FI69096C - Foerfarande foer framstaellning av en karcinostatisk och immunostimulerande tf-2-substans - Google Patents
Foerfarande foer framstaellning av en karcinostatisk och immunostimulerande tf-2-substans Download PDFInfo
- Publication number
- FI69096C FI69096C FI820527A FI820527A FI69096C FI 69096 C FI69096 C FI 69096C FI 820527 A FI820527 A FI 820527A FI 820527 A FI820527 A FI 820527A FI 69096 C FI69096 C FI 69096C
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- precipitate
- water
- adjusted
- added
- medium containing
- Prior art date
Links
- 239000000126 substance Substances 0.000 title claims abstract description 65
- 101000651310 Desulfitobacterium hafniense (strain Y51) Trigger factor 2 Proteins 0.000 title claims abstract description 19
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 title claims abstract description 11
- 238000005057 refrigeration Methods 0.000 title 1
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 46
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims abstract description 21
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims abstract description 15
- 241000605909 Fusobacterium Species 0.000 claims abstract description 12
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 338
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 229
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 145
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 claims description 105
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 99
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N hydrochloric acid Substances Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 65
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 65
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 64
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 51
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 42
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 37
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 36
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 35
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 33
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 33
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 claims description 33
- 239000012452 mother liquor Substances 0.000 claims description 33
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 claims description 32
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 claims description 32
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 30
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 claims description 30
- GEHJYWRUCIMESM-UHFFFAOYSA-L sodium sulfite Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])=O GEHJYWRUCIMESM-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 30
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 29
- 238000001802 infusion Methods 0.000 claims description 28
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 claims description 27
- 239000008272 agar Substances 0.000 claims description 27
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 claims description 26
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 claims description 26
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 claims description 25
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 claims description 25
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 24
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 24
- LEVWYRKDKASIDU-IMJSIDKUSA-N L-cystine Chemical compound [O-]C(=O)[C@@H]([NH3+])CSSC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LEVWYRKDKASIDU-IMJSIDKUSA-N 0.000 claims description 23
- 239000004158 L-cystine Substances 0.000 claims description 23
- 235000019393 L-cystine Nutrition 0.000 claims description 23
- 229960003067 cystine Drugs 0.000 claims description 23
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 23
- 241000605986 Fusobacterium nucleatum Species 0.000 claims description 21
- 108010059712 Pronase Proteins 0.000 claims description 19
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 claims description 16
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 claims description 16
- 239000008101 lactose Substances 0.000 claims description 16
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 16
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 claims description 16
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 15
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 15
- 235000010265 sodium sulphite Nutrition 0.000 claims description 15
- GNBVPFITFYNRCN-UHFFFAOYSA-M sodium thioglycolate Chemical compound [Na+].[O-]C(=O)CS GNBVPFITFYNRCN-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 14
- 229940046307 sodium thioglycolate Drugs 0.000 claims description 13
- 108010050327 trypticase-soy broth Proteins 0.000 claims description 13
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 claims description 12
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 claims description 12
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 claims description 12
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 claims description 12
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 claims description 11
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 claims description 10
- 239000011148 porous material Substances 0.000 claims description 10
- 108010009004 proteose-peptone Proteins 0.000 claims description 10
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 9
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 claims description 9
- 208000001382 Experimental Melanoma Diseases 0.000 claims description 8
- 208000006268 Sarcoma 180 Diseases 0.000 claims description 8
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 8
- -1 phytonipeptone Substances 0.000 claims description 8
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 claims description 6
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 claims description 6
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 claims description 6
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 claims description 5
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 4
- 239000004365 Protease Substances 0.000 claims description 3
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 claims description 3
- AIUDWMLXCFRVDR-UHFFFAOYSA-N dimethyl 2-(3-ethyl-3-methylpentyl)propanedioate Chemical class CCC(C)(CC)CCC(C(=O)OC)C(=O)OC AIUDWMLXCFRVDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229940066779 peptones Drugs 0.000 claims description 3
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims description 3
- 229940024999 proteolytic enzymes for treatment of wounds and ulcers Drugs 0.000 claims description 3
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 claims description 3
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 claims description 3
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 claims description 3
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 claims description 3
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 claims description 3
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 claims description 2
- 230000003544 deproteinization Effects 0.000 claims description 2
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 claims description 2
- 230000001050 lubricating effect Effects 0.000 claims description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 2
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 claims description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims 45
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 claims 33
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 24
- 235000010419 agar Nutrition 0.000 claims 23
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 21
- 239000010200 folin Substances 0.000 claims 13
- OQUKIQWCVTZJAF-UHFFFAOYSA-N phenol;sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O.OC1=CC=CC=C1 OQUKIQWCVTZJAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 12
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 claims 10
- MYKOKMFESWKQRX-UHFFFAOYSA-N 10h-anthracen-9-one;sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O.C1=CC=C2C(=O)C3=CC=CC=C3CC2=C1 MYKOKMFESWKQRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 8
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 claims 8
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 claims 8
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 claims 8
- 238000002844 melting Methods 0.000 claims 8
- 230000008018 melting Effects 0.000 claims 8
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 claims 6
- 239000012609 strong anion exchange resin Substances 0.000 claims 5
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 4
- RJTZUHVCZIGJMB-UHFFFAOYSA-N hydron;1h-indole;chloride Chemical compound Cl.C1=CC=C2NC=CC2=C1 RJTZUHVCZIGJMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 4
- 230000001476 alcoholic effect Effects 0.000 claims 3
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 3
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 238000011084 recovery Methods 0.000 claims 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims 1
- JXUKAWQLFQEMRO-UHFFFAOYSA-N ClCl.N1C=CC2=CC=CC=C12 Chemical compound ClCl.N1C=CC2=CC=CC=C12 JXUKAWQLFQEMRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 206010048612 Hydrothorax Diseases 0.000 claims 1
