FI57444C - Foerfarande foer framstaellning av nya tumoerer motverkande antracyklin-glykosid antibiotika ma 144 - Google Patents
Foerfarande foer framstaellning av nya tumoerer motverkande antracyklin-glykosid antibiotika ma 144 Download PDFInfo
- Publication number
- FI57444C FI57444C FI772915A FI772915A FI57444C FI 57444 C FI57444 C FI 57444C FI 772915 A FI772915 A FI 772915A FI 772915 A FI772915 A FI 772915A FI 57444 C FI57444 C FI 57444C
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- atcc
- streptomyces
- antibiotics
- galilaeus
- ferm
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H15/20—Carbocyclic rings
- C07H15/24—Condensed ring systems having three or more rings
- C07H15/252—Naphthacene radicals, e.g. daunomycins, adriamycins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/44—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides
- C12P19/56—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides having an oxygen atom of the saccharide radical directly bound to a condensed ring system having three or more carbocyclic rings, e.g. daunomycin, adriamycin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/465—Streptomyces
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/465—Streptomyces
- C12R2001/48—Streptomyces antibioticus ; Actinomyces antibioticus
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/886—Streptomyces
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/886—Streptomyces
- Y10S435/888—Streptomyces antibioticus
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Virology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
Description
RSF^l [B] (11)KUULUTUSjULKAISU C7/44 LBJ l11' UTLÄGGNI NCSSKRIFT 0 ' ** ^ „ (45) ·; j ^ ^ (51) KY.it3/inta.3 c 12 P 19/56, C 07 H 15/24 SUOMI—FINLAND (11) !**ΜηαΙΗ»Κ·ΐγ»ι*—PnentsieBkiUnj 7T2915 (22) HakemlipUvt — Anattknlnpd«f 03.10.77 (FI) (23) Atkupilvt—Giltif h«udaf 03*10.77 (41) Tulhit JulklMkal — Bltvlt off«ntilf 06.04. 78
Patentti- ja rekisterihallitus /44) Nlhdvtkslpinon ja kuuLjulktIaun pvm.— . n
Patent· och registerstyrelsen Anteksn utl«*d och utl.*krift*n publkarad 30.04. Ö0 (32)(33)(31) Pyydetty etuoikeus —Begird prloritet 05· 10.76 2U.05.77 Japani-Japan(JF) SH0 51-120237, SH0 52-60908 (71) Zaidanhojin Biseibutsu Kagaku Kenkyukai, lU-23, Kamiosaki 3-chome,
Shinagawa-ku, Tokyo, Japani-Japan(JP) (72) Hamao Umezava, Tokyo, Tornio Takeuchi, Tokyo, Toshikazu Oki, Kanagawa-ken, Taiji Inui, Kanagawa-ken, Japani-Japan(JP) (7*0 Oy Borenius & Co Ab
(5*0 Menetelmä uusien tuumoreiden kasvua vastustavien antrasykliiniglykosidi-antibioottien MA lUU valmistamiseksi - Förfarande för framställning av nya tumörer motverkande antracyklin-glykosid antibiotika MA lUU
Keksinnön kohteena on menetelmä tuumoreiden kasvua vastustavien antrasykliiniglykosidi-antibioottien MA 144, joiden yleinen kaava on R1 0 C00CH3 OCxX^3 OH 0 OH 0
0"K
?0H
R3 12 3 jolloin R , R ja R merkitsevät seuraavaa 2 57444
Antibiootin MA 144 osakomponentin λ o q
tunnus R R
CHo G1 H CH3 J-?o G2 OH CH3 0 \ /
L H H
o
N1 H ch3 /SN
HO'-'
51 H CH3 H
52 OH CH3 H
U1 H CH3 a Oi U2 0H CH3 / HO i '
OH
. Y H CH3
O
valmistamiseksi. Erikoisesti keksinnön kohteena on menetelmä näiden uusien antrasykliiniglykosidiantibioottien valmistamiseksi, jotka on merkitty MA 144-G1, -G2, -L, -N1, -S1, -S2, -U1, -U2 ja -Y viljelemällä Streptomyces-sukuun kuuluvia MA 144-kehittäviä kantoja, sekä menetelmä näiden antibioottien talteenottamiseksi ja puhdistamiseksi.
On aikaisemmin löydetty erityyppisiä antrasykliini-glykosideja Streptomyces-sukuun kuuluvien mikro-organismien viljelyliemistä ja myös selitetty näitä kirjallisuudessa. Näistä on daunomysiiniä ja adria- 3 57444 mysiiniä jo käytetty kliinisesti ihmisen syöpää vastaan ja aklasino-mysiinia A, karminomysiiniä ja rubidatsonia kokeillaan kliinisesti suurella mielenkiinnolla syövän kemoterapiassa.
Tutkittaessa Streptomyces-viljelmiä tuumoreiden kasvua vastustavan vaikutuksen omaavien metaboliittien löytämiseksi ovat keksijät löytäneet uusia yhdisteitä, jotka sen jälkeen, kun ne on puhdistettu ja luokiteltu niiden fysiko-kemiallisten ominaisuuksien perusteella, on vahvistettu, että antibiootit, joista nyt käytetään nimityksiä MA 144-G1 , -G2, -L, -N1, -S1, -S2, -U1, -U2 ja -Y ovat uusia yhdisteitä, joilla on tuumoreiden kasvua vastustava vaikutus ja pieni myrkyllisyys eläimissä.
US-patentissa 3.590.028 on selitetty adriamysiinin valmistus viljelemällä S. peuceticus var. caesius-kantaa. Daunomysiinin kemiallinen muuttaminen adriamysiiniksi on selitetty US-patentissa 3.803.124.
Daunomysiini (valmistettu viljelemällä S. peuceticusta, U.K.-pat. 1.003.383) voi olla sama kuin toiminimen Rhone-Poulenc 13.057 R.P. (aikaisemmin rubidomysiini ja nyt daunorubisiini, ks. U.K. pat.
985.598; 1.188.262 ja 1.241.750 ja U.S.-pat. 3.616.242) ja on toden näköisesti sama kuin Ciban danubomysiini, joka on selitetty U.S.-patentissa 3.092.550 ja U.K.-patentissa 901.830. Ks. myös U.S.-patentin 3.686.163 dihydrodaunomysiinia.
Antrasykliini-antibiootteja, joissa on aklavinoni-aglykonipuolisko, on selitetty seuraavissa julkaisuissa: a) aklasinomysiini A ja B U.S.-patentissa 3.988.315 ja Oki ja kumpp., J. Antibiotics 28:830 (1975).
b) aklaviini J. Bacteriol. 72:90 (1956).
Antrasykliini-antibiootteja, joissa on ε-pyrromysinoni-aglykoniosana, on selitetty kirjallisuudessa seuraavasti: c) musettamysiini ja marsellomysiini boheemihappokompleksista julkaisussa J. Antibiotics 30:525 (1977), d) pyrromysiini, Chem. Ber. 92:1904 (1959), e) sinerubiini A ja B, U.K.-patentti 846.130 (ks. myös US-pat.
3.864.480 ja Keller-Schierlein et ai. Antimicrobial Agents and Chemotherapy, sivu 68(1970) ).
57444
Muita antrasykliini-antibiootteja, joiden aglykoni eroaa aklavinonista ja ε-pyrromysinonista, on selitetty kirjallisuudessa seuraavasti: f) nogalamysiini, J. Amer. Chem. Soc. 99:542 (1977), g) steffimysiini, J. Antibiotics 27:805, 809 (1974), h) karminomysiini, J. Antibiotics 27:254 (1974), DE-patentti 2.362.707 ja J. Amer. Chem. Soc. 97:5955 (1975), i) trypanomysiini, Antimicrobial Agents and Chemotherapy 1:385 (1972), j) resinomysiini, J. Antibiotics 25:393 (1972), k) galirubiini A ja B, Naturwiss. 52:539 (1965) ja Chem. Abstr. 67:90573 (1967).
Lähempiä tietoja antrasykliini-antibiooteista saadaan julkaisusta Index of Antibiotics from Actinomycetes, Hamao Umezawa, Editor-in-Chief, University Park Pfress, State College, Pennsylvania, USA (1967): Antibiootti Sivu numero
Aklaviini 111
Sinerubiini A 220
Sinerubiini B 221
Danubomysiini 242
Daunomysiini 243
Pyrromysiini 524
Rodomysiini A, B 561
Rubidomysiini 574
Julkaisussa Antibiotics, Vol. 1, Mechanism of Action, David Gottlieb ja Paul D. Shaw, Springer-Verlag New York, Inc., N.Y., (1967), sivut 190...210 A DiMarco on esittänyt katsauksen "Daunomycin and related antibiotics”. Julkaisussa Bulletin, No 10, International Center of Antibiotics, yhteistoiminnassa WH0:n kanssa, December 1972, Belgia on esitetty antrasykliinejä ja niiden johdannaisia.
Keksinnön mukaiselle menetelmälle on tunnusomaista, että viljellään jotakin seuraavista MA 144-kehittävistä kannoista Streptomyces sp. ME505-HE1 (PERM P-3667) ATCC 31273, Streptomyces galilaeus MA 144-M1 (FERM P-2455) ATCC 31133, Streptomyces galilaeus ATCC 14969, Streptomyces cinereoruber ATCC 19740, Streptomyces niveoruber ATCC 14971, Streptomyces antibioticus ATCC 8663 tai Streptomyces purpurascens ATCC 25489 upoksissa olevissa aerobisissa olosuhteissa ravinneväliaineessa, joka sisältää hiililähdettä, typpiravinnetta, epäorgaanisia suoloja ja hivenmetalleja, lämpötilassa 5 57444 20...37 °C ja pH:n ollessa 6...9, 2...7 päivän ajan, jonka jälkeen kukin antrasykliini-glykosidi voidaan ottaa talteen ja eristää liuos uutosmenetelmää käyttäen useamman kerran uuttaen veteen sekoittamattomalla liuottimelia pH:n ollessa välillä 6...9 ja happamella vesiliuoksella tai veteen sekoittuvalla liuottimelia pH:n ollessa alle 4, jonka yhteydessä mahdollisesti sovelletaan pylväskromatografointia käyttäen adsorbenttina piihappoa ja näin saatu antrasykliiniglyko-sidia sisältävä liuos väkevöidään kuiviin tyhjössä.
