ES2724176T3 - Nanopartículas para encapsulación de compuestos, su obtención y usos - Google Patents
Nanopartículas para encapsulación de compuestos, su obtención y usos Download PDFInfo
- Publication number
- ES2724176T3 ES2724176T3 ES11767022T ES11767022T ES2724176T3 ES 2724176 T3 ES2724176 T3 ES 2724176T3 ES 11767022 T ES11767022 T ES 11767022T ES 11767022 T ES11767022 T ES 11767022T ES 2724176 T3 ES2724176 T3 ES 2724176T3
- Authority
- ES
- Spain
- Prior art keywords
- zein
- amino acid
- nanoparticles
- cba
- soluble
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 title claims abstract description 216
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title claims abstract description 46
- 238000005538 encapsulation Methods 0.000 title description 40
- 229920002494 Zein Polymers 0.000 claims abstract description 238
- 229940093612 zein Drugs 0.000 claims abstract description 228
- 239000005019 zein Substances 0.000 claims abstract description 228
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims abstract description 120
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims abstract description 60
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 claims abstract description 30
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 claims abstract description 23
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 164
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 130
- OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N Folic acid Natural products C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N 0.000 claims description 122
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 111
- REFJWTPEDVJJIY-UHFFFAOYSA-N quercetin Natural products C=1C(O)=CC(O)=C(C(C=2O)=O)C=1OC=2C1=CC=C(O)C(O)=C1 REFJWTPEDVJJIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 99
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 97
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 67
- 235000019152 folic acid Nutrition 0.000 claims description 65
- 239000011724 folic acid Substances 0.000 claims description 63
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 61
- OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N N-Pteroyl-L-glutaminsaeure Natural products C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 61
- 229960000304 folic acid Drugs 0.000 claims description 61
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 claims description 59
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 57
- MWDZOUNAPSSOEL-UHFFFAOYSA-N kaempferol Natural products OC1=C(C(=O)c2cc(O)cc(O)c2O1)c3ccc(O)cc3 MWDZOUNAPSSOEL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 53
- ZVOLCUVKHLEPEV-UHFFFAOYSA-N Quercetagetin Natural products C1=C(O)C(O)=CC=C1C1=C(O)C(=O)C2=C(O)C(O)=C(O)C=C2O1 ZVOLCUVKHLEPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 50
- HWTZYBCRDDUBJY-UHFFFAOYSA-N Rhynchosin Natural products C1=C(O)C(O)=CC=C1C1=C(O)C(=O)C2=CC(O)=C(O)C=C2O1 HWTZYBCRDDUBJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 50
- 235000005875 quercetin Nutrition 0.000 claims description 50
- 229960001285 quercetin Drugs 0.000 claims description 50
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 47
- QNVSXXGDAPORNA-UHFFFAOYSA-N Resveratrol Natural products OC1=CC=CC(C=CC=2C=C(O)C(O)=CC=2)=C1 QNVSXXGDAPORNA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 41
- LUKBXSAWLPMMSZ-OWOJBTEDSA-N Trans-resveratrol Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1\C=C\C1=CC(O)=CC(O)=C1 LUKBXSAWLPMMSZ-OWOJBTEDSA-N 0.000 claims description 41
- 235000021283 resveratrol Nutrition 0.000 claims description 41
- 229940016667 resveratrol Drugs 0.000 claims description 41
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 claims description 31
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 claims description 31
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 claims description 31
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 claims description 31
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 claims description 20
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 claims description 19
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 claims description 19
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 17
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 16
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 15
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims description 14
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 12
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 claims description 12
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 11
- KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N (2S,3S,4S,5R,6R)-6-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-Acetamido-2-[(2S,3S,4R,5R,6R)-6-[(2R,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N 0.000 claims description 6
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 6
- 230000001476 alcoholic effect Effects 0.000 claims description 6
- AGBQKNBQESQNJD-UHFFFAOYSA-N alpha-Lipoic acid Natural products OC(=O)CCCCC1CCSS1 AGBQKNBQESQNJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 claims description 6
- 238000007865 diluting Methods 0.000 claims description 6
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 claims description 6
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 claims description 6
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 claims description 6
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 229920002674 hyaluronan Polymers 0.000 claims description 6
- 229960003160 hyaluronic acid Drugs 0.000 claims description 6
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 6
- 150000008442 polyphenolic compounds Chemical class 0.000 claims description 6
- 235000013824 polyphenols Nutrition 0.000 claims description 6
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 claims description 6
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 claims description 6
- AGBQKNBQESQNJD-SSDOTTSWSA-N (R)-lipoic acid Chemical compound OC(=O)CCCC[C@@H]1CCSS1 AGBQKNBQESQNJD-SSDOTTSWSA-N 0.000 claims description 5
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 claims description 5
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 claims description 5
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 235000021466 carotenoid Nutrition 0.000 claims description 5
- 150000001747 carotenoids Chemical class 0.000 claims description 5
- 235000019136 lipoic acid Nutrition 0.000 claims description 5
- 239000003223 protective agent Substances 0.000 claims description 5
- 229960002663 thioctic acid Drugs 0.000 claims description 5
- SQDAZGGFXASXDW-UHFFFAOYSA-N 5-bromo-2-(trifluoromethoxy)pyridine Chemical compound FC(F)(F)OC1=CC=C(Br)C=N1 SQDAZGGFXASXDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229920001287 Chondroitin sulfate Polymers 0.000 claims description 4
- 229940059329 chondroitin sulfate Drugs 0.000 claims description 4
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 claims description 4
- 229950008882 polysorbate Drugs 0.000 claims description 4
- 235000019155 vitamin A Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000011719 vitamin A Substances 0.000 claims description 3
- 235000019166 vitamin D Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000011710 vitamin D Substances 0.000 claims description 3
- 235000019165 vitamin E Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000011709 vitamin E Substances 0.000 claims description 3
- 235000019168 vitamin K Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000011712 vitamin K Substances 0.000 claims description 3
- 239000002243 precursor Substances 0.000 claims description 2
- 230000002706 hydrostatic effect Effects 0.000 claims 1
- 108010055615 Zein Proteins 0.000 description 207
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 103
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 101
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 53
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 23
- 239000000047 product Substances 0.000 description 22
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 22
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 22
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 22
- -1 glutamine amino acids Chemical class 0.000 description 21
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 18
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 18
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 17
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 16
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 15
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 15
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 15
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 14
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 12
- 235000019197 fats Nutrition 0.000 description 12
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 12
- 238000005086 pumping Methods 0.000 description 12
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 description 12
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 11
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 10
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 10
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 10
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 10
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 10
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 10
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 10
- KBPHJBAIARWVSC-XQIHNALSSA-N trans-lutein Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C=C/C1=C(C)CC(O)CC1(C)C)C=CC=C(/C)C=CC2C(=CC(O)CC2(C)C)C KBPHJBAIARWVSC-XQIHNALSSA-N 0.000 description 10
- LGJMUZUPVCAVPU-UHFFFAOYSA-N beta-Sitostanol Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)CCC(CC)C(C)C)C1(C)CC2 LGJMUZUPVCAVPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 9
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 9
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 9
- 238000003760 magnetic stirring Methods 0.000 description 9
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 9
- 239000005913 Maltodextrin Substances 0.000 description 8
- 229920002774 Maltodextrin Polymers 0.000 description 8
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 8
- 229940035034 maltodextrin Drugs 0.000 description 8
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 8
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 8
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 8
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 7
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 7
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 7
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 7
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 7
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 7
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 7
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 7
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 7
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 7
- 238000011200 topical administration Methods 0.000 description 7
- OILXMJHPFNGGTO-UHFFFAOYSA-N (22E)-(24xi)-24-methylcholesta-5,22-dien-3beta-ol Natural products C1C=C2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)C=CC(C)C(C)C)C1(C)CC2 OILXMJHPFNGGTO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 6
- UPYKUZBSLRQECL-UKMVMLAPSA-N Lycopene Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C=C/C1C(=C)CCCC1(C)C)C=CC=C(/C)C=CC2C(=C)CCCC2(C)C UPYKUZBSLRQECL-UKMVMLAPSA-N 0.000 description 6
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N Niacin Chemical compound OC(=O)C1=CC=CN=C1 PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- MBMBGCFOFBJSGT-KUBAVDMBSA-N all-cis-docosa-4,7,10,13,16,19-hexaenoic acid Chemical compound CC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCC(O)=O MBMBGCFOFBJSGT-KUBAVDMBSA-N 0.000 description 6
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 6
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 6
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 6
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 6
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 6
- 201000007750 congenital bile acid synthesis defect Diseases 0.000 description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 6
- IYRMWMYZSQPJKC-UHFFFAOYSA-N kaempferol Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1=C(O)C(=O)C2=C(O)C=C(O)C=C2O1 IYRMWMYZSQPJKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 6
- 229960005375 lutein Drugs 0.000 description 6
- KBPHJBAIARWVSC-RGZFRNHPSA-N lutein Chemical compound C([C@H](O)CC=1C)C(C)(C)C=1\C=C\C(\C)=C\C=C\C(\C)=C\C=C\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\[C@H]1C(C)=C[C@H](O)CC1(C)C KBPHJBAIARWVSC-RGZFRNHPSA-N 0.000 description 6
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 6
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 6
- FJHBOVDFOQMZRV-XQIHNALSSA-N xanthophyll Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C=C/C1=C(C)CC(O)CC1(C)C)C=CC=C(/C)C=CC2C=C(C)C(O)CC2(C)C FJHBOVDFOQMZRV-XQIHNALSSA-N 0.000 description 6
- OQMZNAMGEHIHNN-UHFFFAOYSA-N 7-Dehydrostigmasterol Natural products C1C(O)CCC2(C)C(CCC3(C(C(C)C=CC(CC)C(C)C)CCC33)C)C3=CC=C21 OQMZNAMGEHIHNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- JEVVKJMRZMXFBT-XWDZUXABSA-N Lycophyll Natural products OC/C(=C/CC/C(=C\C=C\C(=C/C=C/C(=C\C=C\C=C(/C=C/C=C(\C=C\C=C(/CC/C=C(/CO)\C)\C)/C)\C)/C)\C)/C)/C JEVVKJMRZMXFBT-XWDZUXABSA-N 0.000 description 5
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 5
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 5
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 5
- JAZBEHYOTPTENJ-JLNKQSITSA-N all-cis-5,8,11,14,17-icosapentaenoic acid Chemical compound CC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC(O)=O JAZBEHYOTPTENJ-JLNKQSITSA-N 0.000 description 5
- FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N all-trans-retinol Chemical compound OC\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N 0.000 description 5
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 5
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 5
- JAZBEHYOTPTENJ-UHFFFAOYSA-N eicosapentaenoic acid Natural products CCC=CCC=CCC=CCC=CCC=CCCCC(O)=O JAZBEHYOTPTENJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 5
- 235000012661 lycopene Nutrition 0.000 description 5
- 239000001751 lycopene Substances 0.000 description 5
- 229960004999 lycopene Drugs 0.000 description 5
- OAIJSZIZWZSQBC-GYZMGTAESA-N lycopene Chemical compound CC(C)=CCC\C(C)=C\C=C\C(\C)=C\C=C\C(\C)=C\C=C\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)CCC=C(C)C OAIJSZIZWZSQBC-GYZMGTAESA-N 0.000 description 5
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 5
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 5
- 238000004626 scanning electron microscopy Methods 0.000 description 5
- NLQLSVXGSXCXFE-UHFFFAOYSA-N sitosterol Natural products CC=C(/CCC(C)C1CC2C3=CCC4C(C)C(O)CCC4(C)C3CCC2(C)C1)C(C)C NLQLSVXGSXCXFE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 5
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 5
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 5
- ZCIHMQAPACOQHT-ZGMPDRQDSA-N trans-isorenieratene Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C=C/c1c(C)ccc(C)c1C)C=CC=C(/C)C=Cc2c(C)ccc(C)c2C ZCIHMQAPACOQHT-ZGMPDRQDSA-N 0.000 description 5
- GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N α-tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2O[C@@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N 0.000 description 5
- KZJWDPNRJALLNS-VPUBHVLGSA-N (-)-beta-Sitosterol Natural products O[C@@H]1CC=2[C@@](C)([C@@H]3[C@H]([C@H]4[C@@](C)([C@H]([C@H](CC[C@@H](C(C)C)CC)C)CC4)CC3)CC=2)CC1 KZJWDPNRJALLNS-VPUBHVLGSA-N 0.000 description 4
- CSVWWLUMXNHWSU-UHFFFAOYSA-N (22E)-(24xi)-24-ethyl-5alpha-cholest-22-en-3beta-ol Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)C=CC(CC)C(C)C)C1(C)CC2 CSVWWLUMXNHWSU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- JKQXZKUSFCKOGQ-JLGXGRJMSA-N (3R,3'R)-beta,beta-carotene-3,3'-diol Chemical compound C([C@H](O)CC=1C)C(C)(C)C=1/C=C/C(/C)=C/C=C/C(/C)=C/C=C/C=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)C[C@@H](O)CC1(C)C JKQXZKUSFCKOGQ-JLGXGRJMSA-N 0.000 description 4
- GHOKWGTUZJEAQD-ZETCQYMHSA-N (D)-(+)-Pantothenic acid Chemical compound OCC(C)(C)[C@@H](O)C(=O)NCCC(O)=O GHOKWGTUZJEAQD-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 4
- KLEXDBGYSOIREE-UHFFFAOYSA-N 24xi-n-propylcholesterol Natural products C1C=C2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)CCC(CCC)C(C)C)C1(C)CC2 KLEXDBGYSOIREE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- SGNBVLSWZMBQTH-FGAXOLDCSA-N Campesterol Natural products O[C@@H]1CC=2[C@@](C)([C@@H]3[C@H]([C@H]4[C@@](C)([C@H]([C@H](CC[C@H](C(C)C)C)C)CC4)CC3)CC=2)CC1 SGNBVLSWZMBQTH-FGAXOLDCSA-N 0.000 description 4
- LPZCCMIISIBREI-MTFRKTCUSA-N Citrostadienol Natural products CC=C(CC[C@@H](C)[C@H]1CC[C@H]2C3=CC[C@H]4[C@H](C)[C@@H](O)CC[C@]4(C)[C@H]3CC[C@]12C)C(C)C LPZCCMIISIBREI-MTFRKTCUSA-N 0.000 description 4
- ARVGMISWLZPBCH-UHFFFAOYSA-N Dehydro-beta-sitosterol Natural products C1C(O)CCC2(C)C(CCC3(C(C(C)CCC(CC)C(C)C)CCC33)C)C3=CC=C21 ARVGMISWLZPBCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- BTEISVKTSQLKST-UHFFFAOYSA-N Haliclonasterol Natural products CC(C=CC(C)C(C)(C)C)C1CCC2C3=CC=C4CC(O)CCC4(C)C3CCC12C BTEISVKTSQLKST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- JUUBCHWRXWPFFH-UHFFFAOYSA-N Hydroxytyrosol Chemical compound OCCC1=CC=C(O)C(O)=C1 JUUBCHWRXWPFFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108010020346 Polyglutamic Acid Proteins 0.000 description 4
- HZYXFRGVBOPPNZ-UHFFFAOYSA-N UNPD88870 Natural products C1C=C2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)=CCC(CC)C(C)C)C1(C)CC2 HZYXFRGVBOPPNZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- JKQXZKUSFCKOGQ-LQFQNGICSA-N Z-zeaxanthin Natural products C([C@H](O)CC=1C)C(C)(C)C=1C=CC(C)=CC=CC(C)=CC=CC=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)C[C@@H](O)CC1(C)C JKQXZKUSFCKOGQ-LQFQNGICSA-N 0.000 description 4
- QOPRSMDTRDMBNK-RNUUUQFGSA-N Zeaxanthin Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C=C/C1=C(C)CCC(O)C1(C)C)C=CC=C(/C)C=CC2=C(C)CC(O)CC2(C)C QOPRSMDTRDMBNK-RNUUUQFGSA-N 0.000 description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 4
- JKQXZKUSFCKOGQ-LOFNIBRQSA-N all-trans-Zeaxanthin Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C=C/C1=C(C)CC(O)CC1(C)C)C=CC=C(/C)C=CC2=C(C)CC(O)CC2(C)C JKQXZKUSFCKOGQ-LOFNIBRQSA-N 0.000 description 4
- ANVAOWXLWRTKGA-XHGAXZNDSA-N all-trans-alpha-carotene Chemical compound CC=1CCCC(C)(C)C=1/C=C/C(/C)=C/C=C/C(/C)=C/C=C/C=C(C)C=CC=C(C)C=CC1C(C)=CCCC1(C)C ANVAOWXLWRTKGA-XHGAXZNDSA-N 0.000 description 4
- MJVXAPPOFPTTCA-UHFFFAOYSA-N beta-Sistosterol Natural products CCC(CCC(C)C1CCC2C3CC=C4C(C)C(O)CCC4(C)C3CCC12C)C(C)C MJVXAPPOFPTTCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- NJKOMDUNNDKEAI-UHFFFAOYSA-N beta-sitosterol Natural products CCC(CCC(C)C1CCC2(C)C3CC=C4CC(O)CCC4C3CCC12C)C(C)C NJKOMDUNNDKEAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 4
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 4
- 235000000431 campesterol Nutrition 0.000 description 4
- SGNBVLSWZMBQTH-PODYLUTMSA-N campesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CC[C@@H](C)C(C)C)[C@@]1(C)CC2 SGNBVLSWZMBQTH-PODYLUTMSA-N 0.000 description 4
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 4
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 4
- 150000002224 folic acids Chemical class 0.000 description 4
- 229920000370 gamma-poly(glutamate) polymer Polymers 0.000 description 4
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 4
- 235000012680 lutein Nutrition 0.000 description 4
- 239000001656 lutein Substances 0.000 description 4
- ORAKUVXRZWMARG-WZLJTJAWSA-N lutein Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C=C/C1=C(C)CCCC1(C)C)C=CC=C(/C)C=CC2C(=CC(O)CC2(C)C)C ORAKUVXRZWMARG-WZLJTJAWSA-N 0.000 description 4
- 229960003512 nicotinic acid Drugs 0.000 description 4
- 235000001968 nicotinic acid Nutrition 0.000 description 4
- 239000011664 nicotinic acid Substances 0.000 description 4
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 4
- 229950005143 sitosterol Drugs 0.000 description 4
- 235000015500 sitosterol Nutrition 0.000 description 4
- KZJWDPNRJALLNS-VJSFXXLFSA-N sitosterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CC[C@@H](CC)C(C)C)[C@@]1(C)CC2 KZJWDPNRJALLNS-VJSFXXLFSA-N 0.000 description 4
- 229940032091 stigmasterol Drugs 0.000 description 4
- HCXVJBMSMIARIN-PHZDYDNGSA-N stigmasterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)/C=C/[C@@H](CC)C(C)C)[C@@]1(C)CC2 HCXVJBMSMIARIN-PHZDYDNGSA-N 0.000 description 4
- 235000016831 stigmasterol Nutrition 0.000 description 4
- BFDNMXAIBMJLBB-UHFFFAOYSA-N stigmasterol Natural products CCC(C=CC(C)C1CCCC2C3CC=C4CC(O)CCC4(C)C3CCC12C)C(C)C BFDNMXAIBMJLBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 4
- QAIPRVGONGVQAS-DUXPYHPUSA-N trans-caffeic acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C1=CC=C(O)C(O)=C1 QAIPRVGONGVQAS-DUXPYHPUSA-N 0.000 description 4
- 235000019154 vitamin C Nutrition 0.000 description 4
- 239000011718 vitamin C Substances 0.000 description 4
- 235000010930 zeaxanthin Nutrition 0.000 description 4
- 239000001775 zeaxanthin Substances 0.000 description 4
- 229940043269 zeaxanthin Drugs 0.000 description 4
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N (±)-α-Tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2OC(CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 13-cis retinol Natural products OCC=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 3
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 3
- ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N D-erythro-ascorbic acid Natural products OCC1OC(=O)C(O)=C1O ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 3
- UBSCDKPKWHYZNX-UHFFFAOYSA-N Demethoxycapillarisin Natural products C1=CC(O)=CC=C1OC1=CC(=O)C2=C(O)C=C(O)C=C2O1 UBSCDKPKWHYZNX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 3
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 3
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 3
- IKMDFBPHZNJCSN-UHFFFAOYSA-N Myricetin Chemical compound C=1C(O)=CC(O)=C(C(C=2O)=O)C=1OC=2C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 IKMDFBPHZNJCSN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 3
- 229930003268 Vitamin C Natural products 0.000 description 3
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 3
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 3
- 150000001746 carotenes Chemical class 0.000 description 3
- 235000005473 carotenes Nutrition 0.000 description 3
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 3
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 3
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 3
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 3
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 3
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 3
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 3
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 3
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 3
- 150000002433 hydrophilic molecules Chemical class 0.000 description 3
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 3
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 3
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 3
- 235000008777 kaempferol Nutrition 0.000 description 3
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 3
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 3
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 3
- UXOUKMQIEVGVLY-UHFFFAOYSA-N morin Natural products OC1=CC(O)=CC(C2=C(C(=O)C3=C(O)C=C(O)C=C3O2)O)=C1 UXOUKMQIEVGVLY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PCOBUQBNVYZTBU-UHFFFAOYSA-N myricetin Natural products OC1=C(O)C(O)=CC(C=2OC3=CC(O)=C(O)C(O)=C3C(=O)C=2)=C1 PCOBUQBNVYZTBU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000007743 myricetin Nutrition 0.000 description 3
