FI112481B - Menetelmä antitromboottisten amidinofenyylialaniini- ja amidinopyridyylialaniinijohdannaisten valmistamiseksi - Google Patents

Description

112481

Menetelmä antitromboottisten amidinofenyylialaniini- ja amidinopyridyy1ialaniini j ohdannai s ten valmis tami seksi Tämä keksintö koskee sarjaa amidinofenyylialaniini-5 ja amidinopyridyylialaniinijohdannaisia, jotka ovat anti-tromboottisia aineita, joilla on käyttöä erilaisilla hoidollisilla alueilla, mukaan luettuna syvän laskimotukoksen (DVT) estäminen ja/tai hoito leikkauksen, vaikean sairauden, halvauksen, solun pahanlaatuisuuden, pitkittyneen im-10 mobilisaatiovamman, alaraajan kipsien käytön tai alaraajojen tai lantion murtumien jälkeen; uusiutuvan syvän laskimotukoksen ja raskauden aikana ilmenevän syvän laskimotukoksen ehkäiseminen ja/tai hoito, kun potilaalla on ollut aikaisemmin syvä laskimotukos; trombolyyttistä hoitoa seu-15 raavan uudelleen tukkeutumisen, valtimon kroonisen tukkeutumisen; perifeerisen verisuonitaudin; äkillisen sydäninfarktin; epävakaan rasitusrintakivun; eteisvärinän; trom-boottisen aivohalvauksen; ohimenevien iskeemisten kohtausten; disseminoituneen intravaskulaarisen koagulaation; ruu-20 miin ulkopuolisten verenkiertojen koagulaation; valtimon ja , *. laskimon välisten oikovirtauskanavien ja verisuonisiirrän- ;< näisten (mukaan luettuna sepelvaltimon ohitussiirrännäis- \ ten) tukkeutumisen; ja ahtautuneen verisuonen laajentamisen t jälkeen ilmenevän uudelleen ahtautumisen ja tukkeutumisen 25 ehkäiseminen ja/tai hoito. Niillä on myös käyttöä trombo- 'N ' lyyttisen hoidon lisänä.

V : Keksinnön yhdisteet ovat trombiinin tehokkaita ja valikoivia estäjiä, trombiinin ollessa viimeinen seriini-, : proteaasientsyymi koagulaatiotapahtumasarjassa. Trombiinin : 30 ensisijainen tehtävä on fibrinogeenin pilkkominen fibriinin tuottamiseksi, joka muodostaa lineaarisia liukenemattomia polymeerejä, jotka vuorostaan silloittaa tekijä XHIa, joka '··' itse on trombiinin aktivoima. Lisäksi trombiini säätelee : ’’ omaa tuotantoaan aktivoimalla aikaisemmin koagulaatiotapah- 35 tumasarjassa tekijöitä V ja VIII. Sillä on myös tärkeitä tehtäviä solutasolla, jolloin se vaikuttaa spesifisiin re- 2 112481 septoreihin verihiutaleiden kasautumisen, endoteelisolujen aktivoitumisen ja fibroblastien proliferaation aiheuttamiseksi. Siten trombiinilla on keskeinen säätelevä tehtävä homeostaasissa ja veritulpan muodostumisessa.

5 Epäilemättä tehokkaat, valikoivat ja suun kautta otettuna biologisesti käyttökelpoiset trombiinin estäjät edustavat kiinnostavaa kohdetta veritulpan muodostumisen tarkoituksenmukaista hoidollista kontrollointia varten. Lisäksi trombiini aiheuttaa voimakkaasti hermon viejähaarak- 10 keen takaisinvetäytymistä ja siten trombiinin estäjällä on mahdollisesti hoidollista käyttöä akuuttien ja kroonisten hermoston rappeumatautien hoidossa. Lisäksi tässä julkaistuilla yhdisteillä on mahdollista arvoa tulehdustautien ja arpeutumisen hoidossa ja haavan parantamisessa.

15 Johtuen arginiinijohdannaisten mahdollisesta tehos ta substraattijäljitelminä, niitä on tutkittu trombiinin estäjinä ja tämä työ on johtanut argatrobaanin keksimiseen [katso julkaisu Cardiovascular Drug Rev., 9, 247 (1991)].

Muut tutkimusryhmät puolestaan ovat yrittäneet ilmentää 20 emäksisen arginiinin funktion erilaisissa vaihtoehtoisissa , , rakenteissa; esim. julkaisussa WO-A-92/08 709 julkaistaan

t I

amidino-, guanidino-, amidoksimino-, aminometyyli- ja ami-·' ’ nofenyylialaniinijohdannaiset antitromboottisina aineina.

♦ x ca.in.cAi i KfcJioAiuivjii ^uuaolccl uvat mc j_ jS-x v dii i_ _l t_.ci.UjK” 2 5 kaampia trombiinin estäjiä kuin edellä mainitut, ne ovat ' : : valikoivia (verrattuna esimerkiksi niiden trypsiinin, plas- : I ; miinin, butyryylikolinesteraasin ja elastaasin estämiseen), hyvin siedettyjä ja suun kautta otettuina biologisesti , käyttökelpoisia.

30 Niin ollen tämä keksintö antaa käyttöön menetelmän terapeuttisesti käyttökelpoisen yhdisteen valmistamiseksi, ·,: jolla on kaava 35 112481 3 hn^NH2 5 RV(CH2)„vc/R:i (I) R1—N I -7-R4 \ ( Y, (CHaJriT^ SOaNH ^ 0 co2h 10 jossa X on CH tai N; Y on mahdollisesti monotyydyttymätön C3-5-alkyleeni, joka on mahdollisesti substituoitu Ci-4-alkyylillä tai mety-leenillä; 15 R1 on H, Ci-4-alkyyli, joka on mahdollisesti substituoitu Ci-4-alkoksilla, OH-ryhmällä, NR5R6-ryhmällä, CONR5R6- ryhmällä, C3-6-sykloalkyylillä tai aryylillä, tai C3-6- alkenyyli; R2 on H, Ci-4-alkyyli, joka on mahdollisesti substi- 20 tuoitu Ci_4-alkoksilla, OH-ryhmällä, NR5R6-ryhmällä, CONR5R6- , , ryhmällä, C3-6-sykloalkyylillä tai aryylillä, tai CONR5R6; ' R3 ja R4 on valittu kumpikin toisistaan riippumatta • ' H-atomista, Ci-4-alkyylistä, joka on mahdollisesti substitu- \ -J _ v-ttV> tvn ^ 1 ^ r* Λ J , ν-,-,Ί _ 4_ - ^ ^ * 7 Ή -1 ^ » Oltu ΐΝΐ\ i\ j_ _y iuuci _l ±a r k/i-4 " axh.ujs.o La ^ iiaiuycciiib Lei, K K ~' ' 25 ryhmästä ja aryylistä; : ; : R5 ja R6 on valittu kumpikin toisistaan riippumatta : ; ; H-atomista ja Ci-4-alkyylistä; ja m ja n ovat kumpikin toisistaan riippumatta 1, 2 tai 3; 30 jolloin aryyli merkitsee fenyyliä, joka on mahdol lisesti substituoitu yhdellä, kahdella tai kolmella substi-: : : tuentilla, joka on itsenäisesti Ci-4-alkyyli, Ci-4-alkoksi, : OH, halogeeni tai CF3, jolloin halogeeni merkitsee fluoria, klooria, bromia tai jodia, 112481 4 tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävän suolan tai kummankin kokonaisuuden farmaseuttisesti hyväksyttävän sol-vaatin valmistamiseksi.

Ellei toisin osoiteta, alkyyli- ja a1koksiryhmät, 5 joilla on kolme hiiliatomia tai enemmän, ja alkenyyliryh-mät, joilla on neljä hiiliatomia tai enemmän, voivat olla suoraketjuisia tai haaraketjuisia.

Kaavan (I) mukaiset yhdisteet sisältävät kaksi tai useampia asymmetrisiä keskuksia ja siten ne voivat esiintyä 10 stereoisomeereina, so. enantiomeereina tai diastereoisomee-reina, ja keksintö sisältää sekä erotetut yksittäiset ste-reoisomeerit että niiden seokset.

Edullisilla stereoisomeereilla on kaava (IA): 15 HN^ R \ (CH2)n y 20 ri-\ X^R JLnO w (CH2),fr^ so2nh ^s5Y(r

:V: O 5o2H

• a

Keksinnön jjiiiiin sisältyvät myös kaavan (I) mu-25 kaisten yhdisteiden radioleimatut johdannaiset, jotka ovat ; i ; sopivia biologisiin tutkimuksiin.

Kaavan (I) mukaisten yhdisteiden farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat ovat esimerkiksi myrkyttömiä happoad-:y. ditiosuoloja, jotka on muodostettu epäorgaanisten happojen, i i 30 kuten suolahapon, bromivetyhapon, rikkihapon ja fosforiha- 1' pon kanssa, orgaanisten karboksyylihappojen tai orgaanisten sulfonihappojen kanssa. Kaavan (I) mukaiset yhdisteet voi-vat myös tuottaa farmaseuttisesti hyväksyttäviä metal-lisuoloja, erityisesti myrkyttömiä alkalimetallisuoloja, 'h 35 emästen kanssa. Esimerkkeihin sisältyvät natrium- ja ka- liumsuolat.

5 112481

Edullisen ryhmän muodostavat yhdisteet, joilla on kaava (I), jossa Y on monotyydyttymätön C3-5~alkyleeni, joka on substituoitu metyylillä tai etyylillä; R1 on H; tai Ci-4-alkyyli, joka on mahdollisesti substituoitu NR5R6-ryhmällä 5 tai fenyylillä; R2 on H; Ci-2-alkyyli, joka on substituoitu Ci-4-alkoksilla, NR5R6-ryhmällä tai CONR5R6-ryhmällä; tai CONR5R6; R3 ja R5 on kumpikin valittu toisistaan riippumatta H-atomista, metyylistä, CH2NR5R6-ryhmästä, metoksista, CONR5R6-ryhmästä ja fenyylistä; R5 ja R6 on kumpikin valittu 10 toisistaan riippumatta H-atomista ja metyylistä; ja X, m ja n ovat kuten edellä on määritelty kaavan (I) yhteydessä.

Edullisemman yhdisteiden ryhmän muodostavat yhdisteet, joilla on kaava (IB): 15 hn^nh‘ f~ \ R V (CH2)„ /r:WR7 20 R1 —N jf -J, Jf N \ «nv

V(CH2),ir^^S02NH(rIT

O C02H

• , * j OSSd 25 R1 on metyyli, etyyli, 2-propyyli, 3-dimetyyli- • amino-l-propyyli tai bentsyyli; R2 on H, CH2OCH3 tai CH2CON (CH3) 2; R7 on metyyli tai etyyli; , m on 1 tai 2; t’.-( 30 n on 1 tai 2; ja T X on kuten edellä on määritelty kaavan (I) yhtey- * dessä.

•it/> Keksinnön erityisen edullisiin yksittäisiin yhdis- :v, teisiin sisältyvät: 35 e 112481 6 4-metyyli-l-[N-(2-metyyli-l,2,3,4-tetrahydroisoki-noliini-7-sulfonyyli)-3-amidino-(S)-fenyylialanyyli]-1,2,- 3,6-tetrahydropyridiini-2(R)-karboksyylihappo; 4-metyyli-l-[N-(3-metyyli-2,3,4,5-tetrahydro-lH-3-5 bentsatsepiini-7-sulfonyyli)-3-amidino-(S)-fenyylialanyy-li]-1,2,3,6-tetrahydropyridiini-2(R)-karboksyylihappo; ja 1-{N-[3-dimetyyliamino-1-propyyli)-2,3,4,5-tetra-hydro-lH-3-bentsatsepiini-7-sulfonyyli]-3-amidino-(S)-fe-nyylialanyyli}-4-metyyli-l,2,3,6-tetrahydropyridiini-2(R)-10 karboksyylihappo; ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat ja kummankin kokonaisuuden farmaseuttisesti hyväksyttävät sol-vaatit.

Keksinnön mukaiselle menetelmälle on tunnusomaista, 15 että hydrolysoidaan hapon tai emäksen katalysoimana yhdiste, jolla on kaava hn^nh* 20 R\(CH2)n>^*3 (II)

V : R1-N ^y-R4 [ C X

^(C^in^SOaNH

° co2r8 25 jossa R8 on Ci-3-alkyyli ja X, Y, R1, R2, R3, R4, m ja n ovat kuten edellä tässä patenttivaatimuksessa on määritelty; ja ;v. sen jälkeen muodostetaan mahdollisesti halutun tuotteen 30 farmaseuttisesti hyväksyttävä suola tai jomman kumman koko-naisuuden farmaseuttisesti hyväksyttävä solvaatti. v;.·' Kaavassa (II) R8 on edullisesti metyyli tai etyyli.

: ' ; Reaktio voi olla hapon tai emäksen katalysoima, _ mutta yleensä se toteutetaan käyttäen alkalimetallihydrok- 35 sidia, kuten natrium- tai kaliumhydroksidia vesiliuoksessa, mahdollisesti sopivan keraliuottimen läsnä ollessa, lämpö- 112481 7 tilassa, joka on noin huoneenlämpötilasta noin 100 °C:seen. Edulliset olosuhteet käsittävät vesipitoisen natriumhydrok-sidiliuoksen käytön 1,4-dioksaanin toimiessa keraliuottime-na, suunnilleen huoneenlämpötilassa.

5 Kaavan (II) mukaiset uudet välituote-esterit muo dostavat myös osan keksintöä.

Kaavan (II) mukainen yhdiste voidaan valmistaa yhdisteestä, jolla on kaava (III) :

10 CN

is W^so2nh>yV nn) o co2r8 jossa X, Y, R1, R2, R3, R4, R8, m ja n ovat kuten edellä on määritelty kaavan (II) yhteydessä.

20 Tämä voidaan toteuttaa muuttamalla nitriiliryhmä tarvittavaksi amidiiniksi iminoeetterivälituotteen kautta » t · ’·' ' tavanomaisissa olosuhteissa. Esimerkiksi nitriilin liuos : ,* alemmassa alkoholissa, kuten metanolissa tai etanolissa, ,· · kyllästetään kloorivedyllä noin 0 °C;n j.ampötiiässa imlno— '1' : 25 eetterihydrokloridin saamiseksi, joka vuorostaan käsitel- : lään liuoksena samassa alkoholissa ammoniakin ylimäärällä . noin -10 - 0 °C: n lämpötilassa, ja sen jälkeen tulokseksi saatua seosta kuumennetaan palautusjäähdyttäen.

;·_ _ Siinä tapauksessa, että kyllästäminen ammoniakki- 1, 30 vaiheen kanssa toteutetaan palautusjäähdyttäen, yhdiste, jolla on kaava (III), jossa R1 on suojaryhmä (P1) , joka on herkkä poistumaan tällaisissa olosuhteissa, esim. trif-luoriasetyyli, tuottaa yhdisteen, jolla on kaava (II), jos-sa R1 on H.

’ 35 Vaihtoehtoisesti vapaa iminoeetteriemäs voidaan tuottaa in situ käsittelemällä nitriili sopivalla alkalime- 112481 8 tallialkoksidilla vastaavassa alemmassa alkanoliliuottimes-sa noin huoneenlämpötilassa; esimerkiksi natriummetoksidil-la tai natriumetoksidilla metanolissa tai etanolissa vastaavasti. Tätä vaihetta seuraa iminoeetteriliuoksen käsit-5 tely sopivalla ammoniumsuolalla, esim. ammoniumkloridilla, suunnilleen huoneenlämpötilassa.

Kaavan (III) mukainen yhdiste voidaan valmistaa käyttämällä erilaisia menetelmiä, joista yhdessä N-alkyloidaan yhdiste, jolla on kaava (IV): 10

CN

RV(CH2)nv^R3 15 J (IV)

(CH^m S02NH^Y

° co2r8 jossa X, Y, R2, R3, R4, R8, m ja n ovat kuten edellä on mää-20 ritelty kaavan (III) yhteydessä, sillä varauksella, että mikään muista nukleofiilisistä keskuksista kaavassa (IV) ei ’·' ’ tuota reaktiivisempaa alkyloimispaikkaa, esim. tietyissä : .‘ tapauksissa, kun R2, R3 tai R4 on Ci-4-alkyyli, joka on sub- * I ; • tt (O T hn M D ^ D ^_ ν' t t V> τν> n 1 1 λ , StlLUOj.uu lh l\ i\ ryi iiLtci _l x a. · βί"! 25 Yleensä alkyloiminen voidaan toteuttaa saattamalla ; reagoimaan kaavan (IV) mukainen yhdiste yhdisteen kanssa, jolla on kaava RXQ, jossa R1 on kuten edellä on määritelty kaavan (III) yhteydessä ja Q on sopiva poistuva ryhmä, ;v. esim. halogeeni, Ci-4-alkaanisulfonyylioksi, trifluorime- 30 taanisulf onyylioksi tai aryylisulfonyylioksi (kuten bent- seenisulfonyylioksi tai p-tolueenisulfonyylioksi) , sopivan emäksen, esim. alkali- tai maa-alkalimetallin karbonaatti-tai bikarbonaattisuolan, läsnäollessa sopivassa liuottimes-sa, kuten Ci-3-alkanolissa, asetonitriilissä, dimetyylifor-35 mamidissa tai N,N-dimetyyliasetamidissa, mahdollisesti natriumin tai kaliumin jodidisuolan läsnä ollessa, lämpötilas- 112481 sa, joka on noin huoneenlämpötilasta 100 °C:seen. Edullisesti Q on kloori, bromi tai jodi, emäs on natrium- tai kaliumkarbonaatti tai -bikarbonaatti, liuotin on asetonitrii-li ja reaktio toteutetaan noin 80 - 85 °C:n lämpötilassa.

5 Kun R1 on metyyli, N-metylointi voidaan toteuttaa tarkoituksenmukaisesti käyttämällä pelkistävää alkyloimis-menetelmää, jossa yhdiste (IV) käsitellään formaldehydin vesiliuoksella ja sen jälkeen sopivalla pelkistimellä sopivassa liuottimessa. Edullisesti molemmat reaktiovaiheet to-10 teutetaan huoneenlämpötilassa dikloorimetaaniliuottimessa, käyttämällä natriumtriasetoksiboorihydridiä pelkistysvai-heessa.

Vaihtoehtoisesti kaavan (III) mukainen yhdiste voidaan valmistaa kytkemällä yhdiste, jolla on kaava (V): ‘ . , h

20 R,-A Xn^R X -CO

(CH2)X^ S02NH

* - * j o s s 3. X, r r2^ r3^ r^ m n o v 3. t kuuton scdsllä on määni- k : 25 telty kaavan (III) yhteydessä, yhdisteeseen, jolla on kaava :i;': (vi) : H N ) (VT) : : 30 C02R8 jossa Y ja R8 ovat kuten edellä on määritelty kaavan (III) ..h yhteydessä. Kytkentäreaktio voidaan toteuttaa käyttäen ta- 35 vanomaista amidisidoksen muodostavaa tekniikkaa. Esimerkiksi happo voidaan aktivoida muodostamalla vastaava asyyliha- 10 1 12481 lidi, esim. bromidi tai kloridi, ja sen jälkeen saattamalla jälkimmäinen reagoimaan kaavan (VI) mukaisen amiinin kanssa, jolloin läsnä on mahdollisesti reaktion suhteen inertti emäs, joka toimii hapon vangitsijana, sopivassa liuottimes-5 sa, kuten dikloorimetaanissa. Vaihtoehtoisesti voidaan käyttää mitä tahansa peptidikytkentämuunnelmaa. Esimerkiksi happo voidaan aktivoida käyttäen karbodi-imidiä, kuten 1,3-disykloheksyylikarbodi-imidiä tai l-etyyli-3-dimetyyliami-nopropyylikarbodi-imidiä, mahdollisesti l-hydroksibentso-10 triatsolin läsnäollessa ja kun tarkoituksenmukaista, reaktion suhteen inertin amiinin, kuten N-metyylimorfoliinin tai N-etyylidi-isopropyyliamiinin (esimerkin kun joko yhdiste (VI) tai karbodi-imidi on happoadditiosuolan muodossa) ja/tai katalyytin, kuten 4-dimetyyliaminopyridiinin, 15 läsnä ollessa, sopivassa liuottimessa, kuten dikloorimetaanissa. Siten yhdessä menetelmässä yhdiste (V) muutetaan vastaavaksi asyylikloridiksi käyttäen oksalyylikloridia ja katalyyttistä määrää dimetyyliformamidia sopivassa liuottimessa, esim. dikloorimetaanissa, noin 0-5 °C:n lämpöti-20 lassa ja sitten asyylikloridi saatetaan reagoimaan yhdisteen (VI) kanssa, joka on tarkoituksenmukaisesti hydroklo-’·’ ' ridisuolana, N-etyylidi-isopropyyliamiinin ollessa läsnä ; n reaktion suhteen inerttinä emäksenä dikloorimetaanissa läm- ,· Potilassa, joka on noin 0 °C:sta nuoneeniämpöLiiaan.

25 Kaavan (IV) mukainen yhdiste voidaan valmistaa : h; poistamalla N-suojaus yhdisteestä, jolla on kaava (VII):

CN

·' 30 3 V R\(CH2)nV0<^ \ XdR YC) ^ o (CH2)fir^xso2NHy7 :v. ° C02R8 ί,. ' 35 11 112431 1 2 3 4 8 jossa P on suojaryhmä ja X, Y, R , R , R , R , m ja n ovat kuten edellä on määritelty kaavan (IV) yhteydessä. P1, joka edustaa tavanomaista amiinisuojaryhmää, valitaan ottaen huomioon sen yhteensopivuus erilaisten reagenssien 5 kanssa, joita käytetään aikaisemmissa menetelmän synteettisissä vaiheissa, ja myös ottaen huomioon reaktio-olosuhteet, joita tarvitaan mainitun suojaryhmän valikoivaa poistamista varten; edullisesti se on trifluoriasetyyli. Nimenomainen suojaryhmä voidaan poistaa standardiolosuh-10 teissä, jotka käsittävät trifluoriasetyylin tapauksessa laimean vesipitoisen emäksen, kun läsnä on mahdollisesti keraliuottimena Ci-3-alkanoli. Edullisia olosuhteita ovat natrium- tai kaliumkarbonaatti vesipitoisessa metanolissa tai etanolissa suunnilleen huoneenlämpötilassa.

