ES2927959T3 - Compuestos de imidazol heterocíclicos, composiciones farmacéuticas de los mismos, método de preparación de los mismos y uso de los mismos - Google Patents

Compuestos de imidazol heterocíclicos, composiciones farmacéuticas de los mismos, método de preparación de los mismos y uso de los mismos Download PDF

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Abstract

La presente invención se refiere a un derivado de imidazol heterocíclico, un método de preparación del mismo y un uso médico del mismo, y en particular a un nuevo derivado de imidazol heterocíclico de fórmula general (I), un método de preparación del mismo, una composición farmacéutica que comprende el mismo, y uso del mismo como agente terapéutico, particularmente como inhibidor de poli(ADP-ribosa) polimerasa (PARP). (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN
Compuestos de imidazol heterocíclicos, composiciones farmacéuticas de los mismos, método de preparación de los mismos y uso de los mismos
Antecedentes
Campo técnico
La presente invención se refiere a un derivado de imidazol heterocíclico, un método de preparación, una composición farmacéutica que lo contiene y al uso del mismo como agente terapéutico e inhibidor de la poli(ADP-ribosa) polimerasa (PARP).
Técnica relacionada
Los antineoplásicos y la radiación ionizante son dos medios habitualmente utilizados en el tratamiento del cáncer. Ambas terapias producen escisión en la hebra monocatenaria o bicatenaria del ADN, y ejercen de este modo un efecto citotóxico que da como resultado la muerte de las células tumorales diana debido a daños en el cromosoma. En respuesta a los daños en el ADN, una consecuencia importante es la activación de la señalización de los puntos de regulación del ciclo celular para proteger las células frente a la mitosis en caso de daños en el ADN, evitando así el daño celular. En la mayoría de los casos, las células tumorales tienen una alta tasa de proliferación aunque muestran al mismo tiempo deficiencias en la señalización de los puntos de regulación del ciclo celular. Por tanto, puede inferirse que existe un mecanismo específico de reparación del ADN en las células tumorales que puede responder rápidamente y reparar los daños en el cromosoma asociados con la regulación de la proliferación, de manera que las células tumorales sobreviven al efecto citotóxico de algunos agentes terapéuticos.
En el uso clínico, la concentración del antineoplásico o la intensidad de la radiación es eficaz para contrarrestar el mecanismo de reparación del ADN, para asegurar el efecto de destrucción sobre las células tumorales diana. Sin embargo, se puede desarrollar resistencia al tratamiento en las células tumorales a través de un mecanismo reforzado de reparación de los daños en el ADN, de manera que las células tumorales sobreviven a daños letales en el ADN. Para superar el desarrollo de resistencia, se requiere generalmente que la dosis del agente terapéutico o la intensidad de la radiación estén potenciadas. Esto tiene un efecto perjudicial sobre los tejidos normales alrededor de la lesión, por lo cual, durante el tratamiento, están implicados graves efectos adversos, y el riesgo del tratamiento aumenta. Mientras tanto, el efecto terapéutico disminuye con el aumento de la resistencia. Por lo tanto, puede inferirse que puede aumentarse el efecto citotóxico del agente que daña el ADN de una manera específica de la célula tumoral regulando el mecanismo de reparación y señalización del daño del ADN.
Las poli(ADP-ribosa)polimerasas (PARP) caracterizadas por una actividad de poli(ADP-ribosil)ación constituyen una superfamilia 18 enzimas intranucleares y citoplásmicas. A través de esta poli(ADP-ribosil)ación se pueden modular la actividad catalítica de las proteínas diana y las interacciones entre proteínas, y se regulan algunos procesos biológicos fundamentales, incluyendo la reparación del ADN, y la muerte celular. Además, la estabilidad genómica está correlacionada con la poli(ADP-ribosil)ación.
La actividad de PARP-1 representa aproximadamente el 80 % de la actividad total de PARP en las células. Las PARP-1 y PARP-2 más cercanas a lo anterior son miembros de la familia PARP que tienen la capacidad de reparar los daños en el ADN. Como proteína de detección y señalización de daños en el ADN, PARP-1 puede detectar rápidamente y unirse directamente al sitio dañado del ADN, seguido por inducir la agregación de numerosas proteínas necesarias para la reparación del ADN, de tal manera que se repara el daño en el ADN. Cuando hay deficiencia de PARP-1 en las células, PARP-2 tiene la capacidad de reparar daños en el ADN en lugar de PARP-1. Los estudios muestran que, en comparación con las células normales, las PARP se expresan a un nivel generalmente mayor en tumores sólidos. Además, los cánceres (por ejemplo, cáncer de mama y cáncer de ovario) que son deficientes en genes relacionados con la reparación del a Dn (por ejemplo, BRCA-1 o BRCA-2) son extremadamente sensibles al inhibidor de PARP-1, indicando que el inhibidor de PARP, como agente terapéutico individual, es potencialmente útil en el tratamiento del cáncer de mama triple negativo. Además, como el mecanismo de reparación del daño en el ADN es un mecanismo principal a través del cual se ha desarrollado una resistencia en las células tumorales que contrarresta el antineoplásico y la radiación ionizante. De acuerdo con ello, se considera que PARP-1 es una diana de interés en la búsqueda de un nuevo método para el tratamiento del cáncer.
Los inhibidores de PARP que se han desarrollado y diseñado anteriormente son análogos que se han desarrollado con la nicotinamida de nA d , que es un sustrato de tipo molde para PARP. Estos inhibidores son inhibidores competitivos de NAD, que compiten con NAD por los sitios catalíticos de PARP, impidiendo de este modo la síntesis de la cadena de poli(ADP-ribosa). Sin la modificación con la poli(ADP-ribosil)ación, PARP no se puede escindir del sitio de ADN dañado, de manera que el resto de proteínas implicadas en la reparación no pueden acceder al sitio dañado y por tanto, no se puede llevar a cabo el proceso de reparación. Así, por el ataque de agentes citotóxicos o radiación, la presencia del inhibidor de PARP conduce en último extremo a la destrucción de las células tumorales con ADN alterado.
Además el NAD, consumido como sustrato de PARP, es esencial para la síntesis de ATP en las células. A un elevado nivel de actividad de PARP, el nivel de NAD intracelular disminuye drásticamente, afectando de este modo al nivel de ATP en las células. Debido al contenido inadecuado de ATP en las células, las células fracasan en llevar a cabo la muerte celular programada dependiente de ATP, y tienen que recurrir a la necrosis, un proceso especial de apoptosis. Durante la necrosis se libera una gran cantidad de factores inflamatorios, produciendo un efecto tóxico para otros órganos y tejidos. Por lo tanto, el inhibidor de PARP puede encontrar uso en el tratamiento de muchas enfermedades asociadas con dicho mecanismo, incluyendo enfermedades neurodegenerativas, (por ejemplo, demencia senil, enfermedad de Huntington y enfermedad de Parkinson), diabetes, isquemia o complicaciones durante la revascularización por isquemia, por ejemplo, infarto de miocardio e insuficiencia renal aguda, enfermedades del sistema circulatorio, por ejemplo choque septicémico, y enfermedades inflamatorias tales como reumatismo crónico.
Entre un total 14 inhibidores de PARP en investigación clínica, la FDA ha homologado AZD2281 (con la fórmula estructural siguiente), desarrollado por AstraZeneca en diciembre de 2014 para tratar pacientes con cáncer de ovario en estado terminal con indicaciones que responden a quimioterapia basada en platino. Solicitudes de patente relevantes incluyen los documentos WO2002036576 y WO2006021801.
Figure imgf000003_0001
El documento CN104003940 describe un compuesto de 2,4-difluoro-5-(ftalazona-1-metil)-benzoilpiperazina que tiene un efecto inhibidor de la actividad de PARP y un efecto antitumoral. En particular, este documento da a conocer un compuesto con dos sustituyentes halógeno en la parte fenilo y un 1,2-benzotiazol unido a la parte piperazina:
Figure imgf000003_0002
El documento US2008/0269234A1 describe un inhibidor de PARP y, entre otras posibilidades, este documento da a conocer un compuesto con un único sustituyente en la parte fenilo y un sistema de anillo bicíclico unido a la parte piperazina a través de un grupo carbonilo, como se muestra a continuación:
Figure imgf000004_0001
Aunque en la actualidad se ha dado a conocer una serie de inhibidores de PARP, sigue existiendo la necesidad de desarrollar un nuevo compuesto con una eficacia mayor, mejores propiedades farmacocinéticas y menor toxicidad. T ras incansables esfuerzos, la presente invención se refiere a un compuesto de Fórmula general (I) y se ha encontrado que el compuesto que tiene dicha estructura presenta excelentes efectos y acciones.
Sumario
Un primer objetivo de la presente invención es proporcionar un nuevo compuesto de imidazol heterocíclico de Fórmula general (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
La descripción se refiere a un método para preparar el compuesto de imidazol heterocíclico, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
La descripción se refiere también a un compuesto intermedio útil en la preparación del compuesto de imidazol heterocíclico, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
La descripción se refiere además a un método para preparar el compuesto intermedio útil en la preparación del compuesto de imidazol heterocíclico, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
La descripción se refiere al uso del compuesto intermedio en la preparación del compuesto de Fórmula general (I) y un derivado del mismo.
Otro objetivo de la presente invención es proporcionar una composición farmacéutica que comprende el compuesto de imidazol heterocíclico, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, como principio activo.
Otro objetivo de la presente invención es proporcionar el uso del compuesto de imidazol heterocíclico, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la preparación de fármacos.
En un primer aspecto de la presente invención, se proporciona un compuesto de imidazol heterocíclico de Fórmula general (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo:
Figure imgf000004_0002
donde en la Fórmula general (I)
R es hidrógeno, halo, alcoxi C1-C6 o haloalquilo C1-C6 ;
R2 es:
a)
Figure imgf000005_0001
, en el que
uno de X, Y, y Z es nitrógeno, y el resto son CH; o uno de X, Y, y Z es CH, y el resto son nitrógeno; y M es nitrógeno o CRi, en el que
Ri es hidrógeno, alquilo C1-C6 o haloalquilo C1-C6 ; o
b)
Figure imgf000005_0002
, en el que
uno de X, Y, y Z es nitrógeno, y el resto son CH; o uno de X, Y, y Z es CH, y el resto son nitrógeno; y M es CR1 , en el que
R1 es oxo.
Además, preferentemente, en el compuesto de Fórmula general (I) proporcionado en la presente invención R es hidrógeno, fluoro, metoxi o trifluorometilo;
en el que, cuando R2 es:
a)
Figure imgf000005_0003
uno de X, Y, y Z es nitrógeno, y el resto son CH; o uno de X, Y, y Z es CH, y el resto son nitrógeno; y M es nitrógeno o CR1, en el que
R1 es hidrógeno, metilo o trifluorometilo o
b)
Figure imgf000005_0004
, en el que
uno de X, Y, y Z es nitrógeno, y el resto son CH; o uno de X, Y, y Z es CH, y el resto son nitrógeno; y M es CRi, en el que
Ri es oxo.
En una realización específica de la presente invención, se proporciona un compuesto de Fórmula general (I), en el que R es hidrógeno, halo, alcoxi C1-C3 o haloalquilo C1-C3.
En una realización específica de la presente invención, se proporciona un compuesto de Fórmula general (I) en el que R es hidrógeno, fluoro, metoxi o trifluorometilo.
En una realización específica de la presente invención, se proporciona un compuesto de Fórmula general (I), en el que R2 es:
a)
Figure imgf000006_0001
o
b)
Figure imgf000006_0002
en el que X y Z son nitrógeno, e Y es CH; o X es nitrógeno, e Y y Z son CH; o Z es nitrógeno, y X e Y son CH; o Y es nitrógeno, y X y Z son CH.
En una realización específica de la presente invención, se proporciona un compuesto de Fórmula general (I), en el que R2 es:
a)
Figure imgf000006_0003
en el que M es nitrógeno o CR1, en el que R1 es hidrógeno, alquilo C1-C6 o haloalquilo C1-C6 o
b)
Figure imgf000006_0004
en el que M es CR1, en el que R1 es oxo.
En una realización específica de la presente invención, se proporciona un compuesto de Fórmula general (I), en el que R2 es:
a)
Figure imgf000007_0001
en el que M es nitrógeno o CRi, en el que Ri es hidrógeno, alquilo C1-C3 o haloalquilo C1-C3 ;
o
b)
Figure imgf000007_0002
en el que M es CR1, en el que R1 es oxo.
En una realización específica de la presente invención, se proporciona un compuesto de Fórmula general (I), en el que R2 es:
a)
Figure imgf000007_0003
en el que M es nitrógeno o CR1, en el que R1 es hidrógeno, metilo o trifluorometilo; o
b)
Figure imgf000007_0004
en el que M es CR1, en el que R1 es oxo.
