FI67082B - Foerfarande foer framstaellning av d 1-5-metyltetrahydrofolsyra och salter daerav - Google Patents
Foerfarande foer framstaellning av d 1-5-metyltetrahydrofolsyra och salter daerav Download PDFInfo
- Publication number
- FI67082B FI67082B FI780565A FI780565A FI67082B FI 67082 B FI67082 B FI 67082B FI 780565 A FI780565 A FI 780565A FI 780565 A FI780565 A FI 780565A FI 67082 B FI67082 B FI 67082B
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- acid
- weight ratio
- aqueous solution
- formaldehyde
- process according
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D475/00—Heterocyclic compounds containing pteridine ring systems
- C07D475/02—Heterocyclic compounds containing pteridine ring systems with an oxygen atom directly attached in position 4
- C07D475/04—Heterocyclic compounds containing pteridine ring systems with an oxygen atom directly attached in position 4 with a nitrogen atom directly attached in position 2
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/20—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing sulfur, e.g. dimethyl sulfoxide [DMSO], docusate, sodium lauryl sulfate or aminosulfonic acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/20—Pills, tablets, discs, rods
- A61K9/2004—Excipients; Inactive ingredients
- A61K9/2013—Organic compounds, e.g. phospholipids, fats
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Hematology (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Description
R35^n fol im KUULUTUSJULKAISU .„ηβΛ J®A W ^UTLAGGNINGSSKIUFT 670 8 2 c W P tien lii rayoru.. i';y 10 01 1935 ^ ^^ (SI) K*j//iM.a.3 c 07 D ^75/0^ SUOMI—FINLAND 780565 (22) HiktmhpSIvt—AmOtaOnprfit 21.02.78 (23) ΑΝηρΙΜ—GlMghttadag 21.02.78 (41) TMhKHkiMfai —ΒΗνΚαβΜΙκ 23.08.78
Pntsntti- ja rekisterihallitiM tiiimiiniiiii ι μΐι··ιΐιιΜιιΐ.ιιιι atm.—
Patent- och registerstyralsan ' * AM5kMu€k^<xtiuculiri^^Mnnd 28.09.8** (32)(33)(31) fyrd-tty weHww-a^Ird srlerlw 22.02.77 Englanti-England(GB) 7290/77 (71) Bioresearch S.a.s. del Dr.Livio Camozzi S C., Via Marcona, 37"Milano,
Italia-ltalien(IT) (72) Federico Gennari , Truccazzone, I ta 1 ia-1 ta 1 ien (IT) (7^) Oy Kolster Ab (5*0 Menetelmä d,1-5-metyylitetrahydrofoolihapon ja sen suolojen valmistamiseksi - Förfarande för framstäl1 ning av d,1-5-metyltetrahydrofolsyra och saiter därav
Keksinnön kohteena on parannettu menetelmä d,1-N-^p-(2-amino- 3,4,5,6,7,8-heksahydro-5-metyyli-4-okso-6-pteridinyyli)metyyli/ bentsoyyliglutamiinihapon ja sen suolojen valmistamiseksi, joilla on yleinen kaava coox NH —/' M—CO - NH - CH (i) ί ι \=s '
A M CH2 CllO
HN/\/ I 2 j ' ?H2
H2NAnAnA2 COOX
H
jossa X on vety, alkalimetalli tai maa-alkalimetalliekvivalentti. Tästä lähtien haposta (I) käytetään ainoastaan nimitystä 5-metyyli-tetrahydrofoolihappo (MTHF).
i li h 2 67082
Uutta menetelmää voidaan käyttää teollisesti, ja sillä saadaan tuotetta yksinkertaisesti, taloudellisesti ja korkeilla saannoilla, d,1-5-metyylitetrahydrofoolihappoa valmistetaan tavallisesti foo-lihaposta menetelmällä, joka käsittää seuraavat olennaiset vaiheet: a) foolihappo tetrahydrofoolihappo b) tetrahydrofoolihapon erottaminen ja puhdistus c) tetrahydrofoolihappo 5-metyylitetrahydrofooli- happo d) 5-metyylitetrahydrofoolihapon erottaminen ja puhdistus
Vaihe (a) on suoritettu sekä katalyyttisesti hydraamalla että kemiallisella pelkistyksellä, varsinkin käyttäen alkaliboo-rihydridejä. (Y.Hetefi et ai., Biochem, Prep. 7, 89(1960); K.G.Serimgeour et ai., Biochemistry 5, 1438 (1966)). Riippumatta siitä, mitä menetelmää käytetään saadaan tässä vaiheissa fooli-hapon, tetrahydrofoolihapon ja dihydrofoolihapon seosta, joka sisältää pääasiassa kahta ensinmainittua, ja joka on yleensä vaikea jakaa komponenteikseen. Ainoassa sopivassa menetelmässä vaiheen (b) suorittamiseksi käytetään suuria kromatografipylväitä ja sarjaa eluentteja (L.Jaenicke et ai., Z. Physiol, Chem. 326, 168 (1961); J.C.Keresztesy et ai., Biophysic Res. Commun. 5, 286 (1961); H.Rudiger et ai. FE/BS/Letters 4, 316 (1969)). Kromatografiseen erotukseen vietävästä liuoksesta hajotetaan ensin ylimääräinen boorihydridi lisäämällä happoa, edullisesti kloorivetyhappoa tai etikkahappoa.
Tetrahydrofoolihapon metylointi (vaihe c) voidaan myös suorittaa erilaisin menetelmin, joista tavallisin ja sopivin käsittää reaktion formaldehydin kanssa ja senjälkeen pelkistämisen kemiallisella pelkistimellä, edullisesti jälleen alkaliboorihydridilla (W.Sakami et ai., Biochem. Prep. 10, 103 (1963)).
