FI101302B - Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten 7-(2-karboksialkyyli-2-okso )metyyliamino-5-okso-pyrrolo- ja -6-okso-pyrido- ja -pyratsino£2,1-a|b entsatsepiini- ja -£1,4|oksatsino- ja -tiatsino£3,4-a|£2|bentsatsepiin i-4-karboksyylihappojohdannaisten valmista - Google Patents

Description

101302

Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten 7-(2-karboksi-alkyyli-2-okso)metyyliamino-5-okso-pyrrolo- ja -6-okso-pyrido- ja -pyratsino[2,l-a]bentsatsepilni- ja -[l,4]ok-satsino- ja -tiatsino[3,4-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyy-5 llhappojohdannaisten valmistamiseksi

Keksinnön kohteena on menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten 7-(2-karboksialkyyli-2-okso)metyyliami-no-5-okso-pyrrolo- ja -6-okso-pyrido- ja -pyratsino[2,1-10 a]bentsatsepiini- ja -[1,4]oksatsino- ja -tiatsino[3,4- a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappojohdannaisten valmistamiseksi, joilla on kaava 1 JÖ 15 h (I) / 0 Q-CH2-C02R! j f CO2R3 jossa A on sidos, metyleeni, happi, rikki, NH tai NCOCF3;

Rx on vety, C^-alkyyli tai -CH20C(0)C(CH3)3; ; 25 R3 on vety tai -CH20C(0)C(CH3)3; ja Q on ryhmä, jolla on kaava 0<, OCx -xx - <)Cx 30 ' i jolloin Z on O, NH tai S.

Uudet kaavan I mukaiset yhdisteet ovat käyttökelpoisia enkefalinaasin ja angiotensiinikonvertaasin (ACE:n) estäjinä.

2 101302

Enkefalinaasi tai tarkemmin määriteltynä endopepti-daasi 24.11 on nisäkkään ektoentsyymi, joka on osallisena tiettyjen verenkiertoa säätelevien peptidien metabolisessa hajoamisessa. Tämä entsyymi, joka on Zn2*-metallipeptidaa-5 si, vaikuttaa pilkkomalla solujen ulkopuoliset peptidit hydrofobisten jäännösten aminoryhmässä ja siten inaktivoi peptidit säätelevinä lähetteinä.

Enkefalinaasi on osallisena erilaisten verenkiertoa säätelevien peptidien, mukaan luettuna endorfiinien, kuten 10 β-endorfiinin ja enkefaliinien, atriopeptidin (ANP) ja muiden verenkiertoa säätelevien peptidien, metabolisessa hajoamisessa.

Endorfiinit ovat luonnossa esiintyviä polypeptide-jä, jotka sitoutuvat opiaattireseptoreihin aivojen eri 15 alueilla ja tuottavat siten kipua lievittävän vaikutuksen nostamalla kipukynnystä. Endorfiinit esiintyvät eri muodoissa, mukaan luettuna α-endorfiinina, B-endorfiinina, V-endorfiinina sekä enkefaliineina. Enkefaliinit, nimittäin Met-enkefaliini ja Leu-enkefallini, ovat pentapepti-20 dejä, jotka esiintyvät aivokudoksen, selkäytimen ja gast-rointestinaalisen alueen hermopäätteissä. Kuten muutkin endorfiinit, enkefaliinit tuottavat kipua lievittävän vaikutuksen sitoutumalla opiaattireseptoreihin aivoissa. Estämällä enkefalinaasia estetään luonnossa esiintyvien en-25 dorfiinien ja enkefaliinien metabolinen hajoaminen, jolloin tuotetaan voimakas endorfiinin tai enkefaliinin välittämä kipua lievittävä vaikutus. Enkefalinaasin estäminen olisi siten hyödyllistä potilaalla, joka kärsii akuutista tai kroonisesta kivusta. Enkefalinaasin estäminen 30 olisi myös hyödyllistä, koska se tuottaa depressiota vas-tustavan vaikutuksen ja vähentää opiaatti- tai morfiini-lääkityksen lopettamiseen liittyvien vieroitusoireiden ankaruutta.

Atriopeptidi (ANP) viittaa luonnossa esiintyviin 35 peptideihin, jokta ovat osallisena verenpaineen sekä nat- 3 101302 rium- ja vesipitoisuuksien homeostaattisessa säätelyssä. Atriopeptidien pituuden on havaittu olevan noin 21 - 126 aminohappoa ja niillä on yhteisenä piirteenä yksi tai useampi disulfidimutkainen sekvenssi, joissa on 17 amino-5 happoa ja erilaisia amino- ja karboksipäätteisiä sekvenssejä, jotka ovat kiinnittyneet kystiiniosuuteen. Atriopeptidien on havaittu sitoutuvan spesifisiin sitoutumispaik-koihin eri kudoksissa, mukaan luettuna munuainen, lisämunuainen, aortta ja verisuonten sileä lihas, affiniteettien 10 ollessa noin 50 pM - 500 nM [Needleman, Hypertension 7 (1985) 469]. Lisäksi uskotaan, että atriopeptidit sitoutuvat spesifisiin reseptoreihin aivoissa ja mahdollisesti toimivat neuromodulaattorina sekä tavanomaisina perifeerisinä hormoneina.

15 Atriopeptidien biologiset ominaisuudet koskevat voimakkaita diureettisia/natriureettisia ja verisuonia laajentavia ja verenpainetta alentavia vaikutuksia sekä reniinin ja aldosteronin erittymisen estävää vaikutusta [deBold, Science 230 (1985) 767]. Estämällä enkefalinaa-20 siä estetään luonnossa esiintyvän atriopeptidin metaboli-nen hajoaminen, jolloin tuotetaan tehokkaita ANP:n välittämiä diureettisia, natriureettisia, verenpainetta alentavia, hypoaldosteroneemisia vaikutuksia. Enkefalinaasin estäminen olisi hyödyllistä potilaalla, jolla on sairaus, 25 jolle on tunnusomaista poikkeavuudet nesteen, elektrolyytin, verenpaineen, silmän sisäisen paineen, reniinin tai aldosteronin homeostaasissa, kuten kohonneessa verenpaineessa, munuaistaudeissa, hyperaldosteronemiassa (veren aldosteronirunsaus), sydämen suurentuneisuudessa, silmän-30 painetaudissa ja sydämen dekompensaatiossa, rajoittumatta kuitenkaan näihin sairauksiin.

Lisäksi kaavan I mukaiset yhdisteet ovat angioten-siinikonvertaasin (ACE:n) estäjiä. Angiotensiinikonvertaa-si on peptidyylidipeptidaasi, joka katalysoi angiotensiini 35 I:n muuttumista angiotensiini ll:ksi. Angiotensiini II on 4 101302 verisuonia supistava tekijä, joka stimuloi myös aldostero-nin erittymistä lisämunuaisen kuoresta. Angiotensiinikon-vertaasin estäminen olisi siten hyödyllistä potilaalla, jolla on sairaustila, kuten kohonnut verenpaine tai sydä-5 men dekompensaatio [Katso julkaisu William W. Douglas, "Polypeptides - Angiotensin, Plasma Kinins, and Others", luku 27, teoksessa Goodman and Gillman's, the Farmacologi-cal Basis of Therapeutics, 7. painos, 1985, sivut 652 -653, MacMillan Publishing Co., New York]. Lisäksi on jul-10 kaistu, että ACE-estäjät ovat hyödyllisiä hoidettaessa kognitiivisia (ymmärrystä koskevia) sairauksia [DE-patent-tihakemus 3 901-291-A, julkaistu elokuun 3. päivä, 1989].

Tässä käytettynä termi "C^-alkyyli" viittaa tyydyttyneeseen, suoraketjuiseen tai haaraketjuiseen hiilive-15 tyradikaaliin, jossa on 1 - 4 hiiliatomia ja käsittää metyylin, etyylin, propyylin, isopropyylin, n-butyylin, iso-butyylin, tertiaarisen butyylin ja vastaavan.

Yhdisteissä, joilla on kaava 1, jossa A on sidos, ymmärretään olevan 5-jäseninen rengas.

20 Kuten aina, kun kysymyksessä on mikä tahansa ryhmä rakenteellisesti läheisiä yhdisteitä, joilla on erityistä yleistä käyttöä, myös kaavan mukaisten yhdisteiden osalta tietyt ryhmät ja konfoguraatiot ovat edullisia lopullisessa käyttökohteessa.

25 On tietysti ymmärrettävää, että kaavan mukaiset yhdisteet voivat esiintyä erilaisissa isomeerisissa konfi-guraatioissa, mukaan luettuna rakenteelliset isomeerit ja stereoisomeerit. On lisäksi ymmärrettävää, että tämä keksintö sulkee piiriinsä nuo kaavan mukaiset yhdisteet kukin 30 erilaisissa rakenteellisissa isomeerikonfiguraatioissa ja ’· stereoisomeerikonfiguraatioissa sekä yksittäisinä isomee reinä ja isomeerien seoksina.

Seuraavat kaavan mukaiset, spesifiset yhdisteet ovat erityisen edullisia tämän keksinnön yhdisteiden lo 5 101302 pullisessa käyttökohteessa enkefalinaasin estäjinä ja an-giotensiinikonvertaasin estäjinä: [4S-[4a, 7a(R*), 12be]]-7-[(2-karboksimetyyli-2-oksoindaani )metyyliamino] -1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-5 oksopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappo; [4S-[4a, 7a(R*), 12bB]]-7-[(2-pivaloyylioksimetyy-likarboksimetyyli-2-oksoindaani)metyyliamino]-1,2,3,4,6,-7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappo; 10 [4S-[4a, 7a(R*), 12b8]]-7-[(2-karboksimetyyli-2- oksoindaani) metyyli amino] -1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihapon pi-valoyylioksimetyyliesteri; [4S-[4a, 7o(R*), 12bB]]-7-[(2-pivaloyylioksimetyy-15 likarboksimetyyli-2-oksoindaani Jmetyyliamino]-1,2,3,4,6,- 7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihapon pivaloyylioksimetyyliesteri.

Keksinnön mukaiselle menetelmälle uusien, terapeuttisesti käyttökelpoisten, kaavan I mukaisten yhdisteiden 20 valmistamiseksi on tunnusomaista se, mitä on esitetty patenttivaatimuksen 1 tunnusmerkkiosassa.

Täten yhdisteitä, joilla on kaava I, jossa A on sidos, metyleeni, happi, rikki tai NH, voidaan valmistaa käyttämällä tunnettuja ja alan ammattimiehen hallitsemia 25 menetelmiä ja tekniikkaa. Yleistä synteettistä kaaviota näiden yhdisteiden valmistamiseksi esittää kaavio A, jossa kaikki subsituentit on määritelty edellä, ellei toisin esitetä.

6 101302

Kaavio A

5 9 f°2H

H2N q-ch2-co2Ri 2 fr* n ' -^ θ' I A·

, H

' C02CHPh2

\ -rO

15 \ J \ H

K- / 0 v/· Q-CH2-C02Ri ---f 20 C02CHPh2 A' - sidos, -CH2-, 0, S tai NH.

Yhdisteitä, joilla on kaava 1, jossa A on sidos, metyleeni, happi, rikki tai NH, voidaan valmistaa saatta-25 maila sopiva, rakenteen 2 mukainen esteri/karboksyylihap-poyhdiste reagoimaan sopivan, rakenteen 1 mukaisen ami-noyhdisteen kanssa. Esimerkiksi sopiva, rakenteen 1 mukainen aminoyhdiste voidaan saattaa reagoimaan sopivan, rakenteen 2 mukaisen esterin/karboksyylihappoyhdisteen kans-30 sa kytkentäaineen, kuten EDC:n [l-(3-dimetyyliaminopropyy-li)-3-etyylikarbodi-imidihydrokloridin], DCC:n(1,3-disyk-loheksyylikarbodi-imidin) tai dietyylisyaanifosfonaatin, kanssa sopivassa aproottisessa liuottimessa, kuten mety-leenikloridissa, jolloin saadaan sopiva, rakenteen 3 mu-35 kainen trisyklinen yhdiste.

7 101302

Vaihtoehtoisesti rakenteen 2 mukainen esteri/kar-boksyylihappoyhdiste voidaan muuttaa vastaavaksi este-ri/happokloridiksi ja saattaa se sitten reagoimaan sopivan, rakenteen 1 mukaisen aminoyhdisteen kanssa, jolloin 5 saadaan sopiva, kaavan I mukainen yhdiste.

Kuten taulukossa 1 esitetään yhteenvetona, R^ ja Rj-ryhmiä kaavan I mukaisissa yhdisteissä voidaan käsitellä käyttäen tekniikkaa ja menetelmiä, jotka ovat tunnettuja ja alan ammattimiehen hallitsemia, jolloin saadaan vastaa-10 vat, rakenteiden 4-9 mukaiset yhdisteet.

Esimerkiksi sopivan, rakenteen 3 (jossa Rx on t-bu-tyyli ja R3 on difenyylimetyyli) mukaisen trisyklisen yhdisteen difenyylimetyyliesterifunktionaalisuus ja t-butyy-liesterifunktionaalisuus voidaan poistaa käyttäen trifluo-15 rietikkahappoa, jolloin saadaan sopiva, rakenteen 4 mukainen dikarboksyylihappoyhdiste.

Esimerkiksi sopiva trisyklinen yhdiste, jolla on rakenne 3, jossa Rx on t-butyyli ja R3 on difenyylimetyyli, saatetaan kosketukseen sopivan happaman liuottimen, kuten 20 trifluorietikkahapon kanssa. Reagoivia aineita sekoitetaan tyypillisesti toistensa kanssa huoneenlämpötilassa 1-24 tunnin ajan. Rakenteen 4 mukainen dikarboksyylihappoyhdiste otetaan talteen reaktiovyöhykkeestä uuttomene-telmien avulla, kuten alalla on tunnettua. Se voidaan puh-25 distaa piihappogeelikromatografian avulla.

Sopivan, rakenteen 4 mukaisen dikarboksyylihappoyh-disteen molemmat karboksyylihappofunktionaalisuudet voidaan esteröidä uudelleen käyttäen tekniikkaa ja menetelmiä, jotka ovat alalla hyvin tunnettuja ja arvostettuja. 30 Esimerkiksi rakenteen 5 mukainen dipivaloyylioksimetyy- liesteriyhdiste voidaan valmistaa käsittelemällä rakenteen 4 mukainen dikarboksyylihappoyhdiste 2 mooliekvivalentilla kloorimetyylipivalaattia sopivassa aproottisessa liuotti-messa, kuten dimetyyliformamidissa, yhdessä ei-nukleofii-35 lisen emäksen, kuten kesiumkarbonaatin, kanssa.

8 101302

Sopivasta trisyklisestä yhdisteestä, jolla on rakenne 3, jossa Rx on C^-alkyyli ja R3 on difenyylimetyyli, difenyylimetyyliesterifunktionaalisuus voidaan poistaa valikoivasti käyttäen katalyyttistä hydrausta, kuten alal-5 la on tunnettua, jolloin saadaan sopiva, rakenteen 6 mukainen C1_4-alkyyliesteri/karboksyylihappoyhdiste. Esimerkiksi rakenteen 6 mukainen C1.4-alkyyliesteri/karboksyyli-happoyhdiste voidaan valmistaa käsittelemällä sopiva tri-syklinen yhdiste, jolla on kaava 3, jossa Rx on C^-alkyyli 10 Ja R3 on difenyylimetyyli, katalyyttisella määrällä palla-dium-hiilellä-katalyyttiä ja ammoniumformaatin molaarisella ylimäärällä. Reagoivat aineet saatetaan tyypillisesti kosketukseen sopivassa, polaarisessa orgaanisessa liuotti-messa, kuten metanolissa. Reagoivat aineet saatetaan kos-15 ketukseen huoneenlämpötilassa ajaksi, joka on 3 minuutista 24 tuntiin. Rakenteen 6 mukainen C^-alkyyliesteri/karbok-syylihappoyhdiste voidaan ottaa talteen reaktiovyöhykkees-tä suodattamalla ja haihduttamalla liuotin.

Sopivan, rakenteen 6 mukaisen C1.4-alkyylieste-20 ri/karboksyylihappoyhdisteen karboksyylihappofunktionaa- lisuus voidaan esteröidä uudelleen, jolloin saadaan sopiva, rakenteen 7 mukainen C^-alkyyliesteri/pivaloyylimetyy-lieetteriesteri. Esimerkiksi rakenteen 7 mukainen C1.4-al-kyyliesteri/pivaloyylioksimetyyliesteriyhdiste voidaan 25 valmistaa käsittelemällä sopiva, rakenteen 6 mukainen C1.4-alkyyliesteri/karboksyylihappoyhdiste 1 mooliekvivalen-tilla kloorimetyylipivalaattia sopivassa aproottisessa liuottimessa, kuten dimetyyliformamidissa, yhdessä ei-nuk-leofiilisen emäksen, kuten kesiumkarbonaatin, kanssa.

. 30 Sopivan, rakenteen 7 mukaisen C1_4-alkyyliesteri/pi- valoyylimetyylieetteriesterin Cj^-alkyyliesterifunktionaa-lisuus, kun mainitussa rakenteessa C1.4-alkyyliesteri ei ole t-butyyli, voidaan hydrolysoida emäksisissä olosuhteissa, jotka tarkoittavat esimerkiksi litiumhydroksidia metano-35 lissa, kuten alalla on tunnettua, jolloin saadaan raken- 9 101302 teen 8 mukainen karboksyylihappo/pivaloyylimetyylieette-riesteri.

Monivaiheisen menetelmän avulla voidaan valmistaa yhdisteitä, joilla on kaava I, jossa Rj on pivaloyylioksi-5 metyyliesteri ja R3 on vety.

Esimerkiksi rakenteen 3 mukaisen, sopivan trisykli-sen yhdisteen sopivan C^-alkyyliesteri/difenyylimetyylies-terin C^-alkyyliesterifunktionaalisuus, kun mainitussa rakenteessa C1_4-alkyyliesteri ei ole t-butyyli, voidaan 10 hydrolysoida emäksisissä olosuhteissa, jotka tarkoittavat esimerkiksi litiumhydroksidia metanolissa, kuten alalla on tunnettua, jolloin saadaan välituotteena karboksyylihap-po/difenyylimetyyliesteriyhdiste.

Sopivan, välituotteena saadun karboksyylihappo/di-15 fenyylimetyyliesteriyhdisteen karboksyylihappofunktionaa-lisuus voidaan sitten esteröidä uudelleen, jolloin saadaan välituotteena pivaloyylioksimetyyliesteri/difenyylimetyy-liesteriyhdiste. Esimerkiksi välituotteena saatava piva-loyylioksimetyyli/difenyylimetyyliesteriyhdiste voidaan 20 valmistaa käsittelemällä sopiva karboksyylihappo/difenyy-limetyyliesteriyhdiste -välituote 1 mooliekvivalentilla kloorimetyylipivalaattia sopivassa aproottisessa liuotti-messa, kuten dimetyyliformamidissa, yhdessä ei-nukleofii-lisen emäksen, kuten kesiumkarbonaatin, kanssa.

25 Sopivan, välituotteena saadun pivaloyylioksimetyy- li/difenyylimetyyliesteriyhdisteen difenyylimetyylieste-rifunktionaalisuus voidaan poistaa hydraamalla, kuten alalla on tunnettua, jolloin saadaan rakenteen 9 mukainen pivaloyylioksimetyyli/karboksyylihappoyhdiste. Esimerkik-30 si rakenteen 9 mukainen pivaloyylioksimetyyli/karboksyyli-·: happoyhdiste voidaan valmistaa käsittelemällä sopiva, vä lituotteena saatu pivaloyylioksimetyyli/difenyylimetyy-liesteriyhdiste katalyyttisella määrällä palladium-hiilel-lä-katalyyttiä ja molaarisella ylimäärällä ammoniumfor-35 miaattia. Reagoivat aineet saatetaan tyypillisesti koske- 10 101302 tukseen toistensa kanssa sopivassa polaarisessa, orgaanisessa liuottimessa, kuten metanolissa. Reagoivat aineet ovat tyypillisesti kosketuksessa toistensa kanssa huoneenlämpötilassa ajan, joka on 3 minuutista 24 tuntiin. Raken-5 teen 9 mukainen pivaloyylioksimetyyli/karboksyylihappoyh-diste voidaan ottaa talteen reaktiovyöhykkeestä suodattamalla ja haihduttamalla liuotin.

Taulukko 1

Ryhmien R3 ja R3 käsittely 10 ___

Yhdiste Rl *3

4 H H

5 CH2OCOC(CH3)3 CH?OCOC(CH3)3 15 _

6 C1_C4_ H

alkyyli Z Ci_C4_ CH?OCOC(CH3)3 „ _____________ 20 _|_ H CH?OCOC(CH3)3 9 CH?OCOC(CH3)3 h

Yhdisteitä, joilla on kaava I, jossa A on -NCOCF3, voidaan valmistaa käyttäen tekniikkaa ja menetelmiä, jotka 1 25 alan ammattimies tuntee ja hallitsee hyvin. Yleinen syn teettinen menetelmä näiden yhdisteiden valmistamiseksi esitetään kaaviossa C. Kaaviossa C kaikki substituentit ovat kuten edellä on määritelty, ellei toisin esitetä.

11 101302

Kaavio C

f|M R5CO-CI 13 5 \ \ ih tai (RsC0)2-0 14 V-n -► 7 v n ' / o' t nh Q-CH2-CO2R1 I ^ 10 · CO2R3 10 15 \ B /Ύ / v N ' / 0 \ N**C(°)R5 Q-CH2-C02Ri r—·/

20 I

CO2R3 15 jolloin R5 on -CF3.

Kaavio C tuottaa yleisen synteettisen menetelmän 25 yhdisteiden valmistamiseksi, joilla on kaava I, jossa A on -NCOCF3. Sopiva, rakenteen 10 mukainen aminoyhdiste asy-loidaan käyttäen sopivaa, rakenteen 13 mukaista asyyliklo-ridia tai sopivaa, rakenteen 14 mukaista anhydridiä, kuten alalla on hyvin tunnettua, jolloin saadaan vastaava, ra-30 kenteen 15 mukainen N-asyyliaminoyhdiste.

Ryhmiä Ri ja R3 voidaan käsitellä käyttäen tekniikkaa ja menetelmiä, jotka alan ammattimies hallitsee ja tuntee hyvin, ja jotka on kuvattu edellä kaaviossa A ja esitetty taulukossa 1.

12 101302

Kaavioissa A ja C käytettävät lähtöaineet ovat helposti alan ammattimiehen saatavissa. Esimerkiksi tietyt trisykliset aminoyhdisteet, joilla on rakenne 1, jossa A on S, on kuvattu EP-patentissa 0 249 223 (joulukuun 16.

5 päivä, 1987) ja tietyt muut trisykliset aminoyhdisteet, joilla on rakenne 1, jossa A on metyleeni, voidaan valmistaa, kuten on kuvattu EP-patenttihakemuksessa 34 533 A, Flynn ja Beight, (kesäkuun 11. päivä, 1987).

Trisykllsiä aminoyhdisteitä, joilla on rakenne 1, 10 jossa A on O, voidaan valmistaa kuten kaaviossa D on kuvattu. Kaaviossa D kaikki substituentit ovat kuten edellä on määritelty, ellei toisin esitetä.

Kaavio D

15 1) oksalyylikloridi

“ VT

>OH H°NVX‘SVNHJ o*—NH

° T OH

16 17 k vaihe a 18 C02Me i7 19 ^ -3 3J __ vaihe b PhthN^V valhe c 30 V NH _ ✓ 20 C02Me 35 13 101302

Kaavio D, jatkuu • r®

PhtHN renkaanmuodostus O \ / vaihe d r 10 21 1 C02CH3 . Suojauksen H r\^

-j 1 . Toistaminen \/ H

PhthN»^\ >4^ -► H2N»^( V

O* t O vaihe e ·/ N

» H ° u/ 22 c°2CHPh2 ^ C02CHPh2

Kaavio D tuottaa yleisen synteettisen menetelmän 25 aminoyhdisteiden valmistamiseksi, joilla on rakenne 1, jossa A on O.

Vaiheessa a sopiva, rakenteen 16 mukainen, ftaali-imidillä suljettu (S)-fenyylialaniinijohdannainen muutetaan vastaavaksi happokloridiksi, sitten se saatetaan rea-30 goimaan sopivan, rakenteen 17 mukaisen L-seriinimetyylies-.· terin kanssa, jolloin saadaan vastaava, rakenteen 18 mu kainen l-okso-3-fenyylipropyyli-L-seriinimetyyliesteri.

Esimerkiksi sopiva, rakenteen 16 mukainen, ftaali-idimillä suljettu (S)-fenyylialaniinijohdannainen voidaan 35 saattaa reagoimaan oksalyylikloridin kanssa sopivassa ap- 14 101302 roottisessa liuottimessa, kuten metyleenikloridissa. Tulokseksi saatu happokloridi voidaan sitten kytkeä sopivaan L-seriinimetyyliesteriin, jolla on rakenne 17, käyttäen N-metyylimorfoliinia sopivassa aproottisessa liuotti-5 messa, kuten dimetyyliformamidissa, jolloin saadaan sopiva, rakenteen 18 mukainen l-okso-3-fenyylipropyyli-L-se-riinimetyyliesteri.

