ES2902148T3 - Derivados de amidas policíclicas como inhibidores de CDK9 - Google Patents

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Abstract

Un compuesto de fórmula I para su uso en el tratamiento del cáncer: **(Ver fórmula)** en donde: A es C(R5) o N; Res H, alquilo C1-3, CN o halógeno; R2 es heterocicloalquilo de 3-7 miembros o cicloalquilo de 3-7 miembros; opcionalmente sustituido con uno a tres sustituyentes independientemente seleccionados entre el grupo que consiste en R10, OR10, SR10, S(O)R10, S(O)2R10, C(O)R10, C(O)OR10, OC(O)R10, OC(O)OR10, NH2, NHR10, N(R10)2, NHC(O)H, NHC(O)R10, NR10C(O)H, N R10C(O)R10, NHS(O)2R10, NR10S(O)2R10, NHC(O)OR10, NR10C(O)OR10, NHC(O)NH2, NHC(O)NHR10, NHC(O)N(R10)2, NR10C(O)NH2, NR10C(O)NHR10, NR10C(O)N(R10)2, C(O)NH2, C(O)NHR10, C(O)N(R10)2, C(O)NHOH, C(O)NHOR10, C(O)NHS(O)2R10, C(O)N R10S(O)2R10, S(O)2NH2, S(O)2NHR10, S(O)2N(R10)2, S(O)2NHC(O)OR10, S(O)2NR10C(O)OR10, C(O)H, C(O)OH, OH, CN, NO2, F, Cl, Br y I; en donde uno o más grupos CH2 del anillo pueden reemplazarse opcionalmente por un número correspondiente de grupos -C(O), uno o más átomos de azufre o nitrógeno del anillo pueden oxidarse opcionalmente para formar S-óxidos o N-óxidos; R10, en cada aparición, se selecciona independientemente entre el grupo que consiste en un grupo cicloalquilo o heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros, alquilo C1-6, -O-alquilo C1-6, alquil C1-6-O-alquilo C1-6, NH2, C(O)NH2, C(O)H, C(O)OH, OH, CN, NO2, F, Cl, Br y I; en donde dos grupos R10, junto con los átomos a los que están unidos, pueden formar un grupo cicloalquilo o heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros; y cada grupo R10 alquilo, cicloalquilo y heterocicloalquilo anteriormente mencionado puede estar sustituido adicionalmente con uno o dos sustituyentes seleccionados independientemente entre CN, OH, halógeno, alquilo C1-3, -O-alquilo C1-3, NH2, NH-alquilo C1-3 y NHC(O)-alquilo C1-3; R4 es **(Ver fórmula)** o **(Ver fórmula)** en donde X e Y, junto con los átomos a los que están unidos, forman un anillo heterocicloalquilo de 5 a 7 miembros que, además del nitrógeno de puente, puede contener uno o dos heteroátomos seleccionados entre N, O y S, anillo que puede estar saturado o parcialmente saturado; en donde uno o dos grupos CH2 del anillo pueden reemplazarse opcionalmente por un número correspondiente de grupos -C(O), uno o más átomos de azufre o nitrógeno del anillo pueden oxidarse opcionalmente para formar S-óxidos o N-óxidos y en donde el anillo puede estar sustituido en un carbono del anillo por uno o dos sustituyentes R10 o en un nitrógeno del anillo por un sustituyente R12; J es N o CR11; y R11 es H, alquilo C1-3; R12 se selecciona, en cada aparición, independientemente entre el grupo que consiste en un grupo cicloalquilo o heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros, alquilo C1-6, alquil C1-6-O-alquilo C1-6, C(O)NH2, C(O)H; en donde el grupo R12 alquilo, 0 cicloalquilo y heterocicloalquilo puede estar sustituido adicionalmente con uno o dos sustituyentes seleccionados independientemente entre CN, OH y halógeno, alquilo C1-3, NH2 y NH-alquilo C1-3, NHC(O)-alquilo C1-3 o sales farmacéuticamente aceptables del mismo; además, en donde el cáncer es una neoplasia maligna hematológica seleccionada entre leucemia mieloide aguda, mieloma múltiple, leucemia linfocítica crónica, linfoma difuso de linfocitos B grandes, linfoma de Burkitt, linfoma folicular o un tumor sólido seleccionado entre cáncer de mama, cáncer de pulmón, neuroblastoma y cáncer de colon.

Description

DESCRIPCIÓN
Derivados de amidas policíclicas como inhibidores de CDK9
La presente invención se refiere a ciertos derivados de piridina o pirimidina para su uso en el tratamiento de ciertas formas de cáncer.
Las proteínas cinasas dependientes de ciclina (CDK) representan una familia de proteínas serina/treonina cinasas que se activan al unirse a un compañero regulador de la ciclina. Los complejos CDK/ciclina fueron identificados por primera vez como reguladores de la progresión del ciclo celular. Sin embargo, más recientemente, los complejos CDK/ciclina también se han relacionado con la transcripción y el procesamiento del ARNm. CDK9/PTEFb (factor de elongación positiva de la transcripción b) fosforila el dominio carboxiloterminal (CTD) de la subunidad grande de la ARN polimerasa II (RNAP II), predominantemente Ser-2, regulando la elongación de la transcripción. La inhibición de CDK9 y la represión transcripcional provocan el rápido agotamiento de los transcritos de ARNm de vida corta y de las proteínas asociadas, incluidas Mcl1 y c-myc, lo que conduce a la inducción de la apoptosis en las células tumorales hiperdependientes de estas proteínas de supervivencia. Por lo tanto, el uso como diana de las CDK transcripcionales, incluida CDK9, representa una estrategia terapéutica para tratar tipos de tumores hiperdependientes de estas proteínas lábiles pro-supervivencia, entre los que se incluyen, pero sin limitación, neoplasias hematológicas como leucemia mieloide aguda, mieloma múltiple, leucemia linfocítica crónica, linfoma difuso de linfocitos B grandes, linfoma de Burkitt, linfoma folicular y tumores sólidos como cáncer de mama, cáncer de pulmón, neuroblastoma y cáncer de colon. Los inhibidores de CDK9 también pueden tener utilidad terapéutica en otras indicaciones de enfermedades como la cardiología, la virología, la inflamación y el dolor. En el presente documento se divulga una serie de nuevos derivados de piridina o pirimidina que inhiben a CDK9 y pueden ser útiles para el tratamiento de enfermedades hiperproliferativas. En particular, los compuestos son útiles en el tratamiento de enfermedades proliferativas como el cáncer, incluidas las neoplasias hematológicas como la leucemia mieloide aguda, el mieloma múltiple, la leucemia linfocítica crónica, el linfoma difuso de linfocitos B grandes, el linfoma de Burkitt, el linfoma folicular y los tumores sólidos como el cáncer de mama, el cáncer de pulmón, el neuroblastoma y el cáncer de colon.
La figura 1 es un difractograma de rayos X de polvo representativo de la forma A de (1S,3R)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (ejemplo 14). La figura 2 es un termograma de DSC/TGA representativo de la forma A de (1S,3R)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (ejemplo 14).
La figura 3 es un difractograma de rayos X de polvo representativo de la forma A de (1S,3R)-3-acetamido-N-(4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrol[1,2-b]pirazol-3-il)-5-fluoropiridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (ejemplo 25). La figura 4 es un termograma de DSC/TGA representativo de la forma A de (1S,3R)-3-acetamido-N-(4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)-5-fluoropiridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (ejemplo 25).
La figura 5 es un difractograma de rayos X de polvo representativo de la forma B de (1S,3R)-3-acetamido-N-(4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrol[1,2-b]pirazol-3-il)-5-fluoropiridin-2-il)ciclohexano-1-carboxamida (ejemplo 86). La figura 6 es un termograma de DSC/TGA representativo de la forma B de (1S,3R)-3-acetamido-N-(4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)-5-fluoropiridin-2-il)ciclohexano-1-carboxamida (ejemplo 86). La figura 7 es un difractograma de rayos X de polvo representativo de la forma B de (1S,3R)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (ejemplo 2).
La figura 8 es un termograma de DSC/TGA representativo de la forma B de (1S,3R)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (ejemplo 2).
DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN
De acuerdo con la presente invención se proporcionan compuestos de fórmula I:
Figure imgf000002_0001
En donde:
A es C(R5) o N;
R5 es H, alquilo C1-3, CN o halógeno;
R2 es heterocicloalquilo de 3-7 miembros o cicloalquilo de 3-7 miembros; opcionalmente sustituido con uno a tres sustituyentes independientemente
seleccionados entre el grupo que consiste en R10, OR10, SR10, S(O)R10, S(O)2R10, C(O)R10, C(O)O R10, OC(O) R10, OC(O)OR10, NH2 , NH R10, N(R10)2 , NHC(O)H, NHC(O) R10, NR10C(O)H, N R10C(O)R10, NHS(O)2R10, NR10S(O)2R10, NHC(O)OR10, NR10C(O)OR10, NHC(O)NH2, NHC(O)NHR10, NHC(O)N(R10)2, N R10C(O)NH2, N R10C(O)NH R10, N R10C(O)N(R10)2, C(O)NH2, C(O)NH R10, C(O)N(R10)2, C(O)NHOH, C(O)NHOR10, C(O)NHS(O)2 R10, C(O)N R10S(O)2R10, S(O)2NH2, S(O)2NHR10, S(O)2N(R10)2, S(O)2NHC(O)OR10, S(O)2NR10C(O)O R10, C(O)H, C(O)OH, OH, CN, NO2 , F, Cl, Br y I; en donde uno o más grupos CH2 del anillo pueden reemplazarse opcionalmente por un número correspondiente de grupos -C(O), uno o más átomos de azufre o nitrógeno del anillo pueden oxidarse opcionalmente para formar S-óxidos o N-óxidos;
R10, en cada aparición, se selecciona independientemente entre el grupo que consiste en un grupo cicloalquilo o heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros, alquilo C1-6, -O-alquilo C1-6, alquil C1-6-O-alquilo C1-6, NH2 , C(O)NH2 , C(O)H, C(O)OH, OH, CN, NO2 , F, Cl, Br y I; en donde dos grupos R10 junto con los átomos a los que están unidos pueden formar un grupo cicloalquilo o heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros; y cada grupo R10 alquilo, cicloalquilo y heterocicloalquilo anteriormente mencionado puede estar sustituido adicionalmente con uno o dos sustituyentes seleccionados independientemente entre CN, OH, halógeno, alquilo C1-3, -O-alquilo C1-3, NH2 , NH-alquilo C1-3 y NHC(O)-alquilo C1-3.
R4 es
Figure imgf000003_0001
en donde X e Y, junto con los átomos a los que están unidos, forman un anillo heterocicloalquilo de 5 a 7 miembros que, además del nitrógeno de puente, puede contener uno o dos heteroátomos seleccionados entre N, O y S, anillo que puede estar saturado o parcialmente saturado; en donde uno o dos grupos CH2 del anillo pueden reemplazarse opcionalmente por un número correspondiente de grupos -C(O), uno o más átomos de azufre o nitrógeno del anillo que pueden oxidarse opcionalmente para formar S-óxidos o N-óxidos y en donde el anillo puede estar sustituido en un carbono del anillo por uno o dos sustituyentes R10 o en un nitrógeno del anillo por un sustituyente R12;
J es N o CR11;
R11 es H, alquilo C1-3; y
R12 se selecciona, en cada aparición, independientemente entre el grupo que consiste en un grupo cicloalquilo o heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros, alquilo C1-6, alquil C1-6-O-alquilo C1-6, C(O)NH2 , C(O)H; en donde el grupo R12 alquilo, cicloalquilo y heterocicloalquilo puede estar sustituido adicionalmente con uno o dos sustituyentes seleccionados independientemente entre CN, OH y halógeno, alquilo C1-3, NH2 y NH-alquilo C1-3, NHC(O)-alquilo C1-3 o sales farmacéuticamente aceptables del mismo;
para su uso en el tratamiento de una neoplasia maligna hematológica seleccionada entre leucemia mieloide aguda, mieloma múltiple, leucemia linfocítica crónica, linfoma difuso de linfocitos B grandes, linfoma de Burkitt, linfoma folicular o de un tumor sólido seleccionado entre cáncer de mama, cáncer de pulmón, neuroblastoma y cáncer de colon.
Los compuestos de fórmula (I) son útiles por su capacidad para inhibir la actividad de CDK9 y por consiguiente, también son útiles en el tratamiento de enfermedades o afecciones médicas mediadas exclusivamente o en parte por CDK9.
Los compuestos de fórmula (I) pueden ser útiles para el tratamiento de enfermedades hiperproliferativas. En particular, los compuestos son útiles en el tratamiento de enfermedades proliferativas como el cáncer, incluidas neoplasias malignas hematológicas, tales como, pero sin limitación, leucemia mieloide aguda, mieloma múltiple, leucemia linfocítica crónica, linfoma difuso de linfocitos B grandes, linfoma de Burkitt, linfoma folicular y tumores sólidos, tales como, pero sin limitación, cáncer de mama, cáncer de pulmón (incluido, pero sin limitación, cáncer de pulmón no microcítico (CPNM)) incluidos los subtipos escamocelulares y no escamocelulares, neuroblastoma y cáncer de colon.
También se divulgan procesos para la fabricación de dichos compuestos, composiciones farmacéuticas que los contienen, su uso en la fabricación de medicamentos para la producción de un efecto antiproliferativo en animales de sangre caliente, como el ser humano y métodos de uso de dichos compuestos o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos en el tratamiento del cáncer.
A fin de que la presente invención pueda comprenderse más fácilmente, se definen primero ciertos términos. A lo largo de la descripción detallada se exponen definiciones adicionales.
La memoria descriptiva escrita anterior se considera suficiente para que un experto en la materia ponga en práctica las realizaciones. La descripción anterior y los ejemplos detallan ciertas realizaciones y describen el mejor modo contemplado por los inventores. Sin embargo, se apreciará que independientemente de lo detallada que parezca lo anterior en cuanto al texto, las realizaciones pueden ponerse en práctica de diversos modos y las reivindicaciones incluyen cualquier equivalente de las mismas.
Además, cuando en el presente documento se utiliza "y/o", debe entenderse como la divulgación específica de cada una de las dos características o componentes especificados, con o sin el otro. Por tanto, el término "y/o" como se utiliza en una expresión tal como "A y/o B" en el presente documento pretende incluir "A y B", "A o B", "A" (solo) y "B" (solo). Igualmente, el término "y/o", como se usa en una expresión tal como "A, B y/o C" pretende abarcar cada uno de los siguientes aspectos: A, B y C; A, B o C; A o C; A o B; B o C; A y C; A y B; B y C; A (solo); B (solo); y C (solo).
A menos que se definan de otro modo, todos los términos técnicos y científicos usados en el presente documento tienen el mismo significado que el comúnmente entendido por un experto habitual en la materia a la que se refiere la presente divulgación. Por ejemplo, el Concise Dictionary of Biomedicine and Molecular Biology, Juo, Pei-Show, 2.a ed., 2002, CRC Press; The Dictionary of Cell and Molecular Biology, 3.a ed., 1999, Academic Press; y el Oxford Dictionary Of Biochemistry And Molecular Biology, Revisado, 2000, Oxford University Press, proporcionan a un experto un diccionario general de muchos de los términos utilizados en la presente divulgación.
Las unidades, prefijos y símbolos se indican en su forma aceptada en el Sistema Internacional de Unidades (SI). Los intervalos numéricos incluyen los números que definen el intervalo.
Ha de entenderse que siempre que los aspectos se describan en el presente documento con la expresión "que comprende", también se proporcionan aspectos análogos descritos con la expresión "que consiste en" y/o "que consiste esencialmente en".
Los términos "inhibir", "bloquear" y "suprimir" se utilizan indistintamente en el presente documento y se refieren a cualquier reducción estadísticamente significativa en la actividad biológica, incluido el bloqueo total de la actividad. Por ejemplo, la "inhibición" puede referirse a una reducción de aproximadamente un 10 %, 20 %, 30 %, 40 %, 50 %, 60 %, 70 %, 80 %, 90 % o 100 % en la actividad biológica.
La proliferación celular puede analizarse utilizando técnicas reconocidas en la especialidad que miden la velocidad de la división celular y/o la proporción de células en una población de células que sufre división celular y/o la velocidad de pérdida de células de una población celular debido a la diferenciación terminal o la muerte celular (por ejemplo, incorporación de timidina).
El término "sujeto" se refiere a cualquier animal (por ejemplo, un mamífero), incluidos, pero sin limitación, seres humanos, primates no humanos, roedores y similares, que vaya a ser el receptor de un tratamiento concreto. Normalmente, los términos "sujeto" y "paciente" se utilizan indistintamente en el presente documento en referencia a un sujeto humano.
La expresión "composición farmacéutica" se refiere a una preparación que se encuentra en una forma tal que permite la actividad biológica del principio activo y que no contiene componentes adicionales que sean inaceptablemente tóxicos a un sujeto al que se administraría la composición. Dicha composición puede ser estéril.
Los términos como "tratando" o "tratamiento" o "tratar" o "aliviando" o "aliviar" se refieren tanto a (1) medidas terapéuticas que curan, frenan, alivian los síntomas de y/o que detienen la progresión de una patología o trastorno diagnosticado y a (2) medidas profilácticas o preventivas que previenen y/o frenan el desarrollo de una patología o trastorno concreto. Por lo tanto, aquellos que necesitan tratamiento incluyen aquellos que ya tienen el trastorno; aquellos propensos a tener el trastorno; y aquellos en quienes se debe prevenir un trastorno. En ciertos aspectos, se "trata" con éxito el cáncer en un sujeto de acuerdo con los métodos de la presente divulgación en caso de que el paciente muestre, por ejemplo, una remisión total, parcial o transitoria de un tipo de cáncer concreto.
Los términos "cáncer", "tumor", "canceroso" y "maligno" se refieren a o se describen a la afección fisiológica en mamíferos que normalmente se caracteriza por un crecimiento celular no regulado. Los ejemplos de cánceres incluyen, pero sin limitación, neoplasias hematológicas, tales como leucemia mieloide aguda, mieloma múltiple, leucemia linfocítica crónica, linfoma difuso de linfocitos B grandes, linfoma de Burkitt, linfoma folicular y tumores sólidos, tales como cáncer de mama, cáncer de pulmón, neuroblastoma y cáncer de colon.
La expresión "agente citotóxico", como se usa en el presente documento, se define ampliamente y se refiere a una sustancia que inhibe o previene la función de las células y/o provoca la destrucción de células (muerte celular) y/o ejerce efectos antineoplásicos/antiproliferativos. Por ejemplo, un agente citotóxico previene directa o indirectamente el desarrollo, la maduración o la propagación de células tumorales neoplásicas. El término también incluye aquellos agentes que provocan únicamente un efecto citostático y no un simple efecto citotóxico. El término incluye agentes quimioterapéuticos, como se especifican más adelante, así como otros antagonistas de HER2, agentes antiangiogénicos, inhibidores de tirosina cinasa, inhibidores de proteína cinasa A, miembros de la familia de las citocinas, isótopos radiactivos y toxinas, tales como toxinas enzimáticamente activas de origen bacteriano, fúngico, vegetal o animal.
La expresión "agente quimioterapéutico" es un subconjunto de la expresión "agente citotóxico", que comprende compuestos químicos naturales o sintéticos.
De acuerdo con los métodos de la presente divulgación, los compuestos de la presente divulgación pueden administrarse a un paciente para promover una respuesta terapéutica positiva con respecto al cáncer. La expresión "respuesta terapéutica positiva", con respecto a los tratamientos para el cáncer, se refiere a una mejora en los síntomas asociados con la enfermedad.
Por ejemplo, una mejora en la enfermedad puede caracterizarse como una remisión completa. La expresión "remisión completa" se refiere a la ausencia de enfermedad clínicamente detectable, con normalización de cualquier resultado analítico previo. Como alternativa, una mejora en la enfermedad puede clasificarse como una remisión parcial. Una "respuesta terapéutica positiva" abarca una reducción o inhibición de la progresión y/o la duración de cáncer, la reducción o la mejora de la gravedad del cáncer y/o la mejora de uno o más síntomas de la misma como resultado de la administración de compuestos de la presente invención.
En aspectos específicos, dichos términos se refieren a uno, dos o tres o más resultados tras la administración de los compuestos de la presente divulgación:
(1) una estabilización, reducción o eliminación de la población de células cancerosas;
(2) una estabilización o reducción en el crecimiento del cáncer;
(3) un impedimento en la formación del cáncer;
(4) erradicación, extirpación o control de un cáncer primario, regional y/o metastásico;
(5) una reducción en la mortalidad;
(6) un aumento en la supervivencia, la duración o la tasa sin enfermedad, sin recidivas, sin progresión y/o general; (7) un aumento en la tasa de remisión, la durabilidad de la remisión o el número de pacientes que responden o se encuentran en remisión;
(8) una reducción en la tasa de hospitalización,
(9) una reducción en la duración de la hospitalización,
10. (10) el tamaño del cáncer se mantiene y no aumenta o aumenta en menos de un 10 %, preferentemente menos de un 5 %, preferentemente menos de un 4 %, preferentemente menos de un 2 %, y
(11) un aumento del número de pacientes en remisión.
(12) una reducción en el número de tratamientos adyuvantes (por ejemplo, quimioterapia o terapia hormonal) que de otro modo serían necesarios para tratar el cáncer.
La remisión clínica puede evaluarse utilizando técnicas de cribado, como la TEP, la resonancia magnética (RM), la radiografía, la tomografía computarizada (TAC), la citometría de flujo o el análisis con un clasificador celular activado por fluorescencia (FACS), histología, patología macroscópica y bioquímica sanguínea, lo que incluye, pero sin limitación, cambios detectables mediante ELISA, RIA, cromatografía y similares. Además, las respuestas terapéuticas positivas, el sujeto que se somete a tratamiento puede experimentar el efecto beneficioso de una mejora en los síntomas asociados con la enfermedad.
En la presente memoria descriptiva, el prefijo Cx-y, como se usa en expresiones como alquilo Cx-y y similares (donde x e y son números enteros) indica el intervalo numérico de átomos de carbono presentes en el grupo; por ejemplo, alquilo C1-4 incluye alquilo Ci (metilo), alquilo C2 (etilo), alquilo C3 (propilo e isopropilo) y alquilo C4 (butilo, l-metilpropilo, 2-metilpropilo y í-butilo).
A menos que se indique específicamente, el átomo de enlace de un grupo puede ser cualquier átomo adecuado de dicho grupo; por ejemplo, propilo incluye prop-1-ilo y prop-2-ilo.
Como se usa en el presente documento, la expresión "opcionalmente sustituido" indica que la sustitución es opcional y por tanto, es posible que el grupo indicado esté sustituido o sin sustituir. En caso de que se desee una sustitución, puede reemplazarse cualquier número de hidrógenos en el grupo indicado con una selección de los sustituyentes indicados, a condición de que no se supere la valencia normal de los átomos en un sustituyente concreto y que la sustitución de como resultado un compuesto estable.
En un aspecto, cuando un grupo particular se designa como opcionalmente sustituido con "uno o más" sustituyentes, el grupo particular puede estar sin sustituir. En otro aspecto, el grupo particular puede portar un sustituyente. En otro aspecto, el sustituyente particular puede portar dos sustituyentes. En otro aspecto más, el grupo particular puede portar tres sustituyentes. En otro aspecto más, el grupo particular puede portar cuatro sustituyentes. En un aspecto adicional, el grupo particular puede portar uno o dos sustituyentes. En un aspecto adicional más, el grupo particular puede estar sin sustituir o puede portar uno o dos sustituyentes.
Como se usa en el presente documento, el término "alquilo" se refiere a radicales hidrocarburo saturados tanto lineales como ramificados que tienen el número especificado de átomos de carbono. Las referencias a grupos alquilo individuales, tales como "propilo", son específicas únicamente para la versión de cadena lineal y las referencias a grupos alquilo de cadena ramificada individuales, como "isopropilo", son específicas únicamente para la versión de cadena ramificada. En un aspecto, "alquilo" puede ser "alquilo C1-4". En otro aspecto, "alquilo" y "alquilo C1-4" pueden ser "alquilo C1-3". En otro aspecto, "alquilo", "alquilo C1-4" y "alquilo C1-3" pueden ser metilo. Se aplica una convención análoga para otros términos genéricos, por ejemplo, "alquenilo" y "alquinilo".
"Cicloalquilo" es un anillo de alquilo monocíclico, saturado o parcialmente insaturado, que contiene de 3 a 7 átomos de carbono. Los ejemplos ilustrativos de cicloalquilo incluyen ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo y cicloheptilo.
"Heterocicloalquilo" es un anillo monocíclico saturado o parcialmente saturado que contiene de 3 a 7 átomos de anillo, de los cuales 1, 2, 3 o 4 átomos de anillo se seleccionan entre nitrógeno, azufre u oxígeno, anillo que puede estar enlazado con carbono o nitrógeno, en donde un grupo -CH2- puede reemplazarse opcionalmente por un -C(O)-; en donde un átomo de nitrógeno o azufre del anillo se oxida opcionalmente para formar los N-óxidos o S-óxidos (es decir, sulfóxido y sulfona); en donde un -NH del anillo está opcionalmente sustituido por acetilo, formilo, metilo o mesilo; y en donde un anillo está opcionalmente sustituido con uno o más halo. Entre los ejemplos ilustrativos de "heterocicloalquilo de 5 o 6 miembros" se incluyen imidazolinilo, pirazolidinilo, piperazinilo, piperidinilo, pirrolidinilo, oxazinilo, morfolinilo, hexahidropirimidinilo y tiomorfolinilo.
Los valores l i r r R R1 R12 l i r r i n i h r in luyen:
Figure imgf000006_0001
Cabe destacar que los ejemplos dados para los términos utilizados en la descripción no son limitativos.
Como se usa en el presente documento, la expresión "cantidad eficaz" significa una cantidad de un compuesto o composición que es suficiente para modificar de forma significativa y positiva los síntomas y/o las condiciones que se van a tratar (por ejemplo, proporcionar una respuesta clínica positiva). La cantidad eficaz de un principio activo para su uso en una composición farmacéutica variará en función de la afección concreta que se esté tratando, de la gravedad de la misma, de la duración del tratamiento, de la naturaleza de la terapia concurrente, de los uno o más principios activos que se empleen, los uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables que se utilicen y de factores similares que estén dentro del conocimiento y la experiencia del médico que lo atienda.
En particular, una cantidad eficaz de un compuesto de fórmula (I) para su uso en el tratamiento del cáncer es una cantidad suficiente para aliviar sintomáticamente en un animal de sangre caliente, como ser humano, los síntomas del cáncer y de las enfermedades mieloproliferativas, para frenar la progresión del cáncer y de las enfermedades mieloproliferativas, o para reducir en pacientes con síntomas de cáncer y de enfermedades mieloproliferativas el riesgo de empeoramiento.
Como se usa en el presente documento, la expresión "grupo saliente" pretende referirse a grupos fácilmente desplazables por un nucleófilo, como un nucleófilo de amina, y un nucleófilo de alcohol o un nucleófilo de tiol. Entre los ejemplos de grupos salientes adecuados se encuentran halo, tal como cloro y bromo, y el grupo sulfoniloxi, tal como metanosulfoniloxi y tolueno-4-sulfoniloxi.
Como se usa en el presente documento, la expresión "farmacéuticamente aceptable" se refiere a aquellos compuestos, materiales, composiciones y/o formas farmacéuticas que sean, dentro del alcance del buen criterio médico, adecuados para su uso en contacto con los tejidos de seres humanos y animales sin toxicidad excesiva, irritación, respuesta alérgica u otro problema o complicación, acorde con una relación beneficio/riesgo razonable.
Como se usa en el presente documento, el término "grupo protector" pretende referirse a aquellos grupos utilizados para evitar que los grupos reactivos seleccionados (como los grupos carboxi, amino, hidroxi y mercapto) sufran reacciones no deseadas.
Entre los ejemplos ilustrativos de grupos protectores adecuados para un grupo hidroxi se incluyen, pero sin limitación, grupos acilo; grupos alcanoílo, tal como acetilo; grupos aroílo, tal como benzoílo; grupos sililo, tal como trimetilsililo; y grupos arilmetilo, tal como bencilo. Las condiciones de desprotección para los grupos protectores de hidroxi mencionados variarán necesariamente con la elección del grupo protector. Por tanto, por ejemplo, puede eliminarse un grupo acilo como un alcanoílo o un grupo aroílo, por ejemplo, por hidrólisis con una base adecuada como un hidróxido de metal alcalino, por ejemplo hidróxido de litio o de sodio. Como alternativa, puede eliminarse un grupo sililo, tal como trimetilsililo, por ejemplo, mediante fluoruro o mediante ácido acuoso; o puede retirarse un grupo arilmetilo, tal como un grupo bencilo, por ejemplo, mediante hidrogenación en presencia de un catalizador, tal como paladio sobre carbono.
Entre los ejemplos ilustrativos de grupos protectores adecuados para un grupo amino incluyen, pero sin limitación, grupos acilo; grupos alcanoílo, tales como acetilo; grupos alcoxicarbonilo, tales como metoxicarbonilo, etoxicarbonilo y tbutoxicarbonilo; grupos arilmetoxicarbonilo, tales como benciloxicarbonilo; y grupos aroílo, tales como benzoílo. Las condiciones de desprotección para los grupos protectores de amino mencionados variarán necesariamente con la elección del grupo protector. Por tanto, por ejemplo, puede eliminarse un grupo acilo como un alcanoílo o alcoxicarbonilo o un grupo aroílo, por ejemplo, por hidrólisis con una base adecuada como un hidróxido de metal alcalino, por ejemplo hidróxido de litio o de sodio. Como alternativa, puede eliminarse un grupo acilo, tal como un grupo t-butoxicarbonilo, por ejemplo, mediante tratamiento con un ácido adecuado, tal como ácido clorhídrico, sulfúrico, fosfórico o trifluoroacético y puede eliminarse un grupo arilmetoxicarbonilo, tal como un grupo benciloxicarbonilo, por ejemplo, mediante hidrogenación sobre un catalizador, tal como paladio sobre carbono o mediante tratamiento con un ácido de Lewis, por ejemplo, tricloruro de boro. Un grupo protector alternativo adecuado para un grupo amino primario es, por ejemplo, un grupo ftaloílo, que puede eliminarse por tratamiento con una alquilamina, por ejemplo dimetilaminopropilamina o 2-hidroxietilamina, o con hidracina.
Los grupos protectores pueden eliminarse en cualquier etapa conveniente de la síntesis utilizando técnicas convencionales bien conocidas la técnica de la química, o pueden eliminarse durante una etapa de reacción o de elaboración posterior.
En referencia al sustituyente "R" a efectos ilustrativos, las siguientes definiciones de sustituyente se refieren a la estructura indicada:
Figure imgf000007_0001
En la presente invención debe entenderse que un compuesto de fórmula (I) o una sal del mismo puede presentar el fenómeno del tautomerismo y que los dibujos de las fórmulas dentro de esta memoria descriptiva pueden representar solo una de las posibles formas tautoméricas. Ha de entenderse que la invención abarca cualquier forma tautomérica que tenga actividad inhibidora de CDK9 y no debe limitarse simplemente a una forma tautomérica utilizada en los dibujos de las fórmulas.
También debe entenderse que algunos compuestos de fórmula (I) y sales del mismo pueden existir en formas solvatadas así como no solvatadas, tales como, por ejemplo, formas hidratadas. Debe entenderse que la invención abarca todas estas formas solvatadas que tienen actividad inhibidora de CDK9.
Los compuestos de fórmula (I) también pueden proporcionarse como ésteres hidrolizables in vivo. Un éster hidrolizable in vivo de un compuesto de fórmula (I) que contiene un grupo carboxi o hidroxi es, por ejemplo, un éster farmacéuticamente aceptable que se escinde en el cuerpo humano o animal para producir el ácido o el alcohol precursor. Dichos ésteres pueden identificarse administrando a un animal de ensayo por vía intravenosa, por ejemplo, el compuesto de ensayo y posteriormente examinando líquido corporal del animal de ensayo.
Los ésteres farmacéuticamente aceptables para carboxi incluyen ésteres de alcoxi C1-6 metilo, por ejemplo, metoximetilo, ésteres de alcanoil C1-6 oximetilo, por ejemplo, ésteres de pivaloiloximetilo y ftalidilo, ésteres de cicloalquil C3-8 carboniloxi alquilo C1-6, por ejemplo 1-ciclohexilcarboniloxietilo, ésteres de (1,3-dioxolen-2-ona)ilmetilo, por ejemplo, (5-metil-1,3-dioxolen-2-ona)ilmetilo, y ésteres de alcoxi C1-6 carboniloxietilo, por ejemplo, 1-metoxicarboniloxietilo; y puede formarse en cualquier grupo carboxi en los compuestos de la presente invención.
Los ésteres farmacéuticamente aceptables para hidroxi incluyen ésteres inorgánicos, tales como ésteres de fosfato (incluidos los ésteres cíclicos fosforamídicos) y éteres de a-aciloxialquilo y compuestos relacionados que, como resultado de la hidrólisis in vivo del éster, se descomponen para dar los grupos hidroxi precursores. Entre los ejemplos de éteres de a-aciloxialquilo se encuentran acetoximetoxi y el 2,2-dimetilpropioniloxi. Una selección de grupos formadores de ésteres hidrolizables in vivo para hidroxi incluye alcanoílo C1-10, por ejemplo, acetilo, benzoílo, fenilacetilo, benzoílo y fenilacetilo sustituido; alcoxicarbonilo C1-10 (para dar ésteres de carbonato de alquilo), por ejemplo, etoxicarbonilo; di-alquil C1-4 carbamoílo y N-(di-alquil C1-4 aminoetil)-N-alquil C1-4 carbamoílo (obteniéndose carbamatos); di-alquil C1-4 aminoacetilo y carboxiacetilo. Los ejemplos de sustituyentes del anillo en el fenilacetilo y benzoílo incluyen aminometilo, alquil C1-4 aminometilo y di-(alquil C1-4)aminometilo, y morfolino o piperazino unidos de un átomo de nitrógeno de anillo a través de un grupo de enlace metileno a la posición 3 o 4 del anillo de benzoílo. Otros ésteres hidrolizables in vivo interesantes incluyen, por ejemplo, RAC(O)Oalquil C1-6-CO-, en donde RA es, por ejemplo, benciloxi-alquilo C1-4, o fenilo. Los sustituyentes adecuados en un grupo fenilo en dichos ésteres incluyen, por ejemplo, 4-alquil C1-4piperazino-alquilo C1-4, piperazino-alquilo C1-4 y morfolino-alquilo C1-4.
Los compuestos de fórmula (I) pueden formar sales de ácido o base farmacéuticamente aceptables y en dichos casos, puede ser adecuada la administración de un compuesto en forma de sal. Algunos ejemplos de sales de adición de ácidos son acetato, adipato, ascorbato, benzoato, bencenosulfonato, bicarbonato, bisulfato, butirato, canforato, canforsulfonato, colina, citrato, ciclohexil sulfamato, dietilendiamina, etanosulfonato, fumarato, glutamato, glicolato, hemisulfato, 2-hidroxietil-sulfonato, heptanoato, hexanoato, clorhidrato, bromhidrato, yodhidrato, hidroximaleato, lactato, malato, maleato, metanosulfonato, meglumina, 2-naftalenosulfonato, nitrato, oxalato, pamoato, persulfato, fenilacetato, fosfato, difosfato, picrato, pivalato, propionato, quinato, salicilato, estearato, succinato, sulfamato, sulfanilato, sulfato, tartrato, tosilato (ptoluenesulfonato), trifluoroacetato y undecanoato. Algunos ejemplos de sales de bases se encuentran sales de amonio; sales de metales alcalinos, tales como las de sodio, litio y potasio; sales de metales alcalinotérreos como las de aluminio, calcio y magnesio; sales con bases orgánicas, tales como sales de diciclohexilamina y N-metil-D-glucamina; y sales con aminoácidos como arginina, lisina, ornitina, etc. Además, los grupos básicos que contienen nitrógeno pueden cuaternizarse con agentes como: haluros de alquilo inferior, como los haluros de metilo, etilo, propilo y butilo; sulfatos de dialquilo tales como sulfato de dimetilo, dietilo y dibutilo; sulfatos de diamilo; haluros de cadena larga como los haluros de decilo, laurilo, miristilo y estearilo; haluros de arilalquilo, tales como bromuro de bencilo y otros. Se prefieren las sales no tóxicas fisiológicamente aceptables, aunque otras sales pueden ser útiles, por ejemplo para aislar o purificar el producto.
Las sales pueden formarse por medios convencionales, como por ejemplo haciendo reaccionar la forma de base libre del producto con uno o más equivalentes del ácido adecuado en un disolvente o medio en el que la sal sea insoluble, o en un disolvente como el agua, que se elimina al vacío o por liofilización o intercambiando los aniones de una sal existente por otro anión en una resina de intercambio iónico adecuada.
Los compuestos de fórmula (I) tienen centros quirales y por tanto, existen en forma de estereoisómeros. Debe entenderse que la invención abarca todos estos estereoisómeros, incluidos los enantiómeros y los diastereoisómeros. En la medida en que los compuestos de fórmula (I) puedan existir en formas ópticamente activas o racémicas, la invención incluye en su definición cualquier forma ópticamente activa o racémica de este tipo que posea la actividad mencionada. La presente invención abarca todos los estereoisómeros de este tipo que tengan la actividad definida en el presente documento.
La síntesis de las formas ópticamente activas puede llevarse a cabo mediante técnicas estándar de química orgánica bien conocidas en la técnica, por ejemplo, mediante la síntesis a partir de materiales de partida ópticamente activos o mediante la resolución de una forma racémica. Los racematos pueden separarse en enantiómeros individuales mediante procedimientos conocidos (véase, por ejemplo, Advanced Organic Chemistry: 3.a edición: autor J March, p104-107). Un procedimiento adecuado implica la formación de derivados diastereoméricos por reacción del material racémico con un auxiliar quiral, seguido de la separación, por ejemplo por cromatografía, de los diastereómeros y, luego, la escisión de la especie auxiliar. Asimismo, la actividad mencionada puede evaluarse mediante las técnicas de laboratorio habituales a las que se hace referencia más adelante.
Por lo tanto, a lo largo de la memoria descriptiva, cuando se hace referencia al compuesto de fórmula (I), debe entenderse que el término compuesto incluye estereoisómeros, mezclas de estereoisómeros y polimorfos que inhiban la actividad de CDK9 en un ser humano o animal.
Los estereoisómeros pueden separarse mediante técnicas convencionales, por ejemplo, la cromatografía o la cristalización fraccionada. Los enantiómeros pueden aislarse por separación de un racemato, por ejemplo, por cristalización fraccionada, resolución o HPLC. Los diastereoisómeros pueden aislarse por separación en virtud de las diferentes propiedades físicas de los diastereoisómeros, por ejemplo, mediante cristalización fraccionada, HPLC o cromatografía ultrarrápida. Como alternativa, los estereoisómeros particulares pueden prepararse por síntesis quiral a partir de materiales de partida quirales en condiciones que no causen racemización o epimerización, o por derivatización, con un reactivo quiral.
Cuando se proporciona un estereoisómero específico (ya sea por separación, por síntesis quiral o por otros métodos) se proporciona favorablemente aislado sustancialmente de otros estereoisómeros del mismo compuesto. En un aspecto, una mezcla que contenga un estereoisómero particular de un compuesto de fórmula (I) puede contener menos del 30 %, particularmente menos del 20 % y más particularmente menos del 10 % en peso de otros estereoisómeros del mismo compuesto. En otro aspecto, una mezcla que contiene un estereoisómero particular de un compuesto de fórmula (I) puede contener menos del 6 %, particularmente menos del 3 % y más particularmente menos del 2 % en peso de otros estereoisómeros del compuesto. En otro aspecto, una mezcla que contenga un estereoisómero particular de un compuesto de fórmula (I) puede contener menos del 1 %, particularmente menos del 0,5 %, y más particularmente menos del 0,3 %, y aún más particularmente menos del 0,1 % en peso de otros estereoisómeros del compuesto. Cuando la configuración absoluta de los estereoisómeros aislados no está determinada, los estereoisómeros pueden diferenciarse mediante un método de preparación o separación. Por ejemplo, los estereoisómeros aislados pueden diferenciarse por su tiempo de elución y denominarse, por ejemplo, isómero 1, isómero 2, etc.
De acuerdo con la presente invención, los compuestos de la invención se presentan en una serie de formas estructuralmente diferentes. Un objeto de la presente invención es proporcionar una forma cristalina sustancialmente pura en algunos aspectos de la invención.
Algunas formas estructurales de la invención pueden aportar ventajas. Por ejemplo, algunas formas del compuesto de la invención pueden ser más fáciles de manejar y almacenar. Otras formas del compuesto de la invención pueden ser más fáciles de caracterizar porque existen en un estado bien definido. Además, el compuesto de la invención puede ser más fácil de sintetizar de forma reproducible y, por tanto, más fácil de manejar en una producción a gran escala.
Cuando se proporciona una forma polimórfica específica, es favorable que se proporcione sustancialmente aislada de otras formas polimórficas del mismo compuesto. En un aspecto, una mezcla que contenga una forma polimórfica particular de un compuesto de fórmula (I) puede contener menos de un 30 %, particularmente menos de un 20 % y más particularmente menos de un 10 % en peso de otras formas polimórficas del mismo compuesto. En otro aspecto, una mezcla que contenga una forma polimórfica particular de un compuesto de fórmula (I) puede contener menos de un 6 %, particularmente menos de un 3 % y más particularmente menos de un 2 % en peso de otras formas polimórficas del compuesto. En otro aspecto, una mezcla que contenga una forma polimórfica particular de un compuesto de fórmula (I) puede contener menos de un 1 %, particularmente menos de un 0,5 % y más particularmente menos de un 0,3 % y aún más particularmente menos de un 0,1 % en peso de otras formas polimórficas del compuesto.
Los compuestos de la invención pueden caracterizarse por las posiciones e intensidades de los picos principales en el difractograma de rayos X de polvo, pero también pueden caracterizarse por espectroscopia FT-IR convencional. Estas pueden utilizarse para distinguir una forma cristalina de otras formas cristalinas del compuesto. Los compuestos de la invención se caracterizan por ser altamente cristalinos, es decir, por tener una mayor cristalinidad que otras formas. Por la expresión "cualquier otra forma" se da a entender anhidratos, hidratos, solvatos y polimorfos o formas amorfas de los mismos divulgadas en la técnica anterior. Algunos ejemplos de cualquiera de las otras formas de los compuestos incluyen, pero sin limitación, anhidratos, monohidratos, dihidratos, sesquihidratos, trihidratos, alcoholatos, tales como metanolatos y etanolatos y polimorfos o formas amorfas de los mismos.
Los compuestos de la invención también pueden caracterizarse por su celda unitaria. El compuesto de la invención puede analizarse mediante XRPD, una técnica bien conocida.
La cantidad de agua en el compuesto puede determinarse mediante análisis termogravimétrico, una técnica bien conocida.
Las realizaciones adicionales de la invención son las siguientes. Estas realizaciones se refieren a compuestos de fórmula (I) y a sales farmacéuticamente aceptables de los mismos. Dichos sustituyentes específicos pueden utilizarse, cuando sea apropiado, con cualquiera de las definiciones, reivindicaciones o realizaciones definidas en el presente documento o en lo sucesivo.
A
En un aspecto, A es C(R5).
R5
En un aspecto de la presente invención R5 es halógeno.
En un aspecto de la presente invención R5 es cloro.
En un aspecto de la presente invención R5 es flúor.
En un aspecto de la presente invención R5 es ciano.
R 2
En un aspecto R2 es cicloalquilo de 3-7 miembros.
En otro aspecto R2 es cicloalquilo de 3-7 miembros sustituido con NHCOR10 o R10
En otro aspecto R2 es ciclohexilo sustituido con NHCOR10.
En otro aspecto R2 es ciclopropilo sustituido con R10.
En otro aspecto R2 es heterocicloalquilo de 3-7 miembros.
En otro aspecto R2 es heterocicloalquilo de 3-7 miembros sustituido con NHCOR10.
En otro aspecto R2 es piperidinilo.
En otro aspecto R2 es ciclobutilo.
En otro aspecto R2 es ciclobutilo sustituido con R10.
R4
En un aspecto R4 es
Figure imgf000010_0001
En otro aspecto R4 es
Figure imgf000010_0002
J
En un aspecto J es C(R11) y R11 es H.
X e Y
En un aspecto X e Y junto con los átomos a los que están unidos forman un anillo heterocicloalquilo de 6 miembros. En un aspecto X e Y junto con los átomos a los que están unidos forman un anillo heterocicloalquilo de 6 miembros que contiene un heteroátomo adicional que es oxígeno.
En un aspecto X and Y junto con los átomos a los que están unidos forman un anillo heterocicloalquilo de 6 miembros que contiene un heteroátomo adicional que es nitrógeno.
En un aspecto X and Y junto con los átomos a los que están unidos forman un anillo heterocicloalquilo de 6 miembros en el que un CH2 está sustituido con dos grupos metilo.
En un aspecto X e Y junto con los átomos a los que están unidos forman un anillo heterocicloalquilo de 5 miembros.
En un aspecto X and Y junto con los átomos a los que están unidos forman un anillo heterocicloalquilo de 5 miembros en el que un CH2 está sustituido con dos grupos metilo.
En un aspecto X e Y junto con los átomos a los que están unidos forman un anillo heterocicloalquilo de 7 miembros. En un aspecto X and Y junto con los átomos a los que están unidos forman un anillo heterocicloalquilo de 7 miembros en el que un CH2 está sustituido con dos grupos metilo.
En un aspecto
A es C(R5);
R2 es cicloalquilo de 3-7 miembros;
R4 es
Figure imgf000011_0001
y
X e Y junto con los átomos a los que están unidos forman un anillo heterocicloalquilo de 6 miembros.
En un aspecto
A es C(R5);
R5 es halógeno;
R2 es cicloalquilo de 3-7 miembros;
R4 es
Figure imgf000011_0002
y
X e Y junto con los átomos a los que están unidos forman un anillo heterocicloalquilo de 6 miembros.
En un aspecto
A es C(R5);
R5 es cloro;
R2 es cicloalquilo de 3-7 miembros;
R4 es
Figure imgf000011_0003
y
X e Y junto con los átomos a los que están unidos forman un anillo heterocicloalquilo de 6 miembros.
En un aspecto
A es C(R5);
R5 es cloro;
R2 es ciclohexilo;
R4 es
Figure imgf000012_0001
y
X e Y junto con los átomos a los que están unidos forman un anillo heterocicloalquilo de 6 miembros. En un aspecto
A es C(R5);
R5 es cloro;
R2 es ciclohexilo sustituido con NHC(O)R10;
R4 es
Figure imgf000012_0002
y
X e Y junto con los átomos a los que están unidos forman un anillo heterocicloalquilo de 6 miembros. En un aspecto
A es C(R5);
R5 es cloro;
R2 es ciclohexilo sustituido con NHC(O)R10;
R10 es alquilo C1-6 ;
R4 es
Figure imgf000012_0003
J es C(R11) y R11 es H;
y
X e Y junto con los átomos a los que están unidos forman un anillo heterocicloalquilo de 6 miembros. En un aspecto
A es C(R5);
R2 es cicloalquilo de 3-7 miembros;
R4 es
Figure imgf000013_0001
y
X e Y junto con los átomos a los que están unidos forman un anillo heterocicloalquilo de 5 miembros. A es C(R5);
R5 es halógeno;
R2 es ciclohexilo;
R4 es
Figure imgf000013_0002
y
X e Y junto con los átomos a los que están unidos forman un anillo heterocicloalquilo de 5 miembros. En un aspecto
A es C(R5);
R5 es cloro;
R2 es ciclohexilo;
R4 es
Figure imgf000013_0003
y
X e Y junto con los átomos a los que están unidos forman un anillo heterocicloalquilo de 5 miembros. En un aspecto
A es C(R5);
R5 es cloro;
R2 es ciclohexilo sustituido con NHC(O)R10;
R4 es
y
X e Y junto con los átomos a los que están unidos forman un anillo heterocicloalquilo de 5 miembros. En un aspecto
A es C(R5);
R5 es cloro;
R2 es ciclohexilo sustituido con NHC(O)R10;
R10 es alquilo C1-6 ;
R4 es
Figure imgf000014_0001
J es C(R11) y R11 es H;
y
X e Y junto con los átomos a los que están unidos forman un anillo heterocicloalquilo de 5 miembros. En un aspecto
A es C(R5);
R5 es cloro;
R2 es ciclohexilo sustituido con NHC(O)R10;
R10 es alquilo C1-6 ;
R4 es
Figure imgf000014_0002
J es C(R11) y R11 es H
y
X e Y junto con los átomos a los que están unidos forman un anillo piperidinilo.
En un aspecto
A es C(R5);
R5 es cloro;
R2 es ciclohexilo sustituido con NHC(O)R10;
R10 es alquilo C1-6 ;
R4 es
Figure imgf000015_0001
J es C(R11) y R11 es H
y
X e Y junto con los átomos a los que están unidos forman un anillo piperidinilo en donde un carbono del anillo puede estar sustituido con uno o dos sustituyentes R10.
En un aspecto
A es C(R5);
R5 es cloro;
R2 es ciclohexilo sustituido con NHC(O)R10;
R10 es alquilo C1-6 ;
R4 es
Figure imgf000015_0002
J es C(R5) y R5 es H
y
X e Y, junto con los átomos de carbono a los que están unidos, forman un anillo piperazinilo.
En un aspecto
A es C(R5);
R5 es cloro;
R2 es ciclohexilo sustituido con NHC(O)R10;
R10 es alquilo C1-6 ;
R4 es
Figure imgf000015_0003
J es C(R5) y R5 es H
y
X e Y junto con los átomos a los que están unidos forman un anillo morfolinilo.
En un aspecto
A es C(R5);
R5 es cloro;
R2 es ciclohexilo sustituido con NHC(O)R10;
R10 es alquilo Ci-a;
R4 es
Figure imgf000016_0001
J es C(Ra) y R5 es H
y
X e Y, junto con los átomos de carbono a los que están unidos, forman un pirrolidinilo, en donde un CH2 está sustituido con dos grupos metilo.
A es C(R5);
R2 es cicloalquilo de 3-7 miembros;
R4 es
Figure imgf000016_0002
y
X e Y junto con los átomos a los que están unidos forman un anillo heterocicloalquilo de 7 miembros.
En un aspecto
A es C(R5);
R5 es halógeno;
R2 es cicloalquilo de 3-7 miembros;
R4 es
Figure imgf000016_0003
y
X e Y junto con los átomos a los que están unidos forman un anillo heterocicloalquilo de 7 miembros.
En un aspecto
A es C(R5);
R5 es cloro;
R2 es cicloalquilo de 3-7 miembros;
R4 es
Figure imgf000017_0001
y
X e Y junto con los átomos a los que están unidos forman un anillo heterocicloalquilo de 7 miembros. En un aspecto
A es C(R5);
R5 es cloro;
R2 es ciclohexilo;
R4 es
Figure imgf000017_0002
y
X e Y junto con los átomos a los que están unidos forman un anillo heterocicloalquilo de 7 miembros. En un aspecto
A es C(R5);
R5 es cloro;
R2 es ciclohexilo sustituido con NHC(O)R10;
R4 es
Figure imgf000017_0003
y
X e Y junto con los átomos a los que están unidos forman un anillo heterocicloalquilo de 7 miembros. En un aspecto
A es C(R5);
R5 es cloro;
R2 es ciclohexilo sustituido con NHC(O)R10;
R10 es alquilo C1-6 ;
R4 es
J es C(R11) y R11 es H;
y
X e Y junto con los átomos a los que están unidos forman un anillo heterocicloalquilo de 7 miembros.
En otro aspecto se proporciona un compuesto seleccionado entre:
(R)-N-(5-doro-4-(5,6,7,8-tetrahidroimidazo[1,2-a]piridin-3-il)piridin-2-il)piperidin-3-carboxamida;
(1S,3R)-3-acetamido-N-(5-doro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida;
(1S,3R)-3-acetamido-N-(4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ddohexanocarboxamida; Cis-N-(5-doro-4-(4,5,6,7-tetrahidropi razolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)-3-hidroxiciclobutanocarboxamida;
(R)-N-(5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropi razolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)piperidin-3-carboxamida;
ds-3-hidroxi-N-(4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ddobutanocarboxamida;
(1S,3R)-3-acetamido-N-(5-doro-4-(5,6,7,8-tetrahidroimidazo[1,2-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida;
(1S,3R)-3-acetamido-N-(5-doro-4-(6,7-dihidro-5H-pirazolo[5,1-b][1,3]oxazil-3-il)pi ridin-2-il)ciclohexanocarboxamida; (1R,3S)-3-acetamido-Ñ-(5-doro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida;
(1S,3R)-3-acetamido-N-(5-doro-4-(5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)ddohexanocarboxamida; (1S,3R)-3-acetamido-N-(5-doro-4-(6,7-dihidro-4H-pirazolo[5,1-c][1,4]oxazil-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida;
(1S,3R)-3-acetamido-N-(5-doro-4-(6,7-dihidro-5H-pirrolo[1,2-a]imidazol-3-il)piridin-2-il)ddohexanocarboxamida; (1S,3R)-3-acetamido-N-(5-doro-4-(5-metil-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida;
(1S,3R)-3-acetamido-N-(5-doro-4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)pi ridin-2-il)ciclohexanocarboxamida;
(1S,3R)-3-acetamido-N-(5-doro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirimidin-3-il)pi ridin-2-il)ciclohexanocarboxamida;
(1S,3R)-3-acetamido-N-(4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pi razol-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida;
(1S,3R)-W-(4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)-3-(1-hidroxiciclopropanocarboxamido)ciclohexanocarboxamida;
N-((1R,3S)-3-((4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)carbamoil)ddohexil)oxetano-3-carboxamida;
N-((1R,3S)-3-((5-doro-4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)oxetano-3-carboxamida;
(1S,3R)-N-(5-doro-4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)-3-((S)-2-hidroxipropanamido)ciclohexanocarboxamida;
(1S,3R)-W-(5-doro-4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)-3-(1-hidroxiciclopropanocarboxamido)ciclohexanocarboxamida;
(1S,3R)-3-acetamido-W-(5-doro-4-(6,6-dimetil-6,7-dihidro-5H-pirrolo[1,2-a]imidazol-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida;
(R) -N-((1R,3S)-3-((5-doro-4-(5,5-d¡met¡l-5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[1,2-b]p¡razol-3-¡l)pmdm-2-il)carbamoil)cidohexil)tetrahidrofuran-3-carboxamida;
(S) -N-((1R,3S)-3-((5-doro-4-(5,5-d¡met¡l-5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[1,2-b]p¡razol-3-¡l)p¡ridm-2-¡l)carbamo¡l)c¡clohex¡l)tetrah¡drofuran-3-carboxam¡da;
(1S,3R)-3-acetam¡do-N-(4-(5,5-d¡met¡l-5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[1,2-b]p¡razol-3-¡l)-5-fluorop¡ r¡d¡n-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da;
ds-N-(4-(5,5-d¡met¡l-5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[1,2-b]p¡razol-3-¡l)p¡ridm-2-¡l)-3-h¡drox¡ddobutanocarboxam¡da; ds-N-(5-doro-4-(5,5-d¡met¡l-5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[1,2-b]p¡razol-3-¡l)pmdm-2-¡l)-3-h¡drox¡ddobutanocarboxam¡da; (1S,3R)-3-acetam¡do-N-(6-(4,5,6,7-tetrah¡drop¡razolo[1,5-a]p¡r¡d¡n-3-¡l)p¡r¡m¡d¡n-4-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da; trans-3-h¡drox¡-N-(6-(4,5,6,7-tetrah¡drop¡razolo[1,5-a]p¡ridm-3-¡l)pmm¡dm-4-¡l)ddobutanocarboxam¡da;
(1S,3R)-3-acetam¡do-N-(6-(5,5-d¡met¡l-5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[1,2-b]p¡razol-3-¡l)pmm¡dm-4-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da;
(1S,3R)-N-(5-doro-4-(4,5,6,7-tetrah¡drop¡razolo[1,5-a]pmdm-3-¡l)p¡ r¡d¡n-2-¡l)-3-(2-c¡anoacetam¡do)c¡clohexanocarboxam¡da;
((1R,3S)-3-((5-doro-4-(4,5,6,7-tetrah¡drop¡razolo[1,5-a]p¡r¡d¡n-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)carbamo¡l)c¡clohex¡l)carbamato de ferc-but¡lo;
(1S,3R)-3-ammo-N-(5-doro-4-(4,5,6,7-tetrah¡drop¡razolo[1,5-a]pmdm-3-¡l)pmdm-2-¡l)ddohexanocarboxam¡da; (1S,3R)-N-(5-doro-4-(4,5,6,7-tetrah¡drop¡razolo[1,5-a]pmdm-3-¡l)p¡ r¡d¡n-2-¡l)-3-(1-h¡drox¡c¡clopropanocarboxam¡do)c¡clohexanocarboxam¡da;
(R) -N-((1R,3S)-3-((5-doro-4-(4,5,6,7-tetrah¡drop¡razolo[1,5-a]pmdm-3-¡l)p¡ r¡d¡n-2-¡l)carbamo¡l)c¡clohex¡l)tetrah¡drofuran-3-carboxam¡da;
N-((1R,3S)-3-((5-doro-4-(4,5,6,7-tetrah¡drop¡razolo[1,5-a]p¡ridm-3-¡l)pmdm-2-¡l)carbamo¡l)ddohex¡l)-3-met¡loxetano-3-carboxam¡da;
(S) -N-((1R,3S)-3-((5-doro-4-(4,5,6,7-tetrah¡drop¡razolo[1,5-a]pmdm-3-¡l)p¡ r¡d¡n-2-¡l)carbamo¡l)c¡clohex¡l)tetrah¡drofuran-2-carboxam¡da;
(R) -N-((1R,3S)-3-((5-doro-4-(4,5,6,7-tetrah¡drop¡razolo[1,5-a]pmdm-3-¡l)p¡ r¡d¡n-2-¡l)carbamo¡l)c¡clohex¡l)tetrah¡drofuran-2-carboxam¡da;
(1S,3R)-N-(5-doro-4-(4,5,6,7-tetrah¡drop¡razolo[1,5-a]pmdm-3-¡l)p¡ r¡d¡n-2-¡l)-3-((S)-2-h¡drox¡propanam¡do)c¡clohexanocarboxam¡da;
(S) -N-((1R,3S)-3-((5-doro-4-(4,5,6,7-tetrah¡drop¡razolo[1,5-a]pmdm-3-¡l)p¡ r¡d¡n-2-¡l)carbamo¡l)c¡clohex¡l)tetrah¡drofuran-3-carboxam¡da;
(1S,3R)-3-acetam¡do-N-(5-c¡ano-4-(5,5-d¡met¡l-5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[1,2-b]p¡razol-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da;
Isómero 1 de (1S,3R)-3-acetam¡do-N-(5-doro-4-(5-met¡l-5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[1,2-b]p¡razol-3-¡l)p¡ridm-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da;
Isómero 2 de (1S,3R)-3-acetam¡do-N-(5-doro-4-(5-met¡l-5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[1,2-b]p¡razol-3-¡l)p¡ridm-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da;
(1R,3S)-3-acetam¡do-N-(5-doro-4-(5,5-d¡met¡l-5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[1,2-b]p¡ razol-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da;
(1S,3R)-3-acetam¡do-N-(4-(5,5-d¡met¡l-4,5,6,7-tetrah¡drop¡razolo[1,5-a]pmdm-3-¡l)p¡ r¡d¡n-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da;
(S)-N-((1R,3S)-3-((5-doro-4-(5,5-d¡met¡l-5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[1,2-b]p¡razol-3-¡l)p¡ridm-2-¡l)carbamo¡l)c¡clohex¡l)tetrah¡drofuran-2-carboxam¡da;
(R)-N-((1R,3S)-3-((5-doro-4-(5,5-d¡met¡l-5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[1,2-b]p¡razol-3-¡l)pmdm-2-il)carbamoil)cidohexil)tetrahidrofuran-2-carboxamida;
(1S,3R)-3-acetam¡do-N-(4-(5,5-d¡met¡l-5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[1,2-b]p¡ razol-3-¡l)-5-met¡lp¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da;
(1S,3R)-3-acetam¡do-N-(5-doro-4-(5,5-d¡met¡l-5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[1,2-b]p¡razol-3-¡l)p¡ r¡d¡n-2-¡l)c¡clopentanocarboxam¡da;
(1S,3R)-3-acetam¡do-N-(5-doro-4-(4,5,6,7-tetrah¡dro-[1,2,3]triazolo[1,5-a]pmdm-3-¡l)pmdm-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da;
(1S,3R)-3-acetam¡do-N-(4-(6,6-d¡met¡l-6,7-d¡h¡dro-5H-p¡rrolo[1,2-a]¡m¡dazol-3-¡l)-5-fluoropmdm-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da;
(1S,3R)-3-acetam¡do-N-(4-(5,5-d¡met¡l-4,5,6,7-tetrah¡drop¡ razolo[1,5-a]p¡r¡d¡n-3-¡l)-5-fluorop¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da;
(1S,3R)-3-ammo-N-(4-(5,5-d¡met¡l-4,5,6,7-tetrah¡drop¡razolo[1,5-a]pmdm-3-¡l)-5-fluorop¡ridm-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da;
(1S,3R)-N-(5-doro-4-(5,5-d¡met¡l-5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[1,2-b]p¡razol-3-¡l)pmdm-2-¡l)-3-(3-h¡drox¡propanam¡do)c¡clohexanocarboxam¡da;
(1S,3R)-N-(5-doro-4-(5,5-d¡met¡l-5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[1,2-b]p¡razol-3-¡l)pmdm-2-¡l)-3-(ds-3-h¡drox¡c¡clobutanocarboxam¡do)c¡clohexanocarboxam¡da
(1S,3R)-3-ammo-N-(4-(5,5-d¡met¡l-5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[1,2-b]p¡razol-3-¡l)-5-fluorop¡ridm-2-¡l)ddohexano-1-carboxam¡da;
(1S,3R)-N-(4-(5,5-d¡met¡l-5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[1,2-b]p¡razol-3-¡l)-5-fluoropmdm-2-¡l)-3-(1-h¡drox¡c¡clopropanocarboxam¡do)c¡clohexanocarboxam¡da;
(1S,3R)-N-(5-doro-4-(6,6-d¡met¡l-6,7-d¡h¡dro-5H-p¡rrolo[1,2-a]¡m¡dazol-3-¡l)p¡ r¡d¡n-2-¡l)-3-(1-h¡drox¡c¡clopropanocarboxam¡do)c¡clohexanocarboxam¡da;
N-((1R,3S)-3-((5-doro-4-(6,6-d¡met¡l-6,7-d¡h¡dro-5H-p¡rrolo[1,2-a]¡m¡dazol-3-¡l)pmdm-2-¡l)carbamo¡l)c¡clohex¡l)oxetano-3-carboxam¡da;
ds-N-(5-doro-4-(6,6-d¡met¡l-6,7-d¡h¡dro-5H-p¡rrolo[1,2-a]¡m¡dazol-3-¡l)p¡ridm-2-¡l)-3-h¡drox¡c¡clobutanocarboxam¡da;
Isómero 1 de trans-3-acetam¡do-N-(5-doro-4-(5,5-d¡met¡l-5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[1,2-b]p¡razol-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da;
Isómero 2 de trans-3-acetam¡do-N-(5-doro-4-(5,5-d¡met¡l-5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[1,2-b]p¡razol-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da;
Isómero 1 de trans-3-acetam¡do-N-(5-doro-4-(4,5,6,7-tetrah¡drop¡razolo[1,5-a]p¡r¡d¡n-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da;
Isómero 2 de trans-3-acetam¡do-N-(5-doro-4-(4,5,6,7-tetrah¡drop¡razolo[1,5-a]p¡r¡d¡n-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da;
(1S,3R)-3-acetam¡do-N-(5-fluoro-4-(4,5,6,7-tetrah¡drop¡razolo[1,5-a]pmdm-3-¡l)pmdm-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da;
Isómero 1 de (1S,3R)-3-acetam¡do-N-(5-doro-4-(5-met¡l-4,5,6,7-tetrah¡drop¡razolo[1,5-a]p¡r¡d¡n-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da;
Isómero 2 de (1S,3R)-3-acetam¡do-N-(5-doro-4-(5-met¡l-4,5,6,7-tetrah¡drop¡razolo[1,5-a]pmdm-3-¡l)pmdm-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da;
(1S,3R)-3-acetam¡do-N-(5-doro-4-(5,6,7,8-tetrah¡dro-4H-p¡razolo[1,5-a]azepm-3-¡l)pmdm-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da;
N-((1R,3S)-3-((5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrah¡drop¡razolo[1,5-a]p¡r¡d¡n-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)carbamo¡l)c¡clohex¡l)oxetano-3-carboxamida;
Isómero 1 de (1S,3R)-3-acetam¡do-N-(5-cloro-4-(6-met¡l-4,5,6,7-tetrah¡drop¡razolo[1,5-a]p¡r¡d¡n-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da;
Isómero 2 de (1S,3R)-3-acetam¡do-N-(5-cloro-4-(6-met¡l-4,5,6,7-tetrah¡drop¡razolo[1,5-a]p¡r¡d¡n-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da;
Isómero 1 de (1S,3R)-3-acetam¡do-N-(5-cloro-4-(6-metox¡-4,5,6,7-tetrah¡drop¡razolo[1,5-a]p¡r¡d¡n-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da;
Isómero 2 de (1S,3R)-3-acetam¡do-N-(5-cloro-4-(6-metox¡-4,5,6,7-tetrah¡drop¡razolo[1,5-a]p¡r¡d¡n-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da;
Isómero 1 de (1S,3R)-3-acetam¡do-N-(5-cloro-4-(5-metox¡-4,5,6,7-tetrah¡drop¡razolo[1,5-a]p¡r¡d¡n-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da;
Isómero 2 de (1S,3R)-3-acetam¡do-N-(5-cloro-4-(5-metox¡-4,5,6,7-tetrah¡drop¡razolo[1,5-a]p¡r¡d¡n-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da;
(1S,3R)-3-acetam¡do-N-(5-fluoro-4-(5,6,7,8-tetrah¡dro-4H-p¡razolo[1,5-a]azep¡n-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da;
(1S,3R)-N-(4-(5,5-d¡met¡l-5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[1,2-b]p¡razol-3-¡l)-5-met¡lp¡r¡d¡n-2-¡l)-3-(2-h¡drox¡acetam¡do)c¡dohexanocarboxam¡da;
N-((1R,3S)-3-((4-(5,5-d¡met¡l-5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[1,2-b]p¡razol-3-¡l)-5-met¡lp¡r¡d¡n-2-¡l)carbamo¡l)c¡clohex¡l)oxetano-3-carboxam¡da;
(1S,3R)-3-acetam¡do-N-(5-met¡l-4-(4,5,6,7-tetrah¡drop¡razolo[1,5-a]p¡r¡d¡n-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da;
(1S,3R)-3-acetam¡do-N-(5-cloro-4-(7-h¡drox¡-4,5,6,7-tetrah¡drop¡razolo[1,5-a]p¡r¡d¡n-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da;
(1S,3R)-3-acetam¡do-N-(5-cloro-4-(5-(4-h¡drox¡but¡l)-1H-p¡ razol-4-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)c¡dohexanocarboxam¡da;
Isómero 1 de (1S,3R)-3-acetam¡do-N-(5-cloro-4-(4-h¡drox¡-5,5-d¡met¡l-5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[1,2-b]p¡razol-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da;
Isómero 2 de (1S,3R)-3-acetam¡do-N-(5-cloro-4-(4-h¡drox¡-5,5-d¡met¡l-5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[1,2-b]p¡razol-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da;
(1R,3S)-3-acetam¡do-N-(4-(5,5-d¡met¡l-5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[1,2-b]p¡ razol-3-¡l)-5-fluorop¡ r¡d¡n-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da;
(1S,3R)-3-acetam¡do-N-(5-cloro-4-(5-(3-h¡drox¡-2,2-d¡met¡lprop¡l)-1H-p¡razol-4-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clohexano-1-carboxam¡da;
(1S,3R)-3-acetam¡do-N-(5-cloro-4-(6-h¡drox¡-5,5-d¡met¡l-5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[1,2-b]p¡razol-3-¡l)p¡ r¡d¡n-2-¡l)c¡clohexano-1-carboxam¡da;
(1R,3R)-3-acetam¡do-N-(4-(5,5-d¡met¡l-5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[1,2-b]p¡razol-3-¡l)-5-fluorop¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clohexano-1-carboxam¡da; y
(1S,3S)-3-acetam¡do-N-(4-(5,5-d¡met¡l-5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[1,2-b]p¡ razol-3-¡l)-5-fluorop¡ r¡d¡n-2-¡l)c¡clohexano-1-carboxam¡da.
Los compuestos de fórmula (I) son út¡les por su capac¡dad de ¡nh¡b¡r la act¡v¡dad de CDK9. Los compuestos tamb¡én son út¡les para el tratam¡ento del cáncer en un pac¡ente. Por cons¡gu¡ente, los compuestos de fórmula I o una sal farmacéut¡camente aceptable de los m¡smos pueden adm¡n¡strarse a un pac¡ente que padece un cáncer, tal como neoplas¡as mal¡gnas hematológ¡cas, entre las que se ¡ncluyen leucem¡a m¡elo¡de aguda, m¡eloma múlt¡ple, leucem¡a l¡nfocít¡ca crón¡ca, l¡nfoma d¡fuso de l¡nfoc¡tos B grandes, l¡nfoma de Burk¡tt, l¡nfoma fol¡cular y tumores sól¡dos, tales como cáncer de mama, cáncer de pulmón, neuroblastoma y cáncer de colon.
Se ha demostrado que los compuestos de fórmula (I) inhiben la actividad de CDK9, como se demuestra mediante un ensayo basado en la descripción del ensayo a continuación. Aunque las propiedades farmacológicas de los compuestos de la fórmula (I) pueden variar con el cambio estructural, los compuestos típicos de fórmula (I) poseen una actividad inhibidora de CDK9 a concentraciones CI50 (concentraciones para lograr una inhibición del 50 %) o a dosis a un nivel inferior a 10 |jM.
Ensayo de cinasa de CDK9
Concentración de ATP en Km
La actividad de CDK9 se determinó in vitro mediante un ensayo de desplazamiento de movilidad en un lector Caliper LC3000 (Caliper/PerkinElmer), que mide la fluorescencia de un sustrato péptido fluorescente fosforilado y no fosforilado y calcula un valor ratiométrico para determinar el porcentaje de renovación. Se determinó la fosforilación del péptido en presencia y ausencia del compuesto de interés. Se preincubó mezcla de enzima/sustrato/adenosín trifosfato (ATP) (CDK9/CycT1 3 nM, ATP 6 j M, sustrato peptídico de CDK9 de 1,5 j M (FITC-X-GSRTPMY-NH2 (X: ácido épsilon aminocaproico)), HEPES 50 mM (pH 7,2), ditiotreitol 1 mM, tween 20 al 0,01 %, seroalbúmina bovina a 50 jg/ml, (concentración final del ensayo)) (5 j l) con 2 j l de compuesto durante 15 minutos a 25 °C. Las reacciones se iniciaron con 5 j l de MgCL 24 mM (concentración final del ensayo 10 mM) en tampón (HEPES 50 mM (pH 7,2), ditiotreitol 1 mM, tween 20 al 0,01 %, seroalbúmina bovina a 50 jg/ml, (concentración final del ensayo) y se incubó a 25 °C durante 90 minutos y las reacciones se detuvieron añadiendo 5 j l de mezcla de paro que consiste en HEPES 65 mM (pH 7,2), EDTA 35,5 mM, Coatin Reagent 3 al 0,227 % (Caliper/PerkinElmer), y Tween al 0,003 %. El sustrato fosforilado y no fosforilado se detectó mediante un lector Caliper LC3000 (Caliper/PerkinElmer) en presencia de tampón de separación que consiste en HEPES 100 mM (pH 7,2), EDTA 15,8 mM, Coatin Reagent 3 al 0,1 % (Caliper/PerkinElmer), Brij-35 al 0,015 %, DMSO al 5 % y MgCl2 5,6 mM. La enzima CDK9 se adquirió de Carna Biosciences (número de catálogo 04-110), el sustrato peptídico de CDK9 se adquirió de Intonation (Boston, MA; hecho a medida).
Los valores de CI50 se calcularon utilizando métodos de ajuste de curvas estándar, definiendo la señal máxima como el recambio de la reacción inhibida a EDTA 83,3 mM y la señal mínima como el recambio de la reacción con DMSO al 0,83 %.
Alta concentración de ATP
Los ensayos con alta concentración de ATP se realizaron de la misma manera con las siguientes modificaciones: la concentración final del ensayo de CDK9 fue de 1,5 nM y la concentración final del ensayo de ATP fue de 5 mM.
Ensayo de MOA de RNAPII en pSer2 en MCF7
Se trata de un ensayo de inmunofluorescencia para determinar el efecto de los inhibidores de la CDK9 sobre la fosforilación de la ARN polimerasa II (RNAPII) en el sitio Ser2 en la línea celular del cáncer de mama, MCF7. En el día uno, se sembraron 2500 células MCF7/pocillo en 30 j l de medio de crecimiento (RPMI+FBS al 10 %+L-Glu+P/S al 1 %) en placas de fondo transparente y paredes negras de 384 pocillos, incubando las placas durante una noche a 37 °C en una estufa de incubación. El segundo día, se trataron las células con inhibidores de CDK9 (respuesta a la dosis de 7 puntos en el intervalo de 3 j M a 0,004 j M) utilizando un manipulador de líquidos ECHO (Labcyte). Tras 6 horas de tratamiento en la estufa de incubación a 37 °C, las células se fijaron con 30 jl/pocillo de paraformaldehído al 7,4 % durante 15 minutos a temperatura ambiente; las células se lavaron dos veces con p Bs y, luego, se permeabilizaron con Triton X al 0,3 %/PBS durante 5 minutos a temperatura ambiente. Después de lavar las células con PBS, se incubaron con un anticuerpo Anti-Ser2 Fosfo-ARN pol II diluido a 1:2000 (Covance MMS-129R) en FBS 3 %/PBST al 0,1 % durante la noche a 4 °C. Al día siguiente, las células se lavaron dos veces con PBST al 0,1 % y, a continuación, se incubaron con un anticuerpo Alexa Fluor 488 de cabra-antirratón diluido a 1:1000 (Life Technologies A-11001) y DAPI diluido a 1:4000 a temperatura ambiente y en la oscuridad. Tras una hora de incubación, las células se lavaron dos veces con PBST al 0,1 % y una vez con PBS. Las placas se sellaron y se leyeron en un citómetro de microplacas Acumen eX3 (TTP Labtech) para evaluar el nivel de fosforilación en cada pocillo. Los valores de IC50 se calcularon utilizando el software de análisis GeneData (control de DMSO como máximo y control de Dinaciclib 11 j M como mínimo).
Ensayo de actividad caspasa de MV411
Se trata de un ensayo celular para medir la inducción de actividad caspasa en la línea celular de leucemia mieloide aguda MV411 después de 6 h de tratamiento con inhibidores de CDK9. En el primer día, se sembraron 3000 células MV411 /pocillo en 50 j l de medio de crecimiento (IMDM+FBS al 10 %+L-Glu+P/S al 2 %) en placas blancas de 384 pocillos, incubando las placas a 37 °C en una estufa de incubación. El segundo día, se trataron las células con inhibidores de CDK9 mediante ECHO (respuesta a la dosis de 10 puntos en el intervalo de 31,5 j M hasta 0,001 j M). Después de 6 horas de incubación a 37 °C en una estufa de incubación, se añadieron 25 j l de reactivo Caspase-Glo 3/7 (Promega) por pocillo a cada pocillo, y las placas se incubaron a temperatura ambiente durante 30 min en la oscuridad. Las placas se leyeron en un lector de microplacas Infinite M200 (Tecan) con un tiempo de integración de 100 ms. Los valores de CE50 se calcularon utilizando el software de análisis GeneData (control de DMSO como Mín y control de Dinaciclib 11 |jM como Máx).
La tabla I proporciona los datos de los ensayos.
Tabla I
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En un aspecto, se proporciona un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso como medicamento.
En otro aspecto, se proporciona el uso de un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la fabricación de un medicamento para el tratamiento o la prevención de al menos uno de: neoplasias malignas hematológicas, tales como leucemia mieloide aguda, mieloma múltiple, leucemia linfocítica crónica, linfoma difuso de linfocitos B grandes, linfoma de Burkitt, linfoma folicular y tumores sólidos, tales como cáncer de mama, cáncer de pulmón, neuroblastoma y cáncer de colon.
En otro aspecto, se proporciona el uso de un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la fabricación de un medicamento para el tratamiento del cáncer.
En otro aspecto, se proporciona el uso de un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la fabricación de un medicamento para la producción de un efecto antiproliferativo y/o proapoptótico en un animal de sangre caliente, tal como el ser humano.
En otro aspecto, se proporciona el uso de un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la fabricación de un medicamento para la producción de un efecto inhibidor de CDK9 en un animal de sangre caliente, tal como el ser humano.
En otro aspecto, se proporciona un método para el tratamiento o la prevención de al menos una de las neoplasias malignas hematológicas, tales como leucemia mieloide aguda, mieloma múltiple, leucemia linfocítica crónica, linfoma difuso de linfocitos B grandes, linfoma de Burkitt, linfoma folicular y tumores sólidos, tales como cáncer de mama, cáncer de pulmón, neuroblastoma y cáncer de colon.