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 claims 1
- YSVZGWAJIHWNQK-UHFFFAOYSA-N [3-(hydroxymethyl)-2-bicyclo[2.2.1]heptanyl]methanol Chemical compound C1CC2C(CO)C(CO)C1C2 YSVZGWAJIHWNQK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 125000003158 alcohol group Chemical group 0.000 claims 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 claims 1
- HRYZWHHZPQKTII-UHFFFAOYSA-N chloroethane Chemical compound CCCl HRYZWHHZPQKTII-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 208000003906 hydrocephalus Diseases 0.000 claims 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims 1
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 claims 1
- 239000006210 lotion Substances 0.000 claims 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 abstract description 30
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 abstract description 6
- 239000012530 fluid Substances 0.000 abstract description 4
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 abstract description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 abstract description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 abstract description 2
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 abstract 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 abstract 1
- 230000003327 cancerostatic effect Effects 0.000 description 109
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 101
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 97
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 75
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 43
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 41
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 40
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 24
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 23
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 18
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 15
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 13
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 10
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 9
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 8
- 238000010908 decantation Methods 0.000 description 8
- 229910001873 dinitrogen Inorganic materials 0.000 description 8
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 8
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 8
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 7
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 7
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 7
- 229920001429 chelating resin Polymers 0.000 description 6
- 230000003068 static effect Effects 0.000 description 6
- 229960001322 trypsin Drugs 0.000 description 6
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 5
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 5
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 5
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 5
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 5
- YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N trichloroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(Cl)(Cl)Cl YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 0 CCC**(*CCC*CC*CC*)N Chemical compound CCC**(*CCC*CC*CC*)N 0.000 description 4
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 4
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 4
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 3
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 3
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 description 3
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 3
- 229940126701 oral medication Drugs 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-SVZMEOIVSA-N (+)-Galactose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-SVZMEOIVSA-N 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N Butyric acid Chemical compound CCCC(O)=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N D-Maltose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 2
- SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N Indole Chemical compound C1=CC=C2NC=CC2=C1 SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RSPISYXLHRIGJD-UHFFFAOYSA-N OOOO Chemical compound OOOO RSPISYXLHRIGJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 159000000007 calcium salts Chemical class 0.000 description 2
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 2
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 2
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 2
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 2
- 159000000003 magnesium salts Chemical class 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 229920001467 poly(styrenesulfonates) Polymers 0.000 description 2
- 159000000001 potassium salts Chemical class 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 2
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 2
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 2
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 2
- CWERGRDVMFNCDR-UHFFFAOYSA-M thioglycolate(1-) Chemical compound [O-]C(=O)CS CWERGRDVMFNCDR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 1
- ATRRKUHOCOJYRX-UHFFFAOYSA-N Ammonium bicarbonate Chemical compound [NH4+].OC([O-])=O ATRRKUHOCOJYRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000221198 Basidiomycota Species 0.000 description 1
- 102000016938 Catalase Human genes 0.000 description 1
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 description 1
- 108090000317 Chymotrypsin Proteins 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-VRPWFDPXSA-N D-Fructose Natural products OC[C@H]1OC(O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-VRPWFDPXSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 1
- RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen sulfide Chemical compound S RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IMQLKJBTEOYOSI-UHFFFAOYSA-N Diphosphoinositol tetrakisphosphate Chemical compound OP(O)(=O)OC1C(OP(O)(O)=O)C(OP(O)(O)=O)C(OP(O)(O)=O)C(OP(O)(O)=O)C1OP(O)(O)=O IMQLKJBTEOYOSI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 238000003794 Gram staining Methods 0.000 description 1
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N Hexa-Ac-myo-Inositol Natural products CC(=O)OC1C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C1OC(C)=O SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-HWQSCIPKSA-N L-arabinopyranose Chemical compound O[C@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-HWQSCIPKSA-N 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 101100252165 Mus musculus Rnd2 gene Proteins 0.000 description 1
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 1
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 244000269722 Thea sinensis Species 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 1
- 108010046334 Urease Proteins 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- 230000007059 acute toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000403 acute toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001099 ammonium carbonate Substances 0.000 description 1
- 235000012501 ammonium carbonate Nutrition 0.000 description 1
- 125000000129 anionic group Chemical group 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000721 bacterilogical effect Effects 0.000 description 1
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 229960002376 chymotrypsin Drugs 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 239000012531 culture fluid Substances 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 238000005534 hematocrit Methods 0.000 description 1
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 1
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 1
- WHWDWIHXSPCOKZ-UHFFFAOYSA-N hexahydrofarnesyl acetone Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)=O WHWDWIHXSPCOKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000007236 host immunity Effects 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000005457 ice water Substances 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000036737 immune function Effects 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N indole Natural products CC1=CC=CC2=C1C=CN2 PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N indolenine Natural products C1=CC=C2CC=NC2=C1 RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 229910017053 inorganic salt Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960000367 inositol Drugs 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 1
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 description 1
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 description 1
- 239000003589 local anesthetic agent Substances 0.000 description 1
- 229960005015 local anesthetics Drugs 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 230000000242 pagocytic effect Effects 0.000 description 1
- 229940055729 papain Drugs 0.000 description 1
- 235000019834 papain Nutrition 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 238000005554 pickling Methods 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000005185 salting out Methods 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000035807 sensation Effects 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 230000007480 spreading Effects 0.000 description 1
