FI63410C - Foerfarande foer framstaellning av antibakterial 7beta-haloarylmalonamido-7alfa-metoxi-3-heterocyklisk tiometyl-1-detia-1-oxa-3-cefem-4-karboxylsyra eller derivat daerav - Google Patents

Description

Iv^W.I [B] KUULUTUSJULKAISU /L7L Λ Λ Π MA LBJ (") UTLAGCNINCSSKRIFT 6θ41ϋ C (45) Patentti nyönne-tty 10 06 19---3 ^ ^ (51) K».ik.3/Int.a.^ c 07 D 498/04 SUOM I —FI N LAN D (21) Ptt.nttihik.mu* — Pit.ntl»*»eknini 781313 (22) Hik.mltpiM — Anaekningfdif 27.0U.78 (23) Alkupilvl—GIKl|h*t*d*g 27.0U.78 (41) Tullut luikituksi — Bllvit offtmllg 29.10.78

Patentti- ia rekisterihallitus ..., , ......

_ ^ „ V . (44) Nlhtivikiipanon ja kuul|ulktl*un prm. — p« no flo

Patent-och registerstyrelsen Antttkm utiagd och utUkrifun pubikwnd (32)(33)(31) Pyydttty atuoikwt —B.|trd prlorltut 28' θ1+·TT 25.Ο8.77 Japani-Japan(JP) U9630/77, 102260/77 (71) Shionogi & Co., Ltd., 12, 3-chome, Dosho-machi, Higashi-ku, Osaka,

Japani-Japani(JP) (72) Yoshio Hamashima, Kyoto-shi, Kyoto Pref., Masayuki Narisada, Ibaraki-shi,

Osaka Pref., Sadao Hayashi, Ashiya-shi, Hyogo Pref., Wataru Nagata, Nishinomiya-shi, Hyogo Pref., Japani-Japan(JP) (7U) Ruska & Co (5U) Menetelmä antitakteriaalisen 7^-halogeeniaryylimaloniamido-70f-metoksi--3-heterosyklinen tiometyyli-l-detia-l-oksa-3-kefemi-U-karbonihapon tai sen johdannaisen valmistamiseksi - Förfarande för framstallning av antihakterial 7|9-haloarylmalonamido-7Qi-metoxi-3-heterocyklisk tio-metyl-l-detia-l-oxa-3-cefem-U-karboxylsyra eller derivat därav Tämä keksintö kohdistuu menetelmään antibakteriaalisen 78-halogeeni- ; aryylimaloniamido-7a-metoksi-3“heterosyklinen tiometyyli-1-detia-1-oksa-3-kefemi-U-karbonihapon tai sen johdannaisen valmistamiseksi, jonka yleinen kaava on: ‘ °CH3 (I)

ArCHCONH .

I Y~r^i

C°A

COB

Hai Hai Hai Hai Hai* CP^ CF^ ;

jossa Ar on φ. φ-· φ· €&’ tai <ξ> I

Hai* RO RO RO r jossa Hai ja Hai* kumpikin tarkoittaa halogeenia ja fi tarkoittaa v ty.u tai anisyyliä; C0A tarkoittaa karboksyyliä, difenyyiimetoksi- 2 6341 0 karbonyyliä tai anisyylioksikarbonyyliä; COB tarkoittaa karboksyy-liä tai difenyylimetyylikarbonyyliä; ja Het tarkoittaa 1-metyyli-5-tetratsolyyliä, l,3»4,-tiadiatsoli-2-yyliä tai 5-metyyli-l,3,4,-tiadiatsoli-2-yyliä.

Kefalosporiinianalogeja, joissa happi on rikkiatorain tilalla renkaassa, ovat kuvailleet julkaisussa Journal of Heterocyclic Chemistry, Volume 5, siv. 779 (1968) J.C. Sheehan ja M. Dadic; julkaisussa Canadian Journal of Chemistry, Volume 52, siv. 3996 (1974) S. Wolfe et ai; julkaisussa Journal of American Chemical Society,

Volume 96, siv. 7582 (1974) B.G. Christensen et ai. Niitä on selostettu myös saksalaisessa hakemusjulkaisussa 2 219 601 (1972) sekä japanilaisissa patenttihakemuksissa 49-133 59** > 51~1**9 295 ja 52-65 292.

Kahden tämän keksinnön tekijän erään aikaisemman keksinnön mukaan on todettu, että seuraavan kaavan mukaisilla yhdisteillä oli ylivoimaisesti parempia ominaisuuksia tunnettuihin ja esitettyihin yhdisteisiin nähden:

Ar '-CHCONH^y

Jm (Aikaisemman keksinnön CH2SHet' mukaiset yhdisteet) jossa Ar' on fenyyli, tienyyli, hydroksifenyyli tai asyylioksifenyy-li; COA ja COB kumpikin tarkoittaa karboksia tai suojattua karbok-sia, Het' on 1-metyylitetratsolyyli, kun Y on metoksi, tai 1-metyy-litetratsolyyli, 2-metyyli-,l,3,4-tiadiatsoli-5-yyli tai 1-karboksi-metyylitetratsolyyli, kun Y on vety; ja Y tarkoittaa vetyä tai nietoksia. Tätä aikaisempaa keksintöä on selostettu saksalaisessa patenttihakemuksessa 2 713 370.

Yksi tai useampi halogeeni johdetaan nyt aryyliosaan (Ar'), joka on sidottu maloniamidoryhmään, jolloin saadaan parannettu bakteerinvas-tainen aktiviteetti ja parannetut farmakodynaamiset ominaisuudet.

Tämä muodostaa perustan tälle keksinnölle.

Keksinnön mukaisella menetelmällä valmistettuja yhdisteitä voidaan kuvata edellä olevalla kaavalla I ja se esittää uusia 7S-(haloge- noitu aryylimaloniamido)-7a-metoksi-3~(mahdollisesti alempi alkyyli- substituoitu tetratsoli-5-yyli tai i,3,4-tiadiätsoii-2-yyli) tiome- tyylL-l-detia-l-oksa-i-kefemi-ii-karbonihappoja ja niiden karbokoi- .'ohil&nViaisia (I). r..

· m 3 · 6341 0

Kaavassa I halogeenina, joka on merkitty Hai tai Hai', voi olla fluori, bromi tai jodi.

Tämän keksinnön mukaiselle menetelmälle on tunnusomaista se, että 76-amino-7a-metoksi-3“heterosyklinen tiometyyli-l-detia-l-oksa-3-kefemi-4-karbonihappo tai sen amino- tai karboksijohdannainen, jonka yleinen kaava on: ?CH3 h2ns—r-, (id 0^-N'<i^CH2SHe t

COB

asyloidaan asyloimisaineen kanssa halogeeniaryylimalonihapon, jonka kaava on

ArCOCOOH i | (III) coa : ! asyyliryhmän liittämiseksi, jolloin Ar:llä ja Het:11a on edellä ! mainittu merkitys; ja COA ja COB tarkoittavat suojattuja karboksyy-liryhmiä, joiden suojaryhmänä on difenyylimetoksi tai anisyylioksi, minkä jälkeen seuraa mahdollisesti suojaryhmien poistaminen ja/tai vastaavan suolan valmistus.

Tämän keksinnön mukaan valmistetut edulliset yhdisteet, jotka vastaavat kaavaa I, tunnetaan seuraavista farmakologisista ominaisuuksista: (1) Yhdisteet I verrattuna vastaaviin halogenoimattomiin yhdisteisiin: a) Lisääntynyt bakteerinvastainen vaikutus grampositiivisia bakteereita vastaan 2-4 kertainen; b) Vertailukelpoinen veriarvo vastaavalla puolella elinpituu-della; c) Vertailukelpoinen bakteerinvastainen aktiviteetti gramnega-tiivisia bakteereita vastaan; d) Edullinen rakenne hiirien suojaamiseksi bakteeritartuntoja vastaan, kun Hai on fluori fenyylimalonyyliosan fenyyIin 2-asemassa; e) Alempi stabiliteetti ja f) Seerumiproteiinin lisätty sitoutuminen sekä bakteerinvas- 4 · 63410 täisen aktiviteetin menetyksen korkeampi aste ihmisen seerumissa.

(2) Yhdisteet I, joissa on hydroksi ja halogeeni fenyyIissä, on seuraavat ominaisuudet verrattuna vastaaviin halogenoimatto-miin yhdisteisiin: a) Voimakkaampi· bakteerinvastainen aktiviteetti grampositiivi-sia bakteereita ja Proteus-sukuja vastaan; b) Lisääntynyt bakteerinvastainen aktiviteetti gramnegatiivi-sia bakteereita, paitsi Pseudomonas aeruginosaa vastaan; c) Vertailukelpoinen absorptio vereen; d) Vertailukelpoinen seerumiproteiinin sitoutuminen ja stabiliteetti ja e) Huomattavasti tehokkaampi suojavaikutus in vivo bakteeritartuntoja vastaan, kun yhdisteessä on fluoriryhmä maloni-amidisivuketjuun sidotun fenyyliryhmän 2-asemassa.

Edellä olevissa molemmissa tapauksissa (1) ja (2) halogeenin Hai ja Hai' laji, sijainti ja lukumäärä vaikuttaa suuressa määrässä baktee-rinvastaiseen vaikutukseen. Fluori on tehokkaampi kuin kloori ja aktiivisuuden lisäys riippuu asemasta fenyylirenkaassa järjestyksessä 4, 3 ja 2. Trifluorimetyyli on vähemmän tehokas kuin kloori tai fluori. Voimakkaamman proteiinisitoutumisen johdosta dihalogeenife-nyyli on huonompi valinta aktiviteettia varten kuin monohalogeenifenyyli.

