FI61490C - Foerfarande foer rening av insulin dess analoger och derivat - Google Patents
Foerfarande foer rening av insulin dess analoger och derivat Download PDFInfo
- Publication number
- FI61490C FI61490C FI772023A FI772023A FI61490C FI 61490 C FI61490 C FI 61490C FI 772023 A FI772023 A FI 772023A FI 772023 A FI772023 A FI 772023A FI 61490 C FI61490 C FI 61490C
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- insulin
- buffer
- nacl
- och
- analoger
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
- C07K1/16—Extraction; Separation; Purification by chromatography
- C07K1/18—Ion-exchange chromatography
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K10/00—Animal feeding-stuffs
- A23K10/30—Animal feeding-stuffs from material of plant origin, e.g. roots, seeds or hay; from material of fungal origin, e.g. mushrooms
- A23K10/32—Animal feeding-stuffs from material of plant origin, e.g. roots, seeds or hay; from material of fungal origin, e.g. mushrooms from hydrolysates of wood or straw
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/62—Insulins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/62—Insulins
- C07K14/625—Extraction from natural sources
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
- Y10S530/827—Proteins from mammals or birds
- Y10S530/854—Glands
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Botany (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Physiology (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Description
M <1'> UTLAaJm61490 c °F.l>AOON ΙΝβ»'"υ '* 19.-,= • (45) Patent scad:lat 's (51) Kv.ik?/int.ci.3 C 07 G 7/00, C 07 σ 103/52 SUOMI—FINLAND (21) PMunttlhakumu*— PitMitaiwBItnlng 772023 (22) Hak*ml*p»lvl — AiwBknlngtdag 2 9 · θ6.7 7 (23) Alkupilvi — Glltighatidag 29.06.77 (41) Tullut JulkfMk·! — BlJvlt ofontllg 02.01.78
Patentti- jt rekisterihallitus .... , , . , _ (44) NlhUvtksIpanon |a kuuL|ullulsun pvm. — , „
Patent- och registerstyrelsan Ansökm uttmtd och uti.>kdft«n pubikarad 30.Oh. 82 (32)(33)(31) Pyydetty etuoikeus —Bagtrd prioritat 01.07· j6
Sales an Liittotasavalta-Förbundsrepubliken
Tyskland(DE) P 2629568.1 (71) Hoechst Aktiengesellschaft, 6230 Frankfurt/Main 80, Saksan Liittotasa valta- Förbundsrepubliken Tyskland(DE) (72) Manfred Zoltobrocki, Frankfurt/Main, Saksan Liittotasavalta-Förbundsrepub-liken Tyskland(DE) (7h) Qy Kolster Ab (5h) Menetelmä insuliinin, sen analogien ja johdannaisten puhdistamiseksi -Förfarande för rening av insulin, dess analoger och derivat
Keksintö koskee menetelmää insuliinin, sen analogien ja johdannaisten puhdistamiseksi vesipitoisissa, puskuroiduissa liuottimissa ioninvaihtokromatografian avulla, jolle menetelmälle on tunnusomaista, että käytetään emäksistä ioninvaihtajaa ja että puskuroitu liuotin sisältää vähintään yhtä ei-ionista detergenttiä.