- 238000003892 spreading Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 125000000446 sulfanediyl group Chemical group *S* 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 229940071127 thioglycolate Drugs 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 125000001493 tyrosinyl group Chemical group [H]OC1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 241001148471 unidentified anaerobic bacterium Species 0.000 description 1
- 238000010792 warming Methods 0.000 description 1
- 210000002268 wool Anatomy 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/05—Immunological preparations stimulating the reticulo-endothelial system, e.g. against cancer
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P1/00—Preparation of compounds or compositions, not provided for in groups C12P3/00 - C12P39/00, by using microorganisms or enzymes
- C12P1/04—Preparation of compounds or compositions, not provided for in groups C12P3/00 - C12P39/00, by using microorganisms or enzymes by using bacteria
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/26—Preparation of nitrogen-containing carbohydrates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Oncology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Claims (33)
1 O 3 tillvaratas, vatten tillsätts tili denna fällning, bland-ningens pH regleras till 7,5-8,0, därefter justeras dess pH till 3,5-4,5, supernatantvätskan separeras, dess pH justeras till 1,5-2,5, och den bildade fällningen tillvaratas 5 (vid behov kan denna fraktionering beroende av pH upprepas) för erhällande av TF-240.
1. Förfarande för framställning av en TF-2-substans som är TF-210, TF-220, TF-230, TF-240, TF-250, TF-300 (TF-5 310, TF-320 eller TF-330), TF-340 eller TF-350, eller ett sait av dessa, kännetecknat därav, att man odlar under anaeroba förhällanden i pH 5-8,5 och vid temperaturen 30-45°C under 1-5 dygn bakterier, som producerar TF-2-subs-tans och som hör tili släktet Fusobacterium, i ett odlings-10 medium som innehäller en kvävekälla, en kolkalla, en vita-minkälla, reducerande medel och oorganiska salter tillsam-mans med agar eller utan detta, man tillsätter tili den sä bildade odlingen eller dess supernatantlösning ett ut-fällande medel, som är ett hydrofilt organiskt lösningsmedel, 15 i en koncentration om 30-80 volymprocent och i pH 1,5-7, man läter fällningen bildas, tar fällningen tillvara, frak-tionerar fällningen beroende av pH och tillvaratar TF-2-substansen, som är TF-210, TF-220, TF-230, TF-240 eller TF-250, eller man fraktionerar fällningen beroende av pH och 20 utsätter den erhällna fraktionen för en deproteiniserings-behandling och tar TF-2-substansen tillvara, som är TF-3CC, (TF-310, TF-320 eller TF-330), TF-340 eller TF-350, och om man sk vill, bildas pä sedvanligt sätt ett fysiologiskt godtagbart sait, varvid nämnda TF-210-substans har följande 25 egenskaper: (a) gräskiftande vitt-1jusbrunt pulver, (b) förhindrar tillväxt av Ehrlichs ascitestumör, Ehrlichs fasta tumör, sarkoma 180 och B-16 melanoma hos möss, och har en immunostimulerande aktivitet, 30 (c) är olöslig i metanol, etanol, aceton, bensen, kloroform, etylacetat och dietyleter, (d) saknar tydlig smältpunkt och sönderfaller vid 160-235°C, (e) dess IR-absorptionsspektrum, vilket erhällits 35 medelst KBr-tablettmetoden, har absorptionstoppar i omrädet 3600-3200, 2950-2920, 1680-1620, 1550-1510, 1440, 1380, 1240-1220 och 1120-1020 cm"1, 92 69096 (f) UV-absorptionsspektret, mätt i pH 7,0 i en vatten-lösning av den vattenlösliga fraktionen uppvisar stark absorption vid absorptionskanten, och en absorptionstopp i omrädet 248-265 nm, 5 (g) den ger en positiv Molisch reaktion, fenolsvavel- syrareaktion, antron-svavelsyrareaktion, indolklorvätereak-tion och Lowry-Folins reaktion, (h) elementaranalys: C: 40 - 43 % H: 5 - 7 % N: 9 - 10 % 10 (i) sackaridhalten av den vattenlösliga fraktionen, bestämd i pH 7 medelst en fenol-svavelsyrametod är cirka 5-25 vikt-%, uttryckt som glukos, och proteinhalten, bestämd medelst Lowry-Folins metod är cirka 20-50 vikt-%, uttryckt som nötkreatur-serumalbumin och nämnda TF-220-substans har 15 följande egenskaper: (a) gräskiftande vitt-1jusbrunt pulver, (b) förhindrar tillväxt av Ehrlichs ascitestumör, Ehrlichs fasta tumör, sarkoma 180 och B-16 melanoma hos möss, och har en immunostimulerande aktivitet, 20 (c) är olöslig i metanol, etanol, aceton, bensen, kloroform, etylacetat och dietyleter, (d) saknar tydlig smältpunkt och sönderfaller vid 160-240°C, (e) dess IR-absorptionsspektrum, vilket erhällits 25 medelst KBr-tablettmetoden, har absorptionstoppar i omrä- dets 3600-3200, 2950-2920, 1680-1620, 1550-1510, 1440, 1380, 1240-1220 och 1120-1020 cm'1, (f) UV-absorptionsspektret, mätt i pH 7,0 i en vatten-lösning av den vattenlösliga fraktionen uppvisar stark ab- 30 sorption vid absorptionskanten, och en absorptionstopp i omridet 248-265 nm, (g) den ger en positiv Molisch reaktion, fenol-svavel-syrareaktion, antron-svavelsyrareaktion, indolklorvätereak-tion och Lowry-Folins reaktion, 35 (h) elementaranalys: C: 40 - 42 % H: 5 - 7 % N: 7 - 9 % II 93 6 9 0 9 6 (i) sackaridhalten av den vattenlösliga fraktionen, bestämd i pH 7 och medelst en fenol-svavelsyrametod är cirka 5-20 vikt-%, uttryckt som glukos, och proteinhalten, bestämd medelst Lowry-Folins metod är cirka 10 vikt-% eller mindre, 5 uttryckt som nötkreatur-serumalbumin, och nämnda TF-230-sub-stans har följande egenskaper: (a) gräskiftande vitt-1jusbrunt pulver, (b) förhindrar tillväxt av Ehrlichs ascitestumör, Ehrlichs fasta tumör, sarkoma 180 och B-16 melanoma hos 10 möss, och har en immunostimulerande aktivitet, (c) är olöslig i metanol, etanol, aceton, bensen, kloroform, etylacetat och dietyleter, (d) saknar tydlig smältpunkt och sönderfaller vid 185-225°C, 15 (e) dess IR-absorptionsspektrum, vilket erhällits medelst KBr-tablettmetoden, har absorptionstoppar i omra-det 3600-3200, 2950-2920, 1680-1620, 1550-1510, 1440, 1380, 1240-1220 och 1120-1020 cm"1, (f) UV-absorptionsspektret, mätt i dess vattenlösning 20 i pH 7,0 uppvisar stark absorption vid absorptionskanten, och en absorptionstopp i omrädet 249-264 nm, (g) den ger en positiv Molisch reaktion, fenolsvavel-syrareaktion, antron-svavelsyrareaktion, indolklorvätereak-tion och Lowry-Folins reaktion, 25 (h) elementaranalys: C: 42 - 45 % H: 5 - 7 % N: 10 - 11 % (i) sackaridhalten av den vattenlösliga fraktionen, bestämd i pH 7 medelst en fenol-svavelsyrametod är cirka 5-25 vikt-%, uttryckt som glukos, och proteinhalten, bestämd 30 medelst Lowry-Folins metod är cirka 30-60 vikt-%, uttryckt som nötkreatur-serumalbumin, och nämnda TF-240-substans har följande egenskaper: (a) gräskiftande vitt-1jusbrunt pulver, (b) förhindrar tillväxt av Ehrlichs ascitestumör,
35 Ehrlichs fasta tumör, sarkoma 180 och B-16 melanoma hos möss, och har en immunostimulerande aktivitet, 69096 (c) är olöslig i metanol, etanol, aceton, bensen, kloroform, etylacetat och dietyleter, (d) saknar tydlig smältpunkt och sönderfaller vid 200-215°C, 5 (e) dess IR-absorptionsspektrum, vilket erhällits medelst KBr-tablettmetoden, har absorptionstoppar i omrädet 3600-3200, 2950-2920, 1680-1620, 1550-1520, 1410-1360, 1280-1210, 1060, 960 och 820 cm"1, (f) UV-absorptionsspektret, mätt i dess vattenlösning 10 i pH 7 uppvisar stark absorption vid absorptionskanten, och en absorptionstopp i omrädet 250-265 nm, (g) den ger en positiv Molisch reaktion, fenol-svavel-syrareaktion, antron-svavelsyrareaktion, indolklorvätereak-tion och Lowry-Folins reaktion, 15 (h) elementaranalys: C: 35 - 38 % H: 4- 5 % N: 12 - 14 % (i) sackaridhalten, bestSmd medelst en fenol-svavel-syrametod, är cirka 15-35 vikt-%, uttryckt som glukos, och proteinhalten, bestämd medelst Lowry-Folins metod är cirka 20 20-30 vikt-%, uttryckt som nötkreatur-serumalbumin, och nämnda TF-250-substans har följande egenskaper: (a) gräskiftande vitt-1jusbrunt pulver, (b) förhindrar tillväxt av Ehrlichs ascitestumör, Ehrlichs fasta tumör, sarkoma 180 och B-16 melanoma hos 25 möss, och har en immunostimulerande aktivitet, (c) är löslig i vatten men olöslig i metanol, etanol, aceton, bensen, kloroform, etylacetat och dietyleter, (d) saknar tydlig smältpunkt och sönderfaller vid 165-210°C, 30 (e) dess IR-absorptionsspektrum, vilket erhällits me delst KBr-tablettmetoden, har absorptionstoppar i omrädet 3600-3200, 2950-2920, 1680-1620, 1550-1510, 1410-1380, 1240-1210 och 1150-1120, 1080-1020, 980 och 810 cm"1, (f) UV-absorptionsspektret, mätt i dess vattenlösning 35 i pH 7,0 uppvisar stark absorption vid absorptionskanten, och en absorptionstopp i omrädet 248-269 nm, It . 95 6 9 0 9 6 (g) den ger en positiv Molisch reaktion, fenol-svavel-syrareaktion, antron-svavelsyrareaktion, indolklorvätereak-tion och Lowry-Folins reaktion, (h) elementaranalys:
2. Förfarande enligt patentkravet 1, känne- t e c k n a t därav, att fraktioneringen av fällningen, beroende av pH, utförs genom att vatten tillsätts tili fäll-20 ningen och den resulterande lösningens pH regleras sä, att en fraktion kan tillvaratas, som Sr olöslig i vatten i pH 3.5- 4,5.
3. Förfarande enligt patentkravet 2, känne- t e c k n a t därav, att fraktioneringen av fällningen, 25 beroende av pH, utförs genom att vatten tillsätts tili fällningen och den resulterande lösningens pH regleras tili vär-det 3,5-4,5, och den bildade fraktionen, som är olöslig i vatten, tillvaratas.
