FI61032C - Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt anvaendbara peptidylfosfonsyror - Google Patents

Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt anvaendbara peptidylfosfonsyror Download PDF

Info

Publication number
FI61032C
FI61032C FI760084A FI760084A FI61032C FI 61032 C FI61032 C FI 61032C FI 760084 A FI760084 A FI 760084A FI 760084 A FI760084 A FI 760084A FI 61032 C FI61032 C FI 61032C
Authority
FI
Finland
Prior art keywords
acid
alanyl
benzyloxycarbonyl
water
amino
Prior art date
Application number
FI760084A
Other languages
English (en)
Other versions
FI760084A (fi
FI61032B (fi
Inventor
Frank Ratcliffe Atherton
Michael John Hall
Cedric Herbert Hassall
Robert Wilson Lambert
Peter Stuart Ringrose
Original Assignee
Hoffmann La Roche
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from GB3417/75A external-priority patent/GB1533239A/en
Application filed by Hoffmann La Roche filed Critical Hoffmann La Roche
Publication of FI760084A publication Critical patent/FI760084A/fi
Publication of FI61032B publication Critical patent/FI61032B/fi
Application granted granted Critical
Publication of FI61032C publication Critical patent/FI61032C/fi

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
    • C08G69/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming a carboxylic amide link in the main chain of the macromolecule
    • C08G69/02—Polyamides derived from amino-carboxylic acids or from polyamines and polycarboxylic acids
    • C08G69/08—Polyamides derived from amino-carboxylic acids or from polyamines and polycarboxylic acids derived from amino-carboxylic acids
    • C08G69/10—Alpha-amino-carboxylic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/66—Phosphorus compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/28—Phosphorus compounds with one or more P—C bonds
    • C07F9/30—Phosphinic acids [R2P(=O)(OH)]; Thiophosphinic acids ; [R2P(=X1)(X2H) (X1, X2 are each independently O, S or Se)]
    • C07F9/301—Acyclic saturated acids which can have further substituents on alkyl
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/28—Phosphorus compounds with one or more P—C bonds
    • C07F9/38—Phosphonic acids [RP(=O)(OH)2]; Thiophosphonic acids ; [RP(=X1)(X2H)2(X1, X2 are each independently O, S or Se)]
    • C07F9/3804—Phosphonic acids [RP(=O)(OH)2]; Thiophosphonic acids ; [RP(=X1)(X2H)2(X1, X2 are each independently O, S or Se)] not used, see subgroups
    • C07F9/3808—Acyclic saturated acids which can have further substituents on alkyl
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06191—Dipeptides containing heteroatoms different from O, S, or N
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Description

