FI112092B - Menetelmä luonnollisten avermektiinien saostamiseksi - Google Patents
Menetelmä luonnollisten avermektiinien saostamiseksi Download PDFInfo
- Publication number
- FI112092B FI112092B FI960304A FI960304A FI112092B FI 112092 B FI112092 B FI 112092B FI 960304 A FI960304 A FI 960304A FI 960304 A FI960304 A FI 960304A FI 112092 B FI112092 B FI 112092B
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- avermectin
- natural
- water
- avermectins
- process according
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/44—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides
- C12P19/60—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides having an oxygen of the saccharide radical directly bound to a non-saccharide heterocyclic ring or a condensed ring system containing a non-saccharide heterocyclic ring, e.g. coumermycin, novobiocin
- C12P19/62—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides having an oxygen of the saccharide radical directly bound to a non-saccharide heterocyclic ring or a condensed ring system containing a non-saccharide heterocyclic ring, e.g. coumermycin, novobiocin the hetero ring having eight or more ring members and only oxygen as ring hetero atoms, e.g. erythromycin, spiramycin, nystatin
- C12P19/623—Avermectin; Milbemycin; Ivermectin; C-076
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/465—Streptomyces
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/886—Streptomyces
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
- Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Description
112092
Menetelmä luonnollisten avermektiinien saostamiseksi
Keksinnön tausta Tätä keksintöä koskevassa tekniikan alassa käydään 5 läpi avermektiiniyhdisteiden eristämistä ja puhdistamista, erityisesti menetelmiä avermektiiniyhdisteiden uuttamiseksi fermentointiliemestä.
Avermektiinit ovat laajaspektrinen ryhmä macrolidi-tyyppisiä antiparasiittisia aineita. Niitä tuotetaan fer-10 mentoimalla Streptomvces avermitilis -mikro-organismikan-taa (esim. ATCC 31267, 31271 tai 31272 tai niiden mutant-teja) aerobisissa olosuhteissa vesipitoisessa ravintoalustassa, joka sisältää epäorgaanisia suoloja ja assimiloituvia hiilen- ja typenlähteitä. Tyypillisesti avermektiinit 15 on karakterisoitu nimistöjärjestelmällä, jossa käytetään erilaisia kirjaimia ja numeroita, jotka viittaavat spesifisiin substituentteihin.
Avermektiinien alaryhmä, luonnolliset avermektiinit, sisältävät yhdisteitä, joissa C5-kohta on korvattu 20 nietoksilla (merkitty A: 11a) tai hydroksilla (merkitty B:llä), C25-kohta on korvattu s-butyylillä (merkitty a:11a) tai isopropyylillä (merkitty b:llä) ja C23-kohta on korvat-,*·*, tu hydroksilla (merkitty 2:11a) tai liitetty C22-kohtaan kaksoissidoksella (merkitty l:llä). Näin on olemassa kah-25 deksan mahdollista luonnollista avermektiiniä, ja spesifisiin yhdisteisiin viitataan käyttämällä symbolien yhdis-telmiä, kuten Bla tai B2b. Lisäksi luonnollisten avermek-’·' tiinien alaryhmään voitaisiin viitata esimerkiksi käyttä mällä termiä luonnolliset B-avermektiinit. Luonnolliset B- I * 1 i 30 avermektiinit viittaavat neljään luonnolliseen avermektii- niin, joissa C5-kohta on korvattu hydroksilla, C25-kohta on [·, korvattu joko isopropyylillä tai s-butyylillä ja C23-kohta "... on korvattu hydroksilla tai liitetty C22-kohtaan kaksoissi-
I I
doksella. Kahdeksan luonnollisen avermektiiniyhdisteen i *·· 35 eristys ja kemiallinen rakenne (joskus viitattu C-076-yh- 112092 2 disteet) kuvataan yksityiskohtaisesti GB-patenttijulkaisussa nro 1 573 955.
On useita menetelmiä eristää avermektiinejä kasvualustasta ja eristää selektiivisesti tiettyjä avermektii-5 nejä kasvualustasta. Esimerkiksi US-patenttijulkaisussa nro 4 423 211 kuvataan menetelmä, jossa fermentointialus-tan pH säädetään alueelle 1,5-6 mineraalihapolla, kuten rikki-, kloorivety- tai typpihapolla. Sen jälkeen liemi saatetaan yhteen ja sitä sekoitetaan uuttavan aineen, ku-10 ten tolueenin kanssa, ja avermektiiniyhdisteet liukenevat uuttavaan aineeseen ja saadaan sen mukana talteen. Liuos, joka sisältää avermektiinin ja uutteen, viedään sen jälkeen separaattorin läpi uuttavan aineen poistamiseksi, ja jäljelle jäävä avermektiini eristetään esimerkiksi kiteyt-15 tämällä.
Lisäksi US-patenttijulkaisussa nro 5 077 398 kuvataan kaksivaiheinen menetelmä, jossa B1-komponentit kiteytetään avermektiinia sisältävän liemen konsentroidusta veteen sekoittumattoman liuottimen uutteesta alkoholilla 20 tai hiilivety/alkoholi-seoksella. B2-komponentit kiteyte tään supersaturaatiota seuraavasta, jäljelle jäävästä uut- • teestä (joka jää B1-kiteytyksen jälkeen) (esimerkiksi * * * · alentamalla lämpötilaa) käyttäen B2-ymppikiteitä.
Vaikka edellä kuvatut menetelmät ovat edistäneet 25 tekniikkaa, nämä menetelmät edelleen perustuvat vettä si-sältämättömien liuottimien käyttöön ja ympäristöä koskevat seikat edellyttävät vähäisempää liuottimien käyttöä, mil-loin se on mahdollista. Niinpä etsitään edelleen uusia menetelmiä avermektiinien eristämiseksi.
