FI106961B

FI106961B - Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten bis-indolyyli-1H-pyrroli-2,5-dionijohdannaisten valmistamiseksi

Info

Publication number: FI106961B
Application number: FI942158A
Authority: FI
Inventors: Christopher Huw Hill; Geoffrey Lawton; William Harris
Original assignee: Hoffmann La Roche
Priority date: 1993-05-10
Filing date: 1994-05-10
Publication date: 2001-05-15
Also published as: NO941682L; SI0624586T1; CZ112894A3; JPH06329672A; RU2141960C1; AU678435B2; CA2121567A1; IS1690B; EP0624586A1; HUT71492A; GR3031901T3; BG98761A; ES2137281T3; IS4162A; NO301230B1; IL109547A0; NZ260475A; IL109547A; DE69420310D1; LTIP1927A

Description

106961

Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten bis-indolyyli-lH-pyrroli-2,5-dionijohdannaisten valmistamiseksi Tämän keksinnön kohteena on menetelmä terapeutti-5 sesti käyttökelpoisten bis-indolyyli-lH-pyrroli-2,5-dioni-

johdannaisten valmistamiseksi, joilla on yleinen kaava A

H

o=^mN=° 10 _j|j| / (pH^m | (QH^n I R2 CH R1 15

HNR30 A

jossa R1 on alempi alkyyli, R2 on alempi alkyyli, R30 on vety tai uretaanisuojaryhmä, m on 1 ja n on 2 sekä niiden 20 farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojen valmistamiseksi, jotka kaavan A mukaiset happoyhdisteet, joissa R30 on vety, muodostavat emästen kanssa ja kaavan A mukaiset emäsyhdis-teet, joissa R30 on vety, muodostavat happojen kanssa.

Tämän keksinnön mukaisesti saatavia yhdisteitä voi-25 daan käyttää sairauksien hoidossa tai ennaltaehkäisyssä, erityisesti tulehdusten, immunologisten sairauksien, kas-vainsairauksien, keuhkoputken tulehduksen, ihosairauksien ja sydän-verisuonisairauksien hoidossa tai ennaltaehkäisyssä, astman, AIDSin tai diabeteskomplikaatioiden hoita-30 misessa tai hiusten kasvun stimuloinnissa.

- *: Patenttijulkaisussa EP-A-0 384 349 (joka vastaa FI- patenttijulkaisua 93 447) esitetään monenlaisia bisindo-lyylimaleimideja, jotka pohjimmiltaan sisältävät lisäksi tetrahydropyrido-, tetrahydroatsepino- tai tetrahydropy-3¾ ratsino-osan, joka osa voi olla 1-substituoitu.

* » ·.

2 106961

Bit et ai., julkaisussa J. Med. Chem. 36, 1 (1993) 21 - 29, kuvaavat bisindolyylimaleimidien kemiallisen synteesin, joissa bisindolyylimaleimideissa on lisäksi tetra-hydropyrrolo-, tetrahydroatsepino- tai tetrahydropyrido-5 rengas, joka on substituoitu arainoalkyyliryhmällä.

Patenttijulkaisussa EP-A-0 470 490 (joka vastaa FI-patenttia 95 909) esitetään bisindolyylimaleimideja, joissa on lisäksi sykloalkyylirengas, joka on edelleen substituoitu sykloalkyyli- tai atsasykloalkyyliryhmällä.

10 Keksinnön mukaisesti saatavat yhdisteet eroavat tunnetun tekniikan mukaisista yhdisteistä siten, että keksinnön mukaisilla yhdisteillä on ainakin erilainen substi-tuentti liityneenä tertrahydropyrido-renkaaseen.

Tässä käytettynä termi "alempi alkyyli" pelkästään 15 tai yhdistelmässä tarkoittaa haarautunutta tai haarautuma-tonta alkyyliryhmää, jossa on 1 - 6 hiiliatomia, kuten metyyliä, etyyliä, propyyliä, isopropyyliä, butyyliä, sek-butyyliä, tert-butyyliä, pentyyliä ja vastaavia. Termi "alempi alkoksi" pelkästään tai yhdistelmässä tarkoittaa 20 aikaisemmin määritettyä alkyyliryhmää, joka on liittynyt happiatomin kautta, jolloin esimerkkejä alkoksiryhmistä ovat metoksi, etoksi, propoksi, isopropoksi, butoksi, tert.butoksi ja vastaavat. Termi "aryyli" tarkoittaa subs-tituoimatonta fenyyliä tai fenyyliä, jossa on yksi tai 25 useampia substituentteja valittuna esim. ryhmästä halogeeni, alempi alkyyli ja alempi alkoksi, kuten p-kloorifenyy-li, p-tolyyli ja p-metoksifenyyli. Termi "alempi aralkyy-li" tarkoittaa alempaa alkyyliryhmää, kuten tässä edellä on määritetty, jossa yksi vetyatomi on korvattu aryyliryh-30 mällä, kuten tässä edellä on määritetty, kuten bentsyyliä, ·; 2-fenyylietyyliä, p-klooribentsyyliä, p-metyylibentsyyliä ja p-metoksibentsyyliä. Termi "halogeeni" tarkoittaa fluoria, klooria, bromia tai jodia.

Kaavan A mukaiset yhdisteet sisältävät kaksi kiraa-35 lista hiiliatomia ja voivat siten olla läsnä raseemisissa < 4 • m ► 106961 3 tai optisesti aktiivisissa muodoissa. Tämän keksinnön piiriin eivät kuulu pelkästään raseemiset yhdisteet, vaan myös kaikki optisesti aktiiviset isomeerit.

Kaavan A mukaisissa yhdisteissä R1 on edullisesti 5 alempi alkyyli, jossa on 1 - 3 hiiliatomia ja R2 on edullisesti metyyli.

Erityisen edullisia edellä mainitun kaavan A mukaisia yhdisteitä ovat: 3-[8(S)-[l(R tai S)-aminopropyyli]-6,7,8,9-tetra-10 hydropyrido [1,2-a] indol-10-yyli] -4- (1-metyyli-3-indolyy-li)-lH-pyrroli-2,5-dioni ja 3- [8(S)-[1(S)-amino-2-metyylipropyyli]-6,7,8,9-tet-rahydropyrido[1,2-a]indol-10-yyli]-4-(1-metyyli-3-indolyy-li)-lH-pyrroli-2,5-dioni.

15 Muita edullisia kaavan A mukaisia yhdisteitä ovat: 3-[8(R tai S)-1(R tai S)-aminoetyyli]-6,7,8,9-tet-rahydropyrido [1,2-a]indol-10-yyli]-4-(l-metyyli-3-indolyy-li) -lH-pyrroli-2,5-dioni, 3- [8 (R tai S)-1 (R tai S)aminopropyyli]-6,7,8,9-tet-20 rahydropyrido[1,2-a]indol-10-yyli]-4-(1-metyyli-3-indolyy-li)-lH-pyrroli-2,5-dioni, 3-[8(R tai S)-1(R tai S)aminobutyyli]-6,7,8,9-tet-rahydropyrido [1,2-a]indol-10-yyli]-4-(l-metyyli-3-indolyy-li)-lH-pyrroli-2,5-dioni ja 25 3-[8(R tai S)-1(R tai S)-amino-2-metyylipropyyli]- 6,7,8,9-tetrahydropyrido[1,2-a]indol-10-yyli]-4-(1-metyy-li-3-indolyyli)-lH-pyrroli-2,5-dioni.

Edullinen on myös seuraava kaavan A mukainen yhdiste : 30 3 -[8(S)-1(R)-amino-2-metyylipropyyli]-6,7,8,9-tet- 1 1 rahydropyrido[1,2-a]indol-10-yyli]-4-(l-metyyli-3-indolyy- li)-lH-pyrroli-2,5-dioni.

Tämän keksinnön mukaiselle menetelmälle kaavan A mukaisten yhdisteiden ja niiden armaseuttisesti hyväksyt-35 tävien suolojen valmistamiseksi on tunnusomaista, että 106961 4

a) hydrolysoidaan ja dehydrataan hydroksipyrrolino-ni, jolla on yleinen kaava VI

0=T^ ^-OR4

GnCnnO

/ (CHaim | VI

I R2 10 CH n1 OT HN— R3 jossa R1, R2, ra ja n ovat kuten edellä on määritelty, R3 on uretaanisuojaryhraä ja R4 on alempi alkyyli tai 15 b) käsitellään substituoitu furaanidioni, jolla on

yleinen kaava VIII

O

20 O^CcO

/ (C«2)n, ? Vffl (CHaJn R2 CH R1

^*CHX

.25 I

HN— R3 jossa R1, R2, R3, m ja n ovat kuten edellä on määritelty, heksametyylidisilatsaanilla alkanolin läsnäollessa, ja sen jälkeen 30 yhdisteen saamiseksi, jolla on kaava A, jossa R30 on

vety, lohkaistaan suojaryhmä, joka on merkitty R3:lla, saadusta yhdisteestä, jolla on yleinen kaava II

35 « 106961 5

H

N_ 5 Π / ^ I, (CHaJn I R2 "" CH R1 *^CH·^ 10 HN-R3 jossa R1, R2, R3, m ja n ovat kuten edellä on määritelty, ja haluttaessa muutetaan kaavan A mukainen happoyhdis-te farmaseuttisesti hyväksyttäväksi suolaksi emäksen kanssa tai muutetaan kaavan A mukainen emäsyhdiste farmaseut-15 tisesti hyväksyttäväksi suolaksi hapon kanssa.

Uretaanisuojaryhmä R3 on edullisesti alempi alkoksi-karbonyyli, erityisesti tert.butoksikarbonyyli tai alempi aralkoksikarbonyyli, erityisesti bentsyylioksikarbonyyli.

R3:lla merkityn suojaryhmän lohkaisu kaavan II mu-20 kaisesta yhdisteestä voidaan toteuttaa tavalla, joka on sinänsä tunnettu. Esimerkiksi, kun R3 on alempi alkoksikar-bonyyli, lohkaisu voidaan toteuttaa käyttäen mineraalihap-poa, kuten vetykloridihappoa inertissä orgaanisessa liuot-timessa, kuten syklisessä eetterissä, esim. tetrahydrofu-. 25 raanissa tai dioksaanissa, alkanolissa, esim. metanolissa tai etanolissa, estereissä, kuten etyyliasetaatissa tai halogenoidussa, erityisesti klooratussa hiilivedyssä, esim. dikloorimetaanissa, tai käyttäen trifluorietikkahap-poa. Kun R3 on aralkoksikarbonyyliryhmä, lohkaisu toteute-30 taan hydrogenolyysillä sinänsä tunnetulla tavalla; esimerkiksi käyttäen vetyä katalyytin, kuten palladium/hiilen läsnä ollessa.

