ES2897422T3

ES2897422T3 - Compuestos pirroles como inhibidores de proteínas cinasas ERK y composiciones farmacéuticas que contienen esos compuestos

Info

Publication number: ES2897422T3
Application number: ES19199330T
Authority: ES
Inventors: Gabriel Martinez-Botella; Michael Hale; François Maltais; Qing Tang; Judith Straub
Original assignee: Vertex Pharmaceuticals Inc
Current assignee: Vertex Pharmaceuticals Inc
Priority date: 2004-05-14
Filing date: 2005-05-13
Publication date: 2022-03-01
Anticipated expiration: 2025-05-13
Also published as: ES2751761T3; EP3608315B1; HK1203505A1; USRE47318E1; HUE047130T2; CN1976919A; ZA200609975B; US20060106069A1; EP2799434A1; EP1753738A1; JP2007537295A; US20230183276A1; USRE49500E1; UA84930C2; NO20065727L; EP3305776B1; RU2006144445A; ES2513965T3; AR051735A1; US7354939B2

Abstract

El compuesto **(Ver fórmula)**

Description

DESCRIPCIÓN

Compuestos pirróles como inhibidores de proteínas cinasas ERK y composiciones farmacéuticas que contienen esos compuestos

Campo técnico de la invención

La presente invención se refiere a compuestos útiles como inhibidores de las proteínas cinasas y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos. La invención también proporciona composiciones farmacéuticamente aceptables que contienen los compuestos de la invención.

Antecedentes de la invención

La búsqueda de nuevos agentes terapéuticos se ha visto auxiliada en gran medida en los últimos años por una mejor comprensión de la estructura de las enzimas y otras biomoléculas asociadas a enfermedades que son el objetivo. Una clase importante de enzimas que ha sido objeto de un extenso estudio es la de las proteínas cinasas.

Las proteínas cinasas constituyen una gran familia de enzimas relacionadas estructuralmente que son responsables del control de diversos procesos de transducción de la señal dentro de la célula. (Véase, Hardie, G. y Hanks, S. (1995) The Protein Kinase Facts Book, I y II, Academic Press, San Diego, CA). Se cree que las proteínas cinasas han evolucionado de un gen ancestral común debido a la conservación de su estructura y función catalítica. Casi todas las cinasas tienen un dominio catalítico similar de 250 a 300 aminoácidos. Las cinasas se pueden categorizar en familias por los sustratos a los que fosforilan (por ejemplo, proteína-tirosina, proteína-serina/treonina, lípidos, etc.). Se han identificado motivos de secuencia que corresponden generalmente a los de cada una de esas familias de cinasas (véase, por ejemplo, Hanks, S.K., Hunter, T., FASEB J., 9:576-596 (1995); Knighton et al., Science, 253:407-414 (1991); Hiles et al., Cell, 70:419-429 (1992); Kunz et al., Cell,73:585-596 (1993); Garcia-Bustos et al., EMBO J., 13:2352-2361 (1994)).

En general, las proteínas cinasas actúan de mediadores en la señalización intracelular al efectuar una transferencia de fosforilo desde un nucleósido trifosfato a un aceptor de proteína que está implicado en una vía de señalización. Estas fosforilaciones actúan como interruptores moleculares de encendido/apagado que pueden modular o regular la función biológica de la proteína diana. Estas fosforilaciones son en última instancia activadas en respuesta a diversos estímulos extracelulares y otros. Los ejemplos de dichos estímulos incluyen señales de estrés ambiental y químico (por ejemplo, shock osmótico, shock de calor, radiación ultravioleta, endotoxina bacteriana y H2O2), citocinas (por ejemplo, interleucina-1 (IL-1) y factor de necrosis tumoral a (TNF-a)), y factores de crecimiento (por ejemplo, factor estimulante de las colonias de granulocitos y macrófagos (GM-CSF) y factor de crecimiento de fibroblastos (FGF)). Un estímulo extracelular puede afectar a una o más respuestas celulares relacionadas con la multiplicación celular, la migración, la diferenciación, la secreción de hormonas, la activación de los factores de transcripción, la contracción muscular, el metabolismo de la glucosa, el control de la síntesis de proteínas y la regulación del ciclo celular.

Muchas enfermedades están asociadas a respuestas celulares anómalas activadas por acontecimientos mediados por proteínas cinasas. Estas enfermedades incluyen enfermedades autoinmunitarias, enfermedades inflamatorias, osteopatías, enfermedades metabólicas, neuropatías y enfermedades neurodegenerativas, cáncer, enfermedades cardiovasculares, alergias y asma, enfermedad de Alzheimer y enfermedades hormonales. En consecuencia, se ha hecho un esfuerzo importante en la química medicinal por encontrar inhibidores de las proteínas cinasas que sean eficaces como agentes terapéuticos. No obstante, considerando la ausencia de opciones de tratamiento disponibles en la actualidad para la mayoría de las afecciones asociadas a la proteínas cinasas, existe todavía una gran necesidad de nuevos agentes terapéuticos que inhiban estas proteínas diana.

Las células de mamíferos responden a estímulos extracelulares activando cascadas de señalización que son mediadas por miembros de la familia de las proteínas cinasas activadas por mitógenos (MAP), que incluyen las cinasas reguladas por señal extracelular (ERK), las cinasas p38 MAP y las cinasas c-Jun N-terminal (JNK). Las cinasas MAP (MAPK) son activadas por diversas señales que incluyen factores de crecimiento, citocinas, radiación UV e inductores de estrés. Las MAPK son serina/treonina cinasas y su activación se produce por fosforilación dual de treonina y tirosina en el segmento Thr-X-Tyr del bucle de activación. Las MAPK fosforilan varios sustratos incluidos factores de transcripción, que a su vez regulan la expresión de conjuntos de genes específicos y así median una respuesta específica al estímulo.

ERK2 es una proteína cinasa ampliamente distribuida que alcanza su máxima actividad cuando tanto Thr183 como Tyr185 son fosforiladas por la MAP cinasa cinasa, MEK1 (Anderson et al., 1990, Nature 343, 651; Crews et al., 1992, Science 258, 478). Luego de la activación, ERK2 fosforila muchas proteínas reguladoras, incluidas las proteínas cinasas Rsk90 (Bjorbaek et al., 1995, J. Biol. Chem. 270, 18848) y MAPKAP2 (Rouse et al., 1994, Cell 78, 1027), y factores de transcripción, tales como ATF2 (Raingeaud et al., 1996, Mol. Cell Biol. 16, 1247), Elk-1 (Raingeaud et al.

1996), c-Fos (Chen et al., 1993 Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90, 10952) y c-Myc (Oliver et al., 1995, Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 210, 162). ERK2 también es un objetivo posterior de las rutas dependientes de Ras/Raf (Moodie et al., 1993, Science 260, 1658) y trasmite las señales de estas proteínas potencialmente oncógenas. Se ha demostrado que ERK2 desempeña un papel fundamental en el control negativo de la multiplicación de las células del cáncer de mama (Frey y Mulder, 1997, Cancer Res. 57, 628) y se ha informado de hiperexpresión de ERK2 en cáncer de mama humano (Sivaraman et al., 1997, J Clin. Invest. 99, 1478). También se ha implicado a ERK2 activada en la proliferación de células de músculo liso estimuladas por endotelina en las vías respiratorias, lo que sugiere un papel de esta cinasa en el asma (Whelchel et al., 1997, Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 16, 589).

La sobreexpresión de receptores tirosina cinasas, tales como EGFR y ErbB2 (Arteaga CL, 2002, Semin Oncol. 29, 3 9; Eccles SA, 2001, J Mammary Gland Biol Neoplasia 6:393-406; Mendelsolm J & Baselga J, 2000, Oncogene 19, 6550-65), así como mutaciones activantes en las proteínas Ras GTPasas (Nottage M & Siu LL, 2002, Curr Pharm Des 8, 2231-42; Adjei AA, 2001, J Natl Cancer Inst 93, 1062-74) o los mutantes B-Raf (Davies H. et al., 2002, Nature 417, 949-54; Brose et al., 2002, Cancer Res 62, 6997-7000) son importantes contribuyentes al cáncer humano. Estas alteraciones genéticas se correlacionan con un mal pronóstico clínico y resultan en la activación de la cascada de transducción de señal Raf-1/2/3 - MEK1/2 - ERK1/2 en un amplio grupo de tumores humanos. ERK activada (es decir ERK1 y/o ERK2) es una molécula de señalización central que ha sido asociada al control de la proliferación, la diferenciación, la supervivencia celular independiente del anclaje y la angiogénesis, contribuyendo a varios procesos que son importantes para la formación y el avance de los tumores malignos. Estos datos sugieren que un inhibidor de ERK1/2 ejercerá actividad pleiotrópica, por ejemplo efectos preapoptóticos, antiproliferativos, antimetastásicos y antiangiogénicos, y ofrecerá una oportunidad terapéutica contra un amplio grupo de tumores humanos.

Existe un creciente cuerpo de evidencia que implica la activación constitutiva de la ruta ERK MAPK en el comportamiento oncógeno de determinados cánceres. Se encuentran mutaciones activantes de Ras en ~30 % de todos los cánceres, con algunos, tales como cáncer pancreático (90 %) y de colon (50 %), que ostentan tasas particularmente altas de mutación (ref). También se han identificado mutaciones de Ras en 9-15 % de los melanomas, pero las mutaciones somáticas de sentido erróneo en B-Raf que confieren activación constitutiva son más frecuentes y se encuentran en 60-66 % de los melanomas malignos. Las mutaciones activantes de Ras, Raf y MEK son capaces de transformar oncógenamente los fibroblastos in vitro, y las mutaciones de Ras o Raf conjuntamente con la pérdida de un gen supresor de tumores (por ejemplo p16INK4A) pueden causar un desarrollo espontáneo del tumor in vivo. Se ha demostrado una mayor actividad de ERK en estos modelos y también ha sido comunicada ampliamente en tumores humanos apropiados. En el melanoma, la elevada actividad basal de ERK resultante de las mutaciones B-Raf o N-Ras o la activación del factor de crecimiento autocrino está bien documentada y se ha asociado al crecimiento tumoral rápido, a mayor supervivencia celular y a resistencia a la apoptosis. Además, la activación de ERK se considera una fuerza conductora importante detrás del comportamiento altamente metastásico del melanoma asociado a una mayor expresión tanto de proteasas degradantes de la matriz extracelular como de integrinas que promueven la invasión así como de la disminución de las moléculas de adhesión E-cadherina que normalmente median las interacciones de los queratinocitos para controlar el crecimiento de los melanocitos. Estos datos considerados en su conjunto, señalan a ERK como un objetivo terapéutico promisorio para el tratamiento del melanoma, una enfermedad intratable en la actualidad.

Sumario de la invención

Se ha encontrado en la actualidad que los compuestos de esta invención y composiciones farmacéuticamente aceptables de los mismos, son eficaces como inhibidores de la proteína cinasa ERK. Estos compuestos tienen las fórmulas:

o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.

Estos compuestos, sales y composiciones farmacéuticamente aceptables de los mismos, son útiles para tratar o atenuar la gravedad de diversos trastornos, especialmente trastornos proliferativos, tales como el cáncer.

Los compuestos provistos por esta invención también son útiles para el estudio de las cinasas en fenómenos biológicos y patológicos y el estudio de las vías de transducción intracelular de señales mediadas por dichas cinasas, y la evaluación comparativa de nuevos inhibidores de las cinasas.

Descripción detallada de ciertas realizaciones de la invención

1. Descripción general de los compuestos de la invención:

La presente invención se refiere a compuestos de fórmulas:

o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.

2. Compuestos y definiciones:

Los compuestos de esta invención incluyen los descritos precedentemente en general, y se ilustran además mediante las clases, subclases y especies dadas a conocer en el presente documento. Como se usa en el presente documento, se aplicarán las definiciones siguientes a menos que se indique lo contrario. Para los propósitos de esta invención, los elementos químicos se identifican de conformidad con la tabla periódica de los elementos, versión CAS, Handbook of Chemistry and Physics, 75a Ed. Además, otros principios generales de química orgánica se describen en "Organic Chemistry", Thomas Sorrell, University Science Books, Sausalito: 1999, y "March's Advanced Organic Chemistry", 5a Ed., Ed.: Smith, M.B. and March, J., John Wiley & Sons, Nueva York: 2o0l.

Como se usa en el presente documento, el término "profármaco" se refiere a un derivado de una molécula de fármaco precursora que requiere transformación dentro del organismo para liberar el principio activo, y que tiene mejores propiedades físicas y/o de liberación respecto a la molécula de fármaco precursora. Los profármacos se diseñan para mejorar propiedades farmacéuticas y/o farmacocinéticas asociadas a la molécula de fármaco precursora. La ventaja de un profármaco se basa en sus propiedades físicas, como mayor solubilidad en agua para la administración parenteral a pH fisiológico en comparación con el fármaco precursor, o que aumenta la absorción en el tubo digestivo, o que puede aumentar la estabilidad del fármaco en el almacenamiento a largo plazo. En los últimos años se han explorado varios tipos de derivados biorreversibles para utilizar en el diseño de profármacos. El uso de ésteres como un tipo de profármaco para fármacos que contienen una función carboxilo o hidroxilo es conocido en la técnica, como se describe por ejemplo en "The Organic Chemistry of Drug Design and Drug Interaction" Richard Silverman, publicado por Academic Press (1992).

Como se describe en el presente documento, los compuestos de la invención pueden estar opcionalmente sustituidos con uno o más sustituyentes, tales como los que se ilustran en general antes, o como se ejemplifican mediante clases, subclases y especies particulares de la invención. Se apreciará que la frase "opcionalmente sustituido" se usa indistintamente con la frase "sustituido o sin sustituir". En general, el término "sustituido", ya sea precedido por el término "opcionalmente", o no, alude al reemplazo de los radicales hidrógeno de una determinada estructura por el radical de un sustituyente especificado. A menos que se indique lo contrario, un grupo opcionalmente sustituido puede tener un sustituyente en cada posición sustituible del grupo, y cuando más de una posición en cualquier estructura determinada pueda ser sustituida con más de un sustituyente elegido de un grupo especificado, el sustituyente puede ser el mismo o diferente en cada posición.

Las combinaciones de sustituyentes previstas por esta invención son preferentemente las que resultan en la formación de compuestos estables o químicamente factibles. El término "estable", como se usa en el presente documento, se refiere a compuestos que no se alteran sustancialmente cuando son sometidos a las condiciones para permitir su producción, detección y preferentemente su recuperación, purificación y uso para uno o más de los propósitos dados a conocer en el presente documento. En algunas realizaciones, un compuesto estable o un compuesto químicamente factible es aquel que no se altera sustancialmente cuando se mantiene a una temperatura de 40 °C o menor, en ausencia de humedad u otras condiciones químicamente reactivas, durante al menos una semana.

