ES2938863T3 - Triazol azoles de ácido ciclohexilo como antagonistas de ácido lisofosfatídico (LPA) - Google Patents

Abstract

La presente invención proporciona compuestos de Fórmula (I): Fórmula (I) o un estereoisómero, un tautómero o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptables, en la que todas las variables son como se definen en el presente documento. Estos compuestos son inhibidores selectivos del receptor LPA. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Triazol azoles de ácido ciclohexilo como antagonistas de ácido lisofosfatídico (LPA)

Campo de la Invención

La presente invención se refiere a compuestos de triazol sustituido novedosos, y a composiciones que los contienen y a los compuestos y composiciones para su uso en métodos, por ejemplo, para el tratamiento de trastornos asociados a uno o más de los receptores de ácido lisofosfatídico (LPA, por sus siglas en inglés).

Antecedentes de la Invención

Los lisofosfolípidos son mediadores de lípidos bioactivos derivados de la membrana, de los cuales uno de los más importantes desde el punto de vista médico es el ácido lisofosfatídico (LPA). El LPA no es una sola entidad molecular, sino un conjunto de variantes estructurales endógenas con ácidos grasos de distintas longitudes y grados de saturación (Fujiwara et al., J Biol. Chem., 2005, 280, 35038-35050). La estructura principal de los LPA deriva de fosfolípidos a base de glicerol, tales como fosfatidilcolina (PC) o ácido fosfatídico (PA).

Los LPA son lípidos bioactivos (lípidos de señalización) que regulan distintas vías de señalización celular fijándose a la misma clase de receptores acoplados a la proteína G de dominio de la 7-transmembrana (GPCR, por sus siglas en inglés) (Chun, J., Hla, T., Spiegel, S., Moolenaar, W., Editors, Lysophospholipid Receptors: Signaling and Biochemistry, 2013, Wiley; ISBN: 978-0-470-56905-4 & Zhao, Y. et al., Biochim. Biophys. Acta (BBA)-Mol. Cell Biol. Of Lipids, 2013, 1831, 86–92). Los receptores de LPA conocidos en la actualidad se denominan LPA₁, LPA₂, LPA₃, LPA₄, LPA₅ y LPA₆ (Choi, J. W., Annu. Rev. Pharmacol. Toxicol., 2010, 50, 157-186; Kihara, Y., et al., Br. J. Pharmacol., 2014, 171, 3575-3594).

Los LPA han sido conocidos, por mucho tiempo, como precursores de la biosíntesis de los fosfolípidos tanto en células eucariotas como procariotas, pero los LPA han surgido solo recientemente como moléculas de señalización que se producen rápidamente y son liberadas por células activadas, especialmente, plaquetas, para influenciar a las células diana actuando sobre receptores de la superficie celular específicos (ver, por ejemplo, Moolenaar et al., BioEssays, 2004, 26, 870-881, y van Leewen et al., Biochem. Soc. Trans., 2003, 31, 1209-1212). Además de sintetizarse y procesarse hasta convertirse en fosfolípidos más complejos en el retículo endoplásmico, los LPA pueden generarse a través de la hidrólisis de fosfolípidos preexistentes después de la activación celular; por ejemplo, la posición sn-2 suele carecer de un residuo de ácido graso debido a la desacilación, mientras que solo el hidroxilo sn-1 se esterifica con un ácido graso. Además, una enzima clave en la producción de LPA, autotaxina (lysoPLD/NPP2), puede ser el producto de un oncogén, ya que muchos tipos de tumores regulan de manera ascendente la autotaxina (Brindley, D., J. Cell Biochem. 2004, 92, 900-12). Se informaron las concentraciones de LPA en plasma y suero humanos y en líquido de lavado broncoalveolar humano (BALF, por sus siglas en inglés), lo que incluye determinaciones realizadas mediante el uso de procedimientos de LC/MS y LC/MS/MS sensibles y específicos (Baker et al. Anal. Biochem., 2001, 292, 287-295; Onorato et al., J. Lipid Res., 2014, 55, 1784-1796).

El LPA influye en un amplio intervalo de respuestas biológicas, que varían de la inducción de la proliferación celular, la estimulación de la migración celular y la retracción de neuritas, el cierre de la conexión comunicante, e incluso la quimiotaxia del moho mucilaginoso (Goetzl, et al., Scientific World J., 2002, 2, 324-338; Chun, J., Hla, T., Spiegel, S., Moolenaar, W., Editors, Lysophospholipid Receptors: Signaling and Biochemistry, 2013, Wiley; ISBN: 978-0-470-56905-4). El conjunto de conocimientos acerca de la biología del LPA continúa creciendo a medida que se evalúan más sistemas celulares para determinar el grado de respuesta del LPA. Por ejemplo, se sabe que, además de estimular el crecimiento y la proliferación celular, el LPA promueve la tensión celular y la fijación a la fibronectina en la superficie celular, que son eventos importantes en la cicatrización y la regeneración de la herida (Moolenaar et al., BioEssays, 2004, 26, 870-881). Recientemente, también se atribuyó la actividad antiapoptótica al LPA, y se informó que el PPAR es un receptor/diana del LPA (Simon et al., J. Biol. Chem., 2005, 280, 14656-14662).

La fibrosis es el resultado de un proceso de cicatrización del tejido no controlado que produce una acumulación excesiva y una resorción insuficiente de la matriz extracelular (ECM, por sus siglas en inglés), lo que finalmente da como resultado una falla de los órganos diana (Rockey, D. C., et al., New Engl. J. Med., 2015, 372, 1138-1149). Se ha informado que el receptor de LPA₁ se sobreexpresaba en pacientes con fibrosis pulmonar idiopática (IPF). Los ratones knockout para el receptor de LPA₁ se protegieron contra la fibrosis pulmonar inducida por bleomicina (Tager et al., Nature Med., 2008, 14, 45-54). Se demostró que el antagonista BMS-986020 de LPA₁ reducía de manera significativa la velocidad de disminución de la CVF (capacidad vital forzada) en un ensayo clínico de 26 semanas en pacientes con IPF (Palmer et al., Chest, 2018, 154, 1061-1069). Se demostró que los inhibidores de la vía LPA (por ejemplo, un antagonista de LPA₁) eran agentes antifibróticos quimiopreventivos en el tratamiento de carcinoma hepatocelular en un modelo de rata (Nakagawa et al., Cancer Cell, 2016, 30, 879-890).

Por lo tanto, antagonizar el receptor de LPA₁ puede ser útil para el tratamiento de la fibrosis, tal como fibrosis pulmonar, fibrosis hepática, fibrosis renal, fibrosis arterial y esclerosis sistémica y, por lo tanto, las enfermedades dan como resultado la fibrosis (fibrosis pulmonar-fibrosis pulmonar idiopática (IPF, por sus siglas en inglés)), fibrosis hepáticaesteatohepatitis no alcohólica (NASH,por sus siglas en inglés)), fibrosis renal-nefropatía diabética, esclerosis sistémicaesclerodermia, etc.)

Sumario de la Invención

Cualquier referencia en la descripción a los métodos de tratamiento se refiere a los compuestos, composiciones farmacéuticas y medicamentos de la invención para su uso en un método para el tratamiento del cuerpo (humano) o animal mediante terapia (o para diagnóstico).

La presente invención proporciona compuestos de triazol sustituido novedosos, que incluyen estereoisómeros, tautómeros, y sales o solvatos farmacéuticamente aceptables de los mismos, que son útiles como antagonistas de uno o más de los receptores de ácido lisofosfatídico (LPA), en especial, el receptor de LPA1.

Se describen también (pero no se reivindican) procesos e intermediarios para obtener los compuestos de la presente invención.

La presente invención también proporciona composiciones farmacéuticas que comprenden un vehículo farmacéuticamente aceptable y al menos uno de los compuestos de la presente invención o estereoisómeros, tautómeros, sales o solvatos fármaceuticamente aceptables de los mismos.

Los compuestos de la invención se pueden usar para el tratamiento de afecciones en las que participa el LPA.

Los compuestos de la presente invención se pueden usar en tratamientos.

Los compuestos de la presente invención se pueden usar para la manufactura de un medicamento para el tratamiento de una afección en la que la inhibición de la actividad fisiológica de LPA es útil (tal como enfermedades en donde participa el receptor de LPA), participa en la etiología o patología de la enfermedad, o bien está asociada a al menos un síntoma de la enfermedad.

En otro aspecto, la presente invención se refiere a un compuesto de la invención para su uso en un método para tratar la fibrosis de órganos (hígado, riñón, pulmón, corazón y otros, además de la piel), enfermedades hepáticas (hepatitis aguda, hepatitis crónica, fibrosis hepática, cirrosis hepática, hipertensión portal, falla regenerativa, esteatohepatitis no alcohólica (NASH), hipofunción hepática, trastorno del flujo sanguíneo hepático y similares), enfermedad proliferativa celular [cáncer (tumor sólido, metástasis de tumores sólidos, fibroma vascular, mieloma, mieloma múltiple, sarcoma de Kaposi, leucemia, leucemia linfocítica crónica (CLL, por sus siglas en inglés) y similares) y metástasis invasiva de células cancerosas, y similares], enfermedad inflamatoria (psoriasis, nefropatía, neumonía y similares), enfermedad del tubo gastrointestinal síndrome de intestino irritable (IBS, por sus siglas en inglés), enfermedad inflamatoria intestinal (IBD, por sus siglas en inglés), secreción pancreática anormal y similares), enfermedad renal, enfermedad asociada a las vías urinarias (hiperplasia prostática benigna o síntomas asociados a la enfermedad de la vejiga neuropática, tumor de la médula espinal, hernia del disco intervertebral, estenosis del conducto vertebral, síntomas derivados de la diabetes, enfermedad de las vías urinarias inferiores (obstrucción de las vías urinarias inferiores y similares), enfermedad inflamatoria de las vías urinarias inferiores, disuria, micción frecuente y similares), enfermedad del páncreas, enfermedad asociada a la angiogénesis anormal (obstrucción arterial y similares), esclerodermia, enfermedades cerebrales (infarto cerebral, hemorragia cerebral y similares), dolor neuropático, neuropatía periférica y similares, enfermedad ocular, degeneración macular relacionada con la edad (AMD, por sus siglas en inglés), retinopatía diabética, vitreorretinopatía proliferativa (PVR, por sus siglas en inglés), penfigoide cicatricial, cicatrización patológica de la cirugía de filtración de glaucoma y similares).

En otro aspecto, la presente invención se refiere a un compuesto de la invención para su uso en un método para tratar enfermedades, trastornos o afecciones en los que la activación de al menos un receptor de LPA por parte del LPA contribuye a la sintomatología o progresión de la enfermedad, el trastorno o la afección. Estas enfermedades, trastornos o afecciones pueden surgir de uno o más de una etiología genética, iatrogénica, inmunitaria, infecciosa, metabólica, oncológica, tóxica, quirúrgica y/o traumática.

En otro aspecto, la presente invención se refiere a un compuesto de la invención para su uso en un método para tratar fibrosis renal, fibrosis pulmonar, fibrosis hepática, fibrosis arterial y esclerosis sistémica, que comprende administrar a un paciente que necesita el tratamiento un compuesto de la presente invención como se describió anteriormente.

Los compuestos de la invención se pueden usar solos, en combinación con los otros compuestos de la presente invención o en combinación con uno o más, preferentemente dos, de otros agentes.

Estas y otras características de la invención se explicarán en más detalle a lo largo de la descripción.

Descripción Detallada de la Invención

I. Compuestos de la Invención

En un aspecto, la presente invención proporciona, entre otros, compuestos de la Fórmula (I):

(I),

o un estereoisómero, un tautómero, una sal o un solvato fármaceuticamente aceptables de los mismos, en donde

X¹, X², X³ y X⁴ son, cada uno independientemente, CR⁵ o N; siempre que no más de dos de X¹, X², X³ o X⁴ sean N; uno de Q¹, Q² y Q³ es NR⁶, y los otros dos son N; y el círculo discontinuo indica enlaces opcionales que forman un anillo aromático;

L es un enlace covalente o C_1-4 alquileno sustituido con 0 a 4 R⁷;

Z es CHR^8a, NR^8b u O;

el anillo Y es una porción azol o un heterociclilo de 5 miembros que contiene un átomo de nitrógeno (como parte del anillo) y al menos un heteroátomo distinto (como parte del anillo) seleccionado de nitrógeno, oxígeno y azufre; y el término “azol” se refiere a un heteroarilo de 5 miembros que contiene un átomo de nitrógeno (como parte del anillo) y al menos un heteroátomo distinto (como parte del anillo) seleccionado de nitrógeno, oxígeno y azufre;

R¹ es (-CH₂)_aR⁹;

a es un número entero de 0 o 1;

R² es, cada uno independientemente, halo, ciano, hidroxilo, amino, C_1-6 alquilo, C_3-6 cicloalquilo, heterociclilo de 4 a 6 miembros, alquilamino, haloalquilo, hidroxialquilo, aminoalquilo, alcoxi, alcoxialquilo, haloalcoxialquilo o haloalcoxi; n es un número entero de 0, 1 o 2;

R³ es halo, ciano, hidroxilo, amino, oxo, -OR^a, -SR^a, =S, -NR^cR^c, =NH, =N-OH, =NR^a, =N-OR^a, -NO₂, -S(O)₂R^a, -S(O)₂NHR^b, -S(O)₂NR^cR^c, -S(O)₂OR^b, -OS(O)₂R^b,

-OS(O)₂OR^b, -P(O)(OR^b)(OR^b), -C(O)R^b, -C(NR^b)R^b, -C(O)OR^b, -C(O)NR^cR^c,

-C(NR^b)NR^cR^c, -OC(O)R^b, -NR^bC(O)R^b, -OC(O)OR^b, -NR^bC(O)OR^b, -OC(O)NR^cR^c,

-NR^bC(O)NR^cR^c, -NR^bC(NR^b)R^b, -NR^bC(NR^b)NR^cR^c, C_1-6 alquilo, C_1-6 alquilo deuterado (deuterado de manera total o parcial), C_1-6 haloalquilo, C_1-6 heteroalquilo, arilo de 6 a 10 miembros, arilalquilo, heteroarilo de 5 a 10 miembros, heteroarilalquilo, carbociclilo de 3 a 8 miembros, carbociclilalquilo, heterociclilo de 4 a 8 miembros o heterociclilalquilo; en donde el alquilo, heteroalquilo, arilo, heteroarilo, carbociclilo, heterociclilo y R^a, en sí mismos o como parte de otro grupo, se sustituyen, cada uno independientemente, con 0 a 5 R^d;

R^a se selecciona de C_1-6 alquilo, C_1-6 alquilo deuterado (deuterado de manera total o parcial), haloalquilo, hidroxialquilo, aminoalquilo, alcoxialquilo, haloalcoxialquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, carbociclilo, carbociclilalquilo, heterociclilo y heterociclilalquilo;

R^b es, cada uno independientemente, hidrógeno o R^a;

R^c es, cada uno independientemente, R^b; o, alternativamente, dos R^c, junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, forman un heterociclilo de 4 a 7 miembros

R^d se selecciona, cada uno independientemente de R^a, alcoxi, haloalcoxi, alquilamino, cicloalquilamino, heterociclilamino, haloalquilo, hidroxialquilo, aminoalquilo, cicloalcoxi, heterocicliloxi, haloalcoxi, alcoxialcoxi, haloalquilamino, alcoxialquilamino, haloalcoxialquilamino, arilamino, aralquilamino, ariloxi, aralquiloxi, heteroariloxi, heteroarilalquiloxi, alquiltio, halo, ciano, hidroxilo, amino, oxo, -OR^a, -SR^a, =S, -NR^cR^c, =NH, =N-OH, =NR^a, =N-OR^a, -NO₂, -S(O)₂R^a, -S(O)₂NHR^b, -S(O)₂NR^cR^c, -S(O)₂OR^b,

-OS(O)₂R^b, -OS(O)₂OR^b, -P(O)(OR^b)(OR^b), -C(O)R^b, -C(NR^b)R^b, -C(O)OR^b,

-C(O)NR^cR^c, -C(NR^b)NR^cR^c, -OC(O)R^b, -NR^bC(O)R^b, -OC(O)OR^b, -NR^bC(O)OR^b,

-NR^bC(O)NR^cR^c, -NR^bC(NR^b)R^b y -NR^bC(NR^b)NR^cR^c; o, alternativamente, uno o dos R^d en alquilo, heteroalquilo, arilo, heteroarilo, carbociclilo o heterociclilo, junto con los átomos a los que R^d está unido, forman una porción puente o cíclica;

R⁴ es, cada uno independientemente, halo, hidroxilo, amino, ciano, -C(O)NH₂,

-C(O)NR^12aR^12b, C(O)OR^12a, C_1-4 alquilo, C_1-4 haloalquilo, C_2-6 alcoxialquilo, C_1-4 alcoxi, oxo (=O) o imino (=NH); o, alternativamente, R³ y R⁴, junto con los átomos a los que están unidos, forman una porción cíclica (carbociclilo o heterociclilo);

m es un número entero de 0, 1 o 2,

R⁵ es hidrógeno, halo, ciano, hidroxilo, amino, C_1-6 alquilo, alquilamino, haloalquilo, hidroxialquilo, aminoalquilo, alcoxialquilo, haloalcoxialquilo, alcoxi o haloalcoxi;

R⁶ es hidrógeno, C_1-6 alquilo, alquilamino, haloalquilo, hidroxialquilo, aminoalquilo, alcoxialquilo, haloalcoxialquilo, alcoxi o haloalcoxi;

R⁷ es halo, oxo, ciano, hidroxilo, amino, C_1-6 alquilo, C_3-6 cicloalquilo, heterociclilo de 4 a 6 miembros, alquilamino, haloalquilo, hidroxialquilo, aminoalquilo, alcoxialquilo, haloalcoxialquilo, alcoxi o haloalcoxi;

R^8a es hidrógeno, halo, ciano o C_1-4 alquilo;

R^8b es hidrógeno o C_1-4 alquilo;

R⁹ se selecciona de –CN, –C(O)OR¹⁰, –C(O)NR^11aR^11b,

;

R^e es C_1-6 alquilo, haloalquilo, hidroxialquilo, aminoalquilo, alcoxialquilo o haloalcoxialquilo;

R¹⁰ es hidrógeno o C_1-10 alquilo;

R^11a y R^11b son, cada uno independientemente, hidrógeno, C_1-6 alquilo, C_3-6 cicloalquilo, heterociclilo de 4 a 6 miembros, alquilamino, haloalquilo, hidroxialquilo, aminoalquilo, alcoxialquilo, haloalcoxialquilo, alcoxi o haloalcoxi; R^12a es C_1-4 alquilo; y

R^12b es hidrógeno o C_1-4 alquilo.

en donde, a menos que se indque lo contrario, un grupo alquilo, usado solo o como parte de otro grupo, es un grupo alquilo que tiene de 1 a 10 átomos de carbono;

heteroalquilo se refiere a un grupo alquilo donde uno o más átomos de carbono han sido sustituidos con un heteroátomo seleccionado de O, N, o S;

amino se define como -NR^clR^c2, en donde R^cl y R^c2 son independientemente H o alquilo C_1-6; o alternativamente, R^cl y R^c2, tomados junto con los átomos a los que están unidos, forman un anillo heterocíclico de 3 a 8 miembros que está sustituido opcionalmente con uno o más grupos seleccionados de halo, ciano, hidroxilo, amino, oxo, alquilo C_1-6, alcoxi y aminoalquilo;

cicloalquilo, tal como se usa solo o como parte de otro grupo, se refiere a sistemas de anillos de alquilo ciclados de 1 a 3 anillos que contienen un total de 3 a 20 carbonos que forman los anillos y que pueden fusionarse en 1 o 2 anillos aromáticos como se describe para el arilo;

carbociclilo, tal como se usa solo o como parte de otro grupo, se refiere a cualquier anillo de hidrocarburo estable monocíclico o bicíclico de 3, 4, 5, 6, 7 u 8 miembros o bicíclico o tricíclico de 7, 8, 9, 10, 11, 12 o 13 miembros, cualquiera de los cuales puede ser saturado, parcialmente insaturado, insaturado o aromático, o a cualquier grupo de hidrocarburo cíclico saturado o parcialmente insaturado (que contenga 1 o 2 dobles enlaces) que contenga de 1 a 3 anillos que contenga un total de 3 a 20 carbonos que formen los anillos y que puedan fusionarse a 1 o 2 anillos aromáticos como se describe para el arilo;

arilo, tal como se usa solo o como parte de otro grupo, se refiere a los hidrocarburos aromáticos monocíclicos o policíclicos;

heterociclilo, tal como se usa solo o como parte de otro grupo, se refiere a un anillo heterocíclico monocíclico estable de 3, 4, 5, 6 o 7 miembros o policíclico de 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13 o 14 miembros que está saturado o parcialmente insaturado y que contiene átomos de carbono y 1, 2, 3 o 4 heteroátomos seleccionados independientemente de N, O y S; e incluyendo cualquier grupo policíclico en el que cualquiera de los anillos heterocíclicos definidos anteriormente esté fusionado con un anillo carbocíclico o arilo; y

heteroarilo, tal como se usa solo o como parte de otro grupo, se refiere a hidrocarburos aromáticos monocíclicos, bicíclicos y tricíclicos estables que incluyen al menos un miembro del anillo de heteroátomos seleccionado de azufre, oxígeno o nitrógeno.

En una modalidad de la Fórmula (I), X² es CR⁵, en donde R⁵ es hidrógeno o C_1-4 alquilo (por ejemplo, metilo).

En cualquiera de las modalidades anteriores de la Fórmula (I), R⁶ es hidrógeno o C_1-6 alquilo.

En cualquiera de las modalidades anteriores de la Fórmula (I),

la porción es

En cualquiera de las modalidades anteriores de la Fórmula (I),

la porción es

;

Y¹, Y^2a e Y^3a se seleccionan, cada uno independientemente, de C o N; y el círculo discontinuo indica enlaces opcionales; en donde el anillo de 5 miembros formado por (Y¹, Y², Y^3a, Y⁴ e Y⁵) o (Y¹, Y^2a, Y³, Y⁴ e Y⁵) puede ser aromático o no aromático;

Y², Y³, Y⁴ e Y⁵ se seleccionan, cada uno independientemente, de C, CR^4a, N, NR^4b, S u O; siempre que (1) al menos uno de (Y¹, Y², Y^3a, Y⁴ e Y⁵) o al menos uno de (Y¹, Y^2a, Y³, Y⁴ e Y⁵) sea N o NR^4b, y (2) al menos uno de (Y¹, Y², Y^3a, Y⁴ e Y⁵) o al menos uno de (Y¹, Y^2a, Y³, Y⁴ e Y⁵) sea C o CR^4a;

R^4a es, cada uno independientemente, hidrógeno, halo, oxo, imino, C_1-4 alquilo, C_1-4 haloalquilo, C_2-6 alcoxialquilo, C_1-4 alcoxi; y

R^4b es, cada uno independientemente, hidrógeno o C_1-4 alquilo.

En cualquiera de las modalidades anteriores de la Fórmula (I),

R³ es halo, ciano, hidroxilo, amino, -OR^a, -SR^a, -NR^cR^c, C_1-6 alquilo, C_1-6 heteroalquilo, arilo de 6 a 10 miembros, arilalquilo, heteroarilo de 5 a 10 miembros, heteroarilalquilo, carbociclilo de 3 a 8 miembros, carbociclilalquilo, heterociclilo de 4 a 8 miembros o heterociclilalquilo; en donde el alquilo, heteroalquilo, arilo, heteroarilo, carbociclilo, heterociclilo y R^a, en sí mismos o como parte de otro grupo, se sustituyen, cada uno independientemente, con 0 a 5 R^d,

R^a se selecciona de C_1-6 alquilo, C_1-6 alquilo deuterado, haloalquilo, hidroxialquilo, aminoalquilo, alcoxialquilo, haloalcoxialquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, carbociclilo, carbociclilalquilo, heterociclilo y heterociclilalquilo;

R^b es, cada uno independientemente, hidrógeno o R^a;

R^c es, cada uno independientemente, R^b; o, alternativamente, dos R^c, junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, forman un heterociclilo de 4 a 7 miembros;

R^d se selecciona, cada uno independientemente, de R^a, alcoxi, haloalcoxi, alquilamino, cicloalquilamino, heterociclilamino, haloalquilo, hidroxialquilo, aminoalquilo, cicloalcoxi, heterocicliloxi, haloalcoxi, alcoxialcoxi, haloalquilamino, alcoxialquilamino, haloalcoxialquilamino, arilamino, aralquilamino, ariloxi, aralquiloxi, heteroariloxi, heteroarilalquiloxi, alquiltio, halo, ciano, hidroxilo, amino, oxo, -OR^a, -SR^a y -NR^cR^c; o, alternativamente, uno o dos R^d en alquilo, heteroalquilo, arilo, heteroarilo, carbociclilo o heterociclilo, junto con los átomos a los que R^d está unido, forman una porción puente o cíclica.

En cualquiera de las modalidades anteriores de la Fórmula (I), el compuesto está representado por la Fórmula (IIa) o (IIb):

Y¹, Y^2a e Y^3a se seleccionan, cada uno independientemente, de C o N;

Y², Y³, Y⁴ e Y⁵ se seleccionan, cada uno independientemente, de C, CR^4a, N, NR^4b, S u O; siempre que al menos uno de (Y¹, Y², Y^3a, Y⁴ e Y⁵) o al menos uno de (Y¹, Y^2a, Y³, Y⁴ e Y⁵) sea N o NR^4b; y el círculo discontinuo indica enlaces opcionales; en donde el anillo de 5 miembros formado por (Y¹, Y², Y^3a, Y⁴ e Y⁵) o (Y¹, Y^2a, Y³, Y⁴ e Y⁵) puede ser aromático o no aromático;

R^4a es, cada uno independientemente, hidrógeno, halo, hidroxilo, ciano, -C(O)NH₂, -C(O)NR^12aR^12b, C(O)OR^12a, C_1-4 alquilo, C_1-4 haloalquilo, C_2-6 alcoxialquilo, C_1-4 alcoxi, oxo o imino; o, alternativamente, R³ y R^4a, junto con los átomos a los que están unidos, forman una porción cíclica (carbociclilo o heterociclilo);

R^12a es C_1-4 alquilo;

R^12b es hidrógeno o C_1-4 alquilo;

R^4b es, cada uno independientemente, hidrógeno o C_1-4 alquilo;

R^7a es, cada uno independientemente, hidrógeno, halo, ciano, hidroxilo, amino, C_1-6 alquilo, C_3-6 cicloalquilo, alquilamino, haloalquilo, hidroxialquilo, aminoalquilo, alcoxialquilo, haloalcoxialquilo, alcoxi o haloalcoxi;

f es un número entero de 0, 1 o 2;

Z es CH₂ o NR^8b; siempre que cuando Z es NR^8b, Y¹ sea C;

n es 0 o 1;

R⁶ es C_1-4 alquilo; y

R¹, R², n, R³, R⁶, R^8b, X¹, X², X³ y X⁴ son iguales a los que se definieron anteriormente.

En una modalidad de la Fórmula (IIa) o (IIb), X¹ es CR⁵, en donde R⁵ es hidrógeno o C_1-4 alquilo.

En cualquiera de las modalidades anteriores de la Fórmula (IIa) o (IIb), X³ es N.

En cualquiera de las modalidades anteriores de la Fórmula (IIa) o (IIb),

la porción

se selecciona de

;

R^5a es, cada uno independientemente, halo, ciano, hidroxilo, amino, C_1-6 alquilo, alquilamino, haloalquilo, hidroxialquilo, aminoalquilo, alcoxialquilo, haloalcoxialquilo, alcoxi o haloalcoxi; y

d es un número entero de 0, 1 o 2,

En cualquiera de las modalidades anteriores de la Fórmula (IIa) o (IIb),

la porción

;

y

Y², Y⁴ e Y⁵ son, cada uno independientemente, C, CR^4a, N, O o S.

En cualquiera de las modalidades anteriores de la Fórmula (IIa) o (IIb), la

; R⁴ es metilo, Cl o F.

En cualquiera de las modalidades anteriores de la Fórmula (IIa) o (IIb),

la porción

; y

Y³, Y⁴ e Y⁵ son, cada uno independientemente, C, N, O o S.

En cualquiera de las modalidades anteriores de la Fórmula (IIa) o (IIb),

la porción

En cualquiera de las modalidades anteriores de la Fórmula (IIa) o (IIb),

la porción

En cualquiera de las modalidades anteriores de la Fórmula (IIa) o (IIb), R^7a es hidrógeno.

En cualquiera de las modalidades anteriores de la Fórmula (IIa) o (IIb), R¹ es CO₂H.

En cualquiera de las modalidades anteriores de la Fórmula (IIa) o (IIb), R² es hidrógeno.

En cualquiera de las modalidades anteriores de la Fórmula (IIa) o (IIb), el compuesto está representado por la Fórmula (IIIa) o (IIIb):

Y¹ e Y^3a se seleccionan, cada uno independientemente, de C o N;

Y², Y⁴ e Y⁵ se seleccionan, cada uno independientemente, de C, CR^4a, N, S u O; siempre que al menos uno de Y¹, Y², Y^3a, Y⁴ e Y⁵ sea N o NR^4b; y el círculo discontinuo indica enlaces opcionales que forman un anillo aromático; R^2a es hidrógeno, cloro, flúor o C_1-4 alquilo;

R^4a es, cada uno independientemente, hidrógeno, halo, hidroxilo, ciano, -C(O)NH₂, -C(O)NHR, C(O)OR, C_1-4 alquilo, C_1-4 haloalquilo, C_2-6 alcoxialquilo o C_1-4 alcoxi;

R^4b es, cada uno independientemente, hidrógeno o C_1-4 alquilo;

R⁵ es hidrógeno o C_1-4 alquilo; y

R⁶ es C_1-4 alquilo (por ejemplo, metilo); y

R¹, R³, X², X³ y X⁴ son iguales a los que se definieron anteriormente.

En una modalidad de la Fórmula (IIIa) o (IIIb), dos R^d, cuando están unidos a un cicloalquilo o heterociclilo, junto con los átomos a los que están unidos, forman una porción puente.

En otra modalidad de la Fórmula (IIIa) o (IIIb), R³ y R^4a, junto con los átomos a los que están unidos, forman una porción monocíclia o bicíclica. En un aspecto, la porción bicíclica es heterociclilo.

En cualquiera de las modalidades anteriores de la Fórmula (IIIa) o (IIIb), la porción

se selecciona de

;

en donde las cuñas representan los enlaces orientados hacia el observador, y las líneas punteadas representan los enlaces orientados lejos del observador.

En cualquiera de las modalidades anteriores de la Fórmula (IIIa) o (IIIb), R¹ es CO₂H. En cualquiera de las modalidades anteriores de la Fórmula (IIIa) o (IIIb),

la porción

y R⁵ es hidrógeno, metilo o etilo.

En cualquiera de las modalidades anteriores de la Fórmula (IIIa) o (IIIb),

la porción

;

y Y², Y⁴ e Y⁵ son, cada uno independientemente, C, N, O o S.

En cualquiera de las modalidades anteriores de la Fórmula (IIIa) o (IIIb),

la porción

.

En cualquiera de las modalidades anteriores de la Fórmula (IIIa) o (IIIb),

R³ es halo, ciano, hidroxilo, amino, -OR^a, -SR^a, -NR^cR^c, C_1-6 alquilo, C_1-6 alquilo deuterado, C_1-6 haloalquilo, C_1-6 heteroalquilo, arilo de 6 a 10 miembros, arilalquilo, heteroarilo de 5 a 10 miembros, heteroarilalquilo, carbociclilo de 3 a 8 miembros, carbociclilalquilo, heterociclilo de 4 a 8 miembros, o heterociclilalquilo; en donde el alquilo, heteroalquilo, arilo, heteroarilo, carbociclilo, heterociclilo y R^a, en sí mismos o como parte de otro grupo, se sustituyen, cada uno independientemente, con 0 a 5 R^d;

R^a se selecciona de C_1-6 alquilo, C_1-6 alquilo deuterado, haloalquilo, hidroxialquilo, aminoalquilo, alcoxialquilo, haloalcoxialquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, carbociclilo, carbociclilalquilo, heterociclilo y heterociclilalquilo;

R^b es, cada uno independientemente, hidrógeno o R^a;

R^c es, cada uno independientemente, R^b; o, alternativamente, dos R^c, junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, forman un heterociclilo de 4 a 7 miembros -R^d se selecciona, cada uno independientemente, de R^a, alcoxi, haloalcoxi, alquilamino, cicloalquilamino, heterociclilamino, haloalquilo, hidroxialquilo, aminoalquilo, cicloalcoxi, heterocicliloxi, haloalcoxi, alcoxialcoxi, haloalquilamino, alcoxialquilamino, haloalcoxialquilamino, arilamino, aralquilamino, ariloxi, aralquiloxi, heteroariloxi, heteroarilalquiloxi, alquiltio, halo, ciano, hidroxilo, amino, oxo, -OR^a, -SR^a y -NR^cR^c; o, alternativamente, uno o dos R^d en alquilo, heteroalquilo, arilo, heteroarilo, carbociclilo o heterociclilo, junto con los átomos a los que R^d está unido, forman una porción puente o cíclica.

En cualquiera de las modalidades anteriores de la Fórmula (IIIa) o (IIIb), R³ es C_1-6 alquilo, C_1-6 haloalquilo, C_1-6 alcoxi, C_1-6 alcoxi deuterado, C_1-6 haloalcoxi, -S-(C_1-6 alquilo), C_3-6 cicloalquilo, heterociclilo de 4 a 6 miembros, fenilo, (un heteroarilo de 5 o 6 miembros que contiene de 1 a 3 heteroátomos en donde cada uno se selecciona independientemente de N, O y S), -(C_1-3 alquilen)-(C_3-6 cicloalquilo), -(C_1-3 alquilen)-(fenilo), -(C_1-3 alquilen)-(heterociclilo de 4 a 6 miembros), -O-(C_3-6 cicloalquilo), -O-(heterociclilo de 4 a 6 miembros), -O-fenilo, -O-(heteroarilo de 5 o 6 miembros que contiene de 1 a 3 heteroátomos en donde cada uno se selecciona independientemente de N, O y S), -O-(C_1-3 alquilen)-(fenilo), -O-(C_1-3 alquilen)-(C_3-6 cicloalquilo), -NH-(C_1-3 alquilen)-(fenilo), -NH-(C_1-6 alquilo), -NH-(C_1-6 haloalquilo), -NH-fenilo, -NH-(C_3-6 cicloalquilo), -NH-(C_1-3 alquilen)-(C_3-6 cicloalquilo) y -N(C_1-6 alquilo)₂; y el alquilo, alquileno, cicloalquilo, fenilo, heterociclilo y heteroarilo, en sí mismos o como parte de otro grupo, se sustituyen, cada uno independientemente, con 0 a 3 R^d; R^d es halo, ciano, hidroxilo, amino, C_1-6 alquilo, C_1-6 alcoxi, C_3-6 cicloalquilo o heterociclilo de 4 a 6 miembros; R^4a es hidrógeno, flúor, cloro, C_1-4 alquilo, C_1-4 haloalquilo, C_2-6 alcoxialquilo, o C_1-4 alcoxi; y R^4b es hidrógeno.

En cualquiera de las modalidades anteriores de la Fórmula (IIIa) o (IIIb), R³ es C_1-6 alquilo, C_1-6 haloalquilo, C_1-6 alcoxi, C_1-6 alcoxi deuterado, C_1-6 haloalcoxi, -S-(C_1-6 alquilo), C_3-6 cicloalquilo, fenilo, piridilo, -(C_1-3 alquilen)-(C_3-6 cicloalquilo), -(C_1-3 alquilen)-(fenilo), -O-(C_3-6 cicloalquilo), -O-fenilo, -NH-(C_1-3 alquilen)-(fenilo), -NH-(C_1-6 alquilo), -N(C_1-6 alquilo)₂; y el alquilo, alquileno, cicloalquilo, fenilo y piridilo, en sí mismos o como parte de otro grupo, se sustituyen, cada uno independientemente, con 0 a 3 R^d.

En una modalidad de la presente invención, el compuesto se selecciona de cualquiera de los Ejemplos descritos en la descripción, o un estereoisómero, un tautómero, o un solvato o una sal fármaceuticamente aceptable del mismo.

En otra modalidad de la presente invención, el compuesto se selecciona de los Ejemplos 1 a 412 descritos en la descripción, o un estereoisómero, un tautómero, o un solvato o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En otra modalidad de la presente invención, el compuesto se selecciona de los Ejemplos 1 a 114 descritos en la descripción, o un estereoisómero, un tautómero, o un solvato o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En una modalidad de la presente invención, el compuesto se selecciona de:

o un solvato o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En otra modalidad de la presente invención, el compuesto se selecciona de:

o un solvato o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En otra modalidad de la presente invención, el compuesto se selecciona de:

o un solvato o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En otra modalidad de la presente invención, el compuesto se selecciona de:

o un solvato o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En otra modalidad de la presente invención, el compuesto se selecciona de:

o un solvato o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En otra modalidad de la presente invención, el compuesto se selecciona de:

o un solvato o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En otra modalidad de la presente invención, el compuesto se selecciona de:

o un solvato o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En otra modalidad de la presente invención, el compuesto se selecciona de:

o un solvato o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Los compuestos de la presente invención pueden tener valores IC₅₀ de hLPA₁ 5000 nM, mediante un ensayo de antagonista funcional de LPA₁; los compuestos de la presente invención pueden tener valores IC₅₀ de hLPA₁ 1000 nM; los compuestos de la presente invención pueden tener valores IC₅₀ de hLPA₁ 500 nM; los compuestos de la presente invención pueden tener valores IC₅₀ de hLPA₁ 200 nM; los compuestos de la presente invención pueden tener valores IC₅₀ de hLPA₁ 100 nM; los compuestos de la presente invención tienen valores IC₅₀ de hLPA₁ 50 nM.

II. Otras modalidades de la invención

El compuesto de la Fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable, puede ser un antagonista de al menos un receptor de LPA. El compuesto de la Fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable, puede ser un antagonista de LPA_1. El compuesto de la Fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable, puede ser un antagonista de LPA_2. El compuesto de la Fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable, puede ser un antagonista de LPA₃.

En algunas modalidades, se proporcionan en la presente compuestos seleccionados de tautómeros, solvatos o sales de un compuesto de la Fórmula (I) farmacéuticamente aceptable.

En otro aspecto, la presente invención proporciona una composición que comprende al menos uno de los compuestos de la presente invención o un estereoisómero, un tautómero, o un solvato o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.

En otro aspecto, la presente invención proporciona una composición farmacéutica que comprende un vehículo farmacéuticamente aceptable y una cantidad terapéuticamente efectiva de al menos uno de los compuestos de la presente invención o un estereoisómero, un tautómero, un solvato o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. Se describe también (no se reivindica) un proceso para obtener un compuesto de la presente invención.

Se describe también (no se reivindica) un intermediario para obtener un compuesto de la presente invención.

En otro aspecto, la presente invención proporciona una composición farmacéutica que también comprende agentes terapéuticos adicionales.

En otro aspecto, la presente invención proporciona un compuesto de la presente invención o un estereoisómero, un tautómero, un solvato o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en un método para el tratamiento de una afección asociada a la fibrosis mediada por el receptor de LPA, comprendiendo el método una cantidad terapéuticamente efectiva de al menos uno de los compuestos de la presente invención o un estereoisómero, un tautómero, o un solvato o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. Como se usa en la presente, el término "paciente" abarca todas las especies de mamíferos.

En otro aspecto, la presente invención proporciona un compuesto de la presente invención o un estereoisómero, un tautómero, un solvato o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en un método para tratar una enfermedad, un trastorno o una afección asociados a la desregulación del receptor de ácido lisofosfatídico 1 (LPA₁) en un paciente que lo necesita, comprendiendo el método administrar al paciente una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la presente invención, o un estereoisómero, un tautómero, o un solvato o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En una modalidad, la enfermedad, el trastorno o la afección se relacionan con fibrosis patológica, rechazo a trasplantes, cáncer, osteoporosis o trastornos inflamatorios. En una modalidad, la fibrosis patológica es pulmonar, hepática, renal, cardíaca, dérmica, ocular o fibrosis pancreática. En una modalidad, la enfermedad, el trastorno o la afección es fibrosis pulmonar idiopática (IPF), esteatohepatitis no alcohólica (NASH), hepatopatía grasa no alcohólica (NAFLD, por sus siglas en inglés), enfermedad renal crónica, enfermedad renal diabética y esclerosis sistémica. En una modalidad, el cáncer es de vejiga, de sangre, óseo, cerebral, de mama, del sistema nervioso central, de cuello del útero, de colon, de endometrio, de esófago, de vesícula biliar, genital, del tracto genitourinario, de cabeza, de riñón, de laringe, de hígado, de pulmón, de tejido muscular, de cuello, de mucosa oral o nasal, de ovario, de páncreas, de próstata, de piel, de bazo, de intestino delgado, de intestino grueso, de estómago, de testículo o de tiroides.

En otro aspecto, la presente invención proporciona un compuesto de la presente invención o un estereoisómero, un tautómero, un solvato o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso un método para tratar la fibrosis en un mamífero, comprendiendo el método administrar una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la presente invención, o un estereoisómero, un tautómero, o un solvato o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, al mamífero que lo necesita. En una modalidad, la fibrosis es fibrosis pulmonar idiopática (IPF, por sus siglas en inglés), esteatohepatitis no alcohólica (NASH), enfermedad renal crónica, enfermedad renal diabética y esclerosis sistémica.

En otro aspecto, la presente invención proporciona un compuesto de la presente invención o un estereoisómero, un tautómero, un solvato o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso un método para tratar fibrosis pulmonar (fibrosis pulmonar idiopática), asma, enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC), fibrosis renal, lesión renal aguda, enfermedad renal crónica, fibrosis hepática (esteatohepatitis no alcohólica), fibrosis dérmica, fibrosis del intestino, cáncer de mama, cáncer de páncreas, cáncer de ovarios, cáncer de próstata, glioblastoma, cáncer óseo, cáncer de colon, cáncer de intestino, cáncer de cabeza y cuello, melanoma, mieloma múltiple, leucemia linfocítica crónica, dolor asociado al cáncer, metástasis tumoral, rechazo al órgano trasplantado, esclerodermia, fibrosis ocular, degeneración macular relacionada con la edad (AMD, por sus siglas en inglés), retinopatía diabética, enfermedad vascular del colágeno, ateroesclerosis, fenómeno de Raynaud o dolor neuropático en un mamífero, comprendiendo el método administrar una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la presente invención, o un estereoisómero, un tautómero, o un solvato o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, al mamífero que lo necesita.

Como se usan en la presente, "tratar" o "tratamiento" abarcan el tratamiento de una condición patológica en un mamífero, en particular, un ser humano, e incluyen: (a) inhibir la condición patológica, es decir, detener su desarrollo; y/o (b) aliviar la condición patológica, es decir, causar la regresión de la condición patológica. Como se usa en la presente, “tratar” o “tratamiento” también incluyen el tratamiento protector de una condición patológica para reducir y/o minimizar el riesgo y/o la reducción del riesgo de recurrencia de una condición patológica al administrarle a un paciente una cantidad terapéuticamente efectiva de al menos uno de los compuestos de la presente invención o un estereoisómero, un tautómero, o un solvato o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, al mamífero que lo necesita. Los pacientes pueden seleccionarse para el tratamiento protector en función de factores que se sabe aumentan el riesgo de sufrir una condición patológica clínica, en comparación con la población general. Para el tratamiento protector, las afecciones de la condición patológica clínica pueden o no estar ya presentes. El tratamiento protector se puede dividir en (a) profilaxis primaria y (b) profilaxis secundaria. La profilaxis primaria se define como el tratamiento para reducir o minimizar el riesgo de una condición patológica en un paciente que aún no presentó una condición patológica clínica, mientras que la profilaxis secundaria se define como la minimización o reducción del riesgo de una recurrencia o segunda ocurrencia de la misma condición patológica o de una similar.

III. Química

En toda la descripción y las reivindicaciones adjuntas, un nombre o una fórmula química determinada abarca todos los estereoisómeros, isómeros ópticos y racematos de estos, en caso de que existan los isómeros. A menos que se indique lo contrario, todas las formas quirales (enantioméricas y diastereoméricas) y racémicas se encuentran dentro del alcance de la invención. Muchos isómeros geométricos de enlaces dobles C=C, enlaces dobles C=N, sistemas de anillos y similares también pueden estar presentes en los compuestos, y todos esos isómeros estables se contemplan en la presente invención. Los isómeros geométricos cis y trans (o E y Z) de los compuestos de la presente invención se describen y se pueden aislar como una mezcla de isómeros o como formas isoméricas separadas. Los presentes compuestos se pueden aislar en formas ópticamente activas o racémicas. Las formas ópticamente activas se pueden preparar mediante la resolución de formas racémicas o mediante síntesis de materiales de inicio ópticamente activos. Todos los procesos que se usan para preparar los compuestos de la presente invención y los intermediarios allí elaborados se consideran parte de la presente invención. Cuando se preparan productos enantioméricos o diastereoméricos, se pueden separar mediante métodos convencionales, por ejemplo, mediante cromatografía o cristalización fraccional. En función de las condiciones del proceso, los productos finales de la presente invención se obtienen en forma libre (neutra) o en forma de sal. Tanto la forma libre como las sales de estos productos finales se encuentran dentro del alcance de la invención. Si se desea, una forma de un compuesto puede convertirse en otra forma. Un ácido o una base libre se puede convertir en una sal; una sal se puede convertir en el compuesto libre o en otra sal; una mezcla de compuestos isoméricos de la presente invención se puede separar en los isómeros individuales. Los compuestos de la presente invención, las formas libres y sus sales pueden existir en múltiples formas tautoméricas, en donde los átomos de hidrógeno se transponen a otras partes de las moléculas, y los enlaces químicos entre los átomos de las moléculas se redisponen en consecuencia. Cabe destacar que todas las formas tautoméricas, en caso de que existan, están incluidas en la invención.

El término "estereoisómero" se refiere a isómeros cuya constitución es idéntica, pero que difieren en la disposición de sus átomos en el espacio. Los enantiómeros y diastereómeros son ejemplos de estereoisómeros. El término “enantiómero” se refiere a un par de especies moleculares que son imágenes especulares de ellas mismas y no pueden superponerse. El término “diastereómero” se refiere a estereoisómeros que no son imágenes especulares. El término “racemato” o “mezcla racémica” se refiere a una composición compuesta por cantidades equimolares de dos especies enantioméricas, en donde la composición equimolar está desprovista de actividad óptica.

Los símbolos “R” y “S” representan la configuración de sustituyentes alrededor de un átomo de carbono quiral. Los descriptores isoméricos "R" y "S" se usan como se describe en la presente para indicar configuraciones atómicas con respecto a una molécula nuclear, y se pretende usarlos como se define en la literatura (IUPAC Recommendations 1996, Pure and Applied Chemistry, 68:2193-2222 (1996)).

El término “quiral” se refiere a la característica estructural de una molécula que hace que sea imposible su superposición sobre su imagen especular. El término “homoquiral” se refiere a un estado de pureza enantiomérica. El término “actividad óptica” se refiere al grado al cual una molécula homoquiral o una mezcla no racémica de moléculas quirales hace rotar un plano de luz polarizada.

Como se usan en la presente, los términos "alquilo" o "alquileno" incluyen grupos hidrocarburo alifáticos saturados de cadena lineal o ramificada que tienen la cantidad especificada de átomos de carbono. Mientras que “alquilo” indica un radical alifático saturado monovalente (tal como etilo), “alquileno” indica un radical alifático saturado bivalente (tal como etileno). Por ejemplo, "C₁ a C₁₀ alquilo" o "C_1-10 alquilo" incluyen grupos C₁, C₂, C₃, C₄, C₅, C₆, C₇, C₈, C₉ y C₁₀ alquilo. "C₁ a C₁₀ alquileno" o "C_1-10 alquileno", incluyen grupos C₁, C₂, C₃, C₄, C₅, C₆, C₇, C₈, C₉ y C₁₀ alquileno. Además, por ejemplo, "C₁ a C₆ alquilo" o "C_1-6 alquilo” indica un alquilo que tiene de 1 a 6 átomos de carbono; y "C₁ a C₆ alquileno" o "C_1-6 alquileno" indica un alquileno que tiene de 1 a 6 átomos de carbono; y "C₁ a C₄ alquilo" o "C_1-4 alquilo" indica un alquilo que tiene de 1 a 4 átomos de carbono; y "C₁ a C₄ alquileno" o "C_1-4 alquileno" indica un alquileno que tiene de 1 a 4 átomos de carbono. El grupo alquilo puede ser no sustituido o sustituido con al menos un hidrógeno que se reemplaza por otro grupo químico. Los ejemplos de grupos alquilo incluyen, entre otros, metilo (Me), etilo (Et), propilo (por ejemplo, n-propilo e isopropilo), butilo (por ejemplo, n-butilo, isobutilo, t-butilo) y pentilo (por ejemplo, n-pentilo, isopentilo, neopentilo). Cuando se usan "C₀ alquilo" o "C₀ alquileno", se indica un enlace directo. Asimismo, el término “alquilo”, en sí mismo o como parte de otro grupo, tal como alquiloamino, haloalquilo, hidroxialquilo, aminoalquilo, alcoxi, alcoxialquilo, haloalcoxialquilo y haloalcoxi, puede ser un alquilo que tiene de 1 a 4 átomos de carbono, o de 1 a 6 átomos de carbono, o de 1 a 10 átomos de carbono.

“Heteroalquilo” se refiere a un grupo alquilo donde uno o más átomos de carbono se reemplazaron con un heteroátomo, tal como, O, N o S. Por ejemplo, si el átomo de carbono del grupo alquilo que está unido a la molécula de origen se reemplaza con un heteroátomo (por ejemplo, O, N, o S) los grupos heteroalquilo resultantes son, respectivamente, un grupo alcoxi (por ejemplo, -OCH₃, etc.), un alquilamino (por ejemplo, -NHCH₃, -N(CH₃)₂, etc.), o un grupo tioalquilo (por ejemplo, -SCH₃). Si un átomo de carbono no terminal del grupo alquilo que no se une a la molécula de origen se reemplaza con un heteroátomo (por ejemplo, O, N, o S) y los grupos heteroalquilo resultantes son, respectivamente, un alquiléter (por ejemplo, -CH₂CH₂-O-CH₃, etc.), un alquilaminoalquilo (por ejemplo, -CH₂NHCH₃, -CH₂N(CH₃)₂, etc.) o un tioalquiléter (por ejemplo,-CH₂-S-CH₃). Si un átomo de carbono terminal del grupo alquilo se reemplaza con un heteroátomo (por ejemplo, O, N, o S), los grupos heteroalquilo resultantes son, respectivamente, un grupo hidroxialquilo (por ejemplo, -CH₂CH₂-OH), un grupo aminoalquilo (por ejemplo, -CH₂NH₂), o un grupo alquiltiol (por ejemplo, -CH₂CH₂-SH). Un grupo heteroalquilo puede tener, por ejemplo, 1 a 20 átomos de carbono, 1 a 10 átomos de carbono, o 1 a 6 átomos de carbono. Un grupo A C₁-C₆ heteroalquilo significa un grupo heteroalquilo que tiene de 1 a 6 átomos de carbono.

Los términos "alquenilo" o "alquenileno" incluyen cadenas de hidrocarburos de configuración lineal o ramificada que tienen la cantidad especificada de átomos de carbono y uno o más, preferentemente, uno o dos, enlaces dobles de carbono-carbono que pueden ocurrir en cualquier punto estable de la cadena. Por ejemplo, "C₂ a C₆ alquenilo" o "C_2-6 alquenilo" (o alquenileno) incluyen grupos C₂, C₃, C₄, C₅ y C₆ alquenilo. Los ejemplos de alquenilo incluyen, entre otros, etenilo, 1-propenilo, 2-propenilo, 2-butenilo, 3-butenilo, 2-pentenilo, 3-pentenilo, 4-pentenilo, 2-hexenilo, 3-hexenilo, 4-hexenilo, 5-hexenilo, 2-metil-2-propenilo y 4-metil-3-pentenilo.

Los términos "alquinilo" o "alquinileno" incluyen cadenas de hidrocarburos de configuración lineal o ramificada que tienen uno o más, preferentemente, de uno a tres, enlaces triples de carbono-carbono que pueden ocurrir en cualquier punto estable de la cadena. Por ejemplo, "C₂ a C₆ alquinilo" o "C_2-6 alquinilo" (o alquinileno) incluyen grupos C₂, C₃, C₄, C₅ y C₆ alquinilo; tales como etinilo, propinilo, butinilo, pentinilo y hexinilo.

Como se usa en la presente, “arilalquilo” (también conocido como aralquilo), “heteroarilalquilo” “carbociclilalquilo” o “heterociclilalquilo” se refiere a un radical alquilo acíclico en el que uno de los átomos de hidrógeno unidos a un átomo de carbono, normalmente un terminal o átomo de carbono sp³, se reemplaza con un radical arilo, heteroarilo, carbociclilo o heterociclilo, respectivamente. Los grupos arilalquilo habituales incluyen, entre otros, bencilo, 2-feniletán-1-ilo, naftilmetilo, 2-naftiletán-1-ilo, naftobencilo, 2-naftofeniletán-1-ilo y similares. El grupo arilalquilo, heteroarilalquilo, carbociclilalquilo o heterociclilalquilo puede comprender de 4 a 20 átomos de carbono y 0 a 5 heteroátomos, por ejemplo, la porción de alquilo puede contener de 1 a 6 átomos de carbono.

El término "bencilo”, como se usa en la presente, se refiere a un grupo metilo en el que uno de los átomos de hidrógeno se reemplaza por un grupo fenilo, en donde el grupo fenilo puede sustituirse opcionalmente con 1 a 5 grupos, con preferencia de 1 a 3 grupos, OH, OCH₃, Cl, F, Br, I, CN, NO₂, NH₂, N(CH₃)H, N(CH₃)₂, CF₃, OCF₃, C(=O)CH₃, SCH₃, S(=O)CH₃, S(=O)2CH₃, CH₃, CH₂CH₃, CO₂H y CO₂CH₃. “Bencilo” puede también estar representado por la fórmula “Bn”. Los términos "alcoxi" o "alquiloxi" se refieren a un grupo -O-alquilo. Las expresiones "C₁ a C₆ alcoxi" o "C_1˗6 alcoxi" (o alquiloxi) incluyen grupos C₁, C₂, C₃, C₄, C₅ y C₆ alcoxi. Los ejemplos de grupos alcoxi incluyen, entre otros, metoxi, etoxi, propoxi (por ejemplo, n-propoxi e isopropoxi) y t-butoxi. De manera similar, "alquiltio" o "tioalcoxi" representan un grupo alquilo como se definió anteriormente con la cantidad de átomos de carbono unidos mediante un puente de azufre; por ejemplo, metil-S- y etil-S-.

Como se usa en la presente, el término “alcanoilo” o “alquilcarbonilo”, ya sea solo o como parte de otro grupo, se refiere a alquilo ligado a un grupo carbonilo. Por ejemplo, alquilcarbonilo se puede representar por alquil-C(O)-. "C₁ a C₆ alquilcarbonilo" (o alquilcarbonilo) pretende incluir los grupos C₁, C₂, C₃, C₄, C₅ y C₆ alquil-C(O)-.

El término “alquilsulfonilo” o “sulfonamida”, como se usa en la presente, ya sea solo o como parte de otro grupo, se refiere a alquilo o amino ligado a un grupo sulfonilo. Por ejemplo, el alquilsulfonilo puede estar representado por -S(O)₂R’, mientras que la sulfonamida puede estar representada por -S(O)₂NR^cR^d. R’ es C₁ a C₆ alquilo; y R^c y R^d son iguales según se define a continuación para “amino”.

El término “carbamato” como se usa en la presente ya sea solo o como parte de otro grupo se refiere a oxígeno ligado a un grupo amido. Por ejemplo, carbamato se puede representar por N(R^cR^d)-C(O)-O-, y R^c y R^d son iguales según se define a continuación para “amino”.

Como se usa en la presente, el término “amido”, ya sea solo o como parte de otro grupo, se refiere a amino ligado a un grupo carbonilo. Por ejemplo, amido se puede representar por N(R^cR^d)-C(O)-, y R^c y R^d son iguales según se define a continuación para “amino”.

El término “amino” se define como -NR^c1RC₂, en donde R^c1 y R^c2 son independientemente H o C_1-6 alquilo; o alternativamente, R^c1 y RC₂, junto con los átomos a los que están unidos, forman un anillo heterocíclico de 3 a 8 miembros que se sustituye opcionalmente con uno o más grupos seleccionados de halo, ciano, hidroxilo, amino, oxo, C_1-6 alquilo, alcoxi y aminoalquilo. Cuando R^c1 o R^c2 (o ambos) es C_1-6 alquilo, el grupo amino puede también denominarse alquilamino. Los ejemplos del grupo alquilamino incluyen, entre otros, metilamino, etilamino, propilamino, isopropilamino y similares. En un aspecto, amino es -NH_2.

El término “aminoalquilo” se refiere a un grupo alquilo en el que uno de los átomos de hidrógeno se reemplaza por un grupo amino. Por ejemplo, el aminoalquilo se puede representar por N(R^c1R^c2)-alquileno-. "C₁ a C6” o “C_1-6” alquilamino" (o alquilamino) pretende incluir los grupos C₁, C₂, C₃, C₄, C₅ y C₆ alquilamino.

Como se usa en la presente, el término “halógeno” o “halo”, ya sea solo o como parte de otro grupo, se refiere a cloro, bromo, flúor y yodo, en donde se prefiere cloro o flúor.

El término "haloalquilo" incluye grupos hidrocarburo alifáticos saturados de cadena lineal y ramificada que tienen la cantidad especificada de átomos de carbono, sustituidos con uno o más halógenos.- “C₁ a C₆ haloalquilo" o "C_1-6 haloalquilo" (o haloalquilo) pretende incluir grupos C₁, C₂, C₃, C₄, C₅ y C₆ haloalquilo. Los ejemplos de haloalquilo incluyen, entre otros, fluorometilo, difluorometilo, trifluorometilo, triclorometilo, pentafluoroetilo, pentacloroetilo, 2,2,2-trifluoroetilo, heptafluoropropilo y heptacloropropilo. Los ejemplos de haloalquilo también incluyen "fluoroalquilo", que incluye grupos hidrocarburo alifáticos saturados de cadena lineal y ramificada que tienen la cantidad especificada de átomos de carbono, sustituidos con 1 o más átomos de flúor.- El término “polihaloalquilo”, como se usa en la presente, se refiere a un grupo “alquilo” como se definió anteriormente que incluye de 2 a 9, preferentemente de 2 a 5, sustituyentes de halo, tales como F o Cl, preferentemente F, tales como polifluoroalquilo, por ejemplo, CF₃CH₂, CF₃ o CF₃CF₂CH_2.

