JP2018516884A - コルチスタチン誘導体による治療に対する患者の標的化選択 - Google Patents

コルチスタチン誘導体による治療に対する患者の標的化選択 Download PDF

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Abstract

腫瘍又は癌を有する患者を標的化選択及び治療する方法であって、（ｉ）患者がＲＵＮＸ１経路障害を有するか否かを決定することと、そうであれば（ｉｉ）任意に薬学的に許容可能な組成物中の有効量のコルチスタチン、又はその薬学的に許容可能な塩若しくはオキシドを投与することとを含む、方法。【選択図】図１

Description

関連出願
本願は２０１５年５月８日付けで出願された米国仮出願第６２／１５８，９３６号、２０１５年７月１日付けで出願された米国仮出願第６２／１８７，６５６号及び２０１６年２月２２日付けで出願された米国仮出願第６２／２９８，３５２号に関連し、その利益を主張するものである。これらの仮出願の全体が全ての目的で引用することにより本明細書の一部をなす。
Flyer, et. al.により出願され、President and Fellows of Harvard Collegeに譲渡された「コルチスタチン類縁体及びその合成（Cortistatin Analogs and Synthesis Thereof）」と題する特許文献１は、一般式Ｉ（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、ｎ及びｍは特許文献１に記載される通りである）を有するコルチスタチンＡ、Ｊ、Ｋ及びＬの類縁体並びにその塩、並びにその合成を記載している。
特許文献１は、かかる化合物が血管新生抑制剤であり、増殖性疾患の治療に使用し得ることを開示している。
Shair, et al.により出願され、同様にPresident and Fellows of Harvard Collegeに譲渡された「コルチスタチン類縁体、並びにその合成及び使用（Cortistatin Analogs and Syntheses and Uses Thereof）」と題する特許文献２は、更なるコルチスタチンの類縁体、並びに増殖性障害、例えば癌、特に造血器癌、例えば白血病、多発性骨髄腫（ＭＭ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、骨髄増殖性腫瘍、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）及び原発性骨髄線維症（ＰＭＦ）を治療する方法、並びに記載のコルチスタチン類縁体を含む組成物を記載している。より概略的には、特許文献２は開示の化合物、又はその薬学的に許容可能な塩、第四級アミン若しくはＮ−オキシドを有効量投与することを含む、ＣＤＫ８及び／又はＣＤＫ１９キナーゼ活性と関連する病態を治療する方法を記載している。ＣＤＫ８及びその調節サブユニットであるサイクリンＣは、ＲＮＡポリメラーゼＩＩの最大サブユニットのカルボキシ末端をリン酸化するＲＮＡポリメラーゼＩＩホロ酵素複合体の構成要素である。ＣＤＫ８は、基本転写因子ＴＦＩＩＨのＣＤＫ７／サイクリンＨサブユニットを標的化することによって転写を調節する。
コルチスタチンＡ及びコルチスタチンＡの類縁体の他の合成的及び生物学的説明は、「（＋）−コルチスタチンＡ及びＪの形式全合成（Formal Total Synthesis of (+)-Cortistatins A and J）」と題する非特許文献１、「ジデヒドロ−コルチスタチンＡはＨＩＶ−１ Ｔａｔ媒介神経炎症を阻害し、Ｔａｔトランスジェニックマウスにおけるコカイン報酬の増強を予防する（Didehydro-Cortistatin A Inhibits HIV-1 Tat Mediated Neuroinflammation and Prevents Potentiation of Cocaine Reward in Tat Transgenic Mice）」と題する非特許文献２、「ビタミンＤ２のＣＤ環フラグメントからのコルチスタチンＡ類縁体の合成研究（Synthetic Studies of Cortistatin A Analog from the CD-ring Fragment of Vitamin D2）」と題する非特許文献３、「天然ステロイドアルカロイドコルチスタチンＡの類縁体は、Ｔａｔ依存性ＨＩＶ転写を強く抑制する（An Analog of the Natural Steroidal Alkaloid Cortistatin A Potently Suppress Tat-dependent HIV Transcription）」と題する非特許文献４、「容易にアクセス可能な経口で有効なコルチスタチンＡの類縁体の作製（Creation of Readily Accessible and Orally Active Analog of Cortistatin A）」と題する非特許文献５、「（＋）−コルチスタチンＡの合成研究（Synthetic Studies Toward (+)-Cortistatin A）」と題する非特許文献６、「海綿からの血管新生抑制ステロイドアルカロイドであるコルチスタチンＡの炭素環コアの合成研究（Synthetic Study of Carbocyclic Core of Cortistatin A, an Anti-angiogenic Steroidal Alkaloid from Marine Sponge）」と題する非特許文献７、「コルチスタチンＡのコア構造の立体選択的合成（Stereoselective Synthesis of Core Structure of Cortistatin A）」と題する非特許文献８、「コルチスタチンＡ及び関連構造のスケーラブル合成（Scalable Synthesis of Cortistatin A and Related Structures）」と題する非特許文献９、「コルチスタチンＡ及びＪの全合成（Total Synthesis of Cortistatins A and J）」と題する非特許文献１０、「コルチスタチンＡのオキサ五環コアの簡便合成（Concise Synthesis of the Oxapentacyclic Core of Cortistatin A）」と題する非特許文献１１、「エニン−エンメタセシスによるコルチスタチンＡ炭素環コアの急速構築に向けた努力（Efforts Toward Rapid Construction of the Cortistatin A Carbocyclic Core via Enyne-ene Metathesis）」と題する非特許文献１２、「（±）−コルチスタチンＡの形式全合成（Formal Total Synthesis of (±)-Cortistatin A）」と題する非特許文献１３、「コルチスタチンＡはタンパク質キナーゼＲＯＣＫ、ＣＤＫ８及びＣＤＫ１１の高親和性リガンドである（Cortistatin A is a High-Affinity Ligand of Protein Kinases ROCK, CDK8, and CDK11）」と題する非特許文献１４に記載されている。
Firestein, et al.により出願され、Genentechに譲渡された「ＣＤＫ８アンタゴニストを使用する方法（Methods of Using CDK8 Antagonists）」と題する特許文献３及び特許文献４は、様々な癌に対するＣＤＫ８アンタゴニストの使用を記載している。それらの文献に記載される通り、ＣＤＫ８はメディエーター複合体の一部として、非特許文献１５及び非特許文献１６に記載のように転写において保存的機能を有する。ＣＤＫ８は、結腸癌（非特許文献１７、非特許文献１８、非特許文献１９）及び黒色腫（非特許文献２０）の両方でオンコジーンとして報告されている。ＣＤＫ８は、ヒト結腸腫瘍のサブセットにおいて上方調節及び増幅され、不死化細胞を形質転換することが知られ、ｉｎ ｖｉｔｒｏでの結腸癌増殖に必要とされる。同様に、ＣＤＫ８は黒色腫において過剰発現され、増殖に不可欠であることも見出されている（非特許文献２０）。ＣＤＫ８は、ＥＳ多能性及び癌の両方の主要調節因子である幾つかのシグナル伝達経路を調節することが示されている。ＣＤＫ８は、β−カテニン標的遺伝子の発現を促進するか（非特許文献１７）、又はβ−カテニン転写活性の強力な阻害因子であるＥ２Ｆ１を阻害することによってＷｎｔ経路を活性化する（非特許文献１８）。ＣＤＫ８は、標的遺伝子でＮｏｔｃｈ細胞内ドメインをリン酸化し、Ｎｏｔｃｈエンハンサー複合体を活性化することによってＮｏｔｃｈ標的遺伝子発現を促進する（非特許文献２１）。
腫瘍及び癌は、狭いカテゴリーであっても不均一であり得ることが知られている。例えば、非特許文献２２（２０１３年９月１９日）を参照されたい。特定の腫瘍型は広範な遺伝的異常に起因する可能性があり、結果として主要タンパク質を発現又は抑制することで広範な表現型をもたらし得ることから、狭いクラスの腫瘍又は癌の全てが同じ薬物療法に応答するわけではない。最も活性の高い腫瘍薬（oncology drugs）に対しても応答者及び非応答者が存在し得ることが予想される。
米国特許第９，１２７，０１９号 国際公開第２０１５／１００４２０号 米国特許出願公開第２０１３／０２１７０１４号 国際公開第２０１３／１２２６０９号
Chiu et al., Chemistry (2015), 21: 14287-14291 Valente et al., Current HIV Research (2015), 13: 64-79 Motomasa et al., Chemical & Pharma. Bulletin (2013), 61: 1024-1029 Valente et al., Cell Host & Microbe (2012), 12: 97-108 Motomasa et al., ACS Med. Chem. Lett. (2012), 3: 673-677 Danishefsky et al., Tetrahedron (2011) 67: 10249-10260 Motomasa et al., Heterocycles (2011), 83: 1535-1552 Motomasa et al., Org. Lett. (2011), 13: 3514-3517 Baran et al., JACS (2011), 133: 8014-8027 Hirama et al., JOC (2011), 76: 2408-2425 Zhai et al., Org. Lett. (2010), 22: 5135-5137 Stoltz et al., Org. Biomol. Chem. (2010), 13: 2915-2917 Sarpong et al., Tetrahedron (2010), 66: 4696-4700 Nicolaou et al., Angewandte Chemie (2009), 48: 8952-8957 Taatjes, D. J., Trends Biochem Sci 35, 315-322 (2010) Conaway, R. C. and Conaway, J. W., Curr Opin Genet Dev 21, 225-230 (2011) Firestein R. et al., Nature 455:547-51 (2008) Morris E. J. et al., Nature 455:552-6 (2008) Starr T. K. et al., Science 323:1747-50 (2009) Kapoor A. et al., Nature 468:1105-9 (2010) Fryer C. J. et al., Mol Cell 16:509-20 (2004) Meacham, et al., Tumor heterogeneity and cancer cell plasticity, Nature Vol. 501, 328-337
したがって、どの腫瘍及び癌の細胞がコルチスタチン療法に最良に応答するかを決定する方法を提供することが有利であり得る。
コルチスタチン治療に最良に応答する腫瘍又は癌を有する患者の標的化選択を達成可能とすることも有利であり得る。
コルチスタチン治療に最良に応答する、造血系を有する腫瘍又は癌を有する患者の標的化選択を達成可能とすることが更に有利であり得る。
本発明の第１の実施の形態では、コルチスタチンがＲｕｎｔ関連転写因子１（ＲＵＮＸ１）転写プログラムの障害を有する腫瘍及び癌の治療に特に有用であることが発見された。この発見に基づいて、（ｉ）患者がＲＵＮＸ１経路障害を有するか否かを決定することと、そうであれば（ｉｉ）例えば本明細書に記載のもの、又はその薬学的に許容可能な塩及び／又は組成物を含むコルチスタチン誘導体を有効量投与することとを含む、コルチスタチン療法に応答する可能性が高い患者を標的化選択及び治療する方法が提示される。ＲＵＮＸ１障害は、例えばＲＵＮＸ１点突然変異、ＲＵＮＸ１遺伝子が関与する染色体転座、又はＲＵＮＸ１タンパク質の不安定化若しくは分解の増大をもたらす突然変異の結果であり得る。
一態様では、有効量のコルチスタチンを、ＲＵＮＸ１によって通常転写されるタンパク質の十分な上方調節をもたらし、細胞がより正常な、より低毒性の、又は細胞成長停止若しくはアポトーシスしたものとなるような腫瘍又は癌の分化又は成熟を引き起こす方法及び投与量で投与することによってＲＵＮＸ１障害腫瘍又は癌を治療する方法が提供される。
例えば、コルチスタチンによる治療に対する腫瘍又は癌を有する患者の応答を予測する方法は、患者から腫瘍又は癌のサンプルを得る工程と、患者に由来する生体サンプルにおける１つ以上のバイオマーカーの発現レベル又は量を決定する工程であって、バイオマーカーがＡＣＳＬ１、ＡＤＯＲＡ２Ｂ、ＡＤＲＢ１、ＡＭＰＤ３、ＡＲＲＤＣ４、ＢＣＬ２、ＢＣＬ２Ａ１、ＣＢＦβ、ＣＣＮＡ１、ＣＤ２４４、ＣＤ４４、ＣＤＣ４２ＥＰ３、Ｃ／ＥＢＰα、ＣＥＣＲ６、ＣＦＬＡＲ、ＣＩＳＨ、ＣＳＦ１、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＲ４、ＣＹＴＩＰ、ＤＵＳＰ１０、Ｅ２Ｆ８、ＥＭＢ、ＥＭＲ２、ＥＴＳ１、ＥＴＳ２、ＦＡＭ１０７Ｂ、ＦＡＭ４６Ａ、ＦＣＥＲ１Ａ、ＦＣＧＲ１Ｂ、ＦＬＩ１、ＦＯＧ１、ＦＯＳＬ２、ＧＡＢ２、ＧＡＳ７、ＧＡＴＡ１、ＧＡＴＡ２、ＧＦＩ１Ｂ、ＧＭＰＲ、ＧＰＲ１８、ＧＰＲ１８３、ＨＢＢＰ１、ＨＥＢ、ＨＬＸ、ＨＭＧＣＳ１、ＩＧＦＢＰ４、ＩＧＦＢＰ５、ＩＬ１７ＲＡ、ＩＬ１ＲＡＰ、ＩＰＣＥＦ１、ＩＲＦ１、ＩＲＦ８、ＩＴＧＡ６、ＪＡＧ１、ＬＣＰ２、ＬＤＬＲ、ＬＩＭＡ１、ＬＭＯ２、ＬＲＲＣ３３、ＬＴＢ、ＭＢＰ、ＭＩＣＡＬ２、ＭＹＣＮ、ＭＹＯ１Ｇ、ＮＦＥ２、ＮＯＴＣＨ２、ＮＲＰ１、Ｐ２ＲＹ２、ＰＡＧ１、ＰＬＡＣ８、ＰＬＥＫ、ＰＬＸＮＣ１、ＰＭＰ２２、ＰＴＰＲＥ、ＰＵ．１、ＰＸＫ、ＲＡＢ２７Ａ、ＲＡＳＡ３、ＲＧＳ１６、ＲＨＯＨ、ＲＮＦ２４、ＲＸＲＡ、ＳＥＬＰＬＧ、ＳＬＡ、ＳＬＣ７Ａ１１、ＳＬＣ７Ａ５、ＳＯＣＳ１、ＳＴ３ＧＡＬ４、ＳＴＫ１７Ｂ、ＴＡＬ１、ＴＩＭＰ３、ＴＭＥＭ１０４、ＴＮＦ、ＴＳＣ２２Ｄ１、ＴＳＣ２２Ｄ３、ＺＢＴＢ１６及びＺＣＣＨＣ５からなる群から選択される工程と、続いて判定される発現レベル又は量が対応する正常細胞の範囲外である、例えば対応する正常細胞において見られるものを上回る若しくは下回る、又は患者に対する臨床的利益の増大若しくは減少と関連する或る特定の量を上回る若しくは下回るか否かを決定する工程と、続いて任意に、患者を任意にその薬学的に許容可能な組成物中の有効量のコルチスタチン、又はその薬学的に許容可能な塩若しくはオキシドで治療する工程とを含む。代替的な実施の形態では、上記方法は、選択される遺伝子の発現と、コルチスタチンに対する応答を示す代表数の患者又は予測動物モデル及びコルチスタチンに対する応答を示さない又は応答が不良な代表数の患者を含む対照サンプルセットにおける同じ遺伝子の発現とを比較して、患者がコルチスタチン療法に応答する可能性があるかを決定することを含む。
バイオマーカー若しくはバイオマーカーの組合せのポリヌクレオチドとストリンジェントな条件下でアニールするプローブ、又はバイオマーカータンパク質に結合する抗体を含み得る、患者がコルチスタチン療法に首尾よく応答するか否かを決定するキットも提供される。キットは、遺伝子によって特異的にコードされるＲＮＡに相補的なＤＮＡを増幅するプライマー、及び任意に熱安定性ＤＮＡポリメラーゼを含み得る。一実施の形態では、プライマーは、選択される遺伝子（複数の場合もある）によってコードされるＲＮＡ又はその相補体に標準のストリンジェントな条件下でハイブリダイズする。
選択されるバイオマーカーは、一態様ではＧＡＴＡ１、ＧＡＴＡ２、Ｃ／ＥＢＰα、ＦＬＩ１、ＦＯＧ１、ＥＴＳ１、ＰＵ．１、ＲＵＮＸ１及びＣＢＦαの１つ又は組合せであり得る。代替的には、選択されるバイオマーカーはＢＣＬ２、ＣＣＮＡ１、ＣＤ４４、Ｃ／ＥＢＰα、ＣＢＦβ、ＣＳＦ１、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＲ４、ＥＴＳ１、ＥＴＳ２、ＦＬＩ１、ＦＯＧ１、ＦＣＥＲ１Ａ、ＧＡＴＡ１、ＧＡＴＡ２、ＧＦＩ１Ｂ、ＨＥＢ、ＩＲＦ１、ＩＲＦ８、ＪＡＧ１、ＬＭＯ２、ＬＴＢ、ＮＦＥ２、ＮＯＴＣＨ２、ＰＵ．１、ＳＬＡ、ＳＯＣＳ１、ＴＡＬ１及びＴＮＦの１つ又は組合せである。異なる実施の形態では、選択されるバイオマーカーは構成的ＳＴＡＴ１−ｐＳ７２７、ＷＴ１突然変異、ＴＥＴ２突然変異、ＩＤＨ１突然変異、ＩＤＨ２突然変異、ＭＬＬ転位、Ｃ／ＥＢＰα突然変異、ＣＢＦβ転位、ＰＵ．１突然変異、ＧＡＴＡ １又は２突然変異、ＥＲＧ転座、ＴＬＸ１過剰発現及びＴＬＸ３活性化の１つ又は組合せである。
（ｉ）患者がＥＲ陽性、ＶＨＬ突然変異の機能喪失（ＶＨＬ陰性）、ＨＥＲ２過剰発現、ＥＧＦＲ突然変異、ＭＥＴ突然変異、神経芽細胞腫のバイオマーカー；ＥＷＳ−ＦＬＩ１、ＳＴＡＴ１−ｐＳ７２７、ＳＴＡＴ１、又はＥＴＶ１、ＦＬＩ１、ＳＭＣ３、ＳＭＣ１Ａ、ＲＡＤ２１若しくはＳＴＡＧ２における不活性化突然変異から選択されるバイオマーカーの１つ又は組合せを有するか否かを決定することと、そうであれば（ｉｉ）例えば本明細書に記載のもの、又はその薬学的に許容可能な塩、オキシド及び／又は組成物を含むコルチスタチン誘導体を有効量（effect amount）投与することとを含む、コルチスタチン療法に応答する可能性がある患者を標的化選択及び治療する方法も提供される。
別の態様では、本明細書に記載のいずれかのバイオマーカーの少なくとも２つ、３つ、４つ、５つ又はそれ以上を、有効量のコルチスタチン、又はその塩、ｎ−オキシド及び／又はその薬学的に許容可能な組成物による腫瘍又は癌の治療に対する標的化選択の方法に使用する。
治療することができる非限定的な造血系腫瘍又は癌は、例えば急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ芽球性白血病（ＣＬＬ）、Ｂ細胞急性リンパ芽球性白血病（Ｂ−ＡＬＬ）、小児Ｂ−ＡＬＬ、慢性骨髄性白血病、急性単球性白血病、急性巨核芽球性白血病、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、バーキットリンパ腫、ＡＩＤＳ関連リンパ腫、慢性骨髄増殖性障害、原発性中枢神経系リンパ腫、Ｔ細胞リンパ腫、有毛細胞白血病及び多発性骨髄腫（ＭＭ）から選択され得る。
本発明は、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）に見られるような造血器腫瘍又は癌の前駆体細胞である細胞を治療することを含む。
腫瘍又は癌は乳癌、卵巣癌、類内膜癌、扁平上皮癌、血管肉腫、結腸癌、胃腸腫瘍、転移傾向性固形腫瘍、明細胞癌、腎細胞癌又は食道癌等の非造血系のものであってもよい。
このため、本開示は、本明細書に開示のコルチスタチンを含むが、これに限定されないコルチスタチンによるＣＤＫ８及びＣＤＫ１９の阻害が、ＲＵＮＸ１標的遺伝子の上方調節を引き起こすことによって不活性化ＲＵＮＸ１突然変異の作用を逆転させるという驚くべき発見に基づく、不活性化ＲＵＮＸ１突然変異を克服する方法を提供する。この驚くべき効果のために、例えばＣＤＫ８／１９阻害剤、及び／又はコルチスタチン若しくはそのコルチスタチン類縁体を、不活性化ＲＵＮＸ１突然変異と関連する癌を有する被験体に投与することによって、コルチスタチンを不活性化ＲＵＮＸ１突然変異と関連する悪性腫瘍の治療に使用することができる。
例としては、コルチスタチンが多数のＡＭＬ細胞株の増殖を１０ｎＭ未満の５０％成長阻害濃度（50% maximal growth inhibitory concentrations）（ＧＩ５０）で強く阻害することが発見された。細胞株の感受性はＲＵＮＸ１転写プログラム依存性と一致した。感受性細胞株としては、ＲＵＮＸ１又はその標的遺伝子の転写を直接阻害する融合を有するもの（ＳＫＮＯ−１、ＭＥ−１、ＭＯＬＭ−１４、ＭＶ４；１１）、並びに短縮ＧＡＴＡ−１タンパク質ＧＡＴＡ−１を有する巨核芽球性白血病細胞株（ＣＭＫ−８６及びＭＥＧ−０１）が挙げられる。巨核球形成とは異なり、ＲＵＮＸ１発現は赤血球の末端分化中に急速に低下し、コルチスタチンに対する赤白血病株の不感受性と一致する。
コルチスタチンはＣＥＢＰＡ、ＩＲＦ８及びＮＦＥ２を含むＲＵＮＸ１標的遺伝子を上方調節する。遺伝子セット濃縮分析（ＧＳＥＡ）によると、（ｉ）コルチスタチンが、造血幹細胞におけるＲＵＮＸ１−ＲＵＮＸ１Ｔ１の発現によって抑制されるＳＥＴ−２、ＭＯＬＭ−１４及びＭＶ４；１１細胞株の遺伝子を上方調節すること、（ｉｉ）コルチスタチンが、ＲＵＮＸ１のｓｉＲＮＡ媒介ノックダウン時にＫａｓｕｍｉ−１ ＡＭＬ細胞株における発現が低下するＭＯＬＭ−１４及びＭＶ４；１１細胞の遺伝子を上方調節すること、並びに（ｉｉｉ）コルチスタチンが、Ｋａｓｕｍｉ−１細胞におけるＲＵＮＸ１−ＲＵＮＸ１Ｔ１のｓｉＲＮＡ媒介ノックダウン時に発現が増大するＭＯＬＭ−１４細胞の遺伝子を上方調節することが決定された。ＲＵＮＸ１は、コルチスタチン処理によって上方調節される遺伝子座に動員された。
本開示の幾つかの態様は、ＣＤＫ８／１９阻害剤及び／又はコルチスタチン、又はそのコルチスタチン類縁体による被験体の治療に対して感受性がある癌を診断する方法であって、（ａ）被験体がＲＵＮＸ１活性障害を示す癌を有するか否かを決定することと、（ｂ）被験体がＲＵＮＸ１活性障害を示す癌を有することが決定された場合、被験体を化合物による治療に対して感受性がある癌を有する被験体として特定することとを含む、方法を提供する。幾つかの実施の形態では、上記方法は、ＣＤＫ８／１９阻害剤及び／又はコルチスタチン、又はそのコルチスタチン類縁体を被験体に癌の治療に効果的な量で投与することを含む。
本明細書で提供される診断及び治療方法の幾つかの実施の形態では、癌は不活性化ＲＵＮＸ１突然変異と関連する血液癌である。幾つかの実施の形態では、癌は白血病、例えば急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）及び慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）である。幾つかの実施の形態では、急性リンパ芽球性白血病はＴ細胞急性リンパ芽球性白血病、小児前駆体Ｂ−ＡＬＬ又はＢ細胞急性リンパ芽球性白血病である。幾つかの実施の形態では、癌は乳癌、卵巣癌、類内膜癌又は扁平上皮癌である。
本開示の幾つかの態様は、例えばＲＵＮＸ１活性障害を示す癌の治療に薬剤として使用されるコルチスタチン、又はその薬学的に許容可能な塩、第四級アミン塩若しくはＮ−オキシドを含む医薬組成物及びキットであって、コルチスタチンが式（Ａ−１）、（Ａ−１’）、（Ａ−１’’）、（Ａ−２’）、（Ａ−２’’）、（Ａ−３’）、（Ａ−３’’）、（Ｄ１’）、（Ｄ１’’）、（Ｄ２’）、（Ｄ２’’）、（Ｅ１’）、（Ｅ１’’）、（Ｅ２’）、（Ｅ２’’）、（Ｇ１’）若しくは（Ｇ１’’）のもの、又はその薬学的に許容可能な塩である、医薬組成物及びキットを提供する。
この上記の発明の概要は、本明細書に開示の技術の実施形態、利点、特徴及び用途の幾つかを非限定的に説明することを意図したものである。本明細書に開示の技術の他の実施形態、利点、特徴及び用途は発明を実施するための形態、図面、実施例及び特許請求の範囲から明らかである。
メディエーター複合体と様々な転写調節因子との間の関係を示す図である。ＣＤＫ８及びＣＤＫ１９はメディエーターと会合し、転写を調節する。ＲＵＮＸ１は、スーパーエンハンサーを含むエンハンサー要素に結合し、ＴＡＬ１、Ｃ／ＥＢＰα、ＣＢＦβ、ＦＬＩ１、ＥＴＳ１、ＦＯＧ１、ＧＡＴＡ１及びＰＵ．１を含むが、これらに限定されない転写因子と協調して作用する。ＲＵＮＸ１、Ｃ／ＥＢＰα及びＧＡＴＡ１を含む、これらの転写因子の多くがＡＭＬを有する或る特定の患者において突然変異していることが見出されている。ＣＤＫ８／１９阻害剤コルチスタチンＡによる処理は、ＲＵＮＸ１標的遺伝子及びスーパーエンハンサー関連遺伝子の発現を増大する。コルチスタチンＡ処理時に発現が増大する多くのＲＵＮＸ１標的遺伝子は、スーパーエンハンサー関連遺伝子でもある。 コルチスタチンＡとのそれらの相互作用に対してプロットした、ＡＭＬにおけるＲＵＮＸ１標的遺伝子の遺伝子濃縮分析を示す図である。コルチスタチンＡは、ＡＭＬにおいてＲＵＮＸ１標的遺伝子を上方調節し、遺伝子セット濃縮分析（ＧＳＥＡ）マウンテンプロットから、３時間の２５ｎＭコルチスタチンＡ処理により、ＲＵＮＸ１−ＲＵＮＸ１Ｔ１（ＡＭＬ１−ＥＴＯとしても知られる）のノックダウン時にＫａｓｕｍｉ−１細胞において上方調節されるＭＯＬＭ−１４細胞の遺伝子が上方調節されることが示される。 ビヒクル、５０ｎＭコルチスタチンＡ又は５０ｎｇ／ｍＬ ＰＭＡの存在下での巨核球マーカーＣＤ４１及びＣＤ６１を有する細胞のパーセントの棒グラフである。ＣＤＫ８／１９阻害剤コルチスタチンＡによる処理は、巨核球マーカーＣＤ４１及びＣＤ６１の増大によって測定されるＳＥＴ−２細胞の分化を誘導する。３日間の指定の処理後のＳＥＴ−２細胞上のＣＤ４１及びＣＤ６１（ビヒクル対ＣＡ、ｐ＝それぞれ０．０４及び０．００５、両側ｔ検定）（平均±標準誤差、ｎ＝３）。 コルチスタチンＡ処理の日数に対する理論細胞数のグラフである。ＣＤＫ８／１９阻害剤コルチスタチンＡによる処理は、ＳＥＴ−２細胞の増殖を阻害する。ＣＡについての経時的な細胞数のプロット（平均±標準誤差、ｎ＝３）から、用量依存的な効果が示される。 ＣＤＫ８／１９阻害剤コルチスタチンＡ（ＣＡ）とＪＡＫ１／２阻害剤ルキソリチニブとの組合せの比率に対して併用指数（combination index）をプロットした、ＭＰＮ／ＡＭＬ細胞株ＳＥＴ−２及びＵＫＥ−１の増殖の阻害についての相乗プロットを示す図である。プロットから、ＣＤＫ８／１９阻害がＪＡＫ１／２阻害と相乗作用を示すことが示される。相乗作用は、Ｃｈｏｕ−Ｔａｌａｌａｙ法（ＣａｌｃｕＳｙｎ）を用いて決定した。 様々なコルチスタチンＡ用量でのＡＭＬを有するマウスの脾臓重量のグラフである。コルチスタチンＡ処理は、コルチスタチンＡでＩＰ投与により１５日間にわたって１日１回処理した、播種性ＭＶ４；１１−ｍＣＬＰ白血病を有する雌性ＮＯＤ−ＳＣＩＤ−ＩＬ２Ｒｃγｎｕｌｌ（ＮＳＧ）マウスにおいて脾臓重量の増大を妨げる。点は、コルチスタチンＡ処理の停止の更に１５日後及び２００万個のＭＶ４；１１−ｍＣＬＰ細胞の尾静脈注射の３７日後の個々のマウスについての値を表す。点線は、関連した健常な８週齢雌性ＮＯＤ−ＳＣＩＤマウスについての１平均値の標準偏差内の範囲を指し示し、Ｍｏｕｓｅ Ｐｈｅｎｏｍｅ Ｄａｔａｂａｓｅ ２２９０３（The Jackson Laboratory）から取得した。 ６００ｎＭコルチスタチンＡでの２９４個の組み換えキナーゼに対するキナーゼ活性（残留パーセント単位）のプロットである。コルチスタチンＡは、キナーゼアッセイプロファイリング（ｗｉｌｄｔｙｐｅ−ｐｒｏｆｉｌｅｒ、ProQinase）によって測定されるようにＣＤＫ８／１９を選択的に阻害する。これらのキノームワイドプロファイリング研究から、ＣＤＫ８／１９阻害剤コルチスタチンＡがＣＤＫ８／１９に高度選択的であることが示される。 １０００ｎＭコルチスタチンＡでのネイティブキナーゼ活性（阻害％）のプロットである。コルチスタチンＡは、Ｎａｔｉｖｅ Ｋｉｎａｓｅ Ｐｒｏｆｉｌｉｎｇアッセイ（ＫｉＮａｔｉｖ、ActivX Biosciences）によって測定されるように、ＣＤＫ８／１９を選択的に阻害する。これらのキノームワイドプロファイリング研究から、ＣＤＫ８／１９阻害剤コルチスタチンＡがＣＤＫ８／１９に高度選択的であることが示される。 対数尺度でのコルチスタチンＡの濃度に対するキナーゼ活性（パーセント）のグラフである。グラフから、コルチスタチンＡがＣＤＫ８／サイクリンＣをｉｎ ｖｉｔｒｏで強く阻害することが示される。 ＷＴ及び突然変異ＣＤＫ８及びＣＤＫ１９についてのコルチスタチンＡ濃度（ｎＭ、対数尺度）に対する成長％のグラフである。薬物耐性対立遺伝子により、ＡＭＬ細胞成長がＣＤＫ８／１９キナーゼ活性を必要とすることが確認される。このことから、ＣＤＫ８／１９阻害剤コルチスタチンＡが、ＣＤＫ８／１９を阻害することによりＭＯＬＭ−１４細胞の増殖を阻害することが示される。ＣＤＫ８及びＣＤＫ１９におけるトリプトファン１０５（Ｗ１０５）の突然変異は、コルチスタチンＡ耐性をＣＤＫ８及びＣＤＫ１９に付与する。したがって、ＭＯＬＭ−１４細胞は、ＣＤＫ８ Ｗ１０５Ｍ又はＣＤＫ１９ Ｗ１０５Ｍの発現時にコルチスタチンＡの存在下で増殖することが可能である。 ３０日目のＭＶ４；１１ ＡＭＬマウス分析により、ＣＤＫ８／１９阻害剤コルチスタチンＡによる処理が、ヘマトキシリン及びエオシン染色によって測定されるように、肺において白血病細胞を減少させることが示されることを示す図である。 コルチスタチンＡとのそれらの相互作用に対してプロットした、ＲＵＮＸ１密度が増大した遺伝子の遺伝子濃縮分析を示す図である。コルチスタチンＡは、造血幹細胞（ＨＳＣ）におけるＲＵＮＸ１−ＲＵＮＸ１Ｔ１の発現によって抑制されるＳＥＴ−２、ＭＯＬＭ−１４及びＭＶ４；１１細胞株の遺伝子を上方調節する。 Ｃａｓ９を内因性遺伝子ＢＣＬ２Ｌ１１のノックアウトにも使用し得ることを示すウエスタンブロットを示す図である。非標的化対照と比較して、ＥＬ及びＬアイソフォームのみを標的化するｓｇＲＮＡ＃１及び＃５は、遺伝子産物Ｂｉｍを強く低減した。ｓｇＲＮＡ＃４は、より低効率ではあるが３つ全てのアイソフォームを標的化した。ｓｇＲＮＡ＃２及び＃３はイントロンを標的化し、Ｂｉｍを低減しなかった。 ＺｓＧＲＥＥＮに対してＣａｓ９及びｓｇＲＮＡ＃１又は＃３を発現する細胞において、緑色蛍光が対照非蛍光性細胞と同様のレベルまで低減したことを示す図である。ｓｇＲＮＡ＃１を発現する細胞におけるＺｓＧＲＥＥＮ遺伝子座のシークエンシングにより、予想切断部位でのｉｎｄｅｌが明らかになった。 （Ａ）Ｃａｓ９を、ブラストサイジン選択を用いて対象の細胞株において安定発現し、続いて（Ｂ）ライブラリーに、およそ１８０００個のヒト遺伝子に対するｓｇＲＮＡをコードするレンチウイルスプラスミドを、ピューロマイシン上で７日間導入し、その後（Ｃ）０日目のスクリーニングを開始し、細胞をビヒクル又はＣＡで１４日間処理するスクリーニングワークフローを示す図である。（Ｄ）０日目の参照、１４日目のビヒクル処理及び１４日目のＣＡ処理集団における各ｓｇＲＮＡの分布を決定する。ＣＡ処理群において顕著に濃縮又は枯渇したｓｇＲＮＡは、ＣＤＫ８／１９阻害の代表的なバイオマーカーである。 １００ｎＭコルチスタチンＡの存在下で様々な細胞株について測定された成長レベル（％）のグラフである。 １００ｎＭコルチスタチンＡの存在下で様々な細胞株について測定された成長レベル（％）のグラフである。 １００ｎＭコルチスタチンＡの存在下で様々な細胞株について測定された成長レベル（％）のグラフである。
本発明は少なくとも以下の特徴を含む：
Ａ） コルチスタチン療法に応答する可能性が高い腫瘍又は癌を有する患者を標的化選択及び治療する方法であって、（ｉ）患者がＲＵＮＸ１経路障害を有するか否かを決定することと、そうであれば（ｉｉ）例えば本明細書に記載のものを含む、有効量のコルチスタチン誘導体、又はその薬学的に許容可能な塩、オキシド及び／又は組成物を投与することとを含む、方法。
Ｂ） 有効量のコルチスタチンを、ＲＵＮＸ１によって通常転写されるタンパク質の十分な上方調節をもたらし、細胞がより正常な、より低毒性の、より成熟した、成長停止した又はアポトーシスしたものとなるような腫瘍又は癌の分化を引き起こす方法及び投与量で投与することによって、ＲＵＮＸ１障害腫瘍又は癌を治療する方法。
Ｃ） 患者がコルチスタチン療法に首尾よく応答するか否かを決定するキットを使用することを含み、該キットがバイオマーカー若しくはバイオマーカーの組合せのポリヌクレオチドとストリンジェントな条件下でアニールするプローブ、又はバイオマーカータンパク質に結合する抗体を含む、Ａ）又はＢ）の方法。
Ｄ） コルチスタチンによる治療に対する腫瘍又は癌を有する患者の応答を予測する方法であって、
ａ． 患者から腫瘍又は癌のサンプルを得る工程と、
ｂ． 患者に由来する生体サンプルにおける１つ以上のバイオマーカーの発現レベル又は量を決定する工程であって、該バイオマーカーがＡＣＳＬ１、ＡＤＯＲＡ２Ｂ、ＡＤＲＢ１、ＡＭＰＤ３、ＡＲＲＤＣ４、ＢＣＬ２、ＢＣＬ２Ａ１、ＣＢＦβ、ＣＣＮＡ１、ＣＤ２４４、ＣＤ４４、ＣＤＣ４２ＥＰ３、Ｃ／ＥＢＰα、ＣＥＣＲ６、ＣＦＬＡＲ、ＣＩＳＨ、ＣＳＦ１、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＲ４、ＣＹＴＩＰ、ＤＵＳＰ１０、Ｅ２Ｆ８、ＥＭＢ、ＥＭＲ２、ＥＴＳ１、ＥＴＳ２、ＦＡＭ１０７Ｂ、ＦＡＭ４６Ａ、ＦＣＥＲ１Ａ、ＦＣＧＲ１Ｂ、ＦＬＩ１、ＦＯＧ１、ＦＯＳＬ２、ＧＡＢ２、ＧＡＳ７、ＧＡＴＡ１、ＧＡＴＡ２、ＧＦＩ１Ｂ、ＧＭＰＲ、ＧＰＲ１８、ＧＰＲ１８３、ＨＢＢＰ１、ＨＥＢ、ＨＬＸ、ＨＭＧＣＳ１、ＩＧＦＢＰ４、ＩＧＦＢＰ５、ＩＬ１７ＲＡ、ＩＬ１ＲＡＰ、ＩＰＣＥＦ１、ＩＲＦ１、ＩＲＦ８、ＩＴＧＡ６、ＪＡＧ１、ＬＣＰ２、ＬＤＬＲ、ＬＩＭＡ１、ＬＭＯ２、ＬＲＲＣ３３、ＬＴＢ、ＭＢＰ、ＭＩＣＡＬ２、ＭＹＣＮ、ＭＹＯ１Ｇ、ＮＦＥ２、ＮＯＴＣＨ２、ＮＲＰ１、Ｐ２ＲＹ２、ＰＡＧ１、ＰＬＡＣ８、ＰＬＥＫ、ＰＬＸＮＣ１、ＰＭＰ２２、ＰＴＰＲＥ、ＰＵ．１、ＰＸＫ、ＲＡＢ２７Ａ、ＲＡＳＡ３、ＲＧＳ１６、ＲＨＯＨ、ＲＮＦ２４、ＲＸＲＡ、ＳＥＬＰＬＧ、ＳＬＡ、ＳＬＣ７Ａ１１、ＳＬＣ７Ａ５、ＳＯＣＳ１、ＳＴ３ＧＡＬ４、ＳＴＫ１７Ｂ、ＴＡＬ１、ＴＩＭＰ３、ＴＭＥＭ１０４、ＴＮＦ、ＴＳＣ２２Ｄ１、ＴＳＣ２２Ｄ３、ＺＢＴＢ１６及びＺＣＣＨＣ５からなる群から選択される工程と、
ｃ． ｂ．において判定された発現レベル又は量が対応する正常細胞の範囲外である、例えば対応する正常細胞において見られるものを上回る若しくは下回る、又は患者に対する臨床的利益の増大若しくは減少と関連する或る特定の量を上回る若しくは下回るか否かを決定する工程と、
ｄ． 任意に、患者を任意にその薬学的に許容可能な組成物中の有効量のコルチスタチン、又はその薬学的に許容可能な塩若しくはオキシドで治療する工程と、
を含む、方法。
Ｅ） コルチスタチンによる治療に対して腫瘍又は癌を有する患者を選択する方法であって、
ａ． 患者の腫瘍又は癌のサンプルを得ることと、
ｂ． 患者に由来する生体サンプルにおける１つ以上のバイオマーカーの発現レベル又は量を検出することであって、該バイオマーカーがＡＣＳＬ１、ＡＤＯＲＡ２Ｂ、ＡＤＲＢ１、ＡＭＰＤ３、ＡＲＲＤＣ４、ＢＣＬ２、ＢＣＬ２Ａ１、ＣＢＦβ、ＣＣＮＡ１、ＣＤ２４４、ＣＤ４４、ＣＤＣ４２ＥＰ３、Ｃ／ＥＢＰα、ＣＥＣＲ６、ＣＦＬＡＲ、ＣＩＳＨ、ＣＳＦ１、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＲ４、ＣＹＴＩＰ、ＤＵＳＰ１０、Ｅ２Ｆ８、ＥＭＢ、ＥＭＲ２、ＥＴＳ１、ＥＴＳ２、ＦＡＭ１０７Ｂ、ＦＡＭ４６Ａ、ＦＣＥＲ１Ａ、ＦＣＧＲ１Ｂ、ＦＬＩ１、ＦＯＧ１、ＦＯＳＬ２、ＧＡＢ２、ＧＡＳ７、ＧＡＴＡ１、ＧＡＴＡ２、ＧＦＩ１Ｂ、ＧＭＰＲ、ＧＰＲ１８、ＧＰＲ１８３、ＨＢＢＰ１、ＨＥＢ、ＨＬＸ、ＨＭＧＣＳ１、ＩＧＦＢＰ４、ＩＧＦＢＰ５、ＩＬ１７ＲＡ、ＩＬ１ＲＡＰ、ＩＰＣＥＦ１、ＩＲＦ１、ＩＲＦ８、ＩＴＧＡ６、ＪＡＧ１、ＬＣＰ２、ＬＤＬＲ、ＬＩＭＡ１、ＬＭＯ２、ＬＲＲＣ３３、ＬＴＢ、ＭＢＰ、ＭＩＣＡＬ２、ＭＹＣＮ、ＭＹＯ１Ｇ、ＮＦＥ２、ＮＯＴＣＨ２、ＮＲＰ１、Ｐ２ＲＹ２、ＰＡＧ１、ＰＬＡＣ８、ＰＬＥＫ、ＰＬＸＮＣ１、ＰＭＰ２２、ＰＴＰＲＥ、ＰＵ．１、ＰＸＫ、ＲＡＢ２７Ａ、ＲＡＳＡ３、ＲＧＳ１６、ＲＨＯＨ、ＲＮＦ２４、ＲＸＲＡ、ＳＥＬＰＬＧ、ＳＬＡ、ＳＬＣ７Ａ１１、ＳＬＣ７Ａ５、ＳＯＣＳ１、ＳＴ３ＧＡＬ４、ＳＴＫ１７Ｂ、ＴＡＬ１、ＴＩＭＰ３、ＴＭＥＭ１０４、ＴＮＦ、ＴＳＣ２２Ｄ１、ＴＳＣ２２Ｄ３、ＺＢＴＢ１６及びＺＣＣＨＣ５からなる群から選択されることと、
ｃ． 工程ｂ．において決定される発現と、コルチスタチンに対する応答を示す代表数の患者又は予測動物モデル及びコルチスタチンに対する応答を示さない又は応答が不良な代表数の患者を含む対照サンプルセットにおける同じ遺伝子の発現とを比較して、患者がコルチスタチン療法に応答する可能性が高いかを決定することと、
ｄ． 患者が療法に応答する可能性が高いことが決定された場合に、任意にその薬学的に許容可能な組成物中の有効量のコルチスタチン、又はその薬学的に許容可能な塩若しくはオキシドを投与することと、
を含む、方法。
Ｆ） ＲＵＮＸ１経路障害の診断用の選択される遺伝子（複数の場合もある）の発現レベルを判定するキットを含み、該キットが該遺伝子によって特異的にコードされるＲＮＡに相補的なＤＮＡを増幅するプライマー、及び任意に熱安定性ＤＮＡポリメラーゼを含む、Ａ）〜Ｅ）の方法。
Ｇ） プライマーが各々、選択される遺伝子（複数の場合もある）によってコードされるＲＮＡ又はその相補体に標準のストリンジェントな条件下でハイブリダイズする、Ｆ）の方法。
Ｈ） 選択されるバイオマーカーがＧＡＴＡ１、ＧＡＴＡ２、Ｃ／ＥＢＰα、ＦＬＩ１、ＦＯＧ１、ＥＴＳ１、ＰＵ．１、ＲＵＮＸ１及びＣＢＦαの１つ又は組合せである、Ａ）〜Ｇ）の方法。
Ｉ） 選択されるバイオマーカーがＢＣＬ２、ＣＣＮＡ１、ＣＤ４４、Ｃ／ＥＢＰα、ＣＢＦβ、ＣＳＦ１、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＲ４、ＥＴＳ１、ＥＴＳ２、ＦＬＩ１、ＦＯＧ１、ＦＣＥＲ１Ａ、ＧＡＴＡ１、ＧＡＴＡ２、ＧＦＩ１Ｂ、ＨＥＢ、ＩＲＦ１、ＩＲＦ８、ＪＡＧ１、ＬＭＯ２、ＬＴＢ、ＮＦＥ２、ＮＯＴＣＨ２、ＰＵ．１、ＳＬＡ、ＳＯＣＳ１、ＴＡＬ１及びＴＮＦの１つ又は組合せである、Ａ）〜Ｇ）の方法。
Ｊ） 選択されるバイオマーカーが構成的ＳＴＡＴ１−ｐＳ７２７、ＷＴ１突然変異、ＴＥＴ２突然変異、ＩＤＨ１突然変異、ＩＤＨ２突然変異、ＭＬＬ転位、Ｃ／ＥＢＰα突然変異、ＣＢＦβ転位、ＰＵ．１突然変異、ＧＡＴＡ １又は２突然変異、ＥＲＧ転座、ＴＬＸ１過剰発現及びＴＬＸ３活性化の１つ又は組合せである、Ａ）〜Ｇ）の方法。
Ｋ） Ｄ）、Ｈ）、Ｉ）及びＪ）のリストから独立して選択される少なくとも２つのバイオマーカーを使用することを含む、Ａ）〜Ｊ）の方法。
Ｌ） Ｄ）、Ｈ）、Ｉ）及びＪ）のリストから独立して選択される少なくとも３つのバイオマーカーを使用することを含む、Ａ）〜Ｊ）の方法。
Ｍ） Ｄ）、Ｈ）、Ｉ）及びＪ）のリストから独立して選択される少なくとも４つのバイオマーカーを使用することを含む、Ａ）〜Ｊ）の方法。
Ｎ） 腫瘍又は癌が造血系のものである、Ａ）〜Ｍ）の方法。
Ｏ） 造血系腫瘍若しくは癌が急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ芽球性白血病（ＣＬＬ）、Ｂ細胞急性リンパ芽球性白血病（Ｂ−ＡＬＬ）、小児Ｂ−ＡＬＬ、慢性骨髄性白血病、急性単球性白血病、急性巨核芽球性白血病、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、バーキットリンパ腫、ＡＩＤＳ関連リンパ腫、慢性骨髄増殖性障害、原発性中枢神経系リンパ腫、Ｔ細胞リンパ腫、有毛細胞白血病及び多発性骨髄腫（ＭＭ）から選択されるか、又は細胞が骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）に見られるような造血器腫瘍若しくは癌の前駆体細胞である、Ｎ）の方法。
Ｐ） 腫瘍又は癌が非造血系のものである、Ａ）〜Ｍ）の方法。
Ｑ） 腫瘍又は癌が乳癌、卵巣癌、類内膜癌、扁平上皮癌、血管肉腫、結腸癌、胃腸腫瘍、転移傾向性固形腫瘍、明細胞癌、腎細胞癌又は食道癌である、Ｐ）の方法。
Ｒ） 患者に投与されるコルチスタチンが式（Ａ−１）、（Ａ−１’）、（Ａ−１’’）、（Ａ−２’）、（Ａ−２’’）、（Ａ−３’）、（Ａ−３’’）、（Ｄ１’）、（Ｄ１’’）、（Ｄ２’）、（Ｄ２’’）、（Ｅ１’）、（Ｅ１’’）、（Ｅ２’）、（Ｅ２’’）、（Ｇ１’）又は（Ｇ１’’）の化合物から選択される、Ａ）〜Ｑ）の方法。
Ｓ） 患者に投与されるコルチスタチンが、
である、Ａ）〜Ｑ）の方法。
Ｔ） 患者に投与されるコルチスタチンが天然コルチスタチンである、Ａ）〜Ｑ）の方法。
Ｕ） 患者に投与されるコルチスタチンが、既知のコルチスタチン誘導体から選択される、Ａ）〜Ｑ）の方法。
Ｖ） ＲＵＮＸ１障害がＲＵＮＸ１点突然変異、ＲＵＮＸ１遺伝子が関与する染色体転座、又はＲＵＮＸ１タンパク質の不安定化若しくは分解の増大をもたらす突然変異の結果である、Ａ）〜Ｖ）の方法。
Ｗ） ＲＵＮＸ１転写因子障害が、ＲＵＮＸ１の制御下の遺伝子の発現の減少をもたらす、Ａ）〜Ｖ）の方法。
Ｘ） コルチスタチン療法に応答する可能性が高い患者を標的化選択及び治療する方法であって、（ｉ）患者がＥＲ陽性、ＶＨＬ突然変異の機能喪失（ＶＨＬ陰性）、ＨＥＲ２過剰発現、ＥＧＦＲ突然変異、ＭＥＴ突然変異、神経芽細胞腫のバイオマーカー；ＥＷＳ−ＦＬＩ１、ＳＴＡＴ１−ｐＳ７２７、ＳＴＡＴ１、又はＥＴＶ１、ＦＬＩ１、ＳＭＣ３、ＳＭＣ１Ａ、ＲＡＤ２１若しくはＳＴＡＧ２における不活性化突然変異から選択されるバイオマーカーの１つ又は組合せを有するか否かを決定することと、そうであれば（ｉｉ）例えば本明細書に記載のものを含む、有効量のコルチスタチン誘導体又はその薬学的に許容可能な塩、オキシド及び／又は組成物を投与することとを含む、方法。
Ｙ） 患者がコルチスタチン療法に首尾よく応答するか否かを決定するキットを使用することを含み、該キットがバイオマーカー若しくはバイオマーカーの組合せのポリヌクレオチドとストリンジェントな条件下でアニールするプローブ、又はバイオマーカータンパク質に結合する抗体を含む、Ｘ）、Ｚ）又はＡＡ）の方法。
Ｚ） コルチスタチンによる治療に対する腫瘍又は癌を有する患者の応答を予測する方法であって、
ａ． 患者から腫瘍又は癌のサンプルを得る工程と、
ｂ． 患者に由来する生体サンプルにおける１つ以上のバイオマーカーの発現レベル又は量を決定する工程であって、該バイオマーカーがＥＲ陽性、ＶＨＬ突然変異の機能喪失（ＶＨＬ陰性）、ＨＥＲ２過剰発現、ＥＧＦＲ突然変異、ＭＥＴ突然変異、神経芽細胞腫のバイオマーカー；ＥＷＳ−ＦＬＩ１、ＳＴＡＴ１−ｐＳ７２７、ＳＴＡＴ１、又はＥＴＶ１、ＦＬＩ１、ＳＭＣ３、ＳＭＣ１Ａ、ＲＡＤ２１若しくはＳＴＡＧ２における不活性化突然変異からなる群から選択される工程と、
ｃ． ｂ．において判定された発現レベル又は量が対応する正常細胞の範囲外である、例えば対応する正常細胞において見られるものを上回る若しくは下回る、又は患者に対する臨床的利益の増大若しくは減少と関連する或る特定の量を上回る若しくは下回るか否かを決定する工程と、
ｄ． 任意に、患者を任意にその薬学的に許容可能な組成物中の有効量のコルチスタチン、又はその薬学的に許容可能な塩若しくはオキシドで治療する工程と、
を含む、方法。
ＡＡ） コルチスタチンによる治療に応答する患者を選択する方法であって、
ａ． 患者の腫瘍又は癌のサンプルを得ることと、
ｂ． 患者に由来する生体サンプルにおける１つ以上のバイオマーカーの発現レベル又は量を検出することであって、該バイオマーカーがＥＲ陽性、ＶＨＬ突然変異の機能喪失（ＶＨＬ陰性）、ＨＥＲ２過剰発現、ＥＧＦＲ突然変異、ＭＥＴ突然変異、神経芽細胞腫のバイオマーカー；ＳＴＡＴ１−ｐＳ７２７、ＳＴＡＴ１、ＥＷＳ−ＦＬＩ１、又はＥＴＶ１、ＦＬＩ１、ＳＭＣ３、ＳＭＣ１Ａ、ＲＡＤ２１若しくはＳＴＡＧ２における不活性化突然変異からなる群から選択されることと、
ｃ． 工程ｂ．において決定される発現と、コルチスタチンに対する応答を示す代表数の患者又は予測動物モデル及びコルチスタチンに対する応答を示さない又は応答が不良な代表数の患者を含む対照サンプルセットにおける同じ遺伝子の発現とを比較して、患者がコルチスタチン療法に応答する可能性が高いかを決定することと、
ｄ． 患者が療法に応答する可能性が高いことが決定された場合に、任意にその薬学的に許容可能な組成物中の有効量のコルチスタチン、又はその薬学的に許容可能な塩若しくはオキシドを投与することと、
を含む、方法。
ＢＢ） 選択される遺伝子の診断用のキットを含み、該診断用のキットが、該遺伝子によって特異的にコードされるＲＮＡに相補的なＤＮＡを増幅するプライマー及び任意に熱安定性ＤＮＡポリメラーゼを含む、Ｘ）〜ＡＡ）の方法。
ＣＣ） キットを含み、プライマーが各々、遺伝子によってコードされるＲＮＡ又はその相補体に標準のストリンジェントな条件下でハイブリダイズする、Ｘ）〜ＡＡ）の方法。
ＤＤ） 腫瘍又は癌が造血系のものである、Ｘ）〜ＡＡ）の方法。
ＥＥ） 造血系腫瘍若しくは癌が急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、Ｂ細胞急性リンパ芽球性白血病（Ｂ−ＡＬＬ）、小児Ｂ−ＡＬＬ、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ芽球性白血病（ＣＬＬ）、Ｂ細胞急性リンパ芽球性白血病（Ｂ−ＡＬＬ）、小児Ｂ−ＡＬＬ、慢性骨髄性白血病、急性単球性白血病、急性巨核芽球性白血病、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、バーキットリンパ腫、ＡＩＤＳ関連リンパ腫、慢性骨髄増殖性障害、原発性中枢神経系リンパ腫、Ｔ細胞リンパ腫、有毛細胞白血病及び多発性骨髄腫（ＭＭ）から選択されるか、又は細胞が骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）に見られるような造血器腫瘍又は癌の前駆体細胞である、ＤＤ）の方法。
ＦＦ） 腫瘍又は癌が非造血系のものである、Ｖ）〜ＡＡ）の方法。
ＧＧ） 腫瘍又は癌が乳癌、卵巣癌、類内膜癌、扁平上皮癌、血管肉腫、結腸癌、胃腸腫瘍、転移傾向性固形腫瘍、明細胞癌、腎細胞癌又は食道癌である、ＦＦ）の方法。
ＨＨ） 抗ＣＤＫ８／１９療法に応答する可能性が高い腫瘍又は癌を有する患者を標的化選択及び治療する方法であって、（ｉ）患者がＲＵＮＸ１経路障害を有するか否かを決定することと、そうであれば（ｉｉ）例えば本明細書に記載のものを含む、有効量のＣＤＫ８／１９阻害剤、又はその薬学的に許容可能な塩、オキシド及び／又は組成物を投与することとを含む、方法。
ＩＩ） 有効量のＣＤＫ８／１９阻害剤を、ＲＵＮＸ１によって転写されるタンパク質の十分な上方調節をもたらし、細胞がより正常な、より低毒性の、成熟が誘導された、又は細胞成長停止若しくはアポトーシスしたものとなるような腫瘍又は癌の分化を引き起こす方法及び投与量で投与することによって、ＲＵＮＸ１障害腫瘍又は癌を治療する方法。
ＪＪ） 患者が抗ＣＤＫ８／１９療法に首尾よく応答するか否かを決定するキットを使用することを含み、該キットがバイオマーカー若しくはバイオマーカーの組合せのポリヌクレオチドとストリンジェントな条件下でアニールするプローブ、又はバイオマーカータンパク質に結合する抗体を含む、ＨＨ）、ＩＩ）、ＫＫ）又はＬＬ）の方法。
ＫＫ） ＣＤＫ８／１９阻害剤による治療に対する腫瘍又は癌を有する患者の応答を予測する方法であって、
ａ． 患者から腫瘍又は癌のサンプルを得る工程と、
ｂ． 患者に由来する生体サンプルにおける１つ以上のバイオマーカーの発現レベル又は量を決定する工程であって、該バイオマーカーがＡＣＳＬ１、ＡＤＯＲＡ２Ｂ、ＡＤＲＢ１、ＡＭＰＤ３、ＡＲＲＤＣ４、ＢＣＬ２、ＢＣＬ２Ａ１、ＣＢＦβ、ＣＣＮＡ１、ＣＤ２４４、ＣＤ４４、ＣＤＣ４２ＥＰ３、Ｃ／ＥＢＰα、ＣＥＣＲ６、ＣＦＬＡＲ、ＣＩＳＨ、ＣＳＦ１、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＲ４、ＣＹＴＩＰ、ＤＵＳＰ１０、Ｅ２Ｆ８、ＥＭＢ、ＥＭＲ２、ＥＴＳ１、ＥＴＳ２、ＦＡＭ１０７Ｂ、ＦＡＭ４６Ａ、ＦＣＥＲ１Ａ、ＦＣＧＲ１Ｂ、ＦＬＩ１、ＦＯＧ１、ＦＯＳＬ２、ＧＡＢ２、ＧＡＳ７、ＧＡＴＡ１、ＧＡＴＡ２、ＧＦＩ１Ｂ、ＧＭＰＲ、ＧＰＲ１８、ＧＰＲ１８３、ＨＢＢＰ１、ＨＥＢ、ＨＬＸ、ＨＭＧＣＳ１、ＩＧＦＢＰ４、ＩＧＦＢＰ５、ＩＬ１７ＲＡ、ＩＬ１ＲＡＰ、ＩＰＣＥＦ１、ＩＲＦ１、ＩＲＦ８、ＩＴＧＡ６、ＪＡＧ１、ＬＣＰ２、ＬＤＬＲ、ＬＩＭＡ１、ＬＭＯ２、ＬＲＲＣ３３、ＬＴＢ、ＭＢＰ、ＭＩＣＡＬ２、ＭＹＣＮ、ＭＹＯ１Ｇ、ＮＦＥ２、ＮＯＴＣＨ２、ＮＲＰ１、Ｐ２ＲＹ２、ＰＡＧ１、ＰＬＡＣ８、ＰＬＥＫ、ＰＬＸＮＣ１、ＰＭＰ２２、ＰＴＰＲＥ、ＰＵ．１、ＰＸＫ、ＲＡＢ２７Ａ、ＲＡＳＡ３、ＲＧＳ１６、ＲＨＯＨ、ＲＮＦ２４、ＲＸＲＡ、ＳＥＬＰＬＧ、ＳＬＡ、ＳＬＣ７Ａ１１、ＳＬＣ７Ａ５、ＳＯＣＳ１、ＳＴ３ＧＡＬ４、ＳＴＫ１７Ｂ、ＴＡＬ１、ＴＩＭＰ３、ＴＭＥＭ１０４、ＴＮＦ、ＴＳＣ２２Ｄ１、ＴＳＣ２２Ｄ３、ＺＢＴＢ１６及びＺＣＣＨＣ５からなる群から選択される工程と、
ｃ． ｂ．において判定された発現レベル又は量が、対応する正常細胞の範囲外である、例えば対応する正常細胞において見られるものを上回る若しくは下回る、又は患者に対する臨床的利益の増大若しくは減少と関連する或る特定の量を上回る若しくは下回るか否かを決定する工程と、
ｄ． 任意に、患者を任意にその薬学的に許容可能な組成物中の有効量のＣＤＫ８／１９阻害剤、又はその薬学的に許容可能な塩若しくはオキシドで治療する工程と、
を含む、方法。
ＬＬ） ＣＤＫ８／１９阻害剤による治療に対して腫瘍又は癌を有する患者を選択する方法であって、
ａ． 患者の腫瘍又は癌のサンプルを得ることと、
ｂ． 患者に由来する生体サンプルにおける１つ以上のバイオマーカーの発現レベル又は量を検出することであって、該バイオマーカーがＡＣＳＬ１、ＡＤＯＲＡ２Ｂ、ＡＤＲＢ１、ＡＭＰＤ３、ＡＲＲＤＣ４、ＢＣＬ２、ＢＣＬ２Ａ１、ＣＢＦβ、ＣＣＮＡ１、ＣＤ２４４、ＣＤ４４、ＣＤＣ４２ＥＰ３、Ｃ／ＥＢＰα、ＣＥＣＲ６、ＣＦＬＡＲ、ＣＩＳＨ、ＣＳＦ１、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＲ４、ＣＹＴＩＰ、ＤＵＳＰ１０、Ｅ２Ｆ８、ＥＭＢ、ＥＭＲ２、ＥＴＳ１、ＥＴＳ２、ＦＡＭ１０７Ｂ、ＦＡＭ４６Ａ、ＦＣＥＲ１Ａ、ＦＣＧＲ１Ｂ、ＦＬＩ１、ＦＯＧ１、ＦＯＳＬ２、ＧＡＢ２、ＧＡＳ７、ＧＡＴＡ１、ＧＡＴＡ２、ＧＦＩ１Ｂ、ＧＭＰＲ、ＧＰＲ１８、ＧＰＲ１８３、ＨＢＢＰ１、ＨＥＢ、ＨＬＸ、ＨＭＧＣＳ１、ＩＧＦＢＰ４、ＩＧＦＢＰ５、ＩＬ１７ＲＡ、ＩＬ１ＲＡＰ、ＩＰＣＥＦ１、ＩＲＦ１、ＩＲＦ８、ＩＴＧＡ６、ＪＡＧ１、ＬＣＰ２、ＬＤＬＲ、ＬＩＭＡ１、ＬＭＯ２、ＬＲＲＣ３３、ＬＴＢ、ＭＢＰ、ＭＩＣＡＬ２、ＭＹＣＮ、ＭＹＯ１Ｇ、ＮＦＥ２、ＮＯＴＣＨ２、ＮＲＰ１、Ｐ２ＲＹ２、ＰＡＧ１、ＰＬＡＣ８、ＰＬＥＫ、ＰＬＸＮＣ１、ＰＭＰ２２、ＰＴＰＲＥ、ＰＵ．１、ＰＸＫ、ＲＡＢ２７Ａ、ＲＡＳＡ３、ＲＧＳ１６、ＲＨＯＨ、ＲＮＦ２４、ＲＸＲＡ、ＳＥＬＰＬＧ、ＳＬＡ、ＳＬＣ７Ａ１１、ＳＬＣ７Ａ５、ＳＯＣＳ１、ＳＴ３ＧＡＬ４、ＳＴＫ１７Ｂ、ＴＡＬ１、ＴＩＭＰ３、ＴＭＥＭ１０４、ＴＮＦ、ＴＳＣ２２Ｄ１、ＴＳＣ２２Ｄ３、ＺＢＴＢ１６及びＺＣＣＨＣ５からなる群から選択されることと、
ｃ． 工程ｂ．において決定される発現と、ＣＤＫ８／１９阻害剤に対する応答を示す代表数の患者又は予測動物モデル及びＣＤＫ８／１９阻害剤に対する応答を示さない又は応答が不良な代表数の患者を含む対照サンプルセットにおける同じ遺伝子の発現とを比較して、患者が抗ＣＤＫ８／１９療法に応答する可能性が高いかを決定することと、
ｄ． 患者が療法に応答する可能性が高いことが決定された場合に、任意にその薬学的に許容可能な組成物中の有効量のＣＤＫ８／１９阻害剤、又はその薬学的に許容可能な塩若しくはオキシドを投与することと、
を含む、方法。
ＭＭ） ＲＵＮＸ１経路障害の診断用の選択される遺伝子のセット、該遺伝子によって特異的にコードされるＲＮＡに相補的なＤＮＡを増幅するプライマー、及び任意に熱安定性ＤＮＡポリメラーゼを含むキットを含む、ＨＨ）〜ＬＬ）の方法。
ＮＮ） ＲＵＮＸ１経路障害の診断用の選択される遺伝子セットの各遺伝子について、該遺伝子によって特異的にコードされるＲＮＡに相補的なＤＮＡを増幅するプライマーからなるプライマーセットを含むキットを含み、プライマーが各々、遺伝子によってコードされるＲＮＡ又はその相補体に標準のストリンジェントな条件下でハイブリダイズする、ＨＨ）〜ＬＬ）の方法。
ＯＯ） 選択されるバイオマーカーがＧＡＴＡ１、ＧＡＴＡ２、Ｃ／ＥＢＰα、ＦＬＩ１、ＦＯＧ１、ＥＴＳ１、ＰＵ．１及びＣＢＦαの１つ又は組合せである、ＨＨ）〜ＮＮ）の方法。
ＰＰ） 選択されるバイオマーカーがＢＣＬ２、ＣＣＮＡ１、ＣＤ４４、Ｃ／ＥＢＰα、ＣＢＦβ、ＣＳＦ１、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＲ４、ＥＴＳ１、ＥＴＳ２、ＦＬＩ１、ＦＯＧ１、ＦＣＥＲ１Ａ、ＧＡＴＡ１、ＧＡＴＡ２、ＧＦＩ１Ｂ、ＨＥＢ、ＩＲＦ１、ＩＲＦ８、ＪＡＧ１、ＬＭＯ２、ＬＴＢ、ＮＦＥ２、ＮＯＴＣＨ２、ＰＵ．１、ＳＬＡ、ＳＯＣＳ１、ＴＡＬ１及びＴＮＦの１つ又は組合せである、ＨＨ）〜ＮＮ）の方法。
ＱＱ） 選択されるバイオマーカーが構成的ＳＴＡＴ１−ｐＳ７２７、ＷＴ１突然変異、ＴＥＴ２突然変異、ＩＤＨ１突然変異、ＩＤＨ２突然変異、ＭＬＬ転位、Ｃ／ＥＢＰα突然変異、ＣＢＦβ転位、ＰＵ．１突然変異、ＧＡＴＡ １又は２突然変異、ＥＲＧ転座、ＴＬＸ１過剰発現及びＴＬＸ３活性化の１つ以上である、ＨＨ）〜ＮＮ）の方法。
ＲＲ） ＫＫ）、ＯＯ）及びＰＰ）のリストから独立して選択される少なくとも２つのバイオマーカーを使用することを含む、ＨＨ）〜ＮＮ）の方法。
ＳＳ） ＫＫ）、ＯＯ）及びＰＰ）のリストから独立して選択される少なくとも３つのバイオマーカーを使用することを含む、ＨＨ）〜ＱＱ）の方法。
ＴＴ） ＫＫ）、ＯＯ）及びＰＰ）のリストから独立して選択される少なくとも４つのバイオマーカーを使用することを含む、ＨＨ）〜ＱＱ）の方法。
ＵＵ） 患者がＣＤＫ８／１９療法に首尾よく応答するか否かを決定するキットを使用することを含み、該キットがバイオマーカー若しくはバイオマーカーの組合せのポリヌクレオチドとストリンジェントな条件下でアニールするプローブ、又はバイオマーカータンパク質に結合する抗体を含む、ＨＨ）〜ＴＴ）の方法。
ＶＶ） ＣＤＫ８／１９阻害剤による治療に対する腫瘍又は癌を有する患者の応答を予測する方法であって、
ａ． 患者から腫瘍又は癌のサンプルを得る工程と、
ｂ． 患者に由来する生体サンプルにおける１つ以上のバイオマーカーの発現レベル又は量を決定する工程であって、該バイオマーカーがＥＲ陽性、ＶＨＬ突然変異の機能喪失（ＶＨＬ陰性）、ＨＥＲ２過剰発現、ＥＧＦＲ突然変異、ＭＥＴ突然変異、神経芽細胞腫のバイオマーカー；ＥＷＳ−ＦＬＩ１、ＳＴＡＴ１−ｐＳ７２７、ＳＴＡＴ１、又はＥＴＶ１、ＦＬＩ１、ＳＭＣ３、ＳＭＣ１Ａ、ＲＡＤ２１若しくはＳＴＡＧ２における不活性化突然変異からなる群から選択される工程と、
ｃ． ｂ．において判定された発現レベル又は量が、対応する正常細胞において見られるものを上回る又は下回る、例えば患者に対する臨床的利益の増大又は減少と関連する或る特定の量を上回る又は下回るか否かを決定する工程と、
ｄ． 任意に、患者を任意にその薬学的に許容可能な組成物中の有効量のＣＤＫ８／１９阻害剤、又はその薬学的に許容可能な塩若しくはオキシドで治療する工程と、
を含む、方法。
ＷＷ） ＣＤＫ８／１９阻害剤による治療に応答する腫瘍又は癌を有する患者を選択する方法であって、
ａ． 患者の腫瘍又は癌のサンプルを得ることと、
ｂ． 患者に由来する生体サンプルにおける１つ以上のバイオマーカーの発現レベル又は量を検出することであって、該バイオマーカーがＥＲ陽性、ＶＨＬ突然変異の機能喪失（ＶＨＬ陰性）、ＨＥＲ２過剰発現、ＥＧＦＲ突然変異、ＭＥＴ突然変異、神経芽細胞腫のバイオマーカー；ＥＷＳ−ＦＬＩ１、ＳＴＡＴ１−ｐＳ７２７、ＳＴＡＴ１、又はＥＴＶ１、ＦＬＩ１、ＳＭＣ３、ＳＭＣ１Ａ、ＲＡＤ２１若しくはＳＴＡＧ２における不活性化突然変異からなる群から選択されることと、
ｃ． 工程ｂ．において決定される発現と、ＣＤＫ８／１９阻害剤に対する応答を示す代表数の患者又は予測動物モデル及びＣＤＫ８／１９阻害剤に対する応答を示さない又は応答が不良な代表数の患者を含む対照サンプルセットにおける同じ遺伝子の発現とを比較して、患者がコルチスタチン療法に応答する可能性が高いかを決定することと、
ｄ． 患者が療法に応答する可能性が高いことが決定された場合に、任意にその薬学的に許容可能な組成物中の有効量のＣＤＫ８／１９阻害剤、又はその薬学的に許容可能な塩若しくはオキシドを投与することと、
を含む、方法。
ＸＸ） 選択される遺伝子の診断用のキットを含み、該診断用のキットが該遺伝子によって特異的にコードされるＲＮＡに相補的なＤＮＡを増幅するプライマー及び任意に熱安定性ＤＮＡポリメラーゼを含む、ＶＶ）〜ＷＷ）の方法。
ＹＹ） 選択される遺伝子セットの各遺伝子について、該遺伝子によって特異的にコードされるＲＮＡに相補的なＤＮＡを増幅するプライマーからなるプライマーセットを含むキットを含み、該プライマーが各々、遺伝子によってコードされるＲＮＡ又はその相補体に標準のストリンジェントな条件下でハイブリダイズする、ＶＶ）〜ＷＷ）の方法。
ＺＺ） 腫瘍又は癌が造血系のものである、ＶＶ）〜ＹＹ）の方法。
ＡＡＡ） 造血系腫瘍若しくは癌が急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ芽球性白血病（ＣＬＬ）、Ｂ細胞急性リンパ芽球性白血病（Ｂ−ＡＬＬ）、小児Ｂ−ＡＬＬ、慢性骨髄性白血病、急性単球性白血病、急性巨核芽球性白血病、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、バーキットリンパ腫、ＡＩＤＳ関連リンパ腫、慢性骨髄増殖性障害、原発性中枢神経系リンパ腫、Ｔ細胞リンパ腫、有毛細胞白血病及び多発性骨髄腫（ＭＭ）から選択されるか、又は細胞が骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）に見られるような造血器腫瘍若しくは癌の前駆体細胞である、ＺＺ）の方法。
ＢＢＢ） 腫瘍又は癌が非造血系のものである、ＶＶ）〜ＹＹ）の方法。
ＣＣＣ） 腫瘍又は癌が乳癌、卵巣癌、類内膜癌、扁平上皮癌、血管肉腫、結腸癌、胃腸腫瘍、転移傾向性固形腫瘍、明細胞癌、腎細胞癌又は食道癌である、ＢＢＢ）の方法。患者を第２の活性剤で治療することを更に含む、Ａ）〜ＣＣＣ）の方法。
ＤＤＤ） 患者を第２の活性剤で治療することを更に含み、該第２の活性剤がＢＥＴ阻害剤、ＰＩ３Ｋ阻害剤、Ｒａｆ阻害剤、ＢＴＫ阻害剤、Ｂｃｌ−２阻害剤、ＣＤＫ７阻害剤、ＭＥＫ阻害剤又はＳｙｋ阻害剤から選択される、Ａ）〜ＣＣＣ）の方法。
ＥＥＥ） 患者を第２の活性剤で治療することを更に含み、該第２の活性剤がニボルマブ（BMS）、ペムブロリズマブ（Merck）、ピディリズマブ（CureTech／Teva）、ＡＭＰ−２４４（Amplimmune／GSK）、ＢＭＳ−９３６５５９（BMS）及びＭＥＤＩ４７３６（Roche／Genentech）から選択されるＰＤ−１阻害剤である、Ａ）〜ＣＣＣ）の方法。
ＦＦＦ） 患者を少なくとも１つの付加的な活性剤で治療することを更に含み、第２の活性剤がＪＱ１、Ｉ−ＢＥＴ １５１（ＧＳＫ１２１０１５１Ａとしても知られる）、Ｉ−ＢＥＴ ７６２（ＧＳＫ５２５７６２としても知られる）、ＯＴＸ−０１５（ＭＫ−８２６８としても知られる、ＩＵＰＡＣ ６Ｈ−チエノ［３，２−ｆ］［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］［１，４］ジアゼピン−６−アセトアミド、４−（４−クロロフェニル）−Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）−２，３，９−トリチメル−）、ＴＥＮ−０１０、ＣＰＩ−２０３、ＣＰＩ−０６１０、ＲＶＸ−２０８及びＬＹ２９４００２から選択されるＢＥＴ阻害剤である、Ａ）〜ＣＣＣ）の方法。
ＧＧＧ） 患者を第２の活性剤で治療することを更に含み、付加的な活性剤が免疫調節剤である、Ａ）〜ＣＣＣ）の方法。
ＨＨＨ） 付加的な活性剤が抗ＰＤ１抗体である、Ａ）〜ＣＣＣ）の方法。
ＩＩＩ） 付加的な活性剤がイピリムマブ（Yervoy）又はトレメリムマブ等の抗ＣＴＬＡ−４化合物である、Ａ）〜ＣＣＣ）の方法。
ＪＪＪ） 上記実施形態のいずれかに記載のキット。
ＫＫＫ） コルチスタチンと少なくとも１つの他の活性剤との組み合わせ投薬形態であって、患者選択のために診断と組み合わせて使用される、組み合わせ投薬形態。
本発明を下記セクション：コルチスタチン（セクションＩ）、ＣＤＫ８／１８阻害剤（セクションＩＩ）、サンプルバイオマーカー分析に基づく患者の選択（セクションＩＩＩ）、診断及びキット（セクションＩＶ）、方法及び医薬組成物（セクションＶ）、組合せ（セクションＶＩ）、並びに実施例（セクションＶＩ）において更に説明する。
Ｉ． コルチスタチン