ESS^l rBn m,KUULUTUSJULKAISU ^<1 Λ 7 λ JTa LBJ (11) UTLÄGGN I NGSSKMFT 0 1 U ^ • •OS· (45) c Patentti sy3nr.= tty 10 05 1932 fatfnt sijJdelat (51) Kv.ik. /intci. C 07 F 9/38 // C 07 C 103/52
SUOM I—FI N LAND ¢1) Pit«nttlhtk«mu* — Patantanseknlng 76008U
* (22) Hakamispllvl — Ameknlngtdif 15.01.76 ' * (23) Alkupllvi—Gihighatadag 15.01.76 (41) Tulkit lulkltakal — Bllvlt offantllg 28.07.76
Patentti- ja rekisterihallitus .... ......... , . , _ ___„ , (44) N«ht»y|k»lpanon ja kuuL|ulkalsun prm. —
Patent* och regiaterstyrelsen · Antekan Utlagd oeh utl.*krtfMn publicurad 29.01.82 (32)(33)(31) Pyydetty «tuolkuu» —Begird prloritct 27.01.75 20.11.75 Englanti-England(GB) 3U17/75, **7787/75 (71) F. Hoffmann-La Roche & Co. Aktiengesellschaft, Basel, Sveitsi-Schweiz(CH) (72) Frank Ratcliffe Atherton, Welwyn Garden City, Hertfordshire, Michael John Hall, Welwyn, Hertfordshire, Cedric Herbert Hassall, Welwyn, Hertfordshire, Robert Wilson Lambert, Welwyn, Hertfordshire, Peter Stuart Ringrose,
Royston, Hertfordshire, Englanti-England(GB) (7*0 Oy Kolster Ab (5*0 Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten peptidyylifosfonihappojen valmistamiseksi - Förfarande för framställning av terapeutiskt användbara pepti dyIfos fonsyror
Esillä olevan keksinnön kohteena on menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten peptidyylifosfonihappojen valmistamiseksi, joilla on yleinen kaava I
3 - 2 - 1
R R R O
I I I II
Η,Ν-ΟΗ- CO--NH —CH—CO -NH-CH-P-OH I
(L) _ (L) (R) I
1 " « jossa R on vety, metyyli, fenyyli tai bentsyyli, 2 3 R ja R ovat kumpikin vety, metyyli, isopropyyli, isobutyyli, bentsyyli tai 4- 3 1 aminobutyyli, edellyttäen, että R ei ole vety, kun n on nolla ja R on vety tai fenyyli, n on O, 1, 2 tai 3, ja 1 2 (L) ja (R) merkitsevät näin merkityn hiiliatomin konfiguraatiota, kun R , R ja R3 eivät ole vetyjä, ja näiden farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojen valmistamiseksi .
2
On huomattava, että kun n kaavassa I on 2 tai 3, R :n merkitys voi olla sama tai eri.
2 61032 2 3
Edullisia kaavan I mukaisia yhdisteitä ovat sellaiset, joissa R ja R kumpikin merkitsee vetyä tai metyyliä, isopropyyliä, isobutyyliä, bentsyyliä tai 4-aminobutyyliä, R* on vety tai metyyli ja n on O tai 1.
Keksinnön mukaiselle menetelmälle on tunnusomaista, että yhdisteestä, jolla on yleinen kaava II
r30 Γ *2° " a1 o I I I II 4
R-NH— CH— CO--NH — CH— CO--NH—CH — P— R II
(L) (L) (R) |4
— —in R
1 4 jossa R ja n merkitsevät samaa kuin edellä, R on hydroksi tai alempi alkoksi, 5 20 30 2 R on suojaryhmä, ja R :11a ja R :11a on mikä tahansa R :n ja vastaavasti 3 R :n merkitys tai ne merkitsevät 4-aminobutyyliä, jonka aminoryhmä on suojattu, lohkaistaan suojaryhmä(t), ja haluttaessa saatu kaavan I mukainen yhdiste muutetaan farmaseuttisesti hyväksyttäväksi suolaksi.
Ilmaisulla "alempi alkoksi" tarkoitetaan rakenteen -O-(alempi alkyyli) omaavia ryhmiä, joissa alkyyli on suora tai haarautunut alkyyliryhmä, joka sisältää edullisesti 1-6 hiiliatomia.
Kaavan II ryhmissä R*, R^*3 ja R3<3 mahdollisesti läsnäolevat aminoryhmät voivat olla suojattuja sopivalle peptidikemiasta tunnetuilla aminosuojaryhmillä. Erityisen sopivia aminosuojaryhmiä esillä olevan keksinnön tarkoituksiin ovat aralkoksikarbonyyliryhmät, varsinkin bentsyylioksikarbonyyliryhmä, ja tert.-butoksikarbonyyliryhmä. Aminosuojaryhmä voi olla myös formyyli-, trityyli- tai trifluoriasetyyliryhmä. Kaavan II ryhmissä R^, R^ ja R3*3 mahdollisesti läsnä olevat karboksi- tai hydroksiryhmät voivat olla suojattuja tavanomaisilla karboksi-suojaryhmillä tai hydroksisuojaryhmillä. Karboksiryhmä voidaan esim. suojata muuttamalla se alkyyliesteriksi (esim. tert.-butyyliesteri) aralkyyliesteriksi (esim. bentsyyliesteri). Hydroksiryhmä taas voidaan suojata esimerkiksi aralkoksikarbo-nyyliryhmän (esim. bentsyylioksikarbonyyli), alkanoyyliryhmän (esim. asetyyli, propionyyli jne.), aroyyliryhmän (esim. bentsoyyli), alkyyliryhmän (esim. tert.-butyyli) tai aralkyyliryhmän (esim. bentsyyli) avulla. R^ :n, R^ :n ja R3<3:n sisältämien muiden funktionaalisten ryhmien suojaaminen voidaan suorittaa tunnetulla tavalla. R^:llä kaavassa II esitetty suojaryhmä voi olla mikä tahansa edellä R*:n, R^:n ja R3^:n yhteydessä mainittu aminosuojaryhmä.
Suojaryhmän tai ryhmien lohkaisu kaavan II mukaisesta yhdisteestä suoritetaan sinänsä tunnetulla tavalla. Niinpä esimerkiksi 3 61032 aralkoksikarbonyyliryhmä (esim. bentsyylioksikarbonyyli) tai tert.-butok-eikarbonyyliryhmä voidaan lohkaista hydrolyysin avulla (esim. käsittelemällä bromivedyn ja jääetikan seoksella). Aralkokeikarbonyyliryhmä (esim. bentsyylioksikarbonyyli) voidaan lohkaista myös hydraamalla (esim. palla- diumhiilen läsnäollessa). Tert.-butoksikarbonyyliryhmä voidaan myös loh- 4 kaista kloorivedyllä dioksaanissa. R :llä merkitty alempi alkoksiryhmä voidaan muuttaa hydroksiryhmäksi käsittelemällä bromivedyn ja jääetikan seoksella tai trimetyylikloorisilaanin avulla ja sen jälkeen vesihydrolyysillä. On huomattava, että suojaryhmien lohkaisu voidaan suorittaa läsnäolevien suojaryhmien luonteesta riippuen yhtenä reaktiovaiheena tai useampana vaiheena.
Kaavaa I vastaavan (R,S)-diastereomeerisen yhdisteen jakaminen di-astereomeereikseen ja (R)-stereomeerin eristäminen voidaan suorittaa tunnetuin menetelmin, esim. kiteyttämällä tai korkeapainenestekromatografiällä tms.
Kaavan I mukaiset yhdisteet ovat luonteeltaan amfoteerisia ja muodostavat farmaseuttisesti hyväksyttäviä suoloja vahvojen happojen (esim. metaanisulfonihappo, paratolueenisulfonihappo, kloorivetyhappo, bromivety-happo, rikkihappo jne.) ja emästen (esim. natriumhydroksidi) kanssa*
Edellä esitetyt kaavan II mukaiset lähtöaineet voidaan valmistaa esimerkiksi kondensoimalla yleisen kaavan: R20 ' R100 H--NH-CH-CO--NH-CH-P-R40 (lii) (L) J n 00 R4 mukainen yhdiste, jossa R1 , R20, R4 , n sekä (L) ja(R) merkitsevät samaa kuin edellä; tapauksesta riippuen sopivasti suojatun «-aminohapon, sopivasti suojatun dipeptidin, sopivasti suojatun tripeptidin, sopivasti suojatun tetrapeptidin tai tällaisen reaktiokykyisen johdannaisen kanssa.
Siten käytettäessä kaavan III mukaista yhdistettä, jossa n on O, tämä yhdiste voidaan kondensoida sopivasti suojatun β-aminohapon tai sen reaktiokykyisen johdannaisen kanssa sellaisen kaavan II mukaisen yhdisteen saamiseksi, jossa n on 0, tai sopivasti suojatun dipeptidin tai sen reaktiokykyisen johdannaisen kanssa sellaisen kaavan II mukaisen yhdisteen saamiseksi, jossa n on 1, tai sopivasti suojatun tripeptidin tai sen reaktiokykyisen johdannaisen kanssa sellaisen kaavan II mukaisen yhdisteen saamisek- 4 61032 si, jossa n on 2, tai sopivasti suojatun tetrapeptidin tai sen reaktiokyky!-sen johdannaisen kanssa sellaisen kaavan II mukaisen yhdisteen saamiseksi, jossa n on 3·
Jos taas kaavan III mukaisessa yhdisteessä n on 1, tämä yhdiste voidaan kondensoida sopivasti suojatun α-aminohapon tai sen reaktiokykyisen johdannaisen kanssa sellaisen kaavan II mukaisen yhdisteen saamiseksi, jossa n on 1, tai sopivasti suojatun dipeptidin tai sen reaktiokykyisen johdannaisen kanssa sellaisen kaavan II mukaisen yhdisteen saamiseksi, jossa n on 2, tai sopivasti suojatun tripeptidin tai sen reaktiokykyisen johdannaisen kanssa sellaisen, kaavan II mukaisen yhdisteen saamiseksi, jossa n on 3 ·
Jos taas kaavan III mukaisessa yhdisteessä n on 2, tämä yhdiste voidaan kondensoida sopivasti suojatun α-aminohapon tai sen reaktiokykyisen johdannaisen kanssa sellaisen kaavan II mukaisen yhdisteen saamiseksi, jossa n on 2, tai sopivasti suojatun dipeptidin tai een reaktiokykyisen johdannaisen kanssa sellaisen kaavan II mukaisen yhdisteen saamiseksi, jossa n on 3.
Lopuksi, jos kaavan III mukaisessa yhdisteessä n on 3» tämä yhdiste voidaan kondensoida sopivasti suojatun α-aminohapon tai sen reaktiokykyisen johdannaisen kanssa sellaisen kaavan II mukaisen yhdisteen saamiseksi, jossa n on 3·
Vaihtoehtoisesti kaavan II mukaiset yhdisteet voidaan valmistaa suorittamalla edellä esitetty kondensaatio käyttäen kaavaa III vastaavaa (R,S)-yhdistettä ja erottamalla saadusta (R,S)-tuotteesta (R)-yhdiste sinänsä tunnetulla tavalla, esimerkiksi kiteyttämällä, kromatografoimalla tai fraktio-kiteyttämällä käyttäen sopivaa emästä, kuten o-metyylibentsyyliamiinia tms.
Edellä mainittu kondensaatio voidaan suorittaa peptidikemiassa sinänsä tunnetuilla menetelmillä, esimerkiksi seka-anhydridi-, atsidi-, aktivoitu esteri- tai happokloridimenetelmällä.
Eräässä menetelmässä sopiva kaavan III mukainen yhdiste voidaan kondensoida tapauksesta riippuen sopivasti suojatun aminohapon, di-, tri- tai tetrapeptidin kanssa, jonka pääteasemassa oleva karboksifunktio on orgaanisen tai epäorgaanisen hapon kanssa muodostettu seka-anhydriditähde. Tällaista aminohappoa, di-, tri- tai tetrapeptidiä, jossa on vapaa karboksifunktio käsitellään sopivasti tertiäärisellä emäksellä, kuten tri(alempi alkyyli)amiinilla (esim. trietyyliamiini) tai N-etyylimorfoliinilla iner-tissä orgaanisessa liuottimessa (esim. tetrahydrofuraani, 1,2-di-metoksi-etaani, dikloorimetaani, petrolieetteri tai näiden seokset), ja saatu suola 5 61032 saatetaan reagoimaan kloorimuurahaishappoesterin kanssa (esim. etyyli- tai isobutyyliesteri) alhaisessa lämpötilassa. Saatu seka-anhydridi kondensoidaan sitten sopivasti in situ kaavan III mukaisen yhdisteen kanssa.
Toisessa menetelmässä sopiva kaavan III mukainen yhdiste voidaan konden-soida tapauksesta riippuen sopivasti suojatun aminohapon, di-, tri- tai tetrapep-tidin kanssa, jonka pääteasemassa oleva karboksiryhmä on happoatsidin muodossa.
Tämä kondensaatio suoritetaan edullisesti inertissä orgaanisessa liuottimessa, kuten dimetyyliformamidissa tai etyyliasetaatissa, alhaisessa lämpötilassa.
Vielä eräässä menetelmässä sopiva kaavan III mukainen yhdiste voidaan kon- densoida tapauksesta riippuen sopivasti suojatun aminohapon, di-, tri- tai tetra- peptidin kanssa, jonka pääteasemassa olevan karboksifunktio on aktiivisen esterin (esim. p-nitrofenyyli-, 2,3,4-trikloorifenyyli- tai N-hydroksisukkinimidiesteri- ryhmä) muodossa. Tämä kondensaatio voidaan sopivasti suorittaa joko inertissä orgaanisessa liuottimessa, kuten dimetyyliformamidissa, tai siinä tapauksessa, 4 että vähintään toinen ryhmistä R on alempi alkoksiryhmä, vesipitoisessa alkanolis-sa (esim. vesipitoinen etanoli).
Vielä eräässä menetelmässä sopiva kaavan III mukainen yhdiste voidaan kon-densoida tapauksesta riippuen sopivasti suojatun aminohapon, di-, tri- tai tetra-peptidin kanssa, jonka pääteasemassa oleva karboksifunktio on happokloridin muodossa. Tämä kondensaatio suoritetaan edullisesti emäksen läsnäollessa alhaisessa lämpötilassa.
SE-kuulutusjulkaisussa 384 528 esitetty yhdiste, fosfinotrisiini-L-alanyyli-L-alaniini on '^-aminohappojohdannainen (glutamiinihappojohdannainen), kun taas tämän keksinnön mukaiset yhdisteet ovat °C-aminohappojohdannaisia, erityisesti alaniinijohdannaisia. Tunnetun yhdisteen ja keksinnön mukaisten yhdisteiden välinen rakenteellinen samankaltaisuus on siten vain ulkonaista.
Edellä mainitun tunnetun yhdisteen on esitetty olevan aktiivinen E. colia ja muita organismeja vastaan, kun annos on ollut 1 mg/ml (kts. Helv.Chim. Acta, 55, 233, 1971). Tämä aktiivisuus on huomattavasti vähäisempi kuin tämän keksinnön mukaisilla yhdisteillä, joilla aktiiviset annokset ovat luokkaa ^ug/ml.
Julkaisun J. Med, Chem. Jl8, 106, 1975 relevantti yhdiste, N-D-alanyyli-(ras)-1-aminoetyylifosfonihappo on kahden diastereomeerin seos: L-D-alanyyli-L-1-aminoetyylifosfonihapon ja L-D-alanyyli-D-l-aminoetyylifosfonihapon seos. Molemmat mainitut diastereomeerit ovat kuitenkin inaktiivisia in vitro (MIC>128 yug/ml) esim, seuraavia vastaan: E. coli, S. aureus, S. marcescens, K. aerogenes, Entero-bacter sp., S. faecalis, H. influenzae, P. mirabilis, P. morganii, Ps. aeruginosa ja M. smegmatis.
6 61032 Tämän tunnetun yhdisteen inaktiivisuuteen viittaa myös kyseinen julkaisu sinänsä, koska siinä esitetään tunnetun yhdisteen olevan aktiivinen vain Pseudomonas aeruginosaa vastaan ja vain kun annos on 20 mg/ml. Lisäksi kyseisessä julkaisussa esitetään, että mainitulla yhdisteellä on samanlainen aktiivisuus kuin 1-aminoetyylifosfonihapolla, mikä yhdiste tehdyissä kokeissa kuitenkin todettiin inaktiiviseksi E. colia, Pseudomonas aeruginosaa ja S. aureusta vastaan.
Julkaisun Synthetic Commun. _3, 375 (1973) relevantti yhdiste, (kaavan I mukainen yhdiste, jossa R = H, R' = CH^ ja n = O) todettiin tehdyissä kokeissa inaktiiviseksi edellä lueteltuja mikro-organismeja vastaan, kun annos oli alle 128 yug/ml.
Tämän keksinnön mukaan valmistetut petidijohdannaiset potentoivat antibioottien (esim. penisilliini- ja kefalosporiiniantibiootit ja D-sykloseriini) aktiviteettia. Siten (1R)-1-(L-alanyyliamino)-etyylifosfonihapon fraktioestoväkevyys-indeksi yhdessä kefalosporiini-, penisilliiniantibiootin ja D-sykloseriinin kanssa käytettynä E. colia vastaan elatusalustalla Davis minimal medium esitetään alla olevassa taulukossa 1.
Taulukko 1
Antibiootti Minimiestoväkevyys tyig/ml) Fraktioestoväkevyys- - indeksi
Antibiotti Antibiootti + yksinään peptidijohdan- ___nainen_
Amoksisilliini 4 1 + 0,06 0,3 D-sykloseriini 64 0,25 + 0,25 0,25
Kefradiini 16 4+0,25 0,5
Taulukossa 2 taas on esitettynä seuraavien yhdisteiden fraktioestoväke-vyysindeksit: (1R)-1-(L-alanyyliamino)-etyylifosfonihappo (johdannainen A), (1R)-1-(L-alanyyli-L-alanyyliamino)-etyylifosfonihappo (johdannainen B), (1R)-l-(L-alanyyli-L-alanyyli-L-alanyyliamino)-etyylifosfonihappo (johdannainen C), (1R)-1-(L-alanyyli-L-alanyyli-L-alanyyli-L-alanyyliamino)-etyylifosfonihappo (johdannainen D), (1R)-1-(L-fenyylialanyyliamino)-etyylifosfonihappo (johdannainen E), (1R)-1-(L-valyyliamino)-etyylifosfonihappo (johdannainen F) ja (1R)-1-(L-leusyyliamino)-etyylifosfonihappo (johdannainen G) käytettyinä yhdessä D-syklo-seriinin kanssa suhteessa 2:1 E.colia vastaan Davis minimal medium-ravintoalustalla.
7 61032
Taulukko 2
Peptidijohdannainen D-sykloseriinin fraktio- Fraktioestoväkevyy- estoväkevyys indeksi A 0,06 0,3 B 0,03 0,2 C 0,05 0,1 D 0,10 0,2 E 0,13 0,48 F 0,13 0,60 G 0,12 0,27
Taulukossa 3 esitetään in vivo aktiivisuus ja taulukossa 4 in vitro aktiivisuus yhdisteillä A-L: (A) (1R)-1-(L-alanyyliamino)etyylifosfonihappo (B) (L-fenyylialanyyliamino)-metyylitosfonihappo (C) (L-leusyyliamino)-metyylifosfiinihappo (D) (L-valyyliamino)-metyylifosfonihappo (E) (1R)-1-(L-alanyyli-L-alanyyliamino)-etyylifosfonihappo (F) (1R)-1-(L-fenyylialanyyliamino)-etyylifosfonihappo (G) (1R)-1-(L-valyyliamino)-etyylifosfonihappo (H) (1R)-1-(L-alanyyliamino)-2-fenyylietyylifosfonihappo (I) (1R)-1-(L-leusyyliamino)-etyylifosfonihappo (J) (1R)-1-(L-alanyyli-L-alanyyli-L-alanyyliamino)-etyylifosfonihappo (K) (1R)-1-(L-alanyyli-L-alanyyli-L-alanyyli-L-alanyyliamino)-etyylifosfonihappo (L) (1R)-1-(L-prolyyli-L-alanyyli-L-alanyyliamino-etyylifosfonihappo
Taulukko 3 In vivo aktiivisuus CD50, mg/kg 1
Yhdiste E.coli 281007 P. mirabilis 502075 p.o. s.c s.c A 30-70 3-9 >500 D - >90 E 78 14 F 68 10,1 G 71 6,1 H >400 >40 I 54 2,3 385 61032
CM CM (M
i—( CO OO CO vJ H H CO 00
. | CM i—t 00 CM | CM **3· CM vO · · CM CM
O f-< »—( »—< O O i—( V/ Λ Λ V/ V/ Λ Λ
ΙΛ CM
m co co vo co co cm f—I cc oo
vv«|00 00 00CM|CMi—(CMCM«*CN CM
Ä O r-l r—< »—( f—( O O ^ r—(
Λ Λ Λ Λ V/ Λ A
CM IA CM
»—( CO CO CM f—< CO CO
·!♦—*i—(OOCMlCMMfCMCM · «CM CM
J O CO CO ·—( r-( O O r—<
V/ A A V# A A
W0 CM CM CM CM
CM r*M i—( r—( r—< ΐΛ ΙΛ 00 CO
j, · · · · 00 Ό CM CM CM · · M N · CO CM CM CM
'“'OOOO r-i OO CO o cOr—< * V/ V/ V/ V. Λ Λ
CO » \0 O | vO CO CO
— CM \ r-4 i-» r-4 CM CM
f—( i-M r—( ΑΛΛΑ Λ tn CM uo m uo cm *-t cm co co
O****G0O»-(i-HC0*CM00<3*CM<fCM CM
OOOO *""» O i—*
V/ AA
CM U0 CM
UO r-* CM f-i CO CO CO
2 , * * · · v^vOCMCM^f-HCMCMCMi—(CMCMCM CM
2 ^ O O O O r-l CO CO rS r-l r-I
2 V/ V, AA
>3· -H ^ .
Λ £* _. m es es es m1 NN
2 'j e r i <N rS r-l r-l CM r-l r-4 CO CS 00 00 \5Ti KW . . . I to N N 3 tn - rS · · N P1 M 03 •s t; \ oooo oi o o o >-< r-< r-<
^ -J &> V/ V/ V/ V/ V/ Λ Λ A
Π Π.-- .......... 1 11 1 --11,,.,1.
rt O ^ ™ m S 2 .-.r-l ON 00 to to sf 00 OD 00
^ M , , w «a- · -3 rS CS rS · r-l 00 rS v£> -3 CS r-l VO CS CS SO N N N