Vaiheessa b sopivan, rakenteen 18 mukaisen 1-okso- 3-fenyylipropyyli-L-seriinimetyyliesterin hydroksifunk-10 tionaalisuus allyloidaan rakenteen 19 mukaisen allyyli-imidaatin avulla, jolloin saadaan vastaava, rakenteen 20 mukainen l-okso-3-fenyylipropyyli-L-seriini-O-allyylime-tyyliesteri.

Esimerkiksi sopiva, rakenteen 18 mukainen 1-okso-15 3-fenyylipropyyli-L-seriinimetyyliesteri saatetaan koske tukseen rakenteen 19 mukaisen allyyli-imidaatin 2 mooliek-vivalentin kanssa ja sopivan hapon, kuten trifluorimetaa-nisulfonihapon, mooliekvivalentin kanssa. Reagoivat aineet saatetaan tyypillisesti kosketukseen sopivassa orgaanises-20 sa liuotinseoksessa, kuten metyleenikloridin ja syklohek-saanin seoksessa. Reagoivia aineita sekoitetaan tyypillisesti toistensa kanssa huoneenlämpötilassa inertissä ilmakehässä 2-24 tunnin ajan. Rakenteen 20 mukainen 1-okso- 3-fenyylipropyyli-L-seriini-O-allyylimetyyliesteri ote-25 taan talteen reaktiovyöhykkeestä uuttomenetelmien avulla, kuten alalla on tunnettua. Se voidaan puhdistaa piihappo-geelikromatografiän avulla tai kiteyttämällä.

Vaiheessa c sopiva, rakenteen 20 mukainen 1-okso- 3-fenyylipropyyli-L-seriini-O-allyylimetyyliesteri saate-30 taan rengasrakenteiseksi, jolloin saadaan vastaava, raken teen 21 mukainen (4S)-enamiini.

Esimerkiksi sopiva, rakenteen 20 mukainen 1-okso- 3-fenyylipropyyli-L-seriini-O-allyylimetyyliesteri saatetaan ensin kosketukseen otsonin ja hapen seoksen molaari-35 sen ylimäärän kanssa. Reagoivat aineet saatetaan tyypilli- 15 101302 sesti kosketukseen sopivassa orgaanisessa liuotinseokses-sa, kuten metyleenikloridin ja metanoiin seoksessa. Reagoivia aineita sekoitetaan tyypillisesti toistensa kanssa 5-30 minuutin ajan tai kunnes sininen väri säilyy, läm-5 pötilan ollessa -78 - -40 eC. Reaktio tukahdutetaan metyy-lisulfidin ylimäärän avulla ja välituotteena saatava alde-hydiyhdiste otetaan talteen reaktiovyöhykkeestä uuttomene-telmien avulla, kuten alalla on tunnettua.

Välituotteena saatava aldehydiyhdiste saatetaan 10 sitten kosketukseen trifluorietikkahapon kanssa sopivassa aproottisessa liuottimessa, kuten metyleenikloridissa, jolloin saadaan vastaava, rakenteen 21 mukainen (4S)-ena-miini.

Vaiheessa d sopiva, rakenteen 21 mukainen (4S)-ena-15 miini saatetaan rengasrakenteiseksi, jolloin saadaan vastaava, rakenteen 22 mukainen (4S)-trisyklinen yhdiste hapon katalysoiman Friedel-Crafts-reaktion avulla. Esimerkiksi sopiva, rakenteen 21 mukainen (4S)-enamiini voidaan muuttaa vastaavaksi, rakenteen 22 mukaiseksi (4S)-trisyk-20 liseksi yhdisteeksi käsittelemällä se trifluorimetaanisul-fonihapon ja trifluorietikkahappoanhydridin seoksella sopivassa aproottisessa liuottimessa, kuten metyleenikloridissa.

Vaiheessa d voi olla välttämätöntä, että karboksi-25 funktionaalisuus esteröidään uudelleen työskentelyolosuh teista johtuen. Esimerkiksi raa'an tuotteen käsittelyä bromidifenyylimetaanilla sopivassa aproottisessa liuottimessa, kuten dimetyyliformamidissa, yhdessä ei-nukleofii-lisen emäksen kanssa, kuten kesiumkarbonaatin, kanssa, 30 voidaan käyttää vastaavan (4S)-difenyylimetyyliesterin saamiseksi.

Vaiheessa e sopivan, rakenteen 22 mukaisen (4S)-trisyklisen yhdisteen ftaali-imidi-suojaryhmä poistetaan, Jolloin saadaan vastaava aminoyhdiste, jolla on rakenne 35 23, jossa A on 0. Esimerkiksi sopivan, rakenteen 22 mukai- 16 101302 sen (4S)-trisyklisen yhdisteen ftaali-imidi-suojaryhmä voidaan poistaa käyttäen hydratsiinimonohydraattia sopivassa proottisessa liuottimessa, kuten metanolissa, jolloin saadaan vastaava, rakenteen 23 mukainen (4S)-trisyk-5 linen aminoyhdiste.

Trisyklisiä aminoyhdisteitä, joilla on rakenne 1, jossa A on NH, voidaan valmistaa, kuten kaaviossa E on kuvattu. Kaaviossa E kaikki substituentit ovat kuten edellä on määritelty, ellei toisin esitetä.

10 Kaavio E

(TSS 1) oksalyylikloridi rK? ä- / ^ C02Me 15 Phthrl^X cf3coiw .A.

^OH 24 16 M vaihe a

Xi / O renkaanmuodostus

PhthN^\ Il -► 25 0^ -NXHSS CF3 vaihe b 25 C02Me

; “ X

/ renkaanmuodostus

PhthN Λ /=\ -► λ--N NCOCFj nr % / vaihe c 35 υ V—/ 26 ^ co2ch3 101302 17

Kaavio E, jatkuu

5 [| I suojauksen || I

H ,---H ,—

. f H poistaminen . / H

PhthN H2N JC·.

CT NCOCF3 o' Nt nh 10 C02CHPh2 C02CHPh2 27 28

Kaavio E tuottaa vaihtoehtoisen, synteettisen mene-15 telmän aminoyhdisteiden valmistamiseksi, joilla on rakenne 1, jossa A on NH.

Vaiheessa a sopiva, rakenteen 16 mukainen ftaa- li-imidillä suljettu (S)-fenyylialaniinijohdannainen muutetaan vastaavaksi happokloridiksi, sitten se saatetaan 20 reagoimaan sopivan, rakenteen 24 mukaisen 3-trifluoriase-tyyliamino-3-allyyli-L-2-aminopropionihapon metyyliesterin kanssa, jolloin saadaan vastaava, rakenteen 25 mukainen l-okso-3-fenyylipropyyli-N-trifluoriasetyyli-N-allyyli-L-aminohapon metyyliesteri, kuten edellä on kuvattu kaavios-25 sa D, vaiheessa a.

Vaiheessa b sopiva, rakenteen 25 mukainen 1-okso- 3-fenyylipropyyli-N-trifluoriasetyyli-N-allyyli-L-aminoha-pon metyyliesteri saatetaan rengasrakenteiseksi, jolloin saadaan vastaava, rakenteen 26 mukainen enamiini, kuten 30 edellä on kuvattu kaaviossa D, vaiheessa c.

Vaiheessa c sopiva, rakenteen 26 mukainen (4S)-enamiini saatetaan rengasrakenteiseksi, jolloin saadaan vastaava, rakenteen 27 mukainen (4S)-trisyklinen yhdiste, kuten edellä on kuvattu kaaviossa D, vaiheessa d.

35 Vaiheessa d sopivan, rakenteen 27 mukaisen (4S)- trisyklisen yhdisteen ftaali-imidi-suojaryhmä poistetaan, jolloin saadaan vastaava (4S)-aminoyhdiste, jolla on ra- 18 101302 kenne 28, jossa A on NH, kuten on kuvattu kaaviossa D, vaiheessa e.

Trisyklisiä aminoyhdisteitä, joilla on rakenne 1, jossa A on metyleeni, voidaan valmistaa, kuten kaaviossa F 5 on kuvattu. Kaaviossa F kaikki substituentit ovat kuten edellä on määritelty, ellei toisin esitetä.

Kaavio F

10 l| 1 1). jaksaly^ikloridi 2) C02Me

PhthN HO

i/“ OH

15 ® vaihe a 29 16

2° jQ

r^y H,pett^ne; PhthN \

u-—\ vaihe b V~NH ____ H

PhthN \ O

'f NH k II

O vX\^>*XOH 1 II

25 T 31 C02Me O

C02Me 30

(QJ

30 renkaanmuodostus , , / ^ renkaanmuodostus ^ PhthN K /=\ - V \ vaihe d vaihe c // /

' Y

35 32 1 C02Me 19 101302

Kaavio F, jatkuu 5 f suojauksen β

jj 1 . ® poistaminen '·./ H

PhthN V __^ HlNP\, >S

q*“ ^ \ vaihe e (j^ ^ \ 10 33 C02CHPh2 C02CHPh2

Kaavio F tuottaa yleisen, synteettisen menetelmän trisyklisten aminoyhdisteiden valmistamiseksi, joilla on rakenne 1, jossa A on metyleeni.

15 Vaiheessa a sopiva, rakenteen 16 mukainen, ftaali- imidillä suljettu (S)-fenyylialaniinijohdannainen muutetaan vastaavaksi happokloridiksi, sitten se saatetaan reagoimaan sopivan, rakenteen 29 mukaisen aminohapponne tyy-liesterin kanssa kytkentäreaktiossa. Esimerkiksi sopiva, 20 rakenteen 16 mukainen, ftaali-imidillä suljettu (S)-fenyy-lialaniinijohdannainen voidaan saattaa reagoimaan oksalyy-likloridin kanssa sopivassa aproottisessa liuottimessa, kuten metyleenikloridissa. Tulokseksi saatu happokloridi voidaan sitten kytkeä sopivaan, rakenteen 29 mukaiseen 25 aminohappometyyliesteriin käyttäen N-metyylimorfoliinia sopivassa aproottisessa liuottimessa, kuten dimetyylifor-mamidissa, jolloin saadaan sopiva, rakenteen 30 mukainen l-okso-3-fenyylipropyyliaminohapon metyyliesterijohdan nainen.

30 Vaiheessa b sopivan, rakenteen 30 mukaisen 1-okso- 3-fenyylipropyyliaminohapon metyyliesterin hydroksimety-leenifunktionaalisuus voidaan hapettaa sopivaksi, rakenteen 31 mukaiseksi alhehydiksi alalla hyvin tunnetun ja arvostetun hapetustekniikan avulla. Esimerkiksi sopivan, 35 rakenteen 30 mukaisen l-okso-3-fenyylipropyyliaminohapon 20 101302 metyyliesterijohdannaisen hydroksimetyleenifunktionaali-suus voidaan hapettaa sopivaksi, rakenteen 31 mukaiseksi aldehydiksi Swern’in hapetuksen avulla käyttäen oksalyyli-kloridia ja dimetyylisulfoksidia sopivassa aproottisessa 5 liuottimessa, kuten metyleenikloridissä.

Vaiheessa c sopiva, rakenteen 31 mukainen aldehydi voidaan saattaa rengasrakenteiseksi, sopivaksi rakenteen 32 mukaiseksi enamiiniksi happokatalyysin avulla. Esimerkiksi sopiva, rakenteen 31 mukainen aldehydi voidaan saat-10 taa rengasrakenteiseksi, sopivaksi rakenteen 32 mukaiseksi enamiiniksi käsittelemällä se trifluorietikkahapolla sopivassa aproottisessa liuottimessa, kuten metyleenikloridissä.

Vaiheessa d sopiva, rakenteen 32 mukainen enamiini 15 voidaan muuttaa vastaavaksi, rakenteen 33 mukaiseksi tri-sykliseksi yhdisteeksi hapon katalysoiman Friedel-Crafts-reaktion avulla. Esimerkiksi sopiva, rakenteen 32 mukainen enamiini voidaan muuttaa vastaavaksi, rakenteen 33 mukaiseksi trisykliseksi yhdisteeksi käsittelemällä se trifluo-20 rimetaanisulfonihapon ja trifluorietikkahappoanhydridin seoksella sopivassa aproottisessa liuottimessa, kuten me-tyleenikloridissa.

Vaiheessa d voi olla välttämätöntä, että karboksi-funktionaalisuus esteröidään uudelleen johtuen työskente-• 25 lyolosuhteista. Esimerkiksi raa'an tuotteen käsittelyä bromidifenyylimetaanilla sopivassa aproottisessa liuottimessa, kuten dimetyyliformamidissa yhdessä ei-nukleofiili-sen emäksen kanssa, voidaan käyttää vastaavan difenyylime-tyyliesterin saamiseksi.

30 Vaiheessa e sopivan, rakenteen 33 mukaisen trisyk- .· lisen yhdisteen ftaali-imidi-suojaryhmä voidaan poistaa käyttäen alalla hyvin tunnettuja menetelmiä ja tekniikkaa. Esimerkiksi sopivan, rakenteen 33 mukaisen trisyklisen yhdisteen ftaali-imidi-suojaryhmä voidaan poistaa käyttäen 35 hydratsiinimonohydraattia sopivassa proottisessa liuotti- 21 101302 messa, kuten metanolissa, jolloin saadaan vastaava, rakenteen 34 mukainen aminoyhdiste.

Yhdisteitä, joilla on kaava I, jossa A on sidos, voidaan valmistaa käyttäen menetelmiä ja tekniikkaa, jotka 5 alan ammattimies tuntee ja hallitsee hyvin. Yleistä synteettistä kaaviota näiden yhdisteiden valmistamiseksi esittää kaavio G, jossa kaikki substituentit ovat, kuten edellä on määritelty, ellei toisin esitetä.

Kaavio G

10 J>h

Ph co2Me 211°^-^ Me02Cv^^J

35 2) Hal T

15 vaihe a 36 37 I

HCI^ EEDQ

Me02<X βΗ2 __ 20 vaihe b 38 PhthN 16

fr* OH

O

25 vaihe c : 30 rO -2L*. J®

PMhN-K vaihe a phthN J

ry~~ NH C0*Mt o'" NH s/ CO;M.

35 39 \ 40

k I

^ CHO

22 101302

Kaavio G tuottaa yleisen synteettisen menetelmän yhdisteiden valmistamiseksi, joilla on kaava I, jossa A on sidos.

Vaiheessa a rakenteen 35 mukainen N-(fenyylimety-5 leeni)glysiinimetyyliesteri voidaan käsitellä yhdellä ekvivalentilla ei-nukleofiilistä emästä, kuten litiumdi-iso-propyyliamidia, sopivassa aproottisessa liuottimessa, kuten tetrahydrofuraanissa, minkä jälkeen lisätään rakenteen 36 mukaista 4-halogeenibuteenia, jolloin saadaan rakenteen 10 37 mukainen 2-(3-butenyyli)-N-(fenyylimetyleeni)glysiini- metyyliesteri.

Vaiheessa b rakenteen 37 mukaisen 2-(3-butenyyli)-N-(fenyy1imetyleeni)glysiinimetyyliesterin N-(fenyylime-tyleeni)-funktionaalisuus voidaan hydrolysoida happamissa 15 olosuhteissa, kuten suolahapon avulla, sopivassa aproottisessa liuottimessa, kuten etyylieetterissä, jolloin saadaan rakenteen 38 mukainen 2-(3-butenyyli)glysiinimetyy-liesteri.

Vaiheessa c sopiva, rakenteen 38 mukainen amidiyh-20 diste voidaan valmistaa saattamalla sopiva, rakenteen 16 mukainen ftaali-imidillä suojattu (S)-fenyylialaniiniyh-diste reagoimaan rakenteen 39 mukaisen 2-(3-butenyyli)gly-siinimetyyliesterin kanssa kytkentäreaktion olosuhteissa, kuten EEDQ:n avulla, sopivassa aproottisessa liuottimessa, 25 kuten metyleenikloridissa.

Vaiheessa d sopivan, rakenteen 39 mukaisen amidiyh-disteen olefiinifunktionaalisuus voidaan muuttaa sopivaksi, rakenteen 40 mukaiseksi aldehydiyhdisteeksi hapettavan hajotuksen olosuhteissa, kuten käsittelemällä otsonilla 30 sopivassa liuotinseoksessa, kuten metyleenikloridissa ja metanolissa.

Yhdisteitä, joilla on kaava 1, jossa A on sidos, voidaan valmistaa sopivasta, rakenteen 40 mukaisesta alde-hydistä menetelmän avulla, joka on esitetty pääpiirteit-35 täin edellä kaaviossa F, vaiheissa c - e ja kaaviossa A.

10 Ί 302 23

Kaavan I (jossa A on sidos) mukaisten yhdisteiden yksittäisiä 3(S)~ ja 3(R)-estereitä voidaan valmistaa sopivasta, rakenteen 40 mukaisesta aldehydistä menetelmän avulla, kuten edellä on esitetty pääpiirteittäin kaaviossa 5 F, vaiheessa c, erottamalla enamiiniyhdisteiden 3(S)- ja 3(R)-esterit, jotka on muodostettu renkaanmuodostusreak-tiossa, joka on kuvattu edellä kaaviossa F, vaiheessa c, ja saattamalla päätökseen menetelmä, kuten on esitetty kaaviossa F, vaiheissa d - e ja kaaviossa A.

10 Ryhmiä Rj^ ja R3 voidaan manipuloida alalla hyvin tunnettujen ja hallittujen menetelmien ja tekniikan avulla ja kuten on kuvattu edellä kaaviossa A ja taulukossa 1.

Lähtöaineet käytettäviksi yleisissä synteettisissä menetelmissä, jotka on esitetty kaavioissa D ja F, ovat 15 helposti alan ammattimiehen saatavissa. Esimerkiksi N°- (bentsyylioksikarbonyyli)-β-(amino)-L-alaniini on kuvattu julkaisussa J. Am. Chem. Soc., 107 (24) (1985) 7105, N-(fenyylimetyleeni)glysiinimetyyliesteri on kuvattu julkaisussa J. Org. Chem., 41 (1976) 3491 ja allyylitrikloo-20 riasetimidaatti on kuvattu julkaisussa J. Chem. Soc.

Perkin Trans., 1 (11) (1985) 2247. 3,4-(dikarboetoksi)tio-feeni on kuvattu julkaisussa Bull. Chem. Soc. Jpn., 41 (1968) 2532 ja 3,4-(dikarboksietoksi)pyrroli on kuvattu julkaisussa Tetrahedron Lett., 3165 (1971).

25 Enkefalinaasin estämiseksi potilaalla, jolla on siihen tarvetta, annetaan tehokas, enkefalinaasia estävä määrä kaavan mukaista yhdistettä.

Tässä käytettynä termi "potilas" viittaa lämminverisiin eläimiin tai nisäkkäisiin, mukaan luettuna hiiret, 30 rotat ja ihmiset. Potilas tarvitsee hoitoa enkefalinaasin estämiseksi silloin, kun hän kärsii akuutista tai kroonisesta kivusta ja tarvitsee endorfiinin tai enkefaliinin välittämää kipua lievittävää vaikutusta. Lisäksi potilas tarvitsee hoitoa enkefalinaasin estämiseksi silloin, kun 35 hän kärsii sairaustilasta, jolle on tunnusomaista poikkea- 24 101302 vuudet nesteen, elektrolyytin, verenpaineen, silmän sisäisen paineen, reniinin tai aldosteronin homeostaasissa, kuten kohonneessa verenpaineessa, munuaistaudeissa, hyper-aldosteronemiassa (veren aldosteronirunsaus), sydämen suu-5 rentuneisuudessa, silmänpainetaudissa ja sydämen dekompen-saatiossa, rajoittumatta näihin poikkeavuuksiin. Näissä tapauksissa potilas on ANP:n välittämän diureettisen, nat-riureettisen, verenpainetta alentavan, hypoaldosteroneemi-sen vaikutuksen tarpeessa. Enkefalinaasin estäminen tuot-10 taisi endorfiinin tai enkefaliinin välittämän kipua lievittävän vaikutuksen estämällä endorfiinien ja enkefalii-nien metabolisen hajoamisen. Enkefalinaasin estäminen tuottaisi ANP:n välittämän diureettisen, natriureettisen, verenpainetta alentavan, hypoaldosteroneemisen vaikutuksen 15 estämällä ANP:n metabolisen hajoamisen.

Lisäksi potilas tarvitsee hoitoa enkefalinaasin estämiseksi silloin, kun hän tarvitsee depressiota vähentävää vaikutusta tai opiaatti- tai morfiinilääkityksen lopettamiseen liittyvien vieroitusoireiden vähentämistä.

20 Tehokas, enkefalinaasia estävä määrä kaavan mukais ta yhdistettä on määrä, joka on tehokas enkefalinaasin estämiseksi ja siten luonnossa esiintyvien, verenkiertoa säätelevien peptidien, kuten endorfiinien, mukaan luettuna enkefaliinien ja ANP:n, metabolisen hajoamisen estämisek-25 si, jolloin tuloksena ovat esimerkiksi endorfiinin tai enkefaliinin välittämät, kipua lievittävät vaikutukset tai ANP:n välittämät diureettiset, natriureettiset, verenpainetta alentavat, hypoaldosteroneemiset vaikutukset. Menestyksellisen hoidon ymmärretään myös sisältävän ennalta-30 ehkäisyn hoidettaessa potilasta tapauksissa, kuten leik-·, kausta edeltävissä toimenpiteissä, jolloin potilas tulee kärsimään akuutista tai kroonisesta kivusta lähitulevaisuudessa.

Tehokas, enkefalinaasia estävä määrä kaavan mukais-35 ta yhdistettä vaihtelee yleensä noin 0,01 mg:sta/potilaan 25 101302 kehonpaino-kg/päivä (mg/kg/päivä) noin 20 mg:aan/kg/päivä. Edullinen on päivittäinen annos, joka on noin 0,1 -10 mg/kg.

Angiotensiinikonvertaasin (ACE:n) estämiseksi poti-5 laalla, jolla on siihen tarvetta, annetaan tehokas, angio-tensiinikonvertaasia (ACE:a) estävä määrä kaavan mukaista yhdistettä. Potilaalla on tarvetta ACE:n estämiseksi silloin, kun hän kärsii kohonneesta verenpaineesta, kroonisesta sydämen dekompensaatiosta, veren aldosteronirunsau-10 desta tai ymmärrykseen liittyvistä häiriöistä. ACE:n estäminen vähentää angiotensiini II:n pitoisuuksia ja siten se estää sen aiheuttamia verisuonia supistavia, verenpainetta lisääviä ja hyperaldosternoneemisia vaikutuksia.

Tehokas ACE:a estävä määrä kaavan mukaista yhdis-15 tettä on määrä, joka on tehokas ACE:n estämiseksi potilaalla, jolla on siihen tarvetta, jolloin tuloksena on esimerkiksi verenpainetta alentava vaikutus. Tehokas ACE:a estävä määrä ja tehokas ACE:a estävä annos ovat samat kuin edellä on kuvattu tehokkaan enkefalinaasia estävän määrän 20 ja annoksen tapauksessa.

Hoidettaessa potilasta kaavan mukaiset yhdisteet voidaan antaa missä tahansa muodossa tai millä tahansa tavalla, joka tekee yhdisteen biologisesti käyttökelpoiseksi tehokkaina määrinä, mukaan luettuna yhdisteen antaminen 25 suun kautta ja ruuansulatuskanavan ulkopuolisesti. Esimerkiksi yhdiste voidaan antaa potilaalle suun kautta, ihonalaisesti, lihaksensisäisesti, laskimonsisäisesti, ihon läpi, nenän kautta, peräsuolen kautta ja vastaavasti. Lääkkeen antaminen suun kautta on yleensä edullista.

30 Kaavan mukaiset yhdisteet voidaan antaa potilaalle farmaseuttisten koostumusten tai lääkkeiden muodossa, jotka on valmistettu yhdistämällä kaavan mukaiset yhdisteet farmaseuttisesti hyväksyttävien kantajien tai täyteaineiden kanssa, joiden osuus ja luonne määräytyvät valitun 26 101302 lääkkeen antotavan ja tavanomaisen farmaseuttisen käytännön mukaan.

Farmaseuttiset koostumukset tai lääkkeet valmistetaan tavalla, joka on hyvin tunnettu farmaseuttisella 5 alalla. Kantaja tai täyteaine voi olla kiinteä, puolikiin-teä tai nestemäinen aine, joka voi toimia aktiivisen aineen kantajana tai väliaineena. Sopivat kantajat tai täyteaineet ovat hyvin tunnettuja alalla. Farmaseuttinen koostumus voidaan sovittaa käytettäväksi suun kautta tai 10 ruuansulatuskanavan ulkopuolisesti ja se voidaan antaa potilaalle tablettien, kapseleiden, peräpuikkojen, liuoksen, suspensioiden ja vastaavien muodossa.