Kaavan A mukaisen happoyhdisteen konversio farmaseuttisesti hyväksyttäväksi suolaksi voidaan toteuttaa 35 käsittelemällä sopivalla emäksellä sinänsä tunnetulla me- « 106961 6 netelmällä. Sopivia suoloja eivät ole pelkästään ne, jotka on johdettu epäorgaanisista emäksistä, esim. natrium-suolat, kaliumsuolat, kalsiumsuolat ja vastaavat, vaan myös suolat orgaanisista emäksistä, esimerkiksi ety-5 leenidiamiinista, monoetanoliamiinista ja die-tanoliamiinista, ja vastaavat suolat. Kaavan A mukaisen emäsyhdisteen konversio farmaseuttisesti hyväksyttäväksi suolaksi voidaan toteuttaa käsittelemällä sopivalla hapolla sinänsä tunnetulla menetelmällä. Sopivia suoloja eivät 10 ole pelkästään ne, jotka on johdettu epäorgaanisista hapoista, esimerkiksi hydrokloridit, hydrobroraidit, fosfaatit, sulfaatit ja vastaavat, vaan myös suolat orgaanisista hapoista, esimerkiksi asetaatit, sitraatit, fumaraatit, tartraatit, maleaatit, metaanisulfonaatit, p-tolueenisul- 15 fonaatit ja vastaavat.

Kaavan II mukaiset yhdisteet ja niiden valmistuksessa käytettävät, kaavojen VI ja VIII mukaiset lähtöaineet voidaan valmistaa esimerkiksi:

(a) saattamalla yhdiste, jolla on yleinen kaava III

2 0 |^j|^

/ (CHj)m III

<C^ * R1

CH /R

.. 25 ^CH

HN—R*

jossa R1, R3, m ja n ovat kuten tässä edellä on määritetty, reagoimaan oksalyylikloridin kanssa, kondensoimalla saatu aktivoitu glyoksylaatti, jolla on yleinen kaava IV

3 0 ^C1

O.C

οχ / rv 35 (CH,)„ R’ ^CH / : ^-ch HN—R3 7 106961

jossa R1, R3, m ja n ovat kuten edellä on määritetty, imidaatilla, jolla on yleinen kaava V

NH

^CH,—

Ccr ^ v R»

jossa R2 on kuten tässä edellä on määritelty ja R4 on 10 alempi alkyyli, vahvan emäksen läsnä ollessa ja hydrolysoitumalla ja dehydraamalla saatu hydroksipyrrolinoni, jolla on yleinen kaava VI

.N.

o=r^ -or4

CnrVi^

/ <{*»>„ ? VI

(¾¾. I R* ^ CH Rt 20 HN—R* jossa R1, R2, R3, R4, m ja n ovat kuten tässä edellä on määritetty, tai b) saattamalla edeltävän kaavan IV mukainen akti-. 25 voitu glyoksylaatti reagoimaan indolyylietikkahapon kans

sa, jolla on yleinen kaava VII

α-CHj—COOH

30 | R*

jossa R2 on kuten edellä on määritetty, vahvan emäksen läsnä ollessa ja muuttamalla saatu substituoitu furaanidi-oni, jolla on yleinen kaava VIII

106961 8 / (CHa)m 11 vra (CHa)n I R1 CH R1 HN— R3 10 jossa R1, R2, R3, m ja n ovat kuten tässä edellä on määritetty, vastaavaksi kaavan II mukaiseksi imidiksi.

Kaavan III mukaisen yhdisteen reaktio oksalyylikloridin kanssa toteutetaan edullisesti inertin 15 orgaanisen liuottimen, sopivasti halogenoidun alifaattisen hiilivedyn, kuten dikloorimetaanin, läsnä ollessa. On myös edullista toteuttaa tämä reaktio noin 0 °C:ssa.

Kaavan IV mukaisen aktivoidun glyoksylaatin kondensaatio kaavan V mukaisella imidaatilla, joka on tun-20 nettu yhdiste tai tunnetun yhdisteen analogi, toteutetaan tavallisesti inertissä orgaanisessa liuottimessa. Sopivia emäksiä ovat esimerkiksi tertiaariset amiinit, kuten trie-tyyliamiini, di-isopropyylietyyliamiini, 4-dimetyy- liaminopyridiini, N-etyylimorfOliini ja 1,4-diatsabisyk-, 25 lo[2.2.2]oktaani, kuten myös pyridiini. Sopivia liuottimia ovat esimerkiksi halogenoidut alifaattiset hiilivedyt, kuten dikloorimetaani ja kloroformi, valinnaisesti halogenoidut aromaattiset hiilivedyt, kuten bentseeni, toluee-ni ja klooribentseeni, avoketjuiset ja sykliset eetterit, 30 kuten dimetoksietaani, tert.butyylimetyylieetteri ja tet-' rahydrofuraani, formamidit, kuten dimetyyliformamidi, es terit, kuten etyyliasetaatti ja nitriilit, kuten asetonit-riili. Kondensaatio toteutetaan edullisesti noin 0 40 °C:ssa, erityisesti huoneenlämpötilassa. Lisäksi on 35 edullista toteuttaa tämä kondensaatio in situ.

106961 9

Kaavan VI mukaisen hydroksipyrrolinonin hydrolyysi ja dehydraus kaavan II mukaiseksi yhdisteeksi toteutetaan tarkoituksenmukaisesti käsittelemällä mineraalihapolla, kuten vetykloridihapolla tai rikkihapolla tai orgaanisella 5 hapolla, kuten metaanisulfonihapolla tai p-tolueenisul- fonihapolla, tai käsittelemällä asylointlaineella, kuten trifluorietikkahappoanhydridillä ja sopivalla emäksellä, kuten pyridiinillä, tavallisesti noin huoneenlämpötilassa. Kaavan VI mukainen hydroksipyrrolinoni hydrolysoidaan ja 10 dehydrataan edullisesti in situ.

Kaavan IV mukaisen aktivoidun glyoksylaatin reaktio kaavan VII mukaisen indolyylietikkahapon kanssa, joka on tunnettu yhdiste tai tunnetun yhdisteen analogi, toteutetaan tavallisesti tavalla, joka on analoginen edellä kuva-15 tun kaavan IV mukaisen aktivoidun glyoksylaatin kondensaa-tiossa kaavan V mukaiseksi imidaatiksi kuvatun kanssa.

Kaavan VIII mukaisen substituoidun furaanidionin konversio halutuksi kaavan II mukaiseksi imidiksi voidaan toteuttaa edullisesti käsittelemällä heksametyylidisilat-20 saanilla alkanolin, kuten metanolin läsnä ollessa inertis-sä orgaanisessa liuottimessa. Sopivia liuottimia ovat esimerkiksi halogenoidut alifaattiset hiilivedyt, kuten dikloorimetaani ja kloroformi, valinnaisesti halogenoidut aromaattiset hiilivedyt, kuten bentseeni, tolueeni ja 25 klooribentseeni, avoketjuiset ja sykliset eetterit, kuten dimetoksietaani, tert.butyylimetyylieetteri ja tetrahydro-furaani tai formamidit, kuten dimetyyliformamidi. Reaktio toteutetaan edullisesti noin huoneenlämpötilassa - 100 °C:ssa, erityisesti noin 50 °C:ssa.

30 Kaavan III mukaiset yhdisteet voidaan valmistaa esimerkiksi kuten seuraavassa reaktiokaaviossa I on kuvattu, jossa R1, m ja n ovat kuten tässä aikaisemmin on määritetty.

Reaktiokaavio I

106961 10 COn -" CXjk-- ΟζΧ «o , (CHd- / (CHi. / (CJW-

5 (cmj„ j (chw, I (CHdn I

CH CH CH

^cooei ''"'coon conh, αχ) (X) 10

Ccx --CCk« (x“> / (py« (CHi)*

I (CHj)„ I

(XIII) C\t^R’ ^ CH

IS 11

NH

CPL

, (CHa)„

(CH*). I

"" /»' (XIV) NH* 25 m 30 Reaktiokaaviossa I kaikki yksittäiset vaiheet voi- ·' daan toteuttaa tavallisten menetelmien mukaisesti. Ensim mäisessä vaiheessa kaavan IX mukainen etyyliesteri, joka on tunnettu yhdiste tai tunnetun yhdisteen analogi, saippuoidaan vastaavaksi kaavan X mukaiseksi hapoksi käyttäen 35 esim. natriumhydroksidiliuosta. Sitten saatu happo amidoi- 106961 11 daan esimerkiksi reaktiolla etyylikloroformiaatin kanssa trietyyliamiinin läsnä ollessa, mitä seuraa käsittely ammoniakilla, ja saatu kaavan XI mukainen amidi muutetaan kaavan XII mukaiseksi nitriiliksi käyttäen esim. trif-5 luorietikkahappoanhydridiä. Sitten kaavan XII mukainen nitriili saatetaan reagoimaan Grignard reagenssin kanssa, jolla on kaava R^Mg-X, jossa R1 on kuten aikaisemmin on määritetty ja X on halogeeni, edullisesti kloori, ja saatu kaavan XIII mukainen imiini pelkistetään käyttäen komplek-10 simetallihydridiä, esim. litiumalumiinihydridiä, kaavan XIV mukaiseksi primaariseksi amiiniksi. Tämä pelkistys toteutetaan edullisesti in situ. Kaavan XIV mukainen primaarinen amiini muutetaan kaavan III mukaiseksi yhdisteeksi esimerkiksi saattamalla reagoimaan kaavan R3C1 mukaisen 15 kloroformiaatin tai kaavan R3OR3 mukaisen happoanhydridin kanssa, joissa R3 on kuten aikaisemmin on määritetty, emäksen, kuten trietyyliamiinin läsnä ollessa.

Kaavan III mukaiset homokiraaliset yhdisteet, joita tämän jälkeen on kuvattu kaavalla IIIA, voidaan valmistaa 20 esimerkiksi kuten seuraavassa reaktiokaaviossa II on esitetty, jossa R1, m ja n ovat kuten aikaisemmin on määritetty ja R5 on alempi alkyyli.