En una realización preferida de la presente invención, el compuesto de imidazol heterocíclico de Fórmula general (I) es un compuesto 4-(3-(piperazin-1-carbonil)bencil)ftalazin-1(2H)-ona y una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
Lo más preferente, el compuesto de Fórmula general (I) de acuerdo con la presente invención se selecciona entre el grupo que consiste en los compuestos (1) a (21) siguientes:
Figure imgf000008_0001
Figure imgf000009_0001
Figure imgf000010_0001
El compuesto de Fórmula general (I) está en la forma de un tautómero, un enantiómero, un diastereómero, un mesómero, un racemato, y una mezcla de los mismos.
El compuesto de Fórmula general (I) es un derivado farmacéuticamente aceptable.
El compuesto de Fórmula general (I) de acuerdo con la presente invención puede existir como una sal farmacéuticamente aceptable. De acuerdo con la descripción, se proporciona un método para preparar el compuesto de Fórmula general (I). El esquema de reacción es de la siguiente manera:
Figure imgf000011_0001
donde R, X, Y, Z y M son como se ha definido anteriormente; y R2 es hidroxilo, halo, o biimidazol-1-ilo. El método comprende específicamente:
condensar un Compuesto intermedio (V) con un derivado de ácido ftalazincarboxílico (VI) para producir un compuesto de Fórmula general (I).
De acuerdo con la descripción, se preparó el Compuesto intermedio (V) mediante un proceso que comprende:
Etapa 1): someter una piperazina monoprotegida a una sustitución nucleofílica con un haluro heterocíclico sustituido con un grupo amino o nitro, para obtener un Compuesto intermedio (II);
Etapa 2): hidrogenar catalíticamente el Compuesto intermedio (II) para reducir el grupo nitro con el fin de obtener un Compuesto intermedio (III);
Etapa 3): ciclar el Compuesto intermedio (III) con anhídrido acético, anhídrido trifluoroacético, ortoformiato de trimetilo, carbonil diimidazol o un compuesto de azida, para obtener un Compuesto intermedio (IV); y Etapa 4): desproteger el grupo amino del Compuesto intermedio (IV) para obtener un Compuesto intermedio (V).
Se muestra a continuación el esquema de reacción:
Figure imgf000011_0002
donde P es un grupo protector de amino, y uno de X, Y, y Z es nitrógeno, y el resto son CH; o uno de X, Y, y Z es CH, y el resto son nitrógeno;
M es nitrógeno o CR1;
R1 es hidrógeno, oxígeno, metilo o trifluorometilo.
En una realización específica de la presente invención, se proporciona un compuesto de Fórmula general (I), en el que X y Z son nitrógeno, Y es CH; o X es nitrógeno, e Y y Z son CH; o Z es nitrógeno, y X e Y son CH; o Y es nitrógeno, y X y Z son CH.
De acuerdo con la descripción, se proporciona un compuesto de Fórmula general (I), en el que R1 es hidrógeno, oxígeno, alquilo C1-C6 o haloalquilo C1-C6.
De acuerdo con la descripción, se proporciona un compuesto de Fórmula general (I), en el que R1 es hidrógeno, oxígeno, alquilo C1-C3 o haloalquilo C1-C3.
De acuerdo con la descripción, se proporciona un compuesto de Fórmula general (I), en el que R1 es hidrógeno, oxígeno, metilo o trifluorometilo.
Preferentemente, de acuerdo con la descripción, el derivado de ácido ftalazincarboxílico (VI) es un compuesto que se muestra a continuación:
Figure imgf000012_0001
Preferentemente, el Compuesto intermedio V es un compuesto que se muestra a continuación:
Figure imgf000012_0002
De acuerdo con la invención, el agente de condensación usado en la reacción de condensación se selecciona entre el grupo que consiste en 1,1’-carbonil diimidazol, clorhidrato de 1-etil-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida, hexafluorofosfato de 2-(7-azabenzotriazolil)-N,N,N’,N’-tetrametiluronio, y hexafluorofosfato de benzotriazol-N,N,N’,N’-tetrametiluronio.
De acuerdo con la descripción, el disolvente usado en la reacción de condensación se selecciona entre el grupo que consiste en diclorometano, acetato de etilo, dimetilsulfóxido, tetrahidrofurano, dimetilformamida, dimetilacetamida, N-metilpirrolidona, y acetona.
De acuerdo con la descripción, se añade una base orgánica o inorgánica a la reacción de condensación.
De acuerdo con la descripción, la base orgánica se selecciona entre el grupo que consiste en trietilamina, dietilamina, diisopropiletilamina, y piperidina.
De acuerdo con la descripción, el Compuesto intermedio (III) se cicla con nitrito de sodio, anhídrido acético, anhídrido trifluoroacético, ortoformiato de trimetilo o un compuesto de azida, para obtener el Compuesto intermedio (IV).
De acuerdo con la descripción, el Compuesto intermedio (III) se cicla con anhídrido acético, anhídrido trifluoroacético, ortoformiato de trimetilo o azida de sodio, para obtener el Compuesto intermedio (IV).
De acuerdo con la descripción, se proporciona un compuesto intermedio para preparar un compuesto de imidazol heterocíclico de Fórmula general (I) que es un compuesto de Fórmula estructural (V):
Figure imgf000013_0001
uno de X, Y, y Z es nitrógeno, y el resto son CH; o uno de X, Y, y Z es CH, y el resto son nitrógeno; y M es nitrógeno o CR1, en el que
R1 es hidrógeno, oxígeno, alquilo, alcoxi o haloalquilo.
De acuerdo con la descripción, X y Z son nitrógeno, y Y es CH; o X es nitrógeno, y Y y Z son CH; o Z es nitrógeno, y X y Y son CH; o Y es nitrógeno, y X y Z son CH.
De acuerdo con la descripción, R1 es hidrógeno, oxígeno, alquilo C1-C6 o haloalquilo C1-C6.
De acuerdo con la descripción, R1 es hidrógeno, oxígeno, alquilo C1-C3 o haloalquilo C1-C3.
De acuerdo con la descripción, R1 es hidrógeno, oxígeno, metilo o trifluorometilo.
De forma particularmente preferente, el Compuesto intermedio (V) es un compuesto que se muestra a continuación:
Figure imgf000013_0002
De acuerdo con la descripción, se proporciona un método para preparar el Compuesto intermedio (V), que comprende:
Etapa 1): someter una piperazina monoprotegida a sustitución nucleofílica con un haluro heterocíclico sustituido con un grupo amino o nitro, para obtener un Compuesto intermedio (II);
Etapa 2): hidrogenar catalíticamente el Compuesto intermedio (II) para reducir el grupo nitro, con el fin de obtener un Compuesto intermedio (III);
Etapa 3): ciclar el Compuesto intermedio (III) con nitrito de sodio, anhídrido acético, anhídrido trifluoroacético, ortoformiato de trimetilo o un compuesto de azida, para obtener un Compuesto intermedio (IV); y
Etapa 4): desproteger el grupo amino del Compuesto intermedio (IV) para obtener un Compuesto intermedio (V).
Se muestra a continuación el esquema de reacción:
Figure imgf000014_0001
donde P es un grupo protector de amino; uno de X, Y, y Z es nitrógeno, y el resto son CH; o uno de X, Y, y Z es CH, y el resto son nitrógeno; y M es nitrógeno o CR1, en el que R1 es hidrógeno, oxígeno, metilo o trifluorometilo.
De acuerdo con la descripción, el Compuesto intermedio (III) se cicla con anhídrido acético, anhídrido trifluoroacético, ortoformiato de trimetilo o azida de sodio, para obtener el Compuesto intermedio (IV).
De acuerdo con la descripción, se proporciona el uso del Compuesto intermedio (V) en la preparación del compuesto de Fórmula general (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
En un aspecto adicional de la presente invención, se proporciona una composición farmacéutica, que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de Fórmula general I o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo como principio activo, y uno o más vehículos, excipientes y/o diluyentes farmacéuticamente aceptables La composición farmacéutica se formula en comprimidos, cápsulas, una suspensión acuosa, una suspensión oleosa, un polvo dispersable, gránulos, pastillas para chupar, una emulsión, un jarabe, una crema, supositorios o inyecciones. En la composición farmacéutica, el compuesto de Fórmula general (I) se encuentra en forma libre.
En un aspecto adicional de la presente invención, se proporciona el uso del compuesto de Fórmula general (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en la preparación de fármacos para tratar enfermedades que mejoran mediante la inhibición de la actividad de PARP.
En un aspecto adicional de la presente invención, se proporciona el uso de la composición farmacéutica en la preparación de fármacos para tratar enfermedades que mejoran mediante la inhibición de la actividad de PARP. Las enfermedades que mejoran mediante la inhibición de la actividad de PARP incluyen enfermedades vasculares, choque septicémico, lesión isquémica, síntomas neurotóxicos, choque hemorrágico, enfermedad inflamatoria, esclerosis múltiple, enfermedades neurodegenerativas, o diabetes. Se han llevado a cabo estudios sobre la relación entre las enfermedades y la actividad de PARP por Cantoni et al. (Biochim. Biophys. Acta, 1989, 1014: 1-7) y Liaudet et al (Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 97(3), 2000, 97(3): 10203-10208).
De acuerdo con la presente invención, se proporciona el uso del compuesto de Fórmula general (I) en la preparación de fármacos complementarios para tratar tumores.
De acuerdo con la presente invención, se proporciona el uso del compuesto de Fórmula general (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en la preparación de fármacos complementarios para tratar tumores.
De acuerdo con la presente invención, se proporciona el uso de la composición farmacéutica en la preparación de fármacos complementarios para tratar el cáncer.
De acuerdo con la presente invención, se proporciona el uso del compuesto de Fórmula general (I) en la preparación de antineoplásicos para tratar el cáncer o fármacos para reforzar la radioterapia contra el cáncer.
De acuerdo con la presente invención, se proporciona el uso del compuesto de Fórmula general (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en la preparación de antineoplásicos para tratar el cáncer o fármacos para reforzar la radioterapia contra el cáncer.
De acuerdo con la presente invención, se proporciona el uso de la composición farmacéutica en la preparación de antineoplásicos para tratar el cáncer o fármacos para reforzar la radioterapia contra el cáncer.
De acuerdo con la presente invención, se proporciona el uso del compuesto de Fórmula general (I) en la preparación de fármacos para tratar a un sujeto con un cáncer que es deficiente en la reparación por escisión del ADN bicatenario (DSB) dependiente de recombinación homóloga (HR).
De acuerdo con la presente invención, se proporciona el uso del compuesto de Fórmula general (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en la preparación de fármacos para tratar a un sujeto con un cáncer que es deficiente en la reparación por escisión del ADN bicatenario (DSB) dependiente de recombinación homóloga (HR).
De acuerdo con la presente invención, se proporciona el uso de la composición farmacéutica en la preparación de fármacos para tratar a un sujeto con un cáncer que es deficiente en la reparación por escisión del ADN bicatenario (DSB) dependiente de recombinación homóloga (HR).
Preferentemente, el cáncer es deficiente en la reparación por escisión del ADN bicatenario (DSB) dependiente de recombinación homóloga (HR).
Preferentemente, el cáncer comprende una o más células cancerosas que tienen una capacidad reducida o suprimida en la reparación por escisión del ADN bicatenario dependiente de recombinación homóloga con respecto a células normales.
Preferentemente, el cáncer tiene un fenotipo mutante deficiente en BRCA-1 o BRCA-2. Además, preferentemente, el cáncer es un cáncer mutante deficiente en BRCA1 o/y BRCA2.
Preferentemente, el cáncer es un cáncer de mama, ovario, páncreas, próstata, rectal, de colon o cáncer de mama.
Para examinar el grado de inhibición de los compuestos proporcionados en la presente invención sobre la enzima PARP, se determina la actividad de los compuestos de la presente invención para la enzima PARP mediante el ensayo biológico de actividad de la enzima.
PARP es una enzima responsable de modificaciones posteriores a la traducción, que puede activarse mediante el daño del ADN. El proceso catalizado por PARP in vivo es principalmente una poli(ADP-ribosil)ación dependiente de NAD, en la que los sustratos son principalmente algunas proteínas nucleares que incluyen PARP, un ejemplo de las cuales es histona. En la presente invención se sometió a ensayo la actividad de PARp determinando el grado de poli(ADP-ribosil)ación de histona revestida en una placa de 96 pocillos en presencia de NAD, y la actividad de PARP con la acción de un inhibidor de PARP se sometió a ensayo de manera correspondiente, evaluando de este modo el grado de inhibición de los compuestos sobre la actividad de PARP.
Descripción detallada
A partir de ahora en el presente documento, la presente invención se describe adicionalmente con referencia a los ejemplos; sin embargo, el alcance de la presente invención no está limitado a los mismos.