「コルチスタチン」又は「コルチスタチン誘導体」又は「コルチスタチン類縁体」という用語は本明細書で使用される場合、ＣＤＫ８／１９の阻害剤であり、既知の天然由来のコルチスタチン（コルチスタチンＡ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｊ、Ｋ又はＬ）の１つのコア一般環構造を有するか、又は下記式の１つに記載されるか、又はそうでなければ、背景技術に記載の参照文献のいずれかにおけるものを含む当該技術分野でコルチスタチン誘導体として知られる化合物を指す。コルチスタチンは、所望に応じて第４級アンモニウム塩を含む薬学的に許容可能な塩、Ｎ−オキシドの形態で、及び／又は薬学的に許容可能な組成物中で使用することができる。
Ａ． コルチスタチン類縁体
或る特定の実施形態では、コルチスタチン又はその類縁体は式（Ａ−１）、（Ａ−１’）、（Ａ−１’’）、（Ａ−２’）、（Ａ−２’’）、（Ａ−３’）、（Ａ−３’’）、（Ｄ１’）、（Ｄ１’’）、（Ｄ２’）、（Ｄ２’’）、（Ｅ１’）、（Ｅ１’’）、（Ｅ２’）、（Ｅ２’’）、（Ｇ１’）若しくは（Ｇ１’’）：
（式中、
Ｗは−Ｎ（Ｒ１）（Ｒ２）、−ＯＲＯ、＝Ｏ又は＝Ｎ（Ｒ１）であり、
Ｒ１が水素、任意に置換されたアルキル、任意に置換されたアルケニル、任意に置換されたアルキニル、任意に置換されたカルボシクリル、任意に置換されたヘテロシクリル、任意に置換されたアリール、任意に置換されたヘテロアリール、−ＯＲＡ、−ＳＲＡ、−Ｎ（ＲＡ）２、−Ｃ（＝Ｏ）ＲＡ、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＡ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２、−Ｓ（＝Ｏ）２ＲＡ若しくは窒素保護基であり、
Ｒ２が水素、任意に置換されたアルキル、任意に置換されたアルケニル、任意に置換されたアルキニル、任意に置換されたカルボシクリル、任意に置換されたヘテロシクリル、任意に置換されたアリール、任意に置換されたヘテロアリール、−Ｃ（＝Ｏ）ＲＡ、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＡ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２、−Ｓ（＝Ｏ）２ＲＡ若しくは窒素保護基であるか、
又はＲ１及びＲ２が接合して、任意に置換されたヘテロシクリル又は任意に置換されたヘテロアリールを形成し、
ＲＯは水素、任意に置換されたアルキル、任意に置換されたアルケニル、任意に置換されたアルキニル、任意に置換されたカルボシクリル、任意に置換されたヘテロシクリル、任意に置換されたアリール、任意に置換されたヘテロアリール、−Ｃ（＝Ｏ）ＲＡ、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＡ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２又は酸素保護基であり、
ＲＮは水素、任意に置換されたアルキル、任意に置換されたアルケニル、任意に置換されたアルキニル、任意に置換されたカルボシクリル、任意に置換されたヘテロシクリル、任意に置換されたアリール、任意に置換されたヘテロアリール、−ＯＲＡ、−Ｃ（＝Ｏ）ＲＡ、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＡ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２、−Ｓ（＝Ｏ）２ＲＡ又は窒素保護基であり、
Ｒ３は水素又は任意に置換されたアルキルであり、
Ｒ４は水素、ハロゲン、任意に置換されたアルキル又は−Ｓｉ（ＲＡ）３であり、
Ｒ５Ａは水素、ハロゲン、任意に置換されたアルキル、−ＯＲＡ、−ＯＣ（＝Ｏ）ＲＡ、−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＲＡ、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２、−ＯＳ（＝Ｏ）２ＲＡ、−Ｎ３、−Ｎ（ＲＡ）２、−ＮＲＡＣ（＝Ｏ）ＲＡ、−ＮＲＡＣ（＝Ｏ）ＯＲＡ、−ＮＲＡＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２、−ＮＲＡＳ（＝Ｏ）２ＲＡ又は−Ｃ（ＲＡ）３であり、
Ｒ５Ｂは水素、ハロゲン、任意に置換されたアルキル又は−ＯＲＡであり、
はそれぞれ、原子価が許せば、
ａ． （ｂ）として指定される、
が二重結合を表す場合、（ａ２）として指定される、
が単結合を表し、
ｂ． （ｃ）として指定される、
が二重結合を表す場合、ＲＢ１及びＲＢ２の一方が存在せず、かつＹ１及びＹ２の一方が存在せず、
ｃ． （ｃ）として指定される、
が単結合を表す場合、ＲＢ１及びＲＢ２の両方が存在し、かつＹ１及びＹ２の両方が存在し、
ｄ． （ａ１）として指定される、
が二重結合を表す場合、（ｄ２）及び（ａ２）として指定される、
が各々単結合を表し、
ｅ． （ａ２）として指定される、
が二重結合を表す場合、（ａ１）及び（ｂ）として指定される、
が各々単結合を表し、
ｆ． （ｄ１）として指定される、
が二重結合を表す場合、（ｄ２）として指定される、
が単結合を表し、
ｇ． （ｄ２）として指定される、
が二重結合を表す場合、（ａ１）及び（ｄ１）として指定される、
が各々単結合を表す限りにおいて、単結合又は二重結合を表し、
ＲＢ１及びＲＢ２がそれぞれ独立して水素、−Ｌ１−ＲＢ３又は−ＸＡＲＡ（式中、ＸＡは−Ｏ−、−Ｓ−又は−Ｎ（ＲＡ）−である）であるか、又はＲＢ１及びＲＢ２が接合してオキソ基を形成するが、但し、ＲＢ１及びＲＢ２の少なくとも一方が水素ではなく、
Ｌ１は結合、−ＣＨ（ＣＨ３）（ＣＨ２）２−、−ＣＨ（ＣＨ３）−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｓ−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＬ）−又は−Ｎ（ＲＬ）−（Ｃ（ＲＬＬ）２）ｐ−（式中、ＲＬは水素、任意に置換されたアルキル又は窒素保護基であり、ＲＬＬはそれぞれ独立して水素、ハロゲン又は任意に置換されたアルキルであり、ｐは０、１又は２である）であり、
ＲＢ３は水素、任意に置換されたアルキル、任意に置換されたアルケニル、任意に置換されたアルキニル、任意に置換されたカルボシクリル、任意に置換されたヘテロシクリル、任意に置換されたアリール又は任意に置換されたヘテロアリールであるが、但し、Ｌ１が結合である場合、ＲＢ３は水素ではなく、
ＲＡはそれぞれ独立して水素、任意に置換されたアルキル、任意に置換されたアルケニル、任意に置換されたアルキニル、任意に置換されたカルボシクリル、任意に置換されたヘテロシクリル、任意に置換されたアリール、任意に置換されたヘテロアリール、カルボニル、シリル、酸素に付着する場合に酸素保護基、硫黄に付着する場合に硫黄保護基、又は窒素に付着する場合に窒素保護基であり、任意にＮに付着する場合に、２つのＲＡ基が接合して、任意に置換されたヘテロシクリル又は任意に置換されたヘテロアリール環を形成してもよく、任意にＲＢ１及びＲＢ２が各々−ＸＡＲＡである場合に、２つのＲＡ基が接合して、任意に置換されたヘテロシクリル環を形成してもよく、
Ｙ１及びＹ２がそれぞれ水素であるか、又はＹ１が水素であり、かつＹ２が−ＯＨであるか、又はＹ１及びＹ２が接合してオキソ（＝Ｏ）基を形成する）の化合物、又はその薬学的に許容可能な塩、第四級アミン塩若しくはＮ−オキシドである。
一実施形態では、本発明は式（Ａ−１）、（Ａ−１’）、（Ａ−１’’）、（Ａ−２’）、（Ａ−２’’）、（Ａ−３’）、（Ａ−３’’）、（Ｄ１’）、（Ｄ１’’）、（Ｄ２’）、（Ｄ２’’）、（Ｅ１’）、（Ｅ１’’）、（Ｅ２’）、（Ｅ２’’）、（Ｇ１’）又は（Ｇ１’’）の化合物、及び本明細書に記載の付加的な活性化合物、並びに同位体の天然存在度を超える、すなわち濃縮された量での原子の少なくとも１つの所望の同位体置換を有するこれらの化合物の使用を含む。同位体は同じ原子番号を有するが、異なる質量数を有する、すなわち同じ陽子数を有するが、異なる中性子数を有する原子である。
本発明の化合物に組み込むことができる同位体の例としては、水素、炭素、窒素、酸素、リン、フッ素及び塩素の同位体、例えば２Ｈ、３Ｈ、１１Ｃ、１３Ｃ、１４Ｃ、１５Ｎ、１８Ｆ、３１Ｐ、３２Ｐ、３５Ｓ、３６Ｃｌ、１２５Ｉのそれぞれが挙げられる。本発明は、本明細書に規定される様々な同位体標識化合物、例えば３Ｈ、１３Ｃ及び１４Ｃ等の放射性同位体が存在するものを含む。かかる同位体標識化合物は代謝研究（１４Ｃによる）、反応速度論研究（例えば、２Ｈ又は３Ｈによる）、検出若しくは画像化法、例えば薬物若しくは基質の組織分布アッセイを含む、ポジトロン放出型断層撮影（ＰＥＴ）若しくは単光子放射型コンピュータ断層撮影（ＳＰＥＣＴ）、又は患者の放射線治療に有用である。特に、１８Ｆ標識化合物がＰＥＴ又はＳＰＥＣＴ研究に特に望ましい場合がある。本発明の同位体標識化合物及びそのプロドラッグは概して、スキーム又は下記の実施例及び調製に開示される手順を、非同位体標識試薬を容易に利用可能な同位体標識試薬で置き換えて行うことによって調製することができる。
限定されるものではないが、一般的な例として、水素の同位体、例えば重水素（２Ｈ）及び三重水素（３Ｈ）は記載の構造のどこにでも使用することができる。代替的又は付加的には、炭素の同位体、例えば１３Ｃ及び１４Ｃを使用してもよい。典型的な同位体置換は、薬物のパフォーマンス、例えば薬力学、薬物動態、生体内分布、半減期、安定性、ＡＵＣ、Ｔｍａｘ、Ｃｍａｘ等を改善する分子上の１つ以上の位置での水素の重水素での置換である。例えば、重水素は、代謝時の結合切断位置の炭素（α−重水素動態同位体効果）、又は結合切断部位に隣接した若しくはその近くの炭素（β−重水素動態同位体効果）に結合することができる。
同位体置換、例えば重水素置換は部分的であっても、又は完全なものであってもよい。部分的重水素置換は、少なくとも１つの水素が重水素で置換されることを意味する。或る特定の実施形態では、同位体は対象の任意の位置で９０％、９５％若しくは９９％又はそれ以上同位体濃縮される。一実施形態では、重水素は所望の位置で９０％、９５％又は９９％濃縮される。特に明記しない限り、任意の点での濃縮は天然存在度を超え、ヒトにおける薬物の検出可能な特性を変更するのに十分である。
一実施形態では、重水素原子での水素原子の置換は、Ｒ基内の可変部の少なくとも１つが水素（例えば、２Ｈ又はＤ）又はアルキル（例えば、ＣＨＤ、ＣＤ２、ＣＤ３）である場合にＲ基内で生じる。例えば、Ｒ基のいずれかがメチル、エチル又は別のアルキル基であるか、又は例えば置換によってそれらを含有する場合、アルキル残基は重水素化された、例えばＣＤ３、ＣＨ２ＣＤ３又はＣＤ２ＣＤ３であり得る。或る特定の他の実施形態では、上述のＲ基のいずれかが水素である場合、水素は重水素（すなわち、２Ｈ）として同位体濃縮されていてもよい。
幾つかの実施形態では、ＲＢ１は重水素である。幾つかの実施形態では、ＲＢ１は同位体濃縮された原子（例えば、２Ｈ、３Ｈ、１３Ｃ、１４Ｃ、１８Ｆ）を含む。幾つかの実施形態では、ＲＢ２は重水素である。幾つかの実施形態では、ＲＢ２は同位体濃縮された原子（例えば、２Ｈ、３Ｈ、１３Ｃ、１４Ｃ、１８Ｆ）を含む。幾つかの実施形態では、Ｙ１は重水素である。幾つかの実施形態では、Ｙ１は同位体濃縮された原子（例えば、２Ｈ、３Ｈ、１３Ｃ、１４Ｃ、１８Ｆ）を含む。幾つかの実施形態では、Ｙ２は重水素である。幾つかの実施形態では、Ｙ２は同位体濃縮された原子（例えば、２Ｈ、３Ｈ、１３Ｃ、１４Ｃ、１８Ｆ）を含む。幾つかの実施形態では、Ｒ３は重水素である。幾つかの実施形態では、Ｒ３は同位体濃縮された原子（例えば、２Ｈ、３Ｈ、１３Ｃ、１４Ｃ、１８Ｆ）を含む。幾つかの実施形態では、Ｒ４は重水素である。幾つかの実施形態では、Ｒ４は同位体濃縮された原子（例えば、２Ｈ、３Ｈ、１３Ｃ、１４Ｃ、１８Ｆ）を含む。幾つかの実施形態では、Ｒ５Ａは重水素である。幾つかの実施形態では、Ｒ５Ａは同位体濃縮された原子（例えば、２Ｈ、３Ｈ、１３Ｃ、１４Ｃ、１８Ｆ）を含む。幾つかの実施形態では、Ｒ５Ｂは重水素である。幾つかの実施形態では、Ｒ５Ｂは同位体濃縮された原子（例えば、２Ｈ、３Ｈ、１３Ｃ、１４Ｃ、１８Ｆ）を含む。幾つかの実施形態では、ＲＮは重水素である。幾つかの実施形態では、ＲＮは同位体濃縮された原子（例えば、２Ｈ、３Ｈ、１３Ｃ、１４Ｃ、１８Ｆ）を含む。幾つかの実施形態では、Ｗは同位体濃縮された原子（例えば、２Ｈ、３Ｈ、１３Ｃ、１４Ｃ、１８Ｆ）を含む。幾つかの実施形態では、ＲＯは重水素である。幾つかの実施形態では、ＲＯは同位体濃縮された原子（例えば、２Ｈ、３Ｈ、１３Ｃ、１４Ｃ、１８Ｆ）を含む。幾つかの実施形態では、Ｒ１又はＲ２は重水素である。幾つかの実施形態では、Ｒ１又はＲ２は同位体濃縮された原子（例えば、２Ｈ、３Ｈ、１３Ｃ、１４Ｃ、１８Ｆ）を含む。幾つかの実施形態では、環Ａ（下記を参照されたい）の水素が重水素で置換される。幾つかの実施形態では、環Ｂ上の水素が重水素で置換される。幾つかの実施形態では、環Ｃ上の水素が重水素で置換される。幾つかの実施形態では、環Ｄ上の水素が重水素で置換される。
幾つかの実施形態では、環ＡのＲ５又は別の位置が、エノレートをＤ２Ｏ又は重水素化酸等の重水素源で捕捉することによって重水素化される。幾つかの実施形態では、環Ｂ、Ｃ又はＤの位置は、二重結合（ａ）、（ｂ）又は（ｃ）をそれぞれ重水素源（例えば、Ｄ２、ＨＤ、重水素化ホウ化水素）で還元することによって重水素化される。幾つかの実施形態では、環Ｄの位置が、（例えば、式（ＸＸＩ）の化合物の）エノレートを、Ｄ２Ｏ又は重水素化酸等の重水素源で捕捉することによって重水素化される。
第四級アミン塩及びＮ−オキシド
「第四級アミン塩」は本明細書で使用される場合、窒素原子が正電荷を有し、電荷が対アニオン（例えば、本明細書に規定のＸＣ）と釣り合う（中和する）ように窒素原子が４価の結合を含む（例えば、水素及び／又は非水素基であり得る４つの基で置換される）アミノ基を指す。
「Ｎ−オキシド」は本明細書で使用される場合、窒素原子が正電荷を有し、オキシジル基が窒素原子の正電荷と釣り合う（中和する）ように窒素原子が４価の結合を含む（例えば、水素及び／又は非水素基であり得る４つの基で置換され、窒素原子に直接付着した１つの基がオキシジル（oxidyl）基（−Ｏ−）である）アミノ基を指す。
式（Ａ−１）、（Ａ−１’）、（Ａ−１’’）、（Ａ−２’）、（Ａ−２’’）、（Ａ−３’）又は（Ａ−３’’）のいずれか１つが、アミノ基が位置し得る任意の位置に第四級アミン塩及び／又はＮ−オキシド基を含み得ることを理解されたい。
特に、Ｗが−Ｎ（Ｒ１）（Ｒ２）である式（Ａ−１’）又は（Ａ−２’’）の化合物はＣ３位置に、アミノ基−ＮＲ１Ｒ２が環Ａに付着した第四級アミン塩又はＮ−オキシド基を含み得る（「第四級Ｃ３−アミン塩」及び「Ｃ３−Ｎ−オキシド」とも称される）。
或る特定の実施形態では、Ｃ３位置のアミノ基：
を第四級アミン塩の式：
とすることで、例えば式（Ａ−ＱＡ’）又は（Ａ−ＱＡ’’）：
（式中、
、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５Ａ、ＲＢ１及びＲＢ２は本明細書に規定され、
Ｙは任意に置換されたアルキル、任意に置換されたアルケニル、任意に置換されたアルキニル、任意に置換されたカルボシクリル、任意に置換されたヘテロシクリル、任意に置換されたアリール又は任意に置換されたヘテロアリールであり、
ＸＣは対アニオンである）の化合物を得ることができる。
第四級Ｃ３−アミン塩は、遊離Ｃ３−アミンと基Ｙ−ＸＣ（式中、Ｙは上記に規定され（例えば任意に置換されたアルキル、任意に置換されたアルケニル、任意に置換されたアルキニル、任意に置換されたカルボシクリル又は任意に置換されたヘテロシクリル）、ＸＣは本明細書に規定の脱離基である）との反応によって形成することができる。それにより生じる対イオンＸＣはイオン交換方法、例えばイオン交換クロマトグラフィーによって別の対イオンＸＣと交換することができる。例示的なＸＣ対イオンとしては、ハロゲン化物イオン（例えばＦ−、Ｃｌ−、Ｂｒ−、Ｉ−）、ＮＯ３ −、ＣｌＯ４ −、ＯＨ−、Ｈ２ＰＯ４ −、ＨＳＯ４ −、スルホン酸イオン（例えばメタンスルホネート、トリフルオロメタンスルホネート、ｐ−トルエンスルホネート、ベンゼンスルホネート、１０−カンファースルホネート、ナフタレン−２−スルホネート、ナフタレン−１−スルホン酸−５−スルホネート、エタン−１−スルホン酸−２−スルホネート等）及びカルボン酸イオン（例えばアセテート、エタノエート、プロパノエート、ベンゾエート、グリセレート、ラクテート、タルトレート、グリコレート等）が挙げられるが、これらに限定されない。或る特定の実施形態では、Ｙは任意に置換されたアルキル（例えばメチル）である。或る特定の実施形態では、ＸＣはハロゲン化物イオンである。
或る特定の実施形態では、式（Ａ−ＱＡ’）又は（Ａ−ＱＡ’’）の第四級アミン塩は以下の式：
（式中、
、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５Ａ、ＲＢ１及びＲＢ２は本明細書に規定される通りである）のβ（Ａ−１−ＱＡ’）若しくは（Ａ−１−ＱＡ’’）又はα（Ａ−２−ＱＡ’）若しくは（Ａ−２−ＱＡ’’）異性体である。
代替的には、或る特定の実施形態では、Ｃ３位置のアミノ基：
を式：
のＮ−オキシドとすることで、例えば式（Ａ−ＮＯ’）又は（Ａ−ＮＯ’’）：
（式中、
、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５Ａ、ＲＢ１及びＲＢ２は本明細書に規定される通りである）の化合物を得ることができる。
或る特定の実施形態では、式（Ａ−ＮＯ’）又は（Ａ−ＮＯ’’）のＮ−オキシドは以下の式：
（式中、
、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５Ａ、ＲＢ１及びＲＢ２は本明細書に規定される通りである）のβ（Ａ−１−ＮＯ’）若しくは（Ａ−１−ＮＯ’’）又はα（Ａ−２−ＮＯ’）若しくは（Ａ−２−ＮＯ’’）異性体である。
式（Ａ−１’）又は（Ａ−１’’）の化合物
本明細書で概して規定されるように、或る特定の実施形態では、コルチスタチン又はそのコルチスタチン類縁体は、式（Ａ−１’）又は（Ａ−１’’）：
（式中、Ｗは−Ｎ（Ｒ１）（Ｒ２）、−ＯＲＯ、＝Ｏ又は＝Ｎ（Ｒ１）である）の化合物、又はその薬学的に許容可能な塩、第四級アミン塩若しくはＮ−オキシドである。
或る特定の実施形態では、Ｗが−Ｎ（Ｒ１）（Ｒ２）であり、式：
の化合物、又はその薬学的に許容可能な塩、第四級アミン塩若しくはＮ−オキシドをもたらす。
或る特定の実施形態では、式（Ａ−１−Ａ’）又は（Ａ−１−Ａ’’）の化合物は、式：
の化合物、又はその薬学的に許容可能な塩、第四級アミン塩若しくはＮ−オキシドである。
式（Ａ−１−Ａ’）又は（Ａ−１−Ａ’’）の化合物は、Ｒ５Ａ及びＲ５Ｂが各々独立して−ＯＲＡであるか、又は（ｄ１）若しくは（ｄ２）として指定される、
の少なくとも一方が二重結合を表す、コルチスタチンＡ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｊ、Ｋ及びＬ等のコルチスタチン（すなわち、天然由来のコルチスタチン）を包含する。
例えば、Ｒ５Ａ及びＲ５Ｂが各々独立して−ＯＲＡである、或る特定の実施形態では、式（Ａ−１−Ａ’）又は（Ａ−１−Ａ’’）のコルチスタチンは、
、並びにその薬学的に許容可能な塩、第四級アミン塩及びＮ−オキシドからなる群から選択される。
（ｄ１）又は（ｄ２）として指定される、
の少なくとも一方が二重結合を表す、或る特定の実施形態では、式（Ａ−１−Ａ’）又は（Ａ−１−Ａ’’）のコルチスタチンは、
、並びにその薬学的に許容可能な塩、第四級アミン塩及びＮ−オキシドからなる群から選択される。
Ｒ５Ａ及びＲ５Ｂが各々独立して−ＯＲＡであるか、又は（ｄ１）若しくは（ｄ２）として指定される、
の少なくとも一方が二重結合を表す、或る特定の実施形態では、式（Ａ−１−Ａ’）又は（Ａ−１−Ａ’’）のコルチスタチン類縁体は、
、並びにその薬学的に許容可能な塩、第四級アミン塩及びＮ−オキシドからなる群から選択される。
Ｒ５Ａ及びＲ５Ｂが各々独立して−ＯＲＡであるか、又は（ｄ１）若しくは（ｄ２）として指定される、
の少なくとも一方が二重結合を表す、上記に図示されるような式（Ａ−１−Ａ’）又は（Ａ−１−Ａ’’）の天然コルチスタチン及び様々なコルチスタチン類縁体の合成は、国際公開第２０１０／０２４９３０号（引用することにより本明細書の一部をなす）に記載されている。
いずれかの炭素αでの環状ケトンへのＲ５Ａの導入は、天然コルチスタチン又はコルチスタチン類縁体の合成時に達成することができ、ケトンのエノレート捕捉反応により導入される。ケトンをエノレートとして捕捉し、続いてその後の二重結合の酸化若しくはアミノ化、又は求電子炭素Ｃ（ＲＡ）３−ＬＧ（式中、ＬＧは脱離基である）との二重結合の反応を行い、Ｒ５が−ＯＲＡ、−ＯＣ（＝Ｏ）ＲＡ、−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＲＡ、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２、−ＯＳ（＝Ｏ）２ＲＡ、−Ｎ３、−Ｎ（ＲＡ）２、−ＮＲＡＣ（＝Ｏ）ＲＡ、−ＮＲＡＣ（＝Ｏ）ＯＲＡ、−ＮＲＡＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２、−ＮＲＡＳ（＝Ｏ）２ＲＡ又は−Ｃ（ＲＡ）３である置換ケトン生成物を得ることができる。エノレート捕捉について企図される例示的な条件としては、塩基（例えば、リチウムジイソプロピルアミド（ＬＤＡ））と捕捉試薬Ｐ１−ＬＧ（式中、Ｐ１はシリルであり、ＬＧは脱離基（例えば、トリメチルシリルクロリド等）である）との組合せが挙げられる。
例えば−ＯＲＡ、−ＯＣ（＝Ｏ）ＲＡ、−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＲＡ、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２又は−ＯＳ（＝Ｏ）２ＲＡ基をＲ５位に導入するための例示的な酸化条件としては、捕捉されたエノレートをメタクロロ過安息香酸（ＭＣＰＢＡ）、ＭｏＯＯＰｈ又はＤＭＳＯ等の酸化剤で処理し、Ｒ５が−ＯＨである置換ケトンを得て、続いて、例えばＲ５が−ＯＨである化合物を式ＲＡ−ＬＧ、ＬＧ−Ｃ（＝Ｏ）ＲＡ、ＬＧ−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＡ、ＬＧ−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２又はＬＧ−Ｓ（＝Ｏ）２ＲＡ（式中、ＬＧは脱離基である）の化合物で処理することによる任意の保護を行い、Ｒ５が−ＯＲＡ（式中、ＲＡは非水素基である）、−ＯＣ（＝Ｏ）ＲＡ、−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＲＡ、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２又は−ＯＳ（＝Ｏ）２ＲＡである化合物を得ることが挙げられる。
例えば−Ｎ３、−Ｎ（ＲＡ）２、−ＮＲＡＣ（＝Ｏ）ＲＡ、−ＮＲＡＣ（＝Ｏ）ＯＲＡ、−ＮＲＡＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２又は−ＮＲＡＳ（＝Ｏ）２ＲＡ基をＲ５位に導入するための例示的なアミノ化条件としては、捕捉されたエノレートを化合物Ｎ３−ＬＧ（式中、ＬＧは脱離基（例えば、トリシルアジド等）である）で処理し、Ｒ５が−Ｎ３である置換ケトンを得ることが挙げられる。Ｒ５が−Ｎ３である置換ケトンを、還元剤（例えば、ＰＰｈ３等）で処理し、Ｒ５が−ＮＨ２である化合物を得て、続いて、例えばＲ５が−ＮＨ２である化合物を、式ＲＡ−ＬＧ、ＬＧ−Ｃ（＝Ｏ）ＲＡ、ＬＧ−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＡ、ＬＧ−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２又はＬＧ−Ｓ（＝Ｏ）２ＲＡ（式中、ＬＧは脱離基である）の化合物で処理することによる任意の保護を行い、Ｒ５が−Ｎ（ＲＡ）２（式中、ＲＡの少なくとも１つが非水素基である）、−ＮＲＡＣ（＝Ｏ）ＲＡ、−ＮＲＡＣ（＝Ｏ）ＯＲＡ、−ＮＲＡＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２又は−ＮＲＡＳ（＝Ｏ）２ＲＡである化合物を得ることができる。
或る特定の実施形態では、
（ｄ１）及び（ｄ２）はそれぞれ単結合を表す。或る特定の実施形態では、Ｒ５Ｂは水素であり、
（ｄ１）及び（ｄ２）はそれぞれ単結合を表す。Ｒ５Ｂが水素であり、
（ｄ１）及び（ｄ２）がそれぞれ単結合を表すコルチスタチン類縁体の合成は、国際出願ＰＣＴ／ＵＳ２０１４／０７２３６５号（引用することにより本明細書の一部をなす）に記載されている。
Ｗが−Ｎ（Ｒ１）（Ｒ２）であり、Ｒ５Ｂが水素であり、
（ｄ１）及び（ｄ２）がそれぞれ単結合を表す、或る特定の実施形態では、
式：
の化合物、又はその薬学的に許容可能な塩、第四級アミン塩若しくはＮ−オキシドが提供される。
或る特定の実施形態では、式（Ａ−１−Ｂ’）又は（Ａ−１−Ｂ’’）の化合物は、式：
若しくは
の化合物、又はその薬学的に許容可能な塩、第四級アミン塩若しくはＮ−オキシドである。
Ｗが＝Ｏであり、Ｒ５Ｂが水素であり、
（ｄ１）及び（ｄ２）がそれぞれ単結合を表す、或る特定の実施形態では、
式：
の化合物、又はその薬学的に許容可能な塩、第四級アミン塩若しくはＮ−オキシドが提供される。
Ｗが＝−ＯＲＯであり、Ｒ５Ｂが水素であり、
（ｄ１）及び（ｄ２）がそれぞれ単結合を表す、或る特定の実施形態では、
式：
の化合物、又はその薬学的に許容可能な塩、第四級アミン塩若しくはＮ−オキシドが提供される。
或る特定の実施形態では、式（Ａ−１−Ｄ’）又は（Ａ−１−Ｄ’’）の化合物は、式：
の化合物、又はその薬学的に許容可能な塩、第四級アミン塩若しくはＮ−オキシドである。
Ｗが＝Ｎ（Ｒ１）であり、Ｒ５Ｂが水素であり、
（ｄ１）及び（ｄ２）がそれぞれ単結合を表す、或る特定の実施形態では、
式：
の化合物、又はその薬学的に許容可能な塩、第四級アミン塩若しくはＮ−オキシドが提供される。
或る特定の実施形態では、式（Ａ−１−Ｅ’）又は（Ａ−１−Ｅ’’）の化合物は、式：
の化合物、又はその薬学的に許容可能な塩、第四級アミン塩若しくはＮ−オキシドである。
基Ｒ１及びＲ２
本明細書で概して規定されるように、式（Ａ−１−Ａ’）、（Ａ−１−Ｂ’）、（Ａ−１−Ｅ’）、（Ａ−１−Ａ’’）、（Ａ−１−Ｂ’’）又は（Ａ−１−Ｅ’’）の或る特定の実施形態では、Ｒ１は水素、任意に置換されたアルキル、任意に置換されたアルケニル、任意に置換されたアルキニル、任意に置換されたカルボシクリル、任意に置換されたヘテロシクリル、任意に置換されたアリール、任意に置換されたヘテロアリール、−ＯＲＡ、−ＳＲＡ、−Ｎ（ＲＡ）２、−Ｃ（＝Ｏ）ＲＡ、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＡ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２、−Ｓ（＝Ｏ）２ＲＡ又は窒素保護基である。
さらに、式（Ａ−１−Ａ’）、（Ａ−１−Ａ’’）、（Ａ−１−Ｂ’）及び（Ａ−１−Ｂ’’）の或る特定の実施形態では、Ｒ２は水素、任意に置換されたアルキル、任意に置換されたアルケニル、任意に置換されたアルキニル、任意に置換されたカルボシクリル、任意に置換されたヘテロシクリル、任意に置換されたアリール、任意に置換されたヘテロアリール、−Ｃ（＝Ｏ）ＲＡ、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＡ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２、−Ｓ（＝Ｏ）２ＲＡ又は窒素保護基である。
或る特定の実施形態では、Ｒ１及びＲ２の少なくとも一方が水素である。或る特定の実施形態では、Ｒ１及びＲ２の両方が水素である。或る特定の実施形態では、Ｒ１及びＲ２の一方が水素であり、他方が非水素基、例えば任意に置換されたアルキルである。或る特定の実施形態では、Ｒ１は水素である。
或る特定の実施形態では、Ｒ１及びＲ２の少なくとも一方が任意に置換されたアルキル、例えば任意に置換されたＣ１〜６アルキルである。或る特定の実施形態では、Ｒ１及びＲ２はそれぞれ独立して任意に置換されたアルキルである。或る特定の実施形態では、Ｒ１は任意に置換されたアルキル、例えば任意に置換されたＣ１〜６アルキルである。或る特定の実施形態では、Ｒ１及び／又はＲ２は任意に置換されたＣ１アルキル、任意に置換されたＣ２アルキル、任意に置換されたＣ３アルキル、任意に置換されたＣ４アルキル、任意に置換されたＣ５アルキル又は任意に置換されたＣ６アルキルである。或る特定の実施形態では、Ｒ１及び／又はＲ２は任意に置換されたメチル（Ｃ１）、任意に置換されたエチル（Ｃ２）、任意に置換されたｎ−プロピル（Ｃ３）、任意に置換されたイソプロピル（Ｃ３）、任意に置換されたｎ−ブチル（Ｃ４）又は任意に置換されたｔ−ブチル（Ｃ４）である。或る特定の実施形態では、Ｒ１及び／又はＲ２は１つ以上のハロゲン置換基（例えば、フルオロ）で置換されたアルキルである。或る特定の実施形態では、Ｒ１及び／又はＲ２は−ＣＨ３又は−ＣＦ３である。或る特定の実施形態では、Ｒ１及びＲ２はそれぞれ独立して−ＣＨ３又は−ＣＦ３である。或る特定の実施形態では、Ｒ１及び／又はＲ２は１つ以上のハロゲン（例えば、フルオロ）、アミノ（−ＮＨ２）、置換アミノ、ヒドロキシル（−ＯＨ）、置換ヒドロキシル、チオール（−ＳＨ）、置換チオール又はスルホニル置換基で置換されたアルキルである。或る特定の実施形態では、Ｒ１及び／又はＲ２は、任意に置換されたカルボシクリル（例えば、シクロプロピル）又は任意に置換されたヘテロシクリル（例えば、オキセタニル）環で置換されたアルキルである。
例えば、或る特定の実施形態では、Ｒ１及びＲ２の少なくとも一方が式：
の基であり、例えば式：
の化合物、又はその薬学的に許容可能な塩、第四級アミン塩若しくはＮ−オキシドが提供されるが、
ここで、
、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５Ａ、ＲＢ１及びＲＢ２は本明細書に規定される通りであり、
ｐは１、２、３、４、５又は６であり、
Ｚは−ＣＨ２ＸＺ、−ＣＨ（ＸＺ）２、−Ｃ（ＸＺ）３、−ＯＲＺ、−ＳＲＺ、−Ｎ（ＲＺ）２、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（ＲＺ）２、
であり、
ＲＺはそれぞれ独立して水素、任意に置換されたアルキル、任意に置換されたアルケニル、任意に置換されたアルキニル、任意に置換されたカルボシクリル、任意に置換されたヘテロシクリル、任意に置換されたアリール、任意に置換されたヘテロアリール、−Ｃ（＝Ｏ）ＲＺ、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＺ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＺ）２、酸素に付着する場合に酸素保護基、硫黄に付着する場合に硫黄保護基、又は窒素に付着する場合に窒素保護基であり、任意にＮに付着する場合に、２つのＲＺ基が接合して、任意に置換されたヘテロシクリル又は任意に置換されたヘテロアリール環を形成してもよく、
ＸＺはそれぞれ独立してフルオロ、クロロ、ブロモ又はヨードであり、
ｗは１〜１０の整数（１及び１０を含む）である。
或る特定の実施形態では、Ｒ１及びＲ２はどちらも独立して式：
の基である。
或る特定の実施形態では、ｐは１である。或る特定の実施形態では、ｐは２である。或る特定の実施形態では、ｐは３である。或る特定の実施形態では、ｗは１、２、３又は４である。或る特定の実施形態では、ＲＺは水素又は任意に置換されたアルキル（例えば、−ＣＨ３）である。或る特定の実施形態では、Ｚは−ＯＲＺ、例えば−ＯＨ又は−ＯＲＺ（式中、ＲＺは非水素基であり、例えばＲＺは−ＣＨ３等の任意に置換されたアルキルである）である。或る特定の実施形態では、Ｚは−Ｎ（ＲＺ）２、例えば−ＮＨ２、−ＮＨＲＺ又は−Ｎ（ＲＺ）２（式中、ＲＺは非水素基であり、例えばＲＺは−ＣＨ３等の任意に置換されたアルキルである）である。或る特定の実施形態では、Ｚは−ＣＨ２ＸＺ、−ＣＨ（ＸＺ）２、−Ｃ（ＸＺ）３であり、ここで例えばＸＺはフルオロである。或る特定の実施形態では、Ｚは−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（ＲＺ）２、例えば−Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２又は−Ｓ（Ｏ）２ＮＨＣＨ３である。
或る特定の実施形態では、Ｒ１及びＲ２が接合して任意に置換されたヘテロシクリル、例えば任意に置換された３員〜６員ヘテロシクリルを形成する。或る特定の実施形態では、Ｒ１及びＲ２が接合して任意に置換された３員のヘテロシクリル、任意に置換された４員のヘテロシクリル、任意に置換された５員のヘテロシクリル又は任意に置換された６員のヘテロシクリルを形成する。或る特定の実施形態では、Ｒ１及びＲ２が接合して任意に置換された３員のヘテロシクリル、すなわち任意に置換されたアジリジニルを形成する。或る特定の実施形態では、Ｒ１及びＲ２が接合して任意に置換された４員のヘテロシクリル、例えば任意に置換されたアゼチジニルを形成する。或る特定の実施形態では、Ｒ１及びＲ２が接合して任意に置換された５員のヘテロシクリル、例えば任意に置換されたピロリジニル又は任意に置換されたイミダゾリジン−２，４−ジオンを形成する。或る特定の実施形態では、Ｒ１及びＲ２が接合して任意に置換された６員のヘテロシクリル、例えば任意に置換されたピペリジニル、任意に置換されたテトラヒドロピラニル、任意に置換されたジヒドロピリジニル、任意に置換されたチアニル、任意に置換されたピペラジニル、任意に置換されたモルホリニル、任意に置換されたジチアニル、任意に置換されたジオキサニル又は任意に置換されたトリアジナニルを形成する。
例えば、或る特定の実施形態では、Ｒ１及びＲ２は接合して式：
の基を形成することで、例えば式：
（式中、
、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５Ａ、ＲＢ１及びＲＢ２は本明細書に規定される通りであり、
Ｇは−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、−ＮＲ７−、−ＣＨ２−、−ＣＨ（Ｒ７）−又は−Ｃ（Ｒ７）２−であり、
Ｒ７はそれぞれ独立してハロゲン、任意に置換されたアルキル、任意に置換されたアルケニル、任意に置換されたアルキニル、任意に置換されたカルボシクリル、任意に置換されたヘテロシクリル、任意に置換されたアリール、任意に置換されたヘテロアリール、アミノ、置換アミノ、ヒドロキシル、置換ヒドロキシル、チオール、置換チオール、カルボニル、スルホニル、スルフィニル、又は窒素原子に付着する場合に窒素保護基であり、
任意に２つのＲ７基が接合して任意に置換されたカルボシクリル、任意に置換されたヘテロシクリル、任意に置換されたアリール、任意に置換されたヘテロアリール環又はオキソ（＝Ｏ）基を形成し、
ｎが０、１、２、３又は４である）の化合物、又はその薬学的に許容可能な塩、第四級アミン塩若しくはＮ−オキシドが提供される。
或る特定の実施形態では、Ｒ１及びＲ２は接合して式：
の基を形成することで、例えば式：
（式中、
、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５Ａ、ＲＢ１及びＲＢ２は本明細書に規定される通りであり、
Ｇは−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、−ＮＲ７−、−ＣＨ２−、−ＣＨ（Ｒ７）−又は−Ｃ（Ｒ７）２−であり、
Ｒ７はそれぞれ独立してハロゲン、任意に置換されたアルキル、任意に置換されたアルケニル、任意に置換されたアルキニル、任意に置換されたカルボシクリル、任意に置換されたヘテロシクリル、任意に置換されたアリール、任意に置換されたヘテロアリール、アミノ、置換アミノ、ヒドロキシル、置換ヒドロキシル、チオール、置換チオール、カルボニル、スルホニル、スルフィニル、又は窒素原子に付着する場合に窒素保護基であり、
任意に２つのＲ７基が接合して任意に置換されたカルボシクリル、任意に置換されたヘテロシクリル、任意に置換されたアリール、任意に置換されたヘテロアリール環又はオキソ（＝Ｏ）基を形成し、
ｎは０、１、２、３又は４である）の化合物、又はその薬学的に許容可能な塩、第四級アミン塩若しくはＮ−オキシドが提供される。
或る特定の実施形態では、Ｒ１及びＲ２は接合して式：
の基を形成することで、例えば式：
（式中、
、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５Ａ、ＲＢ１及びＲＢ２は本明細書に規定される通りであり、
Ｇは−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、−ＮＲ７−、−ＣＨ２−、−ＣＨ（Ｒ７）−又は−Ｃ（Ｒ７）２−であり、
Ｒ７はそれぞれ独立してハロゲン、任意に置換されたアルキル、任意に置換されたアルケニル、任意に置換されたアルキニル、任意に置換されたカルボシクリル、任意に置換されたヘテロシクリル、任意に置換されたアリール、任意に置換されたヘテロアリール、アミノ、置換アミノ、ヒドロキシル、置換ヒドロキシル、チオール、置換チオール、カルボニル、スルホニル、スルフィニル、又は窒素原子に付着する場合に窒素保護基であり、
任意に２つのＲ７基が接合して任意に置換されたカルボシクリル、任意に置換されたヘテロシクリル、任意に置換されたアリール、任意に置換されたヘテロアリール環又はオキソ（＝Ｏ）基を形成し、
ｎは０、１、２、３又は４である）の化合物、又はその薬学的に許容可能な塩、第四級アミン塩若しくはＮ−オキシドが提供される。
或る特定の実施形態では、ｎは０であり、Ｒ１及びＲ２が接合することによって形成される環系は本明細書に規定のＲ７基で置換されない。或る特定の実施形態では、ｎは１、２、３又は４であり、環系は本明細書に規定の１つ、２つ、３つ又は４つのＲ７基で置換される。或る特定の実施形態では、ｎは１である。或る特定の実施形態では、ｎは２である。或る特定の実施形態では、ｎは３である。或る特定の実施形態では、ｎは４である。
或る特定の実施形態では、ｎは０ではなく（すなわちｎは１、２、３又は４である）、少なくとも１つのＲ７が炭素原子に付着し、Ｒ７はハロゲン（例えばフルオロ）、ヒドロキシル、置換ヒドロキシル又はカルボニル（例えば−ＣＯ２Ｈ）である。或る特定の実施形態では、ｎは０ではなく（すなわちｎは１、２、３又は４である）、２つのＲ７基が同じ炭素原子に付着し、２つのＲ７基は各々のハロゲン、例えばフルオロである。或る特定の実施形態では、ｎは０ではなく（すなわちｎは１、２、３又は４である）、２つのＲ７基が同じ炭素原子に付着し、２つのＲ７基は接合して任意に置換されたカルボシクリル環又は任意に置換されたヘテロシクリル環（例えば任意に置換されたオキセタニル環）を形成する。或る特定の実施形態では、ｎは０ではなく（すなわちｎは１、２、３又は４である）、２つのＲ７基が異なる炭素原子に付着し、２つのＲ７基は接合して任意に置換されたカルボシクリル環又は任意に置換されたヘテロシクリル環を形成する。
或る特定の実施形態では、Ｇは−Ｏ−である。或る特定の実施形態では、Ｇは−ＮＲ７−であり、例えばＲ７は任意に置換されたアルキル（例えば−ＣＨ３）である。或る特定の実施形態では、Ｇは−ＣＨ（Ｒ７）−又は−Ｃ（Ｒ７）２−であり、少なくとも１つのＲ７がヒドロキシル、置換ヒドロキシル又はカルボニル（例えば−ＣＯ２Ｈ）である。
或る特定の実施形態では、基：
は、
である。
或る特定の実施形態では、基：
は、
である。
或る特定の実施形態では、基：
は、
である。
或る特定の実施形態では、Ｒ１は−Ｓ（＝Ｏ）２ＲＡであり、Ｒ２は任意に置換されたアルキルである。
基ＲＯ
本明細書で概して規定されるように、ＲＯは水素又は任意に置換されたアルキル、任意に置換されたアルケニル、任意に置換されたアルキニル、任意に置換されたカルボシクリル、任意に置換されたヘテロシクリル、任意に置換されたアリール、任意に置換されたヘテロアリール、−Ｃ（＝Ｏ）ＲＡ、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＡ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２又は酸素保護基である。
或る特定の実施形態では、ＲＯが水素である。
或る特定の実施形態では、ＲＯが任意に置換されたアルキル、例えば任意に置換されたＣ１〜６アルキル、例えば任意に置換されたＣ１アルキル、任意に置換されたＣ２アルキル、任意に置換されたＣ３アルキル、任意に置換されたＣ４アルキル、任意に置換されたＣ５アルキル又は任意に置換されたＣ６アルキルである。或る特定の実施形態では、ＲＯが任意に置換されたメチル（Ｃ１）、任意に置換されたエチル（Ｃ２）、任意に置換されたｎ−プロピル（Ｃ３）、任意に置換されたイソプロピル（Ｃ３）、任意に置換されたｎ−ブチル（Ｃ４）、又は任意に置換されたｔ−ブチル（Ｃ４）である。或る特定の実施形態では、ＲＯは１つ以上のハロゲン置換基（例えばフルオロ）で置換されたアルキルである。或る特定の実施形態では、ＲＯは−ＣＨ３又は−ＣＦ３である。或る特定の実施形態では、ＲＯは１つ以上のハロゲン（例えばフルオロ）、アミノ（−ＮＨ２）、置換アミノ、ヒドロキシル（−ＯＨ）、置換ヒドロキシル、チオール（−ＳＨ）、置換チオール又はスルホニル置換基で置換されたアルキルである。或る特定の実施形態では、ＲＯは任意に置換されたカルボシクリル（例えばシクロプロピル）又は任意に置換されたヘテロシクリル（例えばオキセタニル）環で置換されたアルキルである。
例えば、或る特定の実施形態では、ＲＯを式：
の基とすることで、例えば式：
（式中、
、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５Ａ、ＲＢ１及びＲＢ２は本明細書に規定の通りであり、
ｐは１、２、３、４、５又は６であり、
Ｚは−ＣＨ２ＸＺ、−ＣＨ（ＸＺ）２、−Ｃ（ＸＺ）３、−ＯＲＺ、−ＳＲＺ、−Ｎ（ＲＺ）２、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（ＲＺ）２、
であり、ここでＲＺはそれぞれ独立して水素、任意に置換されたアルキル、任意に置換されたアルケニル、任意に置換されたアルキニル、任意に置換されたカルボシクリル、任意に置換されたヘテロシクリル、任意に置換されたアリール、任意に置換されたヘテロアリール、−Ｃ（＝Ｏ）ＲＺ、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＺ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＺ）２、酸素に付着する場合に酸素保護基、硫黄に付着する場合に硫黄保護基又は窒素に付着する場合に窒素保護基であり、任意にＮに付着する場合に、２つのＲＺ基は接合して任意に置換されたヘテロシクリル又は任意に置換されたヘテロアリール環を形成することができ、
ＸＺはそれぞれ独立してフルオロ、クロロ、ブロモ又はヨードであり、
ｗは１〜１０（１及び１０を含む）の整数である）の化合物、又はその薬学的に許容可能な塩、第四級アミン塩若しくはＮ−オキシドが提供される。
或る特定の実施形態では、ｐは１である。或る特定の実施形態では、ｐは２である。或る特定の実施形態では、ｐは３である。或る特定の実施形態では、ｗは１、２、３又は４である。或る特定の実施形態では、ＲＺは水素又は任意に置換されたアルキル（例えば−ＣＨ３）である。或る特定の実施形態では、Ｚは−ＯＲＺ、例えば−ＯＨ又は−ＯＲＺであり、ここでＲＺは非水素基であり、例えばＲＺは−ＣＨ３等の任意に置換されたアルキルである。或る特定の実施形態では、Ｚは−Ｎ（ＲＺ）２、例えば−ＮＨ２、−ＮＨＲＺ又は−Ｎ（ＲＺ）２であり、ここでＲＺは非水素基であり、例えばＲＺは−ＣＨ３等の任意に置換されたアルキルである。或る特定の実施形態では、Ｚは−ＣＨ２ＸＺ、−ＣＨ（ＸＺ）２、−Ｃ（ＸＺ）３であり、ここでＸＺは例えばフルオロである。或る特定の実施形態では、Ｚは−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（ＲＺ）２、例えば−Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２又は−Ｓ（Ｏ）２ＮＨＣＨ３である。
式（Ａ−１−Ｄ’）又は（Ａ−１−Ｄ’’）の或る特定の実施形態では、ＲＯは−Ｃ（＝Ｏ）ＲＡ、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＡ又は−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２である。或る特定の実施形態では、ＲＡは水素又は任意に置換されたアルキル（例えば−ＣＨ３）である。例えば或る特定の実施形態では、ＲＯは−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ３、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＣＨ３、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）２又は−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＣＨ３である。
或る特定の実施形態では、ＲＯは酸素保護基である。
基Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５Ａ、Ｒ５Ｂ及び式：
の結合
本明細書で概して規定されるように、Ｒ３は水素又は任意に置換されたアルキルである。
或る特定の実施形態では、Ｒ３は水素である。或る特定の実施形態では、Ｒ３は任意に置換されたアルキル、例えばメチル（−ＣＨ３）である。
本明細書で概して規定されるように、Ｒ４は水素、ハロゲン、任意に置換されたアルキル又は−Ｓｉ（ＲＡ）３である。或る特定の実施形態では、Ｒ４は水素である。或る特定の実施形態では、Ｒ４は任意に置換されたアルキル、例えばメチルである。或る特定の実施形態では、Ｒ４は−Ｓｉ（ＲＡ）３であり、例えばＲＡはそれぞれ独立して任意に置換されたアルキル又は任意に置換されたフェニルである。
本明細書で概して規定されるように、Ｒ５Ａは水素、ハロゲン、任意に置換されたアルキル、−ＯＲＡ、−ＯＣ（＝Ｏ）ＲＡ、−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＲＡ、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２、−ＯＳ（＝Ｏ）２ＲＡ、−Ｎ３、−Ｎ（ＲＡ）２、−ＮＲＡＣ（＝Ｏ）ＲＡ、−ＮＲＡＣ（＝Ｏ）ＯＲＡ、−ＮＲＡＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２、−ＮＲＡＳ（＝Ｏ）２ＲＡ又は−Ｃ（ＲＡ）３である。或る特定の実施形態では、Ｒ５Ａは水素である。或る特定の実施形態では、Ｒ５Ａは非水素基である。或る特定の実施形態では、Ｒ５Ａはハロゲン（例えば、ブロモ、ヨード、クロロ）である。或る特定の実施形態では、Ｒ５Ａは任意に置換されたアルキル（例えば、−ＣＨ３）である。或る特定の実施形態では、Ｒ５Ａは−ＯＲＡ（例えば、−ＯＨ、−ＯＣＨ３）である。
或る特定の実施形態では、Ｒ５Ａは水素、ハロゲン、任意に置換されたアルキル又は−ＯＲＡである。
或る特定の実施形態では、Ｒ５Ａは−ＯＲＡ、−ＯＣ（＝Ｏ）ＲＡ、−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＲＡ、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２、−ＯＳ（＝Ｏ）２ＲＡである。
或る特定の実施形態では、Ｒ５Ａは−Ｎ３、−Ｎ（ＲＡ）２、−ＮＲＡＣ（＝Ｏ）ＲＡ、−ＮＲＡＣ（＝Ｏ）ＯＲＡ、−ＮＲＡＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２又は−ＮＲＡＳ（＝Ｏ）２ＲＡである。
或る特定の実施形態では、Ｒ５Ａは−Ｃ（ＲＡ）３である。
或る特定の実施形態では、基Ｒ５Ａはα（下向き）配置にある。或る特定の実施形態では、基Ｒ５Ａはβ（上向き）配置にある。
本明細書で概して規定されるように、Ｒ５Ｂは水素、ハロゲン、任意に置換されたアルキル又は−ＯＲＡである。或る特定の実施形態では、Ｒ５Ｂは水素である。或る特定の実施形態では、Ｒ５Ｂは非水素基である。或る特定の実施形態では、Ｒ５Ｂはハロゲン（例えば、ブロモ、ヨード、クロロ）である。或る特定の実施形態では、Ｒ５Ｂは任意に置換されたアルキル、例えばメチルである。或る特定の実施形態では、Ｒ５Ｂは−ＯＲＡ、例えば−ＯＨである。或る特定の実施形態では、Ｒ５Ｂは−ＯＲＡではない。
或る特定の実施形態では、Ｒ５Ａ及びＲ５Ｂの少なくとも一方が水素である。或る特定の実施形態では、Ｒ５Ａは水素であり、Ｒ５Ｂは非水素である。或る特定の実施形態では、Ｒ５Ａは非水素であり、Ｒ５Ｂは水素である。或る特定の実施形態では、Ｒ５Ａ及びＲ５Ｂはそれぞれ水素である。
或る特定の実施形態では、Ｒ５Ａ及びＲ５Ｂの少なくとも一方がハロゲン（例えば、ブロモ、ヨード、クロロ）である。或る特定の実施形態では、Ｒ５Ａ及びＲ５Ｂの少なくとも一方が任意に置換されたアルキル、例えばメチルである。
或る特定の実施形態では、Ｒ５Ａ及びＲ５Ｂの少なくとも一方が−ＯＲＡ、例えば−ＯＨである。或る特定の実施形態では、Ｒ５Ａが−ＯＲＡ、例えば−ＯＨであり、Ｒ５Ｂが水素である。或る特定の実施形態では、Ｒ５Ａが水素であり、Ｒ５Ｂが−ＯＲＡ、例えば−ＯＨである。或る特定の実施形態では、Ｒ５Ａ及びＲ５Ｂはそれぞれ−ＯＲＡ、例えば−ＯＨである。或る特定の実施形態では、Ｒ５Ａ及びＲ５Ｂはいずれも−ＯＲＡでない。
概して、（ａ１）、（ａ２）、（ｂ）、（ｃ）、（ｄ１）及び（ｄ２）として指定される、
はそれぞれ、原子価が許せば、
（ｃ）として指定される、
が二重結合を表す場合、ＲＢ１及びＲＢ２の一方が存在せず、かつＹ１及びＹ２の一方が存在せず、
（ｃ）として指定される、
が単結合を表す場合、ＲＢ１及びＲＢ２の両方が存在し、かつＹ１及びＹ２の両方が存在し、
（ａ１）として指定される、
が二重結合を表す場合、
（ｄ２）及び（ａ２）として指定される、
が各々単結合を表し、
（ａ２）として指定される、
が二重結合を表す場合、（ａ１）及び（ｂ）として指定される、
が各々単結合を表し、
（ｄ２）として指定される、
が二重結合を表す場合、（ａ１）及び（ｄ１）として指定される、
が各々単結合を表す限りにおいて、単結合又は二重結合を表す。
或る特定の実施形態では、（ａ２）として指定される結合、
は単結合である。或る特定の実施形態では、（ａ１）として指定される結合、
は二重結合である。或る特定の実施形態では、（ｂ）として指定される結合、
は二重結合である。或る特定の実施形態では、（ａ１）及び（ｂ）として指定される、
はそれぞれ二重結合である。或る特定の実施形態では、（ｃ）として指定される結合、
は単結合である。或る特定の実施形態では、（ｄ２）として指定される結合、
は単結合である。或る特定の実施形態では、（ｄ１）として指定される結合、
は単結合である。
或る特定の実施形態では、Ｒ３はメチルであり、Ｒ４は水素であり、Ｒ５Ａは水素であり、（ｃ）として指定される結合は単結合である。
他の実施形態では、Ｒ３はメチルであり、Ｒ４は水素であり、（ｃ）として指定される結合は二重結合であり、ＲＢ２は存在しない。
基ＲＢ１及びＲＢ２
本明細書で概して規定されるように、ＲＢ１及びＲＢ２がそれぞれ独立して水素、−Ｌ１−ＲＢ３又は−ＸＡＲＡ（式中、ＸＡは−Ｏ−、−Ｓ−又は−Ｎ（ＲＡ）−である）であるか、又はＲＢ１及びＲＢ２が接合してオキソ基を形成するが、但し、ＲＢ１及びＲＢ２の少なくとも一方は水素ではなく、
Ｌ１は結合、−ＣＨ（ＣＨ３）（ＣＨ２）２−、−ＣＨ（ＣＨ３）−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｓ−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＬ）−又は−Ｎ（ＲＬ）−（Ｃ（ＲＬＬ）２）ｐ−（式中、ＲＬは水素、任意に置換されたアルキル又は窒素保護基であり、ＲＬＬはそれぞれ独立して水素、ハロゲン又は任意に置換されたアルキルであり、ｐは０、１又は２である）であり、
ＲＢ３は水素、任意に置換されたアルキル、任意に置換されたアルケニル、任意に置換されたアルキニル、任意に置換されたカルボシクリル、任意に置換されたヘテロシクリル、任意に置換されたアリール又は任意に置換されたヘテロアリールであるが、但し、Ｌ１が結合である場合、ＲＢ３は水素ではない。
或る特定の実施形態では、ＲＢ１及びＲＢ２の少なくとも一方が−Ｌ１−ＲＢ３である。或る特定の実施形態では、（ｃ）として指定される、
が単結合を表す場合、ＲＢ１は−Ｌ１−ＲＢ３であり、ＲＢ２は水素又は−ＸＡＲＡ（例えば、−ＯＲＡ）である。
或る特定の実施形態では、Ｌ１は結合であり、ＲＢ３は任意に置換されたアルキル、任意に置換されたアルケニル、任意に置換されたアルキニル、任意に置換されたカルボシクリル、任意に置換されたヘテロシクリル、任意に置換されたアリール又は任意に置換されたヘテロアリールである。
或る特定の実施形態では、ＲＢ３は環状基であり、例えばＲＢ３は任意に置換されたカルボシクリル、任意に置換されたヘテロシクリル、任意に置換されたアリール又は任意に置換されたヘテロアリールである。或る特定の実施形態では、ＲＢ３は非芳香族環状基であり、例えば或る特定の実施形態では、ＲＢ３は任意に置換されたカルボシクリル又は任意に置換されたヘテロシクリルである。或る特定の実施形態では、ＲＢ３は芳香族環状基であり、例えば或る特定の実施形態では、ＲＢ３は任意に置換されたアリール又は任意に置換されたヘテロアリールである。
或る特定の実施形態では、ＲＢ３は任意に置換されたアリール、例えば任意に置換されたＣ６〜１４アリールである。或る特定の実施形態では、ＲＢ３は任意に置換されたフェニルである。或る特定の実施形態では、ＲＢ３は任意に置換されたナフチルである。或る特定の実施形態では、ＲＢ３は任意に置換されたフェニルテトラヒドロイソキノリニル等の任意に置換されたヘテロシクリル環に縮合した任意に置換されたフェニルである。縮合ヘテロシクリル環を含む任意に置換されたアリール環系に関して、親分子に対する付着点がアリール（例えばフェニル）環上にあることが理解される。
或る特定の実施形態では、ＲＢ３は任意に置換されたヘテロアリール、例えば任意に置換された５員〜１４員ヘテロアリールである。或る特定の実施形態では、ＲＢ３は任意に置換された５員ヘテロアリール又は任意に置換された６員のヘテロアリールである。或る特定の実施形態では、ＲＢ３は任意に置換された二環式ヘテロアリール、例えば任意に置換された５，６−二環式ヘテロアリール又は任意に置換された６，６−二環式ヘテロアリールである。或る特定の実施形態では、ＲＢ３は任意に置換されたナフチリジニル、任意に置換されたプテリジニル、任意に置換されたキノリニル、任意に置換されたイソキノリニル、任意に置換されたシンノリニル、任意に置換されたキノキサリニル、任意に置換されたフタラジニル及び任意に置換されたキナゾリニルからなる群から選択される任意に置換された５，６−二環式ヘテロアリール又は任意に置換された６，６−二環式ヘテロアリール環系である。或る特定の実施形態では、ＲＢ３の付着点は窒素原子を介するものである。
或る特定の実施形態では、ＲＢ３は任意に置換されたアリール又は任意に置換されたヘテロアリールであり、−Ｌ１−ＲＢ３は、
（式中、
Ｒ６Ａはそれぞれ独立してハロゲン、−ＮＯ２、−ＣＮ、−ＯＲ６Ｃ、−ＳＲ６Ｃ、−Ｎ（Ｒ６Ｃ）２、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ６Ｃ、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ６Ｃ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ６Ｃ）２、任意に置換されたアルキル、任意に置換されたアルケニル、任意に置換されたアルキニル、任意に置換されたカルボシクリル、任意に置換されたヘテロシクリル、任意に置換されたアリール又は任意に置換されたヘテロアリールであり、
Ｒ６Ｂはそれぞれ独立して水素、任意に置換されたアルキル、又は窒素に付着する場合に窒素保護基であり、
Ｒ６Ｃはそれぞれ独立して水素、任意に置換されたアルキル、任意に置換されたアルケニル、任意に置換されたアルキニル、任意に置換されたカルボシクリル、任意に置換されたヘテロシクリル、任意に置換されたアリール、任意に置換されたヘテロアリール、酸素に付着する場合に酸素保護基、硫黄に付着する場合に硫黄保護基又は窒素に付着する場合に窒素保護基であり、任意にＮに付着する場合に、２つのＲ６Ｃ基は接合して任意に置換されたヘテロシクリル又は任意に置換されたヘテロアリール環を形成することができ、
ｍは０又は１〜４の整数（１及び４を含む）である）からなる群から選択される。
或る特定の実施形態では、ｍは０である。或る特定の実施形態では、ｍは１、２、３又は４である。或る特定の実施形態では、ｍは１、２、３又は４であり、少なくとも１つのＲ６Ａがハロゲン（例えばフルオロ）、−ＯＲ６Ｃ、−ＳＲ６Ｃ又は−Ｎ（Ｒ６Ｃ）２である。
或る特定の実施形態では、Ｌ１は結合又は−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＬ）−であり、ここでＲＬは水素又は任意に置換されたアルキル（例えばメチル）であり、ＲＢ３は本明細書に記載の任意に置換されたアリール又は任意に置換されたヘテロアリールである。
式（Ａ−２’）、（Ａ−２’’）、（Ａ−３’）、（Ａ−３’’）、（Ｄ１’）、（Ｄ１’’）、（Ｄ２’）、（Ｄ２’’）、（Ｅ１’）、（Ｅ１’’）、（Ｅ２’）、（Ｅ２’’）、（Ｇ１’）及び（Ｇ１’’）の化合物
本明細書で概して規定されるように、或る特定の実施形態では、コルチスタチン又はそのコルチスタチン類縁体は式：
の化合物、又はその薬学的に許容可能な塩、第四級アミン塩若しくはＮ−オキシドである。
本明細書で概して規定されるように、ＲＮは水素、任意に置換されたアルキル、任意に置換されたアルケニル、任意に置換されたアルキニル、任意に置換されたカルボシクリル、任意に置換されたヘテロシクリル、任意に置換されたアリール、任意に置換されたヘテロアリール、−ＯＲＡ、−Ｃ（＝Ｏ）ＲＡ、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＡ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２、−Ｓ（＝Ｏ）２ＲＡ又は窒素保護基である。
或る特定の実施形態では、ＲＮは任意に置換されたアルキル、例えば任意に置換されたＣ１〜６アルキル、例えば任意に置換されたＣ１アルキル、任意に置換されたＣ２アルキル、任意に置換されたＣ３アルキル、任意に置換されたＣ４アルキル、任意に置換されたＣ５アルキル又は任意に置換されたＣ６アルキルである。或る特定の実施形態では、ＲＯは任意に置換されたメチル（Ｃ１）、任意に置換されたエチル（Ｃ２）、任意に置換されたｎ−プロピル（Ｃ３）、任意に置換されたイソプロピル（Ｃ３）、任意に置換されたｎ−ブチル（Ｃ４）又は任意に置換されたｔ−ブチル（Ｃ４）である。
或る特定の実施形態では、ＲＮは−Ｃ（＝Ｏ）ＲＡ、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＡ又は−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２である。或る特定の実施形態では、ＲＡは水素又は任意に置換されたアルキル（例えば、−ＣＨ３）である。例えば、或る特定の実施形態では、ＲＮは−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ３、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＣＨ３、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）２又は−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＣＨ３である。
或る特定の実施形態では、ＲＮは窒素保護基である。
或る特定の実施形態では、ＲＮは水素である。
或る特定の実施形態では、式（Ａ−２’）又は（Ａ−２’’）の化合物は、式：
の化合物、又はその薬学的に許容可能な塩、第四級アミン塩若しくはＮ−オキシドである。
或る特定の実施形態では、式（Ａ−３’）又は（Ａ−３’’）の化合物は、式：
の化合物、又はその薬学的に許容可能な塩、第四級アミン塩若しくはＮ−オキシドである。
或る特定の実施形態では、化合物は式（Ｇ１’）又は（Ｇ１’’）の化合物である。式（Ｇ１’）又は（Ｇ１’’）の化合物は、下記スキームに図示されるように式（Ａ−１’）又は（Ａ−１’’）の化合物のケトンの還元によって調製することができる。
例えば、出発物質ケトンをエノレートとして任意に捕捉し（例えば、塩基及びＰ１−ＬＧ基（式中、Ｐ１はシリルであり、ＬＧは脱離基である）での処理による）、その後の二重結合の酸化若しくはアミノ化、又は二重結合と求電子炭素Ｃ（ＲＡ）３−ＬＧ（式中、ＬＧは脱離基である）との反応を行い、Ｒ５がハロゲン、−ＯＲＡ、−ＯＣ（＝Ｏ）ＲＡ、−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＲＡ、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２、−ＯＳ（＝Ｏ）２ＲＡ、−Ｎ３、−Ｎ（ＲＡ）２、−ＮＲＡＣ（＝Ｏ）ＲＡ、−ＮＲＡＣ（＝Ｏ）ＯＲＡ、−ＮＲＡＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２、−ＮＲＡＳ（＝Ｏ）２ＲＡ又は−Ｃ（ＲＡ）３等の非水素基である置換ケトン生成物を得ることができる。