En otro aspecto, se proporciona un método para producir un efecto antiproliferativo y/o proapoptótico en un animal de sangre caliente, tal como un ser humano, comprendiendo dicho método administrar a dicho animal una cantidad eficaz de un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
En otro aspecto, se proporciona un método para producir un método para producir un efecto inhibidor de CDK9 en un animal de sangre caliente, tal como un ser humano, comprendiendo dicho método administrar a dicho animal una cantidad eficaz de un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
En otro aspecto, se proporciona un método para tratar el cáncer en un animal de sangre caliente, tal como un ser humano, comprendiendo dicho método administrar a dicho animal una cantidad eficaz de un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
Específicamente, la invención se refiere a un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en el tratamiento de al menos uno de: neoplasias hematológicas malignas seleccionadas entre leucemia mieloide aguda, mieloma múltiple, leucemia linfocítica crónica, linfoma difuso de linfocitos B grandes, linfoma de Burkitt, linfoma folicular y tumores sólidos, seleccionados entre cáncer de mama, cáncer de pulmón, neuroblastoma y cáncer de colon.
En otro aspecto, se proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y al menos un portador, diluyente o excipiente farmacéuticamente aceptable.
Las composiciones pueden estar en una forma adecuada para uso oral (por ejemplo, comprimidos, pastillas para chupar, cápsulas duras o blandas, suspensiones acuosas u oleosas, emulsiones, polvos o gránulos dispersables, jarabes o elixires), para uso tópico (por ejemplo, como cremas, pomadas, geles o soluciones o suspensiones acuosas u oleosas), para su administración por inhalación (por ejemplo, un polvo finamente dividido o un aerosol líquido), para su administración por insuflación (por ejemplo, en forma de un polvo finamente dividido) o para administración parenteral (por ejemplo, en forma de una solución acuosa u oleosa estéril para administración intravenosa, subcutánea, intramuscular o intramuscular o como un supositorio para administración rectal).
Las composiciones pueden obtenerse mediante procedimientos convencionales utilizando excipientes farmacéuticos convencionales bien conocidos en la técnica. Por tanto, las composiciones pensadas para uso oral pueden contener, por ejemplo, uno o más agentes colorantes, edulcorantes, aromatizantes y/o conservantes.
Entre los excipientes farmacéuticamente aceptables para la formulación de un comprimido se encuentran, por ejemplo, diluyentes inertes como lactosa, carbonato de sodio, fosfato de calcio o carbonato de calcio; agentes de granulación y disgregantes, tales como almidón de maíz o ácido algínico; agentes aglutinantes, tales como almidón; agentes lubricantes, tales como estearato de magnesio, ácido esteárico o talco; agentes conservantes, tales como p-hidroxibenzoato de etilo o de propilo; y antioxidantes, tales como ácido ascórbico. Las formulaciones en comprimidos pueden estar recubiertas o sin recubrir para modificar su disgregación y la posterior absorción del principio activo en el tubo digestivo o para mejorar su estabilidad y/o aspecto, en cualquier caso, utilizando agentes de recubrimiento y métodos convencionales bien conocidos en la técnica.
Las composiciones para uso oral pueden encontrarse en forma de cápsulas de gelatina dura en las que se mezcla el principio activo con un diluyente sólido inerte, por ejemplo, carbonato de calcio, fosfato de calcio o caolín, o como cápsulas de gelatina blanda en las que el principio activo se mezcla con agua o un aceite, tal como aceite de cacahuete, parafina líquida o aceite de oliva.
Las suspensiones acuosas contienen generalmente el principio activo en forma de polvo fino o en forma de partículas nano o micronizadas junto con uno o más agentes de suspensión, tales como carboximetilcelulosa sódica, metilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, alginato sódico, polivinilpirrolidona, goma de tragacanto y goma arábiga; agentes dispersantes o humectantes, tales como lecitina o productos de condensación de un óxido de alquileno con ácidos grasos (por ejemplo, estearato de polioxileno), o productos de condensación de óxido de etileno con alcoholes alifáticos de cadena larga, por ejemplo, heptadecaetilenoxicetanol, o productos de condensación de óxido de etileno con ésteres parciales derivados de ácidos grasos y un hexitol, tales como monooleato de sorbitol polioxilenado o productos de condensación de óxido de etileno con alcoholes alifáticos de cadena larga, por ejemplo heptadecaetilenoxicetanol, o productos de condensación de óxido de etileno con ésteres parciales derivados de ácidos grasos y un hexitol como monooleato de sorbitol polioxietilenado, o productos de condensación del óxido de etileno con ésteres parciales derivados de ácidos grasos y anhídridos de hexitol, por ejemplo monooleato de sorbitano polietilenado. Las suspensiones acuosas también pueden contener uno o más conservantes, tales como p-hidroxibenzoato de etilo o propilo; antioxidantes, tales como ácido ascórbico; agentes colorantes; agentes aromatizantes; y/o agentes edulcorantes, tales como sacarosa, sacarina o aspartamo.
Las suspensiones oleosas pueden formularse suspendiendo el principio activo en un aceite vegetal, tal como aceite de cacahuete, aceite de oliva, aceite de sésamo o aceite de coco o en un aceite mineral, tal como parafina líquida. Las suspensiones oleosas también pueden contener un agente espesante, tal como cera de abeja, parafina dura o alcohol cetílico. Pueden añadirse agentes edulcorantes, tales como los expuestos anteriormente y agentes aromatizantes para proporcionar una preparación oral sabrosa. Estas composiciones pueden conservarse mediante la adición de un antioxidante, tal como ácido ascórbico.
Los polvos dispersables y gránulos adecuados para la preparación de una suspensión acuosa mediante la adición de agua en general contienen el principio activo, junto con un agente dispersante o humectante, un agente de suspensión y/o uno o más conservantes. Los agentes de dispersión o humectantes y los agentes de suspensión adecuados se ilustran por los ya mencionados anteriormente. También pueden estar presentes excipientes adicionales, tales como agentes edulcorantes, aromatizantes y colorantes.
Las composiciones farmacéuticas también pueden encontrarse en forma de emulsiones de aceite en agua. La fase oleosa puede ser un aceite vegetal, tal como aceite de oliva o aceite de cacahuete o un aceite mineral, tal como, por ejemplo, parafina líquida o una mezcla de cualquiera de estas. Los agentes emulsionantes adecuados pueden ser, por ejemplo, gomas de origen natural, tales como goma arábiga o goma de tragacanto, fosfátidos de origen natural, tales como soja, lecitina y ésteres o ésteres parciales procedentes de ácidos grasos y anhídridos de hexitol (por ejemplo, monooleato de sorbitán) y productos de condensación de dichos ésteres parciales con óxido de etileno, tal como monooleato de sorbitano polioxietilenado. Las emulsiones también pueden contener agentes edulcorantes, aromatizantes y conservantes.
Los jarabes y elixires pueden formularse con agentes edulcorantes, tales como glicerol, propilenglicol, sorbitol, aspartamo o sacarosa, y también pueden contener un emoliente, un conservante, un aromatizante y/o un colorante.
Las composiciones farmacéuticas también pueden presentarse en forma de suspensión acuosa u oleosa inyectable estéril, que puede formularse según procedimientos conocidos utilizando uno o varios de los agentes dispersantes o humectantes y agentes de suspensión adecuados, que se han mencionado anteriormente. Un preparado inyectable estéril también puede ser una solución o suspensión inyectable estéril en un diluyente o disolvente no tóxico y parenteralmente aceptable, por ejemplo una solución en 1,3-butanodiol.
Las composiciones para administración por inhalación pueden estar en forma de un aerosol presurizado convencional dispuesto para dispensar el principio activo como un aerosol que contiene gotas sólidas o líquidas finamente divididas.
Pueden utilizarse propulsores de aerosol convencionales, como hidrocarburos fluorados volátiles o hidrocarburos, y el dispositivo de aerosol está convenientemente dispuesto para dispensar una cantidad medida de principio activo.
Para información adicional sobre la formulación, se remite al lector al capítulo 25.2 del volumen 5 de Comprehensive Medicinal Chemistry (Corwin Hansch; Presidente del Consejo Editorial), Pregramon Press, 1990.
La cantidad de principio activo que se combina con uno o más excipientes para producir una forma farmacéutica individual variará necesariamente dependiendo del hospedador a tratar y de la vía de administración concreta. Por ejemplo, una formulación pensada para administración oral a seres humanos contendrá generalmente, por ejemplo, de 0,5 mg a 4 g de principio activo, en una composición con una cantidad adecuada y conveniente de excipientes que puede variar de aproximadamente el 5 a aproximadamente el 98 por ciento en peso de la composición total. Las formas farmacéuticas unitarias contendrán generalmente de aproximadamente 1 mg a aproximadamente 500 mg de principio activo. Para información adicional sobre las vías de administración y las pautas posológicas, se remite al lector al capítulo 25.3 del volumen 5 de Comprehensive Medicinal Chemistry (Corwin Hansch; Presidente del Consejo Editorial), Pregramon Press, 1990.
Como se ha indicado anteriormente, la cantidad de dosis necesaria para el tratamiento terapéutico o profiláctico de una patología concreta variará necesariamente dependiendo del hospedador tratado, de la vía de administración y de la gravedad de la enfermedad que se esté tratando. Puede emplearse una dosis diaria en el intervalo de 0,1-50 mg/kg. Por consiguiente, la dosis óptima puede determinarse por el experto que está tratando a cualquier paciente concreto.
Los compuestos de la invención pueden administrarse además en combinación con una cantidad terapéuticamente eficaz de uno o más agentes para tratar un cáncer, donde los ejemplos de los agentes incluyen, radiación, agentes alquilantes, inhibidores de la angiogénesis, anticuerpos, antimetabolitos, antimitóticos, antiproliferativos, antivirales, inhibidores de aurora cinasa, activadores de la muerte celular (por ejemplo, inhibidores de Bcl-2, Bcl-xL, Bcl-w, Bfl-1 o Mcl-1), activadores de la vía del receptor de muerte, inhibidores de Bcr-Abl cinasa, inhibidores de BET (bromodominio), anticuerpos BiTE (del inglés, Bi-Specific T cell Engager), conjugados de anticuerpos y fármacos, modificadores de la respuesta biológica, inhibidores de cinasa dependiente de ciclina, inhibidores del ciclo celular, inhibidores de ciclooxigenasa-2, DVD (anticuerpos de doble dominio variable), inhibidores del receptor del oncogén viral de la leucemia (ErbB2), inhibidores de factores de crecimiento, inhibidores de la proteína de choque térmico (HSP)-90, inhibidores de histona deacetilasa (HDAC), terapias hormonales, agentes inmunológicos, inhibidores de las proteínas inhibidoras de la apoptosis (IAP), antibióticos intercalantes, inhibidores de cinasa, inhibidores de la cinesina, inhibidores de Jak2, inhibidores de la diana de la rapamicina en mamíferos, microARN, inhibidores de la cinasa regulada por señales extracelulares activada por mitógenos, proteínas de unión multivalente, antiinflamatorios no esteroideos (AINE), inhibidores de la poli ADP (adenosina difosfato)-ribosa polimerasa (PARP), agentes quimioterapéuticos de platino, inhibidores de la cinasa similar a polo (Plk), inhibidores de la fosfoinosítido-3 cinasa, inhibidores del proteasoma, análogos de la purina, análogos de la pirimidina, inhibidores de tirosina cinasa receptora, alcaloides vegetales etinoides/deltoides, ácidos ribonucleicos inhibidores pequeños (ARNip), inhibidores de topoisomerasa, inhibidores de ubiquitina ligasa y similares, y en combinación con uno o más de estos agentes.
Los agentes alquilantes incluyen altretamina, AMD-473, AP-5280, apaziquona, bendamustina, brostalicina, busulfán, cisplatino, carboplatino, carbocuona, carmustina (BCNU), clorambucilo, c Lo RETAZINE® (laromustina, VNP 40101M), ciclofosfamida, decarbazina, estramustina, fotemustina, glufosfamida, ifosfamida, KW-2170, lomustina (CCNU), mafosfamida, melfalán, mitobronitol, mitolactol, nimustina, mostaza nitrogenada N-óxido, nitrosoureas, oxaliplatino, ranimustina, temozolomida, tiotepa, TREANDA® (bendamustina), treosulfán, rofosfamida y similares.
Los inhibidores de la angiogénesis incluyen inhibidores del receptor endotelial específico (Tie-2), inhibidores del receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR), inhibidores del receptor del factor de crecimiento de insulínico-2 (IGFR-2), inhibidores de la metaloproteinasa de matriz-2 (MMP-2), inhibidores de la metaloproteinasa de la matriz 9 (MMP-9), inhibidores del receptor del factor de crecimiento plaquetario (PDGFR), análogos de trombospondina, inhibidores de tirosina cinasa del receptor del factor de crecimiento endotelial vascular (VEGFR), inhibidores de la ALK y similares.
Los antimetabolitos incluyen ALIMTA® (pemetrexed disódico, LY231514, MTA), 5-azacitidina, XELODA® (capecitabina), carmofur, LEUSTAT® (cladribina), clofarabina, citarabina, ocfosfato de citarabina, arabinósido de citosina, decitabina, deferoxamina, doxifluridina, eflornitina, EICAR (5-etil-1-p-D-ribofuranosilimidazol-4-carboxamida), enocitabina, etilcitidina, fludarabina, 5-fluorouracilo solo o en combinación con leucovorina, GEMZAR® (gemcitabina), hidroxiurea, ALKERAN® (melfalán), mercaptopurina, robósido de 6-mercaptopurina, metotrexato, ácido micofenólico, nelarabina, nolatrexed, ocfosfato, pelitrexol, pentostatina, pemextred, raltitrexed, ribavirina, triapina, trimetrexato, S-1, tiazofurina, tegafur, TS-1, vidarabina, UFT y similares.
Los inhibidores de la proteína Bcl-2 incluyen ABT-199, AT-101 ((-)gosipol), GENASENSE® (G3139 u oblimersen (oligonucleótido antisentido dirigido a Bcl-2)), IPI-194, IPI-565, N-(4-(4-((4'-cloro(,,1'-bifenil)-2-il)metil)piperazin-1-il)benzoil)-4-((1R)-3-(dimetilamino)-1-((fenilsulfanil)metil)propil)amino)-3-nitrobencenosulfonamida) (ABT-737), N-(4-(4-((2-(4-clorofenil)-5,5-dimetil-1-ciclohex-1-en-1-il)metil)piperazin-1-il)benzoil)-4-((1R)-3-(morfolin-4-il)-1-((fenilsulfanil)metil)propil)amino)-3-((trifluorometil)sulfonil)bencenosulfonamida (ABT-263), GX-070 (obatoclax) y similares.
Entre los inhibidores de bromodominios se incluyen I-BET 762, OTX-015, CPI-203, LY294002 y similares.
Entre los inhibidores de CDK se incluyen BMI-1040, BMS-032, BMS-387, CVT-2584, flavopiridol, GPC-286199, MCS-5A, PD0332991, PHA-690509, seliciclib (CYC-202, R-roscovitina), ZK-304709 y similares.
Entre los inhibidores de EGFR se incluyen anticuerpos dirigidos contra EGFR, ABX-EGF, inmunoliposomas anti-EGFR, vacuna contra EGF, EMD-7200, ERBITUX® (cetuximab), HR3, anticuerpos IgA, IRESSA® (gefitinib), TARCEVA® (erlotinib u OSI-774), TP-38, proteína de fusión de EGFR, Ty KERB® (lapatinib), AZD9291 y similares.
Entre los inhibidores de ALK se incluyen crizotinib, ceritinib y similares.
Entre los inhibidores del receptor de ErbB2 se incluyen CP-724-714, CI-1033 (canertinib), HERCEPTIN® (trastuzumab), TYKERB® (lapatinib), OMNITARG® (2C4, petuzumab), TAK-165, GW-572016 (ionafarnib), GW-282974, EKB-569, PI-166, dHER2 (vacuna contra HER2), APC-8024 (vacuna contra HER-2), anticuerpo biespecífico anti-HER/2neu, B7.her2IgG3, como anticuerpos biespecíficos dirigidos contra HER2, mAB AR-209, mAB 2B-1 y similares.
Entre los conjugados de anticuerpo-fármaco se incluyen anti-CD22-MC-MMAF, anti-CD22-MC-MMAE, anti-CD22-MCC-DM1, CR-011-vcMMAE, PSMA-ADC, MEDI-547, SGN-19Am SGN-35, SGN-75 y similares.
Entre los inhibidores de kinesina se incluyen inhibidores de Eg5, tales como AZD4877, ARRY-520; inhibidores de CENPE, tales como GSK923295A y similares.
Entre los inhibidores de MEK se incluyen ARRY-142886, ARRY-438162, PD-325901, PD-98059, selumitinib y similares.
Entre los agentes quimioterapéuticos de platino se incluyen cisplatino, ELOXATIN® (oxaliplatino), eptaplatino, lobaplatino, nedaplatino, PARAPLATIN® (carboplatino), satraplatino, picoplatino y similares.
Entre los inhibidores de VEGFR se incluyen AVASTIN (bevacizumab), ABT-869, AEE-788, ANGIOZYME™ (una ribozima que inhibe la angiogénesis (Ribozyme Pharmaceuticals (Boulder, Colo.) y Chiron, (Emeryville, Calif.)), axitinib (AG-13736), AZD-2171, CP-547,632, IM-862, MACUGEN (pegaptamib), NEXAVAR® (sorafenib, BAY43-9006), pazopanib (GW-786034), vatalanib (PTK-787, ZK-222584), SUTENT® (sunitinib, SU-11248), trampa de VEGF, ZACTIMA™ (vandetanib, ZD-6474), GA101, ofatumumab, ABT-806 (mAb-806), anticuerpos específicos contra ErbB3, anticuerpos específicos contra BSG2, anticuerpos específicos contra DLL4 y anticuerpos específicos contra C-met y similares.
Entre los antibióticos antitumorales se incluyen los antibióticos intercalantes aclarrubicina, actinomicina D, amrubicina, anamicina, adriamicina, BLENOXANE® (bleomicina), daunorrubicina, CAELYX® or MYOCET® (doxorrubicina liposomal), elsamitrucina, epirbucina, glarbuicina, ZAVEDOS® (idarrubicina), mitomicina C, nemorrubicina, neocarzinostatina, peplomicina, pirarrubicina, rebecamicina, stimalamer, estreptozocina, VALSTAR® (valrubicina), zinostatina y similares.
Inhibidores de los mecanismos de reparación del ADN, como la CHK cinasa; inhibidores de la proteína cinasa dependiente del ADN; inhibidores de la poli (ADP-ribosa) polimerasa (inhibidores de PARP), incluidos ABT-888 (veliparib), olaparib, KU-59436, AZD-2281, AG-014699, BSI-201, BGP-15, INO-1001, ONO-2231 y similares; e inhibidores de Hsp90, como tanespimicina y retaspimicina.
Entre los inhibidores del proteasoma se incluyen VELCADE® (bortezomib), carfilzomib, MG132, NPI-0052, PR-171 y similares.
Entre los ejemplos de agentes inmunológicos se incluyen interferones y otros agentes potenciadores de la inmunidad. Los interferones incluyen interferón alfa, interferón alfa-2a, interferón alfa-2b, interferón beta, interferón gamma-1a, ACTIMMUNE® (interferón gamma-lb) o interferón gamma-nl, combinaciones de los mismos y similares. Otros agentes son ALFAFERONE®, (IFN-a), BAM-002 (glutatión oxidado), BEROMUN® (tasonermina), BeXXAR® (tositumomab), CAMPATH® (alemtuzumab), CTLA4 (antígeno linfocitario citotóxico 4), decarbazina, denileucina, epratuzumab, GRANOCYTE® (lenograstim), lentinano, interferón alfa leucocitario, imiquimod, MDX-010 (anti-CTLA-4), vacuna contra el melanoma, mitumomab, molgramostim, MYLOTARG™ (gemtuzumab ozogamicina), NEUPOGEN® (filgrastim), Onco VAC-CL, OVAREX® (oregovomab), pemtumomab (Y-muHMFG1), PROVENGE® (sipuleucel-T), sargaramostim, sizofilano, teceleucina, THERACYS® (bacilo de Calmette-Guérin), ubenimex, VIRULIZIN® (inmunoterapéutico, Lorus Pharmaceuticals), Z-100 (sustancia específica de Maruyama (SSM)), WF-10 (tetraclorodecaóxido (TCDO)), PROLEUKIN® (aldesleucina), ZADAXIN® (timalfasina), ZENAPAX® (daclizumab), ZEVALIN® (90Y-Ibritumomab tiuxetán) y similares.
Entre los análogos de pirimidina se incluyen citarabina (ara C o arabinósido C), arabinósido de citosina, doxifluridina, FLUDARA® (fludarabina), 5-FU (5-fluorouracilo), floxuridina, GEMZAR® (gemcitabina), TOMUDEX® (ratitrexed), TROXATYL™ (troxacitabina triacetiluridina) y similares.
Entre los agentes antimitóticos se incluyen batabulina, epotilona D (KOS-862), N-(2-((4-hidroxifenil)amino)piridin-3-il)-4-metoxibencenosulfonamida, ixabepilona (BMS 247550) paclitaxel, TAXOTe Re® (docetaxel), p Nu 10094o (10988l), patupilona, XRP-9881 (larotaxel), vinflunina, ZK-EPO (epotilona sintética) y similares.
Además, los compuestos de fórmula (I) pueden combinarse con otros agentes quimioterapéuticos como ABRAXANE™ (ABI-007), ABT-100 (inhibidor de la farnesil transferasa), ADVEXIN® (vacuna Ad5CMV-p53), ALTOCOR® o MEVACOR® (lovastatina), AMPLIGEN® (polipoli C12U, un ARN sintético), APt OsYN® (exisulind), a Re DIA® (ácido pamidrónico), arglabina, L-asparaginasa, atamestano (1-metil-3,17-diona-androsta-1,4-dieno), a Va GE® (tazaroteno), AVE-8062 (derivado de la combreastatina), BEC2 (mitumomab), caquectina o caquexina (factor de necrosis tumoral), canvaxina (vacuna), CEAVAC® (vacuna contra el cáncer), CELEUK® (celmoleucina), CEPLENE® (histamina diclorhidrato), Ce RVa RiX® (vacuna contra el virus del papiloma humano), CHOP® (C: CYTo XAn® (ciclofosfamida); H: ADRIAMYCIN® (hidroxidoxorrubicina); O: Vincristina (ONCOVIN®); P: prednisona), CYPAT™ (acetato de ciproterona), combrestatina A4P, DAB(389)EGF (dominios catalítico y de translocación de la toxina diftérica fusionados mediante un enlace His-Ala con el factor de crecimiento epidérmico humano) o TransMID-107R™ (toxinas diftéricas), dacarbazina, dactinomicina, ácido 5,6-dimetilxantenona-4-acético (DMXAA), eniluracilo, EVIZON™ (lactato de escualamina), DIMERICINE® (loción liposomal T4N5), discodermolida, DX-8951f (mesilato de exatecán), enzastaurina, EPO906 (epitilona B), GARdAs IL® (vacuna recombinante tetravalente contra el virus del papiloma humano (tipos 6, 11, 16, 18)), GASTRIMMUNE®, Ge NASENSE®, GMK (vacuna conjugada con gangliósidos), GVAX® (vacuna contra el cáncer de próstata), halofuginona, histerelina, hidroxicarbamida, ácido ibandrónico, IGN-101, IL-13-PE38, IL-13-PE38QQR (cintredekin besudotox), IL-13-exotoxina de pseudomonas, interferón-a, interferón-Y, JUNOVAN™ o MEPACT™ (mifamurtida), lonafarnib, 5,10-metilentetrahidrofolato, miltefosina (hexadecilfosfolina), NEOVASTAT® (AE-941), NEUTREXIN® (glucuronato de trimetrexato), NIPENT® (pentostatina), ONCONASE® (una enzima ribonucleasa), ONCOPHAGE® (tratamiento de la vacuna contra el melanoma), ONCOVAX® (vacuna contra IL-2), ORATHECIN™ (rubitecán), OSIDe M® (medicamento celular basado en anticuerpos), OVAREX® MAb (anticuerpo monoclonal murino), paclitaxel, PANDIMEX™ (saponinas agliconas del ginseng que comprenden 20(S)protopanaxadiol (aPPD) y 20(S)protopanaxatriol (aPPT)), panitumumab, PANVAC®-VF (vacuna contra el cáncer en investigación), pegaspargasa, PeG Interferón A, fenoxodiol, procarbazina, rebimastat, REMOVAB® (catumaxomab), REVLIMID® (lenalidomida), RSR13 (efaproxiral), SOm ATu LINE® LA (lanreotida), SORIATANE® (acitretina), estaurosporina (Streptomyces staurospores), talabostat (PT100), TARGRETIN® (bexaroteno), TAXOPREXIN® (DHA-paclitaxel), TELCYTA® (canfosfamida, TLK286), temilifeno, TEMODAR® (temozolomida), tesmilifeno, talidomida, THERATOPE® (STn-KLH), timitaq (2-amino-3,4-dihidro-6-metil-4-oxo-5-(4-piridiltio)quinazolina diclorhidrato), TNFERADE™ (adenovector: portador de a Dn que contiene el gen del factor de necrosis tumoral-a), TRACLEER® o ZAVESCA® (bosentán), tretinoína (Retin-A), tetrandrina, TRISENOX® (trióxido de arsénico), VIRULlZlN®, ukrain (derivado de los alcaloides de la planta celandina mayor), vitaxin (anticuerpo antialfa-V-beta-3), Xc YTRIN® (motexafina gadolinio), XINLAY™ (atrasentán), XYOTAX™ (paclitaxel poliglumex), YONDELIS® (trabectedina), ZD-6126, ZINECARD® (dexrazoxano), ZOMETA® (ácido zolendrónico), zorrubicina y similares.
En el presente documento, el término "combinación" se usa para dar a entender que se refiere a la administración simultánea, por separado o secuencial. En una realización, "combinación" se refiere a la administración simultánea. En otra realización, "combinación" se refiere a la administración por separado. En una realización adicional, "combinación" se refiere a la administración secuencial. Cuando la administración es secuencial o por separado, el retraso en la administración del segundo componente no debe ser tal que se pierda el efecto beneficioso de la combinación. Dichos productos combinados emplean los compuestos de la presente invención o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, dentro del intervalo de dosificación anteriormente descrito en el presente documento y el otro agente farmacéuticamente activo dentro de su intervalo de dosificación aprobado. La terapia de combinación puede aportar "sinergia" y demostrar ser "sinérgica", es decir, el efecto logrado cuando se usan juntos los principios activos es mayor que la suma de los efectos obtenidos mediante el uso de los compuestos por separado. Puede lograrse un efecto sinérgico cuando los ingredientes activos: (1) se coformulan y administran o suministran simultáneamente en una formulación unitaria combinada; (2) se administran de manera alterna o en paralelo como formulaciones separadas; o (3) mediante algún otro régimen. Cuando se administran en la terapia de alternancia, se puede conseguir un efecto sinérgico cuando los compuestos se administran o suministran secuencialmente, por ejemplo, mediante diferentes inyecciones en jeringas separadas. En general, durante la terapia de alternancia, se administra una dosis eficaz de cada principio activo de forma secuencial, es decir, en serie, mientras que en la terapia de combinación, se administran conjuntamente dosis eficaces de dos o más principios activos.
En cualquiera de las características de la composición farmacéutica, el proceso, el método, el uso, el medicamento y la fabricación mencionados anteriormente, también se aplica cualquiera de las realizaciones alternativas de los compuestos de la invención descritos en el presente documento.
Los compuestos de fórmula (I) se preparan de acuerdo con las rutas generales siguientes.
Ruta A
Algunos compuestos de fórmula (I) pueden obtenerse a partir de otro compuesto de fórmula (I); por ejemplo, si contiene un grupo amino, mediante acilación (condiciones bien conocidas en la técnica), donde A, R2 y R4 son como se definen para la fórmula (I).
Obsérvese que se pueden utilizar grupos protectores adecuados por cualquier vía, como los conocidos en la técnica: por ejemplo, para amino: f-butoxicarbonilo o (trimetilsilil)etoximetilo (SEM); para hidroxilo: terc-butildimetilsililo o tetrahidropiran-2-ilo. Las condiciones de desprotección son bien conocidas en la técnica.
Ruta B
Pueden prepararse otros compuestos de fórmula (I) mediante la reacción de un compuesto de fórmula (II):
Figure imgf000030_0001
donde L es un átomo de halógeno (por ejemplo, cloro) o un grupo triflato con un compuesto de fórmula (III):
Figure imgf000030_0002
La reacción puede llevarse a cabo en condiciones estándar bien conocidas por los expertos en la materia, por ejemplo en presencia de una fuente de paladio (por ejemplo tetraquis(trifenilfosfina)paladio(0) o acetato de paladio(II)), opcionalmente un ligando de fosfina (por ejemplo Xantphos), y una base adecuada (por ejemplo carbonato de cesio).
Puede prepararse el compuesto de fórmula (II) mediante la reacción de un compuesto de fórmula (IV)
Figure imgf000030_0003
y un compuesto de fórmula (V) R4-L
Y es un grupo de ácido borónico, éster borónico o trifluoroborato de potasio (por ejemplo, ácido borónico, éster de pinacol de ácido borónico o trifluoroborato de potasio) y L es un átomo de halógeno (por ejemplo, cloro o bromo) o un grupo triflato. La reacción puede realizarse en condiciones estándar bien conocidas por los expertos en la materia, por ejemplo, en presencia de una fuente de paladio y un ligando de fosfina (por ejemplo tetraquis(trifenilfosfina)paladio(0), [1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio(II), también conocido como Pd(dppf)Cl2 , y una base adecuada (por ejemplo, carbonato de cesio o fosfato de cesio)).
Como alternativa, puede prepararse el compuesto de fórmula (II) mediante la reacción de un compuesto de fórmula (XIV)
Figure imgf000030_0004
(X IV )
y un compuesto de fórmula (IX): R4-Y
Y es un grupo de ácido borónico, éster borónico o trifluoroborato de potasio (por ejemplo, ácido borónico, éster de pinacol de ácido borónico o trifluoroborato de potasio), L1 y L2 son un átomo de halógeno o un grupo triflato, donde L1 es menos reactivo que L2 durante la reacción de acoplamiento, por ejemplo, donde L1 es cloro y L2 es yodo. La reacción puede realizarse en condiciones estándar bien conocidas por los expertos en la materia, por ejemplo, en presencia de una fuente de paladio y un ligando de fosfina (por ejemplo, precatalizador XPhos de 2.a generación, y una base adecuada, por ejemplo, fosfato de potasio).
Como alternativa, puede prepararse el compuesto de fórmula (II) mediante la reacción de un compuesto de fórmula (XIV) y un compuesto de fórmula (XII): R4-H, donde L1 y L2 son un átomo de halógeno o un grupo triflato, donde L1 es menos reactivo que L2 durante la reacción de acoplamiento, por ejemplo, donde L1 es cloro y L2 es yodo, mediante una reacción de "activación de C-H", por ejemplo, como se describe en el ejemplo de intermedio 50.
Ruta C
Algunos compuestos de fórmula (I) pueden prepararse, por ejemplo, mediante la reacción de un compuesto de fórmula (VI)
Figure imgf000031_0001
con un compuesto de fórmula (VII):
Figure imgf000031_0002
( V I I )
Los reactivos de acoplamiento para esta reacción incluyen, por ejemplo, 1-cloro-N,N,2-trimetilprop-1-en-1-amina, hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio, también conocido como HATU, TBTU (tetrafluoroborato de 2-(1H-benzo[d][1,2,3]triazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametilisouronio), ion de clorhidrato de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida o anhídrido 1-propanofosfónico (T3P), preferentemente 1-cloro-N,N,2-trimetilprop-1-en-1-amina o anhídrido 1-propanofosfónico (T3P).
La reacción se lleva a cabo convenientemente en presencia de una base adecuada. Una base adecuada es, por ejemplo, una base de amina orgánica, tal como, por ejemplo, piridina, 2,6-lutidina, colidina, 4-dimetilaminopiridina, trietilamina, N-metilmorfolina, diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno, diisopropiletilamina, o, por ejemplo, un carbonato o hidróxido de un metal alcalino o alcalinotérreo, por ejemplo, carbonato de sodio, carbonato de potasio, carbonato de calcio, hidróxido de sodio o hidróxido de potasio;
Puede prepararse el compuesto de fórmula (VI) mediante la reacción de un compuesto de fórmula (VIII)
Figure imgf000031_0003
(V II I )
y un compuesto de fórmula (IX): R4-Y
L es un átomo de halógeno (por ejemplo, yodo o bromo) o un grupo triflato.
Y es un grupo de ácido borónico, éster borónico o trifluoroborato de potasio (por ejemplo, ácido borónico, éster de pinacol de ácido borónico o trifluoroborato de potasio)
La reacción puede realizarse en condiciones estándar bien conocidas por los expertos en la materia, por ejemplo, en presencia de una fuente de paladio y un ligando de fosfina (por ejemplo tetraquis(trifenilfosfina)paladio(0), [1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio(N), también conocido como Pd(dppf)Ch), y una base adecuada (por ejemplo, carbonato de cesio o carbonato de potasio).
El compuesto de fórmula (VIII) puede prepararse mediante la reacción de un compuesto de fórmula (X) con amoniaco (como se describe en los ejemplos 2 y 86)
Figure imgf000032_0001
L es un átomo de halógeno (por ejemplo, yodo o bromo) o un grupo triflato.
Se entiende que un compuesto de fórmula (VIII) puede transformarse en otro compuesto de fórmula (VIII), por ejemplo, como se ilustra en el ejemplo 39 (preparación de 6-amino-4-cloronicotinonitrilo).
Ruta D
Pueden prepararse otros compuestos de fórmula (I) mediante la reacción de un compuesto de fórmula (XI) con un compuesto de fórmula (IX) R4-Y:
Figure imgf000032_0002
L es un átomo de halógeno (por ejemplo, yodo, bromo o cloro) o un grupo triflato.
Y es un grupo de ácido borónico, éster borónico o trifluoroborato de potasio (por ejemplo, ácido borónico, éster de pinacol de ácido borónico o trifluoroborato de potasio)
La reacción puede realizarse en condiciones estándar bien conocidas por los expertos en la materia, por ejemplo, en presencia de una fuente de paladio y un ligando de fosfina (por ejemplo: precatalizador XPhos de 2.a generación, también conocido como cloro(2-diciclohexilfosfino-2',4',6'-triisopropiM,1'-bifenil)[2-(2'-amino-1,1'-bifenil)]paladio(N), o [1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio(II)), y una base adecuada (por ejemplo, fosfato de potasio o carbonato de cesio). Como alternativa, pueden prepararse compuestos de fórmula (I), por ejemplo, mediante la reacción de un compuesto de fórmula (XI) con un compuesto de fórmula (XII) R4-H, mediante una reacción de "activación de C-H", como se describe en el ejemplo 7 o 22.
Puede prepararse el compuesto de fórmula (XI) mediante la reacción de un compuesto de fórmula (VIII)
Figure imgf000032_0003
(V III)
L es un átomo de halógeno (por ejemplo, yodo, bromo o cloro) o un grupo triflato.
con un compuesto de fórmula (VII):
Figure imgf000032_0004
(V II)
Los agentes de acoplamiento adecuados para esta reacción incluyen, por ejemplo, hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio, HATU, TBTU (tetrafluoroborato de 2-(1H-benzo[d][1,2,3]triazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametilisouronio) o ion de clorhidrato de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida, preferentemente 1-cloro-N,N,2-trimetilprop-1-en-1-amina y anhídrido 1-propanofosfónico (T3 P).
La reacción se lleva a cabo convenientemente en presencia de una base adecuada. Una base adecuada es, por ejemplo, una base de amina orgánica, tal como, por ejemplo, piridina, 2,6-lutidina, colidina, 4-dimetilaminopiridina, trietilamina, N-metilmorfolina, diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno, diisopropiletilamina, o, por ejemplo, un carbonato o hidróxido de un metal alcalino o alcalinotérreo, por ejemplo, carbonato de sodio, carbonato de potasio, carbonato de calcio, hidróxido de sodio o hidróxido de potasio. Ha de entenderse que cualquiera de los compuestos de fórmula (XI) puede transformarse en otro compuesto de fórmula (XI), por ejemplo, mediante acilación de un grupo amino, como en el ejemplo 39 o 75.
Ruta E
Pueden prepararse algunos compuestos de fórmula (I) mediante la reacción de un compuesto de fórmula (XIII) con un compuesto de fórmula (V) R4-L:
Figure imgf000033_0001
Y es un grupo de ácido borónico, éster borónico o trifluoroborato de potasio (por ejemplo, ácido borónico, éster de pinacol de ácido borónico o trifluoroborato de potasio)
L es un átomo de halógeno (por ejemplo, yodo o bromo) o un grupo triflato.
La reacción puede realizarse en condiciones estándar bien conocidas por los expertos en la materia, por ejemplo, en presencia de una fuente de paladio y un ligando de fosfina (por ejemplo tetraquis(trifenilfosfina)paladio(0), [1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio(N), también conocido como Pd(dppf)Ch), y una base adecuada (por ejemplo, carbonato de cesio o fosfato de potasio).
Por ejemplo, pueden prepararse compuestos de fórmula (XIII) mediante la reacción de un compuesto de fórmula (XI), como se describe en el ejemplo 16.
Ruta F
Algunos compuestos de fórmula (I) pueden prepararse, por ejemplo, mediante una reacción de "ciclación" de un compuesto de fórmula (XV):
Figure imgf000033_0002
en donde X1 e Y1 se definen como (XV) es el precursor en la reacción de ciclación, a condición de que X1 e Y1 junto con los átomos a los que están unidos, no formen un anillo. Por ejemplo, X1 o Y1 pueden ser hidrógeno.
La reacción de "ciclación" puede realizarse en condiciones estándar bien conocidas por los expertos en la materia. A modo ilustrativo, los ejemplos 78 y 82 describen un ejemplo particular de esta reacción de "ciclación".
Los compuestos de fórmula (XV) pueden obtenerse mediante rutas análogas a las rutas A a E descritas para la producción de compuestos de fórmula (I). A modo de ejemplo, por analogía a la ruta D, los compuestos de fórmula (XV) pueden prepararse mediante la reacción de un compuesto de fórmula (XI) con un compuesto de fórmula (XVI): R40-Y:
Figure imgf000034_0001
L es un átomo de halógeno (por ejemplo, yodo, bromo o cloro) o un grupo triflato.
Y es un grupo de ácido borónico, éster borónico o trifluoroborato de potasio (por ejemplo, ácido borónico, éster de pinacol de ácido borónico o trifluoroborato de potasio)
Como alternativa, pueden prepararse compuestos de fórmula (XV), por ejemplo, mediante la reacción de un compuesto de fórmula (XI) con un compuesto de fórmula (XVII) R40-H, mediante una reacción de "activación de C-H".
La reacción puede realizarse en condiciones estándar bien conocidas por los expertos en la materia, como se describe en la ruta D.
Los compuestos de (IX) R4-Y, donde Y es un grupo ácido borónico, éster borónico o trifluoroborato de potasio (por ejemplo, ácido borónico, éster de pinacol de ácido borónico o trifluoroborato de potasio), son intermedios clave en algunas de las rutas sintéticas empleadas para obtener el compuesto de fórmula (I).
Algunos métodos para sintetizar un compuesto de fórmula (IX) a partir de un compuesto de fórmula (V) R4-L, donde L es un átomo de halógeno (por ejemplo, yodo, bromo o cloro) o un grupo triflato, incluyen reacciones de metalación o borilación, como se ilustra mediante el ejemplo 23 y 85 y borilaciones catalizadas con paladio, como se ilustra en el ejemplo 14.
El compuesto de fórmula (V) R4-L se obtiene normalmente a partir de un compuesto de fórmula (XII) R4-H, mediante una reacción de halogenación.
Los compuestos de fórmula (IX) R4 -Y, donde Y es un grupo de ácido borónico, éster borónico o trifluoroborato de potasio (por ejemplo, ácido borónico, éster de pinacol de ácido borónico o trifluoroborato de potasio), también pueden obtenerse directamente a partir de compuestos de fórmula (XII) R4-H, mediante una reacción de "activación de C-H", como se ilustra en el ejemplo 49. Las condiciones típicas utilizan un catalizador de iridio (normalmente dímero de metoxi(ciclooctadieno)iridio(I)) y un ligando (normalmente 4,4'-di-terc-butil-2,2'-dipiridilo o 3,4,7,8-tetrametil-1,10-fenantrolina) con una fuente de boro (normalmente, 4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano) en un disolvente inerte (normalmente THF o dioxano) a aproximadamente 50 °C a 90 °C.
Se apreciará que algunos de los diversos sustituyentes de anillo en los compuestos de la presente invención pueden introducirse mediante reacciones de sustitución aromática estándar o generarse mediante modificaciones convencionales de grupos funcionales, ya sea antes o inmediatamente después de los procesos mencionados anteriormente, y como tales se incluyen en el proceso divulgado. Dichas reacciones y modificaciones incluyen, por ejemplo, la introducción de un sustituyente mediante una reacción de sustitución aromática, reducción de sustituyentes, alquilación de sustituyentes y oxidación de sustituyentes. Los reactivos y las condiciones de reacción para tales procedimientos son bien conocidos en la técnica química. Algunos ejemplos particulares de reacciones de sustitución aromática incluyen la introducción de un grupo nitro utilizando ácido nítrico concentrado, la introducción de un grupo acilo utilizando, por ejemplo, un haluro de acilo y un ácido de Lewis (como el tricloruro de aluminio) en condiciones de Friedel Crafts; la introducción de un grupo alquilo utilizando un haluro de alquilo y un ácido de Lewis (como el tricloruro de aluminio) en condiciones Friedel Crafts; y la introducción de un grupo halógeno. Algunos ejemplos particulares de modificaciones incluyen la reducción de un grupo nitro a un grupo amino mediante, por ejemplo, la hidrogenación catalítica con un catalizador de níquel o el tratamiento con hierro en presencia de ácido clorhídrico con calentamiento; la oxidación de alquiltio a alquilsulfinilo o alquilsulfonilo.
También se apreciará que en algunas de las reacciones mencionadas en el presente documento puede ser necesario/deseable proteger cualquier grupo sensible en los compuestos. Los casos en los que la protección es necesaria o deseable y los métodos adecuados para la protección son conocidos por los expertos en la materia. Los grupos protectores convencionales pueden utilizarse de acuerdo con la práctica habitual (para una ilustración, véase T.W. Green, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley and Sons, 1991). Por tanto, si los reactivos incluyen grupos como amino, carboxi o hidroxi, puede ser deseable proteger el grupo en algunas de las reacciones mencionadas en el presente documento.
Un grupo protector adecuado para un grupo amino o alquilamino es, por ejemplo, un grupo acilo, por ejemplo un grupo alcanoílo, tal como acetilo, un grupo alcoxicarbonilo, por ejemplo un grupo metoxicarbonilo, etoxicarbonilo o terc-butoxicarbonilo, un grupo arilmetoxicarbonilo, por ejemplo benzoilocarbonilo, o un grupo aroílo, por ejemplo benzoílo. Las condiciones de desprotección de los grupos protectores anteriores varían necesariamente con la elección del grupo protector. Por tanto, por ejemplo, puede eliminarse un grupo acilo como un alcanoílo o alcoxicarbonilo o un grupo aroílo, por ejemplo, por hidrólisis con una base adecuada como un hidróxido de metal alcalino, por ejemplo hidróxido de litio o de sodio. Como alternativa, puede eliminarse un grupo acilo, tal como un grupo ferc-butoxicarbonilo, por ejemplo, mediante tratamiento con un ácido adecuado, tal como ácido clorhídrico, sulfúrico o fosfórico o trifluoroacético y puede eliminarse un grupo arilmetoxicarbonilo, tal como un grupo benciloxicarbonilo, por ejemplo, mediante hidrogenación sobre un catalizador, tal como paladio sobre carbono o mediante tratamiento con un ácido de Lewis, por ejemplo, tris(trifluoroacetato) de boro. Un grupo protector alternativo adecuado para un grupo amino primario es, por ejemplo, un grupo ftaloílo, que puede eliminarse por tratamiento con una alquilamina, por ejemplo dimetilaminopropilamina o con hidracina.
Un grupo protector adecuado de un grupo hidroxi es, por ejemplo, un grupo acilo, por ejemplo, un grupo alcanoílo, tal como acetilo, un grupo aroílo, por ejemplo, benzoílo o un grupo arilmetilo, por ejemplo, bencilo. Las condiciones de desprotección de los grupos protectores anteriores variarán necesariamente con la elección del grupo protector. Por tanto, por ejemplo, puede eliminarse un grupo acilo como un alcanoílo o un grupo aroílo, por ejemplo, por hidrólisis con una base adecuada como un hidróxido de metal alcalino, por ejemplo hidróxido de litio o de sodio. Como alternativa, puede eliminarse un grupo arilmetilo, tal como un grupo bencilo, por ejemplo, mediante hidrogenación sobre un catalizador, tal como paladio sobre carbono.
Un grupo protector adecuado para un grupo carboxi es, por ejemplo, un grupo esterificante, por ejemplo, un grupo metilo o etilo que puede eliminarse, por ejemplo, mediante hidrólisis con una base, tal como hidróxido de sodio o por ejemplo, un grupo ferc-butilo, que puede eliminarse, por ejemplo, mediante tratamiento con un ácido, por ejemplo, un ácido orgánico, tal como ácido trifluoroacético o por ejemplo, un grupo bencilo, que puede eliminarse, por ejemplo, mediante hidrogenación sobre un catalizador, tal como paladio sobre carbono.
Los grupos protectores pueden eliminarse en cualquier etapa conveniente de la síntesis utilizando técnicas convencionales bien conocidas la técnica de la química.
Además, se proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, como se define en el presente documento en relación con un diluyente o portador farmacéuticamente aceptable.
Debe entenderse que un compuesto de fórmula (I) puede obtenerse por separación (por ejemplo, separación quiral) a partir de una mezcla de compuestos de fórmula (I); para los ejemplos 9 y 2, 41 y 42, 43 y 14, 59 y 60, 61 y 62, 64 y 65, 68 y 69,70 y 71,72 y 73, 79 y 80, 83 y 84.
Algunos compuestos de las fórmulas (II), (V), (VI), (IX), (XI), (XII), (XIII), (XV), (XVI) y (XVII) son novedosos.
El ácido (1S,3R)-3-(acetamino)ciclohexanocarboxílico es un intermedio clave en la síntesis de algunos compuestos de fórmula (I). La siguiente ruta (esquema a continuación, descrito en el ejemplo 85), que da acceso a este intermedio clave en una forma enantioméricamente pura, es novedosa y útil.
Figure imgf000035_0001
Ácido (1 S,3R)-3-(acetamido)ciclohexanocarboxílico
Figure imgf000035_0003
1) H2p 8 bar, 100 °C 1 Novoz m 435
Figure imgf000035_0002
Figure imgf000035_0004
- , .
46 % 40 %
cis x HCI R i- i-P r
NaOH.
cis
Figure imgf000035_0006
extracciones R1 = H
Figure imgf000035_0005
100 %
Esta ruta está basada en la acilación enzimática enantioselectiva del 3-aminociclohexilcarboxilato de isopropilo (utilizando Novozym 435) como se ilustra a continuación:
Figure imgf000036_0001
Los aspectos de la presente divulgación pueden definirse adicionalmente por referencia a los siguientes ejemplos no limitantes, que describen en detalle la preparación de ciertos compuestos e intermedios de la presente divulgación y los métodos de uso de los compuestos de la presente divulgación. Resultará evidente para los expertos en la materia que pueden ponerse en práctica diversas modificaciones, tanto en los materiales y los métodos, sin desviarse del alcance de la presente divulgación.
A menos que se indique de otro modo:
(i) las operaciones se realizaron a temperatura ambiente, es decir, en el intervalo de 17 a 25 °C y en un atmósfera de un gas inerte, tal como nitrógeno, a menos que se indique de otro modo;
(ii) las evaporaciones se realizaron por evaporación rotativa o utilizando un equipo Genevac o un evaporador Biotage v10 al vacío y los procedimientos de elaboración se llevaron a cabo tras la eliminación de los sólidos residuales por filtración;
(iii) las purificaciones por cromatografía ultrarrápida se realizaron en un Teledyne Isco CombiFlash® Rf o Teledyne Isco CombiFlash® Companion® automatizado utilizando columnas de sílice RediSep Rf Gold™ preempaquetadas (partículas esféricas de 20-40 |jm), cartuchos GraceResolv™ (sílice Davisil®) o cartuchos Silicycle (40 - 63 |jm).
(iv) la cromatografía preparativa se realizó en un instrumento HPLC de preparación de Gilson con recogida de UV; como alternativa, la cromatografía preparativa se realizó en un instrumento HPLC-MS Waters AutoPurification con recogida activada por MS y UV;
(v) la cromatografía preparatoria quiral se realizó en un instrumento Gilson con recogida UV (inyector/colector de fracciones 233, bombas 333 y 334, detector UV 155) o en un instrumento Varian Prep Star (2 bombas SD1, detector UV 325, colector de fracciones 701) que funciona con inyección Gilson 305; como alternativa, la cromatografía preparatoria quiral se realizó en un instrumento Waters Prep 100 SFC-MS con recogida activada por MS y UV o en un instrumento Thar MultiGram III SFC con recogida UV.
(vi) los rendimientos, cuando estaban presentes, no eran necesariamente los máximos alcanzables;
(vii) en general, las estructuras de los productos finales de la fórmula I se confirmaron mediante espectroscopia de resonancia magnética nuclear (RMN); los valores de desplazamiento químico de la RMN se midieron en la escala delta [los espectros de resonancia magnética de protones se determinaron utilizando un instrumento Bruker Avance 500 (500 MHz) o Bruker Avance 400 (400 MHz)]; las mediciones se realizaron a temperatura ambiente, a menos que se especifique lo contrario; se han utilizado las siguientes abreviaturas s, singlete; d, doblete; t, triplete; q, cuartete; m, multiplete; dd, doblete de dobletes; ddd, doblete de doblete de dobletes; dq, doblete de cuartetes; dt, doblete de tripletes; tt, triplete de tripletes; p, penteto; br, señal amplia.
(viii) en general, los productos finales de la fórmula I se caracterizaron también por espectroscopia de masas tras la cromatografía líquida (LCMS o UPLC); la UPLC se llevó a cabo utilizando un UPLC de Waters equipado con un espectrómetro de masas SQ de Waters (temperatura de la columna 40, UV = 220-300 nm, especulación de masas = ESI con conmutación positiva/negativa) a un caudal de 1 ml/min utilizando un sistema de disolventes de 97 % de A 3 % de B a 3 % de A a 97 % de B durante 150 min (tiempo de ejecución total con el equilibrio de vuelta a las condiciones iniciales, etc. 1,70 min), donde A = ácido fórmico al 0,1 % en agua (para el trabajo con ácidos) o amoníaco al 0,1 % en agua (para el trabajo con bases) B = acetonitrilo. Para el análisis de ácidos se utilizó la columna Waters Acquity HSS T3 1,8 jm 2,1 x 50 mm, para el análisis de bases se utilizó la columna Waters Acquity BEH 1,7 jm 2,1 x 50 mm. Como alternativa, se utilizó un UPLC de Waters equipado con un espectrómetro de masas Sq de Waters (temperatura de la columna 30, UV = 210-400 nm, especulación de masas = ESI con conmutación positiva/negativa) a un caudal de 1 ml/min utilizando un gradiente de disolvente del 2 al 98 % de B durante 1,5 min (tiempo de ejecución total con equilibrio de vuelta a las condiciones iniciales: 2 min), donde A = ácido fórmico al 0,1 % en agua y B = ácido fórmico al 0,1 % en acetonitrilo (para el trabajo con ácidos) o A = hidróxido de amonio al 0,1 % en agua y B = acetonitrilo (para el trabajo con bases). Para el análisis de ácidos se utilizó una columna Waters Acquity HSS T3 de 1,8 jm y 2,1 x 30 mm, para el análisis de bases se utilizó una columna Waters Acquity BEH C18 de 1,7 jm y 2,1 x 30 mm; la LCMS se llevó a cabo utilizando un Waters Alliance HT (2795) equipado con un espectrómetro de masas Waters ZQ ESCi y una columna Phenomenex Gemini -NX (5 |jm x 2,1 mm) a un caudal de 1,1 ml/min del 95 % de A al 95 % de B durante 4 min con una retención de 0,5 min. El modificador se mantuvo constante al 5 % de C (50:50 de acetonitrilo:agua con ácido fórmico al 0,1 %) o D (50:50 de acetonitrilo:agua con hidróxido de amonio al 0,1 %, dependiendo de si era un método ácido o básico. Debe entenderse que, a menos que se especifique otra cosa, se notifica el pico de masa más característico, redondeado a la unidad inferior. Normalmente, cuando existen varios isótopos de un átomo, solo se notifica el isótopo inferior más común (por ejemplo, 35Cl, 79Br, 12C...)
(ix) la purificación de intercambio iónico se realizó generalmente utilizando un cartucho SCX-2 (Biotage).
(x) la pureza intermedia se evaluó mediante análisis por cromatografía de capa fina, espectrometría de masas, HPLC (cromatografía de líquidos de alto rendimiento) y/o RMN;
(xi) la rotación óptica se mide en grados;
(xii) el análisis por XRPD se realizó utilizando un difractrómetro Bruker D4, que se encuentra disponible comercialmente de Bruker AXS Inc.™ (Madison, Wisconsin). Los espectros de XRPD se obtuvieron montando una muestra (aproximadamente 20 mg) del material a analizar en un soporte de oblea de cristal de silicio simple (por ejemplo, un soporte de muestra de difracción de rayos X de fondo cero de Bruker) y extendiendo la muestra en una capa fina con la ayuda de un portaobjetos de microscopio. La muestra se hizo girar a 30 revoluciones por minuto (para mejorar las estadísticas de recuento) y se irradió con rayos X generados por un tubo de enfoque largo-fino de cobre operado a 40 kV y 40 mA con una longitud de onda de 1,5406 Angstrom (es decir, aproximadamente 1,54 Angstrom). La muestra se expuso durante 1 segundo por cada incremento de ángulo 2-theta de 0,02 (modo de exploración continua) en el rango de 2 grados a 40 grados 2-theta en el modo theta-theta. El tiempo de análisis fue de 31 min, 41 s. El experto aprecia que los valores de 20 de XRPD pueden variar con un intervalo razonable, por ejemplo, en el intervalo ± 0,1°20. El experto apreciará que las intensidades de XRPD pueden variar cuando se miden para esencialmente la misma forma cristalina por diversos motivos que incluyen, por ejemplo, la orientación preferida. Los principios de la XRPD se describen en publicaciones como, por ejemplo, Giacovazzo, C. et al. (1995), Fundamentals of Crystallography, Oxford University Press; Jenkins, R. y Snyder, R. L. (1996), Introduction to X-Ray Powder Diffractometry, John Wiley & Sons, Nueva York; y Klug, H. P. y Alexander, L. E. (1974), X-ray Diffraction Procedures, John Wiley and Sons, Nueva York. Debido a que las intensidades relativas son menos fiables, en lu ar de valor numérico se utilizan las si uientes definiciones.
Figure imgf000037_0001
Se han omitido algunos picos muy débiles adicionales en el difractograma.
(xiii) La DSC se realizó utilizando un instrumento de TA Instruments, modelo Q1000. Se pesó una muestra (aproximadamente 2 mg) en una bandeja de muestra de aluminio y se transfirió a la DSC. El instrumento se purgó con nitrógeno a 50 ml/min y los datos se recogieron a entre 25 °C y 300 °C, utilizando una tasa de calentamiento dinámico de 10 °C/min. El análisis DSC se realizó en muestras preparadas según los métodos estándar utilizando un calorímetro DSC Q SERIES™ Q1000 disponible de TA INSTRUMENTS® (New Castle, Delaware). El instrumento se purgó con nitrógeno a 50 ml/min y los datos se recogieron entre 25 °C y 300 °C, utilizando una tasa de calentamiento dinámico de 10 °C/minuto. Los datos térmicos se analizaron con el software estándar, por ejemplo, Universal v.4.5A de TA INSTRUMENTS®.
(xiv) Análisis por termogravimetría (TGA): la TGA se realizó utilizando un instrumento de TA Instruments, modelo Q5000. Se colocó una muestra (aproximadamente 5 mg) en una bandeja de muestra de aluminio y se transfirió a la estufa de calentamiento de TGA. El instrumento se purgó con nitrógeno a 50 ml/min y los datos se recogieron a entre 25 °C y 300 °C, utilizando una tasa de calentamiento dinámico de 10 °C/min. Los datos térmicos se analizan con el software estándar, por ejemplo, Universal v.4.5A de TA INSTRUMENTS®.
(xv) Se han utilizado las siguientes abreviaturas:
Precatalizador XPhos (o X-Phos) de 2.a generación: cloro(2-diciclohexilfosfino-2',4',6'-triisopropil-1, 1 '-bifenil)[2-(2'-amino-1,1'-bifenil)]paladio(II)
Precatalizador RuPhos de 3.a generación metanosulfonato de (2-diciclohexilfosfino-2',6'-diisopropoxi-1,1'-bifenil)[2-(2'-amino-1,1'-bifenil)]paladio(II)
ac.
acuoso
atm
atmósfera
BuLi
n-butil litio
CDCla
deutero-cloroformo
CDaOD
deutero-metanol
CDI
carbonil diimidazol
Conc.
concentrado
DCM
diclorometano
DIPEA NN-diisopropiletilamina
DMA MN-dimetilacetamida
DMF
N,N-dimetilformamida
DMSO
dimetilsulfóxido
DMSO-d6
deutero-dimetilsulfóxido
dppf
1, 1 '-bis(difenilfosfino)ferroceno DSC
calorimetría de barrido diferencial EtOH
etanol
EtOAc
acetato de etilo
HATU
hexafluorofosfato de 3-óxido de 1-[b¡s(d¡met¡lammo),met¡len]-1H-1,2,3-tr¡azolo[4,5-jb]p¡r¡dm¡o h
horas
IPA/¡PrOH
alcohol ¡sopropíl¡co
MeCN
aceton¡tr¡lo
MeOH
metanol
MTBE
éter metílico de ferc-butilo
NBS
N-bromosuccrnimida
NIS
N-yodosucc¡n¡m¡da
NMP
N-met¡lp¡rrol¡dma
PdCh(dppf)
[1,1'-B¡s(d¡fen¡lfosf¡no)ferroceno]-d¡cloropalad¡o(N)
Pd(P(Cy)3)2Cl2
B¡s(tr¡c¡clohex¡lfosf¡na)d¡doropalad¡o(N)
t.a.
temperatura amb¡ente
SCX/SCX-2
cromatografía de ¡ntercamb¡o cat¡ón¡co fuerte
SEM-Cl
cloruro de 2-(tr¡met¡ls¡l¡l)etox¡met¡lo
SFC
cromatografía de flu¡dos supercrít¡cos
T3P®
anhídr¡do del ác¡do propanofosfón¡co
TBS/TBDMS
ferc-but¡ld¡met¡ls¡l¡lo
TBS-Cl
cloruro de fe/c-butildimetilsililo
TEA
trietilamina
TFA
ácido trifluoroacético
TGA
análisis de termogravimetría
THF
tetrahidrofurano
TMEDA
tetrametiletilendiamina
Xantphos
4,5-bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilxanteno
XRPD
Difracción de rayos X de polvo
Ejemplo 1: (R)-M-(5-cloro-4-(5.6.7.8-tetrah¡dro¡m¡dazoH .2-alp¡r¡d¡n-3-¡l)pir¡d¡n-2-¡l)p¡per¡d¡n-3-carboxam¡da
Figure imgf000040_0001
Se añadió gota a gota TFA (2 ml, 26,0 mmol) a 3-((5-cloro-4-(5,6,7,8-tetrahidroimidazo[1,2-a]piridin-3-il)piridin-2-il)carbamoil)piperidin-1-carboxilato de (R)-fe/-c-butilo (0,40 g, 0,52 mmol) en DCM (5 ml). La mezcla resultante se agitó a t.a. durante 1 h antes de concentrarse a presión reducida. El producto en bruto resultante se purificó mediante HPLC preparativa (columna Waters XBridge Prep C18 OBD, 5 ^m de sílice, diámetro de 30 mm, longitud de 100 mm) utilizando mezclas decrecientemente polares de agua (que contiene carbonato de amonio al 0,1 %) y MeCN como eluyentes. Las fracciones que contenían el compuesto deseado se concentraron a sequedad, obteniéndose (R)-W-(5-cloro-4-(5,6,7,8-tetrahidroimidazo[1,2-a]piridin-3-il)piridin-2-il)piperidin-3-carboxamida (22,0 mg, 11,7 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (400 MHz, CDsOD, 22 °C) 1,41 - 1,52 (1H, m), 1,57 - 1,68 (2H, m), 1,85 - 1,94 (5H, m), 2,48 - 2,57 (2H, m), 2,68 - 2,76 (1H, m), 2,80 - 2,89 (3H, m), 2,97 - 3,03 (1H, m), 3,78 - 3,84 (2H, m), 7,04 (1H, s), 8,10 (1H, s), 8,29 (1H, s), no se observan los NH de amida y piperidina. m/z: e S+ [M+H]+ 360.
Los procedimientos para preparar el material de partida 3-((5-cloro-4-(5,6,7,8-tetrahidroimidazo [1,2-a]piridin-3-il)piridin-2-il)carbamoil)piperidin-1-carboxilato de (R)-íerc-butilo se describen a continuación:
Preparación de 3-(2.5-d¡clorop¡r¡d¡n-4-¡l)-5.6.7.8-tetrah¡dro¡m¡dazori.2-alp¡rid¡na
Figure imgf000041_0001
Se añadió carbonato de cesio (3,24 g, 9,95 mmol) a 3-bromo-5,6,7,8- tetrahidroimidazo[1,2-a]piridina (500 mg, 2,49 mmol), ácido (2,5-dicloropiridin-4-il)borónico (3,34 g, 17,4 mmol), Pd(dppf)Cl2 -CH2Cl2 (203 mg, 0,25 mmol), dioxano (10 ml), y agua (1 ml) en atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó a 90 °C durante 2 h. La mezcla de reacción se concentró a presión reducida a sequedad y se volvió a disolver en EtOAc (50 ml) antes de lavarla secuencialmente con agua (2 x 20 ml) y cloruro de sodio acuoso saturado (50 ml). La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró, y se concentró a presión reducida. El producto en bruto resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de EtOAc del 0 al 25 % en éter de petróleo. Las fracciones puras se concentraron a sequedad, obteniéndose 3-(2,5-dicloropiridin-4-il)-5,6,7,8-tetrahidroimidazo[1,2-a]piridina (500 mg, 75,0 %) en forma de un sólido de color pardo. m/z: ES+ [M+H]+ 268.
Preparación de 3-((5-cloro-4-(5.6.7.8-tetrah¡dro¡m¡dazori.2-alp¡r¡d¡n-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)carbamo¡l)p¡per¡d¡n-1-carboxílato de (R)-ferc-but¡lo
Figure imgf000041_0002
Se añadió 3-(2,5-dicloropiridin-4-il)-5,6,7,8-tetrahidroimidazo[1,2-a]piridina (460 mg, 1,72 mmol) a 3-carbamoilpiperidin-1-carboxilato de (R)-ferc-butilo (470 mg, 2,06 mmol), Pd(PPh3)4 (198 mg, 0,17 mmol), carbonato de cesio (1,68 g, 5,15 mmol), Xantphos (199 mg, 0,34 mmol) y dioxano (8 ml) en atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó a 120 °C durante 2 h. Después se filtró la mezcla resultante y el filtrado resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de EtOAc del 0 al 50 % en éter de petróleo. Las fracciones puras se concentraron a presión reducida, obteniéndose (R)-ferc-butil-3-((5-cloro-4-(5,6,7,8-tetrahidroimidazo[1,2-a]piridin-3-il)piridin-2-il)carbamoil)piperidin-1 -carboxilato (400 mg, 50,7 %) en forma de un aceite de color amarillo. m/z: ES+ [M+H]+ 460.
Ejemplo________2 _______ nS.3R)-3-acetam¡do-M-(5-cloro-4-(4.5.6.7-tetrah¡drop¡razolori.5-a1p¡r¡d¡n-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da
Figure imgf000041_0003
Se añadió cloruro de acetilo (1,0 ml, 14,5 mmol) gota a gota a una mezcla de (1S,3R)-3-amino-N-(5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (2,46 g, 6,59 mmol) y piridina (6,40 ml, 79,1 mmol) en DCM (58,5 ml) a 0 °C. Después de 45 min, la mezcla se lavó con hidrogenocarbonato de sodio acuoso saturado y cloruro de sodio acuoso saturado antes de secarla sobre sulfato de sodio, filtrarla y concentrarla a presión reducida. El aceite de color ámbar resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de metanol del 0 al 10 % en DCM. Las fracciones de producto se concentraron a presión reducida, obteniéndose (1S,3R)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (2,6 g, rendimiento del 93 % a lo largo de tres etapas) en forma de una espuma sólida de color beige claro.
El análisis de (1 S,3R)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida en condiciones de SFC analítica (véase más adelante), determinó que este material contenía un 98 % de (1S,3R)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (Tr = 1,42 min) y un 2 % de (1R,3S)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (Tr = 2,42 min). Este material se purificó en condiciones de SFC preparativa (columna Chiralpak IA, 5 |jm, diámetro de 30 mm, longitud de 250 mm, temperatura de la columna de 40 °C, presión de salida de 100 bar, caudal de 120 ml/min), eluyendo con metanol al 40 % que contenía dimetiletilamina al 0,1 % en CO2 , para eliminar el enantiómero (1R,3S). Las fracciones de producto para el enantiómero más rápido en eluir se concentraron a presión reducida, obteniéndose 2,3 g de un sólido de color ámbar-rosado. Este sólido se volvió a purificar mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice (tapón), gradiente de elución de MeOH del 0 al 10 % en acetato de etilo, obteniéndose (1S,3R)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (2,25 g) en forma de una espuma sólida de color blanco. El producto se trató con 2 0 ml de acetonitrilo y la mezcla resultante se calentó en condiciones de temperatura de reflujo antes de dejar que se enfriara a t.a. Se añadió acetonitrilo adicional (~5 ml) y el proceso se repitió hasta que se disolvió todo el sólido. La solución de color amarillo pálido resultante se enfrió a t.a. y se formó un precipitado. Después de 1 h, se filtró el precipitado y se lavó con acetonitrilo, antes de secarla al vacío a 65 °C durante 1 h. El sólido se enfrió a t.a., obteniéndose (1S,3R)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (1,76 g). 1H RMN (300 MHz, DMSO-de, 27 °C) 0,97 - 1,17 (1H, m), 1,20 - 1,38 (3H, m), 1,68 - 1,94 (9H, m), 1,96 - 2,07 (2H, m), 2,54 - 2,68 (1H, m), 2,80 (2H, t), 3,46 - 3,65 (1H, m), 4,14 (2H, t), 7,73 (1H, d), 7,76 (1H, s), 8,14 (1H, s), 8,38 (1H, s), 10,57 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 416.
Condiciones de SFC analítica:
Figure imgf000042_0001
Rotación óptica:
Figure imgf000042_0002
Los cristales del ejemplo 2 se analizaron mediante XRPD y los resultados se tabulan a continuación y se muestran en la figura 7. La XRPD del sólido confirma que el sólido contiene la forma B del ejemplo 2.
Los picos prin i l l f rm B l m l 2 m r n n l l 1 n in i n
Figure imgf000042_0003
Figure imgf000043_0003
Por consiguiente, se proporciona una forma cristalina, la forma B, que tiene un patrón de difracción de rayos X de polvo con picos específicos en aproximadamente 2-theta = 5,5, 6 ,8 , 13,6, 16,1, 20,5, 21,2, 21,6, 22,8, 26,7, 27,4°.
Los cristales obtenidos del ejemplo 2 (forma B) se analizaron mediante técnicas térmicas. El análisis por DSC indicó que la forma B tiene varios eventos térmicos, incluido un evento de exotermia con un punto de inicio a 150 °C y un pico a 153 °C, seguido de fusión con un punto de inicio a 201 °C y un pico a 202 °C. El TGA indicó que la forma B muestra una pérdida de masa de aproximadamente el 4,5 % tras calentarla de 22 °C a 150 °C. En la figura 8 se muestra un termograma de DSC/TGA representativo. Los procedimientos para preparar el material de partida, (1S,3R)-3-amino-N-(5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida se describen a continuación:
Preparación de 5-cloro-4-vodop¡rid¡n-2-am¡na
Figure imgf000043_0001
La reacción se dividió en 4 recipientes de reacción de microondas sellados independientes, conteniendo cada uno 750 mg (2,95 mmol) de 5-cloro-2-fluoro-4-yodopiridina, 8,4 ml de hidróxido de amonio acuoso concentrado y 7,5 ml de NMP. Se calentó cada uno de los vasos de reacción a 100 °C durante 17 h. Después se diluyeron los lotes combinados con agua (50 ml) y se extrajeron con EtOAc (3 * 120 ml). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO4 , se filtraron y se concentraron a presión reducida, obteniéndose un aceite de color amarillo pálido. El aceite se cargó en una columna SCX-2 de 20 g y se eluyó secuencialmente con DCM, MeOH y NH3 al 1 % en MeOH. Las fracciones básicas se concentraron, obteniéndose el producto deseado en forma de un sólido incoloro (2,9 g, 99 %). 1H RMN (400 MHz, DMSO-de, 30°C) 6,21 (2H, s), 7,05 (1H, s), 7,93 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 255.
Preparación de 5-cloro-4-(4.5.6.7-tetrah¡drop¡razolori.5-a1p¡rid¡n-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-am¡na
Figure imgf000043_0002
Se añadieron secuencialmente carbonato de cesio (13,4 g, 41,2 mmol) y PdCh(dppf), CH2O 2 (0,94 g, 1,2 mmol) a una mezcla desgasificada de 5-cloro-4-yodopiridin-2-amina (4,19 g, 16,5 mmol), 3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo-[1,5-a]piridina (5,72 g, 23,1 mmol), 1,4-dioxano (141 ml) y agua (23,5 ml). La mezcla de color rojo resultante se calentó a 95 °C y se volvió transparente. Con agitación vigorosa, se formó cierta cantidad de precipitado, que gradualmente se redisolvió en su mayor parte. Después de 4 h, se añadieron otros 800 mg de éster borónico; después de otros 40 min, la reacción se enfrió a t.a. y se agitó en estas condiciones durante 18 h. Después, la mezcla se diluyó con acetato de etilo y se separaron las capas. La capa orgánica se lavó con cloruro de sodio acuoso saturado, se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró a presión reducida. El aceite resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de metanol del 0 al 10 % en acetato de etilo. Se combinaron las fracciones de producto, se concentraron a presión reducida y el residuo resultante se agitó vigorosamente en DCM 1:1: hexano durante 20 minutos. Después, la mezcla se diluyó con hexano y se filtró con un lavado con hexano. El sólido resultante se secó al vacío, obteniéndose 5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-amina (2,79 g, 68,1 %) en forma de agujas de color naranja-beige claro. 1H RMN (300 MHz, DMSO-de, 27 °C) 1,74 - 1,88 (2H, m), 1,96 - 2,06 (2H, m), 2,76 (2H, t), 4,12 (2H, t), 6,03 (2H, s a), 6,43 (1H, s), 7,63 (1H, s), 7,94 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 249.
Preparación de ácido c¡s-3-ferc-butoxicarbon¡lam¡no)c¡clohexanocarboxíl¡co
Figure imgf000044_0001
Se cargó un recipiente fijo de 5 litros con ácido cis-3-aminocidohexanocarboxílico (100 g, 698 mmol; adquirido de TCI), agua (900 ml), 1,4-dioxano (900 ml) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (487 ml, 2793 mmol). Después de agitar a t.a. durante 5 min, la mezcla se enfrió a 0 °C. Después se añadió dicarbonato de di-terc-butilo (168 g, 768 mmol) en porciones a la mezcla de reacción, que se dejó calentar a t.a. después de añadir la porción final. Después, se volvió a enfriar la mezcla de reacción a 0 °C y se añadió HCl acuoso 2 M para ajustar el pH a 2. Se observó una pequeña exotermia (<5 °C) entre la adición de cada porción de 50 ml de HCl acuoso 2 M. La mezcla de reacción se extrajo con EtOAc (2 x 500 ml), y las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua (400 ml) y se secaron sobre sulfato de sodio. La mezcla se filtró y el filtrado se concentró a presión reducida, obteniéndose, tras secar durante una noche, ácido cis-3-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclohexanocarboxílico (170 g, 100 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6 , 30 °C) 0,95 - 1,33 (4H, m), 1,37 (9H, s), 1,64 - 1,75 (2H, m), 1,79 (1H, d), 1,94 (1H, d), 2,22 (1H, tt), 3,13 - 3,26 (1H, m), 6,72 (1H, d), 12,01 (1H, s). m/z: ES+ [M+Na]+ 266.
Preparación de (1S.3R)-3-((ferc-butox¡carbon¡l)am¡no)c¡clohexanocarbox¡lato de (S)-1-feniletanam¡n¡o
Figure imgf000044_0002
Utilizando un procedimiento similar al descrito en el documento WO2011/1106112, se añadió ácido cis-3-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclohexanocarboxílico (49,9 g, 166 mmol) a un matraz de fondo redondo de 1 l y se disolvió en etanol (400 ml). La mezcla se agitó a t.a. hasta que se disolvió todo el material de partida. Se añadió (S)-1-feniletanamina (23,6 ml, 183 mmol); la mezcla se agitó a t.a. hasta que se formó gradualmente un precipitado de color blanco. Después, la mezcla de reacción se calentó a 80 °C hasta que se obtuvo una solución transparente. Después se apagó el calentador de reacción y la mezcla de reacción se dejó enfriar hasta t.a. Después de agitar a t.a. durante otras 16 h, la mezcla de reacción se filtró, obteniéndose un sólido de color blanco. El sólido se redisolvió en etanol (150 ml) y se calentó a 80 °C hasta que se obtuvo una solución transparente. Después se apagó el calentador de reacción y la mezcla de reacción se dejó enfriar hasta t.a. La filtración proporcionó un sólido de color blanco (14,6 g), que se recristalizó nuevamente a partir de etanol (100 ml) utilizando el mismo procedimiento para obtener (1S,3R)-3-((tercbutoxicarbonil)amino)ciclohexanocarboxilato de (S)-1-feniletanaminio (12,5 g, 20,7 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (400 MHz, DMSO-de, 30 °C) 0,98 - 1,23 (4H, m), 1,26 (3H, d), 1,38 (9H, s), 1,66 - 1,84 (3H, m), 1,95 (1H, m), 2,21 (1H, m), 3,21 (1H, m), 4,00 (1H, c), 6,72 (1H, m), 7,16 - 7,23 (1H, m), 7,30 (2H, m), 7,34 - 7,4 (2H, m), NHs+ no observado.
Preparación de ácido (1S.3R)-3-(ferc-butox¡carbon¡lam¡no)c¡clohexanocarboxíl¡co
Figure imgf000044_0003
Se suspendió (1S,3R)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclohexano-carboxilato de (S)-1-feniletanaminio (9,85 g, 27,0 mmol) en 250 ml de EtOAc, y la capa orgánica se lavó con HCl 0,5 M (2 x 125 ml). Se recogió la capa orgánica y las capas acuosas combinadas se extrajeron con EtOAc (300 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua (2 x 500 ml) y cloruro de sodio acuoso saturado (500 ml) antes de secarlas sobre Na2SO4 , filtrarlas y concentrarlas a presión reducida. Después, el sólido resultante se secó al vacío, obteniéndose ácido (1S,3R)-3-((tercbutoxicarbonil)amino)ciclohexanocarboxílico (5,5 g, 84 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6, 30 °C) 0,99 - 1,35 (4H, m), 1,38 (9H, s), 1,68 - 1,85 (3H, m), 1,96 (1H, d), 2,23 (1H, tt), 3,15 - 3,30 (1H, m, parcialmente oscurecido por el pico de agua), 6,72 (1H, d), 12,01 (1H, s).
Determinación representativa de la enantiopureza:
Se añadió HATU (0,413 g, 1,09 mmol) a una solución de (4-metoxifenil)metanamina (0,142 ml, 1,09 mmol), ácido (1S,3R)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclohexanocarboxílico (0,240 g, 0,99 mmol), DIPEA (0,345 ml, 1,97 mmol), y DMF (1,980 ml). La solución amarilla brillante se convirtió en una mezcla a lo largo de 30 minutos y después se diluyó con acetato de etilo y se lavó secuencialmente con agua, bicarbonato sódico acuoso saturado y cloruro sódico acuoso saturado. Después, la capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró, y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, eluyendo con metanol isocrático al 5 % en DCM, obteniéndose ((1R,3S)-3-((4-metoxibencil)carbamoil)ciclohexil)carbamato de tere-butilo (0,30 g, 84 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6, 27 °C) 0,97 - 1,14 (1H, m), 1,15 - 1,32 (3H, m), 1,38 (9H, s), 1,56 -1,84 (4H, m), 2,12 - 2,29 (1H, m), 3,14 - 3,28 (1H, m), 3,73 (3H, s), 4,17 (2H, a. d), 6,70 - 6,77 (1H, m), 6,87 (2H, d), 7,14 (2H, d), 8,16 (1H, t). m/z: ES+ [M+H]+ 363.
