ES2925879T3 - Composiciones de ribósido de nicotinamida para uso tópico en el tratamiento de afecciones de la piel - Google Patents

Abstract

Se proporcionan composiciones que contienen ribósido de nicotinamida (NR). Las composiciones que contienen NR se usan en el cuidado o tratamiento de la piel y afecciones de la piel. En algunas realizaciones, la invención se refiere a composiciones farmacéuticas y composiciones cosméticas que contienen ribósido de nicotinamida. En realizaciones adicionales, la invención se refiere a métodos de uso de ribósido de nicotinamida para promover el aumento de los niveles intracelulares de dinucleótido de nicotinamida y adenina (NAD+) en células y tejidos para mejorar la supervivencia de células y tejidos. Se proporciona un método para tratar signos o síntomas de envejecimiento o arrugas de la piel en un individuo, que comprende administrar tópicamente al individuo que necesita dicho tratamiento una cantidad eficaz del compuesto ribósido de nicotinamida, o sales del mismo. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

d e s c r ip c ió n

Composiciones de ribósido de nicotinamida para uso tópico en el tratamiento de afecciones de la piel

Campo de la invención

Las composiciones que contienen ribósido de nicotinamida (NR) se usan en el cuidado o tratamiento de la piel y afecciones de la piel. La descripción se refiere a composiciones farmacéuticas y composiciones cosméticas que contienen ribósido de nicotinamida. La descripción también se refiere a métodos de ^uso de ribósido de nicotinamida para promover el aumento de los niveles intracelulares de dinucleótido de nicotinamida y adenina (NAD+) en células y tejidos, para mejorar la supervivencia celular y tisular y la salud de todas las células y tejidos.

Antecedentes

Las enzimas que usan NAD+ juegan un papel en el proceso de reparación del ADN. Específicamente, las poli(ADP-ribosa) polimerasas (PARP), en particular PARP-1, se activan por la ruptura de cadenas de ADN y afectan la reparación del ADN. Las PARP consumen NAD+ como donante de adenosina difosfato ribosa (ADPR) y sintetizan poli(ADP-ribosa) en proteínas nucleares como las histonas y su PARP. Aunque las actividades de PARP facilitan la reparación del ADN, la sobreactivación de PARP puede causar un agotamiento significativo de NAD+ celular, lo que lleva a la necrosis celular. La aparente sensibilidad del metabolismo de NAD+ a la genotoxicidad ha llevado a investigaciones farmacológicas sobre la inhibición de PARP como un medio para mejorar la supervivencia celular. Numerosos informes han demostrado que la inhibición de PARP aumenta las concentraciones de NAD+ en células sujetas a genotoxicidad, con la consiguiente disminución de la necrosis celular. Sin embargo, todavía se produce la muerte celular por toxicidad, presumiblemente porque las células pueden completar las vías apoptóticas que se activan por la genotoxicidad. Por lo tanto, la muerte celular significativa sigue siendo una consecuencia del daño del ADN/macromolécula, incluso con la inhibición de PARP. Esta consecuencia sugiere que la mejora del metabolismo de NAD+ en la genotoxicidad puede ser parcialmente eficaz para mejorar la supervivencia celular, pero que otros actores que modulan la sensibilidad apoptótica, como las sirtuínas, también pueden desempeñar un papel importante en las respuestas celulares a las genotoxinas.

L^os mecanismos fisiológicos y bioquímicos que determinan los efectos de la toxicidad química y de la radiación en los tejidos son complejos, y la evidencia indica que el metabolismo de NAD+ es un actor importante en las vías de respuesta al estrés celular. Por ejemplo, se ha demostrado que la regulación positiva del metabolismo de NAD+, a través de la sobreexpresión de mononucleótidos de nicotinamida/ácido nicotínico, protege contra la degeneración axonal de las neuronas, y se ha demostrado recientemente que la nicotinamida usada farmacológicamente proporciona protección neuronal en un modelo de síndrome alcohólico fetal e isquemia fetal. Tales efectos protectores podrían ser atribuibles a la biosíntesis de NAD+ sobrerregulado, lo que aumenta la reserva disponible de NAD+ sujeta a agotamiento durante el estrés genotóxico. Este agotamiento de NAD+ está mediado por las enzimas PARP, que se activan por el daño del ADN y pueden agotar el NAD+ celular, lo que lleva a la muerte necrótica. Otro mecanismo de protección celular mejorada que podría actuar en conjunto con la biosíntesis de NAD+ sobrerregulado es la activación de los programas transcripcionales de protección celular regulados por las enzimas sirtuínas.

L^os ejemplos de protección de células y tejidos relacionados con NAD+ y sirtuínas incluyen el hallazgo de que se requiere SlRTI para la neuroprotección asociada con traumatismos y genotoxicidad. SIRT1 también puede disminuir la toxicidad dependiente de la microglía de la beta-amiloide a través de la reducción de la señalización de NFKB. SIRT1 y el aumento de las concentraciones de NAD+ proporcionan neuroprotección en un modelo de la enfermedad de Alzheimer. Las sirtuínas son enzimas dependientes de NAD+ que tienen actividades de proteína desacetilasa y ADP-ribosiltransferasa que sobrerregulan las vías de respuesta al estrés. La evidencia indica que SIRT1 está sobrerregulado por la restricción calórica y en humanos podría proporcionar a las células protección contra la apoptosis a través de la subregulación de las funciones de p53 y Ku70. Además, SIRT1 aumenta la transcripción dependiente de FOXO de proteínas involucradas en la desintoxicación de especies reactivas de oxígeno (ROS), como MnSOD. Se ha demostrado que la sirtuína SIRT6 participa en las vías de reparación del ADN y ayuda a mantener la estabilidad del genoma. Con respecto a los ribósidos de nicotinilo, incluido el ribósido de nicotinamida, se han propuesto varios ^usos como en la Patente de U.S. 8,106,184.

El documento US 20120172584 se refiere a composiciones de ribósidos de nicotinoilo y derivados de ribósidos de nicotinamida y ^sus métodos de ^uso. En algunas modalidades, el documento US 20120172584 se refiere a métodos para fabricar ribósidos de nicotinoilo. En algunas modalidades, el documento US 20120172584 se refiere a composiciones farmacéuticas y complementos nutricionales que contienen un ribósido de nicotinoilo. En modalidades adicionales, el documento US 20120172584 se refiere a métodos de ^uso de ribósidos de nicotinoilo y derivados de ribósido de nicotinamida que promueven el aumento de los niveles intracelulares de nicotinamida adenina dinucleótido (NAD+) en células y tejidos para mejorar la supervivencia celular y tisular.