ケトンをウォルフ−キッシュナー還元条件下で還元し、式（Ｇ１’）及び（Ｇ１’’）の化合物を得ることができる。例示的なウォルフ−キッシュナー条件は、Furrow, M. E.; Myers, A. G. (2004). "Practical Procedures for the Preparation of N-tert-Butyldimethylsilylhydrazones and Their Use in Modified Wolff-Kishner Reductions and in the Synthesis of Vinyl Halides andgem-Dihalides" Journal of the American Chemical Society126 (17): 5436-5445（引用することにより本明細書の一部をなす）に記載されている。
例示的な化合物
或る特定の実施形態の様々な組合せが本明細書で更に企図される。
例えば、基−Ｌ１−ＲＢ３が式：
の基であり、Ｌ１が結合である、或る特定の実施形態では、式：
（式中、
、ＲＮ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５Ａ、Ｒ６Ａ及びｍは本明細書に規定される通りである）の化合物、又はその薬学的に許容可能な塩、第四級アミン塩若しくはＮ−オキシドが提供される。
或る特定の実施形態では、Ｒ１及びＲ２は接合して任意に置換されたヘテロシクリルを形成し、式：
（式中、Ｒ７、Ｒ６Ａ、ｎ及びｍは本明細書に規定される通りである）の化合物、又はその薬学的に許容可能な塩、第四級アミン塩若しくはＮ−オキシドが提供される。或る特定の実施形態では、ＧはＯである。或る特定の実施形態では、ＧはＮ−ＣＨ３である。或る特定の実施形態では、ｍは０である。或る特定の実施形態では、ｍは１である。或る特定の実施形態では、ｎは０である。或る特定の実施形態では、ｎは１である。
Ｒ１及びＲ２は接合して任意に置換されたヘテロシクリルを形成する、或る特定の実施形態では、式：
（式中、Ｒ７、Ｒ６Ａ、ｎ及びｍは本明細書に規定される通りである）の化合物、又はその薬学的に許容可能な塩、第四級アミン塩若しくはＮ−オキシドが提供される。或る特定の実施形態では、Ｇは−ＣＨ２−である。或る特定の実施形態では、ｍは０である。或る特定の実施形態では、ｍは１である。或る特定の実施形態では、ｎは０である。或る特定の実施形態では、ｎは１である。
Ｒ１及びＲ２はそれぞれ−ＣＨ３である、或る特定の実施形態では、式：
（式中、Ｒ６Ａ及びｍは本明細書に規定される通りである）の化合物、又はその薬学的に許容可能な塩、第四級アミン塩若しくはＮ−オキシドが提供される。或る特定の実施形態では、ｍは０である。或る特定の実施形態では、ｍは１である。
Ｒ１及びＲ２の一方は水素であり、Ｒ１及びＲ２の他方は−ＣＨ３である、或る特定の実施形態では、式：
（式中、Ｒ６Ａ及びｍは本明細書に規定される通りである）の化合物、又はその薬学的に許容可能な塩、第四級アミン塩若しくはＮ−オキシドが提供される。或る特定の実施形態では、ｍは０である。或る特定の実施形態では、ｍは１である。
例示的な式（Ａ−１−Ｂ’）又は（Ａ−１−Ｂ’’）の化合物としては、
、並びにその薬学的に許容可能な塩、その第四級アミン塩及びＮ−オキシド、例えば式：
のＮ−オキシドが挙げられるが、これらに限定されない。
例示的な式（Ａ−１−Ｃ’）又は（Ａ−１−Ｃ’’）の化合物としては、
、及びその薬学的に許容可能な塩、その第四級アミン塩又はＮ−オキシドが挙げられるが、これらに限定されない。
例示的な式（Ａ−１−Ｄ’）又は（Ａ−１−Ｄ’’）の化合物としては、
、及びその薬学的に許容可能な塩が挙げられるが、これらに限定されない。
例示的な式（Ａ−１−Ｅ’）又は（Ａ−１−Ｅ’’）の化合物としては、
、及びその薬学的に許容可能な塩が挙げられるが、これらに限定されない。
例示的な式（Ａ−２’）又は（Ａ−２’’）及び（Ａ−３’）又は（Ａ−３’’）の化合物としては、
、及びその薬学的に許容可能な塩が挙げられるが、これらに限定されない。
例示的な式（Ｄ１’）又は（Ｄ１’’）の化合物としては、
、及びその薬学的に許容可能な塩が挙げられるが、これらに限定されない。
例示的な式（Ｄ２’）又は（Ｄ２’’）の化合物としては、
、及びその薬学的に許容可能な塩が挙げられるが、これらに限定されない。
例示的な式（Ｅ１’）又は（Ｅ１’’）の化合物としては、
、及びその薬学的に許容可能な塩が挙げられるが、これらに限定されない。
例示的な式（Ｅ２’）又は（Ｅ２’’）の化合物としては、
、及びその薬学的に許容可能な塩が挙げられるが、これらに限定されない。
Ｂ． 化学的定義
特定の官能基及び化学用語の定義を下記でより詳細に説明する。化学元素は化学物理学ハンドブック（Handbook of Chemistry and Physics）第７５版の内表紙の元素周期表（ＣＡＳ方式）に従って同定され、特定の官能基は概してそれに記載のように定義される。付加的には、有機化学の一般原理、並びに特定の官能部分及び反応性はOrganic Chemistry, Thomas Sorrell, University Science Books, Sausalito, 1999、Smith and March March's Advanced Organic Chemistry, 5th Edition, John Wiley & Sons, Inc., New York, 2001、Larock, Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers, Inc., New York, 1989及びCarruthers, Some Modern Methods of Organic Synthesis, 3rd Edition, Cambridge University Press, Cambridge, 1987に記載されている。
本明細書に記載の化合物は１つ以上の不斉中心を含むことができ、そのため様々な立体異性体、例えば鏡像異性体及び／又はジアステレオマーで存在し得る。また、二重結合についてのＺ配置若しくはＥ配置のいずれか又はその混合物を特徴とする立体異性体も企図される。例えば、本明細書に記載の化合物は個々の鏡像異性体、ジアステレオマー若しくは幾何異性体の形態であり得るか、又はラセミ混合物及び１つ以上の立体異性体に富んだ混合物を含む立体異性体の混合物の形態であり得る。異性体はキラル高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）並びにキラル塩の形成及び結晶化を含む当業者に既知の方法によって混合物から単離することができるか、又は好ましい異性体を不斉合成によって調製することができる。例えば、Jacques et al., Enantiomers, Racemates and Resolutions (Wiley Interscience, New York, 1981)、Wilen et al., Tetrahedron 33:2725 (1977)、Eliel, E.L. Stereochemistry of Carbon Compounds (McGraw-Hill, NY, 1962)及びWilen, S.H. Tables of Resolving Agents and Optical Resolutions p. 268 (E.L. Eliel, Ed., Univ. of Notre Dame Press, Notre Dame, IN 1972)を参照されたい。本発明は、他の異性体を実質的に含まない個々の異性体、代替的には様々な異性体の混合物である化合物を付加的に包含する。
様々な異性体比のいずれかを有する異性体混合物を、本発明に従って利用することができる。例えば、２つの異性体のみを組み合わせる場合、５０：５０、６０：４０、７０：３０、８０：２０、９０：１０、９５：５、９６：４、９７：３、９８：２、９９：１又は１００：０の異性体比を有する混合物が全て本発明により企図される。より複雑な異性体混合物について類似の比率が企図されることが当業者には容易に理解される。混合物は２つの鏡像異性体、２つのジアステレオマー、又はジアステレオマーと鏡像異性体との混合物を含有し得る。
例えば、本明細書に記載の化合物の特定の鏡像異性体が所望される場合、不斉合成又はキラル補助基での誘導により調製することができ、得られるジアステレオマー混合物を分離し、補助基を切断することで、純粋な所望の鏡像異性体が得られる。幾つかの実施形態では、本明細書に記載の化合物は酵素を用いた不斉合成によって調製される。鏡像異性体及びジアステレオマーは、分別結晶又はクロマトグラフィー（例えば、キラルカラムを用いたＨＰＬＣ）を用いて分離することができる。代替的には、分子がアミノ等の塩基性官能基、又はカルボキシル等の酸性官能基を含有する場合、ジアステレオマー塩は適切な光学活性酸又は塩基により形成され、続いてそれにより形成されるジアステレオマーの当該技術分野で既知の分別結晶又はクロマトグラフィー手段による分割、及びその後の純粋な鏡像異性体の回収を行う。
幾つかの実施形態では、ＲＢ１又はＲＢ２が付着する炭素は（Ｓ）配置にある。幾つかの実施形態では、ＲＢ１又はＲＢ２が付着する炭素は（Ｒ）配置にある。幾つかの実施形態では、ＲＢ１又はＲＢ２が付着する炭素は、天然由来のコルチスタチン（例えば、コルチスタチンＡ、コルチスタチンＢ）と同じ配置にある。幾つかの実施形態では、ＲＢ１又はＲＢ２が付着する炭素は、天然由来のコルチスタチン（例えば、コルチスタチンＡ、コルチスタチンＢ）と逆の配置にある。幾つかの実施形態では、Ｙ１又はＹ２が付着する炭素は（Ｓ）配置にある。幾つかの実施形態では、Ｙ１又はＹ２が付着する炭素は（Ｒ）配置にある。幾つかの実施形態では、Ｙ１又はＹ２が付着する炭素は、天然由来のコルチスタチン（例えば、コルチスタチンＡ、コルチスタチンＢ）と同じ配置にある。幾つかの実施形態では、Ｙ１又はＹ２が付着する炭素は、天然由来のコルチスタチン（例えば、コルチスタチンＡ、コルチスタチンＢ）と逆の配置にある。幾つかの実施形態では、Ｒ３が付着する炭素は（Ｓ）配置にある。幾つかの実施形態では、Ｒ３が付着する炭素は（Ｒ）配置にある。幾つかの実施形態では、Ｒ３が付着する炭素は、天然由来のコルチスタチン（例えば、コルチスタチンＡ、コルチスタチンＢ）と同じ配置にある。幾つかの実施形態では、Ｒ３が付着する炭素は、天然由来のコルチスタチン（例えば、コルチスタチンＡ、コルチスタチンＢ）と逆の配置にある。幾つかの実施形態では、Ｒ５Ｂが付着する炭素は（Ｓ）配置にある。幾つかの実施形態では、Ｒ５Ｂが付着する炭素は（Ｒ）配置にある。幾つかの実施形態では、Ｒ５Ｂが付着する炭素は、天然由来のコルチスタチン（例えば、コルチスタチンＡ、コルチスタチンＢ）と同じ配置にある。幾つかの実施形態では、Ｒ５Ｂが付着する炭素は、天然由来のコルチスタチン（例えば、コルチスタチンＡ、コルチスタチンＢ）と逆の配置にある。幾つかの実施形態では、Ｒ５Ａが付着する炭素は（Ｓ）配置にある。幾つかの実施形態では、Ｒ５Ａが付着する炭素は（Ｒ）配置にある。幾つかの実施形態では、Ｒ５Ａが付着する炭素は、天然由来のコルチスタチン（例えば、コルチスタチンＡ、コルチスタチンＢ）と同じ配置にある。幾つかの実施形態では、Ｒ５Ａが付着する炭素は、天然由来のコルチスタチン（例えば、コルチスタチンＡ、コルチスタチンＢ）と逆の配置にある。幾つかの実施形態では、Ｗが付着する炭素は（Ｓ）配置にある。幾つかの実施形態では、Ｗが付着する炭素は（Ｒ）配置にある。幾つかの実施形態では、Ｗが付着する炭素は、天然由来のコルチスタチン（例えば、コルチスタチンＡ、コルチスタチンＢ）と同じ配置にある。幾つかの実施形態では、Ｗが付着する炭素は、天然由来のコルチスタチン（例えば、コルチスタチンＡ、コルチスタチンＢ）と逆の配置にある。
幾つかの実施形態では、ＲＢ１が付着する炭素は（Ｒ）配置にある。幾つかの実施形態では、ＲＢ１は同位体濃縮された原子（例えば、２Ｈ、３Ｈ、１３Ｃ、１４Ｃ、１８Ｆ）を含む。幾つかの実施形態では、ＲＢ２は重水素である。幾つかの実施形態では、ＲＢ２は同位体濃縮された原子（例えば、２Ｈ、３Ｈ、１３Ｃ、１４Ｃ、１８Ｆ）を含む。幾つかの実施形態では、Ｙ１は重水素である。幾つかの実施形態では、Ｙ１は同位体濃縮された原子（例えば、２Ｈ、３Ｈ、１３Ｃ、１４Ｃ、１８Ｆ）を含む。幾つかの実施形態では、Ｙ２は重水素である。幾つかの実施形態では、Ｙ２は同位体濃縮された原子（例えば、２Ｈ、３Ｈ、１３Ｃ、１４Ｃ、１８Ｆ）を含む。幾つかの実施形態では、Ｒ３は重水素である。幾つかの実施形態では、Ｒ３は同位体濃縮された原子（例えば、２Ｈ、３Ｈ、１３Ｃ、１４Ｃ、１８Ｆ）を含む。幾つかの実施形態では、Ｒ４は重水素である。幾つかの実施形態では、Ｒ４は同位体濃縮された原子（例えば、２Ｈ、３Ｈ、１３Ｃ、１４Ｃ、１８Ｆ）を含む。幾つかの実施形態では、Ｒ５Ａは重水素である。幾つかの実施形態では、Ｒ５Ａは同位体濃縮された原子（例えば、２Ｈ、３Ｈ、１３Ｃ、１４Ｃ、１８Ｆ）を含む。幾つかの実施形態では、Ｒ５Ｂは重水素である。幾つかの実施形態では、Ｒ５Ｂは同位体濃縮された原子（例えば、２Ｈ、３Ｈ、１３Ｃ、１４Ｃ、１８Ｆ）を含む。幾つかの実施形態では、ＲＮは重水素である。幾つかの実施形態では、ＲＮは同位体濃縮された原子（例えば、２Ｈ、３Ｈ、１３Ｃ、１４Ｃ、１８Ｆ）を含む。幾つかの実施形態では、Ｗは同位体濃縮された原子（例えば、２Ｈ、３Ｈ、１３Ｃ、１４Ｃ、１８Ｆ）を含む。幾つかの実施形態では、ＲＯは重水素である。幾つかの実施形態では、ＲＯは同位体濃縮された原子（例えば、２Ｈ、３Ｈ、１３Ｃ、１４Ｃ、１８Ｆ）を含む。幾つかの実施形態では、Ｒ１又はＲ２は重水素である。幾つかの実施形態では、Ｒ１又はＲ２は同位体濃縮された原子（例えば、２Ｈ、３Ｈ、１３Ｃ、１４Ｃ、１８Ｆ）を含む。幾つかの実施形態では、環Ａ上の水素（下記を参照されたい）が重水素で置換される。幾つかの実施形態では、環Ｂ上の水素が重水素で置換される。幾つかの実施形態では、環Ｃ上の水素が重水素で置換される。幾つかの実施形態では、環Ｄ上の水素が重水素で置換される。
特に指定のない限り、本明細書に示される構造は１つ以上の同位体濃縮された原子の存在のみが異なる化合物を含むことも意味する。例えば、重水素又は三重水素による水素の置換え、１８Ｆによる１９Ｆの置換え、又は１３Ｃ若しくは１４Ｃ濃縮炭素による炭素の置換えを除いて本発明の構造を有する化合物は本開示の範囲内である。かかる化合物は、例えば生物学的アッセイにおける分析ツール又はプローブとして有用である。
値の範囲が挙げられる場合、その範囲内の各々の値及び部分範囲を包含することを意図する。例えば、「Ｃ１〜６アルキル」はＣ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ１〜６、Ｃ１〜５、Ｃ１〜４、Ｃ１〜３、Ｃ１〜２、Ｃ２〜６、Ｃ２〜５、Ｃ２〜４、Ｃ２〜３、Ｃ３〜６、Ｃ３〜５、Ｃ３〜４、Ｃ４〜６、Ｃ４〜５及びＣ５〜６アルキルを包含することを意図する。
「脂肪族」という用語は本明細書で使用される場合、アルキル、アルケニル、アルキニル及び炭素環式基を指す。同様に、「ヘテロ脂肪族（heteroaliphatic）」という用語は本明細書で使用される場合、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル及び複素環式基を指す。
本明細書で使用される場合、「アルキル」は１個〜１０個の炭素原子を有する直鎖又は分岐飽和炭化水素基のラジカルを指す（「Ｃ１〜１０アルキル」）。幾つかの実施形態では、アルキル基は１個〜９個の炭素原子を有する（「Ｃ１〜９アルキル」）。幾つかの実施形態では、アルキル基は１個〜８個の炭素原子を有する（「Ｃ１〜８アルキル」）。幾つかの実施形態では、アルキル基は１個〜７個の炭素原子を有する（「Ｃ１〜７アルキル」）。幾つかの実施形態では、アルキル基は１個〜６個の炭素原子を有する（「Ｃ１〜６アルキル」）。幾つかの実施形態では、アルキル基は１個〜５個の炭素原子を有する（「Ｃ１〜５アルキル」）。幾つかの実施形態では、アルキル基は１個〜４個の炭素原子を有する（「Ｃ１〜４アルキル」）。幾つかの実施形態では、アルキル基は１個〜３個の炭素原子を有する（「Ｃ１〜３アルキル」）。幾つかの実施形態では、アルキル基は１個〜２個の炭素原子を有する（「Ｃ１〜２アルキル」）。幾つかの実施形態では、アルキル基は１個の炭素原子を有する（「Ｃ１アルキル」）。幾つかの実施形態では、アルキル基は２個〜６個の炭素原子を有する（「Ｃ２〜６アルキル」）。Ｃ１〜６アルキル基の例としては、メチル（Ｃ１）、エチル（Ｃ２）、ｎ−プロピル（Ｃ３）、イソプロピル（Ｃ３）、ｎ−ブチル（Ｃ４）、ｔｅｒｔ−ブチル（Ｃ４）、ｓｅｃ−ブチル（Ｃ４）、イソ−ブチル（Ｃ４）、ｎ−ペンチル（Ｃ５）、３−ペンタニル（Ｃ５）、アミル（Ｃ５）、ネオペンチル（Ｃ５）、３−メチル−２−ブタニル（Ｃ５）、第三級アミル（Ｃ５）、及びｎ−ヘキシル（Ｃ６）が挙げられる。アルキル基の更なる例としては、ｎ−ヘプチル（Ｃ７）、ｎ−オクチル（Ｃ８）等が挙げられる。他に指定のない限り、アルキル基はそれぞれ独立して非置換であるか（「非置換アルキル」）、又は１つ以上の置換基で置換されている（「置換アルキル」）。或る特定の実施形態では、アルキル基は非置換Ｃ１〜１０アルキル（例えば−ＣＨ３）である。或る特定の実施形態では、アルキル基は置換Ｃ１〜１０アルキルである。
本明細書で使用される場合、「ハロアルキル」は水素原子の１つ以上が独立してハロゲン、例えばフルオロ、ブロモ、クロロ又はヨードに置き換えられる本明細書に規定の置換アルキル基である。「ペルハロアルキル」はハロアルキルのサブセットであり、水素原子の全てが独立してハロゲン、例えばフルオロ、ブロモ、クロロ又はヨードに置き換えられるアルキル基を指す。幾つかの実施形態では、ハロアルキル部分は１個〜８個の炭素原子を有する（「Ｃ１〜８ハロアルキル」）。幾つかの実施形態では、ハロアルキル部分は１個〜６個の炭素原子を有する（「Ｃ１〜６ハロアルキル」）。幾つかの実施形態では、ハロアルキル部分は１個〜４個の炭素原子を有する（「Ｃ１〜４ハロアルキル」）。幾つかの実施形態では、ハロアルキル部分は１個〜３個の炭素原子を有する（「Ｃ１〜３ハロアルキル」）。幾つかの実施形態では、ハロアルキル部分は１個〜２個の炭素原子を有する（「Ｃ１〜２ハロアルキル」）。幾つかの実施形態では、ハロアルキル水素原子の全てがフルオロに置き換えられ、ペルフルオロアルキル基が得られる。幾つかの実施形態では、ハロアルキル水素原子の全てがクロロに置き換えられ、「ペルクロロアルキル」基が得られる。ハロアルキル基の例としては、−ＣＦ３、−ＣＦ２ＣＦ３、−ＣＦ２ＣＦ２ＣＦ３、−ＣＣｌ３、−ＣＦＣｌ２、−ＣＦ２Ｃｌ等が挙げられる。
本明細書で使用される場合、「ヘテロアルキル」は、親鎖内の（すなわち、その隣接炭素原子間に挿入される）及び／又は親鎖の１つ以上の末端位置に位置する酸素、窒素又は硫黄から選択される少なくとも１つのヘテロ原子（例えば１つ、２つ、３つ又は４つのヘテロ原子）を更に含む本明細書に規定のアルキル基を指す。或る特定の実施形態では、ヘテロアルキル基は、親鎖内に１個〜１０個の炭素原子及び１つ以上のヘテロ原子を有する飽和基を指す（「ヘテロＣ１〜１０アルキル」）。幾つかの実施形態では、ヘテロアルキル基は、親鎖内に１個〜９個の炭素原子及び１つ以上のヘテロ原子を有する飽和基である（「ヘテロＣ１〜９アルキル」）。幾つかの実施形態では、ヘテロアルキル基は、親鎖内に１個〜８個の炭素原子及び１つ以上のヘテロ原子を有する飽和基である（「ヘテロＣ１〜８アルキル」）。幾つかの実施形態では、ヘテロアルキル基は、親鎖内に１個〜７個の炭素原子及び１つ以上のヘテロ原子を有する飽和基である（「ヘテロＣ１〜７アルキル」）。幾つかの実施形態では、ヘテロアルキル基は、親鎖内に１個〜６個の炭素原子及び１つ以上のヘテロ原子を有する飽和基である（「ヘテロＣ１〜６アルキル」）。幾つかの実施形態では、ヘテロアルキル基は、親鎖内に１個〜５個の炭素原子及び１つ又は２つのヘテロ原子を有する飽和基である（「ヘテロＣ１〜５アルキル」）。幾つかの実施形態では、ヘテロアルキル基は、親鎖内に１個〜４個の炭素原子及び１つ又は２つのヘテロ原子を有する飽和基である（「ヘテロＣ１〜４アルキル」）。幾つかの実施形態では、ヘテロアルキル基は、親鎖内に１個〜３個の炭素原子及び１つのヘテロ原子を有する飽和基である（「ヘテロＣ１〜３アルキル」）。幾つかの実施形態では、ヘテロアルキル基は、親鎖内に１個〜２個の炭素原子及び１つのヘテロ原子を有する飽和基である（「ヘテロＣ１〜２アルキル」）。幾つかの実施形態では、ヘテロアルキル基は、１個の炭素原子及び１つのヘテロ原子を有する飽和基である（「ヘテロＣ１アルキル」）。幾つかの実施形態では、ヘテロアルキル基は、親鎖内に２個〜６個の炭素原子及び１つ又は２つのヘテロ原子を有する飽和基である（「ヘテロＣ２〜６アルキル」）。他に指定のない限り、ヘテロアルキル基はそれぞれ独立して非置換であるか（「非置換ヘテロアルキル」）、又は１つ以上の置換基で置換されている（「置換ヘテロアルキル」）。或る特定の実施形態では、ヘテロアルキル基は非置換のヘテロＣ１〜１０アルキルである。或る特定の実施形態では、ヘテロアルキル基は置換ヘテロＣ１〜１０アルキルである。
本明細書で使用される場合、「アルケニル」は、２個〜１０個の炭素原子及び１つ以上の炭素間二重結合（例えば１つ、２つ、３つ又は４つの二重結合）を有する直鎖又は分岐炭化水素基のラジカルを指す。幾つかの実施形態では、アルケニル基は２個〜９個の炭素原子を有する（「Ｃ２〜９アルケニル」）。幾つかの実施形態では、アルケニル基は２個〜８個の炭素原子を有する（「Ｃ２〜８アルケニル」）。幾つかの実施形態では、アルケニル基は２個〜７個の炭素原子を有する（「Ｃ２〜７アルケニル」）。幾つかの実施形態では、アルケニル基は２個〜６個の炭素原子を有する（「Ｃ２〜６アルケニル」）。幾つかの実施形態では、アルケニル基は２個〜５個の炭素原子を有する（「Ｃ２〜５アルケニル」）。幾つかの実施形態では、アルケニル基は２個〜４個の炭素原子を有する（「Ｃ２〜４アルケニル」）。幾つかの実施形態では、アルケニル基は２個〜３個の炭素原子を有する（「Ｃ２〜３アルケニル」）。幾つかの実施形態では、アルケニル基は２個の炭素原子を有する（「Ｃ２アルケニル」）。１つ以上の炭素間二重結合は内部にあっても（２−ブテニルの場合等）又は末端にあってもよい（１−ブテニルの場合等）。Ｃ２〜４アルケニル基の例としては、エテニル（Ｃ２）、１−プロペニル（Ｃ３）、２−プロペニル（Ｃ３）、１−ブテニル（Ｃ４）、２−ブテニル（Ｃ４）、ブタジエニル（Ｃ４）等が挙げられる。Ｃ２〜６アルケニル基の例としては、上述のＣ２〜４アルケニル基に加えて、ペンテニル（Ｃ５）、ペンタジエニル（Ｃ５）、ヘキセニル（Ｃ６）等が挙げられる。アルケニルの更なる例としては、ヘプテニル（Ｃ７）、オクテニル（Ｃ８）、オクタトリエニル（Ｃ８）等が挙げられる。他に指定のない限り、アルケニル基はそれぞれ独立して非置換であるか（「非置換アルケニル」）、又は１つ以上の置換基で置換されている（「置換アルケニル」）。或る特定の実施形態では、アルケニル基は非置換のＣ２〜１０アルケニルである。或る特定の実施形態では、アルケニル基は置換Ｃ２〜１０アルケニルである。
本明細書で使用される場合、「ヘテロアルケニル」は、親鎖内の（すなわち、その隣接炭素原子間に挿入される）及び／又は親鎖の１つ以上の末端位置に位置する酸素、窒素又は硫黄から選択される少なくとも１つのヘテロ原子（例えば１つ、２つ、３つ又は４つのヘテロ原子）を更に含む本明細書に規定のアルケニル基を指す。或る特定の実施形態では、ヘテロアルケニル基は親鎖内に２個〜１０個の炭素原子、少なくとも１つの二重結合及び１つ以上のヘテロ原子を有する基を指す（「ヘテロＣ２〜１０アルケニル」）。幾つかの実施形態では、ヘテロアルケニル基は親鎖内に２個〜９個の炭素原子、少なくとも１つの二重結合及び１つ以上のヘテロ原子を有する（「ヘテロＣ２〜９アルケニル」）。幾つかの実施形態では、ヘテロアルケニル基は親鎖内に２個〜８個の炭素原子、少なくとも１つの二重結合及び１つ以上のヘテロ原子を有する（「ヘテロＣ２〜８アルケニル」）。幾つかの実施形態では、ヘテロアルケニル基は親鎖内に２個〜７個の炭素原子、少なくとも１つの二重結合及び１つ以上のヘテロ原子を有する（「ヘテロＣ２〜７アルケニル」）。幾つかの実施形態では、ヘテロアルケニル基は親鎖内に２個〜６個の炭素原子、少なくとも１つの二重結合及び１つ以上のヘテロ原子を有する（「ヘテロＣ２〜６アルケニル」）。幾つかの実施形態では、ヘテロアルケニル基は親鎖内に２個〜５個の炭素原子、少なくとも１つの二重結合及び１つ又は２つのヘテロ原子を有する（「ヘテロＣ２〜５アルケニル」）。幾つかの実施形態では、ヘテロアルケニル基は親鎖内に２個〜４個の炭素原子、少なくとも１つの二重結合及び１つ又は２つのヘテロ原子を有する（「ヘテロＣ２〜４アルケニル」）。幾つかの実施形態では、ヘテロアルケニル基は親鎖内に２個〜３個の炭素原子、少なくとも１つの二重結合及び１つのヘテロ原子を有する（「ヘテロＣ２〜３アルケニル」）。幾つかの実施形態では、ヘテロアルケニル基は親鎖内に２個〜６個の炭素原子、少なくとも１つの二重結合及び１つ又は２つのヘテロ原子を有する（「ヘテロＣ２〜６アルケニル」）。他に指定のない限り、ヘテロアルケニル基はそれぞれ独立して非置換であるか（「非置換ヘテロアルケニル」）、又は１つ以上の置換基で置換されている（「置換ヘテロアルケニル」）。或る特定の実施形態では、ヘテロアルケニル基は非置換のヘテロＣ２〜１０アルケニルである。或る特定の実施形態では、ヘテロアルケニル基は置換ヘテロＣ２〜１０アルケニルである。
本明細書で使用される場合、「アルキニル」は、２個〜１０個の炭素原子及び１つ以上の炭素間三重結合（例えば１つ、２つ、３つ又は４つの三重結合）を有する直鎖又は分岐炭化水素基のラジカルを指す（「Ｃ２〜１０アルキニル」）。幾つかの実施形態では、アルキニル基は２個〜９個の炭素原子を有する（「Ｃ２〜９アルキニル」）。幾つかの実施形態では、アルキニル基は２個〜８個の炭素原子を有する（「Ｃ２〜８アルキニル」）。幾つかの実施形態では、アルキニル基は２個〜７個の炭素原子を有する（「Ｃ２〜７アルキニル」）。幾つかの実施形態では、アルキニル基は２個〜６個の炭素原子を有する（「Ｃ２〜６アルキニル」）。幾つかの実施形態では、アルキニル基は２個〜５個の炭素原子を有する（「Ｃ２〜５アルキニル」）。幾つかの実施形態では、アルキニル基は２個〜４個の炭素原子を有する（「Ｃ２〜４アルキニル」）。幾つかの実施形態では、アルキニル基は２個〜３個の炭素原子を有する（「Ｃ２〜３アルキニル」）。幾つかの実施形態では、アルキニル基は２個の炭素原子を有する（「Ｃ２アルキニル」）。１つ以上の炭素間三重結合は内部にあっても（２−ブチニルの場合等）又は末端にあってもよい（１−ブチニルの場合等）。Ｃ２〜４アルキニル基の例としては、エチニル（Ｃ２）、１−プロピニル（Ｃ３）、２−プロピニル（Ｃ３）、１−ブチニル（Ｃ４）、２−ブチニル（Ｃ４）等が挙げられるが、これらに限定されない。Ｃ２〜６アルケニル基の例としては、上述のＣ２〜４アルキニル基に加えて、ペンチニル（Ｃ５）、ヘキシニル（Ｃ６）等が挙げられる。アルキニルの更なる例としては、ヘプチニル（Ｃ７）、オクチニル（Ｃ８）等が挙げられる。他に指定のない限り、アルキニル基はそれぞれ独立して非置換であるか（「非置換アルキニル」）、又は１つ以上の置換基で置換されている（「置換アルキニル」）。或る特定の実施形態では、アルキニル基は非置換のＣ２〜１０アルキニルである。或る特定の実施形態では、アルキニル基は置換Ｃ２〜１０アルキニルである。
本明細書で使用される場合、「ヘテロアルキニル」は、親鎖内の（すなわち、その隣接炭素原子間に挿入される）及び／又は親鎖の１つ以上の末端位置に位置する酸素、窒素又は硫黄から選択される少なくとも１つのヘテロ原子（例えば１つ、２つ、３つ又は４つのヘテロ原子）を更に含む本明細書に規定のアルキニル基を指す。或る特定の実施形態では、ヘテロアルキニル基は親鎖内に２個〜１０個の炭素原子、少なくとも１つの三重結合及び１つ以上のヘテロ原子を有する基を指す（「ヘテロＣ２〜１０アルキニル」）。幾つかの実施形態では、ヘテロアルキニル基は親鎖内に２個〜９個の炭素原子、少なくとも１つの三重結合及び１つ以上のヘテロ原子を有する（「ヘテロＣ２〜９アルキニル」）。幾つかの実施形態では、ヘテロアルキニル基は親鎖内に２個〜８個の炭素原子、少なくとも１つの三重結合及び１つ以上のヘテロ原子を有する（「ヘテロＣ２〜８アルキニル」）。幾つかの実施形態では、ヘテロアルキニル基は親鎖内に２個〜７個の炭素原子、少なくとも１つの三重結合及び１つ以上のヘテロ原子を有する（「ヘテロＣ２〜７アルキニル」）。幾つかの実施形態では、ヘテロアルキニル基は親鎖内に２個〜６個の炭素原子、少なくとも１つの三重結合及び１つ以上のヘテロ原子を有する（「ヘテロＣ２〜６アルキニル」）。幾つかの実施形態では、ヘテロアルキニル基は親鎖内に２個〜５個の炭素原子、少なくとも１つの三重結合及び１つ又は２つのヘテロ原子を有する（「ヘテロＣ２〜５アルキニル」）。幾つかの実施形態では、ヘテロアルキニル基は親鎖内に２個〜４個の炭素原子、少なくとも１つの三重結合及び１つ又は２つのヘテロ原子を有する（「ヘテロＣ２〜４アルキニル」）。幾つかの実施形態では、ヘテロアルキニル基は親鎖内に２個〜３個の炭素原子、少なくとも１つの三重結合及び１つのヘテロ原子を有する（「ヘテロＣ２〜３アルキニル」）。幾つかの実施形態では、ヘテロアルキニル基は親鎖内に２個〜６個の炭素原子、少なくとも１つの三重結合及び１つ又は２つのヘテロ原子を有する（「ヘテロＣ２〜６アルキニル」）。他に指定のない限り、ヘテロアルキニル基はそれぞれ独立して非置換であるか（「非置換ヘテロアルキニル」）、又は１つ以上の置換基で置換されている（「置換ヘテロアルキニル」）。或る特定の実施形態では、ヘテロアルキニル基は非置換のヘテロＣ２〜１０アルキニルである。或る特定の実施形態では、ヘテロアルキニル基は置換ヘテロＣ２〜１０アルキニルである。
本明細書で使用される場合、「カルボシクリル」又は「炭素環式」は、非芳香環系中に３個〜１４個の環炭素原子（「Ｃ３〜１４カルボシクリル」）及び０個のヘテロ原子を有する非芳香族環状炭化水素基のラジカルを指す。幾つかの実施形態では、カルボシクリル基は３個〜１０個の環炭素原子を有する（「Ｃ３〜１０カルボシクリル」）。幾つかの実施形態では、カルボシクリル基は３個〜９個の環炭素原子を有する（「Ｃ３〜９カルボシクリル」）。幾つかの実施形態では、カルボシクリル基は３個〜８個の環炭素原子を有する（「Ｃ３〜８カルボシクリル」）。幾つかの実施形態では、カルボシクリル基は３個〜７個の環炭素原子を有する（「Ｃ３〜７カルボシクリル」）。幾つかの実施形態では、カルボシクリル基は３個〜６個の環炭素原子を有する（「Ｃ３〜６カルボシクリル」）。幾つかの実施形態では、カルボシクリル基は４個〜６個の環炭素原子を有する（「Ｃ４〜６カルボシクリル」）。幾つかの実施形態では、カルボシクリル基は５個〜６個の環炭素原子を有する（「Ｃ５〜６カルボシクリル」）。幾つかの実施形態では、カルボシクリル基は５個〜１０個の環炭素原子を有する（「Ｃ５〜１０カルボシクリル」）。Ｃ３〜６カルボシクリル基の例としては、シクロプロピル（Ｃ３）、シクロプロペニル（Ｃ３）、シクロブチル（Ｃ４）、シクロブテニル（Ｃ４）、シクロペンチル（Ｃ５）、シクロペンテニル（Ｃ５）、シクロヘキシル（Ｃ６）、シクロヘキセニル（Ｃ６）、シクロヘキサジエニル（Ｃ６）等が挙げられるが、これらに限定されない。Ｃ３〜８カルボシクリル基の例としては、上述のＣ３〜６カルボシクリル基に加えて、シクロヘプチル（Ｃ７）、シクロヘプテニル（Ｃ７）、シクロヘプタジエニル（Ｃ７）、シクロヘプタトリエニル（Ｃ７）、シクロオクチル（Ｃ８）、シクロオクテニル（Ｃ８）、ビシクロ［２．２．１］ヘプタニル（Ｃ７）、ビシクロ［２．２．２］オクタニル（Ｃ８）等が挙げられるが、これらに限定されない。Ｃ３〜１０カルボシクリル基の例としては、上述のＣ３〜８カルボシクリル基に加えて、シクロノニル（Ｃ９）、シクロノネニル（Ｃ９）、シクロデシル（Ｃ１０）、シクロデセニル（Ｃ１０）、オクタヒドロ−１Ｈ−インデニル（Ｃ９）、デカヒドロナフタレニル（Ｃ１０）、スピロ［４．５］デカニル（Ｃ１０）等が挙げられるが、これらに限定されない。上述の例で説明されるように、或る特定の実施形態では、カルボシクリル基は単環式（「単環式カルボシクリル」）又は多環式（例えば二環系（「二環式カルボシクリル」）又は三環系（「三環式カルボシクリル」）等の縮合系、架橋系又はスピロ環系を含有する）であり、飽和していても、又は１つ以上の炭素間二重若しくは三重結合を含有していてもよい。「カルボシクリル」には、上に規定のカルボシクリル環が１つ以上のアリール又はヘテロアリール基と縮合し、付着点がカルボシクリル環上にある環系も含まれ、このような場合に炭素の数は炭素環式環系の炭素の数を指定し続ける。他に指定のない限り、カルボシクリル基はそれぞれ独立して非置換であるか（「非置換カルボシクリル」）、又は１つ以上の置換基で置換されている（「置換カルボシクリル」）。或る特定の実施形態では、カルボシクリル基は非置換Ｃ３〜１４カルボシクリルである。或る特定の実施形態では、カルボシクリル基は置換Ｃ３〜１４カルボシクリルである。
幾つかの実施形態では、「カルボシクリル」は３個〜１０個の環炭素原子を有する単環式の飽和カルボシクリル基である（「Ｃ３〜１０シクロアルキル」）。幾つかの実施形態では、シクロアルキル基は３個〜９個の環炭素原子を有する（「Ｃ３〜９シクロアルキル」）。幾つかの実施形態では、シクロアルキル基は３個〜８個の環炭素原子を有する（「Ｃ３〜８シクロアルキル」）。幾つかの実施形態では、シクロアルキル基は３個〜６個の環炭素原子を有する（「Ｃ３〜６シクロアルキル」）。幾つかの実施形態では、シクロアルキル基は４個〜６個の環炭素原子を有する（「Ｃ４〜６シクロアルキル」）。幾つかの実施形態では、シクロアルキル基は５個〜６個の環炭素原子を有する（「Ｃ５〜６シクロアルキル」）。幾つかの実施形態では、シクロアルキル基は５個〜１０個の環炭素原子を有する（「Ｃ５〜１０シクロアルキル」）。Ｃ５〜６シクロアルキル基の例としてはシクロペンチル（Ｃ５）及びシクロヘキシル（Ｃ５）が挙げられる。Ｃ３〜６シクロアルキル基の例としては、上述のＣ５〜６シクロアルキル基に加えてシクロプロピル（Ｃ３）及びシクロブチル（Ｃ４）が挙げられる。Ｃ３〜８シクロアルキル基の例としては、上述のＣ３〜６シクロアルキル基に加えて、シクロヘプチル（Ｃ７）及びシクロオクチル（Ｃ８）が挙げられる。他に指定のない限り、シクロアルキル基はそれぞれ独立して非置換であるか（「非置換シクロアルキル」）、又は１つ以上の置換基で置換されている（「置換シクロアルキル」）。或る特定の実施形態では、シクロアルキル基は非置換Ｃ３〜１０シクロアルキルである。或る特定の実施形態では、シクロアルキル基は置換Ｃ３〜１０シクロアルキルである。
本明細書で使用される場合、「ヘテロシクリル」又は「複素環式」は、環炭素原子及び１個〜４個の環ヘテロ原子を有し、各ヘテロ原子が独立して窒素、酸素及び硫黄から選択される３員〜１４員の非芳香環系のラジカルを指す（「３員〜１４員ヘテロシクリル」）。１つ以上の窒素原子を含有するヘテロシクリル基では、付着点は原子価が許す限り、炭素又は窒素原子であり得る。ヘテロシクリル基は単環式（「単環式ヘテロシクリル」）又は多環式（例えば、二環式系（「二環式ヘテロシクリル」）又は三環式系（「三環式ヘテロシクリル」）等の縮合系、架橋系又はスピロ環系）であり、飽和していても、又は１つ以上の炭素間二重若しくは三重結合を含有していてもよい。ヘテロシクリル多環式環系は、一方又は両方の環に１つ以上のヘテロ原子を含んでいてもよい。「ヘテロシクリル」は、上に規定のヘテロシクリル環が１つ以上のカルボシクリル基と縮合し、付着点がカルボシクリル若しくはヘテロシクリル環上にある環系、又は上に規定のヘテロシクリル環が１つ以上のアリール若しくはヘテロアリール基と縮合し、付着点がヘテロシクリル環上にある環系も含み、このような場合に環員の数はヘテロシクリル環系中の環員の数を指定し続ける。他に指定のない限り、ヘテロシクリルはそれぞれ独立して非置換であるか（「非置換ヘテロシクリル」）、又は１つ以上の置換基で置換されている（「置換ヘテロシクリル」）。或る特定の実施形態では、ヘテロシクリル基は非置換の３員〜１４員ヘテロシクリルである。或る特定の実施形態では、ヘテロシクリル基は置換された３員〜１４員ヘテロシクリルである。
幾つかの実施形態では、ヘテロシクリル基は環炭素原子及び１個〜４個の環ヘテロ原子を有し、各ヘテロ原子が独立して窒素、酸素及び硫黄から選択される５員〜１０員の非芳香環系である（「５員〜１０員ヘテロシクリル」）。幾つかの実施形態では、ヘテロシクリル基は環炭素原子及び１個〜４個の環ヘテロ原子を有し、各ヘテロ原子が独立して窒素、酸素及び硫黄から選択される５員〜８員の非芳香環系である（「５員〜８員ヘテロシクリル」）。幾つかの実施形態では、ヘテロシクリル基は環炭素原子及び１個〜４個の環ヘテロ原子を有し、各ヘテロ原子が独立して窒素、酸素及び硫黄から選択される５員〜６員の非芳香環系である（「５員〜６員ヘテロシクリル」）。幾つかの実施形態では、５員〜６員ヘテロシクリルは窒素、酸素及び硫黄から選択される１個〜３個の環ヘテロ原子を有する。幾つかの実施形態では、５員〜６員ヘテロシクリルは窒素、酸素及び硫黄から選択される１個〜２個の環ヘテロ原子を有する。幾つかの実施形態では、５員〜６員ヘテロシクリルは窒素、酸素及び硫黄から選択される１個の環ヘテロ原子を有する。
１つのヘテロ原子を含有する３員のヘテロシクリル基の例としては、アジリジニル、オキシラニル及びチイラニルが挙げられるが、これらに限定されない。１つのヘテロ原子を含有する４員のヘテロシクリル基の例としては、アゼチジニル、オキセタニル及びチエタニルが挙げられるが、これらに限定されない。１つのヘテロ原子を含有する５員のヘテロシクリル基の例としては、テトラヒドロフラニル、ジヒドロフラニル、テトラヒドロチオフェニル、ジヒドロチオフェニル、ピロリジニル、ジヒドロピロリル及びピロリル−２，５−ジオンが挙げられるが、これらに限定されない。２つのヘテロ原子を含有する５員のヘテロシクリル基の例としては、ジオキソラニル、オキサチオラニル及びジチオラニルが挙げられるが、これらに限定されない。３つのヘテロ原子を含有する５員のヘテロシクリル基の例としては、トリアゾリニル、オキサジアゾリニル及びチアジアゾリニルが挙げられるが、これらに限定されない。１つのヘテロ原子を含有する６員のヘテロシクリル基の例としては、ピペリジニル、テトラヒドロピラニル、ジヒドロピリジニル及びチアニルが挙げられるが、これらに限定されない。２つのヘテロ原子を含有する６員のヘテロシクリル基の例としては、ピペラジニル、モルホリニル、ジチアニル、ジオキサニルが挙げられるが、これらに限定されない。３つのヘテロ原子を含有する６員のヘテロシクリル基の例としては、トリアジナニルが挙げられるが、これに限定されない。１つのヘテロ原子を含有する７員のヘテロシクリル基の例としては、アゼパニル、オキセパニル及びチエパニルが挙げられるが、これらに限定されない。１つのヘテロ原子を含有する８員のヘテロシクリル基の例としては、アゾカニル、オキセカニル及びチオカニルが挙げられるが、これらに限定されない。二環式ヘテロシクリル基の例としては、インドリニル、イソインドリニル、ジヒドロベンゾフラニル、ジヒドロベンゾチエニル、テトラヒドロベンゾチエニル、テトラヒドロベンゾフラニル、テトラヒドロインドリル、テトラヒドロキノリニル、テトラヒドロイソキノリニル、デカヒドロキノリニル、デカヒドロイソキノリニル、オクタヒドロクロメニル、オクタヒドロイソクロメニル、デカヒドロナフチリジニル、デカヒドロ−１，８−ナフチリジニル、オクタヒドロピロロ［３，２−ｂ］ピロール、インドリニル、フタルイミジル、ナフタルイミジル、クロマニル、クロメニル、１Ｈ−ベンゾ［ｅ］［１，４］ジアゼピニル、１，４，５，７−テトラヒドロピラノ［３，４−ｂ］ピロリル、５，６−ジヒドロ−４Ｈ−フロ［３，２−ｂ］ピロリル、６，７−ジヒドロ−５Ｈ−フロ［３，２−ｂ］ピラニル、５，７−ジヒドロ−４Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラニル、２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジニル、２，３−ジヒドロフロ［２，３−ｂ］ピリジニル、４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジニル、４，５，６，７−テトラヒドロフロ［３，２−ｃ］ピリジニル、４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［３，２−ｂ］ピリジニル、１，２，３，４−テトラヒドロ−１，６−ナフチリジニル等が挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書で使用される場合、「アリール」は、芳香環系内に６個〜１４個の環炭素原子及び０個のヘテロ原子を備える単環式又は多環式（例えば二環式又は三環式）の４ｎ＋２芳香環系（例えば６個、１０個又は１４個のπ電子が環状配置で共有される）のラジカルを指す（「Ｃ６〜１４アリール」）。幾つかの実施形態では、アリール基は６個の環炭素原子を有する（「Ｃ６アリール」；例えばフェニル）。幾つかの実施形態では、アリール基は１０個の環炭素原子を有する（「Ｃ１０アリール」；例えば、１−ナフチル及び２−ナフチル等のナフチル）。幾つかの実施形態では、アリール基は１４個の環炭素原子を有する（「Ｃ１４アリール」；例えばアントラシル（anthracyl））。「アリール」は、上に規定のアリール環が１つ以上のカルボシクリル又はヘテロシクリル基と縮合し、ラジカル又は付着点がアリール環上にある環系も含み、このような場合に炭素原子の数はアリール環系中の炭素原子の数を指定し続ける。他に指定のない限り、アリール基はそれぞれ独立して非置換であるか（「非置換アリール」）、又は１つ以上の置換基で置換されている（「置換アリール」）。或る特定の実施形態では、アリール基は非置換のＣ６〜１４アリールである。或る特定の実施形態では、アリール基は置換Ｃ６〜１４アリールである。
「アラルキル」は「アルキル」のサブセットであり、本明細書に規定のアリール基で置換され、付着点がアルキル部分上にある本明細書に規定のアルキル基を指す。
本明細書で使用される場合、「ヘテロアリール」は、芳香環系内に環炭素原子及び１個〜４個の環ヘテロ原子を備え、各ヘテロ原子が独立して窒素、酸素及び硫黄から選択される５員〜１４員の単環式又は多環式（例えば二環式、三環式）の４ｎ＋２芳香環系（例えば６個、１０個又は１４個のπ電子が環状配置で共有される）のラジカルを指す（「５員〜１４員ヘテロアリール」）。１つ以上の窒素原子を含有するヘテロアリール基では、付着点は原子価が許す限り、炭素又は窒素原子であり得る。ヘテロアリール多環式環系は一方又は両方の環に１つ以上のヘテロ原子を含み得る。「ヘテロアリール」は、上に規定のヘテロアリール環が１つ以上のカルボシクリル又はヘテロシクリル基と縮合し、付着点がヘテロアリール環上にある環系を含み、このような場合に環員の数はヘテロアリール環系の環員の数を指定し続ける。「ヘテロアリール」は上に規定のヘテロアリール環が１つ以上のアリール基と縮合し、付着点がアリール又はヘテロアリール環上にある環系も含み、このような場合に環員の数は縮合多環式（アリール／ヘテロアリール）環系の環員の数を指定する。１つの環がヘテロ原子を含有しない多環式ヘテロアリール基（例えばインドリル、キノリニル、カルバゾリル等）では、付着点はいずれかの環、すなわちヘテロ原子を保有する環（例えば２−インドリル）又はヘテロ原子を含有しない環（例えば５−インドリル）上であり得る。
幾つかの実施形態では、ヘテロアリール基は芳香環系内に環炭素原子及び１個〜４個の環ヘテロ原子を備え、各ヘテロ原子が独立して窒素、酸素及び硫黄から選択される５員〜１０員芳香環系である（「５員〜１０員ヘテロアリール」）。幾つかの実施形態では、ヘテロアリール基は芳香環系内に環炭素原子及び１個〜４個の環ヘテロ原子を備え、各ヘテロ原子が独立して窒素、酸素及び硫黄から選択される５員〜８員芳香環系である（「５員〜８員ヘテロアリール」）。幾つかの実施形態では、ヘテロアリール基は芳香環系内に環炭素原子及び１個〜４個の環ヘテロ原子を備え、各ヘテロ原子が独立して窒素、酸素及び硫黄から選択される５員又は６員芳香環系である（「５員又は６員ヘテロアリール」）。幾つかの実施形態では、５員又は６員ヘテロアリールは窒素、酸素及び硫黄から選択される１個〜３個の環ヘテロ原子を有する。幾つかの実施形態では、５員又は６員ヘテロアリールは窒素、酸素及び硫黄から選択される１個又は２個の環ヘテロ原子を有する。幾つかの実施形態では、５員又は６員ヘテロアリールは窒素、酸素及び硫黄から選択される１個の環ヘテロ原子を有する。他に指定のない限り、ヘテロアリール基はそれぞれ独立して非置換であるか（「非置換ヘテロアリール」）、又は１つ以上の置換基で置換されている（「置換ヘテロアリール」）。或る特定の実施形態では、ヘテロアリール基は非置換の５員〜１４員ヘテロアリールである。或る特定の実施形態では、ヘテロアリール基は置換された５員〜１４員ヘテロアリールである。
１つのヘテロ原子を含有する５員のヘテロアリール基の例としては、ピロリル、フラニル及びチオフェニルが挙げられるが、これらに限定されない。２つのヘテロ原子を含有する５員のヘテロアリール基の例としては、イミダゾリル、ピラゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル及びイソチアゾリルが挙げられるが、これらに限定されない。３つのヘテロ原子を含有する５員のヘテロアリール基の例としては、トリアゾリル、オキサジアゾリル及びチアジアゾリルが挙げられるが、これらに限定されない。４つのヘテロ原子を含有する５員のヘテロアリール基の例としては、テトラゾリルが挙げられるが、これに限定されない。１つのヘテロ原子を含有する６員のヘテロアリール基の例としては、ピリジニルが挙げられるが、これに限定されない。２つのヘテロ原子を含有する６員のヘテロアリール基の例としては、ピリダジニル、ピリミジニル及びピラジニルが挙げられるが、これらに限定されない。３つ又は４つのヘテロ原子を含有する６員のヘテロアリール基の例としてはそれぞれ、トリアジニル及びテトラジニルが挙げられるが、これらに限定されない。１つのヘテロ原子を含有する７員のヘテロアリール基の例としては、アゼピニル、オキセピニル及びチエピニルが挙げられるが、これらに限定されない。５，６−二環式ヘテロアリール基の例としては、インドリル、イソインドリル、インダゾリル、ベンゾトリアゾリル、ベンゾチオフェニル、イソベンゾチオフェニル、ベンゾフラニル、ベンズイソフラニル、ベンズイミダゾリル、ベンゾオキサゾリル、ベンズイソオキサゾリル、ベンゾオキサジアゾリル、ベンズチアゾリル、ベンズイソチアゾリル、ベンズチアジアゾリル、インドリジニル及びプリニルが挙げられるが、これらに限定されない。６，６−二環式ヘテロアリール基の例としては、ナフチリジニル、プテリジニル、キノリニル、イソキノリニル、シンノリニル、キノキサリニル、フタラジニル及びキナゾリニルが挙げられるが、これらに限定されない。三環式ヘテロアリール基の例としては、フェナントリジニル、ジベンゾフラニル、カルバゾリル、アクリジニル、フェノチアジニル、フェノキサジニル及びフェナジニルが挙げられるが、これらに限定されない。
「ヘテロアラルキル」は「アルキル」のサブセットであり、本明細書に規定のヘテロアリール基で置換され、付着点がアルキル部分上にある本明細書に規定のアルキル基を指す。
本明細書で使用される場合、「部分的に不飽和の」という用語は少なくとも１つの二重又は三重結合を含む環部分を指す。「部分的に不飽和の」という用語は、多数の不飽和部位を有する環を包むことを意図するが、本明細書に規定の芳香族基（例えば、アリール又はヘテロアリール部分）を含むことを意図するものではない。
本明細書で使用される場合、「飽和した」という用語は、二重又は三重結合を含有しない環部分、すなわち全て単結合を含有する環を指す。
接尾語「エン（-ene）」を基に付けることで、その基が二価部分であることが示される。例えばアルキレンはアルキルの二価部分であり、アルケニレンはアルケニルの二価部分であり、アルキニレンはアルキニルの二価部分であり、ヘテロアルキレンはヘテロアルキルの二価部分であり、ヘテロアルケニレンはヘテロアルケニルの二価部分であり、ヘテロアルキニレンはヘテロアルキニルの二価部分であり、カルボシクリレンはカルボシクリルの二価部分であり、ヘテロシクリレンはヘテロシクリルの二価部分であり、アリーレンはアリールの二価部分であり、ヘテロアリーレンはヘテロアリールの二価部分である。
上記から理解されるように、本明細書で定義されるようなアルキル基、アルケニル基、アルキニル基、ヘテロアルキル基、ヘテロアルケニル基、ヘテロアルキニル基、カルボシクリル基、ヘテロシクリル基、アリール基及びヘテロアリール基は或る特定の実施形態では任意に置換されている。任意に置換されるとは、置換していても又は置換されていなくてもよい基（例えば「置換」若しくは「非置換」アルキル基、「置換」若しくは「非置換」アルケニル基、「置換」若しくは「非置換」アルキニル基、「置換」若しくは「非置換」ヘテロアルキル基、「置換」若しくは「非置換」ヘテロアルケニル基、「置換」若しくは「非置換」ヘテロアルキニル基、「置換」若しくは「非置換」カルボシクリル基、「置換」若しくは「非置換」ヘテロシクリル基、「置換」若しくは「非置換」アリール基、又は「置換」若しくは「非置換」ヘテロアリール基）を指すものである。概して、「置換された」という用語は、基上に存在する少なくとも１つの水素が許容可能な置換基、例えば置換後に安定した化合物、例えば転位、環化、脱離又は他の反応等の変換を自然に受けることがない化合物を生じる置換基に置き換えられることを意味する。他に指定のない限り、「置換された」基は基の１つ以上の置換可能な位置に置換基を有し、任意の所与の構造中の２つ以上の位置が置換される場合、置換基は各位置で同じか又は異なる。本発明は、安定した化合物に達するあらゆるかかる組合せを企図する。本発明の目的上、窒素等のヘテロ原子はヘテロ原子の原子価を満たし、安定した部分の形成をもたらす本明細書に記載の水素置換基及び／又は任意の好適な置換基を有し得る。
例示的な置換基としては、ハロゲン、−ＣＮ、−ＮＯ２、−Ｎ３、−ＳＯ２Ｈ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＨ、−ＯＲａａ、−ＯＮ（Ｒｂｂ）２、−Ｎ（Ｒｂｂ）２、−Ｎ（Ｒｂｂ）３ ＋Ｘ−、−Ｎ（ＯＲｃｃ）Ｒｂｂ、−ＳＨ、−ＳＲａａ、−ＳＳＲｃｃ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒａａ、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＨＯ、−Ｃ（ＯＲｃｃ）２、−ＣＯ２Ｒａａ、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｒａａ、−ＯＣＯ２Ｒａａ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、−ＮＲｂｂＣ（＝Ｏ）Ｒａａ、−ＮＲｂｂＣＯ２Ｒａａ、−ＮＲｂｂＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、−Ｃ（＝ＮＲｂｂ）Ｒａａ、−Ｃ（＝ＮＲｂｂ）ＯＲａａ、−ＯＣ（＝ＮＲｂｂ）Ｒａａ、−ＯＣ（＝ＮＲｂｂ）ＯＲａａ、−Ｃ（＝ＮＲｂｂ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、−ＯＣ（＝ＮＲｂｂ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、−ＮＲｂｂＣ（＝ＮＲｂｂ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲｂｂＳＯ２Ｒａａ、−ＮＲｂｂＳＯ２Ｒａａ、−ＳＯ２Ｎ（Ｒｂｂ）２、−ＳＯ２Ｒａａ、−ＳＯ２ＯＲａａ、−ＯＳＯ２Ｒａａ、−Ｓ（＝Ｏ）Ｒａａ、−ＯＳ（＝Ｏ）Ｒａａ、−Ｓｉ（Ｒａａ）３、−ＯＳｉ（Ｒａａ）３、−Ｃ（＝Ｓ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、−Ｃ（＝Ｏ）ＳＲａａ、−Ｃ（＝Ｓ）ＳＲａａ、−ＳＣ（＝Ｓ）ＳＲａａ、−ＳＣ（＝Ｏ）ＳＲａａ、−ＯＣ（＝Ｏ）ＳＲａａ、−ＳＣ（＝Ｏ）ＯＲａａ、−ＳＣ（＝Ｏ）Ｒａａ、−Ｐ（＝Ｏ）（Ｒａａ）２、−ＯＰ（＝Ｏ）（Ｒａａ）２、−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＲｃｃ）２、−ＮＲｂｂＰ（＝Ｏ）（ＯＲｃｃ）２、−Ｐ（Ｒｃｃ）２、−ＯＰ（Ｒｃｃ）２、−Ｂ（Ｒａａ）２、−Ｂ（ＯＲｃｃ）２、−ＢＲａａ（ＯＲｃｃ）、Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ１〜１０ペルハロアルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル、ヘテロＣ１〜１０アルキル、ヘテロＣ２〜１０アルケニル、ヘテロＣ２〜１０アルキニル、Ｃ３〜１０カルボシクリル、３員〜１４員ヘテロシクリル、Ｃ６〜１４アリール及び５員〜１４員ヘテロアリール（ここで、各々のアルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、カルボシクリル、ヘテロシクリル、アリール及びヘテロアリールは独立して０個、１個、２個、３個、４個又は５個のＲｄｄ基で置換されるか、又は、
炭素原子上の２つのジェミナル水素が基＝Ｏ、＝Ｓ、＝ＮＮ（Ｒｂｂ）２、＝ＮＮＲｂｂＣ（＝Ｏ）Ｒａａ、＝ＮＮＲｂｂＣ（＝Ｏ）ＯＲａａ、＝ＮＮＲｂｂＳ（＝Ｏ）２Ｒａａ、＝ＮＲｂｂ又は＝ＮＯＲｃｃに置き換えられ、
Ｒａａはそれぞれ独立してＣ１〜１０アルキル、Ｃ１〜１０ペルハロアルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル、ヘテロＣ１〜１０アルキル、ヘテロＣ２〜１０アルケニル、ヘテロＣ２〜１０アルキニル、Ｃ３〜１０カルボシクリル、３員〜１４員ヘテロシクリル、Ｃ６〜１４アリール及び５員〜１４員ヘテロアリールから選択されるか、又は２つのＲａａ基が接合して３員〜１４員ヘテロシクリル若しくは５員〜１４員ヘテロアリール環を形成し、ここで各々のアルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、カルボシクリル、ヘテロシクリル、アリール及びヘテロアリールは独立して０個、１個、２個、３個、４個又は５個のＲｄｄ基で置換され、
Ｒｂｂはそれぞれ独立して水素、−ＯＨ、−ＯＲａａ、−Ｎ（Ｒｃｃ）２、−ＣＮ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒａａ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｃｃ）２、−ＣＯ２Ｒａａ、−ＳＯ２Ｒａａ、−Ｃ（＝ＮＲｃｃ）ＯＲａａ、−Ｃ（＝ＮＲｃｃ）Ｎ（Ｒｃｃ）２、−ＳＯ２Ｎ（Ｒｃｃ）２、−ＳＯ２Ｒｃｃ、−ＳＯ２ＯＲｃｃ、−ＳＯＲａａ、−Ｃ（＝Ｓ）Ｎ（Ｒｃｃ）２、−Ｃ（＝Ｏ）ＳＲｃｃ、−Ｃ（＝Ｓ）ＳＲｃｃ、−Ｐ（＝Ｏ）（Ｒａａ）２、Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ１〜１０ペルハロアルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル、ヘテロＣ１〜１０アルキル、ヘテロＣ２〜１０アルケニル、ヘテロＣ２〜１０アルキニル、Ｃ３〜１０カルボシクリル、３員〜１４員ヘテロシクリル、Ｃ６〜１４アリール及び５員〜１４員ヘテロアリールから選択されるか、又は２つのＲｂｂ基が接合して３員〜１４員ヘテロシクリル若しくは５員〜１４員ヘテロアリール環を形成し、ここで各々のアルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、カルボシクリル、ヘテロシクリル、アリール及びヘテロアリールは独立して０個、１個、２個、３個、４個又は５個のＲｄｄ基で置換され、
Ｒｃｃはそれぞれ独立して水素、Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ１〜１０ペルハロアルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル、ヘテロＣ１〜１０アルキル、ヘテロＣ２〜１０アルケニル、ヘテロＣ２〜１０アルキニル、Ｃ３〜１０カルボシクリル、３員〜１４員ヘテロシクリル、Ｃ６〜１４アリール及び５員〜１４員ヘテロアリールから選択されるか、又は２つのＲｃｃ基が接合して３員〜１４員ヘテロシクリル若しくは５員〜１４員ヘテロアリール環を形成し、ここで各々のアルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、カルボシクリル、ヘテロシクリル、アリール及びヘテロアリールは独立して０個、１個、２個、３個、４個又は５個のＲｄｄ基で置換され、
Ｒｄｄはそれぞれ独立してハロゲン、−ＣＮ、−ＮＯ２、−Ｎ３、−ＳＯ２Ｈ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＨ、−ＯＲｅｅ、−ＯＮ（Ｒｆｆ）２、−Ｎ（Ｒｆｆ）２、−Ｎ（Ｒｆｆ）３ ＋Ｘ−、−Ｎ（ＯＲｅｅ）Ｒｆｆ、−ＳＨ、−ＳＲｅｅ、−ＳＳＲｅｅ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒｅｅ、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２Ｒｅｅ、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｒｅｅ、−ＯＣＯ２Ｒｅｅ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｆｆ）２、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｆｆ）２、−ＮＲｆｆＣ（＝Ｏ）Ｒｅｅ、−ＮＲｆｆＣＯ２Ｒｅｅ、−ＮＲｆｆＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｆｆ）２、−Ｃ（＝ＮＲｆｆ）ＯＲｅｅ、−ＯＣ（＝ＮＲｆｆ）Ｒｅｅ、−ＯＣ（＝ＮＲｆｆ）ＯＲｅｅ、−Ｃ（＝ＮＲｆｆ）Ｎ（Ｒｆｆ）２、−ＯＣ（＝ＮＲｆｆ）Ｎ（Ｒｆｆ）２、−ＮＲｆｆＣ（＝ＮＲｆｆ）Ｎ（Ｒｆｆ）２、−ＮＲｆｆＳＯ２Ｒｅｅ、−ＳＯ２Ｎ（Ｒｆｆ）２、−ＳＯ２Ｒｅｅ、−ＳＯ２ＯＲｅｅ、−ＯＳＯ２Ｒｅｅ、−Ｓ（＝Ｏ）Ｒｅｅ、−Ｓｉ（Ｒｅｅ）３、−ＯＳｉ（Ｒｅｅ）３、−Ｃ（＝Ｓ）Ｎ（Ｒｆｆ）２、−Ｃ（＝Ｏ）ＳＲｅｅ、−Ｃ（＝Ｓ）ＳＲｅｅ、−ＳＣ（＝Ｓ）ＳＲｅｅ、−Ｐ（＝Ｏ）（Ｒｅｅ）２、−ＯＰ（＝Ｏ）（Ｒｅｅ）２、−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＲｅｅ）２、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６ペルハロアルキル、Ｃ２〜６アルケニル、Ｃ２〜６アルキニル、ヘテロＣ１〜６アルキル、ヘテロＣ２〜６アルケニル、ヘテロＣ２〜６アルキニル、Ｃ３〜１０カルボシクリル、３員〜１０員ヘテロシクリル、Ｃ６〜１０アリール、５員〜１０員ヘテロアリールから選択され、ここで各々のアルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、カルボシクリル、ヘテロシクリル、アリール及びヘテロアリールは独立して０個、１個、２個、３個、４個若しくは５個のＲｇｇ基で置換されるか、又は２つのジェミナルＲｄｄ置換基が接合して＝Ｏ若しくは＝Ｓを形成してもよく、
Ｒｅｅはそれぞれ独立してＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜６ペルハロアルキル、Ｃ２〜６アルケニル、Ｃ２〜６アルキニル、ヘテロＣ１〜６アルキル、ヘテロＣ２〜６アルケニル、ヘテロＣ２〜６アルキニル、Ｃ３〜１０カルボシクリル、Ｃ６〜１０アリール、３員〜１０員ヘテロシクリル及び３員〜１０員ヘテロアリールから選択され、ここで各々のアルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、カルボシクリル、ヘテロシクリル、アリール及びヘテロアリールは独立して０個、１個、２個、３個、４個又は５個のＲｇｇ基で置換され、
Ｒｆｆはそれぞれ独立して水素、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６ペルハロアルキル、Ｃ２〜６アルケニル、Ｃ２〜６アルキニル、ヘテロＣ１〜６アルキル、ヘテロＣ２〜６アルケニル、ヘテロＣ２〜６アルキニル、Ｃ３〜１０カルボシクリル、３員〜１０員ヘテロシクリル、Ｃ６〜１０アリール及び５員〜１０員ヘテロアリールから選択されるか、又は２つのＲｆｆ基が接合して３員〜１４員ヘテロシクリル若しくは５員〜１４員ヘテロアリール環を形成し、ここで各々のアルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、カルボシクリル、ヘテロシクリル、アリール及びヘテロアリールは独立して０個、１個、２個、３個、４個又は５個のＲｇｇ基で置換され、
