FI103971B - Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten pyrrolo- ja pyrido£2,3-d|pyrimidinonijohdannaisten valmistamiseksi - Google Patents

Description

103971

Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten pyrrolo- ja pyrido[2,3-d]pyrimidinonijohdannaisten valmistamiseksi Tämä keksintö koskee menetelmää pyrrolo- ja pyri-5 do[2,3-d]pyrimidinonijohdannaisten valmistamiseksi, jotka ovat käyttökelpoisia hypertension hoidossa. Yhdisteet saavat aikaan tämän vaikutuksen estämällä angiotensiini II:n, reniini-angiotensiinisysteemin aktiivisen komponentin vaikutukset .

10 Angiotensinogeeni muutetaan angiotensiini II:ksi reniinientsyymin vaikutuksesta. Angiotensiini II (A II) muodostuu angiotensiiniä konvertoivan entsyymin (ACE) vaikuttaessa angiotensiini I:een. A II on voimakas verisuonten supistaja ja siitä on seurauksena korkea verenpaine 15 useilla lajeilla, ihmiset mukaan luettuina. A II synnyttää näitä verenpainetta kohottavia vasteita vaikuttamalla tiettyihin reseptoripaikkoihin. Tässä keksinnössä kuvatut yhdisteet kilpailevat A II :n kanssa näistä reseptoripai-koista estäen täten A II :n verenpainetta kohottavat vai-20 kutukset.

E. E. Allen et ai. esittää N-substituoituja oksopy- , rimidiinejä EP-hakemusjulkaisussa 419 048.

• > ” E. E. Allen et ai. esittää 4-okso-kinatsoliinejä • · · EP-hakemusjulkaisussa 411 766.

• · · i 25 D. A. Roberts et ai. esittää kinoliinieettereitä EP-hakemusjulkaisussa 412 848.

• · D. J. Carini et ai. esittää N-substituoituja bents-imidatsoleja US-patentissa 4 880 804. P. Chakravarty et ai. esittää samanlaisia imidatsolirakenteita, joissa aro-3 0 maattinen fenyylirengas on korvattu seitsemänjäsenisellä .···. heterorenkaalla EP-hakemusjulkaisussa 401 030. P. Herold

I l I

et ai. esittää atsabentsimidatsoleja EP-hakemusjulkaisussa · 415 886. 1 · f a • · • · « a · 2 103971 D. J. Carini et ai. esittää N-substituoituja imid-atsoleja EP-hakemusjulkaisuissa 253 310 ja 324 377 ja US-patentissa 4 916 129.

D. J. Carini et ai. esittää EP-hakemusjulkaisussa 5 323 841 N-substituoituja pyratsoleja, pyrroleja ja triat- soleja. T. Naka et ai. esittää samanlaisia pyratsolijohdannaisia EP-hakemusjulkaisussa 411 507, ja L. L. Chang et al. kuvaa lisää triatsoleita EP-hakemusjulkaisussa 412 594.

10 Kaikkien edellä esitettyjen yhdisteiden on väitetty olevan A II antagonisteja.

Keksinnön mukaisesti valmistettavat yhdisteet eroavat edellä mainitusta tekniikan tasosta siinä, että niissä on pyrimidiinirengas fuusioituneena pyrroloni- tai pyri-15 dinonirenkaaseen. Ensimmäistä viitejulkaisua (E. E. Allen et ai., EP 419 048 A) lukuunottamatta edellä mainitussa tekniikan tasossa esitetyt ei-peptiset A II antagonistit ovat kaikki 5-jäsenisiä typpirenkaita, joko erossa tai fuusioituneena fenyylirenkaisiin tai 6-jäsenisiä typpiren-20 kaita, jotka ovat fuusioituneita fenyylirenkaisiin. Yhdisteet EP-hakemusjulkaisussa 419 048 ovat pyrimidin-4-oneja.

Suomalaisesta patenttijulkaisusta 94527 ja EP-jul- : f t ' “ kaisusta 415 886 tunnetaan lisäksi samantyyppisen raken- ' teen ja angiotensiini II -antagonistivaikutuksen omaavia i '.· 25 bifenyyli-imidatsopyridiinijohdannaisia ja vastaavasti .,1·1 atsabentsimidatsoliyhdisteitä.

R. F. Shuman et ai. esittää US-patentissa 5 039 814 • · 1 :1·1: menetelmän 2-substituoitujen 1- (tetratsol-5-yyli) -bentsee- nien valmistamiseksi, joka käsittää 1-(tetratsol-5-yyli)-30 bentseenien orto-asemaan suunnatun litiumin liittämisen ja « » > tI··, sitä seuraavan välituotteen, johon litium on liitetty, i « « *. reaktion elektofiilin kanssa. Trifenyylimetyyliryhmää käy- • t \V tetään tetratsolin suojaryhmänä.

I <

Esillä olevan keksinnön yksi menetelmävaihtoeh-35 to eroaa siinä suhteessa, että tert-butyylillä suojattu • · «· • · t · 9 3 103971 2-bromi-l- (tetratsol-5-yyli) aryyli muutetaan 2- (tetratsol- 5-yyli)aryyliboronihapoksi suoraan lisäämällä samanaikaisesti magnesiumia ja trialkyyliboraattia.

Tämä keksintö koskee menetelmää pyrrolo- ja pyri-5 do [2,3-d] pyrimidinonijohdannaisten valmistamiseksi, joilla on kaava rs_(ch);vJ^ (i)

10 M N

R!-ANÄS, jossa R1, R2, R3 ja R4 ovat toisistaan riippumattomasti H, alempialkyyli, joka sisältää 1-6 hiiliatomia, tai per-15 fluorialkyyli, joka sisältää 1-6 hiiliatomia; R5 on H tai, kun n on 1, R5 yhdessä R3:n kanssa käsittää kaksoissi-doksen; n on 0 tai 1; m on 0 - 3; Ar1 on . -Cl· -Cl· --Cl· jossa W on H, alempialkyyli, joka sisältää 1-6 hiiliatomia, halogeeni, hydroksi tai alempialkoksi, joka sisältää : 1-6 hiiliatomia; Ar2 on • ♦ · « « · « : 25 /T=rvx /=vx /=vx /=>* • »· • 9 • · · • · · * · · jossa X on n^n 30 C02H, CN tai • · · • · · • · · jossa R6 on H, tert-butyyli, tri-n-butyylistannyyli tai • * V.' trifenyylimetyyli; ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttä- f · » vien suolojen valmistamiseksi. Keksinnön mukaiselle mene-35 telmälle on tunnusomaista, että • t a * * a a 4 103971 (a) pyrimidiini, jolla on kaava coor' r3~7*x 1 5 \A„ (4'> jossa R1, R2, R3, R4, R5 ja n ovat edellä määriteltyjä, Z1 on 10 poistuva ryhmä, kuten halogeeni, ja R7 on alempialkyyli, kondensoidaan amiinin kanssa, jolla on kaava H2N-(CH2)m-Ar'-Ar2 (5) 15 jossa m, Ar1 ja Ar2 ovat edellä määriteltyjä, tai (b) bisyklinen yhdiste, jolla on kaava ΛΑ^ ,

Fr—Ti N 'Ar y 20 R5-*(CH,n'N«^N (8) r2^N^R' jossa R1, R2, R3, R4, R5, n, m ja Ar1 ovat edellä määritel- tyja ja Y on para-bromi- tai para-jodi ryhmä, saatetaan 25 reagoimaan kaavan Ar2B(OH)2 mukaisen aryyliboronihapon tai kaavan Ar2Sn(R)3 mukaisen aryylistannaanin kanssa, jolloin ···· _ .·, ; Arz on edellä määritelty ja R on C[.6-alkyyli, palladiumkata-

• M

I..* lyytin läsnä ollessa * * * tai 30 (c) bisyklinen yhdiste, jolla on kaava % Ar1,* .*"· p5— (CH) ··:· 35 JK (11) ·:·: ηΆνΑη, • * * • · * • · 5 103971 jossa R1, R2, R3, R4, R5 ja n ovat edellä määriteltyjä, kon-densoidaan biaryyliyhdisteen kanssa, jolla on kaava Z1-(CHj^-Ar’-Ar2 (12) : 5 jossa m, Ar1 ja Ar2 ovat edellä määriteltyjä ja Z1 on poistuva ryhmä, kuten halogeeni, tai (d) kaavan I mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, jossa Ar2 on ~0 ^-O1 jossa X on 15 C02H, CN tai n^n jossa R6 on vety tai tert-butyyli, yhdiste, jolla on kaava C02Ei

R3 ,rS

20 R4/''(CH)nCl a V ’ jossa Rl, R2, R3, R4, R5 ja n ovat edellä määriteltyjä, saa- • » · • ’.· 25 tetaan reagoimaan amiinin kanssa, jolla on kaava h2n (2) I · · jossa m ja Ar1 ovat edellä määriteltyjä ja Y on para-bromi-30 tai para-jodi ryhmä, ja haluttaessa (i) suojaryhmä poistetaan kaavan I mukaisesta yh- • · · disteestä, jossa X on « « • t « • « · =...= -<o*# n^n • * t · · t « » i * « * 6 103971 jossa R6 on tert-butyyli, tri-n-butyylistannyyli tai trife-nyylimetyyli, jolloin saadaan yhdiste, jossa R6 on vety, tai (ii) kaavan I mukainen yhdiste, jossa X on -CN, 5 saatetaan reagoimaan atsidireagenssin kanssa, jolloin saadaan kaavan I mukainen yhdiste, jossa X on —(O*»

N-N

10 tai (iii) muodostetaan kaavan I mukaisen yhdisteen suola epäorgaanisen tai orgaanisen hapon tai emäksen kanssa.

Edullisia kaavan I mukaisia yhdisteitä ovat yhdisteet, joilla on yleinen kaava II: 15 qs-iCH)ovi^ (II) 20 • ’·· jossa Rl, R2, R3 ja R4 ovat toisistaan riippumattomasti H, : : alempi alkyyli, joka sisältää 1-6 hiiliatomia tai per-

25 fluorialkyyli, joka sisältää 1-6 hiiliatomia; R5 on H

• · ··· tai, kun n on 1, R5 yhdessä R3.-n kanssa käsittää kaksoissi- • · · * : doksen; n on 0 - 1; Ar1 on f . -o-· -o-—o- I.. Ar2 on • · · • · · • · • · · « · 4 • · f « · x /=vx /=\-x /=^1 li"; 35 “O ' <J ' tai • · • · 1¾ 7 103971

jossa X on N

C02H, CN tai -(0~~R6 n"n 5 jossa R6 on H, tert-butyyli, tri-n-butyylistannyyli tai trifenyylimetyyli; ja sen farmaseuttisesti hyväksyttävillä suoloilla.

Vielä edullisia kaavan I mukaisia yhdisteitä ovat yhdisteet, joilla on yleinen kaava lii: 10 u

2¾ H

o NyS

(III) *-<cH );nj.n n 15 JL 1 jossa R1, R2, R3 ja R4 ovat toisistaan riippumattomasti H, metyyli, tri f luorimetyyli; R5 on H tai, kun n on 1, R5 yhdessä R3:n kanssa käsittää kaksoissidoksen; n on 0 - 1; Ar1 2 0 on “O- ' “O- tai • ·

• I I

• ja sen farmaseuttisesti hyväksyttävillä suoloilla.

25 Edullisia kaavan I mukaisia yhdisteitä ovat: • « 2,4-dimetyyli-5,7-dihydro-7- [ [2 ' - (1H-tetratsol-5- • · · · .·. : yyli) [1,1-bifenyl] -4-yyli] metyyli]-6H-pyrrolo [2,3-d]pyri- • · · #·;·# midin-6-oni ja sen farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat; 5,7-dihydro-2-metyyli-7- [ [2'-(lH-tetratsol-5-yyli)-30 [1,1-bifenyl] -4-yyli]metyyli] -4-(trifluorimetyyli)-6H-pyr- • · · ; 1·1 1 rolo [2,3-d] pyrimidin-6-oni ja sen farmaseuttisesti hyväk- • · » '·1 1 syttävät suolat; - 2,4-dimetyyli-5,6,8-trihydro-8-[ [2 ' - (lH-tetratsol- 5-yyli) [1,1-bifenyl]-4-yyli]metyyli]-7H-pyrido [2,3-d] pyri- M « • , 35 midin-7-oni ja sen farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat; • » · * · · · 8 103971 2 -metyyli-4 - trif luorimetyyli-5,6,8-trihydro-8- [ [2' -(1H-tetratsol-5-yyli)[1,1-bifenyl]-4-yyli]metyyli]-7H-py-rido[2,3-d]pyrimidin-7-oni ja sen farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat; 5 2,4-dimetyyli-5,6,8-trihydro-8-[ [6-[2-(lH-tetrat- sol - 5-yyli)fenyyli]-3-pyridinyyli]metyyli]-7H-pyrido-[2,3-d]pyrimidin-7-oni ja sen farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat; 2-metyyli-4-trifluorimetyyli-5,6, 8-trihydro-8-[[βίο [2-(lH-tetratsol-5-yyli) fenyyli]-3-pyridinyyli]metyyli] - 7H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-oni ja sen farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat; 2.4- dimetyyli-5,6,8-trihydro-8- [ [5- [2- (1H-tetrat-sol-5-yyli)fenyyli]-2-pyridinyyli]metyyli]-7H-pyrido- 15 [2,3-d]pyrimidin-7-oni ja sen farmaseuttisesti hyväksyttä vät suolat; 2,4,6-trimetyyli-5,6,8-trihydro-8-[[2'-(1H-tetrat-sol-5-yyli) [ 1,1-bifenyl] -4-yyli]metyyli] -7H-pyrido-[2,3-d]pyrimidin-7-oni ja sen farmaseuttisesti hyväksyttä-20 vät suolat; 2.4- dimetyyli-8-[[2'-(lH-tetratsol-5-yyli)[1,1-bi-fenyl]-4-yyli]metyyli]-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-oni ja sen farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat.