Piirustusten selitykset
Kuviot 1...9 esittävät keksinnön mukaisesti valmistettujen MA 144-tuotteiden ultraviolettivalon ja näkyvän valon absorptiospektrejä 90% metanolissa.
Kuviot 10...18 esittävät MA 144-tuotteiden infrapuna-absorptiospektrejä kaliumbromidissa.
Kuviot 19...27 esittävät MA 144-tuotteiden ydinmagneettisia resonanssi-spektrejä CDClgissa (60 100 MHz).
Kuvio 28 esittää tuotteesta MA 144-Y saadun metyloidun disakkaridin ultraviolettivalon ja näkyvän valon absorptiospektriä metanolissa, 0,04 g/1.
Kuvio 29 esittää tuotteesta MA 144-Y saadun metyloidun disakkaridin infrapuna-absorptiospektriä kaliumbromidissa.
Kuvio 30 esittää tuotteesta MA 144-Y saadun metyloidun disakkaridin ydinmagneettista resonanssispektriä CDCl^issa, 100 MHz.
Keksinnön mukaan valmistetaan yhdeksän uutta antrasykliini-antibioottia MA 144-G1, -G2, -L, -N1, -S1, -S2, -U1, -U2 ja -Y, joilla on todettu olevan vaikutuksia sekä bakteereita että kasvaimia vastaan. Erikoisesti keksinnön mukaisilla yhdisteillä on vaikutusta gram-positiivisiin bakteereihin, minkä lisäksi ne estävät nisäkkäiden erilaisten kasvaimien kasvua, kuten L—1210— ja P388-leukemian kasvua hiirissä. Sitä paitsi niiden myrkyllisyys on pieni, vaikka niillä on suuri solumyrkyllisyys, joten ne estävät tuumorisolujen kasvun ja RNA-synteesin viljelmissä.
Näin ollen keksinnön mukaisia yhdisteitä voidaan käyttää bakteereita ja 6 57444 kasvaimia vastustavina lääkkeinä. Tässä käytetyllä sanonnalla MA luu-komponentit tarkoitetaan antibiootteja, jotka käsittävät vähintään yhden yhdisteistä MA 14U-G1, -G2, -L, -N1, -S1, -S2, -U1, -U2 ja -Y.
Kaikkia keksinnön mukaisia yhdisteitä valmistetaan viljelemällä edellä mainittuja Streptomyces-kantoja ennestään tunnetussa vesipitoisessa ravinneliuoksessa, joka sisältää aktinomycetes-lajien ennestään tunnettuja ravinnelähteitä, toisin sanoen hiili-, typpi- ja epäorgaanisten suolojen lähteitä. MA 1UU-komponenttien samoin kuin muiden antibioottien valmistamiseksi teollisessa mittakaavassa käytetään sopivasti upoksissa tapahtuvaa aerobista viljelyä. Yleisiä menetelmiä, joita käytetään muiden aktinomycetes-lajien viljelyyn, voidaan myös käyttää tämän keksinnön mukaiseen viljelyyn. Viljelyväliaine sisältää sopivasti kaupan olevia hiililähteitä, joista mainittakoon glukoosi, glyseroli, tärkkelys, dekstriini, sakkaroosi, maltoosi, öljyt, rasvat jne., joko puhdistettuina tai raakoina, kun taas kaupan olevina typpilähteinä käytetään soijapapujauhetta, hiivauutetta, peptonia, puuvillasiemen-jauhetta, kuivattua hiivaa, maissiuutetta, tai epäorgaanisia suoloja, kuten ammoniumsulfaattia, natriumnitraattia tai ammoniumkloridia. Sopivasti käytetään epäorgaanisia suoloja, kuten natriumkloridia, kaliumklorideja tai fosfaatteja, ja näihin voidaan haluttaessa myös lisätä hivenmetalli-ioneja ja vaahtoamisen estoaineita, joista mainittakoon tuote Adekanol (tavaramerkki Asahi Denka Ind. Co) tai Silicone (tavaramerkki, Shinetsu Chem. Ind. Co). Käymislämpötilan tulee olla rajoissa 20...37 °C, sopivasti noin 25...30 °C, ja väliaineen pH-arvo pidetään rajoissa noin 6...9. MA 1 44-komponenttien syntyminen viljely-liemessä saavuttaa maksiminsa 2...7 vuorokauden kuluttua, joko viljely-pulloa ravistettaessa tai upoksissa tapahtuvaa aerobista käymistä sovellettaessa, jolloin käytetään, ilmastusta ja sekoittamista kuten seuraavissa esimerkeissä selitetään.
MA 144-komponentit eli keksinnön mukaisesti valmistetut yhdisteet voidaan ottaa talteen viljelyliemestä tai reaktioseoksesta ja erottaa toisistaan soveltamalla seuraavia menetelmiä.
Käymisen kehittämät MA-144-komponentit esiintyvät sekä solun sisäisinä että solun ulkopuolisina, mutta pääasiallisesti niitä esiintyy huovas-tossa. MA 1 44-komponenttien ottamiseksi talteen viljelyliemestä tämä liemi voidaan suodattaa ja suodos sitten uuttaa veteen sekoittuvalla orgaanisella liuottimena, joista esimerkkeinä mainittakoon kloroformi, 7 57444 etyyliasetaatti, tolueeni, bentseeni, butyyliasetaatti, n-butanoli, metyylipropyyliketoni, metyleenikloridi, joita käytetään neutraaleina tai heikosti happamina vesiliuoksina. Huovastossa olevat MA luu-komponentit voidaan ottaa talteen uuttamalla orgaanisen liuottimen avulla, joista esimerkkeinä mainittakoon kloroformi, asetoni, n-butanoli, meta-noli, etanoli, etyyliasetaatti tai orgaanisen tai epäorgaanisen hapon, kuten kloorivetyhapon tai etikkahapon vesiliuos. Vaihtoehtoisesti voidaan MA 1UU-komponentit uuttaa suoraan viljelyliemestä soveltamalla edellä mainittuja uuttamismenetelmiä ilman, että huovasto ennalta erotetaan. MA 1UU-uutteet voidaan konsentroida alipaineessa ja tämän jälkeen uuttaa uudelleen veteen sekoittuvalla orgaanisella liuottimena pH-arvon ollessa rajoissa 6...9, minkä jälkeen haihdutetaan alipaineessa ja täten saadut MA-konsentraatit sekoitetaan happameen vesiliuokseen, jonka pH-arvo on alempi kuin U. Tämän jälkeen MA 1UU-komponentit uutetaan uudelleen tästä happamesta vesiliuoksesta orgaanisella liuottimena sen jälkeen, kun pH-arvo on säädetty emäksiseksi. Toistamalla edellä selitettyjä menetelmiä voidaan MA 1UU-komponentteja valmistaa tarpeen vaatiessa puhtaina. Sen sijaan, että käytetään talteenotto-menetelmää, joka perustuu uuttamiseen liuottimen avulla, voidaan vaihtoehtoisesti tai yhdistelmänä tällaisen menetelmän kanssa MA 1UU ottaa talteen viljelyliemestä pylväskromatografoimalla ja käyttämällä adsor-bentteina esim. aktivoitua hiiltä, piihappogeeliä tai modifioitua dekstraania, esim. toiminimen Pharmacia Fine Chem. Co., New York, markkinoimaa Sephadex LH-20 (tavaramerkki, dekstraanigeeli). Talteenotto voidaan myös suorittaa muita sopivia sinänsä tunnettuja menetelmiä soveltaen.
. 8 57444 MA 144-komponenttien fvsiko -kemialliset ominaisuudet
Komponenttien MA 144-G1, -G2, -1, -N1, -S1, -S2, -U1, -U2 ja -Y fysiko -kemialliset ominaisuudet ovat seuraavat: MA 144__G1_G2__
Ulkonäkö lievästi emäksistä amorfis- Lievästi emäksistä ta keltaista jauhetta amorfista punaista __ jauhetta__
Alkuaineanalyysi CHNO CHNO
Todettu 61.45 6.31 1.44 28.93 61.15 6.21 1.75 30.58
Laskettu 62.14 6.58 1.73 29.56 60.93 6.45 1.69 30.92
Empiirinen kaava C42H53°15N c^H^O^N
Molekyylipaino 811.9 827.9
Sulamispiste (°C) 141...145 152...156
Ominaiskierto . o on +54 (c - 0.33, CHC13)
Liukoisuus Liukenee happameen veteen, metanoliin, etano liin, n-hutanoliin, asetoniin, etyyliasetaattiin, kloroformiin, hentseeniin, tolueeniin, di-me tyyli sulioksidiin, metyyli-sellosolviin, dimetyyliformamidiin.
