ES2868748T3 - Compuesto de piridina - Google Patents

Abstract

Un compuesto representado por la siguiente fórmula general (I): **(Ver fórmula)** en donde A representa uno seleccionado entre las siguientes fórmulas (Ia) a (Id): **(Ver fórmula)** en donde R1 representa un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo C1-C3, y R2 representa un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo C1-C3, o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.

Description

DESCRIPCIÓN

Compuesto de piridina

Campo técnico

La presente invención se refiere a un compuesto que tiene actividad inhibidora selectiva sobre la cinasa RET, cinasa PDGFR, cinasa KIT, cinasa NTRK, cinasa FLT3 y similares y es útil para el tratamiento del cáncer, o una sal del mismo.

La presente invención se refiere a un agente preventivo y/o un agente terapéutico para el cáncer de pulmón, cáncer de la glándula tiroidea, cáncer de mama, cáncer de colon, sarcoma, leucemia, etc., que comprenden, como principio activo, el compuesto mencionado anteriormente o una sal del mismo.

Por otra parte, la presente invención se refiere a una composición para prevenir o tratar las enfermedades mencionadas anteriormente, que comprende, como principio activo, el compuesto mencionado anteriormente o una sal del mismo, uso del compuesto mencionado anteriormente para la producción de un medicamento para prevenir o tratar las enfermedades mencionadas anteriormente.

Se desvela en el presente documento un método para prevenir o tratar las enfermedades mencionadas anteriormente, que comprende administrar una cantidad farmacológicamente eficaz del compuesto mencionado anteriormente a un mamífero (preferentemente, un ser humano).

Antecedentes de la técnica

Cinasa RET, cinasa PDGFR (receptor del factor de crecimiento derivado de plaquetas), cinasa KIT (receptor del factor de células madre), cinasa NTRK (receptor del factor neurotrófico), cinasa FLT3 y similares son todas tirosina cinasas receptoras. Estas cinasas tienen una estructura que penetra en la membrana celular y tienen un sitio de unión al factor de crecimiento fuera de la célula y un sitio activo de tirosina cinasa dentro de la célula. Estas tirosina cinasas receptoras convierten la estimulación por un factor de crecimiento desde el exterior de la célula (= unión a un sitio de unión del factor de crecimiento) en señales en las células (= fosforilación de la proteína corriente abajo) y desempeñan una función en el crecimiento, la división, la diferenciación y la morfogénesis de células). Se considera que la mutación activadora (incluyendo mutación puntual, mutación de supresión, mutación de inserción, mutación de fusión, etc.) o el aumento de la expresión de estas cinasas provoca una gran cantidad de cáncer, sarcoma, leucemia y similares, y, por tanto, los inhibidores de estas cinasas se consideran eficaces para el tratamiento del cáncer, sarcoma, leucemia y similares (referencias no de patentes 1 a 5 y referencia de patente 1).

En particular, con respecto a la cinasa RET, su mutación activadora se ha encontrado en algunos pacientes con cáncer de pulmón, pacientes con cáncer de la glándula tiroidea y similares (referencias no de patentes 6 a 8), y estos pacientes no tienen otras mutaciones. Por consiguiente, la cinasa RET mutada se considera una mutación impulsora de estos cánceres. Es decir, se considera que, si se detecta con precisión un paciente con mutación de la cinasa RET y después se administra al paciente un inhibidor de la cinasa RET que tiene suficiente actividad inhibidora, el cáncer se puede tratar con alta probabilidad. Recientemente, se ha sugerido que la mutación activadora de la cinasa RET provoca el crecimiento del cáncer no solo en el cáncer de pulmón y el cáncer de glándula tiroidea, sino también en varios tipos de cáncer de mama y cáncer de colon (referencias no de patentes 9 a 11).

Hasta la fecha, se han usado agentes que tienen actividad inhibidora de la cinasa RET, tales como cabozantinib, vandetanib y lenvatinib, para pacientes con cáncer con mutación de RET, pero los efectos terapéuticos de dichos agentes han sido débiles y restrictivos (referencia no de patente 12). Se ha considerado que los efectos terapéuticos tan bajos de estos agentes son atribuibles a la baja actividad inhibidora de la cinasa RET de estos compuestos y a la toxicidad (referencia no de patente 13) tal como la hipertensión basada en la inhibición de la cinasa KDR (también conocida como: cinasa VEGFR2) (referencia no de patente 14).

Por otra parte, los compuestos inhibidores de la cinasa RET previamente señalados, incluyendo los agentes existentes mencionados anteriormente, tienen actividad inhibidora débil sobre la cinasa con mutación de modulación de acceso, que es una cinasa mutada representativa que es resistente a los inhibidores de la cinasa (referencia no de patente 15) y, por tanto, a pesar de que dicho compuesto se usa en el tratamiento, el cáncer obtiene resistencia al compuesto en una etapa temprana, de modo que el cáncer se vuelve intratable.

Hasta ahora se ha informado de varios inhibidores de RET (referencias de patentes 1 y 2). Sin embargo, estos inhibidores de RET son problemáticos con respecto a baja actividad inhibidora de la cinasa RET, alta actividad inhibidora de la cinasa KDR, inaplicabilidad a mutantes de modulación de acceso de RET y similares.

Lista de citas

[Referencias de patentes]

[Referencia de patente 1] Publicación Internacional n.° WO 2015/031613

[Referencia de patente 2] Publicación Internacional n.° WO 2015/079251

[Referencias no de patentes]

[Referencia no de patente 1] Levitzki, A. Cytokine & Growth Factor Reviews, 2004, 15 (4), págs. 229-235.

[Referencia no de patente 2] George, D. Advances in Experimental Medicine and Biology, 2003, 532, págs. 141­ 151.

[Referencia no de patente 3] Ashman, L. K. y Griffith, R. Expert Opinion on Investigational Drugs, 2013, 22 (1), págs. 103-115.

[Referencia no de patente 4] Wang, T. et al. Expert Opinion on Therapeutic Patents, 2009, 19 (3), págs. 305-319.

[Referencia no de patente 5] Heinrich, M. C. Mini-Reviews in Medicinal Chemistry, 2004, 4 (3), págs. 255-271. [Referencia no de patente 6] Kohno, T. et al. Nature Medicine, 2012, 18 (3), págs. 375-377.

[Referencia no de patente 7] Matsubara, D. et al. Journal of Thoracic Oncology, 2012, 7 (12), págs. 1872-1876.

[Referencia no de patente 8] Agrawal, N. et al. The Journal of clinical endocrinology and metabolism, 2013, 98 (2), E364-E369.

[Referencia no de patente 9] Mulligan, L. M. Nature Reviews Cancer, 2014, 14 (3), págs. 173-186.

[Referencia no de patente 10] Le Rolle, A. F. et al. Oncotarget, 2015, 6 (30), págs. 28929-28937.

[Referencia no de patente 11] Medico, E. et al. Nature Communications, 2015, 6, artículo n.° 7002.

[Referencia no de patente 12] Phay, J. E. y Shah, M. H. Clinical Cancer Research, 2010, 16 (24), págs. 5936­ 5941.

[Referencia no de patente 13] Hayman, S. R. et al. Current Oncology Reports, 2012, 14 (4), págs. 285-294. [Referencia no de patente 14] Sherman, S. I. Oral Oncology, 2013, 49, págs. 707-710.

[Referencia no de patente 15] Kodama, T. et al. Molecular Cancer Therapeutics, 2014, 13, págs. 2910-2918. Sumario de la invención

La presente invención proporciona un agente terapéutico, por ejemplo, un agente antineoplásico, para diversos tipos de cáncer, sarcoma, leucemia y similares provocados por la mutación activadora o el aumento de la expresión de cinasa, en donde estas enfermedades están provocadas por la cinasa RET y los inhibidores existentes presentan efectos terapéuticos insuficientes sobre estas enfermedades.

Los presentes inventores han pensado que, si se desarrollara un agente que sea mucho más fuerte y tenga mayor selectividad de cinasa que los fármacos existentes y/o este se aplicara a enfermedades provocadas por la mutación activadora o el aumento de la expresión de cinasa, tal como cinasa RET, en los que los inhibidores existentes presentan efectos terapéuticos insuficientes, entre las cinasas cuya mutación activadora o expresión aumentada provoca diversos tipos de cáncer, sarcoma, leucemia, etc., el agente podría proporcionar altos efectos terapéuticos sobre las enfermedades y, por tanto, han realizado estudios intensivos para encontrar dicho agente.

Por consiguiente, los presentes inventores han descubierto que el compuesto que se menciona a continuación representado por fórmula (I) presenta una actividad inhibidora fuerte y selectiva sobre cinasas tales como RET, PDGFR, KIT, NTRK y FLT3, y también presenta una fuerte actividad inhibidora sobre sus mutantes de modulación de acceso. Por otra parte, los inventores también han descubierto que, ya que este compuesto tiene actividad inhibidora débil sobre la cinasa KDR que parece expresar toxicidad cuando se inhibe, y tiene excelente selectividad para las cinasas, este compuesto es útil como producto farmacéutico.

Es decir, los presentes inventores han descubierto que el compuesto representado por la fórmula (I) puede usarse como un medicamento que es un agente preventivo/terapéutico seguro y útil para cánceres, o tales afecciones o enfermedades patológicas relacionadas con el cáncer, que tienen la mutación activadora de cinasas tales como RET, PDGFR, KIT, NTRK y FLT3, o se acompañan del aumento de la expresión de estas cinasas. Basándose en estos hallazgos, los inventores han completado la presente invención.

El compuesto de la presente invención tiene actividad inhibidora selectiva y extremadamente fuerte, en particular, sobre la cinasa RET, y es útil como agente terapéutico para cánceres (en particular, cáncer de pulmón, cáncer de la glándula tiroidea, etc.).

Asimismo, ya que el compuesto de la presente invención tiene un átomo o átomos de nitrógeno de anillo aromático que presentan alcalinidad débil en su estructura, tiene alta solubilidad en agua, en particular en una región ácida, en comparación con compuestos neutros tales como los compuestos desvelados en la publicación internacional n.° WO 2015/031613. Además, ya que se pueden formar sales muy solubles en agua utilizando los átomos de nitrógeno del anillo aromático del compuesto mencionado anteriormente, se puede esperar que el compuesto tenga alta capacidad de absorción oral y sea extremadamente útil como producto farmacéutico.

La presente invención se refiere a los siguientes (1) a (17):

(1) Un compuesto representado por la siguiente fórmula general (I):

[Fórmula 1]

en donde A representa uno seleccionado entre las siguientes fórmulas (la) a (Id):

[Fórmula 2]

en donde R1 representa un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo C1-C3, y R2 representa un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo C1-C3, o

una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.

(2) Uno o dos o más compuestos seleccionados entre los compuestos representados por las siguientes fórmulas estructurales:

[Fórmula 3]

(3) 2-[6-(6,7-Dimetoxiquinolin-3-il)piridin-3-il]-N-[5-(1,1,1-trifluoro-2-metilpropan-2-il)-1,2-oxazol-3-il]acetamida, (3-1) un compuesto que tiene la siguiente fórmula estructural o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[Fórmula 4]

(4) 2-[6-(6,7-Dimetoxiquinolin-3-il)piridin-3-il]-N-[3-(1,1,1-trifluoro-2-metilpropan-2-il)-1,2-oxazol-5-il]acetamida, (4-1) un compuesto que tiene la siguiente fórmula estructural o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[Fórmula 5]

(5) 2-[6-(6,7-Dimetoxiquinolin-3-il)piridin-3-il]-N-[3-(1,1,1-trifluoro-2-metilpropan-2-il)-1H-pirazol-5-il]acetamida, (5-1) un compuesto que tiene la siguiente fórmula estructural o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[Fórmula 6]

(6) 2-[6-(6,7-Dimetoxiquinolin-3-il)piridin-3-il]-N-[1 -metil-3-(1,1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-il)-1H-pirazol-5-il]acetamida,

(6-1) un compuesto que tiene la siguiente fórmula estructural o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[Fórmula 7]

(7) Una sal farmacéuticamente aceptable del compuesto de acuerdo con uno cualquiera de los anteriores (2) a (6).

(8) Una sal de metanosulfonato del compuesto de acuerdo con uno cualquiera de los anteriores (2) a (6).

(9) Un inhibidor de la cinasa RET que comprende, como principio activo, el compuesto según uno cualquiera de los (1) a (8) anteriores o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

(10) Un medicamento que comprende, como principio activo, el compuesto según uno cualquiera de los (1) a (8) anteriores o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

(11) El medicamento según la reivindicación 10 para el tratamiento de una enfermedad provocada por una mutación activadora o el aumento de la expresión de la cinasa RET, una enfermedad asociada con la mutación activadora de la cinasa RET o una enfermedad acompañada de la mutación activadora de la cinasa RET.

(12) El medicamento según el (10) anterior para su uso en la prevención o el tratamiento del cáncer.

(12-1) El medicamento según el (10) anterior para su uso en el tratamiento del cáncer.

(13) El medicamento según el (10) anterior para su uso en el tratamiento del cáncer provocado por la mutación activadora o el aumento de la expresión de la cinasa RET.

(14) El medicamento según el (10) anterior para su uso en el tratamiento del cáncer de pulmón, cáncer de la glándula tiroidea, cáncer de mama o cáncer de colon.

(15) Uso del compuesto según uno cualquiera de los (1) a (8) anteriores o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para la producción de una composición farmacéutica.

(16) El compuesto según uno cualquiera de los (1) a (8) anteriores o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en un método para tratar o prevenir una enfermedad.

En el presente documento se desvela un método para tratar o prevenir el cáncer, que comprende administrar una cantidad farmacológicamente eficaz del compuesto de acuerdo con uno cualquiera de los anteriores (1) a (8) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo a un animal de sangre caliente.

En la presente invención, el "grupo alquilo C1-C3" significa un grupo alquilo lineal o ramificado que tiene de 1 a 3 átomos de carbono, y los ejemplos del grupo alquilo C1-C3 pueden incluir un grupo metilo, etilo, n-propilo o isopropilo. En R1 y R2, el grupo alquilo C1-C3 es preferentemente un grupo metilo. En P2, el grupo alquilo C1-C3 es preferentemente un grupo metilo o un grupo etilo.

En la presente invención, el "átomo de halógeno" significa un átomo de flúor, un átomo de cloro, un átomo de bromo o un átomo de yodo. En X1, X2, X3 y X4, el átomo de halógeno es preferentemente un átomo de cloro o un átomo de bromo.

En la presente invención, el "metal monovalente " es preferentemente litio, sodio o potasio.

En la presente invención, cuando el presente compuesto tiene un grupo básico tal como un grupo amino, se puede convertir en una sal haciéndolo reaccionar con un ácido, o cuando el presente compuesto tiene un grupo ácido, tal como un grupo carboxilo, se puede convertir en una sal al reaccionar con una base. Por consiguiente, la "sal farmacéuticamente aceptable" significa la sal así formada.

Los ejemplos preferidos de las sales basadas en un grupo básico pueden incluir: hidrohaluros, tales como fluorohidrato, clorhidrato, bromhidrato y yodhidrato, sales de ácidos inorgánicos, tales como nitrato, perclorato, sulfato y fosfato; alcanosulfonatos inferiores, tales como metanosulfonato, trifluorometanosulfonato y etanosulfonato, arilsulfonatos, tales como bencenosulfonato y p-toluenosulfonato, sales de ácidos orgánicos, tales como acetato, malato, fumarato, succinato, adipato, citrato, ascorbato, tartrato, oxalato y maleato; y sales de aminoácidos, tales como sal de glicina, sal de lisina, sal de arginina, sal de ornitina, glutamato y aspartato. Las sales basadas en un grupo básico son preferentemente hidrohaluros o sales de ácidos inorgánicos.

