ES2941774T3

ES2941774T3 - Acidos oxabiciclo como antagonistas de LPA

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Publication number: ES2941774T3
Application number: ES19779297T
Authority: ES
Inventors: Peter Tai Wah Cheng; Jun Shi; Shiwei Tao; Hao Zhang
Original assignee: Bristol Myers Squibb Co
Current assignee: Bristol Myers Squibb Co
Priority date: 2018-09-18
Filing date: 2019-09-16
Publication date: 2023-05-25
Anticipated expiration: 2039-09-16
Also published as: EP3853232B1; JP2022500473A; JP7412424B2; WO2020060914A1; EP3853232A1; KR20210060546A; US20210317131A1; CN113366000A

Abstract

La presente invención proporciona compuestos de Fórmula (Ia) o (Ib) o un estereoisómero, tautómero o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptables, donde todas las variables son como se definen en este documento. Estos compuestos son inhibidores selectivos del receptor LPA. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Ácidos oxabiciclo como antagonistas de LPA

Campo de la invención

La presente invención se refiere a compuestos de ácido oxabiciclo sustituidos novedosos, a composiciones que los contienen y a los compuestos para su uso en métodos de tratamiento de trastornos asociados con uno o más de los receptores de ácido lisofosfatídico (LPA).

Antecedentes de la invención

Los lisofosfolípidos son mediadores lipídicos bioactivos derivados de la membrana, de los cuales uno de los más importantes desde el punto de vista médico es el ácido lisofosfatídico (LPA). El LPA no es una entidad molecular única sino una colección de variantes estructurales endógenas con ácidos grasos de diversas longitudes y grados de saturación (Fujiwara et al., J Biol. Chem., 2005, 280, 35038-35050). El esqueleto estructural de los l Pa deriva de fosfolípidos basados en glicerol tales como la fosfatidilcolina (PC) o el ácido fosfatídico (PA).

Los LPA son lípidos bioactivos (lípidos de señalización) que regulan varias rutas de señalización celular al unirse a la misma clase de receptores acoplados a proteínas G del dominio 7-transmembrana (GPCR) (Chun, J., Hla, T., Spiegel, S., Moolenaar, W., Editores, Lysophospholipid Receptors: Signaling and Biochemistry, 2013, Wiley; ISBN: 978-0-470 56905-4 y Zhao, Y. et al, Biochim. Biophys. Acta (BBA) Mol. Cell Biol. Of Lipids, 2013, 1831, 86-92). Los receptores de LPA conocidos actualmente se denominan LPA¹, LPA², LPA³, LPA⁴, LPAs y LPA⁶(Choi, J. W., Annu. Rev. Pharmacol. Toxicol., 2010, 50, 157-186; Kihara, Y., et al, Br. J. Pharmacol., 2014, 171, 3575-3594).

Los LPA se conocen desde hace mucho tiempo como precursores de la biosíntesis de fosfolípidos en las células eucariotas y procariotas, pero los LPA han emergido recientemente como moléculas de señalización que las células activadas producen y liberan rápidamente, especialmente las plaquetas, para influir en las células diana al actuar sobre receptores específicos de la superficie celular (véase, por ejemplo, Moolenaar et al., BioEssays, 2004, 26, 870-881, y van Leewen et al., Biochem. Soc. Trans., 2003, 31, 1209-1212). Además de sintetizarse y procesarse a fosfolípidos más complejos en el retículo endoplasmático, los LPA pueden generarse a través de la hidrólisis de fosfolípidos preexistentes después de la activación celular; por ejemplo, a la posición sn-2 le falta comúnmente un resto de ácido graso debido a la desacilación, dejando solo el hidroxilo sn-1 esterificado a un ácido graso. Además, una enzima clave en la producción de LPA, la autotaxina (lysoPLD/NPP2), puede ser el producto de un oncogén, ya que muchos tipos de tumor regulan por incremento la autotaxina (Brindley, D., J. Cell Biochem. 2004, 92, 900-12). Se han notificado las concentraciones de LPA en plasma y suero humano así como en el líquido de lavado broncoalveolar (BALF, del inglés "bronchoalveolar lavage fluid") humano, incluyendo determinaciones hechas usando procedimientos de CL/EM y CL/EN/EM sensibles y específicos (Baker et al. Anal. Biochem., 2001, 292, 287-295; Onorato et al., J. Lipid Res., 2014, 55, 1784-1796).

El LPA influye en un amplio abanico de respuestas biológicas, que van desde la inducción de la proliferación celular, la estimulación de la migración celular y la retracción de neuritas, el cierre de la unión de huecos e incluso la quimiotaxis del moho del limo (Goetzl, et al., Scientific World J., 2002, 2, 324-338; Chun, J., Hla, T., Spiegel, S., Moolenaar, W., Editores, Lysophospholipid Receptors: Signaling and Biochemistry, 2013, Wiley; ISBN: 978-0-470-56905-4). El cuerpo de conocimiento sobre la biología de LPA continúa creciendo a medida que se prueban más y más sistemas celulares para determinar la capacidad de respuesta de LPA. Por ejemplo, ahora se sabe que, además de estimular el crecimiento y la proliferación celular, los LPA promueven la tensión celular y la unión de fibronectina a la superficie celular, que son acontecimientos importantes en la reparación y regeneración de heridas (Moolenaar et al., BioEssays, 2004, 26, 870-881). Recientemente, también se ha atribuido actividad antiapoptótica a los LPA y recientemente se ha informado que PpA ry es un receptor/diana para los LPA (Simon et al., J. Biol. Chem., 2005, 280, 14656-14662).

La fibrosis es el resultado de un proceso de cicatrización de tejido descontrolado que conduce a una acumulación excesiva y una resorción insuficiente de la matriz extracelular (m Ec ) que finalmente da como resultado el fallo terminal del órgano (Rockey, D. C., et al., New Engl. J. Med., 2015, 372, 1138-1149). Recientemente se informó que el receptor LPA1 se sobreexpresó en pacientes con fibrosis pulmonar idiopática (FPI). Los ratones con inactivación del receptor de LPA¹estaban protegidos también frente a la fibrosis pulmonar inducida por bleomicina (Tager et al., Nature Med., 2008, 14, 45-54). Se demostró recientemente que los inhibidores de la ruta de LPA (por ejemplo, un antagonista de LPA¹) eran agentes antifibróticos quimiopreventivos en el tratamiento del carcinoma hepatocelular en un modelo de rata (Nakagawa et al., Cancer Cell, 2016, 30, 879-890).

Por lo tanto, antagonizar el receptor LPA¹puede ser útil para el tratamiento de la fibrosis tales como fibrosis pulmonar, fibrosis hepática, fibrosis renal, fibrosis arterial y esclerosis sistémica y por lo tanto las enfermedades que resultan de la fibrosis (fibrosis pulmonar-fibrosis pulmonar idiopática [IPF, del inglés "Idiopathic Pulmonary Fibrosis"]), fibrosis hepática: esteatohepatitis no alcohólica [NASH, del inglés "Non-alcoholic Steatohepatitis"], fibrosis renal-nefropatía diabética, esclerosis sistémica-esclerodermia, etc.). El documento WO 2019/126085 desvela ácidos carbamoilciclohexílicos unidos con N como antagonistas de LPA. El documento WO 2012/078805 desvela un antagonista de LPA1 policíclicos y sus usos. El documento WO 2017/223016 desvela ácidos carbamoiloximetil-triazolciclohexílicos como antagonistas de LPA.

Sumario de la invención

La presente invención proporciona compuestos de ácido oxabiciclo incluyendo estereoisómeros, tautómeros, sales o solvatos farmacéuticamente aceptables de los mismos, que son útiles como antagonistas frente a uno o más de los receptores de ácido lisofosfatídico (LPA), en especial el receptor LPA1.

La presente invención también proporciona composiciones farmacéuticas que comprenden un vehículo farmacéuticamente aceptable y al menos uno de los compuestos de la presente invención o estereoisómeros, tautómeros, sales o solvatos farmacéuticamente aceptables de los mismos.

Los compuestos de la invención se pueden usar en el tratamiento de afecciones en que las que el LPA desempeña una función.

Los compuestos de la presente invención se pueden usar en terapia.

Los compuestos de la presente invención se pueden usar para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una afección en la que la inhibición de la actividad fisiológica del LPA es útil, tal como enfermedades en las que participa un receptor de LPA, está implicada en la etiología o patología de la enfermedad o está asociada de otro modo con al menos un síntoma de la enfermedad.

En otro aspecto, la presente invención se refiere a compuestos de la presente invención para su uso en un método para tratar fibrosis de órganos (hígado, riñón, pulmón, corazón y similares así como piel), enfermedades hepáticas (hepatitis aguda, hepatitis crónica, fibrosis hepática, cirrosis hepática, hipertensión portal, fallo regenerativo, esteatohepatitis no alcohólica (NASH), hipofunción hepática, trastorno del flujo sanguíneo hepático y similares), enfermedad de las células proliferativas [cáncer (tumor sólido, metástasis tumoral sólida, fibroma vascular, mieloma, mieloma múltiple, sarcoma de Kaposi, leucemia, leucemia linfocítica crónica (CLL) y similares) y metástasis invasiva de células cancerosas y similares], enfermedad inflamatoria (psoriasis, nefropatía, neumonía y similares), enfermedad del tracto gastrointestinal (síndrome del intestino irritable (IBS), enfermedad inflamatoria del intestino (IBD), secreción pancreática anormal y similares), enfermedad renal, enfermedad asociada al tracto urinario (hiperplasia prostática benigna o síntomas asociados con la enfermedad de la vejiga neuropática, tumor de la médula espinal, hernia de disco intervertebral, estenosis del canal espinal, síntomas derivados de la diabetes, enfermedad del tracto urinario inferior (obstrucción de tracto urinario inferior y similares), enfermedad inflamatoria del tracto urinario inferior, disuria, micción frecuente y similares), enfermedad pancreática, enfermedad asociada a angiogénesis anómala (obstrucción arterial y similares), esclerodermia, enfermedad asociada al cerebro (infarto cerebral, hemorragia cerebral y similares), dolor neuropático, neuropatía periférica y similares, enfermedad ocular (degeneración macular relacionada con la edad (AMD), retinopatía diabética, vitreorretinopatía proliferativa (PVR), penfigoide cicatricial, cicatrización por cirugía de filtración de glaucoma y similares).

Los compuestos de la presente invención pueden usarse en un método para tratar enfermedades, trastornos o afecciones en los que la activación de al menos un receptor de LPA por LPA contribuye a la sintomatología o progresión de la enfermedad, trastorno o afección. Estas enfermedades, trastornos o afecciones pueden surgir a partir de una o varias de una etiología genética, iatrogénica, inmunológica, infecciosa, metabólica, oncológica, tóxica, quirúrgica y/o traumática.

Los compuestos de la presente invención pueden usarse en un método para tratar fibrosis renal, fibrosis pulmonar, fibrosis hepática, fibrosis arterial y esclerosis sistémica, que comprende administrar a un paciente que necesita dicho tratamiento un compuesto de la presente invención como se ha descrito anteriormente.

En un aspecto, la presente invención proporciona compuestos, composiciones farmacéuticas y medicamentos descritos en el presente documento que comprenden antagonistas de los receptores de LPA, especialmente antagonistas de LPA1.

Los compuestos de la invención pueden usarse solos, en combinación con otros compuestos de la presente invención o en combinación con uno o más, preferiblemente de uno a dos agentes distintos.

Estas y otras características de la invención se expondrán con más amplitud según avance la divulgación.

Descripción detallada de la invención

I. COMPUESTOS DE LA INVENCIÓN

En un primer aspecto, la presente invención proporciona, entre otros, un compuesto de Fórmula (Ia) o (Ib):

n estereoisómero, tautómero o sal farmacéuticamente aceptable o solvato del mismo, en donde:

el resto

es independientemente;

-Z1-Z2- es -O-CH²- o -CHz-O-;

X1, X²y X³son cada uno independientemente CH o CR6a; y R6a es independientemente halo, hidroxilo, alquilo C¹-⁶, haloalquilo C^1-4o alcoxi C¹-⁴;

el resto

es independientemente

en donde * indica el punto de unión a L; y

el resto

está unido a las posiciones con asterisco (*) en la Fórmula (Ia) o (Ib);

L es independientemente un enlace covalente o metileno;

el resto

es independientemente

Y⁵independientemente es O o NH;

R¹es CO^2;

R^3ay R^3bson independientemente hidrógeno o alquilo C^1-4;

R⁴es -L¹-R^4a;

L¹es independientemente un enlace covalente o alquileno C^1-4sustituido con 0 a 4 R⁹;

R^4aes independientemente alquilo C^1-10, haloalquilo C^1-10, alquenilo C^1-10, cicloalquilo C^3-8, arilo C^6-10, heterociclilo de 3 a 8 miembros, heteroarilo de 5 a 6 miembros; en donde cada uno del alquilo, alquenilo, alquileno, cicloalquilo, arilo, heterociclilo y heteroarilo, por sí mismo o como parte de otro resto, está independientemente sustituido con de 0 a 3 R¹⁰;

R^5aes independientemente hidrógeno, haloalquilo C^1-4, -(CH²)^0-1-(cicloalquilo C^3-6), -(fenilo CH²)^0-1o alquilo C^1-6sustituido con 0 a 3 R^a;

R^5bes independientemente hidrógeno, halo, ciano, hidroxilo, amino, alcoxi C^1-4, haloalquilo C^1.4, haloalcoxi C^1.4, alquilamino C^1.4, -(CH²)^0-1-(cicloalquilo C^3-6), -(fenilo CH²)^ü-1o alquilo C^1.6sustituido con 0 a 3 R^b;

R⁷y R⁸son cada uno independientemente hidrógeno, alquilo C^1-6, haloalquilo C^1.4o cicloalquilo C^3-6;

cada R⁹es independientemente halo, oxo, ciano, hidroxilo, amino, haloalquilo C^1-4, alcoxi C^1.4, haloalcoxi C^1.4, cicloalquilo C^3-6o alquilo C^1.6sustituido con 0 a 3 R^a;

cada R¹⁰es independientemente halo, hidroxilo, amino, ciano, alquenilo C^2-6, alquinilo C^2-6, alquilamino C^1.4, haloalquilo C^1-4, alcoxi C^1.4, haloalcoxi C^1.4, fenilo o heteroarilo de 5 a 6 miembros, alquilo C^1-6sustituido con 0 a 3 R^b;

R^aes independientemente halo, ciano, hidroxilo, alcoxi C^1.4, haloalquilo C^1-4o haloalcoxi C^1.4;

R^bes independientemente halo, ciano, hidroxilo, amino, alcoxi C^1-4, haloalquilo C^1.4o haloalcoxi C^1.4; y m es un número entero de 0, 1 o 2.

En una realización de Fórmula (la) o (Ib), dentro del alcance del primer aspecto, en donde X1, X²y X³son CR6; donde R⁶es hidrógeno, halo o alquilo C¹-⁴, por ejemplo, metilo.

En un segundo aspecto, la presente invención proporciona un compuesto de acuerdo con el 1er aspecto que es un compuesto de Fórmula (IIa) o (IIb):

o un estereoisómero, tautómero o sal farmacéuticamente aceptable o solvato del mismo, en donde:

-Z¹-Z²- es -O-CH²- o -CHz-O-;

el resto

es independientemente

m es un número entero de ¹o ²;

* indica el punto de unión a L;

L es independientemente un enlace covalente o -CH²-;

el resto

es independientemente

R⁴es independientemente cicloalquilo C^3-6, -(CH²)-cicloalquilo C^3-6, -(CH(alquil C^i-2))-cicloalquilo C^3-6, -(CH²)-fenilo o -(CH(alquil C^1-2))-fenilo, en donde cada uno de dicho cicloalquilo y fenilo está independientemente sustituido con 0 a 3 R¹⁰;

R^5aes independientemente alquilo C^1-6o -CH²-(cicloalquilo C^3-6);

R^5bes independientemente hidrógeno, halo, ciano, hidroxilo, alquilo C^1.4, alcoxi C^1-4, haloalquilo C^1.4o haloalcoxi C^1-4;

cada R^6aes independientemente halo, hidroxilo, alquilo C^1-6, haloalquilo C^1.4o alcoxi C^1.4;

R⁷y R⁸son cada uno independientemente hidrógeno o alquilo C^1-2;

cada R¹⁰es independientemente halo, ciano, hidroxilo, alquilo C^1-6, haloalquilo C^1.6, alcoxi C^1.6o haloalcoxi C^1-6; y d es independientemente 0, 1 o 2.

En un tercer aspecto, dentro del alcance del segundo aspecto, en donde:

el resto

es independientemente

m es un numero entero de 1; y

R⁴es independientemente -(CH²)-cicloalquilo C^3-6, -(CH(alquil C^1-2))-cicloalquilo C^3-6, -(CH²)-fenilo o -(CH(alquil C^1-2))-fenilo, en donde cada uno de dicho cicloalquilo y fenilo está independientemente sustituido con 0 a 2 R¹⁰

En un cuarto aspecto, la presente invención proporciona un compuesto de acuerdo con el 1er aspecto que es un compuesto de Fórmula (Mía) o (IlIb):

en donde: -Z¹-Z²- es -O-CH²- o -CH²-O-;

el resto

es independientemente

* indica el punto de unión al átomo de nitrógeno de -NH-C(O)-OR⁴;

R⁴es independientemente -(CH²)-fenilo o -(CH(CH³))-fenilo, en donde dicho fenilo está independientemente sustituido con 0 a 2 R¹⁰;

cada R^6aes independientemente halo o alquilo C^1-4;

cada R¹⁰es independientemente halo, ciano, hidroxilo, alquilo C^1-4, haloalquilo C^1-4o alcoxi C^1.4; y

d es independientemente 0 o 1.

En una realización de la presente invención, el compuesto se selecciona entre uno cualquiera de los ejemplos que se describen en la memoria descriptiva o un estereoisómero, un tautómero o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo.

En una realización, los compuestos de la presente invención tienen valores de CE⁵⁰de hLPA1 < 5000 nM, usando el ensayo de antagonistas funcionales de LPA1; en otra realización, los compuestos de la presente invención tienen valores de CE⁵⁰de hLPA1 < 1000 nM; en otra realización, los compuestos de la presente invención tienen valores de CE⁵⁰de hLPA1 < 500 nM; en otra realización, los compuestos de la presente invención tienen valores de CE⁵⁰de hLPA1 < 200 nM; en otra realización, los compuestos de la presente invención tienen valores de CE⁵⁰de hLPA1 < 100 nM; en otra realización, los compuestos de la presente invención tienen valores de CE⁵⁰de hLPA1 < 50 nM.

II. OTRAS REALIZACIONES DE LA INVENCIÓN

En algunas realizaciones, el compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, es un antagonista de al menos un receptor de LPA. En algunas realizaciones, el compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, es un antagonista de LPA¹. En algunas realizaciones, el compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, es un antagonista de LPA². En algunas realizaciones, el compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, es un antagonista de LPA³.

En algunas realizaciones, se presentan en el presente documento compuestos seleccionados entre tautómeros, sales farmacéuticamente aceptables o solvatos de un compuesto de la presente invención.

En otra realización, la presente invención proporciona una composición que comprende al menos uno de los compuestos de la presente invención o un estereoisómero, un tautómero, una sal farmacéuticamente aceptable o un solvato del mismo.

En otra realización, la presente invención proporciona una composición farmacéutica que comprende un vehículo farmacéuticamente aceptable y una cantidad terapéuticamente eficaz de al menos uno de los compuestos de la presente invención o un estereoisómero, un tautómero, una sal farmacéuticamente aceptable o un solvato del mismo.

En otra realización, la presente invención proporciona una composición farmacéutica que comprende además otro u otros agentes terapéuticos.

En otra realización, la presente invención proporciona compuestos para su uso en un método para el tratamiento de una afección asociada con fibrosis mediada por el receptor de LPA, que comprende administrar a un paciente que necesita dicho tratamiento una cantidad terapéuticamente eficaz de al menos uno de los compuestos de la presente invención o un estereoisómero, un tautómero, una sal farmacéuticamente aceptable o un solvato del mismo. Como se usa en el presente documento, el término "paciente" abarca todas las especies de mamíferos.

En otra realización, la presente invención proporciona compuestos para su uso en un método para tratar una enfermedad, trastorno o afección asociada con desregulación del receptor 1 del ácido lisofosfatídico (LPA1) en un paciente que lo necesita, que comprende administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la presente invención o un estereoisómero, tautómero o una sal farmacéuticamente aceptable o solvato del mismo, al paciente. La enfermedad, trastorno o afección puede estar relacionado con la fibrosis patológica, rechazo de trasplante, cáncer, osteoporosis o trastornos inflamatorios. La fibrosis patológica puede ser fibrosis pulmonar, hepática, renal, cardíaca, dernal, ocular o pancreática. La enfermedad, trastorno o afección pueden ser fibrosis pulmonar idiopática (IPF), esteatohepatitis no alcohólica (NASH), enfermedad de hígado graso no alcohólica (NAFLD), enfermedad renal crónica, enfermedad renal diabética y esclerosis sistémica. El cáncer puede ser de vejiga, sangre, hueso, cerebro, mama, sistema nervioso central, cuello del útero, colon, endometrio, esófago, vesícula biliar, genitales, tracto genitourinario, cabeza, riñón, laringe, hígado, pulmón, tejido muscular, cuello, mucosa oral o nasal, ovario, páncreas, próstata, piel, bazo, intestino delgado, intestino grueso, estómago, testículo o tiroides.

En otra realización, la presente invención proporciona compuestos para su uso en un método para tratar fibrosis en un mamífero que comprende administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la presente invención o un estereoisómero, tautómero o una sal farmacéuticamente aceptable o solvato del mismo, al mamífero que lo necesita. La fibrosis puede ser fibrosis pulmonar idiopática (IPF), esteatohepatitis no alcohólica (NASH), enfermedad renal crónica, enfermedad renal diabética y esclerosis sistémica.

En otra realización, la presente invención proporciona compuestos para su uso en un método para tratar fibrosis pulmonar (fibrosis pulmonar idiopática), asma, enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC), fibrosis renal, lesión renal aguda, enfermedad renal crónica, fibrosis hepática (esteatohepatitis no alcohólica), fibrosis cutánea, fibrosis del intestino, cáncer de mama, cáncer de páncreas, cáncer de ovario, cáncer de próstata, glioblastoma, cáncer de huesos, cáncer de colon, cáncer de intestino, cáncer de cabeza y cuello, melanoma, mieloma múltiple, leucemia linfocítica crónica, dolor por cáncer, metástasis tumoral, rechazo de trasplante de órgano, esclerodermia, fibrosis ocular, degeneración macular relacionada con la edad (AMD), retinopatía diabética, enfermedad vascular por colágeno, aterosclerosis, fenómeno de Raynaud o dolor neuropático en un mamífero, que comprende administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la presente invención o un estereoisómero, tautómero o una sal farmacéuticamente aceptable o solvato del mismo, al mamífero que lo necesita.

Como se usa en el presente documento, "tratar" o "tratamiento" abarca el tratamiento de un estado patológico en un mamífero, en particular en un ser humano e incluyen: (a) inhibir el estado patológico, es decir, detener su desarrollo; y/o (b) aliviar el estado patológico, es decir, provocar la regresión del estado patológico. Como se usa en el presente documento, "tratar" o "tratamiento" también incluye el tratamiento protector de un estado patológico para reducir y/o minimizar el riesgo y/o la reducción del riesgo de recurrencia de un estado patológico mediante la administración a un paciente de una cantidad terapéuticamente eficaz de al menos uno de los compuestos de la presente invención o un estereoisómero, un tautómero, una sal farmacéuticamente aceptable o un solvato del mismo. Los pacientes se pueden seleccionar para dicha terapia protectora basándose en factores que se sabe que aumentan el riesgo de padecer un estado patológico clínico en comparación con la población general. Para el tratamiento protector, las afecciones del estado patológico clínico pueden estar o no presentes todavía. El tratamiento protector se puede dividir en (a) profilaxis primaria y (b) profilaxis secundaria. La profilaxis primaria se define como el tratamiento para reducir o minimizar el riesgo de un estado patológico en un paciente que todavía no ha presentado un estado patológico clínico, mientras que la profilaxis secundaria se define como minimizar o reducir el riesgo de una recurrencia o segunda ocurrencia del mismo o similar estado patológico clínico.

III. QUÍMICA

A lo largo de la memoria descriptiva y las reivindicaciones adjuntas, una fórmula o nombre químico dado puede abarcar todos los estereoisómeros e isómeros ópticos y los racematos del mismo cuando existan tales isómeros. A menos que se indique otra cosa, todas las formas quirales (enantioméricas y diastereoméricas) y racémicas están dentro del alcance de la presente invención. Muchos isómeros geométricos de dobles enlaces C=C, dobles enlaces C=N, sistemas de anillos y similares también pueden estar presentes en los compuestos y todos estos isómeros estables están contemplados en la presente invención. Se describen los isómeros geométricos cis y trans (o E y Z) de los compuestos de la presente invención y pueden aislarse en forma de una mezcla de isómeros o como formas isoméricas separadas. Los compuestos presentes se pueden aislar en formas ópticamente activas o racémicas. Las formas ópticamente activas pueden prepararse por resolución de formas racémicas o por síntesis a partir de materiales de partida ópticamente activos. Se considera que todos los procesos usados para preparar los compuestos de la presente invención y los intermedios elaborados con los mismos forman parte de la presente invención. Cuando se preparan productos enantioméricos o diastereoméricos, pueden separarse por métodos convencionales, por ejemplo, por cromatografía o cristalización fraccionada. Dependiendo de las condiciones del proceso, los productos finales de la presente invención se obtienen en forma libre (neutra) o de sal. Tanto la forma libre como las sales de estos productos finales están dentro del alcance de la invención. Si se desea, una forma de un compuesto se puede convertir en otra forma. Una base o un ácido libre se puede convertir en una sal; una sal se puede convertir en el compuesto libre o en otra sal; una mezcla de compuestos isoméricos de la presente invención se puede separar en los isómeros individuales. Los compuestos de la presente invención, la forma libre y las sales de los mismos, pueden existir en múltiples formas tautoméricas, en las que los átomos de hidrógeno se transponen a otras partes de las moléculas y, por consiguiente, se reordenan los enlaces químicos entre los átomos de las moléculas. Debe entenderse que todas las formas tautoméricas, en la medida en que puedan existir, se incluyen dentro de la invención.

El término "estereoisómero" se refiere a isómeros de constitución idéntica que difieren en la disposición espacial de sus átomos. Los enantiómeros y diastereómeros son ejemplos de estereoisómeros. El término "enantiómero" se refiere a una de un par de especies moleculares que son imágenes especulares entre sí y no son superponibles. El término "diastereómero" se refiere a estereoisómeros que no son imágenes especulares. El término "racemato" o "mezcla racémica" se refiere a una composición compuesta por cantidades equimolares de dos especies enantioméricas, en donde la composición está desprovista de actividad óptica.

Los símbolos "R" y "S" representan la configuración de los sustituyentes alrededor de un átomo o átomos de carbono quirales. Los descriptores isoméricos "R" y "S" se usan como se describe en el presente documento para indicar una configuración o configuraciones de átomos con respecto a una molécula central y se pretende que se usen como se define en la bibliografía (IUPAC Recommendations 1996, Pure and Applied Chemistry, 68:2193-2222 (1996)).

El término "quiral" se refiere a la característica estructural de una molécula que hace imposible que se superponga sobre su imagen especular. El término "homoquiral" se refiere a un estado de pureza enantiomérica. La expresión "actividad óptica" se refiere al grado al cual una molécula homoquiral o mezcla no racémica de moléculas quirales rota un plano de luz polarizada.

Como se usa en el presente documento, se pretende que el término "alquilo" o "alquileno" incluya grupos hidrocarburo alifáticos saturados de cadena tanto ramificada como lineal que tengan el número de átomos de carbono especificado. Mientras que "alquilo" representa un radical alifático, saturado, monovalente (tal como etilo), "alquileno" representa un radical alifático, saturado, bivalente (tal como etileno). Por ejemplo, "alquilo C¹a C¹⁰" o "alquilo C^1-10" pretende incluir grupos alquilo C¹, C², C³, C⁴, C⁵, C^e, C⁷, C^e, C^gy C¹⁰. "Alquileno C¹a C¹⁰" o "alquileno C^1-10", pretende incluir los grupos alquileno C¹, C², C³, C⁴, C⁵, C^e, C⁷, C^e, C⁹y C¹⁰. Además, por ejemplo, "alquilo C¹a C^e" o "alquilo C^1-6" representa alquilo que tiene de 1 a 6 átomos de carbono; y "alquileno C¹a C⁶" o "alquileno C^1-6" representa alquileno que tiene de 1 a 6 átomos de carbono; y "alquilo C¹a C⁴" o "alquilo C^1-4" representa alquilo que tiene de 1 a 4 átomos de carbono; y "alquileno C¹a C⁴" o "alquileno C^1-4" representa alquileno que tiene de 1 a 4 átomos de carbono. El grupo alquilo puede estar sin sustituir o sustituido con al menos un hidrógeno que se reemplaza por otro grupo químico. Los ejemplos de grupos alquilo incluyen, pero sin limitación, metilo (Me), etilo (Et), propilo (por ejemplo, n-propilo e isopropilo), butilo (por ejemplo, n-butilo, isobutilo, t-butilo) y pentilo (por ejemplo, n-pentilo, isopentilo, neopentilo). Cuando se usa "alquilo C⁰" o "alquileno C⁰", se pretende indicar un enlace directo. Además, el término "alquilo", por sí mismo o como parte de otro grupo, tal como alquilamino, haloalquilo, hidroxialquilo, aminoalquilo, alcoxi, alcoxialquilo, haloalcoxialquilo y haloalcoxi, puede ser un alquilo que tiene de 1 a 4 átomos de carbono o de 1 a 6 átomos de carbono o de 1 a 10 átomos de carbono.

"Heteroalquilo" se refiere a un grupo alquilo en donde uno o más átomos de carbono se han reemplazado con un heteroátomo, tal como, O, N o S. Por ejemplo, si el átomo de carbono del grupo alquilo que está unido a la molécula precursora se reemplaza con un heteroátomo (por ejemplo, O, N o S) los grupos heteroalquilo resultantes son, respectivamente, un grupo alcoxi (por ejemplo, -OCH³, etc.), un alquilamino (por ejemplo, -NHCH³, -N(CH³)², etc.) o un grupo tioalquilo (por ejemplo, -SCH³). Si el átomo de carbono no terminal del grupo alquilo que no está unido a la molécula precursora se reemplaza con un heteroátomo (por ejemplo, O, N o S) y los grupos heteroalquilo resultantes son, respectivamente, un alquil éter (por ejemplo, -CH²CH²-O-CH³, etc.), un alquilaminoalquilo (por ejemplo, -CH²NHCH³, -CH²N(CH³)², etc.), o un tioalquil éter (por ejemplo, -CH²-S-CH³). Si un átomo de carbono terminal del grupo alquilo se reemplaza con un heteroátomo (por ejemplo, O, N o S), los grupos heteroalquilo resultantes son, respectivamente, un grupo hidroxialquilo (por ejemplo, -CH²CH²-OH), un grupo aminoalquilo (por ejemplo, -CH²NH²) o un grupo alquil tiol (por ejemplo, -CH²CH²-SH). Un grupo heteroalquilo puede tener, por ejemplo, de 1 a 20 átomos de carbono, de 1 a 10 átomos de carbono o de 1 a 6 átomos de carbono. Un grupo heteroalquilo C¹-C⁶significa un grupo heteroalquilo que tiene de 1 a 6 átomos de carbono.

"Alquenilo" o "alquenileno" pretende incluir cadenas de hidrocarburo tanto de configuración lineal como ramificada que tienen el número especificado de átomos de carbono y uno o más, preferentemente de uno a dos, dobles enlaces carbono-carbono que pueden aparecer en cualquier punto estable a lo largo de la cadena. Por ejemplo, "alquenilo C²a C⁶" o "alquenilo C^2-6" (o alquenileno), pretende incluir los grupos alquilo C², C³, C⁴, grupos alquenilo C⁵y C⁶. Ejemplos de alquenilo incluyen, pero sin limitación, etenilo, 1-propenilo, 2-propenilo, 2-butenilo, 3-butenilo, 2-pentenilo, 3-pentenilo, 4-pentenilo, 2-hexenilo, 3-hexenilo, 4-hexenilo, 5-hexenilo, 2-metil-2-propenilo y 4-metil-3-pentenilo.

"Alquinilo" o "alquinileno" pretende incluir cadenas de hidrocarburo de configuración tanto lineal como ramificada que tienen uno o más, preferentemente de uno a tres, triples enlaces carbono-carbono que pueden aparecer en cualquier punto estable a lo largo de la cadena. Por ejemplo, "alquinilo C²a C⁶" o "alquinilo C^2-6" (o alquinileno), pretende incluir los grupos alquilo C², C³, C⁴, grupos alquinilo C⁵y C⁶; tales como etinilo, propinilo, butinilo, pentinilo y hexinilo.

Como se usa en el presente documento, "arilalquilo" (también conocido como aralquilo), "heteroarilalquilo", "carbociclilalquilo" o "heterociclilalquilo" se refiere a un radical alquilo acíclico en el que uno de los átomos de hidrógeno unido a un átomo de carbono, normalmente un átomo de carbono terminal o sp³, está reemplazado con un radical arilo, heteroarilo, carbociclilo o heterociclilo, respectivamente. Los grupos arilalquilo habituales incluyen, pero sin limitación, bencilo, 2-feniletan-1-ilo, naftilmetilo, 2-naftiletan-1-ilo, naftobencilo, 2-naftofeniletan-1-ilo y similares. El grupo arilalquilo, heteroarilalquilo, carbociclilalquilo o heterociclilalquilo puede comprender de 4 a 20 átomos de carbono y de 0 a 5 heteroátomos, por ejemplo, el resto alquilo puede contener de 1 a 6 átomos de carbono.

El término "bencilo", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo metilo en el que uno de los átomos de hidrógeno está reemplazado por un grupo fenilo, en donde dicho grupo fenilo puede estar opcionalmente sustituido con 1 a 5 grupos, preferentemente de 1 a 3 grupos, OH, OCH³, Cl, F, Br, I, CN, NO², NH², N(CH²)H, N(CH³)², CF³, OCF³, C(=O)CH³, SCH³, S(=O)CH³, S(=O)²CH³, CH³, CH²CH³, CO²H y CO²CH³. "Bencilo" también se puede representar por la fórmula "Bn".

El término "alcoxi" o "alquiloxi" se refiere a un grupo -O-alquilo. "Alcoxi C¹a C⁶" o "alcoxi C^1-6" (o alquiloxi), pretende incluir los grupos alquilo C¹, C², C³, C⁴, grupos alcoxi C⁵y C⁶. Los ejemplos de grupos alcoxi incluyen, pero sin limitación, metoxi, etoxi, propoxi (por ejemplo, n-propoxi e isopropoxi) y f-butoxi. De manera similar, "alquiltio" o "tioalcoxi" representa un grupo alquilo como se ha definido anteriormente con el número indicado de átomos de carbono unidos mediante un puente de azufre; por ejemplo, metil-S- y etil-S-.

El término "alcanoílo" o "alquilcarbonilo" como se usa en el presente documento, solo o como parte de otro grupo, se refiere a alquilo unido a un grupo carbonilo. Por ejemplo, alquilcarbonilo puede estar representado por alquil-C(O)-.

"Alquilcarbonilo C¹a C⁶" (o alquilcarbonilo), pretende incluir los grupos alquil C¹-, C²-, C³-, C⁴-, C⁵- y

El término "alquilsulfonilo" o "sulfonamida" como se usa en el presente documento, solo o como parte de otro grupo, se refiere a alquilo o amino unido a un grupo sulfonilo. Por ejemplo, alquilsulfonilo puede estar representado por -S(O)²R', mientras que sulfonamida puede estar representada por -S(O)²NR^cR^d. R' es alquilo C¹a C⁶; y R^cy R^dson como se definen a continuación para "amino".

El término "carbamato" como se usa en el presente documento, solo o como parte de otro grupo, se refiere a oxígeno unido a un grupo amido. Por ejemplo, el carbamato puede estar representado por N(R^cR^d)-C(O)-O-, y R^cy R^dson como se definen a continuación para "amino".

El término "amido" como se usa en el presente documento, solo o como parte de otro grupo, se refiere a amino unido a un grupo carbonilo. Por ejemplo, amido puede estar representado por N(R^cR^d)-C(O)-, y R^cy R^dson como se definen a continuación para "amino".

El término "amino" se define como -NR^c1R^c2, en donde R^c1y R^c2son independientemente H o alquilo C^1-6; o como alternativa, R^c1y R^c2, tomados junto con los átomos a los que están unidos, forman un anillo heterocíclico de 3 a 8 miembros que está opcionalmente sustituido con uno o más grupos seleccionados entre halo, ciano, hidroxilo, amino, oxo, alquilo C^1-6, alcoxi y aminoalquilo. Cuando R^c1o R^c2(o ambos) es alquilo C^1-6, el grupo amino también se puede denominar alquilamino. Los ejemplos de grupo alquilamino incluyen, sin limitación, metilamino, etilamino, propilamino, isopropilamino y similares. En una realización, amino es -NH².

El término "aminoalquilo" se refiere a un grupo alquilo en el que uno de los átomos de hidrógeno está reemplazado por un grupo amino. Por ejemplo, aminoalquilo puede estar representado por N(R^c1R^c2)-alquileno-. "Aminoalquilo C¹a C⁶" o "C^1-6" (o aminoalquilo), pretende incluir los grupos aminoalquilo C¹, C², C³, C⁴, C⁵y C⁶.

Los términos "halógeno" o "halo" tal como se usan en el presente documento, solos o como parte de otro grupo, se refieren a cloro, bromo, flúor y yodo, prefiriéndose cloro o flúor.

"Haloalquilo" pretende incluir grupos hidrocarburo alifáticos saturados tanto de cadena ramificada como lineal que tienen el número especificado de átomos de carbono, sustituidos con uno o más halógenos. "haloalquilo C¹a C⁶" o "haloalquilo C W (o haloalquilo), pretende incluir los grupos haloalquilo C¹, C², C³, C⁴, C⁵y C⁶. Los ejemplos de haloalquilo incluyen, pero sin limitación, fluorometilo, difluorometilo, trifluorometilo, triclorometilo, pentafluoroetilo, pentacloroetilo, 2,2,2-trifluoroetilo, heptafluoropropilo y heptacloropropilo. Ejemplos de haloalquilo también incluyen "fluoroalquilo", que pretende incluir grupos hidrocarburo alifáticos saturados, tanto de cadena lineal como ramificada, que tienen el número especificado de átomos de carbono, sustituidos con 1 o más átomos de flúor. El término "polihaloalquilo", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo "alquilo" como se ha definido anteriormente que incluye de 2 a 9, preferentemente de 2 a 5, sustituyentes halo, tales como F o Cl, preferentemente F, tal como polifluoroalquilo, por ejemplo, CF³CH², CF³o CF³CF²CH².

"Haloalcoxi" o "haloalquiloxi" representa un grupo haloalquilo como se ha definido anteriormente con el número indicado de átomos de carbono, unido a través de un puente de oxígeno. Por ejemplo, "haloalcoxi C¹a C⁶" o "haloalcoxi C^1-6", pretende incluir los grupos haloalcoxi C¹, C², C³, C⁴, C⁵y C⁶. Ejemplos de haloalcoxi incluyen, pero sin limitación, trifluorometoxi, 2,2,2-trifluoroetoxi y pentafluorotoxi. De manera similar, "haloalquiltio" o "tiohaloalcoxi" representa un grupo haloalquilo como se ha definido anteriormente con el número indicado de átomos de carbono unido a través de un puente de azufre; por ejemplo trifluorometil-S- y pentafluoroetil-S-. El término "polihaloalquiloxi", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo "alcoxi" o "alquiloxi" como se ha definido anteriormente que incluye de 2 a 9, preferentemente de 2 a 5, sustituyentes halo, tales como F o Cl, preferentemente F, tal como polifluoroalcoxi, por ejemplo, CF³CH²O, CF³O o CF³CF²CH²O.