Liukenee hiukan veteen, n-heksaaniin, syklo-heksaaniin, dietyylieetteriin ja petroliin. Bydrokloridisuola liukenee veteen, metanoliin, etanoliin, ja liukenee hiukan kloroformiin, _asetoniin ja etyyliasetaattiin._ R^-arvot** * C:M «= 20:1 0.38 0.38
Reaktio Hapan vesi- ja metanoli- Hapan vesiliuos on liuos on keltaista ja punaista ja muuttuu muuttuu purppuranpunerta- purppuransiniseksi vaksi emäksisenä, ja emäksisenä, ja muut- muuttuu punertavan ruskeak- tuu purppuranväri- si konsentroidussa H2S04~ aSssi H°so!-liuok- liuoksessa. sessa. c 4 57444 9 MA 144__G1____—--------
Ultraviolettivalon ja näkyvän 230 (537)» 259 (330), 235 (580), 259 valon absorptiospektrit ja 290 (14-0)» 4-32 (165) (295), 292 (101 )> <E1cmWs ΜβΟΗ-.ssa 492 (175) (koko viiva) Kuv. 1 ^uv* 2 0,1 N HC1 MeOHjssa 229.5 (610), 259 (372), 235 (627), 259 (katkoviiva) 289 (159), 430 (169) (300), 292 (104), 492 (178) 0.1N NaQH-MeQH:ssa (-.-.- viiva) 239 (521), 285 (151), 242 (575), 565 317 (96), 522 (144) (230), 605 (198)
Infrapuna-absorptio- spektri (KBr) Kuv. 10 Kuv, 11
Ydinmagneettinen resonanssispektri Kuv. 19 Kuv. 20 * C = kloroformi, M - metanoli **Ohutkerroskromatografointi: piihappogeeliä ohutkerros 60Ρρς (Merck Co.) (27 °C:ssa) 254
1 Q
57444 MA 144___1__N1__
Ulkonäkö Lievästi emäksistä amor- Lievästi emäksistä, amor- _fista keltaista jauhetta fista punaista .jauhetta
Alkuaineanalyysi CHNO CHNO
todettu 61.39 6.31 1.54 30.13 61.43 6.71 1.71 29.22 laskettu 61.72 6.44 1.76 30.08 61.97 6.82 1.72 29.48
Empiirinen kaava C^H^O^N C42H55°15N
Molekyylipaino 797.9 813.9
Sulamispiste (°C) 134...136 146...147
Ominaiskierto L\7l° +57,5° (o - 0,4, OHOlj)
Liukoisuus sama kuin MA 144-G1 Sama kuin MA 144-G1
Rf-arvot** *C:M = 20:1 0.31 0.21
Reaktio Sama kuin MA 144-G1 Sama kuin MA 144-G1
Ultraviolettivalon 230 (480), 259 (298), 229.5(482), 259 (298) ' itsÄSpÄt ja 29° <118>’ 290 (12!), 433 (144) ’ • (B1omWa Me0H!B8a ^ , (koko viiva) ***· 3 **v. 4 0.1N HCl-MeOH:ssa 230 (530), 259 (324), 229.5 (488), 259 (304)^ (katkoviiva) 290 (128), 433 (156) 290 (123), 433 (151) 0.1N NaOH-MeOH238 (412), 287 (100)7 239 (450), 287 (121) ^ (-.-.- viiva) 318s(68), 525 (140) 318s(76), 525 (133)
Infrapuna-absorptio- ” " . (KBr J .
spektri_kuv, 12__ 13_
Ydinmagneettinen ———.
resonanssi spektri kuv. 21 22 (PMR)____ 57444 11 ^ MA 144_S1__S2__
Ulkonäkö lievästi emäksistä amor- lievästi emäksistä amor- _fista keltaista jauhetta fista punaista jauhetta
Alkuaineanalyysi C H N 0 CH NO
todettu 61.37 6.45 1.97 29.36 60.09 6.13 1.88 30.94 laskettu 61.79 6.84 2.00 29.72 60.41 6.34 1.96 31.13
Snpiirinen kaava C36H45°13N C36H45°14N
Molekyylipaino 699.8 715.8
Sulamispiste (°C) 144...147 154...158
Ominaiskierto +77° ί\ΐψ (C = 1.0, chci5)
Liukoisuus Sama kuin MA 144-01 Sama kuin MA 144-G1 R^-arvot ** *C:M =20:1 0.14 0.14
Reaktio Sama kuin MA 144-01 Sama kuin MA 144-G2
Ultraviolettivalon Kuv. 5 Kuv. 6 230 f638)· 258.5 (371), 234.5 (607), 258.5(306), (S1# ) 289.5(160), 432 (177) 293 (110), 491 (189) ' 1 cm'max (koko viiva) 0.1N HCl-MeOH 229.5 (652), 258.5 (380), 234.5(629), 258.5(318), " (katkoviiva) _ 289.5 (163), 451 (192) 293 (114), 491 (197) 0.1* NaOH-MeOH 237.5 (553), 286 (141), 242 (606), 566 (244),- (-.-.- viiva) 320 (90), 524 (161) 606 (210)
Infrapuna-absorptio- " ~ spektri (KBr) Kuv. 14 Kuv. 15
Ydinmagneettinen ~ resonanssispektri (PMR) Kuv. 23 Kuv. 24 12 57444 MA 144_ U1_U2_
Ulkonäkö Lievästi emäksistä amor- Lievästi emäksistä amor- _ fista keltaista .jauhetta fista punaista .jauhetta
Alkuaineanalyysi CHN O CH HO
todettu 60.42 6.77 1.74 31.07 59.26 6.60 1.58 31.87 laskettu 60.79 6.68 1.69 30.85 59.64 6.55 1.65 32.15
Empiirinen kaava C42H55°16N C42H55°17N
Molekyylipaino 829.9 845.9
Sulamispiste (°C) 152...155 160...164
Ominai ski ert o + 31° 20 L*J5 (c = i,o, chci5)
Liukoisuus Sama kuin MA 144-G1 Sama kuin MA 144-G1 R^.-arvot** *C:M 20:1 0.07 0.07
Reaktio Sama kuin MA 144-G1 Sama kuin MA 144-G2
Ultraviolettivalon Kuv. 7 Kuv. 8 ja 250 <531>* 259 (525), 235 (452), 259 ( 247), (sJlUv* MeOHissa 290 (135), 432 (164 ) 292 (104), 492 (150) icm maks (koko viiva) 0.1H HCl-MeOH 229.5 (602), 259 (365), 235 (465), 259 (250), (katkoviiva) 289 (150), 430 (168) 292,(103), 492 (152) 0.1N NaOH-MeOH 239 (520), 285 (143), 242 (448), 566 (200), (-.-.- viiva) 317 (94), 522 (144) 606 (164)
Infrapuna-absorptio- spektri (KBr) Kuv. 16 Kuv. 17
Ydinmagneettinen resonanssispektri (PMR) Kuv. 25 Kuv. 26 13 57444 MA 144__ΐ
Ulkonäkö lievästi emäksistä amorfista ______keltaista jauhetta_
Alkuaineanalyysi C H N 0 todettu 61.98 6.30 1.70 30.02 laskettu 62.29 6.35 1.75 29.63
Empiirinen kaava C^H^O^N
Molekyylipaino 810
Sulamispiste (°C) 153...155
Ominaiskierto + 66° 20 _(c· 1.0, CHC15) liukoisuus Sama kuin MA 144-01 R^-arvot** *C:M= 20:1 0.47
Reaktio Sama kuin MA 144-01
Ultraviolettivalon ja näkyvän valon absorptiospektri ja Kuv. 9 (EiomWcs MeOHsssa 229.5 (580), 259 (320), (koko viiva) 290 (126), 432 (158) 0.1N HCl-MeOH 229.5 (590), 259 (334), (katkoviiva) 290.5 (130),433 (160) 0.1N NaOH-MeOH 239 (497), 287 (133), (-.-.- viiva) 320s (82), 524 (138)
Infrapuna-absorptiospektri (KBr) Kuv. 18
Ydinmagneettinen resonanssi- spektri (PMR) Kuv. 27 57444 m
Keksinnön mukaisten yhdisteiden MA 144-G1, -G2, -L, -N1, -S1, -S2, -U1, -U2 ja -Y rakenne määritettiin seuraavasti:
Hydrolysoitiin 0,1 N kloorivetyhapon avulla 30 minuuttia 85 °C:ssa, ja määritettiin fysiko-kemialliset ominaisuudet, kuten ultraviolettivalon, näkyvän valon ja infrapunavalon absorptiospektrit, massa- ja ydinmagneettinen resonanssispektri, sulamispiste, alkuaineanalyysi ja Rf-arvot kromatografoimalla piihappogeelin ohutkerrosta käyttäen, jolloin todettiin, että yhdisteistä MA 144-G1, -L, -N1, -S1, -U1 ja -Y saadun aglykoniosan ominaisuudet täysin lankesivat yhteen aklavino-nin ominaisuuksien kanssa (Tetrahedron Lett., no 8, 28...34, I960), ja yhdisteistä MA 144-G2, -S2, ja -U2 saadun aglykoniosan ominaisuudet lankesivat täysin yhteen ε-pyrromysinonin ominaisuuksien kanssa (Chem.
Ber. 92, 1880...1903, 1959). Toisaalta määritettiin neutraloinnin ja konsentroinnin jälkeen edellä mainittujen hydrolysaattien vesiliukoisissa fraktioissa olevat sokeriosat soveltamalla piihappogeelin avulla ohutkerroskromatografointia (tyyppiä Merck Co, oleva piihappo- geelilevy, n-butanolitetikkahappo:vesi = 4:1:1) ja verrattiin niiden Rf-arvoja autenttisten sokerien arvoihin, jotka saatiin aklasinomysiinis-tä A (J. Antibiotics, 28, 830...834, 1975) ja streptolyditsiinistä (J. Amer. Chem. Soc. 86, 3592...3594, 1972). MA 144-komponenteista saatujen sokeriosien Rf-arvot on esitetty seuraavassa taulukossa. Yhdisteissä MA 144-G1, -G2, -L, -Y ja -N1 on olemassa kolmen tyyppistä sokeria ja yhdisteissä MA 144-S1, -S2, -U1 ja -U2 kahdenlaista sokeria.
MA 144-komponenttien sokeriosan Rf-arvot
Yhdisteet _0 ,16 0,20 0 ,60 0,72 0,83 0,78_; MA 144-G1 +-+-+- -G2 + - + - + - -L - + + - + - -N1 + - + + -- -S1 +- + --- -S2 + - + --- -U1 + - + --- -U2 + - + --- -Y +- + -- + 1 5 5 7444
Vertailemalla autenttisten sokerien Rf-arvoja, eri värireaktioita ja optista kiertoa identifioitiin sokeriosa, joka vastasi Rf= 0,16, 1- rodosamiiniksi, Rf= 0,60 oli 2-deoksi-L-fukoosia, Rf= 0,72 oli L-rodinoosia ja Rf« 0,83 oli L-sineruloosia, mutta Rf-arvoja 0,20 ja 0,78 vastaavat sokerit olivat tuntemattomia.