I U O O H H H rS I—t r-4 r-4 r-4
5 H V/ Λ ΛΑ Λ Λ A
g - " ........
c CS 04 m H , , r-4 r-t ΙΛ CS CO m 00 CO -3 00 00 00 ' r-4 - r-4 · -3 -3 · 3 n · es to es · es es es so escses
OO O O r-l O 4-3 r—I r-l r—I rS
V/ V/ Λ ΑΛΛΑ rs r-l ΙΛ 4Λ 40 00 00 00 -3 CO 00 00
Wes - r-i · <t . . eso0r-400-3fseso0escsiso escses O O O O rl r-4 r-4 r-4 r-4 r-4
V/ Λ Λ Λ Λ Λ A
m es es es in oo oo
-.eSr-lr-IrHSOSOrSeSSOrS «3 CS 00 CS CS
**<···· r-l i-4 r-l · CS «3 lO en 1—4 r-4
OOOO O A A
V/ V/ V/ ooiommuoO.cmm.-lcomOmpiJcN (¾ mm i—4 nr r-ι m rs M 0 m en m m CQ oo CQ pq m rr m m0005r~rt;mmmrs rs < O Ή OO'WjSrtJ-V^r-ttvi'S'OO 00¾ r-ι X υ m -h
O W · U U CQ
U (0 CU E-1 Es M
H Es MUU U
U U Z 2 E 2 •rl 2 2 MM 3
£ i C M (D M <D -HM M
M v I CU 0) -M ·Η 10 M M -H -H -M | -rl
•Μ V-'----' ' U C U Ή N -H 3 i—I -H M -M -M
c ' w tomflflcsJETicocpfl 3 (0 D 0)CnX}OQJ-H-HX3f0t7>3M 6 tri -H U00QJ34->XroCnsJM0=Cn
M «H ^ MMMrJi—(XlCuMM-PdlC <U
O O 3 (OOQJS-i's-iDin-HOCUiO E
υ < E3-P c w 4-> ε ε m · m • · •«β·»..···Μ · U W WZWtOaCQWOjDi&iDi s 61032
Esitetyistä taulukoista ilmenee, että keksinnön mukaisilla yhdisteillä on yllättävät ja arvokkaat ominaisuudet tunnettuihin yhdisteisiin verrattuna.
Tässä keksinnössä valmistettuja peptidijohdannaisia voidaan antaa lääkkeeksi yhdistelmänä antibiootin kanssa, tai antibioottia ja peptidijohdannaista voidaan antaa erikseen ja tarvittaessa eri tietä. Lääkkeeksi annetun peptidi-johdannaisen ja antibiootin suhde voi vaihdella laajoissa rajoissa riippuen sellaisista tekijöistä kuin valitusta johdannaisesta ja antibiootista, lääkkeen-antotavasta ja organismista, jota vastaan taistellaan. Peptidijohdannaista ja antibioottia voidaan antaa esimerkiksi suhteissa noin 100:1 - 1:100.
Esillä olevan keksinnön peptidijohdannaisia voidaan siten käyttää lääkkeinä esimerkiksi farmaseuttisten valmisteiden muodossa, jotka sisältävät niitä niiden kanssa yhteen sopivan farmaseuttisen kantoaineen kanssa. Tämä kantoaine voi olla epäorgaaninen tai orgaaninen kantoaine, joka sopii enteraaliin (esim. oraali) tai parenteraaliin lääkeantoon, kuten esim. vesi, laktoosi, tärkkelys, magnesiumstearaatti, arabikumi, gelatiini, polyalkyleeniglykolit, vaseliini jne. Farmaseuttiset valmisteet voivat olla kiinteinä, (esim. tabletit, drageet, suppo-sitorit tai kapselit) tai nesteinä (esim. liuokset, suspensiot tai amulsiot). Farmaseuttiset valmisteet voidaan steriloida, ja ne voivat sisältää lisäaineita, kuten säilöntäaineita, stabillintiaineita, kostutusaineita tai suoloja osmoottisen paineen muuttamiseksi.
Seuraavat esimerki valaisevat esillä olevaa keksintöä.
Esimerkki 1: (L-alanyyliamino)-metyylifosfonihappo a) Lähtöaineen valmistus: 33,3 g (0,30 moolia) aminometyylifosfonihappoa liuotettiin seokseen, jossa oli 1,5 litraa vettä ja 750 ml etanolia. Liuos jäähdytettiin 10°C:seen, ja sitä käsiteltiin annoksittain 75,6 g:11a (0,90 moolia) kiinteätä natriumbikarbonaattia samalla sekoittaen ja jäähdyttäen 0°C:een. Sitten lisättiin tipoittain nopeasti noin 10 minuutin kuluessa sisäisen lämpötilan ollessa 5°C:n alapuolella reagenssi-liuos, jossa oli 96 g (0,30 moolia) N-bentsyylioksikarbonyyli-L-alaniinin N-hyd-roksisukkinimidiesteriä 1 litrassa kuumaa etanolia. Reagenssi pestiin kahdella 200 ml:n annoksella etanolia. Heterogeenista seosta sekoitettiin vielä 2 tuntia 0°C:ssa ja sitten 24 tuntia huoneen lämpötilassa. Saatiin lähes kirkas liuos. Haihduttamalla huoneen lämpötilassa ja haihduttamalla uudelleen veden (400 ml) kanssa huoneen lämpötilassa saatiin kumimainen kiinteä aine. Tämä kiinteä aine liuotettiin 1,5 litraan vettä, liuos uutettiin 1,5 litralla kloroformia, sitten kahdella 500 ml:n annoksella kloroformia, se tehtiin happameksi 2-n kloorivetyhapolla pH-arvoon 2 ja uutettiin jälleen kloroformilla. Ohutkerroskromatografia osoitti, että haluttu lähtöaine oli vesifraktiossa. Tämä fraktio väkevöitiin noin 300 ml:ksi ja laskettiin kationi-ioninvaihtohartsipylvään lävitse (B.D.H., Zerolit 225, SRC 13, RSO^H; 1,5 kg vastare9eneroitu happosyklissä). Eluoimalla 1 litralla vettä ja senjälkeen 10 61 032 kolmella 500 ml:n annoksella vettä saatiin 4 hapanta fraktiota, joista vain kahdessa ensimmäisessä oli ohutkerroskromatografiän mukaan olennaisia määriä haluttua lähtöainetta. Nämä kaksi fraktiota yhdistettiin, haihdutettiin ja haihdutettiin uudelleen veden kanssa, kunnes niissä ei enää ollut olennaisia määriä kloorivetyä. Saatiin lopullisena jäännöksenä /(N-bentsyylioksikarbonyyli-L-alanyyli)amino7-me-tyylifosfonihappoa, joka muutettiin bentsyyliamiinisuolaksi seuraavasti:
Viimeksi mainittu jäännös liuotettiin 700 ml:aan vettä, ja liuos titrattiin 1-n bentsyyliamiinilla pH-arvoon 4,5, kului 240 ml; teoreettinen määrä 300 ml.
Sakka suodatettiin ja kiteytettiin 800 ml:sta vettä. Kiteet suodatettiin, pestiin vedellä, kunnes suodos oli kloridivapaa, ja pestiin sitten peräkkäin etanolilla ja eetterillä ja kuivattiin. Saatiin 52 g (41 %:n saanto) /TN-bentsyylioksikarbonyyli-L-alanyyli)amino7-metyylifosfonihapon bentsyyliamiinisuolaa, sp. 200-201°C (hajoaa) ; M720= -6,7° (c=l % etikkahapossa). Väkevöimällä emäliuoksia saatiin lisä-saantona S,2 g, sp. 199-201°C (hajoaa); -7,4° (c=l % etikkahapossa).
b) Lopputuotteen valmistus: 56.2 g ^.(N-bentsyylioksikarbonyyli-L-alanyyli)aminp7-metyylifosfonihapon bentsyyliamiinisuolaa liuotettiin mahdollisimman pieneen määrään 2-n ammoniumhyd-roksidia, ja liuos laskettiin kationi-ioninvaihtohartsipylvääseen (B.D.H., Zerolit 225, SRC 13, RSO^H; 1,5 kg vastaregeneroitu happosyklissä). Eluoimalla vedellä saatiin kaikkiaan noin 3,5 litraa eluaattia, joka väkevöitiin noin 600 ml:ksi. Tähän lisättiin 600 ml metanolia, 0,1 ml jääetikkaa ja 7 g 5 %:ista palladiumhiili-katalysaattoria. Seosta hydrattiin huoneen lämpötilassa ja normaalipaineessa. Katalysaattori suodatettiin pois, ja liuotin haihdutettiin. Jäännös haihdutettiin 3 kertaa 100 ml:n annoksen kanssa n-propanolia, jolloin saatiin 28 g kiinteätä ainetta, sp. noin 260°C (hajoaa). Tämä kiinteä aine kiteytettiin 120 ml:sta vettä ja 160 ml:sta etanolia, jolloin saatiin 16,6 g (L-alanyyliamino)-metyylifosfoni-happoa, sp. 276-282°C; +34,3° (c=l % vedessä) . Uudelleenkoteytettynä vedestä saatiin 14,1 g puhdasta tuotetta, sp. 284-286°C (hajoaa); +32,9° (c=l % vedessä).
Esimerkki 2: (L-alanyyliamino)-metyylifosfonihappo a) Lähtöaineen valmistus: 24.2 g (0,24 moolia) trietyyliamiinia lisättiin 53,5 g:aan (0,24 moolia) N-bentsyylioksikarbonyyli-L-alaniinia 2 litrassa kuivaa tolueenia, ja seos jäähdytettiin -5°C:een. Seokseen lisättiin tipoittain 32,8 g (0,24 moolia) isobutyyli-klooriformiaattia samalla sekoittaen, ja seos pidettiin vielä 25 minuuttia -5°C:ssa. Sekoittaen -5°C:ssa seokseen lisättiin tipoittain 6,66 g (0,060 moolia) aminome-tyylifosfonihappoa 60 ml:ssa 2-n natriumhydroksidia, ja sekoitusta jatkettiin vielä 3 tuntia -5°C:ssa. Seoksen annettiin sitten lämmetä huoneen lämpötilaan ja sitä sekoitettiin yli yön. Vesikerros erotettiin, takaisinuutettiin tolueenilla ja pH säädettiin 9,5:een 45 ml:11a 2-n natriumhydroksidia. Liuos haihdutettiin huoneen lämpötilassa trietyyliamiinin poistamiseksi. Jäännös liuotettiin 200 ml:aan vettä 11 61032 ja haihdutettiin, tämä tehtiin 3 kertaa. Lopullinen jäännös liuotettiin 500 ml:aan vettä, ja saatu liuos uutettiin 3 kertaa 350 ml:11a kloroformia. Vesikerroksen pH säädettiin 2,5:een 50 ml:11a 2-n kloorivetyhappoa ja se uutettiin sitten peräkkäin 3:11a 350 ml:n annoksella eetteriä ja 3:11a 350 ml:n annoksella kloroformia. Vesikerros haihdutettiin huoneen lämpötilassa, ja saatu valkea kiinteä aine liuotettiin 50 ral:aan vettä ja 20 ml:aan 2-n ammoniumhydroksidia ja liuos vietiin ka-tioninvaihtohartsipylvääseen (B.D.H., Zeolit 225, SRC 13, RSO^H; 250 g; vastarege-neroitu happosyklissä). Pylväs eluoitiin vedellä, ja hapan eluaatti haihdutettiin. Jäännös haihdutettiin huoneen lämpötilassa 3 kertaa veden (100 ml) kanssa kloori-vedyn poistamiseksi. Lopullisena jäännöksenä saatiin (N-bentsyy1ioksikarbonyy1i-L-alanyyli)amino7-metyylifosfonihappo, joka muutettiin bensyyliamiinisuolaksi seuraavasti :
Viimeksi saatu jäännös titrattiin 36 ml:11a 1-m bentsyyliamiinia pH-arvoon 4. Haihduttamalla saatiin valkea kiinteä aine, joka puhdistettiin kiteyttämällä vedestä. Saatiin kaksi 0,9 g:n saalista /(N-bentsyylioksikarbonyyli-L-alanyyli)-amino7-metyylifosfonihapon bentsyyliamiinisuolaa, joiden vastaavat sulamispisteet olivat 193-195°C (hajoaa) ja 196-199°C (hajoaa) ; “6,0° (c=l % etikkaha- possa).
b) Lopputuotteen valmistus:
Yllä valmistettu /(N-bentsyylioksikarbonyyli-L-alanyyli)-amino7-metyylifos-fonihapon bentsyyliamiinisuola muutettiin (L-alanyyliamino)-metyylifosfonihapoksi analogisesti esimerkissä 1 b) kuvatun kanssa.
Esimerkki 3: (L-valyyllamino)-metyylifosfonihappo a) Lähtöaineen valmistus:
Analogisesti esimerkin 2a) kanssa käyttäen lähtöaineena N-bentsyylioksi- karbonyyli-L-valiinia saatiin /(N-bentsyylioksikarbonyyli-L-valyyli)-amino7-me- 20 tyylifosfonihapon bentsyyliamiinisuola, sp. 235-237°C (hajoaa); ^ = -5,7° (c=0,l % etikkahapossa).
b) Lopputuotteen valmistus:
Analogisesti esimerkin Ib) kanssa käyttäen lähtöaineena 7(N-bensyylioksi-karbonyyli-L-valyyli)amino7-metyylifosfonihapon bentsyyliamiinisuolaa saatiin (L-valyyliamino)-metyylifosfonihappo, sp. 290-292°C (hajoaa); +67,9° (c=0,85 % vedessä).
Esimerkki 4: (L-leusyyliamino)-metyylifosfonihappo a) Lähtöaineen valmistus:
Analogisesti esimerkin la) kanssa käyttäen lähtöaineena N-bentsyylioksi-karbonyyli-L-leusiinin N-hydroksisukkinimidiesteriä saatiin /(N-bensyylioksi-karbonyyli-L-leusyyli)aminc>7-metyylifosfonihapon bensyyliamiinisuola, sp. 175-178°C (hajoaa); -10,1° (c=0,77 % etikkahapossa).
b) Lopputuotteen valmistus:
Analogisesti esimerkin Ib) kanssa käyttäen lähtöaineena TjN-bentsyy- 12 61032 lioksikarbonyyli-L-leusyyli)amino]-metyylifosfonihapon bentsyyliamiini-suolaa saatiin (L-leusyyliamino)-metyylifosfonihappo, ep. 262-264°C (ha- 2D r\ joaa); [a]^ = +59»7 (c = 0,67 # vedessä).
Esimerkki 5:(L-lysyyllamlmQ-metyyllfosfonlhappodlhydroklorldl a) Lähtöaineen valmistus: ? fi
Analogisesti esimerkin la) kanssa käyttäen lähtöaineena N ,N -bis-(bentsyylioksikarbonyyli)-L-lysiinin N-hydroksisukkinimidiesteriä saatiin ^[N ,N -bis(bentsyylioksikarbonyyli)-L-lysyyli]aminoj-metyylifosfonihappo, sp. 160-162°C (hajoaa); [a]j^« -9*55° (c = 0,5 $ etanolissa). Tätä yhdistettä käytettiin seuraavassa vaiheessa vapaana happona.
b) Lopputuotteen valmistus t
Analogisesti esimerkin Ib) kanssa, mutta hydraamalla 2-n kloorivety- 2 6 hapon läsnäollessa käyttäen lähtöaineena £jN ,N°-bis(bentsyylioksikarbo-nyyli)-L-lysyyliJamino^-metyylifosfonihappoa saatiin (L-lysyyliaraino)-metyyli-fosfonihappodihydrokloridi, sp. 212-217°C (hajoaa); [a]^°= +22,35° (c = 1 vedessä).
Esimerkki 6 t (li-fenyylialanyyllamino)-metTYllfosfonlhaimft- a) Lähtöaineen valmistus
Analogisesti esimerkin la) kanssa, mutta suorittaen ioninvaihto me-tanoli/vesiseoksesea veden sijaita ja käyttäen lähtöaineena N-bentsyylioksi-karbonyyli-L-fenyylialaniinin N-hydroksisukkinimidiesteriä, saatiin [ (N-bentsyylioksikarbonyyli-L-fenyylialanyyli)amino]-metyylifosfonihappo, sp. 181-182° (hajoaa); [a]^« -11,9° (c = 1,0 $ metanolissa). Tätä yhdistettä käytettiin seuraavassa vaiheessa vapaana happona.
b) Lopputuotteen valmistus
Analogisesti esimerkin Ib) kansea lähtien [(N-bentsyylioksikarbo-nyyli-L-fenyylialanyyli)amino]-metyylifosf onijaaposta saatiin (L-fenyyliala-nyyliamino)-metyylifosfonihappo, sp. 252-255°C (hajoaa); [ot]^= +67,8° (c = 0,51 $ vedessä).
Esimerkki 7» (L-alanyyli-L-alanyyllamino)-metyvllfosfonihappo a) Lähtöaineen valmistus: 0,91 g (0,005 moolia) (L-alanyyliamino)-metyylifosfonihappoa liuotettiin 25 ml:aan vettä ja 12,5 ml:aan etanolia, ja liuosta käsiteltiin 1,26 g: 11a (0,015 moolia) kiinteätä natriumbikarbonaattia, jolloin saatiin kirkas liuos. Liuosta sekoitettiin 0°C:sea, ja siihen lisättiin lämmin liuos, jossa oli 1,6 g (0,005 moolia) N-bentsyylioksikarbonyylialaniinin N-hydroksisukkinimidiesteriä 16 ml:ssa etanolia, sitten pestiin kahdella 5 ml:n annoksella etanolia. Aluksi heterogeeninen seos muuttui homogeeniseksi 5 mi- 15 61 032 nuutissa. Seosta sekoitettiin 0°C:ssa 2 tuntia ja sitten huoneen lämpötilassa 16 tuntia. Etanoli haihdutettiin ja jäännös haihdutettiin uudelleen veden kanssa. Jäännös liuotettiin 100 ml saan vettä ja uutettiin 100 ml :11a kloroformia ja sen jälkeen kahdella 50 mlsn annoksella kloroformia. Vesi-kerros tehtiin happameksi pH 2:een noin 15 mlslla 2-n kloorivetyhappaa ja uutettiin sitten 100 mlslla kloroformia ja sitten kahdella 50 mlsn annoksella kloroformia. Ohutkerroskromatografia osoitti, että tuote oli vesi-faasissa. Vesifaasi väkevöitiin, kunnes siitä alkoi saostua kiinteätä ainetta. Lisättiin juuri sen verran 2-n ammoniumhydroksidia, että saatiin kirkas liuos. Liuos vietiin kationinvaihtohartsipylvääseen (B.D.H., Zerolit 225, SBC 13» RSO^H; 150 g; vastaregeneroitu happosyklissä) ja eluoitiin vedellä. Happamet eluaatit, jotka sisälsivät pelkästään haluttua lähtöainetta (ohutkerroskromatografiän mukaan; kolme 100 mlsn-annosta) yhdistettiin haihdutettiin kuiviin ja haihdutettiin uudelleen veden kanssa kloorivedyn poistamiseksi. Saatiin raakana tähteenä [(N-bentsyylioksikarbonyyli-L-ala-nyyli-L-alanyyli)amino]-metyylifo8fonihappoa, joka muutettiin bentsyyli-amiinisuolaksi seuraavasti:
Saatu tähde liuotettiin veteen ja titrattiin pH-arvoon 4»5 4-n benteyyliamiinilla; kulutus 1,6 ml; teoreettinen kulutus 1,25 ml. Tuote kiteytyi seisotettaessa ja sitä uutettiin lämpimällä vedellä, jäähdytettiin ja annettiin seistä yli yön. Saatu sakka suodatettiin ja pestiin 25 mlslla vettä kloridi-ionivapaaksi [bentsyyliamiinihydrokloridij. Sakka pestiin peräkkäin etanolilla ja eetterillä ja kuivattiin. Saatiin 1,005 g [(N-bentsyylioksikarbonyyli-L-alanyyli-L-alanyyli)aminoj-metyylifosfonihapon bentsyyliamiinisuolaa, sp. 232-234°C (hajoaa); [oc]^0 -22,1° (c => 0,5 $ etikkahapossa). Väkevöimällä emäliuokset saatiin vielä 0,3 g bentsyyliamii-nisuolaa, sp. 232-234°C (hajoaa). Uudelleenkiteyttämällä ensimmäinen erä 60 ml sata vettä saatiin 0,71 g puhdasta bentsyyliamiinisuolaa, sp. 232-234°C (hajoaa); [α]^ = -20,3° (c *= 0,5 etikkahapossa).
b) Lopputuotteen valmistus 28 g (0,057 moolia) [N-bentsyylioksikarbonyyli-L-alanyyli-L-alanyyli}-amino]-metyylifosfonihapon bentsyyliamiinisuolaa, joka oli valmistettu tämän esimerkin a) kohdan mukaan, liuotettiin mahdollisimman pieneen määrään 2-n ammoniumhydroksidia, ja liuos vietiin kationinvaihtajapylvääseen (B.D.H., Zerolit 225, SRC 13, RSO^H; 1,5 kg; vasta regeneroitu happosyklissä) ja eluoitiin vedellä. Hapanta eluaattia kerättiin 2 litraa, ja se väkevöitiin 500 mlsksi. Tähän lisättiin 500 ml metanolia, 5 g 10-^sista palladiumhiili-katalysaattoria ja 0,2 ml jääetikkaa. Seosta hydrattiin huoneen lämpötilas- 14 61032 sa ja normaalipaineessa. Katalysaattori suodatettiin ja liuotin haihdutettiin. Jäännös haihdutettiin neljä kertaa n-propanolin (250 ml eriä) kanssa ja trituroitiin eetterin kanssa, jolloin saatiin 12,46 g valkeata kiinteätä raakatuotetta, sp. 200-265°C (hajoaa). Tämä valkea kiinteä aine kiteytettiin uudelleen 190 ml:sta vettä ja 190 ml:sta etanolia seisottamalla yön yli 0°C:esa, sitten suodatettiin. Saatiin 8,69 g (L-alanyyli-L-alanyyliamino)-metyylifosfonihappoa, sp. 290-292°C (hajoaa); [a]^°= -38,6° (c - 1 $ vedessä).
Esimerkki 8: (L-alanyyli-L-alanyyli-L-alanyyliamino)-metyylifoBfonihappo a) Lähtöaineen valmistus:
Analogisesti esimerkin 7a) kanssa, käyttäen lähtöaineena N-bentsyyli-oksikarbonyyli-L-alaniinin N-hydroksisukkinimidiesteriä ja (L-alanyyli-L-alanyyliamino)-metyylifosfonihappoa saatiin [(N-bentsyylioksikarbonyyli-L-alanyyli-L-alanyyli-L-alanyyli)amino]-metyylifosfonihapon bentsyyliamiini-suola, sp. 249-251°C (hajoaa); [α]^° = -32,2° (c = 0,5 % etikkahapossa).
b) Lopputuotteen valmistus
Analogisesti esimerkin 76) kanssa käyttäen lähtöaineena (N-bentsyyli-oksikarbonyyli-L-alanyyli-L-alanyyli-L-alanyyli)amino]-metyylifosfonihapon bentsyyliamiinisuolaa saatiin (L-alanyyli-L-alanyyli-L-alanyyliamino)-metyylifosfonihappo, sp. 323-324°C (hajoaa); [a]^°= -78,2° (c = 0,5 # vedessä) .
