FI112213B - Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten trifluorimetyylimerkaptaani- ja merkaptoasyylijohdannaisten valmistamiseksi - Google Patents

Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten trifluorimetyylimerkaptaani- ja merkaptoasyylijohdannaisten valmistamiseksi Download PDF

Info

Publication number
FI112213B
FI112213B FI911399A FI911399A FI112213B FI 112213 B FI112213 B FI 112213B FI 911399 A FI911399 A FI 911399A FI 911399 A FI911399 A FI 911399A FI 112213 B FI112213 B FI 112213B
Authority
FI
Finland
Prior art keywords
ethyl acetate
mmol
give
mixture
product
Prior art date
Application number
FI911399A
Other languages
English (en)
Swedish (sv)
Other versions
FI911399A0 (fi
FI911399A (fi
Inventor
George C Rovnyak
Norma G Delaney
Melanie Loots
Original Assignee
Squibb & Sons Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Squibb & Sons Inc filed Critical Squibb & Sons Inc
Publication of FI911399A0 publication Critical patent/FI911399A0/fi
Publication of FI911399A publication Critical patent/FI911399A/fi
Application granted granted Critical
Publication of FI112213B publication Critical patent/FI112213B/fi

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C319/00—Preparation of thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides
    • C07C319/02—Preparation of thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides of thiols
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C323/00—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups
    • C07C323/50—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C323/51—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
    • C07C323/60—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton with the carbon atom of at least one of the carboxyl groups bound to nitrogen atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/195—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/02—Drugs for disorders of the urinary system of urine or of the urinary tract, e.g. urine acidifiers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/10—Antioedematous agents; Diuretics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/08—Vasodilators for multiple indications
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C319/00—Preparation of thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides
    • C07C319/14—Preparation of thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides of sulfides
    • C07C319/20—Preparation of thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides of sulfides by reactions not involving the formation of sulfide groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C321/00—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides
    • C07C321/02—Thiols having mercapto groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C321/04—Thiols having mercapto groups bound to acyclic carbon atoms of an acyclic saturated carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C327/00—Thiocarboxylic acids
    • C07C327/20—Esters of monothiocarboxylic acids
    • C07C327/32—Esters of monothiocarboxylic acids having sulfur atoms of esterified thiocarboxyl groups bound to carbon atoms of hydrocarbon radicals substituted by carboxyl groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/30—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D207/32—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D207/33—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D207/337—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D209/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D209/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with one carbocyclic ring
    • C07D209/04—Indoles; Hydrogenated indoles
    • C07D209/10—Indoles; Hydrogenated indoles with substituted hydrocarbon radicals attached to carbon atoms of the hetero ring
    • C07D209/18—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D209/20—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals substituted additionally by nitrogen atoms, e.g. tryptophane
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D209/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D209/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with one carbocyclic ring
    • C07D209/44—Iso-indoles; Hydrogenated iso-indoles
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/24—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D213/36—Radicals substituted by singly-bound nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/24—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D213/54—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D213/56—Amides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/24—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D213/54—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D213/59—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals with at least one of the bonds being to sulfur
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/78—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms, with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D213/79—Acids; Esters
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D231/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings
    • C07D231/54—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D231/56—Benzopyrazoles; Hydrogenated benzopyrazoles
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D257/00—Heterocyclic compounds containing rings having four nitrogen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D257/02—Heterocyclic compounds containing rings having four nitrogen atoms as the only ring hetero atoms not condensed with other rings
    • C07D257/04—Five-membered rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
    • C07D307/77—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D307/78—Benzo [b] furans; Hydrogenated benzo [b] furans
    • C07D307/79—Benzo [b] furans; Hydrogenated benzo [b] furans with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to carbon atoms of the hetero ring
    • C07D307/81—Radicals substituted by nitrogen atoms not forming part of a nitro radical
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06191—Dipeptides containing heteroatoms different from O, S, or N

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Pyrrole Compounds (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Indole Compounds (AREA)
  • Other In-Based Heterocyclic Compounds (AREA)