Los términos "haloalcoxi" o "haloalquiloxi" representan un grupo haloalquilo, como se definió anteriormente, con la cantidad indicada de átomos de carbono unidos a través de un puente de oxígeno. Por ejemplo, "C₁ a C₆ haloalcoxi" o “C_1-6 haloalcoxi” incluyen grupos C₁, C₂, C₃, C₄, C₅ y C₆ haloalcoxi. Los ejemplos de haloalcoxi incluyen, entre otros, trifluorometoxi, 2,2,2-trifluoroetoxi y pentafluorotoxi. De manera similar, "haloalquiltio" o "tiohaloalcoxi" representan un grupo haloalquilo, como se definió anteriormente, con la cantidad indicada de átomos de carbono unidos a través de un puente de azufre; por ejemplo, trifluorometil-S- y pentafluoroetil-S-. El término “polihaloalquiloxi”, como se usa en la presente, se refiere a un grupo “alcoxi” o “alquiloxi” como se definió anteriormente que incluye de 2 a 9, con preferencia de 2 a 5, sustituyentes de halo, tales como F o Cl, con preferencia F, tales como polifluoroalcoxi, por ejemplo, CF₃CH₂O, CF₃O o CF₃CF₂CH₂O.

El término "hidroxialquilo" incluye grupos hidrocarburo alifáticos saturados de cadena lineal y ramificada que tienen la cantidad especificada de átomos de carbono, sustituidos con 1 o más hidroxilos (OH).- “C₁ a C₆ hidroxialquilo" (o hidroxialquilo) pretende incluir grupos C₁, C₂, C₃, C₄, C₅, y C₆ hidroxialquilo.

El término "cicloalquilo" se refiere a grupos alquilo ciclizados, que incluyen sistemas de anillos monocíclicos, bicíclicos o policíclicos. Las expresiones "C₃ a C₈ cicloalquilo" o "C_3˗8 cicloalquilo" incluyen grupos C₃, C₄, C₅, C₆, C₇ y C₈ cicloalquilo, que incluyen anillos monocíclicos, bicíclicos y policíclicos. Los ejemplos de grupos cicloalquilo incluyen, entre otros, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo y norbornilo. Los grupos cicloalquilo ramificados, tales como 1-metilciclopropilo y 2-metilciclopropilo y grupos cicloalquilo espiro y en puente, se incluyen en la definición de "cicloalquilo".

El término "cicloheteroalquilo" se refiere a grupos heteroalquilo ciclizados, que incluyen sistemas de anillos monocíclicos, bicíclicos o policíclicos. "C3 a C7 cicloheteroalquilo" o "C3-7 cicloheteroalquilo" incluyen grupos C₃, C₄, C₅, C₆, y C₇ cicloheteroalquilo. Los grupos cicloheteroalquilo de ejemplo incluyen, entre otros, oxetanilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidropiranilo, azetidinilo, pirrolidinilo, piperidinilo, morfolinilo y piperazinilo. Los grupos cicloheteroalquilo ramificados, tales como piperidinilmetilo, piperazinilmetilo, morfolinilmetilo, piridinilmetilo, piridizilmetilo, pirimidilmetilo y pirazinilmetilo, se incluyen en la definición de "cicloheteroalquilo".

Como se usan en la presente, "carbociclo", "carbociclilo" o "residuo carbocíclico" incluyen cualquier anillo de hidrocarburo monocíclico o bicíclico estable de 3, 4, 5, 6, 7 u 8 miembros, o cualquier anillo de hidrocarburo bicíclico o tricíclico de 7, 8, 9, 10, 11, 12 o 13 miembros; y cualquiera de ellos puede ser saturado, parcialmente insaturado, insaturado o aromático. Los ejemplos de carbociclos incluyen, entre otros, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclobutenilo, ciclopentilo, ciclopentenilo, ciclohexilo, cicloheptenilo, cicloheptilo, cicloheptenilo, adamantilo, ciclooctilo, ciclooctenilo, ciclooctadienilo, [3.3.0]biciclooctano, [4.3.0]biciclononano, [4.4.0]biciclodecano (decalin), [2.2.2]biciclooctano, fluorenilo, fenilo, naftilo, indanilo, adamantilo, antracenilo y tetrahidronaftilo (tetralin). Como se indicó anteriormente, los anillos en puente también se incluyen en la definición de carbociclo (por ejemplo, [2.2.2]biciclooctano). A menos que se especifique lo contrario, los carbociclos preferidos son ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, fenilo e indanilo. Cuando se usa el término “carbociclilo”, este incluye “arilo”. Un anillo con puente se produce cuando uno o más átomos de carbono se unen a dos átomos de carbono no adyacentes. Los puentes preferidos son uno o dos átomos de carbono. Cabe destacar que un puente siempre convierte un anillo monocíclico en un anillo tricíclico. Cuando un anillo está en puente, los sustituyentes enumerados para el anillo también pueden estar presentes en el puente.

Además, el término “carbociclilo”, que incluye “cicloalquilo” y “cicloalquenilo”, como se usa en la presente, ya sea solo o como parte de otro grupo, incluye grupos hidrocarburo cíclicos saturados o parcialmente insaturados (que contienen 1 o 2 enlaces dobles) que contienen de 1 a 3 anillos, que incluyen alquilo monocíclico, alquilo bicíclico y alquilo tricíclico, que contienen un total de 3 a 20 carbonos que forman anillos, preferentemente 3 a 10 carbonos o 3 a 6 carbonos, que forman el anillo y que pueden fusionarse con 1 o 2 anillos aromáticos como se describe para el arilo, que incluye ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo, ciclooctilo, ciclodecilo y ciclododecilo, ciclohexenilo,

cualquiera de esos grupos puede ser opcionalmente sustituido con 1 a 4 sustituyentes, tales como halógeno, alquilo, alcoxi, hidroxi, arilo, ariloxi, arilalquilo, cicloalquilo, alquilamido, alcanoilamino, oxo, acilo, arilcarbonilamino, nitro, ciano, tiol y/o alquiltio, y/o cualquiera de los sustituyentes de alquilo.

Como se usan en la presente, las expresiones "carbociclilo bicíclico" o "grupo carbocíclico bicíclico" significan un sistema de anillos carbocíclicos estables de 9 o 10 miembros que contiene dos anillos fusionados y consiste en átomos de carbono. De los dos anillos fusionados, un anillo es un anillo de benzo fusionado a un segundo anillo; y el segundo anillo es un anillo de carbono de 5 o 6 miembros, que es saturado, parcialmente insaturado o insaturado. El grupo carbocíclico bicíclico se puede unir a su grupo colgante en cualquier átomo de carbono que genere una estructura estable. El grupo carbocíclico bicíclico descrito en la presente se puede sustituir en cualquier carbono si el compuesto resultante es estable. Los ejemplos de grupo carbocíclico bicíclico son, entre otros, naftilo, 1,2-dihidronaftilo, 1,2,3,4-tetrahidronaftilo e indanilo.

Como se usa en la presente, el término "arilo", ya sea solo o como parte de otro grupo, se refiere a hidrocarburos aromáticos monocíclicos o policíclicos (que incluyen bicíclico y tricíclico) que incluyen, por ejemplo, fenilo, naftilo, antracenilo y fenantranilo. Las porciones arilo se conocen y se describen, por ejemplo, en Lewis, R.J., ed., Hawley's Condensed Chemical Dictionary, 13.^a edición, John Wiley & Sons, Inc., Nueva York (1997). En un aspecto, el término “arilo” se refiere a grupos aromáticos monocíclicos y bicíclicos que contienen de 6 a 10 carbonos en la porción del anillo (tales como fenilo o naftilo, que incluye 1-naftilo y 2-naftilo). Por ejemplo, "C₆ o C₁₀ arilo" o "C6-10 arilo” se refiere a fenilo y naftilo. A menos que se especifique lo contrario, "arilo", "C₆ o C₁₀ arilo", "C_6-10 arilo", o "residuo aromático” puede ser no sustituido o sustituido con 1 a 5 grupos, con preferencia 1 a 3 grupos, seleccionados de -OH, -OCH₃, -Cl, -F, -Br, -I, -CN, -NO2, -NH2, -N(CH₃)H, -N(CH₃)₂, -CF₃, -OCF₃, -C(O)CH₃, -SCH₃, -S(O)CH₃, -S(O)₂CH₃, -CH₃, -CH₂CH₃, -CO₂H, y -CO₂CH₃.

Como se usa en la presente, el término “bencilo” se refiere a un grupo metilo en el que uno de los átomos de hidrógeno se reemplaza por un grupo fenilo, en donde el grupo fenilo se puede sustituir opcionalmente con 1 a 5 grupos, preferentemente, con 1 a 3 grupos, OH, OCH₃, Cl, F, Br, I, CN, NO₂, NH₂, N(CH₃)H, N(CH₃)₂, CF₃, OCF₃, C(=O)CH₃, SCH₃, S(=O)CH₃, S(=O)₂CH₃, CH₃, CH₂CH₃, CO₂H y CO₂CH₃.

Como se usan en la presente, las expresiones "heterociclo", "heterociclilo", o "grupo heterocíclico" significa anillo heterocíclico monocíclico de 3, 4, 5, 6 o 7 miembros o policíclico de 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13 o 14 miembros (que incluye bicíclico y tricíclico) estable que está saturado, o parcialmente insaturado y que contiene átomos de carbono y 1, 2, 3 o 4 heteroátomos seleccionados independientemente de N, O y S; y que incluye cualquier grupo policíclico en el que cualquiera de los anillos heterocíclicos definidos anteriormente se fusiona a un anillo carbocíclico o un arilo (por ejemplo, benceno). Es decir, las expresiones "heterociclo", "heterociclilo" o "grupo heterocíclico" incluyen sistemas de anillos no aromáticos, tales como heterocicloalquilo y heterocicloalquenilo. Los heteroátomos de nitrógeno y de azufre se pueden oxidar opcionalmente (es decir, N→O y S(O)p, en donde p es 0, 1 o 2). El átomo de nitrógeno puede ser sustituido o no sustituido (es decir, N o NR, en donde R es H u otro sustituyente, si se define). El anillo heterocíclico se puede unir a su grupo colgante en cualquier heteroátomo o átomo de carbono que genere una estructura estable. Los anillos heterocíclicos descritos en la presente se pueden sustituir en un átomo de carbono o de nitrógeno si el compuesto resultante es estable. Opcionalmente, se puede cuaternizar un nitrógeno en el heterociclo. Se prefiere que cuando la cantidad total de átomos S y O en el heterociclo exceda 1, estos heteroátomos no sean adyacentes entre sí. Se prefiere que la cantidad total de átomos S y O en el heterociclo no sea mayor de 1. Los ejemplos de heterociclilo incluyen, entre otros, azetidinilo, piperazinilo, piperidinilo, piperidonilo, piperonilo, piranilo, morfolinilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidroisoquinolinilo, tetrahidroquinolinilo, morfolinilo, dihidrofuro[2,3-b]tetrahidrofurano.

Como se usan en la presente, las expresiones “heterociclo bicíclico” o “grupo heterocíclico bicíclico” significan un sistema de anillos heterocíclicos estable de 9 o 10 miembros, que contiene dos anillos fusionados y consiste en átomos de carbono y 1, 2, 3 o 4 heteroátomos seleccionados independientemente de N, O y S. De los dos anillos fusionados, un anillo es un anillo aromático monocíclico de 5 o 6 miembros que comprende un anillo de heteroarilo de 5 miembros, un anillo de heteroarilo de 6 miembros o un anillo de benzo, cada uno fusionado a un segundo anillo.El segundo anillo es un anillo monocíclico de 5 o 6 miembros que es saturado, parcialmente insaturado o insaturado y comprende un heterociclo de 5 miembros; un heterociclo de 6 miembros o un carbociclo (siempre que el primer anillo no sea benzo cuando el segundo anillo es un carbociclo).

El grupo heterocíclico bicíclico se puede unir a su grupo colgante en cualquier heteroátomo o átomo de carbono que genere una estructura estable. El grupo heterocíclico bicíclico descrito en la presente puede ser sustituido en un átomo de carbono o nitrógeno si el compuesto resultante es estable. Se prefiere que cuando la cantidad total de átomos S y O en el heterociclo exceda 1, estos heteroátomos no sean adyacentes entre sí. Se prefiere que la cantidad total de átomos S y O en el heterociclo no sea mayor de 1. Los ejemplos de un grupo heterocíclico bicíclico son, entre otros, 1,2,3,4-tetrahidroquinolinilo, 1,2,3,4-tetrahidroisoquinolinilo, 5,6,7,8-tetrahidro-quinolinilo, 2,3-dihidro-benzofuranilo, cromanilo, 1,2,3,4-tetrahidro-quinoxalinilo y 1,2,3,4-tetrahidro-quinazolinilo.

Los anillos en puente también se incluyen en la definición de heterociclo. Un anillo en puente se produce cuando uno o más átomos (es decir, C, O, N o S) se unen a dos átomos de carbono o de nitrógeno no adyacentes. Los ejemplos de anillos en puente incluyen, entre otros, un átomo de carbono, dos átomos de carbono, un átomo de nitrógeno, dos átomos de nitrógeno y un grupo carbono-nitrógeno. Cabe destacar que un puente siempre convierte un anillo monocíclico en un anillo tricíclico. Cuando un anillo está en puente, los sustituyentes enumerados para el anillo también pueden estar presentes en el puente.

Como se usa en la presente, el término "heteroarilo" significa hidrocarburos aromáticos monocíclicos y policíclicos (que incluyen bicíclicos y tricíclicos) estables que incluyen al menos un miembro del anillo de heteroátomos, tal como azufre, oxígeno o nitrógeno. Los grupos heteroarilo incluyen, entre otros, piridilo, pirimidinilo, pirazinilo, piridazinilo, triazinilo, furilo, quinolilo, isoquinolilo, tienilo, imidazolilo, tiazolilo, indolilo, pirroilo, oxazolilo, benzofurilo, benzotienilo, benztiazolilo, isoxazolilo, pirazolilo, triazolilo, tetrazolilo, indazolilo, 1,2,4-tiadiazolilo, isotiazolilo, purinilo, carbazolilo, bencimidazolilo, indolinilo, benzodioxolanilo y benzodioxano. Los grupos heteroarilo son sustituidos o no sustituidos. El átomo de nitrógeno es sustituido o no sustituido (es decir, N o NR, en donde R es H u otro sustituyente, si se define). Los heteroátomos de nitrógeno y de azufre se pueden oxidar opcionalmente (es decir, N→O y S(O)p, en donde p es 0, 1 o 2).

Los ejemplos de heteroarilos también incluyen, entre otros, acridinilo, azocinilo, bencimidazolilo, benzofuranilo, benzotiofuranilo, benzotiofenilo, benzoxazolilo, benzoxazolinilo, benztiazolilo, benztriazolilo, benztetrazolilo, bencisoxazolilo, bencisotiazolilo, bencimidazolinilo, carbazolilo, 4aH-carbazolilo, carbolinilo, cromanilo, cromenilo, cinolinilo, decahidroquinolinilo, 2H,6H-1,5,2-ditiazinilo, furanilo, furazanilo, imidazolidinilo, imidazolinilo, imidazolilo, 1H-indazolilo, imidazolopiridinilo, indolenilo, indolinilo, indolizinilo, indolilo, 3H-indolilo, isatinoilo, isobenzofuranilo, isocromanilo, isoindazolilo, isoindolinilo, isoindolilo, isoquinolinilo, isotiazolilo, isotiazolopiridinilo, isoxazolilo, isoxazolopiridinilo, metilendioxifenilo, naftiridinilo, octahidroisoquinolinilo, oxadiazolilo, 1,2,3-oxadiazolilo, 1,2,4-oxadiazolilo, 1,2,5-oxadiazolilo, 1,3,4-oxadiazolilo, oxazolidinilo, oxazolilo, oxazolopiridinilo, oxazolidinilperimidinilo, oxindolilo, pirimidinilo, fenantridinilo, fenantrolinilo, fenazinilo, fenotiazinilo, fenoxatianilo, fenoxazinilo, ftalazinilo, pteridinilo, purinilo, pirazinilo, pirazolidinilo, pirazolinilo, pirazolopiridinilo, pirazolilo, piridazinilo, piridooxazolilo, piridoimidazolilo, piridotiazolilo, piridinilo, pirimidinilo, pirrolidinilo, pirrolinilo, 2-pirrolidonilo, 2H-pirrolilo, pirrolilo, quinazolinilo, quinolinilo, 4H-quinolizinilo, quinoxalinilo, quinuclidinilo, tetrazolilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidroisoquinolinilo, tetrahidroquinolinilo, 6H-1,2,5-tiadiazinilo, 1,2,3-tiadiazolilo, 1,2,4-tiadiazolilo, 1,2,5-tiadiazolilo, 1,3,4-tiadiazolilo, tiantrenilo, tiazolilo, tienilo, tiazolopiridinilo, tienotiazolilo, tienooxazolilo, tienoimidazolilo, tiofenilo, triazinilo, 1,2,3-triazolilo, 1,2,4-triazolilo, 1,2,5-triazolilo, 1,3,4-triazolilo y xantenilo.

Los ejemplos de heteroarilos de 5 a 10 miembros incluyen, entre otros, piridinilo, furanilo, tienilo, pirazolilo, imidazolilo, imidazolidinilo, indolilo, tetrazolilo, isoxazolilo, oxazolilo, oxadiazolilo, oxazolidinilo, tiadiazinilo, tiadiazolilo, tiazolilo, triazinilo, triazolilo, bencimidazolilo, 1H-indazolilo, benzofuranilo, benzotiofuranilo, benztetrazolilo, benzotriazolilo, bencisoxazolilo, benzoxazolilo, oxindolilo, benzoxazolinilo, benztiazolilo, bencisotiazolilo, isatinoilo, isoquinolinilo, octahidroisoquinolinilo, isoxazolopiridinilo, quinazolinilo, quinolinilo, isotiazolopiridinilo, tiazolopiridinilo, oxazolopiridinilo, imidazolopiridinilo y pirazolopiridinilo. Los ejemplos de heteroarilo de 5 a 6 miembros incluyen, entre otros, piridinilo, furanilo, tienilo, pirrolilo, pirazolilo, pirazinilo, imidazolilo, imidazolidinilo, indolilo, tetrazolilo, isoxazolilo, oxazolilo, oxadiazolilo, oxazolidinilo, tiadiazinilo, tiadiazolilo, tiazolilo, triazinilo y triazolilo. En algunas modalidades, el heteroarilo se selecciona de benztiazolilo, imidazopiridinilo, pirrolopiridinilo, quinolinilo e indolilo.

A menos que se indique lo contrario, "carbociclilo" o "heterociclilo" incluye uno a tres anillos adicionales fusionados al anillo carbocíclico o al anillo heterocíclico (tal como los anillos arilo, cicloalquilo, heteroarilo o cicloheteroalquilo), por ejemplo,

y puede sustituirse opcionalmente a través de átomos de carbono o nitrógeno (según corresponda) disponibles con 1, 2 o 3 grupos seleccionados de hidrógeno, halo, haloalquilo, alquilo, haloalquilo, alcoxi, haloalcoxi, alquenilo, trifluorometilo, trifluorometoxi, alquinilo, cicloalquil-alquilo, cicloheteroalquilo, cicloheteroalquilalquilo, arilo, heteroarilo, arilalquilo, ariloxi, ariloxialquilo, arilalcoxi, alcoxicarbonilo, arilcarbonilo, arilalquenilo, aminocarbonilarilo, ariltio, arilsulfinilo, arilazo, heteroarilalquilo, heteroarilalquenilo, heteroarilheteroarilo, heteroariloxi, hidroxi, nitro, ciano, tiol, alquiltio, ariltio, heteroariltio, ariltioalquilo, alcoxiariltio, alquilcarbonilo, arilcarbonilo, alquilaminocarbonilo, arilaminocarbonilo, alcoxicarbonilo, aminocarbonilo, alquilcarboniloxi, arilcarboniloxi, alquilcarbonilamino, arilcarbonilamino, arilsulfinilo, arilsulfinilalquilo, arilsulfoniloamino y arilsulfonaminocarbonilo y/o cualquiera de los sustituyentes de alquilo establecidos en la presente.

Cuando cualquiera de los términos alquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, carbociclilo, heterociclilo, arilo y heteroarilo se usan como parte de otro grupo, la cantidad de átomos de carbono y miembros del anillo es la misma que la que se definió en los términos en sí mismos. Por ejemplo, alcoxi, haloalcoxi, alquilamino, haloalquilo, hidroxialquilo, aminoalquilo, haloalcoxi, alcoxialcoxi, haloalquilamino, alcoxialquilamino, haloalcoxialquilamino, alquiltio y similares contienen, cada uno independientemente, la cantidad de átomos de carbono que es la misma que se definió para el término “alquilo”, tal como 1 a 4 átomos de carbono, 1 a 6 átomos de carbono, 1 a 10 átomos de carbono, etc. De manera similar, cicloalcoxi, heterocicliloxi, cicloalquilamino, heterociclilamino, aralquilamino, arilamino, ariloxi, aralquiloxi, heteroariloxi, heteroarilalquiloxi y similares contienen, cada uno independientemente, miembros del anillo que son los mismos que se definieron para los términos “cicloalquilo”, “heterociclilo”, “arilo” y “heteroarilo”, tal como 3 a 6 miembros, 4 a 7 miembros, 6 a 10 miembros, 5 a 10 miembros, 5 o 6 miembros, etc.

De acuerdo con una convención usada en el estado de la técnica, un enlace que apunta a una línea gruesa, tal como

se usa en las fórmulas estructurales de la presente, indica el enlace que es el punto de unión a la porción o el sustituyente con el núcleo o la estructura principal.

De acuerdo con una convención usada en el estado de la técnica, un enlace de línea ondulada en una fórmula estructural, tal como

,

se usa para representar un centro estereogénico del átomo de carbono al cual se unen X’, Y’ y Z’ y representa ambos enantiómeros en una sola figura. Es decir, una fórmula estructural con el enlace de línea ondulada indica cada uno de los enantiómeros de manera individual, tales como

así como una mezcla racémica de estos. Cuando un enlace de línea ondulada está unido a una porción enlace doble (tal como C=C o C=N), incluye isómeros geométricos cis o trans (o E y Z) o una mezcla de estos.

Se debe tener en cuenta que si una porción carbocíclica o heterocíclica se puede fijar o, de otro modo, unir a un determinado sustrato mediante diversos átomos del anillo sin indicar un punto de unión específico, entonces se prevén todos los puntos posibles, ya sea mediante un átomo de carbono o, por ejemplo, un átomo de nitrógeno trivalente. Por ejemplo, el término “piridilo” significa 2-, 3- o 4-piridilo, el término “tienilo” significa 2- o 3-tienilo, y así sucesivamente. Cuando se muestra que un enlace a un sustituyente cruza un enlace que conecta dos átomos en un anillo, el sustituyente puede unirse a cualquier átomo en el anillo. Cuando se enumera un sustituyente sin indicar el átomo en el cual el sustituyente se une al resto del compuesto de una fórmula determinada, el sustituyente se puede unir a través de cualquier átomo en ese sustituyente. Las combinaciones de sustituyentes y/o variables solo se permiten si las combinaciones producen compuestos estables.

Un experto en la técnica reconocerá que los sustituyentes y otras porciones de los compuestos de la presente invención deben seleccionarse para proporcionar un compuesto que es lo suficientemente estable para proporcionar un compuesto farmacéuticamente útil que puede formularse en una composición farmacéutica aceptablemente estable. Los compuestos de la presente invención que tienen la estabilidad se contemplan dentro del alcance de la presente invención.

El término "contraión" se usa para representar una especie de carga negativa, tal como cloruro, bromuro, hidróxido, acetato y sulfato. El término “ion de metal” se refiere a iones de metal alcalino, tales como sodio, potasio o litio, e iones de metal alcalinotérreo, tales como magnesio y calcio, así como zinc y aluminio.

Como se indica en la presente, el término "sustituido" significa que al menos un átomo de hidrógeno (unido al átomo de carbono o heteroátomo) se reemplaza por un grupo que no es de hidrógeno, siempre que se mantengan las valencias normales y que la sustitución dé como resultado un compuesto estable. Cuando un sustituyente es oxo (es decir, =O), se reemplazan 2 hidrógenos en el átomo. Los sustituyentes oxo no están presentes en las porciones aromáticas. Cuando un sistema de anillos (por ejemplo, carbocíclico o heterocíclico) se sustituye con un grupo carbonilo o un enlace doble, significa que el grupo carbonilo o el enlace doble es parte (es decir, está dentro) del anillo. Los enlaces dobles del anillo, como se usan en la presente, son enlaces dobles que se forman entre dos átomos del anillo adyacentes (por ejemplo, C=C, C=N o N=N). El término “sustituido” en referencia a alquilo, cicloalquilo, heteroalquilo, cicloheteroalquilo, alquileno, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, carbociclilo, y heterociclilo, significa alquilo, cicloalquilo, heteroalquilo, cicloheteroalquilo, alquileno, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, carbociclilo y heterociclilo, respectivamente, en los que uno o más átomos de hidrógeno, que están unidos a carbono o heteroátomo, se reemplazan, cada uno independientemente, por uno o más sustituyentes que no son hidrógeno.

Cuando existen átomos de nitrógeno (por ejemplo, aminas) en compuestos de la presente invención, estos se pueden convertir en N-óxidos mediante el tratamiento con un agente oxidante (por ejemplo, mCPBA y/o peróxidos de hidrógeno) para obtener otros compuestos de la presente invención. Por ello, se considera que los átomos de nitrógeno indicados y reivindicados incluyen el nitrógeno indicado y su derivado de N-óxido (NO).

Cuando cualquier variable ocurre más de una vez en cualquier constituyente o fórmula de un compuesto, su definición en cada caso es independiente de su definición en cada uno de los otros casos. De este modo, por ejemplo, si un grupo se muestra como sustituyente con grupos 0, 1, 2 o 3 R, el grupo puede ser no sustituido con el grupo 0 R, o puede ser sustituido con hasta tres grupos R, y en cada caso, R se selecciona independientemente de la definición de R.

Además, las combinaciones de los sustituyentes y/o las variables se admiten solo si las combinaciones producen compuestos estables.

Como se usa en la presente, el término “tautómero” se refiere a cada uno de dos o más isómeros de un compuesto que existe en conjunto en equilibrio, y que se intercambia fácilmente mediante la migración de un átomo o grupo dentro de la molécula Por ejemplo, un experto en la técnica comprendería fácilmente que existe un 1,2,3-triazol en dos formas tautoméricas como se definió anteriormente:

.

Por ello, la invención pretende abarcar todos los tautómeros posibles, incluso cuando una estructura representa solo uno de ellos.

La expresión "farmacéuticamente aceptable" se emplea en la presente para referirse a los compuestos, materiales, composiciones y/o formas de dosificación que, dentro del alcance del criterio médico sensato, son adecuados para usar en contacto con los tejidos de seres humanos y animales sin provocar excesiva toxicidad, irritación, reacción alérgica ni otros problemas o complicaciones proporcionales con una relación riesgo/beneficio razonable.

Los compuestos de la presente invención pueden estar presentes como sales, que también se encuentran dentro del alcance de la presente invención. Se prefieren las sales farmacéuticamente aceptables. Como se usa en la presente, la expresión "sales farmacéuticamente aceptables" se refiere a derivados de los compuestos descritos, en donde el compuesto de origen se modifica mediante la preparación de sales ácidas o básicas del mismo. Las sales farmacéuticamente aceptables de la presente invención se pueden sintetizar del compuesto de origen que contiene una porción básica o ácida mediante métodos químicos convencionales. En general, las sales se pueden preparar haciendo reaccionar las formas básicas o ácidas libres de estos compuestos con una cantidad estequiométrica de la base o del ácido adecuados en agua, en un solvente orgánico o en una mezcla de los dos; en general, se prefieren medios no acuosos, como éter, acetato de etilo, etanol, isopropanol o acetonitrilo. Se pueden hallar listas de sales adecuadas en Remington's Pharmaceutical Sciences, 18.^a edición, Mack Publishing Company, Easton, PA (1990).

Si los compuestos de la presente invención tienen, por ejemplo, al menos un centro básico, pueden formar sales de adición ácida. Estas se forman, por ejemplo, con ácidos inorgánicos fuertes, tales como ácidos minerales, por ejemplo, ácido sulfúrico, ácido fosfórico o un ácido hidrohálico, con ácidos carboxílicos orgánicos, tales como ácidos alcancarboxílicos de 1 a 4 átomos de carbono, por ejemplo, ácido acético, que son no sustituidos o sustituidos con, por ejemplo, halógeno como ácido cloroacético, tales como ácidos dicarboxílicos saturados o insaturados, por ejemplo, ácidos oxálicos, malónicos, succínicos, maleicos, fumáricos, ftálicos o tereftálicos, tales como ácidos hidroxicarboxílicos, por ejemplo, ácidos ascórbicos, glicólicos, lácticos, málicos, tartáricos o cítricos, tales como aminoácidos, (por ejemplo, ácido aspártico o glutámico o lisina o arginina), o ácido benzoico, o con ácidos sulfónicos orgánicos, tales como (C₁-C₄) alquilo o ácidos arilsulfónicos que son no sustituidos o sustituidos, por ejemplo, mediante halógeno, por ejemplo, ácido metil- o p-toluen- sulfónico. Las sales de adición ácida correspondientes también se pueden formar con, si se desea, un centro básico presente adicionalmente. Los compuestos de la presente invención que tienen al menos un grupo ácido (por ejemplo, COOH) pueden también formar sales con bases. Las sales adecuadas con bases son, por ejemplo, sales de metal, tales como sales de metal alcalino o metal alcalinotérreo, por ejemplo, sales de sodio, potasio o magnesio, o sales con amoníaco o una amina orgánica, tales como morfolina, tiomorfolina, piperidina, pirrolidina, una mono, di o tri alquilamina inferior, por ejemplo, etilo, terc-butilo, dietilo, diisopropilo, trietilo, tributilo o dimetil-propilamina o una mono, di o trihidroxi alquilamina inferior, por ejemplo, mono, di o trietanolamina. Las sales internas correspondientes también se pueden formar. También se incluyen las sales que no son adecuadas para usos farmacéuticos pero que pueden emplearse, por ejemplo, para el aislamiento o la purificación de compuestos libres de la Fórmula (I) o sus sales farmacéuticamente aceptables.

Las sales preferidas de los compuestos de la Fórmula (I) que contienen un grupo básico incluyen monohidrocloruro, hidrogensulfato, metansulfonato, fosfato, nitrato o acetato.

Las sales preferidas de los compuestos de la Fórmula (I) que contienen un grupo ácido incluyen sales de sodio, potasio y magnesio, y aminas orgánicas farmacéuticamente aceptables.

Se pretende que la presente invención incluya todos los isótopos de átomos que ocurren en estos compuestos. Los isótopos incluyen aquellos átomos que tienen el mismo número atómico, pero diferentes números de masa. A fin de brindar ejemplos generales y sin limitación, los isótopos de hidrógeno incluyen deuterio y tritio. El deuterio tiene un protón y un neutrón en su núcleo y tiene el doble de masa del hidrógeno común. El deuterio puede representarse mediante símbolos, tales como "²H" o "D". El término “deuterado” en la presente, por sí mismo o usado para modificar un compuesto o grupo, se refiere a un reemplazo de uno o más átomos de hidrógeno, que se unen al carbono con un átomo de deuterio. Los isótopos de carbono incluyen ¹³C y ¹⁴C.

Por lo general, los compuestos de la invención etiquetados de manera isotópica se pueden preparar mediante técnicas convencionales conocidas por los expertos en la técnica o mediante procesos análogos a los que se describen en la presente, usando un reactivo adecuado etiquetado de manera isotópica en lugar de un reactivo no etiquetado. Los compuestos tienen varios usos posibles, por ejemplo, como estándares y reactivos para determinar la capacidad de un posible compuesto farmacéutico de fijarse a proteínas o receptores diana, o para compuestos de imagen de esta invención fijados a receptores biológicos in vivo o in vitro.

Un “compuesto estable” y una “estructura estable” indican un compuesto que es suficientemente potente para sobrevivir al aislamiento en una mezcla de reacción en grado útil de pureza y la formulación en un agente terapéutico efectiva. Se prefiere que los compuestos de la presente invención no contengan un grupo N-halo, S(O)₂H ni S(O)H.

El término "solvato" significa una asociación física de un compuesto de esta invención con una o más moléculas de solvente, ya sean orgánicas o inorgánicas. Esta asociación física incluye la fijación al hidrógeno. En ciertos casos, el solvato será capaz de aislarse, por ejemplo, cuando una o más moléculas de solvente se incorporan en la red cristalina del sólido cristalino. Las moléculas de solvente en el solvato pueden estar presentes con una distribución regular y/o desordenada. El solvato puede comprender ya sea una cantidad estequiométrica o no estequiométrica de las moléculas de solvente. El "solvato" abarca tanto solvatos en fase de solución como solvatos que se pueden aislar. Los solvatos de ejemplo incluyen, entre otros, hidratos, etanolatos, metanolatos e isopropanolatos. En general, los métodos de solvatación son conocidos en el estado de la técnica.

ABREVIATURAS

Las abreviaturas que se usan en la presente se definen de la siguiente manera: “1 x” para una vez, “2 x” para dos veces, “3 x” para tres veces, "°C" para grados Celsius, “eq.” para equivalente o equivalentes, “g” para gramo o gramos, “mg” para miligramo o miligramos, “l” para litro o litros, “ml” para mililitro o mililitros, “μl” para microlitro o microlitros, “N” para normal, “M” para molar, “mmol” para milimol, “min” para minuto o minutos, “h” para hora u horas, “rt” para temperatura ambiente, “RT” para tiempo de retención, “RBF” para matraz de fondo redondo, “atm” para atmósfera, “psi” para libras por pulgada cuadrada, “conc.” para concentrado, “RCM” para metátesis con cierre de anillo, "sat" o "sat'd" para saturado, “SFC” para cromatografía de fluido supercrítico, "MW" para peso molecular, "mp" para punto de fusión, "ee" para exceso enantiomérico, “MS” o "Esp. de masa" para espectroscopía de masa, “ESI” para espectrometría de masa por ionización de electrospray, “HR” para alta resolución, “HRMS” para espectrometría de masa de alta resolución, “LCMS” para cromatografía de líquidos/espectrometría de masa, “HPLC” para cromatografía de líquidos de alta presión, “RP HPLC” para HPLC de fase inversa, “TLC” o “tlc” para cromatografía de capa delgada, “RMN” para espectroscopía de resonancia magnética nuclear, "nOe" para espectroscopía de efecto nuclear Overhauser, “¹H” para protón, “δ” para delta, “s” para singulete, “d” para doblete, “t” para triplete, “q” para cuarteto, “m” para multiplete, “br” para amplio, “Hz” para hertz, y "", "", “”, "R", "S", "E" y "Z" son designaciones estereoquímicas conocidas por los expertos en la técnica.

Me metilo

Et etilo

Pr propilo

i-Pr isopropilo

Bu butilo

i-Bu isobutilo

t-Bu terc-butilo

Ph fenilo

Bn bencilo

Boc o BOC terc-butiloxicarbonilo

Boc₂O dicarbonato de di-terc-butilo

AcOH o HOAc ácido acético

AlCl₃ tricloruro de aluminio

AIBN azobis-isobutironitrilo

BBr₃ tribromuro de boro

BCl₃ tricloruro de boro

BEMP 2-terc-butilimino-2-dietilamino-1,3-dimetilperhidro-1,3,2-diazafosforina

reactivo BOP hexafluorofosfato de benzotriazol-1-iloxitris(dimetilamino)fosfonio

reactivo de Burgess 1-metoxi-N-trietilamoniosulfonil-metanimidato

CBz carbobenciloxi

DCM o CH₂Cl₂ diclorometano

CH₃CN o ACN acetonitrilo

CDCl₃ deutero-cloroformo

CHCl₃ cloroformo

mCPBA o m-CPBA ácido meta-cloroperbenzoico

Cs₂CO₃ carbonato de cesio

Cu(OAc)₂ acetato de cobre (II)

Cy₂NMe N-ciclohexil-N-metilciclohexanamina

DBU 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno

DCE 1,2-dicloroetano

DEA Dietilamina

DEAD azodicarboxilato de dietilo

Dess-Martin 1,1,1-tris(acetiloxi)-1,1-dihidro-1,2-benziodoxol-3-(1H)-ona

DIAD azodicarboxilato de diisopropilo

DIC o DIPCDI diisopropilcarbodiimida

DIEA, DIPEA diisopropiletilamina

o base de Hunig

DMAP 4-dimetilaminopiridina

DME 1,2-dimetoxietano

DMF dimetilformamida

DMSO dimetilsulfóxido

cADN ADN complementario

Dppp (R)-(+)-1,2-bis(difenilfosfino)propano

DuPhos (+)-1,2-bis((2S,5S)-2,5-dietilfosfolano)benceno

EDC N-(3-dimetilaminopropil)-N΄-etilcarbodiimida

EDCI clorhidrato de N-(3-dimetilaminopropil)-N΄-etilcarbodiimida

EDTA ácido etilendiamintetraacético

(S,S)-EtDuPhosRh(I) trifluorometansulfonato de

(+)-1,2-bis((2S,5S)-2,5-dietilfosfolano)bencen(1,5-ciclooctadien)rodio(I) Et₃N o TEA trietilamina

EtOAc acetato de etilo

Et₂O dietiléter

EtOH etanol

GMF filtro de microfibra de vidrio

Grubbs II (1,3-bis(2,4,6-trimetilfenil)-2-imidazolidiniliden)dicloro(fenilmetilen)

(triiciclohexilfosfin)rutenio

HCl ácido clorhídrico

HATU hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N′,N′-tetrametilouronio HEPES ácido 4-(2-hidroxietil)piperaxin-1-etansulfónico

Hex hexano

HOBt o HOBT 1-hidroxibenzotriazol

H₂O₂ peróxido de hidrógeno

IBX ácido 2-yodoxibenzoico

H₂SO₄ ácido sulfúrico

reactivo de Jones CrO₃ en H₂SO₄ acuoso, solución 2 M

K₂CO₃ carbonato de potasio

K₂HPO₄ fosfato de potasio dibásico (hidrogenofosfato de potasio)

KOAc acetato de potasio

K₃PO₄ fosfato de potasio tribásico

LAH hidruro de litio y aluminio

LG grupo saliente

LiOH hidróxido de litio

MeOH metanol

MgSO₄ sulfato de magnesio

MsOH o MSA ácido metilsulfónico/ácido metansulfónico

NaCl cloruro de sodio

NaH hidruro de sodio

NaHCO₃ bicarbonato de sodio

Na₂CO₃ carbonato de sodio

NaOH hidróxido de sodio

Na₂SO₃ sulfito de sodio

Na₂SO₄ sulfato de sodio

NBS N-bromosuccinimida

NCS N-clorosuccinimida

NH₃ amoníaco

NH₄Cl cloruro de amonio

NH₄OH hidróxido de amonio

NH₄ ⁺HCO₂ ^- formiato de amonio

NMM N-metilmorfolina

OTf triflato o trifluorometansulfonato

Pd₂(dba)₃ tris(dibencilidenacetona)dipaladio (0)

Pd(OAc)₂ acetato de paladio(II)

Pd/C paladio sobre carbón

Pd(dppf)Cl₂ [1,1'-bis(difenilfosfino)-ferroceno]dicloropaladio(II)

Ph₃PCl₂ dicloruro de trifenilfosfina

PG grupo protector

POCl₃ oxicloruro de fósforo

PPTS p-toluensulfonato de piridinio

i-PrOH o IPA isopropanol

PS poliestireno

RT o rt temperatura ambiente

SEM-Cl cloruro de 2-(trimetisilil)etoximetilo

SiO₂ óxido de sílice

SnCl₂ cloruro de estaño (II)

TBAF fluoruro de tetra-n-butilamonio

TBAI yoduro de tetra-n-butilamonio

TFA ácido trifluoroacético

THF tetrahidrofurano

THP tetrahidropirano

TMSCHN₂ trimetilsilildiazometano

TMSCH₂N₃ trimetisililmetil azida

T3P ácido propanfosfónico anhidro

TRIS tris(hidroximetil) aminometano

pTsOH ácido p-toluensulfónico

IV. BIOLOGÍA

Los lisofosfolípidos son mediadores de lípidos bioactivos derivados de la membrana. Los lisofosfolípidos incluyen, entre otros, ácido lisofosfatídico (1-acil-2-hidroxi-sn-glicero-3-fosfato; LPA), 1-fosfato de esfingosina (S1P), lisofosfatidilcolina (LPC) y esfingosilfosforilcolina (SPC). Los lisofosfolípidos afectan funciones celulares fundamentales que incluyen proliferación, diferenciación, supervivencia, migración, adhesión, invasión y morfogénesis celular. Estas funciones influencian muchos procesos biológicos que incluyen neurogénesis, angiogénesis, cicatrización, inmunidad y carcinogénesis.

El LPA actúa a través de conjuntos de receptores acoplados a la proteína G específicos (GPCR, por sus siglas en inglés) de forma autocrina y paracrina. La fijación de LPA a sus GPCR cognados (LPA₁, LPA₂, LPA₃, LPA₄, LPA₅, LPA₆) activa la vía de señalización intracelular para producir varias respuestas biológicas.

Los lisofosfolípidos, tales como LPA, son especies de lípidos cuantitativamente menores en comparación con sus contrapartes de fosfolípidos principales (por ejemplo, fosfatidilcolina, fosfatidiletanolamina y esfingomielina). El LPA tiene una función como una molécula efectora biológica, y tiene un intervalo diverso de acciones fisiológicas tales como, entre otras, efectos sobre la presión arterial, activación de plaquetas y contracción del músculo liso, y varios efectos celulares, que incluyen crecimiento celular, redondeo celular, retracción de neuritas y formación de fibras de estrés de actina y migración celular. Los efectos de LPA son principalmente mediados por el receptor.

La activación de los receptores de LPA (LPA₁, LPA₂, LPA₃, LPA₄, LPA₅, LPA₆) con LPA media un intervalo de cascadas de señalización corriente abajo. Estas incluyen, entre otras, activación de proteína cinasa activada por mitógenos (MAPK, por sus siglas en inglés), inhibición/activación de adenilil ciclasa (AC), activación de fosfolipasa C (PLC)/movilización de Ca²⁺, liberación de ácido araquidónico, activación de Akt/PKB y activación de GTPasas, Rho, ROCK, Rac y Ras pequeñas. Otras vías que son afectadas por la activación del receptor de LPA incluyen, entre otras, monofosfato de adenosina cíclico (cAMP), ciclo de división celular 42/proteína de fijación a GTP (Cdc42), proteína serina/treonina cinasa de protooncogén Raf (c-RAF), proteína tirosina cinasa de protooncogén Src (c-src), cinasa regulada por la señal extracelular (ERK, por sus siglas en inglés), cinasa de adhesión focal (FAK, por sus siglas en inglés), factor de intercambio de nucleótido de guanina (GEF, por sus siglas en inglés), glucógeno sintasa cinasa 3b (GSK3b), amino-terminal cinasa c-jun (JNK, por sus siglas en inglés), MEK, cadena liviana de miosina II (MLC II, por sus siglas en inglés), factor nuclear kB (NF-kB), activación del receptor de N-metil-D-aspartato (NMDA, por sus siglas en inglés), fosfatidilinositol 3-cinasa (PI3K, por sus siglas en inglés), proteína cinasa A (PKA, por sus siglas en inglés), proteína cinasa C (PKC, por sus siglas en inglés), sustrato de la toxina botulínica C3 relacionada con ras 1 (RAC1, por sus siglas en inglés). La vía real y el criterio de valoración obtenido dependen de un intervalo de variables que incluyen uso del receptor, tipo de células, nivel de expresión de un receptor o una proteína de señalización, y concentración de LPA. Casi todas las células, tejidos y órganos de mamíferos coexpresan varios subtipos de receptores de LPA, lo que indica que los receptores de LPA señalizan de forma cooperativa. LPA₁, LPA₂ y LPA₃ comparten similitud de secuencia de aminoácidos alta.

El LPA se produce de plaquetas activadas, adipocitos activados, células neuronales y otros tipos de células. El LPA en suero se produce mediante múltiples vías enzimáticas que implican monoacilglicerol cinasa, fosfolipasa A₁, fosfolipasa de secreción A₂ y lisofosfolipasa D (lisoPLD), que incluye autotaxina. Varias enzimas están involucradas en la degradación de LPA: lisofosfolipasa, fosfatasa de fosfato de lípidos y LPA aciltransferasa, tal como endofilina. Se estima que las concentraciones de LPA en seres humanos son 1–5 μM. El LPA en suero se une a albúmina, a lipoproteínas de baja densidad o a otras proteínas, que posiblemente protegen al LPA de la degradación rápida. Las especies moleculares de LPA con diferentes longitudes y saturación de la cadena de acilo son naturales, e incluyen 1-palmitoil (16:0), 1-palmitoleoil (16:1), 1-estearoil (18:0), 1-oleoil (18:1), 1-linoleoil (18:2) y 1-araquidonil (20:4) LPA. El alquil LPA cuantitativamente menor tiene actividades biológicas similares a acil LPA, y especies de LPA distintas activan subtipos de receptores de LPA con eficacias distintas.

RECEPTORES DE LPA

El LPA₁ (denominado anteriormente VZG-1/EDG-2/mrec1.3) se acopla a tres tipos de proteínas G, G_i/o, G_q y G_12/13. Mediante la activación de estas proteínas G, el LPA induce un intervalo de respuestas celulares a través de LPA₁ que incluyen, entre otras: proliferación celular, activación del elemento de respuesta al suero (SER, por sus siglas en inglés), activación de proteína cinasa activada por mitógenos (MAPK), inhibición de adenilil ciclasa (AC, por sus siglas en inglés), activación de fosfolipasa C (PLC, por sus siglas en inglés), movilización de Ca²⁺, activación de Akt y activación de Rho. Se observa expresión amplia de LPA₁ en ratones adultos, con presencia clara en los testículos, el cerebro, el corazón, los pulmones, el intestino delgado, el estómago, el bazo, el timo y el músculo esquelético. De manera similar, los tejidos humanos también expresan LPA₁; está presente en el cerebro, el corazón, los pulmones, la placenta, el colon, el intestino delgado, la próstata, los testículos, los ovarios, el páncreas, el bazo, los riñones, el músculo esquelético y el timo.

El LPA₂ (EDG-4) también se acopla a tres tipos de proteínas G, G_i/o, G_q y G_12/13, para mediar la señalización celular inducida por LPA. La expresión de LPA₂ se observa en los testículos, los riñones, los pulmones, el timo, el bazo y el estómago en ratones adultos, y en los testículos, el páncreas, la próstata, el timo, el bazo y los leucocitos de sangre periférica en seres humanos. La expresión de LPA₂ se regula de manera ascendente en distintas líneas de células cancerosas, y se observaron varias variantes transcripcionales de LPA₂ humano con mutaciones en la región no traducida 3’. Las eliminaciones dirigidas de LPA₂ en ratones no mostraron ninguna anormalidad fenotípica evidente, pero demostraron una pérdida significativa de la señalización de LPA normal (por ejemplo, activación de PLC, movilización de Ca²⁺ y formación de fibras de estrés) en cultivos primarios de fibroblastos embrionarios de ratón (MEF, por sus siglas en inglés). La creación de ratones doble nulos lpa1(-/-) lpa2 (-/-) mostró que muchas respuestas inducidas por LPA, que incluyen proliferación celular, inhibición de AC, activación de PLC, movilización de Ca²⁺, activación de JNK y Akt, y formación de fibras de estrés, no se observan o se reducen significativamente en MEF doble nulos. Todas estas respuestas, con excepción de la inhibición de AC (la inhibición de AC se elimina prácticamente en MEF con LPA₁ (-/-)), son sólo parcialmente afectadas en MEF con LPA₁ (-/-) o LPA₂ (-/-). El LPA₂ contribuye a respuestas de señalización mediada por LPA normales en al menos algunos tipos de células (Choi et al., Biochemica et Biophysica Acta 2008, 1781, p531-539).

El LPA₃ (EDG-7) es distinto de LPA₁ y LPA₂ por su capacidad para acoplarse a G_i/o y G_q pero no a G_12/13, y tiene una respuesta mucho menor a especies de LPA con cadenas de acilo saturadas. El LPA₃ puede mediar la señalización pleiotrópica inducida por LPA que incluye activación de PLC, movilización de Ca²⁺, inhibición/activación de AC y activación de MAPK. La sobrexpresión de LPA₃ en células de neuroblastoma produce elongación de neuritas, mientras que la sobrexpresión de LPA₁ o LPA₂ genera retracción de neuritas y redondeo celular cuando se estimula con LPA. La expresión de LPA₃ se observa en los testículos, los riñones, los pulmones, el intestino delgado, el corazón, el timo y el cerebro en ratones adultos. En seres humanos, se encuentra en el corazón, el páncreas, la próstata, los testículos, los pulmones, los ovarios y el cerebro (corteza frontal, hipocampo y núcleo amigdalino).

El LPA₄ (p2y₉/GPR23) es de secuencia divergente en comparación con LPA₁, LPA₂ y LPA₃ con similitud más cercana con el receptor del factor de activación de plaquetas (PAF, por sus siglas en inglés). El LPA₄ media la movilización de Ca²⁺ y acumulación de cAMP inducidas por LPA, y el acoplamiento funcional a la proteína G, Gs, para la activación de AC, así como el acoplamiento a otras proteínas G. El gen LPA₄ se expresa en los ovarios, el páncreas, el timo, los riñones y el músculo esquelético.

El LPA₅ (GPR92) es un miembro del grupo purino de GPCR y tiene mayor similitud estructural con LPA_4. El LPA₅ se expresa en el corazón, la placenta, el bazo, el cerebro, los pulmones y el intestino en seres humanos. El LPA₅ también muestra expresión muy alta en el compartimento de linfocitos CD8+ del tubo gastrointestinal.

El LPA₆ (p2y5) es un miembro del grupo purino de GPCR y tiene similitud estructural más estrechamente relacionada a LPA_4. El LPA₆ es un receptor de LPA acoplado a las vías de señalización G12/13-Rho y se expresa en las vainas radiculares internas de folículos pilosos humanos.

Actividad biológica ilustrativa

Cicatrización

La cicatrización normal se produce a través de una secuencia altamente coordinada de eventos en la que células, factores solubles y componentes de matriz actúan juntos para cicatrizar la lesión. La respuesta de cicatrización se puede describir como que tiene lugar en cuatro etapas amplias superpuestas—hemostasia, inflamación, proliferación y reestructuración. Muchos factores de crecimiento y citocinas se liberan en un sitio de la herida para iniciar y perpetuar los procesos de cicatrización.

Ante la herida, los vasos sanguíneos dañados activan las plaquetas. Las plaquetas activadas tienen funciones fundamentales en los procesos de cicatrización posteriores mediante la liberación de mediadores bioactivos para inducir la proliferación celular, migración celular, coagulación de la sangre y angiogénesis. El LPA es uno de esos mediadores que se libera de las plaquetas activadas; esto induce la agregación plaquetaria junto con efectos mitógenos/migratorios en las células circundantes, tales como células endoteliales, células del músculo liso, fibroblastos y queratinocitos. La aplicación tópica de LPA en heridas cutáneas en ratones promueve procesos de cicatrización (cierre de la herida y mayor grosor neoepitelial), y así aumenta la proliferación/migración celular sin afectar la inflamación secundaria.

La activación de fibroblastos dérmicos mediante factores de crecimiento y citocinas genera su posterior migración desde los bordes de la herida hacia la matriz provisional formada por el coágulo de fibrina, en donde los fibroblastos proliferan y comienzan a restaurar la dermis segregando y organizando la matriz extracelular (ECM, por sus siglas en inglés) dérmica característica. La cantidad creciente de fibroblastos dentro de la herida y la precipitación continua de ECM mejora la rigidez de la matriz aplicando fuerzas de tracción pequeñas al tejido granular formado recientemente. El aumento del estrés mecánico, junto con el factor de crecimiento transformante β (TGFβ, por sus siglas en inglés), induce la expresión de α-actina del músculo liso (α-SMA, por sus siglas en inglés) y la posterior transformación de los fibroblastos en miofibroblastos. Los miofibroblastos facilitan la reestructuración del tejido granular mediante la contracción de miofibroblastos y a través de la producción de componentes de ECM.

El LPA regula muchas funciones importantes de los fibroblastos en la cicatrización, que incluyen la proliferación, migración, diferenciación y contracción. La proliferación de fibroblastos es necesaria en la cicatrización a fin de llenar una herida abierta. En contraste, la fibrosis se caracteriza por la proliferación y acumulación intensas de miofibroblastos que sintetizan de manera activa ECM y citocinas proinflamatorias. El LPA puede aumentar o suprimir la proliferación de tipos de células importantes en la cicatrización, tales como células epiteliales y endoteliales (EC, por sus siglas en inglés), macrófagos, queratinocitos y fibroblastos. Una función de LPA₁ en la proliferación inducida por LPA fue proporcionada por la observación de que se atenuó la proliferación estimulada por LPA de fibroblastos aislados del receptor de LPA₁ de ratones nulos (Mills et al., Nat Rev. Cancer 2003; 3: 582-591). El LPA induce cambios del citoesqueleto que son esenciales para la adhesión, migración, diferenciación y contracción de fibroblastos.

Fibrosis

La lesión tisular inicia una serie compleja de respuestas de cicatrización del hospedero; si son exitosas, estas respuestas restauran la estructura y función tisulares normales. Si no lo son, estas respuestas pueden generar fibrosis tisular y pérdida de la función.

Para la mayoría de los órganos y tejidos, el desarrollo de fibrosis involucra una multitud de eventos y factores. Las moléculas involucradas en el desarrollo de la fibrosis incluyen proteínas y péptidos (citocinas profibróticas, quimiocinas, metaloproteinasas, etc.) y fosfolípidos. Los fosfolípidos involucrados en el desarrollo de la fibrosis incluyen factor de activación de plaquetas (PAF), fosfatidilcolina, fosfato de esfingosina-1 (S1P) y ácido lisofosfatídico (LPA).

Varias distrofias musculares se caracterizan por debilidad progresiva y atrofia muscular, y por fibrosis extensiva. Se demostró que el tratamiento con LPA de mioblastos cultivados indujo una expresión significativa del factor de crecimiento de tejido conectivo (CTGF, por sus siglas en inglés). Posteriormente, el CTGF induce la expresión de colágeno, fibronectina e integrina, e induce la desdiferenciación de estos mioblastos. El tratamiento de varios tipos de células con LPA genera la inducción reproducible y de nivel alto de CTGF (J.P. Pradere, et al., LPA₁ receptor activation promotes renal interstitial fibrosis, J. Am. Soc. Nephrol. 18 (2007) 3110–3118; N. Wiedmaier, et al., Int J Med Microbiol; 298(3-4):231-43, 2008). El CTGF es una citocina profibrótica, que señaliza corriente abajo y en paralelo con TGFβ.

Se descubrió que la expresión de CTGF mediante células epiteliales gingivales, que están involucradas en el desarrollo de la fibromatosis gingival, se exacerba mediante tratamiento con LPA (A. Kantarci, et al., J. Pathol.210 (2006) 59-66). El LPA se asocia a la progresión de la fibrosis hepática. In vitro, el LPA induce la proliferación de células estrelladas y hepatocitos. Estas células activadas son el principal tipo de células responsables de la acumulación de ECM en el hígado. Además, los niveles de LPA en plasma aumentan durante la fibrosis hepática inducida por CCl₄ en roedores, o en la fibrosis hepática inducida por el virus de la hepatitis C en seres humanos (N. Watanabe, et al., Plasma lysophosphatidic acid level and serum autotaxin activity are increased in liver injury in rats in relation to its severity, Life Sci.81 (2007) 1009–1015; N.Watanabe, et al., J. Clin. Gastroenterol.41 (2007) 616-623).

Se informó un aumento de las concentraciones de fosfolípidos en el fluido de lavado broncoalveolar en conejos y roedores inyectados con bleomicina (K. Kuroda, et al., Phospholipid concentration in lung lavage fluid as biomarker for pulmonary fibrosis, Inhal. Toxicol.18 (2006) 389–393; K. Yasuda, et al., Lung 172 (1994) 91–102).

El LPA se asocia a enfermedad cardíaca y reestructuración miocárdica. Los niveles de LPA en suero aumentan después del infarto de miocardio en pacientes, y el LPA estimula la proliferación de fibroblastos cardíacos y la producción de colágeno en ratas (Chen et al. FEBS Lett.21 de agosto de 2006;580(19):4737-45).

Fibrosis pulmonar

En el pulmón, las respuestas de cicatrización anormales a lesiones contribuyen a la patogénesis de enfermedades pulmonares fibróticas. Las enfermedades pulmonares fibróticas, tales como fibrosis pulmonar idiopática (IPF), se asocian a morbilidad y mortalidad alta.

El LPA es un mediador importante de reclutamiento de fibroblastos en fibrosis pulmonar. LPA y LPA₁ cumplen funciones patógenas clave en fibrosis pulmonar. La actividad quimioatrayente de fibroblastos cumple una función importante en los pulmones de pacientes con fibrosis pulmonar. Los efectos profibróticos de la estimulación del receptor de LPA₁ se explica mediante filtración vascular mediada por el receptor de LPA₁ y mayor reclutamiento de fibroblastos, en donde ambos son eventos profibróticos. La vía LPA-LPA₁ cumple una función en la mediación de la migración de fibroblastos y la filtración vascular en IPF. El resultado final es el proceso de cicatrización anormal que caracteriza esta afección fibrótica.

El receptor de LPA₁ es el receptor de LPA que se expresa en niveles más altos en fibroblastos obtenidos de pacientes con IPF. Además, el BAL obtenido de pacientes con IPF indujo quimiotaxia de fibroblastos de pulmón fetal humano que se bloquearon mediante el antagonista dual de los receptores de LPA₁- LPA₃, Ki16425. En un modelo experimental de ratón de la lesión pulmonar inducida por bleomicina, se mostró que los niveles de LPA eran altos en muestras de lavado broncoalveolar en comparación con controles sin exposición. Los ratones knockout para LPA₁ se protegieron contra la fibrosis después de la exposición a bleomicina con acumulación de fibroblastos y filtración vascular reducidas. En sujetos humanos con IPF, se observaron niveles de LPA altos en muestras de lavado broncoalveolar en comparación con controles sanos. La actividad quimiotáctica de fibroblastos aumentada en estas muestras se inhibió mediante Ki16425, lo que indicó que la migración de fibroblastos está mediada por la vía de receptores de LPA-LPA (Tager et al. Nature Medicine, 2008, 14, 45-54).

La vía LPA-LPA₁ es esencial en el reclutamiento de fibroblastos y la filtración vascular en fibrosis pulmonar.

