia näistä ovat seuraavat yhdisteet: 1'—(3,4-diklooribentsyyli)-spiro/imidatsolidiini-4,3'-indo-liini7~2,2',5-trioni, 1'-(2-fluori-4-bromibentsyyli)-spiro/imidatsolidiini-4,3'-indoliini7~2,2',5-trioni, 30 1'—(3,4-diklooribentsyyli)-5'-fluorispiro/imidatsolidiini- 4,3'-indoliini7~2,2',5-trioni, 1'-(3-kloori-4-bromibentsyyli)-spiro^imidatsolidiini-4,3'-indoliini7-2,2',5-trioni, 1'-(3,4-diklooribentsyyli)-5'-kloorispiro^imidatsolidiini-3b 4,3'-indoliini7~2,2',5-trioni, 6 70023 1'- (2—fluori-4-bromibentsyyli)-51-kloorispiro/imidatsoli-diini-4,3 1 -indoliiniJ7’-2,2 1 ,5-trioni, 1 ' - (3,4-diklooribentsyyli) -5' -bromispiro</imidatsolidiini-4,3’-indoliini7~2 ,2’,5-trioni, 5 1 '-(2-fluori-4-bromibentsyyli)-51-fluorispiro£Lmidatsoli- diini-4,31-indoliini7~2,2',5-trioni, 1'-(3,4-diklooribentsyyli)-5',6'-dikloorispiro/imidatsoli-diini-4,3'-indoliini7~2,2',5-trioni, 1'-(3,4-diklooribentsyyli)-5',6'-difluorispiro/imidatsoli-10 diini-4,3 '-indoliinij7-2 ,25-trioni ja 1'-(2-fluori-4-jodibentsyyli)-spiro/imidatsolidiini-4,3'-indoliini7-2,2',5-trioni, tai niiden farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat.

Erityisen edullisia farmaseuttisesti hyväksyttäviä 15 kaavan I mukaisten yhdisteiden suoloja ovat esimerkiksi al-kalimetalli- tai maa-alkalimetallisuolat, kuten natrium-, kalium-, kalsium- tai magnesiumsuolat, aluminium- tai ammo-niumsuolat, tai suolat orgaanisten emästen, kuten trietanoli-amiinin, kanssa, jotka muodostavat farmaseuttisesti hyväksyt-20 täviä kationeja.

Keksinnön mukaiselle menetelmälle on tunnusomaista, että a) indol.iini-2,3-dionin, jonka kaava on 25

O

-f ! A II m 30 [l annetaan reagoida alkalimetallisyanidin, ja ammoniumkarbo-naatin tai -karbamaatin kanssa; 7 70023 b) yhdisteen, jonka kaava on 0

5 VI

M] \

H

10 2 annetaan reagoida yhdisteen kanssa, jonka kaava on R —X, 2 1 jossa R :11a on sama merkitys kuin R :llä, paitsi fenyyli, ja X on halogeeni tai aryyli- tai alkyyli-sulfonyylioksi, sopivan emäksen läsnäollessa; 15 c) yhdisteen, jonka kaava on OR3

--CN

A VII

20 XN

R

jossa R on asyyli tai tri-/.( 1-4C) alkyyli_7silyyli / annetaan 25 reagoida ammoniumkarbonaatin tai -karbamaatin kanssa; d) sellaisen kaavan I mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, jonka bentseenirenkaassa A on nitrosubstituentti ja/tai R on bentsyyliryhmä, jossa on nitrosubstituentti, nitrataan vastaavaa kaavan I mukaista yhdistettä, jonka 30 bentseenirengas A on substituoimaton tai jossa on vain

yksi substituentti ja/tai R on bentsyyli., jossa voi olla 1 tai 2 substituenttiaJ

e) kaavan I mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, jonka bentseenirenkaassa A on 1 kloori- tai bromisubstitu- 35 entti, kloorataan tai bromataan vastaavaa kaavan I mukaista yhdistettä, jonka bentseenirengas A on substituoimaton; tai 8 70023 f) kaavan I mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, jonka bentseenirenkaassa A ja/tai R^:ssä on hydroksisubsti-tuentti, dealkyloidaan vastaavaa kaavan I mukaista yhdistettä, jonka bentseenirenkaassa A ja/tai R :ssä on (1-4C)alkok-5 sisubstituentti; minkä jälkeen, haluttaessa kaavan I mukaisen yhdisteen optisesti aktiivista muotoa, mainitun yhdisteen raseemi-sen muodon annetaan reagoida sopivan orgaanisen emäksen optisesti aktiivisen muodon kanssa, minkä jälkeen seuraa näin 10 saatujen suolojen diastereomeerisen seoksen tavanomainen erottaminen, ja mainitun yhdisteen optisesti aktiivisen muodon vapauttaminen käsittelemällä hapon kanssa tavalliseen tapaan; ja haluttaessa saada farmaseuttisesti hyväksyttävää suolaa, kaavan I mukaisen yhdisteen annetaan reagoida 15 sopivan emäksen kanssa, joka muodostaa farmaseuttisesti hyväksyttävän kationin, tavanomaista menetelmää käyttäen.

Menetelmässä a) sopiva alkalimetallisyanidi on esimerkiksi natrium- tai kaliumsyanidi; tämä menetelmä on esimerkki imidatsolidiini-2,4-dionien (hydantoiinien) 20 Bucherer-Bergs-syntees.istä, joka on alalla hyvin tunnettu (E. Ware, Chemical Reviews 46 (1950), ss. 422 - 425), ja sellainen reaktio voi tapahtua hydroksinitriilin, jonka kaava on

OH

25 o 30 1

R

avulla ja/tai aminonitriilin kautta, jonka kaava on 70023 nh2

f^N--CN

A II V

R1 Tämän keksinnön mukaisesti kaavan IV mukainen väliyhdiste 10 valmistetaan erikseen tai in situ (esimerkiksi antamalla kaavan III mukaisen yhdisteen reagoida syanivedyn kanssa), minkä jälkeen seuraa väliyhdisteen reaktio ammoniumkarbonaa-tin tai -karbamaatin kanssa. Myös kaavan V mukainen väli-yhdiste valmistetaan erikseen tai in situ (esimerkiksi an-15 tamalla kaavan III mukaisen yhdisteen reagoida ammoniakin tai syanivedyn kanssa), minkä jälkeen seuraa väliyhdisteen reaktio hiilidoksidin kanssa, jota saadaan edullisesti ammo-niumkarbonaatin tai -karbamaatin muodossa.

Menetelmä suoritetaan mieluiten liuottimessa tai 20 laimentimessa, esimerkiksi (1-4C)alkanolissa, kuten meta-nolissa tai etanolissa, tai etyleeniglykolissa tai diety-leeniglykolissa, lähinnä vesipitoisessa laimentimessa, ja lämpötilan ollessa esimerkiksi 20 - 100°C.

Tarvittaessa ammoniumkarbonaattia tai -karbamaattia 25 voidaan muodostaa tavalliseen tapaan in situ.

Kaavan III mukaisia lähtöaineita saadaan tavallisin indolini-kemian menetelmin. Esimerkiksi kaavan III mukaisia yhdisteitä, joissa R on muu kuin fenyyliryhmä, saadaan antamalla kaavan III mukaisen indoliini-2,3-dionin, jossa R^ 30 on korvattu vedyllä, reagoida sopivan alkyyli- tai aryyli-halogenidin, esimerkiksi kloridin, bromidin tai jodidin kanssa, emäksen kuten natrium- tai kaliumhydroksidin läsnäollessa dimetyylisulfoksidissa lämpötilassa 20 - 40°C.

Kaavan III mukaisia lähtöaineita, joissa R on fenyy-35 liryhmä, valmistetaan esimerkiksi kondensoimalla sopivaa difenyyliamiinia oksalyylikloridin ja aluminiumkloridin kanssa, kuten on selitetty US-patentissa 3 509 149.

,0 70023

Menetelmässä b) on suotavaa, että reaktiossa käytetään noin 3 mooliekvivalenttia emästä ja 1 ekvivalentti 2 kaavan R -X mukaista yhdistettä.

Erityisen sopiva emäs on esimerkiksi vahva emäs, 5 kuten alkalimetallihydroksidi, -karbonaatti tai -hydridi, kuten natrium- tai kaliumhydroksidi tai -karbonaatti ja natrium- tai kaliumhydridi. Käsittely suoritetaan lähinnä liuottimessa tai laimentimessa, esimerkiksi (1-4C)alkanolis-sa, kuten metanolissa tai etanolissa tai N,N-dimetyyliform-10 amidissa, joko alkalimetallihydroksidin tai -karbonaatin vesiseoksena, tai vedettömässä liuottimessa, kuten dimetyy-lisulfoksidissa tai Ν,Ν-dimetyyliformamidissa käytettäessä alkalimetallihydridiä.

Käsittely suoritetaan lähinnä sopivassa lämpötilas-15 sa, esimerkiksi 20 - 40°C:ssa, ja yleensä suhteellisen lyhyen reaktioajan kuluessa jotta imidatsolidiinin typpiato-mien alkyloituminen jäisi mahdollisimman vähäiseksi.

Kaavan VI mukaisia lähtöaineita voidaan valmistaa orgaanisen kemian standardimenetelmillä, jotka ovat hyvin 20 tunnettuja analogisten yhdisteiden syntetisointiin käytettyinä, ja joita menetelmiä ovat selostaneet esim. Otomasu et ai., (Chem. Pharm. Bull., 1975, 23, 1431 - 1435). Niitä voidaan saada edellä esitetyn menetelmän a) mukaisella menetelmällä, mutta lähtemällä sopivasti 1-(substituoimaton)-25 indoliini-2,3-dionista. Jälkimmäisiä yhdisteitä saadaan myös helposti orgaanisen kemian tunnetuilla menetelmillä.

3

Menetelmässä c) R on edullisesti t1-6C)alkanoyyli-ryhmä, kuten asetyyli- tai propionyyliryhmä, fenyylisul-fonyyli-, tolueeni-p-sulfonyyli- tai bentsoyyliryhmä, tai 30 trimetyylisilyyliryhmä.

Voidaan todeta, että menetelmä c) on edellä esitetyn menetelmän a) muunnelma ja niin ollen siinä voidaan käyttää samanlaisia reaktio-olosuhteita. Samoin ammoniumkarbo-naattia tai -karbamaattia voidaan haluttaessa muodostaa in 35 situ.