Hydroksidin sijainti vaikuttaa myöskin bakteerinvastaiseen vaikutukseen ja aktiviteetti kohoaa riippuen hydrosidin asemasta fenyyliren-kaassa järjestyksessä 2, 3 ja erityisesti gramnegatiivisia bakteereita vastaan. Yhdisteet I, joissa RO on hydroksidi, ovat tehokkaampia bakteerinvastaisia aineita Pseudomonas- ja Enterobacteria -sukuja vastaan.

Edullisesti Het on l-metyylitetratsoli-5-yyli·

Kuten edellä on mainittu, yhdisteet I ovat uusia aineita, joilla on tehokas bakteerinvastainen vaikutus grampositiivisia ja gramnegatiivisia bakteereita vastaan, ja ne ovat käyttökelpoisia lääkeaineina, eläinten lääkkeinä sekä desinfioimisaineina. Niitä annetaan tavallisesti suun kautta tai ruoansulatuskanavan ulkopuolisesta ihmisille tai eläimille päivittäisenä annoksena esim. 0,05-50 mg/kg kehon paino.

5 6341 0

Niitä voidaan käyttää sellaisten tartuntojen hoitamiseen tai estämiseen, joita ovat aiheuttaneet grampositiiviset bakteerit (esim. Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes, Bacillus subtilis,

Bacillus cereus, Diplococcus pneumoniae, Corynebacterium di-phtheriae) tai gramnegatiiviset bakteerit (esim. Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Proteus mirabilis, Proteus vulgaris, Proteus rettgeri, Proteus morganii, Enterobacter cloacae, Shigella sonnei, Salmonella paratyphi, Salmonella typhi tai Serratia marsescens). Yhdisteitä voidaan käyttää myöskin desinfioivina aineina, parantamaan helposti pilaantuvien aineiden säilyvyyttä, lisäaineina elintarvikkeissa tai bakteereja estävinä aineina hygieenisissä aineissa.

Tällöin voidaan hoitaa tai ennalta estää tartuntasairaudet, jotka ovat aiheuttaneet bakteerit, jotka ovat herkkiä yhdisteelle I (esim. keuhkotulehdus, keuhkoputkentulehdus, keuhkokuume, ontelomärkimä, nenätulehdus, kitarisatulehdus, nuha, ihotulehdus, märkärakkulai- j suus, haavauma, paise, haava- tai pehmeäkudostartunta, korvatuleh- j dus, luumätä, verenmyrkytys, maha-suolitulehdus, suolitulehdus, ] virtsatiehyttartunta, tai munuaisaltaan ja munuaisen tulehdus).

Selityksen lopussa on selostettu vertailukokeita, joissa keksinnön mukaan valmistettujen yhdisteiden äntibakteriaalista aktiviteettia on verrattu aikaisemmin tunnettuun samantapaiseen yhdisteeseen.

Lisäksi yhdisteet I ovat käyttökelpoisia välituotteita valmistettaessa käyttökelpoisia β-laktaami-antibiootteja, jotka sisältyvät tai eivät sisälly yhdisteisiin I.

Yhdisteitä I voidaan käyttää erilaisissa suun kautta tai ruoansulatuskanavan ulkopuolisesta annettavissa annosmuodoissa yksinään tai seoksena muiden yhdessä toimivien aineiden kanssa. Farmaseuttiset valmisteet voivat sisältää 0,01 - 99 % yhdistettä I ja farmaseuttista kantoainetta, jona voi olla kiinteä aine tai juokseva aine, joihin yhdisteet on sekoitettu, liuotettu, dispergoitu tai suspendoi-tu. Seos voi olla yksikköannosmuodossa. Seos voi olla kiinteässä muodossa, kuten tabletti, pulveri, kuiva siirappi, rae, kapseli, pilleri, peräpuikko tai sen tapainen kiinteä valmiste. Edelleen ' seos voi olla juoksevassa muodossa, esim. ruiskeena, salvana, dispersiona, hengitettävänä lääkkeenä, suspensiona, liuoksena, emulsiona, siirappina tai eliksiirinä. Seos voi olla makeutettu tai värjätty. Tabletit, rakeet ja kapselit voivat olla päällystettyjä.

6 . 63410 β-laktaamiantibiootin osina yhdisteet I eivät ole niin kestäviä, että niitä voidaan varastoida pitkiä aikoja, kun niitä on sekoitettu erilaisten aineiden kanssa. Pääasiallisesti puhtaat yhdisteet ja muutamat harvat tehottomat lisäaineet ovat sopivampia lääkeaineiden valmistamiseksi käytännössä (esim. lasipullot tai kapselit).

Keksinnön mukaista menetelmää voidaan soveltaa esimerkiksi jollakin seuraavalla tavalla: (1) Kaavan II mukaisen amiinin tai sen reaktiokykyisen johdannaisen ja kaavan III mukaisen halogeeniaryylimalonihapon tai sen reaktiokykyisen johdannaisen välisellä reaktiolla:

o m : CH3 ArCHCOOH

2 "j—Γ°Ί (III) coa 0^N^CH2SHet -;-> Yhdl3te 1

(il) COB

jossa Ar:llä, COA:11a, COBtllä ja Het:illä on edellä ilmoitettu merkitys.

Mainittu amiini II, 7B-amino-7a-metoksi-3“heteroaromaattinen tio-metyyli-l-detia-l-oksa-3~kefemi-4-karbonihappojohdannainen on esitetty saksalaisessa patenttihakemuksessa 2 355 209 ja muussa kirjallisuudessa. Amiinin II reaktiokykyiset johdannaiset käsittävät sellaisia johdannaisia, jotka on 7-amino substituoitu tai aktivoitu silyyiillä (esim. trimetyylisilyyli, metoksidimetyylisilyyli), | stannyyIillä (esim. trimetyylistannyyli), karbonyylillä, alkyleenil-lä (esim. enamino asetonin, asetyyliasetonin, asetoetikkahappoeste-rin, asetoasetonitriilin, asetasetamidin, asetoasetanilidin, syklo-pentaanidionin tai asetyylibutyrolaktonin kanssa), alkylideenillä (esim. bensyylideeni, 1-halogeenialkylideeni, 1-halogeeniaralkyli-deeni, 1-alkoksialkylideeni tai 1-alkoksi-l-fenoksialkylideeni) tai hapolla (ts. happoadditiosuola mineraalihapon, karbonihapon, sulfo-nihapon tai tiosyanihapon kanssa tai sen tapaisella.

Halogeeniaryylimalonihappo III on tunnettu aine tai analoginen aine, joka voidaan johtaa tunnetuista aineista yleisesti tunnetulla tavalla.

COA on sama ryhmä kuin COA yhdisteessä I ja sen yksityiskohdat on esitetty edellä.

7 . 63410

Halogeeniaryylimalonihapon III reaktiokykyiset johdannaiset käsittävät reaktiokykyiset esterit, reaktiokykyiset amidit, atsidit ja sen tapaiset.

Tämä reaktio voidaan suorittaa seuraavan seitsemän tyyppisen rea-genssin kanssa: i) Vapaa happo Tätä käytetään kondensoituvan reagenssin, kuten karbodi-imidin, (esim. Ν,Ν’-dietyylikarbodi-imidi tai Ν,Ν’-disykloheksyylikarbodi-imidi), karbonyyliyhdisteen (esim. karbonyylidi-imidatsoli), isoksatsoliniumsuolan, asyyliaminiyhdisteen (esim. 2-etoksi-l-etok-sikarbonyyli-l,2-dihydrokiniliini) tai sen tapaisen reagenssin läsnäollessa, sopivimmin aproottisessa liuottimessa, esim. halogeeni-hiilivedyssä, nitriilissä, eetterissä, amidissa tai sen tapaisessa tai niiden seoksissa ja sopivimmin moolisuhteessa 1-2 moolia vapaata happoa ja 1-2 moolia kondensaatioreagenssia yhtä moolia amiinia II kohti.

ii) Happoanhydridi Tämä voi olla symmetrinen tai sekoitettu anhydridi (esim. mineraali-hapon tai alkoksimuurahaishapon kanssa sekoitettu anhydridi, alkaa-nihapon, sulfonihapon tai sentapaisen kanssa sekoitettu anhydridi), molekyylin sisäinen anhydridi (esim. ketoni tai isosyanidi) tai jokin muu anhydridi, joka on saatavissa happoa poistavan aineen läsnäollessa (esim. epäorgaaninen emäs, kuten alkalimetallin tai maa-al-kalimetallin oksidi, hydroksidi, karbonaatti tai vetykarbonaatti; orgaaninen emäs, kuten trietyyliamiini, N-metyylimorfoliini, N,N-dimetyylianiliini, pyridiini tai kinoliini; oksiraani, kuten ety-leenioksidi tai propyleenioksidi; tai aralkyleenioksidi, kuten sty-reenioksidi) ja sopivimmin aproottinen liuotin (esim. halogeenihii-livety, nitriili, eetteri, amidiliuotin tai näiden seos) sopivasti moolisuhteessa 1-2 moolia happoanhydridiä ja 1-10 moolia happoa poistavaa ainetta yhtä moolia amiinia II tai sen reaktiokykyistä johdannaista kohti.

iii) Happohalogenidi ' Tätä käytetään sopivimmin happoa poistavan aineen läsnäollessa, joka on mainittu edellisessä kohdassa ii) liuottimessa (esim. halo- geenihii livety, nitriili, eetteri, ketoni, vesi tai dialkyyliamidi- I.luotin tai näiden seos) moolisuhteessa 1-2 moolia happohalogenidia ja 8 · 63410 1-10 moolia happoa poistavaa ainetta yhtä moolia amiinia II tai sen reaktiokykyistä johdannaista kohti.

iv) Reaktiokykyinen esteri Tänä voi olla enoliesteri, esim. vinyyli- tai isopropyyliesteri, aryyliesteri (esim. kloorifenyyli), trikloorifenyyli, pentakloori-fenyyli, dinitrofenyy-li tai trinitrofenyyliesteri), heteroaromaat-tinen esteri (esim. esteri 1-hydroksibensotriatsolin kanssa) tai esteri hydroksyyliamiinin kanssa tai sentapainen.

vj Reaktiokykyinen amidi Tänä on aromaattinen amidi, esim. amidi imidatsolin, triatsolin, 3-okso-bensoisotiätsolidiini-1,1-dioksidin tai 2-etoksi-1,2-dihyd-rokinoliinin kanssa.

vi) Formiminojohdannainen Tänä on esim. Ν,Ν-dimetyyliformiminoesteri.

i i vii) Muut reaktiokykyiset johdannaiset.