• V 30 Keksinnön yhteenveto - Tämä keksintö koskee menetelmää eristää luonnolli- ;·, nen B-avermektiini luonnollisesta avermektiiniä sisältä- \.t västä fermentaatioliemestä käyttämällä saostusta vesipi- • · ;* toisella aineella. Menetelmä sisältää luonnollisten aver- | *·· 35 mektiinien uuttamisen fermentaatioliemestä veteen sekoit- »ti 112092 3 tuvalla liuottimena ja riittävän vesimäärän lisäämisen luonnollisten B-avermektiinien saostamiseksi. Edullisesti veteen sekoittuva liuotin on C1.3-alkoholi, asetoni tai ase-tonitriili. Lisäksi voidaan saostamisen helpottamiseksi 5 lisätä happoa, emästä, suolaa tai pinta-aktiivista ainetta. Edullisesti hapossa, emäksessä tai suolassa on natrium-, kalium-, kalsium-, ammonium- tai vetykationi ja kloridi-, fosfaatti-, sulfaatti-, nitraatti-, bikarbonaatti-, karbonaatti- tai hydroksidianioni. Pinta-aktiivinen aine 10 on edullisesti natriumlauryylisulfaatti.
Tässä keksinnössä tehdään merkittävä edistysaskel avermektiinin eristyksessä antamalla käyttöön menetelmä, joka korvaa saostukset vettä sisältämättömillä liuottimilla saostuksilla, joissa käytetään vettä. Vettä sisältämät-15 tornien liuottimien käytön vähentäminen saa aikaan taloudellista etua ja etua ympäristö- ja turvallisuusasioissa. Tuotteiden puhdistusta edistävän saostuksen valitseminen käyttää hyväkseen avermektiinien liukoisuuden voimakasta riippuvuutta veteen sekoittuvien orgaanisten liuottimien 20 vesisisällöstä. Menetelmää voidaan muunnella lisäämällä erilaisia aineita (esim. happoa, emästä, suoloja, pinta-·· aktiivisia aineita) sakan ominaisuuksien muuttamiseksi ,·*·. (esim. rakeinen, mieluummin kuin öljyinen sakka) ja edul- listen komponenttien (esim. B1 -komponentit B2-komponentti-25 en kustannuksella) valitsemisen helpottamiseksi.
"I Muut keksinnön kohteet, piirteet ja edut käyvät ilmeisemmiksi seuraavasta yksityiskohtaisesta selitysosas-'·* ta ja patenttivaatimuksista.
Keksinnön yksityiskohtainen kuvaus • V 30 Tämän keksinnön menetelmässä voidaan käyttää mitä : tahansa avermektiinilientä, joka sisältää halutun tuot- :** teen, luonnollista B-avermektiiniä tai tällaisten avermek- ... tiinien seosta, edullisesti pitoisuus, joka on yli noin 0,2 grammaa/litra. Avermektiiniliemellä tarkoitetaan aver-• 35 mektiiniä sisältävää alustaa, joka syntyy sopivan viljel- 112092 4 män, yleensä Streptomvces avermitilis -kannan, fermentoin-nin tuloksena. On kuitenkin tarkoitus, että siihen sisältyvät myös kiinteät aineet, tai kiinteiden aineiden suspensio (joka sisältää suurimman osan avermektiineistä), 5 jotka syntyvät tällaisen fermentaation tuloksena. Tällaiset kiinteät aineet voidaan konsentroida fermentaatiosta sellaisilla menetelmillä kuten sentrifugointi tai suodatus. Menetelmän tehokkuuden aste johtuu halutun avermek-tiinin/avermektiinien pitoisuudesta liemessä, joka johtuu 10 avermektiinien ja liemestä peräisin olevien epäpuhtauksien liukoisuusominaisuuksista vesipitoisen liuottimen seoksissa. Näiden ominaisuuksien johdosta haluttujen avermektiinien saanto ja menetelmästä saadun tuotteen laatu paranevat, kun halutun avermektiinin/avermektiinien pitoisuus 15 liemessä kasvaa, On edullista, että halutun avermektiinin/avermektiinien pitoisuus liemessä on suurempi kuin noin 0,2 grammaa/litra, koska tämä helpottaa suurempien saantojen ja parempilaatuisten tuotteiden saannon.
Mitä tahansa sellaista veteen sekoittuvaa liuotinta 20 voidaan käyttää luonnollisten avermektiinien uuttamiseksi edellä kuvatusta avermektiiniliemestä, jolla kyetään uut-tamaan luonnolliset avermektiinit ja joka ei vaikuta hai- • 14« ,···, tallisesti haluttuun lopputuotteeseen. Veteen sekoittuva y"·' liuotin on tyypillisesti C^-alkoholi, asetoni tai asetoni- 25 triili. Edullisesti liuotin on C1.3-alkoholi ja erittäin edullisesti liuotin on metanoli. Mitä tahansa sellaista määrää liuotinta voidaan käyttää, jolla kyetään uuttamaan *·' ’ halutut luonnolliset avermektiinit. Yleensä käytetään noin 150 - 300 paino-% liuotinta suhteessa liemeen tai konsent- • · » • 30 roituun liemeen sillä, kun mennään alle noin 150 %:n, huo- : : mättävä määrä haluttuja luonnollisia avermektiinejä jää ;·’ assosioituneeksi liemisuspension kiinteän faasin kanssa, ja noin 300 %:n yläpuolella ei-toivotut fermentaatiosivu-'i' tuotteet voidaan uuttaa mukana ja liuotinta käytetään tar- | '·· 35 peettomasti. Kiinteät aineet poistetaan uutteesta standar- 112092 5 dilla menetelmällä, kuten suodatuksella tai sentrifugoin-nilla.