On tunnettua, että emäksisyydeltään tai happamuudeltaan erilaiset peptidit, joilla on sama tai lähes sama molekyylipaino, voidaan erottaa ioninvaihtajilla. Tämä menetelmä ei kuitenkaan toimi silloin kun eri peptidit muodostavat keskenään komplekseja, jotka ioninvaihtokromatografian aikana ovat pysyviä. Näiden vaikeuksien välttämiseksi on eluointiaineella oltava dissosioivat ominaisuudet* Tähän asti on tätä tarkoitusta varten liuotettu eluointiin käytettyihin puskureihin esim. joko ureaa tai ureajohdannaisia suurina pitoisuuksina (5M-9M), tai on työskennelty veden kanssa sekoittuvilla orgaanisilla liuottimilla. Niinpä esim. insuliinia on kromatografoitu ioninvaihtajalla, Amberlite IRC 50 fosfaattipuskurissa, jossa on 5M-8M ureaa (R.D. Cole, J. Biol. Chem. 235, 2 294 (1960). Englantilaisesta patenttijulkaisusta GB 881 855 tunnetaan veden kanssa sekoittuvan orgaanisen liuotti- 2 61490 men, esim. etanolin käyttö. Suuresti neutraalista poikkeavat pH-arvot, jotka myös vaikuttavat dissosioivasti, eivät ole käyttökelpoisia peptidien herkkyyden vuoksi sellaisissa olosuhteissa. Tunnetuilla menetelmillä on kuitenkin erilaisia haittoja. Niinpä on aineiden erottaminen ureapitoisista puskuriaineista vaikeaa ja aikaavievää. Lisäksi voi urea sisältää epäpuhtauksia, jotka reagoivat peptidien kuten insuliinin kanssa. Etanolin käyttö orgaanisena liuottimena aiheuttaa ongelmia käytettäessä ioninvaihtajaa uudelleen ja lisäksi ioninvaihtokromato-grafiassa peptidihäviö, esim. insuliinihäviö on suuri. Lopuksi on olemassa vaara suurimolekyylisten peptidien denaturoitumisesta orgaanisissa liuottimissa kuten tapahtuu insuliinille 60-prosenttisessa alkoholissa pH-arvossa 7.
Yllättäen on nyt huomattu, että nämä vaikeudet voidaan välttää käyttämällä ei-ionisia detergenttejä peptidien dissosioimiseksi. Ioninvaihtajaa voidaan käyttää uudelleen ilman vaikeuksia. Peptidien denaturoitumista ei ole havaittavissa ja ne voidaan yksinkertaisesti eristää saostamalla sopivilla saostusaineilla ja sen jälkeen mahdollisesti kiteyttämällä. Saanto on selvästi suurempi kuin käytettäessä orgaanisia liuottimia dissosioivana aineena.
Keksinnön mukaisella menetelmällä voidaan puhdistaa kaikkia insuliinilajeja myös ihmisen insuliinia, insuliinianalogeja esim. Des-Phe-Bl-insuliinia ja insuliinijohdannaisia esim. insuliini-B-ketju-sulfonaattia.
Lähtöaineena oleva insuliini voi olla suhteellisen epäpuhdasta tai myös esipuhdistettua (esim. geelikromatografialla). Insuliinissa on vielä usean kiteyttämisen ja myös geelikromatografoinnin jälkeen insuliinin tapaisia epäpuhtauksia, joilla on lähes sama molekyylipaino, ja jotka määrätyssä PH-arvossa eroavat varauksen suhteen toisistaan ja insuliinista, mutta muodostavat insuliinin kanssa komplekseja. Esimerkkejä sellaisista aineista ovat: desamido-, arginiini- ja diarginiini-insuliini, insuliinietyyliesteri yms. Niitä ei voida erottaa insuliinista geelikromatografialla eikä ioninvaihtokromatografiällä ei-dis-sosioivassa eluointiaineessa.
Sopivia ioninvaihtajia insuliinin ja insuliinianalogien puhdistamista varten ovat: Dowex 1® QAE-Sephadex®, Biogel Dl® DEAE-Sephadex®, Amberlyst A 21® ja A 29®» DEAE-Sepharose CL DEAE-sellu- loosaR. Erikoisen hyvin insuliinin, insuliinianalogien ja iftsuliini-johdannaisten puhdistamiseen soveltuvat dekstraaniin perustuvat emäksiset ioninvaihtajat, kuten DEAE-Sephade^^ tai QAE-Sephade^S).
61490
Ioninvaihtoprosessi suoritetaan puskuroidussa, vesipitoisessa liuottimessa, johon on liuotettu vähintään yhtä ei-ionista detergenttiä.