Farmaseuttiset koostumukset voidaan antaa suun kautta, esimerkiksi inertin laimennusaineen tai syötäväksi 15 kelpaavan kantaja-aineen kanssa. Ne voidaan kapseloida gelatiinikapseleihin tai puristaa tableteiksi. Suun kautta otettavaksi kaavan mukaiset yhdisteet voidaan sekoittaa täyteaineiden kanssa ja käyttää tablettien, pillereiden, kapseleiden, eliksiirien, suspensioiden, siirappien, voh-20 veleiden, purukumien ja vastaavien muodossa. Näiden valmisteiden pitäisi sisältää vähintään 4 % kaavan mukaista yhdistettä, aktiivista ainetta, mutta määrä voi vaihdella riippuen erityisestä muodosta ja se voi olla tarkoituksenmukaisesti 4 - noin 70 % yksikön painosta. Koostumuksissa 25 läsnä olevan aktiivisen aineen määrä on sellainen, että saadaan yksikköannosmuoto, joka sopii annettavaksi potilaalle.

Tabletit, pillerit, kapselit ja vastaavat voivat sisältää myös yhtä tai useampaa seuraavista lisäaineista: 30 sideaineita, kuten mikrokiteistä selluloosaa, tragantti-kumia tai gelatiinia; täyteaineita, kuten tärkkelystä tai laktoosia; hajottavia aineita, kuten alginiinihappoa, Primogel'ia, maissitärkkelystä ja vastaavaa; voiteluaineita, kuten magnesiumstearaattia tai Sterotex'ia; liukastus-35 aineita, kuten kolloidista piidioksidia; ja makeutusainei- 27 101302 ta, kuten sakkaroosia ja sakkariinia tai aromiaineita, kuten piparminttua, metyylisalisylaattia tai appelsiini-makuainetta. Kun yksikköannosmuoto on kapseli, se voi sisältää edellä mainitun tyyppisten aineiden lisäksi neste-5 mäisen kantajan, kuten polyetyleeniglykolin tai rasvaöl-jyn. Muut yksikköannosmuodot voivat sisältää erilaisia muita aineita, jotka muuntavat annosyksikön fysikaalista muotoa, esimerkiksi päällysteitä. Siten tabletit tai pillerit voidaan päällystää sokerilla, sellakalla tai muilla 10 enteerisilla päällystysaineilla. Siirappi voi sisältää aktiivisen aineen lisäksi sakkaroosia tai makeutusainetta ja tiettyjä säilöntäaineita, väriaineita ja aromeja. Näiden erilaisten koostumusten valmistukseen käytettävien aineiden pitäisi olla farmaseuttisesti puhtaita ja myrkyt-15 tömiä käytettävien määrien suhteen.

Ruuansulatuskanavan ulkopuolista käyttöä varten kaavan mukaiset yhdisteet voidaan sisällyttää liuokseen tai suspensioon. Näiden valmisteiden pitäisi sisältää vähintään 0,1 % kaavan 1 mukaista yhdistettä, mutta määrä 20 voi vaihdella 0,1 %:ista noin 50 %:iin valmisteiden painosta. Tällaisissa koostumuksissa läsnä olevan aktiivisen aineen määrä on sellainen, että saadaan sopiva annostus.

Liuokset tai suspensiot voivat sisältää myös yhtä tai useampaa seuraavista lisäaineista: steriilejä laimen-25 nussineita, kuten vettä ruisketta varten, suolaliuosta, rasvaöljyjä, polyetyleeniglykoleja, glyseriinia, propylee-niglykolia tai muita synteettisiä liuottimia; antibaktee-risia aineita, kuten bentsyylialkoholia tai metyyliparabe-nia; hapettumisenestoaineita, kuten askorbiinihappoa tai 30 natriumbisulfiittia; kelatoivia aineita, kuten etyleeni-·, diamiinitetraetikkahappoa; puskureita, kuten asetaatteja, sitraatteja tai fosfaatteja ja aineita myrkyllisyyden säätämiseksi, kuten natriumkloridia tai dekstroosia. Ruuansulatuskanavan ulkopuolisesti käytettävä valmiste voidaan 35 sulkea ampulleihin, kertakäyttöruiskuihin tai monen annok- 28 101302 sen lääkepulloihin, jotka ova valmistettu lasista tai muovista.

Seuraavat tutkimukset kuvaavat kaavan I mukaisten yhdisteiden käyttökelpoisuutta enkefalinaasin estäjinä ja 5 angiotensiinikonvertaasin (ACE:n) estäjinä.

Enkefalinaasi puhdistetaan osittain rotan munuaisesta. Entsyymi uutetaan mikrovillusfraktiosta käyttämällä Triton X-100:aa Malfroy'n ja Schwartz'in menetelmän mukaan [J. Biol. Chem., 259 (1984) 14365 - 14370] tai käyttämällä 10 proteolyyttistä käsittelyä Almenoffin ja Orlowskin'n menetelmän mukaan [Biochem., 22 (1983) 590 - 599]. Lisäksi entsyymi puhdistetaan anioninvaihtokromatografian avulla (Mono Q™ -pylväs, Pharmacia) käyttäen Pharmacia FPLC-jär-jestelmää. Entsyymin aktiivisuus voidaan mitata Floren-15 tin'in et ai. fluorometristen menetelmien avulla [Anal. Biochem., 141 (1984) 62 - 69] tai Almenoffin ja Orlowski'n fluorometristen menetelmien avulla [J. Neuro-chemistry, 42 (1984) 151 - 157], Entsyymi määritetään 50 mM Hepes-puskurissa (pH-arvo 7,4), jolloin reaktiotilavuus 20 on 3,0 ml sisältäen 12 μΜ substraattia dansyl-D-AlaGly(p-nitro)PheGly (K,, = 40 μΜ) 25 °C:n lämpötilassa. Substraatti (ja inhibiittori) lisätään väkevästä varastoliuoksesta DMS0:ssa (enintään 0,1 ml DMS0:n lopullinen tilavuus). Entsyymi lisätään pienessä tilavuudessa (suunnilleen 0,1 25 pg FPLC-puhdistettua proteiinia) reaktion aloittamiseksi ja fluoresenssin määrän lisääntyminen rekisteröidään jatkuvasti käyttäen fluorometriä (aktivoiminen aallonpituudella 339 nm, säteily aallonpituudella 562 nm).

Angiotensiinikonvertaasin entsymaattista aktiivi-30 suutta seurataan käyttäen spektrofotometristä substraat-'m tia, joka on kuvattu julkaisussa Holmguist et ai., Anal.

Biochem., 95 (1979) 540 - 548, ja puskurijärjestelmää, joka on kuvattu julkaisussa Ryan, Methods of Enzymatic Analysis, 3. painos, H. U. Bergmeyer, toimittaja, osa V, 35 Verlag Chemie, Weinheim, 1983, sivut 20 - 34.

29 101302

Entsymaattisen aktiivisuuden analyysin tulokset, kuten ne on esitetty taulukossa 2, osoittavat, että kaavan I mukaiset yhdisteet ovat enkefalinaasin estäjiä sekä an-giotensiinikonvertaasin (ACE:n) estäjiä.

5

Taulukko 2

Kaavan mukaisten yhdisteiden Ki-arvot enkefalinaasin ja angiotensiinikonvertaasin (ACE:n) estäjinä

10 Kaavan mukainen Enkefalinaasi ACE

yhdiste Kt (nN) K± (nM) 102,353 < 0,2 < 104 101,137 0,4 15 102,353« [4S-[4a, 7a(R*), 12bS]]-7-[(2-karboksime- tyyli-2-oksoindaani)metyyliamino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-okta-hydro-6-oksopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyyli-happo; 100,137 = [4S-[4a, 7a(R*), 12bB]]-7-[(1-karboksime-20 tyyli-l-oksosyklopentaani)metyyliamino] -1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido[2,1-a] [2]bentsatsepiini-4-karbok-syy li happo.

Seuraavat esimerkit esittävät tyypillisiä synteesejä, kuten kaavioissa A ja C - G on kuvattu. Näiden esi-. 25 merkkien ymmärretään olevan vain kuvaavia eikä niitä ole tarkoitettu rajoittamaan tämän keksinnön piiriä millään tavoin. Tässä käytettynä seuraavilla termeillä on annetut merkitykset: "g" viittaa grammaan, "mmol" viittaa milli-mooliin, "ml" viittaa millilitraan, "kp" viittaa kiehumis-30 pisteeseen, "sp" viittaa sulamispisteeseen, " °C" viittaa ’ Celsius-asteeseen, "mmHg" viittaa elohopeamillimetriin, "μΐ" viittaa mikrolitraan, "pg" viittaa mikrogrammaan ja "μΜ" viittaa mikromolaarisuuteen.

30 101302

Esimerkki 1, MDL 102,353 [4S-[4a, 7a(R*), 12b8]]-7-[(2-karboksimetyyli-2-oksoindaani)metyyliamino] -1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappo 5 Kaavio F, vaihe a: (S)-N-[2-(l,3-dihydro-l,3-diok- so-2H-isoindol-2-yyli)-l-okso-3-fenyylipropyyli]-6-hyd-roksi-(S)-norleusiini, metyyliesteri

Sekoitetaan ftaalihapon anhydridi (1,82 kg, 12,3 mol), (S)-fenyylialaniini (1,84 kg, 11,1 mol) ja ve-10 detön dimetyyliformamidi (2,26 1). Saatua seosta sekoitetaan 115 - 120 °C:n lämpötilassa 2 tunnin ajan typpi-ilma-kehän alla. Seos kaadetaan nopeasti sekoitettavaan veteen (32,6 1) ja saatua seosta jäähdytetään yön yli 0 °C:n lämpötilassa. Seos suodatetaan, pestään kylmällä vedellä (2 x 15 2 1) ja kuivataan ilmassa. Tuote liuotetaan seokseen, jos sa on 9A-etanolia (8,05 1) ja vettä (8,05 1), ja saatua liuosta kuumennetaan palautusjäähdytyslämpötilassa. Liuos omapainosuodatetaan, jäähdytetään ympäröivään lämpötilaan ja sitten sitä jäähdytetään yön yli jääkaapissa noin 20 0 °C:n lämpötilassa. Kiteytynyt tuote suodatetaan, pestään kylmällä 9A-etanolin ja veden 50 : 50 -seoksella (2x21) ja ilmakuivataan, jolloin saadaan 2,96 kg (90,3 %) N-fta-loyyli-(S)-fenyylialaniinia; sulamispiste 177 - 179 °C.

Sekoitetaan N-ftaloyyli-(S)-fenyylialaniini 25 (50,2 g, 0,17 mol), metyleenikloridi (660 ml) ja dimetyy liformamidi (0,5 ml) typpi-ilmakehän alla. Lisätään ok-salyylikloridi (17,7 ml, 0,2 mol) noin 5 minuutin kuluessa sekoittaen. Saatua seosta sekoitetaan ympäröivässä lämpötilassa 3 tunnin ajan ja liuotin haihdutetaan tyhjössä, 30 jolloin saadaan N-ftaloyyli-(S)-fenyylialaniini, happoklo- ridi, kiinteänä aineena (54,3 g, 101,9 %).

Sekoitetaan 6-hydroksi-(S)-norleusiini, metyyliesteri, hydrokloridisuola, (33,5 g, 0,1 mol) ja dimetyyliformamidi (201 ml), saatu seos jäähdytetään noin 0 °C:n 35 lämpötilaan ja pannaan typpi-ilmakehän alle. Siihen lisä- 31 101302 tään tipolttain N-metyylimorfoliini (51 ml, 0,46 mol) jäähdyttäen siten, että astian lämpötila pysyy 0 - 5 °C:ssa. Seosta sekoitetaan 0 - 5 °C:n lämpötilassa vielä 10 minuutin ajan, sitten lisätään liuos, jossa on N-ftalo-5 yyli-(S)-fenyylialaniini, happokloridi, (53,5 g, 0,17 mol) metyleenikloridissa (270 ml) 30 minuutin kuluessa jäähdyttäen siten, että lämpötila pysyy 0-5 °C:ssa. Jäähdytys-haude poistetaan ja seosta sekoitetaan huoneenlämpötilassa 18 tunnin ajan.

10 Metyleenikloridi haihdutetaan tyhjössä ja jäljelle jäänyt jäännös laimennetaan etyyliasetaatilla (800 ml). Tulokseksi saatu seos uutetaan vedellä (800 ml), orgaaninen kerros erotetaan ja uutetaan 1 N suolahapolla (270 ml) ja sen jälkeen vedellä (3 x 500 ml). Orgaaninen 15 kerros kuivataan (MgS04), suodatetaan ja haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan raaka tuote (76 g, 98 %). Raaka tuote liuotetaan kuumaan tolueeniin (223,5 ml), saatu liuos jäähdytetään huoneenlämpötilaan, sitten sitä jäähdytetään yön yli noin 0 °C:n lämpötilassa. Kiteytynyt tuote 20 suodatetaan, pestään kylmällä tolueenilla ja kuivataan ilmassa, jolloin saadaan 56,6 g (76 %) otsikon yhdistettä; sulamispiste 128 - 130 °C.

Kaavio F, vaihe b: 2-(l,3-dihydro-l,3-diokso-2H- isoindol-2-yyli)-l-okso-3-fenyylipropyyli-6-okso-(S)-nor-25 leusiini, metyyliesteri

Sekoitetaan oksalyylikloridi (80 ml, 0,92 mol) ja metyleenikloridi (2 1) ja pannaan typpi-ilmakehän alle. Seos jäähdytetään alle -50 °C:n lämpötilaan ja siihen lisätään liuos, jossa on dimetyylisul£oksidia (65,4 ml, 30 0,92 mol) metyleenikloridissa (425 ml). Saatua seosta se koitetaan 15 minuutin ajan ja siihen lisätään liuos, jossa on (S)-N-[2-(l,3-dihydro-l,3-diokso-2H-isoindol-2-yyli)-l-okso-3-fenyylipropyyli]-6-hydroksi-(S)-norleusiini, metyyliesteri, (200 g, 0,456 mol) metyleenikloridissa (800 35 ml), noin 45 minuutin kuluessa, pitäen astian lämpötilaa 32 101302 -50 °C:n alapuolella 30 minuutin ajan. Seokseen lisätään trletyyllamllnl (420 ml, 3,01 mol) 30 minuutin kuluessa. Saatua seosta sekoitetaan samalla lämmittäen se 0 °C:n lämpötilaan 1,25 tunnin kuluessa. Reaktloseos siirretään 5 12 litran pulloon. Sitä sekoitetaan ja jäähdytetään, jol loin samalla siihen lisätään liuos, jossa on Oxonea (ka-liumperoksimonosulfaattia) (566 g) vedessä (6,74 1) siten, että astian lämpötila pysyy 15 °C:n alapuolella. Seosta sekoitetaan 5 minuutin ajan, orgaaninen kerros erotetaan 10 ja vesipitoinen kerros uutetaan metyleenikloridilla (11). Orgaaniset faasit yhdistetään, kuivataan (MgS04) ja suodatetaan, jolloin saadaan otsikon yhdiste liuoksena.

Kaavio F; vaihe c: [S-(R*,R*)]-N-[2-(l,3-dihydro- 1,3-diokso-2H-isoindol-2-yyli)-l-okso-3-fenyylipropyyli]-15 1,2,3,4-tetrahydro-2-pyridiinikarboksyylihappo,metyylies- teri

Siirretään liuos, jossa on 2-(1,3-dihydro-l,3-diok-so-2H-isoindol-2-yyli )-l-okso-3-fenyylipropyyli] -6-okso- (S)-norleusiini, metyyliesteri, metyleenikloridissa (tila-20 vuus noin 4,5 1) 12 l:n pulloon ja pannaan typpi-ilmakehän alle. Liuosta sekoitetaan ja siihen lisätään trifluo-rietikkahappo (440 ml, 5,71 mol) yhtenä annoksena. Tulokseksi saatua seosta sekoitetaan huoneenlämpötilassa yhden tunnin ajan, sitten se jäähdytetään nopeasti noin 0 °C:n 25 lämpötilaan. Voimakkasti sekoitettuun seokseen lisätään liuos, jossa on natriumhydroksidia (240 g, 6,0 mol) vedessä (3,4 1) hitaana virtana siten, että astian lämpötila pysyy noin 0 °C:ssa. Orgaaninen faasi erotetaan ja vesipitoinen faasi uutetaan metyleenikloridilla (1 1). Orgaa-30 niset faasit yhdistetään ja kuivataan (MgS04). Suodatetaan ja liuotin poistetaan tyhjössä, jolloin jäljelle jää jäännös (262 g, 137 %).

Edellä saatu jäännös liuotetaan dietyylieetteriin (1 1) ja pestään vedellä (5 x 500 ml). Orgaaninen faasi 35 haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan 229 g:n jäännös.

33 101302 Jäännös laimennetaan metyleenikloridilla (200 ml) ja puhdistetaan piihappogeelikromatografian avulla (metyleeni-kloridi), jolloin saadaan tahmeata jäännöstä 225 g.

Edellä saatu jäännös laimennetaan dietyylieette-5 rillä (250 ml) ja sen annetaan seistä huoneenlämpötilassa 24 tunnin ajan. Kiinteä aine suodatetaan, pestään dietyy-lieetterillä ja kuivataan ilmassa, jolloin saadaan 123,2 g ainetta; sulamispiste 140 - 142,5 eC. Se kiteytetään uudelleen [metyleenikloridi (125 ml)/isopropanoli 10 (615 ml)] poistamalla liuotinta keittämällä, kunnes astian lämpötila saavuttaa 75 °C:n lämpötilan ja tulokseksi saadun näytteen annetaan seistä huoneenlämpötilassa 24 tunnin ajan. Näyte suodatetaan, pestään kylmällä isopropanolilla ja kuivataan ilmassa, jolloin saadaan 101,5 g otsikon yh-15 distettä; sulamispiste 144 - 146 °C.

Suodos haihdutetaan tyhjössä, jolloin 101,5 g:sta tuotetta saadaan 24 g. Se kiteytetään uudelleen (isopro-panolista), jolloin saadaan vielä 3,5 g otsikon yhdistettä.

20 Suodos haihdutetaan tyhjössä, jolloin 123,2 g:sta saadaan 62 g öljyä. Se puhdistetaan piihappogeelikromatografian (25 % etyyliasetaattia/75 % heksaania) avulla, jolloin kerätään talteen 32 - 500 ml:n fraktiot. Fraktiot 9-2 yhdistetään ja haihdutetaan tyhjössä, jolloin saa-25 daan 35 g tahmeata öljyä. Se kiteytetään uudelleen kolme kertaa (isopropanoli/5 ml/g), jolloin saadaan vielä 11,9 g otsikon yhdistettä; sulamispiste 142,5 - 144,5 °C. Käyttökelpoisen aineen kokonaissaanto: 116,9 g (61,3 %).

Kaavio F, vaihe d: [4S-[4a, 7a(R*), 12bB]]-7-[(1,3-30 dihydro-l,3-diokso-2H-isoindol-2-yyli)]-l,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido[2,1-a] [2]bentsatsepiini-4-karbok-syylihappo, difenyylimetyyliesteri

Sekoitetaan trifluorimetaanisulfonihappo (500 g, 3,33 mol) ja trifluorietikkahapon anhydridi (74,8 ml, 35 0,53 mol) ja pannaan typpi-ilmakehän alle. Saatua seosta 34 101302 sekoitetaan ja siihen lisätään liuos, jossa on [S-(R*, R*) ] -N- [ 2- (1,3-dihydro-l, 3-diokso-2H-isoindol-2-yyli) -l-okso-3-fenyylipropyyli]-1,2,3,4-tetrahydro-2-pyridiini-karboksyylihappo, metyyliesteri, (200 g, 0,48 mol) mety-5 leenikloridissa (1 1) jäähdyttäen siten, että astian lämpötila pysyy 35 eC:n alapuolella. Saatua seosta sekoitetaan ympäröivässä lämpötilassa 2 päivän ajan. Se kaadetaan voimakkaasti sekoitettavaan j ääveteen (5 1) ja saatua seosta sekoitetaan 30 minuutin ajan. Se uutetaan etyy-10 liasetaatilla (3 x 1 1), orgaaniset faasit yhdistetään ja pestään vedellä (3 x 500 ml). Haihdutetaan tyhjössä jäännökseksi. Jäännös liuotetaan etyyliasetaattiin (4 1) ja uutetaan 1/4-kyllästetyllä kaliumvetykarbonaatilla (1 1), sitten 1/3-kyllästetyllä kaliumvetykarbonaatilla (7 x 15 11). Vesipitoiset uutteet yhdistetään ja laimennetaan etyyliasetaatilla (21). Tulokseksi saatua seosta sekoitetaan ja se jäähdytetään 5 - 10 eC:n lämpötilaan. Sen pH säädetään arvoon 2 käyttäen väkevää suolahappoa (noin 750 ml).

20 Orgaaninen faasi erotetaan ja vesipitoinen faasi uutetaan etyyliasetaatilla (3 x 1 1). Etyyliasetaattiuut-teet yhdistetään, pestään vedellä (3 x 1 1), sitten kyllästetyllä natriumkloridilla (0,8 1) ja kuivataan (MgS04). Suodatetaan ja pestään etyyliasetaatilla (3 x 200 ml).

25 Haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan (188,3 g, 101,5 %) [4S-[4a, 7a(R*), 12b8]]-7-[(1,3-dihydro-l,3-diokso-2H- isoindol-2-yyli)]-1,2,3,4,5,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyri-do[2,l-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappo värittömänä vaahtona.

30 Liuotetaan [4S-[4a, 7a(R*), 12bB]]-7-[(1,3-dihydro- 1,3-diokso-2H-isoindol-2-yyli)]-1,2,3,4,6,7,8,12b-okta-hydro-6-oksopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyyli-happo (113,9 g, 0,28 mol) metyleenikloridiin (1,2 1) ja kuivataan vedettömällä MgS04:lla (60 g). Suodatetaan ja 35 pestään metyleenikloridilla (3 x 200 ml). Haihdutetaan 35 101302 tyhjössä jäännökseksi. Jäännös liuotetaan vedettömään di-metyyliformamidiin (860 ml) ja pannaan typpi-ilmakehän alle. Liuokseen lisätään kesiumkarbonaatti (98,9 g, 0,3 mol) yhtenä annoksena. Seosta sekoitetaan 45 minuutin 5 ajan ympäröivässä lämpötilassa. Lisätään bromidifenyylime-taani (164,8 g, 0,67 mol). Tulokseksi saatua seosta sekoitetaan ympäröivässä lämpötilassa 18 tunnin ajan. Reaktio tukahdutetaan etyyliasetaatilla (2,464 1) ja vedellä (630 ml). Orgaaninen faasi erotetaan ja pestään vedellä 10 (7 x 625 ml), 1/4 -kyllästetyllä kaliumvetykarbonaatilla (625 ml), vedellä (625 ml) ja kyllästetyllä natriumklori-dilla (625 ml). Kuivataan (MgS04), suodatetaan ja haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan 214,4 g öljyä. Yhdistetyt vesipitoiset pesunesteet uutetaan etyyliasetaatilla (3 x 15 500 ml), pestään vedellä (4 x 300 ml) ja kuivataan (MgS04).

Suodatetaan ja haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan vielä 20,2 g öljyä.

Raaka tuote (234,6 g) liuotetaan metyleenikloridiin (200 ml) ja suodatetaan piihappogeelitäytteen (213 g) lä-20 pi, eluoiden metyleenikloridilla (2 1). Liuotin haihdutetaan keittämällä ja korvataan heksaanilla (3 1), jolloin astia saavuttaa maksimilämpötilan 65 °C. Tuote jäähdytetään ympäröivään lämpötilaan, saostunut öljy dekantoidaan pois ja kiteytetään (9A-etanoli), jolloin saadaan 96,6 g 25 (60 %) otsikon yhdistettä; sulamispiste 153 - 155 °C.

Kaavio F, vaihe e: [4S-[4a, 7a(R*), 12bB]]-7-(amino) -1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido[2,1-a][2]— bentsatsepi ini-4-karboksyy1ihappo, di fenyy1imetyy1ieste-ri 30 Sekoitetaan [4S-[4a, 7a(R*), 12b8]]-7-[(1,3-dihyd- ro-l,3-diokso-2H-isoindol-2-yyli )]-l,2,3,4,6,7,8,12b-okta-hydro-6-oksopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyyli-happo, difenyylimetyyliesteri, (170,9 g, 0,3 mol), hydrat-siinimonohydraatti (34,4 g, 0,68 mol) ja metanoli (3,4 1) 35 typpi-ilmakehän alla. Saatua seosta kuumennetaan 5 tunnin 36 101302 ajan palautusjäähdyttäen. Se jäähdytetään ympäröivään lämpötilaan ja suodatetaan ftaloyylihydratsidin poistamiseksi. Suodos haihdutetaan tyhjössä jäännökseksi, joka liete-tään kloroformiin (600 ml). Liukenematon ftaloyylihydrat-5 sidi poistetaan suodattamalla ja pestään kloroformilla (4 x 210 ml). Suodos pestään vedellä (4 x 429 ml, kuivataan (MgS04) ja suodatetaan. Suodos haihdutetaan otsikon yhdisteen kiinteäksi jäännökseksi, jonka paino on 142 g (107,7 %).