11 70023

Kaavan VII mukaisia lähtöaineita voidaan valmistaa tavanomaisin menetelmin. Niitä voidaan saada antamalla kaavan IV mukaisen hydroksinitriilin (jota saadaan kuten menetelmässä a) on selostettu antamalla indoliini-2,3-dionin 5 reagoida syanivedyn kanssa) reagoida sopivan asyyli- tai tri-Z.(1-4C)alkyyli7silyylihalogenidin, esimerkiksi asetyyli-, propionyyli-, fenyylisulfonyyli-/ tolueeni-p-sulfonyyli-, bentsoyyli- tai trimetyylisilyylikloridin kanssa tavanomaiseen tapaan.

10 Vaihtoehtoisesti kaavan VII mukaisia yhdisteitä, joissa R on tri-^(1-4C)alkyyli/silyyliryhmä, voidaan saada antamalla sopivan indoliini-2,3-dionin reagoida tri-^l1-4C)-alkyyli/silyylisyanidin, esimerkiksi trimetyylisilyylisya-nidin kanssa, esimerkiksi lämpötilassa 15 - 40°C ja vedet-15 tömässä liuottimessa, kuten 1,2-dimetoksietaanissa.

Menetelmässä d) nitraus voidaan suorittaa tavanomaisin menetelmin, esimerkiksi rikkihapon läsnäollessa, käyttämällä typpihappoa lämpötilan ollessa 0 - 30°C, tai käyttämällä savuavaa typpihappoa lämpötilan ollessa -20 - +10°C.

20 Menetelmässä e) klooraus voidaan suorittaa tavanomai sia menetelmiä käyttäen, esimerkiksi käyttämällä kloori- tai bromialkuainetta valinnaisesti Friedel-Crafts-katalyytin, kuten ferrikloridin, ferribromidin tai rautajauheen läsnäollessa, lämpötilan ollessa esimerkiksi 10 - 100°C ja sopivassa 25 liuottimessa tai laimentimessa, kuten kloroformissa, nitro-bentseenissä tai etikkahapossa.

Vaihtoehtoisesti klooraus tai bromaus voidaan suorittaa käyttämällä sulfuryylikloridia tai -bromidia valinnaisesti jodin ollessa läsnä katalyyttinä, lämpötilan olles-30 sa esimerkiksi 10 - 100°C, sopivassa liuottimessa tai laimentimessa, kuten etikkahapossa tai kloroformissa.

12 70023

Menetelmässä f) alkyylin poistaminen voidaan suorittaa käyttämällä tavanomaisia tunnettuja menetelmiä, esimerkiksi käyttämällä seosta, jossa on orgaanista tertiääristä emästä, kuten pyri-diiniä^ kinoliinia tai niiden (1-4C)alkyyli-johdannaisia, 5 yhdessä epäorgaanisen hapon, kuten suolahapon tai bromivety-hapon,kanssa lämpötilan ollessa esimerkiksi 80 - 150°C. Orgaanista tertiääristä emästä voidaan käyttää edullisesti ylimäärin ja se voi toimia liuottimena tai laimentimena.

Tämän jälkeen, haluttaessa farmaseuttisesti hyväk-10 syttävää suolaa, kaavan I mukaisen yhdisteen annetaan reagoida sopivan emäksen kanssa, joka muodostaa farmaseuttisesti hyväksyttävän kationin, tavanomaista menetelmää käyttäen .

Edelleen, haluttaessa kaavan I mukaisen yhdisteen 15 optisesti aktiivista muotoa, mainitun yhdisteen raseemisen muodon voidaan antaa reagoida sopivan orgaanisen emäksen, kuten brusiinin, koniinin tai 2-pipekoliinin optisesti aktiivisen muodon kanssa, minkä jälkeen seuraa näin saadun diastereoisomeeri-suolojen seoksen tavanomainen erottaminen, 20 esimerkiksi suorittamalla fraktiokiteytys sopivasta liuot-timesta, kuten (1-4C)alkanolista, minkä jälkeen mainitun yhdisteen optisesti aktiivinen muoto voidaan vapauttaa käsittelemällä hapon kanssa tavanomaista menetelmää käyttäen, esimerkiksi käyttämällä vesipitoista epäorgaanista happoa, 25 kuten laimeata suolahappoa.

Aldoosi-reduktaasia inhiboiva ominaisuus voidaan osoittaa seuraavan standardinmukaisen laboratoriokokeen avulla. Tällöin rotat tehdään sokeritautisiksi (mikä todetaan vakavana sokerivirtsaisuutena) antamalla streptotsoto-30 siinia. Eläimille annetaan päivittäin tutkittavaa yhdistettä 5 vuorokauden ajan, jonka jälkeen eläimet tapetaan ja silmä- 13 7 00 2 3 linssit ja lonkkahermot poistetaan. Standardin mukaisen jatkokäsittelyn jälkeen määritetään kummankin kudoksen jäljellä oleva sorbitolipitoisuus kaasuneste-kromatografiaa käyttäen poly-trimetyylisilyyli-johdannaisiksi muuntamisen jäl-5 keen. Sitten arvioidaan aldoosi-reduktaasin inhiboituminen in vivo vertaamalla lääkettä saaneen sokeritautisen rotta-ryhmän kudoksissa jäljellä olevia sorbitolipitoisuuksia lääkettä saamattoman sokeritautisen rottaryhmän ja lääkettä saamattoman terveen rottaryhmän kudosten sorbitolipitoi-10 suuksiin. Vaihtoehtoisesti voidaan käyttää modifioitua koetta, jossa streptotsotosiinilla sokeritautisiksi tehdyille rotille annetaan päivittäin koeyhdistettä 2 vuorokauden ajan. 2 - 4 tunnin kuluttua viimeisen annoksen antamisesta eläimet tapetaan ja poistetaan lonkkahermot ja jäljellä 15 olevat sorbitolipitoisuudet määritetään edellä selitetyllä tavalla.

Kummassakin näissä kokeissa uudet kaavan I mukaiset yhdisteet alentavat jäljellä olevia sorbitolipitoisuuksia pitoisuuksiin, jotka ovat samat kuin terveillä, lää-20 kettä saamattomilla rotilla. Kaavan I mukaiset yhdisteet aiheuttavat kuitenkin yleisesti merkittävää aldoosi-reduktaasin inhiboitumista suun kautta annetun annoksen ollessa 100 mg/kg tai paljon pienempi. Mainittakoon, että 1 * — (3,4 — diklooribentsyyli)-spiro/imidatsolidiini-4,3'-indoliini7~ 25 2,2',5-trioni ja 1'-(2-fluori-4-bromibentsyyli)-spiro^lmid- atsolidiini-4,3'-indoliini7-2,2',5-trioni tuottavat molemmat lonkkahermon jäljelle jääväksi sorbitolipitoisuudeksi pitoisuuden, joka on noin 20 % siitä, mikä on saatu kontrol-likokeessa lääkettä saamattomilla sokeritautisilla rotilla, 30 suun kautta annetun annoksen ollessa 10 mg/kg 5 vuorokauden ajan. Mitään ilmeisiä myrkyllisiä tai ei-toivottavia vaikutuksia ei todettu edellä esitetyissä kokeissa kaavan I mukaisten yhdisteiden annostuksen ollessa 100 mg/kg.

Uudet kaavan I mukaiset yhdisteet alentavat jäljel-35 lä olevan sorbitolipitoisuuden samaksi kuin terveillä rotilla > kun niitä annetaan suun kautta annoksen ollessa 5 -20 mg/kg.

14 70023

Aldoosi-reduktaasia inhiboiva ominaisuus voidaan osoittaa myös in vitro. Tällöin puhdistettua aldoosi-reduktaasia eristetään tunnetulla tavalla naudan silmälinsseistä. Tämän entsyymin, jolla on kyky pelkistää in vitro aldooseja 5 polyhydrisiksi alkoholeiksi, ja erityisesti pelkistää glukoosi sorbitoliksi, inhiboituminen prosentteina koeyhdis-teen vaikutuksesta määritetään sitten käyttämällä standardinmukaisia spektrofotometrisiä menetelmiä. Tässä kokeessa kaavan I mukaiset yhdisteet osoittavat yleisesti merkittävää 10 aldoosi-reduktaasin inhiboimiskykyä konsentraation ollessa noin 10 tai paljon pienempi.

Kun keksinnön mukaisesti valmistettua yhdistettä käytetään aldoosi-reduktaasiin kohdistuvan vaikutuksen aikaansaamiseen, sitä voidaan antaa pääasiallisesti suun 15 kautta, päivittäisen annostuksen ollessa 10 - 750 mg ihmistä kohden, annettuna tarvittaessa jaettuina annoksina.

Keksintöä valaistaan sivuilla 18-39 kuvatuilla esi-20 merkeillä, joissa, ellei toisin ole mainittu: i) haihdutukset on suoritettu pyörivässä haihduttimessa vakuumissa, ii) työvaiheet on suoritettu huoneen lämpötilassa, so. välillä 18 - 26°C, ellei muuta lämpötilaa ole mainittu, 25 iii) petrolieetteristä (kp. 60 - 80°C) käytetään nimi tystä "bensiini 60 - 80", ja muista petrolieetterifraktiois-ta vastaavia nimityksiä, iv) valmistetut kaavan I mukaiset yhdisteet on karakterisoitu mikroanalyysin ja NMR- ja IR-spektroskooppisten 30 menetelmien perusteella, ja v) saannot (milloin ne on ilmoitettu) on esitetty selvennyksiksi, eivätkä ne ole välttämättä suurimpia saatavissa olevia saantoja.

is 70023

Farmakologisten kokeiden tulokset Määritettiin kaavan I mukaisten yhdisteiden aldoosi-reduktaasia inhiboiva vaikutus edellä selitetyillä standardimenetelmillä.

5 a) 5-vrk-menetelmä Käytettiin urosrottia (110 - 130 g, Alderly-Park-kanta, patogeenivapaa). Koeryhmät käsittivät 6 koe-eläintä. Streptotsotosiinikäsittelyn jälkeen odotettiin 2 viikkoa, todettiin sitten vakava sokerivirtsaisuus, ja ryhdyttiin an-10 tamaan tutkittavaa yhdistettä suun kautta päivittäin 5 vuorokauden ajan. Koe-eläimet tapettiin, ja lonkkahermot poistettiin ja punnittiin. Hiilihydraattiaines uutettiin vedellä, johon oli lisätty ci-metyyli-D-mannosidia (sisäinen standardi) . Proteiiniaines poistettiin Somogyi'n kehittämällä mene-15 telmällä (J. Biol. Chem. 1945, 41, 367) ja jäljellä oleva liuos lyofiloitiin. Hiilihydraattiaines muutettiin vastaavaksi polytrimetyylisilyylijohdannaiseksi (Bentley et ai., Biochem. Biophys. Res. Comm. 1963, 11, 14) ja määritettiin sorbitolipitoisuus (GLC, 2,5-% SE-52/80 - 100 mesh "Diato-20 mite-C", jota oli esikäsitelty hapolla ja silanoitu dikloori-metyylisilaanilla; 185°C). Aldoosi-reduktaasin inhiboitu-minen todettiin vertailemalla jäljellä oleva sorbitolipitoisuus lääkettä saaneiden sokeritautisten koe-eläinten ja lääkettä saamattomien sokeritautisten koe-eläinten kudoksissa.