Por otro lado, los ejemplos preferidos de las sales basadas en un grupo ácido pueden incluir: pueden mencionarse sales de metales alcalinos, tales como sal de sodio, sal de potasio y sal de litio, sales de metales alcalinotérreos, tales como sal de calcio y sal de magnesio, sales metálicas, tales como sal de aluminio y sal de hierro; sales de amina que incluyen sales inorgánicas, tales como sal de amonio y sales orgánicas, tales como sal de ferc-butilamina, sal de t-octilamina, sal de diisopropilamina, sal de dibencilamina, sal de morfolina, sal de glucosamina, sal de éster alquílico de fenilglicina, sal de etilendiamina, sal de N-metilglucamina, sal de guanidina, sal de dietilamina, sal de trietilamina, sal de diciclohexilamina, sal de N,N'-dibenciletilendiamina, sal de cloroprocaína, sal de procaína, sal de dietanolamina, sal de N-bencilfenetilamina, sal de piperazina, sal de tetrametilamonio y sal de tris(hidroximetil)aminometano; y sales de aminoácidos, tales como sal de glicina, sal de lisina, sal de arginina, sal de ornitina, glutamato y aspartato. Los ejemplos más preferidos pueden incluir sal de magnesio, sal de calcio, sal de diisopropilamina y sal de ferc-butilamina, y un ejemplo particularmente preferido puede ser la sal de ferc-butilamina. El compuesto representado por la fórmula general (I) de la presente invención o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo incluye estereoisómeros del mismo.

El compuesto representado por la fórmula general (I) de la presente invención o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo puede contener una proporción no natural de isótopos atómicos en uno o más átomos que constituyen tal compuesto. Ejemplos de tales isótopos atómicos pueden incluir deuterio (2H), tritio (3H), yodo 125 (125I), carbono 13 (13C) y carbono 14 (14C). Además el compuesto descrito anteriormente puede marcarse radiactivamente con un radioisótopo, tal como tritio (3H), yodo 125 (125I) o carbono 14 (14C). El compuesto radiomarcado es útil como un agente terapéutico o preventivo, un reactivo de investigación como un reactivo de ensayo y un agente de diagnóstico como un agente de formación de imágenes de diagnóstico in vivo. Los isótopos mutantes del compuesto de la presente invención están todos incluidos en el alcance de la presente invención, independientemente de si son radiactivos o no.

Cuando el compuesto representado por la fórmula general (I) de la presente invención o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo se deja en el aire o se recristaliza, absorbe agua o se adhiere agua adsorbida al mismo, o se convierte en un hidrato en algunos casos. Tal hidrato también se incluye en la sal de la presente invención.

El compuesto representado por la fórmula general (I) de la presente invención o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo a veces absorbe otro cierto tipo de disolvente y, por tanto, se convierte en un solvato. Tal solvato también se incluye en la sal de la presente invención. También se describen compuestos que se metabolizan in vivo y se convierten en los compuestos de piridina descritos anteriormente representados por la fórmula general (I) o sales de los mismos.

A continuación, se describirán métodos representativos para producir el compuesto representado por la fórmula general (I) a continuación. El compuesto de la presente invención se puede producir mediante varios métodos de producción, y los siguientes métodos de producción se dan solo como ejemplos del presente método de producción, y la presente invención no debe limitarse a estos métodos de producción. Debe observarse que, tras la reacción, los sustituyentes pueden protegerse mediante grupos protectores adecuados, según sea necesario, y que el tipo de tal grupo protector no está particularmente limitado. Se han usado materiales de partida y reactivos comercialmente disponibles sin purificación adicional, a menos que se especifique otra cosa.

Método A: El compuesto descrito anteriormente representado por la fórmula general (I) se puede sintetizar mediante la reacción de condensación de un compuesto de amina (1) con un compuesto de ácido carboxílico (2), como se muestra en la siguiente fórmula 1.

<Fórmula 1>

[Fórmula 8]

en donde A se define anteriormente.

(A-1) Compuesto de amina (1)

Como compuesto de amina (1) usado en la presente reacción, se pueden usar los siguientes compuestos (1a) a (1d). Los compuestos (1a) y (1b) se pueden sintetizar de acuerdo con el método descrito en J. Med. Chem., 2012, 55, 1082-1105. Los compuestos de amina (1c) y (1d) se pueden sintetizar de acuerdo con el método descrito en el segunda etapa del Ejemplo 42, sección 155 del documento WO 2014/141187.

[Fórmula 9]

en donde R1 y R2 se definen anteriormente.

(A-2) Compuesto de ácido carboxílico (2)

(A-2-1) Método de producción 1 del compuesto de ácido carboxílico (2)

<Fórmula 2>

[Fórmula 10]

en donde P1 representa un átomo de hidrógeno o un grupo protector de ácido carboxílico, B1 representa ácido borónico, un éster de ácido borónico, pinacolato de ácido borónico, una sal de trifluoroborato potásico, triolborato cíclico o boronato de MIDA y X1 representa un átomo de halógeno.

El compuesto de ácido carboxílico (2) se puede sintetizar, por ejemplo, realizando una reacción de acoplamiento de Suzuki usando un derivado de ácido 2-halopiridina acético (3) y un derivado de ácido quinolin-3-borónico (4), como se muestra en la fórmula (2) anterior. Cuando P1 es un grupo protector de ácido carboxílico, una vez completada la reacción de acoplamiento de Suzuki, el resultante se somete a una reacción de desprotección tal como una reacción de hidrólisis para que el producto de reacción pueda conducir al compuesto de ácido carboxílico (2).

Con respecto al grupo protector de ácido carboxílico, los grupos protectores adecuados se pueden determinar con referencia a Peter G. M. Wuts, Theodora W. Greene, Greene's Protecting Groups in Organic Synthesis, 4a edición, Wiley-Interscience, 2006, y similares. El grupo protector P1 es preferentemente un grupo metilo, un grupo etilo o un grupo t-butilo. En cuanto a la reacción de desprotección, se pueden determinar las condiciones de reacción adecuadas en función del tipo de grupo protector usado, con referencia a Peter G. M. Wuts, Theodora W. Greene, Greene's Protecting Groups in Organic Synthesis, 4a edición, Wiley-Interscience, 2006, y similares.

(A-2-1-1) Método de producción del derivado del ácido 2-halopiridina acético (3)

Con respecto al derivado de 2-halopiridina (3) como material de partida usado en la presente reacción, se puede usar un compuesto disponible comercialmente, o se puede sintetizar de acuerdo con un método conocido. Como alternativa, en lugar del derivado de 2-halopiridina (3), puede usarse un derivado de 2-(trifluorometanosulfoniloxi)piridina, o derivados de 2-(sulfoniloxi sustituido)piridina, tales como un derivado de 2-(ptoluensulfoniloxi)piridina y un derivado de 2-(metanosulfoniloxi)piridina.

Los ejemplos preferidos del derivado de 2-halopiridina (3) incluyen ácido 2-cloropiridin-5-ilacético, 2-cloropiridin-5-il acetato de metilo, 2-cloropiridin-5-il acetato de etilo y 2-cloropiridin-5-il acetato de t-butilo.

(A-2-1-2) Método de producción del derivado del ácido quinolin-3-borónico (4)

Los ejemplos del derivado del ácido quinolin-3-borónico (4) pueden incluir los compuestos (4a) a (4f), como se muestra en la siguiente fórmula 3, pero los ejemplos no se limitan a los mismos.

<Fórmula 3>

[Fórmula 11]

en donde P2 representa un grupo alquilo C1-C3, X2 representa un átomo de halógeno y M representa un metal monovalente.

Los derivados de ácido quinolin-3-borónico (4a), (4b) y (4c) pueden sintetizarse a partir de la 3-haloquinolina (5) mostrada en la fórmula 3 anterior. Por ejemplo, se permite que el n-butil-litio actúe sobre la 3-haloquinolina (5) que se puede sintetizar de acuerdo con un método conocido, para obtener un derivado de 3-litioquinolina y, posteriormente, se permite que el borato de trialquilo como el borato de triisopropilo actúe sobre el derivado de 3-litioquinolina para sintetizar el derivado de éster de ácido quinolin-3-borónico (4a). Asimismo, el derivado de éster de ácido quinolin-3-borónico (4a) se hidroliza, de modo que se puede conducir al derivado de ácido quinolin-3-borónico (4c). De otro modo, se permite que bis(pinacolato)diboro actúe sobre la 3-haloquinolina (5) en presencia de un catalizador de paladio, de modo que la 3-haloquinolina (5) pueda conducir al derivado de éster de ácido quinolin-3-borónico ( 4b).

Adicionalmente, en lugar del derivado de ácido quinolin-3-borónico (4c) o los derivados de éster de ácido quinolin-3-borónico (4a) y (4b), también se puede usar la sal de trifluoroborato potásico (4d), el triolborato cíclico (4e) o el boronato de MIDA (4f). La sal de trifluoroborato potásico (4d), el triolborato cíclico (4e) y el boronato de MIDA (4f) se pueden sintetizar usando el derivado del ácido quinolin-3-borónico (4c) o los derivados del éster del ácido quinolin-3-borónico (4a ) y (4b) como materias primas de acuerdo con un método conocido.

Después de la finalización de la síntesis, los derivados del ácido quinolin-3-borónico (4a) a (4f) pueden aislarse, o pueden someterse directamente a una reacción de acoplamiento de Suzuki, sin realizar aislamiento y purificación. (A-2-1-3) Reacción de acoplamiento de Suzuki de derivado de ácido 2-halopiridinacético (3) con derivado de ácido quinolin-3-borónico (4)

En la presente reacción, se puede usar un catalizador que contiene paladio. Los ejemplos del catalizador que se puede usar en el presente documento pueden incluir tetraquis(trifenilfosfina)paladio (0), bis[tris(2-met¡lfenil)fosf¡na]palad¡o (0), bis(tri-tercbutilfosfina)paladio (0), bis(triciclohexilfosfina)paladio (0), dicloruro de bis(trifenilfosfina)paladio (II), [1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio (II), diclorobis(tri-o-tolilfosfina)paladio (II), dicloro-bis(triciclohexilfosfina)paladio (II), dicloro[2,2'-bis(difenilfosfino)-1,1'-binaftil]paladio (II), dicloro[9,9-dimetil-4,5-bis(difenilfosfino)xanteno]paladio (II), dicloruro de [1,3-bis(2,6-diisopropilfenil)imidazol-2-ilideno](3-cloropiridil)paladio (II) (PEPSI (marca registrada)-catalizador IPr), cloro(2-diciclohexilfosfino-2',6'-dimetoxi-1,1'-bifenil)[2-(2-aminoetil)fenil]paladio (II) (SPhos Pd G1), cloro(2-diciclohexilfosfino-2',4',6'-triisopropil-1,1 '-bifenil)[2-(2-aminoetil)fenil]paladio (II) (xPhos Pd G1), cloro(trifenilfosfina)[2-(2'-amino-1,1'-bifenil)]paladio(II), cloro[tri(otolil)fosfina][2-(2'-amino-1,1'-bifenil)]paladio(II), cloro[(triciclohexilfosfina)-2-(2'-amino1,1'-bifenil)]paladio (II) (PCy3 Pd G2), cloro[(tri t-butilfosfina)-2-(2'-amino-1,1'-bifenil)]paladio (II) (P(tBu)3 Pd G2), cloro(2-diciclohexilfosfino-2',6'-dimetoxi-1,1'-bifenil)[2-(2'-amino-1,1'-bifenil)]paladio (II) (SPhos Pd G2), cloro(2-diciclohexilfosfino-2',4',6'-triisopropil-1,1'-bifenil)[2-(2'-amino-1,1'-bifenil)]paladio (II) (XPhos Pd G2), metanosulfonato de [2,2'-bis(difenilfosfino)-1, 1 '-binaftil][2-(2'-amino-1,1'-bifenil)]paladio (II) (rac-BINAP Pd G3), metanosulfonato de (2-diciclohexilfosfino-2',6'-dimetoxibifenil)[2-(2'-amino-1,1'-bifenil)]paladio (II) (SPhos Pd G3), metanosulfonato de [(4,5-bis( difenilfosfino)-9,9-dimetilxanteno)-2-(2'-amino-1,1'-bifenil)]paladio (II) (XantPhos Pd G3), metanosulfonato de (2-diciclohexilfosfino-2',4',6'-triisopropil-1,1'-bifenil)[2-(2'-amino-1,1'-bifenil)]paladio (II) (XPhos Pd G3), acetato de paladio (II), tris(dibencilidenoacetona)dipaladio (O) y un catalizador de paladio sobre carbono.

Junto con el catalizador de paladio descrito anteriormente, se puede seleccionar y usar un ligando, según sea necesario. Los ejemplos del ligando pueden incluir trifenilfosfina, tri(o-tolil)fosfina, tri(t-butil)fosfina, tri(ciclohexil)fosfina, 1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno (DPPF), 1,2-bis(difenilfosfino)etano (DPPE), 2,2'-bis(difenilfosfino)-1, 1 '-binaftaleno (rac-BINAP), 4,5-bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilxanteno (XantPhos), 2-diciclohexilfosfino-2',6'-dimetoxibifenilo (SPhos) y 2-diciclohexilfosfino-2',4',6'-triisopropilbifenilo (XPhos).

Puede usarse una base en la presente reacción, según sea necesario. Los ejemplos de la base que puede usarse en el presente documento pueden incluir hidrogenocarbonato sódico, hidrogenocarbonato potásico, carbonato sódico, carbonato potásico, carbonato de cesio, hidróxido sódico, hidróxido potásico, hidróxido de talio, fosfato potásico, fluoruro de cesio, t-butóxido de potasio, trietilamina y diisopropiletilamina, pero los ejemplos no están limitados a ellos.

Con el fin de acelerar la reacción o suprimir la generación de subproductos, se pueden añadir aditivos al sistema de reacción, según sea apropiado. Por ejemplo, cuando se usa un cuerpo de triflato como materia prima, se puede agregar cloruro de litio y también, para suprimir la generación de subproductos, se puede añadir formiato potásico o similares.

En la presente reacción se usa preferentemente un sistema de disolvente acuoso. Sin embargo, la presente reacción también se puede llevar a cabo sin usar agua. Los ejemplos del disolvente pueden incluir alcoholes, tales como metanol, etanol, 1-propanol, 2-propanol y 1-butanol, éteres, tales como tetrahidrofurano, 2-metiltetrahidrofurano y 1,4-dioxano, otros disolventes, tales como N,N-dimetilformamida, N,N-dimetilacetamida, N-metilpirrolidona, dimetilsulfóxido, tolueno, benceno, acetonitrilo, diclorometano, 1,2-dicloroetano, cloroformo y acetato de etilo y un disolvente mezcla del disolvente mencionado anteriormente y agua. Los tipos de disolventes usados no se limitan a los disolventes mencionados anteriormente.

En cuanto a la temperatura de reacción, la reacción se puede llevar a cabo a una temperatura adecuada, dependiendo del sustrato de reacción y reactivo usado. La reacción se puede llevar a cabo a una temperatura entre la temperatura ambiente y 180 °C, y más preferentemente a una temperatura entre 60 ° y 140 °C.

En cuanto al tiempo de reacción, la reacción se puede llevar a cabo durante un período de tiempo adecuado, dependiendo del sustrato de reacción y del reactivo usado. El tiempo de reacción es preferentemente de 30 minutos a 6 horas.

(A-2-2) Método de producción 2 del compuesto de ácido carboxílico (2).

El compuesto de ácido carboxílico (2) también se puede sintetizar mediante la reacción de acoplamiento de Suzuki de un derivado de ácido piridin-2-borónico (6) con una 3-haloquinolina (5), como se muestra en la siguiente fórmula 4.