Daño en el ADN mediado por UV

La luz ultravioleta (UV) Juega un papel integral en el desarrollo de numerosas enfermedades de la piel que van desde el envejecimiento hasta el cáncer. Pruebas considerables que abarcan décadas han demostrado de manera concluyente que la radiación UV desencadena múltiples respuestas celulares independientes. Se sabe que la radiación UV penetra en la piel donde es absorbida por las proteínas, los lípidos y el ADN, provocando una serie de eventos que resultan en el deterioro progresivo de la estructura celular y la función de las células (Valacchi y otros, "Cutaneous responses to environmental stressors", Ann. N. ^y . Acad. S^cí. (2012) 1271: 75-81). El A^d N es el componente básico de la vida y ^su estabilidad es de suma importancia para el correcto funcionamiento de todas las células vivas. La radiación UV es uno de los factores ambientales más poderosos (y comunes) que pueden causar un amplio intervalo de trastornos celulares al inducir lesiones de ADN mutagénicas y citotóxicas; más notablemente dímeros de ciclobutano-pirimidina (CPD) y 6-4 fotoproductos (64 pps) (Narayanan y otros, "Ultraviolet radiation and skin cáncer," Int. J. Dermatol. (2010) 49: 978-86). Es importante tener en cuenta que el daño del ADN mediado por UV es un evento temprano en una plétora de trastornos celulares proliferativos. L^os dos tipos principales de daño en el ADN inducido por UV son los C^pD y 64pp (Junto con ^sus isómeros Dewer) (Sinha, R.P. y Hader, D.P., " UV-induced DNA damage and repair: a review", Photochem. Photobiol. S^cí. (2002) 1: 225-36; and Rastogi y otros, "Molecular mechanisms of ultraviolet radiation-induced DNA damage and repair," J. Nucleic Acids (2010) 2010: 59298^o). Estas abundantes lesiones en el ADN, ^sí no se reparan, pueden interferir con la replicación del ADN y posteriormente causar mutaciones en el ADN. Por lo tanto, estas lesiones pueden ser mutagénicas (potencialmente conduciendo a trastornos proliferativos) y/o pueden ser citotóxicas (dando como resultado la muerte celular). 64 pp ocurren en aproximadamente un tercio de la frecuencia de los CPD, pero son más mutagénicos (Sinha y Hader, 2002). En una modalidad, la prevención de estos aductos de ADN mediados por UV es primordial para protegerse contra la aparición de varios trastornos proliferativos, que van desde el envejecimiento hasta el cáncer.

Pérdida de la función de barrera mediada por UV

Mantener una barrera impermeable al agua entre el organismo y el medio ambiente es una función esencial de la piel. Esta función de barrera sirve para prevenir la deshidratación; que puede conducir a la muerte del organismo (Jiang, S.J. y otros, " Ultraviolet B-índuced alterations of the skin barrier and epidermal calcium gradient," Exp. Dermatol. (20o7) 16: 985-992). Se ha demostrado que la luz UV interrumpe la función de barrera epidérmica de la piel de una manera dependiente de la dosis (Haratake, A. y otros, " UVB-induced alterations in permeability barrier functíon: roles for epidermal hyperproliferation and thymocyte-mediated response" J. Invest. Dermatol. (1997) 108: 769-775; and prev. cítation). La disfunción de la barrera de la piel se puede evaluar directamente midiendo la pérdida de agua transepidérmica (TEWL), que es una medida de hidratación de la piel (Oba, C. y otros, " Collagen hydrolysate intake improves the Ioss of epidermal barrier functíon and skin elasticity induced by UVB irradiation in hairless mice," Photodermatol. Photoímmunol. Photomed. (2013) 29: 204-11; and prev. citatíons).

Por lo tanto, se plantea la hipótesis de que un agente quimiopreventivo para varios trastornos de la piel humana será eficaz para inhibir ^o prevenir la pérdida directa de la función de barrera mediada por UV, el daño del ADN ^o el daño oxídativo para ayudar a mantener una piel humana saludable.

Sí se pudiera encontrar una manera de usar el ribósido de nicotinamida, o sus sales, en una composición tópica para el cuidado de la piel en el mantenimiento de una piel humana saludable, esto representaría una contribución útil a la técnica. Además, si se pudiera encontrar una manera de usar el ribósido de nicotinamida, ^{o sus} sales, en una composición cosmética o cosmecéutica para el mantenimiento de la piel humana saludable, esto también representaría una contribución útil a la técnica.

Resumen de la invención

Debe entenderse que cualquier referencia a un método de tratamiento de un cuerpo humano o animal, o sus divulgaciones, se debe considerar como una referencia a un compuesto para tal ^uso. la composición para el cuidado de la piel incluye ribósido de nicotinamida, o sus sales, opcionalmente en combinación con un compuesto seleccionado de estilbenoides (por ejemplo, pterostilbeno), curcumina, péptidos, retinóles, ácido salicílico, peróxido de benzoilo, vitamina C (ácido L-ascórbico), antocianinas ^{o sus} combinaciones.

El ribósido de nicotinamida puede ser una forma de sal seleccionada de fluoruro, cloruro, bromuro, yoduro, formiato, acetato, ascorbato, benzoato, carbonato, citrato, carbamato, formiato, gluconato, lactato, bromuro de metilo, sulfató de metilo, nitrato, fosfato, difosfato, succinato, sulfató o trifluoroacetato.

Se proporciona un método cítoprotector cosmético para tratar Ios signos o síntomas del envejecimiento o las arrugas de la piel al tratar o prevenir el dañó oxídativo en la piel de un individuó, que comprende administrar tópicamente al individuó que necesita dicho tratamiento una cantidad eficaz del compuesto ribósido de nicotinamida, ^{o sus} sales. Se proporciona un compuesto para usar en un método quimioprotector para tratar o prevenir el dañó del ADN mediado por UV en la piel de un individuó, que comprende administrar tópicamente al individuó que necesita dicho tratamiento una cantidad terapéuticamente eficaz del compuesto ribósido de nicotinamida, o una de sus sales.

Se describe un método citoprotector para tratar o prevenir el daño oxidativo en la piel de un individuo, que comprende administrar tópicamente al individuo que necesita dicho tratamiento una cantidad terapéuticamente eficaz del compuesto ribósido de nicotinamida, o una de sus sales.

Se proporciona un compuesto para usar en un método para tratar ^o reparar una herida en la piel de un individuo, que comprende administrar tópicamente al individuo que necesita dicho tratamiento una cantidad terapéuticamente eficaz del compuesto ribósido de nicotinamida, ^o una de ^sus sales, en donde las células de piel en la piel tienen mayor motilidad y/o proliferación.

Breve descripción de los dibujos

La figura 1 presenta un ensayo de protección frente al daño oxidativo de células epidermoides A431 humanas incubadas con H²O²1 mM en condiciones de detención del crecimiento (suero bovino fetal al 1%, FBS); control, NR 0,2 mM; NR 1 mM; y NR 5 mM. Las células vivas se muestran en unidades de fluorescencia reflectante (RFU).

La Figura 2 presenta el experimento de la Figura 1, se incubó con H²O² 1 mM en condiciones normales de crecimiento (1^o% FBS); control, NR 0,04 mM; NR 0,2 mM; y NR 1 mM.

La Figura 3 presenta un ensayo de daño con UV de células epidermoides A431 humanas pretratadas con medio celular (control); NR 1 mM; y NR 5 mM; luego todas las muestras expuestas a radiación UV-C a 10 J/m2 El daño del ADN inducido por UV se refleja en el nivel de dímero de pirimidina de ciclobutano (CPD).

Las Figura 4A es una microfotografía con un aumento de 40 X que muestra un primer ensayo de cicatrización de heridas por un rascado de células de fibroblastos NIH 3T3 de ratón incubadas con FBS al 1 % (0 h).

La Figura 4B es una microfotografía con un aumento de 40 X que muestra el ensayo de cicatrización de heridas por un rascado de la Figura 4A incubado con FBS al 1 % (24 h) demostrando el cierre de la brecha a través de la migración celular.