Description

112213
Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten trif luorimetyy-limerkaptaani- ja merkaptoasyylijohdannaisten valmistamiseksi 5 Tämän keksinnön mukaisesti esitetään menetelmä uu sien neutraalien endopeptidaasi-inhibiittoreiden valmistamiseksi. Tämän keksinnön mukaisesti valmistetuilla yhdisteillä, jotka ovat käyttökelpoisia esimerkiksi kardiovasku-laarisina aineina, on yleinen kaava 10 CF3 <CH*)n R3-S-CH2-CH-C-NH-X (I)
* O
15 jossa X on Ri - CH -(CH2)p - COOH, -(CH2)2 - COOH, - (CH2)2-/q OH,
- (CH2) 2 -tetratsolyyli, -CH-tetratsolyyli, \—S
20 I
- CH-tetratsolyyli, alempi alkyyli
V': I
e; , CH2-indolyyli tai .
•i; CH= 0 ' ; 25 T li f ] - CH - C - N--COOH; H(L1 R2 on alempi alkyyli, - CH2—' -CH2-tetratsolyyli, 30 - CH2——OH' “ CH2—~ CH2 ( ^ CH2—, 'r* oh v.: -CH2 - COOH tai i’ - CH2~indolyyli; * # i ’·* 35 n on 0 tai 1; p on 0 tai 1; ja R3 on vety tai alempi-alkyyli-C(0)-; 2 112213 jolloin menetemälle on tunnusomaista, että happokloridi, jolla on kaava CF3 5 (CH2)n r3—s—ch2—CH- CO-Cl jossa R3 ja n ovat edellä määriteltyjä, liitetään aminovä-10 lituotteeseen, jolla on kaava
H2N-X
jossa X on edellä määritelty, tai sen vetykloridisuolaan, 15 ja mahdollisesti, kun R3 on alempi-alkyyli-C(0)-, saatua tuotetta käsitellään emäksellä, jolloin saadaan kaavan I mukainen tuote, jossa R3 on vety.
Kaavan I mukaiset neutraalit endopeptidaasi-inhibiittorit ovat käyttökelpoisia kongestiivisen sydämen 20 vajaatoiminnan hoitamiseksi, verenpaineen alentamiseksi ja virtsanerityksen ja natriumin erityksen edistämiseksi anta- » » · · maila farmaseuttista koostumusta, joka sisältää kyseisiä : aineita. Kaavan I mukaisten trifluorimetyylisubstituent- tiyhdisteiden on yllättäen todettu olevan huomattavasti ak-
• I
25 tiivisempia neutraaleina endopeptidaasi-inhibiittoreina kuin merkaptaani- ja merkaptoalkanoyyliyhdisteet, joissa ei ole trif luorimetyyliryhmää .
• i «
Kun termiä "alempi alkyyli" käytetään määriteltäes-.., sä eri symboleita, se viittaa haarautumattoman tai haarau- 3 0 tuneen ketjun omaaviin radikaaleihin, joissa on enintään ’·· seitsemän hiiltä, ellei erityisesti toisin ole ilmoitettu.
:Y: Edullisilla alemmilla alkyyliryhmillä on haarautumaton tai haarautunut ketju, jossa on enintään neljä hiiltä.
Keksinnön mukaisessa menetelmässä käytetty happo- • · 35 kloridi saadaan muuttamalla karboksyylihappo, jolla on kaa- • · • · ... va 3 112213 CF3 (cn2)n
R3-S-CH2-CH-C-OH
0 5 aktivoituun muotoon happokloridiksi.
Kaavan III mukaista välituotetta voidaan käyttää vapaana emäksenä tai vetykloridisuolana.
Kaavan III mukaista välituotetta käsitellään edul-10 lisesti ensin bis(trimetyylisilyyli) trifluoriasetamidilla tai bis(trimetyylisilyyli)asetamidilla aproottisessa liuot-timessa, kuten tetrahydrofuraanissa tai asetonitriilissä, minkä jälkeen lisätään happokloridi.
Vaihtoehtoisesti reaktio toteutetaan edullisesti 15 orgaanisen emäksen, esim. trietyyliamiinin, läsnä ollessa. Aminovälituotetta III voidaan käyttää kaksi ekvivalenttia sekä reagenssina että emäksenä.
Tapauksissa, joissa aminovälituote III ei sisällä vapaata karboksyylihappoa, happokloridin ja amiinin III re-20 aktio voidaan toteuttaa myös vesiliukoisen karbodi-imidireagenssin kanssa, kuten [1-(3-dimetyyliaminopropyy-v · li)-3-etyylikarbodi-imidivetykloridin] kanssa.
V · Kaavan II mukaisia asyylitiokarboksyylihappoja ku- I ' : vataan erilaisessa kirjallisuudessa ja patenttiviittauksis- ·;· 25 sa. Esimerkiksi karboksyylihappoja, joissa n = 0, kuvataan <y>i US-patentissa 4 154 935, Ondetti et ai.
Kaavan II mukaiset välituotteet, joissa n on muu kuin nolla, voidaan valmistaa esimerkiksi kondensoimalla .. . aldehydi, jolla on kaava 30 VIII CF3 (CH2)n-i-CH0 1 1 * » · malonihapon kanssa asetyylikloridin läsnä ollessa, jolloin » · 1 saadaan yhdisteitä, joilla on kaava
I I
35 t
• M
4 112213 co2h /
IX CF3-(CH2)n-1-CH=C
nco2h
Katalyyttisellä hydrauksella käyttäen palladiumia hiilellä 5 ja Mannich-reaktiolla ja tiohappoadditiolla saadaan vastaavia kaavan II mukaisia yhdisteitä.
Edullisia tämän keksinnön mukaisesti valmistettavia yhdisteitä ovat kaavan I mukaiset yhdisteet, joissa X on f» /ν')
Jf , -CH-COOH, ^
-CH-COOH -CH-COOH
15 F» f
yCH J200E h—N
f NCH3 f -(CH2)2-/ I
-(CH2)2-COOH, -CH-COOH, -CH-COOH, N , : " <5° (Ö pO.
-CH-COOH , -CH-COOH tai » N-N ; —CH -^ Il
. 25 N—N
....: R3 on vety, 3a n on nolla tai yksi, erityisesti nolla.
.. . Kaavan I mukaiset yhdisteet, joissa on hydroksi, I t · 30 muodostavat suoloja erilaisten epäorgaanisten tai orgaanis- ’·;·* ten emästen kanssa. Ei-toksiset, farmaseuttisesti hyväksyt- ; tävät suolat ovat edullisia, vaikkakin muut suolat ovat » * :*myös käyttökelpoisia tuotteen eristämisessä tai puhdistami-sessa. Tällaisia farmaseuttisesti hyväksyttäviä suoloja • t 35 ovat mm. alkalimetallisuolat, kuten natrium-, kalium- tai • · **··' litiumsuolat, maa-alkalimetallisuolat, kuten kalsium- tai 5 112213 magnesiumsuolat, ja aminohapoista, kuten arginiinista, ly-siinistä, jne. johdetut suolat. Suolat aikaansaadaan saattamalla yhdisteen happomuoto reagoimaan ekvivalenttimäärän kanssa emästä, josta saadaan haluttu ioni väliaineessa, 5 jossa suola saostuu tai vesipitoisessa väliaineessa, ja sen jälkeen lyofilisoidaan.
Kaavan I mukaiset yhdisteet sisältävät asymmetrisiä keskuksia, joita kuvataan merkillä * kaavassa I. Siten kaavan I mukaiset yhdisteet voivat esiintyä enantiomeerisissä 10 tai diastereomeerisissä muodoissa tai niiden seoksina. Edellä kuvatuissa prosesseissa voidaan käyttää rasemaatte-ja, enantiomeerejä tai diastereomeerejä lähtöaineina. Kun valmistetaan diastereomeerisiä tuotteita, ne voidaan erottaa tavanomaisilla kromatografisilla tai fraktionaalisilla 15 kiteytysmenetelmillä.
Kaavan I mukaiset yhdisteet inhiboivat neutraalin endopeptidaasin (EC 3.4.24.11) aktiivisuutta, joka endopep-tidaasi on membraaniin sitoutunut metallopeptidaasi, jota on useissa kudoksissa, kuten mm. aivoissa ja munuaisissa.
20 Neutraali endopeptidaasi hydrolysoi peptidisidokset, jotka ovat hydrofobisten aminohappotähteiden aminopäätteen puo- * lella.
V · Rajoittamatta tämän keksinnön piiriä tiettyyn teo- • riaan tai toimintamekanismiin neutraalin endopeptidaasin 25 inhibition uskotaan johtavan eksigeenisesti annettavien tai ·,*·· endogeenisten atriaalisten natriureettipeptidien vähenty- neeseen inaktivaatioon. Siten kaavan I mukaiset yhdisteet ovat käyttökelpoisia hoidettaessa korkeaa verenpainetta, # kongestiivisen sydämen vajaatoimintaa, munuaisten vajaatoi-» * 30 mintaa tai maksakirroosia. Lisääntynyt virtsaneritys, li- *;* sääntynyt natriumin eritys ja verenpaineen alentuminen ai- V,: kaansaadaan nisäkäspotilaassa, kuten ihmisessä, antamalla noin 1 mg - noin 100 mg kg:a kohti kehon painosta vuorokau-·[ dessa, edullisesti noin 1 mg - noin 50 mg kg:a kohti kehon 35 painosta vuorokaudessa, yhtä tai useampaa kaavan I mukaista *’* neutraalia endopeptidaasi-inhibiittoria tai sen farmaseut- 6 i10017 ί \ i— L· I 0 tisesti hyväksyttävää suolaa. Kaavan I mukaiset neutraalit endopeptidaasi-inhibiittorit annetaan edullisesti oraalisesti, mutta voidaan käyttää myös parenteraalisia tapoja kuten ihonalaisesti, lihaksen sisään ja laskimonsisäisesti.
5 Päivittäinen annos voidaan antaa yhtenä annoksena, tai se voidaan jakaa 2-4 annokseen, jotka annetaan vuorokauden aikana.
Kaavan I mukaiset neutraalit endopeptidaasi- inhibiittorit voidaan myös antaa yhdistelmänä muiden veren-10 painetta alentavien aineiden kanssa. Kaavan I mukaiset neutraalit endopeptidaasi-inhibiittorit voidaan esimerkiksi yhdistää annettavaksi yhdessä angiotensiiniä muuttavan entsyymin (ACE:n) inhibiittorin kanssa, kuten kaptopriilin, zofenopriilin, fosinopriilin, enalapriilin, lisinopriilin, 15 jne. kanssa. Tällaisen yhdistelmän määrän tulisi olla sellainen, että endopeptidaasi-inhibiittorin painosuhde ACE-inhibiittoriin on noin 1:10 - noin 10:1.
Kaavan I mukaisia neutraaleja endopeptidaasi-
inhibiittoreita voidaan antaa myös yhdistelmänä ihmisen ANF 20 99-126:n kanssa. Tällainen yhdistelmä sisältäisi kaavan I
mukaista inhibiittoria noin 1 - noin 100 mg kg:a kohti ke- V * hon painosta ja ihmisen ANF-99-126:a noin 0,001 - noin V : 0,1 mg kg:a kohti kehon painosta.
»· * j * : Kaavan I mukaisia neutraaleja endopeptidaasi- *:* · * 25 inhibiittoreita tai niiden farmaseuttisesti hyväksyttäviä ·;··· suoloja voidaan myös antaa nisäkäspotHaalle, kuten ihmi- selle, inhiboimaan endogeenisten opioidipentapeptidien, i · · [Met5] -enkefaliinin (Tyr-Gly-Gly-Phe-Met) ja [Leu5] -.. . enkefaliinin (Tyr-Gly-Gly-Phe-Leu) hajoamista aivoissa tai 30 periferisissä kudoksissa.
Tästä syystä kaavan I mukaiset yhdisteet ovat käyt- • * tökelpoisia terapeuttisilla alueilla, joihin kuuluvat esi-merkiksi astman, tulehduksen, kivun, epilepsian, affektii- visten häiriöiden, dementian ja geriatrisen sekavuuden, 35 liikalihavuuden ja gastrointestinaalisten häiriöiden (eri-tyisesti ripulin ja suolen ärsytysoireyhtymän) hoito, vat- • · · 7 112213 sahapon erityksen säätely ja hyperreninemian ja leukemian hoito. Kaavan I mukaiset yhdisteet ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat voidaan sellaisenaan antaa potilaille oraalisesti tai parenteraalisesti tehokkaana määrä-5 nä, joka on päivittäisannostusalueella, joka on noin 0,1 -noin 25 mg kg:a kohti potilaan kehon painosta. Antaminen voi tapahtua kerran vuorokaudessa tai 2-4 jaettuna päivittäisenä annoksena.
Lisäksi kaavan I mukaisilla yhdisteillä, joissa X
10 on D
11
-CH-COOH
on myös angiotensiiniä muuttavaa entsyymiä inhiboiva aktiivisuus. Siten nämä kaavan I mukaiset yhdisteet ovat kak- 15 soisinhibiittoreita ja niitä voidaan käyttää terapeuttisilla alueilla, joissa angiotensiiniä muuttavan entsyymin inhibiittorien, kuten kaptopriilin, on ilmoitettu olevan käyttökelpoisia. Tällaisia alueita ovat mm. kardiovaskulaa-riset käytöt, kuten korkean verenpaineen, kongestiivisen 20 sydämen vajaatoiminnan, pre- ja post-iskeemisten myokardi- aalisten rytmihäiriöiden ja värinän, jne. hoito, sekä ha-v * vaintokyvyn parantaminen, depression ja tuskaisuuden jne.
v · hoitaminen.
j ' : Kaavan I mukaiset inhibiittorit ja muut farmaseut- :··· 25 tisesti hyväksyttävät aineosat voidaan formuloida edellä kuvattuja farmaseuttisia käyttöjä varten. Sopivia koostu-muksia oraalisesti annettaviksi ovat mm. tabletit, kapselit ja eliksiirit, ja sopivia koostumuksia parenteraalisesti ; ··. annettaviksi ovat mm. steriilit liuokset ja suspensiot.
3 0 Noin 10 - 50 mg aktiivista aineosaa seostetaan fysiologi-sesti hyväksyttävän vehikkelin, kantajan, täyteaineen, si- * | :,V deaineen, säilöntäaineen, stabilointiaineen, aromiaineen, : l jne. kanssa yksikköannosmuotoon, kuten hyväksytyn far- ;·) maseuttisen käytännön mukaan sanotaan.
• M
35 Seuraavat esimerkit valaisevat keksintöä. Lämpöti- » · » · lat on annettu Celsius-asteina.
8 112213
Esimerkki 1 1- [3,3,3-trif luori-2- (merkaptometyyli) -1-oksopro-pyyli]-L-fenyylialaniini A. N-[2-[(asetyylitio)metyyli]-3,3,3-trifluori-l-5 oksopropyyli]-L-fenyylialaniini
Fenyylialaniinia (0,825 g, 5 mmol) suspendoitiin 10 mitään metyleenikloridia, lisättiin bis(trimetyylisi-lyyli)trifluoriasetamidia (4 ml), ja seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 3 tuntia. Lisättiin vielä 4 ml bis-10 (trimetyylisilyyli)trifluoriasetamidia, ja seosta sekoi tettiin yön yli. Lisättiin vielä 4 ml bis(trimetyylisilyyli )trif luoriasetamidia ja sen jälkeen 5 ml dimetyyliform-amidia. Kaikki kiinteä aine liukeni 3 tunnin aikana, jolloin saatiin kirkas liuos, joka jäähdytettiin 5 °C:seen.
15 Lisättiin tipoittain 2-trifluorimetyyli-3-asetyylitiopro- pionyylikloridia (0,99 g, 4,22 mmol) 2 ml:ssa tetrahydro-furaania, ja seosta sekoitettiin yön yli huoneenlämpötilassa. Reaktioseos väkevöitiin kiertohaihduttimellä. Jäännökseen lisättiin vettä (20 ml), ja tätä seosta sekoitet-20 tiin 15 minuuttia, ja sen jälkeen jakouutettiin etyyliasetaatilla ja 5-prosenttisella kaliumvetysulfaatilla. Etyy-v * liasetaattiliuos pestiin suolaliuoksella ja väkevöitiin V * öljyksi. Tämä öljy kromatografoitiin käyttäen 400 ml
Merckin silikageeliä ja 40:1:1-suhteista metyleeniklori-·:·· 25 din, metanolin ja etikkahapon seosta eluenttina, jolloin saatiin otsikon A yhdiste öljynä (0,94 g, 2,6 mmol).
TLC Rf = 0,60 (20:1:1 metyleenikloridi:metanoli:etikkahap- po).
... B. 1-[3,3,3-trifluori-2-(merkaptometyyli)-l-okso- 30 propyyli]-L-fenyylialaniini *···’ Otsikon A yhdistettä (890 mg, 2,45 mmol) sekoitet- : : : tiin 0 °C:ssa käyttäen argonia suojakaasuna 1,6 ml:n kans- sa väkevää ammoniumhydroksidia ja 3,5 ml:n kanssa vettä 5 minuuttia, minkä jälkeen lisättiin 100 ml 5-prosenttista • ♦ 35 kaliumvetysulfaattia, ja saatua liuosta uutettiin etyyli- • « 9 112213 asetaatilla. Yhdistetty etyyliasetaattiuute pestiin suolaliuoksella, kuivattiin natriumsulfaatilla ja väkevöitiin keltaiseksi öljyksi, joka sitten kromatografoitiin käyttäen 300 ml Merckin silikaa ja käyttäen 40:1:1-suhteista 5 metyleenikloridin, metanolin ja etikkahapon seosta eluent-tina, jolloin saatiin otsikon diastereomeerien seos valkoisena kiinteänä aineena (120 mg), s.p. 99 °C. TLC Rf = 0, 64 (20:1:1 metyleenikloridi :metanoli:etikkahappo), [a]D = +18,6° (c = 0,5, metanoli).
10 Analyysi, laskettu yhdisteelle C13H14F3N03S 0,65 H20: C 46,89; H 4,63; N 4,21; F 17,11; S 9,63; SH 9,92;
Todettu: C 46,56; H 4,39; N 4,19; F 17,50; S 9,61; SH 10,18.
Esimerkki 2 15 1- [3,3,3-trifluori-2- (merkap tome tyyli) -1-oksopro- pyyli]-L-alaniini A. N-[2-[(asetyylitio)metyyli]-3,3,3-trifluori-l-oksopropyyli]-L-alaniini
Alaniinia (445 mg, 5 mmol) suspendoitiin 5 ml:aan 20 metyleenikloridia, lisättiin bis(trimetyylisilyyli)tri-fluoriasetamidia (4 ml), ja saatua liuosta sekoitettiin 3 V ’ tuntia huoneenlämpötilassa. Lisättiin dimetyyliformamidia • t > V · (4 ml), ja seosta sekoitettiin yön yli. Kaikki aine liu- * · · : 1 .1 keni. Lisättiin 2-trifluorimetyyli-3-asetyylitiopropionyy- ·:··: 25 likloridia (1 g, 4,26 mmol) 2 ml:ssa tetrahydrofuraania, ·;··· ja seosta sekoitettiin yön yli huoneenlämpötilassa. Reak- tioseos väkevöitiin kiertohaihduttimella. Sen jälkeen jäännöstä jakouutettiin etyyliasetaatilla ja 5-prosentti- ... sella kaliumvetysulfaatilla. Etyyliasetaattiliuos pestiin • · ‘..I 30 5-prosenttisella kaliumvetysulfaatilla ja suolaliuoksella c · **;·1 ja väkevöitiin vaaleanruskeaksi öljyksi. Tämä öljy kroma-
tografoitiin käyttäen 400 ml Merckin silikageeliä ja käyt-täen 40:1:1-suhteista metyleenikloridin, metanolin ja etikkahapon seosta eluenttina, jolloin saatiin otsikon A
• · · · • · 10 112213 yhdiste keltaisena öljynä (960 mg). TLC Rf = 0,45 (20:1:1 metyleenikloridi:metanoli:etikkahappo).
B. 1-(3,3,3-trifluori-2-(merkaptometyyli)-1-okso-propyyli]-L-alaniini 5 Otsikon A yhdistettä (960 mg, 3,3 mmol) sekoitet tiin 0 °C:ssa käyttäen argonia suojakaasuna 2,2 ml:n kanssa väkevää ammoniumhydroksidia ja 4,7 ml:n kanssa vettä 10 minuuttia, ja sen jälkeen lisättiin 5-prosenttista kalium-vetysulfaattia (100 ml). Saatua liuosta uutettiin etyyli- 10 asetaatilla. Yhdistetty etyyliasetaattiuute pestiin 5.-pro-senttisella kaliumvetysulfaatilla ja suolaliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja väkevöitiin öljyksi, joka sitten kromatografoitiin käyttäen 200 ml Merckin silika-geeliä ja käyttäen 40:1:1-suhteista metyleenikloridin, 15 metanolin ja etikkahapon seosta eluenttina, jolloin saatiin otsikon diastereomeerien seos valkoisena kiinteänä aineena (720 mg), s.p. 106 - 107 °C, TLC Rf = 0,40 (20:1:1 metyleenikloridi:metanoli:etikkahappo), [a]D = -27,1° (c = 0,73, metanoli).
20 Analyysi, laskettu yhdisteelle C7H10F3NO3S: C 34,28; H 4,11; N 5,71; F 23,24; S 13,07; SH 13,49; t
V : Todettu: C 34,52; H 4,25; N 5,76; F 23,20; S 12,76; SH
0'1 13,74.
• ' : Esimerkki 3 • i :··: 25 N-[2-[(asetyylitio)metyyli.]-3,3,3-trifluor±-l-ok- ·;· · sopropyyli]-L-fenyylialaniini, isomeeri Ä
Suspensio, jonka muodosti L-fenyylialaniini (7,60 g, 46 mmol) 45 ml:ssa kuivaa asetonitriiliä ja jota .. . sekoitettiin käyttäen argonia suojakaasuna, jäähdytettiin • · 30 0 °C:seen, ja lisättiin bis(trimetyylisilyyli)trifluori-
t I
'·;* asetamidia (24,7 ml, 92 mmol). Reaktioseosta sekoitettiin ja lämmitettiin hitaasti huoneenlämpötilaan. 4 tunnin ku-luttua käytännöllisesti katsoen kaikki aminohappo oli liu-oksessa, joka oli väriltään vaaleankeltaista. Lisättiin • · · 35 tipoittain2-trifluorimetyyli-3-asetyylitiopropionyyliklo- • · 11 112213 ridia (4,69 g, 20 mmol), joka oli liuotettu 10 ml:aan ase-tonitriiliä, noin 45 minuutin aikana 5 °C:ssa, ja sen jälkeen reaktioseoksen annettiin lämmetä huoneenlämpötilaan ja sekoitettiin yön yli. Seos haihdutettiin alipaineessa, 5 jolloin saatiin vaaleankeltaista öljyä. Öljyä jakouutet-tiin vedellä (75 ml) ja etyyliasetaatilla (100 ml). Koko seos suodatettiin valkoisen sakan (fenyylialaniinin) poistamiseksi, ja orgaaninen kerros erotettiin. Vesifaasia uutettiin vielä kerran 50 ml:11a etyyliasetaattia. Yhdis-10 tetty etyyliasetaattiuute pestiin suolaliuoksella, kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin, jolloin saatiin 20,1 g raakatuotteena diastereomeerien seosta vaaleankeltaisena kiinteänä aineena. 2,0 g:n erä tuotetta flash-kromatografoitiin silikageelillä (125:1, 15 silikageeli:yhdiste) käyttäen etyyliasetaatin, heksaanien ja etikkahapon seosta (100:100:1) eluenttina, jolloin saatiin 0,370 g nopeammin eluoituvaa diastereomeeriä (isomeeriä A) ja 0,383 g hitaammin eluoituvaa diastereomeeriä (isomeeriä B). Jäljelle jäänyt 18,1 g raakatuotetta flash-20 kromatografoitiin samalla tavoin, jolloin saatiin 2,67 g isomeeriä A ja 2,92 g isomeeriä B. Isomeerin A yhdistetty • i v ’ saanto oli 3,04 g valkoisena kiteisenä kiinteänä aineena, •V ·' s.p. 183 - 185 °C, TLC Rf = 0,30 (200:100:1, etyyliasetaat- «· · • ti:heksaanit:etikkahappo), [a]D = -98,8° (c = 1,00, meta- *: *': 25 noli).
·;·· Analyysi, laskettu yhdisteelle C15H16F3no4S: C 49,58; H 4,44; N 3,86; F 15,69; S 8,82;
Todettu: C 49,63; H 4,35; N 3,70; F 15,35; S 8,81.
·. · Esimerkki 4 • ♦ · • » 30 N-[2-[ (asetyylitio)metyyli]-3,3,3-trifluori-l-ok-
• I
sopropyyli]-L-fenyylialaniini, isomeeri B
• *
Esimerkin 3 raakatuotteena saatu diastereomeerien seos (20,1 g) flash-kromatografoitiin silikageelillä ./ (125:1, silikageeli:yhdiste) käyttäen etyyliasetaatin, • » · 35 heksaanien ja etikkahapon seosta (100:100:1) eluenttina, * »
I I I
12 112213 jolloin saatiin hitaammin eluoituvaa isomeeriä (isomeeriä B) 0,38 g ja 2,92 g. 2,92 g:n erää trituroitiin heksaanien kanssa, joissa oli 10 % etyyliasetaattia, ja valkoinen kiteinen kiinteä aine suodatettiin, jolloin saatiin 0,72 g 5 ainetta. Suodos väkevöitiin, jolloin saatiin 2,1 g ainetta, joka flash-kromatografoitiin kuten edellä on kuvattu, jolloin saatiin suunnilleen 1,3 g ainetta, joka yhdistettiin 0,38 g:n ja 0,72 g:n erien kanssa ja haihdutettiin metanolista, jolloin saatiin 2,20 g otsikon yhdistettä, 10 isomeeriä B, valkoisena kiteisenä kiinteänä aineena, s.p.
134 - 136 °C, TLC Rf = 0,14 (200:100:1, etyyliasetaat ti :heksaanit:etikkahappo), [a]D = +118° (c = 1,00, metano-li).
Analyysi, laskettu yhdisteelle C15H16F3N04S: C 49,58; H 4,44; 15 N 3,86; F 15,69; S 8,82;
Todettu: C 49,58; H 4,33; N 3,78; F 15,44; S 8,54.
Esimerkeissä 5 ja 6 kuvataan esimerkin 1 diastereo-meerien seosta vastaavien yksittäisten diastereomeerien, isomeerien A ja B, valmistus.
20 Esimerkki 5 N-[3,3,3-trif luori-2- (merkap tome tyyli) -1-oksopro- • ·
• ‘ ’ pyyli]-L-fenyylialaniini, isomeeri A
'.* · Suspensiota, jonka muodosti esimerkin 3 otsikon • * · • ',·* yhdiste, isomeeri A (500 mg, 1,37 mmol) 0,9 ml:ssa väkevää 25 ammoniumhydroksidia ja 2 ml:ssa vettä, sekoitettiin huo- *; ·*: neenlämpötilassa käyttäen argonia suojakaasuna 5-6 mi- nuuttia, jona aikana muodostui kirkas liuos. Liuosta käsiteltiin 50 ml:11a 5-prosenttista kaliumvetysulfaattiliuos-ta, ja saatua vesipitoista liuosta uutettiin neljällä
• I
*..! 30 25 ml:n erällä etyyliasetaattia. Yhdistetty etyyliasetaat- • · '!* tiuute kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla ja V.: haihdutettiin, jolloin saatiin 0,43 g raakatuotetta.
: _ Flash-kromatografoitiin silikageelillä (125:1, silikagee- li:yhdiste) CH2Cl2:n, CH30H:n ja H0Ac:n seoksen (40:1:1) • · · 35 kanssa, jolloin saatiin 370 mg tuotetta. Samalla tavoin • · 13 112213 deasyloitiin vielä 2,30 g (6,3 mmol) esimerkin 3 otsikon yhdistettä, isomeeriä A, ja puhdistettiin flash-kromato-grafiällä, jolloin saatiin 2,00 g tuotetta. Nämä kaksi tuotetta yhdistettiin, ja saatua kiinteää ainetta tritu-5 roitiin heksaanien kanssa ja muutaman tipan kanssa eetteriä. Liuotin dekantoitiin pois, ja kiinteä aine kuivattiin tyhjössä, jolloin saatiin 1,79 g otsikon yhdistettä valkoisena kiteisenä kiinteänä aineena, s.p. 133 - 134,5 °C, TLC Rf =0,30 (40:1:1, metyleenikloridi:metanoli:etikkahap-10 po), [a]D = -8,1° (c = 1,00, metanoli).
Analyysi, laskettu yhdisteelle C13H14F3N03S: C 48,59; H 4,39; N 4,36; F 17,74; S 9,98; SH 10,29;
Todettu: C 48,47; H 4,26; N 4,30; F 17,49; S 10,34; SH 10,57.
15 Esimerkki 6
N- [3,3,3-tri fluori-2- (merkap tome tyyli) -1-oksopro-pyyli]-L-fenyylialaniini, isomeeri B
Suspensiota, jonka muodosti esimerkin 4 otsikon yhdiste, isomeeri B (2,05 g, 5,64 mmol) 3,6 ml:ssa väkevää 20 ammoniumhydroksidia ja 8,0 ml:ssa vettä, sekoitettiin käyttäen argonia suojakaasuna 7-10 minuuttia. Kirkas • · V 1 vaaleankeltainen liuos tehtiin happamaksi vesipitoisella V · 5-prosenttisella kaliumvetysulfaattiliuoksella pH-arvoon • · · • ‘ i 2, ja uutettiin neljällä 50 ml:n erällä etyyliasetaattia.
25 Yhdistetty orgaaninen uute pestiin 50 ml:11a suolaliuosta, ;··· kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla, ja liuotin poistettiin alipaineessa, jolloin saatiin 1,87 g keltaista kiinteää ainetta. Raakatuote flash-kromatografoitiin sili-kageelillä (130:1, silikageeli:yhdiste) käyttäen CH2Cl2:n,
« I
*.,! 30 CH30H:n ja H0Ac:n seosta (50:1:1) eluenttina, jolloin saa- * · *;1 tiin 1,70 g otsikon yhdistettä valkoisena kiinteänä ainee- na, s.p. 148 - 150 °C, TLC Rf = 0,29 (40:1:1, metyleeniklo- */’1: ridi:metanoli:etikkahappo), [a]D = +49,2° (c = 1,00, meta- .·’ noli).
• 1 » · • ♦ * ♦ » 14 112213
Analyysi, laskettu yhdisteelle C13H14F3N03S: C 48,59; H 4,39; N 4,36; F 17,74; S 9,98; SH 10,29;
Todettu; C 48,43; H 4,10; N 4,21; F 17,42; S 10,27; SH 10,09.
5 Esimerkki 7
N- [2 - [ (asetyylitio)metyyli] -3,3,3-trifluori-l-ok-sopropyyli]-L-tryptofaani, isomeeri A
Suspensio, jonka muodosti L-tryptofaani (4,08 g, 20 mmol) 50 ml:ssa kuivaa asetonitriiliä ja jota sekoitet-10 tiin käyttäen argonia suojakaasuna, jäähdytettiin 0 -5 °C;seen, ja lisättiin bis(trimetyylisilyyli)trifluori-asetamidia (5,3 ml, 20 mmol). Reaktioseosta sekoitettiin ja lämmitettiin huoneenlämpötilaan. 3 tunnin kuluttua liuos jäähdytettiin 5 °C:seen, ja siihen lisättiin vähi-15 telien 45 minuutin aikana 2-trifluorimetyyli-3-asetyyli-tiopropionyylikloridin (4,69 g, 20 mmol) liuosta 7 ml:ssa asetonitriiliä. Reaktioseosta sekoitettiin yön yli, ja lämmitettiin vähitellen huoneenlämpötilaan. Liuotin haihdutettiin, ja keltaista öljymäistä jäännöstä jakouutettiin 20 etyyliasetaatilla (50 ml) ja vedellä (35 ml). Vesifaasia uutettiin edelleen etyyliasetaatilla (3 x 50 ml), ja yh- » · V * distetty etyyliasetaattiuute pestiin suolaliuoksella, kui- V* vattiin (MgS04) ja haihdutettiin, jolloin saatiin 14,15 g | ‘ keltaista öljymäistä jäännöstä. 12,25 g:n erä tätä tuotet- ·:**: 25 ta flash-kromatografoitiin silikageelillä (120:1, silika- ·;··· geeli: yhdiste) käyttäen etyyliasetaatin, heksaanien ja .*j*. etikkahapon seosta (150:100:1), jolloin saatiin 1,9 g no- peammin eluoituvaa diastereomeeriä (isomeeriä A), 4,2 g j. . molempia diastereomeerejä ja 1,5 g hitaammin eluoituvaa » · 30 diastereomeeriä (isomeeriä B). Eluoitiin edelleen etyyli- • · asetaatin, heksaanien ja etikkahapon seoksella (200:100:1), jolloin saatiin lisäksi 170 mg isomeeriä B. Sekafraktiot kromatografoitiin uudelleen käyttäen samoja olosuhteita, jolloin saatiin 1,65 g isomeeriä A ja 1,76 g 35 isomeeriä B. 1,9 g:n ja 1,65 g:n erät isomeeriä A yhdis- * · * · · 15 112213 tettiin ja uudelleenkiteytettiin tolueenista, jolloin saatiin 2,8 g luonnonvalkoista kiteistä kiinteää ainetta. Vielä 360 mg:n erä isomeeriä A (saatu flash-kromatografoi-malla 1,5 g raakatuotetta) uudelleenkiteytettiin toluee-5 nista, jolloin saatiin 260 mg valkoista kiteistä kiinteää ainetta; otsikon yhdisteen isomeerin A kokonaissaanto oli 3,06 g; s.p. 140 - 143 °C, TLC Rf = 0,46 (300:100:1, etyyliasetaatti :heksaanit:etikkahappo), [a]D = -96,0° (c = 1,00, metanoli).
10 Analyysi, laskettu yhdisteelle C17H17F3N204S: C 50,74; H
4,26; N 6,96; F 14,16; S 7,97;
Todettu: C 50,47; H 4,04; N 6,86; F 13,82; S 8,18.
Esimerkki 8
N- [2- [ (asetyylitio)metyyli] -3,3,3-trifluori-l-ok-15 sopropyyli]-L-tryptofaani, isomeeri B
Esimerkin 7 yhdistetty isomeeri B (3,62 g) uudelleenkiteytettiin tolueenista, jolloin saatiin 2,56 g otsikon yhdistettä, isomeeriä B, jauhemaisena valkoisena kiinteänä aineena; s.p. 148 - 151 °C, TLC Rf = 0,35 20 (300:100:1, etyyliasetaatti:heksaanit:etikkahappo), [a]D = +110,6° (c = 1,00, metanoli).
V ' Analyysi, laskettu yhdisteelle C17H17F3N204S 0,1 H20: C 50,51; V : H 4,29; N 6,93; F 14,10; S 7,93; j’\: Todettu: C 50,67; H 4,08; N 6,62; F 13,72; S 7,82.
’: ·: 25 Esimerkki 9 ·;··· N- [3,3,3-trif luori-2 - (merkaptometyyli) -1-oksopro-
pyyli]-L-tryptofaani, isomeeri A
Suspensiota, jonka muodosti esimerkin 7 tuote :Vi (2,6 g, 6,5 mmol) 4,25 ml:ssa väkevää ammoniumhydroksidia 30 ja 9,3 ml:ssa vettä, sekoitettiin huoneenlämpötilassa • · käyttäen argonia suojakaasuna 12 - 15 minuuttia. Muodostuin: nut liuos tehtiin happamaksi 200 ml:11a 5-prosenttista kaliumvetysulfaattia ja uutettiin etyyliasetaatilla (5 x 50 ml). Yhdistetty etyyliasetaattiuute pestiin suolaliuok- • · · 35 sella, kuivattiin (MgS04) ja haihdutettiin, jolloin saatiin • · • · · 16 112213 2,4 g vaaleankeltaista kiinteää ainetta. Tämä aine yhdistettiin vielä 80 mg:n kanssa yhdistettä ja flash-kromato-grafoitiin käyttäen 300 g silikageeliä ja eluoiden mety-leenikloridin, metanolin ja etikkahapon seoksella 5 (40:1:1), jolloin saatiin 2,3 g valkoista kiinteää ainet ta. Tätä kiinteää ainetta trituroitiin tolueenin kanssa, joka sisälsi suunnilleen 5 % etyyliasetaattia, ja 1,25 g valkoista kiteistä kiinteää ainetta otettiin talteen suodattamalla. Suodos haihdutettiin kuiviin, ja jäännöstä 10 trituroitiin samalla tavoin, jolloin saatiin vielä 560 mg ainetta, joka yhdistettiin ensiksi saadun 1,25 g:n erän kanssa, jolloin saatiin 1,81 g otsikon yhdistettä, isomeeriä A, valkoisena kiteisenä kiinteänä aineena; s.p.
148,5 - 150,5 °C, TLC Rf = 0,48 (300:100:1, etyyliasetaat-15 ti:heksaanit:etikkahappo), [a]D = -10,3° (c = 1,00, metano-li).
Analyysi, laskettu yhdisteelle C15H15F3N203S: C 49,99; H
4,20; N 7,78; F 15,82; S 8,90; SH 9,18;
Todettu: C 49,98; H 3,96; N 7,54; F 15,42; S 9,12; SH 20 9,38.
Esimerkki 10 • · * N-[3,3,3-trifluori-2-(merkaptometyyli)-1-oksopro-
V · pyyli]-L-tryptofaani, isomeeri B
4 · · j * : Suspensiota, jonka muodosti esimerkin 8 tuote ·;"* 25 (2,41 g, 5,99 mmol) 3,75 ml:ssa väkevää ammoniumhydroksi- ·;·· dia ja 8,25 ml:ssa vettä, sekoitettiin huoneenlämpötilassa käyttäen argonia suojakaasuna 12 - 15 minuuttia. Muodos- tunut liuos tehtiin happamaksi 200 ml:11a 5-prosenttista .. . kaliumvetysulfaattia ja uutettiin etyyliasetaatilla • · 30 (5 x 50 ml). Yhdistetty etyyliasetaattiuute pestiin suola- liuoksella, kuivattiin (MgS04) ja haihdutettiin, jolloin • · : saatiin 2,3 g keltaista kumimaista kiinteää ainetta.
Flash-kromatografoitiin käyttäen 315 g silikageeliä ja • · · eluoiden metyleenikloridin, metanolin ja etikkahapon seok- • > · » · • « » · · 35 sella (40:1:1), jolloin saatiin 2,1 g vaaleankeltaista 17 112213 lasimaista jäännöstä, jota trituroitiin tolueenin kanssa, joka sisälsi suunnilleen 5 % etyyliasetaattia, jolloin saatiin 1,55 g otsikon yhdistettä, isomeeriä B, valkoisena kiteisenä kiinteänä aineena, s.p. 144 - 147 °C, TLC Rf = 5 0,44 (300:100:1, etyyliasetaatti:heksaanit:etikkahappo), [a]D = +35,8° (c = 1,00, metanoli).
Analyysi, laskettu yhdisteelle C15H15F3N203S 0,1 H20: C 49,74; H 4,23; N 7,74; F 15,74; S 8,85; SH 9,13;
Todettu: C 50,04; H 3,99; N 7,45; F 15,36; S 9,08; SH 10 9,34.
Esimerkki 11 3-[[2-[(asetyylitio)metyyli]-3,3,3-trifluori-l-ok-sopropyyli]amino]propaanihappo
Suspensio, jonka muodosti 8-alaniini (1,34 g, 15 15 mmol) 30 ml:ssa kuivaa asetonitriiliä ja jota sekoitet tiin käyttäen argonia suojakaasuna, jäähdytettiin 0 -5 °C:seen, ja lisättiin bis(trimetyylisilyyli)trifluori-asetamidia (8,0 ml, 30 mmol). Reaktioseoksen annettiin vähitellen lämmetä 6-7 °C:seen 1 tunnin aikana, jona 20 aikana kaikki aminohappo liukeni. 2-trifluorimetyyli-3- asetyylitiopropionyylikloridia (3,52 g, 15 mmol) liuotet- - · * tiin 6 ml:aan asetonitriiliä ja lisättiin tipoittain seok- V ·’ seen 5 °C:ssa 45 minuutin aikana, minkä jälkeen reaktio- I 1 » j 1 .· seosta sekoitettiin ja lämmitettiin huoneenlämpötilaan.
’i"; 25 1,5 tunnin kuluttua liuotin haihdutettiin, jäljelle jää- nyttä keltaista nestettä jakouutettiin vedellä (50 ml) ja etyyliasetaatilla (50 ml), ja orgaaninen kerros erotet- * tiin. Vesifaasia uutettiin edelleen etyyliasetaatilla (3 x 40 ml), ja yhdistetty etyyliasetaattiuute pestiin » 30 suolaliuoksella, kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaa- * · ;·1 tiliä ja haihdutettiin, jolloin saatiin 6,7 g keltaista • » ::: kiinteää ainetta. Flash-kromatografoitiin silikageelillä (100:1, silikageeli:yhdiste) käyttäen metyleenikloridin, metanolin ja etikkahapon seosta (40:1:1) eluenttina, joi- • · · 35 loin saatiin 1,62 g ainetta, joka oli TLC:n mukaan homo- · i · ta» 18 112213 geenistä, sekä 0,65 g ainetta, joka oli lähes homogeenista, ja 1,16 g ainetta, joka oli epäpuhdasta mutta sisälsi eniten haluttua tuotetta. 0,65 g:n ja 1,62 g:n eriä tuotetta trituroitiin heksaanien ja etyyliasetaatin seoksen 5 (4:1) kanssa, jolloin saatiin 2,21 g raseemista otsikon tuotetta valkoisena kiteisenä kiinteänä aineena, s.p.
114 - 116 °C, TLC Rf = 0,44 (20:1:1, metyleenikloridi^etanoli: etikkahappo).
Analyysi, laskettu yhdisteelle C9H12F3N04S: C 37,63; H 4,21; 10 N 4,88; F 19,84; S 11,16;
Todettu: C 37,62; H 4,12; N 4,83; F 19,77; S 11,38.
Esimerkki 12 (3- [ [2- (merkaptometyyli)-3,3,3-trifluori-l-oksopro-pyy1i]amino]propaanihappo 15 Suspensiota, jonka muodosti esimerkin 11 otsikon yhdiste (2,08 g, 7,24 mmol) 4,2 ml:ssa väkevää ammonium-hydroksidia ja 9,3 ml:ssa vettä, sekoitettiin huoneenlämpötilassa käyttäen argonia suojakaasuna 7-10 minuuttia, jona aikana muodostui kirkas liuos. Liuos tehtiin happa-20 maksi pH-arvoon 2 suunnilleen 200 ml:11a 5-prosenttista kaliumvetysulfaattia, ja uutettiin etyyliasetaatilla ' (5 x 50 ml). Yhdistetty etyyliasetaattiuute pestiin V · 50 ml:11a suolaliuosta, kuivattiin vedettömällä magnesium- • sulfaatilla ja haihdutettiin, jolloin saatiin 1,74 g luon- ·: i 25 nonvalkoista kiinteää ainetta. Flash-kromatografoitiin ·;*·· silikageelillä (120:1, silikageeli:yhdiste) käyttäen mety- leenikloridin, metanolin ja etikkahapon seosta (40:1:1) eluenttina, jolloin saatiin 1,50 g yhdistettä. Samalla tavoin 1,2 g saman lähtöaineen epäpuhdasta fraktiota (ni-30 mellisesti 4,2 mmol) deasyloitiin ja flash-kromatografoi-tiin, jolloin saatiin vielä 0,45 g haluttua tuotetta. Nämä kaksi tuotefraktiota yhdistettiin, jolloin saatiin 1,95 g :otsikon raseemista yhdistettä valkoisena kiteisenä kiin-teänä aineena, s.p. 108 - 110 °C, TLC Rf = 0,40 (20:1:1, • · · 35 metyleenikloridi:metanoii:etikkahappo).
• » » · 19 112213
Analyysi, laskettu yhdisteelle C7H10F3NO3S: C 34,28; H 4,11; N 5,71; F 23,24; S 13,07; SH 13,49;
Todettu; C 34,36; H 4,04; N 5,58; F 22,94; S 13,07; SH 13,64.
