FI116885B

FI116885B - Endoparasiitteja tappavat aineet

Info

Publication number: FI116885B
Application number: FI950091A
Authority: FI
Inventors: Peter Jeschke; Achim Harder; Norbert Mencke
Original assignee: Bayer Ag
Priority date: 1994-01-11
Filing date: 1995-01-09
Publication date: 2006-03-31
Also published as: CZ6195A3; DE4400464A1; NO950093L; EP0662326A2; FR06C0002I2; AU8159294A; FR06C0002I1; CN1121429A; RU2124364C1; NO2006001I1; NO2006001I2; CZ290246B6; ES2168285T3; PT662326E; DE122006000001I2; NZ270300A; NO307030B1; DK0662326T5; NO950093D0; CA2139725C

Description

Endoparasiitteja tappavat aineet

Keksintö koskee pratsikvantelin ja epsiprantelin kä listen depsipeptidien endoparasiitteja tappavan vaikutuksen 1 5 si endoparasiitteja tappavissa aineissa.

Pratsikvanteli 2-{sykloheksyylikarbonyyli)-1,2,3,6, sabydro-4H-pyratsino[2,1-a]isokinolin-4-oni ja sen endopa vastainen vaikutus tunnetaan GB-patenttijulkaisusta 1 441 554.

Epsipranteli 2-(sykloheksyylikarbonyyli)-2,3,6,7,8, 10 hydro-pyratsino[2,1-a][2]bentsatsepin-4(1H)-oni ja sen endopa vastainen vaikutus tunnetaan EP-hakemusjulkaisuista 134 984 ja Syklinen depsipeptidi PF1022 ja sen endoparasiitti1 2 3 nen vaikutus tunnetaan EP-hakemusjulkaisusta 382 173.

Muita syklisiä depsipeptidejä ja niiden endoparasii 15 täinen vaikutus ovat julkaisemattomien patenttihakemusten ruusjulkaisut P 4 317 432.9; P 4 317 457.4; P 4 317 458,2) koht Tämän keksinnön kohteena ovat endoparasiitteja taj neet, jotka sisältävät pratsikvantelia tai epsiprantelia yhc listen depsipeptidien kanssa, joilla syklisillä depsipepti 20 kaava vU7“

vs VA

9 ιΛ i]:, X-OC-” -vOt .........- , I, -Γ1 • · · ' " ' -♦ 1 « 30 jossa Z on vety, N-morfolino, nitro, amino tai dimet • % 2 • · 3

4 _ — 1.- — ^ 1 . 1____1__1__Il____ Ί______1 L ^ ^ J

2 jxL~^jx Γΐίτ*° JL O M·

Tto ____ .

10 jossa Z on vety, N-morfolino, nitro, amino tai dimet} ja jotka koostuvat aminohapoista ja hydroksikarboksyylihapoist rakenneosina ja sisältävät 24 rengasatomia.

Edullisia syklisiä depsipeptidejä ovat sellaiset, 18 - 24 rengasatomia.

15 Depsipeptideihin, joissa on 18 rengasatomia, luetaa kaavan I mukaiset yhdisteet O Rj

vVV

‘ O^o Me 20 RXrMe M,nXo O)

Re o ♦ · · ·*· * jossa _______ • · · R1, R3 ja R5 ovat toisistaan riippumatta vety, suoraketjuinen

; ; 25 roittunut alkyyli, jossa on enintään 8 hiiliatomia, hydrokE

··« • ·*· alkanoyylioksialkyyli, alkoksialkyyli, aryylioksialkyyli, me ··· · kyyli, alkyylitioalkyyli, alkyylisulfinyylialkyyli, alkyylisi • » · alkyyli, karboksialkyyli, alkoksikarbonyylialkyyli, aryylialkc . nyyliaikyyli, karbamoyylia1kyyli, aminoalkyyli, aikyyliamir * * * **“ 30 diaikyyliaminoalkyyli, guanidinoalkyyli, joka voi mahdcllist ·*· substituoitu yhdellä tai kahdella bentsyylioksikarbonyyliryhj 3 atomia, hydroksialkyyli, merkaptoalkyyli, alkano alkyyli, alkoksialkyyli, aryylioksialkyyli, alky kyyli, alkyylisulfinyylialkyyli, alkyylisulfonyyl karboksialkyyli, alkoksikarbonyylialkyyli, aryyl 5 karbonyylialkyyli, karbamoyylialkyyli, aminoalk^ kyyliaminoalkyyli , dialkyyliaminoalkyyli, alkoksi liaminoalkyyli, alkenyyli, sykloalkyyli, sykloa kyyli, mahdollisesti substituoitu aryyli tai ary li, jolloin substituentteina voidaan mainita h 10 hydroksi, alkyyli, alkoksi, samoin kuin niiden optiset isomeerit ja rasemaat O R3

vW

0^0 Me 0 R, RXN.Me < ’ > »v/>.

20 Rs o

Edullisia ovat kaavan I mukaiset yhdisteet, :T: jossa R1, R3 ja R5 ovat toisistaan riippumatta suoraketj :***; 25 haaroittunut C^-alkyyli, erityisesti metyyli, f propyyli, isopropyyli, butyyli, isobutyyli, sek • M * tert-butyyli, pentyyli, isopentyyli, sek-pentyyli li, isoheksyyli, sek-heksyyli, heptyyli, isoheptj heptyyli, tert-heptyyli, oktyyli, iso-oktyyli-sek

Hl 30 hydroksi-Ci_6-alkyyli, erityisesti hydroksimetyyl * * ···* -rnlroi o-htrtjl 1 Γ1 tannuul i nlrcH —fV -—alli'w'H nr 4 merkaptometyyli, C^-alkyylitio-C^g-alkyyli, er j rae tyyli tioe tyyli, C^-alkyylisulfinyyli-Ci.e-alkyj

tyisesti metyylisulfinyylietyyli, C^-alkyylisuJ

C^-alkyyli, erityisesti metyylisulfonyylietyyli, ] 5 C1_6-alkyyli, erityisesti karboksimetyyli, karboks C1_4-alkoksikarbonyyli-C1.6-alkyyli/ erityisesti me1 bonyylimetyyli, etoksikarbonyylietyyli, C^-aryyl: karbonyyli-Ci.g-alkyyli, erityisesti bentsyylioksil· limetyyli, karbamoyyli-C^.g-alkyyli, erityisesti ki 10 limetyyli, karbamoyylietyyli, amino-C^-alkyyli, e:

ti aminopropyyli, aminobutyyli, G^-alkyyliamino-C

li, erityisesti raetyyliaminopropyyli, metyyliamim C^-dialkyyliamino-C^-alkyyli, erityisesti dimel nopropyyli, dimetyyliaminobutyyli, guanido-C^.g- 15 erityisesti guanidopropyyli, C^-alkoksikarbony^ C^-alkyyli, erityisesti tert-butoksikarbonyyliami: li, tert-butoksikarbonyyliaminobutyyli, 9-fluori toksikarbonyyli( Fmoc Jamino-Ci.e-alkyyli, erityisesti renyyli-metoksikarbonyyli(Fmoc)aminopropyyli, 9-f] 20 li-metoksikarbonyyli(Fmoc)aminobutyyli, C2_8-alkeny tyisesti vinyyli, allyyli, butenyyli, C3_7-syklc ***** erityisesti syklopentyyli, sykloheksyyli, syklol :T: C3.7-sykloalkyyli-C1.4-alkyyli, erityisesti syklopei tyyli, sykloheksyylimetyyli, sykloheptyylimetyyld ;***; 25 li-C-^-alkyyli, erityisesti fenyylimetyyli, joka : .*· dollisesti olla substituoitu ryhmillä, joita ovat .···* ni, erityisesti fluori, kloori, bromi tai jodi, * • < * C^-alkoksi, erityisesti raetoksi tai etoksi, Cj_4“ , erityisesti metyyli, • * 30 R2, R4 ja R6 ovat toisistaan riippumatta suoraketji *···* haaroittunut C.e-alkyyli, erityisesti metyyli.

5 tyyli, hydroksi-C^-alkyyli, erityisesti hydroksd 1-hydroksietyyli, C1.4-alkanoyylioksi-C1.6-alkyyli, sesti asetoksimetyyli, 1-asetoksietyyli, Cj_4-alk< alkyyli, erityisesti metoksimetyyli, 1-metoks 5 aryyli-C^-alkyylioksi-C^-alkyyli, erityisesti b« oksimetyyli, 1-bentsyylioksi-etyyli, merkapto-C1-6-erityisesti merkaptometyyli, C^-alkyylitio-CVg-erityisesti metyylitioetyyli, Ci.*-alkyyli sulfin; alkyyli, erityisesti metyylisulfinyylietyyli, Cx_4-10 sulfonyyli-Ci.e-alkyyli, erityisesti metyylisulfon^ li, karboksi-C^-alkyyli, erityisesti karboksimety boksietyyli, C1.4-alkoksikarbonyyli-C1_6-alkyyli, er metoksikarbonyyliinetyyli, etoksikarbonyylietyy 1 i, lialkoksikarbonyyli-C^-alkyyli, erityisesti bents; 15 karbonyylime tyyli, karbamoyyli-C1_6-alkyyli, erd karbamoyylimetyyli, karbamoyylietyyli, amino-C^-erityisesti aminopropyyli, aminobutyyli, C^-alky^ C^g-alkyyli, erityisesti metyyliaminopropyyli, me1 nobutyyli, C^-dialkyyliamino-C^e-alkyyli, erityis 20 metyyliaminopropyyli, dimetyyliaminobutyyli, C2.8-a erityisesti vinyyli, allyyli, butenyyli, C3_7-syklc t erityisesti syklopentyyli, sykloheksyyli, syklo! :T: C3.7-sykloalkyyli-C1_4-alkyyli, erityisesti sykloper tyyli, sykloheksyylimetyyli, sykloheptyylimetyyld ·“’· 25 li, fenyyli-C^-alkyyli, erityisesti fenyylimetyj ··· : on mahdollisesti substoituoitu ryhmillä, joita o\ geeni, erityisesti fluori, kloori, bromi tai jodi, * * * si, Cx_4-alkoksi, erityisesti metoksi tai etoksi, C3 , li, erityisesti metyyli, ♦ * * 30 samoin kuin niiden optiset isomeerit ja rasemaatd • · **··* Erityisen edullisia ovat kaavan I mukaise 6 R1, R3 ja R5 ovat toisistaan riippumatta suoraketji haaroittumaton C^e-alkyyli, erityisesti metyyli, propyyli, isopropyyli, butyyli, isobutyyli, sek-pentyyli, isopentyyli, sek-pentyyli , heksyyli, ii 5 li, sek-heksyyli, heptyyli, isoheptyyli, sek-1

oktyyli, iso-oktyyli, sek-oktyyli, hydroksi-C^· erityisesti hydroksimetyyli, 1-hydroksietyyli, yylioksi-Ci.g-alkyyli, erityisesti asetoksimetyyld toksietyyli, Cj^-alkoksi-C^-alkyyli, erityisesti 10 metyyli, 1-metoksietyyli, aryyli-C^-alkyylioksi-C

li, erityisesti bentsyylioksimetyyli, bentsyylioki C1.4-alkoksikarbonyyliamino-C1.6-alkyyli, erityises butoksikarbonyyliaminopropyyli, tert-butoksikarboi nobutyyli, C2_8-alkenyyli, erityisesti vinyyli, 15 C3_7-sykloalkyyli, erityisesti syklopentyyli, syklo! sykloheptyyli, C3.7-sykloalkyyli-C1_4~alkyyli, er: syklopentyylimetyyli, sykloheksyylimetyyli, syklol metyyli, fenyyli-C^-alkyyli, erityisesti fenyyl: jossa voi mahdollisesti olla substituoitu yhd 20 usealla samoilla tai erilaisilla edellä mainitud mistä, ***** R2, R4 ja R6 ovat toisistaan riippumatta suoraketji :T: haaroittunut C^-alkyyli, erityisesti metyyli, :***; propyyli, isopropyyli, butyyli, isobutyyli, sek- ♦ ·· .···. 25 tert-butyyli, pentyyli, isopentyyli, sek-pentyyli • · · : li, isoheksyyli, sek-heksyyli, heptyyli, isohepty heptyyli, tert-heptyyli, oktyyli, iso-oktyyli, s< * * * li, hydroksi-C^-alkyyli, hydroksi-C^-alkyyli, er: , hydroksimetyyli, aryyli-C1-4-alkyylioksi-Cl.6-alkyy * * * *;;** 30 tyisesti bentsyylioksimetyyli, 1-bentsyylioksiety * *

’···" boksi-Ci.6-alkyyli, erityisesti karboksimetyyli, J

7 ti metyyliaminopropyyli, metyyliaminobutyyli, Οχ.1 2-liamino-C^-alkyyli, erityisesti dimetyyliaminoj dimetyyliaminobutyyli, C2_8-alkenyyli, erityisesti allyyli, butenyyli, C3_7-sykloalkyyli, erityisesti s 5 tyyli, sykloheksyyli, sykloheptyyli, C3_7-sykloalk: alkyyli, erityisesti syklopentyylimetyyli, syklol metyyli, sykloheptyyli-metyyli, fenyyli, fenyyli-C li, erityisesti fenyylimetyyli, joka on mahdc substituoitu yhdellä tai usealla samalla tai erd 10 edellä esitetyistä ryhmistä, samoin kuin niiden optiset isomeerit ja rasemaatd Aivan erityisen edullisia ovat kaavan 1 yhdisteet, jossa 15 R1, R3 ja R5 ovat toisistaan riippumatta suoraketji haaroittunut Cx.g-alkyyli, erityisesti metyyli, ety pyyli, isopropyyli, butyyli, isobutyyli, sek-buty tyyli, isopentyyli, sek-pentyyli, heksyyli, isol sek-heksyyli, heptyyli, isoheptyyli, sek-heptyyld 20 li, iso-oktyyli, sek-oktyyli, C2_8-alkenyyli, erd allyyli, Ca^-sykloalkyyli-C^-alkyyli, erityisest heksyylimetyyli, fenyyli-C^-alkyyli, erityisesti :T: metyyli, :3: R2, R4 ja R6 ovat toisistaan riippumatta suoraketji • 3j 25 haaroittunut Cj_8-alkyyli, erityisesti metyyli, ety * 1 1 : pyyli, isopropyyli, butyyli, isobutyyli, sek-buty .···[ tyyli, isopentyyli, sek-pentyyli, heksyyli, isol • · # sek-heksyyli, heptyyli, isoheptyyli, sek-heptyyld , li, iso-oktyyli, sek-oktyyli, C2.8-alkenyyli, erd • 1 1 111 30 vinyyli, allyyli, C3_7-sykloalkyyli-C1.4-alkyyli, erd 2 • φ 3 *···1 sykloheksyylimetyyli, fenyyli-Ci,4-alkyyli, erityii 8

Keksinnön mielessä voidaan käyttää kaikki kaavan I mukaisia yhdisteitä, jotka ovat optises visissa, stereomeerisissä muodoissa kuten myös ra seoksina. Erikoisesti keksinnön mukaisesti käyte 5 tenkin kaavan 1 mukaisten yhdisteiden optisesti siä, stereo!someerisiä muotoja.