5-metyylitetrahydrofoolihapon erottaminen ja lopullinen puhdistus (vaihe d) tähänmennessä on aina suoritettu kromatografisesti käyttäen puhdistettavan seoksen luonteesta riippuen enemmän tai vähemmän mutkikkaita menetelmiä.
Tämän menetelmän eräässä muunnoksessa (J.A.Blair et ai., Analytical Biochemistry 34, 376-381 (1970)), vaihe (b) jätetään suorittamatta ja reaktioseosta, josta ylimääräinen boorihydridi on hajo- 3 67082 tettu, käsitellään suoraan formaldehydillä ja toisella alkali-boorihydridillä Tällainen muunnos ei ilmeisesti paranna olennaisesti menetelmää, sillä vaiheen (a) johtaessa edellä määritellyn seoksen muodostumiseen saa vaiheen (b) poisjättäminen aikaan vain kompleksisemman ja vaikeammin erotettavan lopullisen seoksen muodostumisen, mikä aiheuttaa puhdistusvaiheen (d) vaikeutumisen ja noin 60 %:N tuotehäviön tässä vaiheessa. Lisäksi saatu tuote ei ole puhtausasteeltaan niin korkeatasoinen kuin farmaseuttisiin tarkoituksiin vaaditaan.
Tätä menetelmää, joka tällä hetkellä on paras tunnettu, ei siten ole koskaan sovellettu muuhun kuin laboratoriomittakaavassa tapahtuvaan valmistukseen, jossa on tuotettu pieniä ainemääriä koekäyttöön.
Nyt on yllättäen keksitty, ja se muodostaa tämän keksinnön kohteen, että on mahdollista muuttaa foolihappo (kaupallisesti helposti sopivalla hinnalla saatavana oleva tuote) d,l-5-metyylitetrahydrofoolihapoksi erittäin korkein saannoin ja farmaseuttisesti erittäin puhtaana käyttämättä kallista ja monimutkaista kromatografista puhdistusta foolihappo pelkistämällä kriittisissä reaktio-olosuhteissa, joiden ansiosta reaktiossa tuotetaan käytännöllisesti katsoen 100-%risen selektiivisesti tetrahydrofoolihappoa.
Keksinnölle on tunnusomaista, että a) foolihappo pelkistetään tetrahydrofoolihapoksi
NaBH.rllä alkalisessa vesiliuoksessa inertissä kaasukehässä 4 käyttämällä painosuhdetta NaBH^ : foolihappo 0,5 : 1-3 : 1, reaktiolämpötilaa 60 - 80°C, pH-arvoa 7 - 8 ja reaktioaikaa 0,5 - 2 tuntia, b) tetrahydrofoolihappo metyloidaan 5-metyylitetrahydro-foolihapoksi formaldehydin ja natriumboorihydridin vesiliuoksella inertissä kaasukehässä käyttämällä painosuhdetta formaldehydin kokonaismäärä : tetrahydrofoolihappo on 0,8 : 1-2,5 : 1, painosuhde NaBH^ : tetrahydrofoolihappo 0,25 : 1-1,5 : 1, lämpötila 25 - 30°C, pH-arvo 6-8, jolloin formaldehydi lisätään peräkkäisinä fraktioina, joista fraktio, jossa painosuhde formaldehydi : tetrahydrofoolihappo on 0,15 : 1, lisätään reak- tion päätyttyä ja vaiheen lopussa lisätään hapettumisen esto- ainetta, joka on kysteiini, pelkistetty glutationi tai pantete- iini, 4 67082 c) natrium-5-metyylitetrahydrofolaatti eristetään sitä sisältävästä vesiliuoksesta sellaisen hapettumisen estoaineen läsnäollessa, joka on kysteiini, pelkistetty glutationi tai panteteiini, ja että vaiheet suoritetaan peräkkäin samassa reaktorissa eristämättä välituotetta.
Tämä vaihe voidaan suorittaa kahdella yhtä edullisella vaihtoehtoisella menetelmällä, joiden kummankin soveltuvuus johtuu siitä, että vaiheessa (2) saatu käsiteltävä liuos sisältää käytännöllisesti katsoen pelkästään natrium-5-metyylitetrahydro-folaattia.
A. Erottaminen aktiivihiilellä adsorboimalla desorboi- malla.
Tämän vaiheen suorittamiseksi aktiivihiiltä, jonka määrä on 5-20 kertaa alunperin käsitellyn foolihapon paino, muodostetaan suspensioksi veteen ja lisätään sekoittaen lopulliseen reaktioseokseen pH-alueella 6,5 - 6,8.
Suodatettu hiili suspendoidaan eluenttiseokseen, jossa on C^_4~alkoholia tai 2-metoksietanolia ja vettä suhteessa 50 : 50-95-5. Eluenttiseos sisältää myös pienen määrän (0,2 - 5 %) pelkistintä ja pienen määrän (0,5 - 5 %) ammoniakkia vesiliuoksena. Natrium-5-metyylitetrahydrofolaatti saadaan talteen hiilestä saadusta effluenttiseoksesta saostamalla veden kanssa sekoittuvalla orgaanisella liuottimena tai väkevöi-mällä ja lyofilisoimalla liuos tai myös maa-alkalisuolana, josta 5-metyylitetrahydrofoolihappo voidaan vapauttaa.