"Hidroxialquilo" pretende incluir grupos hidrocarburo alifáticos saturados, tanto de cadena ramificada como lineal, que tienen el número especificado de átomos de carbono, sustituido con 1 o más hidroxilos (OH). "Hidroxialquilo C¹a C⁶" (o hidroxialquilo), pretende incluir los grupos hidroxialquilo C¹, C², C³, C⁴, C⁵y C⁶.

El término "cicloalquilo" se refiere a grupos alquilo ciclados, incluyendo sistemas de anillo mono-, bi- o policíclicos. "Cicloalquilo C³a C⁸" o "cicloalquilo C^3-8" pretende incluir grupos cicloalquilo C³, C⁴, C⁵, C⁶, C⁷y C⁸, incluyendo anillos monocíclicos, bicíclicos y policíclicos. Ejemplos de grupos cicloalquilo incluyen, pero sin limitación, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo y norbornilo. Los grupos cicloalquilo ramificados tales como 1-metilciclopropilo y 2-metilciclopropilo y espiro y grupos cicloalquilo puenteados están incluidos en la definición de "cicloalquilo".

El término "cicloheteroalquilo" se refiere a grupos heteroalquilo ciclados, incluyendo sistemas de anillo mono-, bi- o policíclicos. "Cicloheteroalquilo C³a C⁷" o "cicloheteroalquilo C^3-7" pretende incluir grupos cicloheteroalquilo C³, C⁴, C⁵, C⁶y C⁷. Los ejemplos de grupos cicloheteroalquilo incluyen, pero sin limitación, oxetanilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidropiranilo, azetidinilo, pirrolidinilo, piperidinilo, morfolinilo y piperazinilo. Los grupos cicloheteroalquilo ramificados, tales como piperidinilmetilo, piperazinilmetilo, morfolinilmetilo, piridinilmetilo, piridizilmetilo, pirimidilmetilo y pirazinilmetilo, están incluidos en la definición de "cicloheteroalquilo".

Como se usa en el presente documento, "carbociclo", "carbociclilo" o "resto carbocíclico" pretende indicar cualquier anillo de hidrocarburo monocíclico o bicíclico de 3, 4, 5, 6, 7 u 8 miembros o anillo de hidrocarburo bicíclico o tricíclico de 7, 8, 9, 10, 11, 12 o 13 miembros estable, cualquiera de los cuales puede estar saturado, parcialmente insaturado, insaturado o ser aromático. Ejemplos de dichos carbociclos incluyen, pero sin limitación, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclobutenilo, ciclopentilo, ciclopentenilo, ciclohexilo, cicloheptenilo, cicloheptilo, cicloheptenilo, adamantilo, ciclooctilo, ciclooctenilo, ciclooctadienilo, [3.3.0]biciclooctano, [4.3.0]biciclononano, [4.4.0]biciclodecano (decalina), [2.2.2] biciclooctano, fluorenilo, fenilo, naftilo, indanilo, adamantilo, antracenilo y tetrahidronaftilo (tetralina). Como se ha mostrado anteriormente, los anillos con puente también están incluidos en la definición de carbociclo (por ejemplo, [2.2.2] biciclooctano). Carbociclos preferidos, a menos que se indique otra cosa, son ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, fenilo e indanilo. Cuando se usa el término "carbociclilo", este pretende incluir "arilo". Un anillo con puente se produce cuando uno o más átomos de carbono unen dos átomos de carbono no adyacentes. Los puentes preferidos son uno o dos átomos de carbono. Nótese que un puente siempre convierte un anillo monocíclico en un anillo tricíclico. Cuando un anillo está puenteado, los sustituyentes citados para el anillo también pueden estar presentes en el puente.

Además, el término "carbociclilo", que incluye "cicloalquilo" y "cicloalquenilo", como se emplea en el presente documento, solo o como parte de otro grupo, incluye grupos hidrocarburo cíclicos saturados o parcialmente insaturados (que contienen 1 o 2 dobles enlaces) que contienen de 1 a 3 anillos, que incluyen monocicloalquilo, bicicloalquilo y tricicloalquilo, que contienen un total de 3 a 20 átomos de carbono formando los anillos, preferentemente de 3 a 10 carbonos o de 3 a 6 carbonos, formando el anillo y que pueden estar condensados con 1 o 2 anillos aromáticos como se describe para arilo, que incluye ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo, ciclooctilo, ciclodecilo y ciclododecilo, ciclohexenilo,

cualquiera de dichos grupos puede estar opcionalmente sustituido con de 1 a 4 sustituyentes tales como halógeno, alquilo, alcoxi, hidroxi, arilo, ariloxi, arilalquilo, cicloalquilo, alquilamido, alcanoilamino, oxo, acilo, arilcarbonilamino, nitro, ciano, tiol y/o alquiltio y/o cualquiera de los sustituyentes alquilo.

Como se usa en el presente documento, la expresión "carbociclilo bicíclico" o "grupo carbocíclico bicíclico" pretende indicar un sistema de anillos carbocíclico de 9 o 10 miembros que contiene dos anillos condensados y consiste en átomos de carbono. De los dos anillos condensados, un anillo es un anillo benzo condensado a un segundo anillo; y el segundo anillo es un anillo de carbono de 5 o 6 miembros que está saturado, parcialmente insaturado o insaturado. El grupo carbocíclico bicíclico puede estar unido a su grupo colgante en cualquier átomo de carbono que dé como resultado una estructura estable. El grupo carbocíclico bicíclico descrito en el presente documento puede estar sustituido en cualquier carbono si el compuesto resultante es estable. Ejemplos de un grupo carbocíclico bicíclico son, pero sin limitación, naftilo, 1,2-dihidronaftilo, 1,2,3,4-tetrahidronaftilo e indanilo.

Como se usa en el presente documento, el término "arilo", como se emplea en el presente documento, solo o como parte de otro grupo, se refiere a hidrocarburos aromáticos monocíclicos o policíclicos (que incluyen bicíclicos y tricíclicos), incluyendo, por ejemplo, fenilo, naftilo, antracenilo y fenantranilo. Los restos arilo se conocen bien y se describen, por ejemplo, en Lewis, R.J., ed., Hawley's Condensed Chemical Dictionary, 13a edición, John Wiley & Sons, Inc., Nueva York (1997). En una realización, el término "arilo" representa grupos aromáticos monocíclicos y bicíclicos que contienen de 6 a 10 carbonos en la porción anular (tales como fenilo o naftilo, que incluye 1 -naftilo y 2-naftilo). Por ejemplo, "arilo C⁶o C¹⁰" o "arilo C^6-10" se refiere a fenilo y naftilo. A menos que se especifique otra cosa, "arilo", "arilo C⁶o C¹⁰", "arilo C^6-10" o "resto aromático" puede estar sin sustituir o sustituido con de 1 a 5 grupos, preferentemente de 1 a 3 grupos, seleccionados entre OH, OCH³, Cl, F, Br, I, CN, NO², NH², N(CH²)H, N(CH^a)², CF³, OCF³, C(=O)CH^a, SCH³, S(=O)CH³, S(=O)²CH³, CH³, CH²CH³, CO²H y CO²CH³.

El término "bencilo", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo metilo en el que uno de los átomos de hidrógeno está reemplazado por un grupo fenilo, en donde dicho grupo fenilo puede estar opcionalmente sustituido con 1 a 5 grupos, preferentemente de 1 a 3 grupos, OH, OCH³, Cl, F, Br, I, CN, NO², NH², N(CH³)H, N(CH³)², CF³, OCF³, C(=O)CH³, SCH³, S(=O)CH³, S(=O)²CH³, CH³, CH²CH³, CO²H y CO²CH³.

Como se usa en el presente documento, el término "heterociclo", "heterociclilo" o "grupo heterocíclico" pretende indicar un anillo heterocíclico monocíclico de 3, 4, 5, 6 o 7 miembros o policíclico de 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13 o 14 miembros (incluyendo bicíclico y tricíclico) estable que es saturado o parcialmente insaturado, y que contiene átomos de carbono y 1, 2, 3 o 4 heteroátomos seleccionados independientemente entre N, O y S; e incluye cualquier grupo policíclico en el que cualquiera de los anillos heterocíclicos anteriormente definidos está condensado a un anillo carbocíclico o uno arilo (por ejemplo, benceno). Es decir, el término "heterociclo", "heterociclilo" o "grupo heterocíclico" incluye sistemas anulares no aromáticos, tales como heterocicloalquilo y heterocicloalquenilo. Los heteroátomos de nitrógeno y azufre pueden estar opcionalmente oxidados (es decir, N ^ O y S(O)^p, en donde p es 0, 1 o 2). El átomo de nitrógeno puede estar sustituido o sin sustituir (es decir, N o NR en donde R es H u otro sustituyente, si se define). El anillo heterocíclico puede estar unido a su grupo colgante en cualquier heteroátomo o átomo de carbono que dé como resultado una estructura estable. Los anillos heterocíclicos descritos en el presente documento pueden estar sustituidos en un átomo de carbono o en uno de nitrógeno si el compuesto resultante es estable. Un nitrógeno del heterociclo puede estar opcionalmente cuaternizado. Se prefiere que cuando el número total de átomos S y O en el heterociclo exceda de 1, entonces estos heteroátomos no sean adyacentes entre sí. Se prefiere que el número total de átomos de S y O en el heterociclo no sea mayor de 1. Los ejemplos de heterociclilo incluyen, sin limitación, azetidinilo, piperazinilo, piperidinilo, piperidonilo, piperonilo, piranilo, morfolinilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidroisoquinolinilo, tetrahidroquinolinilo, morfolinilo, dihidrofuro[2,3-£)]tetrah¡drofurano.

Como se usa en el presente documento, la expresión "heterociclo bicíclico" o "grupo heterocíclico bicíclico" pretende indicar un sistema anular heterocíclico de 9- o 10 miembros estable que contiene dos anillos condensados y que consiste en átomos de carbono y 1, 2, 3 o 4 heteroátomos seleccionados independientemente entre N, O y S. De los dos anillos condensados, un anillo es un anillo aromático monocíclico de 5 o 6 miembros que comprende un anillo heteroarilo de 5 miembros, un anillo heteroarilo de 6 miembros o un anillo benzo, cada uno condensado a un segundo anillo. El segundo anillo es un anillo monocíclico de 5 o 6 miembros el cual está saturado, parcialmente insaturado o insaturado y comprende un heterociclo de 5 miembros, un heterociclo de 6 miembros o un carbociclo (con la condición de que el primer anillo no sea benzo cuando el segundo anillo sea un carbociclo).

El grupo heterocíclico bicíclico puede estar unido a su grupo colgante en cualquier heteroátomo o átomo de carbono que dé como resultado una estructura estable. El grupo heterocíclico bicíclico descrito en el presente documento puede estar sustituido en un átomo de carbono o en uno de nitrógeno si el compuesto resultante es estable. Se prefiere que cuando el número total de átomos S y O en el heterociclo exceda de 1, entonces estos heteroátomos no sean adyacentes entre sí. Se prefiere que el número total de átomos de S y O en el heterociclo no sea superior a 1. Ejemplos de grupo heterocíclico bicíclico son, pero sin limitación, 1,2,3,4-tetrahidroquinolinilo, 1,2,3,4-tetrahidroisoquinolinilo, 5,6,7,8-tetrahidro-quinolinilo, 2,3-dihidro-benzofuranilo, cromanilo, 1,2,3,4-tetrahidro-quinoxalinilo y 1,2,3,4-tetrahidroquinazolinilo.

Los anillos con puentes también están incluidos en la definición de heterociclo. Un anillo con puentes aparece cuando uno o más átomos (es decir, C, O, N o S) unen dos átomos de carbono o de nitrógeno no adyacentes. Los ejemplos de anillos puenteados incluyen, pero sin limitación, un átomo de carbono, dos átomos de carbono, un átomo de nitrógeno, dos átomos de nitrógeno y un grupo de carbono-nitrógeno. Nótese que un puente siempre convierte un anillo monocíclico en un anillo tricíclico. Cuando un anillo está puenteado, los sustituyentes citados para el anillo también pueden estar presentes en el puente.

Como se usa en el presente documento, el término "heteroarilo" pretende indicar hidrocarburos aromáticos monocíclicos y policíclicos (que incluyen bicíclicos y tricíclicos) estables, que incluyen al menos un miembro del anillo heteroátomo, tal como azufre, oxígeno o nitrógeno. Los grupos heteroarilo incluyen, sin limitación, piridilo, pirimidinilo, pirazinilo, piridazinilo, triazinilo, furilo, quinolilo, isoquinolilo, tienilo, imidazolilo, tiazolilo, indolilo, pirroílo, oxazolilo, benzofurilo, benzotienilo, benzotiazolilo, isoxazolilo, pirazolilo, triazolilo, tetrazolilo, indazolilo, 1,2,4-tiadiazolilo, isotiazolilo, purinilo, carbazolilo, benzoimidazolilo, indolinilo, benzodioxolanilo y benzodioxano. Los grupos heteroarilo están sustituidos o sin sustituir. El átomo de nitrógeno está sustituido o sin sustituir (es decir, N o NR en el que R es H u otro sustituyente, si se define). Los heteroátomos de nitrógeno y azufre pueden estar opcionalmente oxidados (es decir, N ^ O y S(O)^p, en donde p es 0, 1 o 2).

Los ejemplos de heteroarilo también incluyen, pero sin limitación, acridinilo, azocinilo, benzoimidazolilo, benzofuranilo, benzotiofuranilo, benzotiofenilo, benzoxazolilo, benzoxazolinilo, benzotiazolilo, benzotriazolilo, benzotetrazolilo, benzoisoxazolilo, benzoisotiazolilo, benzoimidazolinilo, carbazolilo, 4aH-carbazolilo, carbolinilo, cromanilo, cromenilo, cinolinilo, decahidroquinolinilo, 2H,6H-1,5,2-ditiazinilo, furanilo, furazanilo, imidazolidinilo, imidazolinilo, imidazolilo, 1H-indazolilo, imidazolopiridinilo, indolenilo, indolinilo, indolizinilo, indolilo, 3H-indolilo, isatinoílo, isobenzofuranilo, isocromanilo, isoindazolilo, isoindolinilo, isoindolilo, isoquinolinilo, isotiazolilo, isotiazolopiridinilo, isoxazolilo, isoxazolopiridinilo, metilendioxifenilo, naftiridinilo, octahidroisoquinolinilo, oxadiazolilo, 1,2,3-oxadiazolilo, 1,2,4-oxadiazolilo, 1,2,5-oxadiazolilo, 1,3,4-oxadiazolilo, oxazolidinilo, oxazolilo, oxazolopiridinilo, oxazolidinilperimidinilo, oxindolilo, pirimidinilo, fenantridinilo, fenantrolinilo, fenazinilo, fenotiazinilo, fenoxatianilo, fenoxazinilo, ftalazinilo, pteridinilo, purinilo, pirazinilo, pirazolidinilo, pirazolinilo, pirazolopiridinilo, pirazolilo, piridazinilo, piridooxazolilo, piridoimidazolilo, piridotiazolilo, piridinilo, pirimidinilo, pirrolidinilo, pirrolinilo, 2-pirrolidonilo, 2H-pirrolilo, pirrolilo, quinazolinilo, quinolinilo, 4H-quinolizinilo, quinoxalinilo, quinuclidinilo, tetrazolilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidroisoquinolinilo, tetrahidroquinolinilo, 6H-1,2,5-tiadiazinilo, 1,2,3-tiadiazolilo, 1,2,4-tiadiazolilo, 1,2,5-tiadiazolilo, 1,3,4-tiadiazolilo, tiantrenilo, tiazolilo, tienilo, tiazolopiridinilo, tienotiazolilo, tienooxazolilo, tienoimidazolilo, tiofenilo, triazinilo, 1,2,3-triazolilo, 1,2,4-triazolilo, 1,2,5-triazolilo, 1,3,4-triazolilo y xantenilo.

Los ejemplos de heteroarilo de 5 a 10 miembros incluyen, pero sin limitación, piridinilo, furanilo, tienilo, pirazolilo, imidazolilo, imidazolidinilo, indolilo, tetrazolilo, isoxazolilo, oxazolilo, oxadiazolilo, oxazolidinilo, tiadiazinilo, tiadiazolilo, tiazolilo, triazinilo, triazolilo, benzoimidazolilo, 1H-indazolilo, benzofuranilo, benzotiofuranilo, benzotetrazolilo, benzotriazolilo, benzoisoxazolilo, benzoxazolilo, oxindolilo, benzoxazolinilo, benzotiazolilo, benzoisotiazolilo, isatinoílo, isoquinolinilo, octahidroisoquinolinilo, isoxazolopiridinilo, quinazolinilo, quinolinilo, isotiazolopiridinilo, tiazolopiridinilo, oxazolopiridinilo, imidazolopiridinilo y pirazolopiridinilo. Los ejemplos de heteroarilo de 5 a 6 miembros incluyen, pero sin limitación, piridinilo, furanilo, tienilo, pirrolilo, pirazolilo, pirazinilo, imidazolilo, imidazolidinilo, indolilo, tetrazolilo, isoxazolilo, oxazolilo, oxadiazolilo, oxazolidinilo, tiadiazinilo, tiadiazolilo, tiazolilo, triazinilo y triazolilo. En algunas realizaciones, el heteroarilo se selecciona entre benzotiazolilo, imidazolpiridinilo, pirrolopiridinilo, quinolinilo e indolilo.

A menos que se indique otra cosa, "carbociclilo" o "heterociclilo" incluye de uno a tres anillos más condensados al anillo carbocíclico o el anillo heterocíclico (tal como anillos arilo, cicloalquilo, heteroarilo o cicloheteroalquilo), por ejemplo,

y puede estar opcionalmente sustituido mediante átomos de carbono o nitrógeno (según sea aplicable) con 1, 2 o 3 grupos seleccionados entre hidrógeno, halo, haloalquilo, alquilo, haloalquilo, alcoxi, haloalcoxi, alquenilo, trifluorometilo, trifluorometoxi, alquinilo, cicloalquilalquilo, cicloheteroalquilo, cicloheteroalquilalquilo, arilo, heteroarilo, arilalquilo, ariloxi, ariloxialquilo, arilalcoxi, alcoxicarbonilo, arilcarbonilo, arilalquenilo, aminocarbonilarilo, ariltio, arilsulfinilo, arilazo, heteroarilalquilo, heteroarilalquenilo, heteroarilheteroarilo, heteroariloxi, hidroxi, nitro, ciano, tiol, alquiltio, ariltio, heteroariltio, ariltioalquilo, alcoxiariltio, alquilcarbonilo, arilcarbonilo, alquilaminocarbonilo, arilaminocarbonilo, alcoxicarbonilo, aminocarbonilo, alquilcarboniloxi, arilcarboniloxi, alquilcarbonilamino, arilcarbonilamino, arilsulfinilo, arilsulfinilalquilo, arilsulfonilamino y arilsulfonaminocarbonilo y/o cualquiera de los sustituyentes de alquilo indicados en el presente documento.

Cuando cualquiera de los términos alquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, carbociclilo, heterociclilo, arilo y heteroarilo se usan como parte de otro grupo, el número de átomos de carbono y miembros del anillo son los mismos que los definidos en los términos por sí mismos. Por ejemplo, alcoxi, haloalcoxi, alquilamino, haloalquilo, hidroxialquilo, aminoalquilo, haloalcoxi, alcoxialcoxi, haloalquilamino, alcoxialquilamino, haloalcoxialquilamino, alquiltio y similares contienen, cada uno de manera independiente, el número de átomos de carbono que es igual al que se ha definido para el término "alquilo", tal como de 1 a 4 átomos de carbono, de 1 a 6 átomos de carbono, de 1 a 10 átomos de carbono, etc. De manera similar, cicloalcoxi, heterocicliloxi, cicloalquilamino, heterociclilamino, aralquilamino, arilamino, ariloxi, aralquiloxi, heteroariloxi, heteroarilalquilooxi y similares contienen, cada uno de manera independiente, miembros del anillo que son iguales a los definidos para los términos "cicloalquilo", "heterociclilo", "arilo" y "heteroarilo", tales como de 3 a 6 miembros, de 4 a 7 miembros, de 6 a 10 miembros, de 5 a 10 miembros, 5 o 6 miembros, etc.

De acuerdo con una convención usada en la técnica, un enlace que señala una línea en negrita, tal como

como se usa en las fórmulas estructurales en el presente documento, representa el enlace que es el punto de unión del resto o el sustituyente al núcleo o la estructura principal.

De acuerdo con una convención usada en la técnica, un enlace ondulado o sinuoso en una fórmula estructural, tal como

_X1'A, _Y'

se usa para representar un centro estereogénico del átomo de carbono al cual X', Y' y Z' están unidos y se pretende representar a ambos enantiómeros en una única figura. Es decir, una fórmula estructural con dicho enlace ondulado denota cada uno de los enantiómeros por separado, tal como

así como una mezcla racémica de los mismos. Cuando un enlace ondulado o sinuoso está unido a una porción doble enlace (tal como C=C o C=N), este incluye los isómeros geométricos cis- o trans- (o E- y Z-) o una mezcla de los mismos.

En el presente documento se entiende que si un resto carbocíclico o heterocíclico puede estar unido o de otro modo enlazado a un sustrato designado mediante diferentes átomos en el anillo sin denotar un punto de unión específico, entonces se pretenden todos los puntos posibles, ya sea a través de un átomo de carbono o, por ejemplo, un átomo de nitrógeno trivalente. Por ejemplo, el término "piridilo" significa 2, 3- o 4-piridilo, el término "tienilo" significa 2 o 3-tienilo y así sucesivamente.

Cuando se muestra que un enlace a un sustituyente cruza un enlace que conecta dos átomos en un anillo, entonces dicho sustituyente puede unirse a cualquier átomo del anillo. Cuando se enumera un sustituyente sin indicar el átomo en el que está enlazado dicho sustituyente al resto del compuesto de una fórmula dada, entonces tal sustituyente puede unirse a través de cualquier átomo en dicho sustituyente. Solo se permiten combinaciones de sustituyentes y/o variables si tales combinaciones dan como resultado compuestos estables.

Un experto en la técnica reconocerá que los sustituyentes y otros restos de los compuestos de la presente invención deben seleccionarse para proporcionar un compuesto que sea lo suficientemente estable para proporcionar un compuesto farmacéuticamente útil que pueda formularse en una composición farmacéutica aceptablemente estable. Se contempla que los compuestos de la presente invención que tienen dicha estabilidad están dentro del alcance de la invención.

El término "contraión" se usa para representar una especie cargada negativamente tal como cloruro, bromuro, hidróxido, acetato y sulfato. La expresión "ion metálico" se refiere a iones de metales alcalinos tales como sodio, potasio o litio e iones de metales alcalinotérreos tales como calcio, así como cinc y aluminio.

Como se cita en el presente documento, el término "sustituido" significa que al menos un átomo de hidrógeno (unido al átomo de carbono o al heteroátomo) está sustituido con un grupo distinto de hidrógeno, con la condición de que las valencias normales se mantengan y que la sustitución dé como resultado un compuesto estable. Cuando un sustituyente es oxo (es decir, =O), entonces se reemplazan 2 hidrógenos en el átomo. Los sustituyentes oxo no están presentes en los restos aromáticos. Cuando se dice que un sistema de anillo (por ejemplo, carbocíclico o heterocíclico) está sustituido con un grupo carbonilo o un doble enlace, se pretende que el grupo carbonilo o el doble enlace formen parte (es decir, estén dentro) del anillo. Los dobles enlaces de anillo, como se usa en el presente documento, son dobles enlaces que se forman entre dos átomos adyacentes del anillo (por ejemplo, C=C, C=N o N=N). El término "sustituido" en referencia a alquilo, cicloalquilo, heteroalquilo, cicloheteroalquilo, alquileno, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, carbociclilo y heterociclilo, se refiere a alquilo, cicloalquilo, heteroalquilo, cicloheteroalquilo, alquileno, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, carbociclilo y heterociclilo, respectivamente, en el que uno o más átomos de hidrógeno, que está unido al carbono o al heteroátomo, está cada uno independientemente sustituido con uno o más sustituyentes distintos de hidrógeno.

En los casos en donde hay átomos de nitrógeno (por ejemplo, aminas) en compuestos de la presente invención, estos se pueden convertir en N-óxidos mediante tratamiento con un agente oxidante (por ejemplo, mCPBA y/o peróxidos de hidrógeno) para proporcionar otros compuestos de esta invención. Por lo tanto, se considera que los átomos de nitrógeno mostrados y reivindicados incluyen tanto el nitrógeno mostrado como su derivado de N-óxido (N^O ).

Cuando aparece cualquier variable más de una vez en cualquier constituyente o fórmula de un compuesto, su definición en cada aparición es independiente de su definición en cualquier otra aparición. Por lo tanto, por ejemplo, si se muestra que un grupo está sustituido con 0, 1, 2 o 3 grupos R, entonces dicho grupo está sin sustituir cuando está sustituido con 0 grupos R o está sustituido con hasta tres grupos R y cada vez que aparece R se selecciona independientemente a partir de la definición de R.

Asimismo, solo se permiten combinaciones de sustituyentes y/o variables si tales combinaciones dan como resultado compuestos estables.

Como se usa en el presente documento, el término "tautómero" se refiere a cada uno de dos o más isómeros de un compuesto que existen juntos en equilibrio y que son fácilmente intercambiables por la migración de un átomo o grupo dentro de la molécula. Por ejemplo, un experto en la técnica entenderá con facilidad que un 1,2,3-triazol existe en dos formas tautoméricas como se ha definido anteriormente:

1H-1,2,3-triazol 2W-1,2,3-triazo!

Por lo tanto, esta divulgación pretende cubrir todos los tautómeros posibles incluso cuando una estructura representa solo uno de ellos.

La expresión "farmacéuticamente aceptable" se emplea en el presente documento para referirse a aquellos compuestos, materiales, composiciones y/o formas de dosificación que son, dentro del ámbito del buen criterio médico, adecuados para su uso en contacto con los tejidos de seres humanos y animales sin toxicidad excesiva, irritación, respuesta alérgica y/u otro problema o complicación, acorde con una proporción beneficio/riesgo razonable.

Los compuestos de la presente invención pueden estar presentes en forma de sales, que también se encuentran dentro del alcance de esta invención. Se prefieren las sales farmacéuticamente aceptables. Como se usa en el presente documento, "sales farmacéuticamente aceptables" se refiere a derivados de los compuestos divulgados en los que el compuesto original se modifica mediante la preparación de sales ácidas o básicas del mismo. Pueden sintetizarse las sales farmacéuticamente aceptables de la presente invención a partir del compuesto precursor que contiene un resto básico o ácido por métodos químicos convencionales. En general, dichas sales se pueden preparar haciendo reaccionar las formas de ácido o base libre de estos compuestos con una cantidad estequiométrica de la base o el ácido apropiado en agua o en un disolvente orgánico o en una mezcla de los dos; en general, se prefieren los medios no acuosos como éter, acetato de etilo, etanol, isopropanol o acetonitrilo. Se pueden encontrar listas de sales adecuadas en "Remington's Pharmaceutical Sciences", 18a edición, Mack Publishing Company, Easton, PA (1990).

Si los compuestos de la presente invención tienen, por ejemplo, al menos un centro básico, estos pueden formar sales de adición de ácido. Estas se forman, por ejemplo, con ácidos inorgánicos fuertes, tales como ácidos minerales, por ejemplo, ácido sulfúrico, ácido fosfórico o un ácido hidrácido, con ácidos carboxílicos orgánicos, tales como ácidos alcanocarboxílicos de 1 a 4 átomos de carbono, por ejemplo, ácido acético, los cuales están sin sustituir o sustituidos, por ejemplo, con halógeno tal como ácido cloroacético, tales como ácidos dicarboxílicos saturados o insaturados, por ejemplo, oxálico, malónico, succínico, maleico, fumárico, ftálico o tereftálico, tales como ácidos hidroxicarboxílicos, por ejemplo ácido ascórbico, glicólico, láctico, málico, tartárico o cítrico, tales como aminoácidos, (por ejemplo ácido aspártico o glutámico o lisina o arginina) o ácido benzoico o con ácidos sulfónicos orgánicos, tales como ácidos alquil o arilsulfónicos (C¹-C⁴) que están sin sustituir o sustituidos, por ejemplo con halógeno, por ejemplo ácido metil o ptoluenosulfónico. También se pueden formar sales de adición de ácido correspondientes que tienen, si se desea, un centro básico adicional presente. Los compuestos de la presente invención que tienen al menos un grupo ácido (por ejemplo COOH) también pueden formar sales con bases. Las sales con bases adecuadas son, por ejemplo, sales metálicas, tales como sales de metales alcalinos o alcalinotérreos, por ejemplo, sales de sodio, potasio o magnesio, o sales con amonio o una amina orgánica, tal como morfolina, tiomorfolina, piperidina, pirrolidina, una mono-, di- o trialquilamina inferior, por ejemplo etil-, terc-butil-, dietil-, diisopropil-, trietil-, tributil- o dimetil-propilamina o una mono-, di- o trihidroxi-alquilamina inferior, por ejemplo mono-, di- o trietanolamina. Pueden formarse además las sales internas correspondientes. Las sales que no son adecuadas para usos farmacéuticos pero que se pueden emplear, por ejemplo, para el aislamiento o la purificación de compuestos libres de la presente invención o sus sales farmacéuticamente aceptables, también están incluidas.

Las sales preferidas de los compuestos de la presente invención que contienen un grupo básico incluyen monoclorhidrato, hidrogenosulfato, metanosulfonato, fosfato, nitrato o acetato.

Las sales preferidas de los compuestos de la presente invención que contienen un grupo ácido incluyen sales de magnesio, potasio y magnesio y aminas orgánicas farmacéuticamente aceptables.

Se pretende que la presente invención incluya todos los isótopos de los átomos que aparecen en los presentes compuestos. Los isótopos incluyen aquellos átomos que tienen el mismo número atómico pero diferentes números másicos. A modo de ejemplo general y sin limitación, los isótopos de hidrógeno incluyen deuterio y tritio. El deuterio tiene un protón y un neutrón en su núcleo y tiene dos veces la masa del hidrógeno habitual. El deuterio se puede representar con símbolos tales como "²H" o "D". El término "deuterado" en el presente documento, por sí mismo o usado para modificar un compuesto o grupo, se refiere al reemplazo de uno o más átomos de hidrógeno, que están unidos al carbono o carbonos, con un átomo de deuterio. Los isótopos de carbono incluyen ¹³C y ¹⁴C.

Los compuestos marcados con isótopos de la invención pueden prepararse generalmente por técnicas convencionales conocidas por los expertos en la materia o por procesos análogos a los descritos en el presente documento, usando un reactivo marcado con isótopos apropiado en lugar del reactivo no marcado empleado de otro modo. Dichos compuestos tienen diferentes usos potenciales, por ejemplo, como patrones y reactivos para determinar la capacidad de un compuesto farmacéutico potencial de unirse a las proteínas o los receptores diana, o para obtener imágenes de los compuestos de esta invención unidos a los receptores biológicos in vivo o in vitro.

"Compuesto estable" y "estructura estable" pretenden indicar un compuesto que es lo suficientemente robusto para sobrevivir al aislamiento hasta un grado de pureza útil a partir de una mezcla de reacción y su formulación en un agente terapéutico eficaz. Se prefiere que los compuestos de la presente invención no contengan un grupo N-halo, S(O)²H o S(O)H.

El término "solvato" significa una asociación física de un compuesto de la presente invención con una o más moléculas de disolvente, ya sean orgánicas o inorgánicas. Esta asociación física incluye enlaces de hidrógeno. En ciertos casos el solvato podrá aislarse, por ejemplo, cuando se incorporan una o más moléculas de disolvente a la red cristalina del sólido cristalino. Las moléculas de disolvente en el solvato pueden estar presentes en una disposición regular y/o una disposición no ordenada. El solvato puede comprender una cantidad tanto estequiométrica como no estequiométrica de las moléculas de disolvente. "Solvato" abarca solvatos tanto en fase de solución como aislables. Los solvatos a modo de ejemplo incluyen, pero sin limitación, hidratos, etanolatos, metanolatos e isopropanolatos. Habitualmente los métodos de solvatación se conocen en la técnica.

ABREVIATURAS

Las abreviaturas tal como se usan en el presente documento, se definen como sigue: "1 x" para una vez, "2 x" para dos veces, "3 x" para tres veces, " °C" para grados Celsius, "equiv." para equivalente o equivalentes, "g" para gramo o gramos, "mg" para miligramo o miligramos, "l" para litro o litros, "ml" para mililitro o mililitros, " j l" para microlitro o microlitros, "N" para normal, "M" para molar, "mmol" para milimol o milimoles, "min" para minuto o minutos, "h" para hora u horas, "ta" para temperatura ambiente, "TR" para tiempo de retención, "RBF" para matraz de fondo redondo, "atm" para atmósfera, "kPa, psi" para kilopascal (libras por pulgada cuadrada), "conc." para concentrado, "RCM" para metátesis de cierre de anillo, "sat" o "satd" para saturado, "SFC" para cromatografía de fluidos supercríticos, "PM" para peso molecular, "mp" para punto de fusión, "ee" para exceso enantiomérico, "MS" o "Espec. Masas" para espectrometría de masas, "ESI" para espectroscopía de masas con ionización por electropulverización, "HR" para alta resolución, "HRMS" para espectrometría de masas de alta resolución, "LCMS" para cromatografía líquidaespectrometría de masas, "HPLC" para cromatografía líquida de alto rendimiento, "RP HPLC" para HPLC de fase inversa, "TLC" o "tlc" para cromatografía de capa fina, "r Mn " para espectroscopia de resonancia magnética nuclear, "nOe" para espectroscopía nuclear de efecto Overhauser, "1H" para protón, "8" para delta, "s" para singlete, "d" para doblete, "t" para triplete, "c" para cuartete, "m" para multiplete, "a" para ancho, "Hz" para hercio y "a", "p", "^y", "R", "S", "E" y "Z" son denominaciones estereoquímicas familiares para un experto en la técnica.

Me metilo

Et etilo

Pr propilo

i-Pr isopropilo

Bu butilo

/-Bu isobutilo

t-Bu tere-butilo

Ph fenilo

Bn bencilo

Boc o BOC tere-butiloxicarbonilo

BoczO dicarbonato de di-tere-butilo

AcOH u HOAc ácido acético

AlCl³tricloruro de aluminio

AIBN Azobis-isobutironitrilo

BBr3 tribromuro de boro

BCl3 tricloruro de boro

BEMP 2-tere-butilimino-2-dietilamino-1,3-dimetilperhidro-1,3,2-diazafosforina

reactivo BOP hexafluorofosfato de benzotriazol-1-iloxitris(dimetilamino)fosfonio

reactivo de Burgess 1-metoxi-N-trietilammoniosulfonil-metanimidato

CBz carbobenciloxi

DCM o CH²Cl²diclorometano

CH³CN o ACN acetonitrilo

CDCl³deutero-cloroformo

CHCl³cloroformo

mCPBA o m-CPBA ácido meta-cloroperbenzoico

Cs²CO³carbonato de cesio

Cu(OAc)²acetato de cobre (II)

Cy²NMe N-ciclohexil-N-metilciclohexanamina

DBU 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno

DCE 1.2- dicloroetano

DEA Dietilamina

DEAD Azodicarboxilato de dietilo

Dess-Martin 1,1,1-tris(acetiloxi)-1,1-dihidro-1,2-benziodoxol-3-(1H)-ona

DIAD Diisopropil azodicarboxilato

DIBALH Hidruro de diisobutilaluminio

DIC o DIPCDI diisopropilcarbodiimida

DIEA, DIPEA o diisopropiletilamina

base de Hunig, DMAP 4-dimetilaminopiridina

DME 1.2- dimetoxietano

DMF dimetilformamida

DMSO dimetilsulfóxido

ADNc ADN complementario

Dppp (R)-(+)-1,2-bis(difenilfosfino)propano

DuPhos (+)-1,2-bis((2S,5S)-2,5-dietilfosfolano)benceno

EDC W-(3-dimetilaminopropil)-W-etilcarbodiimida

EDCI clorhidrato de A/-(3-dimetilaminopropil)-W’-etilcarbodiimida

EDTA ácido etilendiaminotetraacético

(S,S)-EtDuPhosRh(I) trifluorometanosulfonato de (+)-1,2-bis((2S,5S)-2,5-dietilfosfolano)benceno(1,5-ciclooctadieno)rodio (I)

Et³N o TEA trietilamina

EtOAc acetato de etilo

Et2O éter dietílico

EtOH etanol

GMF filtro de microfibra de vidrio

Grubbs II (1,3-bis(2,4,6-trimetilfenil)-2-imidazolidiniliden)dicloro(fenilmetilen)(triciclohexilfosfina)rutenio HCl ácido clorhídrico

HATU hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio HEPES ácido 4-(2-hidroxietil)piperazin-1-etanosulfónico

Hex hexano

HOBt o HOBT 1-hidroxibenzotriazol

H2O2 peróxido de hidrógeno

IBX ácido 2-yodoxibenzoico

H2SO4 ácido sulfúrico

Reactivo de Jones CrO³en H²SO⁴acuoso, solución 2 M

K2CO3 carbonato potásico

K2HPO4 fosfato de potasio dibásico (hidrogenofosfato de potasio)

KOAc acetato de potasio

K3PO4 fosfato de potasio tribásico

LAH hidruro de aluminio y litio

GS grupo saliente

LiOH hidróxido de litio

MeOH metanol

MgSO4 sulfato de magnesio

MsOH o MSA ácido metilsulfónico/ácido metanosulfónico

NaCl cloruro sódico

NaH hidruro de sodio

NaHCO3 bicarbonato sódico

Na2CO3 carbonato de sodio

NaOH hidróxido de sodio

Na2SO3 sulfito de sodio

Na2SO4 sulfato de sodio

NBS N-bromosuccinimida

NCS N-clorosuccinimida

NH3 amoniaco

NH4Cl cloruro de amonio

NH⁴OH hidróxido de amonio

NH4+HCO2- formiato de amonio

NMM N-metilmorfolina

OTf triflato o trifluorometanosulfonato

Pd2(dba)3 tris(dibencilidenoacetona)dipaladio (0)

Pd(OAc)2 acetato de paladio (II)

Pd/C paladio sobre carbono

Pd(dppf)Cl2 [1,1'-bis(difenilfosfino)-ferroceno]dicloropaladio (II)

Ph3PCl2 dicloruro de trifenilfosfina

PG grupo protector

POCl3 oxicloruro de fósforo

PPTS p-toluenosulfonato de piridinio

i-PrOH o IPA isopropanol

PS Poliestireno

TA o ta temperatura ambiente

SEM-Cl cloruro de 2-(trimetilsilil)etoximetilo

SiO2 óxido de sílice

SnCl2 cloruro de estaño (II)

TBAF fluoruro de tetra-n-butilamonio

TBAI yoduro de tetra-n-butilamonio

TFA ácido trifluoroacético

THF tetrahidrofurano

THP tetrahidropirano

TMSCHN²trimetilsilildiazometano

TMSCH²N³trimetilsililmetil azida

T3P ácido propano fosfónico anhídrido

Tris tris (hidroximetil) aminometano

pTsOH ácido p-toluenosulfónico

IV. BIOLOGÍA

Los lisofosfolípidos son mediadores lipídicos bioactivos derivados de la membrana. Los lisofosfolípidos incluyen, pero sin limitación, ácido lisofosfatídico (1-acil-2-hidroxi-sn-glicero-3-fosfato; LPA), esfingosina 1-fosfato (S1P), lisofosfatidilcolina (LPC) y esfingosilfosforilcolina (SPC). Los lisofosfolípidos afectan a funciones celulares fundamentales que incluyen proliferación, diferenciación, supervivencia, migración, adhesión, invasión y morfogénesis celular. Estas funciones influyen en muchos procesos biológicos que incluyen la neurogénesis, la angiogénesis, la cicatrización de heridas, la inmunidad y la carcinogénesis.