La Figura 5A es una microfotografía con un aumento de 40 X que muestra el primer ensayo de cicatrización de heridas por un rascado de células de fibroblastos NIH 3T3 de ratón incubadas con control de FBS al 5% (0 h). La Figura 5B es una microfotografía con un aumento de 40 X que muestra el ensayo de cicatrización de heridas por un rascado de la Figura 5A incubado con control de FBS al 5 % (24 h) demostrando el cierre de la brecha a través de la migración celular.

La Figura 6A es una microfotografía con un aumento de 40 X que muestra un segundo ensayo de cicatrización de heridas por un rascado de células de fibroblastos NIH 3T3 de ratón incubadas con FBS al 1 % NR 1 mM (Oh).

La Figura 6B es una microfotografía con un aumento de 40 X que muestra el ensayo de cicatrización de heridas por rascado de la Figura 6A incubado con FBS al 1 % NR 1 mM (24 h) demostrando el cierre de la brecha a través de la migración celular.

Descripción detallada

El ribósido de nicotinamida (NR), o sus sales, pueden aumentar la actividad de NAD+. También se cree que el aumento de la actividad de NAD+ puede aumentar la actividad de la sirtuína porque NAD+ puede actuar como sustrato de SIRT1. Dichos agentes pueden incluir NAD+ ^o NADH, un precursor de NAD+, un intermediario en la vía de recuperación de NAD+ o una sustancia que genera NAD+ como una nicotinamida mononucleótido adenililtransferasa (NMNAT) ^o un ácido nucleico que codifica una nicotinamida mononucleótido adenililtransferasa. El mononucleótido de nicotinamida adenililtransferasa puede ser una proteína NMNAT1. Otros precursores útiles de NAD+ incluyen nicotinamida y ácido nicotínico. La Patente de U.S. 7,776,326 de Milbrandt, y otros analiza la vía biosintética de NAD.

En un ejemplo, se describe un método que extiende la vida útil de una célula, extiende la capacidad proliferativa de una célula, retrasa el envejecimiento de una célula, promueve la supervivencia de una célula, retrasa la senescencia celular en una célula, imita los efectos de la restricción calórica, aumentando la resistencia de una célula al estrés, o previniendo la apoptosis de una célula, poniendo en contacto las células con ribósido de nicotinamida, ^{o sus} sales. En una modalidad, los compuestos para usar en los métodos comprenden poner en contacto células de la piel con ribósido de nicotinamida, ^{o sus} sales.

En otro ejemplo, las células que están destinadas a conservarse durante largos periodos de tiempo pueden tratarse con ribósido de nicotinamida ^{o sus} sales. Las células pueden estar en suspensión (por ejemplo, células sanguíneas, suero, medios de crecimiento biológico, etc.) o en tejidos u órganos. Por ejemplo, la sangre extraída de un individuo con fines de transfusión puede tratarse con ribósido de nicotinamida, ^{o sus} sales, para conservar las células sanguíneas durante periodos de tiempo más prolongados. Además, la sangre que se va a utilizar con fines forenses también puede conservarse utilizando ribósido de nicotinamida o sus sales.

Las células particulares que pueden protegerse o tratarse para extender su vida útil o proteger contra la apoptosis con ribósido de nicotinamida, o sus sales, incluyen células de la piel tales como queratinocitos, melanocitos, células dérmicas, células epidérmicas, células dendríticas (Langerhans), células básales, células escamosas celulares, células madre, células madre epidérmicas, folículos pilosos y similares.

Otras células que pueden tratarse para extender ^su vida útil ^o proteger contra la apoptosis incluyen células para producción, consumo o alimentos, por ejemplo, células de mamíferos no humanos (como carne) o células vegetales (como vegetales).

El ribósido de nicotinamida (NR) es un compuesto de piridinio que tiene la fórmula (I):

Los compuestos de fórmula (I) pueden incluir un contraión de sal como, pero no es limitado a, haluro (incluidos cloruro, bromuro, yoduro y similares), formiato, acetato, ascorbato, benzoato, carbonato, citrato, carbamato, formiato, gluconato, lactato, bromuro de metilo, sulfato de metilo, nitrato, fosfato, difosfato, succinato, sulfato, trifluoroacetato, besilato, tosilato, triflato, mesilato y similares. Se hace referencia a la última edición de Remington's Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing C^o., Easton, PA), the article by S. Berge, y otros, J. Pharmaceut. S^cí. (1977) 66:1-19 (y sus referencias citadas en el mismo), and the book chapter by L.D. Bighley, y otros, "Salt Forms of Drugs and Absorption," in Encyclopedia of Pharmaceutical Technology, J. Swarbrick, Ed., VoI. 13, pp. 453-499 (New York: Marcel Dekker, Inc., 1996) (y sus referencias citadas en el mismo).

El ribósido de nicotinamida (NR), como sal de cloruro, está disponible comercialmente como NIAGEN™ de ChromaDex Inc. (Irvine, California).

Otros compuestos útiles para aplicación tópica, soIos o en combinación con NR, incluyen ribósido de ácido nicotínico (NAR), ⁿ R ^o NAR 1,4-dihidro reducido (es decir, ribósido de nicotinamida reducido (NRH) ^o ribósido de ácido nicotínico reducido (NARH)), y similares.

El ribósido de nicotinamida, o sus sales, también se puede aplicar durante las fases de desarrollo y crecimiento en mamíferos, plantas, insectos ^o microorganismos, para, por ejemplo, alterar, retardar ^o acelerar el proceso de desarrollo y/o crecimiento.

Se ha descubierto un método quimioprotector cosmético para inhibir o prevenir el daño del ADN en la piel causado por la luz ultravioleta (UV), o inhibir o prevenir el daño oxidativo, mediante el uso de una cantidad eficaz de NR. Se describen composiciones farmacéuticas y nutracéuticas que contienen pterostilbeno adecuadas para la administración a un individuo con el fin de prevenir daño subsiguiente del ADN mediado por UV, ^o daño oxidativo, en la piel.

En otra descripción, el ribósido de nicotinamida, ^{o sus} sales, se pueden usar para tratar células útiles para trasplante ^o terapia celular, incluidos, por ejemplo, injertos de tejido sólido, trasplantes de órganos, suspensiones celulares, células madre, células de médula ósea, etc. Las células o el tejido puede ser un autoinjerto, un aloinjerto, un sininjerto o un xenoinjerto. Las células o el tejido se pueden tratar con el ribósido de nicotinamida, o una de sus sales, antes de la administración/implantación, al mismo tiempo que la administración/implantación y/o después de la administración/implantación en un sujeto. Las células ^o el tejido se pueden tratar antes de la extracción de las células del individuo donante, ex vivo después de la extracción de las células ^o el tejido del individuo donante ^o después de la implantación en el receptor. Por ejemplo, el individuo donante ^o receptor se pueden tratar sistémicamente con ribósido de nicotinamida, ^o sales del mismo, ^o puede tener un subconjunto de células/tejido tratado localmente con ribósido de nicotinamida, o sus sales. En determinados ejemplos, las células o tejidos (o individuos donantes/receptores) se pueden tratar con uno ^o más agentes terapéuticos adicionales útiles para prolongar la supervivencia del injerto, como, por ejemplo, un agente inmunosupresor, una citoquina, un factor angiogénico, etc.