Vaihtoehdossa A edulliset olosuhteet tuotteen erottamiseksi ja puhdistamiseksi ovat seuraavat: - suhde aktiivihiili : foolihappo 7 : 1 - eluenttiseos sisältää etanolia, metanolia tai 2-metoksietanolia ja vettä suhteessa 80 : 20, v/v - reaktioseoksen sisältämä pelkistin on kysteiini 1 %:iin asti koko eluenttiseoksesta - 34-%risen vesipitoisen ammoniakkiseoksen määrä on aina 2 %:iin asti koko eluenttiseoksesta (0,7 % ammoniakkia).
5 67082 B. Erottaminen saostamalla 5-metyylitetrahydrofoolihappo suoraan sitä sisältävästä liuoksesta maa-alkalimetallisuolana, varsinkin kalsiumsuolana.
Tämä vaihtoehto, joka on vielä yksinkertaisempi kuin vaihtoehto A, on erityisen sopiva silloin, kun vaiheet (l)ja (2) on suoritettu vesipitoisessa väliaineessa suuressa konsentraatiossa ja saatu 5-metyylitetrahydrofoolihappo on erotettava väkevästä vesiliuoksesta.
Vaiheesta (2) saatua liuosta käsitellään CaCl2:n väkevällä vesiliuoksella ja liuos, joka sisältää pienen määränpelkistävää ainetta, jätetään noin 12 tunniksi 0-5°C:seen. Saostunut kalsiumme-tyylitetrahydrofolaatti-pentahydraatti puhdistetaan liuottamalla pieneen määrään kiehuvaa vettä ja antamalla kiteytyä 0-5°C:ssa. Edullinen suhde foolihappo:CaCl2 on 2:1 - 3:1, edullisesti 2,5. Pelkistysaine on edullisesti kysteiini, kystamiini, pelkistetty glu-tamiini, panteteiini.
Edellä kuvatulla menetelmällä saadun tuotteen puhtausaste on 99 %, ja saannot ovat reaktioon pannu foolihapon suhteen laskettuina aina yli 80 %.
Edellä kuvatut vaiheet suoritetaan peräkkäin samassa reaktorissa välituotteita eristämättä. Ilmoitetut suhteet ovat aina paino-suhteita.
Verrattaessa uutta menetelmää tunnettuun parhaaseen menetelmään, jonka olennaiset vaiheet esitettiin yhteenvetona selityksen alussa, voidaan heti havaita, että uudessa menetelmässä voidaan jättää pois sekä välivaiheessa että loppuvaiheessa suoritettava kromatografinen erotus ja puhdistus. Tämä ei ainoastaan yksinkertaista ja tekee taloudellisemmaksi menetelmää, sillä tunnetussa menetelmässä tarvitaan pitkiä ja kalliita pylväitä ja pitkiä prosessiaikoja, vaan myös parantaa huomattavasti saantoja, koska kromatografisessa erotuksessa tapahtuu suuria tuotehäviöitä.
Lisää häviöitä esiintyy, kun tuote otetaan talteen erittäin laimeista liuoksista. Talteenotto on tällöin myös ilmeisesti sangen kallista. Lopullinen erotus- ja puhdistusvaihe on korvattu aktiivi-hiilellä suoritetulla adsorptio/desorptio-vaiheessa tai Ca-suoloil-la suoritetulla saostuksella, jotka ovat yksinkertaisia menetelmiä, joissa saannot ovat hyviä. Nämä vaiheet ovat 5-metyylitetrahydro-foolihapon ja sen suolojen valmistuksessa täysin uusia.
Edellä olevasta kuvauksesta voidaan havaita, että 5-metyyli-tetrahydrofoolihapon koko valmistusprosessi suoritetaan inerttikaa- 6 67082 sun läsnäollessa, ja joissa vaiheissa pelkistimen läsnäollessa.
Tähän on syynä tarve estää tetrahydrofoolihapon tai 5-metyyli-tetrahydrofoolihapon itsehapettuminen vastaaviksi dihydrofooli-tai foolihapoiksi. Sama itsehapettumisen ongelma koskee 5-metyyli-tetrahydrfoolihapon säilytystä.
Tähän mennessä MTHF:n säilytykseen ehdotettuja pelkistysainei-ta ovat 2-merkaptoetanoli ja askorbiinihappo. Näiden aineiden käytöstä voitiin ilmeisesti päätellä, ettei tuotetta ollut tarkoitettu farmaseuttiseen käyttöön, vaan käyttö rajoittui laboratorio-tarkoituksiin. 2-merkaptoetanoli on nimittäin myrkyllinen ja vastenmielisen hajuinen, kun taas askorbiinihappo hajoaa nopeasti injektioliuosten optimi-pH:ssa (7-8).
Tämän keksinnön toisena kohteena on'.'.stabilisoitu alkali- tai maa-alkali-5-metyylitetrahydrofolaatin farmaseuttinen koostumus.
Uudet pysyvät koostumukset sisältävät olennaisesti 5-raetyyli-tetrahydrofolaattia (aktiivisena aineena) ja 5-50 % biologista alkuperää olevaa orgaanista yhdistettä (stabilointiaineena), joka sisältää vähintään yhden -SH ryhmän. Tyypillisiä tällaisia yhdisteitä ovat ksyteiini, kystamiini, panteteiini, pelkistetty glu-tationi ja kaikki niiden johdannaiset, joissa -SH funktio on pysynyt aktiivisena.
Kaikki edellä mainitut aineet ovat myrkyttömiä, pysyviä fysiologisilla pH-alueilla ja siten sopivia käytettäviksi ihmisille tarkoitettuihin nestemäisiin tai kiinteisiin farmaseuttisiin valmisteisiin.
