FI102073B - Menetelmä 2 ,19-etyleenisillan sisältävien, aromataasi-inhibiittoreina käyttökelpoisten steroidien valmistamiseksi - Google Patents

Description

1 102073

Menetelmä 2β,19-etyleenisillan sisältävien, aromataasi-inhibiittoreina käyttökelpoisten steroidien valmistamiseksi 5 Estrogeenihormonit, estroni ja estradioli, liitty vät useisiin fysiologisiin prosesseihin. Näiden steroidien muodostusta säätelevät useat entsyymit. Entsyymi aromataa-si on nopeutta rajoittava entsyymi androgeenihormonien, testosteronin ja androsteenidionin, palautumattomassa kon-10 versiossa estrogeenihormoneiksi, estradioliksi ja estro-niksi. Yhdisteet, jotka ovat aromataasi-inhibiittoreita, voivat täten säädellä tai inhiboida androgeenin muuttamista estrogeeniksi, ja niillä on terapeuttista käyttöä hoidettaessa kliinisiä tiloja, joita tehostaa estrogeenien 15 läsnä olo.

Käsillä oleva keksintö kohdistuu menetelmään 2,19-etyleenisillan sisältävien steroidiyhdisteiden valmistamiseksi. Nämä yhdisteet ovat steroidisia aromataasi-inhibiittoreita. Täsmällisemmin keksinnön mukaisesti valmis-20 tettavat yhdisteet voidaan esittää rakennekaavalla , Rl is "vVrTi . >. 25 / iti ^

• · I

• I

y.'

• ? Λ T

»·· ' • · · n • · · Λ * jossa j 30 ---- tarkoittaa yksinkertaista tai kaksoissidosta; * R on H, =CH2, =0 tai -OH; *,· * R1 on =0, -OH tai -O-iC^-alkanoyyli); • * r.#i> R2, R3 ja R4 ovat kukin toisistaan riippumatta H tai ’.···. C1.4-alkyyli; ja • · *·’ 35 X on ~0, =CH2, -OH tai -0-(C1.,1-alkanoyyli).

• · *

• •I

* · · * · 2 102073

Esimerkkejä C1.4-alkyyliryhmistä ovat metyyli, etyyli ja propyyli. Esimerkkejä C1.4-alkanoyyliryhmistä ovat formyyli, asetyyli, ja butyryyli. Niissä tapauksissa, joissa X, R ja R1 ovat yksivalenssisia ryhmiä, näillä ryh-5 millä on β-konfiguraatio steroidimolekyyliin nähden, ja lisäksi vety on läsnä samassa asemassa ja vedyllä on a-konfiguraatio steroidimolekyyliin nähden. Aaltoviivat ryhmiin R2, R3 ja R4 tarkoittavat sitä, että näillä ryhmillä voi olla kumpi tahansa stereokemiallisista konfiguraati-10 öistä, jotka ovat mahdollisia, kun toinen substituentti tuossa rengasasemassa on vety. Pisteviivoilla esitettyjä kaksoissidoksia rajoitetaan siten, ettei samasta hiiliatomista voi lähteä kahta kaksoissidosta ja kaksoissidos 6-asemassa on mahdollinen vain silloin, kun myös 4-asemassa 15 on kaksoissidos. Lisäksi yhdisteessä täytyy olla ainakin yksi kaksoissidos joko 4-asemassa tai 5-asemassa.

Käsillä olevan keksinnön mukaisesti valmistettuja yhdisteitä kuvattaessa nämä yhdisteet luetaan yleisesti 23,19-etyleenisillan sisältäviksi steroideiksi, ja saman-20 laista terminologiaa käytetään alla nimettäessä joitakin spesifisiä yhdisteitä. Tämän nimistön mukaisesti on kaksi- « · hiilinen ketju, jossa on kaksi vapaata valenssia, jotka • · ovat eri hiiliatomeissa, ja joka yhdistää 2- ja 19-asemat : tavallisessa steroidimolekyylissä. β-nimitystä käytetään 2 : 25 lisäksi 2-aseman yhteydessä, kun tarkoitetaan sitä, että 3 • · « · 4 ·;··· silta on liittynyt 3-puoleen.

Eräitä spesifisiä esimerkkejä käsillä olevan kek-sinnön mukaisesti valmistettavista yhdisteistä ovat seu-. . raavat: 30 23,19-(etyleeni )androst-4-eeni-3,17-dioni, • · · *\ * 23,19-(etyleeni)androsta-4,6-dieeni-3,17-dioni, : . 23,19-(etyleeni)androst-5-eeni-33,173-dioli, :***: : 23,19-(etyleeni)androst-5-eeni-33,173-diolidiasetaatti, \ 23,19-etyleeni-6-metyleeniandrost-4-eeni-3,17-dioni, *·. > 35 23,19-(etyleeni )androst-4-eeni-3,6,17-trioni, 3 102073 2fl,19-etyleeni-6fi-hydroksiandrost-4-eeni-3,17-dioni, 2B,19-etyleeni-19-metyyliandrost-4-eeni-3,17-dioni.

Keksinnön mukaisesti yhdisteitä voidaan saada 19-substituoidun steroidin sisäisellä syklisaatiolla, kun 5 tällä steroidilla on sopivassa asemassa oleva poistuva ryhmä tuossa 19-substituentissa. Täsmällisemmin sanottuna käsillä olevan keksinnön mukaiselle menetelmälle on tunnusomaista, että yhdiste, jolla on kaava 10 R3 f?

Zv > R2 X

χγρπ R4 15 o jossa R2, Rj ja R4 ovat edellä määriteltyjä ja Z on poistuva ryhmä, saatetaan reagoimaan vahvan emäksen kanssa iner-tissä liuottimessa jäähdyttäen, jolloin saadaan yhdiste, 20 jolla on kaava