Los métodos experimentales, cuando no se proporcionan condiciones específicas en los ejemplos de la presente invención, se llevan a cabo de acuerdo con condiciones convencionales, o de acuerdo con las condiciones recomendadas por el fabricante de la materia prima o el producto. Los reactivos para los cuales no se señalan fuentes específicas son reactivos convencionales comercialmente disponibles en el mercado.
Los términos usados en la descripción y en las reivindicaciones tienen los siguientes significados, salvo que se indique de otra manera.
En la presente invención, el término «alquilo C1-C6» se refiere a un grupo hidrocarbilo monovalente saturado, lineal o ramificado que tiene de 1 a 6 átomos de carbono. Los ejemplos incluyen, aunque no de forma limitativa, metilo, etilo, propilo, isopropilo, n-butilo, iso- butilo y t-butilo.
El término «haloalquilo C1-C6» se refiere a un grupo hidrocarbilo monovalente saturado, lineal o ramificado que tiene 1 a 6 átomos de carbono en el que los átomos de hidrógeno están parcial o totalmente sustituidos por átomos de halógeno.
El término «alcoxi C1-C6» se refiere a un grupo hidrocarbilo monovalente saturado, lineal o ramificado que tiene 1 a 6 átomos de carbono a los cuales se une un átomo de oxígeno. Los ejemplos incluyen, aunque no de forma limitativa, metoxi, etoxi, propoxi, isopropoxi, n-butoxi, iso-butoxi, y t-butoxi.
El término «enantiómero» se refiere a estereoisómeros que son imágenes especulares entre sí.
El término «diastereómero» se refiere a estereoisómeros que tienen dos o más centros quirales en sus moléculas que no son imágenes especulares entre sí.
El término «isómero conformacional» se refiere a un isómero producido mediante la rotación de un enlace simple de una molécula orgánica.
El término «tautómero» se refiere al fenómeno de que la estructura de un determinado compuesto orgánico se interconvierta entre dos isómeros funcionales en equilibrio, y los correspondientes isómeros se denominan tautómeros.
El término «mesómero» se refiere a un compuesto sin actividad óptica que contiene un átomo asimétrico en la molécula que tiene una forma simétrica.
El término «racemato» se refiere a una mezcla equimolar de una molécula quiral ópticamente activa con su enantiómero.
El término «metabolito y precursor de metabolito o profármaco» se refiere a una sustancia producida o consumida por un proceso metabólico. El profármaco se refiere a un compuesto obtenido mediante modificación química de un fármaco que no es activo in vitro y tiene un efecto farmacodinámico en un organismo o ser humano convirtiéndose en el fármaco original.
El término «derivado» se refiere a un producto complejo derivado de la sustitución de un átomo o grupo en un compuesto con un átomo o grupo adicional.
El término «cantidad terapéuticamente aceptable» es cualquier cantidad que consigue la respuesta biológica deseada.
El término «halógeno» y «halo» se refiere a F, Cl, Br y I.
«Composición farmacéutica» se refiere a una mezcla de uno o más del compuesto de acuerdo con la presente invención o una sal, solvato, hidrato o profármaco farmacéuticamente aceptables del mismo con otros componentes químicos, por ejemplo, un vehículo farmacéuticamente aceptable. La composición farmacéutica se proporciona para promover la administración del fármaco a un animal.
«Vehículo farmacéuticamente aceptable» se refiere a un componente inactivo de la composición farmacéutica que no produce irritación significativa en un organismo y que no interfiere con la actividad biológica y las propiedades del compuesto administrado, por ejemplo, pero no se limita a: carbonato de calcio, fosfato de calcio, diversos carbohidratos (por ejemplo, lactosa y manitol), almidón, ciclodextrina, estearato de magnesio, celulosa, carbonato de magnesio, polímeros acrílicos o polímeros metacrílicos, gel, agua, polietilenglicol, propilenglicol, etilenglicol, aceite de ricino, aceite de ricino hidrogenado o aceite de ricino polietoxihidrogenado, aceite de sésamo, aceite de maíz y aceite de cacahuete.
Además del vehículo farmacéuticamente aceptable, la composición farmacéutica puede comprender además aditivos complementarios farmacéuticamente aceptables, por ejemplo, agentes antibacterianos, agentes antifúngicos, agentes antimicrobianos, conservantes, colorantes, solubilizantes, espesantes, tensioactivos, agentes quelantes, proteínas, aminoácidos, lípidos, carbohidratos, vitaminas, minerales, oligoelementos, edulcorantes, pigmentos, fragancias o una combinación de los mismos.
En la presente invención, se proporcionan un compuesto y el uso del compuesto como un inhibidor de la poli(ADP-ribosa) polimerasa. Los expertos en la materia pueden adaptar adecuadamente los parámetros de los procesos basándose en las descripciones del presente documento. Debe señalarse concretamente que todas las sustituciones y modificaciones equivalentes son evidentes para los expertos en la materia, y están contempladas en la presente invención. Se han descrito el método y el uso de la presente invención con referencia a ejemplos preferidos, y es evidente que los expertos en la materia pueden implementar y aplicar la invención realizando alguna modificación, o bien mediante alternancia y combinación adecuadas indicadas para el método y el uso de la presente invención sin apartarse de las descripciones, espíritu y alcance de la presente invención.
A partir de ahora en el presente documento, la presente invención se describe adicionalmente con referencia a los ejemplos.
Ejemplos de preparación
La estructura del compuesto se determina mediante resonancia magnética nuclear (RMN) o/y espectrometría de masas (MS). El desplazamiento de la RMN (8) se proporciona en 10-6 (ppm). Durante la determinación, el disolvente es metanol deuterado, dimetilsulfóxido deuterado, cloroformo deuterado y el patrón interno es tetrametilsilano.
Para la determinación mediante MS, se ha utilizado LC-MS (fabricante: Shimadzu, modelo: LCMS-2020).
Los materiales de partida conocidos en la presente invención pueden sintetizarse mediante o de acuerdo con métodos conocidos en la técnica o bien se encuentran comercialmente disponibles en el mercado.
Ejemplo 1
Preparación del Compuesto (1): 4-(3-(4-(1H-[1,2,3]triazol[4,5-b]piridin-5-il)piperazin-1-carbonil)-4-fluorobencil)ftalazin-1(2H)-ona. El esquema de reacción era específicamente de la siguiente manera.
Figure imgf000017_0001
Etapa 1: Preparación de 4-(6-amino-5-nitropiridin-2-il)piperazin-1-carbonato de t-butilo
A una piperazina protegida con un compuesto de mono-t-butoxicarbonilo (mono-t-Boc) (1,86 g, 10 mmol) disuelta en dimetilformamida (10 ml), se le añadieron 6-cloro-3-nitro-2-aminopiridina (1,91 g, 11 mmol) y diisopropiletilamina (1,55 g, 12 mmol), y se hicieron reaccionar durante 8 h a temperatura ambiente. A continuación, se eliminó el disolvente a presión reducida, y el residuo se separó mediante cromatografía ultrarrápida en columna (diclorometano:metanol=50:1 para obtener el Compuesto a: 4-(6-amino-5-nitropiperidin-2-il)piperazin-1-carbonato de t-butilo como un sólido de color blanco (2,72 g, rendimiento de 84 %). MS (ESI) m/z: [M+H]+=324.
Etapa 2: Preparación de 4-(5,6-diaminopiridin-2-il)piperazin-1-carbonato de t-butilo
Se añadió paladio al 10 % sobre carbono (259 mg) a una solución del Compuesto a (2,59 g, 8 mmol) en metanol (20 ml), se hidrogenó durante 7 h a temperatura ambiente, y se filtró. Se separó el resto mediante cromatografía ultrarrápida en columna (diclorometano:metanol=10:1), para obtener el Compuesto b: 4-(5,6-diaminopiperidin-2-il)piperazin-1-carbonato de t-butilo como un sólido de color amarillo (2,25 g, rendimiento de 93 %). MS (ESI) m/z:
[M+H]+=294.
Etapa 3: Preparación de 4-(1 H-[1,2,3]triazol[4,5-b]piridin-5-il)piperazin-1-carbonato de t-butilo
A una solución del Compuesto b (1,76 g, 6 mmol) disuelto en ácido acético (30 ml), se le añadió nitrito de sodio (0,42 g, 6 mmol), se calentó a reflujo, se hizo reaccionar durante 8 h y a continuación se enfrió. El disolvente se eliminó a presión reducida y el residuo se separó mediante cromatografía ultrarrápida en columna (diclorometano:metanol=10:1) para obtener el Compuesto c: 4-(1H-[1,2,3]triazol[4,5-b]piridin-5-il)piperazin-1-carbonato de t-butilo como un sólido de color amarillo claro (1,64 g, rendimiento de 90 %). MS (ESI) m/z: [m H]+=305.
Etapa 4: Preparación de 5-(piperazin-1-il)-1H-[1,2,3]triazol[4,5-b]piperidina
A una solución del Compuesto c (1,52 g, 5 mmol) disuelto en diclorometano (10 ml) se le añadió ácido trifluoroacético (2,28 g, 20 mmol) y se hizo reaccionar durante 8 h a temperatura ambiente. A continuación, el disolvente se eliminó a presión reducida, y el residuo se extrajo en diclorometano (20 ml). Se añadió bicarbonato de sodio hasta que el pH fue 8. Se eliminó el disolvente por concentración y el residuo se separó mediante cromatografía ultrarrápida en columna (diclorometano:metanol=10:1) para obtener el Compuesto d: 5-(piperazin-1-il)-1H-[1,2,3]triazol[4,5-b]piperidina como un sólido de color amarillo claro (0,87 g, rendimiento de 86 %). MS (ESI) m/z: [M+H]+=205.
Etapa 5: Preparación de 2-fluoro-4-((3-oxoisobenzofuran-1(3H)-ilideno)metil)benzonitrilo
A una solución de metóxido de sodio (61,8 g, 1,14 mol) disuelto en metanol anhidro (1 l) en un baño de hielo se le añadió lentamente dimetil fosfito (97 ml, 1,06 mol). Se añadió lentamente 2-carboxibenzaldehído (135 g, 0,9 mol) gota a gota en 20 minutos de manera que la temperatura del sistema de reacción se mantuvo por debajo de 5 °C. El sistema de reacción se calentó gradualmente a temperatura ambiente y se añadió gota a gota gradualmente ácido metanosulfónico (81,6 ml, 1,26 mol) en 0,5 h. El disolvente se eliminó a presión reducida y el residuo se diluyó en agua (600 ml) y se extrajo con diclorometano (500 ml x 3). Se combinaron las fases orgánicas, se extrajeron con agua (100 ml x 3) y se secaron con sulfato de magnesio anhidro. Se eliminó el disolvente a presión reducida para obtener el compuesto 3-oxo-1,3-dihidroisobenzofuran-1-ilfosfito de dimetilo como un sólido de color amarillo claro, que se usó directamente en la siguiente reacción sin purificación. A una solución del compuesto 3-oxo-1,3-dihidroisobenzofuran-1-ilfosfito de dimetilo (35 g, 0,14 mol) obtenido en la etapa anterior sin purificación disuelto en tetrahidrofurano (330 ml) se le añadió 2-fluoro-5-formil benzonitrilo (20,9 g, 0,14 mol). El sistema se enfrió a 15 °C, y se añadió trietilamina (19,5 ml, 0,14 mol) gota a gota lentamente en 30 minutos. El sistema de reacción se calentó gradualmente a temperatura ambiente, se eliminó el disolvente a presión reducida, y el residuo se suspendió en agua (250 ml) y se filtró, para obtener el Compuesto e: 2-fluoro-4-((3-oxoisobenzofuran-1(3H)-ilideno)metil)benzonitrilo como un sólido de color blanco (37,2 g, rendimiento de 96 %).
Etapa 6: Preparación de ácido 2-fluoro-5-((4-oxo-3,4-dihidroftalazin-1-il)metil)benzoico
A una solución del Compuesto e (37 g, 0,14 mol) disuelto en agua (200 ml) se le añadió una solución de hidróxido de sodio 13 N (50 ml), se calentó a 90 °C y se agitó durante 1 h. El sistema de reacción se enfrió a 70 °C, añadiéndose hidracina hidratada (100 ml, 2 mol), y se agitó durante 18 h a la vez que se mantenía la temperatura. La solución de reacción se enfrió a temperatura ambiente, se ajustó a pH 4 con ácido clorhídrico 8 N y se filtró. La torta del filtro se lavó secuencialmente con agua (60 ml x 2) y a continuación con dietil éter (50 ml x 3) y se secó al vacío para obtener el Compuesto f: ácido 2-fluoro-5-((4-oxo-3,4-dihidroftalazin-1-il)metil)benzoico como un sólido de color blanco (30,1 g, rendimiento de 77 %). MS (ESI) m/z: [M+H]+=299.
