FI100800B

FI100800B - Menetelmä terapeuttisesti aktiivisten tetrahydroindenoindoliyhdisteide n valmistamiseksi

Info

Publication number: FI100800B
Application number: FI915999A
Authority: FI
Inventors: Malcolm Sainsbury; Howard G Shertzer
Original assignee: Univ Bath; Univ Cincinnati
Priority date: 1989-06-22
Filing date: 1991-12-19
Publication date: 1998-02-27
Also published as: WO1990015799A1; EP0409410A1; PT94468B; IE902247A1; FI915999A0; RO111573B1; ATE135688T1; IL94830A; DD297960A5; IE74682B1; HRP920903A2; SE8902274D0; KR920702679A; SI9011223B; BG60317B2; IS3590A7; LV10253A; MX21244A; RU2104270C1; YU122390A

Description

100800

Menetelmä terapeuttisesti aktiivisten tetrahydroindenoindoliyhdisteiden valmistamiseksi - Förfarande för framställning av terapeutiskt aktiva tetrahydroindenoindolför-eningar 5

Keksintö koskee menetelmää terapeuttisesti aktiivisten tetrahydroindenoindoliyhdis-teiden valmistamiseksi. Keksintö liittyy hydrofobisen antioksidantin uuteen tyyppiin, joka perustuu indenoindolirakenteeseen, joka on erittäin tehokas pelkistämään, so. sammuttamaan vapaita radikaaleja lipideissä tai lipidien kaksoisfaaseissa kat-10 kaisten tällä tavoin lipidien hapettumisprosessin peroksidiyhdisteiksi ja ehkäisten siitä aiheutuvia tiloja ja sairauksia.

Jotkin biologiset prosessit synnyttävät pysyviä tai vähemmän pysyviä välituotteita, jotka sisältävät parittoman elektronin, joka joko voidaan luovuttaa tai johon voi liit-15 tyä jokin lisäelektroni ympäristöstä. Tällaisia välituotteita kutsutaan vapaiksi radikaaleiksi ja niitä voi syntyä erilaisissa entsymaattisissa tai ei-entsymaattisissa reaktioissa, joista eräät ovat elintärkeitä kehon toiminnalle, esim. ribonukleosididifos-faattien pelkistyminen DNA-synteesille ja prostaglandiinien muodostuminen prosta-glandiinien synteesireaktiossa. Viimeksi mainittu on olennaisen tärkeä tulehdusvas-20 teelle, joka seuraa solun tuhoutumista, ja monissa muissa toiminnoissa. Muita radi-kaalireaktioita ovat myeloperoksidaasireaktio neutrofiileissä ja makrofageissa, jotka tuhoavat bakteereita ja muita sisään tunkeutuvia partikkeleita, ja elektronin siirtyminen mitokondrioiden soluhengitysketjussa. Useimmat organismit sisältävät kemiallisia antioksidantteja, kuten α-tokoferolia (E-vitamiinia), askorbiinihappoa ja erilaisia : 25 radikaaleja ja peroksideja inaktivoivia entsyymejä, esim. superoksididismutaasia, katalaasia ja glutationiperosidaasia.

Erityyppisten vapaiden radikaalien katsotaan yhä useammin liittyvän moniin tiloihin ja sairauksiin, kuten iskeemisiin tai reperfuusiovaurioihin, ateroskleroosiin, trom-30 boosiin ja emboliaan, allergisiin/tulehdustiloihin, kuten keuhkoastmaan ja nivelreumaan, Alzheimerin tautiin, Parkinsonin tautiin ja vanhenemiseen, harmaakaihiin, diabetekseen, kasvaimiin ja kasvainten vastaisten tai immunosuppressiivisten aineiden tai kemikaalien toksisuuteen liittyviin tiloihin. Eräs mahdollinen selitys näihin tiloihin ja sairauksiin on, että, tuntemattomista syistä, vapaiden radikaalien aiheutta-35 miltä tuhoilta suojaavat endogeeniset suoja-aineet eivät ole riittävän aktiivisia suojaamaan kudosta radikaalien aiheuttamilta vaurioilta. Radikaalien liiallisen muodostumisen aiheuttama lipidien hapettuminen peroksidiyhdisteiksi saattaa muodostaa vaurion erään merkittävän tapahtumiskulun edellä mainituissa tiloissa ja sairauk- 100800 2 sissa. Lisäantioksidanttien, jotka estävät radikaalireaktioita, esim. lipidiperoksidaa-tiota, antaminen voisi siten olla eräs tie estää tai parantaa edellä mainittuja tiloja tai sairauksia. Esillä olevassa keksinnössä kuvataan uusia antioksidantteja, jotka ovat indenoindolityyppiä, joka täyttää sekä sen vaatimuksen, että antioksidantit kasaan-5 tuvat solukalvoihin, toisin sanoen ne ovat tarpeeksi hydrofobisia, että sen vaatimuksen, että ne mahdollisesti estävät lipidien hapettumista peroksidiyhdisteiksi. Nämä uudet antioksidantit ovat hyvinkin vertailukelpoisia muiden antioksidanttien, esim. α-tokoferolin, kanssa.

10 N-metyyli-4b,5,9b, 10-tetrahydroindeno[ 1,2-b]indolia kuvataan julkaisussa J. Chem.

Soc. Chem. Commun., s. 647-48, (1981).

4b,5,9b,10-tetrahydro-9b-etyyli-indeno[l,2-b]indolia kuvataan teoksessa Beilsteins Handbuch der Organischen Chemie, 4:e Auflage, It. 20 Eli, s. 310-311 (1953). Vas-15 taava N-asetyyliyhdiste tunnetaan julkaisusta Annalen Der Chemie, 461, s. 27-46 (1928).

Keksintö koskee näin ollen menetelmää terapeuttisesti aktiivisen tetrahydroindeno-indolin valmistamiseksi, jolla on kaava IA (ΤΗΠ) tai kaavan IB (iso-THII) 20 R6 Ri p2 R7 R6 R10 r5xX^xJvrs r5nX_r_Jyr9 r‘Vy^Yvta' R3 k R10 R3 R R« R7

IA IB

25 joissa [ R on vety, alkyyliryhmä tai COR^,

Rl, R^, Rl 1 ja Rl2 ovat muista riippumatta vetyjä tai alempi alkyyliryhmiä, R3, R4, r5 ja RÖ ovat muista riippumatta vetyjä, hydrokseja, halogeeneja, alempi 30 alkyyliryhmiä tai alempi alkoksiryhmiä, mono- tai di-alempi alkyyliaminoryhmiä, NH2taiNR13COR14, 100800 3 r7, r8, r9 ja RIO ovat muista riippumatta vetyjä, hydrokseja, alempi alkyyliryh-miä, alempi alkoksiryhmiä, mono- tai di-alempi alkyyliaminoryhmiä, NH2 tai NR13CORl4

Rl3, r!4 ja r15 ovat muista riippumatta vetyjä tai alempi alkyyliryhmiä, 5 edellyttäen, että: i) kun R on metyyli kaavassa IA, ainakin yksi radikaaleista r!-R12 0n muu kuin vety, 10 ii) kun R on vety tai asetyyli ja R11 on etyyli kaavassa IA, ainakin yksi radikaaleista rI.rIO tai r12 on muu kuin vety; tai sen enantiomeerien tai suolojen valmistamiseksi.

On todettu, että yhdisteet, joilla on kaavojen IA (THII) ja IB (iso-THII) mukaiset 15 tetrahydroindenoindolirakenteet, ovat tehokkaita lipidiperoksidaatioprosessin estäjinä ja niitä voidaan käyttää antioksidantteina lääkehoidossa. IA tai IB voivat esiintyä raseemisena seoksena tai enantiomeerimuodossa.

Esillä olevan keksinnön mukaisten indeno- ja iso-indenoindolirakenteiden renkaiden 20 numerointi on seuraavanlainen.

Indenoindolirakenne

H H

aa 9b^10XLO4^r^ I I 1 1

H

25 I 4b,5,9b, 10-tetrahydroindeno[ 1,2-b]indoli (THII) 4 100800

Iso-indenoindolirakenne « C10a 10b run i

H H H

5 5,5A,6,10b-tetrahydroindeno[2, l-b]indoli (iso-THII)

Alkyyliryhmä radikaalin R määritelmässä on jokin alkyyliryhmä, jossa on 1-24 hiiliatomia, esim. metyyli, etyyli, n-propyyli, iso-propyyli, n-butyyli, sek-butyyli, tert-10 butyyli, pentyyli, heksadekyyli, oktadekyyli.

Termi "alempi" tämän keksinnön mukaisessa yhdisteessä olevien substituenttien määritelmässä tarkoittaa, että hiiliatomien lukumäärä on enintään 6, suositeltavim-min enintään 4.

15

Alempi alkyyliryhmä substituenttien Rl, R^, r3, r4? r5? r6 r7? r8 r9 r10 Rll,Rl25Rl3Rl4jaRl5 määritelmässä on jokin alkyyliryhmä, jossa on 1-6 hiiliatomia, suositeltavammin 1-4 hiiliatomia, esim. metyyli, etyyli, n-propyyli, iso-propyyli, n-butyyli, sek-butyyli tai tert-butyyli, suositeltavimpia ovat metyyli ja 20 etyyli.

Alempi alkoksiryhmä substituenttien R^, r4, r5 ja r6 r7 r8 r9 ja r10 määritelmässä on jokin alkoksiryhmä, jossa on 1-6 hiiliatomia, suositeltavammin 1-4 hiili-atomia, esim. metoksi, etoksi, n-propoksi, isopropoksi, n-butoksi, sek-butoksi tai 25 tert-butoksi, suositeltavimpia ovat metoksi ja etoksi.

Halogeeni substituenttien R^, r4} r5 ja r6 määritelmässä on kloori, bromi, jodi tai ... fluori.

30 Mono- tai di-alempi alkyyliaminoryhmiä substituenttien R^, R^, R^, R6, R^, R8, R^ ja R^® määritelmässä ovat metyyliamino, dimetyyliamino, etyyliamino, dietyy-liamino, propyyliamino, dipropyyliamino, butyyliamino, dibutyyliamino, suositeltavimpia ovat etyyliamino tai dietyyliamino.

100800 5

Suositeltavimpia keksinnön mukaisten yhdisteiden ryhmiä ovat sellaiset, joissa R,

Rl, R.2, r4; r6 ja RlO 0Vat vetyjä ja R^ ja/tai R^ ovat alempi oksiiyhmiä, erityisesti metokseja, ja/tai R^, R^, R^, R^, Rl 1 ja/tai R*2 ovat alempi alkyyliryhmiä, erityisesti metyylejä, etyylejä, i-propyylejä, ja sellaiset yhdisteet, joissa R^ ja/tai R** 5 ovat mono- ja di-alkyyliaminoryhmiä, erityisesti etyyliaminoja tai dietyyliaminoja.

Suositeltavimpia kaavan IA tai IB mukaisia tetrahydroindenoindoliyhdisteitä, joilla on antioksidanttiaktiivisuus, ovat seuraavat: 10 cis-4b,5,9b,10-tetrahydro-indeno[l,2-b]indoli cis-4b,5,9b, 10-tetrahydro-6,8-dimetyyli-indeno[ l,2-b]indoli cis-4b,5,9b,10-tetrahydro-5,8-dimetyyli-indeno[l,2-b]indoli cis-4b,5,9b, 10-tetrahydro-8-metyyli-indeno[ 1,2-b]indoli cis-4b,5,9b, 10-tetrahydro-4b,6,8,9b-tetrametyyli-indeno[ 1,2-b]indoli 15 cis-4b,5,9b, 10-tetrahydro-8-isopropyyli-indeno[ 1,2-b]indoli cis-4b, 5,9b, 10-tetrahydro-8-metoksi-5-metyyli-indeno[ 1,2-b]indoli cis-4b,5,9b, 10-tetrahydro-8-metoksi-indeno[l,2-b]indoli cis-4b,5,9b, 10-tetrahydro-10,10-dimetyyli-indeno[l,2-b]indoli cis-4b, 5,9b, 10-tetrahydro-9b-metyyli-indeno[ 1,2-b]indoli 20 cis-4b,5,9b, 10-tetrahydro-4b,9b-dimetyyli-indeno[ l,2-b]indoli cis-4b,5,9b, 10-tetrahydro-4b,5,9b-trimetyyli-indeno[ 1,2-b]indoli cis-4b, 5,9b, 10-tetrahydro-2-metoksi-1,3-dimetyyli-indeno[ 1,2-b]indoli cis-4b,5,9b, 10-tetrahydro-2-metoksi-l,3-dimetyyli-8-isopropyyli[ l,2-b]indoli cis-4b,5,9b, 10-tetrahydro-4b-metyyli-indeno[ l,2-b]indoli 25 cis-4b,5,9b, 10-tetrahydro-2-hydroksi-l,3-dimetyyli-8-isopropyyli-indeno[l,2-b]indoli cis-4b,5,9b, 10-tetrahydro-2-hydroksi-1,3-dimetyyli-indeno[ 1,2-b]indoli cis-4b,5,9b, 10-tetrahydro-4b,8,9b-trimetyyli-indeno[ 1,2-b]indoli cis-4b,5,9b, 10-tetrahydro-8-isopropyyli-4b,9b-dimetyyli-indeno[ 1,2-b]indoli cis-4b,5,9b,10-tetrahydro-8-isopropyyli-4b-metyyli-indeno[l,2-b]indoli 30 cis-4b,5,9b, 10-tetrahydro-2,8-dimetoksi-1,3-dimetyyli-indeno[ 1,2-b]indoli cis-4b,5,9b, 10-tetrahydro-4b,5,8,9b-tetrametyyli-indeno[ 1,2-b]indoli cis-4b,5,9b, 10-tetrahydro-8-tert-butyyli-indeno[ l,2-b]indoli cis-4b,5,9b, 10-tetrahy dro-8-metoksi-7,9-dimetyyli-indeno[ 1,2-b]indoli cis-4b,5,9b, 10-tetrahydro-8-metoksi-6-metyyli-indeno[ 1,2-b]indoli 35 cis-4b,5,9b, 10-tetrahydro-8-dietyyliamino-5-etyyli-indeno[ 1,2-b]indoli cis-4b,5,9b, 10-tetrahydro-2-dietyyliamino-indeno[ l,2-b]indoli cis-4b,5,9b, 10-tetrahydro-8-tert-butyyli-4b-metyyli-indeno[ 1,2-b]indoli cis-4b,5,9b, 10-tetrahydro-8-fluori-indeno[ 1,2-b]indoli 100800 6 cis-5,5a,6,10b-tetrahydroindeno[2, l-b]indoli cis-5,5a,6,10b-tetrahydro-9-metoksi-indeno[2,1 -bjindoli cis-5,5a,6,10b-tetrahydro-9-isopropyyli-indeno[2, l-b]indoli.

5 Kaavan IA ja IB mukaiset yhdisteet voivat esiintyä sellaisinaan tai farmaseuttisesti hyväksyttävinä suoloina.

Kun kysymyksessä ovat yleisen kaavan IA ja IB mukaiset yhdisteet, jotka ovat asymmetrisiä, sekä puhtaat enantiomeerit, enantiomeerien seokset että raseemiset 10 seokset sisältyvät esillä olevan keksinnön suoja-alaan.

Farmaseuttiset valmisteet

Kaavan IA tai IB mukaisia yhdisteitä annetaan tavallisesti suun kautta, rektaalisesti, dermaalisesti tai injektiona farmaseuttisina valmisteina, jotka sisältävät tehoaineen 15 joko vapaana emäksenä tai farmaseuttisesti hyväksyttävänä ei-toksisena happoaddi-tio-suolana, esim. hydrokloridina, hydrobromidina, laktaattina, asetaattina, fosfaattina, sulfaattina, sulfamaattina, sitraattina, tartraattina, oksalaattina ja senkaltaisina jossakin farmaseuttisesti hyväksyttävässä annosmuodossa. Annosmuoto voi olla jokin kiinteä, puolikiinteä tai nestemäinen valmiste. Tavallisesti tehoaine muodostaa 20 0,1-99 paino-% valmisteesta, tarkemmin sanottuna 0,5-20 paino-% valmisteista, jotka ovat tarkoitetut annettaviksi ruiskeina, ja 0,2-50 paino-% valmisteista, jotka sopivat suun kautta antoon. Dermaalisessa annossa käytetään tavallisesti 0,1-5 paino-% tehoainetta jossakin sopivassa kantajassa.

25 Farmaseuttisten valmisteiden, jotka sisältävät jonkin kaavan I mukaisen yhdisteen suun kautta antoa varten tarkoitetun annosyksikön muodossa, valmistamiseksi valittu yhdiste voidaan sekoittaa johonkin kiinteään täyteaineeseen, esim. laktoosiin, sakkaroosiin, sorbitoliin, mannitoliin, tärkkelyksiin, kuten perunatärkkelykseen, maissitärkkelykseen tai amylopektiiniin, selluloosajohdoksiin, johonkin sideainee-30 seen, kuten gelatiiniin tai polyvinyylipyrrolidoniin, ja johonkin voiteluaineeseen, kuten magnesiumstearaattiin, kalsiumstearaattiin, polyetyleeniglykoliin, vahoihin, parafiiniin ja vastaavanlaisiin aineisiin, ja sitten puristaa tableteiksi. Jos tarvitaan päällystettyjä tabletteja, ytimet, jotka on valmistettu edellä kuvatulla tavalla, voidaan päällystää väkevällä sokeriliuoksella, joka voi sisältää esim. arabikumia, gelatiinia, 35 talkkia, titaniumdioksidia ja vastaavanlaisia aineita. Vaihtoehtoisesti tabletti voidaan päällystää jollakin alaan perehtyneen tuntemalla polymeerillä, joka on liuotettu johonkin helposti haihtuvaan orgaaniseen liuotteeseen tai orgaanisten liuotteiden seokseen. Näihin päällysteisiin voidaan lisätä väriaineita, jotta eri tehoaineita tai eri- 100800 7 laisia aktiiviyhdisteiden määriä sisältävät tabletit pystytään helposti erottamaan toisistaan.

Pehmeiden gelatiinikapseleiden valmistamiseksi aktiiviaine voidaan sekoittaa esim.

5 johonkin kasviöljyyn tai polyetyleeniglykoliin. Kovat gelatiinikapselit voivat sisältää tehoainerakeita, joissa käytetään joko edellä mainittuja tabletteihin tarkoitettuja täyteaineita, esim. laktoosia, sakkaroosia, sorbitolia, mannitolia, tärkkelyksiä (esim. perunatärkkelystä, maissitärkkelystä tai amylopektiiniä), selluloosajohdoksia tai gelatiinia. Lääke voidaan lisätä myös nestemäisinä tai puolinestemäisinä muotoina 10 koviin gelatiinikapseleihin.

Rektaalisesti annettavia annosyksikköjä voivat olla liuokset tai suspensiot tai ne voidaan valmistaa peräpuikoiksi, jotka sisältävät tehoaineen sekoitettuna johonkin neutraaliin rasvapohjaan, tai rektaalisesti annettaviksi gelatiinikapseleiksi, jotka si-15 sältävät tehoaineen sekoitettuna kasviöljyyn tai parafiiniöljyyn.

Suun kautta annettavat nestemäiset valmisteet voivat olla siirappeina tai suspensioina, esim. liuoksina, jotka sisältävät noin 0,2 - noin 20 paino-% tässä kuvattua tehoainetta, lopun ollessa sokeria ja etanolin, veden, glyserolin ja propyleeniglykolin 20 seosta. Tällaiset nestemäiset valmisteet voivat valinnaisesti sisältää väriaineita, maun parannusaineita, sakkariinia ja karboksimetyyliselluloosaa paksunnosaineena tai muita alaan perehtyneen tuntemia täyteaineita.

Parenteraalisesti ruiskeena annettavia liuoksia voidaan valmistaa tehoaineen jonkin 25 vesiliukoisen farmaseuttisesti hyväksyttävän suolan vesiliuoksena, konsentraation ollessa suositeltavimmin noin 0,5 - noin 10 paino-%. Nämä liuokset voivat sisältää myös stabilointiaineita ja/tai puskuriaineita ja ne voidaan kätevästi valmistaa erilaisiksi annosyksikköampulleiksi.