Esimerkki 9: [(L-alanyyliamlno)metyyli]-metyyllfosfilnlhappo a) Lähtöaineen valmistus 2,8 g (0,036 moolia) kiinteätä natriumkarbonaattia lisättiin 5°C:ssa liuokseen, jossa oli 1,96 g (0,018 moolia) (aminometyyli)metyylitosfiini-happoa 72 ml:ssa vettä ja 36 mlsssa etanolia,jolloin saatiin kirkas liuos. Liuosta sekoitettiin 0°C:ssa, samalla kun siihen lisättiin lämmin liuos, jossa oli 5,76 g (0,018 moolia) N-bentsyylioksikarbonyyli-L-alaniinin N-hydroksisukkinimidiesteriä 36 ml:ssa etanolia, sitten pestiin kahdella 10 ml:n annoksella lämmintä etanolia. Heterogeenista seosta sekoitettiin 0°C: ssa 2 tuntia ja sitten yön yli huoneen lämpötilassa. Seos haihdutettiin ja haihdutettiin uudelleen sitten veden (50 ml) kanssa etanolin poistamiseksi. Jäännös liuotettiin 150 mlsaan vettä ja uutettiin kerran 150 ml:11a kloroformia ja kahdesti 30 ml:lla kloroformia. Vesikerros tehtiin happameksi 18 ml:11a 2-n kloorivetyhappoa ja uutettiin jälleen kerran 150 ml:11a kloroformia ja kahdesti 30 ml:lla kloroformia. Vesikerros erotettiin, haihdutettiin ja liuotettiin sitten 10 mlsaan vettä ja 10 ml:aan 2-n ammoniumhydrok-sidia. Liuos vietiin pylvääseen, joka sisälsi kationi-ioninvaihtohartsia (B.D.H., Zerolit 225, SRC 13» RSO^H; 150 g; vastaregeneroitu happosyklissä) 15 61 032 ja eluoitiin vedellä. Kerättiin neljä 100 ml:n hapanta fraktiota. Kaksi ensimmäistä fraktiota yhdistettiin ja haihdutettiin, jolloin saatiin kumi.
Tämä haihdutettiin uudelleen veden kanssa kloorivedyn poistamiseksi, jolloin jäännöksenä saatiin tahmea kiinteä aine, jota trituroitiin eetteri/di-oksaanin (l:l) kanssa. Saatiin 1,8 g valkeata kiinteätä ainetta, sp. 118-121°C (hajoaa). Väkevöimällä emäliuokeet saatiin vielä 2,02 g kiinteätä ainetta, sp. 126-130°C (hajoaa). Uudelleenkiteyttämällä toinen erä dioksaa-ni/eetteristä saatiin 1,82 g £[(N-bentsyylioksikarbonyyli-L-alanyyli)amino}· metyyli|-metyylifosfiinihappoa, sp. 129-131°C (hajoaa); [a]^° * -26,0° (c = 1 i<> vedessä).
b) Lopputuotteen valmistus 1,5 g (0,005 moolia) "f[ (N-bentsyylioksikarbonyyli-L-alanyyli)-amino]-metyylij’-metyylifosfiinihappoa liotettiin 75 mlsaan metanolia ja 75 raitaan vettä. Tähän lisättiin peräkkäin 0,2 g 5-^jista palladiumhiilikatalysaatto-ria ja 5 tippaa jääetikkaa. Seosta hydrattiin huoneen lämpötilassa ja normaalipaineessa. Jäännös haihdutettiin kolme kertaa n-propanolin (4 50 ml) kanssa, jolloin saatiin noin 0,80 g valkeata kiinteätä ainetta, sp. noin 146°C (hajoaa). Uudelleenkiteyttämällä tämä kiinteä aine 5 ml setä metanolia ja 10 mlssta asetonia saatiin 0,63 g [(L-alanyyliamino)metyyli]-metyylifos-fiinihappoa, sp. noin 240°C (hajoaa); hygroskooppinen; [a]^ = +26,9° (c = 1 °Jo vedessä).
Esimerkki 10 i (lR)-l-(L-alanyyliamlno)-etyvllfosfonlhanno a) Lähtöaineen valmistus: 14,1 g (0,168 moolia) kiinteätä natriumbikarbonaattia lisättiin liuokseen, jossa oli 7 g (0,056 moolia) (lR,S)-l-aminoetyylifosfonihappoa 280 ml:ssa vettä ja 140 ml:ssa etanolia, samalla sekoittaen 0°C:ssa. Sekoitusta jatkettiin 0°C:ssä, samalla kun seokseen lisättiin tipoittain noin 15 minuutissa 17»9 g (0,056 moolia) N-bentsyylioksikarbonyyli-L-alaniinin N-hydroksisukkinimidiesteriä 140 mltssa lämmintä etanolia. Viimeksimainittu liuos pestiin 70 ml:lla etanolia. Heterogeenista seosta sekoitettiin tunnin ajan 0°C:ssa ja sitten vielä 16 tuntia huoneen lämpötilassa, jolloin saatiin homogeeninen seos. Seos haihdutettiin ja uudelleen haihdutettiin veden (200 ml) kanssa, jolloin saatiin kumi, joka liuotettiin 500 ml:aan vettä. Liuos uutettiin ensin 500 ml:11a kloroformia ja sitten kahdella 250 ml:n annoksella kloroformia, tehtiin happameksi pH 2:een noin 80 ml :11a 2-n kloorively-happoa ja uutettiin jälleen 500 ml:11a kloroformia ja sitten kahdella 250 ml:n annoksella kloroformia. Vesikerros väkevöitiin ja vietiin pylvääseen, jossa oli kationinvaihtohartsia (B.D.H., Zerolit 225, SRC 13, RSO^H; 750 g; vasta- 16 61 032 regeneroitu happosyklieeä). Pylväs eluoitiin vedellä, koottiin 6 250 ml:n fraktiota. Ensimmäiset 4 fraktiota yhdistettiin, haihdutettiin ja uudelleen-haihdutettiin veden kanssa kloorivedyn poistamiseksi. Saatiin lopullisena jäännöksenä (lR,S)-l-[(N-bentsyylioksikarbonyyli-L-alanyyli)-amino]-etyyli-foefonihappoa, joka erotettiin seuraavalla tavalla:
Viimeksi saatu jäännös liuotettiin 400 ml saan vettä ja titrattiin 1-m bentsyyliamiinilla pH-arvoon 4*5» kulutus 75 ml} teoreettinen kulutus 56 ml. Saatu liuos väkevöitiin ja kiteytettiin vedestä, jolloin saatiin 5,3 g (lS)-l-[(N-bentsyylioksikarbonyyli-L-alanyyli)amino]-etyylifosfoni-hapon bentsyyliamiinisuolaa, sp. 210-215°C. Väkevöimällä emäliuokset ja sitten uudelleenkiteyttämällä jäännös vedestä saatiin ensimmäinen erä (0,59 g) (lR)-l-[(N-bentsyylioksikarbonyyli-L-alanyyli)aminoJ-etyylifosfonihapon bentsyyliamiinisuolaa, sp. 226-228°C (hajoaa); [o]^= -32,3° (c « 1 $ etik-kahapossa) ja toinen erä (0,825 g), sp. 225-227°C (hajoaa); [a]D * -53*0° (c = 1 io etikkahapossa). Uudelleenkiteyttämällä ensimmäinen erä vedestä saatiin 0,333 g puhdasta R-stereoisomeerin bentsyyliamiinisuolaa, sp. 226-228°C (hajoaa); [a]^0 = -33,1° (c = 1 $ etikkahapossa). b) Lopputuotteen valmistus 1,1 g (2,5 mmoolia) (lR)-l-[(N-bentsyylioksikarbonyyli-L-alanyyli)-arainoj-etyylifosfonihapon bentsyyliamiinisuolaa liuotettiin 4 ml saan 2-n ammoniumhydroksidia, ja liuos vietiin pylvääseen, jossa oli kationivaihto-hartsia (B.D.E., Zerolit 225, SRC 13, RSO^H; 120 g; vastaregeneroitu happo-syklissä) ja eluoitiin vedellä. Koottiin 200 ml hapanta eluaattia, joka väkevöitiin 100 mlsksi. Tähän lisättiin peräkkäin 100 ml metanolia, 0,3 g 5 ista palladiumhiilikatalysaattoria ja 3 tippaa jääetikkaa. Seosta hydrattiin huoneen lämpötilassa ja normaalipaineessa. Katalysaattori suodatettiin pois, ja liuotin haihdutettiin. Jäännöksenä saatu kumi haihdutettiin kolmen n-pro-panoliannoksen (a' 50 ml) kanssa, jolloin saatiin 0,6 g kumimaista kiinteätä ainetta, sp. noin 275-280°C (hajoaa). Uudelleenkiteyttämällä vedestä ja etanolista saatiin 0,2 g (lR)-l-(L-alanyyliamino)-etyylifos-fonihappoa, sp. 295-296°C (hajoaa); [aj^°= -44,0° (c = 1 56 vedessä).
Esimerkki 11 : (lR)-l-(L-alanyyllamino)-etyyllfosfonlhappo a) Lähtöaineen valmistus:
Liuosta, jossa oli 30 g (0,24 moolia) (lR,S)-l-aminoetyylifosfoni-happoa 120 ml:ssa 4-n natriumhydroksidia, sekoitettiin 14°C:esa, kun siihen lisättiin 180 ml (0,72 moolia) 4-n natriumhydroksidia ja 102 g (0,60 moolia) benteyyliklooriformiaattia vuorotellen neljänä annoksena. Sekoitusta jatkettiin, 2 tunnin kuluttua lämpötila oli kohonnut 20°C:seen. Seosta sekoitet- 17 61032 tiin vielä 16 tuntia huoneen lämpötilassa. Sitten lisättiin 600 ml eetteriä, ja seosta sekoitettiin voimakkaasti 2 tuntia ylimääräisen bentsyyli-klooriformiaatin uuttamiseksi. Kerrokset erotettiin, ja vesikerros tehtiin happameksi pH-arvoon 2 noin 110 ml:11a 5~n kloorivetyhappoa, lämpötila pidettiin tällöin 10°C:ssa. Saatu liete väkevöitiin pieneen tilavuuteen hiilidioksidin poistamiseksi. Jäännös liuotettiin 100 ml:aan 2-n natriumhydrok-sidia ja 50 mliaan vettä, ja liuos vietiin pylvääseen, jossa oli kationin-vaihtohartsia (B.D.H., Zerolit 225, SRC 13, RSO^H; 750 g» vastaregeneroitu happosyklissä) ja eluoitiin vedellä. Saatiin noin 3*2 litraa hapanta eluaat-tia, joka haihdutettiin huoneen lämpötilassa ja uudelleenhaihdutettiin kolmen 500 ml:n annoksen kanssa vettä. Jäännös liuotettiin veteen ja se sai kiteytyä. Kiteet suodatettiin, pestiin jääkylmällä vedellä ja kuivattiin; saanto 39,2 g; sp. 111-113°C (hajoaa). Haihduttamalla yhdistetyt suodokset ja kiteyttämällä jäännös 75 ml:sta vettä ja 10 ml:sta metanolia jäähdyttäen saatiin lisäsääntönä 6,51 g, sp. 110-112°C (hajoaa). Kaikkiaan saatiin 45,71 g (lR,S)-l-(bentsyylioksikarbonyyliamino)-etyylifosfonihappoa, joka tunnistettiin monobentsyyliamiinisuolan sulamispisteen avulla, 196-197°C (hajoaa).
42,2 g (163 mmoolia) (lR,S)-l-(bentsyylioksikarbonyyliamino)-etyyli-fosfonihappoa liuotettiin 100 ml:aan metanolia. Liuosta käsiteltiin liuoksella, jossa oli 30,8 g (81,5 mmoolia) kiniinitrihydraattia 100 mlsssa metanolia, ja seosta sekoitettiin 3 tuntia huoneen lämpötilassa ja sitten yön yli 0°C:ssa. (lS)-l-(bentsyylioksikarbonyyliamino)-etyylifos£onihapon kinii-nisuola suodatettiin ja pestiin metanolilla. Yhdistetyt suodokset haihdutettiin, ja jäännös liuotettiin 300 ml:aan 2-n ammoniumhydroksidia. Liuos uutettiin kolmella 300 ml:n annoksella kloroformia. Jokainen kloroformiuutos takaisinpestiin 150 mltlla vettä. Vesiuutokset yhdistettiin, väkevöitiin ja vietiin sitten pylvääseen, jossa oli kationinvaihtohartsia (B.D.H., Zerolit 225, SRC 13, RSOjH; 750 g; vastaregeneroitu happosyklissä). Eluoimalla vedellä saatiin noin 2,3 litraa hapanta eluaattia, joka haihdutettiin. Jäännös haihdutettiin ensin kolmen 200 ml:n vesiannoksen kanssa sitten kolmen 300 ml:n metanoliannoksen kanssa, jolloin saatiin noin 24 g kumimaista jäännöstä.
Tämä kumi liuotettiin 100 ml:aan kuivaa metanolia, ja liuosta käsiteltiin dehydroabietyyliamiinin liuoksella [82 mmoolia; vastaregeneroitu 28,4 g:sta (82 mmoolia) dehydroabietyyliamiiniasetaattia ammoniumhydroksidi/petroli-eetterilläj. Seos sai seistä 0°C:ssa, se suodatettiin ja suodos pestiin metanolilla ja vedellä. Saatiin 47,4 g raakaa (lR)-l-(bentsyylioksikarbonyy-liamino)etyylifosfonihapon dehydroabietyyliamiinisuolaa, sp. 189-194°C (ha- 18 61 032 20 o joaa); [α]^ = +16,8° (c = 0,5 $ metanolissa). Uudelleenkiteyttämällä metano-lista ja vedestä saatiin 33,0 g puhdasta (lR)-l-(bentsyylioksikarbonyyli-amino)-etyylifosfonihapon dehydroabietyyliamiinisuolaa, sp. 202-205°C (hajoaa) [o]p° = +18,1° (c = 0,5 $ metanolissa).
8,0 g (14 mmoolia) (lR)-l-bentsyylioksikarbonyyliamino)-etyylifoefo-nihapon dehydroabietyyliamiinisuolaa jaettiin 2-n ammoniumhydroksidin (100 ml) ja petrolieetterin (100 ml, kiehuma-alue 60-80°C) kesken. Seosta ravisteltiin voimakkaasti, ja sitten kerrokset erotettiin. Vesikerros uutettiin kahdella 50 ml:n annoksella petrolieetteriä. Kumpikin petrolieetteri-uutos takaisinuutettiin kahdella 50 ml:n annoksella vettä. Vesiuutokset yhdistettiin ja haihdutettiin huoneen lämpötilassa, jolloin saatiin öljy.
Tämä öljy liuotettiin veteen ja vietiin pylvääseen, jossa oli kationinvaih-tohartsia (B.D.H., Zerolit 225, SRC 13, RSO^H; 250 g; vastaregeneroitu happo-syklissä), ja eluoitiin vedellä. Saatiin 800 ml hapanta fraktiota, joka sitten väkevöitiin 400 ml:ksi. Tähän väkevöitteeseen lisättiin peräkkäin 2,0 g 10- $:ista palladiumhiilikatalysaattoria, 400 ml metanolia ja 0,2 ml jääetik-kaa. Seosta hydrattiin. Katalysaattori suodatettiin pois, ja liuotin haihdutettiin. Jäännös haihdutettiin kolmen 100 ml:n n-propanoliannoksen kanssa ja trituroitiin eetterin kanssa, jolloin saatiin kiinteä aine, sp. 285-288°C (hajoaa). Uudelleenkiteyttämällä vedestä ja etanolista saatiin 1,0 g (1R)- l-aminoetyylifosfonihappoa, sp. 294-205°C (hajoaa); [oe]^0 - -16,9° (c - 2 $ 1-n natriumhydroksidissa).
0,4 g (3,2 mmoolia) (lR)-l-aminoetyylifosfonihappoa, 14 ml vettä ja 7 ml etanolia sekoitettiin 10°C:ssa, seokseen lisättiin 0,806 g (9,6 mmoolia) natriumbikarbonaattia annoksittain. Seosta sekoitettiin 0°C:ssa, samalla kun siihen lisättiin nopeasti tipoittain kuumaa N-bentsyylioksikarbonyy- 11- L-alaniinin N-hydroksisukkinimidiesterin (1,024 g, 3,2 mmoolia) liuos 8 ml:ssa etanolia. Seosta sekoitettiin 3 tuntia 0°C:Bsa ja sitten 16 tuntia huoneen lämpötilassa. Seoksen jatkokäsittely suoritettiin analogisesti esimerkin 10a) kanssa viemällä seos pylvääseen, jossa oli kationinvaihtohartsia, ja muuttamalla tuote bentsyyliamiinisuolaksi. Saatiin 0,26 g (1R)-1-[(N-bentsyylioksikarbonyyli-L-alanyyli)amino]-etyylifosfonihapon benteyyliamii-nisuolaa, sp. 229-231°C (hajoaa); [a]^ - -34*2° (c - 1 $ jääetikassa).
b) Lopputuotteen valmistuet
Analogisesti esimerkin 10b) kanssa käyttäen lähtöaineena (1R)-1-[(N-bentsyylioksikarbonyyli-L-alanyyli)amino]-etyylifosfonihapon bentsyyliamii-nisuolaa saatiin (lR)-l-(L-alanyyliamino)etyylifosfonihappo, sp. 295~296°C (hajoaa); [a]p°- -45,6° (c « 1 # vedessä).
19 61 032
Esimerkki 12 : (lR)-l-(L-alanyyll-L-alanyyliamino)-etyyllfosfonlhappo a) Lähtöaineen valmistus:
Analogisesti esimerkin 7a) kanssa käyttäen lähtöaineena N-bentsyyli-okeikarbonyyli-L-alaniinin N-hydroksisukkinimidiesteriä ja (lR)-l-(L-alanyy-liamino)-etyylifosfonihappoa saatiin (lR)-l-[(N-bentsyylioksikarbonyyli-L-alanyyli-L-alanyyli)amino]-etyylifosfonihapon bentsyyliamiinisuola, sp. 247-250°C (hajoaa); [a]^°= -45*1° (c = 0,5 fo etikkahapossa).
b) Lopputuotteen valmistus:
Analogisesti esimerkin 7b) kanssa käyttäen lähtöaineena (1R)-1-[(N-bentsyylioksikarbonyyli-L-alanyyli-L-alanyyli)amino]-etyylifosfonihapon bentsyyliamiinisuolaa saatiin (lR)-l-(L-alanyyli-L-alanyyliamino)-etyyli-fosfonihappo, sp. 283-284°C (hajoaa); [a]^ = -66,8° (c = 0,5 i vedessä).
Esimerkki 15 : (L-alanyyllamlno)-metyylifoefonihappo a) Lähtöaineen valmistus: 9*6 g (0,03 moolia) N-bentsyylioksikarbonyyli-L-alaniinin N-hydroksisukkinimidiesteriä ja 5*26 g (0,03 moolia) dimetyyliaminometyylifosfo-naattihydrokloridia sekoitettiin 65 ml:ssa kuivaa dimetyyliformamidia. Seokseen lisättiin sekoittaen tipoittain 4*2 ml kuivaa trietyyliamiinia, jolloin lämpötila pidettiin alle 20°C. Sitten seosta sekoitettiin yli yön huoneen lämpötilassa. Trietyyliamiinihydrokloridi suodatettiin ja peetiin pienellä määrällä dimetyyliformamidia..Suodos haihdutettiin öljypumpputyhjössä 40°C:n haudelämpötilassa. Jäännöksenä saatua öljyä käsiteltiin 40 ml:11a vettä, ja saatu seos uutettiin neljällä 40 ml:n annoksella kloroformia. Yhdistetyt orgaaniset faasit pestiin pienellä määrällä vahvaa kaliumkarbo-naattiliuosta ja kuivattiin sitten natriumsulfaatilla. Natriumsulfaatti suodatettiin pois, ja suodos haihdutettiin ensin vesipumpputyhjössä ja sitten öljypumpputyhjössä. Saatiin.11,0 g dimetyyli-[(N-bentsyylioksikarbo-nyyli-L-alanyyli)amino]-metyylifosfonaattia öljynä, jolla oli odotettu NMR-spektri.
b) Lopputuotteen valmistus: 11,0 g dimetyyli-[(N-bentsyylioksikarbonyyli-L-alanyyli)amino]-metyy-lifosfonaattia liuotettiin 40 ml:aan 35 $:ista bromivedyn liuosta jääetikas-sa, ja seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 2 tuntia. Sitten lisättiin sekoittaen 300 ml eetteriä, sekoitus lopetettiin ja eetteri dekantoitiin. Tämä toistettiin käyttäen 200 ml eetteriä ja sitten 100 ml eetteriä. Jäännös liuotettiin 50 ml:aan metanolia, ja saatuun liuokseen lisättiin 6 ml propy-leenioksidia 10 ml:ssa metanolia. Seos sai seistä useita tunteja, muodostunut valkea sakka suodatettiin ja pestiin metanolilla ja etanolilla. Tuote so 61032 kuivattiin vakiopainoon 4»6θ g (84 $:n kokonaissaanto), sp. 289-291°C (hajoaa). Kiteytettäessä uudelleen 20 ml:sta kiehuvaa vettä lisäämällä JO ml etanolia saatiin 4t03 g (L-alanyyliamino)-metyylifosfonihappoa, sp. 29^-296°C (hajoaa); [a]p^ * +31*0° (c = 1 $ vedessä).
Esimerkki 14 t (L-alanyyliamino)-metyylifosfonihappo a) Lähtöaineen valmistus:
Analogisesti esimerkin 13a) kanssa käyttäen lähtöaineena N-bentsyyli-oksikarbonyyli-L-alaniinin N-hydroksisukkinimidiesteriä ja dietyyliamino-metyylifosfonaattihydrokloridia saatiin dietyyli-[(N-bentsyylioksikarbo-nyyli-L-alanyyli)amino]-metyylifosfonaatti kiinteänä aineena, sp. 72-74°C.
b) Lopputuotteen valmistus:
Analogisesti esimerkin 13b) kanssa, mutta käyttäen reaktiossa di-etyyli-[(N-bentsyylioksikarbonyyli-L-alanyyli)amino]-metyylifosfonaattia ja bromivety/jääetikkaa reaktioajan ollessa 22 tuntia, saatiin (L-alanyyli-amino)-metyylif osf onihappo, sp. 293-294°C (hajoaa); [e]^ * +31*8° (c=l $ vedessä).
-Esimerkki 15:(L-fenyylialanyyliamino)-metyylifosfonihappo a) Lähtöaineen valmistus:
Analogisesti esimerkin 13a) kanssa käyttäen lähtöaineena N-bentsyyli-oksikarbonyyli-L-fenyylialaniinin N-hydroksieukkinimidiesteriä ja dimetyyli-aminometyyli-fosfonaattihydrokloridia saatiin dimetyyli-[(N-bentsyylioksi-kerbonyyli-L-fenyylialanyyli)amino]-metyylifosfonaatti öljynä, jolla oli odotettu NMR-spektri.
b) Lopputuotteen valmistus:
Analogisesti esimerkin 13b) kanssa, mutta suorittamalla reaktio dimetyyli-[(N-bentsyylioksikarbonyyli-L-fenyylialanyyli)amino]-metyylifos-fonaatin ja bromivety/jääetikkaseoksen kesken 2 tunnin aikana saatiin (L-fenyylialanyyliamino)-metyylifosfonihappo, sp. 266-268°C (hajoaa); [<x]*° = +74,5° (c = 0,8 io vedessä).