Yksitellen voidaan mainita yleisen kaavan set yhdisteet, jossa ryhmillä R1 - R* on seuraava 10 0 Rs

r2/nV

0^.0 Me OyR, l5 iPv*’ "vAo (I> 15 Ki ij* .

Re O

4 • 4 »f « 4 4 4 4 4 4 4 • 4» • 4 • 4 4 44 M« • 4 • 4 • I» • fr » I · 4 4 4 44# 4 444 4 4 4 4 4 4 « 4 4 4 4 4 4 4 • 4 4 444 4 4 4 4 4 4 4 9 _R|____R]__R^__R^__; -CRMeCH^Me -eyklohekeyyll -CHMoCH,Mo -Me__-CHMeCH,Me _ -CHMcCH,Mc - eyklohekeyy 11 -CHMeCH,Mc -Me__-CKMeCH,Mc -« -CHMeCKiMe -CHyPhc__-CHMaCH,Me -Me__-CHMeCH,Me 5 -CHMcCH,Mc -CIlyPhe__-CHMaCH,Me -Me__-CHMeCH,Me -CHMeCtiiMe -(CH,),-Me__-CHMeCH^te -Me__-CHMeCH,Me -CHMeCH,Me -(CH,)yMe__-CHMeCH,Mc -Me__-CHMeCH,Me -CHMe,__-CHyPhe__-CHMeCH,Me -Me__-CHMeCH,Me -CHyPhe__-CHMe,__-CHyPhe__-CHMe, -CHMeCH,Me -CH,CtiMe,__-CHyPhe__-CH,CHMe, -Me__-CH,CHMe,__ -(CH,)vMe__-lAt__-CHMeCH^ie -Me__-CHMeCH,Me -CHMe,__-Me__-CHMe,__;Me__-CHMe,__ -CHyMe__-Me__-CHyMe__-Me__-CHyMe__ -(CH,),-Mc__;Me__-<CH,)yMe -Me__-(CH,)yMe__ (CH,)yMe__;Me__-(CH,)rMe -Me__-(CH,)rMe__ 15 -CHyCH=CH, -Me__-CH,-CH=CH, -Me__-{CH,)-CH=CH, -CHMeCHJvle -Me -CHMeCH,Me -Me -CHMeCH,Me -CHMcCH,Me -Me__-CHMeCH,Me -Me__-CHMeCH,Me -CHMeCH,Me -Me__-CHMeCH,Ma -Me__-CHMeCH,Me _ I-CHMcCH,Me -Me__-CHMeCH,Ma -Me__-CH,Me__ -CHMeCHtMe -Me__-CHMeCH,Mc -Me__-(CH,)yMe__ -yklohekeyyll -Me -eyklohekejyH -Me_ -eyklohekiyyM _ -CH,CHMe, -ayklohekeyyll -CH,CHMe, -Me__-CH,CHMe, -CH,CHMc, -eyklohekeyyl 1 -CH,CHMe, -Me___-CI I, CHMe,__ lV: -CHMeCH,Me -CHMe,__-CHMeCH,Me -CHMe, -CHMeCH,Ma ;*"· -CHyPhe__;Me__-CHyPhe__-Me__-CHyPhe__ *·* 25 11 - eyklohekeyyl1 -Me_-»rklohekeyyll .Me_ -eyklohekeyyli /" -CHMe,__-CHMe,__-CHMe__;Mo__-CHMe,__ 2*· · -CHM&i__-CHMe,__-CHMe,__-CHMe, -CHMe,__ V * -CHyMe__-CHMe,__-CH,Me__-Me__-CHyMe__ -CHyMe__-CHMe,__-CHMe,__-CHMe, -CHyMe__ . ,·. -<CH,),-Me__-CHMe,__-fCH,VMe -Me__-(CH,)yMe__ III 30 -(CH,)yMe__-CHMe,__-(CH,)yMe -CHMe, -(CH,),-Me__ • * /mix u. PUll- /no x 1/. 11. /nrr v 11* 10

Il R1 R2__Rf___R1_ J

I -(CH,),-Mc -CHMe,__(CH^-Mc -CHMe, -(CH,)rMe__; I -CH,-CH=-CH,__-CHMe,__-CH,-CH°CH, -Me__-CH,-CH=CH, _ | -CH,-CH«CH, -CHMe,__-CH,-CH-CH, -CHMe, -CH,-CH~CH, _ _ ® I -Me -Me__-CHMeCH,Me -Me__-CH,-Me__; II -Me__-Me_ -CHMcCH,Me ^Me^

Me metyyli; Phe = fenyyli 10 Edelleen voidaan depsipeptidinä mainita E] julkaisusta 382 173 tunnettu yhdiste PF 1022, seuraava kaava: 15 Ο-Ζ^-Ν,Α •^Λο o ♦ · • » ·♦· 25 Lisäksi voidaan depsipeptideinä mainita h *** : lisestä POT-hakemus julkaisusta W0 93/19 053 tun «1· · disteet.

• · ·

Erityisesti voidaan mainita kansainvälis , hakemusjulkaisusta HO 93/19 053 yhdisteet, joill • 1 · *"·1 30 raava kaava: * · · ♦ 11 jossa Z on N-morfolinyyli, nitro, amino, mono- tai dime no.

15 Lisäksi voidaan mainita yhdisteet, joille raava kaava:

fRl Me O

» /°V/o s IV-l· g , <>°Λ öH_“e O Me r3 . jossa • * « *·;;* 30 R1, R2, R3 ja R4 ovat toisistaan riippumatta vety, • ♦ *·.·* kvvli tai arvvli. eritvisesti fenwli. 1otka on i Λ 12 ai·, J. Antibiotics 45 (1992) s. 1273 - 1277 [e A, B ja C]; Hiroshi Tomoda et ai., J- Antibd (1992) s* 1207 - 1215 [enftiatiini A, Alr B, Blr synteesin kautta, katso esimerkiksi: P. Quitt 5 Helv. Chimica Acta 46 (1963) s. 1715 - 1720? P. ai., Helv. Chimica Acta 47 (1964) s. 166 - 173 [e A]; Pl. A. Plattner et ai., Helv. Chimica Acta s. 927 - 935 [enniatiini B] ? Yu. A. Ovchinnikov Tetrahedron Lett. 2 (1971) s. 159-162? R. W. ] 10 ai., Biochem. Biophys. Res* Commun. 57 (1974) s* [beauverisiini]; Yu. A. Ovchinnikov et ai., Zh Khim. 42 (19) (1972) s. 2320 - 2334; ref.

58 77 k), tai ne voidaan saada julkaisuissa ma menetelmi11ä.

15 Kaavan I mukaiset yhdisteet voidaan valmis telmällä, jonka U. Scmidt et ai. on kuvannut ma sille peptidialkaloideille (katso esimerkiksi: U et ai·, Synthesis (1991) s. 294 - 300 [didemniin C]? Angew. Chem. 96 (1984) s. 723 - 724 [dolasta 20 Angew. Chem. 102 (1990) s. 562 - 563 [fenesl

Angew. Chem. 97 (1985) s. 606 - 607 [ulisyklaa ·:*·: Org. Chem. 47 (1982) s. 3261 - 3264).

Kaavan I mukaiset yhdisteet valmistetac että • * .···. 25 a) syklisoidaan yleisen kaavan 11-a muka boksi-aktivoituja, avoketjuisia heksadepsipeptid • · » *·· ·

Me O R, Me O R4 Me 0 R6

30 R, o r3 o r5 o pA

··· 13 R1, R2, R3, R4, R5 ja R6 ovat edellä mainitut, hydrauskatalysaattorin, emäksisen reaktioapuaine< tnennusaineen läsnä ollessa, tai b) syklisoidaan yleisen kaavan Il-b muka 5 ketjuisia heksadepsipeptidejä

Me O R, Me O R4 Me O R6 Α-"γ^ο^ΑγΜγν^ο'ΥΗ

R, o R3 o R5 O

10 jossa R1, R2, R3, R4, R5 ja H6 ovat edellä mainitut, liittämisreagenssin, emäksisen reaktioapuaineen ; nusaineen läsnä ollessa.

15 Jos menetelmässä a) kaavan I mukaisten uu listen heksadepsipeptidien (enniatiinien) valmis kaavan II mukaisina yhdisteinä käytetään N-bents karbonyyli-N-metyyli-L-isoleusyyli-D-laktyyli-N-n isoleusyyli-D-laktyyli-N-metyyli-L-isoleusyyli-D-20 po-pentafluorifenyyliesteriä, niin menetelmä voic tää seuraavalla reaktiokaaviolla: ο ^θγγ°ν/°νΛν O 25 0 ΛμΘ ° pMe ° ^Me ° ' : Me Me Me

Mi i ,VIW

··· • · ♦

H2, 10-% Pd/C, 4-pyrro- I

lidino-pyridiini (kat.) J, dioksaani, C2H,-0H, S

s 30 .. /N

::: 0Μβγ^Μβ • # Il 1 • μ II I ä 14

Menetelmän a) suoritukseen lähtöaineina ta avoketjuisten heksadepsipeptidien karboksyylia johdannaiset määritellään yleisesti kaavalla ] kaavassa A ja R1 ja R6 ovat erikoisesti ryhmiä, 5 mainittu näille substituenteille edullisina jo kaavan 1 mukaisten aineiden kuvauksen yhteydessä Lähtöaineina käytetyt kaavan II-a mukaise si-aktivoidut pentafluorifenyyliesterit voidaan s jallisuudesta tunnetuilla menetelmillä (katso L. 10 et ai., J. Org. Chem. 35 (1970), s. 3563? L. Kis ai., J. Org. Chem. 44 (1979) s. 654 - 655). Niide tusta kuvataan edelleen alla.

