ES2709480T3 - Análogos de cortistatina y síntesis y usos de los mismos - Google Patents

Abstract

Un compuesto de Fórmula:**Fórmula** o una sal farmacéuticamente aceptable o una sal de amina cuaternaria del mismo; en donde: m es 0, 1, 2, 3 o 4; R1 y R2 se unen para formar un anillo de fórmula:**Fórmula** n es 0, 1, 2, 3 o 4; cada instancia de R6A es independientemente halógeno, -NO2, -CN, -OR6C, SR6C, N(R6C)2, -C(=O)R6C, - C(=O)OR6C, -C(=O)N(R6C))2, alquilo opcionalmente sustituido, alquenilo opcionalmente sustituido, alquinilo opcionalmente sustituido, carbociclilo opcionalmente sustituido, heterociclilo opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido, o heteroarilo opcionalmente sustituido; en donde cada caso de R6C es independientemente hidrógeno, alquilo opcionalmente sustituido, alquenilo opcionalmente sustituido, alquinilo opcionalmente sustituido, carbociclilo opcionalmente sustituido, heterociclilo opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido, heteroarilo opcionalmente sustituido, un grupo protector de oxígeno cuando está unido a oxígeno, un grupo protector de azufre cuando se une a azufre, o un grupo protector de nitrógeno cuando se une a nitrógeno, opcionalmente cuando se une a N, los dos grupos R6C se pueden unir para formar un heterociclilo opcionalmente sustituido o un anillo de heteroarilo opcionalmente sustituido; G es -O-, -S-, -NH-, -NR7-, -CH2-, -CH(R7)-, o -C(R7)2-; cada instancia de R7 es independientemente amino, hidroxilo, halógeno, alquilo opcionalmente sustituido, alquenilo opcionalmente sustituido, alquinilo opcionalmente sustituido, carbociclilo opcionalmente sustituido, heterociclilo opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido, heteroarilo opcionalmente sustituido, amino sustituido, amino sustituido, hidroxilo, tiol, tiol sustituido, carbonilo, sulfonilo, sulfinilo o un grupo protector de nitrógeno cuando está unido a un átomo de nitrógeno; y opcionalmente, en donde dos grupos R7 se unen para formar un carbociclilo opcionalmente sustituido, un heterociclilo opcionalmente sustituido, un arilo opcionalmente sustituido o un anillo heteroarilo opcionalmente sustituido, o un grupo oxo (=O).

Description

DESCRIPCION

Analogos de cortistatina y smtesis y usos de los mismos

Antecedentes

[0001] Las cortistatinas son un grupo de alcaloides esteroideos anti-angiogenicos aislados por primera vez en 2006 de la esponja marina Corticium simplex. Ver, por ejemplo, Aoki, et al., JACS (2006) 128: 3148-9. Desde la fecha de aislamiento hasta el presente, estos productos naturales han sido objeto de mucho estudio, especialmente en el desarrollo de smtesis totales y de nuevos analogos biologicamente activos y no naturales. Ver, por ejemplo, Aoki et al., Bioorganic & Medicinal chemistry (2007) 15: 6758-62. Mousseau et al., Cell Host & Microbe (2012) 12: 97-108; Chen et al., Organic & Biomolecular Chemistry (2010) 8: 2900; Hardin et al., European Journal of Organic Chemistry (2010) 19: 3553. Por lo tanto, existe un interes activo en el desarrollo de nuevos analogos de cortistatina y metodos para su preparacion. El documento WO2010/024930 describe la preparacion y el uso de analogos de cortistatina para el tratamiento de enfermedades proliferativas.

Sumario de la invencion

[0002] La presente invencion proporciona nuevos analogos de cortistatina como se define en las reivindicaciones adjuntas. En este documento se proporcionan nuevos analogos de cortistatina de Formula (A), (B) y (C), y sales farmaceuticamente aceptables, sales de aminas cuaternarias y N-oxidos de los mismos, sintetizados, en parte, por aminacion reductiva de una cetona de Formula (B) para proporcionar el producto aminado de Formula (A), como se muestra en el Esquema 1, opcionalmente a traves de un intermedio de imina de Formula (C).

[0003] Ademas, se proporcionan nuevos analogos de cortistatina preparados por reduccion de la cetona de Formula (B) para proporcionar un compuesto hidroxilo C3 de Formula (D). Todavfa mas se proporciona un compuesto de Formula (E), preparado por sustitucion del compuesto de Formula (D). Dichos compuestos tambien pueden convertirse en un compuesto de Formula (A) tras el tratamiento con una amina en condiciones adecuadas.

[0004] Se ha encontrado sorprendentemente que se ha encontrado que los isomeros beta de Formula (A), denominados Formula (A-1) son equipotentes, o mas potentes, que la cortistatina A para inhibir la actividad de la quinasa CDK8 y la proliferacion de celulas de AML, y tambien se ha encontrado que los correspondientes isomeros alfa de Formula (A), referidos como Formula (A-2), tambien son muy potentes. Ademas, se ha descubierto que los compuestos de Formula (B) se han mostrado activos contra el crecimiento de las lmeas celulares de AML en cultivo y la actividad de la quinasa CDK8 en las celulas.05*

[0005] Ademas, se proporcionan composiciones farmaceuticas que comprenden analogos de cortistatina de Formula (A), (B), (C), (D) o (E) o una sal farmaceuticamente aceptable, sal de amina cuaternaria o N-oxido del mismo y un excipiente farmaceuticamente aceptable como se define en las reivindicaciones adjuntas. Tambien se describen metodos de uso y tratamiento.

[0006] Tambien se describe un metodo para preparar un compuesto de Formula (A), o una sal farmaceuticamente aceptable, sal de amina cuaternaria o N-oxido del mismo; comprendiendo el metodo la puesta en contacto de un compuesto de Formula (B), o una sal farmaceuticamente aceptable, siempre que RB1 y RB2 no se unan para formar un grupo oxo con una amina de formula HNR1R2, o una sal de la misma, en condiciones de aminacion reductora.

[0007] Tambien se describe un metodo para preparar un compuesto de Formula (D), o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo; el metodo comprende poner en contacto un compuesto de Formula (B), o una sal farmaceuticamente aceptable, con un agente reductor, para proporcionar un compuesto de Formula (D).

[0008] Tambien se describe un metodo para preparar un compuesto de Formula (E), o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo; comprendiendo el metodo la puesta en contacto de un compuesto de Formula (D), o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, con un compuesto de formula RO-LG, en donde LG es un grupo saliente, para proporcionar un compuesto de Formula (E).

[0009] Tambien se describe un metodo para preparar un compuesto de Formula (A), o una sal farmaceuticamente aceptable, sal de amina cuaternaria o N-oxido del mismo; el metodo comprende poner en contacto un compuesto de Formula (E), es C(=O)RA, o una de sus sales farmaceuticamente aceptables, con un compuesto de formula NHR1R2, para proporcionar un compuesto de Formula (A).

[0010] En otro aspecto, se proporcionan composiciones farmaceuticas que comprenden un compuesto de Formula (A), (B), (C), (D) o (E), o una sal farmaceuticamente aceptable, amina cuaternaria o N-oxido de la misma como se define en las reivindicaciones adjuntas.

[0011] En otro aspecto, se proporciona un compuesto para uso en un metodo para tratar una afeccion asociada con angiogenesis que comprende administrar a un sujeto que lo necesite un compuesto de Formula (A), (B), (C), (D), o (E), o una sal farmaceuticamente aceptable, amina cuaternaria o N-oxido de los mismos, o una composicion farmaceutica de los mismos, como se define en las reivindicaciones adjuntas. En ciertas realizaciones, la condicion es una condicion diabetica, una condicion inflamatoria, degeneracion macular, obesidad, aterosclerosis o un trastorno proliferativo.012

[0012] En otro aspecto adicional, se proporciona un compuesto para uso en un metodo para tratar una afeccion asociada con CDK8 y/o actividad quinasa CDK19, que comprende administrar a un sujeto que lo necesite un compuesto de Formula (A), (B), (C), (D), o (E), o una sal farmaceuticamente aceptable, amina cuaternaria o N-oxido de los mismos, o una composicion farmaceutica de los mismos. En ciertas realizaciones, la afeccion es un trastorno proliferativo. En ciertas realizaciones, el trastorno proliferativo es el cancer. En ciertas realizaciones, el cancer es un cancer hematopoyetico. En ciertas realizaciones, el cancer hematopoyetico es un linfoma. En ciertas realizaciones, el cancer hematopoyetico es leucemia. En ciertas realizaciones, el cancer hematopoyetico es mieloma multiple. En ciertas realizaciones, la leucemia es leucemia mielodtica aguda (AML). En ciertas realizaciones, el trastorno proliferativo es una neoplasia mieloproliferativa.

En ciertas realizaciones, la neoplasia mieloproliferativa es mielofibrosis primaria (PMF). En ciertas realizaciones, el cancer es un tumor solido.

[0013] Tambien se describe un metodo para inhibir la actividad de quinasa CDK8 y/o CDK19 en una celula que comprende poner en contacto un compuesto de Formula (A), (B), (C), (D) o (E), o un producto farmaceutico. Sal aceptable, amina cuaternaria, o N-oxido de los mismos, o una composicion farmaceutica de los mismos, con la celula.

[0014] Tambien se describe un metodo para modular la ruta de la p-catenina en una celula que comprende poner en contacto un compuesto de Formula (A), (B), (C), (D) o (E), o una sal farmaceuticamente aceptable, amina cuernaria, o N-oxido de los mismos, o una composicion farmaceutica de los mismos, con la celula.

[0015] Tambien se describe un metodo para modular la actividad de STAT1 en una celula que comprende poner en contacto un compuesto de Formula (A), (B), (C), (D) o (E), o una sal farmaceuticamente aceptable, amina cuaternaria, o N-oxido de los mismos, o una composicion farmaceutica de los mismos, con la celula.

[0016] Tambien se describe un metodo para modular la ruta de TGF p/BMP en una celula que comprende poner en contacto un compuesto de Formula (A), (B), (C), (D) o (E), o un producto farmaceuticamente aceptable. Sal, amina cuaternaria o N-oxido de los mismos, o una composicion farmaceutica de los mismos, con la celula.

[0017] Tambien se describe un metodo para modular la actividad de HIF-1-A (HIF-1-alfa) en una celula que comprende poner en contacto un compuesto de Formula (A), (B), (C), (D), o (E), o una sal farmaceuticamente aceptable, amina cuaternaria o N-oxido de los mismos, o una composicion farmaceutica de los mismos, con la celula.

[0018] Tambien se describe un metodo para aumentar la expresion de BIM para inducir la apoptosis en una celula que comprende poner en contacto un compuesto de Formula (A), (B), (C), (D) o (E), o una sal farmaceuticamente aceptable., amina cuaternaria, o N-oxido de los mismos, o una composicion farmaceutica de los mismos, con la celula.

[0019] En cualquiera de los metodos citados anteriormente, el metodo es un metodo in vitro o un metodo in vivo.

[0020] Tambien se divulgan los mutantes puntuales CDK8 o CDK19 TpR105, y los metodos de uso de los mismos. Por ejemplo, tambien se describe un metodo para validar la actividad de CDK8 y/o CDK19 quinasa en una celula mediante el contacto de un punto mutante CDK8 o CDK19 Trp105 y una cortistatina o analogo de cortistatina. Tambien se describe un mutante puntual CDK8 Trp105. En ciertas realizaciones, el mutante puntual CDK8 Trp105 tiene una secuencia de aminoacidos que tiene un grado de homologfa con la secuencia de aminoacidos de la SEQ ID NO: 1 de al menos aproximadamente el 80%. Tambien se describe una protema que tiene un grado de homologfa con la secuencia de aminoacidos de la SEQ ID NO: 1 de al menos aproximadamente el 80%. En otro aspecto adicional, se proporciona un mutante puntual CDK19 Trp105. En ciertas realizaciones, el mutante puntual CDK19 Trp105 tiene una secuencia de aminoacidos que tiene un grado de homologfa con la secuencia de aminoacidos de la SEQ ID NO: 2 de al menos aproximadamente el 80%. Tambien se describe una protema que tiene un grado de homologfa con la secuencia de aminoacidos de la SEQ ID NO: 2 de al menos aproximadamente el 80%.

[0021] Los detalles de una o mas realizaciones de la invencion se exponen en las Figuras adjuntas. Otras caractensticas, objetos y ventajas de la invencion seran evidentes a partir de la Descripcion Detallada, los Ejemplos y las reivindicaciones.

Breve descripcion de los dibujos

[0022]

La Figura 1 muestra la estructura de la cortistatina A y otras cortistatinas conocidas.

Las Figuras 2A-2B representan una aminacion reductiva ejemplar de la cetona 13 para proporcionar los compuestos 14A y 14B, y sus correspondientes N-oxidos (Figura 2A) y la estructura molecular del compuesto 14B, en donde la dimetilamina es beta (axial) (Figura 2B).

Las Figuras 3A-3M representan compuestos ejemplares de la presente invencion, asf como algunos compuestos de referencia. Los compuestos adicionales se describen adicionalmente en el presente documento.

Las Figuras 4A-4B representan la inhibicion dependiente de la dosis de la proliferacion de las lmeas celulares de AML MV4; 11 (4A) y MOLM-14 (4B) en un tratamiento de 7 dfas con cortistatina A y los analogos indicados. Las celulas se pasaron y los compuestos frescos se agregaron el dfa 3 (media /- error estandar, n = 3).

Las Figuras 5A-5B representan la inhibicion dependiente de la dosis de la proliferacion de la lmea celular de AML MV4; 11 en el tratamiento de 3 dfas o 10 dfas con los analogos de cortistatina indicados. Las celulas se pasaron y los compuestos frescos se agregaron en los dfas 3 y 7 (media /- error estandar, n = 3).

Las Figuras 6A-6b representan la inhibicion dependiente de la dosis de la proliferacion de la lmea celular MOLM-14 de la AML tras un tratamiento de 3 dfas o 10 dfas con los analogos de cortistatina indicados. Las celulas se pasaron y los compuestos frescos se agregaron los dfas 3 y 7 (media /- error estandar, n = 3).

La Figura 7 demuestra que la cortistatina A inhibe de forma potente y selectiva la actividad de la quinasa del modulo CDK8 en las celulas. Se ha informado que CDK8 inhibe la fosforilacion estimulada con interferon gamma de STAT1 S727. Ver, por ejemplo, Bancerek et al., Immunity (2013) 38: 250-262. Las celulas HepG2 se incubaron con cortistatina A durante 1 hora, seguido de la adicion de interferon-gamma recombinante humano (IFN-y) durante 1 hora. Las celulas se lisaron y se sondaron por transferencia Western. Como se muestra, la cortistatina A inhibio potentemente el aumento estimulado por IFN-^y en STAT1 pS727 sin alterar los niveles de STAT1 pY701 o STAT1 total y Actina.

Las Figuras 8A-8C demuestran que la cortistatina A inhibe la proliferacion de lmeas celulares humanas derivadas de pacientes con una variedad de neoplasias malignas hematologicas y con diversos conductores oncogenicos. Las neoplasias malignas hematologicas representadas por estas lmeas celulares son: AML, incluidas las derivadas de pacientes con neoplasmas mieloproliferativos (MPN, UKE-1 y SET-2), T-ALL, B-ALL, CML y MM. Los controladores oncogenicos incluyen fusiones MLL con duplicaciones internas en tandem FLT3 (FLT3-ITD) (MOLM-14 y MV4; 11) y sin FLT3-ITD (RS4; 11), JAK2V617F y BCR-ABL. Tambien se muestran las lmeas celulares que expresan JAK2V617F que se han sometido a un tratamiento prolongado con el inhibidor de JAK1/2 ruxolitinib (SET-2per, UKE-1per) como se describio anteriormente. Ver, por ejemplo, Koppikar et al., Nature (2012) 489: 155-159. Como se muestra, la cortistatina A tambien inhibe la proliferacion de estas celulas que persisten en presencia de ruxolitinib. Las celulas se pasaron y se agrego cortistatina A fresca en los dfas 3 y 7 (media /- error estandar, n = 3).

La Figura 9 representa la inhibicion dependiente de la dosis de la proliferacion de la lmea celular MM.1S de mieloma multiple tras un tratamiento de 10 dfas con los analogos de cortistatina indicados. Las celulas se pasaron y los compuestos frescos se agregaron los dfas 3 y 7 (media /- error estandar, n = 3).

Las Figuras 10A-10C demuestran que CDK8/CDK19 median los efectos antiproliferativos de la cortistatina A al mostrar que los alelos de CDK8 y CDK19 hacen que las celulas sean resistentes a la inhibicion del crecimiento por la cortistatina A (Figura 10A) y resistentes a la inhibicion de la quinasa CDK8 por la cortistatina A in vitro (Figura 10B) y en las celulas (Figura 10C).

Las Figuras 11A-11B representan resultados farmacocineticos para la cortistatina A. Figura 11A: A la cortistatina A se le administro IP en una solucion salina tamponada con DMSO/fosfato al 10% a un pH 6 y a 10 mg/kg a ratones CD-1 macho y se tomaron muestras de plasma de sangre en serie y se analizaron para la presencia de cortistatina A. Como se indico, la Cmax fue de 1,4 microM a 1 hora y el T1/2 calculado fue de 6,06 horas. Basandose en este estudio de PK y la potencia in vitro de la cortistatina A, se predice que la cortistatina A puede mantener una dosis eficaz en ratones con al menos 0,16 mg/kg una vez al dfa de tratamiento. Figura 11B: ratones CD-1 machos a los que se administro una inyeccion IP unica de 1 mg/kg de cortistatina A en 20% de hidroxipropilo-beta-ciclodextrina (HPCD). La Cmax fue de 762 nM a los 30 minutos y la T1/2 calculada entre 0,5-2 h fue de 33 minutos.

Figuras 12A-12G demuestran que la cortistatina A es efectiva en el modelo de raton de leucemia diseminada MV4; 11 de AML. MV4; 11 celulas de AML que expresan mCherry, luciferasa y el gen de resistencia a la puromicina se inyectaron en la cola de ratones inmunodeprimidos NOD-SCID-IL2RcYnull (NSG). Despues de 7 dfas, se documento el injerto mediante imagenes de bioluminiscencia y los ratones se trataron con vehmulo (20% de 2-hidroxipropilo p-ciclodextrina), 0,05 y 0,16 mg/kg una vez al dfa durante 15 dfas. Se indica el tiempo despues del primer tratamiento. La Figura 12A muestra imagenes bioluminiscentes del raton con la bioluminiscencia media para cada punto de tiempo, lo que indica una menor carga de la enfermedad con el tiempo. La Figura 12B muestra la bioluminiscencia media s.e.m., n=11, P <0,0001, determinada por ANOVA de dos vfas. La Figura 12C muestra el analisis de supervivencia de Kaplan-Meier (n = 8, P <0.0001, prueba de logrank). Las Figuras 12D-12F representan el peso del bazo del dfa 30 (D) y el porcentaje de MV4;11 celulas (mCherry-positivo) en el bazo (E) y la medula osea del femur (F) se muestran para el raton en cada grupo con la bioluminiscencia mas alta, baja y media del dfa 29. *, P <0,05, **, P<0,01, ***, P<0,001, determinado por vehmulo ANOVA de una via versus tratamiento. Las lmeas de puntos en la Figura 12D marcan el rango dentro de 1 desviacion estandar de la media para ratones NSG hembra sanos de 8 semanas de edad. La Figura 12G muestra que el peso corporal medio no disminuyo con el tratamiento con cortistatina A, lo que sugiere que el tratamiento con cortistatina A es tolerado. Peso corporal medio s.e.m., n=11.

Las Figuras 13A-13B demuestran que la cortistatina A es tolerada en ratones CD-1 sanos. Los ratones CD-1 se trataron con el mismo regimen de dosificacion que en la Figura 12 (una vez al dfa durante 15 dfas) y se realizaron el peso corporal y el hemograma completo (CBC). Figura 13A, Peso corporal medio s.e.m., n=3. Figura 13B, datos de CBC recopilados 2 horas despues de la ultima dosis en el dfa 15. El analisis de CBC indica que no hay diferencias significativas entre el vehmulo y 0,16 mg kg'1. RBC, globulos rojos (x106 celulas/pl); HGB, hemoglobina (g/dl); HCT, hematocrito (%); MCV, volumen del corpusculo medio (fl); MCH, hemoglobina del corpusculo medio (pg); MCHC, hemoglobina media del corpusculo (g/dl); PLT, plaquetas (x105 plaquetas/pl); WBC, globulos blancos (x103 celulas/pl); LYMPH, linfocitos (x103 celulas/pl).

Las Figuras 14A-14C demuestran que la cortistatina A es prometedora como terapeutica en el tratamiento de la mielofibrosis primaria (PMF). Los resultados son de un estudio piloto en un modelo murino de PMF. En este modelo, la sobreexpresion de MPLW515L en celulas madre hematopoyeticas produce mieloproliferacion in vivo, con marcada fibrosis de la medula osea, esplenomegalia y proliferacion de megacariocitos (ver, por ejemplo, Pikman et al., PLoS Med. (2006) 3:e270). En este modelo, los ratones fueron transplantados con medula osea transducida con MPLW515L. Despues de 14 dfas para permitir el injerto y el desarrollo de graves MPN (incluida la trombocitosis, la leucocitosis y la mielofibrosis), los ratones se asignaron al azar para recibir el vehmulo o la cortistatina A ip una vez al dfa. El sacrificio de 3 ratones por grupo despues de 6 dosis diarias de cortistatina A muestra una reduccion significativa de los pesos del bazo a 0,31 mg/kg y 0,62 mg/kg (A). La reduccion macroscopica de la esplenomegalia se muestra en (C). El analisis de los recuentos sangumeos despues de 4 dosis de tratamiento diario muestra una reduccion significativa de la carga alelica reflejada por el porcentaje de GFP en sangre periferica (el mutante MPLW515L se expresa utilizando un retrovirus MSCV-lRES-GFP) (B). Las Figuras 15A-15E demuestran que la cortistatina A puede modular las rutas de Wnt/beta-catenina (A, B) y TGF-beta (C) y puede inducir la expresion de BCL²L II (D y E) en las celulas. La Figura 15A indica que la cortistatina A inhibe la expresion del gen informador estimulado por la via Wnt/bet a-catenina. Las celulas HEK-293 se transfectaron de manera estable con un indicador de luciferasa bajo el control de varios sitios de union a TCF (denominado SuperTOPflash) (Ver, por ejemplo, Xu, et al., Cell 2004, 116, 883-895). Despues de 24 horas de tratamiento con Wnt3A o con inhibidor de GSK3p 10 pM, azakenpaulona para estimular la via Wnt/betacatenina, la cortistatina A inhibio la expresion de luciferasa segun lo medido por luminiscencia (CI⁵⁰ = 1,5 nM, sin afectar la viabilidad de las celulas HEK-293. Barras verticales = SEM, n=3. La Figura 15B indica que la cortistatina A inhibe los genes de respuesta Wnt/beta-catenina putativos en la lmea celular AML MV4; 11. Las celulas MV4;11 se trataron con cortistatina A durante 24 horas y el analisis de la expresion genica y el enriquecimiento del conjunto de genes y se realizo un analisis (GSEA). La GSEA revelo que la cortistatina A regulaba a la baja un conjunto de genes regulados al alza mediante la inhibicion de GSK3-beta. Dado que la inhibicion de GSK3-beta puede estimular la transcripcion dirigida por beta-catenina, estos genes representan una supuesta via Wnt/beta-catenina. Figura 15C indica que la cortistatina A (CA) inhibe de manera dependiente de la dosis la estimulacion de SMAD2/3 estimulada por TGF-beta. Las celulas HaCat se trataron con vehmulo o CA durante 1 hora, seguido de TGF-beta durante 1 hora. Luego se lavaron, se lisaron y se analizaron mediante transferencia Western. La Figura 15D y E indican que la cortistatina A aumenta la dosis de ARNm de BCL²L¹¹ en un tratamiento de 24 horas con celulas MV4;11 y MOLM-14.

Las Figuras 16A-16D representan la union de cortistatina A al sitio de union CDK8/ciclina C ATP. La Figura 16A representa la estructura cristalina de rayos X del complejo ternario de cortistatina A/CDK8/ciclina C a una resolucion de 2,4 Angstrom. La Figura 16B muestra el bolsillo de union que muestra la complementariedad de la forma equisitica. La Figura 16C muestra los residuos de contacto clave entre CDK8 y cortistatina A. La lmea de puntos indica un enlace H entre la isoquinolina N de cortistatina A y la cadena principal amida NH de CDK8. Tambien se muestra la densidad electronica de cortistatina A La figura 16C tambien incluye la alineacion estructural de ATP (cian/naranja, de la estructura CDK²-ATP) con la estructura de rayos X de la cortistatina A (amarilla) en CDK8. Tenga en cuenta que Trp105 no contacta con ATP. La Figura 16D muestra una vista mas cercana del contacto entre Trp105 y el grupo N,N-dimetilo de la cortistatina A. Como se describe mas adelante en este documento, una mutacion de Trp105 (reemplazo con Met) confiere resistencia a la cortistatina A.

Las Figuras 17A-17B. Figura 17A representa la smtesis del C³-N-oxido de la cortistatina A tras la exposicion de la cortistatina A al gel de sflice, en contraste con el tratamiento de la cortistatina A con gel de sflice tratado con trietilamina. La Figura 17B muestra la sensibilidad de las HUVEC al tratamiento con cortistatina A y N-oxido de cortistatina A y muestra que los 2 compuestos son equipotentes. La inhibicion del crecimiento despues de 96 horas de tratamiento de las HUVEC se midio mediante una senal de fluorescencia utilizando Celltiter Blue (Promega) con un vehmulo (DMSO) que representa el crecimiento maximo y la doxorrubicina 10 pM que representa la inhibicion del crecimiento maximo.

La Figura 18 demuestra que la cortistatina A es efectiva en el modelo de xenoinjerto subcutaneo SET-2 de la proliferacion dirigida por JAK2V617F. 1x107 celulas tumorales SET-2 en matrigel al 50% se inyectaron subcutaneamente en el flanco de ratones hembra SCID Beige de 8 a 12 semanas de edad. Una vez que los tumores alcanzaron un tamano promedio de 80-120 mm3, los ratones se trataron con vehmulo o 0,16 mg kg'1 diariamente durante la duracion del estudio, lo que resulto en un 68% de inhibicion del crecimiento tumoral (n=10, P<0,001, ANOVA de 2 vfas).

La Figura 19 representa un ensayo de estabilidad metabolica de microsomas hepaticos in vitro que demuestra que el N-oxido del compuesto 14B demuestra una estabilidad mejorada.

La Figura 20 representa los resultados de un ensayo de microsoma hepatico in vitro que demuestra que el compuesto 14B sufre N-monodemetilacion en C³ en microsomas hepaticos humanos al compuesto 24B.

Las Figuras 21A-21E demuestran la equipotencia del N-oxido del compuesto 14B y el compuesto 14B en las lmeas celulares ensayadas. Las celulas se pasaron y los compuestos frescos se agregaron los dfas 3 y 7 (media /- error estandar, n=3).

Las Figuras 22A-22B muestran alelos de CDK19 (Figura 22A) y CDK8 (Figura 22B) que hacen que las celulas MV4;11 sean resistentes a la inhibicion del crecimiento por el N-oxido del compuesto 14b (14BNO), lo que indica que CDK8/CDK19 median los efectos antiproliferativos de 14BNO.

La Figura 23 demuestra que el N-oxido del compuesto 14B (14BNO) tiene una vida media y una tasa de eliminacion aceptables al mezclarse con hepatocitos humanos agrupados.

Las Figuras 24A-24C proporcionan los resultados de un estudio farmacocinetico con el compuesto (14A) formulado en 20% de hidroxipropilo-beta-ciclodextrina en ratones CD-1 machos que recibieron una dosis unica de 3 mg/kg IV (Figura 24A), 3 mg/kg IP (Figura 24B), o 10 mg/kg oral (PO) (Figura 24C). Antes de la dosificacion, los ratones se mantuvieron en ayunas durante la noche hasta 4 horas despues de la dosificacion. Las muestras de sangre se recogieron en los puntos de tiempo indicados y se analizaron por HPLC/MS/MS para evaluar la concentracion de (14A). La Cmax despues de la dosis oral fue de 255 ng/ml despues de 2 horas, la T1/2 calculada

fue de aproximadamente 5 horas y la biodisponibilidad oral fue del 44%. El aclaramiento IV fue de 29/ml/min/kg, el Vss fue de 11,7 L/kg y la biodisponibilidad de IP fue del 95%.

Definiciones

Definiciones quimicas

[0023] Las definiciones de grupos funcionales espedficos y terminos qrnmicos se describen con mas detalle a continuacion. Los elementos qrnmicos se identifican de acuerdo con la Tabla Periodica de los Elementos, la version

CAS, el Manual de Qrnmica y Ffsica, edicion 75, cubierta interior, y los grupos funcionales espedficos generalmente

se definen como se describen en la presente. Ademas, los principios generales de la qrnmica organica, asf como los restos funcionales espedficos y la reactividad, se describen en Organic Chemistry, Thomas Sorrell, University Science Books, Sausalito, 1999; Smith y March March's Advanced Organic Chemistry, 5a edicion, John Wiley &

Sons, Inc., Nueva York, 2001; Larock, Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers, Inc., Nueva York,

1989; y Carruthers, Some Modern Methods of Organic Synthesis, 3a edicion, Cambridge University Press, Cambridge, 1987.

[0024] Los compuestos descritos en el presente documento pueden comprender uno o mas centros asimetricos, y por lo tanto pueden existir en diversas formas estereoisomericas, por ejemplo, enantiomeros y/o diastereomeros. Por ejemplo, los compuestos descritos en el presente documento pueden estar en forma de un enantiomero, diastereomero o isomero geometrico individual, o pueden estar en forma de una mezcla de estereoisomeros, incluidas mezclas racemicas y mezclas enriquecidas en uno o mas estereoisomeros. Los isomeros se pueden aislar de mezclas mediante metodos conocidos por los expertos en la tecnica, incluida la cromatograffa lfquida quiral a alta presion (HPLC) y la formacion y cristalizacion de sales quirales; o los isomeros preferidos se pueden preparar por smtesis asimetrica. Ver, por ejemplo, Jacques et al., Enantiomers, Racemates and Resolutions (Wiley Interscience, Nueva York, 1981); Wilen et al., Tetrahedron 33: 2725 (1977); Eliel, EL Stereochemistry of Carbon Compounds (McGraw-Hill, NY, 1962); y Wilen, SH Tables of Resolving Agents and Optical Resolutions p. 268 (eL Eliel, Ed., Univ.

of Notre Dame Press, Notre Dame, EN 1972). La invencion abarca adicionalmente compuestos como isomeros individuales sustancialmente libres de otros isomeros, y alternativamente, como mezclas de diversos isomeros.

[0025] A menos que se indique lo contrario, las estructuras representadas en el presente documento tambien pretenden incluir compuestos que difieren solo en la presencia de uno o mas atomos enriquecidos con isotopos. Por ejemplo, los compuestos que tienen las estructuras presentes excepto la sustitucion de hidrogeno por deuterio o tritio, la sustitucion de 19F por 18F o la sustitucion de un carbono por un carbono enriquecido con 13C o 14C estan

dentro del alcance de la descripcion. Tales compuestos son utiles, por ejemplo, como herramientas analtticas o sondas en ensayos biologicos.

[0026] Cuando se enumera un rango de valores, se pretende abarcar cada valor y sub-rango dentro del rango. Por ejemplo, "C-i-6 alquilo" pretende abarcar, C¹, C² , C³, C⁴, C⁵ , C6, C^1-6, C^1-5, C^1-4, C^1-3, C^1-2, C^2-6, C^2-5, ⁵ , C^3-4, C^4-6, C^4-5 y C^5-6 alquilo.

[0027] El termino "alifatico", como se usa en el presente documento, se refiere a grupos alquilo, alquenilo, alquinilo y carbodclico. Del mismo modo, el termino "heteroalifatico", como se usa en el presente documento, se refiere a heteroalquilo, heteroalquenilo, heteroalquinilo y grupos heterodclicos.

[0028] Como se usa en el presente documento, "alquilo" se refiere a un radical de un grupo hidrocarburo saturado de cadena lineal o ramificada que tiene de 1 a 10 atomos de carbono ("C^1-10 alquilo"). En algunas realizaciones, un grupo alquilo tiene 1 a 9 atomos de carbono ("C^1-9 alquilo"). En algunas realizaciones, un grupo alquilo tiene de 1 a 8 atomos de carbono ("C^1-8 alquilo"). En algunas realizaciones, un grupo alquilo tiene de 1 a 7 atomos de carbono ("C¹-⁷ alquilo"). En algunas realizaciones, un grupo alquilo tiene 1 a 6 atomos de carbono ("C^1-6 alquilo"). En algunas realizaciones, un grupo alquilo tiene 1 a 5 atomos de carbono ("C^1-5 alquilo"). En algunas realizaciones, un grupo alquilo tiene 1 a 4 atomos de carbono ("C^1-4 alquilo"). En algunas realizaciones, un grupo alquilo tiene 1 a 3 atomos de carbono ("C^1-3 alquilo"). En algunas realizaciones, un grupo alquilo tiene 1 a 2 atomos de carbono ("C^1-2 alquilo").

En algunas realizaciones, un grupo alquilo tiene 1 atomo de carbono ("C¹ alquilo"). En algunas realizaciones, un grupo alquilo tiene 2 a 6 atomos de carbono ("C^2-6 alquilo"). Ejemplos de grupos C^1-6 alquilo incluyen metilo (C¹), etilo

(C²), n-propilo (C³), isopropilo (C³), n-butilo (C⁴), ferc-butilo (C⁴), sec-butilo (C⁴), iso-butilo (C⁴), n-pentilo (C⁵), 3-pentanilo (C⁵), amilo (C⁵), neopentilo (C⁵), 3-metilo-2-butanilo (C⁵), amilo terciario (C⁵), y n-hexilo (C6). Ejemplos adicionales de grupos alquilo incluyen n-heptilo (C7), n-octilo (C8) y similares. A menos que se especifique lo contrario, cada caso de un grupo alquilo esta independientemente no sustituido (un "alquilo no sustituido") o sustituido (un "alquilo sustituido") con uno o mas sustituyentes. En ciertas realizaciones, el grupo alquilo es un C^1-10

alquilo no sustituido (por ejemplo, -CH³). En ciertas realizaciones, el grupo alquilo es un C^1-10 alquilo sustituido.

[0029] Como se usa en el presente documento, "haloalquilo" es un grupo alquilo sustituido como se define en el presente documento en el que uno o mas de los atomos de hidrogeno se reemplazan independientemente por un halogeno, por ejemplo, fluor, bromo, cloro o yodo. "Perhaloalquilo" es un subconjunto de haloalquilo, y se refiere a un grupo alquilo en el que todos los atomos de hidrogeno se reemplazan independientemente por un halogeno, por ejemplo, fluor, bromo, cloro o yodo. En algunas realizaciones, el resto haloalquilo tiene 1 a 8 atomos de carbono ("C^1-8 haloalquilo"). En algunas realizaciones, el resto haloalquilo tiene 1 a 6 atomos de carbono ("C^1-6 haloalquilo"). En algunas realizaciones, el resto haloalquilo tiene 1 a 4 atomos de carbono ("C^1-4 haloalquilo"). En algunas realizaciones, el resto haloalquilo tiene 1 a 3 atomos de carbono ("C^1-3 haloalquilo"). En algunas realizaciones, el resto haloalquilo tiene 1 a 2 atomos de carbono ("C^1-2 haloalquilo"). En algunas realizaciones, todos los atomos de hidrogeno de haloalquilo se reemplazan con fluor para proporcionar un grupo perfluoroalquilo. En algunas realizaciones, todos los atomos de hidrogeno de haloalquilo se reemplazan con cloro para proporcionar un grupo "percloroalquilo". Los ejemplos de grupos haloalquilo incluyen -CF³ , -CF²CF³, -CF²CF²CF³, -Ccl³, -CFCh, -CF²C y similares.

[0030] Como se usa en el presente documento, "heteroalquilo" se refiere a un grupo alquilo como se define en el presente documento que incluye ademas al menos un heteroatomo (por ejemplo, 1, 2, 3 o 4 heteroatomos) seleccionado de oxfgeno, nitrogeno o azufre dentro (es decir, insertado entre atomos de carbono adyacentes) y/o colocado en una o mas posiciones terminales de la cadena principal. En ciertas realizaciones, un grupo heteroalquilo se refiere a un grupo saturado que tiene de 1 a 10 atomos de carbono y 1 o mas heteroatomos dentro de la cadena parental ("C^1-10 alquilo"). En algunas realizaciones, un grupo heteroalquilo es un grupo saturado que tiene de 1 a 9 atomos de carbono y 1 o mas heteroatomos dentro de la cadena parental ("C^1-9 heteroalquilo"). En algunas realizaciones, un grupo heteroalquilo es un grupo saturado que tiene de 1 a 8 atomos de carbono y 1 o mas heteroatomos dentro de la cadena parental ("C^1-8 heteroalquilo"). En algunas realizaciones, un grupo heteroalquilo es un grupo saturado que tiene de 1 a 7 atomos de carbono y 1 o mas heteroatomos dentro de la cadena parental ("C^1-7 heteroalquilo"). En algunas realizaciones, un grupo heteroalquilo es un grupo saturado que tiene de 1 a 6 atomos de carbono y 1 o mas heteroatomos dentro de la cadena parental ("C^1-6 heteroalquilo"). En algunas realizaciones, un grupo heteroalquilo es un grupo saturado que tiene de 1 a 5 atomos de carbono y 1 o 2 heteroatomos dentro de la cadena parental ("C^1-5 alquilo"). En algunas realizaciones, un grupo heteroalquilo es un grupo saturado que tiene de 1 a 4 atomos de carbono y 1 o 2 heteroatomos dentro de la cadena parental ("C^1-4 alquilo"). En algunas realizaciones, un grupo heteroalquilo es un grupo saturado que tiene de 1 a 3 atomos de carbono y 1 heteroatomo dentro de la cadena parental ("C^1-3 heteroalquilo"). En algunas realizaciones, un grupo heteroalquilo es un grupo saturado que tiene 1 a 2 atomos de carbono y 1 heteroatomo dentro de la cadena parental ("C^1-2 heteroalquilo"). En algunas realizaciones, un grupo heteroalquilo es un grupo saturado que tiene 1 atomo de carbono y 1 heteroatomo ("C¹ heteroalquilo"). En algunas realizaciones, un grupo heteroalquilo es un grupo saturado que tiene 2 a 6 atomos de carbono y 1 o 2 heteroatomos dentro de la cadena parental ("C^2-6 heteroalquilo"). A menos que se especifique lo contrario, cada instancia de un grupo heteroalquilo esta independientemente no sustituido (un "heteroalquilo no sustituido") o sustituido (un "heteroalquilo sustituido") con uno o mas sustituyentes. En ciertas realizaciones, el grupo heteroalquilo es un C^1-10 heteroalquilo no sustituido. En ciertas realizaciones, el grupo heterocialquilo es un C^1-10 heteroalquilo sustituido.

[0031] Como se usa en el presente documento, "alquenilo" se refiere a un radical de un grupo hidrocarburo de cadena lineal o ramificada que tiene de 2 a 10 atomos de carbono y uno o mas dobles enlaces carbono-carbono (por ejemplo, 1, 2, 3 o 4 dobles enlaces). En algunas realizaciones, un grupo alquenilo tiene 2 a 9 atomos de carbono ("C^2-9 alquenilo"). En algunas realizaciones, un grupo alquenilo tiene 2 a 8 atomos de carbono ("C^2-8 alquenilo"). En algunas realizaciones, un grupo alquenilo tiene 2 a 7 atomos de carbono ("C^2-7 alquenilo"). En algunas realizaciones, un grupo alquenilo tiene 2 a 6 atomos de carbono ("C^2-6 alquenilo"). En algunas realizaciones, un grupo alquenilo tiene de 2 a 5 atomos de carbono ("C^2-5 alquenilo"). En algunas realizaciones, un grupo alquenilo tiene 2 a 4 atomos de carbono ("C^2-4 alquenilo"). En algunas realizaciones, un grupo alquenilo tiene 2 a 3 atomos de carbono ("C^2-3 alquenilo"). En algunas realizaciones, un grupo alquenilo tiene 2 atomos de carbono ("C² alquenilo"). El uno o mas enlaces dobles carbono-carbono pueden ser internos (como en 2-butenilo) o terminales (como en 1 -butenilo). Los ejemplos de grupos C^2-4 alquenilo incluyen etenilo (C²), 1-propenilo (C³), 2-propenilo (C³), 1 -butenilo (C⁴), 2-butenilo (C⁴), butadienilo (C⁴), y similares. Los ejemplos de grupos C^2-6 alquenilo incluyen los grupos C^2-4 alquenilo mencionados anteriormente, asf como pentenilo (C⁵), pentadienilo (C⁵), hexenilo (C6), y similares. Ejemplos adicionales de alquenilo incluyen heptenilo (C⁷), octenilo (C8), octatrienilo (C8) y similares. A menos que se especifique lo contrario, cada instancia de un grupo alquenilo esta independientemente no sustituido (un "alquenilo no sustituido") o sustituido (un "alquenilo sustituido") con uno o mas sustituyentes. En ciertas realizaciones, el grupo alquenilo es un C^2-10 alquenilo sin sustituir. En ciertas realizaciones, el grupo alquenilo es un C^2-10 alquenilo sustituido.

[0032] Como se usa en el presente documento, "heteroalquenilo" se refiere a un grupo alquenilo como se define en el presente documento que incluye ademas al menos un heteroatomo (por ejemplo, 1, 2, 3 o 4 heteroatomos) seleccionado de oxfgeno, nitrogeno o azufre dentro de (es decir, insertado entre atomos de carbono adyacentes y/o colocado en una o mas posiciones terminales de la cadena principal. En ciertas realizaciones, un grupo heteroalquenilo se refiere a un grupo que tiene de 2 a 10 atomos de carbono, al menos un doble enlace y 1 o mas heteroatomos dentro de la cadena principal ("C^2-10 heteroalquenilo"). En algunas realizaciones, un grupo heteroalquenilo tiene de 2 a 9 atomos de carbono, al menos un doble enlace, y 1 o mas heteroatomos dentro de la cadena principal ("C^2-9 heteroalquenilo"). En algunas realizaciones, un grupo heteroalquenilo tiene de 2 a 8 atomos de carbono, al menos un doble enlace y 1 o mas heteroatomos dentro de la cadena principal ("C^2-8 heteroalquenilo"). En algunas realizaciones, un grupo heteroalquenilo tiene de 2 a 7 atomos de carbono, al menos un doble enlace y 1 o mas heteroatomos dentro de la cadena principal ("C^2-7 heteroalquenilo"). En algunas realizaciones, un grupo heteroalquenilo tiene de 2 a 6 atomos de carbono, al menos un doble enlace y 1 o mas heteroatomos dentro de la cadena principal ("C^2-6 heteroalquenilo"). En algunas realizaciones, un grupo heteroalquenilo tiene de 2 a 5 atomos de carbono, al menos un doble enlace y 1 o 2 heteroatomos dentro de la cadena principal ("C^2-5 heteroalquenilo"). En algunas realizaciones, un grupo heteroalquenilo tiene 2 a 4 atomos de carbono, al menos un doble enlace y 1 o 2 heteroatomos dentro de la cadena principal ("C^2-4 heteroalquenilo"). En algunas realizaciones, un grupo heteroalquenilo tiene 2 a 3 atomos de carbono, al menos un doble enlace y 1 heteroatomo dentro de la cadena parental ("C^2-3 heteroalquenilo"). En algunas realizaciones, un grupo heteroalquenilo tiene de 2 a 6 atomos de carbono, al menos un doble enlace y 1 o 2 heteroatomos dentro de la cadena principal ("C^2-6 heteroalquenilo"). A menos que se especifique lo contrario, cada instancia de un grupo heteroalquenilo esta independientemente no sustituido (un "heteroalquenilo no sustituido") o sustituido (un "heteroalquenilo sustituido") con uno o mas sustituyentes. En ciertas realizaciones, el grupo heteroalquenilo es un C^2-10 heteroalquenilo no sustituido. En ciertas realizaciones, el grupo heteroalquenilo es un C^2-10 heteroalquenilo sustituido.

[0033] Como se usa en el presente documento, "alquinilo" se refiere a un radical de un grupo hidrocarburo de cadena lineal o ramificada que tiene de 2 a 10 atomos de carbono y uno o mas enlaces triples carbono-carbono (por ejemplo, 1, 2, 3 o 4 enlaces triples) ("C^2-10 alquinilo"). En algunas realizaciones, un grupo alquinilo tiene 2 a 9 atomos de carbono ("C^2-9 alquinilo"). En algunas realizaciones, un grupo alquinilo tiene 2 a 8 atomos de carbono ("C^2-8 alquinilo"). En algunas realizaciones, un grupo alquinilo tiene 2 a 7 atomos de carbono ("C^2-7 alquinilo"). En algunas realizaciones, un grupo alquinilo tiene 2 a 6 atomos de carbono ("C^2-6 alquinilo"). En algunas realizaciones, un grupo alquinilo tiene 2 a 5 atomos de carbono ("C^2-5 alquinilo"). En algunas realizaciones, un grupo alquinilo tiene 2 a 4 atomos de carbono ("C^2-4 alquinilo"). En algunas realizaciones, un grupo alquinilo tiene 2 a 3 atomos de carbono ("C^2-3 alquinilo"). En algunas realizaciones, un grupo alquinilo tiene 2 atomos de carbono ("C² alquinilo"). Uno o mas enlaces triples carbono-carbono pueden ser internos (como en 2-butinilo) o terminales (como en 1 -butinilo). Los ejemplos de grupos C^2-4 alquinilo incluyen, sin limitacion, etinilo (C²), 1 -propinilo (C³), 2-propinilo (C³), 1 -butinilo (C⁴), 2-butinilo (C⁴), y similares. Los ejemplos de grupos C^2-6 alquenilo incluyen los grupos C^2-4 alquinilo mencionados anteriormente, asf como pentinilo (C⁵), hexinilo (C6), y similares. Los ejemplos adicionales de alquinilo incluyen heptinilo (C⁷), octinilo (C8) y similares. A menos que se especifique lo contrario, cada instancia de un grupo alquinilo esta independientemente no sustituido (un "alquinilo no sustituido") o sustituido (un "alquinilo sustituido") con uno o mas sustituyentes. En ciertas realizaciones, el grupo alquinilo es un C^2-10 alquinilo no sustituido. En ciertas realizaciones, el grupo alquinilo es un C^2-10 alquinilo sustituido.

[0034] Como se usa en el presente documento, "heteroalquinilo" se refiere a un grupo alquinilo como se define en el presente documento que incluye ademas al menos un heteroatomo (por ejemplo, 1, 2, 3 o 4 heteroatomos) seleccionado de oxfgeno, nitrogeno o azufre dentro de (es decir, insertado entre atomos de carbono adyacentes de y/o colocado en una o mas posiciones terminales de la cadena principal. En ciertas realizaciones, un grupo heteroalquinilo se refiere a un grupo que tiene de 2 a 10 atomos de carbono, al menos un enlace triple y uno o mas heteroatomos dentro de la cadena principal ("C^2-10 heteroalquinilo"). En algunas realizaciones, un grupo heteroalquinilo tiene 2 a 9 atomos de carbono, al menos un enlace triple y 1 o mas heteroatomos dentro de la cadena principal ("C^2-9 heteroalquinilo"). En algunas realizaciones, un grupo heteroalquinilo tiene 2 a 8 atomos de carbono, al menos un enlace triple, y 1 o mas heteroatomos dentro de la cadena principal ("C^2-8 heteroalquinilo"). En algunas realizaciones, un grupo heteroalquinilo tiene 2 a 7 atomos de carbono, al menos un enlace triple, y 1 o mas heteroatomos dentro de la cadena principal ("C^2-7 heteroalquinilo"). En algunas realizaciones, un grupo heteroalquinilo tiene 2 a 6 atomos de carbono, al menos un enlace triple, y 1 o mas heteroatomos dentro de la cadena principal ("C^2-6 heteroalquinilo"). En algunas realizaciones, un grupo heteroalquinilo tiene 2 a 5 atomos de carbono, al menos un enlace triple y 1 o 2 heteroatomos dentro de la cadena principal ("C^2-5 heteroalquinilo"). En algunas realizaciones, un grupo heteroalquinilo tiene 2 a 4 atomos de carbono, al menos un enlace triple y 1 o 2 heteroatomos dentro de la cadena principal ("C^2-4 heteroalquinilo"). En algunas realizaciones, un grupo heteroalquinilo tiene 2 a 3 atomos de carbono, al menos un triple enlace y 1 heteroatomo dentro de la cadena parental ("C^2-3 heteroalquinilo"). En algunas realizaciones, un grupo heteroalquinilo tiene 2 a 6 atomos de carbono, al menos un enlace triple y 1 o 2 heteroatomos dentro de la cadena principal ("C^2-6 heteroalquinilo"). A menos que se especifique lo contrario, cada instancia de un grupo heteroalquinilo esta independientemente no sustituido (un "heteroalquinilo no sustituido") o sustituido (un "heteroalquinilo sustituido") con uno o mas sustituyentes. En ciertas realizaciones, el grupo heteroalquinilo es un C^2-10 heteroalquinilo no sustituido. En ciertas realizaciones, el grupo heteroalquinilo es un C^2-10 heteroalquinilo sustituido.

[0035] Como se usa en este documento, "carbociclilo" o "carbodclico" se refiere a un radical de un grupo hidrocarbonado dclico no aromatico que tiene de 3 a 14 atomos de carbono en el anillo ("C^3-14 carbociclilo") y cero heteroatomos en el sistema de anillo no aromatico. En algunas realizaciones, un grupo carbociclilo tiene 3 a 10 atomos de carbono en el anillo ("C^3-10 carbociclilo"). En algunas realizaciones, un grupo carbociclilo tiene de 3 a 9 atomos de carbono en el anillo ("carbociclilo C^3-9"). En algunas realizaciones, un grupo carbociclilo tiene 3 a 8 atomos de carbono del anillo ("carbociclilo C^3-8"). En algunas realizaciones, un grupo carbociclilo tiene de 3 a 7 atomos de carbono del anillo ("carbociclilo C^3-7"). En algunas realizaciones, un grupo carbociclilo tiene 3 a 6 atomos de carbono del anillo ("carbociclilo C^3-6"). En algunas realizaciones, un grupo carbociclilo tiene de 4 a 6 atomos de carbono en el anillo ("carbociclilo C^4-6"). En algunas realizaciones, un grupo carbociclilo tiene 5 a 6 atomos de carbono del anillo ("carbociclilo C^5-6"). En algunas realizaciones, un grupo carbociclilo tiene 5 a 10 atomos de carbono del anillo ("carbociclilo C^5-10"). Los ejemplos de grupos carbociclilo C^3-6 incluyen, sin limitacion, ciclopropilo (C³), ciclopropenilo (C³), ciclobutilo (C⁴), ciclobutenilo (C⁴), ciclopentilo (C⁵), ciclopentenilo (C⁵), ciclohexilo (C6), ciclohexenilo (C6), ciclohexadienilo (C6), y similares. Los grupos de carbociclilo C^3-8 ejemplares incluyen, sin limitacion, los grupos de carbociclilo C^3-6 mencionados anteriormente, asf como cicloheptilo (C⁷), cicloheptenilo (C⁷), cicloheptadienilo (C⁷), cicloheptatrienilo (C⁷), ciclooctilo (C8), ciclooctenilo (C8), biciclo[2.2.1]heptanilo (C⁷), biciclo[2.2.2]octanilo (C8), y similares. Los grupos C^3-10 carbociclilo ejemplares incluyen, sin limitacion, los grupos carbociclilo C^3-8 mencionados anteriormente, as^ como ciclononilo (C⁹), ciclononenilo (C⁹), ciclodecilo (C¹⁰), ciclodecenilo (C¹⁰), octahidro-1H-indenilo (C⁹), decahidronafalenilo (C¹⁰), espiro[4.5]decanilo (C¹⁰) y similares. Como ilustran los ejemplos anteriores, en ciertas realizaciones, el grupo carbociclilo es monodclico ("carbociclilo monodclico") o polidclico (por ejemplo, que contiene un sistema anular fusionado, con puente o espiro, como un sistema bidclico ("carbociclilo bidclico") o un sistema tridclico ("carbociclilo tridclico")) y puede estar saturado o puede contener uno o mas enlaces carbono-carbono dobles o triples. "Carbociclilo" tambien incluye sistemas de anillos en los que el anillo de carbociclilo, como se definio anteriormente, se fusiona con uno o mas grupos arilo o heteroarilo en los que el punto de union esta en el anillo de carbociclilo, y en tales casos, el numero de carbonos continua designando el numero de carbonos en el sistema de anillo carbodclico. A menos que se especifique lo contrario, cada instancia de un grupo carbociclilo es independientemente no sustituida (un "carbociclilo no sustituido") o sustituida (un "carbociclilo sustituido") con uno o mas sustituyentes. En ciertas realizaciones, el grupo carbociclilo es un C^3-14 carbociclilo no sustituido. En ciertas realizaciones, el grupo carbociclilo es un C^3-14 carbociclilo sustituido.

[0036] En algunas realizaciones, "carbociclilo" es un grupo monodclico carbociclilo saturado que tiene de 3 a 10 atomos de carbono en el anillo ("cicloalquilo C^3-10"). En algunas realizaciones, un grupo cicloalquilo tiene de 3 a 9 atomos de carbono en el anillo ("cicloalquilo C^3-9". En algunas realizaciones, un grupo cicloalquilo tiene 3 a 8 atomos de carbono en el anillo (“cicloalquilo C^3-8”). En algunas realizaciones, un grupo cicloalquilo tiene 3 a 6 atomos de carbono en el anillo (“C^3-6 cicloalquilo”). En algunas realizaciones, un grupo cicloalquilo tiene 4 a 6 atomos de carbono en el anillo ("cicloalquilo C^4-6"). En algunas realizaciones, un grupo cicloalquilo tiene 5 a 6 atomos de carbono en el anillo ("cicloalquilo C^5-6"). En algunas realizaciones, un grupo cicloalquilo tiene 5 a 10 atomos de carbono en el anillo ("cicloalquilo C^5-10"). Ejemplos de grupos cicloalquilo C^5-6 incluyen ciclopentilo (C⁵) y ciclohexilo (C⁵). Ejemplos de grupos C^3-6 cicloalquilo incluyen los grupos C^5-6 mencionados anteriormente grupos cicloalquilo, asf como ciclopropilo (C³) y ciclobutilo (C⁴). Los ejemplos de grupos cicloalquilo C^3-8 incluyen los grupos C^3-6 cicloalquilo mencionados anteriormente, asf como cicloheptilo (C⁷) y ciclooctilo (C8). A menos que se especifique lo contrario, cada instancia de un grupo cicloalquilo esta independientemente no sustituido (un "cicloalquilo no sustituido") o sustituido (un "cicloalquilo sustituido") con uno o mas sustituyentes. En ciertas realizaciones, el grupo cicloalquilo es un cicloalquilo C^3-10 sin sustituir. En ciertas realizaciones, el grupo cicloalquilo es un cicloalquilo C^3-10 sustituido.

[0037] Como se usa en el presente documento, "heterociclilo" o "heterodclico" se refiere a un radical de un sistema de anillo no aromatico de 3 a 14 miembros que tiene atomos de carbono del anillo y 1 a 4 heteroatomos del anillo, en donde cada heteroatomo se selecciona independientemente de nitrogeno, oxfgeno y azufre ("heterociclilo de 3 a 14 miembros"). En los grupos heterociclilo que contienen uno o mas atomos de nitrogeno, el punto de union puede ser un atomo de carbono o nitrogeno, segun lo permita la Valencia. Un grupo heterociclilo puede ser monodclico ("heterociclilo monodclico") o polidclico (por ejemplo, un sistema de anillo fusionado, con puente o espiro, como un sistema bidclico ("heterociclilo bidclico") o un sistema tridclico ("heterociclo tridclico")), y puede estar saturado o puede contener uno o mas enlaces carbono-carbono dobles o triples. Los sistemas de anillos polidclicos heterociclilo pueden incluir uno o mas heteroatomos en uno o ambos anillos. "Heterociclilo" tambien incluye sistemas de anillo en los que el anillo de heterociclilo, como se definio anteriormente, se fusiona con uno o mas grupos carbociclilo en los que el punto de union esta en el anillo de carbociclilo o heterociclilo, o sistemas de anillo en los que el anillo de heterociclilo, como se define arriba, esta fusionado con uno o mas grupos arilo o heteroarilo, en donde el punto de union esta en el anillo heterociclilo, y en tales casos, el numero de miembros de anillo continua designando el numero de miembros de anillo en el sistema de anillo heterociclilo. A menos que se especifique lo contrario, cada instancia de heterociclilo esta independientemente sin sustituir (un "heterociclilo sin sustituir") o sustituido (un "heterociclilo sustituido") con uno o mas sustituyentes. En ciertas realizaciones, el grupo heterociclilo es un heterociclilo no sustituido de 3 a 14 miembros. En ciertas realizaciones, el grupo heterociclilo es un heterociclilo sustituido de 3 a 14 miembros.

[0038] En algunas realizaciones, un grupo heterociclilo es un sistema de anillo no aromatico de 5 a 10 miembros que tiene atomos de carbono en el anillo y 1 a 4 heteroatomos en el anillo, en donde cada heteroatomo se selecciona independientemente de nitrogeno, oxfgeno y azufre ("heterociclilo de 5-10 miembros”). En algunas realizaciones, un grupo heterociclilo es un sistema de anillo no aromatico de 5-8 miembros que tiene atomos de carbono en el anillo y 1-4 heteroatomos en el anillo, en donde cada heteroatomo se selecciona independientemente de nitrogeno, oxfgeno y azufre ("heterociclilo de 5-8 miembros"). En algunas realizaciones, un grupo heterociclilo es un sistema de anillo no aromatico de 5-6 miembros que tiene atomos de carbono en el anillo y 1-4 heteroatomos en el anillo, en donde cada heteroatomo se selecciona independientemente de nitrogeno, ox^geno y azufre ("heterociclilo de 5 a 6 miembros”). En algunas realizaciones, el heterociclilo de 5-6 miembros tiene 1-3 heteroatomos de anillo seleccionados de nitrogeno, oxfgeno y azufre. En algunas realizaciones, el heterociclilo de 5-6 miembros tiene 1-2 heteroatomos en el anillo seleccionados de nitrogeno, oxfgeno y azufre. En algunas realizaciones, el heterociclilo de 5 a 6 miembros tiene 1 heteroatomo de anillo seleccionado de nitrogeno, oxfgeno y azufre.

[0039] Los ejemplos de grupos heterociclilo de 3 miembros que contienen 1 heteroatomo incluyen, sin limitacion, azirdinilo, oxananilo y tiiranilo. Los ejemplos de grupos heterociclilo de 4 miembros que contienen 1 heteroatomo incluyen, sin limitacion, azetidinilo, oxetanilo y tietanilo. Los grupos heterociclilo de 5 miembros ejemplares que contienen 1 heteroatomo incluyen, sin limitacion, tetrahidrofuranilo, dihidrofuranilo, tetrahidrotiofenilo, dihidrotiofenilo, pirrolidinilo, dihidropirrolilo y pirrolilo-2,5-diona. Los ejemplos de grupos heterociclilo de 5 miembros que contienen 2 heteroatomos incluyen, sin limitacion, dioxolanilo, oxatiolanilo y ditiolanilo. Los ejemplos de grupos heterociclilo de 5 miembros que contienen 3 heteroatomos incluyen, sin limitacion, triazolinilo, oxadiazolinilo y tiadiazolinilo. Los grupos heterociclilo de 6 miembros ejemplares que contienen 1 heteroatomo incluyen, sin limitacion, piperidinilo, tetrahidropiranilo, dihidropiridinilo y tianilo. Los ejemplos de grupos heterociclilo de 6 miembros que contienen 2 heteroatomos incluyen, sin limitacion, piperazinilo, morfolinilo, ditianilo, dioxanilo. Los grupos heterociclilo de 6 miembros ejemplares que contienen 3 heteroatomos incluyen, sin limitacion, triazinanilo. Los ejemplos de grupos heterociclilo de 7 miembros que contienen 1 heteroatomo incluyen, sin limitacion, azepanilo, oxepanilo y tiepanilo. Los grupos heterociclilo ejemplares de 8 miembros que contienen 1 heteroatomo incluyen, sin limitacion, azocanilo, oxecanilo y tiocanilo. Grupos heterociclilo bidclicos ejemplares incluyen, sin limitacion, indolinilo, isoindolinilo, dihidrobenzofuranilo, dihidrobenzotienilo, tetrahidrobenzotienilo, tetrahidrobenzofuranilo, tetrahidroindolilo, tetrahidroquinolinilo, tetrahidroisoquinolinilo, decahidroquinolinilo, decahidroisoquinolinilo, octahidrocromenilo, octahidroisocromenilo, decahidronaftilridinilo, decahidro-1,8-naftiridinilo, octahidropirrolo[3,2-b]pirrol, indolinilo, ftalimidilo, naftalimidilo, cromanilo, cromenilo, 1H-benzo[e][1,4]diazepinilo, 1,4,5,7-tetrahidropirano[3,4-b]pirrolilo, 5,6-dihidro-4H-furo[3,2-b]pirrolilo, 6,7-dihidro-5H-furo[3,2-b]piranilo, 5,7-dihidro-4H-tieno[2,3-c]piranilo, 2,3-dihidro-1H-pirrolo[2,3-b]piridinilo, 2,3-dihidrofuro[2,3-b]piridinilo, 4,5,6,7-tetrahidro-1H-pirrolo-[2,3-b]piridinilo, 4,5,6,7-tetrahidrofuro[3,2-c]piridinilo, 4,5,6,7-tetrahidrotieno[3,2-b]piridinilo, 1,2,3,4-tetrahidro-1,6-naftiridinilo, y similares.

[0040] Como se usa en este documento, "arilo" se refiere a un radical de un sistema de anillo aromatico 4n+2 monodclico o polidclico (por ejemplo, bidclico o tridclico) (por ejemplo, con 6, 10 o 14 electrones n compartidos en una matriz dciica) con 6-14 atomos de carbono en el anillo y cero heteroatomos provistos en el sistema de anillo aromatico ("C^6-14 arilo"). En algunas realizaciones, un grupo arilo tiene 6 anillos de atomos de carbono ("C6 arilo"; por ejemplo, fenilo). En algunas realizaciones, un grupo arilo tiene 10 atomos de carbono en el anillo ("C¹⁰ arilo"; por ejemplo, naftilo tal como 1-naftilo y 2-naftilo). En algunas realizaciones, un grupo arilo tiene 14 atomos de carbono en el anillo ("arilo C¹⁴"; por ejemplo, antracilo). "Arilo" tambien incluye sistemas de anillo en los que el anillo de arilo, como se definio anteriormente, se fusiona con uno o mas grupos carbociclilo o heterociclilo en donde el radical o punto de union esta en el anillo de arilo, y en tales casos, el numero de atomos de carbono continua para designar el numero de atomos de carbono en el sistema de anillo arilo. A menos que se especifique lo contrario, cada instancia de un grupo arilo esta independientemente no sustituido (un "arilo no sustituido") o sustituido (un "arilo sustituido") con uno o mas sustituyentes. En ciertas realizaciones, el grupo arilo es un C^6-14 arilo no sustituido. En ciertas realizaciones, el grupo arilo es un C^6-14 arilo sustituido.

[0041] "Aralquilo" es un subconjunto de "alquilo" y se refiere a un grupo alquilo, como se define en el presente documento, sustituido por un grupo arilo, como se define en el presente documento, en donde el punto de union esta en el resto alquilo.

[0042] Como se usa en el presente documento, "heteroarilo" se refiere a un radical de un sistema de anillo aromatico 4n+2 monodclico o polidclico (por ejemplo, bidclico, tridclico) de 5 a 14 miembros (por ejemplo, que tiene 6, 10 o 14 electrones n compartidos en una matriz dclica) que tiene atomos de carbono del anillo y 1-4 heteroatomos del anillo provistos en el sistema de anillo aromatico, en donde cada heteroatomo se selecciona independientemente de nitrogeno, oxfgeno y azufre ("heteroarilo de 5-14 miembros"). En los grupos heteroarilo que contienen uno o mas atomos de nitrogeno, el punto de union puede ser un atomo de carbono o nitrogeno, segun lo permita la Valencia. Los sistemas de anillos polidclicos de heteroarilo pueden incluir uno o mas heteroatomos en uno o ambos anillos. "Heteroarilo" incluye sistemas anulares en los que el anillo heteroarilo, como se definio anteriormente, se fusiona con uno o mas grupos carbociclilo o heterociclilo en donde el punto de union esta en el anillo heteroarilo, y en tales casos, el numero de miembros del anillo continua designando el numero de miembros de anillo en el sistema de anillo heteroarilo. "Heteroarilo" tambien incluye sistemas anulares en los que el anillo heteroarilo, como se definio anteriormente, se fusiona con uno o mas grupos arilo en donde el punto de union esta en el anillo arilo o heteroarilo, y en tales casos, el numero de miembros del anillo designa el numero de miembros de anillo en el sistema de anillo polidclico (arilo/heteroarilo) fusionado. Grupos heteroarilo polidclicos en los que un anillo no contiene un heteroatomo (por ejemplo, indolilo, quinolinilo, carbazolilo y similares) el punto de union puede estar en cualquiera de los anillos, es decir, el anillo que tiene un heteroatomo (por ejemplo, 2-indolilo) o el anillo que no contiene un heteroatomo (por ejemplo, 5-indolilo).