4. Förfarande enligt patentkravet 1, känne-30 tecknat därav, att fraktioneringen av fällningen, beroende av pH, utförs genom att vatten tillsätts tili fällningen och den resulterande lösningens pH regleras sä, att en fraktion kan tillvaratas, som är olöslig i vatten i pH 5.5- 6,5. 35 5. Förfarande enligt patentkravet 1, känne- tecknat därav, att fraktioneringen av fällningen, 98 69096 beroende av pH, utförs genom att vatten tillsätts tili fäll-ningen och den resulterande lösningens pH regleras sä, att en fraktion kan tillvaratas; sora är vattenlöslig i pH 5,5- 6,5 men olöslig i vatten i pH 3,5-4,5. 5 6. Förfarande enligt patentkravet 1, känne- t e c k n a t därav, att fraktioneringen av fällningen, beroende av pH, utförs genom att vatten tillsätts tili fällningen och den resulterande lösningens pH regleras s£, att en fraktion kan tillvaratas, sora är vattenlöslig i pH 3,5-10 4,5 men olöslig i vatten i pH 1,5-2,5.
5 C: 30 - 33 % H: 3 - 5 % N: 3 - 5 % (i) sackaridhalten, bestämd medelst en fenol-svavel-syrametod är cirka 60-80 vikt-%, uttryckt som glukos, och proteinhalten bestämd medelst Lowry-Folins metod är cirka 5-20 vikt-%, uttryckt som nötkreaturserumalbumin, och nämn- 10 da TF-300-substans (TF-310, TF-320 och TF-330) har följande egenskaper: (a) gräskiftande vitt-1jusbrunt pulver, (b) förhindrar tillväxt av Ehrlichs ascitestumör, Ehrlichs fasta tumör, sarkoma 180 och B-16 melanoma hos 15 möss, och har en immunostimulerande aktivitet, (c) är löslig i vatten men olöslig i metanol, etanol, aceton, bensen, klorofom, etylacetat och dietyleter, (d) saknar tydlig smältpunkt och börjar sönderfalla vid cirka 180°C sönderfaller märkbart vid över 195°C, 20 (e) dess IR-absorptionsspektrum, vilket erhällits medelst KBr-tablettmetoden har absorptionstoppar i omrädet 3500-3300, 2920-2850, 1660-1620, 1580-1540, 1460-1400, 1380-1360, 1120, 1080-1020, 970 och 820-800 cm"1, (f) UV-absorptionsspektret, mätt i dess vattenlösning 25. pH 7,0 uppvisar stark absorption vid absorptionskanten och en absorptionstopp i omrädet av 246-280 nm, (g) den ger en positiv Molisch reaktion, fenol-svavel-syrareaktion, antron-svavelsyrareaktion, indolklorvätereak-tion och Lowry-Folins reaktion, men en negativ ninhydrin- 30 reaktion, (h) elementaranalys: C: 38 - 47 % H: 5 - 7 % N: 1 - 4 % (i) sackaridhalten, bestämd medelst en fenol-svavel-syrareaktion är cirka 16-60 vikt-%, uttryckt som glukos, 35 och proteinhalten bestämd medelst Lowry-Folins metod är cirka 10 vikt-% eller mindre, uttryckt som nötkreatur-serum- t 96 69096 albumin, och nämnda TF-340-substans har följande egenskaper: (a) gräskiftande vitt-ljusbrunt pulver, (b) förhindrar tillväxt av Ehrlichs ascitestumör, Ehrlichs fasta tumör, sarkoma 180 och B-16 melanoma hos 5 möss, och har en immunostimulerande aktivitet, (c) är löslig i vatten men olöslig i metanol, etanol, aceton, bensen, kloroform, etylacetat och dietyleter, (d) saknar tydlig smältpunkt, börjar sönderfalla vid cirka 140°C och sönderfaller märkbart vid 200°C eller vid 10 temperaturer högre än denna, (e) dess IR-absorptionsspektrum, vilket erhällits medelst KBr-tablettmetoden, har absorptionstoppar i omrädet 3500-3300, 2920-2850, 1660-1640, 1580-1520, 1460-1440, 1410-1340, 1250-1220, 1120-1030, 970 och 835 cm"1, 15 (f) UV-absorptionsspektret, mätt i dess vattenlösnirig i pH 7,0 uppvisar en stark absorption vid absorptionskanten och en absorptionstopp i omrädet 250-265 nm, (g) ger en positiv Molisch reaktion, fenol-svavelsyra-reaktion, antron-svavelsyrareaktion, indol-klorvätereaktion 20 och Lowry-Folins reaktion, men en negativ ninhydrinreakticn, (h) elementaranalys: C: 32 - 34 % H: 4
- 6 % N: 3 - 5 % (i) sackaridhalten bestämd medelst en fenol-svavelsyra-metod, är cirka 20-50 vikt-%, uttryckt som glukos, och pro- 25 teinhalten, bestämd medelst Lowry-Folins metod, är cirka 10 vikt-% eller mindre, uttryckt som nötkreatur-serumalbumin, och nämnda TF-350-substans har följande egenskaper: (a) gräskiftande vitt-ljusbrunt pulver, (b) förhindrar tillväxt av Ehrlichs ascitestumör, 30 hos möss och har en immunostimulerande aktivitet, (c) är löslig i vatten men olöslig i metanol, etanol, aceton, bensen, kloroform, etylacetat och dietyleter, (d) saknar tydlig smältpunkt och börjar sönderfalla vid cirka 110°C och sönderfaller märkbart vid 180°C eller 35 vid temperaturer högre än denna, 97 69096 (e) dess IR-absorptionsspektrum, vilket erhällits medelst KBr-tablettmetoden, har absorptionstoppar i omrädet 3500-3300, 2920-2900, 1660-1630, 1580-1520, 1460-1340, 1140-1100, 1080-1020, 970 och 820-800 cm"1, 5 (f) UV-absorptionsspektret, mätt i dess vattenlösning i pH 7,0 uppvisar stark absorption vid absorptionskanten och en absorptionstopp i omrädet 245-264 nm, (g) ger en positiv Molisch reaktion, fenol-svavelsyra-reaktion, antron-svavelsyrareaktion, indol-klorvätereaktion 10 och Lowry-Folins reaktion, men en negativ ninhydrinreaktion, (h) elementaranalys: C: 34 - 37 % H: 5 - 6 % N: 1 - 2 % (i) sackaridhalten bestämd medelst en fenol-svavelsy-rametod, Sr cirka 80-95 vikt-%, uttryckt som glukos, och 15 proteinhalten, bestämd medelst Lowry-Folins metod Sr cirka 10 vikt-% eller mindre, uttryck som nötkreatur-serumalbumin.
7. Förfarande enligt patentkravet 1, känne- t e c k n a t därav, att fraktioneringen av fällningen, beroende av pH utförs genom att vatten tillsätts tili fällningen och den resulterande lösningens pH regleras sä, att 15 en fraktion kan tillvaratas, som är vattenlöslig i pH 1,5- 2,5.
8. Förfarande enligt patentkravet 1, känne- t e c k n a t därav, att utvinnandet av TF-2-substanserna ur fällningen utförs genom att fällningen fraktioneras be-20 roende av pH och genom att den separerade fraktionen utsätts för en enzymbehandling, väri ett protelolytiskt enzym an-vänds, och de sä erhällna TF-2-substanserna tillvaratas.
9. Förfarande enligt patentkravet 8, känne- t e c k n a t därav, att fraktioneringen av fällningen, 25 beroende av pH utförs genom att vatten tillsätts tili fällningen och den resulterande lösningens pH regleras sä, att en fraktion kan tillvaratas, som är olöslig i vatten i pH 3,5-4,5.