Keksinnön mukaisessa menetelmävaihtoehdossa (d) t 25 suojaryhmä poistetaan kaavan I mukaisesta yhdisteestä,

• I

• jossa X on • · · -> m • · · · ·::= : .· : n-n 30 jossa R6 on tert-butyyli, tri-n-butyylistannyyli tai tri- f · m V · fenyylimetyyli, esim. happamalla tai emäksisellä hydrolyy-

tM

·,· : sillä tai katalyyttisellä hydrauksella.

Keksinnön mukaisessa menetelmävaihtoehdossa (e)

I « I

t'··, käytetään atsidireagenssina esimerkiksi trialkyylitinä-at-

• I I

«« • · · • « I f 9 103971 sidia tai hydratsoiinihappoa (natriumatsidi/ammoniumklori-di) kanssa.

Nämä menetelmät ja menetelmissä käytettävien tyypillisten lähtöaineiden valmistus on kuvattu tarkemmin 5 jäljempänä eri kaaviohin kohdistuvien viittauksien kera. Lähtöaineet, joita ei ole esimerkein kuvattu, ovat tekniikan tasosta tunnettuja tai ne voidaan valmistaa analogisilla menetelmillä tunnetuista lähtöaineista.

Kaavio I

10 COjEI C02Et

r3vL 'R5 R3-^ 'RS

R4 '·<0Η)η (CHjJp^^COzEt nH -- (CH2)p.

T + JT Y nh 15 r'^nh, r2AnAr, I 2 } POCI3 2 0 o3 η *!α_4 f*,

Rs—JCH,„ N e„äB Β*^>0Η).α

(CH!)p—r^N

25 r^n^r.

• · I 5 4 UM • · m · · 9 · · jossa R1, R2, R3, R4, R5, n, m, Ar1 ja Ar2 ovat kuten edellä • · « on määritelty ja p on 0.

... 3 0 Kaaviossa I β-ketoesteri 1 voidaan kondensoida ami- f · 1 ’·* ' diinin 2 kanssa emäksen, kuten natriumetoksidin, läsnä oi-

IM

· · *·’ ’ lessa alkoholiliuottimessa, kuten etanolissa, lämpötilois- - ;V; sa, jotka vaihtelevat ympäristön lämpötilasta palautus- jäähdytyslämpötilaan, jolloin saadaan pyrimidoni 3. Käsit- , 35 telemällä pyrimidonia 3 fosforioksikloridilla palautus- fill* f « « 10 103971 jäähdyttäen saadaan klooripyrimidiiniä 4. Klooripyrimidii-nin 4 reaktiolla amiinin 5 kanssa orgaanisen emäksen, kuten trietyyliamiinin, tai epäorgaanisen emäksen, kuten kaliumkarbonaatin, läsnä ollessa polaarisessa liuottimessa, 5 kuten etanolissa, butanolissa tai dimetyylisulfoksidissa, lämpötiloissa, jotka vaihtelevat ympäristön lämpötilasta i palautusjäähdytyslämpötilaan, saadaan keksinnön kohteena olevia pyrimidiinejä I. Amiini 5 voidaan valmistaa aryyli-stannaanin tai aryyliboronihapon palladiumkatalysoidulla 10 ristikytkennällä aryylibromidin tai aryylijodidin kanssa ja tätä seuraavalla amiinin funktionalisoinnilla.

Kaavio II

co2ei s 9 15 Rr A(CH,„ α el,as ACH!,,"-a,'y (OH,,,—An 8 RANAR, 7 r!AnAr, 4 2 0 B(OH).

Ar2

Pd katalyytti • · • · « «Il » · · • · · 25 R3 o ..:i1 d5 (CH)n N Ar 'Ar2 ” 1 jv.

(CHjJp—N

X JL

30 R^N^r.

Ml • · · • · · • · · • Il 9 .V. jossa R1, R2, R3, R4, R5, n, m, Ar1 ja Ar2 ovat kuten edellä .1··, on määritelty, p on 0 ja ^ on Para-bromi- tai para-jodi- ♦ 35 ryhmä.

I I M I » « · · • « · • « • · 11 103971

Kaaviossa II klooripyrimidiiniä 4 voidaan käsitellä amiinilla 7 epäorgaanisen emäksen, kuten natriumbikarbonaatin, läsnä ollessa alkoholiliuottimessa, kuten etanolissa tai n-butanolissa, esim. lämpötiloissa, jotka vaih-5 televat 80 °C:sta 150 °C:seen, jolloin saadaan bisyklinen yhdiste 8. Yhdisteen 8 reaktiolla aryyliboronihapon 9 kanssa palladiumkatalyytin läsnä ollessa esimerkiksi liuottimessa, kuten DMF:ssa tai tolueenissa, saadaan aikaan pyrimidiinejä I. Siinä tapauksessa, että Ar2:n substi-10 tuentti on nitriili, se voidaan muuttaa tetratsoliksi sta-ndardiolosuhteissa käyttämällä atsidireagenssia.

Aryyliboronihappo 9 voidaan valmistaa kuten alla esitetään: 15 , I) M|, B(OR7)j

Af*—Br -- Af*—B(OH)2 10 2)H* 9 jossa Ar2 on kuten edellä on määritelty ja R7 on alempi alkyyliryhmä, joka sisältää 1-6 hiiliatomia.

20 Täten aryylibromidia 10 voidaan käsitellä magne siumilla ja trialkyyliboraatilla aproottisessa liuottimessa, kuten THF:ssa esim. lämpötiloissa väliltä -20 - 80 °C.

I Happamalla tai emäksisellä hydrolyysillä saadaan boroni- :':': happo 9.

i i · • · · « « t « • · · • · · · • · • · · • · · • · t · · • · · • · I « • · · • · · # · · ··· • · · • · · • · • f · • · • · • f « · « « ·

• I

« · · f · · « · •

Kaavio III

12 103971 R,r<54 VNchi,.'? NH;__1s— ιοί), ^ 5 iCH^p—11 R^N^R' R^N-^R' 4

10 z—{CH2)nwA

12 '

R\ O

15 R^-A ^(CHri^i 2 R“ (CH)n Af

(CH2)p—N R^^N^R1 I

jossa R\ R2, R3, R4, n, m, Ar1 ja Ar2 ovat kuten edellä on määritelty ja Z on halogeeni.

25 Kaaviossa III klooripyrimidiini 4 voidaan muuttaa • · bisykliseksi yhdisteeksi 11 käsittelemällä sitä ammo- ”2. niakilla alkoholiliuottimessa, kuten etanolissa, lämpöti- • · · *..1 loissa, jotka vaihtelevat 100 °C:sta 150 °C:seen. Yhdis- • · · *·1 1 teen 11 alkylointi biaryyliyhdisteellä 12 voidaan suorit- 30 taa esimerkiksi emäksen, kuten NaH:n, läsnä ollessa liuot- • · · V : timessa, kuten DMF:ssa tai THF:ssa, jolloin saadaan pyri- ·«· V 1 midiinejä I. Siinä tapauksessa, että Ar^n substituentti on nitriili, se voidaan muuttaa tetratsoliksi standardiolo- • · · • · .··. suhteissa käyttämällä atsidireagenssia. Biaryyliyhdiste 12 ”1 35 voidaan valmistaa aryylistannaanin tai aryyliboronihapon • IM· • · · · 2 • · 1 • · • · 13 103971 palladiumkatalysoidulla ristikytkennällä aryylibromidin tai aryylijodidin kanssa.

Kun edellä esitetty X on tetratsoli, mainittujen tetratsolien edulliset suojaryhmät ovat niitä, joissa R6 on 5 tert-butyyli, tri-n-butyylistannyyli tai trifenyylimetyy- li. Edellä mainitut ryhmät voidaan optimaalisesti poistaa happamalla tai emäksisellä hydrolyysillä tai katalyyttisella hydrauksella, kuten T Greene kuvaa julkaisussa Protective Groups in Organic Synthesis, Wiley-Interscience 10 (1980).

Tämän keksinnön mukaisesti valmistettavat yhdisteet voivat muodostaa suoloja epäorgaanisten ja orgaanisten happojen ja emästen kanssa. Mikä tahansa näiden yhdisteiden farmaseuttisesti hyväksyttävä suola kuuluu keksinnön 15 suojapiiriin. Nämä suolat voivat olla ammoniumsuoloja, alkalimetallisuoloja, kuten natrium ja kalium, maa-alkali-metallisuoloja, kuten kalsium, disykloheksyyliamiinisuolo-ja, TRIS-suoloja ja aminohappojen suoloja, mutta suolat eivät ole rajoittuneet näihin. Epäorgaanisten ja orgaanis-20 ten happojen, kuten HCl:n, HBr:n, maleiinihapon, fumaari- hapon suoloja voi myös muodostua. Tämän keksinnön mukaisesti valmistettavat yhdisteet voidaan myös muuttaa N-ok-: " sideiksi käsittelemällä peroksidoivalla aineella, esim.

f ( i V ' vetyperoksidilla tavanomaisin keinoin.

Il I

• 25 Esillä olevan keksinnön mukaisesti valmistettuja >t’!‘ yhdisteitä voidaan käyttää farmaseuttisina koostumuksina, jotka sisältävät tämän kaavan I mukaista yhdistettä ja farmaseuttisesti hyväksyttävän kantajan. Erityisesti niitä * käytetään antihypertensiivisinä farmaseuttisina koostumuk-30 sinä, jotka sisältävät antihypertiivisesti tehokkaan mää- • · · rän tämän keksinnön mukaisesti valmistettavaa yhdistettä • ♦ · ja farmaseuttisesti hyväksyttävän kantajan.

• · \\1 Koostumukset soveltuvat edullisesti oraaliseen an- • · · !mi! nosteluun. Kuitenkin niitä voidaan soveltaa muihin annos- • f I I I · • t

· · t · t « I

• · 14 103971 telumuotoihin, esimerkiksi sydämen vajaatoiminnasta kärsivien potilaiden parenteraaliseen annosteluun.

Jotta saavutetaan annostelun luotettavuus, on edullista, että koostumus on yksikköannosmuodossa. Sopiviin 5 yksikköannosmuotoihin sisältyvät tabletit, kapselit ja jauheet pienissä pusseissa tai lääkepulloissa. Tällaiset yksikköannosmuodot voivat sisältää 0,1 - 100 mg kaavan I mukaista yhdistettä, edullisesti 1-50 mg. Kaavan I mukaiset yhdisteet voidaan annostella oraalisesti annoksen 10 vaihdellessa välillä 0,01 - 100 mg/kg tai edullisesti annoksen vaihdellessa välillä 0,1 - 10 mg/kg. Tällaisiä koostumuksia voidaan annostella 1-6 kertaa päivässä, tavallisimmin 1-4 kertaa päivässä. Yhdisteitä voidaan annostella myös parenteraalisessa annostelumuodossa.

15 Koostumukset voidaan formuloida tavanomaisten lisä aineiden, kuten täyteaineen, disintegroivan aineen, sito-jan, voiteluaineen, aromiaineen tai vastaavien kanssa. Ne formuloidaan tavanomaiseen tapaan, esimerkiksi samaan tapaan kuin tunnetut antihypertensiiviset aineet, diureetit, 20 β-salpaajat tai ACE-inhibiittorit.

Yhdisteet, joita käytetään farmaseuttisissa koostumuksissa terapeuttisessa käytössä ja hoitomenetelmissä : ovat edullisesti niitä, joissa X on C02H, CN tai • f · • · · N.

25 -(Oja

N-N

• · ·

j Yhdisteiden suuri affiniteetti angiotensiini II

• · · reseptoreihin vahvistettiin rotan adrenaalireseptorisitou- * · · • tumiskokeella mittaamalla reseptorin radioaktiiviseksi 30 leimatun angiotensiinin II korvautuminen, kuvattuna seu- * · · V* raavasti: Kalvon valmistus: 1. Nukuta urospuoliset • · · V * Sprague-Dawley-rotat, ruumiinpaino 300 - 400 g, C02:lla ja tapa kaulan sijoiltaanpanolla. 2. Leikkele lisämunuaiset • * ,···. ja pidä ne jääkylmässä ruokosokeripuskurissa (0,2 M ruoko- • _ 35 sokeri, 1 mM EDTA, 10 mM Trizma-emäs, pH = 7,2) . 3. Poista

4 I

4 4 4 « 4 15 103971 medulla musertamalla. Paloittele cortex, huuhdo ja homogenisoi jäähdytetyssä hiotusta lasista valmistetussa kudos-myllyssä yhdessä 15 ml:n ruokosokeripuskurin kanssa. 4. Sentrifugoi 3 000 x g:ssa 10 minuuttia. (Sorvali RCSC 5 -sentrifugi, SS34-roottori 6 200 rpm) . Kaada sakan yläpuolella oleva neste harson läpi. 5. Sentrifugoi yhdistetyt-tyjä sakan yläpuolella olevia nesteitä 12 000 x g:ssa 13 minuuttia. (Beckman ultrasentrifugi, 80Ti roottori, 13 000 rpm). 6. Sentrifugoi sakan yllä olevaa nestettä 10 vaiheesta 5 10 200 x g:ssa 60 minuuttia. (Beckman-ultrasentrifugi, 80Ti-roottori, 38 200 rpm). Kaikki vaiheet suoritetaan lämpötilassa 4 °C. 7. Suspendoi pelletti uudelleen 0,5 ml:aan koepuskuria (50 mM Tris HCl, 5 mM MgCl2, 0,2 % BSA (proteaasivapaata) , pH = 7,4, 25 °C) .