- 229940116852 myricetin Drugs 0.000 description 3
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 3
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 3
- SHUZOJHMOBOZST-UHFFFAOYSA-N phylloquinone Natural products CC(C)CCCCC(C)CCC(C)CCCC(=CCC1=C(C)C(=O)c2ccccc2C1=O)C SHUZOJHMOBOZST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- MBWXNTAXLNYFJB-NKFFZRIASA-N phylloquinone Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(C/C=C(C)/CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)=C(C)C(=O)C2=C1 MBWXNTAXLNYFJB-NKFFZRIASA-N 0.000 description 3
- 238000013379 physicochemical characterization Methods 0.000 description 3
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 3
- 235000021055 solid food Nutrition 0.000 description 3
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 3
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 3
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 3
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 3
- 229920001059 synthetic polymer Polymers 0.000 description 3
- NCYCYZXNIZJOKI-UHFFFAOYSA-N vitamin A aldehyde Natural products O=CC=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)CCCC1(C)C NCYCYZXNIZJOKI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- MECHNRXZTMCUDQ-RKHKHRCZSA-N vitamin D2 Chemical compound C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@H](C)/C=C/[C@H](C)C(C)C)=C\C=C1\C[C@@H](O)CCC1=C MECHNRXZTMCUDQ-RKHKHRCZSA-N 0.000 description 3
- DMASLKHVQRHNES-UPOGUZCLSA-N (3R)-beta,beta-caroten-3-ol Chemical compound C([C@H](O)CC=1C)C(C)(C)C=1/C=C/C(/C)=C/C=C/C(/C)=C/C=C/C=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)CCCC1(C)C DMASLKHVQRHNES-UPOGUZCLSA-N 0.000 description 2
- ACEAELOMUCBPJP-UHFFFAOYSA-N (E)-3,4,5-trihydroxycinnamic acid Natural products OC(=O)C=CC1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 ACEAELOMUCBPJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GJJVAFUKOBZPCB-UHFFFAOYSA-N 2-methyl-2-(4,8,12-trimethyltrideca-3,7,11-trienyl)-3,4-dihydrochromen-6-ol Chemical compound OC1=CC=C2OC(CCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)C)(C)CCC2=C1 GJJVAFUKOBZPCB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ALYNCZNDIQEVRV-PZFLKRBQSA-N 4-amino-3,5-ditritiobenzoic acid Chemical compound [3H]c1cc(cc([3H])c1N)C(O)=O ALYNCZNDIQEVRV-PZFLKRBQSA-N 0.000 description 2
- VVIAGPKUTFNRDU-UHFFFAOYSA-N 6S-folinic acid Natural products C1NC=2NC(N)=NC(=O)C=2N(C=O)C1CNC1=CC=C(C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 VVIAGPKUTFNRDU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PYIXHKGTJKCVBJ-UHFFFAOYSA-N Astraciceran Natural products C1OC2=CC(O)=CC=C2CC1C1=CC(OCO2)=C2C=C1OC PYIXHKGTJKCVBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NDVRQFZUJRMKKP-UHFFFAOYSA-N Betavulgarin Natural products O=C1C=2C(OC)=C3OCOC3=CC=2OC=C1C1=CC=CC=C1O NDVRQFZUJRMKKP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JMGZEFIQIZZSBH-UHFFFAOYSA-N Bioquercetin Natural products CC1OC(OCC(O)C2OC(OC3=C(Oc4cc(O)cc(O)c4C3=O)c5ccc(O)c(O)c5)C(O)C2O)C(O)C(O)C1O JMGZEFIQIZZSBH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GHOKWGTUZJEAQD-UHFFFAOYSA-N Chick antidermatitis factor Natural products OCC(C)(C)C(O)C(=O)NCCC(O)=O GHOKWGTUZJEAQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004212 Cryptoxanthin Substances 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- MPJKWIXIYCLVCU-UHFFFAOYSA-N Folinic acid Natural products NC1=NC2=C(N(C=O)C(CNc3ccc(cc3)C(=O)NC(CCC(=O)O)CC(=O)O)CN2)C(=O)N1 MPJKWIXIYCLVCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IHPVFYLOGNNZLA-UHFFFAOYSA-N Phytoalexin Natural products COC1=CC=CC=C1C1OC(C=C2C(OCO2)=C2OC)=C2C(=O)C1 IHPVFYLOGNNZLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000016611 Proteoglycans Human genes 0.000 description 2
- 108010067787 Proteoglycans Proteins 0.000 description 2
- 241000700157 Rattus norvegicus Species 0.000 description 2
- 238000003917 TEM image Methods 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MECHNRXZTMCUDQ-UHFFFAOYSA-N Vitamin D2 Natural products C1CCC2(C)C(C(C)C=CC(C)C(C)C)CCC2C1=CC=C1CC(O)CCC1=C MECHNRXZTMCUDQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QYSXJUFSXHHAJI-XFEUOLMDSA-N Vitamin D3 Natural products C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@H](C)CCCC(C)C)=C/C=C1\C[C@@H](O)CCC1=C QYSXJUFSXHHAJI-XFEUOLMDSA-N 0.000 description 2
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 2
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 2
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 2
- OENHQHLEOONYIE-UKMVMLAPSA-N all-trans beta-carotene Natural products CC=1CCCC(C)(C)C=1/C=C/C(/C)=C/C=C/C(/C)=C/C=C/C=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)CCCC1(C)C OENHQHLEOONYIE-UKMVMLAPSA-N 0.000 description 2
- 229930002945 all-trans-retinaldehyde Natural products 0.000 description 2
- SHGAZHPCJJPHSC-YCNIQYBTSA-N all-trans-retinoic acid Chemical compound OC(=O)\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C SHGAZHPCJJPHSC-YCNIQYBTSA-N 0.000 description 2
- 229940087168 alpha tocopherol Drugs 0.000 description 2
- 239000011795 alpha-carotene Substances 0.000 description 2
- 235000003903 alpha-carotene Nutrition 0.000 description 2
- ANVAOWXLWRTKGA-HLLMEWEMSA-N alpha-carotene Natural products C(=C\C=C\C=C(/C=C/C=C(\C=C\C=1C(C)(C)CCCC=1C)/C)\C)(\C=C\C=C(/C=C/[C@H]1C(C)=CCCC1(C)C)\C)/C ANVAOWXLWRTKGA-HLLMEWEMSA-N 0.000 description 2
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 2
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 2
- 235000010208 anthocyanin Nutrition 0.000 description 2
- 239000004410 anthocyanin Substances 0.000 description 2
- 229930002877 anthocyanin Natural products 0.000 description 2
- 150000004636 anthocyanins Chemical class 0.000 description 2
- 239000004599 antimicrobial Substances 0.000 description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000013734 beta-carotene Nutrition 0.000 description 2
- 239000011648 beta-carotene Substances 0.000 description 2
- TUPZEYHYWIEDIH-WAIFQNFQSA-N beta-carotene Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C=C/C1=C(C)CCCC1(C)C)C=CC=C(/C)C=CC2=CCCCC2(C)C TUPZEYHYWIEDIH-WAIFQNFQSA-N 0.000 description 2
- 235000002360 beta-cryptoxanthin Nutrition 0.000 description 2
- DMASLKHVQRHNES-ITUXNECMSA-N beta-cryptoxanthin Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C=C/C1=C(C)CC(O)CC1(C)C)C=CC=C(/C)C=CC2=C(C)CCCC2(C)C DMASLKHVQRHNES-ITUXNECMSA-N 0.000 description 2
- 229960002747 betacarotene Drugs 0.000 description 2
- 229910021538 borax Inorganic materials 0.000 description 2
- 229940074360 caffeic acid Drugs 0.000 description 2
- 235000004883 caffeic acid Nutrition 0.000 description 2
- FDSDTBUPSURDBL-LOFNIBRQSA-N canthaxanthin Chemical compound CC=1C(=O)CCC(C)(C)C=1/C=C/C(/C)=C/C=C/C(/C)=C/C=C/C=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)C(=O)CCC1(C)C FDSDTBUPSURDBL-LOFNIBRQSA-N 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 2
- QAIPRVGONGVQAS-UHFFFAOYSA-N cis-caffeic acid Natural products OC(=O)C=CC1=CC=C(O)C(O)=C1 QAIPRVGONGVQAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 239000011162 core material Substances 0.000 description 2
- 235000019244 cryptoxanthin Nutrition 0.000 description 2
- 238000013461 design Methods 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- UQGFMSUEHSUPRD-UHFFFAOYSA-N disodium;3,7-dioxido-2,4,6,8,9-pentaoxa-1,3,5,7-tetraborabicyclo[3.3.1]nonane Chemical compound [Na+].[Na+].O1B([O-])OB2OB([O-])OB1O2 UQGFMSUEHSUPRD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008393 encapsulating agent Substances 0.000 description 2
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 2
- XMOCLSLCDHWDHP-IUODEOHRSA-N epi-Gallocatechin Chemical compound C1([C@H]2OC3=CC(O)=CC(O)=C3C[C@H]2O)=CC(O)=C(O)C(O)=C1 XMOCLSLCDHWDHP-IUODEOHRSA-N 0.000 description 2
- 229960002061 ergocalciferol Drugs 0.000 description 2
- IVTMALDHFAHOGL-UHFFFAOYSA-N eriodictyol 7-O-rutinoside Natural products OC1C(O)C(O)C(C)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC=2C=C3C(C(C(O)=C(O3)C=3C=C(O)C(O)=CC=3)=O)=C(O)C=2)O1 IVTMALDHFAHOGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 2
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 2
- HVQAJTFOCKOKIN-UHFFFAOYSA-N flavonol Natural products O1C2=CC=CC=C2C(=O)C(O)=C1C1=CC=CC=C1 HVQAJTFOCKOKIN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000007946 flavonol Chemical class 0.000 description 2
- 235000011957 flavonols Nutrition 0.000 description 2
- 229940014144 folate Drugs 0.000 description 2
- 235000008191 folinic acid Nutrition 0.000 description 2
- VVIAGPKUTFNRDU-ABLWVSNPSA-N folinic acid Chemical compound C1NC=2NC(N)=NC(=O)C=2N(C=O)C1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 VVIAGPKUTFNRDU-ABLWVSNPSA-N 0.000 description 2
- 239000011672 folinic acid Substances 0.000 description 2
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 2
- 235000013376 functional food Nutrition 0.000 description 2
- 102000034238 globular proteins Human genes 0.000 description 2
- 108091005896 globular proteins Proteins 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 description 2
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 2
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 2
- 229940095066 hydroxytyrosol Drugs 0.000 description 2
- 235000003248 hydroxytyrosol Nutrition 0.000 description 2
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 2
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 238000001155 isoelectric focusing Methods 0.000 description 2
- 229960001691 leucovorin Drugs 0.000 description 2
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 2
- KZMACGJDUUWFCH-UHFFFAOYSA-O malvidin Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC(C=2C(=CC=3C(O)=CC(O)=CC=3[O+]=2)O)=C1 KZMACGJDUUWFCH-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 2
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 238000001000 micrograph Methods 0.000 description 2
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 2
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 2
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 2
- 229920005615 natural polymer Polymers 0.000 description 2
- 235000020660 omega-3 fatty acid Nutrition 0.000 description 2
- 229940012843 omega-3 fatty acid Drugs 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- 210000003254 palate Anatomy 0.000 description 2
- 229940055726 pantothenic acid Drugs 0.000 description 2
- 235000019161 pantothenic acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000011713 pantothenic acid Substances 0.000 description 2
- 235000014594 pastries Nutrition 0.000 description 2
- 235000019175 phylloquinone Nutrition 0.000 description 2
- 239000011772 phylloquinone Substances 0.000 description 2
- 239000000280 phytoalexin Substances 0.000 description 2
- 150000001857 phytoalexin derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 229960001898 phytomenadione Drugs 0.000 description 2
- 229940068065 phytosterols Drugs 0.000 description 2
- 229920002643 polyglutamic acid Polymers 0.000 description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 2
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 2
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 2
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 2
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 2
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 108060006613 prolamin Proteins 0.000 description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 2
- 125000001747 pteroyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(C(=O)[*])=C([H])C([H])=C1N([H])C([H])([H])C1=C([H])N=C2N([H])C(N([H])[H])=NC(=O)C2=N1 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- FDRQPMVGJOQVTL-UHFFFAOYSA-N quercetin rutinoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC=2C(C3=C(O)C=C(O)C=C3OC=2C=2C=C(O)C(O)=CC=2)=O)O1 FDRQPMVGJOQVTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003252 repetitive effect Effects 0.000 description 2
- 235000020945 retinal Nutrition 0.000 description 2
- 239000011604 retinal Substances 0.000 description 2
- 230000002207 retinal effect Effects 0.000 description 2
- NCYCYZXNIZJOKI-OVSJKPMPSA-N retinal group Chemical group C\C(=C/C=O)\C=C\C=C(\C=C\C1=C(CCCC1(C)C)C)/C NCYCYZXNIZJOKI-OVSJKPMPSA-N 0.000 description 2
- 229930002330 retinoic acid Natural products 0.000 description 2
- 235000020944 retinol Nutrition 0.000 description 2
- 239000011607 retinol Substances 0.000 description 2
- 229960003471 retinol Drugs 0.000 description 2
- 235000005493 rutin Nutrition 0.000 description 2
- ALABRVAAKCSLSC-UHFFFAOYSA-N rutin Natural products CC1OC(OCC2OC(O)C(O)C(O)C2O)C(O)C(O)C1OC3=C(Oc4cc(O)cc(O)c4C3=O)c5ccc(O)c(O)c5 ALABRVAAKCSLSC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IKGXIBQEEMLURG-BKUODXTLSA-N rutin Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O[C@@H]1OC[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](OC=2C(C3=C(O)C=C(O)C=C3OC=2C=2C=C(O)C(O)=CC=2)=O)O1 IKGXIBQEEMLURG-BKUODXTLSA-N 0.000 description 2
- 229960004555 rutoside Drugs 0.000 description 2
- 210000003752 saphenous vein Anatomy 0.000 description 2
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 235000010339 sodium tetraborate Nutrition 0.000 description 2
- 239000004328 sodium tetraborate Substances 0.000 description 2
- 230000003381 solubilizing effect Effects 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 2
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 2
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 2
- 235000020955 thiamine monophosphate Nutrition 0.000 description 2
- 239000011621 thiamine monophosphate Substances 0.000 description 2
- 229960002363 thiamine pyrophosphate Drugs 0.000 description 2
- 235000008170 thiamine pyrophosphate Nutrition 0.000 description 2
- 239000011678 thiamine pyrophosphate Substances 0.000 description 2
- IWLROWZYZPNOFC-UHFFFAOYSA-O thiamine triphosphate Chemical compound CC1=C(CCOP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)SC=[N+]1CC1=CN=C(C)N=C1N IWLROWZYZPNOFC-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 2
- YXVCLPJQTZXJLH-UHFFFAOYSA-N thiamine(1+) diphosphate chloride Chemical compound [Cl-].CC1=C(CCOP(O)(=O)OP(O)(O)=O)SC=[N+]1CC1=CN=C(C)N=C1N YXVCLPJQTZXJLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GUGWNSHJDUEHNJ-UHFFFAOYSA-N thiamine(1+) monophosphate chloride Chemical compound [Cl-].CC1=C(CCOP(O)(O)=O)SC=[N+]1CC1=CN=C(C)N=C1N GUGWNSHJDUEHNJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960000984 tocofersolan Drugs 0.000 description 2
- 229930003802 tocotrienol Natural products 0.000 description 2
- 239000011731 tocotrienol Substances 0.000 description 2
- 235000019148 tocotrienols Nutrition 0.000 description 2
- NGSWKAQJJWESNS-ZZXKWVIFSA-N trans-4-coumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C1=CC=C(O)C=C1 NGSWKAQJJWESNS-ZZXKWVIFSA-N 0.000 description 2
- 238000004627 transmission electron microscopy Methods 0.000 description 2
- 229960001727 tretinoin Drugs 0.000 description 2
- 238000000825 ultraviolet detection Methods 0.000 description 2
- 235000001892 vitamin D2 Nutrition 0.000 description 2
- 239000011653 vitamin D2 Substances 0.000 description 2
- QYSXJUFSXHHAJI-YRZJJWOYSA-N vitamin D3 Chemical compound C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@H](C)CCCC(C)C)=C\C=C1\C[C@@H](O)CCC1=C QYSXJUFSXHHAJI-YRZJJWOYSA-N 0.000 description 2
- 235000019143 vitamin K2 Nutrition 0.000 description 2
- 239000011728 vitamin K2 Substances 0.000 description 2
- 239000000341 volatile oil Substances 0.000 description 2
- 235000008210 xanthophylls Nutrition 0.000 description 2
- DTOSIQBPPRVQHS-UHFFFAOYSA-N α-Linolenic acid Chemical compound CCC=CCC=CCC=CCCCCCCCC(O)=O DTOSIQBPPRVQHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000004835 α-tocopherol Nutrition 0.000 description 2
- 239000002076 α-tocopherol Substances 0.000 description 2
- OENHQHLEOONYIE-JLTXGRSLSA-N β-Carotene Chemical compound CC=1CCCC(C)(C)C=1\C=C\C(\C)=C\C=C\C(\C)=C\C=C\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C OENHQHLEOONYIE-JLTXGRSLSA-N 0.000 description 2
- PFTAWBLQPZVEMU-DZGCQCFKSA-N (+)-catechin Chemical compound C1([C@H]2OC3=CC(O)=CC(O)=C3C[C@@H]2O)=CC=C(O)C(O)=C1 PFTAWBLQPZVEMU-DZGCQCFKSA-N 0.000 description 1
- PFTAWBLQPZVEMU-ZFWWWQNUSA-N (+)-epicatechin Natural products C1([C@@H]2OC3=CC(O)=CC(O)=C3C[C@@H]2O)=CC=C(O)C(O)=C1 PFTAWBLQPZVEMU-ZFWWWQNUSA-N 0.000 description 1
- PFTAWBLQPZVEMU-UKRRQHHQSA-N (-)-epicatechin Chemical compound C1([C@H]2OC3=CC(O)=CC(O)=C3C[C@H]2O)=CC=C(O)C(O)=C1 PFTAWBLQPZVEMU-UKRRQHHQSA-N 0.000 description 1
- DIPPFEXMRDPFBK-FWTXJDITSA-N (1S,3Z)-3-[(2E)-2-[(1R,3aS,7aR)-1-[(2R,5S)-5,6-dimethylheptan-2-yl]-7a-methyl-2,3,3a,5,6,7-hexahydro-1H-inden-4-ylidene]ethylidene]-4-methylidenecyclohexan-1-ol Chemical compound [C]1([C@@H]2[CH2][CH2][C@@H]([C@]2([CH2][CH2][CH2]1)[CH3])[C@H]([CH3])[CH2][CH2][C@H](C)[CH]([CH3])[CH3])=[CH][CH]=[C]1[CH2][C@@H](O)[CH2][CH2][C]1=[CH2] DIPPFEXMRDPFBK-FWTXJDITSA-N 0.000 description 1
- RQOCXCFLRBRBCS-UHFFFAOYSA-N (22E)-cholesta-5,7,22-trien-3beta-ol Natural products C1C(O)CCC2(C)C(CCC3(C(C(C)C=CCC(C)C)CCC33)C)C3=CC=C21 RQOCXCFLRBRBCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VGSSUFQMXBFFTM-UHFFFAOYSA-N (24R)-24-ethyl-5alpha-cholestane-3beta,5,6beta-triol Natural products C1C(O)C2(O)CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)CCC(CC)C(C)C)C1(C)CC2 VGSSUFQMXBFFTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JNYAEWCLZODPBN-JGWLITMVSA-N (2r,3r,4s)-2-[(1r)-1,2-dihydroxyethyl]oxolane-3,4-diol Polymers OC[C@@H](O)[C@H]1OC[C@H](O)[C@H]1O JNYAEWCLZODPBN-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- ABTRFGSPYXCGMR-KXQOOQHDSA-N (3R)-beta,psi-caroten-3-ol Chemical compound CC(C)=CCCC(C)=CC=CC(C)=CC=CC(C)=CC=CC=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)C[C@@H](O)CC1(C)C ABTRFGSPYXCGMR-KXQOOQHDSA-N 0.000 description 1
- RMDJVOZETBHEAR-KWRPXEFJSA-N (5Z,7E)-(3S,24S)-24-ethyl-9,10-seco-5,7,10(19)-cholestatrien-3-ol Chemical compound [C]1([C@@H]2[CH2][CH2][C@@H]([C@]2([CH2][CH2][CH2]1)[CH3])[C@H]([CH3])[CH2][CH2][C@@H](CC)[CH]([CH3])[CH3])=[CH][CH]=[C]1[CH2][C@@H](O)[CH2][CH2][C]1=[CH2] RMDJVOZETBHEAR-KWRPXEFJSA-N 0.000 description 1
- OYHQOLUKZRVURQ-NTGFUMLPSA-N (9Z,12Z)-9,10,12,13-tetratritiooctadeca-9,12-dienoic acid Chemical compound C(CCCCCCC\C(=C(/C\C(=C(/CCCCC)\[3H])\[3H])\[3H])\[3H])(=O)O OYHQOLUKZRVURQ-NTGFUMLPSA-N 0.000 description 1
- WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N (E)-8-Octadecenoic acid Natural products CCCCCCCCCC=CCCCCCCC(O)=O WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JNYAEWCLZODPBN-UHFFFAOYSA-N 2-(1,2-dihydroxyethyl)oxolane-3,4-diol Polymers OCC(O)C1OCC(O)C1O JNYAEWCLZODPBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HYPYXGZDOYTYDR-HAJWAVTHSA-N 2-methyl-3-[(2e,6e,10e,14e)-3,7,11,15,19-pentamethylicosa-2,6,10,14,18-pentaenyl]naphthalene-1,4-dione Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(C/C=C(C)/CC/C=C(C)/CC/C=C(C)/CC/C=C(C)/CCC=C(C)C)=C(C)C(=O)C2=C1 HYPYXGZDOYTYDR-HAJWAVTHSA-N 0.000 description 1
- LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 20:1omega9c fatty acid Natural products CCCCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AZSNMRSAGSSBNP-UHFFFAOYSA-N 22,23-dihydroavermectin B1a Natural products C1CC(C)C(C(C)CC)OC21OC(CC=C(C)C(OC1OC(C)C(OC3OC(C)C(O)C(OC)C3)C(OC)C1)C(C)C=CC=C1C3(C(C(=O)O4)C=C(C)C(O)C3OC1)O)CC4C2 AZSNMRSAGSSBNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UOELMDIOCSFSEN-FVZZCGLESA-N 7-Dehydrositosterol Chemical compound C1([C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@H](C)C=C[C@H](C)C(C)C)=CC=C1C[C@@H](O)CCC1=C.C1[C@@H](O)CCC2(C)C(CC[C@@]3([C@@H]([C@H](C)C=C[C@H](C)C(C)C)CC[C@H]33)C)C3=CC=C21 UOELMDIOCSFSEN-FVZZCGLESA-N 0.000 description 1
- SPBDXSGPUHCETR-JFUDTMANSA-N 8883yp2r6d Chemical compound O1[C@@H](C)[C@H](O)[C@@H](OC)C[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](OC)C[C@H](O[C@@H]2C(=C/C[C@@H]3C[C@@H](C[C@@]4(O[C@@H]([C@@H](C)CC4)C(C)C)O3)OC(=O)[C@@H]3C=C(C)[C@@H](O)[C@H]4OC\C([C@@]34O)=C/C=C/[C@@H]2C)/C)O[C@H]1C.C1C[C@H](C)[C@@H]([C@@H](C)CC)O[C@@]21O[C@H](C\C=C(C)\[C@@H](O[C@@H]1O[C@@H](C)[C@H](O[C@@H]3O[C@@H](C)[C@H](O)[C@@H](OC)C3)[C@@H](OC)C1)[C@@H](C)\C=C\C=C/1[C@]3([C@H](C(=O)O4)C=C(C)[C@@H](O)[C@H]3OC\1)O)C[C@H]4C2 SPBDXSGPUHCETR-JFUDTMANSA-N 0.000 description 1
- QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 9-Heptadecensaeure Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- JEBFVOLFMLUKLF-IFPLVEIFSA-N Astaxanthin Natural products CC(=C/C=C/C(=C/C=C/C1=C(C)C(=O)C(O)CC1(C)C)/C)C=CC=C(/C)C=CC=C(/C)C=CC2=C(C)C(=O)C(O)CC2(C)C JEBFVOLFMLUKLF-IFPLVEIFSA-N 0.000 description 1
- OILXMJHPFNGGTO-NRHJOKMGSA-N Brassicasterol Natural products O[C@@H]1CC=2[C@@](C)([C@@H]3[C@H]([C@H]4[C@](C)([C@H]([C@@H](/C=C/[C@H](C(C)C)C)C)CC4)CC3)CC=2)CC1 OILXMJHPFNGGTO-NRHJOKMGSA-N 0.000 description 1
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 description 1
- IFYMEZNJCAQUME-APKWKYNESA-N Chrysanthemaxanthin Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C1OC2(C)CC(O)CC(C)(C)C2=C1)C=CC=C(/C)C=CC3=C(C)CC(O)CC3(C)C IFYMEZNJCAQUME-APKWKYNESA-N 0.000 description 1
- HBQJTBXZMPSVBP-UHFFFAOYSA-N Cyanidine Natural products OC1=CC(=C2/Oc3cc(O)cc(O)c3C=C2O)C=CC1=O HBQJTBXZMPSVBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710112164 Cytochrome b6-f complex subunit 4 Proteins 0.000 description 1
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 1
- 101710198774 Envelope protein US9 Proteins 0.000 description 1
- DNVPQKQSNYMLRS-NXVQYWJNSA-N Ergosterol Natural products CC(C)[C@@H](C)C=C[C@H](C)[C@H]1CC[C@H]2C3=CC=C4C[C@@H](O)CC[C@]4(C)[C@@H]3CC[C@]12C DNVPQKQSNYMLRS-NXVQYWJNSA-N 0.000 description 1
- 229920003134 Eudragit® polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000004211 Flavoxanthin Substances 0.000 description 1
- JRHJXXLCNATYLS-NGZWBNMCSA-N Flavoxanthin Chemical compound C/C([C@H]1C=C2C(C)(C)C[C@H](O)C[C@@]2(C)O1)=C\C=C\C(\C)=C\C=C\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\[C@H]1C(C)=C[C@H](O)CC1(C)C JRHJXXLCNATYLS-NGZWBNMCSA-N 0.000 description 1
- QHUMOJKEVAPSCY-JOJDNVQPSA-N Flavoxanthin Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C1(C)OC2(C)CC(O)CC(C)(C)C2=C1)C=CC=C(/C)C=CC3C(=CC(O)CC3(C)C)C QHUMOJKEVAPSCY-JOJDNVQPSA-N 0.000 description 1
- 206010016880 Folate deficiency Diseases 0.000 description 1
- 208000010188 Folic Acid Deficiency Diseases 0.000 description 1
- OCEDEAQHBIGPTE-UHFFFAOYSA-N Gitoxin Natural products CC1OC(CC(O)C1O)OC2C(O)CC(OC3C(O)CC(OC4CCC5(C)C(CCC6C5CCC7(C)C(C(O)CC67O)C8=CCOC8=O)C4)OC3C)OC2C OCEDEAQHBIGPTE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010068370 Glutens Proteins 0.000 description 1
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 1
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- XMOCLSLCDHWDHP-UHFFFAOYSA-N L-Epigallocatechin Natural products OC1CC2=C(O)C=C(O)C=C2OC1C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 XMOCLSLCDHWDHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 241000218922 Magnoliophyta Species 0.000 description 1
- 240000002129 Malva sylvestris Species 0.000 description 1
- 235000006770 Malva sylvestris Nutrition 0.000 description 1
- 102000016943 Muramidase Human genes 0.000 description 1
- 108010014251 Muramidase Proteins 0.000 description 1
- 108010062010 N-Acetylmuramoyl-L-alanine Amidase Proteins 0.000 description 1
- 239000005642 Oleic acid Substances 0.000 description 1
- ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N Oleic acid Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- OOUTWVMJGMVRQF-DOYZGLONSA-N Phoenicoxanthin Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C=C/C1=C(C)C(=O)C(O)CC1(C)C)C=CC=C(/C)C=CC2=C(C)C(=O)CCC2(C)C OOUTWVMJGMVRQF-DOYZGLONSA-N 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 description 1