15 Kaavan (VII) mukainen yhdiste voidaan valmistaa kytkemällä yhdiste, jolla on kaava (VIII): . , h 2 0 R V (CH2)n >55/ p'-n* XjR4 I ^10

;: ' X (CH2)firs^Xs02NH

‘ jossa X, R2, R3, R4, mi, n ja P1 ovat kuten edellä on määri — 25 telty kaavan (VII) yhteydessä, yhdisteeseen, jolla on kaava : ; : (VI), yhdenmukaisesti kuten on kuvattu aikaisemmin kaavan ; ; ; (III) mukaisen yhdisteen valmistuksessa kaavan (V) mukai sesta yhdisteestä.

, Kaavan (V) mukainen yhdiste voidaan valmistaa hyd- 2.' 30 rolysoimalla yhdiste, jolla on kaava (IX):

CN

!'U R\;(CH2)„.^R3 >=/ ... 35 R'-V TV ( (CH^jiT^SOaNH ^X02Re (ΐχ> 12 1 12481 jossa X, R1, R2, R3, R4, m ja n ovat kuten edellä on määritelty kaavan (V) yhteydessä ja R8 on kuten edellä on määritelty kaavan (VI) yhteydessä, olosuhteissa, jotka on kuvattu edellä yhdisteen (II) muuttamiseksi yhdisteeksi (I).

5 Kaavan (IX) mukainen yhdiste voidaan valmistaa N- alkyloimalla yhdiste, jolla on kaava (X):

CN

10 rX(ch2)„^3 G

H N X Xr4 ( (cH2)rfrVv^S02NH '"'XOgR8 ^ 15 jossa X, R2, R3, R4, R8, m ja n ovat kuten edellä on määritelty kaavan (IX) yhteydessä, yhdenmukaisesti kuten yhdisteen (IV) muuttaminen yhdisteeksi (III), kun taas kaavan (X) mukainen yhdiste puolestaan voidaan valmistaa yhdisteestä, jolla on kaava (XI): 20 cn

rn (H

r* ,ΓΗ i ^.R3 v: p'-nx< r ^

·:·: 25 \ Ji vjJ I

. . (CH2),ir S02NH ^O02Re jossa X, R2, R3, R4, R8, m ja n ovat kuten kaavan (X) yhteydessä edellä on määritelty ja P1 on kuten aikaisemmin on 30 määritelty kaavan (VIII) yhteydessä, olosuhteissa, jotka on kuvattu selostettaessa yhdisteen (VII) muuttaminen yhdis-' ;; teeksi (IV) .

: r : Kaavan (VIII) mukainen yhdiste voidaan valmistaa -t sulfonyloimalla yhdiste, jolla on kaava (XII): 1 \ 35 13 112481 h JL^ ^ nh2^co2h jossa X on kuten edellä on määritelty kaavan (VIII) yhtey-10 dessä, käyttämällä yhdistettä, jolla on kaava (XIII): RX-(CH2)n^./R3 p'-n T JR4 (ΧΙΠ) jossa Z on halogeeni, edullisesti kloori, ja R2, R3, R4, m, n ja P1 ovat kuten edellä on määritelty kaavan (VIII) yhteydessä.

20 Kaavan (XII) α-aminohappo suojataan ensin kaksin kertaisesti in situ käyttäen silylointireagenssia reaktion V ‘ suhteen inertin emäksen läsnä ollessa sopivassa liuottimes- • sa, lämpötilassa, joka on noin huoneenlämpötilasta suunnil- * leen reaktioväliarneen palautusjäähdytysläiupötilaan, N— ·; ; 25 silyyli-O-silyyliesterin saamiseksi, joka sitten saatetaan : reagoimaan yhdisteen (XIII) kanssa suunnilleen reaktioväli- aineen palautusjäähdytyslämpötilassa. Tarkoituksenmukainen silylointireagenssi on trimetyylisilyylikloridi, jota käy-, , tetään edullisesti N-etyylidi-isopropyyliamiinin kanssa, 30 joka on emäksenä, dikloorimetaaniliuottimessa.

·;*' Kaavan (XI) mukainen yhdiste voidaan valmistaa myös :: : yhdisteestä (XIII) sulfonyloimalla tavanomaisesti yhdiste, jolla on kaava (XIV):

I I I

: \ 35 14 112481

CN

5 ςΏν) nh2^co2r8 jossa X on kuten edellä on määritelty kaavan (XI) yhteydes-10 sä, reaktion suhteen inertin emäksen läsnä ollessa, sopivassa liuottimessa lämpötilan ollessa noin 0 °C:sta huoneenlämpötilaan. Tässä reaktiossa α-aminoesteriä käytetään yleensä happoadditiosuolana, esim. hydrokloridina, edullinen emäs on N-metyylimorfoliini ja liuotin on edullisesti 15 dikloorimetaani.

Kaavan (XIV) mukainen yhdiste voidaan valmistaa käyttämällä erilaisia menetelmiä käytettävissä olevien a-aminohappo/esterisynteesien runsaasta määrästä. Tarkoituksenmukainen menetelmä on menetelmä, joka koskee sopivasti 20 suojatun glysiinijohdannaisen C-"bentsylointia" ja sen jälkeen tulokseksi saadun fenyylialaniinijohdannaisen N-V ’ suojauksen poistoa. Esimerkiksi kun X on CH ja R8 on etyy- • li, N-(difenyylimetyleeni)glysiinietyyliesteri käsitellään • ! * 3-syaanibentsyylibromidillä, kun läsnä ovat sekä kveternaa— ;··· 25 rinen ammoniumsuola, kuten tetrabutyyliammoniumbromidi, et- tä emäs, kuten kaliumkarbonaatti, sopivassa liuottimessa, , . , kuten asetonitriilissä, suunnilleen reaktioväliaineen pa lautus j äähdytyslämpötilassa . Näin saadusta raa'asta 3-syaanifenyylialaniinijohdannaisesta voidaan sitten poistaa 30 N-suojaus happamissa olosuhteissa, esim. käyttämällä sit-ruunahapon vesiliuosta, sopivan keraliuottimen, kuten teol-: : lisuusspriin, kanssa suunnilleen huoneenlämpötilassa, vaa- ditun α-aminoesterin tuottamiseksi.

Epäilemättä kaavan (XII) mukainen yhdiste on saata- • 1 35 vissa kaavan (XIV) mukaisen yhdisteen standardihydrolyysin avulla.

15 1 12481

Kaavan (IA) mukaisten edullisten stereoisomeerien valmistamiseksi tarvitaan sekä yhdisteen (XII) että yhdisteen (XIV) (S)-enantiomeerit. Jälleen alan ammattimiehen käytettävissä on valikoima menetelmiä asymmetrisestä syn-5 teesistä klassisiin erotusmenetelmiin koskien yhdisteiden (XII) ja (XIV) sopivia johdannaisia. Erityisen tarkoituksenmukainen menetelmä on entsymaattinen erottaminen. Siten kaavan (XIV) mukaisen yhdisteen käsittely, kun mainitussa

Q

kaavassa X on CH ja R on etyyli, esimerkiksi a-10 kymotrypsiinillä sopivassa liuotinväliaineessa, kuten vesipitoisessa tolueenissa, lämpötilassa, joka on noin huoneenlämpötilasta noin 40 °C:seen, tuottaa suoraan (S)-enantiomeerin, jolla on kaava (XII), jossa X on CH.

Kaavan (XII) mukaisen (S)-enantiomeerin muuttaminen 15 kaavan (XIV) mukaiseksi (S)-enantiomeeriksi voidaan toteuttaa käyttämällä tyypillistä α-aminohapon N-suojaus/ suo-jauksenpoistomenettelyä. Esimerkiksi tavanomainen amii-nisuojaryhmä, kuten t-butoksikarbonyyli (Boc) tai bentsyy-lioksikarbonyyli (Cbz) lisätään edelliseen ja tämä väli-20 tuote muutetaan sitten sopivasti reaktiiviseksi alkalime- tallisuolaksi, edullisesti kesiumsuolaksi, joka vuorostaan V ' alkyloidaan käyttämällä yhdistettä, jolla on kaava R8Q, • jossa Q on kuten edellä on määritelty, kuitenkin edullises- * ' ' ti bromi tai jodi. Lopuksi N—suojaryhmä puisteluun standar— ·; : 25 diolosuhteissa, esim. käyttäen trif luorietikkahappoa tai : katalyyttistä hydrausta ja tulokseksi saatu a-aminoesteri , muutetaan mahdollisesti hydrokloridisuolaksi.

Vaihtoehtoinen lähestymistapa kaavan (XII) mukaisen (S)-enantiomeerin ja siten kaavan (XIV) mukaisen (S)-30 enantiomeerin saamiseksi perustuu alaniini j ohdannaisiin, ; ’ jotka ovat riittävän reaktiivisia läpikäydäkseen siirtymä- : : ; metallin välittämän ristikytkentäreaktion sopivan jodi- tai bromisyaanipyridiinin/bentsonitriilin kanssa. Äskettäin julkaistu [J. Org. Chem., 57, 3397, 1992)] organosinkki- ’ ' 35 reagenssi (XV): 112481 16 .R9 ° ΐ U JL (xv)

*BuO N C02CH2Ph H

5 jossa R9 on Znl ja joka valmistetaan vastaavasta 3-jodialaniinijohdannaisesta (XV; jossa R9 on I), mahdollistaa tällaisen lähestymistavan toteuttamisen. Siten esimerkiksi in situ sopivassa liuottimessa, kuten vedettömässä tetrahydrofuraanissa, muodostetun alaniinijohdannaisen kä-10 sittely 4-bromi-2-syaanipyridiinilla, kun läsnä on kata-lyyttisesti tehokas siirtymämetallijohdannainen, esimerkiksi bis(trifenyylifosfiini)palladium (II)kloridi, tuottaa tarvittavan syaanipyridyylialaniinijohdannaisen, jolla on kaava (XV), jossa R9 on 2-syaani-4-pyridyyli. Tavanomainen 15 emäksen katalysoima esterihydrolyysi ja sen jälkeen N-Boc-suojaryhmän poistaminen standardiolosuhteissa, esim. käyttäen trifluorietikkahappoa tai suolahappoa, tuottavat yhdisteen, jolla on kaava (XII), jossa X on N.

Kaavan (XIII) mukainen yhdiste voidaan valmistaa 20 yhdisteestä, jolla on kaava (XVI): p1—n' I ί-R4 (XVI) ·;·: 25 jossa Rz, R3, R4, m, n ja P1 ovat kuten edellä on määritelty kaavan (XIII) yhteydessä, käyttämällä tunnettuja menetelmiä , SCkZ-ryhmän lisäämiseksi elektrofiilisesti aromaattiseen * 30 rengasjärjestelmään, kun mainitussa ryhmässä Z on kuten h. ‘ edellä on määritelty kaavan (XIII) yhteydessä. Esimerkiksi : ; ; kun Z on kloori, käyttämällä kloorisulfonihappoa noin -10 - +5 °C:n lämpötilassa.

_ · Kaavan (XVI) mukainen yhdiste voidaan valmistaa yh- : <’ 35 disteestä, jolla on kaava (XVII): 17 1 12481 r\(ch2)„^.R3 η ν' || 2-R4 (XVII) 5 jossa R2, R3, R4, m ja n ovat kuten edellä on määritelty kaavan (XVI) yhteydessä, käyttämällä tavanomaisia menetelmiä. Esimerkiksi kun P1 on trifluoriasetyyli, käyttämällä trifluorietikkahappoanhydridiä, mahdollisesti emäksen, kuten N-metyylimorfoliinin tai N-etyylidi-isopropyyliamiinin, 10 läsnäollessa ja liuottimen, kuten dikloorimetaanin, läsnäollessa, lämpötilassa, joka on noin 0 °C:sta huoneenlämpö-tilaan.

Kaavan (VI) mukainen yhdiste voidaan valmistaa käyttämällä erilaisia menetelmiä, esim. standardimaisia 15 syklisten α-aminohappojen/estereiden synteesejä, ja kun tarvitaan erityinen stereoisomeeri, käyttämällä klassisia erotusmenetelmiä tai asymmetristä synteesiä.

Esimerkiksi kun yhdiste (VI) edustaa yhdistettä, jolla on kaava (VIA): 20 ::: H N.J (VIA) : Ί : C02R8 25 : jossa R7 on kuten edellä on määritelty kaavan (IB) : , yhteydessä ja R8 on kuten edellä on määritelty kaavan (VI) yhteydessä, joko 4-metyylipyridiini tai 4-etyylipyridiini tarjoaa tarkoituksenmukaisen lähtökohdan ja sitä voidaan 30 käsitellä seuraavasti. Alkyloimalla toteutetun kvater- nisoinnin jälkeen, esim. käyttämällä tavanomaista metyloin- : , ; timenetelmää, tulokseksi saatu pyridiniumsuola saatetaan osittaiseen pelkistykseen käyttäen natriumboorihydridiä ja sen jälkeen toteutetaan in situ 2,5-dihydropyridiini-35 johdannaisen α-syanoiminen käyttäen vetysyanidia, jolloin saadaan tässä esimerkissä l-metyyli-2(R,S)-syaani-4- 1B 112481 1 o metyyli/etyyli-l,2,3,6-tetrahydropyridiini. Seuraavaksi nitriili muutetaan tarvittavaksi esterijohdannaiseksi ja N-demetylointi toteutetaan käyttäen sopivaa kloroformiaattia, esim. 2,2,2-trikloorietyylikloroformiaattia. Lopuksi N-5 suojauksen poisto toteutetaan käyttäen sopivaa reagenssia, esim. sinkkipölyä tässä esimerkissä.

Vaihtoehtoinen lähestymistapa kaavan (VIA) mukaisen yhdisteen saamiseksi koskee atsa-Diels-Alder-sykloadditio-kemiaa, jossa imiini, jolla on kaava (XVIII), jossa P2 on 10 sopiva suojaryhmä, esim. bentsyyli, saatetaan reagoimaan dieenin kanssa, jolla on kaava (XIX): H R? J (XVIU) 1 (XIX) . c p2n^xo2r8

Ib [katso Tetrahedron: Asymmetry, 2, 1263 (1991)] ja sen jäl keen toteuttamalla N-debentsylaatio jälleen käyttäen kloro-formiaattireagenssia, esim. 1-kloorietyylikloroformiaattia 20 tässä tapauksessa. Lopullinen N-suojauksen poisto voidaan toteuttaa käyttäen alkoholin (R80H) ylimäärää suunnilleen V ’ palautusjäähdytyslämpötilassa.

: '.· Epäilemättä yhdisteen (VIA) pelkistäminen, esim.

‘ <‘ * hydraarnalla katalyyttisesti, luolLaa vasLaavat piperidiini- ;·'· 25 2-karboksyyliesterit.

Kun P2 toimii myös kiraalisena apuryhmänä, esim. se on 1(R)- tai 1(S)-fenyylietyyli, asymmetrisen induktion käyttökelpoinen aste on saavutettavissa (4 + 2)- sykloadditioreaktiossa, joka tuottaa helposti erotettavien 30 diastereoisomeerien seoksen; 1(S)-apuryhmä aiheuttaa (R)- ’ stereokemian 2-asemaan ja 1(R)-apuryhmä tuottaa antipodi- : ; sarjan [katso julkaisu Tetrahedron: Asymmetry, 2, 1263 ; (1991)]. N-suojauksen poistaminen voidaan toteuttaa kuten edellä tapauksessa, jossa P2 on bentsyyli, tuottaen siten 35 vastaavasti joko kaavan (VIA) mukaisen edullisen 2(R)- tai 2(S)-enantiomeerin.

19 112481 Jälleen näiden enantiomeerien katalyyttisen hydra-uksen pitäisi johtaa vastaavasti (2R,4 S)— ja (2S,4R)-piperidiinienantiomeereihin.

Vaihtoehtoiset lähestymistavat näiden piperidiini-5 enantiomeerien saamiseksi, joissa R7 on metyyli, ja myös vastaavien (2R,4R)- ja (2S,4S)-enantiomeerien saamiseksi on kuvattu julkaisussa Biochem. Biophys. Res. Comm., 101, 440 (1981), jolloin käytetään klassista jakotislausta, optisesti aktiivisista hapoista (L- ja D-viinihaposta) muodostet-10 tujen suolojen jakokiteyttämistä ja epimerointitekniikkaa.

Erottaminen voidaan toteuttaa myös käyttämällä kromatografisia erottamismenetelmiä. Esimerkiksi sykloaddi-tiotuotteen hapon katalysoima hydrolyysi, kun mainittu syk-loadditiotuote on muodostettu yhdisteestä (XVIII), jossa P2 15 on bentsyyli, ja yhdisteestä (XIX), tuottaa l-bentsyyli-4-metyyli/etyyli-1,2,3,6-tetrahydro-2(R,S)-karboksyylihapon, joka sitten esteröidään standardiolosuhteissa käyttämällä kiraalista alkoholia, esim. N-suojattua efedriinijohdan-naista, kuten N-asetyyli-(1R,2S)-efedriiniä. N-suojauksen 20 poistaminen käyttäen esimerkiksi 2,2,2-trikloorietyyli-kloroformiaattia ja sen jälkeen sinkkipölyä, kuten edellä ♦ I » V ' on kuvattu, ja sen jälkeen kromatografia silikageelin avul- : la tuottavat yksittäiset 2(R)- ja 2 (S)-diastereoisomeeri- • esterit, joista kumpikin kasitenaan seuraavasLi. N:n uu— 'ti 25 delleen suojaus esim. käyttäen Boc-ryhmää, kiraalisen apu-; ryhmän poistaminen emäksen katalysoiman hydrolyysin avulla, ,‘t uudelleen esteröinti käyttämällä RÖH: a ja Boc-ryhmän pois taminen tuottavat yhdisteen (VIA) 2(R)- ja 2 (S)-enantio- .. . meerit, joiden identiteetti voidaan vahvistaa vertaamalla M 30 niitä enantiomeereihin, jotka on saatu käyttämällä edellä kuvattua asymmetristä atsa-Diels-Alder-kemiaa.

: ; ; Kaavan (XVII) mukaisia bisyklisiä amiineja ja nii- ; den valmistuksessa käytettäviä välituotteita, myös jodi- tai bromisyaanipyridiiniä/bentsonit rilliä, jota tarvitaan * 1 35 yhdisteen valmistamiseksi, jolla on kaava (XV), jossa R9 on 2-syaani-4-pyridyyli tai 3-syaanifenyyli, kun kumpaakaan ei 112481 20 ole kaupallisesti saatavissa eikä ole jäljempänä kuvattu, voidaan saada joko yhdenmukaisesti valmistusosassa kuvattujen menetelmien kanssa tai käyttämällä tavanomaisia synteettisiä menetelmiä orgaanisen kemian stantardimaistan op-5 pikirjojen tai edeltävän kirjallisuuden mukaisesti helposti saatavista lähtöaineista käyttäen sopivia reagensseja ja reaktio-olosuhteita.

Lisäksi alan ammattimies on tietoinen jäljempänä esimerkeissä ja valmistusosassa kuvattujen menetelmien 10 muunnelmista ja vaihtoehdoista, jotka tekevät mahdolliseksi kaavan (I) määrittelemien yhdisteiden saamisen.

Kaavan (I) mukaisten yhdisteiden farmaseuttisesti hyväksyttäviä happoadditiosuoloja voidaan myös valmistaa tavanomaisesti. Esimerkiksi vapaan emäksen liuos käsitel-15 lään sopivalla hapolla joko puhtaana tai sopivassa liuotti-messa ja tulokseksi saatu suola eristetään joko suodattamalla tai haihduttamalla tyhjössä reaktioliuotin. Farmaseuttisesti hyväksyttäviä emäsadditiosuoloja voidaan saada vastaavalla tavalla käsittelemällä kaavan (I) mukaisen 20 yhdisteen liuos sopivalla emäksellä. Molempia suolatyyppejä voidaan muodostaa tai niitä voidaan muuttaa keskenään käyt-’ täen ionivaihtohartsitekniikkaa.

.* Tämän keksinnön yhdisteiden biologinen aktiivisuus · määritettiin käyttämällä scuraavia koemenetelmiä.

’ 25 Kromogeeniset määritykset ; Trombiinin, trypsiinin, plasmiinin tai tekijä Xa:n ; estäminen mitataan 96-kuoppaisilla maljoilla käyttämällä kromogeenisiä määrityksiä. Estämisprosentti ja ICso-arvo lasketaan kolmen kerranteen näytteiden muodostamasta 8 kon-30 sentraation annos-vaste-käyrästä. Substraatista Km ja IC50- ’; arvosta lasketaan kunkin estäjän Ki-arvo. Kaikki määrityk- set toteutetaan kokonaisinkubointinesteen käsittäessä 200 : ; μΐ, joka sisältää 50 mM HEPES:iä ja 150 mM NaCl:a pH-arvon ollessa 8,0, ja kaikkia yhdisteen laimennuksia esi-35 inkuboidaan entsyymin kanssa huoneenlämpötilassa 15 minuu tin ajan ennen lisäämistä substraattiin. Sitten 30 minuutin 112481 21 inkuboinnin jälkeen 30 °C:n lämpötilassa O.D. mitataan aallonpituuden ollessa 405 nm 96-kuoppaisen maljan lukulaitteella. Trombiinin aktiivisuus mitataan käyttäen naudan trombiinia ja S2238-tuotetta (H-D-Phe-Pip-Arg-pNA), naudan 5 haiman trypsiini määritetään käyttäen S2222-tuotetta (Bents-Isoleu-Glu-Gly-Arg-pNA), naudan plasman plasmiini määritetään käyttäen Chromozym PL-tuotetta (tosyyli-Gly-Pro-Lys-pNA) ja naudan tekijä Xa määritetään puskurissa, joka käsittää 50 mM Tris:ä, 150 mM NaClra, pH-arvo 7,5, 10 käyttäen S2222-tuotetta.

Hyytymismääritykset

Trombiiniaika (TT) ja aktivoitunut osittainen trom-boplastiiniaika (APTT) mitataan käyttäen Instrumentation Laboratories (IL) Test TT -reagenssia ja IL Test APTT (el-15 lagiinihappo) -reagenssia vastaavasti Automated Coagulation Laboratory-laitteessa (ACL) valmistajan ohjeiden mukaisesti .

In vitro

Lisätään 1 ml:n näytteisiin rotan yhdistettyä plas-20 maa (sitratoitua) 1/100 tilavuutta yhdisteen konsentraati-, , oita ja seoksia esi-inkuboidaan huoneenlämpötilassa 15 mi- * nuutin ajan, minkä jälkeen TT ja APTT mitataan.