15 8. Säilytä jäässä. 9. Määritä kalvoproteiini Lowryn ja

Bradfordin kokeella BSA:n ollessa standardina. Sitoutumis-koe: (Koe suoritetaan kolminkertaisena, 12 x 75 mm muovi sissa koeputkissa tai 96-koloisessa levyssä (lopullinen tilavuus 0,25 ml). 1. Lisää 140 μΐ.-a koepuskuria. 2. Lisää 20 10 μΐ^ kylmää A II:ta (jolloin saadaan loppukonsentraa- tioiksi ΙΟ'10 - 10'7 M standardikäyrälle ja 10'4 M ei-spesifi-selle sitoutumiselle), yhdisteitä (esim. loppukonsentraa- i < : " tioksi 25 ja 100 μΜ tai 1 μΜ, 10 nM ja 100 nM) 50-%:isessa ' DMSO: ssa tai 50-%:ista DMS0:a kontrollina. 3. Lisää 50 μΐ

• f I

\: 25 kalvosuspensiota (esim. 10 μg proteiiniä) . 4. Inkuboi en- ..II* sin 30 minuuttia 25 °C:ssa. 5. Lisää 50 μΐ 125I-A II:ta, joka on valmistettu kuten jäljempänä esitetään (loppukon- ·*:*: sentraatio = 1 nM) . 6. Inkuboi 35 minuuttia 25 °C:ssa.

» 7. Lopeta inkubointi lisäämällä 1 ml:a jääkylmää puskuria 3 0 (koepuskuri ilman BSA:ta) . Suodata GF/C suodattamilla so- • · ,··.·, luharvesterillä (suodattimet on upotettu ensin koepusku- a · riin, joka sisältää 1 % polyetyleeni-imiiniä). 9. Huuhdo • · V.: koeputket 3x5 ml :11a kylmää puskuria (koepuskuri ilman • « · BSA:ta) . 10. Leikkaa ja pane suodatinlevyt koeputkiin ja 35 laske gammalaskimella 1 minuutin ajan. 125I-A II:n valmis- • · « a a 9 · • · • · 16 103971 tus: Säädä 125I-A II:n, joka on ostettu New England Nuc- learilta ominaisaktiivisuus 500 μΟϊ/ηηηοΙ:ksi lisäämällä kylmää A II:ta veteen. 1. Laske kuuman ja kylmän A II:n määrät, jotka tarvitaan laimennusten tekoon. Valmista ali-5 kvootti, sulje tiukasti ja varastoi jäätyneenä, kunnes tarvitaan. 2. Laske A II :n (kuuman ja kylmän) kokonaiskon-sentraatio laimennuksen jälkeen. 3. Koepäivänä sulata jäinen alikvootti ja säädä tilavuus siten, että saadaan kon-sentraatioksi 5 pmol/ml (tai 0,25 pmol/50 μΐ) koepuskuril-10 la (+ proteaasi-vapaa BSA) . Jotta saadaan 1 nM:n 125I-A II :n loppukonsentraatio, lisää 50 μΐ-.a (tai 0,25 pmol) koeputkea kohti loppukonsentraatioon 250 μΐ-.a. Näiden sitoutu-miskokeiden tulokset esitetään koeyhdisteiden inhibitio-konsentraationa, joka on välttämätön, että saavutetaan 15 viidenkymmenen prosentin radioaktiiviseksi leimatun A II :n korvautuminen sen reseptorista (10¾) tai reseptoriin sitoutuneen A II :n korvautumisprosenttina koeyhdisteen 10'8 M:n konsentraatiossa (% I). Kaikki esimerkit, joihin tässä keksinnössä on viitattu osoittivat merkittävää A II :n si-20 toutumisen estoa tässä kokeessa. Tyypillisesti näiden yhdisteiden ICso oli tässä kokeessa pienempi tai yhtä suuri kuin 50 μΜ.

Yllä selostetulla tavalla suoritetussa kokeessa

I I I

' saatiin kaavan I mukaisia yhdisteitä edustaville yhdis- « « i ·1 .’ 25 teille seuraavat tulokset.

··♦ ···· • · « 1 · * ·· • · • •f • » · « « « t ·« » # ♦ · • 4 · ··· « · · • · · • ♦ f · 1 I < ( I ·

I · t I

• · 1 « I 9 « « f I · a a i a « a a 103971 17

Yhdiste esi- A II -reseptori3 A II infusioitu merkistä IC50 rottab 1 63,0 nM -41 % (240 min) 2 66,0 nM -55 % (60 min) 5 3 5,2 nM -97 % (60 min) 4 24,6 nM -68 % (240 min) 5 24,3 nM -16 % (15 min) 6 94,9 nM -41 % (15 min) 7 49,4 nM -34 % (15 min) 10 8 3,2 nM -63 % (30 min) 9 6,5 nM -57 % (60 min) a) IC50 [125] angiotensiini II:n spesifisen sitoutumisen rotan maksan membraaniin (n = 3) inhibitiolle b) maksimaalinen prosenttimuutos angiotensiini II :n tukemassa 15 keskimääräisessä valtimoverenpaineessa (aikana, min), kun oli annettu antraduodenaalisesti 3 mg/kg (n = 3)

Edellä annetut tulokset osoittavat, että kaikilla yhdisteillä, ts. sekä spesifisillä pyrrolopyrimidiineillä että pyridopyrimidiineillä, on samanlainen aktiivisuus.

20 Kykynsä mukaisesti vastustaa angiotensiini II:a tä män keksinnön mukaisesti valmistettavat yhdisteet osoitta-. vat omaavansa antihypertensiivisen vaikutuksen seuraavassa A II-infuusioituneessa rottamallissa. Menettely: Rotat ‘ nukutettiin Dial-Uretaanilla (0,60 ml/kg, ip) ja henkitor- : 25 vi kanyloitiin PR 240:llä. Joko yksi reisivaltimo ja mo- lemmat reisilaskimot tai päänvaltimo ja vastaava kaulalas-V·· kimo kanyloitiin PE 50:llä. Jos kaulalaskimo kanyloitiin, :T: kaksi kanyyliä asetettiin yhteen laskimoon. Pohjukais suolen alkuosa (etäisempi osa vatsasta) kanyloitiin PE .’j·. 30 50:llä pienen keskiviivan aukaisun kautta. Valtimopaine ja m

Vj*. pulssi määritettiin valtimokanyylillä. Valtimopaineen an- • ♦ · nettiin stabiloitua 10 - 15 minuuttia leikkauksen jälkeen. "V Sitten aiheutettiin hermosolun salpaus mekamyyliamiinin 3 « « i mg/kg:n (1 ml/kg:a 3 mg/kg:n liuosta) intravenöösillä an-35 nostelulla. Hermosolun salpaus aiheuttaa valtimopaineen 18 103971 laskun noin 50 mmHg:llä. Mekamyyliamiinia annetaan joka 90 minuutti läpi kokeen jälkiosan. Sitten aloitetaan A Il-in-fuusio toiseen laskimokanyyliin nopeudella 0,25 μg/kg min (9,6 μΐ/min). A II-infuusio palauttaa valtimopaineen hiu-5 kan kontrollitason yläpuolelle. Kun valtimopaine on stabiloitunut A II-infuusiolla perusarvot keskimääräiselle val-timopaineelle (MAP) ja pulssille mitataan. Metyylisellu-loosaan suspendoitua koeyhdistettä annostellaan sitten pohjukaissuolen kanyylin kautta 0,1, 3 tai 30 mg/kg tila-10 vuudessa 1 ml/kg. Keskimääräisen valtimopaineen ja pulssin arvot taulukoidaan 15, 30, 60, 90, 120, 150, 180, 210 ja 240 minuutin kuluttua koeyhdisteen annostelusta. Esimerkiksi esimerkin 1 tuote, jota annosteltiin 3 mg/kg id alensi A II:sta riippuvaista verenpainetta keskimäärin 15 41 % neljä tuntia annostelun jälkeen.

Kuten edellä on kuvattu ovat tämän keksinnön mukaisesti valmistettavat yhdisteet tehokkaita A II-antagonis-teja ja sen vuoksi ne ovat käyttökelpoisia hypertension hoidossa. Ne ovat myös arvokkaita akuutin ja kroonisen 20 kongestiivisen sydämen toimintavajauksen, primaarisen ja sekundaarisen keuhkohyperaldosteronismin, sekundaarisen aldosteronismin, primaarisen ja sekundaarisen keuhkohyper- « ( : " tension, hypertension, joka liittyy oraalisen ehkäisyn • « i V ' käyttöön, verisuonten sairauksien, kuten migreenin, Ray- i · ; 25 naud'in taudin, luminaalisen liikakasvun ja valtimon hau- « φ>*·* rauskovetustautiin liittyvien prosessien, munuaistautien :\j tai muiden sairauksien tai hoitojen munuaiskomplikaatioi- ·*·*· den, kuten proteiiniurian, munuaistaudin, glomerulaarisen kovettumisen, sclerododerman, diabeettisen munuaissairau-.···, 30 den, loppuvaiheen munuaistaudin, munuaissiirrännäisterapi- • · t l··' an ja muiden sairauksien hoitomenettelyssä. Nämä yhdisteet • « f ovat myös käyttökelpoisia hoidettaessa vasemman kammion • ♦ toimintahäiriötä, diabeettista verkkokalvon sairautta, Alzheimerin tautia, tajunnan sisällön lisäämisessä, kohon-35 neen silmänsisäisen paineen hoidossa ja verkkokalvon ve- r r « f « 19 103971 renvirtauksen lisäämisessä. Nämä yhdisteet ovat myös hyödyllisiä masennuksenvastaisina ja anksiolyyttisinä aineina verisuoniplastilkkaa seuraavan restenoosiksen ehkäisyssä ja hoidossa. Tämän keksinnön mukaisesti valmistettavien 5 yhdisteiden käyttö näissä ja vastaavissa sairauksissa on ilmeistä alan ammattimiehelle.

Keksinnön mukaista menetelmää kuvataan seuraavissa kokeellisisssa esimerkeissä. Nämä esimerkit on esitetty kuvaamaan keksintöä, eikä niitä tulee tulkita keksintöä, 10 joka on esitetty mukaan liitetyissä vaatimuksissa rajoittavina.

Esimerkit Esimerkki 1 2,4-dimetyyli-5,7-dihydro-7- [ [2' - (lH-tetratsol-5-yyli) [1,1-15 bifenyl]-4-yyli]metyyli]-6H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-6-oni Vaihe 1) Etyyli-(2,6-dimetyyli-3H-pyrimidin-4-on-5-yyli)asetaatti

Seosta, joka sisälsi NaOEt:a (0,060 mol) EtOH:ssa (valmistettu 1,6 g:sta natriumia 100 ml:ssa EtOH:a), aset-20 amidiinihydrokloridia (6,5 g, 0,069 mol) ja dietyyli-2-asetyylisukkinaattia (15,0 g, 0,060 mol), kuumennettiin , palautusjäähdyttäen 16 tuntia. Seos väkevöitiin, laitet- " tiin veteen (50 ml) ja tehtiin happamaksi 2 N:11a HCl:lla V ‘ (12 ml). Vesipitoinen seos uutettiin CH2Cl2:lla, ja uutteet

* » I

! 25 kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin. Trituroimalla eetterillä » saatiin 3,9 g (27 %) yhdistettä valkoisena kiinteänä ai-:\j neena, sp. 175 - 177 °C.

'H-NMR (DMSO-d6) : dl,10 (t, 3H) , 2,15 (s, 3H) , 2,25 (s, t 3H), 3,20 (s, 2H), 4,05 (q, 2H), 12,20 (br. s, 1H).

30 Analyysi C10H14N2O3: lie :

Laskettu: C, 57,13; H, 6,71; N, 13,32 • · ·

Saatu: C, 57,10; H, 6,63; N, 13,25 * * f c · « < « « « « · · • · • 1 a « • · 20 103971

Vaihe 2) Etyyli-(4-kloori-2,6-dimetyylipyrimidin-5-yyli)asetaatti

Etyyli- (2,6-dimetyyli-3H-pyrimidin-4-on-5-yyli) ase-taatin (1,13 g, 5,4 mmol), fosforioksikloridin (10 ml) ja 5 N,N-dimetyylianiliinin (1,3 ml, 10,3 mmol) seosta kuumen nettiin palautusjäähdyttäen 3,5 tuntia. Reaktioseos väke-vöitiin, kaadettiin jäähän, ja muodostunut seos uutettiin eetterillä. Yhdistetyt uutteet pestiin vedellä, kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin, jolloin saatiin 1,2 g (98 %) tuo- 10 tetta keltaisena öljynä.

Ή-NMR (DMSO-d6) : d 1,20 (t, 3H) , 2,20 (s, 3H) , 2,60 (s, 3H), 3,80 (s, 2H), 4,10 (q, 2H).

Vaihe 3) 2,4-diinetyyli-5,7-dihydro-7-[ [2' - (lH-tet-ratsol-5-yyli) [1,1-bifenyl]-4-yyli]metyyli]-6H-pyrrolo-15 [2,3-d]pyrimidin-6-oni

Etyyli- (4-kloori-2,6-dimetyylipyrimidin-5-yyli)ase-taatin (0,55 g, 2,4 mmol), 5-[(4'-aminometyyli)[1,1-bifen-2-yyli]]-lH-tetratsolihydrokloridin (0,69 g, 2,4 mmol), trietyyliamiinin (0,73 g, 7,2 mmol), natriumasetaatin 20 (0,60 g, 7,2 mmol) ja EtOH:n (14 ml) seosta kuumennettiin palautusjäähdyttäen 5 päivää. Seos väkevöitiin, laitettiin veteen ja uutettiin CHCl3:lla. Uutteet kuivattiin (MgS04) , i / t väkevöitiin, ja raakatuote puhdistettiin "flash"-kromato- lii |;’t' grafisesti (10 % MeOH/CHCl3) , jolloin saatiin keltainen

III

• ·' 25 kiinteä aine. Trituroimalla 10-%:isella Et0H/Et20:11a ja M» uudelleenkiteyttämällä EtOH.-sta saatiin aikaan 0,17 g • · (17 %) tuotetta valkoisena kiinteänä aineena, sp. 228 - :T: 229 °c.

'H-NMR (DMSO-dg) : δ 2,29 (s, 3H) , 2,47 (s, 3H) , 3,67 (s, 30 2H) , 4,83 (s, 2H) , 7,05 (d, J=8,1 Hz, 2H) , 7,24 (d, J=8,1 Hz, 2H) , 7,57 (m, 2H) , 7,63 (m, 2H) .