Sellaisina mainittakoon esim.: palmityylisorbitaanipolyetyleeni-glykolieetteri, stearyylisorbitaanipolyetyleeniglykolieetteri, oleyyli-sorbitaanipolyetyleeniglykolieetteri, nonyylifenolipolyglykolieetteri (10-30 moolia etyleenioksidia/mooli nonyylifenolia), propyleenioksidin ja etyleenioksidin polymerointituotteet (10-80 % etyleenioksidia), rasva-alkoholipolyglykolieetteri ja synteettisten rasva-alkoholien polyglyko-lieetteri.
Erikoisen edullisia ovat rasva-alkoholipolyglykolieetterit, sillä ne ovat tehokkaita ja helposti saatavissa. Ne eivät osoita UV-absorptiota aromaattisten peptidien absorptioalueella, mikä helpottaa peptidien tunnistamista eluaatissa. Sitäpaitsi nämä yhdisteet ovat biologisesti täysin hajoavia, mikä näyttää tekevän niiden käytön ympäristön kuormitusta ajatellen ongelmattomaksi.
Eluointiaineet sisältävät aina puskuria eluointiaineen pH-arvon säätelemiseksi. On edullista työskennellä vakio pH-arvolla. Anionivaih-tajaa käytettäessä voidaan pH-arvona käyttää 5,5-10, edullisesti 6-9.
Sopivat puskurit ovat tunnettuja kirjallisuudesta. Ioninvaihto-kromatografiän aikana lämpötila täytyy pitää vakiona, ja se on välillä 0-50°C, edullisesti 15-30°C. Eluointiin käytetyt liuokset sisältävät paitsi puskuria ja detergenttiä vielä elektrolyyttiä, edullisesti neutraalisuolaa, kuten NaCl, konsentraatioina välillä 0,01 M-0,5 M, edullisesti 0,05 M-0,3 M. Eluointi voidaan myös suorittaa käyttäen elektrolyyttigradienttiä sekoittamalla jatkuvasti elektrolyyttipitois-ta puskuria eluointipuskurin, joka ei sisällä elektrolyyttiä, mutta jonka koostumus on muuten sama, jolloin käytetyn elektrolyytin konsent-raatio nousee eluointitilavuuden funktiona edullisesti lineaarisesti. Elektrolyytin loppukonsentraatio on välillä 0,1 M-l M, edullisesti välillä 0,3 M-0,8 M.
Keksinnön mukaista menetelmää havainnollistetaan seuraavilla esimerkeillä käytetyt detergentit ovat Hoechst AG:n valmistamia kaupallisia tuotteita. Käytetyt ioninväihtajät ovat yhtiön Pharmacia fine Chemicals valmistamia kaupallisia tuotteita.
Esimerkki 1
Valmistetaan puskuri, jonka koostumus on seuraava: 0,1 M Tris-(hydroksimetyyli)-aminometaania,:1 % Genapol® SE 150 (rasva-alkoholi-polyglykolieetteri) pH säädetään HClillä arvoon 7,0.
Osa edellämainitusta puskurista sekoitetaan 0,5 moolia/1 NaCl kanssa. 450 DEAE-Sephadex A 2^ turvotetaan edellämainitussa puskurissa ja saadulla suspensiolla täytetään sen jälkeen 0 5 cm ja 100 cm pitkä kolonna.· 4 61490
Kolonni saatetaan tasapainoon puskurilla. 5 g insuliinia, joka on kiteytetty sitraattipuskurista, 1luotetaan 75 millilitraan edellämainittua puskuria (ilman NaCl). Loppu-pH on 8,3. Kirkas liuos syötetään kolonniin ja eluoidaan 25°C:n lämpötilassa nopeudella 320 ml/h edellämainitun puskurin (pH 7,0) kanssa, jolloin lineaarinen NaCl-gradientti säädetään siten, että NaCl-pitoisuus eluaatissa nousee 5,5 l:n puskuri-määrän läpijuoksuttamisen jälkeen arvosta nolla arvoon 0,33 M. Kootaan 22 ml fraktioita. Eluaatista mitataan ja rekisteröidään jatkuvasti UV-ekstinktio 278 nm kohdalla. Insuliinihuipun keskiosan (0,1-0,24 M NaCl) (1 540 ml) fraktiot otetaan talteen ja sekoitetaan 70 ml:n kanssa 1 % ZnClj-liuosta. Amorfisena saostunut insuliini sentrifugoidaan ja kiteytetään sen jälkeen sinänsä tunnetulla tavalla asetonia sisältävästä sitraattipuskurista. Puhtaan insuliinin saanto on 3,76 g (75,2 %).