• ·' Ex vivo * * * VhH ! σ+· emt annnof q! 1 3 nn omin Vanffa 1 o cl/ τ o -i o ä ΐ —

, -LAA —1— V- > ^ ^ UlliiVO LUUii UUUU JLU U L- U ( AUUlVAiUVU JlOUX

» 25 sesti tai pohjukaissuolensisäisesti rottiin. Ennen annos-: : ; tusta ja sen jälkeen otetaan verinäytteet sitraattiliuok- . : seen ja valmistetaan plasma. TT ja APTT mitataan kuten in vitro -määrityksissä.

, Hoidossa kaavan (I) mukaiset yhdisteet, niiden far- . 30 maseuttisesti hyväksyttävät suolat ja kummankin kokonaisuu den farmaseuttisesti hyväksyttävät solvaatit voidaan antaa : potilaalle yksin, mutta yleensä ne annetaan seoksessa far- ; maseuttisen kantajan kanssa, joka on valittu ottaen huomi- oon aiottu lääkkeen antotapa ja standardimainen farmaseut-35 tinen käytäntö. Edullisesti ne annetaan potilaalle suun kautta tabletteina, jotka sisältävät täyteaineita, kuten 112481 22 tärkkelystä tai laktoosia, tai kapseleissa tai ovuleissa joko yksin tai seoksessa täyteaineiden kanssa, tai eliksiireinä, liuoksina tai suspensioina, jotka sisältävät maku-tai väriaineita. Ne voidaan antaa myös ruiskeena ruuansula-5 tuskanavan ulkopuolisesti, esimerkiksi laskimonsisäisesti, lihaksensisäisesti tai ihonalaisesti. Ruuansulatuskanavan ulkopuolista käyttöä varten niitä käytetään parhaiten steriilin vesiliuoksen muodossa, joka voi sisältää muita aineita, esimerkiksi riittävästi suoloja tai glukoosia liuok-10 sen tekemiseksi isotoniseksi veren kanssa. Poskeen tai kielen alle otettavaksi yhdisteet voidaan antaa tabletteina tai pastilleina, jotka voidaan formuloida tavanomaisella tavalla.

Kaavan (I) mukaisten yhdisteiden ja niiden far-15 maseuttisesti hyväksyttävien suolojen ja solvaattien antamiseksi potilaille suun kautta, ruuansulatuskanavan ulkopuolisesti, poskeen tai kielen alle niiden päivittäinen an-nostustaso on 1 - 1 000 mg (yhtenä annoksena tai jaettuina annoksina). Siten tabletit tai kapselit voivat sisältää 0,5 20 - 500 mg aktiivista yhdistettä annettaksi yksitellen tai kaksi tai useampia tabletteja tai kapseleita kerralla, ku-’ ten tarkoituksenmukaista. Joka tapauksessa lääkäri määrit- t t ' tää todellisen annostuksen, joka on sopivin yksittäiselle : potilaalle, ja se vaihtelee nimenomaisen potilaan iän, pai- 25 non ja vasteen mukaan. Edellä annetut annostukset ovat esi- : merkki keskimääräisestä tapauksesta; tietysti voi olla yk- ; silöllisiä tapauksia, joissa suuremmat tai pienemmät annos- tusalueet ovat paikallaan ja tällaiset annostukset sisältyvät tämän keksinnön piiriin.

30 Kaavan (I) mukaista yhdistettä tai sen farmaseutti sesti hyväksyttävää suolaa tai jomman kumman kokonaisuuden , ; farmaseuttisesti hyväksyttävää solvaattia tai mitä tahansa ; edellä mainituista sisältävää farmaseuttista koostumusta voidaan käyttää lääkkeen valmistukseen syvän laskimotukok-35 sen (DVT) parantavaa tai ennalta ehkäisevää hoitoa varten leikkauksen, vaikean sairauden, halvauksen, solun pahanlaa- 112481 23 tuisuuden, pitkittyneen immobilisaatiovamman, alaraajan kipsien käytön tai alaraajojen tai lantion murtumien jälkeen; uusiutuvan syvän laskimotukoksen ja raskauden aikana ilmenevän syvän laskimotukoksen parantavaa tai ennalta eh-5 käisevää hoitoa varten, kun potilaalla on ollut aikaisemmin syvä laskimotukos; trombolyyttistä hoitoa seuraavan uudelleen tukkeutumisen, valtimon kroonisen tukkeutumisen; perifeerisen verisuonitaudin; äkillisen sydäninfarktin; epävakaan rasitusrintakivun; eteisvärinän; tromboottisen aivo-10 halvauksen; ohimenevien iskeemisten kohtausten; disseminoi-tuneen intravaskulaarisen koagulaation; ruumiin ulkopuolisten verenkiertojen koagulaation; valtimon ja laskimon välisten oikovirtauskanavien ja verisuonisiirrännäisten (mukaan luettuna sepelvaltimon ohitussiirrännäisten) tukkeutu-15 misen; ja ahtautuneen verisuonen laajentamisen jälkeen ilmenevän uudelleen ahtautumisen ja tukkeutumisen; hermoston rappeumatautien; tulehdussairauksien tai arpeutumisen parantavaa tai ennalta ehkäisevää hoitoa varten.

Seuraavat esimerkit ja valmistukset kuvaavat kek-20 sinnön yhdisteiden ja niissä käytettävien välituotteiden synteesejä. Yhdisteiden puhtautta valvottiin rutiininomai- v · sesti ohutkerroskromatografian avulla (Rf) käyttäen Merck • Kieselgel 60 F254 -levyjä ja seuraavia liuotinjär jestelmiä :Ti (SS): -:· ; 25 1. heksaani: eetteri, 1:1; . . 2. eetteri; 3. dikloorimetaani:metanoli:jääetikka, 90:10:1; 4. heksaani:eetteri, 4:1; 5. dikloorimetaani; • ' 30 6. dikloorimetaani:metanoli:0,880 ammoniakin vesi- liuos, 95:5:0,5; : ; ; 7. heksaani:etyyliasetaatti, 3:7; 8. heksaani:etyyliasetaatti, 1:1; 9. dikloorimetaani:metanoli:0,0880 ammoniakin vesi- : ' 35 liuos, 90:10:1; ’ * 10. heksaani:etyyliasetaatti, 3:1; 112481 24 11. tolueeni:etyyliasetaatti, 4:1; 12. tolueeni: etyyliasetaatti, 1:1; 13. isobutyylimetyyliketoni:jääetikka: vesi, 2:1:1 (ylempi faasi); 5 14. etyyliasetaatti:etanoli, 4:1; 15. etyyliasetaatti:etanoli:jääetikka, 90:10:0,4; 16. etyyliasetaatti:etanoli:jääetikka, 80:20:1; 17. etyyliasetaatti:etanoli, 9:1; 18. heksaani:etyyliasetaatti:dietyyliamiini, 9:1: 10 0,2; 19. heksaani:etyyliasetaatti, 50:1; 20. dikloorimetaani:metanoli, 97,5:2,5; 21. dikloorimetaani:etanoli, 97,5:2,5; 22. heksaani:etyyliasetaatti, 1:4; 15 23. dikloorimetaani:metanoli, 95:5; 24. dikloorimetaani:metanoli:0,880 ammoniakin vesi-liuos, 80:20:5; 25. dikloorimetaani:metanoli:0,880 ammoniakin vesi-liuos, 84:14:2.

20 1H-ydinmagneettiset resonanssispektrit (NMR-spekt- rit) rekisteröitiin käyttäen joko Nicolet QE-300- tai Bru-·,' ‘ ker AC-300-spektrometriä ja ne olivat kaikissa tapauksissa • \< yhdenmukaisia ehdotettujen rakenteiden kanssa.

* : * Ma s s a spe kt r r t saatiin risons instrument. 1110 luuu ·;*·· 25 -spektrometrillä käyttäen kuumasumutus-ionisaatiota.

. . Huoneenlämpötila tarkoittaa 20 - 25 °C: n lämpöti- laa.

Esimerkki 1 , 4-metyyli-l-[N-(2-metyyli-l,2,3,4-tetrahydroisoki- •(i| 30 noliini-7-sulfonyyli) -3-amidino- (S) -fenyylialanyy- ‘y ‘ li]-1,2,3,6-tetrahydropyridiini-2(R)-karboksyyli- : happo

Lisättiin 1 M natriumhydroksidin vesiliuosta

t · I

(16,4 ml, 16,4 mmol) sekoitettavaan liuokseen, jossa oli 4- » · * : ·’ 35 metyyli-1-[N-(2-metyyli-l,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-7- ' ' sulfonyyli)-3-amidino-(S)-fenyylialanyyli]-1,2,3,6-tetra- „ 112481 25 hydropyridiini-2(R)-karboksyylihappoetyyliesterihydroklori-dia (valmistus 67; 1,99 g, 3,29 mmol) 1,4-dioksaanissa (15 ml). Sitten 3,5 tunnin kuluttua huoneenlämpötilassa, ylimääräinen natriumhydroksidi neutraloitiin varovasti lisää-5 mällä tipoittain 1 M suolahappoa ja tulokseksi saatu kirkas liuos haihdutettiin kuiviin alennetussa paineessa. Jäännös uutettiin dikloorimetaanin ja 2-propanolin kuumalla seoksella (1:1), sitten uute suodatettiin ja suodos haihdutettiin alennetussa paineessa, jolloin saatiin otsikon yhdiste 10 (1,80 g) valkoisena kiinteänä aineena. Rf 0,12 (SS 13; SS = liuotinjärjestelmä) . [a]25D +44 °C (c = 0,1, CH3OH) . Havaittu: C 55,75; H 6,34; N 11,01. Yhdiste C25H33N5O5S; 2,50 H20; 0,50 (CH3)2CHOH edellyttää: C 55,62; H 6,49; N 10,99 %.

Tämä yhdiste voidaan vielä puhdistaa dihydro-15 kloridisuolana käänteisfaasikromatografiän avulla käyttäen MCI Gel CHP-20P:tä (styreeni-divinyylibentseenipolymeeri; Mitsubishi Kasei Corp.) ja eluoiden vedellä -.metanolilla (4:1), jolloin saadaan valkoinen vaahto, joka voidaan jauhaa valkoiseksi jauheeksi. Rf 0,12 (SS 13) ja 0,30 (SS 24) . 20 [a]25D +61,8 °C (C = 0,1, CH3OH) . Havaittu: C 50,34; H 6,15; N 10,73.

V ' Yhdiste C27H33N5O5S; 2 HC1; S H2O edellyttää: C 50,00; H

; 6,06; N 10,79 %.

I ! Esimerkkien 2 - 15 otsikoiden yhdisteet saatiin ·;· : 25 hydrolysoimalla vastaava etyyliesteriprekursori (valmistuk- . . . set 68 - 81 vastaavasti) käyttäen esimerkissä 1 kuvattua menetelmää. Tapauksissa, joissa käytettiin suolahapon ylimäärää työskentelyssä, otsikon yhdisteet eristettiin hydro-, kloridisuoloina sen jälkeen kun ne oli uutettu kuumalla 2- 30 propanolilla ja uuton jälkeen tarvittaessa trituroitu eet-*···' terillä tai etyyliasetaatilla.

26 1 12481

Esimerkki 2 4-metyyli-l-[N-(2-metyyli-1,2,3,4-tetrahydroisoki-noliini-6-sulfonyyli)-3-amidino-(S)-fenyylialanyy-li]-1,2,3,6-tetrahydropyridiini-2(R)-karboksyyli-5 happodihydrokloridi

Saatiin valmistuksesta 68 valkoisena kiinteänä ai neena. Rf 0,11 (SS 24). Havaittu: C 51,71; H 6,11; N 10,49. Yhdiste C27H33N5O5S; 2 HC1; H20; 0,25 (CH3CH2)20 edellyttää: C 51,80; H 6,13; N 10,79 %.

10 Esimerkki 3 4-metyyli-l-[N-(3-metyyli-2,3,4,5-tetrahydro-lH-3-bentsatsepiini-7-sulfonyyli)-3-amidino-(S)-fenyy-lialanyyli]-1,2,3,6-tetrahydropyridiini-2(R)-kar-boksyylihappodihydrokloridi 15 Saatiin valmistuksesta 69 valkoisena kiinteänä ai neena. Rf 0,14 (SS 13). Havaittu: C 51,95; H 6,46; N 10,03. Yhdiste C28H35N5O5S; 2 HC1; H20; 0,30 (CH3)2CHOH edellyttää: C 52,38; H 6,30; N 10,57 %.

Esimerkki 4 2 0 1- [N- (1(R,S)-metoksimetyy1i-2-metyy1i-1,2,3,4-tet- rahydroisokinoliini-7-sulfonyyli)-3-amidino-(S)-fenyylialanyyli]-4-metyyli-l,2,3,6-tetrahydropyri-• diini-2(R)-karboksyylihappodihydrokloridi ; . , Saatiin valmistuksesta 7 0 valkoisena jauheena. Rf 25 0,13 (SS 13). Havaittu: C 51,86; H 6,45; N 9,76. Yhdiste . C29H37N5O6S; 2 HC1; H20; 0,20 (CH3CH2)20 edellyttää: C 51,75; .·I·. H 6,30; N 10,19 %.

1 1 t

Esimerkki 5 . 1-{N-[1 (R,S) - (N,N-dimetyylikarbamoyylimetyyli)-2- 30 metyyli-1,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-7-sulfonyy- li]-3-amidino-(S)-fenyylialanyyli}-4-metyyli-l,2,- 3,6-tetrahydropyridiini-2(R)-karboksyylihappodihydrokloridi

Saatiin valmistuksesta 71 valkoisena amorfisena : ' 35 jauheena. Rf 0,25 (SS 24) ja 0,12 (SS 13) . Havaittu: C

112481 27 51,62; H 6,54; N 10,96. Yhdiste CaiHÄOeS; 2 HC1; 1,50 H20; 0,31 (CH3)2CHOH edellyttää: C 51,58; H 6,43; N 11,31 %. Esimerkki 6 4-metyyli-1-[N-(2,5-dimetyyli-l,2,3,4-tetrahydro-5 isokinoliini-8-sulfonyyli)-3-amidino-(S)-fenyy- lialanyyli]-1,2,3,6-tetrahydropyridiini-2(R)-kar-boksyylihappodihydrokloridi

Saatiin valmistuksesta 72 valkoisena vaahtona. Rf 0,61 (SS 24). m/e 554 (M+H)+.

10 Esimerkki 7 4-etyyli-l-[N-(2-metyyli-l,2,3,4-tetrahydroisokino-liini-7-sulfonyyli)-3-amidino-(S)-fenyylialanyyli]- 1,2,3,6-tetrahydropyridiini-2(R,S)-karboksyylihap-podihydrokloridi 15 Saatiin valmistuksesta 73 värittömänä kiinteänä ai

neena. Rf 0,18 (SS 25). Havaittu: C 51,13; H 6,45; N 10,06. Yhdiste C28H35N5O5S; 2 HC1; 1,90 H20 edellyttää: C 50,72; H

6,20; N 10,57 %.

Esimerkki 8 2 0 4-metyyli-l-{N-[3-(2-propyyli)-2,3,4,5-tetrahydro- lH-3-bentsatsepiini-7-sulfonyyli]-3-amidino-(S)-V : fenyylialanyyli}-1,2,3,6-tetrahydropyridiini-2(R)- • ' : karboksyylihappodihydrokloridi ! ! ! Saatiin valmi st uksesta 7 ^ valKOisena KimLeänä ai — : 25 neena. Rf 0,21 (SS 24). Havaittu: C 54,33; H 7,19; N 9,19.

. , , Yhdiste C30H39N5O5S; 2 HC1; H20; (CH3)2CHOH edellyttää: C

54,09; H 7,02; N 9,56 %.

Esimerkki 9 1-{N-[3-(3-dimetyyliamino-l-propyyli)-2,3,4,5-tet-30 rahydro-lH-3-bentsatsepiini-7-sulfonyyli]-3-amidi no- (S)-fenyylialanyyli}-4-metyyli-l,2,3,6-tetrahydropyridiini-2 (R) -karboksyylihappodihydrokloridi . Saatiin valmistuksesta 75 kermanvärisenä jauheena.

./ Rf 0,16 (SS 24). m/e 625 (M+H)+.

112481 28

Esimerkki 10 1-[N-(2-bentsyyli-l,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-7-sulfonyyli)-3-amidino-(S)-fenyylialanyyli]-4-metyyli-1,2,3,6-tetrahydropyridiini-2(R)-karboksyy-5 lihappodihydrokloridi

Saatiin valmistuksesta 76 valkoisena kiinteänä ai neena. Rf 0,38 (SS 13). Havaittu: C 54,36; H 6,00; N 9,39. Yhdiste C33H37N5O5S; 2 HC1; 2 H20; 0,30 (CH3)2CHOH edellyttää: C 54,87; H 6,18; N 9,41 %.

10 Esimerkki 11 4-metyyli-l-[N-(2-metyyli-1,2,3,4-tetrahydroisoki-noliini-7-sulfonyyli)-3-amidino-(S)-fenyylialanyyli] -1,2,3,6-tetrahydropyridiini-2(S)-karboksyyli-happodihydrokloridi 15 Saatiin valmistuksesta 77 valkoisena kiinteänä ai

neena. Rf 0,24 (SS 24). Havaittu: C 54,43; H 6,21; N 11,36. Yhdiste C27H33N5O5S; HC1; H20; 0,27 (CH3)2CHOH edellyttää: C

54,72; H 6,31; N 11,48 %.

Esimerkki 12 20 4-metyyli-l-{N-[2-(2-propyyli)-1,2,3,4-tetrahyd- roisokinoliini-7-sulfonyyli]-3-amidino-(S)-fenyy-V ’ lialanyyli}-1,2,3,6-tetrahydropyridiini-2(R)-kar- • ', boksyylihappo ; ; ; Saatiin valmistuksesta 78 valkoisena kiinteänä ai- ·;·· 25 neena. Rf 0,35 (SS 24). Havaittu: C 59,59; H 6,56; N 11,46.

. Yhdiste C29H37N5O5S; H20; 0,33 CH3CO2CH2CH3 edellyttää: C

59,22; H 6,83; N 11,39 %.

Esimerkki 13 4(R)-4-metyyli-l-[N-(2-metyyli-l,2,3,4-tetrahyd-30 roisokinoliini-7-sulfonyyli)-3-amidino-(R,S)-fenyy- * ’ lialanyyli]piperidiini-2(R)-karboksyylihappodihyd- ; ; rokloridi

Saatiin valmistuksesta 79 valkoisena amorfisena t i

jähmeänä aineena. Rf 0,05 (SS 13). Havaittu: C 50,85; H

; ’ 35 6,01; N 10,78. Yhdiste C^HssNsOsS; 2 HC1; 1,50 H20 edellyt- ' tää: C 50,54; H 6,28; N 10,91 %.

112481 29

Esimerkki 14 4-metyyli-1-[N-(2-metyyli-1,2,3,4-tetrahydroisoki-noliini-7-sulfonyyli)-3-(2-amidino-4-pyridyyli)- (S)-alanyyli]-1,2,3,6-tetrahydropyridiini-2(R)kar-5 boksyylihappodihydrokloridi

Saatiin valmistuksesta 80 valkoisena vaahtona. Rf 0,12 (SS 13). Havaittu: C 48,98; H 5,95; N 12,23. Yhdiste C26H32N6O5S; 2 HC1; H20; 0,17 (CH3)2CHOH edellyttää: C 49, 60; H 5,86; N 13,09 %.

10 Esimerkki 15 4-metyyli-l-[N-(l,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-7-sulfonyyli)-3-amidino-(S)-fenyylialanyyli]-1,2,3,6-tetrahydropyridiini-2(R,S)-karboksyylihappodihyd-rokloridi 15 Saatiin valmistuksesta 81 valkoisena kiinteänä ai

neena. Rf 0,13 (SS 13). Havaittu: C 51,72; H 5,78; N 10,69. Yhdiste C26H31N5O5S; 2 HC1 edellyttää: C 51,60; H 5,83; N

11,24 %.

Valmistus 1 2 0 2-trifluoriasetyyli-1,2,3,4-tetrahydroisokinoliini- 7-sulfonyylikloridi ,: · (a) 2-trifluoriasetyyli-1,2,3,4-tetrahydroisokino- j ; liini ; , , Taina välituote saatiin meneLexiiiuxxä, joKa on kuvat — » : 25 tu lähteessä J. Med. Chem., 23, 837 (1980), ja käytettiin , suoraan vaiheessa (b) .

, (b)

Otsikon yhdiste saatiin myös menetelmällä, joka on kuvattu lähteessä J. Med. Chem., 23, 837 (1980), käyttäen : ' 30 edellisestä kohdasta (a) saatua välituotetta, valkoisena ' kiinteänä aineena (saanto 52,9 % perustuen 1,2,3,4-tetra- ; ; ; hydrokino1iiniin); sulamispiste 104 - 105 °C, kiteyttämisen jälkeen eetteristä. Rf 0,25 (SS 1).

30 1 12 4 81

Valmistus 2 2- trifluoriasefcyylx-1,2,3,4-tetrahydroxsokxnolxxnx- 6-sulfonyylxklorxdx

Valmistuksen 1 (b) emäliuoksista talteenotetun ai-5 neen kiteyttäminen di-isopropyylieetteristä tuotti otsikon yhdisteen (saanto 3,6 % perustuen 1,2,3,4-tetrahydroiso- kinoliiniin); sulamispiste 110 - 112 °C. Rf 0,36 (SS 1). Valmistus 3 3- trifluoriasetyyli-2,3,4,5-tetrahydro-lH-3-bent- 10 satsepiini-7-sulfonyylikloridi (a) 2,3,4,5-tetrahydro-lH-3-bentsatsepiini Tämä lähtöaine saatiin menetelmällä, joka on kuvattu lähteessä Helv. Chim. Acta, 1388, 18 (1935).

(b) 3-trifluoriasetyyli-2,3,4,5-tetrahydro-lH-3- 15 bentsatsepiini

Trifluorietikkahappoanhydridiä (6,0 g, 28,56 mmol) lisättiin tipoittain 20 minuutin kuluessa sekoitettavaan, jäällä jäähdytettyyn liuokseen, jossa oli edellisestä kohdasta (a) saatua ainetta (4,2 g, 28,56 mmol) ja N-metyyli-20 morfoliinia (2,89 g, 28,56 mmol) dikloorimetaanissa (45 ml). Sitten 2,5 tunnin kuluttua huoneenlämpötilassa re-V : aktioliuos pestiin peräkkäin vedellä, 1 M sitruunahapon ve- • ' · siliuoksella ja vedellä, kuivattiin (MgSO-j) ja haihdutet- ί ! I tirn alennetussa paineessa, jolloin saaLiin keltainen kiin— ·;·· 25 teä aine, joka trituroitiin kuuman heksaanin kanssa. Yhdis- . tettyjen heksaaniliuosten suodattaminen, väkevöiminen ja jäähdyttäminen tuotti vaaditun tuotteen (5,96 g) vaaleankeltaisena kiinteänä aineena; sulamispiste 78 - 80 °C. Ha-. vaittu: C 58,85; H 4,93; N 5,75. Yhdiste C12H12F3NO edellyt- 30 tää: C 59,25; H 4,97; N 5,76 %.