«3 P

; *’ R4 3 R2 25 Ίτ

• · · I

·*· · I

·;;= ολΑ • · · • · · * minkä jälkeen mahdollisesti suoritetaan jokin seuraavista reaktioista: m · • · · ***** 30 (a) reaktio kloraniilin kanssa t-butanolissa, joi- «·« *— » • · * *·* * loin saadaan vastaava 4,6-dieeni; ·*·.. (b) reaktio formaldehydiasetaalin kanssa, jolloin .***. saadaan vastaava 6-metyleeniyhdiste; • · « (c) pelkistys natriumboorihydridillä, jolloin saa-*·*··’ 35 daan vastaava 3B, 17B-dioli; 4 102073 (d) reaktio asetanhydridin kanssa, jolloin saadaan vastaava 3-asetoksi-3,5-dieeni, ja sitten käsittely kal-siumboorihydridillä etanolissa -15 °C:ssa, jolloin saadaan vastaava δ5-3Β,17B-dioli; 5 (e) edellä kohdassa (d) saadun diolin reaktio sopi van anhydridin kanssa, jolloin saadaan vastaava diesteri; (f) reaktio etyleeniglykoliylimäärän kanssa, kun läsnä on katalyyttinen määrä happoa, jolloin saadaan vastaava Δ5-3,5-bis-etyleeniketaali, ja sen jälkeen reaktio m- 10 klooriperbentsoehapon kanssa dikloorimetaanissa 0 eC:ssa, jolloin saadaan vastaava 5,6-epoksidi, ja sitten vielä reaktio perkloorihapon kanssa tetrahydrofuraanin vesiliuoksessa, jolloin saadaan 5,6-dihydroksi-3,17-diketoni, ja tämän jälkeen hapetus Jonesin reagenssilla ja sitten dehy- 15 draatio p-tolueenisulfonihapolla, jolloin saadaan δ4-3,6,- 17-trioni; (g) reaktio etyleeniglykoliylimäärän kanssa, kun läsnä on katalyyttinen määrä happoa, jolloin saadaan vastaava Δ5-3,5-bis-etyleeniketaali, joka sen jälkeen hydro- 20 lysoidaan selektiivisesti vastaavaksi 17-ketoniksi käyttäen 0,15-%:ista perkloorihapon vesiliuosta t-butanolissa ja '· ··' dikloorimetaanissa, minkä jälkeen 17-ketoni pelkistetään * » 17B-hydroksiyhdisteeksi käyttäen natriumboorihydridin yli-määrää etanolissa, jota seuraa käsittely suolahapon vesi- • ♦ : j|: 25 liuoksella 3-ketaali-suojaryhmän poistamiseksi, jolloin jäljelle jää vapaa 3-ketoni; (h) pelkistys tri-(t-butoksi)-alumiinihydridin • · kanssa, jolloin saadaan 3-keto-17B-hydroksiyhdiste; (i) kohdassa (g) tai (h) saadun 3-ketonin reaktio • · « · 30 metyleenitrifenyylifosforaanin kanssa, jolloin saadaan • * « · V vastaava 3-metyleeni-17-hydroksiyhdiste, minkä jälkeen • · • suoritetaan reaktio Jonesin reagenssin kanssa, jolloin saadaan 3-metyleeni-17-ketoni.

^ Edullinen emäs tässä reaktiossa on litiumheksame- • · * 35 tyylidisilatsidi, ja edullinen liuotin on tetrahydrofuraa- 5 102073 ni. Z voi olla mikä tahansa luonteva poistuva ryhmä, joskin sulfonaattiesterit ovat edullisia, ja erityisen edullinen on 4-tolueenisulfonaattiesteri.

Edellä kuvatun menetelmän ensimmäinen vaihe antaa 5 vastaavan tuotteen, jolla on sama steroidiydin, mutta jossa on 2fi,19-etyleenisilta. Vaihtoehtoisissa lisäreaktiöis-sa tätä yhdistettä voidaan käyttää muiden määriteltyjen yhdisteiden valmistamiseksi. Näitä muunnoksia käsitellään tarkemmin tässä jäljempänä ikään kuin niitä käytettäisiin 10 2B, 19-(etyleeni)androst-4-eeni-3,17-dioniyhdisteeseen, vaikka niitä voidaan myös käyttää muihin samanlaisiin yhdisteisiin.

Täten käsiteltäessä 2β, 19-(etyleeni )androst-4-eeni- 3,17-dionia kloraniililla t-butanolissa, saadaan vastaava 15 4,6-dieeni, kun taas 2β,19-(etyleeni)androst-4-eeni-3,17-dionin reaktiossa formaldehydiasetaalin kanssa saadaan vastaava 6-metyleeniyhdiste. Jälkimmäisessä konversiossa sopivimpia reagensseja ovat esimerkiksi p-tolueenisulfoni-happo, vahvat mineraalihapot, happamat ioninvaihtohartsit 20 tai edullisesti fosforyylikloridi formaldehydidimetyylin tai dietyyliasetaalin kanssa.

• '/ Jos 2β,19-(etyleeni)androst-4-eeni-3,17-dionia pel s’kistetään natriumboorihydridillä etanolissa, saadaan vas- « « : taava Δ*-3β,17B-dioli. Jotta saataisiin Δ5-3β,17B-dioli, • « « : 25 täytyy 2β, 19-(etyleeni)androst-4-eeni-3,17-dioni ensin • · · · muuttaa vastaavaksi 3-asetoksi-3, 5-dieeniksi. Tämä muutta- • · minen suoritetaan käsittelemällä dionia asetanhydridillä, • · kun läsnä on katalyyttinen määrä happoa, kuten g-tolueeni-sulfonihappoa, minkä jälkeen lisätään pyridiiniä, tai • · · *·*·’ 30 muuttaminen voidaan suorittaa antamalla dionin reagoida • · · *.* * asetanhydridiylimäärän ja katalyyttisen määrän kanssa ·*·.. 70-%:ista, vesipitoista perkloorihappoa, kun liuottimena « .·**. on etyyliasetaatti, minkä jälkeen seos neutraloidaan nat- • t * • riumkarbonaatilla. Sitten 3-asetoksi-3,5-dieeniä käsitel- ·.:.· 35 lään kalsiumboorihydridillä etanolissa -15 °C:ssa, jolloin ’* * saadaan toivottu Δ5-άίοϋ. Kun diolia käsitellään anhydri- 6 102073 dillä, kuten asetanhydridillä, saadaan vastaava diasetaat-ti.

Kun 26,19-(etyleeni)androst-4-eeni-3,17-dionin annetaan reagoida etyleeniglykoliylimäärän kanssa, kun läs-5 nä on katalyyttinen määrä happoa, kuten metaanisulfonihap-poa, saadaan vastaava 3,17-bisetyleeniketaali, jossa kak-soissidos on siirtynyt 5-asemaan. 5-eenin hapetuksessa m-klooriperbentsoehapolla dikloorimetaanissa 0 °C:ssa saadaan vastaava 5,6-epoksidi. Kun tämä epoksidi reagoi perit) kloorihapon kanssa vesipitoisessa tetrahydrofuraanissa, saadaan 5,6-dioli ja samaan aikaan ketaalit poistetaan, jolloin jäljelle jää vapaa 3,17-diketoni. Kun dioli hapetetaan Jonesin reagenssilla, saadaan vastaava 5-hydroksi- 6-ketoni (itse asiassa 5-hydroksi-3,6,17-trioni), josta 15 sitten poistetaan vettä käyttämällä p-tolueenisulfonihap-poa, jolloin saadaan δ4-3,6,17-trioni.