Esimerkki 2
Valmistetaan puskuri, jonka koostumus on seuraava: 0,1 M Tris-(hydroksimetyyli)-aminometaania, 0,12 M NaCl, 1 % Genapo]^ (ZDM 110 suoraketjuisten synteettisten rasva-alkoholien polyglykolieetteri (keskimääräinen molekyylipaino 190) , jossa on 11 moolia etyyleenioksi-dia/mooli rasva-alkoholia), pH säädetään HCl:llä arvoon 7,0 13 g QAE-Sephadex A 2f^paisutetaan edellämainitussa puskurissa ja suspensiolla täytetään 0 1,5 cm kolonni, jonka pituus on 30 cm. Kolonni tasapainotetaan puskurilla. 300 mg insuliinia, josta kiteyttämisen jälkeen suuri osa suurimolekyylisistä aineosista on poistettu sinänsä tunnetulla tavalla geelikromatografoimalla käyttäen Sephadex G 5(® liuotetaan 15 millilitraan edellämainittua puskuria (loppu-pH 8,2). Kirkas liuos syötetään kolonniin ja eluoidaan 25°C:n lämpötilassa nopeudella 48 ml/h edellämainitun puskurin (pH 7) kanssa. Kootaan 7 ml:n fraktioita. Eluaatista mitataan ja rekisteröidään jatkuvasti UV-ekstinktio 278 nm kohdalla. Insuliinihuipun keskiosan (620 ml) fraktiot otetaan talteen ja sekoitetaan 18 ml:n kanssa 1 % ZnC^-liuosta. Amorfisena saostunut insuliini sentrifugoidaan ja kiteytetään sen jälkeen sinänsä tunnetulla tavalla asetonia sisältävästä sitraattipuskurista. Puhtaan insuliinin saanto on 185 mg (61,6 %).
Esimerkki 3
Valmistetaan puskuri, jonka koostumus on seuraava: 0,1 M Trls-(hydroksimetyyli)-aminometaania, 2 % Genapoi^SE 150 (ks. esimerkki 1), pH säädetään HCl:llä arvoon 7,0.
Osia tästä puskurista sekoitetaan 0,05 moolia/1, 0,1 moolia/1, 0,2 moolia/1 ja 0,3 moolia/1 NaCl kanssa.
5 61490 450 g DEAE-SEphadex A 2^^paisutetaan edellämainitussa 0,05 M NaCl sisältävässä puskurissa ja suspensiolla täytetään sen jälkeen φ 5 cm kolonni, jonka pituus on 100 cm. Kolonni tasapainotetaan puskurilla .
5 g insuliinia (ks. esimerkki 2) liuotetaan 100 millilitraan edellämainittua puskuria (0,05 M NaCl) (loppu-pH 8,4), syötetään kolonniin ja eluoidaan 25°C:n lämpötilassa nopeudella 290 ml/h. Kootaan 28 ml:n fraktioita. Läpijuoksutetaan 1,82 1 puskuria, jossa on 0,05 M NaCl, minkä jälkeen lisätään 4,76 1 puskuria, jossa on 0,1 M NaCl, 2,24 1, jossa on 0,2 M NaCl, ja lopuksi 5,3 1, jossa on 0,3 M NaCl. Eluaatin UV-ekstinktio mitataan ja rekisteröidään jatkuvasti.