Osittain metanolysoimalla huoneenlämmössä MA 144-komponentte ja metano-lissa, jossa oli 0,01 N-kloorivetyhappoa, saatiin yhdisteistä MA 144-01, -N1, -S1, -U1 ja -Y 1-deoksipyrromysiiniä (L-rodosaminyyli-aklavinonia), J. Antibiotics, 28, 830...834, 1975), joka identifioitiin sen fysiko-kemiallisten ominaisuuksien avulla, joista mainittakoon Rf-arvo pii-happogeelillä suoritetussa ohutkerroskromatografoinnissa, sulamispiste, infrapunavalon, ultraviolettivalon ja näkyvän valon absorptiospektrit, ja ydinmagneettinen resonanssispektri. Vastaavat metyloidut sakkaridit MA 144-02, -S2 ja -U2 antoivat pyrromysiiniä (Chem. Ber. 92, 1880...
1903, 1959) ja vastaavat metyloidut sakkaridit ja MA 144-L antoivat tuntemattoman antrasykliini-glykosidin ja vastaavan metyloidun disakka-ridin.
Yhdisteiden MA 144-G1 ja -G2 seuraavat yleiset kaavat, D-sinerulosyyli- 2- deoksi-L-fukosyyli-L-rodosaminyyli-aklavinoni ja - E-pyrromysinoni määritettiin näiden yhdisteiden ja niiden metyloidun disakkaridin ydin-magneettisen resonanssispektrin, ^C-ydinmagneettisen resonanssispektrin ja infrapunavalon spektrin avulla r 0 COOCHg OH O OH 0 0 or>cH,
£T)( ^CH, MA 144-G1 : R * H
P MA 144-G2 : R = OH
• θ' MA 144-L koostuu aklavinonista ja kolmesta sokeriosasta, nimittäin tuntemattomasta aminosokerista, jonka Rf » 0,20, 2-deoksi-L-fukoosista ja L-sineruloosista. Yhdisteestä MA 144-L metanolysoimalla saadun aklavinoni-glykosidin ja metyloidun disakkaridin ydinmagneettisen resonanssispektrin ja 13c-ydinmagneettisen resonanssispektrin analyysi 16 57444 osoitti, että ne ovat N-monodemetyyli-L-rodosaminyyli-aklavinonia ja metyyli-sinerulosyyli-2-deoksi-L-fukosidia, joita saadaan yhdisteestä aklasinomysiini A.
Täten määritettiin yhdisteen MA 144-L kemialliseksi rakenteeksi seuraava kaava P COOCHx OH ^ OH o 0.·
oE7 MA 144-L
0-© MA 144-S1 ja -S2 sisältävät L-rodosamiinia ja 2-deoksi-L-fukoosia. Metyyli-2-deoksi-L-fukosidia ja 1-deoksipyrro-mysiiniä tai pyrromysiiniä muodostettiin metanolysoimalla, ja täten saatiin yhdisteille MA 144-S1 ja -S2 määritetyksi 2-deoksi-L-fukosyyli-L-rodosaminyyli-aklavinonin eli £-pyrromysinonin rakennekaavat R. 0 ?00CH3 OH 0 «H 0
MA 144-S1 Ϊ R’« H
CH MA 144-S2 : R' = OH
ry 3
HO
OH
MA 144-N1 koostuu aklavinonista ja kolmentyyppisestä sokeriosasta, nimittäin L-rodosamiinista, 2-deoksi-L-fukoosista ja L-rodinoosista. Sokerien järjestyksen määrittämiseksi suoritettiin lievä hydrolyysi 0,5% kloorivetyhapon avulla huoneenlämmössä 10 minuuttia soveltamalla menetelmää, jonka ovat esittäneet Biedermann ja kumpp (Pharmazie 27, 782...789, 1972), jolloin vapautui L-rodinoosia ja samanaikaisesti muodostui yhdistettä MA 144-S1. Yhdisteen MA 144-N1 kemiallinen rakenne-kaava määritettiin seuraaväksi: 17 0000% 57444 OH 0 OH 0 5 MA 144-N1 0
HO
MA 144-U1 ja -U2 sisältävät L-rodosamiinia ja 2-deoksi-l-fukoosia. Metanolysoitaessa muodostui metyyli-2-deoksi-L-fukosyyli-2-deoksi-l-fukosidia, mikä määritettiin ydinmagneettisen resonanssispektrin ja 1^C-ydinmagneettisen reeonanssispektrin avulla, sekä 1-deoksipyrromysiiniä tai pyrromysiiniä, ja täten saatiin seuraavat kemialliset rakenteet R» O COOCH3
CycO*’’ OH 0 OH 0 Λ
/gS|N N CHj MA 144-U1 : Rr « H
MA 144-U2 ϊ R? « OH
OÖH
OH
MA 144-Y koostuu aklavinonista ja L-rodosaaiinista, 2-deokei-L-fukoosis-ta ja tuntemattomasta sokerista. Edelleen saatiin yhdisteestä MA 144-Y metanolysoimalla 1-deoksipyrromysiiniä ja tuntematonta metyloitua disak-karidia. Tämä metyloitu disakkaridi uutettiin eetterillä ja puhdistettiin pylväskromatografoimalla piihappogeelin ja tuotteen Sephadex 1H-20 (tavaramerkki) avulla, minkä jälkeen tuote kiteytettiin valkoisina neu-lamaisina kiteinä bantsesnistä. Tämän metyloidun disakkaridin fysiko-keaialliset ominaisuudet ovat seuraavat:
Alkuaineanalyysi: Todettu C « 57.77% Laskettu: C « 57.34% H * 7.31% H * 7.40% kaavalle ^^20° 6 is 57444
Molekyylipaino: 272 Sulamispiste: 109...110 °C
Optinen kierto: J= -65° (c * 1.0, CHCl^)
Ultraviolettivalon ja näkyvän valon absorptlospektrit metanolissa; Kuv. 28, λ nm (£ ) = 209 (6726)
Infrapunavalon abs orpt i o s pek tri KBr:ssa, kuv. 29 NMR-spektri CDCl^issa, kuv. 30 (100 MHz)
Kuten kuviot 28 ja 29 esittävät, on yhdisteen MA 144-1 metyylidisakka-ridilla absorptio kohdissa 1680 cm”^ ja λ nm (6 ): 209 (6726),
lBcuC
mikä osoittaa <*, β -tyydyttämättömän ketoryhmän läsnäoloa rakenteessa.
Kuvion 30 protonin NMR:sta todettiin, että kolmen protonin dubletti kohdassa b 1.26 (J * 6.8 Hz), kahden protonin dubletti kohdassa ό 1.9, yhden protonin dubletin dubletti kohdassa 8 3.74 (J * 1 ja 3 Hz), yhden protonin kvartetti kohdassa δ 3.94 (J = 6.8 Hz), yksi protoni kohdassa δ 4.7 ja yksi protoni kohdassa 6 4.8 kuuluivat yhdeksään protoniin, jotka olivat 2-deoksi-L-fukoosia, ja kolmen protonin dubletti kohdassa 61.4 (J = 6.8 Hz) ja eetterin happiatomin suojaaman yhden protonin symmetrinen kvartetti kohdassa b 4.73 (J = 6.8 Hz) olivat liittyneet toisiinsa ja kuuluivat vastaavasti metyyliprotoneihin C-6’ ja protoniin C-5». Spiimi-irroituskokeiden avulla todettiin, että dubletti kohdassa 6 6.86 (J = 3,5 ja 10,0 Hz) ja kaksi dublettia kohdassa 6 6.11 (J * 10,0 Hz) ja 6 5.26 (J s 3,5 Hz), kuuluivat ABM-järjestelmän vinyyli-protoneihin, vastaten protoneja kohdissa C-2·, G-31 ja 0-1'. Täten metyylidisakkaridissa oleva toinen sokeriosa, joka ei ollut 2-deoksi-L-fukoosia, identifioitiin 2,3,6-trideoksiheks-2-eno-pyranos-4-uloosiksi, joka oli liittynyt 2-deoksi-L-fukoosin atomiin C-4.
Edellä analysoiduista tuloksista määritettiin metyloidun disakkaridin rakenne uudeksi sokeriksi q?CH3 /H)
ÖÖH
o 19 57444 ja päätesokeri nimitettiin akuloosiksi.
Täten yhdisteen MA 144-Y kemiallinen rakenne tämän keksinnön mukaan määritettiin seuraavaksi 0 cooch3 OH 0 QH. 0 /οη3^ ififs
Vaikka tämän alan tekniikassa tunnetaan joukko antrasykliini-glykosidi-antibiootteja, joissa on aklavinoni- ja ε-pyrromysinoni- aglykonin osat, eroavat yhdisteet MA 144-G1, -G2, -L, -N1, -S1, -S2, -U1 , -U2 ja -Y selvästi kaikista niistä sellaisten ominaisuuksien suhteen, kuten molekyylin rakennekaavan, happamen hydrolyysin tuloksena syntyvien hajoamistuotteiden, ultraviolettivalon, näkyvän valon, infrapunavalon ja ydinmagneettisen resonanssin spektrien suhteen, kuten edellä on selitetty. Tunnettujen antrasykliini-glykosidien joukossa koostuvat aklaviini ja pyrromysiini aklavinonista tai e-pyrromysinonista ja yhdestä sokerista eli L-rodosamiinista, erotukseksi tämän keksinnön mukaisista yhdisteistä. Aklasinomysiini A ja sinerubiini A koostuvat kolmesta sokeriosasta. L-sinerulosyyli-2-deoksi-L-fukosyyli-L-rodos-aminyyli, MA 144-M1 ja -M2 (DE-patenttijulkaisu 2.715.255) muodostuvat myös kolmesta sokeriosasta, samaten L-amisetosyyli-2-deoksi-L-fuko-syyli-L-rodosaminyyli, ja rodirubiini B (US-patenttijulkaisu 4.127.714), koostuvat L-rodinosyyli-L-rodinosyyli-L-rodosaminyylistä, ja nämä kolme tunnettua antibioottia eroavat keksinnön mukaisista yhdisteistä sokeriosan kohdalta. Yhdisteen rodirubiini A sokeriosa on L-rodinosyyli-2-deoksi-L-fukosyyli-L-rodosaminyyli, joka on sama kuin keksinnön mukainen MA 144-N1, mutta yhdisteen MA 144-N1 aglykoni on aklavinonia ja erottuu rodirubiini A:n ε-pyrromysinonista.