El término "alifático" o la expresión "grupo alifático" como se usan en el presente documento, significan una cadena lineal (es decir no ramificada) o ramificada, una cadena de hidrocarburo sustituida o sin sustituir que está completamente saturada o que contiene una o más unidades de insaturación, o un hidrocarburo monocíclico que está completamente saturado o que contiene una o más unidades de insaturación, pero que no es aromático (también denominado en el presente documento como "carbociclo", "cicloalifático" o "cicloalquilo"), que tiene un solo punto de unión al resto de la molécula. En ciertas realizaciones, los grupos alifáticos contienen de 1 a 6 átomos de carbono alifáticos, y aún en otras realizaciones los grupos alifáticos contienen de 1 a 4 átomos de carbono alifáticos. En algunas realizaciones, "cicloalifático" (o "carbociclo" o "cicloalquilo") se refiere a un hidrocarburo C³-C⁶monocíclico completamente saturado o que contiene una o más unidades de insaturación, pero que no es aromático, que tiene un único punto de unión al resto de la molécula. Los grupos alifáticos adecuados incluyen, pero sin limitarse a, grupos alquilo, alquenilo o alquinilo, lineales o ramificados, sustituidos o sin sustituir e híbridos de los mismos, tales como (cicloalquil)alquilo, (cicloalquenil)alquilo o (cicloalquil)alquenilo.

El término "insaturado", como se usa en el presente documento, significa que un resto tiene una o más unidades de insaturación.

Los términos "haloalquilo", "haloalquenilo" y "haloalcoxi" significan alquilo, alquenilo o alcoxi, según el caso, sustituido con uno o más átomos de halógeno. El término "halógeno" significa F, Cl, Br o I.

El término "arilo" empleado solo o como parte de un resto más grande como un "aralquilo", "aralcoxi" o "ariloxialquilo", se refiere a sistemas de anillo monocíclicos, bicíclicos y tricíclicos que tienen un total de cinco a catorce miembros en el anillo, en donde al menos un anillo del sistema es aromático y en donde cada anillo del sistema contiene de 3 a 7 miembros. El término "arilo" se puede usar indistintamente con la expresión "anillo arilo".

Un grupo arilo (incluidos aralquilo, aralcoxi, ariloxialquilo y similares) o heteroarilo (incluidos heteroaralquilo y heteroarilalcoxi y similares) puede contener uno o más sustituyentes. Los sustituyentes adecuados en el átomo de carbono insaturado de un grupo arilo o heteroarilo se eligen entre halógeno; R^o; OR^o; SR^o; 1,2-metilenodioxi, 1,2-etilenodioxi; fenilo (Ph) opcionalmente sustituido con R^o;-O(Ph) opcionalmente sustituido con R^o; (CH²)^1-2(Ph), opcionalmente sustituido con R^o; CH=CH(Ph), opcionalmente sustituido con R^o; NO²; CN; N(R^°)²; NR^°C(O)R^°; NR^°C(O)N(R^°)²; NR^oCO²R^o; -NR^oNR^oC(O)R^o; NR^oNR^oC(O)N(R^o)²; NR^oNR^oCO²R^o; C(O)C(O)R^o; C(O)CH²C(O)R^o; CO²R^o; C(O)R^o; C(O)N(R^o)²; OC(O)N(R^o)²; S(O)²R^o; SO²N(R^o)²; S(O)R^o; NR^°SO²N(R^°)²; NR^°SO²R^°; C(=S)N(R^o)²; C(=NH)-N(r °)2; o (CH²)^o-2NHC(O)R^°donde en cada aparición independiente de R^ose elige entre hidrógeno, alifático C¹-⁶opcionalmente sustituido, un anillo heteroarilo o heterocíclico de 5-6 miembros sin sustituir, fenilo, O(Ph) o CH²(Ph), o, no obstante la definición anterior, dos apariciones independientes de R^°, en el mismo sustituyente o sustituyentes diferentes, tomados juntos con el átomo o los átomos a los cuales el grupo R^°está unido, forman un anillo cicloalquilo, heterociclilo, arilo o heteroarilo de 3 a 8 miembros que tiene 0-4 heteroátomos elegidos independientemente entre nitrógeno, oxígeno o azufre. Los sustituyentes opcionales en el grupo alifático de R^°se eligen entre NH², NH(alifático C^1-4), N(alifático Ci -4)2, halógeno, alifático C¹-⁴, OH, O(alifático C¹-⁴), NO², CN, CO²H, CO²(alifático C¹-⁴), O(haloalifático C¹-⁴) o haloalifático C¹-⁴, en donde cada uno de los grupos alifáticos C^1-4precedentes de R^ono está sustituido.

Un grupo alifático o heteroalifático o un anillo heterocíclico no aromático puede contener uno o más sustituyentes. Los ejemplos de sustituyentes adecuados en el carbono saturado de un grupo alifático o heteroalifático, o de un anillo heterocíclico no aromático se eligen entre los enumerados antes para el carbono insaturado de un grupo arilo o heteroarilo e incluyen además los siguientes: =O, =S, =NNHR*, =NN(R*)², =NNHC(O)R*, =NNHCO²(alquilo), =NNHSO²(alquilo) o =NR*, donde cada R* se elige independientemente entre hidrógeno o un alifático C¹-⁶opcionalmente sustituido. Los sustituyentes opcionales en el grupo alifático de R* se eligen entre NH², NH(alifático C¹-⁴), N(alifático C¹-⁴)², halógeno, alifático C¹-⁴, Oh , O(alifático C¹-⁴), NO², CN, CO²H, CO²(alifático C¹-⁴), O(haloalifático C¹-⁴) o haloalifático C¹-⁴, en donde cada uno de los grupos alifáticos C¹-⁴precedentes de R* no está sustituido.

Los sustituyentes opcionales en el nitrógeno de un anillo heterocíclico no aromático se eligen entre R⁺, N(R⁺)², C(O)R⁺, CO²R⁺, C(O)C(O)R⁺, C(O)CH²C(O)R⁺, SO²R⁺, SO²N(R⁺)², C(=S)N(R⁺)², C(=NH)-N(R⁺)²o NR⁺SO²R⁺; en donde R⁺es hidrógeno, un alifático C¹-⁶opcionalmente sustituido, fenilo opcionalmente sustituido, O(Ph) opcionalmente sustituido, CH²(Ph) opcionalmente sustituido, (CH²)^1-2(Ph) opcionalmente sustituido; CH=CH(Ph) opcionalmente sustituido; o un anillo heteroarilo o heterocíclico de 5-6 miembros sin sustituir que tiene uno a cuatro heteroátomos elegidos independientemente entre oxígeno, nitrógeno o azufre, o, no obstante la definición anterior, dos apariciones independientes de R⁺, en el mismo sustituyente o sustituyentes diferentes, tomados junto con el átomo o los átomos a los cuales cada grupo R⁺está unido, forman un anillo cicloalquilo, heterociclilo, arilo o heteroarilo de 3-8 miembros que tiene 0-4 heteroátomos elegidos independientemente entre nitrógeno, oxígeno o azufre. Los sustituyentes opcionales en el grupo alifático o el anillo fenilo de R⁺se eligen entre NH², NH(alifático C¹-⁴), N(alifático C¹-⁴)², halógeno, alifático C¹-⁴, OH, O(alifático C¹-⁴), NO², CN, CO²H, CO²(alifático C¹-⁴), O(haloalifático C¹-⁴) o halo (alifático C¹-⁴), en donde cada uno de los grupos alifáticos C¹-⁴precedentes de R⁺no está sustituido.

Salvo indicación en contrario, las estructuras descritas también están destinadas a incluir todos los isómeros (por ejemplo, enantiómeros, diastereoisómeros e isómeros geométricos (o conformacionales)) de la estructura; por ejemplo, las configuraciones R y S para cada centro asimétrico, los isómeros de doble enlace (Z) y (E), y los isómeros conformacionales (Z) y (E). Por consiguiente, los isómeros estereoquímicos individuales así como las mezclas de enantiómeros, diastereoisómeros e isómeros geométricos (o conformacionales) de los compuestos de la presente invención están comprendidos por el alcance de la misma. A menos que se indique lo contrario, todos los tautómeros de los compuestos de la invención están comprendidos por el alcance de ésta. Además, a menos que se indique lo contrario, las estructuras descritas en el presente documento también pretenden incluir los compuestos que difieren únicamente en la presencia de uno o más átomos enriquecidos isotópicamente. Por ejemplo, los compuestos que tienen las estructuras de la presente, excepto por el remplazo de un átomo de hidrógeno por un deuterio o tritio, o el remplazo de un átomo de carbono por un carbono enriquecido en ¹³C o ¹⁴C, están comprendidos por el alcance de la invención. Dichos compuestos son útiles, por ejemplo, como herramientas analíticas o sondas en ensayos biológicos.

2. Métodos generales para proporcionar los presentes compuestos:

Los compuestos de esta invención se pueden preparar o aislar en general mediante métodos de síntesis y/o pseudo síntesis conocidos por los expertos en la materia para compuestos análogos y como se ilustra mediante los esquemas generales I, II y III a continuación y los ejemplos preparativos siguientes.

Esquema I

Reactivos y condiciones: (a) i ICI, CH2CI2, ii NaOMe, MeOH; (b) PG-Cl, DMAP, trietilamina; (c) Pd(dppf); (d) R1-NH2; (e) Pd(PPh3)4, 4; (f) desprotección/saponificación; (g) condiciones de acoplamiento.

El Esquema general I anterior muestra un método general para preparar los compuestos de la presente invención. En el paso (a), el compuesto pirrol 1 es yodado y esterificado para formar 2. En el paso (b), el resto pirrol se protege opcionalmente en el -NH- con un grupo protector de amino adecuado para formar 3. Los grupos protectores de amino son bien conocidos en la técnica y se describen en detalle en Protecting Groups in Organic Synthesis, Theodora W. Greene y Peter G. M. Wuts, 1991, publicado por John Wiley and Sons. El resto de yodo del compuesto 3 es desplazado por un ácido o éster borónico apropiado. Como se describe más adelante, se utiliza bis(pinacolato)diborano para formar el compuesto 4 sin embargo se pueden emplear otros ésteres o ácidos borónicos para esta reacción que serán evidentes para los expertos en la materia.

Debido a que los compuestos de la presente están relacionados con un resto de piridina multisustituida, se considera el orden de reacción y se utilizan métodos para activar las posiciones en la piridina para dirigir la regioquímica. En el paso (d) anterior, el primer grupo saliente L1 puede ser desplazado por un alcohol, amina o tiol según se desee. Un experto en la materia comprenderá que se pueden usar diversos grupos salientes L1 para esta reacción. Los ejemplos de tales grupos incluyen, pero no se limitan a, halógeno y éteres activados. Esta reacción puede ser seguida, en el paso (e), por el remplazo de un segundo grupo saliente L2 a través de una reacción de acoplamiento catalizada por un metal o un desplazamiento nucleofílico para formar el compuesto 7. Un experto en la materia comprenderá que se pueden usar diversos grupos salientes L2 para esta reacción. Los ejemplos de dichos grupos incluyen, pero no se limitan a, halógeno, éteres activados, ácido borónico o ésteres borónicos.

En el paso (f), el grupo protector del resto de pirrol se retira por métodos adecuados para retirar el grupo protector de amino usado. Dependiendo de qué grupo protector de amino se use, las condiciones adecuadas para eliminarlo pueden saponificar simultáneamente o de lo contrario proporcionar el resto carboxilato como se describió antes para el compuesto 8. Si las condiciones adecuadas para retirar el grupo protector de amino no son adecuadas para proporcionar el compuesto carboxilato 8, entonces se debe emplear otro paso. Los compuestos de fórmula I se prepararon a partir de 8 acoplando el carboxilato resultante con una amina deseada como se describe en el paso (g). Un experto en la materia comprenderá que diversas condiciones son útiles para dicha reacción de acoplamiento y pueden incluir el paso de activación del resto carboxilato del compuesto 8 antes de, o simultáneamente con, el tratamiento con la amina deseada. Tales condiciones incluyen, pero no se limitan a, las descritas en detalle en la sección de ejemplos siguiente.

Esquema II

Reactivos y condiciones: (a) AC²O/H²O²; (b) HNO³/H²SO⁴; (c) R¹-NH²; (d) L².

El esquema II anterior describe una ruta alternativa para preparar el compuesto intermedio 6 útil para la preparación de los compuestos de la presente invención. En el paso (a), el N-óxido del compuesto 9 se prepara mediante tratamiento con peróxido. El N-óxido compuesto 10 se trata después con ácido nítrico para formar el compuesto nitro 11. El grupo L¹de 11 es desplazado con la amina deseada R¹-NH²para formar 12 y después se introduce el grupo L²en el paso (d) para obtener el compuesto intermedio 6. El compuesto 6 se puede utilizar después para preparar los compuestos de la presente invención según el esquema general I anterior y los ejemplos que se proporcionan más adelante.

Esquema III

El esquema III anterior muestra un método alternativo para preparar el compuesto 7 a partir de 6. En este método, el grupo L2 del compuesto piridinilo 6 es desplazado por un ácido borónico o éster derivado para formar 13, en donde Rx y Ry tienen los significados definidos posteriormente para los compuestos de fórmula A. Este resto boronato es desplazado después por el grupo saliente L3 del pirrol descrito anteriormente, en donde que L3 es un grupo saliente adecuado, para formar el compuesto 7. El compuesto 7 se usa después para preparar los compuestos de la presente invención por los métodos expuestos antes en los esquemas I y II, por los descritos en la sección de ejemplos y por métodos conocidos por los expertos en la materia.

Un experto en la materia comprenderá que se pueden preparar diversos compuestos de la presente invención según el método general de los esquemas I, II y III, y los Ejemplos de síntesis expuestos a continuación.

De acuerdo con otro caso, la presente solicitud se refiere a un compuesto de fórmula A:

o una sal del mismo, en donde:

PG es un grupo protector de amino adecuado;

Rz es un grupo protector de carboxilato adecuado; y

Rx y Ry son independientemente hidrógeno o alifático C1-6 opcionalmente sustituido, o:

Rx y Ry se toman juntos para formar un anillo de 5-7 miembros opcionalmente sustituido.

Los grupos protectores de amino adecuados son bien conocidos en la técnica e incluyen los descritos en detalle en Protecting Groups in Organic Synthesis, Theodora W. Greene y Peter G. M. Wuts, 1991, publicado por John Wiley and Sons. En ciertas realizaciones, el grupo PG de A es un resto alquilo o arilsulfonilo. Los ejemplos de tales grupos incluyen mesilo, tosilo, nosilo, brosilo y 2,4,6-trimetilbencenosulfónico ("Mts"). Otros ejemplos de tales grupos son Bn, PMB, Ms, Ts, SiRs, MOM, BOM, Tr, Ac, CO2R, CH2OCH2CH2Si(CHs)3.