Etapa 7: Preparación de 4-(3-(4-(1H-[1,2,3]triazol[4,5-b]piridin-5-il)piperazin-1-carbonil)-4-fluorobencil)ftalazin-1(2H)-ona
A una solución de Compuesto f (50 mg, 0,17 mmol) disuelto en dimetilformamida (5 ml), Compuesto d (49 mg, 0,24 mmol), se le añadieron hexafluorofosfato de 2-(7-azabenzotriazolil)-N,N,N’,N’-tetrametiluronio (77 mg, 0,2 mmol) y trietilamina (70 mg, 0,7 mmol), y se agitó durante la noche a temperatura ambiente. El disolvente se eliminó por concentración y el residuo se separó mediante cromatografía ultrarrápida en columna (diclorometano:metanol=10:1) para obtener el Compuesto (1): 4-(3-(4-(1H-[1,2,3]triazol[4,5-b]piridin-5-il)piperazin-1-carbonil)-4-fluorobencil)ftalazin-1(2H)-ona como un sólido de color blanco (16 mg, rendimiento de 20 %). MS (ESI) m/z: [M+H]+=485. 1r Mn (300 MHz,DMSO-d6): 6 12,57 (s,1H), 8,24-8,12 (m,2H), 7,96-7,74 (m,1H), 7,89-7,81 (m,3H), 7,43-7,38 (m,2H), 7,26-7,2 1 (m,1H), 7,05-6,99 (m,1H), 4,32 (s,2H), 3,73 (a,6H), 3,57 (a,2H).
Ejemplo 2
Compuesto (2): Preparación de 4-(4-fluoro-3-(4-(2-metil-1 H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperazin-1-carbonil)bencil)ftalazin-1(2H)-ona. El esquema de reacción era específicamente de la siguiente manera.
Figure imgf000018_0001
Etapa 1: Preparación de 4-(2-metil-1H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperazin-1 -carbonato de t-butilo
A una solución del Compuesto b (1,47 g, 5 mmol) disuelto en ácido acético (30 ml) se le añadió anhídrido acético (0,56 g, 5,5 mmol), se calentó a reflujo, se hizo reaccionar durante 8 h y a continuación se enfrió. El disolvente se eliminó a presión reducida y el residuo se separó mediante cromatografía ultrarrápida en columna (diclorometano:metanol=10:1) para obtener el Compuesto g: 4-(2-metil-1H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperazin-1-carbonato de t-butilo como un sólido de color amarillo claro (0,73 g, rendimiento de 46 %). MS (ESI) m/z: [M+H]+=318.
Etapa 2: Preparación de 2-metil-5-(piperazin-1-il)-1H-imidazo[4,5-b]piridina
Análogo al proceso para preparar el Compuesto d en la Etapa 4 del Ejemplo 1, el Compuesto g se desprotegió haciéndolo reaccionar con ácido trifluoroacético para producir el Compuesto h: 2-metil-5-(piperazin-1-il)-1H-imidazo[4,5-b]piridina (320 mg, rendimiento de 82 %). MS (ESI) m/z: [M+H]+=218.
Etapa 3: Preparación de 4-(4-fluoro-3-(4-(2-metil-1 H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperazin-1-carbonil)bencil)ftalazin-1(2H)-ona
Análogo al proceso para preparar el Compuesto (1) en la Etapa 7 del Ejemplo 1, el Compuesto h se condensó con el Compuesto f para producir el Compuesto (2): 4-(4-fluoro-3-(4-(2-metil-1H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperazin-1-carbonil) bencil)ftalazin-1(2H)-ona (26 mg, rendimiento de 32 %). MS (ESI) m/z: [M+H]+= 498. RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6): 612,55 (s,1H), 8,23-8,12 (m,2H), 7,96-7,75 (m,1H), 7,89-7,80 (m,3H), 7,44-7,38 (m,2H), 7,27-7,22 (m,1H), 7,06-6,98 (m,1H), 4,33 (s,2H), 3,72 (a,4H), 3,56 (a,4H), 2,63 (s,3H).
Ejemplo 3
Compuesto (3): Preparación de 4-(4-fluoro-3-(4-(2-trifluorometil)-1H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperazin-1-carbonil)bencil)ftalazin-1(2H)-ona. El esquema de reacción era específicamente de la siguiente manera.
Figure imgf000019_0001
Etapa 1: Preparación de 4-(2-trifluorometil-1H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperazin-1-carbonato de t-butilo
A una solución del Compuesto b (1,47 g, 5 mmol) disuelto en ácido trifluoroacético (30 ml) se le añadió anhídrido trifluoroacético (1,16 g, 5,5 mmol), se calentó a reflujo, se hizo reaccionar durante 8 h y a continuación se enfrió. Se eliminó el disolvente a presión reducida, y el residuo se separó mediante cromatografía ultrarrápida en columna (diclorometano:metanol=10:1) para obtener el Compuesto i: 4-(2-trifluorometil-1H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperazin-1-carbonato de t-butilo como un sólido de color amarillo claro (0,69 g, rendimiento de 37 %). MS (ESI) m/z: [M+H]+=372. Etapa 2: Preparación de 5-(piperazin-1-il)-2-trifluorometil-1H-imidazo[4,5-b]piridina
Análogo al proceso para preparar el Compuesto d en la Etapa 4 del Ejemplo 1, el Compuesto i se desprotegió haciéndolo reaccionar con ácido trifluoroacético para producir el Compuesto j: 5-(piperazin-1-il)-2-trifluorometil-1H-imidazo[4,5-b]piridina (269 mg, rendimiento de 78 %). MS (ESI)m/z: [M+H]+=272.
Etapa 3: Preparación de 4-(4-fluoro-3-(4-(2-trifluorometil)1 H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperazin-1-carbonil)bencil)ftalazin-1(2H)-ona
Análogo al proceso para preparar el Compuesto (1) en la Etapa 7 del Ejemplo 1, el Compuesto j se condensó con el Compuesto f para producir el Compuesto (3): 4-(4-fluoro-3-(4-(2-metil-1H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperazin-1-carbonil)bencil)ftalazin-1(2H)-ona (38 mg, rendimiento de 41 %). MS (ESI) m/z: [M+H]+=552. RMN 1H (300 MHz, DMSO d6): 6 12,59 (a,1H), 8,25 (d, 1H, J=8,1 Hz), 7,98-7,89 (m,3H), 7,87-7,80 (m,2H), 7,45-7,38 (m,2H), 7,26-7,20 (m,1H), 6,92 (d, 1H, J=9,0Hz), 4,33 (s,2H), 3,73 (a,2H), 3,63 (a,2H), 3,46 (a,4H).
Ejemplo 4
Compuesto (4): Preparación de 4-(3-(4-(1H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperazin-1-carbonil)-4-fluorobencil)ftalazin-1(2H)-ona. El esquema de reacción era específicamente de la siguiente manera.
Figure imgf000020_0001
Etapa 1: Preparación de 4-(1 H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperazin-1-carbonato de t-butilo
A una solución del Compuesto b (1,47 g, 5 mmol) disuelto en ortoformiato de trimetilo (6 g) se le añadió ácido ptoluenosulfónico (86 mg, 0,5 mmol), se calentó a reflujo, se hizo reaccionar durante 8 h y a continuación se enfrió. El disolvente se eliminó a presión reducida y el residuo se separó mediante cromatografía ultrarrápida en columna (diclorometano:metanol=10:1) para obtener el Compuesto k: 4-(1H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperazin-1-carbonato de t-butilo como un sólido de color amarillo claro (0,73 g, rendimiento de 48 %). MS (ESI) m/z: [M+H]+=304.
Etapa 2: Preparación de 5-(piperazin-1-il)-1H-imidazo[4,5-b]piridina
Análogo al proceso para preparar el Compuesto d en la Etapa 4 del Ejemplo 1, el Compuesto k se desprotegió haciéndolo reaccionar con ácido trifluoroacético para producir el Compuesto I: 5-(piperazin-1-il)-1H-imidazo[4,5-b]piridina (307 mg, rendimiento de 73 %). MS (ESI) m/z: [M+H]+=204.
Etapa 3: Preparación de 4-(3-(4-(1H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperazin-1-carbonil)-4-fluorobencil)ftalazin-1(2H)-ona Análogo al proceso para preparar el Compuesto (1) en la Etapa 7 del Ejemplo 1, el Compuesto I se condensó con el Compuesto f para producir el Compuesto (4): 4-(3-(4-(1H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperazin-1-carbonil)-)-4-fluorobencil)ftalazin-1(2H)-ona (25 mg, rendimiento de 31 %). MS (ESI) m/z: [M+H]+=484. RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6): 6 12,61 (a,1H), 8,27-8,24 (m,1H), 8,16(s,1H), 8,00-7,97 (m,1H), 7,93-7,82 (m,4H), 7,45-7,39 (m, 2H), 7,28-7,22 (m,1H), 6,83-6,80 (m,1H), 4,34 (s,2H), 3,73 (a,2H), 3,58 (a,2H), 3,42 (a,4H).
Ejemplo 5
Compuesto (5): Preparación de 4-(4-fluoro-3-(4-(2-oxo-2,3-dihidro-1H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperazin-1-carbonil)bencil)ftalazin-1(2H)-ona. El esquema de reacción era específicamente de la siguiente manera.
Figure imgf000021_0001
Etapa 1: Preparación de 4-(2-oxo 2,3-dihidro-1H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperazin-1-carbonato de t-butilo
A una solución del Compuesto b (1,47 g, 5 mmol) disuelto en tetrahidrofurano anhidro (20 ml) se le añadió carbonildiimidazol (1,62 g, 10 mmol), se calentó a reflujo, se hizo reaccionar durante 8 h y a continuación se enfrió. El disolvente se eliminó a presión reducida y el residuo se separó mediante cromatografía ultrarrápida en columna (diclorometano:metanol =10:1) para obtener el Compuesto m: 4-(2-oxo-2,3-dihidro-1H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperazin-1-carbonato de t-butilo como un sólido amarillo claro (1,24 g, rendimiento de 78 %). MS (ESI) m/z:
[M+H]+=320.
Etapa 2: Preparación de 5-(piperazin-1-il)-1H-imidazo[4,5-b]piridin-2(3H)-ona
Análogo al proceso para preparar el Compuesto d en la Etapa 4 del Ejemplo 1, el Compuesto m se desprotegió haciéndolo reaccionar con ácido trifluoroacético para producir el Compuesto n: 5-(piperazin-1-il)-1H-imidazo[4,5-b]piridin-2(3H)-ona (331 mg, rendimiento de 79 %). MS (ESI) m/z: [M+H]+=220.
Etapa 3: Preparación de 4-(4-fluoro-3-(4-(2-oxo-2,3-dihidro-1H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperazin-1-carbonil) bencil)ftalazin-1(2H)-ona
Análogo al proceso para preparar el Compuesto (1) en la Etapa 7 del Ejemplo 1, el Compuesto n se condensó con el Compuesto f para producir el Compuesto (5): 4-(4-fluoro-3-(4-(2-oxo-2,3-dihidro-1H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperazin-1-carbonil) bencil)ftalazin-1(2H)-ona (32 mg, rendimiento de 36 %). MS (ESI) m/z: [M+H]+=500. RMN 1H
Figure imgf000021_0002
Ejemplo 6
Compuesto (6): Preparación de 4-(3-(4-(3H-imidazo[4,5-c]piridin-6-il)piperazin-1-carbonil)-4-fluorobencil)ftalazin-1(2H)-ona. El esquema de reacción era específicamente de la siguiente manera.
Figure imgf000021_0003
Etapa 1: Preparación de 4-(4-amino-5-nitropiperidin-2-il)piperazin-1-carbonato de t-butilo
Análogo al proceso para preparar el Compuesto a en la Etapa 1 del Ejemplo 1, se sometió piperazina protegida con un compuesto de mono-t-butoxicarbonilo (mono-t-Boc) a sustitución nucleofílica con 2-doro-5-nitro-4-aminopiridina para producir el Compuesto o: 4-(4-amino-5-nitropiperidin-2-il)piperazin-1-carbonato de t-butilo (1,1 g, rendimiento de 86 %). MS (ESI) m/z: [M+H]+=324.
Etapa 2: Preparación de 4-(4,5-diaminopiridin-2-il)piperazin-1-carbonato de t-butilo
Análogo al proceso para preparar el Compuesto b en la Etapa 2 del Ejemplo 1, el Compuesto o se hidrogenó catalíticamente para producir el Compuesto p: 4-(4,5-diaminopiperidin-2-il)piperazin-1-carbonato de t-butilo (0,9 g, rendimiento de 97 %). MS (ESI) m/z: [M+H]+=294.