<Fórmula 4>

[Fórmula 12]

en donde B2 representa ácido borónico, un éster de ácido borónico, pinacolato de ácido borónico, una sal de trifluoroborato potásico, triolborato cíclico o MIDA boronato, P3 representa un átomo de hidrógeno o un grupo protector de ácido carboxílico y X3 representa un átomo de halógeno.

En la presente reacción, una porción de ácido borónico del derivado de ácido piridin-2-borónico (6) puede ser ácido borónico, un éster de ácido borónico, pinacolato de ácido borónico, una sal de trifluoroborato potásico, triolborato cíclico o MIDA boronato, como con el derivado de ácido quinolin-3-borónico (4) en el (A-2-1) descrito anteriormente, y además, se pueden aplicar las mismas condiciones de reacción que las usadas en el (A-2-1) descrito anteriormente.

Tal derivado de ácido borónico se puede sintetizar, por ejemplo, a partir de un derivado de 2-halopiridina (3) disponible comercialmente de acuerdo con el método relativo al derivado de ácido quinolin-3-borónico (4) que se describe en el apartado anterior (A-2-1).

Con respecto al grupo protector de ácido carboxílico P3, la protección y desprotección se pueden llevar a cabo de acuerdo con lo descrito anteriormente (A-2-1).

La reacción de acoplamiento del derivado de ácido piridin-2-borónico (6) con la 3-haloquinolina (5) no se limita a la reacción de acoplamiento de Suzuki descrita anteriormente, y también se pueden usar otras diversas reacciones de acoplamiento cruzado. Por ejemplo, se puede usar una reacción de acoplamiento cruzado de uso de un compuesto orgánico de cinc en lugar de un derivado de ácido borónico (reacción de Negishi) o una reacción de acoplamiento cruzado de uso de estaño orgánico (reacción de Stille).

La reacción de desprotección del grupo protector de ácido carboxílico se puede llevar a cabo de acuerdo con el método descrito anteriormente (A-2-1).

(A-2-3) Método de producción 3 del compuesto de ácido carboxílico (2)

El compuesto de ácido carboxílico (2) también se puede sintetizar mediante el método que se muestra en la siguiente fórmula 5. Específicamente, el compuesto de ácido carboxílico (2) se puede sintetizar construyendo un anillo de quinolina de acuerdo con una reacción entre un derivado de amino aldehído (8) y un derivado de acetileno (9).

<Fórmula 5>

[Fórmula 13]

Con respecto al grupo protector de ácido carboxílico P1, la protección y desprotección se pueden llevar a cabo de acuerdo con el método de los descritos anteriormente (A-2-1).

(A-2-3-1) Síntesis de derivado de amino aldehído (8)

El derivado de amino aldehído (8) se puede sintetizar, por ejemplo, a partir del derivado de nitro aldehído (7) o similar, de acuerdo con un método conocido. A partir del derivado de nitro aldehído (7), el derivado de amino aldehído (8) puede sintetizarse mediante un método conocido públicamente usado en la reducción de un grupo nitro. Los ejemplos del método de reducción pueden incluir la reducción por hidrogenación catalítica, un método para usar polvos de hierro en presencia de un ácido, tal como ácido clorhídrico o ácido acético, y un método para usar cloruro de estaño (II).

(A-2-3-2) Síntesis de derivado de acetileno (9)

El derivado de acetileno (9) se puede sintetizar realizando una reacción de acoplamiento de Sonogashira entre el derivado de 2-halopiridina (3) o similar y acetileno protegido con monosililo, y después retirando un grupo sililo del producto de reacción.

La sal de cobre (I) se usa preferentemente como un catalizador en la presente reacción. Los ejemplos de la sal de cobre (I) pueden incluir haluros de cobre, tales como yoduro de cobre (I) y bromuro de cobre (I), pero los tipos de catalizadores de cobre usados no se limitan a ellos.

En la presente reacción, en general, se usa preferentemente un catalizador de paladio. Los ejemplos del catalizador de paladio pueden incluir tetraquis(trifenilfosfina)paladio (0) y dicloruro de bis(trifenilfosfina)paladio (II), pero los tipos de catalizadores de paladio usados no se limitan a los mismos.

En la presente reacción, se usa una base preferentemente. Los ejemplos de la base pueden incluir trietilamina, diisopropiletilamina, dietilamina, diciclohexilamina y ferc-butilamina, pero los tipos de bases usadas no se limitan a ellos.

En la presente reacción, se usa un disolvente preferentemente. El tipo de disolvente usado no está particularmente limitado, siempre que no afecte negativamente a la reacción. Los ejemplos del disolvente pueden incluir éteres como tetrahidrofurano y 1,4-dioxano, y varios disolventes, tales como N,N-dimetilformamida, N,N-dimetilacetamida, N-metilpirrolidona, dimetilsulfóxido, tolueno, benceno, acetonitrilo, diclorometano, 1,2-dicloroetano, cloroformo y acetato de etilo, pero los tipos de disolventes usados no se limitan a ellos. Además, la presente reacción también se puede llevar a cabo sin usar disolventes.

En cuanto a la temperatura de reacción, la reacción se puede llevar a cabo a una temperatura adecuada, dependiendo del sustrato de reacción y reactivo usado. La reacción se puede llevar a cabo a una temperatura entre la temperatura ambiente y 180 °C, y más preferentemente a una temperatura entre 40 °C y 120 °C.

En cuanto al tiempo de reacción, la reacción se puede llevar a cabo durante un período de tiempo adecuado, dependiendo del sustrato de reacción y del reactivo usado. El tiempo de reacción es preferentemente de 30 minutos a 6 horas.

El derivado de 2-halopiridina (3) usado en la presente reacción se puede sintetizar de acuerdo con un método conocido. Además, en lugar del derivado de 2-halopiridina (3), también puede usarse un derivado de 2-(trifluorometanosulfoniloxi)piridina, o derivados de 2-(sulfoniloxi sustituido)piridina, tales como un derivado de 2-(ptoluensulfoniloxi)piridina y un derivado de 2-(metanosulfoniloxi)piridina.

Los ejemplos del acetileno protegido con monosililo que se puede usar en la presente reacción pueden incluir trimetilsililacetileno, trietilsililacetileno, triisopropilsililacetileno, terc-butildimetilsililacetileno y terc-butildifenilsililacetileno, pero no se limitan a los mismos. Asimismo, en lugar del acetileno protegido con monosililo, también se puede usar acetileno monoprotegido apropiadamente protegido. En este caso, es necesario que, una vez completada la reacción de Sonogashira, el acetileno monoprotegido usado se pueda desproteger sin dañar otras estructuras y después se pueda usar en la reacción posterior.

En la reacción de desprotección posterior, se pueden aplicar condiciones de reacción públicamente conocidas dependiendo del tipo de acetileno protegido con mono-sililo u otros acetilenos monoprotegidos usados. Por ejemplo, el método descrito en Peter G. M. Wuts, Theodora W. Greene, Greene's Protecting Groups in Organic Synthesis, 4a edición, Wiley-Interscience, 2006, etc. puede aplicarse. En el caso de usar acetileno protegido con mono-sililo, se puede usar fluoruro de tetra-n-butilamonio o similares, por ejemplo. Como disolvente, por ejemplo, se pueden usar éteres tales como tetrahidrofurano. Además, también se pueden añadir al sistema de reacción aditivos como agua o ácido acético.

(A-2-3-3) Método para producir el compuesto de ácido carboxílico (2) usando derivado de amino aldehido (8) y derivado de acetileno (9)

La presente reacción se puede llevar a cabo, por ejemplo, en presencia de triflato de plata (I) y anilina. Los reactivos usados en el presente documento y una combinación de los mismos no se limitan a los mismos.

Los ejemplos del disolvente que se puede usar en la presente reacción pueden incluir diclorometano, 1,2-dicloroetano y cloroformo, pero no se limitan a los mismos.

Con respecto a la temperatura de reacción, la reacción se puede llevar a cabo a una temperatura de temperatura ambiente a 180 °C, y más preferentemente a una temperatura de 60 °C a 140 °C.

En cuanto al tiempo de reacción, la reacción se puede llevar a cabo durante un período de tiempo adecuado, dependiendo del sustrato de reacción y del reactivo usado. El tiempo de reacción es preferentemente de 30 minutos a 6 horas.

La reacción de desprotección del grupo protector carboxilo se puede llevar a cabo mediante el mismo método que el descrito en el (A-2-1) anterior.

(A-3) Reacción de condensación del compuesto de amina (1) con el compuesto de ácido carboxílico (2)

Los ejemplos de un reactivo de condensación que se puede usar en la presente reacción pueden incluir diciclohexil carbodiimida (DCC), 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida (EDC) y los clorhidrato de los mismos, hexafluorofosfato de benzotriazol-1-iloxi-tris(dimetilamino)fosfonio (BOP), hexafluorofosfato de (benzotriazol-1-iloxi)tripirrolidinofosfonio (PyBOP), hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio (HATU), hexafluorofosfato de O-(benzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio (HBTU), cloruro bis(2-oxo-3-oxazolidinil)fosfínico (BOP-CI), cloruro de 4-(4,6-dimetoxi-1,3,5-triazin-2-il)-4-metilmorfonio (D^m T-MM), hexafluorofosfato de {{[(1-ciano-2-etoxi-2-oxoetilideno)amino]oxi}-4-morfolinometileno}dimetilamonio (COMU), anhídrido propilfosfónico (T3P), N,N'-carbonildiimidazol (CDI) y difenilfosforil azida (DPPA), pero no se limitan a los mismos. El reactivo de condensación es preferentemente anhídrido propilfosfónico (T3P).

En el caso de usar un reactivo de condensación, tal como diciclohexilcarbodiimida (DCC), 1 -etil-3- (3-dimetilaminopropil)carbodiimida (EDC) o el clorhidrato de los mismos, pueden añadirse 1-hidroxibenzotriazol (HOBt), 1-hidroxi-7-azabenzotriazol ( HOAt) o similares.

Asimismo, también puede ser posible añadir una base, tales como trietilamina, diisopropiletilamina, piridina, 2,6-diterc-butilpiridina, 2,6-lutidina, colidina, 2,6-di-terc-butil-4-metilpiridina, 4-dimetilaminopiridina o imidazol, según sea necesario. Sin embargo, los tipos de bases usadas en el presente documento no se limitan a ellos.

Los ejemplos de un disolvente de reacción que se puede usar aquí pueden incluir tetrahidrofurano, 1,4-dioxano, 1,2dimetoxietano, N,N-dimetilformamida, N,N-dimetilacetamida, N-metilpirrolidona, acetonitrilo, diclorometano, 1,2-dicloroetano, cloroformo y tolueno, pero no se limitan a los mismos. El disolvente de reacción es preferentemente N,N-dimetilformamida, N,N-dimetilacetamida, o N-metilpirrolidona.

En cuanto a la temperatura de reacción, la reacción se puede llevar a cabo a una temperatura adecuada, dependiendo del sustrato de reacción y reactivo usado. La reacción se puede llevar a cabo a una temperatura de -20 °C a 120 °C, y más preferentemente a una temperatura de -5 °C a 70 °C.

En cuanto al tiempo de reacción, la reacción se puede llevar a cabo durante un período de tiempo adecuado, dependiendo del sustrato de reacción y del reactivo usado. El tiempo de reacción es preferentemente de 30 minutos a 6 horas.

(A-4) Método para sintetizar el compuesto (I), usando el intermedio obtenido convirtiendo el compuesto de ácido carboxílico (2) en haluro de ácido

El compuesto (I) también se puede sintetizar llevando el compuesto de ácido carboxílico (2) a un haluro de ácido y después condensando el haluro de ácido con la amina (1). El haluro de ácido se puede aislar, según sea necesario. Los ejemplos de un reactivo halogenante ácido que se pueden usar en el presente documento pueden incluir fluoruro de ácido, cloruro de ácido y bromuro ácido.

Como alternativa, el compuesto (I) también se puede sintetizar llevando el ácido carboxílico (2) a un anhídrido de ácido simétrico o un anhídrido de ácido mixto, y después condensándolo con la amina (1). El anhídrido de ácido simétrico o el anhídrido de ácido mixto se pueden aislar, según sea necesario. Como tal anhídrido de ácido mixto, puede usarse un anhídrido de ácido mixto obtenido haciendo reaccionar el ácido carboxílico (2) con cloroformiato de etilo, cloroformiato de isobutilo, cloroformiato de ferc-butilo, cloruro de ácido piválico, etc.

Método B

(B-1) El compuesto (I) también se puede producir formando un enlace amida de acuerdo con la reacción de condensación del compuesto de amina (1) con un compuesto de ácido carboxílico (3B) y después realizando una reacción de acoplamiento cruzado.

<Fórmula 8>

[Fórmula 14]

en donde X4 representa un átomo de halógeno.

En la reacción de condensación y la reacción de acoplamiento cruzado usadas en el presente documento, se pueden aplicar las mismas condiciones de reacción que las usadas en el (A-2) anterior.

En cada una de las fórmulas anteriores, cuando R1 y R2 representan cada uno un átomo de hidrógeno, se puede usar un compuesto de materia prima en el cual se protege un átomo de nitrógeno en un anillo de pirazol. En tal caso, después de la finalización de la reacción de condensación mostrada en la fórmula 1, el grupo protector se desprotege, de modo que el producto de reacción puede conducir al compuesto (I). Cabe señalar que los grupos protectores y la reacción de adición y retirada de los mismos se pueden llevar a cabo de acuerdo con Peter G. M. Wuts, Theodora W. Greene, Greene's Protecting Groups in Organic Synthesis, 4a edición, Wiley-Interscience, 2006, etc.

Después de la finalización de la reacción en cada paso como se describe anteriormente, se recoge un compuesto de interés de la mezcla de reacción de acuerdo con un método ordinario. Por ejemplo, la mezcla de reacción se neutraliza según corresponda, o cuando están presentes materias insolubles, tales materias insolubles se eliminan por filtración y después se añaden al residuo agua y un disolvente orgánico inmiscible, como acetato de etilo, de modo que se separa una capa orgánica que contiene un compuesto de interés. Posteriormente, la capa orgánica se lava con agua o similar y después se seca sobre sulfato de sodio anhidro o similar, y después se destila el disolvente para obtener el compuesto de interés. Asimismo, el compuesto de interés también se puede obtener recolectando materias insolubles generadas en la solución de reacción por filtración, o añadiendo agua o un disolvente orgánico a la solución de reacción y después recolectando las materias insolubles generadas por filtración.

Si es necesario, el producto de interés obtenido se puede separar y purificar combinando apropiadamente métodos ordinarios, como recristalización o reprecipitación, o un método generalmente usando en la separación y purificación de compuestos orgánicos, por ejemplo, un método de uso de adsorbentes sintéticos, como cromatografía en columna de adsorción o cromatografía en columna de partición, un método de uso de cromatografía de intercambio iónico, o cromatografía en columna de fase normal/fase inversa usando gel de sílice o gel de sílice alquilado, y después, eluyendo con un eluyente apropiado.

Asimismo, un cuerpo ópticamente activo se puede separar y/o purificar usando una columna quiral, según sea necesario.

El efecto inhibidor de la actividad de la cinasa RET y el efecto inhibidor de la actividad del mutante de modulación de acceso de la cinasa RET del compuesto de la presente invención pueden medirse mediante un método de evaluación de la actividad cinasa que usa, en general, una persona experta en la materia. Dichos efectos se pueden medir, por ejemplo, mediante un método de ensayo de desplazamiento de la movilidad. Como alternativa, los efectos también se pueden medir mediante un sistema alpha-LISA, un método de transferencia de Western o un método de ELISA. Por otra parte, no solo el efecto inhibidor de la cinasa RET, sino también el efecto inhibidor del presente compuesto sobre otras cinasas tales como PDGFR, KIT, NTRK y FLT3, y el efecto inhibidor del presente compuesto sobre la cinasa KDR asociado con la selectividad también se pueden medir mediante los mismos métodos descritos anteriormente.