Vaikka pelkkää vettä voidaan lisätä avermektiinin veteen sekoittuvan liuottimen uutteeseen haluttujen luon-5 nollisten B-avermektiinien saostamiseksi selektiivisesti, happoa, emästä, suolaa tai pinta-aktiivista ainetta (saostuksen käynnistäjä) lisätään tyypillisesti yhdessä veden kanssa saostuksen helpottamiseksi. Edullisesti hapossa, emäksessä tai suolassa on natrium-, kalium-, kalsium-, 10 ammonium- tai vetykationi ja kloridi-, fosfaatti-, sulfaatti-, nitraatti-, bikarbonaatti-, karbonaatti- tai hyd-roksidianioni. On erittäin edullista, että happo, emäs tai suola on natriumkloridi, kaliumfosfaatti, rikkihappo, natriumbikarbonaatti, natriumhydroksidi tai kaliumhydroksidi. 15 Natriumkloridin tai natriumbikarbonaatin lisäys on erityisen edullista, koska se parantaa sakan käsittelyominaisuuksia. Vaikka mitä tahansa pinta-aktiivista ainetta voidaan käyttää saostamisen helpottamiseksi (esim. saa aikaan edullisemman sakan laadun), on edullista, että pinta-ak-20 tiivinen aine on anioninen tai kationinen ja erityisen edullista, että pinta-aktiivinen aine on alkyylisulfonaat-ti, kuten natriumlauryylisulfaatti. Lisäksi voidaan käyt- I t · t .·*·. tää yhdistelmiä edellä kuvatuista hapoista, emäksistä, :·]·§ suoloista tai pinta-aktiivisista aineista saostamisen hel- 25 pottamiseksi. Esimerkiksi suolojen ja pinta-aktiivisten aineiden yhdistelmät, kuten natriumkloridi ja natriumlau-ryylisulfaatti, ovat erityisen edullisia, koska ne saavat ' aikaan sakkoja, jotka ovat puhtaita ja joilla on halutut käsittelyominaisuudet.
J 30 Voidaan käyttää mitä tahansa sellaista määrää vet- : : tä, joka tehokkaasti, selektiivisesti saostaa luonnolliset .·’ B-avermektiinit veteen sekoittuvan liuottimen liemiuut- teesta. Yleensä sen veden määrä, joka lisätään halutun ;· tuotteen saostamiseksi, johtuu uutteen alkuperäisestä ve- ! *·· 35 sisisällöstä ja halutun avermektiinin/avermektiinien pi- 112092 6 toisuudesta. Seoksen haluttu vesipitoisuus veden lisäyksen jälkeen vaihtelee lopullisen seoksen noin 45 paino-%:sta noin 75 paino-%:iin. Edullisesti lisätty vesi tuottaa lopullisessa seoksessa noin 50 - 65 paino-%:n vesipitoisuu-5 den. Edullinen veden määrä saattaa vaihdella riippuen hapon, emäksen, suolan tai pinta-aktiivisen aineen tyypistä tai lisäyksen määrästä. Näin on yleensä edullista käyttää enemmän vettä, jos esimerkiksi edellä kuvattuja lisäaineita ei käytetä. Lisäksi veden määrää voidaan edullisesti 10 muuttaa tiettyjen luonnollisten B-avermektiinien selektiivisen saostumisen saavuttamiseksi. Näin esimerkiksi pienempi vesimäärän lisäys tekee yleensä helpommaksi Bl-kom-ponenttien selektiivisen saostumisen suhteessa B2-kompo-nentteihin.
15 Yleensä voidaan käyttää mitä tahansa sellaista mää rää saostuksen käynnistäjää, joka tehokkaasti yhdessä veden kanssa selektiivisesti saostaa luonnollisia B-avermek-tiineja veteen sekoittuvan liuottimen liemiuutteesta. Tyypillisesti käytetään suolaa noin 0-8 paino-% lopullises-20 ta seoksesta ja edullisesti suolaa käytetään noin 3-5 paino-% lopullisesta seoksesta. Tyypillisesti käytetään pinta-aktiivista ainetta noin 0-2 paino-% lopullisesta ,···, seoksesta ja edullisesti pinta-aktiivista ainetta käyte- « · tään noin 0,1-1 paino-% lopullisesta seoksesta. Tyypil- 25 lisesti käytetään sellaista määrää happoa, joka riittää '··;* saamaan pH:ksi noin 2 - 7 ja edullisesti käytetään sei- • · · '···* laista määrää happoa, joka riittää saamaan pH:ksi noin • · · v ’ 2,5 - 4. Tyypillisesti käytetään sellaista määrää emästä, joka riittää saamaan pH:ksi noin 8 - 11 ja edullisesti : ' 30 käytetään sellaista määrää emästä, joka riittää saamaan : pH:ksi noin 8,5 - 10.
Yleensä tämän keksinnön menetelmä suoritetaan uut-tamalla luonnolliset avermektiinit fermentointiliemestä veteen sekoittuvalla liuottimena ja lisäämällä riittäväs-: 35 ti vettä (ja mitä tahansa haluttua saostuksen edistäjää) 7 11209? luonnollisten B-avermektiinien saostamiseksi. Edullisesti fermentointiliemen biomassa konsentroidaan esimerkiksi sentrifugoimalla, suodattamalla tai ultrasuodattamalla noin 4 - 12-kertaisesti alkuperäisestä pitoisuudestaan, ja 5 tuloksena syntyvään kosteaan kiinteään aineeseen lisätään sopiva määrä veteen sekoittuvaa liuotinta. Tuloksena syntyvää lietettä sekoitetaan sopivalla voimakkuudella riittävä aika haluttujen avermektiinien liukenemisen varmistamiseksi (yleensä noin 1-8 tuntia). Jäljelle jäävä sus-10 pendoitu kiinteä aine (joka sisältää biomassan, fermentaa-tiosivutuotteet, lipidit, lipoproteiinit jne.) poistetaan sentrifugoimalla, suodattamalla tai ultrasuodattamalla. Tyypillisesti nämä prosessinvaiheet suoritetaan vaihtele-vissa lämpötiloissa, vaikka voidaankin käyttää mitä tahan-15 sa lämpötilaa (esim. noin 15 - 40 °C), joka ei huomattavan haitallisesti vaikuta halutun tuotteen saantoon.