20 57444 Täten on osoitettu, että keksinnön mukaiset yhdisteet MA 1HU-G1, -G2, -L, -N1, -S1 , -S2, -U1, -U2 ja -Y ovat uusia yhdisteitä.
Seuraavassa tarkastetaan MA 1^-komponenttien MA 14>+“G1, -G2 , -L, -S1, -S2, -N1, -U1, -U2 ja -Y mikrobeja vastustavaa vaikutusta erilaisiin mikro-organismeihin nähden. Taulukossa on esitetty keksinnön laukaisten antibioottien estävä minimikonsentraatio, joka on määritetty viljely-liemen laimennusmenetelmäs käyttäen.
21 57444
thC\i0Jr-C\JC\JrWOOt-OO
• · ·· · · · · O O · o o ίΗΟΟΟΟΟΟΟΟ^-τ- ΙΛτ-τ-
Λ A AA
CO VO VO U) CO LTI
r- t— T-mLALAC—CMOOOOO
CM.......· O O O O O
ÖiAOtAr-T-r-ovo^^r*^^ m vo vo vo m
CM r- r- m T-* LA LA CM O O O O O
T- · · · · · · · · O O O O O
tlvOKVKNi-IAr-T-VO'rT-rir- r;
/n A '' A A
m oo co vo oo co ta cMr'-T-t'-i-mc—c--ooooo ^ .......... · o o o o o P COvOOtAO tAr-OO^t-r-r^T-T-
^ Λ A A Λ A
•H rH
cö a 1> % m vo vo vo co
bo CM^-T-inT-iniAC^OOOOO
rt 31-...... · · o o o o o > ·<^Μ VO IA IA ▼- IA τ-> r- O v~ r-j. T- t-
cö w A Λ Av A A
-P
CQ O
0 PM IA 00 00 00 00
Kl CMO-T-C— T-t— "^-!>-00000
rt Sr- ........O O O O O
f> SvOOfAOfAOOO'v-'-r- T-T-
Λ a a A. /A
rt t-s
O
43 IA VO VO IA 00 VO
O CMLAr-tnCMC—-CMLAOOt-OO
U Hi........o o · o o 44 VOT-tAT-VOOO'V-T-T-in'f-'- •H Λ s
CM VO VO CO LA 00 00 CM
O r-inLAC— W [- N f> 00^-00 •H CM********00*00 -P O tA r- τ- O VO O O O v t- [A r- r-
Ö I Λ Λ A
(!) -rh Ö ^
O T- LA Ό CM VO LA 00 VO CM
p CM IA T“ LA CM C*“ CM LA O O r- O O
a <4r-........00*00 O SCbVOT-tAT-VOOO·'-·»- r-tnr-r- 44 Λ . ; s a oo vo IA ^
σ\ LA O CM
IA I CM O -4- p, [Λ ΙΛ P-1 I M LA (Τ' CTV VO vo i- PQ <40·^-
o 4 VO σ\ d 4- >2 CTV
m cm -p cc tA W m -φ 2 a tH O O pcj 0\ M rH *4
ra <4 a O O z S3 -P S M
•H fl M Ej Ej O O rt <} c -=4 <4 a o τ-ra a h ro
rt » rtejooööiH
U) rorom m <4 i- ro o ro M
u fS P -H p o -h a ö rt 0 φ m h ro o ro ra ro m m rt o 1 ΗΗΉΡ-Prtrt-Hroc o -h 0 pp-prortro>t*prt *mp
p rtrt4apb£+»rtoobc-PPO
44 proropH43p!40HP
M · · M O B H «H H o rt rt -P
a ä λ · «h a 43 1 PP*****t>5 o·· ro rt rt oi o| oi Hl « H ·, · o cl cl o -p -p rt rt rt rt m o ra p >, rt rt
M co co pq pq PO ro S o pm ρμ g O O
22 57444
Kuten taulukosta nähdään, on keksinnön mukaisilla MA 1M-4-komponenteilla mikrobeja vastustava vaikutus, varsinkin gram-positiivisiin bakteereihin nähden, joten niitä voidaan käyttää nisäkkäiden hoidossa kurkkumätää, tuberkuloosia, keuhkotulehdusta, jäykkäkouristusta ja muita gram-positiivisten bakteerien aiheuttamia tartuntatauteja vastaan.
Seuraavassa tarkastetaan MA 1 UH-komponenttien kasvaimia vastustavaa vaikutusta ja akuuttista myrkyllisyyttä. Keksinnön mukaisilla MA 144-komponenteilla on eläinkokeiden mukaan korostunut kasvaimia vastustava vaikutus ja pieni myrkyllisyys, joten niitä voidaan käyttää nisäkkäiden kasvaimien kasvun estämiseksi. Erikoisesti keksinnön mukaisilla yhdisteillä on todettu olevan korostunut estävä vaikutus hiiren leukemiaan L1210. Niinpä 19...22 g painaviin BDF^-hiiriin istutettiin vatsaontelon sisäisesti 1 x 10® L1210 solua/hiiri ja 24 tuntia istutuksen jälkeen kokeiltavaa yhdistettä ruiskutettiin vatsaontelon sisäisesti kerran päivässä yhdeksänä peräkkäisenä päivänä. Seuraavassa taulukossa on . esitetty kolmantenakymmenentenä päivänä eloon jääneiden eläinten elinajan prosenttimääräinen pidentyminen suhteessa vertailueläimiin, ja vastaavat LDg^-arvot, kun vatsaontelon sisäisesti oli kerran ruiskutettu yhdistettä hiiriin.
23 5 7 4 4 4
C
φ
C
•H
•H H # 1C >H V- ^ ·Η ·Η >o · -μ I c I ·η x φ Φ ·η o cd m υο ίο > m
ε ·Η ·γ( to ·Η >> τ- CO f' LO zf CM
•rl CO 44 Λ IlgCMCMX-T-r- τ- κϋ rt >> O 2
r-i < 6¾ P
Q) · O
3 LO 00 C' LO »LO
H >H ω J N r I I I I ·
•H y— T- v O
(0 j-
P
c
O) CM LO
> O I CO CO CM LO O) o · •m» i oo oo t- co cm t- z}· +J T— τ— r- r- τ α) s
„ ·Η CM
rt r- O C- LO O' OJ zf · l-H D I CT) CM CO LO CM T- o (U t~ T- T- t— t- I 00 o Φ
v- O LO
CM M CM LO O LO O 00 O' · , V CO IIOOt-J-OOt-CD cm c*P T— r- T— V t— ►4 w
Ct> C
cfl 0) T- rt- •H C CO oo o oo oo j- to · g *rt I CT> LO OO T— CT> Zt-
(1) ε t— τ τ— t I CM
44 φ 3 c Φ <1> iH +J O co •H «rl τ- 00 O zt" O' CO O LO· C Ph Z IOOOOOOCMT- P cm
•H t-CMt— t— t— t— I P CO
•H C
rC
•Γ0 LO
CO (Ö LO 00 zf LO ·
3 CO P OO CM r- CT) LO
3 ·Η I τ- r- T- I I I zf ,¾ e 44 rt O rt Ρ ·η
Φ C
•μ o cm o O CD OOzl-OOOC' · C H i i σ> co co zt- o σ> e- (D ω τ- τ- τ- τ- t- c " *ri
-P CO
P ^ LO
3 >i C" LO LO O CO τ- · Φ CD T- 00 T- zt" 00 T- O 00
P< ·Η Ο I I t— CM t— t— T- r- CM
Φ rH
£-1 rH
Φ >> I P
P X 3- -P
P zf en ^
C >i v- «-m a> bO
φ 6 ω ·Η en X
•h <1 3 JU P 'm.
PC S -p -h rt W) -Ρ Φ 3 Λ ·Η CD ε β rt o 44 rt e ·Η« Φ Ρ τ- Ρ > mx en
C ·Η CM φ Ρ CD
OC τ- > :φ CD CO
ρ· _ ρ α* >, o e £ Φ -ρ οΙ'μ ιο ιο >, h e 0·γο Φ φ > bO locmlooot- cd ΦΦ 44 φ Φ Φ g *< ·* Λ « ·> Ρ -Ρ 1C -Ρ Ρ -Ρ w OOlOCMt—OOO (H 3 3 zt Φ CD ε CD CM τ- Η Ο -Ρ zt Φ ·Η Φ 3 CD >, Φ -Ρ τ- -Ρ Χ3 44 -Ρ Ο 44 CD φ
CD P erne C+JC
<3 φ Φ c >. Φ c S > Ρ > Φ S > Φ 24 57444
Seuraavassa tarkastetaan HA 144-komponenttien solumyrkyllisyyttä viljeltyihin L1210-soluihin nähden. Keksinnön mukaiset MA 144-komponentit estivät nisäkkäiden viljeltyjen kasvainsolujen kasvua varsinkin pienellä konsentraatiolla, ja estivät täydellisesti RNA-synteesin. Tässä kokeessa L1210-soluja istutettiin RPMI-väliaineeseen CNissui, Rosewell Park Memorial Institute 1640), jossa oli 20% vasikka-seerumia, minkä jälkeen viljeltiin 37 °C:ssa 3 vuorokautta C02~inkubaat-torissa, ja lisättiin ensimmäisenä päivänä 0,1 yg/ml keksinnön mukaista yhdistettä. Sisällytettäessä C14 koeyhdisteisiin käytettiin keksinnön mukaisia yhdisteitä 0,5'yg/ml konsentraationa RNA-synteesiä varten ja 1,0 yg/ml konsentraationa DNA-synteesiä varten, ja väliaineeseen *.14 ·*.· · ·*·· * . o lisättiin C-tymiduniä tai -uridunia 60 minuutiksi 37 C:ssa.