5 Esimerkki 13 N- [ 3,3,3- tri f luori- 2 - (merkaptometyy 1 i ) -1 -oksopro-pyyli]-L-asparagiinihappo a) N-[2-[(asetyylitio)metyyli]-3,3,3-trifluori-l-oksopropyyli]-L-asparagiinihappo 10 Suspensio, jonka muodosti L-asparagiinihappo (2,66 g, 20 mmol) 35 mltssa kuivaa asetonitriiliä ja jota sekoitettiin käyttäen argonia suojakaasuna, jäähdytettiin 0 °C:seen, ja lisättiin bis(trimetyylisilyyli)trifluori-asetamidia (10,62 ml, 40 mmol). Reaktioseosta sekoitettiin 15 ja lämmitettiin vähitellen huoneenlämpötilaan yön aikana, ja sen jälkeen lisättiin 5 ml dimetyyliformamidia, ja seosta sekoitettiin 2 tuntia. Muodostunut kirkas vaaleankeltainen liuos jäähdytettiin 5 °C:seen, ja siihen lisättiin tipoittain 2-trifluorimetyyli-3-asetyylitiopropionyy-20 likloridia (4,69 g, 20 mmol), joka oli liuotettu 6 ml:aan asetonitriiliä. Reaktioseosta sekoitettiin ja lämmitettiin V · huoneenlämpötilaan yön aikana, ja sen jälkeen liuotin v · haihdutettiin. Keltaista siirappimaista jäännöstä jako- j 1: uutettiin vedellä (50 ml) ja etyyliasetaatilla (50 ml), ja ·;··; 25 orgaaninen kerros erotettiin. Vesifaasia uutettiin edel- leen etyyliasetaatilla (3 x 50 ml), ja yhdistetty etyyli-asetaattiuute pestiin suolaliuoksella, kuivattiin (MgS04) ja haihdutettiin, jolloin saatiin 12,2 g vaaleankeltaista .. . jäännöstä. Flash-kromatografoitiin silikageelillä (125:1, 30 silikageeli:yhdiste) eluoiden etyyliasetaatin ja etikkaha- • > ’·;·* pon seoksella (15:1), jolloin saatiin 5,25 g pääfraktiota, ::: joka oli vaaleankeltaista tahmeaa kiinteää ainetta, ja 0,63 g fraktiota, joka oli TLC:n mukaan lähes homogeenis- ta, kaikkiaan 5,88 g otsikon yhdistettä diastereomeerien *,,, 35 seoksena.
• · • · 20 112213 b) N-[3,3,3-trifluori-2-(merkaptometyyli)-1-okso-propyyli]-L-asparagiinihappo
Suspensiota, jonka muodosti osan (a) tuote (4,68 g, 14,1 mmol) 8,25 ml:ssa väkevää ammoniumhydroksidia ja 5 20,6 ml:ssa vettä, sekoitettiin huoneenlämpötilassa käyt täen argonia suojakaasuna suunnilleen 10 minuuttia. Muodostunut liuos tehtiin happamaksi 400 ml:11a 5-prosenttis-ta kaliumvetysulfaattia ja uutettiin etyyliasetaatilla (4 x 75 ml). Yhdistetty etyyliasetaattiuute pestiin suola-10 liuoksella, kuivattiin (MgS04) ja haihdutettiin, jolloin saatiin 3,41 g vaaleankeltaista kiinteää ainetta. Flash-kromatografoitiin käyttäen 350 g silikageeliä ja eluoiden metyleenikloridin, metanolin ja etikkahapon seoksella (15:1:1), jolloin saatiin 2,4 g kellertävää kiinteää ai-15 netta, jota trituroitiin metyleenikloridin kanssa, joka sisälsi muutaman tipan etyyliasetaattia ja metanolia, jolloin saatiin 2,1 g otsikon yhdistettä (suunnilleen 1:1-suhteinen diastereomeerien seos) valkoisena kiteisenä kiinteänä aineena, s.p. 180 - 183 °C, TLC Rf = 0,31 20 (10:1:1, metyleenikloridi:metanoli:etikkahappo), [a]D = -1,9° (c= 1,00, metanoli).
* ‘ Analyysi, laskettu yhdisteelle C8H10F3N05S 0,25 H20: C 32,70; v ·’ H 3,60; N 4,77; F 19,40; S 10,91; SH 11,26;
• V Todettu: C 32,64; H 3,20; N 4,70; F 19,23; S 10,85; SH
·:··: 25 11,15.
;··· Esimerkki 14 ;’j*. N- [2- [ (asetyylitio)metyyli] -3,3,3-trifluori-l-ok-
sopropyyli]-L-(8)-naftyylialaniini, isomeeri A
Suspensio, jonka muodosti L-naftyylialaniini 30 (1,92 g, 8,92 ml) 40 ml:ssa asetonitriiliä ja jota sekoi- ‘1* tettiin käyttäen argonia suojakaasuna, jäähdytettiin 0 - V,* 5 °C:seen, ja lisättiin bis(trimetyylisilyyli)trifluori- l l asetamidia (4,75 ml, 17,84 mmol). Reaktioseosta sekoitet- ;·* tiin ja lämmitettiin vähitellen huoneenlämpötilaan. 1,5 * » » 35 tunnin kuluttua lisättiin vielä 2,3 ml bis(trimetyylisi- 21 112213 lyyli)trifluoriasetamidia (8,7 mmol), minkä jälkeen 20 minuutin aikana muodostui kirkas liuos. Reaktioseos jäähdytettiin 5 °C:seen, ja siihen lisättiin tipoittain 2-tri-fluorimetyyli-3-asetyylitiopropionyylikloridia (2,09 g, 5 8,92 mmol), joka oli liuotettu 6 ml:aan asetonitriiliä, ja seos lämmitettiin vähitellen huoneenlämpötilaan. Tunnin kuluttua reaktioseos haihdutettiin keltaiseksi kiinteäksi jäännökseksi, jakouutettiin vedellä (50 ml) ja etyyliasetaatilla (75 ml), ja orgaaninen kerros erotettiin. Vesi-10 pitoista kerrosta uutettiin vielä etyyliasetaatilla (3 x 45 ml), ja yhdistetty etyyliasetaattiuute pestiin suolaliuoksella, kuivattiin (MgS04), ja etyyliasetaatti poistettiin tyhjössä, jolloin saatiin 6,3 g vaaleankeltaista kiinteää jäännöstä. Tämä raakatuote flash-kromato-15 grafoitiin käyttäen 700 g silikageeliä ja eluoiden etyyliasetaatin, heksaanien ja etikkahapon seoksella (100:100:1), jolloin saatiin 1,58 g nopeasti eluoituvaa isomeeriä A ja 1,56 g hitaasti eluoituvaa isomeeriä B.
300 mg:n erä isomeeriä A kiteytettiin heksaanien ja etyy-20 liasetaatin seoksesta (2:1), jolloin saatiin 160 mg otsikon yhdistettä, isomeeriä A, valkoisena kiinteänä aineena, V · jossa oli pitkät neulamaiset kiteet, s.p. 162 - 164 °C, ·/ · TLC Rf = 0,29 (100:50:1, etyyliasetaatti:heksaani:etikka- happo), [a]D = -79,2° (c = 1,00, metanoli).
·:·'· 25 Analyysi, laskettu yhdisteelle C19H18F3N04S: C 55,20; H 4,39; N 3,39; F 13,79; S 7,76;
Todettu: C 55,02; H 4,15; N 3,29; F 13,60; S 7,54.
Esimerkki 15 » N- [2-[ (asetyylitio)metyyli] -3,3,3-trifluori-l-ok-
30 sopropyyli]-L-(B)-naftyylialaniini, isomeeri B
• · ’·;·* Esimerkin 14 tuote, isomeeri B, flash-kromatogra- foitiin jälleen käyttäen etyyliasetaatin ja etikkahapon seosta (200:1,5) ja etyyliasetaatin, heksaanien ja etik-kahapon seosta (100:50:1) eluenttina epäpuhtautena olevan \" 35 isomeerin A poistamiseksi, jolloin saatiin 1,4 g otsikon • · » · 22 112213 yhdistettä, isomeeriä B, valkoisena kiinteänä aineena, s.p. 166 - 169 °C, TLC Rf = 0,15 (100:50:1, etyyliasetaatti :heksaaniretikkahappo), [a]D = +116,3° (c = 1,00, metano-li).
5 Analyysi, laskettu yhdisteelle C19H18F3N04S: C 55,20; H 4,39; N 3,39; F 13,79; S 7,76;
Todettu: C 54,96; H 4,39; N 3,35; F 13,75; S 7,83.
Esimerkki 16
(S) -a- [ [3,3,3-trifluori-2- (merkap tome tyyli) -1-ok-10 sopropyyli]amino]-2-naftaleenipropaanihappo, isomeeri A
Suspensiota, jonka muodosti esimerkin 14 tuote (2,01 g, 4,86 mmol) 3,2 mltssa väkevää ammoniumhydroksidia ja 8,0 ml:ssa vettä, sekoitettiin huoneenlämpötilassa käyttäen argonia suojakaasuna 8 minuuttia. Kirkas liuos 15 tehtiin happamaksi 5-prosenttisella kaliumvetysulfaatti- liuoksella pH-arvoon noin 2, ja uutettiin etyyliasetaatilla (4 x 50 ml). Yhdistetty etyyliasetaattiuute pestiin suolaliuoksella, kuivattiin (MgS04) ja haihdutettiin, jolloin saatiin 1,72 g vaaleankeltaista vahamaista kiinteää 20 ainetta. Tämä raakatuote puhdistettiin flash-kromatogra- fialla käyttäen silikageeliä (150:1, silikageeli:yhdiste) '1 1 ja eluoiden etyyliasetaatin, heksaanien ja etikkahapon · seoksella (100:50:1), jolloin saatiin 1,42 g valkoista j kiteistä tuotetta, jota käsiteltiin tolueenilla ja kuivat- ·:2: 25 tiin tyhjössä, minkä jälkeen saatiin 1,24 g otsikon yhdis- tettä, isomeeriä A, valkoisena kiinteänä aineena, s.p.
165 - 167 °C, TLC Rf = 0,26 (100:50:1, etyyliasetaatti:hek-saani:etikkahappo), [a]D = +31,9° (c = 1,00, metanoli). Analyysi, laskettu yhdisteelle C17H15F3N03S: C 54,98; H 4,34; 30 N 3,77; F 15,35; S 8,63; SH 8,90;
’1:·1 Todettu: C 55,17; H 4,29; N 3,63; F 15,42; S 8,68; SH
:X: 9,18.
• · • · • » · i 2 • 1 23 112213
Esimerkki 17
(S) -a- [ [3,3,3-trifluori-2 - (mer kap tome tyyli ) -1-ok-sopropyyli]amino]-2-naftaleenipropaanihappo, isomeeri B
Liuosta, jonka muodosti esimerkin 15 tuote 5 10 ml:ssa metanolia, käsiteltiin hydroksyyliamiinivetyklo- ridin (0,552 g, 7,94 mmol) liuoksella 7,9 mlrssa 1 N nat-riumhydroksidia ja sekoitettiin huoneenlämpötilassa. Reaktio oli mennyt loppuun 35 minuutin kuluttua TLC:n mukaan. Reaktioseos haihdutettiin, saatu valkoinen kiinteä aine 10 otettiin talteen 25 ml:aan vettä ja uutettiin etyyliasetaatilla (4 x 35 ml). Yhdistetty orgaaninen uute pestiin 50 ml:11a suolaliuosta, kuivattiin (MgS04) ja haihdutettiin, jolloin saatiin 1,4 g valkoista kiinteää ainetta. Tämä raakatuote flash-kromatografoitiin silikageelillä 15 (180:1, silikageeli:yhdiste) eluoiden etyyliasetaatin, heksaanien ja etikkahapon seoksella (100:50:1), jolloin saatiin 1,24 g otsikon yhdistettä, isomeeriä B, valkoisena kiteisenä kiinteänä aineena, s.p. 172 - 179 °C. TLC Rf = 0,19 (100:50:1, etyyliasetaatti:heksaani:etikkahappo), 20 [a]D = +71,3° (c = 1,00, metanoli).
Analyysi, laskettu yhdisteelle C17H16F3N03S: C 54,98; H 4,34; 0 .* N 3,77; F 15,35; S 8,63; SH 8,90;
Todettu: C 55,02; H 4,30; N 3,55; F 15,18; S 8,64; SH 9,09.
• » 25 Esimerkki 18
N- [2- [ (asetyylitio)metyyli] -3,3,3-trif luori-l-ok-... sopropyyli]-L-leusiini, isomeeri A
Suspensio, jonka muodosti L-leusiini (2,62 g, 20 mmol) 35 ml:ssa kuivaa asetonitriiliä ja jota sekoitet- • 30 tiin käyttäen argonia suojakaasuna, jäähdytettiin 0 - • · 5 °C:seen, ja lisättiin bis(trimetyylisilyyli)trifluori-asetamidia (10,62 ml, 40 mmol). Reaktioseosta sekoitettiin samalla kun se lämmitettiin hitaasti huoneenlämpötilaan.
2 tunnin kuluttua lisättiin vielä 3,5 ml (13 mmol) bis- t * • '* 35 (trimetyylisilyyli)trifluoriasetamidia, sekoitettiin vielä 1 » • · 24 112213 tunnin ajan huoneenlämpötilassa, jolloin muodostui kirkas sitruunanvärinen liuos. Reaktioseos jäähdytettiin 0 -5 °C:seen, ja siihen lisättiin tipoittain 45 minuutin aikana 2-trifluorimetyyli-3-asetyylitiopropionyylikloridia 5 (4,69 g, 20 mmol), joka oli liuotettu 8 ml:aan asetonit- riiliä. Sekoitettiin 1,5 tuntia 0-5 °C:ssa, minkä jälkeen annettiin lämmetä huoneenlämpötilaan, ja TLC:n mukaan reaktio oli mennyt loppuun. Reaktioseos haihdutettiin alipaineessa, jolloin saatiin keltainen öljymäinen jäännös, 10 jota jakouutettiin etyyliasetaatilla (75 ml) ja vedellä (50 ml). Vesifaasia uutettiin edelleen etyyliasetaatilla (4 x 50 ml), yhdistetyt uutteet pestiin 75 ml:11a suolaliuosta, kuivattiin (MgS04) ja haihdutettiin, jolloin saatiin 10,3 g keltaista puolikiinteää jäännöstä. 0,68 g:n 15 erä tätä raakatuotetta flash-kromatografoitiin käyttäen 75 g silikageeliä ja eluoiden etyyliasetaatin, heksaanien ja etikkahapon seoksella (100:100:1), jolloin saatiin 0,15 g nopeammin eluoituvaa diastereomeeriä (isomeeriä A) ja 0,12 g hitaammin eluoituvaa diastereomeeriä (isomeeriä 20 B). Jäljelle jäänyt 9,6 g raakatuotetta flash-kromatografoitiin samalla tavoin (silikageeli, 1 300 g), jolloin ' saatiin 2,5 g isomeeriä A, 2,7 g molempien diastereomee- : rien seosta ja 1,5 g isomeeriä B. Sekafraktiot kromatogra- foitiin uudelleen käyttäen samoja olosuhteita, jolloin 1 3 25 saatiin 0,5 g isomeeriä A ja 1,25 g isomeeriä B. 2,5 g:n ja 0,5g:n erät isomeeriä A yhdistettiin, trituroitiin • heksaanien kanssa, jotka sisälsivät muutaman tipan etyyli asetaattia, suodatettiin ja kuivattiin, jolloin saatiin ,,, 2,57 g otsikon tuotetta, isomeeriä A, valkoisena kiteisenä • ;* 30 kiinteänä aineena, s.p. 150 - 152 °C, TLC Rf = 0,40 '·** (100:50:1, etyyliasetaatti :heksaani: et ikkahappo), [a]D = -146,9° (c = 1,00, metanoli).
,*·. Analyysi, laskettu yhdisteelle C12H18F3N04S: C 43,76; H 5,51; ,/* N 4,25; F 17,31; S 9,73; : 35 Todettu: C 43,79; H 5,50; N 3,96; F 17,10; S 9,81.
• · » · 25 112213
Esimerkki 19
N-[2-[ (asetyylitio)metyyli] -3,3,3-trifluori-l-ok-sopropyyli]-L-leusiini, isomeeri B
Erää esimerkin 18 isomeeriä B (2,61 g) trituroitiin 5 kaksi kertaa heksaanien kanssa, jotka sisälsivät muutaman tipan etyyliasetaattia, ja kerran heksaanien ja eetterin seoksella (3:1), suodatettiin ja kuivattiin, minkä jälkeen saatiin 1,6 g otsikon tuotetta, isomeeriä B, valkoisena kiteisenä kiinteänä aineena; s.p. 110 - 113 °C, TLC R1 = 10 0,27 (100:50:1, etyyliasetaatti:heksaanit:etikkahappo), [a]D = +109,6° (c = 1,00, metanoli).
Analyysi, laskettu yhdisteelle C12H18F3N04S: C 43,76; H 5,51; N 4,25; F 17,31; S 9,73;
Todettu: C 43,80; H 5,56; N 3,92; F 17,03; S 9,42.
15 Esimerkki 20
N- [3,3,3-trif luori-2- (merkaptometyyli) -1-oksopro-pyyli]-L-leusiini, isomeeri A
Suspensiota, jonka muodosti esimerkin 18 tuote (2,3 g, 6,98 mmol) 4,45 ml:ssa väkevää ammoniumhydroksidia 20 ja 10 ml:ssa vettä, sekoitettiin huoneenlämpötilassa käyttäen argonia suojakaasuna 8 minuuttia. Muodostunut kirkas liuos tehtiin happamaksi 5-prosenttisella kaliumvetysul-faattiliuoksella pH-arvoon 2, ja uutettiin 100 ml:11a etyyliasetaattia, ja sen jälkeen uutettiin vielä 3 kertaa j 25 75 ml:11a. Yhdistetty etyyliasetaattiuute pestiin 100 ml:11a suolaliuosta, kuivattiin (MgS04) ja haihdutet-tiin, jolloin saatiin 1,94 g luonnonvalkoista kiinteää ainetta. Flash-kromatografoitiin käyttäen 200 g silikagee-. , liä ja eluoiden etyyliasetaatin, heksaanien ja etikkahapon ' 30 seoksella (100:100:1), jolloin saatiin 1,72 g otsikon tuo- ’·<·’ tetta, isomeeriä A, valkoisena kiteisenä kiinteänä ainee- na, s.p. 143 - 145 °C, TLC Rf = 0,38 (100:50:1, etyyliase-taatti:heksaani:etikkahappo), [a]D = -62,2° (c = 1,00, metanoli).
» · • ·» · 26 112213
Analyysi, laskettu yhdisteelle C10H16F3N03S: C 41,80; H 5,61; N 4,88; F 19,84; S 11,16; SH 11,51;
Todettu: C 41,89; H 5,62; N 5,12; F 19,51; S 11,05; SH 11,78.
5 Esimerkki 21
N- [3,3,3-trifluori-2- (merkaptometyyli ) -1-oksopro-pyyli]-L-leusiini, isomeeri B
Suspensiota, jonka muodosti esimerkin 19 tuote (1,3 g, 3,95 mmol) 2,52 ml:ssa väkevää ammoniumhydroksidia 10 ja 5,6 ml:ssa vettä, sekoitettiin huoneenlämpötilassa käyttäen argonia suojakaasuna 8 minuuttia. Kirkas liuos tehtiin happamaksi 5-prosenttisella kaliumvetysulfaatti-liuoksella (120 ml) pH-arvoon 2, ja uutettiin 75 ml:11a etyyliasetaattia ja sen jälkeen vielä 3 x 40 ml:n erällä 15 etyyliasetaattia. Yhdistetty etyyliasetaattiuute pestiin 50 ml:11a suolaliuosta, kuivattiin (MgS04) ja haihdutettiin, jolloin saatiin 1,04 g vaaleankeltaista kiinteää ainetta. Tämä aine yhdistettiin 35 mg:n kanssa ainetta, joka oli valmistettu samalla tavalla. Tämä yhdistetty raa-20 katuote puhdistettiin flash-kromatografiällä käyttäen 200 g silikageeliä ja eluoiden etyyliasetaatin, heksaanien ja etikkahapon seoksella (100:100:1), jolloin saatiin j’j 0,93 g otsikon tuotetta, isomeeriä B, valkoisena kiteisenä kiinteänä aineena, s.p. 132 - 134 °C, TLC Rf = 0,33 • · 25 (100:50:1, etyyliasetaatti:heksaani:etikkahappo), [a]D =
• I
+4,8° (c = 1,00, metanoli).
... Analyysi, laskettu yhdisteelle C10H16F3NO3S: C 41,80; H 5,61; I i t N 4,88; F 19,84; S 11,16; SH 11,51;
Todettu: C 41,83; H 5,66; N 5,04; F 19,67; S 11,13; SH
• » i 30 11,79.
·,,,· Esimerkki 22 2- (asetyylitiometyyli) -3,3,3-trifluori-N- [2- (4-hyd- ,· · ·, roksif enyyli) etyyli ] propaaniamidi • ·
Liuokseen, jonka muodosti 4-(2-aminoetyyli)fenoli • · i ** 35 (4,60 g, 36,2 mmol) 250 ml:ssa kuivaa metyleenikloridia ja t I I > · • · • · · 27 112213 jota sekoitettiin ja pidettiin -10 °C:ssa, lisättiin 2-trifluorimetyyli-3-asetyylitiopropionyylikloridin(4,24 g, 18,1 mmol) liuosta 50 mlrssa kuivaa metyleenikloridia, ja sen jälkeen reaktioseosta sekoitettiin -10 °C:ssa 3 tun-5 tia. Reaktioseos pestiin kolme kertaa 1 N vetykloridiha-polla, ja orgaaninen kerros kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla, suodatettiin ja väkevöitiin tyhjössä, jolloin saatiin 3,5 g keltaista öljyä. Raakatuote kromato-grafoitiin käyttäen 400 ml LPS-l-silikageeliä ja käyttäen 10 2:1-suhteista heksaanin ja etyyliasetaatin seosta eluent- tina; tuote eristettiin, jolloin saatiin 1,6 g otsikon yhdistettä kirkkaana öljynä. TLC Rf = 0,12 (4:1, EtOAc:CH2-Cl2).
Analyysi, laskettu yhdisteelle C14H16F3N03S 1,1 H20: C 49,61; 15 H 4,88; N 4,13; F 16,82; S 9,46;
Todettu: C 49,38; H 4,77; N 4,34; F 16,58; S 9,51.
Esimerkki 23 2- (mer kap tome tyyli) -3,3,3-trif luori-N- [2- (4-hydrok-sifenyyli)etyyli]propaaniamidi 20 Liuosta, jonka muodosti esimerkin 22 otsikon yhdiste 20 ml:ssa metanolia, käsiteltiin 1 N ammoniumhyd-roksidiliuoksella (9 ml, 9,0 mmol), ja sen jälkeen sekoi-.*!*. tettiin huoneenlämpötilassa 3 tuntia. Reaktioseosta jako- uutettiin eetterillä ja 1 N vetykloridihapolla ja kerrok- • t >i<: 25 set erotettiin. Orgaaninen kerros pestiin 1 N vetykloridi- . hapolla ja suolaliuoksella, kuivattiin vedettömällä magne- ... siumsulfaatilla, suodatettiin ja väkevöitiin tyhjössä, '·’ ’ jolloin saatiin 1,40 g lasimaista keltaista kiinteää ai netta. Raakatuote flash-kromatografoitiin käyttäen 300 ml • · · i V 30 LPS-l-silikageeliä ja käyttäen 97:3-suhteista metyleeni- • · · kloridin ja metanolin seosta eluenttina, jolloin saatiin 0,74 g otsikon yhdistettä valkoisena kiinteänä aineena, • · · s.p. 98 - 100 °C.
• · * • *
Analyysi, laskettu: C 48,84; H 4,85; N 4,75; F 19,32; S
: *· 35 10,87; SH 11,23; » · • · • · · 28 112213
Todettu: C 48,97; H 4,63; N 4,62; F 18,96; S 10,76; SH 10,93.
Esimerkki 24 2-(asetyylitiometyyli)-3,3,3-trifluori-N-[2-(4-py-5 ridinyyli)etyyli]propaaniamidi
Liuokseen, jonka muodosti 4-(2-aminoetyyli)pyridii-ni (4,60 g, 37,7 mmol) 250 ml:ssa kuivaa metyleenikloridia ja jota sekoitettiin ja pidettiin -10 °C:ssa, lisättiin 2-trifluorimetyyli-3-asetyylitiopropionyylikloridin(4,38 g, 10 18,7 mmol) liuos 50 ml:ssa kuivaa metyleenikloridia, ja sen jälkeen reaktioseosta sekoitettiin -10 °C:ssa 3 tuntia. Reaktioseos pestiin neljä kertaa 5-prosenttisella natriumvetykarbonaatilla, ja orgaaninen kerros kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla, suodatettiin ja väke-15 voitiin tyhjössä, jolloin saatiin 5,62 g keltaista kiinteää ainetta. Raakatuote flash-kromatografoitiin käyttäen 700 ml LPS-l-silikageeliä ja käyttäen 4:1-suhteista etyyliasetaatin ja metyleenikloridin seosta eluenttina; tuote eristettiin, jolloin saatiin 4,42 g otsikon yhdistettä 20 vaaleankeltaisena kiinteänä aineena, s.p. 87 - 89 °C.
Analyysi, laskettu yhdisteelle C13H15F3N202S: C 48,74; H
: 4,72; F 17,79; N 8,75; S 10,01; Γ; Todettu: C 48,67; H 4,64; F 17,60; N 8,73; S 10,04.
• ’. Esimerkki 25 25 2-(merkaptome tyyli) -3,3,3-trif luori-N- [2-(4-pyri- ,,,: dinyyli)etyyli]propaaniamidin vetykloridi >,.t Liuos, jonka muodosti esimerkin 24 tuote (2,0 g, 6,2 mmol) 30 ml:ssa 1:1-suhteista metanolin ja veden seosta, jäähdytettiin 0 °C:seen ja käsiteltiin 5 ml:11a NH40H:a t « » : ·' 30 (14,8 M, 5 ml, 74 mmol) ja sekoitettiin, kunnes liuos kir- • » kastui, suunnilleen 10 minuuttia. Reaktioseos väkevöitiin tyhjössä, ja jäännös otettiin talteen mahdollisimman pie-neen määrään vettä (lisättiin metanolia stabiilisuuden I » parantamiseksi) ja lyofilisoitiin yön aikana, jolloin saa- : ” 35 tiin 1,9 g keltaista kiinteää ainetta. Raakatuote flash- • · • · 29 112213 kromatografoitiin käyttäen 350 ml silikageeliä ja eluoiden metyleenikloridin ja metanolin seoksella (97:3), jolloin saatiin 1,43 g valkoista kiinteää ainetta, 2-(merkaptome-tyyli)-3,3,3-trifluori-N-[2-[4-pyridinyyli]etyyli]propaa-5 niamidia valkoisena kiinteänä aineena; s.p. 114 - 115 °C, TLC Rf = 0,21 (95:5, metyleenikloridi:metanoli).
Analyysi, laskettu yhdisteelle C11H13F3N2OS: C 47,47; H 4,71; F 20,48; N 10,07; S 11,52; SH 11,88;
Todettu: C 47,62; H 4,69; F 20,16; N 9,88; S 11,75; SH 10 12,06.
Liuosta, jonka muodosti edellä mainittu tuote (1,26 g, 4,53 mmol) 15 ml:ssa asetonitriiliä, käsiteltiin ylimäärällä eetteripitoista HCl:a ja sekoitettiin 5 minuuttia, haihtuva aine poistettiin tyhjössä, jolloin saa-15 tiin kirkas öljy. Öljyä trituroitiin heksaaneilla, jolloin saatiin 0,978 g otsikon yhdistettä valkoisena kiinteänä aineena, s.p. 155 - 156 °C, TLC Rf = 0,17 (95:5, metyleenikloridi :metanoli).
Analyysi, laskettu yhdisteelle C11H14C1F3N20S 0,07 H20: C
20 41,81; H 4,51; N 8,87; F 18,04; S 10,15; SH 10,46; Cl 11,22.
:T: Todettu: C 42,02; H 4,41; N 8,77; F 17,64; S 10,12; SH
10,64; Cl 10,94.
Esimerkki 26 25 2-[(asetyylitio)metyyli]-3,3,3-trifluori-N-[2-(1H- ,,,.: tetratsol-5-yy1i)etyy1i]propaaniamidi • » ... A. (N ) -1 -butoks ikarbonyy 1 i - 3 - aminopr opioni tr i i 1 i * « » » · t * 3-aminopropionitriiliformaattia (1,28 g, 10 mmol) liuotettiin 40 ml:aan absoluuttista etanolia ja lisättiin • » · : 30 di-isopropyylietyyliamiinia (3,48 ml, 20 mmol) 0 °C:ssa.
• * · ·...· Sekoitettiin 10 minuuttia, minkä jälkeen lisättiin di- .V. tert-butyylidikarbonaattia (2,18 g, 10 mmol), ja reaktio- • * .··, seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 48 tuntia, väke- • · '· vöitiin tyhjössä, ja jäännös liuotettiin etyyliasetaattiin • · : ’* 35 (200 ml). Etyyliasetaattiliuos pestiin vedellä, kylläisel- • I t • · • ♦ 30 112213 lä natriumbikarbonaatilla, kuivattiin natriumsulfaatilla ja väkevöitiin tyhjössä, jolloin saatiin otsikon A yhdiste kiinteänä aineena (1,68 g), s.p. 44 - 45 °C.
B.5-((N)-t-butoksikarbonyyli-2-aminoetyyli)tetrat- 5 soli
Tri-n-butyylitina-atsidi ja otsikon A yhdiste kuumennettiin 115 °C:seen 100 ml:ssa ksyleeniä 48 tunniksi. Reaktioseos väkevöitiin tyhjössä, ja jäännös liuotettiin pyridiinin, etikkahapon ja veden seoksen (20:6:11) ja 10 etyyliasetaatin 2:8-suhteiseen seokseen. Lisättiin silika-geeliä (25 g), ja seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa yön yli. Reaktioseos suodatettiin, ja silikakerros pestiin perusteellisesti edellä mainitulla pyridiinin, etikkahapon ja veden seoksen (20:6:11) ja etyyliasetaatin 2:8-suhtei-15 sella liuotinsysteemillä. Suodos väkevöitiin tyhjössä, ja jäännös väkevöitiin tolueenista (2 x). Tuote muuttui kiinteäksi, kun lisättiin isopropyylieetteriä. Tuote suodatettiin, jolloin saatiin 1,88 g otsikon B yhdistettä, s.p.
121 - 126 °C.
20 C. 5-(2-aminoetyyli)tetratsolin vetykloridi
Otsikon B yhdiste (1,88 g, 8,8 mmol) liuotettiin 20 ml:aan etyyliasetaattia, joka oli kyllästetty HCl:lla.
Γ Reaktioseosta sekoitettiin 3 tuntia, ja muodostunut sakka suodatettiin, jolloin saatiin otsikon C yhdiste (1,04 g) • * 25 kiinteänä aineena, s.p. 120 - 129 °C (haj.).
D. 2-[ (asetyylitio)metyyli]-3,3,3-trifluori-N-[2-(lH-tetratsol-5-yyli )etyyli] propaani amidi
Otsikon C yhdiste (0,92 g, 6,15 mmol) suspendoitiin , 15 ml:aan kuivaa asetonitriiliä käyttäen argonia suojakaa- i * · • 30 suna. Lisättiin bis(trimetyylisilyyli)trifluoriasetamidia » · ’·.** (5,2 ml, 19,6 mmol) ja sekoitettiin, kunnes aikaansaatiin ;Y: kirkas liuos (2 tuntia). Reaktioseos jäähdytettiin 5 °C:seen, lisättiin tipoittain 2-trifluorimetyyli-3-ase- t « » ,,· tyylitiopropionyylikloridia (1,44 g, 6,14 mmol), ja seosta i · • [* 35 sekoitettiin 2 tuntia 5-10 °C:ssa. Reaktioseos väkevöi- • · • · • · » 31 112213 tiln tyhjössä, liuotettiin etyyliasetaattiin (200 ml), ja etyyliasetaattiliuos pestiin vedellä (3 x), pH-puskurilla 4,02, suolaliuoksella (2 x), kuivattiin natriumsulfaatilla ja väkevöitiin tyhjössä. Lisättiin isopropyylieetteriä, 5 jolloin aine muuttui kiinteäksi. Kiinteä aine suodatettiin ja kuivattiin (1,38 g), s.p. 157 - 160 °C.
Analyysi, laskettu yhdisteelle C9H12F3N502S: C 34,72; H 3,89; N 22,50; F 18,31; S 10,30;
Todettu: C 34,41; H 3,80; N 21,39; F 18,64; S 10,34.
10 Esimerkki 27 3,3, 3-trif luori-2- (merkaptometyyli) -N- [ 2- (lH-tet-ratsol-5-yyli)etyyli]propaaniamidi
Esimerkin 26 otsikon yhdiste (1,0 g, 3,2 mmol) liuotettiin 0 °C:ssa käyttäen argonia suojakaasuna 15 2,5 ml:aan 1:1-suhteista väkevän NH40H:n ja H20:n liuosta.
Reaktioseosta sekoitettiin 0 °C:ssa 5 minuuttia, ja sen jälkeen tehtiin happamaksi 0 °C:ssa 5 N HCl:lla pH-arvoon 6. Tuotetta uutettiin etyyliasetaatilla, joka sisälsi 5 % metanolia (3 x) (200 ml:n erät). Orgaaninen kerros pestiin 20 suolaliuoksella, kuivattiin natriumsulfaatilla ja väkevöi tiin tyhjössä. Jäännös kromatografoitiin 50 g:n läpi V : Merckin silikageeliä käyttäen metanolin, etikkahapon ja • » · : : metyleenikloridin liuotinsysteemiä (3:3:94). Sopivat frak- tiot yhdistettiin ja väkevöitiin, jolloin saatiin 0,56 g ·;-· 25 otsikon tuotetta, s.p. 182 - 184 °C.
Analyysi, laskettu yhdisteelle C7H10N5OSF3 0,13 H20: C 30,95; H 3,81; N 25,78; F 20,98; S 11,80; SH 12,17; t > »
Todettu: C 31,15; H 3,66; N 25,53; F 20,58; S 11,83; SH
12,21.
* » » * · » • · • ♦ · 32 112213
Esimerkki 28 3,3,3-trifluori-N-(3-hydroksifenyyli)-2-(merkapto-metyyli)propaaniamidi a) 3,3,3-trifluori-2-[(asetyylitio)metyyli]-N-(3- 5 hydroks i fenoli)propaaniamidi
Liuokseen, jonka muodosti 3-aminofenoli (4,02 g, 36,8 mmol) 250 mlrssa metyleenikloridia, lisättiin 2-tri-fluorimetyyli-3-asetyylitiopropionyylikloridia (4,29 g, 1,3 mmol), ja sen jälkeen sekoitettiin -10 °C:ssa 5,5 tun-10 tia. Reaktioseos pestiin 1 N HClrlla (3 x) ja sen jälkeen suolaliuoksella, kuivattiin (MgS04), suodatettiin ja väke-vöitiin tyhjössä, jolloin saatiin 4,58 g otsikon A yhdistettä luonnonvalkoisena kiinteänä aineena, s.p. 148 -149 °C, TLC Rf = 0,73 (4:1, etyyliasetaattirmetyleeniklo-15 ridi).
b) 3,3,3-trifluori-N-(3-hydroksifenoli)-2-(merkap-tometyyli)propaaniamidi
Liuokseen, jonka muodosti otsikon A yhdiste (1,05 g, 3,42 mmol) 16 ml:ssa 1:1-suhteista veden ja meta-20 nolin seosta, lisättiin 0 °C:ssa NH40H:a (14,8 M liuos, 2,6 ml, 38,8 mmol) ja sekoitettiin 10 minuuttia. Reaktio i : pysäytettiin 0 °C:ssa 10-prosenttisella kaliumbisulfaatil- ; : la, ja uutettiin etyyliasetaatilla (4 x). Orgaaniset uut- * ; teet yhdistettiin, kuivattiin (MgS04), suodatettiin ja vä- , | 25 kevöitiin tyhjössä, jolloin saatiin 1,17 g keltaista kiin- : teää ainetta. Tämä raakatuote flash-kromatografoitiin käyttäen 250 ml EM-60-silikageeliä ja eluoiden 98:2-suh-teisella metyleenikloridin ja metanolin seoksella, jolloin saatiin 0,68 g otsikon yhdistettä luonnonvalkoisena kiin-30 teänä aineena, s.p. 147 - 151 °C, TLC Rf = 0,36 (95:5, me-tyleenikloridi/metanoli).
: Analyysi, laskettu yhdisteelle CloH10F3NO2S 0,07 H20: C
.·**. 45,30; H 3,85; N 5,21; F 21,20; S 11,93; SH 11,90;
Todettu: C 45,26; H 3,81; N 5,09; F 20,82; S 11,72; SH i 35 12,31.
* · ♦ 33 112213
Esimerkki 29
N- [2- [ (asetyylitio)metyyli] -3,3,3-trif luori-l-ok-sopropyyli]-L-norleusiini, isomeeri A
Suspensioon, jonka muodosti L-norleusiini (2,62 g, 5 20 mmol) 40 mlrssa asetonitriiliä, lisättiin bis( trimetyy- lisilyyli)trifluoriasetamidia (16 ml, 60 mmol) 0 °C:ssa. Suspension annettiin lämmetä huoneenlämpötilaan ja sekoitettiin 2,5 tuntia, minkä jälkeen lähes kaikki kiinteä aine oli liuennut. Reaktioseos jäähdytettiin uudelleen 10 0 °C:seen ja lisättiin tipoittain 20 minuutin aikana 2- trifluorimetyyli-3-asetyylitiopropionyylikloridia (4,7 g, 20 mmol) liuoksena 10 ml:ssa asetonitriiliä. Sekoitettiin huoneenlämpötilassa 18 tuntia, minkä jälkeen reaktioseos kaadettiin 200 ml:aan vettä, ja saatua seosta uutettiin 15 etyyliasetaatilla (500 ml). Lisättiin suolaliuosta tämän uuton aikana muodostuneen emulsion hajottamiseksi. Vesipitoista kerrosta uutettiin vielä kerran etyyliasetaatilla (100 ml), ja yhdistetyt orgaaniset kerrokset pestiin suolaliuoksella, kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin, jolloin 20 saatiin öljymäinen jäännös, joka esiabsorboitiin Celitel-le. Raakatuote ja Celite-seos laitettiin 8 x 30 cm:n sili-: kageelipylvääseen, jota eluoitiin seuraavasti: 5 1 heksaa- ni: etyyliasetaatti :etikkahappo (750:250:25), 2 1 heksaa- ni: etyyliasetaatti :etikkahappo (700:300:25), 2 1 heksaa- • · |25 ni:etyyliasetaatti:etikkahappo (500:500:25). Puhtaat vä- • · . hemmän polaariset fraktiot väkevöitiin ja kerahaihdutet- tiin heptaanista, jolloin saatiin valkoinen kiinteä aine, • i · '·’ * joka uudelleenkiteytettiin kaksi kertaa etyyliasetaatis- ta/heksaanista. Kuivattiin suurtyhjössä huoneenlämpötilas- * ’,· 30 sa 18 tuntia, jolloin saatiin 1,95 g otsikon yhdistettä, isomeeriä A, valkoisena jauheena, s.p. 176 - 178 °C, TLC Rf = 0,30 (etyyliasetaatti:heksaani:etikkahappo, » · * !.! 30:70:1). [a]n = -133,3° (c = 0,6, metanoli).
'*.* Analyysi, laskettu yhdisteelle C12H18F3N04S: C 43,76; H 5,51; :**·· 35 N 4,25; F 17,31; S 9,73;
Todettu: C 43,76; H 5,45; N 4,35; F 17,57; S 9,67.
34 112213
Esimerkki 30
N- [2-[ (asetyylitio)metyyli] -3,3,3-trifluori-l-ok-sopropyyli]-L-norleusiini, isomeeri B
Esimerkin 29 menettelyssä puhtaat polaarisemmat 5 fraktiot väkevöitiin, jolloin saatiin valkoinen kiinteä aine, joka uudelleenkiteytettiin kaksi kertaa etyyliase-taatista/heksaanista. Kuivattiin suurtyhjössä, jolloin saatiin 1,953 g otsikon yhdistettä, isomeeriä B, s.p.
123 - 125 °C, TLC Rf = 0,19 (etyyliasetaatti:heksaani:etik-10 kahappo, 30:70:1). [a]D = +123° (c = 0,63, metanoli).
Analyysi, laskettu yhdisteelle C12H18F3N04S: C 43,76; H 5,51; N 4,25; F 17,31; S 9,73;
Todettu: C 43,97; H 5,45; N 4,29; F 17,13; S 9,89.
Esimerkki 31 15 N-[3,3,3-tri f luor i - 2 - (mer kap t ome ty y 1 i) -1 - oksopr o -
pyyli]-L-norleusiini, isomeeri A
Suspensioon, jonka muodosti esimerkin 29 tuote 12 ml:ssa vettä, josta oli poistettu happi, lisättiin väkevää ammoniumhydroksidia (3 ml). Reaktioseosta, joka tuli 20 homogeeniseksi alle minuutin aikana, sekoitettiin 15 minuuttia. Tänä aikana pH säädettiin noin arvoon 1,5 kalium-bisulfaatilla, ja saatua vesipitoista seosta uutettiin : : etyyliasetaatilla (2 x 150 ml). Yhdistetyt orgaaniset ker- ; rokset pestiin suolaliuoksella, kuivattiin (MgS04) ja vä- : 25 kevöitiin, jolloin saatiin öljymäinen jäännös. Tämä jään- . nös flash-kromatografoitiin 5 x 12 cm:n silikageelipyl- väällä käyttäen heksaanin, etyyliasetaatin ja etikkahapon seosta (65:35:1). Puhtaat fraktio väkevöitiin, ja jäännös kerahaihdutettiin heptaanista useita kertoja, jolloin saa-: ,· 30 tiin valkoinen kiinteä aine. Trituroitiin heksaanin kanssa *...· ja kuivattiin 18 tuntia suurtyhjössä, jolloin saatiin 1,175 g otsikon yhdistettä, isomeeriä A, valkoisena kiin- • · · ,’··«. teänä aineena, s.p. 96 - 98 °C, TLC Rf = 0,38 (etyyliase- • · *" taatti:heksaani:etikkahappo, 40:60:2). [a]D = -43,2 (c = • # ! ’*· 35 0,60, metanoli).
• t • · • · · 35 112213
Analyysi, laskettu yhdisteelle C10H16F3NO3S: C 41,37; H 5,67; N 4,83; F 19,84; S 11,16; SH 11,51;
Todettu: C 41,68; H 5,42; N 4,52; F 19,53; S 10,89; SH 10,78.
5 Esimerkki 32
N-[3,3,3-trif luor i - 2 - ( merkapt ometyy 1 i) -1 - oksopr o -pyyli]-L-norleusiini, isomeeri B
Suspensioon, jonka muodosti esimerkin 30 tuote 12 ml:ssa vettä, josta oli poistettu happi, lisättiin vä-10 kevää ammoniumhydroksidia (3 ml) huoneenlämpötilassa. Reaktioseos tuli homogeeniseksi minuutin aikana. Sekoitettiin kaikkiaan 15 minuuttia, minkä jälkeen reaktioseos tehtiin happamaksi pH-arvoon 1,5 väkevällä kaliumbisul-faattiliuoksella. Tätä hapanta seosta uutettiin etyyliase-15 taatilla (2 x 150 ml). Yhdistetyt orgaaniset kerrokset pestiin suolaliuoksella (100 ml), kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin, jolloin saatiin vaaleankeltainen jäännös.
Tämä jäännös kromatografoitiin 5 x 12 cm:n silikageelipyl-väällä käyttäen etyyliasetaatin, heksaanin ja etikkahapon 20 seosta (40:60:1) eluoimiseen. Puhtaat fraktiot väkevöitiin ja kerahaihdutettiin heptaanista, jolloin saatiin väritön kiinteä aine, jota trituroitiin heksaanin kanssa. Suoda-tettiin ja kuivattiin, jolloin saatiin 1,16 g valkoista » i t kiinteää ainetta. Tämä aine uudelleenkiteytettiin kaksi \ 25 kertaa etyyliasetaatista/heksaanista, jolloin saatiin , 632 mg otsikon yhdistettä, isomeeriä B, värittöminä neu-
I 1 · « I
| loina, s.p. 131 - 133 °C, TLC Rf = 0,26 (etyyliasetaat- '·’ ‘ ti:heksaani:etikkahappo, 40:60:2). [a]D = +21,3° (c =0,71, metanoii).
* · · • 1,·1 30 Analyysi, laskettu yhdisteelle C10H16F3NO3S 0,1 H20: C 41,53; H 5,65; N 4,84; F 19,71; S 11,09; SH 11,44;
Todettu: C 41,55; H 5,61; N 4,85; F 19,14; S 10,99; SH 30,66.
• 1 » t • · · 36 112213
Esimerkki 33 (S)-N-[3,3,3-trifluori-2-(merkaptometyyli)-1-okso-propyyli]-L-isoleusiini a) N-[2-[(asetyylitio)metyyli]-3,3,3-trifluori-l- 5 oksopropyyli]-L-isoleusiini
Suspensioon, jonka muodosti L-isoleusiini (2,62 g, 20 mmol) 40 mlrssa asetonitriiliä, lisättiin bis(trimetyy-lisilyyli)trifluoriasetamidia (16 ml, 60 mmol) 0 °C:ssa. Suspension annettiin lämmetä huoneenlämpötilaan, ja sekoi-10 tettiin 2 tuntia. Tänä aikana suunnilleen kolmasosa kiinteästä aineesta oli liuennut. Lisättiin vielä bis(trime-tyylisilyyli)trifluoriasetamidia (4 ml, 15 mmol), ja seosta sekoitettiin 45 minuuttia. Seos jäähdytettiin 0 °C:seen, ja siihen lisättiin tipoittain 15 minuutin ai-15 kana 2-trifluorimetyyli-3-asetyylitiopropionyylikloridia (4,7 g, 20 mmol) liuoksena 10 mlrssa asetonitriiliä. Sekoitettiin huoneenlämpötilassa 18 tuntia, minkä jälkeen reaktioseos oli kirkas vaaleankeltainen liuos. Lisättiin suunnilleen 150 ml vettä, ja saatua seosta uutettiin etyy-20 liasetaatilla (2 x 150 ml). Yhdistetyt orgaaniset kerrokset pestiin suolaliuoksella (100 ml), kuivattiin (MgS04) ja : väkevöitiin, jolloin saatiin öljymäinen jäännös, joka esi- adsorboitiin Celitelle kromatografointia varten. Useiden kromatografointien, triturointien ja uudelleenkiteytysten 25 jälkeen eristettiin 1,41 g (R)-N-[2-[(asetyylitio)metyy- _ _ ; li]-3,3,3-trifluori-l-oksopropyyli]-L-isoleusiinia; s.p.