Reaktiokaavio II

106961 12 „ Qa ---Oa .¾ m

CHw CH

(XV) C0°-Mentyyli NCOOH

10 --Oa «tö.1 (CH2)„ I V™3 ^C" R1 "<0H i

15 (XVID) V V

Il (XVII) g ch3 ° o

Qa - Oa <qu, I I B1

(X DC) Ύ ™ NCH

NOR* y NH2 25 / CU7 30 «=Ha)n I B1 (ΠΙΑ)

^ CH ^Rl ^CH

HN-R3 106961 13

Reaktiokaaviossa II kuvatun synteesin yksittäiset vaiheet voidaan toteuttaa sinänsä tunnettujen menetelmien mukaisesti. Ensimmäisessä vaiheessa kaavan XV mukainen mentyyliesteri, joka on tunnettu yhdiste tai tunnetun yh-5 disteen analogi, muutetaan vahvalla hapolla, esim. väkevällä rikkihapolla vastaavaksi kaavan XVI mukaiseksi kar-boksyylihapoksi. Tämä happo kondensoidaan sitten N,0-dime-tyylihydroksyyliamiiniksi ja saatu kaavan XVII mukainen N-metoksi-N-metyylikarboksiamidi saatetaan reagoimaan Grig-10 nard reagenssin kanssa, jolla on kaava R1-Mg-X, jossa R1 on kuten aikaisemmin-on määritetty ja X on halogeeni, edullisesti kloori, antamaan kaavan XVIII mukainen ketoni. Tämän ketonin reaktio kaavan H2N-OR5 mukaisen hydroksyyliamiinin kanssa, jossa R5 .on kuten aikaisemmin on määritetty, antaa 15 kaavan XIX mukaisen oksiimin, joka pelkistetään kompleksi-metalihydridillä, kuten litiumalumiinihydridillä kaavan XX mukaiseksi primaariseksi amiiniksi. Tämän jälkeen jälkimmäinen muutetaan kaavan IIIA mukaiseksi homokiraaliseksi lähtöaineeksi asyloimalla analogisella tavalla, kuten 20 reaktiokaaviossa I on kuvattu kaavan XIV mukaisen yhdisteen konversiolle kaavan III mukaiseksi yhdisteeksi.

Seuraava reaktiokaavio III kuvaa kaavan IIIA mukaisten homokiraalisten lähtöaineiden vaihtoehtoista valmistusmenetelmää. Tässä reaktiokaaviossa R1, m ja n ovat 25 kuten aikaisemmin on määritetty ja Ms on metaanisulfonyy- li.

Reaktiokaavio III

106961 14

Co*.— OgL —- Col 5 (^ί£" I <9^- I (xxiii)

(XXI) CHjOH (ΧΧΠ) ^CHjOM» ^CHiCN

--COL (xxiv) / «CHÄ-

*9SJ5« I (chj« I

^ CH QH

(XXV) ^CHiCOOCHs V

CHjCOOH

15 CXk -- CXx *”» p (CH*)* / «ay.

(a«„ I (ay. I

^ CH ^ 20 (XXVI) “ C?

XCOOH NCO

(XX) 25 (IIIA)

Reaktiokaaviossa III kaikki yksittäiset vaiheet voidaan toteuttaa tavalliseen tapaan. Ensin kaavan XXI mukainen alkoholi sulfonoidaan esim. metaanisulfonihappo-30 anhydridillä ja saatu kaavan XXII mukainen metaanisul-fonaatti muutetaan natriumsyanidilla kaavan XXIII mu-kaiseksi nitriiliksi. Jälkimmäinen hydrolysoidaan esim. natriumhydroksidiliuoksella vastaavaksi kaavan XXIV mukaiseksi karboksyylihapoksi, joka metyloidaan esim. käyttäen 35 metanolia väkevän rikkihapon läsnä ollessa kaavan XXV mu- 106961 15 kaiseksi metyyliesteriksi. Jälkimmäisen reaktio kaavan mukaisen halidin kanssa, jossa R1 ja X ovat kuten edellä on määritetty, vahvan emäksen, kuten litiumdi-isopropyyliamidin läsnä ollessa, mitä seuraa käsittely natriumhydroksi-5 diliuoksella, antaa kaavan XXVI mukaisen karboksyylihapon. Jälkimmäinen saatetaan reagoimaan difenyylifosforyyliatsi-din kanssa antamaan kaavan XXVII mukainen isosyanaatti, joka muutetaan kaavan XX mukaiseksi primaariseksi amiiniksi käsittelemällä vetykloridihapolla. Kaavan XX mukaisen 10 primaarisen amiinin konversio kaavan IIIA mukaiseksi homo-kiraaliseksi yhdisteeksi toteutetaan asyloimalla analogisesti menetelmän kanssa, jota reaktiokaaviossa I on kuvattu.

Kaavan A mukaiset yhdisteet ja niiden farmaseutti-15 sesti hyväksyttävät suolat ovat proteiinikinaasi-inhibiit-toreita; ne inhiboivat soluprosesseja, esimerkiksi solu-kasvua ja eritystä ja niitä voidaan käyttää sairauksien hoidossa tai ennalta ehkäisyssä, esimerkiksi tulehdussairauksien, kuten nivelreuman, immuunisairauksien, pso-20 riasiksen, ihotautien, jotka liittyvät elinsiirtoihin, ja kasvainsairauksien hoidossa tai ennaltaehkäisyssä. Ne inhiboivat solutulehduksia, immuunipuutosvirusta tai Ep-stein-Barr virusta ja ovat täten hyödyllisiä AIDSin ja mononukleosiksen hoidossa. Kaavan A mukaiset yhdisteet ja 25 niiden suolat inhiboivat myös sileän lihaksen supistusta ja täten niitä voidaan käyttää sydän-verisuonitauteja ja keuhkoputkentulehdusta vastaan. Lisäksi ne ovat myös hyödyllisiä astman hoidossa. Nämä yhdisteet ja suolat inhiboivat myös verisuonten kasautumista ja niitä voidaan 30 käyttää verisuonitukosten hoidossa tai ennaltaehkäisyssä. Lisäksi ne inhiboivat välittäjien vapautumista aktivoiduista neutrofiileistä ja niitä voidaan täten käyttää verettömyyssairauksien hoidossa, esim. sydämessä tai aivoissa. Ne inhiboivat myös neurotoksisuutta, joka on in-35 dusoitu korkeilla glukoosiarvoilla ja ovat täten hyödylli- 106961 16 siä diabeteskomplikaatioden hoidossa. Lopuksi nämä yhdisteet ja suolat stimuloivat hiusten kasvua ja niitä voidaan täten käyttää kaljuuntumisen ennaltaehkäisyssä tai torjunnassa.

5 Näiden yhdisteiden aktiivisuus proteiinikinaasin C

inhiboinnissa voidaan osoittaa tässä seuraavassa kuvatulla in vitro koemenetelmällä.

Käytetään koejärjestelmää, jota Takai et ai. ovat kuvanneet julkaisussa BBRC 19, 1218 (1979). Reaktioseokset 10 (100 μΐ) sisältävät 10 μΜ [γ-32Ρ]ΑΤΡ, 0,2 mg/ml (noin 15 μΜ) lysiinirikasta histonia, 0,5 mM CaCl2 ja 40 μ9/τη1 fos-fatidyyliseriiniä 25 mM Tris HCl:ssä, 5 mM MgN03 (pH 7,5) puskuria. Entsyymiproteiinikinaasi C eristettiin rotan aivoista Kikkawa et ai:in menetelmän mukaisesti julkaisusta 15 J. Biol. Chem. 257. 13341 (1982).

Reaktio käynnistetään lisäämällä entsyymiä, lämpötila pidetään 30 °C:ssa 10 minuuttia ja reaktio pysäytetään sitten lisäten 1 ml jääkylmää 10 %:ista trikloori-etikkahappoa. Hapolla saostuva proteiini kerätään lasi-20 kuitukiekoille suodattamalla. Nämä kiekot pestään sitten 5-%:isella trikloorietikkahapolla, joka sisältää 20 mM natriumpyrofosfaattia (reagoimattoman ATP:n poistamiseksi) , mitä seuraa etanoli. Kiekot kuivataan ja analysoidaan tuikelaskurissa. Kunkin kiekon lukemaa käytetään määritet-25 täessä 32P-sitouminen [γ-32Ρ] ATP: stä histoniin. Entsyymin estoaste kullekin koeyhdistepitoisuudelle lasketaan kaavasta

Corn sitoutunut + koevhdiste + entsyymi 30 x 100 %

Cpm sitoutunut + koeyhdiste + entsyymi IC50-arvo on koeyhdistepitoisuus, joka vähentää 35 50-% : isesti kinaasiproteiinilla indusoitua 32P-sitoutumista edellä kuvatuissa koeolosuhteissa.

106961 .17

Edeltävässä kokeessa saadut tulokset edustaville kaavan A mukaisille yhdisteille on annettu taulukossa 1.

Taulukko 1

Tuote esimerkistä nro IC50 (nM) 5 10 3,3 11 5,5

Keksinnön mukaisesti saatujen yhdisteiden aktiivisuutta verrattiin AHH/R2-rotilla suoritetussa, forboli-10 12,13-dibutyraatilla indusoidussa käpälänturvotus-kokeessa läheisintä tunnettua tekniikkaa edustavan yhdisteen aktiivisuuteen. Kokeessa naaraspuolisille AHH/R2-rotille annettiin suun kautta (10ml/kg) koeyhdistettä tuntia ennen kuin niille indusoitiin turvotus injektoimalla forboli-12,13-15' dibutyraattia (PDBu) oikeaan takakäpälään (0,1 ml 10'3 M) . Käpälän kokoa (tilavuus) seurattiin vedensyrjäytys-plety-mografilla 0,5, 1, 2, 3, 4 ja 6 tuntia injektoinnin jälkeen. Koeyhdisteet valmistettiin sonikoimalla 10 prosenttiseen sukkinyloituun gelatiiniin 3 minuutissa ja laimen-20 nettiin sitten tarpeen mukaan vehikkeliin. PDBu-liuos valmistettiin liuottamalla 10 mg PDBu:ta 1 ml:aan etanolia ja 1 ml:aan fysiologista suolaliuosta, jolloin saatiin 10'2 M liuos, joka sitten edelleen laimennettiin fysiologisella suolaliuoksella pitoisuuteen 10'3 M.

25 Edellä kuvatussa kokeessa käytettiin tunnettuna • · ' vertailuyhdisteenä yhdistettä A, joka tunnetaan julkaisusta J. Med. Chem. 36 (1993) 21 - 29, sekä suomalaisen patenttijulkaisun 93 447 esimerkistä 2. Yhdiste A on 3-(8-aminometyyli-6,7,8,9-tetrahydropyrido[1,2-a]indol-10-yy-30 li)-4-(l-metyyli-3-indolyyli)-lH-pyrroli-2,5-dioni ja se on lähin tekniikan tasolla olevista yhdisteistä (suomalaisen patentin 95 909 mukainen yhdiste on paljon kauempana). Taulukossa 2 on esitetty MED-tietoja (MED = minimal effective dosage, pienin vaikuttava annos) in vivo, suun kautta 35 tapahtuneen annostuksen jälkeen.