Ｒｇｇはそれぞれ独立してハロゲン、−ＣＮ、−ＮＯ２、−Ｎ３、−ＳＯ２Ｈ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＨ、−ＯＣ１〜６アルキル、−ＯＮ（Ｃ１〜６アルキル）２、−Ｎ（Ｃ１〜６アルキル）２、−Ｎ（Ｃ１〜６アルキル）３ ＋Ｘ−、−ＮＨ（Ｃ１〜６アルキル）２ ＋Ｘ−、−ＮＨ２（Ｃ１〜６アルキル）＋Ｘ−、−ＮＨ３ ＋Ｘ−、−Ｎ（ＯＣ１〜６アルキル）（Ｃ１〜６アルキル）、−Ｎ（ＯＨ）（Ｃ１〜６アルキル）、−ＮＨ（ＯＨ）、−ＳＨ、−ＳＣ１〜６アルキル、−ＳＳ（Ｃ１〜６アルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ１〜６アルキル）、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２（Ｃ１〜６アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）（Ｃ１〜６アルキル）、−ＯＣＯ２（Ｃ１〜６アルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｃ１〜６アルキル）２、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ（Ｃ１〜６アルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）（Ｃ１〜６アルキル）、−Ｎ（Ｃ１〜６アルキル）Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ１〜６アルキル）、−ＮＨＣＯ２（Ｃ１〜６アルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｃ１〜６アルキル）２、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ（Ｃ１〜６アルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ２、−Ｃ（＝ＮＨ）Ｏ（Ｃ１〜６アルキル）、−ＯＣ（＝ＮＨ）（Ｃ１〜６アルキル）、−ＯＣ（＝ＮＨ）ＯＣ１〜６アルキル、−Ｃ（＝ＮＨ）Ｎ（Ｃ１〜６アルキル）２、−Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ（Ｃ１〜６アルキル）、−Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ２、−ＯＣ（＝ＮＨ）Ｎ（Ｃ１〜６アルキル）２、−ＯＣ（ＮＨ）ＮＨ（Ｃ１〜６アルキル）、−ＯＣ（ＮＨ）ＮＨ２、−ＮＨＣ（ＮＨ）Ｎ（Ｃ１〜６アルキル）２、−ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２（Ｃ１〜６アルキル）、−ＳＯ２Ｎ（Ｃ１〜６アルキル）２、−ＳＯ２ＮＨ（Ｃ１〜６アルキル）、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＳＯ２Ｃ１〜６アルキル、−ＳＯ２ＯＣ１〜６アルキル、−ＯＳＯ２Ｃ１〜６アルキル、−ＳＯＣ１〜６アルキル、−Ｓｉ（Ｃ１〜６アルキル）３、−ＯＳｉ（Ｃ１〜６アルキル）３、−Ｃ（＝Ｓ）Ｎ（Ｃ１〜６アルキル）２、Ｃ（＝Ｓ）ＮＨ（Ｃ１〜６アルキル）、Ｃ（＝Ｓ）ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）Ｓ（Ｃ１〜６アルキル）、−Ｃ（＝Ｓ）ＳＣ１〜６アルキル、−ＳＣ（＝Ｓ）ＳＣ１〜６アルキル、−Ｐ（＝Ｏ）（Ｃ１〜６アルキル）２、−ＯＰ（＝Ｏ）（Ｃ１〜６アルキル）２、−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＣ１〜６アルキル）２、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６ペルハロアルキル、Ｃ２〜６アルケニル、Ｃ２〜６アルキニル、ヘテロＣ１〜６アルキル、ヘテロＣ２〜６アルケニル、ヘテロＣ２〜６アルキニル、Ｃ３〜１０カルボシクリル、Ｃ６〜１０アリール、３員〜１０員ヘテロシクリル、５員〜１０員ヘテロアリールであるか、又は２つのジェミナルＲｇｇ置換基が接合して＝Ｏ若しくは＝Ｓを形成することができ、ここでＸ−は対イオンである）が挙げられるが、これらに限定されない。
或る特定の実施形態では、例示的な置換基は、ハロゲン、−ＣＮ、−ＮＯ２、−Ｎ３、−ＳＯ２Ｈ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＨ、−ＯＲａａ、−Ｎ（Ｒｂｂ）２、−ＳＨ、−ＳＲａａ、−ＳＳＲｃｃ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒａａ、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＨＯ、−ＣＯ２Ｒａａ、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｒａａ、−ＯＣＯ２Ｒａａ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、−ＮＲｂｂＣ（＝Ｏ）Ｒａａ、−ＮＲｂｂＣＯ２Ｒａａ、−ＮＲｂｂＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲｂｂＳＯ２Ｒａａ、−ＮＲｂｂＳＯ２Ｒａａ、−ＳＯ２Ｎ（Ｒｂｂ）２、−ＳＯ２Ｒａａ、−Ｓ（＝Ｏ）Ｒａａ、Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ１〜１０ペルハロアルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル、ヘテロＣ１〜１０アルキル、ヘテロＣ２〜１０アルケニル、ヘテロＣ２〜１０アルキニル、Ｃ３〜１０カルボシクリル、３員〜１４員のヘテロシクリル、Ｃ６〜１４アリール及び５員〜１４員のヘテロアリールからなる群から選択されるものであり、アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、カルボシクリル、ヘテロシクリル、アリール及びヘテロアリールはそれぞれ独立して０個、１個、２個、３個、４個又は５個のＲｄｄ基で置換される。
本明細書で使用される場合、「ハロ」又は「ハロゲン」という用語はフッ素（フルオロ、−Ｆ）、塩素（クロロ、−Ｃｌ）、臭素（ブロモ、−Ｂｒ）又はヨウ素（ヨード、−Ｉ）を指す。
本明細書で使用される場合、「対イオン」は電気的中性を維持するために正に帯電した第四級アミンと結びつく負に帯電した基である。例示的な対イオンとしては、ハロゲン化物イオン（例えばＦ−、Ｃｌ−、Ｂｒ−、Ｉ−）、ＮＯ３ −、ＣｌＯ４ −、ＯＨ−、Ｈ２ＰＯ４ −、ＨＳＯ４ −、スルホン酸イオン（例えばメタンスルホネート（methansulfonate）、トリフルオロメタンスルホネート、ｐ−トルエンスルホネート、ベンゼンスルホネート、１０−カンファースルホネート、ナフタレン−２−スルホネート、ナフタレン−１−スルホン酸−５−スルホネート、エタン−１−スルホン酸−２−スルホネート等）及びカルボン酸イオン（例えばアセテート、エタノエート、プロパノエート、ベンゾエート、グリセレート、ラクテート、タルトレート、グリコレート等）が挙げられる。
本明細書で使用される場合、「脱離基」は不均一結合開裂において電子対とともに離れる分子断片を指す当該技術分野で理解される用語であり、分子断片はアニオン又は中性分子である。例えば、Smith, March Advanced Organic Chemistry 6th ed. (501-502)を参照されたい。例示的な脱離基としては、ハロ（例えばクロロ、ブロモ、ヨード）及び−ＯＳＯ２Ｒａａ（式中、Ｒａａは本明細書に規定される通りである）が挙げられるが、これらに限定されない。基−ＯＳＯ２Ｒａａはトシル、メシル及びベシル等の脱離基を包含し、Ｒａａは任意に置換されたアルキル（例えば−ＣＨ３）又は任意に置換されたアリール（例えばフェニル、トリル）である。
本明細書で使用される場合、「ヒドロキシル」又は「ヒドロキシ」という用語は基−ＯＨを指す。その延長で「置換ヒドロキシル」又は「置換ヒドロキシル」という用語は、親分子に直接付着した酸素原子が水素以外の基で置換されたヒドロキシル基を指し、−ＯＲａａ、−ＯＮ（Ｒｂｂ）２、−ＯＣ（＝Ｏ）ＳＲａａ、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｒａａ、−ＯＣＯ２Ｒａａ、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、−ＯＣ（＝ＮＲｂｂ）Ｒａａ、−ＯＣ（＝ＮＲｂｂ）ＯＲａａ、−ＯＣ（＝ＮＲｂｂ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、−ＯＳ（＝Ｏ）Ｒａａ、−ＯＳＯ２Ｒａａ、−ＯＳｉ（Ｒａａ）３、−ＯＰ（Ｒｃｃ）２、−ＯＰ（＝Ｏ）（Ｒａａ）２及び−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＲｃｃ）２（ここでＲａａ、Ｒｂｂ及びＲｃｃは本明細書に規定される通りである）から選択される基を含む。
本明細書で使用される場合、「チオール」又は「チオ」という用語は基−ＳＨを指す。その延長で「置換チオール」又は「置換チオ」という用語は、親分子に直接付着した硫黄原子が水素以外の基で置換されたチオール基を指し、−ＳＲａａ、−Ｓ＝ＳＲｃｃ、−ＳＣ（＝Ｓ）ＳＲａａ、−ＳＣ（＝Ｏ）ＳＲａａ、−ＳＣ（＝Ｏ）ＯＲａａ及び−ＳＣ（＝Ｏ）Ｒａａ（ここでＲａａ及びＲｃｃは本明細書に規定される通りである）から選択される基を含む。
本明細書で使用される場合、「アミノ」という用語は基−ＮＨ２を指す。その延長で「置換アミノ」という用語は、本明細書に規定の一置換アミノ又は二置換アミノを指す。或る特定の実施形態では、「置換アミノ」は一置換アミノ又は二置換アミノ基である。
本明細書で使用される場合、「一置換アミノ」という用語は、親分子に直接付着した窒素原子が１つの水素及び水素以外の１つの基で置換されたアミノ基を指し、−ＮＨ（Ｒｂｂ）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｒａａ、−ＮＨＣＯ２Ｒａａ、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、−ＮＨＣ（＝ＮＲｂｂ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、−ＮＨＳＯ２Ｒａａ及び−ＮＨＰ（＝Ｏ）（ＯＲｃｃ）２（式中、Ｒａａ、Ｒｂｂ及びＲｃｃは本明細書に規定される通りであり、基−ＮＨ（Ｒｂｂ）のＲｂｂは水素ではない）から選択される基を含む。
本明細書で使用される場合、「二置換アミノ」という用語は、親分子に直接付着した窒素原子が水素以外の２つの基で置換されたアミノ基を指し、−Ｎ（Ｒｂｂ）２、−ＮＲｂｂＣ（＝Ｏ）Ｒａａ、−ＮＲｂｂＣＯ２Ｒａａ、−ＮＲｂｂＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、−ＮＲｂｂＣ（＝ＮＲｂｂ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、−ＮＲｂｂＳＯ２Ｒａａ及び−ＮＲｂｂＰ（＝Ｏ）（ＯＲｃｃ）２（式中、Ｒａａ、Ｒｂｂ及びＲｃｃは本明細書に規定される通りであるが、但し、親分子に直接付着した窒素原子は水素では置換されない）から選択される基を含む。
本明細書で使用される場合、「スルホニル」という用語は−ＳＯ２Ｎ（Ｒｂｂ）２、−ＳＯ２Ｒａａ及び−ＳＯ２ＯＲａａ（式中、Ｒａａ及びＲｂｂは本明細書に規定される通りである）から選択される基を指す。
本明細書で使用される場合、「スルフィニル」という用語は基−Ｓ（＝Ｏ）Ｒａａ（式中、Ｒａａは本明細書に規定される通りである）を指す。
本明細書で使用される場合、「カルボニル」という用語は、親分子に直接付着した炭素がｓｐ２ハイブリダイズし、酸素、窒素又は硫黄原子で置換される基、例えばケトン（−Ｃ（＝Ｏ）Ｒａａ）、カルボン酸（−ＣＯ２Ｈ）、アルデヒド（−ＣＨＯ）、エステル（−ＣＯ２Ｒａａ、−Ｃ（＝Ｏ）ＳＲａａ、−Ｃ（＝Ｓ）ＳＲａａ）、アミド（−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲｂｂＳＯ２Ｒａａ、−Ｃ（＝Ｓ）Ｎ（Ｒｂｂ）２）及びイミン（−Ｃ（＝ＮＲｂｂ）Ｒａａ、−Ｃ（＝ＮＲｂｂ）ＯＲａａ）、−Ｃ（＝ＮＲｂｂ）Ｎ（Ｒｂｂ）２）（式中、Ｒａａ及びＲｂｂは本明細書に規定される通りである）から選択される基を指す。
本明細書で使用される場合、「シリル」という用語は基−Ｓｉ（Ｒａａ）３（式中、Ｒａａは本明細書に規定される通りである）を指す。
本明細書で使用される場合、「オキソ」という用語は基＝Ｏを指し、「チオキソ」という用語は基＝Ｓを指す。
窒素原子は原子価が許す限り置換されていても又は非置換であってもよく、第一級、第二級、第三級及び第四級窒素原子を含む。例示的な窒素原子置換基としては、水素、−ＯＨ、−ＯＲａａ、−Ｎ（Ｒｃｃ）２、−ＣＮ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒａａ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｃｃ）２、−ＣＯ２Ｒａａ、−ＳＯ２Ｒａａ、−Ｃ（＝ＮＲｂｂ）Ｒａａ、−Ｃ（＝ＮＲｃｃ）ＯＲａａ、−Ｃ（＝ＮＲｃｃ）Ｎ（Ｒｃｃ）２、−ＳＯ２Ｎ（Ｒｃｃ）２、−ＳＯ２Ｒｃｃ、−ＳＯ２ＯＲｃｃ、−ＳＯＲａａ、−Ｃ（＝Ｓ）Ｎ（Ｒｃｃ）２、−Ｃ（＝Ｏ）ＳＲｃｃ、−Ｃ（＝Ｓ）ＳＲｃｃ、−Ｐ（＝Ｏ）（Ｒａａ）２、Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ１〜１０ペルハロアルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル、ヘテロＣ１〜１０アルキル、ヘテロＣ２〜１０アルケニル、ヘテロＣ２〜１０アルキニル、Ｃ３〜１０カルボシクリル、３員〜１４員ヘテロシクリル、Ｃ６〜１４アリール及び５員〜１４員ヘテロアリールが挙げられるが、これらに限定されず、又はＮ原子に付着した２つのＲｃｃ基が接合して３員〜１４員ヘテロシクリル若しくは５員〜１４員ヘテロアリール環を形成し、ここで各々のアルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、カルボシクリル、ヘテロシクリル、アリール及びヘテロアリールは独立して０個、１個、２個、３個、４個又は５個のＲｄｄ基で置換され、Ｒａａ、Ｒｂｂ、Ｒｃｃ及びＲｄｄは上に規定される通りである。
或る特定の実施形態では、窒素原子上に存在する置換基は窒素保護基（本明細書で「アミノ保護基」とも称される）である。窒素保護基としては、−ＯＨ、−ＯＲａａ、−Ｎ（Ｒｃｃ）２、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒａａ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｃｃ）２、−ＣＯ２Ｒａａ、−ＳＯ２Ｒａａ、−Ｃ（＝ＮＲｃｃ）Ｒａａ、−Ｃ（＝ＮＲｃｃ）ＯＲａａ、−Ｃ（＝ＮＲｃｃ）Ｎ（Ｒｃｃ）２、−ＳＯ２Ｎ（Ｒｃｃ）２、−ＳＯ２Ｒｃｃ、−ＳＯ２ＯＲｃｃ、−ＳＯＲａａ、−Ｃ（＝Ｓ）Ｎ（Ｒｃｃ）２、−Ｃ（＝Ｏ）ＳＲｃｃ、−Ｃ（＝Ｓ）ＳＲｃｃ、Ｃ１〜１０アルキル（例えばアラルキル、ヘテロアラルキル）、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル、ヘテロＣ１〜１０アルキル、ヘテロＣ２〜１０アルケニル、ヘテロＣ２〜１０アルキニル、Ｃ３〜１０カルボシクリル、３員〜１４員ヘテロシクリル、Ｃ６〜１４アリール及び５員〜１４員ヘテロアリール基（ここで、各々のアルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、カルボシクリル、ヘテロシクリル、アラルキル、アリール及びヘテロアリールは独立して０個、１個、２個、３個、４個又は５個のＲｄｄ基で置換され、Ｒａａ、Ｒｂｂ、Ｒｃｃ及びＲｄｄは本明細書に規定される通りである）が挙げられるが、これらに限定されない。窒素保護基は当該技術分野で既知であり、Protecting Groups in Organic Synthesis, T. W. Greene and P. G. M. Wuts, 3rd edition, John Wiley & Sons, 1999（引用することにより本明細書の一部をなす）に詳細に記載されているものを含む。
例えば、アミド基（例えば−Ｃ（＝Ｏ）Ｒａａ）等の窒素保護基としては、ホルムアミド、アセトアミド、クロロアセトアミド、トリクロロアセトアミド、トリフルオロアセトアミド、フェニルアセトアミド、３−フェニルプロパンアミド、ピコリンアミド、３−ピリジルカルボキサミド、Ｎ−ベンゾイルフェニルアラニル誘導体、ベンズアミド、ｐ−フェニルベンズアミド、ｏ−ニトロフェニルアセトアミド、ｏ−ニトロフェノキシアセトアミド、アセトアセトアミド、（Ｎ’−ジチオベンジルオキシアシルアミノ）アセトアミド、３−（ｐ−ヒドロキシフェニル）プロパンアミド、３−（ｏ−ニトロフェニル）プロパンアミド、２−メチル−２−（ｏ−ニトロフェノキシ）プロパンアミド、２−メチル−２−（ｏ−フェニルアゾフェノキシ）プロパンアミド、４−クロロブタンアミド、３−メチル−３−ニトロブタンアミド、ｏ−ニトロシンナミド、Ｎ−アセチルメチオニン誘導体、ｏ−ニトロベンズアミド及びｏ−（ベンゾイルオキシメチル）ベンズアミドが挙げられるが、これらに限定されない。
カルバメート基（例えば−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲａａ）等の窒素保護基としては、メチルカルバメート、エチルカルバメート、９−フルオレニルメチルカルバメート（Ｆｍｏｃ）、９−（２−スルホ）フルオレニルメチルカルバメート、９−（２，７−ジブロモ）フルオレニルメチルカルバメート、２，７−ジ−ｔ−ブチル−［９−（１０，１０−ジオキソ−１０，１０，１０，１０−テトラヒドロチオキサンチル）］メチルカルバメート（ＤＢＤ−Ｔｍｏｃ）、４−メトキシフェナシルカルバメート（Ｐｈｅｎｏｃ）、２，２，２−トリクロロエチルカルバメート（Ｔｒｏｃ）、２−トリメチルシリルエチルカルバメート（Ｔｅｏｃ）、２−フェニルエチルカルバメート（ｈＺ）、１−（１−アダマンチル）−１−メチルエチルカルバメート（Ａｄｐｏｃ）、１，１−ジメチル−２−ハロエチルカルバメート、１，１−ジメチル−２，２−ジブロモエチルカルバメート（ＤＢ−ｔ−ＢＯＣ）、１，１−ジメチル−２，２，２−トリクロロエチルカルバメート（ＴＣＢＯＣ）、１−メチル−１−（４−ビフェニリル）エチルカルバメート（Ｂｐｏｃ）、１−（３，５−ジ−ｔ−ブチルフェニル）−１−メチルエチルカルバメート（ｔ−Ｂｕｍｅｏｃ）、２−（２’−及び４’−ピリジル）エチルカルバメート（Ｐｙｏｃ）、２−（Ｎ，Ｎ−ジシクロヘキシルカルボキサミド）エチルカルバメート、ｔ−ブチルカルバメート（ＢＯＣ）、１−アダマンチルカルバメート（Ａｄｏｃ）、ビニルカルバメート（Ｖｏｃ）、アリルカルバメート（Ａｌｌｏｃ）、１−イソプロピルアリルカルバメート（Ｉｐａｏｃ）、シンナミルカルバメート（Ｃｏｃ）、４−ニトロシンナミルカルバメート（Ｎｏｃ）、８−キノリルカルバメート、Ｎ−ヒドロキシピペリジニルカルバメート、アルキルジチオカルバメート、ベンジルカルバメート（Ｃｂｚ）、ｐ−メトキシベンジルカルバメート（Ｍｏｚ）、ｐ−ニトロベンジルカルバメート、ｐ−ブロモベンジルカルバメート、ｐ−クロロベンジルカルバメート、２，４−ジクロロベンジルカルバメート、４−メチルスルフィニルベンジルカルバメート（Ｍｓｚ）、９−アントリルメチルカルバメート、ジフェニルメチルカルバメート、２−メチルチオエチルカルバメート、２−メチルスルホニルエチルカルバメート、２−（ｐ−トルエンスルホニル）エチルカルバメート、［２−（１，３−ジチアニル）］メチルカルバメート（Ｄｍｏｃ）、４−メチルチオフェニルカルバメート（Ｍｔｐｃ）、２，４−ジメチルチオフェニルカルバメート（Ｂｍｐｃ）、２−ホスホニオエチルカルバメート（Ｐｅｏｃ）、２−トリフェニルホスホニオイソプロピルカルバメート（Ｐｐｏｃ）、１，１−ジメチル−２−シアノエチルカルバメート、ｍ−クロロ−ｐ−アシルオキシベンジルカルバメート、ｐ−（ジヒドロキシボリル（boryl））ベンジルカルバメート、５−ベンズイソオキサゾリルメチルカルバメート、２−（トリフルオロメチル）−６−クロモニルメチルカルバメート（Ｔｃｒｏｃ）、ｍ−ニトロフェニルカルバメート、３，５−ジメトキシベンジルカルバメート、ｏ−ニトロベンジルカルバメート、３，４−ジメトキシ−６−ニトロベンジルカルバメート、フェニル（ｏ−ニトロフェニル）メチルカルバメート、ｔ−アミルカルバメート、Ｓ−ベンジルチオカルバメート、ｐ−シアノベンジルカルバメート、シクロブチルカルバメート、シクロヘキシルカルバメート、シクロペンチルカルバメート、シクロプロピルメチルカルバメート、ｐ−デシルオキシベンジルカルバメート、２，２−ジメトキシアシルビニルカルバメート、ｏ−（Ｎ，Ｎ−ジメチルカルボキサミド）ベンジルカルバメート、１，１−ジメチル−３−（Ｎ，Ｎ−ジメチルカルボキサミド）プロピルカルバメート、１，１−ジメチルプロピニルカルバメート、ジ（２−ピリジル）メチルカルバメート、２−フラニルメチルカルバメート、２−ヨードエチルカルバメート、イソボルニルカルバメート、イソブチルカルバメート、イソニコチニルカルバメート、ｐ−（ｐ’−メトキシフェニルアゾ）ベンジルカルバメート、１−メチルシクロブチルカルバメート、１−メチルシクロヘキシルカルバメート、１−メチル−１−シクロプロピルメチルカルバメート、１−メチル−１−（３，５−ジメトキシフェニル）エチルカルバメート、１−メチル−１−（ｐ−フェニルアゾフェニル）エチルカルバメート、１−メチル−１−フェニルエチルカルバメート、１−メチル−１−（４−ピリジル）エチルカルバメート、フェニルカルバメート、ｐ−（フェニルアゾ）ベンジルカルバメート、２，４，６−トリ−ｔ−ブチルフェニルカルバメート、４−（トリメチルアンモニウム）ベンジルカルバメート及び２，４，６−トリメチルベンジルカルバメートが挙げられるが、これらに限定されない。
スルホンアミド基（例えば−Ｓ（＝Ｏ）２Ｒａａ）等の窒素保護基としては、ｐ−トルエンスルホンアミド（Ｔｓ）、ベンゼンスルホンアミド、２，３，６，−トリメチル−４−メトキシベンゼンスルホンアミド（Ｍｔｒ）、２，４，６−トリメトキシベンゼンスルホンアミド（Ｍｔｂ）、２，６−ジメチル−４−メトキシベンゼンスルホンアミド（Ｐｍｅ）、２，３，５，６−テトラメチル−４−メトキシベンゼンスルホンアミド（Ｍｔｅ）、４−メトキシベンゼンスルホンアミド（Ｍｂｓ）、２，４，６−トリメチルベンゼンスルホンアミド（Ｍｔｓ）、２，６−ジメトキシ−４−メチルベンゼンスルホンアミド（ｉＭｄｓ）、２，２，５，７，８−ペンタメチルクロマン−６−スルホンアミド（Ｐｍｃ）、メタンスルホンアミド（Ｍｓ）、β−トリメチルシリルエタンスルホンアミド（ＳＥＳ）、９−アントラセンスルホンアミド、４−（４’，８’−ジメトキシナフチルメチル）ベンゼンスルホンアミド（ＤＮＭＢＳ）、ベンジルスルホンアミド、トリフルオロメチルスルホンアミド及びフェナシルスルホンアミドが挙げられるが、これらに限定されない。
他の窒素保護基としては、フェノチアジニル−（１０）−アシル誘導体、Ｎ’−ｐ−トルエンスルホニルアミノアシル誘導体、Ｎ’−フェニルアミノチオアシル誘導体、Ｎ−ベンゾイルフェニルアラニル誘導体、Ｎ−アセチルメチオニン誘導体、４，５−ジフェニル−３−オキサゾリン−２−オン、Ｎ−フタルイミド、Ｎ−ジチアスクシンイミド（Ｄｔｓ）、Ｎ−２，３−ジフェニルマレイミド、Ｎ−２，５−ジメチルピロール、Ｎ−１，１，４，４−テトラメチルジシリルアザシクロペンタン付加体（ＳＴＡＢＡＳＥ）、５置換１，３−ジメチル−１，３，５−トリアザシクロヘキサン−２−オン、５置換１，３−ジベンジル−１，３，５−トリアザシクロヘキサン−２−オン、１置換３，５−ジニトロ−４−ピリドン、Ｎ−メチルアミン、Ｎ−アリルアミン、Ｎ−［２−（トリメチルシリル）エトキシ］メチルアミン（ＳＥＭ）、Ｎ−３−アセトキシプロピルアミン、Ｎ−（１−イソプロピル−４−ニトロ−２−オキソ−３−ピロリン−３−イル）アミン、第四級アンモニウム塩、Ｎ−ベンジルアミン、Ｎ−ジ（４−メトキシフェニル）メチルアミン、Ｎ−５−ジベンゾスベリルアミン、Ｎ−トリフェニルメチルアミン（Ｔｒ）、Ｎ−［（４−メトキシフェニル）ジフェニルメチル］アミン（ＭＭＴｒ）、Ｎ−９−フェニルフルオレニルアミン（ＰｈＦ）、Ｎ−２，７−ジクロロ−９−フルオレニルメチレンアミン、Ｎ−フェロセニルメチルアミノ（Ｆｃｍ）、Ｎ−２−ピコリルアミノＮ’−オキシド、Ｎ−１，１−ジメチルチオメチレンアミン、Ｎ−ベンジリデンアミン、Ｎ−ｐ−メトキシベンジリデンアミン、Ｎ−ジフェニルメチレンアミン、Ｎ−［（２−ピリジル）メシチル］メチレンアミン、Ｎ−（Ｎ’，Ｎ’−ジメチルアミノメチレン）アミン、Ｎ，Ｎ’−イソプロピリデンジアミン、Ｎ−ｐ−ニトロベンジリデンアミン、Ｎ−サリチリデンアミン、Ｎ−５−クロロサリチリデンアミン、Ｎ−（５−クロロ−２−ヒドロキシフェニル）フェニルメチレンアミン、Ｎ−シクロヘキシリデンアミン、Ｎ−（５，５−ジメチル−３−オキソ−１−シクロヘキセニル）アミン、Ｎ−ブラン誘導体、Ｎ−ジフェニルボリン酸誘導体、Ｎ−［フェニル（ペンタアシルクロム−又はタングステン）アシル］アミン、Ｎ−銅キレート、Ｎ−亜鉛キレート、Ｎ−ニトロアミン、Ｎ−ニトロソアミン、アミンＮ−オキシド、ジフェニルホスフィンアミド（Ｄｐｐ）、ジメチルチオホスフィンアミド（Ｍｐｔ）、ジフェニルチオホスフィンアミド（Ｐｐｔ）、ジアルキルホスホルアミデート、ジベンジルホスホルアミデート、ジフェニルホスホルアミデート、ベンゼンスルフェンアミド、ｏ−ニトロベンゼンスルフェンアミド（Ｎｐｓ）、２，４−ジニトロベンゼンスルフェンアミド、ペンタクロロベンゼンスルフェンアミド、２−ニトロ−４−メトキシベンゼンスルフェンアミド、トリフェニルメチルスルフェンアミド及び３−ニトロピリジンスルフェンアミド（Ｎｐｙｓ）が挙げられるが、これらに限定されない。
或る特定の実施形態では、酸素原子上に存在する置換基は酸素保護基（本明細書で「ヒドロキシル保護基」とも称される）である。酸素保護基としては、−Ｒａａ、−Ｎ（Ｒｂｂ）２、−Ｃ（＝Ｏ）ＳＲａａ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒａａ、−ＣＯ２Ｒａａ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、−Ｃ（＝ＮＲｂｂ）Ｒａａ、−Ｃ（＝ＮＲｂｂ）ＯＲａａ、−Ｃ（＝ＮＲｂｂ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、−Ｓ（＝Ｏ）Ｒａａ、−ＳＯ２Ｒａａ、−Ｓｉ（Ｒａａ）３、−Ｐ（Ｒｃｃ）２、−Ｐ（＝Ｏ）（Ｒａａ）２及び−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲｃｃ）２（ここでＲａａ、Ｒｂｂ及びＲｃｃは本明細書に規定される通りである）が挙げられるが、これらに限定されない。酸素保護基は当該技術分野で既知であり、Protecting Groups in Organic Synthesis, T. W. Greene and P. G. M. Wuts, 3rd edition, John Wiley & Sons, 1999（引用することにより本明細書の一部をなす）に詳細に記載されているものを含む。
酸素保護基の例としては、メチル、メトキシルメチル（ＭＯＭ）、メチルチオメチル（ＭＴＭ）、ｔ−ブチルチオメチル、（フェニルジメチルシリル）メトキシメチル（ＳＭＯＭ）、ベンジルオキシメチル（ＢＯＭ）、ｐ−メトキシベンジルオキシメチル（ＰＭＢＭ）、（４−メトキシフェノキシ）メチル（ｐ−ＡＯＭ）、グアイアコールメチル（ＧＵＭ）、ｔ−ブトキシメチル、４−ペンテニルオキシメチル（ＰＯＭ）、シロキシメチル、２−メトキシエトキシメチル（ＭＥＭ）、２，２，２−トリクロロエトキシメチル、ビス（２−クロロエトキシ）メチル、２−（トリメチルシリル）エトキシメチル（ＳＥＭＯＲ）、テトラヒドロピラニル（ＴＨＰ）、３−ブロモテトラヒドロピラニル、テトラヒドロチオピラニル、１−メトキシシクロヘキシル、４−メトキシテトラヒドロピラニル（ＭＴＨＰ）、４−メトキシテトラヒドロチオピラニル、４−メトキシテトラヒドロチオピラニル Ｓ，Ｓ−ジオキシド、１−［（２−クロロ−４−メチル）フェニル］−４−メトキシピペリジン−４−イル（ＣＴＭＰ）、１，４−ジオキサン−２−イル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロチオフラニル、２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ−オクタヒドロ−７，８，８−トリメチル−４，７−メタノベンゾフラン−２−イル、１−エトキシエチル、１−（２−クロロエトキシ）エチル、１−メチル−１−メトキシエチル、１−メチル−１−ベンジルオキシエチル、１−メチル−１−ベンジルオキシ−２−フルオロエチル、２，２，２−トリクロロエチル、２−トリメチルシリルエチル、２−（フェニルセレニル）エチル、ｔ−ブチル、アリル、ｐ−クロロフェニル、ｐ−メトキシフェニル、２，４−ジニトロフェニル、ベンジル（Ｂｎ）、ｐ−メトキシベンジル、３，４−ジメトキシベンジル、ｏ−ニトロベンジル、ｐ−ニトロベンジル、ｐ−ハロベンジル、２，６−ジクロロベンジル、ｐ−シアノベンジル、ｐ−フェニルベンジル、２−ピコリル、４−ピコリル、３−メチル−２−ピコリルＮ−オキシド、ジフェニルメチル、ｐ，ｐ’−ジニトロベンズヒドリル、５−ジベンゾスベリル、トリフェニルメチル、α−ナフチルジフェニルメチル、ｐ−メトキシフェニルジフェニルメチル、ジ（ｐ−メトキシフェニル）フェニルメチル、トリ（ｐ−メトキシフェニル）メチル、４−（４’−ブロモフェナシルオキシフェニル）ジフェニルメチル、４，４’，４’’−トリス（４，５−ジクロロフタルイミドフェニル）メチル、４，４’，４’’−トリス（レブリノイルオキシフェニル）メチル、４，４’，４’’−トリス（ベンゾイルオキシフェニル）メチル、３−（イミダゾール−１−イル）ビス（４’，４’’−ジメトキシフェニル）メチル、１，１−ビス（４−メトキシフェニル）−１’−ピレニルメチル、９−アントリル、９−（９−フェニル）キサンテニル、９−（９−フェニル−１０−オキソ）アントリル、１，３−ベンゾジチオラン−２−イル、ベンズイソチアゾリル Ｓ，Ｓ−ジオキシド、トリメチルシリル（ＴＭＳ）、トリエチルシリル（ＴＥＳ）、トリイソプロピルシリル（ＴＩＰＳ）、ジメチルイソプロピルシリル（ＩＰＤＭＳ）、ジエチルイソプロピルシリル（ＤＥＩＰＳ）、ジメチルテキシルシリル、ｔ−ブチルジメチルシリル（ＴＢＤＭＳ）、ｔ−ブチルジフェニルシリル（ＴＢＤＰＳ）、トリベンジルシリル、トリ−ｐ−キシリルシリル、トリフェニルシリル、ジフェニルメチルシリル（ＤＰＭＳ）、ｔ−ブチルメトキシフェニルシリル（ＴＢＭＰＳ）、ホルメート、ベンゾイルホルメート、アセテート、クロロアセテート、ジクロロアセテート、トリクロロアセテート、トリフルオロアセテート、メトキシアセテート、トリフェニルメトキシアセテート、フェノキシアセテート、ｐ−クロロフェノキシアセテート、３−フェニルプロピオネート、４−オキソペンタノエート（レブリネート）、４，４−（エチレンジチオ）ペンタノエート（レブリノイルジチオアセタール）、ピバロエート、アダマントエート、クロトネート、４−メトキシクロトネート、ベンゾエート、ｐ−フェニルベンゾエート、２，４，６−トリメチルベンゾエート（メシトエート）、メチルカーボネート、９−フルオレニルメチルカーボネート（Ｆｍｏｃ）、エチルカーボネート、２，２，２−トリクロロエチルカーボネート（Ｔｒｏｃ）、２−（トリメチルシリル）エチルカーボネート（ＴＭＳＥＣ）、２−（フェニルスルホニル）エチルカーボネート（Ｐｓｅｃ）、２−（トリフェニルホスホニオ）エチルカーボネート（Ｐｅｏｃ）、イソブチルカーボネート、ビニルカーボネート、アリルカーボネート、ｔ−ブチルカーボネート（ＢＯＣ）、ｐ−ニトロフェニルカーボネート、ベンジルカーボネート、ｐ−メトキシベンジルカーボネート、３，４−ジメトキシベンジルカーボネート、ｏ−ニトロベンジルカーボネート、ｐ−ニトロベンジルカーボネート、Ｓ−ベンジルチオカーボネート、４−エトキシ−１−ナフチルカーボネート、メチルジチオカーボネート、２−ヨードベンゾエート、４−アジドブチレート、４−ニトロ−４−メチルペンタノエート、ｏ−（ジブロモメチル）ベンゾエート、２−ホルミルベンゼンスルホネート、２−（メチルチオメトキシ）エチル、４−（メチルチオメトキシ）ブチレート、２−（メチルチオメトキシメチル）ベンゾエート、２，６−ジクロロ−４−メチルフェノキシアセテート、２，６−ジクロロ−４−（１，１，３，３−テトラメチルブチル）フェノキシアセテート、２，４−ビス（１，１−ジメチルプロピル）フェノキシアセテート、クロロジフェニルアセテート、イソブチレート、モノスクシノエート、（Ｅ）−２−メチル−２−ブテノエート、ｏ−（メトキシアシル）ベンゾエート、α−ナフトエート、ニトレート、アルキルＮ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルホスホロジアミデート、アルキルＮ−フェニルカルバメート、ボレート、ジメチルホスフィノチオイル、アルキル２，４−ジニトロフェニルスルフェネート、スルフェート、メタンスルホネート（メシレート）、ベンジルスルホネート、及びトシレート（Ｔｓ）が挙げられるが、これらに限定されない。
或る特定の実施形態では、硫黄原子上に存在する置換基は硫黄保護基（「チオール保護基」とも称される）である。硫黄保護基としては、−Ｒａａ、−Ｎ（Ｒｂｂ）２、−Ｃ（＝Ｏ）ＳＲａａ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒａａ、−ＣＯ２Ｒａａ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、−Ｃ（＝ＮＲｂｂ）Ｒａａ、−Ｃ（＝ＮＲｂｂ）ＯＲａａ、−Ｃ（＝ＮＲｂｂ）Ｎ（Ｒｂｂ）２、−Ｓ（＝Ｏ）Ｒａａ、−ＳＯ２Ｒａａ、−Ｓｉ（Ｒａａ）３、−Ｐ（Ｒｃｃ）２、−Ｐ（＝Ｏ）（Ｒａａ）２及び−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲｃｃ）２（ここで、Ｒａａ、Ｒｂｂ及びＲｃｃは本明細書で規定される通りである）が挙げられるが、これらに限定されない。硫黄保護基は当該技術分野で既知であり、Protecting Groups in Organic Synthesis, T. W. Greene and P. G. M. Wuts, 3rd edition, John Wiley & Sons, 1999（引用することにより本明細書の一部をなす）に詳細に記載されているものを含む。
これらの及び他の例示的な置換基は、発明を実施するための形態、実施例及び特許請求の範囲により詳細に記載される。本発明は、上記の例示的な置換基のリストによって限定されることを何ら意図するものではない。
Ｃ． コルチスタチン類縁体の例示的な合成
初めに、式（Ｉ）の化合物を出発物質として用いた合成が企図される。エストロン（Ｒ３が−ＣＨ３である）又はノルエストロン（Ｒ３がＨである）（Ｉ）の酸化（例えばＤＤＱ、ＭｎＯ２）により式（ＩＩＩ）の化合物が得られる。例えば、Stephan et al., Steroid, 1995, 60, 809-811を参照されたい。式（ＩＩＩ）の化合物をアセタール又はケタール（例えば、ＨＸＡＲＡ又はＨＸＡＲＡ−ＲＡＸＡＨ（式中、２つのＲＡ基は接合し、ＲＢ１及びＲＢ２は各々独立して−ＸＡＲＡである）との反応による）として保護し、（ＩＶ）−Ａ及び（ＩＶ）−Ｂの混合物（例えば１：１混合物）を得る。保護について企図される例示的な条件には、ＰＴＳＡ及びエチレングリコール、ＰＴＳＡ及びＣＨ（ＯＭｅ）３、ＰＴＳＡ及びＣＨ（ＯＥｔ）３、並びにＰＴＳＡ及び２，２−ジメチル−１，３−プロパンジオール）が含まれる。次いで、保護された化合物をアルキル化剤（例えば、Ｍｅ２ＳＯ４及びＫ２ＣＯ３、ＥｔＮ（ｉ−Ｐｒ）２及びＴＭＳ−ジアゾメタン）を用いてアルキル化（例えばメチル化）し、（Ｖ）−Ａ及び（Ｖ）−Ｂ（式中、Ｅは任意に置換されたアルキルである）を得る。スキーム５を参照されたい。
スキーム６に、例えばＲ３が−ＣＨ３である式（ＩＶ−Ｂ）の化合物を得るための他の例示的な経路を提示する。例えば、式（Ｖ）−Ｂの化合物は、スキーム６（Ａ）に記載のように４つの工程で６−メトキシ−１−テトラロンからラセミ混合物として達成される。グリニャール反応については、例えばSaraber et al., Tetrahedron, 2006, 62, 1726-1742を参照されたい。水素化については、例えばSugahara et al., Tetrahedron Lett, 1996, 37, 7403-7406を参照されたい。スキーム６（Ｂ）に、高光学純度の（enantiopure）Torgovの中間体をキラル分割によって得る方法を示す。例えば、Bucourt et al., J. Bull. Soc. Chim. Fr. (1967) 561-563を参照されたい。スキーム６（Ｃ）には、酵素還元によって補助される高光学純度のTorgovの中間体を調製する別の方法を提示する。例えば、Gibian et al., Tetrahedron Lett. (1966) 7:2321-2330を参照されたい。
式（ＩＶ−Ａ）及び（ＩＶ−Ｂ）の化合物を用いて、エポキシ化／エポキシド開環／エポキシ化反応をワンポットで行い（例えばＭＭＰＰ、ｍＣＰＢＡ）、式（ＩＸ−Ａ）及び（ＩＸ−Ｂ）の化合物を得る。これらは主要化合物である（ＩＸ−Ａ）と平衡下にある。スキーム７Ａ及び７Ｂを参照されたい。
式（ＩＸ−Ａ）及び（ＩＸ−Ｂ）の化合物を、バーチ還元条件（例えば、Ｌｉ／ＮＨ３及びｔ−ＢｕＯＨ、Ｎａ／ＮＨ３及びｔ−ＢｕＯＨ）に曝露し、脱芳香化化合物（Ｘ）を得る。次いで、Ａ環のＣ３をアセタール又はケタール（例えば、ＨＸＡＲＡ又はＨＸＡＲＡ−ＲＡＸＡＨ（式中、２つのＲＡ基は接合し、ＲＢ１及びＲＢ２は各々独立して−ＸＡＲＡである）との反応による）として保護し、化合物（ＸＩ）を得る。例示的な保護条件には、ＰＴＳＡ及びエチレングリコール、ＰＴＳＡ及びＣＨ（ＯＭｅ）３、ＰＴＳＡ及びＣＨ（ＯＥｔ）３、並びにＰＴＳＡ及び２，２−ジメチル−１，３−プロパンジオールが含まれる。スキーム８を参照されたい。
化合物（ＸＩ）を、エーテル化（例えばＮＢＳ、ＮＩＳ、例えばＸがＢｒ又はＩである場合）によって式（ＸＩＩＩ）の化合物へと変換する。次いで、この化合物を酸化し（例えば、ＳＯ３・Ｐｙ／ＤＭＳＯ及びトリエチルアミン、ＩＢＸ、（ＣＯＣｌ）２／ＤＭＳＯ及びトリエチルアミン）、式（ＸＩＶ）の化合物を得る。次いで、この化合物を塩基（例えばＤＢＵ、トリエチルアミン）で処理し、式（ＸＶ）の化合物を得る。次いで、この化合物を還元し（例えば、ＮａＢＨ４及びＣｅＣｌ３、Ｌ−ｓｅｌｅｃｔｒｉｄｅ）、式（ＸＶＩ）の化合物を得る。スキーム９を参照されたい。
次いで、式（ＸＶＩ）の化合物をシクロプロパン化試薬（例えば、ＺｎＥｔ２及びＣｌＣＨ２Ｉ、ＺｎＥｔ２及びＣＨ２Ｉ２、Ｚｎ−Ｃｕ及びＣＨ２Ｉ２）で処理し、式（ＸＶＩＩ）の化合物を得る。ＬＧ１がスルホニルであるシクロプロパン化生成物のアルコールを活性化し（例えば、アルコールをＴｆ２Ｏ、ＭｓＣｌで処理して、ＬＧ１がＴｆ又はＭｓである活性化アルコールを得る）、塩基（例えば、２，６−ジ−ｔ−ブチル−４−メチルピリジン、２，６−ルチジン、トリエチルアミン）で処理して、式（ＸＸ）の化合物を得る。例えば、Magnus et al., Org. Lett. 2009, 11, 3938-3941を参照されたい。スキーム１０を参照されたい。
次いで、式（ＸＸ）の化合物のＤ環上の保護基を酸性条件下（例えば、ＰＴＳＡ及びアセトン／水、ＴＦＡ／水）で脱保護し、式（ＸＸＩ）のケトン中間体を得る。この生成物をＲＢ１−Ｘ（例えばＲＢ１−Ｂｒ、ＲＢ１−Ｉ）から調製される式ＲＢ１−Ｍの化合物（例えばＲＢ１−ＣｅＣｌ２、ＲＢ１−Ｍｇ）で処理し、ＲＢ１が本明細書に規定の非水素基である式（ＸＸＩＩ）の化合物を得る。式（ＸＸＩＩ）の化合物を活性化し（例えば、ＴＦＡＡ及びピリジン、ＰｈＮＣＳ及びＫＨ）、式（ＸＸＩＩＩ）の化合物を得る。式（ＸＸＩＩＩ）の化合物（例えば、ＡＩＢＮ及びＢｕ３ＳｎＨ）の還元により式（ＸＸＩＶ）の化合物を得る。工程Ｓ１４、Ｓ１５及びＳ１６については、例えばFlyer et al., Nature. Chem. 2010, 2, 886-892.及びYamashita et al., J. Org. Chem. 2011, 76, 2408-2425を参照されたい。スキーム１１Ａを参照されたい。
化合物（ＸＸＩＶ）は、（ＸＸ）からＬＧ２がスルホニルである活性化アルコールへの変換（例えば、アルコールをＴｆ２Ｏ、ＭｓＣｌで処理し、ＬＧ２がＴｆ又はＭｓである活性化アルコールを得る；トリフレート化（triflation）、例えばＫＨＭＤＳ及びＰｈＮＴｆ２、ＬｉＨＭＤＳ及びＰｈＮＴｆ２、Ｔｆ２Ｏ及び２，６−ジ−ｔ−ブチル−４−メチルピリジンによる）、続いて式（ＸＸＶＩ）の化合物を得るためのＲＢ１−Ｍ（式中、Ｍは置換ホウ素（例えば−Ｂ（Ｒ’）２、ここで各々のＲ’は−ＯＲ’’又はアルキルであり、アルキル及びＲ’’はアルキルであっても、又は接合して環を形成してもよい）によるパラジウム触媒クロスカップリングによって調製することもできる。例示的なパラジウム触媒クロスカップリング条件としては、ＲＢ１−Ｂ（ｐｉｎ）、ＲＢ１−（９−ＢＢＮ−Ｈ）、ＲＢ１−ＯＢＢＤ若しくはＲＢ１−Ｂ（ｃａｔ）及びＰｄ（ＰＰｈ３）４及びＮａ２ＣＯ３、又はＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２及びＫ３ＰＯ４）（ｐｉｎ＝ピナコール；ｃａｔ＝カテコール；ＯＢＢＤ＝９−オキサ−１０−ボラビシクロ［３．３．２］デカン；９−ＢＢＮ−Ｈ＝９−ボラビシクロ［３．３．１］ノナン）が挙げられるが、これらに限定されない。例えば、Nicolaou et al., J. Am. Chem. Soc. 2009, 131, 10587-10597を参照されたい。Ｃ１６−Ｃ１７二重結合の水素化（例えば、Ｐｄ／Ｃ及びＨ２、ラネーＮｉ及びＨ２）により式（ＸＸＩＶ）の化合物が得られる。スキーム１１Ｂを参照されたい。
次いで、式（ＸＸＶＩ）又は（ＸＸＩＶ）の化合物のいずれか１つを脱保護することができ（例えば、ＰＴＳＡ及びアセトン／水、ＴＦＡ／水、ＨＣｌ）、得られるケトンをエノレートとして捕捉し、その後の二重結合の酸化若しくはアミノ化、又は二重結合と求電子炭素Ｃ（ＲＡ）３−ＬＧ（式中、ＬＧは脱離基である）との反応を行い、Ｒ５が−ＯＲＡ、−ＯＣ（＝Ｏ）ＲＡ、−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＲＡ、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２、−ＯＳ（＝Ｏ）２ＲＡ、−Ｎ３、−Ｎ（ＲＡ）２、−ＮＲＡＣ（＝Ｏ）ＲＡ、−ＮＲＡＣ（＝Ｏ）ＯＲＡ、−ＮＲＡＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２、−ＮＲＡＳ（＝Ｏ）２ＲＡ又は−Ｃ（ＲＡ）３である置換ケトン生成物を得ることができる。スキーム１２Ａ及び１２Ｂを参照されたい。エノレート捕捉について企図される例示的な条件としては、塩基（例えば、リチウムジイソプロピルアミド（ＬＤＡ））と捕捉試薬Ｐ１−ＬＧ（式中、Ｐ１はシリルであり、ＬＧは脱離基（例えば、トリメチルシリルクロリド等）である）との組合せが挙げられる。
例えば−ＯＲＡ、−ＯＣ（＝Ｏ）ＲＡ、−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＲＡ、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２又は−ＯＳ（＝Ｏ）２ＲＡ基をＲ５位に導入するための例示的な酸化条件としては、捕捉されたエノレートをメタクロロ過安息香酸（ＭＣＰＢＡ）、ＭｏＯＯＰｈ又はＤＭＳＯ等の酸化剤で処理し、Ｒ５が−ＯＨである置換ケトンを得た後、例えばＲ５が−ＯＨである化合物を式ＲＡ−ＬＧ、ＬＧ−Ｃ（＝Ｏ）ＲＡ、ＬＧ−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＡ、ＬＧ−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２又はＬＧ−Ｓ（＝Ｏ）２ＲＡ（式中、ＬＧは脱離基である）の化合物で処理することにより任意の保護を行い、Ｒ５が−ＯＲＡ（式中、ＲＡは非水素基である）、−ＯＣ（＝Ｏ）ＲＡ、−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＲＡ、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２又は−ＯＳ（＝Ｏ）２ＲＡである化合物を得ることが挙げられる。
例えば−Ｎ３、−Ｎ（ＲＡ）２、−ＮＲＡＣ（＝Ｏ）ＲＡ、−ＮＲＡＣ（＝Ｏ）ＯＲＡ、−ＮＲＡＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２又は−ＮＲＡＳ（＝Ｏ）２ＲＡ基をＲ５位に導入するための例示的なアミノ化条件としては、捕捉されたエノレートを化合物Ｎ３−ＬＧ（式中、ＬＧは脱離基（例えば、トリシルアジド等）である）で処理して、Ｒ５が−Ｎ３である置換ケトンを得ることが挙げられる。Ｒ５が−Ｎ３である置換ケトンを還元剤（例えば、ＰＰｈ３等）で処理して、Ｒ５が−ＮＨ２である化合物を得た後、例えばＲ５が−ＮＨ２である化合物を式ＲＡ−ＬＧ、ＬＧ−Ｃ（＝Ｏ）ＲＡ、ＬＧ−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＡ、ＬＧ−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２又はＬＧ−Ｓ（＝Ｏ）２ＲＡ（式中、ＬＧは脱離基である）の化合物で処理することにより任意の保護を行い、Ｒ５が−Ｎ（ＲＡ）２（式中、ＲＡの少なくとも１つが非水素基である）、−ＮＲＡＣ（＝Ｏ）ＲＡ、−ＮＲＡＣ（＝Ｏ）ＯＲＡ、−ＮＲＡＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２又は−ＮＲＡＳ（＝Ｏ）２ＲＡである化合物を得ることができる。
次いで、スキーム１２（Ａ）及び１２（Ｂ）に提示されるケトン化合物を式Ｈ２ＮＲ１のアミンで処理し、工程Ｓ２２に示されるように縮合生成物であるイミンを形成することができる。ケトン化合物を式ＨＮＲ１Ｒ２のアミン又はその塩により還元的アミノ化条件下で処理し、工程Ｓ２３に示されるようにアミノ化生成物を得ることもできる。例示的な還元的アミノ化条件としては、酸性ｐＨ（例えばｐＨ３）下でのＮａＣＮＢＨ３、ＮａＣＮ（９ＢＢＮ）Ｈ又はＮａＢＨ（ＯＡｃ）３が挙げられるが、これらに限定されない。アミノ化生成物は、工程Ｓ２５に示されるように対応するＮ−オキシドへと更に酸化することができる。例示的な酸化条件としては、Ｈ２Ｏ２、ｍＣＰＢＡ又はＤＭＤＯが挙げられるが、これらに限定されない。スキーム１３Ａ〜１３Ｄを参照されたい。
ケト化合物は、ＣＯ及びＨＮ（ＲＬ）ＲＢ３（例えば、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４及びトリエチルアミン、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２及びトリエチルアミン）を用いたパラジウム触媒カルボニル化アミノ化によって式（ＸＸＶ−ｉ）の化合物へと変換することもできる。式（ＸＸＶ−ｉ）、（ＸＸＶ−ｉｖ）及び（ＸＸＶ−ｖ）の化合物を得るための以下の工程の条件は先に記載したものと同じである。スキーム１４を参照されたい。
次いで、スキーム１４に提示されるケトン化合物を、先に記載の対応するイミン、アミン及びＮ−オキシドへと変換することができる。スキーム１５Ａ及び１５Ｂを参照されたい。
モノケトン化合物（ＸＸＩ）を、先に記載の条件下でＨＮＲＢ４ＲＢ５（例えば、１，２，３，４−テトラヒドロ−［２，７］ナフチリジン）を用いて還元的にアミノ化し、式（ＸＸＶＩＩ）の化合物を得ることができる。化合物（ＸＸＶＩＩ）は先に記載の対応するイミン、アミン及びＮ−オキシドへと変換することができる。スキーム１１６（Ａ）及び１６（Ｂ）を参照されたい。
ケトンを更に合成的に操作して、対象となる他の化合物を得ることができる。例えば、ケトンを還元剤の存在下で還元し（工程Ｓ２６に示されるように）、Ｃ−３ヒドロキシル化化合物を得ることができる。スキーム１７（Ａ）及び１７（Ｂ）を参照されたい。例示的な還元剤としては、Ｌ−ｓｅｌｅｃｔｒｉｄｅ、Ｋ−ｓｅｌｅｃｔｒｉｄｅ、水素化ジイソブチルアルミニウム（ＤＩＢＡＬＨ）及び水素化アルミニウムリチウム（ＬＡＨ）が挙げられる。さらに、様々な還元剤により、主要異性体として一方のＣ−３ヒドロキシル化化合物が他方に対して優先的に生成される。例えばＬ−ｓｅｌｅｃｔｒｉｄｅを使用すると、好ましくはβ異性体が主要異性体として生成するが、水素化アルミニウムリチウム（ＬＡＨ）を使用すると、好ましくはα異性体が主要異性体として生成する。
次いで、Ｃ−３ヒドロキシル化化合物を（例えば、光延反応条件下（例えば、ＨＯＣ（＝Ｏ）ＲＡ、アゾジカルボン酸ジエチル（ＤＥＡＤ）又はアゾジカルボン酸ジイソプロピル（ＤＩＡＤ）及びＰＰｈ３）での式−Ｃ（＝Ｏ）ＲＡ基による置換により、反応を開始する前又はｉｎ ｓｉｔｕで（反応中に）、基ＬＧ−Ｃ（＝Ｏ）ＲＡ（式中、ＬＧは脱離基である）との反応によって）活性化した後、式ＮＨＲ１Ｒ２のアミンで処理し、主要異性体としてＣ３立体化学が逆転した式（ＸＸＩＶ）の化合物を得ることができる（工程Ｓ２８に示される）。スキーム１７（Ａ）及び１７（Ｂ）を参照されたい。代替的に、式（ＸＸＸ１）のＣ−３ヒドロキシル化化合物を塩基及び式ＲＯ−ＬＧ（式中、ＬＧは脱離基である）の化合物で処理し、主要異性体としてＣ３−立体化学が保持された保護Ｃ３−ヒドロキシル化合物を得ることができる（工程Ｓ２７に示される）。
環Ａのケトンを更に合成的に操作して、本明細書に記載の化合物を得ることができる。式（ＸＸＩＶ−ｉ）のケトンを例とすると、ケトンを遊離オキシム（例えば、スキーム１８を参照されたい）、又はＲＯが非水素基である置換オキシム（例えば、スキーム１９を参照されたい）へと変換した後、ベックマン転位によって変換して、所望のラクタム生成物を得ることができる。例えば、遊離オキシムをヒドロキシルアミンＮＨ２ＯＨでの処理によりケトンから生成しても、好適な転位条件（例えば、酸性条件、例えばＨ２ＳＯ４、ＨＣｌ、ＡｃＯＨ）下でラクタム生成物を直接得てもよい。例えば、スキーム１８を参照されたい。
代替的には、ＲＯが非水素基である置換オキシムは、一工程プロセス（Ｓ２６）において、例えば置換ヒドロキシルアミンＮＨ２ＯＲＯ（式中、ＲＯは非水素基である）での処理によりケトンから生成しても、又は二工程プロセス（Ｓ２３）及び（Ｓ２７）、例えば初めにヒドロキシルアミンＮＨ２ＯＨでの処理、続いて式ＲＯ−ＬＧ（式中、ＲＯは非水素基であり、ＬＧは脱離基である）の化合物での処理により生成してもよい。例えば、スキーム１８を参照されたい。例示的な脱離基（ＬＧ）としては、ハロ（例えば、クロロ、ブロモ、ヨード）及び−ＯＳＯ２Ｒａａ（式中、Ｒａａは本明細書に規定される通りである）が挙げられる。基−ＯＳＯ２Ｒａａはトシル、メシル及びベシル等の脱離基を包含し、Ｒａａは任意に置換されたアルキル（例えば、−ＣＨ３）又は任意に置換されたアリール（例えば、フェニル、トリル）である。式ＲＯ−ＬＧの例示的な化合物としては、ＬＧ−Ｃ（＝Ｏ）ＲＡ、ＬＧ−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＡ、ＬＧ−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２、ＬＧ−Ｓ（＝Ｏ）２ＲＡ、ＬＧ−Ｓｉ（ＲＡ）３、ＬＧ−Ｐ（＝Ｏ）（ＲＡ）２、ＬＧ−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲＡ）２、ＬＧ−Ｐ（＝Ｏ）（ＮＲＡ）２、ＬＧ−Ｐ（＝Ｏ）２ＲＡ、ＬＧ−Ｐ（＝Ｏ）２（ＯＲＡ）又はＬＧ−Ｐ（＝Ｏ）２Ｎ（ＲＡ）２（式中、ＬＧは本明細書に規定される通りである）が挙げられる。具体的に企図される式ＬＧ−Ｓ（＝Ｏ）２ＲＡの化合物としては、Ｃｌ−Ｓ（＝Ｏ）２ＣＨ３（ＭｓＣｌ）、Ｃｌ−Ｓ（＝Ｏ）２Ｃ６Ｈ４−（ｐＣＨ３）（ＴｓＣｌ）及びＣｌ−Ｓ（＝Ｏ）２Ｃ６Ｈ５（ＢｓＣｌ）が挙げられる。置換オキシムは、好適な転位条件（例えば、酸性条件、例えばＨ２ＳＯ４、ＨＣｌ、ＡｃＯＨ）下で、直接ラクタム生成物をもたらすことができる。
代替的には、ケトンをウォルフ−キッシュナー還元条件下で還元して（工程Ｓ３０に図示される）、式（Ｇ１’）及び（Ｇ１’’）の化合物を得ることができる。スキーム２０を参照されたい。例示的なウォルフ−キッシュナー条件は、Furrow, M. E.; Myers, A. G. (2004). "Practical Procedures for the Preparation of N-tert-Butyldimethylsilylhydrazones and Their Use in Modified Wolff-Kishner Reductions and in the Synthesis of Vinyl Halides andgem-Dihalides". Journal of the American Chemical Society126 (17): 5436-5445（引用することにより本明細書の一部をなす）に記載されている。
本明細書で理解されるように、上記の反応により生じるオキシムは、単一のオキシムＣ３異性体生成物又は両方のオキシムＣ３異性体生成物の混合物を含み得る。ベックマン転位がトランス［１，２］−シフトによって進行するため、任意の所与の反応において、ラクタム生成物の混合物の生成及び１つのラクタムが主要生成物である場合が企図されることも一般に理解される。
次いで、ラクタム生成物を様々な条件、例えば水素化物（例えば、水素化アルミニウムリチウム）の使用、クレメンゼン還元（例えば、Ｚｎ（Ｈｇ）／ＨＣｌ）及びウォルフ−キッシュナー還元（例えば、ヒドラジン及び塩基（例えば、ＫＯＨ）、熱による）を用いてアゼピン生成物へと還元することができる。例えば、スキーム２１を参照されたい。
式（Ｅ１’）又は（Ｅ１’’）の化合物は、ラクタムのカルボン酸への加水分解、続いて脱炭酸的ハロゲン化（式中、Ｘは塩素、臭素又はヨウ素である）、及びその後の環化によって合成することができる。例えば、スキーム２２Ａ及び２２Ｂを参照されたい。
式（Ｅ２’）又は（Ｅ２’’）の化合物は、式（Ｂ＊’）又は（Ｂ＊’’）（式中、ＲＯは本明細書に規定される非水素基である）のケトンのエノール捕捉、アルケニル部分の酸化切断、アシルアジドの形成、続くクルチウス転位によりアミノ部分を得て、これを続いて環化し、ラクタムを得て、ＲＮが水素であるピペラジニル生成物へと還元し、これを任意に非水素基ＲＮにより保護することで合成することができる。例えば、スキーム２３Ａ又は２３Ｂを参照されたい。
本明細書で使用される場合、「主要異性体」は他の異性体を上回って、すなわち反応により生成する２つの異性体の合計の５０％超、例えば反応により生成する２つの異性体の合計の６０％、７０％、８０％、９０％又は９５％超生成する異性体を指す。
Ｄ． コルチスタチン類縁体の代表的な合成
材料及び計測装置
特に断りのない限り、全ての反応をアルゴンの陽圧下において火力乾燥ガラス器具内で行った。フラッシュカラムクロマトグラフィーは、シリカゲル６０（４０μｍ〜６３μｍ、Whatman）を用いてStill et al., J. Org. Chem. 1978, 43, 2923-2925に記載のように行った。
以下の点を例外として、市販の試薬及び溶媒をそのまま使用した。テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、ジクロロメタン（ＣＨ２Ｃｌ２）はアルゴンを用いて脱気し、Pangborn et al., Organometallics 1996, 15, 1518-1520に記載のようにアルミナカラムを利用した溶媒精製システム（Glass ContourのJ. C. Meyerによって設計される）に通した。ピリジン及びトリエチルアミンは使用前に水素化カルシウムで蒸留した。使用したセライトは、J.T. Bakerから購入したＣｅｌｉｔｅ（商標） ５４５であった。ｎ−ブチルリチウム溶液のモル濃度は、１，１０−フェナントロリンを指示薬として用いる滴定によって決定した（３回の決定の平均）。
１Ｈ ＮＭＲスペクトルはＶａｒｉａｎ ＩＮＯＶＡ−６００又はＶａｒｉａｎ ＩＮＯＶＡ−５００分光計を用いて記録した。プロトン化学シフトをパーツパーミリオン（parts per million）（δスケール）で報告し、残留非重水素化溶媒を内部参照として用いて較正する（ＣＤＣｌ３：δ７．２６（ＣＨＣｌ３）、Ｃ６Ｄ６：δ７．１５（Ｃ６Ｄ５Ｈ））。１Ｈ ＮＭＲスペクトルのデータは以下のように報告する：化学シフト（δｐｐｍ）（多重度、カップリング定数（Ｈｚ）、積分値）。多重度は以下のように報告する：ｓ＝シングレット、ｄ＝ダブレット、ｔ＝トリプレット、ｑ＝カルテット、ｍ＝マルチプレット、ｂｒ＝ブロード、ａｐｐ＝見掛け（apparent）又はそれらの組合せ。１３Ｃ ＮＭＲスペクトルはＶａｒｉａｎ ＩＮＯＶＡ−５００分光計を用いて記録した。高分解能質量スペクトル（ＨＲＭＳ）はハーバード大学質量分析学研究室によって得られ、Agilentの６２１０ ＴＯＦ ＬＣ／ＭＳ機器でエレクトロスプレーイオン化（ＥＳＩ）質量分析（ＭＳ）実験が行われた。
実施例Ｓ１． ケトン出発物質の合成
経路１：６−メトキシ−１−テトラロンからの８，９−不飽和メトキシエチレンケトンの合成（化合物１）
２０．０ｇ（１１３ｍｍｏｌ、１．００当量）の６−メトキシ−１−テトラロンを用いてグリニャール反応を行い、生成物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製せずに使用した。例えば、Saraber et al., Tetrahedron 2006, 62, 1726-1742を参照されたい。グリニャール反応生成物及び２−メチル−１，３−ペンタジエノン（１２．８ｇ、１１４ｍｍｏｌ、１．０１当量）のキシレン（１４０ｍＬ）溶液にＡｃＯＨ（６４．６ｍＬ、１．１３ｍｏｌ、１０．０当量）を添加し、反応混合物を温めて還流させた。２時間後、反応を室温まで冷却し、減圧下で濃縮した。トルエン及びエチルエーテルの１：１混合物を添加して固体残渣を溶解し、混合物を濾過した。濾液を飽和ＮａＨＣＯ３溶液（２００ｍＬ）及びブラインで順次洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、溶離液：２０：１：１ ヘキサン：ＥｔＯＡｃ：ＤＣＭ）によって精製して、Torgovのジエンを得た。スペクトルデータは以前に報告されたものと一致していた。例えば、Soorukram, D.; Knochel, P. Org. Lett. 2007, 9, 1021-1023を参照されたい。Torgovのジエンを、文献により既知の手順に基づき８，９−不飽和メトキシエチレンケトン化合物１（１５．０ｇ、３工程で４７％）へと変換した。例えば、Sugahara et al., Tetrahedron Lett. 1996, 37, 7403-7406を参照されたい。
経路１：８，９−不飽和メトキシエチレンケタールの合成（化合物２）
化合物１（１５．０ｇ、５３．１ｍｍｏｌ、１．０当量）のベンゼン（２１５ｍＬ）及びエチレングリコール（７２ｍＬ）溶液に、シュウ酸（２．３０ｇ、１２．１ｍｍｏｌ、０．２２当量）を添加した。反応混合物を温めて還流させ、ディーン−スターク装置によって水を捕集した。１６時間後、反応物を室温まで冷却し、飽和ＮａＨＣＯ３溶液（１５０ｍＬ）を添加した。有機層及び水層を分離し、水相を酢酸エチル（２×２００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をブライン（１５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。溶媒を減圧下で蒸発させ、残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、溶離液：１５：１ ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、８，９−不飽和メトキシエチレンケタール化合物２（１５．５ｇ、８９％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝７．１３（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）、６．７３−６．６７（ｍ，２Ｈ）、４．０５−３．８５（ｍ，４Ｈ）、３．７９（ｓ，３Ｈ）、２．８２−２．６５（ｍ，２Ｈ）、２．５２−２．４５（ｍ，２Ｈ）、２．２３−２．１７（ｍ，２Ｈ）、２．１４（ｄｄｄ，Ｊ＝２．２，１１．６，１４．０Ｈｚ，１Ｈ）、１．９９−１．８２（ｍ，４Ｈ）、１．６４（ｔｄ，Ｊ＝４．２，１２．２Ｈｚ，１Ｈ）、１．４９（ｄｑ，Ｊ＝６．８，１１．６Ｈｚ，１Ｈ）、０．８６（ｓ，３Ｈ）。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ２１Ｈ２７Ｏ３［Ｍ＋Ｈ］＋：３２７．１９５５、実測値３２７．１９４７。
経路１：エポキシアルコール３及び３ａの合成