Yksitellen voidaan mainita seuraavat yle van Ha mukaiset yhdisteet, jossa ryhmillä A ja : 15 seuraava merkitys:

Me O R2 Me O R. Me O R6 F

R, O R3 O Rs O

20 F

« 4 #·· • ft · • · · ··« • a • 1 ··· «·· • · • · • a· • · • · ft ♦ · « ·« · « «·« • · « • « ft • ft ft « ft ft ft · ··· ·· • » ft » ··# 15 a r1 P ~ P IR4 IR3 2 -CHMeCHjMc -ayklohakayyl* -CHMeCHjMe -Me -CHMeCHjMe

Bn -CHMeCHjMc -ayklohekayyli CHMeCHjMc Me .CHMeCHjMe

Bn -CHMeCHjMe -CHj-Phe -CHMeCHjMe -Me -CHMeCHjMe

Bn -CHMeCHjMe -CHj-Phe -CHMeCHjMe -Me -CHMeCHjMe Z -CHMeCHjMe -(CHj^-Me -CHMeCHjMe -Me -CHMeCHjMe 5 Z -CHMeCHjMe -(CHjJj-Me -CHMeCHjMe -Me -CHMeCHjMe

Bn -CHMeCHjMe -{CHj)rMe -CHMeCHjMe -Me -CHMeCHjMe

Bn -CHMe, CHj-Phe -CHMeCHjMe -Me -CHMeCHjMe Z -CHj-Phe -CHMej -CHj-Phe -CHMej -CHMeCHjMe

Bn -CHjCHMej -CHj-Phe -CHjCHMej -Me CHjCHMej

Bn -CHj-Me -Me -CHj-Me -Me -CH,-Me Z -(CHj)j-Me -Me -(CH2>j-Me -Me -(CHj)j-Me 10 Bn -(CHj)j-Me -Me -(CH,)3-Me -Me -(CHj)3-Me

Bn -CHj-CH-CHj -Me CHrCH“CHj -Me -CHj-CH-CHj Z -CHMeCHjMe -Me CHMeCHjMe -Me -CHMeCHjMe Z -CHMeCHjMe -Me CHMeCHjMe -Me -CHMeCHjMe Z -CHMeCHjMe -Me -CHMeCHjMe -Me -CHMeCHjMe Z -CHMeCHjMe -Me -CHMeCHjMe -Me -CHjMe Z -CHMeCHjMe -Me -CHMeCHjMe -Me -(CHj^-Me

Bn -ayklohekayyli -Me -nyklohakayyU -Me -ayklohakayylJ

15 Z -CHjCHMej -ayklohekayyli -CHjCHMej -Me CHjCHMej Z -CHjCHMej -ayklohekayyli CHjCHMej -Me -CHjCHMej Z -CHMeCHjMe -CHMej CHMeCHjMe -CHMe, -CHMeCHjMe

Bn CHj-Phe -Me CHj-Phe -Me -CHj-Phe

Bn -ayklohekayyl1 -Me -ayklohekayyli -Me -ayklohekayyli Z -CHMej CHMej -CHMej -Me -CHMej Z -CHMej -CHMea -CHMej -CHMej -CHMej 2Q Bn -CHj-Me -CHMej -CHj-Me -Me CHj-Me U Bn -CHj-Me -CHMej -CHj-Me -CHMea CHj-Me

Bn -(CHj-Me -CHMej -(CHj),-Me -Me -(CHj)j.Me ,r,j Bn (CHjVMe -CHMej -{CHj^-Me -CHMej -(CHjfc-Me

Bn -{CHjJj-Me -CHMej -(CHj)3-Me -Me -{CHj^-Me :T: Bn (CHjVMe -CHMe, -<CHj)rMe -CHMej -(CH,)3-Me eI-.e Bn -CH,CH=CHj -CHMej CH,CH-CH, -Me -CHj-CH-CHj *.··· Bn -CHj-CH-CHj CHMe2 CHj-CH-CHj CHMej -CHj-CH-CHj 25 ^ * 11 11 * " " • · « · « • t · /*·[ Bn: -CH2-fenyyll; Z: -C0-0-CH2-fenyyli; Me * metyj * * · fenyyli.

m 9 9 9 30 Kaavan XI mukaisten yhdisteiden syklisoin * ·

« · , . J J J . » | , J

16

Erikoisesti käytetään jalometallikatalysaattoreil esimerkiksi platinaa, platinaoksidia, palladiumit teniumia mahdollisesti sopivalla kantajalla, kutei kiksi hiilellä tai piidioksidilla.

5 Emäksisinä reaktioapuaineina voidaan käytl kia sopivia happoa sitovia aineita, erityisesti t< siä amiineja samoin kuin alkali- ja maa-alkaliyhc Mainittakoon näistä esimerkkeinä litiumit min, magnesiumin, kalsiumin ja bariumin hydroksid: 10 dit ja karbonaatit, lisäksi muut emäksiset yhdisi ten trietyyliamiini, trimetyyliamiinmi, tribents^ ni, tri-isopropyyliamiini, tributyyliamiini, tribi amiini, trisykloheksyyliamiini, triamyyliamiini, syyliamiini, N, N-dimetyylianiliini, N, N-dimetyyli1 15 ni, N,N-dimetyyli-p-aminopyridiini, N-metyyli-py] ni, N-metyyli-piperidiini, N-metyyli-imidatsoli, li-pyrroli, N-metyyli-morfOliini, N-metyyli-heks* ni-imiini, pyridiini, 4-pyrrolidino-pyridiini, 4-liamino-pyridiini, kinoliini, α-pikoliini, β-ρ: 20 isokinoliini, pyramidiini, akridiini, Ν,Ν,Ν’,Ν'-ΐί leeni-diamiini, N,N,NT,Nf-tetraetyleenidiamiini, liini, N-propyyli-di-isopropyyliamiini, N-etyyl:

:T: propyyliamiini, N,NT-di—metyyli—sykloheksyyliamiJ

·***· lut idiini, 2,4- lut idiini, trietyleenidiamiini, c ♦ · · .·**. 25 syklo-oktaani (DABCO), diatsabisyklononeeni (DBN; • .·. atsabisykloundekeeni (DBU).

* · · [·'./ Erikoisesti käytetään heteroaromaatteja, ki merkiksi pyridiiniä, N-metyyli-imidatsolia tai 4-, dino-pyridiiniä.

* φ * *···* 30 Laimennusaineina menetelmän a) suoritukseei *...· kyseeseen kaikki inertit orgaaniset liuottimet.

17 rietaani, trikloorietyleeni, pentakloorietaani, bentseeni, 1,2-dikloorietaani, klooribentseeni, i bentseeni, klooritolueeni, triklooribentseeni; a kuten metanoli, etanoli, isopropanoli, butanol!; < 5 kuten etyylipropyylieetteri, metyyli-tert-butyyl n-butyylieetteri, di-n-butyylieetteri, di-isobuty ri, di-isoamyylieetteri, di-isopropyylieetteri, fenetoli, sykloheksyylimetyylieetteri, dietyyl etyleeniglykolidimetyylieetteri, tetrahydrofuraa; 10 saani, diklooridietyylieetteri? nitrohiilivedy nitrometaani, nitroetaani, nitrobentseeni, klo* bentseeni, o-nitrotolueeni; nitriilit, kuten ase li, butyronitriili, isobutyronitriili, bentso: m-klooribentsonitriili; alifaattiset, sykloali 15 tai aromaattiset hiilivedyt, kuten heptaani, nonaani, kymeeni, bensiinijakeet kiehumispi st* 70 - 190 eC, sykloheksaani, metyylisykloheksaani, eetteri, ligroiini, oktaani, bentseeni, tolueeni ni; esterit, kuten etyyliasetaatti, isobutyylia 20 amidit, esimerkiksi formamidi, N-metyyliformamidi metyyliformamidi, N-metyyli-pyrrolidoni; ketoni ****** asetoni, metyylietyyliketoni. Myös mainittujen 1 :T: ja laimennusaineiden seokset tulevat kyseeseen.

·"*· Edullisia ovat eetterit, kuten esimerkiksi ··» .··*. 25 ni, ja alkoholien ja eetterien seokset.

: Menetelmä a) suoritetaan siten, että ke a « · l**\ mukaisia yhdisteitä kuumennetaan emäksisen reak • * i neen, sopivan hydrauskatalysaattorin ja vedyn läs , sa laimennusaineessa suuren laimennoksen olosuht< • · · '•!*# 30 Reaktion kesto on noin 4-20 tuntia. Rea:

• M

ritetaan lämDötiloissa välillä +20 ia +200 °C. ed 18

Keksinnön mukaisen menetelmän a) suorltl kaavan Ila mukaisen N-bentsyylioksikarbonyyli-N-mc isoleusyyli-D-laktyyli-N-metyyli-L-isoleusyyli-D-] N-metyyli-L-isoleusyyli-D-maitohappo-pentafluorife 5 terin dloksaanilluosta lisätään tlpolttaln 2-1 sisällä nopeasti sekoitettuun suspensioon, jossa molaarlset määrät käytettyä hydrauskatälysaattor merkiksi Pd/C:tä, ylimäärässä dloksaanla ja jc läpi jatkuvasti vetyä 95 eC:ssa. Liuos sisältää 10 saattorelna yleensä 0,5 - 2,5 mol, erikoisesti 1 mol 4-pyrrolidino-pyridiiniä ja 0,5 - 10 %, eri 2 - 5 % alkoholia (liuottimen perusteella).

Vaihtoehtoisesti voidaan N-bentsyylioksika: substituoldun kaavan Ila mukaisen pentafluorifen^ 15 rin sijasta käyttää myös N-bentsyyli- ja N-tert-karbonyylisubstituoituja pentafluoriestereitä, jc daan syklisolda kaksifaasijärjestelmässä menel jonka on kuvannut U. Schmidt (katso esimerkiksi ji U. Schmidt et ai., Synthesis (1991) s. 294 - 30C 20 niini A, B ja C]).

Reaktion edettyä loppuun reaktioseos jäähc * koko reaktioerä konsentroidaan tyhjössä, uutetaan :T: sella liuottimena ja jatkokäsitellään sisänsä ti tavalla. Muodostuvat tuotteet voidaan puhdistaa

«M

;*·*. 25 sella tavalla uudelleenkiteyttämällä, tyhjötis] : .·. tai pylväskromatografiällä.

• M ·

Jos menetelmässä b) uusien syklisten heksac * · · tidien (enniatiinien) valmistamiseksi kaavan Ilb n , yhdisteinä käytetään N-metyyli-L-isoleusyyli-D-lal· • · ·

’“·* 30 me tyyli-L-isoleusyyli-D-laktyyli-N-me tyyli-L-i so J

* · *—* D-maitohappoa, niin menetelmä voidaan esittää sei 19

Me O Me Me O Me Me O Me h'"Y^0^Y^°\"Y^°\0' p Me ° f*M e ° f“Me 0 5 Me Me Me 1 r 10 Ο Μθγ^^Μβ γΥΥ°

Me0V° °VM®

sX- -A

Me O . J

Me

Menetelmän a) suoritukseen lähtöaineina ta: 20 avoketjuiset heksadepsipeptidit määritellään ; kaavalla II. Tässä kaavassa R1 - R6 ovat erikoises jotka on jo mainittu keksinnön kaavan I mukaisten ··· V i kuvauksen yhteydessä.

·[": Lähtöaineina käytetyt kaavan II mukaiset ] 25 sipeptidit voidaan saada pidemmällä alla kuvatui: telmillä.

««« *

Yksitellen voidaan mainita seuraavat yleis Hb mukaiset yhdisteet, jossa ryhmillä R1 - R6 on merkitys: * ! · #m 30 C: Me O R, Me O R„ Me O R6 20 τ ρ [r5 ρ ρ -CHMeCH2Mc -»yklohek.yyii -CHMeCHjMe -Me -CHMeCHjMe -CHMeCHjMe -.ykloheksyyii -CHMeCHjMe -Me -CHMeCH2Me -CHMeCHjMe -CHrPhe -CHMeCHjMe -Me -CHMeCHjMe SSK SvMe CHMeCH.Me -Me -CHMeCH2Me 5 -CHMeCHjMe -(CH^-Me -CHMeCHjMe -Me -CHMeCHjMe -CHMcj -CHj-Phe -CHMeCHjMe -Me -CHMeCHjMe •CHj-Phe -CHMej -CHMeCHjMe -Me -CHMeCHjMe -CHjCHMej -CHrPhe -CHj-Phe -CHMe2 -CHMeCHjMe *(CH2)rMe -Me -CHjCHMej -Me -CHjCHMej -CHMea -Me -CHMeCHjMe -Me -CHMeCHjMe -CH2-Me -Me -CHMej -Me -CHMe2 io 2 CH^e Me -cH-M' -CHj-CH-CHj -Me -(CHj)j-Me -Me -(CHj)j-Me -CHMeCHjMe -Me -(CHjJj-Me -Me -(CHj)3-Me -CHMeCHjMe -Me -CHj-CHCR, -Me -CHj-CHCHj -CHMeCHjMe -Me -CHMeCHjMe -Me -CHMeCHjMe -CHMeCHjMe -Me -CHMeCHjMe -Me -CHMeCHjMe -CHMeCHjMe -Me -CHMeCHjMe -Me -CHMeCHjMe 15 -sykiohekeyyii -Me -CHMeCHjMe -Me -CHjMe -*"**-*11 -CHMeCHjMe -Me -(CH^-Me -CHjCHMej -eyklohekeyyli 2/2 -CHMeCHjMe -CHMej -TWohrt^H -Me -Tklehekejyll -CHj-Phe -Me -CHjCHMej -Me -CHjCHMej -eyklohekeyyli .j^e -CHjCHMej -Me -CHjCHMej -CHMej -CHMej -CHMeCHjMe -CHMej -CHMeCHjMe -CHMej -CHMej -CHj-Phe -Me -CHj-Phe 2 -CHj-Me -CHMej -eyklohekeyyli -Me -eyklohekeyyli -CHj-M. -CHMe, -CHMe, -Me -CHMej ...: S1'”’ T? -CHMe, -CHMej -CHM^ *;·*; -<CHj)j-Me -CHMej ___2 2 ^ ... -(CHj)j-Mb -CHMej -CHjMe -Me -CHj-Me V * -(CHj)j-Me -CHMej -CHjMe -CHMe2 -CHj-Me .··*. -CHj-CH=CHj -CHMe, -(CHj^-Me -Me -(CHj)2-Me ***** 25 -CHj-CH-CHj -CHMe, -(CHj>j-Me -CHMe2 -(CH2)j-Me -(CHjJj-Me -Me -(CH2)3-Me : -iCHj)j-Me -CHMe2 -(CHjJj-Me ·*;!/ -CHj-CH=CHj -Me -CHj-CH-CHj : -CHj-CH”CHj -CHMej -CHj-CH“CHj 30 -J----- ♦ ·· : : 21 R1 fi? [r3 Ir3 TR5