La selectividad del compuesto de la presente invención para otras cinasas también se puede confirmar mediante el método de ensayo de desplazamiento de la movilidad descrito anteriormente y similares. Por ejemplo, un método que se basa en el método de ensayo de desplazamiento de la movilidad proporcionado por Carna Biosciences, Inc. o un método KinomeScan proporcionado por DiscoverX se aplica a un panel de cinasas que consiste en diversos tipos de cinasas, de modo que se pueda medir la actividad inhibidora del compuesto sobre diversos tipos de cinasas y se pueda confirmar la selectividad de cinasas.

El efecto inhibidor de la actividad de la cinasa RET, el efecto inhibidor de la actividad del mutante de modulación de acceso de la cinasa RET y el efecto inhibidor de la actividad de la cinasa KDR del compuesto de la presente invención, que se presentan en células, puede medirse mediante un método de evaluación de la actividad cinasa que usa en general una persona experta en la materia. Por ejemplo, los efectos se pueden medir mediante un sistema alpha-LISA, un método de transferencia de Western o un método de ELISA. Por otra parte, no solo el efecto inhibidor del presente compuesto sobre las cinasas RET y KDR, sino también el efecto inhibidor sobre otras cinasas tales como PDGFR, KIT, NTRK y FLt3 se pueden medir mediante los mismos métodos descritos anteriormente. La actividad inhibidora del crecimiento del compuesto de la presente invención en una línea celular de cáncer de pulmón no microcítico LC-2/ad y una línea celular de cáncer de glándula tiroidea TT se puede medir usando una prueba de inhibición del crecimiento que usa en general una persona experta en la materia. Por ejemplo, la actividad se puede medir mediante un ensayo de ATP-Glo o un ensayo de MTT. La actividad inhibidora del crecimiento del presente compuesto en otras líneas celulares también se puede medir mediante los mismos métodos descritos anteriormente.

Por otra parte, la actividad antitumoral in vivo del compuesto de la presente invención se puede examinar usando un método de prueba antitumoral que usa en general una persona experta en la materia. Por ejemplo, como en el caso del método mencionado anteriormente, diversos tipos de células tumorales se trasplantan a un ratón, una rata y similares, y, al mismo tiempo que el trasplante, o después de que se haya confirmado la adhesión de las células trasplantadas, el compuesto de la presente invención se administra al sujeto mediante administración oral, administración intravenosa, etc. De varios días a varias semanas después de la administración, el crecimiento tumoral en un grupo sin administración de fármaco se compara con el crecimiento tumoral en un grupo de administración de compuesto, de manera que puede confirmarse la actividad antitumoral in vivo del presente compuesto.

Se puede medir la solubilidad en agua del compuesto de la presente invención, por ejemplo, añadiendo al presente compuesto un medio para examinar, agitando la mezcla obtenida, dejando la mezcla de reacción durante un tiempo, filtrándola y midiendo la concentración del compuesto en el filtrado. Como medio usado en el presente documento, se pueden usar soluciones de tampón que tengan diversos valores de pH y medios que imiten el jugo intestinal en saciedad o en ayunas.

Las propiedades de penetración del compuesto de la presente invención para diversos tejidos y/u órganos, tales como la penetración cerebral, la penetración central y la penetración cutánea, pueden medirse administrando el compuesto a diversos tipos de animales, extirpando los tejidos u órganos de los animales una vez transcurrido un periodo de tiempo predeterminado, tratándolos adecuadamente, midiendo la concentración del compuesto contenido en los mismos y comparando después la concentración medida del compuesto con la concentración en sangre del mismo. Puede haber un caso en el que las propiedades de penetración se puedan medir con mayor precisión o se puedan medir de forma no invasiva, administrando a un animal un compuesto marcado con fluorescencia o radiomarcado.

El compuesto de piridina descrito anteriormente representado por la fórmula general (I) de la presente invención o una sal farmacéuticamente aceptable se puede usar como un medicamento que lo contiene y, preferentemente, como un agente antineoplásico. Los ejemplos de la enfermedad, para cuyo tratamiento o prevención se puede usar el compuesto de la presente invención, pueden incluir diversos tipos de cáncer, sarcoma y leucemia, incluyendo: cánceres tales como cáncer de la corteza suprarrenal, cáncer de ano, cáncer de vía biliar, cáncer de vejiga, cáncer de mama, cáncer de cuello uterino, cáncer de colon, cáncer de endometrio, cáncer de esófago, sarcoma de Ewing, cáncer de vesícula biliar, cáncer hipofaríngeo, cáncer faríngeo, cáncer de labio y boca, cáncer de hígado, cáncer de pulmón no microcítico, melanoma, mesotelioma, mieloma múltiple, cáncer de ovario, cáncer de páncreas, cáncer de próstata, cáncer de estómago, cáncer de testículo y cáncer de glándula tiroidea; leucemia tal como leucemia linfocítica crónica, leucemia linfocítica aguda, leucemia mielógena crónica y leucemia mielógena aguda; y linfoma tal como linfoma de Hodgkin y linfoma no hodgkiniano.

El compuesto de piridina descrito anteriormente representado por fórmula general (I) de la presente invención o una sal farmacéuticamente aceptable se administra en diversas formas. La forma de dosificación del mismo no está particularmente limitada y se determina dependiendo de diversos tipos de formas de preparación, la edad, el sexo y otras condiciones de un paciente, la gravedad de una enfermedad y similares. Por ejemplo, cuando el presente compuesto o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo está en forma de dosificación de comprimido, píldora, polvo, gránulo, jarabe, líquido, suspensión, emulsión o cápsula, se administra por vía oral. Por otro lado, cuando el presente compuesto o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo está en forma de inyección, se administra por vía intravenosa, solo o mezclándolo con un líquido de reemplazo ordinario, tal como glucosa o aminoácido. Asimismo, dicha inyección se administra sola por vía intramuscular, por vía intradérmica, por vía subcutánea o por vía intraperitoneal, según sea necesario. En el caso de un supositorio, se administra por vía rectal. El método de administración es preferentemente la administración oral.

Se pueden formular diversos tipos de estas preparaciones añadiendo agentes adyuvantes conocidos que se pueden usar habitualmente en el campo de las preparaciones farmacéuticas, tales como un excipiente, un aglutinante, un disgregante, un lubricante, un agente de disolución, un corrector y un agente de recubrimiento, al fármaco principal según un método habitual.

Cuando el presente compuesto o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo se moldea en un comprimido, se pueden usar ampliamente vehículos que se conocen convencionalmente en el presente campo técnico. Los ejemplos de vehículo pueden incluir: excipientes tales como lactosa, sacarosa, cloruro sódico, glucosa, urea, almidón, carbonato de calcio, caolín, celulosa cristalina y ácido silícico; aglutinantes tales como agua, etanol, propanol, jarabe simple, solución de glucosa, solución de almidón, solución de gelatina, carboximetilcelulosa, goma laca, metilcelulosa, fosfato de potasio y polivinilpirrolidona; disgregadores tales como almidón seco, alginato de sodio, agar en polvo, laminarina en polvo, hidrogenocarbonato de sodio, carbonato de calcio, ésteres de ácido graso de sorbitano polioxietilenado, laurilsulfato de sodio, estearato de monoglicérido, almidón y lactosa; inhibidores de la disgregación tales como sacarosa, estearina, manteca de cacao y aceite hidrogenado; promotores de la absorción tales como base de amonio cuaternario y laurilsulfato de sodio; hidratantes tales como glicerina y almidón; adsorbentes tales como almidón, lactosa, caolín, bentonita y ácido silícico coloidal; y lubricantes tales como talco purificado, estearato, polvo de bórax y polietilenglicol. Además, el comprimido se puede procesar adicionalmente en un comprimido que está recubierto con una película de recubrimiento general, tal como un comprimido recubierto con azúcar, un comprimido recubierto de gelatina, un comprimido con recubrimiento entérico, un comprimido recubierto con película o, además, un comprimido de doble recubrimiento o un comprimido multicapa, según sea necesario.

Cuando el presente compuesto o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo se moldea en una píldora, se pueden usar ampliamente vehículos que se conocen convencionalmente en el presente campo técnico. Los ejemplos de vehículo pueden incluir: excipientes tales como glucosa, lactosa, almidón, manteca de cacao, aceite vegetal hidrogenado, caolín y talco; aglutinantes tales como goma arábiga en polvo, tragacanto en polvo, gelatina y etanol; y disgregadores tales como laminarina en polvo.

Cuando el presente compuesto o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo se moldea en un supositorio, se pueden usar ampliamente vehículos que se conocen convencionalmente en el presente campo técnico. Los ejemplos del vehículo pueden incluir polietilenglicol, manteca de cacao, alcohol superior, ésteres de alcoholes superiores, gelatina y glicérido semisintético.

Cuando el presente compuesto o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo está en forma de agente de inyección, es preferible que un agente líquido y un agente de suspensión estén esterilizados y sean isotónicos con la sangre o similares. Cuando el presente compuesto o una sal del mismo se moldea en dicho agente líquido, emulsión 0 agente de suspensión, se pueden usar todos los diluyentes que se han usado habitualmente en el presente campo técnico. Los ejemplos del diluyente pueden incluir agua, alcohol etílico, propilenglicol, alcohol isoestearílico etoxilado, alcohol isoestearílico polioxilado y éster de ácido graso de sorbitano polioxietilenado. En este caso, la preparación farmacéutica puede contener sal común, glucosa o glicerina en una cantidad suficiente para la preparación de una solución isotónica y, además, también se pueden añadir a la preparación farmacéutica solubilizador habitual, tampón, agente calmante y similares.

Adicionalmente, la preparación farmacéutica puede contener un agente colorante, un conservante, un aromático, un saborizante, un edulcorante y similares, y otros productos farmacéuticos, según sea necesario.

La cantidad del compuesto de principio activo contenida en la preparación farmacéutica descrita anteriormente no está particularmente limitada y se selecciona de una amplia gama, según sea adecuado. En general, es adecuado que el compuesto de principio activo esté contenido en una cantidad del 1 % al 70 % en peso y, preferentemente, del 1 % al 30 % en peso, en función del peso de la composición completa.

La dosis varía según los síntomas, la edad, el peso corporal, el método de administración, la forma de dosificación y similares. En general, el límite inferior de la dosis diaria para un adulto es de 0,001 mg/kg (preferentemente 0,01 mg/kg, más preferentemente 0,1 mg/kg) y el límite superior del mismo es 200 mg/kg (preferentemente 20 mg/kg, más preferentemente 10 mg/kg). El compuesto de la presente invención se puede administrar a la dosis descrita anteriormente, una vez o dividido en varias veces al día.

El compuesto de la presente invención se puede usar en combinación con diversos agentes terapéuticos o preventivos para las enfermedades mencionadas anteriormente, para las que se considera que la presente invención es eficaz. Por ejemplo, el compuesto de la presente invención se puede usar en combinación con, lo que se denomina, agentes quimioterapéuticos contra el cáncer tales como agentes alquilantes (ciclofosfamida, bendamustina, temozolomida, mitomicina C, etc.), preparaciones de platino (cisplatino, carboplatino, etc.), antimetabolitos (pemetrexed, 5-FU, capecitabina, etc.), inhibidores de la tubulina (vincristina, taxol, eribulina, etc.) e inhibidores de la topoisomerasa (irinotecán, doxorrubicina, etc.), y preparaciones de los mismos en diversas formas. Por otra parte, el compuesto de la presente invención también se puede usar en combinación con diversos tipos de, lo que se denomina, productos biofarmacéuticos, incluyendo preparaciones de anticuerpos tales como trastuzumab, bevacizumab y nivolumab, complejos de anticuerpo-fármaco tales como T-DM1, etc. Asimismo, el presente compuesto también se puede usar en combinación con diversos tipos de, lo que se denomina, agentes dirigidos a moléculas de bajo peso molecular, tales como inhibidores de cinasa (imatinib, nilotinib, erlotinib, gefitinib, afatinib, osimertinib, sunitinib, dasatinib, ibrutinib, sorafenib, vemurafenib, trametinib y palbociclib), inhibidores de proteasoma (bortezomib, etc.), inhibidores de HDAC (vorinostat, etc.) e inhibidores de PARP (olaparib, etc.). Además de los agentes mencionados anteriormente, el presente compuesto también se puede usar en combinación con inmunomoduladores tales como talidomida, interferones y fármacos de terapia hormonal (tamoxifeno, anastrozol, etc.). Además, estos agentes se combinan entre sí, de modo que el presente compuesto se puede usar en combinación con tres o más agentes.

Efectos ventajosos de la invención

Según la presente invención, se proporciona el compuesto representado por la fórmula (I) descrita anteriormente que tiene actividad inhibidora de la cinasa RET. Dicho compuesto es útil como agente terapéutico para una enfermedad provocada por la mutación activadora o el aumento de la expresión de la cinasa RET, una enfermedad asociada con la mutación activadora o el aumento de la expresión de la cinasa RET y/o una enfermedad acompañada de la mutación activadora o el aumento de la expresión de la cinasa RET, por ejemplo, como agente antineoplásico. Descripción detallada

En lo sucesivo en el presente documento, la presente invención se describirá con más detalle en los siguientes ejemplos y similares. Sin embargo, estos ejemplos no pretenden limitar el alcance de la presente invención, y estos ejemplos no se interpretan de forma restrictiva en ningún sentido. Además, en la presente descripción, los reactivos, disolventes y materiales de partida usados están fácilmente disponibles en fuentes de suministro disponibles comercialmente, a menos que se especifique otra cosa.

La RMN del protón se midió usando un espectrómetro de RMN de 400 MHz fabricado por JEOL, o un espectrómetro de RMN de 400 MHz fabricado por Varian. Los datos espectrales de RMN de protones muestran picos significativos, y los datos se muestran con un cambio químico (que se muestra como ppm relativo (6) de un pico de tetrametilsilano), el número de protones y la multiplicidad de división de picos (los cuales se muestran como s: singlete; d: doblete; t: triplete; c: cuadruplete; m: multiplete; s a: singlete amplio; dd: doble doblete, etc.), y además, la constante de acoplamiento se indica como un valor J (unidad: Hz), si se puede describir explícitamente. Los datos espectrales de masas de baja resolución se muestran con respecto al pico máximo de ionización (correspondiente al pico máximo de absorción UV en casi todos los casos) obtenido después de pasar por una columna de cromatografía líquida de alta resolución de fase inversa (Agilent System; columna: Develosil Combi-RP-5, 2,0 x 50 mm, Cadenza CD-18, 3,0 x 75 mm o ZORBAXSB-C18, 2,1 x 50 mm; disolvente: sistema acetonitrilo/agua que contiene ácido fórmico al 0,1 % o sistema acetonitrilo/agua que contiene ácido trifluoroacético al 0,01 %), aplicando un método de ionización por electropulverización (IEN) o un método de ionización química a presión atmosférica (APCI).

La cromatografía en columna de gel de sílice se llevó a cabo aplicando un método de uso de una columna empaquetada disponible comercialmente y un sistema automático (por ejemplo, Biotage SP1 System, etc.), o un método que comprende llenar una columna de vidrio con gel de sílice 60 fabricado por Merck (diámetro de partícula: 0,063-0,200 mm) y se describieron simplemente los múltiples tipos de disolventes usados. Las cantidades de disolventes usadas, la proporción de disolventes, el momento de convertir un disolvente en otro disolvente y un método de gradiente no se describen en el presente documento. Sin embargo, se considera que los métodos de purificación y/o separación aplicados en el presente documento pueden reproducirse fácilmente con conocimientos y/o tecnología ordinarios en el campo de la síntesis química.