• .·, Analyysi C22H19N70: lie :

Laskettu: C, 66,48; H, 4,82; N, 24,67

Saatu: C, 66,09; H, 4,84; N, ei määritetty.

' I I I I

I * I f I I

21 103971

Esimerkki 2 5,7-dihydro-2-metyyli-7-[ [2' -(lH-tetratsol-5-yyli)-[1,1-bifenyl]-4-yyli]metyyli]-4-(trifluorimetyyli)-6H-pyr-rolo[2,3-d]pyrimidin-6-oni 5 Vaihe 1) Etyyli-(2-metyyli-6-trifluorimetyyli-3H- pyrimidin-4-on-5-yyli)asetaatti

Seosta, joka sisälsi NaOEtra (0,074 mol) EtOHrssa (valmistettu 1,7 g:sta natriumia 75 ml:ssa EtOH:a), aset-amidiinihydrokloridia (3,5 g, 0,037 mol) ja dietyyli-2-10 trifluoriasetyylisukkinaattia (10,0 g, 0,037 mol), kuumen nettiin palautusjäähdyttäen 20 tuntia. Seos väkevöitiin, laitettiin veteen (50 ml) ja tehtiin happamaksi pH:hon 4 väkevällä HCl:lla ja uutettiin EtOAc:lla. Uutteet pestiin suolaliuoksella, kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin, jolloin 15 saatiin öljyinen kiinteä aine. Trituroimalla eetteri/hek-saanilla saatiin 2,63 g (27 %) tuotetta valkoisena kiinteänä aineena. Analyyttinen näyte uudelleenkiteytettiin eetteri/heksaanista, sp. 108 - 110 °C.

^-NMR (DMSO-d6) : δ 1,25 (t, J=7,2 Hz, 3H) , 2,51 (s, 3H) , 20 3,72 (s, 2H), 4,17 (q, J=7,2 Hz, 2H), 13,25 (br. s, 1H).

Analyysi CioHuFjNAiHe:

Laskettu: C, 45,46; H, 4,20; N, 10,60 « · :fi" Saatu: C, 45,43; H, 4,18; N, 10,53.

• · t '* ' Vaihe 2) Etyyli- (4-kloori-2-metyyli-6-trifluorime- • * « : '.· 25 tyylipyrimidin-5-yyli) asetaatti

Etyyli- (2-metyyli-6-trifluorimetyyli-3H-pyrimidin- 4-on-5-yyli) asetaatin (2,50 g, 9,46 mmol) , N,N-dimetyy-lianiliinin (3 tippaa) ja fosforioksikloridin (35 ml) • seosta kuumennettiin palautusjäähdyttäen 4,5 tuntia. Seos 30 väkevöitiin, jäähdytettiin ja siihen lisättiin jäävettä.

• · · : Kiinteää KOH:a lisättiin seoksen neutraloimiseksi, ja seos • · · ’ • « f uutettiin eetterillä. Yhdistetyt uutteet pestiin suola- * · liuoksella, kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin, jolloin saa-: : tiin 2,61 g (98 %) tuotetta keltaisena öljynä.

f ' r i < l 22 103971 ’H-NMR (DMSO-d6) :δ 1,24 (t, J=7,2 Hz, 3H) , 2,77 (s, 3H) , 3,93 (s, 2H), 4,19 (q, J=7,2 Hz, 2H).

Vaihe 3) 5,7-dihydro-2-metyyli-7-[[2'-(lH-tetrat- sol-5-yyli) [1,1-bifenyl]-4-yyli]metyyli]-6H-pyrrolo [2,3-5 d]pyrimidin-6-oni

Etyyli-(4-kloori-2-metyyli-6-trifluorimetyylipy-rimidin-5-yyli)asetaatin (848 g, 3,00 mmol), 5-[(4'-amino-metyyli)[1,l-bifen-2-yyli]]-1H-tetratsolihydrokloridin (863 g, 3,00 mmol), trietyyliamiinin (1,25 ml, 9,00 mmol), 10 natriumasetaatin (738 g, 9,00 mmol) ja EtOH:n (10 ml) seosta kuumennettiin palautusjäähdyttäen 16 tuntia. Seos väkevöitiin, laitettiin 1 N:seen NaOH:iin ja uutettiin eetterillä. Vesipitoinen faasi tehtiin happamaksi pH:hon 3 väkevällä HCl:lla, ja tummanruskea sakka otettiin talteen 15 suodattamalla. Puhdistamalla "flash"-kromatografisesti (kaksi kertaa, 5 - 10 % MeOH/CH2Cl2) saatiin ruskeaa vaahtoa. Kiteyttämällä eetteri/heksaanista saatiin 109 g (8 %) tuotetta valkoisena kiinteänä aineena, sp. 195 - 197 °C. ‘H-NMR (DMSO-d6) : δ 2,59 (s, 3H) , 3,92 (s, 2H) , 4,90 (s, 20 2H), 7,05 (d, J=8,l Hz, 2H), 7,28 (d, J=8,l Hz, 2H), 7,52 (d, J=6,2 Hz, 1H), 7,57 (d, J=7,4 Hz, 1H), 7,66 (m, 2H).

IR (KBr, cm’1) : 1750 (C=0) .

Analyysi C22H16F3N70: lie:

Laskettu: C, 58,54; H, 3,57; N, 21,72 25 Saatu: C, 58,58; H, 3,71; N, 21,44.

..11' Esimerkki 3 :#\j 2,4-dimetyyli-5,6,8-trihydro-8-[[2'-(1H-tetratsol- 5-yyli) [1,1-bifenyl] -4-yyli]metyyli] -7H-pyrido [2,3-d] pyri-midin-7-oni 30 Vaihe 1) Etyyli-3-(2,6-dimetyyli-3H-pyrimidin-4-on- • · · .···. 5-yyli)propionaatti • · ·

Seosta, joka sisälsi NaOEt:a (0,069 mol) EtOH:ssa (valmistettu 1,6 g:sta natriumia 35 ml:ssa EtOH:a), aset-amidiinihydrokloridia (3,3 g, 0,035 mol) ja dietyyliase-35 tyyliglutaraattia (8,0 g, 0,035 mol), kuumennettiin palau- 23 103971 tusjäähdyttäen 22 tuntia. Seos väkevöitiin, laitettiin veteen ja tehtiin happamaksi pH:hon 4 väkevällä HCl:lla ja uutettiin EtOAc:lla. Uutteet pestiin suolaliuoksella, kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin. Trituroimalla heksaanilla 5 saatiin 4,0 g (51 %) tuotetta valkoisena kiinteänä aineena. Analyyttinen näyte kiteytettiin eetteri/heksaanista, sp. 114 - 116 °C.

'H-NMR (DMSO-d6) : δ 1,22 (t, J=7,2 Hz, 3H) , 2,33 (s, 3H) , 2,40 (s, 3H), 2,54 (t, J=8,0 Hz, 2H) , 2,81 (t, J=8,0 Hz, 10 2H), 4,10 (q, J=7,2 Hz, 2H).

Analyysi Ο,,Η,^Ο^: lie :

Laskettu: C, 58,91; H, 7,19; N, 12,49 Saatu: C, 59,18; H, 7,25; N, 12,20.

Vaihe 2) Etyyli-3-(4-kloori-2,6-dimetyylipyrimidin-15 5-yyli)propionaatti

Etyyli-3-(2,6-dimetyyli-3H-pyrimidin-4-on-5-yyli)-propionaatin (3,87 g, 0,017 mol), fosforioksikloridin (40 ml) ja N,N-dimetyylianiliinin (10 tippaa) seosta kuumennettiin palautusjäähdyttäen 2 tuntia. Seos väkevöitiin, 20 jäähdytettiin, ja siihen lisättiin jäävettä. Kiinteää KOH:a lisättiin seoksen pH:n säätämiseksi 6:ksi ja seos . uutettiin eetterillä. Uutteet kuivattiin (MgS04) ja väke-

« I I

voitiin, jolloin saatiin 2,95 g (72 %) tuotetta ruskeana öljynä.

'· 25 'H-NMR (DMSO-d6) : δ 1,24 (t, J=7,2 Hz, 3H) , 2,54 (s, 3H) , 2,56 (t, J=8,1 Hz, 2H) , 2,81 (s, 3H) , 3,04 (t, J=8,l Hz, */: 2H) , 4,14 (q, J=7,2 Hz, 2H) .

V : Vaihe 3) 2,4-dimetyyli-5,6,8-trihydro-8-[[2'-(1H- tetratsol-5-yyli)[1,1-bifenyl]-4-yyli]metyyli]-7H-pyrido-3 0 [2,3-d]pyrimidin-6-oni

Etyyli-3- (4-kloori-2,6-dimetyylipyrimidin-5-yyli) -propionaatin (1,27 g, 5,21 mmol) , 5-[ (4'-aminometyyli) - 1 ' [1,l-bifen-2-yyli]]-lH-tetratsolihydrokloridin (1,50 g, : 5,21 mmol), trietyyliamiinin (2,2 ml, 15,64 mmol), nat- 35 riumasetaatin (1,28 g, 15,64 mmol) ja EtOH:n (20 ml) seos-

’ < I

< < 24 103971 ta kuumennettiin palautusjäähdyttäen 5 päivää. Seos jäähdytettiin ja suodatettiin liukenemattoman aineen poistamiseksi. Suodos tehtiin happamaksi pH:hon 4 metanolisel-la HCl:lla ja väkevöitiin. Puhdistamalla "flash"-kromato-5 grafisesti (10 % MeOH/CH2Cl2) ja kiteyttämällä EtOH/eette-ristä saatiin 91 g tuotetta valkoisena kiinteänä aineena, sp. 197 - 199 °C.

'H-NMR (DMSO-d6) : δ 2,35 (s, 3H) , 2,42 (s, 3H) , 2,72 (t, J=7,2 Hz, 2H), 8,87 (t, J=7,2 Hz, 2H), 5,17 (s, 2H), 6,99 10 (d, J=8,2 Hz, 2H), 7,18 (d, J=8,2 Hz, 2H), 7,54 (m, 2H), 7,65 (m, 2H).

IR (KBr, cm'1) : 1710 (C=0) .

Analyysi C23H21N70: lie :

Laskettu: C, 67,14; H, 5,14; N, 23,83 15 Saatu: C, 67,38; H, 5,39; N, 24,19.

Yhdiste 2,4-dimetyyli-5,6,8-trihydro-8-[[2'-(1H-tetratsol-5-yyli)[1,1-bifenyl]-4-yyli]metyyli]-7H-pyrido-[2,3-d]pyrimidin-7-oni voidaan valmistaa myös seuraavalla vaihtoehtoisella menetelmällä, joka on esitetty kaaviossa 20 II.

Vaihe 1) 2,4-dimetyyli-5,6,8-trihydro-8-[(4-bromi-fenyyli)metyyli]-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-oni

Etyyli-3-(4-kloori-2,6-dimetyylipyrimidin-5-yyli)-

< I

propionaatin (8,4 g, 0,035 mol), 4-bromibentsyyli amiini-' 25 hydrokloridin (8,5 g, 0,038 mol), NaHC03:n (5,8 g, 0,070 mol) ja n-BuOH:n (75 ml) seosta kuumennettiin palautus- • · jäähdyttäen 48 tuntia. Seos laimennettiin EtOAc.-lla (30 !ti : ml) ja pestiin vedellä (100 ml) , 10-%:isella vesipitoisel la HOAc:lla (50 ml), vedellä (100 ml), kyllästetyllä vesi-30 pitoisella NaHC03:lla (2 x 100 ml), kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin, jolloin saatiin keltainen kiinteä aine. Tri-.·, turoimalla heksaanilla (50 ml) saatiin 8,3 g (69 %) tuo- r i · tetta harmahtavana kiinteänä aineena, sp. 123 - 124 °C.

i f I I « « « f « I i a a a ( i 25 103971 ’H-NMR (DMSO-d6) :δ 2,34 (s, 3H) , 2,42 (s, 3H) , 2,71 (t, J=7,9 Hz, 2H), 2,86 (t, J=7,9 Hz, 2H), 5,13 (s, 2H), 7,22 (d, J=8,3 Hz, 2H), 7,44 (d, J=8,3 Hz, 2H).

Vaihe 2) 5-(2-bromifenyyli)-1H-tetratsoli 5 2-bromibentsonitriilin (10,0 g, 0,055 mol), nat- riumatsidin (3,9 g, 0,060 mol), ammoniumkloridin (3,2 g, 0,060 mol) ja DMF:n (90 ml) seosta kuumennettiin 100 °C:n lämpötilassassa 18 tuntia. Seos väkevöitiin, laitettiin veteen ja tehtiin emäksiseksi (pH 9) 1 N: 11a KOH-.lla. Ve-10 sipitoinen seos uutettiin eetterillä (erotettu) ja tehtiin happamaksi 2 N:11a HCl:lla. Sakka otettiin talteen suodattamalla, jolloin saatiin 9,1 g (73 %) tuotetta harmahtavana kiinteänä aineena, sp. 179 - 181 °C.

’H-NMR (DMSO-d6) : δ 7,56 (m, 2H) , 7,69 (dd, J=7,0 Hz, 1H) , 15 7,86 (dd, J=7,6 Hz, 1,3 Hz, 1H).

Vaihe 3) 1-tert-butyyli-5-(2-bromifenyyli)-lH-tet- ratsoli 5-(2-bromifenyyli)-lH-tetratsolin (7,9 g, 0,035 mol) liuokseen trifluorietikkahapossa (35 ml) lisättiin 20 t - BuOH: a (5,2 g, 0,070 mol) ja H2S04:a (1,0 ml, 0,0175 mol). 18 tunnin kuluttua liuos väkevöitiin ja jäännös laitettiin EtOAcriin. Seos pestiin vedellä, 2,5 N:lla NaOH:lla, vedellä, kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin. Puh- » « « / distamalla "flash"-kromatografisesti (20 % EtOAc/heksaani) t « < ·* ·' 25 saatiin 6,6 g (67 %) tuotetta vaalean keltaisena öljynä.

lH-NMR (DMSO-d6) δ 1,74 (s, 9H) , 7,55 (m, 2H) , 8,06 (m, 0*1 2H) .