Uusilla farmaseuttisilla koostumuksilla on vaikutusta punasolujen muodostukseen maksaa suojaavaa vaikutusta ja antineoplastis-ta vaikutusta.
Seuraavassa esitetään joitakin esimerkkejä keksinnön mukaisen menetelmän toteutuksesta menetelmän paremmaksi valaisemiseksi. *
Esimerkki 1 30 litraa deionoitua vettä syötetään reaktoriin, ja veteen sus-pendoidaan 2,4 kg d,1-foolihappoa. Sitten lisätään sekoittaen kiinteätä Ha2CQ2i3L> ^unnes foolihappo on täysin liuennut (lopullisen liuoksen pH 7,3), sitten lisätään 4,3 kg NaBH^:ää liuotettuna 7 67082 40 litraan vettä, ja reaktioseosta kuumennetaan 70°C:ssa. Seoksen annetaan reagoida tunnin ajan sekoittaen ja johtaen jatkuvasti typpeä. Reaktion päätyttyä reaktori jäähdytetään 30°C:seen ja siihen lisätään sekoittaen 3,5 kg 37-%:ista vesipitoista formaldehydiä ja 2,4 kg natriumboolihydridiä liuotettuna 20 litraan vettä. Reaktio saa jatkua tunnin ajan sekoittaen ja johtaen typpeä reaktio-seokseen. Tämän ajan kuluttua lisätään vielä 0,15 kg 37-%:ista formaldehydiä ja 1 kg kysteiiniä.
17 kg aktiivihiiltä suspendoidaan 100 litraan ilmavapaata vettä, ja hiilisuspensio lisätään sekoittaen reaktioseokseen, jonka pH on säädetty 6,5:een. Joidenkin minuuttien kuluttua seos suodatetaan typpikehässä ja suodattimena oleva hiilikakku pestään vedellä jossa on 1 % kysteiiniä, kunnes kaikki epäorgaaniset suolat on täysin poistettu. Hiili suspendoidaan 100 litraan eluenttiseosta, jolla on seuraava koostumus tilavuusosina: 2-metoksietanolia 80, vettä (joka sisältää 5 % kysteiiniä) 20, ammoniakkia (34 %) 2.
Suspensiota sekoitetaan joitakin minuutteja, sitten se suodatetaan, ja suodos väkevöidään 20 litraksi. Väkevöity suodos kaadetaan liuokseen, joka sisältää 700 g CaC^^ 100 litrassa etanolia.
Kalsium-5-metyylitetrahydrofolaatti saostuu ja suodatetaan typpikehässä, pestään etanolilla ja kuivataan tyhjössä. Saadaan 2,3 kg tuotetta, mikä vastaa 86 %:n saantoa lähtöaineena käytetyn foolihapon suhteen.
*5
Tuotteen UV-analyysi: (pH - 7; £_= 32.10 ): maksimiabsorptio: 290 nm minimiabsorptio: 245 nm suhde E29q/E245 = 3'8*
Kromatografisessa analyysissa Nixon’in ja Bertino’n (P.F.Nixon, J.R.Bertino, Methods in Enzym. 18, 661 (1971)) menetelmällä käyttäen Sephadex DEAE A-25 kromatografiapylvästä saatiin pelkästään 5-metyylitetrahydrofoolihappo-piikki.
Korkeapainenestekromatografia-analyysissä (HPLC-analyysi) (Partisil-10-SAX 4,6 x 250 mm pylväs; eluentti 5-%:inen ammonium-sitraatti; pH 6) saatiin ainoastaan 5-metyylitetrahydrofooli-happo-piikki.
NMR-spektri: N^-CH^ ryhmän tyypillinen singletti:^51 7,5.
1 kg näin valmistettua kalsium-5-metyylitetrahydrofolaattia liuotetaan kuumentaen typpikehässä 40 litraan vettä, jossa on 1 kg kysteiiniä. Liuoksen pH säädetään 6:ksi laimealla kloorivetyhapolla, 8 67082 ja seos saa seistä jääkaapissa. Saostunut 5-metyylitetrahydrofooli-happo suodatetaan, pestään pienellä määrällä kylmää vettä ja kuivataan. Tuotteen suhde E290^E245 on
Sama menetelmä toistetaan käyttäen eluenttiseoksessa 2-metoksi-etanolin sijasta etanolia, metanolia, 1- tai 2-propanolia, n-butanolia, tertbutanolia, sek-butanolia tai isobutanolia. Kaikissa tapauksissa saatiin yhtä hyvällä saannolla tuotetta, jolla oli samat ominaisuudet.
Esimerkki 2 5-metyylitetrahydrofolaattia valmistetaan esimerkissä 1 kuvatulla tavalla. Hiili eluoidaan seoksella, joka sisältää metanolia 80 tilavuusosaa, vettä (jossa on 5 % pelkistettyä glutationia) 20 tilavuusosaa, ammoniakkia (34 %) 2 tilavuusosaa.
Aktiivihiilen suodattamisen jälkeen eluaattiin lisätään 700 g CaCl2:a luotettuna pieneen vesimäärään.
Kalsium-5-metyylitetrahydrofolaatti saostuu ja suodatetaan typpikehässä, pestään etanolilla ja kuivataan tyhjössä. Saadaan 2,1 kg tuotetta, mikä vastaa 80 %:n saantoa foolihapon suhteen. Tuotteella on samat tyypilliset ominaisuudet kuin esimerkissä 1 saadulla tuotteella.
Esimerkki 3
Esimerkin 1 menetelmä toistetaan aina hiilikakun käsittelyyn asti, joka suoritetaan eluenttiseoksella, joka sisältää 2-propanolia ja vettä, jossa on pieni %-määrä ammoniumhydroksidia ja kysteiiniä, eluaatti suodatetaan ja väkevöidään sitten 20 litraksi.