Balmerkki l6t (L-leusvvllamlnn^-metyyHfnflfnnihannn a) Lähtöaineen valmistus:
Analogisesti esimerkin 13a) kanssa käyttäen lähtöaineena N-bentsyyli-oksikarbonyyli-L-leusiinin N-hydroksisukkinimidiesteriä ja dimetyyliamlno-metyylifosfonaattihydrokloridia saadiin dimetyyli-[(N-bentsyylioksikarbo-nyyli-L-leusyyli)amino]-metyylifosfonaatti kiteisenä kiinteänä aineena, sp. 90-91°C; [e]J°- -24,3° (c - 1 # metanolissa).
b) Lopputuotteen valmistus:
Analogisesti esimerkin 13b) kanssa, mutta suorittamalla reaktio di-metyyli-[(N-bentsyylioksikarbonyyli-L-leusyyli)amino]-metyylifoefonaatin 21 61032 ja bromivety/jääetikkaseoksen kesken 2 tunnin aikana, saatiin (L-leusyyli- amino)-metyylifosfonihappo, sp. aluksi 262-264°C (hajoaa) ja kiteytettynä o 20 uudelleen vesipitoisesta metanolista lopuksi 263-265 C (hajoaa)j [«JD = +62,2° (c = 1 ia vedessä).
Esimerkki 17; (L-alanyyllamino)-metyylifosfonlhappo a) Lähtöaineen valmistus:
Analogisesti esimerkin 13a) kanssa käyttäen lähtöaineena 64,0 g N-bentsyylioksikarbonyyli-L-alaniinin N-hydroksisukkinimidiesteriä ja 35,1 g dimetyyliaminometyylifosfonaattihydrokloridia saatiin 73,3 g dimetyyli-[(N-bentsyylioksikarbonyyli-L-alanyyli)amino]-metyylifosfonaattia öljynä.
Tätä öljyä keitettiin 100 tuntia palauttaen, jolloin kosteuden pääsy estettiin, seoksessa, jossa oli 200 ml trimetyylikloorisilaania ja 100 ml aseto-nitriiliä. Sitten seos jäähdytettiin, suodatettiin ja haihdutettiin tyhjössä rotaatiohaihduttimessa. Jäännös haihdutettiin useampaan kertaan tolu-eenin kanssa. Lopuksi jäännös liuotettiin 250 mljaan dioksaania, ja liuosta käsiteltiin 25 ml:11a vettä. Joidenkin minuuttien kuluttua kiteytyminen alkoi, ja se sai jatkua yli yön. Erottunut kiinteä aine suodatettiin, pestiin etyyliasetaatilla ja kuivattiin tyhjössä. Saatiin 29,0 g kiinteätä ainetta, sp. 147-148°C (hajoaa). Lisää tuotetta (20,0 g), jolla oli sama sulamispiste, saatiin väkevöimällä emäliuoksia ja käsittelemällä sitten etyyliasetaatilla. Kiinteät aineet yhdistettiin ja kiteytettiin uudelleen liuottamalla 1,5 tilavuusosaan haaleata metanolia, suodattamalla ja lisäämällä sitten suodokseen 15 tilavuusosaa etyyliasetaattia. Saatiin 39»5 g puhdasta [(N-bentsyylioksikarbonyyli-L-alanyyli)amino]-metyylifosfonihappoa, sp. 153-155°C (hajoaa); [ot]^° - -28,9° (c - 1 # vedessä).
b) Lopputuotteen valmistus: 63,2 g [(N-bentsyylioksikarbonyyli-L-alanyyli)amino]-metyylifosfoni-happoa metanolin (600 ml) ja väkevän kloorivetyhapon (20 ml) seoksessa hyd-rattiin huoneen lämpötilassa ja normaalipaineessa käyttäen katalysaattorina 10 $:ista palladiumhiiltäj hydrausta jatkettiin, kunnes vedyn sitoutuminen lakkasi. Katalysaattori suodatettiin pois ja pestiin metanolilla»-Suodosta käsiteltiin 30 ml:11a propyleenioksidia, ja seos sai seistä jääkaapissa yön yli. Kiinteä aine suodatettiin, pestiin metanolilla ja eetterillä ja kuivattiin fosforipentoksidilla tyhjössä. Kiinteä aine liuotettiin 80 ml: aan kiehuvaa vettä, suodatettiin, ja liuosta käsiteltiin 120 ml:lla etanolia. Seos jäähdytettiin, ja sen annettiin sitten seistä yli yön jääkaapissa. Kiinteä aine suodatettiin, pestiin hyvin etanolilla ja kuivattiin tyhjössä fosforipentoksidilla. Saatiin 31,85 g (L-alanyyliamino)-metyylifosfonihap- 22 610 32 poa, sp. 295-294°C (hajoaa); [α]^ = +33,8° (c = 1 $ vedessä).
Esimerkki 18 : (L-fenyylialanyyliatnino)-metyyllfosfonihappo a) Lähtöaineen valmistus:
Analogisesti esimerkin 17a) kanssa käyttäen lähtöaineena N-bentsyyli-oksikarbonyyli-L-fenyylialaniinin N-hydroksisukkinimidiesteriä ja dimetyyli-aminometyylifosfonaattihydrokloridia saatiin [(N-bentsyylioksikarbonyyli-L-fenyylialanyyli)amino]-metyylifosfonihappoa, sp. 183-184°C (hajoaa); [a]^ = -10,9° (c = 1 io metanolissa).
b) Lopputuotteen valmistus:
Analogisesti esimerkin 17b) kanssa käyttäen lähtöaineena [(N-bentsyy-lioksikarbonyyli-L-fenyylialanyyli)amino]-metyylifosfonihappoa saatiin (L-fenyylialanyyliamino)-metyylifosfonihappo, sp. 264-266 C (hajoaa); [aJD = +76,2° (c = 1 vedessä).
Esimerkki 1^: (L-leusyyllamino)-metyylifosfonihappo a) Lähtöaineen valmistus
Analogisesti esimerkin 17a) kanssa käyttäen lähtöaineena N-bentsyyli-oksikarbonyyli-L-leusiinin N-hydroksisukkinimidiesteriä ja dimetyyliamino-metyylifosfonaattihydrokloridia saatiin [(N-benteyylioksikarbonyyli-L-leu-syyli)amino]-metyylifosfonihappo, sp. 129-130°C; [a]^°= -29,2d (c = 1 $ vedessä).
b) Lopputuotteen valmistus:
Analogisesti esimerkin 17b) kanssa käyttäen lähtöaineena [(N-bentsyy-lioksikarbonyyli-L-leusyyli)amino]-metyylifosfonihappoa saatiin (L-leusyyli-amino)metyylifosfonihappo, sp. 263-265°C (hajoaa); [a]^ = +62,2° (c » 1 vedessä).
Esimerkki 20 : (L-alanyyll-L-alanyyliamino)-metyylifosfonihappo a) Lähtöaineen valmistus:
Analogisesti esimerkin 13a) kanssa käyttäen lähtöaineena 64,0 g N-bentsyylioksikarbonyyli-L-alaniinin N-hydroksisukkinimidiesteriä ja 35,1 g dimetyyliaminometyylifosfonaattihydrokloridia saatiin 73,3 g dimetyyli-[(N-bentsyylioksikarbonyyli-L-alanyyli)amino]-metyylifosfonaattia öljynä. Tämä öljy liuotettiin 350 ml:aan metanolia ja liuosta käsiteltiin 40 ml:lla 5-n kloorivedyn metanoliliuosta. Seosta hydrattiin useamman tunnin ajan huoneen lämpötilassa ja normaalipaineessa 10 $:isen palladiumhiilikatalysaat-torin (6 g) läsnäollessa käyttäen sooda-kalkki-loukkua, kunnes vedyn sitoutuminen päättyi. Katalysaattori suodatettiin, ja suodos haihdutettiin tyhjössä 100 ml:ksi. Lisättiin 300 ml etyyliasetaattia, jolloin kiteytyminen alkoi, sen annettiin täydellistyä seisottamalla 0°C:Bsa yli yön. Kiinteä 25 61 032 aine suodatettiin, pestiin peräkkäin etyyliasetaatti/metanolilla ja etyyliasetaatilla ja kuivattiin sitten tyhjössä. Saatiin 40,9 g kiinteätä ainetta, joka kiteytettiin metanoli/etyyliasetaatista, jolloin saatiin 40,5 g dimetyy-li-(L-alanyyliamino)metyylifosfonaattihydrokloridia, sp. 168-170°C (hajoaa); [a]^= -5*05° (c « 1 io vedessä).
24*65 g dimetyyli-(L-alanyyliamino)-metyylifosfonaattihydrokloridia ja 52,0 g N-bentsyylioksikarbonyyli-L-alaniinin N-hydroksisukkinimidieste-riä sekoitettiin 200 ml:ssa kuivaa dimetyyliformamidia samalla, kun lisättiin tipoittain 20°C:ssa 14 ml kuivaa trietyyliamiinia. Seosta sekoitettiin yli yön, ja sitten trietyyliamiinihydrokloridi suodatettiin pois ja pestiin pienellä määrällä dimetyyliformamidia. Suodos haihdutettiin öljypumppu-tyhjössä, jäännöstä käsiteltiin 150 ml sila vettä ja sitten uutettiin neljällä 125 mlsn annoksella kloroformia. Yhdistetyt kloroformikerrokset pestiin 20 piisellä kaliumkarbonaattiliuoksella, erotettiin ja kuivattiin natriumsulfaatilla. Natriumsulfaatti suodatettiin, suodos haihdutettiin ensin vesipumpputyhjössä ja sitten öljypumpputyhjössä, ja jäännös liuotettiin 100 ml saan etyyliasetaattia. Lisättiin noin 100 ml eetteriä, kunnes liuos kiteytymisen alkaessa hieman sameni. Jäähdytettiin yli yön, kiinteä aine suodatettiin, pestiin peräkkäin etyyliasetaatti/eetterillä (lsl) ja eetterillä, kuivattiin sitten tyhjössä. Uudelleenkiteytys suoritettiin 200 mlssta kiehuvaa etyyliasetaattia lisäämällä 200 ml eetteriä, jolloin saatiin 27,8 g dimetyyli-[(N-bentsyylioksikarbonyyli-L-alanyyli-L-alanyyli)-amino]-metyylifosfonaattia, sp. 106-108°C; [a]^0 * -37*4° (c = 1 $ jääeti-kassa).
b) Lopputuotteen valmistus s 4,05 g dimetyyli-[(N-bentsyylioksikarbonyyli-L-alanyyli-L-alanyyli-amino]-metyylifosfonaattia sekoitettiin 14 mlsssa bromivedyn 55 $:ista (w/v) liuosta jääetikassa 5 tuntia. Lisättiin 100 ml eetteriä, ja seosta sekoitettiin joitakin minuutteja, sitten se sai seistä. Päällä oleva neste dekantoitiin, ja jäännöksenä saatua kumia käsiteltiin samalla tavalla vielä kahdella 50 ml:n eetteriannoksella. Jäännös liuotettiin 15 mitään metanolia, ja liuosta käsiteltiin 2,5 mltlla propyleenioksidia. Lähes välittömästi erkani kiinteä aine. Jäähdytettiin tunnin ajan, sitten seos suodatettiin, ja kiinteä aine pestiin metanolilla ja kuivattiin tyhjössä. Uudelleen-kiteyttämällä vesi/etanolista saatiin 1,91 g (L-alanyyli-L-alanyyliamino)-metyylifosfonihappoa, sp. 280-281°C (hajoaa); [a]^ * -40*0° (g = 1 $ vedessä).
Esimerkki 21: (L-leusyyli-L-alanyyliamino)-metyylifosfonihappo a) Lähtöaineen valmistus:
Analogisesti esimerkin 20a) mukaan saatiin dimetyyli-(L-alanyyli- 24 61 0 32 amino)-metyylifo8fonaattihydrokloridista ja N-bentsyylioksikarbonyyli-L-leusiinin N-hydroksisukkinimidiesteristä dimetyyli-[(N-bentsyylioksikarbo-nyyli-L-leusyyli-L-alanyyli)amino]-metyylifoefonaatti, ap. 117-H9°C; [a]^ = -42,55° (c * 1 in metanolissa).
b) Lopputuotteen valmistus:
Analogisesti esimerkin 20b) kanssa saatiin dimetyyli-[(N-bentsyyli-oksikarbonyyli-L-leusyyli-L-alanyyli)amino]-metyylifoefonaatista (L-leusyy- 2o li-L-alanyyliamino)-metyylifosfonihappo, sp. 263-265°C (hajoaa); [®Jjj = -12,8° (c = 1 $ vedessä).
Esimerkki 22:(L-alanyyll-L-leusyyliamino)-metyyllfosfonihappo a) Lähtöaineen valmistus:
Analogisesti esimerkin 20a) kanssa saatiin dimetyyli-(L-leusyyli-amino)-metyylifosfonaattihydrokloridista ja N-bentsyylioksikarbonyyli-L-alaniinin N-hydroksisukkinimidiesteristä dimetyyli-[(N-bentsyylioksikarbo-nyyli-L-alanyyli-L-leusyyli)amino]-metyylifosfonaatti, sp. 163-165°C; [ot]j^= -51,6° (c = 1 io metanolissa).
b) Lopputuotteen valmistus:
Analogisesti esimerkin 20b) kanssa saatiin dimetyyli-[(N-bentsyyli-oksikarbonyyli-L-alanyyli-L-leu8yyli)-amino]-metyylifoefonaatista (L-ala- 2o nyyli-L-leusyyliamino)-metyylifosfonihappo, sp. 263-264°C (hajoaa); [α]β = -23,4° (c = 1 # vedessä).
Esimerkki 25: (L-alanyyll-L-alanyyllamlno)-metyylifosfonihappo a) Lähtöaineen valmistus
Analogisesti esimerkin 20a) kanssa, mutta käyttämällä N-bentsyyli-oksikarbonyyli-L-alaniinin 2,4,5-trikloorifenyyliesteriä N-hydroksisukkini-midieeterin sijasta, saatiin dimetyyli-[(N-bentsyylioksikarbonyyli-L-alanyyli-L-alanyyli)amino]-metyylifosfonaatti, sp. 106-108°C; [o]^°* -36,7° (c = 1 96 jääetikassa).
b) Lopputuotteen valmistus:
Analogisesti esimerkin 20b) kanssa saatiin dimetyyli-[(N-bentsyyli-oksikarbonyyli-L-alanyyli-L-alanyyli)-amino]-metyylifoefonaatista (L-ala-nyyli-L-alanyyliamino)-metyylif osf onihappo, sp. 281-282°C (hajoaa); [oc]^ = -39*8° (c - 1 io vedessä).
Esimerkki 24: (L-alanyvliamino)-metyylifoBfonlhappo a) Lähtöaineen valmistus
Analogisesti esimerkin 20a) alkuosan kanssa saatiin N-bentsyylioksi-karbonyyli-L-alaniinin N-hydroksisukkinimidiesteristä ja dimetyyliamino-metyylifosfonaattihydrokloridista dimetyyli-(L-alanyyliamino)-metyyli-fosfonaattihydrokloridi.
55 61 032 b) Lopputuotteen valmistus: 4,93 g dimetyyli-(L-alanyyliamino)-metyylifosfonaattihydrokloridia sekoitettiin 27 ml:ssa bromivedyn 35 Riista liuosta jääetikassa 3 tuntia. Seosta jatkokäsiteltiin analogisesti esimerkin 13b) kanssa. Saatiin 3,04 g (L-alanyyliamino)-metyylifosfonihappoa, sp. 294-295°C (hajoaa); [ot]^°= +30,3° (c = 1 io vedessä).
Esimerkki 25 : (lR)-l-(L-alanyyliamino)-etyyllfosfonihappo a) Lähtöaineen valmistus 139,7 g (0,5 moolia) dimetyyli-l-bentsyyliaminoetyylifosfonaattihydrokloridia liuotettiin 1000 ml saan metanolia. Liuosta hydrattiin huoneen lämpötilassa ja normaalipaineessa 10 piisen palladiumhiilen (15 g) läsnäollessa useita tunteja, kunnes vedyn sitoutuminen oli lakannut. Katalysaattori suodatettiin, ja suodos haihdutettiin tyhjössä. Jäännöksenä saatu dimetyyli-1-aminoetyylifosfonaattihydrokloridi liuotettiin 500 ml:aan kuivaa dimetyy-liformamidia, ja liuosta käsiteltiin 160 g:lla (0,5 moolia) N-bentsyylioksi-karbonyyli-L-alaniinin N-hydroksisukkinimidiesteriä. Seosta sekoitettiin ja lämpötila pidettiin alle 0°C, ja seokseen lisättiin tipoittain 70 ml kuivaa trietyyliamiinia. Seosta sekoitettiin vielä yli yön huoneen lämpötilassa.
Jatkamalla esimerkin 13a) mukaisesti saatiin jäännös, josta käsittelemällä 600 ml:lla kuivaa eetteriä saatiin 72,5 g dimetyyli-(lS)-l-[(N- bentsyylioksikarbonyyli-L-alanyyli)amino^-etyylifosfonaattia, sp. 134-135°C; 20 o [ot)jj = +14,9 (c 1 metanolissa). Haihduttamalla emäliuokeet saatiin noin 100 g kumia, joka koostui pääasiallisesti vastaavasta R-isomeerista.
b) Lopputuotteen valmistus: 100 g kohdassa a) saatua kumia käsiteltiin 250 ml:11a bromivedyn 45 $: ista liuosta jääetikassa 5 tuntia huoneen lämpötilassa. Sitten lisättiin sekoittaen 750 ml eetteriä, sekoitus lopetettiin ja eetteri dekantoitiin. Menettely toistettiin vielä kahdella 250 ml:n annoksella eetteriä. Jäännös liuotettiin 250 ml:aan metanolia, ja saatuun liuokseen lisättiin 50 ml propyleenioksidia liuotettuna 50 ml:aan metanolia. Useamman tunnin seiso-tuksen jälkeen saatu sakka suodatettiin ja pestiin metanolilla ja eetteriin. Tuote kuivattiin vakiopainoon 46,1 g, jolloin sillä oli sulamispiste 283-285°C (hajoaa). Uudelleenkiteyttämällä vesi/etanoliseoksista saatiin 36,5 g (lR)-l-(L-alanyyliamino)-etyylifoBfonihappoa, sp. 295-296°C (hajoaa); [a]^= -46,3° (c - 1 56 vedessä).
Esimerkki 26: (lR)-l-(L-alanyyliamino)-bentsyylifosfonlhajjpo a) Lähtöaineen valmistus:
Analogisesti esimerkin 13a) kansea N-bentsyylioksikarbonyyli-L-ala-niinin N-hydroksisukkinimidiesteristä ja dimetyyli-l-aminobentsyylifosfo- 26 61032
naattihydrokloridista saatiin ieomeeriseos. Kromatografoimalla silikagee-lilla isopropanoli/etyyliasetaattieluentilla ja sitten kiteyttämällä etyyliasetaatti/eetteristä saatiin eristettyä dimetyyli-(lS)-l-[(N-bentsyy-lioksikaxbonyyli-L-alanyyli)-amino]-bentsyylifosfonaatti, sp. 103-105°C
OC\ rs [[a]jj = -46,6 (c « 1 io metanolissa) J ja dimetyyli-(lR)-l-[(N-bentsyyli-oksikarbonyyli-L-alanyyli)amino]-bentsyylifosfonaatti, sp. 120-122 C [[α]^*= +12,3° (c = 1 $ metanolissa)].
b) Lopputuotteen valmistus:
Analogisesti esimerkin 13b) kanssa saatiin dimetyyli-(lR)-l-[(N- bentsyylioksikarbonyyli-L-alanyyliaminoj-bentsyylifosfonaatista (lR)-l- o 20 (L-alanyyliamino)-bentsyylifosfonihappo, sp. 251-252 C (hajoaa); [ot]D = +69,1° (c = 1 io vedessä).
Esimerkki 27:(lR)-l-(L-alanyyli-L-alanyyliamino)-etyylifosfonihanno a) Lähtöaineen valmistus: 100 g esimerkissä 25 a) saatua kumia liuotettiin 500 ml saan metano-lia, joka sisälsi 0,3 moolia kloorivetyä. Liuosta hydrattiin huoneen lämpötilassa normaalipaineessa 10 ^:isen palladiumhiilen (8 g) läsnäollessa, kunnes vedyn sitoutuminen oli päättynyt. Katalysaattori suodatettiin pois, suodos haihdutettiin tyhjössä, ja jäännös trituroitiin asetonin kanssa. Uudelleen kiteyttämisen jälkeen metanoli/eetteristä saatiin 42 g dimetyyli-(lR)-l-(L-alanyyliamino)-etyylifoefonaattihydrokloridia, sp. 195-190°C (hajoaa); [ot]^ = -51»1° (c = 1 $ vedessä).
Analogisesti esimerkin 13a) kanssa saatiin 13 g:sta dimetyyli-(lR)-l-(L-alanyyliamino)-etyylifosfonaattihydrokloridia ja 16 g:sta N-bentsyyli-oksikarbonyyli-L-alaniinin N-hydroksisukkinimidiesteriä 16 g dimetyyli-(lR)-l-[ (’N-bentsyylioksikarbonyyli-L-alanyyli-L-alanyyli)-amino ]-etyyl if os-fonaattia, sp. 149-151°Ci [®]^° = -65*5° (c = 1 $ metanolissa).
b) Lopputuotteen valmistus:
Analogisesti esimerkin 13b) kanssa saatiin dimetyyli-(lR)-l-[(N-bentsyylioksikarbonyyli-L-alanyyli-L-alanyyli)-amino]-etyylifosfonaatista (lR)-l-(L-alanyyli-L-alanyyliamino)-etyylifosfonihappo, sp. 279-280°C (hajoaa); [a]^° = -70,1° (c = 1 $ vedessä).
Esimerkki 28 ; (lR)-l-(glyByvll-L-alanYYHaininr>'>~fltYyTtfoHfonlhftrmf» a) Lähtöaineen valmistus
Analogisesti esimerkin 27a) kansea dimetyyli-(lR)-l-(L-alanyyli-amino)-etyylifosfonaattihydrokloridista ja N-bentsyylioksikarbonyyligly-eiinin N-hydroksisukkinimidiesteristä saatiin dimetyyli-(lR)-l-[(N-bentsyy-liokeikarbonyyliglysyyli-L-alanyyli)amino]-etyylifosfonaatti öljynä, jolla oli odotettu NMR-spektri.
27 61 0 32 b) Lopputuotteen valmistus:
Analogisesti esimerkin 13b) kanssa saatiin dimetyyli-(lR)-[(N-bents-yylioksikarbonyyliglysyyli-L-alanyyli)-amino]-etyylifosfonaatista (1R)-1-(glysyyli-L-alanyyliamino)-etyylifosfonihappo, sp. 289-291°C (hajoaa); [oc]^°= -93»7° (c = 1 io vedessä).
Esimerkki 29 : (lR)-l~(L-pcolarli-L-alanxyliamino)-etyylifosf onihappohemihydreattl a) Lähtöaineen valmistus
Analogisesti esimerkin 27a) kanssa saatiin dimetyyli-(lR)-l-(L-ala-nyyliamino)-etyylifosfonaattihydrokloridista ja N-bentsyylioksikarbonyyli-L-proliinin N-hydroksisukkinimidiesteristä dimetyyli-(lR)-l-[(N-bentsyyli-oksikarbonyyli-L-prolyyli-L-alanyyli)amino]-etyylifosfonaatti öljynä, jonka NMR-spektri oli odotetun mukainen.