La activación de TGF- latente mediante la integrinav6 cumple una función esencial en el desarrollo de la lesión pulmonar y fibrosis (Munger et al. Cell, vol. 96, 319-328, 1999). El LPA induce la activación de TGF- mediada porv6 en células epiteliales de pulmón humano (Xu et al. Am. J. Pathology, 2009, 174, 1264-1279). La activación de TGF- mediada porv6 inducida por LPA está mediada por el receptor de LPA_2. La expresión del receptor de LPA₂ aumenta en células epiteliales y células mesenquimatosas en áreas de fibrosis pulmonar de pacientes con IPF en comparación con tejidos pulmonares humanos normales. La vía LPA-LPA₂ contribuye a la activación de la vía TGF- en fibrosis pulmonar. Los compuestos que inhiben LPA₂ pueden mostrar eficacia en el tratamiento de fibrosis pulmonar. Los compuestos que inhiben LPA₁ y LPA₂ pueden mostrar eficacia mejorada en el tratamiento de fibrosis pulmonar en comparación con los compuestos que inhiben sólo LPA₁ o LPA_2.

Se demostró que el antagonista BMS-986020 de LPA₁ reducía de manera significativa la velocidad de disminución de la CVF (capacidad vital forzada) en un ensayo clínico de 26 semanas en pacientes con IPF (Palmer et al., Chest, 2018, 154, 1061-1069).

Fibrosis renal

LPA y LPA₁ están involucradas en la etiología de la fibrosis renal. El LPA tiene efectos sobre la proliferación y la contracción de células mesangiales glomerulares y, por lo tanto, están implicadas en la glomerulonefritis proliferativa (C.N. Inoue, et al., Clin. Sci. (Colch.) 1999, 96, 431-436). En modelos animales de fibrosis renal [obstrucción ureteral unilateral (UUO)], se descubrió que receptores de LPA renales se expresan en condiciones basales con un orden de expresión de LPA₂>LPA₃=LPA₁>>LPA_4. Este modelo imita de una manera acelerada el desarrollo de la fibrosis renal, que incluye inflamación renal, activación de fibroblastos y acumulación de matriz extracelular en el tubulointersticial. La UUO indujo significativamente la expresión del receptor de LPA_1, Esto se correspondió con la producción de LPA renal (aumento de 3,3 veces) en medio condicionado de explantes renales. Los riñones contralaterales no mostraron cambios significativos en la liberación de LPA y expresión de receptores de LPA. Esto muestra que se cumple una condición previa para una acción del LPA en la fibrosis: la producción de un ligando (LPA) y la inducción de uno de sus receptores (el receptor de LPA₁) (J.P. Pradere et al., Biochimica et Biophysica Acta, 2008, 1781, 582-587).

En ratones, cuando el receptor de LPA₁ se desactivó (LPA₁ (−/−), el desarrollo de la fibrosis renal se atenuó considerablemente. Los ratones con UUO tratados con el antagonista del receptor de LPA, Ki16425, se asemejaron mucho al perfil de ratones con LPA₁ (−/−).

El LPA puede participar en la acumulación intraperitoneal de monocitos/macrófagos, y el LPA puede inducir la expresión de la citocina profibrótica, CTGF, en cultivos primarios de fibroblastos humanos (J.S. Koh, et al., J. Clin. Invest., 1998, 102, 716–727).

El tratamiento con LPA de una línea de células renales epiteliales de ratón, MCT, indujo un aumento rápido en la expresión de la citocina profibrótica, CTGF. El CTGF cumple una función esencial en la fibrosis tubulointersticial inducida por UUO (TIF), y está involucrado en la actividad profibrótica de TGFβ. Esta inducción fue suprimida casi completamente mediante tratamiento conjunto con el antagonista del receptor de LPA, Ki16425. En un aspecto, la actividad profibrótica de LPA en el riñón es el resultado de una acción directa de LPA en células renales que involucra la inducción de CTGF.

Fibrosis hepática

El LPA está involucrado en enfermedad y fibrosis hepática. Los niveles de LPA en plasma y autotaxina en suero (enzima responsable de la producción de LPA) son elevados en pacientes con hepatitis y modelos de animal de lesión hepática en correlación con fibrosis aumentada. El LPA también regula la función celular hepática. Los receptores de LPA₁ y LPA₂ se expresan en células estrelladas hepáticas de ratón, y el LPA estimula la migración de miofibroblastos hepáticos. Fibrosis ocular

El LPA está involucrado en la cicatrización en el ojo. Los receptores de LPA₁ y LPA₃ se pueden detectar en las células epiteliales de la córnea, queratocitos y células endoteliales de conejo normales, y la expresión de LPA₁ y LPA₃ aumenta en las células epiteliales de la córnea después de la lesión.

El LPA y sus homólogos están presentes en el humor acuoso y el fluido de la glándula lagrimal del ojo de conejo y estos niveles aumentan en un modelo de lesión de la córnea de conejo.

El LPA induce la formación de fibras de estrés de actina en células endoteliales y epiteliales de la córnea de conejo y promueve la contracción de fibroblastos de la córnea. El LPA también estimula la proliferación de células epiteliales pigmentadas de la retina de ser humano.

Fibrosis cardíaca

El LPA está involucrado en infarto de miocardio y fibrosis cardíaca. Los niveles de LPA en suero aumentan en pacientes después del infarto de miocardio (MI, por sus siglas en inglés), y el LPA estimula la proliferación y la producción de colágeno (fibrosis) mediante fibroblastos cardíacos de rata. Los receptores de LPA₁ y LPA₃ se expresan en niveles altos en tejido cardíaco humano.

Tratamiento de la fibrosis

Un compuesto de la Fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable, se puede usar en un método para tratar o prevenir la fibrosis en un mamífero. Un compuesto de la Fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable, se puede usar para tratar la fibrosis en un órgano o un tejido en un mamífero. Un compuesto de fórmula (I) o una sal de este farmacéuticamente aceptable se puede usar en un método para prevenir una afección fibrótica en un mamífero, en donde el método comprende administrar al mamífero que tiene riesgo de desarrollar una o más afecciones fibróticas una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la Fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable. En un aspecto, el mamífero se expuso a una o más condiciones ambientales que se conoce que aumentan el riesgo de desarrollar fibrosis en un órgano o tejido. El mamífero puede haber sido expuesto a una o más condiciones ambientales que se conoce que aumentan el riesgo de desarrollar fibrosis pulmonar, hepática o renal. El mamífero puede tener una predisposición genética a desarrollar fibrosis en un órgano o tejido. Un compuesto de la Fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable, se puede administrar a un mamífero para prevenir o minimizar la cicatrización patológica después de la lesión. La lesión puede incluir cirugía.

Como se usan en la presente, las expresiones “fibrosis” o “trastorno fibrótico” se refieren a afecciones asociadas a la acumulación anormal de células y/o fibronectina y/o colágeno y/o mayor reclutamiento de fibroblastos e incluyen, entre otros, fibrosis de órganos o tejidos individuales tales como corazón, riñón, hígado, articulaciones, pulmón, tejido pleural, tejido peritoneal, piel, córnea, retina, aparato locomotor y tubo digestivo.

Los ejemplos de enfermedades, trastornos o afecciones que implican fibrosis incluyen, entre otras: enfermedades pulmonares asociadas a fibrosis, por ejemplo, fibrosis pulmonar idiopática, fibrosis pulmonar derivada de enfermedad inflamatoria sistémica, tal como artritis reumatoide, esclerodermia, lupus, alveolitis fibrosante criptogénica, fibrosis inducida por radiación, enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC), esclerodermia, asma crónica, silicosis, fibrosis pulmonar o pleural inducida por asbestos, lesión pulmonar aguda y síndrome de dificultad respiratoria aguda (que incluye inducida por neumonía bacteriana, inducida por trauma, inducida por neumonía viral, inducida por la ventilación mecánica, inducida por sepsis no pulmonar e inducida por aspiración); nefropatías crónicas asociadas a la lesión/fibrosis (fibrosis renal), por ejemplo, glomerulonefritis derivada de enfermedades inflamatorias sistémicas, tales como lupus y esclerodermia, diabetes, nefritis glomerular, glomeruloesclerosis focal y segmentaria, nefropatía por IgA, hipertensión, aloinjerto y síndrome de Alport; fibrosis intestinal, por ejemplo, esclerodermia y fibrosis intestinal inducida por radiación; fibrosis hepática, por ejemplo, cirrosis, fibrosis hepática alcohólica, esteatohepatitis no alcohólica (NASH), lesión del conducto biliar, cirrosis biliar primaria, fibrosis hepática inducida por infección o virus (por ejemplo, infección por HCV crónica), y hepatitis autoinmunitaria; fibrosis de cabeza y cuello, por ejemplo, inducida por radiación; cicatrización de la córnea, por ejemplo, LASIK (queratomileusis in situ asistida con láser), trasplante de córnea y trabeculectomía; cicatrización patológica hipertrófica y queloides, por ejemplo, inducidos por quemaduras o quirúrgicos; y otras enfermedades fibróticas, por ejemplo, sarcoidosis, esclerodermia, lesión/fibrosis medular, mielofibrosis, reestenosis vascular, ateroesclerosis, arterioesclerosis, granulomatosis de Wegener, enfermedad mixta del tejido conectivo y enfermedad de Peyronie.

Un mamífero que tiene uno de los siguientes ejemplos no limitativos de enfermedades, trastornos o afecciones se puede beneficiar del tratamiento con un compuesto de la Fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable: ateroesclerosis, trombosis, enfermedad cardíaca, vasculitis, formación de tejidos cicatriciales, reestenosis, flebitis, EPOC (enfermedad pulmonar obstructiva crónica), hipertensión pulmonar, fibrosis pulmonar, inflamación pulmonar, adherencias intestinales, fibrosis de vejiga y cistitis, fibrosis de las fosas nasales, sinusitis, inflamación mediada por neutrófilos y fibrosis mediada por fibroblastos.

Un compuesto de la Fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable, se puede administrar a un mamífero que tiene fibrosis en un órgano o tejido, o con una predisposición a desarrollar fibrosis en un órgano o tejido con uno o más agentes distintos usados para el tratamiento de fibrosis. El uno o más de los agentes pueden incluir corticoesteroides. El uno o más de los agentes pueden incluir inmunosupresores. El uno o más de los agentes pueden incluir antagonistas de linfocitos B. El uno o más de los agentes pueden incluir uteroglobina.

Un compuesto de la Fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable, se puede usar en un método para tratar trastornos dermatológicos en un mamífero. Como se usa en la presente, la expresión “trastorno dermatológico” se refiere a un trastorno cutáneo. Estos trastornos dermatológicos incluyen, entre otros, trastornos proliferativos o inflamatorios de la piel, tales como dermatitis atópica, trastornos ampollosos, colagenosis, psoriasis, esclerodermia, lesiones psoriásicas, dermatitis, dermatitis por contacto, eccema, urticaria, rosácea, cicatrización, cicatrización patológica hipertrófica, queloides, enfermedad de Kawasaki, rosácea, síndrome de Sjogren-Larsso, urticaria. Un compuesto de la Fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable, se puede usar en un método para tratar esclerosis sistémica.

Dolor

Debido a que el LPA se libera después de la lesión tisular, el LPA₁ cumple una función importante en la iniciación de dolor neuropático. El LPA₁, a diferencia de LPA₂ o LPA₃, se expresa en el ganglio de la raíz dorsal (DRG, por sus siglas en inglés) y en las neuronas de la raíz dorsal. Usando el oligodesoxinucleótidos antisentido (AS-ODN, por sus siglas en inglés) para LPA₁ y ratones nulos LPA₁, se descubrió que alodinia e hiperalgesia mecánicas inducidas por LPA están mediadas de manera dependiente de LPA_1, El LPA₁ y la activación corriente abajo de Rho–ROCK cumplen una función en la iniciación de la señalización del dolor neuropático. El tratamiento previo con exoenzima C3 de Clostridium botulinum (BoTXC₃, inhibidor de Rho) o Y-27632 (inhibidor de ROCK) elimina completamente la alodinia e hiperalgesia en ratones con lesión nerviosa. El LPA también indujo la desmielinización de la raíz dorsal, que era prevenida por BoTXC3. La desmielinización de la raíz dorsal debido a la lesión no se observó en ratones nulos con LPA₁ o ratones de tipo silvestre inyectados con AS-ODN. La señalización de LPA parece inducir marcadores de dolor neuropático importantes, tales como proteína cinasa Cγ (PKCγ) y una subunidad del canal de calcio regulado por el voltaje α2δ1 (Caα2δ1) de manera dependiente de LPA₁ y Rho (M. Inoue, et al., Initiation of neuropathic pain requires lysophosphatidic acid receptor signaling, Nat. Med.10 (2004) 712-718).

Un compuesto de la Fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable, se puede usar en un método para tratar el dolor en un mamífero. El dolor puede ser dolor agudo o dolor crónico. El dolor puede ser dolor neuropático.

Un compuesto de la Fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable, se puede usar en un método para tratar la fibromialgia. La fibromialgia puede surgir de la formación de tejido cicatricial fibroso en músculos contraíbles (voluntarios). La fibrosis une el tejido e inhibe el flujo sanguíneo, lo que genera dolor.

Cáncer

La señalización del receptor de lisofosfolípidos cumple una función en la etiología del cáncer. El ácido lisofosfatídico (LPA) y sus receptores acoplados a la proteína G (GPCR), LPA₁, LPA₂ y/o LPA₃, cumplen una función en el desarrollo de varios tipos de cáncer. La iniciación, progresión y metástasis del cáncer involucra varios procesos concurrentes y secuenciales que incluyen proliferación y crecimiento celular, supervivencia y antiapoptosis, migración de células, penetración de células extrañas en capas y/u órganos celulares definidos, y promoción de angiogénesis. El control de cada uno de estos procesos mediante la señalización de LPA en condiciones fisiológicas y patofisiológicas destaca la utilidad terapéutica potencial de la modulación de las vías de señalización de LPA para el tratamiento del cáncer, en especial a nivel de los receptores de LPA o ATX/lisoPLD. La autotaxina (ATX, por sus siglas en inglés) es una enzima prometastásica aislada inicialmente del medio condicionado de células de melanoma humano que estimulan varias actividades biológicas, que incluyen angiogénesis y promoción de crecimiento, migración, supervivencia y diferenciación celular a través de la producción de LPA (Mol Cancer Ther 2008;7(10):3352–62).

El LPA señaliza a través de sus propias GPCR que generan la activación de múltiples vías efectoras corriente abajo. Estas vías efectoras corriente abajo cumplen una función en el cáncer. El LPA y sus GPCR están ligados al cáncer a través de vías de señalización oncogénicas principales.

El LPA contribuye a la oncogénesis, y así aumenta la movilidad e invasión de las células. El LPA se implicó en la iniciación o progresión del cáncer de ovario. El LPA está presente en concentraciones considerables (2–80 μM) en el líquido ascítico de pacientes con cáncer de ovario. Las células de cáncer de ovario producen de manera constitutiva mayores cantidades de LPA en comparación con células epiteliales superficiales de ovario normales, el precursor de cáncer epitelial de ovario. Los niveles elevados de LPA también se detectan en el plasma de pacientes con tipos de cáncer de ovario en estadios iniciales en comparación con los controles. Los receptores de LPA (LPA₂ y LPA₃) también se sobrexpresan en células de cáncer de ovario en comparación con células epiteliales superficiales de ovario normales. El LPA estimula la expresión de Cox-2 mediante activación transcripcional y mejora después de la transcripción de mARN de Cox-2 en células de cáncer de ovario. Las prostaglandinas producidas por Cox-2 se implicaron en varios tipos de cáncer humano, y la inhibición farmacológica de la actividad de Cox-2 reduce el desarrollo del cáncer de colon y disminuye el tamaño y la cantidad de adenomas en pacientes con poliposis adenomatosa familiar. El LPA también se implicó en la iniciación o progresión del cáncer de próstata, cáncer de mama, melanoma, cáncer de cabeza y cuello, cáncer de intestino (cáncer colorrectal), cáncer de tiroides y otros tipos de cáncer (Gardell et al., Trends in Molecular Medicine, vol.12, N° 2, p 65-75, 2006; Ishii et al., Annu. Rev. Biochem, 73, 321-354, 2004; Mills et al., Nat. Rev. Cancer, 3, 582-591, 2003; Murph et al., Biochimica et Biophysica Acta, 1781, 547-557, 2008).

Las respuestas celulares a LPA están mediadas a través de los receptores de ácido lisofosfatídico. Por ejemplo, los receptores de LPA median la migración e invasión de líneas de células de cáncer de páncreas: un antagonista de LPA₁ y LPA₃ (Ki16425) y siARN específico de LPA₁ bloqueó efectivamente la migración in vitro en respuesta a LPA y líquido peritoneal (ascitis) de pacientes con cáncer de páncreas; además, Ki16425 bloqueó la actividad de invasión inducida por LPA e inducida por ascitis de una línea de células de cáncer de páncreas altamente metastásico peritoneal (Yamada et al., J. Biol. Chem., 279, 6595-6605, 2004).

Las líneas de células de carcinoma colorrectal muestran expresión significativa de mARN de LPA₁ y responde a LPA mediante migración y producción celular de factores angiogénicos. La sobrexpresión de receptores de LPA cumple una función en la patogénesis del cáncer de tiroides. El LPA₃ fue originalmente clonado de células de cáncer de próstata, de manera concordante con la capacidad de LPA para inducir la proliferación autocrina de células de cáncer de próstata. El LPA cumple funciones de estimulación en la progresión del cáncer en muchos tipos de cáncer. El LPA induce y se produce de la proliferación de líneas de células de cáncer de próstata. El LPA induce la proliferación de células DLD1 de carcinoma de colon humano, la migración, adhesión y secreción de factores angiogénicos a través de la señalización de LPA_1. En otras líneas de células de carcinoma de colon humano (HT29 y WiDR), el LPA mejora la proliferación celular y la secreción de factores angiogénicos. En otras líneas de células de cáncer de colon, la activación de los receptores de LPA₂ y LPA₃ genera la proliferación de las células. La manipulación genética o farmacológica del metabolismo de LPA, el bloqueo específico de la señalización del receptor y/o la inhibición de las vías de transducción de señal corriente abajo, representan enfoques para tratamientos contra el cáncer.

Se informó que LPA y otros fosfolípidos estimulan la expresión de interleucina-8 (IL-8) en líneas de células de cáncer de ovario. Las concentraciones altas de IL-8 en cáncer de ovario se pueden correlacionar con malas respuestas iniciales a la quimioterapia y con mal pronóstico, respectivamente. En modelos de animales, la expresión de IL-8 y otros factores de crecimiento, tales como factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF, por sus siglas en inglés), se asocian con mayor oncogénesis, formación de ascitis, angiogénesis e invasión de células de cáncer de ovario. En algunas modalidades, IL-8 es un modulador importante de progresión del cáncer, resistencia a los fármacos y pronóstico en el cáncer de ovario. Un compuesto de la Fórmula (I) puede inhibir o reducir la expresión de IL-8 en líneas de células de cáncer de ovario.

Un compuesto de la Fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable, se puede usar en un método para tratar el cáncer. Un compuesto de la Fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable, se puede usar en un método para tratar enfermedades proliferativas benignas y malignas. Un compuesto de la Fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable, se puede usar en un método para prevenir o reducir la proliferación de células tumorales, la invasión y metástasis de carcinomas, mesotelioma pleural (Yamada, Cancer Sci., 2008, 99(8), 1603-1610) o mesotelioma peritoneal, dolor asociado al cáncer, metástasis ósea (Boucharaba et al., J. Clin. Invest., 2004, 114(12), 1714-1725; Boucharaba et al., Proc. Natl. acad. Sci., 2006, 103(25) 9643-9648). Un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se puede usar en un método para tratar el cáncer en un mamífero, en donde el método comprende administrar al mamífero un compuesto de la Fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable, y un segundo agente terapéutico, en donde el segundo agente terapéutico es un agente antineoplásico.

Como se usa en la presente, el término “cáncer” se refiere a crecimiento anormal de células que tienden a proliferarse de manera no controlada y, en algunos casos, a hacer metástasis (propagarse). Los tipos de cáncer incluyen, entre otros, tumores sólidos (tales como los de vejiga, intestino, cerebro, mama, endometrio, corazón, riñón, pulmón, tejido linfático (linfoma), ovario, páncreas u otro órgano endocrino (tiroide), próstata, piel (melanoma o cáncer de células basales) o tumores hematológicos (tales como leucemias) en cualquier estadio de la enfermedad, con o sin metástasis.

Los ejemplos no limitativos adicionales de tipos de cáncer incluyen leucemia linfoblástica aguda, leucemia mieloide aguda, carcinoma corticosuprarrenal, cáncer anal, cáncer de apéndice, astrocitomas, tumor teratoideo/rabdoide atípico, carcinoma de células basales, cáncer de las vías biliares, cáncer de vejiga, cáncer óseo (osteosarcoma e histiocitoma fibroso maligno), glioma del tronco encefálico, tumores cerebrales, tumores cerebrales y de la médula espinal, cáncer de mama, tumores bronquiales, linfoma de Burkitt, cáncer de cuello uterino, leucemia linfocítica crónica, leucemia mielógena crónica, cáncer de colon, cáncer colorrectal, craneofaringioma, linfoma cutáneo de linfocitos T, tumores embrionarios, cáncer de endometrio, ependimoblastoma, ependimoma, cáncer de esófago, familia de tumores del sarcoma de Ewing, cáncer de ojo, retinoblastoma, cáncer de vesícula biliar, cáncer gástrico (de estómago), tumor carcinoide gastrointestinal, tumor del estroma gastrointestinal (GIST, por sus siglas en inglés), tumor de células estromales gastrointestinales, tumor de células germinales, glioma, leucemia de tricoleucocitos, cáncer de cabeza y cuello, cáncer hepatocelular (de hígado), linfoma de Hodgkin, cáncer hipofaríngeo, melanoma intraocular, tumores de células de islotes (páncreas endocrino), sarcoma de Kaposi, cáncer de riñón, histiocitosis de células de Langerhans, cáncer de laringe, leucemia, leucemia linfoblástica aguda, leucemia mieloide aguda, leucemia linfocítica crónica, leucemia mielógena crónica, leucemia de tricoleucocitos, cáncer de hígado, cáncer pulmonar de células no pequeñas, cáncer pulmonar de células pequeñas, linfoma de Burkitt, linfoma cutáneo de linfocitos T, linfoma de Hodgkin, linfoma no Hodgkin, linfoma, macroglobulinemia de Waldenström, meduloblastoma, meduloepitelioma, melanoma, mesotelioma, cáncer de boca, leucemia mielógena crónica, leucemia mieloide, mieloma múltiple, cáncer nasofaríngeo, neuroblastoma, linfoma no Hodgkin, cáncer pulmonar de células no pequeñas, cáncer oral, cáncer orofaríngeo, osteosarcoma, histiocitoma fibroso maligno óseo, cáncer de ovario, cáncer epitelial de ovario, tumor de células germinales de ovario, tumor de ovario de bajo potencial maligno, cáncer de páncreas, papilomatosis, cáncer de paratiroides, cáncer de pene, cáncer faríngeo, tumores del parénquima pineal de diferenciación intermedia, pineoblastoma y tumores neuroectodérmicos primitivos supratentoriales, tumor hipofisario, neoplasia de células plasmáticas/mieloma múltiple, blastoma pleuropulmonar, linfoma del sistema nervioso central primario, cáncer de próstata, cáncer rectal, cáncer de células renales (de riñón), retinoblastoma, rabdomiosarcoma, cáncer de glándulas salivales, sarcoma, familia de tumores del sarcoma de Ewing, sarcoma, kaposi, síndrome de Sézary, cáncer de piel, cáncer pulmonar de células pequeñas, cáncer del intestino delgado, sarcoma del tejido blando, carcinoma de células escamosas, cáncer de estómago (gástrico), tumor neuroectodérmico primitivo supratentorial, linfoma de linfocitos T, cáncer de testículo, cáncer de garganta, timoma y carcinoma de timo, cáncer de tiroides, cáncer de uretra, cáncer de útero, sarcoma de útero, cáncer de vagina, cáncer de vulva, macroglobulinemia de Waldenström, tumor de Wilms.

Las concentraciones altas de LPA y vesículas en ascitis de pacientes con cáncer de ovario y efusiones de cáncer de mama indican que podrían ser un marcador de diagnóstico temprano, un indicador de pronóstico o un indicador de respuesta al tratamiento (Mills et al., Nat. Rev. Cancer., 3, 582-591, 2003; Sutphen et al., Cancer Epidemiol. Biomarkers Prev.13, 1185-1191, 2004). Las concentraciones de LPA son consistentemente más altas en muestras de ascitis que en muestras de plasma emparejadas.

De manera reciente, se demostró que los inhibidores de la vía LPA (por ejemplo, un antagonista de LPA₁) eran agentes antifibróticos quimiopreventivos en el tratamiento de carcinoma hepatocelular en un modelo de rata (Nakagawa et al., Cancer Cell, 2016, 30, 879-890).

Trastornos respiratorios y alérgicos

El LPA puede ser un contribuyente a la patogénesis de enfermedades respiratorias. La enfermedad respiratoria puede ser asma. Los efectos proinflamatorios de LPA incluyen desgranulación de mastocitos, contracción de células del músculo liso y liberación de citocinas de células dendríticas. Las células del músculo liso de las vías respiratorias, las células epiteliales y los fibroblastos de pulmón muestran respuestas a LPA. El LPA induce la secreción de IL-8 de células epiteliales bronquiales humanas. IL-8 se encuentra en concentraciones altas en líquidos de BAL de pacientes con asma, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, sarcoidosis pulmonar y síndrome de dificultad respiratoria aguda, y se demostró que Il-8 exacerba la inflamación y reestructuración de las vías respiratorias de asmáticos. Se demostró que los receptores de LPA₁, LPA₂ y LPA₃ contribuyen a la producción de IL-8 inducida por LPA. Los estudios de clonación de múltiples GPCR que se activan mediante LPA permitieron demostrar la presencia de mARN para LPA₁, LPA₂ y LPA₃ en el pulmón (J.J.A. Contos, et al., Mol. Pharmacol.58, 1188-1196, 2000).

La liberación de LPA de plaquetas activadas en el sitio de la lesión y su capacidad para promover la proliferación y contracción de fibroblastos son características de LPA como un mediador de la cicatrización de lesiones. En el contexto de enfermedad de las vías respiratorias, el asma es una enfermedad inflamatoria en donde los procesos de ‘‘cicatrización’’ de las vías respiratorias inadecuados generan la ‘‘reestructuración’’ de las vías respiratorias. En el asma, las células de las vías respiratorias se someten a lesión constante debido a varias lesiones, que incluyen alérgenos, contaminantes, otros agentes medioambientales inhalados, bacterias y virus, que generan la inflamación crónica característica del asma.

En el individuo asmático, la liberación de mediadores de cicatrización normales, que incluyen LPA, puede ser exagerada, o las acciones de los mediadores de cicatrización se pueden prolongar de manera inadecuada, lo que genera la reestructuración de las vías respiratorias inadecuada. Las características estructurales principales de las vías respiratorias reestructuradas observadas en el asma incluyen una lámina reticular más gruesa (la estructura tipo membrana basal debajo de las células epiteliales de las vías respiratorias), mayor cantidad y activación de miofibroblastos, engrosamiento de la capa del músculo liso, mayor cantidad de glándulas mucosas y secreciones mucosas, y alteraciones en el tejido conectivo y lecho capilar a través de la pared de las vías respiratorias. El LPA puede contribuir a estos cambios estructurales en las vías respiratorias. El LPA puede estar involucrado en la hiperreactividad aguda de las vías respiratorias en el asma. El lumen de las vías respiratorias asmáticas reestructuradas es más angosto debido al engrosamiento de la pared de las vías respiratorias, lo que disminuye el flujo de aire. El LPA puede contribuir a la reestructuración a largo plazo y a la hiperreactividad aguda de las vías respiratorias asmáticas. El LPA puede contribuir a la hiperreactividad que es una característica principal de las exacerbaciones agudas del asma.

Además de las respuestas celulares mediadas por LPA, varios de los componentes de la vía de señalización de LPA que generan estas respuestas están relacionados con asma. La regulación ascendente del receptor de EGF está inducida por LPA y también se observa en las vías respiratorias asmáticas (M. Amishima, et al., Am. J. Respir. Crit. Care Med.

157, 1907– 1912, 1998). La inflamación crónica contribuye al asma, y se conoce que varios de los factores de trascripción que se activan mediante LPA están involucrados en la inflamación (Ediger et al., Eur Respir J 21:759-769, 2003).

La proliferación y contracción de fibroblastos y la secreción de matriz extracelular estimulada mediante LPA puede contribuir a las características fibroproliferativas de otras enfermedades de las vías respiratorias, tales como la fibrosis peribronquial presente en bronquitis crónica, enfisema y enfermedad pulmonar intersticial. El enfisema también se asocia a una fibrosis leve de la pared alveolar, una característica que se cree que representa un intento de reparar el daño alveolar. El LPA puede cumplir una función en enfermedades pulmonares intersticiales fibróticas y bronquiolitis obliterante, en donde aumentan el colágeno y los miofibroblastos. El LPA puede estar involucrado en distintos síndromes que constituyen la enfermedad pulmonar obstructiva crónica.

La administración de LPA in vivo induce hiperreactividad de las vías respiratorias, respuestas de picazón y rascado, infiltración y activación de eosinófilos y neutrófilos, reestructuración vascular y respuestas nociceptivas de músculos flexores. El LPA también induce la liberación de histamina de mastocitos de ratón y rata. En una reacción alérgica aguda, la histamina induce distintas respuestas, tales como contracción del músculo liso, exudación de plasma y producción de mucosa. La exudación de plasma es importante en las vías respiratorias, ya que la filtración y el posterior edema de la pared de las vías respiratorias contribuyen al desarrollo de hiperreactividad de las vías respiratorias. La exudación de plasma progresa hacia hinchazón de la conjuntiva en trastornos alérgicos oculares y bloqueó nasal en rinitis alérgica (Hashimoto et al., J Pharmacol Sci 100, 82-87, 2006). La exudación de plasma inducida por LPA puede estar mediada por la liberación de histamina de mastocitos a través de uno o más receptores de LPA. En un aspecto, los receptores de LPA incluyen LPA₁ y/o LPA₃. Un compuesto de la Fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable, se puede usar en un método para tratar diversos trastornos alérgicos en un mamífero. Un compuesto de la Fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable, se puede usar en un método para tratar enfermedades, trastornos o afecciones respiratorias en un mamífero. Un compuesto de la Fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable, se puede usar en un método para tratar el asma en un mamífero. Un compuesto de la Fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable, se puede usar en un método para tratar el asma crónica en un mamífero.

Como se usa en la presente, la expresión “enfermedad respiratoria” se refiere a enfermedades que afectan los órganos involucrados en la respiración, tales como nariz, garganta, laringe, trompas de Eustaquio, tráquea, bronquios, pulmones, músculos relacionados (por ejemplo, diafragma e intercostales) y nervios. Las enfermedades respiratorias incluyen, entre otras, asma, síndrome de dificultad respiratoria en adultos y asma alérgica (extrínseca), asma no alérgica (intrínseca), asma aguda grave, asma crónica, asma clínica, asma nocturna, asma inducida por alérgenos, asma sensible a la aspirina, asma inducida por el ejercicio, hiperventilación isocápnica, asma infantil, asma en adultos, asma con tos variante, asma ocupacional, asma resistente a esteroides, asma estacional, rinitis alérgica estacional, rinitis alérgica perenne, enfermedad pulmonar obstructiva crónica que incluye bronquitis crónica o enfisema, hipertensión pulmonar, fibrosis pulmonar intersticial y/o inflamación de las vías respiratorias, y fibrosis quística e hipoxia.

Como se usa en la presente, el término “asma” se refiere a cualquier trastorno de los pulmones caracterizado por variaciones en el flujo de gas pulmonar asociado a la constricción de las vías respiratorias por cualquier causa (intrínseca, extrínseca o ambas; alérgica o no alérgica). El término asma se puede usar con uno o más adjetivos para indicar la causa.

Un compuesto de la Fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable, se puede usar en un método para tratar o prevenir la enfermedad pulmonar obstructiva crónica en un mamífero que comprende administrar al mamífero al menos una vez una cantidad efectiva de al menos un compuesto de la Fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable. Además, la enfermedad pulmonar obstructiva crónica incluye, entre otras, bronquitis crónica o enfisema, hipertensión pulmonar, fibrosis pulmonar intersticial y/o inflamación de las vías respiratorias, y fibrosis quística.

Sistema nervioso

El sistema nervioso es un locus principal para la expresión de LPA₁; allí se regula espacial y temporalmente a través del desarrollo cerebral. Los oligodendrocitos, las células mielinizantes en el sistema nervioso central (SNC), expresan LPA₁ en mamíferos. Además, las células de Schwann, las células mielinizantes del sistema nervioso periférico, también expresan LPA₁, que está involucrado en la regulación de la supervivencia y morfología de las células de Schwann. Estas observaciones identifican funciones importantes para la señalización de LPA mediada por el receptor en neurogénesis, supervivencia celular y mielinización.

La exposición de líneas de células del sistema nervioso periférico a LPA produce una retracción rápida de sus procesos, lo que produce redondeo celular mediado, en parte, por polimerización del citoesqueleto de actina. En un aspecto, el LPA produce degeneración neuronal en afecciones patológicas cuando la barrera hematoencefálica está dañada, y los componentes de suero se filtran al cerebro (Moolenaar, Curr. Opin. Cell Biol. 7:203-10, 1995). Las líneas de células de neuroblastos del SNC inmortalizadas de la corteza cerebral también muestran respuestas de retracción ante la exposición a LPA a través de la activación de Rho e interacciones con actomiosina. En un aspecto, el LPA se asocia a daño neuronal posisquémico (J. Neurochem.61, 340, 1993; J. Neurochem., 70:66, 1998).

Un compuesto de la Fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable, se puede usar en un método para tratar o prevenir un trastorno del sistema nervioso en un mamífero. Como se usa en la presente, la expresión “trastorno del sistema nervioso” se refiere a afecciones que alteran la estructura o función del cerebro, médula espinal o sistema nervioso periférico, que incluyen, entre otros, enfermedad de Alzheimer, edema cerebral, isquemia cerebral, apoplejía, esclerosis múltiple, neuropatías, enfermedad de Parkinson, aquellas descubiertas después de contusión o trauma quirúrgico (que incluyen disfunción cognitiva posquirúrgica y lesión médula espinal o de tronco encefálico), así como también los aspectos neurológicos de trastornos tales como enfermedad degenerativa de disco y ciática.

Un compuesto de la Fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable, se puede usar en un método para tratar o prevenir un trastorno del SNC en un mamífero. Los trastornos del SNC incluyen, entre otros, esclerosis múltiple, enfermedad de Parkinson, enfermedad de Alzheimer, apoplejía, isquemia cerebral, isquemia retinal, disfunción cognitiva posquirúrgica, migraña, neuropatía periférica/dolor neuropático, lesión medular, edema cerebral y lesión en la cabeza.

Trastornos cardiovasculares

Los fenotipos cardiovasculares observados después de la eliminación dirigida de receptores de lisofosfolípidos revelan las funciones importantes de la señalización de lisofosfolípidos en el desarrollo y la maduración de vasos sanguíneos, la formación de placas ateroescleróticas y el mantenimiento de la frecuencia cardíaca (Ishii, I. et al. Annu. Rev. Biochem.

73, 321–354, 2004). La angiogénesis, la formación de nuevas redes de capilares de vasculatura preexistente, se invoca en general en la cicatrización, el crecimiento tisular y la angiogénesis en el miocardio después de la lesión isquémica. Los factores de crecimiento peptídico (por ejemplo, factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF)) y los lisofosfolípidos controlan la proliferación, migración, adhesión, diferenciación y ensamblaje coordinados de células endoteliales vasculares (VEC, por sus siglas en inglés) y células del músculo liso vasculares circundantes (VSMC, por sus siglas en inglés). La desregulación de los procesos que median la angiogénesis puede generar ateroesclerosis, hipertensión, crecimiento tumoral, artritis reumatoide y retinopatía diabética (Osborne, N. y Stainier, D.Y. Annu. Rev. Physiol.65, 23–43, 2003).

Las vías de señalización corriente abajo provocadas por receptores de lisofosfolípidos incluyen la formación de lamelipodios dependiente de Rac (por ejemplo, LPA₁) y la formación de fibras de estrés dependiente de Rho (por ejemplo, LPA₁), que son importantes para la migración y adhesión celular. Las disfunciones del endotelio vascular pueden desplazar el equilibrio de vasodilatación a vasoconstricción y generar hipertensión y reestructuración vascular, que son factores de riesgo para ateroesclerosis (Maguire, J.J. et al., Trends Pharmacol. Sci.26, 448–454, 2005).

El LPA contribuye en el estadio inicial (disfunción de la barrera y adhesión de monocitos del endotelio) y el estadio tardío (activación de plaquetas y formación de trombos intrarteriales) de ateroesclerosis, además de su progresión general. En el estadio inicial, el LPA de varias fuentes se acumula en lesiones y activa sus GPCR cognados (LPA₁ y LPA₃) expresados en plaquetas (Siess, W. Biochim. Biophys. Acta 1582, 204–215, 2002; Rother, E. et al. Circulation 108, 741– 747, 2003). Esto inicia el cambio de forma y la agregación plaquetaria, que genera formación de trombos intrarteriales y, potencialmente, infarto de miocardio y apoplejía. En soporte de su actividad aterogénica, el LPA también puede ser un mitógeno y motógeno para VSMC y un activador de células endoteliales y macrófagos. Los mamíferos con enfermedad cardiovascular se pueden beneficiar de antagonistas del receptor de LPA que previenen la formación de trombos y de la capa neoíntima.

Un compuesto de la Fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable, se puede usar en un método para tratar o prevenir enfermedades cardiovasculares en un mamífero.

Como se usa en la presente, la expresión “enfermedad cardiovascular” se refiere a enfermedades que afectan el corazón o los vasos sanguíneos, o ambos, e incluyen, entre otras: arritmia (auricular o ventricular, o ambas); ateroesclerosis y sus secuelas; angina; trastornos del ritmo cardíaco; isquemia de miocardio; infarto de miocardio; aneurisma cardíaco o vascular; vasculitis, apoplejía; arteriopatía obstructiva periférica de un miembro, órgano o tejido; lesión por revascularización después de isquemia del cerebro, corazón u otro órgano o tejido; choque endotóxico, quirúrgico o traumático; hipertensión, valvulopatía, insuficiencia cardíaca, presión arterial anormal; choque; vasoconstricción (que incluye la asociada a migrañas); anormalidad, inflamación o insuficiencia vasculares limitadas a un único órgano o tejido. Un compuesto de la fórmula (I) o una sal de este farmacéuticamente aceptable se puede usar en un método para prevenir o tratar vasoconstricción, ateroesclerosis y sus secuelas, isquemia de miocardio, infarto de miocardio, aneurisma de aorta, vasculitis y apoplejía, que comprende administrar al menos una vez al mamífero una cantidad efectiva de al menos un compuesto de la Fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable, o una composición farmacéutica o un medicamento que incluye un compuesto de la Fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable.

Un compuesto de la fórmula (I) o una sal de este farmacéuticamente aceptable se puede usar en un método para reducir las lesiones por revascularización después de isquemia de miocardio y/o choque endotóxico que comprende administrar al menos una vez al mamífero una cantidad efectiva de al menos un compuesto de la Fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable.

Un compuesto de la fórmula (I) o una sal de este farmacéuticamente aceptable se puede usar en un método para reducir la constricción de vasos sanguíneos en un mamífero que comprende administrar al menos una vez al mamífero una cantidad efectiva de al menos un compuesto de la Fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable.

Un compuesto de la fórmula (I) o una sal de este farmacéuticamente aceptable se puede usar en un método para disminuir o prevenir un aumento en la presión arterial de un mamífero que comprende administrar al menos una vez al mamífero una cantidad efectiva de al menos un compuesto de la Fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable.

Inflamación

Se demostró que LPA regula respuestas inmunitarias mediante la modulación de actividades/funciones de células inmunitarias, tales como linfocitos T/B y macrófagos. En linfocitos T activados, el LPA activa la producción de IL-2/proliferación celular a través de LPA₁ (Gardell et al., TRENDS in Molecular Medicine vol.12 NO.2, febrero de 2006). La expresión de genes de respuesta inflamatoria inducida por LPA está mediada por LPA₁ y LPA₃ (Biochem Biophys Res Commun. 363(4):1001-8, 2007). Además, el LPA modula la quimiotaxia de células inflamatorias (Biochem Biophys Res Commun., 1993, 15;193(2), 497). La proliferación y actividad de secreción de citocinas en respuesta a LPA de células inmunitarias (J. Imuunol. 1999, 162, 2049), la actividad de agregación plaquetaria en respuesta a LPA, la aceleración de la actividad de migración en monocitos, la activación de NF-κB en fibroblastos, la mejora de la fijación de fibronectina a la superficie celular, y similares son conocidas. Por ende, el LPA se asocia a distintas enfermedades inflamatorias/inmunitarias.

Un compuesto de la Fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable, se puede usar en un método para tratar o prevenir la inflamación en un mamífero. Los antagonistas de LPA₁ y/o LPA₃ se pueden usar en el tratamiento o la prevención de trastornos inflamatorios/inmunitarios en un mamífero. El antagonista de LPA₁ puede ser un compuesto de la Fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable.

Los ejemplos de trastornos inflamatorios/inmunitarios incluyen psoriasis, artritis reumatoide, vasculitis, enfermedad inflamatoria intestinal, dermatitis, osteoartritis, asma, enfermedad muscular inflamatoria, rinitis alérgica, vaginitis, cistitis intersticial, esclerodermia, eccema, trasplante alogénico o xenogénico (órganos, médula ósea, células madre y otras células y tejidos), rechazo al injerto, enfermedad del injerto contra el hospedero, lupus eritematoso, enfermedad inflamatoria, diabetes tipo I, fibrosis pulmonar, dermatomiositis, síndrome de Sjogren, tiroiditis (por ejemplo, tiroiditis de Hashimoto y tiroiditis autoinmunitaria), miastenia grave, anemia hemolítica autoinmunitaria, esclerosis múltiple, fibrosis quística, hepatitis crónica con recidiva, cirrosis biliar primaria, conjuntivitis alérgica y dermatitis atópica.

Otras enfermedades, trastornos o afecciones

Un compuesto de la fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable, se puede usar en un método para tratar, prevenir, revertir, detener o ralentizar la progresión de enfermedades o afecciones dependientes de LPA o mediadas por LPA una vez que son evidentes desde el punto de vista clínico, o para tratar los síntomas asociados o relacionados con enfermedades o afecciones dependientes de LPA o mediadas por LPA, mediante la administración al mamífero de un compuesto de la Fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable. El sujeto ya puede tener una enfermedad o afección dependiente de LPA o mediada por LPA al momento de la administración, o puede estar en riesgo de desarrollar una enfermedad o afección dependiente de LPA o mediada por LPA.

La actividad de LPA₁ en un mamífero puede estar modulada de manera directa o indirecta por la administración (al menos una vez) de una cantidad terapéuticamente efectiva de al menos un compuesto de la Fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable. Esta modulación incluye, entre otros, reducir y/o inhibir la actividad de LPA_1. La actividad de LPA en un mamífero puede estar modulada de manera directa o indirecta, incluida la reducción y/o inhibición, por la administración (al menos una vez) de una cantidad terapéuticamente efectiva de al menos un compuesto de la Fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable. Esta modulación incluye, entre otros, reducir y/o inhibir la cantidad y/o actividad de un receptor de LPA. En un aspecto, el receptor de LPA es LPA_1.

El LPA puede tener una acción de contracción sobre células del músculo liso de la vejiga aisladas de la vejiga, y promueve el crecimiento de células epiteliales derivadas de la próstata (J. Urology, 1999, 162, 1779-1784; J. Urology, 2000, 163, 1027-1032). En otro aspecto, el LPA contrae las vías urinarias y la próstata in vitro y aumenta la presión intrauretral in vivo (WO 02/062389).

Un compuesto de la fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable, se puede usar en un método para prevenir o tratar el reclutamiento de eosinófilos y/o basófilos y/o células dendríticas y/o neutrófilos y/o monocitos y/o linfocitos T que comprenden administrar al menos una vez al mamífero una cantidad efectiva de al menos un compuesto de la Fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable.

Un compuesto de la fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable, se puede usar en un método para tratar la cistitis que incluye, por ejemplo, cistitis intersticial, que comprenden administrar al menos una vez al mamífero una cantidad terapéuticamente efectiva de al menos un compuesto de la Fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable.

Un compuesto de la fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable, se puede usar en un método diagnosticar o determinar si el paciente tiene o no una enfermedad o afección dependiente de LPA o mediada por LPA administrando al sujeto una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la Fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable, y determinar si el paciente responde al tratamiento.

Los compuestos de la Fórmula (I), sales farmacéuticamente aceptables y solvatos farmacéuticamente aceptables de los mismos, que pueden ser antagonistas de LPA₁, y se pueden usar en un método para tratar pacientes que tienen una o más enfermedades o afecciones dependientes de LPA o mediadas por LPA que incluyen, entre otras, fibrosis pulmonar, fibrosis renal, fibrosis hepática, cicatrización patológica, asma, rinitis, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, hipertensión pulmonar, fibrosis pulmonar intersticial, artritis, alergia, psoriasis, enfermedad inflamatoria intestinal, síndrome de dificultad respiratoria en adultos, infarto de miocardio, aneurisma, apoplejía, cáncer, dolor, trastornos proliferativos y afecciones inflamatorias. Las afecciones o enfermedades dependientes de LPA pueden incluir aquellas en donde está presente y/o se observa un exceso absoluto o relativo de LPA.

Las enfermedades o afecciones dependientes de LPA o mediadas por LPA pueden incluir, entre otras, fibrosis orgánica, asma, trastornos alérgicos, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, hipertensión pulmonar, fibrosis pulmonar o pleural, fibrosis peritoneal, artritis, alergia, cáncer, enfermedad cardiovascular, síndrome de dificultad respiratoria en adultos, infarto de miocardio, aneurisma, apoplejía y cáncer.

Un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se puede usar en un método para mejorar la disminución de la sensibilidad corneal causada por operaciones de córnea tales como queratomileusis in situ asistida con láser (LASIK, por sus siglas en inglés) u operación de cataratas, disminución de la sensibilidad corneal causada por degeneración corneal y síntoma de ojo seco causado por estas.

Un compuesto de la Fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable, se puede usar en un método para tratar o prevenir la inflamación ocular y conjuntivitis alérgica, queratoconjuntivitis primaveral, y conjuntivitis papilar en un mamífero, que comprende administrar al menos una vez al mamífero una cantidad efectiva de al menos un compuesto de la Fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable.

Un compuesto de la Fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable, se puede usar en un método para tratar o prevenir el síndrome de Sjögren o enfermedades inflamatorias con ojo seco en un mamífero, que comprende administrar al menos una vez al mamífero una cantidad efectiva de al menos un compuesto de la Fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable.

El LPA y los receptores de LPA (por ejemplo, LPA₁) pueden estar involucrados en la patogénesis de osteoartritis (Kotani et al., Hum. Mol. Genet., 2008, 17, 1790-1797). Un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se puede usar para tratar o prevenir la osteoartritis en un mamífero, que comprende administrar al menos una vez al mamífero una cantidad efectiva de al menos un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Los receptores de LPA (por ejemplo, LPA₁, LPA₃) pueden contribuir a la patogénesis de artritis reumatoide (Zhao et al., Mol. Pharmacol., 2008, 73(2), 587-600). Un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se puede usar en un método para tratar o prevenir la artritis reumatoide en un mamífero que comprende administrar al mamífero al menos una vez una cantidad efectiva de al menos un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Los receptores de LPA (por ejemplo, LPA₁) pueden contribuir a la adipogénesis. (Simon et al., J.Biol. Chem., 2005, vol.

280, no. 15, p.14656). Un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se puede usar para promover la formación de tejido adiposo en un mamífero, que comprende administrar al menos una vez al mamífero una cantidad efectiva de al menos un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

a. Ensayos in vitro

La eficacia de los compuestos de la presente invención como inhibidores de LPA₁ se puede determinar en un ensayo de antagonista funcional de LPA₁ de la siguiente manera:

Las células de ovario de hámster chino que sobrexpresaban LPA₁ humano se colocaron durante la noche (15,000 células/pocillo) en microplacas de 384 pocillos recubiertos con poli-D-lisina (Greiner bio-one, Cat#781946) en medio DMEM/F12 (Gibco, Cat#11039). Después del cultivo durante la noche, las células se cargaron con una tintura indicadora de calcio (AAT Bioquest Inc., Cat# 34601) durante 30 minutos a 37 °C. Luego, las células se equilibraron hasta temperatura ambiente durante 30 minutos antes del ensayo. Los compuestos de prueba solubilizados en DMSO se transfirieron a placas de 384 pocillos con superficie sin fijación (Corning, Cat# 3575) usando el dosificador acústico Labcyte Echo y se diluyeron con amortiguador de ensayo [1X HBSS con calcio/magnesio (Gibco Cat# 14025-092), 20 mM de HEPES (Gibco Cat# 15630-080) y 0,1 % de BSA libre de ácidos grasos (Sigma Cat# A9205)] hasta una concentración final de 0,5 % de DMSO. Los compuestos diluidos se agregaron a las células mediante FDSS6000 (Hamamatsu) en concentraciones finales que variaban de 0,08 nM a 5 µM y se incubaron durante 20 min a temperatura ambiente, en cuyo momento se agregó LPA (Avanti Polar Lipids Cat#857130C) en concentraciones finales de 10 nM para estimular las células. El valor IC₅₀ del compuesto se definió como la concentración del compuesto de prueba que inhibió 50 % del flujo de calcio inducido por LPA solo. Los valores IC₅₀ se determinaron ajustando los datos a una ecuación logística de cuatro parámetros (GraphPad Prism, San Diego CA).

b. Ensayos in vivo

Exposición a LPA con evaluación de histamina en plasma.

El compuesto se dosifica por vía oral (p.o.) 2 horas a ratones hembra CD-1 antes de la exposición a LPA. Luego, los ratones recibieron una dosis a través de la vena de la cola (IV) de 0,15 ml de LPA en 0,1 % de BSA/ PBS (2 μg/µl). Exactamente 2 minutos después de la exposición a LPA, los ratones se sometieron a eutanasia mediante decapitación y se recolectó la sangre troncal. Estas muestras se centrifugan de manera colectiva y se congelan muestras individuales de 75l a -20C hasta el momento del ensayo de histamina.

El análisis de histamina en plasma se realizó mediante métodos EIA (inmunoensayo enzimático) estándares. Las muestras de plasma se descongelaron y se diluyeron 1:30 en 0,1 % de BSA en PBS. Se siguió el protocolo EIA para el análisis de histamina como indica el fabricante (Histamine EIA, Oxford Biomedical Research, EA#31).

El LPA usado en el ensayo se formuló de la siguiente manera: Se preparó LPA (1-oleoíl-2-hidroxi-sn-glicerol-3-fosfato (sal de sodio), 857130P, Avanti Polar Lipids) en 0,1 % de BSA/PBS para una concentración total de 2 μg/µl. Se pesaron 13 mg de LPA, y se agregaron 6,5 ml de BSA al 0,1 %, se agitó por vórtice y se sometieron a ultrasonido durante ~1 hora hasta obtener una solución transparente.

V. COMPOSICIONES, FORMULACIONES Y COMBINACIONES FARMACÉUTICAS

En algunas modalidades, se proporciona una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. La composición farmacéutica también puede contener al menos un ingrediente inactivo farmacéuticamente aceptable.

En algunas modalidades, se proporciona una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y al menos un ingrediente inactivo farmacéuticamente aceptable. La composición farmacéutica se puede formular para inyección intravenosa, inyección subcutánea, administración oral, inhalación, administración nasal, administración tópica, administración oftálmica o administración ótica. La composición farmacéutica puede ser un comprimido, una píldora, una cápsula, un líquido, un inhalador, una solución para pulverización nasal, un supositorio, una suspensión, un gel, un coloide, una dispersión, una suspensión, una solución, una emulsión, una pomada, una loción, gotas para los ojos o gotas para los oídos.

La composición farmacéutica además puede comprender uno o más agentes terapéuticamente activos adicionales seleccionados de: corticoesteroides (por ejemplo, dexametasona o fluticasona), inmunosupresores (por ejemplo, tacrolimus y pimecrolimus), analgésicos, agentes antineoplásicos, antiinflamatorios, antagonistas del receptor de quimiocina, broncodilatadores, antagonistas del receptor de leucotrieno (por ejemplo, montelukast o zafirlukast), inhibidores de la formación de leucotrieno, inhibidores de monoacilglicerol cinasa, inhibidores de fosfolipasa A₁, inhibidores de fosfolipasa A₂ e inhibidores de lisofosfolipasa D (lisoPLD), inhibidores de autotaxina, descongestivos, antihistamínicos (por ejemplo, loratidina), mucolíticos, anticolinérgicos, antitusivos, expectorantes, antiinfecciosos (por ejemplo, ácido fusídico, en particular para el tratamiento de dermatitis atópica), antifúngicos (por ejemplo, clotriazol, en particular para dermatitis atópica), tratamientos con anticuerpo anti-IgE (por ejemplo, omalizumab), agonistas de β-2 adrenérgicos (por ejemplo, albuterol o salmeterol), otros antagonistas de PGD2 que actúan sobre otros receptores, tales como antagonistas de DP, inhibidores de PDE4 (por ejemplo, cilomilast), fármacos que modulan la producción de citocina, por ejemplo, inhibidores de TACE, fármacos que modulan la actividad de citocinas Th2 IL-4 & IL-5 (por ejemplo, anticuerpos monoclonales de bloqueo y receptores solubles), antagonistas de PPAR (por ejemplo, rosiglitazona y pioglitazona), inhibidores de 5-lipoxigenasa (por ejemplo, zileutón).

La composición farmacéutica además puede comprender uno o más agentes antifibróticos adicionales seleccionados de pirfenidona, nintedanib, talidomida, carlumab, FG-3019, fresolimumab, interferón alfa, superóxido dismutasa con lecitina, simtuzumab, tanzisertib, tralokinumab, hu3G9, AM-152, IFN-gamma-1b, IW-001, PRM-151, PXS-25, pentoxifilina/N-acetil-cisteína, pentoxifilina/vitamina E, salbutamol sulfato, [Sar9,Met(O2)11]-sustancia P, pentoxifilina, bitartrato de mercaptamina, ácido obeticólico, aramchol, GFT-505, etil éster del ácido eicosapentaenoico, metformina, metreleptina, muromonab-CD3, oltipraz, IMM-124-E, MK-4074, PX-102, RO-5093151. En algunas modalidades, se proporciona un método que comprende administrar un compuesto de la Fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable, a un ser humano con una enfermedad o afección dependiente de LPA o mediada por LPA. En algunas modalidades, ya se administra al ser humano uno o más agentes terapéuticamente activos adicionales que no son un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En algunas modalidades, el método comprende administrar uno o más agentes terapéuticamente activos adicionales que no son un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

El uno o más agentes terapéuticamente activos adicionales que no son un compuesto de la Fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable, se pueden seleccionar de: corticoesteroides (por ejemplo, dexametasona o fluticasona), inmunosupresores (por ejemplo, tacrolimus y pimecrolimus), analgésicos, agentes antineoplásicos, antiinflamatorios, antagonistas del receptor de quimiocina, broncodilatadores, antagonistas del receptor de leucotrieno (por ejemplo, montelukast o zafirlukast), inhibidores de la formación de leucotrieno, inhibidores de monoacilglicerol cinasa, inhibidores de fosfolipasa A₁, inhibidores de fosfolipasa A₂ e inhibidores de lisofosfolipasa D (lisoPLD), inhibidores de autotaxina, descongestivos, antihistamínicos (por ejemplo, loratidina), mucolíticos, anticolinérgicos, antitusivos, expectorantes, antiinfecciosos (por ejemplo, ácido fusídico, en particular para el tratamiento de dermatitis atópica), antifúngicos (por ejemplo, clotriazol, en particular para dermatitis atópica), tratamientos con anticuerpo anti-IgE (por ejemplo, omalizumab), agonistas de β-2 adrenérgicos (por ejemplo, albuterol o salmeterol), otros antagonistas de PGD2 que actúan sobre otros receptores, tales como antagonistas de DP, inhibidores de PDE4 (por ejemplo, cilomilast), fármacos que modulan la producción de citocina, por ejemplo, inhibidores de TACE, fármacos que modulan la actividad de citocinas Th2 IL-4 & IL-5 (por ejemplo, anticuerpos monoclonales de bloqueo y receptores solubles), antagonistas de PPAR (por ejemplo, rosiglitazona y pioglitazona), inhibidores de 5-lipoxigenasa (por ejemplo, zileutón).

El uno o más de los agentes terapéuticamente activos adicionales que no son un compuesto de la Fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable, pueden ser otros agentes antifibróticos adicionales seleccionados de pirfenidona, nintedanib, talidomida, carlumab, FG-3019, fresolimumab, interferón alfa, superóxido dismutasa con lecitina, simtuzumab, tanzisertib, tralokinumab, hu3G9, AM-152, IFN-gamma-1b, IW-001, PRM-151, PXS-25, pentoxifilina/N-acetil-cisteína, pentoxifilina/vitamina E, salbutamol sulfato, [Sar9,Met(O2)11]-sustancia P, pentoxifilina, bitartrato de mercaptamina, ácido obeticólico, aramchol, GFT-505, eicosapentil etil éster, metformina, metreleptina, muromonab-CD3, oltipraz, IMM-124-E, MK-4074, PX-102, RO-5093151,

El uno o más de los agentes terapéuticamente activos adicionales que no son un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se pueden seleccionar de inhibidores de ACE, ramipril, antagonistas de AII, irbesartán, antiarrítmicos, dronedarona, activadores de PPAR, activadores de PPAR, pioglitazona, rosiglitazona, prostanoides, antagonistas del receptor de endotelina, inhibidores de elastasa, antagonistas de calcio, betabloqueadores, diuréticos, antagonistas del receptor de aldosterona, eplerenona, inhibidores de renina, inhibidores de rho cinasa, activadores de guanilato ciclasa soluble (sGC), sensibilizadores de sGC, inhibidores de PDE, inhibidores de PDE5, donantes de NO, fármacos digitálicos, inhibidores de ACE/NEP, estatinas, inhibidores de la reabsorción de ácidos biliares, antagonistas de PDGF, antagonistas de vasopresina, acuaréticos, inhibidores de NHE1, antagonistas del factor Xa, antagonistas del factor XIIIa, anticoagulantes, antitrombóticos, inhibidores de plaquetas, profibróticos, inhibidores de la fibrinólisis activable por trombina (TAFI, por sus siglas en inglés), inhibidores de PAI-1, cumarinas, heparinas, antagonistas de tromboxano, antagonistas de serotonina, inhibidores de COX, aspirina, anticuerpos terapéuticos, antagonistas de GPIIb/IIIa, antagonistas de ER, SERM, inhibidores de tirosina cinasa, inhibidores de RAF cinasa, inhibidores de p38 MAPK, pirfenidona, inhibidores de multicinasa, nintedanib, sorafenib.