Las muestras preparadas de este modo se analizaron posteriormente en condiciones de SFC analíticas como se indica a continuación:
Figure imgf000045_0003
Tiempos de retención:
3,33 min, ((1R,3S)-3-((4-metoxibencil)carbamoil)ciclohexil)carbamato de tere-butilo, 5,21 min, ((1S,3R)-3-((4-metoxibencil)carbamoil)ciclohexil)carbamato de tere-butilo
Preparación___________ de___________ ((1R.3S)-3-((5-cloro-4-(4.5.6.7-tetrahidropirazolori.5-alpiridin-3-il)piridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de tere-butilo (también conocido como ejemplo 31a)
Figure imgf000045_0001
Se añadió 1-cloro-N,N,2-trimetilprop-1-en-1-amina (1,12 ml, 8,44 mmol) a una solución de ácido (1S,3R)-3-((terebutoxicarbonil)amino)ciclohexanocarboxílico (2,01 g, 8,24 mmol) en DCM (50 ml) a 0 °C. La reacción se mantuvo en estas condiciones durante 100 minutos. Durante este tiempo, se combinaron en un matraz independiente 5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-amina (1,64 g, 6,59 mmol), piridina (2,1 ml, 26,4 mmol) y DCM (20 ml). La mezcla resultante se calentó suavemente (~40 °C) hasta que se disolvieron todos los sólidos. Después, se enfrió la mezcla resultante a 0 °C, tras lo cual se formó una mezcla homogénea de color amarillo claro. Esta mezcla se añadió rápidamente mediante una cánula a la solución anteriormente preparada de ácido (1S,3R)-3-((terebutoxicarbonil)amino)ciclohexanocarboxílico y 1-cloro-N,N,2-trimetilprop-1-en-1-amina, obteniéndose una solución de color amarillo más oscura. Se dejó calentar la reacción a t.a. durante una noche y después se evaporó a sequedad. La mezcla de color gris se llevó a la etapa siguiente sin purificación adicional. m/z: ES+ [M+H]+ 474.
Preparación de diclorhidrato de (1S.3R)-3-am¡no-M-(5-cloro-4-(4.5.6.7-tetrah¡drop¡razolori.5-alp¡r¡d¡n-3-¡l)p¡rid¡n-2-¡l)ciclohexanocarboxam¡da (también conocido como ejemplo 31b)
Figure imgf000045_0002
Se añadió ácido clorhídrico en dioxano (4 M; 10 ml, 40 mmol) a una mezcla en bruto de ((1R,3S)-3-((5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de tere-butilo (3,12 g, 6,59 mmol) en DCM (5 ml) y metanol (5 ml) a 0 °C. La mezcla se convirtió en una solución de color ámbar. Después de 1 h, la solución de color ámbar se concentró a presión reducida y el residuo resultante se secó al vacío, obteniéndose una espuma sólida de color beige/gris. Este material se llevó a la etapa siguiente sin purificación adicional. m/z: ES+ [M+H]+ 374.
Ejemplo___________ 3 ___________ nS.3R)-3-acetam¡do-M-(4-(4.5.6.7-tetrah¡drop¡razolori.5-alp¡r¡d¡n-3-¡l)p¡rid¡n-2-il)ciclohexanocarboxam¡da
Figure imgf000046_0001
Se añadió anhídrido acético (0,016 ml, 0,17 mmol) a (1S,3R)-3-amino-N-(4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (47 mg, 0,14 mmol) y trietilamina (0,023 ml, 0,17 mmol) en DCM (1 ml) a 21°C en atmósfera de nitrógeno. La solución resultante se agitó en estas condiciones durante 60 h. La mezcla de reacción se cargó directamente sobre sílice y se purificó mediante cromatografía ultrarrápida de gel de sílice, gradiente de elución de MeOH del 1 al 10 % en DCM. Las fracciones puras se evaporaron a sequedad, obteniéndose (1S,3R)-3-acetamido-N-(4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (43 mg, 81 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (400 MHz, CDCls, 30 °C) 1,07 - 1,23 (1H, m), 1,37 - 1,53 (3H, m), 1,87 - 2,03 (8H, m), 2,03 - 2,11 (2H, m), 2,25 (1H, d), 2,39 - 2,51 (1H, m), 3,06 (2H, t), 3,88 (1H, dtq), 4,20 (2H, t), 5,40 (1H, d), 7,10 (1H, dd), 7,80 (1H, s), 8,17 (1H, dd), 8,32 (1H, s), 8,35 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 382.
Los procedimientos para preparar el material de partida (1S,3R)-3-amino-N-(4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida se describen a continuación:
Preparación de ((1R.3S)-3-((4-bromop¡r¡d¡n-2-¡l)carbamo¡l)c¡clohex¡l)carbamato de tere-butilo
Figure imgf000046_0002
Se añadió 1-cloro-N,N,2-trimetilprop-1-en-1-amina (0,574 ml, 4,33 mmol) a una solución de ácido (1S,3R)-3-((terebutoxicarbonil)amino)ciclohexanocarboxílico (1,01 g, 4,16 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 2) en DCM (40 ml) a 0 °C. Después de 1,5 h, se añadió mediante una cánula una mezcla de 4-bromopiridin-2-amina (0,6 g, 3,47 mmol) y piridina (1,12 ml, 13,9 mmol) en DCM (33,0 ml). La mezcla de color amarillo resultante se dejó calentar a t.a. y se agitó en estas condiciones durante 72 h. La mezcla ahora de color blanco se filtró, se enjuagó con un lavado de DCM frío y el precipitado de color blanco se secó al vacío a 70 °C durante 30 min, obteniéndose ((1R,3S)-3-((4-bromopiridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de tere-butilo (1,38 g, 100 %) con una pureza del 95 % en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (300 MHz, DMSO-^, 27 °C) 0,99 - 1,35 (4H, m) 1,38 (9H, s) 1,68 - 1,80 (3H, m) 1,88 (1H, d) 2,53 - 2,64 (1H, m) 3,15 - 3,35 (1H, m) 6,76 (1H, d) 7,34 (1H, dd) 8,21 (1H, d) 8,33 (1H, d) 10,63 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 398. Preparación_______________de_______________(nR.3S)-3-((4-(4.5.6.7-tetrah¡drop¡razolori.5-alp¡r¡d¡n-3-¡l)p¡rid¡n-2-¡l)carbamoil)c¡clohex¡l)carbamato de tere-butilo
Figure imgf000046_0003
Se añadió precatalizador XPhos de 2.a generación (9,88 mg, 0,01 mmol) en una porción a una mezcla desgasificada de ((1R,3S)-3-((4-bromopiridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de tere-butilo (100 mg, 0,25 mmol), 3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridina (93 mg, 0,38 mmol), fosfato de potasio (160 mg, 0,75 mmol), 1,4-dioxano (2 ml), y agua (0,2 ml) a 21 °C en atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó a 100 °C durante 16 h. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (10 ml), y se lavó secuencialmente con NaHCO3 saturado (10 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml), y las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 , se filtraron y se concentraron a presión reducida, obteniéndose el producto en bruto. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de EtOAc del 20 al 80 % en heptano. Las fracciones puras se evaporaron a sequedad, obteniéndose ((1R,3S)-3-((4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de tere-butilo (70,0 mg, 63,4 %) en forma de un polvo de color blanco. 1H RMN (400 MHz, DMSO-de, 30°C) 1,12 (1H, d), 1,21 - 1,33 (3H, m), 1,39 (9H, s), 1,76 (3H, s), 1,82 - 1,95 (3H, m), 2,00 (2H, d), 2,59 (1H, s), 2,97 (2H, t), 3,89 (1H, s), 4,12 (2H, t), 6,75 (1H, s), 7,19 (1H, dd), 7,85 (1H, s), 8,22 (2H, d), 10,32 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 440.
Preparación___________ de___________nS.3R)-3-am¡no-M-(4-(4.5.6.7-tetrah¡drop¡razolori.5-alp¡r¡d¡n-3-¡l)p¡rid¡n-2-il)ciclohexanocarboxam¡da
Figure imgf000047_0001
Se añadió HCl en dioxano (4 M; 0,199 ml, 0,80 mmol) gota a gota a ((1R,3S)-3-((4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de tere-butilo (70 mg, 0,16 mmol) en DCM (2 ml) a 21 °C en atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó a 21 °C durante 16 h. Se añadió MeOH (1 ml), y la mezcla se purificó directamente mediante cromatografía de intercambio iónico, utilizando una columna SCX-2. El producto deseado se eluyó utilizando NH3 1 M en MeOH, y las fracciones puras se evaporaron a sequedad, obteniéndose (1S,3R)-3-amino-Ñ-(4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (47 mg, 87 %) en forma de un sólido cristalino de color blanco. 1H RMN (400 MHz, CD3OD, 30°C) 0,95 - 1,08 (1H, m), 1,2 - 1,4 (3H, m), 1,76 - 1,91 (5H, m), 1,99 (3H, dtt), 2,44 (1H, ddd), 2,61 (1H, tt), 2,95 (2H, t), 3,25 (1H, s), 4,07 (2H, t), 7,11 (1H, dd), 7,74 (1H, s), 8,07 - 8,16 (2H, m), NH2 peak no observado. m/z: eS+ [M+H]+ 340.
Ejemplo_____________ 4 :_____________ C¡s-M-(5-cloro-4-(4.5.6.7-tetrah¡drop¡razolori.5-alp¡r¡d¡n-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)-3-h¡drox¡c¡clobutanocarboxam¡da
Figure imgf000047_0002
Se añadió HCl en dioxano (4 M; 0,388 ml, 1,55 mmol) a cis-3-((tere-butildimetilsilil)oxi)-N-(5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclobutanocarboxamida (143 mg, 0,31 mmol) en d Cm (3 ml) a 21 °C en atmósfera de nitrógeno. La suspensión resultante se agitó a 21 °C durante 30 minutos. Se añadió MeOH (1 ml) y la mezcla se agitó a 21 °C durante 16 h. La mezcla se concentró y después se diluyó con EtOAc (25 ml) y NaHCO3 acuoso saturado (25 ml). Se separaron las capas y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (25 ml). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio y se concentraron a presión reducida. El producto en bruto resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de EtOAc del 50 al 1 0 0 % en heptano. Las fracciones puras se evaporaron a sequedad, obteniéndose cis-N-(5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)-3-hidroxiciclobutanocarboxamida (24,0 mg, 22,3 %) en forma de un sólido de color amarillo pálido. 1H RMN (400 MHz, CDCh, 30°C) 1,88 - 1,94 (2H, m), 2,05 - 2,15 (3H, m), 2,2 - 2,31 (2H, m), 2,62 - 2,73 (3H, m), 2,93 (2H, t), 4,18 - 4,31 (3H, m), 7,81 (1H, s), 7,88 (1H, s), 8,23 (1H, s), 8,26 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ 347.
Los procedimientos para preparar el material de partida cis-3-((tere-butildimetilsilil)oxi)-N-(5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclobutanocarboxamida se describen a continuación:
Preparación de 3-((ferc-but¡ld¡met¡ls¡l¡l)ox¡)c¡clobutanocarbox¡lato de c¡s-ferc-but¡ld¡met¡ls¡l¡lo
Se disolvió ácido cis-3-hidroxicidobutanocarboxílico (300 mg, 2,58 mmol) en DCM (17,2 ml). Se añadieron secuencialmente terc-butilclorodimetilsilano (818 mg, 5,43 mmol) y 1H-imidazol (369 mg, 5,43 mmol) y la solución se puso en atmósfera de nitrógeno. La reacción se dejó en agitación durante 16 h a t.a. La mezcla se diluyó con acetato de etilo (100 ml) y se lavó con HCl acuoso 1 N (30 ml), agua (30 ml) y cloruro de sodio acuoso saturado (40 ml) antes de secarla sobre sulfato de magnesio, filtrarla y concentrarla a presión reducida, obteniéndose 3-((terc-butildimetilsilil)oxi)ciclobutanocarboxilato de cis-ferc-butildimetilsililo (802 mg, 90 %) en forma de un sólido de color blanco.
1H RMN (400 MHz, CDCla, 30°C) 0,03 (6H, s), 0,26 (6H, s), 0,88 (9H, s), 0,94 (9H, d), 2,11 - 2,21 (2H, m), 2,43 - 2,63 (3H, m), 4,07 - 4,17 (1H, m).
Preparación de ácido c¡s-3-((terc-but¡ld¡met¡ls¡l¡hoxhciclobutanocarboxíl¡co
Figure imgf000048_0001
Se añadió carbonato de potasio (644 mg, 4,66 mmol) a una solución de 3-((terc-butildimetilsilil)oxi)ciclobutanocarboxilato de cis-ferc-butildimetilsililo (803 mg, 2,33 mmol) en THF (15 ml) y agua (3 ml). La mezcla resultante se agitó a t.a. durante 20 h. La mezcla de reacción se diluyó agua y se lavó con EtOAc. La capa acuosa se acidificó con HCl acuoso 0,1 N y se extrajo con EtOAc (x2). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron, obteniéndose el producto en bruto, que se usó sin purificación en la etapa siguiente. 1H RMN (400 MHz, CDCb, 30°C) 0,00 (6H, s), 0,84 (9H, s), 2,09 - 2,29 (2H, m), 2,36 - 2,66 (3H, m), 3,97 - 4,23 (1H, m), CO2H no observado.
Preparación de 3-(5-cloro-2-fluorop¡r¡d¡n-4-¡lM.5.6.7-tetrah¡drop¡razoloH.5-a1p¡r¡d¡na
Figure imgf000048_0002
Se suspendieron 3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridina (500 mg, 2,02 mmol), 5-cloro-2-fluoro-4-yodopiridina (432 mg, 1,68 mmol), precatalizador XPhos de 2.a generación (132 mg, 0,17 mmol) y fosfato de potasio (1069 mg, 5,03 mmol) en dioxano (5 ml) y agua (0,50 ml). La reacción se desgasificó burbujeando nitrógeno a través de la mezcla de reacción durante 5 minutos antes de calentarla a 90 °C. La reacción se mantuvo en estas condiciones durante 20 h y después se diluyó con agua (20 ml) y EtOAc (20 ml). Se separaron las capas y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (3 * 20 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con cloruro de sodio acuoso saturado (20 ml), se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El producto en bruto resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de EtOAc del 20 al 80 % en heptano. Las fracciones puras se evaporaron a sequedad, obteniéndose 3-(5-cloro-2-fluoropiridin-4-il)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridina (440 mg, 104 %) en forma de un sólido cristalino de color crema. Este material se llevó a la etapa siguiente sin purificación adicional.
1H RMN (400 MHz, CDCla, 30°C) 1,87 - 1,96 (2H, m), 2,08 - 2,16 (2H, m), 2,83 (2H, t), 4,23 (2H, t), 6,82 (1H, d), 7,80 (1H, s), 8,23 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 252.
Preparación de 5-cloro-4-(4.5.6.7-tetrah¡drop¡razolori.5-a1p¡rid¡n-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-am¡na
Figure imgf000048_0003
Se combinaron 3-(5-cloro-2-fluoropiridin-4-il)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridina (440 mg, 1,49 mmol) e hidróxido de amonio (2,0 ml, 51 mmol) y se sellaron en un tubo para microondas. La reacción se calentó a 150 °C durante 2 h en un reactor de microondas y se enfrió a t.a. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (25 ml) y agua (25 ml). Se separaron las capas y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (3 * 25 ml). Las capas orgánicas se combinaron y se lavaron con cloruro de sodio acuoso saturado (25 ml), se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El producto en bruto resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, eluyendo con EtOAc al 50 % en heptano y después con MeOH al 10 % en DCM. Las fracciones puras se evaporaron a sequedad, obteniéndose 5-cloro 4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-amina (80 mg, 22 %) en forma de un sólido de color blanco, ya caracterizado (véase el ejemplo 3, intermedios)
Preparación de c¡s-3-((ferc-but¡ld¡met¡ls¡l¡l)ox¡)-M-(5-cloro-4-(4.5.6.7-tetrah¡drop¡razolori.5-alp¡r¡d¡n-3-¡l)p¡rid¡n-2-il)ciclobutanocarboxam¡da
Figure imgf000049_0001
Se añadió N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,167 ml, 0,94 mmol) a ácido cis-3-((terc-butildimetilsilil)oxi)ciclobutanocarboxílico (79 mg, 0,34 mmol) y hexafluorofosfato(V) de 2-(3H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-3-il)-1,1,3,3-tetrametilisouronio (179 mg, 0,47 mmol) en DMF (1 ml) a 21 °C en atmósfera de nitrógeno. La solución resultante se agitó a 21 °C durante 10 minutos. Se añadió una solución de 5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-amina (78 mg, 0,31 mmol) en DMF (1 ml) y la mezcla resultante se agitó a 21 °C durante 16 h. La agitación continuó durante 72 h y se añadieron ácido cis-3-((terc-butildimetilsilil)oxi)ciclobutanocarboxílico (79 mg, 0,34 mmol), hexafluorofosfato(V) de 2-(3H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-3-il)-1,1,3,3-tetrametilisouronio (179 mg, 0,47 mmol) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,167 ml, 0,94 mmol) adicionales. La mezcla se agitó durante 24 h adicionales antes de añadir EtOAc (20 ml) e hidrogenocarbonato de sodio acuoso saturado (20 ml). Se separaron las capas, y la capa orgánica se lavó con agua ( 2 0 ml) y cloruro de sodio acuoso saturado ( 2 0 ml), se secaron sobre Na2SO4 , se filtraron, y se concentraron a presión reducida. El residuo en bruto se llevó inmediatamente a la etapa siguiente y se asumió que el rendimiento era cuantitativo. m/z: ES+ [M+H]+ 461.
Ejemplo 5: (R)-M-(5-cloro-4-(4.5.6.7-tetrah¡drop¡razolori.5-alp¡r¡d¡n-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)p¡per¡d¡n-3-carboxamida
Figure imgf000049_0002
Se añadió TFA (1 ml, 13 mmol) a 3-((5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)carbamoil)piperidin-1-carboxilato de (R)-terc-butilo (90 mg, 0,20 mmol) en DCM (2 ml) a 20 °C. La mezcla resultante se agitó a t.a. durante 1 h y después se concentró a presión reducida. El producto en bruto resultante se purificó mediante HPLC preparativa (columna XBridge Prep C18 OBD, 5 ^m de sílice, diámetro de 19 mm, longitud de 150 mm) utilizando mezclas decrecientemente polares de agua (que contiene NH3 al 0,05 %) y MeCN como eluyentes. Las fracciones que contenían el compuesto deseado se evaporaron a sequedad, obteniéndose (R)-N-(5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)piperidin-3-carboxamida (18,0 mg, 25,6 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (400MHz, DMSO-de, 23 °C) 1,30 - 1,47 (1H, m), 1,52 - 1,62 (2H, m),1,76 - 1,90 (3H, m), 1,97 - 2,07 (2H, m), 2,52 - 2,62 (2H, m), 2,69 (1H, t), 2,75 - 2,87 (3H, m), 2,91 - 3,01 (1H, m), 4,14 (2H, t), 7,77 (1H, s), 8,15 (1H, s), 8,37 (1H, s), 10,84 (1H, s), NH de piperidina no observado. m/z: ES+ [M+H]+ 3 6 0.
Los procedimientos para preparar el material de partida 3-((5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)carbamoil)piperidin-1-carboxilato de (R)-terc-butilo se describen a continuación:
Preparación de 3-((5-cloro-4-(4.5.6.7-tetrah¡drop¡razolori.5-a1p¡rid¡n-3-¡l) p¡r¡d¡n-2-¡l)carbamo¡l)p¡perid¡n-1-carboxilato de ferc-butilo
Se añadió piridina (0,10 ml, 1,3 mmol) a ácido 1-(terc-butoxicarbonil)piperidin-3-carboxflico (74 mg, 0,32 mmol) y 1-cloro-N, N,2-trimetilprop-1-en-1-amina (0,050 ml, 0,64 mmol) en DCM (2 ml) a 20 °C. La mezcla resultante se agitó a t.a. durante 20 minutos. Después se añadió a la mezcla 5-doro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-amina (80 mg, O, 32 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 4). La mezcla resultante se agitó a t.a. durante 1 h. La mezcla de reacción se concentró a presión reducida y se diluyó con DCM (100 ml) antes de lavarla secuencialmente con HCl 0,1 M (2 x 25 ml), bicarbonato de sodio acuoso saturado (25 ml), y cloruro de sodio acuoso saturado (2 * 25 ml). La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante TLC preparativa (éter de petróleo: EtOAc = 10:1), obteniéndose 3-((5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)carbamoil)piperidin-1-carboxilato de terc-butilo (100 mg, 67,6 %) en forma de un sólido de color amarillo. m/z: ES+ [M+H]+ 460.
Ejemplo 6 : c¡s-3-h¡drox¡-M-(4-(4.5.6.7-tetrah¡drop¡razolori.5-alp¡r¡d¡n-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clobutanocarboxam¡da
Figure imgf000050_0001
Se añadió HCl en dioxano (4 M; 0,388 ml, 1,55 mmol) a cis-3-((terc-butildimetilsilil)oxi)-N-(4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclobutanocarboxamida (132 mg, 0,31 mmol) en DCM (3 ml) y MeOH (1 ml) a 21 °C en atmósfera de nitrógeno. La suspensión resultante se agitó a 21 °C durante 3 h antes de concentrar la mezcla a presión reducida. El residuo resultante se diluyó con EtOAc (25 ml) e hidrogenocarbonato de sodio acuoso saturado (25 ml). Después se separaron las capas y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (25 ml). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgsO4 y se concentraron a presión reducida. El sólido en bruto resultante se trituró con Et2O y se secó al vacío, obteniéndose cis-3-hidroxi-N-(4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclobutanocarboxamida (35,0 mg, 36,1 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (400 MHz, CDCls, 30 °C) 1,89 - 2,01 (2H, m), 2,08 (3H, ddd), 2,28 (2H, ddd), 2,67 (3H, tq), 3,08 (2H, t), 4,23 (3H, dt), 7,10 (1H, dd), 7,81 (1H, s), 7,83 (1H, s), 8,19 (1H, dd), 8,33 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 313.
Los procedimientos para preparar el material de partida cis-3-((terc-butildimetilsilil)oxi)-N-(4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclobutanocarboxamida se describen a continuación:
Preparación de c¡s-M-(4-bromop¡r¡d¡n-2-¡l)-3-((ferc-but¡ld¡met¡ls¡l¡l)ox¡)c¡clobutanocarboxam¡da
Figure imgf000050_0002
Se añadió N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,461 ml, 2,60 mmol) a ácido cis-3-((terc-butildimetilsilil)oxi)ciclobutanocarboxílico (220 mg, 0,95 mmol; preparado como en el ejemplo 4) y hexafluorofosfato(V) de 2-(3H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-3-il)-1,1,3,3-tetrametilisouronio (494 mg, 1,30 mmol) en DMf (3 ml) a 21 °C en atmósfera de nitrógeno. La solución resultante se agitó a 21 °C durante 10 minutos antes de añadir 4-bromopiridin-2-amina (150 mg, 0,87 mmol), y la mezcla resultante se agitó a 21 °C durante 16 h. Se continuó agitando durante 72 h, y se añadieron ácido cis-3-((terc-butildimetilsilil)oxi)ciclobutanocarboxílico (79 mg, 0,34 mmol), hexafluorofosfato(V) de 2-(3H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-3-il)-1,1,3,3-tetrametilisouronio (179 mg, 0,47 mmol) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,167 ml, 0,94 mmol) adicionales. La mezcla se agitó durante 24 h adicionales y después se añadieron EtOAc (25 ml) y solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio (25 ml). Se separaron las capas, y la capa orgánica se lavó con agua (2 * 25 ml) y cloruro de sodio acuoso saturado (2 * 25 ml), se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El producto en bruto resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de EtOAc del 0 al 100 % en heptano. Las fracciones puras se evaporaron a sequedad, obteniéndose cis-N-(4-bromopiridin-2-il)-3-((terc-butildimetilsilil)oxi)ciclobutanocarboxamida (96 mg, 29 %) en forma de un aceite incoloro. 1H RMN (400 MHz, CDCls, 30°C) 0,06 (6H, s), 0,89 (9H, s), 1,11 - 1,18 (1H, m), 2,23 - 2,31 (2H, m), 2,54 - 2,58 (2H, m), 4,15 - 4,26 (1H, m), 7,18 (1H, dd), 7,82 (1H, s), 8,06 (1H, dd), 8,49 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ 385 (isótopo 79Br), 387 (isótopo 81Br).
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Figure imgf000051_0001
Se añadió precatalizador XPhos de 2.a generación (19,40 mg, 0,02 mmol) a una mezcla desgasificada de cis-N-(4-bromop¡rid¡n-2-¡l)-3-((fe/'c-but¡ld¡met¡ls¡lil)ox¡)c¡dobutanocarboxam¡da (95 mg, 0,25 mmol), 3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridina (73,4 mg, 0,30 mmol) y fosfato de potasio (157 mg, 0,74 mmol) en dioxano (2 ml) y agua (0,2 ml) a 2 l °C en atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó a 100 °C durante 16 h. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (25 ml) y se lavó secuencialmente con hidrogenocarbonato de sodio acuoso saturado (10 ml), agua (10 ml), y cloruro de sodio acuoso saturado (10 ml). La capa orgánica se secó sobre Na2SO4 , se filtró y se concentró a presión reducida. El producto en bruto resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de EtOAc del 30 al 70 % en heptano. Las fracciones puras se evaporaron a sequedad, obteniéndose cis-3-((fe/'c-butildimetilsilil)oxi)-N-(4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclobutanocarboxamida (60,0 mg, 57,1 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (400 Mhz , CDCh, 30 °C) 0,05 (6 H, s), 0,89 (9H, s), 1,9 - 2,01 (2H, m), 2,02 - 2,12 (2H, m), 2,25 - 2,33 (2H, m), 2,5 - 2,62 (3H, m), 3,08 (2H, t), 4,21 (3H, t), 7,09 (1H, dd), 7,76 (1H, s), 7,80 (1H, s), 8,18 (1H, dd), 8,33 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 427.
Ejemplo________7:_______ nS.3R)-3-acetam¡do-M-(5-cloro-4-(5.6.7.8-tetrah¡dro¡m¡dazori.2-a1p¡r¡d¡n-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da
Figure imgf000051_0002
Se suspendieron (1S,3R)-3-acetamido-N-(4-bromo-5-cloropiridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (0,20 g, 0,53 mmol), 5,6,7,8-tetrahidroimidazo[1,2-a]piridina (47 mg, 0,38 mmol), carbonato de cesio (0,14 g, 0,42 mmol), trietilamina (0,11 ml, 0,76 mmol), trifenilfosfina (0,02 g, 0,06 mmol) y diacetoxipaladio (6,85 mg, 0.0300 mmol) en 1,4-dioxano (5 ml) y se sellaron en un tubo para microondas. La reacción se calentó a 100°C durante 16 h en un reactor para microondas y después se enfrió a t.a. La reacción se concentró a presión reducida y el producto en bruto se purificó mediante cromatografía de intercambio iónico utilizando una columna SCX-2. El producto deseado se eluyó de la columna utilizando NH31 M en MeOH, y las fracciones puras se evaporaron a sequedad. El producto en bruto resultante se purificó mediante HPLC preparativa (columna Waters XBridge Prep C18 OBD, 5 ^ de sílice, 50 mm de diámetro, 100 mm de longitud), utilizando mezclas decrecientemente polares de agua (que contenía NH3 al 1 %) y MeCN como eluyentes. Las fracciones que contenían el compuesto deseado se concentraron a presión reducida, obteniéndose (1S,3R)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-(5,6,7,8-tetrahidroimidazo[1,2-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (0,069 g, 44 %) en forma de una goma de color amarillo. 1H RMN (500 MHz, DMSO-da, 30°C) 0,95 - 1,16 (1H, m), 1,19 - 1,39 (3H, m), 1,78 (3H, s), 1,83 - 1,97 (2H, m), 2,55 - 2,68 (1H, m), 2,84 (2H, s), 3,18 (2H, dd), 3,31 (3H, s), 3,57 (1H, dt), 3,83 (2H, s), 4,08 (1H, c), 7,13 (1H, s), 7,75 (1H, d), 8,16 (1H, s), 8,47 (1H, s), 10,70 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 417 (13C, 35Cl pico secundario de isótopo).
Los procedimientos para preparar el material de partida (1S,3R)-3-acetamido-N-(4-bromo-5-cloropiridin-2-il)ciclohexanocarboxamida se describen a continuación:
Preparacíón de 4-bromo-3-clorop¡r¡d¡n-2-am¡na
Figure imgf000051_0003
Se añadió N-cloro-succinimida (3,70 g, 27,7 mmol) disuelta en DMF (20 ml) gota a gota a 4-bromopiridin-2-amina (4,40 g, 25,4 mmol) en DMF (50 ml) a -78 °C a lo largo de un periodo de 30 minutos en atmósfera de nitrógeno. Después, la suspensión resultante se dejó calentar a t.a. Después de agitar en estas condiciones durante 24 h, la mezcla de reacción se diluyó con Et2O (50 ml) y se lavó secuencialmente con NaOH acuoso 1 M (2 x 50 ml), agua (50 ml), y cloruro de sodio acuoso saturado (25 ml). La capa orgánica se secó sobre MgSO4 , se filtró y se concentró a presión reducida. El producto en bruto resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de EtOAc del 0 al 25 % en DCM. Las fracciones puras se evaporaron a sequedad, obteniéndose 4-bromo-5-doropiridin-2-amina (2,30 g, 43,7 %) en forma de un sólido de color crema. 1H RMN (400 MHz, DMSO-de, 30 °C) 6,35 (2H, s), 6,82 (1H, s), 8,01 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 209 ( isótopos 35Cl 81Br y 37Cl 79Br).
Preparación de ((1R.3S)-3-((4-bromo-5-clorop¡r¡d¡n-2-il)carbamo¡l)c¡clohex¡l)carbamato de tere-butilo
Figure imgf000052_0001
Una solución de ácido (1S,3R)-3-((tere-butoxicarbonil)amino)ciclohexanocarboxflico (1,50 g, 6,15 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 2) disuelto en DCM (20 ml) a 0 °C se trató con 1-cloro-N,N,2-trimetilprop-1-en-1-amina (0,976 ml, 7,38 mmol). La mezcla se agitó a t.a. durante 1,5 h antes de añadir secuencialmente 4-bromo-5-cloropiridin-2-amina (1,02 g, 4,92 mmol) y piridina (0,594 ml, 7,38 mmol). La solución resultante se agitó a t.a. durante 16 h. La mezcla de reacción se diluyó con DCM (25 ml), y se lavó secuencialmente con agua (2 * 25 ml) y cloruro de sodio acuoso saturado (25 ml). La capa orgánica se secó sobre MgSO4 , se filtró, y se concentró a presión reducida. El producto en bruto resultante se purificó mediante cromatografía de intercambio iónico, utilizando una columna SCX-2. El producto deseado se eluyó de la columna utilizando metanol, obteniéndose ((1R,3S)-3-((4-bromo-5-cloropiridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de tere-butilo (2,34 g, 110 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (400 MHz, DMSO-GÍ6, 30 °C) 1,12 (1H, dd), 1,22 - 1,32 (3H, m), 1,38 (9H, s), 1,72 (3H, dd), 1,83 - 1,94 (2H, m), 2,11 (1H, dt), 8,48 (1H, s), 8,50 (1H, s), 10,77 (1H, s), un protón no observado. m/z: ES-[M-H]- 430.
Preparación de díclorhídrato de (1S.3R)-3-am¡no-M-(4-bromo-5-clorop¡rid¡n-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da
Figure imgf000052_0002
Se añadió HCl en dioxano (4 M; 5,89 ml, 23,6 mmol) a ((1R,3S)-3-((4-bromo-5-cloropiridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de tere-butilo (1,20 g, 2,77 mmol) en MeOH (7,01 ml) en atmósfera de aire. La solución resultante se agitó a temperatura ambiente durante 16 h. La mezcla de reacción se evaporó, obteniéndose diclorhidrato de (1S,3R)-3-amino-N-(4-bromo-5-cloropiridin-2-il)ciclohexanocarboxamida en forma de un sólido de color blanco. Este se utilizó en la etapa siguiente sin purificación adicional. m/z: ES+ [M+H]+ 332 (isótopo 35Cl 79Br), 334 (isótopos 35Cl 81Br y 37Cl 79Br).
Preparación de (1 S.3R)-3-acetam¡do-M-(4-bromo-5-clorop¡r¡d¡n-2-il)c¡clohexanocarboxam¡da
Figure imgf000052_0003
Se añadió anhídrido acético (0,259 ml, 2,74 mmol) gota a gota a (1S,3R)-3-amino-N-(4-bromo-5-cloropiridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (0,760 g, 2,28 mmol), 4-dimetilaminopiridina (0,014 g, 0,11 mmol) y trietilamina (0,987 ml, 7,08 mmol) en DCM (8,44 ml) a t.a. en atmósfera de nitrógeno. La solución resultante se agitó a t.a. durante una noche antes de inactivarla con n H4CI acuoso saturado (50 ml) y se extrajo con DCM (2 * 50 ml). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO4 , se filtraron, y se concentraron a presión reducida, obteniéndose (1S,3R)-3-acetamido-N-(4-bromo-5-cloropiridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (0,96 g, 95 %) en forma de un sólido de color blanco. El producto se utilizó en la etapa siguiente sin purificación adicional. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6, 30 °C) 1,23 - 1,41 (4H, m), 1,67 - 1,85 (4H, m), 2,39 (3H, tt), 2,75 - 2,92 (1H, m), 3,53 (1H, dtd), 7,59 - 7,83 (1H, m), 8,50 (2H, dd), 10,80 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ 374 (isótopo 35Cl 79Br), 376 (isótopos 35Cl 81Br y 37Cl 79Br).
emp o_______ 8 ______ n . - -ace am¡ o- - -c oro- - . - ¡ ¡ ro- -p¡razo or . - r . oxaz¡ - -¡ p¡r ¡n- -il)ciclohexanocarboxam¡da
Figure imgf000053_0001
Se añadió (1S,3R)-3-acetamido-N-(4-bromo-5-cloropiridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (0,100 g, 0,27 mmol; preparado como en el ejemplo 7) en una porción a una mezcla desgasificada de 3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-6,7-dihidro-5H-pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina (0,067 g, 0,27 mmol), precatalizador X-Phos de 2.a generación (0,021 g, 0,03 mmol), fosfato de potasio (0,170 g, 0,80 mmol), 1,4-dioxano (2,270 ml) y agua (0,454 ml) a t.a. La mezcla resultante se agitó a t.a. durante 16 h y después se evaporó a sequedad antes de purificarla mediante cromatografía de intercambio iónico utilizando un cartucho SCX-2. El producto deseado se eluyó de la columna utilizando NH3 1 M en MeOH, y las fracciones puras se evaporaron a sequedad, obteniéndose (1S,3R)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-(6,7-dihidro-5H-pirazolo[5,1-b][1,3]oxazil-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida en bruto en forma de una goma de color amarillo. El producto semipuro resultante se purificó mediante HPLC preparativa (columna Waters XBridge Prep C18 OBD, 5 ^ de sílice, 30 mm de diámetro, 100 mm de longitud), utilizando mezclas decrecientemente polares de agua (que contenía NH3 al 1 %) y MeCN como eluyentes. Las fracciones que contenían el compuesto deseado se evaporaron a sequedad, obteniéndose (1S,3R)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-(6,7-dihidro-5H-pirazolo[5,1-b][1,3]oxazil-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (0,017 g, 16 %) en forma de una goma de color blanco. 1H RMN (500 MHz, DMSO-CÍ6, 30 °C) 1,21 - 1,32 (1H, m), 1,4 - 1,53 (3H, m), 1,95 (1H, s), 1,96 (3H, s), 2,06 (1H, d), 2,39 - 2,48 (2H, m), 2,7 - 2,85 (3H, m), 3,74 (1H, dt), 4,34 (2H, t), 4,53 - 4,68 (2H, m), 7,93 (1H, d), 8,05 (1H, s), 8,48 (1H, d), 8,58 (1H, s), 10,62 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 418 (isótopo 12C, 35Cli), 419 (pico secundario de isótopo 13C, 35Cl).
Los procedimientos para preparar el material de partida 3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-6,7-dihidro-5H-pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina se describen a continuación:
Preparación de 1.2-d¡h¡drop¡razol-3-ona
Figure imgf000053_0002
A una solución de prop-2-inoato de metilo (150 g, 1785,7 mmol) en MeOH (1500 ml) se le añadió hidrato de hidrazina (89,2 g, 1784,0 mmol) gota a gota a 0°C. La reacción se agitó a t.a. durante 30 min. Se añadió cloruro de sodio acuoso saturado (400 ml), y el metanol se retiró después al vacío. La capa acuosa se extrajo con EtOAc (3 x 500 ml), y las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron a presión reducida, obteniéndose 1 ,2 -dihidropirazol-3-ona (99,5 g, 6 6 %) en forma de un sólido de color blanco. m/z: ES+ [M+H]+ 85.
Preparación de 6.7-d¡h¡dro-5H-p¡razolor5.1-biri.31oxaz¡na
Figure imgf000053_0003
A una solución de 1,2-dihidropirazol-3-ona (99,5 g, 1184 mmol) en DMF (4000 ml) se le añadió K2CO3 (560,0 g, 4057 mmol), y la mezcla se calentó a 130 °C durante 1 h. Después se añadió 1,3-dibromopropano (143,4 ml, 1421 mmol) y la mezcla se agitó a 130 °C durante 2 h y después se concentró. El residuo resultante se repartió entre DCM (2000 ml) y agua (2000 ml). La capa orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo con DCM (3 x 1000 ml). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron, obteniéndose 6,7-dihidro-5H-pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina (83,0 g, 56,8 %) en forma de un aceite de color amarillo. 1H RMN (300 MHz, CDCh, 30 °C) 2,18 - 2,11 (2H, m), 4,13 - 4,05 (2H, m), 4,19 - 4,16 (2H, m), 5,37 - 5,37 (1H, m), 7,21 - 7,20 (1H, m).
Preparación de 3-vodo-6.7-dih¡dro-5H-p¡razolor5.1-biri.31oxaz¡na
Figure imgf000053_0004
A una solución de 6,7-dihidro-5H-pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina (83,0 g, 669,3 mmol) en CH3CN (1500 ml) se le añadió N-yodosuccinimida (155,0 g, 6 8 8 , 8 mmol). La mezcla se agitó a t.a. durante 1 h antes de verterla lentamente en agua agitada vigorosamente (1000 ml). Se añadió tiosulfato de sodio acuoso saturado (500 ml), y la mezcla resultante se extrajo con acetato de etilo (2 x 800 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua, se secaron sobre Na2SO4 , y se concentraron a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (éter de petróleo: EtOAc = 1: 1) obteniéndose 3-yodo-6,7-dihidro-5H-pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina (105,0 g, 62,2 %) en forma de un sólido de color amarillo. 1H RMN (300 MHz, DMSO-de, 30 °C) 2,19 - 2,12 (2H, m), 4,10 - 3,98 (2H, m), 4,34 -4,31 (2H, m), 7,28 (1H, m). m/z: ES+ [M+H]+ 251.
Preparación de 3-(4.4.5.5-tetramet¡l-1.3.2-d¡oxaborolan-2-¡l)-6.7-d¡h¡dro-5H-p¡razolor5,1-biri.31oxaz¡na
Figure imgf000054_0001
A una solución de 3-yodo-6,7-dihidro-5H-pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina (105 g, 420 mmol) en THF (1000 ml) se le añadió 2-isopropoxi-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (126 ml, 630 mmol). La mezcla se enfrió a 5 °C. Después se añadió cloruro de litio y magnesio (410 ml, 420 mmol), y la mezcla se agitó a 5 °C durante 3 h. La reacción se inactivó mediante la adición de MeOH (500 ml) y después se concentró. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, eluyendo con acetato de etilo al 50 % isocrático en éter de petróleo, obteniéndose un aceite de color amarillo pálido. La cristalización a partir de heptano (100 ml) proporcionó 3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-6,7-dihidro-5H-pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina (38,6 g, 36,7 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (400 MHz, d Ms O-d6 , 30 °C) 1,21 (12H, s), 2,15 - 2,12 (2H, m), 4,06 - 4,03 (2H, m), 4,31 - 4,29 (2H, m), 7,32 (1H, m). m/z: ES+ [M+H]+ 251.
Ejemplo________9 _______ (1R.3S)-3-acetam¡do-M-(5-cloro-4-(4.5.6.7-tetrah¡drop¡razolori.5-a1p¡r¡d¡n-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da y
(1S.3R)-3-acetam¡do-M-(5-cloro-4-(4.5.6.7-tetrah¡drop¡razolori.5-a1p¡r¡d¡n-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da (ejemplo 2)
Figure imgf000054_0002
Se añadió cloruro de acetilo (0,280 ml, 3,93 mmol) a una solución de cis-3-amino-N-(5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (0,639 g, 1,71 mmol; proporción de enantiómeros desconocida, preparado como en el ejemplo 2 a partir de 5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-amina y ácido cis-3-(fe/-c-butoxicarbonilamino)ciclohexanocarboxílico, proporción de enantiómeros desconocida) en DCM (14,1 ml) y piridina (2,77 ml, 34,2 mmol) a 0 °C. Después de 30 min, la reacción de color amarillo claro se vertió en DCM y bicarbonato de sodio acuoso saturado. Se separaron las capas y la capa orgánica se lavó con cloruro de sodio acuoso saturado y se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de metanol del 0 al 20 % en EtOAc. Las fracciones de producto se concentraron a presión reducida, obteniéndose producto semipuro en forma de un sólido de color blanco. Este material se purificó adicionalmente mediante HPLC preparativa (columna Waters XBridge Prep C18, 5 ^m, 30 mm de diámetro, 100 mm de longitud), eluyendo con metanol del 60 al 80 % en agua (que contenía hidróxido de amonio al 0,2 % a pH 10) como eluyente. Las fracciones de producto se concentraron a sequedad a presión reducida, obteniéndose cis-3-amino-N-(5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida, proporción de enantiómeros desconocida, en forma de un sólido de color blanco (403 mg).
Este material se transfirió a un matraz de fondo redondo utilizando DCM y se concentró a presión reducida hasta obtener un sólido de color blanco. El residuo se recogió en aproximadamente 10 ml de MeCN y se calentó en condiciones de reflujo. Se enfrió la solución y se empezó a formar rápidamente un precipitado. Después de 10 min, la mezcla se puso en el congelador. Después de 2 h, la mezcla se calentó a t.a. y se agitó vigorosamente durante una noche. Después, se filtró la mezcla de color blanco, se lavó con MeCN en primer lugar y después con hexano. El precipitado resultante se secó al vacío a 60 °C durante 30 min, obteniéndose 159 mg de un sólido cristalino (escamas).
El análisis de este sólido en condiciones de SFC analítica (véanse las condiciones en el ejemplo 2), determinaron que tenía un e.e. del 60,5 % (componente principal = ejemplo 2). Se purificó una porción de este material (112 mg) en condiciones de SFC preparativa (columna Chiralpak IA, 5 ^m, 21,2 mm de diámetro, 250 mm de longitud, temperatura de la columna de 40 °C, presión de salida de 100 bar, caudal de 75 ml/min), eluyendo con metanol al 40 % que contenía dimetiletilamina al 0,1 % en CO2 , obteniéndose (1S,3R)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (70 mg, 67 %, ejemplo 2) en forma de una espuma sólida de color blanco y (1 R,3S)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (13,2 mg, 11,8 %, ejemplo 9) en forma de una espuma sólida de color blanco.
nR.3S)-3-acetam¡do-M-(5-cloro-4-(4.5.6.7-tetrah¡drop¡razolori.5-alp¡r¡d¡n-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)ciclohexanocarboxam¡da: 1H RMN(300 MHz, DMSO-de, 27 °C) 0,99 - 1,17 (1H, m), 1,19 - 1,37 (3H, m), 1,70 - 1,90 (9H, m), 1,96 - 2,08 (2H, m), 2,54 - 2,68 (1H, m), 2,80 (2H, t), 3,46 - 3,68 (1H, m), 4,14 (2H, t), 7,73 (1H, d), 7,76 (1H, s), 8,14 (1H, s), 8,38 (1H, s), 10,57 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 416.
Cond¡c¡ones de SFC analít¡ca:
Figure imgf000055_0002
Rotac¡ón ópt¡ca:
Figure imgf000055_0003
Figure imgf000055_0001
Se trató (1 S,3R)-3-amino-N-(5-doro-4-(5,6-dih¡dro-4H-p¡rrolo[1,2-b]pirazol-3-N)piridin-2-il)cidohexanocarboxamida (0,093 g, 0,26 mmol) en DCM (2 ml) con trietilamina (0,079 ml, 0,57 mmol) seguido de anhídrido acético (0,029 ml, 0,31 mmol). La mezcla de reacción se agitó a t.a. durante 0,5 h y después se lavó con agua. La capa orgánica se purificó mediante cromatografía ultrarrápida de gel de sílice, gradiente de elución de MeOH del 0 al 10 % en DCM. Las fracciones puras se evaporaron a sequedad, obteniéndose (1S,3R)-3-acetam¡do-N-(5-doro-4-(5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[1,2-b]p¡razol-3-iOpiridin^-iOciclohexanocarboxamida (0,075 g, 72 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (400 MHz, CDCb, 30 °C) 1,09 - 1,22 (1H, m), 1,38 - 1,58 (2H, m), 1,88 - 2,03 (6H, m), 2,26 (1H, d), 2,43 - 2,56 (1H, m), 2,69 (2H, p), 3,14 -3,21 (2H, m), 3,49 (1H, s), 3,87 (1H, dtt), 4,21 (2H, t), 5,59 (1H, d), 8,14 (1H, s), 8,22 (1H, s), 8,33 (1H, s), 8,43 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 402.
Los procedimientos para preparar el material de partida (1S,3R)-3-am¡no-N-(5-doro-4-(5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida se describen a continuación:
Preparación de 3-vodo-5.6-dih¡dro-4H-p¡rrolori.2-blp¡razol
Figure imgf000056_0001
Se trató ácido 5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[1,2-b]p¡razol-3-carboxíl¡co (0,75 g, 4,93 mmol) disuelto en DMF (4 ml) con N-yodosuccinimida (1,331 g, 5,92 mmol) y bicarbonato de sodio (0,497 g, 5,92 mmol) a t.a. La mezcla se agitó a t.a. durante 15 h. La reacción se agitó a 60 °C durante 16 h adicionales y después se concentró a presión reducida. El residuo resultante se disolvió en EtOAc (50 ml) y se lavó con agua (2 * 50 ml). La capa orgánica se concentró a presión reducida, y el producto en bruto se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de EtOAc del 0 al 70 % en heptano. Las fracciones puras se evaporaron a sequedad, obteniéndose 3-yodo-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol (0,88 g, 76 %) en forma de un sólido de color beige. 1H RMN (400 MHz, DMs O-cÍ6, 30 °C) 2,53 - 2,6 (2H, m), 2,69 - 2,79 (2H, m), 4,04 - 4,19 (2H, m), 7,46 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 235.
Preparación de 3-(4.4.5.5-tetramet¡l-1.3.2-d¡oxaborolan-2-¡l)-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rroloH.2-blp¡razol
Figure imgf000056_0002
Se disolvieron 3-yodo-5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[1,2-b]p¡razol (0,800 g, 3,42 mmol) y 2-isopropoxi-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (0,954 g, 5,13 mmol) en THF (8 ml) a 4 °C y después se trató gota a gota con complejo de cloruro de isopropilmagnesio y cloruro de litio en THF (1,3 M; 2,63 ml, 3,42 mmol). La mezcla se agitó a 4 °C durante 2 h y después se concentró a presión reducida. El producto en bruto resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de EtOAc del 0 al 70 % en heptano. Las fracciones puras se evaporaron a sequedad, obteniéndose 3-(4,4,5,5-tetramet¡l-1,3,2-d¡oxaborolan-2-¡l)-5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[1,2-b]p¡razol (0,67 g, 84 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (400 MHz, CDCls, 30 °C) 1,29 (12H, s), 2,60 (2H, p), 2,91 - 3,02 (2H, m), 4,05 - 4,19 (2H, m), 7,77 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 235.
Preparación de ((1R.3S)-3-((5-cloro-4-vodop¡r¡d¡n-2-¡l)carbamo¡l)c¡clohex¡l)carbamato de tere-butilo
Figure imgf000056_0003
Se añadió 1-doro-N,N,2-tr¡met¡lpropen¡lam¡na (1,149 ml, 8,68 mmol) a una solución en agitación de ácido (1S,3R)-3-((tere-butoxicarboniOamino^iclohexanocarboxílico (1,41 g, 5,79 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 2) en DCM (25 ml) enfriado en un baño de hielo en una atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. Se añadieron 5-doro-4-yodop¡r¡d¡n-2-am¡na (1,47 g, 5,79 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 2) y piridina (0,702 ml, 8,68 mmol), y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 16 h. La reacción se inactivó mediante la adición de NH4Cl acuoso saturado (50 ml). La mezcla resultante se extrajo con DCM (3 * 75 ml), y las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El sólido de color amarillo pálido resultante se suspendió en Et2O (10 ml) y se filtró, obteniéndose ((1R,3S)-3-((5-doro-4-yodop¡r¡d¡n-2-¡l)carbamo¡l)c¡dohex¡l)carbamato de tere-butilo (1,79 g, 3,73 mmol, 64,4 %) en forma de un sólido de color crema. 1H RMN (400 MHz, CDCls, 30 °C) 1,04 - 1,18 (1H, m), 1,24 - 1,41 (2H, m), 1,44 (9H, s), 1,92 (2H, dq), 2,00 (1H, d), 2,28 (1H, d), 2,31 - 2,41 (1H, m), 3,27 - 3,62 (2H, m), 4,44 (1H, s), 7,80 (1H, s), 8,19 (1H, s), 8,81 (1H, s). m/z: ES- [M-H]- 478.
Preparación____________ de____________ (nR.3S)-3-((5-cloro-4-(5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolori.2-blp¡razol-3-¡l)p¡rid¡n-2-il)carbamo¡l)c¡clohexil)carbamato de tere-butilo
Figure imgf000057_0001
Se disolvieron 3-(4,4,5,5-tetrametiM,3,2-dioxaborolan-2-il)-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol (0,14 g, 0,58 mmol), ((1R,3S)-3-((5-doro-4-yodopiridin-2-N)carbamoN)cidohexN)carbamato de ferc-butilo (0,18 g, 0,38 mmol), precatalizador X-Phos de 2.a generación (0,03 g, 0,04 mmol) y fosfato de potasio, dibásico (0 , 2 0 0 g, 1,15 mmol) en 1,4-dioxano (4 ml) y agua (0,8 ml) a 21 °C. La mezcla se agitó a 21 °C durante 18 h. Después la mezcla se calentó a 40 °C durante 17 h y después a 50 °C durante 2 h. La mezcla se diluyó con EtOAc (30 ml) y después se lavó con agua (10 ml). La capa orgánica se concentró a presión reducida, y el producto en bruto resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de EtOAc del 0 al 70 % en heptano. Las fracciones puras se evaporaron a sequedad, obteniéndose ((1 R,3S)-3-((5-cloro-4-(5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de ferc-butilo (0,119 g, 67,5 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (400 MHz, CDCls, 30 °C) 1,04 - 1,17 (1H, m), 1,34 - 1,41 (2H, m), 1,44 (9H, s), 1,89 - 2,03 (4H, m), 2,29 (1H, d), 2,33 - 2,44 (1H, m), 2,69 (2H, p), 3,14 - 3,21 (2H, m), 3,45 - 3,59 (1H, m), 4,17 - 4,24 (2H, m), 4,44 (1H, s), 7,93 (1H, s), 8,15 (1H, s), 8,23 (1H, s), 8,33 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 460.
Preparación de diclorhidrato de nS.3R)-3-am¡no-M-(5-cloro-4-(5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolori.2-blp¡razol-3-¡l)p¡rid¡n-2-¡l)ciclohexanocarboxam¡da
Figure imgf000057_0002
A una solución de ((1R,3S)-3-((5-cloro-4-(5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de ferc-butilo (0,12 g, 0,26 mmol) disuelto en DCM (3 ml) se le añadió HCl (4 M en dioxano; 1,294 ml, 5,17 mmol). La mezcla se agitó a t.a. durante 30 minutos antes de concentrarse a presión reducida. El producto en bruto resultante se usó directamente en la etapa siguiente. m/z: ES+ [M+H]+ 360.
Ejemplo______ 11______ nS.3R)-3-acetam¡do-N-(5-cloro-4-(6.7-d¡h¡dro-4H-p¡razolor5.1-ciri.41oxazil-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)ciclohexanocarboxam¡da
Figure imgf000057_0003
A una mezcla de ((1R,3S)-3-((5-cloro-4-(6,7-dihidro-4H-pirazolo[5,1-c][1,4]oxazil-3-il)piridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de ferc-butilo (0,072 g, 0,15 mmol) suspendido en DCM (3 ml) a t.a. se le añadió HCl (4 M en dioxano; 0,756 ml, 3,03 mmol). La mezcla se convirtió en una solución que se agitó a t.a. durante 30 minutos. La reacción se concentró a presión reducida, obteniéndose diclorhidrato de (1S,3R)-3-amino-N-(5-cloro-4-(6,7-dihidro-4H-pirazolo[5,1-c][1,4]oxazil-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida en bruto en forma de un sólido. El producto en bruto se disolvió en d Cm (2 ml), y la solución resultante se trató secuencialmente con trietilamina (0,047 ml, 0,33 mmol) y anhídrido acético (0,017 ml, 0,18 mmol) a t.a. La mezcla de reacción se agitó a t.a. durante 30 minutos y después se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de EtOAc del 50 al 100 % en heptano, después MeOH del 0 al 10 % en DCM. Las fracciones puras se evaporaron a sequedad, obteniéndose (1S,3R)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-(6,7-dihidro-4H-pirazolo[5,1-c][1,4]oxazil-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (0,056 g, 8 8 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (400 MHz, DMSO-CÍ6 , 30 °C) 1,08 (1H, d), 1,29 (4H, c), 1,78 (1H, s), 1,91 (3H, s), 2,61 (2H, s), 3,57 (1H, dt), 4,08 - 4,27 (4H, m), 4,89 (2H, s), 7,74 (1H, d), 7,88 (1H, s), 8,01 (1H, s), 8,39 (1H, s), 10,59 (1H, s), 11,90 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 418.
Los procedimientos para preparar el material de partida ((1R,3S)-3-((5-cloro-4-(6,7-dihidro-4H-pirazolo[5,1-c][1,4]oxazil-3-N)piridin-2-N)carbamoN)cidohexN)carbamato de terc-butilo se describen a continuación:
Preparación de 3-vodo-6.7-dih¡dro-4H-p¡razolor5.1 -clH ,41oxaz¡na
Figure imgf000058_0001
Se trató ácido 6,7-dihidro-4H-pirazolo[5,1-c][1,4]oxazin-3-carboxílico (0,750 g, 4,46 mmol) disuelto en DMF (4 ml) con N-yodosuccinimida (1,204 g, 5,35 mmol) y bicarbonato de sodio (0,450 g, 5,35 mmol) a t.a. La mezcla se agitó a 70 °C durante 4 h y después se enfrió a t.a. Después de 60 h, la mezcla se concentró a presión reducida y el residuo se disolvió en EtOAc (70 ml) y se lavó con agua (2 * 70 ml). La capa orgánica se concentró a presión reducida, y el producto en bruto resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de EtOAc del 0 al 70 % en heptano. Las fracciones puras se evaporaron a sequedad, obteniéndose 3-yodo-6,7-dihidro-4H-pirazolo[5,1-c][1,4]oxazina (0,90 g, 81 %). 1H RMN (400 MHz, DMSO-de, 30 °C) 3,98 - 4,06 (2H, m), 4,07 - 4,15 (2H, m), 4,65 (2H, s), 7,53 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 251.
Preparación de 3-(4.4.5.5-tetramet¡l-1.3.2-d¡oxaborolan-2-il)-6.7-d¡h¡dro-4H-p¡razolor5.1-ciri ,41oxazina
Figure imgf000058_0002
Se disolvieron 3-yodo-6,7-dihidro-4H-pirazolo[5,1-c][1,4]oxazina (0,850 g, 3,40 mmol) y 2-isopropoxi-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (0,949 g, 5,10 mmol) en THF ( 8 ml) a 4 °C. La solución resultante se trató gota a gota con complejo de cloruro de isopropilmagnesio y cloruro de litio en THF (1,3 M; 2,61 ml, 3,40 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 4 °C durante 5 h antes de concentrarse a presión reducida. El producto en bruto resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de EtOAc del 0 al 70 % en heptano. Las fracciones puras se evaporaron a sequedad, obteniéndose 3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-6,7-dihidro-4H-pirazolo[5,1-c][1,4]oxazina (0,80 g, 95 %) en forma de una goma incolora. 1H RMN (400 MHz, CDCls, 30 °C) 1,29 (12H, s), 4,08 (2H, dd), 4,17 - 4,23 (2H, m), 4,96 (2H, s), 7,74 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 251.
Preparación__________ de__________ ((1R.3S)-3-((5-cloro-4-(6.7-dih¡dro-4H-p¡razolor5.1 -ciri.41oxazil-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)carbamoil)c¡clohex¡l)carbamato de tere-butilo
Figure imgf000058_0003
Se disolvieron 3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-6,7-dihidro-4H-pirazolo[5,1-c][1,4]oxazina (0,094 g, 0,38 mmol), ((1R,3S)-3-((5-cloro-4-yodopiridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de tere-butilo (0,120 g, 0,25 mmol; preparado como en el ejemplo 10), precatalizador X-Phos de 2.a generación (0,020 g, 0,03 mmol) y fosfato de potasio dibásico (0,131 g, 0,75 mmol) en 1,4-dioxano (4 ml) y agua (0,800 ml) a 50 °C. La mezcla se agitó a 50 °C durante 1 h y después se diluyó con EtOAc (30 ml). La mezcla resultante se lavó con agua (10 ml), y la capa orgánica se concentró a presión reducida. El producto en bruto resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de EtOAc del 0 al 70 % en heptano. Las fracciones puras se evaporaron a sequedad, obteniéndose ((1R,3S)-3-((5-cloro-4-(6,7-dihidro-4H-pirazolo[5,1-c][1,4]oxazil-3-il)piridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de tere-butilo (0,081 g, 6 8 %). 1H RMN (400 MHz, DMSO-da, 30 °C) 1,22 - 1,35 (4H, m), 1,38 (9H, s), 1,75 (3H, s), 1,90 (1H, d), 2,54 -2,63 (1H, m), 4,12 - 4,26 (4H, m), 4,90 (2H, s), 5,75 (1H, s), 6,76 (1H, d), 7,89 (1H, s), 8,01 (1H, s), 8,39 (1H, s), 10,58 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 476.
Ejemplo________ 12_______ nS.3R)-3-acetam¡do-M-(5-cloro-4-(6.7-d¡h¡dro-5H-p¡rrolori.2-a1¡m¡dazol-3-¡l)p¡rid¡n-2-il)ciclohexanocarboxam¡da
Figure imgf000059_0001
Se suspendieron (1S,3R)-3-acetam¡do-N-(5-cloro-4-yodop¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da (130 mg, 0,31 mmol), clorhidrato del ác¡do (6,7-d¡h¡dro-5H-p¡rrolo[1,2-a]¡m¡dazol-3-¡l)borón¡co (145 mg, 0,77 mmol), h¡dróx¡do de bario (211 mg, 1,23 mmol) y PdCb(dppf) (22 mg, 0,030 mmol) en d¡oxano (2 ml) y agua (0,4 ml) y se sellaron en un tubo para m¡croondas. La reacc¡ón se calentó a 75 °C en un reactor para m¡croondas y se mantuvo en estas cond¡c¡ones durante 2 h antes de enfriarla a t.a. La mezcla de reacc¡ón se f¡ltró con un lavado de metanol y el f¡ltrado se concentró posteriormente a pres¡ón reduc¡da. El producto en bruto resultante se purificó med¡ante HPLC preparat¡va (columna Waters XBr¡dge Prep C18 OBD, 5 ^m de síl¡ce, 19 mm de d¡ámetro, 100 mm de long¡tud), ut¡l¡zando mezclas decrec¡entemente polares de agua (que contenía NH3 al 1 %) y MeCN como eluyentes. Las fracc¡ones que contenían el compuesto deseado se evaporaron a sequedad, obten¡éndose (1 S,3R)-3-acetam¡do-N-(5-cloro-4-(6,7-d¡h¡dro-5H-p¡rrolo[1,2-a]¡m¡dazol-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da (21,3 mg, 17,2 %) en forma de un sól¡do. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6, 30 °C) 1,09 (1H, d), 1,30 (3H, c), 1,78 (5H, s), 1,91 (1H, d), 2,57 - 2,73 (4H, m), 2,85 (2H, t), 3,58 (1H, dd), 4,16 (2H, t), 7,55 (1H, s), 7,75 (1H, d), 8,35 (1H, s), 8,42 (1H, s), 10,67 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 402.
Los proced¡m¡entos para preparar los materiales de part¡da (1S,3R)-3-acetam¡do-N-(5-cloro-4-yodop¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da y clorh¡drato del ác¡do (6,7-d¡h¡dro-5H-p¡rrolo[1,2-a]¡m¡dazol-3-¡l)borón¡co se describen a cont¡nuac¡ón:
Preparación de 5-metox¡-3.4-d¡h¡dro-2H-p¡rrol
Figure imgf000059_0002
Se ag¡taron p¡rrol¡d¡n-2-ona (85 g, 1000 mmol) y Me2SO4 (126 g, 1000 mmol) a t.a. durante 30 m¡nutos, y después la mezcla se ag¡tó a 60 °C durante 6 h. La mezcla se vert¡ó lentamente en una soluc¡ón de tr¡et¡lam¡na (140 ml) en DCM a 0 °C y se ag¡tó en estas cond¡c¡ones durante 15 m¡n. Se añad¡ó agua y se separaron las capas. La capa orgán¡ca se secó sobre MgSO4 y se concentró a pres¡ón reduc¡da a t.a., obten¡éndose 5-metox¡-3,4-d¡h¡dro-2H-p¡rrol, que se usó d¡rectamente en la etapa s¡gu¡ente s¡n pur¡f¡cac¡ón ad¡c¡onal. 1H RMN (400 MHz, CDCb, 30 °C) 2,03 - 1,95 (2H, m), 2,43 - 2,39 (2H, m), 3,64 - 3,60 (2H, m), 3,76 (3H, s).
Preparación de 6.7-d¡h¡dro-5H-p¡rroloH.2-a1¡m¡dazol
Figure imgf000059_0003
A una soluc¡ón de 5-metox¡-3,4-d¡h¡dro-2H-p¡rrol (en bruto) en DCM (200 ml) se le añad¡ó MeOH (800 ml) y am¡noacetaldehído d¡met¡l acetal (105 g, 1000 mmol). La mezcla se ag¡tó a 60 °C durante 6 h antes de concentrarse a pres¡ón reduc¡da, obten¡éndose N-(2,2-d¡metox¡et¡l)-3,4-d¡h¡dro-2H-p¡rrol-5-am¡na (82 g, 48 %). El producto en bruto se d¡solv¡ó en ác¡do fórm¡co (400 ml) y se ag¡tó a temperatura de reflujo durante 17 h antes de concentrarse a pres¡ón reduc¡da, obten¡éndose 6,7-d¡h¡dro-5H-p¡rrolo[1,2-a]¡m¡dazol (46 g, 90 %). 1H RMN (400 MHz, DMSO-CÍ6 , 30 °C) 2,51 -2,44 (2H, m), 2,69 - 2,65 (2H, m), 3,91 - 3,88 (2H, m), 6,84 (1H, s), 7,02 (1H, s).
Preparación de clorhidrato del ácido (6.7-d¡h¡dro-5H-p¡rroloH.2-a1¡m¡dazol-3-¡l)borón¡co
Figure imgf000059_0004
A una soluc¡ón en ag¡tac¡ón de 6,7-d¡h¡dro-5H-p¡rrolo[1,2-a]¡m¡dazol (60 g, 560 mmol) en THF anh¡dro (700 ml) a -78 °C se le añad¡ó n-BuL¡ (250 ml, 625 mmol), y la mezcla se ag¡tó durante 1 h a esta temperatura. Se añad¡ó borato de tr¡¡soprop¡lo (115 g, 610 mmol) a -78 °C, y después la mezcla se dejó calentar a t.a. durante una noche. La reacc¡ón se enfrió a 0 °C, y se añad¡ó HCl acuoso (1 M; 1000 ml). La reacc¡ón se concentró a pres¡ón reduc¡da para el¡m¡nar el tetrah¡drofurano. Se ajustó el pH de la capa acuosa restante a 2 med¡ante la ad¡c¡ón cu¡dadosa de HCl concentrado, y el prec¡p¡tado se recog¡ó y se secó, obten¡éndose clorh¡drato del ác¡do (6,7-d¡h¡dro-5H-p¡rrolo[1,2-a]¡m¡dazol-3-¡l)borón¡co (42 g, 40 %). 1H RMN (400 MHz, DMSO-de, 30 °C) 2,64 - 2,49 (2H, m), 3,08 (2H, t), 4,19 (2H, t), 7,92 (1H, s), 8,84 (2H, s), 14,34 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 153.
Preparación de 3-am¡no-M-(5-cloro-4-vodop¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da
Figure imgf000060_0001
Se suspendió (3-((5-doro-4-yodopiridin-2-N)carbamoil)cidohexN)carbamato de terc-butilo (1 g, 2,08 mmol; preparado como en el ejemplo 10) en d Cm (15 ml) a temperatura ambiente. Se añadió HCl (4M) en dioxano (2,61 ml, 10,42 mmol) y la mezcla resultante se agitó durante 16 h. Después, la mezcla de reacción se cargó en una columna SCX de 50 g y se eluyó secuencialmente con DCM, MeOH, y NH3 al 1 % en MeOH. Las fracciones básicas se concentraron a presión reducida, obteniéndose 3-amino-N-(5-cloro-4-yodopiridin-2-il)ciclohexanocarboxamida en forma de un sólido amorfo incoloro (782 mg, 99 %). m/z: ES+ [M+H]+ 380.
Preparación de (1 S.3R)-3-acetam¡do-M-(5-cloro-4-vodop¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da
Figure imgf000060_0002
Se añadió anhídrido acético (0,214 ml, 2,27 mmol) a una solución en agitación de (1S,3R)-3-amino-N-(5-cloro-4-yodopiridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (782 mg, 2,06 mmol) y trietilamina (0,632 ml, 4,53 mmol) en DCM (10 ml) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó durante 5 días antes de filtrarla y lavarla con d Cm , para proporcionar (1S,3R)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-yodopiridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (480 mg, 55 %) en forma de un sólido incoloro. Los licores se concentraron y purificaron mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de EtOAc del 20 al 60 % en heptano. Las fracciones puras se evaporaron a sequedad, obteniéndose más (1S,3R)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-yodopiridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (193 mg, 22 %) en forma de un sólido cristalino incoloro (rendimiento combinado: 77 %). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6, 30°C) 1,01 - 1,17 (1H, m), 1,18 - 1,39 (3H, m), 1,68 - 1,84 (2H, m), 1,78 (3H, s), 1,89 (1H, m), 2,51 (2H, m), 3,48 - 3,65 (1H, m), 7,74 (1H, d), 8,38 (1H, s), 8,71 (1H, s), 10,66 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 422.
Ejemplo 13: (1S.3R)-3-acetam¡do-M-(5-cloro-4-(5-met¡l-4.5.6.7-tetrah¡drop¡razolori.5-alp¡raz¡n-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-
Figure imgf000060_0003
A una solución de ((1R,3S)-3-((5-cloro-4-(5-metil-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-il)piridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de terc-butilo (0,042 g, 0,090 mmol) disuelta en DCM (2 ml) se le añadió HCl (4 M en dioxano; 0,429 ml, 1,72 mmol). La mezcla se agitó a t.a. durante 2 h antes de concentrarse a presión reducida, obteniéndose un sólido en bruto (33 mg). Este sólido se disolvió en DCM (2 ml) y trietilamina (0,026 ml, 0,19 mmol). Después se añadió anhídrido acético (9,6 pl, 0,10 mmol). La mezcla se agitó a t.a. durante 30 min y después se concentró a presión reducida. El producto en bruto resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de EtOAc del 0 al 100 % en (MeOH al 10 % en DCM). Las fracciones puras se evaporaron a sequedad, obteniéndose (1S,3R)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-(5-metil-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (0,027 g, 74 %) en forma de una película seca incolora. 1H RMN (400 MHz, CDCh, 30 °C) 1,09 - 1,24 (1H, m), 1,41 - 1,56 (3H, m), 1,87 - 2,04 (6 H, m), 2,25 (1H, d), 2,51 (4H, s), 2,9 - 2,98 (2H, m), 3,73 (2H, s), 3,87 (1H, dtd), 4,26 (2H, t), 5,60 (1H, d), 7,84 (1H, s), 8,11 (1H, s), 8,25 (1H, d), 8,30 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 431.
Los procedimientos para preparar el material de partida ((1R,3S)-3-((5-cloro-4-(5-metil-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-il)piridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de terc-butilo se describen a continuación:
Preparación de 3-bromo-5-met¡l-4.5.6.7-tetrah¡drop¡razoloH ,5-alpirazina
Figure imgf000061_0001
Se añadió HCl (4 M en dioxano; 3,31 ml, 13,24 mmol) en una porción a 3-bromo-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazina-5(4H)-carboxilato de tere-butilo (0,400 g, 1,32 mmol) en DCM ( 6 ml) a 20 °C. La mezcla resultante se agitó a 20 °C durante 60 minutos. Se formó un sólido de color blanco. La mezcla se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se redisolvió en ácido fórmico (12,7 ml, 331 mmol) y se trató con formaldehído (0,64 ml, 8 , 6 mmol). Esta nueva mezcla se calentó a 100 °C durante 8 h antes de concentrarse a presión reducida. El residuo resultante se disolvió en EtOAc (25 ml) y después se lavó con hidrogenocarbonato de sodio acuoso saturado (2 * 25 ml); las capas acuosas combinadas se extrajeron posteriormente con EtOAc (2 * 25 ml). Las capas orgánicas combinadas se concentraron a presión reducida, y el residuo en bruto resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de EtOAc del 0 al 100 % en heptano. Las fracciones puras se evaporaron a sequedad, obteniéndose 3-bromo-5-metil-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazina (0,185 g, 64,7 %) en forma de un aceite incoloro. 1H RMN (400 MHz, CDCb, 30 °C) 2,45 (3H, s), 2,75 - 2,85 (2H, m), 3,48 (2H, s), 4,05 - 4,15 (2H, m), 7,35 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 218 (isótopo 81Br).
Preparación de 5-metil-3-(4.4.5.5-tetrametil-1.3.2-d¡oxaborolan-2-¡l)-4.5.6.7-tetrah¡drop¡razoloH ,5-alpirazina
Figure imgf000061_0002
Se suspendieron 3-bromo-5-metil-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazina (0,185 g, 0,860 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-octametil-2,2'-bi(1,3,2-dioxaborolano) (0,435 g, 1,71 mmol), acetato de potasio (0,294 g, 3,00 mmol) y Pd(P(Cy)3)2Cl2 (0,063 g, 0,090 mmol) en DMA (3 ml). La reacción se calentó a 80 °C durante 5 h después a 90 °C durante 16 h. La mezcla de reacción se enfrió a t.a. y después se diluyó con agua (20 ml) y se extrajo con EtOAc (20 ml). Los orgánicos combinados se concentraron a presión reducida. El producto en bruto resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de d Cm del 0 al 100 % en heptano, seguido de MeOH del 0 al 10 % en DCM. Las fracciones puras se evaporaron a sequedad, obteniéndose 5-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazina (0,20 g, 89 %) en forma de un aceite incoloro. 1H RMN (400 MHz, CDCb, 30 °C) 1,29 (12H, s), 2,52 (3H, s), 2,88 - 2,92 (2H, m), 3,80 (2H, s), 4,22 (2H, t), 7,72 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 264.
Preparación_______ de_______ ((1R.3S)-3-((5-cloro-4-(5-met¡l-4.5.6.7-tetrah¡drop¡razolori.5-alpiraz¡n-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-il)carbamo¡l)c¡clohexil)carbamato de tere-butilo
Figure imgf000061_0003
Se disolvieron ((1R,3S)-3-((5-cloro-4-yodopiridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de tere-butilo (0,200 g, 0,42 mmol; preparado como en el ejemplo 10), 5-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazina (0,197 g, 0,750 mmol), precatalizador X-Phos de 2.a generación (0,033 g, 0,040 mmol) y fosfato de potasio dibásico (0,218 g, 1,25 mmol) en 1,4-dioxano (4 ml) y agua (0,800 ml) a 45 °C. La mezcla se agitó a 45 °C durante 18 h. Se añadió más precatalizador X-Phos de 2 .a generación (0,033 g, 0,04 mmol), y se aumentó la temperatura a 60 °C durante 1 h. La mezcla de reacción se enfrió y se hizo pasar a través de una columna SCX-2. El producto deseado se eluyó de la columna utilizando NH3 1 M en MeOH, y las fracciones puras se concentraron a presión reducida. El producto en bruto resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de EtOAc del 0 al 100 % en heptano, después MeOH del 0 al 10 % en DCM. Las fracciones puras se evaporaron a sequedad, obteniéndose ((1R,3S)-3-((5-cloro-4-(5-metil-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-il)piridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de terc-butilo (0,054 g, 27 %). 1H RMN (400 MHz, CDCb, 30 °C) 1,04 - 1,19 (1H, m), 1,44 (12H, s), 1,87 - 2,02 (3H, m), 2,29 (1H, d), 2,33 - 2,46 (1H, m), 2,53 (3H, s), 2,95 - 3 (2H, m), 3,50 (1H, s), 3,76 (2H, s), 4,28 (2H, t), 4,52 (1H, s), 7,85 (1H, s), 8,12 (2H, s), 8,26 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 489.
Ejemplo 14: nS.3R)-3-acetam¡do-M-(5-cloro-4-(5.5-d¡met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolori.2-blp¡razol-3-¡l)p¡rid¡n-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da
Figure imgf000062_0001
A una solución en agitación de (1S,3R)-3-amino-N-(5-cloro-4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (111 mg, 0,290 mmol), trietilamina (0,084 ml, 0,60 mmol) y N,N-dimetilpiridin-4-amina (1,748 mg, 0,01 mmol) en d Cm (10 ml) se le añadió anhídrido acético (0,032 ml, 0,34 mmol). La mezcla de reacción se agitó a t.a. durante 4 h y después se purificó mediante cromatografía de intercambio iónico utilizando una columna SCX-2. El producto deseado se eluyó de la columna utilizando NH3 1 M en MeOH, y las fracciones que contienen producto se concentraron a presión reducida. El producto en bruto resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de EtOAc del 0 al 100 % en heptano. Las fracciones puras se evaporaron a sequedad, obteniéndose (1S,3R)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida ( 8 6 mg, 70 %) en forma de un sólido de color blanco (forma A). 1H Rm N (400 MHz, Dm SO-cÍ6 , 30 °C) 1,09 (1H, d), 1,28 (9H, s), 1,78 (6 H, s), 1,90 (1H, d), 2,62 (1H, s), 2,89 (2H, s), 3,57 (1H, dt), 3,95 (2H, s), 7,73 (1H, d), 7,99 (1H, s), 8,25 (1H, s), 8,33 - 8,36 (1H, m), 10,53 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 430.
Rotac¡ón ópt¡ca
Figure imgf000062_0002
Método 1: El material del título (10 mg) se disolvió en 1 ml de acetonitrilo y la solución transparente se evaporó lentamente a t.a. durante 3 días. El sólido resultante resultó ser el del ejemplo 14 en la forma cristalina A.
Método 2: El material del título (10 mg) se añadió a 0,1 ml de acetonitrilo y la suspensión resultante se agitó a temperatura ambiente durante 18 h y después se secó al aire durante 3 días. El sólido resultante resultó ser el del ejemplo 14 en forma cristalina A.
Los cristales de la forma A se analizaron mediante XRPD y los resultados se tabulan a continuación y se muestran en la figura 1. El XRPD del sólido confirma que éste contiene exclusivamente la forma A, que tiene un patrón de difracción de rayos X de polvo con picos específicos en aproximadamente 2-theta = 5,9, 7,0, 9,4, 10,5, 11,5, 11,7, 17,6, 18,0, 20,2 y 2 1 ,0 °.
P¡cos pr¡nc¡pales de la forma A del ejemplo 14
Figure imgf000062_0003
Figure imgf000063_0004
Los cristales (forma A) obtenidos de acuerdo con el ejemplo 14 se analizaron mediante técnicas térmicas. El análisis de DSC indicó que la forma A se funde con un punto de inicio a 191° y un pico a 193°. El TGA indicó que la forma A muestra una pérdida de masa de aproximadamente el 1,6 % tras calentarlo de 22 a 200 °C. En la figura 2 se muestra un termograma de DSC/TGA representativo.
En el ejemplo 85 se describe un procedimiento alternativo para la elaboración del ejemplo 14.
Los procedimientos para preparar el material de partida (1S,3R)-3-amino-N-(5-cloro-4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida se describen a continuación:
Preparación de 2.2-d¡metil-3-(1H-p¡razol-1-¡hpropanoato de etilo
Figure imgf000063_0001
Se agitaron 1H-pirazol (20 g, 293,78 mmol), 3-bromo-2,2-dimetilpropanoato de etilo (61,4 g, 293,78 mmol) y carbonato de cesio (144 g, 440,68 mmol) en DMA (200 ml) a 80 °C durante 16 h. Después se vertió la mezcla en agua (400 ml) y se extrajo con acetato de etilo (150 ml). La capa orgánica se concentró a presión reducida, obteniéndose un aceite incoloro. Este aceite se purificó mediante cromatografía ultrarrápida de sílice, gradiente de elución de acetato de etilo del 10 al 40 % en heptano). Las fracciones de producto se concentraron a presión reducida, obteniéndose 2,2-dimetil-3-(1 H-pirazol-1-il)propanoato de etilo (46,0 g, 80,0 %), en forma de un aceite incoloro. 1H RMN (400 MHz, CDCb, 30 °C) 0,97 (6H, s), 1,02 (3H, t), 3,93 (2H, c), 4,10 (2H, s), 6,00 (1H, t), 7,16 (1H, d), 7,26 (1H, d). m/z: (ES+) [M+H]+ = 197.