106961 18

Taulukko 2

Yhdiste R1 MED(mg/kg) __-chr1-nh2__ A H >100 5

Tuote:___

Esimerkki 2 metyyli__50_

Esimerkki 4 etyyli__30_

Esimerkki 6 n-propyyli__10

Esimerkki 11 i-propyyli__10_ 10

Esitettyjen tulosten perusteella voidaan todeta, että esimerkin 2 mukaisella yhdisteellä, joka eroaa yhdisteestä A vain yhdellä ainoalla metyyliryhmällä MED-arvo on 50 mg/kg, kun taas tunnetulla yhdisteellä A MED-arvo yli 15 100 mg/kg. Yhdisteen saman kohdan laajempi alkyylisubsti- tuointi (etyyli, n-propyyli, iso-propyyli) osoittaa jopa vielä suurempaa lisäystä vaikutuksessa.

Kaavan A mukaisia yhdisteitä ja niiden edellä mainittuja suoloja voidaan käyttää lääkeaineina, esimerkiksi 20 farmaseuttisten valmisteiden muodossa. Farmaseuttisia valmisteita voidaan antaa oraalisesti, esimerkiksi tablettien, päällystettyjen tablettien, rakeiden, kovien ja pehmeiden gelatiinikapseleiden, liuosten, emulsioiden tai suspensioiden muodossa. Kuitenkin niitä voidaan myös antaa 25 peräsuolensisäisesti (esim. peräpuikkojen muodossa) tai • e · ruoansulatuskanavan ulkopuolisesta (esim. injektoitavien liuosten muodossa).

Farmaseuttisten valmisteiden valmistamiseksi kaavan A mukaiset yhdisteet ja niiden edellä mainitut suolat voi-30 daan formuloida terapeuttisten inerttien, epäorgaanisten tai orgaanisten kantoaineiden kanssa. Laktoosia, maissi-tärkkelystä tai niiden johdannaisia, talkkia, stea-riinihappoa tai sen suoloja ja vastaavia voidaan käyttää esimerkiksi tällaisina kantoaineina tableteissa, päällys-35 tetyissä tableteissa, rakeissa ja kovissa gelatiinikapse- 106961 19 leissa. Sopivia kantoaineita pehmeille gelatiinikapseleil-le ovat esimerkiksi kasviöljyt, vahat, rasvat, puolikiin-teät ja nestemäiset polyolit ja vastaavat. Riippuen vaikuttavan aineen luonteesta mitään kantoainetta ei yleensä 5 tarvita pehmeiden gelatiinikapseleiden tapauksessa. Sopivia kantoaineita liuosten ja siirappien valmistuksessa ovat esimerkiksi vesi, polyolit, sakkaroosi, inverttisoke-ri, glukoosi ja vstaavat. Sopivia kantoaineita injektoitavia liuoksia varten ovat esimerkiksi vesi, alkoholit, po-10 lyolit, glyseriini, kasviöljyt ja vastaavat. Sopivia kantoaineita peräpuikkoja varten ovat esimerkiksi luonnon tai karkaistut öljyt, vahat, rasvat, puolikiinteät polyolit ja vastaavat.

Farmaseuttiset valmisteet voivat sisältää myös säi- i 15 löntäaineita, liuottimia, stabilointiaineita, kostuttimia, emulgointlaineita, makeuttimia, väriaineita, makuaineita, suoloja osmoottisen paineen säätämiseksi, puskureita, päällystysaineita tai antioksidantteja. Ne voivat myös sisältää muita terapeuttisesti arvokkaita aineita. Lääkkeet, 20 jotka sisältävät kaavan A mukaista yhdistettä tai sen suolaa, kuten edellä on määritetty ja terapeuttisesti inert-tiä kantoainetta, valmistetaan saattamalla kaavan A mukainen yhdiste tai sen suola, kuten edellä on määritetty, ga-leeniseen antomuotoon yhdessä terapeuttisesti inertin kan-25 toaineen ja haluttaessa yhden tai useamman muun terapeuttisesti vaikuttavan aineen kanssa.

Kuten edellä on mainittu, kaavan A mukaisia yhdisteitä ja niiden edellä mainittuja suoloja voidaan käyttää sairauksien hoitamiseen tai ennaltaehkäisyyn, erityisesti 30 tulehdusten, immunologisten sairauksien, kasvainsairauk-sien, keuhkoputkentulehduksen, ihotautien ja sydän-veri-suonisairauksien hoidossa tai ennaltaehkäisyssä, astman, AIDSin tai diabeteskomplikaatioiden hoitamisessa tai hiusten kasvun stimuloinnissa. Annos voi vaihdella laa-35 joilla alueilla ja säädetään tietenkin vastaamaan kunkin 106961 20 tapauksen yksittäisiä tarpeita. Yleensä oraalisen antomuo-don tapauksessa täysikasvuisille päivittäisen annoksen noin 5 mg - noin 500 mg tulisi olla tarkoituksenmukainen, vaikka yläraja voidaan ylittää kun tämä havaitaan tarkoi-5 tuksenmukaiseksi. Päivittäinen annos voidaan antaa yksittäisenä annoksena tai monina annoksina.

Seuraavat esimerkit kuvaavat tätä keksintöä:

Esimerkki 1

Liuosta, jossa oli 1,25 g (2,32 mmol) 3- [8(R tai 10 S)-[1(R tai S)-tert-butoksiformamidoetyyli]-6,7,8,9-tet-rahydropyrido[1,2-a]indol-10-yyli]-4-(l-metyyli-3-indolyy-li)-lH-pyrroli-2,5-dionia (diastereomeeri A) 10 ml:ssa etyyliasetaattia, käsiteltiin 30 ml :11a vetykloridilla kyllästettyä liuosta etyyliasetaatissa ja sekoitettiin 15' huoneenlämpötilassa 18 tuntia. Saatu kiinteä aine suodatettiin pois ja kuivattiin antamaan 1,0 g 3-[8(R tai S)-[1(R tai S)-aminoetyyli]-6,7,8,9-tetrahydropyrido-[1,2-a]indol-10-yyli]-4-(l-metyyli-3-indolyyli)-lH-pyr-roli-2,5-dionihydrokloridia (diastereomeeri A) punaisena 20 kiinteänä aineena, jonka sulamispiste oli 324 - 325 °C.

3-[8(R tai S)-[1(R tai S)-tert-butoksiformamido-e tyyli]-6,7,8,9-tetrahydropyrido[1,2-a]indol-10-yyli]-4-(l-metyyli-3-indolyyli)-lH-pyrroli-2,5-dioni (diastereomeeri A) , jota käytettiin lähtöaineena, valmistettiin seu-25 raavasti: (i) Sekoituksenalainen suspensio, jossa oli 27 g (126 mmol) 6,7,8,9-tetrahydropyrido[1,2-a]indoli-8-karbok-syylihappoa 30 mlrssa vettä ja 450 ml asetonia, jäähdytettiin 0 °C:seen ja käsiteltiin peräkkäisesti 14,7 g:11a 30 (145 mmol) trietyyliamiinia ja 17,3 g:11a (159 mmol) etyy- • likloroformiaattia. 0,5 tunnin kuluttua lisättiin 6,3 ml 0,880 ammoniakkia ja sekoittamista jatkettiin yksi tunti. Liuotin poistettiin alennetussa paineessa ja jäännös tri-turoitiin vesipitoisella etanolilla. Tuote suodatettiin 35 pois ja kuivattiin antamaan 13 g 6,7,8,9-tetrahydropyrido- 106961 21 [1,2-a] indoli-8-karboksiatnidia valkoisena kiinteänä aineena, jonka sulamispiste oli 165 - 168 °C.

(ii) 25,7 g (126 mmol) trifluorietikkahappoanhydri-diä lisättiin tipoittain sekoituksenalaiseen suspensioon, 5 jossa oli 26,5 g (123 mmol) 6,7,8,9-tetrahydropyrido[1,2-a]indoli-8-karboksiamidia ja 23,4 g (300 mmol) pyridiiniä 500 ml:ssa kuivaa dioksaania 10 °C:ssa. Lisäyksen jälkeen liuotin poistettiin alennetussa paineessa ja jäännös kiteytettiin metanolista antamaan 13 g 6,7,8,9-tetrahydropy-10 rido[1,2-a]indoli-8(RS)-karbonitriiliä vaaleana nahanrus-keana kiinteänä aineena, jonka sulamispiste oli 106 - 109 °C.

(iii) Liuosta, jossa oli 1,4 g (7,2 mmol) 6,7,8,9-tetrahydropyrido[1,2-a]indoli-8(RS)-karbonitriiliä 400 15 ml:ssa kuivaa tolueenia, käsiteltiin 7 ml :11a (21 mmol) 3 M liuosta, jossa oli metyylimagnesiumkloridia tetrahyd-rofuraanissa, ja saatua liuosta kuumennettiin palautus-jäähdyttäen typen paineessa 0,5 tuntia. Sitten liuos lisättiin 17 ml:aan (17 mmol) 1 M liuosta, jossa oli litium-20 alumiinihydridiä tetrahydrofuraanissa. Saatua liuosta kuumennettiin palautusjäähdyttäen 15 minuuttia, jäähdytettiin ja käsiteltiin tipoittain noin 20 ml:11a vettä. Sakka suodatettiin pois ja pestiin 100 ml :11a etyyliasetaattia ja yhdistetty suodos ja pesut haihdutettiin alennetussa pai-25 neessa antamaan 1,55 g vaaleanruskeaa öljyä.

• < Öljy liuotettiin 70 ml:aan kuivaa dikloorimetaania ja käsiteltiin 1,5 g:11a (15 mmol) trietyyliamiinia, mitä seurasi 1,8 g (7,4 mmol) di-tert.butyylidikarbonaattia 0 °C:ssa typen paineessa. Sekoituksenalaisen liuoksen an-30 nettiin lämmetä huoneenlämpötilaan ja sekoittamista jat-• ♦' kettiin yksi tunti. Liuotin poistettiin alennetussa pai neessa ja tuote puhdistettiin flashkromatografisesti sili-kageelillä käyttäen dietyylieetteri/petrolieetteriä (1:2) eluoimiseen antamaan 925 mg tert.butyyli[1(RS)-(6,7,8,9-35 tetrahydropyrido[1,2-a]indol-8(R tai S)-yyli)etyyli]karba- 106961 22 maattia diastereomeerien seoksena valkoisen kiinteän aineen muodossa, jonka sulamispiste oli 114 - 117 °C.