Muodostuvaan veteen sekoittuvan liuottimen fermen-taatioliemiuutteeseen lisätään haluttu määrä vettä ja mitä tahansa haluttua saostuksen edistäjää. Tämä lisäys suori-20 tetaan tyypillisesti ryhmälisäyksenä samalla sekoittaen. Liuosta sekoitetaan riittävä aika (esim. 12 - 48 tuntia) halutun luonnollisen B-avermektiinisakan saamiseksi. Jäi- i · leen tämä saostus suoritetaan edullisesti vaihtelevassa " lämpötilassa, vaikka voidaan käyttää mitä tahansa lämpöti- 25 loja (esim. noin 15 - 40 °C), jotka eivät huomattavan hai-·;’ tallisesti vaikuta halutun tuotteen saantoon.
··* Muodostuvat sakat kerätään esimerkiksi suodattamal- ’ la ja puhdistetaan edelleen. Vaikka jatkopuhdistus voidaan toteuttaa millä tahansa alan ammattimiesten tuntemalla ; 30 keinolla (mukaan lukien esimerkiksi kromatografiset tek- niikat tai liuottimeen perustuva uudelleenkiteytys, kuten t * « ./ ne on kuvattu US-patenttijulkaisussa 5 077 398), on edul lista käyttää uudelleenkiteytystä, joka perustuu veden ja ;·’ veteen sekoittuvan liuottimen käyttöön ensimmäisessä uu- 35 tossa. Näin sakka liuotetaan uudelleen veteen sekoittuvaan . 112092 liuottimeen ja haluttu tuote saadaan puhtaampana lisäämällä riittävästi vettä ja vaihtoehtoisesti suoloja ja/tai pinta-aktiivista ainetta halutun tuotteen selektiivisen kiteytymisen saamiseksi. Menetelmää voidaan toistaa kunnes 5 saadaan tuotteelle haluttu puhtaus. Tämän menetelmän etu on se, että käytetään yhtä ainoaa liuotinta koko tuotteen talteenottamis- ja puhdistusprosessiin, mikä yksinkertaistaa liuottimen uudelleenkäyttöä, mistä seuraa taloudellista etua ja etua ympäristön kannalta.
10 Tämän keksinnön menetelmää voidaan käyttää selek tiivisesti, kollektiivisesti saostamaan luonnollisia B-avermektiinejä tai sitä voidaan käyttää saostamaan peräkkäin selektiivisesti luonnollisten B-avermektiinien alaryhmiä, kuten luonnolliset Bl-avermektiinit (ts. Bla, 15 Blb), jonka jälkeen saostetaan jäljelle jäävät luonnolliset B2-avermektiinit.
Alan ammattimiehille on ilmeistä, että edellä kuvattua menetelmää "luonnollisten" avermektiinien saamiseksi voidaan helposti käyttää muuntyyppisten avermektiinien 20 ottamiseksi talteen. Muita kuin "luonnollisia" avermek-tiineja, joita on kuvattu GB-patenttijulkisussa nro ,i, 1 573 955, ovat esimerkiksi sellaiset, jotka on kuvattu ’•**t US-patenttijulkaisussa nro 5 089 480. Niinpä esimerkiksi • » .1*1 avermektiinejä, joissa on sykloheksyyli- tai syklopentyy- *,,) 25 lisubstituentteja C-25-kohdassa, voidaan saada niitä si- • t *'··* sältävistä fermentaatioliemistä tätä keksintöä käyttämäl- lä.
V · Tämä keksintö antaa käyttöön sellaisen menetelmän avermektiinien saamiseksi, jossa vältetään sellaisten liu- : · : 30 ottimien käyttöä kuin tolueeni tai klooratut liuottimet, :“*: joiden turvallisuusriskit ja ympäristöongelmat tunnetaan, ja tekee mahdolliseksi talteenoton yhden liuottimen avul-
• * I
la, ja puhdistusprosessin, joka helpottaa liuottimen kier-
• I
rätystä ja käyttöä uudelleen. Se myös yhdistää yhdeksi 35 menetelmän vaiheeksi avermektiinien konsentroinnin fermen- t 112092 9 taatioliemestä ja merkittävän avermektiinien yleispuhdis-tuksen ja spesifisesti halutumpien komponenttien puhdistuksen. Lopulta siinä ei tarvitse suorittaa liemiuutteen esikonsentrointia, mistä seuraa mahdollisia säästöjä lai-5 temenoissa menetelmää toteutettaessa.
Tulisi ymmärtää, ettei keksintö rajoitu tässä kuvattuihin tiettyihin suoritusmuotoihin vaan, että voidaan tehdä useita muutoksia ja modifikaatioita poikkeamatta tämän uuden menetelmän hengestä ja piiristä, jotka määri-10 tellään seuraavissa patenttivaatimuksissa.
Esimerkki 1
Fermentaatio
Avermektiinit tuotettiin fermentoimalla
Streptomvces avermitilis -mutanttikantaa. Käytetty kanta, 15 joka nimettiin R69-73’ksi, tallennettiin Budapest-sopimuk- sen mukaisesti American Type Culture Collection’iin, Rockville, Maryland 20852, USA, talletusnumerolla ATCC 55453 20. pnä heinäkuuta, 1993. Tämä kanta tuottaa edullisesti pienempiä määriä A-tyypin (ts. 5-O-metyyli) avermek-20 tiinejä kuin tallennettu kanta, josta tämä kanta oli peräisin (ATCC 31272). Tämä ominaisuus helpottaa B-tyypin avermektiinien tuottoa, jonka tiedetään olevan tehokkaam-paa kuin A-tyypin avermektiinien.