- 108091081062 Repeated sequence (DNA) Proteins 0.000 description 1
- LGJMUZUPVCAVPU-JFBKYFIKSA-N Sitostanol Natural products O[C@@H]1C[C@H]2[C@@](C)([C@@H]3[C@@H]([C@H]4[C@@](C)([C@@H]([C@@H](CC[C@H](C(C)C)CC)C)CC4)CC3)CC2)CC1 LGJMUZUPVCAVPU-JFBKYFIKSA-N 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000592344 Spermatophyta Species 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- OILXMJHPFNGGTO-ZRUUVFCLSA-N UNPD197407 Natural products C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)C=C[C@H](C)C(C)C)[C@@]1(C)CC2 OILXMJHPFNGGTO-ZRUUVFCLSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004213 Violaxanthin Substances 0.000 description 1
- SZCBXWMUOPQSOX-LOFNIBRQSA-N Violaxanthin Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C=C/C12OC1(C)CC(O)CC2(C)C)C=CC=C(/C)C=CC34OC3(C)CC(O)CC4(C)C SZCBXWMUOPQSOX-LOFNIBRQSA-N 0.000 description 1
- FPIPGXGPPPQFEQ-BOOMUCAASA-N Vitamin A Natural products OC/C=C(/C)\C=C\C=C(\C)/C=C/C1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-BOOMUCAASA-N 0.000 description 1
- 229930003316 Vitamin D Natural products 0.000 description 1
- DIPPFEXMRDPFBK-UHFFFAOYSA-N Vitamin D4 Natural products C1CCC2(C)C(C(C)CCC(C)C(C)C)CCC2C1=CC=C1CC(O)CCC1=C DIPPFEXMRDPFBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930003427 Vitamin E Natural products 0.000 description 1
- 229930003448 Vitamin K Natural products 0.000 description 1
- PFRQBZFETXBLTP-UHFFFAOYSA-N Vitamin K2 Natural products C1=CC=C2C(=O)C(CC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)C)=C(C)C(=O)C2=C1 PFRQBZFETXBLTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 1
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 150000001370 alpha-amino acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 235000008206 alpha-amino acids Nutrition 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 239000012296 anti-solvent Substances 0.000 description 1
- 235000019568 aromas Nutrition 0.000 description 1
- 235000013793 astaxanthin Nutrition 0.000 description 1
- 239000001168 astaxanthin Substances 0.000 description 1
- MQZIGYBFDRPAKN-ZWAPEEGVSA-N astaxanthin Chemical compound C([C@H](O)C(=O)C=1C)C(C)(C)C=1/C=C/C(/C)=C/C=C/C(/C)=C/C=C/C=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)C(=O)[C@@H](O)CC1(C)C MQZIGYBFDRPAKN-ZWAPEEGVSA-N 0.000 description 1
- 229940022405 astaxanthin Drugs 0.000 description 1
- YEJAJYAHJQIWNU-UHFFFAOYSA-N azelastine hydrochloride Chemical compound Cl.C1CN(C)CCCC1N1C(=O)C2=CC=CC=C2C(CC=2C=CC(Cl)=CC=2)=N1 YEJAJYAHJQIWNU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 description 1
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 1
- 229920000704 biodegradable plastic Polymers 0.000 description 1
- 235000004420 brassicasterol Nutrition 0.000 description 1
- OILXMJHPFNGGTO-ZAUYPBDWSA-N brassicasterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)/C=C/[C@H](C)C(C)C)[C@@]1(C)CC2 OILXMJHPFNGGTO-ZAUYPBDWSA-N 0.000 description 1
- 235000008429 bread Nutrition 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 235000012682 canthaxanthin Nutrition 0.000 description 1
- 239000001659 canthaxanthin Substances 0.000 description 1
- 229940008033 canthaxanthin Drugs 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- ADRVNXBAWSRFAJ-UHFFFAOYSA-N catechin Natural products OC1Cc2cc(O)cc(O)c2OC1c3ccc(O)c(O)c3 ADRVNXBAWSRFAJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000005487 catechin Nutrition 0.000 description 1
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 description 1
- 229940112822 chewing gum Drugs 0.000 description 1
- 235000015218 chewing gum Nutrition 0.000 description 1
- 229950001002 cianidanol Drugs 0.000 description 1
- 238000012411 cloning technique Methods 0.000 description 1
- 238000005354 coacervation Methods 0.000 description 1
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 description 1
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 238000005100 correlation spectroscopy Methods 0.000 description 1
- VEVZSMAEJFVWIL-UHFFFAOYSA-O cyanidin cation Chemical compound [O+]=1C2=CC(O)=CC(O)=C2C=C(O)C=1C1=CC=C(O)C(O)=C1 VEVZSMAEJFVWIL-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- CYQFCXCEBYINGO-IAGOWNOFSA-N delta1-THC Chemical compound C1=C(C)CC[C@H]2C(C)(C)OC3=CC(CCCCC)=CC(O)=C3[C@@H]21 CYQFCXCEBYINGO-IAGOWNOFSA-N 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 239000003651 drinking water Substances 0.000 description 1
- 235000020188 drinking water Nutrition 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 238000001523 electrospinning Methods 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- LPTRNLNOHUVQMS-UHFFFAOYSA-N epicatechin Natural products Cc1cc(O)cc2OC(C(O)Cc12)c1ccc(O)c(O)c1 LPTRNLNOHUVQMS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000012734 epicatechin Nutrition 0.000 description 1
- DZYNKLUGCOSVKS-UHFFFAOYSA-N epigallocatechin Natural products OC1Cc2cc(O)cc(O)c2OC1c3cc(O)c(O)c(O)c3 DZYNKLUGCOSVKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DNVPQKQSNYMLRS-SOWFXMKYSA-N ergosterol Chemical compound C1[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@H](CC[C@]3([C@H]([C@H](C)/C=C/[C@@H](C)C(C)C)CC[C@H]33)C)C3=CC=C21 DNVPQKQSNYMLRS-SOWFXMKYSA-N 0.000 description 1
- DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N ethyl mercaptane Natural products CCS DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002270 exclusion chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 235000021323 fish oil Nutrition 0.000 description 1
- 235000019243 flavoxanthin Nutrition 0.000 description 1
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 235000013373 food additive Nutrition 0.000 description 1
- 239000002778 food additive Substances 0.000 description 1
- 238000004186 food analysis Methods 0.000 description 1
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 description 1
- LNTHITQWFMADLM-UHFFFAOYSA-N gallic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 LNTHITQWFMADLM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N gamma-tocopherol Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCC1CCC2C(C)C(O)C(C)C(C)C2O1 WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007429 general method Methods 0.000 description 1
- 230000008570 general process Effects 0.000 description 1
- 235000021472 generally recognized as safe Nutrition 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- LKRDZKPBAOKJBT-CNPIRKNPSA-N gitoxin Chemical compound C1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](C)O[C@@H](O[C@@H]2[C@H](O[C@@H](O[C@@H]3C[C@@H]4[C@]([C@@H]5[C@H]([C@]6(C[C@H](O)[C@@H]([C@@]6(C)CC5)C=5COC(=O)C=5)O)CC4)(C)CC3)C[C@@H]2O)C)C[C@@H]1O LKRDZKPBAOKJBT-CNPIRKNPSA-N 0.000 description 1
- 229950000974 gitoxin Drugs 0.000 description 1
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 1
- 235000021312 gluten Nutrition 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 1
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000005469 granulation Methods 0.000 description 1
- 230000003179 granulation Effects 0.000 description 1
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 1
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 1
- 239000000416 hydrocolloid Substances 0.000 description 1
- 239000000017 hydrogel Substances 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 239000000976 ink Substances 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 125000003010 ionic group Chemical group 0.000 description 1
- 235000014705 isoleucine Nutrition 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 1
- QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N isooleic acid Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCCC(O)=O QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002418 ivermectin Drugs 0.000 description 1
- 150000002634 lipophilic molecules Chemical class 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 239000006210 lotion Substances 0.000 description 1
- 235000010335 lysozyme Nutrition 0.000 description 1
- 239000004325 lysozyme Substances 0.000 description 1
- 229960000274 lysozyme Drugs 0.000 description 1
- VTHJTEIRLNZDEV-UHFFFAOYSA-L magnesium dihydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[Mg+2] VTHJTEIRLNZDEV-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000000347 magnesium hydroxide Substances 0.000 description 1
- 229910001862 magnesium hydroxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000009584 malvidin Nutrition 0.000 description 1
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- DKHGMERMDICWDU-GHDNBGIDSA-N menaquinone-4 Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(C/C=C(C)/CC/C=C(C)/CC/C=C(C)/CCC=C(C)C)=C(C)C(=O)C2=C1 DKHGMERMDICWDU-GHDNBGIDSA-N 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- 239000002088 nanocapsule Substances 0.000 description 1
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000031787 nutrient reservoir activity Effects 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N oleic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 1
- 239000006014 omega-3 oil Substances 0.000 description 1
- 235000020665 omega-6 fatty acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940033080 omega-6 fatty acid Drugs 0.000 description 1
- 230000036407 pain Effects 0.000 description 1
- 239000001814 pectin Substances 0.000 description 1
- 235000010987 pectin Nutrition 0.000 description 1
- 229920001277 pectin Polymers 0.000 description 1
- 239000000575 pesticide Substances 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 238000005191 phase separation Methods 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N phosphatidylcholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCC=CCCCCCCCC WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N 0.000 description 1
- 235000011007 phosphoric acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 239000004014 plasticizer Substances 0.000 description 1
- 229920001610 polycaprolactone Polymers 0.000 description 1
- 239000004632 polycaprolactone Substances 0.000 description 1
- 229920000193 polymethacrylate Polymers 0.000 description 1
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 1
- 235000013406 prebiotics Nutrition 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 235000009514 rubixanthin Nutrition 0.000 description 1
- 239000000455 rubixanthin Substances 0.000 description 1
- ABTRFGSPYXCGMR-SDPRXREBSA-N rubixanthin Natural products O[C@H]1CC(C)(C)C(/C=C/C(=C\C=C\C(=C/C=C/C=C(\C=C\C=C(/C=C/C=C(\CC/C=C(\C)/C)/C)\C)/C)\C)/C)=C(C)C1 ABTRFGSPYXCGMR-SDPRXREBSA-N 0.000 description 1
- 235000015067 sauces Nutrition 0.000 description 1
- 238000001338 self-assembly Methods 0.000 description 1
- 239000002453 shampoo Substances 0.000 description 1
- 208000019116 sleep disease Diseases 0.000 description 1
- 229960005055 sodium ascorbate Drugs 0.000 description 1
- 235000010378 sodium ascorbate Nutrition 0.000 description 1
- PPASLZSBLFJQEF-RKJRWTFHSA-M sodium ascorbate Substances [Na+].OC[C@@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1[O-] PPASLZSBLFJQEF-RKJRWTFHSA-M 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- PPASLZSBLFJQEF-RXSVEWSESA-M sodium-L-ascorbate Chemical compound [Na+].OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1[O-] PPASLZSBLFJQEF-RXSVEWSESA-M 0.000 description 1
- 238000005063 solubilization Methods 0.000 description 1
- 230000007928 solubilization Effects 0.000 description 1
- JNYAEWCLZODPBN-CTQIIAAMSA-N sorbitan Polymers OCC(O)C1OCC(O)[C@@H]1O JNYAEWCLZODPBN-CTQIIAAMSA-N 0.000 description 1
- 238000004611 spectroscopical analysis Methods 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- LGJMUZUPVCAVPU-HRJGVYIJSA-N stigmastanol Chemical compound C([C@@H]1CC2)[C@@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@H](C)CC[C@@H](CC)C(C)C)[C@@]2(C)CC1 LGJMUZUPVCAVPU-HRJGVYIJSA-N 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 229930003799 tocopherol Natural products 0.000 description 1
- 235000010384 tocopherol Nutrition 0.000 description 1
- 239000011732 tocopherol Substances 0.000 description 1
- 229960001295 tocopherol Drugs 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 238000000870 ultraviolet spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 235000019245 violaxanthin Nutrition 0.000 description 1
- SZCBXWMUOPQSOX-PSXNNQPNSA-N violaxanthin Chemical compound C(\[C@@]12[C@](O1)(C)C[C@H](O)CC2(C)C)=C/C(/C)=C/C=C/C(/C)=C/C=C/C=C(\C)/C=C/C=C(\C)/C=C/[C@]1(C(C[C@@H](O)C2)(C)C)[C@]2(C)O1 SZCBXWMUOPQSOX-PSXNNQPNSA-N 0.000 description 1
- 235000019156 vitamin B Nutrition 0.000 description 1
- 239000011720 vitamin B Substances 0.000 description 1
- 150000003710 vitamin D derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 235000005282 vitamin D3 Nutrition 0.000 description 1
- 239000011647 vitamin D3 Substances 0.000 description 1
- DIPPFEXMRDPFBK-JPWDPSJFSA-N vitamin D4 Chemical compound C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@H](C)CC[C@H](C)C(C)C)=C\C=C1\C[C@@H](O)CCC1=C DIPPFEXMRDPFBK-JPWDPSJFSA-N 0.000 description 1
- RMDJVOZETBHEAR-LQYWTLTGSA-N vitamin D5 Chemical compound C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@H](C)CC[C@@H](CC)C(C)C)=C\C=C1\C[C@@H](O)CCC1=C RMDJVOZETBHEAR-LQYWTLTGSA-N 0.000 description 1
- 229940046009 vitamin E Drugs 0.000 description 1
- 150000003721 vitamin K derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229940045997 vitamin a Drugs 0.000 description 1
- 229940046008 vitamin d Drugs 0.000 description 1
- 229940021056 vitamin d3 Drugs 0.000 description 1
- 229940046010 vitamin k Drugs 0.000 description 1
- 229940041603 vitamin k 3 Drugs 0.000 description 1
- 235000013618 yogurt Nutrition 0.000 description 1
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
- A61K47/42—Proteins; Polypeptides; Degradation products thereof; Derivatives thereof, e.g. albumin, gelatin or zein
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23P—SHAPING OR WORKING OF FOODSTUFFS, NOT FULLY COVERED BY A SINGLE OTHER SUBCLASS
- A23P10/00—Shaping or working of foodstuffs characterised by the products
- A23P10/30—Encapsulation of particles, e.g. foodstuff additives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
- A61K8/64—Proteins; Peptides; Derivatives or degradation products thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/02—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by special physical form
- A61K8/11—Encapsulated compositions
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
- A61K8/40—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing nitrogen
- A61K8/44—Aminocarboxylic acids or derivatives thereof, e.g. aminocarboxylic acids containing sulfur; Salts; Esters or N-acylated derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
- A61K8/49—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds
- A61K8/4973—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds with oxygen as the only hetero atom
- A61K8/498—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds with oxygen as the only hetero atom having 6-membered rings or their condensed derivatives, e.g. coumarin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
- A61K8/64—Proteins; Peptides; Derivatives or degradation products thereof
- A61K8/645—Proteins of vegetable origin; Derivatives or degradation products thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
- A61K8/67—Vitamins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P39/00—General protective or antinoxious agents
- A61P39/06—Free radical scavengers or antioxidants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q19/00—Preparations for care of the skin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
- A61K2800/40—Chemical, physico-chemical or functional or structural properties of particular ingredients
- A61K2800/41—Particular ingredients further characterized by their size
- A61K2800/412—Microsized, i.e. having sizes between 0.1 and 100 microns
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
- A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
- A61K47/183—Amino acids, e.g. glycine, EDTA or aspartame
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
- A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
- A61K9/51—Nanocapsules; Nanoparticles
- A61K9/5107—Excipients; Inactive ingredients
- A61K9/513—Organic macromolecular compounds; Dendrimers
- A61K9/5169—Proteins, e.g. albumin, gelatin
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B82—NANOTECHNOLOGY
- B82Y—SPECIFIC USES OR APPLICATIONS OF NANOSTRUCTURES; MEASUREMENT OR ANALYSIS OF NANOSTRUCTURES; MANUFACTURE OR TREATMENT OF NANOSTRUCTURES
- B82Y5/00—Nanobiotechnology or nanomedicine, e.g. protein engineering or drug delivery
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S264/00—Plastic and nonmetallic article shaping or treating: processes
- Y10S264/59—Processes in which a partial cure is involved
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Birds (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Cosmetics (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- General Preparation And Processing Of Foods (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Las nanopartículas comprenden una matriz de zeína y un aminoácido básico. Dichas nanopartículas pueden encapsular un compuesto biológicamente activo, hidrosoluble o liposoluble. De aplicación en los sectores alimentario, farmacéutico y cosmético y en el de la nanotecnología.
Description
DESCRIPCIÓN
Nanopartículas para encapsulación de compuestos, su obtención y usos
Campo de la invención
La presente invención se encuadra en los sectores alimentario, farmacéutico y cosmético y en el de la nanotecnología, y se relaciona con la encapsulación de compuestos biológicamente activos empleando zeína como agente de recubrimiento. En particular, la invención se relaciona con unas nanopartículas que comprenden una matriz de zeína y un aminoácido básico, útiles para encapsular compuestos biológicamente activos, así como con su obtención y aplicaciones.
Antecedentes de la invención
Las industrias, en particular, las industrias alimentaria, cosmética y farmacéutica, necesitan evolucionar tecnológicamente para satisfacer las nuevas demandas de los consumidores. La nanotecnología puede proporcionar soluciones interesantes para dichas industrias.
En particular, la nanotecnología presenta un gran potencial para revolucionar la industria alimentaria, cosmética y farmacéutica, ya que permite encapsular compuestos biológicamente activos [CBA], e.g., aceites esenciales, antioxidantes, minerales, prebióticos, sabores, vitaminas, etc., con el fin de obtener diversos beneficios, por ejemplo, incrementar la vida útil del producto, reducir la cantidad de CBA a utilizar, controlar su liberación, incrementar su biodisponibilidad, enmascarar sabores indeseados, etc.
Los antioxidantes, sustancias capaces de generar un beneficio para la salud del consumidor, constituyen un grupo de CBA cuyo empleo despierta cada vez mayor interés. La encapsulación de dichos compuestos antioxidantes, e.g., quercetina o resveratrol, en sistemas particulares (e.g., microparticulas o nanopartículas), con el fin de protegerlos y mantenerlos estables durante su almacenamiento, constituye una opción muy interesante.
Hasta la fecha, la aplicación de compuestos antioxidantes encapsulados se limita, en general, a los campos cosmético y farmacéutico. A modo ilustrativo, se ha descrito la encapsulación de quercetina en (i) nanocápsulas formadas por ácido poli-lactico-co-glicolico (PLGA) y acetato de etilo (Ghosh y col., Life Sciences 2009;84:75-80), (ii) nanopartículas formadas por Eudragit® [poli(met)acrilatos] y alcohol polivinílico (Wu y col., Int J of Pharm 2008;346:160-168), y (iii) en micropartículas lipídicas formadas con fosfatidilcolina y triesstearina (Sccalia y Mezzena, J Pharm Biomed Anal 2009;49:90-94). Asimismo, se ha descrito la encapsulación de resveratrol en (i) nanopartículas de policaprolactona (Lu y col., Int J of Pharm 2009; 375:89-96), (ii) micropartículas de pectina (Das y Ng, Int J of Pharm 2010;385:20-28), (iii) liposomas (Caddeo y col., Int J of Pharm 2008;363:183-191), (iv) microesferas de quitosano (Peng y col., Food Chem 2010;121(1):23-28) y (v) microesferas de poliestireno (Nam y col., Polymer 2005;46:8956-8963).
Sin embargo, la aplicación de compuestos antioxidantes encapsulados en el campo alimentario se encuentra muy limitada ya que los materiales empleados para encapsular dichos compuestos presentan problemas de toxicidad o no están aprobados para su uso en alimentos. Asimismo, el empleo de compuestos antioxidantes en el diseño de alimentos funcionales se encuentra muy limitado debido, entre otras razones, a su corta vida media, alta labilidad y baja biodisponibilidad oral. La encapsulación de compuestos antioxidantes, tales como quercetina o resveratrol, para protegerlos en el alimento y mantenerlos estables durante todo su período de almacenamiento, permitiendo además una liberación controlada que incremente su biodisponibilidad en el organismo sería muy deseable.
Como es conocido, a la hora de diseñar un vehículo adecuado para encapsular un CBA es muy importante seleccionar correctamente el material utilizado como agente de recubrimiento o matriz; para ello, se deben tener en cuenta, entre otros factores, la forma de administración, su toxicidad, el producto en el que se va a incorporar la formulación, etc.
En el campo de la nanotecnología alimentaria, no resulta recomendable utilizar polímeros sintéticos ya que pueden presentar problemas de toxicidad. Aunque los polímeros naturales no presentan esos inconvenientes, su utilización requiere el desarrollo de métodos de producción de partículas más complicados, y, además, en la mayoría de los casos, el tamaño de partícula obtenido (habitualmente superior a 100 pm) es difícil de controlar, por lo que tales micropartículas pueden ser percibidas por el consumidor y alterar las características organolépticas del alimento diana.
Se ha descrito el empleo de proteínas, tanto de origen animal, e.g., caseína, albúmina, etc., como de origen vegetal, e.g., prolaminas, etc. (ES 2269715, US 2004/86595, US 5679377), como agentes de recubrimiento de CBA.
La zeína es la principal proteína de almacenamiento presente en la semilla del grano de maíz. Se trata de una proteína globular perteneciente al grupo de las prolaminas ya que tiende a presentar un elevado número de aminoácidos prolina y glutamina y se caracteriza por su alta insolubilidad en agua. En los últimos años, esta proteína ha cobrado gran importancia en el ámbito científico e industrial debido a sus particulares propiedades físico-químicas
y a su estructura molecular ya que posee características anfifílicas y puede formar diferentes estructuras de autoensamblaje en función de los compuestos hidrofílicos-lipofílicos presentes en el medio (Wang y col., Food Biophysics 2008;3:174-181). Por todo ello, la zeína ofrece numerosas ventajas potenciales como materia prima de films, ya que es capaz de formar recubrimientos duros e hidrófobos con unas características de flexibilidad y compresibilidad excelentes, que, además, son resistentes al ataque microbiano.
Gracias a estas propiedades, se han ido encontrando nuevas aplicaciones a la zeína como adhesivo, plástico biodegradable, goma de mascar, recubrimiento de productos alimenticios, fibra, polvos cosméticos, microencapsulante de pesticidas y tintas, etc. (Muthuselvi y Dhathathreyan, Collids and Surfaces B: Biointerfaces 2006;51:39-43). Esta proteína también es utilizada por la industria farmacéutica para recubrir cápsulas, con el fin de proteger, liberar de forma controlada y enmascarar sabores y aromas indeseados (Shukla y Cheryan, Industrial Crops and Products 2001;13:171-192). Además, se ha propuesto para la microencapsulación de insulina, heparina, ivermectina y gitoxina. En general, se consiguen micropartículas/microesferas estables, incluso en condiciones de alta humedad y calor, que, además, son resistentes al ataque bacteriano (US5679377).