... 81 - 85 °C, [a]D = -105,5° (c = 0,38, metanoli), ja 1,56 g * · * * (S)-N-[2-[ (asetyylitio)metyyli] -3,3,3-trif luori-l-oksopropyyli]-L-isoleusiinia, s.p. 111 - 112 °C, [a]D = +122,6° .* .* 30 (c = 0,38, metanoli).
b) (S)-N-[3,3,3-trifluori-2-(merkaptometyyli)-l-oksopropyyli]-L-isoleusiini ,···. Suspensioon, jonka muodosti osan (a) tuotteen (S)- • · [·* diastereomeeri (1,5 g, 4,55 mmol) 12 mlrssa vettä, josta : ’* 35 oli poistettu happi, lisättiin väkevää ammoniumhydroksidia • * · » · • ♦ i * » 37 112213 (3 ml). Liukeneminen tapahtui muutamassa sekunnissa, ja reaktioseosta sekoitettiin käyttäen argonia suojakaasuna 5 minuuttia. Sen jälkeen seos tehtiin happamaksi pH-arvoon 1,5 kaliumbisulfaattiliuoksella ja uutettiin etyyliasetaa-5 tiliä (2 x 150 ml). Yhdistetyt orgaaniset kerrokset pestiin suolaliuoksella, kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin. Jäännös kromatografoitiin 5 x 15 cm:n silikageelipylväällä eluoiden heksaanin, etyyliasetaatin ja etikkahapon seoksella (75:25:1). Puhtaat fraktiot väkevöitiin ja kerahaih-10 dutettiin heptaanista, jolloin saatiin 1,285 g valkoista kiinteää ainetta. Tämä kiinteä aine uudelleenkiteytettiin kolme kertaa, jolloin saatiin 0,834 g otsikon (S)-diaste-reomeerituotetta, s.p. 130 - 131 °C, TLC Rf = 0,43 (etyyliasetaatti :heksaani:etikkahappo, 40:60:1). [a]D = +35,8° 15 (c = 0,45, metanoli).
Analyysi, laskettu yhdisteelle C10H16F3NO3S 0,10 H20: C
41,55; H 5,65; N 4,85; F 19,72; S 11,09; SH 11,44;
Todettu: C 41,74; H 5,62; N 4,76; F 19,33; S 10,95; SH 13,47.
20 Esimerkki 34 (R)-N-[3,3,3-trifluori-2-(merkaptometyyli)-1-okso-; : propyyli]-L-isoleusiini
Suspensioon, jonka muodosti esimerkin 33(a) (R)- .·, diastereomeerituote (1,3 g, 3,95 mmol) 10 ml:ssa vettä, t , ; 25 lisättiin väkevää ammoniumhydroksidia (2,6 ml). Liukene- , minen tapahtui yhden minuutin aikana, ja reaktioseosta sekoitettiin käyttäen argonia suojakaasuna 5 minuuttia * » ’’ ’ huoneenlämpötilassa. Sen jälkeen seos tehtiin happamaksi pH-arvoon 1,5 kaliumbisulfaattiliuoksella ja uutettiin 1 V 30 etyyliasetaatilla (2 x 100 ml). Yhdistetyt orgaaniset ker- » * * rokset pestiin suolaliuoksella, kuivattiin (MgS04) ja vä-kevöitiin. Jäännös kromatografoitiin 5 x 25 cm:n silika-geelipylväällä eluoiden heksaanin, etyyliasetaatin ja • t etikkahapon seoksella (75:25:1). Puhtaat fraktiot väkevöi- t · • *·· 35 tiin ja kerahaihdutettiin heptaanista, jolloin saatiin • « * • · • · • « · 38 112213 1,01 g valkoista kiinteää ainetta. Tämä kiinteä aine vaati hyvin tehokkaan ja perusteellisen trituroinnin heptaanin, heksaanin ja pentaanin kanssa pienten etyyliasetaattimää-rien poistamiseksi. Lopullisen suodatuksen jälkeen tämä 5 aine kuivattiin suurtyhjössä 100 °C:ssa, jolloin saatiin 0,79 g otsikon (R)-diastereomeerituotetta valkoisena kiinteänä aineena, s.p. 140 - 142 °C, TLC Rf = 0,39 (etyyliasetaatti :heksaani:etikkahappo, 40:60:2). [a]D = -37,3° (c = 0,55, metanoli).
10 Analyysi, laskettu yhdisteelle C10H16F3N03S: C 41,80; H 5,61; N 4,88; F 19,84; S 11,16; SH 11,51;
Todettu: C 42,18; H 5,67; N 5,02; F 19,36; S 11,48; SH 12,29.
Esimerkki 35 15 (S,R) -3- [ [2- [ (asetyylitio)metyyli] -3,3,3-trifluori- 1-oksopropyyli]amino]-5-metyyliheksaanihappo
Liuosta, jonka muodosti 3-[[(2,2-dimetyylietyyli)-oksi]karbonyyli]amino-5-metyyliheksaanihaponmetyyliesteri [valmistettu Arndt-Eistert-kaaviolla, Ondetti et ai., J.
20 Med. Chem., Voi. 18, s. 761 (1975)] (5,26 g, 20,3 mmol) 100 ml:ssa metanolia, käsiteltiin 1 N natriumhydroksidi- * • liuoksella (40 ml, 40 mmol), ja sen jälkeen sekoitettiin : : huoneenlämpötilassa 3 tuntia. Sitten reaktioseos väkevöi- tiin tyhjössä ja jäännös otettiin talteen veteen. Vesipi- 25 toinen liuos pestiin kerran etyyliasetaatilla, ja sen jäl- ,,,,: keen tehtiin happamaksi 6 N HCl:lla, minkä jälkeen uutet- tiin etyyliasetaatilla (4 x). Orgaaniset uutteet yhdistettiin, kuivattiin (MgS04), suodatettiin ja väkevöitiin tyh-,,, jössä, jolloin saatiin 5,68 g 3-[[(2,2-dimetyylietyyli)ok- • ·’ 30 si]karbonyyli]amino-5-metyyliheksaanihappoa kirkkaana öl- ·...· jynä.
Tämän hapon (0,63 g, 2,57 mmol) liuosta etyyliase-» > * taatissa (5 ml) käsiteltiin HCl:lla (3,2 M liuos etyyliasetaatissa, 25 ml, 80 mmol) ja sekoitettiin huoneenläm- • 35 pötilassa 3 tuntia. Reaktioseokseen johdettiin N2:a, ja • · • · • · t 39 112213 sen jälkeen väkevöitiin tyhjössä, jolloin saatiin valkoinen kiinteä aine, jota trituroitiin etyylieetterin kanssa, jolloin saatiin 0,37 g 3-amino-5-metyyliheksaanihapon ve-tykloridia, s.p. 125 - 126 °C.
5 Liuosta, jonka muodosti tämän hapon vetykloridi (2,7 g, 14,9 mmol) kuivassa asetonitriilissä, pidettiin 0 °C:ssa, käsiteltiin di-isopropyyliamiinilla (2,6 ml, 14,9 mmol) ja bis(trimetyylisilyyli)trifluoriasetamidilla (8 ml, 30,1 mmol) ja sekoitettiin 0 °C:ssa 30 minuuttia.
10 Seuraavaksi lisättiin tipoittain 15 minuutin aikana 2-tri- fluorimetyyli-3-asetyylitiopropionyylikloridia (3,46 g, 14,7 mmol) 15 ml:ssa kuivaa asetonitriiliä, ja sen jälkeen annettiin lämmetä huoneenlämpötilaan yön aikana. Reaktio-seos väkevöitiin tyhjössä, ja jäännös otettiin talteen 15 etyyliasetaattiin ja pestiin 1 N HCl:lla (3 x) ja sen jäl keen suolaliuoksella. Orgaaninen kerros kuivattiin (MgS04), suodatettiin ja flash-kromatografoitiin käyttäen 1 800 ml silikageeliä ja eluoiden heksaanin, etyyliasetaatin ja etikkahapon seoksella (2:1:0,01), jolloin saatiin eristet-20 tyä 2,33 g S,R-isomeeriä nopeammin liikkuvana isomeerinä.
Sen jälkeen raakatuotetta trituroitiin useita kertoja hek-i : saanin ja etyyliasetaatin seoksella, ja lopuksi käsitel- tiin väriä poistavalla hiilellä, jolloin saatiin 1,7 g otsikon (S, R)-isomeerituotetta, s.p. 102 - 103 °C, TLC Rf = * * 25 0,34 (heksaani ’.etyyliasetaatti: etikkahappo, 100:100:1).
i . [a]D = -124° (c = 0,78, metanoli).
Analyysi, laskettu yhdisteelle C13H20F3NO4 0,3 H20: C 44,78; H 5,95; N 4,02; F 16,35; S 9,20;
Todettu: C 45,02; H 5,82; N 3,78; F 16,62; S 9,51.
I 30 Esimerkki 36 ·,,,· (S,S)-3- [ [2- [ (asetyylitio)metyyli] -3,3,3-trifluori- .·,1. 1-oksopropyyli]amino]-5-metyyliheksaanihappo ,···, Hitaammin liikkuvaa isomeeriä sisältävät fraktiot *·’ esimerkin 35 f lash-kromatografoinnissa yhdistettiin ja : *· 35 väkevöitiin tyhjössä, jolloin saatiin oranssinvärinen öl- 40 112213 jy, jota trituroitiin useita kertoja heksaanin ja etyyliasetaatin seoksella, ja lopuksi käsiteltiin väriä poistavalla hiilellä, jolloin saatiin 1,2 g otsikon (S,S)-isomeeri tuotetta valkoisena kiinteänä aineena, s.p. 124 -5 125 “C, TLC Rf = 0,78 (heksaani:etyyliasetaattiretikkahap- po, 100:100:1). [a]D = +98,4° (c = 0,89, metanoli).
Analyysi, laskettu yhdisteelle C13H20F3N04S 0,08 H20: C
45,28; H 5,89; N 4,06; F 16,53; S 9,30;
Todettu: C 45,35; H 5,98; N 3,99; F 16,35; S 9,18.
10 Esimerkki 37 (S,R)-3-[[3,3,3-trifluori-2-(merkaptometyyli)-1-oksopropyyli]amino]-5-metyyliheksaanihappo
Suspensiota, jonka muodosti esimerkin 35 (S,R)-iso-meerituote (1,0 g, 2,9 mmol) vedessä, pidettiin 0 eC:ssa 15 käyttäen argonia suojakaasuna ja käsiteltiin ammoniumhyd-roksidilla (5 M liuos, 10 ml, 50 mmol) ja sekoitettiin 5 minuuttia. Reaktio pysäytettiin 0 °C:ssa 140 ml:11a 10-prosenttista kaliumbisulfaattia, ja sen jälkeen uutettiin etyyliasetaatilla (4 x). Orgaaniset uutteet yhdistettiin, 20 kuivattiin (MgS04), suodatettiin ja väkevöitiin tyhjössä, jolloin saatiin 1,0 g keltaista kiinteää ainetta. Raaka- tuotteena oleva reaktioseos flash-kromatografoitiin käyt-."'; täen 200 ml silikageeliä ja eluoiden heksaanin ja etyyli- asetaatin seoksella (2:1), jolloin saatiin eristettyä : 25 0,61 g otsikon (S,R)-isomeerituotetta valkoisena kiinteänä . aineena, s.p. 155 - 156 °C, TLC Rf = 0,19 (heksaani:etyyliasetaatti :etikkahappo, 100:100:1). [a]D = -55,5° (c = ‘ 0,89, metanoli).
Analyysi, laskettu yhdisteelle C11H18F3N03S: C 43,84; H 6,02; : 30 N 4,65; F 18,92; S 10,64; SH 10,97;
Todettu: C 43,81; H 6,08; N 4,79; F 18,52; S 10,62; SH .V. 11,37.
• · » » • · • · » • * » < • * · t » * *
( I
I I I
41 112213
Esimerkki 38 (S, S)-3-[[3,3,3-trifluori-2-(merkaptometyyli)-l-oksopropyyli]amino]-5-metyyliheksaanihappo
Suspensiota, jonka muodosti esimerkin 36 (S,S)-iso-5 meerituote (0,91 g, 2,7 mmol) vedessä, pidettiin 0 °C:ssa käyttäen argonia suojakaasuna ja käsiteltiin ammoniumhyd-roksidilla (5 M liuos, 10 ml, 50 mmol) ja sekoitettiin 5 minuuttia. Reaktio pysäytettiin 0 °C:ssa 140 ml:11a 10-prosenttista kaliumbisulfaattia ja sen jälkeen uutettiin 10 etyyliasetaatilla (4 x). Orgaaniset uutteet yhdistettiin, kuivattiin (MgS04), suodatettiin ja väkevöitiin tyhjössä, jolloin saatiin 1,0 g keltaista kiinteää ainetta. Raaka-tuotteena olevaa reaktioseosta trituroitiin heksaanin ja etyyliasetaatin seoksella, jolloin saatiin 0,78 g (S,S)-15 isomeerituotetta luonnonvalkoisena kiinteänä aineena; s.p.
155 - 156 °C, TLC Rf = 0,18 (etyyliasetaatti:heksaani:etik-kahappo, 100:100:1). [a]D = +26,1° (c = 0,81, metanoli). Analyysi, laskettu yhdisteelle C11H18F3N03S: C 43,84; H 6,02; N 4,65; F 18,92; S 10,64; SH 10,97; 20 Todettu: C 44,26; H 6,26; N 4,62; F 18,34; S 10,22; SH 10,71.
: Esimerkki 39 (S,R)-3,3,3-trifluori-2-(merkaptometyyli)-N-[3-me-tyy1i-1-(1H-tetratsol-5-yy1i)butyy1i]propaaniamidi 25 a) N-[ (fenyylimetoksi)karbonyyli]-L-leusiiniamidi
Liuokseen, jonka muodosti N-[(fenyylimetoksi)kar-bonyyli]-L-leusiini (3 g, 11,3 mmol) 60 ml:ssa metyleenik-' ’ loridia -20 °C:ssa ja jossa käytettiin argonia suojakaa suna, lisättiin N-metyylimorfoliinia (1,24 ml, 11,3 mmol) : 30 ja sen jälkeen isobutyyliklooriformaattia (1,47 ml, >n 11,3 mmol). Muodostunutta suspensiota sekoitettiin -20 °C:ssa 15 minuuttia, jona aikana lisättiin ammoniakin ,*··, liuosta metanolissa (noin 5,6 M, 20 ml, 113 mmol). 30 mi- nuutin jälkeen -20 °C:ssa reaktio pysäytettiin vedellä ja : * 35 lämmitettiin huoneenlämpötilaan. Kerrokset erotettiin, ja » · 42 112213 vesipitoista kerrosta uutettiin metyleenikloridilla (2 x). Yhdistetyt orgaaniset uutteet kuivattiin (MgS04) ja haihdutettiin, jolloin saatiin 2,82 g otsikon A yhdistettä.
b) N-[(fenyylimetoksi)karbonyyli]-L-leusiininitrii- 5 li
Liuokseen, jonka muodosti otsikon A yhdiste (9,25 g, 219,86 mmol) 100 ml:ssa vedetöntä tetrahydrofu-raania, lisättiin huoneenlämpötilassa ja käyttäen argonia suoj akaasuna metoksikarbonyylisulfamoyylitrietyyliammo- 10 niumhydroksidin sisäistä suolaa (11,83 g, 49,65 mmol) viitenä yhtä suurena eränä 2 tunnin aikana. Reaktioseos kaadettiin flash-kromatografiapylvääseen ja eluoitiin heksaa-nien ja etyyliasetaatin seoksella (60:40), jolloin saatiin 4,6 g otsikon B yhdistettä öljynä. TLC Rf = 0,57 (etyyli-15 asetaatti:heksaani, 1:1). [a]D = -49,7° (c = 0,82, metano-li).
c) (S)-[3-metyyli-l-(1H-tetratsoi-5-yyli)butyyli]-karbamiinihapon fenyylimetyyliesteri
Liuosta, jonka muodostivat otsikon B yhdiste 20 (2,98 g, 12,10 mmol) ja tributyylitina-atsidi (6,1 g, 18,14 mmol) 100 ml:ssa ksyleenejä, sekoitettiin 110 °C:ssa ; : 2 tuntia. Seos jäähdytettiin huoneenlämpötilaan ja kaadet- V: tiin suoraan flash-kromatografiapylvääseen ja eluoitiin 1 1:11a heksaanien ja etyyliasetaatin seosta (60:40), , : 25 2 1:11a heksaanien ja etyyliasetaatin seosta (60:40), jos- sa oli 2 % etikkahappoa, jolloin saatiin 2,23 g otsikon C yhdistettä viskoosina öljynä.
d) (S)-a-(2-metyylipropyyli)-lH-tetratsoli-5-metaa-niamiinin vetykloridi • ·’ 30 Suspensiota, jonka muodosti otsikon C yhdiste (2,84 g, 9,81 mmol) 100 ml: ssa metanolia, joka sisälsi asetyylikloridia (1,14 ml, 19,62 mmol) ja 20-prosenttista palladium hiilellä -katalyyttiä (0,28 g), sekoitettiin vetyatmosfäärissä (ilmapallo) huoneenlämpötilassa. 4 tun- I ·’ 35 nin kuluttua lisättiin vielä 20-prosenttista palladium » » 43 112213 hiilellä -katalyyttiä (0,28 g) ja asetyylikloridia (1,14 ml). 22 tunnin kuluttua reaktioseos suodatettiin ja haihdutettiin. Trituroitiin heksaanien kanssa, jolloin saatiin 1,88 g otsikon D yhdistettä valkoisena vaahtona.
5 e) (S,R)-2-[(asetyylitio)metyyli]-3,3,3-trifluori- N-[3-metyyli-l-(1H-tetratsoi-5-yyli)butyyli]propaaniamidi Liuokseen, jonka muodosti otsikon D yhdiste (1,73 g, 9,9 mmol) 22 ml:ssa asetonitriiliä, lisättiin 0 °C:ssa ja käyttäen argonia suojakaasuna bis(trimetyyli-10 silyyli)trifluoriasetamidia (7,67 ml, 31,36 mmol), ja saatua sameaa liuosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 2 tuntia. Reaktioseos jäähdytettiin taas 0 °C:seen, minkä aikana lisättiin 2-trifluorimetyyli-3-asetyylitiopropionyyli-kloridia (2,1 g, 9,8 mmol) asetonitriilissä (6 ml). Vaa-15 leankeltaista liuosta sekoitettiin 2 tuntia 0 °C:ssa, reaktio pysäytettiin kaatamalla se 200 ml:aan vettä, ja sen jälkeen uutettiin etyyliasetaatilla (2 x 250 ml). Yhdistetyt orgaaniset uutteet flash-kromatografoitiin [90 mm x 10 tuumaa (254 mm) - 60:40, heksaanit:etyyliase- 20 taatti + 2 % etikkahappoa, 90 mm x 7 tuumaa (178 mm) - 1:1, heksaanit, etyyliasetaatti + 0,5 % etikkahappoa, ; 90 mm x 12 tuumaa (305 mm) - 1:1, heksaanit, etyyliase- l'; taatti + 0,5 % etikkahappoa, 50 mm x 10 tuumaa (254 mm) - 1:1, heksaanit:etyyliasetaatti + 0,5 % etikkahappoa] ja 25 uudelleenkiteytettiin etyyliasetaatin ja heksaanien seoksesta, minkä jälkeen saatiin 1,10 g otsikon E yhdistettä, (S, R)-isomeeriä, s.p. 188 - 191 °C, TLC Rf = 0,22 (heksaa- * ’ nit/etyyliasetaatti + 0,5 % etikkahappoa), [a]D = -163,8° (c = 0,53, metanoli), ja 1,15 g (S,S )-2-[(asetyylitio)me-: 30 tyyli]-3,3,3-trifluori-N-[3-metyyli-l-(1H-tetratsol-5- ·,,,· yyli )butyyli]propaaniamidia, s.p. 180 - 184 °C, TLC Rf = 0,16 (heksaanit/etyyliasetaatti + 0,5 % etikkahappoa), ,···, [a]D = +60,6° (c = 0,51, metanoli).
t · I I * •
» I
* » * I · * » · * > 44 112213 f) (S,R)-3,3,3-trifluori-2-(merkaptometyyli)-N-[3-metyyli-1-(lH-tetratsol-5-yyli)butyyli]propaaniamidi
Suspensioon, jonka muodosti otsikon E (S,R)-isomee-riyhdiste (0,98 g, 2,8 mmol) 5,65 mlrssa vettä, josta oli 5 poistettu kaasut, lisättiin huoneenlämpötilassa ja käyttäen argonia suojakaasuna seos, jonka muodostivat väkevä NH40H (1,85 ml) ja vesi (1,85 ml). Kahden minuutin kuluttua reaktio pysäytettiin kylläisellä kaliumbisulfaatilla (pH 1,5) ja uutettiin etyyliasetaatilla. Orgaaniset uutteet 10 kuivattiin ja puhdistettiin flash-kromatografiällä
[50 mm x 6 tuumaa (152 mm), 1:1, heksaanit:etyyliasetaatti +0,5 % etikkahappoa], jolloin saatiin 0,72 g valkoista kiinteää tuotetta. Tätä ainetta trituroitiin heptaanin kanssa ja kuivattiin suurtyhjössä 100 °C:ssa, jolloin saa-15 tiin 0,7 g otsikon (S,R)-tuotetta, s.p. 189 - 193 °C
(haj.), TLC Rf = 0,18 (1:1, etyyliasetaattirheksaani + 0,5 % etikkahappoa). [a]D = -97,7° (c = 0,57, metanoli). Analyysi, laskettu yhdisteelle C10H16F3N5OS 0,1 CH3COOC2H5: C 39,02; H 5,29; N 21,88; F 17,80; S 10,01; SH 10,33; 20 Todettu: C 39,25; H 5,35; N 21,54; F 17,60; S 10,17; SH 10,62.
Esimerkki 40 : (S,S)-3,3,3-trifluori-2-(merkaptometyyli)-N-[3-me- ; tyyli-1-(1H-tetratsol-5-yyli)butyyli]propaaniamidi . : 25 Suspensioon, jonka muodosti (S, S )-2-[ (asetyylitio) - , : metyyli]-3,3,3-trifluori-N-[3-metyyli-l-( lH-tetratsol-5- yyli )butyyli]propaaniamidi [valmistettu esimerkissä 39(e), 1,034 g, 2,95 mmol] 6 ml:ssa vettä, josta oli poistettu kaasut, lisättiin huoneenlämpötilassa ja käyttäen argonia : ·’ 30 suojakaasuna seos, jonka muodostivat väkevä NH40H (1,95 ml) ja vesi (1,95 ml). Kahden minuutin kuluttua reaktio pysäy-tettiin kylläisellä kaliumbisulfaatilla (pH 1,5) ja uutet-tiin etyyliasetaatilla. Orgaaniset uutteet kuivattiin ja puhdistettiin flash-kromatografiällä [50 mm x 6 tuumaa » · : 35 (152 mm), 1:1, heksaanit:etyyliasetaatti + 0,5 % etikka- » » » » · 45 112213 happoa], jolloin saatiin 0,76 g valkoista kiinteää tuotetta. Tämä aine yhdistettiin 25 mg:n kanssa edellisestä kokeesta saatua ainetta ja uudelleenkoteytettiin etyyliasetaatin ja heksaanien seoksesta, jolloin saatiin 0,69 g 5 otsikon (S,S)-isomeerituotetta valkoisena kiinteänä aineena, s.p. 183 - 184 °C, TLC Rf =0,14 (1:1, heksaanit, etyyliasetaatti + 0,5 % etikkahappoa). [a]D = -39,8° (c = 0,57, metanoli).
Analyysi, laskettu yhdisteelle C10H16F3N5OS: C 38,58; H 5,18; 10 N 22,50; F 18,31; S 10,30; SH 10,62;
Todettu: C 38,70; H 5,27; N 22,43; F 17,67; S 10,28; SH 11,52.
Esimerkki 41 (S,R)-B-[[2-[ (asetyylitio) metyyli] -3,3,3-trifluori-15 1-oksopropyyli]amino]bentseenibutaanihappo a) 3-[[[(1,1-dimetyylietyyli)oksi]karbonyyli]amino] -2-okso-l-diatso-4-fenyylibutaani
Liuos, jonka muodosti N-[[(1,1-dimetyylietyyliJoksi] karbonyyli]-L-fenyylialaniini (20,01 g, 75 mmol) 20 150 ml:ssa kuivaa tetrahydrofuraania, jäähdytettiin -25 °C:seen ja käsiteltiin N-metyylimorfoliinilla (8,3 ml, . 75 mmol) ja isobutyyliklooriformaatilla (9,8 ml, 75 mmol) , ja sen jälkeen sekoitettiin -25 °C:ssa 10 minuuttia. Sen jälkeen reaktioseos suodatettiin astiaan, joka sisälsi . 25 diatsometaanin (valmistettu 35,48 g:sta, 240 mmol:sta N- , metyyli-N'-nitro-N-nitrosoguanidiinia) liuosta 300 ml:ssa vedetöntä eetteriä -78 °C:ssa, ja sitten annettiin lämmetä -5 °C:seen ja sekoitettiin yön yli. Sen jälkeen kylmä reaktioseos suodatettiin, ja suodos pestiin vedellä, kyl-: 30 Iäisellä natriumbikarbonaatilla ja suolaliuoksella. Orgaa- ninen kerros kuivattiin (MgS04), suodatettiin ja väkevöi-tv, tiin tyhjössä, jolloin saatiin punertavanruskeaa öljyä.
i t i !.! Öljyä trituroitiin kylmän petrolieetterin kanssa, jolloin Ί' saatiin 14,42 g vaaleankullanruskeaa kiinteää ainetta.
I i » 1·· 35 Emäliuos väkevöitiin ja sen annettiin seistä, jolloin saa- i t » > » · 1 46 112213 tiin toinen erä, 1,96 g vaaleankeltaisia kiteitä, otsikon A yhdisteen kokonaissaanto oli 16,38 g kullanruskeana kiinteänä aineena; s.p. 87 - 90 °C. [a]D = -32,2° (c = 1,15, metanoli).
5 b) 3-[[[(2,2-dimetyylietyyli)oksi]karbonyyli]ami no] -4-fenyylibutaanihapon metyyliesteri
Liuokseen, jonka muodosti otsikon A yhdiste (13,35 g, 45,9 mmol) metanolissa (300 ml), lisättiin tipoittaan hopeabentsoaatin (1,57 g, 6,85 mmol) liuosta tri-10 etyyliamiinissa (200 ml), ja seosta sekoitettiin 3 tuntia. Seuraavaksi lisättiin 5 g aktivoitua puuhiiltä ja sekoitettiin 15 minuuttia huoneenlämpötilassa, sen jälkeen seos suodatettiin ja suodos väkevöitiin tyhjössä, jolloin saatiin punertavanruskea öljy. Öljy otettiin talteen eet-15 teriin ja pestiin vedellä, 10-prosenttisella kaliumbisul-faatilla, kylläisellä natriumbikarbonaatilla ja suolaliuoksella. Orgaaninen kerros kuivattiin (MgS04), suodatettiin ja väkevöitiin tyhjössä, jolloin saatiin 11,71 g otsikon B yhdistettä beigenvärisenä kiinteänä aineena, s.p.
20 50 - 52 °C, [a]D = -2,0° (c = 1,15, metanoli).
Analyysi, laskettu yhdisteelle C16H23N04; C 65,50; H 7,90; N 4,78;
Todettu: C 65,48; H 8,04; N 4,86.
’ c) 3-[[[(2,2-dimetyylietyyli)oksi]karbonyyli]ami- 25 no]-4-fenyylibutaanihappo
Liuosta, jonka muodosti otsikon B yhdiste (11,0 g, ’ : 37,5 mmol) metanolissa (200 ml), käsiteltiin 1 N natrium- : ; hydroksidiliuoksella (75 ml, 75 mmol) ja sekoitettiin huo neenlämpötilassa 3,5 tuntia. Reaktioseos väkevöitiin tyh-30 jössä, ja jäännös otettiin talteen veteen ja pestiin kaksi kertaa etyyliasetaatilla. Sitten vesipitoinen kerros teh- I · tiin happamaksi 6 N HClilla ja uutettiin etyyliasetaatilla *.’·,* (4 x). Orgaaniset uutteet yhdistettiin, kuivattiin (MgS04), • · · suodatettiin ja väkevöitiin tyhjössä, jolloin saatiin • * * 47 112213 9,97 g otsikon C yhdistettä valkoisena kiinteänä aineena, s.p. 95 - 97 °C, [a]D = -13,5° (c = 0,77, metanoli).
Analyysi, laskettu yhdisteelle C15H21N04: C 62,56; H 7,79; N 4,86; 5 Todettu: C 62,65; H 7,45; N 4,77.
d) 3-amino-4-fenyylibutaanihapon vetykloridi
Liuosta, jonka muodosti otsikon C yhdiste (9,45 g, 33,8 mmol) etyyliasetaatissa (100 ml), käsiteltiin 310 ml:11a HCl/etyyliasetaattia (3,2 M, 992 mmol), ja sen 10 jälkeen sekoitettiin huoneenlämpötilassa 3 tuntia. Reak-tioseokseen johdettiin N2:a ja sen jälkeen suodatettiin. Suodatetut kiinteät aineet pestiin eetterillä ja sen jälkeen kuivattiin, jolloin saatiin 5,96 g otsikon D yhdistettä valkoisena kiinteänä aineena, s.p. 204 - 205 °C, 15 [aJD = +6,7° (c = 1,43, metanoli).
Analyysi, laskettu yhdisteelle C10H14C1N02 0,1 H20: C 55,24; H 6,58; N 6,37; Cl 16,31;
Todettu: C 55,54; H 6,45; N 6,37; Cl 16,01.
e) (S,R)-B-[[2-[(asetyylitio)metyyli]-3,3,3-tri- 20 fluori-l-oksopropyyli]amino]bentseenibutaanihappo
Liuos, jonka muodosti otsikon D yhdiste (5,0 g, 23,2 mmol) asetonitriilissä (200 ml), jäähdytettiin 0 °C:seen ja käsiteltiin etyylidi-isopropyyliamiinilla ' (4,05 ml, 23,3 mmol) ja bis(trimetyylisilyyli)trifluori- * 25 asetamidilla (12,3 ml, 46,3 mmol), ja sen jälkeen sekoi- • tettiin 0 °C:ssa 30 minuuttia. Seuraavaksi lisättiin ti- : poittain2-trifluorimetyyli-3-asetyylitiopropionyyliklori- : ; : din (5,45 g, 23,2 mmol) liuos asetonitriilissä (20 ml), ja reaktioseoksen annettiin lämmetä huoneenlämpötilaan yön 30 aikana. Reaktioseos väkevöitiin tyhjössä, ja jäännös otet- ,··’·, tiin talteen etyyliasetaattiin ja pestiin 1 N HCl:lla (2 x), vedellä ja suolaliuoksella. Orgaaninen kerros kui-vattiin (MgS04), suodatettiin ja väkevöitiin tyhjössä, jol-loin saatiin 14,8 g syvänkeltaista öljynä. Raakatuotetta 35 trituroitiin kolme kertaa heksaanin ja etyyliasetaatin
* I
♦ » M · 48 112213 seoksen kanssa ja käsiteltiin väriä poistavalla hiilellä etyyliasetaatissa, jolloin saatiin 8,96 g vaaleankeltaista kiinteää ainetta. Raakatuotteena oleva kiinteä aine flash-kromatografoitiin käyttäen 2 1 silikageeliä ja heksaanin, 5 etyyliasetaatin ja etikkahapon seosta (125:75:1), jolloin eluoitui (S,R)-isomeeri, ja sen jälkeen vaihdettiin etyyliasetaatin, heksaanin ja etikkahapon seokseen (150:75:1), jolloin eluoitui (S,S)-isomeeri. Saatiin 1,2 g (S,R)-isomeeriä, 2,1 g sekafraktioita ja 1,68 g (S,S)-isomeeriä.
10 (S,S)- ja (S,R)-isomeerejä trituroitiin kumpaakin heksaa nin ja etyyliasetaatin seoksella, jolloin saatiin 1,04 g (S,R)-isomeeriä ja 1,65 g (S,S)-isomeeriä. (S,S)-isomeerin trituroinnista saatu emäliuos ja sekafraktiot yhdistettiin ja flash-kromatografoitiin kuten edellä on kuvattu, jol-15 loin saatiin eristettyä 0,41 g (S,R)-isomeeriä ja 0,9 g (S,S)-isomeeriä sekä 1,25 g sekafraktioita. Sekafraktiot ja (S,R)-isomeerin trituroinnista saatu emäliuos flash-kromatografoltiin taas kuten edellä on kuvattu, jolloin saatiin eristettyä 1,34 g (S,R)-isomeeriä, 0,31 g (S,S)-20 isomeeriä ja 0,6 g sekafraktioita. Eri (S,R)-fraktiot yhdistettiin, jolloin saatiin 2,22 g tuotetta, ja eri (S,S)-fraktiot yhdistettiin, jolloin saatiin 2,47 g tuotetta.
Sen jälkeen (S,R)-isomeeriä trituroitiin heksaanin ja * 1 etyyliasetaatin seoksella, käsiteltiin väriä poistavalla ! 1 25 hiilellä etyyliasetaatissa ja lopuksi uudelleenkiteytet- : tiin etyyliasetaatin ja heksaanin seoksesta, jolloin saa- • tiin 1,31 g otsikon (S,R)-isomeerituotetta valkoisena : : kiinteänä aineena, s.p. 171 - 172 °C, TLC Rf = 0,28 (hek- saani:etyyliasetaatti:etikkahappo, 100:100:1). [a]D = I'.'; 30 -111,5° (c = 0,75, metanoli).
• (
Analyysi, laskettu yhdisteelle C16H18F3N04: C 50,92; H 4,81; N 3,71; F 15,10; S 8,50; V.: Todettu: C 50,63; H 4,74; N 3,87; F 14,91; S 8,16.
• · • · • · 1 · • · « • « · • · 49 112213
Esimerkki 42 (S, S) -B-[ [2-[ (asetyylitio)metyyli] -3,3,3-trifluori-1-oksopropyyli]amino]bentseenibutaanihappo
Esimerkin 41 (e) (S,S)-isomeeriä (2,47 g) trituroi-5 tiin heksaanin ja etyyliasetaatin seoksella, käsiteltiin väriä poistavalla hiilellä etyyliasetaatissa ja lopuksi uudelleenkoteytettiin etyyliasetaatin ja heksaanin seoksesta, jolloin saatiin 1,39 g otsikon (S,S)-isomeerituotetta valkoisena kiinteänä aineena, s.p. 160 - 162 °C, TLC 10 Rf = 0,17 (heksaani:etyyliasetaattitetikkahappo, 100:100:1). [a]D = +103,2 (c = 0,69, metanoli).
Analyysi, laskettu yhdisteelle C16H18NF304S 0,25 H20: C
50,31; H 4,88; N 3,67; F 14,92; S 8,39;
Todettu: C 50,57; H 4,67; N 3,90; F 14,53; S 8,05.
15 Esimerkki 43 (S,R)-B-[[3,3,3-trifluori-2-(merkaptometyyli)-1-oksopropyyli]amino]bentseenibutaanihappo
Esimerkin 41 tuote (0,81 g, 2,1 mmol) liuotettiin 5 M NH40H:iin (10 ml, 50 mmol) 0 °C:ssa käyttäen argonia 20 suojakaasuna, ja sekoitettiin 5 minuuttia. Reaktio pysäytettiin 0 °C:ssa 150 ml:11a 10-prosenttista kaliumbisul-faattia ja sen jälkeen uutettiin etyyliasetaatilla (4 x). Orgaaniset uutteet yhdistettiin, kuivattiin (MgS04), suodatettiin ja väkevöitiin tyhjössä, jolloin saatiin 0,94 g 25 kkeltaista kiinteää ainetta. Raakatuote flash-kromatogra-foitiin käyttäen 300 ml silikageeliä ja eluoiden l:l-suh-teisella heksaanin ja etyyliasetaatin seoksella, jossa oli 0,5 % etikkahappoa, jolloin saatiin 0,46 g valkoista kiinteää ainetta, joka oli halutun (S,R)-tuotteen ja vastaavan . 30 (S,S)-aineen seos. Sen jälkeen seos erotettiin käänteis- faasipreparatiivisella HPLC:lla käyttäen 50 % seosta, jos- I » ‘1’ sa oli 90 % metanolia, 10 % vettä ja 0,1 % trifluorietik- V.: kahappoa, ja 50 % seosta, jossa oli 90 % vettä, 10 % meta- nolia ja 0,1 % trifluorietikkahappoa), virtausnopeudella ;·, 35 63 ml/min, jolloin saatiin eristettyä 0,36 g otsikon > · * * i 50 112213 (S,R)-isomeeriä kullanruskeana kiinteänä aineena, s.p.
208 - 210 °C, TLC Rf = 0,19 (heksaani:etyyliasetaatti:etik-kahappo, 100:100:1). [a]c = -38,9° (c = 0,70, metanoli). Analyysi, laskettu yhdisteelle C14H16F3N03S 0,25 H20: C
5 49,47; H 4,90; N 4,12; F 16,77; S 9,43; SH 9,73;
Todettu: C 49,21; H 4,48; N 4,04; F 16,40; S 9,52; SH
9,49.
Esimerkki 44 (S,S)-B-[[3,3,3-trifluori-2-(merkaptometyyli)-Ι-ΙΟ oksopropyyli]amino]bentseenibutaanihappo
Esimerkin 42 (S,S)-isomeerituote (1,26 g, 3,3 mmol) liuotettiin 5 M NH40H:iin (20 ml, 100 mmol) ja sekoitettiin 0 °C:ssa 5 minuuttia, ja sen jäkleen reaktio pysäytettiin 10-prosenttisella kaliumbisulfaatilla. Sitten reaktioseos-15 ta uutettiin etyyliasetaatilla (4 x), ja orgaaniset uutteet yhdistettiin, kuivattiin (MgS04), suodatettiin ja vä-kevöitiin tyhjössä, jolloin saatiin 1,16 g keltaista jäännöstä. Raakatuote flash-kromatografoltiin käyttäen 200 ml silikageeliä ja käyttäen 100:100:1-suhteista heksaanin, 20 etyyliasetaatin ja etikkahapon seosta eluenttina, jolloin saatiin eristettyä 800 mg valkoista kiinteää ainetta. Tätä tuotetta trituroitiin sitten heksaanin ja etyyliasetaatin seoksen kanssa, jolloin saatiin 720 mg otsikon (S,S)-iso- » meerituotetta valkoisena kiinteänä aineena, s.p. 177 - 25 178 °C, TLC Rf = 0,10 (heksaani:etyyliasetaatti:etikkahap- : po, 100:100:1). [a]D = +41,6° (c = 0,55, metanoli).
»
• · Analyysi, laskettu yhdisteelle C14H16F3N03S 0,06 H20: C
• ί 49,98; H 4,83; N 4,16; F 16,94; S 9,53; SH 9,83;
Todettu: C 50,11; H 4,85; N 4,03; F 16,56; S 9,47; SH 30 9,74.
t · · » * · • * • · I I » • · • · » • · • * * t · ♦ • · » · · » · • · • * · • · » · » · * » · · | » | t M· 51 112213
Esimerkki 45 (S) -3-hydroksi-N- [3,3,3-trifluori-2- (merkap tome tyyli) -1-oksopropyyli]-L-tyrosiini a) (S)-3-hydroksi-N-[2-[(asetyylitio)metyyli]- 5 3,3,3-trifluori-l-oksopropyyli]-L-tyrosiini
Bis(trimetyylisilyyli)trifluoriasetamidia (16 ml, 60 mmol) lisättiin suspensioon, jonka muodosti 3-hydroksi-L-tyrosiini (2,37 g, 12 mmol) 25 ml:ssa asetonitriiliä 0 °C:ssa. Suspensiota sekoitettiin 6 tuntia huoneenlämpö-10 tila, minkä jälkeen se jäähdytettiin uudelleen 0 °C:seen. Lisättiin 2-trifluorimetyyli-3-asetyylitiopropionyyliklo-ridia (2,81 g, 12 mmol) liuoksena 5 ml:ssa asetonitriiliä, ja reaktioseosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 20 tuntia. Reaktioseos kaadettiin noin 150 ml:aan 1 N HCl:a, 15 minkä jälkeen kaksifaasiseosta sekoitettiin huoneenlämpö- tilassa 30 minuuttia. Tässä vaiheessa seosta uutettiin etyyliasetaatilla (2 x 200 ml), ja yhdistetty orgaaninen kerros pestiin vedellä (200 ml), sitten suolaliuoksella (100 ml), kuivattiin (MgS04) ja sen jälkeen väkevöitiin 20 öljymäiseksi jäännökseksi. Kromatografoitiin useita ker toja, minkä jälkeen saatiin eristettyä valkoisena vaahtona » · · 1,71 g (R)-3-hydroksi-N- [2-[( asetyylitio )metyyli] -3,3,3- trifluori-l-oksopropyyli]-L-tyrosiinia, [a]D = -6,5° (c = : 0,15, metanoli), ja 1,63 g (S)-3-hydroksi-N-[2-[( asetyyli- j 25 tio)metyyli]-3,3,3-trif luori-l-oksopropyyli] -L-tyrosiinia, s.p. 175 - 184 °C, [a]D = +106,3° (c = 0,49, metanoli), eristettiin luonnonvalkoisena amorfisena kiinteänä ainee- ♦ » · ♦ 1 · na.
,, , b) (S)-3-hydroksi-N-[3,3,3-trifluori-2-(merkapto- • 1 · •f<;’ 30 metyyli)-1-oksopropyyli]-L-tyrosiini • · ’··.1 Väkevää ammoniumhydroksidia (2,5 ml) lisättiin sus- pensioon, jonka muodosti otsikon A (S)-isomeerituote • · (1,4 g, 3,54 mmol) vedessä, josta oli poistettu happi,
« « I
huoneenlämpötilassa. Sameaa reaktioseosta sekoitettiin 35 minuutin ajan, minkä jälkeen lisättiin kylläistä kalium- • · • · • · · 52 112213 bisulfaattiliuosta, kunnes saavutettiin pH, joka oli noin 1,5. Hapanta seosta uutettiin etyyliasetaatilla (2 x 125 ml) ja yhdistetyt orgaaniset kerrokset pestiin suolaliuoksella, kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin. Jäännös 5 kromatografoitiin käyttäen 5 x 12 cm:n silikageelipylvästä ja käyttäen etyyliasetaatin, heksaanin ja etikkahapon seosta (55:45:2) liikkuvana faasina. Puhtaimmat fraktiot väkevöitiin, jolloin saatiin 997 mg valkoista vaahtoa, joka kromatografoitiin uudelleen käyttäen 5 x 12 cm:n si-10 likageelipylvästä ja käyttäen etyyliasetaatin, heksaanin ja etikkahapon seosta (40:60:2) liikkuvana faasina. Puhtaimmat fraktiot väkevöitiin vaahtomaiseksi jäännökseksi, joka kerahaihdutettiin perusteellisesti tolueenista, hep-taanista, metyleenikloridista ja heksaanista. Ainetta tri-15 turoitiin perusteellisesti heptaanin ja pentaanin kanssa ja kuivattiin yön aikana suurtyhjössä huoneenlämpötilassa, jolloin saatiin 780 mg otsikon (S)-isomeerituotetta amorfisena kiinteänä aineena, s.p. 103 - 107 °C (haj.), [a]D = +52,5 (c = 0,55, metanoli).
20 Analyysi, laskettu yhdisteelle C13H14F3N05S 0,42 H20: C
43,28; H 4,14; N 3,88; F 15,80; S 8,89; SH 9,17;
: Todettu: C 43,51; H 4,40; N 3,65; F 15,63; S 8,90; SH
; 9,67.
; Esimerkki 46 *. 25 (R)-3-hydroksi-N-[3,3,3-trifluori-2-(merkaptometyy- ; li)-1-oksopropyyli]-L-tyrosiini
Suspensioon, jonka muodosti esimerkin 45(a) (R)-3-hydroksi-N-[2-[(asetyylitio)metyyli]-3,3,3-trifluori-1-oksopropyyli]-L-tyrosiini (1,5 g, 3,8 mmol) vedessä, josta : ·* 30 oli poistettu happi, huoneenlämpötilassa, lisättiin väke- vää ammoniumhydroksidia (2,6 ml). Sekoitettiin minuutin ;Y; ajan, minkä jälkeen lisättiin kylläistä kaliumbisulfaatti- liuosta, kunnes saavutettiin pH, joka oli noin 1,5. Hapanta seosta uutettiin etyyliasetaatilla (2 x 125 ml), ja » * * 35 yhdistetyt orgaaniset kerrokset pestiin suolaliuoksella, • » • « » 53 112213
kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin. Jäännöstä kromatografoi-tiin käyttäen 5 x 15 cm:n silikageelipylvästä ja käyttäen etyyliasetaatin, heksaanin ja etikkahapon seosta (55:45:2) liikkuvana faasina. Puhtaat fraktiot väkevöitiin ja kera-5 haihdutettiin heksaanista, jolloin saatiin kiinteä aine, jota trituroitiin heksaanin kanssa ja uudelleenkiteytet-tiin isopropanolin ja heksaanin seoksesta. Kiteinen kiinteä aine murskattiin hienoksi jauheeksi ja sekoitettiin heptaanissa 3 tuntia jäljelle jääneen isopropanolin pois-10 tamiseksi. Aine suodatettiin, pestiin heksaanilla ja kuivattiin 95 °C:ssa suurtyhjössä 24 tuntia, jolloin saatiin 586 mg otsikon (R)-isomeerituotetta valkoisena jauheena; s.p. 176 - 177 °C, [a]D = +2,5° (c = 0,32, metanoli). Analyysi, laskettu yhdisteelle C13H14F3N05S 0,16 H20: C
15 43,85; H 4,05; N 3,93; F 16,00; S 9,00; SH 9,29;
Todettu: C 43,99; H 4,22; N 3,79; F 15,60; S 8,87; SH 10,52.
Esimerkki 47 (S, S)-a-[[3,3,3-trifluori-2-(merkaptometyyli)-1-20 oksopropyyli]amino]sykloheksaanipropaanihappo a) N-[2-[(asetyylitio)metyyli]-3,3,3-trifluori-1-oksopropyyli]-L-sykloheksyylialaniini : Suspensioon, jonka muodosti L-sykloheksyyliamiini ·’’’: (2,6 g, 15,2 mmol) 35 ml:ssa asetonitriiliä 0 °C:ssa, li- ....j 25 sättiin bis (trimetyylisilyyli ) trif luoriasetamidia !lsl: (12,2 ml, 45,6 mmol). Suspensiota sekoitettiin 6 tuntia » · huoneenlämpötilassa. Merkittävä määrä kiinteää ainetta jäi * » · jäljelle. Reaktioseos jäähdytettiin 0 °C:seen, minkä jäl- ,, , keen lisättiin tipoittain 2-trifluorimetyyli-3-asetyyli- » · · • ·’ 30 tiopropionyylikloridia liuoksena 10 ml:ssa asetonitriiliä.