ϊ.ϊ · Vaihe 4) 2-[ (1-tert-butyyli)-lH-tetratsol-5-yyli] - fenyyliboronihappo 30 Kuiviin Mg-lastuihin (76 mg, 3,13 mmol) THF:ssa "*·*· (1 ml) lisättiin 1-tert-butyyli-5-(2-bromifenyyli)-lH-tet- ratsolin (733 mg, 2,61 mmol) liuos THF:ssa (1,5 ml).

* * ·

Seokseen lisättiin 1,2-dibromietaania (20 μΐ) ja seosta lämmitettiin hieman lämpöpumpulla. 5 minuutin kuluttua •: ·; 35 seokseen lisättiin tri-isopropyyliboraattia (564 mg, • · t « t r c 26 103971 3,00 mmol), ja seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 23 tuntia. Seokseen lisättiin jäätä ja 0,5 N:sta HCl:a (7 ml) ja seosta sekoitettiin 5 minuuttia. Seos uutettiin eetterillä ja yhdistetyt uutteet uuttettiin 1 N:lla KOH:lla 5 (10 ml). Vesipitoiset uutteet suodatettiin ja tehtiin hap- pamiksi pH:hon 3 2 N:11a HCl:lla. Sakka otettiin talteen suodattamalla, jolloin saatiin 306 g (48 %) tuotetta harmahtavana kiinteänä aineena, sp. 112 - 115 °C.

'H-NMR (DMSO-d6) δ 1,72 (s, 9H) , 7,46 (m, 2H) , 7,90 (m, 10 2H).

Vaihe 5) 2,4-dimetyyli-5,6,8-trihydro-8-[[2'-(1- tert-butyyli-lH-tetratsol-5-yyli)[1/1-bifenyl]-4-yyli]metyyli] -7H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-oni 2,4-dimetyyli-5,6,8-trihydro-8- [ (4-bromif enyyli) -15 metyyli]-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onin (1,08 g, 3,43 mmol),2-[(1-tert-butyyli)-lH-tetratsol-5-yyli]fenyy-liboronihapon (844 mg, 3,12 mmol), trietyyliamiinin (1,30 ml, 9,36 mmol), tetrakis(trifenyylifosfiini)palladiumin (108 mg, 0,094 mmol) ja DMF:n (15 ml) seosta kuu-20 mennettiin 100 °C:ssa 22 tuntia. Seos väkevöitiin, laitettiin CHCl3:iin ja pestiin suolaliuoksella. Orgaaninen faasi kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin. Puhdistamalla "flash"- f ( e kromatograf isesti (60 % EtOAc/heksaani) saatiin 1,05 g

( 1 I

j;'/ (66 %) tuotetta keltaisena vaahtona.

25 ’H-NMR (DMSO-d6) δ 2,35 (s, 3H) , 2,43 (s, 3H) , 2,71 (t, J=7,1 Hz, 2H) , 2,85 (t, J=7,l Hz, 2H9, 5,18 (s, 2H) , 6,97 \’·! (d, J=8,2 Hz, 2H) , 7,18 (d, J=8,2 Hz, 2H) , 7,44 (dd, V*S J=7,3 Hz, 1,3 Hz, 1H) , 7,55 (m, 2H) , 7,76 (dd, J=7,5 Hz, 1,3 Hz, 1H).

·':*· 30 Vaihe 6) 2,4-dimetyyli-5,6,8-trihydro-8-[ [2' - (1H- tetratsol-5-yyli) [1,1-bifenyl] -4-yyli]metyyli] -7H-pyrido- • .·. [2,3-d]pyrimidin-7-oni ( i · *;*;* 2,4-dimetyyli-5,6,8-trihydro-8 - ( [2 ' - (1-tert-butyy- li-lH-tetratsol-5-yyli) [1,1-bifenyl]-4-yyli] metyyli]-7H- ·;··· 35 pyrido [2,3-d] pyrimidin-7-onin (200 mg, 0,428 mmol), metaa- • · · i · « 27 103971 nisulfonihapon (280 μΐ, 4,28 mmol) ja tolueenin (4 ml) seosta kuumennettiin palautusjäähdyttaen 18 tuntia. Seos väkevöitiin, ja vettä (2 ml) ja 1 N:sta KOH:a (4,5 ml) lisättiin seokseen, jolloin saatiin liuoksen pH:ksi 8. Seos 5 uutettiin EtOAcrlla reagoimattomien lähtöaineiden poistamiseksi, ja vesipitoinen faasi tehtiin happamaksi pH:hon 5 1 N:11a HCl:lla, jolloin saatiin kumimainen sakka. Sakka uutettiin EtOAc:lla, ja liuos kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin, jolloin saatiin väritön öljy. Trituroimalla ase-10 toni/eetterillä saatiin 70 mg (40 %) tuotetta valkoisena kiinteänä aineena, sp. 197 - 198 °C.

'H-NMR (DMS0-d6) b 2,35 (s, 3H) , 2,42 (s, 3H) , 2,72 (t, J=7,2 Hz, 2H), 2,87 (t, J=7,2 Hz, 2H), 5,17 (s, 2H), 6,99 (d, J=8,2 Hz, 2H), 7,18 (d, J=8,2 Hz, 2H), 7,54 (m, 2H), 15 7,65 (m, 2H).

IR (KBr, cm'1) : 1710 (C=0) .

Esimerkki 4 2-metyyli-4-trif luorimetyyli-5,6,8-trihydro-8- [ [2' -(1H-tetratsol-5-yyli)[1,1-bifenyl]-4-yyli]metyyli]-7H-py-20 rido[2,3-d]pyrimidin-7-oni

Vaihe 1) Dietyylitrifluoriasetyyliglutaraatti

Seokseen, joka sisälsi NaOEt:a (0,217 mol) EtOH:ssa

I I I

(valmistettu 5,0 g:sta natriumia ja 220 mlrsta EtOHra) ,

« « I

/ lisättiin trifluoriasetoasetaattia (40,0 g, 0,217 mol) . 10 • f « ' ·' 25 minuutin kuluttua seokseen lisättiin etyyli-3-bromipro- t · · pionaattia (35,0 g, 0,194 mol), ja seosta kuumennettiin palautus jäähdyttäen 24 tuntia. Reaktioseos väkevöitiin, • ·« I laitettiin eetteriin ja pestiin vedellä. Eetterikerrokset kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin, jolloin saatiin 50 g ·*;*· 30 keltaista öljyä. Tislaamalla (100 - 110 °C/25 mm) saatiin t 14,0 g:a (23 %) tuotetta värittömänä öljynä.

'H-NMR (DMS0-d6) b 1,20 (m, 6H) , 2,93 (t, J=6,4 Hz, 2H) , 3,62 (t, J=6,4 Hz, 2H) , 4,13 (m, 5H) .

• * · • t « · • · · * M f * ·

• V

I · m · 9 • 9 9 · 28 103971

Vaihe 2) Etyyli-3-(2-metyyli-6-trifluorimetyyli-3H-pyrimidin-4-on-5-yyli)propionaatti

Seokseen, joka sisälsi NaOEt:a (0,026 mol) EtOH:ssa (valmistettu 0,60 g:sta natriumia ja 30 ml:sta EtOH:a), 5 lisättiin dietyylitrifluoriasetyyliglutaraattia (3,70 g, 0,013 mol) ja asetamidiinihydrokloridia (1,23 g, 0,013 mol). Reaktioseosta kuumennettiin palautusjäähdyttäen 18 tuntia, väkevöitiin ja laitettiin veteen. Seos tehtiin happamaksi pH:hon 4 2 N:11a HCl:lla ja uutettiin 10 CH2Cl2:lla. Uutteet kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin, jolloin saatiin keltainen kiinteä aine. Trituroimalla heksaa-nilla saatiin 0,87 g tuotetta valkoisena kiinteänä aineena .

'H-NMR (DMSO-d6) δ 1,16 (t, J=7,0 Hz, 3H) , 2,35 (s, 3H) , 15 2,45 (t, J=6,4 Hz, 2H), 2,70 (t, J=6,4 Hz, 2H), 4,06 (q, J=7,0 Hz, 2H).

Vaihe 3) Etyyli-3-(4-kloori-2-metyyli-6-trifluori-metyylipyrimidin-5-yyli)propionaatti

Etyyli-3- (2-metyyli - 6 - trif luorimetyyli-3H-pyrimi-20 din-4-on-5-yyli)propionaatin (0,61 g, 2,20 mmol), N,N-die-tyylianiliinin (0,33 g, 2,2 mmol) ja P0Cl3:n (8 ml) seosta kuumennettiin palautusjäähdyttäen 2 tuntia. Seos väkevöi-*<t" tiin, kaadettiin jäähän ja uutettiin eetterillä. Yhdiste-

( < I

'·' ' tyt uutteet kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin, jolloin saa- • · « : 25 tiin 0,65 g tuotetta ruskeana öljynä.

'H-NMR (DMSO-d6) δ 1,18 (t, J=7,0 Hz, 3H) , 2,56 (t, :/.j J=8,5 Hz, 2H) , 2,67 (s, 3H) , 3,06 (t, J=8,5 Hz, 2H) , 4,10 iT: (m, 2H) .

Vaihe 4) 2-metyyli-4-trifluorimetyyli-5,6,8-trihyd-30 ro-8 - [ [2' - (lH-tetratsol-5-yyli) [1,1-bifenyl] -4-yyli]metyy- • · · ,···. li] -7H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-oni • · ·

Etyyli-3-(4-kloori-2-metyyli-6-trifluorimetyylipy- • · V.· rimidin-5-yyli) propionaatin (1,30 g, 4,40 mmol), 5-[(4'- aminometyyli) [1,1-bifen-2-yyli] ] - 1H-tetratsolihydroklo-35 ridin (1,26 g, 4,40 mmol), natriumasetaatin (1,08 g, 9 9 « · · • · * • m • · 29 103971 13,20 mmol) ja trietyyliamiinin (1,33 g, 13,20 mmol) seosta BuOH:ssa (25 ml) kuumennettiin palautusjäähdyttäen 24 tuntia. Seos väkevöitiin ja jaettiin CHCl3:n ja veden välillä. Kerrokset erotettiin ja orgaaninen faasi pestiin 5 vedellä, kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin, jolloin saatiin keltainen öljy. Puhdistamalla "flash"-kromatografisesti (7 % MeOH/CH2Cl2) ja asetoni/eetteristä (kahdesti) uudel-leenkiteyttämällä saatiin 0,07 g tuotetta valkoisena kiinteänä aineena, sp. 219 - 220 °C.

10 ’H-NMR (DMSO-d6) δ 2,53 (s, 3H) , 2,81 (t, J=7,l Hz, 2H) , 3,07 (t, J=7,1 Hz, 2H) , 5,2 (s, 2H) , 7,00 (d, J=8,l Hz, 2H), 7,22 (d, J=8,1 Hz, 2H), 7,56 (m, 2H), 7,65 (m, 2H). Analyysi C23H18F3N70 : lie :

Laskettu: C, 59,35; H, 3,90; N, 21,07 15 Saatu: C, 59,12; H, 3,85; N, 21,29.

Esimerkki 5 2,4-dimetyyli-5,6,8-trihydro-8-[[6-[2'-(1H-tetrat-sol-5-yyli)fenyyli]-3-pyridinyyli]metyyli]-7H-pyrido[2,3- d]pyrimidin-7-oni 20 Vaihe 1) 2,4-dimetyyli-5,6,8-trihydro-7H-pyrido- [-2,3-d]pyrimidin-7-oni Jäähdytettyyn (-78 °C) etyyli-3-(4-kloori-2,6-di- < ( · metyylipyrimidin-5-yyli)propionaatin (27,1 g, 0,111 mol), joka oli valmistettu kuten esimerkin 3 vaiheessa 2 on ku- I 4 ( : ’ 25 vattu, liuokseen EtOH:Ssa (110 ml) lisättiin nestemäistä ··« NH3:a (20 ml) . Seosta kuumennettiin 150 °C:ssa paineastias- • · sa 12 tuntia, ja se väkevöitiin. Seokseen lisättiin vettä • ti ί,! · (20 ml) , ja seos uutettiin CH2Cl2:lla. Uutteet kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin, jolloin saatiin ruskea kiinteä ai-30 ne. Puhdistamalla " flash"-kromatograf isesti (2 % MeOH/ a ;*·*· CH2C12) ja trituroimalla eetteri/heksaanilla saatiin 14,9 g tuotetta harmahtavina kiteinä, sp. 167 - 168 °C.

• · « ’H-NMR (DMSO-d6) δ 2,30 (s, 3H) , 2,40 (s, 3H) , 2,52 (t, J=7,7 Hz, 2H) , 2,80 (t, J=7,7 Hz, 2H) , 10,64 (s, 1H) .

!··: 35 IR (KBr, cm’1) : 1690.

« a « I · · 4 « I < 30 103971

Analyysi C9HnN30:lle:

Laskettu: C, 61,00; H, 6,26; N, 23,71

Saatu: C, 61,04; H, 6,07; N, 24,10.

Vaihe 2) 2-bromi-5-hydroksimetyylipyridiini 5 Jäähdytettyyn (O °C) , sekoitettuun 6-brominikotii- nihapon (13,8 g, 0,068 mol), joka oli valmistettu julkaisun Campbell et ai. Aust. J. Chem, 1971, 24, 277 mukaan, suspensioon THF:ssa (20 ml) lisättiin 1,0 M:sta BH3:a THF:ssa (204 ml, 0,204 mol). Seosta sekoitettiin huoneen- 10 lämpötilassa 3 tuntia, jäähdytettiin uudelleen 0 °C:seen, ja seokseen lisättiin kyllästettyä vesipitoista K2C03:a ja vettä. Seos uutettiin EtOAc:lla, ja yhdistetyt uutteet pestiin vedellä, kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin, jolloin saatiin keltainen öljy. Puhdistamalla "flash"-kromatogra-15 fisesti (2 % MeOH/CH2Cl2) saatiin 7,5 g (59 %) keltaista kiinteää ainetta, sp. 49 - 51 °C.