,Ymppi valmistettiin kasvattamalla viljelmä 25 Fernbach-pulloissa (2,8 litran kapasiteetti), jotka sisäl- ’···’ tävät 500 ml seuraavaa alustaa: v : grammaa/litra
Pharmamedia (puuvillansiemenjauho) 15 30 Ardamine pH (hiivauute) 5
Ohennettu tärkkelys 20 ,,· Kalsiumkarbonaatti 2 ·;’ Alustan pH säädettiin 7,2:ksi natriumhydroksidilla 35 ja se steriloitiin autoklavoimalla pulloja 121 °C:ssa 45 10 112092 minuuttia ennen käyttöä. Viljelmällä siirrostamisen jälkeen pulloja inkuboitiin 72 tuntia 29 °C:n lämpötilassa pyörivässä ravistelijassa nopeudella 200 rpm. Kahta pulloa käytettiin sen jälkeen siirrostamaan tuotantofermentori, 5 14 litran astia, joka sisältää 10 litraa seuraavaa alus taa: grammaa/litra
Glukoosimonohydraatti 45 10 peptonoitu maitoravinne 24
Ardamiini pH (hiivauute) 2,5 P-2000 vaahtoamisenestoaine 2,5
Alustan pH säädettiin 7,0:ksi natriumhydroksidilla 15 ja se steriloitiin autoklavoimalla pulloja 121 °C:ssa 75 minuuttia. Jäähtymisen jälkeen fermentoriin pantiin ilmaa nopeudella 5 standardilitraa minuutissa ja sitä sekoitettiin nopeudella 600 rpm. Siirrostus suoritettiin edellä kuvatuilla pulloilla. Viisi päivää siirrostuksen jälkeen 20 aloitettiin jatkuva glukoosiliuoksen syöttö, jolloin annettiin 50 grammaa glukoosia päivässä. Syöttöä jatkettiin . 13. päivään saakka siirrostuksen jälkeen, jona ajankohtana 'II! fermentoinnista harvestoitiin saalis. Avermektiinien pi- ·; toisuudet harvestissa mitattuna HPLCrllä olivat seuraavat: '· ·' 25 Bla-413, Blb-333, B2a-471, B2b-186 mg/litra.
* » I
Saalis
Fermentointiliemi (7 litraa) sentrifugoitiin bio-'·/·> massaan sisältyvien avermektiinien konsentroimiseksi. Saa tiin kokonaismääräksi 1 163 grammaa (märkäpaino) konsent-·’·*; 30 roituja liemen kiinteitä aineita. 581 grammaan märkää kiinteää ainetta lisättiin 1 200 ml metanolia. Perusteel- • * lisen sekoittamisen jälkeen avermektiinien liuottamiseksi vesipitoisen metanolin liete suodatettiin suspendoituneen kiinteän aineen poistamiseksi. Jäljelle jäävä metanoliuute I i u 112092 sisälsi 39 painoprosenttia vettä (Karl Fischer -titrauk-sella) ja seuraavat pitoisuudet avermektiinejä:
Bla-1146, Blb-822, B2a-1307, B2b-379 mg/litra. Suodatetun uutteen haihtumaton kiinteä aine - si-5 sältö oli 17,1 grammaa/litra. Bla:n suhde haihtumattoman kiinteän aineen kokonaismäärään (Bla:n puhtaus) oli 6,7 %.
Kussakin taulukon 1 kuvaamassa saaliissa käytettiin 100 ml edellä kuvattua metanoliuuteliuosta. Taulukossa 1 luetellut lisäaineet lisättiin ja liuosta sekoitettiin 24 10 tuntia huoneen lämpötilassa (23 °C). Muodostuvat sakat kerättiin viemällä suspensio suodattimen läpi, joka sisälsi 3 grammaa suodattavaa ainetta (ts. kalsinoitua piimaa-ta) paperilla. Sakan laatu karakterisoitiin tekemällä havaintoja sakasta ennen ja jälkeen suodatuksen, ja tulokset 15 luetteloitiin taulukkoon 1. Sen jälkeen, kun suodatettu kakku oli pesty 10 ml:11a vesipitoista metanolia, jonka vesisisältö oli suurinpiirtein sama kuin suodatetun suspension, kakku suspendoitiin metanoliin avermektiinisakan liuottamiseksi uudelleen. Muodostuneista liuoksista määri-20 tettiin HPLC:llä niiden avermektiinisisällöt. Näytteet liuoksista kuivattiin haihtumattoman materiaalin kokonaissisällön määrittämiseksi. Bla-puhtaudet taulukossa 1 las-", kettiin sakkaliuosten Bla-sisällön suhteena liuosten haih- tumattoman kiinteän aineen kokonaissisältöön.
I I ' i f y 1 t »
I I I
i i i » » » »
i > i I » I
• I I
I I ♦ • t »Il » • · * · I I » •
I I
« I
t I » I t * i *
i I
t » ·.
i2 112092
Taulukko 1
Lisäaineet, Lopullinen Sakan Sakan Bla- Bla:n puhtaus paino/tilav.-% vesisisältö, laatu saanto sakassa paino-% ** Vain vesi 55% öljyinen 79% 25,5%
Vain vesi 60%_ öljyinen 81%__22,5%_
Vesi 55% I öljyinen 78% 18,2%
NaCI 4%_____
Vesi 60% öljyinen 86% 19,5% 10 NaCI 4%_____
Vesi 55% tahnamai- 71% 19 7%
NaCI 4% NaLS* nen 0,2%_____
Vesi 60% vahamai- 82% 20,8% 15 NaCI 4% NaLS* nen 0,2%_____|
Vesi 65% vahamai- 61% 14,6%
NaCI 4% I nen I I n
NaLS* 0,2%_____
Vesi 55% öljyinen 74% 35,4% 20 NaHCO, 2%_____
Vesi 55% öljyinen 81% 27,4% Κ,ΗΡΟ, 2%_____ ;* Vesi 55% erittäin 73% 21,5% ,! H2S04 - öljyinen 25 pH 3_____ ; : : Vesi NH4OH - 61% I erittäin 82% 27,3% Il ;;; pH 9 öljyinen J I^MBsaaasMB——aasaafe^a—saaaeasBB·—Ba^aaa—asasg· .—S==ssssss^^=ss=^=·. .