♦ »

Ne reagenssit, jotka on esitetty edellä olevissa kohdissa iv) - vi), ; saatetaan reagoimaan, sopivimmin aproottisessa liuottimessa (esim. halogeenihiilivety-, eetteri-, ketoni-, amidi- tai esteriliuotin tai näiden seokset) moolisuhteessa yksi tai useampi mooli halogeeni-aryylimalonihapon III reaktiokykyistä johdannaista yhtä moolia amiinia II tai sen reaktiokykyistä johdannaista kohti.

(2) Yhdisteen I, jossa on vapaa karboksi, käsittely epäorgaanisella tai orgaanisella emäksellä aikaansaa suolan muodostumisen. Tällainen emässuola voi olla vastaavaa hydroksidia, heikon karboniha-pon suolaa, karbonaattia tai heikon hapon suolaa, joka sisältää metallia kationisessa osassa. Kun kiinteä suola eroaa orgaanisesta liuottimesta, suolan muodostusta tässä liuottimessa voidaan käyttää hyväksi tuotteen puhdistamiseksi mukavalla tavalla. Suoloja saadaan myöskin tavanomaisesti väkevöimällä neutraloitua vesipitoista suolaliuosta, lyofilisoimalla tai jollakin muulla tavalla.

Nämä reaktiot voidaan suorittaa lämpötilassa noin -30 ... 100°C, sopivimmin -20 ... 50°C. Reaktioliuotin voidaan edelleen valita halo-Ceenihiilivetyjen joukosta (esim. dikloorimetaani), emäksistä (esim. trietyyliamiini, pyridiini) tai liuottimena voi olla vesi tai sentapainen, ja niiden seokset.

9 · 6341 0

Tarvittaessa reaktiota voidaan kiihdyttää sekoittamalla, suojata ilmalta käyttämällä inertiä kaasuvirtaa tai pitää kuivana käyttämällä hyväksi tavallisia menetelmiä kosteuden poistamiseksi.

Tuote voidaan saada esim. tavallisella tavalla suoritetun liuottimen, sivutuotteiden ja reagoimattoman lähtöaineen poistamisen jälkeen (esim. väkevöiminen, uuttaminen, absorptio, eluoiminen tai peseminen) ja puhdistaa tavallisella tavalla (esim. uudestaan saosta-minen, kromatografia, toistokiteyttäminen tai jokin muu puhdistus-menetelmä) .

Seuraavissa esimerkeissä esitetään yksityiskohtaisemmin muutamia keksinnön tiettyjä sovellutusmuotoja.

Kaavoissa ja taulukoissa käytetään seuraavia lyhennyksiä:

Ac = asetyyli, ANS = anisyyli, BH = difenyylimetoksikarbonyyli,

Et = etyyli, MeTdz = 2-metyyli-l,3,i»-tiadiatsoli-5-yyli, Ph = fe-nyyli, PMB = anisyylioksikarbonyyli, Tdz = l,3,^-tiadiatsoli-2-yyli, i Tetr = l-metyylitetratsoli-5-yyli ja Temp. = lämpötila.

Esimerkki 1 (Asyloiminen) (iii) °CH3 ArCHCOOH ?CH3 H0N ; I. ArCHCONHL * T~f Ί C0A . L. \~~F1 * C0A 0^—N'^5iis-CH2SHet COOCHPh. jL_. COOCHPh.

(ii) 2 C0C1 (i) 2 jossa Ar:llä, COArlla ja Het:illä on edellä ilmoitettu merkitys.

Halogeeniaryylimalonihappo (iii) liuotetaan dikloorimetaaniin. Sitten lisätään trietyyliamiinia ja oksalyylikloridia -20°C:ssa. Seos lämmitetään lämpötilaan 0°C ja sitä sekoitetaan määrätty aika, jolloin saadaan vastaavan halogeeniaryylimalonihappokloridin liuos.

Tämä lisätään liuokseen, jonka muodostaa amiini (ii) dikloorimetaa-nissa ja joka on tehty emäksiseksi pyridiinillä, sekoittaen ja jäähdyttäen. Seosta jäähdytetään yksi vuorokausi +10 ... -20°C:-ssa ja kaadetaan sen jälkeen laimeaan suolahappoon tai laimeaan fosforihap-poon. Seos uutetaan dikloorimetaanilla tai etyyliasetaatilla. Uute- liuos pestään vedellä, kuivataan ja väkevöidään alennetussa painees- . - \ 10 , 6341 0 sa. Saatu jäännös kromatografoidaan silikageelin avulla. Eluoimi-nen benseeni-etyyliasetaatin kanssa antaa haluttua yhdistettä (i).

Käytetyt reaktio-olosuhteet on ilmoitettu taulukossa 1 ja tuotteiden saadut fysikaaliset vakiot on ilmoitettu taulukossa 2.

Yhdisteen no 5 yksityiskohtainen valmistusmenetelmä esitetään seuraavassa esimerkkinä koemenetelmistä, joita on käytetty taulukossa 1.

(No 5) Liuokseen, jonka muodostaa 456 mg (1,2 mmoolia a-(2-fluori-ä~hydroksifenyyli)-a-difenyylimetoksikarbonyylietikkahappoa 4 f ml:ssa dikloorimetaania, lisätään 0,l4 ml (1 mmooli) trietyyliamii- i n.a ja 86 yg (1 mmooli) oksalyylikloridia, jäissä jäähdyttäen. Yhden tunnin sekoittamisen jälkeen liuos lisätään liuokseen, jonka · muodostaa 204 mg difenyylimetyyli 7$-amino-7ct-metoksi-3-(l-metyyli- * i:etratsoli-5-yyli)tiometyyli-l-detia-l-oksa-3_kefemi-4-karboksylaat- , tia seoksessa, joka sisältää 4 ml dikloorimetaania ja 100 yl (1,2 | mmoolia) pyridiiniä. Seosta sekoitetaan 50 minuuttia jäissä jääh- 1 dyttäen. Reaktioseos kaadetaan 5 $:seen vesipitoiseen fosforihap- ' poon ja uutetaan etyyliasetaatilla. Uute pestään vedellä, kuiva- s taan natriumsulfaatin avulla ja väkevöidään tyhjössä. Saatu jäännös kromatografoidaan silikageelin avulla, jolloin saadaan l80 mg ; difenyylimetyyli 78-[a-(4-hydroksi-2-fluorifenyyli)-a-difenyylime-toksikarbonyyliasetamido]-76-metoksi-3“(l-metyylitetratsoli-5-yyli) tiometyyli-l-detia-l-oksa-3-ke£emi-4-karboksylaattia (yhdiste 5) saannolla 51>7 % amorfisessa tilassa.

Esimerkki 2 (Suojaryhmän poistaminen)

AlClo PCH3 or J 9CH3

ArljlHCONH^_^ F3CCOOH ArCHCONH^ 0!i-S^l.CH2SHet CH °0H oiXP'CHjSHet

C00CHPh2 J ^ COOH

jossa Ar:llä, COA:lla ja Hetrillä on edellä ilmoitettu merkitys.

Difenyylimetyyli 70-(a-halogeeniaryyli-nt-suojattu karboksiasetami-do)-7ct-metoksi-3-kefemi-4-karboksylaatti (i) liuotetaan dikloorime-taaniin ja/tai anisoliin. Sitten lisätään trifluorietikkahappoa tai aluminiur.kloridin liuosta nitrometaanissa ja kokonaisuutta sekoitetaan noin COC:ssa.

11 · 6341 0

Kun käytetään trifluorietikkahappoa, väkevöidään reaktioseos tyhjössä, hierotaan jauheeksi eetterin kanssa, jolloin saadaan kiinteä tuote, joka erotetaan ja pidetään tyhjössä, niin että jäljellä oleva liuotin poistuu, jolloin saadaan 7B-(a-halogeeniaryyli-a-karbok-siasetamido)-7ci-metoksi-3-heteroaromaattinen tiometyyli-l-detia-1-oksa-3~kefemi-4-karbonihappoa (i1).

Kun käytetään aluminiumkloridia nitrometäänissä, laimennetaan reaktioseos etyyliasetaatilla, pestään suolahapolla ja uutetaan vesipitoisella vetykarbonaatilla. Vesipitoinen uute hapotetaan pH-arvoon 1,5 ja toistouutetaan etyyliasetaatilla. Uuttoliuos väkevöidään.

Saatu jäännös hierotaan jauheeksi liuottimessa, jolloin saadaan haluttua vapaata karbonihappoa (i').