Preparación de ácido 2.2-d¡met¡l-3-(1H-p¡razol-1-il)propano¡co
Figure imgf000063_0002
Se anadió gota a gota hidróxido de sodio acuoso (5 M; 94 ml, 46 mmol) a una solución en agitación de 2,2-dimetil-3-(1H-pirazol-1-il)propanoato de etilo (46 g, 234 mmol) disuelto en metanol (250 ml) a t.a. Se dejó exotermizar la mezcla a 37 °C durante la adición. La solución resultante se agitó en estas condiciones durante 30 minutos y después se enfrió a t.a. antes de concentrarse a presión reducida hasta un volumen de 1/3. Esta nueva solución se acidificó a ~pH 3 con HCl concentrado. Se separó de la mezcla un aceite incoloro. El matraz se agitó en un bano de hielo y se cristalizó un sólido incoloro. La mezcla se dejó reposar durante una noche a t.a., y el sólido se aisló mediante filtración y se secó a presión reducida, obteniéndose ácido 2,2-dimetil-3-(1H-pirazol-1-il)propanoico (30,0 g, 76 %) en forma de un sólido cristalino incoloro. 1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe, 30 °C) 1,05 (6H, s), 4,23 (2H, s), 6,21 (1H, t), 7,35 - 7,44 (1H, m), 7,54 - 7,67 (1H, m), 12,41 (1H, s a). m/z: (ES+) [M+H]+ = 169.
Preparación de 5.5-d¡met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rroloH.2-b1p¡razol-4-ona
Figure imgf000063_0003
Se anadió gota a gota n-BuLi en hexano (9,03 ml, 24,38 mmol) a ácido 2,2-dimetil-3-(1H-pirazol-1-il)propanoico (2 g, 11,89 mmol) en 2-metil tetrahidrofurano (40 ml) a -78°C durante un periodo de 20 minutos en atmósfera de nitrógeno. La suspensión resultante se agitó a -78 °C durante 15 minutos, y después la reacción se agitó a aproximadamente -45 °C durante 1 h, después se dejó calentar a 15 °C antes de inactivar lentamente la reacción en cloruro de amonio saturado enfriado en hielo (100 ml). La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (100 ml) y la capa en cloruro de amonio se separó y se extrajo una vez más con EtOAc (50 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con cloruro de sodio acuoso saturado (50 ml). La capa orgánica se secó sobre MgSO4 , se filtró y se evaporó, obteniéndose 5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-4-ona (0,970 g, 54,3 %) en forma de un aceite de color amarillo pálido que cristalizó al dejarlo reposar.
1H RMN (400 MHz, DMSO-de, 30°C) 1,29 (6 H, s), 4,36 (2H, s), 6,77 (1H, d), 7,89 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ 151.
Preparación de 5.5-d¡met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolof1.2-b1p¡razol
Figure imgf000064_0001
Se añadió hidrato de hidrazina (4,13 ml, 85,23 mmol) a una solución en agitación de 5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-4-ona (2,56 g, 17,1 mmol) disuelta en 2,2'-oxidietanol (48,5 ml, 511 mmol). La solución resultante se agitó a 1 8 0 °C durante 1 h. Se añadió cuidadosamente hidróxido de potasio (3,35 ml, 59,7 mmol) a la mezcla y la suspensión resultante se agitó a 150 °C durante 2 h. Después de enfriar a t.a., la mezcla de reacción se diluyó con agua (50 ml), y se ajustó el pH a 4,5 con HCl acuoso diluido (2 N). Después de la extracción con Et2O (5 * 50 ml), las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua (2 * 20 ml) y después cloruro de sodio acuoso saturado (20 ml). Las capas orgánicas se secaron sobre MgSO4 , se filtraron y se concentraron a presión reducida, obteniéndose 5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol (0,922 g, 39,7 %) en forma de un aceite de color amarillo claro. 1H RMN (400 MHz, CDCb, 30 °C) 1,21 (6 H, s), 2,61 (2H, s), 3,80 (2H, s), 5,82 - 5,93 (1H, m), 7,41 (1H, d).
Preparación de 3-bromo-5.5-d¡met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rroloH.2-b1p¡razol
Figure imgf000064_0002
Se añadió N-bromosuccinimida (1166 mg, 6,55 mmol) a una solución en agitación de 5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol (892 mg, 6,55 mmol) disuelto en Dc M (10 ml) a 23 °C. La mezcla resultante se agitó a 23 °C durante 16 h antes de diluirla con DCM (20 ml) y se lavó secuencialmente con agua (2 * 20 ml) y cloruro de sodio acuoso saturado (20 ml). La capa orgánica se secó sobre MgSO4 , se filtró y se concentró a presión reducida, obteniéndose 3-bromo-5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol (1394 mg, 99 %) en forma de un aceite de color amarillo. 1H RMN (400 MHz, CDCla, 30°C) 1,23 (6 H, s), 2,58 (2H, s), 3,83 (2H, s), 7,35 (1H, s).
Preparación de 5.5-d¡met¡l-3-(4.4.5.5-tetramet¡l-1.3.2-d¡oxaborolan-2-¡l)-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rroloH.2-b1p¡razol
Figure imgf000064_0003
Se añadió Pd(P(Cy)3)2Cl2 (0,247 g, 0,33 mmol) a 4,4,4',4',5,5,5',5'-octametil-2,2'-bi(1,3,2-dioxaborolano) (1,70 g, 6,69 mmol), 3-bromo-5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol (0,720 g, 3,35 mmol) y acetato de potasio (1,150 g, 11,72 mmol) en DMA (7 ml). La suspensión resultante se desgasificó y se agitó a 85 °C durante 5 h. Después, se añadió aducto de dicloro[1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]paladio y DCM (0,273 g, 0,33 mmol) a la mezcla de reacción y se continuó agitando en estas condiciones durante 18 h antes de enfriar la mezcla de reacción a t.a. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (20 ml) y se lavó secuencialmente con agua (2 * 15 ml), y cloruro de sodio acuoso saturado (15 ml). La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró, y se concentró a presión reducida. El producto en bruto resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de EtOAc del 0 al 50 % en heptano. Las fracciones puras se evaporaron a sequedad, obteniéndose 5,5-dimetil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol (0,458 g, 52,2 %) en forma de un sólido color crema. 1H RMN (400 MHz, CDCl3, 30 °C) 1,24 (6 H, s), 1,27 (12H, s), 2,79 (2H, s), 3,87 (2H, s), 7,76 (1H, s).
Preparación_______ de_______ (nR.3S)-3-((5-cloro-4-(5.5-d¡met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolori.2-blp¡razol-3-¡l)p¡rid¡n-2-¡l)carbamoil)c¡clohex¡l)carbamato de tere-butilo
Figure imgf000065_0001
Se disolvieron 5,5-dimetil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol (433 mg, 0,83 mmol), ((1R,3S)-3-((5-cloro-4-yodopiridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de tere-butilo (360 mg, 0,75 mmol; preparado como en el ejemplo 10), precatalizador X-Phos de 2.a generación (59,0 mg, 0,08 mmol) y fosfato de potasio dibásico (392 mg, 2,25 mmol) en 1,4-dioxano (4 ml) y agua (0,8 ml) y se agitó a 50 °C durante 5 h. La mezcla de reacción se enfrió a t.a. y después se purificó mediante cromatografía de intercambio iónico utilizando una columna SCX-2. El producto deseado se eluyó de la columna utilizando NH3 1 M en MeOH, y las fracciones puras se concentraron a presión reducida. El producto en bruto resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de EtOAc del 0 al 100 % en heptano. Las fracciones puras se evaporaron a sequedad, obteniéndose ((1 R,3S)-3-((5-cloro-4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de tere-butilo (188 mg, 51,3 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (400 MHz, DMSO-de, 23 °C) 1,25 (12H, d), 1,37 (7H, s), 1,74 (3H, s), 1,87 (1H, d), 2,52 - 2,62 (1H, m), 2,88 (2H, s), 3,18 - 3,29 (1H, m), 3,93 (2H, s), 6,80 (1H, d), 7,99 (1H, s), 8,24 (1H, s), 8,32 - 8,35 (1H, m), 10,56 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 488.
R)-3-am¡no-M-(5-cloro-4-(5.5-d¡met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolori.2-blp¡razol-3-¡l)p¡rid¡n-2-
Figure imgf000065_0002
Se disolvió ((1 R,3S)-3-((5-cloro-4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de tere-butilo ( 1 8 6 mg, 0,380 mmol) en HCl en dioxano (4 M; 0,810 ml, 3,24 mmol) y MeOH (5 ml) y se agitó a t.a. durante 18 h. La mezcla de reacción se purificó mediante cromatografía de intercambio iónico usando una columna SCX-2. El producto deseado se eluyó de la columna utilizando NH3 1 M en MeOH, y las fracciones puras se evaporaron a sequedad, obteniéndose (1S,3R)-3-amino-N-(5-cloro-4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (114 mg, 77 %) en forma de un sólido de color blanco que se usó directamente en la etapa siguiente. m/z: ES+ [M+H]+ 388.
Ejemplo______ 15______ nS.3R)-3-acetam¡do-M-(5-cloro-4-(4.5.6.7-tetrah¡drop¡razolori.5-a1p¡r¡m¡d¡n-3-¡l)p¡rid¡n-2-
Figure imgf000065_0003
Se añadió gota a gota anhídrido acético (0,021 ml, 0,22 mmol) a (1S,3R)-3-amino-N-(5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirimidin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (0,066 g, 0,18 mmol), 4-dimetilaminopiridina (1,141 mg, 9.34 ^mol) y trietilamina (0,081 ml, 0,58 mmol) en DCM (1 ml) a t.a. en atmósfera de nitrógeno. La solución resultante se agitó a t.a. durante 2 h antes de inactivarla con NH4Cl acuoso saturado (10 ml). La mezcla resultante se extrajo con DCM (2 * 10 ml). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El sólido de color blanco resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de EtOAc del 0 al 100 % en heptano. Las fracciones se evaporaron a sequedad, obteniéndose producto semipuro que se purificó adicionalmente mediante HPLC preparativa (columna Waters XBridge Prep C18 OBD, 5 ^m de sílice, 30 mm de diámetro, 100 mm de longitud) utilizando mezclas decrecientemente polares de agua (que contiene NH3 al 1 %) y MeCN como eluyentes. Las fracciones que contenían el compuesto deseado se evaporaron a sequedad, obteniéndose (1 S,3R)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirimidin-3-il)piridin-2 il)ciclohexanocarboxamida (9,80 mg, 12,6 %). 1H RMN (400 MHz, CDCla, 30 °C) 1,13 (1H, dd), 1,31 - 1,52 (4H, m), 1,87 - 1,95 (2H, m), 1,96 (4H, s), 2,20 (3H, dd), 2,39 - 2,5 (1H, m), 3,39 - 3,45 (2H, m), 4,16 (2H, t), 4,81 (1H, s), 5,49 (1H, d), 7,79 (1H, s), 8,14 (1H, s), 8,19 (1H, s), 8,30 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 417.
Los procedimientos para preparar el material de partida (1S,3R)-3-amino-W-(5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirimidin-3-il)piridin-2-il)cidohexanocarboxamida se describen a continuación:
Preparación de 3-vodo-4.5.6.7-tetrah¡drop¡razolori.5-alp¡rim¡d¡na
Figure imgf000066_0001
Se añadió W-yodosuccinimida (0,581 g, 2,58 mmol) a 4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirimidina (0,265 g, 2,15 mmol) en acetonitrilo (5 ml) a t.a. en atmósfera de nitrógeno. La solución resultante se agitó a t.a. durante 1 h antes de añadir agua (20 ml). Se continuó agitando durante 1,5 h, y después se extrajo la mezcla de reacción con MTBE (3 * 20 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron secuencialmente con NaOH acuoso 2 M (20 ml), solución de Na2S2O3 (20 ml, 10 % p/v), y cloruro de sodio acuoso saturado (20 ml) antes de secarla sobre MgSO4, filtrarla y concentrarla a presión reducida. El producto en bruto resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de EtOAc del 0 al 100 % en heptano. Las fracciones puras se evaporaron a sequedad, obteniéndose 3-yodo-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirimidina (0,155 g, 28,9 %) en forma de un sólido cristalino de color blanco. 1H RMN (400 MHz, CDCla, 30 °C) 2,16 (2H, c), 3,32 - 3,44 (2H, m), 3,98 (1H, s), 4,12 (2H, t), 7,24 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 250.
Preparación__________ de__________ ((1R.3S)-3-((5-cloro-4-(4.5.6.7-tetrah¡drop¡razolon .5-alp¡r¡m¡d¡n-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)carbamo¡l)c¡clohex¡l)carbamato de tere-butilo
Figure imgf000066_0002
Se disolvieron 3-yodo-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirimidina (0,150 g, 0,600 mmol) y 2-isopropoxi-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (0,184 ml, 0,9 mmol) en THF (4 ml) a 4 °C. Después se añadió gota a gota complejo de cloruro de isopropilmagnesio y cloruro de litio en THF (1,3 M; 2,78 ml, 3,61 mmol). La mezcla resultante se agitó a 4 °C durante 16 h, después se añadieron complejo de cloruro de isopropilmagnesio y cloruro de litio en THF (1,3 M; 2,78 ml, 3,61 mmol) y 2-isopropoxi-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (0,184 ml, 0,90 mmol). La reacción se agitó en estas condiciones durante 1 h y después se concentró a presión reducida. El residuo resultante se redisolvió en EtOAc (20 ml) y se lavó secuencialmente con NH4Cl acuoso saturado (25 ml), agua (20 ml), y cloruro de sodio saturado (20 ml). Las capas acuosas combinadas se lavaron con DCM (2 * 20 ml). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron a presión reducida, obteniéndose 3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirimidina en bruto, que se añadió a ((1R,3S)-3-((5-cloro-4-yodopiridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de tere-butilo (0,160 g, 0,33 mmol; preparado como en el ejemplo 10), precatalizador X-Phos de 2.a generación (0,026 g, 0,03 mmol) y fosfato de potasio tribásico (0,175 g, 1,00 mmol) disuelto en 1,4-dioxano (4 ml) y agua (0,8 ml) a 50 °C. La mezcla resultante se agitó a 50 °C durante 2 h y después a 80 °C durante 16 h. La mezcla de reacción se concentró a presión reducida y el residuo resultante se redisolvió en DCM (20 ml) y se lavó con agua (20 ml). La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró a presión reducida, obteniéndose el producto en bruto, que se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de EtOAc del 0 al 30 % en heptano. Las fracciones puras se evaporaron a sequedad, obteniéndose ((1R,3S)-3-((5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirimidin-3-il)piridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de tere-butilo (0,082 g, 52 %) en forma de una goma de color amarillo. 1H RMN (400 MHz, CDCb, 30 °C) 1,44 (12H, s), 1,82 - 2,46 (8H, m), 3,27 - 3,36 (3H, m), 4,12 (3H, t), 5,33 (1H, d), 7,80 (1H, s), 8,13 (1H, s), 8,19 (1H, s), 8,20 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 475.
, - - - - - - - , , , - , - - -¡l)p¡rid¡n-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da
Figure imgf000067_0001
Se disolvieron ((1 R,3S)-3-((5-doro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirimidin-3-il)piridin-2-il)carbamoil)cidohexil)carbamato de tere-butilo (0,086 g, 0,18 mmol) y HCl en dioxano (4 M; 0,362 ml, 1,45 mmol) en metanol (2 ml) a t.a. en atmósfera de aire. La solución resultante se agitó a t.a. durante 3 h antes de concentrarse a presión reducida. El material resultante ( 6 6 mg) se usó directamente en la etapa siguiente sin purificación adicional. m/z: ES+ [M+H]+ 375.
Figure imgf000067_0002
A una solución en agitación de (1S,3R)-3-amino-N-(4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (65 mg, 0,18 mmol), trietilamina (0,054 ml, 0,39 mmol) y N,N-dimetilpiridin-4-amina (1,123 mg, 9.19 ^mol) en DCM (5 ml) se le añadió anhídrido acético (0,021 ml, 0,22 mmol). La mezcla de reacción se agitó a t.a. durante 1 h. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía de intercambio iónico utilizando una columna SCX-2. El producto deseado se eluyó de la columna utilizando NH31 M en MeOH, y se evaporaron las fracciones, obteniéndose (1S,3R)-3-acetamido-N-(4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (60,0 mg, 82,0 %) en forma de un aceite incoloro que se cristalizó a partir de una mezcla de éter/heptano, obteniéndose un sólido de color blanco. 1H RMN (400 MHz, DMSO-de, 30 °C) 1,10 (1H, t), 1,29 (9H, s), 1,79 (6 H, s), 1,85 - 1,94 (1H, m), 2,57 - 2,66 (1H, m), 2,93 (2H, s), 3,58 (1H, dt), 3,90 (2H, s), 7,21 (1H, dd), 7,74 (1H, d), 7,96 (1H, s), 8,18 - 8,24 (2H, m), 10,32 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 396.
Los procedimientos para preparar el material de partida (1S,3R)-3-amino-N-(4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida se describen a continuación:
Preparación_______________ de_______________ (nR,3S)-3-((4-(4,4,5,5-tetramet¡l-1,3,2-d¡oxaborolan-2-¡l)p¡rid¡n-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de tere-butilo
Figure imgf000067_0003
Se cargaron ((1R,3S)-3-((4-bromopiridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de tere-butilo (1,50 g, 3,77 mmol; preparado como en el ejemplo 3), acetato de potasio (1,11 g, 11,3 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-octametil-2,2'-bi(1,3,2-dioxaborolano) (1,44 g, 5,65 mmol), y PdCh(dppf) (0,276 g, 0,380 mmol) en un matraz. Se añadió 1,4-dioxano (30 ml), y la mezcla se agitó a 90 °C en atmósfera de nitrógeno durante 3 h. Se dejó enfriar la mezcla y los sólidos se retiraron por filtración. Se añadieron acetato de etilo (100 ml) y agua (50 ml) y se separaron las capas. La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 5 0 ml), y las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron a presión reducida, obteniéndose el producto en bruto, ((1R,3S)-3-((4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)piridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de tere-butilo (2,76 g), en forma de un aceite de color pardo. Este aceite se usó directamente en la etapa siguiente sin purificación adicional. m/z: ES+ [M+H]+ 446.
Preparación___________ de___________ ((1R.3S)-3-((4-(5.5-d¡met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolori.2-b1p¡razol-3-¡l)p¡rid¡n-2-¡l)carbamoil)c¡clohex¡l)carbamato de tere-butilo
Figure imgf000068_0001
Se añadió didoro[1,1'-b¡s(d¡-f-but¡lfosfino)ferroceno]paladio(II) (45,5 mg, 0,07 mmol) a una solución desgasificada de ((1 R,3S)-3-((4-(4,4,5,5-tetrametil-1 ^^-dioxaborolan^-iOpiridin^-iOcarbamoiOciclohexiOcarbamato de ferc-butilo (518 mg, 0,70 mmol), 3-bromo-5,5-d¡met¡l-5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[1,2-b]p¡razol (150 mg, 0,70 mmol; preparado como en el ejemplo 14) y fosfato de potasio tribásico (444 mg, 2,09 mmol) en 1,4-dioxano (5 ml) y agua (0,5 ml). La mezcla resultante se agitó a 90 °C durante 18 h y después se purificó mediante cromatografía de intercambio iónico utilizando una columna SCX-2. El producto deseado se eluyó de la columna utilizando NH3 1 M en MeOH, y las fracciones puras se concentraron a presión reducida, obteniéndose el producto en bruto como un aceite de color pardo. Este aceite se purificó mediante cromatografía ultrarrápida de sílice, gradiente de elución de EtOAc del 0 al 100 % en heptano. Las fracciones puras se evaporaron a sequedad, obteniéndose ((1R,3S)-3-((4-(5,5-d¡met¡l-5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[1,2-b]p¡razol-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-iOcarbamoiOciclohexiOcarbamato de ferc-butilo (100 mg, 31,6 %) en forma de un sólido de color blanco, m/z: ES+ [M+H]+ 454.
Preparación________de_______ (1S.3R)-3-am¡no-M-(4-(5.5-d¡met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolori.2-b1p¡razol-3-¡l)prid¡n-2-¡l)ciclohexanocarboxam¡da
Figure imgf000068_0002
Se disolvió ((1R,3S)-3-((4-(5,5-d¡met¡l-5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[1 ^-bprazol^-iOpiridin^-iOcarbamoiOciclohexiOcarbamato de ferc-butilo (93 mg, 0,21 mmol) en HCl en dioxano (4 M; 0,436 ml, 1,74 mmol) y MeOH (5 ml), y la mezcla de reacción se agitó a t.a. durante 18 h. Después, se purificó la mezcla de reacción mediante cromatografía de intercambio iónico, usando una columna SCX-2. El producto deseado se eluyó de la columna utilizando NH3 1 M en MeOH, y las fracciones se concentraron a presión reducida. El producto en bruto resultante se purificó adicionalmente mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución (amoniaco 7 N en metanol) del 0 al 10 % en DCM. Las fracciones puras se evaporaron a sequedad, obteniéndose (1S,3R)-3-am¡no-N-(4-(5,5-d¡met¡l-5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[1,2-b]p¡razol-3-iOpiridin^-iOciclohexanocarboxamida (6 8 , 0 mg, 94 %) en forma de un sólido de color blanco. m/z: Es [M+H]+ 354.
Ejemplo__________17:_________ (1 S.3R)-M-(4-(5.5-d¡metil-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolori ■2-b1p¡razol-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)-3-(1 -hidrox¡c¡cloprop
Figure imgf000068_0004
Figure imgf000068_0003
Se añadió HATU (108 mg, 0,28 mmol) a una solución de ácido 1-hidroxiciclopropanocarboxílico (35 mg, 0,34 mmol), (1 S ^R ^-am ino-N -^-^^-d im etil^^-d ih id ro^H -p irro loH ^-bprazol^-iOpiridin^-iOciclohexanocarboxamida ( 1 0 0 mg, 0,28 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 16), y trietilamina (0,12 ml, 0,85 mmol) en DMF (1 ml). La mezcla de reacción se calentó a 50 °C durante 4 h y después se enfrió a t.a. La mezcla de reacción se purificó directamente mediante HPLC preparativa (columna Waters xBridge Prep C18 OBD, 5 ^ de sílice, 19 mm de diámetro, 100 mm de longitud), utilizando mezclas decrecientemente polares de agua (que contenía NH3 al 1 %) y MeCN como eluyentes. Las fracciones que contenían el compuesto deseado se concentraron a presión reducida, obteniéndose (1S,3R)-N-(4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1 ^ -b pra zo l^ -iO p irid in ^ -il^ -O -hidroxiciclopropanocarboxamido^iclohexanocarboxamida (92 mg, 74 %) en forma de un sólido. 1H RMN (500 MHz, DMSO-de, 30 °C) 0,74 (2H, m), 0,85 - 1,01 (2H, m), 1,15 - 1,27 (9H, m), 1,44 (1H, c), 1,61 - 1,77 (3H, m), 1,79 - 1,87 (1H, a. d), 2,52 - 2,59 (1H, m), 2,86 (2H, s), 3,54 - 3,63 (1H, m), 3,83 (2H, s), 6,10 (1H, s), 7,12 - 7,16 (1H, m), 7,57 (1H, d), 7,90 (1H, s), 8,13 - 8,16 (2H, m), 10,27 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 438.
Ejemplo___________ 18___________ M-(nR.3S)-3-((4-(5.5-d¡met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolori.2-blp¡razol-3-¡l)p¡rid¡n-2-¡l)carbamo¡l)c¡clohex¡l)oxetano-3-carboxam¡da
Figure imgf000069_0001
Se añadió HATU (77 mg, 0,20 mmol) a una solución de ácido oxetano-3-carboxílico (25 mg, 0,24 mmol), (1S,3R)-3-amino-N-(4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (72 mg, 0,20 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 16), y trietilamina (0,085 ml, 0,61 mmol) en DMF (1 ml). La mezcla se agitó a t.a. durante 4 h y después se purificó directamente mediante Hp LC preparativa (columna Waters XBridge Prep C18 OBD, 5 ^ de sílice, 19 mm de diámetro, 100 mm de longitud), utilizando mezclas decrecientemente polares de agua (que contenía NH3 al 1 %) y MeCN como eluyentes. Las fracciones que contenían el compuesto deseado se concentraron a presión reducida, obteniéndose N-((1 R,3S)-3-((4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)oxetano-3-carboxamida (17 mg, 19 %) en forma de un sólido. 1H RMN (400 m Hz , DMSO-d6, 30 °C) 1,06 - 1,17 (1H, m), 1,26 - 1,39 (9H, m), 1,77 - 1,86 (3H, m), 1,91 - 1,94 (1H, a d), 2,57 - 2,7 (1H, m), 2,93 (2H, s), 3,54 -3,76 (2H, m), 3,90 (2H, s), 4,4 - 4,71 (4H, m), 7,21 (1H, dd), 7,82 (1H, d), 7,96 (1H, s), 8,21 - 8,24 (2H, m), 10,33 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 438.
Ejemplo________ 19________M-(nR.3S)-3-((5-cloro-4-(5.5-d¡met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolori.2-blp¡razol-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)carbamo¡l)c¡clohex¡l)oxetano-3-carboxam¡da
Figure imgf000069_0002
Se añadió HATU (118 mg, 0,31 mmol) a una solución de ácido oxetano-3-carboxílico (32 mg, 0,31 mmol), (1S,3R)-3-amino-N-(5-cloro-4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (100 mg, 0,26 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 14), y trietilamina (0,11 ml, 0,77 mmol) en DMA (2 ml). La mezcla se agitó a t.a. durante 16 h antes de inactivarla con agua (20 ml). Después, la mezcla se extrajo con DCM (50 ml), y la capa orgánica se lavó cloruro de sodio acuoso saturado (50 ml) antes de hacerle pasar a través de un cartucho de separación de fases. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante HPLC preparativa (columna Waters XBridge Prep C18 o Bd , 5 ^ de sílice, 30 mm de diámetro, 100 mm de longitud), utilizando mezclas decrecientemente polares de agua (que contenía NH3 al 1 %) y MeCN como eluyentes. Las fracciones que contenían el compuesto deseado se concentraron a presión reducida, obteniéndose N-((1R,3S)-3-((5-cloro-4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)oxetano-3-carboxamida (39 mg, 32 %) en forma de un sólido. 1H RMN (500 m Hz , DMSO-d6, 30 °C) 1,06 - 1,14 (1H, m), 1,62 - 1,75 (9H, m), 1,72 - 1,81 (3H, m), 1,92 (1H, a. d), 2,59 - 2,7 (1H, m), 2,90 (2H, s), 3,56 - 3,73 (2H, m), 3,95 (2H, s), 4,53 - 4,66 (4H, m), 7,80 (1H, d), 8,00 (1H, s), 8,25 (1H, s), 8,35 (1H, s), 10,56 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 472.
Ejemplo 20: nS.3R)-M-(5-cloro-4-(5.5-d¡met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolori.2-b1p¡razol-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)-3-((S)-2-h¡drox¡propanam¡do)c¡clohexanocarboxam¡da
Se añadió HATU (78 mg, 0,21 mmol) a una solución de ácido (S)-2-hidroxipropanoico (19 mg, 0,21 mmol), (1S,3R)-3-amino-N-(5-cloro-4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (80 mg, 0,21 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 14), y trietilamina (0,086 ml, 0,62 mmol) en DMF (1 ml). La mezcla se agitó a t.a. durante 1 h y después se purificó directamente mediante HPLC preparativa (columna Waters XBridge Prep C18 OBD, 5 ^ de sílice, 19 mm de diámetro, 100 mm de longitud), utilizando mezclas decrecientemente polares de agua (que contenía NH3 al 1 %) y MeCN como eluyentes. Las fracciones que contenían el compuesto deseado se concentraron a presión reducida, obteniéndose (1S,3R)-N-(5-cloro-4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)-3-((S)-2 -hidroxipropanamido)ciclohexanocarboxamida (56 mg, 59 %) en forma de un sólido. 1H r Mn (300 MHz, DMSO-CÍ6, 27 °C) 1,14 - 1,21 (3H, m), 1,23 - 1,54(10H, m), 1,66 - 1,91 (4H, m), 2,56 - 2,70 (1H, m), 2,90 (2H, s), 3,53 - 3,72 (1H, m), 3,87 - 3,97 (3H, m), 5,37 (1H, d), 7,49 (1H, d), 8,00 (1H, s), 8,25 (1H, s), 8,35 (1H, s), 10,55 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 460.
Ejemplo______ 21 ______ (1S.3R)-M-(5-cloro-4-(5.5-d¡met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolori.2-b1p¡razol-3-¡l)p¡rid¡n-2-¡l)-3-(1-h¡drox¡c¡clopropanocarboxam¡do)c¡clohexanocarboxam¡da
Figure imgf000070_0001
Se añadió HATU (78 mg, 0,21 mmol) a una solución de ácido 1-hidroxiciclopropanocarboxílico (25 mg, 0,25 mmol), (1S,3R)-3-amino-N-(5-cloro-4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (80 mg, 0,21 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 14), y trietilamina (0,086 ml, 0,62 mmol) en DMF (1 ml). La mezcla se calentó a 50 °C durante 3 h y después se enfrió a t.a. La mezcla de reacción se purificó directamente mediante HPLC preparativa (columna Waters XBridge Prep C18 OBD, 5 ^ de sílice, 30 mm de diámetro, 100 mm de longitud), utilizando mezclas decrecientemente polares de agua (que contenía NH3 al 1 %) y MeCN como eluyentes. Las fracciones que contenían el compuesto deseado se concentraron a presión reducida, obteniéndose (1S,3R)-N-(5-cloro-4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)-3-(1 -hidroxiciclopropanocarboxamido)ciclohexanocarboxamida (25 mg, 26 %) en forma de un sólido. 1H RMN (500 MHz, DMSO-de, 30 °C) 0,72 - 0,85 (2H, m), 0,94 - 1,08 (2H, m), 1,23 - 1,49 (9H, m), 1,47 - 1,58 (1H, m), 1,67 - 1,84 (3H, m), 1,87 (1H, a. d), 2,57 - 2,66 (1H, m), 2,90 (2H, s), 3,60 - 3,71 (1H, m), 3,95 (2H, s), 6,16 (1H, s), 7,62 (1H, d), 8,01 (1H, s), 8,26 (1H, s), 8,35 (1H, s), 10,55 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 472.
Ejemplo 22: nS.3R)-3-acetam¡do-M-(5-cloro-4-(6.6-d¡met¡l-6.7-d¡h¡dro-5H-p¡rrolori.2-al¡m¡dazol-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da
Figure imgf000070_0002
Se suspendieron (1S,3R)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-yodopiridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (800 mg, 1,90 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 12), 6,6-dimetil-6,7-dihidro-5H-pirrolo[1,2-a]imidazol (825 mg, 5,69 mmol), acetato de paladio (171 mg, 0,76 mmol) y acetato de potasio (372 mg, 3,79 mmol) en d Ma (15 ml) y se sellaron en un tubo de microondas. El tubo se desgasificó y se purgó con nitrógeno (3x). Después, la reacción se sometió a condiciones de microondas (150 °C, 16 h) y se enfrió a t.a. La mezcla de reacción se purificó mediante HPLC preparativa (columna Waters XBridge Prep C18 OBD, 5 ^ de sílice, 30 mm de diámetro, 100 mm de longitud), utilizando mezclas decrecientemente polares de agua (que contenía NH3 al 1 %) y MeCN como eluyentes. Las fracciones que contenían el compuesto deseado se concentraron a presión reducida. El sólido de color pardo claro resultante se recristalizó utilizando EtOAc/heptano y se secó al vacío, obteniéndose (1S,3R)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-(6,6-dimetil-6,7-dihidro-5H-pirrolo[1,2-a]imidazol-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (180 mg, 22 %) en forma de un sólido de color blanco. El filtrado se concentró a presión reducida, obteniéndose un segundo lote de (1S,3R)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-(6,6-dimetil-6,7-dihidro-5H-pirrolo[1,2-a]imidazol-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (118 mg, 14 %). 1H r Mn (500 MHz, DMSO-CÍ6, 30 °C) 1,03 - 1,16 (1H, m), 1,19 - 1,41 (9H, m), 1,72 - 1,81 (6 H, m), 1,91 (1H, a. d), 2,57 - 2,68 (1H, m), 2,71 (2H, s), 3,50 - 3,62 (1H, m), 3,91 (2H, s), 7,51 (1H, s), 7,75 (1H, d), 8,28 (1H, s), 8,42 (1H, s), 10,66 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 430.
Preparaci n de 4.4-dimet¡lp¡rrol¡d¡n-2-t¡ona
Figure imgf000071_0001
Se añadió reactivo de Lawesson (9,83 g, 24,30 mmol) a una solución en agitación de 4,4-dimetilpirrolidin-2-ona (5,0 g, 44,19 mmol) en tolueno (100 ml). La mezcla resultante se calentó en condiciones de reflujo en atmósfera de nitrógeno durante 4,5 h. Después, la mezcla se enfrió a t.a. y se mantuvo en estas condiciones durante 18 h antes de concentrarla a presión reducida, obteniéndose un sólido de color amarillo. El sólido se disolvió en DCM, se añadió sílice y se filtró la mezcla. El filtrado se concentró a presión reducida para proporcionar un aceite de color amarillo. Este aceite se purificó mediante cromatografía ultrarrápida de sílice, eluyendo con DCM, obteniéndose 4,4-dimetilpirrolidin-2-tiona (2,8 g, 48 %) en forma de un sólido cristalino incoloro. Las fracciones impuras se concentraron a presión reducida, obteniéndose un segundo lote de 4,4-dimetilpirrolidin-2-tiona en forma de cristales de color crema/amarillo pálido (3,1 g, 55 %). A pesar de una pureza ligeramente inferior, este segundo lote de material también era adecuado para su uso en las etapas posteriores.
1H RMN (400 MHz, CDCls, 30 °C) 1,19 (6H, s), 2,70 (2H, s), 3,36 (2H, s), 7,75 (1H, s a).
Preparación de vodhídrato de 3.3-d¡met¡l-5-(met¡lt¡o)-3.4-d¡h¡dro-2H-p¡rrol
Figure imgf000071_0002
Se añadió yodometano en MTBE (2 M; 42,7 ml, 85,4 mmol) a una solución en agitación de 4,4-dimetilpirrolidin-2-tiona (2,76 g, 21,3 mmol) en iPrOH (45 ml) a t.a. Con el tiempo se formó un precipitado de color blanco. La reacción se agitó a t.a. durante 18 h y después se filtró. El sólido recogido se lavó con Et2O y después se secó, obteniéndose 3,3-dimetil-5-(metiltio)-3,4-dihidro-2H-pirrol como la sal de yodhidrato (4,3 g, 75 %). Este material se llevó a la siguiente etapa sin purificación adicional. 1H RMN (500 MHz, DMSO-da, 27 °C) 1,17 (6H, s), 2,74 (3H, s), 3,10 (2H, s), 3,72 (2H, s), 12,3 (1H, s a).
Preparación de vodhídrato de M-(2.2-d¡metox¡et¡l)-3.3-d¡met¡l-3.4-d¡h¡dro-2H-p¡rrol-5-am¡na
Figure imgf000071_0003
Se añadió 2,2-dimetoxietanamina (1,82 ml, 16,7 mmol) a una suspensión en agitación de yodhidrato de 3,3-dimetil-5-(metiltio)-3,4-dihidro-2H-pirrol (4,32 g, 15,9 mmol) en etanol (40 ml) a t.a. La sal de yodhidrato se disolvió tras la adición de la amina. La mezcla resultante se calentó en condiciones de reflujo (utilizando un depurador de lejía) durante 4,5 h y, luego, se retiró del calor. Después de otras 18 h, la mezcla de reacción se concentró a presión reducida, obteniéndose yodhidrato de N-(2,2-dimetoxietil)-3,3-dimetil-3,4-dihidro-2H-pirrol-5-amina en bruto (5,35 g, 102 %) en forma de un sólido cristalino incoloro. 1H RMN (400 MHz, DMSO-da, 30 °C) 1,12 (6H, s), 2,58 - 2,7 (2H, m), 3,34 (8H, s), 3,37 (2H, d), 4,51 (1H, m), 9,35 (2H, s a).
Preparación de 6.6-d¡met¡l-6.7-d¡hidro-5H-p¡rrolori.2-a1¡m¡dazol
Figure imgf000071_0004
Se añadió ácido clorhídrico (4 M; 5 ml, 20 mmol) a una solución en agitación de yodhidrato de N-(2,2-dimetoxietil)-3,3-dimetil-3,4-dihidro-2H-pirrol-5-amina (5,35 g, 16,3 mmol) en 1,4-dioxano (50 ml) a t.a. La mezcla resultante se calentó a 90 °C durante 3 h. Después, la mezcla se enfrió a t.a. y se agitó en estas condiciones durante 2,5 días, antes de concentrarla a presión reducida, obteniéndose un alquitrán de color oscuro. Esta mezcla se disolvió en DCM y se diluyó con Et2O. Se añadió amoniaco acuoso (28-30 %; 2,8 ml) a la mezcla en agitación. Se separaron las capas, y la capa acuosa se secó sobre MgSO4 , se filtró y se concentró a presión reducida, obteniéndose 6,6-dimetil-6,7-dihidro-5H-pirrolo[1,2-a]imidazol (2,32 g, l0o %) en forma de un aceite de color pardo. 1H RMN (400 MHz, CDCI3 , 21 °C) 1,28 (6 H, s), 2,70 (2H, s), 3,69 (2H, s), 6,84 (1H, d), 7,03 (1H, d).
Ejemplo______ 23 ______(R)-M-(nR.3S)-3-((5-cloro-4-(5.5-d¡met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolori.2-blp¡razol-3-¡l)p¡rid¡n-2-¡l)carbamo¡l)c¡clohex¡l)tetrah¡drofuran-3-carboxam¡da
Figure imgf000072_0001
Se agitaron juntos ácido (R)-tetrahidrofurano-3-carboxílico (0,036 g, 0,31 mmol), HATU (0,118 g, 0,31 mmol) y trietilamina (0,11 ml, 0,77 mmol) en DMf (2 ml) en atmósfera de nitrógeno durante 20 minutos. Después, se añadió (1S,3R)-3-amino-Ñ-(5-cloro-4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (0,100 g, 0,26 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 14 usando 5,5-dimetil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol preparado como se describe más adelante) en DMF (1 ml), y la mezcla se agitó durante otros 30 minutos. La reacción se concentró a presión reducida y la mezcla se purificó mediante cromatografía ultrarrápida C18, gradiente de elución de MeCN del 20 al 60 % en agua que contenía NH4OH acuoso al 1 %. Las fracciones puras se concentraron a presión reducida, obteniéndose (R)-N-((1R,3S)-3-((5-cloro-4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)tetrahidrofuran-3-carboxamida (0,113 g, 90 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (400 MHz, DMSO-de, 30 °C) 1,05 - 1,2 (1H, m), 1,20 - 1,38 (9H, sm), 1,79 (3H, a. d), 1, 8 6 - 2,03 (3H, m), 2,56 - 2,63 (1H, m), 2,81 - 2,91 (3H, m), 3,52 - 3,78 (4H, m), 3,83 (1H, t), 3,95 (2H, s), 7,83 (1H, d), 7,99 (1H, s), 8,25 (1H, s), 8,34 (1H, s), 10,53 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 486.
A continuación se describe un procedimiento alternativo usado para preparar 5,5-dimetil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol (ya descrito en el ejemplo 14, intermedios):
Preparación de 3-vodo-5.5-d¡met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolon .2-blp¡razol
Figure imgf000072_0002
Se añadió NIS (1,646 g, 7,32 mmol) en porciones a 5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol (0,906 g, 6,65 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 14) en acetonitrilo (40 ml) a t.a. en atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó a 23 °C durante 18 h. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (50 ml) y se lavó secuencialmente con agua (40 ml), tiosulfato de sodio acuoso (10 g en 30 ml), y cloruro de sodio acuoso saturado (20 ml). La capa orgánica se secó sobre MgSO4 , se filtró, y se concentró a presión reducida, obteniéndose el producto en bruto (1,59 g, 91 %) en forma de un aceite de color naranja. Este aceite se purificó mediante destilación a presión reducida (0.12 mbar), con recolección a una temperatura de cabeza de 140 °C. El destilado recogido de este modo proporcionó 3-yodo-5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol (1,38 g, 79 %) en forma de un líquido incoloro. Como alternativa, el yoduro se llevó al siguiente paso sin destilación. 1H RMN (400 MHz, CDCls, 30 °C) 1,30 (6 H, s), 2,63 (2H, s), 3,94 (2H, s), 7,47 (1H, s).
Preparación de 5.5-d¡met¡l-3-(4.4.5.5-tetramet¡l-1.3.2-d¡oxaborolan-2-¡l)-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolon .2-blpírazol
Figure imgf000072_0003
Se añadió gota a gota complejo de cloruro de isopropilmagnesio y cloruro de litio en THF (1,3 M; 1,69 ml, 2,20 mmol) a lo largo de 10 minutos a 3-yodo-5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol (0,444 g, 1,69 mmol) en THF (5 ml) a -78 °C en atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó a -78 °C durante 45 minutos. Después, se añadió gota a gota 2-isopropoxi-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (0,473 g, 2,54 mmol) a la mezcla de reacción, manteniendo la temperatura interna a -78 °C. Una vez se completó la adición, se dejó calentar la mezcla de reacción hasta t.a. durante 18 h. Después, se concentró la mezcla de reacción a presión reducida y se diluyó con EtOAc (40 ml). La mezcla resultante se lavó secuencialmente con cloruro de amonio acuoso saturado ( 2 0 ml), agua ( 2 0 ml), y cloruro de sodio acuoso saturado (20 ml). La capa orgánica se secó sobre MgSO4 , se filtró, y se concentró a presión reducida, obteniéndose 5,5-dimetil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol (0,41 g, 93 %) contaminado con ~13 % en moles de material de partida des-yodo basándose en el análisis de RMN como un sólido céreo. La trituración con heptano proporcionó 5,5-dimetil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol puro (0,24 g, 55 %) en forma de un sólido de color blanco.
Ejemplo______ 24______ (S)-M-((1R.3S)-3-((5-cloro-4-(5.5-d¡met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolori.2-blp¡razol-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)carbamo¡l)c¡clohex¡l)
Figure imgf000073_0003
Figure imgf000073_0001
Se agitó una solución de ácido (S)-tetrahidrofurano-3-carboxílico (0,036 g, 0,31 mmol), HATU (0,12 g, 0,31 mmol) y trietilamina (0,11 ml, 0,77 mmol) en DMF (2 ml) en atmósfera de nitrógeno durante 20 minutos. Después se añadió (1S,3R)-3-amino-N-(5-cloro-4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (0,10 g, 0,26 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 14 usando 5,5-dimetil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol preparado como se describe en el ejemplo 23) en DMF (1 ml), y la mezcla resultante se agitó en estas condiciones durante 30 minutos. La mezcla se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida C18, gradiente de elución de MeCN del 2 0 al 60 % en agua que contenía NH4OH al 1 %. Las fracciones puras se concentraron a presión reducida, obteniéndose (S)-N-((1R,3S)-3-((5-cloro-4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)tetrahidrofuran-3-carboxamida (0,10 g, 81 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (400 MHz, DMSO-de, 30 °C) 1,05 - 1,16 (1H, m), 1,21 -1,41 (9H, m), 1,72 - 1,83 (3H, m), 1,87 - 2,04 (3H, m), 2,57 - 2,66 (1H, m), 2,82 - 2,91 (3H, m), 3,54 - 3,77 (4H, m), 3,83 (1H, t), 3,95 (2H, s), 7,83 (1H, d), 7,99 (1H, s), 8,25 (1H, s), 8,35 (1H, s), 10,54 (1H, s). m/z: ES+ [M+H+] 486.
Ejemplo 25: (1 S.3R)-3-acetam¡do-M-(4-(5.5-d¡met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rroloH .2-blp¡razol-3-¡l)-5-fluorop¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da
Figure imgf000073_0002
Se añadieron tetraquis(trifenilfosfina)paladio(0) (0,13 g, 0,12 mmol) y Xantphos (0,13 g, 0,23 mmol) juntos en una porción a una mezcla desgasificada de ((1R,3S)-3-carbamoilciclohexil)carbamato de terc-butilo (0,670 g, 2,76 mmol), 3-(2-cloro-5-fluoropiridin-4-il)-5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol (0,61 g, 2,3 mmol), carbonato de cesio (1,88 g, 5,76 mmol), y 1,4-dioxano (26 ml). La mezcla de color amarillo claro resultante se mantuvo en condiciones de reflujo mediante inmersión en un baño de aceite que se había precalentado a 120 °C. Después de 20 h se enfrió la reacción, se diluyó con cloruro de sodio acuoso saturado al 50 %, y se extrajo con acetato de etilo (2x). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron a presión reducida, obteniéndose ((1R,3S)-3-((4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)-5-fluoropiridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de terc-butilo en bruto en forma de un sólido de color amarillo claro. Se añadieron ácido clorhídrico en dioxano (4 M; 10 ml, 40 mmol) y DCM (5 ml), lo que dio lugar a una solución de color naranja claro que rápidamente se volvió turbia y amarilla. Se valoró metanol (~3 ml) en la reacción hasta que la mezcla se volvió mayormente transparente. Tras 15 minutos, la mezcla naranja se concentró a presión reducida para obtener un sólido de color naranja. Se añadió piridina (3,7 ml, 46 mmol) a este sólido junto con DCM (19 ml). Se observó una ligera exotermia y se sumergió la reacción en un baño de agua. Después se añadió anhídrido acético (0,43 ml, 4,6 mmol) gota a gota. Tras otros 10 minutos, se añadieron otros 200 ^l de anhídrido acético. Después de otros 30 min, se añadieron otros 600 ^l de anhídrido y 6 ml de piridina. La reacción se mantuvo en estas condiciones durante otros 45 min y después se vertió en bicarbonato de sodio acuoso saturado y acetato de etilo. Se separaron las capas y la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo de color naranja resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de EtOAc del 50 al 100 % en hexano, seguido de metanol del 0 al 20 % en acetato de etilo, y las fracciones puras se concentraron a presión reducida, obteniéndose (1S,3R)-3-acetamido-N-(4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)-5-fluoropiridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (0,89 g, 94 %) en forma de una espuma sólida de color amarillo pálido.1H RMN (DMSO-cfe, 27 °C): 1,00 - 1,16 (1H, m), 1,22 - 1,40 (9H, m), 1,74 - 1,81 (6H, m), 1,83 - 1,94 (1H, m), 2,55 - 2,68 (1H, m), 2,93 (2H, s), 3,49 - 3,65 (1H, m), 3,94 (s, 2H), 7,75 (1H, d), 7,88 (1H, d), 8,28 (1H, d), 8,30 (1H, d), 10,46 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 414. Método 1: Se agitó una suspensión del ejemplo 25 (381 mg) en EtOAc a t.a. durante 18 h, después se filtró y se lavó con EtOAc frío, obteniéndose (1 S,3R)-3-acetamido-N-(4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)-5-fluoropiridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (149 mg) en forma de un sólido blanco cristalino conocido como el ejemplo 25 forma A. Método 2: Se recogieron aproximadamente 5 g del ejemplo 25 en hexanos:DCM:acetona 1:1:1 (~20 ml) y después se concentró a presión reducida, obteniéndose un gel ligeramente translúcido. Después se trató este gel con una pequeña cantidad del mismo disolvente (~5 ml) y se agitó vigorosamente durante 10 min hasta que se formó una mezcla homogénea y no había gel visible. Esta mezcla se filtró con un lavado de acetona al 30 % en hexano y el precipitado se secó al vacío a 50 °C, obteniéndose el ejemplo 25 forma A en forma de un sólido de color blanco.
Los cristales del ejemplo 25 (forma A) se analizaron mediante XRPD y los resultados se tabulan a continuación y se muestran en la figura 3. La XRPD del sólido confirma que el sólido contiene la forma A.
Los picos princi ales de la forma A del eem lo 25 se muestran en la tabla 2 a continuación:
Figure imgf000074_0002
Por consiguiente, se proporciona una forma cristalina, la forma B, que tiene un patrón de difracción de rayos X de polvo con picos específicos en aproximadamente 2-theta = 8,8, 10,1, 11,5, 18,9, 20,0, 20,5, 21,8, 22,8, 23,9 y 25,2°.
Los cristales obtenidos de acuerdo con los métodos 1 y 2 (forma A) se analizaron mediante técnicas térmicas. El análisis de DSC indicó que la forma A se funde con un punto de inicio a 194° y un pico a 197°. El TGA indicó que la forma A muestra una pérdida de masa de aproximadamente el 1,4 % tras calentarlo de 22 a 100 °C. En la figura 4 se muestra un termograma de DSC/TGA representativo.
Un método alternativo para producir (1S,3R)-3-acetamido-N-(4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)-5-fluoropiridin-2-il)ciclohexanocarboxamida se describe en
Ejemplo 86
Los procedimientos usados para preparar los materiales de partida ((1R,3S)-3-carbamoilciclohexil)carbamato de terc-butilo y 3-(2-cloro-5-fluoropiridin-4-il)-5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol se describen a continuación:
Preparación de 3-(2-cloro-5-fluorop¡r¡d¡n-4-¡l)-5.5-d¡met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolori.2-blp¡razol
Figure imgf000074_0001
Se disolvieron 2-cloro-5-fluoro-4-yodopiridina (1,00 g, 3,88 mmol), 5,5-dimetil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol (1,53 g, 5,83 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 23), precatalizador XPhos de 2.a generación (0,31 g, 0,39 mmol) y fosfato de potasio dibásico (2,03 g, 11,65 mmol) en dioxano desgasificado (10 ml) y agua (2 ml) a 21 °C. La mezcla de reacción se agitó a 80 °C durante 3 h, y después se enfrió la mezcla, se diluyó con EtOAc (30 ml), y se lavó con agua (10 ml). La capa orgánica se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de EtOAc del 0 al 50 % en heptano. Las fracciones puras se concentraron a presión reducida, obteniéndose 3-(2-cloro-5-fluoropiridin-4-il)-5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol (1,00 g, 97 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (500 MHz, CDCls, 27 °C) 1,36 (6 H, s), 2,95 (2H, d), 3,97 (2H, s), 7,31 (1H, d), 7,94 (1H, d), 8,20 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ 266.
Preparación de 3-((terc-butox¡carbon¡l)amino)c¡clohexanocarbox¡lato de (cis)-bencilo
Figure imgf000075_0001
Se añadió bromuro de bencilo (12,4 ml, 104 mmol) gota a gota en forma de una solución en DMF (10 ml) a una mezcla desgasificada de ácido cis-3-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclohexanocarboxílico (19,5 g, 80,0 mmol, preparado de acuerdo con los intermedios del ejemplo 2), carbonato de cesio (33,9 g, 104 mmol), y DMF (80 ml) a 0 °C. Se retiró el baño de hielo y la reacción se agitó en estas condiciones durante 18 h. La mezcla se diluyó posteriormente con un volumen igual de acetato de etilo y se filtró con un lavado de acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con cloruro de sodio acuoso saturado al 50 % (3x) y después cloruro de sodio acuoso saturado. Después, la capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró, y se concentró a presión reducida. El aceite de color amarillo claro resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida de gel de sílice, gradiente de elución de acetato de etilo del 0 al 30 % en hexanos, obteniéndose 3-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclohexanocarboxilato de cis-bencilo (25,4 g, 95 %) en forma de un aceite incoloro transparente que se solidificó en un sólido de color blanco al dejarlo reposar. 1H RMN (DMSO-de, 27 °C) 0,98 - 1,34 (4H, m), 1,38 (9H, s), 1,67 - 1,78 (2H, m), 1,84 (1H, d), 1,99 (1H, d), 2,35 - 2,49 (1H, m), 3,17 - 3,31 (1H, s), 5,09 (2H, s), 6,76 (1H, d), 7,30 - 7,42 (5H, m). m/z: ES+ [M+Na]+ 356.
exanocarbox¡lato de (1S.3R)-bencilo y 3-((terc-
Figure imgf000075_0004
)-bencilo
Figure imgf000075_0002
Se resolvió el 3-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclohexanocarboxilato de cis-bencilo (25,4 g, 76,2 mmol) en condiciones de SFC preparativa (columna: Lux Amylose-2, 5 ^m, 21,2 mm de diámetro, 250 mm de longitud, temperatura de la columna de 40 °C, caudal de 80 ml/min), eluyendo con isopropanol al 10 % en CO2 , obteniéndose 3-((tercbutoxicarbonil)amino)ciclohexanocarboxilato de (1 S,3R)-bencilo (11,5 g, 45 %) en forma de un sólido de color blanco y 3-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclohexanocarboxilato de (1R,3S)-bencilo (11,5 g, 45 %) en forma de un sólido de color blanco.
3-((terc-butox¡carbon¡l)am¡no)c¡clohexanocarbox¡lato de (1S.3R)-bencilo
1H RMN (DMSO- de, 27 °C) 0,96 - 1,34 (4H, m), 1,37 (9H, s), 1,68 - 1,88 (3H, m), 1,98 (1H, d), 2,37 - 2,48 (1H, m), 3,16 -3,32 (1H, m), 5,09 (2H, s), 6,59 - 6,84 (1H, m), 7,26 - 7,50 (5H, m). m/z: ES+ [M+Na]+ 356.
Rotación óptica:
Figure imgf000075_0003
3-((terc-butox¡carbon¡l)amino)c¡clohexanocarbox¡lato de (1 R,3S)-bencilo
1H RMN (DMSO-de, 27 °C) 0,95 - 1,34 (4H, m), 1,37 (9H, s), 1,68 - 1,78 (2H, m), 1,84 (1H, d), 1,98 (1H, d), 2,36 - 2,48 (1H, m), 3,17 - 3,34 (1H, m), 5,09 (2H, s), 6,76 (1H, d), 7,30 - 7,41 (5H, m). m/z: ES+ [M+Na]+ 356.
Rotación óptica:
Figure imgf000076_0002
Condiciones de SFC analítica:
Figure imgf000076_0003
Tiempo de retención:
0,66 min, 3-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclohexanocarboxilato de (1S,3R)-bencilo
0,96 min, 3-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclohexanocarboxilato de (1R,3S)-bencilo e.e.
>98 %, 3-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclohexanocarboxilato de (1S,3R)-bencilo
97,5 %, 3-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclohexanocarboxilato de (1R,3S)-bencilo
Un procedimiento alternativo para la preparación de ácido (1S,3R)-3-((tercbutoxicarboniham inolciclohexanocarboxílico (ya descrito en el ejemplo 2, intermedios) se describe a continuación:
Figure imgf000076_0001
Una mezcla desgasificada de 3-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclohexanocarboxilato de (1S,3R)-bencilo (11,5 g, 34,6 mmol), paladio sobre carbono (10 % en peso; 3,68 g, 34,5 mmol), y metanol (86 ml) se sometió a una atmósfera de hidrógeno (1 atm, globo). Tras 18 h, la mezcla se filtró con un lavado de metanol. El filtrado se concentró hasta obtener un aceite de color gris tenue ligeramente turbio. Este aceite se recogió en acetato de etilo, se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró a presión reducida. El sólido aceitoso de color blanco resultante se calentó al vacío hasta que cesó todo el burbujeo de la evaporación del disolvente. El enfriamiento a t.a. proporcionó ácido (1S,3R)-3-((tercbutoxicarbonil)amino)ciclohexanocarboxílico (8,4 g, 99 %) en forma de un sólido de color blanco (véase el ejemplo 2, intermedios, para su caracterización).
Rotación óptica:
Figure imgf000077_0002
Preparación de (nR.3S)-3-carbamoilciclohexil)carbamato de tere-butilo
Figure imgf000077_0001
Se añadió carbonil diimidazol (6,44 g, 39,74 mmol) a una solución de ácido (1S,3R)-3-((tercbutoxicarbonil)amino)ciclohexanocarboxílico (3,22 g, 13,3 mmol) en DMF (30 ml) a 40 °C. La mezcla resultante se agitó a 40 °C durante 4 h. Después, la mezcla de reacción se enfrió a 0 °C, y se añadió acetato de amonio (7,15 g, 92,7 mmol) en una porción con agitación vigorosa. A esto le siguió el desprendimiento del gas y la generación de una espuma. Se añadió una pequeña cantidad de (~2 ml) de DCM por los lados del matraz para desprender la espuma e impedir que alcanzase la abertura del matraz. Poco a poco esta espuma fue reabsorbida por la mezcla de reacción, que se dejó calentar a t.a. durante una noche. Tras un total de 18 h en estas condiciones, la mezcla de reacción se vertió en agua helada, y la mezcla resultante se agitó en estas condiciones durante 5 min antes de filtrarla con un lavado de agua. El precipitado resultante se secó al vacío a 80 °C durante 2 h antes de enfriarla a t.a. Después se secó al vacío durante 18 h, obteniéndose ((1R,3S)-3-carbamoilciclohexil)carbamato de terc-butilo (2,76 g, 86 %) en forma de un sólido blanco esponjoso. 1H RMN (DMSO-de, 27 °C) 0,99 - 1,31 (4H, m), 1,38 (9H, s), 1,58 - 1,85 (4H, m), 2,06 - 2,19 (1H, m), 3,14 -3,26 (1H, m), 6,63 (1H, s a), 6,73 (1H, d), 7,17 (1H, s a). m/z: ES+ [M+Na]+ 265.
Rotación óptica:
Figure imgf000077_0003
______ . . .
Figure imgf000078_0004
Figure imgf000078_0001
Se añadió fluoruro de tetrabutilamonio en THF (1 M; 0,154 ml, 0,15 mmol) a una solución en agitación de cis-3-((tercbutildimetilsilil)oxi)-N-(4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)cidobutanocarboxamida ( 6 8 mg, 0,15 mmol) en t Hf (3 ml) a t.a. en una atmósfera de nitrógeno. La mezcla de reacción se agitó en estas condiciones durante 2 h y después se purificó utilizando una columna SCX, eluyendo secuencialmente con DCM, MeOH y NH3 al 1 % en MeOH. Las fracciones del producto se concentraron a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante HPLC preparativa (columna Waters XBridge Prep C18 OBD, 5 ^ de sílice, 30 mm de diámetro, 100 mm de longitud), utilizando mezclas decrecientemente polares de agua (que contienen NH3 al 1 %) y MeCN como eluyentes, obteniéndose cis-N-(4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)-3-hidroxiciclobutanocarboxamida (43 mg, 85 %).
1H RMN (500 MHz, DMSO-de, 30 °C) 1,30 (6 H, s), 2,05 (2H, qd), 2,28 - 2,43 (2H, m), 2,71 - 2,85 (1H, m), 2,95 (2H, s), 3,91 (2H, s), 3,98 (1H, c), 5,13 (1H, d), 7,17 - 7,26 (1H, m), 7,98 (1H, s), 8,21 (1H, dd), 8,25 (1H, s), 10,30 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 327.
Los procedimientos utilizados para preparar el material de partida cis-3-((terc-butildimetilsilil)oxi)-N-(4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)ciclobutanocarboxamida se describen a continuación:
Preparación de c¡s-3-((ferc-but¡ld¡met¡ls¡l¡l)ox¡)-M-(4-(5.5-d¡met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolori.2-blp¡razol-3-¡l)p¡rid¡n-2-¡l)ciclobutanocarboxam¡da
Figure imgf000078_0002
Se suspendieron cis-N-(4-bromopiridin-2-il)-3-((terc-butildimetilsilil)oxi)ciclobutanocarboxamida (365 mg, 0,800 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 6), 5,5-dimetil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3-dioxolan-2-il)-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol (185 mg, 0,700 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 23), fosfato de potasio (446 mg, 2,10 mmol) y precatalizador XPhos de 2.a generación (55 mg, 0,070 mmol) en 1,4-dioxano (4 ml) y agua (0,80 ml) a t.a. Se desgasificó la mezcla resultante, se purgó con nitrógeno y después se calentó a 85 °C durante 18 h. La mezcla de reacción se enfrió a t.a. y se repartió entre EtOAc (50 ml) y agua (25 ml). Se separaron las capas y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 5 0 ml) y DCM (50 ml). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron a presión reducida. La goma de color naranja resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida de gel de sílice, eluyendo con EtOAc del 0 al 40 % en heptano. Las fracciones de producto se concentraron a presión reducida, obteniéndose cis-3-((terc-butildimetilsilil)oxi)-N-(4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)ciclobutanocarboxamida (68 mg, 22 %) en forma de un sólido cristalino incoloro. 1H RMN (400 MHz, CDCb, 22 °C) 0,06 (6H, s), 0,89 (9H, s), 1,36 (6H, s), 2,22 - 2,38 (2H, m), 2,49 - 2,67 (3H, m), 3,02 (2H, s), 3,93 (2H, s), 4,15 - 4,35 (1H, m), 7,11 (1H, dd), 7,82 (1H, s), 7,92 (1H, s), 8,17 (1H, d), 8,30 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 441.
Ejemplo_________ 27_________ c¡s-M-(5-cloro-4-(5.5-d¡met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolori.2-b1p¡razol-3-¡l)p¡rid¡n-2-¡l)-3-hidroxiciclobutanocarboxamida
Figure imgf000078_0003
Se añadió fluoruro de tetrabutilamonio en THF (1 M; 0,21 ml, 0,21 mmol) a una solución en agitación de cis-3-((tercbutildimetilsilil)oxi)-N-(5-cloro-4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)ciclobutanocarboxamida (101 mg, 0,210 mmol) en THF (3 ml) a t.a. en atmósfera de nitrógeno. La solución resultante se agitó en estas condiciones durante 18 h. La mezcla de reacción se purificó utilizando una columna SCX, eluyendo secuencialmente con DCM, MeOH y NH3 al 1 % en MeOH. Las fracciones del producto se concentraron a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante HPLC preparativa (columna Waters XBridge Prep C18 Ob D, 5 ^ de sílice, 30 mm de diámetro, 100 mm de longitud), utilizando mezclas decrecientemente polares de agua (que contenía NH3 al 1 %) y MeCN como eluyentes. Las fracciones de producto se concentraron a presión reducida, y el residuo resultante se purificó adicionalmente mediante HPLC preparativa (columna Waters SunFire, 5 ^ de sílice, 30 mm de diámetro, 100 mm de longitud), utilizando mezclas decrecientemente polares de agua (que contenía ácido fórmico al 0,1 %) y MeCN como eluyentes. Las fracciones que contenían el compuesto deseado se concentraron a presión reducida, obteniéndose cis-N-(5-cloro-4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)-3-hidroxiciclobutano carboxamida (35 mg, 45 %). 1H r Mn (500 MHz, DMSO-de, 30 °C) 1,29 (6H, s), 2,04 (2H, qd), 2,37 (2H, qd), 2,77 (1H, ddd), 2,92 (2H, s), 3,96 (2H, s), 3,96 - 4,02 (1H, m), 5,14 (1H, d), 8,02 (1H, s), 8,29 (1H, s), 8,34 (1H, d), 10,51 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 361.
Los procedimientos para preparar el material de partida cis-3-((terc-butildimetilsilil)oxi)-N-(5-cloro-4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)ciclobutanocarboxamida se describen a continuación.
Preparación de c¡s-3-((ferc-but¡ld¡met¡ls¡l¡l)ox¡)-M-(5-cloro-4-vodop¡r¡d¡n-2-il)c¡clobutanocarboxam¡da
Figure imgf000079_0001
Se añadió T3P en acetato de etilo (50 % en peso; 2,85 ml, 4,79 mmol) a una solución en agitación de 5-cloro-4-yodopiridin-2-amina (610 mg, 2,40 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 2), ácido cis-3-((terc-butildimetilsilil)oxi)ciclobutanocarboxílico (552 mg, 2,40 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 4) y piridina (0,78 ml, 9,6 mmol) en EtOAc (10 ml) a t.a. La solución resultante se agitó a t.a. durante 18 h. La reacción se inactivó mediante la adición de cloruro de amonio acuoso saturado (30 ml). Se separaron las capas y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (3 x 5 0 ml). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron a presión reducida, obteniéndose cis-3-((terc-butildimetilsilil)oxi)-N-(5-cloro-4-yodopiridin-2-il)ciclobutano carboxamida (1,07 g, 96 %) en forma de un sólido cristalino de color crema. 1H RMN (400 MHz, CDCb, 21 °C) 0,06 (6H, s), 0,89 (9H, s), 2,23 - 2,35 (2H, m), 2,47 - 2,64 (3H, m), 4,17 - 4,32 (1H, m), 7,95 (1H, s a), 8,18 (1H, s), 8,86 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 467.
Preparación de c¡s-3-((ferc-but¡ld¡met¡ls¡l¡l)ox¡)-N-(5-cloro-4-(5.5-d¡met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolon .2-blp¡razol-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clobutanocarboxam¡da
Figure imgf000079_0002
Se suspendieron cis-3-((terc-butildimetilsilil)oxi)-N-(5-cloro-4-yodopiridin-2-il)ciclobutanocarboxamida (461 mg, 0,840 mmol), 5,5-dimetil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol (200 mg, 0,76 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 23), fosfato de potasio (486 mg, 2,29 mmol) y precatalizador XPhos de 2.a generación (60,0 mg, 0,08 mmol) en 1,4-dioxano y agua a t.a. Se desgasificó la mezcla resultante, se purgó con nitrógeno y se calentó a 85 °C durante una noche. La reacción se enfrió a t.a. y se repartió entre EtOAc (50 ml) y agua (25 ml). Se separaron las capas y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (3 x 50 ml). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron a presión reducida. La goma de color naranja resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida de gel de sílice, eluyendo con EtOAc del 0 al 40 % en heptano. Las fracciones de producto se evaporaron a sequedad, obteniéndose cis-3-((terc-butildimetilsilil)oxi)-N-(5-cloro-4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)ciclobutanocarboxamida (101 mg, 28 %) en forma de un sólido cristalino incoloro.
1H RMN (400 MHz, CDCh, 21 °C) 0,06 (6H, s), 0,89 (9H, s), 1,35 (6H, s), 2,24 - 2,45 (2H, m), 2,5 - 2,74 (3H, m), 2,98 (2H, s), 3,96 (2H, s), 4,18 - 4,24 (1H, m), 7,77 (1H, s), 8,14 (1H, s), 8,23 (1H, s), 8,29 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 475.
Figure imgf000080_0001
Se evacuó un matraz cargado con (1S,3R)-3-acetamido-N-(6-doropinmidin-4-il)ddohexanocarboxamida (100 mg, 0,34 mmol), 3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridina (84 mg, 0,34 mmol), didoro[1,1'-b¡s(d¡-fe/'cbutilfosfino)ferroceno]palad¡o(II) (11 mg, 0,020 mmol) y fosfato de potasio (215 mg, 1,01 mmol) y se volvió a rellenar con nitrógeno (3x). Se añadieron 1,4-dioxano desgasificado (1 ml) seguido de agua (0,2 ml), y la mezcla se calentó a 90 °C y se mantuvo en estas condiciones durante 18 h. Después, la reacción se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se repartió entre bicarbonato de sodio acuoso saturado (20 ml) y acetato de etilo (20 ml). Se separaron las capas, y la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x 20 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con cloruro de sodio acuoso saturado (20 ml), se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía en columna sobre alúmina básica, gradiente de elución de (MeOH al 10 % en EtOAc) del 0 al 100 % en heptano, obteniéndose (1S,3R)-3-acetamido-N-(6-(4,5,6,7-tetrahidropirazolon^-apridin^-iOpirimidin^-iOciclohexanocarboxamida (55 mg, 43 %) en forma de un sólido bronceado.
1H RMN (400 MHz, DMSO-de, 30 °C) 1,01 - 1,38 (4H, m), 1,76 - 2,02 (11H, m), 2,62 - 2,69 (1H, m), 3,10 (2H, t), 3,52 -3,61 (1H, m), 4,13 (2H, t), 7,74 (1H, d), 7,96 (1H, s), 8,21 (1H, d), 8,75 (1H, d), 10,72 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 383. Los procedimientos utilizados para preparar el material de partida (1S,3R)-3-acetam¡do-N-(6-dorop¡r¡m¡d¡n-4-il)ciclohexanocarboxamida se describen a continuación:
Preparación de ((1R.3S)-3-((6-clorop¡r¡m¡d¡n-4-¡l)carbamoil)c¡clohex¡l)carbamato de tere-butilo
Figure imgf000080_0002
Se añadió 1-doro-W,W,2-tr¡met¡lpropen¡lam¡na (3,26 ml, 24,7 mmol) a una solución de ácido (1S,3R)-3-((te/cbutoxicarboniOamino^iclohexanocarboxílico (5,00 g, 20,6 mmol; preparado como en el ejemplo 2) en DCM (50 ml) y la mezcla resultante se agitó durante 90 min a t.a. Después se añadieron 6-dorop¡r¡m¡d¡n-4-am¡na (2,66 g, 20,6 mmol) y piridina (2,0 ml, 25 mmol), y la mezcla resultante se agitó en estas condiciones durante 18 h. La reacción se inactivó con bicarbonato de sodio acuoso saturado (50 ml), y se separaron las capas. La capa acuosa se extrajo con DCM (2 x 50 ml), y las capas orgánicas combinadas se lavaron con cloruro de sodio acuoso saturado y se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y se concentraron a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, eluyendo con (metanol al 10 % en acetato de etilo) del 0 al 100 % en heptano. Se combinaron las fracciones de producto y se concentró a presión reducida, obteniéndose ((1R,3S)-3-((6-dorop¡r¡m¡d¡n-4-iOcarbamoiOciclohexiOcarbamato de te/c-butilo (1,0 g, 14 %) en forma de un sólido de color blanco. m/z: ES- [M-H]- 353. Preparación de díclorhídrato de (1S.3Rl-3-am¡no-M-(6-clorop¡r¡m¡d¡n-4-¡Hc¡clohexanocarboxam¡da
Figure imgf000080_0003
Se añadió ácido clorhídrico en dioxano (4 M; 0,655 ml, 21,6 mmol) a una solución de ((1R,3S)-3-((6-dorop¡r¡m¡d¡n-4-iOcarbamoiOciclohexiOcarbamato de te/c-butilo (900 mg, 2,54 mmol) en metanol (5 ml), y la mezcla resultante se agitó durante una noche a t.a. Después se diluyó la mezcla con tolueno (10 ml) y se concentró a presión reducida, obteniéndose diclorhidrato de (1S,3R)-3-am¡no-W-(6-dorop¡r¡m¡d¡n-4-¡l)ddohexanocarboxam¡da (880 mg, 106 %) en forma de un sólido de color blanco que se usó directamente en la etapa siguiente sin purificación adicional.
Preparaci n de nS.3R)-3-acetam¡do-M-(6-clorop¡r¡m¡d¡n-4-il)c¡clohexanocarboxam¡da
Figure imgf000081_0001
Se añadió cloruro de acetilo (0,11 ml, 1,5 mmol) a una mezcla de (1S,3R)-3-amino-N-(6-cloropirimidin-4-il)ciclohexanocarboxamida (0,217 g, 0,85 mmol), piridina (0,69 ml, 8,5 mmol), y DCM (7,7 ml) a 0 °C. Después de 30 min, se añadieron otros 200 ^l de cloruro de acetilo. Esto se repitió después de otros 30 minutos una última vez. La reacción se apagó entonces con bicarbonato sódico acuoso saturado y se extrajo con acetato de etilo (2x). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de acetato de etilo del 10 al 100 % en hexano, después con metanol del 0 al 15 % en acetato de etilo), obteniéndose (1S,3R)-3-acetamido-N-(6-cloropirimidin-4-il)ciclohexanocarboxamida (0,22 g, 87 %) en forma de un sólido blanquecino. 1H RMN (300 MHz, DMSO-tá) 0,99 - 1,16 (1H, m), 1,18 - 1,38 (3H, m), 1,72 - 1,84 (6H, m), 1,85 - 1,97 (m, 1 H), 2,58 - 2,73 (1H, m) 3,50 - 3,64 (1H, m) 7,76 (1H, d) 8,12 (1H, d) 8,74 (1H, d) 11,18 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 297.
Figure imgf000081_0002
Se añadió ácido clorhídrico en dioxano (4 M; 0,085 ml, 0,34 mmol) a una solución de trans-3-((ferc-butildimetilsilil)oxi)-N-(6-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)pirimidin-4-il)ciclobutanocarboxamida (29 mg, 0,070 mmol) en MeoH (1 ml), y la mezcla resultante se agitó a t.a. durante 2 h. La mezcla se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó mediante HPLC preparativa (columna Waters XBridge Prep C18 OBD, 5 ^ de sílice, 50 mm de diámetro, 100 mm de longitud), utilizando mezclas decrecientemente polares de agua (que contenía NH3 al 1 %) y MeCN como eluyentes. Las fracciones que contenían el compuesto deseado se concentraron a presión reducida, obteniéndose trans-3-hidroxi-N-(6-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)pirimidin-4-il)ciclobutanocarboxamida (10 mg, 47 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (400 MHz, CD3OD, 30 °C) 1,93 - 2,05 (2H, m), 2,07 - 2,18 (2H, m), 2,26 (2H, m), 2,60 (2H, m), 3,17 - 3,28 (3H, m), 4,21 (2H, t), 4,49 (1H, p), 8,06 (1H, s), 8,33 (1H, d), 8,71 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ 314.
Los procedimientos para preparar el material de partida trans-3-((terc-butildimetilsilil)oxi)-N-(6-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)pirimidin-4-il)ciclobutanocarboxamida se describen a continuación:
Preparación de trans-3-((ferc-but¡ld¡met¡ls¡l¡l)ox¡)-N-(6-clorop¡r¡m¡d¡n-4-¡l)c¡clobutanocarboxam¡da
Figure imgf000081_0003
Se añadió 1-cloro-N,N,2-trimetilpropenilamina (0,383 ml, 2,89 mmol) a una solución de ácido trans-3-((fercbutildimetilsilil)oxi)ciclobutanocarboxílico (0,667 g, 2,89 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 4, sustituyendo el ácido cis-3-hidroxiciclobutanocarboxílico por ácido trans-3-hidroxiciclobutanocarboxílico) en Dc M (10 ml) y la mezcla resultante se agitó a t.a. durante 1,5 h. Después se añadieron 6-cloropirimidin-4-amina (0,25 g, 1,93 mmol) y piridina (0,23 ml, 2,9 mmol) y la mezcla se agitó a t.a. durante una noche. La reacción se inactivó con bicarbonato de sodio acuoso saturado (50 ml), y se separaron las capas. La capa acuosa se extrajo con DCM (2 * 50 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con cloruro de sodio acuoso saturado, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de acetato de etilo del 0 al 100 % en heptano. Las fracciones que contenían producto se combinaron, se concentraron a presión reducida, obteniéndose trans-3-((íerc-butildimetilsilil)oxi)-N-(6-cloropirimidin-4-il)ciclobutanocarboxamida (0,230 g, 35 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (400 MHz, DMSO-CÍ6, 30 °C) 0,00 (6H, s), 0,84 (9H, s), 2,10 (2H, m), 2,38 - 2,45 (2H, m), 3,21 (1H, t), 4,44 (1H, p), 8,14 (1H, s), 8,71 (1H, s), 11,13 (1H, s a). m/z: ES+ [M+H]+ 342.
Preparación de trans-3-((ferc-but¡ld¡met¡ls¡l¡l)ox¡)-M-(6-(4.5.6.7-tetrah¡drop¡razolori.5-alp¡r¡d¡n-3-¡l)p¡rim¡d¡n-4-il)ciclobutanocarboxam¡da
Figure imgf000082_0001
Se cargaron trans-3-((fe/'c-but¡ld¡met¡ls¡l¡l)ox¡)-N-(6-clorop¡rim¡d¡n-4-¡l)c¡clobutanocarboxam¡da (100 mg, 0,29 mmol), 3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridina (73 mg, 0,29 mmol), d¡cloro-[1,1'-b¡s(d¡-fercbut¡lfosf¡no)ferroceno]palad¡o(N) (9,5 mg, 0,01 mmol) y fosfato de potas¡o (186 mg, 0,88 mmol) en un matraz, y se evacuó el matraz y se volv¡ó a llenar con n¡trógeno (3x). Después se añad¡ó 1,4-d¡oxano desgas¡f¡cado (1 ml), y la mezcla se calentó a 90 °C y se mantuvo en estas cond¡c¡ones durante 2 h. La reacc¡ón se concentró a pres¡ón reduc¡da, y el res¡duo resultante se repart¡ó entre b¡carbonato de sod¡o acuoso saturado (20 ml) y acetato de et¡lo (20 ml). Se separaron las capas, y la capa acuosa se extrajo con acetato de et¡lo (2 x 20 ml). Las capas orgán¡cas comb¡nadas se lavaron con cloruro de sod¡o acuoso saturado (20 ml), se secaron sobre sulfato de sod¡o, se f¡ltraron y se concentraron a pres¡ón reduc¡da. El res¡duo resultante se pur¡f¡có med¡ante cromatografía ultrarráp¡da en gel de síl¡ce, grad¡ente de eluc¡ón de EtOAc del 0 al 100 % en heptano, obten¡éndose trans-3-((fe/'c-but¡ld¡met¡ls¡l¡l)ox¡)-N-(6-(4,5,6,7-tetrah¡drop¡razolo[1,5-a]p¡r¡d¡n-3-¡l)p¡r¡m¡d¡n-4-¡l)c¡clobutanocarboxam¡da (29 mg, 23 %) en forma de un sól¡do de color blanco. 1H RMN (400 MHz, CDCls, 30 °C) 0,00 (6H, s), 0,89 (9H, s), 1,91 - 1,99 (2H, m), 2,08 (2H, m), 2,29 (2H, m), 2,63 (2H, m), 3,01 - 3,10 (1H, m), 3,23 (2H, t), 4,21 (2H, t), 4,52 - 4,63 (1H, m), 8,08 (1H, s), 8,31 (1H, d), 8,43 (1H, s a), 8,73 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ 428.