(iv) Sekoituksenalaista liuosta, jossa oli 3,0 g (9,57 mmol) tert.butyyli[1(R tai S)(6,7,8,9-tetrahydropy-5 rido[1,2-a]indol-8(R tai S)-yyli)etyyli]karbamaattia 150 mlrssa dikloorimetaania, käsiteltiin tipoittain 0 °C:ssa 1,28 g:lla (10,3 mmol) oksalyylikloridia. Viiden minuutin kuluttua liuotin poistettiin alennetussa paineessa ja jäännös liuotettiin 150 ml:aan dikloorimetaania ja käsi-10 teltiin 2,94 g:11a (11 mmol) isopropyyli-1-metyyli-3-indo-liasetimidaattihydrokloridia ja 4,38 g:11a (43 mmol) tri-etyyliamiinia 0 °C:ssa typen paineessa. Lämmittämisen jälkeen huoneenlämpötilaan liuosta sekoitettiin 24 tuntia, pestiin vedellä ja kuivattiin magnesiumsulfaatilla. Liuo-15 tin poistettiin haihduttamalla ja jäännös liuotettiin 30 ml:aan pyridiiniä. Tämä sekoituksenalainen liuos jäähdytettiin jäähauteessa ja käsiteltiin tipoittain 1,5 ml :11a (10,8 mmol) trifluorietikkahappoanhydridiä. 15 minuutin kuluttua liuotin poistettiin alennetussa paineessa ja 20 jäännös jaettiin 200 ml:n kesken etyyliasetaattia ja 200 ml:n kesken 0,2 M vetykloridihappoa. Orgaaninen kerros pestiin 50 ml :11a natriumbikarbonaattiliuosta, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin. Jäännös puhdistetiin flashkromatografisesti silikageelillä käyt-25 täen etyyliasetaatti/petrolieetteriä (1:2) eluoimiseen antamaan 1,35 g 3-[8(R tai S)-[1(R tai S)-tert.butoksiform-amidoetyyli]-6,7,8,9-tetrahydropyrido[1,2-a]indol-10-yyli]-4-(1-metyyli-3-indolyyli)-lH-pyrroli-2,5-dionia (diastereomeeri A) punaisen kiinteän aineen muodossa, jon-30 ka sulamispiste oli 255 - 7 °C. Lisäeluointi antoi 1,38 g . diastereomeeriä B punaisena kiinteänä aineena, jonka sula mispiste oli 230 - 233 °C.

Esimerkki 2

Analogisella tavalla esimerkissä 1 ensimmäisessä 35 kappaleessa kuvatun kanssa 1,38 g:sta 3-[8(R tai S)-[1(R

106961 23 tai S)-tert.butoksiformamidoetyyli] -6,7,8,9-tetrahydropy-rido[1,2-a]indol-10-yyli]-4-(l-metyyli-3-indolyyli)-1H-pyrroli-2,5-dionia (diastereomeeri B), valmistettu kuten esimerkissä l(iv) on kuvattu, saatiin 930 mg 3-[8(R tai 5 S)-[1(R tai S)-aminoetyyli]-6,7,8,9-tetrahydropyrido[1,2-a]indol-10-yyli]-4-(l-metyyli-3-indolyyli)-lH-pyrroli-2,5-dionihydrokloridia (diastereomeeri B) punaisena kiinteänä aineena, jonka sulamispiste oli 254 - 258 °C.

Esimerkki 3 10 Analogisella tavalla esimerkissä 1 ensimmäisessä kappaleessa kuvatun kanssa 180 mgrsta 3-[8(R tai S)-[1(R tai S)-tert.butoksiformamidopropyyli]-6,7,8,9-tetrahydropyrido [1,2-a]indol-10-yyli]-4-(l-metyyli-3-indolyyli)-1H-pyrroli-2,5-dionia (diastereomeeri A) saatiin 115 mg 15 3-[8(R tai S)-[1(R tai S)-aminopropyyli]-6,7,8,9-tetrahyd ropyrido [1,2-a]indol-10-yyli]-4-(l-metyyli-3-indolyyli)-lH-pyrroli-2,5-dionihydrokloridia (diastereomeeri A) punaisena kiinteänä aineena, jonka sulamispiste oli 321 -323 °C.

20 3-[8(R tai S)-[1(R tai S)-tert.butoksiformamidopro pyyli] -6,7,8,9-tetrahydropyrido[1,2-a]indol-10-yyli]-4-(1-metyyli-3-indolyyli)-lH-pyrroli-2,5-dioni (diastereomeeri A) , jota käytettiin lähtöaineena, valmistettiin seuraavasti : ----- 25 (i) Analogisella tavalla esimerkissä l(iii) kuvatun kanssa 500 mgrsta (2,5 mmol) 6,7,8,9-tetrahydropyrido-[1,2-a]indoli-8(RS)-karbonitriiliä ja 2,5 ml:sta (5 mmol) 2 M liuosta, jossa oli etyylimagnesiumbromidia tetrahydro-furaanissa, saatiin 480 mg tert.butyyli[1(RS)-(6,7,8,9-30 tetrahydropyrido[1,2-a]indol-8(R tai S)-yyli)propyyli]kar-bamaattia diastereomeerien seoksena valkoisen kiinteän aineen muodossa, jonka sulamispiste oli 153 - 156 °C.

(ii) Analogisella tavalla esimerkissä l(iv) kuvatun kanssa 440 mgrsta (1,34 mmol) tert.butyyli[1(R tai S)-35 (6,7,8,9-tetrahydropyrido[1,2-a] indol-8(R tai S)-yyli)pro- 106961 24 pyyli]karbamaattia saatiin 180 mg 3-[8(R tai S)-[1(R tai S)-tert.butoksiformamidopropyyli]-6,7,8,9-tetrahydropyri-do[1,2-a]indol-10-yyli]-4-(l-metyyli-3-indolyyli)-lH-pyr-roli-2,5-dionia (diastereomeeri A) punaisena kumina. Lisä-5 eluointi antoi 130 mg diastereomeeriä B punaisena kumina.

Esimerkki 4

Analogisella tavalla esimerkissä 1 ensimmäisessä kappaleessa kuvatun kanssa 130 mg:sta 3-[8(R tai S)-1(R tai S)-tert.butoksiformamidopropyyli]-6,7,8,9-tetrahydro-10 pyrido[l,2-a]indol-10-yyli]-4-(l-metyyli-3-indolyyli)-1H- pyrroli-2,5-dionia [diastereomeeri B, valmistettuna kuten esimerkissä 3(ii) on kuvattu] saatiin 65 mg 3-[8(R tai S)-[1(R tai S)-aminopropyyli]-6,7,8,9-tetrahydropyrido-[1,2-a]indol-10-yyli]-4-(l-metyyli-3-indolyyli)-lH-pyrro-15 li-2,5-dionihydrokloridia (diastereomeeri B) punaisena kiinteänä aineena, jonka sulamispiste oli 245 - 249 °C.

Esimerkki 5

Analogisella tavalla esimerkissä 1 ensimmäisessä kappaleessa kuvatun kanssa 400 mg:sta (0,7 mmol) 3-[8(R 20 tai S)-[1(R tai S)-tert.butoksiformamidobutyyli]-6,7,8,9-tetrahydropyrido[1,2-a]indol-10-yyli] -4-(l-metyyli-3-indo-lyyli)-lH-pyrroli-2,5-dionia (diastereomeeri A) saatiin 310 mg 3-[8(R tai S)-[1(R tai S)aminobutyyli]-6,7,8,9-tet-rahydropyrido[l,2-a]indol-10-yyli]-4-(l-metyyli-3-indolyy-25 li)-lH-pyrroli-2,5-dionihydrokloridia (diastereomeeri A) punaisena kiinteänä aineena, jonka sulamispiste oli 237 -241 °C.

3-[8(R tai S)-[1(R tai S)-tert.butoksiformamidobu-tyyli]-6,7,8,9-tetrahydropyrido[1,2-a]indol-10-yyli]-4-(1-30 metyyli-3-indolyyli)-lH-pyrroli-2,5-dioni (diastereomeeri [ A) , jota käytettiin lähtöaineena, valmistettiin seuraavas ti :

Analogisella tavalla esimerkissä l(iii) ja (iv) kuvatun kanssa 1,0 g:sta (5 mmol) 6,7,8,9-tetrahydropyri-35 do[1,2-a]indoli-8(RS)-karbonitriiliä ja 5,0 ml:sta (10 106961 25 mmol) 2 M liuosta, jossa oli n-propyylimagnesiumkloridia dietyylieetterissä, saatiin 470 mg 3-[8(R tai S)-[l(R tai S)-tert.butoksiformamidobutyyli]-6,7,8,9-tetrahydropyri-do [1,2-a]indol-10-yyli]-4-(1-metyyli-3-indolyyli)-lH-pyr-5 roli-2,5-dionia (diastereomeeri A) punaisena kiinteänä ai neena, jonka sulamispiste oli 227 - 9 °C. Lisäeluointi antoi 285 mg diastereomeeriä B punaisena kiinteänä aineena, jonka sulamispiste oli 169 - 172 °C.

Esimerkki 6 10 Analogisella tavalla esimerkissä 1 ensimmäisessä kappaleessa kuvatun kanssa 270 mg:sta (0,48 mmol) 3-[8(R tai S)-1(R tai S)-tert.butoksiformamidobutyyli]-6,7,8,9-tetrahydropyrido[1,2-a]indol-10-yyli] -4-(1-metyyli-3-indolyyli)-lH-pyrroli-2, 5-dionia (diastereomeeri B), joka oli 15 valmistettu kuten esimerkin 5 toisessa kappaleessa on kuvattu, saatiin 210 mg 3-[8(R tai S)-[1(R tai S)-aminobu-tyyli]-6,7,8,9-tetrahydropyrido[1,2-a]indol-10-yyli]-4-(1-metyyli-3-indolyyli)-lH-pyrroli-2,5-dionihydrokloridia (diastereomeeri B) punaisena kiinteänä aineena, jonka su-20 lamispiste oli 235 - 238 °C.

Esimerkki 7

Analogisella tavalla esimerkissä 1 ensimmäisessä kappaleessa kuvatun kanssa 400 mg:sta (0,7 mmol) 3-[8(R tai S)-[1(R tai S)-tert.butoksiformamido-2-metyylipropyy- ..... 25 li] - 6,7,8,9-tetrahydropyrido[1,2-a]indol-10-yyli]-4-(1- metyyli-3-indolyyli)-lH-pyrroli-2,5-dionia (diastereomeeri A) saatiin 300 mg 3-[8(R tai S)-[1(R tai S)-amino-2-metyy-lipropyyli]-6,7,8,9-tetrahydropyrido[1,2-a] indol-10-yyli]- 4-(l-metyyli-3-indolyyli)-lH-pyrroli-2,5-dionihydroklori-30 dia (diastereomeeri A) punaisena kiinteänä aineena, jonka ' sulamispiste oli 254 - 256 °C.