El uno o más de los agentes terapéuticamente activos adicionales que no son un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se puedenseleccionar de mAb Gremlin-1, mAb PA1-1, Promedior (PRM-151; pentraxin-2 recombinante humana); FGF21, antagonistas de TGF, pan-antagonistas dev6 &v; inhibidores de FAK, inhibidores de TG2, inhibidores de LOXL2, inhibidores de NOX4, inhibidores de MGAT2, agonistas de GPR120.

Las formulaciones farmacéuticas descritas en la presente se pueden administrar a un sujeto de diversas maneras a través de múltiples vías de administración, que incluyen, entre otras, vías de administración oral, parenteral (por ejemplo, intravenosa, subcutánea, intramuscular), intranasal, bucal, tópica o transdérmica. Las formulaciones farmacéuticas incluyen, entre otras, dispersiones de líquidos acuosos, dispersiones autoemulsionantes, soluciones sólidas, dispersiones liposómicas, aerosoles, formas de dosis sólidas, polvos, formulaciones de liberación inmediata, formulaciones de liberación controlada, formulaciones de desintegración rápida, comprimidos, cápsulas, píldoras, formulaciones de liberación retardada, formulaciones de liberación prolongada, formulaciones de liberación pulsátil, formulaciones multiparticuladas y formulaciones de liberación mixta inmediata y controlada.

El compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se puede administrar por vía oral. El compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se puede administrar por vía tópica. El compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se puede formular en varias composiciones que se pueden administrar por vía tópica, tales como soluciones, suspensiones, lociones, geles, pastas, champús, exfoliantes, ungüento, tiras medicadas, vendajes medicados, bálsamos o pomadas. Estos compuestos farmacéuticos pueden contener solubilizantes, estabilizantes, agentes mejoradores de la tonicidad, amortiguadores y conservadores. El compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se puede administrar por vía tópica en la piel.

El compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se puede administrar por inhalación El compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se puede administrar por inhalación que se dirige directamente al sistema pulmonar.

El compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se puede formular para administración intranasal. Estas formulaciones incluyen espráis nasales, nieblas nasales y similares.

El compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se puede formular como gotas para los ojos.

Un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se puede usar en un método para tratar una enfermedad, un trastorno o afecciones en donde la actividad de al menos un receptor de LPA contribuye a la patología y/o los síntomas de la enfermedad o afección. El LPA se puede seleccionar de LPA₁, LPA₂, LPA₃, LPA₄, LPA₅ y LPA_6. El receptor de LPA puede ser LPA_1. La enfermedad o afección es cualquiera de las enfermedades o afecciones especificadas en la presente.

Un compuesto de la fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable, se puede administrar usando métodos en donde: (a) la cantidad efectiva del compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se administra por vía sistémica al mamífero; y/o (b) la cantidad efectiva del compuesto se administra por vía oral al mamífero; y/o (c) la cantidad efectiva del compuesto se administra por vía intravenosa al mamífero; y/o (d) la cantidad efectiva del compuesto se administra por inhalación; y/o (e) la cantidad efectiva del compuesto se administra por vía nasal; y/o (f) la cantidad efectiva del compuesto se administra mediante inyección al mamífero; y/o (g) la cantidad efectiva del compuesto se administra por vía tópica al mamífero; y/o (h) la cantidad efectiva del compuesto se administra por vía oftálmica; y/o (i) la cantidad efectiva del compuesto se administra por vía rectal al mamífero; y/o (j) la cantidad efectiva se administra por vía no sistémica o local al mamífero.

Un compuesto de la fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable, se puede administrar usando métodos que comprenden administraciones únicas de la cantidad efectiva del compuesto, que incluyen otras modalidades en donde (i) el compuesto se administra una vez; (ii) el compuesto se administra al mamífero múltiples veces durante un día; (iii) de manera continuada; o (iv) continua.

Un compuesto de la fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable, se puede administrar usando métodos que comprenden múltiples administraciones de la cantidad efectiva del compuesto, que incluyen otras modalidades en donde (i) el compuesto se administra de manera continua o intermitente: como en una dosis única; (ii) el tiempo entre las múltiples administraciones es cada 6 horas; (iii) el compuesto se administra al mamífero cada 8 horas; (iv) el compuesto se administra al mamífero cada 12 horas; (v) el compuesto se administra al mamífero cada 24 horas. El método puede comprender un período de descanso del fármaco, en donde la administración del compuesto se suspende temporalmente o la dosis del compuesto que se administra se reduce temporalmente; al final del período de descanso del fármaco, se reanuda la dosis del compuesto. La duración del período de descanso del fármaco puede variar de 2 días a 1 año.

También se proporciona un método para inhibir la actividad fisiológica de LPA en un mamífero que comprende administrar una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, al mamífero que lo necesita.

Un compuesto de la fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable, se puede usar en un método para tratar o prevenir una enfermedad o afección dependiente de LPA o mediada por LPA en un mamífero que comprende administrar una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Las enfermedades o afecciones dependientes de LPA o mediadas por LPA pueden incluir, entre otras, fibrosis de órganos o tejidos, cicatrización patológica, enfermedades hepáticas, afecciones dermatológicas, cáncer, enfermedad cardiovascular, enfermedades o afecciones respiratorias, enfermedad inflamatoria, enfermedad del tubo gastrointestinal, enfermedad renal, enfermedad asociada a las vías urinarias, enfermedad inflamatoria de las vías urinarias inferiores, disuria, micción frecuente, enfermedad pancreática, obstrucción arterial, infarto cerebral, hemorragia cerebral, dolor, neuropatía periférica y fibromialgia.

La enfermedad o afección dependiente de LPA o mediada por LPA puede ser una enfermedad o afección respiratoria. En algunas modalidades, la enfermedad o afección respiratoria es asma, enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC), fibrosis pulmonar, hipertensión arterial pulmonar o síndrome de dificultad respiratoria aguda.

La enfermedad o afección dependiente de LPA o mediada por LPA se puede seleccionar de fibrosis pulmonar idiopática; otras enfermedades pulmonares parenquimatosas difusas de distintas etiologías que incluyen fibrosis inducida por fármaco iatrogénica, fibrosis inducida por la ocupación y/o el entorno, enfermedades granulomatosas (sarcoidosis, neumonía por hipersensibilidad), enfermedad vascular del colágeno, proteinosis alveolar, granulomatosis de células de Langerhans, linfangioleiomiomatosis, enfermedades hereditarias (síndrome de Hermansky-Pudlak, esclerosis tuberosa, neurofibromatosis, trastornos de almacenamiento metabólico, enfermedad pulmonar intersticial familiar); fibrosis inducida por radiación; enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC); esclerodermia; fibrosis pulmonar inducida por bleomicina; asma crónica; silicosis, fibrosis pulmonar inducida por asbestos; síndrome de dificultad respiratoria aguda (ARDS, por sus siglas en inglés); fibrosis renal; fibrosis tubulointersticial; nefritis glomerular; glomeruloesclerosis focal y segmentaria, nefropatía por IgA; hipertensión, síndrome de Alport; fibrosis intestinal; fibrosis hepática; cirrosis; fibrosis hepática alcohólica; fibrosis hepática inducida por tóxicos/fármacos; hemocromatosis; esteatohepatitis no alcohólica (NASH); lesión del conducto biliar; cirrosis biliar primaria; fibrosis hepática inducida por infección; fibrosis hepática inducida por virus; y hepatitis autoinmunitaria; cicatrización patológica de la córnea; cicatrización patológica hipertrófica; enfermedad de Duputren, queloides, fibrosis cutánea; esclerodermia cutánea; lesión/fibrosis medular; mielofibrosis; reestenosis vascular; ateroesclerosis; arterioesclerosis; granulomatosis de Wegener; enfermedad de Peyronie, leucemia linfocítica crónica, metástasis tumoral, rechazo al órgano trasplantado, endometriosis, síndrome de dificultad respiratoria neonatal y dolor neuroático.

Un compuesto de la fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable, se puede usar en un método para tratar o prevenir la fibrosis orgánica en un mamífero que comprende administrar una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, al mamífero que lo necesita.

La fibrosis orgánica puede comprender fibrosis pulmonar, fibrosis renal o fibrosis hepática.

Un compuesto de la fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable, se puede usar en un método para mejorar la función pulmonar en un mamífero que comprende administrar una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, al mamífero que lo necesita. En un aspecto, al mamífero se le diagnosticó fibrosis pulmonar.

Un compuesto de la fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable, se puede usar en un método para tratar fibrosis pulmonar idiopática (neumonía intersticial usual) en un mamífero.

Un compuesto de la fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable, se puede usar en un método para tratar enfermedades pulmonares intersticiales parenquimatosas difusas en mamíferos: inducida por fármaco iatrogénica, inducida por la ocupación y/o el entorno (pulmón de granjero), enfermedades granulomatosas (sarcoidosis, neumonía por hipersensibilidad), enfermedad vascular del colágeno (esclerodermia y otras), proteinosis alveolar, granulomatosis de células de Langerhans, linfangioleiomiomatosis, síndrome de Hermansky-Pudlak, esclerosis tuberosa, neurofibromatosis, trastornos de almacenamiento metabólico, enfermedad pulmonar intersticial familiar.

Un compuesto de la fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable, se puede usar en un método para tratar fibrosis después del trasplante asociada a rechazo crónico en un mamífero: Bronquiolitis obliterante para trasplante de pulmón.

Un compuesto de la fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable, se puede usar en un método para tratar fibrosis cutánea en un mamífero: esclerodermia cutánea, enfermedad de Dupuytren, queloides.

Un compuesto de la fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable, se puede usar en un método para tratar fibrosis hepática con o sin cirrosis en un mamífero: inducida por tóxicos/fármacos (hemocromatosis), enfermedad hepática alcohólica, hepatitis viral (virus de la hepatitis B, virus de la hepatitis C, VHC), enfermedad hepática no alcohólica (NAFLD, NASH), enfermedad metabólica y autoinmunitaria.

Un compuesto de la fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable, se puede usar en un método para tratar fibrosis renal en un mamífero: fibrosis tubulointersticial, glomeruloesclerosis.

Los métodos para el tratamiento de enfermedades o afecciones dependientes de LPA, pueden comprender administrar al menos un agente adicional además de la administración de un compuesto que tiene la estructura de la Formula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable. Cada agente se puede administrar en cualquier orden, que incluye de forma simultánea.

El mamífero puede ser un ser humano.

Un compuesto de la fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable, se puede administrar a un ser humano. Un compuesto de la fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable, se puede administrar por vía oral. Un compuesto de la fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable, se puede usar como antagonistas de al menos un receptor de LPA. Un compuesto de la fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable, se puede usar para inhibir la actividad de al menos un receptor de LPA o para el tratamiento de una enfermedad o afección que se beneficiaría de la inhibición de la actividad de al menos un receptor de LPA. El receptor de LPA es LPA_1.

Un compuesto de la fórmula (I), o una sal de este farmacéuticamente aceptable, se puede usar para la formulación de un medicamento para la inhibición de la actividad de LPA_1,

VI. SÍNTESIS GENERAL QUE INCLUYE ESQUEMAS DE REACCIÓN

Los compuestos de la presente invención pueden prepararse de varias maneras conocidas por los expertos en la técnica en el campo de la síntesis orgánica. Los compuestos de la presente invención se pueden sintetizar con los métodos descritos a continuación, junto con los métodos de síntesis conocidos en el campo de la química orgánica sintética o sus variaciones consideradas por los expertos en la técnica. Los métodos preferidos incluyen, entre otros, los que se describen a continuación. Las reacciones se realizan en un solvente o en una mezcla de solventes adecuados para los reactivos y materiales usados, y son adecuadas para las transformaciones que se llevan a cabo. El experto en la técnica en el área de la síntesis orgánica comprenderá que la funcionalidad presente en la molécula debe ser compatible con las transformaciones que se proponen. En ocasiones, esto requerirá cierto criterio para modificar el orden de las etapas de síntesis o para seleccionar un cronograma particular del proceso en lugar de otro, a fin de obtener el compuesto deseado de la invención.

Otra consideración importante en la planificación de cualquier vía de síntesis en esta área es la elección prudente del grupo protector que se usa para la protección de los grupos funcionales reactivos presentes en los compuestos descritos en esta invención. Una reseña confiable que describe las diversas alternativas para el médico capacitado es Greene et al. (Protective Groups In Organic Synthesis, 4.^a edición, Wiley-Interscience (2006)).

Los compuestos de la Fórmula (I) se pueden preparar mediante los procesos ilustrativos descritos en los siguientes esquemas de reacción y ejemplos de trabajo, así como mediante los procedimientos pertinentes de la literatura publicada que usan los expertos en la técnica. Los reactivos y procedimientos ilustrativos para estas reacciones se indican a continuación y en los ejemplos de trabajo. La protección y desprotección en los siguientes procesos se pueden llevar a cabo mediante procedimientos generalmente conocidos en el estado de la técnica (ver, por ejemplo, Wuts, P.G.M., Greene’s Protective Groups in Organic Synthesis, 5.^a edición, Wiley (2014)). Los métodos generales de síntesis orgánicas y las transformaciones de grupos funcionales se pueden hallar en: Trost, B.M. et al., Eds., Comprehensive Organic Synthesis: Selectivity, Strategy & Efficiency in Modern Organic Chemistry, Pergamon Press, Nueva York, NY (1991); Smith, M.B. et al., March's Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure. 7.^a edición, Wiley, Nueva York, NY (2013); Katritzky, A.R. et al., Eds., Comprehensive Organic Functional Group Transformations II, 2,^a edición, Elsevier Science Inc., Tarrytown, NY (2004); Larock, R.C., Comprehensive Organic Transformations, 2,^a edición, Wiley-VCH, Nueva York, NY (1999), y las referencias allí citadas.

El esquema de reacción 1 describe la síntesis de ácidos amino-azol metil triazol-ariloxi ciclohexil 16. Un derivado de dihalo (preferentemente, dibromo) fenilo o azina (por ejemplo, piridina) 1 se acopla a un alcohol de propargilo protegido de manera adecuada 2 (por ejemplo, como un éter de tetrahidropiranilo) en condiciones de Sonogashira (por ejemplo, Alper, P. et al., WO 2008097428) para obtener el correspondiente alcohol de propargilo protegido con bromo-arilo o bromo-heteroarilo 3. La reacción térmica de alquino 3 con una azida de alquilo 4 (con o sin un catalizador adecuado; Qian, Y. et al., J. Med. Chem., 2012, 55, 7920-7939 o Boren, B. C., et al., J. Am. Chem. Soc., 2008, 130, 8923-8930) proporciona los correspondientes regioisómeros de hidroxilmetil-triazol protegidos, de los que se puede aislar el regioisómero de triazol deseado 5. La reacción de los bromoaril- o bromoheteroaril-triazoles 5 con diboronato de pinacol en la presencia de un catalizador de metal de transición adecuado (por ejemplo, paladio, por ejemplo, Ishiyama, T. et al., J. Org. Chem. 1995, 60, 7508-7510) proporciona el correspondiente boronato de pinacol 6, que luego se oxida con peróxido de hidrógeno para obtener el correspondiente fenol o hidroxiheteroareno 7 (por ejemplo, Fukumoto, S. et al., WO 2012137982). La reacción de fenol/hidroxiheteroareno 7 con un éster 3-hidroxi cicloalquil 8 en condiciones de reacción de Mitsunobu (Kumara Swamy, K. C., Chem. Rev., 2009, 109, 2551-2651) produce el correspondiente éter éster triazol cicloalquil 9. La desprotección del hidroxitriazol 9 proporciona el alcohol de triazol 10, que luego se hace reaccionar con PBr₃ (u otro agente de bromación leve, tal como CBr₄/Ph₃P) para obtener el bromuro 11 correspondiente. El desplazamiento de bromuro 11 con NaN₃ (u otros reactivos de azida equivalentes) produce azida 12, que se somete a reducción (por ejemplo, reducción de Staudinger con Ph₃P/agua) para obtener la amina 13. Luego, se hace reaccionar la amina 13 con un halo-azol 14 adecuado en presencia de una base adecuada (reacción de sustitución nucleófila aromática) o mediante aminación catalizada por Pd para obtener triazol amino-azoles 15, que se someten luego a desprotección de éster para obtener los ácidos de triazol-azol ariloxi cicloalquil 16 deseados.

Esquema de reacción 1

Para el ejemplo específico de análogos 19, en donde R⁵ = CH₃ (Esquema de reacción 1A), en lugar de usar una azida de alquilo para la cicloadición al hidroxialquil alquino protegido 3, la trimetilsilil azida es un reactivo de reemplazo viable (Qian, Y. et al., J. Med. Chem., 2012, 55, 7920-7939) que se puede usar en condiciones catalizadas con metales de transición o térmicas (Boren, B.C. et al., J. Am. Chem. Soc., 2008, 130, 8923-8930). En estas condiciones, el regioisómero de triazol 17 deseado se obtiene como el producto principal de la reacción de cicloadición 1,3-dipolar, y el grupo trimetilsililo se retiró posteriormente en condiciones de desililación estándares (por ejemplo, Bu₄NF, como en Qian, Y. et al., J. Med. Chem., 2012, 55, 7920-7939) para obtener el metil triazol 18. Este Intermediario 18 se usa luego en la misma secuencia de síntesis que se describe para la síntesis de ácidos de amino-azol triazol 16 del Intermediario 5 de triazol en el esquema de reacción 1 para obtener los ácidos de metil-triazol amino-azol 19.

Esquema de reacción 1A

TMSCH₂N₃ Desililación,

p.ej. Bu₄NF

catalizador o

calentamiento

G₁

Como en el

Esquema 1 de

Intermediarios 5 - 15

o Compuesto 16

El Esquema de reacción 2 describe una vía de síntesis alternativa a los ácidos amino-piridil/pirimidinil metil triazol-ariloxi ciclohexil 16. Un derivado 1 de dihalo (preferentemente, dibromo) fenilo o azina (por ejemplo, piridina) se acopla a un alcohol de propargilo en condiciones de Sonogashira (Alper, P. et al., WO 2008097428) para obtener el correspondiente alcohol de propargilo protegido con bromo-arilo o bromo-heteroarilo 20. La reacción térmica de alquino 20 con una azida de alquilo 4 (con o sin un catalizador adecuado; Qian, Y. et al., J. Med. Chem., 2012, 55, 7920-7939; Boren, B.C. et al., J. Am. Chem. Soc., 2008, 130, 8923-8930) proporciona los correspondientes hidroximetil-triazoles regioisoméricos, de los cuales se puede aislar el regioisómero de triazol 21 deseado. El alcohol de triazol 21 se hace reaccionar con PBr₃ para obtener el correspondiente bromuro 22, El desplazamiento de bromuro 22 con NaN₃ (u otros reactivos de azida) produjo azida 23 que se sometió a reducción para obtener amina 24. La protección de la amina primaria 24 proporciona el Intermediario 25. El bromo-aril/heteroaril triazol 25 luego se convierte en el hidroxiaril o hidroxi-heteroaril triazol 26 mediante el boronato correspondiente usando la secuencia de 2 etapas [catálisis de B(pin)₂/Pd y luego tratamiento con H₂O₂] descrita en el esquema de reacción de reacción 1. La reacción de hidroxi-aril/heteroaril triazol 26 con un éster 3-hidroxi cicloalquil 8 en condiciones de reacción de Mitsunobu produce el correspondiente éter éster triazol cicloalquil 27.La desprotección de aminometil triazol 27 proporciona la triazol amina 28, que se hace reaccionar luego con un haloazol 14 adecuado (como se describe en el esquema de reacción 1) para obtener los ácidos de triazol-azol ariloxi cicloalquilo 16 deseados.

Esquema de reacción 2

El esquema de reacción 3 describe una síntesis alternativa de ácidos de amino-azol triazol 16. El triazol-bromuro 11 se puede hacer reaccionar con un amino-azol 29 adecuado ya sea en condiciones básicas (reacción de sustitución nucleofílica de amino-azol con bromuro) o en catálisis de metales de transición (por ejemplo, catalizador de paladio en presencia de ligandos adecuados) para obtener el éster de triazol amino-azol ciclohexil 15. La desprotección posterior del éster 15 proporciona los ácidos de triazol-amino-azol ciclohexil 16.

Esquema de reacción 3

El esquema de reacción 4 describe una síntesis alternativa de ácidos de amino-azol triazol 16. El triazol-alcohol 10 se oxida al triazol-aldehído 30 (por ejemplo, con periodinano de Dess-Martin u oxidación de Swern). El aldehído 30 se puede someter luego a aminación reductora con un amino-azol 29 adecuado (por ejemplo, con triacetoxiborohidruro de sodio, ref. Abdel-Magid, A. F., et al., J. Org. Chem. 1996, 61, 3849-3862) para obtener el éster de triazol amino-azol ciclohexil 15. La desprotección posterior del éster 15 proporciona los ácidos de triazol-amino-azol ciclohexil 16, Esquema de reacción 4

El esquema de reacción 5 describe el caso en donde un 2-amino-1,3,4-oxadiazol adecuadamente sustituido se desprotona con una base (por ejemplo, hidruro de sodio), que se somete luego a reacción con bromuro de triazol 11. Además del desplazamiento directo del bromuro mediante 2-amino-1,3,4-oxadiazol para obtener triazol-amino-oxadiazol 33, también se genera el producto obtenido de la reacción en nitrógeno en la posición 3 de oxadiazol (la triazol 1,3,4-oxadiazol-2(3H)-imina 32). Los ésteres de triazol 2-amino-1,3,4-oxadiazol 33 así como los ésteres de triazol 1,3,4-oxadiazol-2(3H)-imina 32 se desprotegen luego para obtener los correspondientes de ácidos de triazol 2-amino-1,3,4-oxadiazol ciclohexil 35 así como los ácidos de triazol 1,3,4-oxadiazol-2(3H)-imina ciclohexil 34.

Esquema de reacción 5

El esquema de reacción 6 describe la síntesis de ácidos de bis-triazol ciclohexil 37 ligados a N. La triazol azida 12 se somete a cicloadición mediada por Cu [3+2] (por ejemplo, Haldon, E., Org. Biomol. Chem., 2015, 13, 9528-9550) con un alquino 36 adecuadamente sustituido para obtener el éster de 1,2,3-triazol 37, que está desprotegido para proporcionar ácidos de bis-triazol ciclohexil 37.

Esquema de reacción 6

El Esquema de reacción 7 describe la síntesis de ácidos de bis-triazol 41 y 42 ligados a C. Aldehído triazol 30 se hace reaccionar con un alquino metalado adecuado (derivado del tratamiento de un alquino 39 con una base adecuada, por ejemplo, n-BuLi o t-BuLi) para obtener alquino-alcohol 39. El triazol alquino-alcohol se hace reaccionar luego con una azida de alquilo/arilo adecuada para obtener el correspondiente alcohol de 1,2,3-triazol 40. La desprotección de éster de bis-triazol ciclohexil produce los ácidos hidroxil-bis-triazol ciclohexil 41. De manera alternativa, el alcohol de 1,2,3-triazol 40 se puede desoxigenar (por ejemplo, Herrmann, J. M. et al., Eur. J. Org. Chem., 2013, 7017-7027), después de lo cual la desprotección del Intermediario de éster de bis-triazol ciclohexil proporciona ácidos de bis-triazol ciclohexil 42, Esquema de reacción 7

El Esquema de reacción 8 describe la síntesis de ácidos de triazol 1,2,4-oxadiazol ciclohexil 49. Aldehído triazol 30 se hace reaccionar con un reactivo de Wittig (por ejemplo, 43) para obtener el éter triazol enol 44, que se somete a hidrólisis mediada por ácido para obtener el aldehído homologado de 30, y luego mediante oxidación al ácido correspondiente 45 (por ejemplo, con NaClO₂, ref. Lindgren, B. O., Acta Chem. Scand.1973, 27, 888). El acoplamiento del ácido de triazol 45 con una hidrazida 46 adecuada (por ejemplo, con HATU) proporciona la hidrazida de triazol acilo 47, que se somete a reacción con un agente de deshidratación adecuado (por ejemplo, reactivo de Burgess) para obtener el triazol 1,2,4-oxadiazol 48. La desprotección de triazol éster 48 produce los ácidos de triazol 1,2,4-oxadiazol ciclohexil 49,

Esquema de reacción 8

El Esquema de reacción 9 describe la síntesis de ácidos de tetrazol ciclohexil 53 y 54. Un nitrilo (R³ = alquilo, arilo, heteroarilo) se hace reaccionar en condiciones de microondas con NaN₃ en presencia de un ácido de Lewis (por ejemplo, ZnBr₂) para proporcionar los tetrazoles 50 sustituidos correspondientes. Tetrazol 50 se hace reaccionar con éster triazol alcohol ciclohexilico 10 en condiciones de Mitsunobu para proporcionar los tetrazoles 51 y 52 regioisoméricos. La desprotección de los ésteres de ciclohexil 51 y 52 proporciona los ácidos de tetrazol-triazol ciclohexil 53 y 54 regioisoméricos.

Esquema de reacción 9

El Esquema de reacción 10 describe la síntesis de ácidos de heteroariloxi-triazol-piridiloxi-ciclohexano que contiene 56. El alquiléster del ácido ciclohexancarboxílico 10 se desprotege para obtener el correspondiente ácido de hidroximetil triazol-ciclohexil carboxílico 55. La reacción de S_NAr del anión de 55 con heteroaril haluro 14 y luego acidificación proporciona los ácidos de heteroariloxi-metil triazol-piridiloxi-ciclohexancarboxílico 56.

De manera alternativa, el éster-alcohol 10 puede reaccionar con haluro de heteroarilo 14 en condiciones de catalizador de metales de transición (por ejemplo, mediado por ligando de Pd) para obtener el heteroariloxi metil triazol 57, que tras la desprotección de éster y la acidificación posterior proporciona los ácidos heteroariloxi-metil triazol-piridiloxiciclohexancarboxílicos 56 deseados.

Esquema de reacción 10

El Esquema de reacción 11 describe una síntesis alternativa de heteroariloxi-triazol-piridiloxi-ciclohexano que contiene ácidos 56. El éster-alcohol 10 puede reaccionar con compuestos de heteroarilo hidroxi 14 en condiciones de reacción de Mitsunobu para obtener el heteroariloxi metil triazol 57, que tras la desprotección del éster y la acidificación posterior proporciona los ácidos heteroariloxi-metil triazol-piridiloxi-ciclohexancarboxílicos 56 deseados.

Esquema de reacción 11

El Esquema de reacción 12 describe la síntesis de ácidos de triazol amino-azol 63. El éter triazol alcohol ciclohexilo 10 se oxida al ácido carboxílico 58 (por ejemplo, directamente en el ácido con dicromato de piridinio o mediante un procedimiento de 2 etapas a través del aldehído [oxidación de Swern o periodinano de Dess-Martin, y luego oxidación de NaClO₂ al ácido, por ejemplo, Lindgren, B. O., Acta Chem. Scand. 1973, 27, 888]). El reordenamiento de Curtius de 58 en presencia de t-butanol proporciona el triazol NH-Boc-carbamato 59. La desprotección del triazol NH-Boc carbamato 59 en condiciones ácidas proporciona triazol amina 60. La triazol-amina 60 se convierte en hidroxi guanidina 61 en dos etapas. El acoplamiento de hidroxi guanidina 60 con un ácido carboxílico adecuado (por ejemplo, con HATU) y luego con deshidratación mediante calentamiento proporciona el amino oxadiazol 62. La desprotección del éster 62 produce los ácidos triazol-amino-oxadiazol ciclohexil 63 deseados.

Esquema de reacción 12

1) 1,1'-tiocarbonildi-2(1H)-piridona, luego NH3

2) NH₂OH, base

1) HATU, base

HO R3 2

O Desprotección

2) Ácido de Ácido

calor

El Esquema de reacción 13 describe la síntesis de ácidos de triazol amino-oxadiazol 65 y 68, Triazol-amina 60 se hace reaccionar con fosgeno y luego con la adición de una hidrazida adecuadamente sustituida. La deshidratación posterior (por ejemplo, con T3P) mediante calentamiento proporciona el triazol amino-oxadiazol 64. La desprotección del éster 63 produce los ácidos triazol-amino-oxadiazol ciclohexil 65 deseados. De manera alternativa, la triazol-amina 60 se somete a reacción de acoplamiento cruzado catalizada con metal de transición con un halo-oxadiazol 66 adecuadamente sustituido para obtener amino-oxadiazol 67, que se somete luego a desprotección de éster para obtener los ácidos triazol-amino-oxadiazol ciclohexil 68 adecuados.

Esquema de reacción 13

El Esquema de reacción 14 describe la síntesis de ácidos triazol-tetrazol ciclohexil 71 y 72. La reacción del bromuro de triazol 11 con cianuro proporciona nitrilo 69, que se somete luego a una reacción de cicloadición mediada por óxido de dialquil estaño con TMSN₃ (Wittenberger, S., et al., J. Org. Chem., 1993, 58, 4139-4141) para proporcionar triazoltetrazol 70. La reacción de tetrazol 70 con un alcohol adecuado en condiciones de reacción de Mitsunobu y luego con desprotección de éster proporciona los ácidos triazol-alquil-tetrazol ciclohexil 71 deseados. La reacción de tetrazol 70 con arilo o ácidos de heteroaril borónico en condiciones de reacción de acoplamiento cruzado de Chan-Lam (Qiao, J. X., et al., Synthesis, 2011, 829-856) y luego con desprotección de éster proporciona los ácidos triazol-aril/heteroaril-tetrazol ciclohexil 72 deseados.

Esquema de reacción 14

El Esquema de reacción 15 describe la síntesis de ácidos triazol-amino-tetrazol ciclohexil 75 y 76. La aminación reductora (por ejemplo, con NaBH(OAc)₃) de triazol aldehído 30 con amino tetrazol 73 protegido y luego con desprotección de tetrazol proporciona triazol amino-tetrazol 74. La reacción de tetrazol 74 con un alcohol adecuado en condiciones de reacción de Mitsunobu y luego con desprotección de éster proporciona los ácidos triazol-alquil-tetrazol ciclohexil 75 deseados. La reacción de tetrazol 74 con arilo o ácidos de heteroaril borónico en condiciones de reacción de acoplamiento cruzado de Chan-Lam (Qiao, J. X., et al., Synthesis, 2011, 829-856) y luego con desprotección de éster proporciona los ácidos triazol-aril/heteroaril-tetrazol ciclohexil 76 deseados.

Esquema de reacción 15

El Esquema de reacción 16 describe la síntesis de ácidos triazol-alcoxi-tetrazol ciclohexil 79. El bromuro de triazol 11 se hace reaccionar con 5-(metiltio)-2H-tetrazol 77 para obtener sulfuro triazol-tetrazol, que se somete a oxidación (por ejemplo, Oxone^®) a tetrazol sulfona 78. La desprotección del éster 78 y luego el desplazamiento de la sulfona con un alcóxido adecuado (del tratamiento de R³-OH alcohol con una base adecuada, por ejemplo, KN(TMS)₂) proporciona los ácidos triazol-alcoxi-tetrazol ciclohexil 79 adecuados.

Esquema de reacción 16

VII. EJEMPLOS

Los siguientes ejemplos se ofrecen a modo ilustrativo, como alcance parcial y modalidades particulares de la invención, y no pretenden limitar el alcance de la invención. Las abreviaturas y los símbolos químicos tienen sus significados usuales y habituales, a menos que se indique lo contrario. A menos que se indique lo contrario, los compuestos descritos en la presente se prepararon, aislaron y caracterizaron usando los esquemas de reacción y otros métodos descritos en la presente o se pueden preparar usando estos esquemas de reacción y métodos.

Según sea adecuado, las reacciones se llevaron a cabo en una atmósfera de nitrógeno seco (o argón). Para las reacciones anhidras, se usaron solventes DRISOLV® de EM. Para otras reacciones, se usaron solventes de grado de reactivo o de grado de HPLC. A menos que se indique lo contrario, todos los reactivos obtenidos en el comercio se usaron como se recibieron.

Las reacciones para microondas se llevaron a cabo con el uso de un instrumento Biotage Initiator 400 W en recipientes de reacción para microondas en irradiación de microondas (2,5 GHz).

MÉTODOS DE HPLC/MS Y HPLC PREPARATIVA/ANALÍTICA QUE SE USAN EN LA CARACTERIZACIÓN O PURIFICACIÓN DE LOS EJEMPLOS

En general, los espectros de RMN (resonancia magnética nuclear) se obtuvieron en instrumentos Bruker o JEOL de 400 MHz y 500 MHz en los solventes indicados. Todos los desplazamientos químicos se indican en ppm de tetrametilsilano con la resonancia del solvente como estándar interno. En general, los datos espectrales de RMN ¹H se indican de la siguiente manera: desplazamiento químico, multiplicidad (s = singulete, br s = singulete amplio, d = doblete, dd = doblete de dobletes, t = triplete, q = cuarteto, sep = septeto, m = multiplete, app = aparente), constantes de acoplamiento (Hz) e integración.

En los ejemplos en donde el espectro RMN ¹H se recolectó en d₆-DMSO, se utilizó a menudo una secuencia de supresión de agua. Esta secuencia suprime de manera efectiva la señal de agua y cualquier pico de protón en la misma región usualmente entre 3,30-3,65 ppm lo cual afectará la integración general de protones.

El término “HPLC” se refiere a un instrumento de cromatografía de líquidos de alta resolución de Shimadzu con uno de los siguientes métodos:

HPLC-1: columna Sunfire C18 (4,6 × 150 mm) 3,5m, gradiente de 10 a 100 % de B:A durante 12 min, luego mantenimiento de 3 min a 100 % de B.

Fase móvil A: 0,05 % de TFA en agua:CH₃CN (95:5)

Fase móvil B: 0,05 % de TFA en CH₃CN:agua (95:5)

Amortiguador de TFA pH = 2,5; velocidad de flujo: 1 ml/ min; longitud de onda: 254 nm, 220 nm.

HPLC-2: XBridge Phenyl (4,6 × 150 mm) 3,5m, gradiente de 10 a 100 % de B:A durante 12 min, luego mantenimiento de 3 min a 100 % de B.

Fase móvil A: 0,05 % de TFA en agua:CH₃CN (95:5)

Fase móvil B: 0,05 % de TFA en CH₃CN:agua (95:5)

Amortiguador de TFA pH = 2,5; velocidad de flujo: 1 ml/ min; longitud de onda: 254 nm, 220 nm.

HPLC-3: Chiralpak AD-H, 4,6 × 250 mm, 5m.

Fase móvil: 30 % de EtOH-heptano (1:1) / 70 % de CO₂

Velocidad de flujo = 40 ml/min, 100 Bar, 35 °C; longitud de onda: 220 nm

HPLC-4: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2,1 x 50 mm, partículas de 1,7 μm;

Fase móvil A: 5:95 CH₃CN:agua con 10 mM de NH₄OAc;

Fase móvil B: 95:5 CH₃CN:agua con 10 mM de NH₄OAc;

Temperatura: 50 °C; gradiente: 0-100 % de B durante 3 min, luego mantenimiento de 0,75 minutos a 100 % de B; flujo: 1,11 ml/min; detección: UV a 220 nm.

HPLC-5: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2,1 x 50 mm, partículas de 1,7 μm;

Fase móvil A: 5:95 CH₃CN:agua con 0,1 % de TFA;

Fase móvil B: 95:5 CH₃CN:agua con 0,1 % de TFA;

Temperatura: 50 °C; gradiente: 0-100 % de B durante 3 min, luego mantenimiento de 0,75 minutos a 100 % de B; flujo: 1,11 ml/min; detección: UV a 220 nm.

Intermediario 1. (1S,3S)-3-((6-(5-(hidroximetil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de isopropilo

Intermediario 1A.3-bromo-2-metil-6-(3-((tetrahidro-2H-piran-2-il)oxi)prop-1-in-1-il)piridina

A una solución de 2,5-dibromo-6-metil-piridina (5 g, 21,11 mmol) y 2-(prop-2-in-1-iloxi) tetrahidro-2H-pirano (4,44 g, 31,7 mmol) en MeCN (42,2 ml), se agregó Et₃N (8,83 ml, 63,3 mmol). La solución se desgasificó en N₂, luego se agregaron (Ph₃P)₂PdCl₂ (0,74 g, 1,06 mmol) y CuI (0,20 g, 1,06 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 14 h, después de lo cual la mezcla de reacción se filtró a través de un tapón de Celite^, y el tapón se lavó con EtOAc (2 X 10 ml). Los filtrados combinados se concentraron al vacío, el residuo se sometió a cromatografía (SiO₂; gradiente continuo de 0 % a 100 % de EtOAc en hexanos durante 20 min) para obtener el compuesto del título como un sólido blanco (6,0 g, 20,3 mmol, 96 % de rendimiento). RMN ¹H (400 MHz, CDCl₃) 8,65 (d, J=2,0 Hz, 1H), 7,80 (dd, J=8,3, 2,3 Hz, 1H), 7,35 (dd, J=8,4, 0,4 Hz, 1H), 4,91 (t, J=3,3 Hz, 1H), 4,61-4,45 (m, 2H), 3,98-3,81 (m, 1H), 3,66-3,44 (m, 1H), 1,92-1,73 (m, 2H), 1,72-1,52 (m, 2H). LCMS, [M+H]+ = 298,0.

Intermediario 1B.3-bromo-2-metil-6-(1-metil-5-(((tetrahidro-2H-piran-2-il)oxi)metil)-1H-1,2,3-triazol-4-il)piridina

Una solución de Intermediario 1A (6,0 g, 20,3 mmol) en tolueno (20 ml) y TMSCH₂N₃ (7,85 g, 60,8 mmol) se calentó a 90 °C en Ar durante 15 h, luego se enfrió hasta temperatura ambiente. Los volátiles se retiraron al vacío, y el residuo se disolvió en THF (20 ml). A la mezcla se agregó TBAF (20,3 ml de una solución 1 M en THF, 20,3 mmol) a 0C. Después de agitar durante 10 min, la reacción se completó según se determinó mediante HPLC analítica. Los volátiles se retiraron al vacío, y el residuo se sometió a cromatografía (SiO₂, gradiente continuo de 0 % a 100 % de EtOAc en hexanos durante 20 min) para obtener el compuesto del título (2,1 g, 29 % de rendimiento) como un sólido blanco.

RMN ¹H (400 MHz, CDCl₃) 7,85 (d, J=8,4 Hz, 1H), 7,13 (d, J=8,4 Hz, 1H), 6,03 (br. s., 1H), 5,39-5,23 (m, 4H), 4,81-4,76 (m, 1H), 4,17 (s, 3H), 3,91 (ddd, J=11,3, 7,9, 3,3 Hz, 1H), 3,65-3,48 (m, 1H), 2,54 (s, 3H), 1,88-1,68 (m, 2H), 1,56 (br. s., 2H).

Intermediario 1C.2-metil-6-(1-metil-5-(((tetrahidro-2H-piran-2-il)oxi)metil)-1H-1,2,3-triazol-4-il)piridin-3-ol

A una solución desgasificada (rociada con Ar 3X) de Intermediario 1B (213 mg, 0,60 mmol), bis(pinacolato)diboro (230 mg, 0,91 mmol) y KOAc (178 mg, 1,81 mmol) en THF se agregó Pd(dppf)Cl₂ (22 mg, 0,03 mmol). La mezcla de reacción se calentó en un tubo sellado a 80C durante 16 h, luego se enfrió hasta temperatura ambiente y se dividió en agua y EtOAc. La capa acuosa se extrajo con EtOAc (3 X 20 ml). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron (MgSO₄), se filtraron y se concentraron al vacío. El producto de boronato de pinacol crudo se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional. A una solución del producto de boronato de pinacol crudo (241 mg, 0,603 mmol) en EtOAc (2 ml) se agregó H₂O₂ (0,19 ml de una solución acuosa al 30 %, 6,0 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 h, luego se enfrió hasta 0C y se inactivó mediante adición lenta de Na₂S₂O₃ acuoso saturado. La capa acuosa se extrajo con EtOAc (3 X 20 ml). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron (MgSO₄) y se concentraron al vacío. El residuo se sometió a cromatografía (SiO₂, gradiente continuo de 0 % a 100 % de EtOAc en hexanos, durante 20 min) para obtener el compuesto del título (150 mg, 86 %) como un sólido blanco. RMN ¹H (400M Hz, CDCl₃) 8,27 (d, J=2,6 Hz, 1H), 8,06 (d, J=8,6 Hz, 1H), 7,29-7,21 (m, 1H), 5,33 (s, 1H), 5,28 (d, J=2,4 Hz, 2H), 4,76 (s, 1H), 4,18 (s, 3H), 3,90 (s, 1H), 3,63-3,48 (m, 1H), 1,72 (s, 2H), 1,65-1,51 (m, 2H). LCMS, [M+H]⁺ = 291,2,

Intermediario 1D. (1S,3S)-3-((2-metil-6-(1-metil-5-(((tetrahidro-2H-piran-2-il)oxi)metil)-1H-1,2,3-triazol-4-il)piridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de isopropilo

A una solución del Intermediario 1C (1,18 g, 4,06 mmol) y (1S, 3R)-isopropil 3-hidroxiciclo-hexano carboxilato (sintetizado de acuerdo con el procedimiento descrito en US2007/0197788A1, 1,51 g, 8,13 mmol) en tolueno (81 ml) se agregó Bu₃P (3,17 ml, 12,2 mmol). A esta mezcla agitada se agregó (E)-diazen-1,2-diilbis(piperidin-1-il-metanona) (3,08 g, 12,2 mmol) en porciones, y la mezcla de reacción se calentó a 50 °C durante 120 min, luego se enfrió hasta temperatura ambiente. En ese momento, una LCMS de la mezcla de reacción mostró el producto deseado. La mezcla se filtró, y el filtrado se concentró al vacío. El residuo se sometió a cromatografía (SiO₂, gradiente continuo de 0 % a 100 % de EtOAc en hexanos, durante 20 min) para obtener el compuesto del título (1,2 g, 2,62 mmol, 64,4 % de rendimiento) como una espuma blanca. RMN ¹H (400 MHz, CDCl₃) 7,95 (d, J=8,6 Hz, 1H), 7,22 (d, J=8,6 Hz, 1H), 5,45-5,24 (m, 2H), 5,04 (dt, J=12,5, 6,3 Hz, 1H), 4,83-4,64 (m, 2H), 4,16 (s, 3H), 3,91 (ddd, J=11,2, 7,9, 3,1 Hz, 1H), 3,64-3,48 (m, 1H), 2,93-2,71 (m, 1H), 2,52 (s, 3H), 2,23-1,45 (m, 14H), 1,26 (dd, J=6,4, 2,0 Hz, 6H).

Intermediario 1

A una solución del Intermediario 1D (1,7 g, 3,71 mmol) en MeOH (37 ml) se agregó PPTS (0,932 g, 3,71 mmol). La mezcla de reacción se calentó hasta 60C durante 2 h, luego se enfrió hasta temperatura ambiente, se diluyó con agua y NaHCO₃ acuoso saturado, luego se extrajo con EtOAc (3 X 10 ml). Los extractos orgánicos combinados se concentraron al vacío y se sometieron a cromatografía (SiO_2; gradiente continuo de 0 % a 100 % de EtOAc en hexanos, 20 min) para obtener el compuesto del título como una espuma blanca (1,36 g, 3,63 mmol, 98 % de rendimiento). RMN ¹H (400 MHz, CDCl₃) 8,01 (d, J=8,6 Hz, 1H), 7,46 (d, J=5,1 Hz, 1H), 7,27-7,15 (m, 1H), 4,96 (dt, J=12,5, 6,3 Hz, 1H), 4,74 (s, 2H), 4,66-4,59 (m, 1H), 4,00 (s, 3H), 2,80-2,64 (m, 1H), 2,46 (s, 3H), 2,07-1,50 (m, 8H), 1,18 (dd, J=6,4, 2,2 Hz, 6H).

Intermediario 2. (1S,3S)-isopropil 3-((6-(5-(bromometil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexancarboxilato

A una solución a 0 °C de Intermediario 1 (0,28 g, 0,721 mmol) en DME (7 ml) se agregó PBr₃ (0,17 ml, 1,802 mmol). La reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente, luego se enfrió hasta 0 °C y se neutralizó con NaHCO₃ acuoso saturado hasta pH7. La mezcla se dividió entre EtOAc (50 ml) y agua (5 ml), y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (3 x 10 ml). Los extractos orgánicos combinados se secaron (MgSO₄) y se concentraron al vacío. El residuo se sometió a cromatografía (12 g de SiO₂; gradiente continuo de 0 % a 50 % de EtOAc en hexanos durante 25 min) para obtener el compuesto del título (300 mg, 0,665 mmol, 92 % de rendimiento) como un sólido blanco. LCMS, [M H]⁺ = 451,2. RMN ¹H (500 MHz, CDCl₃) 7,99 (d, J=8,5 Hz, 1H), 7,22 (d, J=8,5 Hz, 1H), 5,26 (d, J=1,4 Hz, 2H), 5,03 (spt, J=6,3 Hz, 1H), 4,75-4,63 (m, 1H), 4,12 (s, 3H), 2,82-2,74 (m, 1H), 2,54 (s, 3H), 2,14-2,07 (m, 1H), 1,99-1,88 (m, 3H), 1,81-1,59 (m, 4H), 1,27-1,24 (m, 6H).

Intermediario 3. (1S,3S)-isopropil 3-((6-(5-(aminometil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexancarboxilato

Intermediario 3A. (1S,3S)-isopropil 3-((6-(5-(azidometil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexancarboxilato

A una solución de Intermediario 2 (100 mg, 0,22 mmol) en DMF (1,5 ml) se agregó NaN₃ (36 mg, 0,55 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a 80 °C durante 1 h; en este momento el análisis de LCMS indicó que la reacción se había completado. La mezcla de reacción se enfrió hasta temperatura ambiente, se dividió entre EtOAc y agua (10 ml cada uno), y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente. Después de 15 min, la capa orgánica se secó (Na₂SO₄) y se concentró al vacío. El compuesto del título crudo se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional. LCMS, [M H]⁺ = 414,3.

Intermediario 3

A una solución del Intermediario 3A (92 mg, 0,22 mmol) en THF (1 ml) y H₂O (0,3 ml) se agregó Ph₃P (58 mg, 0,22 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche, luego se absorbió en EtOAc y agua (10 ml cada uno). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 15 min. La capa orgánica separada se secó (Na₂SO₄) y se concentró al vacío. El residuo se sometió a cromatografía (12 g de SiO₂; 100 % de EtOAc durante 10 min, luego a un gradiente continuo de 0 % a 10 % de MeOH en CH₂Cl₂ durante 20 min; velocidad de flujo = 30 ml/min) para obtener el compuesto del título (81 mg, 0,21 mmol, 94 % de rendimiento) como un aceite beige. LCMS, [M H]⁺ = 388,3.

Intermediario 4. (1S,3S)-3-((6-(5-(hidroximetil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de metilo

El Intermediario 4 se sintetizó de carboxilato (1S, 3R)-metil 3-hidroxiciclohexano e Intermediario 1C (con el uso de la misma secuencia de síntesis que se usó para sintetizar el Intermediario 1 de ciclohexancarboxilato de (1S, 3R)-isopropil 3-hidroxi e Intermediario 1C). RMN ¹H (400 MHz, CDCl₃) δ 8,09 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 7,29 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 4,81 (s, 2H), 4,72 (dp, J = 5,1, 2,7 Hz, 1H), 4,07 (s, 3H), 3,69 (s, 3H), 2,82 (tt, J = 10,2, 3,9 Hz, 1H), 2,53 (s, 3H), 2,19-1,54 (m, 8H). LCMS, [M+H]+ = 361,2,

Intermediario 5. (1S,3S)-3-((6-(5-(bromometil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de metilo

El Intermediario 5 se sintetizó del Intermediario 4 (con el uso del mismo procedimiento que se usó para sintetizar el Intermediario 2 del Intermediario 1). RMN ¹H (500 MHz, CDCl₃) δ 8,01 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,22 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 5,32-5,22 (m, 2H), 4,73 (dp, J = 4,7, 2,6 Hz, 1H), 4,14 (s, 3H), 3,72 (s, 3H), 2,86 (tt, J = 10,6, 4,0 Hz, 1H), 2,55 (s, 3H), 2,21-1,60 (m, 8H). LCMS, [M+H]+ = 423,1.

Intermediario 6. (1S,3S)-3-((6-(5-(azidometil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de metilo

El Intermediario 6 se sintetizó del Intermediario 5 (con el uso del mismo procedimiento que se usó para sintetizar el Intermediario 3A del Intermediario 2). LCMS, [M+H]+ = 386,1.

Intermediario 7. (1S,3S)-3-((6-(5-(aminometil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de metilo

El Intermediario 7 se sintetizó del Intermediario 5 (con el uso de la misma secuencia de síntesis que se usó para sintetizar el Intermediario 3 del Intermediario 3A).

RMN ¹H (400 MHz, CDCl₃) δ 7,98 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,21 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 4,70 (dp, J = 5,1, 2,7 Hz, 1H), 4,17 (s, 2H), 4,09 (s, 3H), 3,69 (s, 3H), 2,83 (tt, J = 10,5, 3,9 Hz, 1H), 2,51 (s, 3H), 2,19-1,56 (m, 8H). LCMS, [M+H]+ = 360,1.

Intermediario 8. (1S,3S)-3-((6-(5-formil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de metilo

A una solución del Intermediario 4 (0,37 g, 1,03 mmol) en CH₂Cl₂ (6 ml) se agregó sucesivamente NaHCO₃ (0,43 g, 5,13 mmol) y periodinano de Dess-Martin (0,52 g, 1,23 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 h, después de lo cual la TLC (hexanos/EtOAc = 1/3) mostró la desaparición del material de inicio y la aparición del producto. El sólido blanco se filtró en Celite, que se enjuagó con EtOAc. El filtrado se lavó con NaHCO₃ acuoso saturado, agua y salmuera, se secó (Na₂SO₄) y se concentró al vacío. El producto crudo se sometió a cromatografía (40 g de SiO₂; gradiente continuo de 0 %-80 % de EtOAc/ hexanos durante 20 min) para obtener el compuesto del título (365 mg, 1,02 mmol, 99 % de rendimiento) como un sólido blanco. LCMS, [M+H]+ = 359,1.

Intermediario 9. (1S,3S)-3-((6-(5-formil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de isopropilo

El Intermediario 9 se sintetizó del Intermediario 1 de la misma manera en que el Intermediario 8 se sintetizó del Intermediario 4, [M H]⁺ = 387,1; RMN ¹H (400 MHz, CDCl3) δ 10,96 (s, 1H), 8,08 (d, J=8,6 Hz, 1H), 7,27-7,23 (m, 1H), 5,03 (dt, J=12,5, 6,3 Hz, 1H), 4,75-4,70 (m, 1H), 4,35 (s, 3H), 2,83-2,72 (m, 1H), 2,51 (s, 3H), 2,13-2,03 (m, 1H), 2,02-1,87 (m, 3H), 1,85-1,57 (m, 4H), 1,25 (dd, J=6,2, 2,0 Hz, 6H).

Intermediario 10.5-isopentil-1,2,4-oxadiazol-3-amina.

A una suspensión a 0 °C de cianamida de hidrógeno de sodio (NaHNCN; 1,43 g, 22,3 mmol) en THF (14,9 ml) se agregó por goteo cloruro de 4-metilpentanoil (1,0 ml, 7,43 mmol). La reacción se calentó hasta temperatura ambiente y se agitó a temperatura ambiente durante 18 h, luego se concentró al vacío. El sólido amarillo resultante se disolvió en H₂O (20 ml) y el pH se ajustó hasta 6,5 con 10 % de HCl acuoso. La mezcla se extrajo con EtOAc (2 x 20 ml). La capa acuosa se acidificó hasta pH 1,5 con 10 % de HCl acuoso y se extrajo con DCM (3 x 20 ml). Los extractos orgánicos combinados se secaron (Na₂SO₄) y se concentraron al vacío para obtener N-cian-4-metilpentanamida (0,95 g, 91 %) como un líquido incoloro.

A una solución de N-cian-4-metilpentanamida (0,95 g, 6,78 mmol) en EtOH (10 ml) se agregó NH₂OH.HCl (0,706 g, 10,2 mmol), y luego piridina (2,19 ml, 27,1 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 h, luego se concentró al vacío. El residuo se dividió entre DCM y agua. La capa acuosa se extrajo con DCM (2x). Los extractos orgánicos combinados se secaron (Na₂SO₄) y se concentraron al vacío para obtener el compuesto del título (0,89 g, 85 %) como un sólido blanco. LCMS, [M+H]⁺ = 156,1. RMN ¹H (500 MHz, CDCl₃) δ 4,51 (br s, 2H), 2,86-2,68 (m, 2H), 1,76-1,55 (m, 3H), 0,96 (d, J=6,3 Hz, 6H).

Intermediario 11.5-(ciclobutilmetil)-1,2,4-oxadiazol-3-amina.

A una solución a 0 °C de ácido 2-ciclobutilacético (0,194 g, 1,70 mmol) en DMF (3,4 ml) se agregaron sucesivamente NaHNCN (0,109 g, 1,70 mmol), DIEA (1,48 ml, 8,50 mmol) y HATU (0,776 g, 2,04 mmol). La reacción se calentó hasta temperatura ambiente y se agitó a temperatura ambiente durante 18 h, luego se concentró al vacío. El residuo se suspendió en EtOH (2 ml), luego se agregó NH₂OH.HCl (0,177 g, 2,55 mmol), y luego piridina (0,550 ml, 6,80 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 h, luego se concentró al vacío. El residuo se dividió entre DCM y agua; la capa acuosa se extrajo con DCM (2x). Las capas orgánicas se secaron (Na₂SO₄) y se concentraron al vacío. El producto crudo se sometió a cromatografía (12 g de SiO₂, gradiente continuo de 0-100 % de EtOAc:Hex) para obtener el compuesto del título (0,14 g, 54 %) como un sólido blanco. LCMS, [M+H]⁺ = 154,1. RMN ¹H (400 MHz, CDCl₃) δ 4,61-4,26 (m, 2H), 2,87-2,66 (m, 3H), 2,21-2,10 (m, 2H), 1,95-1,66 (m, 4H).

Intermediario 12: Ácido (1S,3S)-3-((6-(5-(hidroximetil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxílico

A una solución del Intermediario 1 (0,62 g, 1,596 mmol) en MeOH (2 ml) se agregó por goteo KOH (0,448 g, 7,98 mmol) en agua (2 ml) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche, luego se concentró al vacío y se acidificó con HCl concentrado hasta pH ~ 3. Los sólidos se filtraron, se lavaron con agua y se secaron a temperatura ambiente para obtener el compuesto del título (0,45 g, 1,30 mmol, 81 % de rendimiento) como un sólido blanco. LCMS, [M H]⁺ = 347,1. RMN ¹H (500 MHz, DMSO-d₆) δ 7,83 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,49 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 4,96 (s, 2H), 4,77 (s, 1H), 4,03 (s, 3H), 2,64-2,57 (m, 1H), 2,42 (s, 3H), 2,05-1,40 (m, 8H).

Intermediario 13.5-(3-metilenciclobutil)-1,2,4-oxadiazol-3-amina.

A una solución de ácido 3-metilenciclobutan-1-carboxílico (1,22 g, 10,88 mmol) en DCM (9,1 ml) se agregó DMF (0,042 ml, 0,544 mmol) y luego cloruro de oxalilo (0,95 ml, 10,88 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 4h. La mezcla de reacción se agregó por goteo a una suspensión enfriada (0 °C) de hidrogencianamida de sodio (2,09 g, 32,6 mmol) en THF (21,8 ml). Después de la adición, la reacción se calentó hasta temperatura ambiente. Después de 18 h, la reacción se concentró. El sólido amarillo resultante se disolvió en agua destilada (25 ml) y la solución alcalina se ajustó hasta pH 6,5 con 10 % de HCl. La mezcla se extrajo luego con EtOAc (2 x 25 ml). La capa acuosa se acidificó hasta pH 1,5 con 10 % de HCl y se extrajo con DCM (3 x 25 ml). Las capas de DCM se combinaron, se secaron (Na₂SO₄), se filtraron y se concentraron al vacío para obtener N-cian-3-metilenciclobutan-1-carboxamida (1,48 g, 100 %) como un líquido amarillo.

A una solución de N-cian-3-metilenciclobutan-1-carboxamida (1,48 g, 10,88 mmol) en EtOH (43,5 ml) se agregó hidroxilamina clorhidrato (1,13 g, 16,32 mmol) y luego piridina (3,5 ml, 43,5 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 h y luego se concentró. El residuo se dividió en DCM y agua, y luego las capas se separaron. La capa acuosa se extrajo con DCM (2x). Las capas orgánicas se combinaron, se secaron (Na₂SO₄), se filtraron, y se concentraron. El producto crudo se purificó mediante cromatografía de fase normal (40 g de columna SiO₂, que se eluyó con 0-100 % de EtOAc/Hex) para obtener el compuesto del título (1,2 g, 73 %) como un sólido blanco. LCMS, [M+H]⁺ = 152,0. RMN ¹H (500 MHz, CDCl₃) δ 4,96-4,85 (m, 2H), 4,40 (br s, 2H), 3,64 (quin, J=8,3 Hz, 1H), 3,21-3,05 (m, 4H).

Intermediario 14.5-(3-metilciclobutil)-1,2,4-oxadiazol-3-amina

A una solución de 5-(3-metilenciclobutil)-1,2,4-oxadiazol-3-amina (50 mg, 0,331 mmol) en EtOH (2 ml) se agregó 10 % de paladio sobre carbón (35,2 mg, 0,033 mmol). Se hizo burbujear gas de hidrógeno (globo) a través de la mezcla de reacción durante unos pocos minutos, luego la reacción se agitó en un globo de hidrógeno durante 2 h. La mezcla de reacción se filtró a través de una almohadilla de Celite®, y se enjuagó con MeOH. El filtrado se concentró para obtener el compuesto del título (50 mg, 99 %) como un sólido blanco. LCMS, [M+H]⁺ = 153,9. El material se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional.