30 Keksinnön mukaisten yhdisteiden sopivia vuorokausiannoksia ihmisten terapeuttisessa hoidossa ovat noin 0,01 -100 mg kehon painokiloa kohti suun kautta annossa ja 0,001-100 mg kehon painokiloa kohti parenteraalisessa annossa.

Valmistusmenetelmä 35 Kaavan IA ja IB mukaiset yhdisteet voidaan valmistaa jollakin oheisessa patenttivaatimuksessa 1 esitetyistä menetelmistä a-j.

100800 8

Menetelmiä ΤΗΠ-ja iso-THII-yhdisteiden valmistamiseksi ei-THII- tai ei-iso-THII-materiaaleista a. 4b,5,9b, 10-tetrahydromdeno[l,2-b]indoli (ΤΗΠ, IA) ja vastaavat yhdisteet, jotka 5 sisältävät funktionaalisia ryhmiä bentseenirenkaiden atomeissa ja/tai radikaaleja C-10:ssä, kuten alempia alkyylejä, alempia alkokseja, voidaan valmistaa pelkistämällä vastaava 5,10-dihydroindeno[l,2-b]indoli (DHII) R1 R2 ^ R1 R2 ^ RV^_Xjy"' r5\J\_ΧΧΧ

T i il i. T—► .il i i T

χγγ ^Ar9 R‘Vy—YX

R3 r R10 R3 R R10 10

XIA IA

R, Rl, R2, r3, r4} r5 r65 r7 r8 r9 ja r10 ovat kuten kaavan IA yhteydessä määriteltiin.

15 5,5a,6-10b-tetrahydroindeno[2,l-b]indoli (iso-THII, IB) voidaan valmistaa vastaavasti 5,6-dihydroindeno[2,l-b]indolista (iso DHII).

DHII tai analogiset yhdisteet pelkistetään antamalla niiden reagoida sinkin tai jonkin 20 vesipitoisen epäorgaanisen hapon, kuten kloorivetyhapon, kanssa tai vielä tehokkaammin antamalla niiden reagoida jonkin booriperustaisen pelkistimen, kuten nat-riumsyanoboorihydridin, kanssa jossakin liuotteessa, usein etikkahapossa, tai BH3:n kanssa tetrahydrofuraanissa. Vaihtoehtoisesti voidaan käyttää morfoliiniboraania jossakin liuotteessa, usein tetrahydrofuraanissa tai dioksaanissa, ja jonkin vahvan 25 hapon, esim. kloorivetyhapon, läsnäollessa. Vaihtoehtoisesti voidaan käyttää jotakin trialkyylisilaania. Reaktion päättyessä tuote eristetään laimentamalla reaktioseos : vedellä, neutraloimalla ja joko suodattamalla tai liuoteuutolla. Vaihtoehtoisesti pel kistäminen voidaan suorittaa hydraamalla jollakin katalyytillä, kuten palladiumilla, tässä tapauksessa DHII-yhdiste liuotetaan johonkin sopivaan liuotteeseen, esim. eta-30 nollin, etikkahappoon tai etyyliasetaattiin. Tällaisessa tapauksessa tuote eristetään poistamalla katalyytti ja haihduttamalla liuote alipaineessa. THII ja sen kanssa analogiset yhdisteet voidaan puhdistaa kiteyttämällä jostakin sopivasta liuotteesta tai pylväskromatografialla silikaa käyttäen. DHII ja sen kanssa analogiset yhdisteet 100800 9 syntetisoidaan Fischerin indolisointireaktiolla kaavan II mukaisista fenyylihydratsii-neista ja kaavan ΠΙ mukaisista 1-indanoneista, joissa on vety. 5-alkyyli-4b,5,9b,10-tetrahydroindeno[l,2-b]indolit (N-alkyyli-THII:t) saadaan joko N-alky-loimalla vastaavat DHII-yhdisteet ennen pelkistystä tai vastaavista 5H-THII-yhdis-5 teistä suoralla N-alkyloinnilla. Molemmissa tapauksissa on suositeltavaa muodostaa tetrasyklisten amiinien välituoteanioneja käsittelemällä niitä emäksellä ennen kuin niiden annetaan reagoida jonkin alkyylihalidin tai jonkin alkyylisulfaatin kanssa.

b. 4b,5,9b, 10-tetrahydroindeno[ 1,2-b]indoli ja sen kanssa analogiset yhdisteet, 10 joissa on jokin substituentti C-9b:ssä, voidaan syntetisoida Fischerin indolisointimenetelmällä ja sen jälkeen pelkistämällä indoliniinivälituotteet (IV) R6 7 R5x i R’ R2 1 , -TT '— 15 H O R10

II III

R3 R10 R3 I R10

H

20

IV V

• e R1, R2, r3, r4? r55 r6 r7^ r8 r9 rIO ja r1 1 ovat kuten kaavan IA yhteydessä määriteltiin ja, mikäli tarkoituksenmukaista, sen jälkeen N-alkyloimalla R-halidilla 25 tai R-sulfaatilla, joissa R on kuten kaavassa IA määriteltiin.

2-substituoitujen 1-indanonien (III) tai vastaavien lähtömateriaalien, joissa on sopivia funktionaalisia substituutioryhmiä bentseenirenkaassa ja C-3:ssa, voidaan antaa 100800 10 reagoida fenyylihydratsiinien (II) kanssa joko vapaana emäksenä tai suolana, usein hydrokloridina. Tavallisesti reagenssit liuotetaan johonkin liuotteeseen, suositelta-vimmin johonkin alkoholiliuotteeseen, kuten etanoliin tai propanoliin. Eräissä tapauksissa kuumennusta ei vaadita, kun taas toisissa tapauksissa reaktioseosta joudu-5 taan kuumentamaan palautusjäähdyttäen ainakin 1 tunnin ajan. Fenyylihydratsoni-tuote voidaan eristää laimentamalla reaktioseos vedellä ja erottaa suodattamalla tai uuttamalla jollakin sopivalla liuotteella. Puhdistusta voidaan jatkaa edelleen kiteyttämällä tai kromatografialla. Viimeksi mainitussa tapauksessa pylväskromatografia silikalla riittää ja siinä voidaan käyttää useita eluointiliuotteita.

10

Fenyylihydratsonien syklisoituminen indoliniineiksi (IV) saadaan aikaan liuottamalla ne uudelleen johonkin sopivaan liuotteeseen, suositeltavimmin johonkin alkoholiin, kuten etanoliin tai propanoliin, ja käsittelemällä liuos jollakin hapolla, esim. kloorivetyhapolla, etikkahapolla tai trifluorietikkahapolla. Kuumennusta saatetaan 15 tai ei saateta tarvita. Myös muita syklisointireagensseja, mukaan lukien Lewisin hapot, kuten sinkkikloridi, tai reagensseja, jotka sisältävät fosforiatomin, esim. fosforitrikloridia, fosforioksitrikloridia, polyfosforihappoa, tai polyfosfonaatteja voidaan käyttää.

20 Jos fenyylihydratsiinien sijasta reaktioissa indanonien kanssa käytetään fenyylihydratsiinien suoloja, fenyylihydratsonivälituotteiden syklisoituminen indoliniineiksi saattaa tapahtua spontaanisti.

Eräissä tapauksissa havaitaan, että fenyylihydratsiinien ja 2-substituoitujen 1-inda-25 nonien reaktioista saadut fenyylihydratsonit tuottavat, kun niitä kuumennetaan jossakin korkean kiehumispisteen omaavassa liuotteessa, kuten dietyleeniglykolissa, vastaavia THII-johdoksia.

Indoliniinien (IV) pelkistäminen THII-johdoksiksi (V), joissa on substituentti C-30 9b:ssä, saadaan aikaan käyttämällä standardipelkistysameita, kuten natriumboori- • hydridiä jossakin sopivassa liuotteessa, kuten etanolissa. Sen jälkeen tuotteet eristetään ja puhdistetaan tavalliseen tapaan.

c. 4b,9b-dialkyyli-4b,5,9b, 10-tetrahydroindeno[ 1,2-b]indolit (VI) ja niiden kanssa 35 analogiset yhdisteet voidaan valmistaa suoraan antamalla indoliniinien (IV) reagoida litiumalkyylien (R^Li) kanssa jossakin aproottisessa liuotteessa, kuten kuivassa • tetrahydrofuraanissa.

100800 11 f R’ R2 f f R' R2 f RV^_iXJvRe r5V^-^^^V-r8

T II j ijÄ ii I I T

A^—VV r'VYI^Vv R3 R1° R3 I R10

H

IV VI

5 joissa radikaalit R.1-R.12 ovat kuten kaavan IA yhteydessä määriteltiin, ja, mikäli tarkoituksenmukaista, sen jälkeen N-alkyloimalla R-halidilla tai R-sulfaatilla, joissa R on kuten kaavassa IA määriteltiin.

d. 1 Ob-substituoidut 5,5a,6,10b-tetrahydro[2, l-b]indolit (IX) ja niiden kanssa ana-10 logiset yhdisteet voidaan syntetisoida indan-2-oneista (ΧΠ), joissa on jokin substitu-enttiryhmä C-3:ssa, antamalla niiden reagoida sopivien fenyylihydratsiinien (II) kanssa samoissa olosuhteissa, joita kuvattiin indoliniinien (IV) valmistuksen yhteydessä. Välituotteet ovat vastaavia indoliniinejä (VIII), jotka, kun ne liuotetaan johonkin sopivaan liuotteeseen, usein etanoliin, ja niiden annetaan reagoida jonkin 15 pelkistävän aineen, kuten natriumboorihydridin, kanssa, tuottavat iso-THII-yhdistei-tä (IX), joissa on jokin alkyylisubstituentti 10b-asemassa. Nämä yhdisteet voidaan eristää reaktioseoksista laimentamalla ja suodattamalla tai uuttamalla jollakin sopivalla liuotteella.

R. f R" f R)^'y H> * KXX.—- r3 I «νΐ, r

20 H R

: π xii 100800 12 R6 R10 R6 R1° R R K R7 R3 R7

H

VIII IX

Rl, R.2, r3, r4 r5 r6 r7^ r8 r9 rIO r1 1 ovat kuten kaavan IB yhteydessä 5 määriteltiin.

e. Iso-THII-yhdisteet (X), joissa on alkyylisubstituentteja C-5a:ssa ja C-10b:ssä, voidaan valmistaa vastaavista indoliniineistä (VIII) antamalla niiden reagoida al-kyylilitiumien (R^Li) kanssa noudattaen samoja menettelytapoja, joita kuvattiin 10 edellä 4b,9b-dialkyloitujen THII-yhdisteiden (VI) valmistuksen yhteydessä.

R6 p10 ρβ p10

r\JL f1 ly Yirj ΓΎ-^ |—kX

R R R R7 R3 I R7 rl VIII x 15

Rl-Rl2 ovat kuten kaavan IB yhteydessä määriteltiin.

Menetelmiä THII- tai iso-THII-yhdisteiden valmistamiseksi muita THII- tai iso-ΤΗΠ-yhdisteitä muuntamalla 20 f. 5-alkyyli-THII- tai 6-alkyyli-iso-THII-johdoksia syntetisoidaan N-alkyloimalla vastaavia 5H-THII- tai 6H-iso-THII-yhdisteitä liuotettuna johonkin aproottiseen liuotteeseen, esim. asetoniin, asetonitriiliin, dimetyylisulfoksidiin (DMSO), dime-tyyliformamidiin (DMF) niin haluttaessa, mutta suositeltavimmin jonkin vahvan 25 emäksen, esim. natriumhydridin, läsnäollessa, ja reaktioseos käsitellään sen jälkeen jollakin alkyylihalidilla tai alkyylisulfaatilla. Vaihtoehtoisesti vastaava 5-alkyyli-DHII- tai 6-alkyyli-iso-DHII-yhdiste voidaan pelkistää antamalla sen reagoida sinkin ja jonkin vesipitoisen epäorgaanisen hapon, kuten kloorivetyhapon, kanssa tai 100800 13 vielä tehokkaammin pelkistämällä jollakin booriperustaisella pelkistävällä aineella, kuten natriumsyanoboorihydridillä jossakin liuotteessa, usein etikkahapossa, tai BH3:llä tetrahydrofuraanissa. Vaihtoehtoisesti voidaan käyttää morfoliiniboraania jossakin liuotteessa, usein tetrahydroiuraanissa tai dioksaanissa, ja jonkin vahvan 5 hapon, esim. kloorivetyhapon, läsnäollessa. Vaihtoehtoisesti voidaan käyttää jotakin trialkyylisilaania. Reaktion päätyttyä tuote eristetään laimentamalla vedellä ja joko suodattamalla tai liuoteuutolla. Vaihtoehtoisesti pelkistys voidaan suorittaa hydraa-malla jollakin katalyytillä, kuten palladiumilla, jolloin 5-alkyyli-DHII- tai 6-alkyyli-iso-DHII-yhdiste liuotetaan johonkin sopivaan liuotteeseen, esim. etanoliin, etikka-10 happoon tai etyyliasetaattiin. Tällaisessa tapauksessa tuote eristetään poistamalla katalyytti ja haihduttamalla liuote alipaineessa. 5-alkyyli-THII- tai 6-alkyyli-iso-THII-yhdisteet voidaan puhdistaa kiteyttämällä jostakin sopivasta liuotteesta tai pylväskromatografialla silikaa käyttäen.

15 g. 5-alkyyli-THII-tai 6-alkyyli-iso-THII-yhdisteet syntetisoidaan yksinkertaisesti pelkistämällä vastaavia 5-asyyli- tai 6-asyylijohdoksia standardimenetelmillä esim. käyttäen litiumaluminiumhydridiä.

h. THII- tai iso-THII-yhdisteitä, joissa on alkyyliaminoiyhmiä R^-R^rssa ja/tai R^-20 Reissä, voidaan valmistaa vastaavista 5-asyyli-THII- tai 6-asyyli-iso-THII-nitro- yhdisteistä standardinmukaisilla pelkistystekniikoilla, esim. käyttäen TiCl3/HCl:a, ja sen jälkeen yhdellä standardinmukaisella N-alkyloinnilla, ja haluttaessa sen jälkeen 5- tai 6-asyyliryhmien happamalla hydrolyysillä 5- tai 6-substituoitumattomien yhdisteiden aikaansaamiseksi. Nitroyhdisteitä voidaan käyttää joko valmistettuina 25 vastaavista DHII- tai iso-DHII-yhdisteistä edellä kohdissa a. tai d. esitettyjen menetelmien mukaan tai nitraamalla sopivasti substituoituja THII- tai iso-THII-yhdisteitä.

i. Hydroksisubstituoituja yhdisteitä voidaan valmistaa vastaavista alkoksisubstituoi-duista yhdisteistä standardin mukaisilla eetteridealkylointimenetelmillä, esim. käyt- 30 täen erilaisia Lewisin happoja.

j. 4b-alkyyli-THII- ja -iso-THII-yhdisteitä, joissa R^ on alempi alkyyliiyhmä ja R, r!-RH ovat kuten kaavassa I määriteltiin, voidaan valmistaa vastaavista 4b-substi-tuoitumattomista analogisista yhdisteistä sekvenssillä, joka käsittää metalloinnin, 35 esim. käyttäen butyylilitiumia, karbonoinnin hiilidioksidilla, toisen suunnatun metalloinnin, esim. käyttäen butyylilitiumia, ja alkyloinnin R^-halidilla tai R ^-sulfaatilla, minkä jälkeen saatu N-karboksyloitu välituote lopuksi hydrolysoidaan.

100800 14

Menetelmiä lähtömateriaalien, kuten 5,10-dihydroindeno[l,2-b]indolin (DHII) ja 5,6-dihydroindeno[2,l-b]indolin ja niiden kanssa analogisten yhdisteiden, jotka sisältävät funktionaalisia ryhmiä, valmistamiseksi kuvataan hakemuksessa PCT/GB90/00948 (WO 90/15800).

5

Farmakologiset ominaisuudet

Esillä olevassa keksinnössä kuvatut indenoindolit ovat hydrofobisia ja stabiileja rakenteita, jotka muodostavat kationeja, pysyviä kationiradikaaleja tai radikaaleja ha-pettuessaan. Ne ovat potentiaalisia antioksidantteja mitattuna Fe2+-askorbaatilla 10 indusoidun lipidiperoksidaation estolla in vitro, lC5Q-arvon ollessa niinkin alhainen kuin 10 nM. Kaavojen (IA) ja (IB) mukaiset yhdisteet estävät tehokkaasti lipopro-teiinien hapettumista ihmisen plasmassa kaniinin sileiden lihassolujen tai hiiren peritoneaalisten makrofagien läsnäollessa. Ne estävät myös iskeemisiä/reperfuusio-vaurioita eristetyssä perfusoidussa rotan sydämessä ja suojaavat hiilitetrakloridin, 15 asetaminofenin, metyylimetaanisulfonaatin, menadionin, t-butyylihydroperoksidin ja N-metyyli-N 1-nitro-N-nitrosoguanidiinin indusoiman maksavaurion hiirissä tai eristetyissä rotan maksasoluissa.

Nämä ominaisuudet antavat aiheen ehdottaa, että kaavojen (IA) ja (IB) mukaisia ra-20 kenteita voidaan käyttää ehkäisemään tai hoitamaan iskeemisiä tai reperfuusiovau-rioita, erityisesti aivo-ja sydäniskemiaa/infarktia, ateroskleroosia, tromboosia ja emboliaa, Parkinsonin tautia, vanhenemista, Alzheimerin tautia, kasvaimia ja kasvainten vastaisten lääkkeiden ja immunosuppressiivisten aineiden toksisuutta, ja tulehdusta, mukaanlukien allergiset/tulehdustilat, kuten keuhkoastma ja nivelreuma.

25 Muita mahdollisia sovelluksia ovat kemiallisten myrkkyjen tai säteilyvaurioiden kemoehkäisy. UV-valo ei merkittävästi aktivoi indenoindoliyhdisteitä, minkä vuoksi niitä voidaan käyttää ihonsuojatuotteissa. Eräs toinen indenoindoliyhdisteiden mielenkiintoinen ja tärkeä piirre on niiden kyky stabiloida kalvoja.

30 Farmakologisia kokeita ; Keksinnön mukaisten yhdisteiden tärkein piirre on niiden tehokkuus vapaiden radi kaalien sieppaajina eli antioksidantteina. Käytettiin erästä tutkimussysteemiä, jolla mitataan kaavojen (IA) ja (IB) mukaisten yhdisteiden konsentraatiota, joka tarvitaan estämään lipidiperoksidaatio 50-prosenttisesti (IC50). Lipidiperoksidaatiotutkimus 35 kuvataan alla ja tiedot esitetään taulukossa 1. Muita alla kuvattuja kokeita ovat ve ren punasolujen hauraustesti, jota käytetään mittaamaan solukalvojen stabiloitumista • indenoindolien avulla (taulukko 2), ja indenoindolien suojaavaa vaikutusta N-me- tyyli-N'-nitro-N-nitrosoguanidiinin (MNNG) sytotoksisuutta vastaan rotan maksaso- 100800 15 luissa (taulukko 3). MNNG on erittäin sytotoksinen aine, jonka vaikutusmekanismi saattaa aiheuttaa solukalvon radikaalivälitteisen destabiloitumisen.