８，９−不飽和エチレンケタール２（１．６３ｇ、５．００ｍｍｏｌ、１．０当量）のＣＨＣｌ３（５０ｍＬ）溶液を０℃まで冷却し、ｍＣＰＢＡ（最大７７％、２．４６ｇ、１１．０ｍｍｏｌ、２．２当量）を添加した。反応混合物を０℃で１０分間撹拌し、室温まで温めた。更に５０分後、１０％Ｎａ２Ｓ２Ｏ３溶液（４０ｍＬ）及び飽和ＮａＨＣＯ３溶液（４０ｍＬ）を順次添加した。有機層及び水層を分離し、水相をジクロロメタン（３×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、溶離液：３：１→１：１ ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、エポキシアルコール３及び３ａ（１．４０ｇ、７５％）を得た。３及び３ａは任意の溶媒中で平衡下にあり、３が主要であった。エポキシアルコール３についてＨ ＮＭＲを分析した。指定がある場合には、コルチスタチン類縁体（１２、１３、１４Ａ、１４Ｂ、１５Ｂ、１６Ｂ及び１７Ｂ）を６−メトキシ−１−テトラロンで構成されるラセミ混合物として生物学的実験に適用した。
１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝７．７７（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）、６．７６（ｄｄ，Ｊ＝２．０，８．３Ｈｚ，１Ｈ）、６．６３（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）、４．７８（ｄｄ，Ｊ＝７．８，９．８Ｈｚ，１Ｈ）、３．９５−３．８７（ｍ，４Ｈ）、３．７８（ｓ，３Ｈ）、２．８４（ｄｔ，Ｊ＝５．９，１４．４Ｈｚ，１Ｈ）、２．４９（ｄｄ，Ｊ＝４．４，１５．１Ｈｚ，１Ｈ）、２．３６−２．２９（ｍ，１Ｈ）、２．２６（ｄｄ，Ｊ＝５．９，１４．２Ｈｚ，２Ｈ）、２．０６（ｔ，Ｊ＝１１．７Ｈｚ，１Ｈ）、１．９７（ｄｄ，Ｊ＝７．３，１２．２Ｈｚ，１Ｈ）、１．９４−１．８８（ｍ，２Ｈ）、１．７５（ｄｔ，Ｊ＝５．４，１４．２Ｈｚ，１Ｈ）、１．６３−１．５３（ｍ，１Ｈ）、１．４６（ｔ，Ｊ＝１１．０Ｈｚ，１Ｈ）、０．７５（ｓ，３Ｈ）。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ２１Ｈ２７Ｏ５［Ｍ＋Ｈ］＋：３５９．１８５３、実測値３５９．１８５２。
経路２：８，９及び９，１１−不飽和メトキシエチレンケタール化合物２及び４の合成
ＤＤＱ酸化を２２．０ｇ（８１．４ｍｍｏｌ、１．０当量）のエストロンを用いて行い、生成物をフラッシュクロマトグラフィーによる精製なしに使用した。例えば、Stephan et al., Steroid. 1995, 60, 809-811を参照されたい。９，１１−不飽和エストロンのベンゼン（３７５ｍＬ）溶液にエチレングリコール（１１０ｍＬ、１．９９ｍｏｌ、２４．４当量）及びＰＴＳＡ（３．００ｇ、１６．３ｍｍｏｌ、０．２０当量）を添加した。反応混合物を温めて還流させ、ディーン−スターク装置によって水を捕集した。１８時間後、反応物を室温まで冷却し、飽和ＮａＨＣＯ３溶液（３００ｍＬ）を適用した。水相を酢酸エチル（２×３００ｍＬ）で抽出し、合わせた有機相をブライン（２００ｍＬ）で洗浄した。有機相を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、溶媒を減圧下で蒸発させた。生成物を更に精製することなく次の工程に使用した。
エチレンケタール（８，９及び９，１１−不飽和位置異性体の混合物）をアセトン（４２０ｍＬ）に溶解し、Ｋ２ＣＯ３（２２．５ｇ、１６３ｍｍｏｌ、２．００当量）を添加した。これに続いてＭｅ２ＳＯ４（９．３０ｍＬ、９７．６ｍｍｏｌ、１．２０当量）を添加し、反応混合物を温めて還流させた。１８時間後、反応物を室温まで冷却し、アセトンを蒸発させた。２Ｍ ＮａＯＨ溶液を添加し（３００ｍＬ）、水相を酢酸エチル（２×３００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、溶媒を減圧下で蒸発させた。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、溶離液：１５：１ ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、８，９及び９，１１−不飽和メトキシエチレンケタール化合物２及び４の混合物（１６．３ｇ、３工程で６１％、８，９−不飽和位置異性体：９，１１−不飽和位置異性体の約４：５の混合物）を得た。
９，１１−不飽和異性体については、識別可能なピークのみを割り当てた：１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝７．５３（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、６．６０（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）、６．１３（ｔｄ，Ｊ＝２．６，５．０Ｈｚ，１Ｈ）、３．７９（ｓ，３Ｈ）、２．５９（ｔｄ，Ｊ＝３．２，１７．６Ｈｚ，１Ｈ）、２．０９−２．００（ｍ，３Ｈ）、１．４５−１．３３（ｍ，２Ｈ）、０．９０（ｓ，３Ｈ）。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ２１Ｈ２７Ｏ３［Ｍ＋Ｈ］＋：３２７．１９５５、実測値３２７．１９５１。
経路２：エポキシアルコール化合物３及び３ａ
８，９及び９，１１−不飽和エチレンケタール化合物２及び４の混合物（１５．７ｇ、４８．１ｍｍｏｌ、１．００当量）のジクロロメタン（７００ｍＬ）溶液に、モノペルオキシフタル酸マグネシウム六水和物（６８．４ｇ、１１１ｍｍｏｌ、２．３０当量）及び水（４．８ｍＬ）を添加した。反応混合物を室温で２０時間撹拌した後、１０％Ｎａ２Ｓ２Ｏ３水溶液（３００ｍＬ）及び飽和ＮａＨＣＯ３溶液（３００ｍＬ）の混合物でクエンチした。有機層及び水層を分離し、水相をジクロロメタン（２×５００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をブライン（３００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させた（Ｎａ２ＳＯ４）。溶媒を減圧下で蒸発させ、残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、溶離液：３：１→２：１ ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、エポキシアルコール３及び３ａ（８．６０ｇ、５０％）を得た。スペクトルデータは、８，９−不飽和メトキシエチレンケタール２で構成されるエポキシアルコール３及び３ａと一致していた。
ジオール化合物５の合成
アンモニアガスを凝縮し（２４０ｍＬ）、この液体アンモニアにＬｉ（３．９０ｇ、５６５ｍｍｏｌ、２５．０当量）を−７８℃で添加した。３０分間撹拌した後、ＴＨＦ（１１０ｍＬ）中のエポキシアルコール３及び３ａ（８．１０ｇ、２２．６ｍｍｏｌ、１．０当量）をカニューレにより投入し（cannulated）、この温度で更に１．５時間撹拌した。反応混合物にｔ−ＢｕＯＨ（３２ｍＬ）及びＴＨＦ（１６ｍＬ）の混合物を−７８℃で添加し、この温度で更に２０分間撹拌した。ｔ−ＢｕＯＨ（９２ｍＬ）及びＴＨＦ（３８ｍＬ）の混合物、続いてベンゼン（５０ｍＬ）及び水（５０ｍＬ）を−７８℃で添加し、フラスコを開け、冷却浴を取り外すことによって液体アンモニアを穏やかに蒸発させた。水（２００ｍＬ）を添加し、水相を酢酸エチル（２×２５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をブライン（１５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、減圧下で濃縮した。生成物を更に精製することなく次の工程に使用した。
バーチ還元生成物のＴＨＦ（３００ｍＬ）及びエチレングリコール（７５ｍＬ）溶液に、ＰＴＳＡ（４３０ｍｇ、２．２６ｍｍｏｌ、０．１０当量）を添加した。反応混合物を室温で３０分間撹拌し、飽和ＮａＨＣＯ３溶液（２００ｍＬ）を添加した。有機層及び水層を分離し、水相を酢酸エチル（４×２５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させた（Ｎａ２ＳＯ４）。溶媒を減圧下で蒸発させ、残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、溶離液：４：１ ヘキサン：ＥｔＯＡｃ→１００％ＥｔＯＡｃ→１０：１ ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ）によって精製して、ジオール５（４．６０ｇ、５２％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，Ｃ６Ｄ６）シフト＝３．６７−３．４２（ｍ，９Ｈ）、３．２５−３．１４（ｍ，１Ｈ）、２．４０（ｄｄ，Ｊ＝５．９，１３．２Ｈｚ，１Ｈ）、２．３１（ｂｒ．ｓ，２Ｈ）、２．２３−２．０９（ｍ，２Ｈ）、２．０３（ｔ，Ｊ＝１０．７Ｈｚ，１Ｈ）、１．９７−１．９０（ｍ，２Ｈ）、１．８９（ｄｄ，Ｊ＝８．３，１４．２Ｈｚ，１Ｈ）、１．８５−１．７５（ｍ，４Ｈ）、１．６６−１．５０（ｍ，４Ｈ）、１．００（ｓ，３Ｈ）。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ２２Ｈ３２ＮａＯ６［Ｍ＋Ｎａ］＋：４１５．２０９１、実測値４１５．２０７６
スキーム１−３． 最適化経路２
ケタール化合物３ｂ
エストロン（１９５ｇ、７２１ｍｍｏｌ、１．００当量）のＤＭＳＯ（２．８Ｌ）溶液に、ＫＯＨペレット（８５％テクニカルグレード、１６２ｇ、２．４５ｍｏｌ、３．４０当量）及びＣＨ３Ｉ（８９．８ｍＬ、１．４４ｍｏｌ、２．００当量）を添加した。反応混合物を室温で３．５時間撹拌し、蒸留水（２Ｌ）を０℃でゆっくりと添加した。水層をジクロロメタン（３×１．５Ｌ）で抽出し、合わせた有機層をブライン（１．５Ｌ）で洗浄した。有機層を窒素フロー下で濃縮して白色結晶を得て、これを冷メタノールで洗浄した。１８０ｇの粗混合物を更に精製することなく次の工程に使用した。
粗混合物（１００ｇ、３５２ｍｍｏｌ、１．００当量）のメタノール（７５０ｍＬ）及びジクロロメタン（７５０ｍＬ）溶液に、ＮａＨＣＯ３（９３．８ｇ、１．０５ｍｍｏｌ、３．００当量）を添加した。ＤＤＱ（１２０ｇ、５２７ｍｍｏｌ、１．５０当量）を４回に分けて５分間隔で添加し、反応混合物を２時間撹拌した後、１０％Ｎａ２Ｓ２Ｏ３水溶液（５００ｍＬ）でクエンチした。反応フラスコを更に３０分間撹拌し、セライトを通して濾過し、クロロホルムで洗浄した。２Ｍ ＮａＯＨ溶液（５００ｍＬ）を添加し、有機層及び水層を分離し、水相をクロロホルム（３×７００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をブライン（７００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させた（Ｎａ２ＳＯ４）。溶媒を減圧下で蒸発させ、８９ｇの粗混合物を更に精製することなく次の工程に使用した。ＤＤＱ酸化工程は２つのバッチ中で行った。
粗混合物（１５１ｇ、４８０ｍｍｏｌ、１．００当量）のベンゼン（２Ｌ）溶液に、エチレングリコール（２６８ｍＬ、４．８０ｍｏｌ、１０当量）及びＰＴＳＡ（２７．４ｇ、１４４ｍｍｏｌ、０．３０当量）を添加した。反応混合物を温めて還流させ、ディーン−スターク装置によって水を捕集した。３６時間後、反応物を室温まで冷却し、飽和ＮａＨＣＯ３溶液（１Ｌ）を適用した。水相を酢酸エチル（３×５００ｍＬ）で抽出し、合わせた有機相をブライン（１Ｌ）で洗浄した。有機相を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、溶媒を減圧下で蒸発させた。１７０ｇの粗生成物を更に精製することなく次の工程に使用した。
粗混合物（４８０ｍｍｏｌ、１．００当量）のジクロロメタン（２．５Ｌ）溶液に、モノペルオキシフタル酸マグネシウム六水和物（約８０％テクニカルグレード、６８３ｇ、１．１０ｍｏｌ、２．３０当量）及び水（５０ｍＬ）を添加した。反応混合物を室温で１６時間撹拌した後、セライトパッドを通して濾過した。濾液に飽和ＮａＨＣＯ３溶液（１．５Ｌ）を添加し、有機層及び水層を分離し、水相をジクロロメタン（３×１．４Ｌ）で抽出した。合わせた有機相をブライン（１．４Ｌ）で洗浄し、乾燥させた（Ｎａ２ＳＯ４）。溶媒を減圧下で蒸発させ、粗混合物を更に精製することなく次の工程に使用した。
粗混合物（４８０ｍｍｏｌ、１．００当量）の１，２−ジクロロエタン（２Ｌ）溶液に、ＮａＢＨ３ＣＮ（６０．３ｇ、９６０ｍｍｏｌ、２．００当量）及びＡｃＯＨ（５５ｍＬ、９６０ｍｍｏｌ、２．００当量）を室温で順次添加した。２．５時間後、飽和ＮａＨＣＯ３溶液（１．４Ｌ）を添加し、有機層及び水層を分離した。水相をジクロロメタン（３×１．４Ｌ）で抽出した。合わせた有機相をブライン（１．５Ｌ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、溶離液：２：１ ヘキサン：ＥｔＯＡｃ→１：１→１：２→１：３→１００％ＥｔＯＡｃ）によって精製して、化合物３ｂ（７５ｇ、５工程で２９％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝７．２１（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、６．７５（ｄｄ，Ｊ＝２．４，８．３Ｈｚ，１Ｈ）、６．７２（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ）、３．９８−３．８２（ｍ，４Ｈ）、３．７９（ｓ，３Ｈ）、３．８０−３．７６（ｍ，１Ｈ）、３．５４（ｄｔ，Ｊ＝４．４，１０．５Ｈｚ，１Ｈ）、３．０３−２．９１（ｍ，１Ｈ）、２．８１（ｔｄ，Ｊ＝４．４，１８．１Ｈｚ，１Ｈ）、２．３３（ｄ，Ｊ＝９．８Ｈｚ，１Ｈ）、２．２３（ｄｄ，Ｊ＝６．８，１３．２Ｈｚ，１Ｈ）、２．０９−１．９８（ｍ，１Ｈ）、１．９０（ｄｄｄ，Ｊ＝５．９，９．８，１４．６Ｈｚ，１Ｈ）、１．８５（ｄｄ，Ｊ＝４．６，９．５Ｈｚ，２Ｈ）、１．８２−１．７７（ｍ，１Ｈ）、１．７７−１．７０（ｍ，１Ｈ）、１．６５（ｄｑ，Ｊ＝６．３，１２．７Ｈｚ，１Ｈ）、１．０２（ｓ，３Ｈ）。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ２１Ｈ２８Ｏ５［Ｍ＋Ｈ］＋：３６１．２０１０、実測値３６１．２０２２。
ジオール化合物５
ＴＨＦ及びｔ−ＢｕＯＨ（５００ｍＬ及び２００ｍＬの各溶媒、−６０℃で順次添加した）中のＮａ２Ｋ−ＳＧ（Ｉ）（２００ｇ）のスラリーに、ＴＨＦ（５００ｍＬ）中の化合物３ｂ（４０ｇ、１１１ｍｍｏｌ、１．００当量）を−６０℃でカニューレにより投入し、０℃まで温めた。反応をＭＳによって追跡した。０℃で７時間撹拌した後、ＭｅＯＨ（１５０ｍＬ）及びＨ２Ｏ（２５０ｍＬ）をゆっくりと添加することによって反応物をクエンチし、室温まで温めた。溶液をデカントしてシリカゲルから分離した後、ＥｔＯＡｃ（１Ｌ）を添加し、有機層及び水層を分離した。水相をＥｔＯＡｃ（３×５００ｍｌ）で抽出した。合わせた有機相をブライン（２×１Ｌ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。生成物を更に精製することなく使用した。ケタール化条件は化合物３ｂについて記載したものと同じであり、化合物５（３２ｇ、２工程で７４％）が得られる。
アリルアルコール７
ジオール７（７．１ｇ、１８．１ｍｍｏｌ、１．００当量）のジクロロメタン（２３０ｍＬ）溶液に、ＮＢＳ（３．５４ｇ、１９．９ｍｍｏｌ、１．１０当量）を−１０℃で一度に添加し、反応混合物を室温まで温めた。反応をＴＬＣ（完了に約２時間）によってモニタリングした。反応が行われた後、反応混合物を−４０℃まで冷却し、トリエチルアミン（３０．３ｍＬ、２１７ｍｍｏｌ、１２．０当量）を添加した。室温で２０分間予め撹拌したＤＭＳＯ（２００ｍＬ）中のＳＯ３・Ｐｙ（２８．８ｇ、１８１ｍｍｏｌ、１０．０当量）を−４０℃で反応混合物に添加し、これを続いて室温までゆっくりと温めた。３時間後、飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液（２００ｍＬ）を添加し、反応物を室温まで温めた。有機層及び水層を分離し、水相をジクロロメタン（２×３５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をブライン（３５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。粗混合物を更に精製することなく使用した。
粗混合物をジクロロメタン（６００ｍＬ）に溶解し、反応混合物を−４０℃まで冷却し、続いてＤＢＵ（６．７６ｍＬ、４５．３ｍｍｏｌ、２．５０当量）をゆっくりと添加した。１５分後、飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液（２００ｍＬ）を添加し、反応物を室温まで温めた。有機層及び水層を分離し、水相をジクロロメタン（２×２００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をブライン（１５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。
粗混合物（６．５０ｇ、１６．７ｍｍｏｌ、１．００当量）のＭｅＯＨ（２５０ｍＬ）及びＴＨＦ（３０ｍＬ）溶液に、ＣｅＣｌ３・７Ｈ２Ｏ（１８．７ｇ、５０．２ｍｍｏｌ、３．００当量）を室温で添加した。５分間撹拌した後、反応物を−２０℃まで冷却し、続いてＮａＢＨ４（１．２６ｇ、３３．４ｍｍｏｌ、２．００当量）を添加した。３０分後、飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液（１００ｍＬ）及び水（１００ｍＬ）を添加し、これを室温まで温めた。水相を酢酸エチル（３×２５０ｍＬ）で抽出し、合わせた有機相をブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、溶離液：２０：１ ＤＣＭ：ＭｅＯＨ）によって精製して、アリルアルコール７（４．２０ｇ、３工程で６０％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，Ｃ６Ｄ６）シフト＝４．３９−４．３０（ｍ，１Ｈ）、３．５８−３．３６（ｍ，８Ｈ）、３．２２（ｄｄ，Ｊ＝３．７，１６．４Ｈｚ，１Ｈ）、２．９４（ｄｄ，Ｊ＝７．１，１２．５Ｈｚ，１Ｈ）、２．６６（ｄ，Ｊ＝１３．２Ｈｚ，１Ｈ）、２．４９−２．４１（ｍ，１Ｈ）、２．３９（ｄｄ，Ｊ＝２．２，１２．９Ｈｚ，１Ｈ）、２．０７−１．９９（ｍ，１Ｈ）、１．９６−１．７９（ｍ，６Ｈ）、１．７３（ｂｒ．ｓ，３Ｈ）、１．６６−１．５７（ｍ，１Ｈ）、１．１５−１．０７（ｍ，１Ｈ）、０．８６（ｓ，３Ｈ）；１３ＣＮＭＲ（５００ＭＨｚ，Ｃ６Ｄ６）シフト＝１４０．６，１３９．１，１１８．７，１０９．５，８８．３，８６．２，６７．１，６５．４，６４．６，６４．２，４７．９，４６．５，４１．３，４０．９，３４．７，３４．２，３３．９，３０．０，２０．４，１９．８，１５．６；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ２２Ｈ３０ＮａＯ６［Ｍ＋Ｎａ］＋：４１３．１９３５、実測値４１３．１９４２。
シクロプロパン８
ＣｌＣＨ２Ｉ（５．７４ｍＬ、７８．９ｍｍｏｌ、４．００当量）の１，２−ジクロロエタン（４００ｍＬ）溶液に、Ｅｔ２Ｚｎのジエチルエーテル（１Ｍ、３９．４ｍＬ、３９．４ｍｍｏｌ、２．００当量）溶液を−１０℃で添加した。５分間撹拌した後、１，２−ジクロロエタン（２００ｍＬ）中のアリルアルコール７（７．７０ｇ、１９．７ｍｍｏｌ、１．００当量）を反応フラスコに−１０℃で添加した。３０分後、反応物を飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液（３００ｍＬ）によってクエンチし、室温まで温めた。有機層及び水層を分離し、水相をジクロロメタン（２×３５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をブライン（３００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、溶離液：２：１→１：１ ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）によって精製し、シクロプロパン８（６．９３ｇ、８７％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，Ｃ６Ｄ６）シフト＝３．９２（ｄｄ，Ｊ＝３．７，１１．０Ｈｚ，１Ｈ）、３．５１−３．４０（ｍ，８Ｈ）、２．７２（ｄｄ，Ｊ＝７．１，１２．９Ｈｚ，１Ｈ）、２．３９（ｄｄ，Ｊ＝５．４，１７．６Ｈｚ，１Ｈ）、２．３８（ｄ，Ｊ＝１２．２Ｈｚ，１Ｈ）、２．１５（ｄ，Ｊ＝１２．２Ｈｚ，１Ｈ）、２．１２（ｄｔ，Ｊ＝４．９，１２．２Ｈｚ，１Ｈ）、２．０２（ｄｄｄ，Ｊ＝２．９，１１．２，１４．６Ｈｚ，１Ｈ）、１．９２−１．８２（ｍ，３Ｈ）、１．８２−１．７３（ｍ，２Ｈ）、１．６９−１．５４（ｍ，５Ｈ）、１．５２（ｄｄ，Ｊ＝６．１，１２．０Ｈｚ，１Ｈ）、１．４９−１．４４（ｍ，１Ｈ）、０．９８（ｓ，３Ｈ）、０．８６（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ）、０．１５（ｄ，Ｊ＝２．９Ｈｚ，１Ｈ）；１３ＣＮＭＲ（５００ＭＨｚ，Ｃ６Ｄ６）シフト＝１１８．５，１１０．４，８５．４，８４．０，６５．３，６４．９，６４．７，６４．６，６４．１，４８．１，４５．４，４１．５，４０．０，３９．９，３５．４，３４．８，３３．７，３２．７，２９．１，２２．１，１９．３，１６．５，４．０；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ２３Ｈ３２ＮａＯ６［Ｍ＋Ｎａ］＋：４２７．２０９１、実測値４２７．２０８８。
オキサビシクロ［３．２．１］オクテン骨格９
シクロプロパン８（６．９０ｇ、１７．１ｍｍｏｌ、１．００当量）及び２，６−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−４−メチルピリジン（１２．３ｇ、５９．７ｍｍｏｌ、３．５０当量）をベンゼンにより共沸乾燥させ、ジクロロメタン（３３０ｍＬ）に溶解した。４Å分子篩（８．６ｇ）を添加し、反応フラスコを０℃まで冷却した。トリフル酸無水物（triflic anhydride）のジクロロメタン（１Ｍ、３４．１ｍＬ、３４．１ｍｍｏｌ、２．００当量）溶液を滴加し、氷浴を取り外して、反応フラスコを室温まで温めた。２時間後、反応物をトリエチルアミン（５５ｍＬ）でクエンチし、セライトパッドを通して濾過した。飽和ＮａＨＣＯ３溶液（３００ｍＬ）を添加し、水相をジクロロメタン（２×３５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をブライン（３００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、溶離液：９：１→４：１ ベンゼン：ジエチルエーテル）によって精製して、オキサビシクロ［３．２．１］オクテンコア骨格９（３．７６ｇ、５７％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝５．７３（ｓ，１Ｈ）、５．２９−５．２６（ｍ，１Ｈ）、４．０４−３．７６（ｍ，８Ｈ）、２．５８−２．５０（ｍ，１Ｈ）、２．４６（ｔ，Ｊ＝１５．１Ｈｚ，１Ｈ）、２．３１−２．２４（ｍ，２Ｈ）、２．１９（ｔ，Ｊ＝１１．２Ｈｚ，１Ｈ）、２．０９（ｄ，Ｊ＝１３．２Ｈｚ，１Ｈ）、１．９９（ｄｔ，Ｊ＝４．４，１３．２Ｈｚ，１Ｈ）、１．９４（ｄｄ，Ｊ＝２．４，１３．２Ｈｚ，１Ｈ）、１．９１−１．８４（ｍ，１Ｈ）、１．８３−１．７１（ｍ，３Ｈ）、１．７１−１．５３（ｍ，５Ｈ）、０．８８（ｓ，３Ｈ）；１３ＣＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝１４０．６，１３９．９，１１９．９，１１９．８，１１８．５，１０８．９，８１．５，８０．０，６５．２，６４．６，６４．５，６４．２，４６．２，４５．９，４２．４，３９．８，３４．０，３３．２，３２．４，３１．１，２８．０，１８．５，１７．０；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ２３Ｈ３１Ｏ５［Ｍ＋Ｈ］＋：３８７．２１６６、実測値３８７．２１８０。
モノケトン１０
オキサビシクロ［３．２．１］オクテンコア骨格９（３．２４ｇ、８．３８ｍｍｏｌ、１．００当量）のアセトン（４００ｍＬ）及び水（１００ｍＬ）溶液にＰＴＳＡ（７９７ｍｇ、４．１９ｍｍｏｌ、０．５０当量）を添加し、反応混合物を３日間撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ３溶液（２１０ｍＬ）及び酢酸エチル（３００ｍＬ）を反応物に順次添加した。層を分離し、水層を酢酸エチル（２×２００ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせ、ブライン（１５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。次いで、得られる残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、溶離液：４：１ ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）によって精製し、モノケトン１０（２．５０ｇ、８７％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝５．７３（ｓ，１Ｈ）、５．２９−５．２５（ｍ，１Ｈ）、３．９８−３．９０（ｍ，４Ｈ）、２．４８（ｄｄ，Ｊ＝８．８，１９．５Ｈｚ，１Ｈ）、２．４６−２．４０（ｍ，１Ｈ）、２．３６（ｄｄ，Ｊ＝５．９，１２．７Ｈｚ，１Ｈ）、２．３４−２．２５（ｍ，２Ｈ）、２．２４−２．０８（ｍ，５Ｈ）、２．０９（ｄ，Ｊ＝１３．２Ｈｚ，１Ｈ）、１．９５（ｄｄ，Ｊ＝２．４，１３．２Ｈｚ，１Ｈ）、１．９０−１．８１（ｍ，１Ｈ）、１．７９−１．７０（ｍ，２Ｈ）、１．７０−１．６１（ｍ，２Ｈ）、０．８９（ｓ，３Ｈ）；１３ＣＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝２２０．９，１４１．５，１４０．６，１１９．７，１１８．６，１０８．８，８１．１，８０．５，６４．７，６４．３，４７．９，４７．３，４２．５，３９．９，３６．０，３４．０，３３．９，３１．７，２８．１，１８．９，１７．０；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ２１Ｈ２７Ｏ４［Ｍ＋Ｈ］＋：３４３．１９０９、実測値３４３．１９１９。
１−クロロイソキノリン付加物１１
反応フラスコ内のＣｅＣｌ３（５６５ｍｇ、２．３０ｍｍｏｌ、１０．０当量）を真空下、１４０℃で２時間加熱した。フラスコにＡｒを充填し、０℃まで冷却した。３０分後、ＴＨＦ（２．８ｍＬ）を添加し、０℃で２時間撹拌した。次いで、フラスコを室温まで温め、更に１６時間撹拌した。
ＣｅＣｌ３／ＴＨＦ複合体の溶液にＴＨＦ（１．４ｍＬ）中の１−クロロ−７−ヨードイソキノリン（３９６ｍｇ、１．４０ｍｍｏｌ、６．００当量）を添加し、続いて室温で１０分間撹拌した後、これを−７８℃まで冷却した。次いで、ｎ−ブチルリチウムのヘキサン（１．６Ｍ、７１６μＬ、１．１０ｍｍｏｌ、５．００当量）溶液を滴加した。反応混合物を同じ温度で更に３０分間撹拌し、モノケトン１０（７８．５ｍｇ、２２９μｍｏｌ）をＴＨＦ（１．４ｍＬ）にカニューレにより投入した。更に３０分後、飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液（５ｍＬ）を撹拌反応混合物に添加した後、これを室温まで温めた。混合物をＥｔＯＡｃ（５ｍＬ）で希釈し、層を分離した。水層をＥｔＯＡｃ（３×５ｍＬ）で抽出し、有機層を合わせ、ブライン（５ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。次いで、得られる残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、溶離液：２：１ ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、１−クロロイソキノリン付加物１１（１１５ｍｇ、９７％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝８．３４（ｂｒ．ｓ，１Ｈ）、８．２４（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．８９−７．８３（ｍ，１Ｈ）、７．７６（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）、７．５６（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、５．６３（ｓ，１Ｈ）、５．１６−４．９９（ｍ，１Ｈ）、４．０２−３．８７（ｍ，４Ｈ）、２．６２（ｄｄｄ，Ｊ＝４．４，９．８，１４．２Ｈｚ，１Ｈ）、２．４８−２．３８（ｍ，２Ｈ）、２．３６−２．２６（ｍ，３Ｈ）、２．２６−２．１９（ｍ，１Ｈ）、２．１８−２．０８（ｍ，２Ｈ）、１．９６（ｄｄ，Ｊ＝２．４，１３．７Ｈｚ，１Ｈ）、１．８８（ｄｄ，Ｊ＝５．１，１７．８Ｈｚ，１Ｈ）、１．８２−１．７０（ｍ，２Ｈ）、１．６７−１．５７（ｍ，３Ｈ）、１．４９（ｄ，Ｊ＝１７．６Ｈｚ，１Ｈ）、１．２０−１．０８（ｍ，３Ｈ）；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ２２Ｈ２６ＮａＯ５［Ｍ＋Ｎａ］＋：３９３．１６７３、実測値３９３．１６５７。
イソキノリン１２
１−クロロイソキノリン付加物１１（１１５ｍｇ、２２７μｍｏｌ）のジクロロメタン（２０ｍＬ）溶液を０℃まで冷却した。次いで、ピリジン（１８３μＬ、２．３０ｍｍｏｌ、１０．０当量）及びＤＭＡＰ（１３．９ｍｇ、１１４μｍｏｌ、０．５０当量）を溶液に順次添加した。５分後、トリフルオロ酢酸無水物（１５８μＬ、１．１４ｍｍｏｌ、５．００当量）を滴加し、更に３０分間撹拌し、その時点でｐＨ７のリン酸緩衝液（１５ｍＬ）を添加し、続いて反応フラスコを室温まで温めた。有機層及び水層を分離し、水層をジクロロメタン（２×１５ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせ、ブライン（２５ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。次いで、得られる残渣をショートフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、溶離液：２：１ ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、トリフルオロアセチル化生成物を得て、これを迅速に次の工程に使用した。
トリフルオロアセチル化生成物（１３０ｍｇ、２１６ｍｍｏｌ）をベンゼンにより共沸乾燥させ、ベンゼン（４．３ｍＬ）に溶解した。ＡＩＢＮ（１０６ｍｇ、６４７μｍｏｌ、３．００当量）を添加し、反応フラスコを凍結ポンプ融解（freeze-pump thaw）プロセス（３サイクル）によって脱気した。Ｂｕ３ＳｎＨ（１．１６ｍＬ、４．３１ｍｍｏｌ、２０．０当量）を添加し、反応混合物を温めて還流させた。３時間後、反応混合物を室温まで冷却し、減圧下で濃縮した。次いで、得られる残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、溶離液：４：１→３：１→１：１ ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）によって精製し、イソキノリン１２（６７．０ｍｇ、２工程で６５％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝９．２１（ｓ，１Ｈ）、８．４６（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．７７（ｓ，１Ｈ）、７．７３（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）、７．６１（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．５７（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）、５．７４（ｓ，１Ｈ）、５．２９−５．２３（ｍ，１Ｈ）、４．００−３．９０（ｍ，４Ｈ）、３．１１（ｔ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，１Ｈ）、２．４９（ｄｄ，Ｊ＝８．３，１１．２Ｈｚ，１Ｈ）、２．４７−２．４１（ｍ，１Ｈ）、２．３８−２．２４（ｍ，４Ｈ）、２．２４−２．１４（ｍ，２Ｈ）、２．１２（ｄ，Ｊ＝１３．２Ｈｚ，１Ｈ）、２．０６−１．９５（ｍ，２Ｈ）、１．９１（ｄｄ，Ｊ＝５．４，１７．６Ｈｚ，１Ｈ）、１．８３（ｄｑ，Ｊ＝４．９，１１．７Ｈｚ，１Ｈ）、１．７７（ｔｄ，Ｊ＝２．３，１２．９Ｈｚ，１Ｈ）、１．７２−１．５９（ｍ，３Ｈ）、０．５２（ｓ，３Ｈ）；１３ＣＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝１５２．４，１４２．６，１４１．２，１４０．６，１４０．２，１３４．７，１３２．１，１２８．７，１２６．４，１２５．８，１２０．２，１１９．９，１１９．３，１０８．９，８１．４，８０．３，６４．７，６４．３，５７．１，５１．８，４４．９，４２．６，４０．１，３９．８，３４．２，３０．９，２８．２，２６．５，２０．７，１５．３；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ３０Ｈ３３ＮａＮＯ３［Ｍ＋Ｎａ］＋：４７８．２３５３、実測値４７８．２３４７。
ケトン１３
イソキノリン１２（３６５ｍｇ、０．８０１ｍｍｏｌ、１．００当量）のアセトン及び水（４：１、０．０２５Ｍ）溶液にＰＴＳＡ（４１２ｍｇ、２．１６ｍｍｏｌ、２．７０当量）を添加し、反応混合物を５５℃まで温めた。１４．５時間後、反応物を室温まで冷却し、飽和ＮａＨＣＯ３溶液及び酢酸エチルを反応物に順次添加した。層を分離し、水層を酢酸エチルで抽出した。有機層を合わせ、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。次いで、得られる残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、溶離液：３：２→１：２ ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）によって精製し、ケトン１３（２８９ｍｇ、８７％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝９．２３（ｓ，１Ｈ）、８．４８（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．８０（ｓ，１Ｈ）、７．７８（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）、７．６５（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．６１（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）、５．９１（ｓ，１Ｈ）、５．４０−５．３５（ｍ，１Ｈ）、３．１５（ｔ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，１Ｈ）、２．９４（ｄ，Ｊ＝１５．１Ｈｚ，１Ｈ）、２．６８（ｄ，Ｊ＝１５．１Ｈｚ，１Ｈ）、２．６７−２．５９（ｍ，１Ｈ）、２．５８−２．４１（ｍ，４Ｈ）、２．４１−２．２４（ｍ，３Ｈ）、２．２４−２．１０（ｍ，２Ｈ）、２．０４（ｔｔ，Ｊ＝４．６，１３．２Ｈｚ，１Ｈ）、１．９６（ｄｄ，Ｊ＝５．４，１７．６Ｈｚ，１Ｈ）、１．８６（ｄｑ，Ｊ＝５．１，１２．１Ｈｚ，１Ｈ）、１．８０−１．６７（ｍ，２Ｈ）、０．５５（ｓ，３Ｈ）；１３ＣＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝２０８．９，１５２．２，１４２．２，１４０．３，１４０．２，１３９．４，１３４．９，１３２．３，１２８．７，１２６．５，１２６．０，１２１．５，１２０．９，１２０．４，８２．８，８０．４，５７．１，５１．７，４９．２，４４．８，４０．１，４０．０，３９．８，３０．８，２９．８，２８．１，２６．５，２０．７，１５．４；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ２８Ｈ３０ＮＯ２［Ｍ＋Ｈ］＋：４１２．２２７１、実測値４１２．２２８８。
トリフレート
モノケトン１０（２．５０ｇ、７．３０ｍｍｏｌ、１．００当量）のＴＨＦ（４５ｍＬ）溶液に、ＮａＨＭＤＳ（１Ｍ、８．７６ｍＬ、８．７６ｍｍｏｌ、１．２０当量）を−７８℃で滴加した。１．５時間撹拌した後、ＴＨＦ（２０ｍＬ）中のＰｈＮＴｆ２（３．９１ｇ、１１．０ｍｍｏｌ、１．５０当量）をカニューレにより投入し、反応混合物を０℃まで温めた。更に３０分後、飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液（５０ｍＬ）を撹拌反応混合物に添加し、ＥｔＯＡｃ（７０ｍＬ）で希釈した。層を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（２×４５ｍＬ）で抽出し、有機層を合わせ、ブライン（８０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。次いで、得られる残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、溶離液：８：１→５：１ ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、トリフレート（３．３３ｇ、収率は分離することができない微量不純物のためにクロスカップリング後に算出した）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝５．７６（ｓ，１Ｈ）、５．６７（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、５．３２（ｄｄ，Ｊ＝２．０，４．９Ｈｚ，１Ｈ）、４．０２−３．９４（ｍ，４Ｈ）、２．６７（ｄｄ，Ｊ＝６．８，１０．７Ｈｚ，１Ｈ）、２．４９（ｔ，Ｊ＝１４．６Ｈｚ，１Ｈ）、２．４５（ｄｄｄ，Ｊ＝３．７，６．５，１５．２Ｈｚ，１Ｈ）、２．３８−２．２８（ｍ，４Ｈ）、２．１７（ｄｄｄ，Ｊ＝１．５，１０．７，１２．７Ｈｚ，１Ｈ）、２．１２（ｄ，Ｊ＝１３．２Ｈｚ，１Ｈ）、２．１０（ｄｄ，Ｊ＝５．９，１７．６Ｈｚ，１Ｈ）、１．９８（ｄｄ，Ｊ＝２．７，１３．４Ｈｚ，１Ｈ）、１．８８（ｄｄｄ，Ｊ＝７．６，８．９，１２．８Ｈｚ，１Ｈ）、１．８０（ｔｄｄ，Ｊ＝２．４，４．８，１２．７Ｈｚ，１Ｈ）、１．７４−１．６３（ｍ，２Ｈ）、１．０３（ｓ，３Ｈ）；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ２２Ｈ２６Ｏ６Ｆ３Ｓ［Ｍ＋Ｈ］＋：４７５．１３９７、実測値４７５．１４１１。
Ｃ１６〜Ｃ１７不飽和イソキノリン
トリフレート（３．３３ｍｇ、７．０２ｍｍｏｌ、１．００当量）及びイソキノリン−７−ボロン酸（３．６４ｇ、２１．１ｍｍｏｌ、３．００当量）の１，４−ジオキサン（３００ｍＬ）及びＨ２Ｏ（３０ｍＬ）溶液にＫ２ＣＯ３（２．９１ｇ、２１．１ｍｍｏｌ、３．００当量）を添加し、溶液を不活性Ａｒで５分間バブリングした。Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２・ＣＨ２Ｃｌ２（２８６ｍｇ、３５０μｍｏｌ、０．０５当量）を添加し、反応混合物を８０℃で１時間撹拌した。混合物を室温まで冷却し、飽和ＮａＨＣＯ３溶液（２００ｍＬ）を適用した。混合物をＥｔＯＡｃ（３５０ｍＬ）で希釈し、層を分離した。水層をＥｔＯＡｃ（２×３００ｍＬ）で抽出し、合わせた有機層をブライン（５００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。粗混合物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、溶離液：２：１→１：１→１：２ ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、Ｃ１６〜Ｃ１７不飽和イソキノリン（２．６７ｍｇ、２工程で８４％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝９．２３（ｓ，１Ｈ）、８．４９（ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．９４（ｓ，１Ｈ）、７．８５−７．８１（ｍ，１Ｈ）、７．８０−７．７５（ｍ，１Ｈ）、７．６３（ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ）、６．２６（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、５．８２（ｓ，１Ｈ）、５．４０（ｄ，Ｊ＝３．４Ｈｚ，１Ｈ）、４．０８−３．９０（ｍ，４Ｈ）、２．７６（ｄｄ，Ｊ＝７．１，１１．０Ｈｚ，１Ｈ）、２．５８（ｄｔ，Ｊ＝５．４，１７．６Ｈｚ，１Ｈ）、２．５６−２．４０（ｍ，３Ｈ）、２．４０−２．２８（ｍ，４Ｈ）、２．１６（ｄ，Ｊ＝１３．２Ｈｚ，１Ｈ）、２．０２（ｄｄ，Ｊ＝２．０，１３．２Ｈｚ，１Ｈ）、１．９４（ｔｄ，Ｊ＝８．８，１３．２Ｈｚ，１Ｈ）、１．８１（ｔｄ，Ｊ＝２．０，１２．７Ｈｚ，１Ｈ）、１．７６−１．６７（ｍ，２Ｈ）、１．１８（ｓ，３Ｈ；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ３０Ｈ３２ＮＯ３［Ｍ＋Ｈ］＋：４５４．２３７７、実測値４５４．２３６６。
イソキノリン１２
１７，１８−不飽和イソキノリン（５３４ｍｇ、１．１７ｍｍｏｌ、１．００当量）のＴＨＦ（４８ｍＬ）溶液に１０ｗｔ％Ｐｄ／Ｃ（３７４ｍｇ、３５１μｍｏｌ、０．３０当量）を添加し、Ｈ２バルーンを取り付けた。３時間後、反応混合物を、セライトパッドを通して濾過し、０．２Ｍ ＮＨ３のＭｅＯＨ（５０ｍＬ）溶液で洗浄し、減圧下で濃縮した。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、溶離液：４０：１→３０：１ ＤＣＭ：ＭｅＯＨ）によって精製して、イソキノリン１２（４５２ｍｇ、８４％）を得た。
実施例Ｓ２． 式（Ａ−１）、（Ａ−１’）又は（Ａ−１’’）、及び（Ａ−２’）又は（Ａ−２’’）のラクタムの合成
ケトン１３（５．５ｍｇ、１３．６μｍｏｌ、１．００当量）のＭｅＯＨ（３５０μＬ）溶液に、Ｈ２ＮＯＨ・ＨＣｌ（２．５ｍｇ、２７．２μｍｏｌ、２．００当量）及びＮａＯＡｃ（４．９ｍｇ、２７．２μｍｏｌ、２．００当量）を添加した。７０℃で１．５時間撹拌した後、反応混合物を室温まで冷却し、粗濃縮した。Ｈ２Ｏ（３００μＬ）を添加し、酢酸エチル（３×３００μＬ）で抽出し、合わせた有機相をブライン（３００μＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。粗混合物を更に精製することなく次の工程に使用した。
粗混合物（１３．６μｍｏｌ、１．００当量）のＤＣＭ（３５０μＬ）溶液に、トリメチルアミン（１１．４μＬ、８１．６μｍｏｌ、６．００当量）を添加した。０℃でメタンスルホン酸無水物（４．７ｍｇ、２７．２μｍｏｌ、２．００当量）を添加した。反応混合物を０℃で１５分間撹拌し、更に１５分間撹拌しながら室温まで温めた。反応混合物をＮａＨＣＯ３（３００μＬ）でクエンチし、ＤＣＭ（３×３００μＬ）で抽出し、合わせた有機相をブライン（３００μＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。粗混合物を更に精製することなく次の工程に使用した。
粗混合物をＡｃＯＨ（３００μＬ）に溶解し、５０℃で１６時間撹拌した。反応混合物を粗濃縮し、ＮａＨＣＯ３（３００μＬ）を適用した。これを酢酸エチル（３×３００μＬ）で抽出し、合わせた有機相をブライン（３００μＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。粗混合物を分取ＴＬＣ（シリカゲル、溶離液：５：５：１ ＥｔＯＡｃ：ＤＣＭ：ＴＥＡ）によって精製して、ラクタム１５Ｂ（１．５ｍｇ、３工程で２６％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝９．２２（ｓ，１Ｈ）、８．４９（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．７９（ｓ，１Ｈ）、７．７６（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．６３（ｄ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，１Ｈ）、７．５８（ｄｄ，Ｊ＝１．５，８．５Ｈｚ，１Ｈ）、５．８７（ｓ，１Ｈ）、５．７８（ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，１Ｈ）、５．３４（ｄｄ，Ｊ＝２．６，５．０Ｈｚ，１Ｈ）、３．５７（ｄｄ，Ｊ＝５．６，１５．０Ｈｚ，１Ｈ）、３．３３（ｄｄ，Ｊ＝７．６，１５．３Ｈｚ，１Ｈ）、３．１５（ｄｄ，Ｊ＝９．１，１０．９Ｈｚ，１Ｈ）、２．６６（ｄｄｄ，Ｊ＝４．７，１０．０，１４．７Ｈｚ，１Ｈ）、２．６２−２．５３（ｍ，２Ｈ）、２．５２−２．４６（ｍ，２Ｈ）、２．３５（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、２．３８−２．３０（ｍ，１Ｈ）、２．２８−２．２２（ｍ，１Ｈ）、２．２２−２．１２（ｍ，２Ｈ）、２．０１（ｑｔ，Ｊ＝４．１，９．４Ｈｚ，１Ｈ）、１．９６（ｄｄ，Ｊ＝５．３，１７．６Ｈｚ，１Ｈ）、１．９０−１．７９（ｍ，Ｊ＝５．３，１２．３，１２．３Ｈｚ，１Ｈ）、１．７５（ｔｄ，Ｊ＝８．２，１２．３Ｈｚ，１Ｈ）、１．６８（ｄｔ，Ｊ＝７．３，１０．７Ｈｚ，１Ｈ）、０．５４（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ２８Ｈ３１Ｎ２Ｏ２［Ｍ＋Ｈ］＋：４２７．２３８０、実測値４２７．２３９５。
実施例Ｓ３． 還元的アミノ化
方法Ａ
ケトン１３（１．００当量）の１，２−ジクロロエタン（０．０２Ｍ）溶液にアミン（４．００当量）、ＡｃＯＨ（１．５０当量）及びＮａＢＨ３ＣＮ（３．５０当量）を室温で順次添加した。反応アミンがＨＣｌ塩の形態である場合、トリエチルアミン（４当量）を添加した（方法ＡＡ）。反応が行われた後、飽和ＮａＨＣＯ３溶液を添加し、層を分離した。水層をジクロロメタンで抽出した。有機層を合わせ、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。（α−ＮＲ２：β−ＮＲ２＝約１：１．２〜約１：５）。
方法Ｂ
ケトン１３（１．００当量）の１，２−ジクロロエタン（０．０２Ｍ）溶液にアミン（２．００当量）、ＡｃＯＨ（２．００当量）及びＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（２．００当量）を室温で順次添加した。反応アミンがＨＣｌ塩の形態である場合、トリエチルアミン（２．００当量）を添加した（方法ＢＢ）。反応が行われた後、飽和ＮａＨＣＯ３溶液を添加し、層を分離した。水層をジクロロメタンで抽出した。有機層を合わせ、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。（α−ＮＲ２：β−ＮＲ２＝約１：１．２〜約１：５）。
方法Ｃ
第二級アミン（１．００当量）のジクロロメタン（０．０２Ｍ）溶液にホルムアルデヒド又はアセトアルデヒド（５．００当量）を添加し、室温で１時間撹拌した後、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（２．００当量）を添加した。反応が行われた後、飽和ＮａＨＣＯ３溶液を添加し、層を分離した。水層をジクロロメタンで抽出した。有機層を合わせ、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。
方法Ｄ：α−アミンを優先する一般的方法
ケトン１３（１．００当量）のＴＨＦ及びｔ−ＢｕＯＨ（４：１、０．０２Ｍ）溶液に、アミン（５．００当量）及びＴｉ（Ｏｉ−Ｐｒ）４（３．００当量）を順次添加し、室温で１５時間撹拌した（Ｍｅ２ＮＨ、ＭｅＮＨ２及びＮＨ３については４時間）。反応混合物を−２０℃まで冷却し、ＮａＢＨ４（１．５０当量）を添加した。反応が行われた後、飽和ＮａＨＣＯ３溶液を添加し、層を分離した。水層をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を合わせ、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。（α−ＮＲ２：β−ＮＲ２＝約１．１：１〜約３．７：１）。
方法Ｅ：メタンスルホンアミド形成のための一般的方法
アミン（１．００当量）のジクロロメタン（０．０１３Ｍ）溶液に、トリメチルアミン（４．００当量）を添加し、反応混合物を−２０℃まで冷却した。メタンスルホン酸無水物（２．５０当量）をジクロロメタン溶液として添加し、同じ温度で３０分間撹拌した。２Ｎ ＮａＯＨ溶液を添加し、層を分離した。水層をジクロロメタンで抽出した。有機層を合わせ、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。
β−ジメチルアミン１４Ｂ及びα−ジメチルアミン１４Ａ
粗混合物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、溶離液：２０：１ ＥｔＯＡｃ：２Ｍ ＮＨ３のＭｅＯＨ溶液）によって順次精製して、β−ジメチルアミン１４Ｂ（２１．５ｍｇ、６５％）を得た。およそ０．６ｍｇのα−ジメチルアミン１４Ａを３ｍｇの１３からＨＰＬＣ（Ｅｃｌｉｐｓｅ ＸＤＢ−Ｃ８カラム、９．４ｍｍ×２５ｃｍ；勾配＝３０分にわたる０％→３５％ ＭｅＣＮ（０．１％ギ酸）：Ｈ２Ｏ（０．１％ギ酸））によって調製した。
β−ジメチルアミン１４Ｂ：１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，Ｃ６Ｄ６）シフト＝９．３１（ｓ，１Ｈ）、８．６１（ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．４３（ｓ，１Ｈ）、７．３９（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．２５（ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．２３（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、５．７３（ｂｒ．ｓ，１Ｈ）、５．１８（ｓ，１Ｈ）、２．７４（ｔ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，１Ｈ）、２．６３（ｄｄ，Ｊ＝８．８，１１．２Ｈｚ，１Ｈ）、２．４８−２．２８（ｍ，２Ｈ）、２．２７−２．２０（ｍ，１Ｈ）、２．１９−２．０３（ｍ，６Ｈ）、２．００（ｂｒ．ｓ，６Ｈ）、１．９５−１．８４（ｍ，２Ｈ）、１．８３−１．６６（ｍ，５Ｈ）、１．４１（ｔｔ，Ｊ＝５．４，１３．２Ｈｚ，１Ｈ）、０．４５（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ３０Ｈ３７Ｎ２Ｏ［Ｍ＋Ｈ］＋：４４１．２９００、実測値４４１．２９１０。
α−ジメチルアミン１４Ａ：１Ｈ ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，Ｃ６Ｄ６）シフト＝９．２６（ｓ，１Ｈ）、８．５６（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．４４−７．３９（ｍ，１Ｈ）、７．３６（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．２１−７．２０（ｍ，１Ｈ）、７．２０（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、５．６８−５．６５（ｍ，１Ｈ）、５．１５−５．１１（ｍ，１Ｈ）、２．７２−２．６６（ｍ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，１Ｈ）、２．５９（ｄｄ，Ｊ＝８．８，１１．２Ｈｚ，１Ｈ）、２．３４（ｔｔ，Ｊ＝２．９，１２．１Ｈｚ，１Ｈ）、２．１６（ｔｄ，Ｊ＝３．２，１６．０Ｈｚ，１Ｈ）、２．０９（ｓ，６Ｈ）、２．１３−１．９２（ｍ，８Ｈ）、１．８５（ｄｄｄ，Ｊ＝５．０，９．０，１３．６Ｈｚ，１Ｈ）、１．７３（ｄｔ，Ｊ＝５．３，１２．３Ｈｚ，１Ｈ）、１．７２−１．６６（ｍ，２Ｈ）、１．６０−１．５７（ｍ，１Ｈ）、１．５７−１．４９（ｍ，１Ｈ）、１．２０（ｄｑ，Ｊ＝４．１，１２．３Ｈｚ，１Ｈ）、０．４０（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ３０Ｈ３７Ｎ２Ｏ［Ｍ＋Ｈ］＋：４４１．２９００、実測値４４１．２９０９。
β−モルホリン１５Ｂ及びα−モルホリン１５Ａ
β−モルホリン１５Ｂ：粗混合物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、溶離液：１００％ＥｔＯＡｃ→３５：１→２０：１→１０：１ ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ）によって精製して、β−モルホリン１５Ｂ（２１ｍｇ、６６％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝９．２２（ｓ，１Ｈ）、８．４８（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．７９（ｓ，１Ｈ）、７．７５（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）、７．６２（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．５９（ｄｄ，Ｊ＝１．０，８．８Ｈｚ，１Ｈ）、５．７１（ｓ，１Ｈ）、５．２４（ｄ，Ｊ＝２．９Ｈｚ，１Ｈ）、３．７３（ｂｒ．ｓ，４Ｈ）、３．１３（ｔ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，１Ｈ）、２．６５−２．２８（ｍ，１１Ｈ）、２．２３−２．１１（ｍ，３Ｈ）、２．０６（ｄ，Ｊ＝１３．２Ｈｚ，１Ｈ）、２．０１（ｄｔ，Ｊ＝４．４，９．０Ｈｚ，１Ｈ）、１．９３（ｄｄ，Ｊ＝４．９，１７．１Ｈｚ，１Ｈ）、１．８９−１．７９（ｍ，１Ｈ）、１．７５−１．５３（ｍ，４Ｈ）、０．５４（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ３２Ｈ３９Ｎ２Ｏ２［Ｍ＋Ｈ］＋：４８３．３００６、実測値４８３．３０１２。
β−Ｎ−メチルピペラジン１６Ｂ及びα−Ｎ−メチルピペラジン１６Ａ
β−Ｎ−メチルピペラジン１６Ｂ：粗混合物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、第１のカラム：溶離液：１００％ＭｅＯＨ→１０：１ ＥｔＯＡｃ：２Ｍ ＮＨ３のＭｅＯＨ溶液／第２のカラム：溶離液：２０：１ ＥｔＯＡｃ：２Ｍ ＮＨ３のＭｅＯＨ溶液）によって順次精製して、β−Ｎ−メチルピペラジン１６Ｂ（２０ｍｇ、５５％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝９．２２（ｓ，１Ｈ）、８．４８（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．７９（ｓ，１Ｈ）、７．７５（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．６２（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．５９（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）、５．７０（ｓ，１Ｈ）、５．２５−５．２２（ｍ，１Ｈ）、３．１３（ｔ，Ｊ＝９．７Ｈｚ，１Ｈ）、２．５３（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、２．５０（ｄｄ，Ｊ＝８．８，１１．７Ｈｚ，１Ｈ）、２．４１（ｔ，Ｊ＝１２．９Ｈｚ，１Ｈ）、２．３８−２．３３（ｍ，３Ｈ）、２．３２（ｂｒ．ｓ，３Ｈ）、２．２２−２．１１（ｍ，３Ｈ）、２．１０−１．９５（ｍ，３Ｈ）、１．９５−１．８９（ｍ，２Ｈ）、１．８４（ｄｑ，Ｊ＝５．３，１１．７Ｈｚ，１Ｈ）、１．７９−１．５０（ｍ，１１Ｈ）、０．６２−０．４３（ｍ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ３３Ｈ４２Ｎ３Ｏ［Ｍ＋Ｈ］＋：４９６．３３２２、実測値４９６．３３３７。
β−アゼチジン１８Ｂ及びα−アゼチジン１８Ａ
β−アゼチジン１８Ｂ：粗混合物を分取ＴＬＣ（溶離液：１：１ ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ）によって精製して、β−アゼチジン１８Ｂ（２．７ｍｇ、５０％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝９．２２（ｓ，１Ｈ）、８．４８（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．７９（ｓ，１Ｈ）、７．７５（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．６２（ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．５９（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）、５．６９（ｓ，１Ｈ）、５．２２（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ）、３．２０−３．０５（ｍ，５Ｈ）、２．５９−２．４３（ｍ，４Ｈ）、２．３９−２．２８（ｍ，２Ｈ）、２．２３−２．１２（ｍ，２Ｈ）、２．０７−１．９６（ｍ，４Ｈ）、１．９２（ｄｄ，Ｊ＝５．１，１７．３Ｈｚ，１Ｈ）、１．８９−１．７９（ｍ，３Ｈ）、１．７５−１．５５（ｍ，３Ｈ）、１．４０（ｔ，Ｊ＝１３．２Ｈｚ，１Ｈ）、０．５４（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ３１Ｈ３７Ｎ２Ｏ［Ｍ＋Ｈ］＋：４５３．２９０６、実測値４５３．２９１６。
β−ピロリジン１９Ｂ及びα−ピロリジン１９Ａ
β−ピロリジン１９Ｂ：粗混合物を分取ＴＬＣ（溶離液：２０：１０：３ ＥｔＯＡｃ：ヘキサン：２Ｍ ＮＨ３のＭｅＯＨ溶液）によって精製して、β−ピロリジン１９Ｂ（２．０ｍｇ、４０％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝９．２２（ｓ，１Ｈ）、８．４８（ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．７９（ｓ，１Ｈ）、７．７５（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）、７．６２（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．５９（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）、５．７０（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、５．２２（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、３．１３（ｔ，Ｊ＝９．８Ｈｚ，１Ｈ）、２．５９−２．４６（ｍ，６Ｈ）、２．４４（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、２．４１−２．２８（ｍ，３Ｈ）、２．２３−２．１２（ｍ，２Ｈ）、２．１１−２．００（ｍ，２Ｈ）、２．００−１．８２（ｍ，４Ｈ）、１．７９−１．６５（ｍ，６Ｈ）、１．６４−１．５１（ｍ，２Ｈ）、０．５４（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ３２Ｈ３９Ｎ２Ｏ［Ｍ＋Ｈ］＋：４６７．３０５７、実測値４６７．３０５３。
β−ジメチルアミン１７，１８−不飽和イソキノリン２３Ｂ及びα−ジメチルアミン１７，１８−不飽和イソキノリン２３Ａ