[0043] En algunas realizaciones, un grupo heteroarilo es un sistema de anillo aromatico de 5-10 miembros que tiene atomos de carbono del anillo y 1-4 heteroatomos del anillo proporcionados en el sistema de anillo aromatico, en donde cada heteroatomo se selecciona independientemente de nitrogeno, ox^geno y azufre ("heteroarilo de 5-10 miembros"). En algunas realizaciones, un grupo heteroarilo es un sistema de anillo aromatico de 5-8 miembros que tiene atomos de carbono del anillo y 1-4 heteroatomos del anillo provistos en el sistema de anillo aromatico, en donde cada heteroatomo se selecciona independientemente de nitrogeno, oxfgeno y azufre ("heteroarilo de 5-8 miembros”). En algunas realizaciones, un grupo heteroarilo es un sistema de anillo aromatico de 5-6 miembros que tiene atomos de carbono del anillo y 1-4 heteroatomos del anillo provistos en el sistema de anillo aromatico, en donde cada heteroatomo se selecciona independientemente de nitrogeno, oxfgeno y azufre ("heteroarilo de 5-6 miembros”). En algunas realizaciones, el heteroarilo de 5-6 miembros tiene 1-3 heteroatomos de anillo seleccionados de nitrogeno, oxfgeno y azufre. En algunas realizaciones, el heteroarilo de 5 a 6 miembros tiene 1 a 2 heteroatomos de anillo seleccionados entre nitrogeno, oxfgeno y azufre. En algunas realizaciones, el heteroarilo de 5 a 6 miembros tiene 1 heteroatomo de anillo seleccionado de nitrogeno, oxfgeno y azufre. A menos que se especifique lo contrario, cada instancia de un grupo heteroarilo esta independientemente no sustituido (un "heteroarilo no sustituido") o sustituido (un "heteroarilo sustituido") con uno o mas sustituyentes. En ciertas realizaciones, el grupo heteroarilo es un heteroarilo de 5-14 miembros no sustituido. En ciertas realizaciones, el grupo heteroarilo es un heteroarilo de 5-14 miembros sustituido.

[0044] Los ejemplos de grupos heteroarilo de 5 miembros que contienen 1 heteroatomo incluyen, sin limitacion, pirrolilo, furanilo y tiofenilo. Ejemplos de grupos heteroarilo de 5 miembros que contienen 2 heteroatomos incluyen, sin limitacion, imidazolilo, pirazolilo, oxazolilo, isoxazolilo, tiazolilo e isotiazolilo. Los grupos heteroarilo de 5 miembros ejemplares que contienen 3 heteroatomos incluyen, sin limitacion, triazolilo, oxadiazolilo y tiadiazolilo. Los ejemplos de grupos heteroarilo de 5 miembros que contienen 4 heteroatomos incluyen, sin limitacion, tetrazolilo. Los grupos heteroarilo de 6 miembros ejemplares que contienen 1 heteroatomo incluyen, sin limitacion, piridinilo. Los grupos heteroarilo de 6 miembros ejemplares que contienen 2 heteroatomos incluyen, sin limitacion, piridazinilo, pirimidinilo y pirazinilo. Los grupos heteroarilo de 6 miembros ejemplares que contienen 3 o 4 heteroatomos incluyen, sin limitacion, triazinilo y tetrazinilo, respectivamente. Los grupos heteroarilo de 7 miembros ejemplares que contienen 1 heteroatomo incluyen, sin limitacion, azepinilo, oxepinilo y tiepinilo. Los grupos heteroarilo 5,6-bidclicos ejemplares incluyen, sin limitacion, indolilo, isoindolilo, indazolilo, benzotriazolilo, benzotiofenilo, isoenzotiofenilo, benzofuranilo, benzoisofuranilo. benzimidazolilo, benzoxazolilo, bencisoxazolilo, benzoxadiazolilo, benztiazolilo, benzisotiazolilo, benztiadiazolilo, indolizinilo, y purinilo. Los grupos heteroarilo 6,6-bidclicos ejemplares incluyen, sin limitacion, naftiridinilo, pteridinilo, quinolinilo, isoquinolinilo, cinolinilo, quinoxalinilo, ftalazinilo y quinazolinilo. Los ejemplos de grupos heteroarilo tridclicos incluyen, sin limitacion, fenantridinilo, dibenzofuranilo, carbazolilo, acridinilo, fenotiazinilo, fenoxazinilo y fenazinilo.

[0045] "Heteroaralquilo" es un subconjunto de "alquilo" y se refiere a un grupo alquilo, como se define en el presente documento, sustituido por un grupo heteroarilo, como se define en el presente documento, en donde el punto de union esta en el resto alquilo.

[0046] Como se usa en el presente documento, el termino "parcialmente insaturado" se refiere a un resto de anillo que incluye al menos un doble o triple enlace. El termino "parcialmente insaturado" pretende abarcar anillos que tienen multiples sitios de insaturacion, pero no pretende incluir grupos aromaticos (por ejemplo, restos arilo o heteroarilo) como se define aqrn.

[0047] Como se usa en el presente documento, el termino "saturado" se refiere a un resto de anillo que no contiene un doble o triple enlace, es decir, el anillo contiene todos los enlaces simples.

[0048] La colocacion del sufijo "-eno" a un grupo indica que el grupo es un resto divalente, por ejemplo, alquileno es el resto divalente de alquilo, alquenileno es el resto divalente de alquenilo, alquinileno es el resto divalente de alquinilo, el heteroalquileno es el el resto divalente de heteroalquilo, heteroalquenileno es el resto divalente de heteroalquenilo, heteroalquinileno es el resto divalente de heteroalquinilo, el carbociclileno es el resto divalente de carbociclo, heterociclileno es el resto divalente de heterociclilo, arileno es el resto divalente de arilo, y heteroarileno es el resto divalente de heteroarilo.

[0049] Como se entiende a partir de lo anterior, los grupos alquilo, alquenilo, alquinilo, heteroalquilo, heteroalquenilo, heteroalquinilo, carbociclilo, heterociclilo, arilo y heteroarilo, como se definen aqrn, estan, en ciertas realizaciones, opcionalmente sustituidos. Opcionalmente sustituido se refiere a un grupo que puede estar sustituido o no sustituido (por ejemplo, "sustituido" o "no sustituido" alquilo, "sustituido" o "no sustituido" alquenilo, "sustituido" o "no sustituido", alquinilo "sustituido" o "no sustituido", heteroalquilo "sustituido" o "no sustituido", heteroalquenilo "sustituido" o "no sustituido", heteroalquinilo "sustituido" o "no sustituido", carbociclilo "sustituido" o "no sustituido", heterociclilo "sustituido" o "no sustituido", arilo "sustituido" o "no sustituido", o grupo heteroarilo "sustituido" o "no sustituido"). En general, el termino "sustituido" significa que al menos un hidrogeno presente en un grupo se reemplaza con un sustituyente permisible, por ejemplo, un sustituyente que al sustituirlo produce un compuesto estable, por ejemplo, un compuesto que no experimenta una transformacion espontanea como por reordenamiento, ciclacion, eliminacion u otra reaccion. A menos que se indique lo contrario, un grupo "sustituido" tiene un sustituyente en una o mas posiciones sustituibles del grupo, y cuando se sustituye mas de una posicion en cualquier estructura dada, el sustituyente es el mismo o diferente en cada posicion. La presente invencion contempla cualquiera y todas estas combinaciones para llegar a un compuesto estable. Para los fines de esta invencion, los heteroatomos tales como nitrogeno pueden tener sustituyentes de hidrogeno y/o cualquier sustituyente adecuado como se describe en el presente documento que satisfaga las valencias de los heteroatomos y de como resultado la formacion de un resto estable.

[0050] Los sustituyentes ejemplares incluyen, pero no se limitan a, halogeno, -CN, -NO², -N³, -SO²H, -SO³H, -OH, -ORaa, -ON(Rbb)², -N(Rbb)² , -N(Rbb)³+X-, -N(ORcc)Rbb, -SH, -SRaa, -SSRcc, -C(=O)Raa, -CO²H, -CHO, -C(ORcc)², -CO2Raa, -OC(=O)Raa, -OCO2Raa, -C(=O)N(Rbb)2, -OC(=O)N(Rbb)2, -NRbbC(=O)Raa, -NRbbCO2Raa, -NRbbC(=O)N(Rbb)2, -C(=NRbb)Raa, -C(=NRbb)ORaa, -OC(=NRbb)Raa, -OC(=NRbb)ORaa, -C(=NRbb)N(Rbb)2, -OC(=NRbb)N(Rbb)2, -NRbbC(=NRbb)N(Rbb)2, -C(=O)NRbbSO2Raa, -NRbbSO2Raa, -SO2N(Rbb)2, -SO2Raa, -SO2ORaa, -OSO2Raa, -S(=O)Raa, -OS(=O)Raa, -Si(Raa)3, -OSi(Raa)3 -C(=S)N(Rbb)2, -C(=O)SRaa, -C(=S)SRaa, -SC(=S)SRaa, -SC(=O)SRaa, -OC(=O)SRaa, -SC(=O)ORaa, -SC(=O)Raa, -P(=O)2Raa, -OP(=O)2Raa, -P(=O)(Raa)2, -OP(=O)(Raa)2, -OP(=O)(ORcc)2, - P(=O)2N(Rbb)2, -OP(=O)2N(Rbb)2, -P(=O)(NRbb)2, -OP(=O)(NRbb)2, -NRbbP(=O)(ORcc)2, -NRbbP(=O)(NRbb)2, -P(Rcc)2, -P(Rcc)3, -OP (Rcc)², -OP(Rcc)³, -B(Raa)², -B(ORcc)², -BRaa(ORcc), C^1.10 alquilo, C^1-10 perhaloalquilo, C^2-10 alquenilo, C^2-10 alquinilo, C^1-10 heteroalquilo, C^2-10 heteroalquenilo, C^2-10 heteroalquilo, C^3-10 carbociclilo, heterociclilo de 3 a 14 miembros, C^6-14 arilo y heteroarilo de 5 a 14 miembros, en donde cada alquilo, alquenilo, alquinilo, heteroalquilo, heteroalquenilo, heteroalquinilo, carbociclilo, heterociclilo, arilo, y heteroarilo esta sustituido independientemente con 0, 1, 2, 3, 4 o 5 grupos Rdd;

o dos hidrogenos geminales en un atomo de carbono se reemplazan con el grupo =O, =S, =NN(Rbb)², =NNRbbC(=O)Raa, =NNRbbC(=O)ORaa, =NNRbbS(=O)²Raa, =NRbb, o =NORcc;

cada instancia de Raa se selecciona, independientemente, entre C^1-10 alquilo, C^1-10 perhaloalquilo, C^2-10 alquenilo, C²-¹⁰ alquinilo, C^1.10 heteroalquilo, C^2-10 heteroalquenilo, C^2-10 heteroalquinilo, C^3-10 carbociclilo, heterociclilo de 3 a 14 miembros, C^6-14 arilo y heteroarilo de 5 a 14 miembros, o dos grupos Raa se unen para formar un heterociclilo de 3 a 14 miembros o un anillo de heteroarilo de 5 a 14 miembros, en donde cada alquilo, alquenilo, alquinilo, heteroalquilo, heteroalquenilo, heteroalquinilo, carbociclilo, heterociclilo, arilo y heteroarilo estan sustituidos independientemente con 0, 1,2, 3, 4 o 5 grupos Rdd;

cada instancia de Rbb se selecciona, independientemente, de hidrogeno, -OH, -ORaa, -N(Rcc)², -CN, -C(=O)Raa, -C(=O)N(Rcc)2, -CO2Raa, -SO2Raa, -C(=NRcc)ORaa, -C(=NRcc)N(Rcc)2, -SO2N(Rcc)2, -SO2Rcc, -SO2ORcc, -SORaa, -C(=S)N(Rcc)², -C(=O)SRcc, -C(=S)SRcc, -P(=O)²Raa, -P(=O)(Raa)², -P(=O)²N(Rcc)², - P(=O)(NRcc)² , C^1-10 alquilo, C^1-10 perhaloalquilo, C^2-10 alquenilo, C^2-10 alquinilo, C^1-10 heteroalquilo, C^2-10 heteroalquenilo, C^2-10 heteroalquinilo, C^3-10 carbociclilo, heterociclilo de 3 a 14 miembros, C^6-14 arilo y heteroarilo de 5-14 miembros, o dos grupos Rbb se unen para formar un heterociclilo de 3 a 14 miembros o un anillo de heteroarilo de 5-14 miembros, en donde cada alquilo, alquenilo, alquinilo, heteroalquenilo, heteroalquenilo, heteroalquinilo carbociclilo, heterociclilo, arilo y heteroarilo estan independientemente sustituidos con 0, 1, 2, 3, 4 o 5 grupos Rdd; cada instancia de Rcc se selecciona, de forma independiente, entre hidrogeno, C^1-10 alquilo, C^1-10 perhaloalquilo, C^2-10 alquenilo, C^2-10 alquinilo, C^1-10 heteroalquilo, C^2-10 heteroalquenilo, C^2-10 heteroalquinilo, C^3.10 carbociclilo, heterociclilo de 3 a 14 miembros, C^6-14 arilo y heteroarilo de 5 a 14 miembros, o dos grupos Rcc se unen para formar un heterociclilo de 3 a 14 miembros o un anillo de heteroarilo de 5 a 14 miembros, en donde cada alquilo, alquenilo, heteroalquiniloalquilo, heteroalquenilo, heteroalquinilo, carbociclilo, heterociclilo, arilo y heteroarilo estan sustituidos independientemente con 0, 1, 2, 3, 4 o 5 grupos Rdd;

cada instancia de Rdd se selecciona, independientemente, entre halogeno, -CN, -NO², -N³, -SO²H, -SO³H, -OH, -ORee, -ON(Rff)2, -N(Rff)2, -N(Rff)³+X-, -N(ORee)Rff, -SH, -Ree, -SSRee, -C(=O)Ree, -CO²H, -CO²Ree, -OC(=O)Ree, -OCO2Ree, -C(=O)N(Rff)2, -OC(=O)N(Rff)2, -NRffC(=O)Ree, -NRffCO2Ree, -NRffC(=O)N(Rff)2, -C(=NRff)ORee, -OC(=NRff)Ree, -OC(=NRff)ORee, -C(=NRff)N(Rff)2, -OC(=NRff)N(Rff)2, -NRffC(=NRff)N(Rff)2, -NRffSO2Ree, -SO2N(Rff)2, -SO2Ree, -SO2ORee, -OSO2Ree, -S(=O)Ree, -Si(Ree)3, -OSi(Ree)3, -C(=S)N(Rff)2, -C(=O)SRee, -C(=S)SRee, -SC(=S)SRee, -P(=O)²Ree, -P(=O)(Ree)², -OP(=O)(Ree)², -OP(=O)(ORee)², C^1.6 alquilo, C^1.6 perhaloalquilo, C^2-6 alquenilo, C^2-6 alquinilo, C^1.6 heteroalquilo, C^2-6 heteroalquenilo, C^2-6 heteroalquilo, C^3-10 carbodclico, heterociclo de 3 a 10 miembros, C^6-10 arilo, heteroarilo de 5 a 10 miembros, en donde cada alquilo, alquenilo, alquinilo, heteroalquilo, heteroalquenilo, heteroalquinilo, carbociclilo, heterociclilo, arilo y heteroarilo esta independientemente sustituido con 0, 1, 2, 3, 4, o 5 grupos Rgg, o dos sustituyentes Rdd geminales se pueden unir para formar =O o =S;

cada instancia de Ree se selecciona, independientemente, entre C^1-6 alquilo, C^1-6 perhaloalquilo, C^2-6 alquenilo, C^2-6 alquinilo, C^1.6 heteroalquilo, C^2-6 heteroalquenilo, C^2-6 heteroalquinilo, C^3-10 carbociclilo, C6-10 arilo, heterociclilo de 3­ 10 miembros y heteroarilo de 3-10 miembros, en donde cada alquilo, alquenilo, alquinilo, heteroalquilo, heteroalquenilo, heteroalquinilo, carbociclilo, heterociclilo, arilo y heteroarilo estan sustituidos independientemente con 0, 1, 2, 3, 4, o 5 grupos Rgg;

cada instancia de Rff es, independientemente, seleccionada de hidrogeno, C^1-6 alquilo, C^1-6 perhaloalquilo, C^2-6 alquenilo, C^2-6 alquinilo, C^1-6 heteroalquilo, C^2-6 heteroalquileno, C^2-6 heteroalquilo, C^3-10 alquinilo, C^3-10 carbociclilo, heterociclilo de 3 a 10 miembros, arilo C^6-10 y heteroarilo de 5-10 miembros, o dos grupos Rff para formar un heterociclilo de 3 a 14 miembros o un anillo de heteroarilo de 5-14 miembros, en donde cada alquilo, alquenilo, alquinilo, heteroalquilo, heteroalquenilo, heteroalquinilo, carbociclilo, heterociclilo, arilo y heteroarilo estan sustituidos independientemente con 0, 1, 2, 3, 4 o 5 grupos Rgg; y

cada instancia de Rgg es, independientemente, halogeno, -CN, -NO², -N³, -SO²H, -SO³H, -OH, -OC^1-6 alquilo, -ON(C^1-6 alquilo)², -N(C^1-6 alquilo)², -N(C^1-6 alquilo)3+X-, -NH(C^ alquilo)²+X-, -NH²(C ^ alquilo) X-, -NH³ +X-, -N(OC¹-6 alquilo) (C^1-6 alquilo), -N(O^h ) (C^1.6 alquilo), -ⁿ H(OH), -SH, -SC^1.6 alquilo, -SS(C^1-6 alquilo), -C(=O)(C^1-6 alquilo), -CO²H, -CO²(C^1-6 alquilo), -OC(=O)(C^1-6 alquilo), -OCO²(C^1-6 alquilo), -C(=O)NH², -C(=O)N(C^1-6 alquilo)², -OC(=O)NH(C^1-6 alquilo), -NHC(=O)(C^1-6 alquilo), -N(C^1-6 alquilo) C(=O)(C^1-6 alquilo), -NHCO²(C^1-6 alquilo), NHC(=O)N(Ci-6 alquilo)² , -NHC(=O)NH(Ci-6 alquilo), -NHC(=O)NH², -C(=NH)O(Ci-a alquilo), -OC(=NH) (Ci-a alquilo), -OC(=NH) Ci-a alquilo, -C(=NH)N(Ci-a alquilo)², -C(=NH)NH(Ci-a alquilo), -C(=NH)NH², -OC(=NH)N(Ci-a alquilo)² , -OC(NH)NH(Ci-a alquilo), -OC(NH)NH², -NHC(NH)N(Ci-a alquilo)², -NHC(=NH)NH² , -NHSO^Ci-a alquilo), -SO²N(Ci-a alquilo)², -SO²NH(Ci-a alquilo), -SO²NH², -sO²Ci-a alquilo, -SO²OCi-a alquilo, -OSO²Ci-a alquilo, -SoCi-a alquilo, -Si(Ci-a alquilo)3, -OSi(Ci-a alquilo)3-C(=S)N(Ci-a alquilo)², C(=S)NH(Ci-a alquilo), C(=S)NH², -C(=O)S(Ci-a alquilo), -C(=S)SCi-a alquilo, -SC(=S)SCi-a alquilo, -P(=o)²(Ci-a alquilo), -P(=O)(Ci-a alquilo)², -OP(=O)(Ci-a alquilo)² , -OP(=O)(OCi-a alquilo)², Cⁱ -6 alquilo, Cⁱ -6 perhaloalquilo, C^2-6 alquenilo, C^2-6 alquinilo, Cⁱ -6 heteroalquilo, C^2-6 heteroalquenilo, C^2-6 heteroalquinilo, C^3-10 carbociclilo, Ca-i⁰ arilo, heterociclo de 3-i0 miembros, heteroarilo de 5-i0 miembros; o dos sustituyentes geminales Rgg pueden unirse para formar =O o =S; en donde X- es un contraion.

[0051] En ciertas realizaciones, un sustituyente ejemplar se selecciona del grupo que consiste en halogeno, -CN, -NO² , -N³, -SO²H, -SO³H, -OH, -ORaa, -N(Rbb)², -SH, -SRaa, -SSRcc, -C(=O)Raa, -CO²H, -CHO, -CO²Raa, -OC(=O)Raa, -OCO²Raa, -C(=O)N(Rbb)², -OC(=O)N(Rbb)², -NRbbC(=O)Raa, -NRbbCO²Raa, -NRbbC(=O)N(Rbb)², -C(=O)NRbbSO²Raa, -NRbbSO²Raa, -SO²N(Rbb)² , - sO²Raa, -S(=O)Raa, Ci-io alquilo, Ci-io perhaloalquilo, C²-io alquenilo, C²-io alquinilo, Ci-io heteroalquilo, C²-io alquenilo, C²-io heteroalquinilo, C³-io carbociclilo, heterociclilo de 3 a i4 miembros, Ca-i⁴ arilo y heteroarilo de 5 a i4 miembros, en los que cada alquilo, alquenilo, alquinilo, heteroalquilo, heteroalquenilo, heteroalquinilo, carbociclilo, heterociclilo, arilo y heteroarilo se sustituye independientemente con 0, i, 2, 3, 4 o 5 grupos de Rdd.

[0052] Como se usa en el presente documento, el termino "halo" o "halogeno" se refiere a fluor (fluor, -F), cloro (cloro, -CI), bromo (bromo, -Br) o yodo (yodo, -I).

[0053] Como se usa en el presente documento, un "contraion" es un grupo cargado negativamente asociado con una amina cuaternaria cargada positivamente con el fin de mantener la neutralidad electronica. Los contraiones ejemplares incluyen iones haluro (por ejemplo, F-, Cl-, Br-, I-), NO³-, CO ⁴-, OH-, H²PO⁴-, HSO⁴-, iones sulfonato (por ejemplo, metansulfonato, trifluorometanosulfonato, p-toluenosulfonato, bencenosulfonato, iO-alcanforsulfonato, naftaleno-2-sulfonato, naftaleno-i-sulfonico-5-sulfonato, etan-i-sulfonato-2-acido sulfonico y similares, y los iones carboxilato (por ejemplo, acetato de etanoato, propanoato, benzoato, glicerato, lactato, tartrato, glicolato y similares).

[0054] Como se usa en este documento, un "grupo saliente" es un termino comprendido en la tecnica que se refiere a un fragmento molecular que se aleja con un par de electrones en la escision de enlaces heteroltticos, en el que el fragmento molecular es una molecula anionica o neutra. Ver, por ejemplo, Smith, March Advanced Organic Chemistry, 6a ed. (50i-502). Los grupos salientes ejemplares incluyen, pero no se limitan a, halo (por ejemplo, cloro, bromo, yodo) y -OSO²Raa, en donde Raa como se define aqrn. El grupo -OSO²Raa abarca grupos salientes tales como tosilo, mesilo y besilo, en los que Raa es alquilo opcionalmente sustituido (por ejemplo, -CH³) o arilo opcionalmente sustituido (por ejemplo, fenilo, tolilo).

[0055] Como se usa en el presente documento, el termino "hidroxilo" o "hidroxi" se refiere al grupo -OH. El termino "hidroxilo sustituido" o "hidroxilo sustituido", por extension, se refiere a un grupo hidroxilo en el que el atomo de oxfgeno unido directamente a la molecula parental esta sustituido con un grupo distinto de hidrogeno, e incluye grupos seleccionados de -ORaa, -ON(Rbb)², -OC(=O)SRaa, -OC(=O)Raa, -OCO²Raa, -OC(=O)N(R^bb)2 -OC(=NRbb)Raa, -OC(=NRbb)ORaa, -OC(=NRbb)N(Rbb)2, -OS(=O)Raa, -OSO2Raa, -OSi(Raa)3, -OP(Rcc)2, -OP(Rcc)3, -OP(=O)2Raa, -OP(=O)(Raa)², -OP(=O)(ORcc)², -OP(=O)²N(Rbb)², y -OP(=O)(NRbb)², en donde Raa, Rbb y Rcc son como se definen aqrn.

[0056] Como se usa en el presente documento, el termino "tiol" o "tio" se refiere al grupo -SH. El termino "tiol sustituido" o "tio sustituido", por extension, se refiere a un grupo tiol en el que el atomo de azufre directamente unido a la molecula parental esta sustituido con un grupo distinto de hidrogeno, e incluye grupos seleccionados de -SRaa, -S = SRcc, -SC(=S)SRaa, -SC(=O)SRaa, -SC(=O)ORaa, y -SC(=O)Raa, en donde Raa y Rcc son como se definen aqrn.

[0057] Como se usa en el presente documento, el termino "amino" se refiere al grupo -NH². El termino "amino sustituido", por extension, se refiere a un amino monosustituido o un amino disustituido, como se define en el presente documento. En ciertas realizaciones, el "amino sustituido" es un amino monosustituido o un grupo amino disustituido.

[0058] Como se usa en este documento, el termino "amino monosustituido" se refiere a un grupo amino en el que el atomo de nitrogeno directamente unido a la molecula parental esta sustituido con un hidrogeno y un grupo distinto de hidrogeno, e incluye grupos seleccionados de -NH(Rbb), -NHC(=O)Raa, -NHCO²Raa, -NHC(=O)N(Rbb)², -NHC(=NRbb)N(Rbb)², -NHSO²Raa, -NHP(=O)(ORcc)², y -NHP(=O)(NRbb)², en donde Raa, Rbb y Rcc son como se definen en el presente documento, y en donde Rbb del grupo -NH(Rbb) no es hidrogeno.

[0059] Como se usa en el presente documento, el termino "amino disustituido" se refiere a un grupo amino en el que el atomo de nitrogeno unido directamente a la molecula parental esta sustituido con dos grupos distintos de hidrogeno, e incluye grupos seleccionados de -N(Rbb)², -NRbb C(=O)Raa, -NRbbCO²Raa, -NRbbC(=O)N(Rbb)², -NRbbC(=NRbb)N(Rbb)², -NRbbSO²Raa, -NRbbP(=O)(ORcc)², y -NRbbP(=O)(NRbb)², en donde Raa, Rbb y Rcc son como se definen en el presente documento, con la condicion de que el atomo de nitrogeno directamente unido a la molecula

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parental no este sustituido con hidrogeno.

[0060] Como se usa en el presente documento, el termino "sulfonilo" se refiere a un grupo seleccionado entre -SO²N(Rbb)², -SO²Raa y -SO²ORaa, en donde Raa y Rbb son como se definen en el presente documento.

[0061] Como se usa en el presente documento, el termino "sulfinilo" se refiere al grupo -S(=O)Raa, en donde Raa es como se define en el presente documento.

[0062] Como se usa en el presente documento, el termino "carbonilo" se refiere a un grupo en el que el carbono se une directamente a la molecula principal esta hibridado en sp2 y esta sustituido con un atomo de oxfgeno, nitrogeno o azufre, por ejemplo, un grupo seleccionado de cetonas (-C(=O)Raa), acidos carboxflicos (-CO²H), aldehfdos (­ CHO), esteres (-CO²Raa), -C(=O)SRaa, -C(=S)SRaa), amidas (-C(=O)N(Rbb)² , -C(=O)NRbbSO²Raa, -C(=S)N(Rbb)²) e iminas (-C(=NRbb)Raa, -C(=NRbb)ORaa), -C(=NRbb)N(Rbb)²), en donde Raa y Rbb son como se definen aqm.

[0063] Como se usa en el presente documento, el termino "sililo" se refiere al grupo -Si(Raa)³ , en el que Raa es como se define en el presente documento.

[0064] Como se usa en el presente documento, el termino "oxo" se refiere al grupo =O, y el termino "tiooxo" se refiere al grupo = S.

[0065] Los atomos de nitrogeno pueden estar sustituidos o no sustituidos segun lo permita la Valencia, e incluyen atomos de nitrogeno primarios, secundarios, terciarios y cuaternarios. Los ejemplos de sustituyentes de atomos de nitrogeno incluyen, pero no estan limitados a, hidrogeno, -OH, -ORaa, -N(Rcc)², -CN, -C(=O)Raa, -C(=O)N(Rcc)², -CO2Raa, -SO2Raa, -C(=NRbb)Raa, -C(=NRcc)ORaa, -C(=NRcc)N(Rcc)2, -SO2N(Rcc)2, -SO2Rcc, -SO2ORcc, -SORaa, -C(=S)N(Rcc)², -C(=O)SRcc, -C(=S)SRcc, -P(=O)²Raa, -P(=O)(Raa)² , -P(=O)²N(Rcc)² , -P(=O)(NRcc)², C^1.10 alquilo, C-^mo perhaloalquilo, C^2-10 alquenilo, C^2-10 alquinilo, C^1.10 heteroalquilo, C^2-10 heteroalquileno, C^2-10 heteroalquinilo, C^3-10 carbociclilo, heterociclilo de 3 a 14 miembros, C^6-14 arilo y heteroarilo de 5-14 miembros, o dos grupos Rcc unidos a un atomo de N se unen para formar un heterociclilo de 3 a 14 miembros o anillo de heteroarilo de 5-14 miembros, en donde cada alquilo, alquenilo, alquinilo, heteroalquilo, heteroalquenilo, heteroalquinilo, carbociclilo, heterociclilo, arilo y heteroarilo esta independientemente sustituido con 0, 1, 2, 3, 4, o 5 grupos de Rdd, y en donde Raa, Rbb, Rcc y Rdd son como se definen anteriormente.

[0066] En ciertas realizaciones, el sustituyente presente en el atomo de nitrogeno es un grupo protector de nitrogeno (tambien denominado en este documento como un "grupo protector de amino"). Los grupos protectores de nitrogeno incluyen, pero no se limitan a, -OH, -ORaa, -N(Rcc)², -C(=O)Raa, -C(=O)N(Rcc)², -CO²Raa, -SO²Raa -C(=NRcc)Raa, -C(=NRcc)ORaa, -C(=NRcc)N(Rcc)2, -SO2N(Rcc)2, -SO2Rcc, -SO2ORcc, -SORaa, -C(=S)N(Rcc)2, -C(=O)SRcc, -C(=S)SRcc, C^1-10 alquilo (por ejemplo, aralquilo, heteroaralquilo), C^2-10 alquenilo, C^2-10 alquinilo, C^1-10 heteroalquilo, C^2-10 heteroalquenilo, C^2-10 heteroalquilo, C^3-10 carbociclilo, heterociclilo de 3 a 14 miembros, C^6-14 arilo, y heteroarilo de 5­ 14 miembros, en donde cada alquilo, alquenilo, alquinilo, heteroalquilo, heteroalquenilo, heteroalquinilo, carbociclilo, heterociclilo, aralquilo, arilo y heteroarilo estan sustituidos independientemente con 0, 1, 2, 3, 4 o 5 grupos Rdd, y en los que Raa, Rbb, Rcc y Rdd son como se definen en el presente documento. Los grupos protectores de nitrogeno son bien conocidos en la tecnica e incluyen los descritos en detalle en grupos de proteccion en srntesis organica, TW Greene y PGM Wuts, 3a edicion, John Wiley & Sons, 1999.

[0067] Por ejemplo, los grupos protectores de nitrogeno tales como grupos amida (por ejemplo, -C(=O)Raa) incluyen, pero no se limitan a, formamida, acetamida, cloroacetamida, tricloroacetamida, trifluoroacetamida, fenilacetamida, 3-fenilpropanamida, picolinamida, 3-piridilcarboxamida, derivado de N-benzoilfenilalanilo, benzamida, pfenilbenzamida, o-nitrofenilacetamida, o-nitrofenoxiacetamida, acetoacetamida, (N-ditiobenciloxiacilamino)acetamida, 3-(p-hidroxifenilo)propanamida, 3-(o-nitrofenilo)propanamida, 2-metilo-2-(onitrofenoxi)propanamida, 2-metilo-2-(o-fenilazofenoxi)propanamida, 4-clorobutanamida, 3-metilo-3-nitrobutanamida, o-nitrocinamida, derivado de N-acetilmetionina, o-nitrobenzamida y o-(benzoiloximetilo)benzamida.

[0068] Los grupos protectores de nitrogeno tales como grupos carbamato (por ejemplo, -C(=O)ORaa) incluyen, pero no se limitan a, carbamato de metilo, carbamato de etilo, carbamato de 9-fluorenilmetilo (Fmoc), 9-(2-sulfo)carbamato de fluorenilmetilo, carbamato de 9-(2,7-dibromo)fluoroenilmetilo, 2,7-di-f-butilo-[9-(10,10-dioxo-10,10,10,10-tetrahidrotioxantilo)]carbamato de metilo (DBD-Tmoc), carbamato de 4-metoxifenacilo (Phenoc), carbamato de 2,2,2-tricloroetilo (Troc), carbamato de 2-trimetilsililetilo (Teoc), carbamato de 2-feniletilo (hZ), 1-(1-adamantilo)-1-carbamato de metiletilo (Adpoc), 1,1-dimetilo-2-carbamato de haloetilo, 1,1-dimetilo-2,2-carbamato de dibromoetilo (DB-f-BOC), 1,1-dimetilo-2,2,2-carbamato de tricloroetilo (TCBOC), 1-metilo-1-(4-bifenilil)carbamato de etilo (Bpoc), 1-(3,5-di-f-butilfenilo)-1-carbamato de metiletilo (f-Bumeoc), 2-(2'-y 4'-piridilo)carbamato de etilo (Pyoc), 2-(N,N-diciclohexilcarboxamido), carbamato de f-butilo (BOC), carbamato de 1-adamantilo (Adoc), carbamato de vinilo (Voc), carbamato de alilo (Alloc), carbamato de 1 -isopropilalilo (Ipaoc), carbamato de cinamilo (Coc), carbamato de 4-nitrocinamilo (Noc), carbamato de 8-quinolilo, carbamato de N-hidroxipiperidinilo, carbamato de N-hidroxipiperidinilo, carbamato de N-hidroxipiperidinilo), carbamato de p-metoxibencilo (Moz), carbamato de pnitobencilo, carbamato de p-bromobencilo, carbamato de p-clorobencilo, carbamato de 2,4-diclorobencilo, carbamato de 4-metilsulfinilbenzilo (Msz), carbamato de 9-antrilmetilo, carbamato de difenilmetilo, carbamato de 2-metiltioetilo, carbamato de 2-metilsulfoniletilo, 2-(p-toluenosulfonilo)carbamato de etilo, [2-(1,3-ditianilo)]carbamato metilo (Dmoc), carbamato de 4-metiltiofenilo (Mtpc), carbamato de 2,4-dimetiltiofenilo (Bmpc), carbamato de 2-fosfonioetilo (Peoc), carbamato de 2-trifenilfosfonioisopropilo (Ppoc), carbamato de 1,1-dimetilo-2-cianoetilo, m-cloro-p-carbamato de aciloxibencilo, p-(dihidroxiborilo)carbamato de bencilo, carbamato de 5-bencisoxazolilmetilo, 2-(trifluorometilo)-6-carbamato de cromonilmetilo (Tcroc), carbamato de m-nitrofenilo, carbamato de 3,5-dimetoxibencilo, carbamato de 3.5- dimetoxibencilo, carbamato de 4-dimetoxi-6-nitrobencilo, carbamato de fenilo(o-nitrofenilo)metilo, carbamato de f-amilo, tiocarbamato de S-bencilo, carbamato de p-cianobencilo, carbamato de ciclobutilo, carbamato de ciclohexilo, carbamato de ciclopentilo, carbamato de ciclopropilmetilo, carbamato de p-deciloxibencilo, carbamato de 2,2-dimetoxiacilvinilo, carbamato de o-(N,N-dimetilcarboxido)bencilo, carbamato de 1,1-dimetilo-3-(N,N-dimetilcarboxamido), carbamato de 1,1 -dimetilpropinilo, carbamato de di(2-piridilo)metilo, carbamato de 2-furanilmetilo, carbamato de 2-yodoetilo, carbamato de isoborilo, carbamato de isobutilo, carbamato de isonicotinilo, p-(p'-metoxifenilazo)carbamato de bencilo, carbamato de 1 -metilciclobutilo, carbamato de 1-metilciclohexilo, carbamato de 1-metilo-1-ciclopropilmetilo, 1-metilo-1-(3,5-dimetoxifenilo)carbamato de etilo, 1-metilo-1-(pfenilazofenilo)carbamato de etilo, 1-metilo-1-carbamato de feniletilo, 1-metilo-1-(4-piridilo)carbamato de etilo, carbamato de fenilo, p-(fenilazo)carbamato de bencilo, 2,4,6-tri-f-carbamato de butilfenilo, 4-(trimetilamonio)carbamato de bencilo y 2,4,6-trimetil-carbamato de bencilo.

[0069] Los grupos protectores de nitrogeno tales como grupos sulfonamida (por ejemplo, -S(=O)²Raa) incluyen, pero no se limitan a, p-toluensulfonamida (Ts), bencenosulfonamida, 2,3,6,-trimetilo-4-metoxibencenosulfonamida (Mtr), 2,4,6-trimetoxi-bencenosulfonamida (Mtb), 2,6-dimetilo-4-metoxibencenosulfonamida (Pme), 2,3,5,6-tetrametilo-4-metoxibenzesulfonamida (Mte), 4-metoxibencenosulfonamida (Mbs), 2,4,6-trimetilbencenosulfonamida (Mts), 2,6-dimetoxi-4-metilbencenosulfonamida (iMds), 2,2,5,7,8-pentametilcroman-6-sulfonamida (Pmc), metanosulfonamida (Ms), p-trimetilsililetanosulfonamida (SES), 9-antracenosulfonamida, 4-(4',8'-dimetoxinaftilmetilo)bencenosulfonamida (DNMBS), bencilsulfonamida, trifluorometilfosulfonamida, y fenacilsulfonamida.

[0070] Otros grupos protectores de nitrogeno incluyen, pero no se limitan a, derivado de fenotiazinilo-(10)-acilo, derivado de N'-p-tolueno-sulfonilaminoacilo, derivado de N'-fenilaminotioacilo, derivado de N-benzoilfenilalanilo, derivado de N-acetilmetionina, 4,5-difenilo-3-oxazolina-2-ona, N-ftalimida, N-ditiasuccinimida (Dts), N-2,3-difenilmaleimida, N-2,5-dimetilpirrol, Aducto de N-1,1,4,4-tetrametildilaziaciclopentano (STABASE), 1,3-dimetilo-1.3.5- triazaciclohexan-2-ona 5-sustituida, 1,3-dibencilo-1,3,5-triazaciclohexano-2-ona 5-sustituida, 1,3,5-dinitro-4-piridona 1 -sustituida, N-metilamina, N-alilamina, N-[2-(trimetilsilil)etoxi]metilamina (SEM), N-3-acetoxipropilamina, N-(1-isopropilo-4-nitro-2-oxo-3-pirololina-3-ilo)amina, sales de amonio cuaternario, N-bencilamina, N-di(4-metoxifenilo)metilamina, N-5-dibenzosuberilamina, N-trifenilmetilamina (Tr), N-[(4-metoxifenilo)difenilmetil]amina (MMTr), N-9-fenilfluorenilamina (PhF), N-2,7-dicloro-9-fluorenilmetilenamina, N-ferrocenilmetilamino (Fcm), N-2-picolilamino N'-oxido, N-1,1-dimetiltiometilenamina, N-bencilidenamina, N-p-metoxibencilidenamina, N-difenilmetiloeneamina, N-[(2-piridilo)mesitilo]metilenamina, N-('N',N'-dimetilaminometilen)amina, N,N'-isopropilidendiamina, N-p-nitrobencilidenamina, N-salicilidenamina, N-5-clorosalicilidenamina, N-5-cloro-2-hidroxinilo)fenilmetilenamina, N-ciclohexilidenamina, n-(5,5-dimetilo-3-oxo-1-ciclohexenilo)amina, derivado de N-borano, derivado del acido N-difenilbormico, N-[fenilo(pentaacilcromio- o tungsteno)acilo]amina, quelato de N-cobre, quelato de N-zinc, N-nitroamina, N-nitrosoamina, N-oxido de amina, difenilfosfinamida (Dpp), dimetiltiofosfinamida (Mpt), difeniltiofosfinamida de difenilo (Ppt), fosforamidatos de dialquilo, dibencilfosforamidato, bencenosulfenamida, onitrobencenosulfenamida (Nps), 2,4-dinitrobencenosulfenamida, pentaclorobencenosulfenamida, 2-nitro-4-metoxibencenosulfenamida, trifenilmetilsulfenamida y 3-nitropiridinesulfenamida (Npys).

[0071] En ciertas realizaciones, el sustituyente presente en un atomo de oxfgeno es un grupo protector de oxfgeno (tambien denominado en este documento un "grupo protector de hidroxilo"). Los grupos protectores de oxfgeno incluyen, pero no se limitan a, -Raa, -N(Rbb)² , -c(=O)SRaa, -C(=O)Raa, -CO²Raa, -C(=O)N(Rbb)², -C(=NRbb)Raa, -C(=NRbb)ORaa, -C(=NRbb)N(Rbb)2, -S(=O)Raa, -SO2Raa, -Si(Raa)s -P(Rcc)2, -P(Rcc)a, -P(=O)2Raa, -P(=O)(Raa)2, -P(=O)(ORcc)² , -P(=O)²N(Rbb)², y -P(=O)(NRbb)², en donde Raa, Rbb y Rcc son como se definen aqrn. Los grupos protectores de oxfgeno son bien conocidos en la tecnica e incluyen los descritos en detalle en Protecting Groups in Organic Synthesis, TW Greene y PGM Wuts, 3a edicion, John Wiley & Sons, 1999.

[0072] Los grupos protectores de oxfgeno ejemplares incluyen, pero no se limitan a, metilo, metoxilmetilo (MOM), metiltioometilo (MTM), t-butiltiometilo, (fenildimetilsililo)metoximetilo (SMOM), benciloximetilo (BOM), p-metoxi benciloximetilo (PMBM), (4-metoxifenoxi)metilo (p-AOM), guayacoolmetilo (GUM), f-butoximetilo, 4-pentenilximetoetilo (POM), siloximetilo, 2-metoxietoximetilo (MEM), 2,2,2-tricloroetoximetilo, bis(2-cloroetoxi)metilo, 2-(trimetilsililo)etoximetilo (SEMOR), tetrahidropiranilo (THP), 3-bromotetrahidropiranilo, tetrahidrotiopiranilo, 1-metoxiciclohexilo, 4-metoxitetrahidrotiopiranilo S,S-dioxido, 1-[(2-cloro-4-metilo)fenilo]-4-metoxipiperidina-4-ilo (CTMP), 1,4-dioxan-2-ilo, tetrahidrofuronilo, tetrahidrotiofuranilo, 2,3,3a,4,5,6,7,7a-octahidro-7,8,8-trimetilo-4,7-metanobenzofuran-2-ilo, 1 -etoxietilo, 1-(2-cloroetoxi)etilo, 1-metilo-1-metoxietilo, 1-metilo-1-benciloxietilo, 1-metilo-1-benciloxi-2-fluoroetilo, 2,2,2-tricloroetilo, 2-trimetilsililetilo, 2-(fenilselenil)etilo, f-butilo, alilo, p-clorofenilo, p-metoxifenilo, 2,4-dinitrofenilo, bencilo (Bn), p-metoxibencilo, 3,4-dimetoxibencilo, o-nitrobencilo, p-nitrobencilo, phalobencilo, 2,6-diclorobencilo, p-cianobencilo, p-fenilbencilo, 2-picolilo, 4-picolilo, 3-metilo-2-picolilo N-oxido, difenilmetilo, p,p'-dinitrobenzhidrilo, 5-dibenzosuberilo, trifenilmetilo, a-naftildifenilmetilo, p-metoxifenildifenilmetilo, di(p-metoxifenilo)fenilmetilo, tri(p-metoxifenilo)metilo, 4-(4'-bromofenaciloxifenilo)difenilmetilo, 4,4',4”-tris(4,5-dicloruroftalimidofenilo)metilo, 4,4',4”-tris(levulinoiloxifenilo)metilo, 4,4',4”-tris(benzoiloxifenilo)metilo, 3-(imidazol-1ilo)bis(4,4-dimetoxifenilo)metilo, 1,1-bis(4-metoxifenilo)-1'-pirenilmetilo, 9-antrilo, 9-(9-fenilo)xantenilo, 9-(9-fenilo-10-oxo)antrilo, 1,3-benzoditiolan-2-ilo, benzisotiazolilo S,S-dioxido, trimetilsililo (TMS), trietilsililo (TES), triisopropilsililo (TIPS), dimetilisopropilsililo (IPDMS), dietilisopropilsililo (DEIPS), dimetiltexilsililo, t-butildimetilsililo (TBd Ms ), t-butildifenilsililo (TBDPS), tribencilsililo, tri-p-xililsililo, trifenilsililo, difenilmetilsililo (DPMS), t-butilmetoxifenilsililo (TBMPS), formiato, benzoilformiato, acetato, cloroacetato, dicloroacetato, tricloroacetato, trifluoroacetato, metoxiacetato, trifenilmetoxiacetato, fenoxiacetato, p-clorofenoxiacetato, 3-fenilpropionato, 4-oxopentanoato (levulinato), 4,4-(ethyleneditio)pentanoato (levulinoilditioacetal), pivaloato, adamantoato, crotonato, 4-metoxicrotonato, benzoato, p-fenilbenzoato, 2,4,6-trimetilbenzoato (mesitoato), carbonato de metilo, carbonato de 9-fluorenilmetilo (Fmoc), carbonato de etilo, carbonato de 2,2,2-tricloroetilo (Troc), 2-(trimetilsililo)carbonato de etilo (TMSEC), 2-(fenilsulfonil)carbonato de etilo (Psec), 2-(trifenilfosfonio)carbonato de etilo (Peoc), carbonato de isobutilo, carbonato de vinilo, carbonato de alilo, carbonato de t-butilo (BOC), carbonato de p-nitrofenilo, carbonato de bencilo, carbonato de p-metoxibencilo, carbonato de 3,4-dimetoxibencilo, carbonato de o-nitrobencilo, carbonato de p-nitrobencilo, tiocarbonato de S-bencilo, carbonato de 4-etoxi-1-naftilo, ditiocarbonato de metilo, 2-yodobenzoato, 4-azidobutirato, 4-nitro-4-metilpentanoato, o-(dibromometilo)benzoato, 2-formilbencenosulfonato, 2-(metiltiometoxi)etilo, 4-(metiltiometoxi)butirato, 2-(metiltiometoximetilo)benzoato, 2,6-dicloro-4-metilfenoxiacetato, 2,6-dicloro-4-(1,1,3,3-tetrametilo-butilo)fenoxiacetato, 2,4-bis(1,1-dimetilpropilo)fenoxiacetato, clorodifenilacetato, isobutirato, monosuccinato, (E)-2-metilo-2-butenoato, o-(metoxiacilo)benzoato, a-naftoato, nitrato, alquilo N,N,N’,N'-tetrametilfosfonamiamorato, alquilo N-fenilcarbamato, borato, dimetilfosfinotioilo, alquilo 2,4-dinitrofenilsulfenato, sulfato, metanosulfonato (mesilato), bilsulfonato y tosilato (Ts).

[0073] En ciertas realizaciones, el sustituyente presente en un atomo de azufre es un grupo protector de azufre (tambien denominado "grupo protector de tiol"). Los grupos protectores de azufre incluyen, pero no se limitan a, -Raa, -N(Rbb)2, -C(=O)SRaa, -C(=O)Raa, -CO2Raa, -C(=O)N(Rbb)2, -C(=NRbb)Raa, -C(=NRbb)ORaa, -C(=NRbb)N(Rbb)2, -S(=O)Raa, -SO2Raa, -Si(Raa)3, -P(Rcc)2, -P(Rcc)a, -P(=O)2Raa, -P(=O)(Raa)2, -P(=O)(ORcc)2, -P(=O)2N(Rbb)2, y -P(=O)(NRbb)², en donde Raa, Rbb y Rcc son como se definen aqm. Los grupos protectores de azufre son bien conocidos en la tecnica e incluyen los descritos en detalle en Protecting Groups in Organic Synthesis, TW Greene y PGM Wuts, 3a edicion, John Wiley & Sons, 1999.

[0074] Estos y otros sustituyentes ejemplares se describen con mas detalle en la descripcion detallada, ejemplos y reivindicaciones. La invencion no pretende limitarse de ninguna manera por el listado de sustituyentes de ejemplo anterior.

Otras definiciones

[0075] El termino "sal farmaceuticamente aceptable" se refiere a aquellas sales que, dentro del alcance del buen juicio medico, son adecuadas para su uso en contacto con los tejidos de seres humanos y animales inferiores sin toxicidad indebida, irritacion, respuesta alergica y similares, y son proporcionales con una relacion beneficio/riesgo razonable. Las sales farmaceuticamente aceptables son bien conocidas en la tecnica. Por ejemplo, Berge et al., describe sales farmaceuticamente aceptables en detalle en J. Pharmaceutical Sciences (1977) 66: 1-19. Las sales farmaceuticamente aceptables de los compuestos de esta invencion incluyen aquellas derivadas de acidos y bases inorganicas y organicas adecuadas. Ejemplos de sales de adicion de acido no toxicas, farmaceuticamente aceptables, son sales de un grupo amino formado con acidos inorganicos tales como acido clortndrico, acido broml'Hdrico, acido fosforico, acido sulfurico y acido perclorico o con acidos organicos tales como acido acetico, acido oxalico, acido maleico, acido tartarico, acido cftrico, acido succmico o acido malonico o utilizando otros metodos utilizados en la tecnica, como el intercambio ionico. Otras sales farmaceuticamente aceptables incluyen adipato, alginato, ascorbato, aspartato, bencenosulfonato, benzoato, bisulfato, borato, butirato, alcanforato, canforsulfonato, citrato, ciclopentanopropionato, digluconato, dodecilsulfato, etanosulfonato, formiato, fumarato, glucoheptonato, glicerofosfato, gluconato, hemisulfato, heptanoato, hexanoato, hidroyoduro, 2-hidroxietanosulfonato, lactobionato, lactato, laurato, laurilo sulfato, malato, maleato, malonato, metanosulfonato, 2-naftalensulfonato, nicotinato, nitrato, oleato, oxalato, palmitato, pamoato, pectinato, persulfato, 3-fenilpropionato, fosfato, picrato, pivalato, propionato, estearato, succinato, sulfato, tartrato, tiocianato, p-toluensulfonato, undecanoato, sales de valerato, y similares. Las sales farmaceuticamente aceptables derivadas de bases apropiadas incluyen sales de metales alcalinos, metales alcalinoterreos, amonio y N+(C-m alquilo)⁴. Las sales de metal alcalino o alcalinoterreo incluyen sodio, litio, potasio, calcio, magnesio y similares. Otras sales farmaceuticamente aceptables incluyen, cuando sea apropiado, cationes de amonio no toxico, de amonio cuaternario y de amina formados usando consejos tales como haluro, hidroxido, carboxilato, sulfato, fosfato, nitrato, sulfonato de alquilo inferior y arilsulfonato.

[0076] Un "sujeto" para el cual se contempla la administracion incluye, entre otros, humanos (es decir, un hombre o una mujer de cualquier grupo de edad, por ejemplo, un sujeto pediatrico (por ejemplo, un bebe, un nino, un adolescente) o un adulto (por ejemplo, adulto joven, adulto de mediana edad o adulto mayor) y/u otros animales no humanos, por ejemplo marnfferos [por ejemplo, primates (por ejemplo, monos cynomolgus, monos rhesus); marnfferos comercialmente relevantes tales como ganado vacuno, cerdos, caballos, ovejas, cabras, gatos y/o perros], aves (por ejemplo, aves comercialmente relevantes tales como pollos, patos, gansos y/o pavos), reptiles, anfibios y peces. En ciertas realizaciones, el animal no humano es un mamffero. El animal no humano puede ser un macho o una hembra y en cualquier etapa de desarrollo. Un animal no humano puede ser un animal transgenico.

[0077] Como se usa en este documento, y a menos que se especifique lo contrario, los terminos "tratar", "tratado" y "tratamiento" contemplan una accion que se produce mientras que un sujeto sufre una enfermedad, trastorno o afeccion especificada, lo que reduce la gravedad de la enfermedad, trastorno o afeccion, o retrasa la progresion de la enfermedad, trastorno o afeccion ("tratamiento terapeutico"), y tambien contempla una accion que ocurre antes de que un sujeto comience a sufrir la enfermedad, trastorno o afeccion especificada ("tratamiento profilactico").

[0078] En general, la "cantidad efectiva" de un compuesto se refiere a una cantidad suficiente para provocar la respuesta biologica deseada. Como apreciaran los expertos en la tecnica, la cantidad efectiva de un compuesto de la invencion puede variar dependiendo de factores tales como el punto final biologico deseado, la farmacocinetica del compuesto, la enfermedad que se trata, el modo de administracion, y la edad, salud y estado del sujeto. Una cantidad efectiva abarca el tratamiento terapeutico y profilactico.

[0079] Como se usa en este documento, y a menos que se especifique lo contrario, una "cantidad terapeuticamente eficaz" de un compuesto es una cantidad suficiente para proporcionar un beneficio terapeutico en el tratamiento de una enfermedad, trastorno o afeccion, o para retrasar o minimizar uno o mas smtomas asociados a la enfermedad, trastorno o afeccion. Una cantidad terapeuticamente eficaz de un compuesto significa una cantidad de agente terapeutico, solo o en combinacion con otras terapias, que proporciona un beneficio terapeutico en el tratamiento de la enfermedad, trastorno o afeccion. El termino "cantidad terapeuticamente eficaz" puede abarcar una cantidad que mejora la terapia general, reduce o evita los smtomas o causas de enfermedad o afeccion, o aumenta la eficacia terapeutica de otro agente terapeutico.

[0080] Como se usa en este documento, y a menos que se especifique lo contrario, una "cantidad profilacticamente eficaz" de un compuesto es una cantidad suficiente para prevenir una enfermedad, trastorno o afeccion, o uno o mas smtomas asociados con la enfermedad, trastorno o afeccion, o prevenir su recurrencia. Una cantidad profilacticamente eficaz de un compuesto significa una cantidad de un agente terapeutico, solo o en combinacion con otros agentes, que proporciona un beneficio profilactico en la prevencion de la enfermedad, trastorno o afeccion. El termino "cantidad profilacticamente eficaz" puede abarcar una cantidad que mejora la profilaxis general o aumenta la eficacia profilactica de otro agente profilactico.

[0081] Como se usa en este documento, "modulacion" se refiere a la capacidad de un compuesto para aumentar o inhibir un proceso biologico particular (por ejemplo, actividad de quinasa, sobreexpresion), por ejemplo, en una celula (por ejemplo, in vitro, como una celula en un cultivo celular, o in vivo tal como una celula en un sujeto) en relacion con el vehmulo.

[0082] Como se usa en este documento, "inhibicion", "inhibir", e "inhibido", y similares, se refieren a la capacidad de un compuesto para reducir, ralentizar, detener o prevenir la actividad de un proceso biologico particular (por ejemplo, actividad de la quinasa, sobreexpresion), por ejemplo, en una celula (por ejemplo, in vitro, como una celula en un cultivo celular, o in vivo, como una celula en un sujeto) en relacion con el vehmulo.

[0083] Como se usa en este documento, "aumentar" o "incremental"", y similares, se refieren a la capacidad de un compuesto para estimular la actividad de un proceso biologico particular (por ejemplo, actividad de quinasa), por ejemplo, en una celula (por ejemplo, in vitro, como una celula en un cultivo celular, o in vivo, como una celula en un sujeto, en relacion con el vehmulo.

Descripcion detallada de ciertas realizaciones de la invencion

[0084] Como se describe en general en el presente documento, se proporcionan nuevos analogos de cortistatina que pueden sintetizarse, en parte, por aminacion reductiva de una cetona de Formula (B) para proporcionar un producto aminado de Formula (A), opcionalmente a traves de un intermedio de imina de Formula (C). Ademas, se proporcionan nuevos analogos de cortistatina de Formulas (D) y (E). Ver, por ejemplo, Esquema 1, supra.

y sales farmaceuticamente aceptables, sales de aminas cuaternarias o N-oxidos de los mismos,

en donde:

R1 es hidrogeno, alquilo opcionalmente sustituido, alquenilo opcionalmente sustituido, alquinilo opcionalmente sustituido, carbociclilo opcionalmente sustituido, heterociclilo opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido, heteraroilo opcionalmente sustituido, -ORA, -SRA, -N(RA)², -C(=O)RA, -C(=O)ORA, -C(=O)N(RA)² , -S(=O)²RA, o un grupo protector de nitrogeno;

R² es hidrogeno, alquilo opcionalmente sustituido, alquenilo opcionalmente sustituido, alquinilo opcionalmente sustituido, carbociclilo opcionalmente sustituido, heterociclilo opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido, heteraroilo opcionalmente sustituido, -C(=O)RA, -C(=O)ORA, -C(=O)N(RA)², -S(=O)²RA, o un grupo protector de nitrogeno;

o R1 y R2 se unen para formar un heterociclilo opcionalmente sustituido o un heteroarilo opcionalmente sustituido; R3 es hidrogeno o alquilo opcionalmente sustituido;

R4 es hidrogeno, halogeno, alquilo opcionalmente sustituido o -Si(RA)³;

R⁵ es hidrogeno, halogeno o alquilo opcionalmente sustituido;

cada instancia de designada como (a), (b) y (c), representa un enlace simple o doble, siempre que cuando — ~ designada como (c) representa un enlace doble, entonces una de RB1 y RB2 esta ausente, y siempre que cuando designado como (c) representa un enlace sencillo, entonces RB1 y RB2 esten presentes;

cada instancia de RB1 y RB2 es, independientemente, hidrogeno, -L¹-RB3, o -XARA, en donde XA es -O-, -S- o -N(RA)-; o RB1 y RB2 se unen para formar un grupo oxo, siempre que al menos uno de RB1 y RB2 no sea hidrogeno; L¹ es un enlace, -C(=O)-, -C(=O)O-, -C(=O)S-, -C(=O)N(RL)-, o -N(RL)-(C(RLL)²)p-, en donde RL es hidrogeno, alquilo opcionalmente sustituido o un grupo protector de nitrogeno, cada instancia de RLL es independientemente hidrogeno, halogeno o alquilo opcionalmente sustituido, y p es 0, 1, o 2;

RB3 es hidrogeno, alquilo opcionalmente sustituido, alquenilo opcionalmente sustituido, alquinilo opcionalmente sustituido, carbociclilo opcionalmente sustituido, heterociclilo opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido, o heteroarilo opcionalmente sustituido, siempre que cuando L¹ sea un enlace, entonces RB3 no sea hidrogeno;

cada instancia de RA es independientemente hidrogeno, alquilo opcionalmente sustituido, alquenilo opcionalmente sustituido, alquinilo opcionalmente sustituido, carbociclilo opcionalmente sustituido, heterociclilo opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido, heteroarilo opcionalmente sustituido, carbonilo, sililo, un grupo protector de oxfgeno cuando esta unido a oxfgeno, grupo protector de azufre cuando esta unido a azufre, o grupo protector de nitrogeno cuando esta unido a nitrogeno, opcionalmente cuando esta unido a N, los dos grupos RA pueden unirse para formar un heterociclilo opcionalmente sustituido o un anillo de heteroarilo opcionalmente sustituido, y opcionalmente cuando RB1 y RB2 son cada uno -XARA entonces dos grupos RA pueden unirse para formar un anillo heterociclilo opcionalmente sustituido; y

RO es alquilo opcionalmente sustituido, alquenilo opcionalmente sustituido, alquinilo opcionalmente sustituido, carbociclilo opcionalmente sustituido, heterociclilo opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido, heteroarilo opcionalmente sustituido, -C(=O)RA, -C(=O)ORA, -C(=O)N(RA)², o un grupo protector de ox^geno.

[0085] En general, se entiende que cualquier atomo abarcado por cualquiera de la formula descrita en este documento puede reemplazarse con un isotopo de ese atomo, por ejemplo, un atomo de hidrogeno (1H) puede reemplazarse con un deuterio (2H, D) o un atomo de tritio (3H, T), un atomo de carbono (12C) puede reemplazarse con su isotopo 14C, y un atomo de fluor (18F) puede reemplazarse por su isotopo 19F.

[0086] En general, la aminacion reductiva de Formula (B) generalmente proporciona los isomeros aminados alfa y beta incluidos en la Formula (A), referida aqrn como Formula (A-1), el isomero beta y la Formula (A-2), el isomero alfa, y el isomero beta es tfpicamente el principal producto de la reaccion. El isomero alfa comparte la estereoqmmica C3 con otros productos naturales de cortistatina. Vease, por ejemplo, la Figura 1, Ademas, la reduccion de la cetona generalmente proporciona isomeros reducidos tanto alfa como beta abarcados por la Formula (D), a la que se hace referencia aqrn como Formula (D-1), el isomero beta y la Formula (D-2), el isomero alfa. La proteccion posterior de estos isomeros de Formula (D) proporciona respectivamente la Formula (E-1), el isomero beta, y la Formula (E-2), el isomero alfa.

[0087] La estructura cristalina (2,4 A) de un complejo ternario de cortistatina A/CDK8/ciclina C (ver, por ejemplo, la Figura 16) revela que la cortistatina A presenta una notable complementariedad de forma con el bolsillo de union de ATP de CDK8 y existe una aparente interaccion cation-n entre el ion de W,W-dimetilamonio cargado de la cortistatina A y Trp105 de CDK8, que estan en contacto directo (3,4 A). CDK8 y CDK19 son los unicos CDK con Trp en el aminoacido 105, lo que sugiere que la interaccion cationica y los contactos hidrofobicos entre la cortistatina A y Trp105 podnan ser importantes para la alta afinidad y selectividad de la cortistatina A para CDK8. Basado en esta estructura cristalina, se predijo que el isomero beta se enfrentana estericamente con Trp105.

[0088] La estructura cristalina tambien revelo que los grupos hidroxilo del anillo A en la cortistatina A podnan ser prescindibles para la union, ya que no forman enlaces de hidrogeno con CDK8 y se orientan lejos de la CDK8, fuera del bolsillo de union de la cortistatina A. Ademas, la cortistatina J, que carece de los grupos hidroxilo presentes en la cortistatina A, es solo 8 veces menos potente para inhibir la proliferacion de HUVEC (vease, por ejemplo, Aoki, et al., Bioorg. Med. Chem. (2007) 15: 6758-6762) y ciertos analogos sinteticos de cortistatina A con reemplazo de los sustituyentes amina e hidroxilo retuvieron una potente actividad antiproliferativa HUVEC (vease, por ejemplo, Nicolaou, et al., J. Am. Chem. Soc. (2009) 131:10587-10597).

[0089] Sin embargo, y lo mas sorprendente, se ha encontrado que los isomeros beta de Formula (A), que no contienen ningun grupo hidroxilo en el anillo A, son equipotentes o mas potentes que la cortistatina A para inhibir la actividad de la quinasa CDK8 y la proliferacion de celulas AML, y tambien se ha encontrado que los isomeros alfa correspondientes, que tambien no contienen ningun grupo hidroxilo en el anillo A, tambien son muy potentes.

[0090] Tambien se ha descubierto que los compuestos de Formula (B) se han encontrado activos contra el crecimiento de lmeas celulares de AML en cultivo y la actividad de la quinasa CDK8 en celulas. Se preve que la imina de Formula (C), como una oxima en la que R1 es -ORA, tambien estara activa.

[0091] Ademas, a pesar de la perdida de la interaccion cargada de cation-pi de ion de N,N-dimetilamonio, los compuestos de Formula (D) y (E) tambien son sorprendentemente altamente activos.

Sales de aminas cuaternarias y N-oxidos.

[0092] En ciertas realizaciones, como se proporciona en el presente documento, un compuesto de Formula (A), (B), (C), (D) o (E) puede comprender una sal de amina cuaternaria y/o un N-oxido.

[0093] Una "sal de amina cuaternaria", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo amino en el que el atomo de nitrogeno comprende cuatro enlaces de Valencia (por ejemplo, esta sustituido con cuatro grupos que pueden ser hidrogeno y/o grupos no hidrogeno) de manera que el atomo de nitrogeno esta cargado positivamente y la carga se equilibra (neutraliza) con un contraanion (por ejemplo, XC como se define aqrn).