JP2004269384 se refiere a gránulos de aminoácidos que pueden ser recubiertos con zeína. Dichos gránulos de aminoácidos se obtienen por granulación de un polvo que contiene el aminoácido y tienen un diámetro promedio de 250-300 pm.
WO2008/157629 se refiere a un producto encapsulado que comprende un material núcleo y un encapsulante formado a partir de proteína hidrolizada. Zeína y aminoácidos se mencionan entre una larga lista de posibles proteínas y materiales núcleo. Estos productos encapsulados tienen un tamaño promedio de 10-3000 pm.
CN101092514 describe materiales compuestos que comprenden una proteína cereal, nanopartículas y un plastificante. Dichas nanopartículas están hechas de hidróxido de magnesio y aluminio.
Sin embargo, la utilización de zeína como agente encapsulante en el campo de la alimentación para el diseño de alimentos funcionales con ingredientes encapsulados es todavía incipiente. Se ha descrito la obtención de nanopartículas de zeína para encapsular aceites esenciales utilizando la técnica de separación de fases (Parris y col., J Agric Food Chem 2005;53:4788-4792), así como la encapsulación de ácidos grasos omega-3 en dicha proteína aplicando la técnica de lecho fluido para protegerlos de la oxidación y enmascarar sus características organolépticas negativas al introducirlos en los alimentos de interés (MX2008003213). Además, recientemente se ha conseguido encapsular licopeno y el polifenol galato de epigalocatequina (EGCG) en fibras de zeína mediante la técnica de electrospinning (Fernández y col., Food Hydrocolloids 2009;23:1427-1432 y Li y col. J Food Sci 2009;74(3):C233-C240 respectivamente), lisozima mediante el proceso de SAS (del inglés “supecritical anti-solvent”) (Zhong y col. Food Chemistry 2009;115(2):697-700) y aceite de pescado mediante el método de dispersión líquidolíquido (Zhong y col., J Food Process Pres 2009;33(2):255-270). Estos trabajos describen técnicas de fabricación relativamente complejas y difícilmente escalables para su aplicación en la industria, o se ciñen exclusivamente a la encapsulación de compuestos lipófilos, y no resultan adecuados para la encapsulación de compuestos hidrófilos.
Existe, por tanto, la necesidad de desarrollar sistemas versátiles de encapsulación de compuestos biológicamente activos que superen la totalidad o parte de los inconvenientes previamente mencionados, que sean apropiados para vehiculizar tanto compuestos hidrosolubles como liposolubles, y, en particular, compuestos cuya administración por otros medios entrañe dificultades, como es el caso de los compuestos antioxidantes. Adicionalmente, sería también altamente deseable que dichos sistemas fueran obtenibles de manera sencilla y presentaran una estabilidad adecuada durante su almacenamiento y tras su administración, lo que facilitaría su aplicación en distintos sectores tecnológicos, e.g., los sectores alimentario, farmacéutico y cosmético.
Compendio de la invención
Ahora se ha encontrado, sorprendentemente, que el recubrimiento de compuestos biológicamente activos (CBA), tanto hidrosolubles como liposolubles, con una matriz de zeína y un aminoácido básico proporciona unas nanopartículas que constituyen un nuevo sistema de encapsulación y estabilización de dichos CBA para su aplicación en alimentos, en cosmética y en farmacia.
Diversos ensayos realizados por los inventores han puesto de manifiesto que la adición de un aminoácido básico junto a la zeína facilita el procedimiento de producción de dichas nanopartículas que comprenden una matriz de zeína y un aminoácido básico debido a que posibilita la utilización de disoluciones hidroalcohólicas, con un porcentaje relativamente bajo de alcohol, para disolver la zeína, lo que posibilita a su vez la encapsulación de CBA, tanto CBA liposolubles como CBA hidrosolubles. Además, se evita la utilización de aditivos o disolventes básicos que pudieran ocasionar problemas de toxicidad, por lo que se mejoran las propiedades nutricionales de las nanopartículas. Asimismo, el aminoácido básico confiere estabilidad a las nanopartículas puesto que se incrementa la carga superficial de las partículas evitando que éstas se agreguen.
Por tanto, en un aspecto, la invención se relaciona con unas nanopartículas que comprenden una matriz de zeína y un aminoácido básico. Dichas nanopartículas pueden ser utilizadas para encapsular CBA hidrosolubles o liposolubles. En una realización particularmente preferida, el CBA es un compuesto antioxidante. Además, dichas nanopartículas pueden ser utilizadas como aditivos tecnológicos [el aditivo encapsulado puede ser incorporado en
matrices en las que no es soluble, favoreciendo una dispersión uniforme en el medio; a modo ilustrativo, de acuerdo con la invención, un CBA liposoluble encapsulado en dichas nanopartículas puede ser dispersado en una matriz acuosa, proceso que habría sido complejo si el CBA estuviera en su forma libre (sin encapsular)].
Dichas nanopartículas son estables y capaces de proteger al CBA de su degradación por agentes externos, e.g., luz, cambios de pH, oxidación, etc., tanto durante el procesado del producto (e.g., alimento, producto farmacéutico o cosmético) como durante su almacenamiento. Además, cuando dichas nanopartículas se administran por vía oral (e.g., alimentación), protegen al CBA de las condiciones ácidas del estómago y liberan al CBA en el lugar deseado, por ejemplo, en el intestino.
En otro aspecto, la invención se relaciona con un procedimiento para la producción de dichas nanopartículas vacías, es decir, sin CBA.
En otro aspecto, la invención se relaciona con un procedimiento para la producción de dichas nanopartículas cargadas con un CBA, tal como un CBA liposoluble o un CBA hidrosoluble.
Dichos procedimientos son sencillos y aplicables a escala industrial, y, ventajosamente, no incluyen el empleo de polímeros sintéticos ni reactivos que no estén aprobados como aditivos alimentarios, permiten minimizar la inclusión de tensioactivos o emulgentes, y, además, permiten obtener nanopartículas de escala nanométrica, con un tamaño de partícula controlable.
En una realización particular, dichos procedimientos comprenden, además, una etapa adicional de secado de la suspensión que contiene dichas nanopartículas con el objetivo de obtener una formulación en forma de polvo, lo que permite mantener el CBA estable en el tiempo; las formulaciones en forma de polvo son particularmente adecuadas para su empleo en alimentos sólidos. Ventajosamente, el secado de dichas nanopartículas se lleva a cabo en presencia de un agente protector de las nanopartículas. Las nanopartículas conteniendo un CBA así obtenidas se pueden resuspender con facilidad en un medio acuoso, protegiendo al CBA de su degradación en disolución. El producto final obtenido es estable y protege al CBA durante largos periodos de almacenamiento y, además, es aplicable a distintos tipos de alimentos, tanto líquidos (e.g., bebidas) como sólidos.
En otro aspecto, la invención se relaciona con una composición que comprende dichas nanopartículas para su empleo en los sectores alimentario, farmacéutico o cosmético. De hecho, dichas nanopartículas pueden incorporarse en cremas, geles e hidrogeles, con el fin de obtener preparados cosméticos o farmacéuticos estables y adecuados para su empleo en esos sectores. Asimismo, dichas nanopartículas pueden formularse con excipientes adecuados para su administración por vía tópica.
En otro aspecto, la invención se relaciona con un producto alimenticio, que comprende dicha composición a base de nanopartículas de zeína proporcionadas por esta invención. En una realización particular, dicho producto alimenticio se encuentra en forma líquida, semi-sólida o sólida.
Breve descripción de las figuras
Figura 1. Imágenes de microscopía electrónica de transmisión (TEM) de nanopartículas de zeína vacías. A) 8.000x (la barra negra situada en el margen inferior izquierdo de las imágenes corresponde a una referencia de 200 nm). B) 15.750x (la barra negra situada en el margen inferior izquierdo de las imágenes corresponde a una referencia de 100 nm).
Figura 2. Micrografías de microscopía electrónica de barrido (SEM) de unas nanopartículas que comprenden una matriz de zeína y lisina conteniendo resveratrol. Las imágenes corresponden a la formulación en polvo tras ser lavada para eliminar el sacárido protector.
Figura 3. Imágenes de microscopía electrónica de transmisión (TEM) de unas nanopartículas que comprenden una matriz de zeína y lisina conteniendo quercetina. A) 25.000x (la barra negra situada en el margen inferior izquierdo de las imágenes corresponde a una referencia de 150 nm). B) 10.000x (la barra negra situada en el margen inferior izquierdo de las imágenes corresponde a una referencia de 150 nm).
Figura 4. Cantidad de quercetina encapsulada en unas nanopartículas (NP) que comprenden una matriz de zeína y lisina, en función de la cantidad de quercetina incorporada inicialmente en la formulación.
Figura 5. Micrografías de microscopía electrónica de barrido (SEM) de unas nanopartículas que comprenden una matriz de zeína y lisina conteniendo quercetina. Las imágenes corresponden a la formulación en polvo tras ser lavada para eliminar el sacárido protector.
Figura 6. Concentración de ácido fólico en suero (ng/mL) en función del tiempo, tras la administración de las distintas formulaciones de la vitamina en animales de laboratorio. Los resultados muestran la media ± desviación estándar (n = 5). (A) Vía intravenosa (i.v), dosis 1 mg/kg. (B) Vía oral, dosis 1 mg/kg: ácido fólico no encapsulado disuelto en agua (■); ácido fólico encapsulado en nanopartículas de zeína dispersas en agua (•).
Descripción detallada de la invención
La presente invención proporciona unas nanopartículas que comprenden una matriz de zeína y un aminoácido básico y unos métodos para la encapsulación de compuestos biológicamente activos (CBA), con el objetivo de preservarlos de la degradación por agentes externos (e.g., luz, pH, oxidación, etc.). Dichas nanopartículas pueden ser diseñadas para permitir una liberación controlada del CBA con el fin de incrementar su biodisponibilidad; el aumento de biodisponibilidad se puede conseguir por dos vías: mediante la liberación íntegra del CBA encapsulado en el intestino (minimizada su degradación en origen, en la matriz alimentaria y/o por almacenamiento así como por la protección ofrecida frente a las condiciones ácidas del estómago) y mediante un efecto de liberación del CBA controlada o sostenida en el tiempo.
Definiciones
Para facilitar la comprensión de la presente invención, a continuación se indica el significado de algunos términos y expresiones tal como se utilizan en esta descripción.
Un “aminoácido básico”, tal como aquí se utiliza, se refiere a una molécula orgánica que contiene un grupo amino (-NH2) y un grupo carboxílico (-COOH) y carga positiva; preferentemente, dicho aminoácido básico es un alfaaminoácido básico, tal como lisina, arginina e histidina.
“Aproximadamente”, tal como se usa en el presente documento, se refiere a un intervalo de valores próximo a un valor especificado, tal como ± el 10% de un valor especificado. Por ejemplo, “aproximadamente 20” incluye ± el 10% de 20, o desde 18 hasta 22. Además, con independencia de que se especifique o no el término “aproximadamente”, el experto en la materia entiende que cualquier valor numérico expresado en el presente documento engloba un intervalo de valores próximo. Tales variaciones de un valor especificado pueden ser resultado de los errores experimentales durante la correspondiente medición.
Un “compuesto biológicamente activo” o “CBA”, tal como aquí se utiliza, se refiere a un compuesto que presenta una actividad nutricional, terapéutica y/o cosmética; dicho compuesto puede ser liposoluble o hidrosoluble. Ejemplos ilustrativos, no limitativos, de CBA de acuerdo con la presente invención incluyen aminoácidos, antimicrobianos, aromatizantes, conservantes, edulcorantes, esteroides, fármacos, hormonas, lípidos, péptidos, polinucleótidos, polisacáridos, proteínas, proteoglicanos, saborizantes, vitaminas, etc.
Un “compuesto biológicamente activo hidrosoluble” o “CBA hidrosoluble”. tal como aquí se utiliza, se refiere a un compuesto que presenta una actividad nutricional, terapéutica y/o cosmética y que es soluble (muy soluble, fácilmente soluble, soluble, bastante soluble o poco soluble) en una solución acuosa según los criterios definidos por la Real Farmacopea Española:
Ejemplos ilustrativos, no limitativos, de CBA hidrosolubles incluyen vitaminas, por ejemplo, vitaminas de las familias B o C, y sus derivados, sales o ésteres; ácido hialurónico, condroitín sulfato, ácido tióctico, sus sales o ésteres, etc. En una realización particular, dicho CBA hidrosoluble se selecciona del grupo formado por ácido fólico, ácido 4-aminobenzoico, niacina, ácido pantoténico, tiamina monofosfato, tiamina pirofosfato, tiamina trifosfato, ácido ascórbico, ácidos pteroilpoliglutámicos (derivados del ácido fólico: poliglutamatos de folato; folatos de poliglutamato), ácido folínico, ácido nicotínico, ácido hialurónico, ácido tióctico (ácido alfa-lipoico), ácido p-cumárico, ácido cafeico, sus derivados, ésteres o sales farmacéuticamente o cosméticamente aceptables, o de grado alimentario, y sus mezclas.
Un “compuesto biológicamente activo liposoluble” o “CBA liposoluble”, tal como aquí se utiliza, se refiere a un compuesto que presenta una actividad nutricional, terapéutica y/o cosmética y que es soluble (muy soluble, fácilmente soluble, soluble, bastante soluble o poco soluble) en grasas y aceites, según los criterios definidos por la
Real Farmacopea Española. Ejemplos ilustrativos, no limitativos, de CBA liposolubles incluyen vitaminas, por ejemplo, vitaminas de las familias A, D, E, K y sus derivados, fosfolípidos, carotenoides (carotenos, licopeno, luteína, capsantina, zeaxantina etc.), ácidos grasos omega-3 (ácido docosahexanoico (DHA), ácido eicosapentanoico (EPA), etc.), fitostanoles y fitosteroles (sitosterol, campesterol, estigmasterol, etc.), polifenoles (quercetina, rutina, resveratrol, kaempferol, miricetina, isoramnetina, etc.) y sus derivados.
Un producto se dice que es de “grado alimentario” cuando es seguro para su empleo en alimentación, humana o animal, según el Código Alimentario (Codex Alimentarius) de un país o de una organización, por ejemplo, de la Organización de las Naciones Unidas para la Agricultura y la Alimentación (FAO) o de la Organización Mundial de la Salud (OMS); en consecuencia, un producto de “grado alimentario” es un producto no tóxico “apto para su empleo en alimentación” por lo que ambas expresiones son sinónimas y se utilizan indistintamente en esta descripción.
“Medio acuoso”, tal como aquí se utiliza, se refiere a un medio que comprende agua. En una realización particular, el medio acuoso consiste esencialmente en agua.
“Medio hidroalcohólico”, tal como aquí se utiliza, se refiere a un medio que comprende agua y un alcohol, en proporciones relativas variables. En una realización particular, dicho medio hidroalcohólico comprende una solución de etanol en agua, en cualquier proporción relativa entre dichos compuestos.
“Nanopartícula”, tal como aquí se utiliza, se refiere a sistemas coloidales de tipo esferas o formas similares de tamaño inferior a 1 micrómetro (|im), preferentemente del orden de 10 a 900 nanómetros (nm).
“Tamaño medio”, tal como aquí se utiliza, se refiere al diámetro promedio de la población de nanopartículas que se mueve conjuntamente en un medio acuoso. El tamaño medio de estos sistemas se puede medir por procedimientos estándar conocidos por el experto en la materia, y que se describen, por ejemplo, en la parte experimental (véase más adelante).
El término “zeína”, tal como aquí se utiliza, incluye cualquier proteína globular perteneciente al grupo de las prolaminas; en general, dicha proteína se sintetiza durante el desarrollo del endospermo (tejido nutricional formado en el saco embrionario de las plantas con semilla y suele constituir un depósito de alimentos para el embrión de las semillas de diversas plantas angiospermas). La zeína se puede obtener a partir de cualquier fuente adecuada, aunque preferentemente se obtiene a partir del maíz. Se conocen diversos métodos y técnicas para extraer zeína del endospermo del maíz; en general, la zeína comercial se extrae a partir de la harina de gluten de maíz (US 2009/0258050).
El estudio de la zeína revela una extrema variabilidad a nivel genético, y, por tanto, una situación compleja entre las distintas proteínas que forman parte del grupo de proteínas conocidas como zeínas. La zeína nativa, en realidad, es una familia numerosa y heterogénea de varios grupos de proteínas que difieren en su tamaño molecular, solubilidad y carga. Se ha calculado que existen más de veinte zeínas diferentes. Los análisis de los extractos de zeína mediante cromatografía líquida de alta resolución (HPLC), cromatografía de intercambio iónico, cromatografía de exclusión en gel, electroforesis en gel de SDS-poliacrilamida (SDS-PAGE), isoelectroenfoque (IEF), el análisis de aminoácidos, y las técnicas de clonaje de ADN han llevado a una mejor comprensión de las proteínas zeína.
El análisis de la composición de los aminoácidos de la zeína revela una gran cantidad de leucina, alanina, glutamina y fenilalanina; sin embargo, la lisina y el triptófano están ausentes o, alternativamente, están presentes en cantidades muy pequeñas. La alta proporción de residuos de aminoácidos no polares junto con la notable falta de grupos iónicos son los responsables de su naturaleza hidrofóbica y de su particular solubilidad.
Los cuerpos proteicos de zeína están compuestos por tres tipos de proteínas estructuralmente distintas: alfa-zeína (a-zeína), gamma-zeína (Y-zeína) [que incluye beta-zeína (p-zeína)] y delta-zeína (5-zeína). Dichas proteínas pueden clasificarse en cuatro clases (a-zeína, p-zeína, Y-zeína y 5-zeína) en base a las diferencias en la solubilidad y secuencia.
La zeína extraída sin agentes reductores forma una gran familia multigénica de polipéptidos, denominada azeína. Las a-zeínas, en general la fracción más abundante de la zeína nativa, contienen unos 40 aminoácidos en el extremo amino terminal que preceden a una serie de 9 ó 10 péptidos repetidos de 20 aminoácidos. Se cree que estas repeticiones son a-hélices y giran la proteína en una molécula en forma de varilla.
Las demás fracciones de la zeína (p-, y- y 5-zeína) deben ser extraídas utilizando soluciones acuosas de alcoholes que contienen agentes reductores para romper los enlaces disulfuro. A modo ilustrativo, para la extracción en laboratorio se utiliza mercaptoetanol. Las p-, y- y 5-zeínas no muestran una homología de secuencia con la azeína.
La Y-zeína es soluble tanto en disolventes acuosos como alcohólicos en condiciones reductoras. Cada una de las Y-zeínas tiene una secuencia N-terminal única. A modo de ejemplo, en la Y-zeína de 50 kDa, esta región es de 136 aminoácidos de longitud y es muy rica en histidina. La Y-zeína de 27 kDa tiene una serie de 8 repeticiones en tándem de un hexapéptido que se producen 11 aminoácidos después del extremo amino terminal. Los ocho
primeros aminoácidos de la Y-zeína de 16 kDa son idénticos a los de la Y-zeína de 27 kDa, pero la Y-zeína de 16 kDa tiene tres versiones degeneradas de repeticiones ricas en prolina. La Y-zeína representa normalmente entre el 10% y el 15% del total de las zeínas.
La p-zeína, que se relaciona con la Y-zeína, incluye un polipéptido de 17 kDa rico en metionina y constituye hasta un 10% de la zeína total. Aproximadamente los últimos 140 aminoácidos de las p- y Y-zeínas son idénticos en un 85%. La p-zeína no tiene péptidos repetitivos y parece consistir en su mayor parte en láminas p y conformación de giro.
La 8-zeína es una proteína de 10 kDa y es una fracción minoritaria de zeína. Las 8-zeínas son las más hidrófobas del grupo, no contienen péptidos repetitivos y son excepcionalmente ricas en metionina y cisteína.
La zeína ha sido considerada como un producto “Generalmente Reconocido como Seguro” (GRAS, del inglés “Generally Recognized as Safe”) por la Food and Drug Administration (Estados Unidos) desde 1985 [número CAS (Chemical Abstract Service): 9010-66-6].
En la presente invención, la fuente o el grado de zeína no se limita a una única zeína y, de hecho, cualquier zeína puede ser utilizada en la puesta en práctica de la presente invención. A modo ilustrativo, las zeínas comerciales que pueden ser utilizadas en la presente invención incluyen, pero no se limitan a, la zeína suministrada por Sigma-Aldrich (número de producto Z 3625); Wako Puras Chemical Industries (números de productos 261 00015, 264-01281 y 260-01283); Spectrum Chemical (números de productos Z1131 y ZE105); ScienceLab unidades SLZ1150; SJZ Chem-Pharma Company (nombre del producto ZEIN (GLIDZIN); Arco Organics (números de catálogo 17931-0000, 17931-1000, y 17931-5000); y Freeman Industries, zeína de grado regular F4000, zeína de grado regular F4400, zeína de grado especial F6000, etc. En una realización particular, se utiliza la zeína comercial suministrada por Sigma-Aldrich (número de producto Z 3625), obtenida a partir de maíz.
El término “zeína” tal como aquí se utiliza incluye tanto la zeína nativa como la zeína modificada. El término “zeína modificada” incluye cualquier zeína que presenta una secuencia de aminoácidos que normalmente no se produce de forma natural, pero que se comportan de manera similar a las zeínas auténticas, y que son solubles en alcohol. Se pueden introducir sustituciones de aminoácidos, especialmente aquellos que no modifican sustancialmente la hidrofobicidad. A modo ilustrativo, se pueden efectuar sustituciones de aminoácidos en las secciones repetidas, o bien se puede sustituir un único aminoácido, así como sustituciones en los segmentos que conectan los dominios de las secuencias repetidas. También se pueden introducir inserciones y sustituciones tanto en el extremo carboxilo terminal como en el extremo amino terminal de la molécula de zeína. Adicionalmente, se pueden efectuar deleciones en la secuencia de aminoácidos siempre y cuando la proteína resultante sea funcionalmente equivalente a la zeína, es decir, que mantenga sus propiedades.
Nanopartículas de la invención
En un aspecto, la invención se relaciona con una nanopartícula, en adelante nanopartícula de la invención, que comprende una matriz de zeína y un aminoácido básico.
Prácticamente cualquier zeína puede constituir la matriz de la nanopartícula de la invención; no obstante, en una realización particular, dicha zeína es una zeína procedente de maíz, tal como la zeína suministrada por Sigma-Aldrich (número de producto Z 3625).
En una realización particular, dicho aminoácido básico se selecciona del grupo formado por arginina, lisina, histidina, y sus mezclas.
Las nanopartículas de la invención pueden ser utilizadas para encapsular un compuesto biológicamente activo (CBA). Además, las nanopartículas de la invención pueden ser utilizadas como aditivos tecnológicos, por ejemplo, facilitando la incorporación de un CBA liposoluble en una matriz acuosa, etc.
Por tanto, en otra realización particular, la nanopartícula de la invención comprende, además, un CBA. Dicho CBA puede ser un CBA hidrosoluble o un CBA liposoluble; en este caso, la nanopartícula de la invención se identifica, en ocasiones, en esta descripción como “nanopartícula cargada de la invención” para diferenciarla de otras nanopartículas de la invención que no contienen CBA (en ocasiones identificadas como “nanopartículas vacías de la invención”).
En una realización particular, dicho CBA es un CBA liposoluble. En una realización más particular, dicho CBA liposoluble se selecciona del grupo formado por:
a) un polifenol;
b) una vitamina de la familia de vitaminas A, D, E o K;
c) un precursor o un derivado de una vitamina según b);
d) un fosfolípido;
e) un carotenoide;
f) un ácido graso;
g) un fitoestanol o un fitoesterol;
h) una sal o un éster de cualquiera de los compuestos a)-g) anteriores; y
i) combinaciones de los mismos.