El LPA actúa a través de conjuntos de receptores específicos acoplados a proteínas G (GPCR) de forma autocrina y paracrina. El LPA que se une a sus GPCR afines (LPA¹, LPA², LPA³, LPA⁴, LPA⁵, LPA⁶) activa las rutas de señalización intracelular para producir diversas respuestas biológicas.

Los lisofosfolípidos, tales como LPA, son especies de lípidos cuantitativamente minoritarios en comparación con sus homólogos de fosfolípidos principales (por ejemplo, fosfatidilcolina, fosfatidiletanolamina y esfingomielina). El LPA tiene un papel como molécula efectora biológica y tiene una amplia gama de acciones fisiológicas tales como, por ejemplo, pero sin limitación, efectos sobre la presión arterial, activación plaquetaria y contracción del músculo liso, y diversos efectos celulares, que incluyen el crecimiento celular, el redondeo celular, la retracción de neuritas y la formación de fibras de estrés de actina y la migración celular. Los efectos del LPA están predominantemente mediados por el receptor.

La activación de los receptores de LPA (LPA¹, LPA², LPA³, LPA⁴, LPA⁵, LPA⁶) con LPA media una gama de cascadas de señalización posteriores. Estas incluyen, pero sin limitación, activación de la proteína quinasa activada por mitógeno (MAPK), inhibición/activación de adenilil ciclasa (AC), activación de fosfolipasa C (PLC)/movilización de Ca²⁺, liberación de ácido araquidónico, activación de Akt/PKB y activación de pequeñas GTPasas, Rho, ROCK, Rac y Ras. Otras rutas que se ven afectadas por la activación del receptor de LPA incluyen, pero sin limitación, adenosín monofosfato cíclico (AMPc), ciclo de división celular 42/proteína de unión a GTP (Cdc42), serina protooncogénica/treonina-proteína quinasa Raf (c-RAF), tirosina protooncogénica-proteína quinasa Src (c-src), quinasa regulada por señal extracelular (ERK), cinasa de adhesión focal (FAK), factor de intercambio de nucleótidos de guanina (GEF), glucógeno sintasa quinasa 3b (GSK3b), quinasa aminoterminal c-jun (JNK), MEK, cadena ligera de miosina II (MLC II), factor nuclear kB (NF-kB), activación del receptor de N-metil-D-aspartato (NMDA), fosfatidilinositol 3-quinasa (PI3K), proteína quinasa A (PKA), proteína cinasa C (PKC, por sus siglas en inglés), sustrato 1 de toxina botulínica C3 relacionada con ras (RAC1). La ruta real y el punto final realizado dependen de un abanico de variables que incluyen el uso del receptor, el tipo celular, el nivel de expresión de un receptor o proteína de señalización y la concentración de LPA. Prácticamente todas las células, tejidos y órganos de mamífero coexpresan varios subtipos de receptor de LPA, lo que indica que los receptores de LPA señalizan de manera cooperativa. LPA¹, LPA²y LPA³comparten alta similitud de secuencia de aminoácidos.

El LPA se produce a partir de plaquetas activadas, adipocitos activados, células neuronales y otros tipos de células. El LPA sérico se produce por múltiples rutas enzimáticas que implican monoacilglicerol quinasa, fosfolipasa A¹, fosfolipasa secretora A²y lisofosfolipasa D (lysoPLD), incluyendo autotaxina. Varias enzimas están implicadas en la degradación de LPA: lisofosfolipasa, lípido fosfato fosfatasa y LPA acil transferasa tales como la endofilina. Las concentraciones de LPA en suero humano se estiman en 1-5 pM. El LPA sérico se une a la albúmina, a lipoproteínas de baja densidad u otras proteínas, que posiblemente protegen el LPA de la degradación rápida. Las especies moleculares de LPA con longitudes de cadena de acilo y saturación diferentes se producen de forma natural, incluyendo 1 -palmitoilo (16:0), 1-palmitoleoilo (16:1), 1-estearoilo (18:0), 1 -oleoilo (18:1), 1 -linoleoilo (18:2) y 1-araquidonilo (20:4) LPA. El LPA de alquilo cuantitativamente menor tiene actividades biológicas similares al LPA de acilo, y diferentes especies de LPA activan los subtipos de receptores de LPA con diversas efectividades.

RECEPTORES DE LPA

LPA¹(anteriormente denominado VZG-1/EDG-2/mrec1.3) se acopla con tres tipos de proteínas G, G¡/o, G^qy G^12/13. Mediante la activación de estas proteínas G, LPA induce varias respuestas celulares a través de LPA¹incluyendo pero no limitado a: proliferación celular, activación del elemento de respuesta sérica (SRE), activación de la proteína quinasa activada por mitógeno (MAPK), inhibición de la adenilil ciclasa (AC), activación de la fosfolipasa C (PLC), movilización de Ca²⁺, activación de Akt y activación de Rho.

En ratones adultos se observa una amplia expresión de LPA¹, con clara presencia en testículos, cerebro, corazón, pulmón, intestino delgado, estómago, bazo, timo y músculo esquelético. De manera similar, los tejidos humanos también expresan LPA¹; está presente en cerebro, corazón, pulmón, placenta, colon, intestino delgado, próstata, testículos, ovario, páncreas, bazo, riñón, músculo esquelético y timo.

LPA²(EDG-4) también se combina con tres tipos de proteínas G, G ^i/0, G^qy G^12/13, para mediar la señalización celular inducida por LPA. La expresión de LPA²se observa en los testículos, riñón, pulmón, timo, bazo y estómago de ratones adultos y en los testículos humanos, páncreas, próstata, timo, bazo y leucocitos de sangre periférica. La expresión de LPA²está regulada positivamente en diversas líneas celulares de cáncer y se han observado variantes transcripcionales de LPA²humanas con mutaciones en la región 3' no traducida. La eliminación dirigida de LPA²en ratones no ha mostrado ninguna anomalía fenotípica obvia, pero ha demostrado una pérdida significativa de señalización de LPA normal (por ejemplo, activación de PLC, movilización de Ca²⁺y formación de fibras de estrés) en cultivos primarios de fibroblastos embrionarios de ratón (MEF). La creación de ratones doblemente nulos lpa1(-/-) lpa2 (-/-) ha revelado que muchas respuestas inducidas por LPA, que incluyen proliferación celular, inhibición de AC, activación de PLC, movilización de Ca²⁺, activación de JNK y Akt y formación de fibras de estrés, están ausentes o gravemente reducidos en MEF doblemente nulos. Todas estas respuestas, a excepción de la inhibición de AC (la inhibición de AC está casi anulada en MEF LPA¹(-/-)), solo están parcialmente afectadas en cualquiera de los MEF LPA¹(-/-) o LPA²(-/-). LPA²contribuye a las respuestas de señalización mediadas por LPA normales en al menos algunos tipos de células (Choi et al, Biochemica et Biophysica Acta 2008, 1781, p531-539).

LPA³(EDG-7) es distinto de LPA¹y LPA²en su capacidad de emparejarse con G ^i/0y G^qpero no G^12/13y es mucho menos sensible a las especies de lPa con cadenas de acilo saturadas. LPA³puede mediar la señalización pleiotrópica inducida por LPA que incluye la activación del PLC, movilización de Ca²⁺, inhibición/activación de AC y activación de MAPK. La sobreexpresión de LPA³en células de neuroblastoma conduce a alargamiento de neuritas, mientras que la de LPA¹o LPA²da como resultado la retracción de neuritas y el redondeo celular cuando se estimula con LPA. La expresión de LPA³se observa en testículos de ratones adultos, riñón, pulmón, intestino delgado, corazón, timo y cerebro. En seres humanos, se encuentra en el corazón, páncreas, próstata, testículos, pulmón, ovario y cerebro (corteza frontal, hipocampo y amígdala).

LPA⁴(p2y^g/GPR23) es de secuencia divergente en comparación con LPA¹, LPA²y LPA³con similitud más cercana con el receptor del factor activador de plaquetas (PAF). LPA⁴media la movilización de Ca²⁺inducida por LPA y la acumulación de AMPc y el acoplamiento funcional a la proteína G para la activación de AC, así como el acoplamiento a otras proteínas G. El gen de LPA⁴gen se expresa en el ovario, páncreas, timo, riñón y músculo esquelético.

LPA⁵(GPR92) es un miembro de la purinoagrupación de GPCR y estructuralmente está más estrechamente relacionado con LPA⁴. LPA⁵se expresa en el corazón humano, placenta, bazo, cerebro, pulmón e intestino. LPA⁵también muestra una expresión muy alta en el compartimento de linfocitos CD8+ del tracto gastrointestinal.

LPA6 (p2y5) es un miembro de la purinoagrupación de GPCR y estructuralmente está más estrechamente relacionado con LPA⁴. LPA6 es un receptor de LPA acoplado a las rutas de señalización de G12/13-Rho y se expresa en las vainas de la raíz interna de los folículos pilosos humanos.

Actividad biológica ilustrativa

Cicatrización de heridas

La cicatrización de heridas normal se produce mediante una secuencia altamente coordinada de acontecimientos en los que factores solubles celulares y componentes de la matriz actúan conjuntamente para reparar la lesión. La respuesta de cicatrización puede describirse teniendo lugar en cuatro fases amplias, superpuestas - hemostasia, inflamación, proliferación y remodelación. Muchos factores de crecimiento y citocinas se liberan en el sitio de una herida para iniciar y perpetuar los procesos de cicatrización de heridas.

Cuando cicatrizan, los vasos sanguíneos dañados activan las plaquetas. Las plaquetas activadas desempeñan papeles fundamentales en los procesos de reparación posteriores al liberar mediadores bioactivos para inducir la proliferación celular, la migración celular, la coagulación de la sangre y la angiogénesis. LPA es uno de esos mediadores que se libera a partir de las plaquetas activadas; esto induce la agregación plaquetaria junto con efectos mitogénicos/migratorios en las células circundantes, tales como las células endoteliales, células de músculo liso, fibroblastos y queratinocitos.

La aplicación tópica de LPA a heridas cutáneas en ratones promueve procesos de reparación (cierre de heridas y aumento del grosor neoepitelial) al aumentar la proliferación/migración celular sin afectar la inflamación secundaria.

La activación de fibroblastos dérmicos por factores de crecimiento y citocinas conduce a su posterior migración desde los bordes de la herida hacia la matriz provisional formada por el coágulo de fibrina, con lo cual los fibroblastos proliferan y comienzan a restaurar la dermis secretando y organizando la característica matriz extracelular (MEC) dérmica. El creciente número de fibroblastos dentro de la herida y la precipitación continua de la MEC mejora la rigidez de la matriz mediante la aplicación de pequeñas fuerzas de tracción al tejido de granulación recién formado. El aumento de la tensión mecánica, junto con el factor de crecimiento transformante p (TGFp), induce la expresión de actina de músculo liso a (a-SMA) y la posterior transformación de fibroblastos en miofibroblastos. Los miofibroblastos facilitan la remodelación del tejido de granulación mediante la contracción de miofibroblastos y a través de la producción de componentes de la MEC.

LPA regula muchas funciones importantes de los fibroblastos en la cicatrización de heridas, incluyendo la proliferación, la migración, la diferenciación y la contracción. La proliferación de fibroblastos se requiere en la cicatrización de heridas para rellenar una herida abierta. Por lo contrario, la fibrosis se caracteriza por una intensa proliferación y acumulación de miofibroblastos que sintetizan activamente MEC y citocinas proinflamatorias. LPA puede aumentar o suprimir la proliferación de tipos de células importantes en la cicatrización de heridas, tales como células epiteliales y endoteliales (EC), macrófagos, queratinocitos y fibroblastos. Un papel para el LPA¹en la proliferación inducida por LPA se proporcionó por la observación de que se atenuó la proliferación de fibroblastos estimulada por LPA aislada de ratones nulos para el receptor de LPA¹(Mills et al, Nat Rev. Cancer 2003; 3: 582-591). LPA induce cambios en el citoesqueleto que son integrales a la adhesión, migración, diferenciación y contracción de fibroblastos.

Fibrosis

La lesión del tejido inicia una serie compleja de respuestas de cicatrización de heridas del hospedador; si tiene éxito, estas respuestas restauran la estructura y función del tejido normal. Si no, estas respuestas pueden conducir a fibrosis tisular y pérdida de la función.

Para la mayoría de los órganos y tejidos, el desarrollo de fibrosis implica una multitud de acontecimientos y factores. Las moléculas implicadas en el desarrollo de la fibrosis incluyen proteínas o péptidos (citocinas profibróticas, quimiocinas, metaloproteinasas etc.) y fosfolípidos. Los fosfolípidos implicados en el desarrollo de la fibrosis incluyen el factor activador de plaquetas (FAP), fosfatidil colina, esfingosina 1-fosfato (S1P) y ácido lisofosfatídico (LPA).

Una serie de distrofias musculares se caracteriza por una debilidad progresiva y desgaste de la musculatura y por una fibrosis extensa. Se ha demostrado que el tratamiento con LPA de mioblastos cultivados indujo una expresión significativa del factor de crecimiento del tejido conectivo (CTGF). El CTGF posteriormente induce colágeno, la expresión de fibronectina e integrina e induce la desdiferenciación de estos mioblastos. El tratamiento de diversos tipos de células con LPA induce una inducción reproducible y de alto nivel de CTGF (JP Pradere, et al., LPA1 receptor activation promotes renal interstitial fibrosis, J. Am. Soc. Nephrol. 18 (2007) 3110-3118; N. Wiedmaier, et al., Int J Med Microbiol, 298(3-4):231-43, 2008). El CTGF es una citocina profibrótica, que señaliza después y en paralelo con TGFp.

La expresión de CTGF por células epiteliales gingivales, que están implicadas en el desarrollo de la fibromatosis gingival, se descubrió que estaba exacerbada por el tratamiento con LPA (A. Kantarci, et al., J. Pathol. 210 (2006) 59 66).

LPA está asociado con la progresión de la fibrosis hepática. In vitro, LPA induce la proliferación de células estrelladas y hepatocitos. Estas células activadas son el principal tipo de célula responsable de la acumulación de MEC en el hígado. Además, Los niveles plasmáticos de lPa aumentan durante la fibrosis hepática inducida por CCl⁴en roedores o en fibrosis hepática inducida por el virus de la hepatitis C en seres humanos (N. Watanabe, et al., Plasma lysophosphatidic acid level and serum autotaxin activity are increased in liver injury in rats in relation to its severity, Life Sci. 81 (2007) 1009-1015; N.Watanabe, et al., J. Clin. Gastroenterol. 41 (2007) 616-623).

Se ha informado un aumento de las concentraciones de fosfolípidos en el líquido de lavado broncoalveolar en conejos y roedores inyectados con bleomicina (K. Kuroda, et al., Phospholipid concentration in lung lavage fluid as biomarker for pulmonary fibrosis, Inhal. Toxicol. 18 (2006) 389-393; K. Yasuda, et al., Lung 172 (1994) 91-102).

LPA está asociado con enfermedades del corazón y remodelación micocárdica. Los niveles séricos de LPA aumentan después del infarto de miocardio en pacientes y el LPA estimula la proliferación de fibroblastos cardíacos en ratas y la producción de colágeno (Chen et al. FEES Lett. 21 de agosto de 2006; 580(19):4737-45).

Fibrosis pulmonar

En el pulmón, las respuestas aberrantes de cicatrización de heridas a las lesiones contribuyen a la patogénesis de las enfermedades pulmonares fibróticas. Las enfermedades pulmonares fibróticas, tales como la fibrosis pulmonar idiopática (FPI), se asocian a alta morbimortalidad.

LPA es un mediador importante del reclutamiento de fibroblastos en la fibrosis pulmonar. LPA y LPA¹desempeñan papeles patogénicos clave en la fibrosis pulmonar. La actividad quimioatrayente de fibroblastos desempeña un papel importante en los pulmones en pacientes con fibrosis pulmonar. Los efectos profibróticos de la estimulación del receptor de LPA¹se explica por la fuga vascular mediada por el receptor de LPA¹y el aumento del reclutamiento de fibroblastos, ambos acontecimientos profibróticos. La ruta LPA-LPA¹tiene un papel en la mediación de la migración de fibroblastos y la fuga vascular en la FPI. El resultado final es el proceso de cicatrización aberrante que caracteriza a esta afección fibrótica.

El receptor de LPA¹es el receptor de LPA más altamente expresado en fibroblastos obtenidos de pacientes con IPF. Además, BAL obtenido de pacientes con FPI indujo quimiotaxis de fibroblastos de pulmón fetal humano que fue bloqueada por el antagonista dual del receptor LPA¹-LPA³Ki16425. En un modelo experimental de ratón con lesión pulmonar inducida por bleomicina, se demostró que los niveles de LPA eran altos en las muestras de lavado broncoalveolar en comparación con los controles no expuestos. Los ratones con inactivación de LPA¹están protegidos frente a la fibrosis después de la exposición a bleomicina con acumulación reducida de fibroblastos y fuga vascular. En sujetos humanos con FPI, se observaron altos niveles de LPA en muestras de lavado broncoalveolar en comparación con controles sanos. El aumento de la actividad quimiotáctica de fibroblastos en estas muestras fue inhibido por el Ki 16425, lo que indica que la migración de fibroblastos está mediada por la ruta del receptor o receptores LPA-LPA (Tager et al. Nature Medicine, 2008, 14, 45-54).

La ruta LPA-LPA¹es crucial en el reclutamiento de fibroblastos y la fuga vascular en la fibrosis pulmonar.

La activación del TGF-p latente por la integrina avp⁶desempeña un papel crítico en el desarrollo de la lesión pulmonar y la fibrosis (Munger et al. Cell, vol. 96, 319-328, 1999). LpA induce la activación de TGF-p mediada por avp⁶en células epiteliales de pulmón humano (Xu et al. Am. J. Pathology, 2009, 174, 1264-1279). La activación de TGF-p mediada por avp⁶inducida por LPA está mediada por el receptor LPA2. La expresión del receptor LPA2 aumenta en las células epiteliales y las células mesenquimales en áreas de fibrosis pulmonar de pacientes con FPI en comparación con el tejido pulmonar humano normal. La ruta LPA-LPA2 contribuye a la activación de la ruta TGF-p en la fibrosis pulmonar. En algunas realizaciones, los compuestos que inhiben el LPA²muestran efectividad en el tratamiento de la fibrosis pulmonar. En algunas realizaciones, los compuestos que inhiben tanto LPA1 como LPA2 muestran una efectividad mejorada en el tratamiento de la fibrosis pulmonar en comparación con los compuestos que inhiben solo LPA1 o LPA2.

Fibrosis renal

LPA y LPA¹están implicados en la etiología de la fibrosis renal. LPA tiene efectos sobre la proliferación y contracción de las células mesangiales glomerulares y, por lo tanto, se ha implicado en la glomerulonefritis proliferativa (C.N. Inoue, et al., Clin. Sci. (Colch.) 1999, 96, 431-436). En un modelo animal de fibrosis renal [obstrucción ureteral unilateral (UUO)], se descubrió que los receptores de LPA renales se expresan en condiciones basales con un orden de expresión de LPA²>LPA³=LPA-i>>LPA⁴. Este modelo imita de manera acelerada el desarrollo de fibrosis renal incluyendo la inflamación renal, la activación de fibroblastos y la acumulación de matriz extracelular en el tubulointersticio. La UUO indujo significativamente la expresión del receptor de LPA¹. Esto fue paralelo a la producción renal de LPA (aumento de 3,3 veces) en medios condicionados a partir de explantes renales. Los riñones contralaterales no mostraron cambios significativos en la liberación de LPA y la expresión de los receptores de LPA. Esto muestra que se cumple un requisito previo para una acción de LPA en la fibrosis: producción de un ligando (LPA) e inducción de uno de sus receptores (el receptor de LPA¹) (J.P. Pradere et al., Biochimica et Biophysica Acta, 2008, 1781, 582-587).

En ratones donde el receptor de LPA¹se inactivó (LPA¹(-/-), el desarrollo de fibrosis renal se atenuó significativamente. Los ratones con UUO tratados con el antagonista del receptor de LPA Ki 16425 se parecían mucho al perfil de los ratones LPA¹(-/-).

LPA puede participar en la acumulación intraperitonial de monocitos/macrófagos y el LPA puede inducir la expresión de la citocina profibrótica CTGF en cultivos primarios de fibroblastos humanos (J.S. Koh, et al., J. Clin. Invest., 1998, 102, 716-727).

El tratamiento con LPA de una línea celular renal epitelial de ratón, MCT, indujo un rápido aumento en la expresión de la citocina profibrótica CTGF. CTGF desempeña un papel crucial en la fibrosis tubulointersticial inducida por UUO (TIF) y está implicada en la actividad profibrótica de TGFp. Esta inducción se suprimió prácticamente por completo mediante el tratamiento conjunto con el antagonista del receptor de LPA Ki 16425. La actividad profibrótica de LPA en el riñón puede resultar de una acción directa de LPA en las células renales que implican la inducción de CTGF.

Fibrosis hepática

LPA está implicado en la enfermedad hepática y la fibrosis. Los niveles plasmáticos de LPA y autotaxina sérica (enzima responsable de la producción de LPA) están elevados en pacientes con hepatitis y modelos animales de lesión hepática en correlación con el aumento de la fibrosis. LPA también regula la función de las células hepáticas. Los receptores de LPA¹y LPA²se expresan por células estrelladas hepáticas de ratón y el LPA estimula la migración de miofibroblastos hepáticos.

Fibrosis ocular

LPA participa en la cicatrización de heridas en el ojo. Los receptores de LPA¹y LPA³son detectables en las células epiteliales corneales normales, queratocitos y células endoteliales de conejo y la expresión de LPA¹y LPA³aumenta en las células epiteliales corneales después de una lesión.

LPA y sus homólogos están presentes en el humor acuoso y en el líquido de la glándula lagrimal del ojo de conejo y estos niveles aumentan en un modelo de lesión corneal de conejo.

LPA induce la formación de fibra de estrés de actina en células endoteliales y epiteliales corneales de conejo y promueve la contracción de fibroblastos corneales. LPA también estimula la proliferación de células epiteliales pigmentadas de la retina humana.

Fibrosis cardíaca

LPA está implicado en el infarto de miocardio y la fibrosis cardíaca. Los niveles séricos de LPA aumentan en pacientes después de un infarto de miocardio (IM) y el LPA estimula la proliferación y la producción de colágeno (fibrosis) por los fibroblastos cardíacos de rata. Ambos receptores LPA1 y LPA3 se expresan altamente en el tejido cardíaco humano.

Tratamiento de fibrosis

Un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, puede usarse en un método para tratar o prevenir la fibrosis en un mamífero. Un compuesto de Fórmulas (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, puede usarse en un método para tratar la fibrosis de un órgano o tejido en un mamífero. Un compuesto de la invención puede usarse en un método para prevenir una afección de fibrosis en un mamífero, comprendiendo el método administrar al mamífero con riesgo de desarrollar una o más afecciones de fibrosis una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de Fórmulas (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. El mamífero puede haber estado expuesto a una o más condiciones ambientales que aumentan el riesgo de fibrosis de un órgano o tejido. El mamífero puede haber estado expuesto a una o más condiciones ambientales que se conoce que aumentan el riesgo de fibrosis pulmonar, hepática o renal. El mamífero puede tener una predisposición genética a desarrollar fibrosis de un órgano o tejido. Un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, puede administrarse a un mamífero para prevenir o minimizar la cicatrización después de una lesión. La lesión puede incluir cirugía.

Los términos "fibrosis" o "trastorno fibrosante" como se usan en el presente documento, se refieren a afecciones que están asociadas a la acumulación anómala de células y/o fibronectina y/o colágeno y/o aumento del reclutamiento de fibroblastos e incluyen, pero no se limitan a, fibrosis de órganos o tejidos individuales tales como el corazón, riñón, hígado, articulaciones, pulmón, tejido pleural, tejido peritoneal, piel, córnea, retina, aparato musculoesquelético y digestivo.

Ejemplos de enfermedades, trastornos o afecciones que implican fibrosis incluyen, pero sin limitación: Enfermedades pulmonares asociadas a fibrosis, por ejemplo, fibrosis pulmonar idiopática, fibrosis pulmonar secundaria a enfermedad inflamatoria sistémica tales como artritis reumatoide, esclerodermia, lupus, alveolitis fibrosante criptogénica, fibrosis inducida por radiación, enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC), esclerodermia, asma crónico, silicosis, fibrosis pulmonar o pleural inducida por asbesto, lesión pulmonar aguda y dificultad respiratoria aguda (incluyendo neumonía bacteriana inducida, trauma inducido, neumonía vírica inducida, ventilador inducido, sepsis no pulmonar inducida y aspiración inducida); Nefropatías crónicas asociadas a lesiones/fibrosis (fibrosis renal), por ejemplo, glomerulonefritis secundaria a enfermedades inflamatorias sistémicas tales como lupus y esclerodermia, diabetes, nefritis glomerular, esclerosis glomerular segmentaria focal, nefropatía de IgA, hipertensión, aloinjerto y Alport; Fibrosis intestinal, por ejemplo, esclerodermia y fibrosis intestinal inducida por radiación; Fibrosis hepática, por ejemplo, cirrosis, fibrosis hepática inducida por alcohol, esteatohepatitis no alcohólica (NASH), lesión del conducto biliar, cirrosis biliar primaria, infección o fibrosis hepática inducida por virus (por ejemplo, infección crónica por VHC) y hepatitis autoinmune; Fibrosis de cabeza y cuello, por ejemplo, inducida por radiación; Cicatrización corneal, por ejemplo, LASIK (queratomileusis in situ asistida por láser), trasplante de córnea y trabeculectomía; Cicatrices hipertróficas y queloides, por ejemplo, quemaduras inducidas o quirúrgicas; y otras enfermedades fibróticas, por ejemplo, sarcoidosis, esclerodermia, lesión de la médula espinal/fibrosis, mielofibrosis, restenosis vascular, aterosclerosis, arteriesclerosis, granulomatosis de Wegener, enfermedad mixta del tejido conectivo y enfermedad de Peyronie.

Un mamífero que padece una de las siguientes enfermedades, trastornos o afecciones a modo de ejemplo, no limitativos, se puede beneficiar de la terapia con un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo: aterosclerosis, trombosis, cardiopatía, vasculitis, formación de tejido cicatricial, reestenosis, flebitis, EPOC (enfermedad pulmonar obstructiva crónica), hipertensión pulmonar, fibrosis pulmonar, inflamación pulmonar, adherencias intestinales, fibrosis de vejiga y cistitis, fibrosis de las fosas nasales, sinusitis, inflamación mediada por neutrófilos y fibrosis mediada por fibroblastos.

Un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, puede administrarse a un mamífero con fibrosis de un órgano o tejido o con una predisposición a desarrollar fibrosis de un órgano o tejido con uno o más agentes que se usan para tratar la fibrosis. El uno o más agentes pueden incluir corticosteroides. El uno o más agentes diferentes pueden incluir inmunosupresores. El uno o más agentes diferentes pueden incluir antagonistas de linfocitos B. El uno o más agentes pueden incluir uteroglobina.

Un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, puede usarse en un método para tratar un trastorno dermatológico en un mamífero. La expresión "trastorno dermatológico", como se usa en el presente documento se refiere a un trastorno de la piel. Dichos trastornos dermatológicos incluyen, pero sin limitación, trastornos proliferativos o inflamatorios de la piel tales como, dermatitis atópica, trastornos ampulosos, colagenosis, psoriasis, esclerodermia, lesiones psoriásicas, dermatitis, dermatitis de contacto, eccema, urticaria, rosácea, cicatrización de heridas, formación de cicatrices, cicatrices hipertróficas, queloides, enfermedad de Kawasaki, rosácea, síndrome de Sjogren-Larsso, urticaria. Un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, puede usarse para tratar esclerosis sistémica.

Dolor

Puesto que LPA se libera después de una lesión tisular, LPA¹desempeña un papel importante en el inicio del dolor neuropático. LPA¹, a diferencia de LPA²o LPA³, se expresa tanto en el ganglio de la raíz dorsal (DRG) como en las neuronas de la raíz dorsal. Usando el oligodesoxinucleótido antisentido (AS-ODN) para ratones nulos para LPA¹y LPA¹, se descubrió que la alodinia mecánica inducida por LPA y la hiperalgesia están mediadas de una manera dependiente de LPA¹. LPA¹y la activación de Rho-ROCK posterior desempeñan un papel en el inicio de la señalización del dolor neuropático. El tratamiento previo con la exoenzima C3 de Clostridium botulinum (BoTXC3, inhibidor de Rho) o Y-27632 (inhibidor de ROCK) anuló por completo la alodinia y la hiperalgesia en ratones con lesiones nerviosas. LPA también indujo la desmielinización de la raíz dorsal, que se evitó por BoTXC3. La desmielinización de la raíz dorsal por lesión no se observó en ratones nulos a LPA¹o ratones de tipo silvestre inyectados con AS-ODN. La señalización de LPA parece inducir importantes marcadores de dolor neuropático tales como la proteína quinasa Cy (PKCy) y una subunidad a251 del canal de calcio dependiente de voltaje (Caa281) de una manera dependiente de LPA¹y de Rho (M. Inoue, et al., Initiation of neuropathic pain requires lysophosphatidic acid receptor signaling, Nat. Med. 10 (2004) 712-718).

Un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, puede usarse en un método para tratar el dolor en un mamífero. El dolor puede ser dolor agudo o dolor crónico. El dolor puede ser dolor neuropático.

Un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, puede usarse en un método para tratar la fibromialgia. La fibromialgia puede proceder de la formación de tejido cicatricial fibroso en músculos contráctiles (voluntarios). La fibrosis se une al tejido e inhibe el flujo sanguíneo, dando como resultado dolor.

Cáncer

La señalización del receptor de lisofosfolípidos desempeña un papel en la etiología del cáncer. El ácido lisofosfatídico (LPA) y sus receptores acoplados a proteínas G (GPCR) LPA¹, LPA²y/o LPA³desempeñan un papel en el desarrollo de varios tipos de cánceres. El inicio, la progresión y la metástasis del cáncer implican varios procesos simultáneos y secuenciales incluyendo la proliferación y el crecimiento y supervivencia celulares y anti-apoptosis, migración de células, la penetración de células extrañas en capas y/u órganos celulares definidos, y promoción de la angiogénesis. El control de cada uno de estos procesos mediante la señalización de LPA en condiciones fisiológicas y fisiopatológicas subraya la potencial utilidad terapéutica de la modulación de las rutas de señalización de LPA para el tratamiento del cáncer, especialmente a nivel de los receptores LPA o ATX/lysoPLD. La autotaxina (ATX) es una enzima prometastática aislada inicialmente del medio condicionado de células de melanoma humano que estimula una miríada de actividades biológicas, incluyendo la angiogénesis y la promoción del crecimiento celular, la migración, la supervivencia y la diferenciación a través de la producción de LPA (Mol Cancer Ther 2008;7(10):3352-62).

LPA señaliza a través de sus propios GPCR conduciendo a la activación de múltiples rutas efectoras posteriores. Tales rutas efectoras posteriores desempeñan un papel en el cáncer. LPA y sus GPCR están vinculados al cáncer a través de las principales rutas de señalización oncogénicas.

LPA contribuye a la tumorigénesis al aumentar la motilidad y la invasividad de las células. LPA ha sido implicado en el inicio o la progresión del cáncer de ovario. LPA está presente en concentraciones significativas (2-80 ^jM) en el líquido ascítico de pacientes con cáncer de ovario. Las células de cáncer de ovario producen constitutivamente mayores cantidades de LPA en comparación con las células epiteliales normales de la superficie ovárica, el precursor del cáncer epitelial de ovario. Niveles elevados de LPA se detectan también en plasma de pacientes con cánceres de ovario en etapa temprana en comparación con los controles. Los receptores de LPA (LPA2 y LPA3) también se sobreexpresan en las células de cáncer de ovario en comparación con las células epiteliales de la superficie ovárica normal. LPA estimula la expresión de Cox-2 a través de la activación transcripcional y la mejora postranscripcional del ARNm de Cox-2 en células de cáncer de ovario. Las prostaglandinas producidas por Cox-2 se han implicado en varios cánceres humanos y la inhibición farmacológica de la actividad de Cox-2 reduce el desarrollo del cáncer de colon y disminuye el tamaño y el número de adenomas en pacientes con poliposis adenomatosa familiar. LPA también se ha implicado en la iniciación o progresión del cáncer de próstata, cáncer de mama, melanoma, cáncer de cabeza y cuello, cáncer de intestino (cáncer colorrectal), cáncer de tiroides y otros tipos de cáncer (Gardell et al, Trends in Molecular Medicine, vol. 12, n.° 2, p 65-75, 2006; Ishii et al, Annu. Rev. Biochem, 73, 321-354, 2004; Mills et al., Nat. Rev. Cancer, 3, 582-591, 2003; Murph et al., Biochimica et Biophysica Acta, 1781, 547-557, 2008).

Las respuestas celulares a LPA están mediadas a través de los receptores de ácido lisofosfatídico. Por ejemplo, los receptores de LPA median tanto la migración como la invasión de las líneas celulares de cáncer de páncreas: un antagonista de LPA¹y LPA³(Ki16425) y ARNip específico de LPA¹bloquearon eficazmente la migración in vitro en respuesta a LPA y líquido peritoneal (ascitis) de pacientes con cáncer de páncreas; además, Ki 16425 bloqueó la actividad de invasión inducida por LPA e inducida por ascitis de una línea celular de cáncer pancreático metastásico altamente peritoneal (Yamada et al, J. Biol. Chem., 279, 6595-6605, 2004).

Las líneas celulares de carcinoma colorrectal muestran una expresión significativa de ARNm de LPA¹y responden al LPA mediante la migración celular y la producción de factores angiogénicos. La sobreexpresión de los receptores de LPA tiene un papel en la patogénesis del cáncer de tiroides. LPA³se clonó originalmente a partir de células de cáncer de próstata, concordante con la capacidad de LPA para inducir la proliferación autocrina de células de cáncer de próstata.

LPA tiene papeles estimulantes en la progresión del cáncer en muchos tipos de cáncer. LPA se produce a partir de e induce la proliferación de líneas celulares de cáncer de próstata. LPA induce la proliferación de células DLD1 de carcinoma de colon humano, la migración, la adhesión y la secreción de factores angiogénicos a través de la señalización por LPA¹. En otras líneas celulares de carcinoma de colon humano (HT29 y WiDR), LPA mejora la proliferación celular y la secreción de factores angiogénicos. En otras líneas celulares de cáncer de colon, la activación del receptor de LPA2 y LPA3 da como resultado la proliferación de las células. La manipulación genética o farmacológica del metabolismo de LPA, el bloqueo específico de la señalización del receptor y/o la inhibición de las rutas de transducción de señal posteriores, representan enfoques para terapias contra el cáncer.

Se ha notificado que el LPA y otros fosfolípidos estimulan la expresión de interleucina-8 (IL-8) en líneas celulares de cáncer de ovario. En algunas realizaciones, las altas concentraciones de IL-8 en el cáncer de ovario se correlacionan con una pobre respuesta inicial a la quimioterapia y con un mal pronóstico, respectivamente. En modelos animales, la expresión de IL-8 y otros factores de crecimiento tales como el factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) se asocia a una mayor tumorigenicidad, formación de ascitis, angiogénesis e invasividad de las células de cáncer de ovario. IL-8 es un modulador importante de la progresión del cáncer, la resistencia a fármacos y el pronóstico en cáncer de ovario. Un compuesto de la presente invención puede inhibir o reducir la expresión de IL-8 en líneas celulares de cáncer de ovario.

Un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, puede usarse en un método para tratar el cáncer. Un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, puede usarse en un método para tratar enfermedad proliferativa maligna y benigna. Un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, puede usarse para prevenir o reducir la proliferación de células tumorales, la invasión y la metástasis de carcinomas, el mesotelioma pleural (Yamada, Cancer Sci., 2008, 99(8), 1603-1610) o el mesotelioma peritoneal, dolor por cáncer, metástasis óseas (Boucharaba et al, J. Clin. Invest., 2004, 114(12), 1714-1725; Boucharaba et al, Proc. Natl. acad. Sci., 2006, 103(25) 9643-9648). Un método para tratar el cáncer en un mamífero, puede comprender administrar al mamífero un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un segundo agente terapéutico, en donde el segundo agente terapéutico es un agente antineoplásico.

El término "cáncer", como se usa en el presente documento se refiere a un crecimiento anómalo de las células que tienden a proliferar de una manera incontrolada y, en algunos casos, a metastatizar (diseminarse). Los tipos de cáncer incluyen, pero sin limitación, tumores sólidos (tales como los de la vejiga, intestino, cerebro, mama, endometrio, corazón, riñón, pulmón, tejido linfático (linfoma), ovario, páncreas u otro órgano endocrino (tiroides), próstata, piel (melanoma o cáncer de células basales) o tumores hematológicos (tales como las leucemias) en cualquier estadio de la enfermedad con o sin metástasis.

Algunos ejemplos adicionales no limitantes de cánceres incluyen, leucemia linfoblástica aguda, leucemia mieloide aguda, carcinoma adrenocortical, cáncer anal, cáncer de apéndice, astrocitomas, tumor rabdoide/teratoide atípico, carcinoma de células basales, cáncer del conducto biliar, cáncer de vejiga, cáncer óseo (por ejemplo, osteosarcoma e histiocitoma fibroso maligno), glioma del tronco encefálico, tumores cerebrales, tumores de cerebro y de médula espinal, cáncer de mama, tumores bronquiales, linfoma de Burkitt, cáncer de cuello uterino, leucemia linfocítica crónica, leucemia mielógena crónica, cáncer de colon, cáncer colorrectal, craneofaringioma, linfoma cutáneo de linfocitos T, tumores embrionarios, cáncer de endometrio, ependimoblastoma, ependimoma, cáncer de esófago, familia de tumores de sarcoma de Ewing, cáncer ocular, retinoblastoma, cáncer de vesícula biliar, cáncer gástrico (estómago), tumor carcinoide gastrointestinal, tumor del estroma gastrointestinal (GIST), tumor de células del estroma gastrointestinal, tumor de células germinales, glioma, tricoleucemia, cáncer de cabeza y cuello, cáncer hepatocelular (hígado), linfoma de Hodgkin, cáncer hipofaríngeo, melanoma intraocular, tumores de células de los islotes (páncreas endocrino), sarcoma de Kaposi, cáncer de riñón, histiocitosis de células de Langerhans, cáncer de laringe, leucemia, Leucemia linfoblástica aguda, leucemia mieloide aguda, leucemia linfocítica crónica, leucemia mielógena crónica, tricoleucemia, cáncer de hígado, cáncer de pulmón no microcítico, cáncer de pulmón microcítico, linfoma de Burkitt, linfoma cutáneo de linfocitos T, linfoma de Hodgkin, linfoma no Hodgkin, linfoma, macroglobulinemia de Waldenstrom, meduloblastoma, meduloepitelioma, melanoma, mesotelioma, cáncer de boca, leucemia mielógena crónica, leucemia mieloide, mieloma múltiple, cáncer nasofaríngeo, neuroblastoma, linfoma no Hodgkin, cáncer de pulmón no microcítico, cáncer oral, cáncer orofaríngeo, osteosarcoma, histiocitoma fibroso maligno de hueso, cáncer de ovario, cáncer epitelial de ovario, tumor de células germinales ováricas, tumor ovárico de bajo potencial maligno, cáncer de páncreas, papilomatosis, cáncer paratiroideo, cáncer de pene, cáncer faríngeo, tumores del parénquima pineal de diferenciación intermedia, pineoblastoma y tumores neuroectodérmicos primitivos supratentoriales, tumor de la pituitaria, neoplasia de células plasmáticas/mieloma múltiple, blastoma pleuropulmonar, linfoma primario del sistema nervioso central, cáncer de próstata, cáncer rectal, cáncer de células renales (riñón), retinoblastoma, rabdomiosarcoma, cáncer de las glándulas salivales, sarcoma, familia de tumores de sarcoma de Ewing, sarcoma, de Kaposi, síndrome de Sézary, cáncer de piel, cáncer de pulmón microcítico, cáncer del intestino delgado, sarcoma de tejidos blandos, carcinoma de células escamosas, cáncer de estómago (gástrico), tumores neuroectodérmicos primitivos supratentoriales, linfoma de linfocitos T, cáncer testicular, cáncer de garganta, timoma y carcinoma tímico, cáncer de tiroides, cáncer de uretra, cáncer de útero, sarcoma uterino, cáncer de vagina, cáncer de vulva, macroglobulinemia de Waldenstrom, tumor de Wilms.