1. Askorbaatti/Fe2+-riippuvainen lipidiperoksidaatio 5

Ferro/askorbaattilipidiperoksidaatiosysteemiä varten 6,25 ml 0,1 M kaliumfosfaat-tipuskuria (KPj), pH 7,4, lisättiin 12,5 mg:aan kuivattuja soijapapufosfolipidejä. Kim suspensiota oli huuhdeltu argonilla 2 minuuttia, se eristettiin viidellä kerroksella Parafilmiä ja sitä sonikoitiin, kunnes suspensio oli läpinäkyvää. Valmiin reak-10 tioseoksen muodostivat 200 pg/ml fosfolipidiä, 10 μΜ FeNH4(S04)2:a tai

Fe(NH4)2(S04)2'aja 100 μΜ askorbiinihappoa 0,1 M KPj:ssa (pH 7,4) ja testattava antioksidantti asetonissa tai DMSO:ssa. Kantajan tilavuus ei ylittänyt kertaakaan 1 % koko tilavuudesta. Reaktio käynnistettiin lisäämällä askorbiinihappoa plus rautaa. Reaktion annettiin jatkua huoneenlämpötilassa ravistusvesihauteessa 30 mi-15 nuuttia ja sitten se pysäytettiin lisäämällä 10 μΜ 0,5 M butyylihydroksitolueenia DMSO.ssa. Edellä selostettua menettelyä ja sitä seuraavaa 2-tiobarbituurihappore-aktiivisen materiaalin määritystä kuvataan julkaisussa: Shertzer, H.G. ym., Bio-chem. Pharmacol. 37, 333 (1988). Taulukossa 1 on esitetty indenoindolien ja a-to-koferolin vaikutukset askorbaatti/Fe2+-riippuvaiseen lipidiperoksidaatioon.

20

Taulukko 1

Yhdisteet PIC50 25 2,8-dimetoksi-l,3-dimetyyli-THII 8,1 8-metoksi-6-metyyli-THII 8,0 2-hydroksi-l,3-dimetyyli-THII 7,9 8-isopropyyli-4b,9b-dimetyyli 7,7 8-isopropyyli-4b-metyyli-THII 7,7 30 9-metoksi-iso-THII 7,7 4b,8,9b-trimetyyli-THII 7,6 8- fluori-THII 7,5 4b,6,8,9b-tetrametyyli-THII 7,4 9- isopropyyli-iso-THII 7,4 35 6,8-dimetyyli-THII 7,3 8-isopropyyli-THII 7,3 4b,9b-dimetyyli-THII 7,2 2-metoksi-l,3-dimetyyli-THII 7,2 100800 16 2-dietyyliamino-THII 7,2 8-metyyli-THII 7,1 4b-metyyli-THII 7,1 8-dietyyliamino-5-etyyli-THII 7,1 5 8-metoksi-5-metyyli-THII 7,0 9b-metyyli-THII 7,0 THII 6,9 iso-ΤΗΠ 6,9 10,10-dimetyyli-THII 6,9 10 4b,5,8,9b-tetrametyyli-THII 6,8 5, 8-dimetyy li-THII 6,4 6-metyyli-iso-THII 6,1 5-metyy li-THII 6,1 α-tokoferoli (E-vitamiini) 5,0 15 2. Kalvon stabiloituminen veren punasoluissa

Indenoindolien stabilointivaikutus kalvoihin nähden tutkittiin veren punasolujen haurauskokeella. Rotat nukutettiin 65 mg:lla pentobarbitaalia ruumiin painokiloa 20 kohti intraperitoneaalisella ruiskeella. Verinäytteitä otettiin hepariinilla käsitellyllä ruiskulla vasemmasta kammiosta ja laimennettiin 20-kertaisesti puskurilla, joka sisälsi 140 mM NaCl:a, 10 mM natriumsitraattia ja 5 mM glukoosia (pH 7,4) 0°C:ssa. Laimennettu veri pidettiin jään päällä. 0,75 ml:n erä verta lisättiin 4 ml:n kyvettiin, joka sisälsi 10 μΐ DMSO:a tai 10 μΐ antioksidanttia liuotettuna DMSO-kantajaan.

25 Kun sitä oli sekoitettu varovasti 1 minuutti, 0,75 ml 0,9 % NaCl:a tai H20:a lisättiin kyvettiin voimakkaasti pipetoiden ja absorbanssi 656 nm:llä rekisteröitiin Beckman DU-70-spektrofotometrillä. Kun H20:a lisättiin ilman stabilointiainetta, absorbanssi laski 15 sekunnissa arvoon 0,8. Kun H20:n sijasta lisättiin NaCl.a, ajasta riippumattomaksi absorbanssiksi saatiin 2,2. Kun läsnä oli kasvavia konsentraatioita 30 stabilointikemikaaleja, veden lisäämisen jälkeen havaittu absorbanssin lasku väheni.

!! Osmolyysin suoja-% saatiin yhtälöstä [E(2,2-0,8)- A/(2,2-0,8)] x 100 %, kun A = 2,2 miinus absorbanssin lasku, kun vettä lisätään kemikaalin jonkin tunnetun kon-sentraation läsnäollessa. Suoja-%: sta piirrettiin sitten käyrä koskien käsiteltävän kemikaalin useita konsentraatioita. Punaisten verisolujen haurauden suojaindeksi-35 arvo (RBC-PIV) on tämän käyrän lineaarinen alenema ilmaistuna suojaprosenttina osmolyysiä vastaan/μΜ suoja-ainetta. Taulukossa 2 on esitetty RBC-PIV-arvot eri indenoindoleista ja a-tokoferolista.

Taulukko 2 100800 17

Yhdiste RBC-PIV (%/uM) 8- metoksi-THII 0,21 5 iso-THII 0,38 THII 0,41 9- metyyli-THII 0,48 5-metyyli-THII 0,64 a-tokoferoli 0,10 10 3. Suoja MNNG:n sytotoksisia vaikutuksia vastaan hepatosyyteissä

Indenoindolien suojaavat vaikutukset MNNG-indusoitua sytotoksisuutta vastaan tutkittiin rotan hepatosyyteillä. Hepatosyytit valmistettiin Sprague-Dawley-urosro-15 tista kollagenaasikäsittelyllä, jota ovat alunperin kuvanneet Zahlten ja Stratman [Zahlten, R.N. ja Stratman, F.W., Arch. Biochem. Biophys. 163. 600 (1988)], Reitman ym. modifioinnin mukaan [Reitman, F.A., Shertzer, H.G. ja Berger, M.L., Biochem. Pharmacol. 37, 3183 (1988)]. Elinkelpoisuuden parantamiseksi solut sen-trifugoitiin 0,508 g/ml Percollin läpi (Pharmacia AB, Uppsala, Ruotsi) 137 mM.ssa 20 NaCl:a, 8,1 mM:ssa Na2HP04:a ja 1,5 mMrssa KH2P04.*a (pH 7,4). Oletettuja suoja-aineita lisättiin soluihin liuotettuna DMSO.iin siten, että DMSO:n lopullinen konsentraatio ei koskaan ollut suurempi kuin 5 μΐ/ml solususpensiota. MNNG.a lisättiin 0,5 mM:n pitoisuuteen etanoliin liuotettuna siten, että etanolin lopulliseksi konsentraatioksi tuli 1 %; etanolilla yksinään ei ollut minkäänlaista vaikutusta. Elin-25 kelpoisuus määritettiin prosentteina soluja, jotka sulkivat pois 0,2 % trypaanisinisen. Indenoindolien ja α-tokoferolin suojavaikutukset sytotoksisuutta vastaan on esitetty taulukossa 3. Arvot tarkoittavat yhdisteen konsentraatiota, joka tarvitaan pidentämään 1 tunnilla aikaa, joka tarvitaan siihen, että MNNG tappaa 50 % elinkykyisistä soluista.

30 * Taulukko 3

Yhdiste ICsp (μΜ) iso-THII 2,0 35 THII 2,2 5-metyyli-THII 2,2 > a-tokoferyyliasetaatti 161 100800 18

Seuraavat esimerkit valaisevat keksinnön periaatetta ja sen soveltamista kuitenkaan rajoittamatta sitä niihin. Lämpötila ilmoitetaan Celsius-asteina.

Työesimerkit 5

Esimerkki 1 cis-4b.5.9b. 10-tetrahvdroindenof 1.2-blindoli

Suspensioon, joka sisälsi 5,10-dihydroindeno[l,2-b]indolia 19,16 g, 93 mmol jää-10 etikkahapossa (300 cm^), lisättiin erissä puolen tunnin kuluessa natriumsyanoboori-hydridiä (24 g, 400 mmol). Seosta sekoitettiin 3 tuntia, kunnes kaikki aine oli liuennut. Liuos kaadettiin jääveteen (500 cm^) ja sitä sekoitettiin 1 tunti boorihydridi-kompleksin hajottamiseksi. Kirkas liuos neutraloitiin huolellisesti natriumhydrok-sidilla, jolloin muodostui valkoinen saostuma. Se suodatettiin ja pestiin vedellä, 15 kunnes pesuvesissä ei ollut enää syanidi-ioneja. Kuivattaessa saatiin otsikkoyhdiste valkoisena kiinteänä aineena. Saanto: 19 g (98 %). Sp. 107°C. NMR (CDCI3) δ: 3,20 (1H, dd), 3,51 (1H, dd), 3,99 (1H, leveä), 4,18 (1H, ddd), 5,25 (1H, d), 6,60 (1H, d), 6,74 (1H, dd), 6,99 (1H, dd), 7,15-7,22 (4H, m), 7,32 (1H, d).

20 Esimerkki 2 cis-4b.5.9b. 10-tetrahvdro-5-metwli-indenoil.2-blindoli

Liekillä kuivattuun keittopulloon pantiin natriumhydridiä (60 mg, 2,5 mmol) ja tet-rahydrofuraania (THF) (5 cm^) typpikehällä suojattuna. Liikkeessä olevaan suspen-25 sioon lisättiin cis-4b,5,9b,10-tetrahydroindeno[l,2-b]indolia (500 mg, 2,4 mmol) THF:ssa (5 cm^) tiputtamalla. Reaktioseosta sekoitettiin 1 tunti, jolloin sen väri muuttui vaaleanpunaiseksi. Jodimetaania (0,2 cm^) lisättiin ja liuosta sekoitettiin seuraavaan päivään. Vettä (5 cm^) lisättiin ja THF poistettiin tyhjössä. Tällä tavoin saatu väritön kiinteä aine suodatettiin ja kuivattiin vakuumieksikkaattorissa. Tuote 30 liuotettiin 5 % etyyliasetaatti/bensiiniin (60-80°C) ja suodatettiin "flash"-silikatyy-: nyn läpi. Kun liuote oli haihdutettu vakuumissa, otsikkoyhdiste saatiin värittömänä kiinteänä aineena. Saanto: 450 mg (85 %). Sp. 76-77°C. NMR (CDCI3) δ: 3,0 (3H, s), 3,1 (1H, dd), 3,4 (1H, dd), 4,1 (1H, ddd), 4,9 (1H, d), 6,4 (1H, d), 6,7 (1H, dd), 7,1-7,5 (6H, m).

35

Esimerkki 3 cis-4b.5,9b. 10-tetrahvdro-8-metoksi-indenof 1.2-blindoli 100800 19 5,10-dihydro-8-metoksi-indeno[l,2-b]indolin (770 mg, 3,3 mmol) annettiin reagoida 5 natriumsyanoboorihydridin (1,0 g, 16 mmol) kanssa jääetikkahappoliuoksessa (17 cm^). 3o minuutin kuluttua liuos kaadettiin jää/veteen, sekoitettiin 1 tuntija neutraloitiin natriumhydroksidilla. Väritön reaktioseos uutettiin dietyylieetteriin, orgaaniset kerrokset kuivattiin (Na2SC>4) ja väkevöitiin tyhjössä. Jäännös pylväs-kromatografoitiin (10 % etyyliasetaatti/bensiini 60-80°C), jolloin saatiin otsikko-10 yhdiste värittömänä kiinteänä aineena, Saanto: 520 mg (66 %). Sp. 101°C. NMR (CDC13) δ: 3,28 (1H, dd), 3,57 (1H, dd), 3,80 (3H, s), 3,85 (1H, leveä), 4,24 (1H, dd), 5,30 (1H, d), 6,6-7,4 (7H, m).

Esimerkki 4 15 cis-4b.5.9b, 10-tetrahvdro-8-metoksi-5-metwli-indenof 1.2-blindoli Käyttäen samaa menetelmää, jota kuvattiin esimerkissä 2, cis-4b,5,9b, 10-tetrahydro-8-metoksi-indeno[l,2-b]indoli (239 mg, 1,0 mmol) metyloitiin jodimetaanilla käyttäen natriumhydridiä (25 mg, 1,1 mmol) emäksenä, THF:ssa (2 cm3). Uutettaessa 20 lopuksi (dietyylieetteriin) ja puhdistettaessa "suction flash"-kromatografialla saatiin kirkas kumimainen aine. Saanto: 158 mg (63 %), joka kiinteytyi pallokolvista toiseen tislattaessa (180°C/0,2 mmHg), jolloin saatiin otsikkotuote. Sp. 72°C.

NMR (CDCI3) δ: 2,87 (3H, s), 3,03 (1H, dd), 3,36 (1H, dd), 3,70 (3H, s), 4,08 (1H, ddd), 4,80 (1H, d), 6,28 (1H, d), 6,61 (1H, dd), 6,77 (1H, dd), 7,1-7,5 (4H, m).

25

Esimerkki 5 cis-5.5a.6.10b-tetrahvdroindenof2.1-blindoli 5,6-dihydroindeno[2,l-b]indolin (185 mg, 0,9 mmol) annettiin reagoida natriumsya-30 noboorihydridin (310 mg, 5 mmol) kanssa jääetikkahapossa (5 cm3) kuusi tuntia. Liuos kaadettiin jää veteen ja sitä sekoitettiin yksi tunti. Sitten se neutraloitiin natriumhydroksidilla ja valkoinen kiinteä aine, joka muodostui, kerättiin talteen suodattamalla, pestiin vedellä, kuivattiin ja puhdistettiin "flash"-kromatografialla [10 % EtOAc/bensiini 60-80°C, Rf 30 % EtOAc/bensiini (60-80°C) 0,6], jolloin saatiin 35 otsikkoyhdiste värittömänä kiinteänä aineena. Saanto: 81 mg (43 %). Sp. 85-86°C. !h NMR (CDCI3) δ: 3,09 (1H, dd), 3,33 (1H, dd), 3,45 (1H, leveä), 4,74 (1H, d), 4,82 (1H, ddd), 6,55 (1H, d), 6,73 (1H, ddd), 7,00 (1H, ddd), 7,1-7,4 (4H, m).

Esimerkki 6 cis-4b,5.9b. 10-tetrahvdro-10.10-dimetwli-indenon.2-blindoli 100800 20 5,10-dihydro-10,10-dimetyyli-indeno[l,2-b]indolin (1,00 g, 4,29 mmol) annettiin 5 reagoida natriumsyanoboorihydridin 1,0 g, 16 mmol) kanssa jääetikkahapossa (20 cm^) jo minuuttia. Liuos kaadettiin veteen, sitä sekoitettiin 30 minuuttia ja uutettiin dietyylieetteriin. Orgaaninen faasi pestiin 10 kertaa vedellä, kuivattiin (Na2S04), ja liuote poistettiin tyhjössä. Jäännös liuotettiin 5 % etyyliasetaatti/bensiiniin (60-80°C) ja suodatettiin "flash"-silikatyynyn läpi, jolloin saatiin, kun liuote poistettiin, 10 kumimainen tuote, joka kiinteytyi öljypumpulla käsiteltäessä, jolloin saatiin otsik-koyhdiste värittömänä kiinteänä aineena. Saanto: 0,98 g (98 %). Sp. 57-59°C.

NMR (CDC13) δ: 1,17 (3H, s), 1,43 (3H, s), 3,86 (1H, d), 3,9 (1H, leveä), 5,29 (1H, d), 6,59 (1H, d), 6,71 (1H, ddd), 7,02 (1H, ddd), 7,2-7,3 (5H, m).

15 Esimerkki 7 cis-4b.5.9b. 10-tetrahvdro-9b-metwli-indenor 1.2-blindoli 2-metyyli-1 -indanonin fenyylihydratsonia (1,44 g, 6,1 mmol) kuumennettiin diety-leeniglykolissa (20 cm^) lähelle sen refluksointilämpötilaa, kunnes ammoniakkia al-20 koi purkautua ilmajäähdyttimestä. Kuumennusta jatkettiin seuraavaan päivään eli kunnes ammoniakkia ei enää purkautunut. Liuos jäähdytettiin, kaadettiin tilavuudeltaan samaan määrään vettä ja uutettiin dietyylieetteriin. Eetteriä sisältävä liuos uutettiin takaisin 2 M kloorivetyhapolla, joka tehtiin emäksiseksi natriumhydroksidilla ja uutettiin uudelleen dietyylieetterillä. Uutteet haihdutettiin ja jäännös puhdistettiin 25 pylväskromatografialla silikaa käyttäen eluoiden 5 % EtOAc/bensiinillä, jolloin saatiin otsikkoyhdiste värittömänä kiinteänä aineena (Rf 30 % EtOAc/bensiini 0,8). Saanto: 28 %. Sp. 72°C. NMR (CDCI3) 6: 1,46 (3H, s), 3,10 (1H, d), 3,30 (1H, dd), 4,05 (1H, s), 4,69 (1H, s), 6,52 (1H, dd), 6,71 (1H, ddd), 6,95 (1H, ddd), 7,0- 7,2 (5H, m).

30

Esimerkki 8 cis-4b.5.9b. 10-tetrahvdro-4b.9b-dimetwli-indenol 1.2-blindoli

Metyylilitiumia (1,5 ml, 2 ekv. 1,5 M liuosta heksaanissa) lisättiin tiputtamalla 35 -78°C:ssa liuokseen, joka sisälsi 9b, 10-dihydro-9b-metyyli-indeno[l,2-b]indolia (260 mg, 1,19 mmol) THF:ssa (10 cm^). Kun sitä oli sekoitettu -78°C:ssa 1 tunti, tummanpunaiseen liuokseen lisättiin vettä (1 cm3) ja reaktioseoksen annettiin lämmetä. Kun lähestyttiin huoneenlämpötilaa, liuoksen väri oli vaalentunut. Reaktio 100800 21 sammutettiin kyllästetyllä ammoniumkloridiliuoksella (10 cm3), orgaaninen faasi erotettiin ja kuivattiin (Na2SC>4). Liuotteen haihduttaminen ja "flash"-kromatografia [10 % EtOAc/bensiini (60-80°C)] antoi värittömän kumin [Rf (10 % EtOAc/bensiini 60-80°C) 0,5], joka kiinteytyi, kun kaikki jäljellä oleva liuote oli poistettu öljy-5 pumpulla, jolloin saatiin otsikkoyhdiste värittömänä kiinteänä aineena. Saanto: 87 mg (31 %). iH NMR (CDC13) δ: 1,35 (3H, s), 1,46 (3H, s), 3,07 (1H, d), 3,36 (1H, d), 4,27 (1H, leveä), 6,53 (1H), 6,71 (1H, ddd), 6,96 (1H, ddd), 7,1-7,3 (5H, m).

Esimerkki 9 10 cis-4b.5.9b. 10-tetrahvdro-6.8-dimetwli-indenof 1.2-blindoli 5,10-dihydro-6,8-dimetyyli-indeno[l,2-b]indolin (323 mg, 1,38 mmol) annettiin reagoida natriumsyanoboorihydridin (400 mg, 5 ekv.) kanssa jääetikkahappoliuoksessa (7 cm3) 30 minuuttia. Liuos kaadettiin jää veteen ja sitä sekoitettiin vielä 30 minuut-15 tia. Vesipitoinen liuos neutraloitiin natriumhydroksidilla ja suspensio uutettiin dietyy-lieetteriin. Orgaaniset uutteet pestiin vedellä, kuivattiin (Na2S04) ja haihdutettiin tyhjössä. Puhdistaminen "suction flash"-kromatografialla antoi otsikkoyhdisteen värittömänä kiinteänä aineena. Saanto: 2,44 mg (75 %). Sp. 147°C [EtOAc/ben-siinistä (60-80°C)]. NMR (CDCI3) δ: 2,03 ja 2,07 (3H, s), 3,18 (1H, dd), 3,48 20 (1H, dd), 4,16 (1H, ddd), 5,24 (1H, d), 6,66 (1H, s), 6,84 (1H, s), 7,1-7,4 (4H, m).