Insuliinin pääosan eluointi tapahtuu 0,3 M MaCl sisältävän puskurin lisäämisen jälkeen. Insuliinihuipun keskiosan (820 ml) fraktiot otetaan talteen ja sekoitetaan 37 ml:n kanssa 1 % ZnClj-liuosta. Amorfinen sakka sentrifugoidaan ja insuliini kiteytetään sitten sinänsä tunnetulla tavalla asetonia sisältävästä sitraattipuskurista. Puhtaan insuliinin saanto on 2,84 g (56,8 %).
Esimerkki 4
Valmistetaan puskuri, jonka koostumus on seuraava: 0,1 M Tris-(hydroksimetyyli)-aminometaania, 5 % Genapol®SE 100 (rasva-alkoholi-polyglykolieetteri), pH säädetään HClrllä arvoon 7,0.
Osa tästä puskurista sekoitetaan 0,5 moolia/1 NaCl kanssa.
13 g DEAE Sephadex A 2$ paisutetaan edellämainitussa puskurissa (ilman NaCl) ja suspensiolla täytetään sen jälkeen 0 1,5 cm kolonni, jonka pituus on 30 cm. Kolonni tasapainotetaan puskurilla. 300 mg insuliinia (katso esimerkki 2) liuotetaan 15 millilitraan edellämainittua puskuria (ilman NaCl) (loppu-pH 8,3) . Kirkas liuos syötetään kolonniin ja eluoidaan 25°C:n lämpötilassa nopeudella 48 ml/h, jolloin lineaarinen NaCl-gradientti säädetään siten, että NaCl-pitoisuus eluaatissa nousee 500 ml:n puskurimäärän läpijuoksuttamisen aikana arvosta nolla arvoon 0,5 M. Kootaan 7 ml:n fraktioita. Eluaatista mitataan ja rekisteröidään UV-ekstinktio jatkuvasti 278 nm kohdalla. Insuliinihuipun keskiosan (0,09 M-0,22 M NaCl) (100 ml) fraktiot otetaan talteen ja sekoitetaan 4,6 ml:n kanssa 1% ZnCl2-liuosta. Amorfisena saostunut insuliini sentrifugoidaan ja kiteytetään sen jälkeen sinänsä tunnetulla tavalla asetonia sisältävästä sitraattipuskurista. Puhtaan insuliinin saanto on 160 mg (53,3 %).
Esimerkki 5
Menetellään kuten esimerkissä 4, mutta käyttäen detergenttinä 6 61490 1 % Arkopa®N 100 (nonyylifenolipolyglykolieetteri, jossa on 10 moolia etyleenioksidia/mooli nonyylifenolia).
Jatkuva UV-mittaus täytyy suorittaa ArkopajP^ N 100 itseismateri-aaliabsorption vuoksi erotusmittauksena. Puhtaan insuliinin saanto on 214 mg (71,3 %).
Esimerkki 6
Menetellään kuten esimerkissä 4, mutta käyttäen 2 % Arkopai^ N 300 (nonyylifenolipolyglykolieetteri, jossa on 30 moolia etyleenioksidia/mooli nonyylifenolia) detergenttinä ja QAE-Sephadex A 25 ionin-vaihtajana. Puhtaan insuliinin tuotos on 156 mg (52 %).