En una realización más particular, dicho CBA liposoluble es:
i) un polifenol tal como, por ejemplo, un flavonol (e.g., una catequina, una epicatequina, isoramnetina, kaempferol, miricetina, quercetina, etc.); una antocianina (e.g., cianidina, delfinidina, malvidina, peonidina, petunidina, etc.); una fitoalexina (e.g., resveratrol, etc.); hidroxitirosol, etc.;
ii) una vitamina liposoluble tal como, por ejemplo, vitamina A y sus derivados (e.g., ácido retinoico, retinal, retinol, etc.); vitamina E y sus derivados (e.g., un tocoferol, por ejemplo, alfa-tocoferol, etc., un tocotrienol, etc.); vitamina D y sus derivados (e.g., vitamina D1, vitamina D2 (ergocalciferol), vitamina D3 (colecalciferol), vitamina D4 (22-dihidroergocalciferol), vitamina D5 (sitocalciferol), etc.); vitamina K o fitomenadiona y sus derivados (e.g., vitamina K1 (filoquinona), vitamina K2 (menaquinona), menadinona, etc.);
iii) un carotenoide tal como, por ejemplo, un caroteno (e.g., alfa-caroteno, beta-caroteno, criptoxantina, licopeno, etc.); una xantófila (e.g., astaxantina, cantaxantina, capsantina, criptoxantina, flavoxantina, luteína, rodoxantina, rubixantina, violaxantina, zeaxantina, etc.);
iv) un ácido graso tal como, por ejemplo, un ácido graso omega-3 (e.g., ácido a-linolénico (ALA), ácido eicosopentanoico (EPA), ácido docosahexanoico (DHA), etc.; un ácido graso omega-6 (e.g., ácido ylinoleico, etc.); o
v) un fitoesterol o un fitoestanol (e.g., brassicasterol, campesterol, ergosterol, estigmasterol, sitostanol, sitosterol, etc.).
En una realización concreta, dicho CBA liposoluble se selecciona del grupo formado por un flavonol (e.g., quercetina, etc.), una antocianina, una fitoalexina (e.g., resveratrol, etc.), hidroxitirosol, ácido retinoico, retinal, retinol, calciferol (ergocalciferol y colecalciferol), alfa-tocoferol, tocotrienol, fitomenadiona, alfa-caroteno, beta-caroteno, licopeno, capsantina, luteína, zeaxantina, xantofila, EPA, DHA, ácido linoleico, campesterol, estigmasterol, sitosterol, sus derivados, ésteres o sales farmacéuticamente o cosméticamente aceptables, o de grado alimentario, y sus mezclas.
En una realización más concreta, dicho CBA liposoluble se selecciona del grupo formado por quercetina, resveratrol, sus derivados, ésteres o sales farmacéuticamente o cosméticamente aceptables, o de grado alimentario, y sus mezclas.
En otra realización particular, dicho CBA es un CBA hidrosoluble. En una realización más particular, dicho CBA hidrosoluble es:
a) una vitamina de la familia de vitaminas B o C;
b) un derivado de una vitamina según a);
c) un compuesto seleccionado entre el ácido hialurónico, condroitín sulfato y el ácido tióctico;
d) una sal o un éster de cualquiera de los compuestos a)-c) anteriores; y
e) combinaciones de los mismos.
En una realización concreta, dicho CBA hidrosoluble se selecciona del grupo formado por ácido fólico, sus ésteres o sales farmacéuticamente o cosméticamente aceptables, o de grado alimentario, y sus mezclas.
La utilización de las nanopartículas de la invención como sistemas de encapsulación de compuestos antioxidantes constituye una realización particular y preferida.
Procedimiento de obtención de las nanopartículas de la invención
En otro aspecto, la invención se relaciona con un procedimiento para la producción de nanopartículas que comprenden una matriz de zeína y un aminoácido básico (nanopartículas de la invención), en adelante “procedimiento Í11 de la invención”, que comprende:
a) preparar una solución hidroalcohólica que contiene una zeína y un aminoácido básico; y b) añadir agua a la solución de la etapa a).
La solución hidroalcohólica utilizada en la etapa a) del procedimiento [1] de la invención contiene agua y un alcohol, típicamente etanol; en una realización particular, dicha solución hidroalcohólica comprende entre un 25% y un 75% (p/v) de alcohol, preferentemente entre 30% y 60%, más preferentemente, 50% aproximadamente.
La cantidad de zeína que puede contener la solución hidroalcohólica formada en la etapa a) del procedimiento [1] de la invención, puede variar dentro de un amplio intervalo; no obstante, en una realización particular, la cantidad de zeína contenida en dicha solución hidroalcohólica está comprendida entre 0,1% y 10% (p/v), preferentemente entre 0,2% y 2,5%, más preferentemente entre 0,5% y 1%.
La cantidad de aminoácido básico que puede contener dicha solución hidroalcohólica formada en la etapa a) del procedimiento [1] de la invención, puede variar dentro de un amplio intervalo. En general, dicha cantidad se suele expresar en función de la cantidad de zeína a disolver. Así, aunque la proporción en peso entre el aminoácido básico y la zeína [aminoácido básico:zeína] presentes en dicha solución hidroalcohólica depende, en general del tipo de CBA a encapsular y puede variar ampliamente, en una realización particular, dicha proporción en peso aminoácido básico:zeína está comprendida entre 1:0,01 y 1:50, típicamente entre 1:0,5 y 1:25, preferentemente, entre 1:1 y 1:20, más preferentemente, entre 1:5 y 1:15; en una realización concreta, la proporción en peso aminoácido básico:zeína es de 1:6 aproximadamente.
En la etapa b) del procedimiento [1] de la invención se añade agua en cantidad suficiente para que se formen las nanopartículas de la invención. Aunque la cantidad de agua a añadir puede variar dentro de un amplio intervalo, en una realización particular, se añade agua en cantidad suficiente para que la proporción final de alcohol en el medio esté comprendida entre 10% y 60% (p/v), preferentemente entre 15% y 30%, más preferentemente de un 25% aproximadamente.
En otro aspecto, la invención se relaciona con un procedimiento para la producción de nanopartículas que comprenden una matriz de zeína, un aminoácido básico y un CBA liposoluble (nanopartículas de la invención cargadas con un CBA liposoluble), en adelante “procedimiento [2] de la invención”, que comprende:
a) preparar una solución hidroalcohólica (i) que contiene una zeína y un aminoácido básico; b) preparar una solución alcohólica que comprende un CBA liposoluble y diluirla con agua para obtener una solución hidroalcohólica (ii) que comprende un CBA liposoluble;
c) mezclar dicha solución hidroalcohólica (i) que contiene una zeína y un aminoácido básico con dicha solución hidroalcohólica (ii) que comprende un CBA liposoluble; y
d) añadir agua a la mezcla resultante de la etapa c).
La solución hidroalcohólica (i) que contiene una zeína y un aminoácido básico utilizada en la etapa a) del procedimiento [2] de la invención contiene agua y un alcohol, típicamente etanol; en una realización particular, dicha solución hidroalcohólica comprende entre un 25% y un 75% (p/v) de alcohol, preferentemente entre un 30% y un 60%, más preferentemente, un 50% aproximadamente. Dicha solución hidroalcohólica (i) se prepara mezclando sus componentes en las cantidades adecuadas.
La cantidad de zeína que puede contener dicha solución hidroalcohólica (i) que contiene una zeína y un aminoácido básico utilizada en la etapa a) del procedimiento [2] de la invención, puede variar dentro de un amplio intervalo; no obstante, en una realización particular, la cantidad de zeína contenida en dicha solución hidroalcohólica (i) está comprendida entre 0,1% y 10% (p/v), preferentemente entre 0,2% y 2,5%, más preferentemente entre 0,5% y 1%.
La cantidad de aminoácido básico que puede contener dicha solución hidroalcohólica (i) que contiene una zeína y un aminoácido básico utilizada en la etapa a) del procedimiento [2] de la invención, puede variar dentro de un amplio intervalo. En general, dicha cantidad se expresará en función de la cantidad de zeína a disolver. Así, aunque la proporción en peso entre el aminoácido básico y la zeína [aminoácido básico:zeína] presentes en dicha solución hidroalcohólica (i) puede variar ampliamente, en una realización particular, dicha proporción en peso aminoácido básico:zeína está comprendida entre 1:0,01 y 1:50, típicamente entre 1:0,5 y 1:25, preferentemente, entre 1:1 y 1:20, más preferentemente, entre 1:5 y 1:15; en una realización concreta, la proporción en peso aminoácido básico:zeína es de 1:6 (cuando el CBA es resveratrol) y 1:11 (cuando el CbA es quercetina) aproximadamente.
La solución hidroalcohólica (ii) que comprende un CBA liposoluble generada en la etapa b) del procedimiento [2] de la invención puede obtenerse disolviendo o solubilizando dicho CBA liposoluble en un alcohol (e.g., etanol) y, a continuación, diluyendo la solución alcohólica obtenida con agua. Por tanto, dicha solución hidroalcohólica (ii) que comprende un CBA liposoluble generada en la etapa b) del procedimiento [2] de la invención
contiene agua y un alcohol, típicamente etanol; en una realización particular, dicha solución hidroalcohólica (ii) comprende entre un 25% y un 75% (p/v) de alcohol, preferentemente entre un 30% y un 65%, más preferentemente entre un 50 y un 60%.
La cantidad de CBA liposoluble que puede contener dicha solución hidroalcohólica (ii) puede variar dentro de un amplio intervalo; no obstante, en una realización particular, la cantidad de CBA liposoluble contenida en dicha solución hidroalcohólica (ii) está comprendida entre 0,05% y 10% (p/v), preferentemente entre 0,1% y 1%, más preferentemente entre 0,2% y 0,3%.
Según la etapa c) del procedimiento [2] de la invención, se mezcla una solución hidroalcohólica (i) que contiene una zeína y un aminoácido básico con una solución hidroalcohólica (ii) que comprende un CBA liposoluble; de este modo se forma una mezcla que comprende una zeína, un aminoácido básico y un CBA liposoluble en un medio hidroalcohólico. La relación en peso c Ba liposoluble:zeína presente en la mezcla formada en dicha etapa c) puede variar dentro de un amplio intervalo; no obstante, en una realización particular, la proporción en peso entre el CBA liposoluble y la zeína [CBa liposoluble:zeína] está comprendida entre 1:0,5 y 1:70, preferentemente entre 1:5 y 1:50, más preferentemente entre 1:10 y 1:30.
En la etapa d) del procedimiento [2] de la invención se añade agua en cantidad suficiente sobre la mezcla formada en la etapa c) para que se formen las nanopartículas de la invención. Aunque la cantidad de agua a añadir puede variar dentro de un amplio intervalo, en una realización particular, se añade agua en cantidad suficiente para que la proporción final de alcohol en el medio esté comprendida entre 10% y 60% (p/v), preferentemente entre 15% y 30%, más preferentemente de un 25% aproximadamente.
En otro aspecto, la invención se relaciona con un procedimiento para la producción de nanopartículas que comprenden una matriz de zeína, un aminoácido básico, y un compuesto biológicamente activo hidrosoluble (nanopartículas de la invención cargadas con un CBA hidrosoluble), en adelante “procedimiento [3] de la invención”, que comprende:
a) preparar una solución hidroalcohólica (i) que contiene una zeína y un aminoácido básico; b) preparar una solución acuosa que comprende un CBA hidrosoluble y, opcionalmente, un segundo aminoácido básico, y diluirla con un alcohol para obtener una solución hidroalcohólica (ii) que comprende un CBA hidrosoluble y, opcionalmente, un segundo aminoácido básico; c) mezclar dicha solución hidroalcohólica (i) que contiene una zeína y un aminoácido básico con dicha solución hidroalcohólica (ii) que comprende un CBA hidrosoluble y, opcionalmente, un segundo aminoácido básico;
d) opcionalmente, añadir un tensioactivo a la mezcla resultante de la etapa c); y
e) añadir agua a la mezcla resultante de la etapa c) o de la etapa d).
La solución hidroalcohólica (i) que contiene una zeína y un aminoácido básico utilizada en la etapa a) del procedimiento [3] de la invención contiene agua y un alcohol, típicamente etanol; en una realización particular, dicha solución hidroalcohólica comprende entre un 25% y un 75% (p/v) de alcohol, preferentemente entre un 30% y un 60%, más preferentemente, un 50% aproximadamente. Dicha solución hidroalcohólica (i) se prepara mezclando sus componentes en las cantidades adecuadas.
La cantidad de zeína que puede contener dicha solución hidroalcohólica (i) que contiene una zeína y un aminoácido básico utilizada en la etapa a) del procedimiento [3] de la invención, puede variar dentro de un amplio intervalo; no obstante, en una realización particular, la cantidad de zeína contenida en dicha solución hidroalcohólica (i) está comprendida entre 0,1% y 10% (p/v), preferentemente entre 0,2% y 2,5%, más preferentemente entre 0,5% y 1%.
La cantidad de aminoácido básico que puede contener dicha solución hidroalcohólica (i) que contiene una zeína y un aminoácido básico utilizada en la etapa a) del procedimiento [3] de la invención, puede variar dentro de un amplio intervalo. En general, dicha cantidad se expresará en función de la cantidad de zeína a disolver. Así, aunque la proporción en peso entre el aminoácido básico y la zeína [aminoácido básico:zeína] presentes en dicha solución hidroalcohólica (i) puede variar ampliamente, en una realización particular, dicha proporción en peso aminoácido básico:zeína está comprendida entre 1:0,01 y 1:50, típicamente entre 1:0,5 y 1:25, preferentemente, entre 1:1 y 1:20, más preferentemente, entre 1:5 y 1:15; en una realización concreta, la proporción en peso aminoácido básico:zeína es de 1:6,7 aproximadamente.
La solución hidroalcohólica (ii) que comprende un CBA hidrosoluble generada en la etapa b) del procedimiento [3] de la invención puede obtenerse disolviendo o solubilizando dicho CBA hidrosoluble en agua, opcionalmente, en presencia de un segundo aminoácido básico, y, a continuación, diluyendo la solución acuosa obtenida con un alcohol (e.g., etanol). Por tanto, dicha solución hidroalcohólica (ii) que comprende un CBA hidrosoluble y, opcionalmente, un segundo aminoácido básico, generada en la etapa b) del procedimiento [3] de la
invención contiene agua y un alcohol, típicamente etanol; en una realización particular, dicha solución hidroalcohólica (ii) comprende entre un 25% y un 75% (p/v) de alcohol, preferentemente entre un 30% y un 60%, más preferentemente un 50% aproximadamente.
La solución acuosa, resultante de la disolución del CBA hidrosoluble en agua y, opcionalmente, en presencia de dicho segundo aminoácido básico, contiene, en una realización particular, dicho CBA hidrosoluble y agua; y, en otra realización particular, dicho CBA hidrosoluble, dicho aminoácido básico y agua. En general, dicho segundo aminoácido básico estará presente en dicha solución acuosa [y, consecuentemente en dicha solución hidroalcohólica (ii)] cuando su presencia sea necesaria para disolver el CBA hidrosoluble ya que la solubilización de algunos CBA hidrosolubles, e.g., el ácido fólico, se puede facilitar utilizando una solución acuosa basificada con dicho aminoácido básico; en tales casos, la proporción en peso entre dicho CBA hidrosoluble y dicho segundo aminoácido básico en dicha solución acuosa basificada puede estar comprendida entre 1:0,25 y 1:5, preferentemente entre 1:0,5 y 1:2, más preferentemente entre 1:0,8 y 1:1,8; posteriormente, como se ha mencionado previamente, esta solución acuosa se diluye en un medio hidroalcohólico (e.g., en etanol) para obtener dicha solución hidroalcohólica (ii), tal como se ha mencionado previamente, que comprende entre un 25% y un 75% (p/v) de alcohol, preferentemente entre un 30% y un 60%, más preferentemente un 50% aproximadamente.
El procedimiento [3] de la invención contempla la posibilidad de utilizar 2 aminoácidos básicos diferentes. Así, en una realización particular, el aminoácido básico utilizado en la elaboración de la solución hidroalcohólica (i) que contiene zeína y un aminoácido básico (primer aminoácido básico) y el utilizado en la elaboración de la solución hidroalcohólica (ii) que comprende un CBA hidrosoluble y (en este caso) un segundo aminoácido básico (segundo aminoácido básico), es el mismo y se selecciona del grupo formado por arginina, lisina, histidina, y sus mezclas, preferentemente, lisina.
La cantidad de CBA hidrosoluble que puede contener dicha solución hidroalcohólica (ii) puede variar dentro de un amplio intervalo; no obstante, en una realización particular, la cantidad de CBA hidrosoluble contenida en dicha solución hidroalcohólica (ii) está comprendida entre 0,01% y 10% (p/v), preferentemente entre 0,05% y 5%, más preferentemente entre 0,1% y 1%.
Según la etapa c) del procedimiento [3] de la invención, se mezcla una solución hidroalcohólica (i) que contiene una zeína y un aminoácido básico con una solución hidroalcohólica (ii) que comprende un CBA hidrosoluble y, opcionalmente, un segundo aminoácido básico; de este modo se forma una mezcla que comprende una zeína, un aminoácido básico, un CBA hidrosoluble y, opcionalmente, un segundo aminoácido básico (que, como se ha mencionado previamente, puede ser el mismo que el aminoácido básico contenido en dicha solución hidroalcohólica (i)). La relación en peso CBA hidrosoluble: zeína presente en la mezcla formada en la etapa c) puede variar dentro de un amplio intervalo; no obstante, en una realización particular, la proporción en peso entre el CBA hidrosoluble y la zeína [CBA hidrosoluble:zeína] en dicha mezcla formada en la etapa c) está comprendida entre 1:0,2 y 1:50, preferentemente entre 1:1 y 1:15, más preferentemente entre 1:6 y 1:12.
En la etapa opcional d) del procedimiento [3] de la invención se añade un tensioactivo a la mezcla resultante de la etapa c). Aunque no se desea estar vinculado por ninguna teoría se cree que el tensioactivo facilita la encapsulación del CBA hidrosoluble en las nanopartículas ya que permite acercar el CBA hidrosoluble a la matriz polimérica lipófila (zeína) facilitando así su atrapamiento en el momento de inducir la coacervación. En una realización particular, dicho tensioactivo es un tensioactivo no iónico, tal como un polisorbato, por ejemplo, un éster derivado de un ácido graso (e.g., ácido oleico) y de un sorbitano polietoxilado tal como el comercializado con el nombre Tween® 80. La relación en peso tensioactivo: CBA hidrosoluble presente, en su caso, en la mezcla formada en la etapa d) puede variar dentro de un amplio intervalo; no obstante, en una realización particular, la proporción en peso entre el tensioactivo y el CBA hidrosoluble [tensioactivo:CBA hidrosoluble] está comprendida entre 1:10 y 1:50, preferentemente entre 1:15 y 1:45, más preferentemente entre 1:20 y 1:30.
Finalmente, en la etapa e) del procedimiento [3] de la invención se añade agua en cantidad suficiente sobre la mezcla formada en la etapa c) o en la etapa d) para que se formen las nanopartículas de la invención. Aunque la cantidad de agua a añadir puede variar dentro de un amplio intervalo, en una realización particular, se añade agua en cantidad suficiente para que la proporción final de alcohol en el medio esté comprendida entre 10% y 60% (p/v), preferentemente entre 15% y 30%, más preferentemente de un 25% aproximadamente.
Prácticamente cualquier zeína puede ser utilizada en la puesta en práctica de dichos procedimientos [1], [2] y [3] de la invención; no obstante, en una realización particular, dicha zeína es una zeína procedente de maíz, tal como la zeína suministrada por Sigma-Aldrich (número de producto Z 3625).
Aunque se pueden utilizar alcoholes de muy diversa naturaleza, en una realización particular y preferida de esta invención, la solución hidroalcohólica empleada en los procedimientos [1], [2] y [3] de la invención es etanol.
Prácticamente cualquier aminoácido básico puede ser utilizado para la puesta en práctica de dichos procedimientos [1], [2] y [3] de la invención; no obstante, en una realización particular, dicho aminoácido básico se selecciona del grupo formado por arginina, lisina, histidina y sus mezclas, preferentemente, lisina. Dicho aminoácido
básico, que puede estar dentro o fuera de las nanopartículas de la invención, juega un papel fundamentalmente tecnológico ya que:
- facilita la disolución de los componentes antes de la formación de las nanopartículas; en concreto, contribuye a la disolución de la zeína ya que ésta en presencia del aminoácido básico, puede disolverse en una solución hidroalcohólica con una proporción inferior de alcohol (e.g., 50%) con respecto a su disolución en ausencia de dicho aminoácido, y, además, facilita la disolución de los CBA, en particular, de algunos CBA hidrosolubles, en concreto de CBA hidrosolubles ácidos (e.g., ácido fólico);
- mantiene el pH apropiado tras la producción de dichas nanopartículas a ambos lados de las nanopartículas (interior y exterior); y
- permite obtener nanopartículas con una carga superficial negativa y alejada de ± 10 mV, lo que dificulta su agregación.
Por tanto, el aminoácido básico desempeña un papel muy importante en la producción de las nanopartículas, tanto cargadas con CBA como no cargadas, de la invención.
Las nanopartículas de la invención se caracterizan por presentar un tamaño medio de partícula inferior a 1 |im, comprendido, típicamente, entre 1 y 999 nm, preferentemente entre 10 y 900 nm, más preferentemente entre 50 y 500 nm, aún más preferentemente entre 100 y 450 nm, todavía más preferentemente entre 140 y 400 nm. Ventajosamente, las nanopartículas de la invención tienen un tamaño de partículas de alrededor de 200 nm aproximadamente, con el fin de evitar la alteración de propiedades organolépticas (textura al paladar), lo que resulta particularmente adecuado cuando se utilizan en el campo alimentario.
Las nanopartículas de la invención, tanto las que están cargadas con un CBA como las que no lo están (nanopartículas vacías), pueden incorporar en su formulación un antioxidante, e.g., ácido ascórbico (vitamina C), etc., con el fin de incrementar su estabilidad frente a la temperatura y la oxidación. En este caso, dicho antioxidante podría ser introducido co-encapsulado con el CBA (en su caso) o en la cubierta de las nanopartículas de la invención; para ello, dichos procedimientos [1], [2] y [3] de la invención se adaptarán adecuadamente para incorporar el antioxidante en la formulación de las nanopartículas, por ejemplo, añadiendo el antioxidante a la solución acuosa que contiene dicho CBA y, opcionalmente, dicho segundo aminoácido básico.
En una realización particular, el CBA es el ácido fólico y el antioxidante es el ácido ascórbico que parece actuar protegiendo al ácido fólico de la degradación por radiación ultravioleta, cambio de pH, calor, oxígeno, etc., proporcionando, además, el aporte nutricional del propio ácido ascórbico. Dicho antioxidante podría ser introducido co-encapsulado con el CBA o en la cubierta de las nanopartículas de la invención.
Adicionalmente, si se desea, tanto el procedimiento [1] de la invención como los procedimientos [2] y [3] de la invención, pueden incluir una o más etapas adicionales de estabilización de las nanopartículas obtenidas mediante el uso de distintos tratamientos.
En una realización particular, dicho tratamiento de estabilización comprende someter la suspensión que contiene las nanopartículas de la invención formadas, tanto las que están cargadas con un CBA como las que no lo tienen, a un tratamiento de alta presión, por ejemplo, a una presión comprendida entre 100 y 800 MPa, típicamente entre 350 y 600 MPa. En una realización particular, dicho tratamiento comprende someter la suspensión de nanopartículas a ciclos de 3 a 5 minutos, a una presión de 100 MPa a 800 MPa, típicamente entre 350 y 600 MPa; de hecho, una presión de 400 MPa proporciona buenos resultados.
En otra realización particular, dicho tratamiento de estabilización comprende someter la suspensión que contiene las nanopartículas de la invención formadas, tanto las que están cargadas con un CBA como las que no lo tienen, a un tratamiento UHT (Ultra High Temperature), por ejemplo, a una temperatura comprendida entre 130°C y 140°C durante 2 a 5 segundos, seguido de un rápido enfriamiento.
Asimismo, si se desea, tanto el procedimiento [1] de la invención como los procedimientos [2] y [3] de la invención, pueden incluir una etapa de secado de la suspensión que contiene las nanopartículas formadas, con el fin de obtener las nanopartículas de la invención, tanto las que están cargadas con un c Ba como las que no lo tienen, en forma de un polvo. Esta forma de presentación de dichas nanopartículas contribuye a su estabilidad y, además, resulta particularmente útil para su eventual aplicación en alimentos sólidos, tales como harina, pan, productos de bollería, cereales, leche en polvo, etc., así como en productos cosméticos y/o farmacéuticos.