10 Kaavio A: [4S-[4a, 7a(R*), 12bB]]—7—[(2-karboksime- tyyli-2-oksoindaani)metyyliamino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-okta-hydro-6-oksopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyyli-happo

Liuotetaan dietyylimalonaatti (15,2 ml, 0,100 mol) 15 tetrahydrofuraaniin (800 ml). Saatu liuos jäähdytetään jäähauteessa ja käsitellään natriumhydridillä (3,0 g, 0,10 mol, 80-%:inen mineraaliöljyssä). Saatua seosta sekoitetaan, kunnes saadaan liuos, ja siihen lisätään a,a’(26,4 g, 0,100 mol). Saatua seosta sekoitetaan 30 mi-20 nuutin ajan ja sitten siihen lisätään vielä natriumhydri-diä (3,0 g, 0,10 mol). Seosta sekoitetaan huoneenlämpötilassa 20 tunnin ajan, se suodatetaan suodattimen apuaineen läpi ja liuotin haihdutetaan tyhjössä. Tuote puhdistetaan piihappogeelikromatografian avulla, jolloin saadaan 25 2,2-(dikarboetoksi)indaani vaaleankeltaisena öljynä (16,0 g, 61,5 %).

Liuotetaan 2,2-(dikarboetoksi)indaani (15,9 g, 60,6 mmol) dimetyylisulfoksidiin (140 ml). Saatuun liuokseen lisätään vettä (14 ml) ja litiumkloridia (7,0 g, 30 0,16 mol). Saatua seosta kuumennetaan palautusjäähdyttäen 4 tunnin ajan, sitten se jäähdytetään ja jaetaan veden (150 ml) ja metyleenikloridin (2 x 150 ml) kesken. Orgaaninen faasi pestään vedellä (150 ml), kuivataan (MgS04) ja juoksutetaan piihappogeelitäytteen läpi, jolloin saadaan 37 101302 2-(karboetoksi)indaani meripihkanvärisenä öljynä (6,49 g, 56 %).

Liuotetaan 2-(karboetoksi)indaani (6,49 g, 34,1 mmol) etanoliin (95 %, 150 ml) ja veteen (75 ml).

5 Lisätään kallumhydroksldla (9,5 g, 0,17 mol) ja saatua seosta sekoitetaan huoneenlämpötilassa 1 tunnin ajan. Se jaetaan veden (150 ml) ja etyylieetterin (2 x 150 ml) kesken. Vesipitoinen faasi tehdään happamaksi suolahapon avulla pH-arvoon 1. Se uutetaan metyleenikloridilla (2 x 10 150 ml), kuivataan (Na2S04) ja liuotin haihdutetaan tyhjös sä, jolloin saadaan 2-karboksi-indaanihappo nahanruskeana kiinteänä aineena (3,82 g, 69 %).

Liuotetaan 2-karboksi-indaanihappo (3,82 g, 23,5 mmol) metanoliin (60 ml) ja käsitellään se dimetoksi-15 propaanilla (5,8 ml, 47 mmol) ja rikkihapolla (0,8 ml). Saatua seosta sekoitetaan huoneenlämpötilassa 15 tunnin ajan. Liuotin haihdutetaan tyhjössä, tuote laimennetaan metyleenikloridilla (75 ml) ja pestään kyllästetyllä nat-riumvetykarbonaatilla (35 ml). Vesipitoinen faasi uutetaan 20 metyleenikloridilla (30 ml), yhdistetyt orgaaniset uutteet pestään kyllästetyllä suolaliuoksella (30 ml) ja kuivataan (Na2S04). Liuotin haihdutetaan tyhjössä ja tuote juoksutetaan piihappogeelitäytteen läpi, jolloin saadaan 2-(kar-boksimetoksi)indaani keltaisena öljyjä (3,98 g, 95,9 %). 25 Di-isopropyyliamiini (0,88 ml, 6,28 mmol) liuote taan tetrahydrofuraaniin (7,5 ml). Liuos jäähdytetään jää-hauteessa ja siihen lisätään tipoittain n-butyylilitiumia (3,6 ml 1,6 M liuosta heksaaneissa, 5,75 mmol). Saatua seosta sekoitetaan 15 minuutin ajan, sitten se jäähdyte-30 tään -78 °C:n lämpötilaan. Siihen lisätään 2-(karbometok-si)indaani (888 mg, 5,04 mmol) liuos tetrahydrofuraanissa (5 ml). Saatua seosta sekoitetaan 45 minuutin ajan ja sitten siihen lisätään t-butyylibromiasetaatti (1,0 ml, 6,2 mmol). Saatua seosta sekoitetaan 3 tunnin ajan, siihen 35 lisätään ammoniumkloridia (6 ml) ja se lämmitetään huo- 38 101302 neenlämpötilaan. Se jaetaan etyylieetterin (75 ml) ja veden (10 ml) kesken. Kuivataan (Na2S04), liuotin haihdutetaan tyhjössä ja jäännös puhdistetaan piihappogeelikro-matografian avulla (heksaani/etyyliasetaatti, 7:1), jol-5 loin saadaan 2- (karbometoksi)-2-(karbo-t-butyylioksimetyy- li)indaani vaaleankeltaisena kiinteänä aineena (1,28 g, 73,1 %).

Liuotetaan 2- (karbometoksi)-2-(karbo-t-butyylioksi-metyyli)indaani (1,28 g, 4,41 mmol) 95-%:iseen etanoliin 10 (30 ml) ja veteen (15 ml). Liuos käsitellään kaliumhydrok- sidilla (1,4 g, 25 mmol) ja saatua tuotetta sekoitetaan huoneenlämpötilassa 3 tunnin ajan. Tuotteeseen lisätään vettä (40 ml) ja se uutetaan etyylieetterillä (2 x 30 ml) ja vesipitoinen faasi tehdään happamaksi pH-arvoon 3 kiin-15 teän viinihapon avulla. Tuote uutetaan etyyliasetaatilla (2 x 100 ml), kuivataan (Na2S04) ja liuotin haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan 2-karboksi-2-(karbo-t-butyyliok-simetyyli)indaani vaaleankeltaisena kiinteänä aineena (1,08 g, 88,6 %).

20 Liuotetaan [4S-[4a, 7a(R*), 12b8]]-7-(amino)- 1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro- 6 -oksopyr ido [2,l-a][2] bentsat-sepiini-4-karboksyyihappo, difenyylimetyyliesteri, (150 mg, 0,34 mmol) ja EDC (98 mg, 0,50 mmol) tetrahydro-furaaniin (5 ml). Saatu liuos käsitellään 2-karboksi-2-25 (karbo-t-butyylioksimetyyli)indaanilla (118 mg, 0,426 mmol). Saatua tuotetta sekoitetaan huoneenlämpötilassa 15 tunnin ajan ja liuotin haihdutetaan tyhjössä. Jäännös jaetaan etyyliasetaatin (35 ml) ja 1 N suolahapon (6 ml) kesken. Orgaaninen faasi pestään kyllästetyllä nat-30 riumvetykarbonaatilla (6 ml). Kuivataan (Na2S04) ja liuotin haihdutetaan tyhjössä. Jäännös puhdistetaan piihappogeeli-kromatografian avulla (heksaani/etyyliasetaatti, 2 : 1), jolloin saadaan [4S-[4a, 7o(R*), 12b8]]-7-[(2-(karbo-t- butyylioksimetyyli )-2-oksoindaani)metyyliamino]-1,2,3,4,-35 6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini- 39 101302 4-karboksyylihappo, difenyylimetyyliesteri, valkoisena kiinteänä aineena (208 mg, 87,4 %).

Liuotetaan [4S-[4a, 7a(R*), 12bB]]-7-[(2-(karbo-t-butyylioksimetyyli)-2-oksoindaani)metyyliamino]-5 1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro- 6-oksopyr ido [2,l-a][2] bent s- atsepiini-4-karboksyylihappo, difenyylimetyyliesteri, (205 mg, 0,293 mmol) metyleenikloridiin (3 ml) ja liuos jäähdytetään 0 °C:n lämpötilaan. Liuos käsitellään tri-fluorietikkahapolla (0,8 ml, 1 mmol) ja anisolilla 10 (0,2 ml, 1,8 mmol). Saatua tuotetta sekoitetaan huoneen lämpötilassa 18 tunnin ajan, se laimennetaan etyyliasetaatilla (50 ml) ja pestään kyllästetyllä suolaliuoksella (2 x 15 ml). Kuivataan (Na2S04) ja liuotin haihdutetaan tyhjössä. Jäännös puhdistetaan piihappogeelikromatografian 15 avulla (heksaani/etyyliasetaatti, alkaen suhteessa 2 : 1, jatkaen suhteeseen 1 : 1 heksaani/etyyliasetaatti, jossa 5 % etikkahappoa), jolloin saadaan otsikon yhdiste valkoisena jauheena (110 mg, 78,6 %).

Esimerkki 2 20 [4S-[4a, 7a(R*), 12bB]]-7-[(2-(pivaloyylioksime- tyylikarboksimetyyli)-2-oksoindaani)metyyliamino]-1,2,-3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido [2,1-a] [2] bent sat se-pi ini-4-karboksyylihappo, pivaloyylioksimetyy1iesteri

Liuotetaan [4S-[4a, 7a(R*), 12b8]]-7-[(2-(karboksi-. 25 metyyli-2-oksoindaani)metyyliamino]-l,2,3,4,6,7,8,12b-ok- tahydro-6-oksopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyy-lihappo (67 mg, 0,14 mmol) metyleenikloridiin (1 ml) ja liuos kuivataan vedettömällä MgS04:lla (60 mg). Tuote suodatetaan ja pestään metyleenikloridilla (3 x 20 ml). Sit-30 ten se haihdutetaan tyhjössä jäännökseksi. Jäännös liuotetaan vedettömään dimetyyliformamidiin (10 ml) ja pannaan typpi-ilmakehän alle. Lisätään kesiumkarbonaatti (100 mg, 0,3 mmol) yhtenä annoksena. Saatua seosta sekoitetaan 45 minuutin ajan ympäröivässä lämpötilassa. Siihen lisätään 35 kloorimetyylipivalaatti (42 mg, 0,28 mmol). Tulokseksi 40 101302 saatua seosta sekoitetaan ympäröivässä lämpötilassa 18 tunnin ajan. Reaktio tukahdutetaan etyyliasetaatilla (3 ml) ja vedellä (10 ml). Orgaaninen faasi erotetaan ja pestään vedellä (7 x 10 ml), 1/4 -kyllästetyllä kaliumve-5 tykarbonaatilla (10 ml), vedellä (10 ml) ja kyllästetyllä natriumkloridilla (10 ml). Kuivataan (MgS04), suodatetaan ja haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Esimerkki 3 [4S-[4a, 7a(R*), 12bB]]-7-[(2-(2-(karbometoksime- 10 tyyli)-2-oksoindaani)metyyliamino]-l,2,3,4,6,7,8,12b-okta-hydro-6-oksopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyyli-happo

Liuotetaan 2-karboksi-indaanihappo (1,62 g, 10 mmol) dimetyyliformamidiin (5 ml) ja lisätään t-butyy-15 lidimetyylisilyylikloridi (7,5 g, 50 mmol) ja imidatsoli (6,8 g, 0,1 mol). Saatua seosta sekoitetaan 48 tunnin ajan huoneenlämpötilassa, se kaadetaan etyylieetteriin ja veteen ja orgaaninen faasi erotetaan. Kuivataan (MgS04) ja liuotin haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan 2-(karbo-20 t-butyylidimetyylisilyylioksi)indaani.

Liuotetaan di-isopropyyliamiini (0,88 ml, 6,28 mmol) tetrahydrofuraaniin (7,5 ml) ja saatu liuos pannaan typpi-ilmakehän alle. Liuos jäähdytetään jäähau-teessa ja siihen lisätään tipoittain n-butyylilitiumia 25 (3,6 ml 1,6 M liuosta heksaaneissa, 5,75 mmol). Saatua seosta sekoitetaan 15 minuutin ajan, sitten se jäähdytetään -78 °C:n lämpötilaan. Lisätään 2-(karbo-t-butyylidi-metyylisilyylioksiJindaanin (1,39 g, 5,04 mmol) liuos tet-rahydrofuraanissa (5 ml). Saatua seosta sekoitetaan 45 30 minuutin ajan, sitten lisätään metyylibromiasetaatti (949 mg, 6,2 mmol). Seosta sekoitetaan 3 tunnin ajan, siihen lisätään kyllästetty ammoniumkloridi (6 ml) ja seos lämmitetään huoneenlämpötilaan. Se jaetaan etyylieetterin (75 ml) ja veden (10 ml) kesken. Kuivataan (Na2S04), liuo-35 tin haihdutetaan tyhjössä ja jäännös puhdistetaan piihap- pogeelikromatografian avulla, jolloin saadaan 2-(karbo-t- butyylidimetyylisilyylioksi )-2-( karbometoksimetyyli) indaa- ni.

41 101302

Liuotetaan 2-(karbo-t-butyylidimetyylisilyyliok-5 si )-2-(karbometoksimetyyli)indaani (3,17 g, 9,13 mmol) tetrahydrofuraaniin (11 ml) ja liuos pannaan argonilmake-hän alle. Lisätään tipoittain tetra-n-butyyliammoniumfluo-ridi (11 ml 1 M liuosta tetrahydrofuraanissa, 11 mmol). Saatua seosta sekoitetaan 1 tunnin ajan huoneenlämpötilas-10 sa ja se jaetaan etyylieetterin ja veden kesken. Orgaaninen faasi erotetaan, pestään kyllästetyllä, vesipitoisella natrlumkloridilla, kuivataan (MgS04), suodatetaan ja liuotin haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan 2-karboksi-2-(karbometoksimetyyli)indaani.

15 Liuotetaan [4S-[4a, 7a(R*), 12b8]]-7-(amino)-l,2,- 3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido[2,1-a) [2]bentsatse-piini-4-karboksyylihappo, difenyyliraetyyliesteri, (150 mg, 0,34 mmol) ja EDC (98 mg, 0,50 mmol) tetrahydrofuraaniin (5 ml). Saatu liuos käsitellään 2-karboksi-2-(karbometok-20 simetyyli)indaanilla (100 mg, 0,426 mmol). Saatua seosta sekoitetaan huoneenlämpötilassa 15 tunnin ajan ja liuotin haihdutetaan tyhjössä. Jäännös jaetaan etyyliasetaatin (35 ml) ja 1 N suolahapon (6 ml) kesken. Orgaaninen faasi pestään kyllästetyllä natriumvetykarbonaatilla (6 ml). 25 Kuivataan (Na2S04) ja liuotin haihdutetaan tyhjössä. Jäännös puhdistetaan piihappogeelikromatografian avulla, jolloin saadaan [4S-[4a, 7a(R*), 12b8]]-7-[(2-(karbometoksimetyyli )-2-oksoindaani Jmetyyliamino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido[2,1-a] [2]bentsatsepiini-4-karbok-30 syylihappo, difenyylimetyyliesteri.

Suspendoidaan [4S-[4a, 7a(R*), 12b8]]-7-[(2-karbo-metoksimetyyli-2-oksoindaani )metyyliamino] -1,2,3,4,6,7,8,-12b-oktahydro-6-oksopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-kar-boksyylihappo, difenyylimetyyliesteri, (3,28 g, 5 mmol) 35 vedettömään metanoliin (10 ml) ja lisätään 10-%:ista pal- 42 101302 ladium-hiilellä-katalyyttiä (0,2 - 0,3 g). Lisätään vedetön ammoniumformaatti (23 mmol) yhtenä annoksena argonil-makehän alla. Saatua seosta sekoitetaan huoneenlämpötilassa 3 - 40 minuutin ajan, katalyytti poistetaan suodatta-5 maila suodatuksen apuaineen läpi ja pestään kuivalla meta-nolilla (10 ml). Liuotin haihdutetaan tyhjössä, tuote uutetaan etyyliasetaattiin ja kuivataan (Na2S04). Liuotin haihdutetaan tyhjössä ja puhdistetaan piihappogeelikroma-tografian avulla, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

10 Esimerkki 4 [4S-[4a, 7a(R*), 12b8]]-7-[(2-(karbometoksimetyyli-2-oksoindaani)metyyliamino] -1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro- 6-oksopyrido[2,1-a] [2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappo, pivaloyylioksimetyyliesteri 15 Liuotetaan [4S-[4a, 7a(R*), 12b8]]-7-[(2-karbome- toksimetyyli-2-oksoindaani )metyyliamino] -1,2,3,4,6,7,8,-12b-oktahydro-6-oksopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-kar-boksyylihappo (137 mg, 0,28 mmol) metyleenikloridiin (1 ml) ja kuivataan vedettömällä MgS04:lla (60 mg). Suoda-20 tetaan ja pestään metyleenikloridilla (3 x 20 ml). Tuote haihdutetaan tyhjössä jäännökseksi. Jäännös liuotetaan vedettömään dimetyyliformamidiin (10 ml) ja pannaan typpi-ilmakehän alle. Lisätään kesiumkarbonaatti (100 mg, 0,3 mmol) yhtenä annoksena. Saatua seosta sekoitetaan 45 25 minuutin ajan ympäröivässä lämpötilassa. Lisätään kloori-metyylipivalaatti (42 mg, 0,28 mmol). Tulokseksi saatua seosta sekoitetaan ympäröivässä lämpötilassa 18 tunnin ajan. Reaktio tukahdutetaan etyyliasetaatilla ( 3ml) ja vedellä (10 ml). Orgaaninen faasi erotetaan ja pestään 30 vedellä (7 x 10 ml), 1/4 -kyllästetyllä kaliumvetykarbo-naatilla (10 ml), vedellä (10 ml) ja kyllästetyllä nat-riumkloridilla (10 ml). Kuivataan (MgS04), suodatetaan ja haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

43 101302

Esimerkki 5 [4S-[4a, 7a(R*), 12bB]]-7-[(2-karboksimetyyli-2- oksoindaani) metyyli amino] -1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyr ido [ 2,1 -a ] [2] bent sat sepi ini - 4 -karboksyy 1 ihappo, 5 pivaloyylioksimetyyliesteri

Liuotetaan [4S-[4a, 7a(R*), I2b6]]-7-[(2-karbome- toksimetyyli-2-oksoindaani) metyyli ami no] -1,2,3,4,6,7,8,-12b-oktahydro-6-oksopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-kar-boksyylihappo, pivaloyylioksimetyyliesteri, (72 mg, 10 0,12 mmol) metanoliin (3 ml) ja 1 N vesipitoiseen litium- hydroksidiin (0,50 ml, 0,50 mmol). Saatua liuosta sekoitetaan 30 minuutin ajan argonilmakehän alla ympäröivässä lämpötilassa. Liuoksen tilavuus haihdutetaan 1,5 ml:ksi tyhjössä, sitten se lisätään tipoittain nopeasti sekoitet-15 tavaan 2 N suolahappoliuokseen (2 ml). Tulokseksi saatava sakka kerätään talteen, pestään vedellä ja sitä kuivataan tyhjödesikkaattorissa 1 tunnin ajan. Tuotetta kuivataan 35 °C:n lämpötilassa yön yli, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

20 Esimerkki 6 [4S-[4a, 7a(R*), 12b8]]-7-[(2-pivaloyylioksimetyy-likarboksimetyyli-2-oksoindaani)metyyliamino]-1,2,3,4,6,-7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyy1ihappo 25 Liuotetaan [4S-[4a, 7a(R*), 12b6]]-7-[(2-(karbome- toksimetyyli)-2-oksoindaani )metyyliamino]-1,2,3,4,6,7,8,-12b-oktahydro-6-oksopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-kar-boksyylihappo, difenyylimetyyliesteri, (79 mg, 0,12 mmol) metanoliin (3 ml) ja vesipitoiseen 1 N litiumhydroksidiin 30 (0,50 ml, 0,50 mmol). Saatua liuosta sekoitetaan 30 minuu tin ajan argonilmakehän alla ympäröivässä lämpötilassa. Tuote haihdutetaan tyhjössä 1,5 ml:n tilavuuteen, sitten se lisätään tipoittain nopeasti sekoitettavaan 2 N suolahappoliuokseen (2 ml). Tulokseksi saatu sakka kerätään 35 talteen, pestään vedellä ja sitä kuivataan tyhjödesikkaat- 44 101302 torissa 1 tunnin ajan. Tuotetta kuivataan 35 °C:n lämpötilassa yön yli, jolloin saadaan [4S-[4a, 7a(R*), 12bB]]-7-[(2-(karboksimetyyli)-2-oksoindaani)metyyliamino]-1,2,3,-4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido[2,1-a][2]bentsatsepii-5 ni-4-karboksyylihappo, difenyylimetyyliesteri.

Liuotetaan [4S-[4a, 7a(R*), 12bB]]-7-[(2-karboksi-metyyli-2-oksoindaani)metyyliamino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-ok-tahydro-6-oksopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyy-lihappo, difenyylimetyyliesteri, (180 mg, 0,28 nunol) mety-10 leenikloridiin (1 ml) ja kuivataan vedettömällä MgS04:lla (60 mg). Tuote suodatetaan ja pestään metyleenikloridilla (3 x 20 ml). Haihdutetaan tyhjössä jäännökseksi. Jäännös liuotetaan vedettömään dimetyyliformamidiin (10 ml) ja pannaan typpi-ilmakehän alle. Lisätään kesiumkarbonaatti 15 (100 mg, 0,3 mmol) yhtenä annoksena. Seosta sekoitetaan 45 minuutin ajan ympäröivässä lämpötilassa. Lisätään kloori-metyylipivalaatti (42 mg, 0,28 mmol). Tulokseksi saatua seosta sekoitetaan ympäröivässä lämpötilassa 18 tunnin ajan. Reaktio tukahdutetaan etyyliasetaatilla (3 ml) ja 20 vedellä (10 ml). Orgaaninen faasi erotetaan ja pestään vedellä (7 x 10 ml), 1/4 -kyllästetyllä kaliumvetykarbo-naatilla (10 ml), vedellä (10 ml) ja kyllästetyllä nat-riumkloridilla (10 ml). Kuivataan (MgS04), suodatetaan ja haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan [4S-[4a, 7a(R*), .* 25 12bB]]-7-[(2-pivaloyylioksimetyylikarboksimetyyli-2-ok- soindaani)metyyliamino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-ok-sopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappo, difenyylimetyyliesteri .

Suspendoidaan [4S-[4a, 7a(R*), 12bB]]-7-[(2-piva- 30 loyylioksimetyylikarboksimetyyli-2-oksoindaani )metyyliami-no]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido[2,1-a][2]-bentsatsepiini-4-karboksyylihappo,difenyylimetyyliesteri, (3,78 g, 5 mmol) vedettömään metanoliin (10 ml) ja saatuun suspensioon lisätään 10-%:ista palladium-hiilellä-kata-35 lyyttiä (0,2 - 0,3 g). Lisätään vedetön ammoniumformaatti 45 101302 (23 mmol) yhtenä annoksena argonilmakehän alla. Sekoitetaan huoneenlämpötilassa 3-40 minuutin ajan, katalyytti poistetaan suodattamalla suodattimen apuaineen läpi ja pestään kuivalla metanolilla (10 ml). Liuotin haihdutetaan 5 tyhjössä, tuote uutetaan etyyliasetaattiin ja kuivataan (Na2S04). Liuotin haihdutetaan tyhjössä ja jäännös puhdistetaan piihappogeelikromatografian avulla, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Esimerkki 7 10 [ 4S- [ 4a, 7a (R*), 12b8] ] -7- [ (1-karboksimetyyli-l-okso- syklopentaani)metyyliamino] -1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro- 6-oksopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappo

Liuotetaan di-isopropyyliamiini (1,4 ml, 10 tnmol) tetrahydrofuraaniin (20 ml) ja saatu liuos jäähdytetään 15 jäähauteessa. Lisätään tipoittain n-butyylilitium (5,4 ml 1,6 M liuosta heksaaneissa, 8,6 mmol). Saatua liuosta sekoitetaan 15 minuutin ajan, se jäähdytetään -78 “C:n lämpötilaan ja lisätään liuos, jossa on metyylisyklopentaani-karboksylaattia (966 mg, 7,54 mmol) tetrahydrofuraanissa 20 (10 ml). Seosta sekoitetaan 45 minuutin ajan ja sitten se käsitellään l,3-dimetyyli-3,4,5,6-tetrahydro-2(lH)-pyri-midinonilla (DMPU) (1,2 ml, 10 mmol). Saatua seosta sekoitetaan 5 minuutin ajan ja sitten siihen lisätään t-butyy-libromiasetaattia (1,46 ml, 9,04 mmol). Saatua seosta se-25 koitetaan 5 tunnin ajan -78 eC:n lämpötilassa, sitten kylmä haude poistetaan ja reaktio tukahdutetaan kyllästetyllä vesipitoisella ammoniumkloridilla (5 ml) 10 minuutin kuluttua. Tuote jaetaan veden (50 ml) ja etyyliasetaatin (100 ml) kesken. Tuote kuivataan (Na2S04) ja juoksutetaan 30 piihappogeelitäytteen läpi (heksaani/etyyliasetaatti, 4 : 1), jolloin saadaan l-(karbometoksi)-1-(karbo-t-butyy-lioksimetyyli)syklopentaani.