Yhdisteiden vaikutus DNA- ja RNA-synteesiin ja kasvuun osoitettiin estoprosenttina vertailukokeisiin nähden, kuten seuraavassa taulukossa on esitetty. Tuloksista ilmenee, että MA 144-komponentit estivät jopa pienenä konsentraationa viljeltyjen L-1210-solujen kasvua ja RNA-synteesiä huomattavasti. Nämä tulokset tukevat terapeuttista vaikutusta eläinkokeiden kasvaimiin.
RPMI-väliaineen koostumus L-arginiinihydrokloridi 240,0 mg L-asparagiini (monohydraatti) 56,8 mg L-asparagiinihappo 20,0 mg L-systiini dihydrokloridi 65,0 mg L-glutamiinihappo 20,0 mg L-glutamiini 300,0 mg glutationi 1,0 mg glysiini 10,0 mg L-histidiinihydrokloridi (monohydraatti) 20,3 mg L-hydroksiproliini 20,0 mg L-isoleusiini 50,0 mg L-leusiini 50,0 mg L-lysiinihydrokloridi 40,0 mg L-metioniini 15,0 mg L-fenyylialaniini 15,0 mg L-proliini 20,0 mg L-seriini 30,0 mg L-treoniini 20,0 mg L-tryptofaani 5,0 mg L-tyrosiini 20,0 mg 57444 25 L-valiini 20,0 mg biotiini 0,2 mg
Ca-pantotenaatti 0,25 mg koliinikloridi 3,0 mg foolihappo 1 »0 mg I-inositoli 35,0 mg nikotiiniamidi 1>0 mg para-aminobentsoehappo 1,0 mg pridoksiinihydrokloridi 1,0 mg riboflaviini 0,2 mg tiamiinihydrokloridi 1,0 mg syanokobalamiini 0,005 mg natriumkloridi 6000,0 mg kaliumkloridi 4-00,0 mg kalsiumnitraatti (vedetön) 69,5 mg dinatriumvetyfosfaatti (vedetön) 801 ,0 mg magnesiumsulfaatti 48,8 mg glukoosi 2000,0 mg fenolipunainen 5,0 mg natriumbikarbonaatti lääkeannoksena
Yllä olevat aineet liuotetaan veteen niin, että muodostuu 1 litra vesiliuosta.
MA 144-komponenttien vaikutus viljeltyjen L1210-solujen kasvuun ja synteesiin.
Estymis-% y^j· . Kasvu RNA:n DNA:n __(2 päivässä)_synteesi_
Aklasinomysiini 89.7 81.6 69.6 MA 144-G1 80.7 65.6 40.9 -G2 82.1 57.8 39.4 -L 27.4 ' 39.7 11.3 -N1 79.2 74.4 57.4 -S1 86.0 74.1 76.5 -S2 88.1 65.6 48.8 -U1 78.5 67.2 27.7 -U2 80.5 71.5 30.5 -Y 90.2 93.9 99.6 26 5 7444
Seuraavassa esitetään MA 1^-komponenttien terapeuttinen käyttö. Kuten edellä mainittiin, ovat keksinnön mukaiset yhdisteet MA 144-G1, -G2, -L, -N1, -S1, -S2, -U1, -U2 ja -Y uusia antibiootteja, joita voidaan käyttää sekä ihmisten että eläinten lääkinnässä, ja joilla myös on korostunut estävä vaikutus nisäkkäiden pahanlaatuisiin kasvaimiin ja gram-positiivisiin bakteereihin.
Seuraavat esimerkit havainnollistavat keksintöä.
Esimerkki 1
Valmistettiin ravinneväliaine, jonka koostumus oli seuraava:
Glukoosia 2%
Perunatärkkelystä 2% ’'Meat” (soijapapujauhetta,
Ajonomoto Co) 2% K2HP04:a 0,1%
MgS04*7H20:a 0,1%
NaCl:a 0,3%
MnCl2-4H20:a 0,0008%
CuS04-7H20:a 0,0007%
FeS04*7H20:a 0,0001%
ZnS04-7H20:a 0,0002%, pH 7,2 50 ml tätä väliainetta steriloitiin 15 min. 120 °C:ssa 500 ml:n pullossa, johon istutettiin 1 ml mikro-organismia Streptomyces galilaeus MA 144-M1 (FERM P-2455) ATCC 31133 jäädytettyä viljelmää ja haudottiin 30 °C:ssa 48 tuntia pyörivää ravistinta käyttäen.
10 litraa aikaisemmin steriloitua väliainetta pantiin 20 litran ruostumatonta terästä olevaan ammemaiseen käymisastiaan, ja istutettiin aseptisesti 200 ml edellä mainittua siemenviljelmää. Käyminen tapahtui 28 °C:ssa 18 tuntia sekoittaen (300 kierr/min) ja ilmastaen (5 1/min). Tämän jälkeen 10 litraa tätä viljelmää siirrettiin 600 litraan aikaisemmin steriloitua väliainetta, joka oli 2000 litran ruostumatonta terästä olevassa säiliössä, ja viljeltiin 28 °C:ssa 36 tuntia sekoittaen (180 kierr/min) ja ilmastaen (300 1/min).
Saatiin 580 1 viljelylientä, jonka pH säädettiin arvoon 5,0 rikkihapon avulla, ja joka suodatettiin piimaasuodattimen läpi. Saatu 56 kg painava suodatuskakku suspendoitiin 50 litraan asetonia ja sekoitettiin 5 7444 27 tunnin ajan, minkä jälkeen suodatettiin. Jäännös uutettiin uudelleen 50 litralla asetonia. Molemmat uutteet konsentroitiin 25 litran tilavuuteen alennetussa paineessa, lisättiin 20 litraan etyyliasetaattia ja sekoitettiin. Etyyliasetaattikerros erotettiin ja haihdutettiin 1 litraan alennetussa paineessa, minkä jälkeen raaka MA 144-seos saostettiin lisäämällä konsentraattiin 151 n-heksaania. Saatiin 36 g punaista jauhetta sen jälkeen, kun oli pesty kahdesti n-heksaanilla.
Toisaalta edellä saadun viljelysuodoksen pH säädettiin arvoon 6,8 natriumhydroksidin avulla ja uutettiin 100 litralla tolueenia. Uutos haihdutettiin 10 litran tilavuuteen alennetussa paineessa, ja uutettiin uudelleen 10 litralla asetaattipuskuria, pH-arvon ollessa 3,5. Saadun vesikerroksen pH säädettiin arvoon 6,8, minkä jälkeen uutettiin 4 litralla tolueenia ja tämän jälkeen haihdutettiin 30 ml:aan alennetussa paineessa. Raaka MA 144-seos saostettiin lisäämällä 300 ml n-heksaania konsentraattiin, ja tämän jälkeen saatiin 2,5 g punaista jauhetta.
Esimerkki 2
Esimerkin 1 mukaan suodatuskakusta saatu MA 144-seoksen raakajauhe (10 g) liuotettiin 100 ml:aan tolueenia ja kaadettiin pylvääseen (5 x 40 cm), johon oli täytetty 300 g piihappogeeliä. Sen jälkeen kun alkuperäinen eluaatti, joka oli saatu käyttämällä tolueenia, jossa oli 1,5% metanolia, oli hylätty, eluoitiin MA 144-G1, -G2- ja -L-fraktiot vuoron perään tolueenilla, jossa oli 2% metanolia. Tämän jälkeen MA 144-N.1 -fraktio eluoitiin tolueenilla, jossa oli 3% metanolia, ja MA 144-S1- ja -S2-fraktiot ja MA 144-U1- ja -U2-fraktiot eluoitiin vuoron perään tolueenilla, jossa oli 5% metanolia. Jokainen saatu fraktio haihdutettiin, jolloin lisäämällä n-heksaania saatiin raakana oranssinpunaisena jauheena 210 mg MA 144-G1:n ja -G2:n seosta, 190 mg MA 144-L:a, 570 mg MA 144-N1:n ja rodirubiinin A seosta, 360mg MA 144-S1:n ja -S2:n seosta, 270 mg MA 144-U1:n ja -U2:n seosta.
Esimerkki 3 2,5 g MA 144-seoksen raakajauhetta, joka saatiin viljelysuodoksesta samalla tavoin kuin esimerkissä 1, liuotettiin 6 ml:aan tolueenia, suoritettiin pylväskromatografointi pylväällä, jossa oli 100 g piihappogeeliä, minkä jälkeen MA 144-Y-fraktio eluoitiin 5 °C:ssa tolueenilla, 28 57444 jossa oli 1,7% metanolia. Saatu fraktio haihdutettiin kuiviin alennetussa paineessa, jolloin saatiin 400 mg raakaa MA 144-Y oranssinpunaisena jauheena.
Esimerkki 4 210 mg esimerkin 2 mukaan saatua MA 144-G1:n ja -G2:n seosta liuotettiin pieneen määrään etyyliasetaattia, ja suoritettiin pylväskromatografointi pylväässä, johon oli täytetty 30 g tuotetta "Column-Lite" (tavaramerkki, Fuji Chem. Co, piihappogeeli) ja eluoitiin etyyliasetaatin ja metanolin seoksella 1:1. Keltainen fraktio haihdutettiin kuiviin alennetussa paineessa, ja saatu jäännös liuotettiin 50 mlraan kloro- _3 formia, ravistettiin 50 ml:11a 0,01 M fosfaattipuskuria, jossa oli 10 M EDTA (EDTA = etyleenidiamiinitetraetikkahappo), jäljellä olevien metalli-ionien poistamiseksi, minkä jälkeen kloroformikerros pestiin kahdesti vedellä, kuivattiin vedettömän natriumsulfaatin avulla ja haihdutettiin tämän jälkeen kuiviin alennetussa paineessa. Täten saatiin 110 mg MA 144-G1 keltaisena jauheena.