: : (c) ; Kloorisulfonihappoa (10,4 ml, 0,156 mol) lisättiin ."h tipoittain sekoitettavaan, kylmään liuokseen, jossa oli edellisestä kohdasta (b) saatua tuotetta (5,85 g, t \ t • ' 35 11,7 mmol) dikloorimetaanissa, samalla varmistaen, että re- aktioseoksen lämpötilaa pidettiin -12 - -8 °C:n välillä.

31 112431

Kahden päivän kuluttua huoneenlämpötilassa reaktioliuos kaadettiin jään päälle ja vesipitoinen faasi erotettiin ja uutettiin dikloorimetaanilla. Yhdistetyt orgaaniset uutteet kuivattiin (MgSCU) ja haihdutettiin alennetussa paineessa, 5 jolloin saatiin öljy (7,9 g), joka puhdistettiin kromato-grafian avulla käyttäen silikageeliä ja eluoiden heksaanin ja eetterin seoksella (1:3), jolloin saatiin otsikon yhdiste värittömänä öljynä, joka lopulta jähmettyi. Näytteen kiteyttäminen di-isopropyylieetteristä tuotti valkoisen kiin-10 teän aineen; sulamispiste 87 - 88 °C. Havaittu: C 41,75; H 3,18; N 3,92. Yhdiste C12H11F3CINO3S edellyttää: C 42,17; H 3,24; H 4,10 %.

Valmistus 4 1(R, S)-metoksimetyyli-2-trifluoriasetyyli-l,2,3,4-15 tetrahydroisokinoliini-7-sulfonyylikloridi (a) N-metoksiasetyyli-2-fenyylietyyliamiini

Metoksiasetyylikloridia (19,57 g, 0,18 mol) lisättiin 10 minuutin kuluessa sekoitettavaan, jäällä jäähdytettyyn liuokseen, jossa oli 2-fenyylietyyliamiinia (21,85 g, 20 0,18 mol) ja N-etyylidi-isopropyyliamiinia (23,26 g, 0,18 mol) dikloorimetaanissa (200 ml). Kahden tunnin kuluttua V ‘ huoneenlämpötilassa liuotin poistettiin alennetussa pai- * neessa ja jäännös jaettiin eetterin ja veden kesken. Orgaani : ninen faasi pestiin peräkkäin 1 M sitruunahapon vesiliuok- •y ; 25 sella, vedellä, kyllästetyllä natriumbikarbonaatin vesiliu- ; ; ; oksella ja vedellä, kuivattiin (MgSCg) ja haihdutettiin , , alennetussa paineessa, jolloin saatiin vaadittu tuote (29,65 g) öljynä, Rf 0,32 (SS 2), joka käytettiin puhdistamatta enempää seuraavassa vaiheessa.

30 (b) l-metoksimetyyli-3,4-dihydroisokinoliini

Fosforipentoksidia (25 g, 0,176 mol) lisättiin se-: : ; koitettavaan liuokseen, jossa oli edellisestä kohdasta (a) saatua tuotetta (14,47 g, 0,075 mol) ksyleenissä (35 ml) ja ,,0 tulokseksi saatua seosta kuumennettiin palautusjäähdyttäen * *' 35 2,5 tunnin ajan. Liuotin dekantoitiin tulokseksi saadusta mustasta kumista, joka trituroitiin ksyleenin kanssa ja 32 1 Λ O / Ο ί

i Iz4ö I

sitten viileän eetterin kanssa. Sitten lisättiin varovasti vettä jäähdyttäen jäällä ja tulokseksi saatu seos tehtiin emäksiseksi 2 M natriumhydroksidin vesiliuoksella ja sitten uutettiin eetterillä. Uute pestiin vedellä, kuivattiin 5 (MgSCh) ja haihdutettiin alennetussa paineessa, jolloin saatiin ruskea öljy (13,4 g), joka puhdistettiin kromato-grafian avulla käyttäen silikageeliä ja eluenttina eetteriä, jolloin saatiin vaadittu yhdiste (5,88 g) oranssinvärisenä öljynä. Rf 0,28 (SS 2).

10 (c) 1(R,S)-metoksimetyyli-1,2,3,4-tetrahydroisoki- noliini

Natriumtriasetoksiboorihydridiä (8,11 g, 38,3 mmol) lisättiin sekoitettavaan, jäällä jäähdytettyyn liuokseen, jossa oli edellisestä kohdasta (b) saatua tuotetta (6,1 g, 15 34,8 mmol) metanolissa (80 ml), sitten tulokseksi saatua seosta sekoitettiin 18 tunnin ajan huoneenlämpötilassa ennen kuin reaktio pysäytettiin lisäämällä vettä. Suurin osa liuottimesta poistettiin alennetussa paineessa, sitten jäännös tehtiin emäksiseksi 1 M natriumhydroksidin vesiliu-20 oksella ja uutettiin dikloorimetaanilla. Uute pestiin kyllästetyllä suolaliuoksella, kuivattiin (MgSCM ja haihdu-v : tettiin alennetussa paineessa, jolloin saatiin vaadittu : ‘ : tuote (6,19 g) oranssinvärisenä öljynä, Rf 0,25 (SS 3), m/e I . » 1 7 P /TVT-l-T-M η Väuf of f ΐ Ί n nnf rii ef nnomnHn oo.it>—. —. _ t t \ L A J.J. / f J W J J »-·_< ^ ^ -I l_AA Uil «-4. V— i UU ^ Li J_ CJ- CÄ ...d 25 vassa vaiheessa.

d) 1(R,S)-metoksimetyyli-2-trifluoriasetyyli-l,2,- 3,4-tetrahydroisokinoliini

Trifluorietikkahappoanhydridiä (10,26 ml, 72,6 mmol) lisättiin tipoittain 0,5 tunnin kuluessa sekoitetta-30 vaan, jäällä jäähdytettyyn liuokseen, jossa oli edellisestä kohdasta (c) saatua tuotetta (12,26 g, 69,17 mmol) ja N-; ; ; metyy1imorfo1iinia (7,35 g, 72,6 mmol) dikloorimetaanissa (150 ml). Kahden tunnin kuluttua huoneenlämpötilassa liuotin poistettiin alennetussa paineessa ja jäännös jaettiin I I i : 35 eetterin ja veden kesken. Orgaaninen faasi pestiin peräk- *·’ käin vedellä, joka oli tehty emäksiseksi pH-arvoon noin 8 112481 33 lisäämällä natriumbikarbonaattia, 1 M sitruunahapon vesi-liuoksella ja vedellä, kuivattiin (MgSCh) ja haihdutettiin alennetussa paineessa, jolloin saatiin öljy (19,45 g), joka puhdistettiin kromatografiän avulla käyttäen silikageeliä 5 ja eluoiden heksaanin ja eetterin seoksella (4:1), jolloin saatiin vaadittu yhdiste (16,16 g) kirkkaana öljynä. Rf 0,27 (SS 4). Havaittu: C 56,83; H 5,19; N 5,02. Yhdiste C13H14F3NO2 edellyttää: C 57,14; H 5,16; N 5,12 %.

(e) 10 Otsikon yhdiste saatiin edellisen kohdan (d) tuot teesta käyttäen valmistuksen 3(c) menetelmää vaaleankeltaisena öljynä, joka jähmettyi jäähdytettynä. Rf 0,35 (SS 5). Valmistus 5 1 (R, S) - (Ν,Ν-dimetyylikarbamoyylimetyyli) -2-trifluo-15 riasetyyli-1,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-7-sulfo- nyylikloridi (a) 1 (R, S) - (Ν,Ν-dimetyylikarbamoyylimetyyli) -2-tri- fluoriasetyyli-1,2,3,4-tetrahydroisokinoliini

Liuotettiin 1-etoksikarbonyylimetyyli-l,2,3,4-tet-20 rahydroisokinoliini (13,15 g, 60 mmol), joka oli saatu menetelmän mukaan, joka on kuvattu lähteessä J. Org. Chem., ' 30, 3667 (1965), 30-%:iseen dimetyyliamiinin liuokseen eta- ’,· nolissa (100 ml). Lisättiin dimetyyiiamiinia (32 g) ja re- • > i : ! aktioseosta kuumennettiin teräsastiassa 120 °C:xi iämpöti- \*”i 25 lassa 24 tunnin ajan ja 150 °C:n lämpötilassa vielä 24 tun- : nin ajan, sitten se haihdutettiin tyhjössä, jolloin saatiin vaadittu raaka amidi (12,9 g) öljynä, Rf 0,13 (SS 3), plus esterilähtöaineen jäämä Rf-arvon ollessa 0,33, ja tuote käytettiin puhdistamatta enempää seuraavassa vaiheessa, h 30 Trifluorietikkahappoanhydridiä (12,12 g, 72 mmol) lisättiin tipoittain 0,5 tunnin kuluessa sekoitettavaan, ; ; : jäällä jäähdytettyyn liuokseen, jossa oli raakaa amidia (12,9 g) ja N-etyylidi-isopropyyliamiinia (10,34 g, 80 mmol) dikloorimetaanissa (120 ml). Kolmen tunnin kuluttua ’ y 35 huoneenlämpötilassa, liuotin poistettiin alennetussa pai neessa ja jäännös jaettiin eetterin ja veden kesken. Orgaa- 112481 34 ninen faasi pestiin peräkkäin vedellä, 5-%:isella natriumbikarbonaatin vesiliuoksella, 1 M sitruunahapon vesiliuoksella ja vedellä, kuivattiin (MgS04) ja haihdutettiin alennetussa paineessa, jolloin saatiin oranssinvärinen öljy, 5 joka puhdistettiin kromatografiän avulla käyttäen silika-geeliä ja eluoiden heksaanin ja etyyliasetaatin seoksella (3:7), jolloin saatiin vaadittu yhdiste (14,3 g). Rf 0,35 (SS 7). Havaittu: C 56, 88; H 5,38; N 8,85. C15H17F3N2O2 edellyttää: C 57,32; H 5,45; N 8,91 %.

10 (b)

Otsikon yhdiste (saanto 84 %) saatiin edellisen kohdan (a) tuotteesta käyttäen valmistuksen 3(c) menetelmää valkoisena vaahtona. Rf 0,47 (SS 7).

Valmistus 6 15 5-metyyli-2-trifluoriasetyyli-l,2,3,4-tetrahydro- isokinoliini-8-sulfonyylikloridi (a) 5-metyyli-isokinoliini

Lisättiin 3 M metyylimagnesiumjodidin liuosta eetterissä (50 ml, 0,15 mol) tipoittain sekoitettavaan, jäällä 20 jäähdytettyyn liuokseen, jossa oli 5-bromi-isokinoliinia (21 g, 0,10 mol), saatu lähteessä J. Org. Chem. , 29, 329 v 1 (1964) kuvatun menetelmän mukaan, ja [1,3-bis(difenyy- • lifosfino) propaani] nikkeli (II) kloridia (400 mg, 0,7 mmol) : : vedettömässä eetterissä, ja reaktioseosta kuumennettiin pa- 25 lautusjäähdyttäen 5 päivän ajan, sen annettiin jäähtyä, : t sitten se kaadettiin veteen (500 ml). Orgaaninen faasi ero- . \ tettiin, yhdistettiin vesipitoisen faasin eetteriuutteiden kanssa, pestiin kyllästetyllä suolaliuoksella, kuivattiin (MgSO-j) ja haihdutettiin alennetussa paineessa, jolloin 30 saatiin öljy, jonka kromatograf ia käyttäen silikageeliä ja eluoiden gradientilla 5 - 50 % eetteriä heksaanissa tuotti : : : vaaditun tuotteen (8,4 g). Rf 0,40 (SS 8), m/e 144 (M+H)+.

Havaittu: C 79,57; H 6,26; N 8,61. Yhdiste C10H9N; 0,27 CH3CO2CH2CH3 edellyttää: C 79,70; H 6,74; N 8,39 %.

' 35 Kromatografisen puhdistusmenetelmän tärkein kompo nentti oli kuitenkin tuotteen ja lähtöaineen seos (18,4 g), 112481 35 joka tuotti kiteytettäessä se heksaanista 5-bromi-isokino-liinin ja 5-metyyli-isokinoliinin 2:l-seoksen (14,8 g).

(b)

Sekoitettava, jäällä jäähdytetty liuos, jossa oli 5 edellä saatu 2:l-seos (14,3 g) dikloorimetaanissa (150 ml), kyllästettiin kloorivedyllä ja sitten se haihdutettiin alennetussa paineessa, jolloin saatiin vastaava hydroklori-disuola, joka kerättiin taleen ja kuivattiin.

Sekoitettavaa seosta, jossa oli platinaoksidia 10 (1 g) ja edellä saadun hydrokloridisuolan liuos etanolissa (150 ml), hydrattiin 30 tunnin ajan 345 kPa:n (50 psi) paineessa huoneenlämpötilassa ja sitten se suodatettiin. Suo-dos haihdutettiin alennetussa paineessa ja jäännös kromato-grafoitiin käyttäen silikageeliä ja eluoiden seoksella, 15 jossa oli dikloorimetaania/metanolia/O,880 ammoniakin vesi-liuosta (90:10:1), jolloin saatiin 5-metyyli-l,2,3,4-tetrahydroisokinoliinin ja 5-bromi-l,2,3,4-tetrahydroiso-kinoliinin 85:15-seos (5,62 g) öljynä; tärkein aineosa: Rf 0,32 (SS 9), m/e 148 (M+H)+.

20 Edellä saatu 85:15 -seos muutettiin vastaavaksi 2- trifluoriasetyylijohdannaisen seokseksi käyttäen valmistuk-' sessa 3(b) kuvattua menetelmää, jolloin saatiin öljy; tär- • ,· kein aineosa: Rf 0,90 (SS 10), m/e 244 (M+H) + .

: Edellä saatu raaka seos, joka sisälsi 85 % 5- 25 metyyli-2-trifluoriasetyyli-1,2,3,4-tetrahydroisokinolii-; nia, kloorisulfonoitiin noudattaen valmistuksessa 3(c) ku- vattua menetelmää, jolloin saatiin keltainen kiinteä aine, joka puhdistettaessa kromatografiän avulla käyttäen silika-. geeliä ja eluointigradienttia 10 - 50 % etyyliasetaattia

30 heksaanissa tuotti otsikon yhdisteen valkoisena kiinteänä ’ aineena; sulamispiste 152 - 153 °C. Havaittu: C 42,18; H

: 3,24; N 4,10. Yhdiste C12H11F3CINO3S edellyttää: C 42,12; H

; 3,10; N 3,85 %: » < 36 112431

Valmistus 7 3-syaani-(R,S)-fenyylialaniinietyyliesteri

Sekoitettavaa seosta, jossa oli 3-syaanibentsyyli-bromidia (300 g, 1,531 mol), N-(difenyylimetyleeni)glysii-5 nietyyliesteriä (450 g, 1,684 mol), tetrabutyyliammonium-bromidia (50,0 g, 0,153 mol), vedetöntä kaliumkarbonaattia (528,2 g, 3,827 mol) ja asetonitriiliä (2,3 1), kuumennettiin palautusjäähdyttäen 6,5 tunnin ajan, sitten sen annettiin jäähtyä ja sitten suodatettiin. Suodos haihdutettiin 10 alennetussa paineessa, jolloin saatiin jäännös, joka liuotettiin eetteriin (2 1) , sitten tämä liuos pestiin vedellä (5 x 1 1) , kuivattiin (MgSCh) ja haihdutettiin alennetussa paineessa, jolloin saatiin keltainen öljy (595,5 g).

Sitruunahapon (358,96 g, 1,708 mol) liuos vedessä 15 (1,4 1) lisättiin sekoitettavaan liuokseen, jossa oli edel lä saatu keltainen öljy (497,1 g, 1,30 mol) teollisuus-spriissä (2,5 1). Tulokseksi saatua maitomaista liuosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 20 tunnin ajan, se väkevöi-tiin alennetussa paineessa noin puoleen tilavuuteen, lai-20 mennettiin vedellä (1,5 1) ja uutettiin eetterillä. Vesipitoisen faasin pH säädettiin arvoon noin 9,5 käyttäen kiin-'·* * teätä natriumkarbonaattia, sitten toteutettiin uutto etyy liasetaatilla (3 x 800 ml). Kuivattujen (MgSCM , yhdistet- ·’ tyjen uutteiden haihduttaminen alennetussa naineessa tuotti

“ί 25 otsikon yhdisteen (160,0 g) keltaisena öljynä, Rf 0,50 (SS

6) .

Valmistus 8 3-syaani-(S)-fenyylialaniini

Lisättiin a-kymotrypsiiniä (2,55 g) sekoitettavaan 30 seokseen, jossa oli 3-syaani-(R, S)-fenyylialaniinietyyli-esteriä (valmistus 7; 187,0 g, 0,857 mol), vettä (100 ml) : : ja tolueenia (1,0 1). Kolmen tunnin kuluttua huoneenlämpö- : ' ; tilassa reaktioseosta sekoitettiin 65 °C:n lämpötilassa 0,5 tunnin ajan, sitten sen annettiin jäähtyä ja se suodatet-35 tiin. Tulokseksi saatu valkoinen kiinteä aine pestiin eetterillä, sitten se kuivattiin 65 °C:n lämpötilassa tyhjös- 112481 37 sä, jolloin saatiin otsikon yhdiste (68,2 g); sulamispiste 248 - 150 °C. [a] 25d -14,7 °C (c = 1, 1 M HC1) . Havaittu: C 62,39; H 5,37; N 14,24. Yhdiste C10H10N2O2; 0,10 H20 edellyttää: C 62,55; H 5,35; N 14,59 %.

5 Valmistus 9 3-syaani-(S)-fenyylialaniinietyyliesterihydroklori-di (a) N-t-butoksikarbonyyli-3-syaani-(S)-fenyyliala-niini 10 Vedetöntä natriumkarbonaattia (16,7 g, 158 mmol) lisättiin sekoitettavaan suspensioon, jossa oli 3-syaani-(S)-fenyylialaniinia (valmistus 8; 15,0 g, 78,8 mmol) ve dessä (225 ml), ja sen jälkeen lisättiin tipoittain 0,5 tunnin kuluessa liuos, jossa oli di-t-butyylidikarbonaattia 15 (25,8 g, 115 mmol) tetrahydrofuraanissa (75 ml). Sitten 20 tunnin kuluttua reaktioseos väkevöitiin poistamalla suurin osa tetrahydrofuraanista alennetussa paineessa, seos suodatettiin ja pestiin etyyliasetaatilla. Vesiliuoksen pH sää-detiin arvoon noin 3 sitruunahapolla, sitten toteutettiin 20 uutto etyyliasetaatilla. Yhdistetyt orgaaniset uutteet pestiin peräkkäin 1 M sitruunahapon vesiliuoksella ja kylläs-‘ tetyllä suolaliuoksella, kuivattiin (MgSCg) ja haihdutet- I : tiin alennetussa paineessa, jolloin saatiin öljy, joka ki- teyttnn heksaanm ja eetterin seoksesta, jolloin saaLlin ; 25 vaadittu tuote (18,5 g) valkoisena kiinteänä aineena; sula- · ; mispiste 122 - 124 °C.

i: <b>

Seos, jossa oli kesiumkarbonaattia (10,38 g, 31,9 mmol) ja vettä (65 ml), lisättiin sekoitettavaan liuokseen, * t M 30 jossa oli edellisestä kohdasta (a) saatu tuote (18,5 g, ·; * 63,7 mmol) asetonitriilissä (65 ml). Tulokseksi saatu kir- : kas liuos haihdutettiin kuiviin alennetussa paineessa ja ; jäännös kuivattiin atseotrooppisesti käyttäen tolueenia, jolloin saatiin raaka kesiumsuola valkoisena kiinteänä ai-35 neena, joka sitten liuotettiin dimetyyliformamidiin (75 ml) ja sekoitettu liuos käsiteltiin etyylijodidilla (10,93 g, 112481 38 70 mmol). Sitten 20 tunnin kuluttua huoneenlämpötilassa re-aktioseos laimennettiin eetterillä ja tulokseksi saatu suspensio pestiin vedellä. Yhdistetyt vesipesut uutettiin eetterillä, sitten orgaaninen liuos ja uutteet yhdistettiin, 5 pestiin vielä vedellä, kuivattiin (MgSCh) ja haihdutettiin alennetussa paineessa, jolloin saatiin kirkas öljy (19,5 g), joka lopulta jähmettyi.

Tämä välituote liuotettiin dikloorimetaaniin (100 ml) ja sekoitettavaan liuokseen lisättiin trif-10 luorietikkahappoa (50 ml) tipoittain 15 minuutin kuluessa. Kahden tunnin kuluttua reaktioseos haihdutettiin alennetussa paineessa samalla pitäen lämpötila alle 30 °C:ssa. Jäljellä oleva trifluorietikkahappo poistettiin atseotrooppi-sesti käyttäen tolueenia, tuloseksi saatu öljy liuotettiin 15 veteen (200 ml) , sitten tämä liuos tehtiin emäksiseksi kiinteällä natriumbikarbonaatilla ja uutettiin dikloorime-taanilla. Uute pestiin kyllästetyllä natriumbikarbonaatin vesiliuoksella, kuivattiin (MgSCh) , käsiteltiin eetterisen suolahapon ylimäärällä ja haihdutettiin alennetussa pai-20 neessa, jolloin saatiin vaahto, joka jähmettyi eetterin alla tuottaen otsikon yhdisteen (14,25 g) valkoisena jauhee-· na, m/e (219 (M+H)+.

* Valmistus 10 : . : 4-bromi-2-syaanipyridiini *;·· 25 Otsikon yhdiste valmistettiin 4-bromipyridiini-l- , oksidista [Rec. Trav. Chim., 70, 581 (1951)] ja trimetyy- lisilyylisyanidista käyttäen menetelmää, joka on kuvattu lähteessä Chem. Pharm. Bull., 33, 565 (1985), ja saatiin kiinteänä aineena (saanto 49 %); sulamispiste 88 - 93 °C.

: ‘ 30 Rf 0,53 (SS 11). Havaittu: C 39,15; H 1,50; N 15,07. Yhdis- " te CgH3BrN2 edellyttää C 39,37; H 1,65; N 15,30 %.