Etapa 3: Preparación de 4-(3H-imidazo[4,5-c]piridin-6-il)piperazin-1-carbonato de t-butilo
Análogo al proceso para preparar el Compuesto k en la Etapa 1 del Ejemplo 4, el Compuesto p se cicló con ortoformiato de trimetilo para producir el Compuesto q: 4-(3H-imidazo[4,5-c]piridin-6-il)piperazin-1-carbonato de t-butilo (0,6 g, rendimiento de 82 %). MS (ESI) m/z: [M+H]+=304.
Etapa 4: Preparación de 6-(piperazin-1-il)-3H-imidazo[4,5-c]piridina
Análogo al proceso para preparar el Compuesto d en la Etapa 4 del Ejemplo 1, el compuesto q se desprotegió haciéndolo reaccionar con ácido trifluoroacético para producir el Compuesto r: 6-(piperazin-1-il)-3H-imidazo[4,5-c]piridina (279 mg, rendimiento de 75 %). MS (ESI) m/z: [M+H]+=204.
Etapa 5: Preparación de 4-(3-(4-(3H-imidazo[4,5-c]piridin-6-il)piperazin-1-carbonil)-4-fluorobencil)ftalazin-1(2H)-ona Análogo al proceso para preparar el Compuesto (1) en la Etapa 7 del Ejemplo1, el Compuesto r se condensó con el Compuesto f para producir el Compuesto (6): 4-(3-(4-(3H-imidazo[4,5-c]piridin-6-il)piperazin-1-carbonil)-4-fluorobencil)ftalazin-1(2H)-ona (16 mg, rendimiento de 20 %). MS (ESI) m/z: [M+H]+=484. RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6): 612,57 (s,1H), 12,35 (s,1H), 8,54 (s,1H), 8,25 (d, 1H, J=7,8 Hz), 8,09 (s,1H), 7,98-7,80 (m,3H), 7,42 -7,37 (m,2H), 7,26-7,20 (m,2H), 6,76 (s,1H), 4,33 (s,2H), 3,75 (a,2H), 3,50 (a,2H), 3,39 (a,4H).
Ejemplo 7
Compuesto (7): Preparación de 4-(3-(4-(3H-imidazo[4,5-b]piridin-6-il)piperazin-1-carbonil)-4-fluorobencil)ftalazin-1(2H)-ona. El esquema de reacción era específicamente de la siguiente manera.
Figure imgf000022_0001
Etapa 1: Preparación de 4-(5-amino-6-nitropiperidin-3-il)piperazin-1-carbonato de t-butilo
Análogo al proceso para preparar el Compuesto a en la Etapa 1 del Ejemplo 1, una piperazina protegida con un compuesto de mono-t-butoxicarbonilo (mono-t-Boc) se sometió a sustitución nucleofílica con 5-bromo-2-nitro-3-aminopiridina para obtener el Compuesto s: 4-(5-amino-6-nitropiperidin-3-il)piperazin-1-carbonato de t-butilo (0,7 g, rendimiento de 82 %). MS (ESI) m/z: [M+H]+=324.
Etapa 2: Preparación de 4-(5,6-diaminopiridin-3-il)piperazin-1-carbonato de t-butilo
Análogo al proceso para preparar el Compuesto b en la Etapa 2 del Ejemplo 1, el Compuesto s se hidrogenó catalíticamente para obtener el Compuesto t: 4-(5,6-diaminopiperidin-3-il)piperazin-1-carbonato de t-butilo (0,52 g, rendimiento de 91 %). MS (ESI) m/z: [M+H]+=294.
Etapa 3: Preparación de 4-(3H-imidazo[4,5-b]piridin-6-il)piperazin-1-carbonato de t-butilo
Análogo al proceso para preparar el Compuesto k en la Etapa 1 del Ejemplo 4, el Compuesto t se cicló con ortoformiato de trimetilo para producir el Compuesto u: 4-(3H-imidazo[4,5-b]piridin-6-il)piperazin-1-carbonato de t-butilo (0,36 g, rendimiento de 73 %). MS (ESI) m/z: [M+H]+=304.
Etapa 4: Preparación de 6-(piperazin-1-il)-3H-imidazo[4,5-b]piridina
Análogo al proceso para preparar el Compuesto d en la Etapa 4 del Ejemplo 1, el Compuesto u se desprotegió haciéndolo reaccionar con ácido trifluoroacético para producir el Compuesto v: 6-(piperazin-1-il)-3H-imidazo[4,5-b]piridina (126 mg, rendimiento de 82 %). MS (ESI) m/z: [M+H]+=204.
Etapa 5: Preparación de 4-(3-(4-(3H-imidazo[4,5-b]piridin-6-il)piperazin-1-carbonil)-4-fluorobencil)ftalazin-1(2H)-ona
Análogo al proceso para preparar el Compuesto (1) en la Etapa 7 del Ejemplo 1, el Compuesto v se condensó con el Compuesto f para producir el Compuesto (7): 4-(3-(4-(3H-imidazo[4,5-b]piridin-6-il)piperazin-1-carbonil)-4-fluorobencil)ftalazin-1(2H)-ona (16 mg, rendimiento de 22 %). MS (ESI) m/z: 484 [M+1]+. RMN (300 MHz, DMSO -d6): 8 12,59 (s,1H), 8,25-8,20 (m,3H), 7,98-7,79 (m,3H), 7,51-7,45 (m,1H), 7,42-7,37 (m,3H), 7,26-7,20 (m,1H), 4,33 (s,2H), 3,78 (a,2H), 3,55-3,47 (m,2H), 3,19-3,14 (m,2H), 3,03 (a,2H).
Ejemplo 8
Compuesto (8): Preparación de 4-(3-(4-(7H-purin-2-il)piperazin-1-carbonil)-4-fluorobencil)ftalazin-1(2H)-ona. El esquema de reacción era específicamente de la siguiente manera.
Figure imgf000023_0001
Etapa 1: Preparación de 2-cloro-5-nitro-4-aminopirimidina
A 2,4-dicloro-5-nitropirimidina (500 mg, 2.5 mmol) disuelta en tetrahidrofurano (10 ml), se le añadieron hidróxido de sodio (238 mg, 2.8 mmol) y una solución acuosa de amoníaco (0,3 ml) y se hizo reaccionar durante 2 h a 55 °C. Se eliminó el disolvente a presión reducida, y el residuo se separó mediante cromatografía ultrarrápida en columna (diclorometano:metanol=100:1) para obtener el Compuesto w: 2-cloro-5-nitro-4-aminopirimidina como un sólido de color blanco (0,47 g, rendimiento de 84 %). MS (ESI) m/z: [M+H]+=175.
Etapa 2: Preparación de 4-(4-amino-5-nitropirimidina-2-il)piperazin-1-carbonato de t-butilo
Análogo al proceso para preparar el Compuesto a en la Etapa 1 del Ejemplo 1, una piperazina protegida con un compuesto mono-t-butoxicarbonilo (mono-t-Boc) se sometió a sustitución nucleofílica con el Compuesto w para producir el Compuesto x: 4-(4-amino-5-nitropirimidina-2-il)piperazin-1-carbonato de t-butilo (0,61 g, rendimiento de 87 %). MS (ESI) m/z: [M+H]+=325.
Etapa 3: Preparación de 4-(4,5-diaminopiridin-2-il)piperazin-1-carbonato de t-butilo
Análogo al proceso para preparar el Compuesto b en la Etapa 2 del Ejemplo 1, el Compuesto x se hidrogenó catalíticamente para obtener el Compuesto z: 4-(4,5-diaminopiperidin-2-il)piperazin-1-carbonato de t-butilo (0,26 g, rendimiento de 76 %). MS (ESI) m/z: [M+H]+=295.
Etapa 4: Preparación de 4-(7H-purin-2-il)piperazin-1-carbonato de t-butilo
Análogo al proceso para preparar el compuesto k en la Etapa 1 del Ejemplo 4, el Compuesto y se cicló con ortoformiato de trimetilo para producir el Compuesto z: 4-(3H-imidazo[4,5-b]piridin-6-il)piperazin-1-carbonato de t-butilo (0,36 g, rendimiento de 73 %). MS (ESI) m/z: [M+H]+=305.
Etapa 5: Preparación de 2-(piperazin-1-il)-7H-purina
Análogo al proceso para preparar el Compuesto d en la Etapa 4 del Ejemplo 1, el Compuesto z se desprotegió haciéndolo reaccionar con ácido trifluoroacético para producir el Compuesto a': 2-(piperazin-1-il)-7H-purina (141 mg, rendimiento de 74 %). MS (ESI) m/z: [M+H]+=205.
Etapa 6: Preparación de 4-(3-(4-(7H-purin-2-il)piperazin-1-carbonil)-4-fluorobencil)ftalazin-1(2H)-ona
Análogo al proceso para preparar el Compuesto (1) en la Etapa 7 del Ejemplo 1, el Compuesto a'se condensó con el Compuesto f para producir el Compuesto (8): 4-(3-(4-(7H-purin-2-il)piperazin-1-carbonil)-4-fluorobencil)ftalazin-1(2H)-ona (88 mg, rendimiento de 74 %). MS (ESI) m/z: 485 [M+1]+. RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6): 8 12,78 (s,1H), 12,57 (s,1H), 8,72 (s,1H), 8,26-8,24 (m,1H), 8,12 (s,1H), 7,98-7,96 (m,1H), 7,91-7,87 (m,1H), 7,84-7,8 0 (m,1H), 7,45-7,41 (m,1H), 7,39-7,37 (m,1H), 7,25-7,21 (m,1H), 4,32 (s,2H), 3,81-3,79 (m,2H), 3,72-3,65 (m,4H), 3,28-3,26 (m,2H).
Ejemplo 9
Compuesto (9): Preparación de 4-(3-(4-(2-carbonil-2,3-dihidro-1H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperazin-1-carbonil)bencil)ftalazin-1(2H)-ona. El esquema de reacción era específicamente de la siguiente manera.
Figure imgf000024_0001
Etapa 1: Preparación de 3-(1,3-dioxo-2,3-dihidro-1H-inden-2-il)benzonitrilo
A una solución de isobenzofuran-1(3H)-ona (51 g, 0,38 mol) y tricianobenzaldehído (52 g, 0,39 mol) disuelto en propionato de etilo (200 ml) en un baño de hielo se le añadió lentamente una solución (320 ml) de metóxido de sodio al 25 % en metanol en 40 minutos, de tal manera que la temperatura del sistema de reacción se mantuvo por debajo de 30 °C. El sistema de reacción se calentó gradualmente a temperatura ambiente y se calentó a reflujo durante 1 h. Se añadió continuamente metanol (100 ml) y se agitó durante 1 h a reflujo. El sistema de reacción se enfrió a temperatura ambiente y el disolvente se eliminó a presión reducida. A continuación, el residuo se diluyó en agua (1 l) y se filtró. Se lavó la torta del filtro con dietil éter (200 ml x 3) acidificado con ácido acético (110 ml), y se filtró. Se lavó la torta del filtro con agua (100 ml) para obtener el Compuesto b': 3-(1,3-dioxo-2,3-dihidro-1H-inden-2-il)benzonitrilo como un sólido de color rojo (69 g, rendimiento de 94 %).
Etapa 2: Preparación de ácido 3-((4-oxo-3,4-dihidroftalazin-1-il)metil)benzoico
Análogo al proceso para preparar el Compuesto f en la Etapa 6 del Ejemplo 1, el Compuesto b se hidrolizó para producir el Compuesto c': ácido 3-((4-oxo-3,4-dihidroftalazin-1-il)metil)benzoico (28 g, rendimiento de 55 %). MS (ESI) m/z: 281[M+1]+.
Etapa 3: Preparación de 4-(3-(4-(2-carbonil-2,3-dihidro-1H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperazin-1-carbonil)bencil)ftalazin-1(2H)-ona
Análogo al proceso para preparar el Compuesto (1) en la Etapa 7 del Ejemplo 1, el Compuesto c' se condensó con el Compuesto n para producir el Compuesto (9): 4-(3-(4-(2-carbonil-2,3-dihidro-1H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperazin-1-carbonil)bencil)ftalazin-1(2H)-ona (37 mg, rendimiento de 46 %). MS (ESI) m/z: 482 [M+1]+. RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6): 8 12,58 (a,1H), 10,95 (a,1H), 10,37 (a,1H), 8,27-8,24 (m,1H), 7,97-7,80 (m,3H), 7,42-7,35 (m,3 H), 7,26-7,23 (m,1H), 7,11-7,09 (m,1H), 6,34 (d, 1H, J=8,7 Hz), 4,35 (s,2H), 3,69-3,47 (m, 4H), 3,24-3,14 (m,4H).