!H-NMR (DMSO-dJ δ 4,50 (d, J=5,7 HZ, 2H) , 5,40 (t, J=5,7 Hz, 1H), 7,57 (d, J=8,3 Hz, 1H) , 7,70 (dd, J=8,37 Hz, 1,5 Hz, 1H), 8,35 (d, J=l,5 Hz, 1H).

20 Vaihe 3) 2-bromi-5-(tert-butyylidimetyylisilyyliok- si)metyylipyridiini

Sekoitettuun 2-bromi-5-hydroksimetyylipyridiinin (4,7 g, 0,023 mol) ja trietyyliamiinin (3,4 ml, 0,024 mol) i « i seokseen DMF:ssa (30 ml) lisättiin tert-butyylidimetyyli- • t « ! ·' 25 silyylikloridia. Tunnin kuluttua seos laimennettiin eette- « rillä ja pestiin vedellä. Eetterifaasi kuivattiin (MgS04) • · ·,*·· ja väkevöitiin, jolloin saatiin 6,8 g (97 %) tuotetta vä- • »f tf! ϊ rittömänä öljynä.

'H-NMR (DMSO-d6) δ 0,10 (s, 6H) , 0,90 (s, 3H) , 4,73 (s, :*·*: 30 2H) , 7,65 (m, 2H) , 8,35 (d, J=l,5 Hz, 1H) .

Vaihe 4) [5 - (tert-butyylidimetyylisilyylioksimetyy- t\ li)pyridin-2-yyli]tri-n-butyylistannaani » · · Jäähdytettyyn (-78 °C) , sekoitettuun 2-bromi-5-(tert-butyylidimetyylisilyylioksi) metyylipyridiinin i ««o; 35 (6,8 g, 0,022 mol) liuokseen THF: ssa (60 ml) lisättiin it t < i « I « I ·

TM

31 103971 I, 6-molaarista n-BuLi:a heksaanissa (14,1 ml, 0,022 mol).

1 tunnin kuluttua seokseen lisättiin tri-n-butyylitina-kloridia (6,1 ml, 0,022 mol), ja sekoitusta jatkettiin 3 tuntia. Seokseen lisättiin vettä, ja seos lämmitettiin 5 huoneenlämpötilaan ja uutettiin eetterillä. Yhdistetyt uutteet kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin, jolloin saatiin II, 5 g tuotetta ruskeana öljynä.

'H-NMR (DMSO-d6) δ 0,10 (s, 6H) , 0,80 (s, 18H) , 1,10 (m, 6H) , 1,25 (m, 6H) , 1,50 (m, 6H) , 4,73 (s, 2H) , 7,55 (m, 10 2H), 8,61 (d, J=2,2 Hz, 1H).

Vaihe 5) 2-[5-(tert-butyylidimetyylisilyylioksime-tyyli)pyridin-2-yyli]bentsonitriili [5-(tert-butyylidimetyylisilyylioksimetyyli)pyridin-2 -yyli] tri-n-butyylistannaanin (11,5 g, 0,022 mol), 15 2-jodibentsonitrillin (5,1 g, 0,022 mol), Cul:n (0,43 g, 0,002 mol) ja bis(trifenyylifosfiini)palladium(II)kloridin (0,08 g, 0,001 mol) seosta THFrssa (40 ml) kuumennettiin palautusjäähdyttäen 48 tuntia. Seos laimennettiin eetterillä ja pestiin kyllästetyllä vesipitoisella NH4Cl:lla, 20 vesipitoisella NH4OH:lla, vedellä ja suolaliuoksella, kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin, jolloin saatiin 4,9 g tuotetta ruskeana öljynä.

'H-NMR (DMSO-d6) δ 0,10 (s, 6H) , 0,90 (s, 9H) , 4,73 (s, 2H) , 7,45 (m, 1H) , 7,60 (m, 4H) , 7,75 (dd, J=7,9 Hz, • · 25 2,2 Hz, 1H) , 8,50 (d, J=2,2 Hz, 1H) .

• · · .1. Vaihe 6) 2-[5-(hydroksimetyyli)pyridin-2-yyli]bent- • * · • sonitriili • · · • 2- [5- (tert-butyylidimetyylisilyylioksimetyyli) py- *. *: ridin-2-yyli] bentsonitriilin (4,9 g, 0,021 mol) ja Bu4NF- ·»· V · 30 hydraatin (8,1 g, 0,031 mol) seosta THF:ssa (60 ml) sekoi tettiin huoneenlämpötilassa 18 tuntia. Seos laimennettiin EtOAc:lla, pestiin vedellä ja suolaliuoksella, kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin, jolloin saatiin 3,5 g (80 %) tuo-tetta ruskeana kiinteänä aineena, sp. 152 - 153 °C.

i « « « · • « · • · • « · * • · • « · « · « « 32 103971 'H-NMR (DMSO-dJ δ 4,61 (d, J=5,6 Hz, 2H) , 5,42 (t, J=5,6 Hz, 1H), 7,57 (dd, J=7,3 Hz, 1,5 Hz, 1H) , 7,65 (m, 4H), 7,80 (dd, J=7,9 Hz, 2,2 Hz, 1H), 8,52 (d, J=2,2 Hz, 1H) .

5 Vaihe 7) 2-[5-(kloorimetyyli)pyridin-2-yyli]bentso- nitriili Jäähdytettyyn (0 °C), sekoitettuun 2 -[5-(hydroksi-metyyli)pyridin-2-yyli]bentsonitriilin (4,3 g, 0,020 mol) ja ZnCl2:n (0,09 g, 0,61 mmol) liuokseen p-dioksaanissa 10 (40 ml) lisättiin SOCl2:a (1,50 ml, 0,020 mol) tipoittain.

Seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 18 tuntia, se laimennettiin eetterillä, pestiin vedellä ja suolaliuoksella, kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin, jolloin saatiin 4,30 g tuotetta ruskeana kiinteänä aineena, sp. 97 - 98 °C.

15 'H-NMR (DMS0-d6) δ 4,90 (s, 2H) , 7,63 (dd, J=7,76 Hz, 1,3 Hz, 1H), 7,80 (m, 1H), 7,85 (m, 2H), 7,95 (d, J=7,7 Hz, 1H), 8,01 (dd, J=8,0 Hz, 2,2 Hz, 1H), 8,80 (d, J=2,2 Hz, 1H).

Vaihe 8) 2,4-dimetyyli-5,6,8-trihydro-8-[[6-(2- 20 syaanifenyyli)-3-pyridinyyli]metyyli]-7H-pyrido[2,3-d]py-rimidin-7-oni

Sekoitettuun NaH:n (60-%:inen dispersio mineraaliöljyssä; 0,42 g, 9,18 mmol) suspensioon DMF:ssa (20 ml) lisättiin 2,4-dimetyyli-5,6,8-trihydro-7H-pyrido[2,3-d]- t · < 25 pyrimidin-7-onia (1,55 g, 8,75 mmol). Tunnin kuluttua • · · .1. seokseen lisättiin 2-[5-(kloorimetyyli)pyridin-2-yyli]- • · · • ·’ bentsonitriiliä (2,00 g, 8,75 mmol) useissa erissä. Sekoi- • · · ···! tusta jatkettiin 4 tuntia, ja seos väkevöitiin. Seokseen • · *.**: lisättiin vettä, ja se uutettiin CH2Cl2:lla. Yhdistetyt ··· V · 30 uutteet kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin, jolloin saatiin 3,20 g (100 %) tuotetta ruskeana kiinteänä aineena, sp.

i6i - 162 °c.

* :*·; 'H-NMR (DMSO-d6) δ 2,36 (s, 3H) , 2,45 (s, 3H) , 2,78 ( t, J=7,8 Hz, 2H), 2,87 (t, J=7,8 Hz, 2H), 5,27 (s, 2H), 7,61 « * » « « • t • « t · 33 103971 (m, 1H) , 7,80 (m, 4H) , 7,93 (dd, J=7,7 Hz, 1,3 Hz, 1H) , 8,70 (d, J-1,3 Hz, 1H).

Vaihe 9) 2,4-dimetyyli-5,6,8-trihydro-8-[[6-[2 - (lH-tetratsol-5-yyli) fenyyli] -3-pyridinyyli]metyyli] -7H-5 pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-oni 2,4-dimetyyli-5,6,8-trihydro-8-[[6-(2-syaanifenyy-li) -3-pyridinyyli]metyyli]-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onin (4,0 g, 10,8 mmol) , NaN3:n (0,8 g, 11,9 mmol) ja tri-n-butyylitinakloridin (3,9 g, 11,9 mmol) seosta ksyleenis-10 sä (100 ml) kuumennettiin palautusjäähdyttaen 24 tuntia. Seokseen lisättiin toiset 1,5 ekvivalenttia NaN3:a ja tri-n-butyylitinakloridia, ja kuumennusta jatkettiin 24 tuntia. Reaktioseos väkevöitiin, ja siihen lisättiin 2 N:sta HC1:a. Seos uutettiin eetterillä (erotettu), ja pH säädet-15 tiin 5:ksi 50-%:isella NaOH:lla. Vesipitoinen faasi uutet tiin CH2Cl2:lla ja uutteet pestiin vedellä, kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin. Puhdistamalla "flash"-kromatografi-sesti (5 % MeOH/CH2Cl2) ja uudelleenkiteyttämällä EtOH/ve-destä saatiin 2,8 g (63 %) tuotetta valkoisena kiinteänä 20 aineena, sp. 217 - 218 °C.

'H-NMR (DMSO-d6) δ 2,35 (s, 3H) , 2,44 (s, 3H) , 2,73 (t, J=7,8 Hz, 2H), 2,85 (t, J=7,8 Hz, 2H), 5,18 (s, 2H), 7,33 (d, J=8,3 Hz, 1H), 7,65 (m, 5H), 8,36 (s, 1H).

IR (KBr, cm'1): 1690.

« « · 25 Analyysi C^H^gO: lie : • » ·

Laskettu: C, 64,07; H, 4,89; N, 27,17 : f Saatu: C, 63,87; H, 4,81; N, 27,56.

··· • · · · « · f · · • · · • · • · · • · · • · · * ··· • · · • · · • 4 4 4 < I 1 4 4 ( > 1 4 4« i · * 4.4 34 103971

Esimerkki 6 2-metyyli-4-trifluorimetyyli-5,6,8-trihydro-8-[ [6 [2- (lH-tetratsol-5-yyli) fenyyli] -3-pyridinyyli] metyyli] -7H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-oni 5 Vaihe 1) 2-metyyli-4-trifluorimetyyli-5,6,8-trihyd- ro-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-oni

Etyyli-3-(4-kloori-2-metyyli-6-trifluorimetyylipy-; rimidin-5-yyli)propionaatin (0,50 g, 1,70 mmol), joka on valmistettu kuten esimerkin 4 vaiheessa 3 on kuvattu, 10 liuosta kyllästetyssä etanoli-ammoniakissa (15 ml) kuumennettiin suljetussa putkessa 110 °C:ssa 18 tuntia. Seos väkevöitiin, laitettiin CH2Cl2:iin ja pestiin vedellä. Orgaaninen kerros kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin, jolloin saatiin 0,33 g (84 %) tuotetta valkoisena kiinteänä ainee-15 na, sp. 147 - 150 °C.

!H-NMR (DMSO-d6) δ 2,53 (s, 3H) , 2,61 (t, J=7,3 Hz, 2H) , 3,01 (t, J=7,3 Hz, 2H), 11,30 (s, 1H).

Vaihe 2) 2-metyyli-4-trifluorimetyyli-5,6,8-trihyd-ro-8- [ [6- (2-syaanifenyyli) -3-pyridinyyli]metyyli] -7H-pyri-20 do[2,3-d]pyrimidin-7-oni

NaH:n (60-%:inen dispersio mineraaliöljyssä; 33 mg, 1,40 mmol) suspensioon DMF:ssa lisättiin 2-metyyli-4-tri-fluorimetyyli-5,6,8-trihydro-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onia (0,32 g, 1,40 mmol) huoneenlämpötilassa. 30 minuutin 4 · (ii' 25 kuluttua seokseen lisättiin 2- [5-(kloorimetyyli) pyridin-2 - • · · *·1 yyli] bentsonitriiliä (0,32 g, 1,40 mmol), joka on valmis- • · · i tettu kuten esimerkin 5 vaiheessa 7 on kuvattu. Seosta sekoitettiin 42 tuntia, laimennettiin vedellä ja uutettiin ί/·· CH2Cl2:lla. Yhdistetyt uutteet kuivattiin (MgS04) ja väke- :1: i 30 voitiin, jolloin saatiin 0,51 g (86 %) tuotetta keltaisena vaahtona.

'H-NMR (DMSO-d6) δ 2,58 (s, 3H) , 2,86 (t, J=7,6 Hz, 2H) , 3,11 (t, J=7,6 Hz, 2H) , 5,31 (s, 2H) , 7,62 (m, 1H) , 7,85 (m, 5H), 8,75 (s, 1H).

* I « 4 4 « I « I · 4 4« · * · i 4 I • · • · 35 103971

Vaihe 3) 2-metyyli-4-trifluorimetyyli-5,6,8-tri-hydro-8-[[6-[2-(1H-tetratsol-5-yyli)fenyyli]-3-pyridinyy-lilmetyyli]-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-oni 2-metyyli-4-trifluorimetyyli-5,6,8-trihydro-8-[ [6-5 (2-syaanifenyyli)-3-pyridinyyli] metyyli]-7H-pyrido [2,3-d] - pyrimidin-7-onin (0,50 g, 1,23 mmol) , NaN3:n (0,08 g, 1.23 mmol) ja tri-n-butyylitinakloridin (0,40 g, 1.23 mmol) seosta ksyleenissä (9 ml) kuumennettiin palautus j äähdyttäen 48 tuntia. Seokseen lisättiin 1 N:sta HCl:a 10 (1,2 ml), ja seos laimennettiin CH2Cl2:lla, pestiin vedel lä, kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin. Puhdistamalla "flash"-kromatografisesti (5 % MeOH/CH2Cl2) saatiin vaahtoa. Trituroimalla 10-%:isella EtOAc/eetterillä saatiin 0,145 g tuotetta harmahtavana kiinteänä aineena, sp. 189 -15 191 °C.