* NaLS = Natriumlauryylisulfaatti t I ' * » · 30 Lisäpuhdistus suoritettiin avermektiinien vedellä • > ·;·’ tapahtuvalla uudelleenkiteytyksellä metanoliliuoksista | lisäämällä vettä ja toistamalla prosessia kunnes haluttu :puhtaus saavutettiin. Esimerkiksi tässä tapauksessa 4 % NaCl:ää, 0,2 % NaLS:ää ja 60 % vettä käytettiin saostami-,,, 35 seen, kahden uudelleenkiteytyksen jälkeen saatu tuote oli 112092 13 95 paino-%:isesti avermektiiniä (noin 75 % Bla ja 20 % Bib).
Esimerkki 2
Konsentroitu liemen kostea kiinteä aine esimerkistä 5 1, 582 grammaa, sekoitettiin 1 200 ml:n kanssa asetonia avermektiinien liuottamiseksi. Vesipitoinen asetoniliete suodatettiin suspendoitujen kiinteiden aineiden poistamiseksi. Jäljelle jäävä asetoniuute sisälsi 41,9 painoprosenttia vettä (Karl Fischer -titrauksella) ja seuraavat 10 pitoisuudet avermektiinejä:
Bla-1393, Blb-999, B2a-1539, B2b-460 mg/litra.
Uutteen haihtumaton kiinteä aine -sisältö oli 16,9 grammaa/litra ja uutteen Bla:n puhtaus (kuten edellä on kuvattu) Bla oli 8,2 %.
15 Kussakin taulukon 2 kuvaamassa saaliissa käytettiin 100 ml edellä kuvattua asetoniuuteliuosta. Taulukossa 2 luetellut lisäaineet lisättiin ja liuosta sekoitettiin 24 tuntia huoneen lämpötilassa (23 °C). Muodostuvat sakat kerättiin viemällä suspensio suodattimen läpi, joka sisäl-20 si 3 grammaa suodattavaa ainetta (ts. kalsinoitua piimaa-ta) paperilla. Sen jälkeen, kun suodatettu kakku oli pesty ·;· 10 ml:11a asetonin vesisliuosta, jonka vesisisältö oli suurin piirtein sama kuin suodatetun suspension, kakku ·,*. suspendoitiin metanoliin avermektiinisakan liuottamiseksi ,«··. 25 uudelleen. Muodostuvat liuokset analysoitiin, samalla ta- "! voin kuin esimerkin 1 liuokset, taulukko 1.
» * I
> I
* t ιο 112092
Taulukko 2
Lisäaineet, Lopullinen Sakan laatu Sakan Bla- Bla:n puh-Paino/ vesisisältö, saanto taus sakassa tilav.-% paino-% ^ Vain vesi 60% öljyinen 76% 20,3%
Vain vesi 70%__öljyinen__91%__22,1%
Vesi 60% öljyinen 95% 16,1%
NaCI 4%_____ in Vesi 70% öljyinen 97% 16,4% 10 NaCI 4%_____
Vesi 60% vahamainen 75% 16,9%
NaCI 4%
NaLS* 0,2%_____
Vesi 70% vahamainen 87% 15,4% 15 NaCI 4%
NaLS* 0,2%
Kuten esimerkissä 1, tuotteet, joiden averraektiini-puhtaudet olivat 95 %, saatiin toistamalla kiteytykset metanolista vettä lisäämällä.
> * I » * » * » t * * » » · ·
• I
Claims (17)
1. Menetelmä luonnollisen B-avermektiinin erottamiseksi luonnollista avermektiinia sisältävästä fermen- 5 tointiliemestä, tunnettu siitä, että a. uutetaan avermektiinit mainitusta luonnollista avermektiinia sisältävästä fermentointiliemestä Ci-3-alko-holilla, asetonilla tai asetonitriilillä luonnollista B-avermektiinia sisältävän uutteen tuottamiseksi, 10 b. lisätään riittävästi vettä mainittuun luonnol lista B-avermektiiniä sisältävään uutteeseen mainitun luonnollisen B-avermektiinin saostamiseksi, ja c. kerätään sakka.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, 15 tunnettu siitä, että mainittua luonnollista B- avermektiinia sisältävä fermentointiliemi sisältää mainittua luonnollista B-avermektiinia pitoisuuden, joka on suurempi kuin 0,2 grammaa/litra, ja happoa, emästä tai suolaa lisätään mainittuun luonnollista B-avermektiinia sisältä-20 vään uutteeseen, jossa mainitussa hapossa, emäksessä tai suolassa on natrium-, kalium-, kalsium-, ammonium- tai ve-;;; tykationi ja kloridi-, fosfaatti-, sulfaatti-, nitraatti-, '*··’ bikarbonaatti-, karbonaatti- tai hydroksidianioni .
: .· 3. Patenttivaatimuksen 2 mukainen menetelmä, 25 tunnettu siitä, että lisätyn veden määrä on riit-: tävä siten, että vesisisältö on noin 45 - 75 % seoksen painosta.
4. Patenttivaatimuksen 3 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että mainittu happo, emäs tai suo-.··, 30 la on natriumkloridi, kaliumfosfaatti, rikkihappo, natri- ’·* umbikarbonaatti, natriumhydroksidi tai kaliumhydroksidi.
: “ 5. Patenttivaatimuksen 4 mukainen menetelmä, ·...· tunnettu siitä, että mainittu happo, emäs tai suo- :·. la on natriumkloridi tai natriumbikarbonaatti. 16 11209?
6. Patenttivaatimuksen 5 mukainen menetelmä, tunne ttu siitä, että mainittu luonnollinen aver-mektiini uutetaan Ci-3-alkoholilla.
7. Patenttivaatimuksen 6 mukainen menetelmä, 5 tunnettu siitä, että mainittu Ci-3-alkoholi on me- tanoli.
8. Patenttivaatimuksen 7 mukainen menetelmä, tunne ttu siitä, että lisätyn veden määrä on riittävä siten, että vesisisältö on noin 55 - 65 % seoksen 10 painosta.
9. Patenttivaatimuksen 2 mukainen menetelmä, tunne ttu siitä, että siinä lisäksi lisätään riittävästi vettä luonnollista B-avermektiinia sisältävään uutteseen, sen jälkeen kun on poistettu alkuperäinen sak- 15 ka, toisen luonnollista B-avermektiinia sisältävän sakan muodostamiseksi.