Käytetyt reaktio-olosuhteet on esitetty taulukossa 3 ja taulukon 3 mukaisten tuotteiden fysikaaliset vakiot on esitetty taulukossa 4.

Suojaryhmän poistamismenetelmän yksityiskohdat yhdisteelle 5 esitetään seuraavassa ja se edustaa taulukossa 3 esitettyjä kokeita. ) (No 5) liuokseen, jonka muodostaa 10 g difenyylimetyyli 76_0*-(4-metoksibensyylioksi-2-fluorifenyyli)-a-difenyylimetoksikarbonyyli-asetamido]-7a-metoksi-3-(l“nietyylitetratsoli-5-yyli)tiometyyli-l-detia-l-oksa-3“kefemi-4-karboksylaattia 20 ml:ssa anisolia, lisätään ~5°C:ssa 20 ml trifluorietikkahappoa ja seosta sekoitetaan samassa lämpötilassa 30 minuuttia sekä väkevöidään seos tyhjössä. Jäännöstä sekoitetaan 100 ml:n kanssa eetteriä, sekoitetaan petrolieette-rin kanssa ja jatketaan sekoitusta. Saostunut jauhe kootaan suodattamalla, jolloin saadaan 5,44 g 7β-Jja-(2-fluori-4-hydroksifenyyli)-α-karboksiasetamidol -7a-metoksi-3~(l-metyylitetratsoli-5-yyli)tiome-tyyli-l-detia-l-oksa-3-kefemi-4-karbonihappoa, saannon ollessa 100 %.

Esimerkki 3 (Suolan valmistus) 1) Liuokseen, jonka muodostaa 14,9 g 76-[a-(4-hydroksi-2-fluorife-nyyli)-a-karboksiasetamido3 -7a-metoksi-3-(l-metyylitetratsoli-5-yyli)tiometyyli-1-detia-l-oksa-3“kefemi-4-karbonihappoa 60 ml:ssa metanolia, lisätään tipoittain liuosta, jonka muodostaa 0,133 moolia natrium-2-etyyliheksanoaattia 69 ml:ssa metanolia ja seos laimennetaan lisäämällä siihen tipoittain 650 ml etyyliasetaattia 10 minuutin aikana. Saostuneet kiteet kootaan suodattamalla, pestään , 6341 0 etyyliasetaatilla ja eetterillä sekä kuivataan vastaavaksi dinat-riumsuolaksi (11,1 g = 68,1 %:n saanto).

IR: 3175, 1770, 1680, l6l0, 1501 cm”1.

NMR: δ°2° (3.50s + 3.55s)3H, (4.01 + 4.25)ABq(13Hz)2H, 4.00S3H,' 4.50brs2H, (5.10 + 5.l3s)lH, 6.47-7.47m3H.

2) Yhdisteitä I, joissa on vapaa karboksi 4-asemassa, liuotetaan vesipitoiseen natriumvetykarbonaattiin, jolloin saadaan natriumsuo-lan liuos, joka laimennetaan haluttuun väkevyyteen, puskuroidaan pH-arvoon 7 ja testataan agar-agarlevyn päällä tavallisella tavalla. Niillä on tehokas bakteerinvastäinen vaikutus grampositiivisten ja gramnegatiivisten bakteereiden monia eri sukuja vastaan.

Seuraavat valmistukset esittävät menetelmää halogeeniaryylimaloni-hapon (III) tai sen reaktiokykyisten johdannaisten valmistamiseksi synteesiä varten. j

Valmistus 1

Liuokseen, jonka muodostaa 4-hydroksi-2-fluorietikkahappo metyleeni-kloridissa, lisätään tipoittain difenyylidiatsometaanin liuosta n-heksaanissa. Sitten lisätään pieni määrä jääetikkahappoa. Seos vä-kevöidään vastaavaksi difenyylimetyyliesteriksi. Tuote liuotetaan asetoniin ja sitten lisätään 1,3 ekvivalenttia p-metoksibensyyliklo-ridia, 1,2 ekvivalenttia natriumjodidia ja 1,2 ekvivalenttia kaliumkarbonaattia. Seosta sekoitetaan 12 tuntia 50°C:ssa ja epäorgaanisen yhdisteen poistamisen jälkeen se uutetaan etyyliasetaatilla. Uute väkevöidään ja jäännös toistokiteytetään metanolista, jolloin saadaan difenyylimetyyli 4-p-metoksibensyylioksi-2-fluorifenyy-liasetaattia. Seosta, joka sisältää 45,13 ml liuosta, jonka muodostaa n-butyylilitium heksaanissa (2,3 mooli/1), 14,55 ml di-isopro- pyyliamiinia ja 250 ml tetrahydrofuraania, sekoitetaan 10 minuuttia -5 C:ssa. Siihen lisätään 23,7 S edellä mainittua tuotetta tetra-hydrofuraanissa -55°C:ssa. Seosta sekoitetaan 30 minuuttia -55° C:ssa ja sitten se lämmitetään lämpötilaan 0°C kuivan jääjauheen lisäyksen jälkeen. Seos haihdutetaan liuottimen poistamiseksi.

Jäännös liuotetaan etyyliasetaattiin ja pestään jäävedellä sekä 10 %:sella suolahapolla (85 ml). Orgaaninen kerg&s pestään, kuiva- i3 6341 0 » taan ja haihdutetaan, jolloin saadaan 27 g monobenshydryyli 4-p-metoksibensyylioksi-2-fluorifenyylimalonaattia.

NMR: 3.78s3H, 4.93s2H, 5.00slH, 6.87slH, 6.46-7.35ml7H.

mix j·os· TLC: RF = 0.43 (etyyliasetaatti/silikageelilevy)

Samalla tavalla voidaan valmistaa monobenshydryyli 2-p-metoksiben-syylioksi-4-fluorifenyylimalonaattia korvaamalla 4-hydroksi-2-fluo-rifenyylietikkahappo 2-hydroksi-4-fluorifenyylietikkahapolla.

Valmistus 2 p-kloorifenyyliasetönitriiliä valmistetaan p-klooribensyylikloridin ja natriumsyanidin välisellä reaktiolla dimetyylisulfoksidissa ja keitetään palautuksella natriumhydroksidin kanssa etanolissa, jolloin saadaan p-kloorifenyylietikkahappoa. Happo esteröidään dife-nyylidiatsometaanilla, jolloin saadaan difenyylimetyyli p-kloorife-nyyliasetaattia (sulamispiste 107_108°C). 1 g tätä esteriä liuote taan tetrahydrofuraaniin. Tähän liuokseen lisätään tipoittaan 1,04 ml liuosta, joka sisältää di-isopropyyliamiinia ja 0,48 g n-butyyli-litiumia 20 ml:ssa heksaanin ja tetrahydrofuraanin seosta. Seosta sekoitetaan 20 minuuttia -10°C:ssa ja lisäksi 1,5 tuntia kuivan jään lisäyksen jälkeen. Reaktioseos sekoitetaan 10 %:sen suolahapon kanssa jäähdyttäen ja uutetaan etyyliasetaatilla. Uute pestään vedellä, kuivataan ja haihdutetaan. Jäännös toistokiteytetään bensee-nistä, jolloin saadaan 9^2 mg monobenshydryyli 4-kloorifenyylimalo-naattia (saanto 83 %» sulamispiste 138-139°C).

IR: vmaks! 3200> llk5> 1710 NMR: 4.17s 1H, 4.70slH, 6.87slH, 7.2-7.4ml4H.

mx xj·os·

Samalla tavalla saadaan monobenshydryyli 2-kloorifenyylimalonaattia, monobenshydryyli 3-kloorifenyylimalonaattia ja monobenshydryyli 2-fluorifenyylimalonaattia korvaamalla p-kloorifenyyliasetonitriili vastaavasti o-kloorifenyyliasetonitriilillä, m-kloorifenyyliaseto-nitriilillä ja o-fluorifenyyliasetonitriilillä.

14 6341 0 f

Valmistus 3 Jäissä jäähdyttäen lisätään 10,5 g monoetyylioksalaattimonokloridia tipoittain liuokseen, joka sisältää 10,5 g aluminiumkloridia 30 mltssa nitrobenseeniä. Liuokseen lisätään tipoittain 8,4 g 2-kloo-ri-5“fluorianisolia. 30 minuutin kuluttua seos kaadetaan jääveteen ja uutetaan eetterillä. Uute pestään laimealla suolahapolla ja laimennetulla vesipitoisella natriumbikarbonaatilla, kuivataan ja haihdutetaan liuottimen poistamiseksi. Eetterin ja n-heksaanin seoksesta tapahtuneen toistokiteyttämisen jälkeen saadaan etyyli 4-metyyli- 3-kloori-6-fluorifenyyliglyoksalaattia (sulamispiste 84-85°C). Seosta, joka sisältää 5,21 g glyoksalaattia 28 ml etyleeniglykolia, 4,5 g kaliumhydroksidia ja 2,85 ml hydratsiinimonohydraattia, kuumennetaan 1,5 tuntia lämpötilassa 155-158°C ja sen jälkeen 2 tuntia 220°C:ssa sekä kaadetaan veteen. Seos pestään eetterillä, hapote-taan suolahapolla ja uutetaan eetterillä. Uute haihdutetaan. Saatu jäännös toistokiteytetään dikloorimetäänistä, jolloin saadaan 3-kloo-ri-4-hydroksi-6-fluorifenyylietikkahappoa (sulamispiste 137“138°C). Osa haposta, 0,615 g, suspendoidaan 15 mlraan dikloorimetaania ja esteröidään difenyylidiatsometäänillä, jolloin saadaan vastaavan difenyylimetyyliesterin kiteitä (sulamispiste 121-122°C).