Valmistus 11 N-t-butoksikarbonyyli-3-(2-syaani-4-pyridyyli)-(S)-alaniinibentsyyliesteri : ' 35 Lisättiin 1,2-dibromietaania (13 μΐ, 0,14 mol) kui- ’ ' van typen alla sekoitettavaan suspensioon, jossa oli sink- 39 1 12481 kipölyä (240 mg, 3,6 mmol) vedettömässä tetrahydrofuraanissa (1 ml), sitten tulokseksi saatua seosta sekoitettiin varovasti, kunnes ilmeni ensimmäinen merkki kiehumisesta ja seoksen annettiin jäähtyä huoneenlämpötilaan; tämä menetel-5 mä toistettiin kahdesti, minkä jälkeen lisättiin trimetyy-lisilyylikloridia (15 μΐ, 0,11 mmol) ja sekoittamista jatkettiin 15 minuutin ajan huoneenlämpötilassa. Reaktioseok-seen lisättiin seuraavaksi 1 minuutin kuluessa liuos, jossa oli bentsyyli-2(R)-t-butoksikarbonyyliamino-3-jodipropio-10 naattia (0,5 g, 1,2 mmol), saatu lähteessä J. Org. Chem., 57, 3397 (1992) kuvatun menetelmän mukaan, vedettömässä tetrahydrofuraanissa (2 ml). Sitten 1,5 tunnin kuluttua huoneenlämpötilassa reaktioseos käsiteltiin bis(trifenyyli-fosfiini)palladium (II)kloridilla (75 mg, 0,1 mmol) ja sen 15 jälkeen 4-bromi-2-syaanipyridiinilla (valmistus 10; 270 mg, 1,4 mmol) ja reaktioseosta sekoitettiin edelleen 18 tunnin ajan huoneenlämpötilassa, sitten käsiteltiin etyyliasetaatilla (10 ml) ja kyllästetyllä ammoniumkloridin vesiliuoksella (5 ml) ja suodatettiin. Orgaaninen faasi erotettiin, 20 pestiin peräkkäin 1 M sitruunahapon vesiliuoksella, kyllästetyllä natriumbikarbonaatin vesiliuoksella ja kyllästetyl-‘ lä suolaliuoksella, se kuivattiin (MgSO-j) ja haihdutettiin • ,· alennetussa paineessa. Jäännös puhdistettiin kromatografiän '·_ : avulla käyttäen silikageeliä ja eluointigradienttie etyyli- ·; g 25 asetaatti/tolueeni (1:100 -> 25:75), jolloin saatiin otsi-; kon yhdiste (250 mg) öljynä, joka myöhemmin ilmeni valkoi-

sena vaahtona; sulamispiste 74 - 76 °C. Rf 0,59 (SS 12). [a] 25d -24 °C (c = 0,1, CH30H) . Havaittu: C 66,14; H 5,91; N 10,75. Yhdiste C21H23N3O4 edellyttää: C 66,12; H 6,08; N

30 11,02 %.

Valmistus 12 N-t-butoksikarbonyyli-3-(2-syaani-4-pyridyyli)-(S)-; alaniini

Lisättiin 1 M natriumhydroksidin vesiliuosta ' _ 35 (10,8 ml, 10,8 mmol) tipoittain 5 minuutin kuluessa sekoi tettavaan, jäällä jäähdytettyyn liuokseen, jossa oli N-t- 112481 40 butoksikarbonyyli-3-(2-syaani-4-pyridyyli)-(S)-alaniini-bentsyyliesteriä (valmistus 12; 2,73 g, 7,1 mmol) 1,4- dioksaanissa, ja tulokseksi saadun liuoksen annettiin jäähtyä huoneenlämpötilaan. Sitten 1,5 tunnin kuluttua liuoksen 5 pH säädettiin arvoon 9 käyttäen 2 M suolahappoa ja suurin osa orgaanisesta liuottimesta poistettiin alennetussa paineessa. Jäljelle jäänyt vesiliuos pestiin etyyliasetaatilla, tehtiin happamaksi kiinteällä sitruunahapolla ja uutettiin etyyliasetaatilla, sitten jälkimmäiset uutteet kuivat-10 tiin (MgSCU) ja haihdutettiin alennetussa paineessa, jolloin saatiin otsikon yhdiste (1,6 g) valkoisena kiinteänä aineena. Rf 0,67 (SS 13). Havaittu; C 57,86; H 5,99; N 13,52. Yhdiste C14H17N3O4 edellyttää: C 57,72; H 5,88; N 14,42 %.

15 Valmistus 13 3-(2-syaani-4-pyridyyli)-(S)-alaniini

Trifluorietikkahappoa (10 ml) lisättiin tipoittain sekoitettavaan, jäällä jäähdytettyyn liuokseen, jossa oli N-t-butoksikarbonyyli-3-(2-syaani-4-pyridyyli)-(S)-20 alaniinia (valmistus 12, 1,6 g, 5,5 mmol) dikloorimetaanis-sa (10 ml), ja saatua liuosta sekoitettiin 3 tunnin ajan i samassa lämpötilassa, sitten se haihdutettiin alennetussa

• ·’: paineessa. Jäännös liuotettiin veteen (5 ml) ja liuoksen pH

säädettiin arvoon 7 1 M natriumhydroksidin vesiliuoksella 25 ennen puhdistamista ioninvaihtokromatografiän avulla käyt-, , täen Bio Rad AG50W X-8 (H+-muoto) -hartsia ja eluointigra- ^ dienttia pyridiini/vesi (0:100 -> 10:90), jolloin saatiin otsikon yhdiste (1,0 g) valkoisena kiinteänä aineena. Rf 0, 17 (SS 13), m/e 192.

’ 30 Valmistus 14 N-(2-trifluoriasetyyli-1,2,3,4-tetrahydroisokino-liini-7-sulfonyyli)-3-syaani-(S)-fenyylialaniini .·", Trimetyylisilyylikloridia (2,85 g, 26,2 mmol) li sättiin sekoitettavaan suspensioon, jossa oli 3-syaani-(S)-: ·' 35 fenyylialaniinia (valmistus 8; 2,0 g, 10,5 mmol), N- * etyylidi-isopropyyliamiinia (4,1 g, 31,7 mmol) ja kuivaa 41 1 12481 dikloorimetaania (25 ml), ja tulokseksi saatua seosta kuumennettiin palautusjaähdyttäen 2 tunnin ajan. Sitten lisättiin 2-trifluoriasetyyli-1,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-7-sulfonyylikloridia (valmistus 1; 3,8 g, 11,6 mmol) ja jat-5 kettiin kuumentamista palautusjäähdyttäen vielä 2 tunnin ajan ennen liuottimen poistamista alennetussa paineessa. Jäännös jaettiin etyyliasetaatin ja veden kesken, sitten orgaaninen faasi pestiin peräkkäin vedellä, 1 M sitruunahapon vesiliuoksella ja kyllästetyllä suolaliuoksella, kui-10 vattiin (MgSCh) ja haihdutettiin alennetussa paineessa, jolloin saatiin vaahto (5,5 g), johon lisättiin etyyliasetaattia (50 ml) ja seosta kuumennettiin palautusjäähdyttäen, sen jälkeen viileä suspensio suodatettiin, jolloin saatiin otsikon yhdiste (1,6 g) valkoisena kiinteänä aineena. 15 Rf 0,10 (SS 14): [a]25D -16,0 °C (c = 0,1, CH3OH) . Havaittu: C 52,38; H 3,68; N 8,55. Yhdiste C21H18F3N3O5S edellyttää: C 52,38; H 3,77; N 8,73 %.

Tuotteen toinen saanto (1,4 g) saatiin lisäämällä heksaania etyyliasetaattiemäliuokseen, sitten kolmas saanto 20 (1,1 g) saatiin puhdistamalla kromatografisesti silikagee- lin avulla jäännös, joka oli saatu haihduttamalla emäliuos * alennetussa paineessa, ja käyttäen eluointigradienttia hek- : ' saani/dikloorimetaani (50:50 -> 0:100) ja sen jälkeen gra- V · dienttia dikloorimetaarvi /metanol 1 /jääetikka (98: 1:1 -> •f ! 25 97:2:1).

Valmistus 15 ; N- (2-trifluoriasetyyli-1,2,3,4-tetrahydroisokino- liini-7-sulfonyyli)-3-(2-syaani-4-pyridyyli)-(S)-alaniini 30 Otsikon yhdiste saatiin vaahtona 2-trifluoriasetyy li-1, 2,3, 4-tetrahydroisokinoliini-7-sulfonyylikloridista : : : (valmistus 1) ja 3-(2-syaani-4-pyridyyli)-(S)-alaniinista ; : (valmistus 13) käyttäen valmistuksessa 14 kuvattua menetel- _ mää. Rf 0,20 (SS 13). m/e 483.

’’ '! 35 42 1 12 4 81

Valmistus 16 N-(2-trifluoriasetyyli-1,2,3,4-tetrahydroisokino-liini-6-sulfonyyli)-3-syaani-(S)-fenyylialaniini

Otsikon yhdiste saatiin valkoisena vaahtona 2- 5 trifluoriasetyyli-1,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-6-sulfo-nyylikloridista (valmistus 2) ja 3-syaani-(S)-fenyyliala-niinista (valmistus 8) käyttäen esimerkissä 14 kuvattua menetelmää. Rf 0,30 (SS 14). m/e 499 (M + NH4)+.

Valmistus 17 10 N-(3-trifluoriasetyyli-2,3,4,5-tetrahydro-lH-3- bentsatsepiini-7-sulfonyyli)-3-syaani-(S)-fenyylialaniini

Otsikon yhdiste saatiin valkoisena vaahtona 3- trifluoriasetyyli-2,3,4,5-tetrahydro-lH-3-bentsatsepiini-7-15 sulfonyylikloridista (valmistus 3) ja 3-syaani-(S)-fenyyli-alaniinista (valmistus 8) käyttäen esimerkissä 14 kuvattua mentelmää. Rf 0,32 (SS 15).

Valmistus 18 N-(1(R,S)-metoksimetyyli-2-trifluoriasetyyli-1,2,-20 3,4-tetrahydroisokinoliini-7-sulfonyyli)-3-syaani- (S)-fenyylialaniini ' Otsikon yhdiste saatiin valkoisena kiinteänä ainee- • · na 1(R,S)-metoksimetyyli-2-trifluoriasetyyli-1,2,3,4-tetra- : . ; hydroisokinoliini-7-sulfonylikloriuisLa (valmistus 4) ja 3- *;"· 25 syaani-(S)-fenyylialaniinista (valmistus 8) käyttäen esi merkissä 14 kuvattua mentelmää. Rf 0,43 (SS 3).

Valmistus 19 N- [1 (R,S) -Ν,Ν-dimetyylikarbamoyylimetyyli) -2-tri-fluoriasetyyli-1,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-7-30 sulfonyyli]-3-syaani-(S)-fenyylialaniini

Otsikon yhdiste saatiin valkoisena vaahtona 1(R,S)-I (Ν,Ν-dimetyylikarbamoyylimetyyli)-2-trifluoriasetyyli-1,2,- 3,4-tetrahydroisokinoliini-7-sulfonylikloridista (valmistus 5) ja 3-syaani-(S)-fenyylialaniinista (valmistus 8) käyttä-35 en esimerkissä 14 kuvattua mentelmää. Rf 0,35 (SS 16). m/e : 567 (M+H)\ 43 1 12481

Valmistus 20 N-(5-metyyyli-2-trifluoriasetyyli-1,2,3,4-tetrahyd-roisokinoliini-8-sulfonyyli)-3-syaani-(S)-fenyyli-alaniini 5 Otsikon yhdiste saatiin keltaisena vaahtona 5- metyyli-2-trifluoriasetyyli-1,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-

8-sulfonylikloridista (valmistus 6) ja 3-syaani-(S)-fenyy-lialaniinista (valmistus 8) käyttäen esimerkissä 14 kuvattua mentelmää. Rf 0,50 (SS 3). Havaittu: C 53,56; H 4,45; N 10 8,11. Yhdiste C22H20F3N3O5S edellyttää: C 53, 33; H 4,07; N

8,48 %.

Valmistus 21 N-(2-trifluoriasetyyli-1,2,3,4-tetrahydroisokino-liini-7-sulfonyyli)-3-syaani-(S)-fenyylialaniini-15 etyyliesteri

Lisättiin 2-trifluoriasetyyli-1,2,3,4-tetrahydro-isokinoliini-7-sulfonyylikloridia (valmistus 1; 7,72 g, 23,6 mmol) sekoitettavaan, jäällä jäähdytettyyn liuokseen, jossa oli 3-syaani-(S)-fenyylialaniinietyyliesterihydro-20 kloridia (valmistus 9; 6,0 g, 23,6 mmol) ja N-metyyli- morfoliinia (5,0 g, 49,5 mmol) dikloorimetaanissa (130 ml).

'* ‘ Sitten 18 tunnin kuluttua huoneenlämpötilassa reaktioseos I o pestiin peräkkäin vedellä, 5-%:isella sitruunahapon vesi- liuoksella, vedellä ja kyxläs teLynä suolaliuoksella, kui — H": 25 vattiin (MgS04) ja haihdutettiin alennetussa paineessa, : jolloin saatiin öljy, joka liuotettiin minimitilavuuteen t; dikloorimetaania. Tämän liuoksen käsittely di-isopropyyli- eetterillä tuotti otsikon yhdisteen (11,7 g) kumina. Rf 0,56 (SS 8). m/e 510.

30 Valmistus 22 N-(2-trifluoriasetyyli-1,2,3,4-tetrahydroisokino-’ liini-7-sulfonyyli)-3-syaani-(R,S)-fenyylialaniini- : etyyliesteri _ Otsikon yhdiste saatiin 2-trif luoriasetyyli-1,2, - 35 3,4-tetrahydroisokinoliini-7-sulfonyylikloridista (valmis tus 1) ja 3-syaani-(R,S)-fenyylialaniinietyyliesteristä 112481 44 (valmistus 7) käyttäen esimerkissä 21 kuvattua menetelmää valkoisena kiinteänä aineena (kiteyttämisen jälkeen di-isopropyylieetterin ja etyyliasetaatin seoksesta) sulamispiste 114 °C. Rf 0,50 (SS 8). Havaittu: C 54,56; H 4,08; N 5 8,19. Yhdiste C23H22F3N3O5S edellyttää: C 54,22; H 4,35; N 8,25 %.

Valmistus 23 N-(1,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-7-sulfonyyli)-3-syaani-(S)-fenyylialaniinietyyliesteri 10 Liuos, jossa oli natriumkarbonaattia (11,5 g, 108,5 mmol) vedessä (115 ml), lisättiin sekoitettavaan liuokseen, jossa oli N-(2-trifluoriasetyyli-1,2,3,4-tetrahyd-roisokinoliini-7-sulfonyyli)-3-syaani-(S)-fenyylialaniinie-tyyliesteriä (valmistus 21; 11,5 g, 22,6 mmol) etanolissa 15 (115 ml), ja tulokseksi saatua seosta sekoitettiin 3 tunnin ajan huoneenlämpötilassa. Suurin osa etanolista poistettiin sitten alennetussa paineessa, jäännökseen lisättiin vettä ja tulokseksi saatu suspension uutettiin dikloorimetaanil-la. Orgaaninen uute pestiin kyllästetyllä suolaliuoksella, 20 kuivattiin (MgSO-i) ja haihdutettiin alennetussa paineessa, , , sitten jäännös liuotettiin minimitilavuuteen dikloorimetaa- '* ' nia. Tämä liuos laimennettiin etanolilla, sen jälkeen se : .* väkevöitiin ja jäännöksen annettiin seistä yön yli, se suo- V * datettiin ja pestiin eetterillä, jolloin saatiin oLsikon

’’ 7 25 yhdiste valkoisena kiinteänä aineena (6,4 g). Rf 0,26 (SS

: 6) . m/e 414 (M+H)+.

Valmistus 24 N-(1,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-7-sulfonyyli)-3-syaani-(R,S)-fenyylialaniinietyyliesteri 30 Otsikon yhdiste saatiin valkoisena kiinteänä ainee na N-(2-trifluoriasetyyli-l,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-7-f n sulfonyyli)-3-syaani-(R,S)-fenyylialaniinietyyliesteristä : : (valmistus 22) käyttäen valmistuksessa 23 kuvattua menetel-

t mää; sulamispiste 170 °C. Rf 0,25 (SS 6). Havaittu: C

‘ \ 35 60,86; H 5,49; N 9,98. Yhdiste C21H23N3O4S edellyttää: C

61,00; H 5,61; N 10,16 %.

112481 45

Valmistus 25 N-[2- (2-propyyli)-1,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-7-sulfonyyli]-3-syaani-(S)-fenyylialaniinietyyli-esteri 5 Sekoitettavaa seosta, jossa oli N-(l,2,3,4- tetrahydroisokinoliini-7-sulfonyyli)-3-syaani-(S) -fenyyli-alaniinietyyliesteriä (valmistus 23; 1,3 g, 3,14 mmol), 2- jodipropaania (641 mg, 377 μΐ, 3,77 mmol), kaliumkarbonaattia (650 mg, 4,7 mmol) ja asetonitriiliä (50 ml), kuumen-10 nettiin palautusjäähdyttäen 9 tunnin ajan, siihen lisättiin vielä 2-jodipropaania (35 μΐ) ja kuumentamista jatkettiin palautusjäähdyttäen 1 tunnin ajan. Liuotin haihdutettiin alennetussa paineessa ja jäännös puhdistettiin kromatogra-fian avulla käyttäen silikageeliä ja eluontigradienttia 0 -15 5 % metanolia dikloorimetaanissa ja sen jälkeen tuote tri- turoitiin di-isopropyylieetterin kanssa, jolloin saatiin otsikon yhdiste (1,07 g) valkoisena kiinteänä aineena; sulamispiste 110 °C. Rf 0,49 (SS 6). Havaittu: C 63,19; H 6,34; N 8,89. Yhdiste C24H29N3O4S edellyttää: C 63,27; H 20 6,41; N 9,22 %.

Valmistus 26 N-(2-metyyli-l,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-7-sulfonyyli)-3-syaani-(S)-fenyylialaniinietyyli-esteri d 25 Formaldehydin vesiliuosta (37-%:inen, paino/tila- : vuus, 3,15 ml, 42 mmol) lisättiin sekoitettavaan liuokseen, jossa oli N-(1,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-7-sulfonyyli)-3-syaani-(S)-fenyylialaniinietyyliesteriä (valmistus 23; 3,5 g, 8,5 mmol) dikloorimetaanissa (100 ml). Yhden tunnin 30 kuluttua lisättiin natriumtriasetoksiboorihydridiä (566 mg, 2,67 mmol) ja sekoittamista jatkettiin 2 tunnin ajan. Reak-• : tioseos pestiin sitten kyllästetyllä natriumbikarbonaatin 1" ; vesiliuoksella, kuivattiin (MgSCh) ja haihdutettiin alenne- tussa paineessa, jolloin saatiin otsikon yhdiste (3,6 g) ‘ 35 valkoisena vaahtona. Rf 0,83 (SS 3). m/e 428 (M+H)+.

112481 46

Valmistus 27 N-(2-metyyli-l,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-7-sul- fonyyli)-3-syaani-(R,S)-fenyylialaniinietyyliesteri

Otsikon yhdiste saatiin kumina N-(1,2,3,4-tetra-5 hydroisokinoliini-7-sulfonyyli)-3-syaani-(R,S)-fenyyliala-niinietyyliesteristä (valmistus 24) käyttäen valmistuksessa 26 kuvattua menetelmää. Rf 0,30 (SS 6).

Valmistus 28 N-[2-(2-propyyli)-1,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-7-10 sulfonyyli]-3-syaani-(S)-fenyylialaniini

Lisättiin 1 M natriumhydroksidin vesiliuosta (6,0 ml, 6 mmol) sekoitettavaan liuokseen, jossa oli N-[2-(2-propyyli)-1,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-7-sulfonyyli]-3-syaani-(S)-fenyylialaniinietyyliesteriä (valmistus 25; 15 1,0 g, 2,19 mmol) 1,4-dioksaanissa (6,0 ml). Sitten 2,5 tunnin kuluttua huoneenlämpötilassa reaktioseos neutraloitiin käyttäen 1 M suolahappoa (6,0 ml) ja haihdutettiin kuiviin alennetussa paineessa. Jäännös uutettiin peräkkäin dikloorimetaanilla ja dikloorimetaanin/2-propanolin seok-20 sella (9:1), sitten yhdistetyt uutteet haihdutettiin alennetussa paineessa, jolloin saatiin aine, joka trituroitiin ’ eetterin kanssa, jolloin saatiin otsikon yhdiste valkoisena • / jauheena (780 mg). Rf 0,06 (SS 3). m/e 428 (M+H)+.

: Valmistus 29 i 25 N-(2-metyyli-l,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-7-sul- fonyyli)-3-syaani-(S)-fenyylialaniini

Otsikon yhdiste saatiin valkoisena jauheena N-(2- t metyyli-1,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-7-sulfonyyli)-3-syaani-(S)-fenyylialaniinietyyliesteristä (valmistus 26) 30 käyttäen valmistuksessa 28 kuvattua menetelmää. Rf 0,15 (SS ' 1 3). m/e 400 (M+H)+.

Λ 1 O / ο ί 4 7 I I z. 4 ö i

Valmistus 30 N-(2-metyyli-l,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-7-sul-fonyyli)-3-syaani-(R,S)-fenyylialaniini

Otsikon yhdiste saatiin N-(2-metyyli-l,2,3,4-tetra-5 hydroisokinoliini-7-sulfonyyli)-3-syaani-(R,S)-fenyyliala-niinietyyliesteristä (valmistus 27) käyttäen valmistuksessa 28 kuvattua menetelmää valkoisena kiinteänä aineena; sulamispiste 143 - 145 °C (hajoaminen), kiteyttämisen jälkeen asetonitriilistä. Rf 0,35 (SS 13). Havaittu: C 58,77; H

10 5,29; N 10,73. Yhdiste C20H21N3O4S; 0,50 H20; 0,25 CH3CN

edellyttää: C 58,79; H 5,48; N 10,87 %.

Valmistus 31 4 (R)-metyylipiperidiini-2(R)-karboksyylihappoetyy-liesteri 15 Otsikon yhdiste saatiin käyttämällä menetelmää, joka on kuvattu lähteessä Biochem. Biophys. Res. Comm., 101, 440 (1981).