Esimerkki 10 cis-4b.5.9b. 10-tetrahvdro-8-metwli-indenor 1.2-blindoli 25 5,10-dihydro-8-metyyli-indeno[ 1,2-b]indolia (10 mg, 46 mmol) sekoitettiin huo neenlämpötilassa jääetikkahapossa (150 cm3). Natriumsyanoboorihydridiä (8,6 g, 3 ekvivalenttia) lisättiin erissä 30 minuutin kuluessa. Reaktioseosta sekoitettiin vielä tuntija sitten se kaadettiin jää veteen (200 cm3). 30 minuutin sekoittamisen jälkeen hapan liuos tehtiin emäksiseksi lisäämällä natriumhydroksidia ja tällöin muodostu-30 nut väritön kiinteä aine otettiin talteen suodattamalla. Tämä kiinteä aine pestiin run-: saalia vedellä, kunnes jäännöksessä ei enää ollut syanidi-ioneja, ja sitten se kuivat tiin tyhjöuunissa, jolloin saatiin otsikkoyhdiste värittömänä kiinteänä aineena.

Saanto: 7,5 g (73 %). Sp. 110°C (etanoli/vedestä). JH NMR (CDCI3) δ: 2,24 (3H, s), 3,20 (1H, dd), 3,50 (1H, dd), 3,9 (1H, leveä), 4,16 (1H, dd), 5,23 (1H, d), 6,52 35 (1H, d), 6,80 (1H, d), 6,99 (1H, s), 7,1-7,4 (4H, m).

Esimerkki 11 cis-4b.5.9b. 10-tetrahvdro-5.8-dimetwli-indenof 1.2-blindoli 22 100800

Liuos, joka sisälsi 4b,5,9b,10-tetrahydro-8-metyyli-indeno[l,2-b]indolia (1,8 g, 8,1 5 mmol) THFissa (20 cm3), jäähdytettiin -78°C:seen ja n-butyylilitiumia (5,6 cm3 1,6 M liuosta heksaanissa, 9,0 mmol) lisättiin tiputtamalla. Liuoksen lämpötilan annettiin nousta huoneenlämpötilaan ja sitä sekoitettiin 30 minuuttia. Reaktioseos jäähdytettiin sitten -78°C:seen ja jodimetaania (0,6 cm3, 0,9 mmol) lisättiin. Reaktioseok-sen annettiin taas lämmetä hitaasti huoneenlämpötilaan ja sitten reaktio sammutet-10 tiin kyllästetyllä ammoniumkloridiliuoksella (5 cm3). Kun seosta oli sekoitettu seuraa vaan päivään, orgaaninen kerros laimennettiin dikloorimetaanilla, erotettiin, pestiin suolaliuoksella ja kuivattiin (MgSC>4). Kim liuote oli poistettu tyhjössä, jäännös puhdistettiin pylväskromatografialla, jolloin saatiin kumi, joka antoi otsikkoyh-disteen värittömänä kiinteänä aineena hierottaessa jauheeksi etanolin kanssa.

15 Saanto: 1,0 g (53 %). Sp. 54°C (etanolista). *H NMR (CDC13) Ö: 2,25 (3H, s), 2,94 (3H, s), 3,07 (1H, dd), 3,41 (1H, dd), 4,11 (1H, m), 4,88 (1H, d), 6,30 (1H, d), 6,88 (1H, d), 6,96 (1H, d), 7,1-7,4 (4H, m).

Esimerkki 12 20 cis-4b.5.9b. 10-tetrahvdro-8-isopropwli-indenof 1.2-blindoli 5,10-dihydro-8-isopropyyli-indeno[l,2-b]indolia (5,27 g, 21,3 mmol) sekoitettiin huoneenlämpötilassa jääetikkahapossa (100 cm3). Natriumsyanoboorihydridi (5 g, 3 ekvivalenttia) lisättiin erissä 30 minuutin kuluessa. Reaktioseosta sekoitettiin vielä 30 25 minuuttia ja sitten se kaadettiin jää veteen (150 cm3). Kun liuosta oli sekoitettu vielä 30 minuuttia, se neutraloitiin natriumhydroksidivesiliuoksella ja näin muodostunut väritön kiinteä aine otettiin talteen suodattamalla. Tämä kiinteä aine pestiin runsaalla vedellä, kunnes jäännöksessä ei enää ollut syanidi-ioneja ja sitten se kuivattiin tyhjö-uunissa, jolloin saatiin otsikkoyhdiste värittömänä kiinteänä aineena. Saanto: 3,25 g 30 (61 %). Sp. 104°C [bensiinistä (60-80°C)]. NMR (CDCI3) δ: 1,19 (6H, d), 2,80 : (1H, septetti), 3,20 (1H, dd), 3,48 (1H, dd), 4,07 (1H, leveä), 4,15 (1H, ddd), 5,21 (1H, d), 6,53 (1H, d), 6,86 (1H, dd), 7,03 (1H, s), 7,1-7,4 (4H, m).

Esimerkki 13 35 cis-4b.5.9b. 10-tetrahvdro-5-metwli-8-isoDroDwli-indenof 1.2-blindoli

Liuos, jossa oli cis-4b,5,9b,10-tetrahydro-8-isopropyyli-indeno[l,2-b]indolia (1,75 g, 7,0 mmol) THF:ssa (10 cm3), lisättiin suspensioon, joka sisälsi natriumhydridiä 100800 23 (200 mg, 1,2 ekvivalenttia) THFissa (7 cnP), 0°C:ssa. Reaktioseosta sekoitettiin kaksi tuntia ja jodimetaania (0,53 cm^, 1,2 ekvivalenttia) lisättiin. Reaktioseosta sekoitettiin seuraavaan päivään ja sitten reaktio sammutettiin kyllästetyllä ammonium-kloridiliuoksella. Orgaaninen faasi erotettiin ja vesifaasi uutettiin dietyylieetterillä.

5 Yhdistetyt orgaaniset faasit kuivattiin (Na2S04) ja liuote poistettiin tyhjössä, jolloin saatiin otsikkoyhdiste värittömänä kumina, joka puhdistettiin pallokolvista toiseen tislaamalla. Saanto: 1,0 g (54 %). Kp. 200°C 0,4 mmHg:n paineessa. *H NMR (CDC13) δ: 1,22 (6H, d), 2,81 (1H, septetti), 2,94 (3H, s), 3,09 (1H, dd), 3,43 (1H, dd), 4,15 (1H, ddd), 4,90 (1H, d), 6,32 (1H, d), 6,93 (1H, dd), 7,02 (1H, leveä), 7, Ι-ΙΟ 7,5 (4H, m).

Esimerkki 14 cis-4b,5.9b. 10-tetrahvdro-2-metoksi- 1.3-dimetwli-indenor 1.2-blindoli 15 5,10-dihydro-2-metoksi-l,3-dimetyyli-indeno[l,2-b]indolia (1 g, 3,80 mmol) sekoitettiin huoneenlämpötilassa jääetikkahapossa (15 cm-*). Natriumsyanoboorihydridi (0,75 g, 3 ekvivalenttia) lisättiin erissä 15 minuutin kuluessa ja reaktioseosta sekoitettiin vielä kaksi tuntia. Reaktioseos kaadettiin jää/veteen (30 cnv*) ja sitä sekoitettiin vielä 30 minuuttia. Liuos neutraloitiin natriumhydroksidin vesiliuoksella ja 20 uutettiin dietyylieetteriin. Orgaaniset uutteet pestiin runsaalla vedellä, kunnes pesu-jätteissä ei enää ollut syanidi-ioneja. Liuote poistettiin tyhjössä, jolloin saatiin otsikkoyhdiste. Se puhdistettiin pylväskromatografialla, jolloin saatiin väritön kiinteä aine. Saanto: 0,8 g (79 %). Sp. 117°C EtOAc/bensiinistä (60-80°C). Alkuaineanalyysi. todettu: C 81,6, H 7,3, N 5,8, CjgH^NO laskettu: C 81,5, H 7,2, N 5,9, lH 25 NMR (CDCI3) 6: 2,15 (3H, s), 2,25 (3H, s), 3,07 (1H, dd), 3,36 (1H, dd), 3,64 (3H, s), 4,1 (1H, leveä), 4,19 (1H, ddd), 5,20 (1H, d), 6,60 (1H, d), 6,74 (1H, ddd), 6,97 (1H, s), 7,00 (1H, ddd), 7,17 (1H, d).

Esimerkki 15 30 cis-4b.5.9b. 10-tetrahvdro-4b.6.8.9b-tetrametwli-indenof L2-blindoli

Seosta, jossa oli 5,1 g (0,05 mol) 2,4-dimetyylifenyylihydratsiinihydrokloridia, 5,4 g (0,03 mol) 2-metyyli-l-indanonia, 100 ml etanolia (99,5 %) ja 2,5 ml väkevää kloo-rivetyhappoa, keitettiin palautusjäähdyttäen 2 tuntia. Saatu seos suodatettiin, suodos 35 haihdutettiin ja jäännös jaettiin eetteriin ja veteen. Orgaaninen faasi pestiin natrium- karbonaatin vesiliuoksella, kuivattiin (MgS04), suodatettiin ja haihdutettiin. Jäännökselle suoritettiin "flash"-kromatografia 60 Ä:n sitikalla. Kun ei-pooliset epäpuhtaudet oli eluoitu dikloorimetaani/iso-oktaanilla (1/1), metanoli/etyyliasetaatti/hek- 100800 24 saaniseoksella (1/4/5) eluointi antoi 5 g raakaa 9b,10-dihydro-6,8,9b-trimetyyli-in-deno[l,2-b]indolia. Ilman enempää puhdistamista tämä materiaali liuotettiin 100 ml:aan kuivaa tetrahydrofuraania. Argonkehässä lisättiin 50 ml 1,6 M metyylilitiu-mia eetterissä -65°C - -55°C:n lämpötilassa. Saatua seosta pidettiin -78°C:ssa 1 tunti 5 ja sitten se kaadettiin kylmään ammoniumkloridivesiliuokseen. Seos uutettiin eetterillä ja yhdistetyt orgaaniset faasit haihdutettiin, jolloin saatiin 5 g vihreää öljyä. Kromatografia 60 Ä:n silikalla käyttäen 7,5 % etyyliasetaattia iso-oktaanissa antoi 1 g otsikkoyhdistettä. NMR (CDC13) δ: 1,37 (3H, s), 1,48 (3H, s), 2,07 (3H, s), 2,20 (3H, s), 3,00-3,35 (2H, AB-systeemi, J = 15 Hz), 3,9 (1H, leveä s), 6,60 (1H, 10 s), 6,88 (1H, s), 7,08-7,28 (4H, m).

Esimerkki 16 cis-5,5a,6,10b-tetrahvdro-6-metwli-indenof2.1-blindoli 15 Seosta, jossa oli 0,6 g (0,00289 mol) 5,5a,6,10b-tetrahydroindeno[2,1 -b]indolia, 0,9 g (0,00723 mol) K/jCC^a ja 1,03 g (0,00723 mol) metyylijodidia 10 ml:ssa aseto-nitriiliä, sekoitettiin yön yli huoneenlämpötilassa. Saatu seos suodatettiin ja haihdutettiin. Saatu jäännös liuotettiin eetteriin ja pestiin sitten kahdesti vedellä. Kuivaaminen (Na2SC>4) ja haihduttaminen antoi 0,25 g (39 %) otsikkoyhdistettä. NMR 20 (CDCI3) 5: 2,78 (3H, s), 3,2 (2H, d), 4,3 (1H, m), 4,66 (1H, d), 6,37 (1H, d), 6,68 (1H, t), 7,06 (1H, t), 7,13-7,18 (2H, m), 7,22-7,26 (1H, m), 7,3-7,37 (2H, m).

Esimerkki 17 cis-4b,5,9b. 10-tetrahvdro-8-metoksi-6-metwli-indenon,2-blindoli ; 25

Liuokseen, jossa oli 5,0 g (0,020 mol) 5,10-dihydro-8-metoksi-6-metyyli-indeno-[l,2-b]indolia 50 ml:ssa tetrahydrofuraania, lisättiin 8,1 g (0,080 mol) morfoliini-boraania ja tiputtamalla 6,3 ml väkevää kloorivetyhappoa. Aluksi eksotermistä reaktioseosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 72 tuntia. Sitten lisättiin vielä 6,3 ml 30 väkevää kloorivetyhappoa ja seosta sekoitettiin seuraavaan päivään. Sitten lisättiin * 25 ml vettä ja seos haihdutettiin. Jäännös lietettiin 200 ml:aan vettä ja 5 ml:aan vä kevää kloorivetyhappoa ja seosta kuumennettiin vesihauteessa, kunnes suurin osa kiinteästä aineesta oli liuennut. Sitten liuos suodatettiin kuumana ja suodos jäähdytettiin ja tehtiin emäksiseksi lisäämällä 10 M natriumhydroksidiliuosta. Suodattami-35 nen ja pesu vedellä antoi 1,93 g (38,4 %) otsikkoyhdistettä. *H NMR (CDCI3) δ: 2,08 (3H, s), 3,15-3,25 (1H, dd), 3,42-3,55 (1H, dd), 3,7 (3H, s), 4,1-4,22 (1H, t), 5,22-5,28 (1H, d), 6,42-6,46 (1H, d), 6,6-6,65 (1H, d), 7,14-7,25 (3H, m), 7,3-7,4 (1H, m).

Esimerkki 18 cis-4b,5.9b.l0-tetrahvdro-8-metoksi-7.9-dimetwli-indenoi 1.2-blindoli 25 100800 5 Liuokseen, jossa oli 0,8 g (0,3 mmol) 5,10-dihydro-8-metoksi-7,9-dimetyyli-indeno-[l,2-b]indolia ja 1,21 g morfoliiniboraania 4 ml:ssa dioksaania, lisättiin tiputtamalla 1 ml väkevää kloorivetyhappoa. Seosta keitettiin palautusjäähdyttäen 30 minuuttia, sitten se jäähdytettiin, minkä jälkeen lisättiin 3 ml 6 M kloorivetyhappoa. Saatua seosta keitettiin sitten 15 minuuttia palautusjäähdyttäen. Jäähdyttämisen jälkeen 10 liuos tehtiin emäksiseksi natriumhydroksidin vesiliuoksella ja uutettiin kolme kertaa eetterillä. Kuivaaminen (MgS04) ja haihduttaminen antoi raakatuotteen, joka kiteytettiin liuottamalla etyyliasetaattiin ja lisäämällä petrolieetteriä -20°C:ssa. Suodattaminen antoi 0,73 g (92 %) otsikkoyhdistettä. NMR (CDCI3) 2,18 (3H, s), 2,28 (3H, s), 3,17 (1H, dd), 3,53 (1H, dd), 3,66 (3H, s), 4,24 (1H, m), 5,34 (1H, d), 6,30 15 (1H, s), 7,15-7,25 (3H, m), 7,34 (1H, t).

Esimerkki 19 cis-4b.5.9b. 10-tetrahvdro-6-isopropwli-indenof 1.2-blindoli 20 Liuokseen, jossa oli 4,95 g (0,020 mol) 5,10-dihydro-6-isopropyyli-indeno[ 1,2-b]-indolia ja 8,08 g (0,080 mol) morfoliiniboraania 25 mhssa dioksaania, lisättiin tiputtamalla 7 ml väkevää kloorivetyhappoa. Seosta keitettiin palautusjäähdyttäen 30 minuuttia, se jäähdytettiin huoneenlämpötilaan, minkä jälkeen siihen lisättiin 20 ml 6 M kloorivetyhappoa. Seosta keitettiin palautusjäähdyttäen 15 minuuttia. Jäähdyt-25 tämisen jälkeen seos tehtiin emäksiseksi lisäämällä natriumhydroksidivesiliuosta ja uutettiin kolme kertaa eetterillä. Kuivaaminen (MgSC>4) ja haihduttaminen antoi raakatuotteen, joka puhdistettiin pylväskromatografialla silikageelillä käyttäen metyleenikloridi/petrolieetteri (20/80) eluenttina. Näin saatiin 3,53 g (71 %) otsikkoyhdistettä. Ή NMR (CDCI3) δ: 1,19 (3H, d), 1,29 (3H, d), 2,84 (1H, dq), 3,26 30 (1H, dd), 3,56 (1H, dd), 4,24 (1H, td), 5,31 (1H, d), 6,79 (1H, dd), 6,97 (1H, d), 7,05-7,09 (1H, m), 7,28-7,21 (3H, m), 7,36-7,40 (1H, m).

Esimerkki 20 cis-4b.5.9b. 10-tetrahvdro-4b-metwli-indenoi 1,2-b]indoli 35

Liekkikuivattuun keittopulloon pantiin inerdssä ilmakehässä 4b,5,9b, 10-tetrahyd-roindeno[l,2-b]indolia (1,04 g, 5,02 mmol) ja vastatislattua tetrahydrofuraania (30 cm^). Liuos jäähdytettiin -78°C:seen ja siihen lisättiin n-butyylilitiumliuos (3,45 100800 26 cm^ 16 M liuosta heksaanissa, 1,1 ekv.) tiputtamalla. Vaaleankeltaisen liuoksen annettiin lämmetä huoneenlämpötilaan ja sen läpi kuplitettiin kuivaa hiilidioksidikaasua, kunnes liuos oli väritön. Liuote ja hiilidioksidin ylimäärä poistettiin huolellisesti alipaineessa tyhjöpumpulla ja kuiva typpikehä palautettiin. Väritön kiinteä aine 5 liuotettiin uudelleen kuivaan tetrahydrofuraaniin (30 cm3), jäähdytettiin -78°C:seen ja siihen lisättiin vielä 1,1 ekvivalenttia n-butyylilitiumia. Reaktioseosta sekoitettiin -78°C:ssa 1 1/2 tuntia ja sitten reaktio sammutettiin jodimetaanilla (0,35 cm3, \2 ekv.). Kun reaktioseoksen oli annettu lämmetä huoneenlämpötilaan, liuotteet poistettiin, kuten edellä ja 2 M HCl-liuosta (20 cm3) lisättiin. Kun kaasun muodostumi-10 nen oli päättynyt (noin 20 minuuttia), liuos neutraloitiin kiinteällä natriumkarbonaatilla. Orgaaninen aine uutettiin etyyliasetaattiin ja uute pestiin suolaliuoksella ja kuivattiin (Na2S04). Liuotteen poistamisen jälkeen tuote puhdistettiin "flash"-kro-matografialla [Rf=0,4 (10 % EtOAc/60-80°C bensiini)] eluoiden 5 % etyyliasetaat-ti/60-80°C bensiinillä värittömäksi öljyksi, joka kiinteytyi -20°C:ssa, jolloin saatiin 15 vaaleanpunainen kiinteä aine. Saanto 0,76 g (69 %). Sp. 52°C; NMR (CDCI3) δ: 7,3-7,1 (5H, m), 6,96 (1H, ddd), 6,70 (1H, ddd), 6,53 (1H, d J = 7,7 Hz), 4,2 (1H, leveä), 3,37 (1H, m, J = 8,2 Hz), 3,48 (1H, dd, J = 16,3, 7,2 Hz), 3,14 (1H, dd, J = 16,3, 2,0 Hz), 1,61 (3H, s).