Prácticamente cualquier método o técnica convencional adecuado para secar suspensiones que contienen nanopartículas puede ser utilizado para realizar esta etapa de secado; no obstante, en una realización particular, el secado de la suspensión que contiene nanopartículas se lleva a cabo mediante secado por aspiración o pulverización (“spray drying”) o mediante liofilización. En general, este tratamiento se lleva a cabo añadiendo a la suspensión de las nanopartículas un agente protector de dichas nanopartículas adecuado, tal como un sacárido, por ejemplo, lactosa, trehalosa, manitol, sacarosa, maltodextrina, glucosa, sorbitol, maltosa, etc., y sus mezclas. Dicho
agente protector protege a las nanopartículas de la invención tanto frente a la degradación térmica como frente a la oxidación durante el proceso de secado.
La relación en peso zeína:sacárido puede variar dentro de un amplio intervalo; no obstante, en una realización particular, la relación en peso zeína:sacárido está comprendida 1:1 y 1:4, preferentemente alrededor de 1:2.
Asimismo, en una realización particular, la solución que contiene el sacárido podría contener, además, un agente antioxidante, tal como ácido ascórbico (vitamina C), etc.; en este caso, la relación en peso zeína:sacárido:agente protector, por ejemplo, vitamina C, podrían ser 1:0,75-2,5:0,25-1,5, preferentemente 1:1,5:0,5.
Las nanopartículas de la invención obtenidas según el procedimiento [1] de la invención, es decir, las nanopartículas que comprenden una matriz de zeína y un aminoácido básico, producidas mediante el procedimiento [1], constituyen un aspecto adicional de la presente invención.
Asimismo, las nanopartículas cargadas de la invención obtenidas según los procedimientos [2] ó [3] de la invención, es decir, las nanopartículas que comprenden una matriz de zeína y un aminoácido básico cargadas con un CBA liposoluble o hidrosoluble, constituyen un aspecto adicional de la presente invención.
Aplicaciones
Las nanopartículas de la invención tienen la capacidad de encapsular un CBA, e.g., un CBA hidrosoluble o un CBA liposoluble. Además, pueden ser utilizadas como aditivos tecnológicos, por ejemplo, favoreciendo una dispersión uniforme del CBA en un medio en el que no es soluble, etc.
En una realización particular, las nanopartículas de la invención posibilitan la encapsulación de un CBA y su incorporación en composiciones farmacéuticas, cosméticas y alimentarias, ya que en su preparación y en el producto final (nanopartículas) no se utilizan otros ingredientes que no sean polímeros naturales (evitando toxicidad asociada a polímeros sintéticos) e ingredientes de grado alimentario. Dichas nanopartículas protegen al CBA de su degradación frente a agentes externos (luz, cambios pH, oxidación, etc.).
Las nanopartículas de la invención se pueden resuspender en medio acuoso protegiendo al CBA de la degradación en disolución. Además, pueden presentarse en forma de un polvo seco, manteniendo estable el CBA y posibilitando su almacenamiento durante largos periodos de tiempo (en particular, para su incorporación en preparaciones alimenticias sólidas).
Adicionalmente, las nanopartículas de la invención son también adecuadas para la elaboración de composiciones cosméticas y farmacéuticas de uso tópico.
Por tanto, en otro aspecto, la invención se relaciona con una composición, en adelante “composición de la invención”, que comprende, al menos, una nanopartícula de la invención y un vehículo aceptable en alimentación, farmacia o cosmética; en una realización particular, dicha composición de la invención comprende una pluralidad de nanopartículas de la invención. En una realización particular, dicha nanopartícula de la invención es una nanopartícula que comprende una matriz de zeína y un aminoácido básico; en otra realización particular, dicha nanopartícula de la invención es una nanopartícula cargada de la invención, es decir, una nanopartícula que comprende una matriz de zeína y un aminoácido básico, y un CBA con actividad nutricional, terapéutica y/o cosmética, y un vehículo farmacéuticamente o cosméticamente aceptable o un vehículo apto para alimentación.
Dichas nanopartículas de la invención tienen un tamaño medio de partícula inferior a 1 |im, comprendido, típicamente, entre 1 y 999 nm, preferentemente entre 10 y 900 nm, más preferentemente entre 50 y 500 nm, aún más preferentemente entre 100 y 450 nm, todavía más preferentemente entre 140 y 400 nm. Ventajosamente, las nanopartículas de la invención tienen un tamaño de partículas de alrededor de 200 nm aproximadamente, con el fin de evitar la alteración de propiedades organolépticas (textura al paladar), lo que resulta particularmente adecuado cuando se utilizan en el campo alimentario.
En una realización particular, dicho CBA se selecciona del grupo formado por aminoácidos, antimicrobianos, aromatizantes, conservantes, edulcorantes, esteroides, fármacos, hormonas, lípidos, péptidos, polinucleótidos, polisacáridos, proteínas, proteoglicanos, saborizantes, vitaminas, y sus mezclas.
En una realización particular, dicho CBA es un CBA liposoluble. Ejemplos ilustrativos, no limitativos, de CBA liposolubles incluyen vitaminas, por ejemplo de las familias A, D, E, K y sus derivados, fosfolípidos, carotenoides (carotenos, licopeno, luteína, capsantina, zeaxantina, etc.), ácidos grasos omega-3 (e.g. DHA, EPA, etc.), aminoácidos (e.g., iso-leucina, leucina, metionina, fenilanina, triptófano, y valina), fitostanoles y fitosteroles (e.g. sitosterol, campesterol, estigmasterol, etc.), polifenoles (e.g. quercetina, rutina, resveratrol, kaempferol, miricetina, isoramnetina, etc.) y sus derivados.
En otra realización particular, dicho CBA es un CBA hidrosoluble, preferentemente, un CBA hidrosoluble ácido. Ejemplos ilustrativos, no limitativos, de CBA hidrosolubles incluyen vitaminas, por ejemplo, vitaminas de las
familias B o C, y sus derivados, sales o ésteres; ácido hialurónico, condroitín sulfato, ácido tióctico, sus sales o ésteres, etc. En una realización particular, dicho CBA hidrosoluble se selecciona del grupo formado por ácido fólico, ácido 4-aminobenzoico, niacina, ácido pantoténico, tiamina monofosfato, tiamina pirofosfato, tiamina trifosfato, ácido ascórbico, ácidos pteroilpoliglutámicos (derivados del ácido fólico: poliglutamatos de folato; folatos de poliglutamato), ácido folínico, ácido nicotínico, ácido hialurónico, ácido tióctico, ácido p-cumárico, ácido caféico, sus derivados, ésteres o sales farmacéuticamente o cosméticamente aceptables, o de grado alimentario, y sus mezclas.
En una realización particular, la composición de la invención es una composición farmacéutica adecuada para su administración por vía tópica; para ello, dicha composición comprende un vehículo farmacéuticamente aceptable que comprende uno o más excipientes adecuados para su administración por vía tópica, por ejemplo, en forma de gel, pomada, crema, etc. Información sobre excipientes adecuados para la formulación de composiciones farmacéuticas destinadas a su administración por vía tópica así como sobre la producción de dichas composiciones farmacéuticas puede encontrarse en el libro “Tratado de Farmacia Galénica”, de C. Faulí i Trillo, 10 Edición, 1993, Luzán 5, S.A. de Ediciones. La dosis a administrar de nanopartículas de la invención puede variar dentro de un amplio intervalo, por ejemplo, entre aproximadamente 0,5 (g/cm2 de zona a tratar) y aproximadamente 2 (g/cm2 de zona a tratar), de una composición de la invención que contiene entre un 0,1% y un 30% de nanopartículas de la invención, preferentemente, entre 0,5 % y 5 %.
En otra realización particular, la composición de la invención es una composición cosmética adecuada para su administración por vía tópica; para ello, dicha composición comprende un vehículo cosméticamente aceptable que comprende uno o más excipientes adecuados para su administración por vía tópica, por ejemplo, en forma de gel, crema, champú, loción, etc. Información sobre excipientes adecuados para la formulación de composiciones cosméticas destinadas a su administración por vía tópica así como sobre la producción de dichas composiciones cosméticas puede encontrarse en el libro “Manual de Cosmetología”, de Octavio Díez Sales, 1a Edición, 1998, Editorial Videocinco, S.A.
En otra realización particular, la composición de la invención es una composición alimenticia, tal como una preparación alimenticia sólida, líquida o semi-sólida.
En una realización particular, la composición de la invención comprende:
- zeína, entre 15% y 45% en peso;
- un aminoácido básico, entre 1% y 4 % en peso;
- quercetina o resveratrol, entre 0,5% y 5% en peso; y
- un sacárido, entre 45% y 80% en peso,
donde todas las proporciones son en peso respecto al total de la composición.
En otra realización particular, la composición de la invención comprende:
- zeína, entre 15% y 45% en peso;
- un aminoácido básico, entre 4% y 10% en peso;
- opcionalmente, polisorbato (e.g., tween 80), entre 0,05% y 0,5% en peso;
- ácido fólico, entre 0,5% y 5% en peso;
- un sacárido, entre 45% y 80% en peso; y
donde todas las proporciones son en peso respecto al total de la composición.
Alternativamente, la composición de la invención puede ser incorporada en un producto alimenticio. Por tanto, en otro aspecto, la invención se relaciona con un producto alimenticio que comprende una composición de la invención. Dicho producto alimenticio puede encontrarse en forma líquida, semi-sólida o sólida. Ventajosamente, con el fin de evitar o minimizar la disolución total o parcial de las nanopartículas de la invención y, de este modo, colaborar a su estabilidad, dicho producto alimenticio tiene un pH ácido, es decir, inferior a 7, preferentemente, igual o inferior a 6, más preferentemente, igual o inferior a 5. Ejemplos ilustrativos de productos alimenticios que puede ser enriquecidos o fortificados con la composición de la invención incluyen la leche y sus derivados (yogures, quesos, cuajadas, etc.), zumos, mermeladas, productos de panadería y bollería, cárnicos fermentados, salsas, etc. Igualmente, la composición de la invención puede ser incorporada en un producto para alimentación animal, por ejemplo, en piensos.
Ejemplos
Los siguientes ejemplos describen la producción de nanopartículas de zeína y un aminoácido básico, tal como lisina, que pueden incorporar un compuesto biológicamente activo [CBA] en su interior, concretamente resveratrol, quercetina o ácido fólico. Dichas nanopartículas son capaces de proteger dicho CBA de las degradaciones que pueda sufrir en el alimento debido a cambios en el pH, luz, oxidación, etc.
Procedimiento general de producción de nanopartículas de zeína vacías
El procedimiento general de producción de nanopartículas de zeína comprende la disolución de dicha proteína, zeína (Sigma-Aldrich - número de producto Z 3625), en una solución hidroalcohólica, tal como, por ejemplo, una solución de etanol al 50% (p/v), junto con una cantidad determinada de lisina (Sigma-Aldrich), seguido de la adición, bajo agitación magnética y con flujo constante, de un volumen determinado de agua, para dar lugar a la formación de las nanopartículas bajo apariencia de una suspensión lechosa amarillenta.
Caracterización fisicoquímica de las nanopartículas
Los distintos estudios necesarios para conseguir una caracterización fisico-química completa de las nanopartículas se describen a continuación.
Dentro de los ensayos fisico-químicos, se determinó el tamaño y la carga superficial de las nanopartículas. El primero de dichos parámetros (tamaño) fue obtenido por espectroscopía de correlación fotónica, utilizando un Zetasizer nano Z-S (Malvern Instruments/Optilas, España). El segundo de dichos parámetros (carga superficial) fue determinado a través de la medida del potencial zeta, utilizando un Zeta Potential Analyzer (Brookhaven Instruments Corporation, New York, EEUU).
El rendimiento del proceso de formación de nanopartículas se calculó a través de la cuantificación de la zeína libre restante tras la obtención de las nanopartículas, recogida en los sobrenadantes obtenidos al centrifugar la formulación (17.000 x g, 20 minutos). Para la cuantificación, los sobrenadantes se diluyeron en etanol hasta obtener una concentración del alcohol del 75% (p/v), siendo éste el mismo medio en el que fueron preparados los estándares de la curva de calibrado.
La cantidad de proteína (zeína) que forma partículas en la formulación se estimó como la diferencia entre la cantidad inicial añadida y la cantidad cuantificada en los sobrenadantes recogidos durante la etapa de purificación. El rendimiento se estimó como:
Por otra parte, para confirmar los resultados obtenidos por diferencia entre el total y el contenido en zeína del sobrenadante, se realizó un estudio de cuantificación del pellet obtenido tras la centrifugación. En este caso, para romper las partículas se empleó una solución hidroalcohólica de etanol al 75% (p/v), siendo éste el mismo medio empleado para la preparación de la curva de calibrado. Así pues, en este caso el rendimiento se estimó como:
Rendimiento
(% ) =
mgZeínaen pellet
100 [Eq. 2]
mg Zeína Totales
Además, para confirmar la validez del método de cuantificación y comprobar que no existe un efecto matriz se tomaron volúmenes conocidos de formulación sin centrifugar y se diluyeron hasta obtener una concentración en etanol del 75%. De este modo se pudo cuantificar el total de zeína presente en la formulación y compararlo con la cantidad de zeína añadida inicialmente, encontrando en todos los casos desviaciones inferiores al 5%.
Para la realización de los distintos cálculos se utilizó una curva de calibrado entre 90 y 1.200 pg/mL (R2 = 0,999; LD = 43 pg/mL; LC = 143 pg/mL).
Todas las cuantificaciones se llevaron a cabo mediante espectrofotometría UV a 278 nm (Agilent 8453, sistema de espectroscopía UV-visible).
La morfología de las nanopartículas se observó por microscopía electrónica de barrido (Zeiss, DSM 940A Alemania). Para ello, las nanopartículas se cubrieron con una capa de oro molecular de unos 9 nm (Equipo Emitech K550, Sputter-Coater, Reino Unido) y las fotografías se realizaron con un microscopio Zeiss DMS 940 A (Estados Unidos).
Procedimiento general de producción de nanopartículas de zeína conteniendo quercetina o resveratrol El procedimiento general de producción de nanopartículas de zeína cargadas con quercetina o resveratrol comprende la disolución de la proteína (zeína) en medio hidroalcohólico (50% de etanol (p/v)) junto con una cantidad determinada de lisina seguida de la adición, bajo agitación magnética, de un volumen determinado de una dilución con agua de una solución alcohólica de dicho antioxidante (quercetina o resveratrol) previamente preparada. Tras la incubación de la mezcla durante unos minutos, el último paso consiste en la adición de un volumen determinado de agua, para dar lugar a la formación de las nanopartículas bajo apariencia de una suspensión lechosa amarillenta.
A continuación, si se desea, tras una homogeneización de 3 minutos mediante agitación, se añade, sin dejar de agitar, un volumen determinado de solución de un sacárido (lactosa, trehalosa, manitol, glucosa, sorbitol, maltodextrina, maltosa, etc.). Finalmente, la suspensión se pulveriza en un spray dryer (Büchi Mini Spray Drier B-191, Büchi Labortechnik AG, Suiza) bajo las siguientes condiciones:
- Temperatura de entrada de aire (Inlet temperature): 70-110°C
- Temperatura salida del aire (Outlet temperature): 30-90°C
- Presión de aire (Air Pressure): 2-10 bar [2x105 - 10x105 Pa]
- Velocidad de bombeo de la muestra (Pumping rate): 2-9 mL/min
- Aspiración (Aspirador): 30-100%
- Flujo de aire (Air flow): 200-900 L/h
Opcionalmente, tras la adición del sacárido, las formulaciones pueden ser secadas mediante liofilización en lugar de mediante aspiración o pulverización (“spray drying”).
Determinación de la cantidad de quercetina o resveratrol asociado a las partículas de zeína
La cantidad de quercetina o resveratrol asociado a las nanopartículas se cuantificó mediante cromatografía de líquidos de alta resolución (HPLC), de acuerdo con el procedimiento descrito por Lacopini (Lacopini y col., J Food Comp Anal 2008;21:589-598), aunque con algunas variaciones. El análisis se llevó a cabo en un cromatógrafo modelo 1100 series LC (Agilent, Waldbornn, Germany) acoplado a un sistema de detección UV de diodo-array.
Para el análisis de las muestras frescas (antes de su secado), los sobrenadantes obtenidos tras el proceso de purificación de las nanopartículas [por filtración de un volumen determinado de la formulación a través de tubos de diálisis Vivaspin® 300,000 MWcO (VIVASPIN 2, Sartorius stedim Biotech, Alemania)], se diluyeron hasta la obtención de una solución hidroalcohólica con un contenido en etanol del 75% (p/v). Por su parte, el pellet se disolvió también en etanol al 75% (p/v) para romper las partículas y mantener tanto la zeína como el CBA (quercetina o resveratrol) y el aminoácido en disolución y proceder así a su cuantificación. La suma del contenido en CBA encontrado en ambas fracciones (sobrenadante y pellet) coincidió en todo momento con el total añadido inicialmente. Además, también fue posible cuantificar la cantidad total de CBA disolviendo un volumen determinado de la formulación en etanol al 75% (p/v). Este estudio permitió confirmar que las diferencias entre la cantidad de CBA añadido y el obtenido por cuantificación a través del método cromatográfico descrito eran inferiores al 10% en todos los casos.
Por otra parte, para la preparación de las muestras en polvo (formulaciones secadas), se tomaron aproximadamente 15 mg de la formulación de nanopartículas y se resuspendieron en etanol. El sobrenadante obtenido tras la filtración de un volumen determinado de la suspensión a través de tubos de diálisis Vivaspin® 300,000 MWCO (VIVASPIN 2, Sartorius stedim Biotech, Alemania), se diluyó con agua destilada hasta una concentración de etanol del 75% (p/v). El pellet se disolvió en un volumen determinado de etanol al 75% (p/v). Además, también se cuantificó el total del CBA contenido en los 15 mg de polvo disolviéndolos directamente en etanol al 75% (p/v).
Las muestras se analizaron empleando una columna Alltech C18 Alltima™ (5 pm, 150 mm x 2,1 mm) calentada a 40°C, con una precolumna compatible Gemini® C18 AJO-7596 y una mezcla de agua/metanol/ácido acético glacial en gradiente (véase la Tabla 1) como fase móvil bombeada a un flujo de 0,25 mL/min.
La detección se realizó a 360 nm para la quercetina y a 306 nm para el resveratrol. El volumen de inyección de muestra fue de 10 pL. El tiempo de retención de dichos compuestos es de 24,2 ± 0,2 minutos en el caso de la quercetina y de 22,8 ± 0,5 minutos en el caso del resveratrol.
Tabla 1
Condiciones de gradiente para la fase móvil
(A: agua, B: metanol, C: acético glacial)
Tiempo (min) A (%) B (%) C (%)
0 80 15 5
15 70 25 5
20 10 85 5
30 10 85 5
35 80 15 5
40 80 15 5
Previamente a la cuantificación de las muestras se prepararon distintas rectas de calibrado de concentraciones entre 1 y 100 pg/mL en medio hidroalcohólico (75% de etanol), obteniendo resultados de precisión y exactitud inferiores del 5%.
Finalmente, la cantidad de quercetina o resveratrol asociada a las nanopartículas [eficacia de encapsulación (E.E.)] se calculó como la diferencia entre la cantidad del CBA añadido inicialmente y la cantidad del mismo cuantificada en los sobrenadantes.
Procedimiento general de producción de nanopartículas de zeína conteniendo ácido fólico
El procedimiento general de producción de nanopartículas de zeína cargadas con ácido fólico comprende la disolución de la proteína (zeína) en medio hidroalcohólico (50% de etanol (p/v)) junto con una cantidad determinada de lisina seguida de la adición, bajo agitación magnética, de un volumen determinado de una dilución alcohólica de una solución acuosa de dicha vitamina previamente preparada. Tras la incubación de la mezcla durante unos minutos, el último paso consiste en la adición de un volumen determinado de agua, para dar lugar a la formación de las nanopartículas bajo apariencia de una suspensión lechosa amarillenta.
A continuación, si se desea, tras una homogeneización de 3 minutos mediante agitación, se añade, sin dejar de agitar, un volumen determinado de solución de un sacárido (lactosa, trehalosa, manitol, glucosa, sorbitol, maltodextrina, maltosa, etc.). Finalmente, la suspensión se pulveriza en un spray dryer (Büchi Mini Spray Drier B-191, Büchi Labortechnik AG, Suiza) bajo las siguientes condiciones:
- Temperatura de entrada de aire (Inlet temperature): 70-130°C
- Temperatura salida del aire (Outlet temperature): 30-90°C
- Presión de aire (Air Pressure): 2-10 bar [2x105 - 10x105 Pa]
- Velocidad de bombeo de la muestra (Pumping rate): 2-9 mL/min
- Aspiración (Aspirador): 30-100%
- Flujo de aire (Air flow): 200-900 L/h
Opcionalmente, tras la adición del sacárido, las formulaciones pueden ser secadas mediante liofilización en lugar de mediante aspiración o pulverización (“spray drying”).
Determinación de la cantidad de ácido fólico asociado a las partículas de zeína
La cantidad de ácido fólico asociado a las nanopartículas se cuantificó por cromatografía de líquidos de alta resolución (HPLC), de acuerdo con el procedimiento descrito por Faye [Faye Russell, L., Quantitative Determination
of Water-Soluble Vitamins. En Food Analysis by HPLC, Nollet, L.M.L. (Ed.), Marcel Dekker, Inc., New York, Segunda Edición, Capítulo 10 (2000) pp. 444-445]. El análisis se llevó a cabo en un cromatógrafo modelo 1100 series LC (Agilent, Waldbornn, Germany) acoplado a un sistema de detección UV de diodo-array. Los datos se analizaron en un ordenador Hewlett-Packard mediante el software Chem-Station G2171. Para la separación de ácido fólico se empleó una columna Alltech C18 Alltima™ (5 pm, 150 mm x 2,1 mm) calentada a 40°C, con una precolumna compatible Gemini® C18 AJO-7596. La fase móvil se compuso de una mezcla de H3PO4 (33 mM, pH 2,3)/acetonitrilo en gradiente (Tabla 2) y fue bombeada a un flujo de 0,25 mL/min. La detección se realizó a 290 nm. El volumen de inyección de muestra fue de 10 pL. El tiempo de retención del ácido fólico es de 22,6 ± 0,5 minutos.
Tabla 2
Condiciones de gradiente para la fase móvil (A: H
3
PO
4
33 mM, B: Acetonitrilo).
Tiempo (min) A (%) B (%)
0 95,0 5,0
8 95,0 5,0
33 82,5 17,5
45 95,0 5,0
Previamente a la cuantificación de las muestras se prepararon distintas rectas de calibrado de concentraciones entre 2 y 400 pg/mL, obteniendo resultados de precisión y exactitud superiores al 95%, con la confirmación de que la presencia de zeína y/o aminoácidos en la disolución no interfería en la correcta cuantificación del ácido fólico.
Para el análisis de las muestras frescas (antes de su secado), se procedió a cuantificar los sobrenadantes obtenidos tras la filtración de un volumen determinado de la formulación a través de tubos de diálisis Vivaspin® 300,000 MWCO (VIVASPIN 2, Sartorius stedim Biotech, Alemania). Por su parte, el pellet se disolvió en NaOH 0,05M para romper las partículas y mantener tanto la zeína como el ácido fólico y el aminoácido en disolución y proceder así a su cuantificación. La suma del contenido en ácido fólico encontrado en ambas fracciones (sobrenadante y pellet) coincidió en todo momento con el total añadido inicialmente. Además, también fue posible cuantificar la cantidad total de ácido fólico disolviendo 1 mL de la formulación en 1 mL de NaOH 0,05 M. Este estudio permitió confirmar que las diferencias entre la cantidad de ácido fólico añadido y el obtenido por cuantificación a través del método cromatográfico descrito son inferiores al 10% en todos los casos.
Por otra parte, para la cuantificación de las muestras en polvo se tomaron 15 mg de nanopartículas, se resuspendieron en 2 mL de agua y se centrifugaron, procediendo entonces de igual modo que con las muestras frescas.