Ejemplo______30:______nS.3R)-3-acetam¡do-M-(6-(5.5-d¡met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolori.2-blp¡razol-3-¡l)p¡rim¡d¡n-4-¡l)ciclohexanocarboxam¡da
Figure imgf000082_0002
Se añad¡ó anhídrido acét¡co (0,038 ml, 0,41 mmol) gota a gota a clorh¡drato de (1S,3R)-3-am¡no-N-(6-(5,5-d¡met¡l-5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[1,2-b]p¡razol-3-¡l)p¡r¡m¡d¡n-4-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da en bruto (0,120 g, 0,308 mmol), 4-d¡met¡lam¡nop¡r¡d¡na (2,07 mg, 0,02 mmol), y tr¡et¡lam¡na (0,15 ml, 1,1 mmol) en DCM (2 ml) a t.a. en atmósfera de n¡trógeno. La soluc¡ón resultante se ag¡tó a t.a. durante 4 h. Después, la mezcla de reacc¡ón se ¡nact¡vó con NH4Cl acuoso saturado (10 ml), se extrajo con DCM (2 x 10 ml), y las capas orgán¡cas comb¡nadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron, y se concentraron a pres¡ón reduc¡da. El res¡duo resultante se purificó med¡ante HPLC preparat¡va (columna Waters XBr¡dge Prep C18 o Bd , 5 ^ de síl¡ce, 30 mm de d¡ámetro, 100 mm de long¡tud), ut¡l¡zando mezclas decrec¡entemente polares de agua (que contenía NH3 al 1 %) y MeCN como eluyentes. Las fracc¡ones que contenían el compuesto deseado se concentraron a pres¡ón reduc¡da, obten¡éndose (1S,3R)-3-acetam¡do-N-(6-(5,5-d¡met¡l-5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[1,2-b]p¡razol-3-¡l)p¡r¡m¡d¡n-4-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da (0,066 g, 55 %) en forma de un sól¡do de color blanco. 1H RMN (500 MHz, DMSO-de, 30 °C) 1,02 - 1,12 (1H, m), 1,25 - 1,37 (9H, m), 1,76 - 1,88 (6H, m), 1,90 - 1,96 (1H, m), 2,61 - 2,67 (1H, m), 2,95 (2H, s), 3,54 - 3,61 (1H, m), 3,92 (2H, s), 7,76 (1H, a d), 8,03 (1H, d), 8,15 (1H, d), 8,73 (1H, dd), 10,75 (1H, s a). m/z: ES+ [M+H]+ 397.
Los proced¡m¡entos para preparar el material de part¡da clorh¡drato de (1S,3R)-3-am¡no-N-(6-(5,5-d¡met¡l-5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[1,2-b]p¡razol-3-¡l)p¡r¡m¡d¡n-4-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da se describen a cont¡nuac¡ón:
Preparación de (nR.3S)-3-((6-bromop¡r¡m¡d¡n-4-¡l)carbamoil)c¡clohex¡l) carbamato de ferc-butilo
Figure imgf000082_0003
Se añadió 1-cloro-W,W,2-trimetilpropemlam¡na (0,46 ml, 3,5 mmol) gota a gota a una solución de ácido (1S,3R)-3-((fe/cbutoxicarbonil)amino)cidohexanocarboxílico (699 mg, 2,87 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 2) en DCM (10 ml) a 0 °C en atmósfera de nitrógeno. La solución resultante se agitó a 0 °C durante 1,5 h. Después se añadieron 6-bromopirimidin-4-amina (400 mg, 2,30 mmol) y piridina (0,28 ml, 3,5 mmol), y la mezcla de reacción se agitó a t.a. durante una noche. La mezcla de reacción en bruto se concentró a presión reducida. Al sólido resultante se le añadió entonces DCM. Después se filtró la mezcla resultante, y el precipitado resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida de gel de sílice, gradiente de elución de MeOH del 0 al 2 % en DCM. Las fracciones puras se concentraron a presión reducida, obteniéndose ((1 R^S^-^-bromopirimidin^-iOcarbamoiOciclohexiOcarbamato de terc-butilo (605 mg, 66 %) en forma de un sólido de color blanco. m/z: ES+ [M+H]+ 399
Preparación__________de__________((1R,3S)-3-((6-(5,5-d¡met¡l-5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolori.2-blp¡razol-3-il)p¡r¡m¡d¡n-4-il)carbamo¡l)c¡clohexil)carbamato de tere-butilo
Figure imgf000083_0001
Se añadió precatalizador XPhos de 2.a generación (0,039 g, 0,050 mmol) a una mezcla desgasificada de 5,5-dimetil-3-^^^^ -te tra m e tiM ^^ -d io xa b o ro la n ^ -il^^ -d ih id ro ^H -p irro lo n ^ -b p ra zo l (0,18 g, 0,60 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 23), ((1R,3S)-3-((6-bromop¡r¡m¡d¡n-4-¡l)carbamo¡l)c¡clohex¡l)carbamato de fe/c-butilo (0,20 g, 0,50 mmol) y fosfato de potasio tribásico, (0,262 g, 1,50 mmol) en 1,4-dioxano (10 ml) y agua (2 ml). La mezcla se desgasificó y se agitó a 90 °C durante 2 h en atmósfera de nitrógeno. Después se concentró la mezcla de reacción a presión reducida, y el residuo resultante se recogió en agua (20 ml). La mezcla resultante se extrajo secuencialmente con EtOAc (2 * 20 ml) y DCM (20 ml). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de EtOAc del 0 al 100 % en heptano. Las fracciones puras se concentraron a presión reducida, obteniéndose ((1R,3S)-3-((6-^^-dimetil^^-dihidro^H-pirrolon^-bprazol^-iOpirimidin^-iOcarbamoiOciclohexiOcarbamato de fe/c-butilo (0 , 1 8 g, 79 %) en forma de un sólido de color crema. 1H RMN (400 MHz, CDCls, 30 °C) 1,06 - 1,13 (1H, m), 1,35 (6H, s), 1,41 -1,50 (12H, m), 1,87- 1,96 (3H, m), 2,26 - 2,37 (1H, d), 2,38 - 2,44 (1H, m), 3,04 (2H, s), 3,44 - 3,58 (1H, m) 3,93 (2H, s), 4,44 - 4,52 (1H, m), 8,00 (1H, s a), 8,13 (1H, s), 8,18 (1H, d), 8,72 (1H, dm/z: ES+ [M+H]+ 455.
Preparación de clorhidrato de (1S.3R)-3-am¡no-M-(6-(5.5-d¡met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolori.2-blp¡razol-3-¡l)p¡rim¡d¡n-4-¡l)ciclohexanocarboxam¡da
Figure imgf000083_0002
Se disolvieron ((1 R ^ S ^ -^ -^^ -d im e til^ ^ -d ih id ro ^H -p irro lo H ^-bprazol^-iO pirim id in^-iOcarbamoiOciclohexiOcarbamato de fe/c-butilo (0,160 g, 0,35 mmol) y ácido clorhídrico en dioxano (4 M; 0,71 ml, 2,8 mmol) en metanol (2 ml) a t.a. en atmósfera de aire. La solución resultante se agitó a t.a. durante 16 h. La mezcla de reacción se concentró a presión reducida, y el clorhidrato de (1S,3R)-3-am¡no-W-(6-(5,5-d¡met¡l-5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[1,2-b^irazol^-iOpirimidin^-iOciclohexanocarboxamida en bruto (0,120 g, 88 %) se llevó a la etapa siguiente sin purificación adicional. m/z: ES+ [M+H]+ 355.
Ejemplo__________ 31_________ (1S.3R)-M-(5-cloro-4-(4.5.6.7-tetrah¡drop¡razolori.5-alp¡r¡d¡n-3-¡l)p¡rid¡n-2-¡l)-3-(2-cianoacetam¡do)c¡clohexanocarboxam¡da
Figure imgf000084_0001
Se añadió HATU (140 mg, 0,37 mmol) a una solución de diclorhidrato de (1S,3R)-3-amino-N-(5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (150 mg, 0,34 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 2), ácido 2-cianoacético (31,4 mg, 0,37 mmol), DIPEA (0,18 ml, 1,0 mmol) y DMF (1,2 ml). La reacción se agitó a t.a. durante 3 h. La reacción se diluyó con EtOAc y se lavó con NaHCO3 saturado y cloruro de sodio acuoso saturado. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, eluyendo con EtOAc del 80 al 100 % en hexano, obteniéndose (1S,3R)-N-(5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)-3-(2-cianoacetamido)ciclohexanocarboxamida (51 mg, 35 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN(300 MHz, DMSO-d6, 27 °C) 1,04 - 1,19 (1H, m), 1,21 - 1,39 (3H, m), 1,73 - 1,88 (5H, m), 1,93 (1H, a d), 1,99-2,10 (2H, m), 2,56 - 2,68 (1H, m), 2,80 (2H, t), 3,52 - 3,64 (3H, m), 4,14 (2H, t), 7,76 (1H, s), 8,14 (1H, s), 8,19 (1H, d), 8,38 (1H, s), 10,59 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 441.
Rotación óptica:
Figure imgf000084_0003
Ejemplo____________ 31a:____________ ((1R.3S)-3-((5-cloro-4-(4.5.6.7-tetrah¡drop¡razolori .5-alp¡r¡d¡n-3-¡l)p¡r¡din-2-¡l)carbamoil)c¡clohex¡l)carbamato de tere-butilo
Figure imgf000084_0002
Se añadió gota a gota 1-cloro-N,N,2-trimetilprop-1-en-1-amina (0,344 g, 2,57 mmol) a una solución en agitación de ácido (1S,3R)-3-((fere-butoxicarbonil)amino)ciclohexanocarboxílico (0,611 g, 2,51 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 2) en DCM (12 ml) a 0 °C. La mezcla resultante se agitó a 0 °C durante 1,5 h. Después se añadió gota a gota una solución de 5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-amina (0,50 g, 2,0 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 2) y piridina (0,65 ml, 8,0 mmol) en DCM (18 ml). La mezcla de reacción incolora se volvió amarilla. Se retiró el baño de hielo y la reacción se mantuvo en estas condiciones durante 18 h. A continuación se repitió la misma reacción de la siguiente manera: se añadió gota a gota 1 -cloro-N,N,2-trimetilprop-1 -en-1 -amina (1,032 g, 7,72 mmol) a una solución en agitación de ácido (1S,3R)-3-((fere-butoxicarbonil)amino)ciclohexanocarboxflico (1,8 g, 7,5 mmol) en DCM (30 ml) a 0 °C. La mezcla resultante se agitó a 0 °C durante 1,5 h. Después se añadió gota a gota una solución de 5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-amina (1,5 g, 6,0 mmol) y piridina (2,0 ml, 24 mmol) en DCM (50 ml). La mezcla de reacción incolora se volvió amarilla. Se retiró el baño de hielo, y la reacción se mantuvo en estas condiciones durante 18 h. Después se combinaron ambas reacciones y se diluyeron con MeOH (10 ml) para disolver los precipitados. La solución resultante se lavó con cloruro de sodio acuoso saturado, y la capa orgánica se secó sobre Na2SO4, se filtró, y se concentró a presión reducida hasta alcanzar el volumen mínimo. La solución resultante se sometió a cromatografía ultrarrápida en columna de gel de sílice, gradiente de elución de acetato de etilo del 50 al 80 % en hexanos, obteniéndose ((1R,3S)-3-((5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de tere-butilo (2,6 g, 68 %) en forma de un sólido. 1H RMN (300 MHz, CDCla, 27 °C) 1,04 - 1,21 (1H, m), 1,38 - 1,52 (12H, m), 1,87 -2,19 (7H, m), 2,31 (1H, a d), 2,36 - 2,49 (m, 1H), 2,95 (2H, t), 3,45 - 3,61 (m, 1H), 4,24 (2H, t), 4,34 - 4,52 (1H, m), 7,92 (s, 1H). m/z (ES+), [M+H]+ = 474.
Ejemplo________ 31b:________ nS.3R)-3-am¡no-M-(5-cloro-4-(4.5.6.7-tetrah¡drop¡razolori.5-alp¡r¡d¡n-3-¡l)p¡rid¡n-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da
Figure imgf000085_0001
Se añadió ácido clorhídrico en dioxano (4 M; 3,2 ml, 13 mmol) a una suspensión en agitación de ((1R,3S)-3-((5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)carbamoil)cidohexil)carbamato de tere-butilo (1 g, 2,11 mmol) en MeOH (4 ml) y DCM (4 ml). La suspensión de reacción se convirtió en una solución transparente. La reacción se agitó a t.a. durante 2 h y después se concentró a presión reducida, obteniéndose (1S,3R)-3-amino-N-(5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida aislada como la sal de clorhidrato (0,91 g, 97 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (300 MHz, DMSO-tá, 27 °C) 1,12 - 1,39 (3H, m), 1,50 (1H, c), 1,77 - 1,90 (4H, m), 1,90 - 2,10 (4H, m), 2,57 - 2,69 (1H, m), 2,81 (2H, t), 2,95 - 3,09 (1H, m), 4,14 (2H, t), 7,77 (1H, s), 7,99 - 8,21 (4H, m), 8,39 (1H, s), 10,67 (1H, s). Protones adicionales de HCl bajo un singlete amplio a 5,61 ppm. m/z (eS+), [M+H]+ = 374.
Ejemplo__________ 32_________ nS.3R)-M-(5-cloro-4-(4.5.6.7-tetrah¡drop¡razolori.5-alp¡r¡d¡n-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)-3-(1-h¡drox¡c¡clopropanocarboxam¡do)c¡clohexanocarboxam¡da
Figure imgf000085_0002
Se añadió HATU (140 mg, 0,37 mmol) a una solución de clorhidrato de (1S,3R)-3-amino-N-(5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (150 mg, 0,34 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 31b), ácido 1-hidroxiciclopropanocarboxílico (34 mg, 0,34 mmol), DIPEA (0,18 ml, 1,0 mmol) y DMF (1,2 ml). La reacción se agitó a t.a. durante 3 h. La reacción se diluyó con EtOAc y se lavó con NaHCO3 acuoso saturado y cloruro de sodio acuoso saturado. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de EtOAc del 80 al 100 % en hexano, obteniéndose (1S,3R)-N-(5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)-3-(1-hidroxiciclopropanocarboxamido)ciclohexanocarboxamida (61 mg, 40 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (300 MHz, CDCla, 27 °C) 1,00 - 1,09 (m, 2H), 1,19 - 1,31 (1H, m), 1,34 - 1,40 (2H, m), 1,42 - 1,59 (3H, m), 1,88 - 2,17 (7H, m), 2,30 (1H, a d), 2,44 - 2,58 (1H, m), 2,83 (1H, s), 2,90 - 2,99 (2H, m), 3,83 - 3,95 (1H, m), 4,24 (2H, t), 6,83 (1H, d), 7,94 (1H, s), 8,19 (1H, s), 8,27 (1H, s), 8,46 (1H, s a). m/z: ES+ [M+H]+ 458.
Rotac¡ón ópt¡ca:
Figure imgf000085_0003
Ejemplo__________ 33__________(R)-N-(nR.3S)-3-((5-cloro-4-(4.5.6.7-tetrah¡drop¡razolori.5-alp¡r¡d¡n-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)carbamo¡l)c¡clohex¡l)
Figure imgf000086_0004
Figure imgf000086_0001
Se añadió HATU (140 mg, 0,37 mmol) a una solución de diclorhidrato de (1S,3R)-3-amino-N-(5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (150 mg, 0,34 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 31b), ácido (R)-tetrahidrofurano-3-carboxílico (43 mg, 0,37 mmol), DIPEA (0,18 ml, 1,0 mmol) y DMF (1,2 ml). La reacción se agitó a t.a. durante 3 h. La reacción se diluyó con EtOAc y se lavó con hidrogenocarbonato de sodio acuoso saturado y cloruro de sodio acuoso saturado. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró, y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de EtOAc del 80 al 100 % en hexano, obteniéndose (R)-N-((1R,3S)-3-((5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)tetrahidrofuran-3-carboxamida (77 mg, 49 %) en forma de un sólido de color blanco.
1H RMN (300 MHz, CDCls, 27 °C) 1,10 - 1,29 (1H, m), 1,36 - 1,58 (3H, m), 1,84 - 2,04 (5H, m), 1,85 - 2,05 (5H, m), 2,06 -2,21 (4H, m), 2,25 (1H, a d), 2,41-2,55 (1H, m), 2,82 - 2,97 (4H, m), 3,76 - 3,99 (4H, m), 4,23 (2H, t), 5,66 (1H, d), 7,92 (1H, s), 8,13 (1H, s), 8,21 - 8,33 (2H, m). m/z: ES+ [M+H]+ 472.
Rotac¡ón ópt¡ca:
Figure imgf000086_0003
Ejemplo 34: N-((1 R.3S)-3-((5-cloro-4-(4.5.6.7-tetrah¡drop¡razoloH .5-alp¡r¡d¡n-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)carbamo¡l)c¡clohex¡l)-3-met¡loxetano-3-carboxam¡da
Figure imgf000086_0002
Se añadió HATU (140 mg, 0,37 mmol) a una solución de diclorhidrato de (1S,3R)-3-amino-N-(5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (150 mg, 0,34 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 31b), ácido 3-metiloxetano-3-carboxílico (43 mg, 0,37 mmol), DIPEA (0,18 ml, 1,0 mmol) y DMF (1,2 ml). La reacción se agitó a t.a. durante 3 h. La reacción se diluyó con EtOAc y se lavó con hidrogenocarbonato de sodio acuoso saturado y cloruro de sodio acuoso saturado. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró, y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de EtOAc del 80 al 100 % en hexano, obteniéndose N-((1R,3S)-3-((5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)-3-metiloxetano-3-carboxamida (71 mg, 45 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (300 MHz, CDCls, 27 °C) 1,17 - 1,33 (1H, m), 1,42 - 1,62 (6H, m), 1,86 - 2,16 (7H, m), 2,21 - 2,34 (1H, m), 2,44 -2,57 (1H, m), 2,90 - 2,99 (1H, m), 3,89 - 4,02 (1H, m), 4,24 (2H, t), 4,46 (2H, d), 4,84 - 4,89 (2H, m), 5,86 (1H, d), 7,91 (1H, s), 8,09 (1H, s a), 8,19 (1H, s), 8,28 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 472.
Rotac¡ón ópt¡ca:
Figure imgf000087_0002
Ejemplo__________ 35__________(S)-M-(nR.3S)-3-((5-cloro-4-(4.5.6.7-tetrah¡drop¡razolori.5-alp¡r¡d¡n-3-¡l)p¡rid¡n-2-¡l)carbamo¡l)c¡clohex¡l)tetrah¡drofuran-2-carboxam¡da
Figure imgf000087_0001
Se añadió HATU (140 mg, 0,37 mmol) a una solución de diclorhidrato de (1S,3R)-3-amino-N-(5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)cidohexanocarboxamida (150 mg, 0,34 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 31b), ácido (S)-tetrahidrofurano-2-carboxílico (43 mg, 0,37 mmol), DIPEA (0,18 ml, 1,0 mmol) y DMF (1,2 ml). La reacción se agitó a t.a. durante 3 h. La reacción se diluyó con EtOAc y se lavó con NaHCO3 saturado y cloruro de sodio acuoso saturado. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de EtOAc 80 al 100 % en hexano, obteniéndose (S)-N-((1 R,3S)-3-((5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)tetrahidrofuran-2-carboxamida (41 mg, 26 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H Rm N (300 MHz, CDCls, 27 °C) 1,12 - 1,26 (1H, m), 1,35 - 1,57 (3H, m), 1,79 - 2,15 (10H, m), 2,20 - 2,35 (2H, m), 2,41 - 2,53 (1H, m), 2,94 (2H, t), 3,81 - 3,96 (3H, m), 4,23 (2H, t), 4,33 (1H, dd), 6,60 (1H, d), 7,92 (1H, s), 8,26 (2H, s), 8,36 (1H, s a). m/z: ES+ [M+H]+ 472.
Rotac¡ón ópt¡ca:
Figure imgf000087_0003
Ejemplo__________ 36:_________ (R)-M-((1R.3S)-3-((5-cloro-4-(4.5.6.7-tetrah¡drop¡razolori.5-a1p¡r¡d¡n-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)carbamo¡l)c¡clohex¡l)tetrah¡drofuran-2-carboxam¡da
Figure imgf000088_0001
Se añadió HATU (140 mg, 0,37 mmol) a una solución de diclorhidrato de (1S,3R)-3-amino-N-(5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (150 mg, 0,34 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 31b), ácido (R)-tetrahidrofurano-2-carboxílico (43 mg, 0,37 mmol), DIPEA (0,18 ml, 1,0 mmol) y DMF (1,2 ml). La reacción se agitó a t.a. durante 3 h. La reacción se diluyó con EtOAc y se lavó con hidrogenocarbonato de sodio acuoso saturado y cloruro de sodio acuoso saturado. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró, y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de EtOAc del 80 al 100 % en hexano, obteniéndose (R)-N-((1R,3S)-3-((5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)tetrahidrofuran-2-carboxamida (55 mg, 35 %) en forma de un sólido de color blanco.
1H RMN (300 MHz, CDCls, 27 °C) 1,13 - 1,37 (1H, m), 1,37 - 1,58 (3H, m), 1,82 - 2,17 (11H, m), 2,20 - 2,36 (2H, m), 2,51 (1H, s a), 2,90 - 3,00 (1H, m), 3,81 - 3,98 (3H, m), 4,25 (2H, t), 4,33 (1H, dd), 6,62 (1H, d), 7,96 (1H, s), 8,26 (1H, s), 8,27 - 8,31 (1H, s), 8,78 (1H, s a). m/z: ES+ [M+H]+ 472.
Rotación óptica:
Figure imgf000088_0003
Ejemplo________ 37:________ nS.3R)-M-(5-cloro-4-(4.5.6.7-tetrah¡drop¡razolori.5-alp¡r¡d¡n-3-¡l)p¡rid¡n-2-¡l)-3-((S)-2-hidrox¡propanamido)c¡clohexanocarboxam¡da
Figure imgf000088_0002
Se añadió HATU (140 mg, 0,37 mmol) a una solución de diclorhidrato de (1S,3R)-3-amino-N-(5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (150 mg, 0,34 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 31b), ácido (S)-2-hidroxipropanoico (0,033 g, 0,37 mmol), DIp Ea (0,18 ml, 1,0 mmol) y DMF (1,2 ml). La reacción se agitó a t.a. durante 3 h. La reacción se diluyó con EtOAc y se lavó con hidrogenocarbonato de sodio acuoso saturado y cloruro de sodio acuoso saturado. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante HPLC preparativa (columna Waters XBridge Prep C18, 5 ^ de sílice, 19 mm de diámetro, 150 mm de longitud) utilizando mezclas decrecientemente polares de agua (que contenía hidróxido de amonio al 0,2 %, pH 10) y MeCN como eluyentes. Las fracciones que contenían producto se concentraron a presión reducida, obteniéndose (1 S,3R)-N-(5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)-3-((S)-2-hidroxipropanamido)ciclohexanocarboxamida (0,066 g, 44 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (300 MHz, CDCls, 27 °C) 1,15 - 1,31 (1H, m), 1,39 - 1,59 (6H, m), 1,87 - 2,17 (8H, m), 2,28 (1H, a d), 2,48 - 2,61 (1H, m), 2,96 (2H, t), 3,84 - 3,98 (1H, m), 4,20 - 4,28 (3H, m), 6,43 (1H, d), 7,95 (1H, s), 8,25 (1H, s), 8,33 (1H, s), 8,96 (1H, s a). m/z: ES+ [M+H]+ 446.
Rotación óptica:
Figure imgf000089_0002
Ejemplo__________ 38__________(S)-M-((1R,3S)-3-((5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrah¡drop¡razolori,5-a1p¡r¡d¡n-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)carbamo¡l)c¡clohex¡l)tetrah¡drofuran-3-carboxam¡da
Figure imgf000089_0001
Se añadió HATU (140 mg, 0,37 mmol) a una solución de diclorhidrato de (1S,3R)-3-amino-N-(5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (150 mg, 0,34 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 31b), ácido (S)-tetrahidrofurano-3-carboxílico (43 mg, 0,37 mmol), DIPEA (0,18 ml, 1,0 mmol) y DMF (1,2 ml). La reacción se agitó a t.a. durante 3 h. La reacción se diluyó con EtOAc y se lavó con hidrogenocarbonato de sodio acuoso saturado y cloruro de sodio acuoso saturado. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de EtOAc 80 al 100 % en hexano, obteniéndose (S)-N-((1R,3S)-3-((5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)tetrahidrofuran-3-carboxamida (70 mg, 44 %). 1H Rm N (300 MHz, CDCh, 27 °C) 1,09 -1,26 (m, 1H), 1,38 - 1,59 (m, 3H), 1,87 - 2,05 (m, 5H), 2,07 - 2,21 (m, 4H), 2,29 (1H, d), 2,38 - 2,58 (1H, m), 2,82 - 2,99 (4H, m), 3,78 - 4,00 (4H, m), 4,24 (2H, t), 5,63 (1H, d), 7,92 (1H, s), 8,25 (1H, s), 8,27 (1H, s), 8,40 (1H, s a). m/z: ES+ [M+H]+ 472.
Rotac¡ón ópt¡ca:
Figure imgf000089_0003
Ejemplo 39: (1 S,3R)-3-acetam¡do-N-(5-c¡ano-4-(5,5-d¡met¡l-5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolori.2-b1p¡razol-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da
Figure imgf000090_0001
Se combinaron 5,5-dimetil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol (195 mg, 0,57 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 14), (1S,3R)-3-acetamido-N-(4-cloro-5-cianopiridin-2-il)cidohexanocarboxamida (184 mg, 0,57 mmol), carbonato de cesio (561 mg, 1,72 mmol), dioxano (4,3 ml) y agua (1,4 ml) en un matraz de fondo redondo de 100 ml, obteniéndose una solución incolora. La solución se purgó con nitrógeno durante 15 min, y se añadió precatalizador X-Phos de 2.a generación (33 mg, 0,04 mmol). La reacción se calentó a 95 °C en atmósfera de nitrógeno durante 1 hora, después se enfrió y se diluyó con DCM (50 ml). La capa orgánica se lavó con agua (2 * 25 ml) antes de concentrarse a presión reducida. El residuo resultante se adsorbió sobre gel de sílice y se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna, gradiente de elución de metanol del 0 al 10 % en DCM. Las fracciones de producto se concentraron a presión reducida, y el residuo resultante se purificó mediante HPLC en fase inversa (columna RediSep Rf Gold(R) reversed-phase HP C18 de 15 g de Teledyne Isco, 10-40 ^ de sílice), gradiente de elución de acetonitrilo del 0 al 80 % en agua. Las fracciones de producto se concentraron a presión reducida, obteniéndose (1S,3R)-3-acetamido-W-(5-ciano-4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (59 mg, 24 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6, 27 °C) 0,99 - 1,19 (1H, m), 1,21 - 1,40 (9H. m), 1,73 - 1,84 (6H, m), 1,90 (1H, s a), 2,60 - 2,73 (1H, m), 2,95 (2H, s), 3,49 - 3,67 (1H, m), 3,97 (2H, s), 7,74 (1H, d), 8,12 (1H, s), 8,31 (1H, s), 8,72 (1H, s), 10,90 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 421.
Los procedimientos para preparar el material de partida (1S,3R)-3-acetamido-W-(4-cloro-5-cianopiridin-2-il)ciclohexanocarboxamida se describen a continuación:
Preparación de 6-am¡no-4-cloronicot¡non¡tr¡lo
Figure imgf000090_0002
Se sometió una mezcla desgasificada de dicianocinc (0,57 g, 4,8 mmol), 5-bromo-4-cloropiridin-2-amina (1,00 g, 4,82 mmol), tetraquis(trifenilfosfina)paladio(0) (0,28 g, 0,24 mmol), y DMF (12 ml) a condiciones de microondas (170 °C, 2 min). La reacción se enfrió y se purificó directamente mediante cromatografía ultrarrápida de gel de sílice, gradiente de elución de acetato de etilo del 0 al 70 % en hexanos. Se combinaron las fracciones de producto y se concentraron a presión reducida. El aceite de color amarillo resultante se volvió a purificar utilizando las mismas condiciones que se acaban de describir, obteniéndose 6-amino-4-cloronicotinonitrilo (0,47 g, 64 %) en forma de un sólido de color blanquecino.
1H RMN (300 MHz, DMSO-de, 27 °C) 6,63 (1H, s), 7,34 (2H, s a), 8,38 (1H, s). 13C RMN (75 MHz, DMSO-tá, 27 °C) 95,59 (1C, s) 107,12 (1C, s) 116,17 (1C, s) 143,41 (1C, s) 154,87 (1C, s) 162,32 (1C, s). m/z: ES+ [M+H]+ 154.
Preparación de ((1R.3S)-3-((4-cloro-5-c¡anop¡r¡d¡n-2-¡l)carbamoil)c¡clohex¡l)carbamato de tere-butilo
Figure imgf000090_0003
Se añadió 1-cloro-W,W,2-trimetilprop-1-en-1-amina (0,23 ml, 1,7 mmol) a una solución de ácido (1S,3R)-3-((tercbutoxicarbonil)amino)ciclohexanocarboxílico (310 mg, 1,27 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 2) en DCM (5,5 ml) a t.a., obteniéndose una solución incolora. La reacción se mantuvo en estas condiciones durante 2 h, y esta reacción se añadió directamente a una solución de 6-amino-4-cloronicotinonitrilo (178 mg, 1,16 mmol) y piridina (0,37 ml, 4,6 mmol) en DCM (11 ml) a 0 °C. Se dejó calentar la reacción a t.a. y se mantuvo en estas condiciones durante 18 h. Después, la reacción se diluyó con DCM y se lavó con agua y cloruro de sodio acuoso saturado, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se adsorbió sobre gel de sílice y se purificó mediante cromatografía ultrarrápida de gel de sílice, gradiente de elución de metanol del 0 al 10 % en DCM. El material resultante se volvió a purificar mediante cromatografía ultrarrápida de gel de sílice, gradiente de elución de acetato de etilo del 0 al 100 % en hexanos, obteniéndose ((1R,3S)-3-((4-cloro-5-cianopiridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de ferc-butilo (330 mg, 75 %) en forma de un sólido de color blanco. m/z: ES+ [M+Na+]+ 401.
Preparación de (1S.3R)-3-acetam¡do-N-(4-cloro-5-c¡anop¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da
Figure imgf000091_0001
Se añadió ácido clorhídrico en dioxano (4 M; 1,5 ml, 44 mmol) a una solución de ((1R,3S)-3-((4-cloro-5-cianopiridin-2-il)carbamoil)cidohexil)carbamato de tere-butilo (330 mg, 0,87 mmol) en MeOH (2,9 ml) en atmósfera de nitrógeno, obteniéndose una solución incolora. Después de 2 h, la reacción se concentró a presión reducida, obteniéndose un sólido de color blanco (302 mg). Este sólido se disolvió en DCM (4,8 ml) y se añadieron trietilamina (0,61 ml, 4,4 mmol) y anhídrido acético (123 pl, 1,31 mmol). La reacción se agitó a t.a. durante 2 h y después se diluyó con DCM. La mezcla de reacción se lavó con agua (30 ml), y cloruro de sodio acuoso saturado (30 ml), se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se adsorbió sobre gel de sílice y se purificó mediante cromatografía ultrarrápida de gel de sílice, gradiente de elución de metanol del 0 al 10 % en DCM y después metanol al 10 % isocrático en acetato de etilo, obteniéndose (1S,3R)-3-acetamido-N-(4-cloro-5-cianopiridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (184 mg, 6 6 %) en forma de un sólido de color blanco. m/z: ES+ [M+H]+ 321.
Ejemplo_____ 40 _____ nS.3R)-3-acetam¡do-M-(5-cloro-4-(5-met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolori.2-blp¡razol-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da
Figure imgf000091_0002
Se añadió anhídrido acético (0,20 ml, 2,2 mmol) a una solución en agitación de (1S,3R)-3-amino-N-(5-cloro-4-(5-metil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (670 mg, 1,79 mmol), trietilamina (0,52 ml, 3,8 mmol) y N,N-dimetilpiridin-4-amina (11 mg, 0,09 mmol) en DCM (10 ml). La mezcla de reacción se agitó a t.a. durante 18 h. La mezcla se purificó mediante cromatografía de intercambio iónico utilizando una columna SCX, y el producto deseado se eluyó de la columna usando NH3 1 M en MeOH. Las fracciones del producto se concentraron a presión reducida. El producto en bruto resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, usando un gradiente de elución de EtOAc del 0 al 100 % en heptano, seguido de MeOH al 10 % isocrático en EtOAc. Las fracciones puras se concentraron a presión reducida, obteniéndose (1S,3R)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-(5-metil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (693 mg, 93 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (400 MHz, DMSO-de, 30 °C) 1,05 - 1,11 (1H, m), 1,23 (3H, d), 1,27 - 1,38 (3H, m), 1,72 - 1,81 (6 H, m), 1,89 (1H, a d), 2,52 - 2,63 (1H, m), 2,67 (1H, dd), 3,13 - 3,19 (1H, m), 3,20 - 3,28 (1H, m), 3,50 - 3,63 (1H, m), 3,76 (1H, dd), 4,27 -4,37 (1H, m), 7,75 (1H, d), 8,00 (1H, s), 8,27 (1H, s), 8,35 (1H, s), 10,55 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 416.
Los procedimientos utilizados para preparar el material de partida (1S,3R)-3-amino-N-(5-cloro-4-(5-metil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida se describen a continuación:
Preparación de 5-met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolon .2-b1p¡razol-4-ona
Figure imgf000091_0003
Se añadió n-butil litio en hexano (1,6 M; 49,9 ml, 79,8 mmol) gota a gota a ácido 2-metil-3-(1H-pirazol-1-il)propanoico (4,92 g, 31,9 mmol) en THF (150 ml) a -78 °C a lo largo de un periodo de 20 minutos en atmósfera de nitrógeno. La suspensión resultante se agitó a -78 °C durante 15 minutos. Después, la mezcla de reacción se calentó a -45°C y se mantuvo en estas condiciones durante 30 min antes de dejar que se calentase a 15 °C. Después, la reacción se vertió lentamente en NH4Cl acuoso saturado (100 ml) enfriado en hielo. La mezcla se diluyó con Et2O (100 ml), se separaron las fases, y la capa acuosa se extrajo con Et2O (50 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con cloruro de sodio acuoso saturado (50 ml), se secaron sobre MgSO4 , se filtraron y se concentraron a presión reducida. El aceite resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de EtOAc del 0 al 50 % en heptano.
Las fracciones puras se evaporaron a sequedad, obteniéndose 5-metil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-4-ona (1,3 g, 30 %) en forma de un aceite incoloro. 1H RMN (400 MHz, CDCb, 21°C) 1,45 (3H, d), 3,27 - 3,38 (1H, m), 4,09 (1H, dd), 4,74 (1H, dd), 6,65 (1H, d), 7,79 (1H, d).
Preparación de 5-met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rroloH.2-blp¡razol
Figure imgf000092_0001
Se añadió hidrato de hidrazina (2,28 ml, 47,0 mmol) a una solución en agitación de 5-metil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-4-ona (1,28 g, 9,40 mmol) en dietilenglicol (26,8 ml, 282 mmol). La solución resultante se agitó a 180 °C durante 1 hora. A continuación, se dejó enfriar ligeramente la mezcla de reacción. Se añadió cuidadosamente hidróxido de potasio (1,85 g, 32,9 mmol) a la mezcla y la suspensión resultante se agitó a 150 °C durante 2 h. Después se dejó enfriar la mezcla antes de diluirla con agua, acidificada con HCl 2 M diluido a pH 4,5, y se extrajo con Et2O (5 * 30 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua (3 * 20 ml) y cloruro de sodio acuoso saturado (20 ml), se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron a presión reducida, obteniéndose 5-metil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol (0,98 g, 86 %) en forma de un aceite incoloro. 1H RMN (500 MHz, CDCb, 30 °C) 1,28 (3H, d), 2,39 - 2,54 (1H, m), 2,99 - 3,16 (2H, m), 3,66 - 3,76 (1H, m), 4,23 - 4,33 (1H, m), 5,92 (1H, d), 7,48 (1H, d).
Preparación de 3-vodo-5-met¡l-5.6-dih¡dro-4H-p¡rrolof1.2-b1p¡razol
Figure imgf000092_0002
Se añadió NIS (1,81 g, 8,04 mmol) en porciones a 5-metil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol (0,89 g, 7,31 mmol) en acetonitrilo (15 ml) a t.a. en atmósfera de nitrógeno. La mezcla de reacción se agitó a 23 °C durante 18 h. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (20 ml) y se lavó secuencialmente con agua (20 ml) y cloruro de sodio acuoso saturado (10 ml). La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró a presión reducida, obteniéndose 3-yodo-5-metil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol (1,8 g, 99 %) en forma de un aceite de color naranja. 1H RMN (500 MHz, Cd Q b, 30 °C) 1,28 (3H, d), 2,43 (1H, dd), 3,00 (1H, dd), 3,06 - 3,14 (1H, m), 3,79 (1H, dd), 4,36 (1H, dd), 7,46 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 249.
Preparación de 5-met¡l-3-(4.4.5.5-tetramet¡l-1.3.2-d¡oxaborolan-2-¡l)-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rroloH.2-b1p¡razol
Figure imgf000092_0003
Se añadió gota a gota complejo de cloruro de isopropilmagnesio y cloruro de litio en THF (1,3 M; 6,85 ml, 8,91 mmol) a 3-yodo-5-metil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol (1,7 g, 6,9 mmol) en THF (20 ml) a 0 °C a lo largo de un periodo de 5 minutos en atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó a 0 °C durante 30 minutos. Después se añadió 2-isopropoxi-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (2,10 ml, 10,3 mmol) gota a gota a la mezcla, manteniendo la temperatura interna a 0 °C. Después se dejó calentar la mezcla de reacción a t.a. durante una noche antes de diluirla con EtOAc (50 ml) y lavarla secuencialmente con NH4Cl acuoso saturado (50 ml), agua (50 ml) y cloruro de sodio acuoso saturado (50 ml). La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y se evaporó, obteniéndose 5-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol (1,5 g, 87 %) en forma de un aceite de color pardo pálido que se cristalizó. 1H RMN (400 MHz, CDCb, 22 °C) 1,26 (3H, d), 1,29 (12H, s), 2,57 (1H, dd), 3,01 - 3,22 (2H, m), 3,64 - 3,75 (1H, m), 4,27 (1H, ddd), 7,76 (1H, s).
Preparación_________ de________ ((1R.3S)-3-((5-cloro-4-(5-metil-5.6-dihidro-4H-pirroloH.2-blpirazol-3-ihpiridin-2-¡l)carbamo¡l)ciclohex¡l)carbamato de terc-butilo
Figure imgf000093_0001
Se añadió precatalizador XPhos de 2.a generación (0,25 g, 0,31 mmol) a una mezcla desgasificada de 5-metil-3-(4,4,5,5-tetrametiM,3,2-dioxaborolan-2-N)-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol (1,03 g, 3,75 mmol), ((1R,3S)-3-((5-cloro-4-yodopiridin-2-il)carbamoil)cidohexil)carbamato de tere-butilo (1,5 g, 3,13 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 1 0 ) y fosfato de potasio dibásico (1,63 g, 9,38 mmol) en 1,4-dioxano (15 ml) y agua (3 ml). Se desgasificó la mezcla resultante y se agitó a 90 °C durante 18 h en atmósfera de nitrógeno. Después se dejó enfriar la mezcla de reacción a t.a., se diluyó con EtOAc (100 ml) y se lavó secuencialmente con agua (100 ml) y cloruro de sodio acuoso saturado (50 ml). El extracto orgánico se secó sobre MgSO4 , se filtró, y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de EtOAc del 0 al 70 % en heptano. Las fracciones puras se concentraron a presión reducida, obteniéndose ((1R,3S)-3-((5-cloro-4-(5-metil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de tere-butilo (1,0 g, 69 %) en forma de una espuma de color amarillo. 1H RMN (400 MHz, DMSO, 30 °C) 1,07 - 1,12 (1H, m), 1,70 - 1,82 (3H, m), 1,85 - 1,93 (1H, m), 2,53 - 2,62 (1H, m), 2,66 (1H, dd), 3,11-3,18 (1H, m), 3,19-3,29 (1H, m), 3,76 (1H, dd), 4,32 (1H, dd), 6,76 (1H, d), 8,00 (1H, s), 8,27 (1H, s), 8,34 (1H, s), 10,52 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 474.
Preparación_____ de_____nS.3R)-3-am¡no-M-(5-cloro-4-(5-met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolori.2-blp¡razol-3-¡l)p¡rid¡n-2-
Figure imgf000093_0002
Se disolvió ((1 R,3S)-3-((5-cloro-4-(5-metil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de tere-butilo (1,11 g, 2,34 mmol) en DCM (20 ml). Se añadió ácido trifluoroacético (1 , 8 ml, 23 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a t.a. durante 18 h. La reacción se purificó mediante cromatografía de intercambio iónico usando una columna SCX. El producto deseado se eluyó de la columna utilizando NH3 1 M en MeOH, y las fracciones puras se evaporaron a sequedad, obteniéndose (1S,3R)-3-amino-N-(5-cloro-4-(5-metil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (0,68 g, 77 %) en forma de un sólido de color blanco. m/z: ES+ [M+H]+ 374.
Ejemplos 41 y 42: ¡sómero 1 e ¡sómero 2 de (1S.3R)-3-acetam¡do-M-(5-cloro-4-(5-met¡l-5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolori.2-blp¡razol-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da
Figure imgf000093_0003
Ejemplo 41, isómero 1 Ejemplo 42, isómero 2
Enantiómeros puros. La eonfiguraeión del metilo es deseonoeida para los ejemplos 41 y 42, pero es opuesta en el ejemplo 41 frente al ejemplo 42
Se resolvió la (1 S,3R)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-(5-metil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (670 mg, 1,79 mmol; ejemplo 40) mediante HPLC preparativa (columna IA de Chiral Technologies, 20 ^m de sílice, 100 mm de diámetro, 250 mm de longitud), usando una mezcla 70/15/15 de heptano/EtOH/MeOH como eluyentes y un caudal de 450 ml/min, se concentraron fracciones que contenían los compuestos deseados a presión reducida, obteniéndose el isómero 1 de elución más rápida de (1S,3R)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-(5-metil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (356 mg, 48 %) y el isómero 2 de elución más lenta de (1S,3R)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-(5-metil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (348 mg, 47 %).
Ejemplo 41: Isómero 1 de (1S,3R)-3-acetam¡do-W-(5-cloro-4-(5-met¡l-5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[1,2-b]p¡razol-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da:
1H RMN (400 MHz, DMSO-de, 30 °C) 1,05 - 1,15 (1H, m), 1,25 (3H, d), 1,26-1,39 (3H, m), 1,72-1,83 (6H, m), 1,90 (1H, a d), 2,55 - 2,62 (1H, m), 2,67 (1H, dd), 3,11 - 3,19 (1H, m), 3,21 - 3,28 (1H, m), 3,51 - 3,62 (1H, m), 3,76 (1H, dd), 4,27 -4,37 (1H, m), 7,75 (1H, dbr), 8,00 (1H, s), 8,27 (1H, s), 8,35 (1H, s), 10,55 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 416.
Ejemplo 42: Isómero 2 de (1S,3R)-3-acetam¡do-W-(5-cloro-4-(5-met¡l-5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[1,2-b]p¡razol-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida:
1H RMN (400 MHz, DMSO-de, 30 °C) 1,08 - 1,13 (1H, m), 1,24 (3H, d), 1,25 - 1,36 (3H, m), 1,62-1,85 (6H, m), 1,91 (1H, a d), 2,52-2,61 (1H, m), 2,67 (1H, dd), 3,13-3,19 (1H, m), 3,21-3,29 (1H, m), 3,51-3,60 (1H, m), 3,76 (1H, dd), 4,32 (1H, dd), 7,74 (1H, d), 7,98 (1H, s), 8,28 (1H, s), 8,34 (1H, s), 10,54 (1H, s).
Condiciones analíticas de la fase inversa uiral:
Figure imgf000094_0002
Ejemplo 43: (1 R,3S)-3-acetam¡do-M-(5-cloro-4-(5,5-d¡met¡l-5,6-d¡h¡dro-4H-pirrolof1,2-b]p¡razol-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)ciclohexanocarboxam¡da y
(1S.3R)-3-acetam¡do-M-(5-cloro-4-(5.5-d¡met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rroloH.2-b1p¡razol-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da (ejemplo 14)
Figure imgf000094_0001
Se añadieron precatalizador XPhos de 2.a generación (0,019 g, 0,02 mmol) y carbonato de cesio (0,464 g, 1,42 mmol) a una solución desgasificada de 5,5-dimetil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol (1,6 ml, 0,50 mmol, en forma de una solución a 0,106 g/ml en dioxano; preparado de acuerdo con el ejemplo 14), cis-3-acetamido-N-(5-cloro-4-yodopiridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (0,20 g, 0,47 mmol; preparado de acuerdo con los ejemplos 10 y 12, sustituyendo por ácido cis-3-((ferc-butoxicarbonil)amino)ciclohexanocarboxílico (preparado en el ejemplo 2, intermedios) el ácido (1S,3R)-3-((fe/'c-butoxicarbonil)amino)ciclohexanocarboxflico y anhídrido acético por cloruro de acetilo), 1,4-dioxano (2,6 ml), y agua (0,52 ml). La mezcla resultante se sumergió en un baño de aceite precalentado ajustado a 85 °C. Después de 3 h, se añadieron otros 300 ^l de solución madre de 5,5-dimetil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol (0,106 g/ml en dioxano) a la reacción, ahora de color naranja claro. La reacción se mantuvo a esta temperatura durante otros 45 minutos y, luego, se enfrió a t.a. La reacción se diluyó con cloruro sódico acuoso saturado y se extrajo con acetato de etilo (x2). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo de color amarillo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida de gel de sílice, gradiente de elución de acetato de etilo del 10 al 100 % en hexanos y después metanol del 0 al 20 % en acetato de etilo, obteniéndose cis-3-acetamido-N-(5-cloro-4-(5,5-dimetil-5.6- dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (0,147 g, 72 %) contaminada con una pequeña cantidad de pinacol diol en forma de un sólido de color blanquecino.
Este material se resolvió en sus enantiómeros utilizando condiciones de SFC (columna: (S,S) Whelk-O1, 5 |jm, 21,2 mm de diámetro, 250 mm de longitud, temperatura de la columna de 40 °C, presión de salida de 100 bar, caudal de 75 ml/min), eluyendo con isopropanol al 30 % en CO2 , obteniéndose el ejemplo 14, (1S,3R)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-(5,5-dimetil-5.6- dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (0,053 g, 26 %), en forma de una espuma sólida de color blanco y el ejemplo 43, (1R,3S)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (0,061 g, 30 %), en forma de una espuma sólida de color blanco.
(1R.3S)-3-acetam¡do-N-(5-cloro-4-(5.5-d¡met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[1.2-b]p¡razol-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-ihciclohexanocarboxamida (ejemplo 43):
1H RMN(300 MHz, DIVISOR, 27 °C) 1,05 (1H, d), 1,22 - 1,40 (9H, m), 1,78 (6H, s), 1,90 (1H, d), 2,56 - 2,69 (1H, m), 2,89 (2H, s), 3,47 - 3,65 (1H, m), 3,95 (2H, s), 7,74 (1H, a d), 7,99 (1H, s), 8,25 (1H, s), 8,35 (1H, s), 10,54 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 430.
Cond¡c¡ones de SFC analít¡ca:
Figure imgf000095_0001
Rotac¡ón ópt¡ca de (1R.3S)-3-acetam¡do-N-(5-cloro-4-(5.5-d¡met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[1.2-b]p¡razol-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da (ejemplo 43)
Figure imgf000095_0002
Ejemplo_____ 4 4 _____ (1S.3R)-3-acetam¡do-N-(4-(5.5-d¡met¡l-4.5.6.7-tetrah¡drop¡razolo[1.5-a]p¡r¡d¡n-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da
Figure imgf000096_0001
Se añadió anhídrido acético (0,022 ml, 0,23 mmol) a una solución en agitación de (1S,3R)-3-amino-N-(4-(5,5-dimetil-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (70 mg, 0,19 mmol), trietilamina (0,056 ml, 0,40 mmol), y N,N-dimetilpiridin-4-amina (1,2 mg, 9,5 ^mol) en DCM (10 ml). La mezcla de reacción se agitó a t.a. durante 4 h, y la reacción en bruto se purificó mediante cromatografía de intercambio iónico usando una columna SCX. El producto deseado se eluyó de la columna utilizando NH3 1 M en MeOH y las fracciones que contienen producto se concentraron a presión reducida. El residuo resultante se purificó adicionalmente mediante HPLC preparativa (columna Waters XBridge Prep C18 OBD, 5 ^ de sílice, 30 mm de diámetro, 100 mm de longitud), utilizando mezclas decrecientemente polares de agua (que contiene NH3 al 1 %) y MeCN como eluyentes. Las fracciones que contenían el compuesto deseado se concentraron a presión reducida, obteniéndose (1S,3R)-3-acetamido-N-(4-(5,5-dimetil-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (44 mg, 56 %) en forma de un sólido. 1H RMN (500 MHz, Dm So -cÍ6, 30 °C) 1,04 (6H, s), 1,06 - 1,15 (1H, m), 1,32 - 1,38 (3H, m), 1,66 - 1,82 (6H, m), 1,83 - 1,94 (3H, m), 2,58 - 2,64 (1H, m), 2,78 (2H, s), 3,54 - 3,62 (1H, m), 4,14 (2H, t), 7,16 (1H, dd), 7,76 (1H, d), 7,84 (1H, s), 8,18 (1H, s), 8,24 (1H, d), 10,34 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 410.
Los procedimientos para preparar el material de partida (1S,3R)-3-amino-N-(4-(5,5-dimetil-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida se describen a continuación:
Preparación de 1-(4-etoxi-4-oxobut¡l)-1H-p¡razol-5-carbox¡lato de etilo
Figure imgf000096_0002
Se añadió 4-bromobutanoato de etilo (10 ml, 71 mmol) a una mezcla en agitación de 1H-pirazol-5-carboxilato de etilo (9,9 g, 71 mmol) y carbonato de potasio (11,7 g, 84,8 mmol) en DMF (70 ml). La mezcla se agitó a t.a. durante 24 h. Se añadió agua y la mezcla se extrajo con acetato de etilo (3x). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua (2x), se secaron sobre MgSO4, y se concentraron a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, eluyendo con acetato de etilo al 20 % en pentano, obteniéndose el producto deseado de 1-(4-etoxi-4-oxobutil)-1 H-pirazol-5-carboxilato de etilo (9,0 g, 50 %) en forma de un sólido. 1H RMN (400 MHz, CDCh, 30 °C) 1,24 (3H, t), 1,38 (3H, t), 2,11 - 2,25 (2H, m), 2,25 - 2,38 (2H, m), 4,12 (2H, c), 4,34 (2H, c), 4,63 (2H, t), 6,83 (1H, d), 7,47 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ 255. También se aisló 1-(4-etoxi-4-oxobutil)-1H-pirazol-3-carboxilato de etilo (8 g, 44,5 %).
Preparación de 4-oxo-4.5.6.7-tetrah¡drop¡razolori.5-alp¡rid¡n-5-carbox¡lato de etilo
Figure imgf000096_0003
Se añadió terc-butóxido de potasio (1,39 g, 12,4 mmol) a una solución en agitación de 1-(4-etoxi-4-oxobutil)-1H-pirazol-5-carboxilato de etilo (2,1 g, 8,3 mmol) en tolueno (20 ml). La mezcla se agitó a t.a. durante 10 minutos y después se calentó a 110 °C, que dio como resultado la formación de un precipitado espeso. La mezcla se calentó en estas condiciones durante 30 minutos y, luego, se enfrió a temperatura ambiente antes de acidificarla con HCl diluido y extraerla con acetato de etilo (3x). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron, y se concentraron a presión reducida, obteniéndose 4-oxo-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-5-carboxilato de etilo (1,7 g, 99 %) en forma de un sólido. m/z: ES+ [M+H]+ 209.
Preparación de 6.7-d¡h¡drop¡razolori.5-a1p¡rid¡n-4(5H)-ona
Figure imgf000097_0001
Se añadió cloruro de litio (0,458 g, 10,8 mmol) a una solución en agitación de 4-oxo-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-5-carboxilato de etilo (1,5 g, 7,2 mmol) en DMSO (15 ml). La mezcla se calentó a 120 °C durante 24 h y después se enfrió a t.a. Se añadió agua y la mezcla se extrajo con acetato de etilo (3x). Se combinaron las capas orgánicas y se concentraron a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, eluyendo con acetato de etilo al 50 % en heptano, obteniéndose 6,7-dihidropirazolo[1,5-a]piridin-4(5H)-ona (0,90 g, 92 %) en forma de un sólido. 1H RMN (400 MHz, CDCls, 30 °C) 2,26 - 2,45 (2H, m), 2,65 - 2,75 (2H, m), 4,35 - 4,45 (2H, m), 6,87 (1H, d), 7,55 (1H, d).
Preparación de 5.5-d¡metM-6.7-d¡h¡drop¡razoH.5-a1p¡r¡d¡n-4(5H)-ona
Figure imgf000097_0002
Se añadió hidruro de sodio (60 % en peso en aceite mineral; 705 mg, 17,6 mmol) a una solución de 6,7-dihidropirazolo[1,5-a]piridin-4(5H)-ona (800 mg, 5,88 mmol) en DMF (5,0 ml) a 0 °C. La mezcla se agitó durante 10 minutos en estas condiciones y después se añadió yodometano (1,10 ml, 17,6 mmol). Se retiró el baño de hielo y la reacción se mantuvo en estas condiciones durante 18 h. Se añadió agua y se acidificó la mezcla con ácido clorhídrico acuoso diluido hasta alcanzar un pH de 7. Después se extrajo la reacción con éter (3x), y las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, eluyendo con acetato de etilo al 30 % en heptano, obteniéndose 5,5-dimetil-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]piridin-4(5H)-ona (800 mg, 83 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (400 MHz, CDCb, 30 °C) 1,27 (6H, s), 2,06 - 2,26 (2H, m), 4,32 - 4,5 (2H, m), 6,86 (1H, d), 7,54 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ 165.
Preparación de 5.5-d¡metil-4.5.6.7-tetrah¡drop¡razoloH.5-a1p¡r¡d¡na
Figure imgf000097_0003
Se añadió hidrato de hidrazina (1,18 ml, 24,4 mmol) a una solución en agitación de 5,5-dimetil-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]piridin-4(5H)-ona (800 mg, 4,87 mmol) disuelta en dietilenglicol (10 ml, 105 mmol). La solución resultante se agitó a 180 °C durante 1 hora. Después se retiró la reacción del calor, y se añadió cuidadosamente hidróxido de potasio (957 mg, 17,1 mmol) a la mezcla. La suspensión resultante se agitó a 170 °C durante 2 h. Después de enfriar, la mezcla de reacción se diluyó con agua, se acidificó a pH 5 con ácido clorhídrico acuoso diluido (2 N), y se extrajo con Et2O (5 * 50 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua (2 * 20 ml) y después se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron a presión reducida, obteniéndose 5,5-dimetil-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridina (650 mg, 89 %) en forma de un sólido. 1H RMN (400 MHz, CDCla, 30 °C) 1,05 (6H, s), 1,66 - 1,97 (2H, m), 2,57 (2H, s), 4,15 (2H, t), 5,92 -5,94 (1H, m), 7,44 (1H, d).
Preparación de 3-vodo-5.5-d¡met¡l-4.5.6.7-tetrah¡drop¡razoloH.5-a1p¡r¡d¡na
Figure imgf000097_0004
Se añadió NIS (1,07 g mg, 4,76 mmol) a una solución en agitación de 5,5-dimetil-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridina (650 mg, 4,33 mmol) disuelto en acetonitrilo (10 ml) a 23 °C. La mezcla resultante se agitó a 23 °C durante 16 h. Después se diluyó la mezcla de reacción con EtOAc (20 ml) y se lavó secuencialmente con agua (2 * 20 ml) y cloruro de sodio acuoso saturado (20 ml). La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró a presión reducida, obteniéndose 3-yodo-5,5-dimetil-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridina en bruto (1,1 g, 92 %) en forma de un sólido. 1H RMN (400 MHz, CDCla, 30 °C) 1,07 (6H, s), 1,80 (2H, t), 2,43 (2H, s), 4,24 (2H, t), 7,48 (1H, s).
Preparación_________ de_________ ((1R.3S)-3-((4-(5.5-d¡met¡l-4.5.6.7-tetrah¡drop¡razoloH.5-a1p¡r¡d¡n-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)carbamo¡l)ciclohex¡l)carbamato de tere-butilo
Figure imgf000098_0001
Se añadió dicloro[1,1'-bis(di-t-butilfosfino)ferroceno]paladio(N) (44 mg, 0,070 mmol) a una solución desgasificada de ((1 R,3S)-3-((4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)piridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de tere-butilo (300 mg, 0,67 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 16), 3-yodo-5,5-dimetil-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridina (242 mg, 0,88 mmol), y fosfato de potasio tribásico (429 mg, 2,02 mmol), en 1,4-dioxano (10 ml) y agua (1 ml). La mezcla resultante se agitó a 90 °C durante 18 h. La reacción en bruto se enfrió y se purificó mediante cromatografía de intercambio iónico usando una columna SCX. El producto deseado se eluyó de la columna utilizando NH3 1 M en MeOH, y las fracciones que contienen producto se concentraron a presión reducida, obteniéndose el producto en bruto en forma de un aceite de color pardo. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de EtOAc del 0 al 100 % en heptano. Las fracciones puras se concentraron a presión reducida, obteniéndose ((1 R,3S)-3-((4-(5,5-dimetil-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de tere-butilo (170 mg, 54 %) en forma de un sólido. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6 , 30°C) 1,03 (6 H, s), 1,04 - 1,15 (1H, m), 1,21 - 1,41 (12H, m), 1,72 - 1,81 (3H, m), 1,83 - 1,92 (3H, m), 2,53 - 2,62 (1H, m), 2,65 - 2,69 (2H, m), 4,16 (2H, t), 6,76 (1H, a d), 7,76 (1H, d), 8,19 (1H, d), 8,29 (1H, d), 10,43 (1H, s). Multiplete amplio (1H) por debajo de la base del pico Ho D a 3,3 ppm. m/z: ES+ [M+H]+ 468.
Preparación______ de_____ nS.3R)-3-am¡no-M-(4-(5.5-d¡met¡l-4.5.6.7-tetrah¡drop¡razolori.5-alp¡r¡d¡n-3-¡l)p¡rid¡n-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da
Figure imgf000098_0002
Se añadió ácido trifluoroacético (1 ml) a ((1R,3S)-3-((4-(5,5-dimetil-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de tere-butilo (170 mg, 0,36 mmol) en DCM (10 ml). La mezcla resultante se agitó a t.a. durante 6 h. Después, la reacción se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se sometió a cromatografía de intercambio iónico usando una columna SCX. El producto deseado se eluyó de la columna utilizando NH32 M en MeOH. Las fracciones de producto se concentraron a presión reducida, y el residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida de gel de sílice, eluyendo con (amoniaco al 1 % en metanol) al 7 % en DCM, obteniéndose (1S,3R)-3-amino-N-(4-(5,5-dimetil-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (70 mg, 52 %) en forma de un sólido. m/z: eS+ [M+H]+ 368.
Ejemplo______ 4 5 ______ (S)-M-(nR.3S)-3-((5-cloro-4-(5.5-d¡met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolori.2-blp¡razol-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)carbamo¡l)c¡clohex¡l)tetrah¡drofuran-2-carboxam¡da
Figure imgf000098_0003
Se añadió HATU (118 mg, 0,31 mmol) a una solución de ácido (S)-tetrahidrofuran-2-carboxílico (0,03 ml, 0,31 mmol), (1S,3R)-3-amino-N-(5-cloro-4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (100 mg, 0,26 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 14) y trietilamina (0,11 ml, 0,77 mmol) en DMA (2 ml). La mezcla de reacción se agitó a t.a. durante 16 h y después se inactivó con agua (20 ml). La mezcla se extrajo con DCM (50 ml), y la capa orgánica se lavó con salmuera (50 ml). La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró, y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante HPLC preparativa (columna Waters XBridge Prep C18 OBD, 5 ^ de sílice, 30 mm de diámetro, 100 mm de longitud) utilizando mezclas decrecientemente polares de agua (que contenía NH3 al 1 %) y MeCN como eluyentes. Las fracciones que contenían el compuesto deseado se concentraron a presión reducida, obteniéndose (S)-N-((1 R,3S)-3-((5-doro-4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-N)carbamoN)cidohexN)tetrahidrofuran-2 -carboxamida (59 mg, 47 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H Rm N(500 MHz, DMSO-tá, 30 °C) 1,19 - 1,36 (9H, s), 1,49 (1H, c), 1,70 (1H, d), 1,74 - 1,89 (6 H, m), 2,02 - 2,16 (1H, m), 2,58 - 2,68 (1H, m), 2,90 (2H, s), 3,63 (1H, dd), 3,75 (1H, c), 3,89 (1H, c), 3,95 (2H, s), 4,17 (1H, dd), 7,60 (1H, d), 8,00 (1H, s), 8,26 (1H, s), 8,31 - 8,38 (1H, m), 10,55 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 486.
Ejemplo______ 46 ______(R)-M-((1R.3S)-3-((5-cloro-4-(5.5-d¡met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolori.2-b1p¡razol-3-¡l)pir¡d¡n-2-¡l)carbamo¡l)c¡clohex¡l)tetrah¡drofuran-2-carboxam¡da
Figure imgf000099_0001
Se añadió HATU (118 mg, 0,31 mmol) a una solución de ácido (R)-tetrahidrofuran-2-carboxílico (0,03 ml, 0,31 mmol), (1S,3R)-3-amino-N-(5-doro-4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-N)ddohexanocarboxamida (100 mg, 0,26 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 14) y trietilamina (0,11 ml, 0,77 mmol) en DMA (2 ml). La mezcla de reacción se agitó a t.a. durante 16 h y después se inactivó con agua (20 ml). La mezcla se extrajo con Dc M (50 ml), y la capa orgánica se lavó con cloruro de sodio acuoso saturado (50 ml), se secó sobre MgSO4 , se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante HPLC preparativa (columna Waters XBridge Prep C18 OBD, 5 ^ de sílice, 30 mm de diámetro, 100 mm de longitud) utilizando mezclas decrecientemente polares de agua (que contenía NH3 al 1 %) y MeCN como eluyentes. Las fracciones que contenían el compuesto deseado se evaporaron a sequedad, obteniéndose (R)-N-((1 R,3S)-3-((5-cloro-4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)tetrahidrofuran-2-carboxamida (61 mg, 49 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H Rm N (500 MHz, DMSO-CÍ6 , 30 °C) 1,20 - 1,37 (9H, s), 1,49 (1H, c), 1,70 (1H, d), 1,75 - 1,9 (6 H, m), 2,04 - 2,16 (1H, m), 2,58 - 2,68 (1H, m), 2,90 (2H, s), 3,58 - 3,67 (1H, m), 3,75 (1H, c), 3,89 (1H, c), 3,95 (2H, s), 4,17 (1H, dd), 7,60 (1H, d), 8,00 (1H, s), 8,26 (1H, s), 8,35 (1H, s), 10,55 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 486.
Ejemplo 47: nS.3R)-3-acetam¡do-M-(4-(5.5-d¡met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolori.2-blp¡razol-3-¡l)-5-met¡lp¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da
Figure imgf000099_0002
Se añadió 5,5-dimetil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-5,6-dihidro-4H-pirrolo[l,2-b]pirazol (94 mg, 0,26 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 23) a una solución de (1S,3R)-3-acetamido-N-(4-yodo-5-metilpiridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (100 mg, 0,25 mmol) en 1,4-dioxano (2,1 ml) y agua (0,4 ml), obteniéndose una solución incolora. La solución se purgó con nitrógeno durante 10 min, y después se añadieron carbonato de cesio (244 mg, 0,75 mmol) y precatalizador XPhos de 2.a generación (19,6 mg, 0,02 mmol). La reacción se calentó a 85 °C durante 7 h y después se enfrió a t.a. La reacción se diluyó con EtOAc (50 ml) y después se lavó con agua y cloruro de sodio acuoso saturado. La capa orgánica se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se adsorbió sobre gel de sílice y se purificó mediante cromatografía ultrarrápida de gel de sílice, eluyendo con MeOH del 0 al 10 % en DCM, obteniéndose (1S,3R)-3-acetamido-N-(4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)-5-metilpiridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (37 mg, 36 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6 , 27 °C) 1,00 - 1,16 (1H, m), 1,27 (9H, s), 1,78 (6 H, s), 1,85 - 1,96 (1H, m), 2,33 (3H, s), 2,55 - 2,65 (1H, m), 2,86 (2H, s), 3,88 - 3,97 (2H, m), 7,75 (1H, d), 7,82 (1H, s), 7,98 (1H, s), 8,13 (1H, s), 10,45 (1H, s a). m/z: ES+ [M+H]+ 410.
Rotac¡ón ópt¡ca:
Figure imgf000099_0003
Figure imgf000100_0004
Los procedimientos utilizados para preparar el material de partida (1S,3R)-3-acetamido-N-(4-yodo-5-metilpiridin-2-il)ciclohexanocarboxamida se describen a continuación:
Preparación de 4-vodo-5-metilp¡r¡d¡n-2-am¡na
Figure imgf000100_0001
Se sometió una suspensión de color blanco de 2-fluoro-4-yodo-5-metilpiridina (3,00 g, 12,7 mmol) e hidróxido de amonio acuoso concentrado (3,5 ml, 90 mmol) en DMSO (17 ml) a condiciones de microondas (140 °C, 4 h) y después se enfrió. La reacción se diluyó con EtOAc y agua y se separaron las capas. La capa acuosa se extrajo con EtOAc (3 x 50 ml), y las capas orgánicas combinadas se concentraron a presión reducida. El residuo resultante se adsorbió sobre gel de sílice y se purificó mediante cromatografía ultrarrápida de gel de sílice, gradiente de elución de MeOH del 0 al 10 % en DCM, obteniéndose 4-yodo-5-metilpiridin-2-amina (800 mg, 27 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (300 MHz, DMSO-tá, 27 °C) 2,13 (s, 3 H) 5,81 (s, 2 H) 6,99 (s, 1 H) 7,75 (s, 1 H). m/z: ES+ [M+H]+ 235.
Preparación de (nR.3S)-3-((4-vodo-5-met¡lp¡r¡d¡n-2-¡l)carbamoil)c¡clohex¡l)carbamato de tere-butilo
Figure imgf000100_0002
Se añadió 1-cloro-N,N,2-trimetilprop-1-en-1-amina (0,24 ml, 1,8 mmol) a una solución de ácido (1S,3R)-3-((terebutoxicarbonil)amino)ciclohexanocarboxílico (321 mg, 1,32 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 2) en DCM (2,8 ml), obteniéndose una solución incolora. La solución se agitó a t.a. durante 2 h y después se añadió una solución de 4-yodo-5-metilpiridin-2-amina (281 mg, 1,2 mmol) y piridina (0,24 ml, 3,0 mmol) en DCM (2,8 ml) at 0 °C. Se dejó calentar la reacción a t.a. y se agitó en estas condiciones 3 h antes de diluirla con DCM y lavarla con NaHCO3 acuoso saturado, agua y cloruro de sodio acuoso saturado. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró, y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se adsorbió sobre gel de sílice y se purificó mediante cromatografía ultrarrápida de gel de sílice, gradiente de elución de MeOH del 0 al 10 % en DCM, obteniéndose ((1 R,3S)-3-((4-yodo-5-metilpiridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de tere-butilo (530 mg, 96 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6, 27 °C) 1,02 - 1,13 (1H, m), 1,44-1,53 (3H, m), 1,38 (9H, s), 1,65 - 1,80 (3H, m), 1,87 (1H, a d), 2,29 (3H, s), 2,52 - 2,61 (1H, m), 3,19 - 3,34 (1H, m), 6,78 (1H, a d), 8,16 (1H, s), 8,61 (1H, s), 10,43 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 460. Preparación de (1S.3R)-3-acetam¡do-M-(4-vodo-5-met¡lp¡r¡d¡n-2-il)c¡clohexanocarboxam¡da
Figure imgf000100_0003
Se añadió ácido clorhídrico en dioxano (4 M; 2,1 ml, 8,6 mmol) a ((1R,3S)-3-((4-yodo-5-metilpiridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de terc-butilo (393 mg, 0,86 mmol) en MeOH (4,3 ml), obteniéndose una solución incolora. La reacción se agitó a t.a. durante 4 h, obteniéndose una mezcla de color blanco. La reacción se concentró a presión reducida, obteniéndose un sólido de color blanco. Se añadieron TEA (0,60 ml, 4,3 mmol) y anhídrido acético (0,16 ml, 1,7 mmol), y la reacción se agitó a t.a. durante 1 hora. La mezcla después se diluyó con DCM, y se lavó con agua y cloruro de sodio acuoso saturado. La capa orgánica se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se adsorbió sobre gel de sílice y se purificó mediante cromatografía ultrarrápida de gel de sílice, gradiente de elución de MeOH del 0 al 10 % en DCM, obteniéndose (1S,3R)-3-acetam¡do-N-(4-yodo-5-met¡lp¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da (100 mg, 29 %) en forma de un ace¡te transparente. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6 , 27 °C) 1,04 - 1,13 (1H, m), 1,19 - 1,39 (3H, m), 1,69 - 1,81 (6 H, m), 1, 86 (1H, a d), 2,29 (3H, s), 2,55 - 2,61 (1H, m), 3,41 - 3,62 (1H, m), 7,75 (1H, a d), 8,16 (1H, s), 8,61 (1H, s), 10,45 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 402.
Ejemplo 48: (1 S.3R)-3-acetam¡do-M-(5-cloro-4-(5.5-d¡met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rroloH .2-b1p¡razol-3-¡l)pir¡d¡n-2-il)ciclopentanocarboxam¡da
Figure imgf000101_0001
Se añad¡ó anhídr¡do acét¡co (0,25 ml, 2,67 mmol) a (1S,3R)-3-am¡no-N-(5-cloro-4-(5,5-d¡met¡l-5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[1,2-b]p¡razol-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clopentanocarboxam¡da (500 mg, 1,34 mmol) y TEA (0,64 ml, 4,6 mmol) en DCM (10 ml) y MeOH (2 ml) en atmósfera de n¡trógeno. La suspens¡ón resultante se ag¡tó a t.a. durante 6 h. La mezcla de reacc¡ón se d¡luyó después con DCM y se lavó secuenc¡almente con cloruro de amon¡o acuoso saturado y agua antes de secarla sobre sulfato de magnes¡o, filtrarla y concentrarla a pres¡ón reduc¡da. El res¡duo resultante se pur¡f¡có med¡ante HPLC preparat¡va (columna Waters SunF¡re, 5 ^ de síl¡ce, 30 mm de d¡ámetro, 100 mm de long¡tud), ut¡l¡zando mezclas decrec¡entemente polares de agua (que contenían ác¡do fórm¡co al 0,1 %) y MeCN como eluyentes. Las fracc¡ones que contenían el compuesto deseado se concentraron a pres¡ón reduc¡da, obten¡éndose (1S,3R)-3-acetam¡do-N-(5-cloro-4-(5,5-d¡met¡l-5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[1,2-b]p¡razol-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clopentanocarboxam¡da (340 mg, 61 %) en forma de un sól¡do. 1H RMN (500 MHz, DMSO, 30°C) 1,28 (6 H, s), 1,45 - 1,51 (1H, m), 1,62 (1H, dt), 1,79 (3H, s), 1,81 - 1,89 (3H, m), 2,15 (1H, dt), 2,90 (2H, s), 3,00 (1H, dq), 3,95 (2H, s), 4,04 (1H, dq), 7,90 (1H, d), 8,00 (1H, s), 8,28 (1H, s), 8,35 (1H, s), 10,58 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 416.
Los proced¡m¡entos ut¡l¡zados para preparar el material de part¡da (1S,3R)-3-am¡no-N-(5-cloro-4-(5,5-d¡met¡l-5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[1,2-b]p¡razol-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clopentanocarboxam¡da se describen a cont¡nuac¡ón:
Preparación de ((1R.3S)-3-((5-cloro-4-vodop¡r¡d¡n-2-il)carbamo¡l)c¡clopent¡l)carbamato de tere-butilo
Figure imgf000101_0002
Se añad¡ó T3P (>50 % en peso en acetato de et¡lo; 2,60 ml, 4,36 mmol) a una soluc¡ón de 5-cloro-4-yodop¡r¡d¡n-2-am¡na (694 mg, 2,18 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 2), ác¡do (1S,3R)-3-((tercbutox¡carbon¡l)am¡no)c¡clopentanocarboxíl¡co (500 mg, 2,18 mmol) y p¡r¡d¡na (0,71 ml, 8,7 mmol) en EtOAc (10 ml). La soluc¡ón resultante se ag¡tó a t.a. durante 24 h. La mezcla de reacc¡ón se d¡luyó con cloruro de amon¡o acuoso saturado (25 ml) y se extrajo con EtOAc (50 ml). La capa orgán¡ca se secó sobre MgSO4 , se filtró, y se concentró a pres¡ón reduc¡da, obten¡éndose ((1R,3S)-3-((5-cloro-4-yodop¡r¡d¡n-2-¡l)carbamo¡l)c¡clopent¡l)carbamato de ferc-but¡lo (650 mg, 64 %). 1H RMN (400 MHz, DMSO-tá, 30 °C) 1,39 (9H, s), 1,46 - 1,63 (2H, m), 1,74 - 183 (3H, m), 2,04 - 2,17 (1H, m), 2,90 - 3,00 (1H, m), 3,70 - 3,84 (1H, m), 6,73 - 6,82 (1H, m), 8,39 (1H, s), 8,73 (1H, s), 10,68 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 466.
Preparación_______ de_______ ((1R.3S)-3-((5-cloro-4-(5.5-d¡met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolori.2-b1p¡razol-3-¡l)p¡rid¡n-2-¡l)carbamoil)c¡clopent¡l)carbamato de tere-butilo
Figure imgf000101_0003
Se añad¡ó 5,5-d¡met¡l-3-(4,4,5,5-tetramet¡l-1,3,2-d¡oxaborolan-2-¡l)-5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[1,2-b]p¡razol (665 mg, 1,95 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 23) a ((1R,3S)-3-((5-cloro-4-yodop¡r¡d¡n-2-¡l)carbamo¡l)c¡clopent¡l)carbamato de ferc-but¡lo (650 mg, 1,40 mmol), precatal¡zador XPhos de 2.a generac¡ón (110 mg, 0,14 mmol) y fosfato de potasio dibásico (729 mg, 4,19 mmol) en 1,4-dioxano (20 ml) y agua (4 ml) en atmósfera de nitrógeno. La suspensión resultante se agitó a 85 °C durante 20 h. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (50 ml), y se lavó secuencialmente con agua (2 x 25 ml) y cloruro de sodio acuoso saturado (25 ml). La capa orgánica se secó sobre MgSO4 , se filtró, y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, eluyendo con EtOAc del 25 al 70 % en heptano. Las fracciones puras se evaporaron a sequedad, obteniéndose ((1 R,3S)-3-((5-cloro-4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)carbamoil)ciclopentil)carbamato de tere-butilo (600 mg, 91 %) en forma de un sólido de color blanco. m/z: ES+ [M+H]+ 474.
Preparación de (1S.3R)-3-am¡no-M-(5-cloro-4-(5.5-d¡met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolori.2-b1p¡razol-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clopentanocarboxam¡da
Figure imgf000102_0001
Se añadió lentamente ácido clorhídrico en dioxano (4 M; 1,6 ml, 6,3 mmol) a ((1R,3S)-3-((5-cloro-4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)carbamoil)ciclopentil)carbamato de tere-butilo (600 mg, 1,27 mmol) en DCM (10 ml) en atmósfera de nitrógeno. La suspensión resultante se agitó a t.a. durante 4 h y después se almacenó en el frigorífico durante un periodo de 72 horas. Después se diluyó la mezcla de reacción con DCM (10 ml) y MeOH (2 ml), y se añadió ácido clorhídrico en dioxano (4 M; 1,6 ml, 6,3 mmol) en atmósfera de nitrógeno. La suspensión resultante se agitó a t.a. durante 18 h adicionales y después se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía de intercambio iónico usando una columna SCX. El producto deseado se eluyó de la columna utilizando NH3 1 M en MeOH, y las fracciones de producto se concentraron a presión reducida, obteniéndose (1S,3R)-3-amino-N-(5-cloro-4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)ciclopentanocarboxamida (473 mg, 99 %) en forma de un aceite de color amarillo. 1H RMN (500 MHz, DMSO-^, 27°C) 1,28 (6 H, s), 1,49 (1H, dd), 1,59 (1H, dd), 1,73 (1H, dd), 1,91 (2H, c), 2,04 (1H, td), 2,89 - 2,93 (3H, m), 3,78 - 3,83 (1H, m), 3,95 (2H, s), 8,00 (1H, s), 8,27 (1H, s), 8,34 (1H, s). No se observa el NH de la amida; se supone que la señal del NH2 está bajo el pico amplio de agua. m/z: ES+ [M+H]+ 374.