Liuotetaan l-(karbometoksi)-l-(karbo-t-butyyliok-simetyyli)syklopentaani (1,84 g, 7,59 mmol) 95-%:iseen 46 101302 etanoliin (50 ml) ja veteen (25 ml). Liuos käsitellään ka-liumhydroksidilla (2,6 g, 46 mmol). Saatua tuotetta sekoitetaan huoneenlämpötilassa 48 tunnin ajan ja liuotin haihdutetaan tyhjössä. Jäännös jaetaan veden (50 ml) ja etyy-5 lieetterin (150 ml) kesken. Vesipitoinen faasi tehdään happamaksi kiinteän viinihapon avulla ja uutetaan metylee-nikloridilla (125 ml). Orgaaninen faasi pestään kyllästetyllä suolaliuoksella (50 ml), kuivataan (Na2S04) ja liuotin haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan l-(karboksi)-10 l-(karbo-t-butyylioksimetyyli)syklopentaanivaaleankeltai sena öljynä (1,23 g, 71 %).

Liuotetaan [4S-[4a, 7a(R*), 12bB]]-7-(amino)-l,2,-3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido[2,1-a] [2]bentsatse-piini-4-karboksyylihappo, difenyylimetyyliesteri, (220 mg, 15 0,50 mmol), EDC (144 mg, 0,75 mmol) ja l-(karboksi)-l- (karbo-t-butyylioksimetyyli)syklopentaani (130 mg, 0,57 mmol) tetrahydrofuraaniin (5 ml). Liuosta sekoitetaan huoneenlämpötilassa 18 tunnin ajan ja liuotin haihdutetaan tyhjössä. Jäännös jaetaan veden (3 ml), etyyliasetaatin 20 (30 ml) ja 5-%:isen rikkihapon kesken (20 ml). Orgaaninen faasi erotetaan ja pestään kyllästetyllä natriumvetykarbo-naatilla (15 ml). Hapan faasi uutetaan takaisin etyyliasetaatilla (20 ml), orgaaniset faasit yhdistetään ja kuivataan (Na2S04). Liuotin haihdutetaan tyhjössä ja puhdiste-25 taan piihappogeelikromatografian avulla (aloittaen heksaa-nilla/etyyliasetaatilla suhteessa 1:1, jatkaen heksaa-nilla/etyyliasetaatilla suhteeseen 3 : 2 saakka), jolloin saadaan [4S-[4a,7a(R*), 12bB]]-7-[(l-karbo-t-butyylioksi-metyyli-l-oksosyklopentaani)metyyliamino]-1,2,3,4,6,7,8,-. 30 12b-oktahydro-6-oksopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-kar- boksyylihappo, difenyylimetyyliesteri, valkoisena vaahtona (170 mg, 52 %).

Liuotetaan [4S-[4a, 7a(R*), 12bB]]-7-[(l-karbo-t- butyylioksimetyyli -1 -oksosyklopentaani) metyyli amino] -1,2,-35 3,4, 6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido[2,1-a] [2]bentsatse- 47 101302 piini-4-karboksyylihappo, difenyylimetyyliesteri, (170 mg, 0,261 mmol) metyleenikloridiin (3 ml) ja liuos käsitellään anlsolllla (0,28 ml, 2,6 mmol). Saatu tuote jäähdytetään jää-metanoli-kylvyssä ja siihen lisätään trifluorietikka-5 happoa (0,8 ml, 1 mmol) ja seosta sekoitetaan 18 tunnin ajan. Se jaetaan etyyliasetaatin (75 ml) ja kyllästetyn suolaliuoksen (2 x 20 ml) kesken. Orgaaninen faasi erotetaan ja pestään kyllästetyllä suolaliuoksella (15 ml). Kuivataan (Na2S04), liuotin haihdutetaan tyhjössä ja jään-10 nös puhdistetaan piihappogeelikromatografian avulla (hek-saani/etyyliasetaatti), 2 : 1), jolloin saadaan otsikon yhdiste valkoisena jauheena.

Esimerkki 8 [4S-[4a, 7a(R*), 12bB]]-7-[(5-karboksimetyyli-5- 15 oksosyklopentimidatsoli) metyyli amino] -3,4,6,7,8,12b-hek- sahydro-6-okso-lH-[1,4]oksatsino[3,4-a][2]bentsatsepiini- 4-karboksyy1ihappo

Kaavio D, vaihe a: N-[2-(1,3-dihydro-l,3-diokso-2H-isoindol-2-yyli)-l-okso-3-fenyylipropyyli]-L-seriini, 20 metyyliesteri

Lietetään N-ftaloyyli-(S)-fenyylialaniini (90 g, 0,3 mol) metyleenikloridiin (450 ml) ja lietteeseen lisätään tipoittain oksalyylikloridi (54 ml, 0,62 mol). Seos pannaan kuivaan ilmakehään (CaS04 -putki) ja käsitellään 25 dimetyyliformamidilla (10 μΐ). Saatua seosta sekoitetaan 5 tunnin ajan, se suodatetaan ja väkevöidään tyhjössä, jolloin saadaan N-ftaloyyli-(S)-fenyylialaniini, happoklori-di, kellertävänä, amorfisena, kiinteänä aineena.

Liuotetaan seriinimetyyliesterihydrokloridi (56 g, 30 0,36 mol) tetrahydrofuraaniin (300 ml), sitten liuos jääh dytetään 0 °C:n lämpötilaan ja siihen lisätään 4-metyyli-morfOliini (88 ml, 0,8 mol). Saatuun seokseen lisätään tipoittain liuos, jossa on N-ftaloyyli-(S)-fenyylialanii-ni, happokloridi, tetrahydrofuraanissa (200 ml). Seoksen 35 annetaan jäähtyä huoneenlämpötilaan ja sitä sekoitetaan 3 48 101302 tunnin ajan. Se suodatetaan ja suodos väkevöidään tyhjössä. Jäännös liuotetaan etyyliasetaattiin ja orgaaninen faasi erotetaan. Se pestään vedellä, sitten kyllästetyllä natriumkloridilla ja kuivataan (MgS04). Liuotin haihdute-5 taan tyhjössä, jolloin saadaan öljy. Se puhdistetaan pii-happogeelikromatografian avulla (gradientti 50-%:isesta etyyliasetaatista/heksaanista etyyliasetaattiin), jolloin saadaan otsikon yhdiste (80,8 g, 67 %); sulamispiste 129 -132 eC.

10 Kaavio D, vaihe b: N-[2-(l,3-dihydro-l,3-diokso- 2H-isoindol-2-yyli) -l-okso-3-fenyylipropyyli] -0-2-prope-nyyli-L-seriini, metyyliesteri

Liuotetaan N-[2-(1,3-dihydro-l,3-diokso-2H-isoin-dol-2-yyli)-l-okso-3-fenyylipropyyli]-L-seriini, metyy-15 liesteri, (25 g, 63 mmol) metyleenikloridin ja syklohek-saanin seokseen (1 : 1, 600 ml). Liuokseen lisätään allyy-litriklooriasetimidaatti (26 g, 128 mmol) ja trifluorime-taanisulfonihappo (5 ml, 56,6 mmol). Seosta sekoitetaan huoneenlämpötilassa typpi-ilmakehän alla 5 tunnin ajan ja 20 sitten se laimennetaan metyleenikloridilla. Se pestään kyllästetyllä vesipitoisella natriumvetykarbonaatilla ja vedellä, kuivataan (MgS04) ja liuotin haihdutetaan tyhjössä. Jäännös puhdistetaan piihappogeelikromatografian avulla (gradientti 20-%:isesta etyyliasetaatista/heksaanista I; 25 35-%:iseen etyyliasetaattiin/heksaaniin), jolloin saadaan otsikon yhdiste; sulamispiste 95 - 97 °C.

Kaavio D, vaihe c; [S-(R*, R*)]-N-[2-(l,3-dihydro- 1.3- diokso-2H-isoindol-2-yyli)-l-okso-3-fenyylipropyyli]- 3.4- dihydro-2H-l,4-oksatsiini-3-karboksyylihappo, metyy- 30 liesteri

Liuotetaan N-[2-(1,3-dihydro-l,3-diokso-2H-isoin-dol-2-yyli)-l-okso-3-fenyylipropyyli]-0-2-propenyyli-L-seriini, metyyliesteri, (13 g, 29,8 mmol) metyleenikloridin ja metanolin seokseen (10 : 1, 220 ml). Liuos jäähdy-35 tetään -78 °C:n lämpötilaan ja siihen pirskotetaan otso- 49 101302 nia/happea suunnilleen 10 minuutin ajan, kunnes sininen väri säilyy. Sitten siihen pirskotetaan typpeä 10 minuutin ajan -78 °C:n lämpötilassa ylimääräisen otsonin poistamiseksi. Tuote käsitellään metyylisulfidillä (60 ml, 5 0,82 mol) ja sen annetaan lämmetä huoneenlämpötilaan. Saa tua seosta sekoitetaan huoneenlämpötilassa 2,5 tunnin ajan, sitten liuotin haihdutetaan tyhjössä ja jäännös liuotetaan etyyliasetaattiin (200 ml). Saatu liuos pestään vedellä ja kyllästetyllä natriumkloridillä, kuivataan 10 (MgS04) ja liuotin haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan välituote N-[2-(1,3-dihydro-l,3-diokso-2H-isoindol-2-yy-li)-l-okso-3-fenyylipropyyli]-0-2-oksoetyyli-L-seriini, metyyliesteri, vaahtona (13,6 g).

Liuotetaan N-[2-(1,3-dihydro-l,3-diokso-2H-isoin-15 dol-2-yyli )-l-okso-3-fenyylipropyyli]-0-2-oksoetyyli-L- seriini, metyyliesteri, (13,6 g) metyleenikloridin ja tri-fluorietikkahapon seokseen (10 : 1, 330 ml). Saatua liuosta sekoitetaan huoneenlämpötilassa 2,5 tunnin ajan ja liuotin haihdutetaan tyhjössä. Jäännös puhdistetaan pii-20 happogeelikromatografiän avulla (35-%:inen etyyliasetaat- ti/heksaani) ja kiteytetään uudelleen (etyyliasetaat-ti/heksaani), jolloin saadaan otsikon yhdiste (8,52 g, 68 %); sulamispiste 70 - 72 °C.

Kaavio D, vaihe d: [4S-[4o, 7a(R*), 12b8]]-7-[(1,3-25 dihydro-l,3-diokso-2H-isoindol-2-yyli)]-3,4,6,7,8,12b-hek- sahydro-6-okso-lH-[l,4]-oksatsino[3,4-a] [2]bentsatsepiini- 4-karboksyylihappo, difenyylimetyyliesteri

Liuotetaan [S-(R*,R*)]-N-[2-(1,3-dihydro-1,3-diok-so-2H-isoindol-2-yyli )-l-okso-3-fenyylipropyyli] -3,4-di-30 hydro-2H-l,4-oksatsiini-3-karboksyylihappo, metyyliesteri, (2,5 g, 5,9 mmol) metyleenikloridiin (5 ml) ja saatu liuos lisätään tipoittain aikaisemmin valmistettuun liuokseen, jossa on trifluorimetaanisulfonihappo (4,0 ml, 45 mmol) ja trifluorietikkahappoanhydridi (1,0 ml, 7,1 mmol). Saatu 35 seos pannaan typpi-ilmakehän alle ja sitä sekoitetaan huo- 50 101302 neenlämpötilassa 123 tunnin ajan. Se kaadetaan erotussup-piloon, joka sisältää jäätä (200 g) ja etyyliasetaattia (200 ml). Orgaaninen faasi erotetaan, pestään vedellä (3 x 200 ml) ja kyllästetyllä, vesipitoisella natriumkloridilla 5 (100 ml). Orgaaninen faasi uutetaan 10 paino-%:isella ka- liumvetykarbonaatilla (4 x 40 ml) ja vedellä (40 ml). Yhdistetyt, emäksiset, vesipitoiset faasit kerrostetaan etyyliasetaatin avulla (100 ml) ja jäähdytetään jäähau-teessa. Lisätään tipoittain 6 N suolahappoa pH:n säätämi-10 seksi arvoon 1 samalla säilyttäen lämpötila 5-10 °C:ssa. Orgaaninen faasi erotetaan ja vesipitoinen faasi uutetaan etyyliasetaatilla (3 x 200 ml), pestään kyllästetyllä natriumkloridilla ja kuivataan (MgS04). Liuotin haihdutetaan tyhjössä ja jäännöstä kuivataan suurtyhjössä 56 °C:n läm-15 pötilassa 24 tunnin ajan, jolloin saadaan välituote [4S-[4a, 7a(R*), 12b8]]-7-[(1,3-dihydro-l,3-diokso-2H-isoin- dol-2-yyli)]-3,4,6,7,8,12b-heksahydro-6-okso-lH-[1,4]-oksat sino[3,4-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappo (1,75 g, 73 %).

20 Liuotetaan [4S-[4a,7o(R*), I2b8]]-7-[(1,3-dihydro- 1.3- diokso-2H-isoindol-2-yyli)]-3,4,6,7,8,12b-heksahydro- 6-okso-lH- [1,4] -oksatsino[3,4-a] [2]bentsatsepiini-4-kar-boksyylihappo (500 mg, 1,23 mmol) metyleenikloridiin (12 ml) ja saatu liuos käsitellään difenyylidiatsometaa- 25 nilla (360 mg, 1,86 mmol). Saatua seosta sekoitetaan 5,5 tunnin ajan ja liuotin haihdutetaan tyhjössä. Jäännös puhdistetaan piihappogeelikromatografian avulla (gradientti 20-%:isesta etyyliasetaatista/heksaanista 35-%:iseen etyy-liasetaattiin/heksaaniin), jolloin saadaan otsikon yhdiste 30 (563 mg, 80 %); sulamispiste 178 - 181 °C (isopropanoli).

Kaavio D, vaihe e: [4S-[4a, 7a(R*), 12bB]]-7-(amino) -3,4,6,7,8,12b-heksahydro-6-okso-lH-[1,4]-oksatsino-[3,4-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappo, difenyylime-tyyliesteri 35 Liuotetaan [4S-[4a, 7a(R*), 12bB]]-7-[(l,3-dihydro- 1.3- diokso-2H-isoindol-2-yyli)]-3,4,6,7,8,12b-heksahydro- 51 101302 6-okso-lH-[1,4]-oksatsino[3,4-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyyllhappo, difenyylimetyyliesteri, (296 mg, 0,517 mmol) metanoliin (5 ml) ja saatu liuos käsitellään hydratsiinimonohydraatilla (1,1 ml 1 M liuosta metanolis-5 sa, 1,1 mmol). Saatua seosta sekoitetaan huoneenlämpötilassa 44 tunnin ajan, liuotin haihdutetaan tyhjössä ja jäännös lietetään metyleenikloridiin (10 ml). Suodatetaan ja liuotin haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan otsikon yhdiste (218 mg, 95 %).

10 Kaavio A: [4S-[4a, 7a(R*), 12b8]]-7-[(5-karboksime- tyyli-5-oksosyklopentimidatsoli)metyyliamino]3,4,6,7,-8,12b-heksahydro-6-okso-lH- [1,4] -oksatsino [3,4-a][2] bents-atsepiini-4-karboksyy1ihappo

Liuotetaan 4,5-imidatsolidikarboksyylihappo 15 (31,2 g, 0,2 mol) etanoliin (500 ml) ja saatu liuos käsi tellään väkevällä rikkihapolla (0,5 ml). Liuosta kuumennetaan 60 °C:n lämpötilassa 16 tunnin ajan, se jäähdytetään ja liuottimen tilavuudesta haihdutetaan 50 % tyhjössä. Tuote laimennetaan etyylieetterillä (500 ml), pestään 20 kyllästetyllä natriumvetykarbonaatilla, sitten kyllästetyllä suolaliuoksella. Kuivataan (MgS04) ja liuotin haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan 4,5-(dikarboetoksi)imid-atsoli.

Liuotetaan 4,5-(dikarboetoksi)imidatsoli (1,06 g, ' 25 5 mmol) ja trietyyliamiini (1,5 ml, 7,5 mmol) dioksaanin ja veden 50/50-seokseen (25 ml). Liuokseen lisätään [2-(tert-butyylioksikarbonyylioksi-imino)-2-fenyyliaseto-nitriili] (1,36 g, 5,5 mmol) ja saatua seosta sekoitetaan huoneenlämpötilassa 2 tunnin ajan. Siihen lisätään vesi 30 (7,5 ml) ja etyyliasetaatti (10 ml), vesipitoinen faasi erotetaan ja pestään etyyliasetaatilla (10 ml). Orgaaniset faasit yhdistetään, kuivataan (MgS04) ja liuotin haihdutetaan tyhjössä. Jäännös puhdistetaan piihappogeelikromato-grafian avulla, jolloin saadaan N-(karbo-t-butyylioksi)-35 4,5-(dikarboetoksi)imidatsoli.

52 101302

Liuotetaan N-(karbo-t-butyylioksi)-4,5-(dikar-boetoksi)imidatsoli (3,12 g, 10 mmol) vedettömään tetra-hydrofuraaniin (30 ml) ja saatu liuos jäähdytetään -20 eC:n lämpötilaan. Se käsitellään litiumboorihydridillä 5 (7 ml 2 N liuosta) ja saatua seosta sekoitetaan typpi-il- makehän alla useita päiviä. Siihen lisätään varovaisesti vettä ja se jaetaan etyyliasetaatin ja 5-%:isen suolahapon kesken. Orgaaninen faasi erotetaan, pestään kyllästetyllä suolaliuoksella ja kuivataan (MgS04). Liuotin haihdutetaan 10 tyhjössä ja puhdistetaan piihappogeelikromatografian avulla, jolloin saadaan N-(karbo-t-butyylioksi)-4,5-(dihydrok-simetyyli)imidatsoli.

Liuotetaan N-bromisukkinimidi (1,78 g, 0,01 mol) tetrahydrofuraaniin (60 ml) ja lisätään trifenyylifosfii-15 nin (2,62 g, 0,01 mol) liuos tetrahydrofuraanissa. Saatuun seokseenlisätään N-(karbo-t-butyylioksi)-4,5-(dihydroksi-metyyli)imidatsolin (1,14 g, 5 mmol) liuos tetrahydrofu-raanissa (25 ml) ja saatua seosta sekoitetaan, kunnes suurin osa kiinteästä aineesta on liuennut. Liuotin haih-20 dutetaan tyhjössä ja jäännös jaetaan veden ja etyylieette-rin kesken. Orgaaninen faasi erotetaan ja pestään vedellä. Kuivataan (Na2S04) ja liuotin haihdutetaan tyhjössä. Jäännös puhdistetaan piihappogeelikromatografian avulla, jolloin saadaan N-(karbo-t-butyylioksi)-4,5-(dibromimetyy-25 li)imidatsoli.

Liuotetaan dietyylimalonaatti (15,2 ml, 0,100 mol) tetrahydrofuraaniin (800 ml). Liuos jäähdytetään jäähau-teessa ja käsitellään natriumhydridillä (3,0 g, 0,10 mol, 80-%-inen mineraaliöljyssä). Seosta sekoitetaan, kunnes 30 saadaan liuos ja liuokseen lisätään N-(karbo-t-butyyliok- si)-4,5-(dibromimetyyli)imidatsoli (35,4 g, 0,100 mol). Saatua seosta sekoitetaan 30 minuutin ajan ja sitten siihen lisätään vielä natriumhydridiä (3,0 g, 0,10 mol). Saatua seosta sekoitetaan huoneenlämpötilassa 20 tunnin ajan, 35 se suodatetaan suodattimen apuaineen läpi ja liuotin haih- 53 101302 dutetaan tyhjössä. Jäännös puhdistetaan piihappogeelikro-matografian avulla, jolloin saadaan 5,5-(dikarboetoksi)-1-(karbo-t-butyylioksi)syklopentimidatsoli.

Liuotetaan 5,5-(dikarboetoksi)-1-(karbo-t-butyy-5 Iloksi)syklopentimidatsoli (21,3 g, 60,6 mmol) dimetyyli-sulfoksidiin (140 ml). Lisätään vesi (14 ml) ja litiumklo-ridi (7,0 g, 0,16 mol). Saatua seosta kuumennetaan palautus jäähdyttäen 4 tunnin ajan, se jäähdytetään ja jaetaan veden (150 ml) ja metyleenikloridin (2 x 150 ml) kesken.

10 Orgaaninen faasi pestään vedellä (150 ml), kuivataan (MgS04) ja juoksutetaan piihappogeelitäytteen läpi, jolloin saadaan 5-(karboetoksi)-1-(karbo-t-butyylioksi)syklopentimidatsoli .

Liuotetaan 5-(karboetoksi)-1-(karbo-t-butyyliok-15 si)syklopentimidatsoli (9,5 g, 34,1 mmol) etanoliin (95-%:inen, 150 ml) ja veteen (75 ml). Lisätään kaliumhyd-roksidi (9,5 g, 0,17 mol) ja saatua seosta sekoitetaan huoneenlämpötilassa 1 tunnin ajan. Seos jaetaan veden (150 ml) ja etyylieetterin (2 x 150 ml). Vesipitoinen faa-20 si tehdään happamaksi suolahapon avulla pH-arvoon 1. Se uutetaan metyleenikloridilla (2 x 150 ml), kuivataan (Na2S04) ja liuotin haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan 5-(karboksi)-1-(karbo-t-butyylioksi)syklopentimidatsoli.

Liuotetaan 5-(karboksi)-l-(karbo-t-butyylioksi)syk-. 25 lopentimidatsoli (5,9 g, 23,5 mmol) metanoliin (60 ml) ja saatu liuos käsitellään dimetoksipropaanilla (5,8 ml, 47 mmol) ja rikkihapolla (0,8 ml). Saatua seosta sekoitetaan huoneenlämpötilassa 1 päivän ajan. Liuotin haihdutetaan tyhjössä, jäännös laimennetaan metyleenikloridilla 30 (75 ml) ja pestään kyllästetyllä natriumvetykarbonaatilla (35 ml). Vesipitoinen faasi uutetaan metyleenikloridilla (30 ml), yhdistetyt orgaaniset faasit pestään kyllästetyllä suolaliuoksella (30 ml) ja kuivataan (Na2S04). Liuotin haihdutetaan tyhjössä ja jäännös kuljetetaan piihappo- 54 101302 geelitäytteen läpi, jolloin saadaan 5-(karbometoksi)-l-(karbo-t-butyylioksi)syklopentimidatsoli.

Liuotetaan di-isopropyyliamiini (3,5 ml, 25 mmol) tetrahydrofuraaniin (30 ml). Lisätään n-butyylilitium 5 (14 ml 1,6 M liuosta heksaanissa, 22,4 mmol). Saatua seos ta sekoitetaan 15 minuutin ajan ja jäähdytetään -78 eC:n lämpötilaan. Lisätään tipoittain 5-(karbometoksi)-l-(kar-bo-t-butyylioksi)syklopentimidatsoli (5,32 g, 20 mmol) ja saatua seosta sekoitetaan 30 minuutin ajan. Siihen lisä-10 tään t-butyyibromiasetaattia (4,0 ml, 25 mmol) ja saadun seoksen annetaan lämmetä vähitellen yön aikana huoneenlämpötilaan. Reaktio tukahdutetaan ammoniumkloridiliuoksen (10 ml) avulla ja liuos jaetaan veden (25 ml) ja etyy-lieetterin (50 ml) kesken. Orgaaninen £aasi erotetaan, 15 kuivataan (MgS04) ja liuotin haihdutetaan tyhjössä. Jäännös puhdistetaan piihappogeelikromatografian avulla, jolloin saadaan5-(karbometoksi)-1-(karbo-t-butyylioksi)-5-(karbo-t-butyylioksimetyyli)syklopentimidatsoli.

Liuotetaan 5-(karbometoksi)-1-(karbo-t-butyyliok-20 si ) -5- ( karbo-t-butyylioksimetyyli )syklopentimidatsoli (3,48 g, 9,17 mmol) etanoliin (95-%:inen, 60 ml) ja veteen (30 ml). Saatu liuos käsitellään kaliumhydroksidilla (2,94 g, 52 mmol). Saatua seosta sekoitetaan huoneenlämpö-tilassa 3 tunnin ajan. Siihen lisätään vesi (75 ml) ja se 25 uutetaan etyylieetterillä (2 x 50 ml). Yhdistetyt eette-riset faasit uutetaan vedellä (75 ml) ja yhdistetyt vesipitoiset faasit tehdään happamaksi vesipitoisella 1 M viinihapolla (pH-arvoon 2 - 3). Tuote uutetaan etyyliasetaatilla (2 x 125 ml), kuivataan (Na2S04) ja liuotin haihdute-30 taan tyhjössä. Jäännös sekoitetaan metyleenikloridiin ja suodatetaan, jolloin saadaan 5-(karboksi)-1-(karbo-t-butyylioksi )-5-(karbo-t-butyylioksimetyyli)syklopentimidatsoli .