[0094] Un "N-oxido" como se usa en el presente documento se refiere a un grupo amino en el que el atomo de nitrogeno comprende cuatro enlaces de Valencia (por ejemplo, esta sustituido con cuatro grupos que pueden ser hidrogeno y/o grupos no hidrogeno, en donde un grupo esta directamente unido) el atomo de nitrogeno es un grupo oxidilo (-⁰ ©), de tal manera que el atomo de nitrogeno esta cargado positivamente, y en donde el grupo oxidilo equilibra (neutraliza) la carga positiva del atomo de nitrogeno.

[0095] Debe entenderse que cualquiera de las formulas (A), (B), (C), (D) o (E) puede comprender grupos de sal de amina cuaternaria y/o grupos N-oxido en cualquier posicion donde un amino puede estar ubicado.

[0096] En particular, los compuestos de Formula (A) pueden comprender una sal de amina cuaternaria o un grupo N-oxido en la posicion C3 (tambien denominada "sal de amina C3 cuaternaria" y "N-oxido C³"), que comprende el grupo amino -Nr ¹R² unido al anillo A.

[0097] En ciertas realizaciones, el grupo amino

en la posicion C³ puede ser una formula de sal de amina cuaternaria

por ejemplo, para proporcionar un compuesto de Formula (A-QA):

en donde -—, R1, R2, R3, R4, R5, R^B1 y R^B2 son como se definen aqrn; y

en donde:

Y es alquilo opcionalmente sustituido, alquenilo opcionalmente sustituido, alquinilo opcionalmente sustituido, carbociclilo opcionalmente sustituido, heterociclilo opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido, o heteroarilo opcionalmente sustituido; y XC es un contraanion.

[0098] Una sal de amina C3 cuaternaria se puede formar por reaccion de la amina C3 libre con un grupo Y-XC, en donde Y se define anteriormente (por ejemplo, alquilo opcionalmente sustituido, alquenilo opcionalmente sustituido, alquinilo opcionalmente sustituido, carbociclilo opcionalmente sustituido, o heterociclilo opcionalmente sustituido), y XC es un grupo saliente como se define en el presente documento. El contraion XC resultante puede intercambiarse con otro contraion XC por metodos de intercambio ionico, por ejemplo, cromatograffa de intercambio ionico. Los contraiones ejemplares de XC incluyen, entre otros, iones de haluro (por ejemplo, F-, Cl-, Br, I-), NO³', ClO⁴", OH-, H²PO⁴", HSO⁴-, sulfonato (por ejemplo, metansulfonato, trifluorometanosulfonato), p-toluensulfonato, bencenosulfonato, 10-alcanforsulfonato, naftaleno-2-sulfonato, naftaleno-1-acido sulfonico-5-sulfonato, etan-1-acido sulfonico-² -sulfonato, y similares), y los iones de carboxilato (por ejemplo, acetato, etanoato, propanoato, benzoato, glicerato, lactato, tartrato, glicolato, y similares). En ciertas realizaciones, Y es alquilo opcionalmente sustituido (por ejemplo, metilo). En ciertas realizaciones, XC es un ion haluro.

[0099] En ciertas realizaciones, la sal de amina cuaternaria de Formula (A-QA) es el isomero beta (A-1-QA) o alfa (A-2-QA) de la siguiente Formula:

en donde -—, R1, R2, R3, R4, R5, R^B1 y R^B2 son como se definen aqrn.

[0100] Alternativamente, en ciertas realizaciones, el grupo amino

en la posicion C³ puede ser un N-oxido de formula

por ejemplo, para proporcionar un compuesto de Formula (A-NO):

en donde -—, R1, R2, R3, R4, R5, R^B1 y R^B2 son como se definen aqrn.

[0101] En ciertas realizaciones, el N-oxido de formula (A-NO) es el isomero beta (A-1-NO) o alfa (A-2-NO) de la siguiente formula:

en donde —- R1, R2, R3, R4, R5, RB1 y RB2 son como se definen aqrn.

[0102] Se ha descubierto que el N-oxido C³ de la cortistatina A es equipotente con la cortistatina A en la inhibicion de la proliferacion de HUVEC. Ver, por ejemplo, las Figuras 17A y 17B.

[0103] Se ha descubierto ademas que los N-oxidos beta de Formula (A-1-NO), como se describe en este documento, tienen una estabilidad incrementada en los microsomias hepaticos en comparacion con el correspondiente analogo amino beta libre de formula (A-1). Ver, por ejemplo, las Figuras 19, que demuestran una estabilidad aumentada de 14B-N-oxido en comparacion con el compuesto 14B.

Grupos R1 y R2

[0104] Como se define generalmente en el presente documento, en ciertas realizaciones de Formula (A) y (C), R1 es hidrogeno, alquilo opcionalmente sustituido, alquenilo opcionalmente sustituido, alquinilo opcionalmente sustituido, carbociclilo opcionalmente sustituido, heterociclilo opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido, heteroarilo opcionalmente sustituido, -ORA, -SRA, -N(RA)², -C(=O)RA, -C(=O)ORA, -C(=O)N(RA)², -S(=O)²RA, o un grupo protector de nitrogeno.

[0105] Ademas, en ciertas realizaciones de Formula (A), R2 es hidrogeno, alquilo opcionalmente sustituido, alquenilo opcionalmente sustituido, alquinilo opcionalmente sustituido, carbociclilo opcionalmente sustituido, heterociclilo opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido, heteroarilo opcionalmente sustituido, -C(=O)RA, -C(=O)ORA, -C(=O)N(RA)² , -S(=O)²RA, o un grupo protector de nitrogeno.

[0106] Por ejemplo, en ciertas realizaciones de Formula (A), al menos uno de R1 y R2 es hidrogeno. En ciertas realizaciones de Formula (A), tanto R1 como R2 son hidrogeno. En ciertas realizaciones de Formula (A), uno de R1 y R2 es hidrogeno y el otro es un grupo no hidrogeno, por ejemplo, alquilo opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones de Formula (C), R1 es hidrogeno.

[0107] En ciertas realizaciones de Formula (A), al menos uno de R1 y R2 es alquilo opcionalmente sustituido, por ejemplo, C^1-6 alquilo opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones de Formula (A), cada instancia de R1 y R2 es independientemente alquilo opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones de Formula (C), R1 es alquilo opcionalmente sustituido, por ejemplo, C^1-6 alquilo opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones, R1 y/o R2 es C¹ alquilo opcionalmente sustituido, C² alquilo opcionalmente sustituido, C³ alquilo opcionalmente sustituido, C⁴ alquilo opcionalmente sustituido, C⁵ alquilo opcionalmente sustituido, o C6 alquilo opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones, R1 y/o R2 es metilo (C¹) opcionalmente sustituido, etilo (C²) opcionalmente sustituido, n-propilo (C³) opcionalmente sustituido, isopropilo (C³) opcionalmente sustituido, n-butilo opcionalmente sustituido (C⁴), o t-butilo opcionalmente sustituido (C⁴). En ciertas realizaciones, R1 y/o R2 es alquilo sustituido con uno o mas sustituyentes halogenos (por ejemplo, fluor). En ciertas realizaciones, R1 y/o R2 es -CH³ o -CF³. En ciertas realizaciones, cada instancia de R1 y R2 es independientemente -CH³ o -CF³. En ciertas realizaciones, R1 y/o R2 es alquilo sustituido con uno o mas halogenos (por ejemplo, fluor), amino (-NH²), amino sustituido, hidroxilo (-OH), hidroxilo sustituido, tiol (-SH), tiol sustituido, o sustituyentes sulfonilo. En ciertas realizaciones, R1 y/o R2 es alquilo sustituido con un anillo carbociclilo opcionalmente sustituido (por ejemplo, ciclopropilo) o heterociclilo opcionalmente sustituido (por ejemplo, oxetanilo).

[0108] Por ejemplo, en ciertas realizaciones, al menos uno de R1 y R2 es un grupo de formula:

por ejemplo, para proporcionar un compuesto de Formula (A-f), (A-1-f) o (A-2-f):

o una sal farmaceuticamente aceptable, sal de amina cuaternaria, o N-oxido de las mismas,

en donde —-, R1, R3, R4, R5, RB1 y RB2 son como se definen en el presente documento; y

en donde:

p es 1, 2, 3, 4, 5 o 6; y

Z es -CH²XZ -CH(Xz)², -C(Xz)3, -ORz, -SRz, -N(Rz)² , -S(O)²N(RZ)² ,

en donde cada caso de RZ es independientemente hidrogeno, alquilo opcionalmente sustituido, alquinilo opcionalmente sustituido, alquinilo opcionalmente sustituido, carbociclilo opcionalmente sustituido, heterociclilo opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido, heteroarilo opcionalmente sustituido, -C(=O)RZ, -C(=O)ORZ, -C(=O)N(RZ)², un grupo protector de oxfgeno cuando esta unido a oxfgeno, un grupo protector de azufre cuando esta unido a azufre, o un grupo protector de nitrogeno cuando esta unido a nitrogeno, opcionalmente cuando estan unidos a N, los dos grupos RZ pueden unirse para formar un heterociclilo opcionalmente sustituido o un anillo de heteroarilo opcionalmente sustituido;

cada instancia de XZ es independientemente fluor, cloro, bromo o yodo; y

w es un numero entero entre 1 y 10, ambos inclusive.

[0109] En ciertas realizaciones, ambas instancias de R1 y R2 son independientemente un grupo de formula

[0110] En ciertas realizaciones, p es 1, En ciertas realizaciones, p es 2. En ciertas realizaciones, p es 3. En ciertas realizaciones, w es 1, 2, 3 o 4. En ciertas realizaciones, RZ es hidrogeno o alquilo opcionalmente sustituido (por ejemplo, -CH³). En ciertas realizaciones, Z es -ORZ, por ejemplo, -OH o -ORZ en donde RZ es un grupo no hidrogeno, por ejemplo, en donde RZ es alquilo opcionalmente sustituido tal como -CH³. En ciertas realizaciones, Z es -N(Rz)², por ejemplo, -NH², -NHRZ, o -N(RZ)² en donde RZ es un grupo no hidrogeno, por ejemplo, en donde RZ es alquilo opcionalmente sustituido tal como -CH³. En ciertas realizaciones, Z es -CH²XZ, -CH(X^z)² , -C(X^z)³ , por ejemplo, en donde XZ es fluor. En ciertas realizaciones, Z es -S(O)²N(RZ)², por ejemplo, -S(O)²NH² o -S(O)²NHCH³.

[0111] En ciertas realizaciones de Formula (A), al menos uno de R1 y R2 es alquenilo opcionalmente sustituido, por ejemplo, C^2-6 alquenilo opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones de Formula (A), tanto R1 como R2 son alquenilo opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones de Formula (C), R1 es alquenilo opcionalmente sustituido, por ejemplo, C^2-6 alquenilo opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones, R1 y/o R2 es C² alquenilo opcionalmente sustituido, C³ alquenilo opcionalmente sustituido, C⁴ alquenilo opcionalmente sustituido, C⁵ alquenilo opcionalmente sustituido, o C6 alquenilo opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones, R1 y/o R2 es vinilo opcionalmente sustituido (C²) o alilo opcionalmente sustituido (C³).

[0112] En ciertas realizaciones de Formula (A), al menos uno de R1 y R2 es alquinilo opcionalmente sustituido, por ejemplo, C^2-6 alquinilo opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones de Formula (A), tanto R1 como R2 son alquinilo opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones de Formula (C), R1 es alquinilo opcionalmente sustituido, por ejemplo, C^2-6 alquinilo opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones, R1 y/o R2 es C² alquinilo opcionalmente sustituido, C³ alquinilo opcionalmente sustituido, C⁴ alquinilo opcionalmente sustituido, alquinilo C⁵ opcionalmente sustituido, o alquinilo C6 opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones, R1 y/o R2 es acetilenilo opcionalmente sustituido (C²) o propargilo opcionalmente sustituido (C³).

[0113] En ciertas realizaciones de Formula (A), al menos uno de R1 y R2 es carbociclilo opcionalmente sustituido, por ejemplo, C^3-6 carbociclilo opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones de Formula (A), tanto R1 como R2 son carbociclilo opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones de Formula (C), R1 es carbociclilo opcionalmente sustituido, por ejemplo, C^3-6 carbociclilo opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones, R1 y/o R2 es carbociclilo C³ opcionalmente sustituido, C⁴ carbociclilo opcionalmente sustituido, C⁵ carbociclilo opcionalmente sustituido, o carbociclilo C6 opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones, R1 y/o R2 es ciclopropilo opcionalmente sustituido (C³), ciclobutilo opcionalmente sustituido (C⁴), ciclopenilo opcionalmente sustituido (C⁵), o ciclohexilo opcionalmente sustituido (C6).

[0114] En ciertas realizaciones de Formula (A), al menos uno de R1 y R2 es heterociclilo opcionalmente sustituido, por ejemplo, heterociclilo de 3-6 miembros opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones de Formula (A), tanto R1 como R2 son heterociclilo opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones de Formula (C), R1 es heterociclilo opcionalmente sustituido, por ejemplo, heterociclilo de 3-6 miembros opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones, R1 y/o R2 es heterociclilo de 3 miembros opcionalmente sustituido (por ejemplo, oxetanilo opcionalmente sustituido), heterociclilo de 4 miembros opcionalmente sustituido, heterociclilo de 5 miembros opcionalmente sustituido, o heterociclilo de 6 miembros opcionalmente sustituido, por ejemplo, heterociclilo opcionalmente sustituido de 6 miembros que comprende 1 o 2 heteroatomos seleccionados de oxfgeno, azufre o nitrogeno.

[0115] En ciertas realizaciones de Formula (A), al menos uno de R1 y R2 es arilo opcionalmente sustituido, por ejemplo, fenilo opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones de Formula (A), tanto R1 como R2 son fenilo opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones de Formula (C), R1 es arilo opcionalmente sustituido, por ejemplo, fenilo opcionalmente sustituido.

[0116] En ciertas realizaciones de Formula (A), al menos uno de R1 y R2 es heteroarilo opcionalmente sustituido, por ejemplo, heteroarilo de 5-6 miembros opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones de Formula (A), tanto R1 como R2 son heteroarilo opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones de Formula (C), R1 es heteroarilo opcionalmente sustituido, por ejemplo, heteroarilo de 5-6 miembros opcionalmente sustituido.

[0117] En ciertas realizaciones de Formula (A) y (C), R1 es -ORA, por ejemplo, -OH o - OCH³. En ciertas realizaciones de Formula (A) y (C), R1 es -SRA. En ciertas realizaciones de Formula (A) y (C), R1 es -N(Ra)².

[0118] En ciertas realizaciones de Formula (A), al menos uno de R1 y R2 es -C(=O)RA, -C(=O)ORA, o -C(=O)N(RA)²-En ciertas realizaciones de Formula (C), R1 es -C(=O)RA, -C(=O)ORA, o -C(=O)N(RA)².

[0119] En ciertas realizaciones de Formula (A), al menos uno de R1 y R2 es un grupo protector de nitrogeno. En ciertas realizaciones de Formula (C), R1 es un grupo protector de nitrogeno.

[0120] Ademas, como se define en general en el presente documento, en ciertas realizaciones de Formula (A), R1 y R2 se unen para formar un heterociclilo opcionalmente sustituido o un heteroarilo opcionalmente sustituido.

[0121] En ciertas realizaciones de Formula (A), al menos uno de R1 y R2 es -S(O)²RA. En ciertas realizaciones, RA alquilo opcionalmente sustituido (por ejemplo, -CH³). En ciertas realizaciones de Formula (A), uno de R1 y R2 es -S(O)²RA y el otro es alquilo opcionalmente sustituido (por ejemplo, -CH³). En ciertas realizaciones de Formula (C), R1 es -S(O)²RA.

[0122] En ciertas realizaciones de Formula (A), R1 y R2 se unen para formar un heterociclilo opcionalmente sustituido, por ejemplo, un heterociclilo de 3-6 miembros opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones de Formula (A), R1 y R2 se unen para formar un heterociclilo de 3 miembros opcionalmente sustituido, un heterociclilo de 4 miembros opcionalmente sustituido, un heterociclilo de 5 miembros opcionalmente sustituido o un heterociclilo de 6 miembros opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones, R1 y R2 se unen para formar un heterociclilo de 3 miembros opcionalmente sustituido, es decir, un aziridinilo opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones, R1 y R2 se unen para formar un heterociclilo de 4 miembros opcionalmente sustituido, por ejemplo, un azetidinilo opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones, R1 y R2 se unen para formar un heterociclilo de 5 miembros opcionalmente sustituido, por ejemplo, un pirrolidinilo opcionalmente sustituido o imidazolidina-2,4-diona opcionalmente sustituida. En ciertas realizaciones, R1 y R2 se unen para formar un heterociclilo de 6 miembros opcionalmente sustituido, por ejemplo, un piperidinilo opcionalmente sustituido, tetrahidropiranilo opcionalmente sustituido, dihidropiridinilo opcionalmente sustituido, tianilo sustituido opcionalmente, piperazinilo opcionalmente sustituido, morfolinilo opcionalmente sustituido, ditianilo opcionalmente sustituido, dioxanilo opcionalmente sustituido, o triazinanilo opcionalmente sustituido.

[0123] Por ejemplo, en ciertas realizaciones, R1 y R2 se unen para formar un grupo de formula:

por ejemplo, para proporcionar un compuesto de Formula (A-a), (A-1-a) o (A-2-a):

o

o una sal farmaceuticamente aceptable, sal de amina cuaternaria, o N-oxido de las mismas, en donde, R3, R4, R5, RB1 y RB2 son como se definen en el presente documento; y

en donde:

G es -O-, -S-, -NH-, -NR7-, -CH²-, -CH(R7)-, o -C(R7)²-;

cada instancia de R7 es independientemente halogeno, alquilo opcionalmente sustituido, alquenilo opcionalmente sustituido, alquinilo opcionalmente sustituido, carbociclilo opcionalmente sustituido, heterociclilo opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido, heteroarilo opcionalmente sustituido, amino, amino sustituido, hidroxilo, hidroxilo sustituido, tiol, tiol sustituido, carbonilo, sulfonilo, sulfinilo o un grupo protector de nitrogeno cuando se une a un atomo de nitrogeno;

opcionalmente, en donde dos grupos R7 se unen para formar un carbociclilo opcionalmente sustituido, un heterociclilo opcionalmente sustituido, un arilo opcionalmente sustituido, un anillo heteroarilo opcionalmente sustituido o un grupo oxo (=O); y

n es 0, 1, 2, 3 o 4.

[0124] En ciertas realizaciones, R1 y R2 se unen para formar un grupo de formula:

por ejemplo, para proporcionar un compuesto de Formula (A-b), (A-1-b) o (A-2-b):

o

o una sal farmaceuticamente aceptable, sal de amina cuaternaria, o N-oxido de las mismas, en donde, R3, R4, R5, RB1 y RB2 son como se definen en el presente documento; y

en donde:

G es -O-, -S-, -NH-, -NR7-, -CH²-, -CH(R7)-, o -C(R7)²-;

cada instancia de R7 es independientemente halogeno, alquilo opcionalmente sustituido, alquenilo opcionalmente sustituido, alquinilo opcionalmente sustituido, carbociclilo opcionalmente sustituido, heterociclilo opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido, heteroarilo opcionalmente sustituido, amino, amino sustituido, hidroxilo, hidroxilo sustituido, tiol, tiol sustituido, carbonilo, sulfonilo, sulfinilo o un grupo protector de nitrogeno cuando se une a un atomo de nitrogeno;

opcionalmente, en donde dos grupos R7 se unen para formar un carbociclilo opcionalmente sustituido, un heterociclilo opcionalmente sustituido, un arilo opcionalmente sustituido, un anillo heteroarilo opcionalmente sustituido o un grupo oxo (=O); y

n es 0, 1, 2, 3 o 4.

[0125] En ciertas realizaciones, R1 y R2 se unen para formar un grupo de formula:

por ejemplo, para proporcionar un compuesto de Formula (A-c), (A-1-c), (A-2-c):

o

o una sal farmaceuticamente aceptable, sal de amina cuaternaria, o N-oxido de las mismas, en donde, R3, R4, R5, RB1 y RB2 son como se definen en el presente documento; y

en donde:

G es -O-, -S-, -NH-, -NR7-, -CH²-, -CH(R7)-, o -C(R7)²-;

cada instancia de R7 es independientemente halogeno, alquilo opcionalmente sustituido, alquenilo opcionalmente sustituido, alquinilo opcionalmente sustituido, carbociclilo opcionalmente sustituido, heterociclilo opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido, heteroarilo opcionalmente sustituido, amino, amino sustituido, hidroxilo, hidroxilo sustituido, tiol, tiol sustituido, carbonilo, sulfonilo, sulfinilo o un grupo protector de nitrogeno cuando se une a un atomo de nitrogeno;

opcionalmente, en donde dos grupos R7 se unen para formar un carbociclilo opcionalmente sustituido, un heterociclilo opcionalmente sustituido, un arilo opcionalmente sustituido, un anillo heteroarilo opcionalmente sustituido o un grupo oxo (=O); y

n es 0, 1, 2, 3 o 4.

[0126] En ciertas realizaciones, n es 0, y el sistema de anillo formado por la union de R1 y R2 no esta sustituido con un grupo R7 como se define aqrn. En ciertas realizaciones, n es 1,2, 3 o 4, y el sistema de anillo esta sustituido con 1, 2, 3 o 4 grupos R7 como se define aqrn. En ciertas realizaciones, n es 1, En ciertas realizaciones, n es 2. En deltas realizaciones, n es 3. En deltas realizaciones, n es 4.

[0127] En deltas realizaciones, en donde n no es 0 (es dedr, n es 1, 2, 3 o 4) y al menos un R7 esta unido a un atomo de carbono, el R7 es halogeno (por ejemplo, fluor), hidroxilo, hidroxilo sustituido o carbonilo (por ejemplo, -CO²H). En ciertas realizaciones, en donde n no es 0 (es dedr, n es 1, 2, 3 o 4) y dos grupos R7 estan unidos al mismo atomo de carbono, los dos grupos R7 son cada uno halogeno, por ejemplo, fluor. En ciertas realizaciones, donde n no es 0 (es decir, n es 1, 2, 3 o 4) y dos grupos R7 estan unidos al mismo atomo de carbono, los dos grupos R7 estan unidos para formar un anillo de carbociclilo opcionalmente sustituido u opcionalmente anillo heterociclilo sustituido (por ejemplo, anillo de oxetanilo opcionalmente sustituido). En ciertas realizaciones, donde n no es 0 (es decir, n es 1, 2, 3 o 4) y dos grupos R7 estan unidos a un atomo de carbono diferente, los dos grupos R7 se unen para formar un anillo de carbociclilo opcionalmente sustituido o anillo de heterociclilo opcionalmente sustituido.

[0128] En ciertas realizaciones, G es -O-. En ciertas realizaciones, G es -NR7-, por ejemplo, en donde R7 es alquilo opcionalmente sustituido (por ejemplo, -CH³). En ciertas realizaciones, G es - c H(R7)- o -C(R7)²- en donde al menos un R7 es hidroxilo, hidroxilo sustituido o carbonilo (por ejemplo, -CO²H).

[0129] En ciertas realizaciones, el grupo

es

o

[0130] En ciertas realizaciones, el grupo

Es

[0131] En ciertas realizaciones, el grupo

es

[0132] En ciertas realizaciones de Formula (A), R1 y R2 se unen para formar un heteroarilo opcionalmente sustituido, por ejemplo, un heteroarilo de 5 miembros opcionalmente sustituido o un heteroarilo de 6 miembros opcionalmente sustituido.

Grupo RO

[0133] Como generalmente se define aqm, para la Formula (E), RO es alquilo opcionalmente sustituido, alquenilo opcionalmente sustituido, alquinilo opcionalmente sustituido, carbociclilo opcionalmente sustituido, heterociclilo opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido, heteroarilo opcionalmente sustituido, -C(=O)RA, -C(=O)ORA, -C(=O)N(RA)² , o un grupo protector de oxfgeno.

[0134] En ciertas realizaciones de Formula (E), RO es alquilo opcionalmente sustituido, por ejemplo, Ci-6 alquilo opcionalmente sustituido, por ejemplo, Ci alquilo opcionalmente sustituido, C² alquilo opcionalmente sustituido, C³ alquilo opcionalmente sustituido, C⁴ alquilo opcionalmente sustituido, C⁵ alquilo opcionalmente sustituido, opcionalmente C6 alquilo sustituido. En ciertas realizaciones, RO es metilo opcionalmente sustituido (Ci), etilo opcionalmente sustituido (C²), n-propilo opcionalmente sustituido (C³), isopropilo opcionalmente sustituido (C³), nbutilo opcionalmente sustituido (C⁴), o f-butilo opcionalmente sustituido (C⁴). En ciertas realizaciones, el RO es alquilo sustituido con uno o mas sustituyentes halogenos (por ejemplo, fluor). En ciertas realizaciones, RO es -CH³ o -CF³. En ciertas realizaciones, RO es alquilo sustituido con uno o mas halogenos (por ejemplo, fluor), amino (-NH²), amino sustituido, hidroxilo (-OH), hidroxilo sustituido, tiol (-SH), tiol sustituido o sustituyentes de sulfonilo. En ciertas realizaciones, RO es alquilo sustituido con un carbociclilo opcionalmente sustituido (por ejemplo, ciclopropilo) o un anillo de heterociclilo opcionalmente sustituido (por ejemplo, oxetanilo).

[0135] Por ejemplo, en ciertas realizaciones, RO es un grupo de formula:

5

por ejemplo, para proporcionar un compuesto de Formula (E-F), (E-1-f) o (E-2-f):

o

o una de sus sales farmaceuticamente aceptables, sal de amina cuaternaria o N-oxido de las mismas, en donde -R3, R4, R5, RB1 y RB2 son como se definen en el presente documento; y

en donde:

p es 1, 2, 3, 4, 5 o 6; y

Z es -CH²XZ, -CH(X^z)² , -C(X^z)³, -OR^z, -SR^z, -N(R^z)², -S(O)²N(RZ)²,

o

en donde cada caso de RZ es independientemente hidrogeno, alquilo opcionalmente sustituido, alquinilo opcionalmente sustituido, alquinilo opcionalmente sustituido, carbociclilo opcionalmente sustituido, heterociclilo opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido, heteroarilo opcionalmente sustituido, -C(=O)RZ, -C(=O)ORZ, -C(=O)N(RZ)², un grupo protector de oxfgeno cuando esta unido a ox^geno, un grupo protector de azufre cuando esta unido a azufre, o un grupo protector de nitrogeno cuando esta unido a nitrogeno, opcionalmente cuando estan unidos a N, los dos grupos RZ pueden unirse para formar un heterociclilo opcionalmente sustituido o un anillo de heteroarilo opcionalmente sustituido;

cada instancia de XZ es independientemente fluor, cloro, bromo o yodo; y

w es un numero entero entre 1 y 10, ambos inclusive.

[0136] En ciertas realizaciones, p es 1, En ciertas realizaciones, p es 2. En ciertas realizaciones, p es 3. En ciertas realizaciones, w es 1, 2, 3 o 4. En ciertas realizaciones, RZ es hidrogeno o alquilo opcionalmente sustituido (por ejemplo, -CH³). En ciertas realizaciones, Z es -ORZ, por ejemplo, -OH o -ORZ en donde RZ es un grupo no hidrogeno, por ejemplo, en donde RZ es alquilo opcionalmente sustituido tal como -CH³. En ciertas realizaciones, Z es -N(R^z)², por ejemplo, -NH², -NHRZ, o -N(RZ)² en donde RZ es un grupo no hidrogeno, por ejemplo, en donde RZ es alquilo opcionalmente sustituido tal como -CH³. En ciertas realizaciones, Z es -CH²XZ, -CH(XZ)² , -C(XZ)³, por ejemplo, en donde XZ es fluor. En ciertas realizaciones, Z es -S(O)²N(RZ)², por ejemplo, -S(O)²NH² o -S(O)²NHCH³.

[0137] En ciertas realizaciones de Formula (E), RO es alquenilo opcionalmente sustituido, por ejemplo, C^3-6 alquenilo opcionalmente sustituido, por ejemplo, C³ alquenilo opcionalmente sustituido, C⁴ alquenilo opcionalmente sustituido, C⁵ alquenilo opcionalmente sustituido, o C⁶ alquenilo opcionalmente sustituido.

[0138] En ciertas realizaciones de Formula (E), RO es alquinilo opcionalmente sustituido, por ejemplo, C^3-6 alquinilo opcionalmente sustituido, por ejemplo, C³ alquinilo opcionalmente sustituido, C⁴ alquinilo opcionalmente sustituido, C⁵ alquinilo opcionalmente sustituido, o C⁶ alquinilo opcionalmente sustituido.

[0139] En ciertas realizaciones de Formula (E), RO es carbociclilo opcionalmente sustituido, por ejemplo, C^3-6 carbociclilo opcionalmente sustituido, por ejemplo, C³ carbociclilo opcionalmente sustituido, C⁴ carbociclilo opcionalmente sustituido, C⁵ carbociclilo opcionalmente sustituido, C⁶ carbociclilo opcionalmente sustituido, C⁶ carbodclico opcionalmente sustituido o carbonico opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones, RO es ciclopropilo opcionalmente sustituido (C³), ciclobutilo opcionalmente sustituido (C⁴), ciclopenilo opcionalmente sustituido (C⁵), o ciclohexilo opcionalmente sustituido (Ca).

[0140] En ciertas realizaciones de Formula (E), RO es heterociclilo opcionalmente sustituido, por ejemplo, heterociclilo de 3-6 miembros opcionalmente sustituido, por ejemplo, heterociclilo de 3 miembros opcionalmente sustituido (por ejemplo, oxetanilo opcionalmente sustituido), heterociclilo de 4 miembros opcionalmente sustituido, heterociclilo de 5 miembros opcionalmente sustituido, o heterociclilo de 6 miembros opcionalmente sustituido, por ejemplo, heterociclilo de 6 miembros opcionalmente sustituido que comprende 1 o 2 heteroatomos seleccionados de oxfgeno, azufre o nitrogeno.

[0141] En ciertas realizaciones de Formula (E), al menos uno de R1 y R2 es arilo opcionalmente sustituido, por ejemplo, fenilo opcionalmente sustituido.

[0142] En ciertas realizaciones de Formula (A), RO es heteroarilo opcionalmente sustituido, por ejemplo, heteroarilo de 5-6 miembros opcionalmente sustituido.

[0143] En ciertas realizaciones de Formula (E), RO es -C(=O)RA, -C(=O)ORA, o -C(=O)N(RA)2- En ciertas realizaciones, RA es hidrogeno o alquilo opcionalmente sustituido (por ejemplo, - CH³). Por ejemplo, en ciertas realizaciones, RO es -C(=O)CH3, -C(=O)OCH3, -C(=O)N(CH3)2, o -C(=O)NHCH3.

[0144] En ciertas realizaciones de Formula (E), RO es un grupo protector de oxfgeno.

Grupo R3, R4, R5 y enlaces (a), (b) y (c) de formula

[0145] Como se define generalmente en este documento, para la Formula (A), (B), (C), (D) y (E), R3 es hidrogeno o alquilo opcionalmente sustituido.

[0146] En ciertas realizaciones, R3 es hidrogeno. Tales compuestos son posibles utilizando materiales de partida tales como 18-nor estrona.

[0147] En ciertas realizaciones, R3 es alquilo opcionalmente sustituido, por ejemplo, metilo (-CH³). Tales compuestos son posibles utilizando materiales de partida tales como estrona y tetralona para metilo.

[0148] Como se define generalmente en este documento, para la Formula (A), (B), (C), (D) y (E), R4 es hidrogeno, halogeno, alquilo opcionalmente sustituido o -Si(RA)³.

[0149] Por ejemplo, en ciertas realizaciones, R4 es hidrogeno. En ciertas realizaciones, R4 es alquilo opcionalmente sustituido, por ejemplo, metilo. En ciertas realizaciones, R4 es -Si(RA)³, por ejemplo, en donde cada instancia de RA es independientemente alquilo opcionalmente sustituido o fenilo opcionalmente sustituido.

[0150] Como se define generalmente en este documento, R5 es hidrogeno, halogeno o alquilo opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones, R5 es hidrogeno. En ciertas realizaciones, R5 es halogeno (por ejemplo, bromo, yodo, cloro). En ciertas realizaciones, R5 es alquilo opcionalmente sustituido, por ejemplo, metilo.

[0151] Como se define generalmente en este documento, cada instancia de -—, designada como (a), (b) y (c), representa un enlace simple o doble, siempre que cuando —— designada como (c) representa un enlace doble, entonces uno de RB1 y RB2 esta ausente, y siempre que —— designada como (c) represente un enlace sencillo, entonces ambos RB1 y RB2 esten presentes.

[0152] En ciertas realizaciones, el enlace —— designado como (a) es un enlace simple. En ciertas realizaciones, el enlace — designado como (a) es un enlace doble.

[0153] En ciertas realizaciones, el enlace —- designado como (b) es un enlace sencillo. En ciertas realizaciones, el enlace — designado como (b) es un enlace doble.

[0154] En ciertas realizaciones, el enlace designado como (c) es un enlace sencillo. En ciertas realizaciones, el enlace — designado como (c) es un enlace doble, y RB2 esta ausente.

[0155] En ciertas realizaciones, el enlace designado como (a) es un enlace doble, y el enlace designado como (b) es un enlace doble. En este caso, en ciertas realizaciones, el enlace designado como (c) es un enlace doble, y RB2 esta ausente. Sin embargo, en este caso, en otras realizaciones, el enlace designado como (c) es un enlace sencillo.

[0156] Por ejemplo, en ciertas realizaciones de Formula (A), (B), (C), (D) y (E), en donde R3 es metilo, R4 es hidrogeno, R5 es hidrogeno y el enlace designado (c) es un enlace sencillo, siempre que sean compuestos de Formula (A-d), (A-1-d), (A-2-d), (B-d), (C-d), (D-d), (D-1-d), (D-2-d), (E-d), (E-1-d), y (E-2-d):

o una sal farmaceuticamente aceptable, sal de amina cuaternaria o N-oxido de las mismas; en donde R1, R2, RO, RB1, y RB2 son como se definen aqrn.

[0157] En otras realizaciones de Formula (A), (B), (C), (D) y (E), en donde R3 es metilo, R4 es hidrogeno, el enlace designado (c) es un enlace doble, y RB2 esta ausente, siempre que sean compuestos de Formula (Ae), (A-1-e), (A-2-e), (B-e), (C-e), (D-e), (D-1-e), (D-2-e), (E-e), (E-1-e), (E-2-e):

o una sal farmaceuticamente aceptable, sal de amina cuaternaria o N-oxido de las mismas; en donde R1, R2, RO, R5 y RB1, son como se definen aqrn.

Grupos RB1 y RB2

[0158] Como se define generalmente en este documento, cada instancia de RB1 y RB2 es, independientemente, hidrogeno, -Li-RB3, o -XARA, en donde XA es -O-, -S- o -N(RA)-, siempre que al menos uno de RB1 y RB2 no es hidrogeno; o RB1 y RB2 se unen para formar un grupo oxo;

Li es un enlace, -C(=O)-, -C(=O)O-, -C(=O)S-, -C(=O)N(RL)-, o -N(RL)-(C(RLL)²)p-, en donde RL es hidrogeno, alquilo opcionalmente sustituido o un grupo protector de nitrogeno, cada instancia de RLL es independientemente hidrogeno, halogeno o alquilo opcionalmente sustituido, y p es 0, 1 o 2;

RB3 es hidrogeno, alquilo opcionalmente sustituido, alquenilo opcionalmente sustituido, alquinilo opcionalmente sustituido, carbociclilo opcionalmente sustituido, heterociclilo opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido, o heteroarilo opcionalmente sustituido, siempre que cuando Li sea un enlace, entonces RB3 no sera hidrogeno;

cada instancia de RA es independientemente hidrogeno, alquilo opcionalmente sustituido, alquenilo opcionalmente sustituido, alquinilo opcionalmente sustituido, carbociclilo opcionalmente sustituido, heterociclilo opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido, heteroarilo opcionalmente sustituido, carbonilo, sililo, un grupo protector de ox^geno cuando esta unido a ox^geno, grupo protector de azufre cuando se une a azufre, o un grupo protector de nitrogeno cuando se une a nitrogeno; opcionalmente, cuando se unen a N, los dos grupos RA pueden unirse para formar un heterociclilo opcionalmente sustituido o un anillo heteroarilo opcionalmente sustituido; y opcionalmente, cuando RB1 y RB2 son cada uno -XARA, entonces dos grupos RA pueden unirse para formar un anillo heterociclilo opcionalmente sustituido.

[0159] En ciertas realizaciones, al menos una instancia de RB1 y RB2 es -Li-RB3. En este caso, en ciertas realizaciones, el otro de RB1 y RB2 es hidrogeno o -XARA (por ejemplo, -ORA). Por ejemplo, en ciertas realizaciones, cuando designado como (c) representa un enlace sencillo, entonces RB1 es -Li-RB3 y RB2 es hidrogeno o -XARA (por ejemplo, -ORA). En otras realizaciones, cuando —- designado como (c) representa un enlace sencillo, entonces RB2 es -L¹-RB3 y RB1 es hidrogeno o -XARA (por ejemplo, -ORA). Alternativamente, en ciertas realizaciones, cuando — - designado como (c) representa un doble enlace, entonces RB1 es -L¹-RB3 y RB2 esta ausente.

[0160] Por ejemplo, en ciertas realizaciones de Formula (A), (B), (C), (D) y (E), en donde RB1 es -L|-RB3, siempre que sean compuestos de Formula (A-g), (A-1-g), (A-2-g), (B-g), (C-g), (D-g), (D-1-g), (D-2-g), (E-g), (E-1-g), (E-2-g):

o una sal farmaceuticamente aceptable, sal de amina cuaternaria o N-oxido de las mismas; en donde, R1, R2, RO, R3, R4, R5, RB2, L¹ y RB3 son como se definen aqrn.

[0161] En ciertas realizaciones, L¹ es un enlace, y RB3 es alquilo opcionalmente sustituido, alquenilo opcionalmente sustituido, alquinilo opcionalmente sustituido, carbociclilo opcionalmente sustituido, heterociclilo opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido o heteroarilo opcionalmente sustituido.

[0162] En ciertas realizaciones, Li es -C(=O)-, -C(=O)O-, -C(=O)S-, -C(=O)N(RL)-, o -N(RL)-(C(RLL)²)p-, en donde RL es hidrogeno, alquilo opcionalmente sustituido o un grupo protector de nitrogeno, cada instancia de RLL es independientemente hidrogeno, halogeno u alquilo opcionalmente sustituido, y RB3 es hidrogeno, opcionalmente alquilo sustituido, alquenilo opcionalmente sustituido, alquinilo opcionalmente sustituido, carbociclilo opcionalmente sustituido, heterociclilo opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido, o heteroarilo opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones, Li es -C(=O)-. En ciertas realizaciones, Li es -C(=O)O-. En ciertas realizaciones, Li es -C(=O)S-. En ciertas realizaciones, Li es -C(=O)N(RL)-. En ciertas realizaciones, Li es -N(RL)-C (RLL)²-. En ciertas realizaciones, RL es hidrogeno o alquilo opcionalmente sustituido, por ejemplo, metilo. En ciertas realizaciones, cada caso de RLL es independientemente hidrogeno, alquilo opcionalmente sustituido, por ejemplo, metilo o fluor. En ciertas realizaciones, p es 0, En ciertas realizaciones, p es i, En ciertas realizaciones, p es 2.

[0163] En ciertas realizaciones, cuando Li es -C(=O)-, -C(=O)O-, -C(=O)S-, -C(=O)N(RL)-, o -N(RL)-(C(RLL)²)p-, y RB3 es hidrogeno, siempre que sea un grupo de formula -C(=O)H, -C(=o )o H, -C(=O)s H, -C(=O)N(Rl)H, o -N(RL)H.

[0164] Sin embargo, en ciertas realizaciones cuando Li es un enlace o -C(=O)-, -C(=O)O-, -C(=O)S-, -C(=O)N(RL)-, o -N(RL)-(C(RLL)²)p-, RB3 es alquilo opcionalmente sustituido, alquenilo opcionalmente sustituido, alquinilo opcionalmente sustituido, carbociclilo opcionalmente sustituido, heterociclilo opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido, heteroarilo opcionalmente sustituido.

[0165] En ciertas realizaciones, RB3 es un grupo adclico, por ejemplo, RB3 es un alquilo opcionalmente sustituido, alquenilo opcionalmente sustituido o alquinilo opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones, RB3 es alquilo opcionalmente sustituido, por ejemplo, C^1-6 alquilo opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones, RB3 es alquenilo opcionalmente sustituido, por ejemplo, C^2-6 alquenilo opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones, RB3 es alquinilo opcionalmente sustituido, por ejemplo, C^2-6 alquinilo opcionalmente sustituido.

[0166] Sin embargo, en ciertas realizaciones, RB3 es un grupo dclico, por ejemplo, RB3 es carbociclilo opcionalmente sustituido, heterociclilo opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido o heteroarilo opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones, RB3 es un grupo dclico no aromatico, por ejemplo, en ciertas realizaciones, RB3 es carbociclilo opcionalmente sustituido o heterociclilo opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones, RB3 es un grupo dclico aromatico, por ejemplo, en ciertas realizaciones, RB3 es arilo opcionalmente sustituido o heteroarilo opcionalmente sustituido.

[0167] En ciertas realizaciones, RB3 es carbociclilo opcionalmente sustituido, por ejemplo, C^3-6 carbociclilo opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones, RB3 es C³ carbociclilo opcionalmente sustituido, C⁴ carbociclilo opcionalmente sustituido, C⁵ carbociclilo opcionalmente sustituido, o C6 carbociclilo opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones, RB3 es ciclopenilo opcionalmente sustituido (C⁵) o ciclohexilo opcionalmente sustituido (C6).

[0168] En ciertas realizaciones, RB3 es carbociclilo opcionalmente sustituido fusionado a un arilo opcionalmente sustituido o anillo de heteroarilo opcionalmente sustituido, en el que el punto de union esta en el anillo de carbociclilo. En ciertas realizaciones, RB3 es carbociclilo opcionalmente sustituido, por ejemplo, C^3-6 carbociclilo opcionalmente sustituido, fusionado a un arilo opcionalmente sustituido o un anillo heteroarilo opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones, RB3 es C³ carbociclilo opcionalmente sustituido, C⁴ carbociclilo opcionalmente sustituido, C⁵ carbociclilo opcionalmente sustituido o C6 carbociclilo opcionalmente sustituido, fusionado a un anillo arilo opcionalmente sustituido o heteroarilo opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones, RB3 es ciclopenilo opcionalmente sustituido (C⁵) o ciclohexilo opcionalmente sustituido (C6) fusionado a un arilo opcionalmente sustituido o un anillo heteroarilo opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones, el anillo arilo fusionado es un anillo fenilo opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones, el anillo de heteroarilo fusionado es un anillo de heteroarilo de 6 miembros opcionalmente sustituido, por ejemplo, un anillo de piridinilo opcionalmente sustituido.

[0169] En ciertas realizaciones, RB3 es heterociclilo opcionalmente sustituido, por ejemplo, heterociclilo de 3-6 miembros opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones, R B3 es un heterociclilo de 3 miembros opcionalmente sustituido, un heterociclilo de 4 miembros opcionalmente sustituido, un heterociclilo de 5 miembros opcionalmente sustituido o un heterociclilo de 6 miembros opcionalmente sustituido, por ejemplo, que comprende 1 o 2 heteroatomos seleccionados de oxfgeno, azufre, o nitrogeno.

[0170] En ciertas realizaciones, RB3 es un heterociclilo opcionalmente sustituido fusionado a un anillo arilo opcionalmente sustituido o un heteroarilo opcionalmente sustituido, en el que el punto de union esta en el anillo heterociclilo. En ciertas realizaciones, RB3 es heterociclilo opcionalmente sustituido, por ejemplo, heterociclilo opcionalmente sustituido de 3-6 miembros, fusionado a un arilo opcionalmente sustituido o un anillo heteroarilo opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones, RB3 es heterociclilo de 3 miembros opcionalmente sustituido, heterociclilo de 4 miembros opcionalmente sustituido, heterociclilo de 5 miembros opcionalmente sustituido, o heterociclilo de 6 miembros opcionalmente sustituido, que comprende 1 o 2 heteroatomos seleccionados de oxfgeno, azufre o nitrogeno, fusionado a un arilo opcionalmente sustituido o un anillo heteroarilo opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones, el anillo arilo fusionado es un anillo fenilo opcionalmente sustituido fusionado. En ciertas realizaciones, el anillo de heteroarilo fusionado es un anillo de heteroarilo de 6 miembros, por ejemplo, un anillo de piridinilo opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones, el punto de union de RB3 es a traves de un atomo de nitrogeno. En ciertas formas de realizacion, RB3 es un anillo 1,2,3,4-tetrahidro-2,7-naftalinidinilo opcionalmente sustituido, un anillo 3,4-dihidropirido[4,3-d]pirimidinilo, un anillo 3,4-dihidropirido[4,3-d]pirimidina-2-ona, o un anillo 3,4-dihidro-2H-pirido[3,4-e][1,3]oxazin-2-ona, en donde el punto de union es en el anillo heterociclilo no aromatico.

[0171] En ciertas realizaciones, RB3 es arilo opcionalmente sustituido, por ejemplo, C^6-14 arilo opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones, RB3 es fenilo opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones, RB3 es naftilo opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones, RB3 es fenilo opcionalmente sustituido fusionado a un anillo heterociclilo opcionalmente sustituido; tal como un fenilo tetrahidroisoquinolinilo opcionalmente sustituido. Se entiende en referencia a los sistemas de anillo arilo opcionalmente sustituidos que comprenden un anillo heterociclilo fusionado que el punto de union a la molecula parental esta en el anillo arilo (por ejemplo, fenilo).

[0172] En ciertas realizaciones, RB3 es heteroarilo opcionalmente sustituido, por ejemplo, heteroarilo de 5-14 miembros opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones, RB3 es un heteroarilo de 5 miembros opcionalmente sustituido o un heteroarilo de 6 miembros opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones, RB3 es un heteroarilo bidclico opcionalmente sustituido, por ejemplo, un heteroarilo 5,6-bidclico opcionalmente sustituido, o un heteroarilo 6,6-bidclico opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones, RB3 es un sistema de anillo heteroarilo 5,6-bidclico opcionalmente sustituido o heteroarilo 6,6-bidclico opcionalmente sustituido seleccionado del grupo que consiste en naftiridinilo opcionalmente sustituido, pteridinilo opcionalmente sustituido, quinolinilo opcionalmente sustituido, isoquinolinilo opcionalmente sustituido, cinolinilo opcionalmente sustituido, quinoxalinilo opcionalmente sustituido, ftalazinilo opcionalmente sustituido y quinazolinilo opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones, el punto de union de RB3 es a traves de un atomo de nitrogeno.

[0173] En ciertas realizaciones, en donde RB3 es un heterociclilo opcionalmente sustituido, -L|-RB3 se selecciona del grupo que consiste en:

en donde:

cada instancia de R6A es independientemente halogeno, -NO² , -CN, -OR6C, -SR6C, -N(R6C)² , -C(=O)R6C, -C(=O)OR6C, -C(=O)N(R6C)² , alquilo opcionalmente sustituido, alquenilo opcionalmente sustituido, alquinilo opcionalmente sustituido, carbociclilo opcionalmente sustituido, heterociclilo opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido, o heteroarilo opcionalmente sustituido;

cada instancia de R6B es independientemente hidrogeno, alquilo opcionalmente sustituido o un grupo protector de nitrogeno cuando se une a nitrogeno;

en donde cada caso de R6C es independientemente hidrogeno, alquilo opcionalmente sustituido, alquenilo opcionalmente sustituido, alquinilo opcionalmente sustituido, carbociclilo opcionalmente sustituido, heterociclilo opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido, heteroarilo opcionalmente sustituido, un grupo protector de oxfgeno cuando esta unido a oxfgeno, un grupo protector de azufre cuando esta unido a azufre, o un grupo protector de nitrogeno cuando esta unido a nitrogeno, opcionalmente cuando esta unido a N, los dos grupos R6C pueden unirse para formar un anillo heterociclilo opcionalmente sustituido o un anillo heteroarilo opcionalmente sustituido; y

m es 0 o un numero entero entre 1 y 4, inclusive, siempre que L¹ no sea -N(RL)-(C(RLL)²)p- en donde p es 0,

[0174] En ciertas realizaciones, en donde RB3 es un arilo opcionalmente sustituido o un heteroarilo opcionalmente sustituido, -L|-RB3 se selecciona del grupo que consiste en:

y

en donde:

cada instancia de R6A es independientemente halogeno, -NO² , -CN, -OR6C, -SR6C, -N(R6C)² , -C(=O)R6C, -C(=O)OR6C, -C(=O)N(R6C)² , alquilo opcionalmente sustituido, alquenilo opcionalmente sustituido, alquinilo opcionalmente sustituido, carbociclilo opcionalmente sustituido, heterociclilo opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido, o heteroarilo opcionalmente sustituido;

cada instancia de R6B es independientemente hidrogeno, alquilo opcionalmente sustituido o un grupo protector de nitrogeno cuando se une a nitrogeno;

en donde cada caso de R6C es independientemente hidrogeno, alquilo opcionalmente sustituido, alquenilo opcionalmente sustituido, alquinilo opcionalmente sustituido, carbociclilo opcionalmente sustituido, heterociclilo opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido, heteroarilo opcionalmente sustituido, un grupo protector de oxfgeno cuando esta unido a oxfgeno, un grupo protector de azufre cuando esta unido a azufre, o un grupo protector de nitrogeno cuando esta unido a nitrogeno, opcionalmente cuando esta unido a N, los dos grupos R6C pueden unirse para formar un anillo heterociclilo opcionalmente sustituido o un anillo heteroarilo opcionalmente sustituido; y

m es 0 o un numero entero entre 1 y 4, inclusive.

[0175] En dertas realizaciones, m es 0, En deltas realizaciones, m es 1, 2, 3 o 4. En deltas realizaciones, en donde m es 1, 2, 3 o 4, al menos un R6A es halogeno (por ejemplo, fluor), - OR6C, -SR6C, o -N(R6C)².

[0176] En dertas realizaciones, L¹ es un enlace o -C(=O)N(RL)-, en donde RL es hidrogeno o un alquilo opcionalmente sustituido (por ejemplo, metilo), y RB3 es arilo opcionalmente sustituido o heteroarilo opcionalmente sustituido, como se describe aqrn.

[0177] Por ejemplo, en dertas realizaciones de Formula (A), (B), (C), (D) y (E), en donde el grupo -L-i-RB3 es un grupo de formula:

en donde L¹ es un enlace, siempre que sean compuestos de Formula (A-h), (A-1-h), (A-2-h), (B-h) o (C-h), (D-h), (D-1-h), (D-2-h), (E-h), (e-1-h), (e-2-h):

o una sal farmaceuticamente aceptable, sal de amina cuaternaria o N-oxido de las mismas; en donde, R1, R2, R3, R4, R5, R6A y m son como se definen aquf

[0178] Por ejemplo, en ciertas realizaciones de Formula (A), (B) y (C) en donde el grupo -Li-RB3 es un grupo de formula:

en donde Li es un enlace, siempre que sean compuestos de Formula (A-i), (A-1-i), (A-2-i), (B-i) o (C-i):

o una sal farmaceuticamente aceptable, sal de amina cuaternaria o N-oxido de las mismas; en donde, R1, R2, R3, R4, R5, R6A y m son como se definen aqrn.

[0179] En ciertas realizaciones de Formula (A), (B) y (C), en donde el grupo -Li-RB3 es un grupo de formula:

en donde Li es un enlace, siempre que sean compuestos de Formula (A-p), (A-1-p), (A-2-p), (B-p) o (C-p):

o una sal farmaceuticamente aceptable, sal de amina cuaternaria o N-oxido de las mismas; en donde, R1, R2, R3, R4, R5, R6A y m son como se definen aqrn.

[0180] En ciertas realizaciones de Formula (A), (B) y (C), en donde el grupo -Li-RB3 es un grupo de formula:

en donde Li es un enlace, siempre que sean compuestos de Formula (A-q), (A-1-q), (A-2-q), (B-q) o (C-q):

o una sal farmaceuticamente aceptable, sal de amina cuaternaria o N-oxido de las mismas; en donde, R1, R2, R3, R4, R5, R6A y m son como se definen aqm.

[0181] En ciertas realizaciones de Formula (A), (B) y (C), en donde el grupo -Li-RB3 es un grupo de formula:

en donde Li es un enlace, siempre que sean compuestos de Formula (A-r), (A-1-r), (A-2-r), (B-r) o (C-r):

o una sal farmaceuticamente aceptable, sal de amina cuaternaria o N-oxido de las mismas; en donde, R1, R2, R3, R4, R5, R6A y m son como se definen aqrn.

[0182] Compuestos de Formula (A-i), (A-1-i), (A-2-i), (B-i), (Ci), (A-p), (A-1-p), (A-2 -p), (B-p), (C-p), (A-q), (A-1-q), (A-2-q), (B-q), (C-q), (Ar), (A-1-r), (A-2-r), (Br) y (Cr) estan disenados para imitar la isoquinolina de la cortistatina A y se preve que tengan una mejor estabilidad metabolica.

[0183] En otras realizaciones de Formula (A), (B) y (C), en donde RB1 es -Li-RB3, y Li es -C(=O)N(RL)-, siempre que sean compuestos de Formula (A-j), (A-1-j), (A-2-j), (Bj) o (Cj):

o una sal farmaceuticamente aceptable, sal de amina cuaternaria o N-oxido de las mismas; en donde, R1, R2, R3, R4, R5, RL y RB3 son como se definen aqrn.

[0184] En otras realizaciones de Formula (A), (B) y (C), en donde RB1 es -Li-RB3, y Li es -N(RL)-(C(RLL)²)p-, en donde p es 1, siempre que sean compuestos de Formula (A-n), (A-1-n), (A-2-n), (B-n) o (C-n):

o una sal farmaceuticamente aceptable, sal de amina cuaternaria o N-oxido de las mismas; en donde, R1, R2, R3, R4, R5, RL y RB3 son como se definen aqrn.

[0185] Compuestos de Formula (A-j), (A-1-j), (A-2-j), (B-j), (C-j), (A-n), (A-1-n), (A-2-n), (B-n) y (C-n) estan disenados para imitar la isoquinolina de la cortistatina A y se preve que tengan propiedades farmacocineticas mejoradas. En particular, los compuestos en los que - Li-RB3 es un grupo de formula:

en donde Li es -C(O)N(RL)- o -N(RL)-((CRLL)²)p-, en donde p es 1, se contemplan en este documento.

[0186] Alternativamente, en ciertas realizaciones, al menos una instancia de RB1 y RB2 es - XARA En este caso, en ciertas realizaciones, el otro de RB1 y RB2 es hidrogeno o - XARA (por ejemplo, -ORA). Por ejemplo, en ciertas realizaciones, cuando —— designado como (c) representa un enlace sencillo, entonces RB1 es -XARA (por ejemplo, -ORA) y RB2 es hidrogeno o -XARA (por ejemplo, -ORA). En otras realizaciones, cuando —- designado como (c) representa un enlace sencillo, entonces RB2 es -XARA (por ejemplo, -ORA) y RB1 es hidrogeno o -XARA (por ejemplo, -ORA). Alternativamente, en ciertas realizaciones, cuando —- designado como (c) representa un doble enlace, entonces RB1 es -XARA (por ejemplo, -ORA en donde RA no es hidrogeno) y RB2 esta ausente.

[0187] En ciertas realizaciones, ambas instancias de RB1 y RB2 son -XARA. En estas realizaciones, en ciertos casos, los dos grupos RA pueden unirse para formar un anillo heterociclilo opcionalmente sustituido, por ejemplo, un anillo heterociclilo opcionalmente sustituido de 5-6 miembros. Por ejemplo, en ciertas realizaciones de Formula (A), (B) y (C) en donde ambos casos de RB1 y RB2 son -XARA, siempre que sean compuestos de Formula (A-k), (A-1-k), (A-2-k), y (B-k), y (C-k):

o una sal farmaceuticamente aceptable, sal de amina cuaternaria o N-oxido de las mismas; en donde, R1, R2, R3, R4, R5, XA y RA, son como se definen aqrn.

[0188] En ciertas realizaciones, RB1 y RB2 se unen para formar un grupo oxo (=O). Por ejemplo, en ciertas realizaciones de Formula (A), (B) y (C) RB1 y RB2 se unen para formar un grupo oxo (=O), siempre que sean compuestos de Formula (A-m), (A-1-m), (A-2-m), (B-m) o (C-m):

o una sal farmaceuticamente aceptable, sal de amina cuaternaria o N-oxido de las mismas; en donde, R1, R2, R3, R4 y R5, son como se definen aqm.

Compuestos ejemplares

[0189] Se contemplan adicionalmente varias combinaciones de ciertas realizaciones en este documento.

[0190] Por ejemplo, en ciertas realizaciones de Formula (A-1-h), (A-1-i), (A-1-p), (A-1-q), (A-1-r), (A-1-j), (A-1-n), (A-2-h), (D-1-h), (D-2-h), (E-1-h), (E-2-h), y en donde el enlace —— designado como (c) es un enlace sencillo, y RB2 es hidrogeno, siempre que sea un compuesto de Formulas:

o una sal farmaceuticamente aceptable, sal de amina cuaternaria o N-oxido de las mismas; en donde-, R1, R2, R0, R3, R4, R5, R6A, R6B, RL, RLL y m son como se definen aqm. En ciertas realizaciones, R³ es metilo. En ciertas realizaciones, R⁴ es hidrogeno. En ciertas realizaciones, R⁵ es hidrogeno. En ciertas realizaciones, los enlaces —— designados como (a) y (b) son enlaces dobles. En ciertas realizaciones, cada instancia de R¹ y R² es alquilo opcionalmente sustituido, por ejemplo, -CH³. En ciertas realizaciones, al menos uno de R¹ y R² es un grupo de formula

en donde p y Z son como se definen aqm. En ciertas realizaciones, al menos uno de R¹ y R² es - S(=O)²RA. En ciertas realizaciones, R¹ y R² se unen para formar un heterociclilo opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones, R¹ y R² se unen para formar un anillo de formula:

en donde R⁷. n y G son como se definen en el presente documento. En ciertas realizaciones, el compuesto es un N-oxido, por ejemplo, el grupo

es de formula

En ciertas realizaciones, RO es un alquilo opcionalmente sustituido, por ejemplo, -CH³ o un grupo de formula

en donde Z y p son como se definen en el presente documento. En ciertas realizaciones, RO es -C(=O)RA, -C(=O)ORA, o -C(=O)N(Ra)² , por ejemplo, -C(=O)CH3, -C(=O)) OCH³ , -C(=O)N(CH3)2, o -C(=O)NHCH3.

[0191] En ciertas realizaciones de Formula (A-1-h-i), (A-1-i-i), (A-1-p-i), (A-1-q-i), (A-1-r-i), (A-1-j-i), (A-1-n-i), (A-2-h-i), (D-1-h-i), (D-2-h-i), (E-1-h-i), y (E-2-h-i), en donde R3 es metilo, R4 y R5 son hidrogeno, y los enlaces —-designados como (a) y (b) son enlaces dobles, siempre que sea un compuesto de Formulas:

o una sal farmaceuticamente aceptable, sal de amina cuaternaria o N-oxido de las mismas; en donde R1, R2, RO, R6A, R6A, R6B, RL, RLL y m son como se definen aqm. En ciertas realizaciones, cada instancia de R1 y R2 es alquilo opcionalmente sustituido, por ejemplo, -CH³. En ciertas realizaciones, uno de R1 y R2 es hidrogeno, y uno de R1 y R2 es alquilo opcionalmente sustituido, por ejemplo, -CH³. En ciertas realizaciones, al menos uno de R1 y R2 es un grupo de formula

en donde p y Z son como se definen aqm. En ciertas realizaciones, al menos uno de R¹ y R² es -S(=O)²RA En ciertas realizaciones, R¹ y R² se unen para formar un heterociclilo opcionalmente sustituido. En ciertas realizaciones, R¹ y R² se unen para formar un anillo de formula:

o

en donde R⁷. n y G son como se definen en el presente documento. En ciertas realizaciones, el compuesto es un N-oxido, por ejemplo, el grupo

es de formula

En ciertas realizaciones, RO es un alquilo opcionalmente sustituido, por ejemplo, -CH³ o un grupo de formula

en donde Z y p son como se definen en el presente documento. En ciertas realizaciones, RO es -C(=O)RA, -C(=O)ORA, o -C(=O)N(Ra)² , por ejemplo, -C(=O)CH3, -C(=O)) OCH³ , -C(=O)N(CH3)2, o -C(=O)NHCH3.

[0192] En ciertas realizaciones de Formula (A-1-h-ii) y (A-2-h-ii), en donde R1 y R2 se unen para formar un heterociclilo opcionalmente sustituido, siempre que haya un compuesto de Formula:

o una sal farmaceuticamente aceptable, sal de amina cuaternaria o N-oxido de las mismas; en donde R7, R6A, n y m son como se definen en el presente documento. En ciertas realizaciones, G es O. En ciertas realizaciones, G es N-CH³. En ciertas realizaciones, m es 0, En ciertas realizaciones, m es 1, En ciertas realizaciones, n es 0, En ciertas realizaciones, n es 1.

[0193] En ciertas realizaciones de Formula (A-1-h-ii) o (A-2-h-ii), en donde R1 y R2 se unen para formar un heterociclilo opcionalmente sustituido, siempre que haya un compuesto de Formula:

o una sal farmaceuticamente aceptable, sal de amina cuaternaria o N-oxido de las mismas; en donde R7. R6A, n y m son como se definen en este documento. En ciertas realizaciones, G es -CH²-. En ciertas realizaciones, m es 0, En ciertas realizaciones, m es 1, En ciertas realizaciones, n es 0, En ciertas realizaciones, n es 1.

[0194] En ciertas realizaciones de Formula (A-1-h-ii), en donde cada uno de R1 y R2 son -CH³ , se proporciona un compuesto de Formula:

o una sal farmaceuticamente aceptable, sal de amina cuaternaria o N-oxido de las mismas; en donde R6A y m son como se definen en el presente documento. En ciertas realizaciones, m es 0. En ciertas realizaciones, m es 1,

[0195] En ciertas realizaciones de Formula (A-2-h-ii), en donde uno de R1 y R2 es hidrogeno, y el otro de R1 y R2 es -CH³ , siempre que sea un compuesto de Formula:

o una sal farmaceuticamente aceptable, sal de amina cuaternaria o N-oxido de las mismas; en donde R6A y m son como se definen en el presente documento. En ciertas realizaciones, m es 0, En ciertas realizaciones, m es 1,

[0196] Los compuestos ejemplares de Formula (a) incluyen, pero no se limitan a:

y sales farmaceuticamente aceptables, sales de aminas cuaternarias de los mismos y N-oxidos de los mismos, por ejemplo, N-oxidos de formula:

y

[0197] Sin embargo, en ciertas realizaciones, el compuesto de Formula (A) no es:

o una sal farmaceuticamente aceptable o una sal de amina cuaternaria del mismo, o un N-oxido del mismo.

[0198] Los compuestos ejemplares de Formula (B) incluyen, pero no se limitan a:

y sales farmaceuticamente aceptables, sales de aminas cuaternarias o N-oxidos de las mismas.

[0199] Los compuestos ejemplares de Formula (C) incluyen, pero no se limitan a:

y sus sales farmaceuticamente aceptables.

[0200] Los compuestos ejemplares de Formula (D) incluyen, pero no se limitan a:

y sus sales farmaceuticamente aceptables.

[0201] Los compuestos ejemplares de Formula (E) incluyen, pero no se limitan a:

y sus sales farmaceuticamente aceptables.

Composiciones farmaceuticas

[0202] En ciertas realizaciones, la presente invencion proporciona composiciones farmaceuticas que comprenden un compuesto de Formula (A), (B), (C), (D) o (E) o una sal farmaceuticamente aceptable, sal de amina cuaternaria o N-oxido del mismo, y un excipiente farmaceuticamente aceptable como se define en las reivindicaciones adjuntas. En ciertas realizaciones, el compuesto esta presente en una cantidad eficaz, por ejemplo, una cantidad terapeuticamente eficaz o una cantidad profilacticamente eficaz.