El aumento de las concentraciones de LPA y vesículas en la ascitis de pacientes con cáncer de ovario y derrames de cáncer de mama indican que podría ser un marcador de diagnóstico precoz, un indicador pronóstico o un indicador de respuesta a la terapia (Mills et al, Nat. Rev. Cancer., 3, 582-591,2003; Sutphen et al., Cancer Epidemiol. Biomarkers Prev. 13, 1185-1191, 2004). Las concentraciones de LPA son consistentemente más altas en muestras de ascitis que en muestras de plasma coincidentes.

Trastornos respiratorios y alérgicos

LPA puede ser un contribuyente a la patogénesis de las enfermedades respiratorias. La enfermedad respiratoria puede ser asma. Los efectos proinflamatorios del LPA incluyen la desgranulación de mastocitos, la contracción de las células del músculo liso y la liberación de citocinas de las células dendríticas. Las células del músculo liso de las vías respiratorias, las células epiteliales y los fibroblastos de pulmón muestran respuestas a LPA. LPA induce la secreción de IL-8 a partir de las células epiteliales bronquiales humanas. IL-8 se encuentra en concentraciones aumentadas en fluidos ^bA^lde pacientes con asma, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, sarcoidosis pulmonar y síndrome de dificultad respiratoria aguda y se ha demostrado que la Il-8 exacerba la inflamación de las vías respiratorias y la remodelación de las vías respiratorias de los asmáticos. Se ha demostrado que todos los receptores de LPA1, LPA2 y LPA3 contribuyen a la producción de IL-8 inducida por LPA. Los estudios que clonaron múltiples GPCR activados por LPA permitieron demostrar la presencia de ARNm para el LPA¹, LPA²y LPA³en el pulmón (J.J.A. Contos, et al., Mol. Pharmacol. 58, 1188-1196, 2000).

La liberación de LPA a partir de las plaquetas activadas en un sitio de lesión y su capacidad para promover la proliferación y contracción de fibroblastos son características del LPA como mediador de la reparación de heridas. En el contexto de la enfermedad de las vías respiratorias, el asma es una enfermedad inflamatoria en donde los procesos inapropiados de "reparación" de las vías respiratorias conducen a una "remodelación" estructural de las vías respiratorias. En el asma, las células de las vías respiratorias están sujetas a lesiones continuas debido a diversos ataques, incluyendo alérgenos, contaminantes, otros agentes ambientales inhalados, bacterias y virus, que conducen a la inflamación crónica que caracteriza al asma.

En el individuo asmático, la liberación de mediadores de reparación normales, incluyendo la LPA, puede ser exagerada o las acciones de los mediadores de reparación son prolongadas de manera inapropiada conduciendo a una remodelación inapropiada de las vías respiratorias. Las principales características estructurales de las vías respiratorias remodeladas observadas en el asma incluyen una lámina reticular engrosada (la estructura similar a una membrana basal justo debajo de las células epiteliales de las vías respiratorias), mayor número y activación de miofibroblastos, engrosamiento de la capa muscular lisa, aumento del número de glándulas mucosas y secreciones mucosas y alteraciones en el tejido conectivo y el lecho capilar a lo largo de la pared de las vías respiratorias. LPA puede contribuir a estos cambios estructurales en las vías respiratorias. LPA puede estar implicado en la hiperreactividad aguda de las vías respiratorias en el asma. La luz de las vías respiratorias asmáticas remodeladas es más estrecha debido al engrosamiento de la pared de las vías respiratorias, disminuyendo de esta manera el flujo de aire. LPA puede contribuir a la remodelación estructural a largo plazo y la hiperreactividad aguda de las vías respiratorias asmáticas. LPA puede contribuir a la hiperreactividad que es una característica principal de las exacerbaciones agudas del asma.

Además de las respuestas celulares mediadas por LPA, varios de los componentes de la ruta de señalización de LPA que conducen a estas respuestas son relevantes para el asma. La regulación positiva del receptor de EGF está inducida por el LPA y también se observa en las vías respiratorias asmáticas (M. Amishima, et al., Am. J. Respir. Crit. Care Med. 157, 1907-1912, 1998). La inflamación crónica contribuye al asma y se sabe que varios de los factores de transcripción que se activan con el LPA están implicados en la inflamación (Ediger et al., Eur Respir J 21:759-769, 2003).

La proliferación y contracción de los fibroblastos y la secreción de la matriz extracelular estimuladas por el LPA pueden contribuir a las características fibroproliferativas de otras enfermedades de las vías respiratorias, tales como la fibrosis peribronquiolar presente en la bronquitis crónica, enfisema y enfermedad pulmonar intersticial. El enfisema también está asociado con una fibrosis leve de la pared alveolar, una característica que se cree que representa un intento de reparar el daño alveolar. LPA puede desempeñar una función en las enfermedades pulmonares intersticiales fibróticas y la bronquiolitis obliterante, donde se incrementan tanto el colágeno como los miofibroblastos. LPA puede estar implicado en varios de los diferentes síndromes que constituyen la enfermedad pulmonar obstructiva crónica.

La administración de LPA in vivo induce hiperreactividad de las vías respiratorias, respuestas de picazón-rasguño, infiltración y activación de eosinófilos y neutrófilos, remodelación vascular y respuestas flexoras nociceptivas. LPA también induce la liberación de histamina de mastocitos de ratón y rata. En una reacción alérgica aguda, la histamina induce varias respuestas, como la contracción del músculo liso, exudación de plasma y producción de moco. La exudación de plasma es importante en las vías respiratorias, porque la fuga y el posterior edema de la pared de las vías respiratorias contribuyen al desarrollo de la hiperreactividad de las vías respiratorias. La exudación de plasma progresa a tumefacción conjuntival en el trastorno alérgico ocular y obstrucción nasal en la rinitis alérgica (Hashimoto et al., J Pharmacol Sci 100, 82 - 87, 2006). La exudación plasmática inducida por LPA puede estar mediada por la liberación de histamina a partir de los mastocitos a través de uno o más receptores de LPA. El o los receptores de LPA pueden incluir LPA¹y/o LPA³. Un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, puede usarse en un método para tratar diversos trastornos alérgicos en un mamífero. Un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, puede usarse en un método para tratar enfermedades, trastornos o afecciones respiratorias en un mamífero. Un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, puede usarse en un método para tratar asma en un mamífero. Un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, puede usarse en un método para tratar asma crónica en un mamífero.

La expresión "enfermedad respiratoria", como se usa en el presente documento, se refiere a enfermedades que afectan a los órganos implicados en la respiración, tales como la nariz, garganta, laringe, trompas de Eustaquio, tráquea, bronquios, pulmones, músculos relacionados (por ejemplo, diafragma e intercostales) y nervios. Las enfermedades respiratorias incluyen, pero sin limitación, asma, síndrome de dificultad respiratoria en el adulto y asma alérgico (extrínseco), asma no alérgico (intrínseco), asma grave agudo, asma crónico, asma clínico, asma nocturno, asma inducido por alérgenos, asma sensible a aspirina, asma inducido por ejercicio, hiperventilación isocápnica, asma de aparición en la niñez, asma de aparición en el adulto, asma variante por tos, asma laboral, asma resistente a esteroides, asma estacional, rinitis alérgica estacional, rinitis alérgica perenne, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, incluyendo bronquitis crónica o enfisema, hipertensión pulmonar, fibrosis pulmonar intersticial y/o inflamación de las vías respiratorias y fibrosis quística e hipoxia.

El término "asma", como se usa en el presente documento, se refiere a cualquier trastorno de los pulmones caracterizado por variaciones en el flujo de gas pulmonar asociado a la constricción de las vías respiratorias por cualquier causa (intrínseca, extrínseca, o ambas; alérgica o no alérgica). El término asma puede usarse con uno o más adjetivos para indicar la causa.

En un aspecto, en el presente documento se presenta un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en un método para tratar o prevenir enfermedad pulmonar obstructiva crónica en un mamífero que comprende administrar al mamífero menos una vez una cantidad eficaz de al menos un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. Además, la enfermedad pulmonar obstructiva crónica incluye, pero sin limitación, bronquitis crónica o enfisema, hipertensión pulmonar, fibrosis pulmonar intersticial y/o inflamación de las vías respiratorias y fibrosis quística.

Sistema nervioso

El sistema nervioso es un lugar importante para la expresión de LPA¹; allí está regulado espacial y temporalmente a lo largo del desarrollo del cerebro. Los oligodendrocitos, las células mielinizantes en el sistema nervioso central (SNC), expresan LPA¹en mamíferos. Además, las células de Schwann, las células mielinizantes del sistema nervioso periférico, también expresan LPA¹, que participa en la regulación de la supervivencia y la morfología de las células de Schwann. Estas observaciones identifican funciones importantes para la señalización de LPA mediada por receptor en la neurogénesis, la supervivencia celular y la mielinización.

La exposición de las líneas celulares del sistema nervioso periférico a LPA produce una retracción rápida de sus procesos que resulta en el redondeo celular, que estaba, en parte, mediado por la polimerización del citoesqueleto de actina. En un aspecto, LPA provoca degeneración neuronal en condiciones patológicas cuando la barrera hematoencefálica está dañada y los componentes del suero se escapan al cerebro (Moolenaar, Curr. Opin. Cell Biol.

7:203-10, 1995). Las líneas celulares de neuroblastos del SNC inmortalizadas de la corteza cerebral también muestran respuestas de retracción a la exposición a LPA a través de la activación de Rho y las interacciones de actomiosina. En un aspecto, LPA se asocia a daño neuronal postisquémico (J. Neurochem. 61, 340, 1993; J. Neurochem., 70:66, 1998).

Un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, puede usarse en un método para tratar o prevenir un trastorno del sistema nervioso en un mamífero. La expresión "trastorno del sistema nervioso", como se usa en el presente documento, se refiere a afecciones que alteran la estructura o función del cerebro, la médula espinal o el sistema nervioso periférico, incluyendo pero no limitado a enfermedad de Alzheimer, edema cerebral, isquemia cerebral, accidente cerebrovascular, esclerosis múltiple, neuropatías, enfermedad de Parkinson, aquellas encontradas después de traumatismo directo o quirúrgico (incluyendo disfunción cognitiva post quirúrgica y lesión de la médula espinal o del tronco cerebral), así como los aspectos neurológicos de trastornos tales como enfermedad degenerativa de los discos y ciática.

Un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, puede usarse en un método para tratar o prevenir un trastorno del SNC en un mamífero. Los trastornos del SNC incluyen, pero sin limitación, esclerosis múltiple, enfermedad de Parkinson, enfermedad de Alzheimer, accidente cerebrovascular, isquemia cerebral, isquemia retiniana, disfunción cognitiva postquirúrgica, migraña, neuropatía periférica/dolor neuropático, lesión de la médula espinal, edema cerebral y traumatismo craneal.

Trastornos cardiovasculares

Los fenotipos cardiovasculares observados después de la eliminación dirigida de los receptores de lisofosfolípidos revelan funciones importantes para la señalización de lisofosfolípidos en el desarrollo y maduración de los vasos sanguíneos, la formación de placas ateroscleróticas y el mantenimiento de la frecuencia cardíaca (Ishii, I. et al. Annu. Rev. Biochem. 73, 321-354, 2004). La angiogénesis, la formación de nuevas redes capilares a partir de vasculatura preexistente, normalmente se invoca en la cicatrización de heridas, crecimiento de tejido y angiogénesis miocárdica después de lesión isquémica. Los factores de crecimiento peptídico (por ejemplo, factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF)) y los lisofosfolípidos controlan la proliferación coordinada, la migración, la adhesión, la diferenciación y el ensamblaje de células endoteliales vasculares (VEC) y células vasculares musculares lisas (VSMC) circundantes. La desregulación de los procesos que median la angiogénesis puede conducir a aterosclerosis, hipertensión, crecimiento tumoral, artritis reumatoide y retinopatía diabética (Osborne, N. and Stainier, D.Y. Annu. Rev. Physiol. 65, 23-43, 2003).

Las vías de señalización posteriores evocadas por los receptores de lisofosfolípidos incluyen la formación de lamelipodios dependiente de Rac (por ejemplo, ^lP^a-ⁱ) y la formación de fibras de estrés dependiente de Rho (por ejemplo LPA¹), que es importante en la migración y adhesión celular. La disfunción del endotelio vascular puede cambiar el equilibrio de la vasodilatación a la vasoconstricción y provocar hipertensión y remodelación vascular, que son factores de riesgo para la aterosclerosis (Maguire, J.J. et al., Trends Pharmacol. Sci. 26, 448-454, 2005).

El LPA contribuye tanto a la fase temprana (disfunción de barrera y adhesión de monocitos del endotelio) como a la fase tardía (activación de plaquetas y formación de trombos intraarteriales) de aterosclerosis, además de su progresión general. En la fase temprana, el ^lP^ade numerosas fuentes se acumula en las lesiones y activa sus GPCR afines (LPA¹y LPA³) expresado en plaquetas (Siess, W. Biochim. Biophys. Acta 1582, 204-215, 2002; Rother, E. et al. Circulation 108, 741-747, 2003). Esto desencadena el cambio de forma de plaquetas y la agregación, que conduce a la formación de trombos intraarteriales y, potencialmente, infarto de miocardio y apoplejía. En apoyo de su actividad aterogénica, LPA también puede ser un mitógeno y un motógeno para VSMC y un activador de células endoteliales y macrófagos. Los mamíferos con enfermedad cardiovascular se pueden beneficiar de los antagonistas de los receptores de LPA que previenen la formación de trombos y placas de neoíntima.

Un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, puede usarse en un método para tratar o prevenir enfermedad cardiovascular en un mamífero.

La expresión "enfermedad cardiovascular", como se usa en el presente documento se refiere a enfermedades que afectan al corazón o los vasos sanguíneos o ambos, que incluyen, pero sin limitación: arritmia (auricular o ventricular o ambas); ateroesclerosis y sus secuelas; angina; alteraciones del ritmo cardíaco; isquemia miocárdica; infarto de miocardio; aneurisma cardiaco o vascular; vasculitis, ictus; arteriopatía obstructiva periférica de una extremidad, un órgano o un tejido; lesión por reperfusión después de isquemia del cerebro, corazón u otro órgano o tejido; choque endotóxico, quirúrgico o traumático; hipertensión, cardiopatía valvular, insuficiencia cardíaca, presión sanguínea anómala; choque; vasoconstricción (incluyendo la asociada con migrañas); anomalía vascular, inflamación, insuficiencia limitada a un solo órgano o tejido.

Los compuestos de la presente invención puede usarse en un método para prevenir o tratar la vasoconstricción, aterosclerosis y sus secuelas isquemia miocárdica, infarto de miocardio, aneurisma de la aorta, vasculitis y accidente cerebrovascular que comprende administrar al menos una vez al mamífero una cantidad eficaz de al menos un compuesto de la presente invención o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o una composición farmacéutica o un medicamento que incluye un compuesto de la presente invención o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Los compuestos de la presente invención pueden usarse en un método para reducir la lesión por reperfusión cardiaca tras isquemia miocárdica y/o choque endotóxico que comprende administrar al menos una vez al mamífero una cantidad eficaz de al menos un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Los compuestos de la presente invención pueden usarse en un método para reducir la constricción de vasos sanguíneos en un mamífero que comprende administrar al menos una vez al mamífero una cantidad eficaz de al menos un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Los compuestos de la presente invención pueden usarse en un método para bajar o prevenir un aumento en la presión arterial de un mamífero que comprende administrar al menos una vez al mamífero una cantidad eficaz de al menos un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Inflamación

Se ha demostrado que el LPA regula las respuestas inmunológicas al modular las actividades/funciones de las células inmunes como los linfocitos T-/B y los macrófagos. En las células T activadas, LPA activa la producción de Il-2/proliferación celular a través de LPA¹(Gardell et al, TRENDS in Molecular Medicine, vol. 12 No.2 febrero de 2006). La expresión de genes de respuesta inflamatoria inducida por LPA está mediada por LPA¹y LPA³(Biochem Biophys Res Commun. 363(4): 1001-8, 2007). Además, LPA modula la quimiotaxis de las células inflamatorias (Biochem Biophys Res Commun., 1993, 15; 193(2), 497). La proliferación y la actividad secretora de citoquinas en respuesta a LPA de las células inmunes (J. Imuunol. 1999, 162, 2049), actividad de agregación plaquetaria en respuesta a LPA, aceleración de la actividad migratoria en monocitos, activación de NF-^kB en fibroblastos, mejora de la unión de fibronectina a la superficie celular, y similares son conocidos. Por lo tanto, LPA está asociado con diversas enfermedades inflamatorias/inmunológicas.

Un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, puede usarse en un método para tratar o prevenir la inflamación en un mamífero. Los antagonistas de LPA¹y/o LPA³encuentran uso en el tratamiento o la prevención de trastornos inflamatorios/inmunológicos en un mamífero. El antagonista de LPA¹puede ser un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Los ejemplos de trastornos inflamatorios/inmunológicos incluyen psoriasis, artritis reumatoide, vasculitis, enfermedad inflamatoria intestinal, dermatitis, artrosis, asma, enfermedad muscular inflamatoria, rinitis alérgica, vaginitis, cistitis intersticial, esclerodermia, eccema, rechazo de injerto de trasplante alogénico o xenogénico (de órgano, médula ósea, células madre y otras células y tejidos), enfermedad de injerto contra hospedador, lupus eritematoso, enfermedad inflamatoria, diabetes de tipo I, fibrosis pulmonar, dermatomiositis, síndrome de Sjogren, tiroiditis (por ejemplo, de Hashimoto y tiroiditis autoinmune), miastenia grave, anemia hemolítica autoinmune, esclerosis múltiple, fibrosis quística, hepatitis recurrente crónica, cirrosis biliar primaria, conjuntivitis alérgica y dermatitis atópica.

Otras enfermedades, trastornos o afecciones

Los compuestos de la presente invención pueden usarse en métodos para tratar, prevenir, revertir, detener o ralentizar la progresión de enfermedades o afecciones dependientes de LPA o mediadas por LPA una vez que sea clínicamente evidente, o tratar los síntomas asociados o relacionados con enfermedades o afecciones dependientes de LPA o mediadas por LPA, administrando al mamífero un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. El sujeto puede tener ya una enfermedad o afección dependiente de LPA o mediada por LPA en el momento de la administración, o puede estar en riesgo de desarrollar una enfermedad o afección dependiente de LPA o mediada por LPA.

La actividad de LPA¹en un mamífero puede modularse directa o indirectamente mediante la administración de (al menos una vez) una cantidad terapéuticamente eficaz de al menos un compuesto de la presente invención o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. Tal modulación incluye, pero sin limitación, reducir y/o inhibir la actividad de LPA¹. La actividad del LPA en un mamífero se puede modular de manera directa o indirecta, incluyendo reducir y/o inhibir, por la administración de (al menos una vez) una cantidad terapéuticamente eficaz de al menos un compuesto de la presente invención o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. Tal modulación incluye, pero sin limitación, reducir y/o inhibir la cantidad y/o actividad de un receptor de LPA. El receptor de LPA puede ser LPA¹.

LPA puede tener una acción de contracción sobre las células del músculo liso de la vejiga aisladas de la vejiga y promover el crecimiento de las células epiteliales derivadas de la próstata (J. Urology, 1999, 162, 1779-1784; J. Urology, 2000, 163, 1027-1032). LPA puede contraer el tracto urinario y la próstata in vitro y aumentar la presión intrauretral in vivo (documento WO 02/062389).

Los compuestos de la presente invención pueden usarse en métodos para prevenir o tratar el reclutamiento de eosinófilos y/o basófilos y/o células dendríticas y/o neutrófilos y/o monocitos y/o células T que comprenden administrar al menos una vez al mamífero un agente eficaz cantidad de al menos un compuesto de la presente invención o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Los compuestos de la presente invención pueden usarse en métodos para el tratamiento de cistitis, incluyendo, por ejemplo, cistitis intersticial, que comprende administrar al menos una vez al mamífero una cantidad terapéuticamente eficaz de al menos un compuesto de la presente invención o una sal farmacéuticamente aceptable o solvato del mismo.

Los compuestos de la presente invención pueden usarse en métodos descritos en el presente documento que pueden incluir el diagnóstico o la determinación de si un paciente padece o no una enfermedad o afección dependiente de LPA o mediada por LPA administrando al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y determinando si el paciente responde o no al tratamiento.

Los compuestos de la presente invención, sales farmacéuticamente aceptables y solvatos farmacéuticamente aceptables de los mismos, que son antagonistas de LPA¹, pueden usarse en un método para tratar pacientes que padecen una o más afecciones o enfermedades o dependientes de LPA o mediadas por LPA, incluyendo, pero sin limitación, fibrosis pulmonar, fibrosis renal, fibrosis hepática, formación de cicatrices, asma, rinitis, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, hipertensión pulmonar, fibrosis pulmonar intersticial, artritis, alergia, psoriasis, enfermedad inflamatoria intestinal, síndrome de dificultad respiratoria del adulto, infarto de miocardio, aneurisma, accidente cerebrovascular, cáncer, dolor, trastornos proliferativos y afecciones inflamatorias. Las afecciones o enfermedades dependientes de LPA incluyen aquellas en donde está presente y/u observado un exceso absoluto o relativo de LPA.

Las enfermedades o afecciones dependientes de LPA o mediadas por LPA pueden incluir, pero sin limitación, fibrosis orgánica, asma, trastornos alérgicos, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, hipertensión pulmonar, fibrosis pulmonar o pleural, fibrosis peritoneal, artritis, alergia, cáncer, enfermedad cardiovascular, síndrome de dificultad respiratoria máxima, infarto de miocardio, aneurisma, accidente cerebrovascular y cáncer.

Un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se puede usar en un método para mejorar la disminución de la sensibilidad corneal causada por operaciones corneales tales como la queratomileusis in situ asistida por láser (LASIK) o la operación de cataratas, disminución de la sensibilidad corneal causada por la degeneración corneal, y síntomas de ojo seco causados por ello.

Un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, puede usarse en un método para tratar o prevenir la inflamación ocular y conjuntivitis alérgica, queratoconjuntivitis vernal y conjuntivitis papilar en un mamífero que comprende administrar al menos una vez al mamífero una cantidad eficaz de al menos un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, puede usarse en un método para tratar o prevenir la enfermedad de Sjogren o enfermedad inflamatoria con ojos secos en un mamífero que comprende administrar al menos una vez al mamífero una cantidad eficaz de al menos un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

LPA y los receptores de LPA (por ejemplo, LPA¹) pueden estar implicados en la patogénesis de la osteoartritis (Kotani et al, Hum. Mol. Genet., 2008, 17, 1790-1797). Un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, puede usarse en un método para tratar o prevenir la osteoartritis en un mamífero que comprende administrar al menos una vez al mamífero una cantidad eficaz de al menos un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Los receptores de LPA (por ejemplo, LPA¹, LPA³) pueden contribuir a la patogénesis de la artritis reumatoide (Zhao et al, Mol. Pharmacol., 2008, 73(2), 587-600). Un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, puede usarse en un método para tratar o prevenir la artritis reumatoide en un mamífero que comprende administrar al menos una vez al mamífero una cantidad eficaz de al menos un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Los receptores de LPA (por ejemplo, LPA¹) pueden contribuir a la adipogénesis. (Simon et al, J.Biol. Chem., 2005, vol.

280, n.° 15, p.14656). Un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, puede usarse en un método para promover la formación de tejido adiposo en un mamífero que comprende administrar al menos una vez al mamífero una cantidad eficaz de al menos un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

a. Ensayos in vitro

La eficacia de los compuestos de la presente invención como inhibidores de LPA1 puede determinarse en un ensayo de antagonista funcional de LPA1 como sigue:

Las células de ovario de hámster chino que sobreexpresan LPA1 humano se sembraron durante la noche (15.000 células/pocillo) en microplacas de 384 pocillos recubiertas con poli-D-lisina (Greiner bio-one, n.° de cat. 781946) en medio DMEM/F12 (Gibco, n.° de cat. 11039). Después del cultivo durante la noche, las células se cargaron con colorante indicador de calcio (AAT Bioquest Inc, n.° de cat. 34601) durante 30 minutos a 37 °C. Las células se equilibraron a temperatura ambiente durante 30 minutos antes del ensayo. Los compuestos de prueba solubilizados en DMSO se transfirieron a placas de superficie de no unión de 384 pocillos (Corning, n.° de cat. 3575) usando el dispensador acústico Labcyte Echo y se diluyeron con tampón de ensayo [1X HBSS con calcio/magnesio (Gibco n.° de cat. 14025-092), HEPES 20 mM (Gibco n.° de cat. 15630-080) y BSA libre de ácidos grasos al 0,1 % (Sigma n.° de cat. A9205)] hasta una concentración final de DMSO al 0,5 %. Se añadieron los compuestos diluidos a las células mediante FDSS6000 (Hamamatsu) a concentraciones finales que varían de 0,08 nM a 5 pM y después se incubaron durante 20 min a temperatura ambiente, momento en el que se añadió LPA (Avanti Polar Lipids n.° de cat. 857130C) a concentraciones finales de 10 nM para estimular las células. El valor CI⁵⁰del compuesto se definió como la concentración del compuesto de prueba que inhibía el 50 % del flujo de calcio inducido por LPA solo. Los valores CI⁵⁰se determinaron ajustando los datos a una ecuación logística de 4 parámetros (GraphPad Prism, San Diego CA).

b. Ensayos in vivo

Provocación de LPA con evaluación de histamina en plasma.

El compuesto se dosifica por vía oral p.o. 2 horas a ratones hembra CD-1 antes de la provocación con LPA. Se dosifica a los ratones después a través de la vena de la cola (IV) 0,15 ml de LPA en 0,1 % de BSA/PBS (2 pg/pl). Exactamente 2 minutos después de la provocación de LPA, los ratones se sacrifican por decapitación y se recoge la sangre del tronco. Estas muestras se centrifugan colectivamente y las muestras individuales de 75 pl se congelan a -20 °C hasta el momento del ensayo de histamina.

El análisis de histamina en plasma se realizó mediante métodos convencionales de EIA (inmunoensayo enzimático). Las muestras de plasma se descongelaron y se diluyeron 1:30 en BSA al 0,1 % en PBS. Se siguió el protocolo de EIA para el análisis de histamina según lo indicado por el fabricante (Histamine EIA, Oxford Biomedical Research, EA#31).

El LPA usado en el ensayo se formula de la siguiente manera: LPA (1-oleoil-2-hidroxi-sn-glicero-3-fosfato (sal sódica), 857130P, Avanti Polar Lipids) se prepara en BSA/PBS al 0,1 % para una concentración total de 2 pg/pl. Se pesan 13 mg de LPA y se añaden 6,5 ml de BSA al 0,1 %, se agita en vórtex y se somete a ultrasonidos durante ~1 hora hasta que se logre una solución transparente.

V. COMPOSICIONES FARMACÉUTICAS, FORMULACIONES Y COMBINACIONES

En algunas realizaciones, se proporciona una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la presente, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En algunas realizaciones, la composición farmacéutica también contiene al menos un ingrediente inactivo farmacéuticamente aceptable.

Una composición farmacéutica puede comprender una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la presente invención o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y al menos un principio activo farmacéuticamente aceptable. La composición farmacéutica se puede formular para inyección intravenosa, inyección subcutánea, administración oral, inhalación, administración nasal, administración tópica, administración oftálmica o administración ótica. En algunas realizaciones, la composición farmacéutica es un comprimido, una píldora, una cápsula, un líquido, un inhalante, una solución de pulverización nasal, un supositorio, una suspensión, un gel, un coloide, una dispersión, una suspensión, una solución, una emulsión, una pomada, una loción, una gota para los ojos o una gota para los oídos.

La composición farmacéutica puede comprender además uno o más agentes terapéuticamente activos adicionales seleccionados de: corticosteroides (por ejemplo, dexametasona o fluticasona), inmunosupresores (por ejemplo, tacrolimus y pimecrolimus), analgésicos, agente antineoplásico, antiinflamatorios, antagonistas de receptores de quimiocinas, broncodilatadores, antagonistas de los receptores de leucotrienos (por ejemplo, montelukast o zafirlukast), inhibidores de la formación de leucotrienos, inhibidores de la monoacilglicerol quinasa, inhibidores de la fosfolipasa A ¹, inhibidores de la fosfolipasa A²e inhibidores de la lisofosfolipasa D (lysoPLD), inhibidores de la autotaxina, descongestionantes, antihistamínicos (por ejemplo, loratidina), mucolíticos, anticolinérgicos, antitusivos, expectorantes, antiinfecciosos (por ejemplo, ácido fusídico, particularmente para el tratamiento de la dermatitis atópica), antifúngicos (por ejemplo, clotriazol, particularmente para dermatitis atópica), terapias con anticuerpos anti-IgE (por ejemplo, omalizumab), agonistas adrenérgicos p-2 (por ejemplo, albuterol o salmeterol), otros antagonistas de PGD2 que actúan en otros receptores como los antagonistas de DP, inhibidores de PDE4 (por ejemplo, cilomilast), medicamentos que modulan la producción de citocinas, por ejemplo, inhibidores de TACE, fármacos que modulan la actividad de las citocinas Th2 ⁱL-4 e IL-5 (por ejemplo, bloqueando anticuerpos monoclonales y receptores solubles), agonistas de PPARy (por ejemplo, rosiglitazona y pioglitazona), inhibidores de la 5-lipoxigenasa (por ejemplo, zileuton).

La composición farmacéutica puede comprender además uno o más agentes antifibróticos adicionales seleccionados de pirfenidona, nintedanib, talidomida, carlumab, FG-3019, fresolimumab, interferón alfa, superóxido dismutasa lecitinizada, simtuzumab, tanzisertib, tralokinumab, hu3G9, AM-152, IFN-gamma-1b, IW-001, PRM-151, PXS-25, pentoxifilina/N-acetil-cisteína, pentoxifilina/vitamina E, sulfato de salbutamol, [Sar9,Met(O2)11]-Sustancia P, pentoxifilina, bitartrato de mercaptamina, ácido obeticólico, aramcol, GFT-505, éster etílico del ácido eicosapentaenoico, metformina, metreleptina, muromonab-CD3, oltipraz, IMM-124-E, MK-4074, PX-102, RO-5093151. Un método puede comprender administrar un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, a un ser humano con una enfermedad o afección dependiente de LPA o mediada por LPA. Al ser humano se le puede estar ya administrando uno o más agentes terapéuticamente activos adicionales distintos de un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. El método puede comprender además administrar uno o más agentes terapéuticamente activos adicionales distintos de un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

El uno o más agentes terapéuticamente activos adicionales distintos de un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, puede seleccionarse de: corticosteroides (por ejemplo, dexametasona o fluticasona), inmunosupresores (por ejemplo, tacrolimus y pimecrolimus), analgésicos, agente antineoplásico, antiinflamatorios, antagonistas de receptores de quimiocinas, broncodilatadores, antagonistas de los receptores de leucotrienos (por ejemplo, montelukast o zafirlukast), inhibidores de la formación de leucotrienos, inhibidores de la monoacilglicerol quinasa, inhibidores de la fosfolipasa A¹, inhibidores de la fosfolipasa A²e inhibidores de la lisofosfolipasa D (lysoPLD), inhibidores de la autotaxina, descongestionantes, antihistamínicos (por ejemplo, loratidina), mucolíticos, anticolinérgicos, antitusivos, expectorantes, antiinfecciosos (por ejemplo, ácido fusídico, particularmente para el tratamiento de la dermatitis atópica), antifúngicos (por ejemplo, clotriazol, particularmente para dermatitis atópica), terapias con anticuerpos anti-IgE (por ejemplo, omalizumab), agonistas adrenérgicos p-2 (por ejemplo, albuterol o salmeterol), otros antagonistas de PGD2 que actúan en otros receptores como los antagonistas de DP, inhibidores de PDE4 (por ejemplo, cilomilast), medicamentos que modulan la producción de citocinas, por ejemplo inhibidores de TACE, fármacos que modulan la actividad de las citocinas Th2 IL-4 e IL-5 (por ejemplo, bloqueando anticuerpos monoclonales y receptores solubles), agonistas de PPARy (por ejemplo, rosiglitazona y pioglitazona), inhibidores de la 5-lipoxigenasa (por ejemplo, zileuton).

El uno o más agentes terapéuticamente activos adicionales distintos de un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, pueden ser otros agentes antifibróticos seleccionados de pirfenidona, nintedanib, talidomida, carlumab, FG-3019, fresolimumab, interferón alfa, superóxido dismutasa lecitinizada, simtuzumab, tanzisertib, tralokinumab, hu3G9, AM-152, IFN-gamma-lb, IW-001, PRM-151, PXS-25, pentoxifilina/N-acetil-cisteína, pentoxifilina/vitamina E, sulfato de salbutamol, [Sar9,Met(O2)11]-Sustancia P, pentoxifilina, bitartrato de mercaptamina, ácido obeticólico, aramcol, GFT-505, eicosapentil etil éster, metformina, metreleptina, muromonab-CD3, oltipraz, IMM-124E, MK-4074, PX-102, RO-5093151.

El uno o más agentes terapéuticamente activos adicionales distintos de un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, puede seleccionarse de inhibidores de ACE, ramiprilo, antagonistas de AII, irbesartán, antiarrítmicos, dronedarona, activadores de PPARa, activadores de PPAR^y, pioglitazona, rosiglitazona, prostanoides, antagonistas del receptor de endotelina, inhibidores de la elastasa, antagonistas de calcio, betabloqueantes, diuréticos, antagonistas del receptor de aldosterona, eplerenona, inhibidores de la renina, inhibidores de rho quinasa, activadores de guanilato ciclasa soluble (sGC), sensibilizadores de sGC, inhibidores de PDE, inhibidores de PDE5, donadores de NO, fármacos de digitalis, inhibidores de ACE/NEP, estatinas, inhibidores de la recaptación de ácidos biliares, antagonistas de PDGF, antagonistas de vasopresina, acuaréticos, inhibidores de NHE1, antagonistas del Factor Xa, antagonistas del Factor XlIIa, anticoagulantes, antitrombóticos, inhibidores plaquetarios, profibrolíticos, inhibidores de la fibrinólisis activables por trombina (TAFI), inhibidores de PAI1, cumarinas, heparinas, antagonistas de tromboxano, antagonistas de serotonina, inhibidores de COX, aspirina, anticuerpos terapéuticos, antagonistas de GPIIb/IIIa, antagonistas de ER, SERM, inhibidores de tirosina cinasa, inhibidores de la quinasa RAF, inhibidores de p38 MAPK, pirfenidona, inhibidores multi-quinasa, nintedanib, sorafenib.

El uno o más agentes terapéuticamente activos adicionales distintos de un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, puede seleccionarse de Gre mlin-1 mAb, PA1-1 mAb, Promedior (PRM-151; Pentraxina-2 humana recombinante); FGF21, antagonistas de TGFp, pan-antagonistas de avp6 y avp; inhibidores de FAK, inhibidores de TG2, inhibidores de LOXL2, inhibidores de NOX4, inhibidores de m Ga T2, agonistas de GPR120.

Las formulaciones farmacéuticas descritas en el presente documento se pueden administrar a un sujeto en diversas formas mediante múltiples vías de administración, incluyendo pero sin limitación, las vías de administración oral, parenteral (por ejemplo, intravenosa, subcutánea, intramuscular), intranasal, bucal, tópica o transdérmica. Las formulaciones farmacéuticas descritas en el presente documento incluyen, pero sin limitación, dispersiones líquidas acuosas, dispersiones autoemulsionantes, soluciones sólidas, dispersiones liposómicas, aerosoles, formas de dosificación sólidas, polvos, formulaciones de liberación inmediata, formulaciones de liberación controlada, formulaciones de fusión rápida, comprimidos, cápsulas, píldoras, formulaciones de liberación retardada, formulaciones de liberación prolongada, formulaciones de liberación pulsátil, formulaciones de multipartículas y formulaciones mixtas de liberación inmediata y controlada.

El compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se puede administrar por vía oral.

El compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se puede administrar por vía tópica. El compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se puede formular en forma de diferentes composiciones administrables por vía tópica, tales como soluciones, suspensiones, lociones, geles, pastas, champús, exfoliantes, solución para frotar, frotis, barras medicinales, vendas medicadas, bálsamos, cremas o pomadas. Dichos compuestos farmacéuticos pueden contener solubilizantes, estabilizantes, agentes potenciadores de la tonicidad, tampones y conservantes. El compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se puede administrar por vía tópica en la piel.

el compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se puede administrar por inhalación. El compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se puede administrar por inhalación que se dirige directamente al sistema pulmonar.

El compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se puede formular para administración intranasal. Tales formulaciones pueden incluir pulverizaciones nasales, nieblas nasales y similares.

El compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se puede formular como gotas oculares.

Un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, puede usarse en un método para tratar una enfermedad, trastorno o afección en la que la actividad de al menos un receptor de LPA contribuye a la patología y/o los síntomas de la enfermedad o afección. El LPA se puede seleccionar de LPA¹, LPA², LPA³, LPA⁴, LPA⁵y LPA⁶. El receptor de LPA puede ser LPA¹. La enfermedad o afección puede ser cualquiera de las enfermedades o afecciones especificadas en el presente documento.

En cualquiera de los aspectos mencionados anteriormente hay realizaciones adicionales en las que: (a) la cantidad efectiva del compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, puede administrarse de manera sistémica al mamífero; y/o (b) la cantidad efectiva del compuesto puede administrarse por vía oral al mamífero; y/o (c) la cantidad efectiva del compuesto puede administrarse por vía intravenosa al mamífero; y/o (d) la cantidad efectiva del compuesto puede administrarse por inhalación; y/o (e) la cantidad efectiva del compuesto puede administrarse mediante administración nasal; o y/o (f) la cantidad efectiva del compuesto puede administrarse mediante inyección al mamífero; y/o (g) la cantidad efectiva del compuesto puede administrarse por vía tópica al mamífero; y/o (h) la cantidad efectiva del compuesto puede administrarse mediante administración oftálmica; y/o (i) la cantidad efectiva del compuesto puede administrarse por vía rectal al mamífero; y/o (j) la cantidad efectiva puede administrarse de manera no sistémica o localmente al mamífero.

En cualquiera de los aspectos mencionados anteriormente hay realizaciones adicionales que comprenden administraciones individuales de la cantidad eficaz del compuesto, incluyendo realizaciones adicionales en las que (i) el compuesto puede administrarse una vez; (ii) el compuesto puede administrarse al mamífero múltiples veces a lo largo de un día; (iii) continuamente; o (iv) de manera continua.

En cualquiera de los aspectos mencionados anteriormente hay realizaciones adicionales que comprenden administraciones múltiples de la cantidad eficaz del compuesto, incluyendo realizaciones adicionales en la que (i) el compuesto puede administrarse de manera continua o intermitente: como en una dosis única; (ii) el tiempo entre múltiples administraciones puede ser cada 6 horas; (iii) el compuesto puede administrarse al mamífero cada 8 horas; (iv) el compuesto puede administrarse al mamífero cada 12 horas; (v) el compuesto puede administrarse al mamífero cada 24 horas. El método puede comprender un período de reposo farmacológico, en el que se suspende temporalmente la administración del compuesto o se reduce temporalmente la dosis del compuesto que se está administrando; al final del período de reposo farmacológico, se reinicia la administración del compuesto. La duración del reposo farmacológico varía de 2 días a 1 año.