371 mg esteriä liuotetaan 1 ml:aan tetrahydrofuraania ja kaadetaan seokseen, jonka muodostaa 0,56 ml di-isopropyyliamiinia, 20 ml tetrahydrofuraania ja 2,5 ml liuosta, joka sisältää n-butyylilitiumia heksaanissa (1,6 M) -60°C:ssa. Seosta sekoitetaan 20 minuuttia lämpötilassa välillä -60°C ja -20°C, jäähdytetään lämpötilaan -60°C ja sekoitetaan kuivan jään kanssa. Reaktioseos lämmitetään 10 minuutin jälkeen huoneen lämpötilaan ja sekoitetaan 20 minuutia samassa lämpötilassa. Liuotin haihdutetaan pois tyhjössä. Saatuun jäännökseen lisätään jäävettä ja etyyliasetaattia. Seos hapotetaan 10 #:sella suolahapolla pH-arvoon 3· Orgaaninen kerros erotetaan, pestään vedellä, kuivataan ja väkevöidään alennetussa paineessa. Jäännös kiteytetään benseenin ja heksaanin seoksesta, jolloin saadaan 365 mg difenyylimetyyli 3-kloori-6-fluori~4-hydroksifenyylimalonaattia (saanto 88 %, sulamispiste 100-103°C).

NMR: 4.94s, 6.69d( J = 10.5Hz ) 1H , 6.39slH, 7.1-7.5mllH.

ΓΠ1 xJ iGo .

15 . 6341 0

/-> V. ό r- no I cv oo I

•rt CO On On I ir» ON I

to O O O O VN

E m t*. \o oo oo >a r-

'—‘ H H H H H H

t: Ό

O (V

3 —--------- (— o

+> 55 rrt CV r~> -3 VN IO NO

o ______ K -^----

"tv £*. 5 -S o O OO O O O

KM ΓΪεο rN On ιγ» »Λ ο «Λ

OK "I? H

/ O <__---------- / VV O I · o o ')—ο ε*-*ο o o o o o cnooo ,-Vf si._____—:— 0 1 k -rt H —· _ / — O rrt ICN ICN «Λ m -3- O -3

§ 0 tv E O

ffi —' ·» o o υ < ---------- O—O / "Λ -3 -3 -3 -3 O O -3

h (, 4rt « CV CV tv O NO CV

« \-J/3 ___*__£__

-rt —> CV CV CV CV -3 O CV

A -Htoooooocvo /v ΕΗΗΗΗΝΡ^Η r> ·γ4 r4 •H ---------- •rt -rt l, •rt ’d 4» +> —- S Q V : es c r r «4 K t*

K

o --------- O rrt irt —

O < O O O C

BO O O -rt O O *Ν Ο Ο Ο «Λ O_O O—O ,H E Ό Ό ΓΝ ΓΝ NO NO -3 5 ------------ . o o

* * O tv O CV O O O O IfNO O

4* J ±"° Il h

o :ο :ο·— I

K -1 ___________ V) ev ~ _

CV £. H NO NO Ό NO Ό O NO

KO. ooh CV CV CV CV CO 1Λ CV. ’ O K O O A -»

/ O Ο-O'—- C*N

r~i §--------- o ')—o o-— tv cv tv cv o o ev \ / -rt H -3 -3 -3 -3 -3 CV -3

ΓΛ >-Z Mi H NO

δ I h es w______2__ « °VX ~

<u cv o rrt -3 3- cvcv -3 O CV

Ä s aNi 3 : 3 ° ·...... ; <o -------

O I ----- 1Λ rN -3 CV NO O CV

Ή .rrtto-3 ΙΛ NO VN tr\ O VN

O C E rrt rrt rrt rrt -3 O rrt M Q -r 0« ä .3 w t 2 i-------- 5 -2 g g ►. ^ o i ΙΓύ^Ιό^ψϊφ ^' *ϊ σ> o u rl o o o

d o q o x en K

3 Ή Q * μΖ X -¾____________ 2o H CV CN .3 VN NO 1"» jZ C__ ___________J._____ ie 6341 0 « o οο \ο ό h j· o •H VO O O O CO «Ti vo o

ko H N Λ Ό COW CO CV

..EH 0 0\0\ CM Ov H ©\

® ^ H H H CM H

0 ----------------- 3 O H CM o j».

I— O Γ" 00 0\ H H H H H

Ä g S h O O O O OO O ir> E cm ov cm j· \οιλ o -a· < w H ~_____H____ 1 · ^ e 4J O O o

XJ Ό ° ^ ° o O OO O CM

_j q,w__!___________I

cv

H

O H »n in >Λ O I -3· ir>

sf1 3 H

o ___ O O CO H ΙΛΟ 00 ^J· ^ cv co vo -s- -4*cv 1__________

^ ^ CM CM CM .a CO CM CM CM

h to o o o o oo oo •hehhhcm hh hh * •H —— ————— ——— ————— ———— 1 —————— ——— “ — 5 *<

•H 4J +J

•H « 4> s = c rs r s Ί « **________

Th H O I O O OI O I

^ ^E w I Ό .a Ό I VO I

| __ .-

E +* O O O O O O O O O

to :o o j _______ H H^~ VO VO CM OO Γ-~ 1Λ CM Ό

OOH CM CM O VO o .a o CM

O O =L O—O'—·

O CM CM -a H OO _a CM

♦» H -O· ·» CO H Ov t'- OO J·

Ui rl

CM

ÖC ? I N | I | K — o

hnOvOv-JO OP» VO CM

I to o o .a co o «n .a P*

E H H OO -a CM OH

c o___________

o <H

• |11 2 3 ^ A % '<*. X* i^k.

o» c k s x I I o o 1 lo

o O Q b. O O O

V —| O XXX

_x cc 3 x .g ____________________ Φ .

2 OOOCOOVOH CMO -7 ΙΛ 3 k™ V* !C H *-( H »H H j r-t 1----[-- > 17 6341 0

, ^^^_. I I

' III —--« —1--------f" u"\ in m W m ^ n, to O -3 -3- cv --;--

Sen h h h nj n

O —_____co CO

3 H h I— ο wv VO Γ"~ CO _______—--

2 ft Η H rH

------o o 0 'c -* v H o o o o “3 E cv cv o cv _______ < w______ 1 o o

E -*-> Ο O O O O

:o :o° <r π π _ _J Q— I I I -—----- __

H " ^ GO

Ο Η ΙΛ lf\ -^1Λ

Oi E

ä ^ ___!- o_____! O uv «Λ »Ti rv O 2

^ -3 -3 -3 rv _3- CO

Ϊ____«--—

x o uv O uv O O

^ H H s S S H * -- ' 77 ~ u a-----** © =

2 +» N . N N M cZ

π O Ό Ό Ό Ό “ J X H H H H ________.

^ o ju--- ___Σ _______ S! "Ö C~ ° ° M O O O O Ό Ό • H E VO VO VO VO _[__ < ^ --^ o o 'Jo o o o o CM O cv o

= 3·» O .I

:o :o*_, 1 1 J CL_________ γΊ r-t .3 -3 CV VO vo m O U ή rv rv rv cv rv 00 0 0 3.

o o ^ _____—-- rv ^ vo vo vo ™ oj Ov +» H m UV UV -3 _ _

g v5____- H

CV

r*4 ϋ Ή IPk | I —

cv ε 1 I

X — o --—- ^ CV CV CV CV tfV 00 I to o o co co — rs* •H — E CV CV H rU IJ l C -H —- -cr O J_____ —i £ -—--— <"> Ξ < x n _

CN E O P3 ; s - K

-H O CU o = ! 17Τν VλΚ A £ ο < X o

JC X .c __________ X

• 3 ------ " ' __ —I i> . -

5 “ o o r^aocN o H

^ ^ y. ^ ^_ cv cv ---- —- 18 6341 0 cv-, -- O o ^

•H <C H H H H

CO o ·· ·· ·· »*

\ *> cv in cv M

v H I I '—' '—' .—. ·—"

*·· B I I VO I O, CO

o g in h I .3 -a· H'-' ό ό 0 6 x - - a · * h as η* h k n · CV H n .3 n O -3· oo X ne» cv cv o -3 cv

ovn cv n- n- E r^· - E

O »cv -3 oo · ό · a -a- a n- li *3 E ·· -3 -3-3 - H · ·? _ O -3Ό n- cv - · a m n- -a > O -i -g be cv o i an •o » ' a «o - - BO avo Oi n noin cv n -+-* σ cv i aa cv· cv* «n- i· · h n n- +-> ·η no cv h m n- m n- b · .a o · h oo •h m · «n in n i on- on- o ·

«» c -3 n- r-o -3 - -3 o en i cv - n-O

β)>· HIO a ·· HO * K * H

•O -3 - ·· *3 H -3 n- "CV -3 CV B · - oj Ij a -3Ό n -3 · n -3 -3 a

n V * H -O - - Ό - n* E H

° £ B n ... B o\ aa - S ΛΟ -n >«cvo aa cv· cv h a- o·· ao

n -hi n on oh n Ό n oi o a m j- n- en O

e -h n- · n--. oo n-o —h oo i · i >, h Ό n- n h- hoi n n -no n »n · nj*· no -a ·· o oo · a · en a B -3 - · CV -3 H -3 Ό n- On OHO O' --3 s—* B o· n .«n · a cv u, - h o -n- -- 0-3 -h - oh e ϊ ϊ « - + a oo aa + a a a + n h ö o f. a e o · oh n - ooh no · o* neo oo tn no nn n- a noin o Ό oo h ·— o —ή n- on· voh m · o n· · i o <h nvo n · · ό - no oo · n n--3 on -cv ο ·η oma · a ·· on· ·· o O g o » -3wun oh o no —a o -no »—· -o «o a · cv h -a a -H O - e - H - - -.3 -CV - -CV - ·· an + a o an aa a a n a a n a _ O h n H · OQ. OH O- OV.H O U r-f K n a o n m nn nn na non nam £ oo -301 oo en n- n- cv r^on- m o o

a -30 · On O .30 o On -3 n 3 n® -3-3CN

• · O · · · · · · · b ... ...