β−ジメチルアミン１７，１８−不飽和イソキノリン２３Ｂ：粗混合物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、溶離液：２０：１ ＥｔＯＡｃ：２Ｍ ＮＨ３のＭｅＯＨ溶液）によって順次精製して、β−ジメチルアミン１７，１８−不飽和イソキノリン２３Ｂ（６．５ｍｇ、７４％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝９．２４（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、８．５１（ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．９４（ｓ，１Ｈ）、７．８４−７．７６（ｍ，２Ｈ）、７．６３（ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ）、６．２７（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、５．９７（ｓ，１Ｈ）、５．５０（ｄｄ，Ｊ＝２．４，４．９Ｈｚ，１Ｈ）、２．９８（ｄ，Ｊ＝１４．６Ｈｚ，１Ｈ）、２．７８（ｄｄ，Ｊ＝６．８，１１．２Ｈｚ，１Ｈ）、２．７１（ｄ，Ｊ＝１４．６Ｈｚ，１Ｈ）、２．７２−２．６３（ｍ，１Ｈ）、２．６１（ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ）、２．５９−２．５４（ｍ，２Ｈ）、２．５４−２．５０（ｍ，２Ｈ）、２．５０−２．４２（ｍ，２Ｈ）、２．３９（ｄｄｄ，Ｊ＝１．５，１１．０，１２．９Ｈｚ，１Ｈ）、２．２０（ｄｄｄ，Ｊ＝１．５，９．５，１１．５Ｈｚ，１Ｈ）、２．０１（ｄｄｄ，Ｊ＝７．３，８．８，１２．７Ｈｚ，１Ｈ）、１．７９（ｄｔ，Ｊ＝７．３，１１．２Ｈｚ，１Ｈ）、１．１８（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ３０Ｈ３５Ｎ２Ｏ［Ｍ＋Ｈ］＋：４３９．２７４４、実測値４３９．２７５３。
β−モノメチルアミン２４Ｂ及びα−モノメチルアミン２４Ａ
β−モノメチルアミン２４Ｂ：粗混合物を分取ＴＬＣ（溶離液：１０：１ ＥｔＯＡｃ：２Ｍ ＮＨ３のＭｅＯＨ溶液）によって精製して、β−モノメチルアミン２４Ｂ（およそ１．５ｍｇ、５８％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝９．２２（ｓ，１Ｈ）、８．４８（ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．７９（ｓ，１Ｈ）、７．７５（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．６２（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．５９（ｄｄ，Ｊ＝１．０，８．３Ｈｚ，１Ｈ）、５．７２（ｄ，Ｊ＝１．０Ｈｚ，１Ｈ）、５．２４（ｄｄ，Ｊ＝２．２，５．１Ｈｚ，１Ｈ）、３．１３（ｔ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，１Ｈ）、３．０３−２．９８（ｍ，１Ｈ）、２．５７−２．５０（ｍ，１Ｈ）、２．５１（ｄｄ，Ｊ＝８．３，１１．７Ｈｚ，１Ｈ）、２．４４（ｓ，３Ｈ）、２．３６（ｄ，Ｊ＝１５．２Ｈｚ，１Ｈ）、２．３６−２．２８（ｍ，２Ｈ）、２．２６−２．１３（ｍ，２Ｈ）、２．０９（ｄｄ，Ｊ＝３．７，１６．４Ｈｚ，１Ｈ）、２．０７−１．９９（ｍ，２Ｈ）、１．９８−１．９２（ｍ，１Ｈ）、１．９３（ｄｄ，Ｊ＝５．９，１７．６Ｈｚ，１Ｈ）、１．８５（ｄｑ，Ｊ＝４．９，１１．７Ｈｚ，１Ｈ）、１．８２−１．７６（ｍ，１Ｈ）、１．７６−１．５８（ｍ，３Ｈ）、０．５４（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ２９Ｈ３５Ｎ２Ｏ［Ｍ＋Ｈ］＋：４２７．２７４４、実測値４２７．２７４０。
β−重水素ジメチルアミン２６Ｂ及びα−重水素ジメチルアミン２６Ａ
β−重水素ジメチルアミン２６Ｂ：トリエチルアミンを添加した。粗混合物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、溶離液：２０：１ ＥｔＯＡｃ：２Ｍ ＮＨ３のＭｅＯＨ溶液）によって順次精製して、β−重水素ジメチルアミン２６Ｂ（４ｍｇ、６２％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝９．２４（ｓ，１Ｈ）、８．５０（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．８０（ｓ，１Ｈ）、７．７７（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）、７．６４（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．６０（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）、５．７４（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、５．２６（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、３．１５（ｔ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，１Ｈ）、２．５１（ｄｄ，Ｊ＝８．８，１１．２Ｈｚ，１Ｈ）、２．５０−２．４２（ｍ，１Ｈ）、２．３７（ｄ，Ｊ＝１７．１Ｈｚ，１Ｈ）、２．３８−２．２６（ｍ，２Ｈ）、２．２６−２．０９（ｍ，４Ｈ）、２．０８−１．９８（ｍ，２Ｈ）、１．９５（ｄｄ，Ｊ＝５．１，１７．３Ｈｚ，１Ｈ）、１．８７（ｄｑ，Ｊ＝５．４，１２．２Ｈｚ，１Ｈ）、１．８０−１．６８（ｍ，３Ｈ）、１．６２（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ）、０．６３−０．５０（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ３０Ｈ３１Ｄ６Ｎ２Ｏ［Ｍ＋Ｈ］＋：４４７．３２７７、実測値４４７．３２８１。
β−２−メトキシエチルメチルアミン２７Ｂ及びα−２−メトキシエチルメチルアミン２７Ａ
β−２−メトキシエチルメチルアミン２７Ｂ：粗混合物を分取ＴＬＣ（溶離液：１０：１０：１ ヘキサン：ＥｔＯＡｃ：２Ｍ ＮＨ３のＭｅＯＨ溶液）によって精製して、β−２−メトキシエチルメチルアミン２７Ｂ（およそ１．２ｍｇ、２０％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）シフト＝９．２１（ｓ，１Ｈ）、８．４０（ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．９９（ｓ，１Ｈ）、７．９０（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．８１（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．７７（ｓ，１Ｈ）、５．８０（ｓ，１Ｈ）、５．３５−５．２７（ｍ，１Ｈ）、３．６０（ｔ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，２Ｈ）、３．３９（ｓ，２Ｈ）、３．２４（ｔ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，１Ｈ）、３．１５−２．８８（ｍ，２Ｈ）、２．５６（ｂｒ．ｓ．，３Ｈ）、２．５１（ｄｄ，Ｊ＝９．３，１０．７Ｈｚ，１Ｈ）、２．４８−２．３９（ｍ，３Ｈ）、２．３５−２．２８（ｍ，１Ｈ）、２．２５−２．０９（ｍ，４Ｈ）、２．０２−１．８４（ｍ，７Ｈ）、１．７６（ｓ，２Ｈ）、０．５９（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ３２Ｈ４１Ｎ２Ｏ２［Ｍ＋Ｈ］＋：４８５．３１６３、実測値４８５．３１７０。
β−ビス−２−メトキシエチルアミン２８Ｂ及びα−ビス−２−メトキシエチルアミン２８Ａ
β−ビス−２−メトキシエチルアミン２８Ｂ：粗混合物を分取ＴＬＣ（溶離液：１０：１ ジクロロメタン：ＭｅＯＨ）によって精製して、β−ビス−２−メトキシエチルアミン２８Ｂ（およそ１．１ｍｇ、１９％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）シフト＝９．２１（ｓ，１Ｈ）、８．３９（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．９９（ｓ，１Ｈ）、７．９０（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．８１（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．７７（ｓ，１Ｈ）、５．７４（ｓ，１Ｈ）、５．２９−５．２４（ｍ，１Ｈ）、３．４７（ｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，４Ｈ）、３．３６（ｓ，６Ｈ）、３．２４（ｔ，Ｊ＝１０．５Ｈｚ，１Ｈ）、３．０６−２．９３（ｍ，１Ｈ）、２．７８（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，４Ｈ）、２．５２（ｄｄ，Ｊ＝９．０，１１．５Ｈｚ，１Ｈ）、２．４９−２．４３（ｍ，１Ｈ）、２．４４（ｄ，Ｊ＝１７．６Ｈｚ，１Ｈ）、２．４０−２．３５（ｍ，１Ｈ）、２．３５−２．２６（ｍ，１Ｈ）、２．２４−２．１０（ｍ，３Ｈ）、２．０７−１．９４（ｍ，３Ｈ）、１．９１（ｄｄ，Ｊ＝５．４，１７．６Ｈｚ，１Ｈ）、１．８５（ｄ，Ｊ＝１４．６Ｈｚ，１Ｈ）、１．８２−１．６７（ｍ，３Ｈ）、０．５９（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ３４Ｈ４５Ｎ２Ｏ３［Ｍ＋Ｈ］＋：５２９．３４２５、実測値５２９．３４３４。
β−２−フルオロエチルメチルアミン２９Ｂ及びα−２−フルオロエチルメチルアミン２９Ａ
β−２−フルオロエチルメチルアミン２９Ｂ：粗混合物を分取ＴＬＣ（溶離液：２０：１ ジクロロメタン：ＭｅＯＨ）によって精製して、β−２−フルオロエチルメチルアミン２９Ｂ（２．７ｍｇ、５１％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝９．２４（ｓ，１Ｈ）、８．５０（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．８０（ｓ，１Ｈ）、７．７７（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．６４（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．６０（ｄｄ，Ｊ＝１．０，８．３Ｈｚ，１Ｈ）、５．７４（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、５．２６（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、４．６８−４．４６（ｍ，２Ｈ）、３．１５（ｔ，Ｊ＝９．８Ｈｚ，１Ｈ）、２．９９−２．６９（ｍ，３Ｈ）、２．５２（ｄｄ，Ｊ＝８．８，１１．２Ｈｚ，１Ｈ）、２．４７−２．３０（ｍ，６Ｈ）、２．２９−２．１６（ｍ，４Ｈ）、２．１６−２．００（ｍ，３Ｈ）、２．０１−１．９２（ｍ，１Ｈ）、１．９４（ｄｄ，Ｊ＝５．１，１７．３Ｈｚ，１Ｈ）、１．８６（ｄｑ，Ｊ＝５．４，１２．２Ｈｚ，１Ｈ）、１．７９−１．６４（ｍ，３Ｈ）、０．５６（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ３１Ｈ３８Ｎ２ＯＦ［Ｍ＋Ｈ］＋：４７３．２９６３、実測値４７３．２９７１。
β−２，２−ジフルオロエチルメチルアミン３０Ｂ及びα−２，２−ジフルオロエチルメチルアミン３０Ａ
β−２，２−ジフルオロエチルメチルアミン３０Ｂ：粗混合物を分取ＴＬＣ（溶離液：１：１ ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、β−２，２−ジフルオロエチルメチルアミン３０Ｂ（およそ１．１ｍｇ、１９％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝９．２８（ｓ，１Ｈ）、８．５０（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．８６（ｓ，１Ｈ）、７．８３（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）、７．７５（ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．６９（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）、６．１５−５．８３（ｍ，１Ｈ）、５．７５（ｓ，１Ｈ）、５．２７（ｄｄ，Ｊ＝２．４，５．４Ｈｚ，１Ｈ）、３．１７（ｔ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，１Ｈ）、２．９１（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ）、２．５２（ｄｄ，Ｊ＝８．８，１１．７Ｈｚ，１Ｈ）、２．４７（ｂｒ．ｓ，３Ｈ）、２．４５−２．３０（ｍ，４Ｈ）、２．２７−２．１１（ｍ，６Ｈ）、２．１１−１．９９（ｍ，２Ｈ）、１．９５（ｄｄ，Ｊ＝５．１，１７．３Ｈｚ，１Ｈ）、１．８８（ｄｑ，Ｊ＝６．３，１２．７Ｈｚ，１Ｈ）、１．７７−１．６８（ｍ，３Ｈ）、０．５６（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ３１Ｈ３７Ｎ２ＯＦ２［Ｍ＋Ｈ］＋：４９１．２８６８、実測値４９１．２８７９。
β−７−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン３１Ｂ及びα−７−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン３１Ａ
β−７−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン３１Ｂ：粗混合物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、溶離液：１０：１０：１→１０：１０：２ ヘキサン：ＥｔＯＡｃ：２Ｍ ＮＨ３のＭｅＯＨ溶液）によって精製して、β−７−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン３１Ｂ（３ｍｇ、５０％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝９．２４（ｓ，１Ｈ）、８．５０（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．８１（ｓ，１Ｈ）、７．７７（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）、７．６４（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．６１（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）、５．７１（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、５．２４（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、３．４３（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ）、３．１５（ｔ，Ｊ＝９．８Ｈｚ，１Ｈ）、２．６９（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ）、２．５２（ｔ，Ｊ＝９．８Ｈｚ，１Ｈ）、２．４６（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、２．３７（ｄ，Ｊ＝１７．６Ｈｚ，１Ｈ）、２．３８−２．２９（ｍ，１Ｈ）、２．２７−２．１３（ｍ，３Ｈ）、２．１１−１．９２（ｍ，６Ｈ）、１．８７（ｄｑ，Ｊ＝５．９，１２．７Ｈｚ，１Ｈ）、１．８６−１．７９（ｍ，１Ｈ）、１．７８−１．６０（ｍ，８Ｈ）、１．５５（ｔ，Ｊ＝１３．２Ｈｚ，１Ｈ）、０．５６（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ３４Ｈ４１Ｎ２Ｏ［Ｍ＋Ｈ］＋：４９３．３２１３、実測値４９３．３２２４。
β−イソプロピルアミン３２Ｂ及びα−イソプロピルアミン３２Ａ
β−イソプロピルアミン３２Ｂ：粗混合物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、溶離液：１０：１ ＥｔＯＡｃ：２Ｍ ＮＨ３のＭｅＯＨ溶液）によって精製して、β−イソプロピルアミン３２Ｂ（５ｍｇ、７０％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝９．２２（ｓ，１Ｈ）、８．４８（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．７９（ｓ，１Ｈ）、７．７５（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．６２（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．５９（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）、５．７１（ｓ，１Ｈ）、５．２４（ｄ，Ｊ＝２．９Ｈｚ，１Ｈ）、３．２４（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、３．１３（ｔ，Ｊ＝９．７Ｈｚ，１Ｈ）、２．９０（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、２．５０（ｄｄ，Ｊ＝８．５，１１．４Ｈｚ，２Ｈ）、２．４１−２．２６（ｍ，３Ｈ）、２．２４−２．１３（ｍ，３Ｈ）、２．０９（ｄｄ，Ｊ＝２．９，１５．３Ｈｚ，１Ｈ）、２．０６−１．９８（ｍ，２Ｈ）、１．９３（ｄｄ，Ｊ＝５．３，１７．６Ｈｚ，１Ｈ）、１．８５（ｄｑ，Ｊ＝５．３，１２．３Ｈｚ，１Ｈ）、１．７５−１．６２（ｍ，４Ｈ）、１．０７（ｂｒ．ｓ．，６Ｈ）、０．５４（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ３１Ｈ３９Ｎ２Ｏ［Ｍ＋Ｈ］＋：４５５．３０５７、実測値４９３．３０４９。
β−イソプロピルメチルアミン３３Ｂ
粗混合物を分取ＴＬＣ（溶離液：２０：１０：３ ヘキサン：ＥｔＯＡｃ：２Ｍ ＮＨ３のＭｅＯＨ溶液）によって精製して、β−イソプロピルメチルアミン３３Ｂ（４ｍｇ、７８％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝９．２２（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、８．４９（ｄ，Ｊ＝４．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．７９（ｓ，１Ｈ）、７．７５（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．６２（ｄ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，１Ｈ）、７．５９（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）、５．７０（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、５．２２（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、３．２２（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、３．１３（ｔ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，１Ｈ）、２．７７（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、２．５０（ｔ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）、２．４３（ｔ，Ｊ＝１２．９Ｈｚ，１Ｈ）、２．３６（ｄ，Ｊ＝１７．６Ｈｚ，１Ｈ）、２．３５−２．２８（ｍ，２Ｈ）、２．２２−２．１４（ｍ，２Ｈ）、２．１７（ｄｔ，Ｊ＝４．４，９．０Ｈｚ，１Ｈ）、２．１１（ｂｒ．ｓ．，３Ｈ）、２．０８−１．９９（ｍ，２Ｈ）、１．９８−１．９１（ｍ，１Ｈ）、１．９３（ｄｄ，Ｊ＝４．１，１７．０Ｈｚ，１Ｈ）、１．８５（ｄｑ，Ｊ＝５．３，１２．３Ｈｚ，１Ｈ）、１．６９（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ）、１．５９（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、１．５６（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、０．９６（ｂｒ．ｓ．，６Ｈ）、０．５４（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ３２Ｈ４１Ｎ２Ｏ［Ｍ＋Ｈ］＋：４５５．３０５７、実測値４９３．３０４９。
β−イソプロピルエチルアミン３４Ｂ
粗混合物を分取ＴＬＣ（溶離液：１００％ ＭｅＯＨ）によって精製して、β−イソプロピルエチルアミン３４Ｂ（およそ１．５ｍｇ、２０％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）シフト＝９．１９（ｓ，１Ｈ）、８．３８（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．９７（ｓ，１Ｈ）、７．８８（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．７９（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．７４（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）、５．７６（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、５．２７（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、３．２６−３．１９（ｍ，１Ｈ）、２．９１−２．６６（ｍ，３Ｈ）、２．５０（ｄｄ，Ｊ＝９．４，１１．２Ｈｚ，１Ｈ）、２．４８−２．３６（ｍ，３Ｈ）、２．２９（ｔ，Ｊ＝１０．６Ｈｚ，１Ｈ）、２．２３−２．０６（ｍ，４Ｈ）、２．００−１．８６（ｍ，５Ｈ）、１．８６−１．７９（ｍ，１Ｈ）、１．７９−１．６６（ｍ，２Ｈ）、１．２１−１．０８（ｍ，９Ｈ）、０．５７（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ３３Ｈ４３Ｎ２Ｏ［Ｍ＋Ｈ］＋：４８３．３３７０、実測値４８３．３３８２。
β−（Ｒ）−３−フルオロピロリジン３５Ｂ及びα−（Ｒ）−３−フルオロピロリジン３５Ａ
β−（Ｒ）−３−フルオロピロリジン３５Ｂ：粗混合物を分取ＴＬＣ（溶離液：４７．５：４７．５：５ ＥｔＯＡｃ：ヘキサン：２Ｍ ＮＨ３のＭｅＯＨ溶液）によって精製して、β−（Ｒ）−３−フルオロピロリジン３５Ｂ（２．２ｍｇ、３８％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝δ９．２２（ｓ，１Ｈ）、８．４９（ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．７９（ｓ，１Ｈ）、７．７５（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．６２（ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．５９（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、５．７１（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）、５．２３（ｍ，１Ｈ）、５．１１（ｍ，１Ｈ）、３．４０（ｍ，１Ｈ）、３．１３（ｄｄ，Ｊ＝９．３，９．３Ｈｚ，１Ｈ）、２．８８−２．９６（ｍ，２Ｈ）、２．６６−２．７７（ｍ，１Ｈ）、２．４８−２．５８（ｍ，３Ｈ）、２．２９−２．４５（ｍ，３Ｈ）、２．１２−２．２３（ｍ，３Ｈ）、１．９９−２．０９（ｍ，５Ｈ）、１．８３−１．９７（ｍ，２Ｈ）、１．６７−１．７４（ｍ，２Ｈ）、１．５９（ｍ，１Ｈ）、０．５５（ｓ，３Ｈ）。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ３２Ｈ３８ＦＮ２Ｏ［Ｍ＋Ｈ］＋：４８５．２９６８、実測値４８５．２９１５。
β−（Ｓ）−３−フルオロピロリジン３６Ｂ及びα−（Ｓ）−３−フルオロピロリジン３６Ａ
β−（Ｓ）−３−フルオロピロリジン３６Ｂ：粗混合物を分取ＴＬＣ（溶離液：４７．５：４７．５：５ ＥｔＯＡｃ：ヘキサン：２Ｍ ＮＨ３のＭｅＯＨ溶液）によって精製して、β−（Ｓ）−３−フルオロピロリジン３６Ｂ（２．７ｍｇ、４６％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）シフト＝９．２１−９．１８（ｍ，１Ｈ）、８．３７（ｄ，Ｊ＝５．８７Ｈｚ，１Ｈ）、７．９８−７．９６（ｍ，１Ｈ）、７．８８（ｄ，Ｊ＝８．８０Ｈｚ，１Ｈ）、７．８０−７．７７（ｍ，１Ｈ）、７．７４（ｄｄ，Ｊ＝８．５６，１．７１Ｈｚ，１Ｈ）、５．７１（ｄ，Ｊ＝１．４７Ｈｚ，１Ｈ）、５．２３（ｍ，１Ｈ）、５．２２−５．０７（ｍ，２Ｈ）、３．２２（ｔ，Ｊ＝９．８Ｈｚ，１Ｈ）、３．０８−２．９７（ｍ，１Ｈ）、２．９０（ｔｄ，Ｊ＝８．１９，５．６２Ｈｚ，１Ｈ）、２．７０−２．６４（ｍ，１Ｈ）、２．６２−２．５８（ｍ，１Ｈ）、２．５２−２．３４（ｍ，６Ｈ）、２．３３−２．２４（ｍ，１Ｈ）、２．２３−２．０３（ｍ，３Ｈ）、２．０３−１．８５（ｍ，６Ｈ）、１．７７−１．６７（ｍ，２Ｈ）、１．６７−１．５６（ｍ，１Ｈ）、０．５７（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ３２Ｈ３８ＦＮ２Ｏ［Ｍ＋Ｈ］＋：４８５．６５５３、実測値４８５．６５５１。
β−３，３−ジフルオロピロリジン３７Ｂ及びα−３，３−ジフルオロピロリジン３７Ａ
β−３，３−ジフルオロピロリジン３７Ｂ：粗混合物を分取ＴＬＣ（溶離液：８０：１５：５ ＥｔＯＡｃ：ヘキサン：２Ｍ ＮＨ３のＭｅＯＨ溶液）によって精製して、β−３，３−ジフルオロピロリジン３７Ｂ（２．９ｍｇ、４０％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝δ９．２２（ｓ，１Ｈ）、８．４９（ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．７９（ｓ，１Ｈ）、７．７５（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）、７．６２（ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．５９（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、５．７２（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）、５．２５（ｄｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，２．０Ｈｚ，１Ｈ）、３．１３（ｄｄ，Ｊ＝９．３Ｈｚ，９．３Ｈｚ，１Ｈ）、２．８６−３．０３（ｍ，２Ｈ）、２．１４（ｄｄ，Ｊ＝６．９，６．９Ｈｚ，２Ｈ）、２．５８（ｍ，１Ｈ）、２．５０（ｄｄ，Ｊ＝１１．７，８．３Ｈｚ，２Ｈ）、２．１３−２．４４（ｍ，６Ｈ）、１．９８−２．１０（ｍ，２Ｈ）、１．９０−１．９６（ｍ，１Ｈ）、１．８３−１．８９（ｍ，２Ｈ）、１．６６−１．７４（ｍ，２Ｈ）、１．５３−１．６１（ｍ，１Ｈ）、０．５５（ｓ，３Ｈ）。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ３２Ｈ３７Ｆ２Ｎ２Ｏ［Ｍ＋Ｈ］＋：５０３．２８７４ 実測値５０３．２８１４。
α−３，３−ジフルオロピロリジン３７Ａ：粗混合物を分取ＴＬＣ（溶離液：８０：１５：５ ＥｔＯＡｃ：ヘキサン：２Ｍ ＮＨ３のＭｅＯＨ溶液）によって精製して、α−３，３−ジフルオロピロリジン３７Ａ（６．０ｍｇから２．９ｍｇ、４０％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝δ９．２２（ｓ，１Ｈ）、８．４９（ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．７９（ｓ，１Ｈ）、７．７５（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．６２（ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．５９（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、５．７４（ｓ，１Ｈ）、５．２８（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ）、３．１５（ｄｄ，Ｊ＝９．３Ｈｚ，９．３Ｈｚ，１Ｈ）、３．０１（ｄｔ，Ｊ＝１３．７，２．４Ｈｚ，２Ｈ）、２．８３（ｄｄ，Ｊ＝６．８，６．８Ｈｚ，２Ｈ）、２．５２（ｄｄ，Ｊ＝１１．２，８．３Ｈｚ，２Ｈ）、２．１５−２．４０（ｍ，６Ｈ）、２．０２−２．０７（ｍ，３Ｈ）、１．７９−１．９７（ｍ，３Ｈ）、１．７２（ｍ，３Ｈ）、１．６１（ｍ，３Ｈ）、０．５４（ｓ，３Ｈ）。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ３２Ｈ３７Ｆ２Ｎ２Ｏ［Ｍ＋Ｈ］＋：５０３．２８７４ 実測値５０３．２８０７。
β−２−オキサ−６−アザスピロ［３．４］オクタン３８Ｂ及びα−２−オキサ−６−アザスピロ［３．４］オクタン３８Ａ
β−２−オキサ−６−アザスピロ［３．４］オクタン３８Ｂ：粗混合物を分取ＴＬＣ（溶離液：４７．５：４７．５：５ ＥｔＯＡｃ：ヘキサン：２Ｍ ＮＨ３のＭｅＯＨ溶液）によって精製して、β−２−オキサ−６−アザスピロ［３．４］オクタン３８Ｂ（３．４ｍｇ、５５％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）シフト＝９．２１（ｓ，１Ｈ）、８．３９（ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．９９（ｓ，１Ｈ）、７．９０（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．８１（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．７６（ｄｄ，Ｊ＝１．７，８．５Ｈｚ，１Ｈ）、５．７３−５．７０（ｍ，１Ｈ）、５．２８−５．２３（ｍ，１Ｈ）、４．６３（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，４Ｈ）、３．２８−３．２１（ｍ，１Ｈ）、２．９０（ｄｄ，Ｊ＝９．３，４９．８Ｈｚ，２Ｈ）、２．６２（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ）、２．５４−２．４０（ｍ，５Ｈ）、２．３６−２．２７（ｍ，２Ｈ）、２．２３−２．１６（ｍ，１Ｈ）、２．１３（ｓ，２Ｈ）、２．１０−２．０５（ｍ，１Ｈ）、２．０２−１．８８（ｍ，６Ｈ）、１．８１−１．６６（ｍ，２Ｈ）、１．６６−１．５７（ｍ，１Ｈ）、０．５８（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ３４Ｈ４１Ｎ２Ｏ２［Ｍ＋Ｈ］＋：５０９．７０１５、実測値５０９．７０１３。
β−シクロプロピルアミン３９Ｂ及びα−シクロプロピルアミン３９Ａ
β−シクロプロピルアミン３９Ｂ：粗混合物を分取ＴＬＣ（溶離液：４７．５：４７．５：５ ＥｔＯＡｃ：ヘキサン：２Ｍ ＮＨ３のＭｅＯＨ溶液）によって精製して、β−シクロプロピルアミン３９Ｂ（３．７ｍｇ、５５％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）シフト＝９．２１（ｓ，１Ｈ）、８．３９（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．９９（ｓ，１Ｈ）、７．９０（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．８１（ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．７６（ｄｄ，Ｊ＝１．７，８．５Ｈｚ，１Ｈ）、５．７３（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）、５．２８−５．２４（ｍ，１Ｈ）、３．２４（ｔ，Ｊ＝２０．０Ｈｚ，１Ｈ）、３．１８−３．１２（ｍ，１Ｈ）、２．５４−２．４０（ｍ，４Ｈ）、２．３６−２．２７（ｍ，２Ｈ）、２．１８（ｓ，３Ｈ）、２．０５−２．００（ｍ，２Ｈ）、２．００−１．９５（ｍ，２Ｈ）、１．９４−１．９１（ｍ，１Ｈ）、１．９１−１．８４（ｍ，２Ｈ）、１．７７−１．６６（ｍ，３Ｈ）、０．５８（ｓ，３Ｈ）、０．５１（ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ，２Ｈ）、０．３９（ｄｄ，Ｊ＝２．２，３．７Ｈｚ，２Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ３１Ｈ３７Ｎ２Ｏ［Ｍ＋Ｈ］＋：４５３．６３８３、実測値４５３．６３８１。
β−シクロプロピルメチルアミン４０Ｂ
粗混合物を分取ＴＬＣ（溶離液：４７．５：４７．５：５ ＥｔＯＡｃ：ヘキサン：２Ｍ ＮＨ３のＭｅＯＨ溶液）によって精製して、β−メチルシクロプロピルアミン４０Ｂ（１．１ｍｇ、８５％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）シフト＝９．２１（ｓ，１Ｈ）、８．３９（ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ）、８．００−７．９８（ｍ，１Ｈ）、７．９０（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．８１（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．７６（ｄｄ，Ｊ＝１．５，９．３Ｈｚ，１Ｈ）、５．７８−５．７４（ｍ，１Ｈ）、５．２９−５．２５（ｍ，１Ｈ）、３．２６−３．２４（ｍ，１Ｈ）、３．２３（ｔ，Ｊ＝９．８Ｈｚ，１Ｈ）、３．２７−３．２１（ｍ，１Ｈ）、２．８８（ｔ，Ｊ＝１．０Ｈｚ，１Ｈ）、２．５６−２．４９（ｍ，１Ｈ）、２．４８−２．４１（ｍ，２Ｈ）、２．３７（ｓ，３Ｈ）、２．３３−２．２６（ｍ，１Ｈ）、２．２３−２．１０（ｍ，３Ｈ）、２．０３（ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ）、２．０１−１．９６（ｍ，１Ｈ）、１．９６−１．８８（ｍ，２Ｈ）、１．８８−１．８２（ｍ，１Ｈ）、１．７９−１．６８（ｍ，２Ｈ）、０．５９（ｍ，５Ｈ）、０．５０−０．４６（ｍ，２Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ３２Ｈ３９Ｎ２Ｏ［Ｍ＋Ｈ］＋：４６７．６６４９、実測値４６７．６６４５。
β−３−メチル−３−オキセタナミン４１Ｂ及びα−３−メチル−３−オキセタナミン４１Ａ
β−３−メチル−３−オキセタナミン４１Ｂ：粗混合物を分取ＴＬＣ（溶離液：４７．５：４７．５：５ ＥｔＯＡｃ：ヘキサン：２Ｍ ＮＨ３のＭｅＯＨ溶液）によって精製して、β−３−メチル−３−オキセタナミン４１Ｂ（４．７ｍｇ、８１％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）シフト＝９．２１（ｓ，１Ｈ）、８．３９（ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．９９（ｓ，１Ｈ）、７．９０（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．８１（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．７８−７．７４（ｍ，１Ｈ）、５．７５（ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ，１Ｈ）、５．２９−５．２６（ｍ，１Ｈ）、４．６１（ｄｄ，Ｊ＝３．４，５．９Ｈｚ，２Ｈ）、４．３６（ｄｄ，Ｊ＝５．９，８．３Ｈｚ，２Ｈ）、３．２７−３．２１（ｍ，１Ｈ）、３．１９−３．１１（ｍ，１Ｈ）、２．５０（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，４Ｈ）、２．２９（ｓ，２Ｈ）、２．２３−２．１３（ｍ，２Ｈ）、２．０２−１．９５（ｍ，２Ｈ）、１．９４−１．８７（ｍ，３Ｈ）、１．８０−１．６７（ｍ，４Ｈ）、１．５５（ｂｒ．ｓ．，４Ｈ）、０．５９（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ３２Ｈ３９Ｎ２Ｏ２［Ｍ＋Ｈ］＋：４８３．６６４３、実測値４８３．６６４０。
β−Ｎ−メチル−１−（３−メチル−３−オキセタニル）メタンアミン４２Ｂ及びα−Ｎ−メチル−１−（３−メチル−３−オキセタニル）メタンアミン４２Ａ
β−Ｎ−メチル−１−（３−メチル−３−オキセタニル）メタンアミン４２Ｂ：粗混合物を分取ＴＬＣ（溶離液：４７．５：４７．５：５ ＥｔＯＡｃ：ヘキサン：２Ｍ ＮＨ３のＭｅＯＨ溶液）によって精製して、β−Ｎ−メチル−１−（３−メチル−３−オキセタニル）メタンアミン４２Ｂ（１．５ｍｇ、２４％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）シフト＝９．２２（ｓ，１Ｈ）、８．３９（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．９９（ｓ，１Ｈ）、７．９０（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）、７．８１（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．７６（ｄｄ，Ｊ＝１．７，８．５Ｈｚ，１Ｈ）、５．７５−５．７２（ｍ，１Ｈ）、５．３１−５．２７（ｍ，１Ｈ）、４．５７−４．５１（ｍ，２Ｈ）、４．３２（ｄｄ，Ｊ＝１．５，５．９Ｈｚ，２Ｈ）、３．２８−３．２２（ｍ，１Ｈ）、２．６９（ｓ，２Ｈ）、２．５７−２．３１（ｍ，５Ｈ）、２．３０−２．１５（ｍ，４Ｈ）、２．０４−１．８６（ｍ，５Ｈ）、１．８２（ｔ，Ｊ＝２４．９Ｈｚ，１Ｈ）、１．７７−１．６９（ｍ，１Ｈ）、１．６８−１．５７（ｍ，２Ｈ）、１．３９（ｄ，Ｊ＝２．９Ｈｚ，６Ｈ）、０．５８（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ３４Ｈ４３Ｎ２Ｏ２［Ｍ＋Ｈ］＋：５１１．７１７４、実測値５１１．７１７３。
β−ｔ−ブチルアミン４３Ｂ及びα−ｔ−ブチルアミン４３Ａ
β−ｔ−ブチルアミン４３Ｂ：粗混合物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、溶離液：５０：１ ＥｔＯＡｃ：トリエチルアミン）によって精製して、β−ｔ−ブチルアミン４３Ｂ（３．４ｍｇ、６０％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝９．２２（ｓ，１Ｈ）、８．４９（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．７９（ｓ，１Ｈ）、７．７５（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）、７．６２（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．５９（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）、５．７５（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）、５．２９（ｍ，１Ｈ）、３．１４（ｄｄ，Ｊ＝１０．８，１０．８Ｈｚ，１Ｈ）、２．５２（ｄｄ，Ｊ＝１１．７，８．８Ｈｚ，１Ｈ）、２．３２−２．３８（ｍ，２Ｈ）、２．１３−２．２６（ｍ，５Ｈ）、２．０１−２．０８（ｍ，２Ｈ）、１．９４（ｄｄ，Ｊ＝１７．６，５．４Ｈｚ，１Ｈ）、１．８４−１．８７（ｍ，３Ｈ）、１．６２−１．７４（ｍ，３Ｈ）、１．２５（ｂｒｓ，９Ｈ）。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ３２Ｈ４１Ｎ２Ｏ［Ｍ＋Ｈ］＋：４６９．３２１９、実測値４６９．３２６５。
β−アジリジン７８Ｂ及びα−アジリジン７８Ａ
ケトン１３（６ｍｇ、０．０１４６ｍｍｏｌ）のメタノール（０．５ｍＬ）溶液に、２−クロロエチルアミン塩酸塩（５．１ｍｇ、０．０４３７ｍｍｏｌ）、続いてトリエチルアミン（０．００６ｍＬ、０．０４３７ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を室温で１５分間撹拌した。氷酢酸（０．００２５ｍＬ、０．０４３７ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を室温で２０分間撹拌した。この混合物を０℃まで冷却し、シアノ水素化ホウ素ナトリウム（３．２ｍｇ、０．０５１０ｍｍｌ）を添加した。反応物を１６時間かけて室温まで温めた後、塩化アンモニウム（５ｍＬ）の飽和溶液でクエンチした。この混合物を酢酸エチル（３×８ｍＬ）で抽出した。合わせた有機画分を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（溶離液として酢酸エチル、２％トリエチルアミン）によって精製して、所望のβ−アジリジン７８Ｂ（４．５ｍｇ、収率７２％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ＝９．２２（ｓ，１Ｈ）、８．４８（ｄ，Ｊ＝５．８７Ｈｚ，１Ｈ）、７．７９（ｓ，１Ｈ）、７．７５（ｄ，Ｊ＝８．８０Ｈｚ，１Ｈ）、７．６３（ｄ，Ｊ＝５．３８Ｈｚ，１Ｈ）、７．５９（ｄ，Ｊ＝８．８０Ｈｚ，１Ｈ）、５．７４（ｄ，Ｊ＝１．９６Ｈｚ，１Ｈ）、５．２５（ｍ，１Ｈ）、３．３４（ｍ，２Ｈ）、３．１４（ｄｄ，Ｊ＝１０．２７，１０．２７Ｈｚ，１Ｈ）、２．７５（ｍ，３Ｈ）、２．５１（ｄｄ，Ｊ＝１１．２５，８．３１，１Ｈ）、２．４４（ｍ，１Ｈ）、２．２９−２．３７（ｍ，３Ｈ）、２．１２−２．２７（ｍ，３Ｈ）、１．８１−２．０８（ｍ，３Ｈ）、１．５４−１．７４（ｍ，４Ｈ）、１．１５（ｍ，１Ｈ）、１．０５（ｍ，１Ｈ）、０．５５（ｓ，３Ｈ）。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ３０Ｈ３５Ｎ２Ｏ［Ｍ＋Ｈ］＋：４３９．２７４９ 実測値４３９．２７２１。
β−ヒドロキシプロリン６５Ｂ及びα−ヒドロキシプロリン６５Ａ
ケトン１３とヒドロキシプロリンメチルエステルとを「方法Ｂ」条件下で反応させた。粗混合物をＴＨＦ：ＭｅＯＨ：Ｈ２Ｏ中の１Ｍ ＬｉＯＨ＝３：３：１に溶解し、５５℃で１．５時間撹拌した。粗混合物を粗濃縮し、ｐＨ３．７の酢酸ナトリウム緩衝液を適用し、続いてクロロホルムで３回抽出した。粗混合物を分取ＴＬＣ（溶離液：５：１ ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ）によって精製して、β−ヒドロキシプロリン６５Ｂ（３．７ｍｇ、２工程で５８％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝９．２２（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、８．４７（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、７．７７（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、７．７５（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．６３（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、７．５７（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）、５．７７（ｓ，１Ｈ）、５．３０（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、４．４７（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、４．２１−４．０８（ｍ，１Ｈ）、４．０１−３．９０（ｍ，０Ｈ）、３．５５（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、３．１９−３．１１（ｍ，１Ｈ）、３．１２（ｔ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、２．５１−２．４４（ｍ，Ｊ＝１０．６，１０．６Ｈｚ，１Ｈ）、２．４４−２．３７（ｍ，２Ｈ）、２．３５（ｄ，Ｊ＝１７．６Ｈｚ，２Ｈ）、２．３１−２．１４（ｍ，６Ｈ）、２．１１（ｄｄ，Ｊ＝６．２，１３．２Ｈｚ，１Ｈ）、２．０６−１．９６（ｍ，２Ｈ）、１．９２（ｄｄ，Ｊ＝４．７，１７．６Ｈｚ，１Ｈ）、１．８７−１．６８（ｍ，３Ｈ）、０．５３（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ３３Ｈ３９Ｎ２Ｏ４［Ｍ＋Ｈ］＋：５２７．２９０４、実測値５２７．２９２１。
α−ジメチルアミン１４Ａ及びβ−ジメチルアミン１４Ｂ
粗混合物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、溶離液：２０：１ ＥｔＯＡｃ：２Ｍ ＮＨ３のＭｅＯＨ溶液）によって順次精製して、α−ジメチルアミン１４Ａ（２．２ｍｇ、６８％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，Ｃ６Ｄ６）シフト＝９．２６（ｓ，１Ｈ）、８．５６（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．４４−７．３９（ｍ，１Ｈ）、７．３６（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．２１−７．２０（ｍ，１Ｈ）、７．２０（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、５．６８−５．６５（ｍ，１Ｈ）、５．１５−５．１１（ｍ，１Ｈ）、２．７２−２．６６（ｍ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，１Ｈ）、２．５９（ｄｄ，Ｊ＝８．８，１１．２Ｈｚ，１Ｈ）、２．３４（ｔｔ，Ｊ＝２．９，１２．１Ｈｚ，１Ｈ）、２．１６（ｔｄ，Ｊ＝３．２，１６．０Ｈｚ，１Ｈ）、２．０９（ｓ，６Ｈ）、２．１３−１．９２（ｍ，８Ｈ）、１．８５（ｄｄｄ，Ｊ＝５．０，９．０，１３．６Ｈｚ，１Ｈ）、１．７３（ｄｔ，Ｊ＝５．３，１２．３Ｈｚ，１Ｈ）、１．７２−１．６６（ｍ，２Ｈ）、１．６０−１．５７（ｍ，１Ｈ）、１．５７−１．４９（ｍ，１Ｈ）、１．２０（ｄｑ，Ｊ＝４．１，１２．３Ｈｚ，１Ｈ）、０．４０（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ３０Ｈ３７Ｎ２Ｏ［Ｍ＋Ｈ］＋：４４１．２９００、実測値４４１．２９０９。
α−モノメチルアミン２４Ａ及びβ−モノメチルアミン２４Ｂ
粗混合物を分取ＴＬＣ（シリカゲル、溶離液：１０：１ ＥｔＯＡｃ：２Ｍ ＮＨ３のＭｅＯＨ溶液）によって精製して、α−モノメチルアミン２４Ａ（およそ１．２ｍｇ、３７％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝９．２４（ｓ，１Ｈ）、８．５０（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．８１（ｓ，１Ｈ）、７．７７（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．６４（ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．６１（ｄｄ，Ｊ＝１．０，８．８Ｈｚ，１Ｈ）、５．７６（ｓ，１Ｈ）、５．２９（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ）、３．１６（ｔ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，１Ｈ）、２．６１−２．５０（ｍ，３Ｈ）、２．４９（ｓ，３Ｈ）、２．４３−２．３０（ｍ，３Ｈ）、２．３０−２．１５（ｍ，４Ｈ）、２．１３−１．９９（ｍ，２Ｈ）、１．９５（ｄｄ，Ｊ＝５．４，１７．６Ｈｚ，１Ｈ）、１．８８（ｄｑ，Ｊ＝４．９，１１．７Ｈｚ，１Ｈ）、１．７９−１．６０（ｍ，３Ｈ）、１．１９（ｄｑ，Ｊ＝４．４，１２．７Ｈｚ，１Ｈ）、０．５６（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ２９Ｈ３５Ｎ２Ｏ［Ｍ＋Ｈ］＋：４２７．２７４４、実測値４２７．２７５９。
α−第一級アミン６２Ａ及びβ−第一級アミン６２Ｂ
粗混合物を分取ＴＬＣ（シリカゲル、溶離液：２５：１ ＥｔＯＡｃ：２Ｍ ＮＨ３のＭｅＯＨ溶液）によって精製して、α−第一級アミン６２Ａ（３．７ｍｇ、３８％）及びβ−第一級アミン６２Ｂ（２．５ｍｇ、２６％）を得た。
α−第一級アミン６２Ａ：１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝９．２２（ｓ，１Ｈ）、８．４８（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．７９（ｓ，１Ｈ）、７．７５（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．６２（ｄ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，１Ｈ）、７．５９（ｄｄ，Ｊ＝１．２，８．２Ｈｚ，１Ｈ）、５．７４（ｓ，１Ｈ）、５．２７（ｄ，Ｊ＝２．９Ｈｚ，１Ｈ）、３．１４（ｔ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，１Ｈ）、２．８５（ｔｔ，Ｊ＝３．２，１１．７Ｈｚ，１Ｈ）、２．５１（ｄｄ，Ｊ＝８．５，１１．４Ｈｚ，１Ｈ）、２．４０−２．２８（ｍ，３Ｈ）、２．２７−２．１２（ｍ，４Ｈ）、２．１０−１．９６（ｍ，３Ｈ）、１．９３（ｄｄ，Ｊ＝５．３，１７．６Ｈｚ，１Ｈ）、１．９２−１．８１（ｍ，２Ｈ）、１．７６−１．６２（ｍ，２Ｈ）、１．２２（ｄｔｄ，Ｊ＝４．１，１１．７，１３．５Ｈｚ，１Ｈ）、０．５３（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ２８Ｈ３３Ｎ２Ｏ［Ｍ＋Ｈ］＋：４１３．２５８７、実測値４１３．２５９０。
β−第一級アミン６２Ｂ：１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝９．２２（ｓ，１Ｈ）、８．４８（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．７９（ｓ，１Ｈ）、７．７５（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．６２（ｄ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，１Ｈ）、７．５９（ｄｄ，Ｊ＝１．５，８．５Ｈｚ，１Ｈ）、５．７３（ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，１Ｈ）、５．２５（ｄ，Ｊ＝２．９Ｈｚ，１Ｈ）、３．４７（ｔｄ，Ｊ＝３．７，７．９Ｈｚ，１Ｈ）、３．１３（ｔ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，１Ｈ）、２．５８（ｄｔ，Ｊ＝５．３，１４．１Ｈｚ，１Ｈ）、２．５１（ｄｄ，Ｊ＝８．５，１１．４Ｈｚ，１Ｈ）、２．３９−２．２１（ｍ，５Ｈ）、２．１７（ｄｑ，Ｊ＝５．３，９．４Ｈｚ，１Ｈ）、２．１３（ｄｄｄ，Ｊ＝２．３，４．７，１５．８Ｈｚ，１Ｈ）、２．１０−１．９９（ｍ，２Ｈ）、１．９３（ｄｄ，Ｊ＝５．３，１７．０Ｈｚ，１Ｈ）、１．８６（ｄｑ，Ｊ＝５．３，１２．３Ｈｚ，１Ｈ）、１．８２（ｄｄｄ，Ｊ＝１．８，４．１，１３．５Ｈｚ，１Ｈ）、１．７８−１．６６（ｍ，３Ｈ）、０．５４（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ２８Ｈ３３Ｎ２Ｏ［Ｍ＋Ｈ］＋：４１３．２５８７、実測値４１３．２５９９。
モルホリン１５Ａ及びモルホリン１５Ｂ
粗混合物を分取ＴＬＣ（シリカゲル、溶離液：４０：１ ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ）によって精製して、α−モルホリン１５Ａ（およそ１．５ｍｇ、３８％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝９．２３（ｓ，１Ｈ）、８．４９（ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．８０（ｓ，１Ｈ）、７．７６（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）、７．６３（ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．６０（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）、５．７４（ｓ，１Ｈ）、５．２９（ｄ，Ｊ＝２．９Ｈｚ，１Ｈ）、３．７３（ｂｒ．ｓ．，４Ｈ）、３．１５（ｔ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，１Ｈ）、２．６０（ｂｒ．ｓ．，４Ｈ）、２．５２（ｄｄ，Ｊ＝８．５，１１．５Ｈｚ，２Ｈ）、２．４６−２．２９（ｍ，３Ｈ）、２．２９−２．１３（ｍ，４Ｈ）、２．１２−１．９９（ｍ，２Ｈ）、１．９４（ｄｄ，Ｊ＝５．１，１７．３Ｈｚ，１Ｈ）、１．９４−１．８１（ｍ，３Ｈ）、１．７３（ｔｄ，Ｊ＝８．２，１２．３Ｈｚ，１Ｈ）、１．７０−１．６３（ｍ，１Ｈ）、１．３８（ｄｑ，Ｊ＝４．４，１２．２Ｈｚ，１Ｈ）、０．５４（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ３２Ｈ３９Ｎ２Ｏ２［Ｍ＋Ｈ］＋：４８３．３００６、実測値４８３．３０００。
α−ピロリジン１９Ａ及びβ−ピロリジン１９Ｂ
粗混合物を分取ＴＬＣ（シリカゲル、溶離液：２０：１０：３ ＥｔＯＡｃ：ヘキサン：２Ｍ ＮＨ３のＭｅＯＨ溶液）によって精製して、α−ピロリジン１９Ａ（２．５ｍｇ、５５％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝９．２２（ｓ，１Ｈ）、８．４８（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．７９（ｓ，１Ｈ）、７．７５（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．６２（ｄ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，１Ｈ）、７．５９（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、５．７２（ｓ，１Ｈ）、５．２７（ｄ，Ｊ＝２．９Ｈｚ，１Ｈ）、３．１４（ｔ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，１Ｈ）、２．６３（ｂｒ．ｓ．，４Ｈ）、２．５２（ｄｄ，Ｊ＝８．８，１１．２Ｈｚ，１Ｈ）、２．４２−２．２９（ｍ，３Ｈ）、２．２８−２．１５（ｍ，５Ｈ）、２．１２（ｄ，Ｊ＝１２．３Ｈｚ，１Ｈ）、２．１０−２．００（ｍ，２Ｈ）、１．９３（ｄｄ，Ｊ＝５．３，１７．０Ｈｚ，１Ｈ）、１．９０−１．８３（ｍ，２Ｈ）、１．８０（ｂｒ．ｓ．，４Ｈ）、１．７２（ｔｄ，Ｊ＝８．８，１２．９Ｈｚ，１Ｈ）、１．６３（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、１．３７（ｄｑ，Ｊ＝３．５，１１．７Ｈｚ，１Ｈ）、０．５３（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ３２Ｈ３９Ｎ２Ｏ［Ｍ＋Ｈ］＋：４６７．３０５７、実測値４６７．３０６４。
α−アゼチジン１８Ａ及びβ−アゼチジン１８Ｂ
粗混合物を分取ＴＬＣ（シリカゲル、溶離液：１：１ ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ）によって精製して、α−アゼチジン１８Ａ（およそ１．５ｍｇ、３８％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝９．２４（ｓ，１Ｈ）、８．５０（ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．８０（ｓ，１Ｈ）、７．７７（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．６４（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．６０（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、５．７４（ｓ，１Ｈ）、５．２８（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、３．２４（ｂｒ．ｓ．，４Ｈ）、３．１６（ｔ，Ｊ＝９．８Ｈｚ，１Ｈ）、２．５４（ｄｄ，Ｊ＝８．８，１１．２Ｈｚ，１Ｈ）、２．４２−２．３０（ｍ，３Ｈ）、２．３０−２．１３（ｍ，５Ｈ）、２．１２−２．００（ｍ，２Ｈ）、１．９５（ｄｄ，Ｊ＝５．４，１８．１Ｈｚ，１Ｈ）、１．９３−１．７８（ｍ，３Ｈ）、１．７４（ｔｄ，Ｊ＝８．３，１２．２Ｈｚ，１Ｈ）、１．６７−１．５４（ｍ，３Ｈ）、１．１１（ｑ，Ｊ＝１２．２Ｈｚ，１Ｈ）、０．５５（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ３１Ｈ３７Ｎ２Ｏ［Ｍ＋Ｈ］＋：４５３．２９０６、実測値４５３．２９００。
α−ｔ−ブチルアミン４３Ａ及びβ−ｔ−ブチルアミン４３Ｂ
粗混合物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、溶離液：１０：１ ＣＨＣｌ３：ｉ−ＰｒＯＨ）によって精製して、α−ｔ−ブチルアミン４３Ａ（２．４ｍｇ、４２％）及びβ−ｔ−ブチルアミン４３Ｂ（１．６ｍｇ、２８％）を得た。
α−ｔ−ブチルアミン４３Ａ：１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝９．２２（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、８．４８（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．７８（ｓ，１Ｈ）、７．７５（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．６２（ｄ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，１Ｈ）、７．５８（ｄｄ，Ｊ＝１．２，８．２Ｈｚ，１Ｈ）、５．７３（ｓ，１Ｈ）、５．２８（ｄ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，１Ｈ）、３．１４（ｔ，Ｊ＝９．７Ｈｚ，１Ｈ）、２．４９（ｄｄ，Ｊ＝８．８，１１．２Ｈｚ，１Ｈ）、２．４６−２．４０（ｍ，１Ｈ）、２．３９−２．２９（ｍ，３Ｈ）、２．２８−２．１２（ｍ，５Ｈ）、２．０８−１．９９（ｍ，１Ｈ）、１．９３（ｄｄ，Ｊ＝５．３，１７．０Ｈｚ，１Ｈ）、１．８３（ｄｑ，Ｊ＝５．０，１２．２Ｈｚ，２Ｈ）、１．７６−１．６０（ｍ，３Ｈ）、１．５５（ｂｒ．ｓ．，９Ｈ）、１．２６−１．１８（ｍ，１Ｈ）、０．５４（ｓ，３Ｈ）。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ３２Ｈ４１Ｎ２Ｏ［Ｍ＋Ｈ］＋：４６９．３２１３、実測値４６９．３２２３。