Estudios farmacocinéticos. Biodisponibilidad de ácido fólico encapsulado en nanopartículas de zeína Los estudios farmacocinéticos se llevaron a cabo de acuerdo con las normas del comité ético de la Institución así como la legislación Europea en animales de experimentación (86/609/EU). Para ello, 20 ratas macho Wistar, de peso medio 200 g, fueron sometidas a condiciones normales de luz-oscuridad (12 horas - 12 horas), y durante la semana previa al estudio fueron alimentadas a demanda con un pienso deficitario en ácido fólico (Folic Acid Deficient Diet. TD. 95247. Harlan, USA) y agua. Doce horas antes de la administración de las formulaciones, las ratas se aislaron en jaulas metabólicas sin acceso a comida, pero con acceso libre al agua de bebida.
Los animales fueron divididos en 4 grupos de tratamiento (5 ratas por grupo). Al primero de los grupos se le administró por vía oral únicamente 1 mL de PBS (Buffer Fosfato pH 7,4). Los dos grupos siguientes se trataron con dosis orales únicas de 1 mg/kg (200 pg/rata) de ácido fólico (Aditio, Panreac Química, Barcelona, España) incorporado en nanopartículas de zeína, o bien libre (no encapsulado) disuelto en agua. Se administró 1 mL de cada una de las distintas formulaciones dispersas en agua a través de una cánula gastro-esofágica. Por último, al cuarto grupo se le administró por vía intravenosa en la vena safena la misma dosis de ácido fólico libre (1 mg/kg) disuelto en tampón fosfato (PBS) (0,5 mL). Antes de la administración de las formulaciones, se extrajo sangre de la vena safena de la cola con el fin de comprobar el nivel basal de la vitamina en cada rata. Tras la administración se procedió a extraer, a diferentes tiempos, un volumen de sangre de aproximadamente 500 pL utilizando tubos de separación del suero (SARSTEDT Microtube 1,1 mL Z-Gel). En todos los casos, para evitar el dolor de las ratas, la extracción fue llevada a cabo tras dormir al animal con anestesia inhalatoria (isofluorano:oxígeno), comprobando en todo momento sus constantes.
Posteriormente, se repuso volemia administrando 500 pL de suero salino fisiológico vía intraperitoneal, previamente calentado a la temperatura del animal. Durante este periodo, se examinó el estado de los animales (movilidad, agresividad, reacciones alérgicas y temperatura) no observándose ningún cambio significativo.
Pretratamiento y cuantificación del ácido fólico de las muestras de suero
La cuantificación de ácido fólico en las muestras de suero, obtenidas tras centrifugar los tubos con sangre (6.000 rpm, 20 min, 20°C), fue llevada a cabo mediante una técnica de inmunoensayo enzimático. Para ello se empleó un Kit Elisa (Diagnostic automation, INC. Calabasas, California USA), aprobado por la FDA para la determinación cuantitativa de ácido fólico en alimentos. La muestra de suero fue cuantificada sin tratamiento previo y siguiendo las especificaciones del fabricante.
En vista de que el kit está concebido para su empleo en alimentos, se realizó una serie de estudios previos con el fin de confirmar su capacidad de cuantificación de la vitamina en muestras de suero. Dichos estudios consistieron en realizar una comparativa exhaustiva entre los resultados obtenidos mediante el kit y los obtenidos por el método de cromatografía líquida de alta resolución descrito en apartados anteriores, con el siguiente proceso previo de preparación: a 50 j L de suero se le añadieron cantidades variables (0-300 j L) de ácido fólico disuelto en una solución de tetraborato sódico 50 mM preparada en ascorbato sódico al 1% (p/v). La solución resultante se llevó a un volumen final de 350 j L (dilución del suero 1:7) con la solución de tetraborato sódico 50 mM. Cada mezcla se llevó a ebullición durante 30 minutos y posteriormente se enfrió a 2°C y se conservó durante toda la noche a dicha temperatura.
Tras centrifugar las muestras resultantes a 20.000 rpm durante 20 minutos y filtrarlas a través de un filtro de 20 jm, su contenido en ácido fólico se cuantificó mediante cromatografía líquida de alta resolución empleando el método descrito previamente. En este caso, y debido a la baja concentración de la vitamina en suero, se empleó la técnica de adiciones estándar para minimizar los errores en la cuantificación y eliminar cualquier interferencia de la matriz. Este método de extracción y cuantificación por HPLC fue validado siguiendo los criterios establecidos por la FDA.
En todos los casos estudiados las diferencias en las concentraciones de ácido fólico en suero encontradas por ambos métodos fueron inferiores al 10%. Por ello se escogió la técnica de inmunoensayo enzimático para cuantificar la totalidad de las muestras, ya que requiere menor cantidad de suero para su análisis y se trata de una técnica más sencilla y rápida, cuyo límite de detección (2 ng/mL) es muy inferior al de la técnica cromatográfica.
EJEMPLO 1
Preparación y caracterización de nanopartículas de zeína vacías. Rendimiento del proceso de obtención. Influencia de la cantidad de lisina incorporada en la formulación en las características fisico químicas de las nanopartículas
Se disolvieron 60 mg de zeína (Sigma-Aldrich), junto con 10 mg de lisina (Sigma-Aldrich), en 8,8 mL de una solución de etanol al 50% (p/v). Posteriormente, sobre esta disolución, se añadieron 8,8 mL de agua bajo agitación magnética y flujo constante, para formar las nanopartículas. Este procedimiento fue realizado por triplicado.
La Figura 1 (A y B) muestra las imágenes obtenidas por microscopía electrónica de transmisión de las partículas de zeína obtenidas por este método.
Con el objetivo de conocer la influencia de la lisina y el porcentaje de etanol de la disolución hidroalcohólica inicial en las características físico-químicas de las nanopartículas se prepararon 3 nuevas formulaciones variando estos parámetros: (i) una de ellas sin lisina, (ii) otra con lisina y la disolución hidroalcohólica inicial preparada en etanol al 75% (p/v) en lugar del 50% (p/v), y (iii) la tercera se preparó también en etanol al 75% (p/v) y sin lisina.
La Tabla 3 resume los parámetros físico-químicos principales de las nanopartículas resultantes.
Tabla 3
Características físico-químicas de las nanopartículas de zeína (media ± SD, n=6) en presencia de distintas cantidades de lisina y porcentajes de etanol en que se disuelve la zeína antes de la formación de las nanopartículas
Tamaño
Relación en peso lisina:zeínaPorcentaje de etanol PDIa Potencial zeta Rendimiento13 (nm) (mV) (%)
0 (*) 50 150 ± 4 0,11 ± 0,03 - 7,2 ± 3,6 -
1 : 6 50 142 ± 4 0,12 ± 0,09 -37,8 ± 1,6 94,7 ± 1,1 0 75 203 ± 2 0,09 ± 0,01 - 8,9 ± 7,6 94,7 ± 2,4 1 : 6 75 164 ± 2 0,07 ± 0,01 -46,0 ± 1,5 98,5 ± 1,6 (*) Parcialmente soluble
a PDI: polidispersión
b Rendimiento: Porcentaje de zeína transformada en nanopartículas [Eq. 1]
Los estudios estadísticos realizados (test de muestras independientes no paramétrico: Kruskal-Wallis) revelaron la existencia de evidencias estadísticamente significativas para afirmar que la presencia de lisina incide en un incremento de su carga superficial. Las formulaciones preparadas con elevadas cantidades iniciales de etanol (75% (p/v)), mostraron tamaños y rendimientos superiores con respecto a las obtenidas a partir de una solución inicial de etanol al 50% (p/v), no habiendo diferencias significativas en su carga superficial.
La carga superficial encontrada en las muestras que no contenían lisina era muy próxima a cero, lo que significa que dichas partículas presentaban una mayor tendencia a la aglomeración. Sin embargo, en presencia de lisina, la carga superficial es lo suficientemente elevada como para evitar dicho fenómeno.
Así pues, para la encapsulación del CBA se escogieron las formulaciones obtenidas a partir de una solución hidroalcohólica conteniendo un 50% de etanol (p/v) y en presencia de lisina ya que esto evita la agregación de las nanopartículas, las hace versátiles para la encapsulación de CBAs tanto liposolubles como hidrosolubles, y, además, se consigue un ahorro significativo en el empleo del reactivo.
EJEMPLO 2
Preparación y caracterización de nanopartículas de zeína conteniendo resveratrol. Influencia del contenido en lisina y resveratrol en la eficacia de encapsulación
Se prepararon distintas disoluciones hidroalcohólicas, todas ellas conteniendo 60 mg de zeína y cantidades variables de lisina (0, 5, 10 ó 20 mg), en un volumen final de 8,8 mL de etanol al 50%.
Por otra parte, se disolvieron 47 mg de resveratrol en 15 mL de etanol y, a continuación, se diluyeron a 24 mL con agua.
Posteriormente, se añadieron volúmenes variables de la disolución de resveratrol (1, 2 ó 3 mL) sobre las distintas disoluciones de zeína preparadas. Pasados 5 minutos de incubación se añadieron sobre la mezcla 8,8 mL de agua bajo agitación magnética y flujo constante. Este procedimiento fue realizado por triplicado para cada tipo de formulación.
La Tabla 4 recoge las características físico-químicas de las nanopartículas obtenidas en cada caso.
Tabla 4
Características físico-químicas de las nanopartículas de zeína (disueltas inicialmente en etanol al 50% (p/v)) con cantidades variables de lisina (media ± SD, n = 3) con resveratrol encapsulado. La relación en peso entre el resveratrol y la zeína es de 1:16
Relación en peso Potencial Contenido en
Tamaño (nm) PDI resveratrol Eficacia de lisina:zeína zeta (mV) encapsulación (%) (pg R/mg NP)
0 149 ± 1 0,08 ± 0,02 23,3 ± 0,7 56,3 ± 3,6 83,7 ± 1,9
1 : 12 154 ± 1 0,08 ± 0,03 -30,5 ± 0,9 59,0 ± 3,1 91,4 ± 1,9
1 : 6 148 ± 1 0,08 ± 0,02 - 45,2 ± 3,0 54,6 ± 2,3 85,2 ± 1,3
1 : 3 167 ± 2 0,07 ± 0,02 -44,2 ± 1,2 56,7 ± 3,0 88,1 ± 1,9
R: Resveratrol; NP: Nanopartícula
Los resultados obtenidos muestran que la presencia de lisina no influye significativamente en la eficacia de encapsulación. Así pues, teniendo en cuenta que dicho aminoácido modifica la carga superficial de las partículas y reduce la posibilidad de que se agreguen, y que, además, incrementa el rendimiento de formación de partículas, se escogió la formulación que contenía el aminoácido incorporado para continuar con el estudio.
La Tabla 5 recoge las características físico-químicas de las nanopartículas obtenidas variando el contenido en resveratrol cuando la cantidad de lisina es constante.
Tabla 5
Características físico-químicas de las nanopartículas de zeína (disueltas inicialmente en etanol al 50% p/v) con cantidades variables de resveratrol (media ± SD, n = 3). La relación en peso entre la lisina y la zeína es de 1:6
Relación en
peso ficacia de
Tamaño Potencial Contenido en E
encapsulación pg R/mg resveratrol: (nm) PDI resveratrol
zeta (mV) formulación (pg R/mg NP) (%)
zeína
1 : 10,4 162 ± 1 0,10 ± 0,02 -48,0 ± 0,7 70,9 ± 6,4 70,4 ± 1,9 76,1
1 : 16 148 ± 1 0,08 ± 0,02 - 45,2 ± 3,0 54,6 ± 2,3 85,2 ± 1,3 51,1
1 : 31,4 171 ± 3 0,06 ± 0,02 - 42,4 ± 2,8 28,9 ± 1,8 92,4 ± 3,8 26,4
R: Resveratrol; NP: Nanopartícula
Los resultados obtenidos revelan que conforme se incrementa la cantidad de resveratrol añadida a la formulación disminuye la eficacia de encapsulación pero incrementa la cantidad de sustancia bioactiva encapsulada en el interior de las partículas.
EJEMPLO 3
Preparación y caracterización de nanopartículas de zeína conteniendo resveratrol secadas por aspiración (spray drying)
Se disolvieron 126 mg de zeína junto con 21 mg de lisina en 14 mL de etanol al 50% (p/v).
Por otra parte, se disolvieron 60 mg de resveratrol en 10 mL de etanol y, posteriormente, se tomaron 1,4 mL de esa disolución y se llevaron a un volumen final de 2,8 mL con agua.
A continuación, se añadieron 1,1 mL de la solución de resveratrol diluida sobre la disolución de zeína y se dejó incubar la mezcla durante 5 minutos. Transcurrido ese tiempo, se añadieron a la mezcla 15 mL de agua bajo agitación magnética y flujo constante.
Finalmente se añadieron 260 mg de maltodextrina a la mezcla antes de secarla mediante el empleo del spray dryer. Las condiciones del proceso fueron:
- Temperatura de entrada de aire (Inlet temperature): 110°C
- Temperatura salida del aire (Outlet temperature): 70°C
- Presión de aire (Air Pressure): 6 bar [6x105 Pa]
- Velocidad de bombeo de la muestra (Pumping rate): 4,5 mL/min
- Aspiración: 94%
- Flujo de aire (Air flow): 700 L/h
La Tabla 6 resume las características físico-químicas de la formulación resultante.
Tabla 6
Características físico-químicas de las nanopartículas de zeína con lisina y resveratrol (R) (media ± SD, n = 3), secadas mediante la técnica de spray-drying, empleando maltodextrina como adyuvante del proceso. La relación en peso entre la lisina y la zeína es de 1:6. La relación en peso entre el sacárido (maltodextrina) y la zeína es 2:1
Tamaño Potencial
PDI pg R/mg formulación
(nm) zeta (mV)
245 ± 60,24 ± 0,01 -30,3 ± 0,3 9,4 ± 0,8
La cantidad encapsulada por mg de nanopartículas y la eficacia de encapsulación no se ven modificadas por el secado por aspersión (pulverización).
La Figura 2 muestra las imágenes obtenidas por microscopía de barrido electrónico de las partículas de zeína conteniendo resveratrol.
Por otra parte, se llevaron a cabo los mismos experimentos aplicando la técnica de altas presiones (150 MPa en un ciclo de 5 minutos, y 400 MPa en un ciclo de 5 minutos) tras la formación de las nanopartículas, previa a su paso por el spray dryer. Los resultados de encapsulación obtenidos fueron similares a los obtenidos sin dicho tratamiento.
EJEMPLO 4
Preparación y caracterización de nanopartículas de zeína conteniendo quercetina. Influencia del contenido en lisina y quercetina en la eficacia de encapsulación
Se prepararon distintas disoluciones, todas ellas conteniendo 60 mg de zeína y 10 mg de lisina, en un volumen final de 8,8 mL de etanol al 50%.
Por otra parte, se disolvieron 150 mg de quercetina en 50 mL de etanol y posteriormente se diluyeron tomando 31 mL de la disolución anterior y llevándolos a un volumen final de 50 mL con agua.
Posteriormente, se añadieron volúmenes variables de la disolución de quercetina (0,5-3 mL) sobre las distintas disoluciones de zeína preparadas. Pasados 5 minutos de incubación se añadieron sobre la mezcla 8,8 mL de agua bajo agitación magnética y flujo constante. Este procedimiento fue realizado por triplicado para cada tipo de formulación.
La Figura 3 muestra las imágenes obtenidas por microscopía electrónica de transmisión de las partículas de zeína, con quercetina encapsulada, obtenidas por este método. La Tabla 7 recoge las características físico-químicas obtenidas en cada caso.
Tabla 7
Características físico-químicas de las nanopartículas de zeína con lisina y cantidades variables de quercetina (Q) (media ± SD, n = 6). La relación en peso entre la lisina y la zeína es de 1:5,5
Relación en peso Tamaño Potencial Contenido en Eficacia de PDI quercetina encapsulación quercetina: zeína (nm) zeta (mV) pg Q/ mg NP (%)
1:64 147 ± 1 0,22 ± 0,01 -60,2 ± 1,4 16,1 ± 1,0 93,2 ± 8,0
1:30 161 ± 4 0,13 ± 0,03 - 57,1 ± 1,2 29,1 ± 1,8 85,6 ± 1,3
1:20 161 ± 1 0,05 ± 0,01 - 48,3 ± 3,2 38,5 ± 1,3 76,7 ± 2,5
1:16 165 ± 2 0,04 ± 0,03 - 46,8 ± 2,4 48,7 ± 1,1 77,9 ± 1,8
1:11 167 ± 2 0,06 ± 0,01 -45,1 ± 2,4 59,7 ± 2,6 64,6 ± 2,7
NP: Nanopartícula
Los estudios estadísticos realizados (test de muestras independientes no paramétrico: Kruskal-Wallis) revelaron la existencia de evidencias estadísticamente significativas para considerar que existían diferencias en las características físico-químicas de las distintas formulaciones. A la vista de los resultados obtenidos, se puede considerar que, conforme se incrementa la cantidad de quercetina añadida a la formulación, la eficacia de encapsulación disminuye y la cantidad de CBA (quercetina) encapsulado aumenta de forma potencial (Figura 4), atendiendo a la siguiente expresión matemática:
y = 369,92- x -07526; R2 = 0,9955 [Eq. 3]
donde
y corresponde a la cantidad de quercetina encapsulada (|jg Q/mg NP), y
x corresponde a la relación inicial entre quercetina y zeína (mg zeína/mg quercetina).
Con respecto a los tamaños y potenciales, no se encontraron diferencias estadísticamente significativas entre las distintas muestras analizadas.
Por otra parte, se intentó conocer la influencia de la mayor o menor presencia de lisina en la formulación en las características físico-químicas de las nanopartículas, por lo que se realizó el mismo estudio, manteniendo constante en este caso la cantidad de quercetina inicial y variando la cantidad de aminoácido añadido.
Así pues, se prepararon distintas soluciones de zeína conteniendo cantidades variables de lisina (0 a 20 mg). La cantidad de la solución de quercetina descrita anteriormente que se añadió a la formulación fue de 3 mL en todos los casos, de modo que la proporción en peso quercetina:zeína fue de 1:11.
La Tabla 8 muestra los resultados de caracterización físico-química obtenidos en cada caso.
Tabla 8
Características físico-químicas de las nanopartículas de zeína con quercetina y cantidades variables de lisina (media ± SD, n = 6). La relación en peso entre la quercetina y la zeína es de 1:11
Relación en peso Potencial Contenido en
Tamaño (nm) PDI quercetina Eficacia de lisina:zeína zeta (mV) encapsulación (%) pg Q/mg NP
0 164 ± 1 0,10 ± 0,02 17,8 ± 0,9 72,4 ± 2,8 82,5 ± 2,7 1:11 167 ± 2 0,06 ± 0,01 -45,1 ± 2,4 74,7 ± 8,2 78,9 ± 8,4 1:5,5 158 ± 1 0,06 ± 0,05 -44,4 ± 1,0 59,7 ± 2,6 64,6 ± 2,7 1:4 164 ± 1 0,04 ± 0,03 - 45,6 ± 0,4 61,6 ± 6,4 66,4 ± 6,9 1:3 181 ± 3 0,05 ± 0,03 -41,9 ± 2,2 58,1 ± 1,9 64,2 ± 6,9
Los resultados obtenidos muestran que, en el caso de la quercetina, cuando se añaden cantidades superiores a 10 mg a la solución de zeína inicial, la eficacia de encapsulación se reduce aproximadamente un 20% con respecto a las formulaciones que contienen cantidades inferiores de lisina, probablemente debido a que dichas cantidades de aminoácido inducen una oxidación parcial del principio activo. Sin embargo, no se encontraron diferencias estadísticas significativas entre las eficacias de encapsulación de las muestras sin lisina y las que contenían unos 5 mg de ésta en la formulación. Así pues, ésta fue la formulación seleccionada para continuar con los estudios de secado.
EJEMPLO 5
Preparación y caracterización de nanopartículas de zeína conteniendo quercetina secadas por spray drying Se disolvieron 602 mg de zeína junto con 51 mg de lisina en 80 mL de etanol al 50% (p/v).
Por otra parte, se disolvieron 250 mg de quercetina en 50 mL de etanol y posteriormente se tomaron 20 mL de esa disolución y se llevaron a un volumen final de 32 mL con agua.
A continuación, se añadieron 20 mL de la solución de quercetina diluida sobre la disolución de zeína y se dejó incubar la mezcla durante 5 minutos. Transcurrido ese tiempo, se añadieron a la mezcla 80 mL de agua bajo agitación magnética y flujo constante.
Finalmente se añadieron 1.209 mg de manitol a la mezcla antes de secarla mediante el empleo del spray dryer. Las condiciones del proceso fueron:
- Temperatura de entrada de aire (Inlet temperature): 90°C
- Temperatura salida del aire (Outlet temperature): 45°C
- Presión de aire (Air Pressure): 6 bar [6x105 Pa]
- Velocidad de bombeo de la muestra (Pumping rate): 4,5 mL/min
- Aspiración : 100%
- Flujo de aire (Air flow): 600 L/h
La Tabla 9 resume las características físico-químicas de la formulación resultante.
Tabla 9
Características físico-químicas de las nanopartículas de zeína con lisina y quercetina (Q) (media ± SD, n = 3), secadas mediante la técnica de spray-drying, empleando manitol como adyuvante del proceso. La relación en peso entre la lisina y la zeína es de 1:11. La relación en peso entre el sacárido (manitol) y la proteína es 2:1
Tamaño Potencial Rendimiento pg PDI Q/ mg (nm) zeta (mV) (% en masa) formulación
412 ± 14 0,10 ± 0,06 -28,9 ± 2,2 50,6 22,2 ± 2,0
La cantidad encapsulada por mg de nanopartículas y la eficacia de encapsulación no se ven modificadas por el secado por aspersión.
La Figura 5 muestra las imágenes obtenidas por microscopía de barrido electrónico de las partículas de zeína conteniendo quercetina.
El mismo estudio fue realizado empleando maltodextrina en lugar de manitol como adyuvante obteniendo eficacias de encapsulación superiores, ya que la maltodextrina actúa además recubriendo las nanopartículas y encapsulando parte de la quercetina que queda fuera de ellas.
Por otra parte, se llevaron a cabo los mismos experimentos aplicando la técnica de altas presiones (150 MPa en un ciclo de 5 minutos, 400 MPa en un ciclo de 5 minutos y 800 MPa en un ciclo de 5 minutos) tras la formación de las partículas, previa a su paso por el spray dryer. Los resultados de encapsulación obtenidos fueron similares a los obtenidos sin dicho tratamiento.
EJEMPLO 6
Preparación y caracterización de nanopartículas de zeína conteniendo ácido fólico Se disolvieron 121 mg de zeína junto con 18 mg de lisina en 14 mL de etanol al 50% (p/v).
Por otra parte, se disolvieron 303 mg de ácido fólico junto con 402 mg de lisina en 50 mL de agua y posteriormente se diluyeron a la mitad con etanol.
A continuación, se añadieron 5 mL de la solución de ácido fólico diluida sobre la disolución de zeína y se dejó incubar la mezcla durante 5 minutos. Transcurrido ese tiempo, se añadieron a la mezcla 0,6 mL de Tween® 80 (polisorbato) y se dejó incubar la mezcla otros 5 minutos. A continuación, se añadieron 15 mL de agua bajo agitación magnética y flujo constante para formar las nanopartículas.
Finalmente se añadieron 253 mg de lactosa a la mezcla antes de secarla mediante el empleo del spray dryer. Las condiciones del proceso fueron:
- Temperatura de entrada de aire (Inlet temperature): 125°C
- Temperatura salida del aire (Outlet temperatura): 90°C
- Presión de aire (Air Pressure): 6 bar [6x105 Pa]
- Velocidad de bombeo de la muestra (Pumping rate): 4,5 mL/min
- Aspiración : 90%
- Flujo de aire (Air flow): 750 L/h
La Tabla 10 resume las características físico-químicas de la formulación resultante.
Tabla 10
Características físico-químicas de las nanopartículas de zeína con lisina y ácido fólico (AF) (media ± SD, n = 3), secadas mediante la técnica de spray-drying, empleando lactosa como adyuvante del proceso. La relación final en peso entre la lisina y la zeína es de 1:3. La relación en peso entre el sacárido (lactosa) y la zeína es 2:1
Tamaño Potencial Contenido en
PDI Eficacia de ácido fólico pg AF/ mg
(nm) zeta (mV) encapsulación (%) formulación
pg AF/ mg NP
369 ± 7 0,32 ± 0,06 -49,0 ± 2,2 56,6 ± 1,5 70,7 ± 1,6 35,4 ± 0,1
AF: ácido fólico; NP: Nanopartícula
Por otra parte, se preparó una nueva formulación de nanopartículas de zeína conteniendo ácido fólico, omitiendo en este caso el paso de adición de tensioactivo. Para ello se disolvieron 1.270 mg de zeína junto con 200 mg de lisina en 140 mL de etanol al 50% (p/v). Además se preparó otra disolución que contenía 121 mg de ácido fólico y 200 mg de lisina en 25 mL de agua, que posteriormente se diluyó a la mitad con etanol.