o o —'-T n- o in en-3 o a 0310__ru Ό a jj 4» n - o ® o 0 o 8 a o cv cv rl en cv n- \c n·

-S CV Ä H H H

0 aa > o a · - / O PV, NO NO O O oo o -P /-< O h ” CV cv cv o cv O o a» / \\ O o “— n- n* n n- n· m n*

(/» O 7 O a MH H H H H H H H

H \ / O El 1 o N—a > e - -

·· O CV H OO OOO

2 O «-—On On ON On Oi H On o o.......—Ht^n. n- n- n· o n-

•X i w HH HH H H H

•h a o--o--------r---

ΙΛ Z H « Q

- I g -3 -g §-*· ~ p £___5________5___ Ή 4J +» C >—· <y 4) e se ss e

K H

<D ------------- il < x q — O CQ e cc cc e ° 'i< ° 0 s s s -¾ *___________________<________ *H · - *- _IllJ______L_____ _!______1___ 19 6341 0 J—J | | — — —

^ ^ H rl H rl H H H

\+ί Η Η Η «Μ Η Η <M

^,WW Ή v W w ?.« NO N IT) O I Η *0 Λ

Ofi 4 n ^ IV I Λ -J o J ft · ... · ·· H"— O O O O O O o

n -—· X

wo. a w n -E h Π t< OK* h h X X O m P A · -3- x A A v* H · 00 •h o ocv h tv ON noo - On ..9 iO E O J» Ο Ο I X· JL c ·· -OO · "ft ο 0- CV Ό 2- ¾ A· E X® -» A"—· · 0\ n +* P NO CV · UN fl UN · P -

+-“ > - - . . n p - * on no cv X

•HU XX x p ti I - X ΧΌ - ·Η «+> CV H CV I AO Ä'-' cv CV · · X - 4 #

4>c W'"' «f» O · CV O «· * NO X CV X CN

di tin ti · 1ΛΪΝ wo l-t E tiHWH - ON

4J v AO A NO · ® Cl AON A * cv on X· ® H «"> -3- - Jffl p~ · OnX E vn ® ΡΝΌ ? T ,ON · tv- X · O H O' H H p · ® C ry · »η ·χ - h j· + -I <r- * -

h pn + -a- h Xn pn jf η ^ ·Ν Ό ρν X

C n /-. CV PN - /-1 · PN I 1NH

I -H - m - m no\ Xo. -no - o o X - · n N u XO x-o U · cv a X X · cv X oo 3- > pn · ρν Ο ΑΌ mo no- PN vn P m H + On \1_p p-.«n p~- · r~ cv — m X m + on cv · tn— m un r-t- cv · vn cv on m - cv Ό p® 0 ®+ -X -X · Ό E NO o X · ® M p - pm j-h -a-vv -p « o h jp · o -

" . X . tv m cv ρν Ον ρν · η Ό ·—X

PN ° PNH oo -p -E · no - cv rt * +m +· X® X P --=* on X - -n

o m « β 1Λ O · O · X X · PN X XO

Q «—I 00 On NO --- 01NO WP- PN - PN -NO m H PN H

o ·Η NO · P P» ® I '-'X -'-‘X p-^-» p— ·

No e .j- ·- p - p® m cv m h - p n o un

PN PNX · X ·· ®W P- 01 X -CV NO

.. --- - —. H PNH PN A PN tl -O tl H PN H UN - X· n n ·Α «An · ·Χ

nj - <v E --O - P~ - - PN PN PN ON PN -VN PN CV

g X oi no x no xo XX + P -t-®® X + + m S PN tl · PN · PN· PNH n* 01 · · PN m oi tl

01 p p- n.» oi vn nn cv -o un-o Ό oi P cv A

VN NO I P PJ · P- PN PN -O PN O · UN ON

PN^r -O -O - VN- 4 O - · - - UN · X · un ... .χ .χ .. PNX PN X X · UN PN PN*

PN J- NO PN CV PN H PN UN ---CV '— CV H PΝ'—' CV

UN

CV

P

• H

U

PN. O · · ‘

H 1/1 UN UN UN O VN UN O

O V — CV CV CV On CV CV CV

X rH P P P P P P P

O = I H HHH HH H

>E E

••ti - ... .. -

X — O O CV O OH VN

H On On On P On On ® P P P UN P p x-N p

H H H PN H HO H

____·__o ________ O o ® o

n -H ® -M ® H -H

2 -C -C -C -C ft -C

'"j G s = O O 0*2°

, L2 C GOO-^O

+> ti - O -t> xesrs = s s = __H_________ J c x ! 3^¾ ^ ^ °n.tiO OO io oo

j* % < s = X X XX

. G V) —I -------------------- O TO ·

00 0\ O H N O -T

VC »H H ^ »H

• _6341 0 20

sf I I

|1 i I I I ~ ~

5 E

H ^ e -h __ ____Ό CV s · -a- · a oo

. . * GO CM I

K -le SC -S’ '—-X

<m 53 00 p~ -h 1,-(.

:P "ν' X E ^ ^ 5S cm ^ π π S3 H eo Ό -a- cm Ο Ό “ ?3 CO B UV B · K* -a-” I: t —-cm - p- - uv cm vo a -^On-O -3- S3 ÄO X JJ, . i •Η ·Η B · I N CM · C*V , _

<0 < UV CM B D* IT\ BX H - JO

<D O -- - rv «Ö p. CV CMa VO

-ΜΏΥνΚ · ^ X · O £ __I .

O+J H - vo CV H rv Ov — Jj, _ s r ? +* X U"V B · c" 1 Ό i 0 + -h 0 - · P- - -r -CM r* « x » o» x · x 0 · - ?£ ^ a CM H +· O-X a. . _ w.

I-M -m r-B O -3· w X rv ^ Γ?,

N >* · -3· OO · 00 CM X OrICM B31TV + H

X jc '— o\ 00 •-ηγ'-βε vo + On

* · -3· X B · t^* - ' fs. K. ΓΝ. MV

- -3 - uv - cm rv n 10 in .)-. JL) X X n 00 vo * ^ ' °ν rv rv - p. · - -3 · rv- cv· rv M bxbx x co co X p. .- ! HCrr-cM uh vo* rv - 1 _ _ · B0 P* B · .Q 0) B J * 01 X CV μ-, • · CM X P- CM rv X (O J CV K a* 1 o Τ' rvcor-i j- o p* - h -3 e rv·— rv— *0*—( .rv·· X CM · *—* vo (0 S m a •H - -3 E rv uv rvHErvo-*^ ¢. r. a “E Ä mv . B r» Ό λ S· rv - p- - - X - rv vo ... O'—' JO'— « OX- X X 00 X CO · X -3- X Ό O · O CV · ¢. k cm p- rv cm cm rv · p- rv 1 cm * vo a »rvooa » OBi n m E n -3 1 b uv « ..K. . .vo vooco rv cm rv rv rv o«Mrv 1 ..\u

^ «V N in ® Cv -3 - -3 vo · -H CV-X CM 0-3 CM

...... · X · · -3 ·

n J vo CM -3 P- rv CM VO CM --- LV

rv rv co uv o H CM -3- CM CM . .

VO P* CM P- P-

H H H H H O

CV CV ’ r\ ΟΟΝΓ^ΙΛΟΙΛΗ Li Li H VH «V it* co ON On H CO ^ ^ o v> rs. cv r>- >o r*· -C □ E H H H H rH rH *H ** " °>EJi .... .... ° Ά O p. O O O uv O UV ® ® OSOvONCMH o CV *H -5· Is- r^·

H rs· -f -3- NO NO -^cv »H H

Ή rH ίΛ H h H OH -,,,. -,.... ,. , . 1 < --s----_ O -C = —I C s * c •H o ____

. ±L·__^-----U

1 N N -p ^ N *0 N Ό <« CT> Φ *0 H Ό H r*.

cv k (-♦ <u (-4 v H

~f "Ä|n^ v +j *c ! 4 w a vj

Λ |5 JS

3 *H___ί__ —t "O “ --- D O uv VO Γ» CO (rt n ο>-κ*Η -m -m co co

---- ^ I

21 6341 0

— y*. H r» O 0\ O t NO

' Γ* t*· θ\ »rt O I On •H ri cu to cn co r- γν . h cn -a·

IjEVO t-» CO NO H CN Ό o 1 -1 3--------- H—- , O On O H CV r> -3- «n 2 H CV CV CV CV MP4 o ί

V -H O O OO O O «TN

“E CV CV ir\ f- PN -3- O

< ^ __ •o ^ 4» q. o o o oo o o o s. I- W «-------— --- CV λ -—> X ^ ir\ O - 5_V g * £