Valmistus 32 4-metyyli-l,2,3,6-tetrahydropyridiini-2(R)-karbok-2 0 syylihappoetyyliesterihydrokloridi (a) 4-metyyli-l-[1(S)-fenyylietyyli]-1,2,3,6-tetra-hydropyridiini-2(R)-karboksyylihappoetyyliesteri : .· Tämä välituote saatiin käyttämällä menetelmää, joka V : on kuvattu lähteessä Tetrahedron: Asymmetry, 2, 1263 *: : 25 (1991).

: ; (b) . Edellisen välituotteen (13,56 g, 49,7 mmol) sekoi tettavaa liuosta tolueenissa (150 ml) typen alla kuumennet-_ tiin palautusjäähdyttäen 2 tunnin ajan käyttäen Dean- 30 Starkin loukkua. Sitten lisättiin 1,8-bis(dimetyyliamino)-naftaleenia (1,08 g, 5,0 mmol), kuumentamista jatkettiin : ’ vielä yhden tunnin ajan, reaktioseoksen annettiin jäähtyä : ja Dean-Starkin loukku poistettiin. Reaktioseokseen lisät tiin 1-kloorietyylikloroformaattia (10,7 ml, 14,2 g, 99,5 t 1 ‘ j 35 mmol), minkä jälkeen sitä sekoitettiin palautusjäähdyttäen 16 tunnin ajan, sen annettiin jäähtyä, se käsiteltiin abso- 112481 48

luuttisella etanolilla (80 ml), sitä sekoitettiin palautus-jäähdyttäen vielä 2 tunnin ajan ja sitten haihdutettiin alennetussa paineessa. Jäännös jaettiin etyyliasetaatin (100 ml) ja 1 M suolahapon (50 ml) kesken, sitten vesipi-5 toinen faasi erotettiin, neutraloitiin kiinteällä natriumbikarbonaatilla ja uutettiin dikloorimetaanilla (3 x 200 ml) . Kuivattujen (MgS04) , yhdistettyjen uutteiden haihduttaminen alennetussa paineessa tuotti ruskean jäännöksen, joka puhdistettiin kromatografiän avulla käyttäen silika-10 geeliä ja eluointigradienttia 0 - 5 % metanolia dikloorime-taanissa ja muutettiin sitten vaadituksi hydrokloridisuo-laksi käyttäen eetterisen suolahapon ylimäärää. Tuote puhdistettiin vielä liuottamalla se dikloorimetaaniin (20 ml) , suodattamalla (jäljellä olevan silikageelin poistamiseksi), 15 laimentamalla suodos eetterillä (200 ml) , suodattamalla, pesemällä sakka eetterillä ja kuivaamalla tyhjössä. Tämän puhdistetun tuotteen näyte (5,77 g) kiteytettiin eetterin ja etanolin seoksesta, jolloin saatiin otsikon yhdiste valkoisina kiteinä; sulamispiste 110 - 111 °C. Rf 0,35 (SS 3) : 20 [a] 25d +113,7 °C (c = 1,0, CH3CH2OH) . Havaittu: C 52,79; H

7,94; N 6,68. Yhdiste C9H15NO2; HC1 edellyttää: C 52,55; H : 7,84; N 6,81 %.

: ' Valmistus 33 V : 4-metyyli-l,2,3,6-tetrahydropyridiini-2(R,S)-kar- '2 5 boksyylihappoetyyliesterihydrokloridi : : (a) l-bentsyyli-4-metyyli-l,2,3,6-tetrahydropyri- ;diini-2(R,S)-karboksyylihappoetyyliesteri Tämä välituote saatiin käyttämällä menetelmää, joka on kuvattu lähteessä Tetrahedron Asymmetry, 2, 1263 (1991). 30 (b) 1 Otsikon yhdiste (saanto 82 %) saatiin edellisen : ‘ ‘ kohdan (a) välituotteesta käyttäen valmistuksen 32 (b) me- : ’ : netelmää valkoisena kiinteänä aineena; sulamispiste 130 - 130,5 °C. Rf 0,35 (SS 3) .

: i 35 112481 49

Valmistus 34 4-metyyli-l,2,3,6-tetrahydropyridiini-2(S)-karbok-syy1ihappoetyy1ies terihydrokloridi (a) l-bentsyyli-4-metyyli-l,2,3,6-tetrahydropyri- 5 diini-2(R,S)-karboksyylihappohydrokloridi

Sekoitettavaa liuosta, jossa oli l-bentsyyli-4-metyyli-1,2,3,6-tetrahydropyridiini-2(R,S)-karboksyylihap-poetyyliesterihydrokloridia (valmistus 33 (b); 20,1 g, 77,5 mmol) 5 M suolahapossa (200 ml), kuumennettiin 100 °C:n 10 lämpötilassa 4,5 tunnin ajan ja sitten se haihdutettiin kuiviin alennetussa paineessa. Jäljellä oleva vesi poistettiin atseotrooppisesti käyttäen dikloorimetaania ja sitten tolueenia, jolloin saatiin vaadittu tuote (24,0 g) valkoisena vaahtona, Rf 0,40 (SS 13), joka käytettiin puhdista-15 matta enempää seuraavassa vaiheessa.

(b) 1-bentsyyli-4-metyyli-l,2,3,6-tetrahydropyri-diini-2(R,S)-karboksyylihappo-N-asetyyli-(1R,2S)-efedriiniesteri 1,3-disykloheksyylikarbodi-imidi (20,6 g, 0,1 mol) 20 lisättiin sekoitettavaan liuokseen, jossa oli edellisestä kohdasta (a) saatua tuotetta (24,0 g, 89,6 mmol), N-' asetyyli-(1R,2S)-efedriiniä (18,47 g, 89,2 mmol), saatu .* lähteessä J. Amer. Pharmaceut. Assoc., 41, 545 (1952) kuva- , · tun menetelmän mukaan (katso julkaisu J. Med. Chem. 8, 466 Ί 25 (1965)), N-etyylidi-isopropyyliamiinia (12,9 g, 0,1 mmol) : ja 4-dimetyyliaminopyridiinia (9,51 g, 77,5 mmol) dikloori- metaanissa (250 ml). Kolmen päivän kuluttua huoneenlämpötilassa reaktioseos suodatettiin ja suodos haihdutettiin kuiviin alennetussa paineessa. Jäännös jaettiin etyyliasetaa-30 tin ja veden kesken, sitten orgaaninen faasi erotettiin, pestiin vedellä, kuivattiin (MgS04) ja haihdutettiin alen-: : _· netussa paineessa, jolloin saatiin raaka tuote, joka puh- : ; distettiin kromatografiän avulla käyttäen silikageeliä ja ·-' eluenttina eetteriä, jolloin saatiin vaadittu puhdas tuote 1 \ 35 (25,5 g) öljynä. Rf 0,35 (SS 2). Havaittu: C 73,34; H 7,71; 112481 50 N 5,73. Yhdiste C26H32N2O3; 0,30 (C2H5)20 edellyttää: C 73,78; H 7,91; N 6,33 %.

(c) 4-metyyli-l-(2,2,2-trikloorietoksikarbonyyli)- 1,2,3,6-tetrahydropyridiini-2(R,S)-karboksyylihap- 5 po-N-asetyyli-(1R,2S)-efedriiniesteri

Lisättiin natriumbikarbonaattia (11,21 g, 133 mmol), sitten 2,2,2-trikloorietyylikloroformaattia (11,7 ml, 17,97 g, 84,8 mmol) sekoitettavaan liuokseen, jossa oli edellisessä kohdassa (b) saatua tuotetta 10 (25,48 g, 60,6 mmol) kuivassa dikloorimetaanissa (200 ml) ja tulokseksi saatua seosta kuumennettiin palautusjäähdyttäen 22 tunnin ajan. Liuotin poistettiin alennetussa paineessa ja jäännös jaettiin etyyliasetaatin ja veden kesken. Erotettu orgaaninen faasi pestiin kyllästetyllä suolaliuok-15 sella, kuivattiin (MgSCh) ja haihdutettiin alennetussa paineessa, sitten jäännös puhdistettiin kromatografiän avulla käyttäen silikageeliä ja eluenttina eetteriä, jolloin saatiin vaadittu tuote (28,1 g) kumina. Rf 0,40 (SS 2) . Havaittu: C 52,10; H 5,38; N 5,24. Yhdiste C22H27CI3N2O5 edel-20 lyttää: C 52,24;, H 5,38; N 5,54 %.

(d) 4-metyyli-l,2,3,6-tetrahydropyridiini-2(R)-karboksyylihappo-N-asetyyli-(1R,2S)-efedriiniesteri ,* ja 4-metyyli-l,2,3,6-tetrahydropyridiini-2(S)-kar- boksyylihappo-N-asetyyli- (1R,2S) -efedriiniesteri •; · ·: 25 Lisättiin 1 M kaliumdivetyfosfaatin vesiliuosta ; (40 ml, 40 mmol), sitten sinkkipölyä (40 g, 610 mmol) nope- asti sekoitettavaan liuokseen, jossa oli edellisestä kohdasta (c) saatua tuotetta (32,9 g, 65 mmol) tetrahydrofu-.. . raanissa (200 ml). Yhden tunnin kuluttua huoneenlämpötilas- 30 sa reaktioseos suodatettiin ja suurin osa orgaanisesta liu-‘ ottimesta poistettiin alennetussa paineessa, sitten jäännös :: ; tehtiin emäksiseksi kyllästetyllä natriumbikarbonaatin ve- ; siliuoksella ja uutettiin etyyliasetaatilla. Uute pestiin kyllästetyllä suolaliuoksella, kuivattiin (MgSCg) ja haih-1 _ 35 dutettiin alennetussa paineessa, jolloin saatiin öljy (21,46 g), joka kromatografoitiin käyttäen silikageeliä ja 112481 51 eluointigradienttina etanolia/etyyliasetaattia (1:4 -> 3:7), jolloin saatiin ensin 2(R)-diastereoisomeerinen esteri (2,75 g), Rf 0,30 (SS 14), m/e 331 (M+H)+, ja sen jäl keen 2 (S)-diastereoisomeerinen esteri (2,90 g), Rf 0,22 (SS 5 14), m/e 331 (M+H)+, kumpikin vaaleankeltaisena öljynä.

(e) N-t-butoksikarbonyyli-4-metyyli-l,2,3,6-tetra-hydropyridiini-2(S)-karboksyylihappo-N-asetyyli-(1R,2S)-efedriiniesteri

Di-t-butyylidikarbonaatti (4,4 g, 20,2 mmol) lisät-10 tiin sekoitettavaan liuokseen, jossa oli 2 (S)-esterituote edellisestä kohdasta (d) (5,13 g, 15,5 mmol) ja N- metyylimorfoliinia (2,04 g, 20,2 mmol) dikloorimetaanissa (40 ml). Viiden tunnin kuluttua huoneenlämpötilassa lisättiin vielä di-t-butyylidikarbonaattia (1,35 g, 6,2 mmol) ja 15 reaktioseosta sekoitettiin vielä 15 tunnin ajan ennen liuottimen poistamista alennetussa paineessa. Jäljelle jäänyt seos jaettiin etyyliasetaatin ja veden kesken, sitten orgaaninen faasi pestiin peräkkäin 1 M sitruunahapon vesiliuoksella, kyllästetyllä natriumbikarbonaatin vesiliuoksella 20 ja kyllästetyllä suolaliuoksella, kuivattiin (MgSCh) ja haihdutettiin alennetussa paineessa, jolloin saatiin kumi, joka puhdistettiin kromatografiän avulla käyttäen silika-: ‘ geeliä ja eluenttina eetteriä, jolloin saatiin vaadittu

, · tuote (6,02 g) kumina. Rf 0,45 (SS 2). Havaittu: C 66,84; H

H": 25 7,97; N 6,50. Yhdiste C24H34N2O5 edellyttää: C 66, 95; H 7,96; : N 6,51 %.

(f) N-t-butoksikarbonyyli-4-metyyli-l,2,3,6-tetra-hydropyridiini-2(S)-karboksyylihappo _ Lisättiin 1 M natriumhydroksidin vesiliuosta 30 (69 ml, 69 mmol) sekoitettavaan liuokseen, jossa oli edel- > > 1 lisestä kohdasta (e) saatua tuotetta (5,97 g, 13,9 mmol) : 1,4-dioksaanissa (60 ml). Kolmen tunnin kuluttua huoneen- : ; lämpötilassa reaktioseokseen lisättiin kiinteätä sitruuna- happoa (5,53 g, 26 mmol) ja suurin osa liuottimesta pois-35 tettiin alennetussa paineessa. Jäljelle jäänyt suspensio tehtiin emäksiseksi pH-arvoon 10 1 M natriumhydroksidin ve- 112481 52 siliuoksella, pestiin dikloorimetaanilla, tehtiin happamaksi pH-arvoon 3 kiinteällä sitruunahapolla ja uutettiin etyyliasetaatilla. Orgaaninen uute pestiin kyllästetyllä suolaliuoksella, kuivattiin (MgS04) ja haihdutettiin alen-5 netussa paineessa, jolloin saatiin vaadittu tuote (3,47 g) kumina. Rf 0,60 (SS 17).

(g) N-t-butoksikarbonyyli-4-metyyli-l,2,3,6-tetra- hydropyridiini-2(S)-karboksyylihappoetyyliesteri 1,3-disykloheksyylikarbodi-imidiä (4,3 g, 20,8 10 mmol) lisättiin sekoitettavaan liuokseen, jossa oli edellisestä kohdasta (f) saatua tuotetta (3,35 g, 13,9 mmol), etanolia (4,1 ml, 69,4 mmol) ja 4-dimetyyliaminopyridiinia (1,7 g, 13,9 mmol) dikloorimetaanissa (40 ml). Sitten 18 tunnin kuluttua huoneenlämpötilassa reaktioseokseen lisät-15 tiin jääetikkaa (0,4 ml) ja seosta sekoitettiin vielä 0,5 tunnin ajan ennen suodattamista. Suodos haihdutettiin alennetussa paineessa, jolloin saatiin jäännös, joka jaettiin eetterin ja veden kesken, sitten orgaaninen faasi pestiin peräkkäin 1 M sitruunahapon vesiliuoksella, kyllästetyllä 20 natriumbikarbonaatin vesiliuoksella ja kyllästetyllä suolaliuoksella, kuivattiin (MgSCg) ja haihdutettiin alennetussa * paineessa, jolloin saatiin öljy (5,15 g), joka puhdistet- ' ' tiin kromatografiän avulla käyttäen silikageeliä ja eluoi- ·. ’ den heksaanilla/cetterillä (4:1), jolloin saatiin vaadittu > 25 tuote (3,4 g) kirkkaana öljynä. Rf 0,30 (SS 4). m/e 270 (M+H) +.

(h)

Sekoitettava, jäällä jäähdytetty liuos, jossa oli ;·, , edellisestä kohdasta (g) saatu tuote (3,13 g, 11,62 mmol) ·· _ 30 etyyliasetaatissa (30 ml), kyllästettiin kloorivedyllä 0,5 ", tunnin kuluessa ja sitten saadun liuoksen annettiin seistä • ; : huoneenlämpötilassa vielä 2 tunnin ajan. Liuotin haihdutet- ! tiin alennetussa paineessa ja jäännös kiteytettiin eetterin , ja etanolin seoksesta, jolloin saatiin otsikon yhdiste > 35 (2,20 g) valkoisina kiteinä, sulamispiste 108 - 109 °C. Rf 0,35 (SS 3), [a]25 -106, 5 °C (c = 1,0, CH3CH2OH) . Havaittu: 112481 53 C 52, 49; H 7,90; N 6,70. Yhdiste C9H15NO2; HC1 edellyttää: C 52,55; H 7,84; N 6,81 %.

Yhdisteen, joka saatiin toteuttamalla vaiheet (e) , (f), (g) ja (h) koskien edellä kohdasta (d) saatua 2(R)- 5 esteriä, havaittiin olevan identtinen valmistuksen 32 otsikon yhdisteen kanssa.

Valmistus 35 4-etyyli-l,2,3,6-tetrahydropyridiini-2(R,S)-karbok-syylihappoetyyliesterihydrokloridi 10 (a) 2-syaani-4-etyyli-l-metyyli-l,2,3,6-tetrahydro- pyridiinihydrokloridi

Metyylijodidia (74,7 ml, 170,33 g, 1,22 mol) lisättiin varovasti annoksittain sekoitettavaan liuokseen, jossa oli 4-etyylipyridiinia (107,2 g, 1 mol) asetonissa 15 (500 ml) , tulokseksi saatua seosta kuumennettiin palautus- jäähdyttäen 2 tunnin ajan ja sen annettiin jäähtyä, sitten osa liuottimesta (noin 100 ml) poistettiin alennetussa paineessa. Reaktioseokseen lisättiin eetteriä (1,0 1), sakka kerättiin talteen ja pestiin eetterillä ja kuivattiin tyh-20 jössä, jolloin saatiin tarvittava kvaternaarinen jodidi (245 g) hyvin hygroskooppisena kiinteänä aineena.

5 ' Lisättiin 6 M suolahappoa (130 ml) hitaasti sekoi- : ‘ tettavaan liuokseen, jossa oli kaliumsyanidia (130 g, > 2,5 mol) vedessä (260 ml) peitettynä eetterikerroksella : ; 25 (400 ml), varmistaen, että lämpötila pysyi alle 15 °C:ssa.

; Lisättiin peräkkäin ja annoksittain edellä saatua kvater- . naarasta suolaa (139,49 g, 0,56 mol) ja natriumboorihydri- diä (27 g, 0,71 mol) 15 minuutin kuluessa, jolloin saatiin maitomainen seos, jota sekoitettiin noin 10 °C:n lämpöti-30 lassa 0,5 tunnin ajan ja sitten huoneenlämpötilassa vielä 4 tunnin ajan. Eetterifaasi poistettiin imemällä ja yhdistet-' j : tiin vesipitoisen faasin eetteriuutteen kanssa, sitten to- : : teutettiin peseminen kyllästetyllä suolaliuoksella ja kui- vaaminen (MgSCh) . Eetteriliuos jäähdytettiin jäällä sekoit-35 taen ja siihen lisättiin metyylijodidia (6 ml) kaiken ei-toivotun 4-etyyli-l-metyylipiperidiinin saostamiseksi joh- 112481 54 dettuna kvaternaarisena jodidina. Seos suodatettiin ja suo-dos käsiteltiin 1 M eetterisen suolahapon ylimäärällä, jolloin saatiin haluttu tuote (43,77 g) öljynä, Rf (0,20 (SS 18), joka käytettiin puhdistamatta enempää seuraavassa vai-5 heessa.

(b) 4-etyyli-l-(2,2,2-trikloorietoksikarbonyyli)- 1,2,3,6-fcetrahydropyridiini-2(R,S)-karboksyylihap- poetyyliesteri

Sekoitettava liuos, jossa oli edellisestä kohdasta 10 (a) saatua tuotetta (43,5 g, 0,23 mol) etanolissa (100 ml), kyllästettiin kloorivedyllä, sitä kuumennettiin palautus-jäähdyttäen 6,5 tunnin ajan ja sitten se haihdutettiin kuiviin alennetussa paineessa. Jäännös tehtiin emäksiseksi natriumkarbonaatin vesiliuoksella, sitten toteutettiin uut-15 to etyyliasetaatilla. Uute pestiin kyllästetyllä suolaliuoksella, kuivattiin (MgSCh) ja haihdutettiin alennetussa painessa, jolloin saatiin raaka etyyliesteri, joka puhdistettiin osittain kromatografiän avulla käyttäen silikagee-liä ja eluoiden heksaani/etyyliasetaatti/dietyyliamiini-20 seoksella (90:5:2), jolloin saatiin öljy (8,0 g).

Natriumkarbonaattia (10,0 g, 94 mmol) ja 2,2,2-‘ trikloorietyylikloroformaattia (13,0 g, 61 mmol) lisättiin peräkkäin sekoitettavaan liuokseen, jossa oli edellä saatu ·, ' raaka esteri (8,0 g, 40 mmol) dikloorimetaanissa (200 ml), *!"! 25 ja tulokseksi saatua seosta kuumennettiin palautusjäähdyt- : ; täen 20 tunnin ajan, sitten se haihdutettiin alennetussa paineessa. Jäännös jaettiin etyyliasetaatin ja veden kes ken, sitten orgaaninen faasi kuivattiin (MgSCh) ja haihdutettiin alennetussa paineessa, jolloin saatiin öljy, joka 30 puhdistettiin kromatografiän avulla käyttäen silikageeliä ja eluoiden heksaani/etyyliasetaattiseoksella (50:1), jol-,t> loin saatiin vaadittu tuote (4,8 g) värittömänä öljynä. Rf : 0,25 (SS 19).

(c) , 35 Lisättiin 1 M kaliumdivetyfosfaatin vesiliuosta (70 ml, 70 mmol), sitten sinkkipölyä (46 g, 700 mmol) nope- 112481 55 asti sekoitettavaan liuokseen, jossa oli edellisestä kohdasta (b) saatua tuotetta (4,76 g, 13,3 mmol) tetrahydrofu-raanissa (220 ml) . Kahden tunnin kuluttua huoneenlämpötilassa reaktioseokseen lisättiin vielä sinkkipölyä (5 g, 76 5 mmol) ja sitä sekoitettiin vielä yhden tunnin ajan ennen suodattamista. Suodatintäyte pestiin vedellä ja tetrahydro-furaanilla, sitten suurin osa orgaanisesta liuottimesta poistettiin yhdistetystä suodoksesta ja pesunesteistä. Jäljelle jäänyt seos tehtiin happamaksi 2 M suolahapolla (30 10 ml), pestiin etyyliasetaatilla lähtöaineen poistamiseksi (2,32 g otettiin talteen), neutraloitiin kiinteällä kalium-karbonaatilla ja uutettiin dikloorimetaanilla. Yhdistetyt orgaaniset uutteet pestiin kyllästetyllä suolaliuoksella, kuivattiin (MgSO^) , käsiteltiin eetterisen suolahapon yli-15 määrällä ja haihdutettiin alennetussa paineessa. Jäännöksen puhdistaminen kromatografiän avulla käyttäen silikageeliä ja eluoiden dikloorimetaani-metaani/metanoliseoksella (95:5) tuotti otsikon yhdisteen (330 mg) värittömänä vaha-maisena kiinteänä aineena, m/e 184 (M+H)+.