10. Patenttivaatimuksen 3 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että lisätään pinta-aktiivista ainetta mainittuun luonnollista B-avermektiinia sisältävään 20 uutteeseen.
. 11. Patenttivaatimuksen 10 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että mainittu happo, emäs tai suo-;·;* la on natriumkloridi, kaliumfosfaatti, rikkihappo, natri umbikarbonaatti, natriumhydroksidi tai kaliumhydroksidi.
12. Patenttivaatimuksen 11 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että mainittu happo, emäs tai suo-: : : la on natriumkloridi tai natriumbikarbonaatti.
13. Patenttivaatimuksen 12 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että mainittu luonnollinen aver-» · ' .··*. 30 mektiini uutetaan Ci-3-alkoholilla. * i
14. Patenttivaatimuksen 13 mukainen menetelmä, ·' ” tunnettu siitä, että mainittu Ci-3-alkoholi on me- ·...’ tanoli. » * * * 112092 17
15. Patenttivaatimuksen 14 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että lisätyn veden määrä on riittävä siten, että vesisisältö on noin 55 - 65 % seoksen painosta.
16. Patenttivaatimuksen 15 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että pinta-aktiivinen aine on nat-riumlauryylisulfaatti.
17. Patenttivaatimuksen 16 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että siinä lisäksi lisätään riit-10 tävästi vettä luonnollista B-avermektiinia sisältävään uutteseen, sen jälkeen kun on poistettu alkuperäinen sakka, toisen luonnollista B-avermektiinia sisältävän sakan muodostamiseksi. * i » »il 18 11209?
Applications Claiming Priority (4)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US9674593A | 1993-07-23 | 1993-07-23 | |
US9674593 | 1993-07-23 | ||
IB9400080 | 1994-04-26 | ||
PCT/IB1994/000080 WO1995003419A1 (en) | 1993-07-23 | 1994-04-26 | Method for precipitating natural avermectins |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
FI960304A FI960304A (fi) | 1996-01-22 |
FI960304A0 FI960304A0 (fi) | 1996-01-22 |
FI112092B true FI112092B (fi) | 2003-10-31 |
Family
ID=22258886
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
FI960304A FI112092B (fi) | 1993-07-23 | 1996-01-22 | Menetelmä luonnollisten avermektiinien saostamiseksi |
FI20030488A FI112375B (fi) | 1993-07-23 | 2003-04-01 | Avermektiinejä tuottava Streptomyces avermitilis -kanta |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
FI20030488A FI112375B (fi) | 1993-07-23 | 2003-04-01 | Avermektiinejä tuottava Streptomyces avermitilis -kanta |
Country Status (16)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US5686274A (fi) |
EP (1) | EP0710290B1 (fi) |
JP (1) | JP2828343B2 (fi) |
AT (1) | ATE175240T1 (fi) |
AU (1) | AU674743B2 (fi) |
BR (1) | BR9407141A (fi) |
CA (1) | CA2167186C (fi) |
CO (1) | CO4230201A1 (fi) |
DE (1) | DE69415675T2 (fi) |
DK (1) | DK0710290T3 (fi) |
ES (1) | ES2125446T3 (fi) |
FI (2) | FI112092B (fi) |
GR (1) | GR3029285T3 (fi) |
NZ (1) | NZ263615A (fi) |
WO (1) | WO1995003419A1 (fi) |
ZA (1) | ZA945415B (fi) |
Families Citing this family (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1998056939A1 (fr) * | 1997-06-09 | 1998-12-17 | Vladimir Alexandrovich Mosin | Souche de streptomyces avermitilis, procede de separation de complexes d'avermectine et preparations destinees a la protection d'animaux et de vegetaux |
KR100419554B1 (ko) * | 1999-10-29 | 2004-02-19 | 주식회사유한양행 | 아버멕틴의 정제방법 |
US6872708B2 (en) * | 2001-09-10 | 2005-03-29 | Mitsukazu Matsumoto | Local injection prescription |
JP4373080B2 (ja) * | 2002-12-24 | 2009-11-25 | 三井化学アグロ株式会社 | ミルベマイシン類の精製法 |
CN101084300B (zh) * | 2004-12-23 | 2010-09-22 | Jp实验室有限公司 | 制备洗涤剂的方法 |
CN103333214B (zh) * | 2013-07-03 | 2015-08-12 | 大庆志飞生物化工有限公司 | 一种阿维菌素B2a精粉的制备方法 |
Family Cites Families (13)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
FI56187C (fi) * | 1970-07-02 | 1979-12-10 | Takeda Chemical Industries Ltd | Foerfarande foer framstaellning av antibiotiskt aktiva estrar av makrolidglykosiderna b-5050 eller tetrahydro b-5050 |
US4017516A (en) * | 1972-11-15 | 1977-04-12 | Schering Corporation | Novel monoesters of rosamicin |
SE434277B (sv) * | 1976-04-19 | 1984-07-16 | Merck & Co Inc | Sett att framstella nya antihelmintiskt verkande foreningar genom odling av streptomyces avermitilis |
US4201861A (en) * | 1977-10-03 | 1980-05-06 | Merck & Co., Inc. | Acyl derivatives of C-076 compounds |
US4307085A (en) * | 1979-11-09 | 1981-12-22 | Schering Corporation | Antibiotic AR-5 complex, antibiotics coproduced therewith and derivatives thereof |
US4389397A (en) * | 1980-08-04 | 1983-06-21 | Merck & Co., Inc. | Solubilization of ivermectin in water |
US4399274A (en) * | 1981-07-02 | 1983-08-16 | Merck & Co., Inc. | Isolation of non-ionic lipophilic materials on macroreticular polymeric absorbents |
US4703009A (en) * | 1983-03-08 | 1987-10-27 | Merck & Co., Inc. | RDNA cloning vector pVE1, deletion and hybrid mutants and recombinant derivatives thereof products and processes |