10. Förfarande enligt patentkravet 9, känne-30 tecknat därav, att fraktioneringen av fällningen, beroende av pH, utförs genom att vatten tillsätts tili fällningen och den resulterande lösningens pH regleras tili vär-det 3,5-4,5, och den bildade fraktionen, som är olöslig i vatten, tillvaratas. 35
11. Förfarande enligt patentkravet 8, känne- tecknat därav, att fraktioneringen av fällningen, be- 99 690 9 6_ roende av pH utförs genom att vatten tillsätts tili fäll-ningen och den resulterande lösningens pH regleras sä, att en fraktion kan tillvaratas, sora är olöslig i vatten i pH 5,5-6,5. 5
12. Förfarande enligt patentkravet 8, känne- t e c k n a t därav, att fraktioneringen av fällningen, beroende av pH utförs genora att vatten tillsätts tili fällningen och den resulterande lösningens pH regleras sä, att en fraktion kan tillvaratas, sora är vattenlöslig i pH 5,5-10 6,5 men olöslig i vatten i pH 3,5-4,5.
13. Förfarande enligt patentkravet 8, k ä n n e - t e c k n a t därav, att fraktioneringen av fällningen, beroende av pH, utförs genom att vatten tillsätts tili fäll-nigen och den resulterande lösningens pH regleras sä, att 15 en fraktion kan tillvaratas, som är vattenlöslig i pH 3,5- 4,5 men olöslig i vatten i pH 1,5-2,5.
14. Förfarande enligt patentkravet 8, känne- t e c k n a t därav, att fraktioneringen av fällningen beroende av pH, utförs genom att vatten tillsätts tili fäll-20 ningen och den resulterande lösningens pH regleras sä, att en fraktion kan tillvaratas, sora är vattenlöslig i pH 1,5- 2,5.
15. Förfarande enligt nägot av patentkraven 8-14, kännetecknat därav, att enzyrabehandlingen är en 25 behandling med pronas eller trypsin.
16. Förfarande enligt nägot av patentkraven 8-15, kännete cknat därav, att fraktionerna, som ut-satts för en enzymbehandling, utsätts för ätminstone en av följande behandlingar: fraktionering beroende av pH, sepa- 30 rationsutfällning i ett hydrofilt organiskt lösningsmedel, ultrafiltreringsmetod, fraktionering pä jonbytare och till-varatagande av TF-2-substans fraktionerna.
17. Förfarande enligt patentkravet 16, kännete c k n a t därav, att av fraktionen, sora utsatts för 35 en enzymbehandling, fraktioneras den vattenlösliga delen genom att dess pH-värde regleras tili 2,5 eller lägre, att 100 69096 ett hydrofilt organiskt lösningsmedel tillsätts tili den sä erhällna vattenlösliga delen, att den resulterande fäll-ningen behandlas med en jonbytare och att den icke adsorbe-rande fraktionen tas tillvara. 5
18. Förfarande enligt patentkravet 17, k ä n n e - t e c k n a t därav, att den tillvaratagna icke adsorbe-rade fraktionen ultrafiltreras.
19. Förfarande enligt nägot av patentkraven 1-18, kännetecknat därav, att supernatantvätskan, 10 tili vilken det hydrofila organiska lösningsmedlet skall tillsättas, regleras tili ρΗ-värdet 1,5-2,5 före tillsatsen.
20. Förfarande enligt nägot av patentkraven 1-18, kännetecknat därav, att det tili supernatantvätskan tillsatta hydrofila organiska lösningsmedlet är en 15 alkohol.
21. Förfarande enligt nägot av patentkraven 1-20, kännetecknat därav, att odlingsmediet, som an-vänds för odling av bakterierna, innehäller tryptikaspepton, en hjärn-hjärtinfusion (eller en hjärtinfusion), jästextrakt, 20 natriumklorid, glukos, laktos, natriumsulfit och natrium- tioglykolat, eller innehäller de ovannämnda 8 komponenterna och agar, eller innehäller de ovannämnda 8 komponenterna, fytonpepton, proteospepton och L-cystin eller innehäller de ovannämnda 8 komponenterna, fytonpepton, proteospepton,
22. Förfarande enligt nägot av patentkraven 1-21, kännetecknat därav, att odlingen utförs vid 32-37°C under 1-4 dygn i ett odlingsmedium vars pH är 6,5- 7,5. 30
23. Förfarande enligt nägot av patentkraven 1-22, kännetecknat därav, att bakterien, som hör tili släktet Fusobacterium, är Fusobacterium nucleatum.
24. Förfarande enligt patentkravet 1, kännetecknat därav, att Fusobacterium nucleatum odlas 35 under anaeroba förhällanden vid 30-42°C under 1-5 dygn i ett odlingsmedium som innehäller tryptikaspepton, en 101 69096 hjärn-hjärtinfusion (eller en hjärtinfusion), jästextrakt, natriumklorid, glukos, laktos, natriumsulfit och natrium-tioglykolat, eller i ett odlingsmedium som innehäller de ovannämnda 8 komponenterna och agar, eller i ett odlings-5 medium som innehäller de ovannämnda 8 komponenterna, fyton-pepton, proteospepton och L-cystin, eller i ett odlingsmedium som innehäller de ovannämnda 8 komponenterna, fyton-pepton, proteospepton, L-cystin och agar, odlingens super-natantvätska sperareras, dess pH regleras till 1,5-2,5, en 10 alkohol tillsätts sä att dess koncentration i den resulte-rande lösningen blir 50-70 volym-%, och den bildade fäll-ningen tillvaratas, vatten tillsätts tili denna fällning, blandningens pH regleras till 7,5-8,0, därefter justeras dess pH tili värdet 3,5-4,5, och den bildade fällningen 15 tillvaratas (vid behov kan denna fraktionering beroende av pH upprepas) för erhällande av TF-210.
25. Förfarande enligt patentkravet 1, känne-t e c k n a t därav, att Fusobacterium nucleatum odlas under anaeroba förhällanden vid 30-42°C under 1-5 dygn 20 i ett odlingsmedium som innehäller tryptikaspepton, en hjärn-hjärtinfusion (eller en hjärtinfusion), jästextrakt, natriumklorid, glukos, laktos, natriumsulfit och natrium-tioglykolat, eller i ett odlingsmedium som innehäller de ovannämnda 8 komponenterna och agar, eller i ett odlings-25 medium som omfattar de ovannämnda 8 komponenterna, fytonpep-ton, proteospepton och L-cystin, eller i ett odlingsmedium som omfattar de ovannämnda 8 komponenterna, fytonpepton, proteospepton, L-cystin och agar, odlingens supernatant-vätska separeras, dess pH regleras till 1,5-2,5, en alkohol 30 tillsätts sä att dess koncentration i den resulterande lösningen blir 50-70 volym-%, och den bildade fällningen tillvaratas, vatten tillsätts tili denna fällning, blandningens pH regleras till 7,5-8,0, därefter justeras dess pH tili 5,5-6,5, och den bildade fällningen tillvaratas (vid behov 35 kan denna fraktionering beroende av pH upprepas) för erhällande av TF-220. o2 69096
25 L-cystin och agar.
26. Förfarande enligt patentkravet 3, k ä n n e - t e c k n a t därav, att Fusobacterium nucleatum odlas under anaeroba förhällanden vid 30-42°C under 1-5 dygn i ett odlingsmedium som innehäller tryptikaspepton, en hjärn-5 hjärtinfusion (eller en hjärtinfusion), jästextrakt, natrium-klorid, glukos, laktos, natriumsulfit och natriumtioglykolat, eller i ett odlingsmedium som innehäller den ovannämnda 8 komponenterna och agar, eller i ett odlingsmedium som inne-häller de ovannämnda 8 komponenterna, fytonpepton, proteos-10 pepton och L-cystin, eller i ett odlingsmedium som innehäl-ler de ovannämnda 8 komponenterna, fytonpepton, proteospep-ton, L-cystin och agar, odlingens supernatantvätska sepä-reras, dess pH regleras till 1,5-2,5, en alkohol tillsätts sä att dess koncentration i den resulterande lösningen blir 15 50-70 volym-%, och den bildade fällningen tillvaratas, vet ten tillsätts tili denna fällning, blandningens pH regleras till 7,5-8,0, därefter justeras detta pH till 5,5-6,5, su-pernatantvätskan uppsamlas, pH justeras till 3,5-4,5, och den bildade fällningen tillvaratas (vid behov kan denna 20 fraktionering beroende av pH upprepas) för erhällande av TF-230.