Tämä liuos lyofilisoidaan, jolloin saadaan 2,1 kg natrium-5-metyylitetrahydrofolaattia, saanto 80 %.
Tuotteella on E29o/E245 = 3'®*
Esimerkki 4
Esimerkin 1 menetelmä toistetaan aina eluaatin väkevöimiseen asti. Tässä kokeessa eluaattia käsitellään 1,3 kg:11a BaCl2:a liuotettuna 100 litraan etanolia. Barium-5-metyylitetrahydrofo-laatti saostuu, saanto 83 %. E290^245 = 3'^3,
Esimerkki 5
Esimerkin 1 menetelmä toistetaan aina eluaatin väkevöimiseen asti. Tässä kokeessa eluaattia käsitellään 0,6 kg:lla MgCl2:a liuotettuna 100 litraan etanolia. Magnesium-5-metyylitetrahydro-folaatti saostuu, saanto 82 %. Ε290^Ε245 = 3'®* 9 67082
Esimerkki 6 100 g esimerkin 1 mukaisesti valmistettua kalsium-5-metyyli-tetrahydrofolaattia liuotetaan 4 litraan vettä. Liuokseen lisätään stökiometrinen määrä NajSO^iää. CaSO^-saostuu ja suodatetaan.
Kirkas liuos lyofilisoidaan, jolloin saadaan natrium-5-metyyli-tetrahydrofolaattia.
Esimerkki 7 MTHF-hapon kalsiumsuolan valmistus 2,50 kg foolihappoa suspendoidaan 10 litraan vettä, suspensioon lisätään sekoittaen 1 litra 40-%:ista Na2COj-liuosta. pH säädetään Na2CC>3:lla 7,8:aan, liuos jäähdytetään ja siihen lisätään typpi-kehässä 1,70 kg NaBH^rää. Seoksen annetaan reagoida noin 70°C:ssa 2 tuntia, jolloin reaktio on päättynyt. Sitten lisätään 4,00 kg 37-%:ista vesipitoista formaldehydiä ja senjälkeen 0,80 kg natrium-boorihydridiä. Saostunut natriumboraatti suodatetaan ja ylimääräinen boorihydridi hävitetään säätämällä seoksen pH 6:ksi HCl:llä. Saatuun reaktioseokseen lisätään sekoittaen 1 kg CaC^sa liuotettuna 2 litraan vettä ja seos saa seistä 3°C:ssa yli yön.
Kalsiummetyylitetrahydrofolaatti saostuu amorfisena valkeana jauheena, se suodatetaan ja pestään vedellä. Tämä suola liuotetaan 10 litraan kiehuvaa vettä, liuos jäähdytetään ja jätetään seisomaan yön yli. Saostunut kiteinen suola suodatetaan, pestään ja kuivataan tyhjössä. Saadaan 2,40 kg kalsium-metyylitetrahydrofolaatti-pentahydraattia 80 %:n kokonaissaannolla lähtöaineena käytetystä foolihaposta laskien.
Samoissa olosuhteissa voidaan valmistaa Mg-suola, joka kuitenkin on vaikeasti suodatettavissa.
Kuten edellä mainittiin, voidaan keksinnön mukaisella menetelmällä valmistetuista 5-metyylitetrahydrofolaatista ja sen suoloista valmistaa pysyviä terapeuttisia koostumuksia huoneen lämpötilassa sekoittamalla 5-50 % stabilointiainetta, joka on biologista alkuperää oleva yhdiste, jossa on ainakin yksi -SH ryhmä.
Tyypillisiä tällaisia yhdisteitä ovat kysteiini, kystamiini, panteteiini ja pelkistetty glutationi.
Keksinnön tämän aspektin valaisemiseksi esitetään seuraavassa tyypillinen koostumus, joka voidaan valmistaa näitä yhdisteitä käyttäen.
10 67082
Esimerkki 8
Farmaseuttinen valmiste oraaliin käyttöön Tabletti
Aktiivianne 25 mg
Stabilointiaine 12,5 mg
Tabletin valmistuksessa tarvittavia lisäaineita 112,5 mg Injektoitava farmaseuttinen valmiste
Aktiiviaine 25 mg/ml
Stabilointiaine 12,5 mg/ml
Lyofilointikantaja 150 mg/ml
Tarvittaessa liuoksen pH säädetään 7,5:een väkevällä NaOH:lla liuos täytetään lääkepulloihin ja lyofilisoidaan.
Ilmaisulla aktiiviaine tarkoitetaan - 5-metyylitetrahydrofoolihappoa - natrium-5-metyylitetrahydrofoolihappoa - kaisium-5-metyylitetrahydrofoolihappoa - magnesium-5-metyylitetrahydrofoolihappoa
Ilmaisulla "stabilointiaine" tarkoitetaan tässä esimerkissä - kysteiiniä - kystamiinia - panteteiiniä - pelkistettyä glutationia.
Ilmaisulla "lyofilisointikantaja" tarkoitetaan mitä tahansa tämän määritelmän mukaista ainetta, jota tavallisesti käytetään lyofilisointitekniikassa, kuten glysiiniä.
Missään tapauksessa ei liuoksessa havaittu aktiiviaineen muuttumista säilytyksen aikana lääkepullossa tai lyofilisoinnin aikana.