Ejemplo 10
Compuesto (10): Preparación de 4-(3-(4-(1H-[1,2,3]triazol[4,5-b]piridin-5-il)piperazin-1-carbonil)-bencil)ftalazin-1(2H)-ona. El esquema de reacción era específicamente de la siguiente manera.
Figure imgf000025_0001
Análogo al proceso para preparar el Compuesto (1) en la Etapa 7 del Ejemplo 1, el Compuesto c’ se condensó con el Compuesto d para producir el Compuesto (10): 4-(3-(4-(1H-[1,2,3]triazol[4,5-b]piridin-5-il)piperazin-1-carbonil)-bencil)ftalazin-1(2H)-ona (41 mg, rendimiento de 52 %). MS (ESI) m/z: 467 [M+1]+. RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6): 6 12,53 (s,1H), 8,21-8,10 (m,2H), 7,93-7,71 (m,1H), 7,87-7,80 (m,3H), 7,41-7,35 (m,3H), 7,24-7,2 0 (m,1H), 7,02-6,96 (m,1H), 4,30 (s,2H), 3,71 (a,6H), 3,55 (a,2H).
Ejemplo 11
Compuesto (11): Preparación de 4-(3-(4-(2-metil-1 H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperazin-1-carbonil)bencil)ftalazin-1(2H)-ona. El esquema de reacción era específicamente de la siguiente manera.
Figure imgf000025_0002
Análogo al proceso para preparar el Compuesto (1) en la Etapa 7 del Ejemplo 1, el Compuesto c’ se condensó con el Compuesto h para producir el Compuesto (11): 4-(3-(4-(2-metil-1H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperazin-1-carbonil)bencil)ftalazin-1(2H)-ona (34 mg, rendimiento de 45 %). MS (ESI) m/z: 480 [M+1 ]+. RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6): 612,52 (s,1H), 8,21-8,10 (m,2H), 7,94-7,72 (m,1H), 7,87-7,77 (m,3H), 7,41-7,34 (m,3H), 7,26-7,21 (m,1H), 7,03­ 6,97 (m,1H), 4,31 (s,2H), 3,71 (a,4H), 3,52 (a,4H), 2,61 (s,3H).
Ejemplo 12
Compuesto (12): Preparación de 4-(3-(4-(2-trifluorometil)-1 H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperazin-1 -carbonil)bencil)ftalazin-1(2H)-ona. El esquema de reacción era específicamente de la siguiente manera.
Figure imgf000025_0003
Análogo al proceso para preparar el Compuesto (1) en la Etapa 7 del Ejemplo 1, el Compuesto c’ se condensó con el Compuesto j para producir el Compuesto(12): 4-(3-(4-(2-trifluorometil)-1H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperazin-1-carbonil)bencil)ftalazin-1(2H)-ona (36 mg, rendimiento de 42 %). MS (ESI) m/z: 534[M+1]+. RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6): 612,56 (a,1H), 8,22 (d, 1H, J=8,1 Hz), 7,95-7,87 (m,3H), 7,83-7,76 (m,3H), 7,42-7,36 (m,2H), 7,22-7,17 (m,1H), 6,91 (d, 1H, J=9,0Hz), 4,30 (s,2H), 3,72 (a,2H), 3,61 (a,2H), 3,42 (a,4H).
Ejemplo 13
Compuesto (13): Preparación de 4-(3-(4-(1H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperazin-1-carbonil)bencil)ftalazin-1(2H)-ona. El sistema de reacción era específicamente de la siguiente manera.
Figure imgf000026_0001
Análogo al proceso para preparar el Compuesto (1) en la Etapa 7 del Ejemplo 1, el Compuesto c’ se condensó con el Compuesto l para producir el Compuesto (13): 4-(3-(4-(1H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperazin-1-carbonil)bencil)ftalazin-1(2H)-ona (48 mg, rendimiento de 58 %). MS (ESI) m/z: 466 [M+1]+. RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6): 6 12,57 (a,1H), 12,50 (a,1H), 8,23 (d, 1H, J=7,6Hz), 8,0(s,1H), 7,96-7,93 (m,1H), 7,88-7,72 (m,3 H), 7,40-7,34 (m,3H), 7,25-7,24 (m,1H), 6,79-6,73 (m,1H), 4,33(s,2H), 3,68-3,38 (m,8H).
Ejemplo 14
Compuesto (14): Preparación de 4-(3-(4-(1H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperazin-1-carbonil)-4-metoxibencil)ftalazin-1(2H)-ona. El esquema de reacción era específicamente de la siguiente manera.
Figure imgf000026_0002
Etapa 1: Preparación de 3-bromo-4-metoxibenzoato de metilo
A una solución de 4-metoxibenzoato de metilo (1,5 g, 9 mol) disuelto en agua (10 ml), se le añadieron lentamente bromato de potasio (251 mg, 1,5 mmol) y bromo líquido (722 mg, 4,5 mmol) a temperatura ambiente. El sistema de reacción se agitó durante 2,5 h mientras la temperatura se mantenía por debajo de 30 °C. Al sistema de reacción se añadió metil t-butil éter (25 ml) y se extrajo. A continuación, la fase orgánica se lavó con una solución acuosa saturada, se secó y se concentró. El residuo resultante se separó mediante cromatografía ultrarrápida en columna (éter de petróleo:acetato de etilo=10:1) para obtener el Compuesto d’: 3-bromo-4-metoxibenzoato de metilo como un sólido de color blanco (2,1 g, rendimiento de 95 %).
Etapa 2: Preparación de 3-ciano-4-metoxibenzoato de metilo
A una solución del Compuesto d’ (1,1 g, 4,4 mol) disuelto en dimetilformamida (10 ml) se le añadió cianuro cuproso (1,2 g, 13,22 mmol), se calentó a 140 °C y se agitó durante 6 h. El sistema de reacción se enfrió, se añadió acetato de etilo (25 ml) y se extrajo. A continuación, la fase orgánica se lavó con una solución acuosa saturada, se secó y se concentró. El residuo resultante se separó mediante cromatografía ultrarrápida en columna (éter de petróleo:acetato de etilo=10:1) para obtener el Compuesto e’: 3-ciano-4-metoxibenzoato de metilo como un sólido de color blanco (662 mg, rendimiento de 79 %).
Etapa 3: Preparación de 5-(hidroximetil)-2-metoxibenzonitrilo
A una solución del Compuesto e’ (1 g, 5,2 mol) disuelto en tetrahidrofurano (25 ml), se le añadió borohidruro de litio (0,45 g, 20,7 mmol), y se agitaron durante la noche a temperatura ambiente. El sistema de reacción se secó y se concentró. El residuo resultante se separó mediante cromatografía ultrarrápida en columna (éter de petróleo:acetato de etilo=2:1) para obtener el Compuesto f ’: 5-(hidroximetil)-2-metoxibenzonitrilo como un sólido de color blanco (845 mg, rendimiento de 100 %).
Etapa 4: Preparación de 5-formil-2-metoxibenzonitrilo
A una solución del Compuesto f’ (845 mg, 5,2 mol) disuelto en diclorometano (50 ml) se añadió (1,1,1-triacetiloxi)-1,1-dihidro-1,2-benciodoxol-3(1H)-ona (2,6 g, 6,2 mmol) y se agitó durante 2 h a temperatura ambiente. El sistema de reacción se secó y se concentró. El residuo resultante se separó mediante cromatografía ultrarrápida en columna (éter de petróleo :acetato de etilo=3:1) para obtener el Compuesto g’: 5-formil-2-metoxibenzonitrilo como un sólido de color blanco (845 mg, rendimiento de 100 %).
Etapa 5: Preparación de 2-metoxi-5-((3-oxoisobenzofuran-1(3H)-ilideno)metil)fenol
Análogo al proceso para preparar el Compuesto e en la Etapa 5 del Ejemplo 1, el Compuesto g’ se hizo reaccionar con fosfito de 3-oxo-1,3-dihidroisobenzofuran-1-ildimetilo para producir el Compuesto h’: 2-metoxioxoisobenzofuran-1(3H)-ilideno)metil)benzonitrilo (795 mg, rendimiento de 67 %).
Etapa 6: Preparación de ácido 2-metoxi-5-((4-oxo-3,4-dihidroftalazin-1-il)metil)benzoico
Análogo al proceso para preparar el Compuesto f en la Etapa 6 del Ejemplo 1, el Compuesto h’ se hidrolizó para 10 producir el Compuesto i’: ácido 2-metoxi-5-((4-oxo-3,4-dihidroftalazin-1-il)metil)benzoico (318 mg, rendimiento de 63 %). MS (ESI) m/z: 311 [M+1]+.
Etapa 7: Preparación de 4-(3-(4-(1H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperazin-1-carbonil)-4-metoxibencil)ftalazin-1(2H)-ona Análogo al proceso para preparar el Compuesto (1) en la Etapa 7 del Ejemplo 1, el Compuesto i’ se condensó con el Compuesto l para producir el Compuesto(14): 4-(3-(4-(1H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperazin-1-carbonil)-4-metoxibencil)ftalazin-1(2H)-ona (77 mg, rendimiento de 49 %). MS (ESI) m/z: 496 [M+1]+. RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6): 5 12,55 (a,1H), 8,23 (d, 1H, J= 7,6 Hz), 8,19 (s,1H), 7,95 (d, 1H, J=8,4Hz), 7,88-7,80 (m,3H), 7,39-7, 31 (m,1H), 7,16­ 7,15 (m,1H), 7,01 (d, 1H, J=8,4Hz), 6,80(d, 1H, J=9,2Hz), 4,24 (s,2H), 3,73 (s,3H), 3,70-3,69 (m,2H), 3,55-3,54 (m,2H), 3,37-3,36 (m,2H), 3,18-3,16 (m,2H).
Ejemplo 15
Compuesto (15): Preparación de 4-(3-(4-(1H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperazin-1-carbonil)-4-trifluorometilbencil)ftalazin-1(2H)-ona. El esquema de reacción era específicamente de la siguiente manera.
Figure imgf000027_0001
Etapa 1: Preparación de 3-bromo-4-trifluorometilbenzoato de metilo
A una solución de ácido 3-bromo-4-trifluorometilbenzoico (4,1 g, 15,4 mol) disuelto en metanol (30 ml), se añadió lentamente ácido sulfúrico concentrado (1 ml) a temperatura ambiente. El sistema de reacción se calentó a 60 °C y se agitó durante 6 h. Después de enfriar a temperatura ambiente, el sistema de reacción se extrajo con acetato de etilo (25 ml). La fase orgánica se lavó con una solución salina saturada, se secó y se concentró. El residuo resultante se separó mediante cromatografía ultrarrápida en columna (éter de petróleo:acetato de etilo=10:1) para obtener el Compuesto j ’: 3-bromo-4-trifluorometilbenzoato de metilo como un sólido de color blanco (4,2 g, rendimiento de 96 %). Etapa 2: Preparación de 3-ciano-4-trifluorometilbenzoato de metilo
Análogo al proceso para preparar el Compuesto e’ en la Etapa 2 del Ejemplo 14, al Compuesto j ’ se le añadió cianuro para producir el Compuesto k’: 3-ciano-4-trifluorometilbenzoato de metilo (1,6 g, rendimiento de 64 %). MS (ESI) m/z: 230 [M+1 ]+.
Etapa 3: Preparación de 5-(hidroximetil)-2-trifluorometilbenzonitrilo
Análogo al proceso para preparar el Compuesto f’ en la Etapa 3 del Ejemplo 14, el Compuesto k’ se redujo para producir el Compuesto l’: 5-(hidroximetil)-2-trifluorometilbenzonitrilo (1,2 g, rendimiento de 87 %). MS (ESI) m/z: 202 [M+1]+.
Etapa 4: Preparación de 5-formil-2-trifluorometilbenzonitrilo
Análogo al proceso para preparar el Compuesto g’ en la Etapa 4 del Ejemplo 14, el Compuesto I’ se redujo para producir el Compuesto m’: 5-formil-2-trifluorometilbenzonitrilo (1,3 g, rendimiento de 96 %). MS (ESI) m/z: 200 [M+1]+. Etapa 5: Preparación de 2-trifluorometil-5-((3-oxoisobenzofuran-1(3H)-ilideno)metil)benzonitrilo
Análogo al proceso para preparar el Compuesto e en la Etapa 5 del Ejemplo 1, el Compuesto m’ se hizo reaccionar con fosfito de 3-oxo-1,3-dihidroisobenzofuran-1-ildimetilo para producir el Compuesto n’: 2-trifluorometil-5-((3-oxoisobenzofuran-1(3H)-ilideno)metil)benzonitrilo (721 mg, rendimiento de 69 %).