Los grupos protectores de carboxilato adecuados son bien conocidos en la técnica y se describen en detalle en Protecting Groups in Organic Synthesis, Theodora W. Greene y Peter G. M. Wuts, 3a edición, 1999, publicado por John Wiley and Sons. En cierta realizaciones, el grupo Rz de A es un grupo alifático C1-6 opcionalmente sustituido o un grupo arilo opcionalmente sustituido. Los ejemplos de grupos Rz adecuados incluyen metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, bencilo y fenilo en donde cada grupo está opcionalmente sustituido.

En ciertos casos, uno o ambos de Rx y Ry son hidrógeno.

En otros casos, Rx y Ry se toman juntos para formar un anillo de 5-6 miembros opcionalmente sustituido. Aún en otras realizaciones, Rx y Ry se toman juntos para formar un resto 4,4,5,5-tetrametildioxaborolano. Otros derivados boronato adecuados contemplados incluyen ácido borónico, B(O-alifático C1-10)2 y B(O-arilo)2.

De acuerdo con otro caso más, la presente solicitud proporciona un compuesto de fórmula B:

o una sal del mismo, en donde:

R¹es un grupo alifático C¹-⁶, en donde R¹está opcionalmente sustituido con hasta 2 grupos elegidos independientemente entre -OR o -haloalquilo C¹-³;

cada R es independientemente hidrógeno o alifático C¹-⁴;

R³es hidrógeno, alifático C¹-³, flúor o cloro; y

L²es un grupo saliente adecuado.

En ciertos casos, la presente solicitud proporciona un compuesto de fórmula B, como se definió en general y en las clases y subclases descritas antes y en esta sección, en donde L²no es yodo cuando R³es cloro y R¹es isopropilo.

Un grupo saliente adecuado es un grupo químico que es desplazado fácilmente por un resto químico entrante deseado. Por lo tanto, la elección de un grupo saliente adecuado específico depende de su capacidad para desplazar fácilmente al resto químico entrante de fórmula A. Los grupos salientes adecuados son bien conocidos en la técnica, por ejemplo, véase, "Advanced Organic Chemistry," Jerry March, 5a Ed., pág. 351-357, John Wiley and Sons, N.Y. Tales grupos salientes incluyen, pero no se limitan a, halógeno, grupos alcoxi, sulfoniloxi, alquilsulfonilo opcionalmente sustituido, alquenilsulfonilo opcionalmente sustituido, arilsulfonilo opcionalmente sustituido y diazonio. Los ejemplos de grupos salientes adecuados incluyen cloro, yodo, bromo, flúor, metanosulfonilo (mesilo), tosilo, triflato, nitrofenilsulfonilo (nosilo) y bromofenilsulfonilo (brosilo). En ciertos casos, el grupo L²de B es yodo.

De acuerdo con un caso alternativo, el grupo saliente adecuado se puede generar in situ dentro del medio de reacción. Por ejemplo, L²en un compuesto de fórmula B se puede generar in situ a partir de un precursor de ese compuesto de fórmula B, en donde dicho precursor contiene un grupo que es fácilmente reemplazado por L² in situ. En una ilustración específica de un reemplazo de ese tipo, dicho precursor de un compuesto de fórmula B contiene un grupo (por ejemplo, un grupo cloro o un grupo hidroxilo) que es reemplazado in situ por L², tales como un grupo yodo. La fuente del grupo yodo puede ser, por ejemplo, yoduro de sodio. La generación in situ de un grupo saliente adecuado de ese tipo es bien conocida en la técnica, por ejemplo, véase, "Advanced Organic Chemistry," Jerry March, pág. 430-431, 5a Ed., John Wiley and Sons, N.Y.

De acuerdo con ciertos casos, el resto R¹de fórmula B, es un grupo alifático C¹-⁴opcionalmente sustituido con -OR o -haloalquilo C¹-³. En ciertas realizaciones, el resto R¹de fórmula B es un grupo alifático C¹-⁴opcionalmente sustituido con -OH, -CH²F, -CHF²o -CF³. En otras realizaciones, el resto R¹de fórmula B es un grupo alifático C¹-⁴opcionalmente sustituido con -OH. Aún en otras realizaciones, R¹no está sustituido.

De acuerdo con otro caso, el resto R¹de fórmula B es isopropilo, 2-butilo, ciclopropilo o etilo, en donde cada resto está opcionalmente sustituido con -OH o -CF³.

En otros casos, el resto R³de fórmula B es hidrógeno, metilo o cloro.

Un compuesto de fórmula B se puede preparar a partir de un compuesto de fórmula B':

o una sal del mismo, en donde:

R3 es hidrógeno, alifático C-i-3, flúor o cloro; y

L1 y L2 son cada uno independientemente un grupo saliente adecuado.

En ciertos casos, la presente solicitud proporciona un compuesto de fórmula B', como se definió en general y en las clases y subclases descritas antes y en esta sección, en donde L2 no es un resto boronato cuando R3 es cloro y R1 es flúor.

En ciertos casos, se proporciona un compuesto de B' en donde L2 es -B(ORx)(ORy). En otras realizaciones, uno o ambos de Rx y Ry son hidrógeno. En otras realizaciones, Rx y Ry se toman juntos para formar un anillo de 5-6 miembros opcionalmente sustituido. Aún en otras realizaciones, Rx y Ry se toman juntos para formar un resto 4,4,5,5-tetrametildioxaborolano.

Como se ha descrito anteriormente, un grupo saliente adecuado es un grupo químico que es desplazado fácilmente por un resto químico entrante deseado. Los grupos salientes adecuados son bien conocidos en la técnica, por ejemplo, véase, "Advanced Organic Chemistry," Jerry March, 5a Ed., pág. 351-357, John Wiley and Sons, N.Y. Dichos grupos salientes incluyen. pero no se limitan a, halógeno, grupos alcoxi, sulfoniloxi, alquilsulfonilo opcionalmente sustituido, alquenilsulfonilo opcionalmente sustituido, arilsulfonilo opcionalmente sustituido y diazonio. Los ejemplos de grupos salientes adecuados incluyen cloro, yodo, bromo, flúor, metanosulfonilo (mesilo), tosilo, triflato, nitrofenilsulfonilo (nosilo) y bromofenilsulfonilo (brosilo). En ciertas realizaciones, el resto L1 de B' es halógeno. En otra realización, el resto L1 de B' es un grupo alquilsulfonilo opcionalmente sustituido, alquenilsulfonilo opcionalmente sustituido o arilsulfonilo opcionalmente sustituido. En otras realizaciones, el resto L1 de B' es flúor.

De acuerdo con un caso alternativo, el grupo saliente adecuado se puede generar in situ dentro del medio de reacción. Por ejemplo, los grupos L1 o L2 en un compuesto de fórmula B' se pueden generar in situ a partir de un precursor de ese compuesto de fórmula B', en donde dicho precursor contiene un grupo que es fácilmente reemplazado por L1 o L2 in situ. La generación in situ de un grupo saliente adecuado de ese tipo es bien conocida en la técnica, por ejemplo, véase, "Advanced Organic Chemistry," Jerry March, pág. 430-431,5a Ed., John Wiley and Sons, N.Y.

De acuerdo con otro caso, la presente solicitud proporciona un método para preparar un compuesto de fórmula B:

o una sal del mismo, que comprende el paso de hacer reaccionar un compuesto de fórmula B':

o una sal del mismo, con un compuesto de fórmula R1-NH2 en donde dicha reacción se realiza en un medio adecuado y en donde:

R1 es un grupo alifático C1-6, en donde R1 está opcionalmente sustituido con hasta 2 grupos elegidos independientemente entre -OR o -haloalquilo C1-3;

R es hidrógeno o alifático C1-4;

R3 es hidrógeno, alifático C1-3, flúor o cloro; y

L1 y L2 son cada uno independientemente un grupo saliente adecuado.

En ciertos casos, dicha reacción se lleva a cabo opcionalmente en presencia de una base adecuada. Un experto en la materia comprenderá que el desplazamiento de un grupo saliente por un resto amino se logra con o sin la presencia de una base adecuada. Tales bases adecuadas son bien conocidas en la técnica e incluyen bases orgánicas e inorgánicas.

Un medio adecuado es un disolvente o una mezcla de disolventes que, en combinación con los compuestos combinados, puede facilitar el avance de la reacción entre ellos. El disolvente adecuado puede solubilizar uno o más de los componentes de la reacción, o alternativamente, el disolvente adecuado puede facilitar la agitación de una suspensión de uno o más de los componentes de la reacción. Los ejemplos de disolventes adecuados útiles en la presente invención son un disolvente prótico, un hidrocarburo halogenado, un éter, un hidrocarburo aromático, un disolvente polar o no polar aprótico, o cualquiera de las mezclas de los mismos. Tales mezclas incluyen, por ejemplo, mezclas de disolvente próticos y apróticos, tales como benceno/metanol/agua; benceno/agua; DME/agua y similares. Estos y otros disolventes adecuados son bien conocidos en la técnica, por ejemplo, véase, "Advanced Organic Chemistry," Jerry March, 5a edición, John Wiley and Sons, N.Y.

De acuerdo con otro caso más, uno o más reactivos pueden actuar como el disolvente adecuado. Por ejemplo, una base orgánica, tales como trietilamina o diisopropiletilamina, si se utiliza en dicha reacción, puede servir como el disolvente además de su rol como reactivo de basificación.

En ciertos casos, la presente solicitud proporciona un compuesto de fórmula B' en donde R1 y R3 son los definidos en general y en las clases y subclases descritas antes y en esta sección.

De acuerdo con otro aspecto, la presente solicitud proporciona un compuesto de fórmula C:

o una sal del mismo, en donde:

PG es un grupo protector de amino adecuado;

R^zes un grupo protector de carboxilato adecuado;

cada R es independientemente hidrógeno o alifático C¹-⁴; y

R³es hidrógeno, alifático C¹-³, flúor o cloro.

Como se ha indicado anteriormente, los grupos protectores de amino adecuados son bien conocidos en la técnica e incluyen los descritos en detalle en Protecting Groups in Organic Synthesis, Theodora W. Greene y Peter G. M. Wuts, 1991, publicado por John Wiley and Sons. En ciertas realizaciones, el grupo PG de C es un resto alquilo o arilsulfonilo. Los ejemplos de dichos grupos incluyen mesilo, tosilo, nosilo, brosilo y 2,4,6-trimetilbencenosulfónico ("Mts").

Los grupos protectores de carboxilato adecuados son bien conocidos en la técnica y se describen en detalle en Protecting Groups in Organic Synthesis, Theodora W. Greene y Peter G. M. Wuts, 1991, publicado por John Wiley and Sons. En ciertas realizaciones, el grupo R^zde C es un grupo alifático C¹-⁶opcionalmente sustituido o un grupo arilo opcionalmente sustituido. Los ejemplos de grupos R^zadecuados incluyen metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, bencilo y fenilo, en donde cada grupo está opcionalmente sustituido.

De acuerdo con ciertos casos, el resto R¹de fórmula C, es un grupo alifático C¹-⁴opcionalmente sustituido con -OR o -haloalquilo C¹-³. En ciertas realizaciones, el resto R¹de fórmula C es un grupo alifático C¹-⁴opcionalmente sustituido con -OH, -CH²F, -CHF²o -CF³. En otras realizaciones, el resto R¹de fórmula C es un grupo alifático C¹-⁴opcionalmente sustituido con -OH. Aún en otras realizaciones, R¹no está sustituido.

De acuerdo con otro caso, el resto R¹de fórmula C es isopropilo, 2-butilo, ciclopropilo o etilo, en donde cada resto está opcionalmente sustituido con -OH o -CF³.

En otros casos, el resto R3 de fórmula C es hidrógeno, metilo o cloro.

Aún en otro caso de la presente solicitud se refiere a un método para preparar un compuesto de fórmula C:

o una sal del mismo, que comprende el paso de hacer reaccionar un compuesto de fórmula A:

o una sal del mismo, con un compuesto de fórmula B:

o una sal del mismo, en donde dicha reacción se lleva a cabo en un medio adecuado y en donde:

PG es un grupo protector de amino adecuado;

L²es un grupo saliente adecuado.

R^zes un grupo protector de carboxilato adecuado;

R^xy R^yson independientemente hidrógeno o alifático C¹-⁶opcionalmente sustituido, o:

R^xy R^yse toman juntos para formar un anillo de 5-7 miembros opcionalmente sustituido;

cada R es independientemente hidrógeno o alifático C¹-⁴; y

R³es hidrógeno, alifático C¹-³, flúor o cloro.

En ciertos casos, dicha reacción se lleva a cabo en presencia de Ni (II), Pd (0) o Pd(II) donde cada catalizador puede estar asociado a un ligando, tales como ligandos a base de ferroceno o fosfina. En otras realizaciones, dicha reacción se lleva a cabo en presencia de Pd(PPh³)⁴.

Un medio adecuado es un disolvente o una mezcla de disolventes que, en combinación con los compuestos combinados, puede facilitar el avance de la reacción entre ellos. El disolvente adecuado puede solubilizar uno o más de los componentes de la reacción, o alternativamente, el disolvente adecuado puede facilitar la agitación de una suspensión de uno o más de los componentes de la reacción. Los ejemplos de disolventes adecuados útiles en la presente invención son un disolvente prótico, un hidrocarburo halogenado, un éter, un hidrocarburo aromático, un disolvente polar o no polar aprótico, o cualquiera de las mezclas de los mismos. Tales mezclas se incluyen, por ejemplo, mezclas de disolvente próticos y apróticos, tales como benceno/metanol/agua; benceno/agua; DME/agua y similares.

Estos y otros disolventes adecuados son bien conocidos en la técnica, por ejemplo, véase, "Advanced Organic Chemistry," Jerry March, 5a edición, John Wiley and Sons, N.Y.

En ciertos casos, la reacción entre los compuestos A y B para formar C se lleva a cabo en una mezcla de DME y agua.

En ciertos casos, la reacción entre los compuestos A y B para formar C se lleva a cabo a una temperatura que varía de entre aproximadamente 20 °Ca 150 °C. En otras realizaciones, la reacción entre los compuestos A y B para formar C se lleva a cabo con irradiación de microondas a una temperatura que varía de entre aproximadamente 100 °C a 250 °C.