A continuación, se añadieron 43 mL de la disolución de ácido fólico diluida sobre la disolución de zeína, dejando incubar la mezcla durante 5 minutos. Transcurrido ese tiempo se añadieron 150 mL de agua bajo agitación magnética y flujo constante para obtener las nanopartículas.
Finalmente, se añadieron 2.415 mg de manitol a la mezcla antes de secarla mediante la técnica de spray drying. Las condiciones del proceso fueron:
- Temperatura de entrada de aire (Inlet temperature): 120°C
- Temperatura salida del aire (Outlet temperature): 80°C
- Presión de aire (Air Pressure): 6 bar [6x105 Pa]
- Velocidad de bombeo de la muestra (Pumping rate): 4,5 mL/min
- Aspiración : 90%
- Flujo de aire (Air flow): 750 L/h
La Tabla 11 resume las características fisicoquímicas de la formulación resultante.
Tabla 11
Características físico-químicas de las nanopartículas de zeína con lisina y ácido fólico (AF) (media ± SD, n = 3), secadas mediante la técnica de spray-drying, empleando manitol como adyuvante del proceso. La relación final en peso entre la lisina y la zeína es de 1:3,5. La relación en peso entre el sacárido (manitol) y la zeína es 2:1
Tamaño Potencial Contenido en ácido Eficacia de
PDI fólico encapsulación pg AF/ mg
(nm) zeta (mV) formulación
pg AF/ mg NP (%)
181 ± 1 0,21 ± 0,02 -55,3 ± 2,2 41,5 ± 2,5 50,8 ± 3,0 24,7 ± 1,6
AF: Ácido fólico; NP: Nanopartícula
Las nanopartículas resultantes se resuspenden con facilidad y presentan tamaños inferiores a las obtenidas cuando se emplea el tensioactivo.
EJEMPLO 7
Estudio farmacocinético de ácido fólico encapsulado en nanopartículas de zeína La Tabla 12 resume las características fisico-químicas principales de las nanopartículas ensayadas en el estudio farmacocinético. Dichas nanopartículas fueron obtenidos siguiendo el procedimiento descrito en el segundo apartado del Ejemplo 6 (sin tensioactivo).
Tabla 12
Características físico-químicas de las nanopartículas de zeína con ácido fólico (media ± SD, n = 6) utilizadas en los estudios farmacocinéticos
Tamaño Contenido en Ácido Eficacia de PDI Potencial zeta (mV) Fólico encapsulación (nm) pg AF/ mg NP (%)
193 ± 3 0,16 ± 0,02 -29,1 ± 3,3 53,6 ± 6,5 57,9 ± 6,0
AF: Ácido fólico; NP: Nanopartícula
El estudio farmacocinético se dividió en tres fases. La primera de ellas consistió en administrar por vía intravenosa 1 mg/kg de ácido fólico disuelto en tampón fosfato; la segunda de ellas consistió en administrar a las ratas 1 mL de tampón fosfato (PBS) por vía oral a un grupo de 5 ratas macho Wistar (en este grupo de ratas se estudiaron los niveles basales de la vitamina en el tiempo). Por último, la tercera fase consistió en administrar por vía oral 1 mg/kg de (i) ácido fólico disuelto en agua, (ii) ácido fólico encapsulado en nanopartículas de zeína a grupos de ratas compuestos de 5 animales.
Tras la administración, se procedió a extraer a diferentes tiempos (0, 1, 2, 3, 8 y 24 horas) un volumen de sangre de aproximadamente 500 pL y recogerla en tubos de separación del suero, recuperando posteriormente la volemia del animal con un volumen equivalente de suero salino vía intraperitoneal. El análisis farmacocinético de los datos obtenidos tras la administración de ácido fólico se realizó utilizando el procedimiento de ajuste no compartimental del programa de ajuste farmacocinético WiNNonlin 1.5 (Pharsight Corporation, Mountain View, Estados Unidos).
Los resultados obtenidos (después de restar los niveles basales) quedan recogidos en la Figura 6. Como se puede observar, la administración i.v. del ácido fólico (Figura 6A) muestra un pico de concentración de fármaco en suero en la primera toma de muestra, seguido de una disminución drástica de los niveles en suero. Los perfiles obtenidos cuando se administra la vitamina por vía oral (Figura 6B) son diferentes, ya que los máximos de concentración encontrados, significativamente inferiores, aparecen a tiempos superiores y descienden de forma más gradual. Sin embargo, al comparar los niveles de vitamina encontrados tras la administración oral del ácido fólico en su forma libre (sin encapsular) o encapsulado en nanopartículas de zeína, se encontraron perfiles de concentración en el tiempo similares, pero tanto los valores máximos como las áreas bajo la curva fueron superiores cuando la vitamina se administró encapsulada.
La Tabla 13 recoge los valores de los parámetros farmacocinéticos obtenidos tras realizar un análisis no compartimental de los datos experimentales del presente estudio.
Tabla 13
Parámetros farmacocinéticos de las diferentes formulaciones ensayadas (media ± SD, n = 5)
C max AUC (x 104)
Formulación Tmax (min) MRT (min) F
r
(%)
(ng/mL) (ng x min/mL)
AF no encapsulada 58,8 ± 36,0 191,3 ± 41,0 7,8 ± 1,5 383,8 ± 47,5 36,3 ± 7,2 NP Zeína AF 61,8 ± 9,2 431,5 ± 133,8* 15,2 ± 4,3* 543,3 ± 48,0* 70,8 ± 20,2* AF vía IV --- 4227,1 ± 1651,5** 21,5 ± 2,8** 57,8 ± 15,5** 100**
* p< 0.05 vs. Ácido fólico no encapsulado. Test U de Mann Whitney.
** p< 0.01 vs. Ácido fólico no encapsulado. Test U de Mann Whitney.
AUC : área bajo la curva de concentración en suero
Cmax: concentración máxima
Tmax: tiempo en el cual se alcanza la Cmax
MRT: tiempo de residencia media
Fr: Biodisponibilidad relativa en porcentaje.
AF: Ácido fólico
NP: Nanopartícula
IV: Vía intravenosa
Como se puede observar, los valores de AUC experimentan variaciones significativas en función del tipo de muestra administrada. Cuando la vitamina se encuentra encapsulada en nanopartículas de zeína, los valores de AUC son significativamente superiores a los encontrados tras administrar el ácido fólico libre y además éstos se mantienen en el tiempo hasta las 24 h post administración. Además, se observó que el tiempo medio de residencia (MRT) del ácido fólico en plasma fue también significativamente superior que el obtenido al administrar la vitamina libre.
Según estos resultados, se calculó la biodisponibilidad oral de las nanopartículas de zeína con ácido fólico encapsulado, que fue de un 70%, un 95% superior a los valores obtenidos tras administración del ácido fólico libre por vía oral.
Claims (16)
1. Una nanopartícula que comprende una matriz de zeína y un aminoácido básico.
2. Nanopartícula según la reivindicación 1, en la que dicho aminoácido básico se selecciona del grupo formado por arginina, lisina, histidina, y sus mezclas.
3. Nanopartícula según la reivindicación 1 ó 2, que comprende, además, un compuesto biológicamente activo (CBA).
4. Nanopartícula según la reivindicación 3, en la que dicho compuesto biológicamente activo se selecciona entre un compuesto biológicamente activo liposoluble y un compuesto biológicamente activo hidrosoluble.
5. Nanopartícula según la reivindicación 4, en la que el compuesto biológicamente activo liposoluble se selecciona del grupo formado por
a) un polifenol;
b) una vitamina de la familia de vitaminas A, D, E o K;
c) un precursor o un derivado de una vitamina según b);
d) un fosfolípido;
e) un carotenoide;
f) un ácido graso;
g) un fitoestanol o un fitoesterol;
h) una sal o un éster de cualquiera de los compuestos a)-g) anteriores; y
i) combinaciones de los mismos.
6. Nanopartícula según la reivindicación 4, en la que el compuesto biológicamente activo hidrosoluble se selecciona del grupo formado por:
a) una vitamina de la familia B o C;
b) un derivado de una vitamina según a);
c) un compuesto seleccionado entre el ácido hialurónico, condroitín sulfato y el ácido tióctico; d) una sal o un éster de cualquiera de los compuestos a)-c) anteriores; y
e) combinaciones de los mismos.
7. Un procedimiento para la producción de una nanopartícula que comprende una matriz de zeína y un aminoácido básico que comprende:
a) preparar una solución hidroalcohólica que contiene una zeína y un aminoácido básico; y b) añadir agua a la solución de la etapa a).
8. Un procedimiento para producir una nanopartícula que comprende una matriz de zeína y un aminoácido básico, y un compuesto biológicamente activo liposoluble que comprende:
a) preparar una solución hidroalcohólica (i) que contiene una zeína y un aminoácido básico;
b) preparar una solución alcohólica que comprende un CBA liposoluble y diluirla con agua para obtener una solución hidroalcohólica (ii) que comprende un CBA liposoluble;
c) mezclar dicha solución hidroalcohólica (i) que contiene una zeína y un aminoácido básico con dicha solución hidroalcohólica (ii) que comprende un CBA liposoluble; y
d) añadir agua a la mezcla resultante de la etapa c).
9. Un procedimiento para producir una nanopartícula que comprende una matriz de zeína y un aminoácido básico, y un compuesto biológicamente activo hidrosoluble que comprende:
a) preparar una solución hidroalcohólica (i) que contiene una zeína y un aminoácido básico;
b) preparar una solución acuosa que comprende un CBA hidrosoluble y, opcionalmente, un segundo aminoácido básico, y diluirla con un alcohol para obtener una solución hidroalcohólica (ii) que comprende un CBA hidrosoluble y, opcionalmente, un segundo aminoácido básico;
c) mezclar dicha solución hidroalcohólica (i) que contiene una zeína y un aminoácido básico con dicha solución hidroalcohólica (ii) que comprende un CBA hidrosoluble y, opcionalmente, un segundo aminoácido básico;
d) opcionalmente añadir un tensioactivo a la mezcla resultante de la etapa c); y
e) añadir agua a la mezcla resultante de la etapa c) o de la etapa d).
10. Procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones 10 a 13, que comprende, además:
a) someter la suspensión que contiene las nanopartículas de zeína formadas a, al menos, un ciclo de presión hidrostática, a una presión comprendida entre 100 y 800 MPa;
b) si se desea, desecar la suspensión que contiene las nanopartículas formadas, donde dicha desecación se lleva a cabo opcionalmente en presencia de un agente protector y/o un agente antioxidante.
11. Una nanopartícula obtenida mediante un procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones 7 a 10.
12. Una composición que comprende al menos una nanopartícula según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6 o 11, y un vehículo aceptable en alimentación, farmacia o cosmética.
13. Composición según la reivindicación 12, en la que el tamaño medio de las nanopartículas está comprendido entre 100 y 450 nm, preferentemente alrededor de 200 nm.
14. Composición según cualquiera de las reivindicaciones 12 o 13, que comprende:
- zeína, entre 15% y 45% en peso;
- un aminoácido básico, entre 1% y 4 % en peso;
- quercetina o resveratrol, entre 0,5% y 5% en peso; y
- un sacárido, entre 45% y 80% en peso,
donde todas las proporciones son en peso respecto al total de la composición.
15. Composición según cualquiera de las reivindicaciones 12 o 13, que comprende:
- zeína, entre 15% y 45% en peso;
- un aminoácido básico, entre 4% y 10% en peso;
- opcionalmente, un polisorbato, entre 0,05% y 0,5% en peso;
- ácido fólico, entre 0,5% y 5% en peso;
- un sacárido, entre 45% y 80% en peso; y
donde todas las proporciones son en peso respecto al total de la composición.
16. Un producto alimenticio, que comprende una composición según cualquiera de las reivindicaciones 12 a 15.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
ES201031095 | 2010-07-16 | ||
PCT/ES2011/070518 WO2012007628A1 (es) | 2010-07-16 | 2011-07-15 | Nanopartículas para encapsulación de compuestos, su obtención y usos |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
ES2724176T3 true ES2724176T3 (es) | 2019-09-06 |
Family
ID=44764176
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
ES11767022T Active ES2724176T3 (es) | 2010-07-16 | 2011-07-15 | Nanopartículas para encapsulación de compuestos, su obtención y usos |
Country Status (14)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US9381252B2 (es) |
EP (1) | EP2594140B1 (es) |
JP (1) | JP6046615B2 (es) |
KR (1) | KR101933024B1 (es) |
CN (1) | CN103037707B (es) |
AU (1) | AU2011278186B2 (es) |
BR (1) | BR112013000675B1 (es) |
CA (1) | CA2805581C (es) |
DK (1) | DK2594140T3 (es) |
ES (1) | ES2724176T3 (es) |
MX (1) | MX338891B (es) |
PL (1) | PL2594140T3 (es) |
PT (1) | PT2594140T (es) |
WO (1) | WO2012007628A1 (es) |
Families Citing this family (22)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP2625966A1 (en) * | 2012-02-13 | 2013-08-14 | Bionanoplus, S.L. | Nanoparticles comprising a vegetable hydrophobic protein and a water miscible non-volatile organic solvent and uses thereof |
JP6235779B2 (ja) * | 2012-03-28 | 2017-11-22 | 株式会社コーセー | 葉酸含有組成物及び葉酸の安定化方法 |
KR101362800B1 (ko) * | 2012-10-16 | 2014-02-14 | 한국식품연구원 | 피토스테롤이 함유된 프롤라민-양이온 폴리머 복합체 및 이의 제조방법 |
GB201312245D0 (en) * | 2013-07-08 | 2013-08-21 | Gorman Eddie O | An extrusion process |
EP2856987A1 (en) | 2013-10-07 | 2015-04-08 | Absorbest AB | A wound dressing and a method for manufacturing a wound dressing |
WO2016025394A2 (en) | 2014-08-11 | 2016-02-18 | Board Of Supervisors Of Louisiana State University And Agriculatural And Mechanical College | Delivery of bioactive, nanoencapsulated antioxidants |
MX2017013557A (es) | 2015-04-22 | 2018-02-26 | Basf Se | Nanoparticulas, nanoemulsiones y su formacion con micronizacion en camara de mezcla. |
CN108308615A (zh) * | 2018-01-12 | 2018-07-24 | 齐齐哈尔大学 | 一种玉米肽为载体的叶黄素纳米粒的制备方法 |
CN108576501B (zh) * | 2018-01-18 | 2021-07-02 | 广东药科大学 | 一种植物多酚类功能饮料的制备方法 |
EP3581176A1 (en) | 2018-06-12 | 2019-12-18 | Universidad de Navarra | Core-shell zein nanoparticles for the encapsulation of compounds, process for their preparation and uses thereof |
CN112535212A (zh) * | 2019-09-20 | 2021-03-23 | 内蒙古伊利实业集团股份有限公司 | 儿茶素原料的预处理方法以及包含儿茶素的果汁牛奶 |
CN111893584B (zh) * | 2020-06-16 | 2021-06-22 | 杭州千芝雅卫生用品有限公司 | 耐水性环保纤维滤材及其制备方法 |
CN112370419A (zh) * | 2020-10-16 | 2021-02-19 | 江苏大学 | 一种醇溶性蛋白、氨基酸或/和多糖协同稳定的Pickering乳液凝胶的制备方法 |
WO2022136393A1 (en) | 2020-12-23 | 2022-06-30 | Universidad De Navarra | Zein nanoparticles for use in hyperglycemic conditions |
CN113244193A (zh) * | 2021-04-26 | 2021-08-13 | 南京大学 | 用于递送甾醇及其衍生物的蛋白纳米粒的制法与应用 |
CN114129538B (zh) * | 2021-10-26 | 2022-12-09 | 浙江科技学院 | 一种负载藏红花素玉米醇溶蛋白纳米颗粒的制备方法及应用 |
WO2023086572A2 (en) * | 2021-11-12 | 2023-05-19 | Tolan Naomie Lucas | Combinations of nanoparticle-encapsulated cargo entities and methods for making and using same |
WO2023154838A2 (en) * | 2022-02-11 | 2023-08-17 | Arizona Board Of Regents On Behalf Of Arizona State University | Antimicrobial materials and nanoparticles and methods of use thereof |
US11559495B1 (en) * | 2022-03-07 | 2023-01-24 | King Abdulaziz University | Icariin nano-pharmaceutical formulation |
CN114796155B (zh) * | 2022-03-31 | 2023-06-27 | 诺丁汉大学卓越灯塔计划(宁波)创新研究院 | 天然活性物质-玉米蛋白纳米颗粒及其制备方法和用途 |
CN116172115B (zh) * | 2022-12-05 | 2024-05-14 | 西北农林科技大学 | 通过添加L-Lys改善高剂量EGCG对肉蛋白凝胶特性损伤的方法 |
CN116333079B (zh) * | 2023-03-07 | 2023-09-15 | 中国农业科学院农产品加工研究所 | 一种用叶酸修饰的玉米醇溶蛋白及其制备方法和应用 |
Family Cites Families (18)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP0550436A1 (en) * | 1989-11-06 | 1993-07-14 | Alkermes Controlled Therapeutics, Inc. | Protein microspheres and methods of using them |
JP3790567B2 (ja) * | 1994-09-30 | 2006-06-28 | 武田薬品工業株式会社 | 徐放剤 |
FR2824756B1 (fr) | 2001-05-16 | 2005-07-08 | Mainelab | Microcapsules a base de proteines vegetales |
US20040086595A1 (en) | 2002-10-31 | 2004-05-06 | Jingping Liu | Plasticized prolamine compositions |
CN1717180A (zh) * | 2002-11-29 | 2006-01-04 | 服洛因得产业股份有限公司 | 水性虫胶包膜材料、其制造方法、使用该包膜材料的包膜食品、其制造方法、包膜医药品、其制造方法、油性糖果的着色用组合物、着色方法、及着色油性糖果 |
JP2004269384A (ja) * | 2003-03-06 | 2004-09-30 | Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd | 吸水性アミノ酸被覆顆粒 |
CN1476825A (zh) * | 2003-07-04 | 2004-02-25 | 中国科学院上海有机化学研究所 | 谷物类醇溶蛋白微球和制备方法 |
CA2548992A1 (en) | 2003-12-11 | 2005-08-11 | Vaxdesign Corporation | Immunotherapy compositions, method of making and method of use thereof |
CN1562373A (zh) * | 2004-03-25 | 2005-01-12 | 上海交通大学 | 植物源性醇溶蛋白微球固体剂型的制备方法 |
MX2008003213A (es) | 2005-09-09 | 2008-03-18 | Kellog Co | Acidos grasos omega-3 encapsulados en recubrimientos de zeina y productos alimenticios que los incorporan. |
ES2564241T3 (es) * | 2005-12-02 | 2016-03-21 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Nanopartículas para su uso en composiciones inmunogénicas |
US20080305096A1 (en) | 2007-06-07 | 2008-12-11 | Unicity International, Inc. | Method and composition for providing controlled delivery of biologically active substances |
TWI437962B (zh) * | 2007-06-19 | 2014-05-21 | Dsm Ip Assets Bv | 微包封組成物、其製造方法、使用方法及其產物 |
CN201092514Y (zh) | 2007-06-25 | 2008-07-30 | 上海港机重工有限公司 | 双起升式集装箱起重机运行小车的吊具上架限位装置 |
CN100540608C (zh) * | 2007-07-20 | 2009-09-16 | 浙江大学 | 谷类蛋白质/纳米粒子原位复合材料及其制备方法 |
EP2214747A2 (en) | 2007-11-20 | 2010-08-11 | Cook Incorporated | Controlled drug delivery using a zein layer modified with levulinic acid |
CN101485629B (zh) | 2008-01-16 | 2013-01-23 | 沈阳药科大学 | 一种给药系统及其制备方法 |
KR101616771B1 (ko) * | 2008-05-09 | 2016-04-29 | 사우스다코타주립대학 | 비면역원성의 소수성 단백질 나노입자의 형성방법 및 그 용도 |
-
2011
- 2011-07-15 CN CN201180035074.3A patent/CN103037707B/zh active Active
- 2011-07-15 PT PT11767022T patent/PT2594140T/pt unknown
- 2011-07-15 EP EP11767022.4A patent/EP2594140B1/en active Active
- 2011-07-15 ES ES11767022T patent/ES2724176T3/es active Active
- 2011-07-15 AU AU2011278186A patent/AU2011278186B2/en active Active
- 2011-07-15 WO PCT/ES2011/070518 patent/WO2012007628A1/es active Application Filing
- 2011-07-15 US US13/809,089 patent/US9381252B2/en active Active
- 2011-07-15 BR BR112013000675-7A patent/BR112013000675B1/pt active IP Right Grant
- 2011-07-15 DK DK11767022.4T patent/DK2594140T3/da active
- 2011-07-15 PL PL11767022T patent/PL2594140T3/pl unknown
- 2011-07-15 JP JP2013519119A patent/JP6046615B2/ja active Active
- 2011-07-15 KR KR1020137003896A patent/KR101933024B1/ko active IP Right Grant
- 2011-07-15 CA CA2805581A patent/CA2805581C/en active Active
- 2011-07-15 MX MX2013000636A patent/MX338891B/es active IP Right Grant
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
BR112013000675A2 (pt) | 2016-05-31 |
CN103037707A (zh) | 2013-04-10 |
JP6046615B2 (ja) | 2016-12-21 |
MX2013000636A (es) | 2013-05-31 |
EP2594140B1 (en) | 2019-03-20 |
KR101933024B1 (ko) | 2018-12-27 |
KR20130045358A (ko) | 2013-05-03 |
CN103037707B (zh) | 2016-08-31 |
AU2011278186B2 (en) | 2015-02-05 |
DK2594140T3 (da) | 2019-06-03 |
US9381252B2 (en) | 2016-07-05 |
BR112013000675B1 (pt) | 2021-07-20 |
US20130116261A1 (en) | 2013-05-09 |
PL2594140T3 (pl) | 2019-09-30 |
AU2011278186A1 (en) | 2013-01-31 |
MX338891B (es) | 2016-05-04 |
PT2594140T (pt) | 2019-06-11 |
CA2805581A1 (en) | 2012-01-19 |
JP2013532630A (ja) | 2013-08-19 |
CA2805581C (en) | 2018-10-02 |
WO2012007628A1 (es) | 2012-01-19 |
EP2594140A1 (en) | 2013-05-22 |
RU2013106946A (ru) | 2014-08-27 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
ES2724176T3 (es) | Nanopartículas para encapsulación de compuestos, su obtención y usos | |
ES2594929T3 (es) | Nanopartículas para encapsulación de compuestos, su preparación y usos | |
Shin et al. | Recent developments in nanoformulations of lipophilic functional foods | |
CN106659230B (zh) | 疏水性生物活性化合物的包封 | |
Peñalva et al. | Zein nanoparticles for oral folic acid delivery | |
Gumus et al. | Lutein-enriched emulsion-based delivery systems: Impact of Maillard conjugation on physicochemical stability and gastrointestinal fate | |
Lamsen et al. | Encapsulation of vitamin D3 in gum arabic to enhance bioavailability and stability for beverage applications | |
WO2019025880A1 (es) | Nanoparticulas oleosas de cannabis microencapsuladas en polvo | |
US20220175678A1 (en) | Formulations for encapsulation and bioavailability improvement of bioactive compounds based on natural plant based materials | |
RU2575745C2 (ru) | Наночастица (варианты), способ получения наночастицы (варианты), композиция и пищевой продукт | |
Peñalva | Protein nanoparticles for oral delivery of bioactives | |
WO2020234809A1 (es) | Nanoencapsulados de cannabinoides y proceso para su elaboración | |
WO2023135583A1 (en) | Vitamin nanoclusters as therapeutic and nutraceutic agents and carriers | |
Mohammadi1ǂ et al. | Encapsulation of vitamins using nanoliposome: recent advances and | |
Mohammadi et al. | Encapsulation of vitamins using nanoliposome: recent advances and |