[0203] Los excipientes farmaceuticamente aceptables incluyen cualquiera y todos los disolventes, diluyentes u otros vehnculos lfquidos, adyuvantes de dispersion o suspension, agentes de superficie activa, agentes isotonicos, agentes espesantes o emulsionantes, conservantes, aglutinantes solidos, lubricantes y similares, segun sea adecuado para la particular forma de dosificacion deseada. Se pueden encontrar consideraciones generales en la formulacion y/o fabricacion de agentes de composiciones farmaceuticas, por ejemplo, en Remington's Pharmaceutical Science, l6 a Edicion, EW Martin (Mack Publishing Co., Easton, Pa., 1980), y Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21a edicion (Lippincott Williams & Wilkins, 2005).

[0204] Las composiciones farmaceuticas descritas en el presente documento pueden prepararse por cualquier metodo conocido en la tecnica de la farmacologfa. En general, dichos metodos de preparacion incluyen los pasos para llevar el compuesto de Formula (A), (B), (C), (D) o (E) o una sal farmaceuticamente aceptable, sal de amina cuaternaria o N-oxido del mismo (el "ingrediente activo") en asociacion con el excipiente y/o uno o mas ingredientes adicionales, y luego, si es necesario y/o deseable, conformar y/o envasar el producto en una unidad de dosis unica o multiple deseada.

[0205] Las composiciones farmaceuticas pueden prepararse, envasarse y/o venderse a granel, como una dosis unitaria unica, y/o como una pluralidad de dosis unitarias. Como se usa en el presente documento, una "dosis unitaria" es una cantidad discreta de la composicion farmaceutica que comprende una cantidad predeterminada del ingrediente activo. La cantidad del ingrediente activo es generalmente igual a la dosis del ingrediente activo que se administrana a un sujeto y/o una fraccion conveniente de dicha dosis tal como, por ejemplo, la mitad o un tercio de dicha dosis.

[0206] Las cantidades relativas del ingrediente activo, el vehmulo farmaceuticamente aceptable y/o cualquier ingrediente adicional en una composicion farmaceutica de la invencion variaran, dependiendo de la identidad, el tamano y/o el estado del sujeto tratado y, ademas, dependiendo de la ruta por la cual se va a administrar la composicion. A modo de ejemplo, la composicion puede comprender entre el 0,1% y el 100% (p/p) de ingrediente activo.

[0207] Los excipientes farmaceuticamente aceptables utilizados en la fabricacion de composiciones farmaceuticas proporcionadas incluyen diluyentes inertes, agentes dispersantes y/o granuladores, agentes tensioactivos y/o emulsionantes, agentes desintegrantes, agentes aglutinantes, conservantes, agentes tamponantes, agentes lubricantes y/o los aceites. Excipientes tales como manteca de cacao y ceras de supositorio, agentes colorantes, agentes de recubrimiento, edulcorantes, aromatizantes y perfumantes tambien pueden estar presentes en la composicion.

[0208] Los diluyentes ejemplares incluyen carbonato de calcio, carbonato de sodio, fosfato de calcio, fosfato dicalcico, sulfato de calcio, fosfato de hidrogeno y calcio, fosfato de sodio, lactosa, sacarosa, celulosa, celulosa microcristalina, caolm, manitol, sorbitol, inositol, cloruro de sodio, almidon seco, almidon de mafz, azucar en polvo, etc., y combinaciones de los mismos.

[0209] Los agentes de granulacion y/o dispersion ejemplares incluyen almidon de patata, almidon de mafz, almidon de tapioca, glicolato de almidon sodico, arcillas, acido algmico, goma guar, pulpa de cftricos, agar, bentonita, celulosa y productos de madera, esponja natural, intercambio cationico. resinas, carbonato de calcio, silicatos, carbonato de sodio, poli(vinilo-pirrolidona) reticulada (crospovidona), almidon de carboximetilo de sodio (glicolato de almidon de sodio), carboximetilcelulosa, carboximetilcelulosa de sodio reticulada (croscarmelosa), metilcelulosa, almidon pregelatinizado (almidon 1500), almidon microcristalino, almidon soluble en agua, carboximetilcelulosa calcica, silicato de magnesio y aluminio (Veegum), laurilsulfato de sodio, compuestos de amonio cuaternario, etc., y combinaciones de los mismos.

[0210] Los agentes tensioactivos y/o emulsionantes ejemplares incluyen emulsionantes naturales (por ejemplo, acacia, agar, acido algmico, alginato de sodio, tragacanto, chondrux, colesterol, xantano, pectina, gelatina, yema de huevo, casema, grasa de lana, colesterol, cera, y lecitina), arcillas coloidales (p. ej. bentonita [silicato de aluminio] y Veegum [silicato de magnesio y aluminio]), derivados de aminoacidos de cadena larga, alcoholes de alto peso molecular (p. ej. alcohol esteanlico, alcohol cetflico, alcohol oleflico, monoestearato de triacetina, diestearato de etilenglicol, monoestearato de glicerilo y monoestearato de propilenglicol, alcohol de polivinilo, carbomeros (por ejemplo, carboxi polimetileno, poli(acido acnlico, polfmero de acido acnlico y polfmero de carboxivinilo), carragenina, derivados celulosicos, carboximetilcelulosa sodica, celulosa en polvo, hidroxietilcelulosa, hidroxietilo celulosa, metilcelulosa de hidroxipropilo, metilcelulosa), esteres de acidos grasos de sorbitan (p. ej., monoxilato de polioxietileno sorbitano [Tween 20], polioxietileno de sorbitan [Tween 60], monooleato de polioxietileno sorbitan [Tween 80], monopalmitato de sorbitan [Span 40], monoestearato de sorbitan [Span 60], triestearato de sorbitan [Span 65], monooleato de glicerilo, monooleato de sorbitan [Span 80]), esteres de polioxietileno (por ejemplo, monoestearato de polioxietileno [Myrj 45], aceite de ricino hidrogenado de polioxietileno, aceite de ricino polietoxilado, estearato de polioximetileno y Solutol), esteres de acidos grasos de sacarosa, esteres de acidos grasos de polietilenglicol (por ejemplo, Cremophor), eteres de polioxietileno, (por ejemplo, polioxietilendenilo) eter [Brij 30]), poli(vinilo-pirrolidona), monolaurato de dietilenglicol, oleato de trietanolamina, oleato de sodio, oleato de potasio, oleato de etilo, acido oleico, laurato de etilo, sulfato de laurilo de sodio, Pluronic F 68, Poloxamer 188, bromuro de cetrimonio, cloruro de cetilpiridinio, cloruro de benzalconio, docusato de sodio, etc. y/o combinaciones de los mismos.

[0211] Los agentes de union ejemplares incluyen almidon (por ejemplo, maicena y pasta de almidon), gelatina, azucares (por ejemplo, sacarosa, glucosa, dextrosa, dextrina, melaza, lactosa, lactitol, manitol, etc.), gomas naturales y sinteticas (por ejemplo, acacia, sodio, alginato, extracto de musgo irlandes, goma panwar, goma ghatti, mudlago de cascaras de isapol, carboximetilcelulosa, metilcelulosa, etilcelulosa, hidroxietilcelulosa, hidroxipropilo celulosa, y otros artmulos en la celulosa, etc. (Veegum), y arabogalactano de alerce), alginatos, oxido de polietileno, polietilenglicol, sales de calcio inorganico, acido silfcico, polimetacrilatos, ceras, agua, alcohol, etc., y/o combinaciones de los mismos.

[0212] Los conservantes ejemplares incluyen antioxidantes, agentes quelantes, conservantes antimicrobianos, conservantes antifungicos, conservantes de alcohol, conservantes acidos y otros conservantes.

[0213] Los antioxidantes ejemplares incluyen alfa tocoferol, acido ascorbico, palmitato de acorbilo, hidroxianisol butilado, hidroxitolueno butilado, monotioglicerol, metabisulfito de potasio, acido propionico, galato de propilo, ascorbato de sodio, bisulfito de sodio, metabisulfito de sodio y sulfito de sodio.

[0214] Los agentes quelantes ejemplares incluyen acido etilendiaminotetraacetico (EDTA) y sus sales e hidratos (p. ej., edetato de sodio, edetato de disodio, edetato de trisodio, edetato de disodio de calcio, edetato de dipotasio y similares), acido cftrico y sales e hidratos de los mismos (por ejemplo, monohidrato de acido cftrico), acido fumarico y sus sales e hidratos, acido malico y sus sales e hidratos, acido fosforico y sus sales e hidratos, y acido tartarico y sus sales e hidratos. Los conservantes antimicrobianos ejemplares incluyen cloruro de benzalconio, cloruro de bencetonio, alcohol bencftico, bronopol, cetrimida, cloruro de cetilpiridinio, clorhexidina, clorobutanol, clorocresol, cloroxilenol, cresol, alcohol etflico, glicerina, hexetidina, imidurea, fenol, fenoxietanol, alcohol feniletftico, nitrato fenilmercurico, propilenglicol y timerosal.

[0215] Los conservantes antifungicos ejemplares incluyen butilparabeno, metilparabeno, etilparabeno, propilparabeno, acido benzoico, acido hidroxibenzoico, benzoato de potasio, sorbato de potasio, benzoato de sodio, propionato de sodio y acido sorbico.

[0216] Los conservantes de alcohol ejemplares incluyen etanol, polietilenglicol, fenol, compuestos fenolicos, bisfenol, clorobutanol, hidroxibenzoato y alcohol feniletftico.

[0217] Los conservantes acidos ejemplares incluyen vitamina A, vitamina C, vitamina E, betacaroteno, acido cftrico, acido acetico, acido deshidroacetico, acido ascorbico, acido sorbico y acido fftico.

[0218] Otros conservantes incluyen tocoferol, acetato de tocoferol, mesilato de deteroxima, cetrimida, hidroxianisol de butilo (BHA), hidroxitoltenado de butilo (BHT), etilendiamina, laurilsulfato de sodio (SLS), laurilo eter sulfato de sodio (SLES), bisulfito de sodio metabisulfito de sodio, sulfito de potasio, metabisulfito de potasio, Glydant Plus, Phenonip, metilparabeno, Germall 115, Germaben II, neolona, Kathon y Euxyl. En ciertas realizaciones, el conservante es un antioxidante. En otras realizaciones, el conservante es un agente quelante.

[0219] Los agentes de tamponamiento ejemplares incluyen soluciones de tampon de citrato, soluciones de tampon de acetato, soluciones de tampon de fosfato, cloruro de amonio, carbonato de calcio, cloruro de calcio, citrato de calcio, glubionato de calcio, gluceptato de calcio, gluconato de calcio, acido D-gluconico, glicerofosfato de calcio, lactato de calcio, acido propanoico, levulinato de calcio, acido pentanoico, fosfato de calcio dibasico, acido fosforico, fosfato de calcio tribasico, fosfato de hidroxido de calcio, acetato de potasio, cloruro de potasio, gluconato de potasio, mezclas de potasio, fosfato de potasio dibasico, fosfato de potasio monobasico, fosfato de potasio, acetato de sodio, bicarbonato de sodio, cloruro de sodio, cito de sodio, lactato de sodio, fosfato de sodio dibasico, fosfato de sodio monobasico, mezclas de fosfato de sodio, trometamina, hidroxido de magnesio, hidroxido de aluminio, acido algmico, agua libre de pirogenos, solucion salina isotonica, solucion de Ringer, alcohol etftico, etc., y combinaciones de los mismos.

[0220] Los agentes lubricantes ejemplares incluyen estearato de magnesio, estearato de calcio, acido estearico, sftice, talco, malta, behanato de glicerilo, aceites vegetales hidrogenados, polietilenglicol, benzoato de sodio, acetato de sodio, cloruro de sodio, leucina, laurilo sulfato de magnesio, laurilo sulfato de sodio., etc., y sus combinaciones.

[0221] Los aceites naturales ejemplares incluyen almendra, almendra de albaricoque, aguacato, babasu, bergamota, semilla de corriente negra, borraja, cade, manzanilla, canola, alcaravea, carnauba, ricino, canela, manteca de cacao, coco, tftgado de bacalao, cafe, mafz, semilla de algodon, emu, eucalipto, onagra, pescado, linaza, geraniol, calabaza, semilla de uva, avellana, hisopo, miristato de isopropilo, jojoba, nuez kukui, lavandin, lavanda, limon, litsea cubeba, nuez de macadia, semilla de mango, semilla de mora, vison, nuez moscada, oliva, naranja, reloj anaranjado, palma, almendra de palma, almendra de melocoton, mam, semilla de amapola, semilla de calabaza, colza, salvado de arroz, romero, cartamo, sandalo, sasquana, sabroso, espino cerval de mar, ajonjoft, manteca de karite, silicona, soja, girasol, arbol de te, cardo, tsubaki, vetiver, nuez y aceites de germen de trigo. Los aceites sinteticos ejemplares incluyen, pero no se limitan a, estearato de butilo, triglicerido caprftico, triglicerido caprico, ciclometicona, sebacato de dietilo, dimeticona 360, miristato de isopropilo, aceite mineral, octildodecanol, alcohol oleico, aceite de silicona y combinaciones de los mismos.

[0222] Las formas de dosificacion ftquidas para administracion oral y parenteral incluyen emulsiones, microemulsiones, soluciones, suspensiones, jarabes y elixires farmaceuticamente aceptables. Ademas del (de los) ingrediente(s) activo(s), las formas de dosificacion ftquidas pueden comprender diluyentes inertes comunmente utilizados en la tecnica como, por ejemplo, agua u otros disolventes, agentes solubilizantes y emulsionantes como alcohol etftico, alcohol isopropftico, carbonato de etilo, acetato de etilo, alcohol bencftico, benzoato de bencilo, propilenglicol, 1,3-butilenglicol, dimetilformamida, aceites (p. ej., semillas de algodon, mam, mafz, germen, ricino, ricino y aceites de sesamo), glicerol, alcohol tetrahidrofurfurftico, polietilenglicoles y esteres de acidos grasos de sorbitan, y mezclas de los mismos. Ademas de los diluyentes inertes, las composiciones orales pueden incluir adyuvantes tales como agentes humectantes, agentes emulsionantes y suspensores, agentes edulcorantes, saborizantes y perfumantes. En ciertas realizaciones para administracion parenteral, los conjugados de la invencion se mezclan con agentes solubilizantes tales como cremofor, alcoholes, aceites, aceites modificados, glicoles, polisorbatos, ciclodextrinas, polfmeros, conjugados de poKmeros (por ejemplo, IT-101/CLRX101) y combinaciones de los mismos.

[0223] Las preparaciones inyectables, por ejemplo, suspensiones acuosas u oleaginosas inyectables esteriles pueden formularse de acuerdo con la tecnica conocida usando agentes dispersantes o humectantes adecuados y agentes de suspension. La preparacion inyectable esteril puede ser una solucion, suspension o emulsion inyectable esteril en un diluyente o disolvente no toxico parenteralmente aceptable, por ejemplo, como una solucion en 1,3-butanodiol. Entre los vehfculos y disolventes aceptables que se pueden emplear estan el agua, la solucion de Ringer, la USP y la solucion de cloruro de sodio isotonica. Ademas, los aceites fijos esteriles se emplean convencionalmente como un disolvente o medio de suspension. Para este proposito, se puede emplear cualquier aceite fijo insfpido, incluyendo mono o digliceridos sinteticos. Ademas, los acidos grasos como el acido oleico se utilizan en la preparacion de inyectables.

[0224] Las formulaciones inyectables pueden esterilizarse, por ejemplo, mediante filtracion a traves de un filtro de retencion bacteriana, o incorporando agentes esterilizantes en forma de composiciones solidas esteriles que pueden disolverse o dispersarse en agua esteril u otro medio inyectable esteril antes de utilizarse.

[0225] Con el fin de prolongar el efecto del ingrediente activo, a menudo es deseable disminuir la absorcion del ingrediente activo de la inyeccion subcutanea o intramuscular. Esto se puede lograr mediante el uso de una suspension lfquida de material cristalino o amorfo con poca solubilidad en agua. La velocidad de absorcion del ingrediente activo depende entonces de su velocidad de disolucion que, a su vez, puede depender del tamano del cristal y la forma cristalina. Alternativamente, la absorcion retardada de una forma administrada por via parenteral se logra disolviendo o suspendiendo el ingrediente activo en un vetnculo oleoso.

[0226] Las composiciones para administracion rectal o vaginal son tfpicamente supositorios que pueden prepararse mezclando los conjugados de esta invencion con excipientes o vehfculos adecuados no irritantes tales como manteca de cacao, polietilenglicol o una cera de supositorio que son solidos a temperatura ambiente pero lfquidos a la temperatura corporal y, por lo tanto, se funden en el recto o la cavidad vaginal y liberan el ingrediente activo.

[0227] Las formas de dosificacion solidas para administracion oral incluyen capsulas, comprimidos, pfldoras, polvos y granulos. En tales formas de dosificacion solidas, el ingrediente activo se mezcla con al menos un excipiente o vetnculo inerte, farmaceuticamente aceptable, tal como citrato de sodio o fosfato dicalcico y/o a) rellenos o diluyentes tales como almidones, lactosa, sacarosa, glucosa, manitol y acido silfcico, b) aglutinantes tales como, por ejemplo, carboximetilcelulosa, alginatos, gelatina, polivinilpirrolidona, sacarosa y goma arabiga, c) humectantes tales como glicerol, d) agentes desintegrantes tales como agar, carbonato de calcio, papa o almidon de tapioca, acido algmico, ciertos silicatos y carbonato de sodio, e) agentes retardantes de la solucion tales como parafina, f) aceleradores de la absorcion tales como compuestos de amonio cuaternario, g) agentes humectantes tales como, por ejemplo, alcohol cetflico y monoestearato de glicerol, h) absorbentes tales como caolm y arcilla de bentonita, y i) lubricantes tales como talco, estearato de calcio, estearato de magnesio, polietilenglicoles solidos, laurilsulfato de sodio y mezclas de los mismos. En el caso de capsulas, comprimidos y pfldoras, la forma de dosificacion puede comprender agentes tamponantes.

[0228] Las composiciones solidas de un tipo similar pueden emplearse como rellenos en capsulas de gelatina blandas y rellenas que utilizan excipientes como lactosa o azucar de leche, asf como polietilenglicoles de alto peso molecular y similares. Las formas de dosificacion solidas de comprimidos, grageas, capsulas, pfldoras y granulos pueden prepararse con recubrimientos y cubiertas tales como recubrimientos entericos y otros recubrimientos bien conocidos en la tecnica de formulacion farmaceutica. Opcionalmente, pueden comprender agentes opacificantes y pueden ser de una composicion que liberen el (los) ingrediente(s) activo(s) solamente, o preferentemente, en una cierta parte del tracto intestinal, opcionalmente, de manera retardada. Los ejemplos de composiciones de inclusion que pueden usarse incluyen sustancias polimericas y ceras. Las composiciones solidas de un tipo similar pueden emplearse como rellenos en capsulas de gelatina blandas y de relleno duro utilizando excipientes como lactosa o azucar de leche, asf como polietilenglicoles de alto peso molecular y similares.

[0229] El ingrediente o los ingredientes activos pueden estar en forma microencapsulada con uno o mas excipientes como se indico anteriormente. Las formas de dosificacion solidas de comprimidos, grageas, capsulas, pfldoras y granulos pueden prepararse con recubrimientos y envolturas, tales como recubrimientos entericos, recubrimientos que controlan la liberacion y otros recubrimientos bien conocidos en la tecnica de formulacion farmaceutica. En tales formas de dosificacion solidas, el ingrediente activo puede mezclarse con al menos un diluyente inerte tal como sacarosa, lactosa o almidon. Dichas formas de dosificacion pueden comprender, como es practica habitual, sustancias adicionales distintas de los diluyentes inertes, por ejemplo, lubricantes para la formacion de tabletas y otros adyuvantes para la formacion de tabletas tales como estearato de magnesio y celulosa microcristalina. En el caso de capsulas, comprimidos y pfldoras, las formas de dosificacion pueden comprender agentes tamponantes. Opcionalmente, pueden comprender agentes opacificantes y pueden ser de una composicion que liberen el (los) ingrediente(s) activo(s) solamente, o preferentemente, en una cierta parte del tracto intestinal, opcionalmente, de manera retardada. Los ejemplos de composiciones de inclusion que pueden usarse incluyen sustancias polimericas y ceras.

[0230] Las formas de dosificacion para administracion topica y/o transdermica de un compuesto de esta invencion pueden incluir unguentos, pastas, cremas, lociones, geles, polvos, soluciones, pulverizaciones, inhalantes y/o parches. En general, el ingrediente activo se mezcla en condiciones esteriles con un veldculo farmaceuticamente aceptable y/o cualquier conservante y/o tampon necesario, segun sea necesario. Ademas, la presente invencion contempla el uso de parches transdermicos, que a menudo tienen la ventaja adicional de proporcionar un suministro controlado de un ingrediente activo al cuerpo. Dichas formas de dosificacion pueden prepararse, por ejemplo, disolviendo y/o dispensando el ingrediente activo en el medio apropiado. Alternativamente o adicionalmente, la velocidad puede controlarse proporcionando una membrana de control de velocidad y/o dispersando el ingrediente activo en una matriz de polfmero y/o gel.

[0231] Los dispositivos adecuados para uso en la administracion de composiciones farmaceuticas intradermicas descritas en el presente documento incluyen dispositivos de aguja corta tales como los descritos en las patentes de EE.UU. 4.886.499; 5.190.521; 5.328.483; 5.527.288; 4.270.537; 5.015.235; 5.141.496; y 5.417.662. Las composiciones intradermicas pueden administrarse mediante dispositivos que limitan la longitud efectiva de penetracion de una aguja en la piel, como las descritas en la publicacion PCT WO 99/34850 y sus equivalentes funcionales. Son adecuados los dispositivos de inyeccion de chorro que suministran vacunas lfquidas a la dermis a traves de un inyector de chorro de lfquido y/o una aguja que perfora el estrato corneo y produce un chorro que llega a la dermis. Los dispositivos de inyeccion en chorro se describen, por ejemplo, en las patentes de EE.UU. 5.480.381; 5.599.302; 5.334.144; 5.993.412; 5.649.912; 5.569.189; 5.704.911; 5.383.851; 5.893.397; 5.466.220; 5.339.163; 5.312.335; 5.503.627; 5.064.413; 5.520.639; 4.596.556; 4.790.824; 4.941.880; 4.940.460; y las publicaciones PCT WO 97/37705 y WO 97/13537. Son adecuados los dispositivos balfsticos de liberacion de partfculas/polvo que utilizan gas comprimido para acelerar la vacuna en forma de polvo a traves de las capas externas de la piel hasta la dermis. De forma alternativa o adicional, se pueden usar jeringas convencionales en el metodo clasico de mantoux de administracion intradermica.

[0232] Las formulaciones adecuadas para administracion topica incluyen, pero no se limitan a, preparaciones lfquidas y/o semilfquidas tales como linimentos, lociones, aceite en agua y/o agua en emulsiones de aceite tales como cremas, unguentos y/o pastas, y/o soluciones y/o suspensiones. Las formulaciones administrables por via topica pueden, por ejemplo, comprender de aproximadamente 1% a aproximadamente 10% (p/p) de ingrediente activo, aunque la concentracion del ingrediente activo puede ser tan alta como el lfmite de solubilidad del ingrediente activo en el disolvente. Las formulaciones para administracion topica pueden comprender ademas uno o mas de los ingredientes adicionales descritos en el presente documento.

[0233] Una composicion farmaceutica puede prepararse, envasarse y/o venderse en una formulacion adecuada para administracion pulmonar a traves de la cavidad bucal. Dicha formulacion puede comprender partfculas secas que comprenden el ingrediente activo y que tienen un diametro en el intervalo de aproximadamente 0,5 a aproximadamente 7 nanometros o de aproximadamente 1 a aproximadamente 6 nanometros. Dichas composiciones estan convenientemente en forma de polvos secos para administracion usando un dispositivo que comprende un deposito de polvo seco al que puede dirigirse una corriente de propelente para dispersar el polvo y/o usando un recipiente auto-propulsor de dispensacion de disolvente/polvo tal como un dispositivo que comprende el ingrediente activo disuelto y/o suspendido en un propelente de bajo punto de ebullicion en un recipiente sellado. Dichos polvos comprenden partfculas en las que al menos el 98% de las partfculas en peso tienen un diametro superior a 0,5 nanometros y al menos el 95% de las partfculas en numero tienen un diametro inferior a 7 nanometros. Alternativamente, al menos el 95% de las partfculas en peso tienen un diametro mayor que 1 nanometro y al menos el 90% de las partfculas en numero tienen un diametro menor de 6 nanometros. Las composiciones de polvo seco pueden incluir un diluyente de polvo fino solido, tal como azucar, y se proporcionan convenientemente en una forma de dosis unitaria.

[0234] Los propelentes de bajo punto de ebullicion generalmente incluyen propelentes lfquidos que tienen un punto de ebullicion por debajo de 65° F a presion atmosferica. En general, el propelente puede constituir del 50 al 99,9% (p/p) de la composicion, y el ingrediente activo puede constituir del 0,1 al 20% (p/p) de la composicion. El propelente puede comprender ademas ingredientes adicionales tales como un tensioactivo anionico solido no ionico y/o lfquido y/o un diluyente solido (que puede tener un tamano de partfcula del mismo orden que las partfculas que comprenden el ingrediente activo).

[0235] Las composiciones farmaceuticas formuladas para el suministro pulmonar pueden proporcionar el ingrediente activo en forma de gotitas de una solucion y/o suspension. Dichas formulaciones pueden prepararse, envasarse y/o venderse como soluciones y/o suspensiones alcoholicas acuosas y/o diluidas, opcionalmente esteriles, que comprenden el ingrediente activo, y pueden administrarse convenientemente utilizando cualquier dispositivo de nebulizacion y/o atomizacion. Dichas formulaciones pueden comprender ademas uno o mas ingredientes adicionales que incluyen, pero no se limitan a, un agente aromatizante tal como sacarina sodica, un aceite volatil, un agente tampon, un agente tensioactivo y/o un conservante tal como metilhidroxibenzoato. Las gotitas proporcionadas por esta via de administracion pueden tener un diametro promedio en el rango de aproximadamente 0,1 a aproximadamente 200 nanometros.

[0236] Las formulaciones descritas en el presente documento como utiles para la administracion pulmonar son utiles para la admimstracion intranasal de una composicion farmaceutica de la invencion. Otra formulacion adecuada para la administracion intranasal es un polvo grueso que comprende el ingrediente activo y que tiene una partfcula promedio de aproximadamente 0,2 a 500 micrometros. Dicha formulacion se administra por inhalacion rapida a traves del pasaje nasal desde un recipiente del polvo que se mantiene cerca de las fosas nasales.

[0237] Las formulaciones para administracion nasal pueden comprender, por ejemplo, desde aproximadamente el 0,1% (p/p) y hasta el 100% (p/p) del ingrediente activo, y pueden comprender uno o mas de los adicionales. ingredientes descritos en el presente documento. Una composicion farmaceutica de la invencion se puede preparar, envasar y/o vender en una formulacion para administracion bucal. Dichas formulaciones pueden, por ejemplo, estar en forma de tabletas y/o pastillas hechas usando metodos convencionales, y pueden contener, por ejemplo, 0,1 a 20% (p/p) de ingrediente activo, el equilibrio que comprende un disolvente oral y/o composicion degradable y, opcionalmente, uno o mas de los ingredientes adicionales descritos en este documento. Alternativamente, las formulaciones para administracion bucal pueden comprender un polvo y/o una solucion y/o suspension en aerosol y/o atomizada que comprende el ingrediente activo. Dichas formulaciones en polvo, en aerosol y/o atomizadas, cuando se dispersan, pueden tener un tamano promedio de partfculas y/o gotas en el rango de aproximadamente 0,1 a aproximadamente 200 nanometros, y pueden comprender ademas uno o mas de los ingredientes adicionales descritos en este documento.

[0238] Una composicion farmaceutica puede prepararse, envasarse y/o venderse en una formulacion para administracion oftalmica. Dichas formulaciones pueden estar, por ejemplo, en forma de gotas oculares que incluyen, por ejemplo, una solucion al 0,1/1,0% (p/p) y/o suspension del ingrediente activo en un vetuculo lfquido acuoso o aceitoso. Dichas gotas pueden comprender ademas agentes de tamponamiento, sales y/o uno o mas de los ingredientes adicionales descritos en este documento. Otras formulaciones oftalmicamente administrables que son utiles incluyen aquellas que comprenden el ingrediente activo en forma microcristalina y/o en una preparacion liposomal. Se considera que las gotas para ofdos y/o gotas para los ojos estan dentro del alcance de esta invencion.

[0239] Aunque las descripciones de las composiciones farmaceuticas proporcionadas en el presente documento se dirigen principalmente a composiciones farmaceuticas que son adecuadas para la administracion a seres humanos, los expertos en la tecnica entenderan que dichas composiciones son generalmente adecuadas para la administracion a animales de todo tipo. La modificacion de las composiciones farmaceuticas adecuadas para la administracion a seres humanos con el fin de hacer las composiciones adecuadas para la administracion a diversos animales es bien conocida, y el farmacologo veterinario normalmente experto puede disenar y/o realizar dicha modificacion con la experimentacion habitual. Las consideraciones generales en la formulacion y/o fabricacion de composiciones farmaceuticas se pueden encontrar, por ejemplo, en Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21a ed., Lippincott Williams & Wilkins, 2005.

[0240] Aun mas abarcados por la invencion estan los paquetes y/o kits farmaceuticos. Envases farmaceuticos y/o los kits provistos pueden comprender una composicion provista y un contenedor (por ejemplo, un vial, ampolla, botella, jeringa y/o envase dispensador, u otro contenedor adecuado). En algunas realizaciones, los kits proporcionados pueden incluir adicionalmente un segundo recipiente que comprende un vehfculo acuoso adecuado para la dilucion o suspension de la composicion proporcionada para la preparacion de la administracion a un sujeto. En algunas realizaciones, los contenidos del contenedor de formulacion proporcionado y el contenedor de disolvente se combinan para formar al menos una forma de dosificacion unitaria.

[0241] Opcionalmente, un solo recipiente puede comprender uno o mas compartimientos para contener una composicion proporcionada y/o un vehfculo acuoso apropiado para suspension o dilucion. En algunas realizaciones, un solo recipiente puede ser apropiado para una modificacion tal que el recipiente pueda recibir una modificacion ffsica para permitir la combinacion de compartimentos y/o componentes de compartimentos individuales. Por ejemplo, una lamina o bolsa de plastico puede comprender dos o mas compartimientos separados por un sello perforado que puede romperse para permitir la combinacion de contenidos de dos compartimentos individuales una vez que se genera la senal para romper el sello. Por lo tanto, un paquete o kit farmaceutico puede comprender tales contenedores de multiples compartimentos que incluyen una composicion proporcionada y un disolvente apropiado y/o un vetuculo acuoso apropiado para la suspension.

[0242] Opcionalmente, las instrucciones de uso se proporcionan adicionalmente en dichos kits de la invencion. Dichas instrucciones pueden proporcionar, en general, por ejemplo, instrucciones para la dosificacion y administracion. En otras realizaciones, las instrucciones pueden proporcionar ademas detalles adicionales relacionados con instrucciones especializadas para contenedores y/o sistemas particulares para administracion. Ademas, las instrucciones pueden proporcionar instrucciones especializadas para su uso en conjuncion y/o en combinacion con terapia adicional.

Metodos de tratamiento

[0243] CDK8 y CDK19, denominados "quinasas mediadoras", se ensamblan en complejos de multiples protemas que se unen de manera reversible al complejo de mediadores. El complejo mediador vincula los factores de transcripcion unidos al potenciador a la holoenzima pol II del ARN unido al promotor e influye en la arquitectura de la cromatina para regular la transcripcion y la expresion genica a traves de mecanismos aun poco conocidos. La reciente y completa secuenciacion de genomas de muestras de 200 pacientes con AML revelo que, notablemente, casi todas las mutaciones en protemas supuestamente cancengenas se asocian con la regulacion de la expresion genica. Ver, por ejemplo, Aerts, et al., Nature (2013) 499: 35-36; The Cancer Genome Atlas Research Network, 2013. Genomic and Epigenomic Landscapes of Adult De Novo Acute Myeloid Leukemia. N. Engl. J. Med. 368, 2059­ 2074. Por lo tanto, la inhibicion espedfica de las quinasas mediadoras podna ser un nuevo medio para interrumpir la capacidad de algunas mutaciones de AML para desregular los programas de expresion de genes que impulsan el crecimiento celular de AML. La inhibicion espedfica de moleculas pequenas de CDK8/CDK19 tambien puede resultar beneficiosa para el tratamiento de otros canceres que dependen de la expresion genica desregulada. Se observo ademas que CDK8/ciclina C se expresaba mas altamente en neuronas y astrocitos de pacientes con enfermedad de Alzheimer (EA), y por lo tanto la inhibicion de moleculas pequenas espedficas de CDK8 tambien podna ser beneficiosa para tratar trastornos degenerativos, como la eA. Ver, por ejemplo, Hessel et al., Neurobiology of Aging (2003) 24: 427-435, en donde. Se ha informado que la cortistatina A se une a CDK8 y CDK19. Ver, por ejemplo, Cee et al., Angew Chem Int Ed (2009) 48: 8952 y US 20120071477. Ademas, como demuestran las Figuras 7. 10A-10C y 16A-16D, la cortistatina A inhibe la actividad quinasa CDK8, en parte debido a este enlace CDK8 y CDK19 tienen secuencias y dominios cataltticos muy similares que sugieren que la inhibicion de CDK8 probablemente tambien inhibira a CDK19. Ver, por ejemplo, Ries et al., Semin. Celular Dev. Biol. (2011) 22: 735­ 740. La alineacion a chorro de CDK8 frente a CDK19 tambien indica que los aminoacidos son 70% identicos y 82% similares.

[0244] De este modo, en un aspecto, se proporciona un metodo para inhibir la actividad de quinasa CDK8 y/o CDK19 en una celula que comprende poner en contacto un compuesto de Formula (A), (B), (C), (D) o (E) o una sal farmaceuticamente aceptable, amina cuaternaria o N-oxido de las mismas, con la celula. En ciertas realizaciones, el metodo es un metodo in vitro. En ciertas realizaciones, el metodo es un metodo in vivo. En otro aspecto, se proporciona un metodo para tratar una afeccion asociada con CDK8 y/o actividad de quinasa CDK19, que comprende administrar a un sujeto que lo necesite un compuesto de Formula (A), (B), (C), (D) o (E) o una sal farmaceuticamente aceptable, sal de amina cuaternaria o N-oxidos de los mismos.

[0245] En ciertas realizaciones, la afeccion asociada con CDK8 y/o la actividad de la quinasa CDK19 es un trastorno proliferativo, por ejemplo, cancer. La actividad de la quinasa c DK8 se ha relacionado con el cancer de colon. Ver, por ejemplo, Firestein, et al., Nature (2008) 455: 547-551.

[0246] En ciertas realizaciones, la afeccion asociada con CDK8 y/o la actividad de quinasa CDK19 es una afeccion diabetica, por ejemplo, diabetes.

[0247] En ciertas realizaciones, la afeccion asociada con CDK8 y/o la actividad de la quinasa CDK19 es un trastorno degenerativo, por ejemplo, la enfermedad de Alzheimer (EA).

[0248] CDK8 se ha relacionado con la regulacion de una serie de vfas de senalizacion y programas transcripcionales que se han implicado en el mantenimiento y la conduccion de enfermedades como el cancer. Estas vfas y programas incluyen la ruta Wnt/beta-catenina, la ruta Notch, la senalizacion TGF-beta/BMP, la ruta JAK-STAT, la ruta p53 y la respuesta a la hipoxia. La senalizacion aberrante de Wnt/beta-catenina se asocia con leucemias y muchos otros tipos de cancer. Por ejemplo, las mutaciones mas comunes en el cancer de colon son las que conducen a la activacion de la senalizacion de Wnt/beta-catenina, la expresion de los genes diana de Wnt y la tumorigenesis. Dado su papel central en la tumorigenesis, hay mucho interes en identificar inhibidores seguros y efectivos de la senalizacion de Wnt/beta-catenina. Ver, por ejemplo, Wang, et al., Science (2010) 327: 1650-1653. Polakis, EMBO J. (2012) 31:2737-2746.

[0249] Por lo tanto, en otro aspecto, se proporciona un metodo para tratar una afeccion asociada a la ruta de la pcatenina que comprende administrar a un sujeto que lo necesite un compuesto de Formula (A), (B), (C), (D), o (E) o una sal farmaceuticamente aceptable, amina cuaternaria o N-oxido de las mismas. En otro aspecto, se proporciona un metodo para modular la ruta de la p-catenina (por ejemplo, al inhibir la expresion de los genes diana de la betacatenina) en una celula que comprende poner en contacto un compuesto de Formula (A), (B), (C) (D) o (E) o una sal farmaceuticamente aceptable, amina cuaternaria o N-oxido de las mismas, con la celula. En ciertas realizaciones, el metodo es un metodo in vitro. En ciertas realizaciones, el metodo es un metodo in vivo.

[0250] Como se muestra en la Figura 15, la cortistatina A inhibe la transcripcion activada por beta-catenina en un ensayo de gen reportero y la expresion de genes diana putativos de Wnt/beta-catenina en celulas de AML. Numerosos estudios han vinculado la activacion de la via beta-catenina con el inicio, mantenimiento y crecimiento del tumor. Se han observado alteraciones de la via de Wnt/beta-catenina en cancer de mama, cancer colorrectal, carcinoma hepatocelular, meduloblastoma, cancer de pancreas, linfoma/leucemia, cancer de pulmon, cancer de rinon y tumor de Wilms. Ver, por ejemplo, Saito-Dfaz, et al., Growth Factors (2013) 31:1-31. Ademas del cancer, otras enfermedades con la sobreactivacion de la via de Wnt/beta-catenina incluyen enfermedades de masa osea alta y obesidad hipertrofica. Ademas, las variantes del factor de transcripcion de la ruta de catenina Wnt-beta TCF7L2 se han asociado con la diabetes. Ver, por ejemplo, MacDonald et al., Developmental Cell (2009) 17. 9-26.

[0251] En otro aspecto, se proporciona un metodo para tratar una afeccion asociada con la ruta JAK-STAT que comprende administrar a un sujeto que lo necesite un compuesto de Formula (A), (B), (C), (D), o (E) o una sal farmaceuticamente aceptable, amina cuaternaria o N-oxido de las mismas. En otro aspecto, se proporciona un metodo para modular la actividad de STAT1 en una celula (por ejemplo, mediante la inhibicion de la fosforilacion de STAT1 S727 en la via JAK-STAT, lo que conduce a una regulacion ascendente o descendente de genes asociados espedficos de STAT1) que comprende poner en contacto un compuesto de Formula (A), (B), (C), (D) o (E) o una sal farmaceuticamente aceptable, amina cuaternaria o N-oxido de las mismas, con la celula. En ciertas realizaciones, el metodo es un metodo in vitro. En ciertas realizaciones, el metodo es un metodo in vivo.

[0252] Como se muestra en la Figura 7, la cortistatina A inhibe la fosforilacion de STAT1 estimulada con interferon gamma. La inhibicion de la fosforilacion de STAT1 puede ser una estrategia terapeutica para tratar la inflamacion aberrante, incluso en la aterosclerosis, para tratar los canceres, incluidas las MPN y las leucemias, y para tratar la diabetes, mediante la prevencion de la apoptosis de celulas beta mediada por STAT1. El IFN-gamma se expresa en niveles altos en las lesiones ateroscleroticas que conducen a un aumento de la inflamacion a traves de la activacion de STAT1 y el IFN-gamma activa el STAT1 para inducir la apoptosis de las celulas beta. Ver, por ejemplo, Gysemans et al., Biochem. Soc. Trans (2008) 36: 328. Tambien se ha demostrado que la fosforilacion de STAT1 por CDK8 restringe la activacion de NK y la supervivencia del tumor.

[0253] Por lo tanto, la inhibicion de la actividad de la quinasa CDK8 puede permitir beneficiosamente una muerte de celulas tumorales mediada por NK ademas de inhibir directamente la proliferacion de celulas tumorales. Ver, por ejemplo, Putz et al., CellReports (2013) 4: 437-444. Se ha informado de que los CDK nucleares, tales como CDK8, controlan la activacion transcripcional SMAD y el volumen de negocios en BMP y TGF-beta. Ver, por ejemplo, Alarcon et al., Cell (2009) 139: 757-769. Por lo tanto, en otro aspecto adicional, se proporciona un metodo para tratar una afeccion asociada a la ruta de TGF-beta/BMP que comprende administrar a un sujeto que lo necesite un compuesto de Formula (A), (B), (C), (D), o (E) o una sal farmaceuticamente aceptable, amina cuaternaria o N-oxido de las mismas. En otro aspecto, se proporciona un metodo para modular la ruta de TGF-beta/BMP (por ejemplo, mediante la inhibicion de las protemas SMAD de fosforilacion de CDK8/CDK19 en la ruta de TGF-beta/BMP que conduce a la regulacion hacia arriba o hacia abajo de genes espedficos de protemas SMAD asociadas) en una celula que comprende poner en contacto un compuesto de Formula (A), (B), (C), (D) o (E) o una sal farmaceuticamente aceptable, amina cuaternaria o N-oxido de la misma, con la celula. En ciertas realizaciones, el metodo es un metodo in vitro. En ciertas realizaciones, el metodo es un metodo in vivo.

[0254] Las rutas de TGF-beta y BMP son cnticas para la homeostasis del tejido, la modulacion de la actividad de la ruta de TGF-beta y BMP puede ser una estrategia de tratamiento para condiciones que incluyen, entre otras, distrofia muscular (ver, por ejemplo, Ceco, FEBS J. (2013) 280: 4198-4209), respuesta inmune a trasplantes, cancer, fibrosis y smdrome de Marfan (ver, por ejemplo, Akhurst y Hata, Nat Rev Drug Discov (2012) 11:790-811).

[0255] La hipoxia es una afeccion en la que el cuerpo o la region del cuerpo se ve privado de un suministro adecuado de oxfgeno y puede deberse a enfermedad de altura, isquemia, accidente cerebrovascular, ataque cardfaco, anemia, cancer y envenenamiento por monoxido de carbono. CDK8 se ha relacionado con la regulacion de la respuesta hipoxica, desempenando un papel en la induccion de genes diana HIF-1-A (HIF-1-alfa). Estos genes estan involucrados en la angiogenesis, la glucolisis, la adaptacion metabolica y la supervivencia celular, procesos cnticos para el mantenimiento y el crecimiento de tumores. Ver, por ejemplo, Galbraith, et al., Cell 153: 1327-1339.

[0256] Por lo tanto, en un aspecto, se proporciona un metodo para tratar una afeccion asociada con hipoxia que comprende administrar a un sujeto que lo necesite un compuesto de Formula (A), (B), (C), (D), o (E) o una sal farmaceuticamente aceptable, amina cuaternaria o N-oxido de las mismas. En otro aspecto, se proporciona un metodo para reducir la lesion por hipoxia que comprende administrar a un sujeto que lo necesite un compuesto de Formula (A), (B), (C), (D) o (E) o una sal farmaceuticamente aceptable. Amina cuaternaria, o N-oxido de la misma. En otro aspecto adicional, se proporciona un metodo para modular la actividad de HIF-1-A (HIF-1-alfa) (por ejemplo, mediante la inhibicion de la expresion de los genes asociados a HIF-1-alfa) en una celula que comprende poner en contacto un compuesto de Formula (A), (B), (C), (D) o (E) o una sal farmaceuticamente aceptable, amina cuaternaria o N-oxido de las mismas, con la celula. En ciertas realizaciones, el metodo es un metodo in vitro. En ciertas realizaciones, el metodo es un metodo in vivo.

[0257] En otro aspecto, se proporciona un metodo para aumentar la expresion BIM (por ejemplo, la expresion de BCLC2L11) para inducir la apoptosis en una celula que comprende poner en contacto un compuesto de Formula (A), (B), (C), (D) o (E) o una sal farmaceuticamente aceptable, amina cuaternaria o N-oxido de las mismas, con la celula. En ciertas realizaciones, el metodo es un metodo in vitro. En ciertas realizaciones, el metodo es un metodo in vivo. La expresion de BCL2L11 esta estrechamente regulada en una celula. BCL2L11 codifica para BIM, una protema proapoptotica. BCL2L11 esta regulado a la baja en muchos canceres y BIM esta inhibido en muchos canceres, incluyendo la leucemia mielodtica cronica (CML) y el cancer de pulmon de celulas no pequenas (NSCLC) y que la supresion de la expresion de BCL2L11 puede conferir resistencia a los inhibidores de la quinasa de tirosina. Ver, por ejemplo, Ng et al., Nat. Medicine. (2012) 18: 521-528.

[0258] Ademas, se ha encontrado que las cortistatinas como una clase de compuestos tienen actividad antiantiogenica. Ver, por ejemplo, Aoki, et al., JACS (2006) 128: 3148-9. La angiogenesis es el proceso de generar nuevos vasos sangumeos capilares a partir de la vasculatura preexistente. Despues del nacimiento, la angiogenesis contribuye al crecimiento de los organos, pero en la edad adulta esta estrictamente regulada y se produce solo durante la curacion de heridas y en el ciclo reproductivo femenino. Ver, por ejemplo, Klagsbrun et al., Angiogenesis Molecular. Chemistry & Biology 1999, 6 (8), R217-R224. En condiciones fisiologicas normales, la angiogenesis esta estrechamente controlada por una serie de factores proangiogenicos y antiangiogenicos, que permiten el crecimiento vascular durante penodos de tiempo controlados. Ver, por ejemplo, Ferrara, Vascular Endothelial Growth Factor as a Target for Anticancer Therapy. The Oncologist 2004, 9: 2-10. La angiogenesis no regulada y persistente se ha relacionado con una amplia gama de enfermedades, que incluyen la artritis reumatoide, la degeneracion macular, la aterosclerosis, la obesidad, las neoplasias benignas y los canceres. Vease, por ejemplo, Moulton et al., Angiogenesis inhibitors endostatin or TNP-470 reduce intimal neovascularization and plaque growth in apolipoprotein E-deficient mice. Circulation 1999, 99, (13), 1726-1732; y Hanahan et al., The hallmarks of cancer. Cell 2000, 100, (1), 57-70. El hecho de que estos estados patologicos esten unificados por su estatus de "enfermedades dependientes de la angiogenesis", pero que por lo demas no tienen relacion, ha llevado a Folkman a proponer el concepto de angiogenesis como un "principio organizador" en biologfa, mediante el cual se pueden conectar muchos tipos de fenomenos aparentemente diferentes. Ver Folkman, Opinion-Angiogenesis: an organizing principle for drug discovery? Nature Reviews Drug Discovery 2007. 6 (4): 273-286.

[0259] Por lo tanto, en otro aspecto, se proporciona un metodo para tratar una afeccion asociada con la angiogenesis, como, por ejemplo, una afeccion diabetica (por ejemplo, retinopatfa diabetica), una afeccion inflamatoria (por ejemplo, artritis reumatoide), degeneracion macular, obesidad, aterosclerosis o un trastorno proliferativo, que comprende administrar a un sujeto que lo necesite un compuesto de Formula (A), (B), (C), (D) o (E) o una sal farmaceuticamente aceptable, sal de amina cuaternaria, o N-oxido de las mismas.

[0260] En ciertas realizaciones, la afeccion asociada con la angiogenesis es una afeccion diabetica o una complicacion asociada. En ciertas realizaciones, se proporciona un metodo para tratar una afeccion diabetica o una complicacion asociada que comprende administrar a un sujeto que lo necesite un compuesto de Formula (A), (B), (C), (D) o (E) o una sal farmaceuticamente aceptable, sal de amina cuaternaria o N-oxido de las mismas.

[0261] Como se usa en el presente documento, una "condicion diabetica" se refiere a la diabetes y la pre-diabetes. La diabetes se refiere a un grupo de enfermedades metabolicas en las que una persona tiene un alto nivel de azucar en la sangre, ya sea porque el cuerpo no produce suficiente insulina o porque las celulas no responden a la insulina que se produce. Este alto nivel de azucar en la sangre produce los smtomas clasicos de poliuria (miccion frecuente), polidipsia (aumento de la sed) y polifagia (aumento del hambre). Hay varios tipos de diabetes. La diabetes tipo I es el resultado de la incapacidad del cuerpo para producir insulina, y actualmente requiere que la persona se inyecte insulina o use una bomba de insulina. La diabetes tipo 2 es el resultado de la resistencia a la insulina, una condicion en la cual las celulas no usan la insulina adecuadamente, algunas veces combinada con una deficiencia absoluta de insulina. La diabetes gestacional ocurre cuando las mujeres embarazadas sin un diagnostico previo de diabetes desarrollan un nivel alto de glucosa en la sangre. Otras formas de diabetes incluyen la diabetes congenita, que se debe a defectos geneticos de la secrecion de insulina, diabetes relacionada con la fibrosis qrnstica, diabetes esteroide inducida por altas dosis de glucocorticoides y varias formas de diabetes monogenica, por ejemplo, diabetes de inicio maduro de los jovenes (por ejemplo, MODY 1,2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 o 10). La prediabetes indica una afeccion que ocurre cuando los niveles de glucosa en la sangre de una persona son mas altos de lo normal pero no lo suficientemente altos para un diagnostico de diabetes.

[0262] Todas las formas de diabetes aumentan el riesgo de complicaciones a largo plazo (referidas aqrn como la "complicacion asociada" de la condicion diabetica). Estas se desarrollan tfpicamente despues de muchos anos, pero pueden ser el primer smtoma en aquellos que no han recibido un diagnostico antes de esa fecha. Las principales complicaciones a largo plazo se relacionan con el dano a los vasos sangumeos. La diabetes duplica el riesgo de enfermedades cardiovasculares y macrovasculares, como la cardiopatfa isquemica (angina de pecho, infarto de miocardio), accidente cerebrovascular y enfermedad vascular periferica. La diabetes tambien causa complicaciones microvasculares, por ejemplo, dano a los pequenos vasos sangumeos. La retinopatfa diabetica, que afecta la formacion de vasos sangumeos en la retina del ojo, puede provocar smtomas visuales, disminucion de la vision y potencialmente ceguera. La nefropatfa diabetica, el impacto de la diabetes en los rinones, puede provocar cambios cicatriciales en el tejido renal, la perdida de cantidades pequenas o progresivamente mayores de protema en la orina y, finalmente, la enfermedad renal cronica que requiere dialisis. La neuropatfa diabetica es el impacto de la diabetes en el sistema nervioso, que suele causar entumecimiento, hormigueo y dolor en los pies y tambien aumenta el riesgo de dano en la piel debido a una sensacion alterada. Junto con la enfermedad vascular en las piernas, la neuropatfa contribuye al riesgo de problemas del pie relacionados con la diabetes, por ejemplo, ulceras del pie diabetico, que pueden ser diffciles de tratar y, en ocasiones, requieren amputacion.

[0263] Como apreciaran los expertos en la tecnica, en el tratamiento de una afeccion o complicacion diabetica, una cantidad eficaz de un compuesto administrado puede, por ejemplo, reducir, prevenir o retrasar la aparicion de cualquiera de los smtomas siguientes: reducir el nivel de glucosa en plasma en ayunas [el nivel diabetico tfpico es > 7,0 mmol/L (126 mg/dl); el rango prediabetico tipico es de 6,1 a 6,9 mmol/1]; reducir la glucosa en plasma [el nivel diabetico tfpico es > 11,1 mmol/L (200 mg/dL) dos horas despues de una carga de glucosa oral de 75 g como en una prueba de tolerancia a la glucosa]; reducir los smtomas de hiperglucemia y glucosa plasmatica ocasional [el nivel diabetico tipico es > 11,1 mmol/L (200 mg/dl)]; reducir los niveles de hemoglobina glucosilada (Hb A1C) [el nivel diabetico tfpico es > 6,5%]. Los sujetos con niveles de glucosa en ayunas de 110 a 125 mg/dl (6,1 a 6,9 mmol/1) se considera que tienen glucosa en ayunas alterada. Los sujetos con glucosa plasmatica en o por encima de 140 mg/dL (7,8 mmol/L), pero no mas de 200 mg/dL (11,1 mmol/L), dos horas despues de una carga oral de glucosa de 75 g se considera que tienen tolerancia a la glucosa alterada.

[0264] En ciertas realizaciones, la complicacion asociada es la retinopatfa diabetica. Por ejemplo, en ciertas realizaciones, se proporciona un metodo para tratar la retinopatfa diabetica que comprende administrar a un sujeto que lo necesite un compuesto de Formula (A), (B), (C), (D) o (E), o una sal farmaceuticamente aceptable, amina cuaternaria o N-oxido de las mismas.

[0265] En ciertas realizaciones, la afeccion asociada con la angiogenesis es la degeneracion macular. En ciertas realizaciones, se proporciona un metodo para tratar la degeneracion macular que comprende administrar a un sujeto que lo necesite un compuesto de Formula (A), (B), (C), (D) o (E) o una sal farmaceuticamente aceptable, sal de amina cuaternaria o N-oxido de las mismas.

[0266] En ciertas realizaciones, la afeccion asociada con la angiogenesis es la obesidad. Como se usa en el presente documento, "obesidad" y "obeso" como se usa en el presente documento, se refiere a la obesidad de clase I, la obesidad de clase II, la obesidad de clase III y la pre-obesidad (por ejemplo, "sobrepeso") como lo define la Organizacion Mundial de la Salud. En ciertas realizaciones, se proporciona un metodo para tratar la obesidad que comprende administrar a un sujeto que lo necesite un compuesto de Formula (A), (B), (C), (D) o (E) o una sal farmaceuticamente aceptable, sal de amina cuaternaria, o N-oxido de las mismas. La evidencia sugiere que la expansion del tejido adiposo depende del desarrollo de la vasculatura. Por lo tanto, la inhibicion de la angiogenesis puede ser una estrategia terapeutica para restringir la expansion del tejido adiposo para prevenir y tratar la obesidad. Ver, por ejemplo, Christiaens y Lijnen, Molecular and Cellular Endocrinology (2010) 318: 2-9.

[0267] En ciertas realizaciones, la afeccion asociada con la angiogenesis es la aterosclerosis. En ciertas realizaciones, se proporciona un metodo para tratar la aterosclerosis que comprende administrar a un sujeto que lo necesite un compuesto de Formula (A), (B), (C), (D) o (E) o una sal farmaceuticamente aceptable, sal de amina cuaternaria, o N-oxido de las mismas. La evidencia sugiere que se produce una nueva angiogenesis en las lesiones ateroscleroticas, lo que contribuye a su crecimiento y ruptura. Por lo tanto, la inhibicion de la angiogenesis puede ser una estrategia terapeutica para restringir la expansion, el crecimiento y la ruptura final de las placas ateroscleroticas para prevenir y tratar la aterosclerosis. Ver, por ejemplo, Ho-Tin-Noe et al., Trends Cariovasc. Med. (2011) 21:183­ 187.

[0268] En ciertas realizaciones, la afeccion asociada con la angiogenesis es un trastorno proliferativo. En ciertas realizaciones, se proporciona un metodo para tratar un trastorno proliferativo que comprende administrar a un sujeto que lo necesite un compuesto de Formula (A), (B), (C), (D) o (E) o una sal farmaceuticamente aceptable, amina cuaternaria o N-oxido de las mismas.

[0269] Los trastornos proliferativos ejemplares incluyen, pero no se limitan a, tumores (por ejemplo, tumores solidos), neoplasias iniciales, neoplasias premalignas (carcinoma in situ) y neoplasias malignas (canceres).

[0270] Los canceres ejemplares incluyen, pero no se limitan a, neuroma acustico, adenocarcinoma, cancer de glandula suprarrenal, cancer de ano, angiosarcoma (por ejemplo, linfangiosarcoma, linfangioendoteliosarcoma, hemangiosarcoma), apendice cancer, gamopatfa benigna monoclonal, bicina, cancer de vejiga, cancer de mama (por ejemplo, adenocarcinoma de mama, carcinoma papilar de mama, cancer de mama, carcinoma medular de mama), cancer de cerebro (por ejemplo, meningioma; glioma, por ejemplo, astrocitoma, oligodendroglioma, meduloblastoma), cancer de bronquio, tumor carcinoide, cancer cervical (p. ej., adenocarcinoma cervical), coriocarcinoma, cordoma, craneofaringioma, cancer colorectal (p. ej., cancer de colon, cancer rectal, adenocarcinoma colorectal, carcinoma epitelial, ependimoma, cancer de pie), carcinoma epitelial, ependimoma, endoteliosarcoma (p. ej. sarcoma de Kaposi, sarcoma hemorragico idiopatico multiple), cancer endometrio (por ejemplo, cancer uterino, sarcoma uterino), cancer de esofago (por ejemplo, adenocarcinoma de esofago, adenocarinoma de Barrett), sarcoma de Ewing, cancer ocular (p. ej., melanoma intraocular, retinoblastoma), hipereosinofilia familiar, cancer de vesmula biliar, cancer gastrico (p. ej., adenocarcinoma estomacal), tumor del estroma gastrointestinal (GIST), cancer de cabeza y cuello (p. ej., cabeza y carcinoma de celulas escamosas del cuello, cancer oral (por ejemplo, carcinoma de celulas escamosas orales (OSCC), cancer de la garganta (por ejemplo, cancer de laringe, cancer de la faringe, cancer de la nasofaringe, cancer de la orofaringe), canceres hematopoyeticos (por ejemplo, leucemia tal como leucemia linfocftica aguda (LLA): tambien conocida como leucemia linfoblastica aguda o leucemia linfoide aguda (p. ej., LLA de celulas B, LLA de celulas T), leucemia mielodtica aguda (LMA) (p. ej., LMA de celulas B, LMA de celulas T), leucemia mielodtica cronica (CML) (por ejemplo, CML de celulas B, CML de celulas T) y leucemia linfocftica cronica (CLL) (por ejemplo, CLL de celulas B, CLL de celulas T); linfoma como el linfoma de Hodgkin (HL) (por ejemplo, HL de celulas B, HL de celulas T) y el linfoma no Hodgkin (NHL) (por ejemplo, NHL de celulas B como el linfoma difuso de celulas grandes (DLCL) (por ejemplo, linfoma difuso grande de celulas B (DLBCL), linfoma folicular, leucemia linfodtica cronica/linfoma linfodtico pequeno (CLL/SLL), linfoma de celulas del manto (MCL), linfomas de celulas B de la zona marginal (p. ej., linfomas del tejido linfoide asociado a la mucosa (MALT), linfoma de celulas B de la zona marginal nodal, linfoma de celulas B de la zona marginal esplenica, linfoma mediastmico de celulas B, linfoma de Burkitt, linfoma linfoplasmodtico (es decir, "macroglobulinemia de Waldenstrom"), leucemia de celulas pilosas (HCL), linfoma inmunoblastico de celulas grandes, linfoma linfoblastico B precursor y linfoma primario del sistema nervioso central (SNC); y LNH de celulas T, como el linfoma/leucemia linfoblastico de celulas T precursoras, linfoma de celulas T perifericas (PTCL) (por ejemplo, linfoma de celulas T cutaneas (CTCL) (por ejemplo, micosis fungiodes, smdrome de Sezary), linfoma angioinmunoblastico de celulas T, linfoma de celulas T asesinas extranodales, linfoma de celulas T tipo enteropatfa, linfoma de celulas T tipo paniculitis subcutanea, linfoma anaplasico de celulas grandes); una mezcla de uno o mas leucemia/linfoma como se describio anteriormente; y mieloma multiple (MM)), enfermedad de cadena pesada (por ejemplo, enfermedad de cadena alfa, enfermedad de cadena gamma, enfermedad de cadena mu), hemangioblastoma, tumores inflamatorios miofibroblasticos, amiloidosis inmunodtica, cancer de rinon (por ejemplo, nefroblastoma alias tumor de Wilms, carcinoma de celulas renales), cancer de hngado (p. ej., cancer hepatocelular (HCC), hepatoma maligno), cancer de pulmon (p. ej., carcinoma broncogenico, cancer de pulmon de celulas pequenas (CPCP), cancer de pulmon de celulas no pequenas (CPCNP), adenocarcinoma de pulmon), leiomfa - osarcoma (LMS), mastocitosis (p. ej., mastocitosis sistemica), smdrome mielodisplasico (MDS), mesotelioma, trastorno mieloproliferativo (MPD) (p. ej., policitemia veraz (PV), trombocitosis esencial (TE), metaplasia mieloide agnogenica (AMM) tambien conocida como mielofibrosis (MF), mielofibrosis idiopatica cronica, leucemia mielocftica cronica (CML), leucemia neutrofflica cronica (CNL), smdrome hipereosinofflico (HES), neuroblastoma, neurofibroma (por ejemplo, neurofibromatosis (NF), cancer neuroendocrino (p. ej., tumor de neuroendoctrina gastroenteropancreatica (GEP-NET), tumor carcinoide), osteosarcoma, cancer de ovario (p. ej., cistoadenocarcinoma, carcinoma embrionario de ovario, adenocarcinoma del ovario), adenocarcinoma papilar, cancer pancreatico (p. ej. andenocarcinoma pancreatico, neoplasma mucinoso papilar (IPMN), tumores de celulas de los islotes), cancer de pene (p. ej., enfermedad de Paget del pene y escroto), pinealoma, tumor neuroectodermico primitivo (PNT), cancer de prostata (p. ej., adenocarcinoma de prostata), cancer de recto, rabdomiosarcoma, cancer de glandula salival, cancer de piel, por ejemplo, carcinoma de celulas escamosas (SCC), queratoacantoma (KA), melanoma, carcinoma de celulas basales (BCC), cancer del intestino delgado (por ejemplo, cancer de apendice), sarcoma de tejidos blandos (por ejemplo, histiocitoma fibroso maligno (MFH), liposarcoma, tumor maligno de la vaina del nervio periferico (MPNST), condrosarcoma, fibroscomcoma, myxosarcoma, carcinoma de la glandula sebacea, carcinoma de la glandula sudonfera, sinovioma, cancer testicular (por ejemplo, seminoma, carcinoma embrionario testicular), cancer del tiroides (por ejemplo, carcinoma papilar de tiroides, carcinoma papilar de tiroides (PTC), cancer medular de tiroides), cancer de uretra, cancer vaginal y cancer de vulva (por ejemplo, enfermedad de Paget de la vulva).

[0271] En ciertas realizaciones, el cancer esta asociado con CDK8 y/o actividad de quinasa CDK19.

[0272] En ciertas realizaciones, el cancer es un cancer hematopoyetico. En ciertas realizaciones, el cancer hematopoyetico es un linfoma. En ciertas realizaciones, el cancer hematopoyetico es una leucemia. En ciertas realizaciones, la leucemia es leucemia mielodtica aguda (AML). Como se muestra en las Figuras 4, 5, 6 y 8, la cortistatina A o los analogos de la cortistatina A inhiben la proliferacion de lmeas celulares de AML in vitro y como se muestra en la Figura 12, la cortistatina A inhibe la progresion de la AML in vivo.

[0273] En ciertas realizaciones, el trastorno proliferativo es una neoplasia mieloproliferativa. En ciertas realizaciones, la neoplasia mieloproliferativa (MPN) es mielofibrosis primaria (PMF). Como se muestra en la Figura 8, la cortistatina A inhibe la proliferacion de lmeas celulares derivadas de pacientes con MPN y, como se muestra en la Figura 14, la cortistatina A es eficaz en un modelo in vivo de PMF.

[0274] En ciertas realizaciones, el cancer es un tumor solido. Un tumor solido, como se usa en este documento, se refiere a una masa anormal de tejido que generalmente no contiene quistes o areas lfquidas. Los diferentes tipos de tumores solidos se nombran segun el tipo de celulas que los forman. Los ejemplos de clases de tumores solidos incluyen, entre otros, sarcomas, carcinomas y linfomas, como se describe anteriormente en este documento. Los ejemplos adicionales de tumores solidos incluyen, entre otros, carcinoma de celulas escamosas, cancer de colon, cancer de mama, cancer de prostata, cancer de pulmon, cancer de hngado, cancer de pancreas y melanoma.

[0275] Los compuestos de Formula (A), (B), (C), (D) o (E) y sales farmaceuticamente aceptables, aminas cuaternarias y N-oxidos de los mismos, pueden formularse en forma de dosis unitaria para facilitar la administracion y uniformidad de la dosificacion. Se entendera, sin embargo, que el uso del uso diario total de las composiciones que comprenden un compuesto como se describe en este documento sera decidido por el medico asistente dentro del alcance de un buen juicio medico. El nivel de dosis terapeuticamente eficaz espedfico para cualquier sujeto u organismo en particular dependera de una variedad de factores que incluyen la enfermedad, el trastorno o la condicion que se trata y la gravedad del trastorno; la actividad del compuesto espedfico empleado; la composicion espedfica empleada; la edad, peso corporal, salud general, sexo y dieta del sujeto; el tiempo de administracion, la via de administracion y la tasa de excrecion del compuesto espedfico empleado; la duracion del tratamiento; farmacos utilizados en combinacion o coincidentes con el compuesto espedfico empleado; y como factores bien conocidos en las artes medicas.