Claims (9)
1. Menetelmä d,1-5-metyylitetrahydrofoolihapon ja sen suolojen valmistamiseksi, joiden yleinen kaava on (I) _ COOX o ch3 Γ2 «» I ch2 H N_i 1 CH2 I COOX H jossa X on vety, alkalimetalli tai maa-alkalimetallin ekvivalentti, tunnettu siitä, että a) foolihappo pelkistetään tetrahydrofoolihapoksi NaBH.:llä alkalisessa vesiliuoksessa inertissä kaasukehässä 4 käyttämällä painosuhdetta NaBH^ : foolihappo 0,5 : 1 - 3 : 1, reaktiolämpötilaa 60 - 80°C, pH-arvoa 7 - 8 ja reaktioaikaa 0,5 - 2 tuntia, b) tetrahydrofoolihappo metyloidaan 5-metyylitetrahydro-foolihapoksi formaldehydin ja natriumboorihydridin vesiliuoksella inertissä kaasukehässä käyttämällä painosuhdetta formaldehydin kokonaismäärä : tetrahydrofoolihappo on 0,8 : 1-2,5 : 1, painosuhde NaBH^ : tetrahydrofoolihappo 0,25 : 1 - 1,5 : 1, lämpötila 25 - 30°C, pH-arvo 6-8, jolloin formaldehydi lisätään peräkkäisinä fraktioina, joista fraktio, jossa painosuhde formaldehydi : tetrahydrofoolihappo on 0,15 : 1, lisätään reaktion päätyttyä ja vaiheen lopussa lisätään hapettumisen esto-ainetta, joka on kysteiini, pelkistetty glutationi tai pantete-iini, c) natrium-5-metyylitetrahydrofolaatti eristetään sitä sisältävästä vesiliuoksesta sellaisen hapettumisen estoaineen läsnäollessa, joka on kysteiini, pelkistetty glutationi tai panteteiini, ja että vaiheet suoritetaan peräkkäin samassa reaktorissa eristämättä välituotetta. 12 67082
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että erotusvaihe c) suoritetaan käsittelemällä reaktioseosta aktiivihiililisämäärällä, jonka paino on 5-20 kertaa alunperin käsitellyn foolihapon paino, ja että natrium-5-metyylitetrahydrofolaatti desorboidaan hiilestä eluentilla, joka sisältää -alkoholia tai 2-metoksietano-lia ja vettä painosuhteessa 50 : 50-95 : 5.
3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että erotusvaihe c) suoritetaan käsittelemällä vesiliuosta Ca-suolalla ja jäähdyttämällä liuos 0 - 5°C:seen, jolloin painosuhde foolihappo : kalsiumsuola on 2 : 1 - 3 : 1.
4. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että vaiheessa a) on painosuhde NaBH^ : foolihappo 0,7 : 1-2 : 1, lämpötila 70°C, pH 7 - 8 ja reaktioaika 1 tunti ja että vaiheessa b) on painosuhde 37-%sisen formaldehydin kokonaismäärä : tetrahydrofoolihappo 1,4 : 1, painosuhde NaBH^ : tetrahydrofoolihappo 0,5 : 1 - 1 : 1, lämpötila 30°C ja pH 6,5.
5. Patenttivaatimuksen 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että vaiheessa c) on aktiivihiilen määrä 7 kertaa alunperin käsitellyn foolihapon paino ja että eluenttina käytetään seosta, joka sisältää metanolia, etanolia, 2-metoksietanolia, 1- tai 2-propanolia, n-butanolia, tert.-butanolia, sek.-butanolia tai isobutanolia ja vettä suhteessa 80 : 20 v/v ja jossa on 1 til.-% hapetuksen estoainetta ja 0,7 % ammoniakkia vesiliuoksena.
6. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että 5-metyylitetrahydrofoolihappo saoste-taan vesiliuoksesta alkalimetalli- tai maa-alkalimetalli-suolana tekemällä vesiliuos happameksi.
7. Patenttivaatimuksen 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että 5-metyylitetrahydrofoolihappo saadaan natriumsuolana väkevöimällä eluaatti ja lyofilisoimalla vä-kevöite. 13 67082
8. Patenttivaatimuksen 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että 5-metyylitetrahydrofoolihappo erotetaan eluaatista saostamalla maa-alkalisuolana.
9. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että kalsium-5-metyylitetrahydrofolaatti puhdistetaan liuottamalla suolan pentahydraatti pieneen määrään kiehuvaa vettä ja jäähdyttämällä liuos 0 - 5°C:seen. 14 67082
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB7290/77A GB1572137A (en) | 1977-02-22 | 1977-02-22 | Stable compositions for therapeutic use based on d,1-5-methyltetrahydrofolic acid and its salts |
| GB729077 | 1977-02-22 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI780565A FI780565A (fi) | 1978-08-23 |
| FI67082B true FI67082B (fi) | 1984-09-28 |
| FI67082C FI67082C (fi) | 1985-01-10 |
Family
ID=9830275
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI780565A FI67082C (fi) | 1977-02-22 | 1978-02-21 | Foerfarande foer framstaellning av d,1-5-metyltetrahydrofolsyra och salter daerav |
Country Status (32)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5831353B2 (fi) |
| AR (1) | AR215162A1 (fi) |
| AT (1) | AT380020B (fi) |
| AU (1) | AU520715B2 (fi) |
| BE (1) | BE863808A (fi) |
| CA (1) | CA1093554A (fi) |
| CH (1) | CH635344A5 (fi) |
| CZ (1) | CZ279815B6 (fi) |
| DD (1) | DD134099A5 (fi) |
| DE (1) | DE2807393A1 (fi) |
| DK (1) | DK144944C (fi) |
| EG (1) | EG13399A (fi) |
| ES (1) | ES467153A1 (fi) |
| FI (1) | FI67082C (fi) |
| FR (2) | FR2381047A1 (fi) |
| GB (1) | GB1572137A (fi) |
| GR (1) | GR71704B (fi) |
| HU (1) | HU179422B (fi) |
| IE (1) | IE46402B1 (fi) |
| IL (1) | IL54052A (fi) |
| IN (1) | IN149574B (fi) |
| LU (1) | LU79067A1 (fi) |
| MX (1) | MX5288E (fi) |
| NL (1) | NL190285C (fi) |
| NO (1) | NO147793C (fi) |
| NZ (1) | NZ186465A (fi) |
| PL (1) | PL118654B1 (fi) |
| PT (1) | PT67656B (fi) |
| SE (1) | SE437028B (fi) |
| SU (1) | SU747427A3 (fi) |
| YU (1) | YU40505B (fi) |
| ZA (1) | ZA78837B (fi) |
Families Citing this family (15)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5838285A (ja) * | 1981-08-25 | 1983-03-05 | Kanegafuchi Chem Ind Co Ltd | ５−メチル−（６ｒｓ）−５，６，７，８−テトラヒドロ−ｌ−葉酸のマグネシウム塩またはその遊離酸の製法 |
| GB8621268D0 (en) * | 1986-09-03 | 1986-10-08 | Univ Strathclyde | Separation of substances |
| IT1229517B (it) * | 1989-01-31 | 1991-09-03 | Bioresearch Spa | Impiego di acido 5-metiltetraidrofolico, di acido 5 formiltetraidrofolico, e dei loro sali farmaceuticamente accettabili per la preparazione di composizioni farmaceutiche in forma a rilascio controllato adatte ad essere impiegate nella terapia dei disordini depressivi e composizioni farmaceutiche relative. |
| IT1229203B (it) * | 1989-03-22 | 1991-07-25 | Bioresearch Spa | Impiego di acido 5 metiltetraidrofolico, di acido 5 formiltetraidrofolico e dei loro sali farmaceuticamente accettabili per la preparazione di composizioni farmaceutiche in forma a rilascio controllato attive nella terapia dei disturbi mentali organici e composizioni farmaceutiche relative. |
| NL8901432A (nl) * | 1989-06-06 | 1991-01-02 | Pharmachemie Bv | Bij koelkasttemperatuur stabiele waterige folinaatoplossing, alsmede werkwijze ter bereiding daarvan. |
| CH680731A5 (fi) * | 1990-04-12 | 1992-10-30 | Sapec Fine Chemicals | |
| US5217974A (en) * | 1991-03-29 | 1993-06-08 | Eli Lilly And Company | Method for treating gar-transformylase tumors in mammals and reducing mammalian toxicity |
| CH683261A5 (it) * | 1991-10-10 | 1994-02-15 | Applied Pharma Res | Procedimento per la preparazione dell'acido metiltetraidrofolico nella forma (6(R,S)(-))N-5 e separazione del diastereoisomero attivo (6(S)(-))N-5) sotto forma di sali. |
| CH682665A5 (de) * | 1991-10-29 | 1993-10-29 | Sapec Fine Chemicals | Verfahren zur Reinigung von rohen Erdalkalimetallsalzen von N(5)-Methyl-5,6,7,8-tetrahydrofolsäure. |
| US6162914A (en) * | 1998-04-24 | 2000-12-19 | Cerbios-Pharma S.A. | Process for the reduction of pterins |
| CH693905A5 (de) * | 1999-04-15 | 2004-04-15 | Eprova Ag | Stabile kristalline Salze von 5-Methyltetrahydrofolsäure. |
| CH698729B1 (de) * | 2007-05-30 | 2009-10-15 | Cerbios Pharma Sa | Stabile, kristalline (6S)-N(5)-Methyl-5, 6,7,8-tetrahydrofolsäure. |
| CN103214487A (zh) * | 2013-04-12 | 2013-07-24 | 张家港威胜生物医药有限公司 | 一种重要医药化工原料(6s)-5-甲基四氢叶酸盐的合成 |
| WO2015193778A1 (en) | 2014-06-16 | 2015-12-23 | Mylan Laboratories Ltd. | Crystalline form of levomefolate calcium |
| US20210324176A1 (en) | 2018-08-28 | 2021-10-21 | Pmc Organometallix, Inc. | Low free 2-mercaptoethanol ester and uses thereof |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| NL80276C (fi) * | ||||
| GB1293541A (en) * | 1969-03-18 | 1972-10-18 | John Alexander Blair | Folic acid derivatives |
| US3856959A (en) * | 1972-07-24 | 1974-12-24 | Department Of Health Education | Inhibition of leukemia utilizing 5-methyltetrahydrohomofolate |
| US4148999A (en) * | 1977-08-22 | 1979-04-10 | The Government Of The United States Of America | Preparation and purification of citrovorum factor |
| CH649550A5 (en) * | 1984-02-09 | 1985-05-31 | Eprova Ag | Process for the preparation of alkaline earth metal salts of 5-methyltetrahydrofolic acid |