β−ｔ−ブチルアミン４３Ｂ：１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝９．２２（ｓ，１Ｈ）、８．４８（ｄ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，１Ｈ）、７．７８（ｓ，１Ｈ）、７．７５（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．６２（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．５９（ｄ，Ｊ＝９．４Ｈｚ，１Ｈ）、５．７３（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、５．２５（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、３．３８−３．２３（ｍ，１Ｈ）、３．１３（ｔ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，１Ｈ）、２．５７−２．４８（ｍ，１Ｈ）、２．４９（ｄｄ，Ｊ＝８．５，１０．９Ｈｚ，１Ｈ）、２．４０−２．２７（ｍ，２Ｈ）、２．２５−２．０８（ｍ，４Ｈ）、２．０７−１．９８（ｍ，２Ｈ）、１．９３（ｄｄ，Ｊ＝５．３，１７．６Ｈｚ，２Ｈ）、１．８４（ｄｑ，Ｊ＝５．３，１２．３Ｈｚ，１Ｈ）、１．７６−１．６６（ｍ，２Ｈ）、１．６５−１．４７（ｍ，３Ｈ）、１．４２−０．９４（ｂｒ．ｓ．，９Ｈ）、０．５４（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ３２Ｈ４１Ｎ２Ｏ［Ｍ＋Ｈ］＋：４６９．３２１３、実測値４６９．３２２５。
α−ヒドロキシアゼチジン７０Ａ及びβ−ヒドロキシアゼチジン７０Ｂ
粗混合物を分取ＴＬＣ（シリカゲル、溶離液：２：３ ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ）によって精製して、α−ヒドロキシアゼチジン７０Ａ（１．２ｍｇ、３０％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝９．２４（ｓ，１Ｈ）、８．５０（ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．８０（ｓ，１Ｈ）、７．７７（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）、７．６４（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．６０（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）、５．７７（ｓ，１Ｈ）、５．３２（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ）、４．６６−４．５５（ｍ，１Ｈ）、３．９４（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ）、３．３４（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ）、３．１６（ｔ，Ｊ＝９．８Ｈｚ，１Ｈ）、２．５３（ｄｄ，Ｊ＝８．５，１１．５Ｈｚ，１Ｈ）、２．４１（ｄｄ，Ｊ＝１５．６，２８．３Ｈｚ，２Ｈ）、２．３４（ｄｔ，Ｊ＝４．９，１１．２Ｈｚ，１Ｈ）、２．２８（ｔ，Ｊ＝１１．２Ｈｚ，１Ｈ）、２．２５−２．１４（ｍ，３Ｈ）、２．１０−１．９８（ｍ，２Ｈ）、１．９５（ｄｄ，Ｊ＝５．４，１７．６Ｈｚ，１Ｈ）、１．９６−１．８９（ｍ，１Ｈ）、１．８６（ｄｄ，Ｊ＝５．４，１２．２Ｈｚ，１Ｈ）、１．８４−１．７６（ｍ，２Ｈ）、１．７４（ｔｄ，Ｊ＝８．４，１２．４Ｈｚ，１Ｈ）、１．６５（ｄｔ，Ｊ＝７．８，１０．５Ｈｚ，１Ｈ）、１．４０−１．２７（ｍ，１Ｈ）、０．５５（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ３１Ｈ３７Ｎ２Ｏ２［Ｍ＋Ｈ］＋：４６９．２８５０、実測値４６９．２８７２。
α−ヒドロキシメチルアゼチジン６９Ａ及びβ−ヒドロキシメチルアゼチジン６９Ｂ
粗混合物を分取ＴＬＣ（シリカゲル、溶離液：１：１ ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ）によって精製して、α−ヒドロキシメチルアゼチジン６９Ａ（２．３ｍｇ、５３％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝９．２３（ｓ，１Ｈ）、８．４９（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．８０（ｓ，１Ｈ）、７．７６（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．６３（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．５９（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、５．７６（ｓ，１Ｈ）、５．３０（ｄ，Ｊ＝２．９Ｈｚ，１Ｈ）、３．６５−３．３５（ｍ，４Ｈ）、３．１５（ｔ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，１Ｈ）、２．５２（ｄｄ，Ｊ＝８．５，１１．４Ｈｚ，１Ｈ）、２．４０（ｄｄ，Ｊ＝１６．４，２５．８Ｈｚ，２Ｈ）、２．３３（ｄｔ，Ｊ＝４．１，１１．７Ｈｚ，１Ｈ）、２．２６（ｔ，Ｊ＝１１．４Ｈｚ，１Ｈ）、２．２４（ｍ，３Ｈ）、２．０９−２．００（ｍ，１Ｈ）、１．９８（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、１．９４（ｄｄ，Ｊ＝５．０，１７．３Ｈｚ，１Ｈ）、１．９２−１．７７（ｍ，４Ｈ）、１．７３（ｔｄ，Ｊ＝８．２，１２．９Ｈｚ，１Ｈ）、１．６７−１．５９（ｍ，１Ｈ）、１．５８−１．５０（ｂｒ．ｓ．，３Ｈ）、１．３９−１．２８（ｍ，１Ｈ）、０．５８−０．５１（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ３２Ｈ３９Ｎ２Ｏ２［Ｍ＋Ｈ］＋：４８３．３００６、実測値４８３．３０００。
α−アミノエチルスルホンアミド７１Ａ及びβ−アミノエチルスルホンアミド７１Ｂ
粗混合物を分取ＴＬＣ（シリカゲル、溶離液：１００％ ＥｔＯＡｃ）によって精製して、β−アミノエチルスルホンアミド７１Ｂ（０．７ｍｇ、１５％）及びα−アミノエチルスルホンアミド７１Ａ（１．１ｍｇ、２４％）を得た。
β−アミノエチルスルホンアミド７１Ｂ：１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）シフト＝９．２１−９．１７（ｍ，１Ｈ）、８．３７（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．９７（ｓ，１Ｈ）、７．８８（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）、７．７９（ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．７４（ｄｄ，Ｊ＝１．５，８．８Ｈｚ，１Ｈ）、５．７４−５．６９（ｍ，１Ｈ）、５．２８−５．２２（ｍ，１Ｈ）、３．２６−３．１８（ｍ，Ｊ＝９．８Ｈｚ，１Ｈ）、３．１４−３．００（ｍ，４Ｈ）、２．５９−２．３８（ｍ，４Ｈ）、２．３７−２．２６（ｍ，２Ｈ）、２．２３−２．０６（ｍ，３Ｈ）、２．０３−１．８６（ｍ，５Ｈ）、１．８５−１．７６（ｍ，１Ｈ）、１．７６−１．５９（ｍ，３Ｈ）、０．５７（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ３０Ｈ３８Ｎ３Ｏ３Ｓ［Ｍ＋Ｈ］＋：５２０．２６２８、実測値５２０．２６４０。
α−アミノエチルスルホンアミド７１Ａ：１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）シフト＝９．１９（ｓ，１Ｈ）、８．３７（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．９７（ｓ，１Ｈ）、７．８８（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．７９（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．７４（ｄｄ，Ｊ＝１．７，８．６Ｈｚ，１Ｈ）、５．７７−５．７１（ｍ，１Ｈ）、５．３０−５．２４（ｍ，１Ｈ）、３．２９−３．２４（ｍ，２Ｈ）、３．２３（ｄｄ，Ｊ＝９．０，１１．０Ｈｚ，１Ｈ）、３．１３（ｄｔ，Ｊ＝２．７，６．７Ｈｚ，２Ｈ）、２．７３（ｔｔ，Ｊ＝３．１，１２．０Ｈｚ，１Ｈ）、２．５０（ｄｄ，Ｊ＝８．６，１１．５Ｈｚ，１Ｈ）、２．４７−２．３８（ｍ，２Ｈ）、２．３９−２．３４（ｍ，１Ｈ）、２．３２（ｄ，Ｊ＝１１．２Ｈｚ，１Ｈ）、２．３０−２．２２（ｍ，２Ｈ）、２．１７（ｄｔｄ，Ｊ＝５．９，９．３，１４．７Ｈｚ，２Ｈ）、２．１０−２．０３（ｍ，１Ｈ）、２．０１（ｓ，１Ｈ）、２．００−１．９２（ｍ，１Ｈ）、１．９０（ｄｄ，Ｊ＝６．４，１７．１Ｈｚ，１Ｈ）、１．７２（ｔｄ，Ｊ＝８．３，１２．３Ｈｚ，１Ｈ）、１．６８−１．６０（ｍ，２Ｈ）、１．１８（ｄｑ，Ｊ＝４．４，１２．２Ｈｚ，１Ｈ）、０．５６（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ３０Ｈ３８Ｎ３Ｏ３Ｓ［Ｍ＋Ｈ］＋：５２０．２６２８、実測値５２０．２６４３。
α−ヒドロキシアミノメチルオキセタン７２Ａ及びβ−ヒドロキシアミノメチルオキセタン７２Ｂ
粗混合物を分取ＴＬＣ（シリカゲル、溶離液：１００％ ＥｔＯＡｃ）によって精製して、α−ヒドロキシアミノメチルオキセタン７２Ａ（１．５ｍｇ、３４％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）シフト＝９．１９（ｓ，１Ｈ）、８．３８（ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．９７（ｓ，１Ｈ）、７．８８（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）、７．７９（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．７４（ｄｄ，Ｊ＝１．５，８．８Ｈｚ，１Ｈ）、５．８４−５．７８（ｍ，１Ｈ）、５．３５−５．３０（ｍ，１Ｈ）、４．６４（ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ）、４．５７（ｄｄ，Ｊ＝３．７，７．１Ｈｚ，２Ｈ）、３．４８−３．４０（ｍ，２Ｈ）、３．２４（ｄｄ，Ｊ＝９．０，１１．０Ｈｚ，２Ｈ）、２．５４−２．４８（ｍ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、２．４８−２．４０（ｍ，３Ｈ）、２．４０−２．２４（ｍ，４Ｈ）、２．２４−２．１３（ｍ，３Ｈ）、２．０１−１．８５（ｍ，４Ｈ）、１．８０−１．６４（ｍ，２Ｈ）、１．４６（ｄｑ，Ｊ＝４．９，１２．２Ｈｚ，１Ｈ）、０．５７（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ３２Ｈ３９Ｎ２Ｏ３［Ｍ＋Ｈ］＋：４９９．２９５５、実測値４９９．２９３３。
β−ＰＥＧアミン７５Ｂ及びα−ＰＥＧアミン７５Ａ
β−ＰＥＧアミン７５Ｂ：粗混合物を分取ＴＬＣ（シリカゲル、溶離液：５：５：１ ＥｔＯＡｃ：ジクロロメタン：２Ｍ ＮＨ３のＭｅＯＨ溶液）によって精製して、β−ＰＥＧアミン７５Ｂ（１．０ｍｇ、１８％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝９．２４（ｓ，１Ｈ）、８．５０（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．８１（ｓ，１Ｈ）、７．７７（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）、７．６４（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．６１（ｄｄ，Ｊ＝１．７，８．５Ｈｚ，１Ｈ）、５．７２（ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ，２Ｈ）、５．２５（ｄｄ，Ｊ＝２．２，５．１Ｈｚ，１Ｈ）、３．７１−３．６４（ｍ，６Ｈ）、３．６２（ｔ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，２Ｈ）、３．５８（ｄｄ，Ｊ＝３．７，５．６Ｈｚ，２Ｈ）、３．４１（ｓ，３Ｈ）、３．１９−３．１２（ｍ，Ｊ＝１０．７Ｈｚ，１Ｈ）、３．１１（ｔ，Ｊ＝３．９Ｈｚ，１Ｈ）、２．７９（ｔ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，２Ｈ）、２．５６（ｔ，Ｊ＝１６．１Ｈｚ，１Ｈ）、２．５２（ｄｄ，Ｊ＝８．３，１１．２Ｈｚ，１Ｈ）、２．４２−２．２９（ｍ，３Ｈ）、２．２７−２．１３（ｍ，２Ｈ）、２．１２−２．０１（ｍ，２Ｈ）、２．０２（ｄｄ，Ｊ＝３．７，１３．９Ｈｚ，１Ｈ）、１．９５（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ）、１．８６（ｄｑ，Ｊ＝５．４，１２．２Ｈｚ，１Ｈ）、１．８０−１．７３（ｍ，１Ｈ）、１．７１（ｄｄ，Ｊ＝３．２，１１．５Ｈｚ，１Ｈ）、１．６８−１．５８（ｍ，２Ｈ）、０．５６（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ３５Ｈ４７Ｎ２Ｏ４［Ｍ＋Ｈ］＋：５５９．３５３０、実測値５５９．３５４５。
α−ＰＥＧアミン７５Ａ：粗混合物を分取ＴＬＣ（シリカゲル、溶離液：１００：５：１ ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ：トリエチルアミン）によって精製して、α−ＰＥＧアミン７５Ａ（１．１ｍｇ、２０％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝９．２４（ｓ，１Ｈ）、８．５０（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．８１（ｓ，１Ｈ）、７．７７（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．６４（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．６１（ｄｄ，Ｊ＝１．５，８．８Ｈｚ，１Ｈ）、５．７５（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）、５．２８（ｄｄ，Ｊ＝２．２，５．１Ｈｚ，１Ｈ）、３．７０−３．６５（ｍ，７Ｈ）、３．６４（ｔ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，２Ｈ）、３．６１−３．５５（ｍ，２Ｈ）、３．４１（ｓ，３Ｈ）、３．１６（ｄｄ，Ｊ＝９．０，１０．５Ｈｚ，１Ｈ）、２．８７（ｔ，Ｊ＝５．１Ｈｚ，２Ｈ）、２．６７（ｔ，Ｊ＝１１．５Ｈｚ，１Ｈ）、２．５４（ｄｄ，Ｊ＝８．３，１１．７Ｈｚ，１Ｈ）、２．３８（ｄ，Ｊ＝１６．１Ｈｚ，３Ｈ）、２．２４（ｄ，Ｊ＝１２．２Ｈｚ，２Ｈ）、２．２２−２．１４（ｍ，２Ｈ）、２．１１−２．０２（ｍ，２Ｈ）、１．９５（ｄｄ，Ｊ＝５．４，１６．６Ｈｚ，１Ｈ）、１．８８（ｄｑ，Ｊ＝５．４，１２．２Ｈｚ，１Ｈ）、１．７８−１．６９（ｍ，２Ｈ）、１．６８−１．６２（ｍ，１Ｈ）、１．２７−１．１９（ｍ，１Ｈ）、０．５５（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ３５Ｈ４７Ｎ２Ｏ４［Ｍ＋Ｈ］＋：５５９．３５３０、実測値５５９．３５４２。
α−メチルスルホンアミド７３Ａ
粗混合物を分取ＴＬＣ（シリカゲル、溶離液：４０：１ ＭｅＯＨ：ジクロロメタン）によって精製して、α−メチルスルホンアミド７３Ａ（２．０ｍｇ、８２％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝９．２４（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、８．５１（ｄ，Ｊ＝４．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．８０（ｓ，１Ｈ）、７．７７（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）、７．６４（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．６０（ｄｄ，Ｊ＝１．５，８．３Ｈｚ，１Ｈ）、５．７８（ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ，１Ｈ）、５．３６−５．２９（ｍ，１Ｈ）、４．２４（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ）、３．５３（ｔｄｔ，Ｊ＝３．９，７．７，１１．７Ｈｚ，１Ｈ）、３．２０−３．１１（ｍ，Ｊ＝１０．７Ｈｚ，１Ｈ）、３．０４（ｓ，３Ｈ）、２．５１（ｄｄ，Ｊ＝８．３，１１．７Ｈｚ，１Ｈ）、２．３７（ｄ，Ｊ＝１６．６Ｈｚ，３Ｈ）、２．２８（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ）、２．２５−２．１０（ｍ，４Ｈ）、２．１０−２．００（ｍ，１Ｈ）、１．９６（ｄｄ，Ｊ＝５．４，１７．６Ｈｚ，１Ｈ）、１．８８（ｄｔ，Ｊ＝５．４，１１．７Ｈｚ，１Ｈ）、１．８５（ｔ，Ｊ＝１２．２Ｈｚ，１Ｈ）、１．８０−１．６６（ｍ，２Ｈ）、１．４７−１．３５（ｍ，Ｊ＝４．４Ｈｚ，１Ｈ）、０．５５（ｓ，３Ｈ）；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ２９Ｈ３５Ｎ２Ｏ３Ｓ［Ｍ＋Ｈ］＋：４９１．２３６３、実測値４９１．２３８７。
β−メチルスルホンアミド７３Ｂ
粗混合物を分取ＴＬＣ（シリカゲル、溶離液：４０：１ ＭｅＯＨ：ジクロロメタン）によって精製して、β−メチルスルホンアミド７３Ｂ（１．７ｍｇ、９０％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝９．２４（ｓ，１Ｈ）、８．５０（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．８０（ｓ，１Ｈ）、７．７８（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．６４（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．６０（ｄｄ，Ｊ＝１．５，８．３Ｈｚ，１Ｈ）、５．７９（ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ，１Ｈ）、５．３５−５．３０（ｍ，１Ｈ）、４．３１（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，１Ｈ）、４．００（ｑｕｉｎｄ，Ｊ＝３．６，６．７Ｈｚ，１Ｈ）、３．１６（ｄｄ，Ｊ＝９．０，１０．５Ｈｚ，１Ｈ）、３．０３（ｓ，３Ｈ）、２．５２（ｄｄ，Ｊ＝８．５，１１．５Ｈｚ，１Ｈ）、２．４１（ｔ，Ｊ＝１６．１Ｈｚ，１Ｈ）、２．３９（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ）、２．３２−２．２６（ｍ，２Ｈ）、２．２６−２．１４（ｍ，３Ｈ）、２．１２−１．９９（ｍ，２Ｈ）、１．９６（ｄｄ，Ｊ＝５．１，１７．３Ｈｚ，２Ｈ）、１．８６（ｄｑ，Ｊ＝５．４，１２．２Ｈｚ，１Ｈ）、１．８３−１．７２（ｍ，３Ｈ）、０．５６（ｓ，３Ｈ）；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ２９Ｈ３５Ｎ２Ｏ３Ｓ［Ｍ＋Ｈ］＋：４９１．２３６３、実測値４９１．２３７６。
α−メチル−メチルスルホンアミド７６Ａ
粗混合物を分取ＴＬＣ（シリカゲル、溶離液：４０：１ ＭｅＯＨ：ジクロロメタン）によって精製して、α−メチル−メチルスルホンアミド７６Ａ（０．７ｍｇ、５７％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝９．２４（ｓ，１Ｈ）、８．５１（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．８１（ｓ，１Ｈ）、７．７８（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）、７．６４（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．６０（ｄｄ，Ｊ＝１．５，８．３Ｈｚ，１Ｈ）、５．７９（ｓ，１Ｈ）、５．３３（ｄｄ，Ｊ＝２．２，５．６Ｈｚ，１Ｈ）、３．９８（ｔｔ，Ｊ＝３．４，１２．４Ｈｚ，１Ｈ）、３．１６（ｄｄ，Ｊ＝９．０，１０．５Ｈｚ，１Ｈ）、２．８９（ｓ，３Ｈ）、２．８０（ｓ，３Ｈ）、２．５２（ｄｄ，Ｊ＝８．５，１１．５Ｈｚ，１Ｈ）、２．４４（ｄｄｄ，Ｊ＝２．７，４．１，１６．６Ｈｚ，１Ｈ）、２．３６（ｂｒ．ｓ．，３Ｈ）、２．２８（ｄ，Ｊ＝１０．７Ｈｚ，２Ｈ）、２．２１（ｄｑ，Ｊ＝４．９，９．１Ｈｚ，１Ｈ）、２．１４（ｔ，Ｊ＝１２．７Ｈｚ，１Ｈ）、２．１０−２．００（ｍ，０Ｈ）、１．９７（ｄｄ，Ｊ＝５．４，１７．６Ｈｚ，１Ｈ）、１．９３（ｄｄ，Ｊ＝２．９，１２．２Ｈｚ，１Ｈ）、１．８８（ｄｄ，Ｊ＝５．４，１２．２Ｈｚ，１Ｈ）、１．８７−１．８１（ｍ，１Ｈ）、１．８０−１．６０（ｍ，３Ｈ）、０．５６（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ３０Ｈ３７Ｎ２Ｏ３Ｓ［Ｍ＋Ｈ］＋：５０５．２５１９、実測値５０５．２５３７。
実施例Ｓ４． イソキノリン化合物１０から１２への別の可能な経路
イソキノリン１２への新たな経路を設計した。下記スキーム２−１を参照されたい。トリフレート化／鈴木クロスカップリング反応を、同様の基質に対して図面に示される指定の試薬を用いて達成した。例えば、Nicolaou et al., J. Am. Chem. Soc. 2009, 131, 10587-10597を参照されたい。
トリフレート２０の合成
モノケトン１０（２００ｍｇ、５８４μｍｏｌ、１．００当量）のＴＨＦ（４ｍＬ）溶液に、ＮａＨＭＤＳ（１Ｍ、７０１μＬ、７０１μｍｏｌ、１．２０当量）を−７８℃で滴加した。１．５時間撹拌した後、ＴＨＦ（２．５ｍＬ）中のＰｈＮＴｆ２（３１３ｍｇ、８７６μｍｏｌ、１．５０当量）をカニューレにより投入し、反応混合物を０℃まで温めた。更に３０分後、飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液（８ｍＬ）を撹拌反応混合物に添加し、ＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）で希釈した。層を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（２×６ｍＬ）で抽出し、有機層を合わせ、ブライン（１５ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。次いで、得られる残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、溶離液：８：１→５：１ ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、トリフレート２０（２３７ｍｇ、８６％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝５．７６（ｓ，１Ｈ）、５．６７（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、５．３２（ｄｄ，Ｊ＝２．０，４．９Ｈｚ，１Ｈ）、４．０２−３．９４（ｍ，４Ｈ）、２．６７（ｄｄ，Ｊ＝６．８，１０．７Ｈｚ，１Ｈ）、２．４９（ｔ，Ｊ＝１４．６Ｈｚ，１Ｈ）、２．４５（ｄｄｄ，Ｊ＝３．７，６．５，１５．２Ｈｚ，１Ｈ）、２．３８−２．２８（ｍ，４Ｈ）、２．１７（ｄｄｄ，Ｊ＝１．５，１０．７，１２．７Ｈｚ，１Ｈ）、２．１２（ｄ，Ｊ＝１３．２Ｈｚ，１Ｈ）、２．１０（ｄｄ，Ｊ＝５．９，１７．６Ｈｚ，１Ｈ）、１．９８（ｄｄ，Ｊ＝２．７，１３．４Ｈｚ，１Ｈ）、１．８８（ｄｄｄ，Ｊ＝７．６，８．９，１２．８Ｈｚ，１Ｈ）、１．８０（ｔｄｄ，Ｊ＝２．４，４．８，１２．７Ｈｚ，１Ｈ）、１．７４−１．６３（ｍ，２Ｈ）、１．０３（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ２２Ｈ２６Ｏ６Ｆ３Ｓ［Ｍ＋Ｈ］＋：４７５．１３９７、実測値４７５．１４１１。
トリフレート２０からの１７，１８−不飽和イソキノリン２１の鈴木クロスカップリング合成
トリフレート２０（１．００当量）及びイソキノリン−７−ボロン酸（３．００当量）の１，４−ジオキサン及びＨ２Ｏ（１０：１、０．０２Ｍ）溶液にＫ２ＣＯ３（３．００当量）を添加し、溶液を不活性Ａｒで５分間バブリングした。Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２・ＣＨ２Ｃｌ２（０．０５当量）を添加し、反応混合物を８０℃で１時間撹拌した。混合物を室温まで冷却し、飽和ＮａＨＣＯ３溶液を適用した。混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、層を分離した。水層をＥｔＯＡｃで抽出し、合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。
粗混合物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、溶離液：２：１→１：１→１：２ ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、１７，１８−不飽和イソキノリン２１（４９０ｍｇ、８４％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝９．２３（ｓ，１Ｈ）、８．４９（ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．９４（ｓ，１Ｈ）、７．８５−７．８１（ｍ，１Ｈ）、７．８０−７．７５（ｍ，１Ｈ）、７．６３（ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ）、６．２６（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、５．８２（ｓ，１Ｈ）、５．４０（ｄ，Ｊ＝３．４Ｈｚ，１Ｈ）、４．０８−３．９０（ｍ，４Ｈ）、２．７６（ｄｄ，Ｊ＝７．１，１１．０Ｈｚ，１Ｈ）、２．５８（ｄｔ，Ｊ＝５．４，１７．６Ｈｚ，１Ｈ）、２．５６−２．４０（ｍ，３Ｈ）、２．４０−２．２８（ｍ，４Ｈ）、２．１６（ｄ，Ｊ＝１３．２Ｈｚ，１Ｈ）、２．０２（ｄｄ，Ｊ＝２．０，１３．２Ｈｚ，１Ｈ）、１．９４（ｔｄ，Ｊ＝８．８，１３．２Ｈｚ，１Ｈ）、１．８１（ｔｄ，Ｊ＝２．０，１２．７Ｈｚ，１Ｈ）、１．７６−１．６７（ｍ，２Ｈ）、１．１８（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ３０Ｈ３２ＮＯ３［Ｍ＋Ｈ］＋：４５４．２３７７、実測値４５４．２３６６。
１７，１８−不飽和イソキノリン２１からのイソキノリン１２の合成
１７，１８−不飽和イソキノリン２１（４００ｍｇ、８７７μｍｏｌ、１．０当量）のＴＨＦ（３６ｍＬ）溶液に１０ｗｔ％Ｐｄ／Ｃ（２８０ｍｇ、２６３μｍｏｌ、０．３０当量）を添加し、Ｈ２バルーンを取り付けた。３時間後、反応混合物を、セライトパッドを通して濾過し、０．２Ｍ ＮＨ３のＭｅＯＨ（４０ｍＬ）溶液で洗浄し、減圧下で濃縮した。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、溶離液：１：１→１：２ ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、イソキノリン１２（３２５ｍｇ、８０％）を得た。スペクトルデータは１−クロロイソキノリン付加物１１で構成されるイソキノリン１２と一致していた。
実施例Ｓ５． イソキノリン類縁体の合成
トリフレート２０からの１７，１８−不飽和５−インダゾール５６の鈴木クロスカップリング
トリフレート２０（１．００当量）及びインダゾール−５−ボロン酸エステル（３．００当量）の１，４−ジオキサン及びＨ２Ｏ（１０：１、０．０２Ｍ）溶液にＫ２ＣＯ３（３．００当量）を添加し、溶液を不活性Ａｒで５分間バブリングした。Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２・ＣＨ２Ｃｌ２（０．０５当量）を添加し、反応混合物を８０℃で１時間撹拌した。混合物を室温まで冷却し、飽和ＮａＨＣＯ３溶液を適用した。混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、層を分離した。水層をＥｔＯＡｃで抽出し、合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。
粗混合物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、溶離液：１：３→１：１ ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）によって精製して、１７，１８−不飽和６−インダゾール５６（１３ｍｇ、７０％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝８．０４（ｓ，１Ｈ）、７．６７（ｄ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，１Ｈ）、７．４９（ｓ，１Ｈ）、７．２７（ｄ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，１Ｈ）、６．１２（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、５．７８（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、５．３６（ｔ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，１Ｈ）、３．９９（ｍ，４Ｈ）、２．７２（ｍ，１Ｈ）、２．５３−２．４４（ｍ，３Ｈ）、２．４０（ｂｒ．ｄ．，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，１Ｈ）、２．３６−２．２５（ｍ，４Ｈ）、２．１４（ｄ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，１Ｈ）、２．００（ｄｄ，Ｊ＝１０．０，５．０Ｈｚ，１Ｈ）、１．９３−１．８７（ｍ，１Ｈ）、１．７９（ｍ，１Ｈ）、１．７２−１．６６（ｍ，２Ｈ）、１．１０（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ２８Ｈ３１Ｎ２Ｏ３［Ｍ＋Ｈ］＋：４４３．５５７３、実測値４４３．５５７１。
トリフレート２０からの１７，１８−不飽和６−インダゾール５９の鈴木クロスカップリング
トリフレート２０（１．００当量）及びインダゾール−６−ボロン酸エステル（３．００当量）の１，４−ジオキサン及びＨ２Ｏ（１０：１、０．０２Ｍ）溶液にＫ２ＣＯ３（３．００当量）を添加し、溶液を不活性Ａｒで５分間バブリングした。Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２・ＣＨ２Ｃｌ２（０．０５当量）を添加し、反応混合物を８０℃で１時間撹拌した。混合物を室温まで冷却し、飽和ＮａＨＣＯ３溶液を適用した。混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、層を分離した。水層をＥｔＯＡｃで抽出し、合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。
粗混合物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、溶離液：１：４→３：１ ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）によって精製して、１７，１８−不飽和５−インダゾール５９（５．９ｍｇ、６５％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝１０．０４（ｂｒｓ，１Ｈ）、８．０５（ｓ，１Ｈ）、７．７５（ｓ，１Ｈ）、７．４６（ＡＢｑ，ＪＡＢ＝８．８Ｈｚ，Δν＝３３．５Ｈｚ，２Ｈ）、６．０２（ｓ，１Ｈ）、５．７９（ｓ，１Ｈ）、５．３８（ｄｄ，Ｊ＝３．４，３．４Ｈｚ，１Ｈ）、３．９４−４．０１（ｍ，４Ｈ）、２．７３（ｄｄ，Ｊ＝１０．７，６．８Ｈｚ，１Ｈ）、２．４４−２．５３（ｍ，３Ｈ）、２．４０（ｄ，１２．２Ｈｚ，１Ｈ）、２．２８−２．３６（ｍ，３Ｈ）、２．１５（ｄ，Ｊ＝１３．２Ｈｚ，１Ｈ）、２．０３（ｐａｒｏｂｓｄ，Ｊ＝１１．２Ｈｚ，１Ｈ）、２．０１（ｐａｒｏｂｓｄｄ，Ｊ＝１３．２，２．４Ｈｚ，１Ｈ）、１．９１（ｄｔ，Ｊ＝１２．２１，９．３Ｈｚ，１Ｈ）、１．７７−１．８２（ｍ，１Ｈ）、１．６６−１．７３（ｍ，２Ｈ）、１．１０（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ２８Ｈ３１Ｎ２Ｏ３［Ｍ＋Ｈ］＋：４４３．２３３５、実測値４４３．４９５６。
β−ジメチルアミンアミノメチルピリジン４６Ｂ及びα−ジメチルアミンアミノメチルピリジン４６Ａ
β−ジメチルアミンアミノメチルピリジン４６Ｂ：粗混合物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、溶離液：１０：１ ＥｔＯＡｃ：２Ｍ ＮＨ３のＭｅＯＨ溶液）によって精製して、β−ジメチルアミンアミノメチルピリジン４６Ｂ（５ｍｇ、５５％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝８．５８（ｓ，１Ｈ）、８．５１（ｄｄ，Ｊ＝１．５，４．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．７１（ｔｄ，Ｊ＝２．０，７．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．２６（ｄｄ，Ｊ＝４．９，７．８Ｈｚ，１Ｈ）、５．７１（ｓ，１Ｈ）、５．２４（ｄｄ，Ｊ＝２．４，４．４Ｈｚ，１Ｈ）、３．８８−３．８０（ｍ，２Ｈ）、２．８１（ｔ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ）、２．４５（ｄｔ，Ｊ＝６．３，１３．７Ｈｚ，１Ｈ）、２．４６−２．３７（ｍ，１Ｈ）、２．３０（ｂｒ．ｓ．，６Ｈ）、２．２６−２．１９（ｍ，３Ｈ）、２．１７−２．０７（ｍ，５Ｈ）、１．９２（ｄｄ，Ｊ＝２．９，１３．７Ｈｚ，２Ｈ）、１．７９（ｄｄｄｄ，Ｊ＝４．９，８．３，１０．３，１３．２Ｈｚ，１Ｈ）、１．７４−１．５９（ｍ，４Ｈ）、１．３９（ｄｄｔ，Ｊ＝４．４，９．８，１２．７Ｈｚ，１Ｈ）、０．８０（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ２７Ｈ３８Ｎ３Ｏ［Ｍ＋Ｈ］＋：４２０．３００９、実測値４２０．２９９９。
β−ジメチルアミン１７，１８−不飽和アミドピリジン４９Ｂ及びα−ジメチルアミン１７，１８−不飽和アミドピリジン４９Ａ
β−ジメチルアミン１７，１８−不飽和アミドピリジン４９Ｂ：粗混合物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、溶離液：８：１ ＥｔＯＡｃ：２Ｍ ＮＨ３のＭｅＯＨ溶液）によって精製して、β−ジメチルアミン１７，１８−不飽和アミドピリジン４９Ｂ（２．１ｍｇ、４４％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝８．５８（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ）、８．３６（ｄｄ，Ｊ＝１．０，４．９Ｈｚ，１Ｈ）、８．２３（ｔｄ，Ｊ＝２．０，８．３Ｈｚ，１Ｈ）、７．４９（ｓ，１Ｈ）、７．２９（ｄｄ，Ｊ＝４．９，８．８Ｈｚ，１Ｈ）、６．５７（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、５．７３（ｓ，１Ｈ）、５．３３（ｄｄ，Ｊ＝２．０，５．４Ｈｚ，１Ｈ）、２．６６−２．５６（ｍ，２Ｈ）、２．５４（ｄｄ，Ｊ＝３．２，６．６Ｈｚ，１Ｈ）、２．５１−２．３２（ｍ，５Ｈ）、２．２８（ｂｒ．ｓ．，６Ｈ）、２．２０（ｄｄｄ，Ｊ＝１．２，１１．０，１２．７Ｈｚ，１Ｈ）、２．１０（ｔｄ，Ｊ＝６．４，１３．１Ｈｚ，２Ｈ）、１．９７−１．８９（ｍ，３Ｈ）、１．７６（ｄｔ，Ｊ＝７．８，１１．２Ｈｚ，１Ｈ）、１．６６−１．５５（ｍ，１Ｈ）、１．１４（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ２７Ｈ３４Ｎ３Ｏ２［Ｍ＋Ｈ］＋：４３２．２６４６、実測値４３２．２６４９。
β−ジメチルアミン１７，１８−不飽和フタラジン５５Ｂ及びα−ジメチルアミン１７，１８−不飽和フタラジン５５Ａ
β−ジメチルアミン１７，１８−不飽和フタラジン５５Ｂ：粗混合物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、溶離液：９：１ ＥｔＯＡｃ：２Ｍ ＮＨ３のＭｅＯＨ溶液）によって精製して、β−ジメチルアミン１７，１８−不飽和フタラジン５５Ｂ（５．５ｍｇ、７３％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝９．５０（ｓ，２Ｈ）、７．９７−８．０３（ｍ，１Ｈ）、７．８９（ｄ，Ｊ＝４．３９Ｈｚ，２Ｈ）、６．３４−６．３９（ｍ，１Ｈ）、５．７７−５．８３（ｍ，１Ｈ）、５．３２−５．４３（ｍ，１Ｈ）、２．７２（ｄｄ，Ｊ＝１１．２３，６．８４Ｈｚ，１Ｈ）、２．３８−２．５０（ｍ，４Ｈ）、２．４７（ｂｒ．ｍ．，６Ｈ）、２．２４−２．３０（ｍ，３Ｈ）、２．０９−２．２０（ｍ，２Ｈ）、２．０３（ｄ，Ｊ＝１０．２５Ｈｚ，２Ｈ）、１．８８−１．９９（ｍ，２Ｈ）、１．７５−１．８６（ｍ，２Ｈ）、１．１７（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ２８Ｈ３３Ｎ３Ｏ［Ｍ＋Ｈ］＋：４４０．５９９８、実測値４４０．５９９５。
β−ジメチルアミン１７，１８−不飽和６−インダゾール５８Ｂ及びα−ジメチルアミン１７，１８−不飽和６−インダゾール５８Ａ
β−ジメチルアミン１７，１８−不飽和６−インダゾール５８Ｂ：粗混合物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、溶離液：９：１ ＥｔＯＡｃ：２Ｍ ＮＨ３のＭｅＯＨ溶液）によって精製して、β−ジメチルアミン１７，１８−不飽和６−インダゾール５８Ｂ（３．９ｍｇ、７３％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝８．０３（ｓ，１Ｈ）、７．６７（ｄ，Ｊ＝８．３０Ｈｚ，１Ｈ）、７．４９（ｓ，１Ｈ）、７．２５−７．２８（ｍ，１Ｈ）、６．１２（ｔ，Ｊ＝２．４４Ｈｚ，１Ｈ）、５．７５（ｓ，１Ｈ）、５．３３（ｔ，Ｊ＝３．４２Ｈｚ，１Ｈ）、３．２２−３．３８（ｍ，１Ｈ）、２．７１（ｄｄ，Ｊ＝１１．２３，６．８４Ｈｚ，１Ｈ）、２．４４−２．５０（ｍ，４Ｈ）、２．４１（ｂｒ．ｍ．，６Ｈ）、２．２２−２．３１（ｍ，３Ｈ）、２．０９−２．２０（ｍ，２Ｈ）、２．０４（ｄ，Ｊ＝２．９３Ｈｚ，２Ｈ）、１．７８（ｔｄ，Ｊ＝１１．３５，７．０８Ｈｚ，２Ｈ）、１．５２−１．６４（ｍ，１Ｈ）、１．０７−１．１５（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ２８Ｈ３３Ｎ３Ｏ［Ｍ＋Ｈ］＋：４２８．５８９１、実測値４２８．５８８９。
β−ジメチルアミン１７，１８−不飽和５−インダゾール６１Ｂ及びα−ジメチルアミン１７，１８−不飽和５−インダゾール６１Ａ
β−ジメチルアミン１７，１８−不飽和５−インダゾール６１Ｂ：粗混合物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、溶離液：９：１ ＥｔＯＡｃ：２Ｍ ＮＨ３のＭｅＯＨ溶液）によって精製して、β−ジメチルアミン１７，１８−不飽和５−インダゾール６１Ｂ（２．５ｍｇ、７０％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝８．０５（ｓ，１Ｈ）、７．７５（ｓ，１Ｈ）、７．４７（ＡＢｑ，ＪＡＢ＝８．８Ｈｚ，Δν＝３３．５Ｈｚ，２Ｈ）、６．０２（ｄｄ，Ｊ＝２．０，２．０Ｈｚ，１Ｈ）、５．７４（ｓ，１Ｈ）、５．３３（ｄｄ，Ｊ＝３．４，３．４Ｈｚ，１Ｈ）、２．７２（ｄｄ，Ｊ＝１１．２，６．８Ｈｚ，１Ｈ）、２．４３−２．４８（ｍ，５Ｈ）、２．３７−２．４１（ｍ，２Ｈ）、２．２６−２．３５（ｍ，８Ｈ）、２．１１（ｍ，２Ｈ）、２．０４（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，１Ｈ）、１．８８−１．９８（ｍ，３Ｈ）、１．７７（ｍ，１Ｈ）、１．１０（ｓ，３Ｈ）。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ２８Ｈ３４Ｎ３Ｏ［Ｍ＋Ｈ］＋：４２８．２７０２、実測値４２８．２６５３。
β−ジメチルアミンアミドピリジン５０Ｂの合成
β−ジメチルアミン１７，１８−不飽和アミドピリジン４９Ｂ（およそ１．２ｍｇ）のＭｅＯＨ（３００μＬ）溶液にＭｇ（およそ１ｍｇ）を添加し、室温で４８時間撹拌した。反応混合物にＨ２Ｏ（７００μＬ）を添加し、ＥｔＯＡｃ（７００μＬ）で希釈した。水相をＥｔＯＡｃ（２×０．５ｍＬ）で抽出し、合わせた有機相をブライン（０．５ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。残渣をＨＰＬＣ（Ｅｃｌｉｐｓｅ ＸＤＢ−Ｃ８カラム、９．４ｍｍ×２５ｃｍ；勾配＝３０分にわたる０％→３５％ ＭｅＣＮ（０．１％ギ酸）：Ｈ２Ｏ（０．１％ギ酸））によって精製して、β−ジメチルアミンアミドピリジン５０Ｂ（およそ０．３ｍｇ、２５％）を得た。少量であるため、特徴的（diagnostic）ピークのみを割り当てた。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝８．５６（ｂｒ．ｓ，１Ｈ）、８．３７（ｄ，Ｊ＝３．４Ｈｚ，１Ｈ）、８．２１（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）、７．０９（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、５．８１（ｓ，１Ｈ）、５．３９−５．３３（ｍ，１Ｈ）、２．７８（ｂｒ．ｓ．，６Ｈ）、０．８３（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ２７Ｈ３５Ｎ３Ｏ２［Ｍ＋Ｈ］＋：４３４．２８０２、実測値４３４．２８１５。
フタラジン６−トリフレート５１の合成
６−フタラジノール（５８８．４ｍｇ、４．２６ｍｍｏｌ、１．０当量）のＣＨＣｌ３溶液にＮ−フェニル−ビス（トリフルオロメタンスルホンイミド）（１．７３ｇ、４．８３ｍｍｏｌ、１．２当量）、Ｅｔ３Ｎ（０．９ｍＬ、６．０４ｍｍｏｌ、１．５当量）及びＤＭＡＰ（触媒）を添加した。混合物を６０℃まで温め、３時間撹拌した。反応物を室温まで冷却し、飽和ＮａＨＣＯ３及びＣＨ２Ｃｌ２でクエンチし、層を分離した。水層をＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機層を合わせ、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。粗混合物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、溶離液：９：１ ジクロロメタン：ＭｅＯＨ）によって精製して、フタラジン６−トリフレート５１（９９５ｍｇ、９０％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝９．６８（ｄ，Ｊ＝３．９１Ｈｚ，２Ｈ）８．１９（ｄ，Ｊ＝８．７９Ｈｚ，１Ｈ）７．９６（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）７．８４−７．８９（ｍ，１Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ９Ｈ６Ｆ３Ｎ２Ｏ３Ｓ［Ｍ＋Ｈ］＋：２７９．２１５７、実測値２７９．２１５２。
フタラジン６−トリメチルスズ５２の合成
フタラジン６−トリフレート５２（９９２ｍｇ、３．５７ｍｍｏｌ、１．０当量）のＣ６Ｈ６溶液にＬｉＣｌ（９０７ｍｇ、２１．５９ｍｍｏｌ、６．０当量）、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（４１２ｍｇ、０．３５６５ｍｍｏｌ、０．１当量）及び（Ｍｅ３Ｓｎ）２（０．７８ｍＬ、３．７４３ｍｍｏｌ、１．０５当量）を添加した。溶液を超音波処理器において１０分間アルゴンでバブリングし、混合物を１０５℃まで温め、１時間撹拌した。反応物を室温まで冷却し、酢酸エチルで希釈し、セライトで濾過した。有機部分を飽和ＮａＨＣＯ３で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた後、減圧下で濃縮した。粗混合物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、溶離液：１：１ ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）によって精製して、フタラジン６−トリメチルスズ５２（６５６ｍｇ、６３％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝９．５４（ｄ，Ｊ＝４．３９Ｈｚ，２Ｈ）８．１２（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）８．０８（ｄ，Ｊ＝７．８１Ｈｚ，１Ｈ）７．９２（ｄ，Ｊ＝７．８１Ｈｚ，１Ｈ）０．４３（ｓ，９Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ１１Ｈ１５Ｎ２Ｓｎ［Ｍ＋Ｈ］＋：２９３．９６０２、実測値２９３．９６０１。
１７，１８−不飽和フタラジン５３の合成
トリフレート２０（２０ｍｇ、４２．１５μｍｏｌ、１．０当量）のＤＭＳＯ溶液に（トリメチルスタンニル）フタラジン５２（３１ｍｇ、１０５．４０μｍｏｌ、２．０当量）、ＣｕＣｌ（４２ｍｇ、４２１．５０μｍｏｌ、１０．０当量）及びＬｉＣｌ（１８ｍｇ、４２１．５０μｍｏｌ、１０．０当量）を添加した。混合物を凍結融解法によって４回脱酸素化し、Ｐｄ（ＰＰｈ３）（５ｍｇ、４．２２μｍｏｌ、０．１当量）を添加した。混合物を６０℃まで加熱し、１時間撹拌した。反応物を５％ＮＨ４ＯＨ及び酢酸エチルでクエンチし、層を分離した。水層を酢酸エチルで抽出した。有機層を合わせ、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。粗混合物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、溶離液：１：４→１：１→３：１ ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）によって精製して、１７，１８−不飽和フタラジン５３（１６．３ｍｇ、８５％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝９．５１（ｄ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，２Ｈ）８．０２（ｄ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，１Ｈ）、７．９１（ｓ，１Ｈ）、７．９０（ｄ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，１Ｈ）、６．３７（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、５．８０（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、５．３７（ｂｒ．ｍ．，１Ｈ）、３．９８（ｍ，４Ｈ）、２．７５（ｍ，１Ｈ）、２．５９−２．５２（ｍ，２Ｈ）、２．５０−２．４２（ｍ，３Ｈ）、２．３７−２．２６（ｍ，３Ｈ）、２．１４（ｄ，Ｊ＝１５．０Ｈｚ，１Ｈ）、２．００（ｄｄ，Ｊ＝１５．０，２．５Ｈｚ，１Ｈ）、１．９３（ｍ，１Ｈ）、１．７９（ｍ，１Ｈ）、１．７２−１．６６（ｍ，２Ｈ）、１．１６（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ２９Ｈ３１Ｎ２Ｏ３［Ｍ＋Ｈ］＋：４５５．５６８０、実測値４５５．５６７９。
１７，１８−不飽和アミドピリジン４７の合成
トリフレート２０（２０ｍｇ、４２．１μｍｏｌ、１．０当量）及び３−アミノピリジン（１９．８ｍｇ、２１０μｍｏｌ、５．０当量）のＤＭＦ（１ｍＬ）溶液に、トリエチルアミン（１２μＬ、８４．３μｍｏｌ、２．０当量）及びＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２・ＣＨ２Ｃｌ２（１．７２ｍｇ、２．１０μｍｏｌ、０．０５当量）を添加した。反応フラスコにＣＯバルーンを取り付け、溶液を室温で５分間パージした。次いで、反応混合物を８５℃まで加熱し、４時間撹拌した。混合物を室温まで冷却し、ＥｔＯＡｃ（３ｍＬ）及びＨ２Ｏを添加した。層を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（３×２ｍＬ）で抽出し、合わせた有機層をブライン（３ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。粗混合物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、溶離液：１０：１０：１→１０：１０：２ ヘキサン：ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ）によって精製して、１７，１８−不飽和アミドピリジン４７（１７ｍｇ、８９％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝８．５７（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ）、８．３３（ｄｄ，Ｊ＝１．２，４．６Ｈｚ，１Ｈ）、８．２０（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）、７．７０（ｓ，１Ｈ）、７．２６（ｄｄ，Ｊ＝４．９，７．８Ｈｚ，１Ｈ）、６．５５（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、５．７７（ｓ，１Ｈ）、５．３６（ｄ，Ｊ＝２．９Ｈｚ，１Ｈ）、４．０３−３．８９（ｍ，４Ｈ）、２．６３−２．５６（ｍ，２Ｈ）、２．５２（ｄｄｄ，Ｊ＝２．９，７．３，１７．１Ｈｚ，１Ｈ）、２．５２−２．３７（ｍ，３Ｈ）、２．３６−２．２７（ｍ，２Ｈ）、２．２０（ｔ，Ｊ＝１２．２Ｈｚ，１Ｈ）、２．１２（ｄ，Ｊ＝１３．２Ｈｚ，１Ｈ）、１．９７（ｄｄ，Ｊ＝２．２，１２．９Ｈｚ，１Ｈ）、１．８９（ｔｄ，Ｊ＝８．８，１３．２Ｈｚ，１Ｈ）、１．７８（ｔｄｄ，Ｊ＝２．４，４．８，１２．８Ｈｚ，１Ｈ）、１．７１−１．６２（ｍ，２Ｈ）、１．１１（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ２７Ｈ３１Ｎ２Ｏ４［Ｍ＋Ｈ］＋：４４７．２２７８、実測値４４７．２２８９。
実施例Ｓ６． ケトン合成の一般的方法
０℃のケタールのＴＨＦ溶液に、６Ｎ ＨＣｌ（ＴＨＦ：６Ｎ ＨＣｌ＝１：１、０．０５Ｍ）を添加した。混合物を室温まで温め、１時間撹拌した。反応物を６Ｎ ＮａＯＨ及び酢酸エチルでクエンチし、層を分離した。水層を酢酸エチルで抽出した。有機層を合わせ、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。
ケトン４５の合成
粗混合物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、溶離液：１５：１ ジクロロメタン：ＭｅＯＨ）によって精製して、ケトン４５（８．５ｍｇ、９５％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝８．６０（ｓ，１Ｈ）、８．５２（ｄ，Ｊ＝３．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．７４（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、７．２８（ｄｄ，Ｊ＝４．４，８．３Ｈｚ，１Ｈ）、５．９１（ｓ，１Ｈ）、５．３７（ｄｄ，Ｊ＝２．７，４．６Ｈｚ，１Ｈ）、３．８８（ｄ，Ｊ＝１３．７Ｈｚ，１Ｈ）、３．８４（ｄ，Ｊ＝１３．７Ｈｚ，１Ｈ）、２．９１（ｄ，Ｊ＝１４．６Ｈｚ，１Ｈ）、２．８２（ｔ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ）、２．６５（ｄ，Ｊ＝１５．１Ｈｚ，１Ｈ）、２．６４（ｄｄ，Ｊ＝１０．３，１４．６Ｈｚ，１Ｈ）、２．５９−２．４１（ｍ，３Ｈ）、２．３２−２．２０（ｍ，３Ｈ）、２．１９−２．０７（ｍ，３Ｈ）、１．８５−１．７２（ｍ，２Ｈ）、１．７２−１．６１（ｍ，２Ｈ）、１．４４（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、０．８２（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ２５Ｈ３１Ｎ２Ｏ２［Ｍ＋Ｈ］＋：３９１．２３８０、実測値３９１．２３６６。
ケトン５４の合成
粗混合物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、溶離液：１：１ ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）によって精製して、ケトン５４（８．７ｍｇ、８０％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝９．５４（ｄ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，２Ｈ）８．０４（ｄ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，１Ｈ）、７．９３（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ）、６．４０（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、５．９５（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、５．４７（ｂｒ．ｍ．，１Ｈ）、２．９５（ｄ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，１Ｈ）、２．７７（ｍ，１Ｈ）、２．７１−２．６２（ｍ，２Ｈ）、２．５９−２．４４（ｍ，７Ｈ）、２．３４（ｔ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，１Ｈ）、２．１９（ｔ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，１Ｈ）、２．００（ｍ，１Ｈ）、１．７８（ｍ，１Ｈ）、１．１８（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ２７Ｈ２７Ｎ２Ｏ２［Ｍ＋Ｈ］＋：４１１．５１５５、実測値４１１．５１５２。
ケトン５７の合成
粗混合物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、溶離液：１：１ ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）によって精製して、ケトン５７（１３．７ｍｇ、７２％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝８．０４（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、７．６８（ｄ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，１Ｈ）、７．４８（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、７．２７（ｄ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，１Ｈ）、６．１３（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、５．９３（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、５．４５（ｂｒ．ｔ．，Ｊ＝５Ｈｚ，１Ｈ）、２．９７（ｄ，Ｊ＝１５．０Ｈｚ，１Ｈ）、２．７６−２．６４（ｍ，３Ｈ）、２．５３−２．４３（ｍ，６Ｈ）、２．４０−２．３４（ｍ，２Ｈ）、２．１７（ｔ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，１Ｈ）、１．９８（ｍ，１Ｈ）、１．７７（ｍ，１Ｈ）、１．１１（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ２６Ｈ２７Ｎ２Ｏ２［Ｍ＋Ｈ］＋：３９９．５０４８、実測値３９９．５０４７。
ケトン６０の合成
粗混合物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、溶離液：１：１→３：１ ＥｔＯＡｃ：ヘキサン、２％トリエチルアミンで緩衝化）によって精製して、ケトン６０（３．３ｍｇ、６８％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝９．９３−１０．２７（ｂｒｓ，１Ｈ）、８．０６（ｓ，１Ｈ）、７．７５（ｓ，１Ｈ）、７．４７（ＡＢｑ，ＪＡＢ＝８．８Ｈｚ，Δν＝２９．５Ｈｚ，２Ｈ）、６．０３（ｄｄ，Ｊ＝２．０，２．０Ｈｚ，１Ｈ）、５．９４（ｓ，１Ｈ）、５．４７（ｄｄ，Ｊ＝３．９，３．９Ｈｚ，１Ｈ）、２．９７（ｄ，Ｊ＝１５．１Ｈｚ，１Ｈ）、２．６３−２．７６（ｍ，３Ｈ）、２．５３−２．５９（ｍ，１Ｈ）、２．４４−２．５０（ｍ，５Ｈ）、２．３５−２．４２（ｍ，２Ｈ）、２．１７（ｄｄ，Ｊ＝９．３，９．３Ｈｚ，１Ｈ）、１．９５−２．０１（ｍ，１Ｈ）、１．７４−１．８０（ｍ，１Ｈ）、１．１１（ｓ，３Ｈ）。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ２６Ｈ２７Ｎ２Ｏ２［Ｍ＋Ｈ］＋：３９９．２０７３、実測値３９９．２０４３。
ケトン２２の合成
方法については、「ケトン１３の合成」を参照されたい。次いで、得られる残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、溶離液：３：２→１：２ ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、ケトン２２（８．２ｍｇ、６１％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝９．２４（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、８．５１（ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．９４（ｓ，１Ｈ）、７．８４−７．７６（ｍ，２Ｈ）、７．６３（ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ）、６．２７（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、５．９７（ｓ，１Ｈ）、５．５０（ｄｄ，Ｊ＝２．４，４．９Ｈｚ，１Ｈ）、２．９８（ｄ，Ｊ＝１４．６Ｈｚ，１Ｈ）、２．７８（ｄｄ，Ｊ＝６．８，１１．２Ｈｚ，１Ｈ）、２．７１（ｄ，Ｊ＝１４．６Ｈｚ，１Ｈ）、２．７２−２．６３（ｍ，１Ｈ）、２．６１（ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ）、２．５９−２．５４（ｍ，２Ｈ）、２．５４−２．５０（ｍ，２Ｈ）、２．５０−２．４２（ｍ，２Ｈ）、２．３９（ｄｄｄ，Ｊ＝１．５，１１．０，１２．９Ｈｚ，１Ｈ）、２．２０（ｄｄｄ，Ｊ＝１．５，９．５，１１．５Ｈｚ，１Ｈ）、２．０１（ｄｄｄ，Ｊ＝７．３，８．８，１２．７Ｈｚ，１Ｈ）、１．７９（ｄｔ，Ｊ＝７．３，１１．２Ｈｚ，１Ｈ）、１．１８（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ２８Ｈ２８ＮＯ２［Ｍ＋Ｈ］＋：４１０．２１１５、実測値４１０．２１１１。
ケトン４８の合成