Cabe señalar que las abreviaturas usadas en los siguientes ejemplos tienen los siguientes significados. mg: miligramo, g: gramo, ml: mililitro y MHz: megahercio.

Breve descripción de los dibujos

[Figura 1] La figura 1 muestra el resultado del efecto de regresión tumoral en una prueba de actividad antitumoral usando un modelo de xenoinjerto establecido con una línea celular de cáncer de pulmón no microcítico LC-2/ad.

[Figura 2] La figura 2 muestra el resultado de la disminución del efecto de la fosforilación de RET de la tirosina en la posición 905, que se usa como indicador de la actividad de la cinasa RET.

Ejemplos

<Ejemplo 1>

2-[6-(6,7-Dimetoxiquinolin-3-il)piridin-3-il]-N-[5-(1,1,1-trifluoro-2-metilpropan-2-il)-1,2-oxazol-3-il]acetamida

<1-1> Ácido (6,7-dimetoxiquinolin-3-il)borónico

En atmósfera de nitrógeno, una solución de 3-bromo-6,7-dimetoxiquinolina (17,03 g, 63,5 mmol) y borato de triisopropilo (19,0 ml, 82,3 mmol) en tetrahidrofurano (170 ml) se enfrió a -78 °C, y se añadió gota a gota una solución de n-butillitio hexano (1,60 mol/l, 58,0 ml, 92,8 mmol) a la solución durante 1 hora. Posteriormente, la solución mezcla se agitó durante 30 minutos a la misma temperatura que se describió anteriormente. Posteriormente, la temperatura de la solución de reacción se aumentó de -30 °C a -40 °C, se añadió lentamente ácido clorhídrico 1 mol/l (170 ml) a la solución de reacción, y después, la temperatura de la solución se aumentó a temperatura ambiente. Se añadió una solución acuosa 1 mol/l de hidróxido sódico (50 ml) a la solución de reacción y el sólido precipitado se recogió por filtración. El sólido obtenido se disolvió en metanol y después, se concentró a presión reducida. Después de eso, se añadió al residuo un disolvente mezcla de cloroformo/metanol (9 : 1) y después se retiraron por filtración las materias insolubles. Se separó una capa orgánica del filtrado obtenido que contenía agua, y después se saturó una capa de agua con cloruro sódico, seguido de extracción con un disolvente mezcla de cloroformo/metanol (9 : 1) tres veces. Las capas orgánicas obtenidas se combinaron y la capa combinada se secó sobre sulfato de sodio anhidro, después se filtró y después se concentró a presión reducida para obtener el compuesto objetivo (13,74 g, 59,0 mmol, rendimiento: 72 %) en forma de un sólido de color naranja.

EM m/z: 234 (M+H)+.

<1-2> [6-(6,7-Dimetoxiquinolin-3-il)piridil-3-il]acetato de metilo

Una solución de carbonato sódico (5,96 g, 56,2 mmol) en agua (18 ml) se añadió a una suspensión de ácido (6,7-dimetoxiquinolin-3-il)borónico (4,37 g, 18,75 mmol), 2-(6-cloropiridil-3-il)acetato de metilo (3,47 g, 18,70 mmol) y 2-diciclohexilfosfino-2',4',6'-triisopropilbifenilo (895 mg, 1,88 mmol) en 1,4-dioxano (72 ml), seguido de sustitución de nitrógeno. Posteriormente, se añadió tris(dibencilidenoacetona)dipaladio (0) (849 mg, 0,938 mmol) a la mezcla de reacción, y después, de nuevo se llevó a cabo la sustitución de nitrógeno. La mezcla se agitó a 80 °C durante 3 horas. Posteriormente, la solución de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se añadió una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato sódico (200 ml) a la solución de reacción. La solución mezcla se extrajo con acetato de etilo tres veces y después la capa orgánica combinada se secó sobre sulfato sódico anhidro. El resultante se concentró a presión reducida y después se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice (gel de sílice NH, acetato de etilo/hexano) para obtener el compuesto diana (4,04 g, 12,46 mmol, rendimiento: 67 %) en forma de un sólido de color amarillo.

RMN ¹ H (CDCI³) 6: 3,71 (2H, s), 3,74 (3H, s), 4,03 (3H, s), 4,06 (3H, s), 7,14 (1H, s), 7,46 (1H, s), 7,77 (1H, dd, J = 8,2; 2,1 Hz), 7,84 (1H, d, J = 7,3 Hz), 8,62 (1H, d, J = 1,8 Hz), 8,64 (1H, d, J = 1,8 Hz), 9,31 (1H, d, J = 2,4 Hz). EM m/z: 339 (M+H)⁺.

<1-3> Ácido 2-[6-(6,7-dimetoxiquinolin-3-il)piridil-3-il]acético

Se añadieron tetrahidrofurano (20 ml), metanol (20 ml) y una solución acuosa 1 mol/l de hidróxido sódico (20 ml, 20,0 mmol) a 2-[6-(6,7-dimetoxiquinolin-3-il)piridin-3-il]acetato de metilo (2,24 g, 6,91 mmol) y después, la mezcla obtenida se agitó a temperatura ambiente durante 1,5 horas. Posteriormente, se añadió ácido clorhídrico 1 mol/l (20 ml) a la solución de reacción, y después, la solución mezcla se concentró a presión reducida. Se añadió un disolvente mezcla de cloroformo / metanol (9 : 1) al residuo obtenido, seguido de filtración. El filtrado obtenido se concentró a presión reducida y después se secó para obtener un producto aproximadamente purificado del compuesto diana. El producto obtenido aproximadamente purificado se lavó con éter dietílico y después con un disolvente mezcla de etanol éter dietílico (1 : 1) para obtener el compuesto objetivo (1,57 g, 4,83 mmol, rendimiento: 70 %) en forma de un sólido incoloro.

RMN ¹ H (DMSO-d⁶): 3,69 (2H, s), 3,91 (3H, s), 3,93 (3H, s), 7,40 (1H, s), 7,45 (1H, s), 7,81 (1H, dd, J = 8,2; 2,1 Hz), 8.06 (1H, d, J = 8,5 Hz), 8,58 (1H, d, J = 1,8 Hz), 8,81 (1H, d, J = 1,8 Hz), 9,35 (1H, d, J = 1,8 Hz).

EM m/z: 325 (M+H)⁺.

<1-4>

2-[6-(6,7-Dimetoxiquinolin-3-il)piridin-3-il]-N-[5-(1,1,1-trifluoro-2-metilpropan-2-il)-1,2-oxazol-3-il]acetamida

Se añadió anhídrido propilfosfónico (solución al 50 % de acetato de etilo, aproximadamente 1,7 mol/l, 1,80 ml, 3.06 mmol) a una suspensión de ácido 2-[6-(6,7-dimetoxiquinolin-3-il)piridin-3-il]acético (486 mg, 1,495 mmol), 5-(1,1,1-trifluoro-2-metilpropan-2-il)-1,2-oxazol-3-amina (320 mg, 1,648 mmol, descrito en J. Med. Chem., 2012, 55, 1082-1105) y piridina (0,483 ml, 5,97 mmol) en N,N-dimetilformamida (12 ml), y después, la mezcla obtenida se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. Posteriormente, la mezcla de reacción se vertió en una mezcla de agua (90 ml) y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato sódico (60 ml) y la mezcla obtenida se enfrió después a 0 °C. El sólido precipitado se recogió por filtración y después se añadieron agua y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato sódico al sólido obtenido. La solución obtenida se extrajo con diclorometano. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio anhidro y después se concentró a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (diclorometano/metanol) para obtener el compuesto diana (654 mg, 1,308 mmol, rendimiento: 87 %) en forma de un sólido incoloro.

<Ejemplo 2>

Metanosulfonato de 2-[6-(6,7-dimetoxiquinolin-3-il)piridin-3-il]-N-[5-(1,1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-il)-1,2-oxazol-3-il]acetamida

Se añadió una solución acuosa 2,0 mol/l de ácido metanosulfónico (0,821 ml, 1,642 mmol) a una suspensión de 2-[6-(6,7-dimetoxiquinolin-3-il)piridin-3-il]-N-[5-(1,1,1-trifluoro-2-metilpropan-2-il)-1,2-oxazol-3-il]acetamida (632 mg, 1,261 mmol) en alcohol isopropílico (12,6 ml) a temperatura ambiente, y después, la mezcla obtenida se agitó durante 30 minutos. Posteriormente, la mezcla de reacción se enfrió a 0 °C y después se agitó durante 1 hora. Posteriormente, el sólido generado se recogió por filtración. El sólido obtenido se lavó con alcohol isopropílico, y después se secó para obtener el compuesto diana (734 mg, 1,230 mmol, rendimiento: 98 %) en forma de un sólido incoloro.

<Ejemplo 3>

2-[6-(6,7-Dimetoxiquinolin-3-il)piridin-3-il]-N-[3-(1,1,1-trifluoro-2-metilpropan-2-il)-1,2-oxazol-5-il]acetamida

Se añadió anhídrido propilfosfónico (solución al 50 % de acetato de etilo, aproximadamente 1,7 mol/l, 1,80 ml, 3.06 mmol) a una suspensión del ácido 2-[6-(6,7-dimetoxiquinolin-3-il)piridin-3-il]acético (486 mg, 1,495 mmol) obtenido en el Ejemplo 1-3, 3-(1,1,1-trifluoro-2-metilpropan-2-il)-1,2-oxazol-5-amina (320 mg, 1,648 mmol, descrita en J. Med. Chem., 2012, 55, 1082-1105) y piridina (0,483 ml, 5,97 mmol) en N,N-dimetilformamida (12 ml) a temperatura ambiente, y después, la mezcla obtenida se agitó a la misma temperatura como se ha descrito anteriormente durante 2 horas. Posteriormente, la mezcla de reacción se vertió en una mezcla de agua (80 ml) y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato sódico (80 ml), y después, la mezcla obtenida se enfrió a 0 °C. El sólido precipitado se recogió por filtración, y posteriormente, se añadieron sucesivamente diclorometano, agua y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato sódico al sólido obtenido, de modo que se separó una capa orgánica. La capa orgánica obtenida se secó sobre sulfato sódico anhidro y después, se concentró a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (diclorometano/metanol) para obtener el compuesto diana (683 mg, 1,366 mmol, rendimiento: 91 %) en forma de un sólido de color amarillo claro.

<Ejemplo 4>

Metanosulfonato de 2-[6-(6,7-dimetoxiquinolin-3-il)piridin-3-il]-N-[3-(1,1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-il)-1,2-oxazol-5-iljacetamida

Se añadió una solución acuosa 2,0 mol/l de ácido metanosulfónico (0,883 ml, 1,766 mmol) a una suspensión de 2-[6-(6,7-dimetoxiquinolin-3-il)piridin-3-il]-N-[3-(1,1,1-trifluoro-2-metilpropan-2-il)-1,2-oxazol-5-il]acetamida (680 mg, 1,360 mmol) en alcohol isopropílico (20,4 ml) a temperatura ambiente, y después, la mezcla obtenida se agitó a la misma temperatura como se ha descrito anteriormente durante 30 minutos. Posteriormente, la mezcla de reacción se enfrió a 0 °C y después se agitó durante 1 hora. El sólido generado se recogió por filtración. El sólido obtenido se lavó con alcohol isopropílico, y después se secó para obtener el compuesto diana (626 mg, 1,050 mmol, rendimiento: 77 %) en forma de un sólido de color amarillo claro.

<Ejemplo 5>

2-[6-(6,7-Dimetoxiquinolin-3-il)piridin-3-il]-N-[3-(1,1,1-trifluoro-2-metilpropan-2-il)-1H-pirazol-5-il]acetamida

<5-1> 5-Amino-3-(1,1,1-trifluoro-2-metilpropan-2-il)-1H-pirazol-1-carboxilato de ferc-butilo

Una solución de hidróxido potásico (7,0 g, 125 mmol) disuelta en agua (15 ml) se añadió a una solución de 3-( 1,1,1-trifluoro-2-metilpropan-2-il)-1H-pirazol-5-amina (2,6 g, 13,5 mmol, un compuesto sintetizado por la segunda etapa del Ejemplo 42 en la sección 155, documento WO 2014/141187) en diclorometano (100 ml) a temperatura ambiente, y posteriormente, la mezcla obtenida se agitó intensamente a la misma temperatura como se ha descrito anteriormente. A esta solución de reacción, se le añadió dicarbonato de diferc-butilo (3,0 g, 13,8 mmol) a temperatura ambiente, y la solución obtenida de ese modo se agitó a la misma temperatura como se ha descrito anteriormente durante 4 horas. La capa orgánica separada se lavó con una solución salina saturada y después se secó sobre sulfato sódico. Las materias insolubles se retiraron por filtración y después el disolvente se retiró por destilación a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice (hexano/diclorometano) para obtener el compuesto del título (2,2 g, 7,5 mmol, rendimiento: 56 %) en forma de un sólido de color amarillo claro.

RMN 1H (CDCla) 6: 1,49 (6H, s), 1,64 (9H, s), 5,15 (2H, s a), 5,46-5,47 (1H, m).

EM m/z: 194 (M+H-Boc)+.

<5-2> 5-({[6-(6,7-Dimetoxiquinolin-3-il)piridin-3-il]acetil}amino)-3-(1,1,1-trifluoro-2-metilpropan-2-il)-1H-pirazol-1-carboxilato de ferc-butilo

Se añadió anhídrido propilfosfónico (solución al 50 % de acetato de etilo, aproximadamente 1,7 mol/l, 46,0 ml, 78,2 mmol) a una solución de 5-amino-3-(1,1,1-trifluoro-2-metilpropan-2-il)-1H-pirazol-1-carboxilato de ferc-butilo (8,10 g, 27,6 mmol), el ácido 2-[6-(6,7-dimetoxiquinolin-3-il)piridin-3-il]acético (8,5 g, 26,2 mmol) obtenido en el Ejemplo 1-2 y piridina (21 ml, 261 mmol) en N,N-dimetilformamida (80 ml) a temperatura ambiente, y después, la mezcla obtenida se agitó a la misma temperatura como se ha descrito anteriormente durante 5 horas. Posteriormente, la mezcla de reacción se vertió en una mezcla de agua (200 ml) y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato sódico (100 ml), y después, la mezcla obtenida se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. Posteriormente, el sólido precipitado se recogió por filtración. El sólido obtenido se lavó con agua y después con hexano, y después se secó a presión reducida. El producto en bruto obtenido de ese modo se suspendió en diisopropil éter (200 ml), y después, las materias insolubles se recogieron por filtración para obtener el compuesto diana (15,21 g, 25,4 mmol, rendimiento: 97 %) en forma de un sólido casi incoloro.

RMN 1H (CDCla) 6: 1,51 (6H, s), 1,61 (9H, s), 3,83 (2H, s), 4,04 (3H, s), 4,07 (3H, s), 6,91 (1H, s), 7,16 (1H, s), 7,47 (1H, s), 7,83-7,90 (2H, m), 8,63 (1H, d, J = 2,4 Hz), 8,70 (1H, d, J = 1,8 Hz), 9,32 (1H, d, J = 1,8 Hz), 10,34 (1H, s). EM m/z: 600 (M+H)+.

<5-3> 2-[6-(6,7-Dimetoxiquinolin-3-il)piridin-3-il]-N-[3-(1,1,1-trifluoro-2-metilpropan-2-il)-1H-pirazol-5-il]acetamida Se añadió ácido trifluoroacético (5,0 ml) a una solución de 5-({[6-(6,7-dimetoxiquinolin-3-il)piridin-3-il]acetil}amino)-3-(1,1,1-trifluoro-2-metilpropan-2-il)-1H-pirazol-1-carboxilato de ferc-butilo (0,81 g, 1,351 mmol) en diclorometano (20 ml) en enfriamiento en hielo, y después, la temperatura de la mezcla obtenida se incrementó a temperatura ambiente, seguido de agitación de la mezcla. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 24 horas, y después, los componentes volátiles se retiraron por destilación a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (gel de sílice NH, diclorometano/acetato de etilo, y después, diclorometano/metanol). El producto en bruto obtenido se lavó con un disolvente mezcla de acetato de etilo/hexano para obtener el compuesto del título (0,64 g, 1,283 mmol, rendimiento: 95 %) en forma de un sólido de color amarillo claro.