*.·’ Sekoitettiin 24 tuntia huoneenlämpötilassa, minkä jälkeen :Y; reaktioseos oli kirkas keltainen liuos. Reaktioseosta ja- kouutettiin etyyliasetaatilla (150 ml) ja IN HCl:lla (150 ml). Vesipitoista kerrosta uutettiin vielä 150 ml:11a • · : " 35 etyyliasetaattia. Yhdistetyt orgaaniset kerrokset pestiin • a i » a a a a · a 54 112213 vedellä (2 x 400 ml) ja suolaliuoksella (200 ml), kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin öljymäiseksi jäännökseksi. Kro-matografoitiin kaksi kertaa ja uudelleenkoteytettiin useita kertoja, minkä jälkeen saatiin eristettyä 1,7 g (R)-N-5 [2- [ (asetyylitio)metyyli] -3, 3,3-trifluori-l-oksopropyyli] - L-sykloheksyylialaniini, s.p. 142 - 145 °C, [a]D = -135,1° (c = 0,37, metanoli), ja 2,19 g (S)-N-[2-[(asetyylitio)-metyyli]-3,3,3-trifluori-l-oksopropyyli]-L-sykloheksyylialaniini, s.p. 106 - 109 °C, [a]D = +97,2° (c = 0,36, melo tanoli).
b)(S,S)-a-[[3,3,3-trifluori-2-(merkaptometyyli)-1-oksopropyyli]amino]sykloheksaanipropaanihappo
Suspensioon, jonka muodosti osan (a) otsikon (S)-isomeerituote (1,734 g, 4,69 mmol) vedessä, josta oli 15 poistettu happi, lisättiin huoneenlämpötilassa väkevää ammoniumhydroksidia (3,1 ml). Liukeneminen tapahtui lähes välittömästi, ja reaktioseosta sekoitettiin 10 minuuttia huoneenlämpötilassa. pH säädettiin noin arvoon 1,5 kylläisellä kaliumbisulfaattiliuoksella, ja seosta uutettiin 20 etyyliasetaatilla (200 ml). Orgaaninen kerros pestiin suo laliuoksella, kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin jäännöksek-, si, joka kromatografoitiin käyttäen 5 x 15 cm:n silikagee- lipylvästä. Eluoitiin heksaanin, etyyliasetaatin ja etik-kahapon seoksella (80:20:2), puhtaat fraktiot väkevöitiin • · 25 ja kerahaihdutettiin heptaanista, jolloin saatiin valkoi- « · * t · ’ nen kiinteä aine, jota trituroitiin heksaanin kanssa. Tätä kiinteää ainetta kuivattiin suurtyhjössä 18 tuntia, jol-·.’ ’ loin saatiin 1,28 g otsikon (S,S)-isomeerituotetta; s.p.
141 - 143 °C, [a]D = +13,6° (c = 0,85, metanoli).
| ' · 30 Analyysi, laskettu yhdisteelle C13H20F3NO3S: C 47,70; H 6,16; N 4,28; F 17,41; S 9,79; SH 10,10;
Todettu: C 47,61; H 6,15; N 4,12; F 17,24; S 9,49; SH
’f.:* 11,77.
• · • · • · 55 112213
Esimerkki 48 (S, R)-a-[[3,3,3-trifluori-2-(merkaptometyyli)-1-oksopropyyli]amino]sykloheksaanipropaanihappo
Suspensioon, jonka muodosti (R)-N-[2-[(asetyyli-5 tio)metyyli] -3,3,3-trif luori-l-oksopropyyli] -L-syklohek-syylialaniini, joka oli valmistettu kuten esimerkissä 47(a) on kuvattu, 10,5 ml:ssa vettä, josta oli poistettu happi, lisättiin huoneenlämpötilassa väkevää ammoniumhyd-roksidia (2,6 ml). Liukeneminen tapahtui lähes välittömäs-10 ti, ja muodostunutta liuosta sekoitettiin 5 minuuttia.
Tänä aikana reaktioseos tehtiin happamaksi pH-arvoon 1,5 kylläisellä kaliumbisulfaattiliuoksella. Muodostunutta suspensiota uutettiin etyyliasetaatilla (noin 250 ml). Orgaaninen kerros pestiin suolaliuoksella, kuivattiin 15 (MgS04) ja väkevöitiin luonnonvalkoiseksi kiinteäksi ai neeksi. Tämä aine kromatografoitiin käyttäen 2,5 x 20 cm:n silikageelipylvästä ja käyttäen etyyliasetaatin, heksaanin ja etikkahapon seosta (80:20:2) liikkuvana faasina. Puhtaat fraktiot väkevöitiin, kerahaihdutettiin heptaanista 20 ja trituroitiin heksaanin kanssa, jolloin saatiin 858 mg otsikon (S,R)-isomeeriä valkoisena kiinteänä aineena, s.p.
: : 116 - 118 °C, [a]D = -47,2° (c = 0,65, metanoli).
: Analyysi, laskettu yhdisteelle C13H20F3N03S: C 47,69; H 6,16; :* *. N 4,28; F 17,41; S 9,79; SH 10,10; 25 Todettu: C 47,89; H 6,29; N 4,15; F 16,76; S 9,66; SH 10,30.
.,, Esimerkki 49 ‘ (R)-N-[2-[(asetyylitiö)metyyli]-3,3,3-trifluori-l- oksopropyyli ]-L-tyrosiini • ·* 30 Suspensio, jonka muodosti L-tyrosiini (2,72 g, 15 mmol) 50 ml:ssa kuivaa asetonitriiliä ja jossa käytet-tiin argonia suojakaasuna, jäähdytettiin 0-5 °C:seen, ja .···. lisättiin bis( trimetyylisilyyli)trif luoriasetamidia ·’ (12 ml, 45 mmol). Reaktioseosta sekoitettiin ja lämmitet- * · : '* 35 tiin vähitellen huoneenlämpötilaan. 2 tunnin kuluttua li- 56 112213 sättiin 3 ml dimetyyliformamidia, ja sekoitettiin yön yli huoneenlämpötilassa. Koska reaktioseos oli vielä vaalea suspensio, siihen lisättiin vielä 2 ml dimetyyliformamidia ja sekoitettiin 2 tuntia huoneenlämpötilassa, minkä jäl-5 keen lisättiin 3 ml bis(trimetyylisilyyli)trifluoriaset-amidia, mikä johti siihen, että 2,5 tunnissa muodostui kirkas liuos. Reaktioseos jäähdytettiin 0-5 °C:seen, ja siihen lisättiin tipoittain 2-trifluori-3-asetyylitiopro-pionyylikloridia (3,52 g, 15 mmol), joka oli liuotettu 10 7 ml:aan asetonitriiliä, ja seos lämmitettiin vähitellen huoneenlämpötilaan. Reaktioseos haihdutettiin keltaiseksi siirappimaiseksi jäännökseksi, jakouutettiin etyyliasetaatilla (100 ml) ja vedellä (100 ml). Vesipitoista kerrosta uutettiin edelleen vielä etyyliasetaatilla (4 x 75 ml), ja 15 yhdistetty etyyliasetaattiuute pestiin suolaliuoksella (75 ml), kuivattiin (MgS04) ja haihdutettiin, jolloin saatiin 10,5 g keltaista kiinteää jäännöstä. Tämä yhdistettiin 2,5 g:n kanssa raakatuotetta, joka oli valmistettu toisella kerralla. Tämä 13 g raakatuotetta flash-kromato-20 grafoitiin silikageelillä (120:1, silikageeli:yhdiste) käyttäen etyyliasetaatin, heksaanien ja etikkahapon seosta : : ; (100:100:1) eluenttina, jolloin saatiin 2,29 g nopeammin ;' ; eluoituvaa diastereomeeriä (isomeeriä A), 2,31 g molempien r. . diastereomeerien seosta ja 1,88 g hitaammin eluoituvaa : 25 diastereomeeriä (isomeeriä B). 2,29 g:n erää trituroitiin i((ii· etyyliasetaatin ja heksaanien seoksen (1:1) kanssa, jol loin saatiin 1,25 g puhdasta isomeeriä A ja 0,83 g emä-’ liuosta, joka sisälsi molempia isomeerejä. 1,88 g ainetta käsiteltiin samalla tavalla etyyliasetaatin ja heksaanien • · * > ·' 30 seoksella (1:2), jolloin saatiin 1,2 g puhdasta isomeeriä B ja 0,38 g emäliuosta, joka sisälsi enimmäkseen isomeeriä B. 2,31 g:n fraktio kiteytettiin etyyliasetaatin ja hek- ,···, saanien seoksesta (1:1), jolloin saatiin 0,8 g puhdasta '· isomeeriä A ja 1,5 g isomeerien A ja B seosta. Yhdistetyt • · : ** 35 sekafraktiot, 2,71 g, kromatografoitiin uudelleen kaksi • » · * ·
»M
57 112213 kertaa käyttäen samoja olosuhteita, jolloin saatiin 0,41 g puhdasta isomeeriä A ja 1,14 g puhdasta isomeeriä B. 0,8 g:n, 1,25 g:n ja 0,41 g:n erät puhdasta isomeeriä A yhdistettiin ja trituroitiin ensin heksaanien kanssa, jot-5 ka sisälsivät muutaman tipan etyyliasetaattia, ja sen jälkeen uudelleenkiteytettiin etyyliasetaatin ja heksaanien seoksesta (1:1), jolloin saatiin 1,8 g otsikon (R)-isomee-rituotetta valkoisena kiteisenä kiinteänä aineena; s.p. 202 - 204 °C, [a]D = -85,7° (c = 1,0, metanoli).
10 Analyysi, laskettu yhdisteelle C15H16F3N05S: C 47,49; H 4,25; N 3,69; F 15,02; S 8,45;
Todettu: C 47,55; H 4,16; N 3,62; F 14,70; S 8,25.
Esimerkki 50 (S)-N-[2-[(asetyylitio)metyyli]-3,3,3-trifluori-1-15 oksopropyyli]-L-tyrosiini
Esimerkin 49 1,2 g:n ja 1,14 g:n erät puhdasta isomeeriä B yhdistettiin ja niitä trituroitiin heksaanin kanssa, joka sisälsi muutaman tipan etyyliasetaattia, jolloin saatiin 2,2 g otsikon (S)-isomeerituotetta valkoisena 20 kiinteänä aineena, s.p. 170 - 173 °C, [a]D = +11,8° (c = 1,0, metanoli).
.* Analyysi, laskettu yhdisteelle C15H16F3N05S: C 47,49; H 4,25; :T: N 3,69; F 15,02; S 8,45; I’ Todettu: C 47,49; H 4,22; N 3,67; F 14,67; S 8,27.
a I
, 25 Esimerkki 51 , (R)-N-[3,3,3-trifluori-2-(merkaptometyyli)-1-okso- . . propyyli]-L-tyrosiini • a
Suspensiota, jonka muodosti esimerkin 49 (R)-iso-meerituote (1,66 g, 4,4 mmol) 2,8 ml:ssa väkevää ammonium- • a : ·* 30 hydroksidia ja 6,2 ml:ssa vettä, sekoitettiin huoneenläm- • » pötilassa käyttäen argonia suojakaasuna 7 minuuttia. Muo-dostunut kirkas liuos tehtiin happamaksi 5-prosenttisella kaliumbisulfaattiliuoksella pH-arvoon 1,5, ja uutettiin * » a 75 ml:11a etyyliasetaattia ja sen jälkeen vielä 3 x : ” 35 50 ml:n erällä etyyliasetaattia. Yhdistetty etyyliasetaat- • · • ♦ • t · 58 112213 tiuute pestiin suolaliuoksella (75 ml), kuivattiin (MgS04) ja haihdutettiin, jolloin saatiin 1,48 g valkoista kiteistä kiinteää ainetta. Tämä raakatuote flash-kromatografoltiin silikageelillä (240:1, silikageeli:yhdiste) käyttäen 5 etyyliasetaatin, heksaanien ja etikkahapon seosta (100:100:1) eluenttina, jolloin saatiin 1,32 g otsikon (R)-isomeerituotetta valkoisena kiteisenä kiinteänä aineena, s.p. 204 - 206 °C, [a]D = +5,2° (c = 1,0, metanoli). Analyysi, laskettu yhdisteelle C13H14F3N04S: C 46,29; H 4,18; 10 N 4,15; F 16,90; S 9,50; SH 9,80;
Todettu: C 46,32; H 4,02; N 4,04; F 16,60; S 9,52; SH 9,86.
Esimerkki 52 (S)-N-[3,3,3-trifluori-2-(merkaptometyyli)-1-okso-15 propyyli]-L-tyrosiini
Suspensiota, jonka muodosti esimerkin 50 (S)-iso-meerituote (2,05 g, 5,4 mmol) 3,5 ml:ssa väkevää ammonium-hydroksidia ja 7,6 ml:ssa vettä, sekoitettiin huoneenlämpötilassa käyttäen argonia suojakaasuna 7 minuuttia. Kir-20 kas liuos tehtiin happamaksi 150 ml:11a 5-prosenttista kaliumbisulfaattiliuosta ja uutettiin 75 ml:11a etyyliasetaattia ja sen jälkeen vielä 4 x 50 ml:11a etyyliasetaat-! tia. Yhdistetty etyyliasetaattiuute pestiin suolaliuoksel- la (100 ml), kuivattiin (MgS04) ja haihdutettiin alipai-, 25 neessa, jolloin saatiin 1,95 g luonnonvalkoista kiinteää ainetta. Flash-kromatografoitiin käyttäen 400 g silikagee-liä ja käyttäen etyyliasetaatin, heksaanien ja etikkahapon ‘ seosta (100:100:1) eluenttina, jolloin saatiin 1,56 g ot sikon (S)-isomeeriä valkoisena kiteisenä kiinteänä ainee-
• · I
: .* 30 na; s.p. 184 - 187 °C, [a]D = +59,0° (c = 1,0, metanoli).
·...· Analyysi, laskettu yhdisteelle C13H14F3N04S: C 46,29; H 4,18; .V. N 4,15; F 16,90; S 9,50; SH 9,80;
,···. Todettu: C 46,38; H 4,13; N 4,12; F 16,73; S 9,37; SH
• · ./ 9,44.
• · » * · • · 59 1 12213
Esimerkki 53 (S,S) -3,3,3-trifluori-2- (merkaptometyyli)-N-[2-(1H-indol-3-yyli)-1-(lH-tetratsol-5-yyli)etyyli]propaaniamidi a) (S)-a-(lH-tetratsol-5-yyli)-lH-indoli-3-etaani-5 amiinin vetykloridi
Liuokseen, jonka muodosti N-[(1,1-dimetyylietoksi)-karbonyyli]-L-tryptofaani (7,74 g, 25,42 mmol) metyleeni-kloridissa (150 ml) -20 °C:ssa ja jossa käytettiin argonia suojakaasuna, lisättiin N-metyylimorfoliinia (2,79 ml, 10 25,42 mmol) ja sen jälkeen isobutyylikloroformaattia (3,31 ml, 25,42 mmol). Muodostunutta suspensiota sekoitettiin -20 °C:ssa 15 minuuttia, jona aikana lisättiin 5,6 M NH3/metanolia (45 ml, 252 mmol). 30 minuutin jälkeen -20 °C:ssa reaktio pysäytettiin vedellä ja reaktioseos 15 lämmitettiin huoneenlämpötilaan. Kerrokset erotettiin, ja vesipitoista kerrosta uutettiin kaksi kertaa metyleenik-loridilla. Yhdistetyt orgaaniset uutteet kuivattiin (MgS04) ja haihdutettiin, jolloin saatiin 8,0 g valkoista kiinteää ainetta. Uudelleenkiteytettiin etyyliasetaatin ja heksaa-20 nien seoksesta, jolloin saatiin 6,6 g N-[1,1-dimetyylietoksi ) karbonyyli] -L-tryptofaaniamidia.
: ;'· Liuokseen, jonka muodosti trietyyliamiini (10,5 ml, . 75,16 mmol) bentseenissä (40 ml) 10 °C:ssa ja jossa käy- tettiin argonia suojakaasuna, lisättiin 30 minuutin aikana ’ 25 kloorisulfonyylimetyylikarbamaattia (6,5 g, 37,58 mmol), . joka oli liuotettu bentseeniin (70 ml). Reaktioseosta se- » · , ( koitettiin vielä 30 minuuttia huoneenlämpötilassa, minkä • > · *·' jälkeen lisättiin 10 minuutin aikana N-[(1,1-dimetyyli etoksi )karbonyyli]-L-tryptofaaniamidia (5,7 g, ! *,·’ 30 18,79 mmol), joka oli liuotettu vedettömään tetrahydrofu- ί,,,ί raaniin (100 ml). Saatua seosta sekoitettiin tunnin ajan, ja sen jälkeen kaadettiin flash-kromatografiapylvääseen * · · [50 mm x 6 tuumaa (152 mm), eluointi 60:40-suhteisella • · heksaanien ja etyyliasetaatin seoksella], jolloin saatiin • ’*· 35 4,22 g N- [(1,1-dimetyylietoksi )karbonyyli]-L-tryptofanyy- * » • · 60 112213 linitriiliä valkoisena kiinteänä aineena. TLC Rf = 0,47 (1:1, etyyliasetaatti:heksaanit), [a]D = -35,8° (c = 0,57, metanoii).
Liuosta, jonka muodostivat tämä nitriiliyhdiste 5 (2,42 g, 8,48 mmol) ja tributyylitina-atsidi (4,25 g, 12,72 mmol) ksyleeneissä (20 ml), sekoitettiin 90 °C:ssa tunnin ajan. Seos jäähdytettiin huoneenlämpötilaan ja kaadettiin suoraan flash-kromatografiapylvääseen [50 mm x 8 tuumaa (203 mm), eluointi 2 1:11a 60:40-suhteista heksaa-10 nien ja etyyliasetaatin seosta, jossa oli 2 % etikkahap-poa, ja 1 1:11a 3:1-suhteista etyyliasetaatin ja heksaa-nien seosta, jossa oli 2 % etikkahappoa], jolloin saatiin 1,91 g (S-[2-(lH-indol-3-yyli)-1-(lH-tetratsol-5-yyli)- etyyli]karbamiinihapon 1,1-dimetyylietyyliesteriä valkoi-15 sena kiinteänä aineena. TLC Rf = 0,09 (60:40, heksaa- nit:etyyliasetaatti + 2 % etikkahappoa), [a]D = +2,23° (c = 0,71, metanoli).
Etyyliasetaatti (30 ml) kyllästettiin HCl-kaasulla 0 °C:ssa, minkä jälkeen lisättiin anisolia (7,4 ml) ja sen 20 jäkeen (S)—[2—(lH-bentsimidatsol-3-yyli)-1-(lH-tetratsol- 5-yyli)etyyli]karbami inihapon 1,1-dimetyylietyyliesteriä V (1,24 g, 3,77 mmol), joka oli liuotettu etyyliasetaattiin ; (7 ml). Saatua liuosta sekoitettiin 0 °C:ssa tunnin ajan, ·’· ; minkä jälkeen TLC osoitti, ettei jäljellä ollut enää läh- ...·· 25 töainetta. Reaktioseos haihdutettiin ja käsiteltiin mety- leenikloridilla ja eetterillä ja lopuksi kuivattiin pum-pulla 0,95 g:ksi (S)-a-( lH-tetratsol-5-yyli )-lH-indol-3- > · » etaaniamiinin vetykloridia vaaleanruskeana kiinteänä ai-,, , neena.
• 30 b)(2S)-trifluorimetyyli-3-asetyylitiopropionihapon i * ephedriinisuola :Y: 2-trif luorimetyyli-3-asetyylitiopropionihappoa .·**. (7,18 g, 33,2 mmol), joka oli eetterissä (100 ml), käsi- ,,· teltiin (IS, 2R)-( + )-ephedriinillä (2,73 g, 16,6 mmol) eet- • · • 1’ 35 terissä (100 ml) ja annettiin seistä 18 tuntia. Sen jäi- • » i · • · · 112213 61 keen reaktioseos suodatettiin, jolloin saatiin 5,37 g kiinteää ainetta, joka uudelleenkiteytettiin etyyliasetaatista (4 x 40 ml), jolloin saatiin 3,47 g (2S)-trifluori-metyyli-3-asetyylitiopropionihapon ephedriinisuolaa, s.p.
5 139 - 140 °C, [a]D = +100,0° (c = 1,0, metanoli).
c) (S,S)-2-[(asetyylitio)metyyli]-3,3,3-trifluori-N-[2-(lH-indol-3-yyli)-1-(1H-tetratsol-5-yyli)etyyli]pro-paaniamidi
Osan (b) ephedriinisuolatuotetta (2,2 g, 5,74 mmol) 10 ravistettiin erotussuppilossa etyylieetterin (50 ml) ja veden (50 ml) kanssa, joka sisälsi 1 N HCl:a (5,74 ml). Orgaaninen kerros erotettiin, kuivattiin (MgS04), haihdutettiin ja atseotropoitiin metyleenikloridin kanssa. Saatu vapaa karboksyylihappo liuotettiin metyleenikloridiin 15 (14 ml), johon oli lisätty oksalyylikloridia (0,5 ml, 5,74 mmol), ja sen jälkeen lisättiin varovasti tipoittain dimetyyliformamidia (0,05 ml). Saatua seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 2 tuntia. Samaan aikaan suspensioon, jonka muodosti otsikon A tuote (1,73 g, 5,74 mmol) aseto-20 nitriilissä (30 ml) 0 °C:ssa ja jossa käytettiin argonia suojakaasuna, lisättiin bis(trimetyylisilyyli)trifluori-• asetamidia (6,3 ml, 24,12 mmol), ja muodostunutta sameaa I liuosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 2 tuntia. Sen •jälkeen tämä liuos jäähdytettiin -25 °C:seen, minkä jäl-25 keen siihen lisättiin tipoittain 15 minuutin aikana edellä mainittu (2S)-trifluorimetyyli-3-asetyylitiopropionihappo- kloridi. Vaaleankeltaista liuosta sekoitettiin 2 tuntia, -25 - -15 °C:ssa, minkä jälkeen reaktio pysäytettiin kaa-, tamalla seos veteen (75 ml), ja uutettiin etyyliasetaatti- I · ·1 30 la (2 x 75 ml). Yhdistetyt orgaaniset uutteet pestiin suo- laliuoksella (75 ml), kuivattiin (Na2S04) ja haihdutettiin kiinteäksi aineeksi. Flash-kromatografoitiin [pylväs • · 50 mm x 8 tuumaa (203 mm), eluointi 2 1:11a 1:1-suhteista heksaanin ja etyyliasetaatin seosta, jossa oli 1 % etik-: “ 35 kahappoa, 1 1:11a 3:1-suhteista etyyliasetaatin ja heksaa- * t » · • · · 62 112213 nien seosta, jossa oli 2 % etikkahappoa, 1 1:11a 4:l-suh-teista etyyliasetaatin ja heksaanien seosta, jossa oli 2 % etikkahappoa, 1 1:11a 9:1-suhteista etyyliasetaatin ja heksaanien seosta, jossa oli 2 % etikkahappoa] ja uudel-5 leenkiteytettiin etyyliasetaatin ja heksaanien seoksesta,
minkä jälkeen saatiin 1,52 g otsikon C (S,S)-isomeerituo-tetta valkoisena kiinteänä aineena, s.p. 208 - 213 °C
(haj.), TLC Rf = 0,13 (60:40, heksaanit:etyyliasetaat ti + 2 % etikkahappoa), [a]D = -163,8° (c = 0,53, metano-10 li).
d) (S,S)-3,3,3-trifluori-2-(merkaptometyyli)-N-[2-(lH-indol-3-yyli)-1-(lH-tetratsol-5-yyli)etyyli]propaani-amidi
Suspensioon, jonka muodosti otsikon C tuote 15 (1,14 g, 2,67 mmol) vedessä, josta oli poistettu kaasut (5,3 ml), huoneenlämpötilassa ja jossa käytettiin argonia suojakaasuna, lisättiin väkevän NH40H:n (1,76 ml) ja veden (1,76 ml) seos. 2 minuutin kuluttua reaktio pysäytettiin kylläisellä kaliumbisulfaatilla (pH 1,5), ja muodostunut 20 kiinteä aine suodatettiin ja puhdistettiin trituroimalla etyyliasetaatin, etyylieetterin ja heksaanien seoksen kanssa, jolloin saatiin 0,73 g (S,S)-isomeerituotetta valkoisena kiinteänä aineena, s.p. 218 - 223 °C (haj.), TLC ' ; Rf = 0,13 (60:40, heksaanit:etyyliasetaatti + 2 % etikka- 25 happoa), [a]D = +54,8° (c = 0,54, metanoli).
Analyysi, laskettu yhdisteelle C15H15F3N6OS: C 46,87; H 3,93; ,; , N 21,86; F 14,83; S 8,34; SH 8,60; i *
Todettu: C 47,22; H 3,80; N 21,71; F 14,99; S 8,05; SH 12,35.
» » * » I i t »
* » I
» · I
I » I t » » t I t 63 112213
Esimerkki 54 (S,R)-3,3,3-tri fluori-2- (merkaptometyyli) -N- [ 2- (1H-indol-3-yyli)-1-(lH-tetratsol-5-yyli)etyyli]propaaniamidi a) (2R)-trifluorimetyyli-3-asetyylitiopropionihapon 5 ephedriinisuola
Esimerkistä 53(b) saatu suodos haihdutettiin, käsiteltiin vesipitoisella HClrlla, ja sen jälkeen uutettiin etyyliasetaattiin, kuivattiin ja haihdutettiin, jolloin saatiin 3,8 g öljyä. Tämä öljy liuotettiin eetteriin 10 (40 ml) ja yhdistettiin (1R,2S)-(-)-ephedriinin (2,9 g, 17,6 mmol) kanssa, joka oli liuotettu eetteriin (40 ml), ja annettiin seistä 16 tuntia. Kiinteä aine suodatettiin ja uudelleenkiteytettiin etyyliasetaatista (2 x 40 ml), jolloin saatiin 4,0 g (2R)-trifluorimetyyli-3-asetyylitio-15 propionihapon ephedriinisuolaa, s.p. 138 - 139 °C, [a]D = -100,3° (c = 1,0, metanoli).
b) (S,R)-2-[(asetyylitio)metyyli]-3,3,3-trifluori-N-[2-(lH-indol-3-yyli)-1-(lH-tetratsol-5-yyli)etyyli]propaaniamidi 20 Otsikon A ephedriinisuolatuotetta (1,53 g, 4,0 mmol) ravistettiin erotussuppilossa etyylieetterin ; (50 ml) ja veden (50 ml) kanssa, joka sisälsi 1 N HCl:a : : (4,0 ml). Orgaaninen kerros erotettiin, kuivattiin (MgS04), • haihdutettiin ja atseotropoitiin metyleenikloridin kanssa.
; j 25 Saatu vapaa karboksyylihappo liuotettiin metyleeniklori- diin (10 ml), johon oli lisätty oksalyylikloridia (0,35 ml, 4,0 mmol), ja sen jälkeen lisättiin varovasti • * » tipoittain dimetyyliformamidia (0,035 ml). Saatua seosta , sekoitettiin huoneenlämpötilassa 2 tuntia. Samaan aikaan • · • ;* 30 suspensioon, jonka muodosti (S)-a-(lH-tetratsol-5-yyli)- • · ’··’ lH-indoli-3-etaaniamiinin vetykloridi (1,73 g, 5,74 mmol) asetonitriilissä (21 ml) 0 °C:ssa ja jossa käytettiin ar-gonia suojakaasuna, lisättiin bis(trimetyylisilyyli)tri-.,· fluoriasetamidia (4,4 ml, 16,8 mmol), ja muodostunutta :t [* 35 sameaa liuosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 2 tuntia.
• ♦ » * 64 112213
Sen jälkeen tämä liuos jäähdytettiin -25 °C:seen, ja lisättiin tipoittain 15 minuutin aikana happokloridiliuos. Vaaleankeltaista liuosta sekoitettiin 2 tuntia -25 --15 °C:ssa, minkä jälkeen reaktio pysäytettiin kaatamalla 5 seos veteen (50 ml) ja uutettiin etyyliasetaatilla (2 x 50 ml). Yhdistetyt orgaaniset uutteet pestiin suolaliuoksella (50 ml), kuivattiin (NaS04) ja haihdutettiin kiinteäksi aineeksi. Flash-kromatografoitiin [50 mm x 8 tuumaa (203 mm), eluointi 2 1:11a 1:1-suhteista heksaanien 10 ja etyyliasetaatin seosta, jossa oli 1 % etikkahappoa,
1 1:11a 3:1-suhteista etyyliasetaatin ja heksaanien seosta, jossa oli 2 % etikkahappoa] ja uudelleenkiteytettiin etyyliasetaatin ja heksaanien seoksesta, minkä jälkeen saatiin 0,68 g otsikon B tuotetta valkoisena kiinteänä 15 aineena. Emäliuokset haihdutettiin ja kromatografoitiin uudelleen [25 mm x 6 tuumaa (152 mm), eluointi 2 1:11a 1:1-suhteista heksaanien ja etyyliasetaatin seosta, jossa oli 1 % etikkahappoa ja uudelleenkiteytettiin etyyliasetaatin ja heksaanien seoksesta, minkä jälkeen saatiin vie-20 lä 0,26 g valkoista kiinteää ainetta, jolloin otsikon B tuotteen kokonaissaanto oli 0,96 g, s.p. 206 - 213 °C
: ; (haj.), TLC Rf = 0,23 (60:40, heksaanit:etyyliasetaatti + . . 2 % etikkahappoa), [a]D = -93,3° (c = 0,52, metanoli).
;· , c) (S,R)-3,3,3-trifluori-2-(merkaptometyyli)-N- [2- i ; 25 (lH-indol-3-yyli)-l-(lH-tetratsol-5-yyli)etyyli]propaani- . amidi , Suspensioon, jonka muodosti otsikon B (S,R)-tuote ’· 1 (0,9 g, 2,1 mmol) vedessä, josta oli poistettu kaasut (4,2 ml), huoneenlämpötilassa ja jossa käytettiin argonia : ’ ‘ 30 suojakaasuna, lisättiin väkevän NH40H:n (1,39 ml) ja veden (1,39 ml) seos. 2 minuutin kuluttua reaktio pysäytettiin ,V, kylläisellä kaliumbisulfaatilla (pH 1,5), ja saatu seos uutettiin etyyliasetaattiin. Orgaaninen kerros pestiin • » T vedellä ja suolaliuoksella, kuivattiin ja haihdutettiin, ’·· 35 jolloin saatiin kiinteä aine, joka puhdistettiin flash- 65 112213 kromatografiällä [50 mm x 7 tuumaa (178 mm), eluointi 1:1-suhteisella etyyliasetaatin ja heksaanien seoksella, jossa oli 1 % etikkahappoa]. Saatu aine uudelleenkiteytettiin etyyliasetaatin ja heksaanin seoksesta, jolloin saatiin 5 0,59 g otsikon (S,R)-tuotetta valkoisena kiinteänä ainee na, s.p. 206 - 213 °C (haj.), TLC Rf = 0,11 (60:40, heksaa-nit:etyyliasetaatti + 2 % etikkahappoa), [a]D = -38,6° (c = 0,42, metanoli).
Analyysi, laskettu yhdisteelle C15H15F3N6OS 0,1 H20: C 46,66; 10 H 3,97; N 21,76; F 14,76; S 8,30; SH 8,56;
Todettu: C 46,93; H 3,80; N 21,38; F 15,06; S 8,38; SH 15,40.
Esimerkki 55 (S)-N-[4,4,4-trifluori-2-(merkaptometyyli)-1-okso-15 butyyli]-L-leusiini a) 2—[[(fenyylimetyyli)tio]metyyli]-4,4,4-trifluo-rivoihappo
Liuokseen, jonka muodosti litiumdi-isopropyyliamii-ni [valmistettu käyttäen juuri tislattua di-isopropyyli-20 amiinia (4,47 g, 44,4 mmol) ja n-butyylilitiumia heksaa-nissa (18 ml, 45 mmol, 2,5 M)] kuivassa tetrahydrofuraa-: nissa (35 ml), lisättiin 4,4,4-trifluorivoihapon (3,0 g, 21,0 mmol) liuosta tetrahydrofuraanissa (25 ml). Sekoitet-tiin 0 °C:ssa 1,5 tuntia, minkä jälkeen liuos jäähdytet-25 tiin -78 °C:seen ja käsiteltiin bentsyylibromimetyylitio- ,eetterin liuoksella tetrahydrofuraanissa (10 ml). Liuosta (•;.t sekoitettiin yön yli samalla, kun lämpötila nousi ympäris
tön lämpötilaan. Haihtuvat aineet poistettiin tyhjössä, ja jäännös liuotettiin etyyliasetaattiin ja uutettiin 1 N
: *‘ 30 natriumhydroksidilla (50 ml) ja vedellä (2 x 20 ml). Yh- « · distetyt emäksiset uutteet tehtiin happamiksi väkevällä vetykloridihapolla (8 ml) ja uutettiin etyyliasetaatilla .··, (2 x 100 ml). Orgaaniset uutteet pestiin vedellä ja suola liuoksella, yhdistettiin, kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin : " 35 tyhjössä, jolloin saatiin 3,82 g öljyä. Flash-kromatogra- • · * · 66 112213 foitiin käyttäen 350 ml silikageeliä ja eluoiden etyyliasetaatin, heksaanien ja etikkahapon seoksella (50:100:1), jolloin saatiin 1,36 g otsikon A tuotetta, TLC Rf = 0,38 (etyyliasetaatti:heksaanit:etikkahappo, 50:50:1).
5 b) N-[2-[[(fenyylimetyyli)tio]metyyli]-4,4,4-tri- fluori-l-oksobutyyli]-L-leusiini
Osan (a) happotuote (2,26 g, 8,1 mmol) muutettiin happokloridiksi kuumentamalla tionyylikloridin (8 ml) kanssa 90 °C:ssa 2,5 tuntia, poistamalla ylimääräinen tio-10 nyylikloridi tislaamalla ja kuivaamalla saatua jäännöstä pumpulla suurtyhjössä 70 °C:ssa useita tunteja. Tämä hap-pokloridi liuotettiin kuivaan asetonitriiliin (5 ml) ja lisättiin jäällä jäähdytettyyn L-leusiinin/bis(trimetyyli-silyyli)trifluoriasetamidin [valmistettu L-leusiinista 15 (1,12 g, 8,5 mmol) ja bis(trimetyylisilyyli)trifluoriaset- amidista (4,85 ml, 4,7 g, 18,27 mmol) 45 ml:ssa kuivaa asetonitriiliä 0 °C:ssa - ympäristön lämpötilassa yön aikana] asetonitriililiuokseen. Sekoitettiin 5 tuntia, minkä jälkeen haihtuva aine poistettiin tyhjössä ja jäännös 20 liuotettiin etyyliasetaattiin, pestiin 5-prosenttisella kaliumbisulfaatilla, vedellä ja suolaliuoksella. Kuivattu : (MgS04) orgaaninen liuos väkevöitiin tyhjössä, jolloin saa- : tiin 4,5 g öljyä. Flash-kromatografoitiin käyttäen 500 ml i silikageeliä ja eluoiden etyyliasetaatin, heksaanien ja 25 etikkahapon seoksella (80:120:0,5), jolloin saatiin 2,56 g tuotetta, joka sisälsi jonkin verran sivutuotetta.
HPLC suoritettiin käyttäen ruiskeita, joissa oli ‘ 400 mg näytettä (2,85 g yhteensä), 30 x 500 mm:n YLC S-10- pylvääseen isokraattisissa olosuhteissa, joissa käytettiin • ·* 30 70:30-suhteista seosta, jonka muodostivat B-90/10 metano- li/vesi - 0,1 % trifluorietikkahappoa ja A-10/90 metano-;V; li/vesi - 0,1 % trifluorietikkahappoa, virtausnopeudella 50 ml/min, yhdistetyt haluttua tuotetta sisältävät frak-
* t I
tiot väkevöitiin tyhjössä metanolin poistamiseksi ja saa- • 35 tua vesipitoista konsentraattia uutettiin etyyliasetaatil- • · 67 112213 la (3 x). Orgaaniset fraktiot pestiin suolaliuoksella, yhdistettiin, kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin tyhjössä, jolloin saatiin 2,43 g otsikon B tuotetta.
c) (S)-N-[4,4,4-trifluori-2-(merkaptometyyli)-1- 5 oksobutyyli]-L-leusiini
Nestemäiseen ammoniakkiin (100 ml), joka oli -78 °C:ssa, lisättiin pieniä natriumlastuja (527 mg, 22,9 mmol). 10 minuutin kuluttua (sininen väri muodostui välittömästi) lisättiin otsikon B tuotteen (1,53 g, 10 3,9 mmol) liuos kuivassa tetrahydrofuraanissa (3,9 mmol) ja sen jälkeen 10 minuuttia myöhemmin kiinteää ammonium-kloridia (5 g, 94 mmol) reaktion pysäyttämiseksi, minkä jälkeen reaktioseoksen annettiin lämmetä -33 °C:seen (sinisen värin katoaminen). Ylimääräinen ammoniakki haihdu-15 tettiin (argonvirtauksen kanssa), ja jäännöstä jakouutet- tiin etyyliasetaatilla ja 10-prosenttisella kaliumbisul-faatilla. Orgaaninen kerros erotettiin, pestiin vedellä ja suolaliuoksella, kuivattiin (MgS04), jolloin saatiin 1,2 g ainetta (yhdistettiin toisen erän kanssa, jolloin saatiin 20 yhteensä 1,88 g).
Diastereomeerit erotettiin flash-kromatografiällä : käyttäen 500 ml silikageeliä ja eluoiden etyyliasetaatin, , . heksaanin ja etikkahapon seoksella (60:140:0,5, sitten . 80:100:0,5). Eri sekafraktiot kromatografoitiin uudelleen ’ : 25 ja trituroitiin heksaanilla (etyyliasetaatilla), jolloin . saatiin 700 mg otsikon (S)-isomeerituotetta valkoisena kiinteänä aineena, s.p. 102 - 105 °C, TLC Rf = 0,29 (etyy-’·' * liasetaatti:heksaani:etikkahappo, 100:100:1), [a]D =-42,6° (c = 0,97, metanoli).
»» * I 30 Analyysi, laskettu yhdisteelle C11H18F3N03S: C 43,85; H 6,02; N 4,65; F 18,91; S 10,64; SH 10,97;
.v. Todettu: C 43,72; H 5,62; N 4,70; F 18,94; S 10,45; SH
ii,94.
» < < • » 68 112213
Esimerkki 56 (R)-N-[4,4,4-trifluori-2-(merkaptometyyli)-1-okso-butyyli]-L-leusiini
Esimerkin 55 menettelyn mukaisesti sopivien kroma-5 tografiafraktioiden jatkokäsittelyllä saatiin 578 mg otsikon tuotetta, joka oli hitaammin liikkuva isomeeri, valkoisena kiinteänä aineena, s.p. 78 - 81 °C, TLC Rf = 0,23 (etyyliasetaatti:heksaani:etikkahappo, 100:100:1). [a]D = -9,6° (c = 0,53, metanoli).
10 Analyysi, laskettu yhdisteelle Ci;iH18F3N03S: C 43,85; H 6,02; N 4,65; F 18,91; S 10,64; SH 12,64;
Todettu: C 43,84; H 6,04; N 4,62; F 18,93; S 10,48; SH 12,64.
Esimerkki 57 15 (S,R)-a-[[3,3,3-trifluori-2-(merkaptometyyli)-l- oksopropyyli]amino]-2-bentsofuraanipropaanihappo a) Bentsofuraani-2-metanoli
Bentsofuraani-2-karboksyylihappoa (4,59 g, 28,3 mmol), joka oli liuoksena kuivassa etyylieetterissä 20 (100 ml), lisättiin tipoittain 15 minuutin aikana litium- alumiinihydridin (4,3 g, 113 mmol) suspensioon etyylieet- : terissä (180 ml) 0 °C:ssa. Reaktioseosta sekoitettiin 2 ; tuntia samalla, kun se lämmitettiin huoneenlämpötilaan.
:1 . Jäähdytettiin uudelleen 0 °C:seen, minkä jälkeen lisättiin » ,, ; 25 4,3 ml vettä erittäin varovasti. Sitten lisättiin natrium- . hydroksidia (4,3 ml, 15 % vedessä) ja sen jälkeen vielä ... 12,9 ml vettä. Lisättiin magnesiumsulfaattia (noin 10 g), • > · **’ ja paksua valkoista suspensiota sekoitettiin nopeasti noin 30 minuuttia. Suspensio suodatettiin silikageelin läpi, ja : 30 suodoskakku pestiin perusteellisesti etyylieetterillä.
5,,,: Suodos väkevöitiin ja kuivattiin suurtyhjössä, jolloin i saatiin 4,15 g otsikon A tuotetta vaaleankeltaisena öljy-,···, nä.
» » • · • · t 69 112213 b) 2-(bromimetyyli)bentsofuraani
Liuokseen, jonka muodostivat otsikon A tuote (4,08 g, 27,5 mmol) ja hiilitetrabromidi (13,93 g, 42 mmol) dimetyyliformamidissa (85 ml) 0 °C:ssa, lisättiin 5 trifenyylifosfiinia (10,83 g, 41,3 mmol). Sekoitettiin 30 minuuttia, minkä jälkeen lisättiin kylläistä natriumbikar-bonaattiliuosta (50 ml) ja vettä (50 ml). Saatua seosta jakouutettiin heksaanilla ja vedellä. Orgaaninen kerros pestiin vedellä ja suolaliuoksella, kuivattiin (MgS04) ja 10 väkevöitiin keltaiseksi nesteeksi. Tämä aine kromatogra-foitiin käyttäen 5 x 20 cm:n silikageelipylvästä ja käyttäen heksaania liikkuvana faasina. Puhtaat fraktiot väkevöitiin, jolloin saatiin 4,32 g (2-bromimetyyli)bentsofu-raania valkoisena kiteisenä kiinteänä aineena.
15 c) [3aS-[3a,6a,78]-l-[[[bis(metyylitio)metyleeni]- axnino]asetyyli]heksahydro-3H-3a, 6-metano-2,1-bentsisotiat-soli, 2,2-dioksidi
Glysiinimetyyliesterivetykloridin (12,5 g, 100 mmol) seokseen kloroformissa (100 ml) lisättiin huo- 20 neenlämpötilassa hiilidisulfidia (6,3 ml, 105 mmol). Sen jälkeen lisättiin trietyyliamiinia (14,6 ml, 105 mmol), ja reaktioseoksen lämpötila nousi 22 °C:sta 37 °C:seen. Se- • koitettiin tunnin ajan, minkä jälkeen lisättiin tipoittain ,· metyylijodidia (6,8 ml, 110 mmol), ja reaktioseosta ref- ': 25 luksoitiin tunnin ajan. Jäähdytettiin huoneenlämpötilaan, *. ; minkä jälkeen reaktioseos pestiin vedellä (2 x 50 ml) ja haihdutettiin. Jäännös otettiin talteen etyylieetteriin (60 ml) ja pestiin vedellä (2 x 20 ml). Kuivattiin nat- ;· 1, riumsulfaatilla ja väkevöitiin, jolloin saatiin 9 g väli- • · ! 30 tuotemonometyylibistiometyleeniglysinaattia öljynä.
• · T Seosta, jonka muodostivat tämä öljy, jauhemainen • 1 kaliumkarbonaatti (10,3 g, 75 mmol) ja metyylijodidi : ί (3,4 ml, 55 mmol) asetonissa (30 ml), refluksoitiin käyt- ./ täen argonia suojakaasuna 2 tuntia. Lisättiin vielä erä • > · 35 metyylijodidia (0,5 ml, 8,1 mmol), ja reaktioseosta ref- » • · i · · 70 112213 luksoitiin vielä tunnin ajan. Jäähdytettiin, minkä jälkeen seos suodatettiin, ja suodoskakku pestiin asetonilla. Suo-dos väkevöitiin, ja jäännös liuotettiin etyylieetteriin (30 ml). Tämä liuos pestiin vedellä (2 x 10 ml), kuivat-5 tiin natriumsulfaatilla ja väkevöitiin, jolloin saatiin 9,12 g metyyli-N-[bis(metyylitio)metyleeni]glysinaattia keltaisena öljynä.
Trimetyylialurniiniliuosta (11,95 ml, 23,9 mmol, 2 M tolueenissa) lisättiin tipoittain 30 minuutin aikana D-10 2,10-kamferisultaamin liuokseen tolueenissa (120 ml) huon eenlämpötilassa. Sekoitettiin 15 minuuttia, minkä jälkeen lisättiin tipoittain 30 minuutin aikana metyyli-N-[bis(me-tyylitio)metyleeni]glysinaattia (4,2 g, 19,8 mmol) liuoksena tolueenissa (80 ml). Sen jälkeen reaktioseos kuumen-15 nettiin 50 °C:seen 24 tunniksi. Jäähdytettiin huoneenlämpötilaan, minkä jälkeen lisättiin 7 ml vettä erittäin varovasti. Kun vesi oli lisätty, lisättiin magnesiumsulfaattia. Sekoitettiin 15 minuuttia, minkä jälkeen suspensio suodatettiin Celiten läpi, ja suodos väkevöitiin oranssik-20 si öljyksi. Tämä jäännös uudelleenkiteytettiin absoluuttisesta etanolista, jolloin saatiin 5,86 g otsikon C tuotet-: * ta värittöminä kiteinä, s.p. 106 - 108 °C.