Edellisessä kappaleessa saatua alkuperäistä bis-ketaalia voidaan käyttää myös erilaisessa synteesissä. Siten se voidaan hydrolysoida selektiivisesti vastaavaksi 20 17-ketoniksi käyttämällä 0,15-%:ista, vesipitoista per- kloorihappoa t-butanolissa ja dikloorimetaanissa. Sitten • ·' 17-ketoni pelkistetään ylimäärällä natriumboorihydridiä • · etanolissa 0 °C:ssa, jolloin saadaan vastaava 176-hydrok- « i.j.: siyhdiste. Tämän alkoholin käsittely vesipitoisella suola- i 25 hapolla poistaa 3-ketaalin suojaryhmän, jolloin jäljelle >:··· jää vapaa 3-ketoni. Vaihtoehtoisesti 3-keto-176-hydroksi- 4 {"’· yhdiste voidaan saada, kun pelkistetään selektiivisesti 3,17-diketoni käyttäen litiumtri-(t-butoksi)alumiinihydri-diä. Sitten tämän 3-ketonin annetaan reagoida metyleeni-

4 I I

30 trifenyylifosforaanin kanssa, jolloin saadaan vastaava 3- • · · • · · *. metyleeni-17-hydroksiyhdiste. Sitten tämä hapetetaan Jone- ·* j ’♦· sin reagenssilla, jolloin saadaan haluttu 3-metyleeni-17- ketoni.

]·. Edellä esitetyt spesifiset lähtöaineet 26,19-(ety- • « 4 35 leeni)androst-4-eeni-3,17-dionin valmistamiseksi voidaan • 4 saada seuraavien reaktiosarjojen avulla lähtien liikkeelle • · 7 102073 3,3,17,17-bis(etyleenidioksi)androst-5-eeni-19-aalista. Wittig-reaktiota käytetään tämän yhdisteen kanssa, jotta saadaan kaksihiilinen ketju 19-asemaan. Edellä mainittua 19-aldehydiä käsitellään trietyylifosfonoasetaatilla ja 5 vahvalla emäksellä, kuten kaliumheksametyylisilatsidilla inertissä liuottimessa, kuten tetrahydrofuraanissa. Sitten reaktiota jatketaan syklisen polyeetterin, kuten 18-kruu-nu-6:n, läsnä ollessa inertissä ilmakehässä. Reaktion loppuunsaattamisen varmistamiseksi käytetään pitempiaikaista 10 kuumennusta palautusjäähdytyslämpötilassa. Lisäksi voidaan käyttää toistuvia käsittelyjä fosfonoasetaatilla ja emäksellä reaktion loppumisen varmistamiseksi. Tällä reaktiolla saatu spesifinen tuote on yhdiste, jossa 19-okso on korvattu 19-[(etoksikarbonyyli)metyleeni]-ryhmällä.

15 Sitten sivuketjun kaksoissidos pelkistetään selek tiivisesti käsittelemällä yhdistettä magnesiumilla metano-lissa. Trans-esterifikaatio tapahtuu myös, ja pelkistetty tuote on 3,3,17,17-bis(etyleenidioksi)-19-[(metoksikarbo-nyyli)metyyli]-androst-5-eeni. Kun esteriryhmä pelkiste-20 tään hydridipelkistimellä, kuten litiumalumiinihydridillä, . . inertissä liuottimessa, kuten etyylieetterissä, saadaan • · a \ vastaava 19-(2-hydroksietyyli)-yhdiste, jonka sitten anne- • * « ':· taan reagoida sopivan reagenssin, kuten p-tolueenisulfo- • · * M.* nyylikloridin kanssa pyridiinissä, jolloin saadaan vastaa- • · i 25 va esteri. Muut poistuvat ryhmät voidaan hoitaa tavanomai- 1 , androst-5-eeni. Vaihtoehtoisesti tämä 19-(2-oksoetyyli)- » silla menetelmillä. Sitten etyleeniketaaliryhmät poiste- t taan tavanomaisilla menetelmillä, kuten käsittelemällä niitä p-tolueenisulfonihapolla asetonissa. Näin saadaan haluttu 3,17-dionivälituote.

30 Välituotteet yhdisteille, joissa R4 on Ci.-alkyyli, • · · '*· voidaan saada käyttämällä joitakin samoja välituotteita, : "** joihin on viitattu edeltävässä kappaleessa. Siten 19-[(me- • « · toksikarbonyyli )metyyli]-yhdiste voidaan pelkistää käyttä-. mällä di-isobutyylialumiinihydridiä tolueenissa, jolloin 35 saadaan 3,3,17,17-bis-(etyleenidioksi)-19-(2-oksoetyyli)- • · e 102073 yhdiste voidaan saada hapettamalla vastaava 19-(2-hydrok-sietyyli) yhdiste käyttämällä oksalyylikloridia ja dime-tyylisulfoksidia ja näiden jälkeen trietyyliamiinia. Sitten oksoyhdisteen annetaan reagoida sopivan alkyyliliti-5 umin tai alkyyli-Grignard-yhdisteen kanssa tetrahydrofu-raanissa, jolloin saadaan vastaava 19-(2-alkyyli-2-hydrok-sietyyli)-yhdiste. Sitten tämä alkoholi muutetaan vastaavaksi p-tolueenisulfonaattiesteriksi, ja etyleeniketaali-suojaryhmät poistetaan, kuten edellä olevassa kappaleessa 10 on esitetty.

Käsillä olevan keksinnön mukaisesti valmistetut yhdisteet ovat aromataasi-inhibiittoreita. Aromataasi-in-hibiittorit ovat hyödyllisiä hoidettaessa hyperestrogene-miaa. Yhdisteet ovat hyödyllisiä kontrolloitaessa epänor-15 maalin korkeita estrogeenitasoja silloin, kun tarkasteltavat korkeat tasot ovat suhteellisen pysyviä sekä myös silloin, kun esiintyy lyhytaikaisia, vaihtelevia kohonneita tasoja, jotka ovat osa syklisiä neuroendokriinisiä funktioita. Sekä mies- että naispuolisia yksilöitä voidaan 20 hoitaa, vaikkakin estrogeenien taso, jota pidetään korkea na miespuolisille yksilöille, on paljon alhaisempi kuin se • « • V määrä, jota pidetään korkeana naispuolisille yksilöille.

Nämä yhdisteet ovat hyödyllisiä myös ehkäisyaineina eh-; käistäessä ovulaatiota tai munasolun kiinnittymistä kohdun ta· i 25 seinämään, tai ne vähentävät parittelukäyttäytymistä mies-··· · puolisilla yksilöillä, kun aivojen aromatisaatiota vaadi- .···. taan sellaiseen käyttäytymiseen. Lisäksi näillä yhdisteil- • « · lä on merkitystä hoidettaessa gynekomastiaa (miehen rinto- . . jen suurentuminen), miesten hedelmättömyyttä, joka johtuu • · · *;1;1 30 kohonneista estrogeenitasoista, ja hyperestrogenemiaa, • · · *·1 ’ joka saattaa edeltää sydäninfarktia. Yhdisteitä voidaan käyttää myös hoidettaessa rintasyöpää ja useita muita est- • .**'· rogeenin aiheuttamia tai estrogeenin stimuloimia kasvaimia • · · *, ja liikakasvuun liittyviä kudossairauksia.