b) Lopputuotteen valmistus:
Analogisesti esimerkin 13b) kanssa saatiin dimetyyli-(lR)-l-[(N-bentsyylioksikarbonyyli-L-prolyyli-L-alanyyli)-amino]-etyylifosfonaatista (1R)-1-(L-prolyyli-L-alanyyliamino)etyylifosfonihappohemihydraatt i sp. 263-265°C (hajoaa); [a]^® = -101° (c = 1 $ vedessä).
Esimerkki 30: (1R)-1-(glyvyli-L-fllapYy^-Tf-fl'lfl,Tnr1^flm<no)-e1ayllfosf(aihappd a) Lähtöaineen valmistus:
Analogisesti esimerkin 27a) kanssa saatiin dimetyyli-(lR)-l-[(N-bentsyylioksikarbonyyli-L-alanyyli-L-alanyyli)-amino]-etyylifosfonaatista kumimaista dimetyyli-(lR)-l-(L-alanyyli-L-alanyyliamino)-etyylifosfonaatti-hydrokloridia. Viimeksimainittu saatettiin reagoimaan N-bentsyylioksikar-bonyyliglysiinin N-hydroksisukkinimidiesterin kanssa analogisesti esimerkin 13a) kanssa, jolloin saatiin dimetyyli-(lR)-l-[(N-bentsyylioksikarbonyyli- glysyyli-L-alanyyli-L-alanyyli)amino]-etyylifosfonaatti, sp. 162-164°C; 20 [a] = -55*0° (c = 1 # metanolissa).
b) Lopputuotteen valmistus:
Analogisesti esimerkin 13b) kanssa saatiin dimetyyli-(lR)-l-[(N-bentsyylioksikarbonyyliglysyyli-L-alanyyli-L-alanyyli)amino J-etyylifosfo-naatista (lR)-l-(glysyyli-L-alanyyli-L-alanyyliamino)-etyylifosfonihappo, sp. 314-316°C (hajoaa); [o]^= -97»5° (c * 1 $6 1-n natriumhydroksidissa).
Esimerkki 31:(lR)-l-(L-prolyyli-L-alanyyliamino)-etyylifosfonihappo a) Lähtöaineen valmistus:
Analogisesti esimerkin 30a) kanssa aaatiin dimetyyli-(lR)-l-(L-alanyyli-L-alanyyliamino)-etyylifofifonaattihydrokloridista ja N-bentsyyli-oksikarbonyyli-L-proliinin N-hydroksisukkinimidiesteristä dimetyyli-(lR)-l-[(N-bentsyylioksikarbonyyli-L-propyyli-L-alanyyli-L-alanyyli)aminoJ-etyyli· foefonaatti, sp. 181-183°C; [a]^= -100,3° (c = 1 io metanolissa).
28 61 032 b)Lopputuotteen valmistus:
Analogisesti esimerkin 13b) kanssa saatiin dimetyyli-(lR)-l-[(N-bentsyylioksikarbonyyli-L-prolyyli-L-alanyyli-L-alanyyli)amino]-etyyli-fosfonaatista (lR)-l-(L-prolyyli-L-alanyyliamino)-etyylifosfonihappo, sp. 305-306°C (hajoaa); [ot]^°= -134,4° (c = 1 f0 vedessä).
Esimerkki 32: (lR)-1-( glyBjyliglysyyli-L-alanyyllamino)-etyylifbsfonihappo a) Lähtöaineen valmistus:
Analogisesti esimerkin 27a) kanssa saatiin dimetyyli-(lR)-l-[(N-bentsyylioksikarbonyyli-glysyyli-L-alanyyli)-amino]-etyylifosfonaatista dimetyyli-(lR)-l-(glysyyli-L-alanyyliamino)-etyylifosfonaattihydrokloridia. Tämä yhdiste saatettiin reagoimaan N-bentsyylioksikarbonyyliglysiinin N-hydroksisukkinimidiesterin kanssa analogisesti esimerkin 13a) kanssa, jolloin saatiin dimetyyli-(lR)-l-[(N-bentsyylioksikarbonyyliglysyyliglysyyli-L-alanyyli)amino]-etyylifosfonaatti, sp. 124-127°C; [a]^° = -36,6° (c = 1 °fo metanolissa), b) Lopputuotten valmistus:
Analogisesti esimerkin 13b) kanssa saatiin dimetyyli-(lR)-l-[(N-bentsyylioksikarbonyyliglysyyliglysyyli-L-alanyyli)amino]-etyylifosfonaatista (lR)-l-(glysyyliglysyyli-L-alanyyliamino)-etyylifosfonihappo, sp. 288-289°C (hajoaa); [a]^® = -61,5° (c = 1 $ 0,1-n natriumhydroksidissa).
.Esimerkki 33 : (lR)-l-glysyyliamino-etyyllfosfonihappo a) Lähtöaineen valmistus:
Analogisesti esimerkin 2a) kanssa saattamalla (lR,S)-l-aminoetyyli-fosfonihappo reagoimaan N-bentsyylioksikarbonyyliglysiinistä ja isobutyyli-klooriformiaatista saadun seka-anhydridin kanssa saatiin (1R,S)-1-[(N-bentsyylioksikarbonyyliglysyyli)amino]-etyylifosfonihapon bentsyyliamiini-suola, sp. 204-206°C (hajoaa).
2,1 g tätä yhdistettä muutettiin vapaaksi hapoksi ioninvaihdolla. Saatu happo titrattiin (+)-a-metyylibentsyyliamiinilla pH-arvoon 4,0, liuos haihdutettiin Ja haihdutettiin uudelleen metanolin kanssa. Jäännös kiteytettiin metanolin (10 ml) ja veden (0,5 ml) seoksesta 0°C:ssa, jolloin saatiin 0,85 8 raakaa (+)-a-metyylibentsyyliamiinisuolaa, sp. 202-203°C (hajoaa). Kiteyttämällä butanoli/vesiseoksesta saatiin (lR)-l-[(N-bentsyylioksikarbo-nyyliglysyyli)amino]-etyylifosfonihapon (+)-a-metyylibentsyyliamiinisuola, sp. 203-204°C (hajoaa); [a]*°= -14,8° (c = 0,9 vedessä).
b) Lopputuotteen valmistus:
Analogisesti esimerkin Ib) kanssa saatiin (lR)-l-[(N-bentsyyli-oksikarbonyyliglysyyli)amino]-etyylifosfonihapon (+)-a-metyylibentsyyli- 25 61032 amiinisuolasta (lR)-l-glysyyliaminoetyylifosfonihappo, sp. 277~280°C (hajoaa); [ot]p° = -69,6° (c = 1 vedessä).
Esimerkki 54 : (lR)-l-glysyyliamino-etyylifosfonihappo a) Lähtöaineen valmistus: 2,5 g (20 mmoolia) (lR)-l-aminoetyylifosfonihappoa sekoitettiin 5 ml.': ssa vettä 0°C:ssa, ja samalla lisättiin 5,6 ml (40 mmoolia) trietyyliamiinia ja 10 ml dimetyyliformamidia. Sitten lisättiin yhtenä annoksena 7,65 g (25 mmoolia) kiinteätä N-bentsyylioksikarbonyyliglysiinin N-hydroksisukkini-midiesteriä. Seosta sekoitettiin 3 tuntia 0°C:ssa ja sitten 16 tuntia huoneen lämpötilassa. Seoksen jatkokäsittely tapahtui analogisesti esimerkin 11a) kanssa. Saatiin 4,3 g (lR)-l-[(N-bentsyylioksikarbonyyliglysyyli)amino]-etyylifosfonihapon bentsyyliamiinisuolaa, sp. 19S-200°C (hajoaa); [ot]D * -16,6° (c = 1 ^ vedessä).
b) Lopputuotteen valmistus:
Analogisesti esimerkin Ib) kanssa saatiin (lR)-l-[(N-bentsyylioksi-karbonyyliglysyyli)aminoj-etyylifosfonihapon bentsyyliamiinisuolasta (1R)-1-glysyyliaminoetyylifosfonihappo, sp. 279-281°C (hajoaa); [ot]p°= - 69,4° (c - 1 $ vedessä).
Esimerkki 35 t (lR)-l-(L-prolyyliamino)-etyylifosfonihappo a) Lähtöaineen valmistus: 0,^8 g (7,0 mmoolia) (lR)-l-aminoetyylifosfonihappoa sekoitettiin 100 ml:ssa vettä 5uC:ssa, ja liuokseen lisättiin 1,41 g (14 mmoolia) trietyyliamiinia ja 100 ml etanolia. Sitten lisättiin 2,42 g (7,0 mmoolia) kiinteätä N-bentsyylioksikarbonyyli-L-proliinin N-hydroksieukkinimidiesteriä ja pestiin 50 ml:lla etanolia. Seosta sekoitettiin 0°Cjesa 2 tuntia ja sitten huoneen lämpötilassa 72 tuntia. Seoksen jatkokäsittely tapahtui samalla tavalla kuin esimerkissä 11a). Uudelleenkiteytyksen jälkeen metanoli/eet-teristä saatiin 2,3 g (lR)-l-[(N-bentsyylioksikarbonyyli-L-prolyyli)aminoj-etyylifosfonihapon bentsyyliamiinisuolaa, sp. 206-209°C (hajoaa); [cr]^° = -53,1° (c = 0,6 ia jääetikassa).
b) Lopputuotteen valmistus: 2,3 g (lR)-l-[ (N-bentsyylioksikarbonyyli-L-proj,yyli)amino]-etyyli-fosfonihapon bentsyyliamiinisuolaa lisättiin sekoitettuun bromivedyn jää-etikkaliuokseen (45 $) ja pestiin 2,5 ml:11a jääetikkaa. Seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 6 tuntia ja sitten lisättiin sekoittaen 75 ml eetteriä. Päällä oleva liuos dekantoitiin, ja jäännöstä käsiteltiin jälleen 75 ml:11a eetteriä. Saatu rakeinen kiinteä aine liuotettiin 30 ml:aan metanolia, ja liuosta käsiteltiin propyleenioksidin (5 ml) liuoksella 10 ml:ssa metanolia.
50 61 032
Useamman tunnin seisotuksen jälkeen sakka suodatettiin, pestiin metanolilla ja eetterillä ja kuivattiin. Kiteyttämällä vesi/etanolista saatiin 0,39 g (lR)-l-(L-prolyyliamino)-etyylifosfonihappoa, sp. 291-293°C (hajoaa), [«]*>« -92,3° (c = 0,5 $ vedessä).
Esimerkki 56 : (lR)-l-(L-lysyyliamino)-etyylifo!3fonihapon hapan okjaJaattisuola a) Lähtöaineen valmistus: 2 6
Analogisesti esimerkin 34a) kanssa eaatiin N ,N -bis(bentsyylioksi- O (j karbonyyli)-L-lysiinin N-hydroksisukkinimidiesteristä (lR)-l-[(Ν',N -bis-(bentsyylioksikarbonyyli)-L-lysyyli)amino]-etyylifosfonihappo, sp. 195“197°C j(hajoaa); [«]jj = -17»5° (c = 0,5 $ etanolissa).
b) Lopputuotteen valmistus:
2 S
Analogisesti esimerkin Ib) kanssa saatiin (1R)-1-[(N ,N -bis(bentsyy-lioksikarbonyyli)-L-lysyyli)amino]-etyylifosfonihaposta (lR)-l-(L-lysyyli-anino)-etyylifosfonihapon hapan oksalaattisuola (paremman kiteytymisen vuoksi), sp. 265°C (hajoaa); [a]^ = -10,4° (o = 0,5 $ vedessä).
Esimerkki 57 ; (lB)-l-(L-leusyyliaminoj-etyylifosfonihappo a) Lähtöaineen valmistus:
Analogisesti esimerkin 34a) kanssa saatiin N-bentsyylioksikarbonyyli-L-leusiinin N-hydroksisukkinimidiesteristä (lR)-l-[(N-bentsyylioksikarbo-nyyli-L-leusyyli)aaino]-etyylifosfonihapon bentsyyliamiinisuola, sp. 228-230°C (hajoaa); [a]^= -32,0° (c * 0,5 jääetikassa).
b) Lopputuotteen valmistus:
Analogisesti esimerkin Ib) kanssa saatiin (lR)-l-[(N-bentsyylioksi-karbonyyli-L-leusyyli)amino]-etyylifosfonihapon bentsyyliamiinisuolasta (lR)-l-(L-leusyyliamino)-etyylifosfonihappo, sp. 238-240°C (hajoaa); [a]J° = -14,2° (c = 0,5 $ vedessä).
Esimerkki 38 : (lR)-l-tL-valyyliaminoJ-etyyllfoBfonihappo a) Lähtöaineen valmistus: N-bentsyylioksikarbonyyli-L-valiinista, N-etyylimorfoliinista ja (lR)-l-aminoetyylifosfonihaposta saatiin analogisesti esimerkin 2a) kanssa (IE)—1—[(N-bentsyylioksikarbonyyli-L-valyyli)amino]-etyylifosfonihapon bentsyyliamiinisuola, sp. 251-252°C (hajoaa); [a]^= -25,4° (c = 0,5 i» jääetikassa).
b) Lopputuotteen valmistus:
Analogisesti esimerkin 35b) kanssa saatiin (lR)-l-[(N-bentsyylioksi-karbonyyli-L-valyyli)amino]-etyylifosfonihapon bentsyyliamiinisuolasta (lR)-l-(L-valyyliamino)-etyylifosfonihappo, sp. 276-277°C (hajoaa); [e]J°- -9»3° (c =0,5 i» vedessä).
31 61032
Esimerkki 39 :(IR)-I-(L-fenyylialanyyliamino)-etyylifosfcnihappo a) Lähtöaineen valmistus:
Analogisesti esimerkin 34a) kanssa saatiin N-bentsyylioksikarbonyy-li-L-fenyylialaniinin N-hydroksisukkinimidiesteristä (lR)-l-[(N-bentsyylioksikarbonyyli-L-f enyylialanyyli)amino]-etyylifosfonihappo, sp. 212-215°C (hajoaa); [a]^= -16,3° (c = 0,5 f0 etanolissa).
b) Lopputuotteen valmistus:
Analogisesti esimerkin Ib) kanssa saatiin (lR)-l-[(N-bentsyylioksi-karbonyyli-L-fenyylialanyyli)amino]-etyylifosfonihaposta (lR)-l-(L-fenyyli-alanyyliamino)etyylifosfonihappo, sp. noin 254°C (hajoaa); [a] f - -22,3° (c = 0,5 io vedessä).
Esimerkki 401'(.L-fenyylialanyyli-L-alanyyliamino)-mety.vlifosf onihappo a) Lähtöaineen valmistus:
Analogisesti esimerkin 7a) kanssa käyttäen ioninvaihtajaa metanoli/ vesiseoksessa saatiin N-bentsyylioksikarbonyyli-L-fenyylialaniinin N-hydroksisukkinimidiesteristä [(N-bentsyylioksikarbonyyli-L-fenyylialanyyli-L-fenyy-li-alanyyli-L-alanyyli)amino]-metyylifosfonihapon bentsyyliamiinisuola, sp. 233-234°C (hajoaa); [a]^°= -2,7° (c = 0,6 $ jääetikassa).
b) Lopputuotteen valmistus:
Analogisesti esimerkin 7b) kanssa saatiin [(N-bentsyylioksikarbonyyli-L-f enyy lialanyyli-L-alanyyli ) amino ]-metyylif osf onihapon bentsyyliamii-nisuolasta (L-fenyylialanyyli-L-alanyyliamino)-metyylifosfonihappo, sp. 262-264°C (hajoaa); [a]^= -9,6° (c = 0,5 $ vedessä).
Esimerkki 41 ·' (L-fenyylialanyyli-L-fenyylialanyyliamino)-metyylifosfonihappq a) Lähtöaineen valmistus:
Analogisesti esimerkin 7a) kanssa käyttäen ioninvaihtajaa metano-liesa saatiin N-bentsyylioksikarbonyyli-L-fenyylialaniinin N-hydroksisukkinimidiesteristä ja (L-fenyylialanyyliamino)-metyylifosfonihaposta [(N-bentsyylioksikarbonyyli-L-f enyylialanyyli-L-f enyylialanyyli) amino J-metyylifosfonihappo, sp. 200-210°C (hajoaa).
b) Lopputuotteen valmistus:
Analogisesti esimerkin 7*>) kanssa saatiin [ (N-bentsyylioksikarbonyyli-L-f enyylialanyyli-L-f enyylialanyyli )amino]-metyylif osf onihaposta (L-fe-nyylialanyyli-L-fenyylialanyyliamino)-metyylifosfonihappo, sp. 275-277°C
0Γ\ Λ (hajoaa); [aj^^g « +10,4° (c = 0,2 <$> 1-n natriumhydroksidissa).
Esimerkki 42 :(L-alanyyli-L-fenyylialanyyliamino)-metyylifosfonihappo a) Lähtöaineen valmistus:
Analogisesti esimerkin Ja.) kanssa käyttäen ioninvaihtajaa metanoli/-ve8iseoksessa saatiin N-bentsyylioksikarbonyyli-L-alaniinin N-hydroksisukki- 52 61 032 nimidiesteristä ja (L-fenyylialanyyliami.no)-metyylifosfonihaposta [(N-bentsyylioksikarbonyyli-L-alanyyli-L-f enyylialanyyli)-amino]-metyylif osfo-nihapon bentsyyliamiinieuola, sp. 232-234°C (hajoaa); [a]^0 = + 3,0 (c = 0,6 $ jääetikassa).
b) Lopputuotteen valmistus:
Analogisesti esimerkin 7b) kanssa saatiin [(N-bentsyylioksikarbonyy-li-L-alanyyli-L-fenyylialanyyli)amino]-metyylifosfonihapon bentsyyliamiini-suolasta (L-alanyyli-L-fenyylialanyyliamino)-metyylifosfonihappo, sp. 278-280°C (hajoaa); [α]^°= -+8,6° (c « 0,54 $ 1-n natriumhydroksidissa).
Esimerkki 43 (lR)-l-(L-fenyylialanyyli-L-alanyyliamino)-etyylifosfonihappo a) Lähtöaineen valmistus:
Analogisesti esimerkin 34a) kanssa käyttäen ioninvaihtajaa etanoli/ vesiseoksessa saatiin N-bentsyylioksikarbonyyli-L-fenyylialaniinin N-hydrok-sisukkinimidiesteristä ja (lR)-l-(L-alanyyliamino)-etyylifosfonihaposta (lR)—1—[(N-bentsyylioksikarbonyyli-L-fenyylialanyyli-L-alanyyli)amino]-etyylifosfonihappo, sp. 220-221°C (hajoaa); [a]^° -27*1° (c = 1,1 56 jääetikassa) .
b) Lopputuotteen valmistus:
Analogisesti esimerkin 35b) kanssa saatiin (lR)-l-[(N-bentsyylioksi-karbonyyli-L-fenyylialanyyli-L-alanyyli)-amino]-etyylifosfonihaposta (lR)-l-(L-fenyylialanyyli-L-alanyyliamino)-etyylifosfonihappo, sp. 285-287°C (hajoaa); [a]^"* = -28,1° (c = 0,5 i° 1-n natriumhydroksidissa).
Esimerkki 44: (1R)-1~(L-valyyli-L-alanyyliamino)-etyylifosfonihappo a) Lähtöaineen valmistus:
Analogisesti esimerkin 2a) kanssa käyttäen kuitenkin petrolieetteriä tolueenin sijasta ja metanoli/vesiseosta ioninvaihtajassa saatiin N-bentsyy-lioksikarbonyyli-L-valiinistä ja (lR)-l-(L-alanyyliamino)-etyylifosfonihaposta (lR)—1—[(N-bentsyylioksikarbonyyli-L-valyyli-L-alanyyli)aaino]-etyy-lifosfonihapon bentsyyliamiinieuola, sp. 250-251°C (hajoaa); [o]^° = -47>2° (c = 1 $ jääetikassa).
h)Lopputuotteen valmistus:
Analogisesti esimerkin 55¾) kanssa saatiin (lR)-l-[(N-bentsyylioksi-karbonyyli-L-valyyli-L-alanyyli)amino]-etyylifosfonihapon bentsyyliamiini-suolasta (lR)-l-(L-valyyli-L-alanyyliamino)-etyylifosfonihappo, sp. 263-265°C (hajoaa); -44,6° (c - 0,5 $ vedessä).
Esimerkki 45: (lR)-l-(L-alanyyli-L-alanyyli-L-a3anyyliamino)-etyyli-_fosfonihappo a)Lähtöaineen valmistus:
Analogisesti esimerkin 35a·) kanssa saatiin N-bentsyylioksikarbonyyli-L-alaniinin N-hydroksisukkinimidiesteristä ja (lR)-l-(L-alanyyli-L- 53 61 032 alanyyliamino)-etyylifosfonihaposta (lR)-l-[(N-bentsyylioksikarbonyyli-L-alanyyli-L-alanyyli-L-alanyyli)amino]-etyylifosfonihappo, sp. 255-257°C (hajoaa); [α]^°- -62,0° (c = 0,4 $ jääetikassa).
b) Lopputuotteen valmistus:
Analogisesti esimerkin 55b) kanssa saatiin (lR)-l-[(N-bentsyyli- oksikarbonyyli-L-alanyyli-L-alanyyli-L-alanyyli)amino-etyylifosf onihaposta (lR)-l-(L-alanyyli-L-alanyyli-L-alanyyliamino)-etyylifosfonihappo, sp.
312-315°C (hajoaa); [aj^° = -101° (c = 0,55 $ 1-n natriumhydroksidissa).
Esimerkki 46: (lR)-l-(L-alanyyli-L-alanyyli-L-alanyyli-L-alanyyli-amino)-etyylifo8fonihappo a) Lähtöaineen valmistus:
Analogisesti esimerkin 45a) kanssa saatiin N-bentsyylioksikarbonyyli-L-alaniinin N-hydroksisukkinimidiestereistä ja (lR)-l-(L-alanyyli-L-alanyy-li-L-alanyyliamino)etyylifosfonihaposta tekemällä happameksi ja ilman uudelleen suoritettua ioninvaihtoa vapaa happo. Tämä suodatettiin, pestiin vedellä ja asetonilla ja kuivattiin, jolloin saatiin puhdas vapaa happo, (lR)-l-DjT- bentsyylioksikarbonyyli-L-alanyyli-L-alanyyli-L-alanyyli-L-alanyyli-L-alaiyyli) amino]-etyylifosfonihappo, sp. 270-275°C (hajoaa); -71,7° (o - 0,54 λ- 1- n natriumhydroksidisea).
b) Lopputuotteen valmistus:
Analogisesti esimerkin 45b) kanssa saatiin (1R)-1- [(N-bentsyylioksikar-bonyyli-L-alanyyli-L-alanyyli-L-alanyyli-L-alanyyli)amino]-etyylifosfonihaposta (lR)-l-(L-alanyyli-L-alanyyli-L-alanyyli-L-alanyyliamino)-etyylifosfonihappo, sp. 517-519°C (hajoaa); [a]^ * -114° (c * 0,51 $> 1-n natriumhydroksidissa).
Esimerkki 47 : (lR)-l-(L-alanyyliamino)-2-fenyylietyylifosfoninappo a) Lähtöaineen valmistus:
Analogisesti esimerkin 11a) kanssa saatiin N-bentsyylioksikarbonyy-li-L-alaniinin N-hydroksisukkinimidiesteristä ja (lR,S)-l-amino-2-fenyyli-etyylifosfonihaposta (lR,S)-l-[(N-bentsyylioksikarbonyyli-L-alanyyli)amino]- 2- fenyylietyylifosfonihappo diastereoisomeeriseoksena. Seos jaettiin muuttamalla se bentsyyliamiinisuolaksi ja kiteyttämällä vedestä. Saatiin (lR)-l- [(N-bentsyylioksikarbonyyli-L-alanyyli)amino]-2-fenyylietyylifosfonihapon bentsyyliamiinisuola, sp. 225-226°C (hajoaa); [a]^°= -46,5° (c = 0,55 $ jääetikassa).
b) Lopputuotteen valmistus:
Analogisesti esimerkin Ib) kanssa käyttäen ioninvaihtoon kuitenkin metanolia saatiin (lR)-l-[(N-bentsyylioksikarbonyyli-L-alanyyli)amino]-etyy-lifosfonihapon bentsyyliamiinisuolasta (lR)-l-(L-alanyyliamino)-2-fenyyli- etyylifosfonihappo, sp. 250-260°C (hajoaa)^ ^°= -*+0,3° (c = 0,21 % vedessä).