20 Esimerkki 21 cis-4b.5.9b. 10-tetrahvdro-4b-metwli-8-isoproDwli-indenor 1.2-blindoli

Inertissä ilmakehässä liekkikuivattuun keittopulloon pantiin 4b,5,9b,10-tetrahydro-8-isopropyyli-indeno[l,2-b]indolia (1,49 g, 5,98 mmol) kuivassa tetrahydrofuraanis-25 sa (THF, 20 cm3). Liuos jäähdytettiin -78°C:seen ja heksaaniin liuotettua n-butyylilitiumia (4,0 cm3 i56 M liuosta) lisättiin tiputtamalla. Reaktioseoksen annettiin lämmetä huoneenlämpötilaan ja kuivaa C02-kaasua kuplitettiin sen läpi, kunnes unionin väri oli sekoittunut. Liuote ja C02-ylimäärä poistettiin huolellisesti tyhjö-pumpulla, saatu kiinteä aine liuotettiin uudelleen kuivaan tetrahydrofuraaniin (THF, 30 20 cm3) ja jäähdytettiin -78°C:seen. Vielä yksi ekvivalentti n-butyylilitiumia lisät- : tiin ja reaktioseosta sekoitettiin -20°C:ssa 30 minuuttia. Jodimetaania (0,4 cm3, \

ekv.) lisättiin -78°C:ssa ja reaktioseoksen annettiin lämmetä huoneenlämpötilaan ja sitä sekoitettiin 3 tuntia. Liuotteet poistettiin vesipumpulla ja 2 N HCl-liuosta (20 cm3) lisättiin. 20 minuutin kuluttua liuos tehtiin emäksiseksi kiinteällä natriumkar-35 bonaatilla ja uutettiin etyyliasetaattiin. Orgaaninen uute pestiin suolaliuoksella, kuivattiin (Na2S04) ja väkevöitiin tyhjössä. Tuote puhdistettiin "flash"-kromatografial-la pysymättömäksi vaaleankeltaiseksi öljyksi. Saanto: 1,01 g, 64 %. iHNMR

100800 27 (CDC13) δ: 7,30-7,15 (4H, m), 7,00 (1H, s), 6,85 (1H, d, J = 7,9 Hz), 6,49 (1H, d, J = 7,9 Hz), 4,0 (1H, leveä), 3,73 (1H, d, J = 8,1 Hz), 3,49 (1H, dd, J = 16,1, 8,2 Hz), 3.16 (1H, d, J = 16,1 Hz), 2,79 (1H, septetti, J = 6,8 Hz), 1,61 (3H, s), 1,19 (6H, d, J = 6,8 Hz).

5

Esimerkki 22 cis-4b.5.9b. 10-tetrahvdro-2-hvdroksi-1.3-dimetwli-indenor 1.2-blindoli

Vedettömissä olosuhteissa liuotettiin 4b,5,9b,10-tetrahydro-2-metoksi-l,3-dimetyy-10 li-indeno[ 1,2-b]indolia (76 mg, 0,29 mmol) kuivaan dikloorimetaaniin (DCM, 1 cm^), johon oli lisätty pieni määrä etanolia. Liuos jäähdytettiin -78°C:seen ja siihen lisättiin booritribromidin DCM-liuosta (0,5 cm* 1 M liuosta). Reaktioseoksen annettiin hitaasti lämmetä huoneenlämpötilaan, jolloin reaktio tapahtui 0°C:ssa. Kun seosta oli pidetty 30 minuuttia 10°C:ssa, vettä (1 cm·*) lisättiin varovasti ja reaktio-15 seosta sekoitettiin 15 minuuttia. Suurimmaksi osaksi kiinteä aine jakouutettiin täydellisesti DCM:iin ja kyllästettyyn natriumbikarbonaattiliuokseen. DCM-kerros kuivattiin (Na2SC>4) ja suodatettiin "flash"-silikatyynyn läpi, jolloin saatiin väritön kiinteä aine. Saanto: 73 mg, 100 %. Sp. 178-180°C (haj.). ^H NMR (CDCI3) δ: 7.16 (1H, d, J = 7,3 Hz), 6,99 (1H, ddm), 6,94 (1H, s), 6,73 (1H, ddm, J = 7,3, 1,1 20 Hz), 6,60 (1H, d, J = 7,7 Hz), 5,20 (1H, d, J = 8,4 Hz), 4,4 (2H, leveä), 4,15 (1H, ddm), 3,38 (1H, dd, J = 16,1, 8,3 Hz), 3,09 (1H, dd, J = 16,2 Hz), 2,21 (3H, s), 2,12 (3H, s).

Esimerkki 23 25 cis-5-asetwli-4b.5,9b. 10-tetrahvdro-2-metoksi-1.3-dimetwli-indenof 1.2-blindoli 4b,5,9b,10-tetrahydro-2-metoksi-l,3-dimetyyli-indeno[l,2-b]indolia (140 mg, 0,53 mmol) sekoitettiin etikkahappoanhydridissä (2 cm*) 5 minuuttia. Sitten lisättiin vettä (5 cm3) ja sekoittamista jatkettiin 30 minuuttia. Liuos neutraloitiin kiinteällä 30 natriumbikarbonaatilla ja uutettiin dikloorimetaaniin. Orgaaninen aine kuivattiin (MgS04), väkevöitiin ja dikloorimetaanin ylimäärä haihdutettiin atseotrooppisesti pyörivässä haihduttimessa käyttäen 60-80°C bensiiniä, jolloin saatiin väritön kiinteää aine. Saanto: 170 mg, 100 %. Sp. 201°C. ^H NMR (CDCI3) δ: (E/Z-isomeerien seos) 8,10 (½¾ d, J = 7,9 Hz), 8,4-7,0 (4½¾ m), 6,24 ja 5,75 (1H, d, J = 8,2 ja 7,7 35 Hz), 4,23 ja 4,13 (1H, ddd, J = 7,5 ja 8,3 Hz), 3,64 (3H, s), 3,4 (1H, m), 3,13 (1H, 2 x dd, J = 15,5 Hz), 2,59 ja 2,50 (3H, s), 2,53 ja 2,22 (3H, s), 2,16 ja 2,14 (3H, s).

Esimerkki 24 cis-5-asetwli-4b.5.9b. 10-tetrahvdro-2-hvdroksi-1.3-dimetwli-indenor 1.2-blindoli 28 100800

Vedettömissä olosuhteissa liuos, joka sisälsi 5-asetyyli-4b,5,9b,10-tetrahydro-2-5 metoksi-3,3-dimetyyli-indeno[l,2-b]indolia (109 mg, 0,35 mmol) dikloorimetaanis-sa (1 cm^), jäähdytettiin -78°C:seen ja siihen lisättiin dikloorimetaaniin liuotettua booritribromidia (0,7 cm3 1 M liuosta). Reaktioseoksen annettiin lämmetä huoneenlämpötilaan ja sitä sekoitettiin 90 minuuttia, minkä jälkeen siihen lisättiin varovasti vettä (5 cm3). Kun seosta oli sekoitettu vielä 10 minuuttia, se laimennettiin ja uu-10 tettiin dikloorimetaanilla. Yhdistetyt dikloorimetaaniuutteet kuivattiin (Na2SC>4) ja suodatettiin "flash"-silikatyynyn läpi eluoiden edelleen 30 % EtOAc/60-80°C bensiinillä. Kun liuote poistettiin, saatiin väritön kiinteä aine. Saanto: 96 mg, 94 %. Sp. 205°C (haj.). lU NMR (CDC13) δ: (E/Z-isomeerien seos) 8,06 (½¾ d, J = 7,1 Hz), 8,05-7,00 (4V2U, m), 4,23 ja 5,75 (1H, d, J = 8,1 ja 7,5 Hz), 4,6 (1H, leveä), 15 4,22-4,08 (1H, 2 x ddd), 3,45-3,26 (1H, m), 3,25-3,05 (1H, 2 x dd), 2,63 ja 2,52 (3H, s), 2,20 ja 2,17(3H, s), 2,13 ja 2,11 (3H, s).

Esimerkki 25 cis-4b.5.9b. 10-tetrahvdro-2-metoksi- 1.3-dimetwli-8-isoDropwli-indenor 1.2-blindoli 20 5,10-dihydro-2-metoksi-l,3-dimetyyli-8-isopropyyli-indeno[l,2-b]indolia (1,68 g, 5,5 mmol) liuotettiin trifluorietikkahappoon (10 cm3) ja sekoitettiin voimakkaasti. Trietyylisilaania (1 cm3, \ \ ekv.) lisättiin ja sekoittamista jatkettiin 4 tuntia. Reak-tioseos kaadettiin veteen, sitä sekoitettiin 15 minuuttia ja neutraloitiin 2 M 25 NaOHilla. Kaikki orgaaninen aine uutettiin etyyliasetaattiin, pestiin vedellä ja kuivattiin (Na2S04). Liuotteen poistamisen jälkeen kiinteä aine kiteytettiin uudelleen 60-80°C petrolieetteristä valkoisina neuloina. Saanto: 1,18 g, 70 %. Sp. 106°C. ^H NMR (CDCI3) δ: 7,05 (1H, s), 6,97 (1H, s), 6,88 (1H, dd, J = 8,6 Hz), 6,55 (1H, d, J = 8,1 Hz), 5,19 (1H, d, J = 8,4 Hz), 4,18 (1H, ddd), 3,8 (1H, leveä), 3,64 (3H, s), 30 3,36 (1H, dd, J = 16,5, 8,3 Hz), 3,07 (1H, d(leveä), J = 16,5 Hz), 2,81 (1H, septetti, : J = 7,0 Hz), 2,25 (3H, s), 2,15 (3H, s), 1,20 (6H, d, J = 7,0 Hz).

Esimerkki 26 cis-4b.5.9b. 10-tetrahvdro-2-hvdroksi-1.3-dimetwli-8-isopropwli-indenor 1.2-blindoli 35

Liuos, joka sisälsi 4b,5,9b,10-tetrahydro-2-metoksi-l,3-dimetyyli-8-isopropyyli-in-deno[l,2-b]indolia (97 mg, 0,32 mmol) dikloorimetaanissa (DCM, 1 cm3), johon oli lisätty hieman etanolihöyryä, jäähdytettiin -78°C:seen. Booritribromidia (0,4 cm3 1 100800 29 M liuosta DCM.ssa) lisättiin ja reaktioseoksen annettiin lämmetä huoneenlämpötilaan. Vettä (1 cm^) lisättiin varovasti ja seos jaettiin DCM.iin ja natriumbikarbo-naattiliuokseen. Orgaaninen kerros kuivattiin (Na2S04) ja suodatettiin "flash"-sili-katyynyn läpi, eluoiden DCM:lla. Kun liuote poistettiin, saatiin valkoinen kiinteä 5 aine. Saanto: 88 mg, 94 %. Sp. 165°C (haj.) lU NMR (CDC13) δ: 7,04 (1H, s), 6,95 (1H, s), 6,87 (1H, dd), 6,56 (1H, d, J = 8,1 Hz), 5,20 (1H, d, J = 8,6 Hz), 4,16 (1H, ddm), 4,6-4,0 (2H, leveä), 3,36 (1H, dd), 3,06 (1H, dd), 2,81 (1H, septetti, J = 7,0 Hz), 2,20 (3H, s), 2,12 (3H, s), 1,19 (6H, d, J = 7,9 Hz).

10 Esimerkki 27 cis-4b.5.9b. 10-tetrahvdro-2.8-dimetoksi-1.3-dimetvyli-indenor 1.2-blindoli 5,10-dihydro-2,8-dimetoksi-l,3-dimetyyli-indeno[l,2-b]indoli (1,04 g, 3,55 mmol) liuotettiin trifluorietikkahappoon (5 cm3) ja trietyylisilaania (0,6 cm3) lisättiin voi-15 makkaasti sekoittaen. Sekoittamista jatkettiin 4 tuntia ja reaktio tapahtui epätäydelli-sesti, mikä johtui ohutlevykromatografian mukaan epäpuhtauksien esiintymisestä. Liuos kaadettiin veteen, sitä sekoitettiin ja sen pH säädettiin arvoon 7,0 kiinteällä natriumbikarbonaatilla. Orgaaninen aine uutettiin DCM:iin, joka pestiin sitten nat-riumbikarbonaattiliuoksella ja suodatettiin faasienerotussuodatinpaperin lävitse.

20 Tuote ja lähtömateriaali erotettiin pylväskromatografialla eluoiden 20 % EtOAc/60-80°C bensiinillä, jolloin saatiin lähtöindoli (0,06 g, 6 %) ja väritön kiinteä aine. Saanto: 0,57 g, 58 %. Sp. 149-50°C (EtOAc/bensiinistä). lH NMR (CDCI3) δ: 6,99 (1H, s), 6,79 (1H, m), 6,57 (2H, m), 5,18 (1H, d, J = 8,5 Hz), 4,18 [1H, dd(leveä)], 3,74 (3H, s), 3,65 (3H, s), 3,35 (1H, dd, 3J = 8,4 Hz), 3,06 [1H, d(d)], 2,25 (3H, s), 25 2,15 (3H, s).

Esimerkki 28 cis-5-asetwli-4b.5.9b, 10-tetrahvdro-4b.9b-dimetwli-indenol 1,2-blindoli 30 4b,5,9b, 10-tetrahydro-4b,9b-dimetyyli-indeno[l,2-b]indolia (0,2 g, 0,85 mmol) liuotettiin etikkahappoanhydridiin (1 cm3) ja liuosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 16 tuntia. Reaktioseos kaadettiin kyllästettyyn natriumbikarbonaattiliuokseen ja sitä sekoitettiin vielä V-z tuntia. Sitten seos uutettiin eetterillä (3 x 15 cm3) ja yhdistetyt orgaaniset uutteet otettiin talteen, pestiin suolaliuoksella, kuivattiin (Na2SC>4) ja 35 haihdutettiin, jolloin saatiin otsikkoyhdiste öljynä. Se puhdistettiin "flash"-kromato-grafialla silikageelillä eluoiden 5-7 % etyyliasetaatti/60-80°C bensiinillä, jolloin saatiin väritön kiinteä aine. Saanto: 0,15 g, 64 %. Sp. 81°C. ^H NMR (CDCI3) δ: 100800 30 7,82 (1H, s), 6,99-7,29 (7H, m), 3,26 (1H, d, J = 15,9 Hz), 2,97 (1H, d, J = 15,9 Hz), 2,42 (3H, s), 1,77 (3H, s), 1,25 (3H, s).

Esimerkki 29 5 cis-4b.5.9b> 10-tetrahvdro-4b.8.9b-trimetwli-indenor 1.2-blindoli

Liuokseen, joka sisälsi 9b,10-dihydro-8,9b-dimetyyli-indeno[l,2-b]indolia (5,05 g, 0,022 mol) kuivassa tetrahydrofuraanissa (100 cm3) -78°C:ssa, typen alla, liekki-kuivatussa keittopullossa, lisättiin tiputtamalla metyylilitiumia (1,4 M liuos dietyyli-10 eetterissä, 23,2 cm3, 0,032 mol). Seosta sekoitettiin -78°C:ssa 2 tuntia ja sitten -15°C:ssa vielä 1 tunti. Sitten lisättiin kyllästettyä ammoniumkloridiliuosta (3 cm3) ja seoksen annettiin lämmetä huoneenlämpötilaan. Reaktioseos jaettiin eetteriin ja kyllästettyyn ammoniumkloridiliuokseen ja kerrokset erotettiin. Vesifaasi uutettiin dietyylieetterillä (2 x 25 cm3), ja yhdistetyt orgaaniset uutteet pestiin suolaliuoksel-15 la, kuivattiin (Na2SC>4) ja haihdutettiin, jolloin saatiin otsikkoyhdiste harmaanval- koisena kiinteänä aineena. Se puhdistettiin "flash"-kromatografialla silikageelillä eluoiden 3-10 % etyyliasetaatti/60-80oC bensiinillä, jolloin saatiin väritön kiinteä aine. Saanto: 2,73 g, 51 %. Sp. 208-212°C. NMR (CDC13) δ: 7,1-7,3 (4H, m), 6,94 (1H, m), 6,77 (1H, d, J = 7,8 Hz), 6,46 (1H, d, J = 7,8 Hz), 3,35 (1H, d, J = 20 15,9 Hz), 3,06 (1H, d, J = 15,9 Hz), 2,22 (3H, s), 1,46 (3H, s), 1,34 (3H, s).

Esimerkki 30 cis-4b.5.9b. 10-tetrahvdro-4b.9b-dimetwli-8-isopropwli-indenor 1.2-b1-indoli 25 Liuokseen, jossa oli metyylilitiumia (1,4 M eetterissä, 14,5 cm3, 12,4 mmol) kuivassa tetrahydrofuraanissa (20 cm3), -78°C:ssa, typen alla, liekkikuivatussa keittopullossa, lisättiin tiputtamalla 1 tunnin kuluessa liuos, jossa oli 9b,10-dihydro-9b-me-tyyli-8-isopropyyli-indeno[l,2-b]-indolia (1,62 g, 6,20 mmol) kuivassa tetrahydrofuraanissa (30 cm3). Lisäyksen jälkeen seosta sekoitettiin vielä V2 tuntia -78°C:ssa. 30 Sitten lisättiin kyllästettyä ammoniumkloridiliuosta (2 cm3) ja seoksen annettiin •. lämmetä huoneenlämpötilaan. Sitten reaktioseos jaettiin dietyylieetteriin (50 cm3) ja kyllästettyyn ammoniumkloridiliuokseen (25 cm3) ja kerrokset erotettiin. Vesifaasi uutettiin dietyylieetterillä (2x10 cm3) ja yhdistetyt orgaaniset uutteet pestiin suolaliuoksella, kuivattiin (Na2SC>4) ja haihdutettiin. Tällä tavoin saatu raakamateriaali 35 puhdistettiin "flash"-kromatografialla silikageelillä eluoiden 3-10 % etyyliasetaat-ti/60-80°C bensiinillä, jolloin saatiin vaaleankeltainen kumi. Saanto: 0,77 g, 45 %. iH NMR (CDCI3) δ: 7,1-7,3 (4H, m), 6,98 (1H, d, J = 1,8 Hz), 6,82 (1H, dd, J = 1,8 Hz ja 7,9 Hz), 6,47 (1H, d, J = 7,9 Hz), 3,36 (1H, d, J = 15,9 Hz), 3,06 (1H, d, 31 100800 J - 15,9 Hz), 2,78 (1H, septetti, J = 6,8 Hz), 1,45 (3H, s), 1,34 (3H, s), 1,18 (6H, dd, J = 1,3 Hzja 6,9 Hz).

Esimerkki 31 5 cis-5-asetwli-4b.5.9b. 10-tetrahvdro-4b.8,9b-trimetwli-mdenofl.2-blindoli 4b,5,9b,10-tetrahydro-4b,8,9b-trimetyyli-indeno[l,2-b]-indoli (0,25 g, 100 mmol) liuotettiin etikkahappoanhydridiin (1 cm^)ja sekoitettiin huoneenlämpötilassa 16 tuntia. Reaktioseos kaadettiin kyllästettyyn natriumbikarbonaattiliuokseen (25 cm3) 10 ja sekoitettiin lA tuntia. Seos uutettiin dietyylieetterillä (3x10 cm3) ja yhdistetyt orgaaniset uutteet pestiin suolaliuoksella, kuivattiin (Na2SC>4) ja haihdutettiin. Raakamateriaali puhdistettiin ”flash"-kromatografialla silikageelillä eluoiden 4 % etyyliasetaatti/60-80oC bensiinillä, jolloin saatiin vaaleankeltainen kumi. Saanto: 0,15 g, 53 %. JH NMR (CDC13) δ: 7,84 (1H, s), 6,90-7,23 (6H, m), 3,26 (1H, d, J = 15 15,9 Hz), 2,96 (1H, d, J = 15,9 Hz), 2,40 (3H, s), 2,31 (3H, s), 1,77 (3H, s), 1,32 (3 H, s).

Esimerkki 32 cis-5-asetwli-4b.5.9b. 10-tetrahvdro-4b,9b-dimetwli-8-isopropwli-indenor 1.2-bl-20 indoli 4b,5,9b, 10-tetrahydro-4b,9b-dimetyyli-8-isopropyyli-indeno[l,2-b]indolia (0,24 g, 0,87 mmol) liuotettiin etikkahappoanhydridiin (1 cm3) ja sekoitettiin huoneenlämpötilassa 16 tuntia. Reaktioseos kaadettiin kyllästettyyn natriumbikarbonaattiliuok-25 seen (25 cm3) ja sekoitettiin'/2 tuntia. Seos uutettiin eetterillä (3 x 25 cm^). Yhdistetyt orgaaniset uutteet pestiin suolaliuoksella, kuivattiin (Na2SC>4) ja haihdutettiin. Raakamateriaali puhdistettiin "flash"-kromatografialla silikageelillä eluoiden 4 % etyyliasetaatti/60-80°C bensiinillä, jolloin saatiin vaaleankeltainen kumi. Saanto: 0,25 g, 89 %. lH NMR (CDCI3) δ: 7,84 (1H, s), 6,90-7,24 (6H, m), 3,27 (1H, d, J = 30 15,9 Hz), 2,97 (1H, d, J = 15,9 Hz), 2,88 (1H, septetti, J = 6,8 Hz), 2,40 (3H, s), • 1,77 (3H, s), 1,33 (3H, s), 1,23 (6H, dd, J = 0,73 Hzja 6,8 Hz).