3-[8(R tai S)-[1(R tai S)-tert.butoksiformamido-2-metyylipropyyli]-6,7,8,9-tetrahydropyrido[1,2-a]indol-10-yyli] -4-(l-metyyli-3-indolyyli)-lH-pyrroli-2,5-dioni 106961 26 (diastereomeeri A), jota käytettiin lähtöaineena, valmistettiin seuraavasti:

(i) Liuosta, jossa oli 2,0 g (10 mmol) 6,7,8,9-tet-rahydropyrido[1,2-a]indoli-8(RS)-karbonitriiliä 150 ml:ssa 5 kuivaa tolueenia, käsiteltiin 10 ml :11a (20 mmol) 2 M

liuosta, jossa oli isopropyylimagnesiumkloridia tetrahyd-rofuraanissa, ja saatua liuosta kuumennettiin palautus-jäähdyttäen 20 minuuttia. Liuos jäähdytettiin ja käsiteltiin tipoittain 24 ml :11a (24 mmol) 1 M liuosta, jossa oli 10 litiumalumiinihydridiä tetrahydrofuraanissa. Saatua liuosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 1,5 tuntia, jäähdytettiin ja käsiteltiin tipoittain noin 20 ml:11a vettä. Sakka suodatettiin pois, pestiin 100 ml :11a dikloorimetaania ja yhdistetyt suodokset haihdutettiin alennetussa paineessa 15 antamaan 7,2 g vaaleanruskeaa öljyä. Öljy liuotettiin 100 ml:aan kuivaa dikloorimetaania ja käsiteltiin 2,34 g:11a (23,4 mmol) trietyyliamiinia, mitä seurasi 2,8 g (11,6 mmol) di-tert.butyylidikarbonaattia 0 °C:ssa typen paineessa. Sekoituksenalaisen liuoksen annettiin lämmetä huo-20 neenlämpötilaan ja sekoittamista jatkettiin 70 tuntia. Liuotin poistettiin alennetussa paineessa ja tuotteet puhdistettiin flashkromatografisesti silikageelillä käyttäen dietyylieetteri/petrolieetteriä (1:2) eluoimiseen antamaan 800 mg tert.butyyli-[1(R tai S)-[6,7,8,9-tetrahydropyrido-- 25 [1,2-a]indol-8(R tai S)-yyli]-2-metyylipropyyli]karbonaat tia (diastereomeeri A) valkoisena kiinteänä aineena, jonka sulamispiste oli 118 - 9 °C. Lisäeluointi antoi 420 mg di-astereomeeriä B valkoisena kiinteänä aineena, jonka sulamispiste oli 128 - 129 °C.

30 (ii) Sekoituksenalaista liuosta, jossa oli 770 mg . (2,25 mmol) tert.butyyli[1(R tai S)-[6,7,8,9-tetrahydropy- rido[1,2-a]indol-8(R tai S)-yyli]-2-metyylipropyyli]kar-bamaattia (diastereomeeri A) 30 ml:ssa dikloorimetaania 0 °C:ssa, käsiteltiin tipoittain 287 mg:11a (2,4 mmol) ok-35 salyylikloridia. Viiden minuutin kuluttua liuotin pois- 106961 27 tettiin alennetussa paineessa ja jäännös liuotettiin 30 ml:aan dikloorimetaania ja käsiteltiin 686 mg:11a (2,57 mmol) isopropyyli-l-metyyli-3-indoliasetimidaattihyd-rokloridia ja 1,02 g:lla (1,02 mmol) trietyyliamiinia 5 0 °C:ssa typen paineessa- Lämmittämisen jälkeen huoneen lämpötilaan liuosta sekoitettiin 18 tuntia, pestiin 50 ml:11a vettä ja kuivattiin magnesiumsulfaatilla. Liuotin poistettiin haihduttamalla ja jäännös liuotettiin 10 ml:aan pyridiiniä. Sekoituksenalainen liuos jäähdytettiin 10 jäähaudelämpötilaan ja käsiteltiin tipoittain 664 /il :11a (4,8 mmol) trifluorietikkahappoanhydridiä. 15 minuutin kuluttua lisättiin 50 ml etyyliasetaattia ja orgaaninen faasi pestiin vedellä ja 2 M vetykloridihapolla, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin. Jään-15 nös puhdistettiin flashkromatografisesti silikageelillä käyttäen etyyliasetaatti/petrolieetteriä (1:2) eluoimiseen antamaan 460 mg 3-[8(R tai S)- [1(R tai S)-tert.butoksi-formamido-2-metyylipropyyli]-6,7,8,9-tetrahydropyrido[1,2-a] indol-10-yyli]-4-(l-metyyli-3-indolyyli)-lH-pyrroli-2,5-20 dionia (diastereomeeri A) punaisena kiinteänä aineena, jonka sulamispiste oli 223 - 224 °C.

Esimerkki 8

Analogisella tavalla esimerkissä 1 ensimmäisessä kappaleessa kuvatun kanssa 270 mg:sta (0,48 mmol) 3-[8(R

..... 25 tai S)-[1(R tai S)-tert.butoksiformamido-2-metyylipropyy- li] -6,7,8,9-tetrahydropyrido[1,2-a]indol-10-yyli]-4-(1-me-tyyli-3-indolyyli)-lH-pyrroli-2,5-dionia (diastereomeeri B) saatiin 180 mg 3-[8(R tai S)-[1(R tai S)-amino-2-metyy-lipropyyli]-6,7,8,9-tetrahydropyrido[1,2-a] indol-10-yyli]-30 4-(1-metyyli-3-indolyyli)-lH-pyrroli-2,5-dionihydroklori- dia (diastereomeeri B) punaisena kiinteänä aineena, jonka sulamispiste oli 248 - 250 °C.

3-[8(R tai S)-[1(R tai S)-tert.butoksiformamido-2-metyylipropyyli]-6,7,8,9-tetrahydropyrido[1,2-a]indol -35 10-yyli]-4-(1-metyyli-3-indolyyli)-lH-pyrroli-2,5-dioni 106961 28 (diastereomeeri B), jota käytettiin lähtöaineena, valmistettiin seuraavasti:

Analogisella tavalla esimerkissä 7(ii) kuvatun kanssa 385 mg:sta tert.butyyli-[1(R tai S)-[6,7,8,9-tetra-5 hydropyrido[1,2-a]indol-8(R tai S)-yyli]-2-metyylipropyy- li]karbamaattia (diastereomeeri B) , joka oli valmistettu kuten esimerkissä 7 (i) on kuvattu, saatiin 270 mg 3-[8(R tai S)-[1(R tai S)-tert.butoksiformamido-2-metyylipropyy-li]-6,7,8,9-tetrahydropyrido[1,2-a]indol-10-yyli]-4-(1-me-10 tyyli-3-indolyyli)-iH-pyrroli-2,5-dionia (diastereomeeriB) punaisena kumina.

Esimerkki 9

Analogisella tavalla esimerkissä 1 ensimmäisessä kappaleessa kuvatun kanssa 1,2 g:sta (2,17 mmol) 3-[8(SIIS [1(R tai S)-tert.butoksiformamidopropyyli]-6,7,8,9-tetra hydropyrido [1,2-a]indol-10-yyli]-4-(l-metyyli-3-indolyy-li)-IH-pyrroli-2,5-dionia (diastereomeeri A) saatiin 850 mg 3-[8(S)-[1(R tai S)aminopropyyli]-6,7,8,9-tetrahydropyrido [1,2-a]indol-10-yyli]-4-(1-metyyli-3-indolyyli)-1H-20 pyrroli-2,5-dionihydrokloridia (diastereomeeri A) punaisena kiinteänä aineena, jonka sulamispiste oli 304 308 °C.

3-[8(S)-[1(R tai S)-tert.butoksiformamidopropyyli]- 6,7,8,9-tetrahydropyrido[1,2-a]indol-10-yyli]-4-(1-metyy-; 25 li-3-indolyyli)-IH-pyrroli-2,5-dioni (diastereomeeri A), jota käytettiin lähtöaineena, valmistettiin seuraavasti: (i) Jääkylmää liuosta, jossa oli 50,0 g (248 mmol) 8(S) -hydroksimetyyli-6,7,8,9-tetrahydropyrido[1,2-a]indo-lia 500 ml:ssa dikloorimetaania, käsiteltiin 50 ml :11a 30 (358 mmol) trietyyliamiinia ja 52,0 g:lla (298 mmol) me- ] taanisulfonihappoanhydridiä 20 minuutin aikana. Kahden tunnin kuluttua lisättiin 250 ml vettä ja orgaaninen faasi pestiin peräkkäisesti kahdella 250 ml:n annoksella kyllästettyä natriumbikarbonaattiliuosta ja 200 ml :11a vettä. 35 Sitten orgaaninen faasi kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja 106961 29 haihdutettiin. Kiinteä jäännös trituroitiin eetterissä, suodatettiin pois ja kuivattiin tyhjössä antamaan 65,4 g [6,7,8,9-tetrahydropyrido[1,2-a]indol-8(S)-yyli]metyylime-taanisulfonaattia vaaleanpunertavana kiinteänä aineena, 5 jonka sulamispiste oli 114 - 5 °C; [a]2D° = -39,7° (c = 1 %, CH2C12) .

(ii) 18,0 g (367 mmol) natriumsyanidia lisättiin liuokseen, jossa oli 65,0 g (233 mmol) (6,7,8,9-tetrahydropyrido [1,2-a]indol-8(S)-yyli)metyylimetaanisulfonaattia 10 500 ml:ssa dimetyyliformamidia, ja seosta kuumennettiin 70 °C:ssa 24 tuntia. Seos jaettiin 100 ml:n kesken vettä ja 600 ml:n kesken etyyliasetaattia. Vesipitoinen faasi uutettiin kahdesti 700 ml :11a etyyliasetaattia/kerta ja yhdistetyt uutteet pestiin kahdesti 500 ml :11a vettä/ker-15 ta, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin. Saatu ruskea kiinteä aine liuotettiin etyyliasetaattiin ja liuos suodatettiin silikageelikerroksen läpi. Liuotin poistettiin tyhjössä ja jäännös kiteytettiin metanolista antamaan 25,8 g 6,7,8,9-tetrahydropyrido[1,2-a]indoli-20 8(S)-asetonitriiliä vaaleanruskeana kiinteänä aineena, jonka sulamispiste oli 100 - 101 °C; [a]2p = -40,6° (c = 0,84 %, CH2C12) .

(iii) Liuosta, jossa oli 27,0 g (129 mmol) 6,7,8,9-tetrahydropyrido[1,2-a]indoli-8(S)-asetonitriiliä ja 120 ·;--- 25 ml 2 M natriumhydroksidia 400 ml: ssa 1,2-etaanidiolia, kuumennettiin palautusjäähdyttäen neljä tuntia. 400 ml etyyliasetaattia lisättiin ja orgaaninen faasi pestiin peräkkäisesti 500 ml :11a vettä, 150 ml :11a 2 M vetyklori-dihappoa ja kolmella 500 ml:n annoksella vettä, kuivattiin 30 magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin antamaan 29 g [8(S)~ ‘ (6,7,8,9-tetrahydropyrido[1,2-a] indolyyli]etikkahappoa vaaleanpunertavana kiinteänä aineena, jonka sulamispiste oli 118 - 120 °C.