Jatkuva UV-mittaus tulee suorittaa Arkopa^ N 300 itseismateri-aaliabsorption vuoksi erotusmittauksena.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE2629568A DE2629568C3 (de) | 1976-07-01 | 1976-07-01 | Verfahren zur Reinigung von Insulin, seinen Analogen und Derivaten |
| DE2629568 | 1976-07-01 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI772023A FI772023A (fi) | 1978-01-02 |
| FI61490B FI61490B (fi) | 1982-04-30 |
| FI61490C true FI61490C (fi) | 1982-08-10 |
Family
ID=5981950
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI772023A FI61490C (fi) | 1976-07-01 | 1977-06-29 | Foerfarande foer rening av insulin dess analoger och derivat |
Country Status (22)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4129560A (fi) |
| JP (1) | JPS535101A (fi) |
| AT (1) | AT352922B (fi) |
| AU (1) | AU509110B2 (fi) |
| BE (1) | BE856385A (fi) |
| CA (1) | CA1086308A (fi) |
| CH (1) | CH626051A5 (fi) |
| DE (1) | DE2629568C3 (fi) |
| DK (1) | DK149201C (fi) |
| ES (1) | ES460099A1 (fi) |
| FI (1) | FI61490C (fi) |
| FR (1) | FR2356630A1 (fi) |
| GB (1) | GB1582056A (fi) |
| GR (1) | GR78333B (fi) |
| IE (1) | IE44766B1 (fi) |
| IT (1) | IT1080658B (fi) |
| NL (1) | NL188804C (fi) |
| NO (1) | NO145692C (fi) |
| NZ (1) | NZ184516A (fi) |
| PT (1) | PT66751B (fi) |
| SE (1) | SE440507B (fi) |
| ZA (1) | ZA773964B (fi) |
Families Citing this family (26)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4701521A (en) * | 1978-07-17 | 1987-10-20 | The Trustees Of Boston University | Method of effecting cellular uptake of molecules |
| US4783441A (en) * | 1979-04-30 | 1988-11-08 | Hoechst Aktiengesellschaft | Aqueous protein solutions stable to denaturation |
| US4292041A (en) * | 1979-11-02 | 1981-09-29 | Merck & Co., Inc. | Surfactant assay |
| US4459226A (en) * | 1982-02-26 | 1984-07-10 | Eli Lilly And Company | Process for recovering insulin |
| US4839341A (en) * | 1984-05-29 | 1989-06-13 | Eli Lilly And Company | Stabilized insulin formulations |
| DE3511269A1 (de) * | 1985-04-12 | 1986-10-09 | Veb Berlin-Chemie, Ddr 1199 Berlin | Verfahren zur reinigung von insulin |
| JPS6230956A (ja) * | 1985-07-31 | 1987-02-09 | Sumitomo Chem Co Ltd | 合成ペプチド類に含有されるイオン類の分析法 |
| DE3726655A1 (de) * | 1987-08-11 | 1989-02-23 | Hoechst Ag | Verfahren zur isolierung basischer proteine aus proteingemischen, welche solche basischen proteine enthalten |
| JPH07119767B2 (ja) * | 1989-03-07 | 1995-12-20 | 積水化学工業株式会社 | 梅毒検査用試薬及びその製造法 |
| DE4028120C2 (de) * | 1990-09-05 | 1996-09-19 | Hoechst Ag | Verfahren zur Reinigung von Insulin und/oder Insulinderivaten |
| EP0547544B1 (de) * | 1991-12-18 | 1997-03-12 | Hoechst Aktiengesellschaft | Verfahren zur Gewinnung von insulinhaltigen Lösungen |
| US6444788B1 (en) * | 1999-03-15 | 2002-09-03 | Novo Nordisk A/S | Ion exchange chromatography of GLP-1, analogs and derivatives thereof |
| US6451987B1 (en) * | 1999-03-15 | 2002-09-17 | Novo Nordisk A/S | Ion exchange chromatography of proteins and peptides |
| DE602004023626D1 (de) * | 2003-08-21 | 2009-11-26 | Novo Nordisk As | Trennung von polypeptiden mit einer racemisierten aminosäure |
| US20080096800A1 (en) * | 2004-03-12 | 2008-04-24 | Biodel, Inc. | Rapid mucosal gel or film insulin compositions |