-Me -Me -CHMeCHjMe -Me -CHMeCH2M

-H -Me -Me -Me -CHMeCH2M

5 -CH2Me ^Me JVfe ^Me -CHMeCH2W

-(CH^-Me Λίβ ^Me "^Me -CHMeCHjM

-CHMej ^Me Tvfc -CHMeCH2M

-(CH2)3-Me ^Me ^Me "^fe -CHMeCH2lV

10 -CH2CHMe2 "^Me "-Me ^Me -CHMeCH2M

Me metyyli; Phe - fenyyli

Liitosreagensseina menetelmän b) suorittan 15 käyttöä kaikilla liitosreagensseilla, jotka s amidisidoksen valmistukseen [katso esimerkiksi Houben-Weyl, Methoden der organischen Chemie, n Bodanszky et ai., Peptide Synthesis, 2. painos Sons, New York 1976) tai Gross, Meienhofer, The 20 Analysis synthesis, biology (Academic Press, 1979)]. Erikoisesti turvaudutaan seuraaviin men ·;··; aktiiviesterimenetelmä pentakloori- (Pcp) ja pen fenolin (Pfp), N-hydroksisukkinimidin, N-hydrok .·*·. borneeni-2,3-dikarboksamidin (HONB), 1-hydroksi-b .*··. 25 atsolin (HOBt) tai 3-hydroksi-4-okso-3,4-dihyd ;*[·. bentsotriatsiinin kanssa alkoholikomponenttina, » i » ‘11/ nen karbodi-imideillä, kuten disykloheksyylikarb * # * * (DCC) DCC-additiivi-menetelmällä, tai n-propaan happoanhydridi (PPA)- ja seka-anhydridimenetelmä *···' 30 loyylikloridilla, etyyli- (EEDQ) ja isobutyyli-k

«M

*..·* miaatilla (IIDQ). tai liittäminen fosfoniumreaae 22 teri (DEPC) j a difenyylifosforyyliatsidi (DPI uroniumreagensseilla, kuten 2-(lH-bentsotriatsol-1,1,3,3-tetrametyyliuroniumtetrafluori-boraatti < Edullista on liittäminen fosfoniumreagei 5 kuten bis(2-okso-3-oksatsolidinyyli)fosfoniumhapi (B0P-C1), bentsotriatsol-l-yyli-oksi-tris(dimetyj fosfonium)heksafluorifosfaatti (BOP), ja fosfonihi rireagensseilla, kuten syaanifosfonihappodiety^ (DEPC) tai difenyylifosforyyliatsidi (DPPA).

10 Emäksisinä reaktioapuaineina menetelmän b] tautiseksi on käyttöä menetelmässä a) mainituilla risilla amiineilla, erityisesti trialkyyliamiined ten trietyyliamiini, N,N-di-isopropyylietyyliam N-metyyli-morfoliini.

15 Laimennusaineina menetelmän b) suorittami käyttöä menetelmässä a) mainituilla halogenoiduii: vedyillä, erikoisesti kloorihiilivedyillä.

Menetelmä b) suoritetaan siten, että yhdisi sekoitetaan kaavan II mukaisia yhdisteitä ilmod 20 liittämisreagenssien ja emäksisen reaktioapuaine ollessa laimennusaineessa suuren laimennoksen ole *:*·: sa. Reaktion kesto on 4 - 72 tuntia. Reaktio tapa! :T: pötiloissa välillä -5 ja +100 °C, edullisesti νέ ·***; ja +50 °C, erikoisen edullisesti 0 “C:sta huoneet * * * .**·. 25 laan. Työskennellään normaalipaineessa.

: .·. Keksinnön mukaisen menetelmäb b) suoritl

• I I

[11/ käytetään kaavan II mukaisen N-metyyli-L-isolei * laktyyli-N-metyyli-L-isoleusyyli-D-laktyyli-N-me isoleusyyli-D-maitohapon moolia kohden yleensä 1 • * * *·|·* 30 mol, erikoisesti 1,0 - 1,5 mol, liittämisreagenss

Reaktion edettyä loppuun reaktioliuos pesi 23 Lähtöyhdisteinä käytetyt, avoketjuiset de] dit voidaan valmistaa sinänsä tunnetuilla mene esimerkiksi menetelmillä, jotka on kuvattu jull H.-G. Lerchne ja H. Kunz; Tetrahedron Lett. 26 (4 5 s. 5257 - 5260? 28 (17) (1987) s. 1873-1876, h; esteröintimenetelmää, joka on kuvattu julkaisuss Gisin; Helv. Chim. Acta 56 (1973) s. 1476.

Syklisiin depsipeptideihin, joissa on 24 r< mia, luetaan yleisen kaavan la mukaiset yhdisteei 10

R5· R11· O

_yA\

15 R —N N-R12* (I

, >=0 R8*—( R “\ R10a O /=°

WV

20 O R R

jossa ·*·*: Rla, R2a, Rlla ja R12a ovat toisistaan riippumatta :T; C^g-halogeenialkyyli, C3_6-sykloalkyyli, aralkyyli R3a, R5a, R7a ja R9a ovat toisistaan riippumatta • · · .*··. 25 suoraketjuinen tai haaroittunut C^-alkyyli, joka ...

: dollisesti olla hydroksilla, C, .-alkoksilla, ka: * · · ... · „ ... o o ... It (-COH), karboksamidilla (-0-C-NH2), imidatsolyylil a lyylillä, guanidinolla, -SH: 11a tai C1-4-alkyylitio 30 tituoitu, ja lisäksi aryyli tai aralkyyli, jotka *·..* dollisesti olla substituoitu halogeenilla, hyd: 24 alkoksilla, karboksilla, karbokamidilla, imidatsoJ indolyylillä, guanidinolla, SH:lla tai C^-alkyy] samoin kuin aryyli tai aralkyyli, jotka voi olle tuoitu halogeenilla, hydroksilla, C^-alkyylillä 5 alkoksilla, samoin kuin niiden optiset isomeerit ja rasemaatd Edullisesti käytetään kaavan la mukaisia 3 tä, jossa

Rla, R2a, Rlla ja R12a ovat toisistaan riippumatta 10 etyyli, propyyli, isopropyyli, n-, s-, t-butyyli nyyli, joka on mahdollisesti halogeenilla, -ali OH:11a tai Cx_4-alkoksilla substituoitu, samoin ki syyli tai fenyylietyyli, jotka voi mahdollise substituoitu fenyylin kohdalla ilmoitetuilla ryhii 15 R3a - Rl0a ovat edellä esitetyt.

Erityisen edullisia ovat kaavan Ia mukais< teet, jossa

Rla, R2a, Rlla ja Rl2a ovat toisistaan riippumatta etyyli, propyyli, isopropyyli tai n-, s-, t-buty} 20 R3a, R5a, R7a ja R9a ovat vety, suoraketjuinen tai hi nut C^g-alkyyli, erityisesti metyyli, etyyli, ] *2·*: i-propyyli, n-, s-, t-butyyli, jotka voi mahd( :T: olla substituoitu C^-alkoksilla, erityisesti m< :'**· tai etoksilla, imidatsolyylillä, indolyylillä, ta * * # .*·*. 25 kyylitiolla, erityisesti metyylitiolla tai etyyl ·*· : lisäksi fenyyli, bent syy li tai fenetyyli, jotka # I t [II·] dollisesti olla substituoitu halogeenilla, er: * · # * kloorilla, , R4a, R6a, R8a ja R10a ovat toisistaan riippumatta vet: * * * 30 li, etyyli, n-propyyli, n-butyyli, vinyyli, syklol jotka voi mahdollisesti olla substituoitu mel 25

Kaavan Ia mukaiset yhdisteet voidaan valin: ten, että kaavan Ile mukaisia avoketjuisia oktade] dejä g R" O R3* R2* O R5* R11a o R7a R1* o »V»W»WoV/· R10a O R4a O R63 o R8a (Ile) 10 jossa

Rle - R12* ovat edellä ilmoitetut syklisoidaan laimennusaineen ja liittämisreagens: ollessa.

Liittämisreagensseiksi soveltuvat kalkki y] 15 jotka soveltuvat amidi sidoksen liittämiseen (kats kiksi teoksia: Houben-Weyl, Methoden der ori

Chemie, nide 15/2; Bodanszky et ai., Peptide Synti painos (Wiley & Sons, New York 1976).

Erikoisesti tulevat kyseeseen seuraavat r< 20 ja menetelmät: aktiiviesterimenetelmä pentafluori (Pfp), N-hydroksisukkinimidillä, l~hydr oksi bent si *·*** lilla, liittäminen karbodi-imideillä, kuten disyki :T: likarbodi-imidillä tai N1 - (3-dlmetyyliaininopro; etyylikarbodi-imidillä (Ebc), samoin kuin sekaha] ·**· 25 ridimenetelmä tai liittäminen fosfoniumreagensse:

»M

? .·. ten bentsotriatsol-l-yyli-oksi-tris(dimetyyliam: ·.. .

nium)heksafluori fosfaatti (BOP), bis( 2-okso-3-ol * * * dinyyli)fosfoniumhappokloridi (B0P-C1), tai fosfi a esterireagensseilla, kuten syaani f osfonihappodiet * * *l\l 30 ri (DEPC) ja difenyylifosforyyliatsidi (DPPA).

• *

Erityisen edullista on liittäminen bis(: 4 26

Reaktio tapahtuu lämpötiloissa 0 - 150 *C sesti 20 - 100 °C:ssa, erityisen edullisesti huon tilassa.

LaimennuSaineina tulevat kyseeseen kaikk 5 orgaaniset liuottimet. Näihin kuuluvat erityis» faattiset ja aromaattiset, mahdollisesti halogenc livedyt, kuten pentaani, heksaani, heptaani, syk ni, petrolieetteri, bensiini, ligroiini, bentsi lueeni, metyleenikloridi, etyleenikloridi, kl 10 hiilitetrakloridi, klooribentseeni ja o-dikloorib lisäksi eetterit, kuten dietyylieetteri ja dibuty ri, glykolidimetyylieetteri ja diglykolidimetyyl tetrahydrofuraani ja dioksaani, edelleen keton: asetoni, metyylietyyli-, metyyli-isopropyyli- ja 15 isobutyyliketoni, lisäksi esterit, kuten metyyli-liasetaatti, lisäksi nitriilit, kuten esimerkik nitriili ja propionitriili, bentsonitriili, gluta dinitriili, tämän lisäksi amidit, kuten esimerki tyyliformamidi, dimetyyliasetamidi Ja N-raetyylip 20 ni, samoin kuin dimetyylisulfoksidi, tetrametylee ja heksametyylifosforihappotriamidi.

*:**: Kaavan Ile mukaisia yhdisteitä ja liittämi •Tr seja käytetään toisiinsa nähden suhteessa 1:1 ;***« Edullinen on suunnilleen ekvimolaarinen suhde.

·«« .···. 25 Menestyksellisen reaktion jälkeen laim • .·. tislataan pois, ja kaavan Ia mukaiset yhdisteet « « t *11.* taan tavallisella tavalla, esimerkiksi kromatogr

• * J

' Kaavan Ie mukaiset avoketjuiset oktadepsi *:*:* 3° r" o r3· r2* o r5* r11* o r7“ i

• · I II I I π I I II I I

·...* n A JL w A A w Ji X κι .

4 27 jossa ryhmillä on niille edellä ilmoitetut mer saadaan siten, että kaavan lila mukaisia yhdiste r" o R* R2· o r5* r"* o R7’ R12' o R10a OR43 OR63 OR83 ana) jossa 10 A on bentsyyli ja B on OH ja

Ria _ Ri2a ova^ edellä esitetyt, hy dr ogeno ly soidaan laimennusaineen ja katalysaatt nä ollessa.

15 Kaavan Ilia mukaiset yhdisteet

R1a 0 R3* R2a 0 R5* R11> O R7* ^ O

R10a O n OR63 O R

20 (Ma) » *·**: jossa ryhmillä ovat edellä esitetty merkitys, sa :T: ten, että ♦ ·*“*· hydrolysoidaan kaavan IVa mukaisia yhdisteitä **♦ .··*: 25 R1a O R3" R2" O R** R,,a O R7a R,2a o

:-K

R™ OR 0 R®" O R

‘•0 30 (IVa) *»» • · *·«·* jossa ryhmillä on edellä esitetty merkitys.

28 jossa A on bentsyyli ja Z on OH ja

Rl\ R2a, R3·, R4*, R5* ja R10· ovat edellä esitetyt 5 ja kaavan Via mukaisia tetradepsipeptidejä R11* 0 R7' R12* 0 R* 10 R 0 R* o jossa D on vety ja B on tert-butoksi ja R*\ R7*, Re\ R9*, Ru* Ja R1J* ovat edellä esitetyt, 15 kondensoidaan laimennusaineen ja liittämisreagens ollessa.

Kaavan Va mukaisia tetradepsipeptidejä sa ten, että kaavan Vila mukaisia tetradepsipeptide 20 R1* O R3* R2* O R51 ,vri·

R10a OR4* O

• · »

» « I

jossa .··. 25 A on bentsyyli ja #** : B on tert-butoksi ja [·;/ Rla, R2a, R3a, R4a, R5a ja R10a ovat edellä esitetyt, • .

saippuoidaan laimennusaineen ja protonihapon . lessa.