<Ejemplo 6>

Metanosulfonato de 2-[6-(6,7-dimetoxiquinolin-3-il)piridin-3-il]-N-[3-(1,1,1-trifluoro-2-metilpropan-2-il)-1H-pirazol-5-il]acetamida

Una solución acuosa 2,0 mol/l de ácido metanosulfónico (6,00 ml, 12,00 mmol) se añadió a una suspensión de 2-[6-(6,7-dimetoxiquinolin-3-il)piridin-3-il]-N-[3-(1,1,1-trifluoro-2-metilpropan-2-il)-1H-pirazol-5-il]acetamida (4,00 g, 8,02 mmol) en alcohol isopropílico (80 ml) a temperatura ambiente, y después, la mezcla obtenida se agitó a 60 °C hasta que la solución de reacción se convirtió en una solución. Posteriormente, la solución obtenida se dejó en reposo a temperatura ambiente durante la noche. La solución de reacción, junto con el sólido precipitado, se agitó a temperatura ambiente durante 4 horas y el sólido generado se recogió por filtración. El sólido obtenido se secó a presión reducida para obtener el compuesto diana (4,14 g, 6,95 mmol, rendimiento: 87 %) en forma de un sólido de color amarillo claro.

<Ejemplo 7>

2-[6-(6,7-Dimetoxiquinolin-3-il)piridin-3-il]-N-[1-metil-3-( 1,1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-il)-1 H-pirazol-5-il]acetamida Se añadió anhídrido propilfosfónico (solución al 50 % de acetato de etilo, aproximadamente 1,7 mol/l, 0,18 ml, 0,306 mmol) a una solución de 1-metil-3-(1,1,1-trifluoro-2-metilpropan-2-il)-1H-pirazol-5-amina (48 mg, 0,313 mmol, un compuesto sintetizado mediante la segunda etapa del Ejemplo 41 en la sección 153, documento WO 2014/141187), el ácido 2-[6-(6,7-dimetoxiquinolin-3-il)piridin-3-il]acético (68 mg, 0,208 mmol) obtenido en el Ejemplo 1- 3 y piridina (0,050 ml, 0,618 mmol) en N,N-dimetilformamida (1 ml), y después, la mezcla obtenida se agitó a 80 °C durante 2,5 horas. La solución de reacción se enfrió a temperatura ambiente y después se agitó durante una noche. Posteriormente, en la solución de reacción se añadieron piridina (0,017 ml, 0,210 mmol) y anhídrido propilfosfónico (solución al 50 % de acetato de etilo, aproximadamente 1,7 mol/l, 0,061 ml y 0,104 mmol), y después, la mezcla obtenida se agitó a 80 °C durante 2,5 horas. La solución de reacción se enfrió a temperatura ambiente, y después, se añadió a la misma una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato sódico (10 ml). La solución mezcla se extrajo con acetato de etilo tres veces, y después, los extractos obtenidos se combinaron. El extracto combinado se secó sobre sulfato sódico anhidro, y después, se concentró a presión reducida. El residuo se purificó sucesivamente por cromatografía en columna sobre gel de sílice (metanol/diclorometano), y después por cromatografía en columna sobre gel de sílice (gel de sílice NH, metanol/diclorometano). El producto en bruto obtenido se suspendió en éter dietílico, y después, un sólido se recogió por filtración para obtener el compuesto diana (48,9 mg, 0,095 mmol, rendimiento: 46 %) en forma de un sólido incoloro.

<Ejemplo 8>

Método alternativo para sintetizar [6-(6,7-dimetoxiquinolin-3-il)piridil-3-il]acetato de metilo

<8-1> 2-Amino-4,5-dimetoxibenzaldehído

Una suspensión de 4,5-dimetoxi-2-nitrobenzaldehído (5,00 g, 23,7 mmol), ácido clorhídrico 0,1 mol/l (10 ml) y 150 pm de polvo de hierro (5,17 g, 92,6 mmol) en etanol (70 ml) se agitó a 80 °C durante 2,5 horas. Posteriormente, la solución de reacción se enfrió a temperatura ambiente y después se filtró a través de Celite (KANTO KAGAKU, Celite 545). El filtrado se concentró a presión reducida. Se añadió acetato de etilo al residuo, y después, la mezcla se filtró a través de gel de sílice. El filtrado se concentró a presión reducida, y después se secó para obtener el compuesto diana (3,96 g, 21,9 mmol, rendimiento: 92 %) en forma de un sólido de color rojo.

RMN 1H (CDCla) ó: 3,85 (3H, s), 3,89 (3H, s), 6,00-6,17 (3H, m), 6,88 (1H, s), 9,69 (1H, s).

EM m/z: 182 (M+H)+.

<8-2> (6-{[Tri(propan-2-il)silil]etinil}piridin-3-il)acetato de metilo

Se burbujeó nitrógeno en una suspensión de yoduro de cobre (I) (15,1 mg, 0,079 mmol), dicloruro de bis(trifenilfosfina)paladio (II) (58,0 mg, 0,083 mmol), 2-(6-cloropiridin-3-il)acetato de metilo (517 mg, 2,79 mmol), trietilamina (1,20 ml, 8,61 mmol) y triisopropilsililacetileno (1,20 ml, 5,35 mol) en N,N-dimetilformamida (1 ml). Posteriormente, el sistema de reacción se sustituyó con nitrógeno, y después, la suspensión se agitó a 80 °C durante 5,5 horas. La solución de reacción se enfrió a temperatura ambiente, después, se añadieron a la misma agua y una solución salina saturada, seguido de extracción con acetato de etilo. El extracto se secó sobre sulfato sódico anhidro, y después se concentró a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (hexano/acetato de etilo) para obtener el compuesto diana (888 mg, 2,55 mmol, rendimiento: 92 %) en forma de una sustancia oleosa de color amarillo claro.

RMN 1H (CDCla) ó: 1,06-1,18 (21H, m), 3,62 (2H, s), 3,69 (3H, s), 7,40-7,45 (1H, m), 7,54-7,61 (1H, m), 8,44-8,48 (1H, m).

EM m/z: 332 (M+H)+.

<8-3> (6-Etinilpiridin-3-il)acetato de metilo

Se añadió fluoruro de tetrabutilamonio (solución de tetrahidrofurano 1 mol/l, 17 ml) a una solución de (6-{[tri(propan-2- il)silil]etinil}piridin-3-il)acetato de metilo (3,76 g, 10,82 mmol) y ácido acético (1 ml) en tetrahidrofurano (8,5 ml) a 0 °C en la atmósfera de nitrógeno, y después, la mezcla obtenida se agitó durante 5 minutos. La temperatura de la solución de reacción se incrementó a temperatura ambiente, y después, la solución se agitó durante 30 minutos. Posteriormente, la solución de reacción se concentró a presión reducida, y después, se añadió ácido clorhídrico 3 mol/l (12 ml) al concentrado. La fase acuosa se lavó con hexano, y después, se añadió a la misma hidróxido sódico 5 mol/l (7 ml), seguido de la extracción de la mezcla con acetato de etilo tres veces. Las capas orgánicas se combinaron, y la capa orgánica combinada se secó sobre sulfato sódico anhidro y después se concentró a presión reducida. Se añadió acetato de etilo al residuo, y después, la mezcla obtenida se filtró a través de gel de sílice NH. El filtrado se concentró a presión reducida para obtener el compuesto diana (1,83 g, 9,57 mmol, rendimiento: 88 %) en forma de un sólido de color pardo.

RMN 1H (CDCl3) 5: 3,15 (1H, s), 3,65 (2H, s), 3,72 (3H, s), 7,43-7,49 (1H, m), 7,60-7,66 (1 H, m), 8,47-8,52 (1H, m). EM m/z: 176 (M+H)+.

<8-4> [6-(6,7-Dimetoxiquinolin-3-il)piridil-3-il]acetato de metilo

Se añadió anilina (0,110 ml, 1,207 mmol) a una suspensión de (6-etinilpiridin-3-il)acetato de metilo (103 mg, 0,539 mmol), 2-amino-4,5-dimetoxibenzaldehído (130 mg, 0,715 mmol) y trifluorometanosulfonato de plata (29,4 mg, 0,114 mmol) en dicloroetano (1 ml), y después, la mezcla obtenida se agitó en la atmósfera de nitrógeno a 80 °C durante 2 horas. La solución de reacción se enfrió a temperatura ambiente, y después, se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo). Se añadió cloroformo al producto obtenido aproximadamente purificado, y después se retiraron las materias insolubles por filtración. El filtrado se concentró a presión reducida para obtener el compuesto diana (135 mg, 0,398 mmol, rendimiento: 74 %) en forma de un sólido de color verde. RMN 1H (CDCl3) 5: 3,72 (2H, s), 3,75 (3H, s), 4,04 (3H, s), 4,07 (3H, s), 7,16 (1H, s), 7,47 (1H, s), 7,75-7,82 (1H, m), 7,82-7,89 (1H, m), 8,59-8,68 (2H, m), 9,29-9,35 (1H, m).

EM m/z: 339 (M+H)+.

Los datos físicos de los compuestos descritos en los Ejemplos 1 a 7 y las estructuras de los correspondientes compuestos de forma libre se mostrarán a continuación.

continuación

<Ejemplo de referencia 1>

<Etapa 1 > [4-(6.7-Dimetoxiquinolin-3-il)fenil1acetato de etilo

A una solución de 3-bromo-6.7-dimetoxi-quinolina (2.0 g. 7.5 mmol). pinacol éster del ácido 4-(etoxicarbonilmetil)-fenilborónico (2.6 g. 9.0 mmol) y aducto de dicloruro de [1.1'-bis(difenilfosfino)ferroceno1-paladio (II) diclorometano (0.61 g. 0.75 mmol) en 1.4-dioxano (36 ml) se le añadió la solución de carbonato sódico (2.4 g. 22 mmol) en agua (4.0 ml) y la mezcla de reacción se agitó a 100 °C durante 3 h. La mezcla de reacción se repartió entre agua (0.15 l) y diclorometano (2 x 0.15 l). La capa orgánica combinada se lavó con agua (80 ml). seguido de una solución de salmuera (30 ml). La capa orgánica se secó sobre sulfato sódico anhidro. se filtró y se evaporó a sequedad. La purificación por cromatografía en columna ultrarrápida (diclorometano/metanol) proporcionó 2-[4-(6.7-dimetoxi-3-quinolil)fenil]acetato de etilo (2.5 g. 7.0 mmol. rendimiento del 94 %) en forma de un sólido de color pardo claro. RMN 1H (CDCl^a) 5: 1.29 (3H. t. J = 7.2 Hz). 3.69 (2H. s). 4.04 (3H. s). 4.06 (3H. s). 4.19 (2H. c. J = 7.2 Hz). 7.11 (1H. s). 7.43-7.44 (3H. m). 7.66 (2H. d. J = 7.8 Hz). 8.15 (1H. d. J = 2.0 Hz). 8.97 (1H. d. J = 2.0 Hz).

EM m/z: 352 (M+H)⁺.

<Etapa 2> Ácido [4-(6.7-d¡metox¡quinol¡n-3-¡l)fen¡l1acét¡co

Se preparó ácido [4-(6.7-dimetoxiquinolin-3-il)fenil1acético en forma de un sólido de color amarillo usando un procedimiento análogo al que se ha descrito en el <Ejemplo 1-3>. sustituyendo [6-(6.7-dimetoxiquinolin-3-il)pi ridin-3-il]acetato de metilo por [4-(6.7-dimetoxiquinolin-3-il)-fenil1acetato de etilo usado en el <Ejemplo 1-3>.

RMN 1H (DMSO-D6) 5; 3.65 (2H. s). 3.93 (3H. s). 3.95 (3H. s). 7.41-7.42 (4H. m). 7.77 (2H. d. J = 8.3 Hz). 8.44 (1H. d. J = 2.0 Hz). 9.01 (1H. d. J = 2.0 Hz). 12.38 (1H. s). EM m/z: 324 (M+H)⁺.

<Etapa 3> 2-[4-(6.7-D¡metox¡qu¡nol¡n-3-¡l)fen¡ll-N-[3-(1.1.1-tr¡fluoro-2-met¡lpropan-2-¡l)-1.2-oxazol-5-¡llacetam¡da Se obtuvo 2-[4-(6,7-d¡metox¡qu¡nol¡n-3-¡l)fen¡l]-N-[3-(1,1,1-tr¡fluoro-2-met¡lpropan-2-¡l)-1,2-oxazol-5-¡l]-acetam¡da en forma de un sól¡do de color amar¡llo usando un proced¡m¡ento análogo al que se ha descr¡to en el <Ejemplo 3>, sust¡tuyendo ác¡do [6-(6,7-d¡metox¡qu¡nol¡n-3-¡l)-p¡r¡d¡n-3-¡l]acét¡co por ác¡do [4-(6,7-d¡metox¡qu¡nol¡n-3-¡l)fen¡l]acét¡co usado en el <Ejemplo 3>.

RMN 1H (CDCla) 5: 1,54 (6H, s), 3,86 (2H, s), 4,05 (3H, s), 4,07 (3H, s), 6,49 (1H, s), 7,12 (1H, s), 7,44-7,46 (3H, m), 7,72-7,74 (2H, m), 8,11 (1H, s), 8,17 (1H, d, J = 2,4 Hz), 8,95 (1H, d, J = 2,4 Hz). EM m/z: 500 (M+H)+.

<Etapa 4> Mes¡lato de 2-[4-(6.7-d¡metox¡qu¡nol¡n-3-¡l)fen¡ll-N-[3-(1.1.1-tr¡fluoro-2-met¡lpropan-2-¡l)-1.2-oxazol-5-¡llacetam¡da

Se preparó mes¡lato de 2-[4-(6,7-d¡metox¡qu¡nol¡n-3-¡l)fen¡l]-N-[3-(1,1,1-tr¡fluoro-2-met¡lpropan-2-¡l)-1,2-oxazol-5-¡l]-acetam¡da usando un proced¡m¡ento análogo al que se descr¡be en el <Ejemplo 4>, sust¡tuyendo 2-[6-(6,7-d¡metox¡qu¡nol¡n-3-¡l)p¡r¡d¡n-3-¡l]-^-[3-(1,1,1-tr¡fluoro-2-met¡lpropan-2-¡l)-1,2-oxazol-5-¡l]acetam¡da por 2-[4-(6,7-d¡metox¡qu¡nol¡n-3-¡l)fen¡l]-W-[3-(1,1,1-tr¡fluoro-2-met¡lpropan-2-¡l) 1,2-oxazol-5-¡l]acetam¡da usada en el <Ejemplo 4> RMN 1H (CDCla) 51,49 (6H, s), 3,05 (3H, s), 3,88 (2H, s), 4,11 (3H, s), 4,16 (3H, s), 6,41 (1H, s), 7,35 (1H, s), 7,49 (2H, d, J = 7,8 Hz), 7,55 (2H, d, J = 7,8 Hz), 7,90 (1H, s), 8,71 (1H, s), 8,92 (1H, s), 9,78 (1H, s). EM m/z: 500 (M+H-96)+.