Aún en otros casos, la reacción entre los compuestos A y B para formar C se lleva a cabo a un pH algo básico. De acuerdo con otro caso, la presente solicitud proporciona un profármaco de un compuesto de fórmula I en donde dicho profármaco tiene la fórmula II:

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde:

R¹es un grupo alifático C¹-⁶, en donde R¹está opcionalmente sustituido con hasta 2 grupos elegidos independientemente entre -OR, -OR⁴o -haloalquilo C¹-³;

cada R es independientemente hidrógeno o alifático C¹-⁶;

cada R²es independientemente R, flúor o cloro;

m es 0, 1 o 2;

R³es hidrógeno, alifático C¹-³, flúor o cloro;

cada R⁴es independientemente hidrógeno, -C(R)²O-R⁵o R⁵, siempre que al menos un grupo R⁴o R⁸no sea hidrógeno;

cada R⁵es independientemente -C(O)R⁶, -C(O)OR⁶, -C(O)-Q-R⁶, -C(O)-(CH²)ⁿ-C(O)OR⁶, -C(O)-(CH²)ⁿ-C(O)N(R⁷)², -C(O)-(CH²)ⁿ-CH(R⁶)N(R⁷)², -P(O)(OR⁶)²;

cada R⁶es independientemente hidrógeno, un grupo alifático C¹-⁶opcionalmente sustituido o un anillo de 5-8 miembros saturado, parcialmente insaturado o totalmente insaturado, opcionalmente sustituido, que tiene 0-4 heteroátomos elegidos independientemente entre nitrógeno, oxígeno o azufre;

cada R⁷es independientemente hidrógeno, -C(O)R⁶, -C(O)OR⁶, -S(O)²R⁶, -OR⁶, un grupo alifático C¹-⁶opcionalmente sustituido o un anillo de 5-8 miembros saturado, parcialmente insaturado o totalmente insaturado, opcionalmente sustituido, que tiene 0-4 heteroátomos elegidos independientemente entre nitrógeno, oxígeno o azufre, o:

dos R⁶en el mismo átomo de nitrógeno tomados juntos con el átomo de nitrógeno al cual están unidos forman un anillo de 4-7 miembros saturado, parcialmente insaturado o totalmente insaturado que tiene 1-3 heteroátomos además del átomo de nitrógeno, elegidos independientemente entre nitrógeno, oxígeno o azufre;

cada n es 0-6;

Q es una cadena alquilideno C¹-¹⁰opcionalmente sustituida en donde de cero a cuatro unidades de metileno de Q están reemplazadas independientemente por -O-, -N(R)-, -S-, -S(O)-, -S(O)²- o - C(O)-; y

R⁸es hidrógeno o -C(R)²O-R⁵.

De acuerdo con ciertos casos, el resto R¹de fórmula II es un grupo alifático C¹-⁴opcionalmente sustituido con -OR o -haloalquilo C¹-³. En ciertas realizaciones, el resto R¹de fórmula Ii es un grupo alifático C¹-⁴opcionalmente sustituido con -OH, -CH²F, -CHF²o -CF³. En otras realizaciones casos, el resto R¹de fórmula II es un grupo alifático C¹-⁴opcionalmente sustituido con -OH. Aún en otras realizaciones, R¹no está sustituido.

De acuerdo con otros casos, el resto R¹de fórmula II es isopropilo, 2-butilo, ciclopropilo o etilo, en donde cada resto está opcionalmente sustituido con -OH, -CHF², -CH²F o -CF³. De acuerdo con otra realización, el resto R¹de fórmula II es isopropilo, 2-butilo, ciclopropilo o etilo, en donde cada resto está opcionalmente sustituido con -OH o -CF³. Otro aspecto de la presente divulgación se refiere a un compuesto de fórmula II en donde cada R²es independientemente hidrógeno, alifático C¹-³o cloro. De acuerdo con otro aspecto más, la presente solicitud se refiere a un compuesto de fórmula II en donde R²es cloro y m es 1.

En otros casos, el resto R³de fórmula II es hidrógeno, metilo o cloro.

En ciertos casos, R⁴es C(O)-Q-R⁶. Aún otras realizaciones casos se refieren a un compuesto de fórmula II en donde R⁴es C(O)-Q-R⁶y Q es una cadena alquilideno C¹-⁸opcionalmente sustituida en donde de cero a cuatro unidades de metileno de Q están reemplazadas independientemente por -O-, -N(R)-, -S-, -S(O)-, -S(O)²- o -C(O)- y R⁶es el definido en general y en las clases y subclases descritas antes y en esta sección. De acuerdo con otra realización, Q es una cadena alquilideno C¹-⁸opcionalmente sustituida en donde de dos a cuatro unidades de metileno de Q están reemplazadas independientemente por -O-. Dichos grupos Q incluyen -CH²OCH²CH²O-, -CH²OCH²CH²OCH²CH²O-y similares.

Aún otro aspecto de la presente divulgación proporciona un compuesto de fórmula II en donde R⁴es C(O)-(CH²)ⁿ-CH(R⁶)N(R⁷)². En ciertas realizaciones, n es 0-2. En otras realizaciones, R⁶es un grupo alifático C¹-⁶opcionalmente sustituido. Los ejemplos de tales grupos R⁶incluyen metilo, bencilo, etilo, isopropilo, t-butilo y similares. Los grupos R⁷del C(O)-(CH²)ⁿ-CH(R⁶)N(R⁷)²de fórmula II incluyen hidrógeno y un grupo alifático C¹-⁶opcionalmente sustituido. Los ejemplos de tales grupos incluyen metilo, bencilo, etilo, isopropilo, t-butilo y similares.

De acuerdo con un aspecto, la presente divulgación proporciona un compuesto de fórmula II en donde R⁸es hidrógeno. De acuerdo con un caso, R⁴es un éster de L-valina.

En ciertas realizaciones de la presente solicitud, el grupo R⁴de fórmula II es -P(O)(OR⁶)². En otras realizaciones, cada R⁶es independientemente hidrógeno o un grupo alifático C¹-⁶opcionalmente sustituido. Los ejemplos de dichos grupos R⁶incluyen metilo, bencilo, etilo, isopropilo, t-butilo y similares. Aún en otras realizaciones, el grupo R⁴de fórmula II es -P(O)(OH)².

En ciertos casos, un compuesto de fórmula II proporciona una mejora con respecto a una o más características físicas o fisiológicas. En otros casos, un compuesto de fórmula II imparte una mejora con respecto a una o más características físicas o fisiológicas.

Los compuestos representativos de la fórmula II se exponen en la Tabla 2 a continuación.

Tabla 2

Los métodos para preparar dichos profármacos incluyen los expuestos en detalle en la sección de Ejemplos posterior y los métodos conocidos por los expertos en la materia.

3. Usos, formulación y administración

Composiciones farmacéuticamente aceptables

Como se ha tratado anteriormente, la presente invención proporciona compuestos que son inhibidores de las proteínas cinasas, y por lo tanto los compuestos de la presente son útiles para el tratamiento de enfermedades, trastornos y afecciones incluidos, pero no se limitan a, cáncer, trastornos autoinmunitarios, trastornos neurodegenerativos y neurológicos, esquizofrenia, trastornos óseos, enfermedad hepática y trastornos cardíacos. En consecuencia, en otro aspecto de la presente invención, se proporcionan composiciones farmacéuticamente aceptables, que contienen cualquiera de los compuestos descritos en el presente documento, y opcionalmente contienen un portador, adyuvante o vehículo farmacéuticamente aceptable. En ciertas realizaciones, estas composiciones pueden contener opcionalmente uno o más agentes terapéuticos adicionales.

Se apreciará también que algunos de los compuestos de la presente invención pueden existir en forma libre para el tratamiento, o cuando proceda, como un derivado farmacéuticamente aceptable de los mismos. De acuerdo con la presente divulgación, un derivado farmacéuticamente aceptable incluye, pero sin limitarse a, sales, ésteres, sales de dichos ésteres, farmacéuticamente aceptables, o cualquier otro aducto o derivado que una vez administrado a un paciente que lo necesita sea capaz de proporcionar, directa o indirectamente, un compuesto como los descritos en el presente documento, o un metabolito o residuo de los mismos.

Como se usa en el presente documento, la expresión "sal farmacéuticamente aceptable" se refiere a las sales que son, al juicio razonable del médico, adecuadas para usar en contacto con los tejidos de los seres humanos y animales inferiores sin toxicidad, irritación, respuesta alérgica ni similares indebidas, y que están de acuerdo con una relación riesgo/beneficio razonable. Una "sal farmacéuticamente aceptable" significa cualquier sal o sal de un éster de un compuesto de esta invención, atóxica, que luego de la administración a un receptor, es capaz de proporcionar, directa o indirectamente, un compuesto de esta invención o un metabolito o un residuo del mismo, activo como inhibidor. Como se usa en el presente documento, la expresión "metabolito o un residuo del mismo, activo como inhibidor" significa que un metabolito o un residuo del mismo es también un inhibidor de la proteína cinasa ERK2.

Las sales farmacéuticamente aceptables son bien conocidas en la técnica. Por ejemplo, S. M. Berge et al., describen sales farmacéuticamente aceptables en detalle en J. Pharmaceutical Sciences, 1977, 66, 1-19. Las sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos de esta invención incluyen las derivadas de ácidos y bases inorgánicos y orgánicos, adecuados. Son ejemplos de sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables, atóxicas, las sales de un grupo amino formadas con ácidos inorgánicos, tales como ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido fosfórico, ácido sulfúrico y ácido perclórico o con ácidos orgánicos, tales como ácido acético, ácido oxálico, ácido maleico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido succínico o ácido malónico o mediante otros métodos utilizados en la técnica, tales como el intercambio iónico. Otras sales farmacéuticamente aceptables incluyen, sales de adipato, alginato, ascorbato, aspartato, bencenosulfonato, benzoato, bisulfato, borato, butirato, canforato, canforsulfonato, citrato, ciclopentanopropionato, digluconato, dodecilsulfato, etanosulfonato, formiato, fumarato, glucoheptonato, glicerofosfato, gluconato, hemisulfato, heptanoato, hexanoato, yodohidrato, 2-hidroxietanosulfonato, lactobionato, lactato, laurato, laurilsulfato, malato, maleato, malonato, metanosulfonato, 2-naftalenosulfonato, nicotinato, nitrato, oleato, oxalato, palmitato, pamoato, pectinato, persulfato, 3-fenilpropionato, fosfato, picrato, pivalato, propionato, estearato, succinato, sulfato, tartrato, tiocianato, p-toluenosulfonato, undecanoato, valerato, y similares. Las sales derivadas de bases adecuadas incluyen sales de metales alcalinos, metales alcalinotérreos, amonio y N+( alquilo C-m )4. Esta invención también contempla la cuaternización de todos los grupos que contienen nitrógeno básico de los compuestos dados a conocer en el presente documento. Se pueden obtener productos solubles o dispersables en agua o aceite mediante dicha cuaternización. Las sales de metales alcalinos o alcalinotérreos representativas incluyen sales de sodio, litio, potasio, calcio, magnesio y similares. Otras sales farmacéuticamente aceptables incluyen, cuando sea apropiado, amonio, amonio cuaternario y cationes amina no tóxicos, formadas usando contraiones, tales como haluro, hidróxido, carboxilato, sulfato, fosfato, nitrato, aril sulfonato y alquil sulfonato inferior.

Como se ha descrito anteriormente, las composiciones farmacéuticamente aceptables de la presente invención contienen además un portador, adyuvante o vehículo farmacéuticamente aceptable, el cual, como se usa en el presente documento, incluye cualquier y todos los disolventes, diluyentes, u otros vehículos líquidos, auxiliares de dispersión o suspensión, tensioactivos, isotónicos, espesantes o emulsionantes, conservantes, aglutinantes sólidos, lubricantes y similares, según se adapte a la forma farmacéutica particular deseada. Remington's Pharmaceutical Sciences, 16a edición, E. W. Martin (Mack Publishing Co., Easton, Pa., 1980) da a conocer diversos portadores utilizados en la formulación de composiciones farmacéuticamente aceptables y técnicas conocidas para la preparación de las mismas. Excepto en la medida en que cualquier medio portador convencional sea incompatible con los compuestos de la invención, por ejemplo por producir algún efecto biológico indeseable o de lo contrario interaccionar de manera nociva con otro(s) componente(s) de la composición farmacéuticamente aceptable, su uso está contemplado como comprendido por el alcance de esta invención. Algunos ejemplos de materiales que pueden servir como portadores farmacéuticamente aceptables incluyen, pero no se limitan a, intercambiadores de iones, alúmina, estearato de aluminio, lecitina, proteínas del suero, como seroalbúmina humana, sustancias amortiguadoras como fosfatos, glicina, ácido sórbico o sorbato de potasio, mezclas de glicéridos parciales de ácidos grasos vegetales saturados, agua, sales o electrolitos, como sulfato de protamina, fosfato ácido disódico, fosfato ácido de potasio, cloruro de sodio, sales de cinc, sílice coloidal, trisilicato de magnesio, polivinilpirrolidona, poliacrilatos, ceras, polímeros de bloque de polietileno-polioxipropileno, grasa de la lana, azúcares como lactosa, glucosa y sacarosa; almidones como almidón de maíz y almidón de papa; celulosa y sus derivados como carboximetilcelulosa sódica, etilcelulosa y acetato de celulosa; tragacanto en polvo; malta; gelatina; talco; también pueden estar presentes en la composición a criterio del formulador, excipientes como manteca de cacao y cera para supositorios; aceites como aceite de cacahuate, aceite de semilla de algodón; aceite de cártamo; aceite de sésamo, aceite de oliva; aceite de maíz y aceite de soja; glicoles; como propilenglicol o polietilenglicol; ésteres como oleato de etilo y laurato de etilo; agar; amortiguadores del pH como hidróxido de magnesio e hidróxido de aluminio; ácido algínico: agua apirógena; solución salina isotónica; solución de Ringer; alcohol etílico y soluciones amortiguadoras de fosfato, así como otros lubricantes compatibles atóxicos como laurilsulfato de sodio y estearato de magnesio, al igual que colorantes, agentes de liberación, agentes de recubrimiento, edulcorantes, saborizantes y perfumes, conservantes y antioxidantes.