♦ « · *♦·1' 35 Halutun tehon saamiseksi voidaan yhdisteitä antaa 1 oraalisesti, parenteraalisesti, esimerkiksi intravenoosi- 9 102073 sesti, intraperitoneaalisesti, intramuskulaarisesti tai subkutaanisesti, mukaan lukien aktiivisen ainesosan injektio suoraan kudokseen tai kasvaimeen, hoidon tarpeessa olevalle potilaalle. Potilaalla tarkoitetaan lämminverisiä 5 eläimiä, esimerkiksi nisäkkäitä, kuten ihmiset, kädelliset, karja, koirat, kissat, hevoset, lampaat, hiiret, rotat ja siat. Näitä yhdisteitä voidaan antaa myös farmaseuttisen valmisteen muodossa, ja ne voidaan laittaa hi-dastetusti vapauttaviin annostuslaitteisiin. Annetun yh-10 disteen määrä vaihtelee laajalla alueella, ja se voi olla mikä tahansa tehokas määrä. Hoidettavasta potilaasta, potilaan kunnosta ja antotavasta riippuen annettavan yhdisteen tehokas määrä vaihtelee välillä 0,01 - 150 mg painokiloa kohden päivässä ja edullisesti annos on noin 0,1 -15 50 mg painokiloa kohden päivässä.

Oraalista antoa varten yhdisteet voidaan formuloida kiinteiksi tai nestemäisiksi valmisteiksi, kuten kapseleiksi, pillereiksi, tableteiksi, rakeiksi, jauheiksi, liuoksiksi, suspensioiksi tai emulsioiksi. Kiinteä yksik-20 köannosmuoto voi olla kapseli, joka voi olla tavallinen gelatiinityyppinen kapseli, joka sisältää aktiivista yh-:!**: distettä ja kantajaa, esimerkiksi liukastusaineita, ja inerttiä täyteainetta, kuten laktoosia, sakkaroosia ja • · . maissintärkkelystä. Aktiivinen yhdiste tabletoida tavan- : 25 omaisilla tablettipohjilla, kuten laktoosilla, sakkaroo- • · ♦ ‘U silla ja maissintärkkelyksellä, yhdessä sitovien aineiden, ... kuten akaasian, maissintärkkelyksen, algiinihapon ja liu- • · · kastusaineen, kuten steariinihapon tai magnesiumstearaatin kanssa.

• · 30 Parenteraalisesti yhdisteitä voidaan antaa yhdis- • · · : teen injektoitavina liuosannoksina tai suspensioannoksina fysiologisesti hyväksyttävässä laimentimessa farmaseutti- • · ’···. sen kantajan kanssa, joka voi olla steriili neste, kuten ψ vesi öljyssä, pinta-aktiivisen aineen tai muiden farma-35 seuttisesti hyväksyttävien adjuvanttien kanssa tai ilman ·"·* niitä. Kantajia, joita voidaan käyttää näissä valmisteis- 10 102073 sa, ovat öljyt, jotka ovat peräisin raakaöljystä, eläimistä tai kasveista, tai ne ovat synteettisiä, esimerkiksi pähkinäöljy, soijaöljy ja mineraaliöljy. Yleisesti edullisia nestemäisiä kantajia, erityisesti injektoitavissa li-5 uoksissa, ovat vesi, suolaliuos, vesipitoinen dekstroosi ja muut sokeriliuokset, etanolit, glykolit, kuten propy-leeniglykoli tai polyetyleeniglykoli.

Yhdisteitä voidaan antaa kutaanisen laastarin, de-potinjektion tai implantaattivalmisteen muodossa, joita 10 voidaan formuloida sellaisella tavalla, että ne vapauttavat aktiivista ainesosaa hitaasti pitkän ajanjakson aikana. Aktiivinen ainesosa voidaan puristaa pelletteihin tai pieniin sylintereihin, ja ne voidaan laittaa subkutaani-sesti tai intramuskulaarisesti depotinjektioina tai im-15 plantaatteina. Impiantaateissä voidaan käyttää inerttejä materiaaleja, kuten biologisesti hajoavia polymeerejä ja synteettisiä silikoneja, esimerkiksi silikonikumia Silastic11, jota valmistaa Dow Corning Corporation. Lisäinformaatiota sopivista farmaseuttisista kantajista ja formuloin-20 titekniikoista löytyy standarditeksteistä, kuten teoksesta Remington’s Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easton, Pennsylvania.

Seuraavaksi kuvataan spesifisiä farmaseuttisia for- • · * • / mulaatioita, jotka ovat sopivia annettaviksi oraalisesti.

*·:·* 25 Tabletti • · :.t : (a) 2S, 19-(etyleeni)androst-4-eeni-3,17-dionia 75 g (b) laktoosia 1,216 kg : (c) maissintärkkelystä 0,3 kg ·*:*: 30 Sekoita aktiivinen ainesosa, laktoosi ja maissin • · tärkkelys tasaisesti. Granuloi 10-%:isella tärkkelystah-naila. Kuivaa kosteuspitoisuuteen noin 2,5 %. Seulo seulan • · • ” nro 12 läpi. Lisää ja sekoita seuraava: (a) magnesiumstearaattia 0,015 kg . 35 (b) maissintärkkelystä qs ad 1,725 kg • ♦ · ·» * · · « n 102073

Purista sopivalla tablettikoneella painoon 0,115 g per tabletti.

Pehmeä gelatiinikapseli (a) 28,19-(etyleeni)androst-4-eeni-3,17-dionia 0,25 kg 5 (b) polysorbaatti 80:aa 0,25 kg (c) maissiöljyä qs ad 25,0 kg

Sekoita ja täytä 50 000 pehmeää gelatiinikapselia. 10 Käsillä olevan keksinnön mukaisesti valmistettujen yhdisteiden aktiivisuutta aromataasin inhiboinnissa kuvataan käyttämällä laboratoriomenetelmiä, jotka ovat samanlaisia menetelmiin, joita on kuvattu US-patenttijulkaisuissa 4 322 416 ja julkaisussa Johnston et ai., Endocrin-15 ology 115:776 (1984) ja Burkhart et ai., Steroids 45:357 (1985).

Tässä määrityksessä inhibiittoria inkuboidaan ensin entsyymin kanssa ennen kuin määritetään aktiivisuus korkeiden substraattitasojen ollessa läsnä. Aikaan sidottu 20 entsyymiaktiivisuuden pieneneminen voi olla osoitus inhibition halutun menetelmän irreversiibelistä sitoutumises-ta.