25 b) 2-vrk-menetelmä Käytettiin urosrottia (110 - 130 g, Alderly-Park-kanta, patogeenivapaa). Koeryhmät käsittivät 6 koe-eläintä. Streptotsotosiinikäsittelyn jälkeen koe-eläimille annettiin tutkittavaa yhdistettä kahdesti, 17 tunnin välein. Tämän 30 jälkeen koe-eläimet tapettiin, ja lonkkahermot poistettiin ja määritettiin jäljellä oleva sorbitolipitoisuus, kuten kohdassa a) on selitetty.

Seuraavassa taulukossa on esitetty kokeiden tulokset. Kokeiden n:o 3 - 5 tulokset on saatu 2-vrk-menetelmällä, 35 muut 5-vrk-menetelmällä. Tuloksista ilmenee, että uusilla kaavan I mukaisilla yhdisteillä on voimakas aldoosi-reduk-taasia inhiboiva vaikutus.

7 C O 2 3 16

Bentseeni- ~ Annos Sorbito-

Koe renkaan A R (mg/kg) litason n:o substi- suun alenemi- tuentti kautta nen, % 1 - 3/4-Cl2-PhCH2 10 87 2 - 2F-4Br-PhCH2 10 84 f * 3 - naft-1-yylimetyyli 100 50 4 6-C1 propyyli 100 73 ^ (* 5 20 30 ' 6 5-F 3,4-Cl2-PhCH2 10 67 7 - 2/4-Cl2-PhCH2 50 90 8 - nonyyli 50 42 9 - 4-Me-PhCH2 50 52 10 - kinnamyyli 50 52 11 - pentyyli 50 55 12 - heksyyli 50 64 13 - dekyyli 50 60 14 5-MeO 3,4-Cl2-PhCH2 10 27 15 5-Me 3,4-Cl2-PhCH2 5 50 16 - 2F-4l-PhCH2 10 49 17 - 3Cl-4Br-PhCH2 10 71 18 5-Cl 3,4-Cl2-PhCH2 10 91 19 7-Cl 3,4-Cl2-PhCH2 10 96 20 5-Cl 2F-4Br-PhCH2 10 91 21 5-Br 3,4-Cl2-PhCH2 10 88 22 7-F 3,4-Cl2~PhCH2 10 94 23 - 4Br-PhCH2 10 47 (* 2-vrk-menetelma (jatkuu) 17 ,. , 70023 (jatkuu)

Bentseeni- Annos Sorbito-

Koe renkaan A R (mg/kg) litason n:o substi- suun alenemi- tuentti kautta nen, % 24 5-F 2F-4Br-PhCH2 10 91 25 7-Me 3,4-Cl2-PhCH2 10 81 26 - 3CF3-PhCH2 10 25 27 4-C1 3,4-Cl2-PhCH2 10 66 28 - 2-CN-PhCH2 35 30 29 - naft-2-yylimetyyli 50 43 30 5-Br PhCH2 20 52 31 - 4CN-PhCH2 10 31 32 - 3,4-Cl2-kinnamyyli 10 56 33 - Ph 60 43 34 6-C1 3,4-Cl2-PhCH2 10 49 35 5,6-Me2 3,4-Cl2-PhCH2 10 43 36 7-Et 3;4-Cl2-PhCH2 10 69 37 5-N°2 3,4-Cl2-PhCH2 10 45 38 5-C1 Me 50 54 39 5-C1 heksyyli 50 63 40 4,5-Cl2 3,4-Cl2-PhCH2 10 29 41 5-C1 - 7-Me 3,4-Cl2-PhCH2 16 77 42 - 3,5-Cl2-PhCH2 10 36 43 - 4-HO-PhCH2 10 29 44 5'6“f2 3,4-Cl2-PhCH2 10 67 45 5-HO 3,4-Cl2-PhCH2 10 27 18 70023

Esimerkki 1 (suoritusmuoto a)) 1 1 - ( 3,4-diklooribentsyyli) -spiro/_imidatsolidiini- 4,3' -indoiiinj,7-2, 2' ,5-t rioni

Seosta, jossa oli 1-(3,4-diklooribentsyyli)-indolii-5 ni-2,3-dionia (12,0 g), aramoniumkarbonaattia (36,0 g) ja kaliumsyanidia (5,2 g) metanolin (300 ml) ja veden (300 ml) seoksessa, keitettiin 3 tuntia 95 - 100°C:ssa. Saatua tummaksi värjäytynyttä liuosta jäähdytettiin jonkin verran ja lisättiin aktiivihiiltä (3,0 g). Sitten seosta lämmitettiin 10 95 - 100°C:ssa ja kaiken metanolin annettiin tislautua pois.

Kuuma seos erotettiin suodattamalla ja jäännös pestiin kuumalla vedellä. Suodos ja pesunesteet yhdistettiin, jäähdytettiin ja tehtiin happameksi väkevällä suolahapolla pH-arvoon 2. Erottunut paksu kiinteä aine koottiin talteen, 15 pestiin vedellä, kuivattiin ilmassa ja kiteytettiin uudelleen 2 kertaa etyyliasetaatti/bensiini 60 - 80°C-seoksesta (tilavuussuhde 4:1). Näin saatiin 1'-(3,4-diklooribentsyyli)-spiro/imidatsolidiini-4,3'-indoliini7~2,2',5-trionia (yhdiste n:o 1), saanto 3,3 g; sp. 269 - 271°C.

20 Lähtöaineen valmistus:

Kaliumhydroksidin etanoliliuosta (100 ml, 1-m liuos) lisättiin sekoitettuun liuokseen, jossa oli indoliini-2,3-dionia (isatiini) (14,7 g) dimetyylisulfoksidissa (200 ml).

10 minuutin kuluttua lisättiin liuos, jossa oli 3,4-dikloo-25 ribentsyylikloridia (21,5 g) dimetyylisulfoksidissa (10 ml). Seosta sekoitettiin 72 tuntia ja kaadettiin sitten veteen (600 ml). Muodostunut kiinteä aine kerättiin talteen, pestiin vedellä, kuivattiin ilmassa ja kiteytettiin uudelleen etyyliasetaatti/bensiini 60 - 80°C-seoksesta (tilavuussuhde 30 3:2). Saatiin 1-( 3,4-diklooribentsyyli)-indoliini-2,3-dionia (13,8 g); sp. 183 - 184°C.

Esimerkin 1 menetelmän mukaisesti, mutta käyttämällä lähtöaineena vastaavaa kaavan III mukaista indoliini-2,3-dionia, saatiin seuraavat kaavan I mukaiset yhdisteet: 70023 1 9 κ

O

I) en un vo ro vo o o ro iij <*> CM ^ i- CM CM'S·^ (0 — co „ 3

G

Ai

-P -H ' ' -H -H

G C I ^ C C «3

I -P -P G " -H -H

φ -P -H φ T- -H -H

tfl to to _Q '—' tn -H to •m te G G \ G en e -H φ φ —. .p U φ dl Φ $ tn Ή J3 m Λ CO o · Λ > X) S n >i \ ·· \ ·· -po \ ^

S; m >1 -H »- -H T- Π3 OD -H -H -H

i^^tn -P i—l^—rH'— to H <—i i I

tie dl O O 4-> I O o o

P t> -H "" e o e u d) cue C U

-H nj O nJ O tn O nJ O ns -H nj O

iin H ftOftonJcoftoftHfto !j t, 3 O-HO0OO0O-H O oo O O O oo

,,-j -.ta .p G -P P P Ή -H p p C P

y ; h nS 4-> ft I ft I >. G ft I CP fts CP I

Ä ^ -P nj O O >1-P0 O-PO

CU 03 too too -P-H too tO Φ too

β -Ρ ·Ρ CD ·Ρ Ο φ to -H O -P e -H CD

OOOOCMl'-'COCMCM

ΓΤ or-cD-^r^cocDuo

Q CO CM CM CM CM t— CM CM

W I I I I I I I I

A co oo f- o to -^r o o

(XiCDCO^r-COCDLri CM CM CM CM CM t CM CM

H

e

Φ G I -H

dl (C -H -P Tl r

CO (0 -P -P I I V ^ I III

-P Ai co C l I I 1 1 III

C G XI d) " φ φ C 3 co tn

tn p en -P

•H

i-H

>1 •H >1 ^ I rP to -p ^ •P >, 4-1 ΓΡ >1 e >1 e >i >i 0 4-1 dJ >1 “

p Φ Xl en U

λ ε -h -p £ r- I -p PC ¾ ry* ^ f—I ·Η 0 Φ Ή

1 ·Η >1 rH o XI -P-Hr-I

•HrPip >1 rH I -H T1 >1 P >i I >1 Ai CM >i >1 >1

ΟϊΡ’- ft Ή 1—1 Po S

etoi O Tl u c-^”3

rH *P 4-1 P I I 0 <!> G

mcH-i ft t "cr ccc

l ΰ) ns i - - I I -H

CM ,Χ C C CO CM C ^ Ai d)

-P

tn

•H

rri Π ^ Γ. (N ro LO vo r- oo en

>H C

20 7 0 0 2 3

I I

I -H

*, i _U

o -H

-U 3 c __ O O O 'S' Oi CM O r- 0) (flo¥3 in O r- O) r- ΓΟ Γ0 04 01 m — 3 cn 3 4-1 •H 3 -P 3 I I I I 14-1^ d c c d d 3 -t-i 0) 0) Φ φ φ (0 to Λ Λ Λ Λ Λ 4J ·Γ-ι :φ \\\\ \φ — 0) ·Η Ο Ή tj -H CJ Ή Ο Ή O 03 m τη 4-10 4-10 4-10 4~*0. 44 O (tl m ft 4-10*404-104-10 4-10 *4 w φΟΟΦΟΟφΟφΟΟ (Ο 00 *4 ν* η, rn (ΰ (ΰ (ΰ (ΰ (ti in >. Jj C 4-1 I 4-1 I 4J I -p| 4-1 I >i 4J4J.H Φ Φ Φ Φ Φ 4-1 n- m 4j 030 030 030 030 -Η ·Η 03 Ο φ gijjQ φΟΦΟίΟΟφΟ >—I ·—t Γ0 to 4_j η -Η Ή ·Η Ή Ο Ο Ή (Ο •H STJ ·Η I—I ·Η I—( -H Η -γ4 ι—I τ4 d d Η ·Η ft