| US20080085298A1 (en) * | 2004-03-12 | 2008-04-10 | Biodel, Inc. | Rapid Mucosal Gel or Film Insulin Compositions |
| US20080090753A1 (en) | 2004-03-12 | 2008-04-17 | Biodel, Inc. | Rapid Acting Injectable Insulin Compositions |
| US7713929B2 (en) * | 2006-04-12 | 2010-05-11 | Biodel Inc. | Rapid acting and long acting insulin combination formulations |
| US8084420B2 (en) | 2005-09-29 | 2011-12-27 | Biodel Inc. | Rapid acting and long acting insulin combination formulations |
| JP2009533471A (ja) | 2006-04-12 | 2009-09-17 | バイオデル， インコーポレイテッド | 即効型および長時間作用型組合せインスリン製剤 |
| US9060927B2 (en) | 2009-03-03 | 2015-06-23 | Biodel Inc. | Insulin formulations for rapid uptake |
| KR20140007377A (ko) | 2011-02-01 | 2014-01-17 | 노보 노르디스크 에이/에스 | 인슐린의 정제 |
| CN103703015B (zh) * | 2011-08-25 | 2019-07-05 | 霍夫曼-拉罗奇有限公司 | 阳离子和阴离子交换层析法 |
| JP6093364B2 (ja) * | 2011-09-30 | 2017-03-08 | ジーイー・ヘルスケア・バイオプロセス・アールアンドディ・アクチボラグ | 生体分子の精製方法 |
| CN103130868B (zh) * | 2013-03-12 | 2014-09-17 | 合肥天麦生物科技发展有限公司 | 一种蛋白质或多肽的纯化方法 |
| WO2016014325A1 (en) | 2014-07-21 | 2016-01-28 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Chromatography process for purification of inlsulin and insulin analogs |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3616235A (en) * | 1968-05-16 | 1971-10-26 | Forsch Die Garungsindustrie En | Process for precipitating enzymes and enzymatic inactive proteins in solution with synthetic tanning materials |
| US3607858A (en) * | 1970-03-31 | 1971-09-21 | American Cyanamid Co | Process for preparing lyophilized human blood proteins such as gamma globulin in the presence of a nonionic surfactant |
| US3683939A (en) * | 1970-05-28 | 1972-08-15 | Wilson Pharm & Chem Corp | Proteinaceous cosmetic material for hair conditioning |
| US3907676A (en) * | 1970-07-28 | 1975-09-23 | Novo Terapeutisk Labor As | Process for purifying insulin |
| JPS5328989B2 (fi) * | 1974-05-27 | 1978-08-17 | ||
| US4076800A (en) * | 1975-01-13 | 1978-02-28 | The Procter & Gamble Company | Protein-containing detergent compositions for protecting keratinous materials |
-
1976
- 1976-07-01 DE DE2629568A patent/DE2629568C3/de not_active Expired
-
1977
- 1977-06-24 NL NLAANVRAGE7707037,A patent/NL188804C/xx not_active IP Right Cessation
- 1977-06-25 ES ES460099A patent/ES460099A1/es not_active Expired
- 1977-06-28 CH CH792577A patent/CH626051A5/de not_active IP Right Cessation
- 1977-06-28 GR GR53823A patent/GR78333B/el unknown
- 1977-06-29 US US05/810,979 patent/US4129560A/en not_active Expired - Lifetime
- 1977-06-29 IT IT25221/77A patent/IT1080658B/it active
- 1977-06-29 NZ NZ184516A patent/NZ184516A/xx unknown
- 1977-06-29 FI FI772023A patent/FI61490C/fi not_active IP Right Cessation
- 1977-06-30 SE SE7707612A patent/SE440507B/xx not_active IP Right Cessation
- 1977-06-30 AU AU26604/77A patent/AU509110B2/en not_active Expired
- 1977-06-30 NO NO772318A patent/NO145692C/no unknown
- 1977-06-30 ZA ZA00773964A patent/ZA773964B/xx unknown
- 1977-06-30 AT AT466377A patent/AT352922B/de not_active IP Right Cessation
- 1977-06-30 DK DK293277A patent/DK149201C/da not_active IP Right Cessation
- 1977-06-30 GB GB27395/77A patent/GB1582056A/en not_active Expired