Etapa 6: Preparación de ácido 2-trifluorometil-5-((4-oxo-3,4-dihidroftalazin-1-il)metil)benzoico
Análogo al proceso para preparar el Compuesto f en la Etapa 6 del Ejemplo 1, el Compuesto n’ se hidrolizó para producir el Compuesto o’: ácido 2-trifluorometil-5-((4-oxo-3,4-dihidroftalazin-1-il)metil)benzoico (678 mg, rendimiento de 86 %). MS (ESI) m/z: 349 [M+1]+.
Etapa 7: Preparación de 4-(3-(4-(1 H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperazin-1-carbonil)-4-trifluorometilbencil)ftalazin-1(2H)-ona
Análogo al proceso para preparar el Compuesto (1) en la Etapa 7 del Ejemplo 1, el Compuesto o’ se condensó con el Compuesto l para producir el Compuesto (15): 4-(3-(4-(1H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperazin-1-carbonil)-4-trifluorometilbencil)ftalazin-1(2H)-ona (65 mg, rendimiento de 53 %). MS (ESI) m/z: 534 [M+1]+. RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6): 612,57 (s,1H), 8,24 (d, 1H, J=0,8Hz), 8,23 (s,1H), 7,96-7,80 (m,4H), 7,73 (d, 1H, J=8,0 Hz), 7,54 (d, 1H, J=8,0 Hz), 7,50 (s,1H), 6,77 (d, 1H, J=8,4 Hz), 4,42 (s,2H), 3,82-3,77 (m,1H), 3,68-3,62 (m,1 H), 3,59-3,52 (m,2H), 3,36­ 3,29 (m,2H), 3,19-3,10 (m,2H).
Ejemplo 16
Compuesto (16): Preparación de 4-(3-(4-(1 H-[1,2,3]triazol[4,5-b]piridin-5-il)piperazin-1-carbonil)-4-trifluorometilbencil)ftalazin-1(2H)-ona. El esquema de reacción era específicamente de la siguiente manera.
Figure imgf000028_0001
Análogo al proceso para preparar el Compuesto (1) en la Etapa 7 del Ejemplo 1, el Compuesto o’ se condensó con el Compuesto d para producir el Compuesto (16): 4-(3-(4-(1H-[1,2,3]triazol[4,5-b]piridin-5-il)piperazin-1-carbonil)-4 trifluorometilbencil)ftalazin-1(2H)-ona (70 mg, rendimiento de 57 %). MS (ESI) m/z: 535 [M+1]+. RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6): 6 12,57 (s,1H), 8,24 (d, 1H, J=7,2Hz), 8,17 (d, 1H, J=8,8Hz), 7,95-7,81 (m,3H), 7,74 (d, 1H, J=8,0Hz ), 7,55 (d, 1H, J=8,0Hz), 7,51(s,1H), 6,98 (d, 1H, J=9,6Hz), 4,42 (s,2H), 3,80-3,62 (m,4H), 3,50-3,4 6 (m,2H), 3,36-3,30 (m,2H).
Ejemplo 17
Compuesto (17): Preparación de 4-(3-(4-(2-oxo-2,3-dihidro-1H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperazin-1-carbonil)-4-trifluorometilbencil)ftalazin-1(2H)-ona. El esquema de reacción era específicamente de la siguiente manera.
Figure imgf000029_0001
Análogo al proceso para preparar el Compuesto (1) en la Etapa 7 del Ejemplo 1, el Compuesto o’ se condensó con el Compuesto n para producir el Compuesto (17): 4-(3-(4-(2-oxo-2,3-dihidro-1H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperazin-1-carbonil)-4-trifluorometilbencil)ftalazin-1(2H)-ona (67 mg, rendimiento de 53 %). MS (ESl) m/z: 550[M+1]+. RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6): 6 12,57 (s,1H), 10,95 (s,1H), 10,37 (s,1H), 8,23 (d, 1H, J=7,2Hz), 7,94-7,80 (m,3H), 7,73 (d, 1H, J=8, 0Hz), 7,54 (d, 1H, J=8,0Hz), 7,47 (s,1H), 7,09 (d, 1H, J=8,0Hz), 6,33 (d, 1H, J=8,0Hz), 4,42 (s,2H),3, 70-3,64 (m,1H), 3,64-3,59 (m,1H), 3,42-3,25 (m,2H), 3,14-3,08 (m,4H).
Ejemplo 18
Compuesto (18): Preparación de 4-(3-(4-(3H-imidazo[4,5-c]piridin-6-il)piperazin-1-carbonil)-4-metoxibencil)ftalazin-1(2H)-ona. El esquema de reacción era específicamente de la siguiente manera.
Figure imgf000029_0002
Análogo al proceso para preparar el Compuesto (1) en la Etapa 7 del Ejemplo 1,
El Compuesto i’ se condensó con el Compuesto r para producir el Compuesto (18): 4-(3-(4-(3H-imidazo[4,5-c]piridin-6-il)piperazin-1-carbonil)-4-metoxibencil)ftalazin-1(2H)-ona (54 mg, rendimiento de 34 %). MS (ESl) m/z: 496 [M+1]+. RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6): 612,55 (s,1H), 8,56 (s,1H), 8,23 (s,1H), 8,22 (s,1H), 7,93 (d, 1H, J=8,0 Hz), 7,87-7,77 (m,3H), 7,31 (d, 1H, J=8,0 Hz), 7,15(s,1H), 7,0 (d, 1H, J=8,0 Hz), 6,82 (s,1H), 4,23 (s,2H), 3,71 (a,5H), 3,47-3,46 (m,2H), 3,32-3,18 (m,4H).
Ejemplo 19
Compuesto (19): Preparación de 4-(3-(4-(3H-imidazo[4,5-c]piridin-6-il)piperazin-1-carbonil)-4-trifluorometilbencil)ftalazin-1(2H)-ona. El esquema de reacción era específicamente de la siguiente manera.
Figure imgf000030_0001
Análogo al proceso para preparar el Compuesto (1) en la Etapa 7 del Ejemplo 1, el Compuesto o’ se condensó con el Compuesto r para producir el Compuesto (19): 4-(3-(4-(3H-imidazo[4,5-c]piridin-6-il)piperazin-1-carbonil)-4-metoxibencil)ftalazin-1(2H)-ona (46 mg, rendimiento de 46 %). MS (ESI) m/z: 534 [M+1]+. RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6): 6 12,57 (s,1H), 8,55 (s,1H), 8,24 (d, 1H, J=8,0 Hz), 8,17 (s,1H), 7,95-7,72 (m,SH), 7,55 (d, 1H, J=8,0 Hz), 7,48 (s,1H), 6,80 (s,1H), 4,43 (s,2H), 3,81-3,79 (m,1H), 3,78-3,77 (m,1H), 3,68-3,64 (m,2H), 3,49-3,46 (m,2H), 3,17-3,12 (m,2H).
Ejemplo 20
Compuesto (20): Preparación de 4-(3-(4-(3H-imidazo[4,5-b]piridin-6-il)piperazin-1-carbonil)-4-trifluorometilbencil)ftalazin-1(2H)-ona. El esquema de reacción era específicamente de la siguiente manera.
Figure imgf000030_0002
Análogo al proceso para preparar el Compuesto (1) en la Etapa 7 del Ejemplo 1, el Compuesto o’ se condensó con el Compuesto v para producir el Compuesto (20): 4-(3-(4-(3H-imidazo[4,5-b]piridin-6-il)piperazin-1-carbonil)-4-trifluorometilbencil)ftalazin-1(2H)-ona (37 mg, rendimiento de 41 %). MS (ESI) m/z: 534 [M+1]+. RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6): 612,57 (s,1H), 8,47(s,1H), 8,24 (s,1H), 8,22 (s,1H), 7,95-7,73 (m,SH), 7,55 (d, 1H, J=8,0Hz), 7,50(s,1H), 7,49(s,1H), 4,43 (s,2H), 3,85-3,82 (m,1H), 3,73-3,70 (m,1H), 3,20-3,19 (m,4H), 2,98 (m,2H)
Ejemplo 21
Compuesto (21): Preparación de 4-(3-(4-(3H-imidazo[4,5-b]piridin-6-il)piperazin-1-carbonil)-4-metoxibencil)ftalazin-1(2H)-ona. El esquema de reacción era específicamente de la siguiente manera.
Figure imgf000030_0003
Análogo al proceso para preparar el Compuesto (1) en la Etapa 7 del Ejemplo 1, el Compuesto i’ se condensó con el Compuesto v para producir el Compuesto (21): 4-(3-(4-(3H-imidazo[4,5-b]piridin-6-il)piperazin-1-carbonil)-4-metoxibencil)ftalazin-1(2H)-ona (66 mg, rendimiento de 42 %). MS (ESI) m/z: 496 [M+1]+. RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6): 612,55 (s,1H), 8,37 (s,1H), 8,23 (s,1H), 8,21 (s,1H), 7,94-7,76 (m,3H), 7,49 (s,1H), 7,31 (d, 1H, J=8, 0 Hz), 7,15­ 7,12 (m,1H), 7,00 (d, 1H, J=8,0 Hz), 6,93 (s,1H), 4,23 (s,2H), 3,77 (s,3H), 3,76 (a,2H),3, 23-3,13 (m,4H), 3,05-2,97 (m,2H).
Evaluación biológica
Ejemplo 1: Ensayo de actividad de la enzima PARP
Principio experimental:
La poli(ADP-ribosil)ación de proteínas nucleares es una modificación posterior a la traducción que se produce en respuesta a daños en el ADN. PARP es la abreviatura de poli(ADP-ribosa) polimerasa, que cataliza la unión de la poli(ADP-ribosa) a una proteína nuclear adyacente en presencia de NAD, activando de esta manera un mecanismo de reparación del ADN a través de una ruta de reparación con escisión de bases. El nivel de ADP-ribosa marcada con biotina unida a histona se puede detectar usando el kit de Ensayo HT Universal Chemiluminescent PARP comercializado por Trevigen Corp.
Reactivos y materiales
1. Kit de Ensayo HT Universal Chemiluminescent PARP con pocillos de tiras revestidas con histona, comercializado por Trevigen (EE. UU.), N.° de Catálogo: 4676-096-K.
2. Lector de placas: Lector de placas EnVision Multilabel comercializado por Perkin Elmer (EE. UU.).
Soluciones y tampones
1. Tampón de lavado: Triton X-100 al 0,1 % en PBS.
2. Tampón 20X PARP: Se diluyó a 1:20 con agua desionizada para obtener un tampón IX, que se usó para diluir la enzima PARP recombinante, los cócteles de PARP y los compuestos de ensayo.
3. Se formuló un cóctel 10X PARP en un cóctel IX PARP mezclando 2,5 pl/pocillo de cóctel 10X PARP, 2,5 pl/pocillo de ADN activado 10X, y 20 pl/pocillo de tampón IX PARP.
4. La enzima PARP se diluyó cuidadosamente con el tampón IX PARP inmediatamente antes del uso, la solución de enzima diluida debe utilizarse tan rápido como sea posible y la solución restante debe descartarse.
5. Strep-HRP se diluyó a 1:500 con el diluyente IX Strep inmediatamente antes del uso para obtener una solución IX.
6. El sustrato quimioluminiscente se preparó inmediatamente antes del uso, mezclando uniformemente volúmenes iguales de PeroxyGlow A y B para obtener un sustrato para la peroxidasa de rábano picante. Método experimental
Formulación de soluciones de compuestos
1. Una disolución madre 10 mM de cada compuesto de ensayo se diluyó a 10 pM y 1 pM en DMSO.
2. Inmediatamente antes del experimento, la solución a varios gradientes de concentración de cada compuesto disuelto en DMSO se diluyo a 1:20 en el tampón IX PARP para obtener una solución 5X del compuesto para su ensayo. Los pocillos de control positivo y negativo contenían el tampón IX PARP (conteniendo DMSO al 5 %). Se usó AZD2281 (Olaparib, AstraZeneca PLC) como compuesto de control.
Procedimientos experimentales
1. Se añadieron 50 pl de tampón IX PARP a cada pocillo para infiltrar la histona, y la placa se incubó durante 30 minutos a temperatura ambiente. A continuación se aspiró el tampón IX PARP de cada pocillo, y el líquido restante se secó dando golpecitos con toallitas de papel.
2. Las soluciones diluidas 5X de los Compuestos (1) a (21) y el compuesto AZD2281 de control se añadieron a los pocillos respectivos (10 pl por pocillo). Los pocillos de control positivo y negativo contenían el tampón IX PARP (conteniendo DMs O al 5 %).3
3. La enzima PARP se diluyó en el tampón IX PARP para proporcionar una concentración de 0,5 Unidades en 15 pl, y a continuación se añadieron 15 pl de la solución de enzima a cada pocillo salvo que al pocillo de control negativo se añadió exclusivamente el tampón IX PARP. La placa se incubó durante 10 minutos a temperatura ambiente.