• · · 30 Kaavan Via mukaisia tetradepsipeptidejä • * • ft «·« 29 jossa D on vety ja B on tert-butoksl ja muut ryhmät ovat edellä esi saadaan siten, että kaavan Vila mukaisia tetrade] 5 dejä R1a O R31 R22 O R51

10 R O R^ O

jossa A on bentsyyli ja B on tert-butoksi ja R‘\ R32, R31, R4‘, R52 ja R10· ovat edellä esitetyt, 15 hydrogenolysoidaan laimennusaineen ja katalysaatt nä ollessa.

Kaavan Vila mukaisia tetradepsipeptidejä siten, että kaavan Villa mukaisia didepsipeptide, 20 R1a O R31 (VIIIa)

.·:·! R10a O

· · : : jossa >·« :3· 25 A on bentsyyli ja *·· : Z on OH ja R11, R3® ja R102 ovat edellä esitetyt, ja • 1 2 kaavan IXa mukaisia didepsipeptidejä · · rp2a pk D®a 2

··· 30 K U K

3

3· 1 Il I

.N. .R ΠΎο\ 30 B on tert-butoksi ja R2a, R4a ja R5* ovat edellä esitetyt, kondensoidaan laimennusaineessa liittämisreagenss ollessa.

5 Keksinnön mukaiset aineet soveltuvat su< toksisuudella lämminverisillä eläimillä torjumaan nisiä sisäparasiitteja, joita esiintyy ihmisillä ; tenkasvatuksessa ja eläintenjalostuksessa hyöty-tus-, eläintarha-, laboratorio-, koe- ja lemmikki 10 lä. Ne ovat tällöin tehokkaita syöpäläisten kai yksittäisiä kehitysvaiheita vastaan, samoin kuin kyisiä ja normaalin herkkyyden omaavia lajeja Patogeenisten sisäparasiittien torjunnalla on mää: tää sairautta, kuolemantapauksia ja tuotannon ai 15 (esimerkiksi lihan, maidon, villan, vuotien, munii jän ja vastaavien tuotannossa), niin että eläimiä kasvattaa taloudellisesti ja yksinkertaisesti J käyttämällä. Patogeenisiin sisäparasiitteihin lue koisesti heisimadot, sukkulamadot ja väkäkärsäisc 20 Fseudophyllidea-lahkosta esimerkiksi: Di ph] rium spp., Spirometra spp., Schistocephalus spp.

* *!**: spp., Bothridium spp., Diphlogonoporus spp.

:T: Cyclophyllidea-lahkosta esimerkiksi: Meso< ;***: spp., Anoplocephala spp., Paranoplocephala spp., I·# ;·**. 25 spp., Thysanosomsa spp., Thysaniezia spp., »« · : spp., Stilesia spp., Cittotaenia spp., Andyra sr S.! ! ,··[ tiellä spp., Taenia spp., Echinococcus spp., H] • « * spp., Davainea spp., Raillietina spp., Hymenolep , Echinolepis spp., Echinocotyle spp., Diorchis spj * * · *···* 30 lidium spp., Joyeuxiella spp., Diplopylidium spp.

• · *·.·* Monogenea-alaluokasta esimerkiksi: Gyrc 31 cochloridium spp., Brachylalma spp., Echlnosto Echinoparyphium spp., Echinochasmus spp., Hy] spp., Fasciola spp., Fasciolldes spp·, Fasciolop! Cyclocoelum spp., Typhlocoelum spp·, Paramphlstoi 5 Callcophoron spp., Cotylophoron spp., Gigantocot: Fischoederius spp., Gastrothylacus spp., Notocoty Catatropis spp., Plagiorchis spp., Prosthogonln Dicrocoelium spp., Eurytrema spp., Troglotrema sp gonlmus spp., Collyriclum spp., Nanophyetus spp, 10 horchls spp., Clonorchis spp., Metorchis spp., He' spp., Metagonimus spp.

EnoplIda-lahkosta esimerkiksi: Trichuris ! pillaria spp., Trichomosoides spp., Trichinella ä Rhabditia-lahkosta esimerkiksi: Micronei 15 Strongyloides spp.

Strongylida-lahkosta esimerkiksi: StronyJ Triodontophorus spp., Oesophagodontus spp., T: spp., Gyalocephalus spp·, Cylindropharynx spp., 1 tomum spp., Cyclococercus spp., Cylicostephanus : 20 sophagostomum spp., Chabertia spp., Stephanurus : cylostoma spp., Uncinaria spp., Bunostomum spp. *:*·: cephalus spp., Syngamus spp·, Cyathostoma spp., Mi :T: gylus spp., Dictyocaulus spp., Muellerius spp., rongylus spp., Neostronggylus spp., Cystocaul

Ml 25 Pneumostrongylus spp., Spicocaulus spp., Elaphos- *·ι : ,·. spp., Parelaphost rongylus spp., Crenosoma spp., Pi * * * *11/ soma spp., Anglostrongylus spp., Aelurostrongyl • * « * Filaroides spp., Parafilaroides spp., Trichos' spp., Haemonchus spp., Ostertagia spp., Marshalla< • « *···* 30 Cooperia spp., Nematodirus spp., Hyostrongylus S] *...* liscoides sdd. . Amidostomura son. . Ollulanus sdd.

1' 32

Ascaridia-lahkosta esimerkiksi: Ascaris s xascaris spp., Toxocara spp., Parascaris spp., spp., Ascaridia spp.

Spirurida-lahkosta esimerkiksi: Gnathosto 5 Physaloptera spp., Thelazia spp., Gongylonema sj ronema spp., Parabronema spp., Draschia spp., Dre spp.

Filariida-lahkosta esimerkiksi: Stephar spp., Parafilaria spp., Setaria spp., Loa spp·, I 10 ria spp., Litomosoides spp., Brugia spp., Wucherei Onchocerca spp.

Gigantorhynchida-lahkosta esimerkiksi: Fd spp., Moniliformis spp·, Macracanthorhynchus spp. henorchis spp.

15 Hyöty- ja siitoseläimiin kuuluvat nisäkkäc esimerkiksi naudat, hevoset, lampaat, siat, vuota lit, vesipuhvelit, aasit, kaniinit, kuusipeurat turkiseläimet, kuten esimerkiksi vesikot, chinchi: sukarhut, linnut, kuten esimerkiksi kanat, hanhet, 20 nat, ankat, strutsit, makean- ja suolaisen vede kuten esimerkiksi taimenet, karpit, ankeriaat, mc

*:**: hyönteiset, kuten esimerkiksi mehiläiset ja silkJ

··· .

::* kat.

;***; Laboratorio- ja koe-eläimiin kuuluvat hil ··« .*··. 25 tat, marsut, kultahamsterit, koirat ja kissat.

Lemmikkieläimiin kuuluvat koirat ja kissal • · · [11/ Käyttö voi tapahtua sekä ennaltaestävästi * * · * rapeuttisesti.

e Lääkkeiden käyttö tapahtuu suoraan tai • · **:.* 30 valmisteiden muodossa enteraalisesti, parenteral dermaalisesti, nasaalisesti, käsittelemällä ymt 33 Lääkkeiden enteraalinen käyttö tapahtuu es: oraalisesti jauheen, tablettien, kapselien, tahno, mien, granulaattien, oraalisesti annettavien suspensioiden ja emulsioiden, bolusten, lääkityn : 5 juomaveden muodossa. Dermaalinen käyttö tapahtui kiksi kylvyn (kasto), suihkun (sprayt) ja päälJ (pour-on ja spot-on) muodossa. Parenteraalinen ki pahtuu esimerkiksi injektion (lihaksensisäinen, : nen, laskimonsisäinen, vatsaontelonsisäinen) muoc 10 implantaateilla.

Sopivia valmisteita ovat:

Liuokset, kuten injektioliuokset, oraalisc set, laimentamisen jälkeen oraaliseen antoon ta] tiivisteet, iholla tai kehon onteloissa käyttöön 1 15 tut liuokset, valeluformulaatiot, geelit;

Emulsiot ja suspensiot oraaliseen tai deri käyttöön samoin kuin injektiota varten; puolikiin-misteet;

Formulaatiot, joissa lääkeaine on jalostet' 20 pohjaan tai öljy-vedessä- tai vesi-öljyssä-emulsit

Kiinteät valmisteet, kuten jauheet, esisec *:**: tiivisteet, granulaatit, pelletit, tabletit, I

kapselit; aerosolit ja hengitettävät valmisteet, sisältävät muotokappaleet.

• * * .*·. 25 Injektioliuokset annetaan laskimonsisäise • * ; haksensisäisesti tai ihonalaisesti.

* * * "1/ Injektioliuokset valmistetaan siten, että ] * · * * liuotetaan sopivaan liuottimeen ja lisätään mahdc lisäaineita, kuten liuoksenvälittäjiä, happoja, • * « ’·:** 30 puskurisuoloja, hapetuksenestoaineita, säilöntä **

Liuokset steriilisuodatetaan ja täytetään pulloit 34 Lääkeaineet voidaan myös mahdollisesti fysiologisesti hyväksyttäviin kasvis- tai synti öljyihin, jotka soveltuvat injektioon.

Liuoksenvälittäjinä mainittakoon: liuottim 5 edistävät lääkeaineen liukenemista tai estävät se mistä. Esimerkkejä ovat polyvinyylipyrrolidoni, ] etyloitu risiiniöljy, polyoksietyloidut sorbitaan Säilöntäaineita ovat: bentsyylialkoholi, t: butanoli, p-hydroksibentsoehappoesteri, n-butano! 10 Oraalisia liuoksia käytetään suoraan. Ti.

käytetään ennalta tapahtuvan käyttökonsentraatioo tamisen jälkeen. Oraalisia liuoksia ja tiiviste!t tetaan edellä injektioliuosten kohdalla kuvatulli työskentelemättä steriileissä olosuhteissa.

15 Iholla käytettävät liuokset tiputetaan pää rotaan, ruiskutetaan tai suihkutetaan. Nämä liuol mistetaan edellä injektioliuosten kohdalla kuval valla.

Voi olla eduksi lisätä valmistuksessa sa] 20 neita. Sakeutusaineita ovat: epäorgaaniset sakeut kuten bentoniitit, kolloidinen piihappo, alumiinii *:**: raatti, orgaaniset sakeutusaineet, kuten selluloo: :T: naiset, polyvinyy li alkoholit ja niiden kopolymeer laatit ja metakrylaatit.

25 Geelejä levitetään tai sivellään iholle 1 • · :1]·. tään kehon onteloihin. Geelejä valmistetaan si1 • · · *11/ liuoksia, jotka on valmistettu injektioliuosten * 1 kuvatulla tavalla, sekoitetaan niin suuren määri sakeutusaineita, että saadaan kirkasta massaa, + 1 1 '···1 30 salvamainen konsistenssi. Sakeutusaineina käytetä ___· nänä edftllä mainittu ia salcputiisn-i na-i ta .

4 35

Valelu£ormulaatioita valmistetaan siten, < keaine liuotetaan, suspendoidaan tai emulgoidaan iholla hyväksyttäviin liuottimiin tai liuotin; Mahdollisesti lisätään muita apuaineita, kuten v( 5 ta, imeytymistä edistäviä aineita, hapetuksenesti valonsuoja-aineita ja/tai tarttumista edistäviä i Liuottimina mainittakoon: vesi, alkanolit, lit, polyetyleeniglykolit, polypropyleeniglykolil roli, aromaattiset alkoholit, kuten bentsyylialkoi 10 nyylietanoli, fenoksietanoli, esterit, kuten el taatti, butyyliasetaatti, bentsyylibentsoaatti, ( kuten alkyleeniglykolialkyylieetterit, kuten dipr< glykolimonometyylieetteri, dietyleeniglykolimonc eetteri, ketonit, kuten asetoni, metyylietyyliket< 15 maattiset ja/tai alifaattiset hiilivedyt, kasvis- teettiset öljyt, DMF, dimetyyliasetamidi, N-mety] lidoni, 2,2-dimetyyli-4-oksi-metyleeni-l,3-dioksc Väriaineita ovat kaikki eläimillä käyttöön väriaineet, jotka voivat olla liuotettuja tai s\ 20 tuj a.

Imeytymistä edistäviä aineita ovat es: ·:*·: DMSO, levittävät öljyt, kuten isopropyylimyristai propyleeniglykolipelargonaatti, silikoniöljyt, ra; ;’*** esterit, triglyseridit, rasva-alkoholit.

* *# .··*. 25 Hapetuksenestoaineita ovat sulfiitit tai mi ; .·. fiitit, kuten kaliummetabisulfiitti, askorbiinihi * · i * * I / tyylihydroksi tolueeni, butyy 1 ihydroks i ani soi i, toi * # # * Valonsuoj a-aineita ovat esimerkiksi novantd PO.

• a *···* 30 Tarttumista edistäviä aineita ovat esimerk: «»· ..: luloosaj ohdannaiset, tärkkelysj ohdannaiset, pol^ 36

Emulsiot ovat joko vesi-öljyssä- tai öljy tyyppi».

Ne valmistetaan siten, että lääkeaine 1: joko hydrofobiseen tai hydrofiiliseen faasiin, 5 homogenisoidaan toisen faasin liuottimen kanssa emulgoimisaineiden ja mahdollisesti muiden apu; kuten väriaineiden, imeytymistä edistävien ainei< löntäaineiden, hapetuksenestoaineiden, valonsuo; den, viskositeettia kohottavien aineiden avulla.