[0275] Los compuestos y composiciones proporcionados en el presente documento pueden administrarse por cualquier v^ a, incluyendo enterica (por ejemplo, oral), parenteral, intravenosa, intramuscular, intraarterial, intramedular, intratecal, subcutanea, intraventricular, transdermica, interdermica, rectal, intravaginal intraperitoneal, topica (como por polvos, pomadas, cremas y/o gotas), mucosa, nasal, bucal, sublingual; por instilacion intratraqueal, instilacion bronquial y/o inhalacion; y/o como un aerosol oral, aerosol nasal y/o aerosol. Las rutas espedficamente contempladas son la administracion oral, la administracion intravenosa (p. ej., la inyeccion intravenosa sistemica), la administracion regional a traves del suministro de sangre y/o linfa, y/o la administracion directa a un sitio afectado. En general, la via de administracion mas apropiada dependera de una variedad de factores que incluyen la naturaleza del agente (por ejemplo, su estabilidad en el medio ambiente del tracto gastrointestinal), la condicion del sujeto (por ejemplo, si el sujeto es capaz de tolerar la administracion oral).

[0277] La cantidad exacta de un compuesto requerido para lograr una cantidad efectiva variara de un sujeto a otro, dependiendo, por ejemplo, de la especie, la edad y el estado general de un sujeto, la gravedad de los efectos secundarios o el trastorno, la identidad del (los) compuesto(s) particular(es), el modo de administracion y similares. La dosis deseada se puede administrar tres veces al dfa, dos veces al dfa, una vez al dfa, dfa por medio, cada tercer dfa, cada semana, cada dos semanas, cada tres semanas o cada cuatro semanas. En ciertas realizaciones, la dosis deseada puede administrarse utilizando multiples administraciones (por ejemplo, dos, tres, cuatro, cinco, seis, siete, ocho, nueve, diez, once, doce, trece, catorce o mas administraciones).

[0278] En ciertas realizaciones, una cantidad eficaz de un compuesto para administracion una o mas veces al dfa a un humano adulto de 70 kg puede comprender de aproximadamente 0,0001 mg a aproximadamente 3.000 mg, de aproximadamente 0,0001 mg a aproximadamente 2.000 mg, de aproximadamente 0,0001 mg a aproximadamente 1.000 mg, aproximadamente 0,001 mg a aproximadamente 1.000 mg, aproximadamente 0,01 mg a aproximadamente 1.000 mg, aproximadamente 0,1 mg a aproximadamente 1.000 mg, aproximadamente 1 mg a aproximadamente 1.000 mg, aproximadamente 1 mg a aproximadamente 100 mg, aproximadamente 0,1 mg a aproximadamente 10 mg, o aproximadamente 0,1 mg a aproximadamente 15 mg, de un compuesto por forma de dosificacion unitaria.

[0279] En ciertas realizaciones, el compuesto puede administrarse por via oral o parenteral a un adulto a niveles de dosificacion suficientes para administrar de aproximadamente 0,001 mg/kg a aproximadamente 100 mg/kg, de aproximadamente 0,01 mg/kg a aproximadamente 50 mg/kg, preferiblemente de aproximadamente 0,1 mg/kg a aproximadamente 40 mg/kg, preferiblemente de aproximadamente 0,5 mg/kg a aproximadamente 30 mg/kg, de aproximadamente 0,01 mg/kg a aproximadamente 10 mg/kg, de aproximadamente 0,1 mg/kg a aproximadamente 10 mg/kg, y mas preferiblemente de aproximadamente 0,01 mg/kg a aproximadamente 1 mg/kg, de peso corporal del sujeto por dfa, una o mas veces al dfa, para obtener el efecto terapeutico deseado.

[0280] Se apreciara que los intervalos de dosis como se describen en este documento proporcionan una grna para la administracion de composiciones farmaceuticas proporcionadas a un adulto. La cantidad a ser administrada a, por ejemplo, un nino o un adolescente puede ser determinada por un medico o experto en la materia y puede ser inferior o igual a la administrada a un adulto.

[0281] Tambien se apreciara que un compuesto o composicion, como se describe en el presente documento, se puede administrar en combinacion con uno o mas agentes terapeuticamente activos adicionales. Los compuestos o composiciones pueden administrarse en combinacion con agentes terapeuticamente activos adicionales que mejoran su biodisponibilidad, reducen y/o modifican su metabolismo, inhiben su excrecion y/o modifican su distribucion dentro del cuerpo. Tambien se apreciara que la terapia empleada puede lograr un efecto deseado para el mismo trastorno (por ejemplo, un compuesto puede administrarse en combinacion con un agente antiinflamatorio, agente anticancer, etc.) y/o puede lograr diferentes efectos (por ejemplo, control de efectos secundarios adversos, por ejemplo, emesis controlada por un antiemetico).

[0282] El compuesto o composicion puede administrarse simultaneamente, antes o despues de uno o mas agentes terapeuticamente activos adicionales. En general, cada agente se administrara en una dosis y/o en un horario determinado para ese agente. Se apreciara ademas que el agente terapeuticamente activo adicional utilizado en esta combinacion puede administrarse conjuntamente en una unica composicion o administrarse por separado en diferentes composiciones. La combinacion particular a emplear en un regimen tendra en cuenta la compatibilidad del compuesto de la invencion con el agente terapeuticamente activo adicional y/o el efecto terapeutico deseado que se va a lograr. En general, se espera que los agentes terapeuticamente activos adicionales utilizados en combinacion se utilicen a niveles que no excedan los niveles en los que se utilizan individualmente. En algunas realizaciones, los niveles utilizados en combinacion seran mas bajos que los utilizados individualmente.

[0283] Los agentes terapeuticos activos adicionales a modo de ejemplo incluyen, pero no se limitan a, moleculas organicas pequenas tales como compuestos farmacologicos (por ejemplo, compuestos ensayados por la Administracion de Alimentos y Medicamentos segun lo dispuesto en el Codigo de Regulaciones Federales (CFR)), peptidos, protemas, hidratos de carbono, monosacaridos, oligosacaridos, polisacaridos, nucleoprotemas, mucoprotemas, lipoprotemas, polipeptidos o protemas sinteticas, moleculas pequenas con enlaces a las protemas, glicoprotemas, esteroides, acidos nucleicos, ADN, ARN, nucleotidos, nucleosidos, oligonucleotidos, oligonucleotidos antisentido, l^pidos, hormonas, vitaminas y celulas. En ciertas realizaciones, el agente terapeuticamente activo adicional es un agente anticancer, por ejemplo, radioterapia y/o uno o mas agentes quimioterapeuticos.

Metodos de preparacion

[0284] Tambien se proporcionan metodos para preparar compuestos de Formula (A), (B), (C), (D) y (E). Una smtesis ejemplar de los compuestos contemplados en el presente documento se proporciona en los Esquemas 2 a 14.

[0285] La smtesis inicialmente se contempla utilizando un compuesto de Formula (I) como material de partida. La oxidacion (por ejemplo, DDQ, MnO²) de la estrona (en donde R3 es -CH³) o norestrona (en donde R3 es H) (I) proporciona el compuesto de Formula (III). Vease, por ejemplo, Stephan et al., Steroid, 1995, 60, 809-811. El compuesto de Formula (III) se protege como un acetal o cetal (por ejemplo, mediante reaccion con HXARA o HXARA-RAXAH, en donde los dos grupos RA se unen, en donde RB1 y RB2 son cada uno independientemente -XARA) para dar una mezcla (por ejemplo, mezcla 1:1) de (IV)-A y (IV)-B. Las condiciones ejemplares contempladas para la proteccion incluyen Pt Sa y etilenglicol, PTSA y CH(OMe)³, PTSA y CH(OEt)³, PTSA y 2,2-dimetilo-1,3-propandiol). Los compuestos protegidos luego se alquilan (p. ej., se metilan) usando un agente alquilante (p. ej., Me²SO⁴ y K²CO³, EtN(i-Pr)² y TMS-diazometano) para proporcionar (V)-A y (V)-B, en donde E es alquilo opcionalmente sustituido. Ver esquema 2.

Esquema 2

[0286] El esquema 3 proporciona otras rutas ejemplares para proporcionar un compuesto de formula (IV-B), por ejemplo, en donde R3 es -CH³. Por ejemplo, el compuesto de Formula (V)-B se logra como mezclas racemicas de 6-metoxi-1-tetralona en cuatro pasos como se describe en el Esquema 3 (A). Para la reaccion de Grignard, ver, por ejemplo, Saraber et al., Tetrahedron, 2006, 62, 1726-1742. Para la hidrogenacion, ver, por ejemplo, Sugahara et al., Tetrahedron Lett, 1996, 37. 7403-7406. El Esquema 3(B) muestra el metodo para obtener el intermedio de Torgov enantiopure por resolucion quiral. Ver, por ejemplo, Bucourt et al., J. Bull. Soc. Chim P. (1967) 561-563. El Esquema 3(C) proporciona otro metodo para preparar el intermedio de Torgov enantiopuro ayudado por la reduccion enzimatica. Ver, por ejemplo, Gibian et al., Tetrahedron Lett. (1966) 7: 2321-2330.

Esquema 2

[0287] Con los compuestos de Formula (IV-A) y (IV-B) en la mano, se llevan a cabo reacciones de epoxidacion/apertura de epoxido/epoxidacion (por ejemplo, MMPP, mCPBA) en un solo recipiente para proporcionar el compuesto de Formula (IX-A) y (IX-B), que estan en equilibrio con (IX-A) como un compuesto principal. Ver Esquemas 4A y 4B.

Esquema 4.

[0288] El compuesto de Formula (IX-A) y (IX-B) se expone a una condicion de reduccion de abedul (por ejemplo, Li/NH³ y f-BuOH, Na/NH³ y f-BuOH) para dar el compuesto desromatizado (X). El C3 del anillo A se protege entonces como un acetal o cetal (por ejemplo, a traves de la reaccion con HXARA o HXARA-RAXAH, en donde los dos grupos RA se unen, y en donde RB1 y RB2 son cada uno independientemente -XARA) para proporcionar el compuesto (XI). Las condiciones de proteccion ejemplares incluyen PTSA y etilenglicol, PTSA y CH(OMe)³ , PTSA y CH(OEt)³ , y PTSA y 2,2-dimetilo-1,3-propandiol. Ver Esquema 5.

Esquema 5.

[0289] El compuesto (XI) se convierte en un compuesto de Formula (XIII) mediante eterificacion (por ejemplo, NBS, NIS, por ejemplo, en donde X es Br o I). Este compuesto se oxida luego (por ejemplo, SO³ 'Py/DMsO y trietilamina, IBX, (COCl)²/DMSO y trietilamina) para proporcionar el compuesto de Formula (XIV). Este compuesto se trata luego con una base (por ejemplo, DBU, trietilamina) para proporcionar el compuesto de Formula (XV). Este compuesto se reduce luego (por ejemplo, NaBH⁴ y CeCl³, L-selectride) para proporcionar el compuesto de Formula (XVI). Ver Esquema 6.

Esquema 6.

[0290] El compuesto de Formula (XVI) se trata luego con reactivos de ciclopropanacion (por ejemplo, ZnEt² y CICH² I, ZnEt² y CH² I² , Zn-Cu y CH²I²) para proporcionar un compuesto de Formula (XVII). El alcohol del producto ciclopropanado se activa, en donde LG1 es un sulfonilo (por ejemplo, el alcohol se trata con TF²O, MsCl, para proporcionar un alcohol activado en donde LG1 es Tf o Ms) y se trata con una base (por ejemplo, 2,6-di-f-butilo-4-metilpiridina, 2,6-lutidina, trietilamina) para proporcionar el compuesto de Formula (XX). Ver, por ejemplo, Magnus et al., Org. Leton. 2009, 11, 3938-3941. Ver esquema 7.

Esquema 7.

[0291] El grupo protector en el anillo D del compuesto de Formula (XX) se desprotege luego en condiciones acidas (por ejemplo, PTSA y acetona/agua, TFA/agua) para proporcionar el compuesto intermedio de cetona de Formula (XXI). Este producto se trata con un compuesto de Formula RB1-M (por ejemplo, RB1-CeCl² , RB1-Mg) que se prepara a partir de RB1-X (por ejemplo, RB1-Br, RB1-I) para proporcionar un compuesto de Formula (XXII), en donde RB1 es un grupo no hidrogeno como se define aqrn. El compuesto de Formula (XXII) se activa (por ejemplo, TFAA y piridina, PhNCS y KH) para proporcionar un compuesto de Formula (XXIII). La reduccion del compuesto de Formula (XXIII) (por ejemplo, AlBN y Bu3SnH) proporciona el compuesto de Formula (XXIV). Para los pasos S14, S15 y S16, consulte, por ejemplo, Flyer et al., Nature. Chem. ² O¹ O, 2, 886-892., Y Yamashita et al., J. Org. Chem. 2011, 76, 2408-2425. Ver Esquema 8A.

[0292] El Compuesto (XXIV) tambien puede prepararse a partir de (XX) mediante conversion a un alcohol activado, en donde LG2 es un sulfonilo (por ejemplo, el alcohol se trata con TF²O, MsCl, para proporcionar un alcohol activado en donde LG2 es Tf o Ms). por triflacion, por ejemplo, KHMDS y PhNTf², LiHMDS y PhNTf², Tf²O y 2,6-di-f-butilo-4 metilpiridina) seguido de un acoplamiento cruzado catalizado con paladio con RB1-M, en donde M es un boro sustituido (por ejemplo, tal como -B(R')², en donde cada R' es -OR” o alquilo en donde el alquilo y R" es alquilo o se pueden unir para formar un anillo) para proporcionar el compuesto de Formula (XXVI). Las condiciones de acoplamiento cruzado catalizadas por paladio ejemplares incluyen, pero no se limitan a, RB1-B(pin), RB1-(9-BBN-H), Rb1-OBBD, o RB1-B(cat), y Pd(PPh³)⁴ y Na²CO³ , o Pd(dppf)Cl² y K³PO⁴) (pin = pinacol; cat = catecol; OBBD = 9-oxa-10-brabiciclo[3.3.2]decano; 9-BBN-H = 9-broabiciclo[3.3.1]nonano). Ver, por ejemplo, Nicolaou et al., J. Am. Chem. Soc. 2009, 131, 10587-10597. La hidrogenacion del doble enlace Cl6-C17 (p. ej., Pd/C y H², Raney Ni y H²) proporciona el compuesto de Formula (XXIV). Ver Esquema 8B.

Esquema 8.

[0293] Cualquiera de los compuestos de Formula (XXVI) o (XXIV) se pueden desproteger (por ejemplo, PTSA y acetona/agua, TFA/agua, HCl) y el carbono alfa resultante se puede alquilar con un electrofilo (por ejemplo, R5-LG, en donde LG es un grupo saliente, por ejemplo, - OSO²Raa) para proporcionar los productos alquilados correspondientes, en donde R5 es un grupo no hidrogeno. Ver Esquema 9A y 9B.

Esquema 9.

[0294] Los compuestos de cetona que se proporcionan en el Esquema 9(A) y 9(B) se pueden tratar con una amina de formula H²NR¹ para formar los productos de condensacion, iminas, como se muestra en el paso S22. Los compuestos de cetona tambien se pueden tratar con una amina de formula HNR1R2, o una sal del mismo, en condiciones de aminacion reductiva para proporcionar los productos aminados, como se muestra en el paso S23. Las condiciones de aminacion reductora ejemplares incluyen, pero no se limitan a, NaCNBH³ , NaCN(9BBN)H o NaBH(OAc)³ bajo pH acido (por ejemplo, pH de 3). Los productos aminados pueden oxidarse adicionalmente al N-oxido correspondiente, como se muestra en el Paso S25. Las condiciones de oxidacion ejemplares incluyen, pero no se limitan a, H²O², mCPBA o DMDO. Ver Esquemas 10A a 10D.

Esquema 10.

[0295] El compuesto de Formula (XXV) se puede convertir en el compuesto de Formula (XXV-i) a traves de la aminacion de carbonilato catalizada por paladio con CO y HN(RL)RB3 (por ejemplo, Pd(PPh³)⁴ y trietilamina, Pd(dppf)Cl² y trietilo-amina). Las condiciones para los siguientes pasos para llegar al compuesto de Formula (XXV-i), (XXV-iii), (XXV-iv) y (XXV-v) son las mismas que se describieron anteriormente. Ver Esquema 11.

Esquema 11.

[0296] Los compuestos de cetona que se proporcionan en el Esquema 11 se pueden convertir luego en las correspondientes iminas, aminas y N-oxidos, como se describio anteriormente. Ver Esquema 12A y 12B.

Esquema 12.

[0297] El compuesto de monocetona (XXI) puede aminarse de manera reductiva con HNRB4RB5 (por ejemplo, 1,2,3,4-tetrahidrodro-[2,7]naftiridina) en las condiciones previamente descritas para proporcionar el compuesto de Formular (XXVII). El Compuesto (XXVII) se puede convertir en las iminas, aminas y N-oxidos correspondientes, como se describio anteriormente. Ver Esquema 13.

Esquema 13.

[0298] La cetona puede manipularse sinteticamente para proporcionar otros compuestos de interes. Tomando la cetona de formula (XXIV-i) como ejemplo, la cetona puede reducirse (como se representa en el paso S26) en presencia de un agente reductor para proporcionar el compuesto hidroxilado C-3. Consulte el Esquema 14. Los agentes reductores ejemplares incluyen L-selectride, K-selectride, hidruro de diisobutilaluminio (DIBALH) e hidruro de litio y aluminio (^lA^h ). Ademas, varios agentes reductores generaran preferentemente uno de los compuestos hidroxilados en C-3 como el isomero principal sobre el otro, por ejemplo, utilizando L-selectride, el isomero beta se genera preferiblemente como el isomero principal, mientras que al usar hidruro de litio y aluminio (LAH), el alfa se genera preferentemente como el principal isomero.

[0299] Como se usa en este documento, un "isomero principal" se refiere al isomero que se produce en exceso del otro isomero, es decir, mas del 50% de la suma de los dos isomeros producidos a partir de la reaccion, por ejemplo, mas del 60%. 70%, 80%, 90% o 95% de la suma de los dos isomeros producidos a partir de la reaccion.

[0300] El compuesto hidroxilado C-3 de Formula (D) puede luego activarse a un compuesto de Formula (E) (por ejemplo, por reaccion con un grupo LG-C(=O)RA, en donde LG es un grupo saliente, ya sea antes de comenzar la reaccion o in situ (durante la reaccion) mediante sustitucion con un grupo de formula -C(=O)RA en condiciones de reaccion de Mitsunobu (por ejemplo, con HOC(=O)RA, dietilazodicarboxilato (DEAD) o azodicarboxilato de diisopropilo) (DIAD) y PPtb) y luego se trato con una amina de formula NHR1R2 para proporcionar un compuesto de Formula (A) con estereoqmmica C3 invertida como el isomero principal (como se muestra en el paso S28). Alternativamente, el compuesto hidroxilado C-3 de Formula (D) puede tratarse con una base y un compuesto de formula RO-LG, en donde LG es un grupo saliente, para proporcionar un compuesto hidroxilo C3 protegido con retencion de la estereoqmmica C3 como Isomero mayor (como se representa en el paso S27).

Esquema 14.

[0301] De este modo, en un aspecto, se proporciona un metodo para preparar un compuesto de Formula (A):

o una sal farmaceuticamente aceptable, sal de amina cuaternaria o N-oxido de las mismas; el metodo que comprende poner en contacto un compuesto de Formula (B):

o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, siempre que RB1 y RB2 no esten unidos para formar un grupo oxo; con una amina de formula HNR1R2, o una sal de la misma, en condiciones de aminacion reductora. En ciertas realizaciones, el metodo comprende preparar un isomero C3 como el isomero principal sobre el otro isomero. Por ejemplo, en ciertas realizaciones, el metodo comprende preparar el compuesto de Formula (A-1) como el isomero principal. En otras realizaciones, el metodo comprende preparar el compuesto de Formula (A-2) como el isomero principal.

[0302] En dertas realizaciones, el metodo comprende ademas oxidar el compuesto de Formula (a) para proporcionar un N-oxido de Formula (A-NO):

o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.

[0303] En otras realizaciones, se proporciona un metodo para preparar un compuesto de Formula (D):

o una sal farmaceuticamente aceptable, sal de amina cuaternaria o N-oxido de las mismas; comprendiendo el metodo la puesta en contacto de un compuesto de Formula (B):

o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, con un agente reductor. En ciertas realizaciones, el metodo comprende preparar un isomero C3 como el isomero principal sobre el otro isomero. Por ejemplo, en ciertas realizaciones, el metodo comprende preparar el compuesto de Formula (D-1) como el isomero principal. En otras realizaciones, el metodo comprende preparar el compuesto de Formula (D-2) como el isomero principal.

[0304] En otro aspecto, se proporciona un metodo para preparar un compuesto de Formula (E):

una sal farmaceuticamente aceptable del mismo; comprendiendo el metodo la puesta en contacto de un compuesto de Formula (D):

o una de sus sales farmaceuticamente aceptables, con un compuesto de formula RO-LG, en donde LG es un grupo saliente, para proporcionar un compuesto de formula (E).

[0305] En otro aspecto, se proporciona un metodo para preparar un compuesto de Formula (A):

o una sal farmaceuticamente aceptable, sal de amina cuaternaria o N-oxido de las mismas; comprendiendo el metodo proporcionar un compuesto de Formula (E):

en donde RO es -C(=O)RA, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo; y tratar el compuesto de Formula (E) con un compuesto de formula NHR1R2, para proporcionar un compuesto de Formula (A). En ciertas realizaciones, el compuesto de Formula (E) en donde RO es -C(=O)RA se genera in situ a partir de la activacion de un compuesto de Formula (D) con un compuesto de formula RO-LG. En ciertas realizaciones, el compuesto de Formula (E) es un compuesto de Formula (E-1), y el metodo genera un compuesto de Formula (A-2) como el isomero principal. En ciertas realizaciones, el compuesto de Formula (E) es un compuesto de Formula (E-2), y el metodo genera un compuesto de Formula (A-1) como el isomero principal.

Mutantes y metodos de ensayo

[0306] Como se describe en general en el presente documento, se proporcionan ademas nuevos mutantes puntuales de CDK8 y CDK19, y metodos de su uso.

[0307] CDK8 y CDK19 con mutaciones puntuales en Trp105, como Trp105Met, pueden retener la actividad celular e in vitro pero ser insensible a la inhibicion por cortistatina o analogos de cortistatina. Como se muestra en la Figura 10, la expresion de FLAG-CDK8 W105M y FLAG-CDK19 W105M reduce la sensibilidad de las celulas MOLM-14 a la inhibicion del crecimiento por la cortistatina A y FLAG-CDK8W105M retiene la actividad de la quinasa en presencia de cortistatina A. CDK8 y/o CDK19 Trp105 se pueden usar mutantes puntuales junto con una cortistatina o un analogo de cortistatina para validar la actividad de la quinasa CDK8 y CDK19 en diferentes contextos, incluso como dianas de farmacos para diferentes enfermedades. Ademas, puntos mutantes CDK8 y/o CDK19 Trp105 pueden usarse junto con una cortistatina o un analogo de cortistatina para dilucidar los sustratos de la quinasa CDK8 y/o CDK19 y vfas de senalizacion. Estos mutantes puntuales pueden expresarse en celulas mediante sobreexpresion o knock-in y pueden expresarse de manera constitutiva o expresarse de manera inductiva. Estos mutantes puntuales tambien se pueden usar en programas de deteccion para descubrir nuevas estructuras qmmicas que se dirigen selectivamente a CDK8 y/o c Dk 19.

[0308] La secuencia de aminoacidos de tipo salvaje para CDK8 se proporciona a continuacion y en la SEQ ID NO: 1. Trp105 esta subrayado. El mutante puntual CDK8 Trp105 util en este documento comprende una sustitucion de aminoacido en la posicion 105.

MDYDFKVKLSSERERVEDLFEYEGCKVGRGTYGHVYKAKRKDGKDDKDYA

LKQIEGTG ISMS AC R El A LLRE LK HPNVIS LQK VFLSH ADR K VWLLF D Y A EHD

LWHIIKFHRASKANKKPVQLPRGMVKSLLYQILDGIHYLHANWVLHRDLKPA

NILVMGEGPERGRVKIADMGFARLFNSPLKPLADLDPVVVTFWYRAPELLLG

ARHYTKAIDIWAIGCIFAELLTSEPIFHCRQEDIKTSNPYHHDQLDRIFNVMGFP

ADKDWEDIKKMPEHSTLMKDFRRNTYTNCSLIKYMEKHKVKPDSKAFHLLQ

KLLTMDPIKRIT SEQAMQDP YFLEDPLPT SD VFAGCQIP YPKREFLTEEEPDD K

GDKKNQQGQQGNNHTNGTGHPGNQDSSHTQGPPLKKVRVVPPTTTSGGLM

TSDYQRSNPHAAYPNPGPSTSQPQSSMGYSATSQQPPQYSHQTHRY

[0309] La secuencia de aminoacidos de tipo salvaje para CDK19 se proporciona a continuacion y en la SEQ ID NO: 2. Trp105 esta subrayado. El mutante puntual CDK19 Trp105 util en este documento comprende una sustitucion de aminoacido en la posicion 105.

MDYDFKAKLAAERERVEDLFEYEGCKVGRGTYGHVYKARRKDGKDEKEYA

LKQIEGTGISMSACREIALLRELKHPNVIALQKVFLSHSDRKVWLLFDYAEHD

L WHIIKFHR AS K AN K KPMQLPRS M V KS LL Y QILDGIH Y LH AN W V LHRDLK PA

NILVMGEGPERGRVKIADMGFARLFNSPLKPLADLDPVVVTFWYRAPELLLG

ARHYTKAIDIWAIGCIFAELLTSEPIFHCRQEDIKTSNPFHHDQLDRIFSVMGFP

ADKD WEDIRKMPE YPTLQ KDFRRTT Y AN SSLIK YMEKHK V KPDS K V FLLLQK

LLTMDPTKRITSEQALQDPYFQEDPLPTLDVFAGCQIPYPKREFLNEDDPEEK

GDKNQQQQQNQHQQPTAPPQQAAAPPQAPPPQQNSTQTNGTAGGAGAGVG

GTGAGLQHSQDSSLNQVPPNKKPRLGPSGANSGGPVMPSDYQHSSSRLNYQS

SVQGSSQSQSTLGYSSSSQQSSQYHPSHQAHRY

[0310] De este modo, en un aspecto, se proporciona un metodo para validar la actividad de la quinasa CDK8 y/o CDK19 en una celula mediante el contacto de un mutante puntual CDK8 o CDK19 Trp105 y un analogo de cortistatina o cortistatina, como se describe aqrn. En otro aspecto, se proporciona un metodo para validar la actividad de la quinasa CDK8 y/o CDK19 en una celula mediante la expresion de mutante puntual CDK8 o CDK19 Trp105 en una celula para desensibilizar la celula frente a un analogo de cortistatinas o cortistatina, como se describe aqrn.

[0311] En otro aspecto, se proporciona un mutante de punto CDK8 Trp105. En ciertas realizaciones, el mutante puntual CDK8 Trp105 tiene una secuencia de aminoacidos que tiene un grado de homologfa con la secuencia de aminoacidos de la SEQ ID NO: 1 de al menos aproximadamente el 80%, por ejemplo, al menos aproximadamente el 85%, al menos aproximadamente el 90%, al menos aproximadamente el 95%, o al menos aproximadamente el 97%. Ademas, se proporciona una protema que tiene un grado de homologfa con la secuencia de aminoacidos de la SEQ ID NO: 1 de al menos aproximadamente el 80%, por ejemplo, al menos aproximadamente el 85%, al menos aproximadamente el 90%, al menos aproximadamente el 95%, o al menos alrededor el 97%.

[0312] En otro aspecto adicional, se proporciona un mutante de punto Trp105 CDK19. En ciertas realizaciones, el mutante puntual CDK19 Trp105 tiene una secuencia de aminoacidos que tiene un grado de homologfa con la secuencia de aminoacidos de la SEQ ID NO: 2 de al menos aproximadamente el 80%, por ejemplo, al menos aproximadamente el 85%, al menos aproximadamente el 90%, al menos aproximadamente el 95%, o al menos aproximadamente el 97%. Se proporciona adicionalmente una protema que tiene un grado de homologfa con la secuencia de aminoacidos de la SEQ ID NO: 2 de al menos aproximadamente el 80%, por ejemplo, al menos aproximadamente el 85%, al menos aproximadamente el 90%, al menos aproximadamente el 95%, o menos el 97%.

[0313] En otro aspecto adicional, se proporciona un mutante de punto Trp105 CDK19. En ciertas realizaciones, el mutante puntual CDK19 Trp105 tiene una secuencia de aminoacidos como se indica en la SEQ ID NO. 2. Ademas, se proporciona una protema que es 80% homologa a la SEQ ID NO. 2.

[0314] En una realizacion, el mutante puntual CDK8 Trp105 util en los metodos de este documento tiene una sustitucion de metionina localizada en la posicion 105 del polipeptido CDK8 de la SEQ ID NO: 1. En una realizacion, el mutante puntual CDK19 Trp105 util en los metodos de este documento tiene una sustitucion con metionina ubicada en la posicion 105 del polipeptido CDK19 de la SEQ ID NO: 2. En cualquiera de las realizaciones anteriores, otro aminoacido puede estar sustituido en lugar de Trp105, tal como otros aminoacidos naturales o no naturales. Los ejemplos no limitantes de aminoacidos naturales incluyen isoleucina, leucina, valina, alanina, lisina, arginina, treonina, acido glutamico, metionina y cistema. Los ejemplos no limitantes de aminoacidos no naturales incluyen etionina o norleucina.

[0315] En una realizacion, el mutante de punto Trp105 de CDK8 util en este documento tiene una secuencia de aminoacidos que tiene un grado de homologfa con la secuencia de aminoacidos de la SEQ ID NO: 1 de al menos aproximadamente el 80%, al menos aproximadamente el 85%, al menos aproximadamente el 90%, al menos aproximadamente el 95%, o al menos aproximadamente el 97%. En una realizacion, el mutante puntual CDK8 Trp105 de la SEQ ID NO: 1 comprende una o mas sustituciones, deleciones y/o inserciones adicionales de uno o mas aminoacidos. En otra realizacion, el mutante puntual CDK8 Trp105 es una variante alelica de la SEQ ID NO: 1, Una variante alelica denota cualquiera de dos o mas formas alternativas de un gen que ocupa el mismo locus cromosomico. La variacion alelica surge naturalmente a traves de la mutacion, y puede resultar en un polimorfismo dentro de las poblaciones. Las mutaciones geneticas pueden ser silenciosas (sin cambios en el polipeptido codificado) o pueden codificar polipeptidos que tienen secuencias de aminoacidos alteradas. Una variante alelica de un polipeptido es un polipeptido codificado por una variante alelica de un gen.

[0316] En una realizacion, el mutante puntual CDK8 Trp105 es un fragmento de la SEQ ID NO: 1, o una variante alelica de la misma, que tiene actividad CDK8. Un fragmento de la SEQ ID NO: 1 es un mutante puntual CDK8 Trp105 que tiene uno o mas aminoacidos eliminados del extremo amino y/o carboxilo de la SEQ ID NO: 1, o una variante alelica de la misma.

[0317] El mutante puntual CDK8 Trp105 util aqrn tiene al menos aproximadamente el 20%, al menos aproximadamente el 40%, al menos aproximadamente el 60%, al menos aproximadamente el 80%, al menos aproximadamente el 90%, o al menos aproximadamente el 95% de la actividad de quinasa CDK8 del polipeptido CDK8 de la SEQ ID NO: 1.

[0318] En una realizacion, el mutante puntual CDK19 Trp105 util en este documento tiene una secuencia de aminoacidos que tiene un grado de homologfa con la secuencia de aminoacidos de la SEQ ID NO: 2 de al menos aproximadamente el 80%, al menos aproximadamente el 85%, al menos aproximadamente el 90%, al menos aproximadamente el 95%, o al menos aproximadamente el 97%. En una realizacion, el mutante puntual CDK19 Trp105 de la SEQ ID NO: 2 comprende una o mas sustituciones, deleciones y/o inserciones adicionales de uno o mas aminoacidos. En otra realizacion, el mutante puntual CDK19 Trp105 es una variante alelica de la SEQ ID NO: 2. En una realizacion, el mutante puntual CDK19 Trp105 es un fragmento de la SEQ ID NO: 2, o una variante alelica de la misma, que tiene actividad CDK19. Un fragmento de la SEQ ID NO: 2 es un mutante puntual CDK19 Trp105 que tiene uno o mas aminoacidos eliminados del extremo amino y/o carboxilo de la SEQ ID NO: 2, o una variante alelica de la misma.

[0320] El mutante puntual CDK19 Trp105 util aqrn tiene al menos aproximadamente el 20%, al menos aproximadamente el 40%, al menos aproximadamente el 60%, al menos aproximadamente el 80%, al menos aproximadamente el 90%, o al menos aproximadamente el 95% de la actividad de quinasa CDK19 del polipeptido CDK19 de la SEQ ID NO: 2.

[0321] En una realizacion, el mutante puntual CDK⁸ o CDK19 Trp105 util aqu comprende una etiqueta tal como una etiqueta peptfdica (por ejemplo, una etiqueta FLAG®, etiqueta GST, etiqueta de hemaglutinina de influenza humana (HA), etiqueta de protema de union a quitina (CBP), etiqueta de la protema de union a maltosa (MBP), etiqueta de glutation-S-transferasa (GST), etiqueta de poli(His), etiqueta V5, etiqueta Myc) o etiquetas fluorescentes (por ejemplo, etiqueta eGFP, etiqueta mCherry).

[0322] Tambien se contempla un metodo para predecir o determinar la respuesta de un sujeto a la cortistatina o a los analogos de la cortistatina. Por ejemplo, se proporciona un metodo para analizar una muestra de un sujeto para determinar si un sujeto tiene una mutacion puntual ubicada en Trp105 de CDK⁸ y/o CDK19. En una realizacion, la mutacion puntual es un Trp105Met. La presencia de una o mas de las mutaciones de Trp105 es generalmente indicativa de una respuesta disminuida o ineficaz de un sujeto a la cortistatina o analogos de cortistatina. En una realizacion, se administra al sujeto un farmaco diferente ademas de la cortistatina o analogos de la cortistatina si el sujeto tiene una mutacion puntual localizada en Trp105 de CDK⁸ y/o CDK19.

Ejemplos

[0323] Con el fin de que la invencion descrita en el presente documento pueda entenderse mas completamente, se exponen los siguientes ejemplos. Debe entenderse que estos ejemplos son solo para fines ilustrativos y no deben interpretarse como limitantes de esta invencion de ninguna manera.

METODOS SINTETICOS

Materiales e instrumentacion

[0324] Todas las reacciones se realizaron en una vajilla de vidrio secada a la llama a una presion positiva de argon a menos que se indique lo contrario. La cromatograffa flash en columna se realizo segun lo descrito por Still et al., J. Org. Chem. 1978, 43, 2923-2925 empleando gel de sflice 60 (40-63 mm, Whatman).

[0325] Se usaron reactivos y disolventes comerciales tal como se recibieron con las siguientes excepciones: el tetrahidrofurano (THF), el diclorometano (CH²Ch) se desgasificaron con argon y se pasaron a traves de un sistema de purificacion de solvente (disenado por JC Meyer de Glass Contour) utilizando columnas de alumina como se describe por Pangborn et al., Organometallics 1996, 15, 1518-1520. La piridina y la trietilamina se destilaron sobre hidruro de calcio antes de usarse. El celite usado fue Celite® 545, comprado de JT Baker. Las molaridades de las soluciones de n-butillitio se determinaron mediante titulacion utilizando ¹ ,¹⁰ -fenantrolina como indicador (promedio de tres determinaciones).

[0326] Los espectros de 1H RMN se registraron con un espectrometro Varian INOVA-600 o Varian INOVA-500. Los desplazamientos qmmicos de protones se informan en partes por millon (escala ⁸ ) y se calibran utilizando un disolvente residual no deuterado como referencia interna (CDCh: ⁸ 7,26 (CHCh), C⁶D⁶: ⁸ 7,15 (C⁶D⁵H)). Los datos para los espectros de 1H RMN se presentan del siguiente modo: desplazamiento qmmico ^{( 8} ppm) (multiplicidad, constante de acoplamiento (Hz), integracion). Las multiplicidades se informan de la siguiente manera: s = singlete, d = doblete, t = triplete, q = cuarteto, m = multiplete, br = amplio, app = aparente, o combinaciones de los mismos. Los espectros de 13C RMN se registraron con un espectrometro Varian INOVA-500. Los espectros de masas de alta resolucion (HRMS) se obtuvieron del Laboratorio de Espectrometna de Masas de la Universidad de Harvard, donde se realizaron experimentos de espectroscopfa de masas (MS) por ionizacion por electrospray (ESI) en un instrumento Agilent 6210 TOF LC/^m S.

EJEMPLO 1. SINTESIS DE COMPUESTOS QUE CONTIENENISOQUINOLINA

[0327]

Ruta 1: Sintesis de 8.9-metoxietilenetetona insaturada a partir de 6-metoxi-1-tetralona (compuesto 1)

[0328] La reaccion de Grignard se realizo con 20,0 g (113 mmol, 1,00 equiv.) De ⁶ -metoxM-tetralona y el producto se uso sin purificacion por cromatograffa flash. Ver, por ejemplo, Saraber et al., Tetrahedron 2006, 62, 1726-1742. A una solucion de producto de reaccion de Grignard y 2-metilo-1,3-pentadienona (12,8 g, 114 mmol, 1,01 equiv.) En xileno (140 mL) se anadio AcOH (64,6 mL, 1,13 mol, 10,0 equiv) y la mezcla de reaccion. Se calento a reflujo. Despues de 2H, la reaccion se dejo enfriar a temperatura ambiente y se concentro a presion reducida. La mezcla de 1:1 de tolueno y eter efflico se anadio para disolver el residuo solido y la mezcla se filtro. El filtrado se lavo secuencialmente con una solucion saturada de NaHCO^{3 ( 2 0 0} ml) y salmuera, se seco sobre MgSO⁴ y se concentro a presion reducida. El residuo se purifico por cromatograffa flash (gel de silice, eluyente: 20:1:1 Hexanos: EtOAc: DCM) para proporcionar el dieno de Torgov. Los datos espectrales fueron consistentes con los reportados previamente. Ver, por ejemplo, Soorukram, D.; Knochel, P. Org. Leton. 2007. 9, 1021-1023. El dieno de Torgov se convirtio en el compuesto 1 de metoxietilenobetona 8,9 insaturado (15,0 g, 47% en 3 pasos) segun el procedimiento conocido en la literatura. Ver, por ejemplo, Sugahara et al., Tetrahedron Lett. 1996, 37. 7403-7406.

Ruta 1: Sintesis de metoxietilenecetal 8.9-insaturado (compuesto 2)

[0329] A una solucion de compuesto 1 (15,0 g, 53,1 mmol, 1,0 equiv.) en benceno (215 ml) y etilenglicol (72 ml) se le anadio acido oxalico (2,30 g, 12,1 mmol, 0,22 equiv.). La mezcla de reaccion se dejo calentar a reflujo y el agua se atrapo con un aparato Dean-Stark. Despues de 16 h, la reaccion se enfrio a temperatura ambiente y se anadio una solucion saturada de NaHCO³ (150 ml). Las capas organica y acuosa se separaron y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 X 200 ml). Las fases organicas combinadas se lavaron con salmuera (150 ml) y se secaron sobre Na²SO⁴. El disolvente se evaporo a presion reducida y el residuo se purifico por cromatograffa flash (gel de silice, eluyente: 15:1 Hexanos: EtOAc) para proporcionar el compuesto 2 de metoxietilqueniquetal 8,9 insaturado (15,5 g, 89%). ¹ H RMN (500 MHz, CDCh) Cambio = 7,13 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 6,73 - 6,67 (m, 2 H), 4,05 - 3,85 (m, 4 H), 3,79 (s, 3 H), 2,82 -2,65 (m, 2 H), 2,52 -2,45 (m, 2 H), 2,23 -2,17 (m, 2 H), 2,14 (ddd, J = 2,2, 11,6, 14,0 Hz, 1 H), 1,99 -1,82 (m, 4 H), 1,64 (td, J = 4,2, 12,2 Hz, 1 H), 1,49 (dq, J = ⁶ ,⁸ , 11,6 Hz, 1 H), 0,86 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C²¹H²⁷O³ [M+H]+: 327,1955, encontrado 327,1947.

Ruta 1: Sintesis de los alcoholes epoxi 3 y 3a.

[0330] Se enfrio a 0°C una solucion de etilenetaletato 28,9-insaturado (1,63 g, 5,00 mmol, 1,0 equiv.) en CHCh (50 ml) y se anadio mCPBA (max. 77%, 2,46 g, 11,0 mmol, 2,2 equiv.). La mezcla de reaccion se agito durante 10 minutos a 0°C y se calento a temperatura ambiente. Despues de 50 minutos adicionales, se anadieron secuencialmente una solucion al 10% de Na²S²O³ (40 ml) y una solucion saturada de NaHCO³ (40 ml). Las capas organica y acuosa se separaron y la fase acuosa se extrajo con diclorometano (3 X 50 ml). Las fases organicas combinadas se lavaron con salmuera (50 ml), se secaron sobre Na²SO⁴ y se concentraron a presion reducida. El residuo se purifico por cromatograffa flash (gel de silice, eluyente: 3:1 ^ Hexanos: EtOAc ¹ :¹ ) para proporcionar el alcohol epoxi 3 y 3a (1,40 g, 75%). 3 y 3a se encontraban bajo equilibrio en cualquier disolvente, con una concentracion mayor de 3. Se analizo la H RMN por alcohol epoxi 3. Cuando se indico, se aplicaron analogos de cortistatina (12. 13. 14A. 14B. 15B. 16B y 17B) a experimentos biologicos como mezclas racemicas construidas a partir de ⁶ -metoxi-¹ -tetralona.

[0331] 1H RMN (500MHz, CDCh) Desplazamiento = 7,77 (d, J = 8,3Hz, 1 H), 6,76 (dd, J = 2,0, 8,3Hz, 1 H), 6,63 (d, J = 2,0Hz, 1 H), 4,78 (dd, J = 7,8, 9,8 Hz, 1 H), 3,95 - 3,87 (m, 4 H), 3,78 (s, 3 H), 2,84 (dt, J = 5.9, 14,4 Hz, 1 H), 2,49 (dd, J = 4,4, 15,1 Hz, 1 H), 2,36 -2,29 (m, 1 H), 2,26 (dd, J = 5.9, 14,2 Hz, 2 H), 2,06 (t, J = 11,7 Hz, 1 H), 1,97 (dd, J = 7,3, 12,2 Hz, 1 H), 1,94 - 1,88 (m, 2 H), 1,75 (dt, J = 5.4, 14,2 Hz, 1 H), 1,63 - 1,53 (m, 1 H), 1,46 (t, J = 11,0 Hz, 1 H), 0,75 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C²¹H²⁷O⁵ [M+H]+: 359,1853, encontrado 359,1852.

Ruta 2: Sintesis de compuestos 2 y 4 de metoxietilenotetal 8,9 y 9,11-insaturados

[0332] La oxidacion con DDQ se realizo con 22,0 g (81,4 mmol, 1,0 equiv.) de estrona y el producto se uso sin purificacion por cromatograffa flash. Ver, por ejemplo, Stephan et al., Steroid. 1995, 60, 809-811. A una solucion de 9,11-estrona insaturada en benceno (375 ml) se le anadio etilenglicol (110 ml, 1,99 mol, 24,4 equiv.) y PTSA (3,00 g, 16,3 mmol, 0,20 equiv.). La mezcla de reaccion se calento a reflujo y el agua se atrapo con un aparato Dean-Stark. Despues de 18 h, la reaccion se dejo enfriar a temperatura ambiente y se aplico una solucion saturada de NaHCO³ (300 ml). La fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 X 300 ml) y las fases organicas combinadas se lavaron con salmuera (200 ml). La fase organica se seco (Na²SO⁴) y el disolvente se evaporo a presion reducida. El producto se uso en el siguiente paso sin purificacion adicional.

[0333] Se disolvio el etilenecetal (mezcla de los regioisomeros 8,9 y 9,11-insaturados) en acetona (420 ml) y se anadio K²CO³ (22,5 g, 163 mmol, 2,00 equiv.). A esto le siguio la adicion de Me²SO⁴ (9,30 ml, 97,6 mmol, 1,20 equiv.) y la mezcla de reaccion se calento a reflujo. Despues de 18 h, la reaccion se dejo enfriar a temperatura ambiente y la acetona se evaporo. Se anadio una solucion de 2 M NaOH (300 ml) y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 3300 ml). Las fases organicas combinadas se secaron (Na²SO⁴) y el disolvente se evaporo a presion reducida. El residuo se purifico por cromatograffa flash (gel de sffice, eluyente: 15:1 Hexanos: AcOEt) para proporcionar una mezcla de compuestos 2 y 4 de metoxietilqueniquetal 8,9 y 9,11-insaturados (16,3 g, 61% en tres etapas, -4:5 mezcla de 8,9-insaturados: regioisomeros 9,11-insaturados).

[0334] Para el isomero 9,11-insaturado, solo se asignaron picos distinguibles: 1H RMN (500 MHz, CDCh) Cambio = 7,53 (d, J = ^{8 , 8} Hz, 1 H), 6,60 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 6,13 (td, J = 2,6, 5,0 Hz, 1 H), 3,79 (s, 3 H), 2,59 (td, J = 3,2, 17,6 Hz, 1 H), 2,09 - 2,00 (m, 3 H), 1,45 - 1,33 (m, 2 H), 0,90 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C²¹H²⁷O³ [M+H]+: 327,1955, encontrado 327,1951.

Ruta 2: Compuestos de alcohol epoxi 3 y 3a.

[0335] A una solucion de mezcla de 8,9 y 9,11 compuestos etilenquetales insaturados 2 y 4 (15,7 g, 48,1 mmol, 1,00 equiv.) en diclorometano (700 ml) se le anadio hexahidrato de monoperoxiftalato de magnesio (68,4 g, 111 mmol, 2,30 equiv.) y agua (4,8 ml). La mezcla de reaccion se agito durante 20 ha temperatura ambiente y luego se detuvo con la mezcla de Na²S²O³ acuoso al 10% (300 mL) y solucion saturada de NaHCO³ (300 mL). Las capas organica y acuosa se separaron y la fase acuosa se extrajo con diclorometano (2 X 500 ml). Las fases organicas combinadas se lavaron con salmuera (300 ml) y se secaron (Na²SO⁴). El disolvente se evaporo a presion reducida y el residuo se purifico por cromatograffa flash (gel de sffice, eluyente: 3:1 ^ 2 :1 Hexanos: EtOAc) para proporcionar alcohol epoxi 3 y 3a (8,60 g, 50%). Los datos espectrales fueron consistentes con el alcohol epoxi 3 y 3a construidos a partir de metoxietilenetetal 28,9-insaturado.

Sintesis del compuesto 5 de Diol

[0336] Se condenso gas amoniaco (240 ml) y al amomaco ffquido se le anadio Li (3,90 g, 565 mmol, 25,0 equiv.) a -78°C. Despues de agitarse durante 30 minutos, se canularon los alcoholes epoxi 3 y 3a (8,10 g, 22,6 mmol, 1,0 equiv.) en THF (110 ml) y se agito durante 1,5 horas mas a esa temperatura. A la mezcla de reaccion se le anadio la mezcla de f-BuOH (32 ml) y THF (16 ml) a -78°C y se agito durante 20 minutos mas a esa temperatura. Se anadio la mezcla de f-BuOH (92 ml) y THF (38 ml) seguido de benceno (50 ml) y agua (50 ml) a -78°C, y se abrio el matraz para evaporar suavemente el amomaco ffquido mediante la eliminacion de bano de enfriamiento. Se anadio agua (200 ml) y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 X 250 ml). Las fases organicas combinadas se lavaron con salmuera (150 ml), se secaron (Na²SO⁴) y se concentraron a presion reducida. El producto se uso en el siguiente paso sin purificacion adicional.

[0337] A una solucion de producto de reduccion de abedul en THF (300 ml) y etilenglicol (75 ml) se le anadio PTSA (430 mg, 2,26 mmol, 0,10 equiv.). La mezcla de reaccion se agito durante 30 minutos a temperatura ambiente y se anadio una solucion saturada de NaHCO³ (200 ml). Las capas organica y acuosa se separaron y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (4 X 250 ml). Las fases organicas combinadas se lavaron con salmuera (200 ml) y se secaron (Na²SO⁴). El disolvente se evaporo a presion reducida y el residuo se purifico por cromatograffa flash (gel de sffice, eluyente: Hexanos: EtOAc 4:1 ^ EtOAc al 100% ^ EtOAc: MeOH 10:1) para proporcionar el diol 5 (4,60 g, 52%).

[0338] 1H RMN (500 MHz, C6D6) Desplazamiento = 3,67 - 3,42 (m, 9 H), 3,25 - 3,14 (m, 1 H), 2,40 (dd, J = 5,9, 13,2 Hz, 1 H), 2,31 (br. s, 2 H), 2,23 - 2,09 (m, 2 H), 2,03 (t, J = 10,7 Hz, 1 H), 1,97 - 1,90 (m, 2 H), 1,89 (dd, J = 8,3, 14,2 Hz, 1 H), 1,85 - 1,75 (m, 4 H), 1,66 - 1,50 (m, 4 H), 1,00 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C²²H³²NaO⁶ [M+Na]+: 415,2091, encontrado 415,2076.

Sintesis del compuesto 6 de enona

[0339] A una solucion de diol 5 (4,05 g, 10,3 mmol, 1,00 equiv.) en diclorometano (230 mL) se anadio NBS (2,00 g, 11,4 mmol, 1,10 equiv) en una porcion a -10°C y la mezcla de reaccion se calento a temperatura ambiente. La reaccion se controlo por TLC (aproximadamente 30 minutos para completar). Una vez que se realizo la reaccion, la mezcla de reaccion se enfrio a -40°C y se anadio trietilamina (17,3 mL, 124 mmol, 12,0 equiv). Se anadio SOaPy previamente agitado (16,4 g, 103 mmol, 10,0 equiv.) en DMSO (115 ml) durante 20 minutos a temperatura ambiente a la mezcla de reaccion a -40°C, que posteriormente se dejo calentar lentamente a -10°C. Despues de 4 h, se anadio una solucion saturada de NH⁴O (130 ml) y la reaccion se dejo calentar a temperatura ambiente. Las capas organica y acuosa se separaron y la fase acuosa se extrajo con diclorometano (2 X 200 ml). Las fases organicas combinadas se lavaron con salmuera (150 ml), se secaron sobre Na²SO⁴ y se concentraron a presion reducida. El producto se uso sin purificacion adicional.

[0340] El producto de oxidacion se disolvio en diclorometano (300 ml) y la mezcla de reaccion se enfrio a -40°C, seguido de la adicion lenta de DBU (3,90 ml, 25,6 mmol, 2,50 equiv.). Despues de 15 minutos, se anadio una solucion saturada de NH⁴Cl (130 ml) y la reaccion se dejo calentar a temperatura ambiente. Las capas organica y acuosa se separaron y la fase acuosa se extrajo con diclorometano (2 X 200 ml). Las fases organicas combinadas se lavaron con salmuera (150 ml), se secaron sobre Na²SO⁴ y se concentraron a presion reducida. El residuo se purifico por cromatograffa flash (gel de sffice, eluyente: 3:1 ^ Hexanos:EtOAc 1:1) para proporcionar la enona ⁶ (3,16 g, 80% en tres etapas).

[0341] 1H RMN (500MHz, C6D6) Desplazamiento = 3,58-3,51 (m, 1 H), 3,49-3,34 (m, 6H), 3,28-3,23 (m, 2 H), 3,19 (dt, J = 4,2, 7,7 Hz, 1 H), 2,80 (d, J = 16,1 Hz, 1 H), 2,60 (ddd, J = 6,8, 12,7, 19,0 Hz, 1 H), 2,55 (d, J = 13,2 Hz, 1 H), 2,43 (d, J = 16,1 Hz, 1 H), 2,31 (dd, J = 1,5, 13,2 Hz, 1 H), 1,98 - 1,88 (m, 2 H), 1,88 - 1,80 (m, 3 H), 1,71 (ddd, J = 4,2, 9,6, 11,6 Hz, 1 H), 1,68 - 1,59 (m, 3 H), 1,20 (ddd, J = 3,7, 8,4, 11,4 Hz, 1 H), 0,90 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C²²H²sNaO⁶ [M+Na]+: 411,1778, encontrado 411,1786.

Sintesis del compuesto alcoholico afflico 7

[0342] A una solucion de enona 6 (3,20 g, 8,32 mmol, 1,00 equiv.) En MeOH (150 ml) y THF (20 ml) se anadio CeCl³ -⁷ H²O (9,20 g, 24,7 mmol, 3,00 equivalentes) a temperatura ambiente. Despues de agitarse 5 min, la reaccion se enfrio a -20°C, seguido de la adicion de NaBH⁴ (623 mg, 16,5 mmol, 2,00 equiv.). Despues de 30 minutos, se anadio una solucion saturada de NH⁴Cl (50 ml) y agua (50 ml), que se dejo calentar a temperatura ambiente. La fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 X 200 ml) y las fases organicas combinadas se lavaron con salmuera (150 ml), se secaron sobre Na²SO⁴ y se concentraron a presion reducida. El residuo se purifico por cromatograffa flash (gel de sffice, eluyente: 20:1 DCM: MeOH) para proporcionar un alcohol afflico 7 (2,72 g, 85%).

[0343] 1H RMN (500 MHz, C⁶D⁶) Desplazamiento = 4,39 - 4,30 (m, 1 H), 3,58 - 3,36 (m, ⁸ H), 3,22 (dd, J = 3,7, 16,4 Hz, 1 H), 2,94 (dd, J = 7,1, 12,5 Hz, 1 H), 2,66 (d, J = 13,2 Hz, 1 H), 2,49 -2,41 (m, 1 H), 2,39 (dd, J = 2,2, 12,9 Hz, 1 H), 2,07 - 1,99 (m, 1 H), 1,96 - 1,79 (m, ⁶ H), 1,73 (br. s, 3 H), 1,66 - 1,57 (m, 1 H), 1,15 -1,07 (m, 1 H), 0,86 (s, 3 H).

HRMS (ESI) (m/z) calculado para C²²Ha⁰ NaO⁶ [M+Na]+: 413.1935, encontrado 413.1942.

Sintesis del compuesto de ciclopropano 8

[0344] A una solucion de ClCH² l (1,98 ml, 27,1 mmol, 4,00 equivocados) en 1,2-dicloroetano (140 ml) se anadio una solucion de Et²Zn en eter diefflico (1M, 13,6 ml, 13,6 mmol, 2,00 equivocados) a 0°C. Despues de agitarse durante 5 minutos, se anadio alcohol afflico 7 (2,65 g, 6,79 mmol, 1,00 equiv.) en 1,2-dicloroetano (70 ml) al matraz de reaccion a 0°C. Despues de 30 minutos, la reaccion se detuvo con una solucion saturada de NH⁴Cl (100 ml) y se dejo calentar a temperatura ambiente. Las capas organica y acuosa se separaron y la fase acuosa se extrajo con diclorometano (2 X 120 ml). Las fases organicas combinadas se lavaron con salmuera (100 ml), se secaron sobre Na²SO⁴ y se concentraron a presion reducida. El residuo se purifico por cromatograffa flash (gel de sffice, eluyente: 2:1 ^ Hexanos: EtOAc 1:1) para proporcionar ciclopropano 8 (2,59 g, 93%).

[0345] 1H RMN (500 MHz, C6D6) Desplazamiento = 3,92 (dd, J = 3,7, 11,0 Hz, 1 H), 3,51 - 3,40 (m, 8 H), 2,72 (dd, J = 7,1, 12,9 Hz, 1 H), 2,39 (dd, J = 5,4, 17,6 Hz, 1 H), 2,38 (d, J = 12,2 Hz, 1 H), 2,15 (d, J = 12,2 Hz, 1 H), 2,12 (dt, J = 4,9, 12,2 Hz, 1 H), 2,02 (ddd, J = 2,9, 11,2, 14,6 Hz, 1 H), 1,92 - 1,82 (m, 3 H), 1,82 - 1,73 (m, 2 H), 1,69 - 1,54 (m, 5 H), 1,52 (dd, J = 6,1, 12,0 Hz, 1 H), 1,49 - 1,44 (m, 1 H), 0,98 (s, 3 H), 0,86 (d, J = 2,4 Hz, 1 H), 0,15 (d, J = 2,9 Hz, 1 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C²aHa²NaO⁶ [M+Na]+: 427,2091, encontrado 427,2088.

Sintesis del compuesto 9 de oxabiciclor3.2.11octano

[0346] Ciclopropano 8 (2,45 g, 6,06 mmol, 1,00 equiv.) y 2,6-di-ferc-butilo-4-metilpiridina (4,40 g, 21,2 mmol, 3,50 equiv.) se secaron azeotropicamente con benceno y se disolvieron en diclorometano (120 mL). Se anadieron tamices moleculares 4A (3,1 g) y el matraz de reaccion se enfrio a 0°C. Se anadio gota a gota una solucion de anhffdrido tnflico en diclorometano (1 M, 12,1 ml, 12,1 mmol 2,00 equiv.) y se retiro el bano de hielo para calentar el matraz de reaccion a temperatura ambiente. Despues de 2 h, la reaccion se detuvo con trietilamina (20 ml) y se filtro a traves de una capa de celite. Se anadio una solucion saturada de NaHCO³ (100 ml) y la fase acuosa se extrajo con diclorometano ^{( 2} X ¹²⁰ ml). Las fases organicas combinadas se lavaron con salmuera ^{( 1 0 0} ml), se secaron sobre Na²SO⁴ y se concentraron a presion reducida. El residuo se purifico por cromatograffa flash (gel de s l^ice, eluyente: pentano: eter diefflico 3:1) para proporcionar el compuesto 9 de oxabiciclo[3.2.1]octano (1,42 g, 60%). Ver tambien Magnus et al., Org. Leton. 2009, 11, 3938-3941.

[0347] 1H RMN (500 MHz, CDCla) Desplazamiento = 5,73 (s, 1 H), 5,29 - 5,26 (m, 1 H), 4,04 - 3,76 (m, 8 H), 2,58 -2,50 (m, 1 H), 2,46 (t, J = 15,1 Hz, 1 H), 2,31 - 2,24 (m, 2 H), 2,19 (t, J = 11,2 Hz, 1 H), 2,09 (d, J = 13,2 Hz, 1 H), 1,99 (dt, J = 4,4, 13,2 Hz, 1 H), 1,94 (dd, J = 2,4, 13,2 Hz, 1 H), 1,91 - 1,84 (m, 1 H), 1,83 - 1,71 (m, 3 H), 1,71 - 1,53 (m, 5 H), 0,88 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C²³H³⁰O⁵ [M+H]+: 387,2166, encontrado 387,2180.

Sintesis del compuesto de monocetona 10

[0348] A una solucion de bisethyleneketal 9 (110 mg, 285 mmol, 1,0 equiv.) en acetona (14,6 mL) y agua (3,6 mL) se anadio PTSA (21,6 mg, 85,2 pmol, 0,30 equiv) y la mezcla de reaccion se agito por 3 d. La solucion saturada de NaHCO³ (5 ml) y acetato de etilo (25 ml) se anadieron secuencialmente a la reaccion. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 X 15 ml). Las capas organicas se combinaron, se lavaron con salmuera (20 ml), se secaron sobre Na²SO⁴ y se concentraron a presion reducida. El residuo resultante se purifico luego por cromatograffa flash (gel de sflice, eluyente: Hexanos: EtOAc 4:1) para proporcionar monocetona 10 (79,0 mg, 81%).

[0349] 1H RMN (500 MHz, CDCla) Desplazamiento = 5,73 (s, 1 H), 5,29 - 5,25 (m, 1 H), 3,98 - 3,90 (m, 4 H), 2,48 (dd, J = 8,8, 19,5 Hz, 1 H), 2,46 - 2,40 (m, 1 H), 2,36 (dd, J = 5,9, 12,7 Hz, 1 H), 2,34 - 2,25 (m, 2 H), 2,24 - 2,08 (m, 5 H), 2,09 (d, J = 13,2 Hz, 1 H), 1,95 (dd, J = 2,4, 13,2 Hz, 1 H), 1,90 -1,81 (m, 1 H), 1,79 - 1,70 (m, 2 H), 1,70 -1,61 (m, 2 H), 0,89 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C²¹H²⁷O⁴ [M+H]+: 343,1909, encontrado 343,1919.

Sintesis del compuesto de aducto 1-cloroisoquinolina 11

[0350] Se calento CeCl³ (565 mg, 2,30 mmol, 10,0 equiv.) en un matraz de reaccion a 140°C a vado durante 2 h. El matraz se cargo con Ar y se enfrio a 0°C. Despues de 30 min, se anadio THF (2,8 ml) y se agito a 0°C durante 2 h. Luego se dejo calentar el matraz a temperatura ambiente y se agito durante 16 h adicionales.

[0351] 1-Cloro-7-yodoisoquinolina se sintetizo siguiendo el procedimiento proporcionado en Subasinghe et al., Bioorg. Medicina. Chem. Lett. 2013, 23, 1063-1069.

[0352] A una solucion de complejo CeCl³/THF se le anadio 1-cloro-7-yodoisoquinolina (396 mg, 1,40 mmol, 6,00 equiv.) en THF (1,4 ml) seguido de agitacion durante 10 minutos a temperatura ambiente, que luego se permitio enfriar a -78°C. Luego se anadio gota a gota una solucion de n-butillitio en hexanos (1,6 M, 716 ml, 1,10 mmol, 5,00 equiv.). La mezcla de reaccion se agito durante 30 minutos mas a la misma temperatura y se canulo monoketona 10 (78,5 mg, 229 mmol, 1,00 equiv.) en THF (1,4 ml). Despues de 30 minutos adicionales, se anadio una solucion saturada de NH⁴Cl (5 ml) a la mezcla de reaccion agitada, que luego se dejo calentar a temperatura ambiente. La mezcla se diluyo con EtOAc (5 ml) y las capas se separaron. La capa acuosa se extrajo con EtOAc (3 X 5 ml) y las capas organicas se combinaron, se lavaron con salmuera (5 ml) y se secaron sobre Na²SO⁴ y se concentraron a presion reducida. El residuo resultante se purifico luego por cromatograffa flash (gel de sflice, eluyente: 2:1 Hexanos: EtOAc) para proporcionar el aducto de 1-cloroisquinolina 11 (115 mg, 97%).

[0353] 1H RMN (500MHz, CDCh) Desplazamiento = 8,34 (br. s, 1 H), 8,24 (d, J = 5,9Hz, 1 H), 7,89-7,83 (m, 1 H), 7,76 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 7,56 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 5,63 (s, 1 H), 5,16 - 4,99 (m, 1 H), 4,02 - 3,87 (m, 4 H), 2,62 (ddd, J = 4,4, 9,8, 14,2 Hz, 1 H), 2,48 - 2,38 (m, 2 H), 2,36 - 2,26 (m, 3 H), 2,26 - 2,19 (m, 1 H), 2,18 - 2,08 (m, 2 H), 1,96 (dd, J = 2,4, 13,7 Hz, 1 H), 1,88 (dd, J = 5,1, 17,8 Hz, 1 H), 1,82 - 1,70 (m, 2 H), 1,67 - 1,57 (m, 3 H), 1,49 (d, J = 17,6 Hz, 1 H), 1,20 - 1,08 (m, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C³⁰H³²NaO⁴NCl [M+Na]+: 528,1918, encontrado 528,1929.

Sintesis del compuesto de isoquinolina 12

[0354] Una solucion de aducto de 1-cloroisoquinolina 11 (115 mg, 227 pmol, 1,00 equiv.) en diclorometano (20 ml) se enfrio a 0°C. La piridina (183 pl, 2,30 mmol, 10,0 equiv.) y DMAP (13,9 mg, 114 mmol, 0,50 equiv.) se agregaron secuencialmente a la solucion. Despues de 5 minutos, se anadio gota a gota anfffdrido trifluoroacetico (158 pl, 1,14 mmol, 5,00 equivocados) y se agito durante 30 minutos adicionales, momento en el que se anadio tampon fosfato de pH 7 (15 ml) seguido de calentamiento del matraz de reaccion a temperatura ambiente. Las capas organica y acuosa se separaron y la capa acuosa se extrajo con diclorometano (2 X 15 ml). Las capas organicas se combinaron, se lavaron con salmuera (25 ml), se secaron sobre Na²SO⁴ y se concentraron a presion reducida. El residuo resultante se purifico luego por cromatograffa en columna corta (gel de sflice, eluyente: 2:1 Hexanos: EtOAc) para proporcionar un producto trifluoroacetilado que se uso rapidamente para la siguiente etapa.