Claims (3)

3“ 610 3 2
1. Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten peptidyylifosfonihappojen valmistamiseksi, joilla on yleinen kaava I 3 2 1 IT R R O 'rilli H N—CH—CO- -NH—CH—CO- -NH—CH—P—OH I (L) (L) (R) | OH jossa R1 on vety, metyyli, fenyyli tai bentsyyli, 2.3 . . . R ja R ovat kumpikin vety, metyyli, isopropyyli, isobutyyli, bentsyyli tai 3 1 U-aminobutyyli, edellyttäen, että R ei ole vety, kun n on nolla ja R on vety tai fenyyli, n on 0, 1, 2 tai 3, ja 1 p (L) ja (R) merkitsevät näin merkityn hiiliatomin konfiguraatiota, kun R , R ja 3 . ... . R eivät ole vetyjä, ja näiden farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojen valmistamiseksi, tunnettu siitä, että yhdisteestä, jolla on yleinen kaava II R30 _ R20 R1 0 I I I II u R —NH—CH—CO- -NH—CH—C0--NH—CH—P—R II * (L) (L) _]n (R) L ~ R 1 . . . k . . jossa R ja n merkitsevät samaa kuin edellä, R on hydroksi tai alempi alkoksi, 1 20 . 30 . 2 R on suojaryhma, ja R :11a ja R :11a on mikä tahansa R :n ja vastaavasti R :n merkitys tai ne merkitsevät H-aminobutyyliä, jonka aminoryhmä on suojattu, lohkaistaan suojaryhmä(t), ja haluttaessa saatu kaavan I mukainen yhdiste muutetaan farmaseuttisesti hyväksyttäväksi suolaksi.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että n on 0, 1 tai 2.
3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan (1R)-l-(L-alanyyliamino)etyylifosfonihappoa.
FI760084A 1975-01-27 1976-01-15 Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt anvaendbara peptidylfosfonsyror FI61032C (fi)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GB3417/75A GB1533239A (en) 1975-01-27 1975-01-27 Peptide derivatives of phosphonic and phosphinic acids
GB341775 1975-01-27
GB4778775 1975-11-20
GB4778775 1975-11-20