V ,η indindindind 3 3 in d -H

in ή in Ή in ή in ή ^ 4-1 44 in *h 44 44 Ή 44 Ή 4-1 -H 44 -r4 φ φ 44 -H 4-1 Φ03Φ03Φ03Φ03 £ £ φ 03 d Φ ti Φ q ojtoo-r-oicnrocM -n O co <0 in h1 1— cx> i— t— d _ t— r— «— cn 01 03 m 03 d

O

. I I I I I I I I *—I

Qj o ϋ) t— ^omooocMo -4;

co o in ^ oo h r~ -H

t— r— «— CM ΓΜ 03 03 OI H

I Φ Φ

CP

j -H Ή 3 H <ζ 0) rH Λί

c λ; in -H

Φ d I -H o in rH

Φ (tl -H 44 44 44 -H

oi ia 44 41 Φ d) h m i) il to c 1 1 1 E g I I u ' d d 43 φ 11 1 di φ 3 3 ~ P3 ρ U3 44 m in in44 03 •H φ

rH CO

•H -H in Ή -H

rH H Ή in H 144 in in H en in iti

in in in 44 in M

03 03 in d tn Cp

44 4J 03 φ 44 1 O

•H -H d d 44 .Q d 1 -M

H H -H Φ φ d I Φ 3 in in h X3 X2 φ P -Q e ro oi ininin! i -Q CQ 1 O·· 44 03 in (N 03 I | 03 P r- d 42 42 rH HH^TH 42 φ φ Φ U o H* 1 o 3

Or Xi TS I I I H I 3 01 I I I Ή* fci u H1 44 03 d d d ' “il ~ 44 φ rn o in o o φ φ — 44 44 3 U3 Xi 3 -H 3 42 φ TS 01 -P 4J Xt 03 3 03 3 3 •i-! -H 04 3 w fl o > x;.. O T- nj ro "^rintor“ X 3

iHd <- r- r-r-*-T- ^-H

~0 * 21 70023 c ~ 9 o! dp (N oo r~- cm oold oo 3 03 — x^x x— x x x ΙΠ —

U3 +J

03 r-i P •h ω ω 03 0) I I I I >1 I > d d d d d ?,>

0) (D a) <13 -HD 03 P

:«3 ΛΛΛΛ'ϋΧΙΛ'ϋ m \ -n. ^ P p 03 03 -HO -HO -HU Ή U £ -HO -HCJ g 03 O 33 o JJ O P O P O ctf P O P O 03 ω 03 -pOPOPOPOgPOPOg .Y >1 0) 0300 0300 0300 0300 M 0300 03 00 3-1

in P d 03 03 03 03 003 03 O

P P P PI Pt PI PI mpl PI p

>i 03 P 03 03 03 0) P 03 03 P

03PO 030 030 0301/30 H 0)0 030 P

P >1 3 03 ID 03 <D 03 ΙΟ 03 ID >1 03 0 03 ID >-i •Η :o3 -Η ·γΗ ·Η P -h >1 -Η P >i

ΥΪ .Y Ρ P P p p P P I—I -H P Ή ·Η Ρ Ρ P

ϊη d in d in d >1 C 0) in d >iC 03

>i P >1 -Γ-t in P in P g in P in P G

4J P 4J P p P P P P P P P -H P

Q) 03 03 03 0)//3 03 03 03 0)03 Q3E/303 U o P O P i— P 00 x— 0 tjx Or- P C- ID m Γ~~

-- CMCNCNCNCNCNCMCN

I l I I I I I I

CU

U3 O CN 00 00 O CM Γ*·- O

CO <£> O p C- ID CO r-

CM CN CN CN CN CN CN CN

I P

p ril p C >1 03 C I P >i

03 03 P P p p S-ι P

03 03 Ρ Ρ n n PQ ft, h 03

P * t/3 C I I I I I G

d d Λ <13 - - - - I- I I

0)0)33(-- in m r-~ m m u to p t"·

rH

P ·Η >i P p P P P P >i p >i p p ίη p 03 >1 in >1 >1 >1 >1 +> >1 0) in in P 03 in d 01 P 03 03 P P 03 03 P CPP in d P Λ

d Φ d d in a) d I

r- Q3 X) 0) 03 03 Λ 0) CN

0Ä Λ I Λ -Q P I Λ —.

I Ml I d 5m I O

cm 03 <N CN 03 03 cn 03 P I P P Λ I P 51 O P U 03 IP CJ ~

I I I I SM I I I

rj raiptiriNxpQCiiPP

n * I « - I I > - ^ cocNcoropcNcooo

P

•p ® O p 03

P

32 O oo 03 o x— cn co p m

p" v- r- CM CM CN CN CN CM

in d * 22 7002 3 o -μ S'"' τ— co o en lot- o 2 m ·η* οι CN *— ·η· τ α! ·— C0 _ 3 3 Λί •μ -μ ι e ι ιι <ϋ e -H e CC -n Ο) -μ 0) Q)(U -" XI en X) Λ Λ •rt £ \ \ \

“ -rl -H O 0) -HU -H o ·μ O

S -μ-μΟΛ -HO μ O μ O

" "j μ μ o -μο -μο-μο ~ ifl (β co μ ίβ co e co C oo 0 e e -μ e m to O.7 2 &, μ μ I O -μι μμ I μμ ι i?Tj5 a o> o) cuo) cp o ΪΓ, λ, 7! C cn en Ο Γΰ Ο en Ο -μ en o coo x1 " -Jr xi Π3 CO QjO corn Co Co

Sfy e -μ -e o e» -h o ·μ ·μ Σ, X? Z Λ5 -μ -H -H M rH -H C rH ·μ Ή ·μ

*3 *2 Zj m >1 >1 C CU I in C e >1 C >1 C

* ^ ^ -μ >i >1 -H O >1 ·μ -μ >1 -μ >1 -μ μ μ -μ -μ en ο μ ·μ 0) μ ·μ μ -μ 0) α) <y en -μ ο 0 to g aicn οι en 01 o oi 04 en m co ΓΓ o ui un tr> 00 m o x-1 03 04 03 03 OI 04 04 'L, o

I— I I I I II I

. fM

n ^000003010- .0 o-^unenoonen

J OI 03 04 03 OI O) OI

-μ <

C

0) C I -μ 0) (X5 ·μ μ . s.

^^cc'V' 1 7 11 1 e e xi ai J 1 φ Φ 3 3 “ ' CQ M en μ ^ .H 1/1 rH -Ή

•μ >1 iH

Ή >1 !>i •μ >1 μ >ι ι—) >i -μ (U -μ g

t>i tn μ S Ή <XJ

>1 μ >1 I >. C

en C >1 -μ >i C

μ oi en ι—ι en ·μ c χι μ >ι ·μ μ -y ^ 0IIC >4 rP ci a> X) 03 (1) I >,α)οι-μ ^ I ιΗ Λ OI >4X)rH μ moi 1 en 1 u >1 tn 1 2 μ μ z ι >1 u^u μ e o ^ e 1 V I C a) I 0) m m 04 C X! ^ m μ 3 3 Q) £ μ Ό tn -μ

ir( O

r> 7. o 00 o o t— oi en ►*£ oi 03 cn cn m mm m 23 70023 *

O

4j fsj m vo o p av m

G T- CN CN T- (N CN

G diP

(0 —

CO U

O

O -H · oo iH ro 0 -rn

I G O

I I I I (0 I -G

G o G G G -P G G

fl) VO Q) Φ ^ ^

Λ X, Xl Xl -P -Q G

:G \ p ^ \ ^ W ^ W

tn -H U G -H U -H U -H U -HU

M tn .ρ0-Ρ4->0-Ρ0-Ρσ0 -PO c φ o -PO-P-PO-PO-PO-P -PO Φ tn φ njootnGcoGooGcöCU G oo τί

,¾ >i tn G CG G G g G -H

>i -P G +J I <ϋ -Μ I -Ml -Ml I -Pl Φ

-P 44 -P <D ,QQ> CD 0) c\l CD -P

>i <D -p wo'v.tnotnoino'-^ tno -P

(D-PO Gco-pGcoGvoGco-P G vd O

-P >1 G -h G -p -H -H ή -P G

-P ;G *P r—t -P O 'P ‘P 'P *P 1—1 P O iH -P -P

>iC -P >iG >-i G >i G G >i G

>i -H (D Cp *P Cp -P Co ·Ρ G -P G

-p -P G +J ·Ρ -P -P -P -P -P -P -P Φ mtnGCDGCDtncDGtU tDtn -r-i >1

-P

(D

-P

.—. σ> oo o vo .—. r~~ m av Co

U lo ovo tn G °o p CD

O CMOOr-t-CDOJCNOJ -P

'-r -P -P

I II 10 1 l I ^ • -r-i

Dj r-» lo co loGlo to o- G

co lo oio LO JG 00 t** p CD

rs) 00,— V- ^ Γ4 tN CN ^D

I-1 Φ

TG

I G

•PC tN I I G

G r—I “ *“

φ G I -P ,π i—| rp U rH f" -P Γ" -P -P

φ G -P -P M OU I CJ I rp | lp G

tn G -P 4-1 I II - I H Cp *P Co C*

^ AI w c - LO - u Co U >i O

G G -Q Φ LO LOLO ' LO I4JI4-*

φ Φ G G - - φ - φ -P

m p tn -p p tn H m S 0

G

•p s

*P -H G

Cp -p -p rp G

Cp rp lp >1 CO

tn ίρ >1 >i -p >1 i >1 tn * G tn -P m 4-i ^

Φ 4j tn -P G

Λ G λ: g φ I ·ρ Φ O Φ Λ

^ -H rP rD -P *P rD I

Pi rP >,1 φ rP | u

Co -P >1 CN S >i CN CQ

>1 rp tn rp -p >1 rp I

-p >, λ: υ ό en u p

φ >i φ I i -p I I

g 4_) ,C P P G P cp

I Φ I - * φ » I

p SG co CO Λ CO cn

G

4J +> * " ^r'GO rq. lo vo r~ oo av o f3" rocococococop

>i G

24 7 0 0 2 3

Tarvittavia kaavan III mukaisia lähtöaineita saatiin tavalla, jota on selostettu valmistettaessa esimerkin 1 lähtöainetta, käyttämällä sopivaa isatiinia ja kaavan 1 R .X mukaista halogenidia. Saadut ominaisuudet ja saannot 5 olivat seuraavat:

O

25 7 0 0 2 3 -μ —> c ^ ro -o· r^o cn vo m t-~ -«a· 3 it # r-- tn la »a* to m m tn cn cn 3 (θ'- λ:

10 -P

(0 •n

ro I ro I ro I

.· G ·· U G ·· G

T-<Dr-0 <l) T- C_> CU u U

I Xl ^ O Xl — O Xl 00 G \ o \ o \ oo

On -H U <- -H o -H 00 -HU oo CO

:rö X3 o -H O 4-> O -P -HO

W \ O 4-> O I -PO -U I -PO II

to tn -h oo (0 oo id oo td ' id oo -h 0) o pH nj o id id o iti rHoo tn 0) OI-PloO-HI-P^-PIOLOtn ä >t oi co a> a» ai e

>i -P G (¾ o ωο -pH tno tn -pH tn o id -h -pH

-P-P-h cxvoidvDCttivoitiGfdvoCitGG

QJ P φ -pH -pH -iH -pH -pH -pH O -—1 "pH

<D-P0 ^-4-pHfH-pH-pHpH-pHpH-pHiH-H P -H -pH

-p >i 3 QjG>iCtn>iC>iM>iGQtin(n

H :(0 -H O -H >1 -H G >i -H >1 C >1 -H O G G

« <H tn-H-P-H φ-Ρ-Η-Ρ (D -P -pH tn d> CU

-h tn m oi n a>tn cu xi d t» h n xi •— ro 'S' O CN O root U m r» cn en at tn -¾1 ro at cn O r- P- r- -3· i— r- -Ν' Ν'

I I II III III

Qj p- oi oo o at ro t— o-t^r- CO lo o~ t— at co ^ n* ro n· n •pH rfj

G

0) G I -pH rH

1) (d -pH -P O Ph

Wtf-U-P | | Il III III

-P M tn e vo tn G G xi ai CU (1) 3 3 m u tn -p ^

•H r-{ *r-| -H

rH ^>i -H r-i r-H

>1 >1 Ή >1 >1 >. -P >i >t >t tn ai in tn tn

4-) G tn -P -P

Cl -P G G

ai -h e cu ai

XI pH -h cu XI Xl -H -H -H

I iH pH X} I -H -pH γΗιΗρΗ P in in I CMt-HrH in>i>i

'"V, CQ I iHCN Ή in -H Uh Uh iH

« I r- Ot<H OiHiH gptn

-¾1 I OU IG-P (ti G -M

I 4-) P I rrocu G CU CU

tn uh ο*-* ·» e s GOtx;

I id i m I i -pH i I

cn G e CO G ^ -V G G

IxC p i—I pi—I iHpr-H ppp

m U CQ O U CQ U CQ CQ CQ

-Ό

-P CU

X2 G O (0 (d ad h ·· id (d id id td td id tdo*- j id G cn ro n< tn vot^oo at «— »- 26 7002¾

4J

to to

+J

CL> * to — (0 0 3 t __ >1 3 ootNT-ooco^oooooror^ >, 3 ΓΟίΝνώΓΜΓΟΓΜίΠ'ΦΟίΓ' -μ w <U _ •H 3 H V 3 p -P Ai gj c -p Φ 0 to 3 3 -n U -H rH ~ Ο Ο φ :tO o <

03 θυ -H

tn m H-. · T? U5 S C -Π 00 -3 -3 3 S S £ 1 O O °

Jj m i en G o c G O

>, m jj -H Ai 3 -Η ^33 A2 mjjn C 0 CM Ή -H ., a ft ' Ή jj ;>, 3 "3 .G O O rH c O O I Ή H :!o -H -H O U G O -H U U 0

Vt^lr-I tfl rH Ql| 3 C 31 Ή &, &, 0 ^ GAiO-PGrHjQOO on 0>itfi0-PC>StOtfi 3 Λ W -H S 0 U Jfs -H -H a;

*H

c—i

-H

to <TiOOC^CNkDLnv£> >—

Ä VDLOO^DOOr^r^OO

ζ\ LDr— CNt— t— r— T—*r— t— (D

O c

^ I I I I I I I I I -H

3 . ττοοσι<^οθτ-ι_η^τ·^<--^ Ο, ιηιησιιηοΟΓ'Γ'νο'ΧίΧ cn ω to Ό

.G

3 a I 3 H <c -H -A rH 1- P CO rH rH ·· 0 c I -h a; >1 o <- 03-H-P O >1 ^Hr—li-HM 0 (03M4J -P -P UUUtQfe -P 3 a>a;3C i 0 0 i ( I i i t t ww C C Λ Ο ε E ini-uoLnr- 3ω 0 0 3 3 It h 0 CQutnjJ mm 0 0

M Q, -P

Ή ,C

rH -H G 3

*τΗ Ή ·Η £>ι -Η Ή rH ·Η *H · · CO

rH I—I rH —I »—I ^>1 *—i rH O CO

>1 >t >1 ω >1 >1 >1 >1 >1 GJ 3 >ι >ι >i -P >i >i 01 >i >i fH 3 cninoiGtntn-Ptnoi > •P -P -P 0 -P -P GPP .-3

GCG.OGCOCG 0rH

0001 00.Q00 C-H

,- -ΗΧΙΛΛΙηΧΙΛΙΛΧ! -HP

QJ rHlIICQIISHtl 3

>, CM (N H I OJCNCQCNCN -H

I—I I—I I H* 1—I r—I I (—I,—I G C

a: υ υ ^ I u υ h* 0 u 00 0 I I I rH I I I 1 I G 0 _ -rt 3

H I -- I I --1 -- 3 rH

rj GmrncNtHmmcNnco SO

Z> 3 +1 p . Λ ^ 3 3 -r)

•n X S-|rHrHS-|GrHi—IrHrHrH £> P

-r CQUUCQCQUUUUU

”x to p 0 ,G C O 3333333333 r^ro^LnuDir^-oocriOT— v33C r— r-T— t— t— r- v- r- (NJ CN 1

O

* 27 .7 O O 2 3 e m m (N m to (Ί οι θ' γμ vo in £ <#> m <d m m m m r- m co^m 3 O'- .* en 4j (0 •n

-rH

I—I

O I C -h 5.3 I | H 3

m n -P & D +J

M φ <tf -H -H -H -H -H O E ® JS

Λί>ι(Λ (¾ i—1 irH rH H H 0) -H Φ ^

S C +>000 00-HT3 > -P

.p t> -5 o e e e e S ^ r! "7 $ s-gjjj cniöiöid idiö-H-HO-P ,!2 «Γ ® O röacua

-P>i3 -H o O O OOOOgOCH

•H ;«J -h Ή p M P

V v* pH !>i CU CU CU Οί&ιΠί'βε'Ο-ΡρΗ * * ^ £000 o O -P +> P -P <3 >i +i ui en οι ιηϋ]Φωοα)Μ-ί->

φ -H -H -H -H -H £ ε *P ε eö O

/__ l£> 00 ID Γ- CNtNr^eD r~ ro VO

CJ 00 Ό CO OI IDCNVOr' inCNCTi o r- T- r- r- r-CNr-r- r-OJr-

W l I I I I I I I III

Cu h< r- h< m o <- m ^ o n ^ en oo id oo m id m id r·· innjcn

•H < -H

C T* , u Φ C I -H >1 7J ä ΦΠ3-Η-Ρ Pm>i Vii ® , , ui nj +> +> il-Pl I I I I · 1 1 +J>iinc m φ ^ 1/1 e e λ φ ε

Φ Φ D 3 I

ffl P tn pi ι·" -H 'll rH -H -H r1 >~, rH ^ >1 ^ rl 01 >1 I Ή >1 -H -p ^ § rH-PW-H >1 01 rH φ >1 C +> 0] >i -P >i 8 >1 <1) fi Λί 01 Ö >ι ·Η ιηΛΦΟ -Ρ φ οι rH μ'γ! 4JIXI4J-HCXI-P>i 2 ti f r- β p | Φ rH φ I C >1 rHCi Dä 0>βΓΊΕ>ιΛ(ΜΦΙ >ιφΟΝ

XI I rH -H >, I rH .Q CM >li3rH

I Ό· U T3 oi on u I I ω · U

pi I ι-ρΓπΐέ-ρ z i cafe'S’^CU'^rU'w c u ^ II - -ΦΙ - I <0 Φ I ' -rj'tNonm.QromcN c xi-rj-rn 3

B X pprHrH Η Η P P PPH

cqcqoo υ u ® « cqcqu (0

r-> I

— :0

^ β O (0 <0 (0 (0 (d«JiO<3 lOfOiO

aö-H·· m on T m m r- co σο Ot— cn β|π3β <N cn nj γμ cncncnom rnrnm

rO

28 7 0 0 2 3

! G

* i φ (Ti I oi G ι-

Ο -H

4J ^ (0 CT

G — x O

Π) oY> CM O CT r- ro T— ro aj in

rcj>— lo vd i— o "3· o* G

CO :r0 n 0)

P G

I G -H

•H -H -P

i—I Ή -H -H G

i >1 h h λ; a)

G >i O O -P

01 -P G G G (0

Xl 01 (0 rO -H Dj

:r0 \ E -P -P -H I

Ui -H u -H Q1 CU -P CO

g en -P O Ό · -H -H G G>

Q1 O -P O \ G G G

Ui Q) -H -H -H -H G 00 -H Mi Mi G G

Mi >i G ιΗι—{rHrH<0 rH O O -H

>1 +J c OOOO-PIO -P -P —-o

P -P -H G G G G 0) G -H (l) 0) 01 G

>i 01 -P GGGGGOGtJE E CC

OJ-PO DjDjDjDjGcoQjt-II I -H G (0 -P >1 G O O O O -H OECN cm roro -n

H :rfl -h PPPPrH-HpG\ T :0 CO O

kmh aaaaixcaEz z +> +j oooo>i-hopu u χ: c c

gggg-P-hgooi l) :G G

Ή *H *H -H φ CO Ή 0-j Z S i—f o\° G

Ui

G CO

· LO G

ro <D

ro —. u . (0 Ή t_l <T oo cm r-~ "cr o· cm Ο-ΡΦ

O (O LT) Γ~- CO 00 CO. CT CO ·· G -P

J- T- T- OO J- T- T- G -H -P

iH O

• I 1 1 I 1 1 I 1 dl O G

a -p> i -p> CO OO CD O CO LO CM t— CT Ui Oi

ro m r~~ oo oo co (T r- -hi G

»— t— r- t— T— »— r- 'G G 0)

Xl G -n ΪΗ Dj >1 '-o -p

I P -P

H <C G Dj 01

G CM -H -P

aiGl-H -H I -H I -H G G >i CDG-H4-) rH rH rH O cH Γ** i—(l^-iH OO) 0)

G G -P -P UOUI U l >i l >i -H 01 -P

-P Mi G G ΙΙΙΙιΟ I γΗ^ιΗ^,ΌιΗ -H

G G X) ai en m lo * m U-PO-P l -h Mi 0) 0) G G xr I Q1 l ai ro ai mpcnjJ -H in £ in g ^ t? c H -H CM G Q1 tP rH I G 01