/ Vk O +» H CV I

ο, V—O o e o I

«V-rf ~ .3~ Jh B-.-.j-I i —--g-----------------—

Ό PN -3 O O O O O

H CV O O O O O

OK H H 0 0-3 PN -3 O O O --- --- -— —- --- '— —· K o o.—

0—0 CL to PN K

h O E H O

< X--- O O

_ -‘-.-1 = 0= *** ° < c

«Λ O

<U S-------- O yl CL. —

-t-> ' OHOOOOOOO

+J CV3-HCVOOOOO

m K'-'H-VrNOJ’PNJ· ® o to __________— •HO ov

O CL H — VN VN VN

CL O. O H

C CVECVCVPNOOHCV

:a _c -P K — •h e> o e k ——-------- JC CO cv v. cv a — rv k cl to co un vnpn O vn co „ ok e -3 vo v-tt^oo r- o

- / O —- H H H H H H

O / 'λ §-------- 3 O ')-O fi to V / L> +> PN N-is 4> Ö s = s = = *

KT— K H

Η O I_I H

O) / > rl--- ——— 4-1 K O -—· JS 55

3 O ·« K

Φ O < -*-* O n S = S s S e

O K_0 <Λ O

o ° H O O O

J2 o w s s 3 --- 1 - - — - - ---- — - - I il— .....—l — -I . I - ' — ' ' ' 3 C ^ O H CV ΓΊ ΙΛ Ό Γ* t— ^ _j_ 2 2 » 6341 0 Λ ^ £ ο Ον Ον 00 o o o f* Ov 00 C\ f'- 00 o o

*H H

© SP £ o irv r«. VO <* -3 ·—* "E-a-O H uv uv Jf VO. i0 I o ^ HM >CV— 3 l·" · O VO 00 ov o h cv r> o Ä cv cv cv rv o rv tv cv o ? ! ,-^ΗθΐΛ O O O O O o Γ; E J· rv -3 -3 rv cv rv cv << +5

% o o, o o O O O O KV

es „_„ * J3_____________ c

•M

+J

=> ε •H = _l ""

o o o o "o o' "o' "ZT

Οοοοοοοε -c- . o -3 o ο. 'Τ' s —.

| S; SO O

o s s -1- rv = = r - - sr fc __O__________ Λ CU Λ

OHO O O O O O OOH

rv — o o uv O O O O CV c g^J-rv rv-3-^r rv -3 w — rH *—*

U H

cv E cv rv uv cv cv cv cv o

X —-O

U cv cv ao 00 uv O OOS3 E O OV CV 00 H O' OVH'W'

'—'H H CV H

h j *v β> Φ ε s e r r es i S tv I ^-----------

3 S

©OHe e r e s e s ! o Cu O O O o o o s x x x x tn < 3--------------- -V © 30,0(0 Ov O ^v cv rv -3 m

0 V/ ^ »H H H rV ·—I .-I

i—________________

6341 O

23 ♦

—(—j-—-- I I

I I £ I __ •h--:------

W CO O

tD » O irt O O' E C"* -3·--

JS Γ- CO

0 ---1--O O

D ,__

Ο (Λ IΛ VO

2 ο o o o ^ o ! -L-------a-__vrv_ σ "a : _y -h o o o o _ _

•HE r~> c~i Ο ("> O O

< ________ +3 ^ :o o o o o o 3 ° ?· ? ° ? » *

1j ^___O JD

0 0 0 0 ¾ Ο Ό O u-\ ~ Ο Ο Ο <N O ' Ο "ΞΓ H '— ö £ ^ o ~ 00 01 S .- * .- fe

X r\ O

6.

o -- __ PU —« o o

Or-HOOOOo o OAO*nOir>n. Cn B --- C~v C-\ O <V — Ό O H _

CJ

OH CV C\

<V E O O O O

X — ___ 0 --— m m u"\ *r\ -f- o O O -cT cv ^ u- E H H H H ^ ^ N N ,

*> ti Ό N Ό H

a» -a (-> Ό (-< B H ® (H 4> Φ = ^ £ £ f-, I H------- 01 < B B >-« W.-H0»* 2= ss « « ^ p - ? o ·< s § § _* <; S3 ______ D ___ ____

—i O

-λ Ο Ο Ό Γ- CO O' _ f · v· 4C H H H H O *· £ ^_J______ cv tv L___I_ 2 !·\ 6341 0 * NO H H H H ^ “h o 5 ·· ·· ·· .. .. .. „

2 71 H HH H H H

>+ . 00 03 tr\ uv r» K < O Ό VO f* ' 2 K.N 10 Ό N CV rv CV cv

{3-2. + ° © όό ό ό O

α +> h XS ί > O rv-—' ϋ-Η "?§ +* ·Η ' * +J Ο ^-(Ρ •W ·Η X Ο (Λ _3£ CV + 03 Ο «η > fr* r-4 -ρ o £8

O -H Q

> C ΝΟ^ μ α> OJi -t .

il tl K X

N X rv rv

X _* «E

---* rv rv ov m _ Φ rvl^

rv zf -I

rj ° X rv Q n rv U -H nvo o ·Η rv - .. ε *? = rv m g + w S n o X f' · -cr uv O · -

•H rv X

v —- cv c ------------ > +> - ......

"ti “ O J- o UV uv rv O

03 X cv cv rv rv cv rv cv

us co r^-r^Ovor^uvO

W N -C H rV H -I H ! .

rH X · ' ---.-II*.

C O rvj uv cv O O O O O ,H

rv / x rV ^ CO 03 cv cv 00 O cv Γ-

_£ /—« S2ojT·^ £ *s Γ- £v3 r- H

ri v\ 03 — cc 'V H H rV rH H H H

« °* )-© O fe I

" _\_ / > E O UV o UV UV O UV O CO H

x rv —x --ο uv rv uv oo oo o cv coi-i ® c*- X I K —' rvvo cv Is* r- rv \o r- uv r·* 2 _I H rv H rv H H rv H r-t H rl C* --^--o------

,J X O O O

*__ g ° x O X rv cv ego -· 0)^<D^ 0) -8 ϊ-“ £ -§5 ·§ 5 -5 « “ .5.1 -° ,¾ .° ,_____ -p C* 1 P . ^ o * *> *> X β> « r rr e s s

f X H

M _____ : | i 50 j6 ό ‘φ *5 "2 h o o ö ^ X . ... ...... ° = = = 3 . ----(----1-----

o oc>o*Hfvr>^»A

H— */ P rj ^ <v cv <M C4 tv 25 6341 0

0*< Η *τί H H H H H

>r| O *· ·· ·· ·· M ·· ··

CO Ä . H H H H H H H

+· ·· M ·· ·· *· ♦* ·· <h U'' co ia co co co ia co CC <! O '— --- ^ w — -o« oo \oo\ co o\ o O -u K cv ia H ' ca P> Ά o JW+· · * · · · ·

(-1—- O O O O O O O

CA

r SS

-P —4 -t-> O •H ·Η u) j: V c > -p :o 0 -p > c

M <D

C -¥ 1 -P N >n K -* ' </» -"1 o . o ri O e

«oE

h

Xi - - o O Os CM N 04 a a a

H Π P

r\* a IA O IA P CO IA CV

P *0 p CO CO H CM CO (A H

O PC r-^ A- A· A uv A* AVO A-

X Ori H H P P P HP P

O E I - ...

> E H O O O CM O H

-O 00 O VO P CO P CO

K — A- -? CΑΌ A CA r-' A

H P CA CAP H CA O H

O

- - ...... ......— —...... 1 " rv — r\

cv V ^ V

rp JZ s s e s-C^JC

I -p 3 2 t— c στο •p__”______~~ v3__«_ --- tl

+» P

• CJOsc cc cc

-SC r~» K H

P________

T> O O Cm O OO

je jc κ s k x = O >-_____________

* P

? O vo A 00 C\ O P CM

, v- >r, CM CV CV CV CA CV CA

r— ___ 6341 0 » 26 i

... h H H H

(CC « h .· ··

O O H H H H

•HO ·· ·· ..

ν'» V» V» »Λ Ο·—~ Ό βΟ Ό P! < O v\ ^ it» ^ -ON··..

W +? X o o o o H W + {Η — — ——————— ——— —1————— - - ! —I m I I I >

5.-S

5 o

Ή *H

SJ-g

Φ O

+> S3 O

> c •h a) ;

C -X

X -*

Ά; I

o ° H * 8 ^ Ο *H ( <o J= s ; g : rs. 00 ο ό o.

On CN ο O £V Oi Ό it» J>. f·* • H H H H _j 1

no - - * * M M

Ή_ν O -» O oq

On'—' O ON O

X £H t'. r~ t'- r-- v\ vr\ H H H H 00 ffl -ΟΙΛ» O OOH t" Γ-

oo co O eo H H

Η Γ"- NO t'- H H H H H - O a) r . 3 3 I— σ •—v — ____ — _.

-----^ S~^ ♦» N N N N +» • « 2 v V V ® =

-* 55 H ϊ * ζ H

£___*___---

: = A ' ^ ' A A

o — — 3_______*---- 3 Ο CN V» Ό C is o r> {-i r\ r-~ 00 i— _______ o cn » 27

Antibakteriaalisten ominaisuuksien vertailu 6341 0

Seuraavat koetulokset osoittavat keksinnön mukaan valmistettujen tuotteiden paremmuutta verrattuna aikaisemmin tunnettuun tuotteeseen.

I. Menetelmä (1) Näyteliuosten valmistus Näyteyhdiste (4—5 mg) liuotettiin 0,01123 N natriumvetykarbonaattiin Γ mg/ml. Tälle liuokselle suoritettiin kaksinkertaisia laimennus-sarjoja steriilillä vedellä (1000 - 0,23 mcg/ml).

(2) Agar-agarlevyjen valmistus 0,5 ml kutakin näyteliuosta pantiin petrimaljaan (halkaisija 9 cm), johon kaadettiin 9*5 ml sulaa agar-agarväliainetta, sekoitettiin ja annettiin jähmettyä.