• i i ; Ajasta riippuvassa määrityksessä määrä entsyymi- • i « inhibiittoria 100 pl:ssa analyysipuskuria, joka tarjoaa • · < /*; 25 määritysolosuhteet, jotka yleensä ovat välillä 1 nm - • · · 10 pm, lisätään 35 ml:n sentrifugiputkiin, jotka sisältä- * * vät 600 μΐ NADPH:ta muodostavaa systeemiä. Esi-inkubointi ··· ·.· · aloitetaan lisäämällä 700 μΐ aromataasivalmistetta, yleen sä 300 - 800 pg mikrosomaalista proteiinia per millilitra 30 määrityspuskuria. Nämä valmisteet sekoitetaan käyttäen • · ·*·*: pyörösekoitinta, ja niitä inkuboidaan 0, 5, 10 tai 20 mi- ,* nuuttia 25 °C:ssa. Sitten lisätään 100 μΐ androsteenidio- • · nia (6,8 μΜ), joka sisältää 18-3H-androsteenidionia mää- • « *···' rityspuskurissa, jolloin saadaan substraatin määrityskon- . 35 sentraatio (0,55 μΜ), joka on ainakin 10 kertaa androstee- « 4 · ·;··· nidionin K„ (0,04 μΜ). Sekoituksen jälkeen jatketaan ent- 12 102073 syymi-inkubointia 10 minuutin ajan, ennen kuin reaktio lopetetaan lisäämällä kloroformia. Radioaktiivisuuden määrä vesifraktiossa määritetään tuikemenetelmillä. Entsy-maattinen aktiivisuus jokaiselle inhihiittorin pitoisuu-5 delle jokaisena esi-inkuboinnin ajanjaksona lasketaan prosentteina "0 minuutin" vehikkelikontrollista, joka on mielivaltaisesti asetettu 100 prosentiksi. Siksi tämä entsyy-mi-inhibitio ilmaistaan prosentteina (100 prosenttia miinus entsyymiaktiivisuusprosentti, kun inhibiittoria on mu-10 kana).

Entsyymikineettisessä analyysissä käytetään Kitz-Wilson-kuvaajaa ajasta riippuvaisissa määrityksissä. Nämä analyysit tarjoavat arvioita näennäisestä inaktivaation K^stä, joka edustaa inhibiittorikonsentraatiota, joka vaa-15 ditaan tuottamaan entsyymi-inaktivaation puolimaksimaali- nen nopeus. Entsyymi-inaktivaation ensimmäisen kertaluvun kaltainen nopeusvakio (kcat) ja äärettömien inhibiittoripi-toisuuksien inaktivaation puoliintumisaika (t50) määritettiin. k^/K* suhde (inaktivaatio) antaa käyttöön indeksilu- 20 vun, joka kasvaa, kun entsyymi-inaktivaatio tehokkuus li sääntyy ja inhibiittorin affiniteetti entsyymin aktiivi- :X: seen kohtaan kasvaa. Käyttäen tätä testiä saatiin seuraa- * · ;*·,· vat tulokset yhdisteelle 28,19-(etyleeni)androst-4-eeni- • « . 3,17-dioni: • · · : V*. 25 ki (nM) = 23,9 1IJ.S t50 (min) = °'87 kcat/Ki - 557,710 *·* ’ Seuraavat esimerkit kuvaavat käsillä olevaa keksin- « töä, mutta niitä ei pidä tulkita keksintöä millään lailla *.·.· 30 rajoittavina.

V * Esimerkki 1 ·· :·/# Sekoitettuun liuokseen, jossa oli trietyylifosfono- .··}, asetaattia (3,06 ml, 15,44 mmol) ja 18-kruunu-6:ta • ' i *!· (1,4,7,10,13,16-heksaoksasyklo-oktadekaania, 5,44 g, 35 20,59 mmol) tetrahydrofuraanissa (100 ml) argonin alla,

lisättiin kaliumheksametyylidisilatsidia (30,88 ml 0,5M

13 10207¾ liuosta tolueenissa, 15,44 mmol). Viiden minuutin kuluttua lisättiin 3,3,17,17-bis(etyleenidioksi)androst-5-eeni-19-aalia (2,00 g, 5,15 mmol), reaktiota sekoitettiin 30 minuuttia ja sitten se kuumennettiin palautusjäähdytyslämpö-5 tilaan. Sen jälkeen kun reaktioseosta oli pidetty palautus jäähdytyslämpötilassa 89 tuntia, sen annettiin jäähtyä huoneenlämpöiseksi. Erillisessä pullossa sekoitettuun liuokseen, jossa oli trietyylifosfonoasetaattia (0,51 ml, 2,57 mmol) ja 18-kruunu-6:ta (0,68 g, 2,57 mmol) tetrahyd-10 rofuraanissa (20 ml) argonin alla, lisättiin kaliumheksa-metyylidisilatsidia (5,14 ml 0,5 mol/1 liuosta tolueenissa, 2,57 mmol). Viiden minuutin kuluttua tämä liuos lisättiin siirtoneulan kautta reaktioseokseen, ja reaktioseosta kuumennettiin palautusjäähdytyslämpötilassa vielä 46 tun-15 tia. Reaktio konsentroitiin noin kolmasosaan alkuperäisestä tilavuudesta pyöröhaihduttimessa ja kaadettiin etyyli-eetterin (250 ml) ja kyllästetyn kaliumkloridin vesiliuoksen (250 ml) seokseen. Kerrokset erotettiin ja vesikerros-ta uutettiin vielä etyylieetterillä (50 ml). Yhdistetyt 20 orgaaniset uutteet pestiin kyllästetyllä vesipitoisella kaliumkarbonaatilla (2 x 250 ml), kuivattiin (Na2S04) ja konsentroitiin. Sen jälkeen kun oli suoritettu flash-kro-matografointi (6 x 15 cm:n silikageelikolonni) eluoiden e- : tyyliasetaatti/heksaanilla (40:60), saatiin 3,3,17,17-bi- • · · • 25 s( etyleenidioksi)-19-[(etoksikarbonyyli)metyleeni]androst- * · · · 5-eeniä (2,10 g, 89 %) valkoisena vaahtona.

.·;·. 1H-NMR (CDC13) δ 6,93 (d, 1H, J=15,9 Hz, α,β-tyydyt- • · · tymätön vinyyli), 5,78 (d, 1H, J*15,9 Hz, a,β-tyydyttymä-. . tön vinyyli), 5,62 - 5,68 (m, 1H,vinyyli), 4,16 - 4,27 • · t 30 (rn, 2H, 0CH2), 3,79 - 4,02 (m, 8H, 2 x 0CH2CH20), 1,31 1 (t, J=7,2 Hz, CH3), 0,72 (s, 3H, 18-CH3).

IR (KBr) 3434, 2976, 2944, 2876, 1718, 1642, 1306, 1288, 1180, 1104, 1042 cm-1.