Figure imgf000102_0003
p¡r¡d¡n-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-
¡l)c¡clohexanocarboxam¡da
Figure imgf000102_0002
Se añadió dímero de metoxi(ciclooctadieno)iridio(I) (54 mg, 0,08 mmol) a 4,5,6,7-tetrahidro-[1,2,3]triazolo[1,5-a]piridina (100 mg, 0,81 mmol), 4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (312 mg, 2,44 mmol), y 4,4'-di-terc-butil-2,2'-dipiridilo (44 mg, 0,16 mmol) en THF (2 ml) en atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó a 90 °C durante 3 h. Tras enfriarla, se obtuvieron aproximadamente 2,3 ml de mezcla de reacción que contenía 3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-4,5,6,7-tetrahidro-[1,2,3]triazolo[1,5-a]piridina en bruto en forma de una suspensión, m/z: ES+ [M+3H-(C(CH3)2)2]+ 168.
Se añadió 3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-4,5,6,7-tetrahidro-[1,2,3]triazolo[1,5-a]piridina en bruto (aproximadamente 0,3 ml de la suspensión de reacción anterior) a una mezcla de (1S,3R)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-yodopiridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (10 mg, 0,02 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 12), Cs2CO3 (15 mg, 0,05 mmol) y precatalizador XPhos de 2.a generación (1,9 mg, 2.4 ^mol) en 1,4-dioxano (2 ml) y agua (0,5 ml) en atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se calentó a 60 °C y se mantuvo en estas condiciones durante 45 minutos. A continuación, se dejó enfriar esta reacción a t.a.
En un matraz separado, se añadió la mezcla en suspensión restante que contenía 3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-4,5,6,7-tetrahidro-[1,2,3]triazolo[1,5-a]piridina en bruto (aproximadamente 2,0 ml) a una mezcla de (1S,3R)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-yodopiridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (70 mg, 0,17 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 12), Cs2CO3 (325 mg, 1,00 mmol) y precatalizador XPhos de 2.a generación (26 mg, 0,03 mmol) en 1,4dioxano (16 ml) y agua (4 ml) en atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó a 60 °C durante 45 minutos. A continuación, se dejó enfriar esta reacción a t.a.
Se combinaron ambas mezclas de reacción enfriadas y después se diluyeron con cloruro de sodio acuoso saturado (100 ml). La mezcla resultante se extrajo con EtOAc (3 x 100 ml), y las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se filtraron, y se concentraron a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, usando un gradiente de elución de EtOAc del 0 al 100 % en éter de petróleo, seguido de un gradiente de elución de MeOH del 0 al 20 % en EtOAc. Las fracciones puras se concentraron a presión reducida. El residuo resultante se purificó adicionalmente mediante HPLC preparativa (columna XBridge Prep C18 OBD, 5 ^ de sílice, 19 mm de diámetro, 150 mm de longitud), utilizando mezclas decrecientemente polares de agua (que contenía NH4HCO3 al 0,8 %) y MeCN como eluyentes. Las fracciones que contenían el compuesto deseado se concentraron a presión reducida, obteniéndose (1 S,3R)-3-acetamido-W-(5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidro-[1,2,3]triazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (20 mg, 25 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (d Ms O-^6, 400 MHz, 21 °C) 1,00 - 1,14 (1H, m), 1,19 - 1,37 (3H, m), 1,68 - 1,81 (6H, m), 1,81 - 1,92 (3H, m), 1,99 - 2,10 (2H, m), 2,56 - 2,70 (1H, m), 2,82 (2H, t), 3,51 - 3,63 (1H, m), 4,42 (2H, t), 7,80 (1H, d), 8,26 (1H, s), 8,48 (1H, s), 10,73 (1H, s). mlz: ES+ [M+H]+ 417.
Ejemplo 50: (1S.3Rl-3-acetam¡do-M-(4-(6.6-d¡met¡l-6.7-d¡h¡dro-5H-p¡rroloH ,2-alim¡dazol-3-¡l)-5-fluorop¡r¡d¡n-2-¡Hciclohexanocarboxamida
Figure imgf000103_0001
Se añadió anhídrido acético (0,024 ml, 0,26 mmol) gota a gota a (1S,3R)-3-amino-W-(4-(6,6-dimetil-6,7-dihidro-5H-pirrolo[1,2-a]imidazol-3-il)-5-fluoropiridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (0,080 g, 0,22 mmol), 4-dimetilaminopiridina (1 mg, 11 ^mol) y trietilamina (0,093 ml, 0,67 mmol) en DCM (2 ml) a t.a. en atmósfera de nitrógeno. La solución resultante se agitó a t.a. durante 4 h. La mezcla de reacción se inactivó con cloruro de amonio acuoso saturado (10 ml), se extrajo con DCM (2 x 1 0 ml), y las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO4 , se filtraron, y se concentraron a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante HPLC preparativa (columna Waters XBridge Prep C18 OBD, 5 ^ de sílice, 30 mm de diámetro, 100 mm de longitud), utilizando mezclas decrecientemente polares de agua (que contenía NH3 al 1 %) y MeCN como eluyentes. Las fracciones que contenían el compuesto deseado se concentraron a presión reducida, obteniéndose (1S,3R)-3-acetamido-W-(4-(6,6-dimetil-6,7-dihidro-5H-pirrolo[1,2-a]imidazol-3-il)-5-fluoropiridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (0,070 g, 79 %). 1H RMN (500 MHz, DMSO-CÍ6, 30°C) 1,02 - 1,21 (1H, m), 1,22 - 1,38 (9H, m), 1,70 - 1,82 (6H, m), 1,91 (1H, a d), 2,54 - 2,65 (1H, m), 2,71 (2H, s), 3,58 (1H, dt), 4,00 (2H, s), 7,44 (1H, d), 7,76 (1H, d), 8,34 (1H, d), 8,38 (1H, d), 10,56 (1H, s). mlz: ES+ [M+H]+ 414.
Los procedimientos utilizados para preparar el material de partida (1S,3R)-3-amino-W-(4-(6,6-dimetil-6,7-dihidro-5H-pirrolo[1,2-a]imidazol-3-il)-5-fluoropiridin-2-il)ciclohexanocarboxamida se describen a continuación:
Preparación de 3-(2-cloro-5-fluorop¡r¡d¡n-4-¡l)-6.6-d¡met¡l-6.7-d¡h¡dro-5H-p¡rroloH.2-al¡m¡dazol
Figure imgf000103_0002
Se suspendieron 6,6-dimetil-6,7-dihidro-5H-pirrolo[1,2-a]imidazol (0,180 g, 1,32 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 22), 2-cloro-5-fluoro-4-yodopiridina (0,476 g, 1,85 mmol), carbonato de cesio (0,474 g, 1,45 mmol), trietilamina (0,368 ml, 2,64 mmol), trifenilfosfina (0,055 g, 0,21 mmol) y diacetoxipaladio (0,024 g, 0,11 mmol) en 1,4-dioxano (5 ml) y se sellaron en un tubo para microondas. La reacción se sometió a condiciones de microondas (100 °C, 16 h) y se enfrió a t.a. La mezcla de reacción se diluyó con DCM (20 ml) y se lavó con agua (3 x 25 ml). Después, la capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró, y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de EtOAc del 0 al 50 % en heptano. Las fracciones puras se concentraron a presión reducida, obteniéndose 3-(2-cloro-5-fluoropiridin-4-il)-6,6-dimetil-6,7-dihidro-5H-pirrolo[1,2-a]imidazol (0,185 g, 53 %) en forma de un sólido de color naranja. 1H RMN (500 MHz, CDCb, 27 °C) 1,34 (6H, s), 2,80 (2H, s), 3,93 (2H, s), 7,32 (1H, d), 7,59 (1H, d), 8,26 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ 266.
Preparación______ de______ ((1R.3S)-3-((4-(6.6-d¡met¡l-6.7-d¡h¡dro-5H-p¡rrolori.2-a1¡m¡dazol-3-¡l)-5-fluorop¡rid¡n-2-il)carbamo¡l)c¡clohexil)carbamato de tere-butilo
Figure imgf000104_0001
Se añadió tetraquis(trifenilfosfina)paladio(0) (43 mg, 0,04 mmol) a 3-(2-cloro-5-fluoropiridin-4-il)-6,6-dimetil-6,7-dihidro-5H-pirrolo[1,2-a]imidazol (100 mg, 0,38 mmol), ((1R,3S)-3-carbamoilcidohexil)carbamato de ferc-butilo (109 mg, 0,45 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 25), 9,9-dimetil-4,5-bis(difenilfosfino)xanteno (44 mg, 0,08 mmol) y carbonato de cesio (368 mg, 1,13 mmol) en 1,4-dioxano ( 6 ml). La mezcla se desgasificó durante 5 minutos en atmósfera de nitrógeno, y la suspensión resultante se sometió a condiciones de microondas (120 °C, 3 h). La mezcla de reacción se repartió entre agua (20 ml) y DCM (40 ml). Se separaron las capas usando un cartucho de separación de fases, y la capa orgánica se adsorbió sobre sílice y se purificó mediante cromatografía ultrarrápida de gel de sílice, gradiente de elución de EtOAc del 0 al 60 % en heptano. Las fracciones puras se concentraron a presión reducida, obteniéndose ((1 R,3S)-3-((4-(6,6-dimetil-6,7-dihidro-5H-pirrolo[1,2-a]imidazol-3-il)-5-fluoropiridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de ferc-butilo (142 mg, 80 %). m/z: ES+ [M+H]+ 472.
Preparación de (1 S.3R)-3-am¡no-M-(4-(6.6-d¡met¡l-6.7-d¡h¡dro-5H-p¡rrolori.2-al¡m¡dazol-3-¡l)-5-fluorop¡rid¡n-2-¡l)ciclohexanocarboxam¡da
Figure imgf000104_0002
Se disolvió ((1 R,3S)-3-((4-(6,6-dimetil-6,7-dihidro-5H-pirrolo[1,2-a]imidazol-3-il)-5-fluoropiridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de ferc-butilo (0,100 g, 0,21 mmol) en DCM (5 ml) y se añadió ácido trifluoroacético (0,16 ml, 2 , 1 mmol). La mezcla de reacción se agitó a t.a. durante 30 min y después se purificó mediante cromatografía de intercambio iónico usando una columna SCX. El producto deseado se eluyó de la columna utilizando NH3 1 M en MeOH, y las fracciones puras se concentraron a presión reducida, obteniéndose (1S,3R)-3-amino-N-(4-(6,6-dimetil-6,7-dihidro-5H-pirrolo[1,2-a]imidazol-3-il)-5-fluoropiridin-2-il)ciclohexanocarboxamida semipura en forma de una goma incolora (100 mg). Esta goma se usó en la etapa siguiente sin purificación adicional. m/z: ES+ [M+H]+ 372.
Ejemplo 51: (1 S.3R)-3-acetam¡do-M-(4-(5.5-d¡met¡l-4.5.6.7-tetrah¡drop¡razoloH .5-a1p¡r¡din-3-¡l)-5-fluorop¡r¡d¡n-2-¡l)ciclohexanocarboxam¡da
Figure imgf000104_0003
Se añadió anhídrido acético (0,088 ml, 0,93 mmol) a una solución en agitación de (1S,3R)-3-amino-N-(4-(5,5-dimetil-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)-5-fluoropiridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (300 mg, 0,78 mmol; descrito en el ejemplo 51a), trietilamina (0,23 ml, 1,6 mmol) y DCM (10 ml). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 4 h. Se añadió sílice y las fracciones volátiles se retiraron mediante concentración a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida de gel de sílice, eluyendo con metanol al 0,5 % en acetato de etilo, obteniéndose (1 S,3R)-3-acetamido-N-(4-(5,5-dimetil-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)-5-fluoropiridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (300 mg, 90 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMn (400 MHz, DMSO-CÍ6 , 30 °C) 1,03 (6 H, s), 1,02 - 1,14 (1H, m), 1,24 - 1,38 (3H, m), 1,72 - 1,81 (6 H, m), 1,86 - 1,91 (3H, m), 2,55 - 2,64 (1H, m), 2,69 (2H, s), 3,52 - 3,64 (1H, m), 4,16 (2H, t), 7,64 - 7,81 (2H, m), 8,19 (1H, d), 8,29 (1H, d), 10,45 (1H, s). mlz: ES+ [M+H]+ 428.
Ejemplo 51a: (1S.3R)-3-am¡no-M-(4-(5.5-d¡met¡l-4.5.6.7-tetrah¡drop¡razolori.5-alp¡r¡d¡n-3-¡l)-5-fluorop¡rid¡n-2-il)ciclohexanocarboxam¡da
Figure imgf000105_0001
Se añadió TFA (2 ml) a una solución de ((1R,3S)-3-((4-(5,5-dimetil-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)-5-fluoropiridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de tere-butilo (1,1 g, 2,27 mmol) en DCM (20 ml). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 24 h, y después la reacción se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía de intercambio iónico usando una columna SCX. El producto deseado se eluyó de la columna utilizando NH37 N en MeOH. Las fracciones de producto puro se concentraron a presión reducida, obteniéndose (1S,3R)-3-amino-N-(4-(5,5-dimetil-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)-5-fluoropiridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (0,87 g, 100 %) en forma de un sólido. 1H RMN (400 MHz, CDCh, 22 °C) 1,01 - 1,12 (7H, m), 1,31 - 1,49 (3H, m), 1,83 -1,99 (5H, m), 2,14 (1H, d), 2,35 (1H, td), 2,66 - 2,85 (3H, m), 4,23 (2H, t), 7,85 (1H, d), 7,99 - 8,18 (2H, m), 8,29 (1H, d). NH2 no se observa la señal y se asume que está bajo el pico ancho de agua a 1,66 ppm. m/z: ES+ [m H]+ 386.
Los procedimientos para preparar el material de partida de ((1R,3S)-3-((4-(5,5-dimetil-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)-5-fluoropiridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de tere-butilo se describen a continuación:
Preparación de 5.5-d¡met¡l-3-(4.4.5.5-tetramet¡l-1.3.2-d¡oxaborolan-2-¡l)-4.5.6.7-tetrah¡drop¡razolori ,5-alp¡r¡d¡na
Figure imgf000105_0002
Se añadió gota a gota complejo de cloruro de isopropilmagnesio y cloruro de litio en THF (1,3 M; 9,1 ml, 12 mmol) a 3-yodo-5,5-dimetil-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridina (2,5 g, 9,1 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 44) en THF (20 ml) en atmósfera de nitrógeno a 0 °C. La mezcla resultante se agitó a 0 °C durante 30 minutos. Después se añadió gota a gota 2-isopropoxi-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (2,8 ml, 14 mmol) y se retiró el baño de hielo. La reacción se mantuvo en estas condiciones durante 18 h y después se diluyó con Et2O (20 ml). Esta nueva mezcla se lavó secuencialmente con cloruro de amonio acuoso saturado (20 ml), agua (20 ml), y cloruro de sodio acuoso saturado (10 ml). La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró a presión reducida, obteniéndose 5,5-dimetil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridina en bruto (2,5 g, 100 %) en forma de un aceite.
1H RMN (400 MHz, CDCls, 30 °C) 1,06 (6H, s), 1,29 (12H, s), 1,79 (2H, t), 2,74 (2H, s), 4,16 (2H, t), 7,72 (1H, s).
Preparación de 3-(2-cloro-5-fluorop¡r¡d¡n-4-¡l)-5.5-d¡met¡l-4.5.6.7-tetrah¡drop¡razolon .5-alp¡r¡d¡na
Figure imgf000105_0003
Se disolvieron 2-cloro-5-fluoro-4-yodopiridina (1,55 g, 6,03 mmol), 5,5-dimetil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridina (2,0 g, 7,2 mmol), precatalizador XPhos de 2.a generación (0,48 g, 0,60 mmol) y fosfato de potasio dibásico (3,15 g, 18,1 mmol) en dioxano desgasificado (20 ml) y agua (1 ml) a 21 °C. La mezcla se agitó a 90 °C durante 24 h y después se dejó enfriar a t.a. La mezcla se diluyó con EtOAc (30 ml), se lavó con agua (10 ml), y la capa orgánica se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de EtOAc del 0 al 50 % en heptano. Las fracciones puras se concentraron a presión reducida, obteniéndose 3-(2-cloro-5-fluoropiridin-4-il)-5,5-dimetil-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridina (1,3 g, 77 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (400 MHz, CDCls, 30 °C) 1,10 (6H, s), 1,89 (2H, m), 2,68 (2H, s), 4,26 (2H, t), 7,27 (1H, d), 7,80 (1H, d), 8,23 (1H, d). mlz: ES+ [M+H]+ 280.
Preparación______de______((1R.3S)-3-((4-(5.5-d¡met¡l-4.5.6.7-tetrah¡drop¡razolori.5-alp¡r¡d¡n-3-¡l)-5-fluorop¡r¡d¡n-2-il)carbamo¡l)c¡clohexil)carbamato de tere-butilo
Figure imgf000106_0001
Se añadió tetraquis(trifenilfosfina)paladio(0) (0,496 g, 0,43 mmol) a 3-(2-cloro-5-fluoropiridin-4-il)-5,5-dimetil-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridina (1,2 g, 4,29 mmol), ((1R,3S)-3-carbamoilciclohexil)carbamato de ferc-butilo (1,04 g, 4,29 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 25), 9,9-dimetil-4,5-bis(difenilfosfino)xanteno (0,496 g, 0,86 mmol) y carbonato de cesio (4,19 g, 12,9 mmol) en 1,4-dioxano (10 ml). Se desgasificó la mezcla resultante durante 5 min en atmósfera de nitrógeno y después se sometió a condiciones de microondas (120 °C; 17 h). La mezcla de reacción se diluyó con agua (20 ml) y acetato de etilo (100 ml) antes de filtrarla. Se separaron las capas, y la capa orgánica se adsorbió sobre sílice y se purificó mediante cromatografía ultrarrápida de gel de sílice, eluyendo con EtOAc al 50 % isocrático en heptano. Las fracciones puras se concentraron a presión reducida, obteniéndose ((1R,3S)-3-((4-(5,5-dimetil-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)-5-fluoropiridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de ferc-butilo (1,1 g, 53 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (400 MHz, DMSO-de, 30 °C) 1,03 (6 H, s), 1,02 - 1,14 (1H, m), 1,20 - 1,35 (3H, m), 1,39 (9H, s), 1,70 - 1,79 (3H, a m), 1,82 - 1,92 (3H, m), 2,54 - 2,63 (1H, m), 2,68 (2H, s), 4,16 (2H, t), 6,76 (1H, a d), 7,76 (1H, d), 8,19 (1H, d), 8,29 (1H, d), 10,43 (1H, s). 1H multiplete bajo el pico de agua. mlz: ES+ [M+H]+ 486.
Ejemplo______ 52 ______nS.3R)-M-(5-cloro-4-(5.5-d¡met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolori.2-blp¡razol-3-¡l)p¡rid¡n-2-¡l)-3-(3-h¡drox¡propanamido)c¡clohexanocarboxam¡da
Figure imgf000106_0002
Se añadió ácido trifluoroacético (6,5 pl, 0,080 mmol) a (1S,3R)-N-(5-cloro-4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)-3-(3-((tetrahidro-2H-piran-2-il)oxi)propanamido)ciclohexanocarboxamida (0,046 g, 0,080 mmol) en DCM ( 2 ml) a t.a. La solución resultante se agitó a t.a. durante 1 hora. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía de intercambio iónico, usando una columna SCX. El producto deseado se eluyó de la columna utilizando NH3 1 M en MeOH y las fracciones puras se concentraron a presión reducida, obteniéndose (1S,3R)-N-(5-cloro-4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)-3-(3-hidroxipropanamido)ciclohexanocarboxamida (0,032 g, 82 %) en forma de un sólido incoloro. 1H RMN (400 MHz, CDCls, 30°C) 1,08 - 1,21 (1H, m), 1,34 (6 H, s), 1,35 - 1,49 (3H, m), 1,88 - 1,93 (3H, m), 2,10 - 2,37 (2H, m), 2,36 - 2,49 (2H, m), 2,48 - 2,57 (1H, m), 2,95 (2H, s), 3,79 - 3,92 (3H, m), 3,95 (2H, s), 6,56 (1H, a d), 8,09 (1H, s), 8,21 (1H, s), 8,26 (1H, s), 8,89 (1H, s).m/z: ES+ [M+H]+ 460.
Los procedimientos para preparar el material de partida (1S,3R)-N-(5-cloro-4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)-3-(3-((tetrahidro-2H-piran-2-il)oxi)propanamido)ciclohexanocarboxamida se describen a continuación:
Preparación de 3-hidroxipropanoato de metilo
Figure imgf000106_0003
Se añadió gota a gota oxetan-2-ona (22 ml, 350 mmol) a una solución en agitación de MeOH (300 ml) y ácido sulfúrico (5,6 ml, 104 mmol) a 0 °C. Después de 18 h, se volvió a enfriar la mezcla a 10 °C, y se añadió bicarbonato de sodio (18,1 g, 215 mmol) en porciones (pH = 7 tras la adición). La suspensión resultante se dejó en agitación a t.a. durante 30 minutos. Después, se filtró la mezcla y el filtrado se concentró a presión reducida. El residuo resultante se diluyó con DCM y se filtró por segunda vez. El nuevo filtrado se evaporó a sequedad, obteniéndose 3-hidroxipropanoato de metilo (35 g, 97 %) en forma de un líquido incoloro. 1H RMN (500 MHz, CDCls, 24 °C) 2,41 - 2,45 (1H, m), 2,58 (2H, t), 3,72 (3H, s), 3,89 (2H, t).
Preparación de 3-(tetrahidro-2H-p¡ran-2-¡lox¡)propanoato de metilo
Figure imgf000107_0001
Se añadió 4-metilbencenosulfonato de piridina (4,22 g, 16,8 mmol) a una solución de 3-hidroxipropanoato de metilo (35 g, 336 mmol) y 3,4-dihidro-2H-pirano (43 ml, 470 mmol) en DCM (500 ml) en atmósfera de nitrógeno. La solución se agitó a t.a. durante 2,5 días. Después se lavó la mezcla con bicarbonato de sodio acuoso saturado, y la capa acuosa se secó sobre sulfato de magnesio y se concentró a presión reducida. El aceite resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, eluyendo con acetato de etilo al 15 % isocrático en heptano, obteniéndose 3-(tetrahidro-2H-piran-2-iloxi)propanoato de metilo (26 g, 41 %) en forma de un aceite incoloro. 1H RMN (500 MHz, DMSO-CÍ6 , 24 °C) 1,37 - 1,46 (4H, m), 1,54 - 1,59 (2H, m), 2,56 (2H, t), 3,39 - 3,42 (1H, m), 3,53 - 3,63 (4H, m), 3,68 - 3,75 (1H, m), 3,81 - 3,87 (1H, m), 4,57 (1H, t).
Preparación de ácido 3-(tetrahidro-2H-p¡ran-2-¡lox¡)propano¡co
Figure imgf000107_0002
Se añadió hidróxido de sodio acuoso (2 N; 134 ml, 268 mmol) a una solución de 3-(tetrahidro-2H-piran-2-iloxi)propanoato de metilo (26 g, 138 mmol) en THF (300 ml). La mezcla se agitó a t.a. durante 5 h y después se concentró a presión reducida. Se añadió acetato de etilo ( 1 0 0 ml) y se separaron las capas. Las capas acuosas se enfriaron a 0 °C, y se añadió cuidadosamente HCl acuoso (1 N) gota a gota hasta que se alcanzó un pH de 3,5. Después, la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x 250 ml). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se concentraron a presión reducida, obteniéndose ácido 3-(tetrahidro-2H-piran-2-iloxi)propanoico (24 g, 98 %) en forma de un aceite incoloro. 1H RMN (500 MHz, CDCls, 24°C) 1,45 - 1,62 (4H, m), 1,63 - 1,85 (2H, m), 2,64 - 2,68 (2H, m), 3,52 - 3,56, (1H, m), 3,70 - 3,74, (1H, m), 3,85 - 3,89 (1H, m), 3,99 - 4,03 (1H, m), 4,62 - 4,66 (1H, m), 11,2 (1H, s a).
Preparación de (1 S.3R)-M-(5-cloro-4-(5.5-d¡metil-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolori ■2-b1p¡razol-3-il)p¡r¡d¡n-2-¡l)-3-(3-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-2-il)ox¡)propanam¡do)c¡clohexanocarboxam¡da
Figure imgf000107_0003
Se añadió HATU (118 mg, 0,31 mmol) a una solución de ácido 3-((tetrahidro-2H-piran-2-il)oxi)propanoico (54 mg, 0,31 mmol), (1S,3R)-3-amino-N-(5-cloro-4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (100 mg, 0,26 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 14), y trietilamina (0 , 11 ml, 0,77 mmol) en DMA (2 ml). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 16 h antes de añadir HCl en dioxano (4 M; 0,52 ml, 2,1 mmol). Esta nueva mezcla se agitó a t.a. durante 2 h, antes de basificarla con Na2CO3 acuoso saturado. La mezcla resultante se diluyó con agua (20 ml) y se extrajo con DCM (50 ml). La capa orgánica se lavó con cloruro de sodio acuoso saturado (50 ml) antes de hacerla pasar a través de un cartucho de separación de fases. Las fracciones orgánicas se secaron sobre MgSO4 y se concentraron a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante HPLC preparativa (columna Waters XBridge Prep C18 OBD, 5 ^ de sílice, 30 mm de diámetro, 100 mm de longitud), utilizando mezclas decrecientemente polares de agua (que contenía NH3 al 1 %) y MeCN como eluyentes. Las fracciones que contenían el compuesto deseado se concentraron a presión reducida, obteniéndose (1S,3R)-N-(5-cloro-4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)-3-(3-((tetrahidro-2H-piran-2-il)oxi)propanamido)ciclohexanocarboxamida (46 mg, 33 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (500 MHz, DMSO-da, 30°C) 1,05 - 1,2 (1H, m), 1,24 - 1,51 (13H, m), 1,52 - 1,63 (1H, m), 1,64 - 1,71 (1H, m), 1,72 - 1,83 (3H, m), 1,88 - 1,93 (1H, m), 2,25 - 2,35 (2H, m), 2,57 - 2,7 (1H, m), 2,90 (2H, s), 3,38 - 3,44 (1H, m), 3,48 - 3,58 (1H, m), 3,59 -3,64 (1H, m), 3,74 (1H, ddd), 3,81 (1H, ddt), 3,95 (2H, s), 4,55 (1H, d), 7,78 (1H, d), 8,00 (1H, s), 8,25 (1H, s), 8,36 (1H, s), 10,56 (1H, s). mlz: ES+ [M+H]+ 544.
Ejemplo 53: nS.3R)-M-(5-cloro-4-(5.5-d¡met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolori.2-blp¡razol-3-¡l)p¡rid¡n-2-¡l)-3-(c¡s-3-h¡drox¡c¡clobutanocarboxam¡do)c¡clohexanocarboxam¡da
Figure imgf000108_0001
Se añadió HATU (118 mg, 0,31 mmol) a una solución de ácido cis-3-((ferebutildimetilsilil)oxi)ciclobutanocarboxflico (71 mg, 0,31 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 4), (1S,3R)-3-amino-N-(5-cloro-4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[l,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (100 mg, 0,26 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 14), y tríetílamína (0,11 ml, 0,77 mmol) en DMA (2 ml). La mezcla resultante se agitó a t.a. durante 16 h antes de añadir una solución de fluoruro de tetrabutilamonio en THF (1 M; 1,0 ml, 1,0 mmol). La mezcla se agitó a t.a. durante 2 h antes de inactivarla con agua (20 ml). La mezcla se extrajo con DCM (50 ml) y se lavó con cloruro de sodio acuoso saturado (50 ml) antes de hacerla pasar a través de un cartucho de separación de fases. Las fracciones orgánicas se secaron sobre MgSO4 y se concentraron a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante HPLC preparativa (columna Waters XBridge Prep C18 o Bd , 5 ^ de sílice, 30 mm de diámetro, 100 mm de longitud), utilizando mezclas decrecientemente polares de agua (que contenía NH3 al 1 %) y MeCN como eluyentes. Las fracciones de producto se concentraron a presión reducida, y el residuo resultante se purificó adicionalmente mediante cromatografía ultrarrápida de gel de sílice, gradiente de elución de MeOH del 0 al 10 % en EtOAc. Las fracciones puras se concentraron a presión reducida, obteniéndose (1S,3R)-N-(5-cloro-4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)-3-((cis)-3-hidroxiciclobutanocarboxamido)ciclohexanocarboxamida (0,037 g, 53 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (400 MHz, CDCls, 30°C) 1,34 (6 H, s), 1,47 - 1,49 (3H, m), 1,85 - 1,99 (5H, m), 2,10 - 2,30 (4H, m), 2,39 - 2,62 (4H, m), 2,96 (2H, s), 3,79 - 3,86 (1H, m), 3,95 (2H, s), 5,90 (1H, a d), 8,09 (1H, s), 8,22 (1H, s), 8,26 (1H, s), 8,69 (1H, s). mlz: ES+ [M+H]+ 486.
Ejemplo_____ 5 4 _____ nS.3R)-3-am¡no-N-(4-(5.5-d¡met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolori.2-blp¡razol-3-¡l)-5-fluorop¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clohexano-1 -carboxamída
Figure imgf000108_0002
Se añadió ácido clorhídrico en dioxano (4 M; 3,2 ml, 13 mmol) a una solución de ((1R,3S)-3-((4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[l,2-b]pirazol-3-il)-5-fluoropiridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de tere-butilo (600 mg, 1,27 mmol) en DCM (9,5 ml), obteniéndose una suspensión de color amarillo. Se añadió metanol (~5 ml), que proporcionó una solución de color amarillo claro. La reacción se agitó durante 18 h a t.a. y después se concentró a presión reducida, obteniéndose (1 S,3R)-3-amino-N-(4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)-5-fluoropiridin-2-il)ciclohexano-1-carboxamida como la sal de clorhidrato (488 mg, 87 %) y un sólido de color blanquecino. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6, 27 °C) 1,23 -1,36 (9H, m), 1,50 (1H, c), 1,77 - 1,89 (2H, m), 1,89 - 2,01 (1H, m), 2,01 - 2,09 (1H, m), 2,56 - 2,68 (1H, m), 2,94 (2H, s), 2,97 - 3,09 (1H, m), 3,95 (2H, s), 7,85 - 7,93 (1H, m), 7,98 - 8,14 (3H, m), 8,26 - 8,32 (2H, m), 10,56 (1H, s). se asume que un equivalente de HCl se incorpora a un singlete amplio a 5,4 ppm. mlz: ES+ [M+H]+ 372.
Los procedimientos utilizados para preparar el material de partida ((1R,3S)-3-((4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)-5-fluoropiridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de tere-butilo se describen a continuación:
Preparac¡ón de 5-fluoro-4-yodop¡r¡d¡n-2-am¡na
Figure imgf000108_0003
Se añadió gota a gota hidróxido de amonio acuoso concentrado (26 % en peso; 7,0 ml, 45 mmol) (ligera exotermia) a una solución de 2,5-difluoro-4-yodopiridina (2,0 g, 8,30 mmol) en Dm So (2 ml) obteniéndose una suspensión de color blanco.
La suspensión se calentó en el microondas a 140 °C durante 4 h. La reacción se repartió entre EtOAc y agua, y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (3 x 50 ml). Las capas orgánicas combinadas se concentraron a presión reducida, y el residuo resultante se adsorbió sobre gel de sílice antes de purificarlo mediante cromatografía ultrarrápida de gel de sílice (metanol del 0 al 10 % en DCM), obteniéndose 5-fluoro-4-yodopiridin-2-amina (1,3 g, 66 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (300 MHz, DMSO-de,, 27 °C) 5,96 (1H, s a) 5,96 (1H, s) 6,92 (1H, d) 7,77 - 7,84 (1H, m). mlz: ES+ [M+H]+ 239.
(nR.3S)-3-((5-fluoro-4-vodop¡r¡d¡n-2-¡l)carbamoil)c¡clohex¡l)carbamato de tere-butilo
Figure imgf000109_0001
Se añadió 1-cloro-N,N,2-trimetilprop-1-en-1-amina (0,62 ml, 4,7 mmol) a una solución de ácido (1S,3R)-3-((terebutoxicarbonil)amino)ciclohexanocarboxílico (843 mg, 3,47 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 2) en DCM (15 ml). La solución incolora se agitó a t.a. durante 1,5 h. Después se añadió una solución de 5-fluoro-4-yodopiridin-2-amina (750 mg, 3,15 mmol) y piridina (0,51 ml, 6,3 mmol) en DCM (15 ml). La reacción resultante se agitó a t.a. durante 18 h antes de diluirla con DCM (200 ml) y se lavó con agua y cloruro de sodio acuoso saturado. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se adsorbió sobre gel de sílice y se purificó mediante cromatografía ultrarrápida de gel de sílice, gradiente de elución de metanol del 0 al 10 % en DCM, obteniéndose ((1R,3S)-3-((5-fluoro-4-yodopiridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de tere-butilo (827 mg, 57 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (300 MHz, DMSO-de, 27 °C) 1,01 - 1,19 (1H, m), 1,18 - 1,31 (3H, m), 1,38 (9H, s), 1,61 - 1,81 (m, 3H), 1,87 (1H, d), 2,53 - 2,62 (1H, m), 3,16 - 3,26 (1H, m), 6,78 (1H, a d), 8,26 (1H, s), 8,60 (1H, d), 10,61 (1H, s). mlz: ES+ [M+Na+]+ 486.
Preparación_______ de_______ (nR.3S)-3-((4-(5.5-d¡met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolori.2-blp¡razol-3-¡l)-5-fluorop¡r¡d¡n-2-¡l)carbamoil)c¡clohex¡l)carbamato de tere-butilo
Figure imgf000109_0002
Se añadieron carbonato de cesio (2,81 g, 8,61 mmol) y precatalizador XPhos de 2.a generación (0,090 g, 0,11 mmol) a una mezcla desgasificada de 5,5-dimetil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol (0,828 g, 3,16 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 23), ((1R,3S)-3-((5-fluoro-4-yodopiridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de tere-butilo (1,33 g, 2,87 mmol), dioxano (24 ml), y agua (5 ml). La reacción se calentó a 95 °C y se mantuvo en estas condiciones durante 18 h. Después, la reacción se diluyó con EtOAc (250 ml), y se lavó con agua y cloruro de sodio acuoso saturado antes de secarla sobre sulfato de sodio, filtrarla y concentrarla a presión reducida. El residuo resultante se adsorbió sobre gel de sílice y se purificó mediante cromatografía ultrarrápida de gel de sílice, gradiente de elución de acetato de etilo del 0 al 100 % en hexanos, obteniéndose ((1R,3S)-3-((4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)-5-fluoropiridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de tere-butilo (600 mg, 44 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (300 MHz, DMSO-de, 27 °C) 1,03 - 1,15 (1H, osc. m), 1,22 - 1,32 (9H, m), 1,38 (9H, s), 1,69 - 1,82 (3H, m), 1,89 (1H, a d) 2,53 - 2,64 (1H, m), 2,93 (2H, s), 3,21 - 3,32 (1H, m), 3,96 (2H, s), 6,78 (1H, d), 7,88 (1H, d), 8,27 (1H, d), 8,31 (1H, d), 10,45 (1H,s). mlz: ES+ [M+H]+ 472.
Ejemplo______55 _____ nS.3R)-M-(4-(5.5-d¡met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolori.2-blp¡razol-3-¡l)-5-fluorop¡r¡d¡n-2-¡l)-3-(1-hidrox¡c¡clopropanocarboxamido)c¡clohexanocarboxam¡da
Figure imgf000109_0003
Se añadió HATU (98 mg, 0,26 mmol) a una solución de ácido 1-hidroxicidopropanocarboxílico (32 mg, 0,31 mmol), diclorhidrato de (1 S,3R)-3-amino-N-(4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)-5-fluoropiridin-2-il)cidohexanocarboxamida (96 mg, 0,22 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 54), y trietilamina (0,11 ml, 0,77 mmol) en DMF (1,5 ml). La mezcla de reacción se calentó a 50 °C durante 1,75 h y después se dejó enfriar a t.a. Después de 18 h, la mezcla resultante se purificó mediante HPLC preparativa (columna Waters XBridge Prep C18 OBD, 5 ^ de sílice, 30 mm de diámetro, 100 mm de longitud) utilizando mezclas decrecientemente polares de agua (que contenía NH3 al 1 %) y MeCN como eluyentes. Las fracciones que contenían el compuesto deseado se evaporaron a sequedad, obteniéndose (1 S,3R)-Ñ-(4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)-5-fluoropiridin-2-il)-3-(1 -hidroxiciclopropanocarboxamido)ciclohexanocarboxamida (33 mg, 33 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (500 MHz, DMSO-CÍ6, 30 °C) 0,76 - 0,84 (2H, m), 0,98 - 1,04 (2H, m), 1,29 (6H, s), 1,30 - 1,37 (3H, m), 1,52 (1H, c), 1,7 -1,84 (3H, m), 1,88 (1H, d), 2,58 - 2,67 (1H, m), 2,94 (2H, s), 3,63 - 3,73 (1H, m), 3,95 (2H, s), 6,14 (1H, s a), 7,65 (1H, d), 7,89 (1H, d), 8,28 (1H, d), 8,32 (1H, d), 10,46 (1H, s). mlz: ES+ [M+H]+ 456.
Ejemplo_____ 56:_____ nS.3R)-M-(5-cloro-4-(6.6-d¡met¡l-6.7-d¡h¡dro-5H-p¡rrolori.2-a1¡m¡dazol-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)-3-(1-h¡drox¡c¡clopropanocarboxam¡do)c¡clohexanocarboxam¡da
Figure imgf000110_0001
Se añadió HATU (118 mg, 0,31 mmol) a una solución de ácido 1-hidroxiciclopropanocarboxílico (31,6 mg, 0,31 mmol), (1S,3R)-3-amino-N-(5-cloro-4-(6,6-dimetil-6,7-dihidro-5H-pirrolo[1,2-a]imidazol-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (100 mg, 0,26 mmol), y trietilamina (0,11 ml, 0,77 mmol) en DMA (2 ml). La reacción se agitó durante una noche a t.a. y después se purificó mediante HPLC preparativa (columna Waters XBridge Prep C18 OBD, 5 ^ de sílice, 30 mm de diámetro, 100 mm de longitud), utilizando mezclas decrecientemente polares de agua (que contenía NH3 al 1 %) y MeCN como eluyentes. Las fracciones que contenían el compuesto deseado se concentraron a presión reducida, obteniéndose (1S,3R)-N-(5-cloro-4-(6,6-dimetil-6,7-dihidro-5H-pirrolo[1,2-a]imidazol-3-il)piridin-2-il)-3-(1-hidroxiciclopropanocarboxamido)ciclohexanocarboxamida (27 mg, 22 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (500 MHz, DMSO-de, 30 °C) 0,75 - 0,82 (2H, m), 0,93 - 1,09 (2H, m), 1,25 (6H, s), 1,27 - 1,38 (3H, m), 1,52 (1H, c), 1,65 - 1,93 (4H, m), 2,53 - 2,70 (1H, m), 2,71 (2H, s), 3,60 - 3,71 (1H, m), 3,91 (2H, s), 6,15 (1H, s), 7,51 (1H, s), 7,65 (1H, d), 8,29 (1H, s), 8,42 (1H, s), 10,65 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 472.
Los procedimientos utilizados para preparar el material de partida (1S,3R)-3-amino-N-(5-cloro-4-(6,6-dimetil-6,7-dihidro-5H-pirrolo[1,2-a]imidazol-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida se describen a continuación:
Preparación_______de______ (nR.3S)-3-((5-cloro-4-(6.6-d¡met¡l-6.7-d¡h¡dro-5H-p¡rrolori.2-a1¡m¡dazol-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)carbamo¡l)c¡clohex¡l)carbamato de tere-butilo
Figure imgf000110_0002
Se suspendieron ((1R,3S)-3-((5-cloro-4-yodopiridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de tere-butilo (0,40 g, 0,83 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 10), 6,6-dimetil-6,7-dihidro-5H-pirrolo[1,2-a]imidazol (0,200 g, 1,25 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 22), acetato de potasio (0,163 g, 1,66 mmol) y acetato de paladio (0,337 g, 0,33 mmol) en DMA (10 ml) y se sellaron en un tubo para microondas. El tubo se evacuó y se purgó con nitrógeno (3x) y después se calentó a 150 °C durante 16 h. La mezcla de reacción se purificó mediante cromatografía de intercambio iónico usando una columna SCX. El producto deseado se eluyó de la columna utilizando NH3 1 M en MeOH, y las fracciones puras se concentraron a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de EtOAc del 0 al 100 % en heptano. Las fracciones puras se concentraron a presión reducida, obteniéndose ((1 R,3S)-3-((5-cloro-4-(6,6-dimetil-6,7-dihidro-5H-pirrolo[1,2-a]imidazol-3-il)piridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de tere-butilo (0,20 g, 49 %) en forma de una goma de color naranja. 1H RMN (400 MHz, CDCl3 , 21°C) 1,05 - 1,19 (1H, m), 1,33 (6H, s), 1,40 - 1,46 (12H, m), 1,9 - 2,05 (3H, m), 2,20 - 2,47 (2H, m), 2,78 (2H, s), 3,46 - 3,52 (1H, m), 3,93 (2H, s), 4,44 - 4,52 (1H, m), 7,67 (1H, s), 8,06 (1H, s a), 8,28 (1H, s), 8,29 (1H, s). mlz: ES+ [M+H]+ 488.
Preparación de (1 S.3R)-3-am¡no-M-(5-cloro-4-(6.6-d¡metil-6.7-d¡h¡dro-5H-p¡rrolori ■2-a1im¡dazol-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-il)ciclohexanocarboxam¡da
Figure imgf000111_0001
Se disolvió ((1 R,3S)-3-((5-doro-4-(6,6-dimetN-6,7-dihidro-5H-pirrolo[1,2-a]imidazol-3-il)piridin-2-il)carbamoil)cidohexil)carbamato de tere-butilo (0,25 g, 0,51 mmol) en DCM (5 ml). Se añadió ácido trifluoroacético (0,39 ml, 5,1 mmol), y la mezcla de reacción se agitó a t.a. durante 30 min. Después, la mezcla de reacción se purificó mediante cromatografía de intercambio iónico usando una columna SCX. El producto deseado se eluyó de la columna utilizando NH3 1 M en MeOH, y las fracciones puras se concentraron a presión reducida, obteniéndose (1S,3R)-3-amino-N-(5-cloro-4-(6,6-dimetil-6,7-dihidro-5H-pirrolo[1,2-a]imidazol-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (0,19 g, 96 %) en forma de una goma de color naranja. Esta goma se usó en la etapa siguiente sin purificación adicional. m/z: ES+ [M+H]+ 388.
Ejemplo_______ 57 _______ M-((1R.3S)-3-((5-cloro-4-(6.6-d¡met¡l-6.7-d¡h¡dro-5H-p¡rrolori.2-al¡m¡dazol-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)carbamo¡l)ciclohex¡l)oxetano-3-carboxam¡da
Figure imgf000111_0002
Se añadió HATU (118 mg, 0,31 mmol) a una solución de ácido oxetano-3-carboxílico (32 mg, 0,31 mmol), (1S,3R)-3-amino-N-(5-cloro-4-(6,6-dimetil-6,7-dihidro-5H-pirrolo[1,2-a]imidazol-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (100 mg, 0,26 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 56) y trietilamina (0,11 ml, 0,77 mmol) en DMA (2 ml). La mezcla de reacción se purificó mediante HPLC preparativa (columna Waters XBridge Prep C18 OBD, 5 ^ de sílice, 30 mm de diámetro, 100 mm de longitud), utilizando mezclas decrecientemente polares de agua (que contenía NH3 al 1 %) y MeCN como eluyentes. Las fracciones que contenían el compuesto deseado se concentraron a presión reducida, obteniéndose producto semipuro. Este material se purificó adicionalmente mediante cromatografía ultrarrápida de gel de sílice, gradiente de elución de MeOH del 0 al 10 % en EtOAc. Las fracciones puras se concentraron a presión reducida, obteniéndose N-((1R,3S)-3-((5-cloro-4-(6,6-dimetil-6,7-dihidro-5H-pirrolo[1,2-a]imidazol-3-il)piridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)oxetano-3-carboxamida (13 mg, 11 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H Rm N (400 MHz, CDCb, 30 °C) 1,11 - 1,29 (1H, m), 1,32 (6 H, s), 1,36 - 1, 6 (3H, m), 1,9 - 2,02 (3H, m), 2,22 - 2,31 (1H, a d), 2,41 - 2,55 (1H, m), 2,78 (2H, s), 3,67 (1H, ddd), 3,82 - 3,96 (3H, m), 4,74 - 4,9 (4H, m), 5,75 (1H, d), 7,64 (1H, s), 8,27 (3H, d). m/z: ES+ [M+H]+ 472.
Ejemplo_________58:________ c¡s-M-(5-cloro-4-(6.6-d¡met¡l-6.7-d¡h¡dro-5H-p¡rrolori.2-a1¡m¡dazol-3-¡l)p¡rid¡n-2-¡l)-3-hidroxiciclobutanocarboxamida
Figure imgf000111_0003
Se suspendieron cis-3-((tere-butildimetilsilil)oxi)-N-(5-cloro-4-yodopiridin-2-il)ciclobutanocarboxamida (0,194 g, 0,42 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 27), 6,6-dimetil-6,7-dihidro-5H-pirrolo[1,2-a]imidazol (0,100 g, 0 , 6 2 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 22), acetato de potasio (0,082 g, 0,83 mmol) y acetato de paladio (0,168 g, 0,17 mmol) en DMA (10 ml) y se sellaron en un tubo para microondas. El tubo se evacuó y se purgó con nitrógeno (3x) y después se calentó a 150 °C durante 16 h. La mezcla de reacción se diluyó con agua (20 ml) y se lavó con DCM (3 x 20 ml). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO4 , se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante HPLC preparativa (columna Waters xBridge Prep C18 OBD, 5 ^ de sílice, 19 mm de diámetro, 100 mm de longitud), utilizando mezclas decrecientemente polares de agua (que contenía NH3 al 1 %) y MeCN como eluyentes. Las fracciones de producto se concentraron a presión reducida, y el residuo resultante se volvió a purificar mediante HPLC preparativa (columna Waters SunFire, 5 ^ de sílice, 19 mm de diámetro, 100 mm de longitud), utilizando mezclas decrecientemente polares de agua (que contenía ácido fórmico al 0,1 %) y MeCN como eluyentes. Las fracciones que contenían el compuesto deseado se concentraron a presión reducida, obteniéndose cis-W-(5-cloro-4-(6,6-dimetil-6,7-dihidro-5H-pirrolo[1,2-a]imidazol-3-il)piridin-2-il)-3-hidroxiciclobutanocarboxamida (0,016 g, 11 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (500 MHz, DMSO-de, 30°C) 1,26 (6 H, s), 1,98 - 2,09 (2H, m), 2,30 - 2,40 (2H, m), 2,72 (2H, s), 2,74 - 2,83 (1H, m), 3,93 (2H, s), 3,95 - 4,00 (1H, m), 5,15 (1H, s), 7,53 (1H, s), 8,32 (1H, s), 8,41 (1H, s), 10,61 (1H, s). mlz: ES+ [M+H]+ 361.
Ejemplo 59 y 60: isómero 1 e isómero 2 de trans-3-acetam¡do-M-(5-cloro-4-(5.5-d¡met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rroloH.2-blp¡razol-3-¡l)pir¡d¡n-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da
Figure imgf000112_0001
Los ejemplos 59 y 60 son enantiómeros puros con configuraciones trans relativas. Las configuraciones absolutas de los ejemplos 59 y 60 se desconocen pero son opuestas entre sí.
Se añadió anhídrido acético (0,049 ml, 0,52 mmol) gota a gota a trans-3-amino-W-(5-cloro-4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (0,167 g, 0,43 mmol), 4-dimetilaminopiridina (2,6 mg, 0,02 mmol) y trietilamina (0,19 ml, 1,3 mmol) en DCM (2 ml) a t.a. en atmósfera de nitrógeno. La solución resultante se agitó a t.a. durante 4 h. La mezcla de reacción se inactivó con cloruro de amonio acuoso saturado (10 ml), se extrajo con DCM (2 x 1 0 ml), y las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron, y se concentraron a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante HPLC preparativa (columna IE de Chiral Technologies, 20 ^m de sílice, 50 mm de diámetro, 250 mm de longitud) eluyendo con heptano al 30 % isocrático en acetona a 120 ml/min con detección a 210 nm. Las fracciones que contenían los compuestos deseados se concentraron a presión reducida, obteniéndose el isómero 1 de elución más rápida de trans-3-acetamido-W-(5-cloro-4-((5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (0,059 g, 32 %) y el isómero 2 de elución más lenta de trans-3-acetamido-W-(5-cloro-4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (0,052 g, 28 %) en forma de sólidos de color blanco.
Ejemplo 59, ¡sómero 1:
1H RMN (400 MHz, CDCls, 30 °C) 1,34 (6H, s), 1,56 - 2,00 (8H, m), 2,01 (3H, s), 2,48 - 2,56 (1H, m), 2,96 (2H, s), 3,95 (2H, s), 4,17 - 4,24 (1H, m), 5,42 - 5,49 (1H, m), 7,96 (1H, s a), 8,10 (1H, s), 8,24 (1H, s), 8,26 (1H, s). mlz: ES+ [M+H]+ 430.
Ejemplo 60, ¡sómero 2:
1H RMN (400 MHz, CDCls, 30°C) 1,34 (6H, s), 1,48 - 1,55 (1H, m), 1,62 - 1,78 (4H, m), 1,82-1,90 (1H, m), 1,94 - 1,98 (2H, m), 2,01 (3H, s), 2,46 - 2,58 (1H, m), 2,96 (2H, s), 3,95 (2H, s), 4,17 - 4,26 (1H, m), 5,45 - 5,54 (1H, a d), 8,01 (1H, s), 8,10 (1H, s), 8,23 (1H, s), 8,26 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 430.
Condiciones analíticas de la fase inversa uiral:
Figure imgf000112_0002
Figure imgf000113_0003
Los procedimientos utilizados para preparar el material de partida trans-3-amino-W-(5-cloro-4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida se describen a continuación:
Preparación de trans-3-((5-cloro-4-vodop¡r¡d¡n-2-il)carbamo¡l)c¡clohex¡l)carbamato de ferc-butilo
Figure imgf000113_0001
Se añadió 1-cloro-W,W,2-trimetilprop-1-en-1-amina (1,1 ml, 8,2 mmol) a ácido trans-3-((fercbutoxicarbonil)amino)cidohexanocarboxílico (1,34 g, 5,50 mmol) en DCM (20 ml) a 0 °C en atmósfera de nitrógeno. La solución resultante se agitó a 20 °C durante 1,5 h, y después se añadieron gota a gota 5-doro-4-yodopiridin-2-amina (1,40 g, 5,50 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 2) y piridina (0,67 ml, 8,2 mmol) a lo largo de 2 minutos. La solución resultante se agitó durante 70 h. Después, la mezcla de reacción se inactivó con hidrogenocarbonato de sodio acuoso saturado (300 ml), se extrajo con DCM (3 * 30 ml), y las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO4 , se filtraron y se concentraron a presión reducida, obteniéndose un sólido de color crema. Este sólido se purificó mediante HPLC preparativa (columna Waters XBridge Prep C18 OBD, 5 ^ de sílice, 30 mm de diámetro, 100 mm de longitud), utilizando mezclas decrecientemente polares de agua (que contenía NH3 al 1 %) y MeCN como eluyentes. Las fracciones que contenían el compuesto deseado se concentraron a presión reducida, obteniéndose (trans-3-((5-cloro-4-yodopiridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de ferc-butilo (0,99 g, 37 %) en forma de un sólido de color rosa. 1H RMN (500 MHz, CDCh, 27 °C) 1,46 (9H, s), 1,49 - 1,55 (1H, m), 1,61 - 1,72 (4H, m), 1,82 - 1,93 (3H, m), 2,47 -2,52 (1H, m), 3,89 - 3,99 (1H, s a), 4,55 - 4,59 (1H, s a), 7,84 (1H, s a), 8,19 (1H, s), 8,83 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 480.
Preparación________ de________ (trans-3-((5-cloro-4-(5,5-d¡met¡l-5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolon .2-blp¡razol-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)carbamo¡l)c¡clohex¡l)carbamato de terc-butílo
Figure imgf000113_0002
Se añadió precatalizador XPhos de 2.a generación (0,049 g, 0,06 mmol) a una mezcla desgasificada de 5,5-dimetil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol (0,219 g, 0,75 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 23), (trans-3-((5-cloro-4-yodopiridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de ferc-butilo (0,30 g, 0,63 mmol) y fosfato de potasio tribásico (0,327 g, 1,88 mmol) en 1,4-dioxano ( 8 ml) y agua (1,6 ml). La mezcla se desgasificó y se agitó a 90 °C durante 2 h en atmósfera de nitrógeno. Después se concentró la mezcla de reacción a presión reducida y se recogió en agua (20 ml). La mezcla resultante se extrajo secuencialmente con EtOAc (2 * 20 ml) y DCM (20 ml). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO4 , se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de EtOAc del 0 al 70 % en heptano. Las fracciones de producto se concentraron a presión reducida, obteniéndose (trans-3-((5-cloro-4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de ferc-butilo (0,26 g, 8 6 %) en forma de un sólido de color crema. m/z: ES+ [M+H]+ 488.
Preparación de trans-3-am¡no-M-(5-cloro-4-(5.5-d¡met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolori.2-b1p¡razol-3-¡l)p¡rid¡n-2-¡l)ciclohexanocarboxam¡da
Figure imgf000114_0001
Se disolvió (trans-3-((5-cloro-4-(5,5-dimetM-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)carbamoil)cidohexil)carbamato de tere-butilo (0,263 g, 0,54 mmol) en DCM (5 ml). Se añadió ácido trifluoroacético (0,41 ml, 5,4 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a t.a. durante 18 h. Después, se purificó la reacción mediante cromatografía de intercambio iónico usando una columna SCX. El producto deseado se eluyó de la columna utilizando NH3 1 M en MeOH, y las fracciones de producto se concentraron a presión reducida, obteniéndose trans-3-amino-N-(5-cloro-4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida en forma de un sólido de color blanco. m/z: ES+ [M+H]+ 388.
Ejemplos 61 y 62: isómero 1 e isómero 2 de trans-3-acetam¡do-M-(5-cloro-4-(4.5.6.7-tetrah¡drop¡razolon .5-alp¡r¡d¡n-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)ciclohexanocarboxam¡da
Figure imgf000114_0002
Los ejemplos 61 y 62 son enantiómeros puros eon eonfiguraeiones trans relativas. Las eonfiguraeiones absolutas de los ejemplos 61 y 62 se deseonoeen pero son opuestas entre sí.
Se añadió anhídrido acético (0,036 ml, 0,38 mmol) gota a gota a trans-3-amino-N-(5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (0,119 g, 0,32 mmol), 4-dimetilaminopiridina (1,9 mg, 0,02 mmol), y trietilamina (0,14 ml, 1,0 mmol) en DCM (2 ml) a t.a. en atmósfera de nitrógeno. La solución resultante se agitó a t.a. durante 4 h. La mezcla de reacción se inactivó con cloruro de amonio acuoso saturado (10 ml), se extrajo con DCM (2 * 10 ml), las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante HPLC preparativa (columna IE de Chiral Technologies, 20 ^m de sílice, 50 mm de diámetro, 250 mm de longitud), usando una mezcla 30/70 de heptano/acetona como eluyentes, un caudal de 120 ml/min y un umbral de detección a 210 nm. Las fracciones que contenían los compuestos deseados se concentraron a presión reducida, obteniéndose el isómero 1 de elución más rápida de trans-3-acetamido-N-(5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (0,076 g, 57 %) y el isómero 2 de elución más lenta de trans-3-acetamido-N-(5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (0,056 g, 42 %).
Ejemplo 61, ¡sómero 1:
1H RMN (400 MHz, CDCls, 31 °C) 1,57 - 1,96 (7H, m), 2,01 (3H, s), 2,04 - 2,16 (2H, m), 2,49 - 2,56 (1H, m), 2,92 (2H, t), 4,16 - 4,23 (3H, m), 5,46 - 5,52 (1H, m), 7,87 (1H, s), 8,05 (1H, s a), 8,21 (1H, s), 8,27 (1H, s). 3H at 1,50 to 1,62 ppm oscurecida por la señal de agua, mlz: ES+ [M+H]+ 416.
Ejemplo 62, ¡sómero 2:
1H RMN (400 MHz, CDCls, 30 °C) 1,45 - 1,96 (10H, m), 2,01 (3H, s), 2,04 - 2,13 (2H, m), 2,49 - 2,58 (1H, m), 2,92 (2H, t), 4,16 - 4,24 (3H, m), 5,52 - 5,57 (1H, m), 7,87 (1H, s), 8,12 (1H, s a), 8,21 (1H, s), 8,26 (1H, s). mlz: ES+ [M+H]+ 416. Condiciones analíticas de la fase inversa quiral:
Columna: Columna IE de Chiral Technologies
Figure imgf000115_0003
Los procedimientos utilizados para preparar el material de partida trans-3-amino-N-(5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida se describen a continuación:
Preparación____________ de____________ (trans-3-((5-cloro-4-(4.5.6.7-tetrah¡drop¡razolori.5-alp¡r¡d¡n-3-¡l)p¡rid¡n-2-¡l)carbamoil)c¡clohex¡l)carbamato de tere-butilo
Figure imgf000115_0001
Se añadió precatalizador XPhos de 2.a generación (0,049 g, 0,06 mmol) a una mezcla desgasificada de 3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridina (0,186 g, 0,75 mmol), (trans-3-((5-cloro-4-yodopiridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de tere-butilo (0,30 g, 0,63 mmol; preparado de acuerdo con los ejemplos 59 y 60, intermedios) y fosfato de potasio tribásico (0,327 g, 1,88 mmol) en 1,4-dioxano (10 ml) y agua (2 ml). Se desgasificó la mezcla de reacción y después se agitó a 90 °C durante 2 h en atmósfera de nitrógeno. La mezcla de reacción se concentró a presión reducida y se recogió en agua (20 ml). La mezcla resultante se extrajo secuencialmente con EtOAc (2 x 20 ml) y DCM (20 ml). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO4 , se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de EtOAc del 0 al 70 % en heptano. Las fracciones puras se concentraron a presión reducida, obteniéndose (trans-3-((5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de tere-butilo (0,163 g, 55 %) en forma de un sólido de color crema. 1H RMN (500 MHz, CDCl3 , 27 °C) 1,46 (9h , s), 1,48 - 1,54 (1H, m), 1,61 - 1,74 (4H, m), 1,82 - 1,97 (5H, m), 2,05 - 2,13 (2H, m), 2,46 - 2,57 (1H, m), 2,92 (2H, t), 3,98 (1H, s a), 4,21 (2H, t), 4,60 (1H, s a), 7,87 (2H, s), 8,21 (1H, s), 8,27 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 474.
Preparación________ de________ trans-3-am¡no-M-(5-cloro-4-(4.5.6.7-tetrah¡drop¡razolori.5-alp¡r¡d¡n-3-¡l)p¡rid¡n-2-¡l)ciclohexanocarboxam¡da
Figure imgf000115_0002
Se disolvió (trans-3-((5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de tere-butilo (0,16 g, 0,34 mmol) en DCM (5 ml). Se añadió ácido trifluoroacético (0,26 ml, 3,4 mmol), y la mezcla de reacción se agitó a t.a. durante 18 h. Después, la mezcla de reacción se purificó mediante cromatografía de intercambio iónico usando una columna SCX. El producto deseado se eluyó de la columna utilizando NH3 1 M en MeOH, y las fracciones de producto se concentraron a presión reducida, obteniéndose trans-3-amino-N-(5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida en forma de una goma de color amarillo. m/z: ES+ [M+H]+ 374.
Ejemplo_______63:______ (1S.3R)-3-acetam¡do-M-(5-fluoro-4-(4.5.6.7-tetrah¡drop¡razolori.5-alp¡r¡d¡n-3-¡l)p¡rid¡n-2-il)ciclohexanocarboxam¡da
Figure imgf000116_0001
Se añadió anhídrido acético (0,032 ml, 0,34 mmol) a (1S,3R)-3-amino-N-(5-fluoro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)cidohexanocarboxamida (0,10 g, 0,28 mmol), trietilamina (0,12 ml, 0,84 mmol) y N,N-dimetilpiridin-4-amina (2 mg, 0,01 mmol) en DCM (5 ml) a t.a. en atmósfera de aire. La solución resultante se agitó a t.a. durante 2 h. La mezcla de reacción se inactivó con cloruro de amonio acuoso saturado (20 ml) y se extrajo con DCM (2 * 20 ml). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO4 , se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante HPLC preparativa (columna Waters XBridge Prep C18 o Bd , 5 ^ de sílice, 30 mm de diámetro, 100 mm de longitud), utilizando mezclas decrecientemente polares de agua (que contenía NH3 al 1 %) y MeCN como eluyentes. Las fracciones que contenían el compuesto deseado se concentraron a presión reducida, obteniéndose (1S,3R)-3-acetamido-N-(5-fluoro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (0,047 g, 42 %) en forma de una goma. 1H RMN (500 MHz, DMSO-de, 30 °C) 1,03 - 1,15 (1H, m), 1,23 - 1,37 (3H, m), 1,74-1,82 (6 H, m), 1,83 - 1,94 (3H, m), 2,00-2,08 (2H, m), 2,56 - 2,68 (1H, m), 2,91 (2H, t), 3,58 - 3,61 (1H, m), 4,15 (2H, t), 7,73 - 7,78 (2H, m), 8,26 (1H, d), 8,30 (1H, d), 10,48 (1H, s). mlz: ES+ [M+H]+ 400.
Los procedimientos para preparar el material de partida (1S,3R)-3-amino-N-(5-fluoro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida se describen a continuación:
Preparación de 3-(2-cloro-5-fluorop¡r¡d¡n-4-¡l)-4.5.6,7-tetrah¡drop¡razolori.5-alp¡r¡d¡na
Figure imgf000116_0002
Se añadió precatalizador XPhos de 2.a generación (0,092 g, 0,12 mmol) a una mezcla desgasificada de 3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridina (0,347 g, 1,40 mmol), 2-cloro-5-fluoro-4-yodopiridina (0,300 g, 1,17 mmol) y fosfato de potasio tribásico (0,609 g, 3,50 mmol) en 1,4-dioxano (10 ml) y agua (2 ml). La mezcla se desgasificó y se agitó a 90 °C durante 2 h en atmósfera de nitrógeno. La mezcla de reacción se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se recogió en agua (20 ml). La mezcla resultante se extrajo secuencialmente con DCM (3 * 20 ml). La capa orgánica se secó sobre MgSO4 , se filtró, y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de EtOAc del 0 al 60 % en heptano. Las fracciones puras se concentraron a presión reducida, obteniéndose 3-(2-cloro-5-fluoropiridin-4-il)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridina (200 mg, 6 8 %) en forma de una goma de color amarillo. m/z: ES+ [M+H]+ 252.
Preparación___________de__________ (nR.3S)-3-((5-fluoro-4-(4.5.6.7-tetrah¡drop¡razolori.5-alp¡r¡d¡n-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)carbamoil)c¡clohex¡l)carbamato de tere-butilo
Figure imgf000116_0003
Se añadió tetraquis(trifenilfosfina)paladio(0) (0,092 g, 0,080 mmol) a una mezcla de 3-(2-cloro-5-fluoropiridin-4-il)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridina (0,20 g, 0,79 mmol), ((1R,3S)-3-carbamoilciclohexil)carbamato de tere-butilo (0,231 g, 0,95 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 25), 9,9-dimetil-4,5-bis(difenilfosfino)xanteno (0,092 g, 0,16 mmol), y carbonato de cesio (0,777 g, 2,38 mmol) en 1,4-dioxano ( 6 ml). Se desgasificó la mezcla (al vacío), se volvió a rellenar con nitrógeno y la suspensión resultante se agitó a 120 °C durante 2 h en el reactor de microondas. La mezcla de reacción se repartió entre agua (20 ml) y DCM (40 ml) y se separó usando un cartucho de separación de fases. Las capas orgánicas se adsorbieron sobre sílice y se purificaron mediante cromatografía ultrarrápida de gel de sílice, gradiente de elución de EtOAc del 0 al 60 % en heptano. Las fracciones que contenían producto se concentraron a presión reducida, obteniéndose ((1 R,3S)-3-((5-fluoro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de terc-butilo (136 mg). Este material se usó directamente en la etapa siguiente sin purificación adicional. m/z: ES+ [M+H]+ 458.
Preparación_______ de_______nS.3R)-3-am¡no-M-(5-fluoro-4-(4.5.6.7-tetrah¡drop¡razolori.5-alp¡r¡d¡n-3-¡l)p¡rid¡n-2-il)ciclohexanocarboxam¡da
Figure imgf000117_0001
Se añadió ácido trifluoroacético (0,17 ml, 2,2 mmol) a ((1R,3S)-3-((5-fluoro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de terc-butilo (0,10 g, 0,22 mmol) en DCM (5 ml). La solución resultante se agitó a t.a. durante 1 h. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía de intercambio iónico usando una columna SCX. El producto deseado se eluyó de la columna utilizando NH3 1 M en MeOH, y las fracciones puras se concentraron a presión reducida, obteniéndose (1S,3R)-3-amino-N-(5-fluoro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida en forma de una goma de color amarillo. Este material se usó directamente en la etapa siguiente sin purificación adicional. m/z: ES+ [M+H]+ 358.
Ejemplo 64 y 65: Preparación del ¡sómero 1 y el ¡sómero 2 de (1S.3R)-3-acetam¡do-N-(5-cloro-4-(5-met¡l-4.5.6.7-tetrah¡drop¡razolori.5-alp¡r¡d¡n-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da
Figure imgf000117_0002
Enantiómeros puros. La configuración del metilo es desconocida para los ejemplos 64 y 65, pero es opuesta en el ejemplo 64 frente al 65.
Se añadió precatalizador XPhos de 2.a generación (0,056 g, 0,07 mmol) a una mezcla de 5-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridina (0,56 g, 0,85 mmol), (1S,3R)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-yodopiridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (0,30 g, 0,71 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 12) y Cs2CO3 (0,695 g, 2,13 mmol) en dioxano (10 ml) y agua (2,0 ml) en atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó a 100 °C durante 30 minutos. Después se concentró la mezcla de reacción a presión reducida, y el residuo resultante se diluyó con DCM (100 ml) antes de lavarlo secuencialmente con agua (100 ml) y cloruro de sodio acuoso saturado (100 ml). La capa orgánica se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de MeOH del 0 al 10 % en DCM. Las fracciones de producto se concentraron a presión reducida, y el residuo resultante se purificó adicionalmente mediante HPLC preparativa (columna Waters XBridge Prep C18 OBD, 5 ^ de sílice, 19 mm de diámetro, 150 mm de longitud), utilizando mezclas decrecientemente polares de agua (que contenía NH4 HCO3 al 0,1 %) y MeCN como eluyentes. Las fracciones de producto se concentraron a presión reducida, obteniéndose (1S,3R)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-(5-metil-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[l,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (0,120 g, 39 %; mezcla de los ejemplos 64 y 65, relación desconocida) en forma de un sólido de color blanco. m/z: ES+ [M+H]+ 430.
Este material se resolvió mediante HPLC preparativa (columna Chiralpak® IA-3, 5 ^m de sílice, 20 mm de diámetro, 250 mm de longitud), usando una mezcla ¡socrática de isopropanol al 30 % en hexano (que contenía dietilamina al 0,1 %) como eluyentes a lo largo de 23 min a un caudal de 20 ml/min. Las fracciones de producto se concentraron a presión reducida, obteniéndose el isómero 1 de elución más rápida (14,3 min) de (1S,3R)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-(5-metil-4.5.6.7- tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (0,045 g, 38 %, ejemplo 64) en forma de un sólido de color blanco y el isómero 2 de elución más lenta (18,8 min) de (1S,3R)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-(5-metil-4.5.6.7- tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (0,045 g, 38 %, ejemplo 65) en forma de un sólido de color blanco.
Ejemplo 64, isómero 1:
1H RMN (400 MHz, DMSO-da, 21 °C) 1,00 - 1,14 (4H, m), 1,19 - 1,36 (3H, m), 1,69 - 1,84 (7H, m), 1,85 - 2,10 (3H, m), 2.37 - 2,49 (1H, m), 2,56 - 2,66 (1H, m), 2,79 - 2,90 (1H, m), 3,49 - 3,63 (1H, m), 4,01 - 4,13 (1H, m), 4,19 - 4,30 (1H, m), 7,75 (1H, s), 7,79 (1H, d), 8,12 (1H, s), 8,39 (1H, s), 10,61 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 430.
Ejemplo 65, isómero 2:
1H RMN (400 MHz, DMSO-de, 21 °C) 1,01 - 1,14 (4H, m), 1,21 - 1,35 (3H, m), 1,70 - 1,83 (7H, m), 1,83 - 2,09 (3H, m), 2.37 - 2,49 (1H, m), 2,56 - 2,63 (1H, m), 2,79 - 2,89 (1H, m), 3,49 - 3,62 (1H, m), 4,01 - 4,14 (1H, m), 4,19 - 4,30 (1H, m), 7,74 (1H, s), 7,78 (1H, d), 8,12 (1H, s), 8,39 (1H, s), 10,61 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 430.
Condiciones analíticas de la fase inversa uiral:
Figure imgf000118_0003
Los procedimientos para preparar el material de partida 5-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridina se describen a continuación:
Preparación de 5-metilp¡razolof1.5-a1p¡r¡d¡na
Figure imgf000118_0001
Se añadió acetato de paladio(II) (0,114 g, 0,51 mmol) a 5-bromopirazolo[1,5-a]piridina (1,00 g, 5,08 mmol), 2,4,6-trimetil-1,3,5,2,4,6-trioxatriborinano (0,765 g, 6,09 mmol), carbonato de potasio (2,10 g, 15,2 mmol), 1,4-dioxano (10 ml), y agua (1 ml) en atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó a 80 °C durante 1 hora. Esta reacción se repitió en un matraz independiente, y se combinaron ambas reacciones, se diluyeron con EtOAc (100 ml), y se lavaron secuencialmente con agua (75 ml) y cloruro de sodio acuoso saturado (75 ml). La capa orgánica se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de EtOAc del 0 al 20 % en éter de petróleo. Las fracciones puras se concentraron a presión reducida, obteniéndose 5-metilpirazolo[1,5-a]piridina (1,1 g, 82 %) en forma de un aceite de color pardo. 1H RMN (400 MHz, DMSO-de, 20 °C) 2,33 (3H, s), 6,45 (1H, d), 6,71 (1H, dd), 7,44 (1H, s), 7,92 (1H, d), 8,55 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ 133.
Preparación de 5-metil-4.5.6.7-tetrahidropirazolori.5-a1piridina
Figure imgf000118_0002
Se agitaron 5-metilpirazolo[1,5-a]piridina (500 mg, 3,78 mmol), paladio sobre carbono (10 % en peso; 250 mg) y ácido acético (0,217 ml, 3,78 mmol) en MeOH (20 ml) en una atmósfera de hidrógeno a 20 atm y 80 °C durante 50 h. Después se repitió esta reacción en un matraz independiente. Tras enfriarlas, ambas reacciones se filtraron a través de Celite®, y los filtrados se combinaron concentrados a presión reducida, obteniéndose 5-metil-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridina en bruto (1,05 g, 98 %) en forma de un aceite de color pardo. Este producto se usó en la etapa siguiente directamente sin purificación adicional. 1H RMN (400 MHz, DMSO-de, 20°C) 1,06 (3H, d), 1,57 - 1,72(1H, m), 1,84 - 2,04 (2H, m), 2,24 -2,36 (1H, mf), 2,81 - 2,93 (1H, m), 3,90 - 4,07 (1H, m), 4,11 - 4,19 (1H, m), 5,95 (1H, s), 7,33 (1H, s).
Preparación de 3-vodo-5-metil-4.5.6.7-tetrahidropirazolori.5-a1piridina
Figure imgf000119_0001
Se añadió NIS (1,98 g, 8,81 mmol) a 5-metil-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridina (1,05 g, 7,34 mmol) en acetonitrilo (2 ml). La mezcla resultante se agitó a t.a. durante 3 h antes de concentrarse a presión reducida. Después, el sólido resultante se diluyó con EtOAc (100 ml) y se lavó secuencialmente con agua (75 ml) y cloruro de sodio acuoso saturado (2 x 7 5 ml). La capa orgánica se secó sobre Na2SO4 , se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de EtOAc del 0 al 30 % en éter de petróleo. Las fracciones de producto se concentraron a presión reducida, obteniéndose 3-yodo-5-metil-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridina (1,0 g, 52 %) en forma de un sólido de color pardo. 1H RMN (400 m Hz , DMSO-d6, 20 °C) 1,08 (3H, d), 1,58 - 1,72 (1H, m), 1,87 - 2,01 (2H, m), 2,07 - 2,22 (1H, m), 2,64 - 2,71 (1H, m), 3,93 - 4,06 (1H, m), 4,10 -4,22 (1H, m), 7,47 (1H, s).
Preparación de 5-metil-3-(4.4.5.5-tetrametil-1.3.2-d¡oxaborolan-2-il)-4.5.6.7-tetrah¡drop¡razolori ,5-alpiridina
Figure imgf000119_0002
Se añadió gota a gota n-BuLi en hexano (2,5 M; 0,916 ml, 2,29 mmol) a 3-yodo-5-metil-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridina (0,50 g, 1,91 mmol), 2-isopropoxi-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (0,532 g, 2,86 mmol) y TMEDA (0,40 ml, 2,7 mmol) en THF (20 ml) a -78 °C en atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó a -78 °C durante 1 hora. La mezcla de reacción se inactivó con cloruro de amonio acuoso saturado (5 ml) y se extrajo con EtOAc (3 x 20 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con cloruro de sodio acuoso saturado (50 ml), se secaron sobre Na2SO4 , se filtraron, y se concentraron a presión reducida, obteniéndose 5-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridina (0,60 g, 79 %) contaminada con ~23 % en moles de 5-metil-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridina basándose en el análisis por RMN en forma de una goma de color amarillo. m/z: ES+ [M+CH3CN+H]+ 304.
Ejemplo_____ 66:_____nS.3R)-3-acetamido-M-(5-cloro-4-(5.6.7.8-tetrahidro-4H-pirazolori.5-alazepin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida
Figure imgf000119_0003
Se añadió anhídrido acético (0,13 ml, 1,4 mmol) a una solución en agitación de (1S,3R)-3-amino-N-(5-cloro-4-(5,6,7,8-tetrahidro-4H-pirazolo[1,5-a]azepin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (450 mg, 1,16 mmol), trietilamina (0,34 ml, 2,4 mmol) y DCM (10 ml). La mezcla de reacción se agitó a t.a. durante 4 h. Se añadió sílice y la mezcla se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, eluyendo con metanol al 0,5 % en acetato de etilo, obteniéndose (1S,3R)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-(5,6,7,8-tetrahidro-4H-pirazolo[1,5-a]azepin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida ( 2 6 0 mg, 52 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (400 MHz, DMSO-de, 30 °C) 1,05 - 1,12 (1H, m), 1,17 - 1,37 (3H, m), 1,57 - 1, 66 (2H, m), 1,69 - 1,95 (11H, m), 2,56 - 2,65 (1H, m), 2,70 - 2,77 (2H, m), 3,50 - 3,61 (1H, m), 4,21 - 4,45 (2H, m), 7,48 (1H, s), 7,73 (1H, d), 8,05 (1H, s), 8,40 (1H, s), 10,58 (1H, s). mlz: ES+ [M+H]+ 430.
Los procedimientos para preparar el material de partida (1S,3R)-3-amino-N-(5-cloro-4-(5,6,7,8-tetrahidro-4H-pirazolo[1,5-a]azepin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida se describen a continuación:
Preparación de 1-(5-metoxi-5-oxopentil)-1H-pirazol-5-carboxilato de etilo
Figure imgf000120_0001
Se agitaron 1H-pirazol-5-carboxilato de etilo (9,9 g, 71 mmol) y carbonato de potasio (12 g, 85 mmol) en DMF (70 ml) y se añadió 5-bromopentanoato de metilo (14 g, 71 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 24 h. Se añadió agua y la mezcla se extrajo con éter (3x). Las capas orgánicas combinadas se combinaron y se lavaron con éter (2x), se secaron sobre sulfato de magnesio y se concentraron a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, eluyendo con acetato de etilo al 20 % en pentano, obteniéndose 1-(5-metoxi-5-oxopentil)-1H-pirazol-5-carboxilato de etilo (9 g, 50,1 %). 1H RMN (400 MHz, CDCls, 30 °C) 1,38 (3H, t), 1,54 - 1,75 (2H, m), 1,8 - 1,95 (2H, m), 2,34 (2H, t), 3,65 (3H, s), 4,34 (2H, c), 4,58 (2H, t), 6,83 (1H, d), 7,46 (1H, d). mlz: ES+ [M+H]+ 255. También se aisló 1-(5-metoxi-5-oxopentil)-1H-pirazol-3-carboxilato de etilo (7,70 g, 43 %).