>i >1 -h rH

Ui >1 I G >c rH

-p G -H -H 4J 01 G -P G -H -P T3 oi c λ; rp qi · g

X! -H 01 o O -P :G G

•H i—I Xl MJ -H -H 1 -H TO >-c '—!

i—I rHl 01Ή|>—I P i—i C 01 1—l-P

-H >i -H >i CM E >i CM >i C3 >1 -H -p :c3 G

t— i—I £h i—I G ·—t -H £h 1—I i>j ! >i I -H E r>

« >, +J >1 Mi U Ό G C_1 G H1 G -H Mi Ή O

>1 01 >1 01 I I -P I -P I -P rH —’O)

GE-PXiH' o< G o* G P-ι C >i -P -P

aii oii - ^ ai - oi i oi >ι υ a> o

CPH* E Gro (Ο X3 o Λ cm X3 GO CG

01 CT Φ G

m co g co

I r- G

sd I P M P *-H rH i—I i—I r- G dl

G CQCQUUUO I rH

rj H *K

pj X CO 01 -r 4J | co Ui G ·*0 Ti ττ -P 0) 10 ^ XGGO GGGGG G G G · Mi

ao-p.. co ri« m co r~ oo cr o D<G

pqnJO! corocococo ro co H* G g 29 70023

Esimerkki 2 (suoritusmuoto e)) 1'-(3/4-diklooribentsyyli)-5'-kloorispiro/imidatso-3 1 -indoliinj7~2 r2 1 ,5-trioni Sulfuryylikloridia (16,0 ml) lisättiin 10 minuu-5 tin aikana sekoitettuun seokseen, jossa oli 1'-(3,4-dikloo-ribentsyyli)spiro^imidatsolidiini-4,3'-indoliini7~2,2' , 5-trionia (28,2 g) etikkahapossa (400 ml). Saatua seosta sekoitettiin sitten 40 minuuttia 60 - 65°C:ssa. Muodostunut kirkas liuos kaadettiin veteen (3 1). Saostunut kiinteä ai-10 ne koottiin talteen suodattamalla, pestiin vedellä ja kuivattiin ilmassa. Kiteyttämällä näin saatu raaka kiinteä aine uudelleen vesipitoisesta propan-2-olista saatiin 1'-(3,4-diklooribentsyyli)-5'-kloorispiro/imidatsolidiini-4,3'-indoliini7~2,2',5-trionia (yhdiste n:o 41), saanto 15 15,4 g; sp. 257 - 259°C.

Esimerkki 3 (suoritusmuoto d)) 1'-(3,4-diklooribentsyyli)-51-nitrospiro/imidatso-lidiini-4,31-indoliini7-2,21,5-trioni Savuavaa typpihappoa (0,2 ml) lisättiin 10 minuu-20 tin kuluessa sekoitettuun liuokseen, jossa oli 11 — (3,4 — diklooribentsyyli)spiro/imidatsolidiini-4,31-indoliini7-2,2',5-trionia (1,79 g) väkevässä rikkihapossa (1,5 ml), jota pidettiin 0 - 5°C:n lämpötilassa. Reaktioseosta sekoitettiin sitten tunnin ajan 0 - 5°C:ssa ja lopuksi vielä 25 tunnin ajan 5 - 20°C:ssa. Sitten liuos kaadettiin murskattuihin jäihin (300 g) ja muodostunut seos uutettiin etyyliasetaatilla. Yhdistetyt uutteet pestiin vedellä (3 x 150 ml), sitten suolaliuoksella (100 ml) ja kuivattiin magnesium-sulfaatilla. Uutteet haihdutettiin kuiviin ja jäljelle jää-30 nyt öljy liuotettiin uudelleen etyyliasetaattiin (20 ml). Liuos haihdutettiin kromatografialaatua olevan silikagee-lin läsnäollessa ja jäännös siirrettiin kolonnin yläpäähän, jossa oli samaa silikageeliä tolueenilla käsiteltynä. Ko-lonni eluoitiin lisääntyvin pitoisuuksin etyyliasetaattia 35 sisältävällä tolueenilla (tilavuussuhteeseen 1:1 saakka).

30 70023 Pääkomponenttia sisältävät fraktiot yhdistettiin (TLC: Λ/ 0,6 SiC^Ha: eluenttina etyyliasetaatti/tolueeni tilavuussuhteessa 1:1) ja haihdutettiin kuiviin. Jäännös kiteytettiin uudelleen tolueeni/etyyliasetaatti/bensiini 60-5 80°C-seoksesta, jolloin saatiin 1'-(3,4-diklooribentsyyli)-51-nitrospiro/imidatsolidiini-4,3'-indoliini7~2,2', 5-tri-onia (yhdiste n:o 42), saanto 0,46 g; sp. 249 - 251°C.

Käyttämällä samanlaista menetelmää, mutta lähtemällä 1 ’ -{2—fluori-4-bromibentsyyli)spiro/imidatsolidiini-10 4,3'-indoliini/-2,2',5-trionista ja vastaavasti 1'-bentsyy- li~5 ' -brom.ispiro/Tmidatsolidiini-4,3 ' -indoliin.i7“2,2' , 5-trionista, saatiin 1'-(2 — fluori-4-bromi-5-nitro-bentsyyli)-5'-nitrospiroT^datsolidiini-4,3 Vindoliini7“2,2',5-trionia (yhdiste n:o 43), sp. 180 - 181^C (kiteytetty uudelleen isopropa-15 noli/bensiini 60 - 80°C-seoksesta ) 36 %:n saannoin; ja 1!~ (4-nitrobentsyyli)-5'-bromi-7'-nitrospiro^/imidatsolidiini-4,31-indoliini7~2,2',5-trionia (yhdiste n:o 44), sp. 245 -246°C (kiteytetty uudelleen etyyliasetatti/bensiini 60 - 80°C-seoksesta) 7 %:n saannoin.

20 Esimerkki 4 (suoritusmuoto c)) 1 1 - (4-bromi- 3,5-diklooribentsyyli) spiro/.imidatsoli-diini-4,3'-indoliini7-2,21,5-trioni Trimetyylisilyylisyanidia (0,6 g) lisättiin sekoitettuun liuokseen, jossa oli 1-(4-bromi-3,5-diklooribentsyy-25 li)indoliini-2,3-dionia (1,2 g) kuivassa 1,2-dimetoksietaa-nissa (40 ml). Seosta sekoitettiin 5 tuntia, jolloin saatiin 1-(4-bromi-3,5-diklooribentsyyli)-3-syano-3-(trimetyy-lisilyylioksi)-indoliini-2-onia in situ. Sitten lisättiin liuos, jossa oli ammoniumkarbonaattia (6,0 g) vedessä (40 30 ml). Muodostunutta seosta lämmitettiin kiehuttaen 6 tuntia, jäähdytettiin ja haihdutettiin kuiviin. Jäännöstä käsiteltiin veden (100 ml) kanssa ja seos erotettiin suodattamalla. Jäännös pestiin lämpimällä vedellä (2 x 50 ml). Vesipitoinen suodos ja pesunesteet jäähdytettiin 0 - 5°C:seen ja seos 35 tehtiin happameksi (pH 4) 2-m suolahapolla. Erottunut kiin- 31 70023 teä aine koottiin talteen suodattamalla, pestiin vedellä, kuivattiin ilmassa ja kiteytettiin uudelleen vesi/N,N-di-metyyliformamidi-seoksesta (tilavuussuhde 1:1), jolloin saatiin 1'-(4-bromi-3,5-diklooribentsyyli)spiro^Imidatsolidii-5 ni-4,3'-indoliini7~2,2',5-trionia (yhdiste 45), saanto 0,63 g; sp. 290 - 292°C.

Käyttämällä samanlaista menetelmää, mutta lähtemällä sopivasta 1-bentsyyli-indoliini-2,3-dionista, saatiin seuraavat yhdisteet: 10 Yhdiste n:o 46: 1'-(3,4-diklooribentsyyli)-6'-kloo- rispiro/imidatsolidiini-4,3'-indoliini7”2,2',5-trioni, sp. 286 - 287°C (kiteytetty uudelleen etyyliasetaatti/bensiini 60 - 80°C-seoksesta) 57 %:n saannoin.

Yhdiste n:o 47: 1'-(3,4-diklooribentsyyli)-5',6-15 dimetyylispiro/imidatsolidiini-4,3'-indoliini7-2,21,5-tri-oni, sp. 262 - 263°C (kiteytetty uudelleen etyyliasetaatti/ bensiinin 60 - 80°C-seoksesta 10 %:n saannoin; ja

Yhdiste n:o 48: 1'-(3,4-diklooribentsyyli)-7'-etyyli-spiro/lmidatsolidiini-4,31-indoliini7-2,21,5-trioni, sp.

20 232 - 233°C (kiteytetty uudelleen etyyliasetaatti/bensiini 60 - 80°C-seoksesta 7 %:n saannoin.

Käyttämällä samanlaista menetelmää, joka on selostettu esimerkissä 4, mutta lähtemällä sopivasta kaavan III mukaisesta 1-bentsyyli-indoliini-2,3-dionista ja muodosta-25 maila välillä vastaava kaavan VII mukainen 1-bentsyyli-3- 3 trimetyylisilyylioksi-3-syano-indoliini-2-oni (R = tri-metyylisilyyli), saadaan seuraavat kaavan I mukaiset yhdisteet: 70023 32 * o p VO CN *— 00 N*

C t— LT) t- ID

3 cx> ifl — tn •H <0 in -r-ι

<D O

>11 -P

^ G G G

-h φ φ to Ό Λ Λ <0 :3 -h \ U ^ m

in e -H O -H U

in cn 3 -P o -P O G

mo ε +JO-PO cu ιηαι u «j T- nj oo t! AC >i tn O to ns -h

>1 -M G VW 4-> I 4-> I CU

P -P -H -W CU CU -P

>t(U-P rP-HinOCOO-H -P

(U-PO >i <H 3 oo 3 vo G o -P >t 3 >ι O Ή ·Η Φ 3

-H :ifl -H -P G Ή -H ιΗ -H Φ -P

ft AC .H φ 3 >i G >i G G

E -P >Ί -H >i -H rH G

H φ -P -H -P -W O Φ τ>εΦωΦΦ·Ρ -n >1

-P

Φ

-P

— P~ VO LT) VO 00 >1 cj av oo n* m oo cu

O CN CN CN CN CN -P

-r-|

111 I I AC

• G

ft m vn n· ld Γ"- Φ CO av oo Ν’ m ro Φ

(N (N IN CN IN rH

r—t Φ

Tl 3 I 3

•H < IN

G CN Ή -P

Φ G I -H rH ft U 3 Φ 3 -H -P U I I >

UI 3 -P -P | | - I O

-P X in G - vo vo

G G Λ Φ in - -P

Φ Φ 3 3 - O

cQ w tn -p m m G

G

3 nH 3 W i—i co f~t >i Ή Ή Ή >ι >ι Ή rH <-Η >ι in >ι >1 >1 * ε -Ρ >1 >ι >1 ν 3 G in in in