10 Hydrofobisena faasina (öljyinä) mainittako fiiniöljyt, silikoniöljyt, luonnolliset kasvisölj seesamiöljy, manteliöljy, risiiniöljy, synteettd glyseridit, kuten kapryyli/kapriinihappo-biglyser glyseridiseos, jossa on kasvisrasvahappoja, joide 15 pituus on C8_12, tai muita erityisesti valikoituja lisiä rasvahappoja, tyydyttyneiden tai tyydyttym; mahdollisesti myös hydroksyyliryhmiä sisältävien : pojen osittaisglyseridiseokset, C8/C10-rasvahappo; ja diglyseridit.

20 Rasvahappoesterit, kuten etyylistearaatti, tyryyliadipaatti, lauriinihappoheksyyliesteri, di] ·:·1: ni-glykolipelargonaatti, keskinkertaisen ket j ui omaavan, haaroittuneen rasvahapon esterit ketjui ·1· C16_18 omaavien tyydyttyneiden rasva-alkoholien kan • »· .·1·. 25 propyylimyristaatti, isopropyylipalmitaatti, ket; : den C12_18 omaavien tyydyttyneiden rasva-alkoholiei * 1 φ li/kapriinihappoesterit, isopropyylistearaatti, ö; * oleyyliesteri, öljyhappodekyyliesteri, etyyli1 maitohappoetyyliesteri, vahamaiset rasvahappoest1 * 1 1 "···" 30 ten keinotekoinen ankanpyrstönrasvarauhasrasva, d: ··1 · ftalaatti aHHni inihannrtfH-ififtnrnnvvl loetori 37

Rasvahapot, kuten Öljyhappo ja niiden seol Hydrofiilisenä faasina mainittakoon:

Vesi, alkoholit, kuten esimerkiksi propyle< li, glyseroli ja/tai sorbitoli* 5 Emulgoimisaineina mainittakoon: ionittoma dit, esimerkiksi polyoksietyloitu risiiniöljy, ] etyloitu sorbitaanimono-oleaatti, sorbitaanimonoi ti, glyserolimonostearaatti, polyoksietyylisteara kyylifenolipolyglykolieetterit ; 10 amfolyyttiset tensidit, kuten di-Na-lauryy: nodipropionaatti tai lesitiini; anioniaktiiviset tensidit, kuten Na-lau: faatti, rasva-alkoholieetterisulfaatit, mono/dia: lyglykolieetteriortofosforihappoesteri-monoetano^ 15 suola; kationiaktiiviset tensidit, kuten setyylii liammoniumkloridi.

Muina apuaineina mainittakoon: viskositea hottavat ja emulsiota stabiloivat aineet, kuten 1 20 metyyliselluloosa, metyyliselluloosa ja muut se; ja tärkkelysjohdannaiset, polyakrylaatit, algina? ·:··: latiinit, arabikumi, polyvinyylipyrrolidoni, pol] alkoholi, metyylivinyylieetterin ja maleiinihapp<

.··'· din kopolymeerit, polyetyleeniglykolit, vahat, koJ

*·· .···. 25 piihappo, tai näiden seokset.

• « ; Suspensioita voidaan käyttää oraalisesti, c • * t [11/ sesti tai injektiona. Ne valmistetaan siten, että * * ne suspendoidaan väliainenesteeseen lisäten mahdc muita apuaineita, kuten kostutusaineet, väriainec 30 tyrnistä edistävät aineet, säilöntäaineet, hapetu! aineet ja valonsuola-alneet.

38

Muina apuaineina mainittakoon edempänä ed< nitut.

Puolikiinteitä valmisteita voidaan antaa oi ti tai dermaalisesti. Ne eroavat edellä mainitud 5 pensioista ja emulsioista vain suuremman viskosii kautta.

Kiinteiden valmisteiden valmistamiseksi ! sekoitetaan sopivien väliaineiden kanssa lisäten < ta, ja saatetaan haluttuun muotoon.

10 Väliaineina mainittakoon kaikki fysiologii väksyttävät kiinteät, inertit aineet. Sellaisina epäorgaaniset ja orgaaniset aineet. Epäorgaanisia ovat esimerkiksi keittosuola, karbonaatit, kuten karbonaatti, vetykarbonaatit, alumiinioksidit, ] 15 alumiinioksidit, saostettu tai kolloidinen piit fosfaatit.

Orgaanisia aineita ovat esimerkiksi sokerd loosa, ravinto- ja rehuaineet, kuten maitojauheel jauhot, viljajauhot ja -rouheet, tärkkelykset.

20 Apuaineita ovat säilöntäaineet, hapetuksc neet, ja väriaineet, jotka on mainittu jo edempäni Muita sopivia apuaineita ovat voitelu- ja neet, kuten esimerkiksi magnesiumstearaatti, steai po, talkki, bentoniitit, hajoamista edistävät aii ·· .*·*. 25 ten tärkkelys ja verkkoutettu polyvinyylipyrrolic ·· φ : .·, deaineet, kuten esimerkiksi tärkkelys, gelatiini « « · raketj uinen polyvinyylipyrrolidoni, samoin kuii * # t sideaineet, kuten esimerkiksi tärkkelys, kiteine , loosa.

• · · 30 Lääkeaineet voivat olla valmisteissa myös *·..* synergististen aineiden tai muiden lääkeaineiden 39 Käyttövalmiit valmisteet sisältävät lääl konsentraatiot 10 ppm - 20 paino-%, edullisesti paino-%.

Valmisteet, jotka laimennetaan ennen käyt 5 sältävät lääkeainetta konsentraatiot 0,5 - 90 edullisesti 5-50 paino-%·

Yleensä on osoittautunut edulliseksi antae nön mukaista seosta tehokkaiden tulosten saavutl määrä noin 10 - 100 mg/kg kehonpainoa/päivä- I

10 ovat määrät 10 - 50 mg lääkeaineseosta/kg kehonpe

Yleensä pratsikvantelin tai epsiprantelin j de depsipeptidiin pidetään aineissa tasolla 1: edullisesti 1:1 - 2; aivan erikoisen edullisesti

Esimerkki A

15 In vivo -sukkulamatotesti

Ancylostoma canicum koirassa

Beagle-koiran pennuille tartutettiin kokee Ancylostoma canicum -lajin koukkumadoilla. Tartut! ten koirille annettiin A. caninumia oraalisesti 20 toukkana.

Oireettoman ajan kuluttua (tai kun oire *ί··ϊ aikana osoitettiin toukkien toimintaa) annetaan 1 oraalisesti (p.o.) puhtaana lääkkeenä gelatiinike s : sa* 25 Teho määritetään 2 kuukauden kuluttua.

: 1. Ulosteen mukana erittyneiden madonmunie • · · *···| minen ennen käsittelyä ja sen jälkeen.

2. Vaikutus-% kriittisessä testissä seurae , van mukaisesti: • · · **·· 30 *—* Erittyvät madot käsittelyn jälkee 11 40

Seuraavassa taulukossa ilmoitetaan annos jolla molempien määritysmenetelmien mukaisesti ι tiin 100-%:inen vaikutus:

5 Taulukko A

Lääkeaine Tehokaa annos [n$

Syklo-(MeLeu-D-Lac-MaLeu-D-PhLac-KaLeu-D-Lac-MeLeu-D- 1

PhLac)- [PP 1022] 10 2-(sykloheksyylikerbonyyli)-1,2,3,6,7,llb-hekaahy<iro-4H- 0 pyratsino£2,1-a]iso-kinolin-4-onl [prateikventel1] 2-(sykioheksyylikarbonyyli)-2,3,6,7,B,12b-heksahydro-pyrat- 0 sino[2,1-a][2]bentsatsepin-4(lH)-oni [epsipranteli]

Syklo-(MeLeu-D-Lac-MeLeu-D-PhLac-MeLeu-D-Lac-HeLeti-D-15 PhLac)· [PP 1022] + 2-(syklohekByyllkarbonyyll)-l,2,3,6,7,llb-hekMhydro-4H- 0,5 pyratsino[2,1-a]lao-klnolin-4-onl (pratsikvanteli) (1:1)

Syklo-(HeLeu-D-Lac-HeLeu-D-PhLac-HeL4U-D-LaC-HeLeu-D-FhLac)- [PF 1022] 1 20 2-(sykloheksyylikarbonyyli)-2,3,6,7,8,12b-hekaahydro-pyrat- 0,5 sino[2,l-a][2]bentsatsapln-4(lH)-oni [epsipranteli] (1:1)

Syklo(-MeLeu-D-Lac-KeLeu-D-p-MorPhLac-MeLeu-D-Lac-MeLeu-D- 0,5 p-HorFhLac-) • ^ ——ι ........— * 1 Syklo(-HeLeu-D-Lac-HeLeu-O-p-HorPhLac-HeLeu-D-Lac-HeLau-D- ***** 25 p-HorPhLac-) + • · · *e> 2-(aykloheksyylikarbonyyli)-l,2,3,6,7,llb-hekaahydro-4H- 0,25 pyratsino[2,l-a]iso-klnolin-4-oni Ipratslkrantell] (1:1) • · — "' * ,β e · Syklo(-MeLeu-D-Lac-MeLeu-D-p-MorPhLac-MeLeu-D-Lac-MeLeu-D- * p-HorPhLac-) + **j'1 30 2-(sykloheksyyllkarbonyyli)-2,3,6,7,8,12b-hekaahydro-pyrat- 0,25 * · ! sino[2,l-a][2]bentsatsepln-4(lH)-onl [epsipranteli] (1:1)

MeLeu: N-metyyli-L-leusiini; D-lac: D-maitohappo; .···. Ο-β-fenyylimaitohappo; D-p-MorPhLac: D-B-p-morf< «»« _ _ _ _ 41

Esimerkki B

In vivo -sukkulaaatotesti Ancylostoma canicua kissassa

Kissoja tartutettiin kokeellisesti Ancylo: 5 baeforma-lajin koukkumadoilla. Tartutusta varten 1 annettiin Ancylostoma tubaeformea oraalisesti 25C kana tai ihon kautta 500 L3-toukkana.

Oireettoman ajan kuluttua (tai kun oir< aikana osoitettiin toukkien toimintaa) annetaan ; 10 oraalisesti (p.o.) puhtaana lääkkeenä gelatiiniko sa.

Teho määritetään 2 kuukauden kuluttua.

1. Ulosteen mukana erittyneiden madonmuni< minen ennen käsittelyä ja sen jälkeen.

15 2. Vaikutus-% kriittisessä testissä seurao van mukaisesti:

Erittyvät madot käsittelyn jälke<

Vaikutus-% *---- 20 Erittyvät madot käsittelyn jälke< ja jäljelle jääneet madot

Seuraavassa taulukossa ilmoitetaan annos :T: jolla molempien määritysmenetelmien mukaisesti i 25 tiin 100-%:inen vaikutus: ·«· • te • · ♦ * »* » • * • « · * · · *·♦ · ··· • · · • * i « ft « • * « M· ··· * · « ·« 42

Taulukko B

LSttkealne Tehokas aimo· (n

Syklo-(NeLau-D-Lac-MeLeu-D-PhLac-HeLeu-D-Lac-HeLeu-D- 1 5 PhLac)- [PF 1022]

2-(syklohekayylikarbonyyll)-1,2,3,6,7,1lb-heksahydro-4H- O

pyratalno[2,l-a]iao-klnolin-4-onl [pratalkvantell] 2-(sykloheksyyllkarbonyyli)-2,3,6,7,8,12b-heksahydro-pyrat- 0 aino[2,1-a][2]bent*ataepin-4(lH)-onl (epsiprantell) 10 Syklo-(HeLeu-D-Lac-MeLeu-D-PhLac-KeLeu-D-Lac-MeLeu-D-

PhLae)- [PF 1022] + 2-(sykloheksyyllkarbonyyli)-!.2,3.6,7.llb-heksahydro-4H- 0,5 pyrataino[2,1-a]iso-kinolln-4-Ohi [pratsikvanteli] (1:1)

Syklo-(MaLeu-D-Lac-MeLeu-D-PhLac-MeLeu-D-Lac-MeLeu-D- 15 PhLac)- [pf 1022] ♦ 2-(sykloheksyyllkarbonyyli)-2,3,6,7,8,12b-hakaahydro-pyrat- 0.5 alno[2,l-a][2]bentaatsepin-4(lK)-onl [epsiprantell] (1:1)

Syklo(-HeLeu-D-Lac-MeLeu-D-p-MorPhLac-MeLeu-D-Lac-MeLeu-D- 0,5 p-MorPhLac-) 20 Syklo(-HeLeu-D-Lac-MeLeu-D-p-MorPhLac-HeLeu-D-Lac-MeLeu-D- P-MorPhLac-) + 2-(sykloheksyyllkarbonyyli)-1,2,3,6.7,llb-heksahydro-4H- 0,25 pyrats ino[2,1-a]iao-klnolin-4-onl [pratsikvanteli] (1:1) ^ Syklo(-MeLeu-D-Lac-MeLeu-D-p-MorPhLac-MeLeu-D-Lac-MeLeu-D- *·*"* 25 p-HorPhLac-) + t · ·· m 2-(sykloheksyyllkarbonyyli)-2,3,6,7,8,12b-hekaahydro-pyrat- 0,25 *·* * alno[2,1-a](2]bentsataepln-4(lH)-oni [epsiprantell] (1:1) «·* ♦ *