En otras descripciones más, las células pueden tratarse con ribósido de nicotinamida, o sus sales, que aumenta el nivel de NAD+ in vivo, por ejemplo, para aumentar ^su vida útil ^o prevenir la apoptosis. Por ejemplo, en una modalidad principal, la piel puede protegerse del envejecimiento (por ejemplo, desarrollo de arrugas, pérdida de elasticidad, etc.) tratando la piel o las células epiteliales con ribósido de nicotinamida, o sus sales, que aumentan el nivel de NAD+ intracelular. En una modalidad ejemplar, la piel se pone en contacto con una composición farmacéutica o cosmética que comprende ribósido de nicotinamida, o sus sales, que aumenta el nivel de NAD+ intracelular. Afecciones ejemplares de la piel o condiciones de la piel que pueden tratarse de acuerdo con los métodos descritos en la presente descripción incluyen trastornos ^o enfermedades asociadas ^o causadas por inflamación, daño solar ^o envejecimiento natural. Por ejemplo, las composiciones encuentran utilidad en la prevención ^o tratamiento de dermatitis de contacto (incluyendo dermatitis de contacto irritante y dermatitis de contacto alérgica), dermatitis atópica (también conocida como eczema alérgico), queratosis actínica, trastornos de queratinización (que incluye eczema), enfermedades de epidermólisis ampollosa (que incluye pénfigo), dermatitis exfoliativa, dermatitis seborreica, eritemas (incluyendo eritema multiforme y eritema nodoso), daño causado por el sol u otras fuentes de luz, lupus eritematoso discoide, dermatomiositis, psoriasis, cáncer de piel y los efectos del envejecimiento natural. En otra modalidad, el ribósido de nicotinamida, ^{o sus} sales, que aumentan el nivel de NAD+ intracelular se pueden usar para el tratamiento de heridas y/o quemaduras para promover la curación, incluidas, por ejemplo, quemaduras de primer, segundo ^o tercer grado y/o quemaduras térmicas, químicas ^o eléctricas. Las formulaciones se pueden administrar por vía tópica, a la piel ^o tejido mucoso, como un ungüento, loción, crema, microemulsión, gel, solución ^o similar, como se describe más adelante en la presente descripción, dentro del contexto de un régimen de dosificación eficaz para lograr el resultado deseado.

Las formulaciones tópicas que comprenden uno o más de ribósido de nicotinamida, o sus sales, que aumentan el nivel de NAD+ intracelular también pueden usarse como composiciones preventivas, por ejemplo, quimiopreventivas. Cuando se usa en un método quimiopreventivo, la piel susceptible se trata antes de cualquier condición visible en un individuo en particular.

Las formulaciones tópicas pueden incluir otros precursores de NAD+ o compuestos capaces de aumentar el NAD+ in vivo, como, entre otros, nicotinamida y ácido nicotínico.

L^os intervalos útiles de NR, ^{o sus} sales, en las composiciones tópicas incluyen desde aproximadamente el 0,001 % hasta aproximadamente el 50 % en peso, basado en el peso total de la composición. Otro intervalo adecuado para NR es de aproximadamente 0,1 % a aproximadamente 10 % en peso, basado en el peso total de la composición. Otro intervalo adecuado para NR es de alrededor de 0,5% a alrededor de 5% en peso, basado en el peso total de la composición.

Se contemplan formulaciones orales de NR. Las dosis terapéuticas útiles de NR pueden variar, pero no se limitan a, de aproximadamente 1 mg hasta aproximadamente 5000 mg en un individuo humano. Otro intervalo de dosis adecuado es de alrededor de 5 mg a alrededor de 500 mg. Otro intervalo de dosis adecuado es de alrededor de 50 mg a alrededor de 500 mg. El NR puede formularse por vía oral ^o tópica como una composición farmacéutica ^o nutracéutica, que incluye un vehículo farmacéutica ^o nutracéuticamente aceptable, respectivamente. En una modalidad de una composición farmacéutica que contiene NR, un nivel adecuado de NR puede oscilar entre aproximadamente el O,0l % en peso y aproximadamente el 50 % en peso, basado en el peso total de la composición. En otra modalidad de una composición farmacéutica que contiene NR, un nivel adecuado de NR puede oscilar entre aproximadamente el O,1 % en peso y aproximadamente el 10 % en peso, basado en el peso total de la composición.

La piel humana comprende una capa epidérmica superior (epidermis) que descansa sobre una capa dérmica inferior (dermis). La epidermis se compone principalmente de queratinocitos, que se desarrollan en la parte inferior, se mueven hacia la parte superior y se reemplazan constantemente. A medida que se desprenden las células muertas viejas, se reemplazan, por lo que esta capa se renueva constantemente. La epidermis también contiene melanocitos, ubicados generalmente cerca de la parte inferior de la capa, que producen el pigmento melanina, que contribuye al color de la piel y también proporciona protección UV. La epidermis también contiene células dendríticas (Langerhans), que están implicadas en el sistema inmunitario, y células basales que se encuentran en la parte inferior de la capa. La epidermis también incluye células escamosas. Las capas epidérmica y dérmica también contienen células madre y folículos pilosos. En los mamíferos, los melanocitos también se distribuyen en el cerebro, los ojos, los oídos y el corazón, entre otros tejidos.

Las células de la piel, como se describe, son susceptibles al daño inducido por la luz ultravioleta, daño al ADN y carcinogénesis. Además, el envejecimiento normal contribuye a la formación de arrugas, manchas de la edad, pérdida de elasticidad de la piel y otros signos de envejecimiento, como arrugas superficiales, arrugas gruesas y profundas, poros dilatados, fotodaño, descamación, sequedad, flacidez de la piel, hinchazón de la piel. alrededor de los ojos, hinchazón de la piel alrededor de la papada, pérdida de firmeza de la piel, pérdida de la tirantez de la piel, pérdida de la función de barrera, pérdida del retroceso de la piel debido a la deformación, decoloración, manchas, palidez, hiperpigmentación, queratosis, hiperqueratinización, elastosis o descomposición del colágeno y celulitis, o sus combinaciones.

Por lo tanto, en una modalidad, NR, ^{o sus} sales, se pueden usar de la siguiente manera: para mejorar los signos del envejecimiento, incluidas las arrugas superficiales, una arruga gruesa y profunda, poros dilatados, manchas de la edad, fotodaño, descamación, sequedad, flacidez en la piel, hinchazón de la piel alrededor de los ojos, hinchazón de la piel alrededor de la papada, pérdida de elasticidad de la piel, pérdida de firmeza de la piel, pérdida de tirantez de la piel, pérdida de la función de barrera, pérdida del retroceso de la piel debido a la deformación, decoloración, manchas, palidez, hiperpigmentación, queratosis, hiperqueratinización, elastosis o descomposición del colágeno y celulitis, o sus combinaciones.

El NR, ^{o sus} sales, se pueden usar en combinación con uno ^o más estilbenoides. Un compuesto estilbenoide ejemplar es el pterostilbeno (3,5-dimetoxi-4'-hidroxi-trans-estilbeno), un compuesto biodisponible por vía oral con una semivida t i ^/2 de aproximadamente 105 minutos en sangre. El pterostilbeno es un compuesto útil para el tratamiento de afecciones de la piel en combinación con ribósido de nicotinamida ^{o sus} sales.

Opcionalmente, NR, o sus sales, se pueden usar en combinación con pterostilbeno, en combinación adicional con curcumina.

Opcionalmente, el NR o sus sales se pueden usar en combinación con uno o más compuestos que incluyen péptidos, retinóles, ácido salicílico, peróxido de benzoilo, vitamina C (ácido L-ascórbico), antocianinas o sus combinaciones. Una antocianina útil es la cianidina-3-glucósido ("C3G").