- 1977-06-30 IE IE1358/77A patent/IE44766B1/en not_active IP Right Cessation
- 1977-06-30 CA CA000281825A patent/CA1086308A/en not_active Expired
- 1977-06-30 PT PT66751A patent/PT66751B/pt unknown
- 1977-07-01 FR FR7720310A patent/FR2356630A1/fr active Granted
- 1977-07-01 JP JP7797677A patent/JPS535101A/ja active Granted
- 1977-07-01 BE BE179012A patent/BE856385A/xx not_active IP Right Cessation
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| FI61490C (fi) | Foerfarande foer rening av insulin dess analoger och derivat | |
| Farrell et al. | Analysis of Phosphorylation of Protein Synthesis Initiation Factor eIF‐2 by Two‐Dimensional Gel Electrophoresis | |
| Bentley et al. | Action of nitrogen trichloride on proteins: Progress in the isolation of the toxic factor | |
| Zull et al. | Studies with Tritiated Polypeptide Hormones: I. THE PREPARATION AND PROPERTIES OF AN ACTIVE, HIGHLY TRITIATED DERIVATIVE OF PARATHYROID HORMONE: ACETAMIDINO-PARATHYROID HORMONE | |
| Kelmers | Preparation of a highly purified phenylalanine transfer ribonucleic acid | |
| Expert-Bezançon et al. | Identification of neighbouring proteins in Escherichia coli 30 S ribosome subunits | |
| Gordon et al. | An electrophoretic investigation of the mixture of oligonucleotides formed by the enzymic degradation of deoxyribonucleic acid by deoxyribonuclease | |
| Schirmer et al. | Purification, characterization and crystallization of pork myokinase | |
| Toniolo et al. | Protamines: II. Circular dichroism study of the three main components of clupeine | |
| NL8501105A (nl) | Werkwijze voor de zuivering van insuline. | |
| Reese et al. | A 1 H nuclear magnetic resonance spectroscopic study of some N-methyl and N-acyl derivatives of guanosine. The structure of N, O (2′), O (3′), O (5′)-tetra-acetylguanosine | |
| EP0013826A1 (en) | Process for purifying insulin and insulin so prepared | |
| King et al. | Countercurrent Distribution Studies with Ribonuclease and Lysozyme | |
| Black et al. | THE RECOVERY OF NORLEUCINE FROM CASEIN AFTER ADMINISTERING NORLEUCINE-3-C14 TO INTACT COWS1 | |
| KR800000970B1 (ko) | 고분자량의 펩타이드의 정제 방법 | |
| Sigrist-Nelson et al. | Purification of the chloroplast-membrane dicyclohexylcarbodi-imide-binding proteolipid by ion-exchange chromatography. | |
| Hofmann et al. | Modulation of histone H5-nucleosome interactions by H5 phosphorylation | |
| Gibbons | The determination of glycolloyl in substances containing neuraminic acid | |
| Offord et al. | Diazoalkanes in peptide semisynthesis. | |
| Rokugawa et al. | The role of zinc atoms in nuclease P1 | |
| Gruss et al. | Amino‐Acid Composition of the Covalent Rigid‐Layer Lipoprotein in Cell Walls of Proteus mirabilis | |
| Dillon et al. | HETEROGENEITY OF INSULIN: I. ISOLATION OF A CHROMATOGRAPHICALLY PURIFIED, HIGH-POTENCY INSULIN AND SOME OF ITS PROPERTIES | |
| SUTTON et al. | Preparation of a crystalline A1-(2-nitro-4-trimethylammoniophenyl) derivative of bovine insulin | |
| Veibel | Characterisation of amidines as picrates through thin-layer chromatography | |
| DE1966573C3 (de) | Verfahren zur Reinigung von Insulin |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MA | Patent expired | ||
| MA | Patent expired |
Owner name: HOECHST AKTIENGESELLSCHAFT |