Esimerkki 33 cis-4b.5.9b. 10-tetrahvdro-5-etwli-indenof 1.2-blindoli 35 5,10-dihydroindeno[l,2-b]indolia (60,0 g, 0,29 M) sekoitettiin voimakkaasti jää-: etikkahapossa (1 000 cm3) ja siihen lisättiin natriumsyanoboorihydridiä (79 g, 1,25 M) erissä 40 minuutin kuluessa. 3 tunnin sekoittamisen jälkeen reaktioseos kaadet- 100800 32 tiin jääveteen (2 000 cm3) ja muodostunutä hyytelömäinen kiinteä aine erotettiin ja sitä sekoitettiin etyyliasetaatin (75 cm3) ja veden (100 cm3) seoksen kanssa. Jäljelle jäänyt väritön kiinteä aine todettiin reagoimattomaksi lähtömateriaaliksi (19,0 g). Alkuperäinen suodos uutettiin etyyliasetaatilla (2 x 75 cm3) ja yhdistetyt orgaaniset 5 faasit kuivattiin ja haihdutettiin. Jäännös liuotettiin sitten osittain 60-80°C:isen pet-rolieetterin (20 cm3) ja etyyliasetaatin (40 cm3) seokseen. Kiinteä jäännös poistettiin ja se osoittautui epäpuhtaaksi lähtömateriaaliksi (2,5 g ). Suodos uutettiin 2 M kloorivetyhapolla (8 x 25 cm3) ja yhdistetyt happamat uutteet pestiin etyyliasetaatilla (2 x 15 cm3), ennen kuin ne tehtiin emäksisiksi 0,89 ammoniakilla. Erottunut 10 öljy uutettiin etyyliasetaattiin (6 x 25 cm3) ja yhdistetyt orgaaniset kerrokset kui vattiin sitten ja haihdutettiin, jolloin saatiin otsikkoyhdiste värittömänä öljynä. Saanto: 34 g, 75 %. lH NMR (CDC13) δ: 1,20 (3H, t, J = 7,0 Hz), 3,05 (1H, dd, J = 16,5 ja 5,0 Hz), 3,38 (2H, q, J = 7,0 Hz), 3,40 (1H, dd, J = 16,5 ja 9,0 Hz), 4,12 (1H, ddd, J = 9,0, 5,0 ja 5,0 Hz), 5,11 (1H, d, J = 9,0 Hz), 6,33 (1H, d, J = 7,0 Hz), 15 6,57 (1H, dt, J = 7,5 ja 1,0 Hz), 7,02 (1H, t, J = 8,0 Hz), 7,08 (1H, d, J = 8,0 Hz), 7,14-7,20 (3H, m), 7,34-7,40 (1H, m).

Esimerkki 34 cis-4b.5.9b. 10-tetrahvdro-2-(N.N-dietwliaminoVindenon.2-blindoli 20 5,10-dihydro-2-(N,N-dietyyliamino)-indeno[l,2-b]indoli (180 mg, 0,65 mM) liuotettiin trifluorietikkahappoon (3 cm3), joka sisälsi trietyylisilaania (0,5 cm3), ja liuosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 3 tuntia. Sitten se käsiteltiin vedellä (15 cm3) ja 0,89 ammoniakilla (5 cm3) ja sitä sekoitettiin vielä 0,5 tuntia. Seos uutettiin 25 dikloorimetaanilla (3x5 cm3) ja yhdistetyt uutteet suodatettiin faasienerotussuoda-tinpaperin läpi ja haihdutettiin, jolloin saatiin vaaleankeltainen öljy (280 mg). Öljylle suoritettiin pylväskromatografia (silikageeli; 7,5 % EtOAc 60-80°C petrolieette-rissä), jolloin saatiin otsikkoyhdiste värittöminä neuloina. Saanto: 65 mg, 35 %. Sp.

116-118°C. Tämä tuote kiteytyi uudelleen dietyylieetteri/60-80°C petrolieetteristä 30 pitkinä värittöminä neuloina. Sp. 118°C; Ή NMR (CDCI3) δ: 1,08 (6H, t, J = 7,0 Hz), 3,10 (1H, dd, J = 16,0 ja 2,0 Hz), 3,25 (4H, q, J = 7,0 Hz), 3,42 (1H, dd, J = 16.0 ja 8,5 Hz), 3,55 (1H, leveä s), 4,10 (1H, ddd, J = 8,5, 8,5 ja 2,0 Hz), 5,13 (1H, d, J = 8,5 Hz), 6,46 (1H, d, J = 2,0 Hz), 6,50-6,60 (2H, m), 6,70 (1H, ddd, J = 7,0, 7.0 ja 1,0 Hz), 6,95 (1H, ddd, J = 7,0, 7,0 ja 1,0 Hz), 7,06-7,13 (2H, m).

35 100800 33

Esimerkki 35 cis-(EV ia (ZV4b.5.9b.lO-tetrahvdro-5-asetwli-8-fN.N-dietwliaminoVindenor 1.2-bj-indoli 5 (E)- ja (Z)-4b,5,9b,10-tetrahydro-5-asetyyli-8-aminoindeno[l,2-b]indolia (1,0 g), natriumkarbonaattia (1 g) ja etyylijodidia (2,0 cin*) kuumennettiin yhdessä palau-tusjäähdyttäen tetrahydrofuraanin (80 cm3) ja veden (15 cm·*) seoksessa sekoittaen 24 tuntia. Sitten lisättiin lisää etyylijodidia (0,5 cm3) ja kuumennusta jatkettiin vielä 3 tuntia. Liuotteet haihdutettiin pois ja jäännökseen lisättiin dikloorimetaania. Kiin-10 teät aineet poistettiin suodattamalla ja ne pestiin sitten perusteellisesti dietyylieette-rillä. Suodos ja pesujätteet yhdistettiin ja niiden tilavuus supistettiin noin 15 emiksi. Jäähdytettäessä otsikkoyhdisteet erottuivat vaaleankeltaisina prismoina. Saanto: 0,75 g, 62 %. Sp. 176-178°C; NMR (CDC13) δ: 1,10 (6H, t J = 7,0 Hz), 1,13 (6H, t, J = 7,0 Hz), 2,43 (3H, s), 2,54 (3H, s), 3,21 (1H, d, J - 16 Hz), 3,29 15 (10H, m), 4,06 (1H, dd, J = 8 Hz), 4,16 (1H, dd, J = 7,5 Hz), 5,56 (1H, d, J = 2 Hz), 5,72 (1H, d, J = 7,5 Hz), 6,27 (1H, d, J = 8 Hz), 6,47 (2H, ddd, J = 7,5, J = 2 Hz), 6,63 (1H, d, J = 2 Hz), 6,90 (1H, d, J = 9 Hz), 7,15-7,23 (6H, m), 7,41 (1H, m), 7,60 (1H, m), 7,89 (1H, d, J = 9 Hz).

20 Esimerkki 36 cis-4b.5.9b. 10-tetrahvdro-5-etwli-8-fN.N-dietwliamino)-indenof 1.2-blindoli cis-(E)- ja (Z)-4b,5,9b, 10-tetrahydro-5-asetyyli-8-(N,N-di-etyyliaminoindeno[ 1,2-bjindoleja (0,32 g, 1 mM) kuivassa tetrahydrofuraanissa (60 cm*) käsiteltiin litium-25 aluminiumhydridillä (0,38 g, 10 mM) erissä 30 minuutin kuluessa. Sitten reaktio-seosta kuumennettiin palautusjäähdyttäen 3 tuntia ja sitten reagenssiylimäärä tuhottiin lisäämällä 30 % natriumammoniumtartraattia. Orgaaninen liuote dekantoitiin sitten pois ja jäännös uutettiin tetrahydrofuraanilla (3x10 cm-*). Liuote ja uutteet yhdistettiin, kuivattiin ja haihdutettiin, jolloin saatiin öljy, joka absorboitiin silikaan 30 (1 g) ja lisättiin silikakolonnin (5 g) yläpäähän ennen sen eluoimista 10 % etyyliase- : taatilla 60-80°C petrolieetterissä. Kolonnin väri muuttui tummansiniseksi, mutta otsikkoyhdiste eluoitui pois värittömänä öljynä. Saanto: 0,2 g, 65 %. Yhdiste on py-symätön ilmassa muuttuen siniseksi ja sitten tummanpunaiseksi. *H NMR (CDCI3) 5: 1,09 (6H, t, J = 7,0 Hz), 1,27 (3H, t, J = 7,0 Hz), 3,1-3,3 (5H, m), 3,3-3,5 (3H, 35 m), 4,18 (1H, leveä s), 5,07 (1H, leveä s), 6,40 (1H, d, J = 7,0 Hz), 6,57 (1H, d, J = 7,0 Hz), 6,74 (1H, s), 7,22 (3H, s), 7,43 (1H, m).

34 100800

Esimerkki 37 cis-4b.5.9b. 10-tetrahvdro-8-tert-butwli-indenor 1.2-blindoli

Liuos, jossa oli 5,10-dihydro-8-tert-butyyli-indeno[l,2-b]indolia (0,57 g, 2,2 mM) 5 trifluorietikkahapossa (5 cm3), sekoitettiin nopeasti ja trietyylisilaania (0,7 cm3, 2 ekv.) lisättiin yhtenä eränä. Reaktioseosta sekoitettiin yön yli, se kaadettiin veteen (10 cm3) ja neutraloitiin lisäämällä natriumhydroksidia. Tuote uutettiin dietyylieet-teriin (2 x5 cm3) ja yhdistetyt uutteet pestiin vedellä, kuivattiin (Na2SC>4) ja haihdutettiin, jolloin saatiin vaaleanpunainen kiinteä aine. Se pestiin kylmällä petrolieet-10 terillä (60-80°C) ja sitten se kiteytettiin bensiinistä, jolloin saatiin väritön kiinteä aine. Saanto: 0,47 g, 81 %. Sp. 103-105°C; lU NMR (CDCI3) δ: 7,4-6,9 (6H, m), 6,58 (1H, d, J = 8 Hz), 5,25 (1H, d, J = 8,5 Hz), 4,15 (2H, leveä m), 3,5 (1H, dd, J = 16,0 ja 9 Hz), 3,2 (1H, d, J = 16 Hz), 1,2 (9H, s).

15 Esimerkki 38 cis-4b.5.9b. 10-tetrahvdro-5-metwli-8-tert-butwli-indenor 1.2-blindoli

Liekkikuivattuun keittopulloon pantiin 4b,5,9b,10-tetrahydro-8-tert-butyyli-indeno-[l,2-b]indolia (309 mg, 1,17 mM) ja tetrahydrofuraania (2,5 cm3). Liuos jäähdytet-20 tiin -78°C:seen ja n-butyylilitiumliuos (0,75 cm3 1,6 M liuosta heksaanissa, 1,1 ekv.) lisättiin tiputtamalla. Reaktioseosta sekoitettiin -78°C:ssa yksi tuntija sitten lisättiin jodimetaania (0,1 cm3, 1,3 ekv.). Kun reaktioseoksen oli annettu lämmetä hitaasti huoneenlämpötilaan, lisättiin kyllästetty ammoniumkloridiliuos ja orgaaninen materiaali uutettiin dietyylieetteriin. Orgaaninen faasi pestiin suolaliuoksella ja 25 kuivattiin (MgS04). Liuotteen haihduttaminen antoi vaaleanruskean öljyn, joka kiinteytyi jäähdytettäessä vaalean kellanruskeaksi kiinteäksi aineeksi. Saanto: 311 mg, 96 %. Sp. 74°C; JH NMR (CDCI3) δ: 7,5-7,0 (6H, m), 6,32 (1H, d, J = 8,3 Hz), 4,91 (1H, d, J = 8,8 Hz), 4,16 (1H, ddd, J = 9,0, 8,8 ja 5,3 Hz), 3,44 (1H, dd, J = 16,3 ja 9,1 Hz), 3,10 (1H, dd, J = 16,3 ja 5,3 Hz), 2,95 (3H, s), 1,29 (9H, s).

30 V Esimerkki 39 cis-4b.5.9b. 10-tetrahvdro-4b-metwli-8-tert-butwli-indenori.2-b1indoli

Liekkikuivattu keittopullo puhdistettiin typellä ja siihen pantiin 4b,5,9b,10-tetra-35 hydro-8-tert-butyyli-indeno[ 1,2-b]indolia (240 mg, 0,91 mM) ja vastatislattua tetrahydrofuraania (3 cm3). Näin muodostunut liuos jäähdytettiin -78°C:seen ja n-bu-tyylilitiumia (0,60 cm3 1,6 M liuosta heksaanissa, 1,1 ekv.) lisättiin tiputtamalla. Vaaleankeltaisen liuoksen annettiin lämmetä huoneenlämpötilaan ja kuivaa hiilidi- 100800 35 oksidikaasua kuplitettiin liuoksen läpi, kunnes se muuttui jokseenkin värittömäksi. Liuote poistettiin huolellisesti alipaineessa ja kuiva typpikehä järjestettiin. Väritön jäännös liuotettiin uudelleen kuivaan tetrahydrofuraaniin (3 cm^) ja liuos jäähdytettiin -78°C:seen ja 1,1 ekvivalenttia n-butyylilitiumia lisättiin. Reaktioseosta se-5 koitettiin -78°C:ssa 2 tuntia ja sitten se käsiteltiin jodimetaanilla (0,60 cm^, 1,1 ekv.). Kun reaktioseoksen oh annettu lämmetä huoneenlämpötilaan, liuotteet poistettiin ja 2 M HCl-liuos (20 cm^) lisättiin. Kun kaasun kehittyminen oli lakannut (noin 20 minuuttia), liuos neutraloitiin kiinteällä natriumkarbonaatilla. Orgaaninen materiaali uutettiin dikloorimetaanilla (3x5 cm^) ja yhdistetyt uutteet pestiin suola-10 liuoksella ja kuivattiin (Na2S04). Liuotteen poistamisen jälkeen jäljelle jäävä kiinteä tuote puhdistettiin "flash"-kromatografialla [Rf = 0,4 (10 % EtOAc/60-80°C bensiini)] eluoiden 10 % etyyliasetaatti/60-80°C bensiinillä. Tällöin saatiin vaaleankeltainen öljy, joka kiinteytyi -20°C:ssa vahamaiseksi kiinteäksi aineeksi. Saanto: 0,86 mg, 34 %. Sp. 82-84°C. NMR (CDC13) δ: 7,4-7,0 (6H, m), 6,49 (1H, d, J = 15 9,0 Hz), 4,15 (1H, leveä m), 3,71 (1H, leveä m), 3,51 (1H, dd, J = 16,0 ja 9,0 Hz), 3,17 (1H, dd, J = 16,0 ja 5 Hz), 1,61 (3H, s), 1,27 (9H, s).

Esimerkki 40 cis-4b.5.9b. 10-tetrahvdro-8-fluori-indenor 1.2-blindoli 20

Liuos, joka sisälsi 5,10-dihydro-8-fluori-indeno[l,2-b]mdoli (0,8 g, 3,6 mM) trifluo-rietikkahapossa (5 cm^), sekoitettiin nopeasti ja trietyylisilaania (0,86 cm^, 1,5 ekv.) lisättiin yhdessä erässä. Reaktioseosta sekoitettiin 4 tuntia ja trifluorietikka-happoylimäärä poistettiin tyhjössä. Vettä (10 cm^) lisättiin kiinteään aineeseen ja 25 liete neutraloitiin lisäämällä natriumhydroksidia. Tuote uutettiin dietyylieetteriin ja pestiin vedellä, kuivattiin ja haihdutettiin, jolloin saatiin harmaanvalkoinen kiinteä aine. Se kiteytettiin etyyliasetaatti/petrolieetteristä (60-80°C), jolloin saatiin väritön kiinteä aine. Saanto: 0,53 g, 81 %. Sp. 92-94°C. JH NMR (CDCI3) δ: 7,34 (1H, m), 7,8-7,2 (3H, m), 6,87 (1H, m), 6,69 (1H, m), 6,52 (1H, dd, J = 8,4 ja 4,4 Hz), 5,27 30 (1H, d, J = 8,8 Hz), 4,16 (1H, ddm, J = 8,8 ja 8,3 Hz), 4,1 (1H, leveä s), 3,51 (1H, • dd, J = 16,5 ja 8,3 Hz), 3,18 (1H, dd, J = 16,5 ja 2,0 Hz).

Esimerkki 41 cis-4b.5.9b. 10-tetrahvdro-3.7-dinitroindenor 1.2-blindoli 35

Liuosta, jossa oli cis-4b,5,9b,10-tetrahydroindeno[l,2-b]indolia (1,0 g, 4,8 mM) väkevässä rikkihapossa (20 cm^), sekoitettiin voimakkaasti 45 minuuttia ja se jäähdytettiin sitten 0°C:seen ja käsiteltiin kaliumnitraatilla (0,7 g, 6,9 mM) pienissä 100800 36 erissä 15 minuutin kuluessa. Kirsikanpunaista liuosta sekoitettiin 0°C:ssa vielä 15 minuuttia ja sitten se kaadettiin jäälle. Muodostunut keltainen kiinteä aine koottiin suodattamalla ja pestiin ensin vedellä ja sitten kuumalla 25 % etanoli-vesiliuoksella (30 cm^). Viimeisestä pesusta saadun suodoksen annettiin jäähtyä, minkä jälkeen 5 otsikkoyhdiste erottui syvänkeltaisina liuskeina. Saanto: 0,45 g, 31,5 %. Sp. 174-176°C. ΪΗ NMR (CDCI3) δ: 3,30 (1H, dd, J = 17,5 ja 1,0 Hz), 3,65 (1H, dd, J = 17,5 ja 8,5 Hz), 4,20 (1H, leveä s), 4,33 (1H, t, J = 8,5 Hz), 5,41 (1H, d, J = 8,5 Hz), 7,22 (1H, dd, J = 8,0 ja 1,0 Hz), 7,28 (1H, d, J = 2,0 Hz), 7,38 (1H, d, J = 8,5 Hz), 7,50 (1H, dd, J = 8,0 ja 2,0 Hz), 8,17 (1H, dd, J - 8,5 ja 2,0 Hz), 8,40 (1H, d, 10 J = 2,0 Hz).

Esimerkki 42 cis-4b.5.9b. 10-tetrahvdro-5-asetwli-3.7-dinitroindenof 1.2-blindoli 15 cis-4b,5,9b, 10-tetrahydro-3,7-dinitroindeno[ 1,2-b]indolia (0,40 g, 1,35 mM) ja etikkahappoanhydridiä (1,5 cm3) kuumennettiin 90°C:ssa 1 tunti, jäähdytettiin ja kaadettiin jääveteen (7 cm3) ja seosta sekoitettiin 30 minuuttia. Kerrostunut väritön kiinteä aine koottiin ja syötettiin kuumaan etanoliin. Kuumana suodatuksen jälkeen otsikkoyhdiste erottui kylmästä suodoksesta prismoina. Saanto: 0,42 g, 92 %. Sp.

20 264-266°C.

Esimerkki 43 cis-(E)- ia -fZ)-4b.5.9b. 10-tetrahvdro-5-asetwli-3.7-diaminoindenofl.2-blindoli 25 cis-4b,5,9b,10-tetrahydro-5-asetyyli-3,7-di-aminoindeno[l,2-b]indolia (0,4 g, 1,2 mM) sekoitettiin jääetikkahapon (30 cm3) ja veden (5 cm3) liuoksessa. Tähän seokseen lisättiin titaniumtrikloridia (3 cm3 30 % liuosta 24 % kloorivetyhappovesi-liuoksessa) 5 minuutin kuluessa. Kun vielä 2 tuntia oli kulunut, reaktioseos muuttui värittömäksi ja lisäannos (0,5 cm3) titaniumtrikloridireagenssia syötettiin. Reagoi-30 maton lähtömateriaali suodatettiin pois (0,13 g) ja suodos kaadettiin jäämurskaan. Näin saadun liuoksen pH säädettiin arvoon 6(15 cm3, o,89 ammoniakki) ja tuote uutettiin etyyliasetaattiin (8 x 50 cm3). Tämä uutto tapahtui erittäin hitaasti, koska muodostui emulsioita, ja se saatiin päätökseen 3 vuorokauden kuluessa. Uutteet yhdistettiin ja haihdutettiin, jolloin saatiin vihertävä kiinteä aine, joka jauhettiin 35 hienoksi dietyylieetterin kanssa, jolloin saatiin värittömiä mikroprismoja. Saanto: 0,13 g, 58 %. Sp. 254-256°C.