Liuotetaan [4S-[4o, 7a(R*), 12bB]]-7-(amino)-3,4,-35 6,7,8,12b-heksahydro-6-okso-lH-[l,4]-oksatsino[3,4-a][2]- 55 101302 bentsatsepiini-4-karboksyylihappo, di fenyylimetyyliesteri, (200 mg, 0,454 mmol) ja EDC (130 mg, 0,68 mmol) tetrahyd-rofuraaniin (5 ml). Saatu liuos käsitellään 5-(karboksi)-1-(karbo-t-butyylioksi)-5- (karbo-t-butyylioksimetyyli) syk-5 lopentimidatsolilla (166 mg, 0,454 mmol). Saatua seosta sekoitetaan huoneenlämpötilassa 20 tunnin ajan ja liuotin haihdutetaan tyhjössä. Jäännös liuotetaan etyyliasetaattiin (50 ml) ja pestään 5-%:isella rikkihapolla (15 ml), sitten kyllästetyllä natriumvetykarbonaatilla (15 ml). 10 Kuivataan (Na2S04) ja liuotin haihdutetaan tyhjössä. Jäännös puhdistetaan piihappogeelikromatografian avulla, jolloin saadaan [4S-[4a, 7a(R*), 12b8]]-7-[(5-(karbo-t-butyy-lioksimetyyli)-5-okso-l-(karbo-t-butyylioksi)syklopent-imidatsoli)metyyliamino]-3,4,6,7,8,12b-heksahydro-6-okso-15 1H- [1,4]oksatsino[3,4-a] [2]bentsatsepiini-4-karboksyyli- happo, difenyylimetyyliesteri.

Liuotetaan [4S-[4a, 7a(R*), 12b8]]-7-[(5-(karbo-t-butyylioksimetyyli )-5-okso-l-( karbo-t-butyylioksi )syklo-pentimidatsoli) me tyyli amino] -3,4,6,7,8,12b-heksahydro-6-20 okso-lH-[l,4]oksatsino[3,4-a] [2]bentsatsepiini-4-karbok-syylihappo, difenyylimetyyliesteri, (129 mg, 0,163 mmol) metyleenikloridiin (3 ml) ja saatu liuos käsitellään anisolilla (0,19 ml, 1,7 mmol). Saatu tuote jäähdytetään jää-metanoli-hauteessa ja siihen lisätään trifluorietikka-25 happoa (0,8 ml, 10 mmol) ja saatua seosta sekoitetaan 2,5 tunnin ajan 0 °C:n lämpötilassa. Se jaetaan etyyliasetaatin (25 ml) ja kyllästetyn suolaliuoksen (15 ml) kesken. Orgaaninen faasi erotetaan ja pestään kyllästetyllä suolaliuoksella (15 ml). Kuivataan (Na2S04), liuotin haihdute-30 taan tyhjössä ja jäännös puhdistetaan piihappogeelikroma-tografian avulla, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

56 101302

Esiaerkki 9 [48-[4α, 7a(R*), 12bB]]-7-[(5-(karboksimetyyli-5- okso-4,5,6-trihydrosyklopenta[c]f uraani)metyyliamino]-3,-4,6,7,8,12b-heksahydro-6-okso-lH- [1,4] -1 iatsino [3,4-a][2]-5 bentsatsepiini-4-karboksyylihapon valmistus

Liuotetaan 3,4-(dikarboetoksi)furaani (2,12 g, 10 nunol) vedettömään tetrahydrofuraaniin (30 ml) ja saatu liuos jäähdytetään -20 °C:n lämpötilaan. Se käsitellään litiumboorihydridillä (7 ml 2 N liuosta) ja saatua seosta 10 sekoitetaan typpi-ilmakehän alla useita päiviä. Siihen lisätään varovaisesti vettä ja se jaetaan etyyliasetaatin ja 5-%:isen suolahapon kesken. Orgaaninen faasi erotetaan, pestään kyllästetyllä suolaliuoksella ja kuivataan (MgS04). Liuotin haihdutetaan tyhjössä ja jäännös puhdistetaan pii-15 happogeelikromatografian avulla, jolloin saadaan 3,4-(di-hydroksimetyyli)furaani.

Liuotetaan 3,4-(dihydroksimetyyli)furaani (11,9 g, 0,093 mol) 2,4,6-kollidiiniin (12,4 g) ja saatuun liuokseen lisätään liuos, jossa on litiumbromidia (7,9 g, 20 91 mmol) dimetyyliformamidissa (80 ml). Saatu liuos jääh dytetään -50 °C:n lämpötilaan ja pannaan typpi-ilmakehään. Siihen lisätään metaanisulfonyylikloridi (11,8 g) siten, että lämpötila pysyy 0 eC:n alapuolella. Sitä sekoitetaan 0 °C:n lämpötilassa 2 tunnin ajan ja se kaadetaan jääve-25 teen. Se uutetaan etyylieetterillä, kuivataan (MgS04), liuotin haihdutetaan tyhjössä ja jäännös puhdistetaan pii-happogeelikromatografian avulla, jolloin saadaan 3,4-(di-bromimetyyli)furaani.

Liuotetaan dietyylimalonaatti (15,2 ml, 0,100 mol) 30 tetrahydrofuraaniin (800 ml). Saatu liuos jäähdytetään jäähauteessa ja käsitellään natriumhydridillä (3,0 g, 0,10 mol, 80-%:inen mineraaliöljyssä). Saatua seosta sekoitetaan, kunnes saadaan liuos, johon lisätään 3,4-(di-bromimetyyli)furaani (23,8 g, 0,100 mol). Seosta sekoite-35 taan 30 minuutin ajan, sitten siihen lisätään vielä nat- 57 101302 riumhydridiä (3,0 g, 0,10 mol). Seosta sekoitetaan huoneenlämpötilassa 20 tunnin ajan, se suodatetaan suodattimen apuaineen läpi ja liuotin haihdutetaan tyhjössä. Jäännös puhdistetaan piihappogeelikromatografian avulla, jol-5 loin saadaan 5,5-(dikarboetoksi)-2,4,5,6-tetrahydrosyklo-penta[c]furaani.

Liuotetaan 5,5-(dikarboetoksi)-2,4,5,6-tetrahydro-syklopenta[c]furaani (15,3 g, 60,6 mmol) dimetyylisulfok-sidiin (140 ml). Saatuun liuokseen lisätään vettä (14 ml) 10 ja litiumkloridia (7,0 g, 0,16 mol). Saatua seosta kuumennetaan palautusjäähdyttäen 4 tunnin ajan, se jäähdytetään ja jaetaan veden (150 ml) ja metyleenikloridin (2 x 150 ml) kesken. Orgaaninen faasi pestään vedellä (150 ml), kuivataan (MgS04) ja juoksutetaan piihappogeelitäytteen 15 läpi, jolloin saadaan 5-(karboetoksi)-2,4,5,6-tetrahydro-syklopenta[c]furaani.

Liuotetaan 5- (karboetoksi)-2,4,5,6-tetrahydrosyklo-penta[c]furaani (6,2 g, 34,1 mmol) etanoliin (95-%:inen, 150 ml) ja veteen (75 ml). Liuokseen lisätään kaliumhyd-20 roksidi (9,5 g, 0,17 mol) ja saatua seosta sekoitetaan huoneenlämpötilassa 1 tunnin ajan. Se jaetaan veden (150 ml) ja etyylieetterin (2 x 150 ml) kesken. Vesipitoinen faasi tehdään happamaksi suolahapolla pH-arvoon 1. Se uutetaan metyleenikloridilla (2 x 150 ml), kuivataan • 25 (Na2S04) ja liuotin haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan 5-(karboksi)-2,4,5,6-tetrahydrosyklopenta[c]furaani.

Liuotetaan 5-(karboksi)-2,4,5,6-tetrahydrosyklopen-ta[c]furaani (3,6 g, 23,5 mmol) metanoliin (60 ml) ja saatu liuos käsitellään dimetoksipropaanilla (5,8 ml, 30 47 mmol) ja rikkihapolla (0,8 ml). Saatua seosta sekoite- taan huoneenlämpötilassa 1 päivän ajan. Liuotin haihdutetaan tyhjössä, jäännös laimennetaan metyleenikloridilla (75 ml) ja pestään kyllästetyllä natriumvetykarbonaatilla (35 ml). Vesipitoinen faasi uutetaan metyleenikloridilla 35 (30 ml), yhdistetyt orgaaniset faasit pestään kylläste- 58 101302 tyllä suolaliuoksella (30 ml) ja kuivataan (Na2S04). Liuotin haihdutetaan tyhjössä ja jäännös juoksutetaan piihap-pogeelin läpi, jolloin saadaan 5-(karbometoksi)-2,4,5,6-tetrahydrosyklopenta[c]furaani.

5 Liuotetaan di-isopropyyllamiini (3,5 ml, 25 mmol) tetrahydrofuraaniin (30 ml). Lisätään n-butyylilitium (14 ml 1,6 M liuosta heksaanissa, 22,4 mmol). Saatua seosta sekoitetaan 15 minuutin ajan ja sitten se jäähdytetään -78 eC:n lämpötilaan. Siihen lisätään tipoittain 5-(karbo-10 metoksi)-2,4,5,6-tetrahydrosyklopenta[c]furaani (3,32 g, 20 mmol) ja saatua seosta sekoitetaan 30 minuutin ajan. Lisätään t-butyylibromiasetaatti (4,0 ml, 25 mmol) ja seoksen annetaan vähitellen lämmitä huoneenlämpötilaan yön kuluessa. Reaktio tukahdutetaan ammoniumkloridiliuoksen 15 avulla (10 ml) ja liuos jaetaan veden (25 ml) ja etyy-lieetterin (50 ml) kesken. Orgaaninen £aasi erotetaan, kuivataan (MgS04) ja liuotin haihdutetaan tyhjössä. Jäännös puhdistetaan piihappogeelikromatografian avulla, jolloin saadaan 5- (karbometoksi )-5-( karbo-t-butyylioksimetyyli) -20 2,4,5,6-tetrahydrosyklopenta[c]furaani.

Liuotetaan 5-(karbometoksi)-5-(karbo-t-butyylioksi-metyyli)-2,4,5,6-tetrahydrosyklopenta[c]furaani (2,6 g, 9,17 mmol) etanoliin (95-%:inen, 60 ml) ja veteen (30 ml). Saatu liuos käsitellään kaliumhydroksidilla (2,94 g, 25 52 mmol). Saatua tuotetta sekoitetaan huoneenlämpötilassa 3 tunnin ajan. Siihen lisätään vesi (75 ml) ja se uutetaan etyylieetterillä (2 x 50 ml). Yhdistetyt eetteriset faasit uutetaan vedellä (75 ml) ja yhdistetyt vesipitoiset faasit tehdään happamaksi vesipitoisella 1 M viinihapolla (pH-30 arvoon 2-3). Tuote uutetaan etyyliasetaatilla (2 x • 125 ml), kuivataan (Na2S04) ja liuotin haihdutetaan tyhjös sä. Jäännös sekoitetaan metyleenikloridiin ja suodatetaan, jolloin saadaan 5-(karboksi)-5-(karbo-t-butyylioksimetyy-li)-2,4,5,6-tetrahydrosyklopenta[c]furaani.

59 101302

Liuotetaan [4S-[4a, 7a(R*), 12bB]]-7-(amino )-3,4, -6,7,8,12b-heksahydro-6-okso- 1H-[1,4] - tiatsino [3,4-a][2]-bentsatsepiini-4-karboksyylihappo, difenyylimetyyliesteri, (208 mg, 0,454 mmol) ja EDC (130 mg, 0,68 mmol) tetrahyd-5 rofuraaniin (5 ml). Saatu liuos käsitellään 5-(karboksi)- 5-(karbo-t-butyylioksimetyyli )-2,4,5, 6-tetrahydrosyklopen-ta[c]furaanilla (121 mg, 0,454 mmol). Saatua seosta sekoitetaan huoneenlämpötilassa 20 tunnin ajan ja liuotin haihdutetaan tyhjössä. Jäännös liuotetaan etyyliasetaattiin 10 (50 ml) ja pestään 5-%:isella rikkihapolla (15 ml), sitten kyllästetyllä natriumvetykarbonaatilla (15 ml). Tuote kuivataan (Na2S04) ja liuotin haihdutetaan tyhjössä. Jäännös puhdistetaan piihappogeelikromatografian avulla, jolloin saadaan [4S-[4a, 7a(R*), 12bB]]-7-[(5-karbo-t-butyylioksi-15 metyyli-5-okso-2,4,5,6-tetrahydrosyklopenta[c]furaani)me-tyyliamino] -3,4,6,7,8,12b-heksahydro-6-okso-lH- [1,4] -tiat-sino[3,4-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappo, difenyylimetyyliesteri .

Liuotetaan [4S-[4a, 7a(R*), 12bB]]-7-[(5-karbo-t- 20 butyylioksimetyyli-5-okso-2,4,5,6-tetrahydrosyklopenta- [c]furaani)metyyliamino]-3,4,6,7,8,12b-heksahydro-6-okso-1H- [1,4] - tiatsino [3,4-a] [ 2 ] bentsatsepiini-4-karboksyyli-happo, difenyylimetyyliesteri, (115 mg, 0,163 mmol) mety-leenikloridiin (3 ml) ja saatu liuos käsitellään anisolil-25 la (0,19 ml, 1,7 mmol). Saatu seos jäähdytetään jää-meta-nolihauteessa ja siihen lisätään trifluorietikkahappo (0,8 ml, 10 mmol) ja saatua tuotetta sekoitetaan 2,5 tunnin ajan 0 eC:n lämpötilassa. Se jaetaan etyyliasetaatin (25 ml) ja kyllästetyn suolaliuoksen (15 ml) kesken. Or-30 gaaninen faasi erotetaan ja pestään kyllästetyllä suolaliuoksella (15 ml). Se kuivataan (Na2S04), liuotin haihdutetaan tyhjössä ja jäännös puhdistetaan piihappogeelikromatografian avulla, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

60 101302

Esimerkki 10 [48-[4α, 7a(R*), 12bB]]-7-[(5-karboksimetyyli-5- okso-4,5,6-trlhydrosyklopenta[c]tiofeeni)metyyliamino]-3,4,6,7,8,12b-heksahydro-6-okso-lH-[l,4]-tiatsino[3,4-5 a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihapon valmistus

Liuotetaan 3,4-(dikarboetoksi)tiofeeni (2,28 g, 10 mmol) vedettömään tetrahydrofuraaniin (30 ml) ja saatu liuos jäähdytetään -20 °C:n lämpötilaan. Se käsitellään litiumboorihydridillä (7 ml 2 N liuosta) ja saatua seosta 10 sekoitetaan typpi-ilmakehän alla useita päiviä. Siihen lisätään varovaisesti vettä ja se jaetaan etyyliasetaatin ja 5-%:isen suolahapon kesken. Orgaaninen faasi erotetaan, pestään kyllästetyllä suolaliuoksella ja kuivataan (MgS04). Liuotin haihdutetaan tyhjössä ja jäännös puhdistetaan pii-15 happogeelikromatografian avulla, jolloin saadaan 3,4-(di-hydroksimetyyli)tiofeeni.

Liuotetaan 3,4-(dihydroksimetyyli)tiofeeni (13,4 g, 0,093 mol) 2,4,6-kollidiiniin (12,4 g) ja saatuun liuokseen lisätään liuos, jossa on litiumbromidia (7,9 g, 20 91 mmol) dimetyyliformamidissa (80 ml). Saatu seos jäähdy tetään -50 eC:n lämpötilaan ja pannaan typpi-ilmakehän alle. Siihen lisätään metaanisulfonyylikloridi (11,8 g) siten, että lämpötila pysyy 0 °C:n alapuolella. Seosta sekoitetaan 0 °C:n lämpötilassa 2 tunnin ajan ja se kaade-25 taan jääveteen. Se uutetaan etyylieetterillä, kuivataan (MgS04), liuotin haihdutetaan tyhjössä ja jäännös puhdistetaan piihappogeelikromatografian avulla, jolloin saadaan 3,4-(dibromimetyyli)tiofeeni.

Liuotetaan dietyylimalonaatti (15,2 ml, 0,100 mol) 30 tetrahydrofuraaniin (800 ml). Saatu liuos jäähdytetään ; jäähauteessa ja käsitellään natriumhydridillä (3,0 g, 0,10 mol, 80-%:inen mineraaliöljyssä). Seosta sekoitetaan, kunnes saadaan liuos, johon lisätään 3,4-(dibromimetyyli)-tiofeeni (25,4 g, 0,100 mol). Saatua seosta sekoitetaan 30 35 minuutin ajan, sitten siihen lisätään vielä natriumhydri- 61 101302 diä (3,0 g, 0,10 mol). Saatua seosta sekoitetaan huoneenlämpötilassa 20 tunnin ajan, se suodatetaan suodattimen apuaineen läpi ja liuotin haihdutetaan tyhjössä. Jäännös puhdistetaan piihappogeelikromatografian avulla, jolloin 5 saadaan 5,5-(dikarboetoksi)-2,4,5,6-tetrahydrosyklopen-ta[c]tiofeeni.

Liuotetaan 5,5-(dikarboetoksi)-2,4,5,6-tetrahydro-syklopenta[c]tiofeeni (16,2 g, 60,6 mmol) dimetyylisulfok-sidiin (140 ml). Saatuun liuokseen lisätään vesi (14 ml) 10 ja litiumkloridi (7,0 g, 0,16 mol). Saatua seosta kuumennetaan palautusjäähdyttäen 4 tunnin ajan, se jäähdytetään ja jaetaan veden (150 ml) ja metyleenikloridin (2 x 150 ml) kesken. Orgaaninen faasi pestään vedellä (150 ml), kuivataan (MgS04) ja juoksutetaan piihappogeelitäytteen 15 läpi, jolloin saadaan 5-(karboetoksi)-2,4,5,6-tetrahydro-syklopenta[c]tiofeeni.

Liuotetaan 5-(karboetoksi)-2,4,5,6-tetrahydrosyklo-penta[c]tiofeeni (6,68 g, 34,1 mmol) etanoliin (95-%:inen, 150 ml) ja veteen (75 ml). Lisätään kaliumhydroksidi 20 (9,5 g, 0,17 mol) ja saatua seosta sekoitetaan huoneenläm pötilassa 1 tunnin ajan. Se jaetaan veden (150 ml) ja etyylieetterin (2 x 150 ml) kesken. Vesipitoinen faasi tehdään happamaksi suolahapon avulla pH-arvoon 1. Se uutetaan metyleenikloridilla (2 x 150 ml), kuivataan (Na2S04) 25 ja liuotin haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan 5-(kar-boksi)-2,4,5,6-tetrahydrosyklopenta[c]tiofeeni.

Liuotetaan 5-(karboksi)-2,4,5,6-tetrahydrosyklo-penta[c]tiofeeni (3,95 g, 23,5 mmol) metanoliin (60 ml) ja saatu liuos käsitellään dimetoksipropaanilla (5,8 ml, 30 47 mmol) ja rikkihapolla (0,8 ml). Saatua seosta sekoite taan huoneenlämpötilassa 6 päivän ajan. Liuotin haihdutetaan tyhjössä, jäännös laimennetaan metyleenikloridilla (75 ml) ja pestään kyllästetyllä natriumvetykarbonaatilla (35 ml). Vesipitoinen faasi uutetaan metyleenikloridilla 35 (30 ml), orgaaniset faasit yhdistetään, pestään kylläste- 62 101302 tyllä suolaliuoksella (30 ml) ja kuivataan (Na2S04). Liuotin haihdutetaan tyhjössä ja jäännös juoksutetaan piihap-pogeelitäytteen läpi, jolloin saadaan 5-(karbometoksi)- 2,4,5,6-tetrahydrosyklopenta[c]tiofeeni.

5 Liuotetaan di-isopropyyliamiini (3,5 ml, 25 mmol) tetrahydrofuraaniin (30 ml). Saatuun liuokseen lisätään n-butyylilitium (14 ml 1,6 M liuosta heksaanissa, 22,4 mmol). Saatua seosta sekoitetaan 15 minuutin ajan ja sitten se jäähdytetään -78 eC:n lämpötilaan. Siihen lisä-10 tään tipoittain 5-(karbometoksi)-2,4,5,6-tetrahydrosyklo- penta[c]tiofeeni (3,64, 20 mmol) ja saatua seosta sekoitetaan 30 minuutin ajan. Siihen lisätään t-butyylibromiase-taatti (4,0 ml, 25 mmol) ja sen annetaan vähitellen lämmetä huoneenlämpötilaan yön kuluessa. Reaktio tukahdutetaan 15 ammoniumkloridiliuoksen (10 ml) avulla ja liuos jaetaan veden (25 ml) ja etyylieetterin (50 ml) kesken. Orgaaninen faasi erotetaan, kuivataan (MgS04) ja liuotin haihdutetaan tyhjössä. Jäännös puhdistetaan piihappogeelikromatografian avulla, jolloin saadaan 5-(karbometoksi)-5-(karbo-t-butyy-20 lioksimetyyli)-2,4,5,6-tetrahydrosyklopenta[c]tiofeeni.

Liuotetaan 5-(karbometoksi)-5-(karbo-t-butyylioksi-metyyli)-2,4,5,6-tetrahydrosyklopenta[c]tiofeeni (2,7 g, 9,17 mmol) etanoliin (95-%:inen, 60 ml) ja veteen (30 ml). Saatu liuos käsitellään kaliumhydroksidilla (2,94 g, 25 52 mmol). Saatua seosta sekoitetaan huoneenlämpötilassa 3 tunnin ajan. Siihen lisätään vesi (75 ml) ja saatu tuote uutetaan etyylieetterillä (2 x 50 ml). Yhdistetyt eetteri-pitoiset faasit uutetaan vedellä (75 ml) ja yhdistetyt vesipitoiset faasit tehdään happamaksi vesipitoisen 1 M 30 viinihapon avulla (pH-arvoon 2 - 3). Uutetaan etyyliase-; taatilla (2 x 125 ml), kuivataan (Na2S04) ja liuotin haih dutetaan tyhjössä. Jäännös sekoitetaan metyleenikloridiin ja suodatetaan, jolloin saadaan 5-(karboksi)-5-(karbo-t-butyylioksimetyyli )-2,4, 5,6-tetrahydrosyklopenta[c] tiofee-35 ni.

63 101302

Liuotetaan [4S-[4a, 7a(R*), 12b8]]-7-(amino)-3,4,-6,7,8,12b-heksahydro-6-okso-lH- [1,4] -tiatsino[3,4-a] [2] -bentsatsepiini-4-karboksyylihappo, difenyylimetyyliesteri, (208 mg, 0,454 mmol) ja EDC (130 mg, 0,68 mmol) tetrahyd-5 rofuraaniin (5 ml). Saatu liuos käsitellään 5-(karboksi)- 5-(karbo-t-butyylioksimetyyli)-2,4,5, 6-tetrahydrosyklopen-ta[c]tiofeenilla (128 mg, 0,454 mmol). Saatua seosta sekoitetaan huoneenlämpötilassa 20 tunnin ajan ja liuotin haihdutetaan tyhjössä. Jäännös liuotetaan etyyliasetaat-10 tiin (50 ml) ja pestään 5-%:isella rikkihapolla (15 ml), sitten kyllästetyllä natriumvetykarbonaatilla (15 ml). Kuivataan (Na2S04) ja liuotin haihdutetaan tyhjössä. Jäännös puhdistetaan piihappogeelikromatografian avulla, jolloin saadaan [4S-[4a, 7a(R*), 12b8]]-7-[(5-(karbo-t-butyy-15 lioksimetyyli)-5-okso-2,4,5,6-tetrahydrosyklopenta[c]tio-feeni)metyyliamino]-3,4,6,7,8,12b-heksahydro-6-okso-lH- [l,4]-tiatsino[3,4-a] [2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappo, difenyylimetyyliesteri.

Liuotetaan [4S-[4a, 7a(R*), 12bB]]-7-[(5-(karbo-t-20 butyylioksimetyyli )-5-okso-2,4,5,6-tetrahydrosyklopen-ta[c]tiofeeni)metyyliamino]-3,4,6,7,8,12b-heksahydro-6-okso-ΙΗ-[ 1,4]-tiatsino[3,4-a] [2]bentsatsepiini-4-karbok-syylihappo, difenyylimetyyliesteri, (118 mg, 0,163 mmol) metyleenikloridiin (3 ml) ja saatu liuos käsitellään 25 anisolilla (0,19 ml, 1,7 mmol). Saatu tuote jäähdytetään jää-metanoli-hauteessa ja siihen lisätään trifluorietikka-happo (0,8 ml, 10 mmol) ja saatua seosta sekoitetaan 2,5 tunnin ajan 0 eC:n lämpötilassa. Se jaetaan etyyliasetaatin (25 ml) ja kyllästetyn suolaliuoksen (15 ml) kesken.