-
1977
- 1977-02-22 GB GB7290/77A patent/GB1572137A/en not_active Expired
-
1978
- 1978-02-09 AT AT0090378A patent/AT380020B/de not_active IP Right Cessation
- 1978-02-09 CA CA296,754A patent/CA1093554A/en not_active Expired
- 1978-02-09 BE BE185038A patent/BE863808A/xx not_active IP Right Cessation
- 1978-02-09 IE IE285/78A patent/IE46402B1/en not_active IP Right Cessation
- 1978-02-13 ZA ZA00780837A patent/ZA78837B/xx unknown
- 1978-02-13 NZ NZ186465A patent/NZ186465A/xx unknown
- 1978-02-15 LU LU79067A patent/LU79067A1/xx unknown
- 1978-02-15 IN IN174/CAL/78A patent/IN149574B/en unknown
- 1978-02-15 PT PT67656A patent/PT67656B/pt unknown
- 1978-02-15 IL IL54052A patent/IL54052A/xx unknown
- 1978-02-16 NL NLAANVRAGE7801775,A patent/NL190285C/xx not_active IP Right Cessation
- 1978-02-18 PL PL1978204747A patent/PL118654B1/pl unknown
- 1978-02-20 AU AU33430/78A patent/AU520715B2/en not_active Expired
- 1978-02-20 DD DD78203761A patent/DD134099A5/xx unknown
- 1978-02-20 GR GR55500A patent/GR71704B/el unknown
- 1978-02-20 YU YU379/78A patent/YU40505B/xx unknown
- 1978-02-21 NO NO780594A patent/NO147793C/no unknown
- 1978-02-21 EG EG103/78A patent/EG13399A/xx active
- 1978-02-21 FI FI780565A patent/FI67082C/fi not_active IP Right Cessation
- 1978-02-21 SE SE7801973A patent/SE437028B/sv not_active IP Right Cessation
- 1978-02-21 DK DK76578A patent/DK144944C/da not_active IP Right Cessation
- 1978-02-21 DE DE19782807393 patent/DE2807393A1/de active Granted
- 1978-02-21 FR FR7804847A patent/FR2381047A1/fr active Granted
- 1978-02-21 MX MX786871U patent/MX5288E/es unknown
- 1978-02-21 SU SU782588551A patent/SU747427A3/ru active
- 1978-02-21 ES ES467153A patent/ES467153A1/es not_active Expired
- 1978-02-22 HU HU78BI562A patent/HU179422B/hu unknown
- 1978-02-22 CH CH193678A patent/CH635344A5/de not_active IP Right Cessation
- 1978-02-22 CZ CS781129A patent/CZ279815B6/cs unknown
- 1978-02-22 JP JP53018637A patent/JPS5831353B2/ja not_active Expired
- 1978-02-22 AR AR271183A patent/AR215162A1/es active
- 1978-07-13 FR FR7820936A patent/FR2385397A1/fr active Granted
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| FI67082B (fi) | Foerfarande foer framstaellning av d 1-5-metyltetrahydrofolsyra och salter daerav | |
| US5124452A (en) | Process for producing d,1-5-methyltetrahydrofolic acid and its salts | |
| Kriek et al. | Structural identification of the pyrimidine derivatives formed from N-(deoxyguanosin-8-yl)-2-aminofluorene in aqueous solution at alkaline pH | |
| WO1993019069A1 (en) | Intermediates and a process for synthesis of tetrahydropteridine c6-stereoisomers, including (6s)-tetrahydrofolate and n5-formyl-(6s)-tetrhydrofolate | |
| AU635831B2 (en) | Ammonium salts of n5-methyl-5,6,7,8-tetrahydrofolic acid | |
| CA1339803C (en) | Dideoxydidehydrocarbocyclic nucleosides | |
| CN109096346B (zh) | 制备二核苷多磷酸化合物的方法 | |
| SAMEJIMA et al. | Improved synthesis of decarboxylated S-adenosylmethionine and related sulfonium compounds | |
| US5239074A (en) | Diastereoisomeric compounds derived from tetrahydrofolic acid, process for their preparation and use in the synthesis of diastereoisomers 6s and 6r of reduced folates | |
| Wagenaar et al. | Methodology for the preparation of N-guanidino-modified arginines and related derivatives | |
| US5223500A (en) | Stable pharmaceutical composition of alkaline or alkaline earth 5-methyl tetrahydrofolate | |
| Gilissen et al. | Synthesis of N‐(2‐[18F] fluoroethyl)‐N′‐methylthiourea: a hydrogen peroxide scavenger | |
| US4401808A (en) | Adenosine cyclic 3',5'-phosphate triesters and the acid addition salts thereof, and process for production thereof | |
| EP0403544B1 (en) | Method of making radioiodinated pyrimidine | |
| US5489684A (en) | Process for the preparation of (6S)-5,6,7,8-tetrahydrofolic acid | |
| Choi et al. | Synthesis of 5-selenium-substituted uracil derivatives. Inhibition of thymidylate synthetase by 5-hydroseleno-2'-deoxyuridylate | |
| GlÖggler et al. | The synthesis of deuterium-substituted, spin-labeled analogues of AMP and NAD+ and their use in ESR studies of lactate dehydrogenase | |
| CN106573895B (zh) | 作为相应的5-硫烷基组氨酸和其二硫化物的前体的新型5-酰基硫烷基-组氨酸化合物 | |
| GB1572138A (en) | Process for the preparation of d,1-5-methyltetrahydrofolic acid | |
| CA2322424A1 (en) | 5-imino-13-deoxy anthracycline derivatives, their uses, and processes for preparing them | |
| Cook et al. | Fluorinated pyrimidine nucleosides. 2. Reaction of 2, 2'-anhydro-1-. beta.-D-arabinofuranosyl-5-fluorocytosine hydrochloride with nitrogen and sulfur nucleophiles | |
| WO2011056091A1 (ru) | Способ получения амидов креатина | |
| US6346610B1 (en) | Process for preparing antifungal V-28-3M | |
| US5081289A (en) | Synthesis and isolation of nopaline and its analogues | |
| HU203553B (en) | New process for producing oxetanocin g |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MA | Patent expired | ||
| MA | Patent expired |
Owner name: BIORESEARCH S.P.A. |