* · · MS (Cl, CH4) m/z (rel intensiteetti) 459 (MH*, 100), 35 413 (20), 397 (14), 99 (14).

14 102073

Esimerkki 2

Magnesiumlastuja (4,77 g, 0,20 mol) metanolissa (100 ml) käsiteltiin pienellä jodikiteellä. Sen jälkeen kun väri oli hävinnyt ja kaasun muodostus oli selvää, li-5 sättiin tähän liuos, jossa oli 3,3,17,17-bis(etyleenidi-oksi)-19-[(etoksikarbonyyli)metyleeni]androst-5-eeniä (1,80 g, 3,92 mmol) tetrahydrofuraanissa (10 ml). Vesihaudetta ja sitten jäävesihaudetta käytettiin hidastamaan reaktiota. Sen jälkeen kun kaikki magnesiumlastut olivat 10 liuenneet, reaktioseos konsentroitiin noin neljännekseen alkuperäisestä tilavuudesta pyöröhaihduttimellä, ja tähän konsentraattiin lisättiin etyylieetteriä (250 ml) vedessä (300 ml). IN suolahappoa (noin 300 ml) lisättiin hitaasti samalla sekoittaen, kunnes vesikerroksen pH oli 4-5.

15 Kerrokset erotettiin, etyylieetteriä (200 ml) lisättiin vielä vesikerrokseen, ja vesikerros tehtiin happamaksi pH-arvoon 2-3 lisäämällä vielä 1 N suolahappoa (noin 100 ml). Sitten kerrokset erotettiin uudelleen, yhdistetyt orgaaniset uutteet pestiin 0,5 N suolahapolla (2 x 100 ml) 20 ja sitten suolavedellä (100 ml). Sen jälkeen kun seos oli kuivattu (Na2S04) ja konsentroitu, saatiin vaikeahkoa vaah-toa (1,63 g), joka 1H-NMR-spektrillä osoittautui olevan ;·*./; 3,3,17,17-bis(etyleenidioksi )-19 - [ (metoksikarbonyyli )me- .·. tyyli]androst-5-eenin ja lähtöaineen metyyliesterin seos • · v 25 40:60. Kun edellä kuvattu menetelmä toistettiin 3 kertaa • » • · · Γ” t peräkkäin, saatiin raakatuotetta, joka sisälsi vähemmän «... kuin 5 % lähtöaineen metyyliesteriä. Sen jälkeen kun oli • · ♦ .’·* * suoritettu flash-kromatografointi (5 x 12 cm:n silikagee- likolonni) eluoiden etyyliasetaatti/heksaanilla (40:60), « · ·.·. 30 saatiin 3,3,17,17-bis(etyleenidioksi)-19-[(metoksikarbo- ♦ ♦ · V 1 nyyli)metyyli]androst-5-eeniä (1,10 g, 63 %) valkoisena vaahtona.

• · * ^-NMR (CDC13) 6 5,53 - 5,61 (m, 1H, vinyyli), 3,81 -4,04 (m, 8H, 2 x 0CH2CH20), 3,67 (s, 3H, 0CH3), 0,89 35 (s, 3H, I8-CH3).

« « * ’ < c is 102073 IR (KBr) 3438, 2948, 2876, 1738, 1634, 1436, 1380, 1308, 1104, 1044 cm-1.

MS (CI, CH4) m/z (rel. intensiteetti) 447 (MH*, 100), 415 (12), 385 (20), 99 (12). MS (El) m/z (rel. in-5 tensiteetti) 446 (M*, 28), 99 (100).

Esimerkki 3

Sekoitettuun liuokseen, jossa oli 3,3,17,17-bis-(etyleenidioksi )-19- [ (metoksikarbonyyli)metyyli]androst-5-eeniä (1,04 g, 2,33 mmol) vedettömässä etyylieetterissä 10 (30 ml) argonin alla ja jäävesihauteessä, lisättiin li- tiumalumiinihydridiä (0,13 g, 3,49 mmol). Yhden tunnin jälkeen reaktiota käsiteltiin vedellä (0,1 ml) ja sen jälkeen 1 N natriumhydroksidilla (0,1 ml) ja lopulta vielä vedellä (0,3 ml). Supernatantit dekantoitiin ja konsent-15 roitiin, jolloin saatiin raakatuotetta. Sen jälkeen kun oli suoritettu flash-kromatografointi (5 x 10 cm:n silika-geelikolonni) eluoiden etyyliasetaatti/heksaanilla (60:40), saatiin 3,3,17,17-bis(etyleenidioksi)-19-(2-hyd-roksietyyli)androst-5-eeniä (0,90 g, 93 %) valkoisena 20 vaahtona.

HRES laskettiin C25H3905:lle (MH*) - 419,2797, saatiin MH* = 419,2775; virhe -5,2 ppm.

^-NMR (CDC13) δ 5,51 - 5,57 (m, 1H, vinyyli), f:' 3,82 - 4,03 (m, 8H, 2 x 0CH2CH20), 3 , 53 - 3 , 64 (m, 2H, 25 CH20), 0,90 (S, 3H, 18-CH3).

*<*.*..: IR (KBr) 3440, 2944, 2874, 1632, 1378, 1308, 1104, .♦ * .···. 1048 cm*1.

• · · ,* MS (CI, CH4) m/z (rel. intensiteetti) 420 (27), 419 (MH*, 100), 418 (12), 417 (22), 357 (30), 99 (12).

30 Esimerkki 4 • · · • · · *·* Sekoitettuun liuokseen, jossa oli 3,3,17,17-bis- ·'·.. (etyleenidioksi )-19-( 2-hydroksietyyli )androst-5-eeniä • .*' (0,42 g, 1,00 mmol) pyridiinissä (10 ml) argonin alla, • · « ·, lisättiin p-tolueenisulfonyylikloridia (0,29 g, *··' 35 1,50 mmol). 3,5 tunnin jälkeen reaktio konsentroitiin • f 1 * 16 102073 pyöröhaihduttimella, ja jäännös otettiin etyylieetterin (60 ml) ja veden (60 ml) seokseen. Kerrokset erotettiin, ja vesikerros uutettiin vielä etyylieetterillä (30 ml). Yhdistetyt orgaaniset kerrokset pestiin 1 N suolahapolla 5 (30 ml), kyllästetyllä natriumbikarbonaatin vesiliuksella (30 ml) ja sitten suolavedellä (30 ml), kuivattiin (Na2S04) ja konsentroitiin, jolloin saatiin raaka tuote. Sen jälkeen kun oli suoritettu flash-kromatografointi (5 x 12 cm:n silikageelikolonni) eluoiden etyyliasetaatti/hek-10 saanilla (35:65), saatiin 3,3,17,17-bis(etyleenidioksi)-19-[2-(4-tolueenisulfonyylioksi)etyyli]androst-5-eeniä (0,34 g, 60 %) valkoisena vaahtona.

lH-NMR (CDC13) δ 7,80 ja 7,36 (pr d, 4H, aryyli), 5,49 - 5,53 (m, 1H, vinyyli), 3,81 - 4,03 (m, 10H, 2 x 15 0CH2CH20) ja CH20), 2,46 (s, 3H, aryyli CH3), 0,83 (s, 3H, I8-CH3).