27. Förfarande enligt patentkravet 1, k ä n n e -t e c k n a t därav, att Fusobacterium nucleatum odlas under anaeroba förhällanden vid 30-42°C under 1-5 dygn i 25 ett odlingsmedium som innehäller tryptikaspepton, en hjärn-hjärtinfusion (eller en hjärtinfusion), jästextrakt, nat-riumklorid, glukos, laktos, natriumsulfit och natriumtioglykolat, eller i ett odlingsmedium som innehäller de ovannämnda 8 komponenterna och agar, eller i ett odlingsmedium 30 som innehäller de ovannämnda 8 komponenterna, fytonpepton, proteospepton och L-cystin, eller i ett oldingsmedium som innerhäller de ovannämnda 8 komponenterna, fytonpepton, proteospepton, L-cystin och agar, odlingens supernatantvätska separeras, dess pH regleras till 1,5-2,5, en alko-35 hoi tillsätts sä att dess koncentration i den resulterande lösningen blir 50-70 volym-%, och den bildade fällningen 69096
28. Förfarande enligt patentkravet 1, kanne-t e c k n a t därav, att Fusobacterium nucleatum odlas under anaeroba förhällanden vid 30-42°C under 1-5 dygn i 10 ett odlingsmedium som innehäller tryptikaspepton, en hjärn-hjärtinfusion (eller en hjärtinfusion), jästextrakt, nat-riumklorid, glukos, laktos, natriumsulfit och natriumtio-glykolat, eller i ett odlingsmedium som innehäller de ovan-nämnda 8 komponenterna och agar, eller i ett odlingsmedium 15 som innehäller de ovannämnda 8 komponenterna, fytonpepton, proteospepton och L-cystin, eller i ett odlingsmedium som innehäller de ovannämnda 8 komponenterna, fytonpepton, proteospepton, L-cystin och agar, odlingens superantantvätska separeras, dess pH regleras till 1,5-2,5, en alkohol till-20 sätts sä att dess koncentration i den resulterande lösningen blir 50-70 volym-%, och den bildade fällningen tillvaratas, vatten tillsätts tili denna fällning, blandningens pH regleras till 7,5-8,0, därefter justeras detta pH tili 1,5- 2,5, supernatantvätskan separeras, en alkohol tillsätts 25 tili denna supernatantvätska sä att dess koncentration i den resulterande lösningen blir 20-80 volym-%, och den bildade fällningen tillvaratas för erhällande TF-250.
29. Förfarande enligt patentkravet 1, k ä n n e -t e c k n a t därav, att Fusobacterium nucleatum odlas 30 under anaeroba föhällanden vid 30-42°C under 1-5 dygn i ett odlingsmedium som innehäller tryptikaspepton, en hjärn-hjärtinfusion (eller en hjärtinfusion), jästextrakt, nat-riumklorid, glukos, laktos, natriumsulfit och natriumtio-glykolat, eller i ett odlingsmedium som innehäller de ovan-35 nämnda 8 komponenterna och agar, eller i ett odlingsmedium som innehäller de ovannämnda 8 komponenterna, fytonpepton, 10< 69096 proteospepton och L-cystin, eller i ett odlingsmedium som innehäller de ovannämnda 8 komponenterna, fytonpepton, proteospepton, L-cystin och agar, odlingens supernatantvätska separeras, dess pH regleras till 1,5-2,5, en alkohol till-5 sätts sä att dess koncentration i den resulterande lösningen blir 50-70 volym-% och den bildade fällningen tillvaratas, vatten tillsätts till denna fällning, blandningens pH regleras till 7,5-8,0, därefter justeras detta pH till 3,5-4,5, den bildade fällningen tillvaratas (vid behov kan denna fraktio-10 nering beroende av pH upprepas), vatten tillsätts till den erhällna fällningen, pH justeras till 7-8, sedan tillsätts pronas eller trypsin, blandningen utsätts för enzymbehand-ling vid 30-40°C under 1-72 tinunar, den behandlade blandningens pH regleras till 2,5 eller mindre, och den sälunda 15 erhällna supernatantvätskan separeras, en alkohol tillsätts till supernatantvätskan sä att alkoholkoncentrationen i den kombinerade lösningen blir 30-80 volym-%, och den bildade fällningen tillvaratas, eller, vid behov, behandlas den erhällna fällningen med ett starkt anjonbytarharts, och dess 20 icke adsorberade fraktion ultrafiltreras (denna ultrafilt-rering kan upprepas vid behov), filtreras sedan genom ett milliporefilter och frystorkas för erhällande av TF-310.
30. Förfarande enligt patentkravet 1, känne-t e c k n a t därav, att Fusobacterium nucleatum odlas un-25 der anaeroba förhällanden vid 30-42°C under 1-5 dygn i ett odlingsmedium som innehäller tryptikaspepton, en hjärn-hjärtinfusion (eller en hjärtinfusion), jästextrakt, nat-riumklorid, glukos, laktos, natriumsulfit och natriumtio-glykolat, eller i ett odlingsmedium som innehäller de ovan-30 nämnda 8 komponenterna och agar, eller i ett odlingsmedium som innehäller de ovannämnda 8 komponenterna, fytonpepton, proteospepton och L-cystin, eller i ett odlingsmedium soit innehäller de ovannämnda 8 komponenterna, fytonpepton, proteospepton, L-cystin och agar, odlingens supernatantvätska 35 tillvaratas, dess pH regleras till 1,5-2,5, en alkohol tillsätts sä att dess koncentration i den resulterande lösningen 105 69096 blir 50-70 volym-%, och den bildade fällningen tillvaratas, vatten tillsätts till denna falining, blandningens pH reg-leras till 7,5-8,0, därefter justeras detta pH till 5,5-6,5, den bildade fällningen tillvaratas (vid behov kan denna 5 fraktionering beroende av pH upprepas), vatten tillsätts till den erhällna fällningen, dess pH regleras till 7-8, pronas eller trypsin tillsätts, blandningen utsätts för en-zymbehandling vid 30-40°C under 1-72 timmar, den behandlade blandningens pH regleras till 2,5 eller mindre, och den sä-10 lunda erhällna supernatantvätskan separeras, en alkohol tillsätts till supernatantvätskan sä att alkoholkoncentrationen i den kombinerade lösningen blir 30-80 volym-%, och den bildade fällningen tillvaratas, eller, vid behov, behandlas den ovanerhällna fällningen med ett starkt anjonbytarharts, 15 och dess icke adsorberade fraktion ultrafiltreras (denna ultrafiltrering kan upprepas vid behov), filtreras sedan genom ett milliporefilter och frystorkas för erhällande av TF-320.