Intermediario 15.5-((1R,3R)-3-fluoro-3-metilciclobutil)-1,2,4-oxadiazol-3-amina

5-(cis-3-fluoro-3-metilciclobutil)-1,2,4-oxadiazol-3-amina

Una suspensión amarilla a 0 °C de oxalato de Fe(III) hexahidrato(726 mg, 1,50 mmol) en agua (30 ml) se desgasificó al hacer burbujear N₂ a través de la mezcla de reacción durante 10 min. Se agregaron Selectfluor (531 mg, 1,50 mmol) y MeCN (15 ml), y luego una solución de 5-(3-metilenciclo-butil)-1,2,4-oxadiazol-3-amina (113 mg, 0,75 mmol) en MeCN (15 ml). Por último, se agregó NaBH₄ (91 mg, 2,40 mmol), y la mezcla de reacción se agitó durante 2 min, después de lo cual se agregó más NaBH₄ (91 mg, 2,40 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 30 min, luego se inactivó mediante la adición de 30 % de NH₄OH acuoso (12 ml) y se extrajo con 10 % de MeOH en DCM (2x). Los extractos orgánicos combinados se secaron (Na₂SO₄) y se concentraron al vacío. El producto crudo se sometió a cromatografía (12 g de SiO₂, gradiente continuo de 0-100 % de EtOAc en hexanos) para obtener el compuesto del título (38 mg, 30 %) como un sólido blanco. LCMS, [M+H]⁺ = 172,0. RMN ¹H (500 MHz, CDCl₃) δ 4,58 (br s, 2H), 3,72 (tt, J=9,8, 6,8 Hz, 1H), 2,92-2,76 (m, 2H), 2,63-2,45 (m, 2H), 1,54 (d, J=22,3 Hz, 3H). Además, 5-((trans-3-fluoro-3-metilciclobutil)-1,2,4oxadiazol-3-amina (38 mg, 30 %) se obtuvo también como un sólido blanco. LCMS, [M+H]⁺ = 172,0. RMN ¹H (500 MHz, CDCl₃) δ 4,59 (br s, 2H), 3,16-3,08 (m, 1H), 2,84-2,72 (m, 2H), 2,63-2,52 (m, 2H), 1,57 (d, J=21,7 Hz, 3H).

[Los isómeros cis/trans se asignaron de acuerdo con RMN ¹H (trans metino adyacente al oxadiazol campo abajo) en WO2013/134298].

Intermediario 16.3-cloro-5-isopentil-1,2,4-oxadiazol

A una solución enfriada (0 °C) de 5-isopentil-1,2,4-oxadiazol-3-amina (400 mg, 2,58 mmol) en 37 % de HCl (25,8 ml) se agregó por goteo una solución de nitrito de sodio (445 mg, 6,44 mmol) en agua (2 ml). La reacción se agitó durante 2 h a 0 °C. La mezcla de reacción se diluyó con agua y se extrajo luego con DCM (3x). Las capas orgánicas se combinaron, se lavaron con salmuera, se secaron (Na₂SO₄), se filtraron y se concentraron. El producto crudo se sometió a cromatografía (12 g de columna SiO₂, que se eluyó con 0-100 % de EtOAc en n-hexanos) para obtener el compuesto del título (320 mg, 71 %) como un aceite amarillo. RMN ¹H (500 MHz, CDCl₃) δ 2,92 (t, J=7,8 Hz, 2H), 1,79-1,61 (m, 3H), 0,98 (d, J=6,3 Hz, 6H). El material se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional.

Intermediario 17.5-(3-fluorobutil)-1,2,4-oxadiazol-3-amina

5-(3-fluorobutil)-1,2,4-oxadiazol-3-amina (38 mg, 32 %, sólido blanco) se preparó de 5-(but-3-en-1-il)-1,2,4-oxadiazol-3-amina (104 mg, 0,75 mmol) de acuerdo con el procedimiento descrito para la síntesis de 5-((1R,3R)-3-fluoro-3-metilciclobutil)-1,2,4-oxadiazol-3-amina. LCMS, [M+H]⁺ = 160,0. RMN ¹H (500 MHz, CDCl₃) δ 4,88-4,64 (m, 1H), 4,48 (br s, 2H), 3,06-2,81 (m, 2H), 2,17-1,97 (m, 2H), 1,44-1,35 (m, 3H).

Intermediario 18. (1S,3S)-3-((6-(5-amino-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de metilo

Intermediario 18A. Ácido 4-(5-(((1S,3S)-3-(metoxicarbonil)ciclohexil)oxi)-6-metilpiridin-2-il)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-carboxílico

A una mezcla de Intermediario 8 (2,36 g, 6,58 mmol), NaH₂PO₄ (3,95 g, 32,9 mmol), 2-metil-2-buteno, (26,35 ml de una solución 2 M en THF; 52,7 mmol), agua (1,7 ml) y t-BuOH (8,4 ml) se agregó a temperatura ambiente NaClO₂ (1,489 g, 13,17 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 h, luego se vertió en salmuera y se extrajo con EtOAc (3X). Los extractos orgánicos combinados se secaron (Na₂SO₄) y se concentraron al vacío para obtener el compuesto del título crudo (2,40 g, 97 %) como un sólido blanco. Este ácido crudo se usó en la siguiente reacción sin purificación adicional. LC-MS, [M+H]⁺ = 375,0. RMN ¹H (500 MHz, CDCl₃) δ 8,52-8,19 (m, 1H), 7,67-7,40 (m, 1H), 4,85-4,75 (m, 1H), 4,52-4,40 (m, 3H), 3,78-3,63 (m, 3H), 2,90-2,77 (m, 1H), 2,67-2,53 (m, 3H), 1,99-1,83 (m, 3H), 1,80-1,62 (m, 5H).

Intermediario 18B. (1S,3S)-3-((6-(5-((terc-butoxicarbonil)amino)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de metilo

Una mezcla del Intermediario 18A (0,60 g, 1,6 mmol), (PhO)₂PON₃ (0,63 ml, 2,9 mmol), t-butanol (0,46 ml, 2,4 mmol), TEA (0,89 ml, 6,4 mmol) en tolueno (5,3 ml) se agitó a 80 °C durante 1 h, luego se enfrió hasta temperatura ambiente y se concentró al vacío. El producto crudo se sometió a cromatografía (40 g de SiO₂; gradiente continuo de 0 % a 60 % de EtOAc en n-hexanos) para obtener el compuesto del título (0,44 g, 62 %) como una espuma blanca. LC-MS, [M+H]⁺ = 446,4.

Intermediario 18

Una solución del Intermediario 18B (0,44 g, 0,99 mmol) en CH₂Cl₂ (9 ml) y TFA (1 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 16 h, luego se concentró al vacío. El producto crudo se disolvió en DCM, se lavó con NaHCO₃ acuoso saturado y salmuera, se secó (Na₂SO₄), y se concentró al vacío. El producto crudo se sometió a cromatografía (24 g de SiO₂; gradiente continuo de 0 % a 100 % de EtOAc en hexano durante 30 min y 100 % de EtOAc durante 20 min) para obtener el compuesto del título (0,20 g, 59 %) como un sólido blanco. LCMS, [M H]⁺ = 346,2. RMN ¹H (400 MHz, CDCl₃) δ 7,87 (d, J=8,6 Hz, 1H), 7,20 (d, J=8,7 Hz, 1H), 5,29 (br s, 2H), 4,69-4,64 (m, 1H), 3,85 (s, 3H), 3,69 (s, 3H), 2,83 (tt, J=10,5, 3,9 Hz, 1H), 2,49 (s, 3H), 2,18-2,10 (m, 1H), 2,00-1,84 (m, 3H), 1,81-1,69 (m, 1H), 1,66-1,54 (m, 3H).

Intermediario 19.2,5-dibromo-3-fluoro-6-metilpiridina

Intermediario 19A.3-fluoro-6-metilpiridin-2-amina

A una solución de 2-bromo-3-fluoro-6-metilpiridina (5,0 g, 26,3 mmol) en etilenglicol (50 ml) y 28 % de NH₄OH acuoso (63 ml; 450 mmol) se agregaron Cu₂O (0,19 g, 1,32 mmol), K₂CO₃ (0,73 g, 5,26 mmol), y N1, N1-dimetiletan-1,2-diamina (0,29 ml, 2,63 mmol). La mezcla de reacción se purgó con N₂, luego se calentó a 80 °C durante la noche en un tubo sellado, después de lo cual se enfrió hasta temperatura ambiente y se extrajo con CH₂Cl₂ (3x), Los extractos orgánicos combinados se secaron (Na₂SO₄) y se concentraron al vacío. El residuo se sometió a cromatografía (SiO₂; gradiente continuo de 0-100 % de EtOAc en hexanos) para obtener el compuesto del título (2,81 g, 85 % de rendimiento). RMN ¹H (500 MHz, CDCl₃) δ 7,11 (dd, J=10,6, 8,1 Hz, 1H), 6,47 (dd, J=8,0, 3,0 Hz, 1H), 4,55 (br s, 2H), 2,38 (s, 3H).

Intermediario 19B.5-bromo-3-fluoro-6-metilpiridin-2-amina

A una solución a 0 °C de Intermediario 19A (3,91 g, 31,0 mmol) en CH₃CN (100 ml), se agregó NBS (5,52 g, 31,0 mmol) en porciones mientras se mantenía la temperatura de reacción a ≤5 °C. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 30 min, luego se concentró al vacío. El residuo se sometió a cromatografía (SiO₂; 30 % de EtOAc en hexanos, isocrático) para obtener el compuesto del título (6,14 g, 97 % de rendimiento). RMN ¹H (500 MHz, CDCl₃) δ 7,37 (d, J=9,6 Hz, 1H), 4,59 (br s, 2H), 2,48 (d, J=1,1 Hz, 3H).

Intermediario 19

A una solución a 0 °C de 48 % de HBr acuoso (23,7 ml, 210 mmol, 48 %), se agregó lentamente Intermediario 19B (6,14 g, 29,9 mmol) en porciones. Se agregó Br₂ (3,09 ml, 59,9 mmol) por goteo mientras se mantenía la temperatura de reacción a ≤5 °C. La mezcla de reacción se agitó a 0 °C durante 30 min, después de lo cual se agregó una solución de NaNO₂ (5,17 g, 74,9 mmol) en agua (10 ml) por goteo mientras se mantenía la temperatura de reacción a ≤5 °C. La mezcla de reacción se agitó durante 30 min a 0 °C, luego se vertió en agua helada, se basificó con 50 % de NaOH acuoso y extrajo con EtOAc (2x).

Los extractos orgánicos combinados se lavaron con 10 % de Na₂S₂O₃ acuoso, salmuera, se secaron (Na₂SO₄), y se concentraron al vacío. El residuo se sometió a cromatografía (SiO₂; gradiente continuo de 0-25 % de EtOAc en hexanos) para obtener el compuesto del título (3,90 g, 48 % de rendimiento). RMN ¹H (500 MHz, CDCl₃) δ 7,60 (d, J=6,6 Hz, 1H), 2,64 (d, J=1,4 Hz, 3H).

Intermediario 20. (1S,3S)-3-((5-fluoro-6-(5-formil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de isopropilo

El compuesto del título se sintetizó usando el mismo procedimiento que se usó para sintetizar el Intermediario 9 a excepción de que se usó el Intermediario 19 en lugar de 2,5-dibromo-6-metil-piridina (como se describió para la preparación del Intermediario 1A). LCMS, [M+H]⁺ = 405. RMN ¹H (400 MHz, CDCl₃) δ 10,59 (s, 1H), 7,12 (d, J=11,7 Hz, 1H), 5,05 (quin, J=6,2 Hz, 1H), 4,68 (m, 1H), 4,38 (s, 3H), 2,78 (m, 1H), 2,49 (d, J=0,9 Hz, 3H), 2,05 (m, 2H), 1,96-1,88 (m, 2H), 1,81-1,61 (m, 4H), 1,27 (m, 6H)

Intermediario 21. (1S,3S)-3-((6-(5-formil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)piridin-3-il) oxi)ciclohexan-1-carboxilato de metilo

A una solución de (1S,3S)-3-((6-(5-(hidroximetil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)piridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de metilo(preparada de la misma forma que el Intermediario 4 a excepción de que se usó 2,5-dibromopiridina en lugar de 2,5-dibromo-6-metilpiridina como material de inicio; 660 mg, 1,90 mmol) en DCM (10 ml) se agregó NaHCO₃ (800 mg, 9,53 mmol) y luego periodinano de Dess-Martin (970 mg, 2,29 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 h, luego se filtró a través de un tapón de Celite^, que se lavó con EtOAc (2 X 3 ml). Los filtrados combinados se dividieron en NaHCO₃ acuoso saturado y EtOAc. La capa acuosa se extrajo con EtOAc (3 X 5 ml). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con agua, salmuera, se secaron (MgSO₄) y se concentraron al vacío. El residuo se sometió a cromatografía (SiO₂; gradiente continuo de 0 % a 100 % de EtOAc en hexanos durante 20 min) para obtener el compuesto del título (650 mg, 99 % de rendimiento). LCMS [M H]⁺ = 345,1; RMN ¹H (400 MHz, CDCl₃) δ 10,89 (s, 1H), 8,36 (d, J=3,1 Hz, 1H), 8,25 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,38 (dd, J=8,8, 3,1 Hz, 1H), 4,87-4,69 (m, 1H), 4,38 (s, 3H), 3,7Ejemplo3 (s, 3H), 3,01-2,79 (m, 1H), 2,17-2,08 (m, 1H), 2,03-1,91 (m, 3H), 1,82-1,61 (m, 4H).

Ejemplo 1. Ácido (1S,3S)-3-((6-(5-(((5-ciclopropil-1,2,4-tiadiazol-3-il)amino)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxílico

A una solución de Intermediario 8 (15 mg, 0,04 mmol), 5-ciclopropil-1,2,4-tiadiazol-3-amina (8,9 mg, 0,06 mmol) en MeOH (0,8 ml) se agregó HOAc (0,01 ml, 0,21 mmol), y la reacción se calentó hasta 65 °C durante 2 h, luego se enfrió hasta temperatura ambiente, y se agregó NaBH₃CN (5,3 mg, 0,08 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 h, después de lo cual se agregó NaHCO₃ acuoso saturado. La capa acuosa se extrajo con EtOAc. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó (MgSO₄) y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante HPLC de fase inversa (Phenomenex Luna Axis 5u 30 x 100 mm; velocidad de flujo 40 ml/min; detección 220 nm; elución de gradiente 0 % de B a 100 % de B durante 12 min) (A = 10 % de MeCN, 90 % de H₂O, 0,1 % de TFA & B = 90 % de MeCN, 10 % de H₂O, 0,1 % de TFA) para obtener metil (1S,3S)-3-((6-(5-(((5-ciclopropil-1,2,4-tiadiazol-3-il)amino)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi) ciclohexan-1-carboxilato como un sólido incoloro. Este material se disolvió en THF (0,8 ml)/ MeOH (0,4 ml)/H₂O (0,4 ml). Se agregó LiOH.H₂O (5 mg, 0,12 mmol) a la reacción a temperatura ambiente, y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. Los volátiles se retiraron al vacío y el residuo se absorbió en H₂O (5 ml). El pH se ajustó hasta ~5 con HCl acuoso 1 N y la mezcla se extrajo con EtOAc (3 x 5 ml). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (2 ml), se secaron (MgSO₄) y se concentraron al vacío. El producto crudo se purificó mediante HPLC de fase inversa (Sunfire 5u 30 x 100 mm; velocidad de flujo 40 ml/min; detección 220 nm; elución de gradiente 0 % de B a 100 % de B durante 12 min) (A = 10 % de MeCN, 90 % de H₂O, 0,1 % de TFA & B = 90 % de MeCN, 10 % de H₂O, 0,1 % de TFA) para obtener el compuesto del título (7,1 mg, 0,02 mmol, 60 % de rendimiento) como un aceite. LCMS, [M+H]+ = 470,1. RMN ¹H (500 MHz, CDCl₃) δ 8,09 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,72 (d, J=8,8 Hz, 1H), 4,92 (s, 2H), 4,88-4,82 (m, 1H), 4,25 (s, 3H), 2,97-2,90 (m, 1H), 2,78 (s, 3H), 2,19-1,67 (m, 9H), 1,23-1,16 (m, 2H), 1,05-0,99 (m, 2H). hLPA₁ IC₅₀ = 1184 nM.

Ejemplo 2. Ácido (1S,3S)-3-((2-metil-6-(1-metil-5-(((5-propil-1,3,4-tiadiazol-2-il)amino)metil)-1H-1,2,3-triazol-4-il)piridin-3-il)oxi)ciclohexancarboxílico

A una solución de 5-propil-1,3,4-tiadiazol-2-amina (6,4 mg, 0,04 mmol) en THF (0,5 ml) se agregó NaH (1,3 mg de una dispersión al 60 % en aceite, 0,03 mmol); la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 30 min. Se agregó una solución de Intermediario 5 (10 mg, 0,02 mmol) en THF (0,2 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 4 h. En este momento, la LCMS indicó la formación del producto. Se agregaron sucesivamente a la reacción THF (0,8 ml)/H₂O (0,4 ml)/MeOH (0,4 ml) y LiOH.H₂O (5 mg, 0,11 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante la noche, después de lo cual se retiraron los solventes al vacío y el residuo se absorbió en H₂O (5 ml). El pH de la mezcla se ajustó hasta ~5 con HCl acuoso 1 N hasta ~5 y se extrajo con EtOAc (3 x 5 ml). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (2 ml), se secaron (MgSO₄) y se concentraron al vacío. El producto crudo se purificó mediante LC/MS preparativa: (Columna: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 μm; columna Guard: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partículas de 5 μm; fase móvil A: 5:95 MeCN:H₂O con 0,1 % de TFA; fase móvil B: 95:5 MeCN:H₂O con 0,1 % de TFA; gradiente: 18-58 % de B durante 20 min, luego un mantenimiento de 5 minutos a 100 % de B; flujo: 20 ml/min) para proporcionar el compuesto del título (2,9 mg, 5,8 µmol, 26 % de rendimiento) como un aceite: LCMS, [M+H]+ = 472,0. RMN ¹H (500 MHz, DMSO-d₆) δ 7,85 (br d, J=8,5 Hz, 1H), 7,48 (br d, J=8,7 Hz, 1H), 5,00 (br d, J=4,0 Hz, 2H), 4,81-4,72 (m, 1H), 4,13 (s, 3H), 2,75 (br t, J=7,3 Hz, 2H), 2,62 (br t, J=10,4 Hz, 1H), 2,41 (s, 3H), 2,05-1,42 (m, 10H), 0,89 (br t, J=7,3 Hz, 3H). hLPA₁ IC₅₀ = 185 nM.

Ejemplo 3. Ácido (1S,3S)-3-((6-(5-(((3-(terc-butil)-1,2,4-tiadiazol-5-il)amino)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexancarboxílico

A una solución del Intermediario 7 (5 mg, 0,01 mmol) en n-BuOH (0,7 ml) se agregaron 3-(terc-butil)-5-cloro-1,2,4-tiadiazol (3,7 mg, 0,02 mmol) e iPr₂NEt (5 µl, 0,03 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla se agitó 180 °C durante 80 min, luego se enfrió hasta temperatura ambiente. Se agregaron THF (0,8 ml)/H₂O (0,4 ml)/MeOH (0,4 ml) y LiOH.H₂O (3 mg, 0,07 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante la noche. Los solventes se retiraron al vacío; el residuo se absorbió en H₂O (5 ml), el pH se ajustó hasta ~5 con HCl acuoso 1 N, y se extrajo con EtOAc (3 x 5 ml). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (2 ml), se secaron (MgSO₄) y se concentraron al vacío. El producto crudo se purificó mediante LC/MS preparativa: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 μm; columna Guard: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partículas de 5 μm; fase móvil A: 5:95 MeCN:H₂O con 0,1 % de TFA; fase móvil B: 95:5 MeCN:H₂O con 0,1 % de TFA; gradiente: 15-55 % de B durante 20 min, luego un mantenimiento de 5 minutos a 100 % de B; flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se concentraron mediante evaporación centrífuga para proporcionar el compuesto del título como un aceite (6,5 mg, 0,013 mmol, 96 % de rendimiento). LCMS, [M+H]⁺ = 486,1. RMN ¹H (500 MHz, DMSO-d6) δ 7,84 (br d, J=8,5 Hz, 1H), 7,50 (br d, J=8,8 Hz, 1H), 5,10 (br d, J=4,5 Hz, 2H), 4,79-4,73 (m, 1H), 4,17 (s, 3H), 2,58-2,55 (m, 1H), 2,43 (s, 3H), 2,00-1,45 (m, 8H), 1,19 (s, 9H). hLPA₁ IC₅₀ = 236 nM.

Los ejemplos de la Tabla 1 a continuación se sintetizaron de acuerdo con los procedimientos descritos anteriormente.

Tabla 1

continuación

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Ejemplo 21. Ácido (1S,3S)-3-((6-(5-(((5-fluoro-4-feniltiazol-2-il)amino)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il) -2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxílico

21A.5-fluoro-4-feniltiazol-2-amina

1-clorometil-4-fluoro-1,4-diazoniabiciclo[2.2.2]octan bis(tetrafluoroborato) (1,17 g, 3,29 mmol) se agregó a una solución agitada de 4-feniltiazol-2-amina (580 mg, 3,29 mmol) en MeCN anhidro (20 ml) a 0 °C. La mezcla de reacción se calentó hasta temperatura ambiente y se agitó durante la noche a temperatura ambiente, luego se concentró al vacío y se absorbió en CH₂Cl₂ (15 ml). Las sales de quinuclidina precipitadas se filtraron y los filtrados combinados y los enjuagues con CH₂Cl₂ se concentraron al vacío. El producto crudo residual se sometió a cromatografía (40 g de SiO₂; gradiente continuo de 0 % a 20 % de EtOAc en hexano durante 20 min) para obtener el compuesto del título (300 mg, 1,55 mmol, 46,9 % de rendimiento) como un sólido rosa claro. RMN ¹H (500 MHz, CDCl₃) δ 7,81 (d, J=7,7 Hz, 2H), 7,44 (t, J=7,7 Hz, 2H), 7,36-7,30 (m, 1H), 5,07 (br s, 2H); RMN ¹⁹F (471 MHz, CDCl₃) δ -153,50 (s, F)

21B. Ácido (1S,3S)-3-((6-(5-formil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclo-hexan-1-carboxílico

Una mezcla de Intermediario 9 (149 mg, 0,386 mmol) y NaOH acuoso 1 N (1,16 ml, 1,16 mmol) en THF (2 ml)/MeOH (1 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 18 h, luego se acidificó con TFA (0,089 ml, 1,16 mmol). La solución se purificó mediante HPLC preparativa (columna regenerada Sunfire C1830 x 100 mm; detección a 220 nm; velocidad de flujo = 40 ml/min; gradiente continuo de 0 % de B a 100 % de B durante 10 min 2 min de tiempo de retención a 100 % de B, en donde A = 90:10:0,1 H₂O:MeCN:TFA y B = 90:10:0,1 MeeCN:H₂O:TFA) para obtener el compuesto del título (sal de TFA; 125 mg, 0,273 mmol, 70,7 % de rendimiento) como un sólido blanco. LCMS, [M+H]⁺ = 345,2; RMN ¹H (500 MHz, CDCl₃) δ 10,89 (s, 1H), 8,11 (d, J=8,5 Hz, 1H), 7,35-7,30 (m, 1H), 4,79 (br s, 1H), 4,40 (s, 3H), 2,97-2,88 (m, 1H), 2,57 (s, 3H), 2,20 (br d, J=13,2 Hz, 1H), 2,09-1,62 (m, 7H).

Ejemplo 21

A una solución a temperatura ambiente de 21B (sal de TFA; 60 mg; 0,13 mmol), TFA (40 mg, 0,087 mmol), 5-fluoro-4-feniltiazol-2-amina (25 mg, 0,13 mmol) en DCM (1 ml) se agregó Ti(OiPr)₃Cl (0,071 ml, 0,262 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 h, después de lo cual NaBH(OAc)₃ (37,0 mg, 0,175 mmol) y TFA (0,03 ml) se agregaron en porciones. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 5 días, luego se concentró en N_2. El residuo se disolvió en MeCN (1 ml), se inactivó con TFA y agua, luego se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante HPLC preparativa (columna regenerada Sunfire C1830 x 100 mm; detección a 220 nm; velocidad de flujo = 40 ml/min; gradiente continuo de 0 % de B a 100 % de B durante 10 min 2 min de tiempo de retención a 100 % de B, en donde A = 90:10:0,1 H₂O:MeCN:TFA y B = 90:10:0,1 MeCN:H₂O:TFA) para obtener el compuesto del título (sal de TFA; 5 mg, 7,7 µmol, 8,8 % de rendimiento) como un aceite amarillento. LCMS, [M+H]⁺ = 523,2; RMN ¹H (500 MHz, CDCl₃) δ 8,11 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,65 (br d, J=8,8 Hz, 1H), 7,39-7,21 (m, 5H), 5,01 (s, 2H), 4,79 (br s, 1H), 4,27 (s, 3H), 2,87-2,76 (m, 1H), 2,11-1,62 (m, 11H); RMN ¹⁹F (471 MHz, CDCl₃) δ -75,90 (s, TFA), -154,94 (s, F). hLPA₁ IC₅₀ = 18 nM.

Ejemplo 22. Ácido (1S,3S)-3-((6-(5-(((2-isobutil-2H-1,2,3-triazol-4-il)amino)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxílico

22A y 22B. (2-isobutil-4-nitro-2H-1,2,3-triazol y 1-isobutil-4-nitro-1H-1,2,3-triazol

Una mezcla de 4-nitro-1,2,3-triazol (0,50 g, 4,38 mmol), 2-metil-1-propanol (0,61 ml, 6,58 mmol), Ph₃P (1,73 g, 6,58 mmol) y DIAD (1,28 ml, 6,58 mmol) en THF (10 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 18 h, luego se concentró al vacío. El aceite crudo se sometió a cromatografía (columna Gold C18 ISCO de 100g inversa; detección a 220 nm; velocidad de flujo = 60 ml/min; gradiente continuo de 0 % de B a 100 % de B durante 20 min 5 min de tiempo de retención a 100 % de B, en donde A = 95:5:0,05 H₂O:MeCN:TFA y B = 95:5:0,05 MeCN:H₂O:TFA) para obtener los dos regioisómeros separados de N-isobutil-triazol: 1-isobutil-4-nitro-1H-1,2,3-triazol 22A (0,10 g, 0,588 mmol, 13,4 % de rendimiento) ( RMN ¹H (400 MHz, CDCl₃) δ 8,28 (s, 1H), 4,28 (d, J=7,0 Hz, 2H), 2,30 (dt, J=13,6, 6,8 Hz, 1H), 1,01 (d, J=6,6 Hz, 6H)) y 2-isobutil-4-nitro-2H-1,2,3-triazol 22B (0,40 g, 2,35 mmol, 53,6 % de rendimiento) (RMN ¹H (400 MHz, CDCl₃) δ 8,18 (s, 1H), 4,33 (d, J=7,3 Hz, 2H), 2,42 (dt, J=13,7, 6,9 Hz, 1H), 0,98 (d, J=6,6 Hz, 6H)).

22C.2-isobutil-2H-1,2,3-triazol-4-amina

Una mezcla de 2-isobutil-4-nitro-2H-1,2,3-triazol (0,40 g, 2,35 mmol), y 10 % de Pd/C (0,025 g, 0,24 mmol) en MeOH (10 ml) se agitó en una atmósfera de H₂ a temperatura ambiente durante 3 h, después de lo cual se filtró el catalizador. El filtrado se concentró al vacío para obtener el compuesto del título (0,32 g, 2,283 mmol, 97 % de rendimiento) como un aceite transparente. LCMS, [M+H]⁺ = 141,2; RMN ¹H (400 MHz, CDCl₃) δ 6,96 (s, 1H), 4,02 (d, J=7,3 Hz, 2H), 3,62 (br s, 2H), 2,26 (dt, J=13,7, 6,9 Hz, 1H), 0,91 (d, J=6,8 Hz, 6H).

22D. (1S,3S)-3-((6-(5-(((2-isobutil-2H-1,2,3-triazol-4-il)amino)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de isopropilo

A una solución a temperatura ambiente de Intermediario 9 (60 mg, 0,155 mmol), 22C (33 mg, 0,23 mmol) en DCM (0,5 ml) se agregó Ti(OiPr)₃Cl (0,126 ml, 0,47 mmol). Después de 2 h de agitación a temperatura ambiente, NaBH(OAc)₃ (66 mg, 0,31 mmol) y TFA (0,05 ml) se agregaron sucesivamente a la mezcla en porciones. La mezcla de reacción se agitó durante 18 h a temperatura ambiente, después de lo cual se agregó NaHCO₃ acuoso saturado. La capa acuosa se extrajo con EtOAc (3X). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron (MgSO₄) y se concentraron al vacío. El producto crudo se sometió a cromatografía (4 g de SiO₂; gradiente continuo de 0 % a 50 % de EtOAc/hexano durante 10 min) para obtener el compuesto del título (60 mg, 0,117 mmol, 76 % de rendimiento) como un aceite amarillento claro. RMN ¹H (500 MHz, CDCl₃) δ 8,03 (d, J=8,5 Hz, 1H), 7,34-7,22 (m, 1H), 5,04 (dt, J=12,4, 6,3 Hz, 1H), 4,71 (br s, 1H), 4,62 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 4,01 (d, J=7,2 Hz, 2H), 2,84-2,74 (m, 1H), 2,56 (s, 3H), 2,24 (dquin, J=13,8, 6,9 Hz, 1H), 2,15-2,06 (m, 1H), 2,02-1,88 (m, 3H), 1,82-1,59 (m, 4H), 1,32-1,21 (m, 7H), 0,88 (d, J=6,9 Hz, 6H).

Ejemplo 22

Una mezcla de 22D (60 mg, 0,117 mmol) y NaOH acuoso 1,0 M (0,47 ml, 0,47 mmol) en THF (0,5 ml)/MeOH (0,5 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 18 h, luego se concentró al vacío. El producto crudo se purificó mediante HPLC preparativa (columna Sunfire C1830 x 100 mm; detección a 220 nm; velocidad de flujo = 40 ml/min; gradiente continuo de 30 % de B a 100 % de B durante 10 min 2 min de tiempo de retención a 100 % de B, en donde A = 90:10:0,1 H₂O:MeCN:TFA y B = 90:10:0,1 MeeCN:H₂O:TFA) para obtener el compuesto del título (sal de bis-TFA; 61 mg, 0,086 mmol, 73,0 % de rendimiento) como un aceite. LCMS, [M H]⁺ = 469,1; RMN ¹H (500 MHz, CDCl₃) δ 8,28 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,80 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,23 (s, 1H), 4,82 (br s, 1H), 4,75 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 4,01 (d, J=7,2 Hz, 2H), 2,92-2,81 (m, 1H), 2,68 (s, 3H), 2,22-2,08 (m, 2H), 2,04-1,73 (m, 6H), 1,68 (br s, 1H), 0,85 (d, J=6,9 Hz, 6H). hLPA₁ IC₅₀ = 42 nM. Ejemplo 23. Ácido (1S,3S)-3-((6-(5-(((1-isobutil-1H-1,2,3-triazol-4-il)amino)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxílico

23A.1-isobutil-4-nitro-1H-1,2,3-triazol

23B.2-isobutil-4-nitro-2H-1,2,3-triazol

Una mezcla de 4-nitro-1,2,3-triazol (0,5 g, 4,38 mmol), 2-metil-1-propanol (0,61 ml, 6,58 mmol), Ph₃P (1,73 g, 6,58 mmol) y DIAD (1,28 ml, 6,58 mmol) en THF (10 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 18 h, luego se concentró al vacío. El aceite crudo se purificó mediante HPLC preparativa (columna Gold C18 RediSep de 100g; detección a 214/254 nm; velocidad de flujo = 60 ml/min; gradiente continuo de 0 % de B a 100 % de B durante 20 min 5 min de tiempo de retención a 100 % de B, en donde A = 95:5:0,05 H₂O:MeCN:TFA y B = 95:5:0,05 MeCN:H₂O:TFA) para obtener el Ejemplo 23A (0,10 g, 0,59 mmol, 13,4 % de rendimiento); RMN ¹H (400 MHz, CDCl₃) δ 8,28 (s, 1H), 4,28 (d, J=7,0 Hz, 2H), 2,30 (dt, J=13,6, 6,8 Hz, 1H), 1,01 (d, J=6,6 Hz, 6H)) y el Ejemplo 23B ( 0,40 g, 2,35 mmol, 53,6 % de rendimiento); RMN ¹H (400 MHz, CDCl₃) δ 8,18 (s, 1H), 4,33 (d, J=7,3 Hz, 2H), 2,42 (dt, J=13,7, 6,9 Hz, 1H), 0,98 (d, J=6,6 Hz, 6H). Ambos compuestos se obtuvieron como sólidos blancos.

23C.1-isobutil-1H-1,2,3-triazol-4-amina

Una mezcla del Ejemplo 23A (0,1 g, 0,588 mmol) en MeOH (5 ml) se agitó en una atmósfera de H₂ a temperatura ambiente durante 3 h, luego se filtró. El filtrado se concentró al vacío para obtener el compuesto del título (80 mg, 0,571 mmol, 97 % de rendimiento) como un sólido blanco. RMN ¹H (400 MHz, CDCl₃) δ 6,92 (s, 1H), 4,03 (d, J=7,3 Hz, 2H), 3,72 (br s, 2H), 2,16 (dt, J=13,5, 6,9 Hz, 1H), 0,93 (d, J=6,6 Hz, 6H); [M H]⁺ = 141,3.

23D. (1S,3S)-3-((6-(5-(((1-isobutil-1H-1,2,3-triazol-4-il)amino)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de isopropilo

A una solución del Intermediario 9 (30 mg, 0,078 mmol) y del Ejemplo 23C (16,3 mg, 0,116 mmol) en DCM (0,5 ml) se agregó Ti(OiPr)₃Cl (0,07 ml, 0,233 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h, después de lo cual se agregó NaBH(OAc)₃ (33 mg, 0,155 mmol) en porciones, y luego TFA (0,1 ml) en porciones. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 h, luego se inactivó con NaHCO₃ acuoso saturado (5 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó (MgSO₄) y se concentró al vacío. El producto crudo se sometió a cromatografía (4 g de SiO₂; gradiente continuo de 0 % a 50 % de EtOAc en hexano durante 10 min) para obtener el compuesto del título (24 mg, 0,047 mmol, 60,5 % de rendimiento) como un aceite amarillo claro. [M H]⁺ = 511,1.

Ejemplo 23

Una mezcla del Ejemplo 23D (24 mg, 0,047 mmol) y NaOH acuoso 1,0 M (0,19 ml, 0,188 mmol) en THF/ MeOH (0,5 ml cada uno) se agitó a temperatura ambiente durante 18 h, luego se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante HPLC preparativa (columna Sunfire C1830 x 100 mm; detección a 220 nm; velocidad de flujo = 40 ml/min; gradiente continuo de 30% de B a 100 % de B durante 10 min 2 min de tiempo de retención a 100 % de B, en donde A = 90:10:0,1 H₂O:MeCN:TFA y B = 90:10:0,1 MeeCN:H₂O:TFA) para obtener el compuesto del título (24 mg, 0,034 mmol, 72,6 % de rendimiento) como un aceite. LCMS, [M H]⁺ = 469,1; RMN ¹H (500 MHz, CDCl₃) δ 8,14 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,92 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,37 (s, 1H), 4,91 (br s, 1H), 4,70 (s, 2H), 4,24 (s, 3H), 4,09 (d, J=7,2 Hz, 2H), 2,98-2,88 (m, 1H), 2,85 (s, 3H), 2,30-1,64 (m, 9H), 0,96 (d, J=6,6 Hz, 6H); hLPA₁ IC₅₀ = 435 nM.

Ejemplo 24. Ácido (1S,3S)-3-((6-(5-(((2-(ciclobutilmetil)-2H-1,2,3-triazol-4-il)amino)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxílico

24A.2-(ciclobutilmetil)-4-nitro-2H-1,2,3-triazol

Una mezcla de 4-nitro-1,2,3-triazol (0,43 g, 3,77 mmol), (bromometil)ciclo-butano (0,847 ml, 7,54 mmol), y K₂CO₃ (2,084 g, 15,08 mmol) en MeCN (20 ml) se agitó a 60 °C durante 18 h, luego se enfrió hasta temperatura ambiente y se absorbió en DCM (20 ml) y se filtró. El filtrado se concentró al vacío. El residuo se sometió a cromatografía (40g de SiO₂; gradiente continuo de 0 % a 30 % de EtOAc en hexano durante 20 min) para obtener el compuesto del título (222 mg, 1,22 mmol, 32,3 % de rendimiento) como un aceite transparente. RMN ¹H (400 MHz, CDCl₃) δ 8,15 (s, 1H), 4,52 (d, J=7,5 Hz, 2H), 3,18-2,85 (m, 1H), 2,23-1,76 (m, 6H).

24B.2-(ciclobutilmetil)-2H-1,2,3-triazol-4-amina

Una mezcla de 24A (0,22 g, 1,208 mmol), y 10 % Pd/C (0,013 g, 0,121 mmol) en MeOH (10 ml) se agitó en una atmósfera de H₂ a temperatura ambiente durante 3 h, después de lo cual se filtró el catalizador. El filtrado se concentró al vacío para obtener el compuesto del título (0,18 g, 1,18 mmol, 98 % de rendimiento) como un aceite amarillento claro. LCMS, [M+H]⁺ = 153,2; RMN ¹H (400 MHz, CDCl₃) δ 6,95 (s, 1H), 4,22 (d, J=7,5 Hz, 2H), 2,96-2,78 (m, 1H), 2,14-2,01 (m, 2H), 1,97-1,76 (m, 4H).

Ejemplo 24

A una solución del Intermediario 9 (25 mg, 0,065 mmol), 24B (15 mg, 0,097 mmol) en DCM (0,5 ml) se agregó Ti(OiPr)₃Cl (0,053 ml, 0,194 mmol). Después de 2 h, se agregó NaBH(OAc)₃ (27 mg, 0,13 mmol) a la mezcla en porciones, y luego TFA (0,05 ml) en porciones. La mezcla se agitó durante 18 h a temperatura ambiente, después de lo cual se agregó NaHCO₃ acuoso saturado. La capa acuosa se extrajo con EtOAc. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó (MgSO₄) y se concentró al vacío. El residuo crudo se sometió a cromatografía (4 g de SiO₂; gradiente continuo de 0 % a 100 % de EtOAc en hexano durante 10 min) para obtener el amino-triazol ciclohexil éster como un aceite transparente. Este producto crudo se agitó con NaOH acuoso 1,0 M (0,54 ml, 0,54 mmol) en THF (1 ml)/MeOH (0,2 ml) a temperatura ambiente durante 18 h, luego se concentró al vacío. El producto crudo se purificó mediante HPLC preparativa (columna Sunfire C1830 x 100 mm; detección a 220 nm; velocidad de flujo = 40 ml/min; gradiente continuo de 10 % de B a 100 % de B durante 10 min 2 min de tiempo de retención a 100 % de B, en donde A = 90:10:0,1 H₂O:MeCN:TFA y B = 90:10:0,1 MeeCN:H₂O:TFA) para obtener el compuesto del título (sal de bis-TFA; 18 mg, 0,025 mmol, 38,5 % de rendimiento) como un aceite amarillento claro. LCMS, [M H]⁺ = 481,1; RMN ¹H (500 MHz, CDCl₃) δ 8,25 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,77 (d, J=9,1 Hz, 1H), 7,19 (s, 1H), 4,82 (br s, 1H), 4,73 (s, 2H), 4,27 (s, 3H), 4,20 (d, J=7,2 Hz, 2H), 2,95-2,84 (m, 1H), 2,76 (dt, J=15,2, 7,7 Hz, 1H), 2,67 (s, 3H), 2,18-1,61 (m, 15H). hLPA₁ IC₅₀ = 33 nM.

Ejemplo 25. Ácido (1S,3S)-3-((6-(5-(((1-isobutil-1H-1,2,4-triazol-3-il)amino)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxílico

25A.1-isobutil-1H-1,2,4-triazol-3-amina

Una solución de NaOMe en MeOH se generó al disolver sodio (1,37 g, 59,5 mmol) en MeOH (100 ml). N,1-diisobutil-1H-1,2,4-triazol-3-amina (5 g, 59,5 mmol) se agregó y la solución resultante se agitó durante 10 min a 25 °C, después de lo cual se agregó 1-bromo-2-metilpropano (6,49 ml, 59,5 mmol). La solución resultante se calentó a reflujo durante 24 h, luego se enfrió hasta temperatura ambiente y se concentró al vacío. El residuo se absorbió en EtOAc (50 ml), se lavó con salmuera (2 x 50 ml), se secó (MgSO₄) y se concentró al vacío. El sólido resultante se sometió a cromatografía (80 g de SiO₂; gradiente continuo de 0 % a 10 % de MeOH/DCM durante 20 min) para obtener el compuesto del título (1,80 g, 12,8 mmol, 22 % de rendimiento) como un sólido blanco. RMN ¹H (500 MHz, CDCl₃) δ 7,66 (s, 1H), 4,80 (br s, 2H), 3,75-3,70 (m, 2H), 2,21-2,12 (m, 1H), 0,93-0,86 (m, 6H); RMN ¹³C (126 MHz, CDCl₃) δ 163,8, 142,2, 56,5, 28,4, 19,6, Ejemplo 25

A una solución del Intermediario 9 (25 mg, 0,065 mmol), 1-isobutil-1H-1,2,4-triazol-3-amina (13,60 mg, 0,097 mmol) en DCM (0,5 ml) se agregó Ti(OiPr)₃Cl (0,053 ml, 0,194 mmol). Después de 2 h, NaBH(OAc)₃ (27,4 mg, 0,129 mmol) y TFA (0,02 ml) se agregaron sucesivamente a la mezcla en porciones. La mezcla se agitó durante 18 h a temperatura ambiente, después de lo cual se agregó NaHCO₃ acuoso saturado. La capa acuosa se extrajo con EtOAc. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó (MgSO₄) y se concentró al vacío. Este producto de éster crudo se agitó con NaOH acuoso 1,0 M (0,54 ml, 0,54 mmol) en THF (1 ml)/MeOH (0,2 ml) a temperatura ambiente durante 18 h, luego se concentró al vacío. El producto crudo se purificó mediante HPLC preparativa (columna Sunfire C18 30 x 100 mm; detección a 220 nm; velocidad de flujo = 40 ml/min; gradiente continuo de 10 % de B a 100 % de B durante 10 min 2 min de tiempo de retención a 100 % de B, en donde A = 90:10:0,1 H₂O:MeCN:TFA y B = 90:10:0,1 MeeCN:H₂O:TFA) para obtener el compuesto del título (sal de bis-TFA; 24 mg, 0,034 mmol, 86 % de rendimiento) como un aceite. LCMS, [M H]⁺ = 469,0; RMN ¹H (400 MHz, CDCl₃) δ 8,37 (s, 1H), 7,94 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,71 (d, J=9,0 Hz, 1H), 4,85-4,73 (m, 3H), 4,23 (s, 3H), 3,81 (d, J=7,3 Hz, 2H), 2,93-2,85 (m, 1H), 2,71 (s, 3H), 2,23-1,60 (m, 9H), 0,92 (d, J=6,6 Hz, 6H). hLPA₁ IC₅₀ = 125 nM

Los ejemplos de la Tabla 2 a continuación se sintetizaron mediante los mismos procedimientos ejemplificados mediante los Ejemplos 21-25.

Tabla 2

continuación

continuación

continuación

continuación

Ejemplo 33. Ácido (1S,3S)-3-((6-(5-(((2-(4-fluorofenil)-2H-1,2,3-triazol-4-il)amino)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxílico

Ejemplo 33A.2-(4-fluorofenil)-4-nitro-2H-1,2,3-triazol

Una mezcla de 5-nitro-1H-1,2,3-triazol (140 mg, 1,23 mmol), ácido (4-fluorofenil)borónico (172 mg, 1,23 mmol), Cu(OAc)₂ (268 mg, 1,47 mmol), TEA (0,34 ml, 2,46 mmol), piridina (1 ml, 12,3 mmol), y tamices moleculares 4Å (1 g) en DCM (5 ml) se agitó al aire a temperatura ambiente durante 4 días, luego se filtró. El filtrado se concentró al vacío. El producto crudo se disolvió en EtOAc (5 ml), que se lavó con HCl acuoso 1 N y agua, luego se concentró al vacío. El residuo se sometió a cromatografía (24 g de SiO₂; gradiente continuo de 0 % a 30 % de EtOAc en hexano durante 10 min) para obtener el Ejemplo 33A (50 mg, 0,240 mmol, 19,6 % de rendimiento; RMN ¹H (400 MHz, CDCl₃) δ 8,71 (s, 1H), 7,83-7,75 (m, 2H), 7,36-7,28 (m, 2H); RMN ¹⁹F (377 MHz, CDCl₃) δ -108,80 (s, F)) y Ejemplo XXB (140 mg, 0,673 mmol, 54,8 % de rendimiento) ( RMN ¹H (400 MHz, CDCl₃) δ 8,37 (s, 1H), 8,16-8,08 (m, 2H), 7,28-7,19 (m, 2H); RMN ¹⁹F (377 MHz, CDCl₃) δ -110,50 (s, F)) como sólidos blancos.

33B.2-(4-fluorofenil)-2H-1,2,3-triazol-4-amina

Una mezcla de Ejemplo 33A (140 mg, 0,673 mmol) y 10 % de Pd/C (72 mg, 0,067 mmol) en AcOH (5 ml) se agitó en una atmósfera de H₂ a temperatura ambiente durante 18 h, luego se filtró. El filtrado se concentró al vacío para obtener el compuesto del título (60 mg, 0,337 mmol, 50,1 % de rendimiento) como un sólido blanco. RMN ¹H (500 MHz, MeOH-d₄) δ 7,93-7,79 (m, 2H), 7,24 (s, 1H), 7,21-7,09 (m, 2H); RMN ¹⁹F (471 MHz, MeOH-d₄) δ -119,17 (s, 1F); MS (ESI) m/z: 179,2 (M+H)⁺

Ejemplo 33

Una mezcla del Intermediario 2 (30 mg, 0,066 mmol), el Ejemplo 33B (18 mg, 0,10 mmol), y DIPEA (35l, 0,199 mmol) en DMF (1 ml) se calentó a 150 °C en un reactor de microondas durante 15 min, luego se enfrió hasta temperatura ambiente y se concentró al vacío. El residuo se agitó con NaOH acuoso 1,0 M (0,2 ml, 0,2 mmol) en THF/MeOH (0,5 ml cada uno) a temperatura ambiente durante 18 h, luego se concentró al vacío. El aceite crudo se purificó mediante HPLC preparativa (columna Sunfire C1830 x 100 mm; detección a 220 nm; velocidad de flujo = 40 ml/min; gradiente continuo de 0 % de B a 100 % de B durante 10 min 2 min de tiempo de retención a 100 % de B, en donde A = 90:10:0,1 H₂O:MeCN:TFA y B = 90:10:0,1 MeeCN:H₂O:TFA) para obtener el compuesto del título (13,9 mg, 0,018 mmol, 27,7 % de rendimiento) como un aceite transparente. LCMS, [M H]⁺ = 507,4; RMN ¹H (500 MHz, DMSO-d₆) δ 7,86 (br d, J=8,5 Hz, 1H), 7,69 (br dd, J=8,9, 4,9 Hz, 2H), 7,53 (d, J=8,5 Hz, 1H), 7,40 (s, 1H), 7,26 (br t, J=8,7 Hz, 2H), 4,90 (s, 2H), 4,80 (br s, 1H), 4,16 (s, 3H), 2,64 (br t, J=10,4 Hz, 1H), 2,45 (s, 3H), 2,09-1,99 (m, 1H), 1,91-1,44 (m, 7H); hLPA₁ IC₅₀ = 84 nM Ejemplo 41. Ácido (1S,3S)-3-((6-(5-((5-bencil-2-imino-1,3,4-oxadiazol-3(2H)-il)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxílico, sal de bis TFA

41A. Metil (1S,3S)-3-((6-(5-((5-bencil-2-imino-1,3,4-oxadiazol-3(2H)-il)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato, sal de bis TFA

Una solución del Intermediario 5 (28 mg, 0,066 mmol), 5-bencil-1,3,4-oxadiazol-2-amina (34,8 mg, 0,198 mmol) y DIEA (0,035 ml, 0,198 mmol) en DMF (1 ml) se calentó en microondas a 150 °C durante 15 min, luego se enfrió hasta temperatura ambiente y se concentró al vacío. El producto crudo se purificó mediante HPLC preparativa: Columna: Sunfire Prep C18 OBD 30 x 100 mm, partículas de 5-μm; fase móvil A: 10:90 MeCN:H₂O con 0,1 % de TFA; fase móvil B: 90:10 MeCN:H₂O con 0,1 % de TFA; gradiente: 20-100 % de B durante 12 min; flujo: 40 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron mediante evaporación centrífuga para obtener el compuesto del título (9 mg, 18%). LCMS, [M H]⁺ = 518,1. RMN ¹H (400 MHz, CD₃OD) δ 7,94 (d, J=8,4 Hz, 1H), 7,61 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,42-7,30 (m, 5H), 5,70 (s, 2H), 4,91-4,87 (m, 1H), 4,22-4,17 (m, 5H), 3,70 (s, 3H), 2,90-2,79 (m, 1H), 2,53 (s, 3H), 2,19-2,08 (m, 1H), 2,03-1,90 (m, 3H), 1,83-1,61 (m, 4H).

Ejemplo 41

A una solución del Intermediario 41A (9 mg, 0,012 mmol) en THF (1 ml)/agua (0,5 ml) se agregó LiOH acuoso 2M (0,030 ml, 0,060 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 18 h, después de lo cual el pH se ajustó con HCl acuoso 1 N a ~4 y se extrajo con EtOAc (3 x 5 ml). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron (Na₂SO₄) y se concentraron al vacío. El material crudo se purificó mediante HPLC preparativa: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 μm; fase móvil A: 5:95 MeCN:H₂O con 0,1 % de TFA; fase móvil B: 95:5 MeCN:H₂O con 0,1 % de TFA; gradiente: 12-52 % de B durante 20 min, luego mantenimiento de 5 minutos a 100 % de B; flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron mediante evaporación centrífuga para obtener el compuesto del título (4 mg, 45 %). LCMS, [M H]⁺ = 504,3. RMN ¹H (500 MHz, DMSO-d₆) δ 7,90 (d, J=8,5 Hz, 1H), 7,60 (d, J=8,9 Hz, 1H), 7,40-7,27 (m, 5H), 5,68 (s, 2H), 4,83 (br s, 1H), 4,19 (s, 2H), 4,14 (s, 3H), 2,68-2,59 (m, 1H), 2,43 (s, 3H), 2,09-2,00 (m, 1H), 1,93-1,77 (m, 3H), 1,71-1,47 (m, 4H). hLPA₁ IC₅₀ = 221 nM.

Ejemplo 42. Ácido (1S,3S)-3-((6-(5-(((5-isopropil-1,3,4-oxadiazol-2-il)amino)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxílico, sal de 2 TFA

42A. (1S,3S)-3-((6-(5-(((5-isopropil-1,3,4-oxadiazol-2-il)amino)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de metilo, sal de bis TFA

A una solución del Intermediario 8 (35 mg, 0,098 mmol), 5-isopropil-1,3,4-oxadiazol-2-amina (19 mg, 0,146 mmol) en MeOH (1,1 ml) se agregó HOAc (0,028 ml, 0,488 mmol). La reacción se agitó en un vial sellado a 65 °C durante 2 h, luego se enfrió hasta temperatura ambiente. Se agregó NaBH₃CN (12 mg, 0,195 mmol), y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h, luego se inactivó con NaHCO₃ acuoso saturado. La capa acuosa se extrajo con EtOAc. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó (Na₂SO₄) y se concentró al vacío. El material crudo se purificó mediante HPLC preparativa: Columna: Sunfire Prep C18 OBD, 30 x 100mm, partículas de 5-μm; fase móvil A: 10:90 MeCN:H₂O con 0,1 % de TFA; fase móvil B: 90:10 MeCN:H₂O con 0,1 % de TFA; gradiente: 20-100 % de B durante 12 min, luego mantenimiento de 3 minutos a 100 % de B; flujo: 40 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron mediante evaporación centrífuga para obtener el compuesto del título (10 mg, 15 %). LCMS, [M H]⁺ = 470,2. RMN ¹H (400 MHz, CD₃OD) δ 8,17-8,07 (m, 2H), 5,09-5,00 (m, 1H), 4,85-4,81 (m, 2H), 4,24 (s, 3H), 3,71 (s, 3H), 3,09 (quin, J=6,9 Hz, 1H), 2,91-2,79 (m, 4H), 2,18 (dt, J=14,0, 4,4 Hz, 1H), 2,09-1,95 (m, 3H), 1,89-1,65 (m, 4H), 1,34 (d, J=7,0 Hz, 6H).

Ejemplo 42

El compuesto del título se preparó del Intermediario 42A de acuerdo con el procedimiento descrito para la síntesis del Ejemplo 41. LCMS, [M H]⁺ = 456,1. RMN ¹H (500 MHz, DMSO-d₆) δ 7,95-7,80 (m, 1H), 7,48 (br d, J=8,5 Hz, 1H), 4,91 (br d, J=4,3 Hz, 2H), 4,76 (br s, 1H), 4,12 (s, 3H), 2,97-2,87 (m, 1H), 2,67-2,59 (m, 1H), 2,41 (br s, 3H), 2,08-1,95 (m, 1H), 1,90-1,76 (m, 3H), 1,70-1,38 (m, 4H), 1,14 (d, J=7,0 Hz, 6H). hLPA₁ IC₅₀ = 1410 nM.

Ejemplo 43. Ácido (1S,3S)-3-((6-(5-(((3-butil-1,2,4-oxadiazol-5-il)amino)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxílico, sal de bis TFA.

43A.3-butil-5-(triclorometil)-1,2,4-oxadiazol.

A una solución enfriada (0 °C) de (Z)-N'-hidroxipentanimidamida (166 mg, 1,43 mmol) y piridina (0,14 ml, 1,72 mmol) en dioxano (6 ml) se agregó por goteo cloruro de 2,2,2-tricloroacetilo (0,19 ml, 1,72 mmol). La reacción se calentó hasta temperatura ambiente y se agitó a temperatura ambiente durante 18 h, luego se filtró para retirar piridina-HCl. El filtrado se concentró al vacío. El residuo se disolvió en EtOAc y se lavó con NaHCO₃ acuoso saturado (2x), agua (2x), se secó (MgSO₄), y se concentró al vacío para obtener el compuesto del título (300 mg, 86 %) como un aceite incoloro. LCMS, [M H]⁺ = 242,9. RMN ¹H (400 MHz, CDCl₃) δ 2,87-2,77 (m, 2H), 1,86-1,72 (m, 2H), 1,44 (dq, J=15,0, 7,4 Hz, 2H), 0,97 (t, J=7,4 Hz, 3H).

43B. (1S,3S)-3-((6-(5-(((3-butil-1,2,4-oxadiazol-5-il)amino)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de metilo, sal de 2 TFA.

A una solución de (1S,3S)-3-((6-(5-(aminometil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de metilo (31 mg, 0,086 mmol) y 43A (25 mg, 0,10 mmol) en DMF (1 ml) se agregó Cs₂CO₃ (56 mg, 0,17 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 h, luego se concentró al vacío. El producto crudo se purificó mediante HPLC preparativa: Columna: Sunfire Prep C18 OBD, 30 x 100mm; partículas de 5-μm; fase móvil A: 10:90 MeCN:H₂O con 0,1 % de TFA; fase móvil B: 90:10 MeCN:H₂O con 0,1 % de TFA; gradiente: 20-100 % de B durante 12 min, luego mantenimiento de 3 minutos a 100 % de B; flujo: 40 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron mediante evaporación centrífuga para obtener el compuesto del título (26 mg, 42 %) como un sólido marrón. LCMS, [M H]⁺ = 484,3. RMN ¹H (500 MHz, CD₃OD) δ 8,06 (br d, J=8,5 Hz, 1H), 7,92 (br d, J=8,5 Hz, 1H), 4,99-4,92 (m, 3H), 4,24 (s, 3H), 3,70 (s, 3H), 2,90-2,83 (m, 1H), 2,68 (s, 3H), 2,51 (t, J=7,4 Hz, 2H), 2,19-2,09 (m, 1H), 2,06-1,91 (m, 3H), 1,85-1,53 (m, 6H), 1,40-1,28 (m, 2H), 0,92 (t, J=7,4 Hz, 3H).

Ejemplo 43

El compuesto del título se preparó del Intermediario 43B de acuerdo con el procedimiento descrito para la síntesis del Ejemplo 41. LCMS, [M H]⁺ = 470,3. RMN ¹H (500 MHz, DMSO-d₆) δ 8,48-8,42 (m, 1H), 7,85 (d, J=8,5 Hz, 1H), 7,47 (d, J=8,6 Hz, 1H), 5,02 (br d, J=5,1 Hz, 2H), 4,76 (br s, 1H), 4,10 (s, 3H), 2,70-2,61 (m, 1H), 2,47-2,39 (m, 5H), 2,07-1,97 (m, 1H), 1,90-1,77 (m, 3H), 1,70-1,48 (m, 6H), 1,37-1,27 (m, 2H), 0,88 (t, J=7,4 Hz, 3H). hLPA₁ IC₅₀ = 76 nM.

Ejemplo 44. Ácido (1S,3S)-3-((6-(5-(((3-ciclobutil-1,2,4-oxadiazol-5-il)amino)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxílico, sal de 2 TFA.

44A.(1S,3S)-3-((6-(5-(((3-ciclobutil-1,2,4-oxadiazol-5-il)amino)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de metilo.

Una solución del Intermediario 7 (20 mg, 0,056 mmol), 5-cloro-3-ciclobutil-1,2,4-oxadiazol (13 mg, 0,083 mmol) e iPr₂NEt (0,029 ml, 0,167 mmol) en EtOH (1 ml) se calentó en microondas a 80 °C durante 15 min, luego se enfrió hasta temperatura ambiente y se concentró al vacío. El producto crudo se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional. LCMS, [M H]⁺ = 482,2.

Ejemplo 44

El compuesto del título se preparó del Intermediario 44A de acuerdo con el procedimiento descrito para la síntesis del Ejemplo 41. LCMS, [M H]⁺ = 468,3. RMN ¹H (500 MHz, DMSO-d₆) δ 8,57 (br t, J=5,0 Hz, 1H), 7,85 (d, J=8,5 Hz, 1H), 7,49 (d, J=8,5 Hz, 1H), 5,06 (br d, J=4,9 Hz, 2H), 4,78 (br s, 1H), 4,12 (s, 3H), 2,69-2,60 (m, 1H), 2,41 (s, 3H), 2,25-2,12 (m, 4H), 2,06-1,95 (m, 2H), 1,91-1,74 (m, 4H), 1,68-1,44 (m, 4H). nota: no se observaron 2 de 29 protones debido a supresión de agua o interferencia del solvente. hLPA₁ IC₅₀ = 105 nM.