<Ejemplo de referenc¡a 2>

<Etapa 1> 5-({[4-(6.7-D¡metox¡qu¡nol¡n-3-¡l)fen¡llacet¡l}am¡no)-3-(1.1.1-tr¡fluoro-2-met¡lpropan-2-¡l)-1H-p¡razol-1-carbox¡lato de terc-but¡lo

Se obtuvo 5-({[4-(6,7-d¡metox¡qu¡nol¡n-3-¡l)fen¡l]acet¡l}am¡no)-3-(1,1,1-tr¡fluoro-2-met¡lpropan-2-¡l)-1H-p¡razol-1-carbox¡lato de ferc-but¡lo en forma de un sól¡do ¡ncoloro usando un proced¡m¡ento análogo al que se ha descr¡to en el <Ejemplo 5-2>, sust¡tuyendo ác¡do [6-(6,7-d¡metox¡qu¡nol¡n-3-¡l)p¡r¡d¡n-3-¡l]acét¡co por ác¡do [4-(6,7-d¡metox¡qu¡nol¡n-3-¡l)fen¡l]acét¡co usado en el <Ejemplo 5-2>.

RMN 1H (CDCls) 51,51 (6H, s), 1,59 (9H, s), 3,83 (2H, s), 4,05 (3H, s), 4,07 (3H, s), 6,92 (1H, s), 7,11 (1H, s), 7,46­ 7,49 (3H, m), 7,70-7,72 (2H, m), 8,16 (1H, d, J = 1,8 Hz), 8,97 (1H, d, J = 2,4 Hz), 10,23 (1H, s). EM m/z: 599 (M+H)+.

<Etapa 2> 2-[4-(6.7-D¡metox¡qu¡nol¡n-3-¡l)fen¡ll-N-[3-(1.1.1-tr¡fluoro-2-met¡lpropan-2-¡l)-1H-p¡razol-5-¡ll-acetam¡da Se preparó 2-[4-(6,7-d¡metox¡qu¡nol¡n-3-¡l)fen¡l]-N-[3-(1,1,1-tr¡fluoro-2-met¡lpropan-2-¡l)-1H-p¡razol-5-¡l]-acetam¡da en forma de un sól¡do ¡ncoloro usando un proced¡m¡ento análogo al que se ha descr¡to en el <Ejemplo 5-3>, sust¡tuyendo 5-({[6-(6,7-d¡metox¡qu¡nol¡n-3-¡l)p¡ r¡d¡ n-3-¡l]acet¡l}am¡no)-3-(1,1,1-tr¡fluoro-2-met¡lpropan-2-¡l)-1 W-p¡razol-1-carbox¡lato de ferc-butNo por 5-({[4-(6,7-d¡metox¡qu¡nol¡n-3-¡l)fen¡l]acet¡l}am¡no)-3-(1,1,1-tr¡fluoro-2-met¡lpropan-2-¡l)-1H-p¡razol-1-carbox¡lato de ferc-but¡lo usado en el <Ejemplo 5-3>.

RMN 1H (CDCls) 51,53 (6H, s), 3,81 (2H, s), 4,05 (3H, s), 4,06 (3H, s), 6,47 (1H, s a), 7,12 (1H, s), 7,25-7,29 (1H, m), 7,43-7,46 (3H, m), 7,69 (2H, d, J = 7,9 Hz), 7,93 (1H, s), 8,15 (1H, s), 8,94 (1H, s). EM m/z: 499 (M+H)+.

<Ejemplo de referenc¡a 3>

<Etapa 1 > (4-Bromo-2-fluorofen¡l)acetato de met¡lo

A una soluc¡ón en ag¡tac¡ón de ác¡do 4-bromo-2-fluorofen¡lacét¡co (2,5 g, 11 mmol) y carbonato potás¡co (4,5 g, 32 mmol) en N,N-d¡met¡lformam¡da (30 ml) se le añad¡ó yodometano (0,80 ml, 13 mmol) a 0 °C y la mezcla de reacc¡ón se dejó en ag¡tac¡ón a temperatura amb¡ente durante 1 h. La mezcla de reacc¡ón se dejó durante una noche. Se reanudó la agitación a temperatura ambiente durante 1 h más. La mezcla de reacción se repartió entre una solución acuosa saturada de NaHCO3 (150 ml) y acetato de etilo (2 x 100 ml). La capa de acetato de etilo combinado se lavó con agua (60 ml), seguido de una solución de salmuera (30 ml). La capa orgánica se secó sobre sulfato sódico anhidro, se filtró y se evaporó a sequedad para proporcionar (4-bromo-2-fluorofenil)acetato de metilo (2,5 g, 10 mmol, rendimiento del 96 %) en forma de un líquido incoloro.

RMN 1H (CDCl³) 53,63 (2H, s), 3,71 (3H, s), 7,14-7,15 (1H, m), 7,24-7,25 (1H, m), 7,27-7,27 (1H, m).

<Etapa 2> [4-(6.7-D¡metox¡qu¡nolin-3-¡l)-2-fluorofen¡l1acetato de metilo

Una solución de 2-(4-bromo-2-fluoro-fenil)acetato de metilo (0,58 g, 2,3 mmol), bis(pinacolato)diboro (0,65 g, 2,6 mmol), aducto de dicloruro de [1,1'-bis(d¡fen¡lfosf¡no)ferroceno]palad¡o (II) diclorometano (0,19 g, 0,23 mmol) y acetato potásico (0,69 g, 7,0 mmol) en 1,4-dioxano (8,0 ml) se calentó a 100 °C durante 1 h. A esta mezcla resultante se le añadieron 3-bromo-6,7-dimetoxi-quinolina (0,50 g., 1,9 mmol) y carbonato sódico (0,74 g, 7,0 mmol) disuelto en agua (2,0 ml) y se continuó la agitación a 100 °C durante 3 h. La mezcla de reacción se repartió entre agua (70 ml) y diclorometano (2 x 70 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua (40 ml), seguido de una solución de salmuera (20 ml). La capa orgánica se secó sobre sulfato sódico anhidro, se filtró y se evaporó a sequedad. La purificación por cromatografía en columna ultrarrápida (diclorometano/metanol) proporcionó 2-[4-(6,7-dimetoxi-3-quinolil)-2-fluorofenil]acetato de metilo (0,64 g, 1,8 mmol) en forma de un sólido de color pardo brillante. RMN 1H (CDCl^a) 53,74-3,76 (5H, m), 4,05 (3H, s), 4,06 (3H, s), 7,11 (1H, s), 7,40-7,44 (4H, m), 8,14 (1H, d, J = 2,0 Hz), 8,95 (1H, d, J = 2,0 Hz). EM m/z: 356 (M+H)⁺.

<Etapa 3> Ácido [4-(6,7-dimetoxiquinolin-3-il)-2-fluorofenil]acético

Se obtuvo ácido [4-(6,7-dimetoxiquinolin-3-il)-2-fluorofenil]acético en forma de un sólido de color amarillo usando un procedimiento análogo al que se ha descrito en el <Ejemplo 1-3>, sustituyendo [6-(6,7-dimetoxiquinolin-3-il)piridin-3-il]acetato de metilo por [4-(6,7-dimetoxiquinolin-3-il)-2-fluorofenil]acetato de metilo usado en el <Ejemplo 1-3>.

RMN 1H (DMSO-D6) 53,70 (2H, s), 3,93 (3H, s), 3,96 (3H, s), 7,40-7,41 (2H, m), 7,49 (1H, t, J = 8,1 Hz), 7,64-7,65 (1H, m), 7,68-7,70 (1H, m), 8,51 (1H, s), 9,04 (1H, d, J = 2,0 Hz), 12,52 (1H, s). EM m/z: 342 (M+H)⁺.

<Etapa 4> 2-[4-(6,7-Dimetoxiquinolin-3-il)-2-fluorofenil1-N-[3-(1,1,1-trifluoro-2-metilpropan-2-il)-1,2-oxazol-5-illacetamida

Se preparó 2-[4-(6,7-dimetoxiquinolin-3-il)-2-fluorofenil]-W-[3-(1,1,1-trifluoro-2-metilpropan-2-il)-1,2-oxazol-5-il]acetamida en forma de un sólido de color amarillo usando un procedimiento análogo al que se ha descrito en el <Ejemplo 3>, sustituyendo ácido [6-(6,7-dimetoxiquinolin-3-il)piridin-3-il]acético por ácido [4-(6,7-dimetoxiquinolin-3-il)-2-fluorofenil]acético usado en el <Ejemplo 3>.

RMN 1H (CDCl^a) 51,54 (6H, s), 3,87 (2H, s), 4,05 (3H, s), 4,07 (3H, s), 6,49 (1H, s), 7,12 (1H, s), 7,46-7,47 (3H, m), 7,51-7,52 (1H, m), 8,15 (1H, d, J = 2,4 Hz), 8,34 (1H, s), 8,93 (1H, d, J = 2,4 Hz). EM m/z: 518 (M+H)⁺.

<Ejemplos de prueba>

<Ejemplo de prueba 1> Evaluación de la actividad inhibidora de la cinasa RET (sistema sin células)

Un tampón de reacción (HEPES 100 mM (pH 7,4), MgCl2 10 mM, Brij-35 al 0,003 %, Tween-20 al 0,004 % y DTT 1 mM) se mezcló con una proteína recombinante RET (RET - tipo silvestre; Invitrogen n.° PV3819, concentración final: 80 pg/ul, o una RET - mutación de modulación de acceso (V804L); Invitrogen n.° PV4397, concentración final: 80 pg/ul) para preparar una solución de cinasa RET. El compuesto de prueba se preparó para tener una concentración final de 4000 nm con DMSO y, además, se prepararon muestras de compuestos de prueba a 12 concentraciones diferentes con un aumento de dilución de V10. Se añadieron 19 ul de la solución de cinasa RET a cada una de las líneas A a P de una placa de 384 pocillos y, a continuación, se añadió el compuesto de prueba a cada concentración a las líneas C a N y, además, se añadió 1 ul de dimetilsulfóxido (en lo sucesivo denominado DMSO) a cada una de las líneas A, B, O y P. A continuación, cada una de las mezclas obtenidas se preincubó a temperatura ambiente durante 20 minutos. Asimismo, se produjeron una solución de sustrato A que contenía ATP (concentración final: 1 mM) y una solución de sustrato B que no contenía ATP, ambas además de un tampón de reacción y FL-péptido 22 (PerkinElmer, n.° 760366, concentración final: 1,5 uM). La solución de sustrato A se añadió en una cantidad de 5 ul a las líneas B a O, mientras que la solución de sustrato B se añadió en una cantidad de 5 ul a las líneas A y P. Cada una de las mezclas obtenidas se incubó a 28 °C durante 45 minutos. Se añadió una solución de terminación de la reacción (HEPES 100 mM (pH 7,4), Briji-35 0,015 %, EDTA 40 mM y reactivo de recubrimiento 3 al 0,1 %) en una cantidad de 40 ul a la mezcla de reacción, para terminar la reacción.

Con EZ Reader II (Perkin Elmer), se separó un péptido sustrato de un péptido fosforilado en la solución de reacción y se usó la relación de producto (P/(P S)) calculada a partir del máximo (S) del péptido sustrato y el máximo (P) del péptido fosforilado para evaluación. La inhibición del compuesto de prueba que tenía cada concentración se obtuvo mediante la siguiente fórmula (calculada automáticamente usando el programa informático del sistema EZ Reader II).

Inhibición (%) = 100 x (1 - C^¡/C^o) (a)

C^¡: Tasa de conversión de una reacción de un compuesto de prueba con la solución de sustrato A - tasa de conversión de una reacción de DMSO con la solución de sustrato B

C^o: Tasa de conversión de una reacción de DMSO con la solución de sustrato A - tasa de conversión de una reacción de DMSO con la solución de sustrato B

En función de las tasas de inhibición del compuesto de prueba a 12 concentraciones diferentes según la fórmula (a), se trazó una curva de regresión logística de 4 parámetros. En este momento, la ecuación de regresión logística de 4 parámetros se expresa de la siguiente manera.

Inhibición (%) = Inferior (Superior - Inferior)/(1 (X/Cl⁵⁰)A^pendiente) (b) Superior: Asíntota ascendente

Pendiente: Parámetro de pendiente

CI50: Valor X de (superior inferior)/2

Inferior: Asíntota descendente

X: Concentración del compuesto de prueba

En primer lugar, cualquier valor inicial dado se introduce en Superior, Pendiente, CI⁵⁰, Inferior (Superior = 100, Pendiente = -1, CI⁵⁰ = aprox. CI⁵⁰ e inferior = 0), de modo que se trace una curva de regresión. Posteriormente, se ejecutó un método de mínimos cuadrados a la suma de cuadrados de una diferencia entre el valor medido y el valor estimado obtenido de la fórmula (b) para calcular el coeficiente de la ecuación de regresión logística de 4 parámetros, de modo que se calcule CI⁵⁰.

T l 2

<Ejemplo de prueba 2> Evaluación de la actividad inhibidora de la cinasa KDR (sistema celular)

Se sembraron células HUVEC en una placa a una densidad celular de 1500 células por pocillo y después se cultivaron durante una noche. El compuesto de prueba (10 uM, 2,5 uM, 625 nM, 156 nM, 50 nM, 10 nM, 2,5 nM o 0,6 nM) se añadió a cada pocillo, seguido de cultivo de la mezcla obtenida durante 2 horas. A continuación, se añadió VEGF165 (Peprotech, n.° 100-20) al cultivo a una concentración final de 50 ng/ml y después se hizo reaccionar la mezcla obtenida a 37 °C durante 5 minutos. A continuación, las células resultantes se lisaron con 50 ul de tampón de lisis incluido en AlphaLISA SureFire Ultra (Perkin Elmer, n.° ALSU-PVGFR-A500) y después se añadieron perlas aceptoras y perlas donantes a 10 ul del lisado celular según el manual de instrucciones incluido con el equipo mencionado anteriormente. La mezcla obtenida de este modo se hizo reaccionar a temperatura ambiente durante una noche y, a continuación, se midió una tasa de actividad inhibidora de la cinasa KDR usando Envision (Perkin Elmer).

El valor de un pocillo al que solo se había añadido el tampón de lisis se restó como fondo de todos los valores. A continuación, el valor para un pocillo al que se había añadido VEGFR y no se había añadido el compuesto de prueba se definió como una actividad de cinasa KDR del 100 % y se corrigió el valor obtenido. Usando la función de crecimiento de Microsoft Excel 2010, se estimó el valor de inhibición al 50 % de cada compuesto de prueba y se usó como un valor de CI⁵⁰.

<Ejemplo de prueba 3> Evaluación de la actividad inhibidora de la cinasa RET (sistema celular)

Se sembraron células Ba/F3 en las que se había sobreexpresado un gen de RET marcado con Myc o un gen muíante de RET (V804L) en una placa a una densidad celular de 500000 células por pocilio y después se añadió el compuesto de prueba (10 uM, 2,5 uM, 625 nM, 156 nM, 50 nM, 10 nM, 2,5 nM o 0,6 nM) a cada pocillo, seguido de cultivo de la mezcla obtenida durante 2 horas. A continuación, se añadieron 1 ml de tampón de lisis celular (Cell signaling technology, n.° 9803), un solo comprimido de inhibidor de fosfatasa (Roche, n.° 04906837001) y un solo comprimido de inhibidor de proteasa (Roche, n.° 0469312400) a 9 ml de MilliQ y después se añadieron a cada pocillo 20 ul de la mezcla obtenida. La mezcla obtenida de este modo se colocó en hielo durante 20 minutos, de modo que se lisaran las células. Se tomó una alícuota de 5 ul del lisado celular y, a continuación, se añadieron 64 nl de anticuerpo Myc (Cell signaling technology, n.° 3946) y perlas donantes de estreptavidina en una cantidad igual de 102 nl de perlas aceptoras P-Tyr-100 incluidas en el equipo de ensayo de fosfotirosina Alpha Screen (P-Tyr-100) (Perkin Elmer, n.° 6760620C) a la alícuota de acuerdo con el manual de instrucciones incluido con el equipo de ensayo mencionado anteriormente. La mezcla obtenida se hizo reaccionar a temperatura ambiente durante una noche y después se midió la tasa de actividad inhibidora de la cinasa RET usando Envision.