Usos de los compuestos y composiciones farmacéuticamente aceptables

También se desvela un compuesto de la presente invención, o una composición farmacéuticamente aceptable que comprende un compuesto de la presente invención, para su uso en el tratamiento o la reducción de la gravedad del cáncer, un trastorno inmunitario, un trastorno neurodegenerativo o neurológico, una enfermedad hepática o un trastorno cardíaco. En ciertas realizaciones de la presente invención una "cantidad eficaz" del compuesto o la composición farmacéuticamente aceptables en la cantidad eficaz para tratar o atenuar la gravedad de la enfermedad, la afección o el trastorno seleccionado entre cáncer, un trastorno autoinmunitario, un trastorno neurodegenerativo o neurológico, esquizofrenia, un trastorno óseo, una enfermedad hepática o un trastorno cardíaco. Los compuestos y las composiciones, de acuerdo con la presente invención, se pueden administrar utilizando cualquier cantidad y cualquier vía de administración que sean eficaces para tratar o atenuar la gravedad de un cáncer, un trastorno autoinmunitario, un trastorno neurodegenerativo o neurológico, la esquizofrenia, un trastorno óseo, una enfermedad hepática o un trastorno cardíaco. La cantidad exacta necesaria variará de un sujeto a otro, dependiendo de la especie, la edad y el estado general de salud del sujeto, la gravedad de la infección, el fármaco particular, su modo de administración, y similares. Los compuestos de la invención se formulan preferentemente en formas farmacéuticas unitarias para facilitar la administración y la uniformidad de dosis. La expresión "forma farmacéutica unitaria" como se usa en el presente documento se refiere a una unidad físicamente discreta de un fármaco apropiado para el paciente que se va a tratar. Se entenderá, sin embargo, que el uso diario total de los compuestos y las composiciones de la presente invención será decidido por el médico tratante según su criterio profesional. El nivel de dosis eficaz específico para cualquier paciente u organismo particular dependerá de una serie de factores como el trastorno en tratamiento y la gravedad del mismo; la actividad del compuesto específico empleado; la composición específica empleada; la edad, el peso corporal, el estado general de salud, el género y la dieta del paciente; el tiempo de administración, la vía de administración y la velocidad de eliminación del compuesto específico empleado; la duración del tratamiento; otros fármacos utilizados en combinación o simultáneamente con el compuesto específico empleado y factores semejantes conocidos en la técnica médica. El término "paciente" como se usa en el presente documento, significa un animal, preferentemente un mamífero, y muy preferentemente un humano.

Las composiciones farmacéuticamente aceptables de esta invención se pueden administrar a los humanos y otros animales por vía oral, rectal, parenteral, intracisternal, intravaginal, intraperitoneal, tópica (por ejemplo mediante polvos, pomadas o gotas), bucal como un aerosol oral o nasal, o similares, dependiendo de la gravedad de la infección en tratamiento. En ciertas realizaciones, los compuestos de la invención se pueden administrar por vía oral o parenteral en dosis entre aproximadamente 0,01 mg/kg y aproximadamente 50 mg/kg y preferentemente entre aproximadamente 1 mg/kg y aproximadamente 25 mg/kg de peso corporal del sujeto por día, una o más veces al día, para obtener el efecto terapéutico deseado.

Las formas de dosificación líquidas para administración oral incluyen, pero no se limitan a, emulsiones, microemulsiones, soluciones, suspensiones, jarabes y elixires farmacéuticamente aceptables. Además de los principios activos, las formas farmacéuticas líquidas pueden contener diluyentes inertes comúnmente utilizados en la técnica como, por ejemplo, agua u otros disolventes, solubilizantes y emulsionantes, como alcohol etílico, alcohol isopropílico, carbonato de etilo, acetato de etilo, alcohol bencílico, benzoato de bencilo, propilenglicol, 1,3-butilenglicol, dimetilformamida, aceites (en particular, aceites de semilla de algodón, maní, maíz, germen de trigo, oliva, ricino y sésamo), glicerol, alcohol tetrahidrofurfurílico, polietilenglicoles y ésteres de sorbitán de ácidos grasos, y mezclas de los mismos. Además de diluyentes inertes, las composiciones orales también pueden contener adyuvantes como humectantes, emulsionantes y suspendentes, edulcorantes, saborizantes y perfumes.

Las preparaciones inyectables, por ejemplo, las suspensiones estériles inyectables acuosas u oleosas se pueden formular de acuerdo con las técnicas conocidas empleando dispersantes o humectantes y suspendentes adecuados. La preparación estéril inyectable también puede ser una solución, suspensión o emulsión estéril inyectable en un diluyente o disolvente atóxico, aceptable para uso parenteral, por ejemplo, como una solución en 1,3-butanodiol. Entre los vehículos y disolventes aceptables que se pueden emplear se encuentran el agua, la solución de Ringer y la solución de cloruro de sodio isotónica U.S.P. Además, convencionalmente se emplean aceites fijos estériles como disolvente o medio de suspensión. Para este propósito se puede emplear cualquier aceite fijo blando incluidos los mono o diglicéridos sintéticos. Además, en la preparación de inyectables se usan ácidos grasos como el ácido oleico.

Las formulaciones inyectables se pueden esterilizar, por ejemplo, por filtración a través de un filtro de retención de bacterias, o mediante la incorporación de agentes esterilizantes en forma de composiciones sólidas estériles que se pueden disolver o dispersar en agua estéril o cualquier otro medio inyectable estéril antes de usarlas.

Para prolongar el efecto de un compuesto de la presente invención, a menudo es deseable retardar la absorción del compuesto de la inyección subcutánea o intramuscular. Esto se puede lograr mediante el uso de una suspensión líquida de material cristalino o amorfo con baja solubilidad en agua. La velocidad de absorción del compuesto depende entonces de su velocidad de disolución que, a su vez, puede depender del tamaño del cristal y de la forma cristalina. Alternativamente, la absorción retardada de una forma del compuesto administrada por vía parenteral se logra disolviendo o suspendiendo el compuesto en un vehículo oleoso. Las formas inyectables en depot se elaboran por formación de matrices de microencapsulación del compuesto en polímeros biodegradables como poliláctidopoliglicólido. Dependiendo de la proporción entre compuesto y polímero y de la naturaleza del polímero particular empleado, se puede controlar la velocidad de liberación del compuesto. Son ejemplos de otros polímeros biodegradables los poli(ortoésteres) y poli(anhídridos). También se preparan formulaciones inyectables en depot por atrapamiento del compuesto en liposomas o microemulsiones que sean compatibles con los tejidos corporales.

Las composiciones para administración rectal o vaginal son preferentemente supositorios que se pueden preparar mezclando los compuestos de esta invención con excipientes o portadores no-irritantes adecuados como manteca de cacao, polietilenglicol, o una cera para supositorio, que sean sólidos a temperatura ambiente pero líquidos a la temperatura corporal y por lo tanto, se fundan en el recto o la cavidad vaginal y liberen el principio activo.

Las formas de dosificación sólidas para administración oral incluyen cápsulas, comprimidos, pastillas, polvos y gránulos. En dichas formas farmacéuticas sólidas, el principio activo se mezcla con al menos un excipiente o portador inerte farmacéuticamente aceptable como citrato de sodio o fosfato dicálcico y/o a) rellenos o diluyentes, tales como almidones, lactosa, sacarosa, glucosa, manitol y ácido silícico, b) aglutinantes, tales como por ejemplo carboximetilcelulosa, alginatos, gelatina, polivinilpirrolidona, sacarosa y acacia, c) humectantes, tales como glicerol, d) desintegrantes, tales como agar-agar, carbonato de calcio, almidón de papa o tapioca, ácido algínico, ciertos silicatos y carbonato de sodio; e) retardantes de la solución, tales como parafina; f) aceleradores de la absorción, tales como compuestos de amonio cuaternario, g) humectantes, tales como, por ejemplo, alcohol cetílico y monoestearato de glicerol, h) absorbentes, tales como caolín y bentonita y i) lubricantes, tales como talco, estearato de calcio, estearato de magnesio, polietilenglicoles sólidos, laurilsulfato de sodio y mezclas de los mismos. En el caso de las cápsulas, los comprimidos y las pastillas, las formas farmacéuticas también pueden comprender agentes tamponantes.

También se pueden emplear composiciones sólidas de tipo similar como relleno de cápsulas de gelatina blanda y dura, utilizando excipientes como lactosa o azúcar de la leche, así como polietilenglicoles de alto peso molecular y similares. Las formas farmacéuticas sólidas de comprimidos, grageas, cápsulas, pastillas y gránulos se pueden preparar con recubrimientos y cubiertas, como recubrimientos entéricos y otros recubrimientos conocidos en la técnica de la formulación farmacéutica. Dichas formas pueden contener opcionalmente opacificantes y también pueden ser de una composición tal, que liberen sólo el principio o principios activos, o los liberen preferencialmente en cierta parte del tracto intestinal, opcionalmente, de manera retardada. Los ejemplos de composiciones de inclusión que se pueden utilizar comprenden sustancias poliméricas y ceras. Se pueden emplear composiciones sólidas de tipo similar como rellenos de cápsulas de gelatina blanda y dura, utilizando excipientes como lactosa o azúcar de la leche así como polietilenglicoles de alto peso molecular y similares.

Los compuestos activos también pueden estar en forma microencapsulada con uno o más excipientes como los indicados antes. Las formas farmacéuticas sólidas de comprimidos, grageas, cápsulas, pastillas y gránulos se pueden preparar con recubrimientos y cubiertas, como recubrimientos entéricos, recubrimientos de liberación controlada y otros recubrimientos conocidos en la técnica de la formulación farmacéutica. En dichas formas farmacéuticas sólidas el principio activo se puede mezclar con al menos un diluyente inerte como sacarosa, lactosa o almidón. Dichas formas farmacéuticas también pueden contener, como es la práctica habitual, sustancias adicionales diferentes de los diluyentes inertes, por ejemplo, lubricantes de compresión y otros auxiliares de compresión como estearato de magnesio y celulosa microcristalina. En el caso de las cápsulas, los comprimidos y las pastillas, las formas farmacéuticas también pueden contener amortiguadores del pH. Dichas formas pueden contener opcionalmente opacificantes y también pueden ser de una composición tal, que liberen sólo el principio o principios activos, o los liberen preferencialmente en cierta parte del tracto intestinal, opcionalmente, de manera retardada. Los ejemplos de composiciones de inclusión que se pueden utilizar comprenden sustancias poliméricas y ceras.

Las formas farmacéuticas para administración tópica o transdérmica de un compuesto de esta invención incluyen pomadas, pastas, cremas, lociones, geles, polvos, soluciones, aerosoles, inhalantes o parches. El principio activo se mezcla en condiciones asépticas con un portador farmacéuticamente aceptable y cualquier conservante o amortiguador del pH que sea necesario. También se contemplan la formulación oftálmica, las gotas para los oídos y las gotas oculares como comprendidas por el alcance de esta invención. Además, la presente invención contempla el uso de parches transdérmicos, que tienen la ventaja adicional de proporcionar una liberación controlada de un compuesto al organismo. Dichas formas farmacéuticas se pueden preparar disolviendo o dispensando el compuesto en el medio apropiado. Se pueden utilizar potenciadores de la absorción para aumentar el flujo del compuesto a través de la piel. La velocidad se puede controlar o bien proporcionando una membrana que controle la velocidad o dispersando el compuesto en una matriz polimérica o un gel.

Como se ha descrito en general anteriormente, los compuestos de la invención son útiles como inhibidores de las proteínas cinasas ERK. En una realización, los compuestos y las composiciones de la invención son inhibidores de una o ambas de las proteínas cinasas ERK1 y ERK2 y por lo tanto, sin querer quedar restringidos por ninguna teoría en particular, los compuestos y las composiciones son particularmente útiles para tratar o atenuar la gravedad de una enfermedad, una afección o un trastorno en los que la activación de una o ambas de las proteínas cinasas ERK1 y ERK2 está implicada en la enfermedad, la afección o el trastorno. Cuando la activación de las proteínas cinasas ERK1 y/o ERK2 está implicada en una enfermedad, una afección o un trastorno particular, la enfermedad, la afección o el trastorno también se pueden denominar "enfermedad, afección o síntoma de enfermedad mediado por ERK1 o ERK2". En consecuencia, en otro caso, la presente solicitud proporciona un método para tratar o atenuar la gravedad de una enfermedad, una afección o un trastorno en los que la activación de una o ambas de las proteínas cinasas ERK1 y ERK2 está implicada en dicha enfermedad, afección o trastorno.

La actividad de un compuesto utilizado en esta invención como un inhibidor de las proteínas cinasas ERK1 y/o ERK2 se puede determinar in vitro, in vivo o en una línea celular. Los ensayos in vitro incluyen ensayos que determinan la inhibición de la actividad de fosforilación o la actividad de ATPasa de las proteínas cinasas ERK1 o ERK2 activadas. Alternativamente los ensayos in vitro cuantifican la capacidad del inhibidor para unirse a las proteínas cinasas ERK1 o ERK2. La unión del inhibidor se puede medir mediante radiomarcado del inhibidor antes de la unión, aislando el complejo inhibidor/ERK1 o inhibidor/ERK2 y determinando la cantidad de radiomarcador unido. Alternativamente, la unión del inhibidor se puede determinar realizando un experimento de competición en el cual se incuban nuevos inhibidores con las proteínas cinasas ERK1 o ERK2 unidas a radioligandos conocidos.

La expresión "inhibe mensurablemente", como se usa en el presente documento significa un cambio mensurable en la actividad de la proteína cinasa ERK1 o ERK2 entre una muestra que contiene dicha composición y una proteína cinasa ERK1 o e RK2 y una muestra equivalente que contiene proteína cinasa ERK1 o ERK2 en ausencia de dicha composición. Dichas mediciones de la actividad de la proteína cinasa son conocidas por los expertos en la materia e incluyen los métodos expuestos más adelante en el presente documento.

De acuerdo con otro caso, la solicitud se refiere a un compuesto de la presente invención o una composición que contenga dicho compuesto para su uso en un método para inhibir la actividad de la proteína quinasa ERK1 o ERK2 en un paciente.

La expresión "afección o enfermedad mediada por ERK", como se usa en el presente documento significa cualquier enfermedad o afección perjudicial en la que se sabe que ERK desempeña un papel. La expresión "afección o" enfermedad" mediada por ERK" también significa las enfermedades o afecciones que se alivian mediante el tratamiento con un inhibidor de ERK. Tales afecciones incluyen, sin limitación, cáncer, accidente cerebrovascular, diabetes, hepatomegalia, enfermedades cardiovasculares inclusive cardiomegalia, enfermedad de Alzheimer, fibrosis quística, virosis, enfermedades autoinmunitarias, aterosclerosis, reestenosis, psoriasis, trastornos alérgicos inclusive asma, inflamación, trastornos neurológicos y enfermedades hormonales. El término "cáncer" incluye, pero no se limita a, los cánceres siguientes: de mama, de ovario, de cuello de útero, de próstata, de testículos, de aparato genitourinario, de esófago, de laringe, glioblastoma, neuroblastoma, de estómago, de piel, queratoacantoma, de pulmón, carcinoma epidermoide, carcinoma de células grandes, carcinoma microcítico, adenocarcinoma pulmonar, óseo, de colon, adenoma, de páncreas, adenocarcinoma, de tiroides, carcinoma folicular, carcinoma indiferenciado, carcinoma papilar, seminoma, melanoma, sarcoma, carcinoma de vejiga, carcinoma de hígado y vías biliares, carcinoma de riñón, trastornos mieloides, trastornos linfoides, enfermedad de Hodgkin, de células pilosas, de cavidad bucal y faringe (oral), de labios, de lengua, de boca, de faringe, de intestino delgado, de colon-recto, de intestino grueso, de recto, de cerebro y sistema nervioso central, y leucemia.