31. Förfarande enligt patentkravet 1, k ä n n e -20 tecknat därav, att Fusobacterium nucleaturn odlas under anaeroba förhallanden vid 30-42°C under 1-5 dygn i ett odlingsmedium soin innehäller tryptikaspepton, en hjärn-hjärtinfusion (eller en hjärtinfusion), jästextrakt, nat-riumklorid, glukos, laktos, natriumsulfit och natriumtio-25 glykolat, eller i ett odlingsmedium som innehäller de ovan-nämnda 8 komponenterna och agar, eller i ett odlingsmedium som innehäller de ovannämnda 8 komponenterna, fytonpepton, proteospepton och L-cystin, eller i ett odlingsmedium som innehäller de ovannämnda 8 komponenterna, fytonpepton, pro-30 teospepton, L-cystin och agar, odlingens supernatantvätska tillvaratas dess pH regleras till 1,5-2,5, en alkohol tillsätts sä att dess koncentration i den resulterande lösningen blir 50-70 volym-%, och den bildade fällningen tillvaratas, vatten tillsätts tili denna fällning, blandningens 35 pH regleras till 7,5-8,0, därefter justeras detta pH tili 5,5-6,5, supernatantvätskan tillvaratas, dess pH regleras 106 6 9 0 9 6 till 3,5-4,5, den bildade fällningen tillvaratas (vid behov kan denna fraktionering beroende av pH upprepas), vatten tillsätts till den erhällna fällningen, dess pH regleras till 7-8, pronas eller trypsin tillsätts, blandningen ut-5 sätts för enzymbehandling vid 30-40°C under 1-72 timmar, den behandlade blandningens pH regleras till 2,5 eller mind-re, och den sälunda erhällna supernatantvätskan separeras, en alkohol tillsätts till denna supernatantvätska sä att alkoholkoncentrationen i den kombinerade lösningen blir 3ΟΙ 0 80 volym-%, och den bildade fällningen tillvaratas, eller, vid behov, behandlas den ovan erhällna fällningen med ett starkt anjonbytarharts, och dess icke adsorberade fraktion ultrafiltreras (denna ultrafiltrering kan upprepas vid behov) , filtreras sedan genom ett milliporefilter och frystor-15 kas för erhällande av TF-330.
32. Förfarande enligt patentkravet 1, k ä n n e -t e c k n a t därav, att Fusobacterium nucleatum odlas under anaeroba förhällanden vid 30-42°C under 1-5 dygn i ett odlingsmedium som innehäller tryptikaspepton, en hjärn-hjärt-20 infusion (eller en hjärtinfusion), jästextrakt, natriumklo-rid, glukos, laktos, natriumsulfit och natriumtioglykolat, eller i ett odlingsmedium som innehäller de ovannämnda 8 komponenterna och agar, eller i ett odlingsmedium som innehäller de ovannämnda 8 komponenterna, fytonpepton, proteos-25 pepton och L-cystin, eller i ett odlingsmedium som innehäller de ovannämnda 8 komponenterna, fytonpepton, proteospep-ton, L-cystin och agar, odlingens supernatantvätska tillvaratas, dess pH regleras till 1,5-2,5, en alkohol tillsätts sä att dess koncentration i den resulterande lösningen blir 30 50-70 volym-%, den bildade fällningen tillvaratas, vatten tillsätts tili denna fällning, blandningens pH regleras till 7,5-8,0, därefter justeras detta pH till 3,5-4,5, en supernatantvätska erhälls, denna supernatantvätskas pH regleras till 1,5-2,5, den bildade fällningen tillvaratas 35 (vid behov kan denna fraktionering beroende av pH upprepas), vatten tillsätts tili den erhällna fällningen, dess pH jus- II 107 6 9 0 9 6 teräs till 7-8, sedan tillsätts pronas eller trypsin, bland-ningen utsätts för enzymbehandling vid 30-40° under 1-72 tim-mar, den behandlade bladningens pH regleras till 2,5 eller mindre, den sälunda erhallna supernatantvätskan separeras, 5 en alkohol tillsätts till denna supernatantvätska sä att al-koholkoncentrationen i den kombinerade lösningen blir 3C-80 volym-%, den bildade fällningen tillvaratas eller, vid be-hov, behandlas den ovanerhällna fällningen med ett starkt anjonbytarharts, och dess icke adsorberade fraktion ultra-10 filtreras (denna ultrafiltrering kan upprepas vid behov), filtreras sedan genom ett milliporefilter och frystorkas för erhallande av TF-340.
33. Förfarande enligt patentkravet 1, kanne-t e c k n a t därav, att Fusobacterium nucleatum odlas 15 under anaeroba förhällanden vid 30-42° under 1-5 dygn i ett odlingsmedium som innehäller tryptikaspepton, en hjärn-hjärtinfusion (eller en hjärtinfusion), jästextrakt, nat-riumklorid, glukos, laktos, natriuxnsulfit och natriumtio-glykolat, eller i ett odlingsmedium som innehäller de ovan-20 nämnda 8 komponenterna och agar, eller i ett odlingsmedium som innehäller de ovannämnda 8 komponenterna, fytonpepton, proteospepton och L-cystin, eller i ett odlingsmedium som innehäller de ovannämnda 8 komponenterna, fytonpepton, proteospepton, L-cystin och agar, odlingens supernatantvätska 25 tillvaratas, dess pH regleras till 1,5-2,5, en alkohol tillsätts sä att dess koncentration i den resulterande lösningen blir 50-70 volym-%, den bildade fällningen tillvaratas, vat-ten tillsätts tili denna fällning, blandningens pH regleras till 7,5-8,0, därefter justeras detta pH till 1,5-2,5, su-30 pernatantvätskan tillvaratas, en alkohol tillsätts tili denna supernatantvätska sä att alkoholkoncentrationen i den resulterande lösningen blir 20-80 volym-%, den bildade fällningen tillvaratas (vid behov kan denna fraktionering be-roende av pH upprepas), vatten tillsätts tili den erhällna 35 fällningen, dess pH regleras tili 7-8, pronas eller trypsin tillsätts, blandningen utsätts för enzymbehandling vid 30-
Applications Claiming Priority (18)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP56022277A JPS57139089A (en) | 1981-02-19 | 1981-02-19 | Carcinostatic substance tf-350, its preparation and carcinostatic agent containing the same |
| JP2227081 | 1981-02-19 | ||
| JP56022274A JPS57136597A (en) | 1981-02-19 | 1981-02-19 | Carcinostatic substance tf-250, its preparation, and carcinostatic agent containing the same |
| JP56022270A JPS57136593A (en) | 1981-02-19 | 1981-02-19 | Carcinostatic substance tf-210, its preparation, and carcinostatic agent containing the same |
| JP2227681 | 1981-02-19 | ||
| JP56022275A JPS57136598A (en) | 1981-02-19 | 1981-02-19 | Carcinostatic substance tf-300, its preparation, and carcinostatic agent containing the same |
| JP56022273A JPS57136596A (en) | 1981-02-19 | 1981-02-19 | Carcinostatic substance tf-240, its preparation, and carcinostatic agent containing the same |