Publications (3)

Publication Number Publication Date
FI760084A FI760084A (fi) 1976-07-28
FI61032B FI61032B (fi) 1982-01-29
FI61032C true FI61032C (fi) 1982-05-10

Family

ID=26238285

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
FI760084A FI61032C (fi) 1975-01-27 1976-01-15 Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt anvaendbara peptidylfosfonsyror

Country Status (26)

Country Link
US (1) US4016148A (fi)
JP (1) JPS598278B2 (fi)
AR (1) AR218850A1 (fi)
AT (1) AT359217B (fi)
AU (1) AU502919B2 (fi)
BR (1) BR7600449A (fi)
CA (1) CA1065857A (fi)
CH (2) CH624965A5 (fi)
DD (1) DD123756A5 (fi)
DE (1) DE2602193C2 (fi)
DK (1) DK143755C (fi)
DO (1) DOP1976002544A (fi)
ES (1) ES444622A1 (fi)
FI (1) FI61032C (fi)
FR (1) FR2298335A1 (fi)
GR (1) GR58609B (fi)
HU (1) HU176800B (fi)
IE (1) IE42466B1 (fi)
IL (1) IL48835A (fi)
LU (1) LU74249A1 (fi)
NL (1) NL177021C (fi)
NO (1) NO146429C (fi)
PH (1) PH16560A (fi)
PL (1) PL99096B1 (fi)
PT (1) PT64743B (fi)
SE (2) SE424328B (fi)

Families Citing this family (31)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2351125A1 (fr) * 1976-05-14 1977-12-09 Hoffmann La Roche Derives peptidiques et procede pour leur preparation
GB1577232A (en) * 1976-05-14 1980-10-22 Roche Products Ltd Peptide derivatives of phosphonic and phosphinic acids
IT1081511B (it) * 1976-07-13 1985-05-21 Hoffmann La Roche Derivati di peptidi e loro preparazione
GB1585076A (en) * 1976-07-13 1981-02-25 Roche Products Ltd Peptides of phosphonic and phosphinic acids
GB1585275A (en) * 1976-07-21 1981-02-25 Roche Products Ltd Peptide derivatives of phosphonic and phosphinic acids
US4179464A (en) * 1977-11-14 1979-12-18 Schultz Robert J Preparation of N-(phosphonoacetyl)-L-aspartic acid
EP0002039A1 (en) * 1977-11-19 1979-05-30 Ciba-Geigy Ag Phosphonous acid derivatives, processes for their preparation and their use in combating microorganisms
CA1108125A (en) * 1977-12-23 1981-09-01 Frank R. Atherton Olgiopeptide derivatives of phosphonic acid
US4178306A (en) * 1978-08-10 1979-12-11 Parsons Jack L Preparation of N-(phosphonoacetyl)-L-aspartic acid
US4154759A (en) * 1978-08-10 1979-05-15 Henryk Dubicki Preparation of N-(phosphonoacetyl)-L-aspartic acid
US4331591A (en) * 1978-10-05 1982-05-25 Ciba-Geigy Corporation Chemical process for the production of α-aminophosphonic acids and peptide derivatives
DE2966111D1 (en) * 1978-10-05 1983-10-06 Ciba Geigy Ag Process for influencing plant growth
EP0026867A1 (de) * 1979-09-28 1981-04-15 F. HOFFMANN-LA ROCHE & CO. Aktiengesellschaft Peptidylphosphonsäuren, deren Herstellung und Verwendung und sie enthaltende pharmazeutische Präparate
JPS5831992A (ja) * 1981-08-19 1983-02-24 Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd 新規生理活性物質ｋ−４およびその製造法
JPS57156498A (en) * 1981-03-20 1982-09-27 Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd Novel physiologically active substance k-26
JPS5885897A (ja) * 1981-11-17 1983-05-23 Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd 光学活性な１−アミノ−２−（４−ヒドロキシフエニル）エチルホスホン酸およびその誘導体
EP0103867B1 (en) * 1982-09-17 1986-12-17 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Phosphorus-containing peptide derivative
PT77368A (en) * 1982-09-27 1983-10-01 Lilly Co Eli Improved process for preparing immunomodulating agents or rela-ting there to
US4482488A (en) * 1982-09-27 1984-11-13 Eli Lilly And Company Antibiotic A53868 and process for production thereof
US4463092A (en) * 1982-09-27 1984-07-31 Eli Lilly And Company Process for production antibiotic A53868
DE3669512D1 (de) 1985-06-11 1990-04-19 Ciba Geigy Ag Mikrobizide mittel.
FR2584077B1 (fr) * 1985-06-28 1988-07-08 Irceba L-di ou tripeptides possedant une activite biologique utilisable en medecine humaine et veterinaire, procede pour leur obtention et medicament en contenant
GB8726714D0 (en) * 1987-11-14 1987-12-16 Beecham Group Plc Compounds
HUT52785A (en) * 1988-03-03 1990-08-28 Squibb & Sons Inc Process for producing 1,2-hydroxy-phosphonates and derivatives
JPH03505875A (ja) * 1988-07-08 1991-12-19 スミスクライン・ベックマン・コーポレイション レトロウイルス・プロテアーゼ結合ペプチド
US5468732A (en) * 1989-02-16 1995-11-21 Pfizer Inc. Phosphorus containing renin inhibitors
WO1990009172A1 (en) * 1989-02-16 1990-08-23 Pfizer Inc. Phosphorus containing renin inhibitors
US5321153A (en) * 1992-06-15 1994-06-14 Monsanto Company Process for making chiral alpha-amino phosphonates selected novel chiral alpha-amino phosphonates
US5473092A (en) * 1992-11-20 1995-12-05 Monsanto Company Synthesis of optically-active phosphono analogs of succinates
GB0022556D0 (en) * 2000-09-14 2000-11-01 Oxoid Ltd Improvements in or relating to selective agents for biological cultures
AU2001286121A1 (en) * 2000-09-18 2002-04-02 Newcastle Upon Tyne Hospitals Nhs Trust Selective growth media

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3893992A (en) * 1970-11-19 1975-07-08 Rohm & Haas N-acylated peptides of amino aromatic sulfonic acids and their derivatives
GB1445087A (en) * 1972-11-08 1976-08-04 Ici Ltd Preparing n-phosphonomethylglycine and nitrile intermediates therefor
US3954860A (en) * 1973-08-06 1976-05-04 Monsanto Company Phosphorous compounds
US3969398A (en) * 1974-05-01 1976-07-13 Monsanto Company Process for producing N-phosphonomethyl glycine

Also Published As

Publication number Publication date
DOP1976002544A (es) 1982-11-29
NO760231L (fi) 1976-07-28
NL7600539A (nl) 1976-07-29
CH624965A5 (fi) 1981-08-31
IL48835A0 (en) 1976-03-31
JPS598278B2 (ja) 1984-02-23
FI760084A (fi) 1976-07-28
FR2298335A1 (fr) 1976-08-20
HU176800B (en) 1981-05-28
AR218850A1 (es) 1980-07-15
DE2602193C2 (de) 1982-07-08
NL177021C (nl) 1985-07-16
DK143755C (da) 1982-03-22
IL48835A (en) 1979-05-31
JPS5198223A (fi) 1976-08-30
DK29576A (da) 1976-07-28
DK143755B (da) 1981-10-05
AU1035476A (en) 1977-07-21
GR58609B (en) 1977-11-10
BR7600449A (pt) 1976-08-31
AT359217B (de) 1980-10-27
CA1065857A (en) 1979-11-06
SE7710045L (sv) 1977-09-07
PH16560A (en) 1983-11-18
LU74249A1 (fi) 1977-08-03
DE2602193A1 (de) 1976-07-29
CH623829A5 (fi) 1981-06-30
US4016148A (en) 1977-04-05
IE42466B1 (en) 1980-08-13
PT64743B (en) 1978-01-04
IE42466L (en) 1976-07-27
ES444622A1 (es) 1977-10-16
SE7600731L (sv) 1976-07-28
PT64743A (en) 1976-02-01
SE424328B (sv) 1982-07-12
NL177021B (nl) 1985-02-18
FI61032B (fi) 1982-01-29
AU502919B2 (en) 1979-08-16
NO146429C (no) 1982-09-29
NO146429B (no) 1982-06-21
PL99096B1 (pl) 1978-06-30
DD123756A5 (fi) 1977-01-12
FR2298335B1 (fi) 1980-06-20
ATA49276A (de) 1980-03-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
FI61032C (fi) Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt anvaendbara peptidylfosfonsyror
EP0598129B1 (en) Novel tetrapeptide derivative
AU609900B2 (en) Amino acid derivatives of phosphorus acids
Atherton et al. Synthesis and structure-activity relationships of antibacterial phosphonopeptides incorporating (1-aminoethyl) phosphonic acid and (aminomethyl) phosphonic acid
Lavielle et al. New. alpha.-amino phosphonic acid derivatives of vinblastine: chemistry and antitumor activity
CA1293589C (en) Carboxyalkyl amino acid derivatives of various substituted prolines
KR19980703203A (ko) 신규 펩티드 유도체
EP1077218A2 (en) Peptido-mimetic compounds containing RGD sequence useful as integrin inhibitors
US7446102B2 (en) Antibacterial amide macrocycles IV
AU627156B2 (en) Amino acid derivatives
US4143134A (en) Halo-phosphonopeptides
US4335111A (en) Compounds associating peptidyl of aminoacyl residues to lipophilic groups and pharmaceutical compositions containing said new compounds
AU721261B2 (en) Peptide inhibitors of hematopoietic cell proliferation
US5478809A (en) TAN-1511, its derivatives, production and use thereof
US4610817A (en) N-acyl derivatives of peptides, their preparation and their use in the treatment of disorders, and agents for this purpose
US6025466A (en) Cyclic hepta-peptide derivative from colonial ascidians, Lissoclinum sp.
US3904593A (en) Peptide derivatives having an &#39; -hydrazide linkage and preparation thereof
CA1313724C (en) Aminoacid derivatives as antihypertensives
CA2039341A1 (en) Peptide derivatives
US20040033940A1 (en) Cyclic hepta-peptide derivative from colonial ascidians, lissoclinum SP
CA1060798A (en) Compositions
Pearson The enantiospecific total syntheses of Adda and Nodularin
JPH01110695A (ja) アミノ酸誘導体その製造方法及び血圧降下剤
GARDNER TOTAL SYNTHESIS OF CHLAMYDOCIN: CORRELATION OF PEPTIDE CONFORMATION TO BIOLOGICAL ACTIVITY
JPH07145084A (ja) Ｔａｎ−１５１１関連化合物

Legal Events

Date Code Title Description
MM Patent lapsed

Owner name: F. HOFFMANN-LA ROCHE & CO.