[0355] El producto trifluoroacetilado (130 mg, 216 mmol, 1,00 equiv.) se seco azeotropicamente con benceno y se disolvio en benceno (4,3 ml). Se anadio AIBN (106 mg, 647 pmol, 3,00 equiv.) y el matraz de reaccion se desgasifico mediante el proceso de descongelacion por congelacion y bomba (3 ciclos). Se anadio Bu³SnH (1,16 ml, 4,31 mmol, 20,0 equiv.) Y la mezcla de reaccion se dejo calentar a reflujo. Despues de 3 h, la mezcla de reaccion se enfrio a temperatura ambiente y se concentro a presion reducida. El residuo resultante se purifico luego por cromatograffa flash en columna (gel de silice, eluyente: 4:1 ^-3:1 ^ 1:1 Hexanos: EtOAc) para proporcionar isoquinolina 12 (67,0 mg, 65% en dos etapas). Ver tambien Yamashita et al., J. Org. Chem. 2011, 76, 2408-2425.

[0356] 1H RMN (500MHz, CDCh) Desplazamiento = 9,21 (s, 1 H), 8,46 (d, J = 5,9Hz, 1 H), 7,77 (s, 1 H), 7,73 (d, J = 8,3Hz, 1 H), 7,61 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,57 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 5,74 (s, 1 H), 5,29 - 5,23 (m, 1 H), 4,00 - 3,90 (m, 4 H), 3,11 (t, J = 10,0 Hz, 1 H), 2,49 (dd, J = 8,3, 11,2 Hz, 1 H), 2,47 - 2,41 (m, 1 H), 2,38 - 2,24 (m, 4 H), 2,24 - 2,14 (m, 2 H), 2,12 (d, J = 13,2 Hz, 1 H), 2,06 - 1,95 (m, 2 H), 1,91 (dd, J = 5,4, 17,6 Hz, 1 H), 1,83 (dq, J = 4,9, 11,7 Hz, 1 H), 1,77 (td, J = 2,3, 12,9 Hz, 1 H), 1,72 - 1,59 (m, 3 H), 0,52 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C³⁰H³³NaNOa [M+Na]+: 478,2353, encontrado 478,2347.

Sintesis de la cetona 13

[0357] A una solucion de isoquinolina 12 (19,0 mg, 41,7 pmol, 1,00 equiv.) en acetona (1,4 mL) y agua (350 mL) se anadio PTSA (20,9 mg, 83,4 mmol, 2,00 equiv.) y la mezcla de reaccion se calento. a 55°C. Despues de 14,5 h, la reaccion se enfrio a temperatura ambiente y a la reaccion se anadieron secuencialmente solucion saturada de NaHCO³ (2 ml) y acetato de etilo (2,5 ml). Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 X 2,5 ml). Las capas organicas se combinaron, se lavaron con salmuera (2 ml), se secaron sobre Na²SO⁴ y se concentraron a presion reducida. El residuo resultante se purifico luego por cromatograffa flash (gel de silice, eluyente: 3:2 ^ 1:2 Hexanos: EtOAc) para proporcionar la cetona 13 (15,0 mg, 87%).

[0358] 1H RMN (500MHz, CDCla) Desplazamiento = 9,23 (s, 1 H), 8,48 (d, J = 5,9Hz, 1 H), 7,80 (s, 1 H), 7,78 (d, J = 8,3Hz, 1 H), 7,65 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,61 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 5,91 (s, 1 H), 5,40 - 5,35 (m, 1 H), 3,15 (t, J = 10,0 Hz, 1 H), 2,94 (d, J = 15,1 Hz, 1 H), 2,68 (d, J = 15,1 Hz, 1 H), 2,67 - 2,59 (m, 1 H), 2,58 - 2,41 (m, 4 H), 2,41 - 2,24 (m, 3 H), 2,24 -2,10 (m, 2 H), 2,04 (tt, J = 4,6, 13,2 Hz, 1 H), 1,96 (dd, J = 5,4, 17,6 Hz, 1 H), 1,86 (dq, J = 5,1, 12,1 Hz, 1 H), 1,80 - 1,67 (m, 2 H), 0,55 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C²⁸H³⁰NO² [M+H]+: 412,2271, encontrado 412,2288.

Esquema 1-3. Ruta 2 optimizada

Compuestos 3 y 3a de alcohol epoxi

[0359] A una solucion de estrona (180 g, 667 mmol, 1,00 equiv.) en DMSO (2,8 L) se anadio una pastilla de KOH (85% de calidad tecnica, 150 g, 2,26 mol, 3,40 equiv.) y CH³ I (83,0 mL, 1,33 mol, 2,00 equiv). La mezcla de reaccion se agito durante 3,5 horas a temperatura ambiente y se anadio lentamente agua destilada (2 L) a 0°C. La capa acuosa se extrajo con diclorometano (3 X 1,5 L) y la capa organica combinada se lavo con salmuera (1,5 L). La capa organica se concentro bajo un flujo de nitrogeno para dar un cristalino blanco, que se lavo con metanol frio. Los 180 g de mezcla cruda se usaron en el siguiente paso sin purificacion adicional. El resto de los tres pasos se realizaron en dos tandas.

[0360] A una solucion de la mezcla cruda (100 g, 352 mmol, 1,00 equiv.) en metanol (750 ml) y diclorometano (750 ml) se anadio NaHCO³ (93,8 g, 1,05 mmol, 3,00 equiv.). Se anadio D^dQ (120 g, 527 mmol, 1,50 equiv.) en cuatro porciones con un intervalo de 5 minutos y la mezcla de reaccion se agito durante 2 horas y luego se detuvo con Na²S²O³ acuoso al 10% (500 ml). El matraz de reaccion se agito durante 30 minutos adicionales y se filtro a traves de celite, se lavo con cloroformo. Se anadio la solucion 2 M de NaOH (500 ml) y las capas organica y acuosa se separaron y la fase acuosa se extrajo con cloroformo (3 X 700 ml). Las fases organicas combinadas se lavaron con salmuera (700 ml) y se secaron (Na²SO⁴). El disolvente se evaporo a presion reducida y los 89 g de la mezcla cruda se usaron en el siguiente paso sin purificacion adicional.

[0361] A una solucion de la mezcla cruda (81,4 g, 291 mmol, 1,00 equiv.) en benceno (1,25 L) se le agrego etilenglicol (162 mL, 2,91 mol, 10 equiv.) y PTSA (11,1 g, 58,3 mmol, 0,20). equiv. La mezcla de reaccion se calento a reflujo y el agua se atrapo con un aparato Dean-Stark. Despues de 24 horas, la reaccion se dejo enfriar a temperatura ambiente y se aplico una solucion saturada de NaHCO³ (500 ml). La fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (33300 ml) y las fases organicas combinadas se lavaron con salmuera (500 ml). La fase organica se seco (Na²SO⁴) y el disolvente se evaporo a presion reducida. Los 81,4 g de producto crudo se usaron en el siguiente paso sin purificacion adicional.

[0362] A una solucion de mezcla de etilenetetales 8,9 y 9,11-insaturados (81,4 g, 249 mmol, 1,00 equiv.) en diclorometano (1,28 L) se le anadio hexahidrato de monoperoxiftalato de magnesio (354 g, 573 mmol, 2,30 equiv) y agua (25 ml). La mezcla de reaccion se agito durante 16 horas a temperatura ambiente y luego se filtro a traves de una capa de celite. Al filtrado se le anadio una solucion saturada de NaHCO³ (800 ml) y las capas organica y acuosa se separaron y la fase acuosa se extrajo con diclorometano (3 X 700 ml). Las fases organicas combinadas se lavaron con salmuera (700 ml) y se secaron (Na²SO⁴). El disolvente se evaporo a presion reducida y el residuo se purifico por cromatograffa flash (gel de sflice, eluyente: 3:1 ^ ^{2 :1} Hexanos: EtoAc) para proporcionar el alcohol epoxi 3 y 3a (3:3a = 8:1, 81,0 g de 180 g, 34% en 4 pasos). Se analizaron 1H RMN y 13C RMN para el alcohol epoxi 3.

[0363] 1H RMN (500MHz, CDCh) Desplazamiento = 7,77 (d, J = 8,3Hz, 1 H), 6,76 (dd, J = 2,0, 8,3Hz, 1 H), 6,63 (d, J = 2,0Hz, 1 H), 4,78 (dd, J = 7,8, 9,8 Hz, 1 H), 3,95 - 3,87 (m, 4 H), 3,78 (s, 3 H), 2,84 (dt, J = 5,9, 14,4 Hz, 1 H), 2,49 (dd, J = 4,4, 15,1 Hz, 1 H), 2,36 -2,29 (m, 1 H), 2,26 (dd, J = 5,9, 14,2 Hz, 2 H), 2,06 (t, J = 11,7 Hz, 1 H), 1,97 (dd, J = 7,3, 12,2 Hz, 1 H), 1,94 - 1,88 (m, 2 H), 1,75 (dt, J = 5,4, 14,2 Hz, 1 H), 1,63 - 1,53 (m, 1 H), 1,46 (t, J = 11,0 Hz, 1 H), 0,75 (s, 3 H); 13C RMN (500 MHz, CDCh) Desplazamiento = 159,1, 139,5, 130,2, 125,9, 117,6, 114,1, 111,1, 69,0, 67,5, 65,4, 64,5, 61,8, 55,2, 47,4, 46,8, 37,0, 34,9, 26,2, 25,0, 21,3, 14,9; FTIR (cm'1) 3464, 2944, 2885, 1610, 1503; HRMS (ESI) (m/z) calculado para C²¹H²⁷O⁵ [M+H]+: 359,1853, encontrado 359,1852; [a]o= -147,4° (c = 0,01g/mL en CHCh).

Compuesto de Diol 5

[0364] A una solucion de 3 y 3a (10,0 g, 27,9 mmol, 1,00 equiv.) en 1,2-dicloroetano (175 mL) se le anadio NaBH³CN (3,51 g, 55,8 mmol, 2,00 equiv) y AcOH (3,19 mL, 55,8 mmol, 2,00 equiv) secuencialmente a temperatura ambiente. Despues de 2,5 horas, se anadio solucion saturada de NaHCO³ (150 ml) y se separaron las capas organica y acuosa. La fase acuosa se extrajo con diclorometano (3 X 150 ml). Las fases organicas combinadas se lavaron con salmuera (200 ml), se secaron sobre Na²SO⁴ y se concentraron a presion reducida. La mezcla cruda se uso para la siguiente etapa sin purificacion adicional.

[0365] Se condenso gas amoniaco (60 ml) y al amomaco ffquido se anadio Li (1,94 g, 279 mmol, 10,0 equiv.) A -78°C. Despues de agitarse durante 30 minutos, la mezcla cruda en THF (10 ml) y EtOH ^{( 6} ml) se canulo y la reaccion se calento hasta -40°C. Despues de 1,5 horas, a la mezcla de reaccion se le anadio EtOH (20 mL) y EtOH: H²O = 1:1 (20 mL) secuencialmente, y el matraz se abrio para evaporar suavemente el amomaco ffquido retirando el bano de enfriamiento. Se anadio agua (50 ml) y la fase acuosa se extrajo con eter diefflico (3 X 90 ml). Las fases organicas combinadas se lavaron con salmuera (150 ml), se secaron (Na²SO⁴) y se concentraron a presion reducida. El producto se uso en el siguiente paso sin purificacion adicional.

[0366] A una solucion de producto de reduccion de abedul en THF (300 ml) y etilenglicol (75 ml) se le anadio PTSA (530 mg, 2,79 mmol, 0,100 equiv.). La mezcla de reaccion se agito durante 30 minutos a temperatura ambiente y se anadio una solucion saturada de NaHCO³ (200 ml). Las capas organica y acuosa se separaron y la fase acuosa se extrajo con cloroformo (4 X 200 ml). Las fases organicas combinadas se lavaron con salmuera (200 ml) y se secaron (Na²SO⁴). El disolvente se evaporo a presion reducida y el residuo se purifico por cromatograffa flash (gel de sflice, eluyente: 4:1 Hexanos: EtOAc ^ EtOAc al 100% ^ EtOAc: MeOH 10:1) para proporcionar diol 5 (^{6 , 6} g, 60% en 3 pasos).

[0367] 1H RMN (500 MHz, C⁶D⁶) Desplazamiento = 3,67 - 3,42 (m, 9 H), 3,25 - 3,14 (m, 1 H), 2,40 (dd, J = 5,9, 13,2 Hz, 1 H), 2,31 (br. s, 2 H), 2,23 - 2,09 (m, 2 H), 2,03 (t, J = 10,7 Hz, 1 H), 1,97 - 1,90 (m, 2 H), 1,89 (dd, J = 8,3, 14,2 Hz, 1 H), 1,85 - 1,75 (m, 4 H), 1,66 - 1,50 (m, 4 H), 1,00 (s, 3 H); 13C RMN (500MHz, CDCI³) Desplazamiento = 127,8, 126,9, 118,3, 108,5, 74,2, 72,0, 65,3, 64,7, 64,4, 64,3, 63,7, 58,9, 52,5, 45,9, 41,2, 40,5, 33,8, 31,6, 27,6, 25,8, 18,0, 16,6; FTIR (cm-1) 3417,2940, 2884; HRMS (ESI) (m/z) calculado para C²²H³²NaO⁶ [M+Na]+: 415,2091, encontrado 415,2076; [a]D= -13,4° (c = 0,01g/mL en CHCI³).

Compuesto de alcohol alilico 7

[0368] A una solucion de diol 5 (4,05 g, 10,3 mmol, 1,00 equiv.) en diclorometano (230 mL) se le anadio NBS (2,00 g, 11,4 mmol, 1,10 equiv.) en una porcion a -10°C y la mezcla de reaccion se calento a temperatura ambiente. La reaccion se controlo por TLC (aproximadamente 30 minutos para la complecion). Una vez que se realizo la reaccion, la mezcla de reaccion se enfrio a -40°C y se anadio trietilamina (17,3 mL, 124 mmol, ^{1 2 , 0} equiv). Se anadio SO³ 'Py previamente agitado (16,4 g, 103 mmol, 10,0 equiv.) en DMSO (115 ml) durante 20 minutos a temperatura ambiente a la mezcla de reaccion a -40°C, que posteriormente se dejo calentar lentamente a temperatura ambiente. Despues de 3 horas, se anadio una solucion saturada de NH⁴Cl (130 ml) y la reaccion se dejo calentar a temperatura ambiente. Las capas organica y acuosa se separaron y la fase acuosa se extrajo con diclorometano (2 X 200 ml). Las fases organicas combinadas se lavaron con salmuera (150 ml), se secaron sobre Na²SO⁴ y se concentraron a presion reducida. La mezcla cruda se uso sin purificacion adicional.

[0369] La mezcla cruda se disolvio en diclorometano (300 ml) y la mezcla de reaccion se enfrio a -40°C, seguido de la adicion lenta de DBU (3,90 ml, 25,6 mmol, 2,50 equiv.). Despues de 15 minutos, se anadio una solucion saturada de NH⁴Cl (130 ml) y la reaccion se dejo calentar a temperatura ambiente. Las capas organica y acuosa se separaron y la fase acuosa se extrajo con diclorometano (2 X 200 ml). Las fases organicas combinadas se lavaron con salmuera (150 ml), se secaron sobre Na²SO⁴ y se concentraron a presion reducida.

[0370] A una solucion de mezcla cruda (3,20 g, 8,32 mmol, 1,00 equiv.) en MeOH (150 ml) y THF (20 ml) se anadio CeCl3'7H2O (9,20 g, 24,7 mmol, 3,00 equiv.) a temperatura ambiente. Despues de agitarse 5 min, la reaccion se enfrio a -20°C, seguido de la adicion de NaBH⁴ (623 mg, 16,5 mmol, 2,00 equiv.). Despues de 30 minutos, se anadio una solucion saturada de NH⁴Cl (50 ml) y agua (50 ml), que se dejo calentar a temperatura ambiente. La fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 X 200 ml) y las fases organicas combinadas se lavaron con salmuera (150 ml), se secaron sobre Na²SO⁴ y se concentraron a presion reducida. El residuo se purifico por cromatograffa flash (gel de sflice, eluyente: 20:1 DCM: MeOH) para proporcionar un alcohol alflico 7 (2,60 g, 64% en 4 etapas).

[0371] 1H RMN (500 MHz, C6D6) Desplazamiento = 4,39 - 4,30 (m, 1 H), 3,58 - 3,36 (m, 8 H), 3,22 (dd, J = 3,7, 16,4 Hz, 1 H), 2,94 (dd, J = 7,1, 12,5 Hz, 1 H), 2,66 (d, J = 13,2 Hz, 1 H), 2,49 -2,41 (m, 1 H), 2,39 (dd, J = 2,2, 12,9 Hz, 1 H), 2,07 - 1,99 (m, 1 H), 1,96 - 1,79 (m, 6 H), 1,73 (br. s, 3 H), 1,66 - 1,57 (m, 1 H), 1,15 -1,07 (m, 1 H), 0,86 (s, 3 H);

13C RMN (500MHz, C6D6) Desplazamiento = 140,6, 139,1, 118,7, 109,5, 88,3, 86,2, 67,1, 65,4, 64,6, 64,2, 47,9, 46,5, 41,3, 40,7, 34,7, 34,2, 33,9, 30,0, 20,8, 15,6; HRMS (ESI) (m/z) calculado para C²²H³⁰NaO⁶ [M+Na]+: 413,1935, encontrado 413,1942.

Aminacion reductiva

Metodo A

[0372] A una solucion de cetona 13 (1,00 equiv.) en 1,2-dicloroetano (0,02 M) se le anadio secuencialmente amina (4,00 equiv.), AcOH (1,50 equiv.) y NaBH³CN (3,50 equiv.) A temperatura ambiente. Se anadio trietilamina (4 equiv.) si la amina que reacciona es una forma de sal HCl (Metodo a A). Una vez que se realiza la reaccion, se agrega solucion saturada de NaHCO³ y se separan las capas. La capa acuosa se extrajo con diclorometano. Las capas organicas se combinaron, se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na²SO⁴ y se concentraron a presion reducida. (cr-NR²: (⁶ -NR² = ~ 1:1,2 a ~ 1:5).

Metodo B

[0373] A una solucion de cetona 13 (1,00 equiv.) en 1,2-dicloroetano (0,02 M) se agrego secuencialmente amina (2,00 equiv.), AcOH (2,00 equiv.) y NaBH(OAc⁾³ (2,00 equiv.) a temperatura ambiente. Se anadio trietilamina (2,00 equiv.) si la amina que reacciona es una forma de sal HCl (Metodo BB). Una vez que se realiza la reaccion, se agrega solucion saturada de NaHCO³ y se separan las capas. La capa acuosa se extrajo con diclorometano. Las capas organicas se combinaron, se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na²SO⁴ y se concentraron a presion reducida. (a-NR²: P-NR² = ~ 1:1,2 a ~ 1:5).

Metodo C

[0374] A una solucion de amina secundaria (1,00 equiv.) en diclorometano (0,02 M) se le anadio formaldehndo o acetaldehfdo (5,00 equiv.) y se agito 1 h a temperatura ambiente antes de la adicion de NaBH(OAc⁾³ (2,00 equiv.). Una vez que se realiza la reaccion, se agrega solucion saturada de NaHCO³ y se separan las capas. La capa acuosa se extrajo con diclorometano. Las capas organicas se combinaron, se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na²SO⁴ y se concentraron a presion reducida.

Metodo D: Metodo general para favorecer la a-amina

[0375] A una solucion de cetona 13 (1,00 equiv.) en THF y M3uOH (4: 1, 0,02 M) se le anadieron amina (5,00 equiv.) y Ti(O/-Pr⁾⁴ (3,00 equiv.) y se agito a temperatura ambiente durante 15 horas (4 horas para Me²NH, MeNH² y NH³).

La mezcla de reaccion se enfrio a -20°C y se anadio NaBH⁴ (1,50 equiv.). Una vez que se realiza la reaccion, se

agrega solucion saturada de NaHCO³ y se separan las capas. La capa acuosa se extrajo con EtOAc. Las capas organicas se combinaron, se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na²SO⁴ y se concentraron a presion reducida.

(a-NR²: P-NR² = ~ 1,1:1 a ~ 3,7:1).

Metodo E: Metodo general para la formacion de metanosulfonamida

[0376] A una solucion de amina (1,00 equiv.) en diclorometano (0,013 M) se anadio trimetilamina (4,00 equiv.) y la mezcla de reaccion se enfrio a -^{2 0} °C. Se anadio anhndrido metanosulfonico (2,50 equiv.) como una solucion en diclorometano y se agito 30 min a la misma temperatura. Se anadio solucion de 2 N NaOH y se separaron las capas.

La capa acuosa se extrajo con diclorometano. Las capas organicas se combinaron, se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na²SO⁴ y se concentraron a presion reducida.

B-dimetilamina 14B y a-dimetilamina 14A

[0377]

[0378] La mezcla bruta se purifico secuencialmente por cromatograffa flash (gel de silice, eluyente: 20: 1 de solucion

de EtOAc:2M NH³ en MeOH) para proporcionar p-dimetilamina 14B (21,5 mg, 65%). ca. Se prepararon 0,6 mg de adimetilamina 14A a partir de 3 mg de 13 por HPLC (columna Eclipse XDB-C⁸ , 9,4 mm X 25 cm; gradiente = 0% ^

35% de MeCN (0,1% de acido formico): H²O (0,1% de acido formico) mas de 30 min)

[0379] B-dimetilamina 14B: 1H RMN (500 MHz, CaDa) Desplazamiento = 9,31 (s, 1 H), 8,61 (d, J = 5,4 Hz, 1 H), 7.43 (s, 1 H), 7,39 (d, J = ^{8 , 8} Hz, 1 H), 7,25 (d, J = 5,4 Hz, 1 H), 7,23 (d, J = ^{8 , 8} Hz, 1 H), 5,73 (br. s, 1 H), 5,18 (s, H), 2,74 (t, J = 10,0 Hz, 1 H), 2,63 (dd, J = 8,8, 11,2 Hz, 1 H), 2,48 - 2,28 (m, 2 H), 2,27 - 2,20 (m, 1 H), 2,19 - 2,03

(m, ⁶ H), 2,00 (br. s, ⁶ H), 1,95 - 1,84 (m, 2 H), 1,83 - 1,66 (m, 5 H), 1,41 (tt, J = 5,4, 13,2 Hz, 1 H), 0,45 (s, 3 H).

HRMS (ESI) (m/z) calculado para C³⁰H³⁷N²O [M+H]+: 441,2900, encontrado 441,2910.

[0380] a-dimetilamina 14A: 1H RMN (600 MHz, C6D6) Desplazamiento = 9,26 (s, 1 H), 8,56 (d, J = 5,9 Hz, 1 H),

7.44 - 7,39 (m, 1 H), 7,36 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 7,21 - 7,20 (m, 1 H), 7,20 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 5,68 - 5,65 (m, 1 H),

5.15 -5,11 (m, 1 H), 2,72 -2,66 (m, J = 10,0 Hz, 1 H), 2,59 (dd, J = 8,8, 11,2 Hz, 1 H), 2,34 (tt, J = 2,9, 12,1 Hz, 1 H),

2.16 (td, J = 3,2, 16,0 Hz, 1 H), 2,09 (s, ⁶ H), 2,13 - 1,92 (m, ⁸ H), 1,85 (ddd, J = 5,0, 9,0, 13,6 Hz, 1 H), 1,73 (dt, J =

5,3, 12,3 Hz, 1 H), 1,72 - 1,66 (m, 2 H), 1,60 - 1,57 (m, 1 H), 1,57 - 1,49 (m, 1 H), 1,20 (dq, J = 4,1, 12,3 Hz, 1 H),

0,40 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C³⁰H³⁷N²O [M+H]+: 441,2900, encontrado 441,2909.

B-morfolina 15B y a-morfolina 15A

[0381]

[0382] p-morfolina 15B: la mezcla cruda se purifico por cromatograffa flash (gel de silice, eluyente: 100% de EtOAc — 35: 1 — 20: 1 — 10:1 EtOAc: MeOH) para proporcionar p-morfolina 15B (21 mg, ^{6 6} %). 1H RMN (500 MHz, CDCla) Desplazamiento = 9,22 (s, 1 H), 8,48 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,79 (s, 1 H), 7,75 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 7,62 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,59 (dd, J = 1,0, ^{8 , 8} Hz, 1 H), 5,71 (s, 1 H), 5,24 (d, J = 2,9 Hz, 1 H), 3,73 (br. s, 4 H), 3,13 (t, J = 10,0 Hz, 1 H), 2,65 - 2,28 (m, 11 H), 2,23 - 2,11 (m, 3 H), 2,06 (d, J = 13,2 Hz, 1 H), 2,01 (dt, J = 4,4, 9,0 Hz, 1 H), 1,93 (dd, J = 4,9, 17,1 Hz, 1 H), 1,89 - 1,79 (m, 1 H), 1,75 - 1,53 (m, 4 H), 0,54 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C³²H³⁹N²O² [M+H]+: 483,3006, encontrado 483,3012.

P-N-Metilpiperazina 16B y a-N-Metilpiperazina 16A

[0383]

[0384] P-N-Metilpiperazina 16B: La mezcla bruta se purifico secuencialmente por cromatograffa flash (gel de silice, primera columna: eluyente: MeOH al 100% —^ 10:1 solucion de EtOAc:2M NH³ en MeOH/2a columna: eluyente: 20:1 solucion de EtOAc: 2M NH³ en MeOH) para proporcionar p-W-metilpiperazina 16B (20 mg, 55%). ¹ H RMN (600 MHz, CDCla) Desplazamiento = 9,22 (s, 1 H), 8,48 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,79 (s, 1 H), 7,75 (d, J = ^{8 , 8} Hz, 1 H), 7,62 (d, J = 5.9 Hz, 1 H), 7,59 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 5,70 (s, 1 H), 5,25 - 5,22 (m, 1 H), 3,13 (t, J = 9,7 Hz, 1 H), 2,53 (br. s., 1 H), 2,50 (dd, J = 8,8, 11,7 Hz, 1 H), 2,41 (t, J = 12,9 Hz, 1 H), 2,38 -2,33 (m, 3 H), 2,32 (br. s, 3 H), 2,22 -2,11 (m, 3 H), 2.10 - 1,95 (m, 3 H), 1,95 - 1,89 (m, 2 H), 1,84 (dq, J = 5,3, 11,7 Hz, 1 H), 1,79 - 1,50 (m, 11 H), 0,62 - 0,43 (m, 3 H).

HRMS (ESI) (m/z) calculado para C³³H⁴²N³O [M+H]+: 496,3322, encontrado 496,3337.

P-azetidina 18B y a-azetidina 18A

[0385]

[0386] p-Azetidina 18B: la mezcla bruta se purifico por TLC preparativa (eluyente: 1:1 EtOAc: MeOH) para proporcionar p-azetidina 18B (2,7 mg, 50%). ¹ H RMN (500MHz, CDCI³) Desplazamiento = 9,22 (s, 1 H), 8,48 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,79 (s, 1 H), 7,75 (d, J = ^{8 , 8} Hz, 1 H), 7,62 (d, J = 5,4 Hz, 1 H), 7,59 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 5,69 (s, 1 H), 5,22 (d, J = 2,4 Hz, 1 H), 3,20 - 3,05 (m, 5 H), 2,59 - 2,43 (m, 4 H), 2,39 - 2,28 (m, 2 H), 2,23 - 2,12 (m, 2 H), 2,07 -1,96 (m, 4 H), 1,92 (d d, J = 5,1, 17,3 Hz, 1 H), 1,89 - 1,79 (m, 3 H), 1,75 - 1,55 (m, 3 H), 1,40 (t, J = 13,2 Hz, 1 H), 0,54 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C³¹H³⁷N²O [M+H]+: 453,2906, encontrado 453,2916.

P-pirrolidina 19B y a-pirrolidina 19A

[0387]

[0388] P-pirrolidina 19B: la mezcla bruta se purifico por TLC preparativa (eluyente: 20:10:3 EtOAc: hexano: solucion de 2 M NH³ en MeOH) para proporcionar p-pirrolidina 19B (2,0 mg, 40%). 1H RMN (500 MHz, CDCh) Desplazamiento = 9,22 (s, 1 H), 8,48 (d, J = 5,4 Hz, 1 H), 7,79 (s, 1 H), 7,75 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 7,62 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,59 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 5,70 (br. s., 1 H), 5,22 (br. s., 1 H), 3,13 (t, J = 9,8 Hz, 1 H), 2,59 - 2,46 (m, ⁶ H), 2,44 (br. s., 1 H), 2,41 -2,28 (m, 3 H), 2,23 -2,12 (m, 2 H), 2,11 -2,00 (m, 2 H), 2,00 - 1,82 (m, 4 H), 1,79 - 1,65 (m, ⁶ H), 1,64 - 1,51 (m, 2 H), 0,54 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C³²H³⁹N²O [M+H]+: 467,3057. encontrado 467,3053.

P-dimetilamina 17,18-insaturada isoquinolina 23B y a dimetilamina 17,18-insaturada isoquinolina 23A [0389]

[0390] p-dimetilamina 17,18-insaturada isoquinolina 23B: la mezcla bruta se purifico secuencialmente por cromatograffa flash (gel de silice, eluyente: 20:1 solucion de EtOAc:2M NH³ en MeOH) para proporcionar pdimetilamina 17,18-insaturada isoquinolina 23B (6,5 mg, 74%). ¹ H RMN (500 MHz, CDCh) Desplazamiento = 9,24 (br. s., 1 H), 8,51 (d, J = 5,4 Hz, 1 H), 7,94 (s, 1 H), 7,84 - 7,76 (m, 2 H), 7,63 (d, J = 5,4 Hz, 1 H), 6,27 (br. s., 1 H), 5,97 (s, 1 H), 5,50 (dd, J = 2,4, 4,9 Hz, 1 H), 2,98 (d, J = 14,6 Hz, 1 H), 2,78 (dd, J = 6,8, 11,2 Hz, 1 H), 2,71 (d, J = 14,6 Hz, 1 H), 2,72 - 2,63 (m, 1 H), 2,61 (d, J = 5,4 Hz, 1 H), 2,59 - 2,54 (m, 2 H), 2,54 - 2,50 (m, 2 H), 2,50 - 2,42 (m, 2 H), 2,39 (ddd, J = 1,5, 11,0, 12,9 Hz, 1 H), 2,20 (ddd, J = 1,5, 9,5, 11,5 Hz, 1 H), 2,01 (ddd, J = 7,3, ⁸ ,⁸ , 12,7 Hz, 1 H), 1,79 (dt, J = 7,3, 11,2 Hz, 1 H), 1,18 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C³⁰H³⁵N²O [M+H]+: 439,2744, encontrado 439,2753.

P-monometilamina 24B y a-monometilamina 24A

[0391]

[0392] p-monometilamina 24B: la mezcla bruta se purifico por TLC preparativa (eluyente: 10:1 solucion de EtOAc:2M NH³ en MeOH) para proporcionar p-monometilamina 24B (aprox. 1,5 mg, 58%). ¹ H RMN (500 MHz, CDCI³) Desplazamiento = 9,22 (s, 1 H), 8,48 (d, J = 5,4 Hz, 1 H), 7,79 (s, 1 H), 7,75 (d, J = ^{8 , 8} Hz, 1 H), 7,62 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,59 (dd, J = 1,0, 8,3 Hz, 1 H), 5,72 (d, J = 1,0 Hz, 1 H), 5,24 (dd, J = 2,2, 5,1 Hz, 1 H), 3,13 (t, J = 10,0 Hz, 1 H), 3,03 - 2,98 (m, 1 H), 2,57 - 2,50 (m, 1 H), 2,51 (dd, J = 8,3, 11,7 Hz, 1 H), 2,44 (s, 3 H), 2,36 (d, J = 15,2 Hz, 1 H), 2,36 - 2,28 (m, 2 H), 2,26 - 2,13 (m, 2 H), 2,09 (dd, J = 3,7, 16,4 Hz, 1 H), 2,07 - 1,99 (m, 2 H), 1,98 - 1,92 (m, 1 H), 1,93 (dd, J = 5,9, 17,6 Hz, 1 H), 1,85 (dq, J = 4,9, 11,7 Hz, 1 H), 1,82 - 1,76 (m, 1 H), 1,76 - 1,58 (m, 3 H), 0,54 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C²⁹H³⁵N²O [M+H]+: 427,2744, encontrado 427,2740.

P-Deuterodimetilamina 26B y a-Deuterodimetilamina 26A

[0393]

[0394] p-Deuterodimetilamina 26B: se anadio trietilamina. La mezcla cruda se purifico secuencialmente por cromatograffa flash (gel de sflice, eluyente: 20:1 solucion de EtOAc: 2M NH³ en MeOH) para dar pdeuterodimetilamina 26B (4 mg, 62%). 1H RMN (500 MHz, CDCh) Desplazamiento = 9,24 (s, 1 H), 8,50 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,80 (s, 1 H), 7,77 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 7,64 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,60 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 5,74 (br. s., 1 H), 5,26 (br. s., 1 H), 3,1 5 (t, J = 10,0 Hz, 1 H), 2,51 (dd, J = 8,8, 11,2 Hz, 1 H), 2,50 - 2,42 (m, 1 H), 2,37 (d, J = 17,1 Hz, 1 H), 2,38 -2,26 (m, 2 H), 2,26 -2,09 (m, 4 H), 2,08 - 1,98 (m, 2 H), 1,95 (dd, J = 5,1, 17,3 Hz, 1 H), 1,87 (dq, J = 5,4, 12,2 Hz, 1 H), 1,80 - 1,68 (m, 3 H), 1,62 (br. s., 2 H), 0,63 - 0,50 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C³⁰H³¹D⁶N²O [M+H]+: 447,3277. encontrado 447,3281.

P-2-metoxietilmetilamina 27B y a-2-metoxietilmetilamina 27A

[0395]

[0396] B-2-metoxietilmetilamina 27B: la mezcla bruta se purifico por TLC preparativa (eluyente: 10:10:1 Hexanos: solucion de EtOAc:2M NH³ en MeOH) para proporcionar la p-2-metoxietilmetilamina 27B (aprox. 1,2mg, 20%). 1H RMN (500MHz, CD³OD) Desplazamiento = 9,21 (s, 1 H), 8,40 (d, J = 5,4 Hz, 1 H), 7,99 (s, 1 H), 7,90 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 7,81 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,77 (s, 1 H), 5,80 (s, 1 H), 5,35 - 5,27 (m, 1 H), 3,60 (t, J = 5,4 Hz, 2 H), 3,39 (s, 2 H), 3,24 (t, J = 10,0 Hz, 1 H), 3,15 - 2,88 (m, 2 H), 2,56 (br. s., 3 H), 2,51 (dd, J = 9,3, 10,7 Hz, 1 H), 2,48 - 2,39 (m, 3 H), 2,35 - 2,28 (m, 1 H), 2,25 - 2,09 (m, 4 H), 2,02 - 1,84 (m, 7 H), 1,76 (s, 2 H), 0,59 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C³²H⁴¹N²O² [M+H]+: 485,3163, encontrado 485,3170.

B-Bis-2-metoxietilamina 28B y a-Bis-2-metoxietilamina 28A

[0397]

[0398] □-Bis-2-metoxietilamina 28B: la mezcla bruta se purifico por TLC preparativa (eluyente: 10:1 diclorometano: MeOH) para dar la p-bis-2-metoxietilamina 28B (aprox. 1,1 mg, 19%). 1H RmN (500^m H^z , CD³OD) Desplazamiento = 9,21 (s, 1 H), 8,39 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,99 (s, 1 H), 7,90 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 7,81 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,77 (s, 1 H), 5,74 (s, 1 H), 5,29 - 5,24 (m, 1 H), 3,47 (t, J = 6,1 Hz, 4 H), 3,36 (s, 6 H), 3,24 (t, J = 10,5 Hz, 1 H), 3,06 - 2,93 (m, 1 H), 2,78 (d, J = 5,9 Hz, 4 H), 2,52 (dd, J = 9,0, 11,5 Hz, 1 H), 2,49 - 2,43 (m, 1 H), 2,44 (d, J = 17,6 Hz, 1 H), 2,40 -2,35 (m, 1 H), 2,35 -2,26 (m, 1 H), 2,24 -2,10 (m, 3 H), 2,07 - 1,94 (m, 3 H), 1,91 (dd, J = 5,4, 17,6 Hz, 1 H), 1,85 (d, J = 14,6 Hz, 1 H), 1,82 - 1,67 (m, 3 H), 0,59 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C³⁴H⁴⁵N²O³ [M+H]+: 529,3425, encontrado 529,3434.

B-2-fluoroetilmetilamina 29B y a-2-fluoroetilmetilamina 29A

[0399]

[0400] b-2-fluoroetilmetilamina 29B: la mezcla bruta se purifico por TLC preparativa (eluyente: 20:1 diclorometano: MeOH) para dar la b-2-fluoroetilmetilamina 29B (2,7 mg, 51%). 1H RMN (500 MHz, CDCh) Desplazamiento = 9,24 (s, 1 H), 8,50 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,80 (s, 1 H), 7,77 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 7,64 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,60 (dd, J = 1,0, 8,3 Hz, 1 H), 5,74 (br. s., 1 H), 5,26 (br. s., 1 H), 4,68 - 4,46 (m, 2 H), 3,15 (t, J = 9,8 Hz, 1 H), 2,99 - 2,69 (m, 3 H), 2,52 (dd, J = 8,8, 11,2 Hz, 1 H), 2,47 - 2,30 (m, 6 H), 2,29 -2,16 (m, 4 H), 2,16 -2,00 (m, 3 H), 2,01 - 1,92 (m, 1 H), 1,94 (dd, J = 5,1, 17,3 Hz, 1 H), 1,86 (dq, J = 5,4, 12,2 Hz, 1 H), 1,79 - 1,64 (m, 3 H), 0,56 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C³¹H³⁸ N²OF [M+H]+: 473.2963, encontrado 473.2971.

B-2.2-difluoroetilmetilamina 30B y a-2.2-difluoroetilmetilamina 30A

[0401]

[0402] b-2,2-difluoroetilmetilamina 30B: la mezcla bruta se purifico por TLC preparativa (eluyente: 1:1 hexanos: EtOAc) para proporcionar p-2,2-difluoroetilmetilamina 30B (aprox. 1,1 mg, 19%). 1H RMN (500 MHz, CDCI³) Desplazamiento = 9,28 (s, 1 H), 8,50 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,86 (s, 1 H), 7,83 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 7,75 (d, J = 5,4 Hz, 1 H), 7,69 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 6,15 - 5,83 (m, 1 H), 5,75 (s, 1 H), 5,27 (dd, J = 2,4, 5,4 Hz, 1 H), 3,17 (t, J = 10,0 Hz, 1 H), 2,91 (br. s., 2 H), 2,52 (dd, J = 8,8, 11,7 Hz, 1 H), 2,47 (br. s, 3 H), 2,45 - 2,30 (m, 4 H), 2,27 - 2,11 (m, ⁶ H), 2,11 - 1,99 (m, 2 H), 1,95 (dd, J = 5,1, 17,3 Hz, 1 H), 1,88 (dq, J = 6,3, 12,7 Hz, 1 H), 1,77 - 1,68 (m, 3 H), 0,56 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C³¹H³⁷N²OF² [M+H]+: 491,2868, encontrado 491,2879.

B-7-azabiciclo[2.2.1]heptano 31B y a-7-azabiciclo[2.2.1]heptano 31A

[0403]

[0404] b-7-azabiciclo[2.2.1]heptano 31B: la mezcla cruda se purifico por cromatograffa flash (gel de sflice, eluyente: 10:10:1 ^ 10:10:2 Hexanos: EtOAc: solucion de 2M NH³ en MeOH) para proporcionar p-7-azabiciclo[2.2.1]heptano 31B (3 mg, 50%). 1H RMN (500 MHz, CDCh) Desplazamiento = 9,24 (s, 1 H), 8,50 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,81 (s, 1 H), 7,77 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 7,64 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,61 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 5,71 (br. s., 1 H), 5,24 (br. s., 1 H), 3,43 (br. s., 2 H), 3,15 (t, J = 9,8 Hz, 1 H), 2,69 (br. s., 2 H), 2,52 (t, J = 9,8 Hz, 1 H), 2,46 (br. s., 1 H), 2,37 (d, J = 17,6 Hz, 1 H), 2,38 -2,29 (m, 1 H), 2,27 -2,13 (m, 3 H), 2,11 - 1,92 (m, ⁶ H), 1,87 (dq, J = 5,9, 12,7 Hz, 1 H), 1,86 - 1,79 (m, 1 H), 1,78 - 1,60 (m, ⁸ H), 1,55 (t, J = 13,2 Hz, 1 H), 0,56 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C³⁴H⁴¹N²O [M+H]+: 493,3213, encontrado 493,3224.

B-isopropilamina 32B y a-isopropilamina 32A

[0405]

[0406] b-isopropilamina 32B: la mezcla bruta se purifico por cromatograffa flash (gel de sflice, eluyente: 10:1 solucion de EtOAc:2M NH³ en MeOH) para dar la p-isopropilamina 32B (5 mg, 70%). 1H RMN (600 MHz, CDCI³) Desplazamiento = 9,22 (s, 1 H), 8,48 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,79 (s, 1 H), 7,75 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 7,62 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,59 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 5,71 (s, 1 H), 5,24 (d, J = 2,9 Hz, 1 H), 3,24 (br. s., 1 H), 3,13 (t, J = 9,7 Hz, 1 H), 2,90 (br. s., 1 H), 2,50 (dd, J = 8,5, 11,4 Hz, 2 H), 2,41 -2,26 (m, 3 H), 2,24 - 2,13 (m, 3 H), 2,09 (dd, J = 2,9, 15,3 Hz, 1 H), 2,06 - 1,98 (m, 2 H), 1,93 (dd, J = 5,3, 17,6 Hz, 1 H), 1,85 (dq, J = 5,3, 12,3 Hz, 1 H), 1,75 - 1,62 (m, 4 H), 1,07 (br. s., 6 H), 0,54 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C³¹H³⁹N²O [M+H]+: 455,3057. encontrado 493,3049. B-isopropilmetilamina 33B

[0407]

[0408] La mezcla cruda se purifico por TLC preparativa (eluyente: 20:10:3 Hexanos: solucion de EtOAc:2M NH³ en MeOH) para proporcionar p-isopropilmetilamina 33B (4 mg, 78%). 1H RMN (600MHz, CDCh) Desplazamiento = 9,22 (br. s., 1 H), 8,49 (d, J = 4,7 Hz, 1 H), 7,79 (s, 1 H), 7,75 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 7,62 (d, J = 5,3 Hz, 1 H), 7,59 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 5,70 (br. s., 1 H), 5,22 (br. s., 1 H), 3,22 (br. s., 1 H), 3,13 (t, J = 10,0 Hz, 1 H), 2,77 (br. s., 1 H), 2,50 (t, J = 8,2 Hz, 1 H), 2,43 (t, J = 12,9 Hz, 1 H), 2,36 (d, J = 17,6 Hz, 1 H), 2,35 - 2,28 (m, 2 H), 2,22 - 2,14 (m, 2 H), 2,17 (dt, J = 4,4, 9,0 Hz, 1 H), 2,11 (br. s., 3 H), 2,08 - 1,99 (m, 2 H), 1,98 -1,91 (m, 1 H), 1,93 (dd, J = 4,1, 17,0 Hz, 1 H), 1,85 (dq, J = 5,3, 12,3 Hz, 1 H), 1,69 (br. s., 2 H), 1,59 (br. s., 1 H), 1,56 (br. s., 1 H), 0,96 (br. s., 6 H), 0,54 (s, 3 H).

HRMS (ESI) (m/z) calculado para C³²H⁴¹N²O [M+H]+: 455,3057. encontrado 493,3049.

B-isopropiletilamina 34B

[0409]

[0410] La mezcla bruta se purifico por TLC preparativa (eluyente: 100% de MeOH) para proporcionar pisopropiletilamina 34B (aproximadamente 1,5 mg, 20%). 1H ^r Mⁿ (600 MHz, CD³OD) Desplazamiento = 9,19 (s, 1 H), 8,38 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,97 (s, 1 H), 7,88 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 7,79 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,74 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 5,76 (br. s., 1 H), 5,27 (br. s., 1 H), 3,26 -3,19 (m, 1 H), 2,91 -2,66 (m, 3 H), 2,50 (dd, J = 9,4, 11,2 Hz, 1 H), 2,48 - 2,36 (m, 3 H), 2,29 (t, J = 10,6 Hz, 1 H), 2,23 - 2,06 (m, 4 H), 2,00 - 1,86 (m, 5 H), 1,86 - 1,79 (m, 1 H), 1,79 - 1,66 (m, 2 H), 1,21 - 1,08 (m, 9 H), 0,57 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C³³H⁴³N²O [M+H]+: 483,3370, encontrado 483,3382.

B-(R)-3-fluoropirrolidina 35B y a-(R)-3-fluoropirrolidina 35A

[0411]

[0412] b-(R)-3-Fluoropirrolidina 35B: la mezcla bruta se purifico por TLC preparativa (eluyente: 47,5:47,5:5 solucion de EtOAc:Hexanos:2M NH³ en MeOH) para proporcionar p-(R)-3-fluoropirrolidina 35B (2,2 mg, 38%). 1H RMN (500MHz, CDCh) Desplazamiento = ⁸ 9,22 (s, 1 H), 8,49 (d, J = 5,4 Hz, 1 H), 7,79 (s, 1 H), 7,75 (d, J = ^{8 , 8} Hz, 1 H), 7,62 (d, J = 5,4 Hz, 1 H), 7,59 (d, J = ^{8 , 8} Hz, 1 H), 5,71 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 5,23 (m, 1 H), 5,11 (m, 1 H), 3,40 (m, 1 H), 3,13 (dd, J = 9,3, 9,3 Hz, 1 H), 2,88-2,96 (m, 2 H), 2,66-2,77 (m, 1 H), 2,48-2,58 (m, 3H), 2,29-2,45 (m, 3H), 2,12-2,23 (m, 3H), 1,99-2,09 (m, 5H), 1,83-1,97 (m, 2 H), 1,67-1,74 (m, 2 H), 1,59 (m, 1 H), 0,55 (s, 3H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C³²H³⁸FN²O [M+H]+: 485,2968, encontrado 485,2915.

B-(S)-3-Fluoropirrolidina 36B y a-(S)-3-Fluoropirrolidina 36A

[0413]

[0414] b-(S)-3-Fluoropirrolidina 36B: La mezcla cruda se purifico por TLC preparativa (eluyente: 47,5:47,5:5 Solucion de EtOAc:Hexanos:2M NH³ en MeOH) para proporcionar p-(S)-3-fluoropirrolidina 36^b (2,7 mg, 46%). 1H RMN (500 MHz, CD³OD) Desplazamiento = 9,21 - 9,18 (m, 1 H), 8,37 (d, J = 5,87 Hz, 1 H), 7,98 - 7,96 (m, 1 H), 7,88 (d, J = 8,80 Hz, 1 H), 7,80 - 7,77 (m, 1 H), 7,74 (dd, J = 8,56, 1,71 Hz, 1 H), 5,71 (d, J = 1,47 Hz, 1 H), 5,23 (m, 1 H), 5,22 - 5,07 (m, 2 H), 3,22 (t, J = 9,8 Hz, 1 H), 3,08 - 2,97 (m, 1 H), 2,90 (td, J = 8,19, 5,62 Hz, 1 H), 2,70 - 2,64 (m, 1 H), 2,62 - 2,58 (m, 1 H), 2,52 - 2,34 (m, ⁶ H), 2,33 - 2,24 (m, 1 H), 2,23 - 2,03 (m, 3 H), 2,03 - 1,85 (m, ⁶ H), 1,77 -1,67 (m, 2 H), 1,67 - 1,56 (m, 1 H), 0,57 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C³²H³⁸FN²O [M+H]+: 485,6553, encontrado 485,6551.

B-3.3-difluoropirrolidina 37B y a-3.3-difluoropirrolidina 37A

[0415]

[0416] B-3.3-Difluoropirrolidina 37B: la mezcla bruta se purifico por TLC preparativa (eluyente: 80:15:5 solucion de EtOAc:Hexanos:2M NH³ en MeOH) para proporcionar p-3,3-difluoropirrolidina 37B (2,9 mg, 40%). 1H RMN (500 MHz, CDCl³) Desplazamiento = ⁸ 9,22 (s, 1 H), 8,49 (d, J = 5,4 Hz, 1 H), 7,79 (s, 1 H), 7,75 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 7,62 (d, J = 5,4 Hz, 1 H), 7,59 (d, J = ^{8 , 8} Hz, 1 H), 5,72 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 5,25 (dd, J = 5,4 Hz, 2,0 Hz, 1 H), 3,13 (dd, J = 9,3 Hz, 9,3 Hz, 1 H), 2,86-3,03 (m, 2 H), 2,14 (dd, J = 6,9, 6,9 Hz, 2 H), 2,58 (m, 1 H), 2,50 (dd, J = 11,7, 8,3 Hz, 2 H), 2,13-2,44 (m, ⁶ H), 1,98-2,10 (m, 2 H), 1,90-1,96 (m, 1 H), 1,83-1,89 (m, 2 H), 1,66-1,74 (m, 2 H), 1,53-1,61 (m, 1 H), 0,55 (s, 3H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C³²H³⁷F²N²O [M+H]+: 503,2874 encontrado 503,2814.

[0417] a-3.3-Difluoropirrolidina 37A: La mezcla bruta se purifico por TLC preparativa (eluyente: 80:15:5 solucion de EtOAc:Hexanas:2M NH³ en MeOH) para proporcionar b-3,3-difluoropirrolidina 37A (2,9 mg a partir de 6,0 mg, 40%). 1H RMN (500MHz, CDCh) Desplazamiento = ⁸ 9,22 (s, 1 H), 8,49 (d, J = 5,4 Hz, 1 H), 7,79 (s, 1 H), 7,75 (d, J = ^{8 , 8} Hz, 1 H), 7,62 (d, J = 5,4 Hz, 1 H), 7,59 (d, J = ^{8 , 8} Hz, 1 H), 5,74 (s, 1 H), 5,28 (d, J = 2,4 Hz, 1 H), 3,15 (dd, J = 9,3 Hz, 9,3 Hz, 1 H), 3,01 (dt, J = 13,7, 2,4 Hz, 2 H), 2,83 (dd, J = ⁶ ,⁸ , ^{6 , 8} Hz, 2 H), 2,52 (dd, J = 11,2, 8,3 Hz, 2 H), 2,15-2,40 (m, ⁶ H), 2,02-2,07 (m, 3H), 1,79-1,97 (m, 3H), 1,72 (m, 3H), 1,61 (m, 3H), 0,54 (s, 3H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C³²H³⁷F²N²O [M+H]+: 503,2874 encontrado 503,2807.

B-2-oxa-6-azaspiror3.41octano 38B y a-2-oxa-6-azaspiror3.41octano 38A

[0418]

[0419] B-2-oxa-6-azaspiro[3.4]octano 38B: La mezcla cruda se purifico por TLC preparativa (eluyente: 47.5:47.5:5 Solucion de EtOAc:Hexanos:2M NH³ en MeOH) para proporcionar p-2-oxa-6-azaspiro[3.4]octano 38B (3,4 mg, 55%). 1H RMN (500MHz, CD³OD) Desplazamiento = 9,21 (s, 1 H), 8,39 (d, J = 5,4 Hz, 1 H), 7,99 (s, 1 H), 7,90 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 7,81 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,76 (dd, J = 1,7. 8,5 Hz, 1 H), 5,73 - 5,70 (m, 1 H), 5,28 - 5,23 (m, 1 H), 4,63 (d, J = 2,4 Hz, 4 H), 3,28 - 3,21 (m, 1 H), 2,90 (dd, J = 9,3, 49,8 Hz, 2 H), 2,62 (t, J = 7,3 Hz, 2 H), 2,54 - 2,40 (m, 5 H), 2,36 -2,27 (m, 2 H), 2,23 -2,16 (m, 1 H), 2,13 (s, 2 H), 2,10 -2,05 (m, 1 H), 2,02 - 1,88 (m, 6 H), 1,81 -1,66 (m, 2 H), 1,66 - 1,57 (m, 1 H), 0,58 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C³⁴H⁴¹N²O² [M+H]+: 509,7015, encontrado 509,7013.

B-ciclopropilamina 39B y a-ciclopropilamina 39A

[0420]

[0421] B-ciclopropilamina 39B: la mezcla bruta se purifico mediante TLC preparativa (eluyente: 47,5:47,5:5 Solucion de EtOAc:Hexanos:2M NH³ en MeOH) para dar la p-ciclopropilamina 39B (3,7 mg, 55%). 1H RMN (500MHz, CD³OD) Desplazamiento = 9,21 (s, 1 H), 8,39 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,99 (s, 1 H), 7,90 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 7,81 (d, J = 5,4 Hz, 1 H), 7,76 (dd, J = 1,7. 8,5 Hz, 1 H), 5,73 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 5,28 - 5,24 (m, 1 H), 3,24 (t, J = 20,0 Hz, 1 H), 3,18 - 3,12 (m, 1 H), 2,54 - 2,40 (m, 4 H), 2,36 - 2,27 (m, 2 H), 2,18 (s, 3 H), 2,05 - 2,00 (m, 2 H), 2,00 -1,95 (m, 2 H), 1,94 - 1,91 (m, 1 H), 1,91 - 1,84 (m, 2 H), 1,77 - 1,66 (m, 3) H), 0,58 (s, 3 H), 0,51 (d, J = 4,4 Hz, 2 H), 0,39 (dd, J = 2,2, 3,7 Hz, 2 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C³¹H³⁷N²O [M+H]+: 453,6383, encontrado 453,6381.

B-ciclopropilmetilamina 40B

[0422]

[0423] La mezcla cruda se purifico por TLC preparativa (eluyente: 47,5:47,5:5 Solucion de EtOAc:Hexanos:2M NH³ en MeOH) para proporcionar p-metilciclopropilamina 40B (1,1 mg, 85%). 1H RMN (500MHz, CD³OD) Desplazamiento = 9,21 (s, 1 H), 8,39 (d, J = 5,4 Hz, 1 H), 8,00 - 7,98 (m, 1 H), 7,90 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,81 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,76 (dd, J = 1,5, 9,3 Hz, 1 H), 5,78 - 5,74 (m, 1 H), 5,29 - 5,25 (m, 1 H), 3,26 - 3,24 (m, 1 H), 3,23 (t, J = 9,8 Hz, 1 H), 3,27 - 3,21 (m, 1 H), 2,88 (t, J = 1,0 Hz, 1 H), 2,56 - 2,49 (m, 1 H), 2,48 - 2,41 (m, 2 H), 2,37 (s, 3 H), 2,33 - 2,26 (m, 1 H), 2,23 - 2,10 (m, 3 H), 2,03 (d, J = 7,3 Hz, 2 H), 2,01 - 1,96 (m, 1 H), 1,96 - 1,88 (m, 2 H), 1,88 -1,82 (m, 1 H), 1,79 - 1,68 (m, 2 H), 0,59 (m, 5 H), 0,50 - 0,46 (m, 2 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C³²H³⁹N²O [M+H]+: 467,6649, encontrado 467,6645.

B-3-metilo-3-oxetanamina 41B y a-3-metilo-3-oxetanamina 41A

[0424]

[0425] B-3-metilo-3-oxetanamina 41B: la mezcla bruta se purifico por TLC preparativa (eluyente: 47,5:47,5:5 Solucion de EtOAc:Hexanos:2M NH³ en MeOH) para proporcionar p-3-metilo-3-oxetanamina 41B (4,7 mg, 81%). 1H RMN (500MHz, CD³OD) Desplazamiento = 9,21 (s, 1 H), 8,39 (d, J = 5,4 Hz, 1 H), 7,99 (s, 1 H), 7,90 (d, J = ^{8 , 8} Hz, 1 H), 7,81 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,78 - 7,74 (m, 1 H), 5,75 (d, J = 1,5 Hz, 1 H), 5,29 - 5,26 (m, 1 H), 4,61 (dd, J = 3,4, 5,9 Hz, 2 H), 4,36 (dd, J = 5,9, 8,3 Hz, 2 H), 3,27 - 3,21 (m, 1 H), 3,19 - 3,11 (m, 1 H), 2,50 (d, J = 8,3 Hz, 4 H), 2,29 (s, 2 H), 2,23 - 2,13 (m, 2 H), 2,02 - 1,95 (m, 2 H), 1,94 - 1,87 (m, 3 H), 1,80 - 1,67 (m, 4 H), 1,55 (br. s., 4 H), 0,59 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C³²H³⁹N²O² [M+H]+:483,6643, encontrado 483,6640.

B-N-Metilo-1-(3-metilo-3-oxetanilo) metanamina 42B y a-N-Metilo-1-(3-metilo-3-oxetanilo) metanamina 42A [0426]

[0427] □-N-Metilo-1-(3-metilo-3-oxetanilo) metanamina 42B: La mezcla cruda se purifico por TLC preparativa (eluyente: 47.5:47.5:5 Solucion de EtOAc:Hexanos:2M NH³ en MeOH) para proporcionar p-N-metilo-1-(3-metilo-3-oxetanilo)metanamina 42B (1,5 mg, 24%). 1H RMN (500MHz, CD³OD) Desplazamiento = 9,22 (s, 1 H), 8,39 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,99 (s, 1 H), 7,90 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 7,81 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,76 (dd, J = 1,7. 8,5 Hz, 1 H), 5,75 -5,72 (m, 1 H), 5,31 - 5,27 (m, 1 H), 4,57 - 4,51 (m, 2 H), 4,32 (dd, J = 1,5, 5,9 Hz, 2 H), 3,28 - 3,22 (m, 1 H), 2,69 (s, 2 H), 2,57 - 2,31 (m, 5 H), 2,30 - 2,15 (m, 4 H), 2,04 - 1,86 (m, 5 H), 1,82 (t, J = 24,9 Hz, 1 H), 1,77 - 1,69 (m, 1 H), 1,68 - 1,57 (m, 2 H), 1,39 (d, J = 2,9 Hz, ⁶ H), 0,58 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C³⁴H⁴³N²O² [M+H]+: 511,7174, encontrado 511,7173.

B-f-butilamina 43B y a-f-butilamina 43A

[0428]

[0429] -f-butilamina 43B: la mezcla bruta se purifico por cromatograffa flash (gel de silice, eluyente:50:1 de EtOAc:trietilamina) para dar p-f-butilamina 43B (3,4 mg, 60%). 1H RMN (500 MHz, CDCI³) Desplazamiento = 9,22 (s, 1 H), 8,49 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,79 (s, 1 H), 7,75 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 7,62 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,59 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 5,75 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 5,29 (m, 1 H), 3,14 (dd, J = 10.8, 10,8 Hz, 1 H), 2,52 (dd, J = 11.7. ^{8 , 8} Hz, 1 H), 2,32­ 2,38 (m, 2 H), 2,13-2,26 (m, 5H), 2,01-2,08 (m, 2 H), 1,94 (dd, J = 17,6, 5,4 Hz, 1 H), 1,84-1,87 (m, 3H), 1,62-1,74 (m, 3H), 1,25 (br s, 9H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C³²H⁴¹N²O [M+H]+: 469,3219, encontrado 469,3265. B-aziridina 78B y a-aziridina 78A

[0430]

[0431] A una solucion de cetona 13 ^{( 6} mg, 0,0146 mmol) en metanol (0,5 ml) se le anadio hidrocloruro de 2-cloroetilamina (5,1 mg, 0,0437 mmol), seguido de trietilamina (0,006 ml, 0,0437 mmol). Esta mezcla se puso a temperatura ambiente durante 15 minutos. Se anadio acido acetico glacial (0,0025 ml, 0,0437 mmol) y esta mezcla se agito a temperatura ambiente durante 20 minutos. Esta mezcla se enfrio a 0°C y se anadio cianoborohidruro de sodio (3,2 mg, 0,0510 mml). La reaccion se dejo calentar a temperatura ambiente durante 16 horas y luego se detuvo con una solucion saturada de cloruro de amonio (5 ml). Esta mezcla se extrajo con acetato de etilo (3 x ⁸ ml). Las fracciones organicas combinadas se secaron sobre magnesio anhidro. Sulfato de io, filtrado y concentrado. El producto en bruto se purifico mediante cromatograffa en gel de sflice (acetato de etilo, trietilamina al ² % como eluyente) para proporcionar la p-aziridina 78B deseada (4,5 mg, 72% de rendimiento).

[0432] 1H RMN (500 MHz, CDCh) ⁸ = 9,22 (s, 1 H), 8,48 (d, J = 5,87 Hz, 1 H), 7,79 (s, 1 H), 7,75 (d, J = 8,80 Hz, 1 H), 7,63 (d, J = 5,38 Hz, 1 H), 7,59 (d, J = 8,80 Hz, 1 H), 5,74 (d, J = 1,96 Hz, 1 H), 5,25 (m, 1 H), 3,34 (m, 2 H), 3,14 (dd, J = 10,27. 10,27 Hz, 1 H), 2,75 (m, 3H), 2,51 (dd, J = 11.25, 8,31, 1 H), 2,44 (m, 1 H), 2,29-2,37 (m, 3H), 2,12­ 2,27 (m, 3H), 1,81-2,08 (m, 3H), 1,54-1,74 (m, 4H), 1,15 (m, 1 H), 1,05 (m, 1 H), 0,55 (s, 3H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C³⁰H³⁵N²O [M+H]+: 439,2749 encontrado 439,2721.

B-hidroxiprolina 65B y a-hidroxiprolina 65A

[0433]

[0434] La cetona 13 se hizo reaccionar con ester metilico de hidroxiprolina en la condicion "Metodo B". La mezcla cruda se disolvio en THF:MeOH:1 M LiOH en H²O = 3:3:1 y se agito a 55°C durante 1,5 horas. La mezcla bruta se concentro aproximadamente y se aplico un tampon de acetato de sodio de pH 3.7. seguido de la extraccion con cloroformo tres veces. La mezcla bruta se purifico mediante TLC propativa (eluyente: 5:1 CHCl³ :MeOH) para proporcionar p-hidroxiprolina 65B (3,7 mg, 58% en 2 etapas).

[0435] 1H RMN (500 MHz, CDCla) Desplazamiento = 9,22 (br. s., 1 H), 8,47 (br. s., 1 H), 7,77 (br. s., 1 H), 7,75 (d, J) = 8,2 Hz, 1 H), 7,63 (br. s., 1 H), 7,57 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 5,77 (s, 1 H), 5,30 (br. s., 1 H), 4,47 (br. s., 1 H), 4,21 -4,08 (m, 1 H), 4,01 - 3,90 (m, 0 H), 3,55 (br. s., 1 H), 3,19 -3,11 (m, 1 H), 3,12 (t, J = 8,8 Hz, 1 H), 2,51 -2,44 (m, J = 10,6, 10,6 Hz, 1 H), 2,44 -2,37 (m, 2 H), 2,35 (d, J = 17,6 Hz, 2 H), 2,31 -2,14 (m, 6 H), 2,11 (dd, J = 6,2, 13,2 Hz, 1 H), 2,06 - 1,96 (m, 2 H), 1,92 (dd, J = 4,7. 17,6 Hz, 1 H), 1,87 - 1,68 (m, 3 H), 0,53 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C³³H³⁹N²O⁴ [M+H]+: 527,2904, encontrado 527,2921.

a-dimetilamina 14A y B-dimetilamina 14B

[0436]

[0437] La mezcla bruta se purifico secuencialmente por cromatograffa flash (gel de silice, eluyente: 20:1 de solucion de EtOAc:2M NH³ en MeOH) para proporcionar a-dimetilamina 14A (2,2 mg, 68%). 1H R^m N (600 MHz, C6D6) Desplazamiento = 9,26 (s, 1 H), 8,56 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,44 - 7,39 (m, 1 H), 7,36 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 7,21 - 7,20 (m, 1 H), 7,20 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 5,68 - 5,65 (m, 1 H), 5,15 - 5,11 (m, 1 H), 2,72 - 2,66 (m, J = 10,0 Hz, 1 H), 2,59 (dd, J = 8,8, 11,2 Hz, 1 H), 2,34 (tt, J = 2,9, 12,1 Hz, 1 H), 2,16 (td, J = 3,2, 16,0 Hz, 1 H), 2,09 (s, 6 H), 2,13 - 1,92 (m, 8 H), 1,85 (ddd, J = 5,0, 9,0, 13,6 Hz, 1 H), 1,73 (dt, J = 5,3, 12,3 Hz, 1 H), 1,72 - 1,66 (m, 2 H), 1,60 - 1,57 (m, 1 H), 1,57 - 1,49 (m, 1 H), 1,20 (dq, J = 4,1, 12,3 Hz, 1 H), 0,40 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C³⁰H³⁷N²O [M+H]+:441,2900, encontrado 441,2909.

a-monometilamina 24A y B-monometilamina 24B

[0438]

[0439] La mezcla bruta se purifico por TLC preparativa (gel de silice, eluyente: 10:1: solucion de EtOAc 2M NH³ en MeOH) para proporcionar a-monometilamina 24A (aprox. 1,2 mg, 37%). 1H RMN (500 MHz, CDCh) Desplazamiento = 9,24 (s, 1 H), 8,50 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,81 (s, 1 H), 7,77 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 7,64 (d, J = 5,4 Hz, 1 H), 7,61 (dd, J = 1,0, 8,8 Hz, 1 H), 5,76 (s, 1 H), 5,29 (d, J = 2,4 Hz, 1 H), 3,16 (t, J = 10,0 Hz, 1 H), 2,61 - 2,50 (m, 3 H), 2,49 (s, 3 H), 2,43 - 2,30 (m, 3 H), 2,30 -2,15 (m, 4 H), 2,13 - 1,99 (m, 2 H), 1,95 (dd, J = 5,4, 17,6 Hz, 1 H), 1,88 (dq, J = 4,9, 11,7 Hz, 1 H), 1,79 - 1,60 (m, 3) H), 1,19 (dq, J = 4,4, 12,7 Hz, 1 H), 0,56 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C²⁹H³⁵N²O [M+H]+: 427,2744, encontrado 427,2759.

a-Amina primaria 62A y B-Amina primaria 62B

[0440]

[0441] La mezcla bruta se purifico por TLC preparativa (gel de silice, eluyente:25:1 solucion de EtOAc:2M NH³ en MeOH) para proporcionar a-primariaamina 62A (3,7 mg, 38%) y p-primariaamina 62B (2,5 mg, 26%).