ES8800986A1 (es) * | 1985-07-27 | 1987-12-01 | Pfizer | Un procedimiento para la produccion de un nuevo derivado de avermectina |
US5077348A (en) * | 1986-10-31 | 1991-12-31 | Toyo Ink Manufacturing Co., Ltd. | Aqueous coating composition, process for the production thereof and aqueous coating |
US5077398A (en) * | 1986-11-18 | 1991-12-31 | Merck & Co., Inc. | Process for isolation of avermectin B1 components with improved purity and subsequent isolaton of B2 components |
US5234831A (en) * | 1987-01-23 | 1993-08-10 | Pfizer Inc | Cultures for production of B avermectins |
JP2888586B2 (ja) * | 1990-03-05 | 1999-05-10 | 社団法人北里研究所 | エバーメクチンの特定成分を選択生産するための微生物およびその選択的製造法 |
-
1994
- 1994-04-26 WO PCT/IB1994/000080 patent/WO1995003419A1/en active IP Right Grant
- 1994-04-26 DK DK94912049T patent/DK0710290T3/da active
- 1994-04-26 EP EP94912049A patent/EP0710290B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1994-04-26 US US08/569,200 patent/US5686274A/en not_active Expired - Fee Related
- 1994-04-26 DE DE69415675T patent/DE69415675T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1994-04-26 JP JP6520399A patent/JP2828343B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1994-04-26 BR BR9407141A patent/BR9407141A/pt not_active Application Discontinuation
- 1994-04-26 CA CA002167186A patent/CA2167186C/en not_active Expired - Fee Related
- 1994-04-26 AU AU64361/94A patent/AU674743B2/en not_active Ceased
- 1994-04-26 AT AT94912049T patent/ATE175240T1/de not_active IP Right Cessation
- 1994-04-26 ES ES94912049T patent/ES2125446T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1994-04-26 NZ NZ263615A patent/NZ263615A/xx not_active IP Right Cessation
- 1994-07-19 CO CO94031529A patent/CO4230201A1/es unknown
- 1994-07-22 ZA ZA945415A patent/ZA945415B/xx unknown
-
1996
- 1996-01-22 FI FI960304A patent/FI112092B/fi active
-
1997
- 1997-07-10 US US08/891,198 patent/US5905034A/en not_active Expired - Fee Related
-
1999
- 1999-02-03 GR GR990400365T patent/GR3029285T3/el unknown
-
2003
- 2003-04-01 FI FI20030488A patent/FI112375B/fi active
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
GR3029285T3 (en) | 1999-05-28 |
DE69415675D1 (de) | 1999-02-11 |
BR9407141A (pt) | 1996-09-17 |
US5686274A (en) | 1997-11-11 |
CA2167186A1 (en) | 1995-02-02 |
CA2167186C (en) | 1999-01-26 |
CO4230201A1 (es) | 1995-10-19 |
DE69415675T2 (de) | 1999-05-20 |
DK0710290T3 (da) | 1999-08-30 |
FI960304A (fi) | 1996-01-22 |
FI20030488A (fi) | 2003-04-01 |
FI112375B (fi) | 2003-11-28 |
JP2828343B2 (ja) | 1998-11-25 |
EP0710290A1 (en) | 1996-05-08 |
ATE175240T1 (de) | 1999-01-15 |
WO1995003419A1 (en) | 1995-02-02 |
ZA945415B (en) | 1996-01-22 |
US5905034A (en) | 1999-05-18 |
NZ263615A (en) | 1997-08-22 |
FI960304A0 (fi) | 1996-01-22 |
AU674743B2 (en) | 1997-01-09 |
ES2125446T3 (es) | 1999-03-01 |
AU6436194A (en) | 1995-02-20 |
JPH08506966A (ja) | 1996-07-30 |
EP0710290B1 (en) | 1998-12-30 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP2001523966A (ja) | 微生物バイオマスからのカロテノイド結晶の単離 | |
DE3887820T2 (de) | Antibiotika, Benanomicine A und B und Dexylosylbenanomicin B, ihre Herstellung und Verwendung. | |
FI112092B (fi) | Menetelmä luonnollisten avermektiinien saostamiseksi | |
DE3873845T2 (de) | Antimikrobielles agens, fr 109 615 und seine herstellung. | |
AU677890B2 (en) | Process for natamycin recovery | |
US3127315A (en) | Hypocholesterolemic agent m- | |
CN1175952A (zh) | 克拉维酸盐及其制备方法 | |
US4440857A (en) | Process for preparing mycarosyltylactone | |
HU210867B (en) | Method for extraction and purification of mevinolin from culture medium | |
JP2592468B2 (ja) | 新規抗生物質ベナノマイシンaおよびbならびにその製造法 | |
US4584134A (en) | Process for the recovery of nosiheptide | |
US4137405A (en) | Isolation of antibiotic Cephamycin C | |
EP0834574B1 (en) | METHOD OF PURIFYING K-252a | |
EP0045157A1 (en) | Macrolide antibiotics, their preparation and veterinary compositions containing them | |
US3182004A (en) | Production of fungimycin | |
US6812007B1 (en) | Process for the isolation and purification of mevinolin | |
EP0855402B1 (en) | Novel terpenoid compound 0406TP-1 | |
JPH03294289A (ja) | 新規抗かび性抗生物質2′―デメチルベナノマイシンaならびにその製造法 | |
IL44622A (en) | Single - sodium citrate crystals Monohydrate in the form of a prism and their preparation | |
JP2594085B2 (ja) | 新規抗腫瘍抗生物質sf2575物質ならびにその製造法 | |
US3979433A (en) | 1,6-Di-O-(2-isocyano-3-methylcrotonyl)-D-mannitol compounds | |
US5215981A (en) | Polyether antibiotic mi215-nf3 substance, production process thereof, and agent for control of chicken coccidiosis | |
US3986928A (en) | Antibiotic a-32390 and process for preparation thereof | |
US20060223150A1 (en) | Process for the isolation and purification of mevinolin | |
JPH0641178A (ja) | 新規抗かび性抗生物質12−ヒドロキシベナノマイシンaおよびその製造法 |