• •I

ϊβ#βί MeLeu: N-metyyli-L-leuslini; D-lac: D-maitohappo? • 30 D-B-fenyylimaitohappo; D-p-MorPhLac: D-B-p-morf: *·* * ·**'; nyylimaitohappo

Esimerkkejä 18 rengasatomia sisältävien • 4 * depsipeptidien valmistuksesta: • » 43

Esimerkki X

Syklo(-N-metyyli-L-isoleusyyli-D-laktyyli li-L-isoleusyyli-D-laktyyli-N-metyyli-L-isoleusyy tyyli-) 5

Me 0 y^Me 10 Me°Y° °γΜ·

"VS

Μβο^ί^γ^ΟγΛγ-Μβ

Me O . J

Me 15

Nopeasti sekoitettuun suspensioon, jossa 10-%:ista Pd/C:tä 550 ml:ssa absoluuttista di joka sisältää 12 ml etanolia ja 160 mg (1,08 mmc 20 rolidino-pyridiiniä, suihkutetaan sisälämpötila tasaisesti 6 tunnin kuluessa 0,99 g (1,08 mmo *"*! MeIle-D-Lac)3-0-Pfp:tä 50 ml:ssa absoluuttista di :T: Tällöin reaktioliuoksen läpi johdetaan vetyä. Se :”*· sekoitetaan vielä 4 tuntia 95 *C:ssa ja 12 tuntie .***· 25 lämpötilassa. Suodatetaan, ja koko reaktiopanos ; roidaan tyhjössä. Väritön öljymäinen jäännös ote roformiin ja pestään kahdesti 5-%:isella sitruun * · *

kahdesti NaHC03-liuoksella ja kahdesti vedellä. C

. faasi kuivataan natriumsulfaatilla, ja liuotin • « · 'lii 30 seuraavaksi pois tyhjössä. Jäljelle jäävä raakat • · ··# /laari od i nnh/1 ^ c+aa Ummafnrtraf 4 enof ί o 4 1 4 Irarr/ial i 44

metyy1i-L-isoleusyy1i-D-laktyy1i-N-metyy1i-L-iso D-laktyyli-N-metyyli-L-isoleusyyli-D-laktyyliä-) Sp.: 210 - 212 °C

1H-NMR (400 MHz, CDCla, 6): 0,87 (t, 9H, -CHj-CHj 5 Hz); 0,98; 1,44 (2d, 18H, -CH-CH3; J - 6,5 Hz); 1, (leveä, m, 3H, -CH-CH3); 2,02 - 2,04 (leveä m, CH3); 3,03 (s, 9H, -N-CHa); 4,45 (m, 3H, N-CH-CO

5,62 (m, 3H, 0-CH-C0) ppm

13C-NMR (100 MHz, CDCla, 6): 10,9; 16,0; 16,6 (-£ 10 (-£H2-); 33,3 (-CH-); 33,9 (-N-CH3); 61,9 (-N-Q

(-0-CH-); 169,3 (-£0-N-); 169,9 (-CO-0-) ppm FAB-MS m/z (%): 598 (M*+H, 12); 597 (37); 541 (14); 182 (100)

Analogisesti voidaan valmistaa seuraavasi 15 kossa 1 esitetyt kaavan I mukaiset yhdisteet LD reoisomeereinä.

* · * *! • * • a i • i * « a a a a i • 4 • 44 499 • · * · 444 • · 4 4 4 4 4 4 444 4 494 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 9 944 494 9 4 4 4 444 45

Taulukko 1

Esimerkkejä yleisen kaavan 1 mukaisista y: 0 R3

vVV

0^.0 Me 0n^R4 rXn.M<, MeNXQ » 10 r6 o

Il Kein. | Rl I R2 IR3 I R4 IR5 IR6 Tji ie 2 -CHjCHMe3 -Me -CHjCHMej -Me -CHjCHMe, -Me ~\6t x J 24, 37, 67, _______N: 3 -CHjCHMtj -Me -CHjCHMej -CHj-Ph -CHjCHMej -Me 16, 23,

(-C

CP

(-C

20 li ________17; , 4 -CHMeCHjMe -CHMe2 -CHMeCHjMe -CHMej -CHj-Ph -CHMe3 15, ·:··: (-£ 25, 29, V · M 36, ... H Ph

: : I CP

··· 12' 25 16! • . _ : 5 -CHMeCHjMe -CHMe, -CHMeCHjMe -Me -CHMeCHjMe -Me lä ... 16, : 2 : <-c • <-c (-c

(N

. (N

: : : (o ·*· 30 (ci «e. a ./nj r»uu* w. rmivnx w. mu.ou u. w- m 46 nro"’ R* R1 RJ R4 R5 R6 7 "-Me -CHMeCHjMe -Me -CHMcCH,Me 10 16 24 31 c 34 5 60 67 17 _________17 8 -Me -Me -CHMeCHjMe -Me -H -Me 49 31

_______JZ

9 -Me -Me -CHMeCHjMe -Me -Me -Me 31 16 (-< io " 21 _______ 10 -Me -Me -CHMeCHjMe -Me -CH2CHrMe -Me 30 16 <-< 17 87 (4: ________14 15 II -Mc -Me -CHMeCB2Me -Me -CHMrt -Me 30 16 il 81 ______ j* 12 -Me -Me -CHMeCHjMe -Me -CHj-CHMej -Me 29 16 -c 17 20 *i ^—1—I i pi — ·:··: a) 13C-NMR (100 MHz, CDC13, 6) [yksikössä ppm]; EI-MS m/z (%)

V

··« « m • · .···, 25 Kaavan II mukaiset lähtöaineet /*! Esimerkki II - 1 4 a * N-bentsyylioksikarbonyyli-N-metyyli-L-is '·* * D-Iaktyyli-N-metyyIi-I.“isoIeusyyli-D-laktyyli-N- isoleusyyli-O-maitohappo-tert-butyyliesteri * • · · _ 30 a. _ * . - _ . . . « _ 11 47

Liuokseen, jossa on 5,8 g (16,5 mmol) Z-L Lac-OH:ta ja 7,8 g (16,5 mmol) H-(L-Melle-D-Lac) 150 ml:ssa metyleenikloridia, lisätään 0 eC:s (36,3 mmol) N,N-di-isopropyylietyyliamiinia 5 emäs") samoin kuin 4,6 g (18,1 mmol) bis(2-okso-3 lidinyyli)fosfoniumhappokloridia (B0P-C1) ja se 4 tunnin ajan. Reaktioliuos ravistellaan kahden kanssa, orgaaninen faasi erotetaan, ja kun on natriumsulfaatilla, konsentroidaan tyhjössä. Jälj 10 vä raaka tuo te kromatografoidaan silikageelipylväc selgel 60 - Merck, hiukkaskoko: 0,04 - 0,63 min) etyyliasetaatti (5:1) -eluentilla, jolloin saada (77,4 % teoreettisesta) N-bentsyylioksikarbonyyli li-L-isoleusyyli-D-laktyyli-N-metyyli-L-isoleusyy 15 tyyli -N-metyy 1 i - L- i soleusyy 1 i-D-mai tohappo - ter t - b teriä.

FAB-MS m/z (%): 805 (M\ 3); 749 (M*-H2OCMe2, 10); 793 (10); 91 (100)

Esimerkki 11-2 20 N-bentsyy1ioksikarbonyy1i-N-metyyli-L-ise D-laktyyli-H-metyyli-L-isoleusyyli-D-laktyyli-N-n ····· isoleusyyli-D-mai tohappo * · ·

:·: 1 Me O Me Me O Me Me O

S » G~o i;;:; :T: Me Me Me *

Liuokseen, joka on jäähdytetty 0 eC:seen s.:!: 30 on 9,2 g (11,2 mmol) Z-(-L-MeIle-D-Lao-)3-0-¾ : ml:ssa absoluuttista metyleenikloridia, johdeta 11 48 syyli-D-laktyyli-N-metyyli-L-isoleusyyli-D-lakty tyyli-L-isoleusyyli-D-maitohappoa, Joka voidaan reagoimaan edelleen enempää puhdistamatta* MS m/z (%): 749 (M\ 10); 721 (1); 693 (2); 533 5 (100)

Esimerkki II - 3 N-bentsyy1ioksikarbonyy1i-H-metyyli-L-iso D- laktyyli-N-metyyl i - L- i soleusyyl i-D-laktyyll-N-m isoleusyyli-D-maitohappo-pentafluorifenyyliester 10 rMe O Me Me O Me Me O Me ^γΛνΛγ/Λ ° ρ'Μβ ° 0

Me Me Me 15 5,0 g (6,67 mmol) Z-(L-MeIle-D-Lac)3-0H: ti taan yhdessä 1,23 g:n (6,67 mmol) pentafluorifei mitään absoluuttista etyyliasetaattia (inerttikaa hä). Tähän lisätään 0 °C:ssa 1,38 g (6,67 mmol) 20 heksyylikarbodi-imidiä (DCC), ja sekoitetaan vie nin ajan tässä lämpötilassa. Kun saostunut disyk *;**: liurea on suodatettu pois, suodos konsentroidaa; :*·*: tyhjössä, ja jäännös kromatografoidaan esikuiva .·*·. likageelipylväällä (Kieselgel 60 - Merck, hiu .···. 25 0,04 - 0,063 mm) tolueeni:etyyliasetaatti (10:1)- * *

la, jolloin saadaan 3,3 g (54 % teoreettisesta) N

* * * lioksikarbonyyli-N-metyyli-L-isoleusyyli-D-lakty * tyyli-L-isoleusyyli-D-laktyyli-N-metyyli-L-isole maitohappo-pentafluorifenyyliesteriä värittömänä :.j.: 30 FAB-MS m/z (%): 915 (M4, 2); 914 <M*-H, 4); 859 C.1 (1); 780 (5); 91 (100) 49

Esimerkki II - 4 H-metyyli-L-isoleueyyli-D-laktyyli-N-mety] leusyyli-D-laktyyli-N-metyyli-L-isoleusyyli-D-ma - Me O Me Me O Me Me 0 Me |^Me f^Me

Me Me Me 10 1,0 g (1,33 mmol) Z-(-L-MeIle-D-Lac)3-0H: taan vedyn vastaanoton loppumiseen asti (noin 20 ml:ssa etanolia, kun läsnä on 0,15 g Pd(0H)2/ pitoisuus 20 %]. Kun katalysaattori on suodate koko reaktioliuos konsentroidaan tyhjössä, jolloi 15 0,81 g (100 % teoreettisesta) N-metyyli-L-isole laktyyli-N-metyyli-L-isoleusyyli-D-laktyyli-N-m isoleusyyli-D-maitohappoa, joka voidaan syklisoit puhdistamatta.

EI-MS m/z (%): 615 <M\ 3)? 600 (1); 558 (7); 472 20 (14); 100 (100)

Analogisesti voidaan valmistaa seuraavas ·:·1 2: kossa 2 esitetyt kaavan II mukaiset yhdisteet LE

·3: reoisomeereinä.

s · s • · • · ··« • s1 • s • « ··· S 9 ♦ · 1 • · f

SS· I

• SS ··· • s · s s

«SS

• · s SS s

SS

I · · »n ^0 o wL· X ο»σ*9 ^isS

>t-H —>οθ ~ *Λ(νΞ o > <N ONOM CMpJS I iu 4J C?\ "C r- wO OO&rH ΟΌΟ MÖC

I n I « o m O *** S ^ e 9 a V 9 a m 9_9_9_9_9_

I GQ

I v U i> 4> V O

I ^=0 oä ? ? ? ? “? I k\ I ,° I* § I" I* I" I au \ «> u u 5 u u ii o /-* „ aT sf X a? rf

" s-z fc V V V V V

I Φ \ — »Il —' - — - H $. ^ I ^ \ t) 4> 4> H-* hr! I f, O ci_ 3_3_?_V_V_ I « o=( I ra e )—of £ £ £ £ £ I ra s-z S a a s s I M \ oouoo s „ >=ο , ί i i i i

....: 2 οΓ-/ « V V V V V

I * * E \ — — - — -....... -- | :.:: s o=/ * ? 5? ? 3 ? I £ \ ^ K * · · · * [0 m o S M SiSSi I : :*: * ^ o ö u <_> o I : : : g * 9 9 9 9 9 I -H " I Φ I i-HI j3 j3 -C j3 j3 . N S» ^ S *v, ·.:.· - a s a sf sf I TO r%r^r\r\r* 51 1 ,-s o o a is .. § sr. -r $- ps

„ rp S&SafSo^S· S°1 S-S

• il ίΓ° •T'JS £ —< 1^0 ·-.— -r -r- C

(λγ*'-' + -c inOC

*ίβ "L* 9-£t tri "w x trf O L o ^ 2^1-1 t_. in "L* ·— t_i Ό C

is S^§ r SSc Sr- eg - Jar er~ Ss ~ es 2

* * 00¾5\2S ci 2 2 ^2?£ sa- io52S oi$?2 2SoT

t *J C7\ C7v W> 00 w'—· OO^^ ΉΐΛν Ov ww VO CO

ν' v» «J° VI o' 9 9*99*9*; m 9_9 9_9 9 9 9 9 u" i I i w" i ^2 o o o o u o 2 pH · * I r » I · < j- S J=! xJ J=! -C j=! Xi 9 sc* ί ϊ aN a" f ^