20 Valmistus 36 4-metyyli-1-[N-(2-trifluoriasetyyli-l,2,3,4-tetra-hydroisokinoliini-7-sulfonyyli)-3-syaani-(S)-fenyy-lialanyyli]-1,2,3,6-tetrahydropyridiini-2(R)-kar-boksyylihappoetyyliesteri *: 'f 25 Oksalyylikloridia (3,10 g, 24,4 mmol) lisättiin ti- : poittain sekoitettavaan, jäällä jäähdytettyyn suspensioon, . jossa oli N-(2-trifluoriasetyyli-l, 2,3,4-tetrahydroisokino- liini-7-sulfonyyli)-3-syaani-(S)-fenyylialaniinia (valmis- :V( tus 14; 2,93 g, 6,08 mmol) dikloorimetaanissa (20 ml), ja 30 sen jälkeen dimetyylif ormamidia (1 tippa). Kahden tunnin ·; ’ kuluttua huoneenlämpötilassa reaktioliuotin haihdutettiin : : ; alennetussa paineessa ja jäljelle jäänyt oksalyylikloridi ; poistettiin atseotrooppisesti käyttäen dikloorimetaania (x 2) ja sen jälkeen tolueenia, jolloin saatiin raaka asyyli- < i ' _ 35 kloridihydrokloridi öljynä, joka liuotettiin sitten dikloo- rimetaaniin (50 ml).

112481 56 Tähän sekoitettavaan, jäällä jäähdytettyyn liuokseen lisättiin peräkkäin 4-metyyli-l,2,3,6-tetrahydro- pyridiini-2(R)-karboksyylihappoetyyliesterihydrokloridia (valmistus 32; 1,37 g, 6,67 mmol) ja N-etyylidi- 5 isopropyyliamiinia (1,72 g, 13,3 mmol). Tulokseksi saatua liuosta pidettiin noin 0 °C:n lämpötilassa 18 tunnin ajan ja sitten se haihdutettiin alennetussa paineessa. Jäännös liuotettiin etyyliasetaattiin, sitten liuos pestiin peräkkäin vedellä, 1 M suolahapolla, kyllästetyllä natriumbikar-10 bonaatin vesiliuoksella ja kyllästetyllä suolaliuoksella, kuivattiin (MgSCh) ja haihdutettiin alennetussa paineessa, jolloin saatiin raaka tuote, joka puhdistettiin kromatogra-fian avulla käyttäen silikageeliä ja eluontigradienttina etyyliasetaattia heksaanissa, jolloin saatiin otsikon yh-15 diste (3,43 g) valkoisena vaahtona. Rf 0,42 (SS 20). [a]25D +23° (c = 0,1, CH3OH) . Havaittu: C 56, 70; H 4,75; N 8,68. Yhdiste C30H31F3N4O6S edellyttää: C 56, 95; H 4,94; N 8,85 %.

Valmistusten 37 - 44 otsikoiden yhdisteet saatiin yhdenmukaisesti valmistuksen 36 kanssa kytkemällä toisiinsa 20 sopivat aminohapon ja amiinin prekursorit.

Valmistus 37 4-metyyli-l-[N-(2-trifluoriasetyyli-l,2,3,4-tetra-hydroisokinoliini-7-sulfonyyli)-3-(2-syaani-4-pyri-• · dyyli)-(S)-alanyyli]-1,2,3,6-tetrahydropyridiini- Y '! 25 2(R)-karboksyylihappoetyyliesteri : Saatiin valmistuksesta 15 ja valmistuksesta 32

; ; vaahtona. Rf 0,21 (SS 12). Havaittu: C 54,65; H 4,89; N

10,69. Yhdiste C29H30F3N5O6S edellyttää: C 54,96; H 4,77; N

11,05 %.

30 Valmistus 38 4-metyyli-l-[N-(2-trifluoriasetyyli-l,2,3,4-tetra-•V ; : hydroisokinoliini-6-sulfonyyli) -3-syaani- (S) -fenyy- : : lialanyyli]-1,2,3,6-tetrahydropyridiini-2(R)-kar boksyylihappoetyyliesteri 112481 57

Saatiin valmistuksesta 16 ja valmistuksesta 32. Rf 0,35 (SS 6). Havaittu: C 56,58; H 5,10; N 8,84. Yhdiste C30H31F3N4O6S edellyttää: C 56, 95; H 4,94; N 8,86 %.

Valmistus 39 5 4-metyyli-1-[N-(3-trifluoriasetyyli-2,3,4,5-tetra- hydro-lH-3-bentsatsepiini-7-sulfonyyli)-3-syaani- (S)-fenyylialanyyli]-1,2,3,6-tetrahydropyridiini-2(R)-karboksyylihappoetyyliesteri

Saatiin valmistuksesta 17 ja valmistuksesta 32 valio koisena vaahtona. Rf 0,25 (SS 21). m/e 647 (M+H)+.

Valmistus 40 1-[N-(1(RS)-metoksimetyyli-2-trifluoriasetyyli-l,- 2,3,4-tetrahydroisokinoliini-7-sulfonyyli)-3-syaa-ni- (S)-fenyylialanyyli]-4-metyyli-l,2,3,6-tetrahyd-15 ropyridiini-2(R)-karboksyylihappoetyyliesteri

Saatiin valmistuksesta 18 ja valmistuksesta 32 valkoisena vaahtona. Rf 0,35 (SS 8). Havaittu: C 56, 60; H

5,03; N 8,13. Yhdiste C32H35F3N4O7S edellyttää: C 56,30; H

5,21; N 8,28 %.

20 Valmistus 41 1-{N-[1(R,S)-(N,N-dimetyylikarbamoyylimetyyli)-2-trifluoriasetyyli-1,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-7-sulfonyyli]-3-syaani-(S)-fenyylialanyyli}-4-metyy-• li-1,2,3,6-tetrahydropyridiini-2(R)-karboksyylihap- ' · 25 poetyyliesteri

: Saatiin valmistuksesta 19 ja valmistuksesta 32 valkoisena vaahtona. Rf 0,40 (SS 22). Havaittu: C 56,53; H

5,22; N 9,54. Yhdiste C34H38F3N5O7S edellyttää: C 56, 90; H

5,34; N 9,76 %.

30 Valmistus 42 4-metyyli-l-[N-(5-metyyli-2-trifluoriasetyyli-l,2,-' : 3,4-tetrahydroisokinoliini-8-sulfonyyli)-3-syaani- : (S)-fenyylialanyyli]-1,2,3,6-tetrahydropyridiini- 2(R)-karboksyylihappoetyyliesteri

‘ , 35 Saatiin valmistuksesta 20 ja valmistuksesta 32 keltaisena vaahtona. Rf 0,60 (SS 8). Havaittu: C 57,32; H

112481 58 5,28; N 8,16. Yhdiste C3iH33F3N406S; 0,50 CH3CO2CH2CH3 edellyttää; C 57,38; H 5,40; N 8,11 %.

Valmistus 43 4-metyyli-l-[N-(2-trifluoriasetyyli-1,2,3,4-tetra-5 hydroisokinoliini-7-sulfonyyli)-3-syaani-(S)-fenyy- lialanyyli]-1,2,3,6-tetrahydropyridiini-2(R,S)-kar-bok syy1ihappoetyy1ies teri

Saatiin valmistuksesta 14 ja valmistuksesta 33. Rf 0,42 (SS 20). Havaittu: C 56, 72; H 4,77; N 8,71. Yhdiste 10 C30H31F3N4O6S edellyttää: C 56, 95; H 4,94; N 8,85 %.

Valmistus 44 4-etyyli-l-[N-(2-trifluoriasetyyli-1,2,3,4-tetra-hydroisokinoliini-7-sulfonyyli)-3-syaani-(S)-fenyy-lialanyyli]-1,2,3,6-tetrahydropyridiini-2(R,S)-kar-15 boksyylihappoetyyliesteri

Saatiin valmistuksesta 14 ja valmistuksesta 35 vä rittömänä vaahtona. Rf 0,53 (SS 8). m/e 664,6 (M+NH4)+. Valmistus 45 4-metyyli-l-[N-(l,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-7-20 sulfonyyli)-3-syaani-(S)-fenyylialanyyli]-1,2,3,6- tetrahydropyridiini-2(R)-karboksyylihappoetyylies-*, teri ! ' Natriumkarbonaatin (2,83 g, 26,7 mmol) liuos vedes- sä (20 ml) lisättiin sekoitettavaa liuokseen, jossa oli 4- - 25 metyyli-1-[N-(2-trifluoriasetyyli-l,2,3,4-tetrahydroisoki- ... noliini-7-sulfonyyli)-3-syaani-(S)-fenyylialanyyli]-1,2,- 3,6-tetrahydropyridiini-2(R)-karboksyylihappoetyyliesteriä (valmistus 36; 3,38 g, 5,34 mmol) etanolissa (20 ml), ja tulokseksi saatua suspensiota sekoitettiin 20 tunnin ajan. 30 Suurin osa etanolista poistettiin alennetussa painessa, jäljelle jäänyt seos laimennettiin vedellä ja uutettiin • etyyliasetaatilla. Orgaaninen uute pestiin vedellä, sitten kyllästetyllä suolaliuoksella, kuivattiin (MgS04) ja haihdutettiin alennetussa painessa, jolloin saatiin otsikon yh-; ’ 35 diste (2,29 g) vaahtona. Rf 0,42 (SS 9) . [o(]25d +14° (c = 112481 59 0,1, CH3OH) . Havaittu: C 61,60; H 6,06; N 10,10. Yhdiste C28H32N4O5S; 0,50 H2O edellyttää: C 61,63; H 6,09; N 10,26 %.

Valmistusten 46 - 52 otsikon yhdisteet saatiin niiden trifluoriasetyyliprekursoreista, vastaavasti valmistuk-5 sista 37 - 42 ja 44, käyttäen valmistuksessa 36 kuvattua menetelmää.

Valmistus 46 4-metyyli-l-[N-(1,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-7-sulfonyyli)-3-(2-syaani-4-pyridyyli)-(S)-alanyyli]-10 1,2,3,6-tetrahydropyridiini-2(R)-karboksyylihappo- etyyliesteri

Saatiin valmistuksesta 37 vaahtona. Rf 0,41 (SS 13). m/e 538 (M+H)+. Havaittu: C 59,45; H 5,95; N 12,47.

Yhdiste C27H31N5O5S edellyttää: C 60,31; H 5,81; N 13,02 %.

15 Valmistus 47 4-metyyli-l-[N-(1,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-6-sulfonyyli)-3-syaani-(S)-fenyylialanyyli]-1,2,3,6-tetrahydropyridiini-2(R)-karboksyylihappoetyyli-esteri 20 Saatiin valmistuksesta 38 valkoisena vaahtona. Rf 0,50 (SS 9). m/e 537 (M+H)+.

Valmistus 48 • 4-metyyli-l-[N-(2,3,4,5-tetrahydro-lH-3-bentsatse- piini-7-sulfonyyli)-3-syaani-(S)-fenyylialanyyli]-·;·; 25 1,2,3,6-tetrahydropyridiini-2 (R) -karboksyylihappo- etyyliesteri

Saatiin valmistuksesta 39 valkoisena vaahtona. Rf 0,28 (SS 3). m/e 551 (M+H)+.

Valmistus 49 30 1-[N-(1(R,S)-metoksimetyyli-1,2,3,4-tetrahydroiso- kinoliini-7-sulfonyyli)-3-syaani-(S)-fenyylialanyyli] -4-metyyli-l,2,3,6-tetrahydropyridiini-2(R)kar-boksyylihappoetyyliesteri

Saatiin valmistuksesta 40 valkoisena vaahtona. Rf : ' 35 0,18 (SS 6). m/e 581 (M+H)+.

60 1 ΊΟ/ π ί I Ιζ4ό ί

Valmistus 50 1- {N- [1 (R,S) - (Ν,Ν-dimetyylikarbamoyylimetyyli) - 1,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-7-sulfonyyli]-3-syaani-(S)-fenyylialanyyli}-4-metyyli-l,2,3,6-tet-5 rahydropyridiini-1(R)-karboksyylihappoetyyliesteri

Saatiin valmistuksesta 41 valkoisena vaahtona. Rf 0,15 (SS 6). m/e 622 (M+H)+.

Valmistus 51 4-metyylx-l-[N-(5-metyyli-1,2,3,4-tetrahydroisoki-10 noliini-8-sulfonyyli)-3-syaani-(S)-fenyylialanyy- li]-1,2,3,6-tetrahydropyridiini-2(R)-karboksyylihappoetyyliesteri

Saatiin valmistuksesta 42 valkoisena vaahtona. Rf 0,40 (SS 3). m/e 551 (M+H)+.

15 Valmistus 52 4-etyyli-l-[N-(1,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-7-sulfonyyli)-3-syaani-(S)-fenyylialanyyli]-1,2,3,6-tetrahydropyridiini-2(R,S)-karboksyylihappoetyyliesteri 20 Saatiin valmistuksesta 44 värittömänä vaahtona. Rf 0,13 (SS 23). m/e 551,3 (M+H)+.

Valmistus 53 ; 4-metyyli-l- [N- (2-metyyli-l ,2,3,4-tetrahydroisoki- noliini-7-sulfonyyli)-3-syaani-(S)-fenyyliala-25 nyyli]-1,2,3,6-tetrahydropyridiini-2(R)-karboksyy lihappoetyyliesteri ;·, Formaldehydin vesiliuosta (37-%:inen, paino/tila- vuus, 1,4 ml, 17,3 mmol) lisättiin sekoitettavaan liuok-. seen, jossa oli 4-metyyli-l-[N-(1,2,3,4-tetrahydroisokino- ’>t; 30 liini-7-sulfonyyli) -3-syaani- (S) -fenyylialanyyli] -1,2, -3, 6- t i '··' tetrahydropyridiini-2 (R) -karboksyylihappoetyyliesteriä : (valmistus 45; 2,26 g, 4,2 mmol) dikloorimetaanissa (30 ml). Sitten 0,75 tunnin kuluttua lisättiin natriumtri- « * asetoksiboorihydridiä (1,34 g, 6,32 mmol) ja sekoittamista : ·' 35 jatkettiin 4 tunnin ajan. Reaktioseos pestiin sitten peräk- käin kyllästetyllä natriumbikarbonaatin vesiliuoksella ja 61 A A O A Q 1

I I I

kyllästetyllä suolaliuoksella, kuivattiin (MgSCg) ja haihdutettiin alennetussa paineessa, sitten jäännös puhdistettiin kromatografiän avulla käyttäen silikageeliä ja eluoi-den etyyliasetaatti/dietyyliamiiniseoksella (98:2), jolloin 5 saatiin otsikon yhdiste (2,15 g) vaahtona. [a]25D +9 °C (c = 0,1 CH3OH) . Havaittu: C 62,81; H 6,28; N 9,53. Yhdiste C29H34N4O5S; 0,30 H20 edellyttää: C 62,63; H 6,27; N 10,07 %.

Valmistusten 54 - 60 otsikoiden yhdisteet saatiin niiden vastaavista prekursoreista, valmistuksista 46 - 52 10 vastaavasti, käyttäen valmistuksessa 53 kuvattua menetelmää .

Valmistus 54 4-metyyli-l-[N-(2-metyyli-1,2,3,4-tetrahydroisoki-noliini-7-sulfonyyli)-3-(2-syaani-4-pyridyyli)-(S)-15 alanyyli]-1,2,3,6-tetrahydropyridiini-2(R)-karbok- syylihappoetyyliesteri

Saatiin valmistuksesta 46 vaahtona. Rf 0,36 (SS 13). m/e 552 (M+H)+. Havaittu: C 61,52; H 5,94; N 11,78.

Yhdiste C28H33N5O5S edellyttää: C 60,96; H 6,03; N 12,69 %.

20 Valmistus 55 4-metyyli-l-[N-(2-metyyli-1,2,3,4-tetrahydroisoki-noliini-6-sulfonyyli)-3-syaani-(S)-fenyylialanyy-li]-1,2,3,6-tetrahydropyridiini-2(R)-karboksyyli-happoetyy1iesteri ... : 25 Saatiin valmistuksesta 47 valkoisena kiinteänä ai- . , , neena. Rf 0,30 (SS 6) . Havaittu: C 63,31; H 6,22; N 10,17.

, Yhdiste C29H34N4O5S2 edellyttää: C 63,25; H 6,09; N 10,12 %.

Valmistus 56 4-metyyli-l-[N-(3-metyyli-2,3,4,5-tetrahydro-lH-3-* 30 bentsatsepiini-7-sulfonyyli)-3-syaani-(S)-fenyyli- alanyyli]-1,2,3,6-tetrahydropyridiini-2(R)-karbok-syylihappoetyyliesteri

Saatiin valmistuksesta 48 valkoisena vaahtona. Rf 0,30 (SS 3). m/e 565 (M+H)+.

: 35 62 1 12481

Valmistus 57 1-[N-(1(R,S)-metoksimetyy1i-2-metyyli-1,2,3,4-tet-rahydroisokinoliini-7-sulfonyyli)-3-syaani-(S)-fe-nyylialanyyli]-4-metyyli-l,2,3,6-tetrahydropyridii-5 ni-2(R)-karboksyylihappoetyyliesteri

Saatiin valmistuksesta 49 valkoisena vaahtona. Rf 0,22 (SS 6). m/e 595 (M+H)+.

Valmistus 58 1-{N- [1 (R, S) - (N,N-dimetyylikarbamoyylimetyyli-2-10 metyyli-1,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-7-sulfonyy- li]-3-syaani-(S)-fenyylialanyyli}-4-metyyli-l,2,- 3.6- tetrahydropyridiini-2(R)-karboksyylihappoetyyliesteri

Saatiin valmistuksesta 50 valkoisena vaahtona. Rf 15 0,23 (SS 6). m/e 636 (M+H)+.

Valmistus 59 4-metyyli-l-[N-(2,5-dimetyyli-1,2,3,4-tetrahydro-isokinoliini-8-sulfonyyli)-3-syaani-(S)-fenyyliala-nyyli]-1,2,3,6-tetrahydropyridiini-2(R)-karboksyy-20 lihappoetyyliesteri

Saatiin valmistuksesta 51 kumina. Rf 0,51 (SS 3). V ’ m/e 565 (M+H)+.

Valmistus 60 4-etyyli-l-[N-(2-metyyli-l,2,3,4-tetrahydroisokino-25 liini-7-sulfonyyli)-3-syaani-(S)-fenyylialanyyli]- 1.2.3.6- tetrahydropyridiini-2(R,S)-karboksyylihappoetyyliesteri

Saatiin valmistuksesta 52 värittömänä vaahtona. Rf 0,25 (SS 23). Havaittu: C 63,77; H 6,51; N 9,85. Yhdiste 30 C30H36N4O5S edellyttää: C 63,83; H 6,38; N 9,33 %.

Valmistus 61 4-metyyli-l-(N-[3-(2-propyyli)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-3-bentsatsepiini-7-sulfonyyli]-3-syaani-(S)-fenyylialanyyli}-1,2,3,6-tetrahydropyridiini-2 (R)-• 35 karboksyylihappoetyyliesteri 112481 63

Sekoitettavaa seosta, jossa oli 4-metyyli-l-[N-(2,3,4,5-tetrahydro-lH-3-bentsatsepiini-7-sulfonyyli-3-sy-aani-(S)-fenyylialanyyli]-1,2,3,6-tetrahydropyridiini-2(R)-karboksyylihappoetyyliesteriä (valmistus 48; 550 mg, 1 5 mmol), 2-jodipropaania (204 mg, 120 μΐ, 1,2 mmol), vedetöntä kaliumkarbonaattia (207 mg, 1,5 mmol) ja asetonitriiliä (20 ml) , kuumennettiin palautusjäähdyttäen 6 tunnin ajan, siihen lisättiin vielä 2-jodipropaania (60 μΐ, 0,6 mmol), sitten kuumentamista jatkettiin vielä 3,5 tunnin ajan. Vii-10 leä reaktioseos suodatettiin, suodos haihdutettiin alennetussa paineessa ja jäännös kromatografoitiin käyttäen sili-kageeliä ja eluoiden dikloorimetaanin/metanolin/O,880 ammoniakin vesiliuoksen seoksella (95:5:0,5), jolloin saatiin otsikon yhdiste (400 mg) valkoisena vaahtona. Rf 0,29 (SS 15 6). m/e 593 (M+H)+.

Valmistusten 62 ja 63 otsikoiden yhdisteet saatiin yhdenmukaisesti valmistuksen 61 kanssa niiden vastaavista amiiniprekursoreista ja sopivasta alkyloimisaineesta. Valmistus 62 2 0 1-{N-[3- (3-dimetyyliamino-l-propyyli)-2,3,4,5-tet- rahydro-lH-3-bentsatsepiini-7-sulfonyyli]-3-syaani-V : (S)-fenyylialanyyli}-4-metyyli-l,2,3,6-tetrahydro- pyridiini-2(R)-karboksyylihappoetyyliesteri

Saatiin valmistuksesta 48 ja 3-dimetyyliamino-l-25 propyylikloridihydrokloridista valkoisena vaahtona. Rf 0,33 (SS 9). m/e 636 (M+H)+.

Valmistus 63 1-[N-(2-bentsyyli-l,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-7-,, , sulfonyyli)-3-syaani-(S)-fenyylialanyyli]-4-metyy- * 30 li-1,2,3,6-tetrahydropyridiini-2(R)-karboksyylihap poetyyliesteri : ; : Saatiin valmistuksesta 45 ja bentsyylibromidista valkoisena vaahtona. Rf 0,78 (SS 6). m/e 627 (M+H)+.

Valmistusten 64 - 66 otsikoiden yhdisteet saatiin ! ’ 35 yhdenmukaisesti valmistuksen 36 kanssa kytkemällä sopivat • aminohappo- ja amiiniprekursorit.

112481 64

Valmistus 64 4-metyyli-1-[N-(2-metyyli-l,2,3,4-tetrahydroisoki-noliini-7-sulfonyyli)-3-syaani-(S)-fenyylialanyy-li]-1,2,3,6-tetrahydropyridiini-2(S)-karboksyyli-5 happoetyyliesteri

Saatiin valmistuksesta 29 ja valmistuksesta 34 valkoisena vaahtona. Rf 0,50 (SS 6). m/e 551 (M+H)+.

Valmistus 65 4-metyyli-l-{N-[2-(2-propyyli)-1,2,3,4-tetrahyd-10 roisokinoliini-7-sulfonyyli]-3-syaani-(S)-fenyy- lialanyyli}-1,2,3,6-tetrahydropyridiini-2(R)-kar-boksyylihappoetyyliesteri

Saatiin valmistuksesta 28 ja valmistuksesta 32 valkoisena vaahtona. Rf 0,30 (SS 6). m/e 579 (M+H)+.