(3) Koeorganismien viivatekniikka

Silmukallinen bakteerisuspensiota ympättiin 1 ml:aan kasvuväliainet-ta ja inkuboitiin 37°C:ssa 18-20 tuntia.

Viljelmä pidettiin jääkaapissa käyttöön asti. Juuri ennen käyttöä se laimennettiin steriilillä suolaliuoksella suhteessa 1 : 1000.

Ymppiin käytettiin yksi silmukallinen (halkaisija 1 mm) suspensiota ja sitä vedettiin l8 mm pitkänä viivana agar-agarlevyjen pintaan käyttäen moniviivasysteemiä.

(4) MIC-arvojen mittaus

Bakteerien kasvu mitattiin makroskooppisesti yön yli 37°C:ssa tapahtuneen inkubaation jälkeen.

Alin väkevyys, missä bakteerien kasvu estyi täysin, määritettiin MIC:nä (minimal inhibitory concentration) ja ilmoitettiin yksikössä pg/ml.

(5) Koeyhdisteet a) 76“ [ot-(2-f luori-^-hydroksifenyyli )-a-karboksiasetamido3 -7o-me-toksi-5-(l-metyylitetratsoli-5-yyli)tiometyyli-l-detia-l-oksa- 3-kefemi-^-karbonihappo; 28 6341 0 t) 78-(a-(2-fluori-5-hydroksifenyyli)-a-karboksiasetamido] -7a-me- toksi-3“(l-metyylitetratsoli-5-yyli ) tiometyyli-1-detia-l-oksa- 3-kefemi-4-karbonihappo; ,-.-} 78- [a- (2- f 1uori-5-kloori-^-hydroksifenyy li) -a-karboksiasetamidol - 7a-metoksi~3-(l-metyylitetratsoli-5-yyli)tiometyyli-l-detia-l-oksa-3-kefemi-4-karbonihappo; ' 78- [a- (2,5-dif luori-4-hydroksifenyyli )-a-karboksiasetamido3 -7a- metoksi-3-(1-metyylitetratsoli-5-yyli)-tiometyyli-l-detia-l-oksa- 3- kefemi-4-karbonihappo; '· : 78- [a-(2-fluori-5“hydroksifenyyli )-cx-karboksiasetamido] -7a-me- toksi-3-(2-metyyli-l,3, 4-tiadiatsoli-5-yyli)tiometyyli-l-detia- l-oksa-3-kefemi-^-karbonihappo; .Γ) 78- [a-(2-fluori-il-hydroksifenyyli )-a-karbbksiasetamido1 -7a-me- ; toksi-3-(2-metyyli-l,3,4-tiadiatsoli-5-yyli)-tiometyyli-l-detia- 1-oksa- 3~ke femi-4-karbonihappo j a

Vertailuyhdiste 78- [ja-( ^-hydroksifenyyii)-a-karboksiasetamido]J -7a-metoksi-3-(l-metyylitetratsoli-5-yyli)tiometyyli-1-detia-l-oksa-3-kefemi- 4- karbonihappo.

(6) Bakteerilajit Oramnegatiiviset bakteerit

1) Escherichia coli H

2) Escherichia coli 377 (kefalosporiinia vastustava laji) 3) Escherichia coli 73 (kefalosporiinia vastustava laji) 4} Klebsiella sp 363 (kefalosporiinia vastustava laji) 5) Proteus morganii No. 9 6) Proteus vulgaris No. 3 (kefalosporiinia vastustava laji) 7) Enterobactor cloacae 233 8) Serratia mercescens 13880 9) Pseudomonas aeruginosa 25619 29 6341 0 II. Tulokset

Tulokset on esitetty taulukossa 5. Taulukon ylimmällä rivillä olevat numerot viittaavat edellä mainittuihin bakteerilajeihin. Vasemmassa sarakkeessa olevat kirjaimet viittaavat koeyhdisteisiin, jotka on lueteltu edellä.

Yleisesti todettiin, että halogenoidut yhdisteet, erityisesti yhdisteet a) - d), olivat antibakteriaalisilta ominaisuuksiltaan gram-negatiivisia lajeja vastaan vahvempia kuin halogenoimattomat yhdisteet .

30 —----r^n— 6 3 410 lf\ ΙΛ lf\ m f) Ν >Λ cv cv cv cv cv *vo cv

H Or< OH oH OH oH

-—'s -— — -'——-----—--

OvrVrVrVrVUVrVCV

CV rH CV H CV rH t-H

_ vo *rv oΌ *rv o vo *rv *rv rH CO Ov CN OO CO rv rv

E Γ'· rv rv r- r- -h rH

«·····! « O *0 *0 o o O o O rv n -------- —· oo o\ oo σν rv cv cv cv cv r·^ rv ___o_ *o *a *o *Q O Op ov oo ov rv h cv cv i-i rv • * · · · * · · · o *a *a *a *Q O O o

^°0 °°θ f'*' r—t rH r-( i—( rH CV CV

H rH ····*··

O o O oo OO oo O O

o o____L_____

o O 00 CN

nm r>» cv rv *rH cv cv cv • $ · ·$·£·$·$· cc o *o *o *o *o *o *o •H »H ------- _ _ .. _ . _____— s % VO ov ?%>> rv cv cv rH i-ι cv cv • · - * · * · u u___O *Q ¥θ *o *o *o *o

«V

a <u cv «n

-¾¾ CV H rH *0 O CV CV

(jU · * · * · * · · ·

<0 cg O *0 *0 *0 *0 o O o O

CO CO ·"" " "' —'—----------------- ^ tr\ ir\ SS ^ cv cv

3j 2 CVHrH*0*0rHH

«•η · · · * · * * · > o__O |*Q *Q *0 *0 *0 *0 rv uv

CV O O H H CV CV

• φ · φ » · · · · O *0 *0 *0 *0 o O O O « J- ίν ίΓ“ίν .H (U 4*

CV rv CV cv Ό *J *J

i-H O O O O rH H .C en en « φ · · φ · φ · · · Ή *ri o *o *o *o *o o o o o -2 2 2 ^“ " “ 1 — I ^ ^ oo co co rv co vo vo «cc Γ'' Γ" E^- H O- rv irv O oo oo rv oo H H 2 > 2 2

---·-------- U K

rr rv σν σ\ oo σν co co r! c <u e H rv cv rv r- rv o- 2'c>> S ******* V rt rt ^ o *o o o o o o o o e -5-5 _________rH <U 3 3 2 ov OV co 00 'aa·*·* £ rv <-( cv rv cv r^- 2 2 <g <g > ·*······ In u > > <U O *0 *0 00 *0 O O i) 3 eo m

X ____L___> 16 U 4J

> C «33 cv rH rH rv cv rv rv -h > ^ ^

•tlj ······* 3 *-H »*H

> o *o *o o o o o o c 3 2 -«J ·ιΗ > >

« -------——I--eB

en «O > C C C

Φ uv rv rv cv ee .5 -5 _ rHOOOOrHH « 2 '2 '2 ^ ·*··φ··· te e e 'e O *0 *0 +0 *0 o O O O 2 u eel nj 4) - - - . — .' - . ' - -» - h ei (O q •W IT\ (Q ^ tl u °* --- uv IA CV > U (-1 H (ΜΆΝΗ UV «'»22 Ηθοο*ο-ιο 22^·“ . * · · * · * « · · x. m ,n O *0 ψΟ *Q( ° o *o ^ ^ 4 ffl o -n-,--------- ^ rv o * * * u u m * * 2. * -O U ~D —' '—' '—r '—' H J Si li Ä I >. ||>

Claims (1)

1. 31 6341 0 Patentti vaatimus Menetelmä antibakteriaalisen 76-halogeeniaryylimaloniamido-7ot-metoksi-3“heterosyklinen tiometyyli-l-detia-l-oksa-J-kefemi-^-karboniha-pon tai sen johdannaisen valmistamiseksi, jonka yleinen kaava on: OCH_ • J ArCHCONH I COÄ o-J i^^CHgSHe t COB Hal Hal Hal Hal Hal · CP^ CP^ jossa Ar on * φ· φ. <&·‘*φ· ; Hal' RO RO RO jossa Hai ja Half kumpikin tarkoittaa halogeenia ja R tarkoittaa ve- j tyä tai anisyyliä; COA tarkoittaa karboksyyliä, difenyylimetoksi- j karbonyyliä tai anisyylioksikarbonyyliä; COB tarkoittaa karböksyy- ^ liä tai difenyylimetyylikarbonyyliä; ja Het tarkoittaa l-metyyli-5-tetratsolyyliä, 1,3>4,-tiadiatsoli-2-yyliä tai 5-metyyli-l,3» tiadiatsoli-2-yyliä, tunnettu siitä, että 76-amino-7a-nie-toksi-3“heterosyklinen tiometyyli-l-detia-l-oksa-3“kefemi-4-karboni-happo tai sen amino tai karboksijohdannainen, jonka yleinen kaava on: och3 oXO,CH2SHet (II) COB asyloidaan asyloimisaineen kanssa halogeeniaryylimalonihapon, jonka kaava on ArCHCOOH (III) COA asyyliryhmän liittämiseksi, jolloin Ar:llä ja Het :11a on edellä mainittu merkitys; ja COA ja COB tarkoittavat suojattuja karböksyyli-ryhmiä, joiden suojaryhmänä on difenyylimetoksi tai anisyyiioksi, minkä jälkeen seuraa mahdollisesti suojaryhmien poistaminen ja/tai vastaavan suolan valmistus.