G Φ -P -P -P

C Λ G G G

*- -Η -W φ φ Φ ft AC in Xi Λ Λ

I X I I I

CN o CN CN CN

rH Pi I-1 rH rH

U Ί3 O U U

I >1 I I I

x; in ' I ' - m η to τί Φ

P

in w av o «— <N ro fl O r* m in m m Λ ··

>H G

33 70023

Tarvittavia kaavan III mukaisia lähtöaineita saatiin antamalla sopivan indoliini-2,3-dionin reagoida kaavan 1 R .X mukaisen halogenidin kanssa, kuten esimerkissä 1 on selitetty, ja niiden ominaisuudet olivat seuraavat: * 34 70023

O

4-J

G —- h· in r- cn m in o oo (0 <#> ro «noo t— uo Γ" -<a< (0 —· en i e α eu <t3 O Λ -ro

m O ^ O

m -H 00 -H -H U +J

U) UI jj +) +J O C

0) O -P | -P -P O (0 ^ „ CU -H «J «J«Jao (¾ en rHajotC <0 en

>1-Ρ£ OP 10 P P I

-p -p -H e <D <U eu e >> <u P -h to w -Htn-Htno qj CU-PO rH Cp (ö e <ö C rt eo ·η Ti P >1 P O O -rl -rt -rl φ -H i—t -i-Η •J ™ -P G M Ή -rl rH QJ rH -rl O 0)

X X <~\ flj 04 >1 B) >1 3 >1 C β -P

-P O OrOr-i>-t-r-tf^ 4J

eu tn-p oj-po-p-h-p o £ -h eu xjeu-ptDeneu rt

-P

e eu -ΓΊ

CT

e_> ro (NO o O <— o ro +j o τρ 00 (N (N (T Γ" O o P .

' ' (N t— (N r— T— «— (N «— O)

-P

• I II I I I I I >.

Λ <u

m T- O 00 N· O r- CN -P

'S* 00 1— (N CT n- CT (Ti -H

(N T— (N *— r- r- 1- T— χ

C

I «

L ^ -H CU

P ^ I -rt r-t (N rH

P -rt i—I >1 (NM rH

mSLTl rHO>.>irHfeO Q) X S Τί U I >1 P U I I Ti ^2-P-P I I CD P (U 1 CO 10 I p

Pp^wc o-euim»^ P

S S ·§ ^ ^ in m p tn -p n] >

•rt O

•H Ή -H rH «H »H *H

rHrH r—Η^ίγΗγ-Η «~H 4J

ΪΗ >1 >1 >i >1 Uh ΪΗ O

>1 >-i >1 S >1 >1 G

t tntn cn rt en tn tn e CN P P 4-> β 4-> -P -P rt r4 CC CCCC e (0 u a; ai tu -h φ eu eu en I -H Λ Λ Λ Λ Λ Λ

'“L, in rH I I lilt I

04 - >1 (N <N CN CN CN CN <N * ΓΟ ΪΗ rH ·—I rH I—I r—I rH i—I *—'

lenuu UOUU U

P P I I till I

CQ C ^ rr rO O’ Ν' in I QJ * -. -.

•Ν' .X3 ro co rotNroro ro

jxj rH f—t I—I I—I I—f rH rH rH

U UO UUUCJ u 1 :θ -P <u ,Cco (0 rt rt rt rt rt rt to

MtJ-rt·· m eon- oocti—(n ro C rt C h· rp ίτ in m m 35 _ _ 70023 Lähtöaine n:o 50a, 1-(4-hydroksibentsyyli)-indoliini-2, 3-dioni, saatiin seuraavasti:

Kaliumhydroksidin etanoliliuosta (16,6 g 400 ml:ssa) lisättiin sekoitettuun liuokseen, jossa oli indoliini-2,3-5 dionia (isatiini) (43,6 g) dimetyylisulfoksidissa (400 ml). 10 minuutin kuluttua lisättiin liuos, jossa oli 4-asetoksi-bentsyylibromidia (76,3 g) dimetyylisulfoksidissa (40 ml). Seosta sekoitettiin 72 tuntia ja sen jälkeen se kaadettiin jää/vesi-seokseen (ru 1 000 ml). Aluksi muodostunut hartsi 10 kiteytyi hitaasti. Muodostunut kiinteä aine kiteytettiin uudelleen metanolista (500 ml), jolloin saatiin 1-(4-aset-oksibentsyyli)indoliini-2,3-dionia kiinteänä aineena, sp.

159 - 161°C.

Tämä kiinteä aine ja emäliuoksista lisäksi saatu 15 aine yhdistettiin ja kromatografoitiin silikageelillä (500 g) käyttäen eluenttina tölueenia, jossa oli lisääntyvin määrin etyyliasetaattia (25 tilavuus~%:iin asti). Eluaattifraktiot, jotka oli koottu käyttäen eluenttia, jossa oli 20 - 25 tilavuus-% etyyliasetaattia, yhdistettiin 20 ja haihdutettiin kuiviinf jolloin tolueenin ja etyyliasetaatin seoksesta uudelleen kiteyttämisen jälkeen saatiin 1-(4-hydroksibentsyyli)-indoliini-2,3-dionia (lähtöaine n:o 50 a) alhaalla sulavana kiinteänä aineena (sp. 28 -35°C).

25 Huom! On ilmeistä, että asetoksi-ryhmä hydrolysoi tuu halutuksi hydroksiryhmäksi edellä suoritetun piidioksil-la tapahtuneen kromatografoinnin aikana.

Esimerkki 5 (suoritusmuoto f)) 1'-(3,4-diklooribentsyyli)-5f-hydroksi-spiro/imid-30 atsolidiini-4,31 -indollin:i7-2,2 1 ,5-trioni

Seosta, jossa oli pyridiiniä (20 ml) ja väkevää suolahappoa (20 ml), lämmitettiin noin 180°C:ssa 20 minuuttia. Sitten lisättiin 11-(3,4-diklooribentsyyli)-5'metoksi-spiro^imidatsolidiini-4,3'-indoliini7-2,2',5-trionia (2,0 g) 35 ja muodostunutta seosta lämmitettiin edelleen tunnin ajan 36 70023 noin 180°C:ssa. Saatu liuos jäähdytettiin ja kaadettiin veteen (200 ml). Vesiseos uutettiin etyyliasetaatilla (2 x 200 ml), yhdistetyt uutteet pestiin vedellä (3 x 100 ml), sitten suolaliuoksella (kyllästettyä natriumkloridiliuosta) 5 (100 ml) , kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin. Saatu öljy liuotettiin etyyliasetaattiin (20 ml) ja haihdutettiin kromatografista laatua olevan silikageelin (10 g) läsnäollessa. Jäännös siirrettiin sitten kolonnin yläpäähän, jossa oli samaa silikageeliä (100 g) tolueenilla 10 käsiteltynä. Kolonni eluoitiin tolueenilla, jossa oli lisääntyvin pitoisuuksin etyyliasetaattia (50 tilavuus-%:iin asti). Eluaattifraktiot, jotka oli koottu käyttäen eluent-tia, jossa oli 50 tilavuus-% etyyliasetaattia, yhdistettiin ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 1'-{3,4-dikloori-15 bentsyyli)-51-hydroksi-spiro/imidatsolidiini-4,3'-indoliiniy-2,2',5-trionia (yhdiste n:o 54), saanto 0,7 g; sp. 296 -298°C (etyyliasetaatti/bensiini 60 - 80°C-seoksesta suoritetun uusintakiteytyksen jälkeen).

Esimerkki 6 (suolan muodostus) 20 Suodatettu liuos, jossa oli 1'-(3,4-dikloori-bents- yyli) spiro/imidatsolidiini-4,3 ' -indoliini7-2,2 ' , 5-trionia (3,76 g) vedessä (20 ml), joka sisälsi natriumhydroksidia (0,40 g), haihdutettiin kuiviin, jolloin jäljelle jäi jälkiä vedestä, joka poistettiin tislaamalla aseotrooppina toluee-25 nin kanssa. Näin saatiin vastaavaa mono-natrium-suolaa (yhdiste n:o 55) kvantitatiivisin saannoin amorfisena, hygroskooppisena kiinteänä aineena, jonka mikroanalyysi oli tyydyttävä.

Esimerkki 7 (suoritusmuoto b)) 30 11 -(3,4-diklooribentsyyli)-spiro/imidatsolidiini- 4,3'-indoliini7-2,21,5-trioni

Natriumhydridiä (1,5 g, 50 paino-%:n mineraaliöljy-dispersiota) lisättiin jatkuvasti liuokseen, jossa oli spi-ro/Imidatsolidiini-4,3'-indoliini7~2,2',5-trionia (2,17 g) 35 N,N-dimetyyliformamidin (40 ml) ja veden (20 ml) seoksessa.

37 70023

Saatua seosta sekoitettiin 30 minuuttia ja sitten lisättiin tiputtamalla 10 minuutin kuluessa liuos, jossa oli 3,4-di-klooribentsyylikloridia (1,95 g) tetrahydrofuraanissa (5 ml). Saatua liuosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 2 5 tuntia ja sen jälkeen se kaadettiin veteen (150 ml). Seos tehtiin happameksi väkevällä suolahapolla ja uutettiin sitten eetterillä (2 x 100 ml). Yhdistetyt uutteet pestiin vedellä (3 x 100 ml), sen jälkeen kyllästetyllä natriumklori-diliuoksella (100 ml), kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja 10 haihdutettiin kuiviin. Jäljelle jäänyt kiinteä aine liuotettiin kloroformiin ja puhdistettiin kromatografisesti piidioksidilla (25 g) käyttäen eluenttina lisääntyvin pit-toisuuksin etyyliasetaattia sykloheksaanissa. Haihduttamalla kuiviin etyyliasetaatti-rikkaat fraktiot saatiin 1'-15 (3,4-diklooribentsyyli)-spiro^imidatsolidiini-4,3'-indo- liini_7~2,2 ', 5-trionia, joka oli identtistä esimerkissä 1 saadun tuotteen kanssa.

Esimerkki 8 (optisten isomeerien erotus) (d) -1 1 - (3,4-diklooribentsyyli) -spiro/j-midatsoli-20 diini-4,31-indoliini7~2,2 *,5-trioni (dl)-11-(3,4-diklooribentsyyli)-spiro^imidatsoli-diini-4 ,3'-indoliini7-2,2',5-trionia (4,4 g) lisättiin 61,5 mitään 0,19-m (1)-Ν,Ν,Ν-trimetyyli(1-fenyylietyyli)-ammoniumhydroksidin liuosta. Seosta lämmitettiin liukene-25 misen helpottamiseksi ja sitten haihdutettiin kuiviin.