Un compuesto de la presente invención puede usarse en un método para inhibir la actividad fisiológica de LPA en un mamífero que comprende administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la presente invención o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo al mamífero que lo necesita.

Un compuesto de la presente invención puede usarse en un medicamento para tratar a una enfermedad o afección dependiente de LPA o mediada por LPA en un mamífero que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se puede usar en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad o afección dependiente de lPa o mediada por LPA.

Un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, puede usarse en un método para tratar o prevenir una enfermedad o afección dependiente de LPA o mediada por LPA.

Un compuesto de la presente invención puede usarse en un método para tratar o prevenir una enfermedad o afección dependiente de LPA o mediada por LPA en un mamífero que comprende administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Las enfermedades o afecciones dependientes de LPA o mediadas por LPA incluyen, pero sin limitación, fibrosis de órganos o tejidos, formación de cicatrices, enfermedades hepáticas, afecciones dermatológicas, cáncer, enfermedad cardiovascular, enfermedades o afecciones respiratorias, enfermedad inflamatoria, enfermedad del tracto gastrointestinal, enfermedad renal, enfermedad asociada al tracto urinario, enfermedad inflamatoria del tracto urinario inferior, disuria, micción frecuente, enfermedad pancreática, obstrucción arterial, infarto cerebral, hemorragia cerebral, dolor, neuropatía periférica y fibromialgia.

La enfermedad o afección dependiente de LPA o mediada por LPA puede ser una enfermedad o afección respiratoria. La enfermedad o afección respiratorias puede ser asma, enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC), fibrosis pulmonar, hipertensión arterial pulmonar o síndrome de dificultad respiratoria aguda.

La enfermedad o afección dependiente de LPA o mediada por LPA puede seleccionarse de fibrosis pulmonar idiopática; otras enfermedades pulmonares parenquimatosas difusas de diferentes etiologías, incluyendo fibrosis iatrogénica inducida por fármacos, fibrosis laboral y/o ambiental inducida, enfermedades granulomatosas (sarcoidosis, neumonía por hipersensibilidad), enfermedad vascular por colágeno, proteinosis alveolar, granulomatosis de células de Langerhans, linfangioleiomiomatosis, enfermedades hereditarias (síndrome de Hermansky-Pudlak, esclerosis tuberosa, neurofibromatosis, trastornos del almacenamiento metabólico, enfermedad pulmonar intersticial familiar); fibrosis inducida por radiación; enfermedad pulmonar obstructiva crónica (COPD); esclerodermia; fibrosis pulmonar inducida por bleomicina; asma crónica; silicosis; fibrosis pulmonar inducida por el asbesto; síndrome de dificultad respiratoria aguda (ARDS); fibrosis renal; fibrosis del tubulointersticio; nefritis glomerular; esclerosis glomerular segmentaria focal; nefropatía de IgA; hipertensión; Alport; fibrosis intestinal; fibrosis hepática; cirrosis; fibrosis hepática inducida por alcohol; fibrosis hepática tóxica/inducida por fármacos; hemocromatosis; esteatohepatitis no alcohólica (NASH); lesión del conducto biliar; cirrosis biliar primaria; infección inducida por fibrosis hepática; fibrosis hepática inducida por virus; y hepatitis autoinmune; cicatrices corneales; cicatrices hipertróficas; enfermedad de Duputren, queloides, fibrosis cutánea; esclerodermia cutánea; lesión de la médula espinal/fibrosis; mielofibrosis; restenosis vascular; aterosclerosis; arteriosclerosis; granulomatosis de Wegener; enfermedad de Peyronie, leucemia linfocítica crónica, metástasis tumoral, rechazo de trasplante de órgano, endometriosis, síndrome de dificultad respiratoria neonatal y dolor neuropático.

La enfermedad o afección dependiente de LPA o mediada por LPA puede ser como se describe en el presente documento.

Un compuesto de la presente invención puede usarse en un método para el tratamiento o prevención de fibrosis de órganos en un mamífero que comprende administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la presente invención o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo a un mamífero que lo necesita.

La fibrosis de órganos puede comprender fibrosis pulmonar, fibrosis renal o fibrosis hepática.

Un compuesto de la presente invención puede usarse en un método para mejorar la función pulmonar en un mamífero que comprende administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo al mamífero que lo necesita. En un aspecto, el mamífero ha sido diagnosticado con fibrosis pulmonar.

Los compuestos divulgados en el presente documento pueden usarse en un método para tratar fibrosis pulmonar idiopática (neumonía intersticial usual) en un mamífero.

Los compuestos divulgados en el presente documento pueden usarse en un método para tratar enfermedades pulmonares intersticiales paranquimales difusas en un mamífero: inducidas por fármaco iatrogénico, laborales/ambientales (pulmón de granjero), enfermedades granulomatosas (sarcoidosis, neumonía por hipersensibilidad), enfermedad vascular del colágeno (esclerodermia y otras), proteinosis alveolar, granulonmatosis de células de Langerhans, linfangioleiomiomatosis, Síndrome de Hermansky-Pudlak, esclerosis tuberosa, neurofibromatosis, trastornos del almacenamiento metabólico, enfermedad pulmonar intersticial familiar.

Los compuestos divulgados en el presente documento pueden usarse en un método para tratar fibrosis post-trasplante asociada con rechazo crónico en un mamífero: Bronquiolitis obliterante para trasplante pulmonar.

Los compuestos divulgados en el presente documento pueden usarse en un método para tratar fibrosis cutánea en un mamífero: esclerodermia cutánea, enfermedad de Dupuytren, queloides.

Los compuestos divulgados en el presente documento pueden usarse en un método para tratar fibrosis hepática con o sin cirrosis en un mamífero: tóxica/inducida por fármacos (hemocromatosis), hepatopatía alcohólica, hepatitis vírica (virus de la hepatitis B, virus de la hepatitis C, VHC), enfermedad hepática no alcohólica (NAFLD, NASH), enfermedad metabólica y autoinmune.

Los compuestos divulgados en el presente documento pueden usarse en un método para tratar fibrosis renal en un mamífero: fibrosis del tubulointersticio, esclerosis glomerular.

En cualquiera de los aspectos mencionados anteriormente que implican el tratamiento de enfermedades o afecciones dependientes de LPA, hay realizaciones adicionales que pueden comprender administrar al menos un agente adicional además de la administración de un compuesto que tiene la estructura de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. Cada agente puede administrarse en cualquier orden, incluyendo simultáneamente.

El mamífero puede ser un ser humano.

Los compuestos proporcionados en el presente documento se pueden administrar a un ser humano.

Los compuestos proporcionados en el presente documento se pueden administrar por vía oral.

Los compuestos proporcionados en el presente documento se pueden usar como antagonistas de al menos un receptor de LPA. Los compuestos proporcionados en el presente documento se pueden usar para inhibir la actividad de al menos un receptor de LPA o para el tratamiento de una enfermedad o afección que se beneficiaría de la inhibición de la actividad de al menos un receptor de LPA. El receptor de LPA puede ser LPA¹.

Los compuestos proporcionados en el presente documento pueden usarse en un método para inhibir la actividad de LPA¹.

Se proporcionan artículos de fabricación, que incluyen material de acondicionamiento, un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, dentro del material de acondicionamiento y una etiqueta que indica que el compuesto o la composición, o sal farmacéuticamente aceptable, tautómeros, N-óxido farmacéuticamente aceptable, o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, puede usarse para inhibir la actividad de al menos un receptor de LPA, o para el tratamiento, prevención o mejora de uno o más síntomas de una enfermedad o afección que se beneficiaría de la inhibición de la actividad de al menos un receptor de LPA.

VI. SÍNTESIS GENERAL INCLUYENDO ESQUEMAS

Los compuestos de la presente invención se pueden preparar en varias rutas conocidas por un experto en la técnica de la síntesis orgánica. Los compuestos de la presente invención se pueden sintetizar usando los métodos descritos a continuación, junto con los métodos de síntesis conocidos en la materia de la química orgánica sintética o mediante variaciones en los mismos, según apreciarán los expertos en la materia. Los métodos preferidos incluyen, pero sin limitación, los descritos a continuación. Las reacciones se realizan en un disolvente o una mezcla de disolventes adecuada para los reactivos y materiales empleados y adecuada para que las transformaciones se lleven a cabo. Los expertos en la técnica de síntesis orgánica entenderán que la funcionalidad presente en la molécula debe ser consistente con las transformaciones propuestas. Esto requerirá en ocasiones una valoración para modificar el orden de las etapas de síntesis o para seleccionar un esquema de proceso concreto frente a otro para obtener un compuesto deseado de la invención.

También se reconocerá que otra consideración principal al planear cualquier vía de síntesis en este campo es la elección acertada del grupo protector usado para la protección de grupos funcionales reactivos presentes en los compuestos descritos en la presente invención. Un informe con autoridad que describe las muchas alternativas al médico capacitado es Greene et al., (Protective Groups in Organic Synthesis, cuarta edición, Wiley-Interscience (2006)).

Los compuestos de la presente invención se pueden preparar mediante los procesos a modo de ejemplo descritos en los esquemas y ejemplos funcionales siguientes, así como en procedimientos relevantes publicados en la literatura que son usados por un experto en la materia. Los reactivos y procedimientos a modo de ejemplo para estas reacciones aparecen en el presente documento a partir de ahora y en los ejemplos de trabajo. La protección y desprotección en los procesos siguientes se puede llevar a cabo mediante procedimientos normalmente conocidos en la técnica (véase, por ejemplo, Wuts, P.G.M., Greene's Protective Groups in Organic Synthesis, 5a edición, Wiley (2014)). Los métodos generales de síntesis orgánica y transformaciones de grupos funcionales se encuentran en: Trost, B.M. et al., Eds., Comprehensive Organic Synthesis: Selectivity, Strategy & Efficiency en Modern Organic Chemistry, Pergamon Press, Nueva York, NY (1991); Smith, M.B. et al., March's Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure. ⁷a edición, Wiley, Nueva York, NY (2013); Katritzky, A. R. et al., Eds., Comprehensive Organic Functional Group Transformations II, 2a Edición, Elsevier Science Inc., Tarrytown, NY (2004); Larock, R.C., Comprehensive Organic Transformations, 2a Edición, Wiley-VCH, Nueva York, NY (1999) y las referencias en los mismos.

El esquema 1 describe la síntesis de boronato de pinacol 9. Una reacción de Michael doble del anión de un éster de ácido 4-halo-(preferiblemente 4-bromo-)fenil-acético 1 con éster de acrilato 2 (dos equivalentes) proporciona el éster p-ceto ciclohexílico 3. La hidrólisis del diéster 3 seguido de la descarboxilación del intermedio de ácido p-ceto ciclohexílico proporciona el ceto-ácido ciclohexílico 4. La reacción de Horner-Emmons con el fosfonato-éster 5 proporciona el éster-ácido a,p-insaturado 6. La reducción del resto ácido del éster-ácido 6 proporciona el alcohol ciclohexílico 7, que experimenta una reacción de Michael oxi intramolecular mediada por base para proporcionar el oxabiciclo[2.2.2] éster 8. La reacción del haloareno 8 con bis(pinacolato)diboro en presencia de un catalizador de metal de transición apropiado (por ejemplo, paladio, por ejemplo Ishiyama, T. et al, J. Org. Chem. 1995, 60, 7508-7510) proporciona el pinacol boronato 9 correspondiente.

El esquema 2 describe la síntesis de ácidos isoxazol 2-oxabicido[2.2.2]octan-1-il aril acéticos 13. El ácido isoxazol carboxílico 10 se somete a un reordenamiento de Curtius con (PhO^POÑ en presencia de un alcohol apropiado para dar el isoxazol N-carbamato correspondiente, que entonces se broma (por ejemplo, N-bromo-succinimida) para proporcionar el bromo-isoxazol N-carbamato 11. El acoplamiento cruzado de Suzuki-Miyaura de boronato de arilo 9 y el bromo-isoxazol 11 proporciona el isoxazol N-carbamato de arilo 12, que entonces se desprotege para proporcionar los ácidos de oxabiciclo[2.2.2] isoxazol N-carbamato 13 deseados.

E sq u e m a 2

El esquema 3 describe la síntesis análoga de ácidos pirazol 2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il acéticos 17. Se somete ácido 4-bromo-pirazol-5-carboxílico 14 se somete a un reordenamiento de Curtius con (PhO)²PON³en presencia de un alcohol apropiado para proporcionar el bromo-pirazol-N-carbamato 15 correspondiente. El acoplamiento cruzado de Suzuki-Miyaura de boronato de arilo 9 y el bromo-pirazol 15 proporciona el pirazol N-carbamato de arilo 16, que entonces se desprotege para proporcionar los ácidos de oxabiciclo[2.2.2] pirazol N-carbamato 17 deseados.

Esquema 3

El esquema 4 describe la síntesis de los ácidos isoxazol oxabicídico[2.2.2] aril acéticos 30 regioisoméricos. Un alcohol halo-bencílico 18 protegido de manera apropiada se litia (por ejemplo, con n-BuLi) y se hace reaccionar con el 4 oxociclohexanona bis-tosilato 19 (sintetizado a partir de malonato de dietilo y acrilato de etilo en 6 etapas, como se describe en el documento WO 2001034610) para formar el aducto de aril ciclohexanol bis-tosilato correspondiente, que entonces se somete al desplazamiento intramolecular mediado por base de un tosilato por el alcohol para proporcionar el oxabiciclo[2.2.2]tosilato 20. El desplazamiento de tosilato 20 por cianuro proporciona nitrilo 21, que se somete a hidrólisis para dar el ácido correspondiente, que entonces se protege de manera apropiada (con un grupo protector ortogonal al alcohol bencílico) como éster oxabicíclico 22. La desprotección selectiva de alcohol bencílico (23) seguida de oxidación (por ejemplo, oxidación de Swern o peryodinano de Dess-Martin seguido de oxidación con NaClO²al ácido, por ejemplo, Lindgren, B. O., Acta Chem. Scand. 1973, 27, 888) proporciona el ácido benzoico 24. El ácido benzoico 24 se trata con reactivo de Vilsmeier 25 para dar el cloruro de ácido, que entonces se hace reaccionar en un éster de (E)-3-(metil-imino)butanoato 26 apropiado, para dar el éster de p-ceto-imina 27 correspondiente. El éster de p-ceto-imina 27 se hace reaccionar con hidroxilamina para proporcionar el fenil isoxazol éster 28 (Ishiyama, T., et al., J. Org. Chem. 1995, 60, 7508). La desprotección del isoxazol éster 28 proporciona el isoxazol ácido 29, que entonces se somete a un reordenamiento de Curtius y reacción con un alcohol apropiado para proporcionar el isoxazol carbamato correspondiente. La desprotección final del isoxazol carbamato-éster oxabicíclico proporciona los ácidos isoxazol oxabicíclico [2.2.2] N-carbamato acéticos 30.

Esquem a 4

X = Haluro,

. .

El esquema 5 describe la síntesis de ácidos oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il acéticos 39. El tosilato 20 se hidroliza y protege (ortogonalmente con respecto al otro alcohol primario) como 31. La desprotección del alcohol bencílico de 31 proporciona 32, que entonces se convierte en el mesilato correspondiente y se desplaza con cianuro para proporcionar nitrilo bencílico 33. La desprotección del alcohol y la hidrólisis de nitrilo proporcionan el alcohol de ácido fenilacético 34. La protección del ácido fenilacético, seguido de oxidación del alcohol primario (por ejemplo, oxidación de Swern o peryodinano de Dess-Martin seguido de oxidación con NaClO²para dar el ácido, por ejemplo, Lindgren, B. O., Acta Chem. Scand. 1973, 27, 888) proporciona el ácido-éster 35. El ácido 35 se trata con reactivo de Vilsmeier 25 para dar el cloruro de ácido, que entonces se hace reaccionar en un éster de (E)-3-(metilimino)butanoato 26 apropiado, para dar el éster de p-ceto-imina 36 correspondiente. El éster de p-ceto-imina 36 se hace reaccionar con hidroxilamina para proporcionar el isoxazol éster 37 (Ishiyama, T., et al., J. Org. Chem. 1995, 60, 7508). La desprotección del isoxazol éster 37 proporciona el isoxazol ácido 38, que entonces se somete a un reordenamiento de Curtius y reacción con un alcohol apropiado para proporcionar el isoxazol carbamato correspondiente. La desprotección final del éster de ácido isoxazol carbamato fenilacético proporciona los ácidos oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il acéticos 39 deseados.

Esquema 5

1) Reordenamiento de Curtius

p. ej. (PhO)²PON³/R OH

2) Desproteger CO²PG³

El esquema 6 describe la síntesis de ácidos isoxazol O-carbamil oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il acéticos 45. El acoplamiento cruzado (en condiciones catalizadas con metal de transición convencionales, por ejemplo PdCl²(dppf)/Xphos) del boronato de éster oxabiciclo[2.2.2] acético 9 con 5-bromo-3-metil-isoxazol-4-il)metanol proporciona el aril isoxazol alcohol 41. La reacción de isoxazol alcohol 41 con cloroformiato de 4-nitrofenilo proporciona el intermedio carbonato de isoxazol 4-nitrofenilo 42, que entonces se hace reaccionar con amina 43 para proporcionar el isoxazol O-carbamato 44. La hidrólisis del éster oxabiciclo[2.2.2] acético 44 proporciona los ácidos isoxazol O-carbamil oxabiciclo [2.2.2]octan-1-il acéticos 45 deseados.

Esquema 6

El esquema 7 describe la síntesis de ácidos pirazol O-carbamil oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il acéticos 45. El acoplamiento cruzado (en condiciones catalizadas con metal de transición convencionales, por ejemplo PdCl²(dppf)/Xphos) del boronato de éster oxabiciclo[2.2.2] acético 9 con (4-bromo-1-metil-1H-pirazol-5-il)metanol 46 proporciona el aril pirazol alcohol 47. La reacción de pirazol alcohol 47 con cloroformiato de 4-nitrofenilo proporciona el intermedio carbonato de pirazol 4-nitrofenilo 48, que entonces se hace reaccionar con amina 43 para proporcionar el pirazol O-carbamato 49. La hidrólisis del éster oxabiciclo[2.2.2] acético 49 proporciona los ácidos pirazol O-carbamil oxabiciclo [2.2.2]octan-1-il acéticos 50 deseados.

Esquema 7

El esquema 8 describe la síntesis de ácidos triazol O-carbamil oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il propanoicos 56. La reducción de éster de ácido oxabiciclo[2.2.2] acético 8 (con por ejemplo DIBALH) proporciona el alcohol 51, que se convierte (a través del mesilato correspondiente y desplazamiento con NaCN) en el nitrilo 52 correspondiente. La hidrólisis del nitrilo en presencia de metanol proporciona el metil éster 53 correspondiente. La reacción de acoplamiento de Sonogashira (por ejemplo, Alper, P. et al, documento WO 2008097428) de haluro de oxabiciclo[2.2.2] arilo 53 con alcohol propargílico proporciona el alcohol aril propargílico 54. La reacción del alcohol propargílico 54 con trimetilsilil metil azida (Qian, Y. et al, J. Med. Chem., 2012, 55,7920-7939) en condiciones o bien térmicas o bien catalizadas con metal de transición (Boren, B.C. et. al., J. Am. Chem. Soc., 2008, 130, 8923-8930) proporciona el 1,2,3 triazol sililado; el grupo trimetilsililo se elimina posteriormente en condiciones de desililación convencionales (por ejemplo, Bu⁴NF, como en Qian, Y. et al, J. Med. Chem., 2012, 55, 7920-7939) para el triazol alcohol 55. La reacción de triazol alcohol 55 con cloroformiato de 4-nitrofenilo proporciona el intermedio carbonato de triazol 4-nitrofenilo, que entonces se hace reaccionar con amina 43 seguido de hidrólisis de éster para proporcionar los ácidos triazol O-carbamil oxabiciclo[2.2.2] octan-1-il propanoicos 56 deseados.

Esquema 8

El esquema 9 describe la síntesis de ácidos triazol N-carbamil oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il propanoicos 58. La oxidación de triazol alcohol 55 proporciona el triazol ácido 57 (por ejemplo, a través de oxidación directa para dar el ácido con reactivo de Jones/dicromato de piridinio o a través de un procedimiento de 2 etapas a través del aldehído [oxidación de Swern o peryodinano de Dess-Martin seguido de oxidación con NaClO²para dar el ácido, por ejemplo, Lindgren, B. O., Acta Chem. Scand. 1973, 27, 888]). El reordenamiento de Curtius de triazol acid 57 en presencia de un alcohol R¹-OH proporciona el triazol NH-carbamato, que se somete a hidrólisis de éster para proporcionar los ácidos triazol N-carbamil oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il propanoicos 58 deseados.

Esquema 9

El esquema 10 describe la síntesis del intermedio haloaril oxabiciclo[2.2.2]éster 61. El oxabiciclo[2.2.2] alcohol 51 se convierte en el bromuro correspondiente (por ejemplo, usando un protocolo de bromación convencional tal como Ph³P/CBr4) 59. La eliminación de bromuro 59 proporciona el intermedio vinil oxabiciclo[2.2.2]octano 60. La escisión oxidativa del alqueno 60 para dar el ácido carboxílico correspondiente, seguido de la protección con ácido, proporciona el haloaril oxabiciclo[2.2.2]éster 61 deseado.

Esquema 10

El esquema 11 describe la síntesis de 4-bromo-pirazol-5-il N-carbamatos 15. El éster de pirazol 5-carboxilato 62 se somete a una reacción de Mitsunobu (Kumara Swamy, K. C., Chem. Rev., 2009, 109, 2551-2651) con alcohol 63 para dar pirazol éster N-alquilado 64. La bromación regioselectiva (por ejemplo, N-bromosuccinimida) de pirazol éster 64 proporciona el 4-bromo-pirazol éster 65. La desprotección del éster proporciona el ácido bromo-pirazol carboxílico 14, que se somete a un reordenamiento de Curtius en presencia de un alcohol 67 para proporcionar los 4-bromo-pirazol-5-il N-carbamatos 15 deseados.

El esquema 12 describe la síntesis de ácidos isoxazol 2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il aril acéticos 73 y ácidos pirazol 2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il aril acéticos 74. Una reacción de Michael doble del anión de un éster de ácido 3-bromofenil ácido 66 con éster de éster 2 (2 equivalentes) proporciona el éster p-ceto ciclohexílico 67. La hidrólisis del diéster 67 seguido de la descarboxilación del intermedio de ácido p-ceto proporciona el ceto-ácido ciclohexílico 68. La reacción de Homer-Emmons con el fosfonato-éster 5 proporciona el éster-ácido a,p-insaturado 69, que se reduce para dar el alcohol ciclohexílico 70. El ciclohexil éster a,p-insaturado-alcohol 70 se somete a una reacción de Michael oxi intramolecular mediada con base para proporcionar el oxabiciclo[2.2.2] éster 71. La reacción del 3-haloareno 71 con bis(pinacolato)diboro en presencia de un catalizador de metal de transición apropiado (por ejemplo, paladio, por ejemplo Ishiyama, T. et al, J. Org. Chem. 1995, 60, 7508-7510) proporciona el pinacol boronato 72 correspondiente, que entonces después se convierte en los ácidos de oxabiciclo[2.2.2] isoxazol N-carbamato 73 deseados usando los procedimientos y el esquema de síntesis general descrito en el Esquema 2. De manera similar, el boronato de aril pinacol 72 se convierte en los ácidos de oxabiciclo[2.2.2] pirazol N-carbamato 74 deseados usando los procedimientos y el esquema de síntesis general descrito en el Esquema 3.

Los ejemplos siguientes se ofrecen a modo de ilustración, como un ámbito parcial y realizaciones particulares de la invención y no pretenden limitar el ámbito de la invención. Las abreviaturas y símbolos químicos tienen sus significados habituales a menos que se indique lo contrario. A menos que se indique otra cosa, los compuestos descritos en el presente documento han sido preparados, aislados y caracterizados usando los esquemas y otros métodos divulgados en el presente documento o pueden prepararse usando los mismos.

Según sea adecuado, las reacciones se realizaron en una atmósfera de nitrógeno seco (o argón). Para reacciones anhidras, se emplearon disolventes DRISOLV® de EM. Para otras reacciones, se utilizaron disolventes de calidad de reactivo o calidad de HPLC. A menos que se especifique otra cosa, todos los reactivos obtenidos comercialmente se utilizaron según se recibieron.

Se llevaron a cabo reacciones con microondas usando un instrumento Biotage Initiator de 400 W en recipientes de reacción con microondas con irradiación de microondas (2,5 GHz).

Se emplearon métodos de HPLC/MS y HPLC preparatoria/analítica en la caracterización o purificación de los ejemplos.

Habitualmente los espectros de RMN (resonancia magnética nuclear) se obtuvieron con instrumentos Bruker o JEOL 400 MHz y 500 MHz en los disolventes indicados. Todos los desplazamientos químicos se indican en ppm a partir de tetrametilsilano con la resonancia del disolvente como patrón interno. En los ejemplos en los que los espectros de RMN 1H se recogieron en d6-DMSO, a menudo se utiliza una secuencia de supresión de agua. Esta secuencia suprime de manera eficaz la señal de agua y cualquier pico protónico en la misma región, normalmente entre 3,30-3,65 ppm, que afectaría la integración protónica global.

Los datos espectrales de RMN 1H se indican normalmente de la siguiente manera: desplazamiento químico, multiplicidad (s = singlete, s a = singlete ancho, d = doblete, dd = doblete de dobletes, t = triplete, c = cuartete, sep = septuplete, m = multiplete, ap = aparente), constantes de acoplamiento (Hz) e integración.

El término HPLC se refiere a un instrumento de cromatografía líquida de alta resolución Shimadzu con uno de los métodos siguientes:

HPLC-1: columna Sunfire C18 (4,6 x 150 mm) 3,5 pm, gradiente del 10 al 100 % de B:A durante 12 min, después parada de 3 min al 100 % de B.

Fase móvil A: TFA al 0,05 % en agua:CH³CN (95:5)

Fase móvil B: TFA al 0,05 % en CH³CN:agua (95:5)

Tampón de TFA pH = 2,5; Caudal: 1 ml/min; Longitud de onda: 254 nm, 220 nm.

HPLC-2: XBridge Phenyl (4,6 x 150 mm) 3,5 pm, gradiente del 10 al 100 % de B:A durante 12 min, después parada de 3 min al 100 % de B.

Fase móvil A: TFA al 0,05 % en agua:CH³CN (95:5)

Fase móvil B: TFA al 0,05 % en CH³CN:agua (95:5)

Tampón de TFA pH = 2,5; Caudal: 1 ml/min; Longitud de onda: 254 nm, 220 nm.

HPLC-3: Chiralpak AD-H, 4,6 x 250 mm, 5 pm.

Fase móvil: EtOH al 30 %-heptano (1:1)/CO2 al 70 %

Caudal = 40 ml/min, 100 Bar, 35 °C; Longitud de onda: 220 nm

HPLC-4: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2,1 x 50 mm, partículas de 1,7 pm;

Fase móvil A: 5:95 de CH³CN:agua con NH⁴OAc 10 mM;

Fase móvil B: 95:5 de CH³CN:agua con NH⁴OAc 10 mM;

Temperatura: 50 °C; Gradiente: 0-100% de B durante 3 min, después una parada de 0,75 min al 100% de B; Flujo: 1,11 ml/min; Detección: UV a 220 nm.

HPLC-5: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2,1 x 50 mm, partículas de 1,7 pm;

Fase móvil A: 5:95 CH³CN:agua con TFA al 0,1 %;

Fase móvil B: 95:5 CH³CN:agua con TFA al 0,1 %;

Intermedio 1. 2-(4-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)acetato de metilo

Una solución de 2-(4-(4-bromofenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)acetato de metilo (340 mg, 1,00 mmol, preparada de acuerdo con los procedimientos como se describe en la patente de los EE. UU. 8993619), KOAc (295 mg, 3,01 mmol) y bis(pinacolato)diboro (305 mg, 1,20 mmol) en DMSO (4 ml) se desgasificó mediante burbujeo con Ar durante 5 min, después de lo cual se añadió PdCh(dppf) (73,3 mg, 0,100 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 85 °C durante 5 h bajo Ar, después se enfrió a TA se repartió entre EtOAc (5 ml) y agua (5 ml). La fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 8 ml). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con agua (10 ml) y salmuera (10 ml), se secaron (MgSO⁴) y se concentraron al vacío. El producto en bruto se sometió a cromatografía (SO ²; gradiente continuo del 0 % al 100 % de EtOAc en hexanos durante 20 min) para dar el compuesto del título en forma de un sólido de color blanco (310 mg, 0,80 mmol, 80 % de rendimiento). RMN de 1H (400 MHz, CDCh) 67,79 (d, J=8,4 Hz, 2H), 7,31 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 4,04 (s, 2H), 3,72 (s, 3H), 2,50 (s, 2H), 2,19 -1,81 (m, 8H), 1,42 - 1,30 (m, 12H).

Intermedio 2. 2-(4-(2-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)-2-oxabiciclo [2.2.2]octan-1-il)acetato de metilo

El intermedio 2 se preparó mediante la misma secuencia de síntesis que se usó para sintetizar el Intermedio 1. Se usó 2-(4-(4-bromo-2-fluorofenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)acetato de metilo como material de partida en lugar de 2-(4-(4-bromofenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)acetato de metilo. RMN de 1H (400M Hz, CDCI³) ⁸7,51 (d, J=7,7 Hz, 1H), 7,42 (d, J=13,0 Hz, 1H), 7,12 (t, J=7,7 Hz, 1H), 4,14 (s, 2H), 3,69 (s, 3H), 2,47 (s, 2H), 2,22 - 1,99 (m, ⁶H), 1,96 -1,85 (m, 2H), 1,32 (s, 12H).

Intermedio 3. 2-(4-(3-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)acetato de metilo

El intermedio 3 se preparó mediante la misma secuencia de síntesis que se usó para sintetizar el Intermedio 1. Se usó 2-(4-(4-bromo-3-fluorofenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)acetato de metilo como material de partida en lugar de 2-(4-(4-bromofenil)-2-oxabiddo[2.2.2]odan-1-il)acetato de metilo. RMN de 1H (400 MHz, CDCh) ⁸7,70 (dd, J = 7,8, 6,7 Hz, 1H), 7,07 (dd, J=7,8, 1,7 Hz, 1H), 6,95 (dd, J = 11,2, 1,5 Hz, 1H), 4,01 (s, 2H), 3,72 (s, 3H), 2,50 (s, 2H), 2,22 -2,03 (m, 4H), 2,00 - 1,85 (m, 4H), 1,37 (s, 10H).

Intermedio 4. (R)-1-feniletil (5-bromo-3-metilisoxazol-4-il)carbamato

Intermedio 4A. (R)-1 -feniletil (3-metilisoxazol-4-il)carbamato

Una mezcla de ácido 3-metilisoxazol-4-carboxílico (2,0 g, 15,7 mmol), (PhO)²PON³(4,24 ml, 18,9 mmol), (R)-1-feniletanol (2,11 g, 17,3 mmol), Et³N (2,85 ml, 20,5 mmol) en tolueno (40 ml) se agitó a 80 °C durante 4 h, después se enfrió a TA y se concentró al vacío. El producto en bruto se sometió a cromatografía (SO ²; gradiente continuo del 0 % al 100 % de EtOAc en hexanos durante 25 min) para dar el compuesto del título en forma de un sólido de color blanco (2,31 g, 9,38 mmol, 59,6 % de rendimiento). LCMS [M H]+ = 247,0; RMN de 1H (400 MHz, CDCh) ^{8 8 , 6 6}(s. a., 1H), 7,38 (d, J=4,4 Hz, 5H), 6,08 (s a, 1H), 5,89 (c, J = ^{6 , 6}Hz, 1H), 2,26 (s, 3H), 1,62 (d, J=^{6 , 6}Hz, 3H).

Intermedio 4

A una solución del intermedio 4A (248 mg, 1,01 mmol) en CH³CN (10 ml) se añadió lentamente NBS (233 mg, 1,31 mmol). La mezcla de reacción se agitó a TA durante la noche, después se concentró al vacío. El producto en bruto se sometió a cromatografía (SO ²; gradiente continuo del 0 % al 100 % de EtOAc en hexanos durante 20 min) para dar el compuesto del título en forma de un sólido de color amarillo claro (241 mg, 0,73 mmol, 72,9 % de rendimiento). LCMS [M H]⁺= 327,0; RMN de ¹H (400 MHz, CDC^h) ⁸7,44 -7,28 (m, 5H), 5,94 -5,83 (m, 1H), 5,82 -5,68 (m, 1H), 2,23 (s, 3H), 1,60 (d, J=^{6 , 8}Hz, 3H).

Intermedio 5. (R)-1-ciclopropiletil (5-bromo-3-metilisoxazol-4-il)carbamato

El intermedio 5 se preparó mediante la misma secuencia de síntesis que se usó para sintetizar el Intermedio 4 a partir de ácido 3-metil isoxazol-4-carboxílico, excepto porque se usó (R)-1-ciclopropiletanol como material de partida en lugar de (R)-1-feniletanol. RMN 1H (400 MHz, CDCh) ⁸5,83 (s a, 1H), 4,31 (dc, J = ⁸,⁸, 6,3 Hz, 1H), 2,32 (s, 3H), 1,38 (d, J=5,1 Hz, 3H), 1,02 (s a, 1H), 0,77 -0,17 (m, 4H).

Intermedio ⁶. (R)-1-(2-clorofenil)etil (5-bromo-3-metilisoxazol-4-il)carbamato

El intermedio 6 se preparó mediante la misma secuencia de síntesis que se usó para sintetizar el Intermedio 4 a partir de ácido 3-metil isoxazol-4-carboxílico, excepto porque se usó (R)-1-(2-clorofenil)etanol como material de partida en lugar de (R)-l-feniletanol. RMN de 1H (400 MHz, CDCh) 87,38 (d, J=8,1 Hz, 3H), 7,25 (s a, 1H), 6,22 (c, J = 6,6 Hz, 1H), 5,91 (s a, 1H), 2,26 (s, 3H), 1,66 - 1,58 (m, 3H).

Intermedio 7. (R)-1-(o-tolil)etil (5-bromo-3-metilisoxazol-4-il)carbamato

El intermedio 7 se preparó mediante la misma secuencia de síntesis que se usó para sintetizar el Intermedio 4 a partir de ácido 3-metil isoxazol-4-carboxílico, excepto porque se usó (R)-1-(o-tolil)etan-1-ol como material de partida en lugar de (R)-1-feniletanol. RMN 1H (400 MHz, CDCh) 87,44 (s a, 1H), 7,27 - 7,15 (m, 3H), 6,09 (c, J = 6,6 Hz, 1H), 5,92 (s a, 1H), 2,41 (s, 3H), 2,26 (s, 3H), 1,61 (d, 3H).

Intermedio 8. (±)-1-(4-clorofenil)etil (5-bromo-3-metilisoxazol-4-il)carbamato

El intermedio 8 se preparó mediante la misma secuencia de síntesis que se usó para sintetizar el Intermedio 4 a partir de ácido 3-metil isoxazol-4-carboxílico, excepto porque se usó (±)-1-(4-clorofenil) etan-1-ol como material de partida en lugar de (R)-1-feniletanol. RMN de 1H (400 MHz, CDCh) 87,33 (d, J=6,2 Hz, 4H), 5,96 - 5,87 (m, 1H), 5,83 (c, J = 6,6 Hz, 1H), 2,24 (s, 3H), 1,59 (d, J = 1,0 Hz, 3H).

Intermedio 9. (±)-1-(3-clorofenil)etil (5-bromo-3-metilisoxazol-4-il)carbamato

El intermedio 9 se preparó mediante la misma secuencia de síntesis que se usó para sintetizar el Intermedio 4 a partir de ácido 3-metil isoxazol-4-carboxílico, excepto porque se usó (±)-1-(3-clorofenil) etan-1-ol como material de partida en lugar de (R)-1-feniletanol. RMN de 1H (400 MHz, CDCla) 87,47 (s, 1H), 7,31 (s a, 3H), 6,35 -6,14 (m, 1H), 5,85 (c, J = 6,6 Hz, 1H), 3,77 (s, 3H), 1,62 (s a, 3H; superponiéndose con el pico del agua).

Intermedio 10. (R)-1 -feniletil (4-bromo-1-metil-1H-pirazol-5-il)carbamato

Una mezcla de ácido 4-bromo-1-metil-1H-pirazol-5-carboxílico (200 mg, 0,97 mmol), (P l iO ^ O N (254 pl, 1,17 mmol) y (R)-1-feniletanol (125 mg, 1,02 mmol), TEA (272 pl, 1,95 mmol) en tolueno (3 ml) se agitó a 80 °C durante 1 h, después se enfrió a TA y se concentró al vacío. El producto en bruto se sometió a cromatografía (SO ²; gradiente continuo del 0 % al 100 % de EtOAc en hexanos durante 20 min) para dar el compuesto del título (200 mg, 0,617 mmol, 63,2 % de rendimiento). LCMS [M H]+ = 325,8; RMN de 1H (400 MHz, CDCh) 87,75 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,37 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 5,94 (s a, 1H), 4,02 (s, 2H), 4,01 - 3,95 (m, 2H), 3,70 (s, 3H), 2,49 (s, 2H), 2,29 (s, 3H), 2,11 (d, J = 9,2 Hz, 4H), 2,01 -1,85 (m, 4H), 0,93 -0,74 (m, 1H), 0,67-0,21 (m, 4H).

Intermedio 11. (R)-1-(2-clorofenil)etil (4-bromo-1-metil-1H-pirazol-5-il)carbamato

El intermedio 11 se preparó mediante el mismo procedimiento que se usó para sintetizar el Intermedio 10, usando (R)-1-(2-clorofenil)etanol como material de partida en lugar de (R)-1-feniletanol. RMN de 1H (400 MHz, CDCh) ⁸7,44 (s, 1H), 7,41 - 7,27 (m, 3H), 7,24 (s, 1H), 6,22 (c, J = 6,5 Hz, 1H), 6,16 - 6,04 (m, 1H), 3,76 (s, 3H), 1,59 (d, J = 5,3 Hz, 3H).

Intermedio 12. (±)-1-(4-clorofenil)etil (4-bromo-1-metil-1H-pirazol-5-il)carbamato

El intermedio 12 se preparó mediante el mismo procedimiento que se usó para sintetizar el Intermedio 10, usando (±)-1-(4-clorofenil)etan-1-ol como material de partida en lugar de (R)-1 -feniletanol. RMN 1H (400 MHz, CDCh) ⁸: 7,47 (s, 1H), 7,30-7,42 (m, 4H), 6,01-6,36 (m, 1H), 5,86 (c, J = ^{6 , 6}Hz, 1H), 3,76 (s, 3H), 1,61 (s, 3H).

Intermedio 13. 2-(4-(4-(3-metil-4-((((4-nitrofenoxi)carbonil)oxi) metil)isoxazol-5-il)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)acetato de metilo

Intermedio 13A. (5-bromo-3-metilisoxazol-4-il)metanol

A una solución de 5-bromo-3-metilisoxazol-4-carboxilato de etilo (480 mg, 2,05 mmol)) en THF se añadió DIBALH (6,5 ml de una solución 1 M en DCM; 6,50 mmol) gota a gota durante 5 min a TA. La reacción se agitó a TA durante 1 h, después se interrumpió con tartrato de potasio y sodio ac. (10 ml de una solución 1 M) y se agitó a TA durante 1 h. La mezcla resultante se filtró a través de un lecho de Celite®; el tapón se lavó con EtOAc (2 x 5 ml) y se concentró al vacío para dar el compuesto del título en forma de un sólido de color blanco (334 mg, 1,74 mmol, 85 % de rendimiento). LCMS [M H]+=193,9; RMN de 1H (CDCla) ⁸: 4,51 (s, 2H), 2,40 (s, 3H).