(iv) Liuosta, jossa oli 29 g (127 mmol) 8(S)- 3*5 (6,7,8,9-tetrahydropyrido [1,2-a] indolyyli) etikkahappoa ja 106961 30 5 ml väkevää rikkihappoa 500 ml:ssa metanolia, kuumennettiin palautusjäähdyttäen yksi tunti. Seos väkevöitiin alennetussa paineessa ja tuote suodatettiin pois ja kuivattiin antamaan 28,4 g metyyli[8(S)-(6,7,8,9-tetrahydro-5 pyrido [1,2-a] indolyyli] asetaattia vaaleanpunertavana kiin teänä aineena, jonka sulamispiste oli 84 - 87 °C.

(v) 10 g (100 mmol) di-isopropyyliamiinia 60 ml:ssa kuivaa tetrahydrofuraania käsiteltiin 0 °C:ssa typen paineessa 63 ml :11a (100 mmol) 1,6 M liuosta, jossa oli n-bu- 10 tyylilitiumia heksaanissa, ja sekoitettiin 15 minuuttia. Saatu liuos jäähdytettiin -78 °C:seen ja liuos, jossa oli 14,9 g (61,3 mmol) metyyli[8(S)-6,7,8,9-tetrahydropyrido-[1,2-a]indolyyli]asetaattia 60 mlrssa tetrahydrofuraania, lisättiin tipoittain. 30 minuutin kuluttua lisättiin 15 15,6 g (100 mmol) etyylijodidia ja seosta sekoitettiin 0,5 tuntia. 8 g etyylijodidia lisättiin sitten ja seoksen annettiin lämmetä huoneenlämpötilassa noin yksi tunti. Seos jaettiin 300 ml:n dietyylieetteriä ja 20 ml:n 2 M vetykloridihappoa kesken. Orgaaninen faasi pestiin kolme 20 kertaa 300 ml :11a vettä/kerta, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin antamaan 17 g vaaleanoranssista öljyä. Näyte kiteytettiin metanolista antamaan metyyli-a-(R tai S)-etyyli-6,7,8,9-tetrahydropyrido[1,2-a]indoli-8(S)-asetaatti (diastereomeerit A + B) vaaleanpunertavana 25 kiinteänä aineena, jonka sulamispiste oli 87 - 90 °C.

(vi) Liuosta, jossa oli 17 g (63 mmol) metyyli-a-(R tai S)-etyyli-6,7,8,9-tetrahydropyrido[1,2-a]indoli-8 (S)-asetaattia (diastereomeerit A + B) 150 ml:ssa metanolia, käsiteltiin 13 0 ml :11a 2 M natriumhydroksidia ja kuumen- 30 nettiin palautusjäähdyttäen 18 tuntia. Jäähdytetty liuos lisättiin 150 ml:aan 4 M vetykloridihappoa ja saatu sakka suodatettiin pois ja jaettiin 200 ml:n kesken dikloorime-taania ja 100 ml-.n kesken vettä. Orgaaninen faasi erotettiin, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin 35 antamaan 15 g a(R tai S)-6,7,8,9-tetrahydropyrido[1,2-a]- 106961 31 indoli-8(S)-etikkahappoa (diastereomeerit A + B) vaaleanpunertavana kiinteänä aineena.

(vii) Sekoituksenalaista liuosta, jossa oli 15 g (58,4 mmol) a-(R tai S)-6,7,8,9-tetrahydropyrido[1,2-a]in- 5 doli-8(S)-etikkahappoa (diastereomeerit A + B) 450 mlrssa tolueenia, käsiteltiin 6,5 g:lla (65 mmol) trietyyliamii-nia ja 18,6 g:11a (67,5 mmol) difenyylifosfonyyliatsidia huoneenlämpötilassa typen paineessa. Yhden tunnin kuluttua huoneenlämpötilassa seosta kuumennettiin palautusjäähdyt-10 täen 0,5 tuntia, jäähdytettiin ja liuotin poistettiin alennetussa paineessa. Jäännös puhdistettiin flashkromato-grafisesti silikageelillä käyttäen dietyylieetteri/petro-lieetteriä (1:3) eluointiin antamaan 14 g isosyanaattia värittömänä öljynä. Öljy liuotettiin 400 ml:aan dioksaania 15 ja 150 ml:aan 2 M vetykloridihappoa ja saatua liuosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 18 tuntia. Liuos väkevöi-tiin ja jaettiin 300 ml:n kesken etyyliasetaattia ja 2 M natriumhydroksidiliuosta. Vesipitoinen kerros uutettiin 100 ml :11a etyyliasetaattia ja yhdistetyt orgaaniset 20 liuokset pestiin kahdesti 400 ml:11a vettä/kerta, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin antamaan 7,7 g kermanväristä vaahtoa.

Tätä vaahtoa 200 ml:ssa kuivaa dikloorimetaania käsiteltiin 7,6 g:lla (75 mmol) trietyyliamiinia ja • 25 10,9 g:lla (50 mmol) di-tert.butyylidikarbonaattia ja seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa kolme tuntia. Liuotin poistettiin alennetussa paineessa ja jäännös altistettiin flashkromatografiälle silikageelillä käyttäen dietyylieetteri/petrolieetteriä (1:2) eluoimiseen antamaan 30 4,5 g tert.butyyli-[1(R tai S)-[6,7,8,9-tetrahydropyrido- [1,2-a]indol-8(S)-yyli]propyyli]karbamaattia (diastereo-isomeerit A + B) valkoisena kiinteänä aineena, jonka sulamispiste oli 152 - 158 °C.

(viii) Analogisella tavalla esimerkissä l(iv) kuva-35 tun kanssa 4,3 g:sta (13,1 mmol) tert.butyyli-[1(R tai S)- 32 1 0 6 9 61 [6,7,8,9-tetrahydropyrido[1,2-a]indol-8(S)-yyli]propyy-li]karbamaattia (diastereomeerit A + B) saatiin 1,2 g 3-[8(S)-[l(R tai S)-tert.butoksiformamidopropyyli] - 6,7,8,9-tetrahydropyrido[1,2-a]indol-10-yyli]-4-(1-metyy-5 li-3-indolyyli)-lH-pyrroli-2,5-dionia (diastereomeeri A) ja 2,0 g diastereomeeriä B, molemmat punaisina kiinteinä aineina.

Esimerkki 10

Analogisella tavalla esimerkissä 1 ensimmäisessä 10 kappaleessa kuvatun kanssa 2,0 g:sta (3,62 mmol) 3—[8(S) -[1(R tai S)-tert.butoksiformamidopropyyli]-6,7,8,9-tetrahydropyrido [1,2-a]indol-10-yyli]-4-(1-metyyli-3-indolyy-li)-lH-pyrroli-2,5-dionia (diastereomeeri B) , joka oli valmistettu kuten esimerkissä 9 on kuvattu, saatiin 1,28 g 15 3-[8(S)-[1(R tai S)-aminopropyyli]-6,7,8,9-tetrahydropyri do [1, 2-a] indol-10-yyli]-4-(l-metyyli-3-indolyyli)-lH-pyr-roli-2,5-dionihydrokloridia (diastereomeeri B) punaisena kiinteänä aineena, jonka sulamispiste oli 247 - 253 °C.

Esimerkki 11 20 Analogisella tavalla esimerkissä 1 ensimmäisessä kappaleessa kuvatun kanssa 1,46 g:sta 3-[8(S)-[1(S)-tert.-butoksiformamido-2-metyylipropyyli]-6,7,8,9-tetrahydrohyd-ropyrido(1,2-a]indol-10-yyli]-4-(l-metyyli-3-indolyyli)-lH-pyrroli-2,5-dionia saatiin 1,29 g 3-[8(S)-[1(S)-amino-25 2-metyylipropyyli]-6,7,8,9-tetrahydropyrido [1,2-a] indol- 10-yyli-4-(l-metyyli-3-indolyyli)-lH-pyrroli-2,5-dionihydrokloridia punaisena kiinteänä aineena, jonka sulamispiste oli 253 - 256 °C.

3-[8(S)-[1(S)-tert.butoksiformamido-2-metyylipro-30 pyyli]-6,7,8,9-tetrahydropyrido[1,2-a] indol-10-yyli]-4-(1-metyyli-3-indolyyli)-ΙΗ-pyrroli-2,5-dioni, jota käytettiin lähtöaineena, valmistettiin seuraavasti: (i) 40 g:aan (114 mmol) 6,7,8,9-tetrahydropyrido- [1,2-a] indoli-8(S)-karboksyylihappo-l-metyyliesteriä li-35 sättiin 50 ml väkevää rikkihappoa ja saatua seosta sekoi- 106961 33 tettiin kunnes lähtöaine oli liuennut (noin 20 minuuttia). Liuos kaadettiin varovasti l 500 ml:aan jäävettä ja saatu sakka suodatettiin pois, pestiin petrolieetteri/tolueenil-la (3:1) ja kuivattiin antamaan 24,2 g 6,7,8,9-tetrahyd-5 ropyrido[1,2-a]indoli-8(S)-karboksyylihappoa valkoisena kiinteänä aineena, jonka sulamispiste oli 251 - 253 ®C.

(ii) Sekoituksenalaista suspensiota, jossa oli 24,0 g (111 mmol) 6,7,8,9-tetrahydropyrido[1,2-a]indoli-8(S)-karboksyylihappoa 500 ml:ssa dikloorimetaania, käsi- 10 teltiin peräkkäisesti 0 °C:ssa 24 ml :11a (138 mmol) di- isopropyylietyyliamiinia, 13,24 g:11a (136 mmol) N,0-dime-tyylihydroksyyliamiinihydrokloridia, 10 mg:11a dimetyyli-aminopyridiiniä ja 23,04 g:11a (112 mmol) disykloheksyyli-karbodi-imidiä. Saatua seosta sekoitettiin huoneenlämpöti-15 lassa 18 tuntia ja suodatettiin ja kiinteä aine pestiin kahdesti 100 ml :11a dikloorimetaania/kerta. Yhdistetyt suodokset haihdutettiin kuiviin ja jäännös puhdistettiin flashkromatografisesti silikageelillä käyttäen etyyliase-taatti/petrolieetteriä (1:3) eluoimiseen antamaan 22,6 g 20 valkoista kiinteää ainetta. Näyte trituroitiin eetteri/ petrolieetterillä antamaan 6,7,8,9-tetrahydro-N-metoksi-N-metyylipyrido[1,2-a]indoli-8(S)-karboksiamidi valkoisena kiinteänä aineena, jonka sulamispiste oli 78 - 80 °C.