En consecuencia, otro caso de la presente solicitud se refiere a tratar o atenuar la gravedad de una o más enfermedades en las que se sabe que ERK desempeña un papel. Específicamente, la presente solicitud se refiere a una composición según la presente solicitud para su uso en un método para tratar o atenuar la gravedad de la enfermedad o afección seleccionada entre cáncer, accidente cerebrovascular, diabetes, hepatomegalia, enfermedades cardiovasculares inclusive cardiomegalia, enfermedad de Alzheimer, fibrosis quística, virosis, enfermedades autoinmunitarias, aterosclerosis, reestenosis, psoriasis, trastornos alérgicos inclusive asma, inflamación, trastornos neurológicos y enfermedades hormonales.

De acuerdo con otro caso, la presente solicitud se refiere a un método para tratar un cáncer seleccionado entre cáncer de mama, de ovario, de cuello de útero, de próstata, de testículos, de aparato genitourinario, de esófago, de laringe, glioblastoma, neuroblastoma, de estómago, de piel, queratoacantoma, de pulmón, carcinoma epidermoide, carcinoma de células grandes, carcinoma microcítico, adenocarcinoma pulmonar, óseo, de colon, adenoma, de páncreas, adenocarcinoma, de tiroides, carcinoma folicular, carcinoma indiferenciado, carcinoma papilar, seminoma, melanoma, sarcoma, carcinoma de vejiga, carcinoma de hígado y vías biliares, carcinoma de riñón, trastornos mieloides, trastornos linfoides, enfermedad de Hodgkin, de células pilosas, de cavidad bucal y faringe (oral), de labios, de lengua, de boca, de faringe, de intestino delgado, de colon-recto, de intestino grueso, de recto, de cerebro y sistema nervioso central, y leucemia.

Otra realización se refiere a un método para tratar melanoma, cáncer de mama, cáncer de colon o cáncer pancreático en un paciente que lo necesita.

También se apreciará que los compuestos y las composiciones farmacéuticamente aceptables de la presente invención se pueden emplear en terapias de combinación, es decir, los compuestos y las composiciones farmacéuticamente aceptables se pueden administrar simultáneamente con, antes de, o a continuación de, uno o más de otros medicamentos o procedimientos médicos deseados. La combinación particular de terapias (medicamentos o procedimientos) para emplear en un régimen de combinación tendrá en cuenta la compatibilidad de los medicamentos y/o los procedimientos deseados y el efecto terapéutico buscado que se debe lograr. También se apreciará que las terapias empleadas pueden lograr un efecto deseado para el mismo trastorno (por ejemplo, un compuesto de la invención se puede administrar simultáneamente con otro medicamento utilizado para tratar el mismo trastorno), o pueden lograr efectos diferentes (por ejemplo, control de cualquier efecto adverso). Como se usa en el presente documento, los agentes terapéuticos adicionales que normalmente se administran para tratar o prevenir una enfermedad o afección particular, son conocidos como "apropiados para la enfermedad o afección en tratamiento".

Por ejemplo, se pueden combinar quimioterápicos u otros fármacos antiproliferativos con los compuestos de esta invención para tratar enfermedades proliferativas y cáncer. Los ejemplos de quimioterápicos conocidos, incluyen, pero no se limitan a, por ejemplo otras terapias o antineoplásicos que se pueden utilizar en combinación con los antineoplásicos de la invención, incluyen cirugía, radioterapia (en unos pocos ejemplos, radiación gamma, radioterapia de haz de neutrones, radioterapia de haz de electrones, terapia de protones, braquiterapia e isótopos radiactivos sistémicos, por nombrar unos pocos), hormonoterapia, modificadores de la respuesta biológica (interferones, interleucinas y factor de necrosis tumoral (TNF) por nombrar unos pocos), hipertermia y crioterapia, fármacos para atenuar los efectos adversos (por ejemplo, antieméticos) y otros antineoplásicos aprobados, incluidos, pero no se limitan a, fármacos alquilantes (mecloretamina, clorambucilo, Ciclofosfamida, Melfalán, Ifosfamida), antimetabolitos (Metotrexato), antagonistas de purinas y antagonistas de pirimidinas (6-Mercaptopurina, 5-Fluorouracilo, Citarabilo, Gemcitabina), venenos del huso (Vinblastina, Vincristina, Vinorelbina, Paclitaxel), podofilotoxinas (Etopósido, Irinotecán, Topotecán), antibióticos (Doxorrubicina, Bleomicina, Mitomicina), nitrosoureas (Carmustina, Lomustina), iones inorgánicos (Cisplatino, Carboplatino), enzimas (Asparraginasa) y hormonas (Tamoxifeno, Leuprolida, Flutamida y Megestrol), Gleevec™, adriamicina, dexametasona y ciclofosfamida. Por una discusión completa de tratamientos contra el cáncer actualizados, consulte http://www.nci.nih.gov/, una lista de los antineoplásicos aprobados por la FDA en http://www.fda.gov/cder/cancer/druglistframe.htm y el Manual Merck, 17a Ed. 1999.

Otros ejemplos de medicamentos con los que los inhibidores de esta invención también se pueden combinar incluyen, sin limitación: tratamientos para la enfermedad de Alzheimer como Aricept® y Excelon®; tratamientos para la enfermedad de Parkinson como L-DOPA/carbidopa, entacapona, ropinrol, pramipexol, bromocriptina, pergolida, trihexefendilo y amantadina; medicamentos para tratar la esclerosis múltiple (MS) como beta interferón (por ejemplo, Avonex® y Rebif®), Copaxone® y mitoxantrona; tratamientos para el asma como albuterol y Singulair®; medicamentos para tratar la esquizofrenia como zyprexa, risperdal, seroquel y haloperidol; antiinflamatorios como corticoesteroides, bloqueantes de TNF, IL-1 RA, azatioprina, ciclofosfamida y sulfasalazina; inmunomoduladores e inmunosupresores como ciclosporina, tacrolimus, rapamicina, micofenolato mofetilo, interferones, corticoesteroides, ciclofosfamida, azatioprina y sulfasalazina; factores neurotróficos como inhibidores de la acetilcolinesterasa, inhibidores de MAO, interferones, anticonvulsantes, bloqueantes de los canales iónicos, riluzol y antiparkinsonianos; medicamentos para tratar enfermedades cardiovasculares como betabloqueantes, inhibidores de ACE, diuréticos, nitratos, bloqueantes de los canales de calcio y estatinas; medicamentos para tratar enfermedades hepáticas como los corticoesteroides, colestiramina, interferones y antivirales; medicamentos para tratar trastornos sanguíneos como corticoesteroides, antileucémicos y factores de crecimiento; y medicamentos para tratar trastornos de inmunodeficiencia como gammaglobulina.

La cantidad de agente terapéutico adicional presente en las composiciones de esta invención no será mayor que la cantidad que se administraría normalmente en una composición que contuviera ese agente terapéutico como el único agente activo. Preferentemente, la cantidad de agente terapéutico adicional en las composiciones dadas a conocer en la presente variará entre aproximadamente 50 % y 100 % de la cantidad normalmente presente en una composición que contiene ese fármaco como el único principio terapéuticamente activo.

En un caso alternativo, los métodos de esta solicitud que utiliza composiciones que no contienen un agente terapéutico adicional, comprende el paso adicional de administrar por separado a dicho paciente otro agente terapéutico. Cuando esos agentes terapéuticos adicionales se administran por separado se pueden administrar al paciente antes, secuencialmente con, o luego de la administración de las composiciones de esta invención.

Los compuestos de esta invención o composiciones farmacéuticamente aceptables de los mismos también se pueden incorporar en composiciones para recubrir dispositivos médicos implantables, tales como prótesis, válvulas artificiales, injertos vasculares, estents y catéteres. Por consiguiente, la presente solicitud, en otro caso, incluye una composición para recubrir un dispositivo implantable que contiene un compuesto de la presente invención como los descritos en general antes y en las clases y subclases de esta parte, y un portador adecuado para recubrir dicho dispositivo implantable. Aún en otro aspecto, la presente invención incluye un dispositivo implantable recubierto con una composición que contiene un compuesto de la presente invención como los descritos en general antes, y en las clases y subclases de esta parte, y un portador adecuado para recubrir dicho dispositivo implantable.

Los estents vasculares, por ejemplo, han sido utilizados para solucionar el problema de reestenosis (reestrechamiento de la pared de los vasos luego de una lesión). Sin embargo, los pacientes que usan estents u otros dispositivos implantables corren el riesgo de formación de coágulos o activación de las plaquetas. Estos efectos indeseados se pueden prevenir o mitigar con un recubrimiento previo del dispositivo con una composición farmacéuticamente aceptable que contenga un inhibidor de cinasas. Los recubrimientos adecuados y la preparación general de los dispositivos implantables recubiertos se describen en las patentes de Estados Unidos 6.099.562; 5.886.026; y 5.304.121. Los recubrimientos son habitualmente materiales poliméricos biocompatibles como un polímero de hidrogel, polimetildisiloxano, policaprolactona, polietilenglicol, ácido poliláctico, etileno vinil acetato y mezclas de los mismos. Los recubrimientos pueden opcionalmente recubrirse con una capa superior adecuada de fluorosilicona, polisacáridos, polietilenglicol, fosfolípidos o combinaciones de los mismos, para impartirle a la composición características de liberación controlada.

Otro caso de la solicitud se refiere a inhibir la actividad de la proteína cinasa ERK1 o ERK2 en una muestra biológica o en un paciente, cuyo método comprende administrar al paciente, o poner en contacto dicha muestra biológica con, un compuesto de la presente invención o una composición que contenga dicho compuesto. La expresión "muestra biológica", como se usa en el presente documento, incluye, sin limitación, cultivos celulares o extractos; material de biopsia obtenido de un mamífero o extractos de los mismos; y sangre, saliva, orina, heces, semen, lágrimas u otros líquidos corporales o extractos de los mismos.

La inhibición de la actividad de la proteína cinasa ERK1 o ERK2 en una muestra biológica es útil para distintos propósitos conocidos por los expertos en la materia. Los ejemplos de dichos propósitos incluyen, pero no se limitan a, transfusión sanguínea, trasplante de órganos, almacenamiento de muestras y ensayos biológicos.

Ejemplos de síntesis

Como se usa en el presente documento, el término "T^r" se refiere al tiempo de retención de HPLC, en minutos, asociado al compuesto. Salvo indicación en contrario, el método HPLC utilizado para obtener el tiempo de retención informado es el siguiente:

Columna: Agilent / ZORBAX SB-C18 / 5 pm / 3,0 x 150 mm / PN 883975-302 / SN USBM001410

Gradiente: 10 a 90 % de MeCN en 8 minutos

Flujo: 1,0 ml/minuto

Detección: 214 nm y 254 nm

A menos que se indique lo contrario, cada RMN ¹H se obtuvo a 500 MHz en CDCh y los números de los compuestos corresponden a los números de los compuestos enumerados en la Tabla 1.

Ejemplo de referencia 1

2,2,2-Tricloro-1-(4-yodo-1H-pirrol-2-il)etanona: A una solución en agitación de 50 g (235 mmol, 1,0 equiv.) de 2,2,2-tricloro-1-(1H-pirrol-2-il)-etanona en diclorometano seco (400 ml) en atmósfera de nitrógeno, se le añadió gota a gota una solución de monocloruro de yodo (39 g, 240 mmol, 1,02 equivalentes) en diclorometano (200 ml). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La solución se lavó con carbonato de potasio al 10 %, agua, tiosulfato de sodio 1,0 M, cloruro de sodio saturado, se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró a presión reducida. El sólido se recristalizó de hexanos/acetato de metilo para obtener el compuesto del título (68,5 g, 86 %) en forma de un sólido incoloro (86 %). MS FIA: 335,8, 337,8 ES-.

Éster metílico del ácido 4-yodo-1H-pirrol-2-carboxílico: A una solución en agitación de 2,2,2-tricloro-1-(4-yodo-1 H-pirrol-2-il)etanona (68 g, 201 mmol, 1,0 equivalente) en metanol seco (400 ml) en atmósfera de nitrógeno, se le añadió una solución de metóxido de sodio en metanol (4,37 M, 54 ml, 235 mmol, 1,2 equivalentes) en el transcurso de 10 minutos. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. Se retiraron los volátiles a presión reducida y el producto en bruto se repartió después entre agua y ferc-butilmetil éter. La fase orgánica se separó, se lavó dos veces con agua y cloruro de sodio saturado, se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró al vacío para obtener el compuesto del título (48 g, 96 %) en forma de un sólido incoloro que se usó directamente sin purificación adicional.

Éster metílico del ácido 4-yodo-1-(tolueno-4-sulfonil)-1H-pirrol-2-carboxílico: Se disolvió éster metílico del ácido 4-yodo-1H-pirrol-2-carboxílico (24,6 g, 98 mmol, 1,0 equivalente) en diclorometano (150 ml) y trietilamina (30 ml, 215,6 mmol, 2,2 equivalentes). Se añadieron 4-(dimetilamino)piridina (1,2 g, 9,8 mmol, 0,1 equivalente) y cloruro de p-toluenosulfonilo (20,6 g, 107,8 mmol, 1,1 equivalentes) y la mezcla de reacción se agitó durante 16 horas a temperatura ambiente. La reacción se detuvo con HCl 1 M y la capa orgánica se lavó con bicarbonato de sodio acuoso y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio. Después de secar sobre sulfato de magnesio, se retiró el disolvente a presión reducida y el residuo se cristalizó de ferc-butilmetil éter, produciendo el compuesto del título en forma de un sólido de color amarillo pálido (30 g, 75 %). T^r(min) 8,259 minutos.

Éster metílico del ácido 4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolan-2-il)-1-(tolueno-4-sulfonil)-1H-pirrol-2-carboxílico: A una solución desgasificada de éster metílico del ácido 4-yodo-1-(tolueno-4-sulfonil)-1H-pirrol-2-carboxílico (20 g, 49,4 mmol, 1,0 equivalente) y bis(pinacolato)diborano (15 g, 65 mmol, 1,3 equivalentes) en DMF (200 ml) en atmósfera de nitrógeno, se le añadió aducto de diclorometano de dicloro[1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]paladio (II) (3,6 g, 4,9 mmol, 0,1 equivalente). Después la mezcla de reacción se agitó a 80 °C durante 18 horas. Después de retirar la DMF a presión reducida, el residuo oleoso espeso resultante se suspendió en éter dietílico (500 ml) e inmediatamente precipitó un sólido. Este sólido se retiró por filtración y el filtrado se lavó con HCl 1 M, agua, solución acuosa saturada de cloruro de sodio y se secó en MgSO⁴. La concentración produjo el compuesto del título en forma de un sólido de color blanco que se usó sin purificación adicional (10 g, 50 %). CL/EM: T^r(min) 4,6; 406,4 ES+. MS FIA: 406,2 ES+. RMN ¹H 5 1,2 (s, 12H), 2,35 (s, 3H), 3,8 (s, 3H), 7,2 (m, 3H), 7,8 (d, 2H), 8,0 (s, 1H).