[0442] a-primaryamina 62A: 1H RMN (500MHz, CDCh) Desplazamiento = 9,22 (s, 1 H), 8,48 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7.79 (s, 1 H), 7,75 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 7,62 (d, J = 5,3 Hz, 1 H), 7,59 (dd, J = 1,2, 8,2 Hz, 1 H), 5,74 (s, 1 H), 5,27 (d, J = 2,9 Hz, 1 H), 3,14 (t, J = 10,0 Hz, 1 H), 2,85 (tt, J = 3,2, 11,7 Hz, 1 H), 2,51 (dd, J = 8,5, 11,4 Hz, 1 H), 2,40 -2,28 (m, 3 H), 2,27 - 2,12 (m, 4 H), 2,10 - 1,96 (m, 3 H), 1,93 (dd, J = 5,3, 17,6 Hz, 1 H), 1,92 - 1,81 (m, 2 H), 1,76 - 1,62 (m, 2 H), 1,22 (dtd, J = 4,1, 11,7. 13,5 Hz, 1 H), 0,53 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C²⁸H³³N²O [M+H]+:413,2587. encontrado 413,2590.

[0443] B-primariaamina 62B: 1H RMN (500 MHz, CDCh) Desplazamiento = 9,22 (s, 1 H), 8,48 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7.79 (s, 1 H), 7,75 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 7,62 (d, J = 5,3 Hz, 1 H), 7,59 (dd, J = 1,5, 8,5 Hz, 1 H), 5,73 (d, J = 1,2 Hz, 1 H), 5,25 (d, J = 2,9 Hz, 1 H), 3,47 (td, J = 3,7. 7,9 Hz, 1 H), 3,13 (t, J = 10,0 Hz, 1 H), 2,58 (dt, J = 5,3, 14,1 Hz, 1 H), 2,51 (dd, J = 8,5, 11,4 Hz, 1 H), 2,39 - 2,21 (m, 5 H), 2,17 (dq, J = 5,3, 9,4 Hz, 1 H), 2,13 (ddd, J = 2,3, 4,7. 15,8 Hz, 1 H), 2,10 - 1,99 (m, 2 H), 1,93 (dd, J = 5,3, 17,0 Hz, 1 H), 1,86 (dq, J = 5,3, 12,3 Hz, 1 H), 1,82 (ddd, J = 1,8, 4,1, 13,5 Hz, 1 H), 1,78 - 1,66 (m, 3 H), 0,54 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C²⁸H³³N²O [M+H]+: 413,2587. encontrado 413,2599.

a-Morfolina 15A y B-morfolina 15B

[0444]

[0445] La mezcla bruta se purifico por TLC preparativa (gel de s l^ice, eluyente: 40:1 EtOAc:MeOH) para proporcionar a-morfolina 15A (aproximadamente 1,5 mg, 38%). ¹ H RMN (600 MHz, CDCh) Desplazamiento = 9,23 (s, 1 H), 8,49 (d, J = 5,4 Hz, 1 H), 7,80 (s, 1 H), 7,76 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 7,63 (d, J = 5,4 Hz, 1 H), 7,60 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 5,74 (s, 1 H), 5,29 (d, J = 2,9 Hz, 1 H), 3,73 (br. s., 4 H), 3,15 (t, J = 10,0 Hz, 1 H), 2,60 (br. s., 4 H), 2,52 (dd, J = 8,5, 11,5 Hz, 2 H), 2,46 -2,29 (m, 3 H), 2,29 - 2,13 (m, 4 H), 2,12 - 1,99 (m, 2 H), 1,94 (dd, J = 5,1, 17,3 Hz, 1 H), 1,94 - 1,81 (m, 3) H), 1,73 (td, J = 8,2, 12,3 Hz, 1 H), 1,70 - 1,63 (m, 1 H), 1,38 (dq, J = 4,4, 12,2 Hz, 1 H), 0,54 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C³²H³⁹N²O² [M+H]+:483,3006, encontrado 483,3000.

a-pirrolidina 19A y B-pirrolidina 19B

[0446]

[0447] La mezcla bruta se purifico por TLC preparativa (gel de silice, eluyente: 20:10:3 Solucion de EtOAc:Hexanos:2M NH³ en MeOH) para proporcionar a-pirrolidina 19A (2,5 mg, 55%). ¹ H RMN (500 MHz, CDCh) Desplazamiento = 9,22 (s, 1 H), 8,48 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,79 (s, 1 H), 7,75 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 7,62 (d, J = 5,3 Hz, 1 H), 7,59 (d, J = ^{8 , 8} Hz, 1 H), 5,72 (s, 1 H), 5,27 (d, J = 2,9 Hz, 1 H), 3,14 (t, J = 10,0 Hz, 1 H), 2,63 (br. s., 4 H), 2,52 (dd, J = 8,8, 11,2 Hz, 1 H), 2,42 -2,29 (m, 3 H), 2,28 -2,15 (m, 5 H), 2,12 (d, J = 12,3 Hz, 1 H), 2,10 -2,00 (m, 2 H), 1,93 (dd, J = 5,3, 17,0 Hz, 1 H), 1,90- 1,83 (m, 2 H), 1,80 (br. s., 4 H), 1,72 (td, J = 8,8, 12,9 Hz, 1 H), 1,63 (br. s., 1 H), 1,37 (dq, J = 3,5, 11,7 Hz, 1 H), 0,53 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C³²H³⁹N²O [M+H]+:467,3057. encontrado 467,3064.

a-azetidina 18A y B-azetidina 18B

[0448]

[0449] La mezcla bruta se purifico por TLC preparativa (gel de silice, eluyente:EtOAc:MeOH 1:1) para proporcionar a-azetidina 18A (aproximadamente 1,5 mg, 38%). ¹ H RMN (500 MHz, cDch) Desplazamiento = 9,24 (s, 1 H), 8,50 (d, J = 5,4 Hz, 1 H), 7,80 (s, 1 H), 7,77 (d, J = ^{8 , 8} Hz, 1 H), 7,64 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,60 (d, J = ^{8 , 8} Hz, 1 H), 5,74 (s, 1 H), 5,28 (br. s., 1 H), 3,24 (br. s., 4 H), 3,16 (t, J = 9,8 Hz, 1 H), 2,54 (dd, J = 8,8, 11,2 Hz, 1 H), 2,42 - 2,30 (m, 3 H), 2,30 - 2,13 (m, 5 H), 2,12 - 2,00 (m, 2 H), 1,95 (dd, J = 5,4, 18,1 Hz, 1 H), 1,93 - 1,78 (m, 3 H), 1,74 (td, J = 8,3, 12,2 Hz, 1 H), 1,67 - 1,54 (m, 3 H), 1,11 (q, J = 12,2 Hz, 1 H), 0,55 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C³¹H³⁷N²O [M+H]+: 453,2906, encontrado 453,2900.

a-f-butilamina 43A y B-f-butilamina 43B

[0450]

[0451] La mezcla cruda se purifico por cromatograffa flash (gel de silice, eluyente: 10:1 CHCl3:/'-PrOH) para proporcionar a-f-butilamina 43A (2,4 mg, 42%) y p-f-butilamina 43b (1,6 mg, 28%).

[0452] □-f-butilamina 43A: 1H RMN (500 MHz, CDCh) Desplazamiento = 9,22 (br. s., 1 H), 8,48 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,78 (s, 1 H), 7,75 (d, J = ^{8 , 8} Hz, 1 H), 7,62 (d, J = 5,3 Hz, 1 H), 7,58 (dd, J = 1,2, 8,2 Hz, 1 H), 5,73 (s, 1 H), 5,28 (d, J = 2,3 Hz, 1 H), 3,14 (t, J = 9,7 Hz, 1 H), 2,49 (dd, J = 8,8, 11,2 Hz, 1 H), 2,46 -2,40 (m, 1 H), 2,39 -2,29 (m, 3 H), 2,28 -2,12 (m, 5 H), 2,08 - 1,99 (m, 1 H), 1,93 (dd, J = 5,3, 17,0 Hz, 1 H), 1,83 (dq, J = 5,0, 12,2 Hz, 2 H), 1,76 -1,60 (m, 3 H), 1,55 (br. s., 9 H), 1,26 - 1,18 (m, 1 H), 0,54 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C³²H⁴¹N²O [M+H]+:469,3213, encontrado 469,3223.

[0453] b-f-butilamina 43B: 1H RMN (500MHz, CDCh) Desplazamiento = 9,22 (s, 1 H), 8,48 (d, J = 5,3 Hz, 1 H), 7,78 (s, 1 H), 7,75 (d, J = ^{8 , 8} Hz, 1 H), 7,62 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,59 (d, J = 9,4 Hz, 1 H), 5,73 (br. s., 1 H), 5,25 (br. s., 1 H), 3,38 - 3,23 (m, 1 H), 3,13 (t, J = 10,0 Hz, 1 H), 2,57 - 2,48 (m, 1 H), 2,49 (dd, J = 8,5, 10,9 Hz, 1 H), 2,40 - 2,27 (m, 2 H), 2,25 - 2,08 (m, 4 H), 2,07 - 1,98 (m, 2 H), 1,93 (dd, J = 5,3, 17,6 Hz, 2 H), 1,84 (dq, J = 5,3, 12,3 Hz, 1 H), 1,76 - 1,66 (m, 2 H), 1,65 - 1,47 (m, 3 H), 1,42 - 0,94 (br. s., 9 H), 0,54 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C³²H⁴¹N²O [M+H]+: 469,3213, encontrado 469,3225.

a-Hidroxiacetidina 70A y B-hidroxiacetidina 70B

[0454]

[0455] La mezcla bruta se purifico por TLC preparativa (gel de silice, eluyente:2:3 EtOAc:MeOH) para proporcionar a-hidroxiazididina 70A (1,2 mg, 30%). 1H RMN (500 MHz, CDCh) Desplazamiento = 9,24 (s, 1 H), 8,50 (d, J = 5,4 Hz, 1 H), 7,80 (s, 1 H), 7,77 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 7,64 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,60 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 5,77 (s, 1 H), 5,32 (d, J = 2,4 Hz, 1 H), 4,66 - 4,55 (m, 1 H), 3,94 (br. s., 2 H), 3,34 (br. s., 2 H), 3,16 (t, J = 9,8 Hz, 1 H), 2,53 (dd, J = 8,5, 11,5 Hz, 1 H), 2,41 (dd, J = 15,6, 28,3 Hz, 2 H), 2,34 (dt, J = 4,9, 11,2 Hz, 1 H), 2,28 (t, J = 11,2 Hz, 1 H), 2,25 -2,14 (m, 3 H), 2,10 - 1,98 (m, 2 H), 1,95 (dd, J = 5,4, 17,6 Hz, 1 H), 1,96 - 1,89 (m, 1 H), 1,86 (dd, J = 5,4, 12,2 Hz, 1 H), 1,84 - 1,76 (m, 2 H), 1,74 (td, J = 8,4, 12,4 Hz, 1 H), 1,65 (dt, J = 7,8, 10,5 Hz, 1 H), 1,40 - 1,27 (m, 1 H), 0,55 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C³¹H³⁷N²O² [M+H]+:469,2850, encontrado 469,2872.

a-Hidroximetilazetidina 69A y B-hidroximetilazetidina 69B

[0456]

[0457] La mezcla bruta se purifico por TLC preparativa (gel de silice, eluyente:EtOAc:MeOH 1:1) para proporcionar a-hidroximetilazetidina 69A (2,3 mg, 53%). ¹ H RMN (600 MHz, CDCh) Desplazamiento = 9,23 (s, 1 H), 8,49 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,80 (s, 1 H), 7,76 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 7,63 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,59 (d, J = ^{8 , 8} Hz, 1 H), 5,76 (s, 1 H), 5,30 (d, J = 2,9 Hz, 1 H), 3,65 -3,35 (m, 4 H), 3,15 (t, J = 10,0 Hz, 1 H), 2,52 (dd, J = 8,5, 11,4 Hz, 1 H), 2,40 (dd, J = 16.4, 25,8 Hz, 2 H), 2,33 (dt, J = 4,1, 11,7 Hz, 1 H), 2,26 (t, J = 11,4 Hz, 1 H), 2,24 (m, 3 H), 2,09 - 2,00 (m, 1 H), 1,98 (br s., 1 H), 1,94 (dd, J = 5,0, 17,3 Hz, 1 H), 1,92 - 1,77 (m, 4 H), 1,73 (td, J = 8,2, 12,9 Hz, 1 H), 1,67 - 1,59 (m, 1 H), 1,58 - 1,50 (br. s., 3 H), 1,39 - 1,28 (m, 1 H), 0,58 - 0,51 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C³²H³⁹N²O² [M+H]+:483,3006, encontrado 483,3000.

a-Aminoetilsulfonamida 71A y B-aminoetilsulfonamida 71B

[0458]

[0459] La mezcla bruta se purifico por TLC preparativa (gel de silice, eluyente:100% de EtOAc) para proporcionar paminoetilsulfonamida 71B (0,7 mg, 15%) y a-aminoetilsulfonamida 71A (1,1 mg, 24%).

[0460] B-aminoetilsulfonamida 71B: 1H RMN (500 MHz, CD³OD) Desplazamiento = 9,21 - 9,17 (m, 1 H), 8,37 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,97 (s, 1 H), 7,88 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 7,79 (d, J = 5,4 Hz, 1 H), 7,74 (dd, J = 1,5, ^{8 , 8} Hz, 1 H), 5,74 -5,69 (m, 1 H), 5,28 - 5,22 (m, 1 H), 3,26 - 3,18 (m, J = 9,8 Hz, 1 H), 3,14 - 3,00 (m, 4 H), 2,59 - 2,38 (m, 4 H), 2,37 -2,26 (m, 2 H), 2,23 - 2,06 (m, 3 H), 2,03 - 1,86 (m, 5 H), 1,85 - 1,76 (m, 1 H), 1,76 - 1,59 (m, 3 H), 0,57 (s, 3 H)).

HRMS (ESI) (m/z) calculado para C³⁰H³⁸N³O³S [M+H]+: 520,2628, encontrado 520,2640.

[0461] a-aminoetilsulfonamida 71A: 1H RMN (500 MHz, CD³OD) Desplazamiento = 9,19 (s, 1 H), 8,37 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,97 (s, 1 H), 7,88 (d, J = ^{8 , 8} Hz, 1 H), 7,79 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,74 (dd, J = 1,7. ^{8 , 6} Hz, 1 H), 5,77 - 5,71 (m, 1 H), 5,30 - 5,24 (m, 1 H), 3,29 - 3,24 (m, 2 H), 3,23 (dd, J = 9,0, 11,0 Hz, 1 H), 3,13 (dt, J = 2,7. 6,7 Hz, 2 H), 2,73 (tt, J = 3,1, 12,0 Hz, 1 H), 2,50 (dd, J = 8,6, 11,5 Hz, 1 H), 2,47 -2,38 (m, 2 H), 2,39 -2,34 (m, 1 H), 2,32 (d, J = 11.2 Hz, 1 H), 2,30 - 2,22 (m, 2 H), 2,17 (dtd, J = 5,9, 9,3, 14,7 Hz, 2 H), 2,10 - 2,03 (m, 1 H), 2,01 (s, 1 H), 2,00 -1,92 (m, 1 H), 1,90 (dd, J = 6,4, 17,1 Hz, 1 H), 1,72 (td, J = 8,3, 12,3 Hz, 1 H), 1,68 - 1,60 (m, 2 H), 1,18 (dq, J = 4,4, 12.2 Hz, 1 H), 0,56 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C³⁰H³⁸N³O³S [M+H]+: 520,2628, encontrado 520,2643. a-Hidroxiaminometiloxetano 72A y B-hidroxiaminometiloxetano 72B

[0462]

[0463] La mezcla bruta se purifico por TLC preparativa (gel de silice, eluyente:100% de EtOAc) para proporcionar ahidroxiaminometilxietano 72a (1,5 mg, 34%). 1H RMN (500 MHz, CD³OD) Desplazamiento = 9,19 (s, 1 H), 8,38 (d, J = 5,4 Hz, 1 H), 7,97 (s, 1 H), 7,88 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 7,79 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,74 (dd, J = 1,5, 8,8 Hz, 1 H), 5,84 a 5,78 (m, 1 H), 5,35 a 5,30 (m, 1 H), 4,64 (d, J = 7,3 Hz, 2 H), 4,57 (dd, J = 3,7, 7,1 Hz, 2 H), 3,48 - 3,40 (m, 2 H), 3,24 (dd, J = 9,0, 11,0 Hz, 2 H), 2,54 -2,48 (m, J = 8,8 Hz, 1 H), 2,48 -2,40 (m, 3 H), 2,40 -2,24 (m, 4 H), 2,24 -2,13 (m, 3 H), 2,01 - 1,85 (m, 4 H), 1,80 - 1,64 (m, 2 H), 1,46 (dq, J = 4,9, 12,2 Hz, 1 H), 0,57 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C³²H³⁹N²O³ [M+H]+: 499,2955, encontrado 499,2933.

B-PEGamina 75B y a-PEGamina 75A

[0464]

[0465] b-PEGamina 75B: la mezcla bruta se purifico por TLC preparativa (gel de silice, eluyente:5:5:1 EtOAc:diclorometano:soluci6n de 2M NH³ en MeOH) para dar p-PEGamina 75B (1,0 mg, 18%). %). 1H RMN (500 MHz, CDCl³) Desplazamiento = 9,24 (s, 1 H), 8,50 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,81 (s, 1 H), 7,77 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 7,64 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,61 (dd, J = 1,7. 8,5 Hz, 1 H), 5,72 (d, J = 1,5 Hz, 2 H), 5,25 (dd, J = 2,2, 5,1 Hz, 1 H), 3,71 -3.64 (m, 6 H), 3,62 (t, J = 5,4 Hz, 2 H), 3,58 (dd, J = 3,7. 5,6 Hz, 2 H), 3,41 (s, 3 H), 3,19 - 3,12 (m, J = 10,7 Hz, 1 H), 3,11 (t, J = 3,9 Hz, 1 H), 2,79 (t, J = 5,4 Hz, 2 H), 2,56 (t, J = 16,1 Hz, 1 H), 2,52 (dd, J = 8,3, 11,2 Hz, 1 H), 2,42 -2,29 (m, 3 H), 2,27 -2,13 (m, 2 H), 2,12 -2,01 (m, 2 H), 2,02 (dd, J = 3,7. 13,9 Hz, 1 H), 1,95 (br. s., 2 H), 1,86 (dq, J = 5,4, 12,2 Hz, 1 H), 1,80 - 1,73 (m, 1 H), 1,71 (dd, J = 3,2, 11,5 Hz, 1 H), 1,68 - 1,58 (m, 2 H), 0,56 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C³⁵H⁴⁷N²O⁴ [M+H]+: 559,3530, encontrado 559,3545.

[0466] a-PEGamina 75A: la mezcla bruta se purifico por TLC preparativa (gel de s l^ice, eluyente:100:5:1 EtOAc:MeOH:trietilamina) para proporcionar □-PEGamina 75A (1,1 mg, 20%). 1H RMN (500 MHz, CDCh) Desplazamiento = 9,24 (s, 1 H), 8,50 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,81 (s, 1 H), 7,77 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 7,64 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,61 (dd, J = 1,5, 8,8 Hz, 1 H), 5,75 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 5,28 (dd, J = 2,2, 5,1 Hz, 1 H), 3,70 - 3,65 (m, 7 H), 3.64 (t, J = 5,4 Hz, 2 H), 3,61 - 3,55 (m, 2 H), 3,41 (s, 3 H), 3,16 (dd, J = 9,0, 10,5 Hz, 1 H), 2,87 (t, J = 5,1 Hz, 2 H), 2,67 (t, J = 11,5 Hz, 1 H), 2,54 (dd, J = 8,3, 11,7 Hz, 1 H), 2,38 (d, J = 16,1 Hz, 3 H), 2,24 (d, J = 12,2 Hz, 2 H), 2,22 -2,14 (m, 2 H), 2,11 -2,02 (m, 2 H), 1,95 (dd, J = 5,4, 16,6 Hz, 1 H), 1,88 (dq, J = 5,4, 12,2 Hz, 1 H), 1,78 - 1,69 (m, 2 H), 1,68 - 1,62 (m, 1 H), 1,27 - 1,19 (m, 1 H), 0,55 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C³⁵H⁴⁷N²O⁴ [M+H]+:559,3530, encontrado 559,3542.

a-metilsulfonamida 73A

[0467]

[0468] La mezcla bruta se purifico por TLC preparativa (gel de s l^ice, eluyente:MeOH:diclorometano 40:1) para proporcionar a-metilsulfonamida 73A (2,0 mg, 82%). ¹ H RMN (500 MHz, CDCh) Desplazamiento = 9,24 (br. s., 1 H), 8,51 (d, J = 4,9 Hz, 1 H), 7,80 (s, 1 H), 7,77 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 7,64 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,60 (dd, J = 1,5, 8,3 Hz, 1 H), 5,78 (d, J = 1,5 Hz, 1 H), 5,36 - 5,29 (m, 1 H), 4,24 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 3,53 (tdt, J = 3,9, 7,7, 11,7 Hz, 1 H), 3,20 - 3,11 (m, J = 10,7 Hz, 1 H), 3,04 (s, 3 H), 2,51 (dd, J = 8,3, 11,7 Hz, 1 H), 2,37 (d, J = 16,6 Hz, 3 H), 2,28 (br. s., 2 H), 2,25 -2,10 (m, 4 H), 2,10 -2,00 (m, 1 H), 1,96 (dd, J = 5,4, 17,6 Hz, 1 H), 1,88 (dt, J = 5,4, 11,7 Hz, 1 H), 1,85 (t, J = 12,2 Hz, 1 H), 1,80 - 1,66 (m, 2 H), 1,47 - 1,35 (m, J = 4,4 Hz, 1 H), 0,55 (s, 3 H); HRMS (ESI) (m/z) calculado para C²⁹H³⁵N²O³S [M+H]+: 491,2363, encontrado 491,2387.

B-metilsulfonamida 73B

[0469]

[0470] La mezcla bruta se purifico por TLC preparativa (gel de sflice, eluyente:MeOH:diclorometano 40:1) para proporcionar la p-metilsulfonamida 73^b (1,7 mg, 90%). 1H RMN (500 MHz, CDCh) Desplazamiento = 9,24 (s, 1 H), 8,50 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,80 (s, 1 H), 7,78 (d, J = ^{8 , 8} Hz, 1 H), 7,64 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,60 (dd, J = 1,5, 8,3 Hz, 1 H), 5,79 (d, J = 1,5 Hz, 1 H), 5,35 - 5,30 (m, 1 H), 4,31 (d, J = 6,3 Hz, 1 H), 4,00 (quind, J = 3,6, 6,7 Hz, 1 H), 3,16 (dd, J = 9,0, 10,5 Hz, 1 H), 3,03 (s, 3 H), 2,52 (dd, J = 8,5, 11,5 Hz, 1 H), 2,41 (t, J = 16,1 Hz, 1 H), 2,39 (br s s., 2 H), 2,32 -2,26 (m, 2 H), 2,26 -2,14 (m, 3 H), 2,12 -1,99 (m, 2 H), 1,96 (dd, J = 5,1, 17,3 Hz, 2 H), 1,86 (dq, J = 5,4, 12,2 Hz, 1 H), 1,83 - 1,72 (m, 3 H), 0,56 (s, 3 H); HRMS (ESI) (m/z) calculado para C²⁹H³⁵N²O³S [M+H]+:491.2363, encontrado 491.2376.

a-Metilo-metilsulfonamida 76A

[0471]

[0472] La mezcla bruta se purifico por TLC preparativa (gel de sflice, eluyente: 40:1 MeOH:diclorometano) para proporcionar a-metilo-metilsulfonamida 76A (0,7 mg, 57%). ¹ H RMN (500 m Hz, CDCh) Desplazamiento = 9,24 (s, 1 H), 8,51 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,81 (s, 1 H), 7,78 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 7,64 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,60 (dd, J = 1,5, 8,3 Hz, 1 H), 5,79 (s, 1 H), 5,33 (dd, J = 2,2, 5,6 Hz, 1 H), 3,98 (t t, J = 3,4, 12,4 Hz, 1 H), 3,16 (dd, J = 9,0, 10,5 Hz, 1 H), 2,89 (s, 3 H), 2,80 (s, 3 H), 2,52 (dd, J = 8,5, 11,5 Hz, 1 H), 2,44 (ddd, J = 2,7. 4.1, 16,6 Hz, 1 H), 2,36 (br s s., 3 H), 2,28 (d, J = 10,7 Hz, 2 H), 2,21 (dq, J = 4,9, 9,1 Hz, 1 H), 2,14 (t, J = 12,7 Hz, 1 H), 2,10 - 2,00 (m, 0 H), 1,97 (dd, J = 5,4, 17,6 Hz, 1 H), 1,93 (dd, J = 2,9, 12,2 Hz, 1 H), 1,88 (dd, J = 5,4, 12,2 Hz, 1 H), 1,87 - 1,81 (m, 1 H), 1,80 - 1,60 (m, 3 H), 0,56 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C³⁰H³⁷N²O³S [M+H]+:505.2519, encontrado 505.2537. EJEMPLO 2. OTRA POSIBLE RUTA DEL COMPUESTO 10 A 12 DE LA ISOQUINOLINA

[0473] Se diseno una nueva ruta a la isoquinolina 12, Vea el Esquema 2-1 a continuacion. La reaccion de acoplamiento cruzado de Triflation/Suzuki se logro en un sustrato similar con los reactivos designados que se muestran en la figura. Ver, por ejemplo, Nicolaou et al. J. Am. Chem. Soc. 2009, 131, 10587-10597.

Esquema 2-1

Sintesis del Triflate 20

[0474] A una solucion de monocetona 10 (200 mg, 584 mmol, 1,00 equiv.) en THF (4 ml) se le anadio NaHMDS (1 M, 701 ml, 701 pmol, 1,20 equiv.) a - 78°C gota a gota. Despues de agitarse durante 1,5 h, se canulo PhNTf² (313 mg, 876 pmol, 1,50 equiv.) en THF (2,5 ml) y la mezcla de reaccion se calento hasta 0°C. Despues de 30 minutos adicionales, se anadio una solucion saturada de NH⁴Cl (8 ml) a la mezcla de reaccion agitada y se diluyo con EtOAc (10 ml). Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 X 6 ml) y las capas organicas se combinaron, se lavaron con salmuera (15 ml), se secaron sobre Na²SO⁴ y se concentraron a presion reducida. El residuo resultante se purifico luego por cromatograffa flash en columna (gel de silice, eluyente: 8:1 ^ 5:1 Hexanos:EtOAc) para proporcionar el triflato 20 (237 mg, 86%). 1H RMN (500MHz, CDCh) Desplazamiento = 5,76 (s, 1 H), 5,67 (br. s., 1 H), 5,32 (dd, J = 2,0, 4,9 Hz, 1 H), 4,02 - 3,94 (m, 4 H), 2,67 (dd, J = 6,8, 10,7 Hz, 1 H), 2,49 (t, J = 14,6 Hz, 1 H), 2,45 (ddd, J = 3,7. 6,5, 15,2 Hz, 1 H), 2,38 - 2,28 (m, 4 H), 2,17 (ddd, J = 1,5, 10.7. 12,7 Hz, 1 H), 2,12 (d, J = 13,2 Hz, 1 H), 2,10 (dd, J = 5,9, 17,6 Hz, 1 H), 1,98 (dd, J = 2,7, 13,4 Hz, 1 H), 1,88 (ddd, J = 7,6, 8,9, 12,8 Hz, 1 H), 1,80 (tdd, J = 2,4, 4,8, 12,7 Hz, 1 H), 1,74 - 1,63 (m, 2 H), 1,03 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C²²H²⁶O⁶F³S [M+H]+:475.1397. encontrado 475.1411.

Sintesis de Suzuki Acoplamiento cruzado para isoquinolina 17,18-insaturada 21 de Triflato 20

[0475] A una solucion de triflato 20 (1,00 equiv.) y isoquinolina-7-acido boronico (3,00 equiv.) en 1,4-dioxano y H²O (10:1, 0,02 M) se agrego K²CO³ (3,00 equivocados) y la solucion se burbujeo a traves de Ar inerte durante 5 min. Se anadio Pd(dppf)Cl² 'CH²Cl² (0,05 equiv.) y la mezcla de reaccion se agito a 80°C durante 1 h. La mezcla se dejo enfriar a temperatura ambiente y se aplico una solucion saturada de NaHCO³. La mezcla se diluyo con EtOAc y los disolventes se separaron. La capa acuosa se extrajo con EtOAc y las capas organicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na²SO⁴ y se concentraron a presion reducida.

[0476] La mezcla cruda se purifico por cromatograffa flash en columna (gel de sflice, eluyente: 2:1 ^ 1 :1 ^ 1 :2 Hexanos:EtOAc) para proporcionar la isoquinolina 21 17,18-insaturada (490 mg, 84%).). 1H RMN (500 MHz, CDCh) Desplazamiento = 9,23 (s, 1 H), 8,49 (d, J = 5,4 Hz, 1 H), 7,94 (s, 1 H), 7,85 - 7,81 (m, 1 H), 7,80 - 7,75 (m, 1 H), 7,63 (d, J = 5,4 Hz, 1 H), 6,26 (br. s., 1 H), 5,82 (s, 1 H), 5,40 (d, J = 3,4 Hz, 1 H), 4,08 - 3,90 (m, 4 H), 2,76 (dd, J = 7,1, 11,0 Hz, 1 H), 2,58 (dt, J = 5,4, 17,6 Hz, 1 H), 2,56 - 2,40 (m, 3) H), 2,40 - 2,28 (m, 4 H), 2,16 (d, J = 13,2 Hz, 1 H), 2,02 (dd, J = 2,0, 13,2 Hz, 1 H), 1,94 (td, J = 8,8, 13,2 Hz, 1 H), 1,81 (td, J = 2,0, 12,7 Hz, 1 H), 1,76 - 1,67 (m, 2 H), 1,18 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C³⁰H³²NO³ [M+H]+:454.2377. encontrado 454.2366.

Sintesis de isoquinolina 12 a partir de isoquinolina 21 17,18-insaturada

[0477] A una solucion de isoquinolina 21 17,18-insaturada (400 mg, 877 mmol, 1,0 equiv.) en THF (36 ml) se anadio 10% en peso de Pd/C (280 mg, 263 mmol, 0,30 equiv.) y H² se instalo el globo. Despues de 3 h, la mezcla de reaccion se filtro a traves de una capa de celite y se lavo con una solucion de NH³ 0,2 M en MeOH (40 ml), se concentro a presion reducida. El residuo se purifico por cromatograffa flash en columna (gel de silice, eluyente:1:1 ^ 1:2 Hexanos:EtOAc) para proporcionar isoquinolina 12 (325 mg, 80%). Los datos espectrales fueron consistentes con la isoquinolina 12 construida a partir del aducto de 1-cloroisoquinolina 11.

EJEMPLO 3. SINTESIS DE ANALOGICOS DEISOQUINOLINA

[0478]

Esquema 3-1.

Esquema 3-2.

*,

Esquema 3-3.

Esquema 3-4.

Acoplamiento cruzado Suzuki para 5-indazol 17,18-insaturado 56 de Triflato 20

[0479] A una solucion de triflato 20 (1,00 equiv.) y ester indazol-5-boronico (3,00 equiv.) en 1,4-dioxano y H²O (10:1, 0,02M) se agrego K²CO³ (3,00 equiv.) y la solucion se burbujeo a traves de Ar inerte durante 5 min. Se anadio Pd(dppf)Cl² CH²Cl² (0,05 equiv.) y la mezcla de reaccion se agito a 80°C durante 1 h. La mezcla se dejo enfriar a temperature ambiente y se aplico una solucion saturada de NaHCO³. La mezcla se diluyo con EtOAc y las capas se separaron. La capa acuosa se extrajo con EtOAc y las capas organicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na²SO⁴ y se concentraron a presion reducida.

[0480] La mezcla bruta se purifico por cromatograffa flash en columna (gel de sflice, eluyente: 1:3 ^ 1:1 EtOAc:hexanos) para proporcionar ⁶ -indazol 17,18-insaturado 56 (13 mg, 70%).

¹ H RMN (500 MHz, CDCla) Desplazamiento = 8,04 (s, 1 H), 7,67 (d, J = 10,0 Hz, 1 H), 7,49 (s, 1 H), 7,27 (d, J = 10,0 Hz, 1 H), 6,12 (br. s., 1 H), 5,78 (br. s., 1 H), 5,36 (t, J = 5,0 Hz, 1 H), 3,99 (m, 4 H), 2,72 (m, 1 H), 2,53 - 2,44 (m, 3 H), 2,40 (br. d., J = 10,0 Hz, 1 H), 2,36 - 2,25 (m, 4 H), 2,14 (d, J = 10,0 Hz, 1 H), 2,00 (dd, J = 10,0, 5,0 Hz, 1 H), 1,93 - 1,87 (m, 1 H), 1,79 (m, 1 H), 1,72-1,66 (m, 2 H), 1,10 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C²⁸H³¹N²O³ [M+H]+:443.5573, encontrado 443.5571.

Acoplamiento cruzado Suzuki para 6-indazol 17,18-insaturado de Triflato 20

[0481] A una solucion de triflato 20 (1,00 equiv.) y de ester indazol-⁶ -boronico (3,00 equiv.) en 1,4-dioxano y H²O (10:1, 0,02M) se agrego K²CO³ (3,00 equiv.) y la solucion se burbujeo a traves de Ar inerte durante 5 min. Pd(dppf)Cl² CH²Cl² (0,05 equiv.) se anadio y la mezcla de reaccion se agito a 80°C durante 1 h. La mezcla se dejo enfriar a temperatura ambiente y se aplico una solucion saturada de NaHCO³. La mezcla se diluyo con EtOAc y las capas se separaron. La capa acuosa se extrajo con EtOAc y las capas organicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na²SO⁴ y se concentraron a presion reducida.

[0482] La mezcla bruta se purifico por cromatograffa flash en columna (gel de sflice, eluyente: 1:4 ^ 3:1 EtOAc:hexanos) para proporcionar 5-indazol 17,18-insaturado 59 (5,9 mg, 65%). ¹ H RMN (500 MHz, CDCla) Desplazamiento = 10,04 (br s, 1 H), 8,05 (s, 1 H), 7,75 (s, 1 H), 7,46 (ABq, J^ab = ^{8 , 8} Hz, v = 33,5 Hz, 2 H), 6,02 (s, 1 H), 5,79 (s, 1 H), 5,38 (dd, J = 3,4, 3,4 Hz, 1 H), 3,94-4.01 (m, 4H), 2,73 (dd, J = 10,7. ^{6 , 8} Hz, 1 H), 2,44 - 2,53 (m, 3H), 2,40 (d, 12,2 Hz, 1 H), 2,28-2,36 (m, 3H), 2,15 (d, J = 13,2 Hz, 1 H), 2,03 (par obs d, J = 11,2 Hz, 1 H), 2,01 (par obs dd, J = 13.2, 2,4 Hz, 1 H), 1,91 (dt, J = 12,21, 9,3 Hz, 1 H), 1,77-1,82 (m, 1 H), 1,66-1,73 (m, 2 H), 1,10 (s, 3H).

HRMS (ESI) (m/z) calculado para C²⁸H³¹N²O³ [M+H]+:443.2335, encontrado 443.4956.

B-dimetilamina aminometilpiridina 46B y a-dimetilamina aminometilpiridina 46A

[0483]

[0484] B-dimetilamina aminometilpiridina 46B: la mezcla cruda se purifico por cromatograffa flash (gel de silice, eluyente:10:1 solucion de EtOAc:2M NH³ en MeOH) para proporcionar p-dimetilamina aminometilpiridina 46B (5 mg, 55%). ¹ H RMN (500 MHz, CDCl³) Desplazamiento = 8,58 (s, 1 H), 8,51 (dd, J = 1,5, 4,9 Hz, 1 H), 7,71 (td, J = 2,0, 7,8 Hz, 1 H), 7,26 (dd, J = 4,9, 7,8 Hz, 1 H), 5,71 (s, 1 H), 5,24 (dd, J = 2,4, 4,4 Hz, 1 H), 3,88 - 3,80 (m, 2 H), 2,81 (t, J = 9,0 Hz, 1 H), 2,45 (dt, J = 6,3, 13,7 Hz, 1 H), 2,46 - 2,37 (m, 1 H), 2,30 (br. s., ⁶ H), 2,26 - 2,19 (m, 3 H), 2,17 -2,07 (m, 5 H), 1,92 (dd, J = 2,9, 13,7 Hz, 2 H), 1,79 (dddd, J = 4,9, 8,3, 10,3, 13,2 Hz, 1 H), 1,74 - 1,59 (m, 4 H), 1,39 (ddt, J = 4,4, 9,8, 12,7 Hz, 1 H), 0,80 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C²⁷H³⁸N³O [M+H]+:420.3009, encontrado 420.2999.

B-dimetilamina 17.18-amidapiridina insaturada 49B y a-dimetilamina 17.18-amidapiridina insaturada 49A [0485]

[0486] B-dimetilamina 17.18-insaturada amidapiridina 49B: la mezcla cruda se purifico por cromatograffa flash (gel de silice, eluyente:8:1 solucion de EtOAc:2M NH³ en MeOH) para dar p-dimetilamina 17.18-insaturada amidapiridina 49B (2,1 mg, 44%). 1H RMN (500MHz, CDCh) Desplazamiento = 8,58 (d, J = 2,4 Hz, 1 H), 8,36 (dd, J = 1,0, 4,9 Hz, 1 H), 8,23 (td, J = 2,0, 8,3 Hz, 1 H), 7,49 (s, 1 H), 7,29 (dd, J = 4,9, ^{8 , 8} Hz, 1 H), 6,57 (br. s., 1 H), 5,73 (s, 1 H), 5,33 (dd, J = 2,0, 5,4 Hz, 1 H), 2,66 - 2,56 (m, 2 H), 2,54 (dd, J = 3,2, ^{6 , 6} Hz, 1 H), 2,51 - 2,32 (m, 5 H), 2,28 (br. s., ⁶ H), 2,20 (ddd, J = 1,2, 11,0, 12,7 Hz, 1 H), 2,10 (td, J = 6,4, 13,1 Hz, 2 H), 1,97 - 1,89 (m, 3 H), 1,76 (dt, J = 7,8, 11,2 Hz, 1 H), 1,66 - 1,55 (m, 1 H), 1,14 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C²⁷H³⁴N³O² [M+H]+: 432.2646, encontrado 432.2649.

B-dimetilamina 17.18-insaturada ftazina 55B y a-dimetilamina 17.18-insaturada ftazina 55A

[0487]

[0488] B-dimetilamina 17,18-insaturada ftalazina 55B: la mezcla bruta se purifico por cromatograffa flash (gel de silice, eluyente:9:1 solucion de EtOAc:2M NH³ en MeOH) para dar p-dimetilamina 17,18-insaturada ftalazina 55B (5,5 mg, 73%). ¹ H RMN (500 MHz, CDCla) Desplazamiento = 9,50 (s, 2 H), 7,97 - 8,03 (m, 1 H), 7,89 (d, J = 4,39 Hz, 2 H), 6,34 - 6,39 (m, 1 H), 5,77 - 5,83 (m, 1 H), 5,32 - 5,43 (m, 1 H), 2,72 (dd, J = 11,23, 6,84 Hz, 1 H), 2,38 - 2,50 (m, 4 H), 2,47 (br, M), ⁶ H), 2,24 - 2,30 (m, 3 H), 2,09 - 2,20 (m, 2 H), 2,03 (d, J = 10,25 Hz, 2 H), 1,88 - 1,99 (m, 2 H), 1,75 - 1,86 (m, 2 H), 1,17 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C²⁸H³³N³O [M+H]+:440.5998, encontrado 440.5995.

B-dimetilamina 17,18-insaturada 6-indazol 58B y a-dimetilamina 17,18-insaturada 6-indazol 58A

[0489]

[0490] B-dimetilamina 17,18-insaturada 6-indazol 58B: la mezcla bruta se purifico por cromatograffa flash (gel de silice, eluyente:9:1 solucion de EtOAc:2M NH³ en MeOH) para dar la p-dimetilamina 17,18-insaturada ⁶ -indazol 58B (3,9 mg, 73%). ¹ H RMN (500 MHz, CDCh) Desplazamiento = 8,03 (s, 1 H), 7,67 (d, J = 8,30 Hz, 1 H), 7,49 (s, 1 H), 7,25 - 7,28 (m, 1 H), 6,12 (t, J = 2,44 Hz, 1 H), 5,75 (s, 1 H), 5,33 (t, J = 3,42 Hz, 1 H), 3,22 - 3,38 (m, 1 H), 2,71 (dd, J = 11,23, 6,84 Hz, 1 H), 2,44 - 2,50 (m, 4 H), 2,41 (br. M., ⁶ H), 2,22 - 2,31 (m, 3 H), 2,09 - 2,20 (m, 2 H), 2,04 (d, J = 2,93 Hz, 2 H), 1,78 (td, J = 11,35, 7,08 Hz, 2 H), 1,52 - 1,64 (m, 1 H), 1,07 - 1,15 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C²⁸H³³N³O [M+H]+:428.5891, encontrado 428.5889.

B-Dimetilamina 17,18-insaturada 5-indazol 61B y a-dimetilamina 17,18-insaturada 5-indazol 61A

[0491]

[0492] B-dimetilamina 17,18-insaturada 5-indazol 61B: la mezcla bruta se purifico por cromatograffa en columna flash (gel de silice, eluyente:9:1 solucion de EtOAc:2M NH³ en MeOH) para proporcionar p-dimetilamina 17,18-insaturada 5-indazol 61B (2,5 mg, 70%). ¹ H RMN (500MHz, CDCfj) Desplazamiento = 8,05 (s, 1 H), 7,75 (s, 1 H), 7,47 (ABq, Jab = ^{8 , 8} Hz, Av = 33,5 Hz, 2H), 6,02 (dd, J = 2,0, 2,0 Hz, 1 H), 5,74 (s, 1 H), 5,33 (dd, J = 3,4, 3,4 Hz, 1 H), 2,72 (dd, J = 11,2, ^{6 , 8} Hz, 1 H), 2,43-2,48 (m, 5H), 2,37-2,41 (m, 2H), 2,26-2,35 (m, ⁸ H), 2,11 (m, 2H), 2,04 (d, J = ^{6 , 8} Hz, 1 H), 1,88-1,98 (m, 3H), 1,77 (m, 1 H), 1,10 (s, 3H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C²⁸H³⁴N³O [M+H]+:428.2702, encontrado 428.2653.

Sintesis de B-dimetilamina amidapiridina 50B

[0493]

[0494] A una solucion de p-dimetilamina 17,18-amidapiridina insaturada 49B (aprox. 1,2 mg) en MeOH (300 ml) se le anadio Mg (aprox. 1 mg) y se agito a temperatura ambiente durante 48 h. La mezcla de reaccion se anadio H²O (700 ml) y se diluyo con EtOAc (700 ml). La fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 X 0,5 ml) y las fases organicas combinadas se lavaron con salmuera (0,5 ml), se secaron sobre Na²SO⁴ y se concentraron a presion reducida. El residuo se purifico por HPLC (columna Eclipse XDB-C⁸ , 9,4 mm³25 C-m; gradiente = 0% ^ 35% de MeCN (0,1% de acido formico):H²O (0,1% de acido formico) durante 30 minutos) para proporcionar p-dimetilamina amidapiridina 50B (aprox. 0,3 mg, 25%). Debido tambien a la pequena cantidad, solo se asignaron picos de diagnostico. ¹H RMN (500MHz, CDCl³) Desplazamiento = 8,56 (br. s, 1 H), 8,37 (d, J = 3,4 Hz, 1 H), 8,21 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 7,09 (br. s., 1 H), 5,81 (s, 1 H), 5,39 - 5,33 (m, 1 H), 2,78 (br. s., ⁶ H), 0,83 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C²⁷H ³⁵N³O² [M+H]+:434.2802, encontrado 434.2815.

Sintesis de ftalazina 6-triflato 51

[0495] A una solucion de ⁶ -ftalazinol (588,4 mg, 4,26 mmol, 1,0 equiv.) en CHCh se le anadio N-fenilobis(trifluorometanosulfonimida) (1,73 g, 4,83 mmol, 1,2 equiv.), Et³N (0,9 mL, 6,04 mmol, 1,5 equiv. y DMAP (cat.). La mezcla se calento a 60°C y se agito durante 3 h. La reaccion se enfrio a temperatura ambiente y se detuvo con una solucion sat. NaHCO³ y CH²Cl² y las capas se separaron. La capa acuosa se extrajo con CH²Cl². Las capas organicas se combinaron, se secaron sobre Na²SO⁴ y se concentraron a presion reducida. La mezcla bruta se purifico por cromatograffa en columna ultrarrapida (gel de sflice, eluyente:9:1 de diclorometano:MeOH) para proporcionar ⁶ -triflato de ftalazina 51 (995 mg, 90%). ¹ H RMN (500 MHz, CDCh) Desplazamiento = 9,68 (d, J = 3,91 Hz, 2H) 8.19 (d, J = 8,79 Hz, 1 H) 7,96 (br s., 1 H) 7,84 - 7,89 (m, 1 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C⁹H⁶F³N²O³S [M+H]+:279.2157. encontrado 279.2152.

Sintesis de ftalazina 6-trimetiltina 52

[0496] A una solucion de ⁶ -triflato de ftalazina 52 (992 mg, 3,57 mmol, 1,0 equiv.) en C⁶H⁶ se le anadio LiCl (907 mg, 21,59 mmol, 6,0 equiv.), Pd(PPh³)⁴ (412 mg, 0,3565 mmol, 0,1 equiv. y (Me³Sn)² (0,78 ml, 3,743 mmol, 1,05 equiv.). La solucion se burbujeo con argon en un sonicador durante 10 minutos y la mezcla se calento a 105°C y se agito durante 1 h. La reaccion se enfrio a temperatura ambiente, se diluyo con acetato de etilo y se filtro sobre celite. La porcion organica se lavo con NaHCO³ sat. y se seco sobre Na²SO⁴ y luego se concentro a presion reducida. La mezcla bruta se purifico por cromatograffa flash (gel de sflice, eluyente:EtOAc:Hexanos 1:1) para proporcionar ftalazina ⁶ -trimetilestano 52 (656 mg, 63%). ¹H RMN (500 MHz, CDCh) Desplazamiento = 9,54 (d, J = 4,39 Hz, 2 H) 8.12 (br. s., 1 H) 8,08 (d, J = 7,81 Hz, 1 H) 7,92 (d, J = 7,81 Hz, 1 H) 0,43 (s, 9 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para Ci¹H¹⁵N²Sn [M+H]+:293.9602, encontrado 293.9601.

Sintesis de 17,18-insaturada ftalazina 53

[0497] A una solucion de triflato 20 (20 mg, 42,15 pmol, 1,0 equiv.) en DMSO se anadio (trimetilestanilo)ftalazina 52 (31 mg, 105,40 pmol, 2,0 equiv.), CuCl (42 mg, 421,50 pmol, 10,0 equiv.) y LiCl (18 mg, 421.50 pmol, 10,0 equiv.). La mezcla se desoxigeno mediante el metodo de congelacion y descongelacion cuatro veces y se anadio Pd(PPh³) (5 mg, 4,22 mmol, 0,1 equiv.). La mezcla se calento a 60°C y se agito durante 1 h. La reaccion se detuvo con 5% de NH⁴OH y acetato de etilo y las capas se separaron. La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo. Las capas organicas se combinaron, se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na²SO⁴ y se concentraron a presion reducida. La mezcla cruda se purifico por cromatograffa flash (gel de sflice, eluyente:1:4 ^ ^{1 :1} ^ 3 :1 EtoAc:Hexanos) para proporcionar la ftalacina 17,18 insaturada 53 (16,3 mg, 85%). ¹ H RMN (500MHz, CDCh) Desplazamiento = 9,51 (d, J = 5,0 Hz, 2 H) 8,02 (d, J = 5,0 Hz, 1 H), 7,91 (s, 1 H), 7,90 (d, J = 5,0 Hz, 1 H), 6,37 (br. s., 1 H), 5,80 (br. s., 1 H), 5,37 (br. M., 1 H), 3,98 (m, 4 H), 2,75 (m, 1 H), 2,59 - 2,52 (m, 2H), 2,50 - 2,42 (m, 3 H), 2,37 - 2,26 (m, 3 H), 2,14 (d, J = 15,0 Hz, 1 H), 2,00 (dd, J = 15,0, 2,5 Hz, 1 H), 1,93 (m, 1 H), 1,79 (m, 1 H), 1,72-1,66 (m, 2H), 1,16 (s, 3 H).

HRMS (ESI) (m/z) calculado para C²⁹H³¹N²O³ [M+H]+:455.5680, encontrado 455.5679.

Sintesis de amidapiridina 17,18-insaturada 47

[0498] A una solucion de triflato 20 (20 mg, 42,1 mmol, 1,0 equiv.) y 3-aminopiridina (19,8 mg, 210 mmol, 5,0 equiv.) en ^d M^f (1 mL) se le anadio trietilamina (12 mL, 84,3 mmol, 2,0). equiv) y pd(dppf)Cl² 'CH²Cl² (1,72 mg, 2,10 mmol, 0,05 equiv.). El matraz de reaccion se instalo con un balon de CO y la solucion se purgo durante 5 minutos a temperatura ambiente. A continuacion, la mezcla de reaccion se calento hasta 85°C y se agito durante 4 h. La mezcla se dejo enfriar a temperatura ambiente y se anadio EtOAc (3 ml) y H²O. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (3 X 2 ml) y las capas organicas combinadas se lavaron con salmuera (3 ml), se secaron sobre Na²SO⁴ y se concentraron a presion reducida. La mezcla bruta se purifico mediante cromatograffa en columna de resolucion rapida (gel de sflice, eluyente:10:10:1 ^ 10:10:2 Hexanos:EtOAc:MeOH) para proporcionar la amidapiridina 17,18-insaturada 47 (17 mg, 89%). ¹ H RMN (500MHz, CDCh) Desplazamiento = 8,57 (d, J = 2,4 Hz, 1 H), 8,33 (dd, J = 1,2, 4,6 Hz, 1 H), 8,20 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 7,70 (s, 1 H), 7,26 (dd, J = 4,9, 7,8 Hz, 1 H), 6,55 (br. s., 1 H), 5,77 (s, 1 H), 5,36 (d, J = 2,9 Hz, 1 H), 4,03 - 3,89 (m, 4 H), 2,63 - 2,56 (m, 2H), 2,52 (ddd, J = 2,9, 7,3, 17,1 Hz, 1 H), 2,52 - 2,37 (m, 3 H)), 2,36 - 2,27 (m, 2H), 2,20 (t, J = 12,2 Hz, 1 H), 2,12 (d, J = 13,2 Hz, 1 H), 1,97 (dd, J = 2,2, 12,9 Hz, 1 H), 1,89 (td, J = 8,8, 13,2 Hz, 1 H), 1,78 (tdd, J = 2,4, 4,8, 12,8 Hz, 1 H), 1,71 - 1,62 (m, 2H), 1,11 (s, 3 H).

HRMS (ESI) (m/z) calculado para C²⁷H³¹N²O⁴ [M+H]+:447.2278, encontrado 447.2289.

EJEMPLO 4. METODO GENERAL DE SINTESIS DE CETONAS.

[0499] A una solucion de cetal en THF a 0°C se le anadio ⁶ N HCl (THF:⁶ N HCl = 1:1, 0,05M). La mezcla se calento a temperatura ambiente y se agito durante 1 h. La reaccion se inactivo con ⁶ N NaOH y acetato de etilo y las capas se separaron. La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo. Las capas organicas se combinaron, se secaron sobre Na²SO⁴ y se concentraron a presion reducida.

Sintesis de la cetona 45

[0500] La mezcla bruta se purifico por cromatograffa flash en columna (gel de sflice, eluyente:15:1 de diclorometano:Me-OH) para proporcionar la cetona 45 (8,5 mg, 95%). ¹ H RMN (50o MHz, CDCh) Desplazamiento = 8,60 (s, 1 H), 8,52 (d, J = 3,9 Hz, 1 H), 7,74 (br. s., 1 H), 7,28 (dd, J = 4,4, 8,3 Hz, 1 H), 5,91 (s, 1 H), 5,37 (dd, J = 2,7. 4,6 Hz, 1 H), 3,88 (d, J = 13,7 Hz, 1 H), 3,84 (d, J = 13,7 Hz, 1 H), 2,91 (d, J = 14,6 Hz, 1 H), 2,82 (t, J = 9,0 Hz, 1 H), 2,65 (d, J = 15,1 Hz, 1 H), 2,64 (dd, J = 10,3, 14,6 Hz, 1 H), 2,59 - 2,41 (m, 3 H), 2,32 - 2,20 (m, 3 H), 2,19 -2,07 (m, 3 H), 1,85 - 1,72 (m, 2H), 1,72 - 1,61 (m, 2H), 1,44 (br. s., 1 H), 0,82 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C²⁵H³¹N²O² [M+H]+:391.2380, encontrado 391.2366.

Sintesis de la cetona 54

[0501] La mezcla bruta se purifico por cromatograffa flash en columna (gel de sflice, eluyente:EtOAc:hexanos 1:1) para proporcionar la cetona 54 (8,7 mg, 80%). ¹ H RMN (500MHz, CDCh) Desplazamiento = 9,54 (d, J = 10,0 Hz, 2 H) 8,04 (d, J = 10,0 Hz, 1 H), 7,93 (br. s., 2H), 6,40 (br. s., 1 H), 5,95 (br. s., 1 H), 5,47 (br. M., 1 H), 2,95 (d, J = 10,0 Hz, 1 H), 2,77 (m, 1 H), 2,71 - 2,62 (m, 2H), 2,59 - 2,44 (m, 7 H), 2,34 (t, J = 10,0 Hz, 1 H), 2,19 (t, J = 10,0 Hz, 1 H), 2,00 (m, 1 H), 1,78 (m, 1 H), 1,18 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C²⁷H²⁷N²O² [M+H]+:411.5155, encontrado 411.5152.

Sintesis de la cetona 57

[0502] La mezcla bruta se purifico por cromatograffa flash en columna (gel de sflice, eluyente:EtOAc:hexanos 1:1) para proporcionar la cetona 57 (13,7 mg, 72%). ¹ H RMN (500 MHz, CDCh) Desplazamiento = 8,04 (br. s., 1 H), 7,68 (d, J = 10,0 Hz, 1 H), 7,48 (br. s., 1 H), 7,27 (d, J = 10,0 Hz, 1 H), 6,13 (br. s., 1 H), 5,93 (br. s., 1 H), 5,45 (br. T., J = 5 Hz, 1 H), 2,97 (d, J = 15,0 Hz, 1 H), 2,76 - 2,64 (m, 3 H), 2,53 - 2,43 (m, ⁶ H), 2,40 - 2,34 (m, 2H), 2,17 (t, J = 10,0 Hz, 1 H), 1,98 (m, 1 H), 1,77 (m, 1 H), 1,11 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C²⁶H²⁷N²O² [M+H]+:399.5048, encontrado 399.5047.

Sintesis de la cetona 60.

[0503] La mezcla bruta se purifico por cromatograffa flash en columna (gel de sflice, eluyente:1:1 ^ 3:1 EtOAc:hexanos, tamponados con 2% de trietilamina) para proporcionar la cetona 60 (3,3 mg, ^{6 8} %). ¹ H RMN (500 MHz, CDCla) Desplazamiento = 9,93-10,27 (br s, 1 H), 8,06 (s, 1 H), 7,75 (s, 1 H), 7,47 (ABq, Jab = ^{8 , 8} Hz, Av = 29,5 Hz, 2H) 6,03 (dd, J = 2,0, 2,0 Hz, 1 H), 5,94 (s, 1 H), 5,47 (dd, J = 3,9, 3,9 Hz, 1 H), 2,97 (d, J = 15,1 Hz, 1 H), 2,63­ 2,76 (m, 3H), 2,53-2,59 (m, 1 H), 2,44-2,50 (m, 5H), 2,35-2,42 (m, 2H), 2,17 (dd, J = 9,3, 9,3 Hz, 1 H), 1,95-2,01 (m, 1 H), 1,74-1,80 (m, 1 H), 1,11 (s, 3H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C²⁶H²⁷N²O² [M+H]+:399.2073, encontrado 399.2043.

Sintesis de la cetona 22

[0504] Para el metodo, consulte "Sintesis de la cetona 13". El residuo resultante se purifico luego por cromatograffa flash (gel de sflice, eluyente:3:2 ^ 1:2 Hexanos:EtOAc) para proporcionar la cetona 22 (8,2 mg, 61%). ¹ H RMN (500 MHz, CDCla) Desplazamiento = 9,24 (br. s., 1 H), 8,51 (d, J = 5,4 Hz, 1 H), 7,94 (s, 1 H), 7,84 - 7,76 (m, 2H), 7,63 (d, J = 5,4 Hz, 1 H), 6,27 (br. s., 1 H), 5,97 (s, 1 H), 5,50 (dd, J = 2,4, 4,9 Hz, 1 H), 2,98 (d, J = 14,6 Hz, 1 H), 2,78 (dd, J = 6,8, 11,2 Hz, 1 H), 2,71 (d, J = 14,6 Hz, 1 H), 2,72 - 2,63 (m, 1 H), 2,61 (d, J = 5,4 Hz, 1 H), 2,59 - 2,54 (m, 2H), 2,54 -2,50 (m, 2H), 2,50 -2,42 (m, 2H), 2,39 (ddd, J = 1,5, 11,0, 12,9 Hz, 1 H), 2,20 (ddd, J = 1,5, 9,5, 11,5 Hz, 1 H), 2,01 (ddd, J = 7,3, 8,8, 12,7 Hz, 1 H), 1,79 (dt, J = 7,3, 11,2 Hz, 1 H), 1,18 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C²⁸H²⁸NO² [M+H]+:410.2115, encontrado 410.2111.

Sintesis de la cetona 48.

[0505] Para el metodo, consulte "Sintesis de la cetona 13". El residuo resultante se purifico luego por cromatograffa flash (gel de sflice, eluyente:20:10:3 Hexanos:solucion de EtOAc:2M NH³ en MeOH) para proporcionar la cetona 48 (5,0 mg, 74%). ¹ H RMN (500 MHz, CDCh) Desplazamiento = 8,60 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 8,37 (dd, J = 1,0, 4,9 Hz, 1 H), 8,24 - 8,20 (m, 1 H), 7,55 (s, 1 H), 7,30 (dd, J = 4,9, 8,3 Hz, 1 H), 6,57 (br. s., 1 H), 5,94 (s, 1 H), 5,48 (dd, J = 2,2, 5,1 Hz, 1 H), 2,95 (d, J = 15,1 Hz, 1 H), 2,69 (d, J = 14,6 Hz, 1 H), 2,68 (d, J = 12,7 Hz, 1 H), 2,66 - 2,61 (m, 2H), 2,61 - 2,53 (m, 2H), 2,52 - 2,44 (m, 3 H), 2,41 (d, J = 18,1 Hz, 1 H), 2,29 (ddd, J = 1,5, 11,1, 12,8 Hz, 1 H), 2,22 -2,15 (m, J = 1,5, 9,4, 11,1 Hz, 1 H), 1,98 (ddd, J = 7,6, 9,0, 12,7 Hz, 1 H), 1,76 (dt, J = 7,3, 11,2 Hz, 1 H), 1,14 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C²⁵H²⁷N²O³ [M+H]+:403.2016, encontrado 403.2023.

EJEMPLO 5. METODO GENERAL PARA LA SINTESIS DE LOS N-OXIDOS.

[0506] A una solucion de amina (1,00 equiv.) en metanol (0,028 M) se le anadio H²O² (32,0 equiv.) a temperatura ambiente. Despues de 25 h, se anadio solucion saturada de NaHCO³ , se diluyo con diclorometano y se separaron las capas. La capa acuosa se extrajo con diclorometano. Las capas organicas se combinaron, se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na²SO⁴ y se concentraron a presion reducida.

Sintesis de 14B-N-oxido (14BNO)

[0507]

[0508] La mezcla bruta se purifico por cromatografia flash en columna (gel de since, eluyente: 90:9:1 ^ 80:18:2 Cloroformo:Metanol:solucion de 5N NH⁴OH en H²O) para proporcionar N-oxido 14BNO (23,5 mg, 95%). ¹ H RMN (500 MHz, CDCl³) Desplazamiento = 9,21 (s, 1 H), 8,48 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,77 (s, 1 H), 7,75 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 7,61 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,57 (dd, J = 1,0, ^{8 , 8} Hz, 1 H), 5,76 (s, 1 H), 5,28 (d, J = 2,9 Hz, 1 H), 3,44 - 3,36 (m, 1 H), 3,22 (s, 3 H), 3,12 (t, J = 10,8 Hz, 1 H), 3,10 (d, J = 1,0 Hz, 3 H), 2,47 (dd, J = 8,8, 11,2 Hz, 1 H), 2,44 -2,29 (m, 5 H), 2,28 -2,13 (m, 4 H), 2,09 (ddd, J = 1,5, 9,3, 11,2 Hz, 1 H), 2,06 - 1,97 (m, 2H), 1,94 (dd, J = 5,1, 17,4 Hz, 1 H), 1,85 (dq, J = 5,4, 12,2 Hz, 1 H), 1,83 - 1,76 (m, 1 H), 1,72 (td, J = 9,3, 12,2 Hz, 1 H), 0,54 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C³⁰H³⁷N²O² [M+H]+:457,2850, encontrado 457,2842.

Sintesis de 14A-N-oxido (14ANO)

[0509]

[0510] La mezcla bruta se purifico por cromatografia flash en columna (gel de silice, eluyente:90:9:1 ^ 80:18:2 Cloroformo:Metanol:solucion de 5N NH⁴OH en H²O) para proporcionar N-oxido 14ANO (3,6 mg, 77%). ¹ H RMN (500 MHz, CDCl³) Desplazamiento = 9,24 (s, 1 H), 8,50 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,80 (s, 1 H), 7,77 (d, J = ^{8 , 8} Hz, 1 H), 7,64 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,60 (d, J = ^{8 , 8} Hz, 1 H), 5,81 (s, 1 H), 5,36 (d, J = 2,9 Hz, 1 H), 3,46 (t, J = 12,4 Hz, 1 H), 3,24 (s, 3 H), 3,18 (s, 3 H), 3,16 (t, J = 9,8 Hz, 1 H), 2,64 (dd, J = 3,2, 7,1 Hz, 1 H), 2,59 - 2,47 (m, 3 H), 2,43 - 2,28 (m, 4 H), 2,28 - 2,15 (m, 2H), 2,09 - 1,99 (m, 2H), 1,97 (dd, J = 5,1, 12,4 Hz, 1 H), 1,88 (dq, J = 5,4, 12,2 Hz, 1 H), 1,81 -1,71 (m, 2H), 1,51 (dq, J = 4,1, 12,3 Hz, 1 H), 0,56 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C³⁰H³⁷N²O² [M+H]+:457,2850, encontrado 457,2846.