(iii) Sekoituksenalaista liuosta, jossa oli 10,0 g 25 (38,7 mmol) 6,7,8,9-tetrahydro-N-metoksi-N-metyylipyrido- [1,2-a] indoli-8 (S) -karboksiamidia 250 ml:ssa tetrahydrofu-raania, käsiteltiin tipoittain 0 °C:ssa 60 ml :11a (120 mmol) 2 M liuosta, jossa oli isopropyylimagnesiumkloridia tetrahydrofuraanissa. Seosta sekoitettiin huoneenlämpöti-30 lassa 18 tuntia ja kaadettiin 250 ml:aan kyllästettyä am-moniumkloridiliuosta. Vesipitoinen faasi pestiin neljä kertaa 100 ml :11a dietyylieetteriä/kerta ja yhdistetyt eetteriuutteet pestiin 200 ml :11a suolaliuosta, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin. Tuote puh-35 distettiin flashkromatografisesti silikageelillä käyttäen 106961 34 etyyliasetaatti/petrolieetteriä (1:3) eluoimiseen antamaan 4.4 g isopropyyli-6,7,8,9-tetrahydropyrido[1,2-a]indol-8(S)-yyliketonia valkoisena kiinteänä aineena, jonka sulamispiste oli 78 - 79 °C.

5 (iv) Suspensiota, jossa oli 4,0 g (16,6 mmol) iso propyyli-6 , 7 , 8 , 9-tetrahydropyrido[1,2-a]indol-8(S)-yyliketonia 120 ml:ssa etanolia, käsiteltiin liuoksella, jossa oli 2,30 g (33 mmol) hydroksyyliamiinihydrokloridia ja 1,0 g (25 mmol) natriumhydroksidia 20 ml:ssa vettä. Saatua 10 seosta kuumennettiin palautusjäähdyttäen 3,5 tuntia, jäähdytettiin ja suodatettiin. Saatu kiinteä aine kuivattiin antamaan 3,54 g oksiimia valkoisena kiinteänä aineena.

Oksiimi liuotettiin 150 ml:aan kuivaa tetrahydrofu-raania ja käsiteltiin 12,5 ml :11a (12,5 mmol) 1 M liuosta, 15 jossa oli litiumalumiinihydridiä tetrahydrofuraanissa.

Saatua liuosta kuumennettiin palautusjäähdyttäen kolme tuntia typen paineessa, jäähdytettiin ja käsiteltiin varovasti 150 ml :11a vettä. Seos uutettiin 200 ml :11a etyyliasetaattia ja sitten kahdella 150 ml:n annoksella etyyli-20 asetaattia ja yhdistetyt orgaaniset uutteet kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin. Jäännös liuotettiin 150 ml:aan dikloorimetaania ja saatua liuosta käsiteltiin 3 ml :11a (21,5 mmol) trietyyliamiinia ja 3.4 g:lla (15,6 mmol) di-tert.butyylidikarbonaattia ja 25 sekoitettiin 18 tuntia. Seos pestiin 150 ml :11a kyllästettyä ammoniumkloridiliuosta, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin alennetussa paineessa. Puhdistaminen flashkromatografisesti silikageelillä käyttäen dietyyli-eetteri/petrolieetteriä (1:3) eluoimiseen antoi 1,4 g 30 tert.butyyli- [1(R)-6,7,8,9-tetrahydropyrido[1,2-a]indol-8 (S) -yyli] -2-metyylipropyyli] karbamaattia valkoisena kiinteänä aineena, jonka sulamispiste oli 122 - 124 °C. Lisä-eluointi antoi 1,1 g tert.butyyli-[1(S)-[6,7,8,9-tetrahydropyrido [1,2-a]indol-8(S)-yyli]-2-metyylipropyyli]karba- 106961 35 maattia valkoisena kiinteänä aineena, jonka sulamispiste oli 154 - 155 °C.

(v) Analogisella tavalla esimerkissä l{iv) kuvatun kanssa 1,1 g:sta tert.butyyli-[1(S)-[6,7,8,9-tetrahydropy-5 rido[1,2-a]indol-8(S)-yyli]-2-metyylipropyyli]karbamaattia saatiin 1,46 g 3-[8(S)-[1(S)-tert.butoksiformamido-2-me-tyylipropyyli]-6,7,8,9-tetrahydropyrido[1,2-a]indol-10-yyli]-4- (l-metyyli-3-indolyyli)-lH-pyrroli-2,5-dionia punaisena vaahtona.

10 Esimerkki 12

Analogisella tavalla esimerkissä 1 ensimmäisessä kappaleessa kuvatun kanssa 0,5 g:sta (0,88 mmol) 3-[8(S)— [1(R)-tert.butoksiformamido-2-metyylipropyyli]-6,7,8,9-tetrahydropyrido[1,2-a]indol-10-yyli]-4-(l-metyyli-3-indo-15 lyyli) -lH-pyrroli-2,5-dionia saatiin 0,41 g 3-[8(S)-[l(R)-amino-2-metyylipropyyli]-6,7,8,9-tetrahydropyrido[1,2-a]-indol-10-yyli]-4-(1-metyyli-3-indolyyli)-lH-pyrroli-2,5-dionihydrokloridia punaisena kiinteänä aineena, jonka sulamispiste oli 235 - 242 °C.

20 3-[8(S)-[1(R)-tert.butoksiformamido-2-metyylipro- pyyli]-6,7,8,9-tetrahydropyrido[1,2-a]indol-10-yyli]-4-ilme tyyli- 3 -indolyyli) -lH-pyrroli-2,5-dioni, jota käytettiin lähtöaineena, valmistettiin seuraavasti:

Tavalla, joka on analoginen esimerkissä l(iv) kuva-j. 25 tun kanssa, 0,94 g:sta tert.butyyli-[1(R)-[6,7,8,9-tetra-hydropyrido[1,2-a]indol-8(S)-yyli]-2-metyylipropyyli]karbamaattia, joka oli valmistettu kuten esimerkissä 11 (i) - (iv) on kuvattu, saatiin 1,05 g 3-[8(S)-[1(R)-tert.butok-si-formamido-2-metyylipropyyli]-6,7,8,9-tetrahydropyrido-30 [1,2-a]indol-10-yyli]-4-(l-metyyli-3-indolyyli)-lH-pyrro- li-2,5-dionia punaisena vaahtona.

Claims

106961 36

1. Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten bis-indolyyli-lH-pyrroli-2,5-dionijohdannaisten valmistamisek-5 si, joilla on yleinen kaava A • OÄO ^ N N v / (CH2)m | (CH^n I R2 ^CH /R1 CH

15 HNR30 A 1 2 jossa R on alempi alkyyli, R on alempi alkyyli, R30 on vety tai uretaanisuojaryhmä, m on 1 ja n on 2 sekä niiden farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojen valmistamiseksi, 20 jotka kaavan A mukaiset happoyhdisteet, joissa R30 on vety, muodostavat emästen kanssa ja kaavan A mukaiset emäsyhdisteet, joissa R30 on vety, muodostavat happojen kanssa, tunnettu siitä, että a) hydrolysoidaan ja dehydrataan hydroksipyrroli- 25 noni, jolla on yleinen kaava VI 7—OR4 ΟγαίπΟ / (pHj)m | VI (CHaJn I R2 ^ CH R1

35 HN—R3 106961 37 jossa R1, R2, m ja n ovat kuten edellä on määritelty, R3 on uretaanisuojaryhmä ja R4 on alempi alkyyli tai b) käsitellään substituoitu furaanidioni, jolla on yleinen kaava VIII 5 ^ 10 /" (CHA, Ϊ vm (CHA, | R* ch n1 HN—R» 15 jossa R1, R2, R3, m ja n ovat kuten edellä on määritelty, heksametyylidisilatsaanilla alkanolin läsnäollessa, ja sen j älkeen yhdisteen saamiseksi, jolla on kaava A, jossa R1 2 3 4 5 6 3 on vety, lohkaistaan suojaryhmä, joka on merkitty R :11a, 20 saadusta yhdisteestä, jolla on yleinen kaava II H N N / (CHA, T " II («3«. I R1 CH R1 HN-R3 2 * ,· 1 2 3 3 jossa R , R , R , m ja n ovat kuten edellä on määritelty, ja 4 haluttaessa muutetaan kaavan A mukainen happoyh- 5 diste farmaseuttisesti hyväksyttäväksi suolaksi emäksen 6 kanssa tai muutetaan kaavan A mukainen emäsyhdiste farmaseuttisesti hyväksyttäväksi suolaksi hapon kanssa. 106961 38

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan 3-[8(S)-[l(R tai S)-aminopropyyli]-6,7,8,9-tetrahydropyrido[1,2-a]indol-10-yyli] -41- (l-metyyli-3-indolyyli) -lH-pyrroli-2,5-dioni .

3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan 3-[8(S)-[1(S)-amino-2-metyylipropyyli]-6,7,8,9-tetrahydropyrido[1,2-a]-indol-10-yyli]-4-(l-metyyli-3-indolyyli)-lH-pyrroli-2,5-dioni.

4. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä,, tunnettu siitä, että valmistetaan 3 —[8(R tai S)-1(R tai S)-aminoetyyli]-6,7,8,9-tetrahydropyrido[1,2-a]indol-10-yyli]-4-(l-metyyli-3-indolyyli)-lH-pyrroli-2,5-dioni.

5. · Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, 15 tunnettu siitä, että valmistetaan 3-[8(R tai S)-1 (R tai S)aminopropyyli]-6,7,8,9-tetrahydropyrido[1,2-a]-indol-10-yyli]-4-(l-metyyli-3-indolyyli)-lH-pyrroli-2,5-dioni.

6. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, 20 tunnettu siitä, että valmistetaan 3-[8(R tai S)-1 (R tai S)aminobutyyli]-6,7,8,9-tetrahydropyrido[1,2-a]in-dol-10-yyli]-4-(l-metyyli-3-indolyyli)-lH-pyrroli-2,5-dioni.

7. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, 25 tunnettu siitä, että valmistetaan 3—[8(R tai S)-1(R tai S)-amino-2-metyylipropyyli]-6,7,8,9-tetrahydropyrido [1,2-a]indol-10-yyli]-4-(l-metyyli-3-indolyyli)-1H-pyrroli-2,5-dioni.

8. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, 30 tunnettu siitä, että valmistetaan 3—[8(S)—1(R)— amino-2-metyylipropyyli]-6,7,8,9-tetrahydropyrido[1,2-a]-indol-10-yyli]-4-(l-metyyli-3-indolyyli)-lH-pyrroli-2,5-dioni. 39 106961