Edellä mainittua tuotetta "Column-Lite" sisältävä pylväs eluoitiin, _ g ja keltaisia fraktioita käsiteltiin 10 M EDTA-pitoisella 30% metanoli-seoksella. Saatu punainen eluaatti haihdutettiin kuiviin, jäännös liuotettiin pieneen määrään kloroformiin, ja poistettiin jäljellä olevat metalli-ionit soveltamalla edellä mainittua menetelmää, jolloin saatiin 22 mg MA 144-G2:a punaisena jauheena.
Esimerkin 2 mukaista raakaa MA 144-L-jauhetta käsiteltiin samalla tavoin kuin edellä on selitetty MA 144-G1:n yhteydessä, jolloin saatiin 115 mg keltaista MA 144-L-jauhetta. Soveltamalla samaa yhdisteiden MA 144-G1 ja -G2 puhdistusmenetelmää saatiin puhdistettuina jauheina 260 mg MA 144-N1:a, 150 mg MA 144-S1:a, 88 mg MA 144-S2:a, 128 mg MA 144-U1:a, 54 mg MA 144-U2:a ja 114 mg MA 144rY:a.
Esimerkki 5
Soveltamalla esimerkkien 1, 2 ja 4 mukaista menetelmää valmistettiin keksinnön mukaisia yhdisteitä käyttämällä seuraavassa mainittuja Streptomyces-kantoj a.
Claims (7)
- 5 7444 29 Saatu MA 144 (mg) Kanta_G1 G2 L N1 S1 S2 U1 U2 Y_ S. galilaeus ATCC 14969 42 68 55 126 63 145 115 63 43 S.sp ME505-HE1 TFERM P-3667) ATCC 31273 - - - - 143 89 97 101 S. cinereoruber ATCC 19740 25 37 38 76 88 79 27 83 16 S. niveoruber ATCC 14971 - 56-43 54 38 - 64 12 S. antibioticus ATCC 8663 - 28 --- 18 - 32 - S. purpurascens ATCC 25489 - 13 9 - 14 - S. = Streptomyces Patenttivaatimus Menetelmä tuumoreiden kasvua vastustavien antrasykliiniglykosidi-antibioottien, MA 144, joiden yleinen kaava on R1 0 C00CH3 ¢¢¢¢^ OH 0 OH } $ fö/ R OOH H3 • · 12.3 jolloin R , R ja R merkitsevät seuraavaa: 30 57444 Antibiootin MA 144 osakomponentin λ o 3 tunnus_R_R_R_ G1 H CH3 ?3 G2 OH CH3 0 J N! L H H o, N1 H CH3 \j HO ' f
- 51. CH3 H
- 52 OH CH3 H U1 H CH3 'j U2 OH CH- HO^-’
- 6 OH Y H CH3 valmis tamjLs.ek.si,* tunnettu siitä, että viljellään jotakin seuraavista MA 144 kehittävistä kannoista: Streptomyces sp.ME5Q5-HE1 (FERM P-3667) ATCC 31273, Streptomyces galilaeus MA 144-M1 (FERM P-2455) ATCC 31133, Streptomyces galilaeus ATCC 14969, Streptomyces cinereoruber ATCC 1 9 740 , Streptomyces niveoruber ATCC 14971 , Streptomyces antibioti-cus ATCC 8663 tai Streptomyces purpurascens ATCC 25489 upoksissa olevissa aerobisissa olosuhteissa ravinneväliaineessa, joka sisältää hiililähdettä, typpiravinnetta, epäorgaanisia suoloja ja hivenmetalleja, lämpötilassa 20...37 °C ja pH:n ollessa 6...9, 2...7 päivän ajan, jonka jälkeen kukin antrasykliiniglykosidi voidaan ottaa talteen ja eristää 31 57444 liuotinuutosmenetelmää käyttäen mahdollisesti useamman kerran uuttaen veteen sekoittumattomalla liuottimena pH:n ollessa välillä 6...9 ja happamella vesiliuoksella tai veteen sekoittuvalla liuottimena pH:n ollessa alle 4, jonka yhteydessä mahdollisesti sovelletaan pylväs-kromatografointia käyttäen piihappoa adsorbenttina ja näin saatu antrasykliiniglykosidia sisältävä liuos väkevöidään kuiviin tyhjössä. Förfarande för framställning av tumor motverkande antracyklinglyko-sidantibiotika MA 144 med den allmänna formeln R1 0 C00CH3 ^^CH2CH3 OH 0 OH 0 ifj (I) &TVCH
- 0 OH l3 ΊΓ 17 3 där R , R och R betecknar följande: 32 57444 Kännetecken för delkomponenterna 1 ~ av antibiotikumet MA 14¼ R_R__R__ G1 H CH3 ^3 G2 OH CH3 0V~ \l L H H 0 N1 H CH3 yj—0 , HO '-
- 51. CH3 H
- 52 OH CH3 H U1 H CH, _n U! OK OK, Ä) ’ ‘ “· 0-0 kännetecknat därav, att man odlar en av följande M 144-producerande stammar Streptomyces sp. ME505-HE1 (FERM P-3667) ATCC 31273, Streptomyces galilaeus MA 144-M1 (FERM P-2455) ATCC 31133, Streptomyces galilaeus ATCC 14969, Streptomyces cinereoruber ATCC 19740, Streptomyces niveoruber ATCC 14971 , Streptomyces antibioticus ATCC 8663 eller Streptomyces purpurascens ATCC 25489 under submersa aeroba förhällanden i ett näringsmedium, som innehäller en kolkälla, ett kvävenäringsmedel, oorganiska salter och spärmetaller vid en temperatur mellan 20 och 37 °C och pH mellan 6 och 9 i 2...7 dagar, varefter man
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FI800169A FI63945C (fi) | 1976-10-05 | 1980-01-21 | Foerfarande foer framstaellning av nya tumoerer motverkande anracyklinglykosidantibiotika |
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP12023776 | 1976-10-05 | ||
| JP12023776A JPS5344555A (en) | 1976-10-05 | 1976-10-05 | Anthracyclin.glycoside antibiotics |
| JP6090877 | 1977-05-24 | ||
| JP6090877A JPS5463067A (en) | 1977-05-24 | 1977-05-24 | Oncostatic drugs and their preparation |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI772915A FI772915A (fi) | 1978-04-06 |
| FI57444B FI57444B (fi) | 1980-04-30 |
| FI57444C true FI57444C (fi) | 1980-08-11 |
Family
ID=26401967
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI772915A FI57444C (fi) | 1976-10-05 | 1977-10-03 | Foerfarande foer framstaellning av nya tumoerer motverkande antracyklin-glykosid antibiotika ma 144 |
Country Status (18)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US4207313A (fi) |
| AU (1) | AU505971B2 (fi) |
| CA (1) | CA1100895A (fi) |
| CH (1) | CH637160A5 (fi) |
| DE (1) | DE2743654B2 (fi) |
| DK (1) | DK145200C (fi) |
| ES (1) | ES471823A1 (fi) |
| FI (1) | FI57444C (fi) |
| FR (1) | FR2403350A1 (fi) |
| GB (1) | GB1589536A (fi) |
| GR (1) | GR63996B (fi) |
| HU (1) | HU181999B (fi) |
| IE (1) | IE46236B1 (fi) |
| LU (1) | LU78242A1 (fi) |
| NL (1) | NL176004C (fi) |
| NO (2) | NO148959C (fi) |
| SE (1) | SE425798B (fi) |
| YU (1) | YU40483B (fi) |
Families Citing this family (19)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4123608A (en) * | 1977-07-18 | 1978-10-31 | Bristol-Myers Company | Antibiotic compound |
| JPS5543012A (en) * | 1978-09-20 | 1980-03-26 | Sanraku Inc | Novel anthracycline derivatine and its preparation |
| JPS6023679B2 (ja) * | 1979-07-13 | 1985-06-08 | メルシャン株式会社 | ロドマイシン群抗生物質とその製造法 |
| JPS5648893A (en) * | 1979-09-07 | 1981-05-02 | Sanraku Inc | Preparation of anthracycline glycoside |
| EP0030255B1 (en) * | 1979-09-07 | 1986-01-29 | Sanraku Incorporated | 2-hydroxyaclacinomycin a, pharmaceutical composition containing it; 2-hydroxyaclavinone and fermentative process for preparing same |
| CH648327A5 (de) * | 1980-10-16 | 1985-03-15 | Hoffmann La Roche | Anthracycline. |
| JPS5874694A (ja) * | 1981-10-29 | 1983-05-06 | Sanraku Inc | アントラサイクリン誘導体 |
| JPS5995891A (ja) * | 1982-11-26 | 1984-06-02 | Kitasato Inst:The | 新規な制癌性抗生物質８０−２１７およびその製造法 |
| JPS61236792A (ja) * | 1985-04-12 | 1986-10-22 | Sanraku Inc | 新規アントラサイクリン抗生物質 |
| DE3524117A1 (de) * | 1985-07-05 | 1987-02-05 | Hoechst Ag | Neue anthracyclin-tetrasaccharide, ein verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung als cytostatik |
| DE3641833A1 (de) * | 1986-12-08 | 1988-06-09 | Behringwerke Ag | Zytostatisch wirksame anthracyclinderivate |
| US4977084A (en) * | 1989-02-16 | 1990-12-11 | Board Of Trustees Operating Michigan State University | Production, isolation, and identification of novel antifungal compounds |
| US5013549A (en) * | 1989-02-16 | 1991-05-07 | Board Of Trustees Operating Michigan State University | Production, isolation, and identification of novel antifungal compounds |
| US5066585A (en) * | 1990-07-09 | 1991-11-19 | Board Of Trustees Operating Michigan State University | Method of inhibiting fungus using novel antifungal compounds |
| KR970000591B1 (ko) * | 1993-09-03 | 1997-01-14 | 동국제약 주식회사 | 신균주 스트렙토마이세스 라벤도폴리아 DKRS 및 이를 이용한 아클라시노마이신 A, B, Y 및 아글리콘(Aglycone)의 제조방법 |
| US6589591B1 (en) * | 2001-07-10 | 2003-07-08 | Baylor College Of Medicine | Method for treating medical devices using glycerol and an antimicrobial agent |
| US20040256561A1 (en) * | 2003-06-17 | 2004-12-23 | Allyson Beuhler | Wide band light sensing pixel array |