Los ejemplos de la Tabla 3 a continuación se sintetizaron de acuerdo con los mismos procedimientos descritos para los Ejemplos 41 a 44.

Tabla 3

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Ejemplo 73. Ácido (1S,3S)-3-((6-(5-((5-bencil-1,3,4-oxadiazol-2-il)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxílico

73A.(1S,3S)-3-((2-metil-6-(1-metil-5-((E)-2-((trimetilsilil)oxi)vinil)-1H-1,2,3-triazol-4-il)piridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de metilo

A cloruro de trifenil((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)fosfonio (1,62 g, 3,77 mmol) en THF (25 ml) a 0 °C se agregó KOtBu (338 mg, 3,01 mmol) y se agitó durante 30 min, y luego se agregó el Intermediario 9 (900 mg, 2,51 mmol) en THF (10 ml). La reacción se agitó a 0 °C durante 30 min, luego se calentó hasta temperatura ambiente y se agitó a temperatura ambiente durante 1 h, después de lo cual se inactivó mediante la adición de NH₄Cl acuoso saturado a 0C, luego se calentó hasta temperatura ambiente. Se agregó EtOAc y la capa acuosa se extrajo con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron (Na₂SO₄), y se concentraron al vacío. El producto crudo se sometió a cromatografía (80 g de SiO₂; gradiente continuo de 0 % a 80 % de EtOAc en hexanos durante 30 min y 80 % de EtOAc en hexanos durante 20 min) para obtener el compuesto del título (650 mg, 1,38 mmol, 55 % de rendimiento) como un aceite. LCMS, [M H]⁺ = 463,2.

73B. (1S,3S)-3-((2-metil-6-(1-metil-5-(2-oxoetil)-1H-1,2,3-triazol-4-il)piridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de metilo

Una solución del Intermediario 73A (600 mg, 1,269 mmol) en CH₂Cl₂ (12 ml)/TFA (1,15 ml) a 23 °C se agitó a temperatura ambiente durante 16 h, luego se concentró al vacío para obtener el compuesto del título crudo, que se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional. LCMS, [M H]⁺ = 373,1

73C. Ácido 2-(4-(5-(((1S,3S)-3-(metoxicarbonil)ciclohexil)oxi)-6-metilpiridin-2-il)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)acético

A una mezcla de Intermediario 73B crudo (43 mg, 0,115 mmol), NaH₂PO₄ (69 mg, 0,577 mmol), 2-metil-2-buteno, 2,0 M en THF (0,10 ml, 0,20 mmol), agua (0,2 ml), y t-BuOH (2 ml) a temperatura ambiente se agregó NaClO₂ (21 mg, 0,23 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 h, luego se vertió en salmuera y se extrajo con EtOAc (3X). Los extractos orgánicos combinados se secaron (Na₂SO₄) y se concentraron al vacío. El compuesto del título crudo se usó en la siguiente reacción sin purificación adicional. LCMS, [M H]⁺ = 389,1,

73D. (1S,3S)-3-((2-metil-6-(1-metil-5-(2-oxo-2-(2-(2-fenilacetil)hidrazinil) etil)-1H-1,2,3-triazol-4-il)piridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de metilo

A una solución del Intermediario 73C (16 mg, 0,041 mmol) y 2-fenilacetohidrazida (6 mg, 0,041 mmol) en MeCN (0,82 ml) se agregó HATU (19 mg, 0,049 mmol) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (7,3 µl, 0,041 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 3 h, luego se concentró al vacío. El producto crudo se sometió a cromatografía (12 g de SiO₂; gradiente continuo de 0 % a 80 % de EtOAc en hexanos durante 30 min y a 80 % de EtOAc en hexanos durante 20 min) para obtener el compuesto del título (16 mg, 0,031 mmol, 74,6 % de rendimiento). LCMS, [M H]⁺ = 521,1.

73E. (1S,3S)-3-((6-(5-((5-bencil-1,3,4-oxadiazol-2-il)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de metilo

Una mezcla de Intermediario 73D (16 mg, 0,03 mmol), DCM (1 ml) y reactivo de Burgess (15 mg, 0,06 mmol) se calentó a 40 °C durante 4 h, luego se enfrió hasta temperatura ambiente. La mezcla de reacción se concentró al vacío. El producto crudo se sometió a cromatografía (12 g de SiO₂; gradiente continuo de 0 % a 80 % de EtOAc en hexanos durante 30 min y a 80 % de EtOAc en hexanos durante 20 min) para obtener el compuesto del título crudo como un aceite (10 mg, 0,020 mmol, 64,7 % de rendimiento).

Ejemplo 73

A una solución agitada del Intermediario 73E (10 mg, 0,020 mmol) en THF (1,5 ml), MeOH (0,100 ml) y agua (0,15 ml) a temperatura ambiente se agregó LiOH acuoso 2,0 M (0,030 ml, 0,060 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 50 °C durante 1 h, después de lo cual la LCMS no mostró restos de material de inicio. La mezcla de reacción se enfrió hasta temperatura ambiente y se acidificó hasta pH 2,3 mediante adición por goteo de HCl acuoso 1 M. La mezcla se concentró al vacío, y el producto crudo se purificó mediante HPLC preparativa ((Sunfire C18 (150 x19) mm; 5m; fase móvil A: 10 mM de NH₄OAc en agua (pH: 4,5); fase móvil B: MeCN, velocidad de flujo: 15 ml/min; tiempo (min)/% de B: 0/20, 25/60; tiempo de retención: 15,19 min)) para obtener el compuesto del título (sal de TFA; 2 mg, 3,32 µmol, 16,7 % de rendimiento). LCMS, [M H]⁺ = 489,0, RMN ¹H (500 MHz, CD₃CN) δ 7,97-7,87 (m, 1H), 7,58-7,50 (m, 1H), 7,40-7,23 (m, 5H), 4,86-4,80 (m, 1H), 4,78-4,69 (m, 2H), 4,21-4,16 (m, 2H), 4,11-4,02 (m, 3H), 2,85-2,74 (m, 1H), 2,47-2,41 (m, 3H), 2,15-2,06 (m, 1H), 1,92-1,85 (m, 3H), 1,79-1,56 (m, 5H). hLPA₁ IC₅₀ = 55 nM.

Los Ejemplos de la Tabla 4 a continuación se sintetizaron con los mismos métodos ejemplificados mediante la preparación del Ejemplo 73.

Tabla 4

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Ejemplo 78. Ácido (1S,3S)-3-((6-(5-((1-bencil-1H-1,2,3-triazol-4-il)(hidroxi)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxílico

78A. (1S,3S)-3-((6-(5-(1-hidroxiprop-2-in-1-il)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de metilo

A una solución del Intermediario 8 (100 mg, 0,279 mmol) en THF (2,79 ml) a -78 °C se agregó bromuro de etinilmagnesio (558 µl de una solución de 0,5 M en THF; 0,279 mmol). La reacción se calentó a 0 °C y se agitó a 0 °C durante 30 min, luego se calentó hasta temperatura ambiente y se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. La reacción se inactivó luego mediante la adición de NH₄Cl acuoso saturado a 0C, luego se calentó hasta temperatura ambiente. Se agregó EtOAc y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (2X). Las capas orgánicas combinadas se combinaron y se lavaron con salmuera, se secaron (Na₂SO₄) y se concentraron al vacío. El producto crudo se sometió a cromatografía (12 g de SiO₂; gradiente continuo de 0 % a 80 % de EtOAc en hexanos durante 30 min y 80 % de EtOAc en hexanos durante 20 min) para obtener el compuesto del título (86 mg, 0,22 mmol, 80 % de rendimiento). RMN ¹H (400 MHz, CDCl₃) δ 9,90-9,37 (m, 1H), 8,24-8,05 (m, 1H), 7,36-7,30 (m, 1H), 5,82-5,49 (m, 1H), 4,83-4,66 (m, 1H), 4,13-4,11 (m, 3H), 3,78-3,64 (m, 3H), 2,93-2,75 (m, 1H), 2,64-2,51 (m, 3H), 2,48-2,43 (m, 1H), 2,21-2,10 (m, 1H), 2,02-1,84 (m, 3H), 1,81-1,48 (m, 4H).

78B. (1S,3S)-3-((6-(5-((1-bencil-1H-1,2,3-triazol-4-il)(hidroxi)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de metilo

A una mezcla de 78A (63 mg, 0,164 mmol) y (azidometil)benceno (144 mg, 1,081 mmol), ascorbato de sodio (1,966 mg, 0,016 mmol) en tBuOH (0,5 ml) en H₂O (0,5 ml) a temperatura ambiente se agregó CuSO₄ (3 mg, 0,016 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 40 °C durante 18 h, luego se enfrió hasta temperatura ambiente y se concentró al vacío. El producto crudo se sometió a cromatografía (12 g de SiO₂; gradiente continuo de 0 % a 80 % de EtOAc en hexanos durante 30 min y 80 % de EtOAc en hexanos durante 20 min) para obtener el compuesto del título (28 mg, 0,054 mmol, 33 % de rendimiento). RMN ¹H (400 MHz, CDCl₃) δ 9,76-9,49 (m, 1H), 8,14 (dd, J=8,7, 1,7 Hz, 1H), 7,46-7,38 (m, 1H), 7,38-7,31 (m, 2H), 7,30-7,25 (m, 2H), 7,23-7,12 (m, 2H), 6,29-6,14 (m, 1H), 5,60-5,34 (m, 2H), 4,77-4,64 (m, 1H), 4,26 (s, 3H), 3,76-3,67 (m, 3H), 2,93-2,73 (m, 1H), 2,44-2,35 (m, 3H), 2,21-2,07 (m, 1H), 2,04-1,87 (m, 3H), 1,81-1,63 (m, 4H).

Ejemplo 78

A una solución agitada de Intermediario 78B (20 mg, 0,039 mmol) en THF (1,5 ml), MeOH (0,10 ml) y agua (0,15 ml) a temperatura ambiente se agregó LiOH acuoso 2,0 M (0,058 ml, 0,116 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 50 °C durante 1 h, luego se enfrió hasta temperatura ambiente y se acidificó hasta pH 2,3 mediante adición por goteo de HCl acuoso 1M. La mezcla se concentró al vacío y el producto crudo residual se purificó mediante HPLC preparativa ((Sunfire C18 (150 x19) mm; 5m; fase móvil A: 10 mM de NH₄OAc en H₂O(pH: 4,5); fase móvil B: MeCN, velocidad de flujo: 15 ml/min; tiempo (min)/% de B: 0/20, 25/60; tiempo de retención: 15,19 min)) para obtener el compuesto del título (sal de TFA; 20 mg, 0,032 mmol, 84 % de rendimiento). LCMS, [M H]⁺ = 504,1; RMN ¹H (400 MHz, CDCl₃) δ 8,54-8,33 (m, 1H), 7,95-7,80 (m, 2H), 7,44-7,34 (m, 3H), 7,32-7,29 (m, 2H), 6,71-6,59 (m, 1H), 6,37-5,82 (m, 2H), 5,58-5,45 (m, 2H), 4,95-4,74 (m, 1H), 4,11 (d, J=1,5 Hz, 3H), 3,00-2,81 (m, 1H), 2,70-2,59 (m, 3H), 2,30-2,10 (m, 1H), 2,04-1,62 (m, 7H). ); hLPA₁ IC₅₀ = 88 nM.

Ejemplo 79. Ácido (1S,3S)-3-((6-(5-((4-butil-1H-1,2,3-triazol-1-il)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxílico

Una solución de Intermediario 6 de azida (25 mg, 0,065 mmol) y hex-1-ina (27 mg, 0,32 mmol) en 1:1 tBuOH/H₂O (0,65 ml) se trató con ascorbato de sodio (3 mg, 0,013 mmol) y CuSO_4,5H₂O (2 mg, 6,5 µmol). La mezcla de reacción se calentó a 37C durante 3 h (después de lo cual la LCMS indicó que la reacción se completó), luego se enfrió hasta temperatura ambiente y se extrajo con EtOAc (2X). Los extractos orgánicos combinados se concentraron al vacío y el producto crudo residual se agregó a una solución de LiOH acuoso (162 µl, 0,649 mmol) en THF/MeOH (0,5 ml/0,1 Mel). La reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente, después de lo cual LC/MS indicó que la reacción se completó. La reacción se filtró y se concentró al vacío. El producto crudo residual se purificó mediante HPLC preparativa (PHENOMENEX®, columna Axia 5µ C18 30x100 mm; detección a 220 nm; velocidad de flujo=40 ml/min; gradiente continuo de 0 % de B a 100 % de B durante 10 min+2 min de tiempo de retención a 100 % de B, en donde A=90:10:0,1 H2O:MeOH:TFA y B=90:10:0,1 MeeOH:H2O:TFA), para obtener el compuesto del título (18 mg, 0,038 mmol, 58,2 % de rendimiento) como un aceite.

[M H]⁺ = 454,1; RMN ¹H (500 MHz, DMSO-d₆) δ 7,95 (s, 1H), 7,89 (d, J=8,5 Hz, 1H), 7,51 (d, J=8,9 Hz, 1H), 6,17 (s, 2H), 4,80 (br s, 1H), 4,14 (s, 3H), 2,58 (br t, J=7,5 Hz, 3H), 2,49 (s, 3H), 2,03 (br d, J=13,7 Hz, 1H), 1,91-1,76 (m, 3H), 1,70-1,45 (m, 6H), 1,27 (sxt, J=7,4 Hz, 2H), 0,86 (t, J=7,3 Hz, 3H); hLPA₁ IC₅₀ = 44 nM.

Ejemplo 80. Ácido (1S,3S)-3-((6-(5-((4-bencil-1H-pirazol-1-il)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxílico

4-bencil-1H-pirazol (17 mg, 0,11 mmol) se agregó a una solución del Intermediario 5 (30 mg, 0,071 mmol) en DMF (1 ml) a temperatura ambiente, y luego se agregó NaH (6 mg de una dispersión al 60 % en aceite, 0,11 mmol). La reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente, después de lo cual la LCMS indicó que la reacción se completó. La reacción se inactivó con agua (3 ml), luego se dividió entre EtOAc y agua y se extrajo con EtOAc (3 X 8 ml). Los extractos orgánicos combinados se secaron (MgSO₄) y se concentraron al vacío. El residuo se mezcló con LiOH acuoso (177 µl, 0,709 mmol) en THF/MeOH (0,5 ml/0,1 Mel) y se agitó durante 2 h a temperatura ambiente, después de lo cual LCMS indicó que la reacción se completó. La reacción se filtró, se concentró al vacío y se purificó mediante HPLC preparativa (PHENOMENEX®, columna Axia 5µ C18 30x100 mm; detección a 220 nm; velocidad de flujo=40 ml/min; gradiente continuo de 0 % de B a 100 % de B durante 10 min+2 min de tiempo de retención a 100 % de B, en donde A=90:10:0,1 H₂O:MeOH:TFA y B=90:10:0,1 MeeOH:H₂O:TFA), para obtener el compuesto del título (11 mg, 30,4 % de rendimiento). LCMS, [M+H]⁺ = 487,0; RMN ¹H (DMSO-d₆) δ: 7,87 (br d, J=8,9 Hz, 1H), 7,65 (br d, J=6,1 Hz, 1H), 7,44-7,58 (m, 2H), 7,10-7,34 (m, 6H), 5,87 (s, 2H), 4,79 (br s, 1H), 4,34-4,52 (m, 1H), 4,14 (s, 3H), 3,72 (s, 2H), 2,59-2,72 (m, 1H), 2,33-2,43 (m, 3H), 1,21-2,18 (m, 8H); hLPA₁ IC₅₀ = 15 nM.

Los Ejemplos de la Tabla 5 a continuación se sintetizaron con los mismos métodos ejemplificados mediante la preparación de los Ejemplos, como se indicó.

Tabla 5

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Ejemplo 105. Ácido (1S,3S)-3-((6-(5-((5-(ciclopropilmetil)-2H-tetrazol-2-il)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxílico

Ejemplo 106. Ácido (1S,3S)-3-((6-(5-((5-(ciclopropilmetil)-1H-tetrazol-1-il)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxílico

105A.5-(ciclopropilmetil)-2H-tetrazol

Una mezcla de 2-ciclopropilacetonitrilo (0,225 ml, 2,47 mmol), NaN₃ (0,176 g, 2,71 mmol) y ZnBr₂ (0,555 g, 2,47 mmol) en agua (4 ml) se calentó en un reactor de microondas a 150 °C durante 3 h, luego se enfrió hasta temperatura ambiente. Se agregaron HCl acuoso 6 N y EtOAc (10 ml), y la mezcla se agitó vigorosamente hasta que se disolvieron todos los sólidos y la capa acuosa tuvo un pH de 1. La capa orgánica se separó; la capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron (Na₂SO₄) y se concentraron al vacío para obtener el compuesto del título crudo (0,16 g, 1,29 mmol, 52,3 % de rendimiento), que se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional.

Ejemplos 105 y 106

A una solución del Intermediario 4 (26 mg, 0,072 mmol) en DCM (721 µl) se agregaron 105A (18 mg, 0,14 mmol) y Ph₃P (38 mg, 0,14 mmol), y luego DIAD (29 mg, 0,14 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche, después de lo cual la LCMS indicó que la reacción se completó. La mezcla de reacción se concentró al vacío, y el residuo se sometió a cromatografía (4 g de SiO₂; gradiente continuo de 0 %-100 % de EtOAc en hexano) para obtener dos isómeros de tetrazol regioisoméricos. El isómero que se eluyó en primer lugar fue (1S,3S)-3-((6-(5-((5-(ciclopropilmetil) -2H-tetrazol-2-il)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclo-hexan-1-carboxilato de metilo (20 mg, 0,034 mmol, 47,5 % de rendimiento). El isómero que se eluyó en segundo lugar fue (1S,3S)-3-((6-(5-((5-(ciclopropilmetil)-1H-tetrazol-1-il)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de metilo (30 mg crudo), que se mezcló con Ph₃PO; este material se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional.

A una solución de (1S,3S)-3-((6-(5-((5-(ciclopropilmetil)-2H-tetrazol-2-il)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de metilo(20 mg, 0,034 mmol) en THF (0,5 ml) se agregó MeOH (0,1 ml), y luego LiOH acuoso (0,047 ml, 0,189 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche; en este momento la LCMS indicó que la reacción se completó. La reacción se filtró y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante HPLC preparativa (Phenomenex^®, columna Axia 5µ C18 30x100 mm; detección a 220 nm; velocidad de flujo=40 ml/min; gradiente continuo de 0 % de B a 100 % de B durante 10 min+2 min de tiempo de retención a 100 % de B, en donde A=90:10:0,1 H₂O:MeOH:TFA y B=90:10:0,1 MeeOH:H₂O:TFA) para obtener el Ejemplo 105 (4,6 mg, 9,9 µmol, 21 % de rendimiento). LCMS, [M+H]⁺ = 453,1. RMN ¹H (DMSO-d₆) δ: 7,70 (d, J=8,5 Hz, 1H), 7,31 (d, J=8,5 Hz, 1H), 6,36 (s, 2H), 4,61 (br s, 1H), 4,00 (s, 3H), 2,56 (d, J=7,0 Hz, 2H), 2,44-2,50 (m, 1H), 2,22 (s, 3H), 0,72-1,95 (m, 9H), 0,20-0,42 (m, 2H), -0,06-0,12 (m, 2H). LCMS, [M+H]⁺ =453,1; hLP₁ IC₅₀ = 29 nM.

A una solución de (1S,3S)-3-((6-(5-((5-(ciclopropil- metil) -1H-tetrazol-1-il)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi) ciclohexan-1-carboxilato de metilo(30 mg, con impureza de Ph₃PO) en THF (0,5 ml) se agregó MeOH (0,1 ml), y luego LiOH acuoso (0,043 ml, 0,171 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche; en este momento la LCMS indicó que la reacción se completó. La mezcla de reacción se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante HPLC preparativa (PHENOMENEX®, columna Axia 5µ C18 30x100 mm; detección a 220 nm; velocidad de flujo=40 ml/min; gradiente continuo de 0 % de B a 100 % de B durante 10 min+2 min de tiempo de retención a 100 % de B, en donde A=90:10:0,1 H₂O:MeOH:TFA y B=90:10:0,1 MeeOH:H₂O:TFA) para obtener el Ejemplo 106 (17,5 mg, 0,033 mmol, 77 % de rendimiento). LCMS, [M+H]+ = 453,3. RMN ¹H (DMSO-d₆) δ: 7,77 (d, J=8,5 Hz, 1H), 7,40 (d, J=8,5 Hz, 1H), 6,17 (s, 2H), 4,67 (br s, 1H), 4,03 (s, 3H), 2,76 (d, J=7,0 Hz, 2H), 2,50 (br t, J=10,4 Hz, 1H), 2,29 (s, 3H), 0,80-1,98 (m, 9H), 0,34 (br d, J=7,3 Hz, 2H), 0,01 (br d, J=4,6 Hz, 2H). [M+H]⁺ =453,3; hLP₁ IC₅₀ = 147 nM.

Los Ejemplos de la Tabla 7 a continuación se sintetizaron con los mismos métodos ejemplificados mediante la preparación de los Ejemplos 105 y 106.

Tabla 7

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Ejemplo 115. Ácido (1S,3S)-3-((2-metil-6-(1-metil-5-(((1-fenil-1H-1,2,4-triazol-3-il)oxi) metil)-1H-1,2,3-triazol-4-il)piridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxílico

A una solución a temperatura ambiente de Intermediario 4 (20 mg, 0,055 mmol), 1-fenil-1H-1,2,4-triazol-3-ol (9 mg, 0,055 mmol) y Ph₃P (29 mg, 0,111 mmol) en DCM (0,3 ml) se agregó DEAD (0,018 ml, 0,111 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 16 h, luego se concentró al vacío. El residuo se sometió a cromatografía (4 g de SiO₂; gradiente continuo de 0 a 100 % de EtOAc en hexanos durante 13 min, luego se mantuvo a 100 % de EtOAc durante 5 min) para obtener el producto impuro como un aceite. El producto impuro se disolvió en THF y agua (0,5 ml cada uno). Se agregó LiOH.H₂O (12 mg, 0,28 mmol) y la reacción se agitó durante 3 h a temperatura ambiente, luego se concentró al vacío. El residuo se disolvió en EtOAc (2 ml)/agua (1 ml), y se ajustó hasta pH ~ 5 con HCl acuoso 1 N y se extrajo con EtOAC (3 x 5 ml). Los extractos orgánicos combinados se secaron (MgSO₄) y se concentraron al vacío. El producto crudo se purificó mediante LC/MS preparativa: Columna: XBridge C18, 200 mm x 19 mm, partículas de 5 μm; fase móvil A: 5:95 MeCN:H₂O con 10-mM de NH₄OAc acuoso; fase móvil B: 95:5 MeCN:H₂O con 10-mM de NH₄OAc acuoso; Gradiente: mantenimiento de 0-min a 11 % de B, 11-51 % de B durante 20 min, luego mantenimiento de 6-min a 100 % de B; velocidad de flujo: 20 ml/min; temperatura de columna: 25 °C. La recolección de fracciones se activó mediante señales de MS. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron mediante evaporación centrífuga para obtener el compuesto del título (14,4 mg, pureza mediante LCMS = 99 %). LCMS, [M H]⁺ = 490,4. RMN ¹H (500 MHz, DMSO-d₆) δ 9,00 (s, 1H), 7,85 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,64 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,48 (t, J = 7,9 Hz, 3H), 7,35 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 6,04 (s, 2H), 4,76 (s, 1H), 4,15 (s, 3H), 2,61-2,56 (m, 1H), 2,33 (s, 3H), 2,01-1,42 (m, 8H). hLPA₁ IC₅₀ = 47 nM.

Ejemplo 116. Ácido (1S,3S)-3-((6-(5-(((3-ciclopropil-1,2,4-tiadiazol-5-il)oxi)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxílico

A una solución del Intermediario 12 (25 mg, 0,072 mmol) en 1,4-dioxano (1,5 ml) se agregó NaH (17 mg de una dispersión al 60 % en aceite, 0,43 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 10 min, luego se agregó 5-cloro-3-ciclopropil-1,2,4-tiadiazol (23 mg, 0,14 mmol). La reacción se agitó a 160C en un reactor de microondas durante 1 h, luego se enfrió hasta temperatura ambiente y se concentró al vacío. El producto crudo se disolvió en EtOAc (2 ml)/agua (1 ml), y se ajustó hasta pH ~ 5 con HCl acuoso 1N. La mezcla se extrajo con EtOAc (3 x 2 ml). Los extractos orgánicos combinados se secaron (MgSO₄) y se concentraron al vacío. El producto crudo se purificó mediante LC/MS preparativa: Columna: XBridge C18, 200 mm x 19 mm, partículas de 5 μm; fase móvil A: 5:95 MeCN:H₂O con 0,1 % de TFA; fase móvil B: 95:5 MeCN:H₂O con 0,1 % de TFA; Gradiente: mantenimiento de 0-min a 19 % de B, 19-59 % de B durante 20 min, luego mantenimiento de 4-min a 100 % de B; velocidad de flujo: 20 ml/min; temperatura de columna: 25 C. La recolección de fracciones se activó mediante señales de MS. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron mediante evaporación centrífuga para obtener el compuesto del título (sal de bis-TFA; 4,2 mg, 8 % de rendimiento; pureza mediante LCMS = 97 %). LCMS, [M H]⁺ = 471,2. RMN ¹H (500 MHz, DMSO-d₆) δ 7,79 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 7,45 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 5,70 (s, 2H), 4,75 (s, 1H), 3,98 (s, 3H), 2,64-2,56 (m, 1H), 2,39 (s, 3H), 2,05-1,40 (m, 9H), 0,77-0,71 (m, 2H), 0,53 (dd, J = 8,3, 2,8 Hz, 2H). hLPA₁ IC₅₀ = 405 nM.

Ejemplo 117. Ácido (1S,3S)-3-((6-(5-(((5-(ciclopropilmetil)-1,2,4-oxadiazol-3-il)oxi)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxílico

Una mezcla de BrettPhos (0,8 mg, 1,665 µmol) y NaOtBu (11 mg, 0,12 mmol) se evacuó y se volvió a llenar con N₂ (repetido 3X), después de lo cual se agregaron el Intermediario 4 (30 mg, 0,083 mmol) y 3-bromo-5-(ciclopropilmetil)-1,2,4-oxadiazol (17 mg, 0,083 mmol). Un segundo matraz se cargó con el precatalizador Pd t-Bu-BrettPhos Pd G3 (1,4 mg, 1,67 µmol), que se evacuó y se volvió a llenar con Ar (repetido 3X), después de lo cual se agregó 1,4-dioxano (0,3 ml); la mezcla se agitó a temperatura ambiente hasta volverse una solución homogénea. Esta solución precatalizadora se agregó por goteo a la mezcla de reacción, que se evacuó rápidamente y se volvió a llenar con Ar, luego se agitó a temperatura ambiente durante 18 h. Después, THF/agua (0,5 ml cada uno) y LiOH.H₂O (18 mg, 0,43 mmol) se agregaron a la mezcla de reacción, que se agitó durante 18 h a temperatura ambiente, luego se concentró al vacío. El residuo se absorbió en EtOAc (2 ml)/agua (1 ml), y se ajustó hasta pH ~5 con HCl acuoso 1N. La mezcla se extrajo con EtOAc (3 x 2 ml). Los extractos orgánicos combinados se secaron (MgSO₄) y se concentraron al vacío. El producto crudo se purificó mediante LC/MS preparativa: Columna: XBridge C18, 200 mm x 19 mm, partículas de 5 μm; fase móvil A: 5:95 MeCN:H₂O con 0,1 % de TFA; fase móvil B: 95:5 MeCN:H₂O con 0,1 % de TFA; Gradiente: mantenimiento de 0-min a 10% de B, 10-70% de B durante 20 min, luego mantenimiento de 4-min a 100 % de B; velocidad de flujo: 20 ml/min; temperatura de columna: 25C. La recolección de fracciones se activó mediante señales de MS. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron mediante evaporación centrífuga. Este material se purificó adicionalmente mediante LC/MS preparativa: Columna: XBridge C18, 200 mm x 19 mm, partículas de 5 μm; fase móvil A: 5:95 MeCN:H₂O con 10-mM de NH4OAc acuoso; fase móvil B: 95:5 MeCN:H₂O con 10-mM de NH4OAc acuoso; Gradiente: un mantenimiento de 0-min a 15 % de B, 15-40 % de B durante 35 min, luego un mantenimiento de 4-min a 100 % de B; velocidad de flujo: 20 ml/min; temperatura de columna: 25C. La recolección de fracciones se activó mediante señales de MS. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron mediante evaporación centrífuga para obtener el compuesto del título (3,4 mg, 9 % de rendimiento; pureza mediante análisis de LCMS = 100 %). Inyección 1. condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 2,1 Mem x 50 mm, partículas de 1,7 μm; fase móvil A: 5:95 MeCN:H₂O con 10 mM de NH₄OAc acuoso; fase móvil B: 95:5 MeCN:H₂O con 10 mM de NH₄OAc acuoso; Temperatura: 50 °C; gradiente: 0 % de B a 100 % de B durante 3 min, luego mantenimiento de 0,50 min a 100 % de B; flujo: 1 ml/min; detección: MS y UV (220 nm). Resultados de la inyección 1: Pureza: 100,0 %; masa observada: 469,23; tiempo de retención: 1,45 min. Inyección 2, condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 2,1 Mem x 50 mm, partículas de 1,7 μm; fase móvil A: 5:95 MeCN:H₂O con 0,1 % de TFA; fase móvil B: 95:5 MeCN:H₂O con 0,1 % de TFA; Temperatura: 50 °C; gradiente: 0 % de B a 100 % de B durante 3 min, luego mantenimiento de 0,50 min a 100 % de B; flujo: 1 ml/min; detección: MS y UV (220 nm). Resultados de la inyección 2: Pureza: 100,0 %; masa observada: 469,23; tiempo de retención: 1,67 min. LCMS, [M H]⁺ = 469,2; RMN ¹H (500 MHz, DMSO-d₆) δ 7,87 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,53 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 5,99 (s, 2H), 4,74 (s, 1H), 4,15 (s, 3H), 2,78 (d, J = 7,1 Hz, 2H), 2,49-2,44 (m, 1H), 2,31 (s, 3H), 1,90-1,48 (m, 8H), 1,11-1,03 (m, 1H), 0,53 (dd, J = 7,9, 1,8 Hz, 2H), 0,26 (d, J = 5,0 Hz, 2H). hLPA₁ IC₅₀ = 11 nM.

Los Ejemplos de la siguiente tabla 8 se sintetizaron mediante los procedimientos descritos para la preparación de los Ejemplos 1-5,

Tabla 8

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Ejemplo 135. Ácido (1S,3S)-3-((6-(5-(((1-isobutil-1H-1,2,4-triazol-3-il)oxi)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxílico

135A.1-isobutil-3-nitro-1H-1,2,4-triazol

A una suspensión de 3-nitro-1H-1,2,4-triazol (1 g, 8,77 mmol) en EtOH (20 ml) en un vial de centelleo de 40 ml se agregó NaH (0,88 g de dispersión al 60 % en aceite, 21,9 mmol). La suspensión se agitó durante 30 min, después de lo cual se agregó 1-bromo-2-metilpropano (2,86 ml, 26,3 mmol). La reacción se calentó a 70 °C durante la noche, luego se enfrió hasta temperatura ambiente y se concentró al vacío. El residuo se disolvió en EtOAc (100 ml) y se lavó con KH₂PO₄ acuoso 1,0 M, agua y salmuera, se secó (Na₂SO₄) y se concentró al vacío. El producto aceitoso amarillo crudo se sometió a cromatografía (80 g de SiO₂, gradiente continuo de 0-50 % de EtOAc en hexanos) para obtener el compuesto del título (240 mg, 1,41 mmol, 16 % de rendimiento) como un aceite transparente. RMN ¹H (500 MHz, CDCl₃) δ 8,13 (s, 1H), 4,10 (d, J=7,2 Hz, 2H), 2,41-2,28 (m, 1H), 1,01 (d, J=6,6 Hz, 6H). LCMS, [M+H]+ = 171,2.

Ejemplo 135

Una solución del Intermediario 12 (20 mg, 0,06 mmol) en THF (0,4 ml) se agregó por goteo a una mezcla de 1-isobutil-3-nitro-1H-1,2,4-triazol (15 mg, 0,09 mmol) y NaH (5 mg de una dispersión al 60 % de aceite, 0,12 mmol) en THF (0,4 ml) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 15 h, luego se concentró al vacío. El residuo se absorbió en EtOAc (2 ml)/agua (1 ml), y se ajustó hasta pH ~ 5 con HCl acuoso 1 N. La mezcla se extrajo con EtOAc (3 x 2 ml); los extractos orgánicos combinados se secaron (MgSO₄) y se concentraron al vacío. El producto crudo se purificó mediante LC/MS preparativa: Columna: XBridge C18, 200 mm x 19 mm, partículas de 5 μm; fase móvil A: 5:95 MeCN:H₂O con 0,1 % de TFA; fase móvil B: 95:5 MeCN:H₂O con 0,1 % de TFA; Gradiente: mantenimiento de 0-min a 9 % de B, 9-49 % de B durante 20 min, luego mantenimiento de 4-min a 100 % de B; velocidad de flujo: 20 ml/min; temperatura de columna: 25 °C. La recolección de fracciones se activó mediante señales de MS. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron para obtener el compuesto del título (14 mg, 0,02 mmol, 35 % de rendimiento) como un sólido blanco. LCMS, [M+H]+ = 469,9, RMN ¹H (500 MHz, DMSO-d₆) δ 8,20 (s, 1H), 7,85 (br d, J=8,5 Hz, 1H), 7,47 (br d, J=8,5 Hz, 1H), 5,90 (s, 2H), 4,79-4,74 (m, 1H), 4,12 (s, 3H), 3,80 (br d, J=6,7 Hz, 2H), 2,67-2,57 (m, 1H), 2,33 (s, 3H), 2,06-1,41 (m, 9H), 0,81 (br d, J=6,7 Hz, 6H). hLPA₁ IC₅₀ = 32 nM.

Ejemplo 136. Ácido (1S,3S)-3-((6-(5-(((2-isobutil-2H-tetrazol-5-il)oxi)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxílico

136A.2-isobutil-5-(metiltio)-2H-tetrazol; 136B.1-isobutil-5-(metiltio)-1H-tetrazol

A una solución de 5-(metiltio)-1H-tetrazol (500 mg, 4,31 mmol) en DCM (30 ml) se agregaron 2-metilpropan-1-ol (0,80 ml, 8,61 mmol), Ph₃P (2,0 g, 7,75 mmol), Et₃N (0,90 ml, 6,46 mmol), y luego DIAD (1,52 ml, 7,75 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche, luego se concentró al vacío. El residuo se sometió a cromatografía (120 g de SiO₂; gradiente continuo de 0 % a 20 % de EtOAc en hexanos durante 25 min, luego a 20 % de EtOAc/hexano durante 10 min) para obtener el Ejemplo 126A (502 mg, 2,91 mmol, 68 % de rendimiento) como un aceite incoloro: LCMS, [M+H]+ = 173,2. RMN ¹H (500 MHz, CDCl₃) δ 4,40 (d, J=7,2 Hz, 2H), 2,70 (s, 3H), 2,45-2,32 (m, 1H), 0,99 (d, J=6,6 Hz, 6H) y Ejemplo 126B (400 mg, 2,32 mmol, 54 % de rendimiento) como un aceite incoloro: LCMS, [M+H]+ = 173,2. RMN ¹H (500 MHz, CDCl₃) δ 4,04 (d, J=7,2 Hz, 2H), 2,84 (s, 3H), 2,38-2,22 (m, 1H), 0,99 (d, J=6,6 Hz, 6H).

136C.2-isobutil-5-(metilsulfonil)-2H-tetrazol

Una mezcla de 136A (150 mg, 0,87 mmol), Bu₄NBr (14 mg, 0,04 mmol), 10 % de HOAc acuoso (5 ml) y CHCl₃ (5 ml) se agitó, la solución se volvió homogénea, después de lo cual se agregó KMnO₄ (275 mg, 1,74 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 10 h a temperatura ambiente; las fases se separaron y la capa orgánica se lavó con agua (5 ml) y salmuera (5 ml), se secó (Na₂SO₄) y se concentró al vacío para obtener el compuesto del título crudo (170 mg, 96 % de rendimiento) como un aceite marrón oscuro, que se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional. RMN ¹H (500 MHz, CDCl₃) δ 4,58 (d, J=7,2 Hz, 2H), 3,41 (s, 3H), 2,54-2,35 (m, 1H), 1,03 (d, J=6,9 Hz, 7H).

Ejemplo 136

Una solución del Intermediario 12 (15 mg, 0,04 mmol), 136C (11 mg, 0,05 mmol) y NaOH (9 mg, 0,22 mmol) en MeCN (1 ml) se agitó a temperatura ambiente durante la noche, luego se concentró al vacío. El residuo se diluyó con H₂O (5 ml), y la mezcla se ajustó con HCl acuoso 1 N hasta pH ~5 y se extrajo con EtOAc (3 x 5 ml). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (2 ml), se secaron (MgSO₄) y se concentraron al vacío. El producto crudo se purificó mediante LC/MS preparativa: Columna: XBridge C18, 200 mm x 19 mm, partículas de 5 μm; fase móvil A: 5:95 MeCN:H₂O con 0,1 % de TFA; fase móvil B: 95:5 MeCN:H₂O con 0,1 % de TFA; Gradiente: mantenimiento de 0-min a 21 % de B, 21-61 % de B durante 20 min, luego mantenimiento de 4-min a 100 % de B; velocidad de flujo: 20 ml/min; temperatura de columna: 25 °C. La recolección de fracciones se activó mediante señales de MS. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron mediante evaporación centrífuga para obtener el compuesto del título (14 mg, 47 % de rendimiento) como un aceite incoloro. LCMS, [M+H]+ = 470,9. RMN ¹H (500 MHz, DMSO-d₆) δ 7,88 (d, J=8,6 Hz, 1H), 7,49 (d, J=8,7 Hz, 1H), 6,08 (s, 2H), 4,82-4,74 (m, 1H), 4,35 (d, J=7,1 Hz, 2H), 4,16 (s, 3H), 2,67-2,57 (m, 1H), 2,28 (s, 3H), 2,05-1,40 (m, 9H), 0,86 (d, J=6,6 Hz, 6H). hLPA₁ IC₅₀ = 20 nM.

Los Ejemplos de la siguiente tabla 9 se sintetizaron mediante los procedimientos descritos para la preparación de los Ejemplos, como se indicó.

Tabla 9

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continuación

Ejemplo 159. Ácido (1S,3S)-3-((2-metil-6-(1-metil-5-(((5-((E)-prop-1-en-1-il)-1,2,4-oxadiazol-3-il)amino)metil)-1H-1,2,3-triazol-4-il)piridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxílico, sal de bis TFA

A una solución del Ejemplo 162 (43 mg, 0,089 mmol; preparada de 5-(2-fluoropropil)-1,2,4-oxadiazol-3-amina de acuerdo con el procedimiento descrito para la síntesis del Ejemplo 42) en THF (2 ml)/agua (1 ml) se agregó LiOH acuoso 2 M (0,23 ml, 0,46 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 h; el pH se ajustó con HCl acuoso 1 N a ~4. La mezcla se extrajo con EtOAc (3 x 5 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (2 ml), se secaron (MgSO₄) y se concentraron al vacío. El producto crudo se purificó mediante HPLC preparativa (columna: Sunfire Prep C18 OBD 5 u 30 x 100 mm; fase móvil A: 10 % de MeCN-90 % de H₂O-0,1 % de TFA; fase móvil B: 90 % de MeCN-10 % de H₂O-0,1 % de TFA; Gradiente: 20-100 % de B durante 12 min; flujo: 40 ml/min) para obtener el compuesto del título (5,5 mg, 8,8 %). LCMS, [M+H]⁺ = 454,3. RMN ¹H (500 MHz, CD₃OD) δ 8,05 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,95 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,07-6,99 (m, 1H), 6,32 (dd, J=15,8, 1,8 Hz, 1H), 4,97 (br s, 1H), 4,74 (s, 2H), 4,25 (s, 3H), 2,87-2,79 (m, 1H), 2,72 (s, 3H), 2,18-2,10 (m, 1H), 2,07-1,93 (m, 6H), 1,86-1,65 (m, 4H).

Ejemplo 160. Ácido (3S)-3-((6-(5-(((5-isopentil-1,2,4-oxadiazol-3-il)amino)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)-1-metilciclohexan-1-carboxílico, sal de bis TFA (mezcla diastereomérica)

A una solución a 0 °C del Ejemplo 69 (32 mg, 0,044 mmol) en THF (2 ml) se agregó yodometano (5,5 µl, 0,088 mmol) y NaHMDS (1M en THF, 0,13 ml, 0,132 mmol). La reacción se agitó a 0 °C durante 2 h, luego se inactivó con NH₄Cl acuoso saturado y se extrajo con EtOAc. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó (Na₂SO₄) y se concentró al vacío. El residuo se disolvió en THF (2 ml)/agua (1 ml), y se agregó LiOH acuoso 2 M (0,098 ml, 0,195 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 h, después de lo cual se agregaron MeOH (1 ml) y LiOH acuoso 2 M (98l, 0,195 mmol). La reacción se agitó a 50 °C durante 5 h, luego se enfrió hasta temperatura ambiente. El pH se ajustó con HCl acuoso 1 N hasta pH 4; la mezcla se extrajo con EtOAc (3 x 5 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (2 ml), se secaron (MgSO₄) y se concentraron al vacío. El producto crudo se purificó mediante HPLC preparativa (columna: Sunfire Prep C18 OBD 5 u 30 x 100 mm; fase móvil A: 10 % de MeCN-90 % de H₂O- 0,1 % de TFA; fase móvil B: 90 % de MeCN- 10 % de H₂O- 0,1 % de TFA; Gradiente: 20-100 % de B durante 12 min; flujo: 40 ml/min) para obtener el compuesto del título (9 mg, 32 %). LCMS, [M+H]⁺ = 498,3. RMN ¹H (500 MHz, CD₃OD) δ 8,13-8,05 (m, 2H), 4,74-4,63 (m, 3H), 4,25 (s, 3H), 2,81-2,72 (m, 2H), 2,69 (s, 3H), 2,67-2,55 (m, 1H), 2,27-2,16 (m, 2H), 1,92-1,83 (m, 1H), 1,66-1,47 (m, 5H), 1,35-1,24 (m, 5H), 0,94 (d, J=6,3 Hz, 6H).

Ejemplo 161. Ácido (1S,3S)-3-((6-(5-(((5-isopentil-1,2,4-oxadiazol-3-il)(metil)amino)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxílico, sal de 2 TFA

161A. (1S,3S)-3-((2-metil-6-(1-metil-5-((metilamino)metil)-1H-1,2,3-triazol-4-il)piridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de metilo

A una solución del Intermediario 8 (325 mg, 0,91 mmol) en MeOH (3,6 ml) se agregó MeNH_2,HCl (92 mg, 1,36 mmol). La reacción se agitó durante 20 min a temperatura ambiente, después de lo cual se agregó NaBH₃CN (85 mg, 1,36 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h, luego se dividió entre EtOAc y K₂HPO₄ acuoso 1,0 M. La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron (Na₂SO₄) y se concentraron al vacío. El producto aceitoso amarillo viscoso se sometió a cromatografía (SiO₂; gradiente continuo de 0-10 % de MeOH/DCM) para obtener el compuesto del título (180 mg, 53 %) como un aceite transparente, incoloro. LCMS, [M+H]⁺ = 374,2. RMN ¹H (500 MHz, CD₃OD) δ 7,89 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,47 (d, J=8,5 Hz, 1H), 4,84-4,79 (m, 1H), 4,16 (s, 3H), 4,09 (s, 2H), 3,70 (s, 3H), 2,89-2,82 (m, 1H), 2,53 (s, 3H), 2,46 (s, 3H), 2,19-2,09 (m, 1H), 2,01-1,90 (m, 3H), 1,82-1,61 (m, 4H).

Ejemplo 161

Una solución del Ejemplo 161A (20 mg, 0,054 mmol), 3-cloro-5-isopentil-1,2,4-oxadiazol (18,70 mg, 0,107 mmol) e iPr₂NEt (0,028 ml, 0,161 mmol) en EtOH (1 ml) se calentó a 100 °C durante 30 min en un reactor de microondas, luego se enfrió hasta temperatura ambiente. Se agregó 3-cloro-5-isopentil-1,2,4-oxadiazol adicional (18,7 mg, 0,107 mmol) y la reacción se calentó a 100 °C durante 2 h más en un reactor de microondas, luego se enfrió hasta temperatura ambiente y se concentró al vacío. El residuo se disolvió en THF (2 ml)/agua (1 ml) y se agregó LiOH acuoso 2 M (0,135 ml, 0,270 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 h, luego a 50 °C durante 1 h, luego se enfrió hasta temperatura ambiente. El pH se ajustó con HCl acuoso 1N a ~4; la mezcla se extrajo con EtOAc (3 x 5 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron (MgSO₄) y se concentraron al vacío. El producto crudo se purificó mediante HPLC preparativa: Columna: Sunfire Prep C18 OBD 5 u 30 x 100 mm; fase móvil A: 10 % de MeCN-90 % de H₂O- 0,1 % de TFA; fase móvil B: 90 % de MeCN- 10 % de H₂O- 0,1 % de TFA; Gradiente: 20-100 % de B durante 12 min; flujo: 40 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron mediante evaporación centrífuga para obtener el compuesto del título (7,5 mg, 18 %). LCMS, [M+H]⁺ = 498,4. RMN ¹H (500 MHz, CD₃OD) δ 8,04-7,97 (m, 2H), 5,05-4,96 (m, 3H), 4,19 (s, 3H), 2,98 (s, 3H), 2,87-2,77 (m, 3H), 2,70 (s, 3H), 2,19-2,10 (m, 1H), 2,08-1,92 (m, 3H), 1,88-1,57 (m, 7H), 0,96 (d, J=6,3 Hz, 6H).

Ejemplo 162. Ácido (1S,3S)-3-((6-(5-(((5-(2-fluoropropil)-1,2,4-oxadiazol-3-il)amino) metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxílico, sal de 2 TFA (mezcla diastereomérica)

162A. (1S,3S)-3-((6-(5-(hidroximetil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de trecbutilo

Una mezcla del Intermediario 12 (250 mg, 0,72 mmol) y terc-butil (Z)-N,N'-diisopropil carbamimidato (434 mg, 2,17 mmol) en t-BuOH/THF (5 ml cada uno) se agitó a temperatura ambiente durante 18 h. La mezcla de reacción se filtró y el filtrado se concentró al vacío. El producto crudo se sometió a cromatografía (24 g de SiO₂; gradiente continuo de 0-100 % de EtOAc en hexano) para obtener el compuesto del título (210 mg, 72 %) como un sólido blanco. LCMS, [M+H]⁺ = 403,1.

162B. (1S,3S)-3-((6-(5-formil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de terc-butilo

A la solución de 162A (0,21 g, 0,522 mmol) en DCM (2,6 ml) se agregó NaHCO₃ (219 mg, 2,61 mmol) y periodinano de Dess-Martin (0,266 g, 0,63 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 h, luego se filtró a través de Celite^®; la torta de filtro se lavó con EtOAc. Los filtrados combinados se lavaron con NaHCO₃ acuoso saturado, agua y salmuera, se secaron (Na₂SO₄) y se concentraron al vacío. El producto crudo se sometió a cromatografía (12 g de SiO₂; gradiente continuo de 0-100 % de EtOAc en hexanos) para obtener el compuesto del título (180 mg, 86 %) como un sólido blanco. LCMS, [M+H]⁺ = 401,1,

162C. (1S,3S)-3-((6-(5-(((5-(2-fluoropropil)-1,2,4-oxadiazol-3-il)amino) metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de trec-butilo(mezcla diastereomérica)

Un tubo sellado que contenía una solución de 162B (30 mg, 0,075 mmol), 5-(2-fluoro-propil)-1,2,4-oxadiazol-3-amina (11 mg, 0,075 mmol, preparada de 5-alil-1,2,4-oxadiazol-3-amina de acuerdo con el procedimiento descrito para la síntesis de 5-(3-fluoro-butil)-1,2,4-oxadiazol-3-amina) y HOAc (21l, 0,38 mmol) en MeOH (1,5 ml) se agitó a 65 °C durante 2 h. La reacción se enfrió hasta temperatura ambiente; se agregó NaBH₃CN (9,4 mg, 0,15 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h, luego se agregó NaHCO₃ acuoso saturado. La mezcla se extrajo con EtOAc. La capa orgánica se secó (Na₂SO₄) y se concentró al vacío. El producto crudo se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional.

Ejemplo 162

Una solución de 162C en DCM (1 ml) y TFA (0,40 ml, 5,2 mmol) se agitó a temperatura ambiente durante 18 h, luego se concentró al vacío. El material crudo se purificó mediante LC/MS preparativa (Columna: XBridge C18, 200 mm x 19 mm, partículas de 5 μm; fase móvil A: 5:95 MeCN:H₂O con 0,1 % de TFA; fase móvil B: 95:5 MeCN:H₂O con 0,1 % de TFA; Gradiente: mantenimiento de 0-min a 15% de B, 15-55% de B durante 20 min, luego mantenimiento de 4-min a 100 % de B; velocidad de flujo: 20 ml/min; temperatura de columna: 25 ℃) para obtener el compuesto del título (2 mg, 4 %). LCMS, [M+H]⁺ = 474,2. RMN ¹H (500 MHz, DMSO-d₆) δ 7,85 (br d, J=8,2 Hz, 1H), 7,49 (br d, J=8,5 Hz, 1H), 5,14-4,95 (m, 1H), 4,81-4,75 (m, 3H), 4,10 (s, 3H), 3,19-3,04 (m, 2H), 2,66-2,59 (m, 1H), 2,42 (s, 3H), 2,05-1,96 (m, 1H), 1,91-1,74 (m, 3H), 1,68-1,44 (m, 4H), 1,41-1,31 (m, 3H).

Ejemplo 163. Ácido (1S,3S)-3-((6-(5-(((5-(3-(fluorometil)ciclobutil)-1,2,4-oxadiazol-3-il)amino) metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi) ciclohexan-1-carboxílico, sal de 2 TFA (diastereómero A)

Ejemplo 164. Ácido (1S,3S)-3-((6-(5-(((5-(3-(fluorometil)ciclobutil)-1,2,4-oxadiazol-3-il)amino) metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi) ciclohexan-1-carboxílico, sal de 2 TFA (diastereómero B)

163A.5-(3-((4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)metil)ciclobutil)-1,2,4-oxadiazol-3-amina

Un matraz que contenía dímero de cloro(1,5-ciclooctadien)iridio(I) (15 mg, 0,022 mmol) y 1,3-bis(difenilfosfino)propano (18 mg, 0,044 mmol) se purgó con Ar. Se agregaron DCM (5 ml), pinacol borano (1,0 ml, 7,34 mmol), y 5-(3-metilenciclobutil)-1,2,4-oxadiazol-3-amina (222 mg, 1,47 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 días, luego se inactivó con agua; la mezcla se agitó durante 30 min a temperatura ambiente hasta que cesó la evolución del gas.

La capa acuosa se extrajo con DCM (2x). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron (Na₂SO₄) y se concentraron al vacío. El producto crudo se sometió a cromatografía (12 g de SiO₂, gradiente continuo de 0-100 % de EtOAc en hexanos) para obtener el compuesto del título (80 mg, 20%) como un sólido marrón. LCMS, [M+H]⁺ = 280,0.

163B. (1S,3S)-3-((2-metil-6-(1-metil-5-(((5-(3-((4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaboro-lan-2-il)metil)ciclobutil)-1,2,4-oxadiazol 3-il)amino)metil)-1H-1,2,3-triazol-4-il)piridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de metilo (mezcla diastereomérica)

163B (40 mg, 51 %) se preparó de 163A de acuerdo con el procedimiento descrito para la síntesis del Ejemplo 42. LCMS, [M+H]⁺ = 622,3.

163C. (1S,3S)-3-((6-(5-(((5-(3-(hidroximetil)ciclobutil)-1,2,4-oxadiazol-3-il)amino) metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de metilo (mezcla diastereomérica)

A una solución a 0 °C de 163B (40 mg, 0,064 mmol) en THF (1 ml) se agregó una solución de perborato de sodio tetrahidratado (39,6 mg, 0,257 mmol) en agua (1 ml). La reacción se calentó hasta temperatura ambiente y se agitó a temperatura ambiente durante 18 h, luego se inactivó con agua. La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron (MgSO₄) y se concentraron al vacío para obtener el compuesto del título (29 mg, 88 %) como un sólido incoloro. LCMS, [M+H]⁺ = 512,5. Este material se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional.

163D. (1S,3S)-3-((6-(5-(((5-(3-(fluorometil)ciclobutil)-1,2,4-oxadiazol-3-il)amino)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi) ciclohexan-1-carboxilato de metilo, sal de 2 TFA (mezcla diastereomérica)

A una solución a 0 °C de 163C (29 mg, 0,057 mmol), DMAP (0,69 mg, 5,67 µmol) y TEA (17 µl, 0,125 mmol) en DCM (0,57 ml) se agregó cloruro de p-tolensulfonilo (13 mg, 0,068 mmol). La solución de reacción se calentó hasta temperatura ambiente y se agitó a temperatura ambiente durante 18 h, luego se concentró al vacío. El residuo se disolvió en Bu₄NF (1,0 M en THF, 0,57 ml, 0,57 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 días, luego se dividió entre agua y EtOAc. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó (Na₂SO₄) y se concentró al vacío. El producto crudo se purificó mediante HPLC preparativa (columna: Sunfire Prep C18 OBD 5 u 30 x 100 mm; fase móvil A: 10 % de MeCN- 90 % de H₂O- 0,1 % de TFA; fase móvil B: 90 % de MeCN- 10 % de H₂O- 0,1 % de TFA; Gradiente: 20-100 % de B durante 12 min; flujo: 40 ml/min.) para obtener el compuesto del título (18 mg, 43 %) como un sólido incoloro. LCMS, [M+H]⁺ = 514,2.

Ejemplos 163 y 164

Los Ejemplos 163 y 164 se prepararon del Intermediario 163D de acuerdo con el procedimiento descrito para la síntesis del Ejemplo 41. La mezcla diastereomérica (12 mg) se separó mediante cromatografía preparativa: Columna: quiral AD 25 X 3 cm ID, 5 μm; velocidad de flujo: 85,0 ml/min; fase móvil: 65/35 CO₂/MeOH con 0,1 % de DEA; longitud de onda del detector: 256 nm; inyección: 1000 ul de inyección de muestra de 12 mg en 12 ml para obtener dos diastereómeros. Ejemplo 163. Isómero que se eluyó en primer lugar (diastereómero A): (3,1 mg, 18 %). LCMS, [M+H]⁺ = 500,3. RMN ¹H (500 MHz, DMSO-d₆) δ 7,86 (d, J=8,6 Hz, 1H), 7,48 (d, J=8,6 Hz, 1H), 7,15 (br t, J=5,8 Hz, 1H), 4,84-4,72 (m, 3H), 4,42-4,28 (m, 2H), 4,11 (s, 3H), 3,66-3,46 (m, 1H), 2,77-2,63 (m, 2H), 2,48-2,32 (m, 5H), 2,15-1,98 (m, 3H), 1,93-1,77 (m, 3H), 1,70-1,48 (m, 4H).

Ejemplo 164. Isómero que se eluyó en segundo lugar (diastereómero B): (2,3 mg, 13 %). LCMS, [M+H]⁺ = 500,2. RMN ¹H (500 MHz, DMSO-d₆) δ 7,87 (d, J=8,6 Hz, 1H), 7,49 (d, J=8,6 Hz, 1H), 7,18 (br t, J=5,7 Hz, 1H), 4,84-4,75 (m, 3H), 4,56-4,43 (m, 2H), 4,12 (s, 3H), 3,69-3,59 (m, 1H), 2,78-2,63 (m, 2H), 2,46 (s, 3H), 2,42-2,22 (m, 4H), 2,07-1,99 (m, 1H), 1,94-1,76 (m, 3H), 1,73-1,49 (m, 4H).

Ejemplo 207. Ácido (1S,3S)-3-((2-metil-6-(1-metil-5-((5-fenil-1H-1,2,4-triazol-1-il) metil)-1H-1,2,3-triazol-4-il)piridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxílico, sal de 2 TFA

Ejemplo 208. Ácido (1S,3S)-3-((2-metil-6-(1-metil-5-((3-fenil-1H-1,2,4-triazol-1-il) metil)-1H-1,2,3-triazol-4-il)piridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxílico, sal de 2 TFA

207A y 208A

A una solución de 3-fenil-1H-1,2,4-triazol (27 mg, 0,18 mmol) en THF (1,40 ml) se agregó NaHMDS 1,0 M en THF (142 l; 0,14 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 h, después de lo cual se agregó Intermediario 5 (60 mg, 0,14 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 h (se convirtió en una suspensión), luego se inactivó con NH₄Cl acuoso saturado. La mezcla se dividió entre EtOAc y agua; la capa acuosa se extrajo con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se secaron (Na₂SO₄) y se concentraron al vacío. El residuo transparente incoloro se purificó mediante cromatografía de fase inversa (Sunfire, columna 5µ C18 OBD 30x100 mm; detección a 220 nm; velocidad de flujo=40 ml/min; gradiente continuo de 30 % de B a 100 % de B durante 10 min 5 min de tiempo de retención a 100 % de B, en donde A=90:10:0,1 H₂O:MeOH:TFA y B=90:10:0,1 MeeOH:H₂O:TFA). El regiosómero que se eluyó en primer lugar fue 207A, 2 TFA (11,4 mg, 11 %, residuo transparente, incoloro). El regiosómero que se eluyó en segundo lugar fue 208A, 2 TFA (43 mg, 43%, residuo transparente, incoloro).

Ejemplo 207

Una solución de 207A (11,4 mg, 0,016 mmol) en THF (0,10 ml) y LiOH acuoso 1,0 M (80 µl, 0,080 mmol) se agitaron a temperatura ambiente durante 16 h, luego se concentraron al vacío. El residuo se disolvió en 1:1 MeCN/agua y se acidificó con TFA. La purificación mediante cromatografía de fase inversa (Sunfire, columna 5µ C18 OBD 30x100 mm; detección a 220 nm; velocidad de flujo=40 ml/min; gradiente continuo de 10 % de B a 100 % de B durante 10 min 2 min de tiempo de retención a 100 % de B, en donde A=90:10:0,1 H₂O:MeCN:TFA y B=90:10:0,1 MeeCN:H₂O:TFA) produjo el compuesto del título (1,5 mg, 13 %) como un sólido blanco. LCMS, [M+H]⁺ = 474,2. RMN ¹H (400 MHz, CDCl₃) δ 8,06 (s, 1H), 7,87 (d, J=8,6 Hz, 1H), 7,61-7,56 (m, 2H), 7,54-7,49 (m, 1H), 7,48-7,39 (m, 3H), 6,21-6,09 (m, 2H), 4,78-4,71 (m, 1H), 4,07 (s, 3H), 2,94-2,77 (m, 1H), 2,28 (s, 3H), 2,14-1,61 (m, 8H). Se encontraron 26 de 27 protones, falta el protón de ácido carboxílico. hLPA₁ IC₅₀ = 213 nM.