’H-NMR (DMSO-d6) δ 2,55 (s, 3H) , 2,82 (t, J=7,0 Hz, 2H) , 3,07 (t, J=7,0 Hz, 2H), 5,20 (s, 2H), 7,31 (d, J=8,0 Hz, 1H) , 7,65 (m, 5H) , 8,39 (s, 1H) .

Analyysi C22H17F3N80 : lie : 20 Laskettu: C, 56,65; H, 3,67; N, 24,03

Saatu: C, 56,22; H, 4,11; N, 23,44.

Esimerkki 7 2,4-dimetyyli-5,6,8-trihydro-8-([5[2-(1H-tetratsol- 5-yyli)fenyyli]-2-pyridinyyli]metyyli] -7H-pyrido [2,3-d] py- 2 5 rimidin-7-oni • t ·

Vaihe 1) (6-metyylipyridin-3-yyli) trifluorimetaa- • ’ nisulfonaatti • · ·

Sekoitettuun, jäähdytettyyn (0 °C) 3-hydroksi-6- • · · * '! metyylipyridiinin (14,0 g, 0,128 mol) liuokseen pyridii- • te V * 30 nissä (70 ml) lisättiin trifluorimetaanisulfonianhydridiä (39,8 g, 0,141 mol) tipoittain. Seosta sekoitettiin huo-: neenlämpötilassa 5 tuntia. Seokseen lisättiin vettä ja : ; ; seos uutettiin eetterillä. Uutteet pestiin suolaliuoksel la, kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin, jolloin saatiin 35 27,3 g (88 %) tuotetta ruskeana öljynä.

«ι(ΐ· 1 « · « < · f » 36 103971 'H-NMR (DMSO-d6) δ 2,50 (s, 3H) , 7,45 (d, J=9,2 Hz, 1H) , 7,90 (dd, J=9,2 Hz, 2,3 Hz, 1H), 8,60 (d, J=2,3 Hz, 1H).

Vaihe 2) (6-metyylipyridin-3-yyli)trifluorimetaa-nisulfonaatin N-oksidi 5 Sekoitettuun (6-metyylipyridin-3-yyli)trifluorime- taanisulfonaatin (27,3 g, 0,113 mol) liuokseen CH2Cl2:ssa (140 ml) lisättiin m-CPBA:ta (21,5 g, 0,124 mol) erissä.

16 tunnin kuluttua sakka poistettiin suodattamalla, ja suodos väkevöitiin. Puhdistamalla "flash"-kromatografises-10 ti (2 % MeOH/CH2Cl2) saatiin 25,0 g (86 %) tuotetta värittöminä kiteinä, sp. 47 - 48 °C.

'H-NMR (DMSO-d6) δ 2,36 (s, 3H) , 7,56 (dd, J=8,9 Hz, 2,3

Hz, 1H), 7,69 (d, J=8,9 Hz, 1H), 8,84 (d, J=2,3 Hz, 1H).

Vaihe 3) (6-hydroksimetyylipyridin-3-yyli)trifluo-15 rimetaanisulfonaatti

Sekoitettuun, jäähdytettyyn (0 °C) (6-metyylipyri-din-3-yyli) trifluorimetaanisulfonaatin N-oksidiin (25,0 g, 0,097 mol) lisättiin trifluorietikkahapon anhydridiä (69,0 ml, 0,487 mol) tipoittain. Seosta sekoitettiin huo-20 neenlämpötilassa 30 minuuttia, ja sitten sitä kuumennettiin palautusjäähdyttäen 1 tunti. Seos jäähdytettiin huoneenlämpötilaan ja siihen lisättiin 10-%:ista vesipitoista NaHC03:a (400 ml) . Muodostunut seos uutettiin CH2Cl2:lla ja uutteet pestiin suolaliuoksella, kuivattiin (MgS04) ja vä-25 kevöitiin. Puhdistamalla "flash"-kromatografisesti (2 % • 1 1

MeOH/CH2Cl2) saatiin 10,0 g (40 %) tuotetta värittömänä • · ’ \ öljynä.

* · · 'H-NMR (DMSO-d6) δ 4,60 (s, 1H) , 5,60 (s, 1H) , 7,64 (d, J=8,8 Hz, 1H) , 8,03 (dd, J=8,8 Hz, 2,8 Hz, 1H) , 8,67 (d, • « · V : 3 0 J=2,8 Hz, 1H) .

Vaihe 4) 2-(2-tert-butyyli-lH-tetratsol-5-yyli)- • · · il ! fenyylitri-n-butyylistannaani Jäähdytettyyn (-78 °C) l-tert-butyyli-5-(2-bromi-fenyyli)-lH-tetratsolin (12,3 g, 0,043 mol), joka oli val- 35 mistettu kuten esimerkin 3 vaihtoehtoisen synteesin vai- v · « · · • · a · · « · · m m · 37 103971 heessa 3 on kuvattu, liuokseen THFrssa (80 ml) lisättiin 1,6 M:sta n-BuLi:a heksaanissa (32,7 ml, 0,052 mol). Tunnin kuluttua liuokseen lisättiin tri-n-butyylitinakloridia (17,1 g, 0,052 mol), ja sekoitusta jatkettiin 3 tuntia 5 -78 °C:ssa. Seos lämmitettiin huoneenlämpötilaan, ja sitä sekoitettiin 18 tuntia. Seokseen lisättiin vettä, ja se uutettiin eetterillä. Yhdistetyt uutteet pestiin vedellä, suolaliuoksella, kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin, jolloin saatiin ruskeaa öljyä. Tri-n-butyylitinakloridi-ylimäärä 10 ja jäljelle jäänyt lähtöaine poistettiin tislaamalla suur-tyhjössä, jolloin saatiin 9,6 g (45 %) tuotetta ruskeana öljynä.

’H-NMR (DMSO-d6) δ 0,78 (t, J=7,3 Hz, 9H) , 0,93 (t, J=8,3 Hz, 6H) , 1,21 (m, 6H) , 1,43 (m, 6H) , 7,43 (d, 15 J=8,9 Hz, 1H), 7,45 (d, J=8,5 Hz, 1H), 7,60 (dd, J=8,9 Hz, 2,3 Hz, 1H) , 8,0 (dd, J=8,5 Hz, 2,3 Hz, 1H) .

Vaihe 5) 2-tert-butyyli-5-[2-[(2-hydroksimetyyli)-pyridin-5-yyli]fenyyli]tetratsoli (6-hydroksimetyylipyridin-3-yyli)trifluorimetaani-20 sulfonaatin (5,0 g, 0,019 mol), 2-(2-tert-butyyli-lH-tetratsol-5-yyli)fenyylitri-n-butyylistannaanin (9,5 g, 0,019 mol), bis(trifenyylifosfiini)palladiumkloridin (0,70 g, 0,97 mmol) , Cul:n (0,37 g, 1,9 mmol) ja DMF:n (30 ml) seosta kuumennettiin 100 °C:ssa 18 tuntia. Seok- « i f 25 seen lisättiin 20-%:ista vesipitoista KF:a, ja seosta se- • * * *;'/ koitettiin huoneenlämpötilassa 30 minuuttia. Sakka pois- • · · ' ·’ tettiin suodattamalla, ja suodos uutettiin eetterillä.

..I: Uutteet pestiin NH40H:lla, kyllästetyllä vesipitoisella • · :.’·ί NH4Cl:lla, vedellä, suolaliuoksella, kuivattiin (MgS04) ja • · · ·,· · 30 väkevöitiin. Puhdistamalla "flash"-kromatografisesti (5 %

EtOAc/heksaani) saatiin 0,5 g (8 %) tuotetta keltaisena öljynä.

. . 'H-NMR (DMSO-d6) δ 1,55 (s, 9H) , 4,56 (d, J=6,0 Hz, 2H) , 5,40 (t, J=6,0 Hz, 1H) , 7,38 (d, J=8,8 Hz, 1H) , 7,60 (m, r f | f <11 * • · • l · • · * *

• I

38 103971 4H), 7,90 (dd, J=8,8 Hz, 2,3 Hz, 1H), 8,20 (d, J=2,3 Hz, 1H) .

Vaihe 6) 2-tert-butyyli-5-[2-[(2-bromimetyyli)py- ridin-5-yyli]fenyyli]tetratsoli 5 2-tert-butyyli-5-[2-[(2-hydroksimetyyli)pyridin-5- yyli]fenyyli]tetratsolin (0,50 g, 1,62 mmol), trifenyyli-fosfiinin (0,51 g, 1,94 mmol) ja CBr4:n (0,64 g. 1,94 mmol) seosta THF:ssa (30 ml) sekoitettiin huoneenlämpötilassa 16 tuntia. Seos väkevöitiin ja puhdistettiin "flash"-kromato-10 grafisesti (20 % EtOAc/heksaani) , jolloin saatiin 0,40 g (66 %) tuotetta värittömänä öljynä.

lH-NMR (DMSO-d6) δ 1,56 (s, 9H) , 4,70 (s, 2H) , 7,60 (m, 5H), 7,95 (dd, J=8,8 Hz, 1,6 Hz, 1H), 8,28 (d, J=l,6 Hz, 1H) .

15 Vaihe 7) 2,4-dimetyyli-5,6,8-trihydro-8-[[5[2-(1H- tetratsol-5-yyli)fenyyli]-2-pyridinyyli]metyyli]-7H-pyri-do[2,3-d]pyrimidin-7-oni

Sekoitettuun NaH:n (60-%:inen dispersio mineraali-öljyssä; 41 mg, 1,03 mmol) suspensioon DMF:ssa (1 ml) li-20 sättiin 2,4-dimetyyli-5,6,8-trihydro-7H-pyrido[2,3-d]py-rimidin-7-onia (170 mg, 0,94 mmol), joka on valmistettu kuten esimerkin 5 vaiheessa 1 on kuvattu. 30 minuutin kuluttua seokseen lisättiin 2-tert-butyyli-5-[2-[(2-bromi-metyyli)pyridin-5-yyli]fenyyli]tetratsolin (350 mg, 0,94 25 mmol) liuos DMFrssa (5 ml) ja seosta sekoitettiin 3 tun- • · · . tia. Seos väkevöitiin, laitettiin EtOAc:iin ja pestiin • · · • ·’ vedellä. Orgaaninen faasi kuivattiin (MgS04) , väkevöitiin • · · • •♦ί ja puhdistettiin " flash"-kromatograf isesti (3 % MeOH/ • « CH2Cl2) , jolloin saatiin keltainen vaahto. Vaahtoa kuumen- • · · V ’ 30 nettiin 6 N:ssa HCl:ssa (2 ml) 16 tuntia, se jäähdytet tiin, ja pH säädettiin 4:ksi 50-%:isella NaOH:lla. Seos uutettiin CHCl3:lla, ja yhdistetyt uutteet kuivatttiin r (MgS04) ja väkevöitiin. Trituroimalla EtOH/eetterillä saatiin 40 mg (10 %) tuotetta valkoisena kiinteänä aineena, 35 sp. 208 - 209 °C.

f 4 · 4 4 • 4 4 « 4 4 4 39 103971 •H-NMR (DMSO-d6) δ 2,35 (s, 3H) , 2,37 (s, 3H) , 2,77 (t, J=7,9 Hz, 2H), 2,90 (t, J=7,9 Hz, 2H), 5,30 (s, 2H), 7,10 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,36 (dd, J=8,8 Hz, 1,6 Hz, 1H), 7,60 (m, 4H), 8,23 (d, J=l,6 Hz, 1H).

5 IR (KBr, cm'1) : 1690.

Analyys i C22H20N8O:11 e:

Laskettu: C, 64,07; H, 4,89; N, 27,17 Saatu: C, 63,87; H, 5,16; N, 27,22.

Esimerkki 8 10 2,4,6-trimetyyli-5,6,8-trihydro-8-[[2'-(lH-tetrat- sol-5-yyli) [1,1-bifenyl] -4-yyli]metyyli] -7H-pyrido [2,3-d] -pyrimidin-7-oni

Vaihe 1) 2,4-dimetyyli-5,6,8-trihydro-8-[[2'-syaa ni [1,1-bifenyl]-4yyli]metyyli]-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-15 7-oni

Sekoitettuun NaH:n (60-%:inen dispersio mineraaliöljyssä; 0,115 g, 4,80 mmol) suspensioon DMF:ssa (5 ml) lisättiin 2,4-dimetyyli-5,6,8-trihydro-7H-pyrido[2,3-d]-pyrimidin-7-onia (0,85 g, 4,80 mmol), joka on valmistettu 20 kuten esimerkin 5 vaiheessa 1 on kuvattu. 45 minuutin kuluttua seokseen lisättiin 2 -[4 -(bromimetyyli)fenyyli]-bentsonitriiliä (1,00 g, 3,7 mmol) DMF:ssa (4 ml), ja seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 18 tuntia. Seok-seen lisättiin vettä, ja se uutettiin CH2Cl2:lla. Uutteet « i · « 25 väkevöitiin, ja raakatuote puhdistettiin "flash"-kromato- • · · grafisesti (2 % MeOH/CH2Cl2) . Trituroimalla eetterillä saa- • · ’ tiin 0,80 g (60 %) tuotetta keltaisena kiinteänä aineena, « · · sp. 133 - 137 °C.