Cortistatina A Formacion de N-Oxido

[0511]

[0512] Cortistatina A N-oxido: A una solucion de cortistatina A (2 mg) en acetato de etilo (1 ml) se le anadio gel de silice Aldrich Davisil™ (200 malla) (200 mg) y esta solucion se agito al aire durante 1 hora. El gel de silice se filtro y el filtrado se concentro para dar N-oxido de cortistatina A bruto que se purifico adicionalmente mediante cromatograffa de SO ² (eluyente:metanol al 50%/acetato de etilo) para proporcionar N-oxido de cortistatina A (1,8 mg, 90% de rendimiento). ¹ H RMN (500 MHz, CDCh) ⁸ 9,22 (s, 1 H), 8,50 (d, J = 5,8 Hz, 1 H), 7,78 (s, 1 H), 7,76 (d, J = ^{8 , 8} Hz, 1 H), 7,63 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,58 (d, J = ^{8 , 8} Hz, 1 H), 6,28 (s, 1 H), 5,49 (m, 1 H), 4,15 (d, J = 9,3 Hz, 1 H), 3,83 (t, J = 9,8, 9,8 Hz, 1 H), 3,31-3,36 (m, 1 H), 3,26 (s, ³H), 3,19 (s, 3H), 3,16 (dd, J = 9,3, 9,3 Hz, 1 H), 2,50 (dd, J = 11,7. ^{8 , 8} Hz, 1 H), 2,14-2,40 (m, 5H), 1,97-2,07 (m, 3H), 1,81-1,90 (m, 2H), 1,68-1,75 (m, 1 H), 1,49-1,65 (m, 1 H), 0,55 (s, 3H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C³⁰H³⁷N²O⁴ [M+H]+:489.2753, encontrado 489.5928.

EJEMPLO 6. SINTESIS DE ALCOHOLES C3 Y ANALOGICOS SUSTITUIDOS

[0513]

Síntesis de β-alcohol 17B

[0514]

[0515] p-Alcohol 17B: una solucion de cetona 13 (2,00 mg, 4,85 jmol, 1,0 equiv.) en THF (350 jl) se enfrio a -78°C y una solucion de L-selectride en THF (1 M, 9,71 jL, 9,71 jmol, 2,0 equiv) se anadio. Despues de 1 h, se anadio solucion saturada de NH⁴Cl (400 jl) y acetato de etilo (300 jl), que se dejo calentar a temperatura ambiente. La fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 X 1 ml) y las fases organicas combinadas se lavaron con salmuera (1 ml), se secaron sobre Na²SO⁴ y se concentraron a presion reducida. El residuo se purifico por TLC preparativa (eluyente:1:1 Hexanos:EtOAc) para proporcionar el p-alcohol 17B (aprox. 1,2 mg, 60%).

[0516] 1H RMN (600 MHz, CDCh) Desplazamiento = 9,26 (br.s, 1 H), 8,49 (br.s, 1 H), 7,82 (s, 1 H), 7,78 (d, J = 8,2Hz, 1 H), 7,69 (br. s, 1 H), 7,63 (d, J = 7,6 Hz, 1 H), 5,75 (s, 1 H), 5,26 (br. s, 1 H), 4,36 (br. s, 1 H), 3,15 (t, J = 9,7 Hz, 1 H), 2,63 (t, J = 13,5 Hz, 1 H), 2,51 (dd, J = 9,1, 10,9 Hz, 1 H), 2,42 - 2,28 (m, 2H), 2,24 (t, J = 10,6 Hz, 1 H), 2,21 - 2,12 (m, 2H), 2,12 - 1,97 (m, 3 H), 1,93 (dd, J = 5,0, 17,3 Hz, 2H), 1,90 - 1,80 (m, 2H), 1,79 - 1,58 (m, 3 H), 0,54 (s, 2 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C²⁸H³²NO² [M+H]+:414.2428, encontrado 414.2436.

a-Alcohol 17A

[0517]

[0518] Una solucion de cetona 13 (9,6 mg, 23,3 jmol, 1,00 equiv.) en THF (750 |jl) se enfrio a -78°C y se anadio una solucion de LAH en eter dietilico (1,0 M, 35,0 jl, 35,0 jmol, 1,50 equiv). Despues de 10 minutos, se anadieron una solucion saturada de NH⁴Cl (500 ml) y acetato de etilo (500 ml), que se dejo calentar a temperatura ambiente. La fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 X 1 ml) y las fases organicas combinadas se lavaron con salmuera (1 ml), se secaron sobre Na²SO⁴ y se concentraron a presion reducida. El residuo se purifico por cromatograffa flash en columna (gel de sflice, eluyente:1:1 ^ 1:5 Hexanos:EtOAc ^ 100% de EtOAc) para proporcionar a-alcohol 17A (8,5 mg, ^{8 8} %). ¹ H RMN (500 MHz, CDCla) Desplazamiento = 9,22 (s, 1 H), 8,47 (d, J = 5,3 Hz, 1 H), 7,79 (s, 1 H), 7,75 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 7,63 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,59 (dd, J = 1,2, ^{8 , 8} Hz, 1 H), 5,75 (s, 1 H), 5,28 (d, J = 2,3 Hz, 1 H), 3,78 (tt, J = 4,0, 11,3 Hz, 1 H), 3,14 (t, J = 10,0 Hz, 1 H), 2,51 (dd, J = 8,5, 11,4 Hz, 1 H), 2,40 - 2,33 (m, 2) H), 2,32 (dt, J = 4,7. 12,3 Hz, 1 H), 2,28 - 1,98 (m, 7 H), 1,93 (dd, J = 5,0, 17,3 Hz, 1 H), 1,90 - 1,81 (m, 2H), 1,74 - 1,62 (m, 2H), 1,40 (dtd, J = 5,9, 11,6, 13,8 Hz, 1 H), 0,53 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C²⁸H³²NO² [M+H]+:414.2428, encontrado 414.2437.

a-Metileter 64A

[0519]

[0520] A una solucion de a-alcohol 17A (2,0 mg, 4,83 mmol, 1,00 equiv.) en DMF (300 jl) se anadio 60% en peso de NaH (1,0 mg, 24,1 jmol, 5,00 equiv.) a temperatura ambiente y se agito previamente durante 30 minutos. La temperatura se redujo a -10°C y se anadio Mel (2,0 jl, 29,0 jmol, 6,00 equiv.). Despues de 2,5 horas, se anadieron una solucion 2M NaOH (200 jl) y acetato de etilo (500 jl), que se dejo calentar a temperatura ambiente. La fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 X 1 ml) y las fases organicas combinadas se lavaron con salmuera (1 ml), se secaron sobre Na²SO⁴ y se concentraron a presion reducida. El residuo se purifico por TLC preparativa (eluyente:1:2 Hexanos:EtOAc) para proporcionar a-metileter 64A (aproximadamente 1,2 mg, 58%). ¹ H r Mn (600 MHz, CDCla) Desplazamiento = 9,22 (s, 1 H), 8,48 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,79 (s, 1 H), 7,75 (d, J = ^{8 , 8} Hz, 1 H), 7,63 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,59 (dd, J = 1,5, 8,5 Hz, 1 H), 5,74 (s, 1 H), 5,28 (d, J = 2,9 Hz, 1 H), 3,39 (s, 3 H), 3,29 (tt, J = 3,5, 11,4 Hz, 1 H), 3,14 (t, J = 10,0 Hz, 1 H), 2,52 (dd, J = 8,5, 11,4 Hz, 1 H), 2,42 - 2,29 (m, 3 H), 2,25 (t, J = 11,7 Hz, 1 H), 2,24 -2,08 (m, 5 H), 2,06 (td, J = 4,1, 12,9 Hz, 1 H), 1,93 (dd, J = 5,3, 17,0 Hz, 1 H), 1,86 (dq, J = 5,3, 12,3 Hz, 1 H), 1,79 (t, J = 12,0 Hz, 1 H), 1,75 - 1,61 (m, 2H), 1,32 (dtd, J = 4,7. 11,5, 14,0 Hz, 1 H), 0,53 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C²⁸H³²NO² [M+H]+:428.2584, encontrado 428.2573.

B-Metileter 64B

[0521]

[0522] La condicion de reaccion es la misma que la smtesis de a-metileter 64A. El residuo se purifico por TLC preparativa (eluyente:1:2 Hexanos:EtOAc) para proporcionar C3 p-metileter 64B (1,2 mg, 58%). ¹ H RMN (500 MHz, CDCl³) Desplazamiento = 9,22 (s, 1 H), 8,48 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,79 (s, 1 H), 7,76 (d, J = ^{8 , 8} Hz, 1 H), 7,63 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,60 (dd, J = 1,5, 8,3 Hz, 1 H), 5,74 - 5,70 (m, 1 H), 5,25 (dd, J = 2,2, 5,1 Hz, 1 H), 3,75 - 3,69 (m, 1 H), 3,35 (s, 3 H), 3,18 - 3,10 (m, J = 9,3 Hz, 1 H), 2,51 (dd, J = 8,5, 11,5 Hz, 1 H), 2,52 -2,44 (m, 1 H), 2,40 -2,26 (m, 4 H), 2,17 (s, 3 H), 2,14 - 2,08 (m, 1 H), 2,07 - 1,96 (m, 2H), 1,96 - 1,90 (m, 2H), 1,86 (dq, J = 4,9, 12,0 Hz, 1 H), 1,76 -1,61 (m, 1 H), 1,55 - 1,45 (m, 1 H), 0,54 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C²⁸H³²NO² [M+H]+:428.2584, encontrado 428.2599.

a-Monometilcarbamato 68A

[0523]

[0524] A una solucion de a-alcohol 17A (3,5 mg, 8,5 pmol, 1,00 equiv.) en CH³CN (350 pL) se anadio CDI (2,1 mg, 12,7 pmol, 1,50 equiv.) y la mezcla de reaccion se calento a reflujo durante 4 horas. La mezcla bruta se concentro a presion reducida y se uso para la siguiente reaccion sin purificacion adicional.

[0525] En una solucion de la mezcla cruda en DCM (300 pl) se anadio MeNH² en THF (2 M, 50 pl) a temperatura ambiente y se agito durante 14 horas. La mezcla bruta se concentro a presion reducida y se purifico por TLC preparativa (eluyente:hexanos:EtOAc 1:1) para proporcionar C3 a-monometilcarbamato 68A (2,4 mg, 60% en 2 etapas). ¹ H RMN (500 MHz, CDCh) Desplazamiento = 9,28 (s, 1 H), 8,50 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,87 (s, 1 H), 7,83 (d, J = ^{8 , 8} Hz, 1 H), 7,75 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,69 (d, J = ^{8 , 8} Hz, 1 H), 5,77 (s, 1 H), 5,30 (dd, J = 2,2, 4,6 Hz, 1 H), 4,76 (t, J = 11,7 Hz, 1 H), 4,61 (br s., 1 H), 3,17 (t, J = 10,0 Hz, 1 H), 2,82 (d, J = 4,4 Hz, 3 H), 2,53 (dd, J = 8,5, 11,5 Hz, 1 H), 2,38 (d, J = 17,1 Hz, 2H), 2,32 (dd, J = 3,7. 11,5 Hz, 1 H), 2,30 -2,14 (m, 5) H), 2,13 -2,01 (m, 2H), 1,95 (dd, J = 5,1, 17,3 Hz, 1 H), 1,94 - 1,82 (m, 2H), 1,78 - 1,67 (m, 2H), 1,43 (dq, J = 4,9, 12,7 Hz, 1 H), 0,55 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C³⁰H³⁵N²O³ [M+H]+:471.2642, encontrado 471.2631.

a-metoxietileter 63A

[0526]

[0527] A una solucion de a-alcohol 17A (2,0 mg, 4,83 pmol, 1,00 equiv.) en DMF (300 pl) se le anadio 60% en peso de NaH (1,0 mg, 24,1 pmol, 5,00 equiv.) a temperatura ambiente y se agito 30 min antes de la adicion de MeO(CH²)²Br (1,6 pL, 16,6 pmol, 3,00 equiv.). Despues de 36 horas, se anadieron una solucion 2M NaOH (200 pl) y acetato de etilo (500 pl). La fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 X 1 ml) y las fases organicas combinadas se lavaron con salmuera (1 ml), se secaron sobre Na²SO⁴ y se concentraron a presion reducida. El residuo se purifico por TLC preparativa (eluyente:2:5 Hexanos:EtOAc) para proporcionar C3 a-metoxietileter 63A (aproximadamente 0,7 mg, 27%). ¹ H RMN (600 MHz, CDCh) Desplazamiento = 9,24 (s, 1 H), 8,50 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,81 (s, 1 H), 7,77 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 7,65 (d, J = 5,9 Hz, 1 H), 7,61 (d, J = ^{8 , 8} Hz, 1 H), 5,75 (s, 1 H), 5,29 (d, J = 2,4 Hz, 1 H), 3,74 -3,63 (m, 2H), 3,61 - 3,51 (m, 2H), 3,44 (tt, J = 3,9, 11,7 Hz, 1 H), 3,44 - 3,39 (s, 3 H), 3,16 (t, J) = 9,8 Hz, 1 H), 2,54 (dd, J = 8,5, 11,5 Hz, 1 H), 2,43 - 2,30 (m, 3 H), 2,30 - 2,17 (m, 4 H), 2,17 - 2,02 (m, 3 H), 1,95 (dd, J = 5,1, 17,3 Hz, 1 H), 1,92 - 1,82 (m, 2H), 1,78 - 1,62 (m, J = 8,3 Hz, 2H), 1,41 (dtd, J = 4,1, 11,9, 13,5 Hz, 1 H), 0,55 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C²⁸H³²NO² [M+H]+:472.2846, encontrado 472.2850.

EJEMPLO 7. SINTESIS DE AMINAS DE ALCOHOLES

g-Dimetilhidantoina 74A

[0528]

[0529] A una solucion de p-alcohol 17B (5,0 mg, 12,3 jmol, 1,0 equiv.) en THF (400 j L) se le anadio dimetilhidantoma (7.8 mg, 61,6 jmol, 5,0 equiv.) y PPh³ (9,7 mg, 36,9 jmol, 3,0 equiv. La mezcla de reaccion se enfrio a 0°C y se agoto (16,1 j l de solucion al 40% en peso en tolueno, 36,9 jmol, 3,0 equiv.). La reaccion se calento a 50°C y se agito durante 17 h. Despues de enfriar la mezcla de reaccion a temperatura ambiente, se anadio solucion de 1N NaOH (300 jl) y se anadio la fase acuosa con acetato de etilo (3 X 0,5 ml) y las fases organicas combinadas se lavaron con salmuera ⁽¹ ml) y se secaron. sobre Na²SO⁴, y se concentraron bajo presion reducida. La mezcla bruta se purifico mediante TLC preparativa (gel de sflice, eluyente:40:1 MeOH:diclorometano) para proporcionar a-dimetilhidantoma 74A (0,9 mg, 14%). ¹ H RMN (500 MHz, CDCh) Desplazamiento = 9,24 (s, 1 H), 8,50 (d, J = 5,4 Hz, 1 H), 7,81 (s, 1 H), 7,77 (d, J = ^{8 , 8} Hz, 1 H), 7,64 (d, J = 5,4 Hz, 1 H), 7,61 (dd, J = 1,5, ^{8 , 8} Hz, 1 H), 5,79 (d, J = 1,5 Hz, 1 H), 5,32 (dd, J = 2,7. 5,1 Hz, 1 H), 5,18 (s, 1 H), 4,10 (tdd, J = 3,2, 11,3, 13,1 Hz, 1 H), 3,16 (dd, J = 9,3, 10,7 Hz, 1 H), 2,86 (t, J = 12,7 Hz, 1 H), 2,54 (dd, J = 8,3, 11,7 Hz, 1 H), 2,45 (dd, J = 2,9, 14,6 Hz, 1 H), 2,30 (br. s., ⁶ H), 2,19 (tq, J = 4,4, 9,0 Hz, 1 H), 2,09 -2,00 (m, 1 H), 1,96 (dd, J = 5,4, 17,6 Hz, 1 H), 1,92 - 1,80 (m, 2H), 1,80 - 1,64 (m, 3 H), 1,42 (d, J = 4,9 Hz, ⁶ H), 0,56 (s, 3 H). HRMS (ESI) (m/z) calculado para C³³H³⁸N³O³ [M+H]+:524.2908, encontrado 524.2892.

Metodos biologicos

Cultivo celular y lineas celulares

[0530] Se obtuvieron celulas MV4; 11, RS4; 11, HL-60, K562, L-Wnt3A y L de ATCC. Ross Levine (MSKCC) proporciono las celulas HEL, NB4, KG1, UKE-1, UKE-1per, SET-2 y SET-2per. MOLM-14 fue proporcionado por Scott Armstrong (Boston Children's Hospital). Las celulas MV4; 11-mCLP fueron proporcionadas por Andrew Kung (Dana Farber Cancer Institute). Las celulas HEK293STF fueron proporcionadas por Jeremy Nathans (Escuela de Medicina de la Universidad Johns Hopkins). Todas las celulas se mantuvieron en una incubadora humidificada ajustada a 37°C, 5% de CO². Las celulas MV4; 11, RS4; 11, K562, HEL, NB4, MOLM-14 y KG1 se cultivaron en RPMI-1640 con FBS al 10%, 100 U ml^{' 1} de penicilina y 100 jg ml^{' 1} de estreptomicina. Se cultivaron celulas HaCaT y HEK293STF en DMEM con FBS al 10%, 100 U ml^-1 de penicilina y 100 jg ml^-1 de estreptomicina, con 200 jg ml^-1 G418 para celulas HEK293STF. Las celulas L-Wnt3A y L se cultivaron en DMEM con 10% de FBS, 100 U ml^-1 de penicilina, 100 jg ml^-1 de estreptomicina y 400 jg ml^-1 G418 (solo para L-Wnt3A). Las celulas SET-2 se cultivaron en RPMI-1640 con FBS al 20%, 100 U ml^-1 de penicilina y 100 jg ml^-1 de estreptomicina. HL-60 se cultivaron en IMDM con 20% de FBS, 100 U ml^-1 de penicilina y 100 jg ml^-1 de estreptomicina. Las celulas UKE-1 se cultivaron en RPMI-1640 con 10% de FBS, 10% de suero de caballo, 100 U ml^-1 de penicilina, 100 jg ml^-1 de estreptomicina y 1 jM de hidrocortisona. Las celulas SET-2per y UKE-1per se mantuvieron en presencia de ruxolitinib 0,7 jM y 1 jM, respectivamente. Se obtuvieron celulas endoteliales de vena umbilical humana (HUVEC) de Life Technologies y se cultivaron en medio M200 con un suplemento de bajo crecimiento de suero (LSGS, Life Technologies).

Reactivos

[0531] Los compuestos para ensayo se prepararon como soluciones madre de DMSO al 100% y se almacenaron bajo argon a -80°C. Los anticuerpos anti-FLAG (F1804) y anti-actina (A5060) de doxorubicina se obtuvieron de Sigma-Aldrich. Los anticuerpos anti-Smad 2/3 (8565), anti-Statl (9172), anti-fosfo-Statl TyR701 (9171) y anti-fosfo-Statl SeR727 (9177) se obtuvieron de Cell Signaling Technologies. Se obtuvo anti-fosfo-Smad 2/3 T220/T179 de Rockland, se obtuvo IFNy de Life Technologies y se obtuvo TGFp1 de R&D Systems. Los medios condicionados Wnt3A y los medios condicionados con celulas L se obtuvieron como se describe por ATCC.

Plasmidos, mutagenesis, envasado y transduccion.

[0532] CDK⁸ etiquetado con 5'-FLAG se amplifico por PCR a partir de pBabe.puro.CDK⁸.flag (Addgene, fuente original Firestein et al., Nature (2008) 455, 547-551) con la adicion de EcoRI (5') y los sitios de restriccion XbaI (3') y se clonaron en el vector de expresion lentiviral pLVX-EF1alpha-IRES-mCherry (Clonetech) mediante ligadura de extremo pegajoso (ecoRI y XbaI) y se transformaron en E. coli (One Shot Stbl3, Invitrogen). El CDK19 etiquetado con 5'-FLAG se amplifico por PCR a partir de F-CDK⁸ L (Addgene, fuente original Conaway et al., FEBS Letters (2005) 579, 904-908) con la adicion de sitios de restriccion SpeI(5')y XbaI (3') y se clono en el vector de expresion lentiviral pLVX-EF1alpha-IRES-ZsGreen1 (Clonetech) por ligadura en el extremo pegajoso y se transformo en E. coli (One Shot Stbl3, Invitrogen). Las mutaciones puntuales se introdujeron mediante la PCR plasmida completa (kit de mutagenesis dirigida al sitio QuikChange II XL, Agilent). 5'-FLAG etiquetado CDK⁸ o CDK19 mutante fue posteriormente amplificado por PCR, utilizando cebadores EF1alpha delanteros e IRES inversos (ver Tabla 1), y clonado en pLVX-EF1alpha-IRES-mCherry o pLVX-EF1alpha-IRES-ZsGreen1, respectivamente, y transformado en E. coli (One Shot Stbl3, Invitrogen). Los cebadores utilizados para clonar CDK⁸ y CDK19 e introducir la mutacion puntual W105M en cada protema se proporcionan en la Tabla 1.

[0533] Los vectores de expresion lentivirales fueron empaquetados por la Universidad de Massachusetts RNAi Core Facility mediante cotransfeccion de celulas 293T con el vector de empaquetamiento psPAX² (Addgene) y el vector de envoltura pMD2.G (Addgene). 48 h despues de la transfeccion, se recogieron los sobrenadantes vmcos, se pasaron a traves de un filtro de 0,45 pm (Millipore) y se usaron para la transduccion (MOI 2 para celulas 293T). Las transducciones se realizaron con RetroNectin (Clontech), de acuerdo con las instrucciones del fabricante. Brevemente, las placas esteriles de 24 pocillos se recubrieron con 500 pl de RetroNectina 20 pg/ml en PBS esteril y se almacenaron a 4°C durante la noche. Al dfa siguiente, la solucion de RetroNectin se aspiro y las placas se bloquearon con BSA al 2% en PBS esteril durante 30 minutos a temperatura ambiente. Las placas se lavaron luego 1x con PBS y se agregaron 300 a 500 pl de sobrenadante viral. Las placas se centrifugaron a 2.000 x g durante 1,5 h con un cambio de orientacion de 180° despues de 45 min. Las placas se incubaron luego durante 2 h en una incubadora humidificada ajustada a 37°C, 5% de CO². Luego se elimino el sobrenadante vmco y se agregaron 500 pl de 200.000 celulas/pl a cada pocillo. Despues de la incubacion de las placas durante 1-3 dfas, las celulas se expandieron y las celulas fluorescentes que expresaban protemas se aislaron mediante FACS.

[0534] Con el fin de determinar si CDK⁸ y CDK19 median los efectos antiproliferativos de la cortistatina A o de los analogos de la cortistatina A, se identificaron alelos de ambas mediadoras quinasas que hanan a las celulas resistentes a la inhibicion del crecimiento por la cortistatina A. Con la grna de nuestra estructura cristalina, CDK⁸ Trp105 se selecciono para la mutacion a Met, ya que el modelo molecular sugirio que interrumpina la union de CDK⁸ a la cortistatina A pero no a ATP. Se encontro que las celulas MOLM-14 que expresaban en exceso FLAG-CDK⁸ W105M o FLAG-CDK19 W105M estaban altamente desensibilizadas a la inhibicion del crecimiento de cortistatina A (> 50 veces, Figura 10A) y 14BNO (> 50 veces, Figura 22). Ademas, CDK⁸ W105M era catalfticamente competente pero mucho menos sensible a la inhibicion de la quinasa por la cortistatina A in vitro (Figura 10B) y en las celulas (Figura 10C), lo que demuestra que estas mutaciones actuan reduciendo la afinidad por la cortistatina A, pero no por el ATP (Figura 10B). En conjunto, estos resultados proporcionaron una prueba inequvoca de que CDK⁸ y CDK19 actuan de manera redundante para mediar los efectos antiproliferativos de la cortistatina A. Para las Figuras 10A y 22, las celulas se pasaron y se agrego compuesto fresco el dfa 3 (media /- error estandar, n=3). Para la Figura 10B, se aislaron FLAG-CDK⁸ y FLAG-CDK⁸ W105M a partir de celulas MOLM-14 que sobreexpresan cada protema y se sometieron a reacciones de quinasa en presencia de las concentraciones indicadas de cortistatina A. Para la Figura 10C, las celulas MOLM-14 expresan niveles iguales de FLAG-CDK⁸ o FLAG-CDK⁸ W105M se trataron con las concentraciones indicadas de cortistatina A durante 1 hora, seguido de IFN-gamma durante 1 hora. Las celulas se recogieron, se lisaron y se analizaron mediante transferencia Western.

Ensayos de crecimiento celular

[0535] Las HUVEC se plaquearon por triplicado en placas de 96 pocillos a una densidad de 1.000 celulas/pocillo en 75 pl. Despues de 24 h, los compuestos se diluyeron en serie en medio y se administraron a las celulas como soluciones 4x en 25 |jl (0,1% DMSO final para ensayo). 96 h despues de la adicion del compuesto, se anadio CellTiter-Blue (Promega) a los pocillos, las placas se incubaron a 37°C durante 90 min y se detecto la fluorescencia (excitacion de 555 nm; emision de 580 nm) utilizando un SPECTRAmax M3. La CI⁵⁰ se determino ajustando los datos a una curva de dosis-respuesta de cuatro parametros utilizando GraphPad Prism 5.0.

[0536] Para todas las demas lmeas celulares, los compuestos se diluyeron en serie en medio y se dispensaron por triplicado en placas de 96 pocillos (⁰ ,¹ % de DMSO final para ensayo) seguido de la adicion de celulas en crecimiento exponencial a densidades que oscilan entre 5.000 y 30.000 celulas/pocillo. Las celulas tambien se sembraron en 2 pocillos de control adicionales que conteman vehfculo (DMSO al 0,1%). Despues de 3 dfas, el numero de celulas viables en uno de los pocillos de control se conto con un hemocitometro o MOXIZ (Orflo) y se dividio un volumen igual de celulas para todos los pocillos con vehfculo/compuestos nuevos, de modo que la densidad de siembra resultante para el el pozo de control fue de 5,000-30,000 celulas/pozo, igualando la densidad de siembra inicial en ese pozo. Este procedimiento se repitio el dfa 7 y el dfa ^{1 0}. El crecimiento se calculo como % de crecimiento = 100 X (numero total de celulas estimado en el numero de celulas iniciales del dfa 0)/(numero promedio total de celulas estable del vehuculo - numero de celulas iniciales del dfa 0). Para determinar el numero de celulas estimado en cada pocillo, las celulas que se contaron en el pocillo de control se diluyeron 3 veces para una serie de dilucion de ⁸ puntos y se transfirieron a placas de 384 pocillos por duplicado, 20 ml por pocillo. Las celulas en todos los otros pocillos se diluyeron 4 veces y se transfirieron a placas de 384 pocillos por duplicado, 20 ml por pocillo. Posteriormente, se agregaron 20 ml de CellTiter-Glo (Promega) a todos los pocillos y se detecto la luminiscencia con un SPECTRAmax M3. La serie de dilucion del pozo de control se ajusto a una regresion lineal y se uso como un estandar para calcular el numero de celulas estimado para cada pozo. Para los dfas 7 y 10, el numero total de celulas estimado representa el numero de celulas teorico ajustado dividido.

Ensayo de quinasa in vitro CDK⁸

[0537] El ensayo de quinasa in vitro se realizo como se describio previamente (vease, por ejemplo, Knuesel et al., Mol. Cell. Biol. (2009) 29, 650-661). FLAG-CDK⁸ y FLAG-CDK^{8 w} 105M se expresaron en exceso y se purificaron a partir de celulas MOLM-14.

Estructura cristalina de rayos X

[0538] La estructura cristalina de rayos X de la cortistatina A (CA) unida a CDK⁸ /ciclina C se obtuvo por Proteros Biostructures GmbH. La expresion y purificacion de CDK⁸ /ciclina C se realizo como se describio anteriormente (ver, por ejemplo, Schneider et al., J. Mol. Biol. (2011) 412, 251-266). Los datos de difraccion se recopilaron en SWISS LIGHT SOURCE (SLS, Villigen, Suiza). La estructura fue resuelta y refinada a una resolucion final de 2,40 A. Los datos fueron procesados utilizando los programas XDS y XSCALE. La informacion de fase necesaria para determinar y analizar la estructura se obtuvo mediante reemplazo molecular con una estructura previamente resuelta de CDK⁸ /CycC como modelo de busqueda. La posterior construccion y refinamiento del modelo se realizo con los paquetes de software CCP4 y COOT. Para el calculo del factor R libre, una medida para validar en forma cruzada la correccion del modelo final, aproximadamente el 3,4% de las reflexiones medidas se excluyeron del procedimiento de refinamiento. Se llevo a cabo el refinamiento de TLS (usando REFMAC5, CCP4), lo que resulto en menores factores R y una mayor calidad del mapa de densidad electronica. La parametrizacion de ligandos y la generacion de los archivos de biblioteca correspondientes se llevaron a cabo con CORINA. El modelo de agua se construyo con el algoritmo "Buscar aguas" de COOT al colocar las moleculas de agua en los picos del mapa de Fo-Fc contorneado en 3,0, luego se refino con REFMAC5 y se verificaron todas las aguas con la herramienta de validacion de COOT. Los criterios para la lista de aguas sospechosas fueron: Factor B mayor 80 A2, mapa 2Fo-Fc menor que 1,2 a, distancia al contacto mas cercano menor que 2,3 A o mayor que 3,5 A. Las moleculas de agua sospechosas y las del sitio activo (distancia al inhibidor inferior a ¹⁰ A) se verificaron manualmente. La ocupacion de las cadenas laterales, que se encontraban en picos negativos en el mapa de Fo-Fc (contorneado a -3,0 a), se establecio en cero y posteriormente en 0,5 si se produjo un pico positivo despues del siguiente ciclo de refinamiento. El grafico de Ramachandran del modelo final muestra el 93,2% de todos los residuos en la region mas favorecida, el ⁶ ,⁶ % en la region adicionalmente permitida y el 0,2% en la region generosamente permitida. No se encuentran residuos en la region prohibida. Siguen las tablas de recoleccion, procesamiento y refinamiento de datos. Los valores entre parentesis se refieren a la bandeja de mayor resolucion.

[0539] Para entender como la cortistatina A inhibe a CDK⁸ , resolvimos una estructura cristalina de rayos X del complejo ternario de cortistatina A/CDK⁸ /ciclina C a una resolucion de 2,40 A (Figura 16A). La cortistatina A se une al sitio de union a ATP de CDK⁸ y forma un enlace H unico con CDK⁸ (lmea discontinua, Figura 16C) entre el nitrogeno de isoquinolina de la cortistatina A y la cadena principal amida NH de Ala100 ubicada en la region bisagra. Los contactos restantes entre la cortistatina A y CDK⁸ son hidrofobos, y la cortistatina A presenta una notable complementariedad de forma con el sitio de union de ATP (Figura 16B). En particular, el grupo metilo angular C13 y el puente de etano C5-C9 de la cortistatina A llenan perfectamente las cavidades hidrofobas formadas por las cadenas laterales de His106, Ala155, Trp105 y Asp103 (Figura 16C). Otros CDK no tienen cavidades hidrofobas similares para acomodar el puente de metano C13-metilo y C5-C9 de la cortistatina A, quizas explicando la impresionante selectividad de la cortistatina A para CDK8/CDK19.

[0540] Tambien hay una aparente interaccion cation-n entre el ion C3-N,N-dimetilamonio cargado de cortistatina A y Trp105 de CDK⁸ , que estan en contacto cercano (3,4 A). CDK⁸ y CDK19 son los unicos CDK con Trp en el aminoacido 105, lo que sugiere que la interaccion cation-n y los contactos hidrofobicos entre la cortistatina A y Trp105 podnan ser importantes para la alta afinidad y selectividad de la cortistatina A para CDK⁸. En la Figura 16D se muestra una vista mas cercana del contacto entre Trp105 y el ion N,N-dimetilamonio de la cortistatina A. Existe un contacto directo entre un grupo metilo de la N,N-dimetilamina de la cortistatina A y Trp105, que es perfecto para una interaccion cation-n.

[0541] Es muy sorprendente que 14B fuera tan potente o mas potente (aproximadamente 2 veces mas potente) que una cortistatina A en la inhibicion del crecimiento celular y en la inhibicion de la quinasa CDK⁸ ya que la amina C3 ahora es axial y podna esperarse que chocara con Trp105.

Transferencia Western

[0542] Para los estudios STAT1, las celulas MOLM-14 se trataron con vehmulo (DMSO al 0,1%) o compuesto durante 1 h seguido de la adicion de IFNy (Life Technologies, PHC4031) durante 1 h. Las celulas se recogieron, se lavaron dos veces con PBS fno y se congelaron instantaneamente en nitrogeno lfquido. Para toda la transferencia de Western, se prepararon lisados de celulas completas en tampon RIPA (Sigma-Aldrich, R0278) con aditivos de fosfatasa e inhibidores de proteasa (Sigma-Aldrich, P8340, P0044, P5762) y la concentracion de protemas se determino mediante ensayo BCA (Thermo Scientific, 23225). Los extractos de RIPA se resolvieron mediante electroforesis en gel de poliacrilamida desnaturalizante (Life Technologies, NuPAGE) y se transfirieron a una membrana de PVDF (Millipore) utilizando el sistema Mini Trans-Blot (BioRad). Las membranas se sondaron segun lo recomendado por los fabricantes de anticuerpos y las protemas se detectaron por quimioluminiscencia utilizando anticuerpos secundarios conjugados con peroxidasa de horsera. Para los estudios SMAD2/3, las celulas HaCaT se trataron como se describe para STAT1 con la adicion de TGFp1 (R&D Systems) en lugar de IPNy.

Ensayo de reportero

[0543] HEK293STF de crecimiento exponencial se sembraron en triplicato en placas de 96 pocillos a una densidad de 5.000 celulas/pocillo en 75 pl. Para experimentos con azakenpaulona, despues de 24 h, la cortistatina A se diluyo en serie en un medio que contema azakenpaulona 40 pM y se administro a las celulas como soluciones 4x en 25 pl (DMSO al 0,2% y azakenpaulona final 10 pM para ensayo). Los pocillos de control por triplicado adicionales en cada placa teman medios sin celulas o celulas sin azakenpaulona. Para los experimentos con medios condicionados con Wnt3A, despues de 24 h, los compuestos se diluyeron en serie en medios condicionados con Wnt3A en forma de soluciones 1x (0,1% DMSO final). Se retiraron los medios antiguos de las celulas y se reemplazaron con el medio/Wnt3A-compuesto. Los pocillos de control por triplicado adicionales en cada placa teman medios sin celulas o celulas que se trataron con medios acondicionados con L (sin Wnt3A). Despues de 24 h, los ensayos CellTiter-Fluor y Steady-Glo (Promega) se realizaron posteriormente en serie para determinar la viabilidad y la luminiscencia, respectivamente, en cada pocillo (mediciones realizadas en un SPECTRAmax M3, Molecular Devices). Los graficos se realizaron en Prism 5 (GraphPad Software, Inc.) con ajuste de regresion no lineal a una curva de dosis-respuesta sigmoidal (pendiente variable).

Expresion genica

[0544] Se sembraron celulas MOLM-14, MV4;11 y K562 de crecimiento exponencial en placas de 12 pocillos a una densidad de 500.000 a 800.000 celulas/ml en 1 ml de medio seguido de la adicion de un vehmulo (DMSO al 0,1%) o cortistatina A a 10 nM ("CA10") para MOLM-14 y MV4;11 celulas y 25 nM para celulas K562 en pocillos por triplicado. Despues de 24 h, las celulas se lavaron 2 veces con PBS fno, se congelaron instantaneamente y el ARN se aislo mediante RNeasy Plus Microkit (Qiagen) o TRIzol (Life Technologies). El ARN fue procesado por el Centro de Micromatrices de Dana Farber Cancer Institute e hibridado con la micromatriz Human U133 Plus 2,0 (Affymetrix). Las micromatrices fueron controladas por calidad utilizando el paquete affyQCReport Bioconductor (ver, por ejemplo, Gentleman et al., Genome Biol (2004) 5: R80; R Core Development Team, R:A Language and Environment for Statistical Gentleman et al. Viena, Austria. ISBN 3-900051-07-0). Las matrices satisfactorias se corrigieron para el fondo, se normalizaron y se transformaron en log2 utilizando la funcion rma del paquete de Bioconductor afy (Ver, por ejemplo, Rafael et al., Nucleic Acids Research (2003) 31:e15; Bolstad et al., Bioinformatics (2003) 19:185-193; Irizarry et al., Biostatistics (2003) 4:249-264). Las llamadas presentes/ausentes se realizaron utilizando la funcion mas5calls del paquete affy. Los conjuntos de sondas presentes en >20% de las muestras y para los cuales el rango intercuartil fue >log2 (1,2) se conservaron para un analisis adicional. La correccion de lotes por tipo de celula (MOLM-14 vs. MV4; 11) se realizo con ComBat (Ver, por ejemplo, Johnson et al., Biostatistics (2007) 8:118-127). Utilizamos GenePattern para la agrupacion jerarquica no supervisada de las muestras basadas en la distancia euclidiana. Los conjuntos de sondas que fueron significativamente regulados hacia arriba o hacia abajo al menos 1,5 veces en las muestras de control tratadas con CA10 versus DMSO se identificaron utilizando el paquete de bioconductor de limma (ver, por ejemplo, Smyth, GK (2005). Limma:modelos lineales para datos de micromatrices En: " Bioinformatics and Computational Biology Solutions using R and Bioconductor". R. Gentleman, V. Carey, S. Dudoit, R. Irizarry, W. Huber (eds), Springer, Nueva York, 2005). Establecimos un valor de P<0,05, corregido para la prueba de hipotesis multiple mediante el metodo de Benjamini-Hochberg (ver, por ejemplo, Benjamini, Y. & Hochberg, YJR Stat. Soc., B (1995) 57:289-300) como nuestro corte de significado. El analisis de enriquecimiento de conjuntos de genes (vease, por ejemplo, Subramanian et al., Proc Natl Acad Sci US A. (2005) 102:15545-50) se llevo a cabo utilizando pruebas T en valores log2 como la metrica. Las firmas incluyeron conjuntos de genes curados (C2) descargados de la MSigDB de Broad, asf como firmas conservadas internamente en la literatura.

Estudios in vivo

[0545] Para estudios farmacocineticos con cortistatina A (CA), se recogieron muestras de sangre de ratones CD-1 en los momentos indicados despues de la administracion ip de cortistatina A a 10 mg kg^-1 (Figura 11A) y 1 mg/kg (Figura 11B) y se analizo por HPLC/MS/MS para evaluar la concentracion de cortistatina A.

[0546] Para estudios farmacocineticos con (14A), (14A) se formulo en 20% de hidroxipropilo-beta-ciclodextrina (HPCD) y a ratones machos CD-1 se les administro una dosis unica de 14A a 3 mg/kg por via ip e intravenosa (iv) y 10 mg/kg oral (po). Antes de la dosificacion, los ratones se mantuvieron en ayunas durante la noche hasta 4 horas despues de la dosificacion. Las muestras de sangre se recogieron en los puntos de tiempo indicados y se analizaron por HPLC/MS/MS para evaluar la concentracion de (14A). Consulte la Figura 24. A partir de estos estudios, se realizaron las siguientes observaciones: (1) el compuesto (14A) tiene un aclaramiento IV en ratones CD-1 macho de 29 mL/min/kg, que es solo 1/3 del flujo sangumeo hepatico en esta especie e indica que (14A) tiene buena estabilidad; (2) el Vss es grande (aproximadamente 11,7 L/kg), por lo que (14A) tiene una buena distribucion tisular; (3) se encontro que la biodisponibilidad oral era aproximadamente del 44%; (4) la Cmax despues de la dosis oral fue de 255 ng/mL; (5) el t1/2 despues de la dosis oral fue de aproximadamente 5 horas (las concentraciones de C24 orales fueron de 14,2 ng/mL); y (5) la biodisponibilidad de IP fue del 95%.

[0547] Los estudios de eficacia utilizando el modelo de xenoinjerto MV4;11 se realizaron como se describe previamente. Ver, por ejemplo, Etchin et al., Leukemia (2013) 27. 66-74. Brevemente, se introdujeron 2 millones de celulas MV4;11 mCLP en ratones NOD-SCID-IL2RcYnull (nSg ) de 7 semanas de edad (The Jackson Laboratory) mediante inyeccion en la vena de la cola. La carga tumoral se evaluo mediante imagenes de bioluminiscencia (BLl) utilizando un sistema IVIS Spectrum (Caliper Life Sciences). 7 dfas despues de la inyeccion, se documento el establecimiento de leucemia por BLI y los ratones se dividieron en grupos de tratamiento para recibir un vehmulo (20% de hidroxipropilo-p-ciclodextrina) o cortistatina A (0,05 y 0,16 mg kg'1) y se trataron una vez al dfa por 15 dfas. A los 30 dfas posteriores a la fecha de inicio del tratamiento, se sacrificaron 3 ratones por grupo y se obtuvieron recuentos sangumeos utilizando el instrumento Hemavet 950 F (Drew Scientific) y se recogieron y analizaron celulas de sangre periferica, y bazo, femur, y se analizaron por citometna de flujo (^lS^r Fortessa, ^bD Biosciences). Los ratones y una porcion del bazo tambien se conservaron en bouins para histopatologfa. Los ratones se seccionaron, se embebieron en parafina y se tineron con hematoxilina y eosina. La supervivencia de los ratones tratados con el farmaco se midio como el tiempo desde el inicio del tratamiento hasta el estado de moribundidad. El beneficio de supervivencia se evaluo mediante el analisis de Kaplan-Meier. Para las pruebas de seguridad con cortistatina A (Figura 13), los ratones hembra CD-1 se trataron con un vehmulo (20% de hidroxipropilo-p-ciclodextrina) o cortistatina A (0,16 mg kg-1) una vez al dfa durante 15 dfas y se pesaron diariamente. Dos horas despues de la ultima dosis, se sacrificaron los ratones, se obtuvieron recuentos sangumeos, se analizo la qmmica sangumea y se fijaron los microfonos con bouins para histopatologfa. Los estudios de eficacia utilizando el modelo murino de mielofibrosis primaria (ratones MPLW515L) se realizaron como se describio anteriormente (ver, por ejemplo, Marubayashi, et al., J. Clin, Invest. (2010) 120, 3578-3593) con una dosis diaria con vehmulo. (20% de hidroxipropilo-p-ciclodextrina) o cortistatina A. Para los estudios de eficacia que utilizan el modelo de xenoinjerto subcutaneo s ET-2, se inyectaron 1x10⁷ celulas tumorales SET-2 en matrigel al 50% en el flanco de ratones hembra Beige SCID de ⁸ a 12 semanas de edad. Una vez que los tumores alcanzaron un tamano promedio de 80-120 mm3, los ratones se trataron con vehmulo o 0,16 mg kg^-1 diariamente durante la duracion del estudio.

Ensayo de estabilidad metabolica del microsoma hepatico

[0548] Los compuestos de ensayo se incubaron a 37°C con microsomas hepaticos agrupados de multiples donantes a 1 micromolar en presencia de un sistema de regeneracion de NADPH a 0,5 mg/ml de protema microsomal. A los 0, 5, 10, 20, 30 y 60 minutos, las muestras se retiraron y se mezclaron con acetonitrilo frio que contema un patron interno. Despues de la separacion de protemas, las muestras se analizaron por LC/^m S/MS para detectar la desaparicion del compuesto de ensayo utilizando la relacion del area del pico del analito al estandar interno. A partir de los valores, se calculo el aclaramiento del microsoma. Las especies utilizadas fueron humanos, ratas Sprague Dawley, perros beagle y ratones CD-1.

Ensayo de estabilidad de hepatocitos humanos

[0549] Los compuestos de ensayo se incubaron por duplicado con hepatocitos crioconservados a 37°C. Las celulas se descongelaron; celulas viables contadas, y equilibradas de acuerdo a las instrucciones del proveedor. Despues de 30 minutos de equilibrio a 37°C con agitacion suave, los compuestos de prueba se agregaron a las celulas para dar la concentracion final deseada de 1 pM. La suspension celular se incubo a 37°C como anteriormente. En los momentos indicados, las muestras se extrajeron y se mezclaron con un volumen igual de Solucion de Paro helada (acetonitrilo que contiene estandares internos). Las reacciones detenidas se incubaron al menos diez minutos en hielo y se anadio un volumen adicional de agua. Las muestras se centrifugaron para eliminar la protema precipitada y los sobrenadantes se analizaron por LC/MS/MS para cuantificar el progenitor restante. Los datos se convirtieron a % restante dividiendo por el valor de concentracion de tiempo cero. Los datos se ajustaron a un modelo de decaimiento de primer orden para determinar la vida media. A partir de un grafico de log (In) area pico frente al tiempo, se determino la pendiente de la lmea. Posteriormente, la vida media y el aclaramiento intrmseco se calcularon mediante las siguientes ecuaciones:constante de velocidad de eliminacion (k) = (- pendiente); Vida media (T1/2) min = 0,693/k; Liquidacion intrmseca (CLint) (ml/min/millon de celulas) = (Vx0,693)/T1/2; V = volumen de incubacion ml/numero de celulas. Datos in vitro

[0550]

Otras realizaciones

[0551] En las reivindicaciones, los artfculos tales como "un", "una", "el" y "la" pueden significar uno o mas de uno a menos que se indique lo contrario o, de lo contrario, se desprenda del contexto. Las reclamaciones o descripciones que incluyen "o" entre uno o mas miembros de un grupo se consideran satisfechas si uno, mas de uno, o todos los miembros del grupo estan presentes, empleados o, de lo contrario, relevantes para un producto o proceso dado, a menos que se indique por el contrario o sea evidente por el contexto. La invencion incluye realizaciones en las que exactamente un miembro del grupo esta presente, empleado o de otro modo relevante para un producto o proceso dado. La invencion incluye realizaciones en las que mas de uno, o todos los miembros del grupo estan presentes, empleados o, por lo demas, relevantes para un producto o proceso dado.

[0552] Ademas, la invencion abarca todas las variaciones, combinaciones y permutaciones en las que una o mas limitaciones, elementos, clausulas y terminos descriptivos de una o mas de las reivindicaciones enumeradas se introducen en otra reivindicacion. Por ejemplo, cualquier reivindicacion que depende de otra reivindicacion puede modificarse para incluir una o mas limitaciones encontradas en cualquier otra reivindicacion que dependa de la misma reivindicacion base. Donde los elementos se presentan como listas, por ejemplo, en el formato de grupo de Markush, cada subgrupo de elementos tambien se revela, y cualquier elemento se puede eliminar del grupo. Debe entenderse que, en general, cuando la invencion, o aspectos de la invencion, se refieren a elementos y/o caractensticas particulares, ciertas realizaciones de la invencion o aspectos de la invencion consisten, o consisten esencialmente en, tales elementos y/o caractensticas. Para propositos de simplicidad, esas realizaciones no se han expuesto espedficamente en haec verba aqrn. Tambien se senala que los terminos "que comprende" y "que contiene" estan destinados a ser abiertos y permiten la inclusion de elementos o pasos adicionales.

[0553] Donde se dan los intervalos, se incluyen los puntos finales. Ademas, a menos que se indique lo contrario o sea evidente por el contexto y la comprension de un experto en la tecnica, los valores que se expresan como intervalos pueden asumir cualquier valor espedfico o sub-rango dentro de los rangos establecidos en diferentes realizaciones de la invencion, para la decima parte de la unidad del Umite inferior del rango, a menos que el contexto indique claramente lo contrario.

[0554] Esta solicitud se refiere a varias patentes emitidas, solicitudes de patentes publicadas, artfculos de revistas y otras publicaciones. Si hay un conflicto entre cualquiera de las referencias y la especificacion instantanea, la especificacion prevalecera. Ademas, cualquier realizacion particular de la presente invencion que cae dentro de la tecnica anterior puede excluirse explfcitamente de una o mas de las reivindicaciones. Debido a que tales realizaciones se consideran conocidas por un experto en la tecnica, pueden excluirse incluso si la exclusion no se establece explfcitamente en el presente documento. Cualquier realizacion particular de la invencion puede excluirse de cualquier reivindicacion, por cualquier razon, relacionada o no con la existencia del estado de la tecnica.

[0555] Los expertos en la tecnica reconoceran o podran determinar utilizando no mas que la experimentacion rutinaria muchos equivalentes a las realizaciones espedficas descritas en este documento. El alcance de las presentes realizaciones descritas en el presente documento no pretende limitarse a la descripcion anterior, sino que se establece en las reivindicaciones adjuntas. Los expertos en la materia apreciaran que pueden realizarse diversos cambios y modificaciones a esta descripcion sin apartarse del alcance de la presente invencion, como se define en las siguientes reivindicaciones.

Claims (40)

REIVINDICACIONES

1. Un compuesto de Formula:

o una sal farmaceuticamente aceptable o una sal de amina cuaternaria del mismo;

en donde:

m es 0, 1, 2, 3 o 4;

R¹ y R² se unen para formar un anillo de formula:

n es 0, 1, 2, 3 o 4;

cada instancia de R6A es independientemente halogeno, -NO² , -CN, -OR6C, SR6C, N(R6C)², -C(=O)R6C, -C(=O)OR6C, -C(=O)N(R6C))², alquilo opcionalmente sustituido, alquenilo opcionalmente sustituido, alquinilo opcionalmente sustituido, carbociclilo opcionalmente sustituido, heterociclilo opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido, o heteroarilo opcionalmente sustituido;

en donde cada caso de R6C es independientemente hidrogeno, alquilo opcionalmente sustituido, alquenilo opcionalmente sustituido, alquinilo opcionalmente sustituido, carbociclilo opcionalmente sustituido, heterociclilo opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido, heteroarilo opcionalmente sustituido, un grupo protector de oxfgeno cuando esta unido a oxfgeno, un grupo protector de azufre cuando se une a azufre, o un grupo protector de nitrogeno cuando se une a nitrogeno, opcionalmente cuando se une a N, los dos grupos R6C se pueden unir para formar un heterociclilo opcionalmente sustituido o un anillo de heteroarilo opcionalmente sustituido;

G es -O-, -S-, -NH-, -NR⁷-, -CH²-, -CH(R⁷)-, o -C(R⁷)²-;

cada instancia de R⁷ es independientemente amino, hidroxilo, halogeno, alquilo opcionalmente sustituido, alquenilo opcionalmente sustituido, alquinilo opcionalmente sustituido, carbociclilo opcionalmente sustituido, heterociclilo opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido, heteroarilo opcionalmente sustituido, amino sustituido, amino sustituido, hidroxilo, tiol, tiol sustituido, carbonilo, sulfonilo, sulfinilo o un grupo protector de nitrogeno cuando esta unido a un atomo de nitrogeno; y

opcionalmente, en donde dos grupos R⁷ se unen para formar un carbociclilo opcionalmente sustituido, un heterociclilo opcionalmente sustituido, un arilo opcionalmente sustituido o un anillo heteroarilo opcionalmente sustituido, o un grupo oxo (=O).

2. El compuesto de la reivindicacion 1 de Formula:

o una sal farmaceuticamente aceptable o una sal de amina cuaternaria del mismo.

3. El compuesto de la reivindicacion 2, en el que m o n son independientemente 0, 1 o 2.

4. El compuesto de la reivindicacion 3, en el que m es 0 y n es 1.

5. El compuesto de la reivindicacion 4, en el que G es -CH(R⁷)- o -C(R⁷)²- y al menos un R⁷ es hidroxilo.

6. El compuesto de la reivindicacion 3, en el que m es 0 y n es 0,

7. El compuesto de la reivindicacion ⁶ , en el que G es -NR7-, -CH(R7)- o -C(R⁷)²- y R⁷ es amino.

8. El compuesto de la reivindicacion 1 de Formula:

o una sal farmaceuticamente aceptable o una sal de amina cuaternaria del mismo.

9. El compuesto de la reivindicacion ⁸ , en el que m o n son independientemente 0, 1 o 2.

10. El compuesto de la reivindicacion 9, en donde m y n son 0,

11. El compuesto de la reivindicacion 10, en el que G es -CH(R7)- o -C(R⁷)²-, y R⁷ es hidroxilo.

12. El compuesto de la reivindicacion 10, en el que G es -NR7-, -CH(R7)- o -C(R⁷)²-, y R⁷ es amino.

13. El compuesto de la reivindicacion 1 de Formula:

o una sal farmaceuticamente aceptable o una sal de amina cuaternaria del mismo.

14. El compuesto de la reivindicacion 13, en donde m y n o independientemente 0, 1 o 2.

15. El compuesto de la reivindicacion 2, en el que el compuesto se selecciona del grupo que consiste en:

y sus sales farmaceuticamente aceptables.

16. El compuesto de la reivindicacion ⁸ , en el que el compuesto se selecciona del grupo que consiste en:

y sus sales farmacéuticamente aceptables.

17. El compuesto de la reivindicacion 13, en el que el compuesto se selecciona del grupo que consiste en:

y sus sales farmaceuticamente aceptables.

18. Una composicion farmaceutica que comprende un compuesto segun cualquiera de las reivindicaciones 1 a 17, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, en combinacion con un excipiente farmaceuticamente aceptable.

19. Un compuesto o sal farmaceuticamente aceptable del mismo de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 17 para uso en un metodo para tratar una afeccion asociada con CDK⁸ y/o actividad de quinasa CDK19, que comprende administrar a un sujeto que lo necesite el compuesto o sal farmaceuticamente aceptable del mismo de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 17, opcionalmente en una composicion farmaceutica; en donde la condicion es un trastorno proliferativo y el trastorno proliferativo es cancer.

20. Un compuesto o sal farmaceuticamente aceptable del mismo de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 17 para uso en un metodo para tratar una afeccion asociada con angiogenesis, que comprende administrar a un sujeto que lo necesite el compuesto o sal farmaceuticamente aceptable del mismo segun cualquiera de las reivindicaciones ¹ a 17, opcionalmente en una composicion farmaceutica de los mismos.

21. Un compuesto o sal farmaceuticamente aceptable del mismo para su uso de acuerdo con la reivindicacion 20, en el que la afeccion es una afeccion diabetica, una afeccion inflamatoria, degeneracion macular, obesidad, aterosclerosis y un trastorno proliferativo.

22. Un compuesto o sal farmaceuticamente aceptable del mismo para uso de acuerdo con la reivindicacion 21, en donde la condicion es un trastorno proliferativo y el trastorno proliferativo es una neoplasia mieloproliferativa (MPN) y la neoplasia mieloproliferativa (MPN) es la mielofibrosis primaria (PMF).

23. Un compuesto o sal farmaceuticamente aceptable del mismo para uso de acuerdo con la reivindicacion 19, en el que el cancer es un tumor solido o un cancer hematopoyetico.

24. Un compuesto o sal farmaceuticamente aceptable del mismo para uso segun la reivindicacion 23, en el que el cancer es un cancer hematopoyetico, y el cancer hematopoyetico se selecciona de mieloma multiple, linfoma y leucemia mielocftica aguda (AML).

25. Un compuesto o sal farmaceuticamente aceptable del mismo para uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 19 a 24, en el que el sujeto es un ser humano.

26. Un compuesto de formula:

o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo;

en donde:

m es 0, 1, 2, 3 o 4;

cada instancia de R6A es independientemente halogeno, -NO² , -CN, -OR6C, SR6C, N(R6C)², -C(=O)R6C, -C(=O)OR6C, -C(=O)N(R6C))², alquilo opcionalmente sustituido, alquenilo opcionalmente sustituido, alquinilo opcionalmente sustituido, carbociclilo opcionalmente sustituido, heterociclilo opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido, o heteroarilo opcionalmente sustituido; y

en donde cada caso de R6C es independientemente hidrogeno, alquilo opcionalmente sustituido, alquenilo opcionalmente sustituido, alquinilo opcionalmente sustituido, carbociclilo opcionalmente sustituido, heterociclilo opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido, heteroarilo opcionalmente sustituido, un grupo protector de oxfgeno cuando se une a oxfgeno, un grupo protector de azufre cuando esta unido a azufre, o un grupo protector de nitrogeno cuando esta unido a nitrogeno, opcionalmente cuando esta unido a N, los dos grupos R6C pueden unirse para formar un heterociclilo opcionalmente sustituido

o anillo de heteroarilo opcionalmente sustituido.

27. Un compuesto de formula:

o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo;

en donde:

m es 0, 1, 2, 3 o 4;

cada instancia de R6A es independientemente halogeno, -NO² , -CN, -OR6C, SR6C, N(R6C)², -C(=O)R6C, -C(=O)OR6C, -C(=O)N(R6C)² , alquilo opcionalmente sustituido, alquenilo opcionalmente sustituido, alquinilo opcionalmente sustituido, carbociclilo opcionalmente sustituido, heterociclilo opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido, o heteroarilo opcionalmente sustituido; y

en donde cada caso de R6C es independientemente hidrogeno, alquilo opcionalmente sustituido, alquenilo opcionalmente sustituido, alquinilo opcionalmente sustituido, carbociclilo opcionalmente sustituido, heterociclilo opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido, heteroarilo opcionalmente sustituido, un grupo protector de oxfgeno cuando se une a oxfgeno, un grupo protector de azufre cuando esta unido a azufre, o un grupo protector de nitrogeno cuando esta unido a nitrogeno, opcionalmente cuando esta unido a N, los dos grupos R6C se pueden unir para formar un heterociclilo opcionalmente sustituido o un anillo heteroarilo opcionalmente sustituido.

28. Un compuesto de formula:

o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo;

en donde:

m es 0, 1, 2, 3 o 4;

R³ es hidrogeno o alquilo opcionalmente sustituido;

R⁴ es hidrogeno, halogeno, alquilo opcionalmente sustituido o -Si(RA)³;

R⁵ es hidrogeno, halogeno o alquilo opcionalmente sustituido;

cada instancia de —-, designada como (a) y (b) representa un enlace simple o doble;

RO es alquilo opcionalmente sustituido, alquenilo opcionalmente sustituido, alquinilo opcionalmente sustituido, carbociclilo opcionalmente sustituido, heterociclilo opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido, heteroarilo opcionalmente sustituido, -C(=O)RA, -C(=O)ORA, -C(=O)N(RA)², o un grupo protector de oxfgeno. cada instancia de RA es independientemente hidrogeno, alquilo opcionalmente sustituido, alquenilo opcionalmente sustituido, alquinilo opcionalmente sustituido, carbociclilo opcionalmente sustituido, heterociclilo opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido, heteroarilo opcionalmente sustituido, carbonilo, sililo, un grupo protector de oxfgeno cuando esta unido al oxfgeno, un grupo protector de azufre cuando se une a azufre, o un grupo protector de nitrogeno cuando se une a nitrogeno; opcionalmente, cuando se unen a N, los dos grupos RA pueden unirse para formar un heterociclilo opcionalmente sustituido o un anillo heteroarilo opcionalmente sustituido;

cada instancia de R6A es independientemente halogeno, -NO² , -CN, -OR6C, SR6C, N(R6C)², -C(=O)R6C, -C(=O)OR6C, -C(=O)N(R6C)² , alquilo opcionalmente sustituido, alquenilo opcionalmente sustituido, alquinilo opcionalmente sustituido, carbociclilo opcionalmente sustituido, heterociclilo opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido o heteroarilo opcionalmente sustituido; y

en donde cada caso de R6C es independientemente hidrogeno, alquilo opcionalmente sustituido, alquenilo opcionalmente sustituido, alquinilo opcionalmente sustituido, carbociclilo opcionalmente sustituido, heterociclilo opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido, heteroarilo opcionalmente sustituido, un grupo protector de oxfgeno cuando se une a oxfgeno, un grupo protector de azufre cuando esta unido a azufre, o un grupo protector de nitrogeno cuando esta unido a nitrogeno, opcionalmente cuando esta unido a N, los dos grupos R6C se pueden unir para formar un heterociclilo opcionalmente sustituido o un anillo heteroarilo opcionalmente sustituido.

29. El compuesto de la reivindicacion 28, en el que el compuesto se selecciona del grupo que consiste en:

y sus sales farmaceuticamente aceptables.

30. Un compuesto de formula:

o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo;

en donde:

m es 0, 1, 2, 3 o 4;

R³ es hidrogeno o alquilo opcionalmente sustituido;

R⁴ es hidrogeno, halogeno, alquilo opcionalmente sustituido o -Si(RA)³;

R⁵ es hidrogeno, halogeno o alquilo opcionalmente sustituido;

cada instancia de —-, designada como (a) y (b) representa un enlace simple o doble;

RO es alquilo opcionalmente sustituido, alquenilo opcionalmente sustituido, alquinilo opcionalmente sustituido, carbociclilo opcionalmente sustituido, heterociclilo opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido, heteroarilo opcionalmente sustituido, -C(=O)RA, -C(=O)ORA, -C(=O)N(RA)², o un grupo protector de oxfgeno. cada instancia de RA es independientemente hidrogeno, alquilo opcionalmente sustituido, alquenilo opcionalmente sustituido, alquinilo opcionalmente sustituido, carbociclilo opcionalmente sustituido, heterociclilo opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido, heteroarilo opcionalmente sustituido, carbonilo, sililo, un grupo protector de oxfgeno cuando esta unido a oxfgeno, un grupo protector de azufre cuando esta unido a azufre, o un grupo protector de nitrogeno cuando esta unido a nitrogeno; opcionalmente, cuando se unen a N, los dos grupos RA pueden unirse para formar un heterociclilo opcionalmente sustituido o un anillo de heteroarilo opcionalmente sustituido;

cada instancia de R6A es independientemente halogeno, -NO² , -CN, -OR6C, SR6C, N(R6C)², -C(=O)R6C, -C(=O)OR6C, -C(=O)N(R6C)² , alquilo opcionalmente sustituido, alquenilo opcionalmente sustituido, alquinilo opcionalmente sustituido, carbociclilo opcionalmente sustituido, heterociclilo opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido, o heteroarilo opcionalmente sustituido; y

en donde cada caso de R6C es independientemente hidrogeno, alquilo opcionalmente sustituido, alquenilo opcionalmente sustituido, alquinilo opcionalmente sustituido, carbociclilo opcionalmente sustituido, heterociclilo opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido, heteroarilo opcionalmente sustituido, un grupo protector de oxfgeno cuando se une a oxfgeno, un grupo protector de azufre cuando esta unido a azufre, o un grupo protector de nitrogeno cuando esta unido a nitrogeno, opcionalmente cuando esta unido a N, los dos grupos R6C se pueden unir para formar un heterociclilo opcionalmente sustituido o un anillo heteroarilo opcionalmente sustituido.

31. El compuesto de la reivindicacion 26 de Formula:

o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.

32. Una composicion farmaceutica que comprende el compuesto:

o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, y un excipiente farmaceuticamente aceptable.

33. Un compuesto de Formula:

o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo;

para uso en un metodo de tratamiento de una afeccion medica asociada con CDK8 y/o actividad de quinasa CDK19, que comprende administrar a un sujeto que lo necesite el compuesto o la sal farmaceuticamente aceptable del mismo, opcionalmente en una composicion farmaceutica del mismo;

en donde la condicion es un trastorno proliferativo y el trastorno proliferativo es cancer.

34. Un compuesto de formula:

o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo;

para uso en un metodo para tratar una afeccion asociada con la angiogenesis, que comprende administrar a un sujeto que lo necesite el compuesto o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, opcionalmente en una composicion farmaceutica del mismo.

35. El compuesto o sal farmaceuticamente aceptable del mismo para su uso de acuerdo con la reivindicacion 34, en el que la afeccion es una afeccion diabetica, una afeccion inflamatoria, degeneracion macular, obesidad, aterosclerosis o un trastorno proliferativo.

36. El compuesto o sal farmaceuticamente aceptable del mismo para su uso de acuerdo con la reivindicacion 35, en donde la condicion es un trastorno proliferativo y el trastorno proliferativo es una neoplasia mieloproliferativa (MPN) y la neoplasia mieloproliferativa (MPN) es la mielofibrosis primaria (PMF).

37. El compuesto o sal farmaceuticamente aceptable del mismo para uso de acuerdo con la reivindicacion 33, en el que el cancer es un tumor solido o un cancer hematopoyetico.

38. El compuesto o sal farmaceuticamente aceptable del mismo para uso de acuerdo con la reivindicacion 37, en el que el cancer es un cancer hematopoyetico, y el cancer hematopoyetico se selecciona de mieloma multiple, linfoma y leucemia mielodtica aguda (AML).

39. El compuesto o sal farmaceuticamente aceptable del mismo para uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 33 a 38, en el que el sujeto es un ser humano.

40. El compuesto de la reivindicacion 27. en el que el compuesto es:

o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.