| US20050059156A1 (en) * | 2003-08-06 | 2005-03-17 | Pharmacia Italia S.P.A. | Method for detecting contaminants in pharmaceutical products |
| AU2005231417A1 (en) * | 2004-04-02 | 2005-10-20 | Baylor College Of Medicine | Novel modification of medical prostheses |
Family Cites Families (18)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB846130A (en) | 1956-03-23 | 1960-08-24 | Ciba Ltd | New antibiotic and derivatives and salts thereof, preparations containing the same and process for the manufacture of these substances |
| US3092550A (en) * | 1957-10-29 | 1963-06-04 | Ciba Geigy Corp | Antibiotic danubomycin and process for its manufacture |
| CH362490A (de) | 1957-10-29 | 1962-06-15 | Ciba Geigy | Verfahren zur Herstellung eines neuen Antibiotikums |
| FR1533151A (fr) | 1962-05-18 | 1968-07-19 | Rhone Poulenc Sa | Nouvel antibiotique et sa préparation |
| FR1527892A (fr) | 1967-03-15 | 1968-06-07 | Rhone Poulenc Sa | Nouveau procédé de préparation de l'antibiotique 13057 r.p. |
| YU33730B (en) * | 1967-04-18 | 1978-02-28 | Farmaceutici Italia | Process for preparing a novel antibiotic substance and salts thereof |
| US3803124A (en) * | 1968-04-12 | 1974-04-09 | Farmaceutici It Soc | Process for the preparation of adriamycin and adriamycinone and adriamycin derivatives |
| US3686163A (en) * | 1968-05-14 | 1972-08-22 | Farmaceutici Italia | Dihydrodaunomycin antibiotic and derivatives thereof |
| FR1593235A (fi) | 1968-11-18 | 1970-05-25 | ||
| US3616624A (en) * | 1969-11-04 | 1971-11-02 | Becton Dickinson Co | Laminar flow work bench |
| US3828021A (en) * | 1972-06-14 | 1974-08-06 | Merck & Co Inc | Gentamicin c1 derivatives |
| GB1440626A (fi) * | 1973-05-02 | 1976-06-23 | Farmaceutici Italia | |
| GB1426637A (en) | 1973-12-04 | 1976-03-03 | Vnii Izyskaniju Novykh Antibio | Manthracyclic antibiotic and a method of production thereof |
| US3864480A (en) * | 1974-05-06 | 1975-02-04 | Merck & Co Inc | Cinerubin A and B As Antiparasitic Agents |
| JPS5134915B2 (fi) * | 1974-07-27 | 1976-09-29 | ||
| US4009328A (en) * | 1975-05-02 | 1977-02-22 | Schering Corporation | Aminoglycoside 66-40C, method for its manufacture, method for its use as an intermediate in the preparation of known antibiotics and novel antibacterials |
| JPS5231051A (en) * | 1975-09-03 | 1977-03-09 | Kowa Co | Preparation of amino sugar derivatives |
| US4039736A (en) * | 1976-04-15 | 1977-08-02 | Bristol-Myers Company | Antibiotic compounds marcellomycin and musettamycin |
-
1977
- 1977-09-22 CH CH1159577A patent/CH637160A5/fr not_active IP Right Cessation
- 1977-09-22 NL NLAANVRAGE7710380,A patent/NL176004C/xx not_active IP Right Cessation
- 1977-09-28 DE DE2743654A patent/DE2743654B2/de active Granted
- 1977-09-30 NO NO773353A patent/NO148959C/no unknown
- 1977-09-30 FR FR7729595A patent/FR2403350A1/fr active Granted
- 1977-09-30 SE SE7710972A patent/SE425798B/xx not_active IP Right Cessation
- 1977-09-30 DK DK435577A patent/DK145200C/da not_active IP Right Cessation
- 1977-09-30 HU HU77ZA402A patent/HU181999B/hu not_active IP Right Cessation
- 1977-09-30 CA CA287,886A patent/CA1100895A/en not_active Expired
- 1977-09-30 IE IE2007/77A patent/IE46236B1/en unknown
- 1977-10-03 GB GB41047/77A patent/GB1589536A/en not_active Expired
- 1977-10-03 FI FI772915A patent/FI57444C/fi not_active IP Right Cessation
- 1977-10-03 US US05/838,617 patent/US4207313A/en not_active Expired - Lifetime
- 1977-10-03 YU YU2352/77A patent/YU40483B/xx unknown
- 1977-10-03 GR GR54487A patent/GR63996B/el unknown
- 1977-10-04 LU LU78242A patent/LU78242A1/xx unknown
- 1977-10-04 AU AU29337/77A patent/AU505971B2/en not_active Expired
-
1978
- 1978-06-05 NO NO78781949A patent/NO147953C/no unknown
- 1978-07-17 ES ES471823A patent/ES471823A1/es not_active Expired
-
1979
- 1979-05-10 US US06/037,804 patent/US4245045A/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| NO147953C (no) | 1983-07-20 |
| FI57444B (fi) | 1980-04-30 |
| FR2403350B1 (fi) | 1981-04-30 |
| NO148959B (no) | 1983-10-10 |
| AU505971B2 (en) | 1979-12-06 |
| CH637160A5 (fr) | 1983-07-15 |
| US4207313A (en) | 1980-06-10 |
| NL176004B (nl) | 1984-09-03 |
| GB1589536A (en) | 1981-05-13 |
| IE46236L (en) | 1978-04-05 |
| HU181999B (en) | 1983-11-28 |
| LU78242A1 (fi) | 1978-01-26 |
| SE7710972L (sv) | 1978-04-06 |
| NL176004C (nl) | 1985-02-01 |
| DK145200C (da) | 1983-02-28 |
| DK145200B (da) | 1982-10-04 |
| SE425798B (sv) | 1982-11-08 |
| YU235277A (en) | 1982-06-30 |
| YU40483B (en) | 1986-02-28 |
| GR63996B (en) | 1980-01-18 |
| DE2743654A1 (de) | 1978-04-06 |
| NO147953B (no) | 1983-04-05 |
| DE2743654C3 (fi) | 1980-08-21 |
| FR2403350A1 (fr) | 1979-04-13 |
| US4245045A (en) | 1981-01-13 |
| IE46236B1 (en) | 1983-04-06 |
| AU2933777A (en) | 1979-04-12 |
| NL7710380A (nl) | 1978-04-07 |
| CA1100895A (en) | 1981-05-12 |
| ES471823A1 (es) | 1979-02-01 |
| FI772915A (fi) | 1978-04-06 |
| DE2743654B2 (de) | 1979-12-13 |
| NO773353L (no) | 1978-04-06 |
| NO148959C (no) | 1984-01-18 |
| NO781949L (no) | 1978-04-06 |
| DK435577A (da) | 1978-04-06 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| FI57444C (fi) | Foerfarande foer framstaellning av nya tumoerer motverkande antracyklin-glykosid antibiotika ma 144 | |
| US4970198A (en) | Antitumor antibiotics (LL-E33288 complex) | |
| US5108912A (en) | Antitumor antibiotics (LL-E33288 complex) | |
| EP0602597B1 (en) | Process for preparation of indolopyrrolocarbazole derivatives | |
| JPH0566394B2 (fi) | ||
| RU2026302C1 (ru) | Способ получения n-алкилпроизводных антибиотиков или их фармацевтически приемлемых солей | |
| NZ208622A (en) | Anthracycline derivatives, preparation by fermentation process and pharmaceutical compositions | |
| US5643760A (en) | Microbial process for preparation of indolopyrrolocarbazole derivatives | |
| Cassinelli et al. | NEW ANTHRACYCLINE GLYCOSIDES FROM MICROMONOSPORA II. ISOLATION, CHARACTERIZATION AND BIOLOGICAL PROPERTIES | |
| US4209588A (en) | Process for producing new antitumor anthracycline antibiotics | |
| CA1097238A (en) | Antitumor antibiotics ma 144-m .sub.1 and ma 144- m.sub.2 | |
| US4373094A (en) | Anthracycline derivatives | |
| CA1093998A (en) | Antitumor antibiotic baumycin complex and components thereof | |
| EP0110155B1 (en) | Novel anthracycline derivatives, a process for preparing the same by a microorganism strain, the novel strain streptomyces cyaneus, and use of the anthracycline derivatives as medicaments | |
| KR920001448B1 (ko) | Bbm-2478 항생제 착화합물 | |
| JP2791028B2 (ja) | Ｌｌ−ｅ３３２８８抗生物質のジヒドロ誘導体 | |
| EP0118732B1 (en) | An anthracycline compound, a process for the production thereof, a pharmaceutical composition containing the same and its use as a medicament | |
| EP0206138A1 (en) | Anthracycline compounds, a process for their preparation and their use as medicaments | |
| CA1207693A (en) | Compound, arugomycin | |
| EP0157203A2 (en) | Antitumor agents LL-D49194 alpha 1, LL-D49194 beta, LL-D49194 beta 2, LL-D49194 upsilon, LL-D49194 delta, LL-D49194 epsilon, LL-D49194 zeta, and LL-D49194 eta | |
| JP4443740B2 (ja) | アントラサイクリン抗生物質 | |
| EP0205981B1 (en) | A novel anti-tumor and antimicrobial compound, its microbiological preparation and its use as medicament | |
| FI63945B (fi) | Foerfarande foer framstaellning av nya tumoerer motverkande anracyklinglykosidantibiotika | |
| JP2581931B2 (ja) | 新規アントラサイクリン抗生物質 | |
| CA1125746A (en) | Antitumor antiobiotics ma 144-m.sub.1 and ma 144- m.sub.2 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM | Patent lapsed |
Owner name: ZAIDANHOJIN BISEIBUTSU KAGAKU KENKYUKAI |