Ejemplo 208

Una solución de 208A (43,4 mg, 0,061 mmol) en THF (0,40 ml) y LiOH 1,0 M (0,20 ml, 0,20 mmol) se agitó a temperatura ambiente durante 16 h, luego se concentró al vacío. El residuo se disolvió en 1:1 MeCN/agua y se acidificó con TFA. La purificación mediante cromatografía de fase inversa (Sunfire, columna 5µ C18 OBD 30x100 mm; detección a 220 nm; velocidad de flujo=40 ml/min; gradiente continuo de 10 % de B a 100 % de B durante 10 min 2 min de tiempo de retención a 100 % de B, en donde A=90:10:0,1 H₂O:MeCN:TFA y B=90:10:0,1 MeeCN:H₂O:TFA) produjo el compuesto del título (24,2 mg, 57 %) como un sólido blanco. LCMS, [M+H]⁺ = 474,2. RMN ¹H (500 MHz, DMSO-d₆) δ 8,72 (s, 1H), 7,98-7,94 (m, 2H), 7,89 (d, J=8,5 Hz, 1H), 7,51 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,48-7,38 (m, 3H), 6,13-6,01 (m, 2H), 4,82-4,77 (m, 1H), 4,30 (s, 3H), 2,71-2,60 (m, 1H), 2,54 (s, 3H), 2,08-1,98 (m, 1H), 1,92-1,74 (m, 3H), 1,71-1,46 (m, 4H). Se encontraron 26 de 27 protones, falta el protón de ácido carboxílico. hLPA₁ IC₅₀ = 370 nM.

Los Ejemplos de la siguiente tabla 10 se sintetizaron de acuerdo con los procedimientos descritos para la preparación de los Ejemplos, como se indicó.

Tabla 10

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Ejemplo 211. Ácido (1S,3S)-3-((6-(5-(((1-(3,5-difluorofenil)-1H-1,2,4-triazol-3-il)amino)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxílico

211A.1-(3,5-difluorofenil)-3-nitro-1H-1,2,4-triazol

Una mezcla de 3-nitro-1H-1,2,4-triazol (570 mg, 5,00 mmol), ácido (3,5-difluorofenil)borónico (789 mg, 5,00 mmol), Cu(OAc)₂ (1089 mg, 6,00 mmol), piridina (4,0 ml, 50,0 mmol), y tamices moleculares 4A (1 g) en DCM (5 ml) se agitó al aire a temperatura ambiente durante 4 días, luego se filtró. El filtrado se concentró al vacío. El residuo se disolvió en EtOAc (5 ml) y se lavó con HCl acuoso 1 N y agua; la capa orgánica se concentró al vacío. El residuo se sometió a cromatografía (12 g de SiO₂; gradiente continuo de 0 % a 50 % de EtOAc en hexano durante 10 min) para obtener el compuesto del título (300 mg, 1,33 mmol, 26,5 % de rendimiento) como un sólido blanco. RMN ¹H (400 MHz, CDCl₃) δ 8,70 (s, 1H), 7,45-7,35 (m, 2H), 7,01 (tt, J=8,5, 2,2 Hz, 1H); RMN ¹⁹F (377 MHz, CDCl₃) δ -104,41 (s, F).

211B.1-(3,5-difluorofenil)-1H-1,2,4-triazol-3-amina

Una mezcla del Ejemplo 211A (300 mg, 1,33 mmol) y 10 % de Pd-C (14 mg, 0,013 mmol) en MeOH (10 ml) se agitó en una atmósfera de H₂ a 50 psi (0,06 atm) durante 18 h, luego se filtró y se concentró al vacío para obtener el compuesto del título (250 mg, 1,27 mmol, 96 % de rendimiento) como un sólido blanco. RMN ¹H (400 MHz, CD₃CN) δ 8,42 (s, 1H), 7,44-7,22 (m, 2H), 6,90 (tt, J=9,2, 2,4 Hz, 1H), 5,38-3,45 (m, 2H); RMN ¹⁹F (377 MHz, CD₃CN) δ -109,53 (s, F); ESI-MS m/z 197,2 [M+1]⁺.

Ejemplo 211

Una mezcla del Intermediario 2 (31 mg, 0,069 mmol), el Ejemplo 211B (27 mg, 0,137 mmol) y DIPEA (0,04 ml, 0,206 mmol) en DMF (1 ml) se calentó en un reactor de microondas a 150 °C durante 15 min, luego se enfrió hasta temperatura ambiente y se concentró al vacío. Una mezcla del producto crudo con NaOH acuoso 1 N (0,3 ml) en THF (1 ml) y MeOH (0,5 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 3 días, luego se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante HPLC preparativa (columna Sunfire C1830 x 100 mm; detección a 220 nm; velocidad de flujo = 40 ml/min; gradiente continuo de 0 % de B a 100 % de B durante 10 min 2 min de tiempo de retención a 100 % de B, en donde A = 90:10:0,1 H₂O:MeCN:TFA y B = 90:10:0,1 MeCN:H₂O:TFA) para obtener el compuesto del título (27 mg, 0,036 mmol, 51,7 % de rendimiento) como un aceite. LCMS, [M H]⁺ = 525,2; RMN ¹H (400 MHz, CDCl₃) δ 8,29 (s, 1H), 7,99 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,39 (d, J=8,6 Hz, 1H), 7,11 (dd, J=7,7, 2,2 Hz, 2H), 6,78 (tt, J=8,6, 2,3 Hz, 1H), 4,78 (s, 2H), 4,73 (br s, 1H), 4,30 (s, 3H), 2,94-2,85 (m, 1H), 2,65 (s, 3H), 2,17-1,60 (m, 8H); RMN ¹⁹F (377 MHz, CDCl₃) δ -106,31 (s, F); hLPA₁ IC₅₀ = 45 nM.

Ejemplo 212. Ácido (1S,3S)-3-((6-(5-(((5-(ciclopropoximetil)-1,2,4-oxadiazol-3-il)amino)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxílico

212A. Ácido 2-ciclopropoxiacético

A una solución a 0 °C de ciclopropanol (1,10 ml, 17,3 mmol) en THF (5 ml) se agregó NaH (1,44 g de una dispersión al 60 % en aceite, 36,0 mmol). La reacción se agitó durante 2 h a temperatura ambiente, después de lo cual se agregó BrCH₂CO₂H (2,0 g, 14,4 mmol) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 20 h, después de lo cual se formó un sólido blanco. Se agregó agua (30 ml) cuidadosamente y la mezcla se agitó hasta que se obtuvo una solución transparente. La solución se extrajo con Et₂O (2X). La capa acuosa se acidificó con HCl concentrado (1,80 ml, 21,6 mmol) hasta pH = 1 y se extrajo con Et₂O (3X 5 ml). Los extractos orgánicos combinados se secaron (MgSO₄) y se concentraron al vacío para obtener el compuesto del título (1,30 g, 11,2 mmol, 78 % de rendimiento) como un líquido amarillo claro. RMN ¹H (400 MHz, CDCl₃) δ 4,17 (s, 2H), 3,56-3,50 (m, 1H), 0,72-0,67 (m, 2H), 0,58-0,51 (m, 2H).

212B. Cloruro de 2-ciclopropoxiacetilo

A una solución del Ejemplo 212A (1,30 g, 11,2 mmol) en DCM (5 ml) a temperatura ambiente se agregó DMF (43L, 0,56 mmol), y luego cloruro de oxalilo 2,0 M en DCM (5,6 ml, 11,2 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h para obtener el compuesto del título en DCM, que se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional. 212C. N-cian-2-ciclopropoxiacetamida

A una suspensión a 0 °C de cianamida de hidrógeno de sodio (2,85 g, 44,6 mmol) en THF (22,3 ml) se agregó por goteo una solución del Ejemplo 212B (1,50 g, 11,2 mmol) en DCM (5 ml). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche, luego se concentró al vacío. El residuo sólido amarillo se disolvió en agua (20 ml) y el pH de la solución se ajustó a ~6,5 con 10 % de HC1 acuoso. La solución acuosa se extrajo con EtOAc (2 X 20 ml). La capa acuosa se acidificó hasta pH 1,5 con 10 % de HCI acuoso y se extrajo con CH₂Cl₂ (3 X 10 ml). Los extractos combinados de CH₂Cl₂ se secaron (Na₂SO₄) y se concentraron al vacío para obtener el compuesto del título (0,32 g, 2,28 mmol, 20,5 % de rendimiento) como un aceite amarillo claro, que se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional.

212D.5-(ciclopropoximetil)-1,2,4-oxadiazol-3-amina

A una solución del Ejemplo 212C (320 mg, 2,283 mmol) en EtOH (10 ml) se agregaron NH₂OH.HCl (238 mg, 3,43 mmol) y piridina (0,74 ml, 9,13 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 días, luego se concentró al vacío. El residuo sólido amarillo se disolvió en agua (10 ml) y se extrajo con DCM (5 x 5 ml). Los extractos orgánicos combinados se secaron (Na₂SO₄) y se concentraron al vacío. El aceite crudo se purificó mediante HPLC preparativa (columna C1830 x 100 mm; detección a 220 nm; velocidad de flujo = 40 ml/min; gradiente continuo de 30 % de B a 100 % de B durante 10 min 2 min de tiempo de retención a 100 % de B, en donde A = 90:10:0,1 H₂O:MeCN:TFA y B = 90:10:0,1 MeCN:H₂O:TFA) al compuesto del título (28 mg, 0,104 mmol, 4,56 % de rendimiento) como un sólido blanco (sal de TFA). RMN ¹H (500 MHz, CDCl₃) δ 4,64 (s, 4H), 3,55 (tt, J=5,9, 2,9 Hz, 1H), 0,76-0,67 (m, 2H), 0,60-0,48 (m, 2H); LCMS, [M+H]⁺ = 156,1,

Ejemplo 212

Una solución de Intermediario 8 (30 mg, 0,084 mmol), Ejemplo 212D (28 mg, 0,10 mmol) y AcOH (17l, 0,29 mmol) en MeOH (1 ml) se agitó a 65 °C durante 2 h, luego se enfrió hasta temperatura ambiente, después de lo cual se agregó NaBH₃CN (10,52 mg, 0,167 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 h, luego se concentró al vacío. El residuo se agitó con NaOH acuoso 1 N (0,2 ml) en THF (1 ml) a temperatura ambiente durante 2 h, luego se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante HPLC preparativa (columna Sunfire C1830 x 100 mm; detección a 220 nm; velocidad de flujo = 40 ml/min; gradiente continuo de 0 % de B a 100 % de B durante 10 min 2 min de tiempo de retención a 100 % de B, en donde A = 90:10:0,1 H₂O:MeCN:TFA y B = 90:10:0,1 MeCN:H₂O:TFA) para obtener el compuesto del título (31 mg, 0,043 mmol, 51,5 % de rendimiento) como un aceite transparente. RMN ¹H (500 MHz, CDCl₃) δ 8,07 (d, J=8,5 Hz, 1H), 7,82 (br d, J=8,8 Hz, 1H), 4,86 (br s, 1H), 4,73 (s, 2H), 4,63 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 3,52 (tt, J=6,0, 2,8 Hz, 1H), 2,90 (br s, 1H), 2,76 (s, 3H), 2,20-1,64 (m, 8H), 0,72-0,65 (m, 2H), 0,58-0,52 (m, 2H); LCMS, [M H]⁺ = 483,3; hLPA₁ IC₅₀ = 34 nM.

Los siguientes Ejemplos se prepararon de acuerdo con los procedimientos descritos previamente para la síntesis del Ejemplo 212,

Tabla 11

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Ejemplo 215. Ácido (1S,3S)-3-((6-(5-(((5-((R)-1-metoxipropil)-1,2,4-oxadiazol-3-il)amino)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxílico

215A. (R)-5-(1-metoxipropil)-1,2,4-oxadiazol-3-amina

215B. (S)-5-(1-metoxipropil)-1,2,4-oxadiazol-3-amina

Los enantiómeros del Ejemplo 215A (213 mg, 1,36 mmol, 42,6 % de rendimiento, pico que se eluyó en primer lugar) y 215B (234 mg, 1,489 mmol, 46,8 % de rendimiento, pico que se eluyó en segundo lugar) se obtuvieron de (±)-5-(1-metoxipropil)-1,2,4-oxadiazol-3-amina (500 mg, 3,18 mmol) mediante separación por SFC quiral (Instrumento: SFC preparativa de solución de PIC-200; columna: Chiralpak AD-H, 21 x 250 mm, 5m; fase móvil: 10 % de MeOH / 90 % de CO₂; condiciones de flujo: 45 ml/min, 150 Bar, 40 °C; longitud de onda del detector: 226 nm; detalles de inyección: 0,4 ml de ~25 mg/ml en MeOH). La estereoquímica absoluta de estos 2 compuestos se asignó de manera arbitraria.

215A: [α]²⁴ _{(589 nm)}: 92° (1 %, MeOH); RMN ¹H (400 MHz, CDCl₃) δ 4,44 (br s, 2H), 4,30 (t, J=6,6 Hz, 1H), 3,44 (s, 3H), 2,02-1,87 (m, 2H), 1,00 (t, J=7,5 Hz, 3H).

215B: [α]²⁴ _{(589 nm)}: -91° (1 %, MeOH); RMN ¹H (400 MHz, CDCl₃) δ 4,44 (br s, 2H), 4,30 (t, J=6,6 Hz, 1H), 3,44 (s, 3H), 2,02-1,87 (m, 2H), 1,00 (t, J=7,5 Hz, 3H).

Ejemplo 215

Una solución del Intermediario 8 (30 mg, 0,084 mmol), Ejemplo 215A (20 mg, 0,13 mmol), y AcOH (14l, 0,25 mmol) en MeOH (1 ml) se agitó a 65C durante 2 h, luego se enfrió hasta temperatura ambiente. Se agregó NaBH₃CN (10,5 mg, 0,167 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 h, luego se concentró al vacío. El residuo se agregó a NaOH acuoso 1 N (0,2 ml) en THF (1 ml); la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h, luego se concentró al vacío. El producto crudo se purificó mediante HPLC preparativa (columna Sunfire C1830 x 100 mm; detección a 220 nm; velocidad de flujo = 40 ml/min; gradiente continuo de 0 % de B a 100 % de B durante 10 min 2 min de tiempo de retención a 100 % de B, en donde A = 90:10:0,1 H₂O:MeCN:TFA y B = 90:10:0,1 MeCN:H₂O:TFA) para obtener el compuesto del título (30 mg, 0,042 mmol, 49,7 % de rendimiento) como un aceite transparente. La estereoquímica absoluta del centro quiral de oxadiazol no se determinó, y se asignó de manera arbitraria. LCMS, [M H]⁺ = 486,3; RMN ¹H (500 MHz, CDCl₃) δ 8,10 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,88 (d, J=8,8 Hz, 1H), 4,87 (br s, 1H), 4,73 (s, 2H), 4,32-4,22 (m, 4H), 3,39 (s, 3H), 2,92-2,84 (m, 1H), 2,77 (s, 3H), 2,19-2,09 (m, 1H), 2,04 (br dd, J=9,1, 4,1 Hz, 1H), 1,99-1,74 (m, 7H), 1,74-1,62 (m, 1H), 0,97 (t, J=7,4 Hz, 3H); hLPA₁ IC₅₀ = 154 nM.

Ejemplo 216. Ácido (1S,3S)-3-((6-(5-(((5-((S)-1-metoxipropil)-1,2,4-oxadiazol-3-il)amino)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxílico

El Ejemplo 216 se sintetizó del Ejemplo 215B de acuerdo con los procedimientos descritos para la preparación del Ejemplo 215 de Ejemplo 215A. LCMS, [M H]⁺ = 486,3; RMN ¹H (500 MHz, CDCl₃) δ 8,10 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,88 (d, J=8,8 Hz, 1H), 4,87 (br s, 1H), 4,73 (s, 2H), 4,32-4,22 (m, 4H), 3,39 (s, 3H), 2,92-2,84 (m, 1H), 2,77 (s, 3H), 2,19-2,09 (m, 1H), 2,04 (br dd, J=9,1, 4,1 Hz, 1H), 1,99-1,74 (m, 7H), 1,74-1,62 (m, 1H), 0,97 (t, J=7,4 Hz, 3H); hLPA₁ IC₅₀ = 121 nM. Los siguientes Ejemplos se prepararon de acuerdo con los procedimientos descritos previamente para la síntesis del Ejemplo 215.

Tabla 12

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Ejemplo 227. Ácido (1S,3S)-3-((6-(5-((5-(3,3-difluorobutil)-1,2,4-oxadiazol-3-il)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxílico

227A. (1S,3S)-3-((6-(5-((Z)-2-amino-2-(hidroxiimino)etil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de metilo

Una solución de (1S,3S)-3-((6-(5-(cianometil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de metilo (sintetizada del Intermediario 5 mediante desplazamiento con NaCN análogo a la síntesis del Intermediario 3A de Intermediario 2; 102 mg, 0,28 mmol), NH₂OH.HCl (24 mg, 0,35 mmol) y NaHCO₃ (29,0 mg, 0,35 mmol) en EtOH (2 ml) se calentó a 75C durante 18 h, luego se enfrió hasta temperatura ambiente y se concentró al vacío para obtener el compuesto del título como un sólido blanco (120 mg, 90 % de pureza, 97 % de rendimiento) LCMS(+) MS =403,1. RMN ¹H (CDCl₃) δ: 8,62-9,11 (m, 2H), 7,92 (d, J=8,6 Hz, 1H), 7,57 (d, J=8,8 Hz, 1H), 4,83 (br s, 1H), 4,23 (s, 2H), 4,16 (s, 3H), 3,74 (s, 3H), 2,86 (dt, J=8,8, 4,6 Hz, 1H), 2,61 (s, 3H), 1,87-2,20 (m, 4H), 1,60-1,85 (m, 4H).

227B. (1S,3S)-3-((6-(5-((Z)-2-(4,4-difluoropentanamido)-2-(hidroxiimino)etil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de metilo

A una mezcla de 227A (18 mg, 0,045 mmol), ácido 4,4-difluoropentanoico (6,2 mg, 0,045 mmol) y DIEA (8 µl, 0,045 mmol) en MeCN (1,5 ml) se agregó HATU (17,0 mg, 0,045 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 h, luego se concentró al vacío. El producto crudo se sometió a cromatografía (SiO₂; gradiente continuo de 0 % a 15 % de MeOH en DCM durante 20 min) para obtener el compuesto del título (20 mg, 0,038 mmol, 86 % de rendimiento) LCMS(+) MS =523,0, RMN ¹H (CDCl₃) δ: 8,12-8,45 (m, 1H), 7,86 (d, J=8,6 Hz, 1H), 7,22 (d, J=8,6 Hz, 1H), 4,92-5,39 (m, 1H), 4,57-4,73 (m, 1H), 4,09 (s, 3H), 3,84 (s, 2H), 3,63 (s, 3H), 2,75-2,81 (m, 1H), 2,53-2,60 (m, 2H), 2,43 (s, 3H), 2,06-2,29 (m, 5H), 1,81-1,97 (m, 3H), 1,60-1,63 (m, 2H), 1,33-1,43 (m, 3H).

227C. (1S,3S)-3-((6-(5-((5-(3,3-difluorobutil)-1,2,4-oxadiazol-3-il)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de metilo

Una mezcla de 227B (20 mg, 0,038 mmol) en tolueno (1,5 ml) y HOAc (50l) se calentó a 105 °C durante 6 h, luego se enfrió hasta temperatura ambiente y se concentró al vacío. El producto crudo se sometió a cromatografía (SiO₂; gradiente continuo de 0 % a 100 % de EtOAc en hexanos durante 20 min) para obtener el compuesto del título (14 mg, 0,028 mmol, 72,5 % de rendimiento) como un aceite incoloro. MS(+) MS = 505,0; RMN ¹H (CDCl₃) δ: 7,98 (d, 1H), 7,19 (d, 1H), 4,87 (s, 2H), 4,67-4,72 (m, 1H), 4,10 (s, 3H), 3,70 (s, 3H), 3,02-3,13 (m, 2H), 2,83 (s, 3H), 2,48 (s, 3H), 1,87-2,04 (m, 4H), 1,65 (d, 5H), 1,29 (br s, 2H).

Ejemplo 227

A una solución de 227C (14 mg, 0,028 mmol) en THF se agregó LiOH acuoso 2M (0,069 ml, 0,14 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 h, luego se concentró al vacío. El residuo se disolvió en H₂O (1 ml), y el pH se ajustó con HCl acuoso 1 N a ~3 y se extrajo con EtOAc (2 x 1 ml). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (1 ml), se secaron (MgSO₄) y se concentraron al vacío. El producto crudo se purificó mediante LC/MS preparativa: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 μm; columna Guard: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partículas de 5 μm; fase móvil A: 5:95 MeCN:H₂O con 0,1 % de TFA; fase móvil B: 95:5 MeCN:H₂O con 0,1 % de TFA; gradiente: 50-90 % de B durante 20 min, luego mantenimiento de 5 minutos a 100 % de B; flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se concentraron al vacío mediante evaporación centrífuga para obtener el compuesto del título como la sal de TFA. (5,2 mg, 0,086 mmol, 31 % de rendimiento) LCMS(+) MS = 491,0; RMN ¹H (CDCl₃) δ: 8,01 (d, 1H), 7,72 (br d, 1H), 7,58-7,64 (m, 1H), 4,84 (br s, 1H), 4,55 (s, 2H), 4,18 (s, 3H), 3,05-3,13 (m, 2H), 2,93 (br d, 1H), 2,73 (s, 3H), 2,29-2,47 (m, 2H), 2,10 (br s, 2H), 1,89-2,01 (m, 2H), 1,77-1,89 (m, 3H), 1,67 (m, 3H); hLPA₁ IC₅₀ = 2 nM.

Los Ejemplos detallados en la siguiente tabla 13 se prepararon con el uso de la misma secuencia de síntesis y los mismos intermediarios según se describe para la síntesis del Ejemplo 227.

Tabla 13

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Ejemplo 241. Ácido (1S,3S)-3-((6-(5-((3-isopentil-1,2,4-oxadiazol-5-il)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxílico

241A. Ácido 2-(4-(5-(((1S,3S)-3-(metoxicarbonil)ciclohexil)oxi)-6-metilpiridin-2-il)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)acético

A una mezcla a temperatura ambiente del Ejemplo 73B (80 mg, 0,22 mmol), 2 M de 2-metil-2-buteno en THF (859 µl, 1,72 mmol), y NaH₂PO₄ (129 mg, 1,07 mmol) en t-BuOH (2 ml)/agua (0,5 ml) se agregó NaClO₂ (48,6 mg, 0,43 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 h, luego se vertió en salmuera y se extrajo con EtOAc (3 x 5 ml). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (5 ml), se secaron (Na₂SO₄) y se concentraron al vacío para obtener el compuesto del título (72 mg, 0,19 mmol, 86 % de rendimiento). LCMS(+) MS = 389,1.

241B. (1S,3S)-3-((6-(5-(2-((E)-N'-hidroxi-4-metilpentanimidamido)-2-oxoetil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de metilo

A una mezcla de 241A (15 mg, 0,039 mmol), (Z)-N'-hidroxi-4-metilpentan-imidamida (5 mg, 0,039 mmol) e iPr₂NEt (14 µl, 0,077 mmol) en MeCN (2 ml) se agregó HATU (14,7 mg, 0,039 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 h, luego se concentró al vacío. El producto crudo se sometió a cromatografía (SiO₂; gradiente continuo de 0 % a 100 % de EtOAc en hexano durante 20 min) para obtener el compuesto del título (12 mg, 0,024 mmol, 62,1 % de rendimiento). LCMS [M H]⁺ =501,1.

241C. (1S,3S)-3-((6-(5-((3-isopentil-1,2,4-oxadiazol-5-il)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3 il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de metilo

Una mezcla del Ejemplo 241B (12 mg, 0,024 mmol) en tolueno (1 ml)/HOAc (0,05 ml) se calentó a 100C durante 18 h, luego se concentró al vacío. El producto crudo se sometió a cromatografía (SiO₂; gradiente continuo de 0 % a 100 % de EtOAc en hexanos durante 20 min) para obtener el compuesto del título (6 mg, 0,012 mmol, 52 % de rendimiento), RMN ¹H (CDCl₃) δ: 8,00 (d, J=8,1 Hz, 1H), 7,20 (d, J=8,6 Hz, 1H), 4,99 (d, J=2,2 Hz, 2H), 4,67-4,73 (m, 1H), 4,12 (s, 3H), 3,71 (s, 3H), 2,78-2,90 (m, 1H), 2,66-2,73 (m, 2H), 2,46 (s, 3H), 2,10-2,21 (m, 1H), 1,85-2,07 (m, 3H), 1,70-1,82 (m, 1H), 1,60 (br d, J=4,6 Hz, 4H), 1,53-1,58 (m, 1H), 0,93 (d, J=6,6 Hz, 6H.

Ejemplo 241

A una solución de 241C (6 mg, 0,012 mmol) en THF (1 ml) se agregó LiOH acuoso 2 M (31 µl, 0,062 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 h, luego se concentró al vacío. El residuo se disolvió en H₂O (1 ml), y el pH se ajustó con HCl acuoso 1 N a ~3 y se extrajo con EtOAc (2 x 1 ml). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (1 ml), se secaron (MgSO₄) y se concentraron al vacío. El producto crudo se purificó mediante LC/MS preparativa: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 μm; columna Guard: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partículas de 5 μm; fase móvil A: 5:95 MeCN:H₂O con 0,1 % de TFA; fase móvil B: 95:5 MeCN:H₂O con 0,1 % de TFA; gradiente: 50-90 % de B durante 20 min, luego mantenimiento de 5 minutos a 100 % de B; flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se concentraron al vacío mediante evaporación centrífuga para obtener el compuesto del título como sal de TFA (3,5mg, 0,006 mmol, 47,4 % de rendimiento). LCMS, [M H]⁺ = 469,1; RMN ¹H (CDCl₃) δ: 7,96 (d, J=8,6 Hz, 1H), 7,68 (d, J=8,8 Hz, 1H), 4,82 (br s, 1H), 4,74 (s, 2H), 4,18 (s, 3H), 2,92 (br d, J=3,7 Hz, 1H), 2,71 (br d, J=7,7 Hz, 2H), 2,68 (s, 3H), 2,05-2,17 (m, 2H), 1,90-2,04 (m, 2H), 1,77-1,89 (m, 3H), 1,69 (br d, J=5,7 Hz, 1H), 1,59 (dd, J=7,4, 4,5 Hz, 3H), 0,94 (d, J=6,2 Hz, 6H); hLPA₁ IC₅₀ = 33 nM.

Los Ejemplos detallados en la siguiente tabla 14 se prepararon con el uso de la misma secuencia de síntesis y los mismos intermediarios, según se describe para la síntesis del Ejemplo 241.

Tabla 14

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Ejemplo 250. Ácido (1S,3S)-3-((6-(5-((5-(ciclopropilmetil)-2H-tetrazol-2-il)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)piridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxílico

250A. (1S,3S)-3-((6-(5-((5-(ciclopropilmetil)-2H-tetrazol-2-il)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)piridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de isopropilo

250B. (1S,3S)-3-((6-(5-((5-(ciclopropilmetil)-1H-tetrazol-1-il)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)piridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de isopropilo

A una solución del Intermediario 1 (20 mg, 0,053 mmol) y Et₃N (37 µl, 0,267 mmol) en DCM (534 µl) se agregó una mezcla 1:1 de 5-(ciclopropilmetil)-2H-tetrazol y 5-(ciclo- propil-metil)-1H-tetrazol (33 mg, 0,27 mmol) y Ph₃P (70 mg, 0,27 mmol), y luego diisopropil (E)-diazen-1,2-dicarboxilato (54 mg, 0,27 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 5 h, luego se filtró y se concentró al vacío. El producto se sometió a cromatografía (SiO₂; gradiente continuo de 0 % a 100 % de EtOAc en hexanos durante 20 min) para obtener los dos productos de tetrazol isómerico. El isómero que se eluyó en primer lugar fue el Ejemplo 250A (9 mg, 0,019 mmol, 35,1%); [M H]⁺ = 481,2 RMN ¹H (CDCl₃) δ: 8,10 (d, J=2,4 Hz, 1H), 7,93 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,11 (dd, J=8,7, 3,0 Hz, 1H), 6,34 (s, 2H), 4,74-4,88 (m, 1H), 4,48 (tt, J=5,3, 2,9 Hz, 1H), 3,92 (s, 3H), 2,58 (dt, J=9,0, 4,7 Hz, 1H), 2,53 (d, J=7,0 Hz, 2H), 1,72-1,87 (m, 2H), 1,62-1,71 (m, 2H), 1,33-1,57 (m, 5H), 1,03 (dd, J=6,4, 2,0 Hz, 6H), 0,26-0,40 (m, 2H), -0,02-0,04 (m, 2H). El isómero que se eluyó en segundo lugar fue el Ejemplo 250B (11 mg, 0,023 mmol, 42,9%); [M H]⁺ = 481,2 RMN ¹H (CDCl₃) δ: 8,06 (d, J=2,9 Hz, 1H), 8,01 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,19 (dd, J=8,8, 2,9 Hz, 1H), 6,08 (s, 2H), 4,76-4,91 (m, 1H), 4,52 (br d, J=3,1 Hz, 1H), 4,06 (s, 3H), 2,73 (d, J=7,0 Hz, 2H), 2,57-2,67 (m, 1H), 1,84 (br dd, J=7,6, 2,5 Hz, 2H), 1,69 (td, J=6,2, 3,6 Hz, 2H), 1,49-1,60 (m, 3H), 1,40 (ddd, J=9,2, 6,2, 3,3 Hz, 1H), 1,06 (dd, J=6,2, 1,1 Hz, 6H), 0,79-0,93 (m, 1H), 0,31-0,42 (m, 2H), -0,04-0,04 (m, 2H).

Ejemplo 250

A una solución del Ejemplo 250A (9 mg, 0,019 mmol) en THF/MeOH (0,5 ml cada uno) se agregó LiOH acuoso 2 M (0,047 ml, 0,094 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 50C durante 1 h, luego se enfrió hasta temperatura ambiente y se concentró al vacío. El residuo se disolvió en H₂O (1 ml), y el pH se ajustó con HCl acuoso 1 N a ~3 y se extrajo con EtOAc (2 x 1 ml). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (1 ml), se secaron (MgSO₄) y se concentraron al vacío. El producto crudo se purificó mediante LC/MS preparativa: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 μm; columna Guard: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partículas de 5 μm; fase móvil A: 5:95 MeCN:H₂O con 0,1% de TFA; fase móvil B: 95:5 MeCN:H₂O con 0,1 % de TFA; gradiente: 50-90 % de B durante 20 min, luego mantenimiento de 5 minutos a 100 % de B; flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se concentraron al vacío mediante evaporación centrífuga para obtener el compuesto del título como la sal de TFA. (7 mg, 0,013 mmol, 64,3 % de rendimiento) LCMS, [M H]⁺ = 439,0; RMN ¹H ¹H (CDCl₃) δ: 8,65 (d, J=2,8 Hz, 1H), 8,27 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,84 (dd, J=8,9, 2,9 Hz, 1H), 6,27 (s, 2H), 4,80-4,97 (m, 1H), 4,29 (s, 3H), 2,92-3,06 (m, 1H), 2,79 (d, J=7,2 Hz, 2H), 2,15-2,25 (m, 1H), 2,01-2,12 (m, 1H), 1,75-1,97 (m, 4H), 1,61-1,74 (m, 1H), 1,01-1,21 (m, 1H), 0,54-0,66 (m, 2H), 0,20-0,31 (m, 2H), NOE observado entre protones a6,27 y4,3, hLPA₁ IC₅₀ = 44 nM.

Ejemplo 251. Ácido (1S,3S)-3-((6-(5-((5-(ciclopropilmetil)-1H-tetrazol-1-il)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)piridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxílico

A una solución del Ejemplo 250B (12 mg, 0,023 mmol) en THF/MeOH (0,5 ml cada uno) se agregó LiOH acuoso 2 M (0,062 ml, 0,13 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 50C durante 1 h, luego se enfrió hasta temperatura ambiente y se concentró al vacío. El residuo se disolvió en H₂O (1 ml), y el pH se ajustó con HCl acuoso 1 N a ~3 y se extrajo con EtOAc (2 x 1 ml). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (1 ml), se secaron (MgSO₄) y se concentraron al vacío. El producto crudo se purificó mediante LC/MS preparativa: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 μm; columna Guard: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partículas de 5 μm; fase móvil A: 5:95 MeCN:H₂O con 0,1 % de TFA; fase móvil B: 95:5 MeCN:H₂O con 0,1 % de TFA; gradiente: 50-90 % de B durante 20 min, luego mantenimiento de 5 minutos a 100 % de B; flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se concentraron al vacío mediante evaporación centrífuga para obtener el compuesto del título como sal de TFA (11,4 mg, 0,021 mmol, 90 % de rendimiento). LCMS, [M H]⁺ = 439,0; RMN ¹H (CDCl₃) δ: 8,32 (d, J=2,8 Hz, 1H), 8,19 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,47 (dd, J=8,9, 2,9 Hz, 1H), 6,25 (s, 2H), 4,72-4,80 (m, 1H), 4,32 (s, 3H), 2,98 (d, J=6,9 Hz, 2H), 2,90-2,95 (m, 1H), 1,89-2,16 (m, 4H), 1,72-1,86 (m, 2H), 1,63-1,72 (m, 1H), 1,01-1,13 (m, 1H), 0,56-0,70 (m, 2H), 0,20-0,26 (m, 2H), NOE observado entre protones a6,25,4,32,2,98, hLPA₁ IC₅₀ = 125 nM.

Los Ejemplos detallados en la siguiente tabla 15 se prepararon con el uso de la misma secuencia de síntesis y los mismos intermediarios, según se describe para la síntesis de Ejemplos 250 o 251.

Tabla 15

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Ejemplo 260. Ácido (1S,3S)-3-((6-(5-((4-isobutil-2H-1,2,3-triazol-2-il)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxílico

260A. (4-isobutil-2H-1,2,3-triazol-2-il)metanol

260B. (4-isobutil-1H-1,2,3-triazol-1-il)metanol

Una mezcla de paraformaldehído (9,88 g, 122 mmol), HOAc glacial (1,05 ml, 18,26 mmol), y 1,4-dioxano (10 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 15 min, después de lo cual se agregaron sucesivamente NaN₃ (1,19 g, 18,26 mmol) y 4-metilpent-1-ino (1,43 ml, 12,17 mmol). Después de 10 min a temperatura ambiente, se agregó ascorbato de sodio (4,82 g, 24,35 mmol), y luego una solución de CuSO_4,5H₂O (1,52 g, 6,09 mmol) en H₂O (8 ml). La mezcla de reacción se agitó durante 18 h a temperatura ambiente, luego se diluyó con H₂O (10 ml) y se extrajo con CHCl₃ (3 x 25 ml). Los extractos orgánicos combinados se filtraron a través de Celite^® para retirar sólidos, se secaron (MgSO₄) y se concentraron al vacío para obtener una mezcla de los dos compuestos del título (1,26 g, 67 % de rendimiento). Los productos crudos se usaron en la siguiente etapa sin purificación adicional. LCMS, [M+H]+ = 156,2.

260C.4-isobutil-2H-1,2,3-triazol

Una mezcla de 260A y 260B (100 mg, 0,64 mmol) y MnO₂ activado (0,56 g, 6,44 mmol) en CHCl₃ (2,5 ml) se agitó a reflujo durante 20 h, luego se enfrió hasta temperatura ambiente. La mezcla se filtró a través de Celite^®, que se lavó con CHCl₃:MeOH (1:1). Los filtrados combinados se concentraron al vacío para obtener el compuesto del título (75 mg, 93 % de rendimiento) como un aceite amarillento. RMN ¹H (400 MHz, CDCl₃) δ 7,49 (s, 1H), 2,62 (d, J=7,0 Hz, 2H), 2,11-1,86 (m, 1H), 0,95 (d, J=6,6 Hz, 6H)

260D. (1S,3S)-3-((6-(5-((4-isobutil-2H-1,2,3-triazol-2-il)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de metilo

260E. (1S,3S)-3-((6-(5-((4-isobutil-1H-1,2,3-triazol-1-il)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de metilo

260F. (1S,3S)-3-((6-(5-((5-isobutil-1H-1,2,3-triazol-1-il)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de metilo

Una solución del Intermediario 5 (30 mg, 0,07 mmol), 260C (9,76 mg, 0,08 mmol) e iPr₂NEt (0,02 ml, 0,11 mmol) en ClCH₂CH₂Cl (0,4 ml) se calentó a 100C durante 1 h en un reactor de microondas, luego se enfrió hasta temperatura ambiente y se concentró al vacío. El residuo se sometió a cromatografía (12 g de SiO₂; gradiente continuo de 0 % a 70 % de EtOAc en hexanos durante 15 min, luego a 70 % de EtOAc/hexano durante 10 min) para obtener 260D (4,6 mg, 14 % de rendimiento) como un aceite incoloro y una mezcla de 260E y 260F (8,2 mg, 25 % de rendimiento) como un aceite incoloro.

Ejemplo 260

Una mezcla del Ejemplo 260D (4,6 mg, 9,84 µmol) y LiOH.H₂O (2 mg, 0,05 mmol) en THF (0,8 ml)/H₂O (0,4 ml) se agitó a temperatura ambiente durante la noche, luego se concentró al vacío; el pH se ajustó con HCl acuoso 1 N a ~5 y se extrajo con EtOAc (3 x 5 ml). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (2 ml), se secaron (MgSO₄) y se concentraron al vacío. El producto crudo se purificó mediante LC/MS preparativa: Columna: XBridge C18, 200 mm x 19 mm, partículas de 5 μm; fase móvil A: 5:95 MeCN:H₂O con 10 mM de NH4OAc acuoso; fase móvil B: 95:5 MeCN:H₂O con 10 mM de NH4OAc acuoso; Gradiente: mantenimiento de 0-min a 25 % de B, 25-65 % de B durante 20 min, luego mantenimiento de 4-min a 100 % de B; velocidad de flujo: 20 ml/min; temperatura de columna: 25 °C. La recolección de fracciones se activó mediante señales de MS. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron mediante evaporación centrífuga. El compuesto del título (3,2 mg, 69 % de rendimiento) se obtuvo como un aceite incoloro. LCMS, [M+H]+ = 454,3. RMN ¹H (500 MHz, DMSO-d₆) δ 7,84 (br d, J=8,5 Hz, 1H), 7,52 (s, 1H), 7,45 (br d, J=8,5 Hz, 1H), 6,28 (s, 2H), 4,79-4,73 (m, 1H), 4,01 (s, 3H), 2,65-2,56 (m, 1H), 2,43 (br d, J=7,0 Hz, 2H), 2,40 (s, 3H), 2,03-1,43 (m, 9H), 0,81 (br d, J=6,7 Hz, 6H). hLPA₁ IC₅₀ = 35 nM.

Los siguientes Ejemplos se sintetizaron de acuerdo con los procedimientos generales descritos para la preparación para el Ejemplo 260,

Tabla 16

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Ejemplo 269. Ácido (1S,3S)-3-((2-metil-6-(1-metil-5-((4-propil-1H-1,2,3-triazol-1-il)metil)-1H-1,2,3-triazol-4-il)piridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxílico

269A. (1S,3S)-3-((6-(5-((4-bromo-2H-1,2,3-triazol-2-il)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de metilo

269B. (1S,3S)-3-((6-(5-((4-bromo-1H-1,2,3-triazol-1-il)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de metilo

Una solución de Intermediario 5 (100 mg, 0,24 mmol), 4-bromo-2H-1,2,3-triazol (53 mg, 0,35 mmol) e iPr₂NEt (62l, 0,35 mmol) en 1,2-dicloroetano (1,5 ml) se calentó a 100C durante 1 h en un reactor de microondas, luego se enfrió hasta temperatura ambiente y se concentró al vacío. El residuo se sometió a cromatografía (12 g de SiO₂, gradiente continuo de 0-100 % de EtOAc en hexanos durante 13 min) para obtener 269A (isómero que se eluyó antes, 30 mg, 0,061 mmol, 25,9 % de rendimiento) y 269B (isómero que se eluyó después, 70 mg, 0,143 mmol, 60,4 % de rendimiento) como aceites incoloros. La regioquímica de 269B se determinó mediante análisis de NOE RMN ¹H.

269A, LCMS, [M H]⁺ = 490,0. RMN ¹H (500 MHz, CDCl₃) δ 8,00 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,56 (s, 1H), 7,21 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 6,39 (s, 2H), 4,71 (dq, J = 5,0, 2,5 Hz, 1H), 4,12 (s, 3H), 3,71 (s, 3H), 2,85 (tt, J = 10,5, 3,9 Hz, 1H), 2,52 (s, 3H), 2,21-1,57 (m, 8H).

269B, LCMS, [M H]⁺ = 490,0. RMN ¹H (500 MHz, CDCl₃) δ 8,11 (s, 1H), 8,07 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,29 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,24 (s, 2H), 4,76 (dq, J = 5,9, 3,5, 2,9 Hz, 1H), 4,21 (s, 3H), 3,72 (s, 3H), 2,86 (tt, J = 10,4, 3,9 Hz, 1H), 2,56 (s, 3H), 2,21-1,60 (m, 8H).

269C. (1S,3S)-3-((2-metil-6-(1-metil-5-((4-((E)-prop-1-en-1-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)metil)-1H-1,2,3-triazol-4-il)piridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de metilo

Una mezcla de 269B (24 mg, 0,049 mmol), (E)-4,4,5,5-tetrametil-2-(prop-1-en-1-il)-1,3,2-dioxaborolano (33 mg, 0,20 mmol), aducto de PdCl₂(dppf)-CH₂Cl₂ (2 mg, 2,5 µmol), y K₃PO₄ (31 mg, 0,15 mmol) en 1,4-dioxano (1 ml) se desgasificó y se volvió a llenar con N₂ (3X). La mezcla de reacción se calentó a 50C durante 15 h, luego se enfrió hasta temperatura ambiente. La mezcla se diluyó con Et₂O (5 ml) y se filtró a través de Celite^®. El filtrado se concentró al vacío. El residuo se sometió a cromatografía (12 g de SiO₂, gradiente continuo de 0-100 % de EtOAc en hexano durante 12 min) para obtener el compuesto del título (10 mg, 0,022 mmol, 45 % de rendimiento). LCMS, [M H]⁺ = 452,1.

Ejemplo 269

Una mezcla del Compuesto 269C (10 mg, 0,022 mmol) y 10 % de Pd/carbono (2 mg) en MeOH (1 ml) se agitó en 1 atmósfera de H₂ durante 14 h. La mezcla se filtró, y el filtrado se concentró al vacío para obtener el (1S,3S)-3-((2-metil-6-(1-metil-5-((4-propil-1H-1,2,3-triazol-1-il)metil)-1H-1,2,3-triazol-4-il)piridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de metilo crudo (10 mg, 0,022 mmol, 100 % de rendimiento) como un aceite levemente colorido. LCMS, [M H]⁺ = 454,0. El metiléster crudo se disolvió en THF (0,5 ml) y agua (0,5 ml). Se agregó LiOH.H₂O (9 mg, 0,22 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 5 h. El pH de la mezcla se ajustó a ~ 5 con HCl acuoso 1 N, luego se extrajo con EtOAc (3 x 2 ml). Los extractos orgánicos combinados se secaron (MgSO₄) y se concentraron al vacío. El residuo se disolvió en DMF y se purificó mediante LC/MS preparativa: columna: XBridge C18, 200 mm x 19 mm, partículas de 5-μm; fase móvil A: 5:95 MeCN:H₂O con 0,1 % de TFA; fase móvil B: 95:5 MeCN:H₂O con 0,1 % de TFA; gradiente: mantenimiento de 0-min a 18 % de B, 18-58 % de B durante 20 min, luego mantenimiento de 4-min a 100 % de B; velocidad de flujo: 20 ml/min; temperatura de columna: 25 °C La recolección de fracciones se activó mediante señales de MS. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron mediante evaporación centrífuga para obtener el compuesto del título (sal de TFA, 8,5 mg, 57,2 % de rendimiento; pureza de LCMS = 99 %). LC/MS[M H]⁺ = 440,5; RMN ¹H (500 MHz, DMSO-d₆) δ 7,94 (s, 1H), 7,88 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,50 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 6,16 (s, 2H), 4,78 (s, 1H), 4,13 (s, 3H), 2,62 (t, J = 10,8 Hz, 1H), 2,57-2,52 (m, 2H), 2,47 (s, 3H), 2,06-1,45 (m, 10H), 0,85 (t, J = 7,4 Hz, 3H); hLPA₁ IC₅₀ = 76 nM.

Ejemplo 270. Ácido (1S,3S)-3-((2-metil-6-(1-metil-5-((4-propil-2H-1,2,3-triazol-2-il)metil)-1H-1,2,3-triazol-4-il)piridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxílico

El compuesto del título se sintetizó del Intermediario 269A de acuerdo con la misma secuencia de la preparación del Ejemplo 269. LCMS, [M H]⁺ = 440,1. RMN ¹H (500 MHz, DMSO-d₆) δ 7,84 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,54 (s, 1H), 7,48 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 6,28 (s, 2H), 4,74 (s, 1H), 4,03 (s, 3H), 2,40 (s, 3H), 1,99-1,42 (m, 10H), 0,85 (t, J = 7,3 Hz, 3H). (No se observan el propil -CH₂- del triazol y α-protón del ácido carboxílico debido a la supresión de agua). hLPA₁ IC₅₀ = 61 nM.

Ejemplo 271. Ácido (1S,3S)-3-((2-metil-6-(1-metil-5-((4-(prop-1-en-2-il)-2H-1,2,3-triazol-2-il)metil)-1H-1,2,3-triazol-4-il)piridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxílico

271A. (1S,3S)-3-((2-metil-6-(1-metil-5-((4-(prop-1-en-2-il)-2H-1,2,3-triazol-2-il) metil)-1H-1,2,3-triazol-4-il)piridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de metilo

Una mezcla de 269A (24 mg, 0,049 mmol), 4,4,5,5-tetrametil-2-(prop-1-en-2-il)-1,3,2-dioxaborolano (21 mg, 0,12 mmol), aducto de PdCl₂(dppf)-CH₂Cl₂ (2 mg, 2,5 µmol), y K₃PO₄ (31 mg, 0,15 mmol) en 1,4-dioxano (1 ml) se desgasificó y se volvió a llenar con N₂ (3X). La mezcla de reacción se calentó a 70C durante 24 h, luego se enfrió hasta temperatura ambiente. La mezcla se diluyó con Et₂O (5 ml) y se filtró a través de Celite^®. El filtrado se concentró al vacío. El residuo se sometió a cromatografía (12 g de SiO₂, gradiente continuo de 0-100 % de EtOAc en hexano durante 12 min) para obtener el compuesto del título (16 mg, 0,035 mmol, 72,4 % de rendimiento). LCMS, [M H]⁺ = 452,4. RMN ¹H (400 MHz, CDCl₃) δ 8,01 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,63 (s, 1H), 7,20 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 6,37 (s, 2H), 5,55 (t, J = 1,1 Hz, 1H), 5,15 (t, J = 1,5 Hz, 1H), 4,71 (dt, J = 5,2, 2,4 Hz, 1H), 4,10 (s, 3H), 3,71 (s, 3H), 2,85 (tt, J = 10,4, 3,8 Hz, 1H), 2,54 (s, 3H), 2,17 (dd, J = 13,9, 4,5 Hz, 1H), 2,12 (t, J = 1,3 Hz, 3H), 2,05-1,55 (m, 7H).

Ejemplo 271

A una solución de 271A (3,5 mg, 7,8 µmol) en THF/agua (0,5 ml cada uno) se agregó LiOH.H₂O (3 mg, 0,07 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 16 h a temperatura ambiente; el pH se ajustó a ~ 5 con HCl acuoso 1 N. La mezcla se extrajo con EtOAc (3 x 2 ml). Los extractos orgánicos combinados se secaron (MgSO₄) y se concentraron al vacío. El producto crudo se disolvió en DMF y se purificó mediante LC/MS preparativa: columna: XBridge C18, 200 mm x 19 mm, partículas de 5 μm; fase móvil A: 5:95 MeCN:H₂O con 0,1 % de TFA; fase móvil B: 95:5 MeCN:H₂O con 0,1 % de TFA; Gradiente: mantenimiento de 0-min a 18 % de B, 18-58 % de B durante 20 min, luego mantenimiento de 4-min a 100 % de B; velocidad de flujo: 20 ml/min; temperatura de columna: 25C. La recolección de fracciones se activó mediante señales de MS. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron mediante evaporación centrífuga para obtener el compuesto del título (2,2 mg, 42,6 % de rendimiento; pureza de LCMS = 100 %). LCMS, [M H]⁺ = 438,2. RMN ¹H (500 MHz, DMSO-d₆) δ 7,92 (s, 1H), 7,85 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,46 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 6,31 (s, 2H), 5,57 (s, 1H), 5,14 (s, 1H), 4,76 (s, 1H), 4,10 (s, 3H), 2,65-2,58 (m, 1H), 2,41 (s, 3H), 2,08-1,40 (m, 11H). hLPA₁ IC₅₀ = 136 nM.

Ejemplo 272. Ácido (1S,3S)-3-((6-(5-((4-isopropil-2H-1,2,3-triazol-2-il)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxílico

El compuesto del título se sintetizó de 269A con el uso de la misma secuencia usada durante la preparación del Ejemplo 271. El compuesto se purificó mediante LC/MS preparativa: columna: Phenomenex Luna 5u C1830 x 250 mm; Solvente A: 10 % de MeCN-90 % de H₂O-0,1 % de TFA; Solvente B: 90 % de MeCN-10 % de H₂O-0,1 % de TFA; Gradiente: 0-100 % de B durante 30 min; velocidad de flujo: 40 ml/min; temperatura de columna: 25 °C Longitud de onda de detección UV: 220 nm. Las fracciones se recolectaron y se concentraron para obtener el compuesto del título (11 mg, 0,016 mmol, 56,9 % de rendimiento; 99 % de pureza mediante LC/MS) como un aceite incoloro. LCMS, [M H]⁺ = 440,4. RMN ¹H (400 MHz, CDCl₃) δ 8,33 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,94 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,46 (s, 1H), 5,89 (s, 2H), 4,91 (s, 1H), 4,28 (s, 3H), 3,04 (dt, J = 13,9, 7,0 Hz, 1H), 2,91 (br s, 1H), 2,82 (s, 3H), 2,03 (s, 8H), 1,29 (d, J = 6,9 Hz, 6H). hLPA₁ IC₅₀ = 35 nM.

Ejemplo 273. Ácido (1S,3S)-3-((2-metil-6-(1-metil-5-((4-fenil-2H-1,2,3-triazol-2-il)metil)-1H-1,2,3-triazol-4-il)piridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxílico

A una solución de 4-fenil-2H-1,2,3-triazol (10 mg, 0,071 mmol) en THF (0,5 ml) se agregó NaH (6 mg de dispersión al 60 % en aceite mineral; 0,14 mmol). La mezcla se agitó durante 5 min, después de lo cual se agregó el Intermediario 5 (15 mg, 0,035 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 72 h a temperatura ambiente, después de lo cual se agregaron THF/agua (0,5 ml cada uno) y LiOH.H₂O (2 mg, 0,05 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 4 h, luego se concentró al vacío. El residuo se absorbió en EtOAc (2 ml)/agua (1 ml), y se ajustó hasta pH ~ 5 con HCl acuoso 1 N. La mezcla se extrajo con EtOAc (3 x 2 ml); los extractos orgánicos combinados se secaron (MgSO₄) y se concentraron al vacío. El residuo se disolvió en DMF y se purificó mediante LC/MS preparativa: columna: XBridge C18, 200 mm x 19 mm, partículas de 5 μm; fase móvil A: 5:95 MeCN:H₂O con 10 mM de NH₄OAc acuoso; fase móvil B: 95:5 MeCN:H₂O con 10 mM de NH₄OAc acuoso; Gradiente: mantenimiento de 0-min a 15 % de B, 15-55 % de B durante 25 min, luego mantenimiento de 4-min a 100 % de B; velocidad de flujo: 20 ml/min; temperatura de columna: 25C. La recolección de fracciones se activó mediante señales de MS. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron mediante evaporación centrífuga para obtener el compuesto del título (1,3 mg, 8 % de rendimiento; 100 % de pureza mediante LCMS) como un aceite incoloro (también se aislaron 1,3 mg del otro regioisómero). LCMS, [M H]⁺ = 474,2. RMN ¹H (500 MHz, DMSO-d₆) δ 8,20 (s, 1H), 7,87 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,79 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 7,51 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,45 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 7,37 (t, J = 7,4 Hz, 1H), 6,41 (s, 2H), 4,73 (s, 1H), 4,15 (s, 3H), 2,66-2,62 (m, 1H), 2,44 (s, 3H), 1,94-1,48 (m, 8H). hLPA₁ IC₅₀ = 57 nM.

Ejemplo 274. Ácido (1S,3S)-3-((6-(5-((5-ciclopropil-3-imino-1,2,4-tiadiazol-2(3H)-il)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxílico

Una mezcla del Intermediario 5 (16 mg, 0,038 mmol), clorhidrato de 5-ciclopropil-1,2,4-tiadiazol-3-amina (13 mg, 0,075 mmol) e iPr₂NEt (7 µl, 0,038 mmol) en DMF (0,5 ml) se calentó en un reactor de microondas a 130C durante 30 min, luego se enfrió hasta temperatura ambiente y se concentró al vacío. El residuo se disolvió en THF/agua (0,5 ml cada uno). Se agregó LiOH.H₂O (8 mg, 0,19 mmol) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 5 h, luego se diluyó con EtOAc (2 ml)/agua (1 ml). El pH se ajustó a ~ 5 con HCl acuoso 1 N. La mezcla se extrajo con EtOAc (3 x 2 ml); los extractos orgánicos combinados se secaron (MgSO₄) y se concentraron al vacío. El producto crudo se disolvió en DMF y se purificó mediante LC/MS preparativa: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 μm; fase móvil A: 5:95 MeCN:H₂O con 10 mM de NH₄OAc acuoso; fase móvil B: 95:5 MeCN:H₂O con 10 mM de NH₄OAc; Gradiente: 5-45 % de B durante 20 min, luego mantenimiento de 4-min a 100 % de B; flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron mediante evaporación centrífuga para obtener el compuesto del título (5,5 mg, 30% de rendimiento; 96 % de pureza mediante LCMS) como un aceite incoloro. LCMS, [M H]⁺ = 470,3. RMN ¹H (500 MHz, DMSO-d₆) δ 7,81 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,46 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 5,54 (s, 2H), 4,76 (s, 1H), 4,05 (s, 3H), 2,66-2,59 (m, 1H), 2,44 (s, 3H), 2,04-1,46 (m, 9H), 0,88 (td, J = 6,9, 4,3 Hz, 2H), 0,64-0,58 (m, 2H). hLPA₁ IC₅₀ = 1000 nM.

Ejemplo 275. Ácido (1S,3S)-3-((6-(5-((5-butil-1,2,4-oxadiazol-3-il)amino)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxílico, sal de 2 TFA

275A. (1S,3S)-3-((6-(5-((imino(metiltio)metil)amino)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de metilo

Una mezcla del Intermediario 18 (170 mg, 0,49 mmol) y 1,1'-tiocarbonildi-2(1H)-piridona (343 mg, 1,48 mmol) en DCM (6,5 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 18 h, luego se concentró al vacío. Se agregaron 2 M de amoníaco en MeOH (6,2 ml, 12,4 mmol) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 4 h, luego se concentró al vacío. El residuo se disolvió en EtOH (2,5 ml) y se agregó MeI (0,092 ml, 1,48 mmol). La mezcla se calentó en un tubo sellado a 50 °C durante 2 h, luego se enfrió hasta temperatura ambiente y se concentró al vacío. El residuo se disolvió en EtOAc, se lavó con NaHCO₃ acuoso saturado (2x) y salmuera, se secó (Na₂SO₄) y se concentró al vacío. El producto crudo se sometió a cromatografía (12 g de SiO₂, gradiente continuo de 0-100 % de EtOAc en hexano) para obtener el compuesto del título (143 mg, 69 %) como un sólido blanco. LCMS, [M+H]⁺ = 419,1; RMN ¹H (500 MHz, CDCl₃) δ 7,85 (d, J=8,5 Hz, 1H), 7,23 (d, J=8,5 Hz, 1H), 6,18 (br s, 2H), 4,73-4,67 (m, 1H), 3,89 (s, 3H), 3,71 (s, 3H), 2,84 (tt, J=10,4, 3,9 Hz, 1H), 2,57 (s, 3H), 2,46 (s, 3H), 2,21-2,11 (m, 1H), 2,03-1,87 (m, 3H), 1,82-1,56 (m, 4H).

275B. (1S,3S)-3-((6-(5-(3-hidroxiguanidino)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de metilo

Una mezcla de 275A, iPr₂NEt (0,36 ml, 2,1 mmol) y NH₂OH.HCl (71 mg, 1,02 mmol) en MeOH (3 ml) se calentó en un reactor de microondas a 140 °C durante 1 h, luego se enfrió hasta temperatura ambiente y se concentró al vacío. El producto crudo se sometió a cromatografía (12 g de SiO₂, gradiente continuo de 0-10 % de MeOH en DCM) para obtener el compuesto del título (163 mg, 118 %) como un sólido marrón. LCMS, [M+H]⁺ = 404,1. RMN ¹H (500 MHz, CD₃OD) δ 7,88 (d, J=8,5 Hz, 1H), 7,50 (d, J=8,8 Hz, 1H), 4,86-4,81 (m, 1H), 4,05 (s, 3H), 3,70 (s, 3H), 2,89-2,79 (m, 1H), 2,54 (s, 3H), 2,18-2,04 (m, 1H), 2,04-1,90 (m, 4H), 1,83-1,62 (m, 5H).