Las composiciones cosméticas o cosmecéuticas de la presente descripción pueden administrarse en combinación con un vehículo nutracéuticamente aceptable. L^os ingredientes activos en dichas formulaciones pueden comprender de i % en peso a 99 % en peso, ^o alternativamente, 0,1 % en peso a 99,9 % en peso. "Vehículo nutracéuticamente aceptable" significa cualquier vehículo, diluyente ^o excipiente que sea compatible con los demás ingredientes de la formulación y que no sea perjudicial para el usuario. Los excipientes útiles incluyen celulosa microcristalina, estearato de magnesio, estearato de calcio, cualquier azúcar aceptable (por ejemplo, manitol, xilitol), y para uso cosmético se prefiere una base de aceite.

Las composiciones farmacéuticas tópicas de la presente descripción se pueden administrar en combinación con un vehículo farmacéuticamente aceptable. L^os ingredientes activos en dichas formulaciones pueden comprender de 1 % en peso a 99 % en peso, ^o alternativamente, 0,1 % en peso a 99,9 % en peso. "Vehículo farmacéuticamente aceptable" significa cualquier vehículo, diluyente o excipiente que sea compatible con los demás ingredientes de la formulación y que no sea perjudicial para el usuario.

De acuerdó con ciertos ejemplos, las composiciones farmacéuticas cosméticas y/o tópicas descritas en este documento se pueden proporcionar en forma de ungüentó, crema, loción, gel u otros sistemas de administración transdérmica como se describe en LV Alien, Jr., y otros, Ansel's Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, 9th Ed., pp. 272-293 (Philadelphia, Pennsylvania: Lippincott Williams & Wilkins, 2011).

Los ungüentos, como se usa aquí, se refieren a preparaciones semisólidas que incluyen una base de ungüentó que tiene uno ^o más ingredientes activos incorporados ^o fusionados (es decir, fundidos juntó con otros componentes de la formulación y enfriados con agitación constante para formar una preparación congelada) en las mismas. La base del ungüentó puede estar en forma de: una base oleaginosa o de hidrocarburo (por ejemplo, vaselina o una combinación de vaselina/cera); una base de absorción que permite la incorporación de una solución acuosa que da como resultado la formación de una emulsión de agua en aceite (por ejemplo, vaselina hidrófila) o que es una emulsión de agua en aceite que permite la incorporación de cantidades adiciónales de soluciones acuosas (por ejemplo, lanolina); una base removible con agua que son emulsiones de aceite en agua que se pueden diluir con agua ^o soluciones acuosas (por ejemplo, ungüentó hidrofílico, USP); ^o una base soluble en agua que no contiene componentes oleaginosos (por ejemplo, formulaciones de polietilenglicol (PEG) que combinan PEG que tienen un peso molecular medió inferior a 600 con un PEG que tiene un peso molecular medió superior a 1000); y similares. Las cremas, como se usa aquí, se refieren a preparaciones semisólidas que contienen uno ^o más agentes activos ^o medicinales disueltos o dispersos en una emulsión de agua en aceite o una emulsión de aceite en agua o en otro tipo de base lavable con agua. Generalmente, las cremas se diferencian de los ungüentos por la facilidad con la que se aplican/esparcen sobre una superficie tal como la piel y la facilidad con la que se eliminan de una superficie tratada.

Las lociones, como se usa en la presente, se refieren a suspensiones de materiales sólidos en un vehículo acuoso. Generalmente, las lociones tienen un carácter no grasó y una mayor capacidad de esparcimiento sobre grandes áreas de la piel que los ungüentos, cremas y geles.

Los geles, como se usa en la presente, se refieren a sistemas semisólidos que incluyen una dispersión de moléculas pequeñas y/o grandes en un vehículo líquido acuoso que se vuelve gelatinoso mediante la adición de un agente gelificante. Los agentes gelificantes adecuados incluyen, pero no se limitan a, macromoléculas sintéticas (por ejemplo, polímeros de carbómero), derivados de celulosa (por ejemplo, carboximetilcelulosa y/o hidroxipropilmetilcelulosa) y gomas naturales (por ejemplo, goma de tragacanto, carragenina y similares). Las preparaciones en gel pueden estar en forma de un gel de una sola fase en el que los ingredientes activos o medicinales se dispersan uniformemente en todo el vehículo líquido sin límites visibles ^o un gel de dos fases en el que se dispersan floculantes o pequeñas partículas distintas del ingrediente activo o medicinal dentro del vehículo líquido.

Las preparaciones transdérmicas se pueden formar a partir de un ungüento, crema o gel que se ha combinado con un potenciador de la penetración y están diseñadas para administrar sistémicamente un ingrediente activo ^o medicinal. L^os potenciadores de la penetración incluyen, por ejemplo, dimetilsulfóxido, etanol, propilenglicol, glicerina, PEG, urea, dimetilacetamida, laurilsulfato de sodio, poloxámeros, Spans, Tweens, lecitina y/o terpenos, entre otros.

Otras formas semisólidas adecuadas para usar como composiciones cosméticas y/o farmacéuticas tópicas incluyen pastas (preparados que contienen una mayor proporción de material sólido que los hace más rígidos que los ungüentos) y glicerogelatinas (masas plásticas que contienen gelatina, glicerina, agua y un principio activo ^o ingrediente medicinal).

En otros ejemplos, las composiciones tópicas y/o cosméticas se pueden preparar de acuerdo con formas de dosificación como se describe en Sample Preparation of Pharmaceutical Dosage Forms, B. Nickerson, Ed. (Nueva York: Springer, 2011).

El pterostilbeno se puede proporcionar en dosis tópicas diarias de aproximadamente 10 mg a aproximadamente 250 mg, en un paciente humano, por ejemplo. Otro intervalo de dosificación tópica adecuado es de aproximadamente 50 mg a aproximadamente 150 mg al día. Otro intervalo de dosificación tópica adecuado es de aproximadamente de 50 mg a aproximadamente de 100 mg al día. Una dosificación particularmente adecuada es de aproximadamente 100 mg administrados diariamente.

Rutas de administración

L^os compuestos pueden administrarse por cualquier vía, incluidas, pero no está limitado a la administración oral, sublingual, bucal, ocular, pulmonar, rectal y parenteral, o como un aerosol oral o nasal (por ejemplo, inhalación de vapores nebulizados, gotitas o partículas sólidas). La administración parenteral incluye, por ejemplo, administración intravenosa, intramuscular, intraarterial, intraperitoneal, intranasal, intravaginal, intravesical (por ejemplo, a la vejiga), intradérmica, transdérmica, tópica o subcutánea. También se contempla en la presente descripción la instilación de NR en el cuerpo del paciente en una formulación controlada, con liberación sistémica ^o local del fármaco que se producirá en un momento posterior. Por ejemplo, el fármaco puede estar localizado en un depósito para ^su liberación controlada a la circulación.

L^os métodos descritos anteriormente pueden comprenderse mejor en relación con los siguientes ejemplos. En cada uno de los ejemplos, se contempla que se puede usar NR, ^o una de ^sus sales.

Ejemplo 1

En un ejemplo, la NR se usa como vehículo para la administración transdérmica de compuestos y/o productos farmacéuticos.