MS (CI, CH4) m/z (rel intensiteetti) 574 (22), 573 (MH+, 60), 419 (21), 402 (26), 401 (100), 400 (16), 399 (28), 357 (21), 339 (21), 217 (23), 173 (43), 93 (17).

20 Esimerkki 5

Sekoitettuun liuokseen, jossa oli 3,3,17,17-bis-(etyleenidioksi )-19- [2-(4-tolueenisulfonyylioksi )etyyli] -androst-5-eeniä (0,67 g, 1,17 mmol) asetonissa (25 ml), lisättiin p-tolueenisulfonihapon monohydraattia (44 mg, • ; 25 0,23 mmol). 24 tunnin jälkeen reaktioseos konsentroitiin ··· · ....i pyöröhaihduttimella, jäännös liuotettiin metyleeniklori- diin (3 ml) ja laitettiin kolonniin. Sen jälkeen kun oli • · · suoritettu flash-kromatografointi (4 x 12 cm:n silikagee- ., likolonni) eluoiden etyyliasetaatti/heksaanilla (65:35), • · « *;,* 30 saatiin 19-[2-(4-tolueenisulfonyylioksi )etyyli]androst-4- • · ·, *·* ’ eeni-3,17-dionia (0,46 g, 81%) valkoisena vaahtona.

Γ·..* 1H-NMR (CDCI3) 6 7,79 ja 7,35 (pr d, 4H, J=8,l Hz, ·*" aryyli), 5,87 (s, 1H, vinyyli), 4,03 (t, 2H, J=5,5 Hz, CH20), 2,46 (s, 3H, aryyli-CH3), 0,92 (s, 3H, 18-CH3).

35 IR (KBr) 3444, 2946, 2858, 1738, 1670, 1618, 1358, , 1188, 1176 cm'1.

1 1 17 102073 MS (CI, CH4) m/z (rel. intensiteetti) 485 (MH*, 100), 331 (17), 313 (17).

Esimerkki 6

Sekoitettuun liuokseen, jossa oli litiumheksametyy-5 lisilatsidia (1,50 ml 1,0 mol/1 liuosta tetrahydrofuraa-nissa, 1,50 mmol) tetrahydrofuraanissa (15 ml) argonin alla -78 eC:ssa, lisättiin tipoittain kylmää (-78 eC) liuosta, jossa oli 19-[2-(4-tolueenisulfonyylioksi)etyyli]-androst-4-eeni-3,17-dionia (242 mg, 0,50 mmol) tetrahydro-10 furaanissa (10 ml). Sen jälkeen kun reaktioseosta oli pidetty 40 minuuttia -78 °C:ssa, sen annettiin lämmetä hitaasti (noin 2 tuntia) huoneenlämpöiseksi. Sen jälkeen kun seosta oli pidetty huoneenlämmössä yhden tunnin ajan, se kaadettiin 0,5 N suolahappoon (60 ml) ja uutettiin mety-15 leenikloridilla (60 ml, sitten 30 ml). Yhdistetyt orgaaniset uutteet pestiin 0,5 N suolahapolla (60 ml), 1/2-kyl-lästetyllä natriumbikarbonaatin vesiliuoksella (60 ml) ja sitten suolavedellä (50 ml). Kuivaamisen (Na2S04) ja kon-sentroinnin jälkeen saatiin raakatuote. Sen jälkeen kun 20 oli suoritettu flash-kromatografointi (2 x 15 cm:n silika-geelikolonni) eluoiden etyyliasetaatti/heksaanilla » i (45:55), saatiin 28,19-(etyleeni)androst-4-eeni-3,17-dio- • nia (96 mg, 62 %) valkoisena kiinteänä aineena, sp. 180 - : 183 eC.

; 25 1H-NMR (CDC13) δ 6,02 (s, 1H, vinyyli), 0,91 (s, 3H, 18-CH,).

• · ,·:·. 13C-NMR (CDCl,) 6 220,4, 202,6, 167,1, 128,1, 52,1, • · · 51,1, 47,4, 43,1, 40,3, 38,8, 35,7, 34,6, 32,2, 31,4, 29,9, 27,3, 25,3, 21,7, 20,1, 18,8, 13,6.

30 IR (KBr) 3454, 2922, 2858, 1740, 1658, 1610, 1450, :·: 1 1220 cm’1.

MS (CI, CH4) m/z (rel. intensiteetti) 313 (MH*, 100), 295 (18).

Tällä yhdisteellä on seuraava rakenne:

« I

35 18 102073

O

5 10 Esimerkki 7 26,19-(etyleeni)androst-4-eeni-3,17-dionin (1 mmol) annetaan reagoida seoksen kanssa, jossa on 1,3 mmol li-tium-tri-(t-butoksi)alumiinihydridiä (käytetään 1 mol/1 liuoksena tetrahydrofuraanissa) 8 ml:ssa tetrahydrofuraa-15 nia, 0 °C:ssa 45 minuuttia. Reaktioseos sammutetaan vedellä, ja sitten se tehdään happamaksi 10-%:isella suolahapolla. Tuloksena saatua seosta uutetaan etyyliasetaatilla, ja orgaaninen uute pestään natriumasetaatin vesiliuoksella ja suolavedellä ja kuivataan sitten natriumsulfaatilla. 20 Tämän jälkeen liuotin haihdutetaan pois ja sitten suoritetaan kromatografointi, jolloin saadaan puhdasta 28,19- 4 ( (etyleeni )-178-hydroksiandrost-4-eeni-3-onia.

: ' Esimerkki 8 < : : Liuokseen, jossa on 28,19—(etyleeni)androst-4-eeni- i I; 25 3,17-dionia t-butyylialkoholissa, lisätään kloraniilia • 4· · (1,2 ekvivalenttia). Seosta refluksoidaan kolme tuntia, se • · ·;·. jäähdytetään ja sitten konsentroidaan. Sakka otetaan tai- • · · teen kloroformista ja pestään vedellä, NaOH:n vesiliuok- , c sella ja suolavedellä. Sen jälkeen kun sakka on kuivattu, • · 1 *·]'1 30 konsentroitu ja kromatografoitu, saadaan 28,19-(etyleeni)- • · · *·* ‘ androst-4,6-dieeni-3,17-dionia.