De todos los valores, el valor de un pocillo, al que solo se había añadido el tampón de lisis, se restó como valor de fondo y, a continuación, se corrigió el valor obtenido, definiendo al mismo tiempo el valor de un pocillo, al que no se había añadido el compuesto de prueba, como una actividad de cinasa RET del 100 %. Usando la función de crecimiento de Microsoft Excel 2010, se estimó el valor de inhibición al 50 % de cada compuesto de prueba y se usó como un valor de CI⁵⁰.

T l 41

<Ejemplo de prueba 4> Medición de la actividad inhibidora del crecimiento celular usando la línea celular de cáncer de pulmón no microcítico LC-2/ad

Se midió la actividad inhibidora del crecimiento celular del compuesto de prueba en la línea celular de cáncer de pulmón no microcítico LC-2/ad que tiene un gen de fusión CCDC6-RET (RIKEN, J Thorac Oncol. diciembre de 2012, 7 (12), 1872-6).

Se sembraron células LC-2/ad en una placa de 96 pocillos a una densidad celular de 5000 células por pocillo y después se cultivaron a 37 °Cen presencia de CO² al 5 % durante una noche en un medio preparado mezclando RPMl-1640 que contiene FBS al 15 % y HEPES 25 mM con la mezcla F12 de Ham en una relación de mezcla de 1:1. A continuación, el compuesto de prueba se diluyó y después se añadió a la placa de 96 pocillos. Como control negativo, se añadió dimetilsulfóxido (en lo sucesivo en el presente documento denominado DMSO). La mezcla obtenida se cultivó a 37 °C en presencia de CO2 al 5 % durante 9 días y, a continuación, se añadió al cultivo un reactivo de medición del recuento celular de ensayo de viabilidad celular luminiscente CellTiter-Glo(R) (Promega, n.° G7571), seguido de agitación de la mezcla. A continuación, utilizando un dispositivo de medición de luminiscencia Envision, se midió la intensidad de la luminiscencia. El valor de medición de un pocillo al que solo se le había añadido el medio se definió como una tasa de supervivencia del 0 % y el valor de medición de un pocillo al que se le había añadido DMSO se definió como una tasa de supervivencia del 100 %. Se calculó la tasa de supervivencia de las células LC-2/ad en presencia de cada concentración del compuesto de prueba. Usando la función de crecimiento de Microsoft Excel 2010, se estimó el valor de inhibición al 50 % de cada compuesto de prueba y se usó como un valor de Cl50.

<Ejemplo de prueba 5> Medición de la actividad inhibidora del crecimiento celular usando la línea celular TT de cáncer de glándula tiroidea

Se midió la actividad inhibidora del crecimiento celular del compuesto de prueba en la línea celular TT de cáncer de glándula tiroidea que tiene mutación activadora de RET (C634W) (Biochemical and Biophysical Research Communications. 27 de febrero de 1995 (207), 1022-1028).

Se sembraron células TT en una placa de 96 pocillos a una densidad celular de 5000 células por pocillo y después se cultivaron a 37 °C en presencia de CO² al 5 % durante una noche en un medio de mezcla de nutrientes F-12K que contenía SBF al 10 %. A continuación, el compuesto se diluyó y después se añadió a la placa de 96 pocillos. Como control negativo, se añadió dimetilsulfóxido (en lo sucesivo en el presente documento denominado DMSO). La mezcla obtenida se cultivó a 37 °C en presencia de CO² al 5 % durante 9 días y, a continuación, se añadió al cultivo un reactivo de medición del recuento celular de ensayo de viabilidad celular luminiscente CellTiter-Glo(R), seguido de agitación de la mezcla. A continuación, usando un dispositivo de medición de la luminiscencia Envision (Perkin Elmer), se midió la intensidad de la luminiscencia. El valor de medición de un pocillo al que solo se le había añadido el medio se definió como una tasa de supervivencia del 0 % y el valor de medición de un pocillo al que se le había añadido DMSO se definió como una tasa de supervivencia del 100 %. Se calculó la tasa de supervivencia de las células TT en presencia de cada concentración del compuesto de prueba. Usando la función de crecimiento de Microsoft Excel 2010, se estimó el valor de inhibición al 50 % de cada compuesto de prueba y se usó como un valor de CI⁵⁰.

T l

<Ejemplo de prueba 6> Evaluación de la actividad antitumoral utilizando un modelo de xenoinjerto establecido con la línea celular de cáncer de pulmón no microcítico LC-2/ad

Se mezclaron células de una línea celular de cáncer de pulmón no microcítico LC-2/ad (RIKEN, J Thorac Oncol. diciembre de 2012, 7 (12), 1872-6) suspendidas en DP^bS (Gibco, n° 14190) con una cantidad igual de matriz de membrana basal de matrigel Corning (Corning, n.° 354234) y la mezcla obtenida se trasplantó después por vía subcutánea en ratones NOG para formar un tumor. (Los ratones NOG se aclimataron después de haberlos recibido de In Vivo Science Inc. y, a continuación, las células se trasplantaron a los ratones cuando los ratones tenían 9 semanas de edad. Como pienso, se usó FR-2 (fabricado por Funabashi Farm Co., Ltd.).) Después de que el tumor hubiera alcanzado un tamaño de 100 a 200 mm³, los ratones se aleatorizaron en función del diámetro del tumor y después se inició la administración oral del compuesto del ejemplo 4 (en lo sucesivo en el presente documento denominado compuesto A). Como disolvente para disolver el compuesto A, se usó hidroxipropilmetilcelulosa al 1 %. La administración oral del compuesto A a una dosis de 3 mg/kg o 1 mg/kg por peso corporal del ratón tres veces al día se continuó durante 9 días [en donde un grupo al que se administraron 3 mg/kg de compuesto A tres veces al día se denomina grupo de administración a (■), un grupo al que se administró 1 mg/kg de compuesto A tres veces al día se denomina grupo de administración b (▲) y un grupo al que solo se administró disolvente se denomina grupo de vehículo (♦)]. Como resultado, se observó una regresión tumoral dependiente de la dosis (figura 1). Durante esta prueba, no se observó una reducción significativa del peso corporal en los grupos de administración del compuesto A en comparación con el grupo de vehículo. Por otra parte, se recogió el tumor (no se llevó a cabo administración en el grupo de vehículo) dos horas y seis horas después de la administración final del compuesto A y la fosforilación de RET de la tirosina en la posición 905 usada como indicador de la actividad de la cinasa RET (pRET(Y905), Nature Medicine, 18, 375-377 (2012)) se detectó después mediante el método de transferencia de Western. Como resultado, se confirmó la supresión dependiente de la dosis de la fosforilación de Y905 (figura 2).

[Datos comparativos 1]

Se proporcionan a continuación los valores de CI⁵⁰ de RET y CI⁵⁰ de KDR (sistema celular) de los compuestos de la invención (tabla 7) y los compuestos de comparación (tabla 8). Resulta evidente a partir de la tabla 8 que los compuestos de comparación son equipotentes en RET y KDR. En cambio, la tabla 7 muestra que los compuestos de la invención son selectivos para RET sobre KDR.

Tabla 7

CI ⁵⁰ (nM) de CI ⁵⁰ (nM)

N.° de e. Estructura RET Forma de Kd R Forma

18 Libre 828 Mesilato Ej. 3 (libre) / Ej. 4

_(mesilato)

4 Libre 287 Mesilato (continuación)

CI ⁵⁰ (nM) de CI ⁵⁰ (nM)

N.° de ej. Estructura RET Forma de KDR Forma

Ej. 5 (libre) / Ej. 6 '

(mesilato) Í ^h Y Y Y ^ ^{i i} 10 Libre 566 Mesilato ^{^ V "H 0} k?VY Nf Y0

Tabla 8

Documento

WO2015/031613 N.° de CI ⁵⁰ (nM) CI ⁵⁰ (nM)

ej./N.° de comp. Estructura de RET Forma de KDR Forma

Ej. 8

7 Libre 9 Libre

Ej. 182

2 Libre 1,5 Libre

Ej. ref. 1

8 Libre 7 Mesilato

Ej. ref. 2

5 Libre 16 Libre

Ej. ref. 3

8 Libre 6 Libre

[Datos comparativos 2] Análisis de PKPD de una dosis

Linfocitos pro-B murinos, Ba/F3, que expresan la proteína de fusión de la variante 6 de ets (ETV)-RET y ETV-RET-V804L fueron construidos por Daiichi Sankyo ^r D Novare Co., Ltd. y se cultivaron en medio RPMI1640 (Thermo Fisher Scientific K.K.) complementado con suero bovino fetal termoinactivado al 10 % (v/v) (FBS, GE Healthcare) y puromicina 1,5 |jg/ml en una incubadora de CO2 que se ajustó a 37 °C con una atmósfera de CO2 al 5 %. Las células se suspendieron en DPBS y se inocularon por vía subcutánea en ratones a 1,0 x 107 células por ratón. Después de que el tumor hubiera alcanzado un tamaño de 100 a 200 mm3, los ratones se aleatorizaron en función del diámetro del tumor y los compuestos de prueba (10 mg/kg, compuesto 229 o ejemplo 3) que se disolvieron en una solución de hidroxipropilmetilcelulosa al 1 % (p/v) se administraron por vía oral. Al grupo de control se le administró una solución de hidroxipropilmetilcelulosa al 1 % (p/v). Seis horas después de la administración, los tumores se recogieron y se congelaron con nitrógeno líquido inmediatamente. Las muestras congeladas se homogeneizaron mediante un homogeneizador de molino de vidrio (Biomedical Science Co., Ltd. y Yasui Kikai Corporation) con tampón de lisis (Cell Signaling Technology, Inc.) y cóctel inhibidor de proteasa y fosfatasa (Roche Diagnostics GmbH). La concentración de proteína del lisado tumoral se cuantificó mediante reactivo colorimétrico (Thermo Fisher Scientific K.K.) y todos se diluyeron a la misma concentración mediante tampón de lisis. Se añadió lisado tumoral al tampón de muestra con un reactivo reductor (Thermo Fisher Scientific K.K.) y se desnaturalizó mediante calor (70 °C, 10 minutos). Se usaron 30 jg, 15 jg y 15 jg de proteína para detectar la expresión de fosfo-RET, RET y actina, respectivamente. La proteína se resolvió en geles de tris HCl del 5 % al 20 % (DRC Co., Ltd.) y se transfirió a membranas de nitrocelulosa (Thermo Fisher Scientific K.K.). Las membranas se transfirieron con anticuerpo monoclonal de conejo anti-RET (dilución 1:1000, Cat. n.° 14698, Cell Signaling Technology, Inc.), anticuerpo policlonal de conejo anti-fosfo RET (Y905) (dilución 1:250, Cat. n.° 3221, Cell Signaling Technology, Inc.) y anticuerpo policlonal de conejo anti-actina (dilución 1:4000, Cat. n.° sc-1616R, Santa Cruz Biotechnology, Inc.), anticuerpos primarios seguidos de anticuerpo secundario conjugado con HRP anticuerpo de cabra anti-IgG de conejo (dilución 1:2000, Cat. n.° 7074, Cell Signaling Technology, Inc.). La reacción de quimioluminiscencia de HRP y el sustrato (sustrato de transferencia de Western Pierce ECL Plus, cat. n.° 32132, Thermo Fisher Scientific K.K.) se detectó mediante un explorador de imágenes Typhoon 9400 (GE Healthcare). Las intensidades de señal para RET fosforilada (pRET) y RET se cuantificaron y se calcularon con los siguientes métodos.

Relación de fosforilación de RET: (intensidad de señal de pRET) I (intensidad de señal de RET) Fosforilación relativa de RET (%): [(relación de fosforilación media de RET en muestras tratadas con el compuesto de prueba) / (relación de fosforilación media de RET en muestras tratadas con vehículo)] X 100

Tabla 9

El compuesto 229 no suprimió la RET fosforilada (pRET) en los tumores Ba/F3-RET-V804M debido a una exposición escasa en los tumores (datos disponibles), aunque el comp. 229 mostró un fuerte efecto inhibidor in vitro. La exposición escasa podría ser la principal razón de la potencia débil in vivo del compuesto 229. Por otro lado, el compuesto del ejemplo 3 inhibió claramente pRET en tumores Ba/F3-RET.

<Ejemplos de formulación>

<Ejemplo de formulación 1> Agente de cápsula

Compuesto del ejemplo 4 o 6 50 mg

Lactosa 128 mg

Almidón de maíz 70 mg

Estearato de magnesio_____ 2 mg

250 mg

El polvo que tenía la prescripción anterior se mezcló y después se pasó a través de un tamiz con 60 mallas. A continuación, este polvo se colocó en 250 mg de una cápsula de gelatina para preparar un agente de cápsula. <Ejemplo de formulación 2> Agente de comprimido

Compuesto del ejemplo 4 o 6 50 mg

Lactosa 126 mg

Almidón de maíz 23 mg

Estearato de magnesio_____ 1 mg

200 mg

El polvo que tenía la prescripción anterior se mezcló y, a continuación, la mezcla se granuló usando pasta de almidón de maíz y después se secó. Usando una máquina de preparación de comprimidos, se prepararon comprimidos a partir de la mezcla de reacción (comprimido individual: 200 mg). Estos comprimidos se pueden recubrir con azúcar, según sea necesario.

Aplicabilidad industrial

El nuevo compuesto de piridina representado por la fórmula general (I) de la presente invención descrita anteriormente, o una sal del mismo o un solvato del mismo, tiene una excelente acción inhibidora de la cinasa RET y es útil como medicamento.

Claims (15)

REIVINDICACIONES

1. Un compuesto representado por la siguiente fórmula general (I):

en donde A representa uno seleccionado entre las siguientes fórmulas (Ia) a (Id):

en donde R1 representa un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo C1-C3, y R2 representa un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo C1-C3, o

una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.

2. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 seleccionado entre los compuestos representados por las siguientes fórmulas estructurales:

o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.

3. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 que es 2-[6-(6,7-dimetoxiquinolin-3-il)piridin-3-il]-N-[5-(1,1,1-trifluoro-2-metilpropan-2-il)-1,2-oxazol-3-il]acetamida o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

4. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 que es 2-[6-(6,7-dimetoxiquinolin-3-il)piridin-3-il]-N-[3-(1,1,1-trifluoro-2-metilpropan-2-il)-1,2-oxazol-5-il]acetamida o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

5. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 que es 2-[6-(6,7-dimetoxiquinolin-3-il)piridin-3-il]-N-[3-(1,1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-il)-1H-pirazol-5-il]acetamida o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

6. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 que es 2-[6-(6,7-dimetoxiquinolin-3-il)piridin-3-il]-N-[1-metil-3-(1,1,1-trifluoro-2-metilpropan-2-il)-1H-pirazol-5-il]acetamida o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

7. Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 2 a 6 como una sal farmacéuticamente aceptable.

8. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 7 en donde la sal farmacéuticamente aceptable es un metanosulfonato.

9. Un inhibidor de la cinasa RET que comprende, como principio activo, un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

10. Uso del compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para la producción de una composición farmacéutica.

11. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8 y uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables.

12. Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en terapia.

13. Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en el tratamiento o la prevención del cáncer.

14. Un compuesto o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso según la reivindicación 13, en donde el cáncer se selecciona de un cáncer de pulmón, cáncer de la glándula tiroidea, cáncer de mama y cáncer de colon.

15. Un compuesto o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso según la reivindicación 13, en donde el cáncer es un cáncer de pulmón no microcítico.