4. Se añadieron 25 |jl del cóctel IX PARP secuencialmente a cada pocilio.
5. La placa se incubó durante 60 minutos a 27 °C.
6. Tras la incubación, la solución de reacción se aspiró de los pocillos y el líquido restante se secó dando golpecitos con toallitas de papel. A continuación, se lavó la placa 4 veces con Triton X-100 al 0,1 % en PBS (200 j l por pocillo por lavado), y el líquido restante se secó dando golpecitos con toallitas de papel.
7. Posteriormente, la solución IX Strep-HRP diluida se añadió a cada pocillo, y a continuación la placa se incubó durante 60 minutos a 27 °C.
8. Tras la incubación, la solución de reacción se aspiró de los pocillos y el líquido restante se secó dando golpecitos con toallitas de papel. A continuación, se lavó la placa 4 veces con Triton X-100 al 0,1 % en PBS (200 j l por pocillo por lavado), y el líquido restante se secó dando golpecitos con toallitas de papel.
9. Tras el lavado, un volumen igual de soluciones de PeroxyGlow A y B se mezclaron uniformemente, se añadieron 100 j l de la solución a cada pocillo y se registraron las señales quimioluminiscentes inmediatamente en un lector de placas.
Procesamiento de datos
La lectura de cada pocillo se convirtió al porcentaje de inhibición. El porcentaje de inhibición de los compuestos puede calcularse mediante la ecuación siguiente:
Lectura de pocillo de control positivo - X
Inhibición (% )= ------------------------------------------ ------------------------- -------------------------------------------- x 100% Lectura de pocillo de control positivo - Lectura de pocillo de control negativo Nota: la lectura del pocillo de control positivo se designó como 100 % de actividad de la enzima; la lectura del pocillo de control negativo se designó como 0 % de actividad de la enzima; y la actividad X se refiere a la lectura de la concentración respectiva de cada muestra.
Tabla 1. Inhibición de los com uestos sobre la enzima PARP-1
Figure imgf000032_0001
Conclusión: los compuestos preferidos de la presente invención tienen una notable actividad inhibidora sobre la proliferación de la enzima PARP-1.
Ejemplo 2. Ensayo de inhibición de la proliferación celular
Se ensayó in vitro la actividad inhibidora del compuesto de la presente invención sobre la proliferación en la línea celular MDA-MB-436 de cáncer de mama con fenotipo triple negativo.
Reactivos y materiales
1. Línea celular tumoral MDA-MB-436 suministrada por HD Biosciences (Shanghái) Co., Ltd., y sometida a detección de micoplasmas.
2. Medio de cultivo L15, Invitrogen, N.° de catálogo: 11415-064.
3. Suero de feto de bovino, Hyclone, N.° de catálogo: CH30160.03.
4. Penicilina-estreptomicina líquida, Invitrogen, N.° de catálogo: 15140-122.
5. DMSO, Sigma, N.° de catálogo D4540.
6. placa de 96 pocillos, Corning, N.° de catálogo: 3610.
7. Ensayo Luminiscente de Viabilidad Celular CellTiter-Glo, Promega, N.° de catálogo: G7571.
8. Lector de placas: Lector de placas EnVision Multilabel comercializado por Perkin Elmer.
Medio de cultivo celular
1. Medio L15. Medio de cultivo celular completo L15: Medio L15 que contiene suero de feto bovino al 10 %, 100 U de penicilina y 100 pg/ml de estreptomicina
Método experimental
Formulación de soluciones de compuestos
1. Se formuló cada compuesto de ensayo en una disolución madre 60 mM en DMSO, se envasó y se almacenó en un congelador a -80 °. La disolución madre de cada compuesto de ensayo se diluyó en serie en DMSO para proporcionar soluciones a varios gradientes de concentración, incluyendo 6 mM, 2 mM, 0,6 mM, 0,2 mM, 60 pM y 20 pM.
2. Inmediatamente antes del experimento, la solución formulada a varios gradientes de concentración de cada compuesto de ensayo se diluyó de forma aséptica 100 veces en el medio de cultivo celular completo. En este caso, los gradientes de concentración del compuesto de ensayo incluyeron 60 pM, 20 pM, 6 pM, 2 pM, 0,6 pM y 0,2 pM. Estas fueron soluciones 2x de los compuestos, y podían utilizarse para tratar las células.
3. Las disoluciones madre de los Compuestos (1) a (21) y el compuesto AZD2281 de control se diluyó en serie en DMSO para proporcionar soluciones a varios gradientes de concentración, incluyendo 20 pM, 2 pM, 0,2 pM, 0. 02.pM, 0,002 pM, y 0,0002 pM. Antes del experimento, la solución formulada a varios gradientes de concentración de cada compuesto de ensayo se diluyó de forma aséptica 100 veces en el medio de cultivo celular completo. Los gradientes de concentración del compuesto positivo incluían 200 nM, 20 nM, 2 nM, 0,2 nM, 0,02 nM, y 0,002 nM. Estas fueron soluciones 2x de los compuestos, y podían utilizarse para tratar las células.
Procedimientos experimentales
1. El día antes del tratamiento con los compuestos, las células se inocularon en una placa de 96 pocillos a una densidad de 8000 células/50 pl/pocillo.2345
2. El día siguiente, se añadieron las soluciones de compuesto 2x formuladas, de acuerdo con una matriz de disposición de compuestos, a la placa en una cantidad de 50 pl/pocillo.
3. La placa se agitó suavemente y se incubó durante 120 horas en una incubadora a 37 °C.
4. T ras la incubación, el reactivo formulado se añadió a la placa siguiendo las instrucciones del reactivo CellTiter Glo, se mezcló completamente y se incubó durante 10 minutos a temperatura ambiente en la oscuridad. 5. La placa se analizó en un lector de placas, se leyó la quimioluminiscencia, y se registraron los datos.
Procesamiento de datos
La lectura de cada pocillo debe convertirse a viabilidad celular. La viabilidad celular se puede calcular usando la siguiente fórmula:
Viabilidad celular Lectura de pocilio de muestra______
% ) = x 100% Lectura de pocilio de control de disolvente
Los datos procesados se sometieron a análisis de regresión no lineal usando el programa informático de análisis GraphPad Prism5 para obtener una curva dosis-respuesta; y se calculó la mediana de la dosis eficaz (DE50) de los compuestos de ensayo para las células MDA-MB-436.
Tabla - B-436
Figure imgf000034_0001
Conclusión: algunos compuestos preferidos de la presente invención tienen una actividad inhibidora significativa contra la proliferación de las células MdA-MB-436.
Ejemplo 3. Ensayo del efecto de la inhibición tumoral de los compuestos de la presente invención en ratones Se realizaron los siguientes experimentos para evaluar y comparar los efectos del presente compuesto utilizado solo en modelos de tumor en ratones que recibieron trasplantes con la línea celular de cáncer de mama humano MDA-MB-436, con la línea celular de cáncer de mama humano MX-1 o con la línea celular de cáncer de páncreas humano CAPAN-1 in vivo.
Compuesto de ensayo: Compuesto de ejemplo (4)
Animal de ensayo
Ratones BALB/cA lampiños, 6-7 semanas, hembra, disponibles de Shanghai SLAC Laboratory Animal Co., Ltd., Número de certificado: SCXK (Shanghái) 2012-0002. Entorno de reproducción: Calidad SPF.
Procedimientos experimentales
Los ratones lampiños se inocularon subcutáneamente con células de cáncer de mama humano MDA-MB-436, células de cáncer de mama humano MX-1 o células de cáncer de páncreas humano CAPAN-1. Una vez que el tumor hubo crecido hasta 100-200 mm3, los animales se agruparon aleatoriamente (D0). La dosificación y la pauta terapéutica se muestran en la Tabla 1. El volumen tumoral se midió dos o tres veces a la semana, se midió el peso corporal de los ratones y se registraron los datos. El volumen tumoral (V) es calculado usando la fórmula siguiente:
V = l / 2 x a x b 2
donde a y b denotan la longitud y la anchura.
T/C (%) = (T-T0)/(C-Co) X 100
donde T y C son volúmenes tumorales al final del experimento, y To y Co son los volúmenes tumorales al principio del experimento.
Tabla 3. Dosificación, pauta terapéutica y efecto de inhibición tumoral de los compuestos en un modelo de tumor en ratones lam iños tras lantados con células de cáncer de mama^ humano MDA-MB-436
Figure imgf000035_0001
Conclusión: algunos compuestos preferidos de la presente invención tienen evidente actividad antineoplásica en el modelo de tumor en ratones lampiños trasplantados con células de cáncer de mama humano MDA-MB-436, cuando se administra solos.
Tabla 4. Dosificación, pauta terapéutica y efecto de inhibición tumoral de los compuestos en un modelo de tumor en ratones lam iños tras lantados con células de cáncer de mama humano MX-1
Figure imgf000035_0002
Conclusión: algunos compuestos preferidos de la presente invención tienen evidente actividad antineoplásica en el modelo de tumor en ratones lampiños trasplantados con células de cáncer de mama humano MX-1, cuando se administra solos.
Tabla 5. Dosificación, pauta terapéutica y efecto de inhibición tumoral de los compuestos en un modelo de tumor en r n l m iñ r l n n l l n r n r h m n APAN-1
Figure imgf000035_0003
Conclusión: algunos compuestos preferidos de la presente invención tienen evidente actividad antineoplásica en el modelo de tumor en ratones lampiños trasplantados con células de cáncer de páncreas de humano CAPAN-1, cuando se administra solos.

Claims (12)

REIVINDICACIONES
1. Un compuesto de imidazol heterocíclico de Fórmula general I o
una sal farmacéuticamente aceptable del mismo:
Figure imgf000036_0001
R es hidrógeno, halo, alcoxi C1-C3 o haloalquilo C1-C3 ;
R2 es:
a)
Figure imgf000036_0002
, en el que
uno de X, Y, y Z es nitrógeno, y el resto son CH; o uno de X, Y, y Z es CH, y el resto son nitrógeno; y M es nitrógeno o CR1, en el que
Ri es hidrógeno, alquilo C1-C6 o haloalquilo C1-C6 ; o
b)
Figure imgf000036_0003
, en el que
uno de X, Y, y Z es nitrógeno, y el resto son CH; o uno de X, Y, y Z es CH, y el resto son nitrógeno; y M es CR1 , en el que
R1 es oxo.
2. El compuesto de la Fórmula general I de acuerdo con la reivindicación 1, en el que
R es hidrógeno, fluoro, metoxi o trifluorometilo; en el que R2 es:
a) haloalquilo.
Figure imgf000036_0004
, M es CRi en el que Ri es hidrógeno, alquilo C1-C30 C1-C3
3. El compuesto de la Fórmula general I de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 2, en el que X es nitrógeno, y Y y Z son CH; o Z es nitrógeno, y X y Y son CH; o Y es nitrógeno, y X y Z son CH; o X y Z son nitrógeno, y Y es CH.
4. El compuesto de la Fórmula general I de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que R2 es:
a)
Figure imgf000037_0001
M es CR1 en el que R1 es hidrógeno, metilo o trifluorometilo.
5. El compuesto de la Fórmula general I de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, que está seleccionado del grupo que consiste en los Compuestos 1 a 21 o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos:
Figure imgf000037_0002
Figure imgf000038_0001

Figure imgf000039_0001

Figure imgf000040_0001
6. Una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de Fórmula general I de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y uno o más vehículos y/o excipientes farmacéuticamente aceptables.
7. Un compuesto de Fórmula general I de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o una composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 8 de uso en el tratamiento de enfermedades mediante la inhibición de la actividad de PARP, seleccionándose dichas enfermedades entre el grupo que consiste en: enfermedades vasculares, choque septicémico, lesión isquémica, síntomas neurotóxicos, choque hemorrágico, enfermedad inflamatoria, esclerosis múltiple, enfermedades neurodegenerativas o diabetes.
8. El compuesto de la Fórmula general I de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o una composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 6 de uso en el tratamiento del cáncer, o de uso como antineoplásicos para tratar el cáncer o como fármaco para reforzar la radioterapia contra el cáncer.
9. El compuesto de uso de acuerdo con la reivindicación 8, en el que el cáncer es deficiente en la reparación por escisión del ADN bicatenario (DSB) dependiente de recombinación homóloga (HR).
10. El compuesto de uso de acuerdo con la reivindicación 9, en el que el cáncer comprende una o más células cancerosas que tienen una capacidad reducida o suprimida en la reparación por escisión del ADN bicatenario dependiente de recombinación homóloga con respecto a células normales.
11. El compuesto de uso de acuerdo con la reivindicación 9, en el que el cáncer es uno que tiene un fenotipo mutante deficiente en BRCA-1 o BRCA-2.
12. El compuesto de uso de acuerdo con la reivindicación 9, en el que el cáncer es un cáncer de mama, ovario, páncreas, próstata, rectal, de colon o mama.
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