Intermedio 13B. 2-(4-(4-(4-(hidroximetil)-3-metilisoxazol-5-il)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)acetato de metilo

A una solución del Intermedio 1 (40,2 mg, 0,10 mmol) y el Intermedio 13A (20 mg, 0,104 mmol) en THF/agua se añadió K²CO³(43,2 mg, 0,31 mmol). La solución se desgasificó en atmósfera de N², después de lo cual se añadió PdCh(dppf) (7,6 mg, 10,4 pmol). La mezcla de reacción se calentó en un tubo cerrado herméticamente a 80 °C durante 18 h, después se enfrió a TA y se filtró a través de un lecho de Celite. El tapón de Celite se lavó con EtOAc (2 x 2 ml). Los filtrados combinados se repartieron entre agua y EtOAc (5 ml cada uno). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (3 x 2 ml). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron (MgSO⁴) y se concentraron al vacío. El residuo se cromatografió (SO ²; gradiente continuo del 0 % al 100 % de EtOAc en hexanos durante 20 min) para dar el compuesto del título en forma de un aceite de color amarillo claro (18 mg, 0,068 mmol, 46,5 % de rendimiento). LCMS [M H]+ = 373,1; RMN de 1H (400 MHz, CDCh) 87,77 (d, J=8,6 Hz, 2H), 7,42 (d, J=8,6 Hz, 2H), 4,66 (s, 2H), 4,06 (s, 2H), 3,73 (s, 3H), 2,51 (s, 2H), 2,40 (s, 3H), 2,14 (d, J=8,6 Hz, 4H), 1,95 (d, J=7,5 Hz, 4H).

Intermedio 13

A una solución del Intermedio 13B (18 mg, 0,048 mmol) en DCE (1 ml) se añadió piridina (0,020 ml, 0,24 mmol), seguido de cloroformiato de 4-nitrofenilo (19,5 mg, 0,097 mmol). La mezcla de reacción se agitó a TA durante 18 h, después se filtró y se concentró al vacío. El residuo se cromatografió (SO ²; gradiente continuo del 0 % al 100 % de EtOAc en hexanos durante 20 min) para dar el compuesto del título en forma de un sólido de color amarillo claro (16 mg, 0,030 mmol, 60,5 % de rendimiento). LCMS [M H]+ = 537,2; RMN de 1H (400 MHz, CDCh) 88,31 (d, J=9,2 Hz, 2H), 7,77 (d, J=8,6 Hz, 2H), 7,44 (dd, J = 18,0, 9,0 Hz, 4H), 5,29 (s, 2H), 4,07 (s, 2H), 3,73 (s, 3H), 2,52 (s, 2H), 2,46 (s, 3H), 2,15 (d, J=8,6 Hz, 4H), 2,05 - 1,87 (m, 4H).

Intermedio 14. 2-(4-(4-(1-metil-5-((((4-nitrofenoxi)carbonil)oxi)metil)-1H-pirazol-4-il)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)acetato de metilo

Intermedio 14A. (4-bromo-1-metil-1H-pirazol-5-il)metanol

A una solución de 5-bromo-3-metilisoxazol-4-carboxilato de etilo (480 mg, 2,05 mmol)) en THF se añadió DIBALH (6,5 ml de una solución 1 M en DCM; 6,50 mmol) gota a gota durante 5 min a TA. La reacción se agitó a TA durante 1 h, después se interrumpió con tartrato de potasio y sodio ac. (10 ml de una solución 1 M) y se agitó a TA durante 1 h. La mezcla resultante se filtró a través de un lecho de Celite; el tapón se lavó con EtOAc (2 x 5 ml) y se concentró al vacío para dar el compuesto del título en forma de un sólido de color blanco (334 mg, 1,74 mmol, 85 % de rendimiento). LCMS [M H]+ = 193,9; RMN de 1H (CDCla) 8: 4,51 (s, 2H), 2,40 (s, 3H).

Intermedio 14B. 2-(4-(4-(5-(hidroximetil)-1-metil-1H-pirazol-4-il)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2] octan-1-il)acetato de metilo

A una solución del Intermedio 1 (101 mg, 0,26 mmol) y el Intermedio 14A (50 mg, 0,26 mmol) en THF/agua se añadió K²CO³(109 mg, 0,79 mmol). La solución se desgasificó en atmósfera de N², después de lo cual se añadió PdCh(dppf) (19,2 mg, 0,026 mmol). La reacción se calentó en un tubo cerrado herméticamente a 80 °C durante 18 h, después se enfrió a TA y se filtró a través de un lecho de Celite. El tapón de Celite se lavó con EtOAc (2 x 2 ml). Los filtrados combinados se repartieron entre agua y EtOAc (5 ml cada uno). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (3 x 5 ml). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron (MgSO⁴) y se concentraron al vacío. El residuo se cromatografió (columna ISCO de SO ²; gradiente continuo del 0 % al 100 % de EtOAc en hexanos durante 20 min) para dar el compuesto del título en forma de un aceite de color amarillo claro (75 mg, 0,20 mmol, 77 % de rendimiento). LCMS [M H]+ = 372,1; RMN de 1H (400 MHz, CDCh) 87,45 (s, 1H), 7,32 - 7,15 (m, 5H), 4,67 (d, J = 5,1 Hz, 2H), 3,99 - 3,87 (m, 5H), 3,63 (s, 3H), 2,41 (s, 2H), 2,04 (d, J = 7,0 Hz, 4H), 1,91 -1,80 (m, 4H).

Intermedio 14

A una solución del Intermedio 14B (75 mg, 0,20 mmol) en DCE (2 ml) se añadieron sucesivamente piridina (0,082 ml, 1,01 mmol) y cloroformiato de 4-nitrofenilo (73,5 mg, 0,36 mmol). La mezcla de reacción se agitó a TA durante 18 h, después se filtró y se concentró al vacío. El residuo se cromatografió (columna ISCO de SO ²; gradiente continuo del 0 % al 100 % de EtOAc en hexanos durante 20 min) para dar el compuesto del título en forma de un sólido de color amarillo claro (76 mg, 0,14 mmol, 70 % de rendimiento). LCMS [M H]+ = 536,1; RMN de 1H (400 MHz, CDCh) 88,33 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 7,64 (s, 1H), 7,47 - 7,33 (m, 7H), 5,41 (s, 2H), 4,06 (s, 5H), 3,73 (s, 3H), 2,52 (s, 2H), 2,15 (d, J = 7,0 Hz, 4H), 2,04 - 1,89 (m, 4H).

Intermedio 15. 3-(4-(4-(5-(hidroximetil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)propanoato de metilo

Intermedio 15A. 2-(4-(4-bromofenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)etan-1-ol

A una solución a 0 °C de 2-(4-(4-bromofenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)acetato de metilo (1,01 g, 2,98 mmol, preparada de acuerdo con los procedimientos descritos en la patente de los EE. UU. 8993619) en THF (59,5 ml) se añadió DIBALH (14,9 ml de una solución 1 M en THF, 14,9 mmol). Después de agitar a 30 min a 0 °C, la reacción se interrumpió con tratrato de potasio y sodio ac. (60 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (3 x 60 ml); los extractos orgánicos combinados se secaron (Na²SO⁴) y se concentraron al vacío para dar el compuesto del título (0,97 g, 3,12 mmol, 105 % de rendimiento) en forma de un aceite. RMN 1H (400 MHz, CDCh) 7,44 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 7,14 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 3,96 (s, 2H), 3,81 (s a, 2H), 3,32 - 3,07 (m, 1H), 2,21 -1,84 (m, 6H), 1,82 - 1,63 (m, 4H).

Intermedio 15 B. metanosulfonato de 2-(4-(4-bromofenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)etilo

A una solución de 0 °C del Intermedio 15A (1,0 g, 3,21 mmol) en THF (32,1 ml) se añadió Et³N (2,24 ml, 16,1 mmol) y cloruro de metanosulfonilo (0,376 ml, 4,82 mmol) a 0 °C y la reacción se agitó a TA durante 30 min. LCMS mostró que la reacción se había completado. NaHCO³ac. sat. (10 ml) se añadió lentamente a la mezcla de reacción. La mezcla se extrajo con EtOAc (2 x 20 ml), y los extractos orgánicos combinados se secaron (Na²SO⁴) y se concentraron al vacío para dar el Intermedio 15B (1,3 g, 3,34 mmol, 104 % de rendimiento) en forma de un aceite, que se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional. RMN de 1H (400 MHz, CDCla) 87,44 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,13 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 4,38 (t, J=7,0 Hz, 2H), 3,94 (s, 2H), 3,01 (s, 3H), 2,10 -1,84 (m, 8H), 1,80 - 1,64 (m, 2H).

Intermedio 15 C. 3-(4-(4-bromofenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)propanonitrilo

A una solución del Intermedio 15B (1,3 g, 3,34 mmol) en DMSO (33,4 ml) se añadieron NaCN (0,491 g, 10,02 mmol) y Bu⁴NI (0,123 g, 0,334 mmol) y la reacción se agitó a 90 °C durante 16 h, después de lo cual LCMS mostró la presencia del producto deseado. La reacción se enfrió a TA y se añadió H²O (10 ml) lentamente a la mezcla de reacción. La mezcla se extrajo después con EtOAc (2 x 20 ml), y los extractos orgánicos combinados se secaron (Na²SO⁴) y se concentraron al vacío. El producto en bruto se sometió a cromatografía (SiO²; gradiente continuo del 0 % al 100 % de EtOAc en hexanos durante 20 min) para dar el compuesto del título (0,85 g, 2,65 mmol, 79 % de rendimiento). RMN de ¹H (400 MHz, CDCh) 87,53 - 7,40 (m, 2H), 7,20 - 7,08 (m, 2H), 3,99 - 3,89 (m, 2H), 2,55 - 2,37 (m, 2H), 2,16 -1,90 (m, 6H), 1,87 - 1,65 (m, 4H).

Intermedio 15 D. 3-(4-(4-bromofenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)propanoato de metilo

Preparación de una solución de HCl 3,6 M en MeOH/MeOAc: A una solución de MeOH (30 ml) a 0 °C se añadió gota a gota cloruro de acetilo (10 ml, d = 1,104 g/ ml, PM = 78,49). Tras completarse la adición, la solución resultante se calentó a TA durante 30 min. Esta solución de HCl 3,6 M en MeOH/MeOAc (36,9 ml, 133 mmol) se añadió al Intermedio 15C (850 mg, 2,65 mmol) y la reacción se agitó a TA durante 72 h. La mezcla de reacción se diluyó con MeCN (25 ml) y se concentró al vacío para eliminar MeOH y MeCN. El residuo se disolvió en EtOAc (30 ml) y se lavó con NaHCOs ac. sat. (2 x 30 ml), agua (30 ml) y salmuera (30 ml). La capa orgánica se secó (Na²SO⁴) y se concentró al vacío. El producto en bruto se sometió a cromatografía (SO ²; gradiente continuo del 0 % al 100 % de EtOAc en hexanos durante 20 min) para dar el compuesto del título (810 mg, 2,293 mmol, ⁸⁶% de rendimiento) en forma de un aceite. RMN de 1H (400 MHz, CDCla) ⁸7,43 (d, J=^{8 , 6}Hz, 2H), 7,21 - 6,99 (m, 2H), 4,00 - 3,84 (m, 2H), 3,67 (s, 3H), 2,49 - 2,28 (m, 2H), 2,12 -1,85 (m, ⁶H), 1,82 - 1,73 (m, 2H), 1,71 -1,60 (m, 2H), 1,35 -1,18 (m, 1H), 0,92 -0,75 (m, 1H).

Intermedio 15 E. 3-(4-(4-(3-hidroxiprop-1-in-1-il)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)propanoato de metilo

A una solución desgasificada del Intermedio 15D (200 mg, 0,566 mmol) en THF (2,8 ml) se añadieron sucesivamente: Cul (10,8 mg, 0,057 mmol), Pd(PPh³)⁴(65,4 mg, 0,057 mmol) y DBU (0,25 ml, 1,70 mmol). La mezcla resultante se desgasificó de nuevo y se añadió prop-2-in-1-ol (0,1 ml, 1,70 mmol) durante 10 min. La mezcla de reacción se calentó lentamente a 60 °C y después se agitó a 60 °C durante una noche, después se enfrió a TA y se diluyó con éter (50 ml). La mezcla se lavó con agua (20 ml), HCl ac. al 15 % (2 x 20 ml) y NaHCO³ac. sat. (25 ml). La capa orgánica se secó (MgSO⁴) y se concentró al vacío. El residuo se cromatografió (SO ²; gradiente continuo del 0 % al 100 % de EtOAc en hexanos durante 20 min) para dar el compuesto del título (160 mg, ^{8 6}%) en forma de un aceite. RMN de ¹H (400 MHz, CDCl^a) ⁸7,46 - 7,35 (m, 2H), 7,25 - 7,11 (m, 2H), 4,57 - 4,46 (m, 2H), 4,03 - 3,91 (m, 2H), 3,77 - 3,61 (m, 2H), 2,49 - 2,35 (m, 4H), 2,04 - 1,85 (m, 4H), 1,84 - 1,75 (m, 2H), 1,72 - 1,66 (m, 2H).

Intermedio 15

Una solución del Intermedio 15E (160 mg, 0,487 mmol) en tolueno (0,5 ml) y TMSCH²N³(315 mg, 2,44 mmol) se calentó a reflujo bajo Ar durante 15 h, después se enfrió a TA. Los volátiles se eliminaron al vacío y el residuo se disolvió en THF (0,5 ml). A la mezcla se le añadió Bu⁴NF (0,5 ml de una solución 1 M en THF, 0,50 mmol) a 0 °C. Después de agitar durante 10 min a 0 °C, la mezcla de reacción se concentró al vacío y el residuo se cromatografió (SO ²; gradiente continuo del 0 % al 100 % de EtOAc en hexanos durante 20 min) para dar el compuesto del título (35 mg, 19%) en forma de un aceite. RMN de ¹H (400 MHz, CDCh) ⁸7,65 - 7,55 (m, 2H), 7,35 - 7,30 (m, 2H), 4,87 - 4,81 (m, 2H), 4,11 -4,08 (m, 3H), 3,98 - 3,95 (m, 2H), 3,71 - 3,67 (m, 3H), 2,45 -2,38 (m, 2H), 2,13 -2,06 (m, 2H), 2,00 -1,89 (m, 4H), 1,84 - 1,76 (m, 2H), 1,73 -1,61 (m, 2H).

Intermedio 16. Ácido 4-(4-(1-(3-metoxi-3-oxopropil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-4-il)fenil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-carboxílico

A una solución a 0 °C del Intermedio 15 (16 mg, 0,043 mmol) en acetona (1,4 ml) se añadió reactivo de Jones (0,3 ml, 0,90 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 0 °C durante 1 h, después de lo cual se añadió iPrOH (1 ml) y los volátiles se concentraron al vacío. Se añadió agua (10 ml) y la mezcla se extrajo con EtOAc (3 x 10 ml). Los extractos orgánicos combinados se concentraron al vacío para dar el compuesto del título (16 mg, 0,042 mmol, 96 % de rendimiento). Este material se usó para la siguiente etapa sin purificación adicional. LCMS [M H]+ =386,1.

Intermedio 17. 4-(4-bromofenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octano-1-carboxilato de metilo

Intermedio 17A. 1-(2-bromoetil)-4-(4-bromofenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octano

A una solución de 0 °C de 2-(4-(4-bromofenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)etanol (2,5 g, 8,03 mmol)) en DCM (2 ml) se añadieron sucesivamente CBr⁴(4,00 g, 12,1 mmol) y PIÍ³P (2,53 g, 9,64 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 0 °C durante 2 h, después se dejó calentar a TA y se agitó a TA durante 2 h, después de lo cual se concentró al vacío. El residuo se cromatografió (SO ²; gradiente continuo del 0 % al 100 % de EtOAc en hexanos durante 20 min) para dar el compuesto del título (2,8 g, 93%). RMN de 1H (400 MHz, CDCh) 7,53 - 7,43 (m, 2H), 7,22 - 7,10 (m, 2H), 4,10 -3,85 (m, 2H), 3,57 - 3,36 (m, 2H), 2,16 -1,86 (m, ⁸H), 1,79 -1,62 (m, 2H).

Intermedio 17B. 4-(4-bromofenil)-1-vinil-2-oxabiciclo[2.2.2]octano

A una solución del Intermedio 17A (2,70 g, 7,22 mmol)) en DMSO (144 ml) se añadió KOtBu (1,22 g, 10,83 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 80 °C durante 1 h, después se enfrió a TA, después de lo cual se añadió lentamente NaHCOs ac. sat. (10 ml). La mezcla se extrajo con EtOAc (2 x 20 ml) y los extractos orgánicos combinados se secaron (Na²SO⁴) y se concentraron al vacío para dar el compuesto del título (1,70 g, 80 %). RMN de 1H (400 MHz, CDCh) 7,58 - 7,40 (m, 2H), 7,22 - 7,11 (m, 2H), 5,98 - 5,83 (m, 1H), 5,27 - 5,17 (m, 1H), 5,12 - 4,98 (m, 1H), 4,14 - 3,99 (m, 2H), 2,19 - 2,02 (m, 4H), 2,00 - 1,93 (m, 2H), 1,89 - 1,79 (m, 2H).

Intermedio 17C. Ácido 4-(4-bromofenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octano-1-carboxílico

A una solución del Intermedio 17B (600 mg, 2,05 mmol) en MeCN (3 ml), CCl⁴(3 ml) y agua (3 ml) se añadió NaIO⁴(1,7 g, 8,19 mmol) y Ru(III)Cl³(42,4 mg, 0,205 mmol). La mezcla de reacción se agitó a TA durante 23 h, después se filtró. El filtrado se diluyó con EtOAc (10 ml) y se lavó con HCl ac. 1 N (10 ml), después se concentró al vacío. El material en bruto se trituró con EtOAc (3 ml) para dar el compuesto del título (600 mg, 1,928 mmol, 94 % de rendimiento) en forma de un sólido. RMN de 1H (400 MHz, CDCh).42 - 7,34 (m, 2H), 7,11 -6,99 (m, 2H), 4,10 - 3,98 (m, 2H), 2,24 - 1,76 (m, 8H).

Intermedio 17

A una solución a 0 °C del Intermedio 17C (300 mg, 0,964 mmol) en THF (0,3 ml)/MeOH (0,6 ml) se añadió TMSCHN²(0,482 ml de una solución 2 M en Et²O, 0,964 mmol) gota a gota. La mezcla de reacción se calentó lentamente a TA y se agitó a TA durante 1 h. Los volátiles se eliminaron al vacío. El producto en bruto se sometió a cromatografía (SO ²; gradiente continuo del 0 % al 100 % de EtOAc en hexanos durante 20 min) para dar el compuesto del título (300 mg, 96 %). RMN de ¹H (400 MHz, CDCl^a) 7,34 - 7,25 (m, 2H), 7,01 - 6,89 (m, 2H), 3,93 - 3,86 (m, 2H), 3,84 - 3,70 (m, 3H), 2,03 - 1,33 (m, 8H).

Intermedio 18. (R)-1 -feniletil (4-bromo-1-(ciclopropilmetil)-1H-pirazol-5-il)carbamato

18A. 1-(ciclopropilmetil)-1H-pirazol-5-carboxilato de metilo

A una solución de 1H-pirazol-5-carboxilato de metilo (100 mg, 0,793 mmol), ciclopropil-metanol (68 mg, 0,952 mmol) y Ph³P (260 mg, 0,991 mmol) en DCM (1 ml) se añadió DEAD (176 pl, 1,11 mmol) a TA. La mezcla de reacción se agitó a TA durante 16 h, después se concentró al vacío. El material en bruto se cromatografió (SO ²; gradiente continuo del 0 % al 100 % de EtOAc en hexanos durante 20 min) para proporcionar el compuesto del título (45 mg, 0,25 mmol, 31,5 % de rendimiento) en forma de un aceite incoloro. R^mN de 1H (400 MHz, CDCla) 7,27 (d, J=2,0 Hz, 1H), 6,62 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 4,22 (d, J = 7,3 Hz, 2H), 3,66 (s, 3H), 1,21 -0,99 (m, 1H), 0,30 (s, 2H), 0,22 -0,10 (m, 2H).

18B. 4-bromo-1-(ciclopropilmetil)-1H-pirazol-5-carboxilato de metilo

Una mezcla del Intermedio 18A (45 mg, 0,250 mmol) y NBS (49 mg, 0,275 mmol) en MeCN (1,25 ml) se agitó a TA durante 16 h, después se concentró al vacío. El producto en bruto se cromatografió (24 g de SO ²; gradiente continuo del 0-50% de EtOAc en hexanos durante 15 min) para proporcionar el Intermedio en bruto 18B (30 mg, 0,116 mmol, 46,4 % de rendimiento) en forma de un aceite de color amarillo pálido. RMN de 1H (400 MHz, CDCh) 87,37 - 7,17 (m, 1H), 4,38 -4,07 (m, 2H), 3,80 -3,63 (m, 3H), 0,69 -0,64 (m, 1H), 0,39 -0,28 (m, 2H), 0,21 -0,11 (m, 2H).

Intermedio 18C. Ácido 4-bromo-1-(ciclopropilmetil)-1H-pirazol-5-carboxílico

A una solución agitada del Intermedio en bruto 18B (40 mg, 0,154 mmol) en THF (1,5 ml), MeOH (0,100 ml) y agua (0,15 ml) a TA se añadió LiOH ac 2,0 M (0,23 ml, 0,463 mmol). La mezcla de reacción se agitó a TA durante 16 h, después se acidificó mediante la adición gota a gota de HCl ac. 1 M (0,5 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (3 x 3 ml). Los extractos orgánicos combinados se secaron (Na²SO⁴) y se concentraron al vacío para dar el compuesto del título (40 mg, 0,163 mmol, 106 % de rendimiento). LCMS [M H]⁺= 246,9.

Intermedio 18

Una mezcla del intermedio 18C (35 mg, 0,143 mmol), (PhO)²PON³(0,040 ml, 0,186 mmol), (R)-1-feniletanol (0,023 ml, 0,186 mmol) y TEA (0,10 ml, 0,714 mmol) en tolueno (5 ml) se agitó a 80 °C durante 1 h, después se enfrió a TA y se concentró al vacío. El aceite en bruto se cromatografió (4 g de SiO²; gradiente continuo del 0 % al 50 % de EtOAc en hexano durante 10 min) para dar el compuesto del título (36 mg, 0,099 mmol, 69,2 % de rendimiento) en forma de un aceite transparente. RMN de ¹H (400 MHz, CDCl^a) 7,14 - 6,82 (m, 5H), 6,14 - 5,81 (m, 1H), 5,73 - 5,56 (m, 1H), 3,74 -3,53 (m, 2H), 1,47 - 1,24 (m, 4H), 1,03 -0,83 (m, 1H), 0,33 -0,22 (m, 2H), 0,10 --0,01 (m, 2H).

Ejemplo 1. Ácido 2-(4-(4-(3-metil-4-((((R)-1-feniletoxi)carbonil)amino)isoxazol-5-il)fenil)-2-oxabiciclo [2.2.2]octan-1-il)acético

1A. 2-(4-(4-(3-metil-4-((((R)-1-feniletoxi)carbonil)amino)isoxazol-5-il)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)acetato de metilo

Una solución del Intermedio 1 (50 mg, 0,13 mmol), Intermedio 4 (42 mg, 0,13 mmol), K²CO³(54 mg, 0,39 mmol) y PdCh(dppf) (10 mg, 0,013 mmol) en THF (5 ml) y agua (1,25 ml) se purgó con Ar durante 5 min. Después, la mezcla de reacción se calentó a 80 °C durante 18 h bajo Ar, después se enfrió a TA y se filtró a través de Celite. El filtrado se repartió entre EtOAc (3 ml) y agua (3 ml); la fase acuosa se extrajo con EtOAc (2x3 ml). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con agua (2 ml) y salmuera (2 ml), se secaron (MgSO⁴) y se concentraron al vacío. El producto en bruto se cromatografió (columna ISCO de SO ²; gradiente continuo del 0 % al 100 % de EtOAc en hexanos durante 20 min) para dar el compuesto del título en forma de un aceite incoloro. (23 mg, 0,045 mmol, 34,5 % de rendimiento) LCMS [M H]⁺= 505,0; RMN de ¹H (400 MHz, CDCh) 88,00 - 7,23 (m, 9H), 5,87 (d, J=6,4 Hz, 2H), 4,01 (s, 2H), 3,70 (s, 3H), 2,49 (s, 3H), 2,21 (s, 3H), 2,16 -2,04 (m, 4H), 2,00 - 1,88 (m, 4H), 1,70 - 1,59 (m, 2H).

Ejemplo 1

A una solución del compuesto 1A (22 mg, 0,044 mmol) en THF (1 ml) se añadió LiOH ac. 1 M (0,44 ml, 0,44 mmol). La reacción se agitó a Ta durante 18 h, después se concentró al vacío. El residuo se disolvió en H²O (1 ml), y el pH se ajustó con HCl ac. 1 N a ~3 y se extrajo con EtOAc (2 x 1 ml). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (1 ml), se secaron (MgSO⁴) y se concentraron al vacío. El producto en bruto se purificó por LC/MS preparativa: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Precolumna: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 MeCN:H²O con TFA al 0,1 %; Fase móvil B: 95:5 MeCN:H²O con TFA al 0,1 %; Gradiente: 50-90 % de B durante 20 min, después una parada de 5 min al 100 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se concentraron al vacío mediante evaporación centrífuga para dar el compuesto del título (11 mg, 0,023 mmol, 52,3 % de rendimiento). LCMS [M H]⁺=491,2; RMN ¹H (400 MHz, CDCl^a) 87,61 (s a, 2H), 7,22 (d, J = 6,6 Hz, 6H), 7,10 - 6,90 (m, 1H), 6,01 - 5,72 (m, 2H), 4,03 (s, 2H), 2,49 (s, 2H), 2,14 (s, 3H), 2,09 - 1,72 (m, 8H), 1,55 (s a, 3H); Antagonista de hLPA¹CI⁵⁰= 116 nM.

Ejemplo 2. Ácido 2-(4-(4-(1-metil-5-((((R)-1-feniletoxi)carbonil)amino)-1H-pirazol-4-il)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)acético

2A. 2-(4-(4-(1-metil-5-((((R)-1-feniletoxi)carbonil)amino)-1H-pirazol-4-il)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)acetato de metilo

Una solución del Intermedio 1 (20 mg, 0,052 mmol), Pd(OAc)²(2,3 mg, 10,4 pmol),K³PO⁴(33 mg, 0,16 mmol) y Xphos (5 mg, 10,4 pmol) en tolueno (1,5 ml) y agua (0,2 ml) se purgó con Ar durante 5 min, después se calentó a 100 °C durante 4 h bajo Ar. Después de enfriar a TA, la mezcla de reacción se filtró a través de Celite. El filtrado se repartió entre EtOAc (2 ml) y agua (2 ml); la fase acuosa se extrajo con EtOAc (2x1 ml). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con agua (1 ml) y salmuera (1 ml), se secaron (MgSO⁴) y se concentraron al vacío. El producto en bruto se cromatografió (columna ISCo de SO ²; gradiente continuo del 0 % al 100 % de EtOAc en hexanos durante 20 min) para dar el compuesto del título. (13 mg, 0,026 mmol, 49,9% de rendimiento). LCMS [M H]⁺= 504,0; RMN ¹H (400 MHz, CDCh) 8: 7,55-7,73 (m, 1H), 7,28-7,47 (m, 6H), 7,17-7,23 (m, 2H), 6,07-6,20 (m, 1H), 5,89 (d a, 1H), 4,01 (s, 2H), 3,65-3,85 (m, 6H), 2,49 (s, 2H), 2,10 (d a, 3H), 1,86-1,96 (m, 3H), 1,60 (d a, 3H), 1,20-1,37 (m, 3H).

Ejemplo 2

A una solución agitada del compuesto 2A (13 mg, 0,026 mmol) en THF (1,0 ml) y agua (0,5 ml) a TA se añadió LiOH ac. 2,0 M (0,039 ml, 0,077 mmol). La mezcla de reacción se agitó a TA durante 5 h, después se concentró al vacío. El residuo se disolvió en H²O (1 ml), y el pH se ajustó con HCl ac. 1 N a ~3 y se extrajo con EtOAc (2 x 1 ml). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (1 ml), se secaron (MgSO⁴) y se concentraron al vacío. El producto en bruto se purificó por LC/MS preparativa: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Precolumna: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 MeCN:H²O con TFA al 0,1 %; Fase móvil B: 95:5 MeCN:H²O con TFA al 0,1 %; Gradiente: 50-90 % de B durante 20 min, después una parada de 5 min al 100 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se concentraron al vacío mediante evaporación centrífuga para dar el compuesto del título (8 mg, 0,016 mmol, 60,8 % de rendimiento). LCMS [M H]⁺=490,1; RMN ¹H (400 MHz, CD³CN) 87,55 (s, 1H), 7,43 - 6,93 (m, 9H), 5,74 - 5,45 (m, 1H), 3,92 (s, 2H), 3,58 (s, 3H), 2,35 (s, 2H), 2,10 - 1,64 (m, 8H), 1,54 - 1,20 (m, 3H); CI⁵⁰de hLPA¹= 88 nM.

Ejemplo 3. Ácido 2-(4-(4-(4-(((ciclopentil(metil)carbamoil)oxi)metil)-3-metilisoxazol-5-il)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)acético

A una solución del Intermedio 13 (3,5 mg, 6,52 pmol) en THF (1 ml) se añadió iPr²NEt (2,3 pl, 0,013 mmol) seguido de N-metilciclopentanamina (0,65 mg, 6,5 pmol). La mezcla de reacción se agitó a TA durante 18 h, después de lo cual se añadió LiOH ac. 2 M (33 pl, 0,065 mmol). La reacción se agitó a TA durante 18 h, después se concentró al vacío. El residuo se disolvió en H²O (1 ml), y el pH se ajustó con HCl ac. 1 N a ~3 y se extrajo con EtOAc (2 x 1 ml). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (1 ml), se secaron (MgSO⁴) y se concentraron al vacío. El producto en bruto se purificó por LC/MS preparativa: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Precolumna: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 MeCN:H²O con TFA al 0,1 %; Fase móvil B: 95:5 MeCN:H²O con TFA al 0,1 %; Gradiente: 50-90 % de B durante 20 min, después una parada de 5 min al 100 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se concentraron al vacío mediante evaporación centrífuga para dar el compuesto del título (2,7 mg, 5,6 pmol, 86 % de rendimiento). LCMS [M H]⁺= 483,4; RMN de ¹H (400 MHz; DMSO-d⁶) 8: 7,75 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,54 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 5,07 (s, 2H), 3,93 (s, 2H), 3,41 (s, 1H), 2,67 (s, 3H), 2,30-2,37 (m, 5H), 1,82-2,08 (m, 8H), 1,30-1,72 (m, 8H); hLPA¹CI⁵⁰=317 nM.

Ejemplo 4. Ácido 2-(4-(4-(5-(((ciclopentil(metil)carbamoil)oxi)metil)-1-metil-1H-pirazol-4-il)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)acético

A una solución del Intermedio 14 (5,0 mg, 9,3 pmol) en THF (1 ml) se añadió DIEA (9 pl, 0,012 mmol) seguido de N-metilciclopentanamina (1,5 mg, 7 pmol). La mezcla de reacción se agitó a TA durante 18 h, después de lo cual se añadió LiOH ac. 2 M (22 pl, 0,022 mmol). La reacción se agitó a TA durante 18 h, después se concentró al vacío. El residuo se disolvió en H²O (1 ml), y el pH se ajustó con HCl ac. 1 N a ~3 y se extrajo con EtOAc (2 x 1 ml). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (1 ml), se secaron (MgSO⁴) y se concentraron al vacío. El producto en bruto se purificó por LC/MS preparativa: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Precolumna: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 MeCN:H²O con TFA al 0,1 %; Fase móvil B: 95:5 MeCN:H²O con TFA al 0,1 %; Gradiente: 50-90 % de B durante 20 min, después una parada de 5 min al 100 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se concentraron al vacío mediante evaporación centrífuga para dar el compuesto del título (1,5 mg, 3,1 pmol, 33 % de rendimiento). [MS]⁺= 482,4. RMN de ¹H (400 MHz; DMSO-d⁶) 8: 7,63 (s, 1H), 7,30-7,43 (m, 4H), 5,18 (s, 2H), 3,85 3,95 (m, 5H), 2,63-2,73 (m, 3H), 2,55 (s, 1H), 2,31 (s, 2H), 1,85-2,05 (m, 8H), 1,61 (s a, 4H), 1,47 (s a, 4H). hLPA¹IC⁵⁰=1610 nM.

Ejemplo 5. Ácido (±)-3-(4-(4-(5-((((1-Ciclobutiletil)(metil)carbamoil)oxi)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)fenil)-2-oxabiddo[2.2.2]octan-1-il)propanoico

A una solución del Intermedio 15 (12 mg, 0,031 mmol) y DIPEA (0,022 ml, 0,125 mmol) en THF (0,5 ml) se añadió cloroformiato de 4-nitrofenilo (12,0 mg, 0,062 mmol). La mezcla de reacción se agitó a TA durante 16 h, después de lo cual se añadió 1-ciclobutil-N-metilmetanamina (3,09 mg, 0,031 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 1 h a TA, después de lo cual se añadieron MeOH (0,3 ml) y LiOH ac. 2 N (0,5 ml), y la mezcla se calentó a 50 °C durante 30 min, después se enfrió a TA. Se añadió HCl ac. 3 N (0,5 ml) a la mezcla, que se concentró al vacío. El residuo se purificó por LC/MS preparativa: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Precolumna: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 M e C N ^O con TFA al 0,1 %; Fase móvil B: 95:5 MeCN:H²O con TFA al 0,1 %; Gradiente: 50-90 % de B durante 20 min, después una parada de 5 min al 100 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se concentraron al vacío mediante evaporación centrífuga para dar el compuesto del título (11 mg, 62,3 % de rendimiento). LCMS [M H]⁺= 511,2; RMN de ¹H (500 MHz, DMSO-d^a) 88,33-8,22 (m, 2H), 7,48 - 7,28 (m, 2H), 6,72 -6,57 (m, 2H), 5,34 -5,16 (m, 2H), 4,20 -4,06 (m, 5H), 2,28 -2,17 (m, 2H), 2,02 -1,48 (m, 10H), 1,24-1,07 (m, 10H), 0,93 -0,74 (m, 4H); antagonista de hLPA¹CI⁵⁰= 440 nM.

Ejemplo 6. Ácido 2-(4-(4-(5-(((ciclopentil(metil)carbamoil)oxi)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-fluorofenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)acético

El Ejemplo 6 se preparó de acuerdo con los procedimientos generales descritos en el Esquema 7 y para la síntesis del Ejemplo 5 usando ácido 2-(4-(4-bromo-2-fluorofenil)-2-oxabiciclo[2.2.2] octan-1-il)acético como el intermedio y N-metil-ciclopentanamina en lugar de 1-ciclo-butil-N-metilmetanamina. LC^mS [M H]⁺= 501,2; RMN de ¹H (DMSO-d⁶) 8: 8,53-8,55 (m, 1H), 7,55-7,61 (m, 1H), 7,52 (dd, J=14,0, 1,7 Hz, 1H), 7,35 (t, J=8,4 Hz, 1H), 5,34 (s, 2H), 4,13 (s, 3H), 4,02 (s, 2H), 2,67 (s, 3H), 2,29 (s, 2H), 1,87-2,15 (m, 9H), 1,35-1,71 (m, 8H); antagonista de hLPA¹CI⁵⁰= 363 nM.

Ejemplo 7. Ácido 3-(4-(4-(1-metil-5-((((R)-1-feniletoxi)carbonil)amino)-1H-1,2,3-triazol-4-il)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)propanoico

Una mezcla del Intermedio 16 (6 mg, 0,015 mmol), (PhO)²PON³(16 pl, 0,075 mmol), (R)-l-feniletanol (2 mg, 0,016 mmol) y Et³N (20 pl, 0,15 mmol) en tolueno (1 ml) se agitó a 65 °C durante 2 h, después se enfrió a TA y se concentró al vacío. El producto en bruto se disolvió en THF (1 ml) y LiOH ac. 2 N (0,5 ml) y se agitó durante 1 h a TA. Se añadió HCl ac. 3 M (0,5 ml), y la mezcla se concentró al vacío. El residuo se purificó por LC/MS preparativa: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Precolumna: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 MeCN:H²O con TFA al 0,1 %; Fase móvil B: 95:5 MeCN:H²O con TFA al 0,1 %; Gradiente: 50 90 % de B durante 20 min, después una parada de 5 min al 100 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se concentraron al vacío mediante evaporación centrífuga para dar el compuesto del título (1 mg, 13 % de rendimiento). LCMS [M H]⁺= 505,2; RMN de ¹H (500 MHz, DMSO-d⁶) 87,69-7,52 (m, 2H), 7,49 - 7,35 (m, 2H), 7,33 - 7,13 (m, 5H), 5,27 - 4,96 (m, 2H), 3,73 - 3,41 (m, 4H), 2,03 - 1,84 (m, 5H), 1,86 - 1,64 (m, 2H), 1,51 -1,33 (m, 2H), 1,38 -1,18 (m, 2H), 1,06 -0,78 (m, 6H); CI⁵⁰de hLPA¹= 264 nM.

Ejemplo 8. Ácido 3-(4-(4-(5-((((R)-1-(2-clorofenil)etoxi)carbonil)amino)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)propanoico

El Ejemplo 8 se preparó de acuerdo con el procedimiento usado para la síntesis del Ejemplo 7 usando (R)-1-(2-clorofenil)etan-1-ol como el alcohol en la reacción de reordenamiento de Curtius en lugar de (R)-1-feniletanol. LCMS [M H]⁺= 539,2; RMN de ¹H (500 MHz, DMSO-d⁶) 87,81-7,56 (m, 3H), 7,53 - 7,26 (m, 5H), 6,08 - 5,89 (m, 1H), 3,71 - 3,45 (m, 3H), 2,35 -2,18 (m, 3H), 2,09 - 1,76 (m, 8H), 1,73 -1,41 (m, 7H); CI⁵⁰de hLPA¹= 418 nM.

Ejemplo 9. Ácido (R)-4-(4-(1-metil-5-(((1-feniletoxi)carbonil)amino)-1H-pirazol-4-il)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octano-1-carboxílico

El Ejemplo 9 se sintetizó de acuerdo con los procedimientos/la secuencia de síntesis descritos para la síntesis de los Ejemplos 1 y 2, pero usando el Intermedio 17 en lugar del Intermedio 1. LCMS [M H]⁺= 501,2; RMN de ¹H (DMSO-d⁶) 8: 8,53-8,55 (m, 1H), 7,55-7,61 (m, 1H), 7,52 (dd, J=14,0, 1,7 Hz, 1H), 7,35 (t, J=8,4 Hz, 1H), 5,34 (s, 2H), 4,13 (s, 3H), 4,02 (s, 2H), 2,67 (s, 3H), 2,29 (s, 2H), 1,87-2,15 (m, 9H), 1,35-1,71 (m, 8H); CI⁵⁰de hLPA¹= 278 nM.

Ejemplo 10. Ácido (R)-2-(4-(4-(1-(ciclopropilmetil)-5-(((1-feniletoxi)carbonil)amino)-1H-pirazol-4-il)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)acético

El Ejemplo 10 se preparó a partir del intermedio 18 bromo-pirazol N-carbamato y el Intermedio 1 de acuerdo con la secuencia de síntesis descrita para la síntesis del Ejemplo 2 (así como el Esquema 2). LCMS [M H]⁺= 530,2; RMN de ¹H (500 MHz, DMSO-d⁶) 59,61-9,41 (m, 1H), 7,85 - 7,64 (m, 1H), 7,50 - 7,32 (m, 6H), 7,26 - 7,16 (m, 2H), 5,81 -5,67 (m, 1H), 3,82 - 3,66 (m, 2H), 3,49 - 3,38 (m, 1H), 2,42 - 2,25 (m, 3H), 2,06 - 1,74 (m, 9H), 1,64 - 1,44 (m, 3H), 1,21 -1,01 (m, 2H), 0,59 - 0,40 (m, 2H), 0,36 - 0,21 (m, 2H); CI⁵⁰de hLPA¹= 422 nM.