Preparación de 4-oxo-5.6.7.8-tetrah¡dro-4H-p¡razolori.5-a1azep¡n-5-carboxilato de metilo
Figure imgf000120_0002
Se añadió terc-butóxido de potasio (6,29 g, 56,0 mmol) a 1-(5-metoxi-5-oxopentil)-1 H-pirazol-5-carboxilato de etilo (9,5 g, 37 mmol) en tolueno (200 ml). La mezcla se agitó durante 10 minutos y después se calentó a 110 °C, obteniéndose un precipitado espeso. La mezcla se calentó durante 30 minutos y, luego, se dejó enfriar a temperatura ambiente. La mezcla se neutralizó a pH 7 con HCl acuoso diluido (2 N) y se extrajo con acetato de etilo (3x). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de magnesio y se concentraron a presión reducida, obteniéndose 4-oxo-5,6,7,8-tetrahidro-4H-pirazolo[1,5-a]azepine-5-carboxilato de metilo (8,00 g, 103 %) contaminado con análogo de éster etílico. Este material se usó directamente en la etapa siguiente sin purificación adicional. m/z: ES+ [M+H]+ 209 (éster de Me) y 223 (éster de Et). Preparación de 5.6.7.8-tetrah¡dro-4H-p¡razolon.5-a1azep¡n-4-ona
Figure imgf000120_0003
Se añadió cloruro de litio (2,60 g, 61,2 mmol) a una solución de 4-oxo-5,6,7,8-tetrahidro-4H-pirazolo[1,5-a]azepine-5-carboxilato de metilo (8,50 g, 40,8 mmol, contaminado con el análogo de éster de etilo) en Dm So (50 ml). La mezcla se calentó a 120 °C durante 24 h y después se enfrió a t.a. Se añadió agua y la mezcla se extrajo con acetato de etilo (3x). Las capas orgánicas combinadas se concentraron a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, eluyendo con acetato de etilo al 30 % en heptano, obteniéndose 5,6,7,8-tetrahidro-4H-pirazolo[1,5-a]azepin-4-ona (3,50 g, 57 %) en forma de un aceite. 1H RMN (400 MHz, CDCb, 30 °C) 1,91 -2,08 (2H, m), 2,08 - 2,28 (2H, m), 2,76 - 2,93 (2H, m), 4,49 - 4,64 (2H, m), 6,86 (1H, d), 7,44 (1H, d).
Preparación de 5.6.7.8-tetrahidro-4H-p¡razolori.5-a1azep¡na
Figure imgf000120_0004
Se añadió hidrato de hidrazina (5,65 ml, 117 mmol) a una solución en agitación de 5,6,7,8-tetrahidro-4H-pirazolo[1,5-a]azepin-4-ona (3,5 g, 23 mmol) disuelta en dietilenglicol (66 ml). La solución resultante se agitó a 170 °C durante 1 hora. Después se retiró la reacción del calor y se añadió cuidadosamente a la mezcla hidróxido de potasio (4,58 g, 81,6 mmol). La suspensión resultante se agitó a 170 °C durante 2 h y después se enfrió a t.a. Después se diluyó la mezcla de reacción con agua, se acidificó a pH 5 con ácido clorhídrico acuoso diluido (2 N), y se extrajo con Et2O (5 * 50 ml). Las capas en éter combinadas se lavaron con agua (2 * 20 ml), se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se concentraron a presión reducida, obteniéndose 5,6,7,8-tetrahidro-4H-pirazolo[1,5-a]azepina (2,10 g, 66 %) en forma de un sólido. 1H RMN (400 MHz, CDCls, 30 °C) 1,61 - 1,67 (2H, m), 1,71 - 1,79 (2H, m), 1,80 - 1,87 (2H, m), 2,62 - 2,83 (2H, m), 4,17 - 4,3 (2H, m), 5,98 (1H, d), 7,26 (1H, d).
Preparación de 3-vodo-5.6.7.8-tetrah¡dro-4H-p¡razolon ,5-alazepina
Figure imgf000121_0001
Se añadió NIS (3,47 g, 15,4 mmol) a una solución en agitación de 5,6,7,8-tetrahidro-4H-pirazolo[1,5-a]azepina (2,10 g, 15,4 mmol) disuelta en acetonitrilo (30 ml) a t.a. La mezcla resultante se agitó a t.a. durante 16 h. Después se diluyó la mezcla de reacción con éter (50 ml), y se lavó secuencialmente con agua (2 x 20 ml) y cloruro de sodio acuoso saturado (20 ml). La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró, y se concentró a presión reducida, obteniéndose 3-yodo-5,6,7,8-tetrahidro-4H-pirazolo[1,5-a]azepina (3,3 g, 82 %) en forma de un aceite de color naranja que se solidificó al dejarla reposar. Este material se usó directamente en la etapa siguiente sin purificación adicional. 1H RMN (400 MHz, cD ch, 30 °C) 1,6 - 1,72 (2H, m), 1,73 - 1,82 (2H, m), 1,82 - 1,92 (2H, m), 2,74 - 2,83 (2H, m), 4,25 - 4,35 (2H, m), 7,32 (1H, s).
Preparación de 3-(4.4.5.5-tetramet¡l-1.3.2-d¡oxaborolan-2-il)-5.6.7.8-tetrah¡dro-4H-p¡razolori ,5-alazepina
Figure imgf000121_0002
Se añadió gota a gota complejo de cloruro de isopropilmagnesio y cloruro de litio en THF (1,3 M; 12,6 ml, 16,4 mmol) a lo largo de 5 minutos a 3-yodo-5,6,7,8-tetrahidro-4H-pirazolo[1,5-a]azepina (3,30 g, 12,6 mmol) en THF (20 ml) a 0 °C en atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó a 0 °C durante 30 minutos. Se añadió 2-isopropoxi-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (3,85 ml, 18. 9 mmol) gota a gota a 0 °C, y la mezcla de reacción se dejó calentar posteriormente a t.a. durante una noche. La mezcla de reacción se diluyó con éter (20 ml) y se lavó secuencialmente con cloruro de amonio acuoso saturado (20 ml), agua (20 ml), y cloruro de sodio acuoso saturado (10 ml). La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró, y se concentró a presión reducida. El aceite resultante se recogió en heptano, dando lugar a la formación de una mezcla blanca. Se filtró esta mezcla, obteniéndose 3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-pirazolo[1,5-a]azepina (2,00 g, 61 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (400 MHz, CDCls, 30 °C) 1,29 (12H, s), 1,63 - 1,72 (2H, m), 1,72 - 1,8 (2H, m), 1,80 - 1,87 (2H, m), 2,88 - 3,09 (2H, m), 4,20 - 4,33 (2H, m), 7,56 (1H, s).
Preparación_________ de________ (nR.3S)-3-((5-cloro-4-(5.6.7.8-tetrah¡dro-4H-p¡razolori.5-a1azep¡n-3-¡l)pir¡d¡n-2-¡l)carbamoil)c¡clohex¡l)carbamato de terc-butilo
Figure imgf000121_0003
Se añadió precatalizador XPhos de 2.a generación (0,16 g, 0,21 mmol) a una mezcla desgasificada de 3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-pirazolo[1,5-a]azepina (0,656 g, 2,50 mmol), (1R,3S)-3-((5-cloro-4-yodopiridin-2-ilcarbamoil)ciclohexil)carbamato de tere-butilo (1,00 g, 2,08 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 10) y fosfato de potasio tribásico, (1,09 g, 6,25 mmol) en 1,4-dioxano (20 ml) y agua (2 ml). La mezcla se desgasificó nuevamente y se agitó a 85 °C durante 24 h en atmósfera de nitrógeno. La mezcla de reacción se dejó enfriar y se añadió sílice. Esta nueva mezcla se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida de gel de sílice, eluyendo con acetato de etilo al 50 % en heptano, obteniéndose ((1R,3S)-3-((5-cloro-4-(5,6,7,8-tetrahidro-4H-pirazolo[1,5-a]azepin-3-il)piridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de tere-butilo (0,70 g, 69 %) en forma de un sólido. Este material se llevó a la etapa siguiente sin purificación adicional. m/z: ES+ [M+H]+ 488.
Preparación______de_____ (1S.3R)-3-am¡no-M-(5-cloro-4-(5.6.7.8-tetrah¡dro-4H-p¡razolori.5-alazep¡n-3-¡l)pir¡d¡n-2-¡l)ciclohexanocarboxam¡da
Figure imgf000122_0001
Se añadió TFA (2 ml) a una solución en agitación de ((1R,3S)-3-((5-cloro-4-(5,6,7,8-tetrahidro-4H-pirazolo[1,5-a]azepin-3-N)piridin-2-N)carbamoN)cidohexN)carbamato de tere-butilo (700 mg, 1,43 mmol) en DCM (10 ml). La reacción se agitó a t.a. durante 24 h, los volátiles se retiraron al vacío y el residuo resultante se purificó mediante cromatografía de intercambio iónico usando una columna SCX, eluyendo con amoniaco 7 N en metanol. Las fracciones de producto se concentraron a presión reducida, obteniéndose (1 S,3R)-3-amino-N-(5-cloro-4-(5,6,7,8-tetrahidro-4H-pirazolo[1,5-a]azepin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (550 mg, 99 %) en forma de un sólido. mlz: ES+ [M+H]+ 388.
Ejemplo____________67___________ M-(nR.3S)-3-((5-cloro-4-(4.5.6.7-tetrah¡drop¡razolori.5-alp¡r¡d¡n-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)carbamo¡l)c¡clohex¡l)oxetano-3-carboxam¡da
Figure imgf000122_0002
Se añadieron HATU (166 mg, 0,44 mmol) y DIPEA (0,18 ml, 1,0 mmol) secuencialmente a una solución de diclorhidrato de (1 S,3R)-3-amino-Ñ-(5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (150 mg, 0,34 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 31b) y ácido oxetano-3-carboxílico (45 mg, 0,44 mmol) en DMF (1,2 ml). La reacción se agitó a t.a. durante 3 h antes de diluirla con hidrogenocarbonato de sodio acuoso saturado y se extrajo con EtOAc (3x). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron a presión reducida. La goma en bruto resultante se purificó mediante HPLC preparativa (columna Waters XBridge Prep Phenyl OBD, 5 ^ de sílice, 19 mm de diámetro, 150 mm de longitud) utilizando mezclas decrecientemente polares de agua (que contenía hidróxido de amonio al 0,2 %, pH 10) y MeCN como eluyentes, obteniéndose N-((1R,3S)-3-((5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)-oxetano-3-carboxamida (20 mg).
Se estableció una segunda reacción de la siguiente manera: se añadió HATU (140 mg, 0,37 mmol) a una solución de diclorhidrato de (1 S,3R)-3-amino-N-(5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (150 mg, 0,34 mmol), ácido oxetano-3-carboxílico (45 mg, 0,44 mmol), DIPEA (0,18 ml, 1,0 mmol) y DMF (1,2 ml). La reacción se agitó a t.a. durante 3 h. La reacción se diluyó con EtOAc y se lavó con NaHCO3 saturado y cloruro de sodio acuoso saturado. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, eluyendo con un gradiente de EtOAc del 80 al 100 % en hexano, obteniéndose N-((1R,3S)-3-((5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)oxetano-3-carboxamida (50 mg) en forma de un sólido de color blanco. Este residuo se combinó con el producto de la primera reacción y se volvió a purificar mediante HPLC preparativa (columna Waters XBridge Prep Phenyl OBD, 5 ^ de sílice, 19 mm de diámetro, 150 mm de longitud) obteniéndose N-((1R,3S)-3-((5-cloro-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)oxetano-3-carboxamida (54 mg, 17 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (300 MHz, CDCls, 27 °C) 1,10 - 1,26 (1H, m), 1,37 - 1,68 (3H, m), 2,17 - 1,84 (7H, m), 2,37 - 2,22 (1H, m), 2,57 - 2,43 (1H, m), 2,95 (2H, t), 3,67 (1H, tt), 3,85 - 4,00 (1H, m), 4,24 (2H, t), 4,89 - 4,78 (4H, m), 5,52 (1H, a d), 7,93 (1H, s), 8,27 (1H, s), 8,28 (1H, s), 8,60 (1H, s a). m/z: ES+ [M+H]+ 458.
Ejemplos 68 y 69: ¡sómero 1 e ¡sómero 2 de (1S.3R)-3-acetam¡do-M-(5-cloro-4-(6-met¡l-4.5.6.7-tetrah¡drop¡razolori.5-alp¡r¡d¡n-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da
Figure imgf000123_0001
Ejemplo 68, isómero 1 Ejemplo 69, isómero 2
Enantiómeros puros. La configuración del metilo es desconocida para los ejemplos 68 y 69, pero es opuesta en el ejemplo 68 frente al 69.
Se separó la (1 S,3R)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-(6-metil-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)cidohexanocarboxamida (163 g, 0,379 mmol; mezcla de los ejemplos 68 y 69, proporción desconocida) usando condiciones de SFC (columna: Chiralpak AS, 5 ^m, 21,2 mm de diámetro, 250 mm de longitud, caudal de 20 ml/min a lo largo de 7 min), eluyendo con metanol al 25 % en CO2 , obteniéndose el isómero 1 (3,10 min) de (1S,3R)-3-acetamido-N-(5-doro-4-(6-metil-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (65 mg, 28 %, ejemplo 68) y el isómero 2 (4,09 min) de (1S,3R)-3-acetamido-Ñ-(5-cloro-4-(6-metil-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (68, 29 %, ejemplo 69) en forma de sólidos de color blanco.
Ejemplo 68, isómero 1:
1H RMN (300MHz, CDCls, 27 °C) 1,05 - 1,25 (4H, m), 1,65 - 1,33 (4H, m), 1,85 - 2,09 (7H, m), 2,15 - 2,32 (2H, m), 2,38 -2,53 (1H, m), 2,86 - 3,03 (2H, m), 3,70 (1H, dd), 3,82 - 3,97 (1H, m), 4,33 (1H, dd), 5,47 (1H, a d), 7,89 (1H, s), 8,12 (1H, s a), 8,22 (1H, s), 8,27 (1H, s). mlz: ES+ [M+H]+ 430.
Ejemplo 69, isómero 2:
1H RMN (300MHz, CDCls, 27 °C) 1,09 - 1,24 (4H, d), 1,34 - 1,58 (4H, m), 1,86 - 2,08 (7H, m), 2,15 - 2,32 (1H, m), 2,41 -2,51 (1H, m), 2,86 - 3,03 (1H, m), 3,64 - 3,75 (1H, m), 3,81 - 3,95 (1H, m), 4,33 (1H, dd), 5,52 (1H, a d), 7,88 (1H, s), 8,15 - 8,21 (2H, m), 8,27 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 430.
Condiciones de SFC analítica:
Figure imgf000123_0002
Los procedimientos utilizados para preparar el material de partida (1S,3R)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-(6-metil-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida se describen a continuación:
Preparación de 6-met¡lp¡razolori.5-alp¡rid¡na
Figure imgf000124_0001
Se añadieron dioxano (32 ml) y agua (6,0 ml) a carbonato de potasio (1,82 g, 13,2 mmol), 2,4,6-trimetil-1,3,5,2,4,6-trioxatriborinano (1,9 ml, 13 mmol) y 6-bromopirazolo[1,5-a]piridina (1,3 g, 6,60 mmol). La suspensión de la reacción se desgasificó con nitrógeno. Se añadió precatalizador RuPhos de 3.a generación (0,27 g, 0,33 mmol), y la reacción se sumergió en un baño de aceite que se había precalentado a 100 °C. La reacción se mantuvo en estas condiciones durante 4 h y después se enfrió a t.a. La mezcla resultante se filtró y el filtrado se lavó con cloruro sódico acuoso saturado. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró a presión reducida. El aceite resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de acetato de etilo del 5 al 40 % en hexano, obteniéndose 6-metilpirazolo[1,5-a]piridina (0,680 g, 78 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (300 MHz, CDCls, 27 °C) 2,29 (3H, s), 6,53 (1H, dd), 7,07 (1H, dd), 7,60 (1H, d), 7,90 (1H, d), 8,49 - 8,52 (1H, m). m/z: ES+ [M+H]+ 133.
Preparación de 6-met¡l-4.5.6.7-tetrah¡drop¡razolori.5-alp¡rid¡na
Figure imgf000124_0002
Se añadieron metanol (45 ml) y ácido acético (0,5 ml) a un matraz cargado con 6-metilpirazolo[1,5-a]piridina (0,71 g, 5,4 mmol) y óxido de platino(IV) (0,12 g, 0,54 mmol). El matraz se purgó con nitrógeno, se evacuó y se sometió a una atmósfera de hidrógeno (globo). La reacción se agitó a 35 °C durante 18 h y después se filtró a través de un lecho de Celite®. El filtrado se concentró a presión reducida y, luego, se diluyó con éter dietílico. La mezcla se lavó con hidrogenocarbonato de sodio acuoso saturado y cloruro de sodio acuoso saturado. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró a presión reducida, obteniéndose 6-metil-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridina en bruto (0,71 g, 97 %) en forma de un sólido de color blanquecino. 1H RMN (300 MHz, CDCls, 27 °C) 1,1 (3H, d), 1,50 (1H, dtd), 1,92 - 2,01 (1H, m), 2,08 - 2,27 (1H, m), 2,64 - 2,80 (1H, m), 2,87 - 2,96 (1H, m), 3,64 (1H, dd), 4,27 (1H, ddd), 5,99 (1H, s), 7,39 (1H, d). mlz: ES+ [M+H]+ 137.
Preparación de 3-vodo-6-metil-4.5.6.7-tetrah¡drop¡razolori .5-alpiridina
Figure imgf000124_0003
Se añadió NIS (1,16 g, 5,14 mmol) a una solución de 6-metil-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridina (0,70 g, 5,14 mmol) en acetonitrilo (12 ml) a t.a. La reacción se agitó en estas condiciones durante 18 h y después se diluyó con EtOAc. La mezcla resultante se lavó con agua, y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (4 * 100 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con cloruro de sodio acuoso saturado y se concentraron a presión reducida. La goma en bruto resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida de gel de sílice, gradiente de elución de acetato de etilo del 5 al 50 % en hexanos, obteniéndose 3-yodo-6-metil-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridina (1,10 g, 82 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (300 MHz, CDCh, 27 °C) 1,15 (3H, d), 1,42 - 1,61 (1H, m), 1,90 - 2,07 (1H, m), 2,08 - 2,22 (1H, m), 2,52 - 2,60 (1H, m), 2,75 - 2,86 (1H, m), 3,65 (1H, dd), 4,26 (1H, dd), 7,49 (1H, s). mlz: ES+ [M+H]+ 263.
Preparación de 6-metil-3-(4.4.5.5-tetramet¡l-1.3.2-d¡oxaborolan-2-il)-4.5.6.7-tetrah¡drop¡razolori .5-alpiridina
Figure imgf000124_0004
Se añadió tetrahidrofurano (3 ml) a un matraz cargado con 3-yodo-6-metil-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridina (0,40 g, 1,53 mmol). La reacción se sumergió en un baño de hielo, y se añadieron gota a gota complejo de cloruro de isopropilmagnesio y cloruro de litio en THF (1,3 M; 1,5 ml, 2,0 mmol). La reacción se mantuvo a entre 0 y 3 °C durante 30 min. Después se añadió 2-isopropoxi-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (0,426 g, 2,29 mmol) con una jeringa y se retiró el baño de agua. La reacción se mantuvo en estas condiciones durante 18 h y después se diluyó con cloruro de amonio acuoso saturado. La mezcla se extrajo en EtOAc (3x), y las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron a presión reducida, obteniéndose 6-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridina (0,186 g). Este material se usó en la etapa siguiente sin purificación adicional. m/z: ES+ [M+H]+ 263.
Preparación de (1S.3R)-3-acetam¡do-M-(5-cloro-4-(6-met¡l-4.5.6.7-tetrah¡drop¡razolo ri.5-alp¡r¡d¡n-3-¡l)p¡rid¡n-2-il)ciclohexanocarboxam¡da
Figure imgf000125_0001
Mezcla de los ejemplos 68 y 69, proporción desconocida
Se añadieron 1,4-dioxano (5 ml) y agua (0,63 ml) a un matraz cargado con (1 S,3R)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-yodopiridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (0,23 g, 0,55 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 12) y 6-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridina (0,19 g, 0,71 mmol). La mezcla de reacción se evacuó y se purgó con nitrógeno. Después se añadieron carbonato de cesio (0,444 g, 1,36 mmol) y PdCh(dppf) (0,040 g, 0,05 mmol). La reacción se colocó en un baño de aceite precalentado a 95 °C, y la reacción se mantuvo en estas condiciones durante 2 h. La reacción después se enfrió a t.a. y se filtró a través de Celite® usando un lavado con acetato de etilo. El filtrado se lavó con cloruro de sodio acuoso saturado, y la capa acuosa se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró a presión reducida. El sólido de color gris resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida de gel de sílice, gradiente de elución de metanol del 1 al 10 % en acetato de etilo, obteniéndose (1S,3R)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-(6-metil-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (0,16 g, 69 %). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6, 27 °C) 0,99-1,15 (4H, m), 1,20 - 1,33 (3H, m), 1,37 - 1,48 (1H, m), 1,68 - 1,77 (6H, m), 1,81 - 1,92 (2H, m), 2,10 - 2,20 (1H, m), 2,54-2,62 (1H, m), 2,79 - 2,87 (2H, m), 3,48 - 3,61 (1H, m), 3,65 (1H, dd), 4,26 (1H, dd), 7,73 (1H, a d), 7,76 (1H, s), 8,15 (1H, s), 8,38 (1H, s), 10,58 (1H, s). mlz: ES+ [M+H]+ 430.
Ejemplo 70 y ejemplo 71: preparación del isómero 1 y el isómero 2 de (1S.3R)-3-acetam¡do-M-(5-cloro-4-(6-metox¡-4.5.6.7-tetrah¡drop¡razolori.5-alp¡r¡d¡n-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)ciclohexanocarboxam¡da
Figure imgf000125_0002
Enantiómeros puros. La configuración del metoxi es desconocida para los ejemplos 70 y 71, pero es opuesta en el ejemplo 70 frente al 71.
Se resolvió la (1S,3R)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-(6-metoxi-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (100 mg, 0,22 mmol) en condiciones de HPLC preparativa (columna Chiralpak ¡A, 5 ^m, 20 mm de diámetro, 250 mm de longitud, temperatura de la columna de 25 °C, caudal de 15 ml/min), eluyendo con etanol al 50 % isocrático en hexano a lo largo de 22 min, obteniéndose el isómero 1 de elución más rápida (10,8 min) de (1S,3R)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-(6-metoxi-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (0,030 g, 30 %) y el isómero 2 de elución más lenta (17,9 min) de (1S,3R)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-(6-metoxi-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (0,030 g, 30 %) en forma de sólidos de color blanco.
Ejemplo 70, isómero 1:
1H RMN (400 MHz, DMSO-da, 19 °C) 1,00 - 1,14 (1H, m), 1,20 - 1,34 (3H, m), 1,72 - 1,80 (6H, m), 1,84 - 1,97 (2H, m), 2,07 - 2,19 (1H, m), 2,56 - 2,66 (1H, m), 2,70 - 2,92 (2H, m), 3,36 (3H, s), 3,48 - 3,63 (1H, m), 3,93 - 4,02 (1H, m), 4,23 (2H, d), 7,76 - 7,83 (2H, m), 8,15 (1H, s), 8,39 (1H, s), 10,64 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 446.
Ejemplo 71, isómero 2:
1H RMN (400 MHz, DMSO-de, 19 °C) 1,00 - 1,17 (1H, m), 1,19 - 1,35 (3H, m), 1,72 - 1,80 (6H, m), 1,85 - 1,97 (2H, m), 2,06 - 2,19 (1H, m), 2,55 - 2,63 (1H, m), 2,71 - 2,92 (2H, m), 3,36 (3H, s), 3,50 - 3,62 (1H, m), 3,93 - 4,02 (1H, m), 4,23 (2H, d), 7,76 - 7,83 (2H, m), 8,16 (1H, s), 8,39 (1H, s), 10,64 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 446.
Condiciones de SFC analítica:
Figure imgf000126_0003
Los procedimientos utilizados para preparar el material de partida (1S,3R)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-(6-metoxi-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida se describen a continuación:
Preparación de 6-metox¡p¡razolof1.5-a1p¡rid¡na
Figure imgf000126_0001
Se añadió carbonato de cesio (3,31 g, 10,2 mmol) a 6-bromopirazolo[1,5-a]piridina (1,00 g, 5,08 mmol), MeOH (0,41 ml, 10 mmol), acetato de paladio (0,057 g, 0,25 mmol) y 2-(di-1-adamantilfosfino)-3,6-dimetoxi-2',4'6'-triisopropil-1,1'-bifenilo (AdBrettPhos; 0,14 g, 0,25 mmol) en tolueno (10 ml). La mezcla resultante se agitó a 90 °C durante 2 h. La reacción anterior se repitió en una reacción separada. Una vez se enfriaron ambas reacciones, se combinaron, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de EtOAc del 0 al 20 % en éter de petróleo. Las fracciones puras se concentraron a presión reducida, obteniéndose 6-metoxipirazolo[1,5-a]piridina (0,83 g, 55 %) en forma de un aceite incoloro. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6, 27 °C) 3,82 (3 H, s), 6,54 (1 H, s), 7,01 (1 H, d), 7,61 (1 H, d), 7,87 (1 H, s), 8,38 (1 H, s).
Preparación de 6-metoxi-4.5.6.7-tetrahidropirazoloH.5-a1pmdina
Figure imgf000126_0002
Se agitó 6-metoxipirazolo[1,5-a]piridina (0,36 g, 2,4 mmol) y paladio sobre carbono (10 % en peso; 0,078 g, 0,73 mmol) en MeOH (50 ml) en una atmósfera de hidrógeno a 20 atm y 80 °C durante 16 h. La mezcla se filtró a través de un lecho de Celite®, y el filtrado se concentró a presión reducida. El residuo resultante se diluyó con EtOAc (25 ml) y se lavó secuencialmente con hidrogenocarbonato de sodio acuoso saturado (25 ml) y cloruro de sodio acuoso saturado (25 ml). La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró a presión reducida, obteniéndose 6-metoxi-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridina (0,30 g, 81 %) en forma de un sólido céreo de color amarillo. 1H RMN (400 MHz, DMSO, 20 °C) 1,85 - 1,94 (1H, m), 1,98 - 2,09 (1H, m), 2,71 - 2,78 (2H, m), 3,32 (3H, s), 3,89 (1H, m), 4,02 - 4,18 (2H, m), 5,97 (1H, d), 7,34 (1H, d).
Preparación de 3-vodo-5-metox¡-4.5.6.7-tetrah¡drop¡razolon ,5-alpiridina
Figure imgf000127_0001
Se añadió NIS (0,559 g, 2,48 mmol) a 5-metoxi-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridina (0,27 g, 1,77 mmol) en acetonitrilo (10 ml). La mezcla resultante se agitó a t.a. durante 30 minutos.
La mezcla de reacción se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se diluyó con EtOAc (25 ml). Esta nueva mezcla se lavó secuencialmente con agua (25 ml) y cloruro de sodio acuoso saturado (25 ml). La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de EtOAc del 0 al 30 % en éter de petróleo. Las fracciones de producto se concentraron a presión reducida, obteniéndose 3-yodo-5-metoxi-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridina (0,40 g, 81 %) en forma de un aceite de color amarillo. 1H RMN (400 MHz, DMSO-de, 21°C) 1,78 - 1,99 (1H, m), 2,02 - 2,23 (1H, m), 2,53 - 2,60 (2H, m), 3,34 (3H, s), 3,82 - 3,96 (1H, m), 4,07 - 4,26 (2H, m), 7,48 (1H, s).
Preparación de 6-metoxi-3-(4.4.5.5-tetrametil-1 ^^ -d io x a b o ro la n ^-ilM ^^J -te tra h id ro p ira z o lo H ^-a lp ir íd in a
Figure imgf000127_0002
Se añadió n-BuLi (0,805 ml, 2,01 mmol) a 3-yodo-6-metoxi-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridina (0,4 g, 1,44 mmol), 2-isopropoxi-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (0,401 g, 2,16 mmol), y t Me DA (0,30 ml, 2,0 mmol) en THF (20 ml) enfriado a -78°C en atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se mantuvo a -78 °C durante 1 hora. Después se inactivó la mezcla de reacción con cloruro de amonio acuoso saturado (200 ml), se extrajo con EtOAc (3 x 150 ml), la capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró a presión reducida, obteniéndose 6-metoxi-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridina (0,400 g, 100 %) en forma de una goma incolora, contaminada con material de partida des-yodo al 14 % en peso (análisis por RMN). Este material se llevó a la etapa siguiente sin purificación adicional.
Preparación_______de______ ((IR ^ S ^ -fre -c lo ro ^ -fó -m e to x M ^^ J -te tra h id ro p ira z o lo r i^ -a lp ir id in ^ -in p ir id in ^ -incarbamoinciclohexihcarbamato de tere-butilo
Figure imgf000127_0003
Se añadió precatalizador XPhos de 2.a generación (0,049 g, 0,06 mmol) a 6-metoxi-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridina (0,387 g, 1,25 mmol), ((1R,3S)-3-((5-cloro-4-yodopiridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de tere-butilo (0,3 g, 0,63 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 10) y carbonato de cesio (0,611 g, 1,88 mmol) en dioxano (10 ml) y agua (1 ml) en atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó a 100 °C durante 1 hora, y la mezcla de reacción se enfrió posteriormente y se diluyó con EtOAc (200 ml). La mezcla de reacción se lavó secuencialmente con agua (200 ml) y cloruro de sodio acuoso saturado (200 ml). La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de EtOAc del 0 al 60 % en éter de petróleo. Las fracciones puras se concentraron a presión reducida, obteniéndose ((1R,3S)-3-((5-cloro-4-(6-metoxi-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de tere-butilo (0,14 g, 44 %) en forma de un sólido de color blanco. m/z: ES+ [M+H]+ 504.
Preparación de n S ^R ^-a m in o -M -fó -c lo ro ^-fó -m e to x M ^^J -te tra h id ro p ira z o lo ri^ -a lp ir id in ^ -in p ir id in ^ -iPciclohexanocarboxamida
Figure imgf000128_0001
Se añadió TFA (4 ml, 51,92 mmol) a ((1R,3S)-3-((5-cloro-4-(6-metoxi-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)carbamoil)cidohexil)carbamato de tere-butilo (0,14 g, 0,28 mmol) en DCM (10 ml). La mezcla resultante se agitó a t.a. durante 1 hora. La reacción se concentró a presión reducida, obteniéndose (1S,3R)-3-amino-N-(5-cloro-4-(6-metoxi-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida en bruto como la sal de ácido ditrifluoroacético (0,15 g, 98 %) en forma de una goma de color amarillo. m/z: ES+ [M+H]+ 404.
Preparación de nS.3R)-3-acetam¡do-N-(5-cloro-4-(6-metox¡-4.5.6.7-tetrah¡drop¡razolori.5-alp¡r¡d¡n-3-¡l)p¡rid¡n-2-il)ciclohexanocarboxam¡da
Figure imgf000128_0002
Mezela de los ejemplos 70 y 71, proporeión deseonoeida.
Se añadió anhídrido acético (0,023 ml, 0,25 mmol) a (1S,3R)-3-amino-N-(5-cloro-4-(6-metoxi-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (sal de ácido di-trifluoroacético; 0,15 g, 0,25 mmol) y TEA (0,17 ml, 1,2 mmol) en d Cm (5 ml). La mezcla resultante se agitó a t.a. durante 16 h. Después, la reacción se concentró a presión reducida, y el producto en bruto se purificó mediante HPLC preparativa (columna XBridge Prep C18 OBD, 21,2 mm de diámetro, 250 mm de longitud), utilizando mezclas decrecientemente polares de agua (que contenían NH4HCO3 al 0,1 %) y MeCN como eluyentes. Las fracciones que contenían el compuesto deseado se concentraron a presión reducida, obteniéndose (1 S,3R)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-(6-metoxi-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (0,100 g, 91 %; mezcla de los ejemplos 70 y 71) en forma de un sólido de color blanco. m/z: ES+ [M+H]+ 446.
Ejemplo 72 y ejemplo 73: preparación del ¡sómero 1 y el ¡sómero 2 de (1S.3R)-3-acetam¡do-M-(5-cloro-4-(5-metox¡-4.5.6.7-tetrah¡drop¡razolori.5-alp¡r¡d¡n-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da
Figure imgf000128_0003
Enantiómeros puros. La eonfiguraeión del metoxi es deseonoeida para los ejemplos 72 y 73, pero es opuesta en el ejemplo 72 frente al 73.
Se resolvió la (1S,3R)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-(5-metoxi-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (120 mg, 0,270 mmol; preparado de acuerdo con los ejemplos 70 y 71, sustituyendo la 6-bromopirazolo[1,5-a]piridina por 5-bromopirazolo[1,5-a]piridina) en condiciones de HPLC preparativa (columna Chiralpak ID, 5 ^m, 20 mm de diámetro, 250 mm de longitud, temperatura de la columna de 25 °C, caudal de 15 ml/min), eluyendo con etanol al 50 % isocrático en hexano a lo largo de 31 min, obteniéndose el isómero 1 de elución más rápida (16,0 min) de (1S,3R)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-(6-metoxi-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2 il)ciclohexanocarboxamida (0,040 g, 33,3 %) y el isómero 2 de elución más lenta (24,8 min) de (1S,3R)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-(6-metoxi-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (0,040 g, 33,3 %) en forma de sólidos de color blanco.
Ejemplo 72, isómero 1:
1H RMN (400 MHz, DMSO-de, 19 °C) 5 1,03 - 1,14 (1H, m), 1,19 - 1,35 (3H, m), 1,65 - 1,84 (6H, m), 1,84 - 1,94 (1H, m), 2.16 - 2,25 (2H, m), 2,56 - 2,66 (1H, m), 2,83 - 2,94 (1H, m), 2,97 - 3,08 (1H, m), 3,29 (3H, s), 3,50 - 3,63 (1H, m), 3,82 -3,91 (1H, m), 4,06 - 4,24 (2H, m), 7,77 (1H, s), 7,80 (1H, d), 8,13 (1H, s), 8,39 (1H, s), 10,64 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 446.
Ejemplo 73, isómero 2:
1H RMN (400 MHz, DMSO-de, 19 °C) 5 1,00 - 1,14 (1H, m), 1,19 - 1,35 (3H, m), 1,72 - 1,81 (6H, m), 1,84 - 1,92 (1H, m), 2.16 - 2,25 (2H, m), 2,56 - 2,66 (1H, m), 2,83 - 2,93 (1H, m), 3,03 (1H, m), 3,29 (3H, s), 3,48 - 3,62 (1H, m), 3,82 - 3,91 (1H, m), 4,06 - 4,24 (2H, m), 7,77 (1H, s), 7,80 (1H, d), 8,13 (1H, s), 8,39 (1H, s), 10,64 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 446.
Condiciones de SFC analítica:
Figure imgf000129_0002
Ejemplo 74: Preparación de nS.3R)-3-acetam¡do-M-(5-fluoro-4-(5.6.7.8-tetrah¡dro-4H-p¡razoloH.5-a1azep¡n-3-¡l)p¡r¡din-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da
Figure imgf000129_0001
Se añadió anhídrido acético (0,11 ml, 1,1 mmol) a una solución en agitación de (1S,3R)-3-amino-N-(5-fluoro-4-(5,6,7,8-tetrahidro-4H-pirazolo[1,5-a]azepin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (350 mg, 0,94 mmol), trietilamina (0,28 ml, 2,0 mmol) y DCM (10 ml). La mezcla de reacción se agitó a t.a. durante 4 h. Se añadió sílice, y la mezcla resultante se concentró a presión reducida. El residuo adsorbido resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida de gel de sílice, eluyendo con metanol al 0,5 % en acetato de etilo, obteniéndose (1S,3R)-3-acetamido-N-(5-fluoro-4-(5,6,7,8-tetrahidro-4H-pirazolo[1,5-a]azepin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (200 mg, 51 %) en forma de un sólido de color blanquecino. 1H RMN (400 MHz, DMSO-de, 30 °C) 1,03 - 1,07 (1H, m), 1,30 (3H, m), 1,57 - 1,96 (13H, m), 2,56 - 2,62 (1H, m), 2,68 -2,93(2H, m), 3,47 - 3,66 (1H, m), 4,19 - 4,4 (2H, m), 7,49 (1H, d), 7,73 (1H, d), 8,09 (1H, d), 8,32 (1H, d), 10,48 (1H, s). mlz: ES+ [M+H]+ 414.
Los procedimientos utilizados para preparar el material de partida (1S,3R)-3-amino-N-(5-fluoro-4-(5,6,7,8-tetrahidro-4H-pirazolo[1,5-a]azepin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida se describen a continuación:
Preparación de 3-(2-cloro-5-fluorop¡r¡d¡n-4-¡l)-5.6.7.8-tetrah¡dro-4H-p¡razoloH.5-a1azep¡na
Figure imgf000130_0001
Se disolvieron 2-doro-5-fluoro-4-yodopiridina (1,064 g, 4,13 mmol), 3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-pirazolo[1,5-a]azepina (1,30 g, 4,96 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 66), precatalizador XPhos de 2.a generación (0,325 g, 0,41 mmol) y fosfato de potasio dibásico (2,16 g, 12,4 mmol) en dioxano desgasificado (20 ml) y agua (1 ml) a 21 °C. La mezcla se agitó a 90 °C durante 24 h y después se enfrió. La mezcla se diluyó con EtOAc (30 ml), se lavó con agua (10 ml), y después se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de EtOAc del 0 al 50 % en heptano. Las fracciones de producto se evaporaron a sequedad, obteniéndose 3-(2-cloro-5-fluoropiridin-4-il)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-pirazolo[1,5-a]azepina (0,650 g, 59 %) en forma de un aceite. 1H RMN (400 MHz, CDCls, 30 °C) 1,62 - 1,94 (6H, m), 2,77 - 2,88 (2H, m), 4,29 - 4,4 (2H, m), 7,22 (1H, d), 7,50 (1H, d), 8,25 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ 266.
Preparación_________de_________((1R.3S)-3-((5-fluoro-4-(5.6.7.8-tetrah¡dro-4H-p¡razolori.5-a1azep¡n-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)carbamoil)c¡clohex¡l)carbamato de tere-butilo
Figure imgf000130_0002
Se añadió tetraquis(trifenilfosfina)paladio(0) (0,30 g, 0,26 mmol) a una mezcla desgasificada de 3-(2-cloro-5-fluoropiridin-4-il)-5,6,7,8-tetrahidro-4H-pirazolo[1,5-a]azepina (0,700 g, 2,63 mmol), ((1R,3S)-3-carbamoilciclohexil)carbamato de terc-butilo (0,638 g, 2,63 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 25), 9,9-dimetil-4,5-bis(difenilfosfino)xanteno (0,305 g, 0,53 mmol) y carbonato de cesio (2,58 g, 7,90 mmol) en 1,4-dioxano (10 ml). La mezcla resultante se purgó durante 5 min en atmósfera de nitrógeno, y la suspensión resultante se sometió a condiciones de microondas (120 °C, 17 h). La mezcla de reacción se enfrió y repartió entre agua (20 ml) y acetato de etilo (100 ml) antes de filtrarla. Se separaron las capas, y la capa orgánica se concentró a presión reducida, se adsorbió sobre sílice y se purificó mediante cromatografía ultrarrápida de gel de sílice, eluyendo con EtOAc al 50 % en heptano. Las fracciones de producto se concentraron a presión reducida, obteniéndose ((1 R,3S)-3-((5-fluoro-4-(5,6,7,8-tetrahidro-4H-pirazolo[1,5-a]azepin-3-il)piridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de terc-butilo en bruto (0,90 g, 72 %) en forma de un sólido de color blanco. m/z: ES+ [M+H]+ 472.
Preparación_____ de_____(1S.3R)-3-am¡no-M-(5-fluoro-4-(5.6.7.8-tetrah¡dro-4H-p¡razolori.5-alazep¡n-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)ciclohexanocarboxam¡da
Figure imgf000130_0003
Se añadió TFA (1 ml) a una solución de ((1R,3S)-3-((5-fluoro-4-(5,6,7,8-tetrahidro-4H-pirazolo[1,5-a]azepin-3-il)piridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de terc-butilo (600 mg, 1,27 mmol) en DCM (10 ml). La mezcla se agitó a t.a. durante 24 h, y después la reacción se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía de intercambio iónico, utilizando una columna SCX y eluyendo con amoníaco 7 N en metanol. Las fracciones de producto se concentraron a presión reducida, obteniéndose (1S,3R)-3-amino-N-(5-fluoro-4-(5,6,7,8-tetrahidro-4H-pirazolo[1,5-a]azepin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (350 mg, 74 %) en forma de un sólido de color blanco. m/z: ES+ [M+H]+ 372.
Ejemplo 75: Preparación de (1S.3R)-M-(4-(5.5-d¡met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolori.2-b1p¡razol-3-¡l)-5-met¡lp¡r¡d¡n-2-¡l)-3-(2-h¡droxiacetam¡do)c¡clohexanocarboxam¡da
Figure imgf000131_0001
Se añadieron carbonato de cesio (436 mg, 1,34 mmol) y precatalizador XPhos de 2.a generación (35 mg, 0,04 mmol) a una mezcla desgasificada de 5,5-dimetil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol (168 mg, 0,470 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 23) y (1S,3R)-3-(2-hidroxiacetamido)-N-(4-yodo-5-metilpiridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (186 mg, 0,45 mmol) en 1,4-dioxano (3,7 ml) y agua (0,7 ml), obteniéndose una solución incolora. La reacción se agitó a 85 °C durante 18 h y después se enfrió y se diluyó con EtOAc (50 ml). Esta nueva mezcla se lavó con agua y cloruro de sodio acuoso saturado. Las capas acuosas se extrajeron con EtOAc (2 x 50 ml). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo resultante se adsorbió sobre gel de sílice y se purificó mediante cromatografía ultrarrápida de gel de sílice, eluyendo con MeOH al 10 % en DCM, obteniéndose (1S,3R)-N-(4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)-5-metilpiridin-2-il)-3-(2-hidroxiacetamido)ciclohexanocarboxamida (78 mg, 41 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (300 MHz, DMSO-de, 27 °C) 1,18 - 1,38 (9H, m), 1,46 (1H, c), 1,65 - 1,92 (4H, m), 2,32 (3H, s), 2,57 - 2,67 (1H, m), 2,85 (2H, s), 3,58 - 3,72 (1H, m), 3,78 (1H, d), 3,93 (2H, s), 5,36 (1H, t), 7,54 (1H, d), 7,77 (1H, s), 8,07 (1H, s), 8,13 (1H, 2), 10,27 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 426.
Rotación óptica:
Figure imgf000131_0003
Los procedimientos utilizados para preparar el material de partida (1S,3R)-3-(2-hidroxiacetamido)-N-(4-yodo-5-metilpiridin-2-il)ciclohexanocarboxamida se describen a continuación:
Preparación de nS.3R)-3-amino-M-(4-vodo-5-metilpiridin-2-il)ciclohexanocarboxamida
Figure imgf000131_0002
Se añadió ácido clorhídrico en dioxano (4 M; 2 ml, 8 mmol) a ((1R,3S)-3-((4-yodo-5-metilpiridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de terc-butilo (530 mg, 1,15 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 47) en MeOH (11 ml) obteniéndose una solución incolora. La reacción se agitó durante 2 h a t.a. y después se concentró a presión reducida, obteniéndose (1S,3R)-3-amino-N-(4-yodo-5-metilpiridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (550 mg) como la sal de diclorhidrato en forma de un sólido de color blanco. Este sólido se llevó a la etapa siguiente sin purificación adicional. 1H RMN (300 MHz, DMSO-de, 27 °C) 1,11 - 1,36 (3H, m), 1,49 (1H, c), 1,76 - 1,88 (2H, m), 1,88 - 1,89 (1H, m) 2,04 (1H, d), 2,30 (3H, s), 2,54 - 2,67 (1H, m), 2,94 - 3,07 (1H, m), 8,03 (3H, s a), 8,17 (1H, s), 8,61 (1H, s), 10,58 (1H, s a). Se ha detectado un equivalente de HCl, el segundo se supone enterrado bajo el amplio pico de h Od a 5,9 ppm. m/z: ES+ [M+H]+ 360.
Preparación de nS.3R)-3-(2-hidroxiacetamido)-M-(4-vodo-5-metilpiridin-2-il)ciclohexanocarboxamida
Figure imgf000132_0001
Se añadió HATU (328 mg, 0,86 mmol) a una mezcla de diclorhidrato de (1S,3R)-3-amino-N-(4-yodo-5-metilpiridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (228 mg, 0,53 mmol), ácido 2-hidroxiacético (66 mg, 0,86 mmol), TEA (0,24 ml, 1,7 mmol), DMF (2,8 ml) y DCM (2,8 ml). La reacción se agitó a t.a. en atmósfera de nitrógeno durante 5 h y después se concentró a presión reducida. El residuo resultante se recogió en DCM y se lavó con agua (4 * 25 ml) y cloruro de sodio acuoso saturado. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se adsorbió sobre gel de sílice y se purificó mediante cromatografía ultrarrápida de gel de sílice, eluyendo con metanol del 0 al 10 % en d Cm , obteniéndose (1S,3R)-3-(2-hidroxiacetamido)-N-(4-yodo-5-metilpiridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (186 mg, 52 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (300 m Hz , DMSO-CÍ6, 27 °C) 1,17 - 1,34 (3H, m) 1,43 (1H, c) 1,60 - 1,91 (4H, m) 2,28 (3H, s), 2,54 - 2,69 (1H, m), 3,56 - 3,72 (1H, m), 3,78 (2H, d), 5,36 (1H ,t) 7,55 (1H, d) 8,16 (1H, s) 8,61 (1H, s) 10,45 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 418.
Ejemplo 76: Preparación de M-(nR.3S)-3-((4-(5.5-d¡met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolori.2-blp¡razol-3-¡l)-5-met¡lpir¡d¡n-2-¡l)carbamo¡l)c¡clohex¡l)oxetano-3-carboxam¡da
Figure imgf000132_0002
Se añadieron carbonato de cesio (247 mg, 0,76 mmol) y precatalizador XPhos de 2.a generación (20 mg, 0,03 mmol) a una mezcla desgasificada de 5,5-dimetil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol (90 mg, 0,25 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 23) y N-((1R,3S)-3-((4-yodo-5-metilpiridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)oxetano-3-carboxamida (112 mg, 0,25 mmol) en 1,4-dioxano (2,1 ml) y agua (0,4 ml). La reacción se agitó a 85 °C durante 18 h, se enfrió a t.a. y después se diluyó con EtOAc (50 ml). La mezcla se lavó con agua y cloruro de sodio acuoso saturado. Las capas orgánicas combinadas se extrajeron con EtOAc (2 * 50 ml), y las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, y se concentraron a presión reducida. El residuo resultante se adsorbió sobre gel de sílice y se purificó mediante cromatografía ultrarrápida de gel de sílice, eluyendo con MeOH al 10 % en DCM, obteniéndose un sólido de color blanquecino (72 mg). Este material se volvió a purificar mediante cromatografía ultrarrápida de gel de sílice, metanol del 0 al 10 % en DCM, obteniéndose N-((1R,3S)-3-((4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)-5-metilpiridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)oxetano-3-carboxamida (50 mg, 44 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (300 MHz, DMSO-de, 27 °C) 1,00 - 1,17 (1H, m), 1,21 - 1,37 (9H, m) 1,68 -1,84 (3H, m), 1,89 (1H, a d), 2,33 (3H, s), 2,55 - 2,67 (1H, m), 2,84 (2H, s), 3,53 - 3,74 (2H, m), 3,93 (2H, s), 4,54 - 4,65 (4H, m), 7,73 - 7,84 (2H, m), 8,07 (1H, s), 8,14 (1H, s), 10,28 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 452.
Rotac¡ón ópt¡ca:
Figure imgf000132_0003
Los procedimientos para preparar el material de partida N-((1R,3S)-3-((4-yodo-5-metilpiridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)oxetano-3-carboxamida se describen a continuación:
Preparacíón de M-(nR.3S)-3-((4-vodo-5-met¡lp¡r¡d¡n-2-¡l)carbamo¡l)c¡clohex¡l)oxetano-3-carboxam¡da
Figure imgf000133_0001
Se añadió HATU (219 mg, 0,58 mmol) a una solución de diclorhidrato de (1S,3R)-3-amino-N-(4-yodo-5-metilpiridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (228 mg, 0,53 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 75), ácido oxetano-3-carboxílico (59 mg, 0,58 mmol), TEA (0,24 ml, 1,7 mmol), Dc M (2,8 ml) y DMF (2,8 ml), obteniéndose una solución incolora. La reacción se volvió amarilla con el tiempo; tras 4 h a t.a., la reacción se concentró a presión reducida y se diluyó con DCM. La mezcla se lavó con agua (3 * 50 ml), se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se adsorbió sobre gel de sílice y se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna, eluyendo con MeOH del 0 al 10 % y DCM, obteniéndose N-((1R,3S)-3-((4-yodo-5-metilpiridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)oxetano-3-carboxamida (112 mg, 47 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (300 MHz, DMSO-CÍ6, 27 °C) 0,99 - 1,17 (1H, m), 1,20 - 1,37 (3H, m), 1,70 - 1,83 (3H, m), 1,84 - 1,94 (1H, m), 2,29 (3H, s), 2,54 - 2,64 (1H, m), 3,55 - 3,73 (2H, m), 4,54 - 4,64 (4H, m), 7,81 (1H, d), 8,16 (1H, s), 8,61 (1H, s), 10,45 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 444.
Figure imgf000133_0002
A una solución en agitación de (1S,3R)-3-amino-N-(5-metil-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (150 mg, 0,42 mmol), trietilamina (0,12 ml, 0,89 mmol) en d Cm (10 ml) se le añadió anhídrido acético (0,048 ml, 0,51 mmol). La mezcla de reacción se agitó a t.a. durante 4 h. Se añadió sílice y los volátiles se retiraron al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida de gel de sílice, eluyendo con metanol al 0,5 % en acetato de etilo, obteniéndose (1S,3R)-3-acetamido-N-(5-metil-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (140 mg, 83 %) en forma de un sólido de color blanquecino. 1H r Mn (400 MHz, DMSO-d6, 30 °C) 1,04 - 1,11 (1H, m), 1,22 - 1,35 (3H, m), 1,7 - 1,94 (9H, m), 1,99 - 2,08 (2H, m), 2,23 (3H, s), 2,55 - 2,63 (1H, m), 2,75 (2H, t), 3,51 - 3,61 (1H, m), 4,13 (2H, t), 7,62 (1H, s), 7,72 (1H, d), 7,96 (1H, s), 8,16 (1H, s), 10,27 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 396.
Los procedimientos utilizados para preparar el material de partida (1S,3R)-3-amino-N-(5-metil-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida se describen a continuación:
Preparación___________ de___________ (nR.3S)-3-((5-met¡l-4-(4.5.6.7-tetrah¡drop¡razolori.5-alp¡r¡d¡n-3-¡l)p¡rid¡n-2-¡l)carbamoil)c¡clohex¡l)carbamato de tere-butilo
Figure imgf000133_0003
Se añadió precatalizador XPhos de 2.a generación (86 mg, 0,11 mmol) a una mezcla desgasificada de 3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridina (324 mg, 1,31 mmol), ((1R,3S)-3-((4-yodo-5-metilpiridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de tere-butilo (500 mg, 1,09 mmol, preparado de acuerdo con el ejemplo 47, intermedio) y fosfato de potasio tribásico, (569 mg, 3,27 mmol) en 1,4-dioxano (10 ml) y agua (1 ml). La mezcla se desgasificó y se agitó a 85 °C durante 24 h en atmósfera de nitrógeno. La mezcla de reacción se enfrió y se añadió sílice. La mezcla se concentró a presión reducida, y el residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida de gel de sílice, eluyendo con acetato de etilo al 60 % isocrático en heptano, obteniéndose ((1R,3S)-3-((5-metil-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de tere-butilo (220 mg, 45 %) en forma de un sólido. 1H RMN (400 MHz, DMSO, 30 °C) 1,05-1,14 (1H, m), 1,21 - 1,31 (3H, m), 1,38 (9H, s), 1,69 - 1,94 (7H, m), 1,96 2,08 (2H, m), 2,23 (3H, s), 2,54 - 2,61 (1H, m), 2,75 (2H, t), 4,13 (2H, t), 6,75 (1H, a d), 7,62 (1H, s), 7,96 (1H, s), 8,16 (1H, s), 10,25 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 454.
Preparación________de_______ nS.3R)-3-am¡no-M-(5-met¡l-4-(4.5.6.7-tetrah¡drop¡razolori.5-alp¡r¡d¡n-3-¡l)p¡rid¡n-2-il)ciclohexanocarboxam¡da
Figure imgf000134_0001
Se añadió TFA (1 ml) a ((1R,3S)-3-((5-metil-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de tere-butilo (200 mg, 0,44 mmol) en DCM (10 ml). La mezcla se agitó a t.a. durante 24 h, y los volátiles se retiraron a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía de intercambio iónico utilizando una columna SCX, eluyendo con amoníaco 7 N en metanol. Las fracciones de producto se concentraron a presión reducida, obteniéndose (1S,3R)-3-amino-N-(5-metil-4-(4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (150 mg, 96 %) en forma de un sólido de color blanco. Este material se usó directamente en la etapa siguiente sin purificación adicional. m/z: ES+ [M+H]+ 354.
Ejemplo 78: nS.3R)-3-acetam¡do-M-(5-cloro-4-(7-h¡drox¡-4.5.6.7-tetrah¡drop¡razolori.5-alp¡r¡d¡n-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-il)ciclohexanocarboxam¡da
Figure imgf000134_0002
Mezela deseonoeida de diastereómeros ya que la eonfiguraeión hidroxi es deseonoeida.
Se añadió trióxido de azufre y piridina (40 mg, 0,25 mmol) a una solución de (1S,3R)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-(5-(4-hidroxibutil)-1H-pirazol-4-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (100 mg, 0,23 mmol, preparado en el ejemplo 78a) en DCM:DMSO 2:1 (4 ml) a 0 °C. Después de 2 h a 0 °C la mezcla de reacción se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo (3x). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de MeOH del 0 al 15 % en DCM que contenía trietilamina al 0,2 %, obteniéndose un sólido de color blanco. Este sólido se trituró con DCM al 10 % en hexanos, obteniéndose (1S,3R)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-(7-hidroxi-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]piridin-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (74 mg, 74 %) en forma de una espuma sólida de color blanco. 1H RMN (300 MHz, DMSO-de, 27 °C) 0,98 - 1,11 (1H, m), 1,18 - 1,41 (3H, m), 1,70 - 1,81 (6H, m), 1,85 -2,18 (4H, m), 2,56 - 2,66 (1H, m), 2,67 - 2,91 (2H, m), 3,49 -3,67 (1H, m), 4,23 - 4,40 (1H, m), 5,54 - 5,73 (1H, m), 6,87 (1H, d), 7,75 (1H, d), 7,81 (1H, s), 8,15 (1H, s), 8,39 (1H, s), 10,59 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 432.
Ejemplo 78a: Preparación de nS.3R)-3-acetam¡do-M-(5-cloro-4-(5-(4-h¡drox¡but¡l)-1H-p¡razol-4-¡l)p¡r¡d¡n-2-il)ciclohexanocarboxam¡da
Figure imgf000134_0003
Se añadió ácido clorhídrico en dioxano (4 M; 2,2 ml, 8,8 mmol) a una solución de (1S,3R)-3-acetamido-N-(4-(5-(4-((terebutildimetilsilil)oxi)butil)-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-5-cloropiridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (300 mg, 0,44 mmol) en metanol (3 ml). La reacción se agitó durante 2 h a t.a. y después se concentró a presión reducida. El residuo resultante se diluyó con agua (40 ml) y se basificó con bicarbonato de sodio. La mezcla se diluyó entonces con cloruro de sodio saturado y se extrajo con acetato de etilo (5x). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de metanol del 0 al 30 % en DCM, obteniéndose (1S,3R)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-(5-(4-hidroxibutil)-1H-pirazol-4-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida en bruto (163 mg, 83 %) en forma de una goma. 1H RMN (300 MHz, DMSO-de, 27 °C) 1,02 - 1,23 (1H, m), 1,24 - 1,47 (5H, m), 1,52 - 1,66 (2H, m), 1,75 - 1,88 (6H, m), 1,88 - 1,97 (1H, m), 2,59 - 2,76 (3H, m), 3,35 - 3,43 (2H, m), 3,54 - 3,68 (1H, m), 4,25 - 4,39 (1H, m), 7,66 (0,6H, s), 7,79 (1H, d), 7,92-8,02 (0,4H, m), 8,12-8,21 (1H, m), 8,43 (1H, s), 10,62 (1H, s), 12,91 (0,4H, s a), 12,98 (0,6H, s a) -2:3 proporción de tautómeros de pirazol. m/z: eS+ [M+H]+ 434.
La (1S,3R)-3-acetamido-N-(4-(5-(4-((fe/'c-butildimetilsilil)oxi)butil)-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-5-cloropiridin-2-il)ciclohexanocarboxamida usada como material de partida se preparó del siguiente modo:
Preparación de 1-((2-(tr¡met¡ls¡lil)etox¡)met¡l)-1H-p¡razol
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Se añadió NaH (al 60 % en peso en aceite mineral; 1,85 g, 46,3 mmol) en porciones a 1H-pirazol (3,0 g, 44,1 mmol) en THF (30 ml) a 5 °C a lo largo de un periodo de 10 minutos en atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó a 5 °C durante 30 minutos. Después se añadió SEM-Cl (8,2 ml, 46 mmol) gota a gota a la reacción. La mezcla resultante se agitó a 5 °C durante 1 hora. Después se diluyó la mezcla de reacción con agua (50 ml) y se lavó secuencialmente con Et2O (3 x 5 0 ml). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se concentraron a presión reducida, obteniéndose 1 -((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1 H-pirazol (6,5 g, 78 %) en forma de un aceite de color amarillo pálido. 1H RMN (300 MHz, DMSO-cfe, 27 °C) 0,00 (s, 9 H), 0,79 - 0,95 (2H, m), 3,48 - 3,62 (2H, m), 5,45 (2H, s), 6,36 (1H, t), 7,56 (1H, d), 7,91 (1H, d).
Preparación de 5-bromo-1 -((2-(tr¡met¡lsil¡l)etox¡)met¡l)-1 H-p¡razol
Figure imgf000135_0001
Se añadió diclorhidrato de 2,2,6,6-tetrametilpiperidin-1-uro de litio y magnesio (25,2 ml, 27,7 mmol) gota a gota a 1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1 H-pirazol (5 g, 25 mmol) en THF (30 ml) a 21 °C en atmósfera de nitrógeno. La suspensión resultante se agitó a 21 °C durante 1 hora. Después de 1,5 h la reacción se enfrió a 0 °C, y después se añadió 1,2-dibromo-1,1,2,2-tetracloroetano (8,21 g, 25,2 mmol). Se retiró el baño de hielo y se dejó que la mezcla se calentara hasta t.a.; tras 18 h, la mezcla de reacción se apagó con cloruro sódico acuoso saturado y se extrajo con acetato de etilo (2 veces). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de acetato de etilo del 0 al 40 % en hexanos, obteniéndose 5-bromo-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1 H-pirazol (4,2 g, 60 %) en forma de un aceite de color pardo. 1H RMN (DMSO-CÍ6, 27 °C) 0,00 (9H, s), 0,88 - 0,96 (2H, m), 3,61 (2H, t), 5,49 (2H, s), 6,58 (1H, d), 7,67 (1H, d).
Preparación de 5-(pent-4-en-1-¡l)-1-((2-(tr¡met¡ls¡l¡l)etoxi)met¡l)-1H-p¡razol
Se añadió precatalizador RuPhos de 3.a generación (0,247 g, 0,30 mmol) a una mezcla desgasificada de 5-bromo-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol (4,1 g, 15 mmol), ácido pent-4-en-1-ilborónico (2,19 g, 19,2 mmol) y carbonato de cesio (9,64 g, 29,6 mmol) en 1,4-dioxano (120 ml), y la reacción se agitó a 90 °C durante 18 h. La mezcla de reacción se enfrió a t.a. y después se diluyó con agua. Se añadió bicarbonato de sodio acuoso y la mezcla resultante se extrajo con acetato de etilo (3x). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de acetato de etilo del 0 al 50 % en hexanos, obteniéndose 5-(pent-4-en-1-il)-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1 H-pirazol (2,2 g, 55 %) en forma de un aceite de color amarillo claro. 1H RMN (DMSO-CÍ6, 27 °C) 0,00 (9H, s), 0,75 - 0,93 (2h , m), 1,66 -1,88 (2H, m), 2,15 (2H, c), 2,61 - 2,85 (2H, m), 3,44 - 3,61 (2H, m), 4,92 - 5,22 (2H, m), 5,43 (2H, s), 5,89 (1H, ddt), 6,18 (1H, d), 7,42 (1H, d).
Preparación de 4-(1-((2-(tr¡met¡ls¡l¡l)etox¡)met¡l)-1H-p¡razol-5-¡l)butanal
Figure imgf000136_0001
Se disolvió 5-(pent-4-en-1-il)-1 -((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1 H-pirazol (2,14 g, 8,03 mmol) en DCM (40 ml) y se enfrió a -78 °C. Se burbujeó ozono a través de la solución durante 12 minutos. Después, se purgó el ozono de la reacción usando una corriente de nitrógeno y se añadió trifenilfosfina (2,11 g, 8,03 mmol). Se dejó calentar la reacción a t.a. y se mantuvo en estas condiciones durante 18 h antes de concentrarse a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de acetato de etilo del 0 al 50 % en hexano, obteniéndose 4-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-5-il)butanal (1,34 g, 62 %) en forma de un aceite. 1H RMN (DMSO-CÍ6, 27 °C) 0,00 (9H, s), 0,76 - 0,94 (2H, m), 1,81 - 2,01 (2H, m), 2,57 - 2,60 (2H, m), 2,73 (2H, t), 3,42 - 3,64 (2H, m), 5,43 (2H, s), 6,20 (1H, d), 7,43 (1H, d), 9,74 (1H, t).
Preparación de 4-(1-((2-(tr¡met¡ls¡l¡l)etox¡)met¡l)-1H-p¡razol-5-¡l)butan-1-ol
Figure imgf000136_0002
Se añadió borohidruro de sodio (0,372 g, 9,84 mmol) a una solución en agitación de 4-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-5-il)butanal (1,32 g, 4,92 mmol) en metanol (20 ml) a 0 °C. La mezcla resultante se agitó durante 1 h en estas condiciones. La reacción se diluyó entonces con agua y se extrajo con acetato de etilo (2x). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo en bruto resultante se filtró a través de un tapón de sílice eluyendo con acetato de etilo. El filtrado se concentró a presión reducida, obteniéndose 4-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1 H-pirazol-5-il)butan-1-ol (1,1 g, 85 %) en forma de un aceite de color pardo claro. 1H RMN (DMSO-A, 27 °C) 0,00 (9H, s), 0,86 (2H, t), 1,43 - 1,59 (2H, m), 1,61 - 1,79 (2H, m), 2,72 (2H, t), 3,39 -3,64 (4H, m), 4,43 (1H, t), 5,42 (2H, s), 6,16 (1H, d), 7,42 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ 271.
Preparación de 5-(4-((ferc-but¡ld¡met¡ls¡l¡l)ox¡)but¡l)-1-((2-(tr¡met¡ls¡lil)etox¡)met¡l)-1H-p¡razol
Figure imgf000136_0003
Se añadió TBS-Cl (0,94 g, 6,2 mmol) a una solución en agitación de 4-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1 H-pirazol-5-il)butan-1 -ol (1,1 g, 4,1 mmol) e imidazol (0,85 g, 12 mmol) en DCM (20 ml) a 0 °C, y la reacción se agitó a t.a. durante 18 h. La mezcla de reacción se diluyó con agua y se extrajo con EtOAc. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de acetato de etilo del 0 al 40 % en hexano, obteniéndose 5-(4-((fe/'cbutildimetilsilil)oxi)butil)-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1 H-pirazol (1,5 g, 96 %) en forma de un aceite. 1H RMN (DMSO-d6 , 27 °C) 0,00 (9H, s), 0,09 (6 h , s), 0,81 - 0,89 (2H, m), 0,92 (9H, s), 1,49 - 1,62 (2H, m), 1,65 - 1,80 (2H, m), 2,73 (2H, t), 3,47 - 3,61 (2H, m), 3,67 (2H, t), 5,43 (2H, s), 6,15 (1H, d), 7,42 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ 385.
Preparación de 5-(4-((terc-but¡ld¡met¡ls¡l¡l)ox¡)but¡l)-4-vodo-1-((2-(tr¡met¡ls¡l¡l)etox¡)met¡l)-1H-pirazol
Figure imgf000137_0001
Se añadió NIS (0,89 g, 4,0 mmol) a una solución en agitación de 5-(4-((fe/'c-butildimetilsilil)oxi)butil)-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1 H-pirazol (1,5 g, 4,0 mmol) en DCM (25 ml) a 0 °C. Se retiró el baño de hielo, y la reacción se agitó durante 18 h en estas condiciones. La mezcla de reacción se diluyó con agua y se extrajo con EtOAc. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró, y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de acetato de etilo del 0 al 50 % en hexano, obteniéndose 5-(4-((fe/'c-butildimetilsilil)oxi)butil)-4-yodo-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1 H-pirazol (1,7 g, 85 %) en forma de una goma. 1H RMN (DMSO-d6 , 27 °C) 0,00 (9H, s), 0,07 (6 H, s), 0,82 - 0,88 (2H, m), 0,91 (9H, s), 1,45 - 1,74 (4H, m), 2,75 (2H, t), 3,48 - 3,60 (2H, m), 3,64 (2H, t), 5,48 (2H, s), 7,55 (1H, s).
Preparación______ de_____ 5-(4-((ferc-but¡ld¡met¡ls¡l¡l)ox¡)but¡l)-4-(4.4.5.5-tetramet¡l-1.3.2-d¡oxaborolan-2-¡l)-1 -((2-(tr¡met¡ls¡l¡l)etox¡)metil)-1H-p¡razol
Figure imgf000137_0002
Se añadió THF (16 ml) a 5-(4-((/erc-butildimetilsilil)oxi)butil)-4-yodo-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1 H-pirazol (800 mg, 1,57 mmol). La reacción se enfrió a 0 °C, y se añadió gota a gota complejo de cloruro de isopropilmagnesio y cloruro de litio en THF (1,3 M; 1,57 ml, 2,04 mmol). La reacción se mantuvo en estas condiciones durante 30 minutos. Después se añadió gota a gota 2-isopropoxi-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (0,48 ml, 2,3 mmol). La reacción se dejó calentar a t.a. y después se agitó en estas condiciones durante 18 h. La reacción se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo (2x). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo resultante se llevó a la siguiente etapa sin purificación. 1H RMN (300 MHz, DMSO-tá) 0,00 (9H, s), 0,05 (6 H, s), 0,83 - 0,91 (11H, m), 1,30 (12H, s), 1,45 - 1,55 (2H, m), 1,55 - 1,69 (2H, m), 2,89 (2H, t), 3,48 - 3,69 (4H, m), 5,44 (2H, s), 7,54 (1H, s).
Preparación de (1S.3R)-3-acetam¡do-N-(4-(5-(4-((terc-but¡ld¡met¡ls¡l¡l)ox¡)but¡l)-1-((2-(tr¡met¡ls¡l¡l)etox¡)met¡l)-1H-p¡razol-4-¡l)-5-clorop¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da
Figure imgf000138_0001
Se añadió precatalizador XPhos de 2.a generación (28 mg, 0,04 mmol) a una mezcla desgasificada de (1S,3R)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-yodopiridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (300 mg, 0,71 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 12), 5-(4-((terc-butildimetilsilil)oxi)butil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-IH-pirazol (472 mg, 0,92 mmol) y Cs2C ü 3 (695 mg, 2,13 mmol) en 1,4-dioxano (4 ml) y agua (1 ml). La mezcla de reacción se agitó a 90 °C durante 3 h y después se enfrió y diluyó con cloruro de sodio acuoso saturado. La mezcla se extrajo con acetato de etilo (2x) y las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida de gel de sílice, gradiente de elución de metanol del 0 al 10 % en DCM, obteniéndose (1S,3R)-3-acetamido-N-(4-(5-(4-((terc-butildimetilsilil)oxi)butil)-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-5-cloropiridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (423 mg, 88 %) en forma de una goma de color amarillo (pureza mediante HPLC: 91 %). 1H RMN (DMSO-tá, 27 °C) -0,08 (6H, s), -0,05 - -0,02 (9H, m), 0,75 - 0,79 (9H, m), 0,80 - 0,88 (2H, m), 1,04-1,16 (1H, m), 1,20 - 1,40 (5H, m), 1,42 - 1,62 (2H, m), 1,76 (6H, s), 1,90 (1H, d), 2,54 - 2,67 (1H, m), 2,76 (2H, t), 3,40 - 3,48 (2H, m), 3,51 - 3,62 (3H, m), 5,48 (2H, s), 7,62 (1H, s), 7,74 (1H, d), 8,12 (1H, s), 8,40 (1H, s), 10,62 (1H, s). El multiplete a 1,04 - 1,16 ppm está parcialmente oscurecido por impurezas de pinacol. m/z: ES+ [M+H]+ 678.
Ejemplos 79 y 80: isómero 1 e isómero 2 de (1S.3R)-3-acetam¡do-M-(5-cloro-4-(4-h¡drox¡-5,5-d¡met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolori.2-blp¡razol-3-¡l)p¡r¡d¡n-2-il)c¡clohexanocarboxam¡da
Figure imgf000138_0002
Enantiómeros puros. La configuración del hidroxi es desconocida para los ejemplos 79 y 80, pero es opuesta en el ejemplo 79 frente al 80.
Se resolvió la (1S,3R)-3-acetamido-N-(4-(4-((terc-butildimetilsilil)oxi)-5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)-5-cloropiridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (180 mg, 0,32 mmol) en los componentes diastereoméricos usando condiciones de SFC (columna: Chiralpak AS, 5 ^m, 21,2 mm de diámetro, 250 mm de longitud, caudal de 75 ml/min a lo largo de 8 min), eluyendo con isopropanol al 20 % en CO2 , obteniéndose el isómero 1 de elución más rápida de (1S,3R)-3-acetamido-N-(4-(4-((tercbutildimetilsilil)oxi)-5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)-5-cloropiridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (49 mg, 27 %) en forma de una película transparente y el isómero 2 de elución más lenta de (1s,3R)-3-acetamido-N-(4-(4-((terc-butildimetilsilil)oxi)-5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)-5-cloropiridin-2- il)ciclohexanocarboxamida (42 mg, 22 %) en forma de una película transparente.
A continuación, se desprotegió cada isómero de la siguiente manera: Se añadió ácido clorhídrico en dioxano (4 M; 0,500 ml, 14,40 mmol) gota a gota a una solución de o bien el isómero 1 (49 mg) o bien el isómero 2 (42 mg) de (1S,3R)-3- acetamido-N-(4-(4-((terc-butildimetilsilil)oxi)-5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)-5-cloropiridin-2-il)ciclohexanocarboxamida en THF (2 ml). La solución incolora resultante se agitó a t.a. durante 18 h y después se diluyó con EtOAc (10 ml). La mezcla resultante se lavó con bicarbonato sódico acuoso saturado y se extrajo con EtOAc (3x). Las capas orgánicas combinadas se concentraron a presión reducida, y el residuo resultante se adsorbió sobre gel de sílice antes de purificarse mediante cromatografía ultrarrápida de gel de sílice, gradiente de elución de metanol del 0 al 10 % en DCM, obteniéndose o bien isómero 1 (26 mg, 67 %) o bien isómero 2 (16 mg, 48 %) de (1S,3R)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-(4-hidroxi-5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida en forma de un sólido de color blanco.
Ejemplo 79, isómero 1:
1H RMN (300 MHz, DMSO-cfe, 27 °C) 1,01 - 1,20 (7H, m), 1,20 - 1,34 (3H, m), 1,67 - 1,85 (6H, m), 1,90 (1H, d), 2,58 - 2,66 (1H, m), 3,51 - 3,63 (1H, m), 3,88 (1H, d), 4,00 (1H, d), 4,68 (1H, d), 5,53 (1H, d) 7,75 (1H, d), 7,93 (1H, s), 8,37 (2H, d), 10,52 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 446.
Ejemplo 80, isómero 2:
1H RMN (300 MHz, DMSO-cfe) 1,16 (7H, m), 1,22 - 1,38 (3H, m), 1,72 - 1,83 (6H, m), 1,89 (1H, a d), 2,56 - 2,68 (1H, m), 3,47 - 3,66 (1H, m), 3,88 (1H, d), 4,00 (1H, d), 4,68 (1H, d) 5,53 (1H, d) 7,75 (1H, a d), 7,93 (1H, s), 8,37 (2H, s), 10,52 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 446.
Condiciones de SFC analítica:
Figure imgf000139_0003
Los procedimientos utilizados para preparar el material de partida (1S,3R)-3-acetamido-N-(4-(4-((fe/-cbutildimetilsilil)oxi)-5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)-5-cloropiridin-2-il)ciclohexanocarboxamida se describen a continuación:
Preparación de 5.5-d¡metM-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rroloH.2-b1p¡razol-4-ol
Figure imgf000139_0001
Se añadió NaBH4 (202 mg, 5,33 mmol) a una solución de 5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-4-ona (400 mg, 2,66 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 14) en MeOH (12 ml), obteniéndose una mezcla de color blanco. La reacción se agitó en estas condiciones durante 1 hora y después se inactivó con agua. La mezcla resultante se extrajo con DCM (25 ml) y después se extrajo adicionalmente con IPA al 25 % en cloroformo (50 ml). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, se concentraron a presión reducida (405 mg, cuantitativa) obteniéndose un aceite transparente. 1H RMN (500 MHz, DMSO-cfe, 27 °C) 1,11 (6H, s), 3,75 (1H, d), 3,91 (1H, d), 4,48 (1H, d), 5,49 (1H, d), 6,11 (1H, d), 7,42 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 153.
Preparación de 4-((ferc-but¡ld¡met¡ls¡l¡l)ox¡)-5.5-d¡met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolori.2-b1p¡razol
Figure imgf000139_0002
Se añadió TBS-Cl (501 mg, 3,33 mmol) a una solución de 5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-4-ol (405 mg, 2,66 mmol), imidazol (362 mg, 5,32 mmol), y DCM (12 ml), obteniéndose una suspensión de color blanco. La reacción se agitó a t.a. durante 18 h y después se diluyó con DCM (100 ml) y se lavó con agua y cloruro de sodio acuoso saturado. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró, y se concentró a presión reducida antes de adsorberse sobre gel de sílice y purificarse mediante cromatografía ultrarrápida de gel de sílice, gradiente de elución de MeOH del 0 al 10 % en DCM, obteniéndose 4-((fe/'c-but¡ld¡metils¡l¡l)ox¡)-5,5-d¡met¡l-5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[1,2-b]pirazol (391 mg, 55 %) en forma de un aceite transparente. m/z: ES+ [M+H]+ 267.
Preparación de 4-((ferc-but¡ld¡met¡ls¡l¡l)ox¡)-3-vodo-5.5-d¡met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolon.2-blp¡razol
Figure imgf000140_0001
Se añadió NIS (330 mg, 1,47 mmol) a una solución de 4-((fe/'c-but¡ld¡metils¡l¡l)ox¡)-5,5-d¡met¡l-5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[1,2-b]pirazol (391 mg, 1,47 mmol) en DCM (3 ml), obteniéndose una solución de color rojo. La reacción se agitó a t.a. en atmósfera de nitrógeno durante 18 h. Después, la reacción se diluyó con DCM (50 ml) y se lavó con agua y cloruro de sodio acuoso saturado. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró, y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de metanol del 0 al 10 % en DCM, obteniéndose 4-((fe/'c-but¡ld¡met¡lsil¡l)ox¡)-3-yodo-5,5-d¡met¡l-5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[1,2-b]p¡razol (350 mg, 61 %) en forma de una espuma de color rojo 1H RMN (300 MHz, DMSO-de, 27 °C) 0,19 (3H, s), 0,23 (3H, s) 0,87 (9H, s) 1,03 (3H, s) 1,12 (3H, s) 3,81 (1H, d) 3,96 (1H, d) 4,52 - 4,63(1 H, s) 7,47 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 393.
Preparación de 4-((ferc-but¡ld¡met¡ls¡l¡l)ox¡)-5.5-d¡met¡l-3-(4.4.5.5-tetramet¡l-1.3.2-d¡oxaborolan-2-¡l)-5.6-d¡h¡dro-
Figure imgf000140_0002
Se añadió gota a gota complejo de cloruro de isopropilmagnesio y cloruro de litio en THF (1,3 M; 0,89 ml, 1,2 mmol) a una solución de 4-((fe/'c-but¡ld¡met¡lsil¡l)ox¡)-3-yodo-5,5-d¡met¡l-5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[1,2-b]p¡razol (350 mg, 0,89 mmol) en THF (2,2 ml) a 0 °C. Después se añadió gota a gota 2-¡sopropoxi-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-d¡oxaborolano (0,273 ml, 1,34 mmol). Se dejó calentar la reacción a t.a. y se mantuvo en estas condiciones durante 18 h. Después, la reacción se diluyó con EtOAc (25 ml) y se lavó con cloruro de amonio acuoso saturado y cloruro de sodio acuoso saturado. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró, y se concentró a presión reducida, obteniéndose 4-((fercbut¡ld¡met¡ls¡l¡l)ox¡)-5,5-dimet¡l-3-(4,4,5,5-tetramet¡l-1,3,2-d¡oxaborolan-2-¡l)-5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[1,2-b]p¡razol en bruto (290 mg, 83 %) en forma de una espuma sólida de color amarillo. 1H Rm N (300 MHz, Dm So -^6, 27 °c ) 0,00 (3H, s), 0,19 (3H, s), 0,81 (9H, s), 0,92 (3H, s), 1,17 (3H, s), 1,22 (6H, s), 1,24 (6H, s), 3,70 (1H, d), 3,91 (1H, d), 4,47 (1H, s), 7,55 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 393.