Esimerkki 44 cis-4b.5.9b. 10-tetrahvdro-5-asetwli-3.7-di-(N.N-dietwliamino)indeno Γ1.2-blindoli cis-4b,5,9b,10-tetrahydro-5-asetyyli-3,7-diaminoindeno[l,2-b]indoli (0,13 g) liuo-5 tettiin tetrahydrofuraaniin (18 cm3), joka sisälsi vettä (3,5 cm3), natriumkarbonaattia (0,3 g) ja etyylijodidia (0,8 cm3), ja kuumennettiin palautusjäähdyttäen 24 tuntia. Sitten lisättiin vielä etyylijodidia (0,8 cm3) ja kuumentamista jatkettiin 4 tuntia. Liuotteet ja ylimäärä reagenssia poistettiin ja jäännös uutettiin dietyylieetterillä (6 x 10 cm·^). Yhdistetyt uutteet haihdutettiin, jolloin saatiin ruskea kumi (0,33 g), se 10 puhdistettiin pylväskromatografialla silikalla (4 g), eluoiden 20 % etyyliasetaatti/60-80°C petrolieetterillä. Tämä antoi otsikkoyhdisteen värittöminä prismoina. Saanto: 0,023 g, 12,5 %. Sp. 137-138°C. NMR (CDC13) δ: 4 x [1,12 (6H, t, J = 7,03 Hz)], 2,50 ja 2,57 2 x [(3H, s)], 3,05 (1H, d, J = 16,5 Hz), 3,10 (1H, d, J = 16,0 Hz), 3,26 ja 3,30 4 x [(4H, q, J = 7,0 Hz)], 3,98 (1H, dd, J = 7,5 ja 7,5 Hz), 4,07 (1H, dd, 15 J = 7,5 ja 7,0 Hz), 5,70 (1H, d, J = 7,5 Hz), 6,23 (1H, d, J = 7,0 Hz), 6,32-6,40 (2H, m), 6,59 (2H, ddd, J = 8,0, 8,0 1,5 Hz), 6,96 (2H, d, J = 1,0 Hz), 6,95-7,10 (5H, m), 7,61 (1H, d, J = 1,5 Hz).

Esimerkki 45 20 cis-5.5a.6.10b-tetrahvdro-9-metoksi-indenof2.1-blindoli 5,6-dihydro-9-metoksi-indeno[2,l-b]indolia (0,56 g) lietettynä jääetikkahappoon (25 cm^) i6°C:ssa käsiteltiin natriumsyanoboorihydridillä (1,0 g) pienissä erissä 6 tunnin kuluessa. Saatua liuosta sekoitettiin vielä 1 tuntija sitten se kaadettiin jääveteen 25 (100 cm3). Liuos erotettiin pienestä määrästä hartsiainetta ja suodos käsiteltiin nat riumkarbonaatilla (2,5 g) pienissä erissä voimakkaasti sekoittaen. Erottunut väritön kiinteä aine koottiin ja kiteytettiin etanolista neuloina. Saanto: 0,31 g, 55 %. Sp. 129-130°C. JH NMR (CDCI3) δ: 3,06 (1H, dd, J = 16,5 ja 1,5 Hz), 3,2-3,8 (1H, leveä s), 3,31 (1H, dd, J = 16,5 ja 6,0 Hz), 3,76 (3H, s), 4,71 (1H, d, J = 8,0 Hz), 4,80 30 (1H, ddd, J = 8,0, 6,0 ja 2,0 Hz), 6,5 (1H, d, J = 8,5 Hz), 6,58 (1H, dd, J = 8,5 ja 2,5 : Hz), 6,99 (1H, d, J = 2,5 Hz), 7,15-7,24 (3H, m), 7,33-7,36 (1H, m).

Esimerkki 46 cis-5.5a.6.10b-tetrahvdro-9-isopropwli-indenor2. l-blindoli ia cis-5.5a.6.10b-tetra-35 hvdro-6-etwli-9-isopropwli-indenor2.1 -blindoli

Suspensioon, joka sisälsi 5,6-dihydro-9-isopropyyli-indeno[2, l-b]indolia (2,3 g, 9,3 mmol) jääetikkahapossa (30 cm3), lisättiin natriumsyanoboorihydridiä (2 g) pieninä 100800 38 erinä 30 minuutin kuluessa. Seosta sekoitettiin 3 tuntia ja sitten saatu liuos kaadettiin jääveteen (50 cm3) ja sitä sekoitettiin 1 tunti. Kirkas liuos neutraloitiin huolellisesti natriumhydroksidilla, jolloin muodostui valkoinen saostuma. Se uutettiin dietyylieetteriin (3x10 cm3) ja yhdistetyt uutteet pestiin runsaalla vedellä, kuivat-5 tiin (Na2SC>4) ja haihdutettiin. Jäännöksen ohutlevykromatografia-analyysi osoitti, että oli muodostunut kaksi tuotetta, jotka eristettiin pylväskromatografialla eluoiden 10 % etyyliasetaatti/petrolieetterillä (60-80°C), jolloin saatiin ensiksi pieni määrä cis-5,5a,6,10b-tetrahydro-6-etyyli-9-isopropyyli-indeno[2,l-b]indolia (0,07 g, 3 %) ja sitten otsikossa mainittua tuotetta (0,93 g, 40 %), molemmat värittöminä öljyinä. 10 Viimeksi mainitut tuotteet puhdistettiin edelleen tislaamalla. *H NMR (CDCI3) δ: 7,4-7,1 (5H, m), 6,87 (1H, dd, J = 8,1, 1,8 Hz), 6,50 (1H, d, J = 8,1 Hz), 4,81 (1H, ddd, J = 8,1, 6,2 ja 2,0 Hz), 4,73 (1H, d, J = 8,1 Hz), 3,32 (1H, dd, J = 16,6 ja 6,2 Hz), 3,08 (1H, dd, J = 16,6 ja 2,0 Hz), 2,83 (1H, septetti, J = 6,9 Hz), 1,23 (6H, d, J = 6,9 Hz).

15

Esimerkki 47 cis-5.5a.6.10b-tetrahvdro-9-fluori-indenol2.1-blindoli 5,6-dihydro-9-fluori-indeno[2,l-b]indolia (0,55 g, 2,5 mM) jääetikkahapossa (25 20 cm3) sekoitettiin ja käsiteltiin natriumsyanoboorihydridillä (2,1 g, 36,5 mM) pienissä erissä 10 tunnin kuluessa pitäen samalla lämpötila 18°C:n alapuolella. Pelkis-tysaineen määrä osoittautuu kriittiseksi, koska muodostuu seoksia, jos sitä lisätään enemmän. Sitten reaktioseos lisättiin jääveteen (100 cm3) ja muodostunut keltainen öljy erotettiin vesifaasista. Vesifaasin pH säädettiin sitten arvoon 6 lisäämällä nat-25 riumkarbonaattia (30 g) ja eronnut väritön öljy uutettiin sitten dietyylieetteriin (4 x 20 cm3). Yhdistetyt uutteet kuivattiin ja haihdutettiin, jolloin saatiin öljy, joka uutettiin kuumalla 60-80°C petrolieetterillä (6 x 10 cm3) ja jäännös jauhettiin hienoksi etanolin (1 cm3) kanssa. Tämä käsittely sai yhdisteen kiteytymään värittöminä prismoina, jotka kiteytettiin uudelleen etanolista, jolloin saatiin otsikkoyhdiste.

30 Saanto: 60 mg, 11 %. Sp. 116-117°C; NMR (CDCI3) δ: 3,06 (1H, dd, J = 16,5 ja 1,5 Hz), 3,31 (1H, dd, J = 16,5 ja 6,0 Hz), 3,67 (1H, leveä s), 4,70 (1H, d, J = 8,0 Hz), 4,82 (1H, ddd, J = 8,0, 6,0 ja 1,5 Hz), 6,43 (1H, dd, J = 8,5 ja 4,0 Hz), 6,70 (1H, ddd, J = 8,5, 8,5 ja 2,5 Hz), 7,07 (1H, dd, J = 8,5 ja 2,5 Hz), 7,16-7,25 (3H, m), 7,33 (1H, m).

35 100800 39

Esimerkki 48 cis-9-tert-butwli-5.5a.6.10b-tetrahvdroindenoi2.1-blindoli 9-tert-butyyli-5,6-dihydroindeno[2,l-b]indolia (0,16 mg, 0,6 mM) jääetikkahapossa 5 (25 cm^) sekoitettiin ja käsiteltiin natriumsyanoboorihydridillä (0,7 g, 11 mM) pie nissä erissä 3 tunnin kuluessa pitäen lämpötilan 18°C:n alapuolella. Sitten reaktio-seos lisättiin jääveteen (80 cm3) ja muodostunut keltainen öljy erotettiin vesifaasis-ta. Vesifaasin pH säädettiin sitten arvoon 6 lisäämällä natriumkarbonaattia (25 g) ja erottunut väritön öljy uutettiin dietyylieetteriin (6 x 10 cm3). Yhdistetyt uutteet kui-10 vattiin ja haihdutettiin, jolloin saatiin öljy, joka puhdistettiin "flash"-kromatografial-la silikalla eluoiden 5 % etyyliasetaatti/60-80°C petrolieetterillä. Tämä antoi otsik-koyhdisteen värittöminä prismoina. Saanto: 0,11 g, 7 %. Sp. 92°C; *H NMR (CDC13) δ: 1,30 (9H, s), 3,05 (1H, d, J = 16,5 Hz), 3,28 (1H, dd, J = 16,5 ja 6,0 Hz), 3,79 (1H, s), 4,70 (1H, d, J = 8,0 Hz), 4,75 (1H, ddd, J = 8,0, 6,0 ja 2,0 Hz), 15 6,48 (1H, d, J = 8,0 Hz), 7,03 (1H, dd, J = 8,0 ja 2,0 Hz), 7,14-7,24 (3H, m), 7,34 (1H, m), 7,40 (1H, d, J = 2,0 Hz).

Esimerkki 49 9b, 10-dihvdro-9b-metwli-indenon.2-blindoli 20

Liekkikuivattuun keittopulloon pantiin liuos, joka sisälsi 2-metyyli-l-indanonin fenyylihydratsonia (1,47 g, 6,22 mmol) DCM:ssa (30 cm3) ja sen jälkeen fosfori-trikloridia (3,4 cm3 2,0 M liuosta DCM:ssa). Liuosta keitettiin palautusjäähdyttäen 2 tuntia, jäähdytettiin ja kaadettiin kyllästettyyn natriumvetykarbonaattiliuokseen.

25 Tunnin sekoittamisen jälkeen orgaaninen aine uutettiin lisämäärällä DCM:a. Emäksiset komponentit uutettiin takaisin 2 M kloorivetyhappoon. Tämä vesipitoinen liuos tehtiin emäksiseksi ja uutettiin uudelleen DCM:lla. Liuotteen haihduttaminen pois tyhjössä ja jäännöksen pylväskromatografia [20 % EtOAc/bensiini (60-80°C)] antoi kirkkaan kumin [Rf (10 % EtOAc/bensiini) 0,1], joka voitiin puhdistaa edelleen 30 pallokolvista toiseen tislaamalla, jolloin saatiin otsikkoyhdiste kumina. Saanto: 0,4 g (30 %). Kp. 170°C/0,2 mmHg. lR NMR (CDCI3) δ: 1,39 (3H, s), 2,84 (1H, d), 3,11 (1H, d)6,4, 8,4 (8H, m).

Esimerkki 50 35 cis-9b. 10-dihvdro-8.9b-dimetwli-indenor l,2-blindoli

Liuokseen, joka sisälsi 4-metyylifenyylihydratsiinihydrokloridia (9,73 g, 0,06 mmol) absoluuttisessa etanolissa (240 cm3), lisättiin tiputtamalla 2-metyyli-l-in- 100800 40 danonia (8,14 g, 0,056 mmol) ja sen jälkeen väkevää kloorivetyhappoa (3 cm1). Seosta keitettiin 2 tuntia, liuotteet poistettiin ja jäännös jaettiin dietyylieetteriin ja veteen ja kerrokset erotettiin. Vesifaasi uutettiin dietyylieetterillä (3 x 50 cm1). Yhdistetyt orgaaniset faasit pestiin peräjälkeen kyllästetyllä natriumbikarbonaatti-5 liuoksella ja suolaliuoksella, kuivattiin (Na2SC>4) ja haihdutettiin. Näin saatu raaka materiaali puhdistettiin pylväskromatografialla silikageelillä eluoiden 7-12 % etyyli-asetaatti/60-80oC bensiinillä, jolloin saatiin kiinteä aine (5,05 g, 39%). iHNMR (CDC13) δ: 7,87 (1H, m), 7,51 (1H, d, J = 7,9 Hz), 7,39 (3H, m), 7,25 (1H, s), 7,15 (1H, d, J = 8,0 Hz), 3,07 (1H, d, J = 14,7 Hz), 2,81 (1H, d, J = 14,7 Hz), 2,41 (3H, 10 s), 7,37 (3H, s).

Esimerkki 51 9b. 10-dihvdro-9b-metwli-8-isopropwli-indenor 1.2-blindoli 15 Liuokseen, jossa oli 4-isopropyylifenyylihydratsiinihydrokloridia (6,50 g, 0,035 mmol) absoluuttisessa etanolissa (140 cm1), lisättiin tiputtaen 2-metyyli-l-indano-nia (4,6 g, 0,032 mmol) ja sen jälkeen väkevää kloorivetyhappoa (2,5 cm1). Seosta keitettiin palautusjäähdyttäen 2 tuntia ja etanoli haihdutettiin. Jäännös jaettiin dietyylieetteriin (100 cm3) ja veteen (100 cm3) ja kerrokset erotettiin. Vesifaasi uu-20 tettiin dietyylieetterillä (2 x 30 cm3) ja orgaaniset uutteet pestiin peräjälkeen kyllästetyllä natriumbikarbonaattiliuoksella ja suolaliuoksella ja sitten kuivattiin (Na2SC>4). Liuotteen poisto antoi otsikkoyhdisteen, joka puhdistettiin "flash"-kro-matografialla silikageelillä eluoiden 10 % etyyliasetaatti/60-80oC bensiinillä, jolloi-nä saatiin keltainen kumi; (1,62 g, 25 %); ^H NMR (CDCI3) δ: 7,88 (1H, m), 7,55 25 (1H, d, J = 8,1 Hz), 7,41 (3H, m), 7,30 (1H, d, J = 1,8 Hz), 7,23 (1H, dd, J = 1,8 Hz ja 7,1 Hz), 3,10 (1H, d, J = 14,7 Hz), 2,98 (1H, septetti, J = 7,0 Hz), 2,85 (1H, d, J = 14,7 Hz), 1,39 (3H, s), 1,30 (6H, d J = 7,0 Hz).

Lähtömateriaaleina käytettyjä DHII-ja iso-DHII-johdoksia kuvataan tarkemmin rin-30 nakkaishakemuksen työesimerkeissä.

Esimerkki 52 cis-(E)- ia -(Z)-5-asetwli-8-amino-4b.5.9b. 10-tetrahvdroindenor 1.2-blindoli 5 (E)- ja (Z)-5-asetyyli-8-nitro-4b,5,9b, 10-tetrahydroindeno[ 1,2-b]indolia (4,2 g) jääetikkahapossa (250 cm1) ja vettä (25 cm1) sekoitettiin ja käsiteltiin 30 % tita-• niumtrikloridivesiliuoksella (42 cm1) 5 minuutin ajan. Vielä 15 minuutin kuluttua reaktioseos kaadettiin jääveteen (800 cm1) ja liuoksen pH säädettiin arvoon 4,5 100800 41 ammoniumhydroksidilla. Sitten tuote uutettiin mahdollisimman nopeasti dikloorime-taaniin (6 x 75 cm^). Yhdistetyt uutteet kuivattiin ja haihdutettiin, jolloin saatiin kiinteä aine, joka jauhettiin hienoksi dietyylieetterin kanssa, jolloin saatiin otsikko-yhdisteet värittömänä kiinteänä aineena. Saanto: 2,9 g, 77 %. Sp. 196-198°C; 5 NMR δ: 2,42 (3H, s), 2,55 (3H), 3,16 (1H, d, J = 16 Hz), 3,22 (1H, d, J = 16 Hz), 3,45 (2H, m), 3,65 (4H, vaihdettu D20:lla), 4,01 (1H, dd, J = 8 Hz), 4,13 (1H, dd, J = 7,5 Hz), 5,72 (1H, d), 6,26 (1H, d, J = 8 Hz), 6,46 (2H, d, J = 8,5 Hz), 6,57 (1H, s), 6,64 (1H), 6,82 (1H, d, J = 8,5 Hz), 7,16-7,25 (6H, m), 7,38 (1H, d, J = 7,5 Hz), 7,64 (1H, d, J = 7,5 Hz), 7,85 (1H, d, J = 8,5 Hz).

10

Otsikkoyhdisteet voidaan valmistaa samanlaisin saannoin hydraamalla katalyytti-sesti isomeeristen nitroyhdisteiden seoksia 10 %:isella palladiumilla käyttäen hiili-katalyyttiä ja kloroformia liuotteena.

15 Esimerkki 53 cis-(E)- ia -(ZV5-asetwli-8-(N-asetwliaminol-4b.5.9b. 10-tetrahvdroindenon.2-bl-indoli

Esimerkistä 52 saatu cis-(E)-ja -(Z)-5-asetyyli-8-(N-asetyyliamino)-4b,5,9b,10-tet-20 rahydroindeno[ 1,2-b]indoliseos asetyloitiin konventionaalisilla menetelmillä, jolloin saatiin otsikkoyhdisteet. [Todettu: C 74,1; H 5,8; N 9,0; C19H18N2O2 edellyttää: C 74,5; H 5,9; N 9,2 %].

Esimerkki 54 • 25 cis-4b.5.9b. 10-tetrahvdro-4.6-dimetwli-8-metoksi-indenof 1.2-blindoli i) 4-hydratsiini-3-metyylianisolihydrokloridi 33 g (0,19 mol) 4-metoksi-2-metyylianiliinihydrokloridia lietettiin 100 ml:aan (6 M) kloorivetyhappoa argonkehässä. Seos jäähdytettiin +5°C:seen ja liuos, jossa oli 13,1 30 g (0,19 mol) NaN02:a 35 ml:ssa vettä, lisättiin tiputtaen sellaisella nopeudella, että ·' lämpötila pysyi +5°C:n alapuolella. Kun lisäys oli saatu päätökseen, liuosta se koitettiin 30 minuuttia +5°C:ssa. 101,7 g (0,58 mol) Na2S204:a liuotettiin 500 ml:aan vettä +5°C:ssa ja liuos kaadettiin reaktioseokseen ja sitä sekoitettiin 30 minuuttia. 250 ml dietyylieetteriä lisättiin ja seos tehtiin emäksiseksi NaOH:lla (10 M), 35 kunnes sen pH oli 9. Faasit erotettiin ja vesifaasi uutettiin dietyylieetterillä. Yhdistetyt orgaaniset faasit pestiin NaCl (vesiliuos) ja kuivattiin Na2SC>4:lla. Eetterifaasi suodatettiin seliitin läpi. Tuotteen sisältävään liuokseen lisättiin kyllästetty HCl(g) liuos eetterissä ja hydratsiinin hydrokloridisuola saostui. Kiteet koottiin alipainesuo- 42 100800 dattimella ja pestiin dietyylieetterillä ja kloroformilla. 29,5 g (82 %) tuotetta eristettiin.

ii) 5,10-dihydro-4,6-dimetyyli-8-metoksi-indeno[ l,2-b]indoli 5 130 ml etanolia, kyllästetty HCl(g) liuos 130 ml:ssa eetteriä, 5,8 g (31 mmol) 4-hyd- ratsiini-3-metyylianisolihydrokloridia ja 4,8 g (31 mmol) 7-metyyli-l-indanonia lisättiin keittopulloon. Liuosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa yön yli. Jonkin verran 7-metyyli-l-indanonia oli vielä jäljellä reaktioseoksessa. Liuokseen lisättiin ylimäärä 4-hydratsiini-3-metyylianisolihydrokloridia (0,6 g ) ja sitä sekoitettiin yön yli.