15 Valmistus 66 4(R)-metyyli-1-[N-(2-metyyli-l,2,3,4-tetrahydro-isokinoliini-7-sulfonyyli)-3-syaani-(R,S)-fenyy-lialanyyli]piperidiini-2(R)-karboksyylihappoetyyli-esteri 20 Saatiin valmistuksesta 30 ja valmistuksesta 31 val koisena vaahtona. Rf 0,34 ja 0,42 (SS 6).

V Valmistus 67 ;' 4-metyyli-l-[N-(2-metyyli-l,2,3,4-tetrahydroisoki- :: noliini-7-sulfonyyli)-3-amidino-(S)-fenyylialanyy- *;· 25 li] -1,2,3,6-tetrahydropyridiini-2 (R) -karboksyyli- . , happoetyyliesterihydrokloridi . ; Sekoitettava, jäällä jäähdytetty liuos, jossa oli 4-metyyli-l-[N-(2-metyyli-l,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-7-sulfonyyli)-3-syaani-(S)-fenyylialanyyli]-1,2,3,6-tetrahyd-30 ropyridiini-2(R)-karboksyylihappoetyyliesteriä (valmistus 53; 2,12 g, 3,85 mmol) kuivassa etanolissa (25 ml), kylläs-; tettiin kloorivedyllä, pantiin jääkaappiin 68 tunnin ajaksi ja sitten se haihdutettiin alennetussa paineessa. Jäännös liuotettiin dikloorimetaaniin, liuos haihdutettiin alenne-35 tussa paineesa ja jäljelle jäänyt jäännös liuotettiin kui-’ * vaan etanoliin (25 mlj . Tämä liuos jäähdytettiin jää-suola- 112481 65 hauteessa sekoittaen, se kyllästettiin ammoniakilla ja sitä kuumennettiin palautusjäähdyttäen 2 tunnin ajan. Reak-tioseos haihdutettiin alennetussa paineessa, jäännös liuotettiin veteen ja liuos pestiin eetterillä ja kyllästetyllä 5 natriumkloridiliuoksella ja uutettiin dikloorimetaanilla. Kuivatun (MgSCh) uutteen haihduttaminen alennetussa painee-esa tuotti otsikon yhdisteen (2,05 g) valkoisena kiinteänä aineena. [a]25D +30 °C (C = 0,1, CH3OH) . Havaittu: C 54,98; H 6,49; N 10,94. Yhdiste C29H37N505S; HC1; 0,50 CH2C12 edel-10 lyttää: C 54,79; H 6,07; N 10,83 %.

Valmistuksen 73 otsikon yhdiste saatiin vastaavasta nitriiliprekursorista (valmistus 60) käyttäen valmistuksessa 67 kuvattua menetelmää. Valmistusten 68 - 72 ja 74 -79 otsikoiden yhdisteet saatiin vastaavista nitriiliprekurso-15 reistä (valmistukset 55 - 59 ja 61 - 66 vastaavasti) kuten valmistuksessa 67, mutta käyttäen seuraavaa muunnettua työskentelymenetelmää.

Suoraan aminointivaiheesta saatu raaka amidiinihyd-rokloridi liuotettiin veteen ja tämä liuos tehtiin happa-20 maksi pH-arvoon 2 1 M suolahapolla, pestiin eetterillä, tehtiin emäksiseksi 1 M natriumhydroksidin vesiliuoksella, ' ‘ kyllästettiin natriumkloridilla ja uutettiin etyyliasetaa- i ,· tiliä. Kuivatun (MgSCy) uutteen haihduttaminen alennetussa '· painessa tuotti vaaditun amidiinin karbonaattina tai vety- ;Ί 25 karbonaattisuolana.

: Valmistus 68 '", 4-metyyli-1-[N-(2-metyyli-l,2,3,4-tetrahydroisoki- noliini-6-sulfonyyli)-3-amidino-(S)-fenyylialanyy-li]-1,2,3,6-tetrahydropyridiini-2(R)-karboksyyli-30 happoetyyliesterivetykarbonaatti y" Saatiin valmistuksesta 55 valkoisena vaahtona. Rf 0,50 (SS 24). m/e 568 (M+H) + .

112481 66

Valmistus 69 4-metyyli-l-[N-(3-metyyli-2,3,4,5-tetrahydro-lH-3-bentsatsepiini-7-sulfonyyli)-3-amidino-(S)-fenyy-lialanyyli]-1,2,3,6-tetrahydropyridiini-2(R)-kar-^ boksyylihappoetyyliesterivetykarbonaatti

Saatiin valmistuksesta 56 valkoisena kiinteänä aineena. Rf o,15 (SS 24). Havaittu: C 57,68; H 6,78; N 10,85. Yhdiste C30H39N5O3S; H2C03 edellyttää: C 57,84; H 6,42; N

10,88 %.

10 Valmistus 70 1- [N- (1 (R, S) -metoksimetyyli-2-metyyli-l ,2,3,4-tet-rahydroisokinoliini-7-sulfonyyli)-3-amidino-(S)-fenyylialanyyli]-4-metyyli-l,2,3,6-tetrahydropyri-diini-2(R)-karboksyylihappoetyyliesterivetykarbo- 10 naatti

Saatiin valmistuksesta 57 valkoisena vaahtona. Rf 0,40 (SS 24). Havaittu: C 56,29; H 6,51; N 10,13. Yhdiste C3iH4iN506S; H2CO3; 0,50 H20 edellyttää: C 56,29; H 6,49; N 10,26 %.

20 Valmistus 71 1-{N- [1 (R, S) - (Ν,Ν-dimetyylikarbamoyylimetyyli) -2-metyyli-1,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-7-sulfonyy-li]-3-amidino-(S)-fenyylialanyyli}-4-metyyli-l,2,- * 3,6-tetrahydropyridiini-2(R)-karboksyylihappoetyy- * > : 25 liesterivetykarbonaatti ; Saatiin valmistuksesta 58 valkoisena amorfisena

: jauheena. Rf 0,32 (SS 24). Havaittu: C 56, 64; H 6,71; N

11,54. Yhdiste C33H44N6O6S; H2C03; 0,30 CH3C02CH2CH3 edellyt-tää: C 57,03; H 6,58; N 11,34 %.

112481 67

Valmistus 72 4-metyyli-1-[N-(2,5-dimetyyli-l,2,3,4-tetrahyd-roisokinoliini-8-sulfonyyli)-3-amidino-(S)-fenyy-lialanyyli]-1,2,3,6-tetrahydropyridiini-2(R)-kar-5 boksyylihappoetyyliesterivetykarbonaatti

Saatiin valmistuksesta 59 valkoisena amorfisena jauheena. Rf 0,68 (SS 24). Havaittu: C 56,23; H 6,63; N

10,72. Yhdiste C3iH4iN508S; H2C03; H20 edellyttää: C 56,26; H 6,55; N 10,58 %.

10 Valmistus 73 4-etyyli-l-[N-(2-metyyli-l,2,3,4-tetrahydroisokino-liini-7-sulfonyyli)-3-amidino-(S)-fenyylialanyyli]- 1,2,3,6-tetrahydropyridiini-2(R,S)-karboksyylihap-poe tyy1ies terihydrokloridi 15 Saatiin valmistuksesta 60 värittömänä kiinteänä ai neena. Rf 0,21 (SS 25). Havaittu: C 55,44; H 6,54; N 10,45. Yhdiste C3oH39N505S; HC1; 0,50 CH2C12 edellyttää: C 55,21; H 6,19; N 10,55 %.

Valmistus 74 20 4-metyyli-l-(N-[3-(2-propyyli)-2,3,4,5-tetrahydro- lH-3-bentsatsepiini-7-sulfonyyli]-3-amidino-(S)-fenyylialanyyli}-1,2,3,6-tetrahydropyridiini-2(R)-karboksyylihappoetyyliesterivetykarbonaatti >' · : Saatiin valmistuksesta 61 valkoisena vaahtona. Rf ·:·: 25 0,34 (SS 24). m/e 610 (M+H)+.

Valmistus 75 . ·, 1-{N-[3-dimetyyliamino-l-propyyli)-2,3,4,5-tetra hydro-lH-3-bentsatsepiini-7-sulfonyyli]-3-amidino- (S)-fenyylialanyyli}-4-metyyli-l,2,3,6-tetrahydro ’,, 30 pyridiini-2 (R) -karboksyylihappoetyyliesterive- tykarbonaatti ; : : Saatiin valmistuksesta 62 valkoisena vaahtona. Rf ; 0,30 (SS 24). m/e 653 (M+H)+.

βΛ 1 12481 bo

Valmistus 76 1-[N-(2-bentsyyli-l,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-7-sulfonyyli)-3-amidino-(S)-fenyylialanyyli]-4-metyyli-1,2,3,6-tetrahydropyridiini-2(R)-karbok-5 syylihappoetyyliesterivetykarbonaatti

Saatiin valmistuksesta 63 valkoisena vaahtona. Rf 0,49 (SS 24). m/e 644 (M+H)+.

Valmistus 77 4-metyyli-l-[N-(2-metyyli-l,2,3,4-tetrahydroisoki-10 noliini-7-sulfonyyli)-3-amidino-(S)-fenyylialanyy li] -1,2,3,6-tetrahydropyridiini-2(S)-karboksyyli-happoetyyliesterivetykarbonaatti

Saatiin valmistuksesta 64 valkoisena kiinteänä aineena. Rf 0,13 (SS 9). m/e 568 (M+H)+.

15 Valmistus 78 4-metyyli-l-{N-[2-(2-propyyli)-1,2,3,4-tetrahyd-roisokinoliini-7-sulfonyyli]-3-amidino-(S)-fenyylialanyyli} -1 ,2,3,6-tetrahydropyridiini-2(R)-kar-boksyylihappoetyyliesterivetykarbonaatti 20 Saatiin valmistuksesta 65 vaahtona. Rf 0,10 (SS 9).

m/e 596 (M+H)+.

Valmistus 79 : 4(R)-metyyli-1-[N-(2-metyyli-l,2,3,4-tetrahydroiso- kinoliini-7-sulfonyyli)-3-amidino-(R,S)-fenyyliala-f : 25 nyyli]piperidiini-2(R)-karboksyylihappoetyylieste- : rikarbonaatti . Saatiin valmistuksesta 66 valkoisena amorfisena jähmeänä aineena saostamalla asetonitriilistä käyttäen eet-.. ^ teriä. Rf 0,10 (SS 3). Havaittu: C 58,05; H 6,59; N 11,35.

‘ ’ 30 Yhdiste C29H39N5O5; 0,50 H2C03; 0,50 H20 edellyttää: C 58,11; H 6,78; N 11,48 %.

69 1 12 4 81

Valmistus 80 4-metyyli-l-[N-(2-metyyli-1,2,3,4-tetrahydroisoki-noliini-7-sulfonyyli)-3-(2-amidino-4-pyridyyli)- (S)-alanyyli]-1,2,3,6-tetrahydropyridiini-2(R)-kar-5 boksyylihappoetyyliesterihydrokloridi

Natriuinmetallia (30 mg, 1,3 mmol) lisättiin sekoitettavaan liuokseen, jossa 4-metyyli-l-[N-(2-metyyli- 1,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-7-sulfonyyli)-3-(2-syaani-4-pyridyyli)-(S)-alanyyli]-1,2,3,6-tetrahydropyridiini-2(R)-10 karboksyylihappoetyyliesteriä (valmistus 54; 243 mg,

0,44 mmol) etanolissa (4 ml) huoneenlämpötilassa. Yhden tunnin kuluttua lisättiin ammoniumkloridia (140 mg, 2,6 mmol) ja tulokseksi saatua seosta sekoitettiin 18 tunnin ajan ja sitten se suodatettiin. Suodoksen haihduttaminen 15 alennetussa painessa ja sen jälkeen jäännöksen puhdistaminen kromatografiän avulla käyttäen silikageeliä ja eluoiden dikloorimetaanin/metanolin/O,880 ammoniakin vesiliuoksen seoksella (90:10:1) tuottivat otsikon yhdisteen (176 mg) vaahtona. Rf 0,21 (SS 13). Havaittu: C 55, 64; H 6,31; N

20 13,47. Yhdiste C28H36N6O5S; HC1 edellyttää C 55,56; H 6,16; N

13,88 %.

Valmistus 81 4-metyyli-l-[N-(l,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-7-sulfonyyli)-3-amidino-(S)-fenyylialanyyli]-1,2,3,6-25 tetrahydropyridiini-2(R,S)-karboksyylihappoetyyli- esterivetykarbonaatti

Sekoitettava, jäällä jäähdytetty liuos, jossa oli 4-metyyli-l-[N-(2-trifluoriasetyyli-1,2,3,4-tetrahydroiso-kinoliini-7-sulfonyyli)-3-syaani-(S)-fenyylialanyyli]-1,2,-30 3,6-tetrahydropyridiini-2(R,S)-karboksyylihappoetyylieste- '· ’ riä (valmistus 43; 504 mg, 0,8 mmol) kuivassa etanolissa (6 ; : : ml), kyllästettiin kloorivedyllä, pantiin jääkaappiin 20 ; tunnin ajaksi ja sitten haihdutettiin alennetussa painees- sa. Jäännös liuotettiin kuivaan etanoliin (10 ml), liuos * ^ 35 haihdutettiin alennetussa paineessa ja tulokseksi saatu valkoinen vaahto liuotettiin kuivaan etanoliin (25 ml). Tä- 70 112451 tä liuosta sekoitettiin palautusjäähdyttäen samalla kyllästäen se ammoniakilla ja sitä kuumennettiin palautusjäähdyt-täen 4 tunnin ajan, minkä jälkeen se haihdutettiin alennetussa paineessa. Jäännös liuotettiin veteen ja liuos pes-5 tiin eetterillä, tehtiin emäksiseksi 1 M natriumhydroksidin vesiliuoksella ja uutettiin dikloorimetaanilla. Uute pestiin kyllästetyllä suolaliuoksella, kuivattiin (MgSCg) ja haihdutettiin alennetussa paineessa, jolloin saatiin otsikon yhdiste (435 mg) valkoisena kiinteänä aineena. Rf 0,15 10 (SS 13). Havaittu: C 54,73; H 6,07; N 11,04. Yhdiste C28H35N5O5S; H2CO3; H20 edellyttää C 54,96; H 6,20; N 11,05 %.

Biologinen aktiivisuus

Seuraavassa taulukossa esitetään joidenkin keksinnön yhdisteiden estävä aktiivisuus trombiinia, trypsiiniä 15 ja plasmiinia vastaan.

Taulukko

Ki (M)

Esimerkki Trombiini Trysiini Plasmlini 2 0 2 3.9 x 10~9 5,7 x 10“8 6.1 X 10"6 5 2,2 x 10'9 5.4 x 10*8 6.0 x 10’6 ·’ 8 6,4 x 10*9 4,0 x 10"8 1,8 x 10-6 10 1,0 x 10‘9 4,8 x 10-8 1,8 x 10'7 ’ ’ 13 4,0 x 10‘9 4,9 x 10'8 1,2 x 10'5

\ ; ’ 15 7,8 x 10*8 3.2 x 10‘7 1.4 x 10"S

·, · 25

Turvallisuusprofiili

Useita keksinnön yhdisteitä on tutkittu käyttämällä ,, moninkertaisia annoksia 30 mg:aan saakka/kg laskimonsisäi- « ' > • ‘ 30 sesti hiirellä ja 20 mg:aan saakka/kg laskimonsisäisesti ‘ rotalla yhdisteiden osoittamatta merkkiä haitallisesta myr- : - ; kyllisyydestä.

Claims (11)

71 Ί ΊΟ/ΟΊ I I Ζ4ό i

1. Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisen yhdisteen valmistamiseksi, jolla on kaava „2 „3 \ !) (I) rV(Ch2)„^-/" >=/ y r,-nx X^R iCj ° CO 2h 5 jossa X on CH tai N; Y on mahdollisesti monotyydyttymätön C3-5~alkyleeni, 10 joka on mahdollisesti substituoitu Ci-4-alkyylillä tai mety-leenillä; R1 on H, Ci-4-alkyyli, joka on mahdollisesti substituoitu Ci-4-alkoksilla, OH-ryhmällä, NR5R6-ryhmällä, CONR5R6-; ryhmällä, C3-6-sykloalkyylillä tai aryylillä, tai C3-6- !’ . 15 alkenyyli; R2 on H, Ci-4-alkyyli, joka on mahdollisesti substi-; tuoitu Ci-4-alkoksilla, OH-ryhmällä, NR5R6-ryhmällä, CONR5R6- ryhmällä, C3-6-sykloalkyylillä tai aryylillä, tai CONR5R6; ’ R3 ja R4 on valittu kumpikin toisistaan riippumatta * ' 20 H-atomista, Ci-4-alkyylistä, joka on mahdollisesti substitu oitu NR5R6-ryhmällä, Ci-4-alkoksista, halogeenista, CONR5R6-ryhmästä ja aryylistä; : R5 ja R6 on valittu kumpikin toisistaan riippumatta 'H-atomista ja Ci-4-alkyylistä; ja 1 25 m ja n ovat kumpikin toisistaan riippumatta 1, 2 ; tai 3; ‘ : jolloin aryyli merkitsee fenyyliä, joka on mahdol- ' : lisesti substituoitu yhdellä, kahdella tai kolmella substi- tuentilla, joka on itsenäisesti Ci-4-alkyyli, Ci-4-alkoksi, 112481 72 OH, halogeeni tai CF3, jolloin halogeeni merkitsee fluoria, klooria, bromia tai jodia, tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävän suolan tai kummankin kokonaisuuden farmaseuttisesti hyväksyttävän sol-5 vaatin valmistamiseksi, tunnettu siitä, että hydrolysoidaan hapon tai emäksen katalysoimana yhdiste, jolla on kaava hn^nh* R2 tr*li \ ^ R (II) r>-nx ^(CH^Y^sc^NH ΥγΝγ-^ ° co2r® 10 jossa R8 on Ci-3-alkyyli ja X, Y, R1, R2, R3, R4, m ja n ovat kuten edellä tässä patenttivaatimuksessa on määritelty; ja sen jälkeen muodostetaan mahdollisesti halutun tuotteen farmaseuttisesti hyväksyttävä suola tai jomman kumman koko-, naisuuden farmaseuttisesti hyväksyttävä solvaatti.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että se toteutetaan emäksen katalysoimana vesipitoisessa väliaineessa, mahdollisesti tuki-liuottimen läsnä ollessa, lämpötilassa, joka on noin huojui neen lämpötilasta noin 100 °C:seen. :: 20

3. Patenttivaatimuksen 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että emäs on alkalimetallihydroksi-di. * I

4. Patenttivaatimuksen 3 mukainen menetelmä, • tunnettu siitä, että emäs on natriumhydroksidi, tu- » 1 1 '.f 25 kiliuotin on 1,4-dioksaani ja reaktio toteutetaan suunnil- leen huoneen lämpötilassa. :v,

5. Jonkin patenttivaatimuksista 1-4 mukainen me- , ; netelmä, tunnettu siitä, että R8 on metyyli tai etyyli. 73 Ί <1 O ,1 Q Ί I I z. 4 o I

6. Jonkin patenttivaatimuksista 1-5 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että kaavan I mukaisen yhdisteen edullisella stereoisomeerilla, joka on tuotettu kaavan II mukaisen yhdisteen vastaavasta stereoisomee- 5 rista, on kaava hn^NHz Hk./ R>-NV ™ v(CH2)rfr^xso2NH ° co2h

7. Patenttivaatimuksen 6 mukainen menetelmä, tun nettu siitä, että Y on monotyydyttymätön C3-5- 10 alkyleeni, joka on substituoitu metyylillä tai etyylillä; R1 on H tai Ci-4-alkyyli, joka on mahdollisesti substituoitu NR5R6-ryhmällä tai fenyylillä; R2 on H tai Ci-2-alkyyli, joka on substituoitu Ci-4-alkoksilla, NR5R6-ryhmällä tai CONR5R6-: ryhmällä, tai CONR5R6; R3 ja R4 on valittu kumpikin toisis- : 15 taan riippumatta H-atomista, metyylistä, CH2NR5R6-ryhmästä, ; metoksista, CONR5R6-ryhmästä ja fenyylistä; R5 ja R6 on va- littu kumpikin toisistaan riippumatta H-atomista ja metyylistä; ja X, m ja n ovat kuten edellä patenttivaatimuksessa 1 on määritelty.

8. Patenttivaatimuksen 7 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että tuotetaan yhdiste, jolla on ' kaava * » » 1 112481 74 hn^nh* >x (IB) 1¾^7 V(CH2)(iis/^'so2NH'^)Y CR)i O' co2h jossa R1 on metyyli, etyyli, 2-propyyli, 3-dimetyyliamino-l-propyyli tai bentsyyli; R2 on H, CH2OCH3 5 tai CH2CON (CH3) 2; R7 on metyyli tai etyyli; m on 1 tai 2; ja n on 1 tai 2.

9. Patenttivaatimuksen 8 mukainen menetelmä, tun nettu siitä, että tuotettu kaavan IB mukainen yhdiste on 10 4-metyyli-l-[N-(2-metyyli-l,2,3,4-tetrahydroiso- kinoliini-7-sulfonyyli)-3-amidino-(S)-fenyylialanyyli]- 1,2,3,6-tetrahydropyridiini-2(R)-karboksyylihappo; 4-metyyli-l-[N-(3-metyyli-2,3,4,5-tetrahydro-lH-3-bentsatsepiini-7-sulfonyyli)-3-amidino-(S)-fenyyliala-15 nyyli]-1,2,3,6-tetrahydropyridiini-2(R)-karboksyylihappo; tai '. · 't 1-{N-[3-dimetyyliamino-l-propyyli)-2,3,4,5-tetra- hydro-lH-3-bentsatsepiini-7-sulfonyyli]-3-amidino-(S)-fenyylialanyyli}-4-metyyli-l,2,3,6-tetrahydropyridiini-' 20 2 (R)-karboksyylihappo; tai ’ niiden farmaseuttisesti hyväksyttävä suola ja kum mankin osuuden farmaseuttisesti hyväksyttävä solvaatti. 1 i

10. Yhdiste, tunnettu siitä, että sillä on : : kaava I i I t V5 112481 m^NH* R2 //"*11 Λ R3 R'-NX ΓΓϊ <«> Χ(οη2)Υ^4ο2μη /γ'Νγ-^ o co2rö jossa R8 on Ci-3-alkyyli, ja X, Y, R1, R2, R3, R4, m ja n ovat kuten edellä on määritelty patenttivaatimuksessa 1.

11. Patenttivaatimuksen 10 mukainen yhdiste, tunnettu siitä, että R8 on metyyli tai etyyli. 76 112481