’· > d) [3aS-[3aa,6a,7B]-l-[3-(2-bentsofuranyyli-2- i : [ [bis(metyylitio)metyleeni] amino]-l-oksopropyyli]heksahyd- ·; · 25 ro-3H-3a,6-metano-2,1-bentsisotiatsoli, 2,2-dioksidi .. : Otsikon C tuotteen (0,94 g, 2,5 mmol) liuos kuivas- .· ·, sa tetrahydrofuraanissa (3,75 ml) lisättiin n-butyylili- tiumin (0,92 ml, 2,3 mmol, 2,5 M heksaanissa) liuokseen . kuivassa tetrahydrofuraanissa (6,25 ml) -78 °C:ssa 10 mi- 30 nuutin aikana. Seosta sekoitettiin tunnin ajan -78 °C:ssa, minkä jälkeen lisättiin tipoittain 10 minuutin aikana 2-: ; : (bromimetyyli)bentsofuraania liuoksena kuivassa tetrahyd- rofuraanissa (1,25 ml) ja heksametyylifosforitriamidissa (1,25 ml). Sen jälkeen lisättiin tetrabutyyliammoniumjodi- * · * * » 35 dia (50 mg), ja reaktioseosta sekoitettiin -78 °C:sta 71 112213 -20 °C:seen 2 tuntia. Sen jälkeen lisättiin vettä, ja seosta uutettiin etyyliasetaatilla (150 ml). Orgaaninen kerros pestiin vedellä (100 ml) ja suolaliuoksella (100 ml), kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin, jolloin saa-5 tiin öljymäinen jäännös, joka kiteytettiin noin 4 ml:sta absoluuttista etanolia. Värittömät kiteet suodatettiin ja pestiin etanolilla (10 ml), joka oli jäähdytetty -20 °C:seen. Kuivattiin suurtyhjössä, jolloin saatiin 1,08 g otsikon D tuotetta värittömänä kiteisenä kiinteänä 10 aineena, s.p. 145 - 148 °C, TLC Rf = 0,18 (metyleeniklori-di), [a]D = -86,5° (c = 0,40, kloroformi).
e)[3aS-[3aa,6α,78]]-1-[2-amino-3-(2-bentsofuranyy-li) -l-oksopropyyli]heksahydro-3H-3a, 6-metano-2,1-bentsiso-tiatsidi, 2,2-dioksidi 15 Seosta, jonka muodostivat otsikon (D) tuote (1,05 g, 2,07 mmol), 0,5 N HCl (11 ml, 5,5 mmol) ja tetra-hydrofuraani (11 ml), sekoitettiin 40 °C:ssa 18 tuntia. Tehtiin emäksiseksi pH-arvoon 12 natriumhydroksidilla (6 N), minkä jälkeen seosta uutettiin etyyliasetaatilla.
20 Orgaaninen kerros pestiin suolaliuoksella, kuivattiin nat-riumsulfaatilla ja väkevöitiin öljymäiseksi jäännökseksi.
Öljy liuotettiin noin 2,5 ml:aan etyyliasetaattia, ja li-• sättiin heksaania, kunnes liuos muuttui hiukan sameaksi.
; Lisättiin siemenkiteitä, ja seoksen annettiin kiteytyä.
'· 25 Suodatettiin ja kuivattiin suurtyhjössä, jolloin saatiin • ·· 0,71 g otsikon E yhdistettä värittömänä kiteisenä kiinteä- . nä aineena, s.p. 123 - 125 °C, TLC Rf = 0,16 (etyyliase taatti :heksaani, 1:1), [a]D = -52,8° (c = 0,29, klorofor- .. · mi).
* · 30 f) (S)-a-amino-2-bentsofuraanipropaanihapon vetyk- • · *;*’ loridi
• I
Litiumhydroksidimonohydraattia (336 mg, 8 mmol) lisättiin vesiliuoksena (10 ml) otsikon E tuotteen liuok- • · · ./ seen tetrahydrofuraanissa (20 ml) huoneenlämpötilassa.
• * · 35 Kaksif aasista reaktioseosta sekoitettiin tunnin ajan, »Il 72 112213 minkä jälkeen lisättiin vettä (30 ml), ja seosta uutettiin metyleenikloridilla (2 x 25 ml). Vesipitoinen kerros tehtiin happamaksi pH-arvoon 1,5 HCl:lla (1 N), minkä jälkeen liuotin poistettiin tyhjössä, jolloin saatiin valkoinen 5 kiinteä aine. Tämä kiinteä aine laitettiin vesisuspensiona HP-20-pylvääseen, jota eluoitiin vedellä (500 ml), 1:1-suhteisella veden ja metanolin seoksella (500 ml) ja 2:3-suhteisella veden ja metanolin seoksella (250 ml). Tuotetta sisältävät fraktiot yhdistettiin, tehtiin uudelleen 10 happamiksi pH-arvoon 1,5 HCl:lla (1 N) ja väkevöitiin, jolloin saatiin 465 mg otsikon F tuotetta valkoisena jauheena, s.p. 190 °C. (tummui), 225 - 230 °C (haj.), TLC Rf = 0,36 (butanoli:etikkahappo:vesi:etyyliasetaatti, 1:1:1:2), [a]D = -9,5° (c = 0,55, metanoli).
15 g)(S,R)-a-[[3,3,3-trifluori-2-[(asetyylitio)metyy li] -1-oksopropyyli]amino]-2-bentsofuraanipropaanihappo
Esimerkin 54(a) ephedriinisuolatuotetta (393 mg, 1,03 mmol) jakouutettiin etyylieetterillä (100 ml) ja laimealla HCl:lla (1,03 ml 1 N HC1:a 100 ml:ssa vettä). Eet-20 terikerros pestiin vedellä (2 x 100 ml), kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin. Jäännös haihdutettiin metyleenikloridista : (2 x 20 ml). Vapaa happo liuotettiin metyleenikloridiin ; (3 ml), ja lisättiin oksalyylikloridia (0,09 ml, % I’·'. 1,03 mmol). Lisättiin dimetyyliformamidia (0,009 ml, , ; 25 0,01 mmol), ja seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 2 » » ; tuntia. Samanaikaisesti otsikon F tuotteen suspensioon , asetonitriilissä lisättiin bis(trimetyylisilyyli)trifluo- * riasetamidia. Sekoitettiin 2,5 tuntia, jona aikana tämä suspensio muuttui vaaleankeltaiseksi liuokseksi. Tämä seos ' ‘ 30 jäähdytettiin 0 °C:seen, ja siihen lisättiin yhtenä eränä ’ edellä mainittu happokloridiliuos. Lämmitettiin huoneen- lämpötilaan, minkä jälkeen seosta sekoitettiin 18 tuntia. Reaktioseosta jakouutettiin etyyliasetaatilla (75 ml) ja IN HCl:lla (75 ml). Vesipitoista kerrosta uutettiin vielä i ’* 35 25 ml:11a etyyliasetaattia, ja yhdistetyt orgaaniset ker- » > i » i * # 73 1 122 1 3 roksen pestiin 1 N HClrlla (50 ml) ja sen jälkeen suolaliuoksella (25 ml). Sitten orgaaninen kerros kuivattiin (MgS04), väkevöitiin ja kerahaihdutettiin tolueenista (2 x 10 ml). Jäännös kromatografoitiin käyttäen 5 2,5 x 20 cm:n silikageelipylvästä ja käyttäen heksaanin, etyyliasetaatin ja etikkahapon seosta (60:40:2) liikkuvana faasina. Puhtaat fraktiot väkevöitiin, ja jäännös kerahaihdutettiin heptaanista, jolloin saatiin 259 mg valkoista kiinteää ainetta, joka uudelleenkiteytettiin etyyliase-10 taatista/heksaanista, jolloin saatiin 224 mg otsikon G (S,R)-tuotetta, s.p. 147 - 149 °C, TLC Rf = 0,26 (etyyliasetaatti :heksaani: et ikkahappo, 60:40:2).
h)(S,R)-a-[[3,3,3-trifluori-2-(merkaptometyyli)-1-oksopropyyli]amino]-2-bentsofuraanipropaanihappo 15 Otsikon G tuotteen (200 mg, 0,5 mmol) suspensioon vedessä (4 ml) lisättiin väkevää ammoniumhydroksidia (1 ml). Liukeneminen tapahtui minuutissa, ja reaktioseosta sekoitettiin yhteensä 2 minuuttia. Tänä aikana pH säädettiin arvoon 1,5 kylläisellä kaliumbisulfaattiliuoksella, 20 ja seosta uutettiin etyyliasetaatilla (2 x 30 ml). Yhdistetyt orgaaniset kerrokset pestiin suolaliuoksella , . (30 ml), kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin kullanruskeaksi , , kiinteäksi aineeksi, joka kromatografoitiin käyttäen < · ,1 t 2,5 x 15 cm:n silikageelipylvästä ja käyttäen heksaanin, ’ . 25 etyyliasetaatin ja etikkahapon seosta (60:40:1) liikkuvana i ;> · · # faasina. Puhtaat fraktiot väkevöitiin ja kerahaihdutettiin heptaanista, jolloin saatiin valkoista kiinteää ainetta, \ ‘ jota trituroitiin pentaanin kanssa, jolloin saatiin 161 mg otsikon (S,R)-tuotetta valkoisena kiinteänä aineena; s.p.
| ·' 30 143 - 145 °C, TLC Rf = 0,31 (etyyliasetaatti:heksaani:etik- : : kahappo, 60:40:2), [a]D = -2,4°, (c = 0,45, metanoli).
. Analyysi, laskettu yhdisteelle C15H14FsN04S: C 49,86; H 3,91; N 3,88; F 15,77; S 8,87; SH 9,15:
*·;·1 Todettu: C 49,82; H 4,12; N 4,22; F 15,90; S 8,64; SH
··.. 35 9,68.
» · # i » • · • I 1 74 112213
Esimerkki 58 (S, S)-a-[[3,3,3-trifluori-2-(merkaptometyyli)-1-oksopropyyli]amino]-2-bentsofuraanipropaanihappo a)(S,S)-a-[[3,3,3-trifluori-2-[(asetyylitio)metyy-5 li]-1-oksopropyyli]amino-2-bentsofuraanipropaanihappo
Esimerkin 53(b) ephedriinisuolatuotetta (425 mg, 1.22 mmol) jakouutettiin etyylieetterillä (100 ml) ja laimealla HClilla (1,22 ml 1 N HCl:a 100 mlissa vettä). Eet-terikerros pestiin vedellä (2 x 100 ml), kuivattiin (MgS04) 10 ja väkevöitiin. Jäännös kerahaihdutettiin metyleeniklori- dista (2 x 20 ml). Vapaa happo liuotettiin metyleeniklori-diin (3 ml), ja lisättiin oksalyylikloridia (0,107 ml, 1.22 mmol). Lisättiin dimetyyliformamidia (0,011 ml, 0,012 mmol), ja seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 2 15 tuntia. Samanaikaisesti esimerkin 57(f) tuoteen suspen sioon asetonitriilissä lisättiin bis(trimetyylisilyyli)-trifluoriasetamidia (0,75 ml, 2,8 mmol). Sekoitettiin 2,5 tuntia, jona aikana tämä suspensio muuttui vaaleankeltaiseksi liuokseksi. Tämä seos jäähdytettiin 0 °C:seen, ja 20 siihen lisättiin yhtenä eränä edellä mainittu happoklori-diliuos. Lämmitettiin huoneenlämpötilaan, minkä jälkeen seosta sekoitettiin 18 tuntia. Reaktioseosta jakouutettiin etyyliasetaatilla (75 ml) ja 1 N HClilla (75 ml). Etyyli-asetaattikerros pestiin 1 N HClilla (75 ml), vedellä ’ , 25 (75 ml) ja suolaliuoksella (75 ml). Sen jälkeen orgaaninen t I· * kerros kuivattiin (MgS04), väkevöitiin ja kerahaihdutettiin ' ' tolueenista (2 x 10 ml). Jäännös kromatografoitiin käyt- ', · täen 2,5 x 20 emin silikageelipylvästä ja käyttäen 1 1 heksaanin, etyyliasetaatin ja etikkahapon seosta (70:30:2) 30 ja 1 1 heksaanin, etyyliasetaatin ja etikkahapon seosta » * ;* (60:40:2) liikkuvana faasina. Puhtaat fraktiot väkevöi- ,*, tiin, ja jäännös kerahaihdutettiin heptaanista, jolloin *;/, saatiin 270 mg kullanruskeaa kiinteää ainetta, joka uudel- * · *·*·’ leenkiteytettiin etyyliasetaatin ja heksaanin seoksesta.
35 Suodatettiin ja pestiin heptaanilla, jolloin saatiin * » · • · 75 112213 203 mg otsikon A (S,S)-yhdistettä valkoisena kiinteänä aineena, s.p. 139 - 140 °C, TLC Rf = 0,10 (etyyliasetaatti :heksaani:etikkahappo, 50:50:2).
b) (S,S)-a-[[3,3,3-trifluori-2-(merkaptometyyli-1-5 oksopropyyli]amino]-2-bentsofuraanipropaanihappo
Otsikon A tuotteen (180 mg, 0,45 mmol) suspensioon vedessä (3,6 ml) lisättiin väkevää ammoniumhydroksidia (0,9 ml). Liukeneminen tapahtui minuutissa, ja reaktio-seosta sekoitettiin yhteensä 2 minuuttia. Tänä aikana pH 10 säädettiin arvoon noin 1,5 kylläisellä kaliumbisulfaatti- liuoksella, ja seosta uutettiin etyyliasetaatilla (50 ml). Orgaaninen kerros pestiin suolaliuoksella (50 ml), kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin. Jäännös yhdistettiin toisesta kerrasta saadun erän (18 mg) kanssa ja kromatografoitiin 15 käyttäen 2,5 x 15 cm:n silikageelipylvästä ja käyttäen heksaanin, etyyliasetaatin ja etikkahapon seosta (60:40:1) liikkuvana faasina. Puhtaat fraktiot väkevöitiin ja kera-haihdutettiin heptaanista valkoiseksi kiinteäksi aineeksi, jota trituroitiin pentaanin kanssa, jolloin saatiin 146 mg 20 otsikon (S,S)-tuotetta valkoisena kiinteänä aineena, s.p.
141 - 142 °C, TLC Rf =0,30 (etyyliasetaatti:heksaani:etikkahappo, 60:40:2), [a]D = +45,7° (c = 0,37, metanoli).
1 · ’Analyysi, laskettu yhdisteelle C15H14F3N04S: C 49,86; H 3,91; N 3,88; F 15,77; S 8,87; SH 9,15; » » 1
: 25 Todettu: C 49,80; H 3,90; N 3,88; F 15,99; S 8,96; SH
9,24.
Esimerkki 59 : : (S)-1-[N-[3,3,3-trifluori-2-(merkaptometyyli)-1- oksopropyyli]-L-alanyyli]-L-proliini 30 a) (S)-1-[N-[3,3,3-trifluori-2-[ (asetyylitio)metyy- t » , li] -1-oksopropyyli] -L-alanyyli] -L-proliini » ·
Esimerkin 53(b) ephedriinisuolatuotetta (1,64 g, « · * 4,3 mmol) jakouutettiin etyyliasetaatilla ja vesipitoisel- e * » la HCl:lla (6 mmol). Orgaaninen kerros pestiin vedellä ja :\it 35 suolaliuoksella, kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin tyhjös- i » · * » · # 76 112213 sä, jolloin saatiin 0,94 g vapaata happoa. Tämä aine liuotettiin metyleenikloridiin (10 ml) huoneenlämpötilassa, ja käsiteltiin oksalyylikloridilla (400 μΐ, 573 mg, 4,51 mmol) ja yhdellä tipalla dimetyyliformamidia. 1,5 5 tunnin kuluttua tämä liuos lisättiin liuokseen, jonka muo-dostiL-alanyyli-L-proliini/bis(trimetyylisilyyli)trifluo-riasetamidi asetonitriilissä [valmistettu L-alanyyli-L-proliinin tosylaatista (1,54 g, 4,3 mmol), di-isopropyyli-etyyliamiinista (0,75 ml, 554 mg, 4,3 mmol) ja bis(trime-10 tyylisilyyli)trifluoriasetamidista (2,3 ml, 2,21 g, 8,6 mmol) 15 ml:ssa asetonitriiliä, sekoitettiin kaksi tuntia 0 °C:ssa - huoneenlämpötilassa, jolloin saatiin homogeeninen liuos], ja sekoitettiin yön yli. Haihtuvat aineet poistettiin tyhjössä, ja jäännös, joka oli liuotet-15 tu etyyliasetaattiin, pestiin 10-prosenttisella kaliumbi-sulfaatilla, vedellä ja suolaliuoksella. Orgaaninen fraktio kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin tyhjössä, jolloin saatiin öljy. Flash-kromatografoitiin käyttäen 250 ml si-likageeliä ja eluoiden etyyliasetaatin, heksaanin, metano-20 Iin ja etikkahapon seoksella (10:6:2:0,2), jolloin saatiin 1,2 g otsikon A tuotetta vaahtona, TLC Rf = 0,29 (etyyli-.··.·. asetaatti:heksaani:metanoli:etikkahappo, 10:4:2:0,2).
t·;·, b) (S)-1- [N-[3,3,3-trifluori-2-(merkaptometyyli)-l- • · · .! , oksopropyyli]-L-alanyyli]-L-proliini
k I
77 112213 seoksella (10:6:2:0,2), jolloin saatiin tuote vaahtona. Trituroitiin heksaanin kanssa (sisälsi muutaman prosentin etyyliasetaattia), jolloin saatiin 750 mg otsikon (S)-iso-meerituotetta, s.p. 100 - 110 °C, TLC Rf = 0,37 (etyyliase-5 taatti:heksaani:metanoli:etikkahappo, 10:6:2:0,2), [a]D = -65,8° (c = 0,8, metanoli).
Analyysi, laskettu yhdisteelle C12H17F3N204S 0,25 H20: C
41,53; H 5,09; N 8,07; F 16,42; S 9,24; SH 9,53;
Todettu: C 41,75; H 4,87; N 7,85; F 16,41; S 9,24; SH
10 11,92.
Esimerkki 60 (R)-l-[N-[3,3,3-trifluori-2-(merkaptometyyli)-1-oksopropyyli]-L-alanyyli]-L-proliini a) (R)-1-[N-[3,3,3-trifluori-2-[(asetyylitio)metyy- 15 li]-1-oksopropyyli]-L-alanyyli]-L-proliini
Esimerkin 54(a) ephedriinisuolatuote (1,66 g, 4,35 mmol) muutettiin vapaaksi hapoksi ja sen jälkeen hap-pokloridiksi ja saatettiin reagoimaan L-alanyyli-L-prolii-ni/bis(trimetyylisilyyli)trifluoriasetamidin asetonitrii-20 liliuoksen kanssa kuten edellä esimerkissä 59(a) on esi tetty, jolloin saatiin 1,2 g otsikon A tuotetta vaahtona, TLC Rf =0,37(etyyliasetaatti:heksaani:metanoli:etikkahap-po, 12:6:2:0,2).
b) (R)-l - [N- [3,3,3-tri f luori-2- (merkaptometyyli) -1- 25 oksopropyyli]-L-alanyyli]-L-proliini t · · ·
Otsikon A tuotetta (1,25 g, 3,25 mmol) käsiteltiin ammoniumhydroksidilla esimerkin 59(b) menettelyn mukaises- • · ti, puhdistettiin kromatografisesti ja trituroitiin heksaanin kanssa (sisälsi muutaman prosentin etyyliasetaat- • · · | 30 tia), jolloin saatiin 740 mg otsikon (R)-isomeerituotetta, : s.p. 100 - 105 °C, TLC Rf = 0,37 (etyyliasetaatti:heksaa- ^.’.t ni: metanoli: et ikkahappo, 12:6:2:0,2), [a]D = -124,2° (c = • * ♦ 1,1, metanoli).
Analyysi, laskettu yhdisteelle C12H17F3N204S 0,25 H20: C
35 41,53; H 5,09; N 8,07; F 16,42; S 9,25; SH 9,53; • · • · • » * 78 112213
Todettu: C 41,75; H 4,95; N 8,01; F 16,59; S 9,36; SH
11,01.
Esimerkki 61 (R, S)-a-[[3,3,3-trifluori-2-(raerkaptometyyli)-1-5 oksopropyyli]amino]-lH-indatsoli-3-propaanihappo a) 3-metyyli-lH-indatsoli
Puhtaaseen 2-aminoasetofenoniin lisättiin väkevää HCl:a (23 ml) -10 °C:ssa. Muodostunutta paksua suspensiota sekoitettiin voimakkaasti samalla kun se lämmitettiin 10 -5 °C:seen. Lisättiin tipoittain 15 minuutin aikana nat- riumnitriittiä (5,8 g, 84 mmol) liuoksena 13 ml:ssa vettä niin, että lämpötila pidettiin samalla välillä -5 °C -3 °C. Reaktioseosta sekoitettiin vielä 15 minuuttia 0 eC:ssa, jona aikana se muuttui oranssiksi liuokseksi.
15 Tällöin reaktioseos kaadettiin natriumsulfiitin ja nat- riumbisulfaatin liuokseen 5 °C:ssa [liuos valmistettiin liuottamalla natriumsulfiitti (21,12 g, 160 mmol) mahdollisimman pieneen määrään vettä (noin 75 ml) ja lisäämällä natriumbisulfaattia, kunnes se ei enää liuennut. Lisättiin 20 pieni määrä vettä mahdollisen jäljellä olevan kiinteän aineen liuottamiseksi]. Saatua keltaista liuosta sekoitet-t1;· tiin 15 minuuttia, minkä jälkeen saostui kiinteää ainetta.
Suspension annettiin seistä huoneenlämpötilassa yön yli,
• I
, jolloin sakka korvautui punaisella öljyllä, joka kellui • 1 25 vesipitoisen kerroksen päällä. Koko seos tehtiin emäksi- M 1 seksi 1 N natriumhydroksidilla ja uutettiin etyylieette-’1 rillä. Orgaaninen kerros pestiin suolaliuoksella, kuivat- V ; tiin (MgS04), suoritettiin värin poisto ja väkevöitiin vaa leankeltaiseksi kiinteäksi aineeksi, joka uudelleenkitey-30 tettiin etyylieetteristä/pentaanista, jolloin saatiin 3,83 g otsikon A tuotetta kullanruskeana kiteisenä kiinteänä aineena, s.p. 110 - 113 °C.
» · I
• · · • 1
• I
• » · » • » 79 112213 b) 3-metyyli-lH-indatsoli-l-sulfiinihapon fenyyli- esteri
Suspensioon, jonka muodostivat otsikon A tuote (3,5 g, 26,5 mmol) ja jauhemainen kaliumhydroksidi (7,5 g, 5 133 mmol) dimetoksietaanissa (110 ml) 0 °C:ssa, lisättiin bentseenisulfonyylikloridia (4,2 ml, 33 mmol). Reaktioseos lämmitettiin huoneenlämpötilaan, ja sitä sekoitettiin tunnin ajan. Sen jälkeen reaktioseos kaadettiin tolueeniin (850 ml), ja muodostunut suspensio suodatettiin Celiten 10 läpi. Suodos pestiin suolaliuoksella, kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin kiinteäksi aineeksi, joka uudelleenkitey-tettiin etyyliasetaatista/heksaanista, jolloin saatiin 5,6 g otsikon B tuotetta värittömänä kiteisenä kiinteänä aineena, s.p. 141 - 143 °C.
15 c) 3-(bromimetyyli)-lH-indatsoli-l-sulfiinihapon fenyyliesteri
Seosta, jonka muodostivat otsikon B tuote (3 g, 11 mmol), N-bromisukkinimidi (1,95 g, 11 mmol) ja bentso-yyliperoksidi (12 mg) hiilitetrakloridissa (160 ml), ref-20 luksoitiin 7 tuntia. Jäähdytettiin huoneenlämpötilaan, minkä jälkeen reaktioseos suodatettiin Celiten läpi, ja .'I suodos väkevöitiin oranssiksi kiinteäksi aineeksi. Tämä
» I
,·; kiinteä aine kromatografoitiin käyttäen 5 x 20 cm:n sili- * · kageelipylvästä ja käyttäen heksaanin ja etyyliasetaatin 25 seosta (95:5) liikkuvana faasina. Kaikki tuotetta sisältävät fraktiot väkevöitiin kiinteäksi aineeksi, joka uudelleenkiteytettiin etyyliasetaatista/heksaanista, joi- i » *·1 ' loin saatiin 2,46 g otsikon C tuotetta värittömänä kitei senä kiinteänä aineena.
» 1 • · 1 » » • · • · » • · 1 I I t • • · • · · » · • · » · · · 1 * 1 • · • 1 « 80 112213 d) [3aS-[3aa,6a,78]]-1-[2-[[bis(metyylitio)metylee-ni] amino] -l-okso-3- [1- (fenoksisulf inyyli) -lH-indatsol-3-yyli]propyyli]-3H-3a,6-metano-2,1-bentsisotiatsoli, 2,2-dioksidi 5 Liuos, jonka muodosti [3aS-[3α,6α,78-1-[[[bis(me- tyylitio)metyleeni] amino] asetyyli] heksahydro-3H-3a, 6-me-tano-2,1-bentsisotiatsoli, 2,2-dioksidi [1,13 g, 3 mmol, valmistettu kuten esimerkissä 57(c) on kuvattu] tetrahyd-rofuraanissa (4,5 ml), lisättiin tipoittain n-butyylili-10 tiumin (1,13 ml 2,5 M heksaaneissa, 2,82 mmol) liuokseen tetrahydrofuraanissa (7,5 ml) -78 °C:ssa. Sekoitettiin tunnin ajan -78 °C:ssa, minkä jälkeen otsikon C tuote (1,29 g, 2,82 mmol) lisättiin tipoittain liuoksena tetrahydrof uraanissa (1,5 ml) ja heksametyylifosforitriamidissa 15 (1,5 ml). Sen jälkeen lisättiin tetrabutyyliammoniumjodi- dia (spaattelin kärjellinen), ja reaktioseosta sekoitettiin -78 - 0 °C:ssa 2 tuntia. Reaktioseosta jakouutettiin vedellä (250 ml) ja etyyliasetaatilla (250 ml). Orgaaninen kerros pestiin vedellä (2 x 100 ml) ja suolaliuoksella 20 (100 ml), kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin. Jäännös kro- matografoltiin käyttäen 5 x 20 cm:n pylvästä ja eluoiden i : : 2 1:11a heksaanin ja etyyliasetaatin seosta (8:2) ja 2 1:11a heksaanin ja etyyliasetaatin seosta (7:3). Puhtaat
j‘ fraktiot väkevöitiin, jolloin saatiin 1,58 g otsikon D
• * 25 tuotetta värittömänä öljynä.
e) [3aS-[3aa,6a,78]]-1-[2-amino-l-okso-3-[1-(fenok-si sulf inyyl i ) - 1H- indat sol - 3 -yy 1 i ] pr opyy 1 i ] -3H- 3a , 6 -metano -2,1-bentsisotiatsoli, 2,2-dioksidi
Seos, jonka muodosti otsikon D tuote (1,53 g, 30 2,25 mmol) 0, 5 N HCl:ssa (15 ml), kuumennettiin 50 °C:seen 20 tunniksi. Sen jälkeen seos tehtiin emäksiseksi pH-ar-voon 12 natriumhydroksilla (1 N), ja saatua emäksistä ker- ,···, rosta uutettiin etyyliasetaatilla (100 ml). Orgaaninen
• I
kerros pestiin suolaliuoksella, kuivattiin (Na2S04) ja vä- • « s ** 35 kevöitiin kiinteäksi aineeksi, joka uudelleenkiteytettiin » *
• I
* · I
81 112213 etyyliasetaatista/heksaanista, jolloin saatiin 1,19 g otsikon E tuotetta värittömänä kiteisenä kiinteänä aineena, s.p. 187 - 188 °C.
f) (S)-a-amino-lH-indatsoli-3-propaanihapon vety- 5 kloridi
Seosta, jonka muodostivat otsikon E tuote (1,14 g, 2,1 mmol), litiumhydroksidihydraatti (550 mg, 12,5 mmol), vesi (12,5 ml) ja tetrahydrofuraani, sekoitettiin 96 tuntia huoneenlämpötilassa. Lisättiin toinen erä litiumhyd-10 roksidia (100 mg, 2,5 mmol) liuoksena 3 ml:ssa vettä. Vielä 18 tunnin kuluttua reaktioseos laimennettiin vedellä (50 ml), ja vesipitoista seosta uutettiin metyleeniklori-dilla (2 x 30 ml). Sen jälkeen vesipitoinen kerros tehtiin happamaksi pH-arvoon 1,5 HCl:lla (1 N) ja uutettiin etyy-15 liasetaatilla (50 ml). Sitten vesipitoinen kerros kaadettiin HP-20-pylvääseen (5 x 10 cm), jota eluoitiin seuraavasti: 400 ml vettä; 200 ml vesirmetanoli, 9:1; 200 ml vesi:metanoii, 8:2; 200 ml vesi:metanoli, 7:3; 200 ml vesi :metanoli, 6:4; 200 ml vesi:metanoli, 5:5. Puhtaat frak-20 tiot väkevöitiin suunnilleen 10 ml:ksi, ja pH säädettiin uudelleen arvoon 1,5 HCl:lla (1 N). Tämä liuos haihdutet-V tiin kuiviin ja kerahaihdutettiin metanolista, etyyliase- : taatista ja heksaanista. Saatua kiinteää ainetta sekoitet- ·'· tiin suspensiona etyyliasetaatissa 24 tuntia, minkä jäi- • .. 25 keen se suodatettiin ja pestiin heksaanilla. Kuivattiin, ,, jolloin saatiin 598 mg otsikon F yhdistettä amorfisena ,·, kiinteänä aineena, [a]D = +21,4° (c = 0,44, metanoli).
• i g) (R,S)-a-[[3,3,3-trifluori-2-[(asetyylitio)metyy- , li]-1-oksopropyyli]amino]-l-indatsoli-3-propaanihappo • · • 30 Esimerkin 54(a) ephedriinisuolatuotetta (256 mg, 0,76 mmol) jakouutettiin etyylieetterillä (60 ml) ja lai-mealla HCl:lla (0,76 ml 1 N HCl:a 60 ml:ssa vettä). Eet-terikerros pestiin vedellä (2 x 60 ml), kuivattiin (MgS04) II· ,,· ja väkevöitiin. Jäännös kerahaihdutettiin metyleeniklori- i · • ” 35 dista (2 x 10 ml). Sen jälkeen vapaa happo liuotettiin
» I
» i • I · 82 112213 metyleenikloridiin (2 ml), ja lisättiin oksalyylikloridia (0,066 ml, 0,76 mmol). Lisättiin dimetyyliformamidia (5 μΐ), ja seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 2 tuntia. Samanaikaisesti otsikon F yhdisteen (150 mg, 5 0,54 mol) suspensioon asetonitriilissä (2 ml) lisättiin bis(trimetyylisilyyli)trifluoriasetamidia (0,64 ml, 2,27 mmol). Sekoitettiin 2,5 tuntia, jona aikana tämä suspensio muuttui vaaleankeltaiseksi sameaksi liuokseksi.
Tämä seos jäähdytettiin 0 °C:seen, ja siihen lisättiin 10 yhtenä eränä edellä mainittu happokloridiliuos. Seoksen annettiin lämmetä 10 °C:seen 2 tunnin aikana. Lisättiin 1 N HCl:a (2 ml), ja reaktioseosta jakouutettiin etyyliasetaatilla (75 ml) ja vedellä (75 ml). Sen jälkeen etyy-liasetaattikerros pestiin suolaliuoksella (75 ml). Orgaa-15 ninen kerros kuivattiin (MgS04), väkevöitiin ja kerahaihdu-tettiin tolueenista (3 x 15 ml). Jäännös kromatografoitiin käyttäen 2,5 x 20 cm:n silikageelipylvästä ja käyttäen 1 1 etyyliasetaatin, heptaanin ja etikkahapon seosta (80:20:2) ja 1 1 etyyliasetaatin ja etikkahapon seosta (98:2) liik-20 kuvana faasina. Puhtaat fraktiot väkevöitiin, jolloin saatiin 127 mg otsikon G (R,S)-isomeerituotetta valkoisena . kiinteänä aineena, s.p. 198 - 204 °C (haj.).
h)(R,S)-a-[[3,3,3-trifluori-2-(merkaptometyyli)-1-oksopropyyli]amino]-lH-indatsoli-3-propaanihappo ’ 25 Suspensioon, jonka muodosti otsikon G (R,S)-isomee ri tuote (120 mg, 0,3 mmol) vedessä, josta oli poistettu ' * happi (2,4 ml), lisättiin väkevää ammoniumhydroksidia ·,· · (0,6 ml). Muodostunutta suspensiota sekoitettiin 2,5 mi nuuttia, minkä jälkeen reaktioseos tehtiin happamaksi kyl- !*’ : 30 Iäisellä kaliumbisulfaattiliuoksella pH-arvoon, joka oli • * alle 2. Hapanta kerrosta uutettiin etyyliasetaatilla • 1 » (50 ml), ja etyyliasetaattikerros pestiin suolaliuoksella.
• » ·
Orgaaninen kerros kuivattiin (Na2S04), väkevöitiin ja esi- • · ’···* absorboitiin Celitelle. Kromatografoitiin käyttäen 2,5 x 35 10 cm:n silikageelipylvästä ja käyttäen etyyliasetaatin, • · · • · • · 83 112213 heptaanin ja etikkahapon seosta (75:25:2) liikkuvana faasina, jolloin saatiin kiinteä jäännös, joka kerahaihdutet-tiin useita kertoja heptaanista, jolloin saatiin 78 mg otsikon (R,S)-isomeerituotetta valkoisena amorfisena kiin-5 teänä aineena, s.p. 218 - 220 °C, TLC Rf = 0,17 (8:2, etyyliasetaatti :heksaani + 2 % etikkahappoa), [a]D = -15,5° (c = 0,11, metanoli).
Analyysi, laskettu yhdisteelle C14H14F3N303S 0,2 H20: C 47,09; H 4,30; N 11,21; F 15,20; S 8,55; SH 8,82;
10 Todettu: C 47,10; H 4,02; N 10,85; F 15,39; S 8,20; SH
10,11.
Esimerkki 62 (S, S)-a-[[3,3,3-trifluori-2-(merkaptometyyli)-1-oksopropyyli]amino]-lH-indatsoli-3-propaanihappo 15 a) (S,S)-a-[[3,3-trifluori-2-[(asetyylitio)metyy li] -1-oksopropyyli]amino]-lH-indatsoli-3-propaanihappo
Otsikon A (S,S)-isomeerituote aikaansaadaan esimerkin 61(g) menettelyn mukaisesti, mutta käyttämällä esimerkin 53(b) ephedriinisuolatuotteesta saatua happokloridia.
20 b)(S,S)-a-[[3,3,3-trifluori-2-(merkaptometyyli)-1- oksopropyyli]amino]-lH-indatsoli-3-propaanihappo
Otsikon (S,S)-isomeerituote aikaansaadaa käsitte-*. lemällä otsikon A tuotetta väkevällä ammoniumhydroksidilla ·.·, esimerkin 61(h) menettelyn mukaisesti.
. 25 Esimerkki 63 . (aS)-a-[[3,3,3-trilfuori-2-(merkaptometyyli)-1-ok sopropyyli] amino] -lH-tetratsoli-5-propaanihappo ’* ’ a)(2S)-[[(fenyylimetoksi)karbonyyli]amino]-3-syaa- nipropaanihappo .· 30 Suspensioon, jonka muodosti (aS)-amino-3-syaanipro- paanihappo (2,0 g, 17,5 mmol) 10 ml:ssa kuivaa asetonit-riiliä, lisättiin bis( trimetyylisilyyli ) trif luoriasetami-dia (9,4 ml, 35 mmol), ja reaktioseosta sekoitettiin 3 *!* tuntia. Lisättiin bentsyyliklooriformaattia (2,5 ml, » i '*· 35 17,5 mmol), reaktioseosta sekoitettiin yön yli, väkevöi- • · · * · • · • I · 84 112213 tiin tyhjössä ja liuotettiin etyyliasetaattiin (200 ml). Orgaaninen liuos pestiin vedellä (2 x) ja suolaliuoksella, kuivattiin (Na2S04) ja väkevöitiin tyhjössä. Kiteytettiin isopropyylieetteristä, jolloin saatiin 3,82 g otsikon A 5 tuotetta.
b) (2S)-[[(fenyylimetoksi)karbonyyli]amino]-3-syaa-nipropaanihapon 1,1-dimetyylietyyliesteri
Liuokseen, jonka muodostivat otsikon A tuote (3,42 g, 13,8 mmol) ja t-butanoli (5,2 g, 70 mmol) kuivas-10 sa metyleenikloridissa (20 ml), lisättiin etyyli-3-(3-di- metyyliamino)propyylikarbodi-imidin vetykloridisuolaa (2,64 g, 13,8 mmol) ja dimetyyliaminopyridiiniä (0,2 g). Reaktioseos laimennettiin metyleenikloridilla (100 ml) ja pestiin 0,5 M HClrlla, kylläisellä vesipitoisella natrium-15 bikarbonaatilla ja suolaliuoksella, kuivattiin (Na2S04) ja väkevöitiin tyhjössä. Raakatuote puhdistettiin kromatogra-fisesti silikageelin (100 g) läpi käyttäen 1:1-suhteista etyyliasetaatin ja heksaanin liuotinsysteemiä. Sopivat fraktiot yhdistettiin ja väkevöitiin, jolloin saatiin 20 2,3 g otsikon B tuotetta.
c) (aS)-a-[[(fenyylimetoksi)karbonyyli]amino]-1H- ,·; tetratsoli-5-propaanihapon 1,1-dimetyyliesteri !. Otsikon B tuotetta (2,0 g, 6,57 mmol) ja tri-n-bu- I i ; .! tyylitina-atsidia (2,7 g, 8,0 mmol) kuumennettiin ' 25 135 °C:ssa ksyleenissä (30 ml) yön yli. Reaktioseos väke vöitiin tyhjössä, liuotettiin 50 ml:aan 1:1:8-suhteista ' ‘ metanolin, etikkahapon ja kloroformin seosta ja sekoitet- » » » v : tiin 20 g:n kanssa silikageeliä yön yli. Reaktioseos väke vöitiin tyhjössä, laitettiin silikageelipylvään (100 g) 30 huipulle ja kromatografoitiin käyttäen 3:3:96-suhteista metanolin, etikkahapon ja kloroformin liuotinsysteemiä. Sopivat fraktio yhdistettiin ja väkevöitiin, jolloin saa- • · · tiin 1,45 g otsikon C tuotetta.
» 1» > · 85 112213 d) (aS)-a-amino-lH-tetratsoli-5-propaanihapon 1,1-dimetyylietyyliesteri
Otsikon C tuotetta, joka oli metanolissa (40 ml), hydrattiin yön yli käyttäen 0,1 g 20-prosenttista palla-5 diumhydroksidia hiilellä -katalyyttiä. Reaktioseos suodatettiin Celiten läpi, ja kerros pestiin perusteellisesti metanoli-vedellä. Suodos väkevöitiin tyhjössä, jolloin saatiin 0,79 g otsikon D tuotetta.
e) (aS)-a-[[3,3,3-trifluori-2-[(asetyylitio)metyy- 10 li]-1-oksopropyyli]amino]-lH-tetratsoli-5-propaanihapon 1,1-dimetyylietyyliesteri
Otsikon D tuote (0,78 g, 3,67 mmol) suspendoitiin kuivaan asetonitriiliin (8 ml). Lisättiin 5 °C:ssa bis-(trimetyylisilyyli)trifluoriasetamidia (1,87 g, 7,34 mmol) 15 ja sekoitettiin tunnin ajan, jolloin aikaansaatiin kirkas liuos. Lisättiin 0 °C:ssa 2-trifluorimetyyli-3-asetyyli-tiopropionihappokloridia (0,86 g, 3,67 mmol), ja reaktio-seosta sekoitettiin 2 tuntia, laimennettiin etyyliasetaatilla (150 ml), ja saatu liuos pestiin vedellä (2 x) ja 20 suolaliuoksella, kuivattiin (Na2S04) ja väkevöitiin tyhjös sä. Kiteytettiin isopropyylieetteristä, jolloin saatiin : 0,95 g otsikon E tuotetta 1:1-suhteisena isomeerien seok- . sena, s.p. 150 - 158 °C.
f) (a,S)-a-[ [3,3,3-trifluori-2-[ (asetyylitio)metyy- > > 25 li] -1-oksopropyyli]amino] -lH-tetratsoli-5-propaanihappo _ . Otsikon E tuote (0,9 g, 2,2 mmol) ja anisoli ,,, (0,1 g) liuotettiin asetonitriiliin (5 ml). Lisättiin tri- '· * fluorietikkahappoa (4 ml), ja reaktioseosta sekoitettiin yön yli. Reaktioseos väkevöitiin tyhjössä ja kromatogra- i '/ 30 foitiin 50 g:n läpi silikageeliä käyttäen 7:5:88-sulvteista metanolin, etikkahapon ja kloroformin liuotinsysteemiä.
Sopivat fraktiot yhdistettiin ja väkevöitiin, jolloin saa- .··*, tiin 0,68 g otsikon F tuotetta 1:1-suhteisena isomeerien *“ seoksena.
» · 86 112213 g) (aS)-a-[[3,3,3-trifluori-2-(merkaptometyyli)-1-oksopropyyli]amino]-lH-tetratsoli-5-propaanihappo
Suspensiota, jonka muodosti otsikon F tuote (0,4 g, I, 12 mmol) väkevässä ammoniumhydroksidissa (0,72 ml) ja 5 vedessä (1,6 ml), sekoitettiin huoneenlämpötilassa käyttäen argonia suojakaasuna 15 minuuttia. Muodostunut kellertävän vihreä liuos tehtiin happamaksi 5-prosenttisella kaliumbisulfaatilla pH-arvoon 1,5 ja uutettiin etyyliasetaatilla (4 x 50 ml). Yhdistetty etyyliasetaattiuute pes- 10 tiin vedellä ja suolaliuoksella, kuivattiin (MgS04) ja haihdutettiin alipaineessa, jolloin saatiin 0,29 g vaaleankeltaista kumimaista kiinteää ainetta. Flash-kromato-grafoitiin käyttäen 60 g silikageeliä ja käyttäen metylee-nikloridin, metanolin ja etikkahapon seosta (15:1:1) elu-15 enttina, jolloin saatiin 0,24 g lievästi keltaista tahmeaa kiinteää ainetta, jota trituroitiin heksaanin kanssa, joka sisälsi muutaman tipan metyleenikloridia, etyyliasetaattia ja metanolia, jolloin saatiin 0,17 g tuotetta. Tätä tuotetta puhdistettiin edelleen preparatiivisella kromatogra-20 fialla ja trituroitiin heksaanin ja etyyliasetaatin seoksen kanssa, jolloin saatiin 0,07 g otsikon tuotetta val-ί, I koisena kiinteänä aineena, s.p. 158 - 161 °C, TLC Rf = 0,26 ; ; (metyleenikloridi:metanoli:etikkahappo, 10:1:1), [a]D = ·’ : 4,4° (c = 0,5, metanoli).
• .· ; 25 Analyysi, laskettu yhdisteelle C8H10F3N503S 0,08 heksaani:
C 31,81; H 3,50; N 21,88; F 17,80; S 10,01; SH 10,56; Todettu: C 31,39; H 3,37; N 21,35; F 18,27; S 10,51; SH
II, 01.
. Esimerkit 64 - 83 t · » • ·1 30 Seuraavat lisäyhdisteet voidaan valmistaa käyttäen
• I
edellä esitettyjä menetelmiä.
• 1 1 • · » • » • »
• I
· • · • · · 87 112213 CF3
R3-S-CH2-CH-C-NH-X il O
X r3 64 ”CH2~(0/ H-
vOH
65 " CH3-C-
3 H O
N
66 H_ i co2h 67 " CH3-C-
II
0 . sch3 : 68 I-* H- : /C\
C02H
69 " CH3-C- ll
O
» k » t t i * ee 112213 χ0Η f 70 CH H- 7 co2h 71 " CH3-C- 0 72 jC—c°zB- h~ 73 " CH3-C-
O
ch3 74 I NH ^C02H H- "l
: O
: \‘· 75 " CH3-C- : o 76 -(CH2)3-C02H H- 77 " CH3-C- : Il
O
89 112213 f Η 78 '^'^COaH Η- 79 " CH3-C- fi
O
80 Λ ^ ι S*" -TT)C02h o 81 " CH3-C- • ·* |i 0 S β £ ΐ '' 82 NH^^COaH H- li o 83 " CH3-C-
II
0 90 112213
Esimerkki 84 1 000 tablettia, jotka kukin sisältävät seuraavat aineosat: N-[[3,3,3-trifluori-2-(merkaptometyy1i)-1-5 oksopropyyli]-L-tryptofaani, isomeeri A 100 mg
Maissitärkkelys 50 mg
Gelatiini 7,5 mg
Avicel/mikrokiteinen selluloosa 25 mg
Magnesiumstearaatti 2,5 mg 10 185 mg valmistetaan sopivista ainemääristä sekoittamalla esimer kin 9 tuotetta ja maissitärkkelystä gelatiinin vesiliuoksen kanssa. Sen jälkeen seos kuivataan ja jauhetaan jauheeksi. Avicel ja sitten magnesiumstearaatti sekoitetaan 15 samalla granuloiden. Sen jälkeen tämä seos puristetaan tablettipuristimessa, niin että saadaan 1 000 tablettia, jotka kukin sisältävät 100 mg aktiivista aineosaa. Tätä samaa menettelyä voidaan käyttää tablettien valmistukseen, jotka sisältävät 50 mg aktiivista aineosaa. Samalla tavoin 20 voidaan valmistaa tabletit, jotka sisältävät 50 mg tai 100 mg minkä tahansa esimerkin 1-8 tai 10 - 83 tuotetta.
·' · Esimerkki 85 ! : Kaksiosaiset n:ro l:n gelatiinikapselit täytetään * seoksella, joka muodostuu seuraavista aineosista: * 25 N-[3,3,3-trifluori-2-(merkaptometyyli)-l- . oksopropyyli]-L-leusiini, isomeeri B 100 mg
Magnesiumstearaatti 7 mg
Laktoosi 193 mg .. . 300 mg \ ;* 30 Samalla tavoin voidaan valmistaa kapselit, jotka * ♦ sisältävät 100 mg esimerkkien 1-20 tai 22 - 83 tuotetta.
• · » • * * I 4