Preparación de (1 S.3R)-3-acetam¡do-N-(4-(4-((ferc-but¡ld¡met¡ls¡l¡l)ox¡)-5.5-d¡met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rroloH.2-blp¡razol-3-¡l)-5-clorop¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da
Figure imgf000140_0003
Se añadieron carbonato de cesio (641 mg, 1,97 mmol) y precatalizador XPhos de 2.a generación (52 mg, 0,07 mmol) a una mezcla desgasificada de 4-((fe/'c-but¡ld¡metils¡l¡l)ox¡)-5,5-d¡met¡l-3-(4,4,5,5-tetramet¡l-1,3,2-d¡oxaborolan-2-¡l)-5,6-dihidro-4H-p¡rrolo[1,2-b]p¡razol (270 mg, 0,69 mmol) y (1S,3R)-3-acetam¡do-N-(5-cloro-4-yodopir¡d¡n-2-il)ciclohexanocarboxamida (276 mg, 0,66 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 12) en 1,4-dioxano (5,4 ml) y agua (1,1 ml). Después, la reacción se calentó a 85 °C y se mantuvo en estas condiciones durante 18 h antes de diluirla con EtOAc, lavarla con agua, salmuera y concentrarla a presión reducida. El residuo resultante se adsorbió sobre gel de sílice y se purificó mediante cromatografía ultrarrápida de gel de sílice, gradiente de elución de MeOH del 0 al 10 % en DCM, obteniéndose (1S,3R)-3-acetam¡do-N-(4-(4-((fe/'cbut¡ld¡metils¡l¡l)ox¡)-5,5-d¡met¡l-5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[1,2-b]pirazol-3-il)-5-cloropir¡d¡n-2-¡l)c¡clohexanocarboxamida (180 mg, 49 %) en forma de un sólido de color amarillo. 1H r Mn (300 MHz, DMSO-de, 27 °C) -0,38 (3H, d), 0,00 (3H, s), 0,71 (9H, s), 1,03 - 1,47 (10H, m), 1,76 - 2,01 (7H, m), 2,61 - 2,75 (1H, m), 3,51-3,72 (1H, m), 3,96 (1H, d), 4,06 (1H, d), 4,87 (1H, s), 7,79 - 7,87 (2H, m), 8,32 (1H, s), 8,46 (1H, s), 10,67 (1H, s a).
m/z: ES+ [M+H]+ 560.
Ejemplo 81: (1R.3Sl-3-acetam¡do-M-(4-(5.5-d¡met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolori.2-blp¡razol-3-¡H-5-fluoropir¡d¡n-2-¡Hciclohexanocarboxamida
Figure imgf000141_0001
Se añadieron carbonato de cesio (482 mg, 1,48 mmol) y precatalizador XPhos de 2.a generación (15 mg, 0,02 mmol) a una mezcla desgasificada de 5,5-dimetil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol (142 mg, 0,54 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 23), (1R,3S)-3-acetamido-W-(5-fluoro-4-yodopiridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (200 mg, 0,49 mmol), dioxano (4,1 ml), y agua (0,8 ml). La reacción se mantuvo a 95 °C; después de 4 h, se añadió 5,5-dimetil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol (100 mg) adicional. La reacción se mantuvo en estas condiciones durante otras 18 h, se enfrió, y después se diluyó con EtOAc (150 ml) y se lavó con agua y cloruro de sodio acuoso saturado. Después, la capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró, y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se adsorbió sobre gel de sílice y se purificó mediante cromatografía ultrarrápida de gel de sílice, gradiente de elución de acetato de etilo del 0 al 100 % en hexanos, seguido de MeOH del 0 al 10 % en EtOAc, obteniéndose un sólido de color beige. 1H RMN (300 MHz, DMSO-CÍ6, 27 °C) 0,98 - 1,19 (1H, t), 1,19 - 1,41 (9H, m), 1,73 - 1,83 (6H, m), 1,90 (1H, a d), 2,56 - 2,69 (1H, m), 2,93 (3H, s), 3,50 - 3,64 (1H, m), 3,94 (2H, s), 7,75 (1H, d), 7,88 (1H, d), 8,28 (1H, d)), 8,30 (1H, d), 10,46 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 414.
Rotac¡ón ópt¡ca:
Figure imgf000141_0003
Los procedimientos utilizados para preparar el material de partida (1R,3S)-3-acetamido-W-(5-fluoro-4-yodopiridin-2-il)ciclohexanocarboxamida se describen a continuación:
Preparacíón de ((1S.3R)-3-((5-fluoro-4-vodop¡r¡d¡n-2-¡l)carbamo¡l)c¡clohex¡l)carbamato de tere-butilo
Figure imgf000141_0002
Se añadió 1-cloro-W,W,2-trimetilprop-1-en-1-amina (489 pl, 3,70 mmol) gota a gota a una solución de ácido (1R,3S)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclohexanocarboxílico (660 mg, 2,7 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 25 sustituyendo el 3-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclohexanocarboxilato de (1R,3S)-bencilo por 3-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclohexanocarboxilato de (1S,3R)-bencilo) en DCM (6,3 ml). Después de 1 hora, se añadió una solución de 5-fluoro-4-yodopiridin-2-amina (587 mg, 2,47 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 54) y piridina (400 pl, 4,9 mmol) en DCM (6 ml). Después de 18 h, la reacción se diluyó con DCM (200 ml) y se lavó con agua y cloruro de sodio acuoso saturado. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró, y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se adsorbió sobre sílice y se purificó mediante cromatografía ultrarrápida de gel de sílice, gradiente de elución de metanol del 0 al 10 % en DCM, obteniéndose ((1S,3R)-3-((5-fluoro-4-yodopiridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de tere-butilo (1,10 g, 96 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (300 MHz, DMSO-ds, 27 °C) 1,02 - 1,18 (1H, m), 1,19 - 1,35 (3H, m), 1,38 (10H, s), 1,62 - 1,81 (3H, m), 1,82 - 1,94 (1H, m), 2,56 - 2,71 (1H, m), 3,48 - 3,59 (1H, m), 6,78 (1H, d), 8,25 (1H, s), 8,60 (1H, d), 10,59 (1H, s). m/z: ES+ [M+Na]+ 486.
Preparación de (1 R.3S)-3-acetam¡do-M-(5-fluoro-4-vodop¡r¡d¡n-2-il)c¡clohexanocarboxam¡da
Figure imgf000142_0001
Se añadió ácido clorhídrico en dioxano (4 M; 2,7 ml, 11 mmol) a una solución de ((1S,3R)-3-((5-fluoro-4-yodopiridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de tere-butilo (500 mg, 1,08 mmol) en metanol (8,97 ml) a t.a. Después de agitar en estas condiciones durante 19 h, la reacción se concentró a presión reducida. Se añadieron trietilamina (750 pl, 5,4 mmol) y anhídrido acético (200 pl, 2,2 mmol) al residuo resultante. La reacción se agitó en estas condiciones durante 1 hora y después se diluyó con d Cm (100 ml). La mezcla resultante se lavó con HCl acuoso 1 N, agua y cloruro de sodio acuoso saturado. Después, la capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo resultante se adsorbió sobre gel de sílice y se purificó mediante cromatografía ultrarrápida de gel de sílice, gradiente de elución de acetato de etilo del 0 al 100 % en hexano, seguido de metanol del 0 al 10 % en acetato de etilo, obteniéndose (1 R,3S)-3-acetamido-N-(5-fluoro-4-yodopiridin-2-il)ciclohexanocarboxamida (200 mg, 46 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (300 MHz, DMSO-da, 27 °C) 1,00 - 1,17 (1H, m), 1,20 - 1,40 (3H, m), 1,71 - 1,82 (6H, m), 1,83 - 1,92 (1H, m) 2,54 - 2,64 (1H, m) 3,48 - 3,58 (1H, m) 7,76 (1H, d) 8,25 (1H, s) 8,61 (1H, d) 10,61 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 406.
Ejemplo 82a: Preparación de (1S.3R)-3-acetam¡do-N-(5-cloro-4-(5-(3-h¡drox¡-2.2-d¡met¡lprop¡l)-1H-p¡razol-4-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clohexano-1 -carboxamída
Figure imgf000142_0002
Se añadió ácido clorhídrico en dioxano (4 M, 0,27 ml, 1,09 mmol) a una solución que contenía una proporción 7:3 de isómeros de pirazol no identificados de (1S,3R)-3-acetamido-N-(4-(3-(3-((terebutildimetilsilil)oxi)-2,2-dimetilpropil)-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-5-cloropiridin-2-il)ciclohexano-1-carboxamida y (1S,3R)-3-acetamido-N-(4-(5-(3-((terebutildimetilsilil)oxi)-2,2-dimetilpropil)-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-5-cloropiridin-2-il)ciclohexano-1-carboxamida (0,75 g, 1,1 mmol) en metanol (2 ml). Después de 4 h, la reacción se guardó en el congelador durante 6 días y, luego, se concentró a presión reducida. El residuo resultante se basificó con bicarbonato de sodio acuoso saturado y la mezcla resultante se extrajo con acetato de etilo (x2). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de metanol del 0 al 40 % en acetato de etilo, obteniéndose (1S,3R)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-(5-(3-hidroxi-2,2-dimetilpropil)-1 H-pirazol-4-il)piridin-2-il)ciclohexano-1 -carboxamida (0,48 g, 98 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (DMSO-da, 27 °C) 0,49-0,66 (m, 6H), 0,97-1,13 (1H, m), 1,27 (3H, d), 1,71 - 1,83 (6H, m), 1,89 (1H, d), 2,54 - 2,70 (3H, m), 2,93-3,06 (2H, m), 3,45 - 3,66 (1H, m), 4,34 (0,3H, s a), 4,45 -4,64 (0,7H, m), 7,54 (0,7H, s a), 7,74 (1H, d), 7,87 (0,3H, s a), 8,08 (1H, s), 8,39 (1H, s), 10,55 (1H, s), 12,77 (0,7H, s a), 12,89 (0,3H, s a). m/z: ES+ [M+H]+ 448.
Rotac¡ón ópt¡ca:
Figure imgf000142_0003
Figure imgf000143_0004
Los procedimientos para preparar el material de partida, mezcla de (1S,3R)-3-acetamido-N-(4-(3-(3-((íercbutildimetilsilil)oxi)-2,2-dimetMpropil)-1 -((2-(trimetilsilM)etoxi)metM)-1 H-pirazol-4-il)-5-cloropiridin-2-il)ciclohexano-1-carboxamida y (1 S,3R)-3-acetamido-^-(4-(5-(3-((íercbutildimetilsilil)oxi)-2,2-dimetilpropil)-1 -((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-5-cloropiridin-2-il)ciclohexano-1-carboxamida se describen a continuación:
Preparación de 1-bencil-1H-p¡razol-3-carbox¡lato de etilo
Figure imgf000143_0001
Se añadió hidruro de sodio (60 % en aceite mineral; 3,14 g, 78,5 mmol) a una solución de 1 H-pirazol-3-carboxilato de etilo (10 g, 71,4 mmol), bromuro de bencilo (12,7 ml, 107 mmol), y DMF (100 ml) a 0 °C en porciones a lo largo de 3 min con agitación vigorosa. La mezcla se dejó calentar hasta t.a. durante 18 h y, luego, se diluyó con acetato de etilo. La mezcla resultante se lavó con agua (x3) y cloruro de sodio acuoso saturado. Después, la capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna de gel de sílice, gradiente de elución de acetato del 0 al 50 % en hexanos, obteniéndose 1-bencil-1H-pirazol-3-carboxilato de etilo (11,3 g, 69 %) en forma de un aceite de color ámbar de elución más lenta. También se aisló 1-bencil-1 H-pirazol-5-carboxilato de etilo (2,69 g, 16,4 %) en forma de un aceite de color ámbar claro.
1 -bencil-1 H-pirazol-3-carboxilato de etilo:
1H RMN (DMSO-da, 27 °C) 1,28 (3H, t), 4,25 (2H, c), 5,43 (2H, s), 6,77 (1H, d), 7,23 - 7,42 (5H, m), 7,97 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ 231.
Preparación de ácido 1-bencil-1H-p¡razol-3-carboxíl¡co
Figure imgf000143_0002
Se añadió hidróxido de litio (1,3 g, 56 mmol) a una solución de 1-bencil-1H-pirazol-3-carboxilato de etilo (11,3 g, 49,1 mmol) en tetrahidrofurano (55 ml), agua (19 ml) y metanol (19 ml). Después de agitar en estas condiciones durante 1,5 h, la reacción se vertió en acetato de etilo y se inactivó con ácido clorhídrico acuoso (1 N; 57 ml, 57 mmol). La mezcla se lavó con cloruro de sodio acuoso saturado, y la capa acuosa se secó sobre sulfato de sodio, se filtró, y se concentró a presión reducida, obteniéndose un sólido blanco oleoso. Este sólido se recogió en DCM mínimo y después se diluyó con éter al 50 % en hexanos. Después de agitar vigorosamente durante 15 min, la mezcla se filtró, obteniéndose ácido 1 -bencil-1 H-pirazol-3-carboxílico (3,78 g, 38 %) en forma de un sólido cristalino de color blanco.
Se añadió ácido clorhídrico acuoso (1 N) a las capas acuosas combinadas hasta que la mezcla alcanzó un pH de 5. Después se extrajeron las capas acuosas combinadas con acetato de etilo (x3), y las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El sólido resultante se recogió en hexanos y se agitó vigorosamente durante 10 min. Tras la filtración, el sólido de color blanco cristalino resultante se secó al vacío, obteniéndose ácido 1-bencil-1H-pirazol-3-carboxílico adicional (5,3 g, 53 %) en forma de un sólido cristalino de color blanco. 1H RMN (DMSO-da, 27 °C) 5,40 (2H, s), 6,69 (1H, d), 7,22 - 7,41 (5H, m), 7,92 (1H, d), 12,07 - 13,22 (1H, s a). m/z: ES+ [M+H]+ 203.
Preparación de cloruro de 1-bromo-3-metilbut-2-eno y litio
Figure imgf000143_0003
Siguiendo los procedimientos de Samann y Knochel (Synthesis, 2013, 45, 1870), se secó cloruro de litio al vacío (1,78 g, 42,0 mmol) en un matraz secado a la llama con una pistola de calor durante 5 min. Tras enfriarla, se añadió polvo de cinc (5,0 g, 77 mmol) seguido de THF (37 ml). Después de agitar vigorosamente durante 5 min, se añadieron 1,2-dibromoetano (0,19 ml, 2,2 mmol) y después TMS-Cl (0,39 ml, 3,1 mmol). La mezcla resultante se dejó en agitación a t.a. durante 2 min y después se sumergió en un baño de agua. Se añadió gota a gota una solución de 1-bromo-3-metilbut-2-eno (4 ml, 35 mmol) en THF (37 ml) a lo largo de 30 min, y se retiró el baño de agua. La mezcla negra se mantuvo en estas condiciones durante 1,5 h y, luego, se detuvo la agitación. La mezcla se dejó sedimentar durante 18 h y, luego, se utilizó directamente sin purificación adicional.
Preparación de cloruro de 1-bencil-1H-p¡razol-3-carbon¡lo
Figure imgf000144_0001
Se añadieron dos gotas de DMF a una mezcla de ácido 1-bencil-1H-pirazol-3-carboxílico (5,26 g, 26,0 mmol) y cloruro de oxalilo (3,4 ml, 39 mmol) en DCM (100 ml). Tras 4 h, la solución, ahora de color amarillo claro, se concentró a presión reducida y el aceite de color amarillo-naranja resultante se secó al vacío con calor (pistola de calor) para eliminar el exceso de cloruro de oxalilo. El aceite, ahora de color naranja oscuro/ámbar, se utilizó directamente sin purificación adicional.
Preparación de 1-n-benc¡l-1H-p¡razol-3-il)-2.2-d¡met¡lbut-3-en-1-ona
Figure imgf000144_0002
Se añadió gota a gota bromuro de (3-metilbut-2-en-1-il)cinc(II) y cloruro de litio (77 ml, 32,5 mmol) en THF (como se ha descrito anteriormente) a una solución de color amarillo de cloruro de 1-bencil-1H-pirazol-3-carbonilo (5,74 g, 26,0 mmol) en tetrahidrofurano (53 ml) a -78 °C. Después de 45 min, la reacción se inactivó con cloruro de sodio acuoso saturado al 50 % y se separaron las capas. La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo, y las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna de gel de sílice, gradiente de elución de acetato de etilo del 0 al 50 % en hexanos, obteniéndose 1-(1-bencil-1H-pirazol-3-il)-2,2-dimetilbut-3-en-1-ona (5,2 g, 79 %) en forma de un aceite de color ámbar pálido. Las fracciones de producto impuras se concentraron a presión reducida y se volvieron a purificar usando las mismas condiciones, obteniéndose 1-(1-bencil-1H-pirazol-3-il)-2,2-dimetilbut-3-en-1-ona adicional (0,81 g, 12 %) en forma de un aceite de color ámbar pálido. 1H RMN (DMSO-da, 27 °C) 1,40 (6H, s), 5,02 (1H, dd), 5,07(1 H, dd), 5,43 (2H, s), 6,44 (1H, dd), 6,71 (1H, d), 7,25 - 7,40 (5H, m), 7,89 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ 255.
Preparación de 1-bencil-3-(2.2-d¡met¡lbut-3-en-1-¡l)-1H-p¡razol
Figure imgf000144_0003
Se añadió monohidrato de hidrazina (5,1 ml, 67 mmol) a una solución de 1-(1 -bencil-1 H-pirazol-3-il)-2,2-dimetilbut-3-en-1-ona (3,42 g, 13,45 mmol) y 2,2'-oxibis(etan-1-ol) (35 ml, 369 mmol) a 120 °C. Después, la reacción se calentó a 180 °C y se añadió cuidadosamente hidróxido de potasio acuoso (3,8 ml, 67 mmol) seguido de 8 escamas de KOH. Después de 1 hora, se añadieron otras 4 escamas de KOH. La reacción se mantuvo en estas condiciones durante otras 2 h y después se enfrió a t.a. y se diluyó con agua. La mezcla se extrajo con éter (x3). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía en columna, gradiente de elución de acetato de etilo del 0 al 30 % en hexanos, obteniéndose 1 -bencil-3-(2,2-dimetilbut-3-en-1-il)-1 H-pirazol (2,72 g, 84 %) en forma de un aceite incoloro. 1H RMN (DMSO-d6, 27 °C) 0,96 (6H, s), 4,85 (1H, s), 4,88 - 4,93 (1H, m), 5,26 (2H, s), 5,83 - 5,94 (1H, m), 6,02 (1H, d), 7,12 - 7,17 (2H, m), 7,22 - 7,35 (3H, m), 7,64 (1H, d). A 2H el multiplete está enterrado bajo la señal de d Ms O. m/z: eS+ [M+H]+ 241.
Preparación de 3-n-benc¡l-1H-p¡razol-3-il)-2.2-d¡met¡lpropan-1-ol
Se burbujeó ozono a través de una solución de 1-bencil-3-(2,2-dimetilbut-3-en-1-il)-1H-pirazol (2,7 g, 11 mmol) en metanol (45 ml) a -78 °C durante 30 min, obteniéndose como resultado una solución de color amarillo-verdoso claro. Después se añadió borohidruro de sodio (1,1 g, 28 mmol), y la reacción se dejó calentar a t.a. Después de 15 min, se añadieron otros 200 mg de borohidruro de sodio, y la reacción se mantuvo en estas condiciones durante 20 min adicionales. Después, la reacción se concentró a presión reducida y se inactivó con HCl acuoso concentrado (4,5 ml). La mezcla de color blanco resultante se diluyó con agua y acetato de etilo y se basificó con carbonato de potasio hasta alcanzar un pH de 8. Se separaron las capas, y la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (x3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con cloruro de sodio acuoso saturado y se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo resultante se recogió en DCM y se purificó mediante cromatografía ultrarrápida de gel de sílice, gradiente de elución de acetato de etilo del 0 al 100 % en hexanos) obteniéndose 3-(1-bencil-1H-pirazol-3-il)-2,2-dimetilpropan-1-ol (2,14 g, 78 %) en forma de un aceite incoloro transparente. 1H RMN (DMSO-CÍ6, 27 °C) 0,78 (6H, s), 2,42 (2H, s), 3,11 (2H, d), 4,44 (1H, t), 5,26 (2H, s), 6,04 (1H, d), 7,12 - 7,19 (2H, m), 7,23 - 7,36 (3H, m), 7,65 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ 245.
Preparación de 2.2-d¡met¡l-3-(1H-p¡razol-3-¡l)propan-1-ol
Figure imgf000145_0001
Una mezcla desgasificada de 3-(1-bencil-1H-pirazol-3-il)-2,2-dimetilpropan-1-ol (2,10 g, 8,59 mmol), ácido clorhídrico acuoso (1 N; 3,9 ml, 3,9 mmol), y Pd(OH)2 al 20 % en peso sobre carbono (0,151 g, 0,21 mmol) se sometió a una atmósfera de hidrógeno y se calentó a 50 °C. Después de 2 h, la reacción se filtró mientras seguía caliente con un lavado de metanol. El filtrado incoloro y transparente se concentró a presión reducida hasta obtener un aceite de color amarillo claro, que después se reconcentró a partir de tolueno (x3). Se obtuvo una goma de color amarillo claro (sal de HCl de 0,45 equiv.) que se utilizó en el siguiente paso sin más purificación. 1H RMN (DMSO-CÍ6, 27 °C) 0,79 (6H, s), 2,55 (2H, s), 3,11 (2H, s), 6,18 (1H, d), 7,70 (1H, d), 9,63 (1H, s a). No se observan señales de OH y HCl. m/z: ES+ [M+H]+ 155.
Preparación de 3-(3-((ferc-but¡ld¡met¡lsil¡l)ox¡)-2.2-d¡met¡lprop¡l)-1 H-pirazol
Figure imgf000145_0002
Se añadió gota a gota TBS-Cl (50 % en peso en tolueno; 4,5 ml, 13 mmol) a una solución de 2,2-dimetil-3-(1H-pirazol-3-il)propan-1-ol en bruto (sal de HCl 0,45 molar; 1,47 g, 8,59 mmol) e imidazol (1,75 g, 25,8 mmol) en DCM (81 ml) a t.a. Después de 15 min, se añadió 1 ml de TBS-Cl adicional en tolueno. La mezcla de color blanco se mantuvo en estas condiciones durante 1,5 h y después se vertió en bicarbonato de sodio acuoso saturado. Se separaron las capas, y la capa acuosa se extrajo con DCM (2x). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con cloruro de sodio acuoso saturado, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El aceite incoloro transparente resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida de gel de sílice, gradiente de elución de acetato de etilo del 0 al 60 % en hexano, obteniéndose 3-(3-((terc-butildimetilsilil)oxi)-2,2-dimetilpropil)-1H-pirazol (2,13 g, 92 %) en forma de un aceite transparente de color amarillo pálido. 1H RMN (DMSO-CÍ6, 27 °C) 0,00 (s, 6H), 0,75 (6H, s), 0,86 (9H, s), 3,22 (2H, s), 5,92 (1H, s a), 7,08 - 7,67 (1H, m), 12,35 (1H, s a). m/z: ES+ [M+H]+ 269.
Preparación del compuesto de 3-(3-((ferc-but¡ld¡met¡ls¡l¡l)ox¡)-2.2-d¡met¡lprop¡l)-1-((2-(tr¡met¡lsil¡l)etox¡)met¡l)-1H-pirazol y 5-(3-((fercbut¡ld¡met¡ls¡l¡l)ox¡)-2,2-d¡met¡lprop¡l)-1-((2-(trimet¡ls¡l¡l)etox¡)met¡l)-1 H-pirazol
Figure imgf000145_0003
Aislado como una proporción 2:3 de isómeros no identificados protegidos por SEM
Se añadió hidruro de sodio (60 % en peso en aceite mineral; 0,381 g, 9,52 mmol) en una porción a una solución de 3-(3-((terc-butildimetilsilil)oxi)-2,2-dimetilpropil)-1 H-pirazol (2,13 g, 7,93 mmol) en DMF (11 ml) a 0 °C. Después de 5 min, se añadió gota a gota (2-(clorometoxi)etil)trimetilsilano (SEM-Cl; 1,8 ml, 9,5 mmol). Después de 10 min, se añadieron 100 ^l de SEM-Cl adicionales junto con 20 mg de NaH (suspensión al 60 % en peso en aceite mineral). Después de 15 min finales, la reacción se inactivó con bicarbonato de sodio acuoso saturado y se diluyó con acetato de etilo. Se separaron las capas, y la capa orgánica se lavó con cloruro de sodio acuoso saturado al 50 % (x2) y después cloruro de sodio acuoso saturado. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró, y se concentró a presión reducida, obteniéndose un aceite incoloro transparente. Este aceite se purificó mediante cromatografía ultrarrápida de sílice, gradiente de elución de acetato de etilo del 0 al 20 % en hexanos, obteniéndose una mezcla no separada del compuesto de 3-(3-((terc-butildimetilsilil)oxi)-2,2-dimetilpropil)-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1 H-pirazol y 5-(3-((terc-butildimetilsilil)oxi)-2,2-dimetilpropil)-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1 H-pirazol (2,58 g, 81,6 %) como una proporción 2:3 de isómeros protegidos con s Em no identificados y un aceite incoloro transparente. 1H RMN (DMSO-CÍ6, 27 °C) -0,09 -(-0,05) (9H, m), 0,02 - 0,07 (6H, m), 0,77-0,84 (8H, m), 0,89 (9H, s), 2,44 (1,2H, s), 2,65 (0,8H, s), 3,23 (0,8H, m), 3,27 (1,2H, m), 3,48 (2H, t), 5,31 (1,2H, s), 5,40 (0,8H, s), 6,05 (0,6H, d), 6,09 (0,4H, d), 7,40 (0,4H, d), 7,71 (0,6H, d). m/z: ES+ [M+H]+ 399
Preparación del compuesto 3-(3-((ferc-but¡ld¡met¡ls¡l¡l)ox¡)-2.2-d¡met¡lprop¡l)-4-vodo-1-((2-(tr¡met¡ls¡lil)etox¡)met¡l)-1 H-pirazol y 5-(3-((fercbut¡ld¡met¡ls¡l¡l)oxi)-2.2-d¡met¡lprop¡l)-4-vodo-1 -((2-(tr¡met¡lsil¡l)etox¡)met¡l)-1 H-pirazol
Figure imgf000146_0001
Aislado como una proporción 2:3 de isómeros no identificados protegidos por SEM
Se añadió NIS (1,78 g, 7,91 mmol) a una solución de una mezcla 2:3 no identificada de compuesto de 3-(3-((tercbutildimetilsilil)oxi)-2,2-dimetilpropil)-1 -((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1 H-pirazol y 5-(3-((terc-butildimetilsilil)oxi)-2,2-dimetilpropil)-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1 H-pirazol (2,58 g, 6,48 mmol) en acetonitrilo (34 ml). Después de 18 h, se añadió 1,8 g de NIS adicional, y la reacción se calentó a 50 °C. Después de 4 h, se añadieron otros 400 mg de NIS. Después de otras 4 h, se dejó enfriar la reacción a t.a. y se mantuvo en estas condiciones durante 18 h. Después se vertió la reacción en cloruro de acuoso saturado al 50 % y se valoró con tiosulfato de sodio hasta que desapareció todo el color rojo-ámbar oscuro. Se separaron las capas, y la capa orgánica se lavó con cloruro de sodio acuoso saturado. Después, la capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró, y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna de gel de sílice, gradiente de elución de acetato de etilo del 0 al 15 % en hexanos, obteniéndose el compuesto de 3-(3-((terc-butildimetilsilil)oxi)-2,2-dimetilpropil)-4-yodo-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1 H-pirazol y 5-(3-((terc-butildimetilsilil)oxi)-2,2-dimetilpropil)-4-yodo-1 -((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol (2,93 g, 86 %) en forma de una mezcla 2:3 de isómeros protegidos con SEM no identificados y un aceite de color amarillo claro. 1H RMN (DMSO-de, 27 °C) -0,09 -(-0,05) (9H, m), 0,02 - 0,06 (6H, m), 0,76 - 0,92 (17H, m), 2,45 (1,2H, s), 2,71 (0,8H, s), 3,29 - 3,32 (0,8H, m), 3,34 - 3,37 (1,2H, m), 3,50 (2H, td), 5,33 (1,2H, s), 5,47 (0,8H, s), 7,56 (s, 0,4H), 7,96 (0,6H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 525.
Preparación del compuesto de 3-(3-((ferc-but¡ld¡met¡ls¡l¡l)ox¡)-2.2-d¡met¡lprop¡l)-4-(4,4.5.5-tetramet¡l-1.3.2-d¡oxaborolan-2-¡l)-1-((2-(tr¡met¡ls¡lil)etox¡)met¡l)-1H-p¡razol y 5-(3-((ferc-but¡ld¡met¡ls¡l¡l)oxi)-2.2-d¡met¡lprop¡l)-4-(4.4.5.5-tetramet¡l-1.3.2-d¡oxaborolan-2-¡l)-1-((2-(tr¡met¡ls¡lil)etox¡)met¡l)-1H-p¡razol
Figure imgf000146_0002
Aislado en una proporción de 3:2 de isómeros protegidos por SEM como se muestra
Se añadió gota a gota complejo de cloruro de isopropilmagnesio y cloruro de litio en THF (1,3 M; 6,45 ml, 8,39 mmol) a una solución de una mezcla 2:3 no identificada de compuesto de 3-(3-((terc-butildimetilsilil)oxi)-2,2-dimetilpropil)-4-yodo-1 -((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1 H-pirazol y 5-(3-((terc-butildimetilsilil)oxi)-2,2-dimetilpropil)-4-yodo-1-((2(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol (2,93 g, 5,59 mmol) en THF (40 ml) a -78 °C. Después de 1 hora, se añadió gota a gota 2-isopropoxi-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (1,8 ml, 8,9 mmol), y la reacción se dejó en agitación en estas condiciones durante 2 h. Después, la reacción se sumergió en un baño de hielo (0 °C). Tras otras 2 h, la reacción se vertió en cloruro de amonio acuoso saturado. La mezcla se extrajo con acetato de etilo (3x), y las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de acetato de etilo del 0 al 10 % en hexanos durante 20 min), obteniéndose una mezcla 3:2 no identificada de 3-(3-((fe/'cbutildimetilsilil)oxi)-2,2-dimetilpropil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1 H-pirazol y 5-(3-((fe/'c-butildimetilsilil)oxi)-2,2-dimetilpropil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol (2,37 g, 80 %) en forma de un aceite incoloro transparente. 1H RMN (DMSO-de, 27 °C) -0,09 -(-0,05) (9H, m), 0,01 - 0,06 (6H, m), 0,73 - 0,84 (8H, m), 0,87 - 0,92 (9H, m), 1,24 (12H, s), 2,63 (1,2H, s), 2,85 (0,6H, s), 3,26 (0,8H, s), 3,33 (1,2H, s), 3,50 (2H, t), 5,33 (1,2H, s), 5,43 (8H, s), 7,54 (4H, s), 7,91 (0,6H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 525.
Preparación________ de________ nS.3R)-3-acetam¡do-M-(4-(3-(3-((ferc-but¡ld¡met¡ls¡lil)ox¡)-2.2-d¡met¡lprop¡l)-1-((2-(tr¡met¡ls¡l¡l)etox¡)met¡l)-1H-p¡razol-4-¡l)-5-clorop¡r¡din-2-¡l)c¡clohexano-1 -carboxamida y (1S.3R)-3-acetamido-M-(4-(5-(3-((fercbut¡ld¡met¡ls¡l¡l)ox¡)-2.2-d¡met¡lprop¡l)-1-((2-(tr¡met¡ls¡l¡l)etox¡)met¡l)-1H-p¡razol-4-¡l)-5-clorop¡rid¡n-2-¡l)ciclohexano-1 -carboxamida
Figure imgf000147_0001
Se añadieron PdCh(dppf) (aducto con DCM; 0,061 g, 0,07 mmol) y carbonato de cesio (1,45 g, 4,46 mmol) a una mezcla desgasificada de (1S,3R)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-yodopiridin-2-il)ciclohexano-1-carboxamida (0,74 g, 1,49 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 12), una mezcla 3:2 de 3-(3-((fe/'c-butildimetilsilil)oxi)-2,2-dimetilpropil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1 H-pirazol y 5-(3-((fe/'cbutildimetilsilil)oxi)-2,2-dimetilpropil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1 H-pirazol (0,813 g, 1,55 mmol), 1,4-dioxano (12 ml), y agua (2,5 ml). La mezcla se calentó a 93 °C y se mantuvo en estas condiciones durante 18 h. Después, la reacción se enfrió, se diluyó con acetato de etilo y se lavó con cloruro de sodio acuoso saturado. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró, y se concentró a presión reducida. El residuo de color negro-verde resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida de gel de sílice, gradiente de elución de acetato de etilo del 50 al 100 % en hexano y después con metanol del 0 al 10 % en acetato de etilo, obteniéndose (1S,3R)-3-acetamido-N-(4-(3-(3-((fe/'c-butildimetilsilil)oxi)-2,2-dimetilpropil)-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1 H-pirazol-4-il)-5-cloropiridin-2-il)ciclohexano-1-carboxamida y (1S,3R)-3-acetamido-N-(4-(5-(3-((fe/'c-butildimetilsilil)oxi)-2,2-dimetilpropil)-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-5-cloropiridin-2-il)ciclohexano-1-carboxamida (0,75 g, 73 %) a una proporción 3:7 de isómeros protegidos con SEM no identificados y un cristal de color ámbar claro. 1H Rm N (DMsO-d6, 27 °C) -0,06 - 0,02 (15H, m), 0,61 (1,7H, s), 0,72 (4,3H, s), 0,81 (6,3H, s), 0,84 - 0,93 (4,7H, m), 1,04 - 1,22 (1H, m), 1,22 - 1,40 (3H, m), 1,71 - 1,87 (6H, m), 1,88 - 1,98 (1H, m), 2,58 - 2,73 (2,4H, m), 2,91 (0,6H, s), 3,12 (0,6H, s), 3,19 (1,4H, s), 3,55 - 3,67 (3H, m), 5,46 (1,3H, s), 5,57 (0,7H, s), 7,66 (0,3H, s), 7,78 (1H, d), 8,09 (0,7H, s), 8,12 - 8,15 (0,3H, s), 8,15-8,17 (0,7H, s), 8,42-8,44 (0,7H, s), 8,46 (0,3H, s), 10,64 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 692.
Ejemplo 82: Preparación de nS.3R)-3-acetam¡do-M-(5-cloro-4-(6-h¡drox¡-5.5-d¡met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rroloH.2-b1p¡razol-3-¡l)p¡rid¡n-2-¡l)c¡clohexano-1 -carboxamida
Figure imgf000148_0001
Mezcla desconocida de diastereómeros ya que la configuración hidroxi es desconocida.
Se añadió trióxido de azufre y piridina (0,30 g, 1,9 mmol) a una solución de (1S,3R)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-(5-(3-hidroxi-2,2-dimetNpropil)-1H-pirazol-4-il)piridin-2-N)cidohexano-1-carboxamida (0,48 g, 1,1 mmol, preparado en el ejemplo 82a) en DCM (6 , 8 ml) y dimetilsulfóxido (3,4 ml) a 0 °C. La solución resultante se mantuvo en estas condiciones durante 15 minutos y después se vertió en acetato de etilo y cloruro de amonio acuoso saturado. Se separaron las capas y la capa orgánica se lavó con cloruro de sodio acuoso al 50 % y después con cloruro de sodio acuoso saturado al 100 %. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró, y se concentró a presión reducida. El residuo turbio resultante se recogió en DCM y se purificó mediante cromatografía ultrarrápida de gel de sílice, gradiente de elución de metanol del 0 al 40 % en acetato de etilo, obteniéndose una espuma sólida de color blanco (460 mg). Este sólido se purificó adicionalmente mediante HPLC preparativa (columna Waters XBridge Phenyl Prep, 5 p de sílice, 19 mm de diámetro, 100 mm de longitud), utilizando mezclas decrecientemente polares de agua (que contenía NH4OH al 0,2 %, pH 10) y metanol como eluyentes. Las fracciones que contenían el compuesto deseado se concentraron a presión reducida, obteniéndose (1S,3R)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-(6-hidroxi-5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)ciclohexano-1-carboxamida (255 mg, 53 %) en forma de una espuma sólida de color blanco. 1H r Mn (DMSO-d6, 27 °C) 0,99 - 1,16 (4H, m), 1,20 (3H, s), 1,23 - 1,40 (3H, m), 1,73 - 1,83 (6 H, m), 1,89 (1H, d), 2,56 - 2,68 (1H, m), 2,75 (1H, d), 2,95 (1H, d), 3,50 - 3,63 (1H, m), 5,25 (1H, s), 6,92 (1H, s a), 7,75 (1H, d), 8,04 (1H, s), 8,25 (1H, s), 8,36 (1H, s), 10,56 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 446.
Ejemplos 83 y 84: Preparación de nR.3R)-3-acetam¡do-M-(4-(5.5-d¡met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rroloH.2-blp¡razol-3-¡l)-5-fluorop¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clohexano-1-carboxam¡da y nS.3S)-3-acetam¡do-M-(4-(5.5-d¡met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rroloH.2-blp¡razol-3-¡l)-5-fluorop¡r¡d¡n-2-¡l)c¡clohexano-1-carboxam¡da
Figure imgf000148_0002
Ejemplo 83, isómero 1 Ejemplo 84, isómero 2
Los ejemplos 83 y 84 son enantiómeros puros. Se desconoce la configuración absoluta de los ejemplos 83 y 84, pero son opuestos entre sí. La configuración relativa es trans para los ejemplos 83 y 84.
Se añadieron trietilamina (0,29 ml, 2,1 mmol) y anhídrido acético (0,066 ml, 0,70 mmol) a trans-3-amino-N-(4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)-5-fluoropiridin-2-il)ciclohexano-1-carboxamida racémica (0,24 g, 0,64 mmol) en DCM (4 ml). Después de agitar t.a. durante 1 hora, la mezcla se lavó con agua y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de MeOH del 0 al 10 % en DCM, obteniéndose trans-3-acetamido-N-(4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)-5-fluoropiridin-2-il)ciclohexano-1-carboxamida racémica (0,270 g) en forma de un aceite incoloro. El material racémico se resolvió mediante HPLC preparativa (columna Phenomonex Lux C4, 20 pm de sílice, 50 mm de diámetro, 250 mm de longitud), usando una mezcla 70/30 de heptano/IPA como eluyente a un caudal de 120 ml/min. Las fracciones que contenían el isómero 1 (de elución más rápida) y el isómero 2 (de elución más lenta) se evaporaron a sequedad. El isómero 1 (114 mg) se volvió a purificar mediante HPLC preparativa (columna Waters XBridge Prep C18 OBD, 5 p de sílice, 30 mm de diámetro, 100 mm de longitud), utilizando mezclas decrecientemente polares de agua (que contenía NH3 al 1 %) y MeCN como eluyentes, obteniéndose el isómero 1 de trans-3-acetamido-N-(4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)-5-fluoropiridin-2-il)ciclohexano-1-carboxamida (0,081 g, 31 %).
El isómero 2 de trans-3-acetamido-N-(4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)-5-fluoropiridin-2-il)ciclohexano-1-carboxamida (0,090 g, 34 %) se aisló a partir de la primera purificación preparativa quiral.
Ejemplo 83. ¡sómero 1:
1H RMN (400 MHz, DMSO-de, 30 °C) 1,29 (6H, s), 1,45 - 1,83 (9H, m), 1,86 (3H, s), 2,71 - 2,84 (1H, m), 2,94 (2H, s), 3,94 (2H, s), 7,54 (1H, d), 7,89 (1H, d), 8,22 - 8,34 (2H, m), 10,30 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 414.
Ejemplo 84, isómero 2:
1H RMN (400 MHz, CDCls, 30 °C) 1,35 (6H, s), 1,44 - 1,92 (7H, m), 1,95 - 2,04 (4H, m), 2,54 (1H, s), 3,02 (2H, s), 3,94 (2H, s), 4,17 - 4,35 (1H, m), 5,57 (1H, d), 8,01 (1H, d), 8,08 (2H, d), 8,34 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ 414.
Condiciones quirales analíticas:
Figure imgf000149_0003
Los procedimientos usados para preparar trans-3-amino-N-(4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)-5-fluoropiridin-2-il)ciclohexano-1-carboxamida racémica se describen a continuación:
Preparación de ácido trans-3-((ferc-butoxicarbonil)amino)ciclohexano-1-carboxílico racémico
Figure imgf000149_0001
racemico
Una solución de clorhidrato del ácido trans-3-aminociclohexanocarboxílico racémico (2,00 g, 11,1 mmol) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (7,9 ml, 44 mmol) en 1,4-dioxano (16 ml) y agua (16 ml) se enfrió a 0 °C. Después se añadió dicarbonato de di-terc-butilo (2,67 g, 12,25 mmol) en porciones a la mezcla de reacción, que se dejó calentar hasta t.a. después de añadir la porción final. Después, la mezcla de reacción se enfrió a 0 °C, y se añadió ácido clorhídrico acuoso 2 M para ajustar el pH a 2. La mezcla de reacción se extrajo con EtOAc (2 * 200 ml), y las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua (100 ml) y se secaron sobre Na2SO4. La mezcla resultante se filtró y el filtrado se concentró a presión reducida. El sólido de color blanco resultante se secó al vacío durante 18 h, obteniéndose ácido trans-3-((tercbutoxicarbonil)amino)ciclohexano-1-carboxílico racémico (2,73 g, 101 %). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6, 30 °C) 1,25 -1,33 (1H, m), 1,39 (9H, s), 1,45 - 1,61 (6H, m), 1,71 - 1,81 (1H, m), 2,58 - 2,69 (1H, m), 3,55 (1H, s a), 6,71 (1H, s a), 12,03 (1H, s a).
Preparación de trans-(-3-carbamoilciclohexil)carbamato de ferc-butilo racémico
Figure imgf000149_0002
racemico
Se añadió CDI (3,14 g, 19,39 mmol) a una solución de ácido trans-3-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclohexanocarboxílico racémico (1,73 g, 7,11 mmol) en d Mf (15 ml) a 40 °C. La mezcla resultante se mantuvo en estas condiciones durante 4 h. Después, la mezcla de reacción se enfrió a 0 °C y se añadió sal de amonio del ácido acético (3,49 g, 45,3 mmol). La mezcla de reacción se dejó calentar a t.a. y se agitó durante 60 h adicionales. La mezcla de reacción se vertió en aguahielo y la mezcla resultante se filtró. El precipitado recogido se secó al vacío, obteniéndose trans-(3-carbamoilciclohexil)carbamato de ferc-butilo racémico (0,95 g, 61 %). 1H RMN (400 MHz, CDCh, 30°C) 1,45 (9H, s), 1,48 - 1,56 (2H, m), 1,62 - 1,78 (4H, m), 1,79 - 1,92 (2H, m), 2,45 (1H, dt), 3,84 (1H, s), 4,57 (1H, s), 5,35 (1H, s a), 5,66 (1H, s a).
Preparación________ de________ (trans-3-((4-(5,5-d¡met¡l-5,6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolori,2-blp¡razol-3-¡l)-5-fluorop¡r¡d¡n-2-il)carbamo¡l)c¡clohexil)carbamato de tere-butilo racémico
Figure imgf000150_0001
Se añadió tetraquis(trifenilfosfina)paladio(0) (0,094 g, 0,08 mmol) a (trans-3-carbamoilcidohexil)carbamato de ferc-butilo racémico (0,235 g, 0,97 mmol), 3-(2-doro-5-fluoropiridin-4-N)-5,5-dimetN-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol (0,215 g, 0,81 mmol, preparado de acuerdo con el ejemplo 25), (9,9-dimetil-9H-xanteno-4,5-diil)bis(difenilfosfano) (0,094 g, 0,16 mmol) y carbonato de cesio (0,791 g, 2,43 mmol) en 1,4-dioxano ( 6 ml) y agua (1,2 ml). La suspensión resultante se desgasificó durante 10 minutos en atmósfera de nitrógeno y después se agitó a 100 °C durante 48 h. Se enfrió la mezcla, se diluyó con agua (40 ml) y se extrajo con EtOAc (3 x 20 ml). Las capas orgánicas combinadas se evaporaron hasta obtener un material en bruto. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, gradiente de elución de acetato de etilo del 0 al 60 % en heptano. Las fracciones puras se evaporaron a sequedad, obteniéndose (trans-3-((4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)-5-fluoropiridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de ferc-butilo racémico (0,322 g, 84 %) en forma de una espuma sólida de color blanco. m/z: ES+ [M+H]+ 472.
Preparación de trans-3-am¡no-M-(4-(5.5-d¡met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolori.2-blp¡razol-3-¡l)-5-fluorop¡rid¡n-2-¡l)ciclohexano-1 -carboxamida racémica
Figure imgf000150_0002
Se añadió ácido trifluoroacético (2,3 g, 20 mmol) a una solución de (trans-3-((4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)-5-fluoropiridin-2-il)carbamoil)ciclohexil)carbamato de terc-butilo racémico (0,322 g, 0,68 mmol) en DCM (10 ml). Después de 15 min, la reacción se purificó mediante cromatografía de intercambio iónico usando una columna SCX. El producto deseado se eluyó de la columna utilizando NH3 1 M en MeOH y las fracciones puras se concentraron a presión reducida, obteniéndose trans-3-amino-N-(4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)-5-fluoropiridin-2-il)ciclohexano-1-carboxamida racémica (0,237 g, 93 %) en forma de una película seca de color blanco. m/z: ES+ [M+H]+ 372.
Ejemplo 85: Preparación de nS.3R)-3-acetam¡do-M-(5-cloro-4-(5.5-d¡met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rroloH.2-b1p¡razol-3-¡l)pir¡d¡n-2-¡l)c¡clohexano-1 -carboxamida
Figure imgf000150_0003
Se añadieron 5-cloro-4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-amina (56,7 g, 215,7 mmol) y piridina (0,073 l, 863 mmol) a una suspensión fina de ácido (1S,3R)-3-acetamidociclohexano-1-carboxílico (49,9 g, 84 % p/p, 227 mmol) en EtoAc (1 l) en una atmósfera de nitrógeno. Después se añadió lentamente anhídrido 1 -propanofosfónico (T3P, >50 % en peso en EtOAc; 206 g, 324 mmol) a lo largo de 1 hora. Después de 20 h de agitación adicionales, se añadió agua (400 ml), y la mezcla bifásica se agitó durante 10 minutos adicionales. La capa orgánica se lavó con carbonato de sodio acuoso saturado (300 ml) y agua (300 ml). La capa orgánica se concentró a presión reducida, y el sólido resultante se recogió en acetonitrilo (300 ml) y se reconcentró a presión reducida. De nuevo se añadió acetonitrilo (450 ml), y la suspensión resultante se calentó a 70 °C. Se añadieron núcleos de cristalización y la suspensión espesa se agitó a 50 °C durante 3 h. Después, la mezcla se enfrió a 20 °C y se mantuvo en estas condiciones durante 3 días. Se filtró la suspensión, y se lavó el precipitado aislado con acetonitrilo (3 x 100 ml) y después se secó a presión reducida a 45 °C. Esto proporcionó (1S,3R)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)ciclohexano-1-carboxamida en forma de un sólido cristalino de color blanquecino (83,2 g, 90 %). 1H RMN (400 MHz, CDCls, 23 °C) 1,08 - 1,23 (1H, m), 1,33 (6H, s), 1,37 - 1,57 (3H, m), 1,86 - 2,04 (6H, m), 2,26 (1H, d), 2,38 - 2,52 (1H, m), 2,95 (2H, s), 3,79 - 3,92 (1H, m), 3,94 (2H, s), 5,51 (1H, d), 8,09 (1H, s), 8,12 (1H, s), 8,22 (1H, s), 8,24 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 430. Caracterización coherente con el ejemplo 14.
Los cristales obtenidos del ejemplo 85 se analizaron por XRPD, confirmando que el sólido contiene exclusivamente la forma A, caracterizada previamente en el ejemplo 14.
Los procedimientos usados para preparar los materiales de partida, 5-cloro-4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-amina y ácido (1S,3R)-3-acetamidociclohexano-1-carboxílico se describen a continuación:
Preparación de cloruro de c¡s-3-(¡sopropox¡carbonil)c¡clohexanam¡n¡o
Figure imgf000151_0001
Se añadió ácido clorhídrico (5 a 6 M en 2-propanol; 16 ml) a una suspensión de ácido 3-aminobenzoico (10 g, 73 mmol) en 2-propanol (100 ml). Después se añadió rodio (5 % en AhOa; 0,75 g, 0,36 mmol), y la mezcla se sometió a una atmósfera de hidrógeno (8 bar) a 100 °C durante 3 días. Se añadió ácido clorhídrico adicional (5 a 6 M en 2-propanol; 5 ml), y la mezcla se agitó a 70 °C en un recipiente de acero sellado durante 2 días adicionales. Después, la mezcla se filtró a través de Celite® usando lavados con 2-propanol (2 x 10 ml) y agua (2 x 20 ml). El filtrado se concentró a presión reducida, obteniéndose un sólido de color blanco. Este sólido se trató con 2-propanol (50 ml) y se reconcentró a presión reducida antes de suspenderlo en 100 ml de acetato de isopropilo caliente (70 °C). La mezcla se enfrió lentamente a 20 °C y después se agitó durante 15 minutos adicionales. Se filtró la mezcla y el sólido recogido se lavó con acetato de isopropilo (3 x 3 0 ml) y se secó a presión reducida, obteniéndose cloruro de cis-3-(isopropoxicarbonil)ciclohexanaminio (7,5 g, 46 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (400 MHz, D2O, 23 °C) 1,27 (6H, d), 1,30 - 1,57 (4H, m), 1,90 - 2,14 (3H, m), 2,28 (1H, d), 2,52 (1H, tt), 3,20 - 3,36 (1H, m), 5,01 (1H, hept).
Preparación de 3-am¡noc¡clohexanocarbox¡lato de c¡s-¡soprop¡lo
Figure imgf000151_0002
racemico
Se añadió lentamente una solución de hidróxido de sodio (2,72 g, 68,1 mmol) en agua (20 ml) a una mezcla de cloruro de cis-3-(isopropoxicarbonil)ciclohexanaminio (14,0 g, 62 mmol) en agua (50 ml) y acetato de i-Pr (150 ml) a 20 °C hasta que se alcanzó un pH de 10,9. La capa acuosa se extrajo con acetato de i-Pr (2 x 50 ml) y la capa orgánica reunida se concentró a presión reducida. El residuo resultante se reconcentró a partir de acetato de isopropilo (2 x 20 ml), obteniéndose 3-aminociclohexanocarboxilato de cis-isopropilo en forma de un aceite no viscoso incoloro (11,86 g, rendimiento del 100 %). 1H RMN (400 MHz, CDCla, 20 °C) 0,83 - 0,97 (1H, m), 0,82 - 1,27 (5H, m), 1,11 (6H, d), 1,67 -1,82 (3H, m), 1,93 - 2,02 (1H, m), 2,18 (1H, tt), 2,56 (1H, tt), 4,88 (1H, hept).
Preparación de 3-acetam¡doc¡clohexanocarbox¡lato de (1S.3R)-isoprop¡lo
Figure imgf000151_0003
quiral
151
Se añadió NOVOZYM 435 (3 g, adquirido de Novozymes A/S Dinamarca (actividad 10000 PLU/g)) a una solución
transparente de 3-aminociclohexanocarboxilato de cis-isopropilo (59,4 g, 298 mmol) en acetato de isopropilo (480 ml). La
mezcla se agitó a 20 °C durante 12 h y después se filtró. El precipitado recogido se lavó con acetato de isopropilo (150 ml),
y el filtrado se lavó con ácido clorhídrico acuoso (2 M; 200 ml). La capa acuosa se extrajo con acetato de isopropilo
(3 x 1 5 0 ml), y las capas orgánicas combinadas se filtraron nuevamente y se concentraron a presión reducida,
obteniéndose un sólido de color blanco (43 g). Este sólido se recogió en acetato de isopropilo (2 x 200 ml) y se
reconcentró a presión reducida. El residuo resultante se disolvió en acetato de isopropilo (400 ml) y se lavó con carbonato
de sodio acuoso saturado (50 ml). La capa acuosa se extrajo con acetato de isopropilo (100 ml), y las capas orgánicas
combinadas se lavaron con agua (50 ml) y se concentraron a presión reducida, obteniéndose un sólido de color blanco.
Este sólido se recogió en acetato de isopropilo (2 x 100 ml) y se concentró nuevamente a presión reducida. El residuo
resultante se trató con ciclopentilmetiléter (70 ml) y ciclohexano (140 ml). Esto proporcionó una suspensión, que se calentó
a 70 °C. Se obtuvo una solución homogénea, que tras enfriarla a 20 °C, se convirtió en una mezcla. Se añadieron núcleos
de cristalización a 50 °C. La suspensión resultante se agitó durante 2 días, seguido de filtración y lavado del sólido con
ciclopentilmetil éter al 33 % en ciclohexano (2 x 30 ml). Después de secar a presión reducida, se obtuvo 3-acetamidociclohexanocarboxilato de (1S,3R)-isopropilo (26,8 g, 40 %) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN
(400 MHz, CDCls, 20 °C) 1,01 - 1,13 (1H, m), 1,20 (6H, d), 1,22 - 1,45 (3H, m), 1,77 - 1,93 (3H, m), 1,94 (3H, s), 2,12 -2,26 (1H, m), 2,37 (1H, tt), 3,70 - 3,91 (1H, m), 4,96 (1H, p), 5,67 (1H, d).
Condiciones de SFC analítica:
Figure imgf000152_0002
Tiempo de retención:
1.9 min, 3-acetamidociclohexanocarboxilato de (1R,3S)-isopropilo
2,7 min, 3-acetamidociclohexanocarboxilato de (1S,3R)-isopropilo, e.e.
99.9 %, 3-acetamidociclohexanocarboxilato de (1S,3R)-isopropilo
Preparación de ácido (1S,3R)-3-acetamidociclohexanocarboxílico
Figure imgf000152_0001
Se añadió una solución de hidróxido de sodio acuoso (3,8 M; 3,9 ml, 14,8 mmol) en una atmósfera de nitrógeno a una
solución de 3-acetamidociclohexanocarboxilato de (1S,3R)-isopropilo (1,71 g, 7,37 mmol) en MeOH (3 ml). La mezcla se
agitó a 20 °C durante 1 hora y después se añadió a la mezcla una solución de ácido clorhídrico acuoso (3.8 M; 4,5 ml)
hasta que se logró un pH de 1. Se añadió acetato de etilo (10 ml) y se separaron las capas. La capa acuosa se extrajo
con acetato de etilo (4 x 10 ml). Las capas orgánicas combinadas se concentraron a presión reducida a 40 °C. El residuo
resultante se reconcentró a partir de acetato de etilo (2 x 10 ml), obteniéndose ácido (1S,3R)-3-acetamidociclohexanocarboxílico (1,4 g, 94 %; 92 % en peso) contaminado con cloruro de sodio en forma de un sólido de
color blanco. 1H RMN (400 MHz, CDsOD, 20 °C) 1,08 - 1,47 (4H, m), 1,78 - 1,99 (6H, m), 2,12 (1H, d), 2,3 - 2,45 (1H, m),
3,58 - 3,74 (1H, m). m/z: ES+ [M+H]+ 186.
3-Bromo-5.5-d¡met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rroloH.2-blp¡razol
Figure imgf000153_0001
Se cargó un reactor con 5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol (79,5 g, 525 mmol; preparado de acuerdo con el ejemplo 14) y CH2CI2 (800 ml) en una atmósfera de nitrógeno. Se añadió NBS (95,4 g, 533 mmol) en porciones a lo largo de 15 minutos. La temperatura de reacción se mantuvo entre 20 y 23 °C durante la adición. Después de 0,5 h de agitación a 20 °C, se añadió una solución de Na2SO3 acuoso al 8 % en peso (250 ml), y la mezcla bifásica se agitó en estas condiciones durante 45 minutos. La capa orgánica se lavó con carbonato de sodio acuoso saturado (1 x 250 ml, 1 x 200 ml) y agua (100 ml). Después, se concentró la capa orgánica a presión reducida a 30 °C y 400 mbar. El residuo resultante se reconcentró a partir de THF (3 x 100 ml), obteniéndose 3-bromo-5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol (138 g, 99 %; 81 % en peso mediante análisis de la concentración mediante RMN) en forma de un aceite de color pardo pálido. Este material se usó en la etapa siguiente sin purificación adicional. 1H RMN (400 MHz, CDCh, 20 °C) 1,29 (6H, s), 2,64 (2H, s), 3,89 (2H, s), 7,41 (1H, s).
Preparación de 5.5-d¡met¡l-3-(4.4.5.5-tetramet¡l-1.3.2-d¡oxaborolan-2-¡l)-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rroloH.2-blp¡razol
Figure imgf000153_0002
Se añadió lentamente una solución de butillitio (2,5 M en hexanos; 0,309 l, 774 mmol) a una solución de 3-bromo-5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol (137 g, 516 mmol; 81 % en peso) y borato de triisopropilo (0,21 l, 929 mmol) en THF (0,7 l) y tolueno (0,7 l) a -70 °C en una atmósfera de nitrógeno en un matraz de 3 bocas de 3 l equipado con un termómetro. La temperatura de reacción se mantuvo entre -65 a -70 °C durante la adición. Una vez completada la adición, se añadió una solución de 2,3-dimetilbutano-2,3-diol (91 g, 774 mmol) en tolueno (0,5 l) durante 10 minutos. Se dejó que la mezcla alcanzase lentamente la t.a. en el baño de hielo y después se agitó durante 18 h adicionales. La mezcla de reacción se transfirió a un reactor de 5 l que contenía una solución fría a 10 °C de cloruro de amonio acuoso saturado (2,5 l). La mezcla bifásica se agitó durante 15 minutos a 20 °C, y la capa orgánica se lavó con agua (2 x 500 ml) seguido de concentración a 35 °C, obteniéndose 5,5-dimetil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol en forma de un sólido de color amarillo claro (194 g, 92 %; 64 % en peso mediante análisis de la concentración mediante RMN). Este material se usó en la etapa siguiente sin purificación adicional. 1H RMN (400 MHz, CDCls, 20 °C) 1,21 (6H, s), 1,26 (12H, s), 2,77 (2H, s), 3,84 (2H, s), 7,74 (1H, s). miz: ES+ [M+H]+ 263.
Preparac¡ón de 5-cloro-4-yodop¡r¡d¡n-2-am¡na
Figure imgf000153_0003
Se añadió 5-cloro-2-fluoro-4-yodopiridina (90 g, 350 mmol) disuelta en NMP (200 ml) a una solución a 10 °C de hidróxido de amonio acuoso concentrado (ac. 26 %; 298 g, 4,54 mol). La temperatura de reacción se mantuvo por debajo de 10 °C durante la adición. El recipiente se selló y después se calentó a 100 °C. Después de 18 h, la mezcla se enfrió a t.a. tras lo cual se obtuvo una suspensión. La mezcla en bruto se combinó con la obtenida en un experimento a pequeña escala llevado a cabo en condiciones idénticas, partiendo de 8 g (31 mmol) de 5-cloro-2-fluoro-4-yodopiridina. Se añadieron MTBE (500 ml) y agua (200 ml). Se separaron las capas, y la capa acuosa se extrajo con MTBE (2 x 250 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua (100 ml) y después se concentraron a presión reducida, obteniéndose un sólido de color beige. Este sólido se volvió a concentrar a presión reducida a partir de MTBE (2 x 200 ml) hasta retirar el agua residual. Después, la mezcla en bruto se disolvió en tolueno caliente (65 °C) (400 ml) usando un evaporador rotatorio. Después, se dejó que la mezcla alcanzase lentamente 45 °C, tras lo cual se añadieron núcleos de cristalización. La suspensión obtenida se dejó enfriar lentamente hasta 10 °C y después se agitó durante 18 h adicionales en estas condiciones. La suspensión se filtró y el sólido recogido se lavó con tolueno enfriado en hielo (2 x 70 ml). Esto proporcionó 5-cloro-4-yodopiridin-2-amina (63,8 g, 65,9 %) en forma de un sólido incoloro. 1H RMN (400 MHz, DMSO-CÍ6, 20 °C) 6,23 (2H, s), 7,04 (1H, s), 7,92 (1H, s).
Preparación de 5-cloro-4-(5.5-d¡met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolori.2-blp¡razol-3-¡l)p¡rid¡n-2-am¡na
Figure imgf000154_0001
Se añadieron carbonato de potasio (81 g, 582,6 mmol) y Pd(dppf)Cl2 (3,41 g, 4,66 mmol) secuencialmente a una mezcla desgasificada de 5-doro-4-yodopiridin-2-amina (59,9 g, 233 mmol) y 5,5-dimetil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol (64 % en peso; 110 g, 268 mmol) en acetonitrilo (500 ml) y agua (500 ml). La mezcla bifásica de color rojo pálido transparente se calentó a 50 °C. Después de agitar vigorosamente durante 2 h, se añadió Pd(dppf)Cl2 adicional (1,0 g, 1,4 mmol), y la mezcla se agitó durante 20 h adicionales en estas condiciones. Después, la mezcla se enfrió a 20 °C y se añadió acetato de etilo (450 ml). Se separaron las capas, y la capa orgánica se lavó con agua (200 ml). Después se añadió el depurador de Pd Silicycle (SilaMetS)-tiol, (n.° de cat. R51030B; 20 g) a la capa orgánica, y la mezcla se agitó adicionalmente durante 2 h a 20 °C. Después se filtró la mezcla y se concentró a presión reducida hasta obtener un sólido de color pardo. Este sólido se disolvió en DCM (100 ml), y después se filtró la solución a través de un lecho corto de gel de sílice, eluyendo con 2-propanol al 5 % en CH2G 2. Las fracciones de producto se concentraron a presión reducida, obteniéndose un sólido de color pardo. Se añadió metilisobutilcetona (MIBK, 250 ml), y la suspensión resultante se calentó a 70 °C y después se enfrió a 20 °C. La suspensión resultante se agitó en estas condiciones durante 18 h y después se filtró, se lavó con metil isobutilcetona (5 * 30 ml) hasta obtener 5-cloro-4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-amina en forma de un sólido de color rosa pálido (50,7 g, 193 mmol). 1H RMN (400 MHz, CDCls, 20 °C) 1,28 (6H, s), 2,81 (2H, s), 3,91 (2H, s), 4,56 (2H, s a), 6,41 (1H, s), 7,83 (1H, s), 8,03 (1H, s). m/z: ES+ [M+H]+ 263.
Ejemplo 86: Preparación de (1S.3R)-3-acetam¡do-N-(4-(5.5-d¡met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rroloH.2-blp¡razol-3-¡n-5-fluorop¡r¡d¡n-2-¡llc¡clohexano-1 -carboxamída
Figure imgf000154_0002
Se añadieron 4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)-5-fluoropiridin-2-amina (31,8 g, 129 mmol) y piridina (43,9 ml, 517 mmol) en una atmósfera de nitrógeno a 20 °C a una suspensión de ácido (1S,3R)-3-acetamidociclohexano-1-carboxílico (29,9 g, 136 mmol; 84 % en peso, preparado de acuerdo con el ejemplo 85) en EtOAc (800 ml). Se añadió T3P (>50 % en peso en EtOAc; 123 g, 194 mmol) a lo largo de 40 minutos, y la mezcla resultante se agitó durante 21 h en estas condiciones. Después se añadió agua (400 ml). La mezcla bifásica se agitó durante 10 minutos y se separaron las capas. La capa orgánica se lavó con carbonato de sodio acuoso saturado (300 ml) y agua (300 ml) antes de filtrarla y concentrarla a presión reducida, obteniéndose un semisólido de color pardo oscuro. Se añadió acetonitrilo (250 ml) y la mezcla se calentó a 70 °C, tras lo cual se obtuvo una solución de color pardo homogénea. Se dejó que la mezcla alcanzase 60 °C, se añadió acetonitrilo adicional (200 ml), y la suspensión se agitó durante 2 h adicionales en estas condiciones, antes de dejarla enfriar lentamente a 20 °C. La suspensión obtenida se agitó durante 3 días, seguido de filtración y lavado del sólido con CH3CN (250 ml). Después de secar a presión reducida a 48 °C durante 20 h, se obtuvo (1S,3R)-3-acetamido-N-(4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)-5-fluoropiridin-2-il)ciclohexano-1-carboxamida (49,2 g, 119 mmol) en forma de un sólido cristalino de color blanquecino. 1H RMN (400 MHz, CDCb, 20 °C) 1,08 - 1,23 (1H, m), 1,33 (6H, s), 1,37 - 1,58 (3H, m), 1,88 - 1,94 (1H, m), 1,96 - 2,01 (5H, m), 2,26 (1H, d), 2,38 - 2,42 (1H, m), 3,00 (2H, s), 3,80 - 3,91 (1H, m), 3,93 (2H, s), 5,47 (1H, d), 8,00 (1H, d), 8,09 - 8,17 (2H, m), 8,31 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ 414. Consistente con la caracterización del ejemplo 25
Los cristales de (1 S,3R)-3-acetamido-N-(4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)-5-fluoropiridin-2-il)ciclohexano-1-carboxamida obtenidos mediante el procedimiento descrito en el ejemplo 86 se analizaron mediante XRPD. Los resultados se tabulan a continuación y se muestran en la figura 5, confirmando que el sólido contiene exclusivamente la forma B.
Los picos principales de la forma B de (1S,3R)-3-acetamido-N-(4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)-5-fluoropiridin-2-il)ciclohexano-1-carboxamida se muestran en la tabla 3 a continuación:
Figure imgf000155_0002
De acuerdo con la presente invención, se proporciona una forma cristalina, la forma B, que tiene un patrón de difracción de rayos X de polvo con picos específicos en aproximadamente 2-theta = 8,3, 11,0, 13,1, 16,6, 19,4, 20,4, 22,3, 27,0, 27,2 y 28,6°. El análisis por DSC indicó que la forma B se funde con un punto de inicio a 191 °C y un pico a 193 °C. El TGA indicó que la forma B muestra una pérdida de masa de aproximadamente un 1,6 %, tras calentarla de 22 °C a 210 °C. EN la figura 6 se muestra un termograma de DSC/TGA representativo.
Conversión de la forma A en la form a B
Se añadieron 100 mg de (1S,3R)-3-acetamido-N-(4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)-5-fluoropiridin-2-il)ciclohexano-1-carboxamida, forma A (aislado del ejemplo 25) en un vial de 20 ml. AL vial, se le añadieron 2,0 ml de acetona, obteniéndose una suspensión. La suspensión resultante se agitó a temperatura ambiente durante el fin de semana y después se secó al aire mediante evaporación. El sólido de color blanco resultante se caracterizó e identificó como (1S,3R)-3-acetamido-N-(4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)-5-fluoropiridin-2-il)ciclohexano-1-carboxamida, forma B.
Los procedimientos utilizados para preparar el material de partida 4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pi razol-3-il)-5-fluoropiridin-2-amina se describen a continuación:
Preparación de 5-fluoro-4-vodop¡rid¡n-2-am¡na
Figure imgf000155_0001
Se cargó un recipiente de hidrogenación de acero de 5 l con amoniaco acuoso (26 %; 777 g, 11,9 mol) y 2,5-difluoro-4-yodopiridina (220 g, 913 mmol). La mezcla se enfrió a 5 °C, y se añadió lentamente NMP (500 ml) a lo largo de unos minutos (desprendimiento de gas). Se selló el vial y después se calentó la mezcla de reacción a 100 °C. Después de 36 h, se redujo la mezcla de reacción a 90 °C, y la reacción se mantuvo en estas condiciones durante 3,5 días. Después se enfrió la mezcla a 5 °C, y se añadieron MTBE (1 l) y agua (500 ml). La capa acuosa se extrajo con MTBE (2 * 500 ml), y las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua (200 ml), se filtraron y se concentraron a presión reducida. El sólido de color amarillo pálido se reconcentró a partir de MTBE (2 * 500 ml), y después se añadió tolueno (400 ml). La mezcla resultante se calentó a 70 °C, y se obtuvo una solución homogénea de color pardo. Se añadió lentamente heptano (500 ml). Después, se dejó que la solución homogénea alcanzase 18 °C en un baño de agua, y los núcleos de cristalización se añadieron una vez que la mezcla había alcanzado 42 °C. La mezcla se agitó durante una noche en estas condiciones. Se filtró la suspensión, y el sólido recogido se lavó con tolueno al 45 % en heptano (200 ml), seguido de secado a presión reducida a 40 °C, obteniéndose 5-fluoro-4-yodopiridin-2-amina (111 g, 51 %) en forma de un sólido de color gris pálido. 1H RMN (400 MHz, CDCla, 20 °C) 4,52 (2H, s a), 6,89 (1H, d), 7,79 (1H, s).
Preparación de 4-(5.5-d¡met¡l-5.6-d¡h¡dro-4H-p¡rrolori.2-b1p¡razol-3-il)-5-fluorop¡r¡d¡n-2-am¡na
Figure imgf000156_0001
Se añadieron carbonato de potasio (63,1 g, 457 mmol) y Pd(dppf)Cl2 (2,67 g, 3,66 mmol) secuencialmente en atmósfera de nitrógeno a una mezcla desgasificada de 5-fluoro-4-yodopiridin-2-amina (43,5 g, 182,8 mmol) y 5,5-dimetil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol (86 g, 210 mmol; 64 % en peso, preparado de acuerdo con el ejemplo 85) en acetonitrilo (400 ml) y agua (400 ml). La mezcla bifásica de color rojo pálido se calentó a 50 °C y se agitó vigorosamente durante 5 h. Se enfrió la reacción y después se añadió acetato de etilo (400 ml). Se separaron las capas, y la capa orgánica se lavó con agua (200 ml). Se añadió el depurador de Pd Silicycle (SilaMetS)-tiol, (n.° de cat. R51030B, 10 g) a la capa orgánica y después se dejó la mezcla en agitación durante una noche a 20 °C. Se filtró la mezcla y el filtrado se concentró a presión reducida, obteniéndose un sólido de color pardo. Se añadió isopropanol (200 ml), y la mezcla se calentó a 70 °C, lo que proporcionó una solución homogénea de color pardo oscuro. Después, la mezcla se enfrió lentamente a 20 °C y después se agitó durante 15 h. La suspensión obtenida se filtró y el sólido se recogió y se lavó con isopropanol frío (4 °C) (3 * 30 ml), obteniéndose 4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)-5-fluoropiridin-2-amina (32 g, 71 %) en forma de un sólido de color pardo. 1H RMN (400 MHz, CDCb, 20 °C) 1,34 (6H, s), 2,91 (2H, s), 3,95 (2H, s), 4,30 (2H, s), 6,51 (1H, d), 7,89 (1H, s), 7,93 (1H, d). m/z: ES+ [M+H]+ 247.

Claims (15)

REIVINDICACIONES
1. Un compuesto de fórmula I para su uso en el tratamiento del cáncer:
Figure imgf000157_0001
A es C(R5) o N;
R5 es H, alquilo C1-3, CN o halógeno;
R2 es heterocicloalquilo de 3-7 miembros o cicloalquilo de 3-7 miembros;
opcionalmente sustituido con uno a tres sustituyentes independientemente
seleccionados entre el grupo que consiste en R10, OR10, SR10, S(O)R10, S(O)2 R10, C(O)R10, C(O)OR10, OC(O)R10, OC(O)OR10, NH2 , NHR10, N(R10)2 , NHC(O)H, NHC(O)R10, NR10C(O)H, N R10C(O)R10, NHS(O)2R10, NR10S(O)2R10, NHC(O)OR10, NR10C(O)OR10, NHC(O)NH2, NHC(O)NHR10, NHC(O)N(R10)2, NR10C(O)NH2, NR10C(O)NHR10, NR10C(O)N(R10)2, C(O)NH2, C(O)NHR10, C(O)N(R10)2, C(O)NHOH, C(O)NHOR10, C(O)NHS(O)2R10, C(O)N R10S(O)2R10, S(O)2NH2 , S(O)2NHR10, S(O)2N(R10)2 , S(O)2 NHC(O)OR10, S(O)2 NR10C(O)OR10, C(O)H, C(O)OH, OH, CN, NO2 , F, Cl, Br y I; en donde uno o más grupos CH2 del anillo pueden reemplazarse opcionalmente por un número correspondiente de grupos -C(O), uno o más átomos de azufre o nitrógeno del anillo pueden oxidarse opcionalmente para formar S-óxidos o N-óxidos;
R10, en cada aparición, se selecciona independientemente entre el grupo que consiste en un grupo cicloalquilo o heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros, alquilo C1-6, -O-alquilo C1-6, alquil C1-6-O-alquilo C1-6, NH2 , C(O)NH2 , C(O)H, C(O)OH, OH, CN, NO2 , F, Cl, Br y I; en donde dos grupos R10, junto con los átomos a los que están unidos, pueden formar un grupo cicloalquilo o heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros; y cada grupo R10 alquilo, cicloalquilo y heterocicloalquilo anteriormente mencionado puede estar sustituido adicionalmente con uno o dos sustituyentes seleccionados independientemente entre CN, OH, halógeno, alquilo C1-3, -O-alquilo C1-3, NH2 , NH-alquilo C1-3 y NHC(O)-alquilo C1-3; R4 es
Figure imgf000157_0002
en donde X e Y, junto con los átomos a los que están unidos, forman un anillo heterocicloalquilo de 5 a 7 miembros que, además del nitrógeno de puente, puede contener uno o dos heteroátomos seleccionados entre N, O y S, anillo que puede estar saturado o parcialmente saturado; en donde uno o dos grupos CH2 del anillo pueden reemplazarse opcionalmente por un número correspondiente de grupos -C(O), uno o más átomos de azufre o nitrógeno del anillo pueden oxidarse opcionalmente para formar S-óxidos o N-óxidos y en donde el anillo puede estar sustituido en un carbono del anillo por uno o dos sustituyentes R10 o en un nitrógeno del anillo por un sustituyente R12;
J es N o CR11; y
R11 es H, alquilo C1-3;
R12 se selecciona, en cada aparición, independientemente entre el grupo que consiste en un grupo cicloalquilo o heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros, alquilo C1-6, alquil C1-6-O-alquilo C1-6, C(O)NH2 , C(O)H; en donde el grupo R12 alquilo, cicloalquilo y heterocicloalquilo puede estar sustituido adicionalmente con uno o dos sustituyentes seleccionados independientemente entre CN, OH y halógeno, alquilo C1-3, NH2 y NH-alquilo C1-3, NHC(O)-alquilo C1-3 o sales farmacéuticamente aceptables del mismo;
además, en donde el cáncer es una neoplasia maligna hematológica seleccionada entre leucemia mieloide aguda, mieloma múltiple, leucemia linfocítica crónica, linfoma difuso de linfocitos B grandes, linfoma de Burkitt, linfoma folicular o un tumor sólido seleccionado entre cáncer de mama, cáncer de pulmón, neuroblastoma y cáncer de colon.
2. Compuesto para su uso de acuerdo con la reivindicación 1, en donde el cáncer es una neoplasia maligna hematológica seleccionada entre leucemia mieloide aguda, mieloma múltiple, leucemia linfocítica crónica, linfoma difuso de linfocitos B grandes, linfoma de Burkitt y linfoma folicular.
3. Compuesto para su uso de acuerdo con la reivindicación 1, en donde el cáncer es leucemia mieloide aguda.
4. Compuesto para su uso de acuerdo con la reivindicación 1, en donde el cáncer es linfoma difuso de linfocitos B grandes.
5. Compuesto para su uso de acuerdo con la reivindicación 1, en donde A es C(R5).
6. Compuesto para su uso de acuerdo con la reivindicación 5, en donde R5 es cloro o flúor.
7. Compuesto para su uso de acuerdo con la reivindicación 1, en donde R2 es un cicloalquilo de 3-7 miembros, opcionalmente sustituido con NHCOR10 o R10
8. Compuesto para su uso de acuerdo con la reivindicación 7, en donde R2 se selecciona entre ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo y cicloheptilo.
9. Compuesto para su uso de acuerdo con la reivindicación 8, en donde R2 es ciclopentilo o ciclohexilo.
10. Compuesto para su uso de acuerdo con la reivindicación 9, en donde R2 es ciclohexilo sustituido con NHCOR10.
11. Compuesto para su uso de acuerdo con la reivindicación 1, en donde R2 es heterocicloalquilo de 3-7 miembros, opcionalmente en donde R2 está sustituido con NHCOR10.
12. Compuesto para su uso de acuerdo con la reivindicación 1, en donde X e Y, junto con los átomos a los que están unidos, forman un anillo heterocicloalquilo de 6 miembros, opcionalmente en donde el anillo heterocicloalquilo de 6 miembros contiene un heteroátomo adicional que es oxígeno o nitrógeno.
13. Compuesto para su uso de acuerdo con la reivindicación 1, en donde X e Y, junto con los átomos de carbono a los que están unidos, forman un anillo heterocicloalquilo de 5 miembros, opcionalmente en donde un CH2 en el anillo heterocicloalquilo de 5 miembros está sustituido con dos grupos metilo.
14. Compuesto para su uso de acuerdo con la reivindicación 1, en donde X e Y, junto con los átomos de carbono a los que están unidos, forman un anillo heterocicloalquilo de 7 miembros.
15. Compuesto para su uso de acuerdo con la reivindicación 1, que es (1S,3R)-3-acetamido-N-(5-cloro-4-(5,5-dimetil-5,6-dihidro-4H-pirrolo[1,2-b]pirazol-3-il)piridin-2-il)ciclohexanocarboxamida, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
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