275C. (1S,3S)-3-((6-(5-((Z)-2-hidroxi-3-pentanoilguanidino)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de metilo

A una solución de 275B (70 mg, 0,17 mmol), ácido pentanoico (18 mg, 0,17 mmol) e iPr₂NEt (36l, 0,21 mmol) en MeCN (1 ml) se agregó HATU (79 mg, 0,21 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 h, luego se concentró al vacío. El producto crudo se sometió a cromatografía (4 g de SiO₂, gradiente continuo de 0-100 % de EtOAc en hexano) para obtener el compuesto del título (32 mg, 38 %) como un sólido blanco. LCMS, [M+H]⁺ = 488,3. 275D. (1S,3S)-3-((6-(5-((5-butil-1,2,4-oxadiazol-3-il)amino)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de metilo, sal de 2 TFA

Una mezcla de 275C (32 mg, 0,066 mmol) y HOAc (0,75 µl, 0,013 mmol) en tolueno (2 ml) se calentó en un tubo sellado a 110 °C durante 18 h, luego se enfrió hasta temperatura ambiente y se concentró al vacío. El material crudo se purificó mediante HPLC preparativa: columna: Sunfire Prep C18 OBD 5 u 30 x 100 mm; fase móvil A: 10 % de MeCN- 90 % de H₂O- 0,1 % de TFA; fase móvil B: 90 % de MeCN- 10 % de H₂O- 0,1 % de TFA; Gradiente: 20-100 % de B durante 12 min; flujo: 40 ml/min) para obtener el compuesto del título (12 mg, 26 %) como un sólido blanco. LCMS, [M+H]⁺ = 470,2. RMN ¹H (500 MHz, CD₃OD) δ 7,80 (s, 2H), 4,97-4,88 (m, 1H), 4,06 (s, 3H), 3,70 (s, 3H), 2,88-2,75 (m, 3H), 2,62 (s, 3H), 2,16-2,07 (m, 1H), 2,02-1,89 (m, 3H), 1,81-1,62 (m, 6H), 1,38 (dq, J=15,0, 7,5 Hz, 2H), 0.95 (t, J=7,4 Hz, 3H).

Ejemplo 275

A una solución de 275D (12 mg, 0,017 mmol) en THF (2 ml)/agua (1 ml) se agregó LiOH acuoso 2M (0,043 ml, 0,086 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 h; el pH se ajustó con HCl acuoso 1N a ~4. La mezcla se extrajo con EtOAc (3 x 5 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron (MgSO₄), y se concentraron al vacío. El producto crudo se purificó mediante HPLC preparativa: columna: Sunfire Prep C18 OBD 5 u 30 x 100 mm; fase móvil A: 10 % de MeCN- 90 % de H₂O- 0,1 % de TFA; fase móvil B: 90 % de MeCN- 10 % de H₂O- 0,1 % de TFA; Gradiente: 20-100 % de B durante 12 min; flujo: 40 ml/min para obtener el compuesto del título (2,5 mg, 22 %) como un sólido blanco. LCMS, [M+H]⁺ = 456,1. RMN ¹H (500 MHz, CD₃OD) δ 7,84-7,78 (m, 2H), 4,97-4,89 (m, 1H), 4,06 (s, 3H), 2,83-2,77 (m, 3H), 2,62 (s, 3H), 2,15-2,06 (m, 1H), 2,04-1,90 (m, 3H), 1,82-1,63 (m, 6H), 1,43-1,33 (m, 2H), 0,95 (t, J=7,4 Hz, 3H). hLPA₁ IC₅₀ = 18 nM.

Ejemplo 276. Ácido (1S,3S)-3-((6-(5-((5-(ciclopropilmetil)-1,3,4-oxadiazol-2-il)amino)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxílico, sal de 2 TFA

276A. (1S,3S)-3-((6-(5-(2-(2-ciclopropilacetil)hidrazina-1-carboxamido)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de metilo

A una mezcla a 0 °C del Intermediario 18 (30 mg, 0,087 mmol) y NaHCO₃ (0,022 g, 0,26 mmol) en DCM/MeCN (1 ml cada uno) se agregó 20 % de fosgeno en tolueno (0,14 ml, 0,26 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 0 °C durante 30 min, luego se concentró al vacío. El residuo se disolvió en DCM/MeCN (1 ml cada uno), y a esta solución (enfriada hasta 0 °C) se agregaron 2-ciclopropilacetohidrazida (0,030 g, 0,26 mmol) y Et₃N (0,024 ml, 0,17 mmol). La mezcla turbia resultante se agitó a 0 °C durante 30 min, a temperatura ambiente durante 18 h, y a 65 °C durante 36 h, luego se enfrió hasta temperatura ambiente y se concentró al vacío. El producto crudo se sometió a cromatografía (4 g de SiO₂, gradiente continuo de 0-100 % de EtOAc en hexanos) para obtener el compuesto del título (13 mg, 31 %) como un sólido blanco. LCMS, [M+H]⁺ = 486,2. RMN ¹H (400 MHz, CDCl₃) δ 9,02 (br s, 1H), 8,29 (br s, 2H), 7,83 (d, J=8,6 Hz, 1H), 7,17 (d, J=8,8 Hz, 1H), 4,70-4,62 (m, 1H), 3,98 (s, 3H), 3,69 (s, 3H), 2,90-2,70 (m, 1H), 2,43 (s, 3H), 2,33-2,07 (m, 3H), 2,02-1,81 (m, 3H), 1,79-1,55 (m, 4H), 1,13-0,89 (m, 1H), 0,65-0,54 (m, 2H), 0,28-0,14 (m, 2H).

276B. (1S,3S)-3-((6-(5-((5-(ciclopropilmetil)-1,3,4-oxadiazol-2-il)amino)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de metilo, sal de 2 TFA

Una mezcla de 276A (13 mg, 0,027 mmol), Et₃N (11l, 0,080 mmol) y 2,4,6-tripropil-1,3,5,2,4,6-trioxatrifosforinan-2,4,6-trióxido (50 % en EtOAc, 0,048 ml, 0,080 mmol) en MeCN (1 ml) se calentó a 100 °C durante 30 min, luego a 135 °C durante 30 min en un reactor de microondas, luego se enfrió hasta temperatura ambiente y se concentró al vacío. El producto crudo se purificó mediante HPLC preparativa (columna: Sunfire Prep C18 OBD 5 u 30 x 100mm; fase móvil A: 10 % de MeCN- 90 % de H₂O- 0,1 % de TFA; fase móvil B: 90 % de MeCN-10 % de H₂O- 0,1 % de TFA; Gradiente: 20-100 % de B durante 12 min; flujo: 40 ml/min) para obtener el compuesto del título (3 mg, 16 %) como un sólido blanco. LCMS, [M+H]⁺ = 468,1. RMN ¹H (500 MHz, CD₃OD) δ 7,90 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,80 (d, J=8,8 Hz, 1H), 4,95-4,91 (m, 1H), 4,00 (s, 3H), 3,73-3,67 (m, 3H), 2,90-2,80 (m, 1H), 2,67-2,50 (m, 5H), 2,18-2,05 (m, 1H), 2,03-1,89 (m, 3H), 1,84-1,61 (m, 4H), 0,95-0,86 (m, 1H), 0,54-0,47 (m, 2H), 0,24-0,16 (m, 2H).

Ejemplo 276. Ácido (1S,3S)-3-((6-(5-((5-(ciclopropilmetil)-1,3,4-oxadiazol-2-il)amino) -1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxílico, sal de 2 TFA

El compuesto del título (1,7 mg, 53 %, sólido blanco) se preparó de 276B de acuerdo con el procedimiento descrito para la síntesis del Ejemplo 275, LCMS, [M+H]⁺ = 454,1. RMN ¹H (500 MHz, CD₃OD) δ 7,88 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,76 (d, J=8,8 Hz, 1H), 5,10-4,93 (m, 1H), 4,00 (s, 3H), 3,56-3,46 (m, 1H), 2,84-2,74 (m, 1H), 2,58-2,49 (m, 5H), 2,15-2,05 (m, 1H), 2,05-1,87 (m, 3H), 1,82-1,63 (m, 4H), 0,94-0,85 (m, 1H), 0,55-0,45 (m, 2H), 0,23-0,15 (m, 2H). hLPA₁ IC₅₀ = 446 nM.

Los siguientes ejemplos se sintetizaron de acuerdo con los procedimientos, como se indicó.

Tabla 17

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Ejemplo 285. Ácido (1S,3S)-3-((6-(5-(((5-isopentil-1,2,4-oxadiazol-3-il)amino)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)piridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxílico

A una solución del Intermediario 21 (32 mg, 0,093 mmol), 5-isopentil-1,2,4-oxadiazol-3-amina (14,4 mg, 0,093 mmol) en MeOH (1 ml) se agregó HOAc (0,027 ml, 0,46 mmol). La reacción se calentó a 65 °C durante 2 h, luego se enfrió hasta temperatura ambiente, después de lo cual se agregó NaBH₃CN (12 mg, 0,19 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 h; luego se agregó NaHCO₃ acuoso saturado. La capa acuosa se extrajo con EtOAc. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó (MgSO₄) y se concentró al vacío; producto de LCMS [M H]⁺ = 484,2. El residuo se disolvió en THF/MeOH (0,5 ml cada uno) y se agregó LiOH acuoso 2 M (0,13 ml, 0,25 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 h, luego se concentró al vacío. El residuo se disolvió en H₂O (1 ml), y el pH se ajustó con HCl acuoso 1 N a ~3 y se extrajo con EtOAc (2 x 1 ml). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (1 ml), se secaron (MgSO₄) y se concentraron al vacío. El producto crudo se purificó mediante LC/MS preparativa: columna: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 μm; columna Guard: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partículas de 5 μm; fase móvil A: 5:95 MeCN:H₂O con 0,1 % de TFA; fase móvil B: 95:5 MeCN:H₂O con 0,1 % de TFA; gradiente: 50-90 % de B durante 20 min, luego mantenimiento de 5 minutos a 100 % de B; flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se concentraron al vacío mediante evaporación centrífuga para obtener el compuesto del título (sal de bis-TFA) como un sólido incoloro (18,5 mg, 0,026 mmol, 41,9 % de rendimiento). LCMS, [M H]⁺ = 470,2; RMN ¹H (400 MHz, CDCl₃) δ 8,34 (br d, J=1,8 Hz, 1H), 8,09 (br d, J=8,8 Hz, 1H), 7,37 (dd, J=8,8, 2,4 Hz, 1H), 4,67 (br s, 1H), 4,60 (s, 3H), 4,21 (s, 3H), 2,84 (dq, J=8,8, 4,4 Hz, 1H), 2,68-2,58 (m, 2H), 2,11-1,79 (m, 4H), 1,78-1,48 (m, 7H), 0,84 (d, J=6,4 Hz, 6H); hLPA₁ IC₅₀ = 93 nM.

Los Ejemplos detallados en la siguiente tabla 18 se prepararon con el uso de la misma secuencia de síntesis y los mismos intermediarios, según se describe para la síntesis del Ejemplo 285 (y según se describe también en la secuencia de síntesis que se muestra en el Esquema de reacción 1).

Tabla 18

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Los siguientes ejemplos se sintetizaron de acuerdo con los procedimientos descritos para la preparación de los Ejemplos 105 y 106,

Tabla 19

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Ejemplo 316. Ácido (1S,3S)-3-((6-(5-((5-(2-ciclopropiletoxi)-2H-tetrazol-2-il)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxílico

316A. (1S,3S)-3-((2-metil-6-(1-metil-5-((5-(metiltio)-2H-tetrazol-2-il)metil)-1H-1,2,3-triazol-4-il)piridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de metilo

Una mezcla de Intermediario 5 (1,80 g, 4,25 mmol), 5-(metiltio)-2H-tetrazol (1,09 g, 9,35 mmol) e iPr₂NEt (3,0 ml, 17,0 mmol) en 1,4-dioxano (10 ml) se calentó a 100 °C durante 1 h en un reactor de microondas, luego se enfrió hasta temperatura ambiente y se concentró al vacío. El residuo se sometió a cromatografía (80 g de SiO₂, gradiente continuo de 0-100 % de EtOAc en hexano durante 15 min, 60 ml/min) para obtener el compuesto del título como un aceite viscoso incoloro (1,14 g, 59 %). LCMS, [M+H]⁺ = 459,1.

316B. Ácido (1S,3S)-3-((2-metil-6-(1-metil-5-((5-(metilsulfonil)-2H-tetrazol-2-il)metil)-1H-1,2,3-triazol-4-il)piridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxílico

A una solución de 316A (0,360 g, 0,785 mmol) en THF (3 ml) y MeOH (1 ml) se agregó LiOH acuoso 4 M (0,981 ml, 23,9 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h, después de lo cual se agregaron oxone (0,531 g, 0,864 mmol) y agua/MeOH (1 ml de cada uno). La reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente, luego se filtró; el filtrado se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante HPLC preparativa: columna Phenomenex Axia Luna (30 x 75 mm); 0-100 % de B durante 15 min, luego mantenimiento de B de 3 min a 40 ml/min; solvente A = 10 % de MeCN, 90 % de H₂O, 0,10 % de TFA; solvente B = 90 % de MeCN, 10 % de H₂O, 0,10 % de TFA) para obtener el compuesto del título como un aceite viscoso incoloro (0,211 g, 56 %). LCMS, [M+H]⁺ = 477,2.

Ejemplo 316

A una solución a temperatura ambiente de 316B (15 mg, 0,031 mmol) y 2-ciclopropiletan-1-ol (0,008 mg, 0,094 mmol) en THF (0,32 ml) se agregó KN(TMS)₂0,5 M en tolueno (0,264 ml, 0,132 mmol) por goteo. La reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente, luego se dividió entre DCM y HCl acuoso 1 N, y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 15 min. El pH se ajustó a ~3-4 con HCl acuoso 1 M. La capa orgánica se secó (Na₂SO₄) y se concentró al vacío. El producto crudo se purificó mediante LC/MS preparativa: Columna: XBridge C18, 200 mm x 19 mm, partículas de 5 μm; fase móvil A: 5:95 MeCN:H₂O:10 mM de NH₄OAc acuoso; fase móvil B: 95:5 MeCN:H₂O:10 mM de NH₄OAc acuoso; gradiente: mantenimiento de 0-min a 15 % de B, 15-55 % de B durante 20 min, luego mantenimiento de 4-min a 100 % de B; velocidad de flujo: 20 ml/min; temperatura de columna: 25 °C. La recolección de fracciones se activó mediante señales de MS. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron mediante evaporación centrífuga. El compuesto del título se obtuvo como un aceite viscoso incoloro (10 mg, 62 %). LCMS, [M+H]⁺ = 483,32. RMN ¹H (500 MHz, DMSO-d₆) δ 7,86 (d, J=8,5 Hz, 1H), 7,46 (d, J=8,5 Hz, 1H), 6,41 (s, 2H), 4,76 (br s, 1H), 4,31 (t, J=6,6 Hz, 2H), 4,14 (s, 3H), 2,64-2,58 (m, 1H), 2,38 (s, 3H), 1,99 (br d, J=12,5 Hz, 1H), 1,84 (br d, J=11,3 Hz, 1H), 1,81-1,73 (m, 2H), 1,58 (q, J=6,6 Hz, 4H), 1,55-1,42 (m, 2H), 0,72 (br d, J=7,0 Hz, 1H), 0,39-0,34 (m, 2H), 0,06-0,02 (m, 2H). hLPA₁ IC₅₀ = 22 nM.

Los siguientes Ejemplos se sintetizaron de acuerdo con los procedimientos descritos para la preparación de los Ejemplos como se especifica en la tabla 20

Tabla 20

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Ejemplo 362. Ácido (1S,3S)-3-((6-(5-((5-(butilamino)-2H-tetrazol-2-il)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxílico

362A. (1S,3S)-3-((6-(5-((5-amino-2H-tetrazol-2-il)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de metilo

Una mezcla del Intermediario 5 (200 mg, 0,472 mmol), 2H-tetrazol-5-amina (48 mg, 0,567 mmol) y Cs₂CO₃ (185 mg, 0,567 mmol) en MeCN (4,7 ml) se agitó a temperatura ambiente durante la noche, luego se concentró parcialmente al vacío. La mezcla se dividió en DCM y 50 % de NH₄Cl acuoso saturado y se agitó a temperatura ambiente durante 15 min. La capa orgánica se separó, se secó (Na₂SO₄) y se concentró al vacío. El residuo se sometió a cromatografía (12 g de SiO₂; gradiente continuo de 0-25 % de MeOH en DCM durante 20 min, 30 ml/min) para obtener el compuesto del título como una espuma blanca (204 mg, 100 %). LCMS, [M+H]⁺ = 428,3.

362B. (1S,3S)-3-((6-(5-((5-(butilamino)-2H-tetrazol-2-il)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de metilo

Una mezcla de 362A (40 mg, 0,094 mmol), 1-bromobutano (15 mg, 0,103 mmol), Bu₄NI (3 mg, 0,009 mmol) y Cs₂CO₃ (0,037 g, 0,112 mmol) en MeCN (0,94 ml) se agitó a temperatura ambiente durante la noche, luego se concentró parcialmente al vacío. El residuo se dividió en DCM y 50 % de NH₄Cl acuoso saturado y se agitó a temperatura ambiente durante 15 min. La capa orgánica se separó, se secó (Na₂SO₄) y se concentró al vacío. El residuo se sometió a cromatografía (12 g de SiO₂; gradiente continuo de 0-100 % de EtOAc en hexano durante 10 min, 30 ml/min) para obtener el compuesto del título como un aceite viscoso incoloro (17 mg, 39 %). LCMS, [M+H]⁺ = 484,2.

Ejemplo 362

A una solución a temperatura ambiente de 362B (5 mg, 0,010 mmol) en THF/MeOH (0,16 ml/0,05 ml) se agregó 2 M de LiOH acuoso (50l, 0,10 mmol). La reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente, luego se dividió entre DCM y HCl acuoso 1 N. La mezcla se agitó durante 15 min a temperatura ambiente; el pH se ajustó a 3-4 con HCl acuoso 1 N. La capa orgánica se secó (Na₂SO₄), luego se concentró al vacío. El producto crudo se purificó mediante LC/MS preparativa (Columna: XBridge C18, 200 mm x 19 mm, partículas de 5 μm; fase móvil A: 5:95 MeCN:H₂O con NH₄OAc acuoso 10-mM; fase móvil B: 95:5 MeCN:H₂O con NH₄OAc acuoso 10-mM; Gradiente: mantenimiento de 0-min a 15 % de B, 15-55 % de B durante 20 min, luego mantenimiento de 4-min a 100 % de B; velocidad de flujo: 20 ml/min; temperatura de columna: 25 °C. La recolección de fracciones se activó mediante señales de MS; las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron mediante evaporación centrífuga) para obtener el compuesto del título como un aceite viscoso incoloro (2 mg, 33 %). LCMS, [M+H]⁺ = 470,4; RMN ¹H (500 MHz, DMSO-d₆) δ 7,90 (d, J=8,5 Hz, 1H), 7,57 (d, J=8,9 Hz, 1H), 7,45 (t, J=5,5 Hz, 1H), 5,93-5,85 (m, 2H), 4,79 (br s, 1H), 4,07 (s, 3H), 3,29-3,23 (m, 2H), 2,62-2,52 (m, 1H), 2,48-2,45 (m, 3H), 1,96 (br d, J=14,0 Hz, 1H), 1,84-1,75 (m, 3H), 1,62 (br d, J=8,9 Hz, 2H), 1,52 (br d, J=15,6 Hz, 2H), 1,39 (quin, J=7,2 Hz, 2H), 1,13-1,05 (m, 2H), 0,73 (t, J=7,3 Hz, 3H); hLPA₁ IC₅₀ = 316 nM.

Ejemplo 384. Ácido (1S,3S)-3-((6-(5-(((2-(4-clorofenil)-2H-tetrazol-5-il)amino)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxílico

384A.2-tritil-2H-tetrazol-5-amina

Una mezcla de 2H-tetrazol-5-amina (5,00 g, 58,8 mmol), cloruro de tritilo (19,7 g, 70,5 mmol), DMAP (0,36g, 2,94 mmol) e iPr₂NEt (15,4 ml, 88,0 mmol) en DCM (294 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 7 días. El producto sólido se filtró y se secó al vacío para obtener el compuesto del título como un sólido blanco (12,1 g, 63 %). RMN ¹H (400 MHz, CDCl₃) δ 7,39-7,27 (m, 9H), 7,24-7,11 (m, 6H), 4,36 (br s, 2H).

384B. (1S,3S)-3-((2-metil-6-(1-metil-5-(((2-tritil-2H-tetrazol-5-il)amino)metil)-1H-1,2,3-triazol-4-il)piridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de metilo

A una solución a temperatura ambiente de Intermediario 8 (500 mg, 1,40 mmol), 348A (695 mg, 1,50 mmol) y NaBH(OAc)₃ (591 mg, 2,79 mmol) en DCE (14 ml) se agregó HOAc (16l, 0,279 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente, luego se dividió entre DCM y 50 % de NaHCO₃ acuoso saturado. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 15 min. La capa orgánica se secó (Na₂SO₄) y se concentró al vacío. El residuo se sometió a cromatografía (40 g de SiO₂; gradiente continuo de 0-100 % de EtOAc en hexano durante 20 min, 40 ml/min) para obtener el compuesto del título como un aceite viscoso incoloro (0,703 g, 75 %). LCMS, [M+H]⁺ = 670,4. 384C. (1S,3S)-3-((6-(5-(((2H-tetrazol-5-il)amino)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de metilo

A una solución a temperatura ambiente de LJK4 (0,700 g, 1,05 mmol) y Et₃SiH (0,501 ml, 3,14 mmol) en DCM (9,4 ml) se agregó TFA (1 ml). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h, luego se concentró al vacío. El residuo se sometió a cromatografía (24 g de SiO₂; gradiente continuo de 0-50 % de MeOH en DCM durante 20 min, 30 ml/min) para obtener el compuesto del título como un aceite viscoso incoloro (0,442 g, 99 %). LCMS, [M+H]⁺ = 428,2,

384D. (1S,3S)-3-((6-(5-(((2-(4-clorofenil)-2H-tetrazol-5-il)amino)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de metilo

A una solución a temperatura ambiente de LJK5 (20 mg, 0,047 mmol), ácido (4-clorofenil)borónico (9 mg, 0,056 mmol) y piridina (15l, 0,19 mmol) en DCM (0,23 ml) se agregó Cu(OAc)₂ (10 mg, 0,056 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente, luego se filtró a través de Celite^®; el filtrado se concentró al vacío. El residuo se sometió a cromatografía (12 g de SiO₂; gradiente continuo de 0-100 % de EtOAc en hexano durante 10 min, 30 ml/min) para obtener el compuesto del título como un aceite viscoso incoloro (12 mg, 47 %). LCMS, [M+H]⁺ = 538,2.

Ejemplo 384

A una solución a temperatura ambiente de 384C (11 mg, 0,020 mmol) en THF/MeOH (0,30 ml/0,10 ml) se agregó LiOH acuoso 2 M (0,10 ml, 0,20 mmol). La reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente, luego se dividió entre DCM y HCl acuoso 1 N; la mezcla resultante se agitó durante 15 min a temperatura ambiente. El pH se ajustó a 3-4 con HCl acuoso 1 N. La capa orgánica separada se secó (Na₂SO₄) y se concentró al vacío. El producto crudo se purificó mediante LC/MS preparativa (Columna: XBridge C18, 200 mm x 19 mm, partículas de 5 μm; fase móvil A: 5:95 MeCN:H₂O con NH₄OAc acuoso 10-mM; fase móvil B: 95:5 MeCN:H₂O con NH₄OAc acuoso 10-mM; Gradiente: mantenimiento de 0-min a 15 % de B, 15-55 % de B durante 20 min, luego mantenimiento de 4-min a 100 % de B; velocidad de flujo: 20 ml/min; temperatura de columna: 25 °C. La recolección de fracciones se activó mediante señales de MS; las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron mediante evaporación centrífuga) para obtener el compuesto del título como un aceite viscoso incoloro (5 mg, 49 %). LCMS, [M+H]⁺ = 524,3; RMN ¹H (500 MHz, DMSO-d₆) δ 7,85 (d, J=8,5 Hz, 1H), 7,61 (d, J=8,9 Hz, 2H), 7,51-7,47 (m, 4H), 4,93 (br d, J=5,8 Hz, 2H), 4,76 (br s, 1H), 4,17 (s, 3H), 2,61-2,55 (m, 1H), 2,11 (s, 3H), 1,97 (br d, J=12,5 Hz, 1H), 1,85-1,75 (m, 3H), 1,64-1,48 (m, 4H); hLPA₁ IC₅₀ = 41 nM.`

Ejemplo 388. Ácido (1S,3S)-3-((6-(5-(((2-isobutil-2H-tetrazol-5-il)amino)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxílico

388A. (1S,3S)-3-((6-(5-(((2-isobutil-2H-tetrazol-5-il)amino)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de metilo

A una solución a temperatura ambiente de 384C (14 mg, 0,033 mmol), isobutanol (4 mg, 0,049 mmol) y Ph₃P (13 mg, 0,049 mmol) se agregó DEAD por goteo (solución al 10 % en DCM, 77l, 0,049 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente, luego se concentró al vacío. El residuo se sometió a cromatografía (12 g de SiO₂; gradiente continuo de 0-100 % de EtOAc en hexano durante 15 min, 30 ml/min) para obtener el compuesto del título como un aceite viscoso incoloro (6 mg, 37 %). LCMS, [M+H]⁺ = 484,1.

Ejemplo 388

A una solución a temperatura ambiente de 388A (5 mg, 0,010 mmol) en THF/MeOH (0,16 ml/0,05 ml) se agregó LiOH acuoso 2 M (52l, 0,103 mmol). La reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente, luego se dividió entre DCM y HCl acuoso 1 N y la mezcla resultante se agitó durante 15 min a temperatura ambiente. El pH se ajustó a 3-4 con HCl acuoso 1 N. La capa orgánica separada se secó (Na₂SO₄) y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante LC/MS preparativa (Columna: XBridge C18, 200 mm x 19 mm, partículas de 5 μm; fase móvil A: 5:95 MeCN:H₂O con NH₄OAc acuoso 10-mM; fase móvil B: 95:5 MeCN:H₂O con NH₄OAc acuoso 10-mM; Gradiente: mantenimiento de 0-min a 15 % de B, 15-55 % de B durante 20 min, luego mantenimiento de 4-min a 100 % de B; velocidad de flujo: 20 ml/min; temperatura de columna: 25 °C. La recolección de fracciones se activó mediante señales de MS; las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron mediante evaporación centrífuga) para obtener el compuesto del título como un aceite viscoso incoloro (0,005 g, 93 %). LCMS, [M+H]⁺ = 469,9; RMN ¹H (500 MHz, DMSO-d₆) δ 7,84 (d, J=8,5 Hz, 1H), 7,49 (d, J=8,9 Hz, 1H), 7,13 (br t, J=6,1 Hz, 1H), 4,83 (br d, J=5,8 Hz, 2H), 4,77 (br s, 1H), 4,19 (d, J=7,3 Hz, 2H), 4,11 (s, 3H), 2,67-2,57 (m, 1H), 2,42 (s, 3H), 2,15-1,95 (m, 2H), 1,94-1,82 (m, 1H), 1,82-1,71 (m, 2H), 1,68-1,52 (m, 3H), 1,49 (br d, J=10,4 Hz, 1H), 0,80 (d, J=6,7 Hz, 6H).

Ejemplo 400. Ácido (1S,3S)-3-((6-(5-((2-(2-ciclopropiletil)-2H-tetrazol-5-il)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxílico

400A. (1S,3S)-3-((6-(5-(cianometil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de metilo

A una solución de Intermediario 5 (1,10 g, 2,60 mmol) en MeCN (10 ml) se agregó NaCN (0,127 g, 2,60 mmol) en DMSO (10 ml) en porciones. La mezcla de reacción se agitó a 0 °C durante 30 min, luego se dividió en EtOAc y agua. La fase acuosa se extrajo con EtOAc (3 X 20 ml). Los extractos orgánicos combinados se concentraron al vacío. El producto crudo se sometió a cromatografía (SiO₂; gradiente continuo de 0 % a 100 % de EtOAc en hexanos durante 20 min) para obtener el compuesto del título como un sólido blanco (0,864g, 2,34 mmol, 90 % de rendimiento). LCMS, [M+H]⁺ = 370,2; RMN ¹H (400 MHz, CDCl₃) δ 8,28-7,77 (m, 1H), 7,23 (d, J=8,8 Hz, 1H), 4,79-4,55 (m, 3H), 4,20 (s, 3H), 3,72 (s, 3H), 3,06-2,72 (m, 1H), 2,53 (s, 3H), 2,25-2,08 (m, 1H), 2,03-1,59 (m, 7H).

400B. (1S,3S)-3-((6-(5-((2H-tetrazol-5-il)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de metilo

Una mezcla de Intermediario 400A (230 mg, 0,623 mmol), TMSN₃ (717 mg, 6,23 mmol) y Bu₂SnO (0,310 g, 1,24 mmol) en tolueno (12,5 ml) se calentó a 90 °C, durante la noche, luego se enfrió hasta temperatura ambiente y se concentró al vacío. El residuo se sometió a cromatografía (12 g de SiO₂; gradiente continuo de 0-25 % de MeOH en DCM durante 20 min, 30 ml/min) para obtener el compuesto del título como una espuma blanca (201 mg, 79 %). LCMS, M+H]⁺ = 413,2.

400C. (1S,3S)-3-((6-(5-((2-(2-ciclopropiletil)-2H-tetrazol-5-il)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-metilpiridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de metilo

A una solución a temperatura ambiente de 400B (20 mg, 0,048 mmol), 2-ciclopropiletan-1-ol (8 mg, 0,097 mmol) y Ph₃P (25 mg, 0,097 mmol) se agregó DEAD por goteo (solución al 10 % en DCM, 0,150 ml, 0,097 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche, luego se concentró al vacío. El residuo se sometió a cromatografía (12 g de SiO₂; gradiente continuo de 0-100 % de EtOAc en hexano durante 15 min, 30 ml/min) para obtener el compuesto del título (como una mezcla inseparable con Ph₃PO; 100 % de rendimiento asumido). Este material se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional.

Ejemplo 400

A una solución a temperatura ambiente de 400C (23 mg, 0,048 mmol) en THF/MeOH (0,72 ml/0,24 ml) se agregó LiOH acuoso 2 M (0,24 ml, 0,48 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche, luego se dividió en DCM y HCl acuoso 1 N y la mezcla resultante se agitó durante 15 min a temperatura ambiente. El pH se ajustó a 3-4 con HCl acuoso 1 N; la capa orgánica se secó (Na₂SO₄), luego se concentró al vacío. El producto crudo se purificó mediante LC/MS preparativa (columna: XBridge C18, 200 mm x 19 mm, partículas de 5 μm; fase móvil A: 5:95 MeCN:H₂O con NH₄OAc acuoso 10-mM; fase móvil B: 95:5 MeCN:H₂O con NH₄OAc acuoso 10-mM; Gradiente: mantenimiento de 0-min a 15 % de B, 15-55 % de B durante 20 min, luego mantenimiento de 4-min a 100 % de B; velocidad de flujo: 20 ml/min; temperatura de columna: 25 °C. La recolección de fracciones se activó mediante señales de MS; las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron mediante evaporación centrífuga) para obtener el compuesto del título como un aceite viscoso incoloro (11 mg, 46 %, 2 etapas). LCMS, [M+H]⁺ = 457,4. RMN ¹H (500 MHz, DMSO-d₆) δ 7,81 (d, J=8,5 Hz, 1H), 7,43 (br d, J=8,5 Hz, 1H), 4,94 (s, 2H), 4,73 (br s, 1H), 4,62 (t, J=6,7 Hz, 2H), 4,03 (s, 3H), 2,59 (br s, 1H), 2,32 (s, 3H), 1,98 (br d, J=12,2 Hz, 1H), 1,83 (br s, 1H), 1,80-1,68 (m, 4H), 1,63-1,45 (m, 4H), 0,50 (br s, 1H), 0,23-0,19 (m, 2H), -0,16 (br d, J=4,6 Hz, 2H). hLPA₁ IC₅₀ = 129 nM.

Los Ejemplos de la siguiente tabla 21 se sintetizaron de acuerdo con los procedimientos descritos para la preparación de los Ejemplos indicados.

Tabla 21

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Ejemplo 411. Ácido (1S,3S)-3-((2-metil-6-(1-metil-5-((3-fenil-1,2,4-oxadiazol-5-il)amino)-1H-1,2,3-triazol-4-il)piridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxílico, 2 TFA

411A. (1S,3S)-3-((2-metil-6-(1-metil-5-((3-fenil-1,2,4-oxadiazol-5-il)amino)-1H-1,2,3-triazol-4-il)piridin-3-il)oxi)ciclohexan-1-carboxilato de metilo, 2 TFA

A una solución de Intermediario 18 (20 mg, 0,058 mmol) en 1,4-dioxano (1 ml) se agregaron 5-cloro-3-fenil-1,2,4-oxadiazol (10 mg, 0,058 mmol), Zn(OAc)₂ (6 mg, 0,035 mmol), 4,5-bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilxanteno (3,7 mg, 6,37 µmol), aducto de Pd₂(dba)₃-CHCl₃ (3 mg, 2,90 µmol) y K₂CO₃ (16 mg, 0,116 mmol). El recipiente de reacción se evacuó y se volvió a llenar con Ar (3X). La mezcla de reacción se agitó a 100 °C durante 18 h, luego se enfrió hasta temperatura ambiente y se concentró al vacío. El producto crudo se purificó mediante HPLC preparativa: Columna: Sunfire Prep C18 OBD 5 u 30 x 100 mm; fase móvil A: 10 % de MeCN- 90 % de H₂O- 0,1 % de TFA; fase móvil B: 90 % de MeCN- 10 % de H₂O- 0,1 % de TFA; Gradiente: 20-100 % de B durante 12 min; flujo: 40 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron mediante evaporación centrífuga para obtener el compuesto del título (4 mg, 10 %) como un sólido blanco. LCMS, [M+H]⁺ = 490,2. RMN ¹H (500 MHz, CD₃OD) δ 7,88-7,82 (m, 3H), 7,64 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,56-7,44 (m, 3H), 4,83-4,78 (m, 1H), 4,13 (s, 3H), 3,68 (s, 3H), 2,83-2,75 (m, 1H), 2,45 (s, 3H), 2,10-2,02 (m, 1H), 1,97-1,81 (m, 3H), 1,74-1,52 (m, 4H).

Ejemplo 411

El compuesto del título (3,1 mg, 79 % de rendimiento, sólido blanco) se preparó de 411A de acuerdo con el procedimiento descrito para la síntesis del Ejemplo 275, LCMS, [M+H]⁺ = 476,1. RMN ¹H (400 MHz, CD₃OD) δ 7,87-7,82 (m, 3H), 7,64 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,54-7,43 (m, 3H), 4,83-4,77 (m, 1H), 4,12 (s, 3H), 2,79-2,70 (m, 1H), 2,44 (s, 3H), 2,09-1,99 (m, 1H), 1,97-1,80 (m, 3H), 1,73-1,57 (m, 4H). hLPA₁ IC₅₀ = 1440 nM.

Claims (15)

REIVINDICACIONES

1. Compuesto de la Fórmula (I):

o un estereoisómero, un tautómero, un solvato o una sal fármaceuticamente aceptable de los mismos, en donde X¹, X², X³ y X⁴ son, cada uno independientemente, CR⁵ o N; siempre que no más de dos de X¹, X², X³ o X⁴ sean N; uno de Q¹, Q² y Q³ es NR⁶, y los otros dos son N; y el círculo discontinuo indica enlaces opcionales que forman un anillo aromático;

L es un enlace covalente o C_1-4 alquileno está sustituido con 0 a 4 R⁷;

Z es CHR^8a, NR^8b u O;

el anillo Y es un heteroarilo de 5 miembros o un heterociclilo de 5 miembros, cada uno de los cuales contiene independientemente un átomo de nitrógeno y al menos un heteroátomo adicional seleccionado de nitrógeno, oxígeno y azufre;

R¹ es (-CH₂)_aR⁹;

a es un número entero de 0 o 1;

R² es, cada uno independientemente, halo, ciano, hidroxilo, amino, C_1-6 alquilo, C_3-6 cicloalquilo, heterociclilo de 4 a 6 miembros, alquilamino, haloalquilo, hidroxialquilo, aminoalquilo, alcoxi, alcoxialquilo, haloalcoxialquilo o haloalcoxi; n es un número entero de 0, 1 o 2;

R³ es halo, ciano, hidroxilo, amino, oxo, -OR^a, -SR^a, =S, -NR^cR^c, =NH, =N-OH, =NR^a, =N-OR^a, -NO₂, -S(O)₂R^a, -S(O)₂NHR^b, -S(O)₂NR^cR^c, -S(O)₂OR^b, -OS(O)₂R^b, -OS(O)₂OR^b, -P(O)(OR^b)(OR^b), -C(O)R^b, -C(NR^b)R^b, -C(O)OR^b, -C(O)NR^cR^c, -C(NR^b)NR^cR^c, -OC(O)R^b, -NR^bC(O)R^b, -OC(O)OR^b, -NR^bC(O)OR^b, -OC(O)NR^cR^c, -NR^bC(O)NR^cR^c, -NR^bC(NR^b)R^b, -NR^bC(NR^b)NR^cR^c, C_1-6 alquilo, C_1-6 alquilo deuterado, C_1-6 haloalquilo, C_1-6 heteroalquilo, arilo de 6 a 10 miembros, arilalquilo, heteroarilo de 5 a 10 miembros, heteroarilalquilo, carbociclilo de 3 a 8 miembros, carbociclilalquilo, heterociclilo de 4 a 8 miembros o heterociclilalquilo; en donde los alquilo, heteroalquilo, arilo, heteroarilo, carbociclilo, heterociclilo y R^a, en sí mismos o como parte de otro grupo, se sustituyen, cada uno independientemente, con 0 a 5 R^d;

R^a se selecciona de C_1-6 alquilo, C_1-6 alquilo deuterado, haloalquilo, hidroxialquilo, aminoalquilo, alcoxialquilo, haloalcoxialquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, carbociclilo, carbociclilalquilo, heterociclilo y heterociclilalquilo;

R^b es, cada uno independientemente, hidrógeno o R^a;

R^c es, cada uno independientemente, R^b; o, alternativamente, dos R^c, tomados junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, forman un heterociclilo de 4 a 7 miembros;

R^d se selecciona, cada uno independientemente, de R^a, alcoxi, haloalcoxi, alquilamino, cicloalquilamino, heterociclilamino, haloalquilo, hidroxialquilo, aminoalquilo, cicloalcoxi, heterocicliloxi, haloalcoxi, alcoxialcoxi, haloalquilamino, alcoxialquilamino, haloalcoxialquilamino, arilamino, aralquilamino, ariloxi, aralquiloxi, heteroariloxi, heteroarilalquiloxi, alquiltio, halo, ciano, hidroxilo, amino, oxo, -OR^a, -SR^a, =S, -NR^cR^c, =NH, =N-OH, =NR^a, =N-OR^a, -NO₂, -S(O)₂R^a, -S(O)₂NHR^b, -S(O)₂NR^cR^c, -S(O)₂OR^b, -OS(O)₂R^b, -OS(O)₂OR^b, -P(O)(OR^b)(OR^b), -C(O)R^b, -C(NR^b)R^b, -C(O)OR^b, -C(O)NR^cR^c, -C(NR^b)NR^cR^c, -OC(O)R^b, -NR^bC(O)R^b, -OC(O)OR^b, -NR^bC(O)OR^b, -NR^bC(O)NR^cR^c, -NR^bC(NR^b)R^b y -NR^bC(NR^b)NR^cR^c; o, alternativamente, uno o dos R^d en alquilo, heteroalquilo, arilo, heteroarilo, carbociclilo o heterociclilo, tomados junto con los átomos a los que están unidos, forman una porción puente o cíclica;

R⁴ es, cada uno independientemente, halo, hidroxilo, amino, ciano, -C(O)NH₂, -C(O)NR^12aR^12b, C(O)OR^12a, C_1-4 alquilo, C_1-4 haloalquilo, C_2-6 alcoxialquilo, C_1-4 alcoxi, oxo (=O) o imino (=NH); o, alternativamente, R³ y R⁴, junto con los átomos a los que están unidos, forman una porción carbociclilo o heterociclilo;

m es un número entero de 0, 1 o 2;

R⁵ es hidrógeno, halo, ciano, hidroxilo, amino, C_1-6 alquilo, alquilamino, haloalquilo, hidroxialquilo, aminoalquilo, alcoxialquilo, haloalcoxialquilo, alcoxi o haloalcoxi;

R⁶ es hidrógeno, C_1-6 alquilo, alquilamino, haloalquilo, hidroxialquilo, aminoalquilo, alcoxialquilo, haloalcoxialquilo, alcoxi o haloalcoxi;

R⁷ es halo, oxo, ciano, hidroxilo, amino, C_1-6 alquilo, C_3-6 cicloalquilo, heterociclilo de 4 a 6 miembros, alquilamino, haloalquilo, hidroxialquilo, aminoalquilo, alcoxialquilo, haloalcoxialquilo, alcoxi o haloalcoxi;

R^8a es hidrógeno, halo, ciano o C_1-4 alquilo;

R^8b es hidrógeno o C_1-4 alquilo;

R⁹ se selecciona de –CN, –C(O)OR¹⁰, –C(O)NR^11aR^11b,

;

R^e es C_1-6 alquilo, haloalquilo, hidroxialquilo, aminoalquilo, alcoxialquilo o haloalcoxialquilo;

R¹⁰ es hidrógeno o C_1-10 alquilo;

R^11a y R^11b son, cada uno independientemente, hidrógeno, C_1-6 alquilo, C_3-6 cicloalquilo, heterociclilo de 4 a 6 miembros, alquilamino, haloalquilo, hidroxialquilo, aminoalquilo, alcoxialquilo, haloalcoxialquilo, alcoxi o haloalcoxi; R^12a es C_1-4 alquilo; y

R^12b es hidrógeno o C_1-4 alquilo;

en donde, a menos que se indique lo contrario, un grupo alquilo, tal como se usa solo o como parte de otro grupo, es un grupo alquilo que tiene de 1 a 10 átomos de carbono;

heteroalquilo se refiere a un grupo alquilo donde uno o más átomos de carbono han sido sustituidos con un heteroátomo seleccionado de O, N, o S;

amino se define como -NR^clR^c2, en donde R^cl y R^c2 son independientemente H o alquilo C_1-6; o alternativamente, R^cl y R^c2, tomados junto con los átomos a los que están unidos, forman un anillo heterocíclico de 3 a 8 miembros que está sustituido opcionalmente con uno o más grupos seleccionados de halo, ciano, hidroxilo, amino, oxo, alquilo C_1-6, alcoxi y aminoalquilo;

cicloalquilo, tal como se usa solo o como parte de otro grupo, se refiere a sistemas de anillos de alquilo ciclados de 1 a 3 anillos que contienen un total de 3 a 20 carbonos que forman los anillos y que pueden fusionarse en 1 o 2 anillos aromáticos como se describe para el arilo;

carbociclilo, tal como se usa solo o como parte de otro grupo, se refiere a cualquier anillo de hidrocarburo estable monocíclico o bicíclico de 3, 4, 5, 6, 7 u 8 miembros o bicíclico o tricíclico de 7, 8, 9, 10, 11, 12 o 13 miembros, cualquiera de los cuales puede estar saturado, parcialmente insaturado, insaturado o aromático, o a cualquier grupo de hidrocarburo cíclico saturado o parcialmente insaturado (que contenga 1 o 2 dobles enlaces) que contenga de 1 a 3 anillos, que contenga un total de 3 a 20 carbonos que formen los anillos y que puedan fusionarse en 1 o 2 anillos aromáticos tal como se describe para el arilo;

arilo, tal como se usa solo o como parte de otro grupo, se refiere a los hidrocarburos aromáticos monocíclicos o policíclicos;

heterociclilo, tal como se usa solo o como parte de otro grupo, se refiere a un anillo heterocíclico monocíclico estable de 3, 4, 5, 6 o 7 miembros o policíclico de 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13 o 14 miembros que está saturado o parcialmente insaturado y que contiene átomos de carbono y 1, 2, 3 o 4 heteroátomos seleccionados independientemente de N, O y S; e incluyendo cualquier grupo policíclico en el que cualquiera de los anillos heterocíclicos definidos anteriormente esté fusionado con un anillo carbocíclico o arilo; y

heteroarilo, tal como se usa solo o como parte de otro grupo, se refiere a hidrocarburos aromáticos monocíclicos, bicíclicos y tricíclicos estables que incluyen al menos un miembro del anillo de heteroátomos seleccionado de azufre, oxígeno o nitrógeno.

2. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, en donde

la porción

;

/o en donde:

Y¹, Y^2a e Y^3a se seleccionan, cada uno independientemente, de C o N; y el círculo discontinuo indica enlaces opcionales;

Y², Y³, Y⁴ e Y⁵ se seleccionan, cada uno independientemente, de C, CR^4a, N, NR^4b, S u O; siempre que (1) al menos uno de (Y¹, Y², Y^3a, Y⁴ e Y⁵) o al menos uno de (Y¹, Y^2a, Y³, Y⁴ e Y⁵) sea N o NR^4b, y (2) al menos uno de (Y¹, Y², Y^3a, Y⁴ e Y⁵) o al menos uno de (Y¹, Y^2a, Y³, Y⁴ e Y⁵) sea C o CR^4a;

R^4a es, cada uno independientemente, hidrógeno, halo, oxo, imino, C_1-4 alquilo, C_1-4 haloalquilo, C_2-6 alcoxialquilo, C_1-4 alcoxi; y

R^4b es, cada uno independientemente, hidrógeno o C_1-4 alquilo, y/o en donde:

R³ es halo, ciano, hidroxilo, amino, -OR^a, -SR^a, -NR^cR^c, C_1-6 alquilo, C_1-6 heteroalquilo, arilo de 6 a 10 miembros, arilalquilo, heteroarilo de 5 a 10 miembros, heteroarilalquilo, carbociclilo de 3 a 8 miembros, carbociclilalquilo, heterociclilo de 4 a 8 miembros o heterociclilalquilo; en donde los alquilo, heteroalquilo, arilo, heteroarilo, carbociclilo, heterociclilo y R^a, en sí mismos o como parte de otro grupo, se sustituyen, cada uno independientemente, con 0 a 5 R^d,

R^a se selecciona de C_1-6 alquilo, C_1-6 alquilo deuterado, haloalquilo, hidroxialquilo, aminoalquilo, alcoxialquilo, haloalcoxialquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, carbociclilo, carbociclilalquilo, heterociclilo y heterociclilalquilo;

R^b es, cada uno independientemente, hidrógeno o R^a;

R^c es, cada uno independientemente, R^b; o, alternativamente, dos R^c, tomados junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, forman un heterociclilo de 4 a 7 miembros; y

R^d se selecciona, cada uno independientemente, de R^a, alcoxi, haloalcoxi, alquilamino, cicloalquilamino, heterociclilamino, haloalquilo, hidroxialquilo, aminoalquilo, cicloalcoxi, heterocicliloxi, haloalcoxi, alcoxialcoxi, haloalquilamino, alcoxialquilamino, haloalcoxialquilamino, arilamino, aralquilamino, ariloxi, aralquiloxi, heteroariloxi, heteroarilalquiloxi, alquiltio, halo, ciano, hidroxilo, amino, oxo, -OR^a, -SR^a y -NR^cR^c; o, alternativamente, uno o dos R^d en alquilo, heteroalquilo, arilo, heteroarilo, carbociclilo o heterociclilo, tomados junto con los átomos a los que R^d está unido, forman una porción puente o cíclica.

3. El compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 o 2, caracterizado por que está representado por las Fórmulas (IIa) o (IIb):

Y¹, Y^2a e Y^3a se seleccionan, cada uno independientemente, de C o N;

Y², Y³, Y⁴ e Y⁵ se seleccionan, cada uno independientemente, de C, CR^4a, N, NR^4b, S u O; siempre que al menos uno de (Y¹, Y², Y^3a, Y⁴ e Y⁵) o al menos uno de (Y¹, Y^2a, Y³, Y⁴ e Y⁵) sea N o NR^4b; y el círculo discontinuo indica enlaces opcionales;

R^4a es, cada uno independientemente, hidrógeno, halo, hidroxilo, ciano, -C(O)NH₂, -C(O)NR^12aR^12b, C(O)OR^12a, C_1-4 alquilo, C_1-4 haloalquilo, C_2-6 alcoxialquilo, C_1-4 alcoxi, oxo o imino; o, alternativamente, R³ y R^4a, tomados junto con los átomos a los que están unidos, forman una porción carbociclilo o heterociclilo;

R^12a es C_1-4 alquilo;

R^12b es hidrógeno o C_1-4 alquilo;

R^4b es, cada uno independientemente, hidrógeno o C_1-4 alquilo;

R^7a es, cada uno independientemente, hidrógeno, halo, ciano, hidroxilo, amino, C_1-6 alquilo, C_3-6 cicloalquilo, alquilamino, haloalquilo, hidroxialquilo, aminoalquilo, alcoxialquilo, haloalcoxialquilo, alcoxi o haloalcoxi;

f es un número entero de 0, 1 o 2;

Z es CH₂ o NR^8b; siempre que cuando Z es NR^8b, Y¹ sea C;

n es 0 o 1;

R⁶ es C_1-4 alquilo; y

R¹, R², n, R³, R^8b, X¹, X², X³, y X⁴ son iguales a los que se definieron de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 o 2.

4. El compuesto de conformidad con la reivindicación 3, en donde X¹ es CR⁵, en donde R⁵ es hidrógeno o C_1-4 alquilo, y/o en donde X³ es N;

y en donde:

la porción

selecciona de

R^5a es, cada uno independientemente, halo, ciano, hidroxilo, amino, C_1-6 alquilo, alquilamino, haloalquilo, hidroxialquilo, aminoalquilo, alcoxialquilo, haloalcoxialquilo, alcoxi o haloalcoxi; y

d es un número entero de 0, 1 o 2.

5. El compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 3 o 4, en donde

la porción

Y², Y⁴ e Y⁵ son, cada uno independientemente, C, CR^4a, N, O o S;

preferentemente en donde:

y

R⁴ es metilo, Cl o F.

6. El compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 3 o 4, en donde

Y³, Y⁴ e Y⁵ son, cada uno independientemente, C, N, O o S; preferentemente en donde

7. El compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 3 a 6, en donde la porción

es

y/o en donde R^7a es hidrógeno;

y/o en donde R¹ es CO₂H.

8. EL compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, que está representado por las Fórmulas

Y¹ e Y^3a se seleccionan, cada uno independientemente, de C o N;

Y², Y⁴ e Y⁵ se seleccionan, cada uno independientemente, de C, CR^4a, N, S u O; siempre que al menos uno de Y¹, Y², Y^3a, Y⁴ e Y⁵ sea N o NR^4b; y el círculo discontinuo indica enlaces opcionales que forman un anillo aromático; R^2a es hidrógeno, cloro, flúor o C_1-4 alquilo;

R^4a es, cada uno independientemente, hidrógeno, halo, hidroxilo, ciano, -C(O)NH₂, -C(O)NHR, C(O)OR, C_1-4 alquilo, C_1-4 haloalquilo, C_2-6 alcoxialquilo o C_1-4 alcoxi;

R^4b es, cada uno independientemente, hidrógeno o C_1-4 alquilo;

R⁵ es hidrógeno o C_1-4 alquilo;

R⁶ es C_1-4 alquilo; y

R¹, R³, X², X³ y X⁴ son iguales a los que se definieron de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7.

9. Compuesto de conformidad con la reivindicación 8, en donde

la porción

se selecciona de

y/o en donde R¹ es CO₂H.

/o en donde

R⁵ es hidrógeno, metilo o etilo.

10. El compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 8 o 9, en donde

la porción

es

o

y

Y², Y⁴ e Y⁵ son, cada uno independientemente, C, N, O o S;

preferentemente en donde

la porción

es

.

11. El compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 8 a 10, en donde

R³ es halo, ciano, hidroxilo, amino, -OR^a, -SR^a, -NR^cR^c, C_1-6 alquilo, C_1-6 alquilo deuterado, C_1-6 haloalquilo, C_1-6 heteroalquilo, arilo de 6 a 10 miembros, arilalquilo, heteroarilo de 5 a 10 miembros, heteroarilalquilo, carbociclilo de 3 a 8 miembros, carbociclilalquilo, heterociclilo de 4 a 8 miembros o heterociclilalquilo; en donde los alquilo, heteroalquilo, arilo, heteroarilo, carbociclilo, heterociclilo y R^a, en sí mismos o como parte de otro grupo, se sustituyen, cada uno independientemente, con 0 a 5 R^d;

R^a se selecciona de C_1-6 alquilo, C_1-6 alquilo deuterado, haloalquilo, hidroxialquilo, aminoalquilo, alcoxialquilo, haloalcoxialquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, carbociclilo, carbociclilalquilo, heterociclilo y heterociclilalquilo;

R^b es, cada uno independientemente, hidrógeno o R^a;

R^c es, cada uno independientemente, R^b; o, alternativamente, dos R^c, tomados junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, forman un heterociclilo de 4 a 7 miembros; y

R^d se selecciona, cada uno independientemente, de R^a, alcoxi, haloalcoxi, alquilamino, cicloalquilamino, heterociclilamino, haloalquilo, hidroxialquilo, aminoalquilo, cicloalcoxi, heterocicliloxi, haloalcoxi, alcoxialcoxi, haloalquilamino, alcoxialquilamino, haloalcoxialquilamino, arilamino, aralquilamino, ariloxi, aralquiloxi, heteroariloxi, heteroarilalquiloxi, alquiltio, halo, ciano, hidroxilo, amino, oxo, -OR^a, -SR^a y -NR^cR^c; o, alternativamente, uno o dos R^d en alquilo, heteroalquilo, arilo, heteroarilo, carbociclilo o heterociclilo, tomados junto con los átomos a los que R^d está unido, forman una porción puente o cíclica;

y/o en donde:

R³ es C_1-6 alquilo, C_1-6 haloalquilo, C_1-6 alcoxi, C_1-6 alcoxi deuterado, C_1-6 haloalcoxi, -S-(C_1-6 alquilo), C_3-6 cicloalquilo, heterociclilo de 4 a 6 miembros, fenilo, (un heteroarilo de 5 o 6 miembros que contiene de 1 a 3 heteroátomos en donde cada uno se selecciona independientemente de N, O y S), -(C_1-3 alquilen)-(C_3-6 cicloalquilo), -(C_1-3 alquilen)-(fenilo), -(C_1-3 alquilen)-(heterociclilo de 4 a 6 miembros), -O-(C_3-6 cicloalquilo), -O-(heterociclilo de 4 a 6 miembros), O-fenilo, -O-(heteroarilo de 5 o 6 miembros que contiene de 1 a 3 heteroátomos en donde cada uno se selecciona independientemente de N, O y S), -O-(C_1-3 alquilen)-(fenilo), -O-(C_1-3 alquilen)-(C_3-6 cicloalquilo), -NH-(C_1-3 alquilen)-(fenilo), -NH-(C_1-6 alquilo), -NH-(C_1-6 haloalquilo), -NH-fenilo, -NH-(C_3-6 cicloalquilo), -NH-(C_1-3 alquilen)-(C_3-6 cicloalquilo) y -N(C_1-6 alquilo)₂; y los alquilo, alquileno, cicloalquilo, fenilo, heterociclilo y heteroarilo, en sí mismos o como parte de otro grupo, se sustituyen, cada uno independientemente, con 0 a 3 R^d; y

R^d es halo, ciano, hidroxilo, amino, C_1-6 alquilo, C_1-6 alcoxi, C_3-6 cicloalquilo o heterociclilo de 4 a 6 miembros;

R^4a es hidrógeno, flúor, cloro, C_1-4 alquilo, C_1-4 haloalquilo, C_2-6 alcoxialquilo o C_1-4 alcoxi; y

R^4b es hidrógeno.

12. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, que se selecciona de

Ċ

IJ66

o un estereoisómero, un tautómero o un solvato o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

13. Composición farmacéutica que comprende uno o más compuestos de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12, o un estereoisómero, un tautómero o una sal farmacéuticamente aceptable o un solvato del mismo; y un vehículo o un diluyente farmacéuticamente aceptables.

14. Compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12, o un estereoisómero, un tautómero, o un solvato o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para usarse en terapia.

15. Un compuesto o un estereoisómero, un tautómero, o un solvato o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12, o una composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 13,

(A) para usarse en el tratamiento de una enfermedad, un trastorno o una afección asociados a la desregulación del receptor 1 de ácido lisofosfatídico (LPA₁), en donde la enfermedad, el trastorno o la afección se seleccionan de: (I) fibrosis patológica, preferentemente fibrosis pulmonar, hepática, renal, cardíaca, dérmica, ocular o pancreática, rechazo a trasplante; cáncer, preferentemente en donde el cáncer es de vejiga, de sangre, óseo, cerebral, de mama, del sistema nervioso central, del cuello del útero, de colon, de endometrio, de esófago, de la vesícula biliar, genital, del tracto genitourinario, de cabeza, de riñón, de laringe, de hígado, de pulmón, de tejido muscular, de cuello, de mucosa oral o nasal, de ovario, de páncreas, de próstata, de piel, del bazo, del intestino delgado, del intestino grueso, de estómago, de testículo o de tiroides; osteoporosis o trastornos inflamatorios; o

(II) fibrosis pulmonar idiopática (IPF), esteatohepatitis no alcohólica (NASH), hepatopatía grasa no alcohólica (NAFLD), enfermedad renal crónica, enfermedad renal diabética y esclerosis sistémica; o

(B) para usarse en el tratamiento de fibrosis en un mamífero que lo necesita, preferentemente en donde la fibrosis es fibrosis pulmonar idiopática (IPF), esteatohepatitis no alcohólica (NASH), enfermedad renal crónica, enfermedad renal diabética y esclerosis sistémica, o

(C) para usarse en el tratamiento de fibrosis pulmonar (fibrosis pulmonar idiopática), asma, enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC), fibrosis renal, lesión renal aguda, enfermedad renal crónica, fribrosis hepática (esteatohepatitis no alcohólica), fibrosis dérmica, fibrosis del intestino, cáncer de mama, cáncer de páncreas, cáncer de ovarios, cáncer de próstata, glioblastoma, cáncer óseo, cáncer de colon, cáncer de intestino, cáncer de cabeza y cuello, melanoma, mieloma múltiple, leucemia linfocítica crónica, dolor asociado al cáncer, metástasis tumoral, rechazo al órgano trasplantado, esclerodermia, fibrosis ocular, degeneración macular relacionada con la edad (AMD), retinopatía diabética, enfermedad vascular del colágeno, ateroesclerosis, fenómeno de Raynaud o dolor neuropático en un mamífero que lo necesita.