W,W-2-(5-Cloro-4-yodo-piridil)-isopropilamina:

Método A. (Microondas)

En un tubo para microondas de 10 ml, se disolvió 5-cloro-2-fluoro-4-yodopiridina (1,0 g, 3,9 mmol, 1,0 equivalente) en DMSO (4,0 ml) y después se le añadió isopropilamina (0,99 ml, 11,7 mmol, 3,0 equivalentes). El tubo se cerró herméticamente y se colocó bajo irradiación de microondas durante 600 s a 150 °C. Esta reacción se repitió seis veces. Se combinaron las mezclas de reacción, después se diluyeron en acetato de etilo y se lavaron con agua. Después de secar sobre sulfato de sodio, el disolvente se evaporó para obtener el compuesto del título en forma de un aceite espeso de color pardo (5,6 g, 80 %) que se usó directamente sin purificación adicional. T^r(min) 4,614; MS FIA: 296,9 ES+. RMN ¹H 81,25 (d, 6H), 3,65 (m, 1H), 7,15 (s, 1H), 7,75 (s, 1H).

Método B: (Térmico)

Se disolvió 5-cloro-2-fluoro-4-yodopiridina (400 mg, 1,55 mmol, 1,0 equivalente) en etanol (5,0 ml) y después se le añadió isopropilamina (0,66 ml, 7,8 mmol, 5,0 equivalentes). La solución resultante se agitó a 80 °C durante 48 horas. Después la mezcla de reacción se diluyó en acetato de etilo y se lavó con agua. Después de secar sobre sulfato de sodio, el disolvente se evaporó y se obtuvo un aceite espeso de color pardo, que se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice eluyendo con mezclas de hexanos/acetato de etilo (desde 99:1 hasta 80:20) para obtener el compuesto del título en forma de un sólido de color amarillo pálido (96 mg, 21 %).

Éster metílico del ácido 4-(5-cloro-2-isopropilaminopiridin-4-il)-1-(tolueno-4-sulfonil)-1H-pirrol-2-carboxílico: A una solución de W,W-2-(5-cloro-4-yodo-piridil)-isopropilamina (0,53 g, 1,8 mmol, 1,0 equivalente) y éster metílico del ácido 4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolan-2-il)-1-(tolueno-4-sulfonil)-1H-pirrol-2-carboxílico (0,78 g, 1,8 mmol, 1,0 equivalente) en DME (4,0 ml) se le añadió una solución acuosa de carbonato de sodio 2M (1,0 ml) seguido de Pd(PPh³)⁴(0,21 mg, 0,18 mmol, 0,1 equivalente). El tubo para microondas se cerró herméticamente y la mezcla de reacción se irradió con microondas durante 1800 s a 170 °C. El producto en bruto de seis reacciones se combinó, se diluyó en acetato de etilo y se lavó con agua. Después de secar la capa orgánica con sulfato de sodio, se retiró el disolvente y el aceite espeso resultante se adsorbió en gel de sílice. Después se purificó el producto en bruto mediante cromatografía ultrarrápida en sílice, eluyendo con mezclas de hexanos/acetato de etilo (desde 99:1 hasta 70:30) para obtener el compuesto del título en forma de un sólido de color amarillo (3,1 g, 61 % en dos pasos). T^r(min) 6,556. MS FIA: 448,1 ES+. RMN ¹H 81,45 (d, 6H), 2,5 (s, 3H), 3,81 (s, 3H), 6,8 (s, 1H), 7,35 (s, 1H), 7,4 (d, 2H), 8,0 (m, 3H), 8,3 (s, 1H).

Éster metílico del ácido 4-(5-cloro-2-isopropilaminopiridin-4-il)-1-(2,4,6-trimetilbencenosulfonil)-1H-pirrol-2-carboxílico: A una solución de W,W-2-(5-cloro-4-yodo-piridil)-isopropilamina (96 mg, 0,32 mmol, 1,0 equivalente) y éster metílico del ácido 4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolan-2-il)-1-(2,4,6-trimetilbencenosulfonil)-1H-pirrol-2-carboxílico (152 mg, 0,35 mmol, 1,1 equivalentes) en DME (2 ml), se le añadió una solución acuosa de carbonato de sodio 2 M (0,2 ml) seguida de Pd(PPh³)⁴(37 mg, 0,032 mmol, 0,1 equivalente). La mezcla de reacción se agitó a 80 °C durante 16 horas. El producto en bruto se diluyó en acetato de etilo y se lavó con agua. Después de secar la capa orgánica con sulfato de sodio, se retiró el disolvente y el aceite espeso resultante se adsorbió en gel de sílice. Después se purificó el producto en bruto mediante cromatografía ultrarrápida sobre sílice, eluyendo con mezclas de hexanos/acetato de etilo (desde 99:1 hasta 80:20) para obtener el compuesto del título en forma de un sólido de color amarillo (65 mg, 43 %). T^r(min) 7,290. MS FIA:476,1 ES+.

Ácido 4-(5-cloro-2-isopropilaminopiridin-4-il)-1H-pirrol-2-carboxílico:

Método A. (Microondas)

Se añadió una solución de éster metílico del ácido 4-(5-cloro-2-isopropilaminopiridin-4-il)-1-(tolueno-4-sulfonil)-1 H-pirrol-2-carboxílico (3,1 g, 6,9 mmol, 1,0 equivalente) en THF (2,0 ml) a una solución de hidróxido de litio monohidratado (710 mg, 17,3 mmol, 2,5 equivalentes) en agua (3,0 ml). El tubo para microondas se cerró herméticamente y la mezcla de reacción se irradió con microondas durante 1200 s a 150 °C. La solución en bruto se acidificó con HCl acuoso 6 N. El disolvente se evaporó para obtener el compuesto del título que se usó directamente sin purificación adicional. T^r(min): 3,574. FIA MS: 279,9 ES+; 278,2 ES-.

Método B: (Térmico)

Se añadió una solución de éster metílico del ácido 4-(5-cloro-2-isopropilaminopiridin-4-il)-1 -(2,4,6-trimetilbencenosulfonil)-1H-pirrol-2-carboxílico (0,69 g, 1,4 mmol, 1,0 equivalente) en THF (3,0 ml) a una solución de hidróxido de litio monohidratado (1,19 g, 29 mmol, 20,0 equivalentes) en agua (3,0 ml). Después la mezcla se calentó a reflujo durante 8 horas. La solución en bruto se acidificó con HCl acuoso 6 N hasta que se enturbió, el disolvente orgánico se retiró parcialmente y el producto precipitó. El compuesto del título se aisló por filtración y se lavó con agua y éter dietílico, produciendo un sólido de color blanco (0,38 g, 96 %).

[1-(3-Clorofenil)-2-hidroxietil]amida del ácido 4-(5-cloro-2-isopropilaminopiridin-4-il)-1H-pirrol-2-carboxílico: A una suspensión de ácido 4-(5-cloro-2-isopropilaminopiridin-4-il)-1H-pirrol-2-carboxílico (1,93 g, 6,9 mmol, 1,0 equivalente) en DMF (5,0 ml) se le añadió EDCI (1,45 g, 7,6 mmol, 1,1 equivalentes), HOBt (0,94 g, 6,9 mmol, 1,0 equivalente) y (S)-3-clorofenilgMcinol (1,58 g, 7,6 mmol, 1,1 equivalentes). Después se le añadió diisopropiletilamina (2,7 ml) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante toda la noche. Después la mezcla se vertió en agua y se extrajo con acetato de etilo. Después de secar sobre sulfato de sodio, el disolvente se retiró y el producto en bruto se adsorbió en gel de sílice. La purificación se efectuó mediante cromatografía ultrarrápida sobre sílice, eluyendo con mezclas de hexanos/acetona (desde 80:20 hasta 60:40) para obtener el compuesto del título en forma de un sólido de color blanco (1,9 g, 64 %). T ^r(min) 4,981s. FIA MS: 433,1 ES+; 431,2 ES-. RMN ¹H (CD³OD) 5 1,31 (d, 6H), 3,85 (m, 3H), 5,15 (t, 1H), 7,01 (s, 1H), 7,25 (m, 3H), 7,4 (s, 1H), 7,45 (s, 1H), 7,7 (s, 1H), 7,95 (s, 1H).

Ejemplo de referencia 2

El compuesto 1-9 se preparó también de acuerdo con el siguiente método alternativo:

N-óxido de 2,5-dicloro-4-nitropiridina: A una suspensión de 2-cloro-5-cloropiridina (10 g, 0,067 mol) en anhídrido acético (25 ml) se le añadió peróxido de hidrógeno al 30 % (25 ml) en pequeñas porciones. Esta mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 24 horas y después se calentó a 60 °C durante 30 horas. Después de retirar el exceso de ácido acético a presión reducida, el residuo se añadió en pequeñas porciones a ácido sulfúrico concentrado (15 ml). La solución resultante se añadió a una mezcla de ácido sulfúrico concentrado (15 ml) y ácido nítrico fumante (25 ml) y después se calentó a 100 °C durante 90 minutos. La mezcla de reacción se vertió sobre hielo, se neutralizó con carbonato de amonio sólido y finalmente con amoníaco acuoso hasta que se obtuvo un pH básico y se formó un precipitado. El precipitado se recogió por filtración para obtener el compuesto del título en forma de un sólido de color amarillo pálido (3,1 g), T ^r(min) 3,75. MS FIA no muestra picos. RMN ¹H (DMSO-d⁶) 58,78 (s, 1H), 9,15 (s, 1H).

N-óxido de 4-bromo-2-cloro-5-W-isopropilpiridin-2-amina: A 2,5-dicloro-4-nitropiridina N-óxido (400 mg, 1,9 mmol) se le añadió bromuro de acetilo (2 ml) muy lentamente. Después la mezcla de reacción se calentó a 80 °C durante 10 minutos. El disolvente se retiró bajo una corriente de nitrógeno y el producto en bruto se secó en alto vacío. El material en bruto (165 mg, 0,62 mmol) se disolvió en etanol (2 ml), se le añadió /so-propilamina (0,53 ml) y la mezcla resultante se calentó a 80 °C durante 2 horas. La solución en bruto se purificó después por HPLC de fase inversa (acetonitrilo/agua/TFA al 1 %) para obtener el compuesto del título en forma de un sólido de color amarillo pálido (60 mg, 36,6 %). T^r(min) 5,275. MS FIA: 264,8, 266,9 ES+.

[1-(3-Clorofenil)-2-hidroxietil]amida del ácido 4-(5-cloro-2-isopropilaminopiridin-4-il)-1H-pirrol-2-carboxílico (1-9): Se disolvieron N-óxido de 4-bromo-2-cloro-5-W-isopropilpiridin-2-amina (25 mg, 0,094 mmol, 1,0 equivalente) y éster metílico del ácido 4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolan-2-il)-1-(2,4,6-trimetilbencenosulfonil)-1H-pirrol-2-carboxílico (39 mg, 0,094 mmol, 1,0 equivalente) en benceno (5 ml) después se le añadieron Na²CO³2 M (1 ml) y Pd(PPh³)⁴(115,6 mg, 0,1 mmol, 0,2 equivalente) y la suspensión resultante se calentó a reflujo a 80 °C durante 16 horas. La mezcla de reacción se diluyó en acetato de etilo, se lavó con agua y se secó sobre sulfato de sodio anhidro para obtener N-óxido de éster metílico del ácido 4-(5-cloro-2-isopropilamino-piridin-4-il)-1-(2,4,6-trimetil-bencenosulfonil)-1 H-pirrol-2-carboxílico (Tr(min) 6,859. MS FIA: 492,0 ES+) que después se trató con una solución de PCh 2 M en diclorometano (1 ml) a temperatura ambiente. Después de 10 minutos, el disolvente se retiró bajo una corriente de nitrógeno y el aceite en bruto se disolvió en metanol (1 ml) y NaOH acuoso 1 M (1 ml). La mezcla resultante se calentó a reflujo durante 16 horas, después la solución en bruto se acidificó empleando HCl acuoso 1 M y se retiró el disolvente. El ácido 4-(5-cloro-2-isopropilamino-piridin-4-il)-1H-pirrol-2-carboxílico resultante (T^r(min) 3,527. MS FIA: 279,4 ES+; 278,2 Es-) se suspendió en DMF (3 ml) junto con e Dc I (36 mg, 0,19 mmol, 2 equivalentes), HOBt (26 mg, 0,19 mmol, 2 equivalentes), sal de HCl de (S)-3-clorofenilglicinol (59 mg, 0,28 mmol, 3 equivalentes) y DIEA (0,12 ml, 0,75 mmol, 8 equivalentes). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. La mezcla de reacción se diluyó en acetato de etilo, se lavó con agua y se secó sobre sulfato de sodio. Después de retirar el disolvente a presión reducida, el producto en bruto se purificó por HPLC de fase inversa (acetonitrilo/agua/TFA al 1 %) para obtener el compuesto del título en forma de un sólido de color blanco (4,8 mg, 8,1 %).

Ejemplo 3

El compuesto 1-3 se preparó como sigue a continuación:

N-óxido de 2-cloro-5-metil-4-nitropiridina: El compuesto del título se preparó de manera sustancialmente similar a la descrita por Z. Talik, A. Puszko, Roczniki Chemii Ann. Soc. Chim. Polonorum 1976, 50, 2209, como sigue a continuación. A una suspensión de 2-cloro-5-metilpiridina (10 g, 0,078 mol) en anhídrido acético (25 ml) se le añadió peróxido de hidrógeno al 30 % (25 ml) en pequeñas porciones. Esta mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 24 horas y después se calentó a 60 °C durante 30 horas. Después de retirar el exceso de ácido acético a presión reducida, el residuo se añadió en pequeñas porciones a ácido sulfúrico concentrado (15 ml). La solución resultante se añadió a una mezcla de ácido sulfúrico concentrado (15 ml) y ácido nítrico fumante (25 ml) y después se calentó a 100 °C durante 90 minutos. La mezcla de reacción se vertió sobre hielo, se neutralizó con carbonato de amonio sólido y finalmente con amoníaco acuoso hasta que se obtuvo un pH básico y se formó un precipitado. Este precipitado se recogió por filtración para obtener el compuesto del título en forma de un sólido de color amarillo pálido (9,4 g, 0,050 mol, T^r(min) 3,272, FIA ES+ 188,9, E S -188,0).

N-óxido de 2-((S)-1-hidroximetilpropilamino)-5-metil-4-nitro-piridina: Se disolvió 2-cloro-5-metil-4-nitropiridina N-óxido (200 mg, 1,06 mmol, 1,0 equivalente) en etanol (1,5 ml). Después se le añadió (S)-2-aminobutanol (284 mg, 3,2 mmol, 3,0 equivalentes) y la mezcla resultante se calentó a reflujo durante 16 horas. La solución en bruto se purificó después por HPLC de fase inversa (acetonitrilo/agua/TFA) para obtener el compuesto del título en forma de un sólido de color pardo (146 mg, 0,61 mmol, T ^r(min) 3,787; FIA e S+ 241,8, ES- no se observó).