Los compuestos enumerados en la Tabla 1 se prepararon usando los mismos métodos de síntesis generales que se describen para la síntesis del Ejemplo respectivo indicado usando los intermedios apropiados como se ha descrito anteriormente (Esquemas 1 y 6).

Tabla 1

Continuación

Continuación

Continuación

Continuación

Continuación

Continuación

Continuación

Continuación

Ejemplo 46. Ácido 2-(1-(4-(3-Metil-5-((((R)-1-feniletoxi)carbonil)amino)isoxazol-4-il)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-4-il)acético

46A. 5-bromo-3-metilisoxazol-4-carboxilato de ferc-butilo y 4-bromo-3-metilisoxazol-5-carboxilato de ferc-butilo (mezcla)

Se añadió NaOCI ac. al 6% (70,2 ml, 68,3 mmol) a una solución de acetaldoxima (2,42 g, 41,0 mmol) y 3-bromopropiolato de terc-butilo (5,60 g, 27,3 mmol) en DCM (100 ml) gota a gota a TA durante 2 h. La reacción se agitó a TA durante 30 min, después de lo cual HPLC analítica mostró que el material de partida estaba aún presente. Se añadieron más acetaldoxima (2,42 g, 41,0 mmol) y NaOCl ac. al 6 % (70,2 ml, 68,3 mmol) y la reacción se agitó a TA hasta que la HPLC analítica mostró que la reacción se había completado. La fase orgánica se separó, se lavó con agua y salmuera, se secó (MgSO⁴) y se concentró al vacío. El producto en bruto (un aceite) se cromatografió (40 g de SiO²; gradiente continuo del 0 % al 30 % de EtOAc en hexano durante 10 min) para dar una mezcla de los dos compuestos del título isoméricos (3,20 g, 12,2 mmol, 44,7 % de rendimiento) en forma de un aceite transparente.

46B. 4-metilbencenosulfonato de (1-(4-bromofenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-4-il)metilo

Una solución de nBuLi 1,6 M en hexano (8,0 ml, 12,8 mmol) se añadió gota a gota a una solución a - 78 °C de 1,4-dibromobenceno (5,47 g, 23,2 mmol) en THF (25 ml). La reacción se agitó a -78 °C durante 2 h, después de lo cual se añadió una solución de (4-oxociclohexano-1,1-diil)bis(metileno) bis(4-metilbencenosulfonato; sintetizado de acuerdo con el Ejemplo 1E, página 55 en la patente de los Ee . UU. 8,962,660; Se añadieron 5,1 g, 10,9 mmol) en THF (20 ml). Se dejó calentar lentamente la mezcla de reacción a TA durante 1 h y se agitó a TA durante 1 h más, después de lo cual LC-MS mostró la formación del producto deseado. Se añadió con cuidado NaOH en polvo (2,19 g, 54,7 mmol). La mezcla de reacción se calentó a reflujo en atmósfera de N²durante 18 h, después se enfrió a TA y se repartió entre EtOAc y agua (50 ml cada uno). La capa orgánica se lavó con agua (50 ml x 3), se secó (MgSO⁴) y se concentró parcialmente al vacío. El precipitado sólido se recogió por filtración para dar el compuesto del título (3,70 g, 8,20 mmol, 75 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanquecino. LCMS [M H]+ = 450,9/452,9; RMN de 1H (CDCh) 8: 7,81 - 7,75 (m, 2H), 7,44 - 7,39 (m, 2H), 7,36 (dt, J = 8,2, 0,8 Hz, 2H), 7,25 - 7,20 (m, 2H), 3,81 (t, J = 1,5 Hz, 2H), 3,75 (s, 2H), 2,46 (s, 3H), 1,98 (t, J = 8,0 Hz, 4H), 1,81 - 1,57 (m, 4H).

46C. 2-(1-(4-bromofenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-4-il)acetonitrilo

Una mezcla del compuesto 46B (3,70 g, 8,20 mmol), NaCN (1,47 g, 30,0 mmol), y una cantidad catalítica de KI en DMSO (10 ml) se agitó a 80 °C durante 18 h, después se enfrió a TA. La HPLC analítica mostró que la reacción se había completado. La mezcla de reacción se repartió entre EtOAc y agua (50 ml cada uno). La capa orgánica se lavó con NaOH ac. 1 N (x1), agua (x 3), se secó (MgSO⁴) y se concentró al vacío para dar el compuesto del título (2,50 g, 8,16 mmol, 100 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanquecino. LCMS [M Na]+ = 360,9/362,9; RMN de 1H (CDCla) 8: 7,46 - 7,41 (m, 2H), 7,28 - 7,23 (m, 2H), 3,93 (t, J = 1,4 Hz, 2H), 2,23 (s, 2H), 2,11 - 1,99 (m, 4H), 1,91 -1,78 (m, 4H).

46D. Ácido 2-(1-(4-bromofenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-4-il)acético

Una mezcla del compuesto 46C (2,50 g, 8,16 mmol) y KOH ac al 40 % (5,75 ml, 40,8 mmol) en etilenglicol (20 ml) se agitó a 120 °C durante 18 h, después se enfrió a TA. La HPLC analítica mostró que la reacción se había completado. La mezcla de reacción se concentró parcialmente al vacío. La solución restante se diluyó con agua (200 ml), después se acidificó a pH = 2 con HCl conc. a 0 °C. La mezcla se filtró, los sólidos recogidos se lavaron con agua hasta que el filtrado era neutro. Los sólidos se secaron al vacío para dar el compuesto del título (2,58 g, 7,93 mmol, 97 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco. LCMS [M - H]+ = 323,1/325,1; RMN de 1H (DMSO-d6) 8: 12,13 (s, 1H), 7,51 -7,45 (m, 2H), 7,35 -7,30 (m, 2H), 3,84 (t, J = 1,4 Hz, 2H), 2,11 -2,00 (m, 4H), 1,85 - 1,65 (m, 6H).

46E. 2-(1-(4-bromofenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-4-il)acetato de metilo

Una solución de TMSCHN²2,0 M en hexano (7,69 ml, 15,38 mmol) se añadió a una solución del compuesto 46D (2,50 g, 7,69 mmol) en THF (10 ml)/MeOH (5 ml) a 0 °C. La mezcla de reacción se dejó calentar a TA y se agitó a TA durante 2 h, después se concentró al vacío. El aceite en bruto se cromatografió (40 g de SiO²; gradiente continuo del 0 % al 50 % de EtOAc en hexano durante 10 min) para dar el compuesto del título (2,5 g, 7,37 mmol, 96 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco. [M Na]⁺= 360,9/362,9; RMN de ¹H (CDCl^a) 8: 7,44 - 7,40 (m, 2H), 7,28 - 7,24 (m, 2H), 3,93 (t, J = 1,3 Hz, 2H), 3,67 (s, 3H), 2,18 (s, 2H), 2,06 - 1,95 (m, 4H), 1,86 - 1,73 (m, 4H).

46F. 2-(1-(4-(5,5-dimetil-1,3,2-dioxaborinan-2-il)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-4-il)acetato de metilo

Una mezcla de PdCh(dppf) (101 mg, 0,139 mmol), bis(pinacolato)diboro (438 mg, 1,94 mmol), KOAc (218 mg, 2,22 mmol) y compuesto 46E (470 mg, 1,39 mmol) en DMSO anhidro (10 ml) se desgasificó bajo Ar. La mezcla de reacción se agitó a 80 °C bajo Ar durante 2 h, después se enfrió a TA y se vertió en HCl ac. 1 N frío (20 ml) y se extrajo con EtOAc (3 x). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (2 x), se secaron (Na²SO⁴) y se concentraron al vacío. El aceite en bruto se cromatografió (24 g de SO ²; gradiente continuo del 0 % al 30 % de EtOAc en hexano durante 10 min) para dar el compuesto del título (418 mg, 1,12 mmol, 81 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanquecino. RMN de 1H (CDCla) 8: 7,74 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,37 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 3,94 (s, 2H), 3,75 (s, 4H), 3,67 (s, 3H), 2,18 (s, 2H), 2,10 -1,99 (m, 4H), 1,85 - 1,73 (m, 4H), 1,01 (s, 6H)

46G. 5-(4-(4-(2-metoxi-2-oxoetil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)fenil)-3-metilisoxazol-4-carboxilato de tere-butilo

Una mezcla del compuesto 46A (93 mg, 0,355 mmol), compuesto 46F (110 mg, 0,295 mmol), (Ph³P)²Pd(II)Cl²(21 mg, 0,030 mmol) y K²CO³(123 mg, 0,89 mmol) en DME (8 ml) se desgasificó bajo Ar, después se agitó a 80 °C durante 4 h y se enfrió a TA. La mezcla de reacción se acidificó con HCl ac. 1 N y se extrajo con EtOAc. La capa orgánica se lavó con agua y se concentró al vacío. El producto en bruto (un aceite) se purificó por HPLC preparativa (columna Phenomenex Axia 5u C1830 x 100 mm; detección a 220 nm; caudal = 40 ml/min; gradiente continuo de B al 50 % a B al 100 % durante 10 min 2 min de parada al 100 % de B, donde A = 90:10:0,1 de H²O:MeOH:TFA y B = 90:10:0,1 de MeOH:H²O:TFA) para dar el compuesto del título (20 mg, 0,045 mmol, rendimiento de 15,3 %) en forma de un aceite de color marrón claro. LCMS [M H]⁺= 442,1; RMN de ¹H (CDCh) 8: 7,82 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,50 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 3,97 (s, 2H), 3,68 (s, 3H), 2,48 (s, 3H), 2,20 (s, 2H), 2,14 -1,95 (m, 4H), 1,92 - 1,75 (m, 4H), 1,51 (s, 9H).

46H. Ácido 5-(4-(4-(2-metoxi-2-oxoetil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)fenil)-3-metilisoxazol-4-carboxílico

Una mezcla del compuesto 46G (20 mg, 0,045 mmol) y ácido fórmico (174 pl, 4,53 mmol) se agitó a TA durante 18 h, después se concentró al vacío. El residuo se disolvió en EtOAc, se lavó con agua, se secó (MgSO⁴) y se concentró al vacío para dar el compuesto del título (17 mg, 0,044 mmol, 97 % de rendimiento) en forma de un sólido de color marrón claro. [M - H]+ = 384,3; RMN de 1H (CDCh) 8: 7,88 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 7,52 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 3,97 (s, 2H), 3,69 (s, 3H), 2,53 (s, 3H), 2,20 (s, 2H), 2,14 -2,04 (m, 4H), 1,91-1,76 (m, 4H)

46I. 2-(1-(4-(3-metil-4-((((R)-1-feniletoxi)carbonil)amino)isoxazol-5 il) fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-4-il)acetato de metilo

Una mezcla del compuesto 46H (17 mg, 0,044 mmol), (PhO)²PON³(0,011 ml, 0,053 mmol), (R)-(+)-1-feniletanol (5,4 pl, 0,049 mmol) y TEA (8 pl, 0,057 mmol) en tolueno (1 ml) se agitó a 80 °C durante 1 h, después se enfrió a TA y se concentró al vacío. El producto en bruto oleoso se purificó por HPLC preparativa (columna Phenomenex Axia 5 u C18 30 x 100 mm; detección a 220 nm; caudal = 40 ml/min; gradiente continuo de B al 50 % a B al 100 % durante 10 min 2 min de parada al 100 % de B, donde A = 90:10:0,1 de H²O:MeOH:TFA y B = 90:10:0,1 de MeOH:H²O:TFA) para dar el compuesto del título (17 mg, 0,034 mmol, rendimiento de 76 %) en forma de un sólido de color blanquecino. LCMS [M H]⁺= 505,1; RMN de ¹H (CDCl^a) 8: 7,82 - 7,01 (m, 9H), 6,71 - 5,75 (m, 2H), 4,02 - 3,92 (m, 2H), 3,74 - 3,64 (m, 3H), 2,27 -2,13 (m, 5H), 2,04 (t, J = 8,0 Hz, 4H), 1,92 - 1,72 (m, 4H), 1,71 -1,33 (m, 3H).

Ejemplo 46

Una solución del compuesto 46I (17 mg, 0,034 mmol) y NaOH ac. 1 N (0,34 ml, 0,34 mmol) en THF (0,5 ml)/MeOH (0,5 ml) se agitó a TA durante 2 h, después se concentró al vacío. El residuo se acidificó a pH = 2 con HCl ac. 1 N y después se purificó por HPLC preparativa (columna Phenomenex Axia 5u C18 30 x 100 mm; detección a 220 nm; caudal = 40 ml/min; gradiente continuo de B al 30 % a B al 100 % durante 10 min 2 min de parada al 100 % de B, donde A = 90:10:0,1 de H²O:MeOH:TFA y B = 90:10:0,1 de MeOH:H²O:TFA) para dar el compuesto del título (11 mg, 0,021 mmol, 63,2 % de rendimiento) en forma de un aceite transparente. LCMS [M - H]⁺= 489,2; RMN de ¹H (CDC^h) 8: 7,83 - 7,05 (m, 9H), 6,20 - 5,79 (m, 1H), 3,98 (s, 2H), 2,28 - 2,14 (m, 5H), 2,06 (t, J = 7,9 Hz, 4H), 1,86 (c, J = 7,6, 7,0 Hz, 4H), 1,70 - 1,35 (m, 3H); CI⁵⁰de hLPA¹= 190 nM.

Los compuestos enumerados en la Tabla 2 se prepararon usando la misma secuencia de síntesis y los mismos intermedios que se describen para la síntesis del Ejemplo 46 (y también como se describe en la secuencia de síntesis mostrada en el Esquema 3).

Tabla 2

(Continuación)

(Continuación)

2,11 -

Ejemplo 53. Ácido 2-(1-(4-(4-(((cidopentil(metil)carbamoil)oxi)metil)-3-metilisoxazol-5-il)fenil)-2-oxabicido[2.2.2]octan-4-il)acético

53A. Ácido 5-bromo-3-metilisoxazol-4-carboxílico y ácido 4-bromo-3-metilisoxazol-5-carboxílico (mezcla)

Una solución del compuesto 46A (mezcla de dos isómeros como se ha descrito anteriormente; 1,00 g, 3,82 mmol) en TFA (0,88 ml, 11,5 mmol) y DCM se agitó a 50 °C durante 2 h, después se enfrió a TA y se concentró al vacío para dar una mezcla de ácido 5-bromo-3-metilisoxazol-4-carboxílico y ácido 4-bromo-3-metilisoxazol-5-carboxílico (0,786 g, 3,82 mmol, 100 % de rendimiento) en forma de un aceite transparente.

53B. Mezcla de 5-bromo-3-metilisoxazol-4-il)metanol y (4-bromo-3-metilisoxazol-5-il)metanol

Una solución de BH³.THF 1 M en THF (2,77 ml, 2,77 mmol) se añadió al compuesto 53A (285 mg, 1,38 mmol) en THF (2 ml) a -20 °C. La reacción se dejó calentar a TA y se agitó a TA durante 18 h, después se concentró al vacío. El residuo se disolvió en EtOAc y se lavó con agua. La capa orgánica se concentró al vacío. El producto en bruto (aceite) se purificó por HPLC preparativa (columna Phenomenex Axia 5u C1830 x 100 mm; detección a 220 nm; caudal = 40 ml/min; gradiente continuo de B al 20 % a B al 100 % durante 10 min 2 min de parada al 100 % de B, donde A = 90:10:0,1 de H²O:MeOH:TFA y B = 90:10:0,1 de MeOH:H²O:TFA) para dar el compuesto del título (93 mg, 0,484 mmol, rendimiento de 35,0 %).

53C. 2-(1-(4-(4-(hidroximetil)-3-metilisoxazol-5-il)fenil)-2-oxabicido[2.2.2]octan-4-il)acetato de metilo

Una mezcla del Intermedio 1 (811 mg, 2,18 mmol), compuesto 53B (1,26 g, 4,79 mmol), Pd(Ph³P⁾⁴(12 mg, 10,1 |jmol) y K²CO³(139 mg, 1,01 mmol) en DME (5 ml)/H²O (0,2 ml) se desgasificó bajo Ar, después se agitó a 80 °C durante 18 h y se enfrió a TA. La mezcla de reacción se filtró y el filtrado se concentró al vacío. El producto en bruto (aceite) se purificó por HPLC preparativa (columna Phenomenex Axia 5u C1830 x 100 mm; detección a 220 nm; caudal = 40 ml/min; gradiente continuo de B al 30 % a B al 100 % durante 10 min 2 min de parada al 100 % de B, donde A = 90:10:0,1 de H²O:MeOH:TFA y B = 90:10:0,1 de MeOH:H²O:TFA) para dar el compuesto del título (22 mg, 0,059 mmol, rendimiento de 29,4 %) en forma de un sólido de color amarillento claro. LCMS [M H]+ = 372,2; RMN de 1H (CDCh) ⁸7,71 (d, J = ^{8 , 6}Hz, 2H), 7,51 (d, J = ^{8 , 6}Hz, 2H), 4,63 (s, 2H), 3,96 (s, 2H), 3,68 (s, 3H), 2,37 (s, 4H), 2,19 (s, 2H), 2,10 -2,00 (m, 4H), 1,90 - 1,75 (m, 4H).

53D. 2-(1-(4-(3-metil-4-((((4-nitrofenoxi)carbonil)oxi)metil)isoxazol-5-il)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-4-il)acetato de metilo

Una solución de cloroformiato de 4-nitrofenilo (24 mg, 0,12 mmol) en DCM (0,5 ml) se añadió a una solución del compuesto 53C (22 mg, 0,059 mmol) y iPr²NEt (0,041 ml, 0,24 mmol) en DCM (1 ml). La mezcla de reacción se agitó a TA durante 18 h, después se concentró al vacío. El producto oleoso en bruto se cromatografió (4 g de SO ²; gradiente continuo del 0 % al 30 % de EtOAc en hexano durante 10 min) para dar el compuesto del título (30 mg, 0,056 mmol, 94 % de rendimiento) en forma de un aceite de color amarillento claro. RMN de 1H (CDCh) ⁸: 8,29 (d, J = 9,1 Hz, 2H), 7,66 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 7,49 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 7,32 (d, J = 9,2 Hz, 2H), 5,20 (s, 2H), 3,90 (s, 2H), 3,62 (s, 3H), 2,37 (s, 3H), 2,14 (s, 2H), 2,09 - 1,94 (m, 4H), 1,83 - 1,69 (m, 4H).

53E. 2-(1-(4-(4-(((ciclopentil(metil)carbamoil)oxi)metil)-3-metilisoxazol-5-il)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-4-il)acetato de metilo

Una mezcla del compuesto 53D (30 mg, 0,056 mmol), ciclopentilmetilamina (0,020 ml, 0,17 mmol) y iPr²NEt (0,049 ml, 0,28 mmol) en THF (1 ml) se agitó a TA durante 2 h y después se concentró al vacío. El producto en bruto se cromatografió (4 g de SO ²; gradiente continuo del 0 % al 50 % de EtOAc en hexano durante 10 min) para dar el compuesto del título (27 mg, 0,054 mmol, 97 % de rendimiento) en forma de un aceite transparente. RMN de 1H (CDCla) ⁸7,65 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,48 - 7,42 (m, 2H), 5,02 (s, 2H), 3,89 (s, 2H), 3,62 (s, 3H), 2,69 (s a, 3H), 2,32 (s, 3H), 2,13 (s, 2H), 2,06 - 1,94 (m, 4H), 1,83 - 1,35 (m, 13H).

Ejemplo 53

Una mezcla del compuesto 53E (27 mg, 0,054 mmol) y LiOH ac. 2,0 M (0,27 ml, 0,54 mmol) en THF (0,5 ml)/MeOH (0,2 ml) se agitó a TA durante 5 h, después se repartió entre EtOAc y HCl ac. 1 N. La capa orgánica se lavó con agua y se concentró al vacío. El producto en bruto (aceite) se purificó por HPLC preparativa (Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 MeCN:H²O con TFA al 0,1 %; Fase móvil B: 95:5 MeCN:H²O con TFA al 0,1 %; Gradiente: 30-70 % de B durante 25 min, después una parada de 5 min al 100 % de B; Flujo: 20 ml/min) para dar el compuesto del título (18,3 mg, 0,036 mmol, 66,3 % de rendimiento) en forma de un aceite. LCMS [M - H]⁺= 481,05; RMN de ¹H (DMSO-d^a) 8: 7,71 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,56 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 5,05 (s, 2H), 3,86 (s, 2H), 2,65 (s, 3H), 2,31 (s, 3H), 2,18 -1,96 (m, 4H), 1,89 - 1,16 (m, 15H); CI⁵⁰de hLPA¹= 2.552 nM.

Ejemplo 54. Ácido (R)-2-(4-(4-(3-metil-4-(((1-feniletoxi)carbonil)amino)isoxazol-5-il)-2-oxabiciclo[2.2.2] octan-1-il)fenil)acético

54A. 4-metilbencenosulfonato de (1-(4-(((tetrahidro-2H-piran-2-il)oxi)metil)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-4-il)metilo

Una solución de n-BuLi 1,6 M en hexano (8,0 ml, 12,8 mmol) se añadió gota a gota a una solución de 2-((4-bromobencil)oxi)tetrahidro-2H-pirano (7,0 g, 25,8 mmol) en THF (25 ml) a -78 °C. La reacción se agitó a -78 °C durante 2 h, después de lo cual se añadió una solución de (4-oxociclohexano-1,1-diil)bis (metileno)bis(4-metilbencenosulfonato) (sintetizado de acuerdo con el compuesto 1E, página 55 en la patente de los EE. UU.

8,962,660; 10,0 g, 21,4 mmol) en THF (50 ml). La mezcla de reacción se dejó calentar lentamente a TA durante 1 h y se agitó a TA durante 1 h. LC-MS mostró la formación del producto de alcohol inicial a partir de la adición de ArLi. Se añadió NaOH en polvo (4,29 g, 107 mmol). La mezcla de reacción se calentó a reflujo en atmósfera de N²durante 18 h, después se enfrió a TA. El residuo se repartió entre EtOAc (50 ml) y agua. La capa orgánica se lavó con agua (50 ml x 3), se secó (MgSO⁴) y se concentró al vacío. El producto en bruto (un aceite) se cromatografió (80 g de SO ²; gradiente continuo del 0 % al 20 % de EtOAc en hexano durante 20 min) para dar el compuesto del título (4,80 g, 9,86 mmol, 46,0 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanquecino. [M - OTHP]+ = 385,1; RMN de 1H (CDCh) 8: 7,80 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,41 - 7,29 (m, 6H), 4,76 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 4,69 (t, J = 3,6 Hz, 1H), 4,48 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 3,92 (ddd, J = 11,6, 8,5, 3,1 Hz, 1H), 3,83 (t, J = 1,4 Hz, 2H), 3,76 (s, 2H), 3,58 -3,50 (m, 1H), 2,47 (s, 3H), 2,02 (t, J = 8,0 Hz, 4H), 1,93 - 1,48 (m, 10H).

54B. Acetato de (1-(4-(((tetrahidro-2H-piran-2-il)oxi)metil)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-4-il)metilo

Una mezcla del compuesto 54A (2,72 g, 5,59 mmol) y NaOAc (2,29 g, 27,9 mmol) en DMSO (10 ml) se agitó a 80 °C durante 8 días, después se enfrió a TA y se repartió entre EtOAc y agua (50 ml cada uno). La capa orgánica se lavó con agua, se secó (MgSO⁴), y se concentró al vacío para dar el compuesto del título en bruto (2,0 g, 5,34 mmol, 96 % de rendimiento) en forma de un aceite de color marrón claro. Este material se usó en la siguiente reacción sin purificación adicional. [M - THPO]+ = 273,1.

54C. Acetato de (1-(4-(hidroximetil)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-4-il)metilo

Una mezcla del compuesto 54B (2,0 g, 5,34 mmol) y PPTS (0,134 g, 0,534 mmol) en MeOH (10 ml) se agitó a 50 °C durante 5 h, después se enfrió a TA y se concentró al vacío. El aceite en bruto se cromatografió (24 g de SO ²; gradiente continuo del 0 % al 50 % de EtOAc/ hexano durante 10 min) para dar el compuesto del título (1,25 g, 4,31 mmol, 81 % de rendimiento) en forma de un sólido de color amarillento claro. RMN de 1H (500 MHz, cD ch) 87,41 - 7,37 (m, 2H), 7,30 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 4,65 (s, 2H), 3,93 (s, 2H), 3,84 (s, 2H), 2,08 - 2,02 (m, 7H), 1,86 - 1,74 (m, 3H), 1,73 -1,63 (m, 2H).

54D. Acetato de (1-(4-(((metilsulfonil)oxi)metil)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-4-il)metilo

Se añadió cloruro de metanosulfonilo (0,403 ml, 5,17 mmol) gota a gota a una solución del compuesto 54C (1,25 g, 4,31 mmol) y Et³N (1,20 ml, 8,61 mmol) en DCM (10 ml) a 0 °C. La reacción se dejó calentar a TA y se agitó a TA durante 2 h. HPLC mostró que la reacción se había completado en este punto. La mezcla de reacción se concentró al vacío. El residuo se repartió entre EtOAc y agua (25 ml cada uno). La capa orgánica se lavó con HCl ac. 1 N y agua, se secó (MgSO⁴) y se concentró al vacío para dar el compuesto del título (1,58 g, 4,29 mmol, 100 % de rendimiento) en forma de un aceite amarillento. [M - OAc]+ = 309,4.

54E. Acetato de (1-(4-(cianometil)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-4-il)metilo

Una mezcla del compuesto 54D (1,58 g, 4,29 mmol) y NaCN (0,420 g, 8,58 mmol) en DMSO (10 ml) se agitó a 80 °C durante 18 h, después se enfrió a TA y se repartió entre EtOAc y agua (25 ml cada uno). La capa orgánica se lavó con agua (2 x) y se concentró al vacío para dar el compuesto del título en bruto (1,284 g, 4,29 mmol, 100 % de rendimiento) en forma de un aceite amarillento. Este material en bruto se usó en la siguiente reacción sin purificación adicional. [M H]+ = 300,4.

54F. Ácido 2-(4-(4-(hidroximetil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)fenil)acético

Una mezcla del compuesto 54E y NaOH ac. al 30 % (2,86 g, 21,5 mmol) en EtOH (10 ml) se agitó a la temperatura de reflujo durante 30 h, después se enfrió a TA. La mezcla de reacción se acidificó a pH = 2 con HCl conc., después se extrajo con EtOAc (3X). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron (MgSO⁴), y se concentraron al vacío para dar el compuesto del título (0,41 g, 1,48 mmol, 34,6 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco. [M - H]+ = 275,4.

54G. 2-(4-(4-(hidroximetil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)fenil)acetato de metilo

Una mezcla del compuesto 54F (410 mg, 1,48 mmol) y TMSCHN²(1,48 ml de una solución 2,0 M en hexano; 2,97 mmol) en MeOH (10 ml)/THF (10 ml) se agitó a TA durante 2 h, después se concentró al vacío. El producto en bruto (aceite) se cromatografió (4 g de SO ²; gradiente continuo del 0 % al 50 % de EtOAc/hexano durante 10 min) para dar el compuesto del título (280 mg, 0,964 mmol, 65,0 % de rendimiento) en forma de un aceite transparente. RMN de ¹H (500 MHz, CDCl^a) 87,37 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,23 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 3,94 (t, J=1,4 Hz, 2H), 3,68 (s, 3H), 3,60 (s, 2H), 3,39 (s, 2H), 2,08 - 2,02 (m, 4H), 1,82 - 1,59 (m, 5H).

54H. 2-(4-(4-formil-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)fenil)acetato de metilo

Se añadió DMSO (0,205 ml, 2,89 mmol) gota a gota a una solución de (COCl)²(0,127 ml, 1,45 mmol) en DCM (5 ml) a -78 °C. Después de agitar a -78 °C durante 15 min, se añadió gota a gota una solución del compuesto 54G (280 mg, 0,964 mmol) en DCM (5 ml) y la reacción se agitó a -78 °C durante 15 min. Et³N (0,67 ml, 4,82 mmol) se añadió gota a gota y la reacción se dejó calentar a TA durante 2 h, después se concentró al vacío. El residuo se disolvió en EtOAc (5 ml) y se lavó con HCl ac. 1 N (1 x 5 ml), agua (2 x 5 ml), NaHCO³ac. sat., y salmuera. La capa orgánica se secó (Na²SO⁴) y se concentró al vacío para dar el compuesto del título en bruto (278 mg, 0,964 mmol, 100 % de rendimiento) en forma de un aceite de color amarillento claro, que se usó en la siguiente reacción sin purificación adicional. [M H]+ = 289,3.

54I. Ácido 1-(4-(2-metoxi-2-oxoetil)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octano-4-carboxílico

A una mezcla del compuesto 54H (278 mg, 0,964 mmol), 2-metil-2-buteno (7,23 ml de una solución 2,0 M en THF; 14,5 mmol), NaH²PO⁴(578 mg, 4,82 mmol), agua (1 ml) y t-BuOH (4 ml) se añadió NaClO²(545 mg, 4,82 mmol) a 0 °C. La mezcla de reacción se dejó calentar a TA y se agitó a TA durante 18 h, después se vertió en salmuera y se extrajo con EtOAc (3 x). Los extractos orgánicos combinados se secaron (Na²SO⁴) y se concentraron al vacío. El producto en bruto se purificó por HPLC preparativa (columna Phenomenex Axia 5 u C18 30 x 100 mm; detección a 220 nm; caudal = 40 ml/min; gradiente continuo de B al 30 % a B al 100 % durante 10 min 2 min de parada al 100 % de B, donde A = 90:10:0,1 de H²O:MeOH:TFA y B = 90:10:0,1 de MeOH:H²O:TFA) para dar el compuesto del título (293 mg, 0,963 mmol, rendimiento de 100 %) en forma de un sólido de color blanco. [M - H]+ = 303,3; RMN de 1H (500 MHz, CDCla) 87,36 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,24 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 4,19 (s, 2H), 3,69 (s, 3H), 3,61 (s, 2H), 2,18 -2,04 (m, 8H).

54J. 2-(4-(4-(clorocarbonil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)fenil)acetato de metilo

Una solución del compuesto 54I (293 mg, 0,963 mmol) y 1-cloro-N,N,2-trimetil-prop-1-en-1-amina (0,127 ml, 0,963 mmol) en DCM (5 ml) se agitó a TA durante 1 h, después se concentró al vacío para dar el compuesto del título en bruto en forma de un aceite (311 mg, 0,96 mmol, 100 % de rendimiento). Este material se usó directamente en la siguiente reacción sin purificación adicional.

54 K. 2-(1-(4-(2-metoxi-2-oxoetil)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octano-4-carbonil)-3-(metilimino)butanoato de (E)-tere-butilo

A una solución a 0 °C de 3-(metilimino)butanoato de (E)-tere-butilo (247 mg, 1,45 mmol) y piridina (0,31 ml, 3,85 mmol) en THF (5 ml) se añadió gota a gota una solución del compuesto 54J (311 mg, 0,96 mmol) en DCM durante 10 min. La reacción se agitó a TA durante 24 h, después se concentró al vacío. El residuo se repartió entre EtOAc y agua (10 ml cada uno). La fase acuosa se extrajo con EtOAc, y los extractos orgánicos combinados se secaron (MgSO⁴) y se concentraron al vacío. El producto en bruto (aceite) se cromatografió (4 g de SO ²; gradiente continuo del 0 % al 50 % de EtOAc/hexano durante 10 min) para dar el compuesto del título (240 mg, 0,53 mmol, 54,4 % de rendimiento) en forma de un aceite de color naranja. [M H]+ = 458,3.

54L. 5-(1-(4-(2-metoxi-2-oxoetil)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-4-il)-3-metilisoxazol-4-carboxilato de tere-butilo

Una mezcla del compuesto 54K (240 mg, 0,53 mmol) y NH²OH.HCl (109 mg, 1,57 mmol) en MeOH (2 ml)/H²O (0,2 ml) se agitó a 60 °C durante 18 h, después se enfrió a Ta y se concentró al vacío. El producto en bruto se purificó por HPLC preparativa (columna Phenomenex Axia 5 u C18 30 x 100 mm; detección a 220 nm; caudal = 40 ml/min; gradiente continuo de B al 50 % a B al 100 % durante 10 min 2 min de parada al 100 % de B, donde A = 90:10:0,1 de H²O:MeOH:TFA y B = 90:10:0,1 de MeOH:H²O:TFA) para dar el compuesto del título (70 mg, 0,16 mmol, rendimiento de 30,2 %) en forma de un sólido de color blanco. RMN de ¹H (500 MHz, CDCl^a) 87,39 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 7,25 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 4,41 (s, 2H), 3,69 (s, 3H), 3,62 (s, 2H), 2,43 -2,31 (m, 7H), 2,21 -2,12 (m, 4H), 1,60 (s, 9H); RMN de ¹³C (126MHz, CDCl3) 8177,9, 172,0, 161,4, 160,6, 144,7, 132,4, 128,9, 124,9, 110,6, 82,3, 72,1, 69,5, 51,9, 40,7, 35,8, 32,7, 28,2, 27,4, 12,3

54M. Ácido 5-(1-(4-(2-metoxi-2-oxoetil)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-4-il)-3-metilisoxazol-4-carboxílico

Una mezcla del compuesto 54L (70 mg, 0,159 mmol) y ácido fórmico (608 pl; 15,9 mmol) se agitó a TA durante 6 h, después se concentró al vacío. El residuo se disolvió en EtOAc (2 ml), se lavó con agua, se secó (MgSO⁴) y se concentró al vacío para dar el compuesto del título (60 mg, 0,156 mmol, 98 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco. [M H]+ = 386,2

54N. 2-(4-(4-(3-metil-4-(((1-feniletoxi)carbonil)amino)isoxazol-5-il)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)fenil)acetato de (R)-metilo

Una mezcla del compuesto 54M (18 mg, 0,047 mmol), (PhO²)PON³(0,012 ml, 0,056 mmol), (R)-(+)-1-feniletanol (10,4 pl, 0,093 mmol) y Et³N (0,020 ml, 0,140 mmol) en tolueno (1 ml) se agitó a 80 °C durante 1 h, después se enfrió a TA y se concentró al vacío. El aceite en bruto se purificó por HPLC preparativa (columna Phenomenex Axia 5u C1830 x 100 mm; detección a 220 nm; caudal = 40 ml/min; gradiente continuo de B al 30 % a B al 100 % durante 10 min 2 min de parada al 100 % de B, donde A = 90:10:0,1 de H²O:MeOH:TFA y B = 90:10:0,1 de MeOH:H²O:TFA) para dar el compuesto del título (11 mg, 0,022 mmol, 46,7 % de rendimiento) en forma de un aceite transparente.

Ejemplo 54

Una mezcla del compuesto 54N (11 mg, 0,022 mmol) y LiOH ac. 2,0 M (0,109 ml, 0,218 mmol) en THF (1 ml)/MeOH (0,1 ml) se agitó a t A durante 2 h, después se acidificó a pH = 2 con HCl ac. 1 N. La mezcla se extrajo con EtOAc (2 X 2 ml). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con agua (2 ml) y se concentraron al vacío. El producto en bruto (aceite) se purificó por HPLC preparativa (columna Phenomenex Axia 5u C1830 x 100 mm; detección a 220 nm; caudal = 40 ml/min; gradiente continuo de B al 50 % a B al 100 % durante 10 min 2 min de parada al 100 % de B, donde A = 90:10:0,1 de H²O:MeOH:TFA y B = 90:10:0,1 de MeOH:H²O:TFA) para dar el compuesto del título (4,2 mg, 8,39 pmol, rendimiento de 38,5 %) en forma de un sólido de color blanco. [M - H]⁺= 489,2; RMN de ¹H (500 MHz, CDCl^a) 87,45 -7,07 (m, 9H), 5,99 -5,82 (m, 1H), 4,22 (s a, 2H), 3,66 (s, 2H), 2,27 - 1,94 (m, 11H), 1,69 - 1,48 (m, 3H); CI⁵⁰de hLPA¹= 88 nM.

Los siguientes compuestos se prepararon mediante la misma secuencia de síntesis que se describe para la síntesis del Ejemplo 54.

Ejemplo 57. Ácido 2-(4-(2-fluoro-4-(3-metil-4-((((R)-1-feniletoxi)carbonil)amino) isoxazol-5-il)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)acético

Ejemplo 57 se preparó de acuerdo con los procedimientos generales descrito para la síntesis del Ejemplo 1 usando el Intermedio 2 en lugar del Intermedio 1. LCMS [M H]⁺= 509,0; RMN de ¹H (400 MHz, CDCl³) 87,53 - 7,27 (m, 6H), 7,17 (t, J=8,0 Hz, 2H), 6,09 -5,93 (m, 1H), 5,87 (c, J = 6,6 Hz, 1H), 4,25 (s, 2H), 2,56 (s, 3H), 2,27 -2,21 (m, 2H), 2,20 -1,80 (m, 8H), 1,62 (s a, 3H); CI⁵⁰de hLPA¹= 41 nM.

Ejemplo 58. Ácido 3-(1-(4-(3-metil-4-((((R)-1-feniletoxi)carbonil)amino)isoxazol-5-il)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-4-il)propanoico

58A. 2-(1-(4-(((tetrahidro-2H-piran-2-il)oxi)metil)fenil)-2-oxabicido[2.2.2]octan-4-il) acetonitrilo

Una mezcla del compuesto 54A (1 g, 2,055 mmol) y NaCN (0,302 g, 6,16 mmol) en DMSO (5 ml) se agitó a 80 °C durante 3 días, después se enfrió a TA y se repartió entre EtOAc y agua (20 ml cada uno). La capa orgánica se lavó con agua, se secó (MgSO⁴) y se concentró al vacío. El aceite en bruto se cromatografió (12 g de SO ²; gradiente continuo del 0 % al 50 % de EtOAc en hexano durante 10 min) para dar el compuesto del título (0,65 g, 1,904 mmol, 93 % de rendimiento) en forma de un aceite transparente. [M - OTHP]+ = 240,1; RMN 1H (400 MHz, CDCh) 8: 7,37 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,33 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 4,77 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 4,71 - 4,68 (m, 1H), 4,49 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 3,99 - 3,88 (m, 3H), 3,59 - 3,51 (m, 1H), 2,23 (s, 2H), 2,10 (t, J = 8,2 Hz, 4H), 1,93 --1,49 (m, 10H).

58B. 2-(1-(4-(((tetrahidro-2H-piran-2-il)oxi)metil)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-4-il) acetaldehído

Una solución de DIBALH 1 M en CH²Ch (2,28 ml, 2,28 mmol) se añadió gota a gota a una solución del compuesto 58A (0,65 g, 1,90 mmol) en CH²Ch (10 ml) a -78 °C en atmósfera de N². La mezcla de reacción se agitó a -78 °C durante 2 h, después se añadió Celite (1 g) y la reacción se interrumpió con NH⁴Cl ac. sat. (2 ml). La mezcla se agitó a TA durante 30 min, después se añadió MgSO⁴(1 g) y la mezcla se agitó a TA durante 30 min, después se filtró. Los sólidos se lavaron con CH²Cl²(3 x). Los filtrados combinados se concentraron al vacío. El aceite en bruto se cromatografió (12 g de SO ²; gradiente continuo del 0 % al 50 % de EtOAc en hexano durante 10 min) para dar el compuesto del título (0,58 g, 1,684 mmol, 88 % de rendimiento) en forma de un aceite transparente. RMN de 1H (CDCla) 89,85 (t, J = 2,7 Hz, 1H), 7,37 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,35 -7,30 (m, 2H), 4,77 (dd, J = 12,0, 2,1 Hz, 1H), 4,69 (t, J = 3,5 Hz, 1H), 4,49 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 4,01 -3,88 (m, 3H), 3,60 -3,49 (m, 1H), 2,28 (d, J = 2,8 Hz, 2H), 2,12 -2,03 (m, 4H), 1,96 - 1,47 (m, 10H).