En otro ejemplo, NR se usa de la siguiente manera: para mejorar los signos del envejecimiento, incluidas las arrugas superficiales, una arruga gruesa y profunda, poros dilatados, manchas de la edad, fotodaño, descamación, sequedad, flacidez en la piel, hinchazón en la piel alrededor de los ojos, hinchazón en la piel alrededor de la papada, pérdida de elasticidad de la piel, pérdida de firmeza de la piel, pérdida de tirantez de la piel, pérdida de la función de barrera, pérdida del retroceso de la piel por deformación, decoloración, manchas, palidez, hiperpigmentación, queratosis, hiperqueratinización, elastosis ^o degradación del colágeno, y celulitis, ^{o sus} combinaciones.

En otro ejemplo, la NR se usa en un método para tratar daños en la piel que incluyen rosácea, dermatitis, psoriasis, acné y daños inducidos por UV (que incluyen, por ejemplo, quemaduras solares), o sus combinaciones.

En otro ejemplo, el NR se puede usar para reducir los efectos del estrés oxidativo para ayudar a prevenir los signos del envejecimiento.

Ejemplo 2

En un ejemplo, NR se usa en combinación con pterostilbeno, opcionalmente en combinación adicional con curcumina.

En este ejemplo, la combinación que contiene NR funciona como un modulador inflamatorio inducido por UV que afecta los signos de envejecimiento y daño de, por ejemplo, UV/radiación que incluye aclaramiento de la piel, inflamación y enrojecimiento por quemaduras solares.

Además, en otro ejemplo, la combinación que contiene NR se puede usar para tratar el enrojecimiento y la inflamación asociados con lo siguiente: acné, rosácea, psoriasis, dermatosis por radiación y cicatrización de heridas. En otro ejemplo, la combinación que contiene NR se usa de la siguiente manera: para mejorar los signos del envejecimiento, incluidas las arrugas superficiales, una arruga gruesa profunda, poros dilatados, manchas de la edad, fotodaño, descamación, sequedad, flacidez en la piel, hinchazón en la piel alrededor ^ojos, hinchazón de la piel alrededor de la papada, pérdida de elasticidad de la piel, pérdida de firmeza de la piel, pérdida de tirantez de la piel, pérdida de la función de barrera, pérdida del retroceso de la piel debido a la deformación, decoloración, manchas, palidez, hiperpigmentación, queratosis, hiperqueratinización y elastosis ^o descomposición del colágeno, ^{o sus} combinaciones.

En otro ejemplo, la combinación que contiene NR se usa de la siguiente manera: para reparar el ADN en la piel, mejorar la reparación del ADN en la piel y/o potenciar los procesos mejorados de reparación del ADN.

Ejemplo 3

En un ejemplo, NR se usa en combinación con uno o más estilbenoides (es decir, compuestos de estilbeno). Los estilbenoides ejemplares se discuten en el documento US2009/0069444 de Joseph y otros, aunque para un uso diferente.

En este ejemplo, la combinación que contiene NR con uno o más estilbenoides funciona como un modulador inflamatorio inducido por UV que afecta los signos de envejecimiento y daño de, por ejemplo, UV/radiación que incluye aclaramiento de la piel, inflamación, acné y rosácea.

En otro ejemplo, la combinación que contiene NR con uno o más estilbenoides se usa de la siguiente manera: para mejorar los signos del envejecimiento, incluidas las arrugas superficiales, una arruga gruesa y profunda, poros dilatados, manchas de la edad, fotodaño, descamación, sequedad, flacidez en la piel, hinchazón de la piel alrededor de los ojos, hinchazón de la piel alrededor de la papada, pérdida de elasticidad de la piel, pérdida de firmeza de la piel, pérdida de tirantez de la piel, pérdida de la función de barrera, pérdida del retroceso de la piel debido a la deformación, decoloración, manchas, palidez, hiperpigmentación, queratosis, hiperqueratinización y elastosis o descomposición del colágeno, ^{o sus} combinaciones.

En otro ejemplo, la combinación que contiene NR con uno ^o más estilbenoides se usa de la siguiente manera: para reparar el ADN en la piel, mejorar la reparación del ADN en la piel y/o potenciar los procesos mejorados de reparación del ADN.

Ejemplo 4

En un ejemplo, la NR se usa en combinación con uno ^o más péptidos para mejorar la administración transdérmica de compuestos y/o productos ^o preparaciones farmacéuticas.

Ejemplo 5

En un ejemplo, NR se usa en combinación con uno o más retinóles, ácido salicílico, peróxido de benzoilo o vitamina C (ácido L-ascórbico), para tratar afecciones de la piel seleccionadas de acné, rosácea, queratosis, psoriasis, dermatitis y la me gusta.

En los siguientes protocolos, NR se usa como una sal de cloruro (NIAGENtm).

Ejemplo A

Tratamiento NR que previene el dañó oxidativo en las células de la piel humana.

Se cultivaron células epidermoides humanas A431 (ATCC # CRL1555) en medió DMEM complementado con FBS al 10 % y PenStrep al 1 % en matraces T75 según las recomendaciones de cultivo. El medió se reemplazó cada dos o tres días hasta que se alcanzó una confluencia >80%. Las células se tripsinizaron con una solución de EDTA con tripsina al 0,25% durante 2-3 minutos hasta que las células se desprendieron. Las células se subcultivaron en una proporción de 1:3 para un mayor crecimiento y aumentó de escala para el ensayó. Las células se tripsinizaron y contaron hasta una densidad de 5000 ^o 15000 células y se sembraron en 100 |jl de medio/pocillo en placas negras de fondo transparente de 96 pocilios. L^os pocilios exteriores en la periferia de las placas se dejaron sin sembrar y en su lugar se llenaron con medió para reducir el efecto de borde durante la incubación. Las placas se incubaron durante la noche en una incubadora humidificada a 37 °C/C02 al 5 % hasta confirmar que las células estaban adheridas. El cloruro de ribósido de nicotinamida (cloruro de NR) se añadió a las concentraciones de ensayó finales indicadas en los medios, ya sea bajó pretratamiento durante 24 h (sin peróxido de hidrógeno) ^o juntó con peróxido de hidrógeno 1 mM para una incubación de 20 h en una incubadora humidificada a 37 °C/C02 al 5 %, con reposición de medios a las 8 h o en condiciones de crecimiento sincronizado utilizando FBS al 1 %. Cada concentración se probó en 6 réplicas. Controles apropiados: células sin compuesto y peróxido de hidrógeno (sin citotoxicidad; control negativo), células sin compuesto, pero en presencia de peróxido de hidrógeno 1 mM (control positivo), pocilios solos con azul alamar (blanco) se mantuvieron en cada ensayo.

Se representó gráficamente la viabilidad celular y los datos se representaron como porcentaje de citotoxicidad para H²O² 1 mM bajo una determinada condición de ensayo con respecto a las células negativas (control sin tratar) ^o porcentaje de citoprotección en presencia del compuesto de prueba calculado con respecto al control positivo (H202 1 mM).

Para muestras de crecimiento sincronizado, la comparación del control positivo con el control negativo mostró una citotoxicidad del 75 % después del tratamiento con H²O², mientras que el tratamiento con cloruro de NR a 0,2 mM, 1 mM y 5 mM mostró una citoprotección del 2 %, 15 % y 38 %, respectivamente, en comparación con los controles (ver Figura 1).

Para muestras de crecimiento normal, la comparación del control positivo con el control negativo mostró una citotoxicidad del 53 % después del tratamiento con H²O², mientras que el tratamiento con cloruro de NR a 0,04 mM, 0,2 mM y 1 mM mostró -1 %, 8 % y 23 % de citoprotección, respectivamente, en comparación con los controles (ver Figura 2).