·*·,. Esimerkki 9 4

Suspensiota, jossa on natriumasetaattia absoluuttisessa kloroformissa, joka sisältää formaldehydidimetyyli- « 35 asetaalia ja fosforyylikloridia, sekoitetaan palautusjääh-dytyslämpötilassa yhden tunnin ajan. Sen jälkeen kun 19 102073 2β,19-(etyleeni)androst-4-eeni-3,17-dionia on lisätty, käsitellään seosta tipoittain fosforyylikloridilla 2,5 tunnin ajan. Tämän jälkeen reaktioseosta sekoitetaan palautus jäähdytyslämpötilassa sopiva aikan. Suspension anne-5 taan jäähtyä, ja voimakkaan sekoittamisen aikana lisätään tipoittain kyllästettyä natriumkarbonaatin vesiliuosta, kunnes vesikerroksen pH tulee alkaliseksi. Orgaaninen kerros erotetaan, pestään suolavedellä ja kuivataan natrium-sulfaatilla. Konsentroimisen ja puhdistamisen jälkeen saa-10 daan 6-metyleeni-2B,19-(etyleeni)androst-4-eeni-3,17-dio-nia.

• · • · «

• I

• « « t • 1 • « ·· « • · ♦ ♦ · · • ♦ • · · • · · ««· · • · • · « • · · • ♦ * ♦ ♦ • · « • ♦ ··♦ « · · ♦ · · « « « ♦ « < • « « • · « • « « • I · • t « «

Claims (6)

20 102073

1. Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisen yhdisteen valmistamiseksi, jolla on kaava ίο R jossa 15 ---- tarkoittaa yksinkertaista tai kaksoissidosta; R on H, =CH2, =0 tai -OH; R1 on =0, -OH tai -O-fC^-alkanoyyli); R2, R3 ja R4 ovat kukin toisistaan riippumatta H tai Cj^-alkyyli; ja 20. on =0, =CH2, -OH tai -0-(Cx_4-alkanoyyli), tunnet-t u siitä, että yhdiste, jolla on kaava :: R3 ? ’ z i R2 Ji 25 r /V Jl J_J : R4 • · · I T • · 30 jossa R2, R3 ja R4 ovat edellä määriteltyjä ja Z on poistu- • · j va ryhmä, saatetaan reagoimaan vahvan emäksen kanssa iner- tissä liuottimessa jäähdyttäen, jolloin saadaan yhdiste, * < : jolla on kaava . \ 35 i « * 21 102073 R3 ° r1 3 r2 A γγΛΛ minkä jälkeen mahdollisesti suoritetaan jokin seuraavista 10 reaktioista: (a) reaktio kloraniilin kanssa t-butanolissa, jolloin saadaan vastaava 4,6-dieeni; (b) reaktio formaldehydiasetaalin kanssa, jolloin saadaan vastaava 6-metyleeniyhdiste; 15 (c) pelkistys natriumboorihydridillä, jolloin saa daan vastaava 38,178-dioli; (d) reaktio asetanhydridin kanssa, jolloin saadaan vastaava 3-asetoksi-3,5-dieeni, ja sitten käsittely kal-siumboorihydridillä etanolissa -15 °C:ssa, jolloin saadaan 20 vastaava Δ5-38,178-dioli; (e) edellä kohdassa (d) saadun diolin reaktio sopivan anhydridin kanssa, jolloin saadaan vastaava diesteri; . (f) reaktio etyleeniglykoliylimäärän kanssa, kun • < läsnä on katalyyttinen määrä happoa, jolloin saadaan vas-25 taava Δ5-3,5-bis-etyleeniketaali, ja sen jälkeen reaktio » · · *«·1 m-klooriperbentsoehapon kanssa dikloorimetaanissa « · : 0 °C:ssa, jolloin saadaan vastaava 5,6-epoksidi, ja sitten vielä reaktio perkloorihapon kanssa tetrahydrofuraanin i vesiliuoksessa, jolloin saadaan 5,6-dihydroksi-3,17-dike- 30 töni, ja tämän jälkeen hapetus Jonesin reagenssilla ja sitten dehydraatio £-tolueenisulfonihapolla, jolloin saa- • · .1:1♦ daan Δ4-3,6,17-trioni; • · · (g) reaktio etyleeniglykoliylimäärän kanssa, kun läsnä on katalyyttinen määrä happoa, jolloin saadaan vas- 35 taava Δ5-3,5-bis-etyleeniketaali, joka sen jälkeen hydro- . ; ; lysoidaan selektiivisesti vastaavaksi 17-ketoniksi käyt- « · ( · „ 102073 22 täen 0,15-%:ista perkloorihapon vesiliuosta t-butanolissa ja dikloorimetaanissa, minkä jälkeen 17-ketoni pelkistetään 17B-hydroksiyhdisteeksi käyttäen natriumboorihydridin ylimäärää etanolissa, jota seuraa käsittely suolahapon 5 vesiliuoksella 3-ketaali-suojaryhmän poistamiseksi, jol loin jäljelle jää vapaa 3-ketoni; (h) pelkistys tri-(t-butoksi)-alumiinihydridin kanssa, jolloin saadaan 3-keto-173-hydroksiyhdiste; (i) kohdassa (g) tai (h) saadun 3-ketonin reaktio 10 metyleenitrifenyylifosforaanin kanssa, jolloin saadaan vastaava 3-metyleeni-17-hydroksiyhdiste, minkä jälkeen suoritetaan reaktio Jonesin reagenssin kanssa, jolloin saadaan 3-metyleeni-17-ketoni.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä yhdis-15 teen valmistamiseksi, jolla on kaava R3 O R4 § R2

20 J jossa R2, R3 ja R4 ovat kukin toisistaan riippumatta H tai 25 Cjl.4 alkyyli, tunnettu siitä, että yhdiste, jolla • « · *···' on kaava • · • · · ··· · O ·:··? R3 II Z v R2 ,/ f.. \ : R4 # ♦ · I « · I • · · I * · * \ 35 jossa R2, R3 ja R4 ovat edellä määriteltyjä ja Z on poistu- 23 102073 va ryhmä, saatetaan reagoimaan vahvan emäksen kanssa iner-tissä liuottimessa jäähdyttäen.

3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan 2β,19-(etyleeni)and- 5 rost-4-eeni-3,17-dioni.

4. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, t -u n-n e t t u siitä, että valmistetaan 2β,19-(etyleeni)-17β-hydroksiandrost-4-eeni-3-oni.

5. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, t u n-10 n e t t u siitä, että valmistetaan 2β, 19-(etyleeni)and- rost-4,6-dieeni-3,17-dioni.

6. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan 6-ι^^1ββηϊ-2β, 19- (etyleeni)androst-4-eeni-3,17-dioni. • 1 4 . ♦ • , ♦ Φ ♦ • »· · •4 · • · • · « • »· · • •4 · • · • · · • · · • · · t • · • · · 4 4 4 • « ·· · « · · • i • 4 • t • 1 ' 4 · ' 4 < « • 4 « 4 « « • 4 4 24 102073