30 Orgaaninen faasi erotetaan ja pestään kyllästetyllä suola-; liuoksella (15 ml). Se kuivataan (Na2S04), liuotin haihdu tetaan tyhjössä ja jäännös puhdistetaan piihappogeelikromatografian avulla, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

64 101302

Esimerkki 11 [4S-[4a, 7a(R*), 12b6]]-7-[(5-karboksimetyyli-5- okso-2,4,5,6-tetrahydrosyklopenta[c]pyrroli )metyyliamino] -3,4,6,7,8,12b-heksahydro-6-okso-lH-[1,4]-pyratsino[2,1-a] 5 [2]bentsatsepiini-4-karboksyylihapon valmistus

Kaavio E, vaihe a: N-[2-(l,3-dihydro-l,3-diokso-2H-isoindol-2-yyli)-l-okso-3-fenyylipropyyli]-(S)-3-[ (trifluoriasetyyli-2-propenyyli) amino] -2-aminopropioni-happo, metyyliesteri 10 Liuotetaan N°-(karbobentsyylioksi)-6-( amino)-L-ala- niini (47,6 g, 0,2 mol) metanoliin (500 ml) ja saatu liuos käsitellään väkevällä rikkihapolla (0,5 ml). Seosta kuumennetaan 60 °C:n lämpötilassa 16 tunnin ajan, se jäähdytetään, liuottimen tilavuus haihdutetaan 50 %:iin tyhjös-15 sä. Jäännös laimennetaan etyylieetterillä (500 ml), pes tään kyllästetyllä natriumvetykarbonaatilla, sitten kyllästetyllä suolaliuoksella. Se kuivataan (MgS04) ja liuotin haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan N°-(karbobentsyy-lioksi)-6-(amino)-L-alaniini, metyyliesteri.

20 Liuotetaan N°-(karbobentsyylioksi)-6-(amino)-L-ala- niini, metyyliesteri, (15,9 g, 63 mmol) metyleeniklori-diin/sykloheksaaniin (1 : 1, 600 ml). Liuokseen lisätään allyylitriklooriasetimidaatti (26 g, 128 mmol) ja trifluo-rimetaanisulfonihappo (5 ml, 56,6 mmol). Seosta sekoite-25 taan huoneenlämpötilassa typpi-ilmakehän alla 5 tunnin ajan ja se laimennetaan metyleenikloridilla. Se pestään kyllästetyllä vesipitoisella natriumvetykarbonaatilla ja vedellä, kuivataan (MgS04) ja liuotin haihdutetaan tyhjössä. Jäännös puhdistetaan piihappogeelikromatogra£ian avul-30 la, jolloin saadaan Na-(karbobentsyylioksi)-6-(ailyyliami-no)-L-alaniini, metyyliesteri.

Liuotetaan N°- (karbobentsyylioksi) -6- (allyyliamino) -L-alaniini, metyyliesteri, (663 mg, 2,27 mmol) vedettömään tetrahydrofuraaniin (15 ml). Saatu liuos käsitellään pyri-35 diinilla (183 μΐ, 2,27 mmol), sitten trifluorietikkahap- 65 101302 poanhydridillä (321 μΐ, 2,27 mmol) ja saatua tuotetta sekoitetaan huoneenlämpötilassa yön yli. Se jaetaan etyy-lieetterin ja veden kesken. Orgaaninen faasi erotetaan, kuivataan (MgS04) ja liuotin haihdutetaan tyhjössä. Jäännös 5 puhdistetaan piihappogeelikromatografian avulla, jolloin saadaan ^-(karbobentsyylioksi)-8-(trifluoriasetyyliallyy-liamino)-L-alaniini, metyyliesteri.

Pannaan booritribromidi (215 mg, 0,86 mmol) pulloon ja jäähdytetään 0 °C:n lämpötilaan. Lisätään varovaisesti 10 trifluorietikkahappo (5 ml) sekoittaen. Liuotin haihdutetaan, jolloin saadaan booritris(trifluoriasetaatti).

Liuotetaan booritris(trifluoriasetaatti) (0,3 g, 0,86 mmol) trifluorietikkahappoon (10 ml) ja saatuun liuokseen lisätään N°-(karbobentsyylioksi)-8-(trifluoriase-15 tyyliallyyliamino)-L-alaniini, metyyliesteri, (105 mg, 0,27 mmol). Seosta sekoitetaan argonilmakehän alla 1 tunnin ajan, sitten liuotin haihdutetaan tyhjössä huoneenlämpötilassa. Lisätään metanolia ja haihdutetaan toistuvasti. Jäännös puhdistetaan piihappogeelikromatografian avulla, 20 jolloin saadaan 8-(trifluoriasetyyliallyyliamino)-L-ala niini, metyyliesteri, hydrokloridi.

Liuotetaan 8-(trifluoriasetyyliallyyliamino)-L-alaniini, metyyliesteri, hydrokloridi, (104,8 g, 0,36 mol) tetrahydrofuraaniin (300 ml), liuos jäähdytetään 0 eC:n 25 lämpötilaan ja siihen lisätään 4-metyylimorfoliini (88 ml, 0,8 mol). Saatuun seokseen lisätään tipoittain liuos, jossa on N-ftaloyyli-(S)-fenyylialaniini, happokloridi, (108,7 g, 0,36 mol) tetrahydrofuraanissa (200 ml). Seoksen annetaan lämmetä huoneenlämpötilaan ja sitä sekoitetaan 3 30 tunnin ajan. Se suodatetaan ja suodos väkevöidään tyhjös- 1. sä. Jäännös liuostetaan etyyliasetaattiin ja orgaaninen faasi erotetaan. Se pestään vedellä ja sitten kyllästetyllä natriumkloridilla ja kuivataan (MgS04). Liuotin haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan öljy. Se puhdistetaan 35 piihappogeelikromatografian avulla, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

66 101302

Kaavio E, vaihe b: [S-(R*, R*)]-N-[2-(l,3-dihydro- 1.3- diokso-2H-isoindol-2-yyli)-l-okso-3-£enyylipropyyli]- 3.4- dihydro-2H-4-trifluoriasetyyli-l, 4-atsatsiini-3-kar-boksyy1ihappo, metyyliesteri 5 Liuotetaan N-[2-(l,3-dihydro-l,3-diokso-2H-isoin- dol-2-yyli)-l-okso-3-fenyylipropyyli]-(S)-3-[(trifluo-riasetyyli-2-propenyyli)amino] -2-aminopropionihappo, me-tyyliesteri, (15,8 g, 29,8 mmol) metyleenikloridiin/meta-noliin (10 : 1, 220 ml). Liuos jäähdytetään -78 °C:n läm-10 pötilaan ja siihen pirskotetaan otsonin ja hapen seosta noin 10 minuutin ajan, kunnes sininen väri säilyy. Typpeä pirskotetaan 10 minuutin ajan -78 eC:n lämpötilassa ylimääräisen otsonin poistamiseksi. Tuote käsitellään metyy-lisulfidilla (60 ml, 0,82 mol) ja sen annetaan lämmetä 15 huoneenlämpötilaan. Sitä sekoitetaan huoneenlämpötilassa 2,5 tunnin ajan, liuotin haihdutetaan tyhjössä ja jäännös liuotetaan etyyliasetaattiin (200 ml). Liuos pestään vedellä, kyllästetyllä natriumkloridilla, kuivataan (MgS0«) ja liuotin haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan välituo-20 te N-[2-(1,3-dihydro-l,3-diokso-2H-isoindol-2-yyli)-l-ok- so-3-fenyylipropyyli]-N-2-oksoetyyli, metyyliesteri.

Liuotetaan N-[2-(1,3-dihydro-l,3-diokso-2H-isoin-dol-2-yyli)-l-okso-3-fenyylipropyyli]-(S)-3-[(trifluo-riasetyyli-2-oksoetyyli)amino]-2-aminopropionihappo, me-25 tyyliesteri, (15,9 g, 29,8 mmol) metyleenikloridiin/tri-fluorietikkahappoon (10 : 1/330 ml). Liuosta sekoitetaan huoneenlämpötilassa 2,5 tunnin ajan ja liuotin haihdutetaan tyhjössä. Jäännös puhdistetaan piihappogeelikromato-grafian avulla, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

30 Kaavio E, vaihe c: [4S-[4a, 7a(R*), 12b8]]-7-[(1,3- dihydro-l,3-diokso-2H-isoindol-2-yyli) ] -3,4,6,7,8,12b-hek-sahydro-6-okso-lH-4-trifluoriasetyyli-[1,4]-pyratsino-[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappo, difenyylime-tyyliesteri 35 Liuotetaan [S-(R*, R*)]-N-[2-(1,3-dihydro-l,3-diok- so-2H-isoindol-2-yyli )-l-okso-3-fenyylipropyyli] -3,4-di- 67 101302 hydro-2H-4-trif luoriasetyyli-1,4-atsatsiini-3-karboksyyli-happo, metyyHester!, (3,04 g, 5,9 mmol) metyleeniklori-diin (5 ml) ja liuokseen lisätään tipoittain aikaisemmin valmistettua liuosta, jossa on trifluorimetaanisulfonihap-5 poa (4,0 ml, 45 mmol) ja trifluorietikkahappoanhydridiä (1,0 ml, 7,1 mmol). Saatu seos pannaan typpi-ilmakehän alle ja sitä sekoitetaan huoneenlämpötilassa 123 tunnin ajan. Se kaadetaan erotussuppiloon, joka sisältää jäätä (200 g) ja etyyliasetaattia (200 ml). Orgaaninen faasi 10 erotetaan, pestään vedellä (3 x 200 ml) ja kyllästetyllä vesipitoisella natriumkloridilla (100 ml). Orgaaninen faasi uutetaan painon mukaan 10-%:isella kaliumvetykarbonaa-tilla (4 x 40 ml) ja vedellä (40 ml). Yhdistetyt emäksiset vesipitoiset faasit kerrostetaan etyyliasetaatin (100 ml) 15 avulla ja tuote jäähdytetään jäähauteessa. Siihen lisätään tipoittain 6 N suolahappoa pH-arvon säätämiseksi arvoon 1, samalla säilyttäen lämpötila 5-10 °C:ssa. Orgaaninen faasi erotetaan ja vesipitoinen faasi uutetaan etyyliasetaatilla (3 x 200 ml), pestään kyllästetyllä natriumklori-20 dilla ja kuivataan (MgS04). Liuotin haihdutetaan tyhjössä ja jäännöstä kuivataan suurtyhjössä 56 °C:n lämpötilassa 24 tunnin ajan, jolloin saadaan välituote [4S-[4a, 7a(R*), 12 bB]]-7-[(1,3-dihydro-l,3-diokso-2H-isoindol-2-yyli)]-3,4,6,7,8,12b-heksahydro-6-okso-lH-4-trifluoriasetyyli-25 [l,4]-pyratsino[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihap- po.

Liuotetaan [4S-[4a, 7a(R*), 12 b8]]-7-[(1,3-dihydro-l, 3-diokso-2H-isoindol-2-yyli) ] -3,4,6,7,8,12b-heksahyd-ro-6-okso-lH-4-trifluoriasetyyli- [1,4] -pyratsino[2,1-a] -30 [2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappo (616 mg, 1,23 mmol) metyleenikloridiin (12 ml) ja saatu liuos käsitellään di-fenyylidiatsometaanilla (360 mg, 1,86 mmol). Saatua seosta sekoitetaan 5,5 tunnin ajan ja liuotin haihdutetaan tyhjössä. Jäännös puhdistetaan piihappogeelikromatografian 35 avulla, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

68 101302

Kaavio E, vaihe d: [4S-[4a, 7a(R*), 12bB]]-7-(amino )-3,4,6,7,8,12b-heksahydro-6-okso-1H-[1,4]-pyratsino-[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappo, difenyylime-tyyliesteri 5 Liuotetaan [4S-[4a, 7a(R*), 12 bB]]-7-[(l,3-dihyd- ro-1,3-diokso-2H-isoindol-2-yyli)]-3,4,6,7,8,12b-heksa-hydro-6-okso-lH-4-trifluoriasetyyli-[1,4]-pyratsino-[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappo, difenyylime-tyyliesteri, (345 mg, 0,517 mmol) metanoliin (5 ml) ja 10 saatu liuos käsitellään hydratsiinimonohydraatilla (1,1 ml 1 M liuosta metanolissa, 1,1 mmol). Saatua seosta sekoitetaan huoneenlämpötilassa 44 tunnin ajan, liuotin haihdutetaan tyhjössä ja jäännös lietetään metyleenikloridiin (10 ml). Liete suodatetaan ja liuotin haihdutetaan tyhjös-15 sä, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Kaavio A: [4S-[4a, 7a(R*), 12bB]]-7-[(5-karboksime-tyyli-5-okso-2,4,5,6-tetrahydrosyklopenta[c]pyrroli)metyy-liamino] -3,4,6,7,8,12b-heksahydro-6-okso-lH- [1,4] -pyratsi -no[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappo 20 Liuotetaan 3,4-(dikarboetoksi)pyrroli (1,06 g, 5 mmol) 50/50 -dioksaaniveteen (25 ml) ja pH-arvo puskuroidaan arvoon 10 1 N natriumhydroksidin avulla. Liuokseen lisätään tipoittain di-t-butyylidikarbonaatin eetteriliuos (1,2 g, 5,5 mmol) 10 °C:n lämpötilassa. Saadun seoksen 25 annetaan lämmetä huoneenlämpötilaan ja silloin tällöin sitä puskuroidaan, jotta pH säilyy arvossa 10. Seos tehdään happamaksi natriumsitraatin/sitruunahappo-puskurin avulla pH-arvoon 5, se uutetaan etyylieetterillä (3 x), kuivataan (MgS04) ja liuotin haihdutetaan tyhjössä. Jäännös 30 puhdistetaan piihappogeelikromatografiän avulla, jolloin saadaan N-(karbo-t-butyylioksi)-3,4-(dikarboetoksi)pyrro- li.

Liuotetaan N-(karbo-t-butyylioksi)-3,4-(dikarboetoksi )pyrroli (3,11 g, 10 mmol) vedettömään tetrahydro-35 furaaniin (30 ml) ja saatu liuos jäähdytetään -20 °C:n 69 101302 lämpötilaan. Se käsitellään litiumboorihydridillä (7 ml 2 N liuosta) ja saatua seosta sekoitetaan typpi-ilmakehän alla useita päiviä. Siihen lisätään varovaisesti vettä ja se jaetaan etyyliasetaatin ja 5-%:isen suolahapon kesken.

5 Orgaaninen faasi erotetaan, pestään kyllästetyllä suolaliuoksella ja kuivataan (MgS04). Liuotin haihdutetaan tyhjössä ja jäännös puhdistetaan piihappogeelikromatografian avulla, jolloin saadaan N-(karbo-t-butyylioksi)-3,4-(di-hydroksimetyyli)pyrroli.

10 Liuotetaan N-bromisukkinimidi (1,78 g, 0,01 mol) tetrahydrofuraaniin (60 ml) ja lisätään liuos, jossa on trifenyylifosfiinia (2,62 g, 0,01 mol) tetrahydrofuraanissa. Saatuun seokseen lisätään liuos, jossa on N-(karbo-t-butyylioksi)-3,4-(dihydroksimetyyli)pyrrolia (1,14 g, 15 5 mmol) tetrahydrofuraanissa (25 ml) ja seosta sekoite taan, kunnes suurin osa kiinteästä aineesta on liuennut. Liuotin haihdutetaan tyhjössä ja jäännös jaetaan veden ja etyylieetterin kesken. Orgaaninen faasi erotetaan ja pestään vedellä. Se kuivataan (Na2S04) ja liuotin haihdutetaan 20 tyhjössä. Jäännös puhdistetaan piihappogeelikromatografian avulla, jolloin saadaan N-(karbo-t-butyylioksi)-3,4-(di-bromimetyyli)pyrroli.

Liuotetaan dietyylimalonaatti (15,2 ml, 0,100 mol) tetrahydrofuraaniin (800 ml). Saatu liuos jäähdytetään 25 jäähauteessa ja käsitellään natriumhydridillä (3,0 g, 0,10 mol, 80-%:inen mineraaliöljyssä). Saatua seosta sekoitetaan, kunnes saadaan liuos, johon lisätään N-(t-bu-tyylioksi)-3,4-(dibromimetyyli)pyrroli (35,3 g, 0,100 mol). Saatua seosta sekoitetaan 30 minuutin ajan, 30 sitten siihen lisätään vielä natriumhydridiä (3,0 g, 0,10 mol). Saatua seosta sekoitetaan huoneenlämpötilassa 20 tunnin ajan, se suodatetaan suodattimen apuaineen läpi ja liuotin haihdutetaan tyhjössä. Jäännös puhdistetaan piihappogeelikromatografian avulla, jolloin saadaan 5,5- 70 101302 (dikarboetoksi)-2-(karbo-t-butyylioksi)-2,4,5,6-tetrahyd-rosyklopenta[c]pyrrol!.

Liuotetaan 5,5-(dikarboetoksi)-2-(karbo-t-butyy-lioksl)-2,4,5,6-tetrahydrosyklopenta[c]pyrrol! (21,3 g, 5 60,6 mmol) dimetyylisulfoksidiin (140 ml). Saatuun liuok seen lisätään vesi (14 ml) ja litiumkloridi (7,0 g, 0,16 mol). Saatua seosta kuumennetaan palautusjäähdyttäen 4 tunnin ajan, se jäähdytetään ja jaetaan veden (150 ml) ja metyleenikloridin (2 x 150 ml) kesken. Orgaaninen faasi 10 pestään vedellä (150 ml), kuivataan (MgS04) ja juoksutetaan piihappogeelitäytteen läpi, jolloin saadaan 5-(karboetok-si)-2-(karbo-t-butyylioksi)-2,4,5,6-tetrahydrosyklopenta- [c]pyrroli.

Liuotetaan 5- (karboetoksi )-2-( karbo-t-butyylioksi) -15 2,4,5,6-tetrahydrosyklopenta[c]pyrroli (9,5 g, 34,1 mmol) etanoliin (95-%:inen, 150 ml) ja veteen (75 ml). Saatuun liuokseen lisätään kaliumhydroksidi (9,5 g, 0,17 mol) ja saatua seosta sekoitetaan huoneenlämpötilassa 1 tunnin ajan. Se jaetaan veden (150 ml) ja etyylieetterin (2 x 20 150 ml) kesken. Vesipitoinen faasi tehdään happamaksi suo lahapon avulla pH-arvoon 1. Se uutetaan metyleenikloridil-la (2 x 150 ml), kuivataan (Na2S04) ja liuotin haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan 5-(karboksi)-2-(karbo-t-butyylioksi )-2,4, 5, 6-tetrahydrosyklopenta[c]pyrroli.

25 Liuotetaan 5-(karboksi)-2-(karbo-t-butyylioksi)- 2,4,5,6-tetrahydrosyklopenta[c]pyrroli (5,9 g, 23,5 mmol) metanoliin (60 ml) ja saatu liuos käsitellään dimetoksi-propaanilla (5,8 ml, 47 mmol) ja rikkihapolla (0,8 ml). Seosta sekoitetaan huoneenlämpötilassa 1 päivän ajan.

30 Liuotin haihdutetaan tyhjössä, jäännös laimennetaan mety-leenikloridilla (75 ml) ja pestään kyllästetyllä natrium-vetykarbonaatilla (35 ml). Vesipitoinen faasi uutetaan metyleenikloridilla (30 ml), yhdistetyt orgaaniset uutteet pestään kyllästetyllä suolaliuoksella (30 ml) ja kuivataan 35 (Na2S04). Liuotin haihdutetaan tyhjössä ja jäännös juoksu- 71 101302 tetaan piihappogeelitäytteen läpi, jolloin saadaan 5-(kar-bometoksi)-2-(karbo-t-butyylioksi)-2,4,5,6-tetrahydrosyk-lopenta[c]pyrroli.

Liuotetaan di-isopropyyliamiini (3,5 ml, 25 mmol) 5 tetrahydrofuraaniin (30 ml). Saatuun liuokseen lisätään n-butyylilitium (14 ml 1,6 M liuosta heksaanissa, 22,4 mmol). Saatua seosta sekoitetaan 15 minuutin ajan ja sitten se jäähdytetään -78 °C:n lämpötilaan. Siihen lisätään tipoittain 5-(karbometoksi)-2-(karbo-t-butyylioksi)-10 2,4,5,6-tetrahydrosyklopenta[c]pyrroli (5,3 g, 20 mmol) ja saatua seosta sekoitetaan 30 minuutin ajan. Siihen lisätään t-butyylibromiasetaatti (4,0 ml, 25 mmol) ja sen annetaan lämmetä vähitellen huoneenlämpötilaan yön kuluessa. Reaktio tukahdutetaan ammonlumkloridiliuoksen (10 ml) 15 avulla ja liuos jaetaan veden (25 ml) ja etyylieetterin (50 ml) kesken. Orgaaninen faasi erotetaan, kuivataan (MgS04) ja liuotin haihdutetaan tyhjössä. Jäännös puhdistetaan piihappogeelikromatografian avulla, jolloin saadaan 5-(karbometoksi)-5-(karbo-t-butyylioksimetyyli)-2-(karbo-20 t-butyylioksi)-2,4,5,6-tetrahydrosyklopenta[c]pyrroli.

Liuotetaan 5-(karbometoksi)-5-(karbo-t-butyylioksimetyyli )-2-(karbo-t-butyylioksi)-2,4,5,6-tetrahydro-syklopenta[c]pyrroli (2,92 g, 9,17 mmol) etanoliin (95-%:inen, 60 ml) ja veteen (30 ml). Saatu liuos käsitel-25 lään kaliumhydroksidilla (2,94 g, 52 mmol). Saatua tuotetta sekoitetaan huoneenlämpötilassa 3 tunnin ajan. Siihen lisätään vesi (75 ml) ja saatu liuos uutetaan etyylieette-rillä (2 x 50 ml). Yhdistetyt eetteriset faasit uutetaan vedellä (75 ml) ja yhdistetyt vesipitoiset faasit tehdään 30 happamaksi vesipitoisen 1 M viinihapon avulla (pH-arvoon 2-3). Tuote uutetaan etyyliasetaatilla (2 x 125 ml), kuivataan (Na2S04) ja liuotin haihdutetaan tyhjössä. Jäännös sekoitetaan metyleenikloridiin ja seos suodatetaan, jolloin saadaan 5-(karboksi)-5-(karbo-t-butyylioksimetyy- 72 101302 11)-2-(karbo-t-butyyIloksi )-2,4,5,6-tetrahydrosyklopen-ta[c]pyrrol!.

Liuotetaan [4S-[4a, 7o(R*), 12bB]]-7-(amino)-3,4, -6,7,8,12b-heksahydro-6-okso-lH-[1,4)-pyratsino[2,1-a][2]-5 bentsatsepiini-4-karboksyylihappo, difenyylimetyyliesteri, (200 mg, 0,454 mmol) ja EDC (130 mg, 0,68 mmol) tetrahyd-rofuraaniin (5 ml). Saatu liuos käsitellään 5-(karboksi)- 5- (karbo-t-butyylioksimetyyli)-2-(karbo-t-butyylioksi)- 2.4.5.6- tetrahydrosyklopenta[c]pyrrolilla (166 mg, 0,454 10 mmol). Saatua tuotetta sekoitetaan huoneenlämpötilassa 20 tunnin ajan ja liuotin haihdutetaan tyhjössä. Jäännös liuotetaan etyyliasetaattiin (50 ml) ja pestään 5-%:isella rikkihapolla (15 ml), sitten kyllästetyllä natriumvetykar-bonaatilla (15 ml). Kuivataan (Na2S04) ja liuotin haihdu-15 tetaan tyhjössä. Jäännös puhdistetaan piihappogeelikroma- tografian avulla, jolloin saadaan [4S-[4a, 7a(R*), 12bB]]- 7- [ (5- (karbo-t-butyylioksimetyyli) -5-okso-2- (karbo-t-bu-tyylioksi )-2,4,5,6-tetrahydrosyklopenta[c]pyrroli )metyy-li amino] -3,4,6,7,8,12b-heksahydro-6-okso-lH- [ 1,4] -pyratsi-20 no[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappo, difenyyli- metyyliesteri.