Claims (7)

  1. 91 112213
  2. 1. Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten tri-fluorimetyylimerkaptaani- ja merkaptoasyylijohdannaisten 5 valmistamiseksi, joilla on kaava f' (CH2)no (I) II
  3. 10 R3 S—CH2 — CH-C-NH-X jossa X on Ri
  4. 15. CH -(CH2)p - COOH, -(CH2)2 - COOH, - (CH2)2-(O V~0H' - (CH7)2 -tetratsolyyli, -CH-tetratsolyyli, '-' - CH-tetratsolyyli, alempi alkyyli
  5. 20 CH2-indolyyli tai CHj 0 —\ T li f| - CH - C - N—1- COOH; : HtL) ’ ί 25 on alempi alkyyli, - CH2_H(g) , -CH-tetratsolyyli, '·' ' - ch2-®-oh, - CH2—(^\~0Rr - CH2 <( y ,- CH2 j^q) ' ^OH : ’*·* 30 -CH2 - COOH tai - CH2-indolyyli; \V n on 0 tai 1; p on 0 tai 1; ja r. R3 on vety tai alempi-alkyyli-C(0)-; » · · 35 tunnettu siitä, että happokloridi, jolla on kaava i , * · · 112213 92 CF3 (CH2)n 5 R3-S—CH2—CH- C0-C1 jossa R3 ja n ovat edellä määriteltyjä, liitetään aminovä-10 lituotteeseen, jolla on kaava H2N-X jossa X on edellä määritelty, tai sen vetykloridisuolaan, 15 ja mahdollisesti, kun R3 on alempi-alkyyli-C(0)-, saatua tuotetta käsitellään emäksellä, jolloin saadaan kaavan I mukainen tuote, jossa R3 on vety.
  6. 2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä sellaisten kaavan I mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi, 2. joissa n on nolla, R3 on vety ja X on i r . 25 “Ch· C00H ' —CK-COOH , 30 f —CH—COOK , —(CH2)2 COOH , .*··. CH(CH3)2 COOH i\" f f
  7. 35. CH-COOH , —CH-COOH ’ a 93 112213 m il / 4 N-N -Oi COOH — CH COOH , H / io j~$ f ?-* -(CH2)2 NS II tai —CH-C N~N Vn tunnettu siitä, että happokloridi, jolla on kaava 15 O CF3 O Il I II h3c- c— s— CH2—CH— c— Cl kytketään aminovälituotteeseen, jolla on kaava 20 H2N-X • jossa X on edellä määritelty, tai sen hydrokloridisuolaan, ja saatua tuotetta käsitellään emäksellä. > · * > * · · 94 112213
FI911399A 1990-03-22 1991-03-22 Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten trifluorimetyylimerkaptaani- ja merkaptoasyylijohdannaisten valmistamiseksi FI112213B (fi)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US49738690A 1990-03-22 1990-03-22
US49738690 1990-03-22
SG165394 1994-11-16
SG165394A SG165394G (en) 1990-03-22 1994-11-16 Mercapto-or acylthio-trifluoromethyl amide derivatives and their use