| JP56022272A JPS57136595A (en) | 1981-02-19 | 1981-02-19 | Carcinostatic substance tf-230, its preparation, and carcinostatic agent containing the same |
| JP2227181 | 1981-02-19 | ||
| JP56022276A JPS57139088A (en) | 1981-02-19 | 1981-02-19 | Carcinostatic substance tf-340, its preparation and carcinostatic agent containing the same |
| JP2227481 | 1981-02-19 | ||
| JP2227781 | 1981-02-19 | ||
| JP2227581 | 1981-02-19 | ||
| JP2227381 | 1981-02-19 | ||
| JP56022271A JPS57136594A (en) | 1981-02-19 | 1981-02-19 | Carcinostatic substance tf-220, its preparation, and carcinostatic agent containing the same |
| JP2227281 | 1981-02-19 | ||
| JP57011744A JPS58129977A (ja) | 1982-01-29 | 1982-01-29 | 制癌性物質ｔｆ−３００−２及びその製造法並びにこれを含有する制癌剤 |
| JP1174482 | 1982-01-29 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI820527L FI820527L (fi) | 1982-08-20 |
| FI69096B FI69096B (fi) | 1985-08-30 |
| FI69096C true FI69096C (fi) | 1985-12-10 |
Family
ID=27576620
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI820527A FI69096C (fi) | 1981-02-19 | 1982-02-17 | Foerfarande foer framstaellning av en karcinostatisk och immunostimulerande tf-2-substans |
Country Status (16)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4591558A (sv) |
| AT (1) | AT381722B (sv) |
| BE (1) | BE892204A (sv) |
| CA (1) | CA1184864A (sv) |
| CH (1) | CH651052A5 (sv) |
| DE (1) | DE3205074A1 (sv) |
| DK (1) | DK151640C (sv) |
| FI (1) | FI69096C (sv) |
| FR (1) | FR2499855B1 (sv) |
| GB (1) | GB2093347B (sv) |
| IT (1) | IT1189224B (sv) |
| NL (1) | NL8200640A (sv) |
| NO (1) | NO157426C (sv) |
| NZ (1) | NZ199771A (sv) |
| PT (1) | PT74455B (sv) |
| SE (1) | SE457000B (sv) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5931715A (ja) * | 1982-08-17 | 1984-02-20 | Toyama Chem Co Ltd | 制癌性物質ｔｆ−５００の製造法 |
| WO2010096668A1 (en) * | 2009-02-20 | 2010-08-26 | Frymaster L.L.C. | Racking system for deep fryer |
| CA2753301A1 (en) | 2009-07-15 | 2011-01-20 | Frymaster L.L.C. | Automated rack/basket lifting system for deep open vat frying system |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5461112A (en) * | 1977-10-24 | 1979-05-17 | Ono Pharmaceut Co Ltd | Oncostatic polysaccharide* its preparation* and oncostatic drugs containing it as an effective component |
| JPS5943929B2 (ja) * | 1979-08-13 | 1984-10-25 | サッポロビール株式会社 | 多糖体ｒｂｓ物質，その製法およびそれを有効成分とする抗腫瘍性剤 |
| DE3031152A1 (de) * | 1979-08-24 | 1981-03-19 | Toyama Chemical Co. Ltd., Tokyo | Carcinostatische substanzen, verfahren zur herstellung derselben und mittel mit einem gehalt derselben |
| US4477437A (en) * | 1981-02-19 | 1984-10-16 | Toyama Chemical Co., Ltd. | Substances having carcinostatic and immunostimulating activity |
-
1982
- 1982-02-12 DE DE19823205074 patent/DE3205074A1/de active Granted
- 1982-02-12 GB GB8204093A patent/GB2093347B/en not_active Expired
- 1982-02-17 FI FI820527A patent/FI69096C/fi not_active IP Right Cessation
- 1982-02-17 CA CA000396425A patent/CA1184864A/en not_active Expired
- 1982-02-17 CH CH979/82A patent/CH651052A5/de not_active IP Right Cessation
- 1982-02-17 IT IT47817/82A patent/IT1189224B/it active
- 1982-02-17 FR FR8202601A patent/FR2499855B1/fr not_active Expired
- 1982-02-17 DK DK069282A patent/DK151640C/da not_active IP Right Cessation
- 1982-02-18 NO NO820509A patent/NO157426C/no unknown
- 1982-02-18 NL NL8200640A patent/NL8200640A/nl not_active Application Discontinuation
- 1982-02-18 PT PT74455A patent/PT74455B/pt not_active IP Right Cessation
- 1982-02-18 NZ NZ199771A patent/NZ199771A/en unknown
- 1982-02-18 SE SE8201016A patent/SE457000B/sv unknown
- 1982-02-19 AT AT0064682A patent/AT381722B/de not_active IP Right Cessation
- 1982-02-19 BE BE0/207355A patent/BE892204A/fr not_active IP Right Cessation
-
1984
- 1984-08-06 US US06/619,895 patent/US4591558A/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DK69282A (da) | 1982-08-20 |
| NO820509L (no) | 1982-08-20 |
| DK151640C (da) | 1988-06-20 |
| GB2093347A (en) | 1982-09-02 |
| FR2499855A1 (fr) | 1982-08-20 |
| ATA64682A (de) | 1986-04-15 |
| GB2093347B (en) | 1985-03-27 |
| NZ199771A (en) | 1985-09-13 |
| AT381722B (de) | 1986-11-25 |
| FI820527L (fi) | 1982-08-20 |
| IT1189224B (it) | 1988-01-28 |
| CA1184864A (en) | 1985-04-02 |
| SE8201016L (sv) | 1982-08-20 |
| BE892204A (fr) | 1982-08-19 |
| US4591558A (en) | 1986-05-27 |
| NL8200640A (nl) | 1982-09-16 |
| IT8247817A0 (it) | 1982-02-17 |
| DE3205074C2 (sv) | 1987-09-24 |
| DE3205074A1 (de) | 1982-12-16 |
| PT74455A (en) | 1982-03-01 |
| NO157426B (no) | 1987-12-07 |
| FR2499855B1 (fr) | 1985-07-12 |
| CH651052A5 (de) | 1985-08-30 |
| DK151640B (da) | 1987-12-21 |
| SE457000B (sv) | 1988-11-21 |
| NO157426C (no) | 1988-03-16 |
| FI69096B (fi) | 1985-08-30 |
| PT74455B (en) | 1984-12-04 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4289688A (en) | Protein-bound polysaccharides | |
| FI69096C (fi) | Foerfarande foer framstaellning av en karcinostatisk och immunostimulerande tf-2-substans | |
| JPH021154B2 (sv) | ||
| CA1239364A (en) | Hypotriglyceridemically active polysaccharides | |
| EP0172559A2 (en) | Polysaccharide RON substance, production of the same and use of the same | |
| US4209507A (en) | Novel anti-tumor substance and preparation thereof | |
| FI79140C (sv) | Förfarande för framställning av ett TF-500-ämne med karsinostatisk och immunitet stimulerande aktivitet | |
| JPS6359679B2 (sv) | ||
| KR890002256B1 (ko) | 항암 물질 tf-2 제조 방법 | |
| JPS627918B2 (sv) | ||
| JPS627916B2 (sv) | ||
| EP0173228A2 (en) | Polysaccharide rin substance, production of the same and use of the same | |
| JPH0242478B2 (sv) | ||
| NO155697B (no) | Fremgangsmaate for fremstilling av fysiologisk aktive forbindelser ved fermentering. | |
| JPH021156B2 (sv) | ||
| JPS6261036B2 (sv) | ||
| KR830002817B1 (ko) | 생물학적으로 활성인 fr-900156물질의 제조방법 | |
| JPS648637B2 (sv) | ||
| JPH021151B2 (sv) | ||
| JPH021153B2 (sv) | ||
| JPH039120B2 (sv) | ||
| JPS596890A (ja) | 抗腫瘍性物質５１１７およびその製造法 | |
| JPH03184995A (ja) | 抗腫瘍剤 | |
| JPS6152806B2 (sv) | ||
| JPH03291232A (ja) | 抗腫瘍、免疫賦活剤 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM | Patent lapsed | ||
| MM | Patent lapsed |
Owner name: TOYAMA CHEMICAL CO. LTD. |