En conclusión, se observó que la presencia de NR redujo la muerte celular mediada por daño oxidativo en un 10-40%, incluso en condiciones de crecimiento detenido. Se espera además que el tratamiento con cloruro de NR sea eficaz para reducir la muerte celular mediada por el daño oxidativo al menos aproximadamente un 10% o más. Ejemplo B

Tratamiento NR que previene el daño nocivo mediado por UV-C en las células de la piel humana.

La línea celular A431 se sembró en una placa de 6 pocilios a una densidad de siembra de 4*10s células/pocillo en 2 mi de medio de cultivo que contiene FBS al 10 %. Las células se dejaron sin tratar como control ^o se trataron con diferentes concentraciones de cloruro de NR en el medio (5 mM y 1 mM) durante 2 h en una atmósfera totalmente humidificada que contenía 5 % de C02 a 37 °C. Después de la incubación, el medio de cultivo se reemplazó por PBS y las células se expusieron a 10 J/m2 de radiación UV-C. Las placas se recogieron junto con los respectivos controles inmediatamente después de la exposición a UV-C (el control negativo eran células sin exposición a UV-C mientras que el control positivo eran células sin tratar con exposición a UV-C). El ADN de las células en cada condición fue extraído y cuantificado por NanoDrop. Luego se agregaron muestras de ADN en la placa ELISA a 100 ng/pocillo conc. y la cantidad de dímero de pirimidina de ciclobutano (CPD) se estimó en las muestras de ADN usando estuches de estimación de CPD-DNA (OxiSelect™, Cell Biolabs, Inc., San Diego, EE. UU.) según el protocolo del fabricante.

El daño del ADN inducido por UV se refleja en el nivel de dímero de pirimidina de ciclobutano (CPD): 1. 2 pg/ml de control de ADN; cloruro de NR 1 mM (-32% frente al control); cloruro de NR 5 mM (-34% frente al control); 2.

1 pg/ml de control de ADN; cloruro de NR 1 mM (-41 % frente al control); cloruro de NR 5 mM (-50% frente al control); ver la Figura 3.

En conclusión, se observó que NR fue eficaz para reducir la cantidad de CPD en el intervalo de 32% a 50% en comparación con el control expuesto a UV sin tratar. Se espera además que el tratamiento con cloruro de NR sea eficaz para reducir los niveles de CPD en al menos un 10% o más.

Ejemplo C1 (Experimento de control)

Tratamiento NR que promueve el crecimiento celular y la migración en células de piel de ratón.

L^os fibroblastos NIH 3T3 se obtuvieron de ATCC (#CRL-1658tm) y se cultivaron en medio de Eagle modificado por Dulbecco (DMEM) suplementado con suero fetal bovino (FBS) al 10 %, L-glutamina 4 mM, penicilina/estreptomicina al 1 % en un ambiente completamente humidificado, atmósfera que contiene 5 % de CO² a 37 °C. Para los experimentos, las células se colectaron de monocapas subconfluentes con tripsina/EDTA. La viabilidad celular fue superior al 95 % usando la tinción de exclusión con colorante azul tripán. El estudio se llevó a cabo usando células de los pases 4 - 7 en medio DMEM que contenía FBS al 1 %. Las células no tratadas (FBS 1 %) se usaron como controles negativos. Se investigó el efecto del cloruro de ribósido de nicotinamida (cloruro de NR) sobre el cierre de heridas en fibroblastos NIH 3T3.

La viabilidad celular se determinó por titulación de las células teñidas con azul (Promega), el cierre de la herida mediante el estuche de ensayo de cicatrización de heridas CytoSelect™ (Cell Biolabs, Inc., San Diego, USA). Todas las condiciones se realizaron en tres experimentos controlados e independientes. En resumen, los fibroblastos NIH 3T3 (2,5 * io5/ 500 pl) en DMEM que contenía FBS al 10 %, se sembraron en placas de cultivo de tejidos de 24 pocilios que contenían insertos tratados en cada pocilio con el campo de la herida alineado en la misma orientación durante 24 h, lo que permitió que las células se adhirieran y alcanzaran -70-80 % confluencia. Después de 24 h, se retiraron los insertos de los pocilios y se aspiró cuidadosamente el medio sin remover las células, seguido de lavado de los pocilios con medio de prueba (DMEM que contenía FBS al 1 %) para eliminar las células muertas y los desechos. Después del lavado, las células se trataron con diferentes concentraciones de compuestos de prueba en un medio que contenía FBS al 1 % durante 24 horas más, mientras se estudiaba la migración de células NⁱH3T3 en el campo de la herida mediante examen visual bajo microscopio óptico según las instrucciones del fabricante. Se fotografiaron imágenes representativas enfocadas en el centro del campo de la herida. Se analizaron las imágenes microscópicas del cierre de la herida usando el software "Image J". El efecto del compuesto de ensayo sobre el cierre de la herida se comparó con el pocilio de control de FBS al 1 % a "Cero min". Y a las 24 h después del tratamiento compuesto. Se ^usó DMEM con FBS al 5 % como control positivo. La densidad de células en pocilios sin área de herida creada (área confluente) se ^usó como cierre de herida al 100 %. Aparte de las observaciones microscópicas, se analizaron los datos para la determinación del área de superficie total del área definida de la herida usando el software "Image J". El área superficial de las células migradas al área de la herida se calculó restando el área superficial después de 24 horas del área superficial total de la herida a la hora "0". El porcentaje (%) de cierre se calculó como la relación entre el área de superficie celular migrada y el área de superficie total, mientras que el cierre del espacio (%) se determinó restando el porcentaje de cierre en presencia de la muestra de control sin tratar de la muestra de prueba tratada.

Se observó que el cierre de la brecha fue del 51 % en presencia de FBS al 5 % en comparación con el 20 % en presencia de FBS al 1 % después de 24 horas de incubación, como se muestra en las Figuras 5 y 4, respectivamente.

Ejemplo C2 (Respuesta a la dosis NR)

Tratamiento NR que promueve el crecimiento celular y la migración en células de piel de ratón.

Utilizando las mismas condiciones experimentales que se describen en el EJEMPLO C1, se investigó el efecto del cloruro de ribósido de nicotinamida en el medio (1 mM y 0,2 mM) sobre el cierre de heridas con el estuche de ensayo de cicatrización de heridas CytoSelect ™.

Se observó que el cierre de la brecha fue del 46 % en presencia de cloruro NR 1 mM FBS al 1 % en comparación con el 20 % en presencia de FBS al 1 % solo después de 24 horas de incubación (Ejemplo C1); ver la Figura 6. Por lo tanto, el cierre de la brecha indicativo de la motilidad celular en presencia de NR (al 1 % de FBS) fue comparable al 5 % de FBS como control en el Ejemplo C1. Además, se observó un cierre del espacio del 13 % en presencia de NR 0,2 mM (+1 % de FBS), lo que demuestra un efecto de respuesta a la dosis.

Las heridas del tejido de los mamíferos se someten a una serie compleja y ordenada de eventos para reparar el tejido. D^os componentes clave de esa reparación son la motilidad celular y la proliferación. L^os datos presentados aquí demuestran claramente que NR promueve la motilidad celular y la proliferación de células de piel de mamíferos en una "herida".

Ejemplo D

Tratamiento NR que previene el daño nocivo causado por los rayos UV en las células de la piel humana.