58C. 2-(1-(4-(((tetrahidro-2H-piran-2-il)oxi)metil)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-4-il) etanol

Una solución de DIBALH 1,0 M en CH²Ch (2,02 ml, 2,021 mmol) se añadió gota a gota a una solución del compuesto 58B (0,58 g, 1,684 mmol) en CH²Ch (10 ml) a -78 °C en atmósfera de N². La mezcla de reacción se agitó a -78 °C durante 2 h, después de lo cual se añadió Celite (1 g) y la reacción se interrumpió con NH⁴Cl ac. sat. (2 ml). La reacción se agitó a TA durante 30 min, se añadió MgSO⁴(1 g) y la mezcla se agitó a Ta durante 30 min, después se filtró. Los sólidos se lavaron con CH²Ch (3 x). Los filtrados combinados se concentraron al vacío. El aceite en bruto se cromatografió (12 g de SO ²; gradiente continuo del 0 % al 50 % de EtOAc en hexano durante 10 min) para dar el compuesto del título (0,49 g, 1,414 mmol, 84 % de rendimiento) en forma de un aceite transparente. RMN de 1H (CDCla) 87,38 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,31 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 4,77 (d, J = 11,9 Hz, 1H), 4,69 (t, J = 3,6 Hz, 1H), 4,48 (d, J = 11,9 Hz, 1H), 3,98 - 3,84 (m, 3H), 3,72 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 3,60 - 3,50 (m, 1H), 2,09 - 1,98 (m, 4H), 1,93 - 1,80 (m, 1H), 1,79 - 1,44 (m, 12H).

58D. metanosulfonato de 2-(1-(4-(((tetrahidro-2H-piran-2-il)oxi)metil)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-4-il)etilo

Se añadió MsCl (0,132 ml, 1,70 mmol) gota a gota a TA a una solución del compuesto 58C (0,49 g, 1,41 mmol) y TEA (0,30 ml, 2,12 mmol) en CH²CI²(5 ml). La reacción se agitó a TA durante 2 h, después se concentró al vacío. El residuo se repartió entre EtOAc y agua. La capa orgánica se lavó con HCl ac. 1 N y agua, se secó (MgSO⁴), y se concentró al vacío para dar el compuesto del título (0,6 g, 1,413 mmol, 100 % de rendimiento) en forma de un aceite de color amarillento claro que se usó directamente en la siguiente reacción sin purificación adicional. RMN de 1H (500 MHz, CDCla) 87,39 - 7,35 (m, 2H), 7,34 - 7,29 (m, 2H), 4,76 (d, J = 11,8 Hz, 1H), 4,69 (t, J=3,6 Hz, 1H), 4,48 (d, J=11,8 Hz, 1H), 4,29 (t, J=7,0 Hz, 2H), 3,92 (ddd, J=11,3, 8,5, 3,0 Hz, 1H), 3,88 (s, 2H), 3,57 - 3,51 (m, 1H), 3,02 (s, 3H), 2,08 -2,02 (m, 4H), 1,92 - 1,82 (m, 1H), 1,80 - 1,49 (m, 11H).

58E. 3-(1-(4-(((tetrahidro-2H-piran-2-il)oxi)metil)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-4-il) propanonitrilo

Una mezcla del compuesto 58D (0,60 g, 1,41 mmol) y NaCN (0,14 g, 2,83 mmol) en DMSO (5 ml) se agitó a 50 °C durante 18 h, después se enfrió a TA y se repartió entre EtOAc y agua. La capa orgánica se lavó con agua, se secó (MgSO⁴) y se concentró al vacío. El aceite en bruto se cromatografió (24 g de SO ²; gradiente continuo del 0 % al 50 % de EtOAc en hexano durante 10 min) para dar el compuesto del título (0,4 g, 1,125 mmol, 80 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco. RMN de 1H (500 MHz, CDCla) 87,40 - 7,36 (m, 2H), 7,35 - 7,31 (m, 2H), 4,78 (d, J=12,1 Hz, 1H), 4,70 (t, J=3,6 Hz, 1H), 4,49 (d, J=11,8 Hz, 1H), 3,93 (ddd, J=11,3, 8,4, 3,2 Hz, 1H), 3,84 (s, 2H), 3,58 - 3,52 (m, 1H), 2,34 - 2,28 (m, 2H), 2,06 (t, J=8,0 Hz, 4H), 1,91 -1,83 (m, 1H), 1,78 - 1,50 (m, 11H).

58F. Ácido 3-(1-(4-(((tetrahidro-2H-piran-2-il)oxi)metil)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-4-il) propanoico

Una mezcla del compuesto 58E (200 mg, 0,563 mmol) y KOH ac. al 40 % (1,13 ml, 11,3 mmol) en etilenglicol (5 ml) se agitó a 160 °C durante 18 h, después se enfrió a TA y se concentró al vacío. El residuo se repartió entre EtOAc y HCl ac. 1 N. La capa orgánica se lavó con agua, se secó (MgSO⁴) y se concentró al vacío para dar el compuesto del título (200 mg, 0,534 mmol, 95 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco. [M - H]+ = 373,3; Rm N de 1H (500 MHz, CDCta) 87,31 - 7,27 (m, 2H), 7,25 - 7,21 (m, 2H), 4,68 (d, J=12,1 Hz, 1H), 4,62 (t, J=3,6 Hz, 1H), 4,40 (d, J=12,1 Hz, 1H), 3,85 (ddd, J=11,3, 8,5, 3,0 Hz, 1H), 3,76 (s, 2H), 3,51 -3,44 (m, 1H), 2,28 -2,22 (m, 2H), 1,96 (t, J=7,8 Hz, 4H), 1,84 - 1,73 (m, 1H), 1,70 - 1,41 (m, 11H).

58G. 3-(1-(4-(((tetrahidro-2H-piran-2-il)oxi)metil)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2] octan-4-il)propanoato de metilo

Una solución de TMSCHN²2 M en hexano (0,80 ml, 1,602 mmol) se añadió a una solución del compuesto 58F (200 mg, 0,534 mmol) en THF (5 ml) y MeOH (1 ml). La reacción se agitó a TA durante 2 h, después se concentró al vacío para dar el compuesto del título (200 mg, 0,515 mmol, 96 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco. RMN de ¹H (500 MHz, CDCt^a) 87,40 - 7,35 (m, 2H), 7,34 - 7,29 (m, 2H), 4,77 (d, J=11,8 Hz, 1H), 4,69 (t, J=3,6 Hz, 1H), 4,48 (d, J=12,1 Hz, 1H), 3,93 (ddd, J = 11,3, 8,5, 3,0 Hz, 1H), 3,83 (s, 2H), 3,69 (s, 3H), 3,58 -3,51 (m, 1H), 2,33 -2,26 (m, 2H), 2,03 (t, J=8,0 Hz, 4H), 1,87 (d, J=9,4 Hz, 1H), 1,78 - 1,50 (m, 11H).

58H. 3-(1-(4-(hidroximetil)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-4-il)propanoato de metilo

Una mezcla del compuesto 58G (200 mg, 0,515 mmol) y PPTS (13 mg, 0,051 mmol) en MeOH (10 ml) se agitó a 50 °C durante 3 h, después se enfrió a TA y se concentró al vacío. El aceite en bruto se cromatografió (12 g de SO ²; gradiente continuo del 0 % al 50 % de EtOAc en hexano durante 10 min) para dar el compuesto del título (156 mg, 0,513 mmol, 100 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco. R^mN de 1H (500 MHz, CDCh) 87,42 - 7,36 (m, 2H), 7,34 -7,28 (m, 2H), 4,66 (s, 2H), 3,83 (s, 2H), 3,69 (s, 3H), 2,33 -2,26 (m, 2H), 2,03 (t, J=8,1 Hz, 4H), 1,76 -1,60 (m, 5H), 1,58 - 1,50 (m, 2H).

58I. 3-(1-(4-formilfenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-4-il)propanoato de metilo

Una mezcla del compuesto 58H (128 mg, 0,421 mmol), peryodinano de Dess-Martin (268 mg, 0,631 mmol) y Na²CO³(446 mg, 4,21 mmol) en CH²Ch (5 ml) se agitó a TA durante 3 h, después se filtró. El filtrado se concentró al vacío. El residuo se disolvió en EtOAc y se lavó con NaOH ac. 1 N y agua, se secó (MgSO⁴) y se concentró al vacío para dar el compuesto del título (126 mg, 0,417 mmol, 99 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco, que se usó en la siguiente reacción sin purificación adicional. [M H]+ = 303,2.

58J. Ácido 4-(4-(3-metoxi-3-oxopropil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)benzoico

A una mezcla a 0 °C del compuesto 581 (127 mg, 0,420 mmol), una solución 2 M de 2-metil-2-buteno en THF (3,15 ml, 6,30 mmol) y NaH²PO⁴(252 mg, 2,100 mmol) en agua (1 ml) y t-BuOH (4 ml) se añadió NaClO²(190 mg, 2,100 mmol). La mezcla de reacción se dejó calentar a TA y se agitó a t A durante 18 h, después se vertió en salmuera y se extrajo con EtOAc (5 ml x 3). Los extractos orgánicos combinados se secaron (Na²SO⁴) y se concentraron al vacío. El aceite en bruto se purificó por HPLC preparativa (columna Phenomenex Axia 5u C18 30 x 100 mm; detección a 220 nm; caudal = 40 ml/min; gradiente continuo de B al 30 % a B al 100 % durante 10 min 2 min de parada al 100 % de B, donde A = 90:10:0,1 de H²O:MeOH:TFA y B = 90:10:0,1 de MeOH:H²O:TFA) para dar el compuesto del título (110 mg, 0,346 mmol, rendimiento de 82 %) en forma de un sólido de color blanco. RMN de 1H (500 MHz, CDCh) 8 8,07 (d, J=8,5 Hz, 2H), 7,51 (d, J=8,5 Hz, 2H), 3,86 (s, 2H), 3,71 (s, 3H), 2,36 - 2,28 (m, 2H), 2,14 -1,99 (m, 4H), 1,78 - 1,63 (m, 4H), 1,58 (t, J = 8,4 Hz, 2H).

58K. 3-(1-(4-(clorocarbonil)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-4-il)propanoato de metilo

Una mezcla del compuesto 58J (110 mg, 0,346 mmol) y 1-cloro-N,N,2-trimetil prop-1-en-1-amina (0,055 ml, 0,415 mmol) en CH²Ch (1 ml) se agitó a TA durante 1 h. La HPLC analítica mostró que la reacción se había completado. Este producto en bruto se usó en la siguiente reacción directamente.

58L. 2-(4-(4-(3-metoxi-3-oxopropil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)benzoil)-3-(metilimino)butanoato de (E)-tere-butilo

Una solución del compuesto 58K (116 mg, 0,344 mmol) en CH²Ch (2 ml) se añadió gota a gota a una solución de 3-(metilimino)butanoato de (E)-tere-butilo (88 mg, 0,517 mmol) y piridina (0,111 ml, 1,38 mmol) en THF (1 ml) a 0 °C durante 5 min. La reacción se dejó calentar a TA y se agitó a TA durante 24 h, después se concentró al vacío y el residuo se repartió entre EtOAc y agua. La fase acuosa se extrajo con EtOAc, y las capas orgánicas combinadas se secaron (MgSO⁴) y se concentraron al vacío para dar el compuesto del título en bruto (162 mg, 0,344 mmol, 100 % de rendimiento) en forma de un aceite de color naranja. Este compuesto en bruto se usó en la siguiente reacción sin purificación adicional. [M H]+ = 472,2.

58M. 5-(4-(4-(3-metoxi-3-oxopropil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)fenil)-3-metilisoxazol-4-carboxilato de tere-butilo

Una mezcla del compuesto en bruto 58L (162 mg, 0,344 mmol) y NH²OH.HCI (71,6 mg, 1,031 mmol) en MeOH (3 ml)/H²O (0,3 ml) se agitó a 60 °C durante 18 h. LC-MS mostró que la reacción se había completado. La mezcla se concentró al vacío, y el residuo se purificó por HPLC preparativa (columna Phenomenex Axia 5u C18 30 x 100 mm; detección a 220 nm; caudal = 40 ml/min; gradiente continuo de B al 50 % a B al 100 % durante 10 min 3 min de parada al 100 % de B, donde A = 90:10:0,1 de H²O:MeOH:TFA y B = 90:10:0,1 de MeOH:H²O:TFA) para dar el compuesto del título (87 mg, 0,191 mmol, rendimiento de 55,6 %) en forma de sólido de color blanco. [M H]+ = 456,5; RMN de 1H (500 MHz, CDCh) 87,86 - 7,81 (m, 2H), 7,53 - 7,48 (m, 2H), 3,85 (s, 2H), 3,70 (s, 3H), 2,48 (s, 3H), 2,33 -2,26 (m, 2H), 2,11 -1,99 (m, 4H), 1,75 - 1,62 (m, 4H), 1,59 - 1,53 (m, 2H), 1,52 (s, 9H).

58N. Ácido 5-(4-(4-(3-metoxi-3-oxopropil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)fenil)-3-metilisoxazol-4-carboxílico

Una mezcla del compuesto 58M (87 mg, 0,191 mmol) y HCO²H (146 pl, 3,82 mmol) se agitó a TA durante 2 h, después se concentró al vacío para dar el compuesto del título (75 mg, 0,188 mmol, 98 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco. [M - H]+ = 398,3.

58O. (R)-metil-3-(1-(4-(3-metil-4-(((1-feniletoxi)carbonil)amino)isoxazol-5-il)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-4-il)propanoato

Una mezcla del compuesto 58N (21,7 mg, 0,054 mmol), (R)-(+)-1-feniletanol (13,3 mg, 0,109 mmol), (PhO)²PON³(18 mg, 0,065 mmol) y TEA (0,030 ml, 0,217 mmol) en tolueno ⁽¹ml) se agitó a 80 °C durante 1 h, después se enfrió a TA y se concentró al vacío. El residuo se purificó por HPLC preparativa (columna Phenomenex Axia 5 u C18 30 x 100 mm; detección a 220 nm; caudal = 40 ml/min; gradiente continuo de B al 50 % a B al 100 % durante 10 min 2 min de parada al 100 % de B, donde A = 90:10:0,1 H²O:MeOH:TFA y B = 90:10:0,1 MeOH:HzO:TFA) para dar el compuesto del título (27 mg, 0,052 mmol, 96 % de rendimiento) en forma de un aceite transparente. [M H]⁺= 519,4; RMN de ¹H (400 MHz, CDCl^a) 87,48 -7,21 (m, 7H), 7,19 -7,09 (m, 2H), 6,29 -5,77 (m, 1H), 3,85 (s, 2H), 3,70 (s, 3H), 2,40 -2,13 (m, 4H), 2,09 - 1,92 (m, 4H), 1,75 - 1,33 (m, 9H).

Ejemplo 58

Una mezcla del compuesto 58O (27 mg, 0,052 mmol) y LiOH ac. 2,0 M (0,2 ml, 0,40 mmol) en THF (1 ml)/MeOH (0,1 ml) se agitó a TA durante 2 h, después se acidificó a pH = 2 con HCl ac. 1 N. La mezcla se extrajo con EtOAc (2 x). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con agua y se concentraron al vacío. El aceite en bruto se purificó por HPLC preparativa (columna Phenomenex Axia 5u C1830 x 100 mm; detección a 220 nm; caudal = 40 ml/min; gradiente continuo de B al 50 % a B al 100 % durante 10 min 2 min de parada al 100 % de B, donde A = 90:10:0,1 de H²O:MeOH:TFA y B = 90:10:0,1 de MeOH:H²O:TFA) para dar el compuesto del título (12,5 mg, 0,024 mmol, rendimiento de 46,6 %) en forma de un sólido de color blanco. [M - H]⁺= 503,2; RMN ¹H (500 MHz, CDCI³) 88,64 (s a, 1H), 7,84 - 6,70 (m, 9H), 6,27 - 5,78 (m, 1H), 3,86 (s, 2H), 2,42 - 2,30 (m, 2H), 2,21 (s a, 3H), 2,04 (t, J=8,0 Hz, 4H), 1,78 - 1,33 (m, 9H); CI⁵⁰de hLPAⁱ= 157 nM.

Ejemplo 59. Ácido 2-(4-(3-(4-((((R)-1-(2-clorofenil)etoxi)carbonil)amino)-3-metilisoxazol-5-il)fenil)-2-oxabicido[2.2.2]octan-1-il)acético

59A. 2-(4-(3-(4-((((R)-1-(2-clorofenil)etoxi)carbonil)amino)-3-metilisoxazol-5-il)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)acetato de metilo

Una solución del Intermedio 19 (17 mg, 0,044 mmol), intermedio 6 (15,8 mg, 0,044 mmol), K²CO³(18,2 mg, 0,13 mmol) y PdCh(dppf) (3,2 mg, 0,0044 mmol) en THF (4 ml) y agua (1 ml) se purgó con Ar durante 5 min. Después, la mezcla de reacción se calentó a 80 °C durante 18 h bajo Ar, después se enfrió a TA y se filtró a través de Celite. El filtrado se repartió entre EtOAc (3 ml) y agua (3 ml); la fase acuosa se extrajo con EtOAc (2x3 ml). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con agua (2 ml) y salmuera (2 ml), se secaron (MgSO⁴) y se concentraron al vacío. El producto en bruto se cromatografió (columna ISCO de SO ²; gradiente continuo del 0 % al 100 % de EtOAc en hexanos durante 20 min) para dar el compuesto del título en forma de un aceite incoloro. (4,5 mg, 0,0084 mmol, 19 % de rendimiento) LCMS [M H]⁺=539,2; RMN de ¹H (CDCh) 8: 7,70-7,76 (m, 1H), 7,58-7,68 (m, 1H), 7,48-7,55 (m, 1H), 7,33-7,45 (m, 4H), 6,26 (d a, J = 6,6 Hz, 1H), 4,00-4,06 (m, 2H), 3,73 (s, 3H), 2,51 (s, 2H), 2,29 (s, 3H), 2,08-2,16 (m, 4H), 1,88-1,95 (m, 4H), 1,62-1,70 (m, 2H), 1,27-1,32 (m, 2H).

Ejemplo 59

A una solución del compuesto 59A (4,5 mg, 8,35 pmol) en THF (1 ml) se añadió LiOH ac. 2 M (0,04 ml, 0,08 mmol). La reacción se agitó a Ta durante 18 h, después se concentró al vacío. El residuo se disolvió en H²O (1 ml), y el pH se ajustó con HCl ac. 1 N a ~3 y se extrajo con EtOAc (2 x 1 ml). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (1 ml), se secaron (MgSO⁴) y se concentraron al vacío. El producto en bruto se purificó por LC/MS preparativa: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Precolumna: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 MeCN:H²O con TFA al 0,1 %; Fase móvil B: 95:5 MeCN:H²O con TFA al 0,1 %; Gradiente: 50-90 % de B durante 20 min, después una parada de 5 min al 100 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se concentraron al vacío mediante evaporación centrífuga para dar el compuesto del título (2,2 mg, 0,004 mmol, 47,7 % de rendimiento). LCMS [M H]⁺= 525,3; RMN de ¹H (DMSO-d⁶) 8: 9,41 (s a, 1H), 7,72 (s a, 1 H), 7,55-7,65 (m, 2H), 7,42-7,52 (m, 4H), 7,38 (d a, J = 7,6 Hz, 1H), 5,77-6,20 (m, 1H), 3,90 (s a, 2H), 3,46 (s a, 2H), 2,34 (s, 2H), 2,14 (s a, 3H), 2,00 (s a, 4H), 1,87 (s a, 4H), 1,55 (d a, J = 5,8 Hz, 2^h); Antagonista de hLPA¹CI⁵⁰= 95 nM.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Un compuesto de Fórmulas (la) o (Ib):

o un estereoisómero, un tautómero o una sal farmacéuticamente aceptable o solvato del mismo, en las que:

el resto

es independientemente

-Z1-Z2- es -O-CH²- o -CH²-O-;

X1, X²y X³son cada uno independientemente CH o CR6a; y R6a es independientemente halo, hidroxilo, alquilo C¹-⁶, haloalquilo C^1-4o alcoxi C¹-⁴;

el resto

es independientemente

en las que * indica el punto de unión a L; y;

el resto

está unido a la posición con asterisco (*) en las Fórmulas (la) o (Ib);

L es independientemente un enlace covalente o metileno;

el resto

es independientemente

Y⁵independientemente es O o NH;

R¹es CO²H;

R3a y R3b son independientemente hidrógeno o alquilo C¹-⁴;

R4 es -L¹-R4a;

L¹es independientemente un enlace covalente o alquileno C^1-4sustituido con 0 a 4 R9;

R4a es independientemente alquilo C¹-¹⁰, haloalquilo C¹-¹⁰, alquenilo C¹-¹⁰, cicloalquilo C³-⁸, arilo C⁶-¹⁰, heterociclilo de 3 a ⁸miembros, heteroarilo de 5 a ⁶miembros; en donde cada uno del alquilo, alquenilo, alquileno, cicloalquilo, arilo, heterociclilo y heteroarilo, por sí mismo o como parte de otro resto, está independientemente sustituido con de 0 a 3 R10;

R5a es independientemente hidrógeno, haloalquilo C¹-⁴, -(CH²)⁰-¹-(cicloalquilo C³-⁶), -(fenilo CH²A o alquilo C^1-6sustituido con 0 a 3 Ra;

R5b es independientemente hidrógeno, halo, ciano, hidroxilo, amino, alcoxi C-m , haloalquilo C¹-⁴, haloalcoxi C¹-⁴, alquilamino C¹-⁴, -(CH²)⁰-i-(cicloalquilo C³-⁶), -(fenilo CH²)⁰-i o alquilo C^1-6sustituido con de 0 a 3 Rb;

R7 y R8 son cada uno independientemente hidrógeno, alquilo C¹-⁶, haloalquilo C^1.4o cicloalquilo C³-⁶;

cada R⁹es independientemente halo, oxo, ciano, hidroxilo, amino, haloalquilo C¹-⁴, alcoxi C¹.⁴, haloalcoxi C¹.⁴, cicloalquilo C^3-6o alquilo C^1-6sustituido con de 0 a 3 Ra;

cada R10 es independientemente halo, hidroxilo, amino, ciano, alquenilo C²-⁶, alquinilo C²-⁶, alquilamino C¹-⁴, haloalquilo C¹.⁴, alcoxi C¹.⁴, haloalcoxi C¹.⁴, fenilo o heteroarilo de 5 a ⁶miembros, alquilo C^1-6sustituido con de 0 a 3 Rb;

Ra es independientemente halo, ciano, hidroxilo, alcoxi C¹-⁴, haloalquilo C^1.4o haloalcoxi C¹.⁴;

Rb es independientemente halo, ciano, hidroxilo, amino, alcoxi C¹-⁴, haloalquilo C^1.4o haloalcoxi C¹-⁴; y m es un número entero de 0, 1 o 2.

2. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 que es un compuesto de Fórmulas (IIa) o (Ilb):

o un estereoisómero, un tautómero o una sal farmacéuticamente aceptable o un solvato del mismo, en las que:

-Z--Z2- es -O-CH²- o -CH²-O-;

el resto

es independientemente

m es un número entero de 1 o 2;

* indica el punto de unión a L;

L es independientemente un enlace covalente o -CH²-;

el resto

Es independientemente

R⁴es independientemente cicloalquilo C^3-6, -(CH²)-cicloalquilo C^3-6, -(CH(alquil C^i-2))-cicloalquilo C^3-6, -(CH²)-fenilo o -(CH(alquil C^1-2))-fenilo, en donde cada uno de dichos cicloalquilo y fenilo está independientemente sustituido con de 0 a 3 R¹⁰;

R^5aes independientemente alquilo C^1-6o -CH²-(cicloalquilo C^3-6);

R^5bes independientemente hidrógeno, halo, ciano, hidroxilo, alquilo C^1-4, alcoxi C^1.4, haloalquilo C^1.4o haloalcoxi C^1-4;

cada R^6aes independientemente halo, hidroxilo, alquilo C^1-6, haloalquilo C^1.4o alcoxi C^1-4;

R⁷y R⁸son cada uno independientemente hidrógeno o alquilo C^1-2;

cada R¹⁰es independientemente halo, ciano, hidroxilo, alquilo C^1-6, haloalquilo C^1.6, alcoxi C^1.6o haloalcoxi C^1.6; y d es independientemente 0, 1 o 2.

3. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 2, en donde:

el resto

es independientemente

m es un número entero de 1; y

R⁴es independientemente -(CH²)-cicloalquilo C^3-6, -(CH(alquil C^1-2))-cicloalquilo C^3-6, -(CH²)-fenilo o -(CH(alquil C^1.

²))-fenilo, en donde cada uno de dichos cicloalquilo y fenilo está independientemente sustituido con 0 a 2 R¹⁰4. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 que es un compuesto de Fórmulas (Illa) o (IlIb):

en las que: -Z1-Z2- es -O-CH²- o -CH²-O-;

el resto

es independientemente

* indica el punto de unión al átomo de nitrógeno de -NH-C(O)-OR4;

R4 es independientemente -(CH²)-fenilo o -(CH(CH³))-fenilo, en donde dicho fenilo está independientemente sustituido con 0 a 2 R10;

cada R6a es independientemente halo o alquilo C¹-⁴;

cada R¹⁰es independientemente halo, ciano, hidroxilo, alquilo C¹-⁴, haloalquilo C^1-4o alcoxi C¹.⁴; y

d es independientemente ⁰o ¹.

5. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, que se selecciona de entre uno cualquiera de:

ácido 2-(4-(4-(3-metil-4-((((R)-1-feniletoxi)carbonil)amino)isoxazol-5-il)fenil)-2-oxabiciclo [2.2.2]octan-1-il)acético; ácido 2-(4-(4-(1-metil-5-((((R)-1-feniletoxi)carbonil)amino)-1H-pirazol-4-il)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)acético;

ácido 2-(4-(4-(4-(((ciclopentil(metil)carbamoil)oxi)metil)-3-metilisoxazol-5-il)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)acético;

ácido 2-(4-(4-(5-(((ciclopentil(metil)carbamoil)oxi)metil)-1-metil-1H-pirazol-4-il)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)acético;

ácido (±)-3-(4-(4-(5-((((1 -ciclobutiletil)(metil)carbamoil)oxi)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)propanoico;

ácido 2-(4-(4-(5-(((cidopentil(metil)carbamoil)oxi)metil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-fluorofenil)-2-oxabicido[2.2.2]octan-1-il)acético;

ácido 3-(4-(4-(1-metil-5-((((R)-1-femletoxi)carboml)amino)-1H-1,2,3-tnazol-4-il)feml)-2-oxabiciclo[2.2.2]odan-1-il)propanoico;

ácido 3-(4-(4-(5-((((R)-1-(2-clorofeml)etoxi)carboml)amino)-1-metiMH-1,2,3-tnazol-4-il)feml)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)propanoico;

ácido (R)-4-(4-(1-metil-5-(((1-feniletoxi)carbonil)amino)-1H-pirazol-4-il)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octano-1-carboxílico;

ácido (R)-2-(4-(4-(1-(ciclopropilmetil)-5-(((1-femletoxi)carboml)amino)-1H-pirazol-4-il)feml)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)acético;

ácido 2-(4-(4-(4-((((R)-1-ciclopropil-etoxi)carbonil)amino)-3-metil isoxazol-5-il)fenil)-2-oxabiciclo [2.2.2]octan-1-il)acético;

ácido 2-(4-(4-(4-((((R)-1-(2-clorofenil) etoxi)carbonil)amino)-3-metil isoxazol-5-il)fenil)-2-oxabiciclo [2.2.2]octan-1-il)acético;

ácido 2-(4-(4-(3-metil-4-((((R)-1-(o-tolil)etoxi)carbonil)amino)isoxazol-5-il)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)acético;

ácido (±)-2-(4-(2-fluoro-4-(3-metil-4-((((R)-1-feniletoxi)carbonil) ammo)isoxazol-5-il)feml)-2-oxabiciclo[2.2.2]odan-1-il)acético;

ácido (±)-2-(4-(4-(4-(((1-(3-clorofenil) etoxi) carbonil)amino)-3-metil-isoxazol-5-il)fenil)-2-oxabiciclo [2.2.2]octan-1-il)acético;

ácido 2-(4-(4-(4-((((R)-1-ciclopropil etoxi)carbonil)amino)-3-metil isoxazol-5-il)-2-fluorofeml)-2-oxabiciclo[2.2.2]odan-1-il)acético;

ácido 2-(4-(2-fluoro-4-(3-metil-4-((((R)-1-(o-tolil)etoxi)carbonil) amino) isoxazol-5-il)fenil)-2-oxabiciclo [2.2.2]octan-1-il)acético;

ácido 2-(4-(4-(4-((((R)-1-(2-clorofenil) etoxi)carbonil)amino)-3-metil-isoxazol-5-il)-2-fluorofenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)acético;

ácido (±)-2-(4-(4-(4-(((1-(3-clorofenil) etoxi)carbonil)amino)-3-metil-isoxazol-5-il)-2-fluorofenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)acético;

ácido 2-(4-(4-(4-((((R)-1-ciclopropil etoxi)carbonil)amino)-3-metil isoxazol-5-il)-3-fluorofenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)acético;

ácido 2-(4-(3-fluoro-4-(3-metil-4-((((R)-1-feniletoxi)carbonil)amino)isoxazol-5-il)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)acético;

ácido 2-(4-(4-(4-((((R)-1-(2-clorofenil) etoxi)carbonil)amino)-3-metil isoxazol-5-il)-3-fluorofenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)acético;

ácido 2-(4-(3-fluoro-4-(3-metil-4-((((R)-1-(o-tolil)etoxi)carbonil) amino) isoxazol-5-il)fenil)-2-oxabiciclo [2.2.2]octan-1-il)acético;

ácido (±)-2-(4-(4-(4-(((1-(4-clorofenil) etoxi)carbonil)amino)-3-metilisoxazol-5-il)-3-fluorofenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)acético;

ácido (±)-2-(4-(4-(4-(((1-(3-clorofenil) etoxi)carbonil)amino)-3-metil-isoxazol-5-il)-3-fluorofenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)acético;

ácido (±)-2-(4-(3-metil-4-(3-metil-4-((((R)-1-(o-tolil)etoxi)carbonil) amino)isoxazol-5-il)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)acético;

ácido 2-(4-(4-(4-((((R)-1-(2-clorofenil) etoxi)carbonil)amino)-3-metil-isoxazol-5-il)-3-metilfenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)acético;

ácido 2-(4-(4-(5-((((R)-1-(2-clorofenil) etoxi)carbonil)amino)-1-metil-1H-pirazol-4-il)fenil)-2-oxa-biciclo[2.2.2]octan-1-il)acético;

ácido (±)-2-(4-(4-(5-(((1-(4-clorofenil) etoxi)carbonil)amino)-1-metil-1H-pirazol-4-il)-2-fluorofenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)acético;

ácido 2-(4-(2-fluoro-4-(1-metil-5-((((R)-1-feniletoxi)carbonil)amino)-1H-pirazol-4-il)fenil)-2-oxabiciclo [2.2.2] octan-1-il)acético;

ácido 2-(4-(4-(5-((((R)-1-(2-clorofenil)etoxi)carbonil)amino)-1-metil-1H-pirazol-4-il)-2-fluorofenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)acético;

ácido 2-(4-(4-(5-((((R)-1-(2-clorofenil) etoxi)carbonil)amino)-1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-fluorofenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)acético;

ácido 2-(4-(4-(5-((((R)-1-(2-clorofenil) etoxi)carbonil)amino)-1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-metilfenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)acético;

ácido 2-(4-(4-(4-((((ciclobutil metil) (metil)carbamoil)oxi)metil)-3-metilisoxazol-5-il)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)acético;

ácido 2-(4-(4-(4 2-(4-(4-(4-((((ciclobutil-metil) carbamoil)oxi)metil)-3-metilisoxazol-5-il)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)acético;

ácido (rac)-2-(4-(4-(5-((((1-ciclopropil-etil)(metil)carbamoil)oxi)metil)-1-metil-1H-pirazol-4-il)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)acético;

ácido (rac)-2-(4-(4-(5-((((1-ciclobutil-etil)(metil)carbamoil)oxi)metil)-1-metil-1H-pirazol-4-il)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)acético;

ácido 2-(4-(4-(5-(((isopentil(metil) carbamoil)oxi)metil)-1-metil-1H-pirazol-4-il) fenil)-2-oxabiciclo [2.2.2] octan-1-il)acético;

ácido 2-(4-(4-(5-(((bencil(metil) carbamoil)oxi)metil)-1-metil-1H-pirazol-4-il)fenil)-2-oxabicido [2.2.2]octan-1-il)acético;

ácido 2-(4-(4-(5-((((4-clorofenetil) (metil)carbamoil)oxi)metil)-1-metiMH-pirazol-4-il)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)acético;

ácido 2-(4-(4-(5-(((ciclopentil(metil) carbamoil)oxi)metil)-1-metil-1H-pirazol-4-il)-2-fluorofenil)-2-oxabiciclo [2.2.2] octan-1-il)acético;

ácido 2-(4-(2-fluoro-4-(5-(((isopentil (metil) carbamoil)oxi)metil)-1-metiMH-pirazol-4-il)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)acético;

ácido 2-(4-(4-(5-(((ciclopentil(metil) carbamoil)oxi)metil)-1-metiMH-pirazol-4-il)-3-fluorofenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)acético;

ácido 2-(4-(3-fluoro-4-(5-(((isopentil(metil)carbamoil)oxi)metil)-1-metiMH-pirazol-4-il)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)acético;

ácido 2-(1-(4-(3-metil-5-((((R)-1-feniletoxi)carbonil)amino)isoxazol-4-il)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-4-il)acético; ácido 2-(1-(4-(4-((((R)-1-ciclopropiletoxi) carbonil)amino)-3-metilisoxazol-5-il)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-4-il)acético;

ácido 2-(1-(4-(4-((((R)-1-(2-clorofenil) etoxi)carbonil)amino)-3-metil-isoxazol-5-il)fenil)-2-oxabiciclo [2.2.2] octan-4-il)acético;

ácido 2-(1-(4-(3-metil-4-((((R)-1-(o-tolil) etoxi)carbonil)amino)isoxazol-5-il) fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-4-il)acético;

ácido 2-(1-(2-fluoro-4-(3-metil-4-((((R)-1-feniletoxi)carbonil)amino)isoxazol-5-il)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan -4-il)acético;

ácido 2-(1-(4-(4-((((R)-1-ciclopropiletoxi) carbonil)amino)-3-metilisoxazol-5-il)-2-fluorofenil)-2-oxabiciclo [2.2.2] octan-4-il)acético;

ácido 2-(1-(4-(4-((((R)-1-(2-fluorofenil) etoxi)carbonil)amino)-3-metil-isoxazol-5-il)fenil)-2-oxabiciclo [2.2.2]octan-4-il)acético;

ácido 2-(1-(4-(4-(((ciclopentil(metil)carbamoil)oxi)metil)-3-metilisoxazol-5-il)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-4-il)acético;

ácido (R)-2-(4-(4-(3-metil-4-(((1-feniletoxi)carbonil)amino)isoxazol-5-il)-2-oxabiciclo[2.2.2] octan-1-il)fenil)acético; ácido (R)-2-(4-(4-(4-(((1-ciclopropiletoxi)carbonil)amino)-3-metil-isoxazol-5-il)-2-oxabiciclo [2.2.2] octan-1-il)fenil)acético;

ácido (R)-2-(4-(4-(4-(((1-(2-clorofenil) etoxi)carbonil)amino)-3-metilisoxazol-5-il)-2-oxabiciclo [2.2.2] octan-1-il)fenil)acético;

ácido 2-(4-(2-fluoro-4-(3-metil-4-((((R)-1-feniletoxi)carbonil)amino)isoxazol-5-il)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)acético;

ácido 3-(1-(4-(3-metil-4-((((R)-1-feniletoxi)carbonil)amino)isoxazol-5-il)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-4-il)propanoico;

ácido 2-(4-(3-(4-((((R)-1-(2-clorofenil)etoxi)carbonil)amino)-3-metilisoxazol-5-il)fenil)-2-oxabiciclo[2.2.2]octan-1-il)acético;

o un estereoisómero, un tautómero o una sal farmacéuticamente aceptable o un solvato del mismo.

6. Una composición farmacéutica que comprende uno o más compuestos de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 o un estereoisómero, un tautómero o una sal farmacéuticamente aceptable o un solvato del mismo; y un vehículo o un diluyente farmacéuticamente aceptable.

7. Un compuesto o un estereoisómero, un tautómero o una sal farmacéuticamente aceptable o un solvato del mismo, de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, o una composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 6, para su uso en terapia

8. Un compuesto o un estereoisómero, un tautómero o una sal farmacéuticamente aceptable o un solvato del mismo, de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, o una composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 6, para su uso en el tratamiento de una enfermedad, un trastorno o una afección asociados a la desregulación del receptor del ácido lisofosfatídico 1 (LPA1), en donde la enfermedad, el trastorno o la afección están relacionados con fibrosis patológica, rechazo de trasplante, cáncer, osteoporosis o trastornos inflamatorios.

9. El compuesto o la composición para su uso de acuerdo con la reivindicación 8, en donde la fibrosis patológica es fibrosis pulmonar, hepática, renal, cardíaca, dernal, ocular o pancreática.

10. El compuesto o la composición para su uso de acuerdo con la reivindicación 8, en donde la enfermedad, el trastorno o la afección son fibrosis pulmonar idiopática (IPF), esteatohepatitis no alcohólica (NASH), enfermedad de hígado graso no alcohólica (NAFLD), enfermedad renal crónica, enfermedad renal diabética y esclerosis sistémica.

11. El compuesto o la composición para su uso de acuerdo con la reivindicación 8, en donde el cáncer es de vejiga, sangre, hueso, cerebro, mama, sistema nervioso central, cuello del útero, colon, endometrio, esófago, vesícula biliar, genitales, tracto genitourinario, cabeza, riñón, laringe, hígado, pulmón, tejido muscular, cuello, mucosa oral o nasal, ovario, páncreas, próstata, piel, bazo, intestino delgado, intestino grueso, estómago, testículo o tiroides.

12. El compuesto o un estereoisómero, un tautómero o una sal farmacéuticamente aceptable o un solvato del mismo, de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, o una composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 6, para su uso en el tratamiento de fibrosis en un mamífero, comprendiendo el uso administrar una cantidad terapéuticamente eficaz del compuesto o de la composición farmacéutica al mamífero que lo necesita.

13. El compuesto o la composición para su uso de acuerdo con la reivindicación 12, en donde la fibrosis es fibrosis pulmonar idiopática (PF), esteatohepatitis no alcohólica (NASH), enfermedad renal crónica, enfermedad renal diabética y esclerosis sistémica.

14. Un compuesto o un estereoisómero, un tautómero o una sal farmacéuticamente aceptable o un solvato del mismo, de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, o una composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 6, para su uso en el tratamiento de fibrosis pulmonar (fibrosis pulmonar idiopática), asma, enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC), fibrosis renal, lesión renal aguda, enfermedad renal crónica, fibrosis hepática (esteatohepatitis no alcohólica), fibrosis cutánea, fibrosis del intestino, cáncer de mama, cáncer de páncreas, cáncer de ovario, cáncer de próstata, glioblastoma, cáncer de huesos, cáncer de colon, cáncer de intestino, cáncer de cabeza y cuello, melanoma, mieloma múltiple, leucemia linfocítica crónica, dolor por cáncer, metástasis tumoral, rechazo de trasplante de órgano, esclerodermia, fibrosis ocular, degeneración macular relacionada con la edad (AMD), retinopatía diabética, enfermedad vascular por colágeno, aterosclerosis, fenómenos de Raynaud o dolor neuropático en un mamífero, comprendiendo el uso administrar una cantidad terapéuticamente eficaz del compuesto o de la composición farmacéutica al mamífero que lo necesita.