Publications (3)

Publication Number Publication Date
FI911399A0 FI911399A0 (fi) 1991-03-22
FI911399A FI911399A (fi) 1991-09-23
FI112213B true FI112213B (fi) 2003-11-14

Family

ID=26664489

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
FI911399A FI112213B (fi) 1990-03-22 1991-03-22 Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten trifluorimetyylimerkaptaani- ja merkaptoasyylijohdannaisten valmistamiseksi

Country Status (27)

Country Link
EP (1) EP0449523B1 (fi)
JP (1) JP2955051B2 (fi)
KR (1) KR0184876B1 (fi)
CN (1) CN1038505C (fi)
AT (1) ATE110056T1 (fi)
AU (1) AU632408B2 (fi)
CA (1) CA2038379C (fi)
CY (1) CY1820A (fi)
CZ (1) CZ281165B6 (fi)
DE (1) DE69103454T2 (fi)
DK (1) DK0449523T3 (fi)
EG (1) EG19711A (fi)
ES (1) ES2057761T3 (fi)
FI (1) FI112213B (fi)
HK (1) HK24295A (fi)
HU (1) HU210313B (fi)
IE (1) IE65539B1 (fi)
IL (1) IL97626A (fi)
MX (1) MX25035A (fi)
NO (1) NO175147C (fi)
NZ (1) NZ237534A (fi)
PL (1) PL165153B1 (fi)
PT (1) PT97121B (fi)
RU (1) RU2024504C1 (fi)
SG (1) SG165394G (fi)
SK (1) SK279617B6 (fi)
ZA (1) ZA912133B (fi)

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IT1273455B (it) * 1995-01-27 1997-07-08 Zambon Spa Derivati tiolici ad attivita' inibitrice delle metallopeptidasi
IT1277736B1 (it) * 1995-12-28 1997-11-12 Zambon Spa Derivati tiolici ad attivita' inibitrice delle metallopeptidasi
FR2805259B1 (fr) * 2000-02-17 2002-03-29 Inst Nat Sante Rech Med Nouveaux derives d'aminoacides n-mercaptoacyles, leur procede de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent
TW200519106A (en) 2003-05-02 2005-06-16 Novartis Ag Organic compounds

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SE429374B (sv) * 1980-04-15 1983-08-29 Luxor Ab Feste
FR2480747A1 (fr) * 1980-04-17 1981-10-23 Roques Bernard Derives d'acides amines et leur application therapeutique
US4333943A (en) * 1980-04-24 1982-06-08 Miles Laboratories, Inc. Ethyl 3-(3-indolyl)-3-(5-tetrazolyl) propionate compounds used as anti-hypertensive agents
BE890948A (fr) * 1981-10-30 1982-02-15 Luitpold Werk Chem Pharm Derives de l'acide anthranilique
EP0361365A1 (en) * 1988-09-30 1990-04-04 E.R. SQUIBB &amp; SONS, INC. Aminobenzoic and aminocyclohexane-carboylic acid compounds, compositions, and their method of use

Also Published As

Publication number Publication date
HK24295A (en) 1995-03-03
NO175147B (no) 1994-05-30
KR0184876B1 (ko) 1999-05-15
PT97121A (pt) 1991-11-29
HUT57186A (en) 1991-11-28
PL165153B1 (pl) 1994-11-30
ES2057761T3 (es) 1994-10-16
AU7367291A (en) 1991-10-03
JP2955051B2 (ja) 1999-10-04
RU2024504C1 (ru) 1994-12-15
NO911149L (no) 1991-09-23
HU910956D0 (en) 1991-10-28
ATE110056T1 (de) 1994-09-15
FI911399A0 (fi) 1991-03-22
AU632408B2 (en) 1992-12-24
EP0449523B1 (en) 1994-08-17
PT97121B (pt) 1998-08-31
EP0449523A1 (en) 1991-10-02
HU210313B (en) 1995-07-28
ZA912133B (en) 1991-12-24
SK279617B6 (sk) 1999-01-11
MX25035A (es) 1994-01-31
DE69103454T2 (de) 1995-03-16
CA2038379C (en) 2002-11-05
CS9100765A2 (en) 1991-10-15
PL289549A1 (en) 1991-10-21
SG165394G (en) 1995-04-28
NO911149D0 (no) 1991-03-21
DE69103454D1 (de) 1994-09-22
CY1820A (en) 1995-10-20
CZ281165B6 (cs) 1996-07-17
NO175147C (no) 1994-09-07
FI911399A (fi) 1991-09-23
CN1055735A (zh) 1991-10-30
KR910016693A (ko) 1991-11-05
CN1038505C (zh) 1998-05-27
IE65539B1 (en) 1995-11-01
IL97626A0 (en) 1992-06-21
IE910941A1 (en) 1991-09-25
DK0449523T3 (da) 1994-09-19
CA2038379A1 (en) 1991-09-23
EG19711A (en) 1995-09-30
JPH04234842A (ja) 1992-08-24
NZ237534A (en) 1992-09-25
IL97626A (en) 1995-08-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US5414013A (en) Trifluoromethyl mercaptan and mercaptoacyl derivatives and method of using same
DE69310475T2 (de) Benzokondensierte Lactame
CZ289488B6 (cs) Merkaptoalkanoylový a acylmerkaptoalkanoylový derivát oxazepinu, thiazinu a thiazepinu, způsob jeho přípravy, meziprodukt pro jeho přípravu a farmaceutický prostředek, který ho obsahuje
CA2063185A1 (en) Benzo-fused lactams that promote the release of growth hormone
DK148711B (da) Analogifremgangsmaade til fremstilling af 1-(3-mercapto-2-methylpropanoyl)-prolyl-aminosyre-derivater, optiske isomere deraf eller farmaceutisk acceptable salte deraf
DE60019954T2 (de) Fab i hemmer
EP0416373A2 (de) Aminosäurederivate
JPH08503475A (ja) 抗変性活性剤としてのカルボキシ−ペプチジル誘導体
KR100432618B1 (ko) 시클릭아미노산유도체
PT655461E (pt) Derivados ciclicos de aminoacidos
AU765642B2 (en) Growth hormone secretagogues
EP0310918A2 (de) Peptidartige Aminosäurederivate
FI112213B (fi) Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten trifluorimetyylimerkaptaani- ja merkaptoasyylijohdannaisten valmistamiseksi
CA1322074C (en) Pharmaceutically useful derivatives of thiazolidine-4- carboxylic acid
WO1997009066A1 (fr) INHIBITEUR DE SOLUBILISATION DE LIGAND Fas
FR2532308A1 (fr) Nouveaux polypeptides, leur preparation et leur application comme medicaments
JPH0526775B2 (fi)
DE3222779C2 (fi)
US6828331B1 (en) Growth hormone secretagogues
FR2595704A1 (fr) Derives de la proline
JPS61122298A (ja) アミノチオールペプチド類
KR890002173B1 (ko) 치환된 디펩티드 및 이의 제조방법
DE4038947A1 (de) Dithiolano- und dithianoglycin-haltige renininhibitorische peptide, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung in arzneimitteln
JPH06104680B2 (ja) プロリン誘導体
JPH0136465B2 (fi)