En este ejemplo, el ribósido de nicotinamida (NR) se usa para ayudar a mantener una función de barrera saludable de la piel. La función de barrera es la función más importante de la piel. La piel es la primera y mejor defensa del cuerpo humano contra las exposiciones ambientales, incluida la radiación solar ultravioleta (UV). La exposición a la luz U^v es un factor clave en el desarrollo de muchos trastornos de la piel. Un componente central del daño a la piel mediado por los rayos UV es la pérdida de la función de barrera.

Se espera que la aplicación de NR tópico a dosis terapéuticas como se describe en este documento evite la pérdida de la función de barrera mediada por UV. Una forma en la que la NR evitará la pérdida de la función de barrera de la piel mediada por los rayos UV es previniendo el conocido aumento de la pérdida de agua transepidérmica (TEWL) mediado por los rayos Uv . Además, se anticipa que la administración oral de NR será eficaz en el mantenimiento de la función de barrera saludable de la piel.

Por ejemplo, la disfunción de la barrera cutánea se puede evaluar directamente midiendo la pérdida de agua transepidérmica (TEWL), que es una medida de la hidratación de la piel (Oba, C., y otros, "Collagen hydrolysate intake improves the I^oss of epidermal barrier function and skin elasticity induced by ^uV^b irradiation in hairless mice", Photodermatol. Photoimmunol. Photomed. (2013) 29: 204-11; y referencias citadas en el mismo; Jiang, SJ, y otros, " Ultraviolet B-induced alterations of the skin barrier and epidermal calcium gradient ", Exp. Dermatol. (2007) 16: 985­ 992); y Haratake, ^a ., y otros, " UVB-induced alterations in permeability barrier function: roles for epidermal hyperproliferation and thymocyte-mediated response" J. Invest. Dermatol. (ⁱ 997) 108: 769-775).

El uso de Ios términos "un", "una", "el" y referencias similares en el contexto de la descripción de la presente invención reivindicada (especialmente en el contexto de las reivindicaciones) deben interpretarse para cubrir tanto el singular como el plural, a menos que se indique lo contrario en este documento o que el contexto lo contradiga claramente. La enumeración de Ios intervalos de valores en este documento, tiene la intención meramente de servir como un método abreviado para referirse individualmente a cada valor separado que se encuentra dentro del intervalo, a menos que se indique lo contrario en este documento, y cada valor separado se incorpora a la especificación como si se mencionara individualmente en este documento. El ^uso del término "sobre" pretende describir valores por encima o por debajo del valor indicado en un intervalo de aprox. ±10%; en otras modalidades, I^os valores pueden oscilar por encima ^o por debajo del valor establecido en un intervalo de aprox. ±5%; en otras modalidades, I^os valores pueden oscilar por encima ^o por debajo del valor establecido en un intervalo de aprox. ±2%; en otras modalidades, Ios valores pueden oscilar por encima o por debajo del valor establecido en un intervalo de aprox. ±1 %. Los intervalos anteriores están destinados a ser aclarados por el contexto, y no se implica ninguna limitación adicional. Todos Ios métodos descritos en este documento se pueden realizar en cualquier orden adecuado a menos que se indique lo contrario en este documento o que el contexto lo contradiga claramente. El uso de cualquiera y todos I^os ejemplos, ^o lenguaje ilustrativo (por ejemplo, "tal como") proporcionado en este documento, pretende simplemente ilustrar mejor la invención y no supone una limitación en el alcance de la invención a menos que se reivindique lo contrario. Ningún lenguaje en la especificación debe interpretarse como una indicación de cualquier elemento no reivindicado como esencial para la práctica de la invención.

Aunque en la especificación anterior se ha descrito esta invención en relación con ciertas modalidades de la misma, y se han presentado muchos detalles con fines ilustrativos, será evidente para Ios expertos en la técnica que la invención es susceptible de modalidades adicionales y que algunos de Ios detalles descritos en la presente descripción pueden variar considerablemente sin apartarse de Ios principios básicos de la invención.

La presente invención se puede materializar en otras formas específicas sin apartarse de ^sus atributos esenciales y, en consecuencia, debe hacerse referencia a las reivindicaciones adjuntas, en lugar de a la especificación anterior, como indicación del alcance de la invención.

Claims (12)

r e iv in d ic a c io n e s

1. Un método citoprotector cosmético para tratar Ios signos o síntomas del envejecimiento o las arrugas de la piel al tratar o prevenir el daño oxidativo en la piel de un individuo, el método comprende administrar tópicamente al individuo que necesita dicho tratamiento una cantidad eficaz del compuesto ribósido de nicotinamida, o una de sus sales.

2. Un compuesto para usar en un método quimioprotector para tratar o prevenir el daño del ADN mediado por UV en la piel de un individuo, el ^uso comprende administrar tópicamente al individuo que necesita dicho tratamiento una cantidad terapéuticamente eficaz del compuesto ribósido de nicotinamida, ^o una de ^sus sales.

3. El compuesto para el uso de la reivindicación 2, en donde el daño del ADN indicado por la formación de dímeros de ciclobutano-pirimidina (CPD) o 6-4 fotoproductos (64 pps) se reduce en más de aproximadamente un 10 %.

4. Un compuesto para usar en un método para tratar o reparar una herida en la piel de un individuo, el uso comprende administrar tópicamente al individuo que necesita dicho tratamiento una cantidad terapéuticamente eficaz del compuesto ribósido de nicotinamida, o una de sus sales, en donde las células de piel en la piel tienen mayor motilidad y/o proliferación.

5. El método de la reivindicación 1 ^o el compuesto para el ^uso de la reivindicación 2 ^o 4, en donde el individuo es un ser humano.

6. El método o el compuesto para el uso de la reivindicación 5, en donde el compuesto ribósido de nicotinamida, o una de sus sales, se proporciona en una composición que comprende un vehículo farmacéuticamente aceptable.

7. El método ^o el compuesto para el ^uso de la reivindicación 6, en donde el compuesto ribósido de nicotinamida es una sal seleccionada del grupo que consiste en fluoruro, cloruro, bromuro, yoduro, formiato, acetato, ascorbato, benzoato, carbonato, citrato, carbamato, gluconato, lactato, bromuro de metilo, sulfato de metilo, nitrato, fosfato, difosfato, succinato, sulfato y trifluoroacetato.

8. El método o el compuesto para el uso de la reivindicación 7, en donde el compuesto ribósido de nicotinamida es una sal de cloruro.

9. El método de la reivindicación 6, en donde la cantidad eficaz de compuesto ribósido de nicotinamida, o una de ^sus sales, para una dosis total está en un intervalo de aproximadamente 0,01 % en peso a aproximadamente 50 % en peso basado en el peso total de la composición.

10. El compuesto para el uso de la reivindicación 6, en donde la cantidad terapéuticamente eficaz del compuesto ribósido de nicotinamida, ^o una de ^sus sales, para una dosis total está en un intervalo de aproximadamente 0,01 % en peso a aproximadamente 50 % en peso basado en el peso total de la composición.

11. El método de la reivindicación 1, en donde la cantidad eficaz de compuesto ribósido de nicotinamida, ^o una de sus sales, para una dosis total está en un intervalo de aproximadamente 0,1 % en peso a aproximadamente 10 % en peso basado en el peso total de la composición.

12. El compuesto para el ^uso de la reivindicación 2 ^o 4, en donde la cantidad terapéuticamente eficaz del compuesto ribósido de nicotinamida, o una de sus sales, para una dosis total está en un intervalo de aproximadamente 0,1 % en peso a aproximadamente 10 % en peso basado en el peso total de la composición.