Liuotetaan [4S-[4a, 7a(R*), 12bB]]-7-[(5-(karbo-t-butyylioksimetyyli )-5-okso-2-(karbo-t-butyylioksi)-2,4,- 5.6- tetrahydrosyklopenta[c]pyrroli )metyyliamino] -3,4,6,- 25 7,8,12b-heksahydro-6-okso-lH-[1,4]-pyratsino[2,1-a][2]- bentsatsepiini-4-karboksyylihappo, difenyylimetyyliesteri, (128 mg, 0,163 mmol) metyleenikloridiin (3 ml) ja saatu liuos käsitellään anisolilla (0,19 ml, 1,7 mmol). Saatu tuote jäähdytetään jää-metanoli-hauteessa ja siihen lisä-30 tään trifluorietikkahappo (0,8 ml, 10 mmol) ja saatua seosta sekoitetaan 2,5 tunnin ajan 0 °C:n lämpötilassa. Se jaetaan etyyliasetaatin (25 ml) ja kyllästetyn suolaliuoksen (15 ml) kesken. Orgaaninen faasi erotetaan ja pestään kyllästetyllä suolaliuoksella (15 ml). Se kuivataan 35 (Na2S04), liuotin haihdutetaan tyhjössä ja jäännös puhdis- 73 101302 tetraan piihappogeelikromatografiän avulla, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Esimerkki 12 [4S-[4a, 7a(R*), 12bB]]-7-[(5-(karboksimetyyli-5- 5 okso-2,4,5,6-tetrahydrosyklopenta [c] pyrroli) me tyyli amino] - 3,4,6,7,8,12b-heksahydro-6-okso-lH- [1,4] -N4-trifluoriase-tyylipyratsino[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihapon valmistus

Liuotetaan [4S-[4a, 7a(R*), 12bB]]-7-[(5-(karbo-t-10 butyylioksimetyyli)-5-okso-2-(karbo-t-butyylioksi )-2,4,-5, 6-tetrahydrosyklopenta [c] pyrroli) metyyli amino] -3,4,6,7,-8,12b-heksahydro-6-okso-lH-[l,4]-pyratsino[2,1-a][2]-bentsatsepiini-4-karboksyylihappo,difenyylimetyyliesteri, (1,79 g, 2,27 mmol) vedettömään tetrahydrofuraaniin (15 15 ml). Saatu liuos käsitellään pyridiinilla (183 μΐ, 2,27 mmol), sitten trifluorietikkahappoanhydridillä (321 μΐ, 2,27 mmol), ja saatua seosta sekoitetaan huoneenlämpötilassa yön yli. Se jaetaan etyylieetterin ja veden kesken. Orgaaninen faasi erotetaan, kuivataan (MgS04) ja liuotin 20 haihdutetaan tyhjössä. Jäännös puhdistetaan piihappogeelikromatograf iän avulla, jolloin saadaan [4S-[4a, 7a(R*), 12bB] ] —7— [ (5-(karbo-t-butyylioksimetyyli)-5-okso-2-(karbo-t-butyylioksi)-2,4,5,6-tetrahydrosyklopenta[c]pyrroli)me-tyyliamino] -3,4,6,7,8,12b-heksahydro-6-okso-lH- [1,4] -N4-25 trifluoriasetyylipyratsino[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-kar- boksyylihappo, difenyylimetyyliesteri.

Liuotetaan [4S-[4a, 7a(R*), 12bB]]-7-[(5-(karbo-t-butyylioksimetyyli )-5-okso-2-(karbo-t-butyylioksi )-2,4, - 5,6-tetrahydrosyklopenta[c]pyrroli Jmetyyliamino] -3,4,6,-30 7,8,12b-heksahydro-6-okso-lH-[1,4]-N4-trifluoriasetyy- lipyratsino[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappo, difenyylimetyyliesteri, (141 mg, 0,163 mmol) metyleeniklo-ridiin (3 ml) ja saatu liuos käsitellään anisolilla (0,19 ml, 1,7 mmol). Saatu tuote jäähdytetään jää-metano-35 li-hauteessa ja siihen lisätään tri-fluorietikkahappo 74 101302 (0,8 ml, 10 mmol) ja saatua seosta sekoitetaan 2,5 tunnin ajan 0 °C:n lämpötilassa. Se jaetaan etyyliasetaatin (25 ml) ja kyllästetyn suolaliuoksen (15 ml) kesken. Orgaaninen faasi erotetaan ja pestään kyllästetyllä suola-5 liuoksella (15 ml). Se kuivataan (Na2S04), liuotin haihdutetaan tyhjössä ja jäännös puhdistetaan piihappogeelikro-matografian avulla, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Esimerkki 13 [6a (R*), llbfl]-6-[(S)-(5-karboksimetyyli-S-okso- lO 2,4,5,6-tetrahydrosyklopenta [c]pyrroli) metyyli amino] -1,2,- 3,5,6,7,llb-heptahydro-5-oksopyrrolo[2,1 -a] [2]bentsatse-piini-3(S)-karboksyylihappo, metyyliesteri

Kaavio G, vaihe a: N-(fenyylimetyleeni)-2-(3-bute-nyyli)glysiinimetyyliesteri 15 Liuotetaan di-isopropyyliamiini (15,4 ml, 110 mmol) tetrahydrofuraaniin (250 ml), liuos pannaan typpi-ilmake-hän alle ja jäähdytetään -78 °C:n lämpötilaan. Siihen lisätään n-butyylilitium (39 ml 2,7 M liuosta heksaanissa, 105 mmol). Saatua seosta sekoitetaan 30 minuutin ajan ja 20 siihen lisätään tipoittain N-(fenyylimetyleeni)glysiinime-tyyliesterin (17,7 g, 100 mmol) liuos tetrahydrofuraanissa (25 ml). Seosta sekoitetaan 15 minuutin ajan ja siihen lisätään 4-bromibuteeni (13,5 g, 100 mmol) ja sen annetaan lämmetä hitaasti huoneenlämpötilaan. Siihen lisätään hek-25 sametyylifosforamidi (20 ml, 100 mmol) ja saatua seosta sekoitetaan typpi-ilmakehän alla 3 tunnin ajan. Se kaadetaan veteen, tuote uutetaan etyylieetteriin ja pestään useita kertoja kyllästetyllä suolaliuoksella. Kuivataan (MgS04) ja liuotin haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan 30 otsikon yhdiste meripihkanvärisenä öljynä (25 g).

Kaavio G, vaihe b: 2-(3-butenyyli)glysiinimetyy liesteri

Liuotetaan N-(fenyylimetyleeni)-2-(3-butenyyli)-glysiinimetyyliesteri (25 g) etyylieetteriin (400 ml) ja 35 saatua liuosta sekoitetaan 1 N suolahapon (150 ml) ja ve- 75 101302 den (150 ml) kanssa. Tuote asetetaan argonilmakehän alle ja sitä sekoitetaan 2 tunnin ajan. Vesipitoinen faasi erotetaan ja sen pH säädetään arvoon 9, tuote uutetaan kloroformiin, kuivataan ja liuotin haihdutetaan tyhjössä, jol-5 loin saadaan otsikon yhdiste vaaleana öljynä (4,5 g).

Kaavio 6, valhe c: (S)-N-[2-(l,3-dihydro-l,3-diok-so-2H-isoindol-2-yyli)-l-okso-3-fenyylipropyyli]-2-(3-bu-tenyyli)glysiini, metyyliesterlt

Liuotetaan N-ftaloyyli-(S)-fenyylialaniini (2) 10 (6,0 g, 20 mmol) ja EEDQ (6,0 g, 24 mmol) metyleeniklori- dlln (30 ml). Saatuun liuokseen lisätään 2-(3-butenyyli)-glysiinimetyyliesteri (3,0 g, 21 mmol) ja saatua seosta sekoitetaan 18 tunnin ajan. Se kaadetaan metyleeniklori-diin, pestään 10-%:isella suolahapolla (2 x 100 ml), sit-15 ten kyllästetyllä natriumvetykarbonaatilla. Kuivataan ja liuotin haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan 8,3 g keltaista öljyä. Jäännös puhdistetaan piihappogeelikromato-grafian avulla (25-%:inen etyyliasetaatti/heksaani), jolloin saadaan otsikon yhdisteiden diastereomeerinen seos 20 vaahtona (5,2 g).

Kaavio 6, vaihe d: (S)-N-[2-(l,3-dihydro-l,3-diok-so-2H-isoindol-2-yyli)]-(S)-fenyylialanyyli]-2-(3-okso-propyyli)glysiini, metyyliesterlt

Liuotetaan (S)-N-[2-(1,3-dihydro-l,3-diokso-2H-25 isoindol-2-yyli)-l-okso-3-fenyylipropyyli]-2-( 3-butenyy li )glysiinin metyyliestereiden diastereomeerinen seos (4,2 g, 10 mmol) metyleenikloridiin (100 ml) ja absoluuttiseen metanoliin (10 ml). Liuos jäähdytetään -78 °C:n lämpötilaan ja sitä käsitellään otsonilla, kunnes se saa-30 daan siniseksi. Poistetaan kaasu hapen avulla ja lisätään metyylisulfidi (10 ml) ja pyridiini (0,5 ml). Seoksen annetaan lämmetä hitaasti huoneenlämpötilaan ja sitä sekoitetaan 18 tunnin ajan. Se pestään 10-%:isella suolahapolla ja sitten kyllästetyllä suolaliuoksella. Tuote kuivataan 76 101302 ja liuotin haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan otsikon yhdisteiden diastereomeerinen seos öljynä (4,5 g).

Kaavio F, vaihe c: (S)-N-[2-(1,3-dihydro-l,3-diok-eo-2H-isoindol-2-yyli)]-l-okso-3-fenyylipropyyli-l,2,3-5 trihydro-2(S)-pyrrolikarboksyylihappo, metyyliesteri, ja (S) -N- [ 2- (1,3-dihydro-l, 3-diokso-2H-isoindol-2-yyli ) ] -1-okso-3-fenyylipropyyli-l,2,3-trihydro-2(R)-pyrrolikarbok-syylihappo, metyyliesteri

Liuotetaan (S)-N-[2-(1,3-dihydro-1,3-diokso-2H-10 isoindol-2-yyli) ] - (S) -fenyylialanyyli ] -2-(3-oksopropyyli) - glysiinin metyyliestereiden diastereomeerinen seos (4,5 g) 1,1,1-trikloorietaaniin (150 ml) ja saatu liuos käsitellään trifluorietikkahapolla (0,5 ml). Saatua tuotetta kuumennetaan palautusjäähdyttäen 18 tunnin ajan, liuotin 15 haihdutetaan ja jäännös puhdistetaan piihappogeelikromato- grafian avulla (80-%:inen etyyliasetaatti/heksaani), jolloin saadaan otsikon 2(S)-yhdiste (700 mg) ja 2(R)-yhdiste (600 mg).

Kaavio F, vaihe d: [6a(R*), llbfl]-6-[(S)-(l,3-dihy-20 dro-l,3-diokso-2H-isoindol-2-yyli) ] -1,2,3,5,6,7, llb-hepta- hydro-5-oksopyrrolo[2,1-a] [2]bentsatsepiini-3(S) -karbok-syylihappo, metyyliesteri

Liuotetaan (S)-N-[2-(l,3-dihydro-l,3-diokso-2H-isoindol-2-yyli)] -l-okso-3-fenyylipropyyli-l, 2,3-trihydro-25 2(S)-pyrrolikarboksyylihappo, metyyliesteri, (338 mg, 0,836 mmol) vedettömään metyleenikloridiin (10 ml) ja saatu liuos lisätään trifluorimetaanisulfonihappoon (5 ml). Saatua seosta sekoitetaan 3,5 tunnin ajan, se jäähdytetään jäähauteessa ja siihen lisätään varovaisesti vettä 30 (25 ml). Se uutetaan etyyliasetaatilla (75 ml) ja pestään '! kyllästetyllä natriumvetykarbonaatilla (25 ml). Kuivataan (Na2S04) ja liuotin haihdutetaan tyhjössä. Jäännös puhdistetaan piihappogeelikromatografian avulla (alkaen etyy-liasetaatista/heksaanista suhteessa 1:1, jatkaen suhtee- 77 101302 seen 2 : 1), jolloin saadaan otsikon yhdiste valkoisena vaahtona (314 mg, 93 %).

Kaavio F, vaihe e: [6a(R*), llbfl]-6-[(S)-amino]- 1,2,3,5,6,7,llb-heptahydro-5-oksopyrrolo[2,1-a][2]bent-5 satsepiini-3(S)-karboksyylihappo, metyyliesteri

Liuotetaan [6a(R*), llb8]-6-[(S)-(l,3-dihydro-l,3-diokso-2H-isoindol-2-yyli)]-1,2,3,5,6,7,llb-heptahydro-5-oksopyrrolo[2,1-a][2]bentsatsepiini-(3(S)-karboksyylihap-po, metyyliesteri, (244 mg, 0,603 mmol) metanoliin (3 ml) 10 ja saatu liuos käsitellään hydratsiinimonohydraatilla (0,70 ml 1 M liuosta metanolissa) ja saatua tuotetta sekoitetaan huoneenlämpötilassa 24 tunnin ajan. Siihen lisätään vielä hydratsiinimonohydraattia (0,3 ml 1 M liuosta metanolissa) ja sitä sekoitetaan 48 tunnin ajan. Se suoda-15 tetaan suodatuksen apuaineen läpi, liuotin haihdutetaan tyhjössä ja lisätään metyleenikloridia. Suodatetaan hitaasti suodattimen apuaineen ja MgS04:n seoksen läpi, sitten liuotin haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan otsikon yhdiste keltaisena öljynä (181 mg).

20 Kaavio A: [6a(R*), llbfl]-6-[(S)-(5-karboksimetyyli- 5-okso-2,4,5,6-tetrahydrosyklopenta[c]pyrroli)metyyliamino) -1,2,3,5,6,7,llb-heptahydro-5-oksopyrrolo[2,1-a][2]-bentsatsepiini-3(S)-karboksyylihappo, metyyliesteri

Liuotetaan 5-(karboksi)-2-(karbo-t-butyylioksi)-5-25 (karbo-t-butyylioksimetyyli )-2,4,5,6-tetrahydrosyklopen- ta[c]pyrroli (308 mg, 0,845 mmol) raetyleenikloridiin (6 ml), saatu liuos jäähdytetään jää-metanoli-hauteessa ja käsitellään oksalyylikloridilla (0,94 ml, 11 mmol). Saatua tuotetta sekoitetaan 1,5 tunnin ajan, liuotin haihdutetaan 30 tyhjössä 0 - 5 °C:n lämpötilassa. Jäännös laimennetaan . metyleenikloridilla (3 ml) ja lisätään liuos, jossa on [6a(R*), llbB]-6-[(S)-amino]-1,2,3,5,6,7,llb-heptahydro- 5-oksopyrrolo[2,1-a] [2]bentsatsepiini-3( S)-karboksyylihappo, metyyliesteri, (155 mg, 0,565 mmol) metyleenikloridis-35 sa (6 ml). Saatuun seokseen lisätään pyridiini (68 μΐ, 78 101302 0,85 mmol) ja seosta sekoitetaan 2 tunnin ajan. Se laimennetaan etyyliasetaatilla (60 ml) ja pestään 1 N suolahapolla (30 ml) ja kyllästetyllä natriumvetykarbonaatllla (2 x 30 ml). Kuivataan (MgS04), liuotin haihdutetaan tyh-5 jössä ja jäännös puhdistetaan pllhappogeellkromatograflan avulla, jolloin saadaan [6a(R*), llbB]-6-[(S)-(5-(karbo-t-butyylioksimetyyli)-5-okso-2-(karbo-t-butyylioksi )-2,4,- 5.6- tetrahydrosyklopenta[c]pyrrol! )metyyliamino] -1,2,3, -5,6,7,llb-heptahydro-5-oksopyrrolo[2,1-a][2]bentsatsepiΙ- ΙΟ ni-3(S)-karboksyylihappo, metyyliesteri.

Liuotetaan [6a(R*), llbB]-6-[(S)-(5-(karbo-t-butyy-lloksimetyyli)-5-okso-2-(karbo-t-butyylioksi )-2,4,5, 6-tet-rahydrosyklopenta [c] pyrrol! )metyyliamino] -1,2,3,5,6,7,11b-heptahydro- 5-oksopyrrolo [2,l-a][2] bent sat sepi ini-3 (S) -kar-15 boksyylihappo, metyyliesteri, (101 mg, 0,163 mmol) mety-leenikloridiin (3 ml) ja liuos käsitellään anisolilla (0,19 ml, 1,7 mmol). Se jäähdytetään jää-metanoli-hautees-sa ja siihen lisätään trifluorietlkkahappo (0,8 ml, 10 mmol) ja saatua seosta sekoitetaan 2,5 tunnin ajan 0 °C:n 20 lämpötilassa. Se jaetaan etyyliasetaatin (25 ml) ja kyllästetyn suolaliuoksen (15 ml) kesken. Orgaaninen faasi erotetaan ja pestään kyllästetyllä suolaliuoksella (15 ml). Kuivataan (Na2S04), liuotin haihdutetaan tyhjössä ja jäännös puhdistetaan piihappogeelikromatografian avul-25 la, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Esimerkki 14 [6a(R*), llbB]-6-[(S)-(5-karboksimetyyli-5-okso- 2.4.5.6- tetrahydrosyklopenta [ c] pyrrol i) metyyli amino] -1,2,-3,5,6,7, llb-heptahydro-5-oksopyrrolo[2,1-a] [2]bentsatse- 30 piini-3(S)-karboksyylihapon valmistus

Liuotetaan [6a(R*), llbB]-6-[(S)—(5-karboksimetyy-li-5-okso-2,4,5,6-tetrahydrosyklopenta[c]pyrroli)metyy-1iamino]-1,2,3,5,6,7,1lb-heptahydro-5-oksopyrrolo[2,1-a]-[ 2]bentsatsepiini-3(S)-karboksyylihappo, metyyliesteri, 35 (46 mg, 0,098 mmol) metanoliin (1,5 ml) 0 °C:n lämpötilas- 79 101302 sa ja saatuun liuokseen lisätään 1 N litiumhydroksidi (0,6 ml, 0,6 mmol) 0 °C:n lämpötilassa. Saatuun seokseen lisätään tetrahydrofuraania, jolloin saadaan liuos (4 ml), jota sekoitetaan 17 tunnin ajan huoneenlämpötilassa, se 5 jäähdytetään jäähauteessa ja siihen lisätään 1 N suolahappoa (1 ml). Saatu seos jaetaan metyleenikloridin (30 ml) ja veden (15 ml) kesken ja orgaaninen faasi erotetaan. Se kuivataan (Na2S04), liuotin haihdutetaan tyhjössä ja jäännös puhdistetaan piihappogeelikromatografian avulla, jol-10 loin saadaan otsikon yhdiste.

Claims (6)

80 101302

1. Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten 7-(2-karboksialkyyli-2-okso)metyyliamino-5-okso-pyrrolo- j a 5 -6-okso-pyrido- ja -pyratsino[2,l-a]bentsatsepiini- ja -[1,4]oksatsino- ja -tiatsino[3,4-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappojohdannaisten valmistamiseksi, joilla on kaava I

10 JÖ H\ 8 <u \ J Y H

0 K co2R3 jossa A on sidos, metyleeni, happi, rikki, NH tai NCOCF3;

20 R2 on vety, Cx.4-alkyyli tai -CH20C(0)C(CH3)3; R3 on vety tai -CH20C(0)C(CH3)3; ja Q on ryhmä, jolla on kaava - 0<, OCx .χ* - <Cx / ^ I H jolloin Z on 0, NH tai S; tunnettu siitä, että yhdiste, jolla on kaava 1 30 Jj (1) H /---SV/1 H2N H C02CHPh2 35. i A' 81 101302 jossa A' on sidos, metyleeni, happi, rikki tai NH ja Ph on fenyyli, saatetaan reagoimaan yhdisteen kanssa, jolla on kaava 2

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan [4S- [4a, 7a(R*), 12b8] ] -7- [ (2-karboksimetyyli-2-oksoindaa-20 ni )metyyliamino] -1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido- [2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappo.

3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan [4S-[4a, 7a(R*), 12b8] ] -7- [ (2-karboksimetyyli-2-oksoindaa-25 ni)metyyliamino]-l,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido- [2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihapon pivaloyyli-oksimetyyliesteri.

4. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan 30 [4S- [4a, 7a( R*), 12bB] ] -7- [ (2-pivaloyylioksimetyylikarboksi- metyyli-2-oksoindaani)metyyliamino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido[2,1-a] [2]bentsatsepiini-4-karbok-syylihapon pivaloyylioksimetyyliesteri.

5. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, 35 tunnettu siitä, että valmistetaan 84 101302 [4S- [4α, 7α(R*), 12b6] ] -7- [ (2-pivaloyylioksimetyylikarboksi-metyyli-2-oksoindaani)metyyliamino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-ok-tahydro-6-oksopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyy-llhappo.

5 CO,H Q-CHj-COjRi (2) jossa Rj ja Q merkitsevät samaa kuin edellä, tai sen suolan kanssa yhdisteen saamiseksi, jolla on kaava 3 10 h h ' \ . H (3) 15 ----- λ / °hQ· q-CH2-C02Ri N C02CHPh2 20 jossa A', Ph, Rx ja Q merkitsevät samaa kuin edellä, ja haluttaessa kaavan 3 mukainen yhdiste, jossa A' on NH, muutetaan vastaavaksi kaavan 3’ mukaiseksi yhdisteeksi, jossa A on NCOCF3, saattamalla se reagoimaan trifluori-25 asetanhydridin tai -kloridin kanssa, minkä jälkeen yhdisteessä oleva ryhmä -CHPh2 poistetaan hydrolysoimalla tai hydraamalla, jolloin saadaan sellaisia kaavan I mukaisia yhdisteitä, joissa R3 on vety, (1) kaavan I mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi, 30 joissa Rx ja R3 ovat vetyjä ja A ja Q merkitsevät samaa kuin edellä kaavan I määrittelyn yhteydessä, yhdiste, jolla on kaava 3' 35 82 101302 H H \ / V H N (3' ) 5 ' / ° Lv* Q-CH2-C02Ri p C02CHPh2 10 jossa A, Ph ja Q merkitsevät samaa kuin edellä ja Rx on t-butyyli, saatetaan reagoimaan hapon kanssa, (2) kaavan I mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi, joissa Rx on C1.4-alkyyli, R3 on vety ja A ja Q merkitsevät samaa kuin edellä kaavan I määrittelyn yhteydessä, 15 yhdiste, jolla on kaava 3', jossa A, Ph ja Q merkitsevät samaa kuin edellä ja R* on C^-alkyyli, saatetaan reagoimaan palladium-hiilellä-katalyytin kanssa vedyn läsnä ollessa, tai (3) kaavan 1 mukaisten yhdisteiden valmistamisek- 20 si, joissa Rx on -CH20C(0)C(CH3)3, R3 on vety ja A ja Q merkitsevät samaa kuin edellä kaavan I määrittelyn yhteydessä, yhdiste, jolla on kaava 3', jossa A, Ph ja Q merkitsevät samaa kuin edellä ja R3 on -CH2OC(0)C(CH3)3, saatetaan reagoimaan palladium-hiilellä-katalyytin kanssa vedyn läs- , 25 nä ollessa, ja sen jälkeen (i) kaavan I mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi, joissa Rx on -CH20C(0)C(CH3)3, R3 on -CH20C(0)C(CH3)3 ja A ja Q merkitsevät samaa kuin edellä kaavan I määrittelyn yhteydessä, yhdiste, jolla on kaava I, jossa A ja Q merkit- 30 sevät samaa kuin edellä ja Rx ja R3 ovat vetyatomeja, saa-♦' tetaan reagoimaan kloorimetyylipivalaatin kanssa sopivan emäksen läsnä ollessa, (ii) kaavan I mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi, joissa Rt on C1_4-alkyyli, R3 on -CH20C(0)C(CH3)3 ja A ja 35. merkitsevät samaa kuin edellä kaavan I määrittelyn yh- 83 101302 teydessä, yhdiste, jolla on kaava I, jossa A, Q ja Rx merkitsevät samaa kuin edellä ja R3 on vety, saatetaan reagoimaan kloorimetyylipivalaatin kanssa sopivan emäksen läsnä ollessa, 5 (iii) kaavan I mukaisten yhdisteiden valmistamisek si, joissa Rx on vety, R3 on -CH20C(0)C(CH3)3 ja A ja Q merkitsevät samaa kuin edellä kaavan I määrittelyn yhteydessä, yhdiste, jolla on kaava I, jossa A, Q ja R3 merkitsevät samaa kuin edellä ja Rx on C^-alkyyli, saatetaan 10 reagoimaan emäksen kanssa, tai (iv) kaavan I mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi, joissa A on NCOCF3 ja Q, Rx ja R3 ja n merkitsevät samaa kuin edellä kaavan I määrittelyn yhteydessä, kaavan I mukainen yhdiste, jossa A on NH ja Q, Rj ja R3 merkitsevät 15 samaa kuin edellä, saatetaan reagoimaan trifluoriasetan-hydridin tai -kloridin kanssa.

6. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan [4S- [4a, 7a(R*), 12b3] ] -7- [ (1-karboksimetyyli-l-oksosyklo-pentaani) me tyyli amino] -1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-okso-pyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappo. 85 101302