10 Liuote haihdutettiin pois ja raaka tuote liuotettiin eetteriin, pestiin kaksi kertaa NaOH:lla (1 M) ja vedellä. Orgaaninen faasi kuivattiin Na2S04:lla, suodatettiin ja haihdutettiin. Jäljellejäänyt öljy kromatografoitiin ja eluoitiin dikloorimetaanilla.

1,3 g (16 % tuotetta eristettiin.

15 iii) cis-4b,5,9b, 10-tetrahydro-4,6-dimetyyli-8-metoksi-indeno[ 1,2-b]indoli 16 ml dioksaania, 1,3 g (4,9 mmol) 5,10-dihydro-4,6-dimetyyli-8-metoksi-indeno-[l,2-b]indolia ja 1,98 g (19,6 mmol) morfoliiniboraania lisättiin pyöreäpohjaiseen keittopulloon. 4 ml (väkevää) kloorivetyhappoa lisättiin tiputtamalla samalla kun liuosta sekoitettiin. Reaktioseosta keitettiin palautusjäähdyttäen 1 tunti. 8 ml (6 M) 20 kloorivetyhappoa lisättiin ja liuosta keitettiin palautusjäähdyttäen 30 minuuttia. Kun liuoksen lämpötila oli laskenut huoneenlämpötilaan, lisättiin 50 ml vettä. Seos tehtiin emäksiseksi NaOH:lla (vesil.), kunnes pH oli 9. Tuote uutettiin dikloorimetaanilla kaksi kertaa. Orgaaninen faasi kuivattiin Na2S04:lla ja liuote haihdutettiin. Tuote kromatografoitiin dikloorimetaanissa. Eristetty tuote liuotettiin asetonitriiliin, 25 kyllästetty HCl(g) liuos eetterissä lisättiin ja tuote saostui hydrokloridisuolana ja poistettiin suodattamalla. 1,2 g (82,2 %) tuotetta eristettiin. NMR (CDCI3) δ: 2,33 (3H, s), 2,48 (3H, s), 2,95 (1H, dd), 3,56 (1H, dd), 3,77 (3H, s), 4,44 (1H, ddd), 5,71 (1H, d), 6,78 (1H, s), 6,93 (1H, s), 7,11-7,17 (2H, m), 7,30 (1H, d).

30 Esimerkki 55 cis-5.5a.6.10b-tetrahvdro-7-metwli-9-metoksi-indenof 2.1 -blindoli i) 4-hydratsiini-3-metyylianisoli Jäähdytetty, sekoitettu suspensio, jossa oli 33,0 g (0,19 mol) 2-metyyli-4-metoksi-35 aniliinia, HCl:a 100 ml:ssa 6 N kloorivetyhappoa käsiteltiin tiputtamalla argonke-hässä liuoksella, jossa oli 13,1 g (0,19 mol) natriumnitriittiä liuotettuna 35 ml:aan vettä. Lisäysnopeus oli sellainen, että lämpötila ei noussut +5°C:n yläpuolelle. Kim lisäys oli saatu päätökseen, saatua seosta sekoitettiin vielä 30 minuuttia samassa 100800 43 lämpötilassa. Sitten reaktioseos lisättiin sekoittaen argonkehässä jäähdytettyyn (+5°C) liuokseen, jossa oli 101,7 g (0,58 mol) Na2S2C>4:a liuotettuna 500 ml.aan vettä. Kun seosta oli sekoitettu 20 minuuttia tässä lämpötilassa, lisättiin 250 ml eetteriä ja sen jälkeen tehtiin emäksiseksi pH-arvoon 9 10 N natriumhydroksidiliuok-5 sella. Orgaaninen faasi erotettiin ja pestiin natriumkloridiliuoksella. Kuivaamisen (Na2S04), puuhiilellä käsittelyn ja suodattamisen jälkeen tuote saostui hydroklori-dina, kun siihen lisättiin HCl(g)/eetteriä (pH-arvoon 3). Suodattaminen ja pesu eetterillä ja kloroformilla antoi 29,6 g (69 %) tuotetta. Sp. 105°C.

10 ii) 5,6-dihydro-7-metyyli-9-metoksi-indeno[2,l-b]indoli

Seosta, jossa oli 1,9 g (0,01 mol) 4-hydratsiini-3-metyylianisolihydrokloridia ja 1,3 g (0,01 mol) 1-indanonia 25 ml:ssa etikkahappoa, keitettiin palautusjäähdyttäen ar-gonäkehässä 6 tuntia. Vedellä laimentamisen jälkeen saatu seos uutettiin 3 kertaa metyleenikloridilla. Yhdistetyt orgaaniset uutteet pestiin kahdesti NaOH-liuoksella 15 (1 M), kuivattiin (Na2S04), käsiteltiin puuhiilellä ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin raaka tuote. Puhdistaminen silikalla käyttäen metyleenikloridia eluenttina antoi 0,85 (34 %) tuotetta. Sp. 208°C.

iii) cis-5,5a,6,10b-tetrahydro-7-metyyli-9-metoksi-indeno[2, l-b]indoli 20 Sekoitettuun suspensioon, jossa oli 0,74 g (0,00296 mol) 5,6-dihydro-7-metyyli-9-metoksi-indeno[2,l-b]indolia 25 ml:ssa etikkahappoa, lisättiin 0,93 g (0,0148 mol) NaCNBH3:a erissä 5 minuutin kuluessa. Seosta sekoitettiin 3 tuntia huoneenlämpö-tilassa, minkä jälkeen se laimennettiin vedellä ja sitten sitä sekoitettiin vielä tunti. Saatu seos tehtiin emäksiseksi NaOH-liuoksella (10 M) pH-arvoon 9 ja sitten se 25 uutettiin kahdesti eetterillä. Yhdistetyt orgaaniset faasit pestiin kahdesti NaCl-vesi-liuoksella ja kuivattiin (Na2S04). Haihduttamisen jälkeen jäännös puhdistettiin kromatografialla silikalla käyttäen metyleenikloridia eluenttina. Tämä antoi 0,61 g (24 %) odotettua tuotetta. Sp. 104°C. NMR (CDC13) 5: 2,2 (3H, s), 3,0-3,4 (2H, dd), 3,4-3,5 (1H, leveä s), 3,75 (3H, s), 4,65-4,80 (2H, m), 6,4-7,4 (6H, m) - siitä 30 6,45 (lH,dd), 6,75 (1H, dd).

• » iv) Vaiheessa iii) saatu raseeminen seos erotettiin ja saaduilla enantiomeereillä oli seuraavat fysikaalis-kemialliset ominaisuudet: 35 (-) cis-5,5a,6,10b-tetrahydro-7-metyyli-9-metoksi-indeno[2, l-b]indoli [a]D = -14,5°(C=l,CH2Cl2)

Sp. 93,5°C

(+) cis-5,5a,6,10b-tetrahydro-7-metyyli-9-metoksi-indeno[2, l-b]indoli 100800 44 [a]D = +14,5° (C=l, CH2C12)

Sp. 93,5°C

Esimerkki 56 5 cis-4b.5.9b. 10-tetrahvdro-8-metoksi-4b.6.9b-trimetwli-indenof 1.2-blindoli i) 2-metyyli-1 -indanonin 2-metyyli-4-metoksifenyylihydratsoni Seos, jossa oli 14,9 g (0,08 mol) 4-hydratsiini-3-metyylianisolia [valmistettu kuten esimerkissä 55(i)] ja 20 g (0,24 mol) natriumasetaattia 60 ml:ssa vettä, sekoitettiin 10 huolellisesti ja sitten se suodatettiin. Sekoitettuun suodokseen lisättiin 9,3 g (0,06 mol) 2-metyyli-1 -indanonia 10 ml:ssa etanolia, jolloin erottui punertava öljy. Seoksen jäähtyessä öljy kiteytyi. Kiteet koottiin ja kiteytettiin uudelleen etanolista, jolloin saatiin 5,0 g (30 %) odotettua tuotetta.

15 ii) 9b,10-dihydro-8-metoksi-6,9b-dimetyyli-indeno[l,2-b]indoli

Sekoitettuun liuokseen, jossa oli edellä saatua hydratsonia 100 ml:ssa etanolia, lisättiin 75 ml HCl-kyllästettyä eetteriä 35°C:ssa 15 minuutin kuluessa. Seosta kuumennettiin 35-45°C:ssa 10 minuuttia ja sitten sen annettiin jäähtyä. Liuotteen haihduttamisen jälkeen jäännös liuotettiin metyleeni-kloridiin, pestiin laimealla natriumklori-20 dilla (vesil), kuivattiin (Na2SC>4) ja haihdutettiin, jolloin saatiin 1,7 g (35 %) raaka-tuotetta ruskeana öljynä. Tämä käytettiin suoraan seuraavaan vaiheeseen ilman lisäpuhdistusta.

iii) cis-4b,5,9b, 10-tetrahydro-8-metoksi-4b,6,9b-trimetyyli-indeno[l,2-b]indoli 25 1,7 g (0,006 mol) edellä saatua raakamateriaalia liuotettiin 20 ml:aan tetrahydro- furaania ja jäähdytettiin -78°C:seen argonkehässä. Tähän sekoitettuun liuokseen lisättiin 10 ml metyylilitiumia (1,6 M) eetterissä, minkä jälkeen seoksen annettiin lämmetä huoneenlämpötilaan (3 tuntia). Sammuttaminen suoritettiin sitten lisäämällä eetterin ja kyllästetyn ammoniumkloridiliuoksen seos. Orgaaninen faasi erotettiin, 30 pestiin vedellä, kuivattiin (Na2S04) ja haihdutettiin. Jäännös puhdistettiin kroma-; tografialla silikageelillä käyttäen etyyliasetaatti/isosyanaattia (2/8) eluenttina. Saa dun öljyn loppupesu iso-oktaanilla antoi 0,4 g (24 %) tuotetta värittöminä kiteinä. lH NMR (CDC13) δ: 1,35 (3H, s), 1,5 (3H, s), 2,1 (3H, s), 3,08 (1H, d), 3,38 (1H, d), 3,7 (3H, s), 6,44 (1H, d), 6,63 (1H, d), 7,1-7,28 (3H, m), 7,35 (1H, d).

35

Claims

45 100800

1. Menetelmä terapeuttisesti aktiivisen tetrahydroindenoindolin, valmistamiseksi, jolla on kaava IA tai IB R6 Ri rj2 R7 R6 „ R10 ^ i ΓΧ21 r8 r3 I p10 D3 | r7

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan kaavan IA tai IB mukainen yhdiste, jossa ainakin yksi radikaaleista R^, R^, R^, r9 R11 ja R12 on alempi alkyyliryhmä, suositeltavimmin metyyli, etyyli tai i-propyyli.

3. Patenttivaatimuksen 1 tai 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmiste taan kaavan IA tai IB mukainen yhdiste, jossa ainakin yksi radikaaleista R^ ja R^ on mono- tai di-alempi alkyyliaminoryhmä, suositeltavimmin etyyli- tai dietyyliamino.

4. Patenttivaatimuksen 1 tai 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmiste-15 taan kaavan IA tai IB mukainen yhdiste, jossa ainakin yksi radikaaleista R^ ja R^ on hydroksi tai alempi alkoksiryhmä, suositeltavimmin metoksi.

5. Jonkin edellä olevan patenttivaatimuksen mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan kaavan IA tai IB mukainen yhdiste, jossa R, Rl, R^ r4, r6 ja

20 Rovat vetyjä.

5. R11 R l .nh2 + °<VV e—► R3 I R1 R2\ R H R7 20. ii XII R6 R10 R6 R10 r\Jx__ f Jkx- r5\X ? T ii J CT-^ l ii i-~\fX r7 k I R R7 H VIII IX 48 100800 joissa Rl, R2, r3, r4 r5? r6 r7 r8 r9 rIO ja r1 1 ovat kuten kaavan IB yhteydessä määriteltiin, ja, mikäli tarkoituksenmukaista, sen jälkeen suoritetaan N-alky-lointi R-halogenidilla tai R-sulfaatilla, joissa R on kuten kaavassa IB määriteltiin, 5 e. 5a,10b-substituoitu-5,5a,6,10b-tetrahydroindeno[2,l-b]indolin ja sen kanssa analogisten yhdisteiden valmistamiseksi annetaan kaavan VIII indoleniinin reagoida li-tiumalkyylin Rl^Li kanssa R6 R10 R6 R10 _J—Jvt-L· R%λ—*— ^VRS ^ il J I 1^- f I! I Ci R K R R7 R3 R7 H

10 Vili X joissa Rl, R^, r3, r4 r5 r6 r7 r8 r9 rIO Rl 1 ja Rl2 0vat kuten kaavan IB yhteydessä määriteltiin, ja mikäli on tarkoituksenmukaista, sen jälkeen suoritetaan N-alkylointi R-halogenidilla tai R-sulfaatilla, joissa R on kuten kaavassa IB määri-15 teltiin, f. 5-alkyyli-THII- tai 6-alkyyli-iso-THII-yhdisteen, joissa Rl, R^, r3; r4 r5 r6 R^, R^, R^, RIO ovat kuten kaavassa I määriteltiin, valmistamiseksi vastaava 5-H-THII- tai 6-H-iso-THII-yhdiste N-alkyloidaan R-halogenidilla tai R-sulfaatilla, 20 1 g. 5-alkyyli-THII- tai 6-alkyyli-iso-THII-yhdisteen, joissa Rl, R^, r3, r4 r5 r6 R^, R^, R^, RIO ovat kuten kaavassa I määriteltiin, valmistamiseksi vastaava 5-asyyli-THIl- tai 6-asyyli-iso-THII-yhdiste pelkistetään, 25 h. THII- tai iso-THII-yhdisteen, joissa R3-R6 ja/tai R^-RlO ovat mono- tai di-alempi alkyyliaminoryhmiä ja R, Rl, R^, Rl 1 ja Rl2 ovat kuten kaavassa I määriteltiin, valmistamiseksi vastaava 5-asyyli-THII- tai 6-asyyli-iso-THII-nitrokompo-nentti pelkistetään ja sen jälkeen suoritetaan N-alkylointi ja valinnaisesti suoritetaan hapan hydrolyysi, 1 30 THII- tai iso-THII-yhdisteen, joissa R3-R6 ja/tai R^-RlO ovat hydroksejaja R, Rl, R2, Rl 1 ja Rl2 ovat kuten kaavassa I määriteltiin, valmistamiseksi vastaava al-koksisubstituoitu THII- tai iso-THII-yhdiste eetteridealkyloidaan, 100800 49 j. THII- tai iso-THII-yhdisteen, joissa RJ2 0n alempi alkyyliryhmä ja R, r1-R1 1 ovat kuten kaavassa I määriteltiin, valmistamiseksi peräjälkeen metalloidaan vastaava 4b-substituoimaton analoginen yhdiste ja sen jälkeen suoritetaan alkylointi Rl2-halogenidilla tai Rl^-sulfaatilla ja lopuksi hydrolysointi. 5

5. R R R R12 R IA IB joissa 10. on vety, alkyyliryhmä tai COR^, Rl, R^, Rl 1 ja R^2 ovat muista riippumatta vetyjä tai alempi alkyyliryhmiä, R3, R4, r5 ja r6 ovat muista riippumatta vetyjä, hydrokseja, halogeeneja, alempi alkyyliryhmiä tai alempi alkoksiryhmiä, mono- tai di-alempi alkyyliaminoryhmiä, NH2 tai NR13COR14,

15 R^, r8, r9 ja RIO ovat muista riippumatta vetyjä, hydrokseja, alempi alkyyliryh miä, alempi alkoksiryhmiä, mono- tai di-alempi alkyyliaminoryhmiä, NH2 tai NRl3cORl4, Rl3, Rl4 ja R^ ovat muista riippumatta vetyjä tai alempi alkyyliryhmiä, edellyttäen, että: 20 i) kun R on metyyli kaavassa IA, ainakin yksi radikaaleista r!-R12 Qn muu kuin vety, ii) kun R on vety tai asetyyli ja R^ on etyyli kaavassa IA, ainakin yksi radikaaleista

25 R1-R10 tai R^2 on muu kuin vety; tai sen enantiomeerien tai suolojen valmistamiseksi, tunnettu siitä, että a. pelkistetään 5,10-dihydroindeno[l,2-b]indoli (DHII) tai 5,6-dihydroindeno[2,l-b]-indoli (iso-DHII) 30 100800 46 f R1 f f R10 R3 r R10 R3 \R r7 XI A XIB 5 jossa R, Rl, RY r3, r4} r5 r6 r7 r8 r9 ja rIO ovat kuten kaavassa IA tai IB määriteltiin, ja mikäli tarkoituksenmukaista, DHII tai iso-DHII N-alkyloidaan ennen pelkistystä, tai ΤΗΠ tai iso-THII N-alkyloidaan pelkistyksen jälkeen R-halogenidilla tai R-sulfaatilla, joissa R on kuten kaavassa IA tai IB määriteltiin, 10 b. indolisoidaan Fischerin menetelmällä kaavan II mukainen fenyylihydratsiini ja kaavan III mukainen 2-substituoitu 1-indanoni, minkä jälkeen indoleniini (IV) pelkistetään R H OR10 15 II III R6 R1 R2 R6 1 , R7 JLrs Y n j_lY—-Tn i Ci r<Yv VV fTYY Vv : R3 R10 R3 I v .. H 20 iv v joissa Rl, R^, r3} r4, r5? r6 r7 r8 r9 rIO ja r1 1 ovat kuten kaavassa IA määriteltiin ja, mikäli tarkoituksenmukaista, sen jälkeen suoritetaan N-alkylointi R-halogenidilla tai R-sulfaatilla, joissa R on kuten kaavassa IA määriteltiin, 100800 47 c. kaavan IV mukaisen indoleniinin annetaan reagoida litiumalkyylin (R.12-U) kanssa R6 R1 r2 r7 R6 d1 _ R7 T II J I. Τώι I I I I I γν ΜτΛν R3 R10 R3 R10 H 5 IV VI joissa Rl, R2, r3, r4 r5, r6? r75 r8 r9 r10? r1 1 ja Rl2 ovat kuten kaavassa IA määriteltiin, ja jos on tarkoituksenmukaista, sen jälkeen suoritetaan N-alkylointi 10 R-halogenidilla tai R-sulfaatilla, joissa R on kuten kaavassa IA määriteltiin, d. 10b-substituoitu-5,5a,6,10b-tetrahydroindeno[2,1 -bjindolin (IX) ja sen kanssa analogisten yhdisteiden valmistamiseksi annetaan indan-2-onin (XII), jossa on sub-stituenttiryhmä C-3:ssa, Fischerin indolisointimenetelmässä reagoida kaavan II fe- 15 nyylihydratsiinin kanssa, minkä jälkeen välituotteen VIII annetaan reagoida pelkistävän aineen kanssa R6 ..

6. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan cis-4b,5,9b, 10-tetrahydro-4,6-dimetyyli-8-metoksi-indeno[l,2-b]indoli, cis-5,5a,6,10b-tetrahydro-7-metyyli-9-metoksi-indeno[2, l-b]indoli tai cis-4b,5,9b, 10-tetrahydro-8- 25 metoksi-4b,6,9b-trimetyyli-indeno[l,2-b]indoli.

7. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan (-)cis-5,5a,6,10b-tetrahydro-7-metyyli-9-metoksi-indeno[2,l-b]indoli.

8. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan (+)cis-5,5a,6,10b-tetrahydro-7-metyyli-9-metoksi-indeno[2,1 -b]indoli. 50 100800