Jäännös liuotettiin lämpimään propan-2-oliin (11 ml). Saatua liuosta jäähdytettiin 0°C:ssa 48 tuntia. Muodostunut kiinteä aine koottiin talteen suodattamalla, pestiin kylmällä propan-2-olilla (5 ml), sitten bensiinillä (kp. 40 30 - 60°C) (20 ml) ja kiteytettiin uudelleen kahdesti propan- 2-olista, jolloin saatiin (1)-Ν,Ν,Ν-trimetyyli-(1-fenyylietyyli) ammoniumhydroksidin ja (d)-1'-(3,4-diklooribentsyyli) -spiro^Imidatsolidiini-4,3 *-indoliini^-2,2',5-trionin (d)diastereoisomeerisuolaa (1,6 g), sp. 148 - 150°C, 35 /0*7^ +32,8° (c, 1,4; metanoli) .

38 7 00 23

Suola (1,6 g) liuotettiin veteen (10 ml) ja metano-liin (3 ml) ja liuos tehtiin happameksi väkevällä suolahapolla (1 ml). Saostunut kiinteä aine koottiin talteen, pestiin vedellä ja kiteytettiin uudelleen etanolista, jol-5 loin saatiin (d)-1'-(3,4-diklooribentsyyli)-spiro/imid- atsolidiini-4,31-indoliini7~2,2',5-trionia, sp. 199 - 200°C, +41° (c, 1,6; metanoli) Lähtöaineena käytettyä kvaternääristä ammoniumhydr-oksidi-liuosta saatiin laskemalla (1)-Ν,Ν,Ν-trimetyyli-10 (1-fenyylietyyli)ammoniumjodidin (27,8 g) vesiliuosta (I. Angers ja H. E. Zieger, J. Org. Chem. 1975, 40, 1457 -1460) hiukan aikasemmin hydroksidi-muotoon muunnetun anio-ninvaihtajahartsi-pylvään ("Amberlite" IRA 401, 200 g) läpi. ("Amberlite" on tavaramerkki).

15 On ilmeistä, että muitakin optisesti aktiivisten kvaternääristen ammoniumhydroksidien, esimerkiksi Ν,Ν,Ν-trimetyyli-(1-metyyli-2-hydroksi-2-fenyylietyyli)ammonium-hydroksidin yksittäisiä enantiomeerejä voidaan käyttää kaavan I mukaisten yhdisteiden raseemisten muotojen erotta-20 miseen.

Esimerkki 9 (suoritusmuoto c)) 1 1 - ( 3,4-diklooribentsyyli) -spiro/j-midatsolidiini- 4,3 1 -ίηάο1ϋηΐ7~2,2 ' , 5-tr ioni

Seosta, jossa oli 3-bentsyylioksikarbonyylioksi-1-25 (3,4-diklooribentsyyli)-3-syanoindoliini-2-onia (1,0 g) ja ammoniumkarbamaattia (5,0 g) sekä etanolin (20 ml) ja veden (20 ml) liuosta, lämmitettiin palautustislauslämpötilassa 3 tunnin ajan. Seokseen lisättiin hienojakoista aktiivi-hiiltä (0,5 g), haihdutettiin pieneen tilavuuteen ja suoda-30 tettiin. Suodos jäähdytettiin, tehtiin happameksi ja uutettiin etyyliasetaatilla (100 ml). Uute pestiin ensin vedellä, ja sitten kyllästetyllä natriumkloridiliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin. Kiinteä jäännös kiteytettiin kahdesti etyyliasetaatin ja ben-35 siinin (kp. 60 - 80°C) seoksesta, jolloin saatiin puhdasta 11 -(3,4-diklooribentsyyli)-spiro/imidatsolidiini-4, 3' -indoliini/-2,2',5-trionia (0,15 g), sp. 267 - 269°C.

39 70023 Lähtöaine valmistettiin seuraavasti:

Seokseen, jossa oli 1-(3,4-diklooribentsyyli)-indo-liini-2 ,3-dionia (24,5 g), kaliumsyanidia (5,2 g) ja bentsyylitrimetyyliammoniumkloridia (0,6 g), lisättiin 5 vettä (40 ml) ja metyleenikloridia (400 ml), ja ravistettiin voimakkaasti. Tämän jälkeen sekoituksen alaiseen reak-tioseokseen tiputettiin 2 tunnin aikana erikseen liuosta, jossa oli bentsyylioksikarbonyylikloridia (23,0 ml) mety-leenikloridissa (120 ml), sekä liuosta, jossa oli 2-m nat-10 riumhydroksidia (50 ml) ja vettä (90 ml). Sekoitettiin vielä 15 tunnin ajan, suodatettiin piimään läpi, ja erotettiin faasit. Vesifaasi uutettiin metyleenikloridilla (500 ml), ja orgaaniset faasit yhdistettiin. Pestiin vedellä (2 x 300 ml) ja kyllästetyllä natriumkloridiliuoksella 15 (300 ml), kuivattiin magnesiumsulfaatilla, ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 3-bentsyylioksikarbonyyiioksi-1-(3,4-diklooribentsyyli)-3-syano-indoliini-2-onia (16,0 g), sp. 110 - 112°C (kiteytetty kahdesti etanolista).

Analogisella tavalla lähtemällä 3-bentsoyylioksi-20 1- (3,4-diklooribentsyyli)-3-syano-indoliini-2-onista saa tiin 1'-(3,4-diklooribentsyyli)-spiro/imidatsolidiini- 4,3 ’ -indoliini7*-2,2 ' ,5-trionia, sp. 266 - 268°C (saanto 40 %) .

Lähtöaine valmistettiin käyttämällä asylointiai-25 neena bentsoyylikloridia, jolloin saatiin 3-bentsoyylioksi- 1-(3,4-diklooribentsyyli)-3-syano-indoliini-2-onia, sp.

145 - 146°C (saanto 48 %).

Claims

40 70023

1. Menetelmä uusien, sokeritaudin tai galaktosemian hoitoon soveltuvien 1'-substituoitu-spiro^imidatsolidiini-5 4,3'-indoliini/-2,2',5-trionien valmistamiseksi, joiden kaa va on h Ah % nh 10 A I ° I R1 15 jossa R on (1-12C)alkyyli, fenyyli tai naftyylimetyyli, tai kinnamyyli, joka voi olla substituoitu 1 tai 2 halogeenillä, tai bentsyyli, joka voi olla substituoitu 1, 2 tai 3 halogeenillä, (1-4C)alkyylillä, (1-4C)alkoksilla tai nitrolla, tai 20 yhdellä trifluorimetyylillä, syanolla tai hydroksilla, ja bentseenirenkaassa A on valinnaisesti 1 tai 2 halogeenia, (1-4C)alkyyliä tai nitroa, tai yksi hydroksi tai (1-4C)alk- oksi; lukuunottamatta yhdisteitä, joissa R on metyyli-, etyyli- tai n-propyyliryhmä tai substituoimaton bentsyyli-25 ryhmä, ja bentseenirengas A on substituoimaton, sekä näiden yhdisteiden farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojen, kuten alkalimetalli-, maa-alkalimetalli-, aluminium- tai ammonium-suolan, tai orgaanisen emäksen kanssa muodostetun suolan valmistamiseksi, tunnettu siitä, että 30 a) indoliini-2,3-dionin, jonka kaava on 41 70023 A III R1 5 annetaan reagoida alkalimetallisyanidin, ja ammoniumkarbo-naatin tai -karbamaatin kanssa; b) yhdisteen, jonka kaava on O

10 IL H ^ Nn _La A I \

15 H 2 annetaan reagoida yhdisteen kanssa, jonka kaava on R -X, 2. jossa R :11a on sama merkitys kuin R :llä, paitsi fenyyli, ja X on halogeeni tai aryyli- tai alkyyli-sulfonyylioksi, 20 sopivan emäksen läsnäollessa; c) yhdisteen, jonka kaava on OR3 „ ^--CN

25 A | VII I1 30 jossa R3 on asyyli tai tri-^O-^C)alkyyli/silyyli, annetaan reagoida ammoniumkarbonaatin tai -karbamaatin kanssa; 42 7 0 0 2 3 d) sellaisen kaavan I mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, jonka bentseenirenkaassa A on nitrosubstituentti ja/tai R on bentsyyliryhmä, jossa on nitrosubstituentti, nitrataan vastaavaa kaavan I mukaista yhdistettä, jonka 5 bentseenirengas A on substituoimaton tai jossa on vain yksi substituentti ja/tai R1 on bentsyyli, jossa voi olla 1 tai 2 substituentt.ia* e) kaavan I mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, jonka bentseenirenkaassa A on 1 kloori- tai bromisubstitu- 10 entti, kloorataan tai bromataan vastaavaa kaavan I mukaista yhdistettä, jonka bentseenirengas A on substituoimaton; tai f) kaavan I mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, jonka bentseenirenkaassa A ja/tai R :ssä on hydroksisubsti- 15 tuentti, dealkyloidaan vastaavaa kaavan I mukaista yhdistet- ·] tä, jonka bentseenirenkaassa A ja/tai R :ssä on {1-4C)alkok-sisubstituentti; minkä jälkeen, haluttaessa kaavan I mukaisen yhdisteen optisesti aktiivista muotoa, mainitun yhdisteen raseemi- 20 sen muodon annetaan reagoida sopivan orgaanisen emäksen optisesti aktiivisen muodon kanssa, minkä jälkeen seuraa näin saatujen suolojen diastereomeerisen seoksen tavanomainen erottaminen, ja mainitun yhdisteen optisesti aktiivisen muodon vapauttaminen käsittelemällä hapon kanssa tavalliseen 25 tapaan; ja haluttaessa saada farmaseuttisesti hyväksyttävää suolaa, kaavan I mukaisen yhdisteen annetaan reagoida sopivan emäksen kanssa, joka muodostaa farmaseuttisesti hyväksyttävän kationin, tavanomaista menetelmää käyttäen.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, 30 tunnettu siitä, että valmistetaan kaavan I mukainen yhdiste, jossa bentseenirengas A on substituoimaton tai siinä on halogeenisubstituentti asemassa 5', 6' tai 7'.

3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan kaavan I mukainen 35 yhdiste, jossa R1 on 4-halogeeni-, 2,4-dihalogeeni-, 3,4-di-halogeeni-tai 3,5-dihalogeeni-bentsyyli, jossa halogeeni-substituentit voivat olla samoja tai erilaisia. 43 70023