Éster 2-(4-bromo-5-metilpiridin-2-ilamino)-butílico del ácido acético: Se disolvió 2-((S)-1-hidroximetilpropilamino)-5-metil-4-nitro-piridina N-óxido (146 mg, 0,61 mmol) en bromuro de acetilo (1,5 ml). Después la mezcla se calentó a 90 °C durante 3 horas. Se evaporó el bromuro de acetilo bajo una corriente de nitrógeno y el material en bruto se disolvió en una solución 2 M de PCl³en diclorometano (2 ml). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora y la mezcla de reacción se vertió en una solución acuosa saturada de NaHCO³y se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con agua, después el disolvente se secó sobre Na²SO⁴y se retiró a presión reducida para obtener el compuesto del título en forma de un aceite de color pardo (149 mg, (T^r(min) 4,146; FIA ES+ 300,9, ES-no se observó).

Éster metílico del ácido 4-[2-(S)-(1-acetoximetilpropilamino)-5-metilpiridin-4-il]-1-(2,4,6-trimetilbencenosulfonil)-1H-pirrol-2-carboxílico: A una solución de éster 2-(4-bromo-5-metilpiridin-2-ilamino)-butílico del ácido acético (149 mg, 0,5 mmol, 1,0 equivalente) y éster metílico del ácido 4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolan-2-il)-1-(2,4,6-trimetilbencenosulfonil)-1H-pirrol-2-carboxílico (215 mg, 0,50 mmol, 1,0 equivalente) en benceno (5 ml) se le añadió Na²CO³2 M (1 ml) y Pd(PPh³)⁴(115,6 mg, 0,1 mmol, 0,2 equivalente). Después de calentar a reflujo durante 16 horas, la mezcla se vertió en agua y se extrajo con acetato de etilo. El extracto orgánico se secó en Na²SO⁴y el disolvente se retiró a presión reducida para obtener el compuesto del título (T^r(min) 6,684; FIA ES+ 528,3, ES- no se observó) que se utilizó en el paso siguiente.

[1 -(S)-(3-Clorofenilglicinol]amida del ácido 4-[2-(S)-hidroximetilpropilamino)-5-metilpiridin-4-il]-1 H-pirrol-2-carboxílico (1-3): El éster metílico del ácido 4-[2-(S)-(1-acetoximetilpropilamino)-5-metilpiridin-4-il]-1-(2,4,6-trimetilbencenosulfonil)-1H-pirrol-2-carboxílico en bruto se disolvió en metanol (1,5 ml) y NaOH acuoso 1 M (2 ml), y la mezcla se calentó a reflujo durante 16 horas. Después de acidificar con HCl acuoso 1 M (2,2 ml), el disolvente se retiró a presión reducida y el producto en bruto se suspendió a continuación en DMF (5 ml). Después de añadir EDCI (192 mg, 1,0 mmol), HOBt (135 mg, 1,0 mmol) y DIeA (0,48 ml, 3,0 mmol), la mezcla se agitó durante 30 minutos a temperatura ambiente antes de añadir sal de HCl de (S)-3-clorofenilglicinol (312 mg, 1,5 mmol) y después la mezcla de reacción se agitó durante 16 horas a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se disolvió en acetato de etilo, se lavó con agua, la capa orgánica se secó en Na²SO⁴y el disolvente se retiró a presión reducida. El residuo en bruto se purificó por HPLC de fase inversa (acetonitrilo/agua/TFA) para obtener el compuesto del título como un sólido incoloro (29,3 mg, 0,07 mmol, T ^r(min) 4,563; FIA ES+ 443,1, ES- 441,5, ES+ 443,1, ES- 441,5; RMN ¹H (CD³OD) 8 1,0 (t, 3H), 1,50 (m, 1H), 1,7 (m, 1H), 2,3 (s, 3H), 3,5 (m, 1H), 3,7 (m, 2H), 3,8 (m, 2H), 5,1 (t, 1H), 7,0 (s, 1H), 7,3 (m, 4H), 7,4 (dos s, 2H), 7,6 (s, 1H).

Ejemplo 4

Datos de caracterización

Los compuestos de la presente invención se prepararon por métodos sustancialmente similares a los descritos en los Ejemplos 1 a 3 anteriores y por métodos conocidos por los expertos en la materia. Los datos de caracterización para estos compuestos se resumen en la tabla 3 siguiente que incluye datos de HPLC, MS y RMN ¹H. A menos que se indique lo contrario, los datos de RMN ¹H se obtuvieron a 500 MHz y todos los desplazamientos químicos se informan en ppm. Los números de los compuestos corresponden a los números de los compuestos indicados en las tablas 1,2 y 3. Como se usa en el presente documento, el término "T ^r" se refiere al tiempo de retención, en minutos, obtenido para el compuesto designado usando el método de HPLC descrito antes. Cuando se obtuvo más de una medición analítica para un determinado compuesto, como los descritos en el presente documento, sólo se proporciona una única medida de ejemplo.

Ejemplo 5

Síntesis de profármacos

Los profármacos de fórmula II se preparan a partir de compuestos hidroxilo de fórmula I por diversos métodos conocidos por los expertos en la materia. Estos métodos incluyen, pero no se limitan a, acilación mediante un ácido carboxílico deseado o formación de fosfato. Cuando el resto hidroxilo de fórmula I se acila por un aminoácido deseado, el resto amino del aminoácido puede ser opcionalmente protegido por un grupo protector de amino adecuado como los descritos anteriormente en el presente documento.

La preparación del profármaco L-valina del compuesto de referencia 1-9 se describe en detalle a continuación.

(2S)-(S)-2-(4-(5-cloro-2-(isopropilamino)piridina-4-il)-1H-pirrol-2-carboxamido)-2-(3-clorofenil)etil-2-amino-2-metilbutanoato (II-1): A una solución del compuesto 1-9 (1 g, 2,3 mmol, 1,0 equivalente) en diclorometano (50 ml) se le añadieron DIEA (1,1 ml, 6,9 mmol, 3,0 equivalentes) y W-BOC-L-Valina (1,2 g, 5,52 mmol, 2,4 equivalentes). Después se le añadió PyBOP (2,9 g, 5,75 mmol, 2,5 equivalentes) lentamente y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 48 horas. Después la mezcla se lavó con agua y se secó sobre sulfato de sodio. El sólido en bruto se adsorbió en sílice y después se purificó mediante cromatografía ultrarrápida eluyendo con mezclas de hexano/acetato de etilo (desde 90:10 hasta 50:50), produciendo el compuesto protegido con Boc en forma de un sólido de color blanco (786 mg). Este producto intermedio (761 mg, 1,2 mmol) se disolvió en dioxano (1 ml) y se trató con una solución de HCl 4 M en dioxano. La mezcla resultante se agitó durante 16 horas a temperatura ambiente. Después se retiró el disolvente y se obtuvo la sal 2 x HCl del compuesto del título en forma de un sólido de color blanco (571 mg). HPLC T^r: 4,56 minutos. FIA MS: 531,9 ES+; 529,8 ES-. CL/EM: T ^r: 2,07 minutos; 532,0 ES+; 530,1 ES-. RMN 1H (CD³OD) 80,9 (dd, 6H), 1,35 (d, 6H), 2,2 (m, 1H), 3,9 (m, 2H), 4,7 (m, 2H), 5,6 (m, 1H), 7,1 (s, 1H), 7,3 (d, 1H), 7,35 (t, 1H), 7,4 (d, 1H), 7,5 (s, 1H), 7,6 (s, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,95 (s, 1H).

La preparación de un profármaco fosfato del compuesto de referencia 1-9 se describe en detalle a continuación.

4-(5-Cloro-2-(isopropilamino)piridina-4-il)-A/-((S)-1-(3-clorofenil)-2-hidroxietil)-1H-pirrol-2-carboxamida fosfato de diferc-butilo: Se disolvieron el compuesto 1-9 (1 g, 2,3 mmol, 1,0 equivalente) y tetrazol (241 mg, 3,45 mmol, 1,5 equivalentes) en diclorometano (5 ml) y acetonitrilo (5 ml) en atmósfera de nitrógeno a temperatura ambiente. Se añadió gota a gota diisopropil fosfoamidita de di-ferc-butilo (1,1 ml, 3,45 mmol, 1,5 equivalentes) y la mezcla resultante se agitó durante 16 horas. Después la mezcla de reacción se enfrió en un baño de hielo, se trató con una solución de ferc-butilhidroxiperóxido 6 M (3 ml) y se agitó durante 20 minutos. La solución transparente se diluyó en diclorometano y una pequeña cantidad de metanol, se lavó con Na2S2O3 y agua, y se secó sobre sulfato de sodio. El aceite en bruto se adsorbió en gel de sílice y se purificó primero mediante cromatografía ultrarrápida eluyendo con mezclas de hexano/acetona (desde 90:10 hasta 60:40) y después mediante HPLC de fase inversa (acetonitrilo/agua/TFA al 1 %), produciendo el di-t-butil éter intermedio en forma de un sólido de color blanco (336 mg). HPLC Tr: 6,53 minutos, MS FIA: 625,0 ES+; 623,1ES-.

4-(5-Cloro-2-(isopropilamino)piridina-4-il)-A/-((S)-1-(3-clorofenil)-2-hidroxietil)-1H-pirrol-2-carboxamida fosfato (II-2): El intermedio fosfato de t-butilo (336 mg, 0,54 mmol) se suspendió en dioxano (5 ml) y se le añadió una solución de HCl 4 M en dioxano. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. Después se retiró el disolvente y el fosfato libre se disolvió en una solución de d Ms O (15 ml), metanol (50 ml) y agua (25 ml) y se trató con una solución de Na2CO3 2 M (0,25 ml). El metanol se retiró a presión reducida y la mezcla de agua/DMSO se retiró empleando un liofilizador para obtener el compuesto del título en forma de un sólido de color blanquecino (187 mg).

HPLC T ^r: 4,24 minutos. FIA MS: 512,9 ES+; 510,9 ES-. CL/EM: T^r2,39 minutos; 512,9 ES+; 510,9 ES-. RMN ¹H (CD³OD) 8 1,2 (d, 6H), 3,9 (m, 1H), 4,1 (dm, 2H), 5,1 (m, 1H), 6,7 (s, 1H), 7,2 (d, 1H), 7,25 (t, 1H), 7,3 (m, 2H), 7,45 (s, 1H), 7,55 (s, 1H), 7,9 (s, 1H).

Ejemplo 6

Ensayo de inhibición de ERK2:

Se ensayaron compuestos para determinar si inhibían a ERK2 mediante un ensayo espectrofotométrico acoplado para la enzima (Fox et al (1998) Protein Sci 7, 2249). En este ensayo, una concentración fija de ERK2 activada (10 nM) se incubó con diversas concentraciones del compuesto en d Ms O (2,5%) durante 10 minutos a 30 °C en solución amortiguadora HEPES 0,1 M, pH 7,5, que contenía MgCh 10 mM, fosfoenolpiruvato 2,5 mM, NADH 200 pM, 150 pg/ml de piruvato cinasa, 50 pg/ml de lactato deshidrogenasa y péptido erktide 200 pM. La reacción se inició por adición de ATP 65 pM. Se monitoreó la velocidad de disminución de la absorbancia a 340 nM. Se evaluó la CI⁵⁰a partir de los datos de velocidad como una función de la concentración del inhibidor.

Se encontró que los compuestos de la presente invención son inhibidores de la proteína cinasa ERK2. En ciertas realizaciones, se encontró que los compuestos inhibían la cinasa ERK2 a una concentración <0,1 pM. En otras realizaciones, se encontró que los compuestos inhibían la cinasa ERK2 a una concentración <0,01 pM.

Ejemplo 7

Ensayo de inhibición de ERK1

Se ensayaron compuestos para determinar si inhibían a ERK1 mediante un ensayo espectrofotométrico acoplado para la enzima (Fox et al (1998) Protein Sci 7, 2249). En este ensayo, una concentración fija de ERK1 activada (20 nM) se incubó con diversas concentraciones del compuesto en d Ms O (2,0%) durante 10 minutos a 30 °C en solución amortiguadora HEPES 0,1 M, pH 7,6, que contenía MgCh 10 mM, fosfoenolpiruvato 2,5 mM, NADH 200 pM, 30 pg/ml de piruvato cinasa, 10 pg/ml de lactato deshidrogenasa y péptido erktide 150 pM. La reacción se inició por adición de ATP 140 pM (20 pl). Se monitoreó la velocidad de disminución de la absorbancia a 340 nM. Se evaluó la Kⁱa partir de los datos de velocidad como una función de la concentración del inhibidor.

Si bien hemos descrito una serie de realizaciones de esta invención, es evidente que nuestros ejemplos básicos pueden ser modificados para proporcionar otras realizaciones que utilicen los compuestos y los métodos de esta invención. Por consiguiente, se apreciará que el alcance de esta invención debe ser definido por las reivindicaciones adjuntas en lugar de por las realizaciones específicas que han sido representadas a modo de ejemplo.

Claims

REIVINDICACIONES

1. El compuesto

2. Una composición que comprende un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 y un portador, adyuvante o vehículo farmacéuticamente aceptable.

3. El compuesto

4. Una composición que comprende un compuesto de acuerdo con la reivindicación 3 y un portador, adyuvante o vehículo farmacéuticamente aceptable.

5. Una sal farmacéuticamente aceptable del compuesto

6. Una composición que comprende la sal farmacéuticamente aceptable del compuesto de acuerdo con la reivindicación 5 y un portador, adyuvante o vehículo farmacéuticamente aceptable.

7. Una sal farmacéuticamente aceptable del compuesto

8. Una composición que comprende la sal farmacéuticamente aceptable del compuesto de acuerdo con la reivindicación 7 y un portador, adyuvante o vehículo farmacéuticamente aceptable.

9. El compuesto

10. Una composición que comprende un compuesto de acuerdo con la reivindicación 9 y un portador, adyuvante o vehículo farmacéuticamente aceptable.

11. El compuesto

12. Una composición que comprende un compuesto de acuerdo con la reivindicación 11 y un portador, adyuvante o vehículo farmacéuticamente aceptable.

13. Una sal farmacéuticamente aceptable del compuesto

14. Una composición que comprende la sal farmacéuticamente aceptable del compuesto de acuerdo con la reivindicación 13 y un portador, adyuvante o vehículo farmacéuticamente aceptable.

15. Una sal farmacéuticamente aceptable del compuesto

16. Una composición que comprende la sal farmacéuticamente aceptable del compuesto de acuerdo con la reivindicación 15 y un portador, adyuvante o vehículo farmacéuticamente aceptable.