:·’*· ‘H-NMR (DMSO-d6) δ 2,37 (s, 2H) , 2,45 (s, 3H) , 2,76 (t, • # · V : 30 J=7,9 Hz, 2H), 2,88 (t, J=7,9 Hz, 2H), 5,27 (s, 2H), 7,42 (d, J=8,2 Hz, 2H), 7,50 (d, J=8,2 Hz, 2H) , 7,58 (m, 2H) , :*/:’·· 7,77 (m, 1H) , 7,93 (d, J=7,6 Hz, 1H) .

• · · * # » i · ♦ • · · • » • * · • · t · • · · » m I « · • · • · 40 103971

Vaihe 2) 2,4,6-trimetyyli-5,6,8-trihydro-8-[[2'- syaani[1,1-bifenyl]-4-yyli]metyyli]-7H-pyrido[2,3-d]pyri-midin-7-oni Jäähdytettyyn (-78 °C) 2,4-dimetyyli-5,6,8-trihyd-5 ro-8-[[2'-syaani[1,1-bifenyl]-4yyli]metyyli]-7H-pyrido- [2,3-d]pyrimidin-7-onin (0,40 g, 1,10 mmol) liuokseen THF:SSa (2,0 ml) lisättiin LDA:a (2 M; 0,55 ml, 1,10 mmol). 45 minuutin kuluttua liuokseen lisättiin Mel:a (0,16 g, 1,15 mmol), ja sen annettiin jäähtyä huoneenläm-10 potilaan, ja sitä sekoitettiin 18 tuntia. Seos väkevöitiin ja jaettiin veden ja CH2Cl2:n välillä. Orgaaninen faasi kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin, jolloin saatiin oranssi öljy. Puhdistamalla "flash"-kromatografisesti ( 60 %

EtOAc/heksaani) saatiin 0,15 g (36 %) tuotetta keltaisena 15 kiinteänä aineena, sp. 153 - 156 °C.

'H-NMR (DMSO-d6) δ 1,21 (d, J=6,3 Hz, 3H) , 2,37 (s, 3H) , 2,44 (s, 3H), 2,60 (m, 1H), 2,80 (m, 1H), 3,05 (dd, J=9,6, 6,0 Hz, 1H), 5,21 (d, J=15,l Hz, 1H), 7,39 (d, J=8,3 Hz, 2H), 7,49 (d, J=8,3 Hz, 2H), 7,58 (m, 2H), 7,80 (m, 1H), 20 7,91 (dd, J=7,9, 0,9 Hz, 1H).

Vaihe 3) 2,4,6-trimetyyli-5,6,8-trihydro-8-[[2'- (1H-tetratsol-5-yyli) [1,1-bifenyl] -4-yyli]metyyli] -7H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-oni 2,4,6-trimetyyli- 5,6,8-trihydro-8-[[2'- syaani[1,1- « · 25 bifenyl] -4-yyli] metyyli]-7H-pyrido [2,3-d]pyrimidin-7-onin . (0,57 g, 1,50 mmol), NaN3:n (0,13 g, 1,90 mmol) ja tri-n-

• · J

• * butyylitinakloridin (0,62 g, 1,90 mmol) seosta ksyleenissä ··· ···· (5 ml) kuumennettiin palautus jäähdyttäen 48 tuntia. Seos • » · *. jäähdytettiin ja siihen lisättiin 1 N:sta HCl:a (2 ml).

··· V · 30 Seokseen lisättiin CHCl3:a ja vettä, ja orgaaninen faasi kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin. Uudelleenkiteyttämällä EtOAc:sta saatiin 0,25 g (39 %) tuotetta valkoisena kiin-teänä aineena, sp. 161 - 163 °C.

’h-NMR (DMSO-d6) δ 1,19 (d, J=6,7 Hz), 2,37 (s, 3H) , 2,43 |ll 35 (s, 3H) , 2,59 (m, 1H) , 2,80 (m, 1H) , 3,02 (dd, J=15,7, • m 9 » • · * m 9 9

• » I

• · * • · _ 9 · 41 103971 7,0 Hz, 1H), 5,12 (d, J=15,0 Hz, 1H) , 5,22 (d, J=15,0 Hz, 1H) , 7,00 (d, J=8,0 Hz, 2H) , 7,18 (d, 8,0 Hz, 2H) , 7,57 (m, 2H), 7,63 (m, 2H).

Esimerkki 9 5 2,4-dimetyyli-8-[[2'-(1H-tetratsol-5-yyli)[1,1-bi- fenyl]-4-yyli]metyyli]-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-oni

Vaihe 1) 2,4-dimetyyli-8-[[2'-syaani[1,1-bifenyl]- 4-yyli]metyyli]-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-oni Käyttämällä samaa menettelytapaa kuin esimerkin 8 10 vaiheessa 1 on kuvattu sekoitettuun NaH:n (60-%:inen dispersio mineraaliöljyssä) suspensioon DMFrssa lisätään 2,4-dimetyyli-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onia, joka on valmistettu julkaisun T. Sakamoto et ai. Chem. Pharm. Bull., 1982, 30, 2410 mukaan. 45 minuutin kuluttua lisää seokseen 15 2-[4-(bromimetyyli)fenyyli]bentsonitriiliä DMFrssa ja se koita huoneenlämpötilassa 18 tuntia. Lisää vettä ja uuta seos CH2C12:11a. Väkevöi uutteet ja puhdista raakatuote "flash"-kromatografisesti (2 % MeOH/CH2Cl2) . Trituroimalla eetterillä saadaan tuotetta.

20 Vaihe 2) 2,4-dimetyyli-8-[[2'-(1H-tetratsol-5-yy- li) [1,1-bifenyl] -4-yyli]metyyli] -7H-pyrido [2,3-d]pyrimi-din-7-oni Käyttämällä samaa menettelytapaa kuin esimerkin 8 ,·, vaiheessa 3 on kuvattu kuumenna 2,4-dimetyyli-8-[ [2'-syaa- * « · _ 2 5 ni [1,1-bifenyl] -4-yyli] metyyli] -7H-pyrido [2,3 - d] pyrimidin- • · · . 7-onin, NaN3:n ja tri-n-butyylitinakloridin seosta ksylee- • · · • ; nissä palautusjäähdyttäen 48 tuntia. Jäähdytä seos ja li- ··· sää 1 Nrsta HClra (2 ml). Lisää CHCl3:a ja vettä ja kuivaa • » < ’· 1· (MgS04) ja väkevöi orgaaninen faasi. Uudelleenkiteyttämällä *♦· V: 30 EtOAcrsta saadaan tuote.

··· • ♦ · • ♦ · • » · « » » • ♦ · « « 1 i » « • 1 · » · • » » » 1 • · t » » • f · f 1 · 9 · t »

Claims (8)

103971

1 A »·# • · · • · · jossa R1, R2, R3 ja R4 ovat toisistaan riippumattomasti H, metyyli, trifluorimetyyli; R5 on H tai, kun n on 1, R5 yh- « · « · · « · • * · • · 47 103971 dessä R3:n kanssa käsittää kaksoissidoksen; n on 0 tai 1; Ar1 on O- · tai ~^cy~ 5 tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävä suola.

1. Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten pyr-rolo- ja pyrido[2,3-d]pyrimidinonijohdannaisten valmista-5 miseksi, joilla on kaava O R\ X .(CH2WAci R2"^ N R1 jossa R1, R2, R3 ja R4 ovat toisistaan riippumattomasti H, alempialkyyli, joka sisältää 1-6 hiiliatomia, tai per-15 fluorialkyyli, joka sisältää 1-6 hiiliatomia; R5 on H tai, kun n on 1, R5 yhdessä R3:n kanssa käsittää kaksoissi-doksen; n on 0 tai 1; m on 0 - 3; Ar1 on <l·· <l· jossa W on H, alempialkyyli, joka sisältää 1-6 hiiliatomia, halogeeni, hydroksi tai alempialkoksi, joka sisältää 1-6 hiiliatomia; Ar2 on K " -O"·-O'-O’--O' • · • · · :\j jossa X on n„n

30 C02H, CN tai —<0~B‘ : • n"n ««· 9 9 · • · · jossa R6 on H, tert-butyyli, tri-n-butyylistannyyli tai • 1 1 trifenyylimetyy1i; ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttä- • « I · I 1 1 « · Ml · • · • · 1 * * I · · · • · « · t • · · « I 103971 vien suolojen valmistamiseksi, tunnet tu siitä, että (a) pyrimidiini, jolla on kaava

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, t u n-| ’·· n e t t u siitä, että valmistetaan yhdiste, jolla on kaa- :1! : va il R5._-iCH)n>si^ (II) 30 • · • « · # · · ’·’ 1 jossa R1, R2, R3 ja R4 ovat toisistaan riippumattomasti H, :Y: alempialkyyli, joka sisältää 1-6 hiiliatomia, tai per- • fluorialkyyli, joka sisältää 1-6 hiiliatomia; R5 on H • · · · * « · » t · • · • · 103971 tai, kun n on 1, R5 yhdessä R3:n kanssa käsittää kaksoissi-doksen; n on 0 tai 1; Ar1 on · O- tai Ar2 on -O'-O* ·-O'--o’ 10 jossa X on n„n C02H, CN tai 15 jossa R6 on H, tert-butyyli, tri-n-butyylistannyyli tai trifenyylimetyyli; tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävä suola.

3. Patenttivaatimuksen 1 tai 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että X tuotteessa on C02H, CN tai 20 N"™

4. Patenttivaatimuksen 1 tai 2 mukainen menetelmä, • I tunnettu siitä, että valmistetaan yhdiste, jolla • · « 25 on kaava Y 2¾ h

0 NW” ·*· : rf II I :J: η“Ίί f (m)

30 Rs—(CH,nvyi^N

5. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan 2,4-dimetyyli-5,6,8-trihydro-8-[[2'-(lH-tetratsol-5-yyli) [1,1-bifenyl]-4-yy- 10 li]metyyli]-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-oni tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävä suola.

5 COOR7 r3-7^ , l 10 jossa R1, R2, R3, R4, R5 ja n ovat edellä määriteltyjä, Z1 on poistuva ryhmä, kuten halogeeni, ja R7 on alempialkyyli, kondensoidaan amiinin kanssa, jolla on kaava

15 H2N-(CH2)m-Ar‘-Ar2 (5) jossa m, Ar1 ja Ar2 ovat edellä määriteltyjä, tai (b) bisyklinen yhdiste, jolla on kaava 20 Γ\Χ,,^Η2, - R \C Ϊ Y (8) «ΛΑ1 : 25 jossa Rl, R2, R3, R4, R5, n, m ja Ar' ovat edellä määritel- t tyjä ja Y on para-bromi- tai para-jodiryhmä, saatetaan •V. reagoimaan kaavan Ar2B(OH)2 mukaisen aryyliboronihapon tai • · kaavan Ar2Sn(R)3 mukaisen aryylistannaanin kanssa, jolloin ♦ »♦· - .·, · Arz on edellä määritelty ja R on C,.6-alkyyli, palladiumkata- • ·· #···, 30 lyytin läsnä ollessa, tai • · · »· « · · • Φ · • 1 1 i i · • « « f • · • · • · · I f «II • · • · < 11 f t «II»· 4 · » · • · · • · • J „ 103971 (c) bisyklinen yhdiste, jolla on kaava A1,· R5-(CH,"1S^n (ii> 10 jossa R1, R2, R3, R4, R5 ja n ovat edellä määriteltyjä, kon-densoidaan biaryyliyhdisteen kanssa, jolla on kaava Z1-(CH2)m-Ar'-Ar2 (12) 15 jossa m, Ar1 ja Ar2 ovat edellä määriteltyjä ja Z1 on poistuva ryhmä, kuten halogeeni, tai (d) kaavan I mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, jossa Ar2 on ~0 “O “O tai_0 jossa X on C02H, CN tai -(Ö+R5 . 25 N . 11« • ] jossa R6 on vety tai tert-butyyli, yhdiste, jolla on kaava • · · • ·· · • m V·: co2ei Φ nftL A ft :.:: r^n^r1 « • « · · *;’·/ jossa R1, R2, R3, R4, R5 ja n ovat edellä määriteltyjä, saa- * · ’·«1 35 tetaan reagoimaan amiinin kanssa, jolla on kaava ti · t « 1 • 1 « · 103971 ^(CH2)b H2N Ar1Y (2) jossa m ja Ar1 ovat edellä määriteltyjä ja Y on para-bromi-5 tai para-jodiryhmä, ja haluttaessa (i) poistetaan suojaryhmä kaavan I mukaisesta yhdisteestä, jossa X on

10 N-N jossa R6 on tert-butyyli, tri-n-butyylistannyyli tai trife-nyylimetyyli, jolloin saadaan yhdiste, jossa R6 on vety, tai (ii) kaavan I mukainen yhdiste, jossa X on -CN, 15 saatetaan reagoimaan atsidireagenssin kanssa, jolloin saa daan kaavan I mukainen yhdiste, jossa X on Nv -<Όΐ1 w-N tai N 20 (iii) muodostetaan kaavan I mukaisen yhdisteen suo la epäorgaanisen tai orgaanisen hapon tai emäksen kanssa.

6. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan 2-metyyli-4-trifluori-metyyli-5,6,8-trihydro-8- [ [2' - (lH-tetratsol-5-yyli) [1,1- 15 bif enyl] -4 -yyli] metyyli] -7H-pyrido [2,3 - d] pyrimidin-7-oni tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävä suola.

7. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan 2,4,6-trimetyyli-5,6,- 8-trihydro-8 - [ [2'-(1H-tetratsol-5-yyli) [1,1-bifenyl]-4- 20 yyli]metyyli]-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-oni tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävä suola.

8. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan 2,4-dimetyyli-5,6,8- I f ’ " trihydro-8-[ [5 [2-(lH-tetratsol-5-yyli) fenyyli]-2-pyridi- I I I V ' 25 nyyli]metyyli]-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-oni tai sen ; farmaseuttisesti hyväksyttävä suola, m • · · • · · · • « • · · • < f 9 · i · • · • · · • · f • # · 1 1 • · · • · · • · · • · • · « • » • t · »M « · * · 103971