^u <JO<JO<JOU

05 t I I I t * I I

g I I I I" I I

V O 0 0 0 0 0 0 2 05 I 111(111 υ u ο υ υ o u

i 111*1 I II

. a ooooooo ***** ^ ^ ^ ^ ^ ^ > o ooooooo + Pm > I liki·» • I · • ft

*.,, * fS fS <N (N <N M

^ ^ ^ ^ ^ ^ /*! 7L, 2 0000002 • « « P-r i I ft ft · ft * r ft ft · NVNM· ··· · rt :7: ί 5

«, f ! I I I £ f I

“ g oooooog *** * ^ ^ ^ ^ jj

.···. N rJ O OOOOOOO

52 1 I—I-ΓΤΠ-^-1—ΞΓ1 00 S S t- cnr^C· \o r- cs _ vo fs k^sl ki k*oe k^lL k?§§

*1 S^SS! SS SiVgg «^S§ S^SS

t +j t- &vo — r- > r- COr- c-~ oor- w r- Ovo <n

fH (Π fO fH

V V t) V

2 S 2 2 U — « u O u * tJUr ΨΜ r v r ~ o o o o o o

PQ 1 III I I

t) ου 4> i> v -, s ? ^ ? S ? o o V O V 43

1 5 3. I I I

K KKK K X

u o o o o o 0 ο ο ο a o

Ρΐ i III I I

43 u o u υ 4) ^ 2_ ?_?_?_ ο ου υ ο υ

1 II I I I

o o υ o o u :: o uu o o o

K I III I I

K --iii---- ··* 43 Φ 2 X 43 43 ^ :*": ΐί ? S> S’ S’ ? 3 • Φ Φ MHI MM ' φ a ^ # * · { • * · *

• M · ^ « t> U

III 5 M o ··· 0 o r rs <n Ϊ V · X S KKK 3 (rt 43 43 43 Λ > £ § § § ** ** 6 . κ S S S k x ;:: . -^, υ o o o o o » .:. ' « ... ( .**·. M * • Φ * * a » 53

Esimerkkejä 24 rengasatomia sisältävien i depsipeptIdien valmistuksesta 1. Kaavan Ia mukaisten yhdisteiden valmisl Liuokseen, jossa oli kaavan Ile mukaista y] 5 (0,104 mmol) ja HUnigin emästä (0,258 mmol) diklo< nissa (100 ml), lisättiin 0 eC:ssa B0P-Cl:ää (0,i: ja sekoitettiin sen jälkeen 24 tuntia huoneenlämpö Tämän ajan jälkeen lisättiin samat määrät BOP-emästä, ja sekoitettiin edelleen 24 tuntia. Liuos 10 kahdesti kylläisellä natriumvetykarbonaattilii kuivattiin natriumsulfaatilla ja konsentroitiin, puhdistettiin pyiväskromatograf iällä sykloheksaan: asetaatti (2:1) -eluentilla, jolloin saatiin kaav kaisia yhdisteitä, jossa substituenteilla oli 15 merkitys (taulukko 3): * * » ♦ · » ♦ · ♦ ··· s » • i ··· • ·· • · s · «·· • · • · f # · · ··· • ♦ ·

« · I

• · · « · · 1 • · • · • · · 54

I I I I M I I I I I I

|r 2 r -Τ' ? S' ± S' g ί ϊ St

C/3 _ * O - O

^ O tS O *-h 00 rn t- <λ ra n oo ά> ro o oo

<, > ^ σ\ —I O

Uh B Cv ^ M rl rl

H-) M

H

3 fc fc h a 0.

1 S S E

<3 o o, i> *> o o o t) a

rt_ä_ _2_A

Ή H fl

·* >ι Ή R

H pi rH fl - fc f g

3 oa«« » ω Λ Ji P

«_ä_ 1_ 2_s_s_2_l_s_i_ s m ra £ a ra rt A = = t/j - Λ CQ mbss ti ti d CQ Pp ffl Λ ä Ö Ö O ö

R < i i ÖQ

K CQ te*t t es (ö ^ » 5 m | £ a m

Ph CO C t V} .H ffl West «a £

Ch ^ e t t t s tett

E

« · ... 5 m m & ö m • · · Ph to t * en · pH Pm en t t e • »»· • : ö ö d

*.·.· PQ ffl PQ

I I I

·1· « - u O O ö ··* pH ffltctt * <S <N ^ .

• « —Ί· Il 1 I HIHII 1 " ' • · Ψ • * ·

··· I

.·:·. ·? m ra £ e m V * rt ώ « b A _λ_ra_ A b * e ::*: «_2-^z* .^-z_-_-_-_-_T- -h „ .:::. M 3 κ { 43?

*···" A fc B* p Pi P

. Ω e di b Λ\ Jtl Λ\ Λ\ Λ\ Eh fl JJ Sil J.

55

Esimerkkejä kaavan Ile mukaisten yhdiste: alistuksesta

Liuosta, jossa oli kaavan lila mukaista av ta oktadepsipeptidiä (1,222 mmol) etanolissa (50 5 rattiin Pd(0H)a/C:n (20-%; 200 mg) läsnä ollessa v taanoton loppumiseen asti (noin 2 tuntia). Kun ka tori oli suodatettu pois, muodostui kaavan Ile puhdasta yhdistettä, joka saatettiin reagoimaan ilman lisäpuhdistusta.

10 Tämän ohjeen mukaan saatiin kaavan Ile yhdisteitä, jossa substituenteilla on taulukon 4 merkitys.

• * ··· 4 · · I « « ♦ · • e* • · • · ··· • · i « « • ♦ · «M · ··♦ • · · • * * ♦ * • · · • · * ··· ··« • · • * 56 *h i I 1 ^ |l a I fc

h g> o. II

Λ 8·ί<υυυυυν£ H 1—( .at: 5 « t » t: z* ^ΐυυυυυυο ä if! £39

Pd crt ε ε = Λ CQ «Λ ε e e rt rt rt mmm ·» u u υ c » ö 1 1 1 nn

Di CQ E * E E E (N CO Τί" 1

am £ e (S

Ph M e * e ·Λι ® «rt E e e |

£ U

cd i2 E E E E e e e e e -3 ra m rt m

Pd M E E E -Λ CQ «Λ E E E

• rt rt rt ·:·*: ® φ m ... >3 rt S5 U O rt : : : mm* e e * r (Nfort.

* —^ — — — — — ' ' — — ··* • # » 1 h a ::: - ® ΐ « • « KcOsesEwncovce * * ' __ — __ __ __ __ — __ ___ « · · • * * « ·

♦ · · H M

M* · ^ ··» EX^csssctcst ♦ ♦ · — — — - -H - — — — — — Ή ·

♦ · * Ή pH

a g fc ..

►j 0> o, i ί I ; s i II 2 2 ϊ Έ :

*:::' „---i-------- 3.SI

:-s ! li a fc -a ? £ 11 57

Kaavan lila aukaisten yhdisteiden valmisti Liuokseen, jossa oli kaavan IVa mukaista tyyliesteriä (1,609 mmol) dikloorimetaanissa (40 dettiin 0 °C:ssa 1,5 tunnin ajan HCl-kaasua. Se 5 lämmitettiin huoneenlämpötilaan, ja sekoitettiin ajan. Liuos konsentroitiin kiertohaihduttimella, vattiin suurtyhjössä. Jäännös saatettiin reagoim lisäpuhdistusta.

Analogisesti saatiin kaavan lila mukaisc 10 teet, jossa substituenteilla on seuraava merkitys ko 5): * · ··« ♦ # · « « 4 9 999 • 9 999 9 9 9 9 999 9 9 9 9 9 9 9 9 999 9 999 9 9 9 9 9 9 ' 9 9 9 9 9 9 9 9 999 999 9 9 9 9 58 <_ _£§__*_ _ *_ r_ ^_ Ή

H H

i » ε

Ή II

II

3ft 3, " £ s £ Il

*_ i_ J_ -L 2L Ά. *L Ά. Ά- JJ

I ω £ ö m

Ph ΙΛ r e = . Λ CQ t/5 I t t e c c m «9 to *, a Ö ö 5 «

Oh CQ C t t * * (N CO Ti* i 5 m £ d ra θί A e * e !ZCQA« c c I5 ^ Ρ£*5εΕ = ΕΕΕ«ΕΕ S, m έ: ti ffl

OcJotc e * -Λ PQ V5 e e e .. · Ö Ö s ····; m f? « .·;·. *. s V 3 3 ä • ♦ · Ph 00 t s e c τ Cl Cl ^ i • ________ ___ - - T r ^^__T-p ___

Mi • * “·** -=3 U* &

··· 4 ώ Oh d PQ

; ; c^mi e e .JiCQnt i · ··» —' ....... 1 — ** |M"·^ 1 1 1 11 ' 1 1,1 *“ • · • · · :·: *· λ λ

... Oi 2 E E E E E E . E E

• * * ----- . . Ή - - - - - - ... · -H -

• * · P-l pH

S £ £ -H

P fr Oi I

hO p n . .·. . Kr

• * · ----—------ -H -P

·*· ή H *H 3 ··*·. in H, -i hh S H Λ

• * pH E T* Kh Sh I J

59

Kaavan IVa mukaisten yhdisteiden valmistu:

Liuokseen, jossa oli kaavan Via ja Va muka radepsipeptIdejä (kumpaakin 2,52 raraol) dikloorinu (15 ml), lisättiin 0 1C:ssa liuos, jossa oli etyy: 5 propyyliamiinia (0,912 mmol) ja B0P-Cl:ää (0,4: Sen jälkeen sekoitettiin 1 tunnin ajan 0 °C:ss tuntia huoneenlämpötilassa, laimennettiin 20 ml kloorimetaania, pestiin kahdesti pienellä määräi: kuivattiin Na2S04;llä ja konsentroitiin» Jäännös pi 10 tiin sllikageelillä sykloheksaani:t-BuOMe-e: (2:1).

Kaavan Va mukaisten yhdisteiden valmistus

Liuokseen, jossa oli kaavan Vila mukaista 1 sipeptidiä (2,848 mmol) dikloorimetaanissa (50 n 15 dettiin 0 °C:ssa 2 tunnin ajan HCl-kaasua.

Seuraavaksi sekoitettiin 8 tuntia huoneei lassa, konsentroitiin, ja kuivattiin suurtyhjössä saatettiin reagoimaan edelleen ilman lisäpuhdisti

Kaavan Via mukaisten yhdisteiden valmistu: 20 Liuos, jossa oli kaavan Vila mukaista tel peptidiä (9,53 mmol) etanolissa (37 ml), sek< ·:♦1: Pd(0H)2/C:n (20-%) (0,6 g) kanssa, ja hydrattiin i ·’·’· men tunnin ajan huoneenlämpötilassa ja normaalipa .···. Reaktioseos suodatettiin, konsentroitiin, ja #···. 25 erotettiin sllikageelillä t-BuOMe: sykloheksaani • 1 ***lr eluentilla (1:1:0,5).

s s s *!1,1 Kaavan Vila mukaisten yhdisteiden valmisti • s Φ

Liuos, joka oli jäähdytetty 0 °C:seen ja ; kaavan IXa mukaista depsipeptidiä (22,9 mmol) j :J.: 30 Villa mukaista didepsipeptidiä (27,5 mmol) dikloc • i · nissa (80 ml K sekoitettiin di-isonronvvlietvv' 60 lä, kuivattiin natriumsulfaatilla, ja konsen Jäännös erotettiin silikageelillä sykloheksaani: e taatti-eluentilla (15:1).

ψ · « « « • « 4 • ftftft • ft • ft • M ft · · • · • ·

Mi • ft • « ft ft ft ft ft · ft ft • ft ft ft · ft ft ft ft ft ft ft ft · ft ft ft ft ft ft 1 ftft ft ft • Λ

Claims

61

1. Endoparasiittejä tappavat aineet, t i t u t siitä, että ne sisältävät pratsikvantelia t 5 prantelia yhdessä syklisten depsipeptidien kanssa syklisillä depsipeptideillä on kaava M1 fTVY T jctV"

20 Me Me ’ 1 jossa Z on vety, N-morfolino, nitro, amino V 1 metyyliamino, ja jotka koostuvat aminohapoista ja l· • t» i"/1 karboksyylihapoista renkaan rakenneosina ja sisäl 25 rengasatomia. «M

2. Pratsikvantelin tai epsiprantelin käytte « 1 1 φ rasiitteja tappavien aineiden valmistamiseksi yhde listen depsipeptidien kanssa, joilla syklisillä dep . deillä on kaava • · · * « « 30 4 f 1 62 XC'-'Xo' 10 O Ma UnT 14» 15 * "" " " jossa Z on vety, N-morfolino, nitro, amino metyyliamino, ja jotka koostuvat aminohapoista ja 1 karboksyylihapoista renkaan rakenneosina ja sisäl rengasatomia. a • a aa# • * * • a a a·· « a • « *·* a a a i ·· * a a f · « a a · a · a · aa* a a a a a a a a • a a III a a 63