方法については、「ケトン１３の合成」を参照されたい。次いで、得られる残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、溶離液：２０：１０：３ ヘキサン：ＥｔＯＡｃ：２Ｍ ＮＨ３のＭｅＯＨ溶液）によって精製して、ケトン４８（５．０ｍｇ、７４％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝８．６０（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）、８．３７（ｄｄ，Ｊ＝１．０，４．９Ｈｚ，１Ｈ）、８．２４−８．２０（ｍ，１Ｈ）、７．５５（ｓ，１Ｈ）、７．３０（ｄｄ，Ｊ＝４．９，８．３Ｈｚ，１Ｈ）、６．５７（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、５．９４（ｓ，１Ｈ）、５．４８（ｄｄ，Ｊ＝２．２，５．１Ｈｚ，１Ｈ）、２．９５（ｄ，Ｊ＝１５．１Ｈｚ，１Ｈ）、２．６９（ｄ，Ｊ＝１４．６Ｈｚ，１Ｈ）、２．６８（ｄ，Ｊ＝１２．７Ｈｚ，１Ｈ）、２．６６−２．６１（ｍ，２Ｈ）、２．６１−２．５３（ｍ，２Ｈ）、２．５２−２．４４（ｍ，３Ｈ）、２．４１（ｄ，Ｊ＝１８．１Ｈｚ，１Ｈ）、２．２９（ｄｄｄ，Ｊ＝１．５，１１．１，１２．８Ｈｚ，１Ｈ）、２．２２−２．１５（ｍ，Ｊ＝１．５，９．４，１１．１Ｈｚ，１Ｈ）、１．９８（ｄｄｄ，Ｊ＝７．６，９．０，１２．７Ｈｚ，１Ｈ）、１．７６（ｄｔ，Ｊ＝７．３，１１．２Ｈｚ，１Ｈ）、１．１４（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ２５Ｈ２７Ｎ２Ｏ３［Ｍ＋Ｈ］＋：４０３．２０１６、実測値４０３．２０２３。
実施例Ｓ７． Ｎ−オキシド合成の一般的方法
アミン（１．００当量）のメタノール（０．０２８Ｍ）溶液に、Ｈ２Ｏ２（３２．０当量）を室温で添加した。２５時間後、飽和ＮａＨＣＯ３溶液を添加し、ジクロロメタンで希釈し、層を分離した。水層をジクロロメタンで抽出した。有機層を合わせ、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。
１４Ｂ−Ｎ−オキシド（１４ＢＮＯ）の合成
粗混合物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、溶離液：９０：９：１→８０：１８：２ クロロホルム：メタノール：５Ｎ ＮＨ４ＯＨのＨ２Ｏ溶液）によって精製して、Ｎ−オキシド１４ＢＮＯ（２３．５ｍｇ、９５％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝９．２１（ｓ，１Ｈ）、８．４８（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．７７（ｓ，１Ｈ）、７．７５（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）、７．６１（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．５７（ｄｄ，Ｊ＝１．０，８．８Ｈｚ，１Ｈ）、５．７６（ｓ，１Ｈ）、５．２８（ｄ，Ｊ＝２．９Ｈｚ，１Ｈ）、３．４４−３．３６（ｍ，１Ｈ）、３．２２（ｓ，３Ｈ）、３．１２（ｔ，Ｊ＝１０．８Ｈｚ，１Ｈ）、３．１０（ｄ，Ｊ＝１．０Ｈｚ，３Ｈ）、２．４７（ｄｄ，Ｊ＝８．８，１１．２Ｈｚ，１Ｈ）、２．４４−２．２９（ｍ，５Ｈ）、２．２８−２．１３（ｍ，４Ｈ）、２．０９（ｄｄｄ，Ｊ＝１．５，９．３，１１．２Ｈｚ，１Ｈ）、２．０６−１．９７（ｍ，２Ｈ）、１．９４（ｄｄ，Ｊ＝５．１，１７．４Ｈｚ，１Ｈ）、１．８５（ｄｑ，Ｊ＝５．４，１２．２Ｈｚ，１Ｈ）、１．８３−１．７６（ｍ，１Ｈ）、１．７２（ｔｄ，Ｊ＝９．３，１２．２Ｈｚ，１Ｈ）、０．５４（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ３０Ｈ３７Ｎ２Ｏ２［Ｍ＋Ｈ］＋：４５７．２８５０、実測値４５７．２８４２。
１４Ａ−Ｎ−オキシド（１４ＡＮＯ）の合成
粗混合物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、溶離液：９０：９：１→８０：１８：２ クロロホルム：メタノール：５Ｎ ＮＨ４ＯＨのＨ２Ｏ溶液）によって精製して、Ｎ−オキシド１４ＡＮＯ（３．６ｍｇ、７７％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝９．２４（ｓ，１Ｈ）、８．５０（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．８０（ｓ，１Ｈ）、７．７７（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．６４（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．６０（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、５．８１（ｓ，１Ｈ）、５．３６（ｄ，Ｊ＝２．９Ｈｚ，１Ｈ）、３．４６（ｔ，Ｊ＝１２．４Ｈｚ，１Ｈ）、３．２４（ｓ，３Ｈ）、３．１８（ｓ，３Ｈ）、３．１６（ｔ，Ｊ＝９．８Ｈｚ，１Ｈ）、２．６４（ｄｄ，Ｊ＝３．２，７．１Ｈｚ，１Ｈ）、２．５９−２．４７（ｍ，３Ｈ）、２．４３−２．２８（ｍ，４Ｈ）、２．２８−２．１５（ｍ，２Ｈ）、２．０９−１．９９（ｍ，２Ｈ）、１．９７（ｄｄ，Ｊ＝５．１，１２．４Ｈｚ，１Ｈ）、１．８８（ｄｑ，Ｊ＝５．４，１２．２Ｈｚ，１Ｈ）、１．８１−１．７１（ｍ，２Ｈ）、１．５１（ｄｑ，Ｊ＝４．１，１２．３Ｈｚ，１Ｈ）、０．５６（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ３０Ｈ３７Ｎ２Ｏ２［Ｍ＋Ｈ］＋：４５７．２８５０、実測値４５７．２８４６。
コルチスタチンＡ Ｎ−オキシド形成
コルチスタチンＡ Ｎ−オキシド：コルチスタチンＡ（２ｍｇ）の酢酸エチル（１ｍＬ）溶液にAldrichのシリカゲルＤａｖｉｓｉｌ（商標）（２００メッシュ）（２００ｍｇ）を添加し、この溶液を撹拌し、空気に１時間曝露した。シリカゲルを濾過し、濾液を濃縮して粗コルチスタチンＡ Ｎ−オキシドを得て、これをＳｉＯ２クロマトグラフィー（溶離液：５０％メタノール／酢酸エチル）によって更に精製して、コルチスタチンＡ Ｎ−オキシド（１．８ｍｇ、収率９０％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ９．２２（ｓ，１Ｈ）、８．５０（ｄ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．７８（ｓ，１Ｈ）、７．７６（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．６３（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．５８（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、６．２８（ｓ，１Ｈ）、５．４９（ｍ，１Ｈ）、４．１５（ｄ，Ｊ＝９．３Ｈｚ，１Ｈ）、３．８３（ｔ，Ｊ＝９．８，９．８Ｈｚ，１Ｈ）、３．３１−３．３６（ｍ，１Ｈ）、３．２６（ｓ，３Ｈ）、３．１９（ｓ，３Ｈ）、３．１６（ｄｄ，Ｊ＝９．３，９．３Ｈｚ，１Ｈ）、２．５０（ｄｄ，Ｊ＝１１．７，８．８Ｈｚ，１Ｈ）、２．１４−２．４０（ｍ，５Ｈ）、１．９７−２．０７（ｍ，３Ｈ）、１．８１−１．９０（ｍ，２Ｈ）、１．６８−１．７５（ｍ，１Ｈ）、１．４９−１．６５（ｍ，１Ｈ）、０．５５（ｓ，３Ｈ）。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ３０Ｈ３７Ｎ２Ｏ４［Ｍ＋Ｈ］＋：４８９．２７５３、実測値４８９．５９２８。
実施例Ｓ８． Ｃ３−アルコール及び置換類縁体の合成
β−アルコール１７Ｂの合成
β−アルコール１７Ｂ：ケトン１３（２．００ｍｇ、４．８５μｍｏｌ、１．０当量）のＴＨＦ（３５０μＬ）溶液を−７８℃まで冷却し、Ｌ−ｓｅｌｅｃｔｒｉｄｅのＴＨＦ（１Ｍ、９．７１μＬ、９．７１μｍｏｌ、２．０当量）溶液を添加した。１時間後、飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液（４００μＬ）及び酢酸エチル（３００μＬ）を添加し、これを室温まで温めた。水相を酢酸エチル（３×１ｍＬ）で抽出し、合わせた有機相をブライン（１ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。残渣を分取ＴＬＣ（溶離液：１：１ ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、β−アルコール１７Ｂ（およそ１．２ｍｇ、６０％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝９．２６（ｂｒ．ｓ，１Ｈ）、８．４９（ｂｒ．ｓ，１Ｈ）、７．８２（ｓ，１Ｈ）、７．７８（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．６９（ｂｒ．ｓ，１Ｈ）、７．６３（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ）、５．７５（ｓ，１Ｈ）、５．２６（ｂｒ．ｓ，１Ｈ）、４．３６（ｂｒ．ｓ，１Ｈ）、３．１５（ｔ，Ｊ＝９．７Ｈｚ，１Ｈ）、２．６３（ｔ，Ｊ＝１３．５Ｈｚ，１Ｈ）、２．５１（ｄｄ，Ｊ＝９．１，１０．９Ｈｚ，１Ｈ）、２．４２−２．２８（ｍ，２Ｈ）、２．２４（ｔ，Ｊ＝１０．６Ｈｚ，１Ｈ）、２．２１−２．１２（ｍ，２Ｈ）、２．１２−１．９７（ｍ，３Ｈ）、１．９３（ｄｄ，Ｊ＝５．０，１７．３Ｈｚ，２Ｈ）、１．９０−１．８０（ｍ，２Ｈ）、１．７９−１．５８（ｍ，３Ｈ）、０．５４（ｓ，２Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ２８Ｈ３２ＮＯ２［Ｍ＋Ｈ］＋：４１４．２４２８、実測値４１４．２４３６。
α−アルコール１７Ａ
ケトン１３（９．６ｍｇ、２３．３μｍｏｌ、１．００当量）のＴＨＦ（７５０μＬ）溶液を−７８℃まで冷却し、ＬＡＨのジエチルエーテル（１．０Ｍ、３５．０μＬ、３５．０μｍｏｌ、１．５０当量）溶液を添加した。１０分後、飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液（５００μＬ）及び酢酸エチル（５００μＬ）を添加し、これを室温まで温めた。水相を酢酸エチル（３×１ｍＬ）で抽出し、合わせた有機相をブライン（１ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、溶離液：１：１→１：５ ヘキサン：ＥｔＯＡｃ→１００％ＥｔＯＡｃ）によって精製して、α−アルコール１７Ａ（８．５ｍｇ、８８％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝９．２２（ｓ，１Ｈ）、８．４７（ｄ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，１Ｈ）、７．７９（ｓ，１Ｈ）、７．７５（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．６３（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．５９（ｄｄ，Ｊ＝１．２，８．８Ｈｚ，１Ｈ）、５．７５（ｓ，１Ｈ）、５．２８（ｄ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，１Ｈ）、３．７８（ｔｔ，Ｊ＝４．０，１１．３Ｈｚ，１Ｈ）、３．１４（ｔ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，１Ｈ）、２．５１（ｄｄ，Ｊ＝８．５，１１．４Ｈｚ，１Ｈ）、２．４０−２．３３（ｍ，２Ｈ）、２．３２（ｄｔ，Ｊ＝４．７，１２．３Ｈｚ，１Ｈ）、２．２８−１．９８（ｍ，７Ｈ）、１．９３（ｄｄ，Ｊ＝５．０，１７．３Ｈｚ，１Ｈ）、１．９０−１．８１（ｍ，２Ｈ）、１．７４−１．６２（ｍ，２Ｈ）、１．４０（ｄｔｄ，Ｊ＝５．９，１１．６，１３．８Ｈｚ，１Ｈ）、０．５３（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ２８Ｈ３２ＮＯ２［Ｍ＋Ｈ］＋：４１４．２４２８、実測値４１４．２４３７。
α−メチルエーテル６４Ａ
α−アルコール１７Ａ（２．０ｍｇ、４．８３μｍｏｌ、１．００当量）のＤＭＦ（３００μＬ）溶液に６０ｗｔ％ＮａＨ（１．０ｍｇ、２４．１μｍｏｌ、５．００当量）を室温で添加し、３０分間予め撹拌した。温度を−１０℃まで下げ、ＭｅＩ（２．０μＬ、２９．０μｍｏｌ、６．００当量）を添加した。２．５時間後、２Ｍ ＮａＯＨ溶液（２００μＬ）及び酢酸エチル（５００μＬ）を添加し、これを室温まで温めた。水相を酢酸エチル（３×１ｍＬ）で抽出し、合わせた有機相をブライン（１ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。残渣を分取ＴＬＣ（溶離液：１：２ ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、α−メチルエーテル６４Ａ（およそ１．２ｍｇ、５８％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝９．２２（ｓ，１Ｈ）、８．４８（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．７９（ｓ，１Ｈ）、７．７５（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．６３（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．５９（ｄｄ，Ｊ＝１．５，８．５Ｈｚ，１Ｈ）、５．７４（ｓ，１Ｈ）、５．２８（ｄ，Ｊ＝２．９Ｈｚ，１Ｈ）、３．３９（ｓ，３Ｈ）、３．２９（ｔｔ，Ｊ＝３．５，１１．４Ｈｚ，１Ｈ）、３．１４（ｔ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，１Ｈ）、２．５２（ｄｄ，Ｊ＝８．５，１１．４Ｈｚ，１Ｈ）、２．４２−２．２９（ｍ，３Ｈ）、２．２５（ｔ，Ｊ＝１１．７Ｈｚ，１Ｈ）、２．２４−２．０８（ｍ，５Ｈ）、２．０６（ｔｄ，Ｊ＝４．１，１２．９Ｈｚ，１Ｈ）、１．９３（ｄｄ，Ｊ＝５．３，１７．０Ｈｚ，１Ｈ）、１．８６（ｄｑ，Ｊ＝５．３，１２．３Ｈｚ，１Ｈ）、１．７９（ｔ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ，１Ｈ）、１．７５−１．６１（ｍ，２Ｈ）、１．３２（ｄｔｄ，Ｊ＝４．７，１１．５，１４．０Ｈｚ，１Ｈ）、０．５３（ｓ，３Ｈ）．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ２８Ｈ３２ＮＯ２［Ｍ＋Ｈ］＋：４２８．２５８４、実測値４２８．２５７３。
β−メチルエーテル６４Ｂ
反応条件はα−メチルエーテル６４Ａの合成と同じである。残渣を分取ＴＬＣ（溶離液：１：２ ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、Ｃ３β−メチルエーテル６４Ｂ（１．２ｍｇ、５８％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝９．２２（ｓ，１Ｈ）、８．４８（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．７９（ｓ，１Ｈ）、７．７６（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．６３（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．６０（ｄｄ，Ｊ＝１．５，８．３Ｈｚ，１Ｈ）、５．７４−５．７０（ｍ，１Ｈ）、５．２５（ｄｄ，Ｊ＝２．２，５．１Ｈｚ，１Ｈ）、３．７５−３．６９（ｍ，１Ｈ）、３．３５（ｓ，３Ｈ）、３．１８−３．１０（ｍ，Ｊ＝９．３Ｈｚ，１Ｈ）、２．５１（ｄｄ，Ｊ＝８．５，１１．５Ｈｚ，１Ｈ）、２．５２−２．４４（ｍ，１Ｈ）、２．４０−２．２６（ｍ，４Ｈ）、２．１７（ｓ，３Ｈ）、２．１４−２．０８（ｍ，１Ｈ）、２．０７−１．９６（ｍ，２Ｈ）、１．９６−１．９０（ｍ，２Ｈ）、１．８６（ｄｑ，Ｊ＝４．９，１２．０Ｈｚ，１Ｈ）、１．７６−１．６１（ｍ，１Ｈ）、１．５５−１．４５（ｍ，１Ｈ）、０．５４（ｓ，３Ｈ）。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ２８Ｈ３２ＮＯ２［Ｍ＋Ｈ］＋：４２８．２５８４、実測値４２８．２５９９。
α−モノメチルカルバメート６８Ａ
α−アルコール１７Ａ（３．５ｍｇ、８．５μｍｏｌ、１．００当量）のＣＨ３ＣＮ（３５０μＬ）溶液にＣＤＩ（２．１ｍｇ、１２．７μｍｏｌ、１．５０当量）を添加し、反応混合物を４時間還流させた。粗混合物を減圧下で濃縮し、更に精製することなく次の反応に使用した。
粗混合物のＤＣＭ（３００μＬ）溶液にＴＨＦ（２Ｍ、５０μＬ）中のＭｅＮＨ２を室温で添加し、１４時間撹拌した。粗混合物を減圧下で濃縮し、分取ＴＬＣ（溶離液：１：１ ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、Ｃ３α−モノメチルカルバメート６８Ａ（２．４ｍｇ、２工程で６０％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝９．２８（ｓ，１Ｈ）、８．５０（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．８７（ｓ，１Ｈ）、７．８３（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．７５（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．６９（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、５．７７（ｓ，１Ｈ）、５．３０（ｄｄ，Ｊ＝２．２，４．６Ｈｚ，１Ｈ）、４．７６（ｔ，Ｊ＝１１．７Ｈｚ，１Ｈ）、４．６１（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、３．１７（ｔ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，１Ｈ）、２．８２（ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ，３Ｈ）、２．５３（ｄｄ，Ｊ＝８．５，１１．５Ｈｚ，１Ｈ）、２．３８（ｄ，Ｊ＝１７．１Ｈｚ，２Ｈ）、２．３２（ｄｄ，Ｊ＝３．７，１１．５Ｈｚ，１Ｈ）、２．３０−２．１４（ｍ，５Ｈ）、２．１３−２．０１（ｍ，２Ｈ）、１．９５（ｄｄ，Ｊ＝５．１，１７．３Ｈｚ，１Ｈ）、１．９４−１．８２（ｍ，２Ｈ）、１．７８−１．６７（ｍ，２Ｈ）、１．４３（ｄｑ，Ｊ＝４．９，１２．７Ｈｚ，１Ｈ）、０．５５（ｓ，３Ｈ）。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ３０Ｈ３５Ｎ２Ｏ３［Ｍ＋Ｈ］＋：４７１．２６４２、実測値４７１．２６３１。
α−メトキシエチルエーテル６３Ａ
α−アルコール１７Ａ（２．０ｍｇ、４．８３μｍｏｌ、１．００当量）のＤＭＦ（３００μＬ）溶液に６０ｗｔ％ＮａＨ（１．０ｍｇ、２４．１μｍｏｌ、５．００当量）を室温で添加し、３０分間予め撹拌した後、ＭｅＯ（ＣＨ２）２Ｂｒ（１．６μＬ、１６．６μｍｏｌ、３．００当量）を添加した。３６時間後、２Ｍ ＮａＯＨ溶液（２００μＬ）及び酢酸エチル（５００μＬ）を添加した。水相を酢酸エチル（３×１ｍＬ）で抽出し、合わせた有機相をブライン（１ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。残渣を分取ＴＬＣ（溶離液：２：５ ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、Ｃ３α−メトキシエチルエーテル６３Ａ（およそ０．７ｍｇ、２７％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝９．２４（ｓ，１Ｈ）、８．５０（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．８１（ｓ，１Ｈ）、７．７７（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）、７．６５（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．６１（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、５．７５（ｓ，１Ｈ）、５．２９（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ）、３．７４−３．６３（ｍ，２Ｈ）、３．６１−３．５１（ｍ，２Ｈ）、３．４４（ｔｔ，Ｊ＝３．９，１１．７Ｈｚ，１Ｈ）、３．４４−３．３９（ｓ，３Ｈ）、３．１６（ｔ，Ｊ＝９．８Ｈｚ，１Ｈ）、２．５４（ｄｄ，Ｊ＝８．５，１１．５Ｈｚ，１Ｈ）、２．４３−２．３０（ｍ，３Ｈ）、２．３０−２．１７（ｍ，４Ｈ）、２．１７−２．０２（ｍ，３Ｈ）、１．９５（ｄｄ，Ｊ＝５．１，１７．３Ｈｚ，１Ｈ）、１．９２−１．８２（ｍ，２Ｈ）、１．７８−１．６２（ｍ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ）、１．４１（ｄｔｄ，Ｊ＝４．１，１１．９，１３．５Ｈｚ，１Ｈ）、０．５５（ｓ，３Ｈ）。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ２８Ｈ３２ＮＯ２［Ｍ＋Ｈ］＋：４７２．２８４６、実測値４７２．２８５０。
実施例Ｓ９． アルコールからのアミンの合成
α−ジメチルヒダントイン７４Ａ
β−アルコール１７Ｂ（５．０ｍｇ、１２．３μｍｏｌ、１．０当量）のＴＨＦ（４００μＬ）溶液に、ジメチルヒダントイン（７．８ｍｇ、６１．６μｍｏｌ、５．０当量）及びＰＰｈ３（９．７ｍｇ、３６．９μｍｏｌ、３．０当量）を添加した。反応混合物を０℃まで冷却し、ＤＥＡＤ（４０ｗｔ％のトルエン溶液１６．１μＬ、３６．９μｍｏｌ、３．０当量）を添加した。反応物を５０℃まで温め、１７時間撹拌した。反応混合物を室温まで冷却した後、１Ｎ ＮａＯＨ溶液（３００μＬ）を添加し、水相を酢酸エチル（３×０．５ｍＬ）で抽出し、合わせた有機相をブライン（１ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。粗混合物を分取ＴＬＣ（シリカゲル、溶離液：４０：１ ＭｅＯＨ：ジクロロメタン）によって精製して、α−ジメチルヒダントイン７４Ａ（０．９ｍｇ、１４％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）シフト＝９．２４（ｓ，１Ｈ）、８．５０（ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．８１（ｓ，１Ｈ）、７．７７（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．６４（ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．６１（ｄｄ，Ｊ＝１．５，８．８Ｈｚ，１Ｈ）、５．７９（ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ，１Ｈ）、５．３２（ｄｄ，Ｊ＝２．７，５．１Ｈｚ，１Ｈ）、５．１８（ｓ，１Ｈ）、４．１０（ｔｄｄ，Ｊ＝３．２，１１．３，１３．１Ｈｚ，１Ｈ）、３．１６（ｄｄ，Ｊ＝９．３，１０．７Ｈｚ，１Ｈ）、２．８６（ｔ，Ｊ＝１２．７Ｈｚ，１Ｈ）、２．５４（ｄｄ，Ｊ＝８．３，１１．７Ｈｚ，１Ｈ）、２．４５（ｄｄ，Ｊ＝２．９，１４．６Ｈｚ，１Ｈ）、２．３０（ｂｒ．ｓ．，６Ｈ）、２．１９（ｔｑ，Ｊ＝４．４，９．０Ｈｚ，１Ｈ）、２．０９−２．００（ｍ，１Ｈ）、１．９６（ｄｄ，Ｊ＝５．４，１７．６Ｈｚ，１Ｈ）、１．９２−１．８０（ｍ，２Ｈ）、１．８０−１．６４（ｍ，３Ｈ）、１．４２（ｄ，Ｊ＝４．９Ｈｚ，６Ｈ）、０．５６（ｓ，３Ｈ）。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）算出値Ｃ３３Ｈ３８Ｎ３Ｏ３［Ｍ＋Ｈ］＋：５２４．２９０８、実測値５２４．２８９２。
ＩＩ． ＣＤＫ８／１９阻害剤
本明細書に記載の実施形態のいずれにおいても、コルチスタチン以外のＣＤＫ８／１９阻害剤を、本明細書で特定されるバイオマーカーを用いた療法に対する患者の標的化選択の方法と組み合わせて使用することができる。以下の刊行物に記載されるものを含むが、これらに限定されない様々なＣＤＫ８／１９阻害剤が当該技術分野で既知である：Schiemann, K. et al. Discovery of potent and selective CDK8 inhibitors from an HSP90 pharmacophore. Bioorg. Med. Chem. Lett. 26, 1443-1451 (2016)、Mallinger, A. et al. Discovery of Potent, Selective, and Orally Bioavailable Small-Molecule Modulators of the Mediator Complex-Associated Kinases CDK8 and CDK19. J. Med. Chem. 59, 1078-1101 (2016)、Koehler, M., Bergeron, P. & Blackwood, E. M. Potent, Specific CDK8 Kinase Inhibitors Lack CDK8-dependent Antiproliferative Activity in HCT-116 Colon Cancer Cell Line. ACS Med. Chem. Lett. (2016). doi:10.1021/acsmedchemlett.5b00278、Dale, T. et al. A selective chemical probe for exploring the role of CDK8 and CDK19 in human disease. Nat. Chem. Biol. 11, 973-980 (2015)。
当該技術分野で既知のＣＤＫ８／１９阻害剤の付加的な非限定的な例は、以下の米国特許出願：米国特許出願公開第２０１３／０２１７０１４号、米国特許出願公開第２０１５／０２７９５３号、米国特許出願公開第２００４／０１８０８４８号、米国特許出願公開第２００４／０１８８４４号、米国特許出願公開第２０１４／００３８９５８号、米国特許出願公開第２０１２／００７１４７７号、米国特許出願公開第２０１１／０２２９４８４号、米国特許出願公開第２００５／０００９８４６号、米国特許出願公開第２００８／０２８７４３９号、米国特許出願公開第２０１０／００９３７６９号、米国特許出願公開第２００５／０２５６１４２号、米国特許出願公開第２００３／００１８０５８号、米国特許出願公開第２００１／００４７０１９号、米国特許出願公開第２００２／００２１７８号、米国特許出願公開第２００９／０３１８４４１号、米国特許出願公開第２００５／０１９２３００号、米国特許出願公開第２００９／０３２５９８３号、米国特許出願公開第２００６／０２３５０３４号、米国特許出願公開第２０１０／０２１５６４４号、米国特許出願公開第２０１０／００１２０７８１号、米国特許出願公開第２００６／０１８３７６０号、米国特許出願公開第２００９／０２７０４２７号、米国特許出願公開第２００２／０１６５２５９号、米国特許出願公開第２００６／０２４１２９７号、米国特許出願公開第２００４／０１８６２８８号、米国特許出願公開第２００６／０２４１１１２号、米国特許出願公開第２００６／０２７０６８７号、米国特許出願公開第２００６／０２７０６８７号、米国特許出願公開第２００４／０２５４０９４号、米国特許出願公開第２００３／０１７６６９９号、米国特許出願公開第２００６／０１４８８２４号、米国特許出願公開第２００３／０１１４６７２号、米国特許出願公開第２００９／０２１５８０５号、米国特許出願公開第２００９／０１３７５７２号及び米国特許出願公開第２００７／０１６１６３５号に提示されている。
一実施形態では、ＣＤＫ８／１９阻害剤はセネキシン（Senexin）の類縁体である。別の実施形態では、ＣＤＫ８／１９阻害剤はセルビタ（Selvita）の類縁体である。
ＩＩＩ． ＣＤＫ８／１９阻害剤療法に対する患者の標的化選択
或る特定の腫瘍又は癌を有する患者が、他の患者よりもコルチスタチン療法に応答する可能性が高く、これらの患者を、下記に詳細に記載される患者の腫瘍又は癌における特定のバイオマーカーの分析によって特定することができることが発見された。当該技術分野で既知の方法を本明細書の開示と組み合わせて用いることで、医療供給者は患者がコルチスタチン治療に首尾よく応答するか否かを決定することができる。本発明は、コルチスタチン療法から利益を得る患者を治療候補として特定することを可能とし、応答する可能性が低い患者を除外する基礎となる。
「バイオマーカー」という用語は本明細書で使用される場合、サンプル中で検出することができる、例えば予測、診断及び／又は予後診断のための指標を指す。バイオマーカーは、或る特定の分子的、病理学的、組織学的及び／又は臨床的特徴を特徴とする疾患又は障害（例えば、癌）の特定のサブタイプの指標として機能することができる。幾つかの実施形態では、バイオマーカーは遺伝子又は遺伝子の組合せである。幾つかの実施形態では、バイオマーカーはタンパク質又はタンパク質の組合せである。他の実施形態では、バイオマーカーは遺伝子とタンパク質との組合せである。幾つかの実施形態では、バイオマーカーは遺伝子によって発現されるタンパク質である。バイオマーカーとしては、ポリヌクレオチド（例えば、ＤＮＡ及び／又はＲＮＡ）、ポリペプチド、ポリペプチド及びポリヌクレオチドの修飾（例えば、翻訳後修飾）、炭水化物及び／又は糖脂質ベースの分子マーカーが挙げられるが、これらに限定されない。更に別の実施形態では、バイオマーカーは、患者応答の可能性を確認するためのタンパク質の局在化、例えば或る特定の遺伝子座でのＲＵＮＸ１の存在量である。
Ａ． ＲＵＮＸ１経路障害に基づく患者の選択
ＲＵＮＸ１は、成熟血液細胞への造血幹細胞の分化を調節するマスター造血転写因子（ＴＦ）である。ＲＵＮＸ１は、代替的には急性骨髄性白血病１タンパク質（ＡＭＬ１）又はコア結合因子サブユニットα−２（ＣＢＦＡ２）と称される場合もある。ＲＵＮＸ１は成熟血液細胞への造血幹細胞の分化を調節することが報告されており、ＲＵＮＸ１不活性化をもたらす３５個を超える突然変異が、様々な悪性腫瘍に関与することが特定されている。かかる不活性化突然変異としては、限定されるものではないが、ＲＵＮＸ１点突然変異、ＲＵＮＸ１遺伝子が関与する染色体転座、及びＲＵＮＸ１タンパク質の不安定化又は分解の増大をもたらす突然変異が挙げられる。癌と関連することが知られる例示的なＲＵＮＸ１不活性化突然変異の概要については、例えばIto et al., The RUNX family: developmental regulators in cancer, Nature Reviews Cancer 15, 81-95 (2015)（例えば８３頁最終段落から８４頁最終段落、並びに表１及び表２）、及びLey et al., Genomic and Epigenomic Landscapes of Adult De Novo Acute Myeloid Leukemia, NEJM 368:22, 2059-74 (2013)（それらの全内容が引用することにより本明細書の一部をなす）を参照されたい。癌におけるＲＵＮＸ１突然変異に関する知識は、様々な悪性腫瘍の分子病理の洞察をもたらしたが、ＲＵＮＸ１等の転写因子の不活性化を臨床的介入によって治療又は修正することは困難であった。
乳癌等の非造血悪性腫瘍では、不活性化ＲＵＮＸ１突然変異も観察され、固形腫瘍形成に寄与し得る（Ito et al., The RUNX family: developmental regulators in cancer, Nature Reviews Cancer 15, 81-95 (2015)、Ellis, M. J. et al. Whole-genome analysis informs breast cancer response to aromatase inhibition. Nature 486, 353-360 (2012)、Banerji, S. et al. Sequence analysis of mutations and translocations across breast cancer subtypes. Nature 486, 405-409 (2012)）。さらに、原発性腫瘍と比較してＲＵＮＸ１下方調節が固形腫瘍転移で明らかであり、その発現の低下は転移と関連する１７個の遺伝子特徴の一部である（Ramaswamy, S., Ross, K. N., Lander, E. S. & Golub, T. R. A molecular signature of metastasis in primary solid tumors. Nature Genet. 33, 49-54 (2003)）。
ＣＤＫ８／１９阻害がＲＵＮＸ１プログラムを活性化するという確証には、１）コルチスタチンＡが、ＡＭＬへと移行した骨髄異形成症候群と診断された患者に由来したＭＯＬＭ−１４を含むＡＭＬ細胞株におけるＣＥＢＰＡ、ＩＲＦ８及びＮＦＥ２を含む多くのＲＵＮＸ１標的遺伝子の発現を顕著に増大すること、並びに２）コルチスタチンＡがコルチスタチンにより上方調節される遺伝子座へのＲＵＮＸ１の動員を誘導し、ＣＤＫ８／１９キナーゼ活性が標的遺伝子座でのＲＵＮＸ１の蓄積を阻止することが示唆されたこと、並びに３）コルチスタチンの抗増殖活性が、ＲＵＮＸ１突然変異を有するものを含むＲＵＮＸ１標的遺伝子発現障害を有する細胞株と正に相関することが含まれる。
通例、ＲＵＮＸ１活性障害をもたらすＲＵＮＸ１遺伝子における突然変異は、野生型（非突然変異）ＲＵＮＸ１配列と比較したＲＵＮＸ１タンパク質のアミノ酸配列の変化と関連する。異常ＲＵＮＸ１タンパク質をもたらす、かかる突然変異としては、例えばアミノ酸若しくはアミノ酸配列の置換、欠失若しくは重複、フレームシフト、又はＲＵＮＸ１のタンパク質コード配列における未成熟終止コドン、又はＲＵＮＸ１タンパク質配列若しくはそのフラグメントと異種タンパク質若しくはそのフラグメントとの融合が挙げられる。かかる融合は通例、ＲＵＮＸ１タンパク質又はそのフラグメントをコードするゲノム配列と、異なるタンパク質又はそのフラグメントをコードするゲノム配列との融合をもたらす染色体転座の結果である。
これら及び他のＲＵＮＸ１結合パートナー又はＲＵＮＸ１標的遺伝子の遺伝子、転写産物及びタンパク質の配列は当業者に既知である。代表的なヒトＲＵＮＸ１結合パートナー及びＲＵＮＸ１標的遺伝子を下記表１に特定する。
当業者は、ＲＵＮＸ１結合パートナー及びＲＵＮＸ１標的遺伝子の野生型配列を上記に提示した特定に基づいて特定することが可能である。
幾つかの実施形態では、癌はＲＵＮＸ１−ＲＵＮＸ１Ｔ１転座を含む。ＲＵＮＸ１−ＲＵＮＸ１Ｔ１転座は当該技術分野で既知である。例えば、Kim et al., Acute myeloid leukemia with a RUNX1-RUNX1T1 t(1;21;8)(q21;q22;q22) novel variant: a case report and review of the literature. Acta Haematol. 125(4):237-41 (2011)（その内容全体が引用することにより本明細書の一部をなす）を参照されたい。癌と関連する付加的なＲＵＮＸ１転座、例えばＲＵＮＸ１−ＥＴＯ ＥＴＶ６−ＲＵＮＸ１及びＲＵＮＸ１−ＥＶＩ１転座も当業者に既知である。
幾つかの実施形態では、癌はＡ１４２＿Ａ１４９ｄｕｐ、Ａ１４２ｆｓＸ１７０、Ａ１４９ｆｓＸ、Ａ２５１ｆｓＸ、Ａ３３８ｆｓＸ４８２、Ａ６３ｆｓＸ、Ｄ１６０Ｙ、Ｄ３２６ｆｓＸ４８１、Ｅ２２３ｆｓＸ、Ｅ４２２ｆｓＸ、Ｆ４１１ｆｓＸ４８２、Ｇ１６５Ｒ、Ｇ１７０ｆｓＸ２０１、Ｇ３９４＿Ｌ４０６ｄｕｐ、Ｇ３９４ｆｓＸ４８２、Ｇ４０９ｆｓＸ４８２、Ｇ４３９ｆｓＸ４８２、Ｈ１０５＿Ｆ１１６ｄｕｐ、Ｈ１０５ｆｓＸ５４１、Ｈ４２７ｆｓＸ、Ｉ１１４ｆｓＸ１１７、Ｉ３４２ｆｓＸ、Ｋ２１５ｆｓＸ２６９、Ｌ１１２ｆｓＸ１１７、Ｌ１４４ｆｓＸ１７０、Ｌ２１０ｆｓＸ２６９、Ｌ３１３ｆｓＸ３２３、Ｌ３８２ｆｓＸ４８２、Ｌ９８ｆｓＸ、Ｎ４４８＿Ｖ４５２ｄｕｐ、Ｐ１１３Ａ、Ｐ３４５Ｒ、Ｐ４６４Ｐ、Ｐ９５ｆｓＸ１１７、Ｑ３３５＿Ｌ３３９ｄｕｐ、Ｑ４３８ｆｓＸ４８２、Ｒ１０７Ｃ、Ｒ１０７Ｓ、Ｒ１６６Ｑ、Ｒ２０１Ｇ、Ｒ２０１Ｑ、Ｒ２０１Ｘ、Ｒ２３２Ｗ、Ｒ３２０Ｘ、Ｒ３４６ｆｓＸ、Ｒ３４６ｆｓＸ４８２、Ｓ１４１ｆｓＸ、Ｓ２２６ｆｓＸ２６９、Ｓ２５６ｆｓＸ２６９、Ｓ３２２ｆｓＸ３２３、Ｓ３３１ｆｓＸ、Ｓ３８８ｆｓＸ４８１、Ｔ１４８ｆｓＸ１７０、Ｙ３５５ｆｓＸ若しくはＹ３８０ｆｓＸ４８２突然変異、又はそれらの任意の組合せを、癌のゲノムによってコードされるＲＵＮＸ１タンパク質に含む。上記及び本明細書の他の部分で挙げた突然変異の位置は、ヒトＲＵＮＸ１について、ＮＣＢＩアセンブリＧＲＣｈ３７．ｐ１３（ＧＣＦ＿０００００１４０５．２５）のアクセッション番号ＮＣ＿００００２１．８（３６１６００９８．．３６４２１５９５、相補体）、アノテーションリリース１０５（国立生物工学情報センター（ＮＣＢＩ）のウェブサイトncbi.orgでアクセス可能）に従って規定される。当業者は、例えば当該技術分野で日常的に行われるように、ヒト及び非ヒトＲＵＮＸ１配列をアラインメントし、対応する残基を特定することによって、非ヒト被験体における相同突然変異を特定することが可能である。加えて、当業者は、配列アラインメント及び相同残基の特定に基づいて、ＮＣＢＩデータベースの任意の新たなアノテーションリリース、例えばＮＣＢＩアセンブリＧＲＣｈ３８．ｐ２（ＧＣＦ＿０００００１４０５．２８）、アノテーションリリース１０７のアクセッション番号ＮＣ＿００００２１．９（３４７８７８０１．．３５０４９３１０、相補体）における上記で挙げた突然変異の位置を特定することが可能である。
ＣＤＫ８／１９阻害剤であるコルチスタチン、又はその薬学的に許容可能な塩、第四級アミン塩若しくはＮ−オキシドを、ＲＵＮＸ１障害に対抗し、ＲＵＮＸ１突然変異癌、及び結合パートナー又はＲＵＮＸ１標的遺伝子が突然変異した癌を治療するために使用することができることが発見された。ＣＤＫ８及びＣＤＫ１９は、メディエーター複合体と可逆的に結合する多タンパク質複合体へと集合することから、「メディエーターキナーゼ」と称される場合もある。メディエーター複合体は、エンハンサー結合転写因子とプロモーター結合ＲＮＡ ｐｏｌ ＩＩホロ酵素とを連結し、クロマチン構造に影響を与え、依然として不明なところが多い機構により転写及び遺伝子発現を調節する。近年の２００人のＡＭＬ患者に由来するサンプルの包括的なゲノムワイドシークエンシングから、注目すべきことに、推定癌駆動タンパク質におけるほぼ全ての突然変異が遺伝子発現の調節と関連することが明らかになった。例えば、Aerts, et al., Nature (2013) 499:35-36; The Cancer Genome Atlas Research Network, 2013. Genomic and Epigenomic Landscapes of Adult De Novo Acute Myeloid Leukemia. N. Engl. J. Med. 368, 2059-2074を参照されたい。このため、本開示の幾つかの態様は、メディエーターキナーゼの特異的阻害並びにＣＤＫ８及びＣＤＫ１９の阻害が特に、様々な癌、特に例えばＡＭＬ等の血液癌においてＲＵＮＸ１活性障害の下流効果を破壊する新たな手段を構成するという認識に基づく。
一例では、ＡＭＬにおいて、ＲＵＮＸ１はＣＢＦｂ、ＧＡＴＡ１／２、ＰＵ．１及びＥＲＧを含む突然変異を有し得る他の転写因子及び結合パートナーと共に転写を調節する。ＲＵＮＸ１障害はこの経路に影響を及ぼす。さらに、ＡＭＬにおける他の突然変異は、ＲＵＮＸ１タンパク質分解（ＭＬＬ融合）又はＤＮＡメチル化による遺伝子抑制（ＩＤＨ２突然変異）を介してＲＵＮＸ１転写プログラムを抑制し得る。このため、コルチスタチン療法を用いたＲＵＮＸ１障害を有する患者の標的化選択は、ＲＵＮＸ１転写プログラムを活性化し、その結果としてより正常な造血を回復させるか、又は細胞がより正常な、より低毒性の、成熟が誘導された、若しくは成長停止及び／又はアポトーシスの可能性があるものとする新たな広く有用な機構となる。
第２の実施形態の一態様では、バイオマーカーは直接又は間接的にＲＵＮＸ１経路と関連する。例えば、患者がＲＵＮＸ１遺伝子又はＲＵＮＸ１媒介転写に関与する遺伝子（ＧＡＴＡ１、ＧＡＴＡ２、Ｃ／ＥＢＰα、ＦＬＩ１、ＦＯＧ１、ＥＴＳ１、ＰＵ．１、ＥＲＧ及びＣＢＦα等であるが、これらに限定されない）の不活性化突然変異を有するか否かを初めに判定することによって、腫瘍又は癌を有する患者がコルチスタチンにより首尾よく治療され得るか否かを決定する方法が提供される。ＲＵＮＸ１阻害（部分的又は完全）は、野生型ＲＵＮＸ１ ＤＮＡの会合及び転写を阻止する単一対立遺伝子性不活性化突然変異又はＲＵＮＸ１−ＲＵＮＸ１Ｔ１（ＡＭＬ１−ＥＴＯとも呼ばれる）への転座によって現れ得る。
幾つかの実施形態では、本明細書で提供される診断又は治療方法はＲＵＮＸ１、ＲＵＮＸ１結合パートナー及び／又はＲＵＮＸ１標的遺伝子の発現レベルを検出することと、それを参照レベルと比較して、癌がＲＵＮＸ１活性障害を示すか否かを決定することとを含み、ＲＵＮＸ１標的遺伝子はＡＣＳＬ１、ＡＤＯＲＡ２Ｂ、ＡＤＲＢ１、ＡＭＰＤ３、ＡＲＲＤＣ４、ＢＣＬ２、ＢＣＬ２Ａ１、ＣＢＦβ、ＣＣＮＡ１、ＣＤ２４４、ＣＤ４４、ＣＤＣ４２ＥＰ３、Ｃ／ＥＢＰα、ＣＥＣＲ６、ＣＦＬＡＲ、ＣＩＳＨ、ＣＳＦ１、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＲ４、ＣＹＴＩＰ、ＤＵＳＰ１０、Ｅ２Ｆ８、ＥＭＢ、ＥＭＲ２、ＥＴＳ１、ＥＴＳ２、ＦＡＭ１０７Ｂ、ＦＡＭ４６Ａ、ＦＣＥＲ１Ａ、ＦＣＧＲ１Ｂ、ＦＬＩ１、ＦＯＧ１、ＦＯＳＬ２、ＧＡＢ２、ＧＡＳ７、ＧＡＴＡ１、ＧＡＴＡ２、ＧＦＩ１Ｂ、ＧＭＰＲ、ＧＰＲ１８、ＧＰＲ１８３、ＨＢＢＰ１、ＨＥＢ、ＨＬＸ、ＨＭＧＣＳ１、ＩＧＦＢＰ４、ＩＧＦＢＰ５、ＩＬ１７ＲＡ、ＩＬ１ＲＡＰ、ＩＰＣＥＦ１、ＩＲＦ１、ＩＲＦ８、ＩＴＧＡ６、ＪＡＧ１、ＬＣＰ２、ＬＤＬＲ、ＬＩＭＡ１、ＬＭＯ２、ＬＲＲＣ３３、ＬＴＢ、ＭＢＰ、ＭＩＣＡＬ２、ＭＹＣＮ、ＭＹＯ１Ｇ、ＮＦＥ２、ＮＯＴＣＨ２、ＮＲＰ１、Ｐ２ＲＹ２、ＰＡＧ１、ＰＬＡＣ８、ＰＬＥＫ、ＰＬＸＮＣ１、ＰＭＰ２２、ＰＴＰＲＥ、ＰＵ．１、ＰＸＫ、ＲＡＢ２７Ａ、ＲＡＳＡ３、ＲＧＳ１６、ＲＨＯＨ、ＲＮＦ２４、ＲＸＲＡ、ＳＥＬＰＬＧ、ＳＬＡ、ＳＬＣ７Ａ１１、ＳＬＣ７Ａ５、ＳＯＣＳ１、ＳＴ３ＧＡＬ４、ＳＴＫ１７Ｂ、ＴＡＬ１、ＴＩＭＰ３、ＴＭＥＭ１０４、ＴＮＦ、ＴＳＣ２２Ｄ１、ＴＳＣ２２Ｄ３、ＺＢＴＢ１６及びＺＣＣＨＣ５の１つ又は組合せである。幾つかの実施形態では、ＲＵＮＸ１標的遺伝子はＢＣＬ２、ＣＣＮＡ１、ＣＤ４４、Ｃ／ＥＢＰα、ＣＢＦβ、ＣＳＦ１、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＲ４、ＥＴＳ１、ＥＴＳ２、ＦＬＩ１、ＦＯＧ１、ＦＣＥＲ１Ａ、ＧＡＴＡ１、ＧＡＴＡ２、ＧＦＩ１Ｂ、ＨＥＢ、ＩＲＦ１、ＩＲＦ８、ＪＡＧ１、ＬＭＯ２、ＬＴＢ、ＮＦＥ２、ＮＯＴＣＨ２、ＰＵ．１、ＳＬＡ、ＳＯＣＳ１、ＴＡＬ１及びＴＮＦの１つ又は組合せである。
或る特定の実施形態では、ＲＵＮＸ１障害腫瘍又は癌は急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ芽球性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病、Ｂ細胞急性リンパ芽球性白血病（Ｂ−ＡＬＬ）、小児Ｂ−ＡＬＬ、急性単球性白血病、急性巨核芽球性白血病、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、バーキットリンパ腫、ＡＩＤＳ関連リンパ腫、慢性骨髄増殖性障害、原発性中枢神経系リンパ腫、Ｔ細胞リンパ腫、有毛細胞白血病又は多発性骨髄腫（ＭＭ）である。
別の実施形態では、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）と診断された患者は、本発明を用いて治療することができる。ＭＤＳ表現型を駆動する多くの反復体細胞突然変異が、転写を調節する転写因子及びエピジェネティック標的中に存在する。ＲＵＮＸ１は、１０％〜２０％のＭＤＳ患者で突然変異した転写因子及び造血のマスター調節因子であるため、ＭＤＳにおいて最も頻繁に突然変異する遺伝子となっている。ＲＵＮＸ１の突然変異は、分化を駆動する標的遺伝子の発現を弱め、この効果により、より高いリスク及びより短時間の二次性ＡＭＬ（ｓＡＭＬ）移行が予測される。ＣＤＫ８／１９の阻害がＲＵＮＸ１標的遺伝子の発現を増大することが見出されており、したがって本発明は、ＲＵＮＸ１突然変異及びこの主要分化プログラムを抑制する他の突然変異を有するＭＤＳ患者を治療する効果的な治療アプローチとなり得る。
例えばＲＵＮＸ１遺伝子の機能喪失突然変異に起因するＲＵＮＸ１活性障害は、例えば様々なタイプの白血病を含む様々な形態の癌と関連することが知られている。ＲＵＮＸ１は活性化転写因子であり、ＲＵＮＸ１によって媒介される転写活性化の喪失を補う戦略が利用可能でないことから、ＲＵＮＸ１活性の障害に対抗する臨床的介入は存在しない。本開示の幾つかの態様は、ＲＵＮＸ１結合パートナー及び標的遺伝子の群の特定に基づく。本開示の幾つかの態様は、例えばＣＤＫ８／１９阻害剤及び／又はコルチスタチン若しくはそのコルチスタチン類縁体等の或る特定の化合物を、単独で又は本明細書で提供される付加化合物と組み合わせて投与することで、ＲＵＮＸ１結合パートナー及び標的遺伝子の発現又は活性を変調することが、ＲＵＮＸ１活性障害に対抗する、例えばＲＵＮＸ１活性障害を示す癌を有する被験体を治療する効果的な戦略となるという認識に基づく。
したがって、本開示は、ＲＵＮＸ１活性障害を示す癌を治療する方法、組成物及びキットを提供する。加えて、本開示は、被験体における癌が、本明細書で提供される化合物及び組成物による治療に対して感受性があるか否かを決定し、かかる決定に基づいて本明細書で提供される治療方法及び戦略のいずれかによる治療に対して患者を選択する方法も提供する。
本開示が、ＲＵＮＸ１活性障害をもたらすＲＵＮＸ１突然変異に関して限定されないことが当業者によって理解される。ＲＵＮＸ１活性障害をもたらすＲＵＮＸ１突然変異の概要については、例えばIto et al., The RUNX family: developmental regulators in cancer, Nature Reviews Cancer 15, 81-95 (2015)、例えば８３頁最終段落から８４頁最終段落、並びに表１及び表２、Ley et al., Genomic and Epigenomic Landscapes of Adult De Novo Acute Myeloid Leukemia, NEJM 368:22, 2059-74 (2013)、Gelsi-Boyer et al., Genome profiling of chronic myelomonocytic leukemia: frequent alterations of RAS and RUNX1 genes. BMC Cancer 8, 299 (2008)、及びKuo et al., RUNX1 mutations are frequent in chronic myelomonocytic leukemia and mutations at the C-terminal region can predict acute myeloid leukemia transformation. Leukemia 23, 1426-1431 (2009)（それら各々の内容全体が引用することにより本明細書の一部をなす）を参照されたい。
Ｂ． ＲＵＮＸ１以外のバイオマーカーに基づく患者の選択
本発明の別の実施形態では、コルチスタチン療法による治療に対する腫瘍又は癌を有する患者の応答を予測する方法は、患者から腫瘍又は癌のサンプルを得る工程と、患者に由来する生体サンプルにおける１つ以上のバイオマーカーの発現レベル又は量を決定する工程であって、バイオマーカーがＥＲ陽性、ＶＨＬ突然変異の機能喪失（ＶＨＬ陰性）、ＨＥＲ２過剰発現、ＥＧＦＲ突然変異、ＭＥＴ突然変異、神経芽細胞腫のバイオマーカー；ＥＷＳ−ＦＬＩ１、ＳＴＡＴ１−ｐＳ７２７、ＳＴＡＴ１、又はＥＴＶ１、ＦＬＩ１、ＳＭＣ３、ＳＭＣ１Ａ、ＲＡＤ２１若しくはＳＴＡＧ２における不活性化突然変異からなる群から選択される工程と、発現レベル又は量が対応する正常細胞において見られるものを上回る又は下回る、例えば患者に対する臨床的利益の増大又は減少と関連する或る特定の量を上回る又は下回るか否かを決定する工程と、続いて任意に患者を有効量のＣＤＫ８／１９阻害剤又はその薬学的に許容可能な塩、オキシド又はその薬学的に許容可能な塩で治療する工程とを含む。代替的な実施形態では、観察される遺伝子発現を、ＣＤＫ８／１９阻害剤に対する応答を示す代表数の患者又は予測動物モデル及びＣＤＫ８／１９阻害剤に対する応答を示さない又は応答が不良な代表数の患者を含む対照サンプルセットにおける同じ遺伝子の発現と比較して、患者がコルチスタチン療法に応答する可能性があるかを決定する。患者のバイオマーカーが示す場合、医療供給者は患者が療法に応答する可能性が高いことを想定することができる。
一実施形態では、神経芽細胞腫は、ＲＵＮＸ１転写プログラムの活性化のために更にＣＤＫ８／１９阻害剤に対して感受性がある。Inoue, K.-I. & Ito, Y. Neuroblastoma cell proliferation is sensitive to changes in levels of RUNX1 and RUNX3 protein. Gene 487, 151-155 (2011)を参照されたい。
異常なＳＴＡＴ１又はＳＴＡＴ１−ｐＳ７２７レベルを有する腫瘍及び癌の例としては、Timofeeva, O. A. et al. Serine-phosphorylated STAT1 is a prosurvival factor in Wilms' tumor pathogenesis. Oncogene 25, 7555-7564 (2006)、Liu, W., Zhang, L. & Wu, R. Differential expression of STAT1 and IFN-γ in primary and invasive or metastatic wilms tumors. J. Surg. Oncol. 108, 152-156 (2013)、Arzt, L., Kothmaier, H., Halbwedl, I., Quehenberger, F. & Popper, H. H. Signal transducer and activator of transcription 1 (STAT1) acts like an oncogene in malignant pleural mesothelioma. Virchows Arch 465, 79-88 (2014)に記載されるものが挙げられる。一実施形態では、ＳＴＡＴ１又はＳＴＡＴ１−ｐＳ７２７バイオマーカーと関連する腫瘍又は癌は、中皮腫及び転移性ウィルムス腫瘍である。
ＩＶ． 診断及びキット
癌又は腫瘍の細胞を含む細胞又は組織サンプルを被験体から得る方法は、当業者に既知である。かかる方法は通例、腫瘍生検材料を被験体から、例えば癌細胞を含む組織生検材料を固形腫瘍から、又は腫瘍細胞を含む体液生検材料を液性腫瘍から得ることを含む。被験体が有する癌のタイプに応じた、被験体における癌細胞の好適な供給源は当業者に認識される。例えば、幾つかの実施形態では、癌は白血病であり、癌細胞は骨髄細胞、末梢血細胞又は造血幹細胞である。かかる幾つかの実施形態では、上記方法は、白血病細胞を含む血液又は骨髄サンプルを被験体から得ることを含む。
一実施形態では、本明細書で提供される診断方法では、被験体における癌がＲＵＮＸ１活性障害と関連するか、又はそれを示すか否かを決定する。かかるＲＵＮＸ１活性障害は種々の方法で検出することができる。例えば、ＲＵＮＸ１活性障害は、幾つかの実施形態では、ＲＵＮＸ１活性障害と関連することが報告されているＲＵＮＸ１遺伝子中の突然変異を検出することによって検出される。幾つかの実施形態では、ＲＵＮＸ１活性障害は、被験体から得られる癌細胞におけるＲＵＮＸ１遺伝子産物の発現レベル、例えばＲＵＮＸ１転写産物、ｍＲＮＡ又はタンパク質レベルを測定し、測定レベルを同じ又は同様の細胞型の健常細胞において測定又は予想される参照レベルと比較することによって検出される。幾つかの実施形態では、癌細胞において測定されるＲＵＮＸ１発現レベルが、健常細胞におけるＲＵＮＸ１発現レベルと比較して２５％超、３０％超、４０％超、５０％超、６０％超、７０％超、８０％超、９０％超、９５％超又は９８％超減少する場合に、ＲＵＮＸ１活性障害が検出される。反対の記述がなければ、癌細胞において測定されるＲＵＮＸ１発現レベルが、健常細胞におけるＲＵＮＸ１発現レベルと比較して２５％超減少する場合に、ＲＵＮＸ１活性障害が検出される。
幾つかの実施形態では、本明細書で提供される診断方法は、ＲＵＮＸ１活性障害をもたらす癌のゲノム中の突然変異を検出することによって、被験体における癌がＲＵＮＸ１活性障害と関連するか、又はそれを示すか否かを決定することを含む。ＲＵＮＸ１活性障害をもたらす多数の突然変異が以前に報告されている。かかる突然変異としては、限定されるものではないが、Gaidzik et al., RUNX1 mutations in acute myeloid leukemia: results from a comprehensive genetic and clinical analysis from the AML study group. J Clin Oncol. 29(10):1364-72 (2011)（その全内容が引用することにより本明細書の一部をなす）の付表Ａ２に開示される突然変異が挙げられる。幾つかの実施形態では、上記方法は、ＲＵＮＸ１タンパク質をコードする遺伝子における突然変異、例えばＲＵＮＸ１遺伝子における突然変異を検出することを含む。幾つかの実施形態では、上記方法は、野生型ＲＵＮＸ１配列と比較してＲＵＮＸ１タンパク質のアミノ酸配列中の変化をもたらす突然変異を検出することを含む。幾つかの実施形態では、上記方法は、ＲＵＮＸ１のタンパク質コード配列におけるアミノ酸若しくはアミノ酸配列の置換、欠失若しくは重複、フレームシフト、又は未成熟終止コドンをもたらす突然変異を検出することを含む。幾つかの実施形態では、突然変異は、異常ＲＵＮＸ１タンパク質をもたらす転座である。幾つかの実施形態では、突然変異はＲＵＮＸ１タンパク質のフラグメントの欠失をもたらす。幾つかの実施形態では、突然変異は、種々のタンパク質又はそのフラグメントをコードするゲノム配列へのＲＵＮＸ１タンパク質又はそのフラグメントをコードするゲノム配列の融合をもたらす。幾つかの実施形態では、突然変異は、種々のタンパク質又はそのフラグメントをコードするゲノム配列へのＲＵＮＸ１標的タンパク質又はそのフラグメントをコードするゲノム配列の融合をもたらす。幾つかの実施形態では、突然変異はＲＵＮＸ１−ＲＵＮＸ１Ｔ１転座である。幾つかの実施形態では、突然変異はＡ１４２＿Ａ１４９ｄｕｐ、Ａ１４２ｆｓＸ１７０、Ａ１４９ｆｓＸ、Ａ２５１ｆｓＸ、Ａ３３８ｆｓＸ４８２、Ａ６３ｆｓＸ、Ｄ１６０Ｙ、Ｄ３２６ｆｓＸ４８１、Ｅ２２３ｆｓＸ、Ｅ４２２ｆｓＸ、Ｆ４１１ｆｓＸ４８２、Ｇ１６５Ｒ、Ｇ１７０ｆｓＸ２０１、Ｇ３９４＿Ｌ４０６ｄｕｐ、Ｇ３９４ｆｓＸ４８２、Ｇ４０９ｆｓＸ４８２、Ｇ４３９ｆｓＸ４８２、Ｈ１０５＿Ｆ１１６ｄｕｐ、Ｈ１０５ｆｓＸ５４１、Ｈ４２７ｆｓＸ、Ｉ１１４ｆｓＸ１１７、Ｉ３４２ｆｓＸ、Ｋ２１５ｆｓＸ２６９、Ｌ１１２ｆｓＸ１１７、Ｌ１４４ｆｓＸ１７０、Ｌ２１０ｆｓＸ２６９、Ｌ３１３ｆｓＸ３２３、Ｌ３８２ｆｓＸ４８２、Ｌ９８ｆｓＸ、Ｎ４４８＿Ｖ４５２ｄｕｐ、Ｐ１１３Ａ、Ｐ３４５Ｒ、Ｐ４６４Ｐ、Ｐ９５ｆｓＸ１１７、Ｑ３３５＿Ｌ３３９ｄｕｐ、Ｑ４３８ｆｓＸ４８２、Ｒ１０７Ｃ、Ｒ１０７Ｓ、Ｒ１６６Ｑ、Ｒ２０１Ｇ、Ｒ２０１Ｑ、Ｒ２０１Ｘ、Ｒ２３２Ｗ、Ｒ３２０Ｘ、Ｒ３４６ｆｓＸ、Ｒ３４６ｆｓＸ４８２、Ｓ１４１ｆｓＸ、Ｓ２２６ｆｓＸ２６９、Ｓ２５６ｆｓＸ２６９、Ｓ３２２ｆｓＸ３２３、Ｓ３３１ｆｓＸ、Ｓ３８８ｆｓＸ４８１、Ｔ１４８ｆｓＸ１７０、Ｙ３５５ｆｓＸ若しくはＹ３８０ｆｓＸ４８２突然変異、又はそれらの任意の組合せである。突然変異の位置は、アクセッション番号ｃＤＮＡ ＮＣ＿００００２１．８（国立生物工学情報センター（ＮＣＢＩ）のウェブサイトncbi.orgでアクセス可能）に従って規定される。ＲＵＮＸ１活性障害をもたらす付加的な突然変異は、本開示及び当該技術分野の知識に基づいて当業者に明らかである。本開示はこの点で限定されない。
幾つかの実施形態では、本明細書で提供される診断方法は、ＲＵＮＸ１結合パートナー又はＲＵＮＸ１標的遺伝子をコードする遺伝子における突然変異を検出することによって、被験体における癌がＲＵＮＸ１活性障害と関連するか、又はそれを示すか否かを決定することを含む。例えば、幾つかの実施形態では、ＲＵＮＸ１結合パートナー又はＲＵＮＸ１標的遺伝子をコードする遺伝子はＣ／ＥＢＰα、ＣＢＦβ、ＥＴＳ１、ＦＬＩ１、ＦＯＧ１、ＧＡＴＡ１、ＧＡＴＡ２、ＰＵ．１、ＴＡＬ１、ＬＭＯ２又はＨＥＢである。幾つかの実施形態では、上記方法は、癌におけるＭＬＬ−ＡＦ９転座、ＭＬＬ−ＡＦ４転座、Ｂｃｒ−Ａｂｌ融合又はＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ突然変異を検出することによって、被験体における癌がＲＵＮＸ１活性障害と関連するか、又はそれを示すか否かを決定することを含む。
幾つかの実施形態では、上記方法は、ＲＵＮＸ１、ＲＵＮＸ１結合パートナー及び／又はＲＵＮＸ１標的遺伝子の発現レベルを検出することと、それを参照レベルと比較して、癌がＲＵＮＸ１活性障害を示すか否かを決定することとを含む。幾つかの実施形態では、ＲＵＮＸ１標的遺伝子はＡＣＳＬ１、ＡＤＯＲＡ２Ｂ、ＡＤＲＢ１、ＡＭＰＤ３、ＡＲＲＤＣ４、ＢＣＬ２、ＢＣＬ２Ａ１、ＣＢＦβ、ＣＣＮＡ１、ＣＤ２４４、ＣＤ４４、ＣＤＣ４２ＥＰ３、Ｃ／ＥＢＰα、ＣＥＣＲ６、ＣＦＬＡＲ、ＣＩＳＨ、ＣＳＦ１、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＲ４、ＣＹＴＩＰ、ＤＵＳＰ１０、Ｅ２Ｆ８、ＥＭＢ、ＥＭＲ２、ＥＴＳ１、ＥＴＳ２、ＦＡＭ１０７Ｂ、ＦＡＭ４６Ａ、ＦＣＥＲ１Ａ、ＦＣＧＲ１Ｂ、ＦＬＩ１、ＦＯＧ１、ＦＯＳＬ２、ＧＡＢ２、ＧＡＳ７、ＧＡＴＡ１、ＧＡＴＡ２、ＧＦＩ１Ｂ、ＧＭＰＲ、ＧＰＲ１８、ＧＰＲ１８３、ＨＢＢＰ１、ＨＥＢ、ＨＬＸ、ＨＭＧＣＳ１、ＩＧＦＢＰ４、ＩＧＦＢＰ５、ＩＬ１７ＲＡ、ＩＬ１ＲＡＰ、ＩＰＣＥＦ１、ＩＲＦ１、ＩＲＦ８、ＩＴＧＡ６、ＪＡＧ１、ＬＣＰ２、ＬＤＬＲ、ＬＩＭＡ１、ＬＭＯ２、ＬＲＲＣ３３、ＬＴＢ、ＭＢＰ、ＭＩＣＡＬ２、ＭＹＣＮ、ＭＹＯ１Ｇ、ＮＦＥ２、ＮＯＴＣＨ２、ＮＲＰ１、Ｐ２ＲＹ２、ＰＡＧ１、ＰＬＡＣ８、ＰＬＥＫ、ＰＬＸＮＣ１、ＰＭＰ２２、ＰＴＰＲＥ、ＰＵ．１、ＰＸＫ、ＲＡＢ２７Ａ、ＲＡＳＡ３、ＲＧＳ１６、ＲＨＯＨ、ＲＮＦ２４、ＲＸＲＡ、ＳＥＬＰＬＧ、ＳＬＡ、ＳＬＣ７Ａ１１、ＳＬＣ７Ａ５、ＳＯＣＳ１、ＳＴ３ＧＡＬ４、ＳＴＫ１７Ｂ、ＴＡＬ１、ＴＩＭＰ３、ＴＭＥＭ１０４、ＴＮＦ、ＴＳＣ２２Ｄ１、ＴＳＣ２２Ｄ３、ＺＢＴＢ１６及びＺＣＣＨＣ５からなる群から選択される。幾つかの実施形態では、ＲＵＮＸ１標的遺伝子はＢＣＬ２、ＣＣＮＡ１、ＣＤ４４、Ｃ／ＥＢＰα、ＣＢＦβ、ＣＳＦ１、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＲ４、ＥＴＳ１、ＥＴＳ２、ＦＬＩ１、ＦＯＧ１、ＦＣＥＲ１Ａ、ＧＡＴＡ１、ＧＡＴＡ２、ＧＦＩ１Ｂ、ＨＥＢ、ＩＲＦ１、ＩＲＦ８、ＪＡＧ１、ＬＭＯ２、ＬＴＢ、ＮＦＥ２、ＮＯＴＣＨ２、ＰＵ．１、ＳＬＡ、ＳＯＣＳ１、ＴＡＬ１及びＴＮＦからなる群から選択される。
幾つかの実施形態では、癌はＭＬＬ−ＡＦ９転座、ＭＬＬ−ＡＦ４転座、Ｂｃｒ−Ａｂｌ融合又はＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ突然変異を含む。これらの転座の概要については、例えば、Horton et al., MLL-AF9-mediated immortalization of human hematopoietic cells along different lineages changes during ontogeny. Leukemia 27(5):1116-26 (2013)、Bueno et al., Insights into the cellular origin and etiology of the infant pro-B acute lymphoblastic leukemia with MLL-AF4 rearrangement. Leukemia. 25(3):400-10 (2011)、Press et al., BCR-ABL1 RT-qPCR for monitoring the molecular response to tyrosine kinase inhibitors in chronic myeloid leukemia. J Mol Diagn. 15(5):565-76 (2013)、及びMata et al., JAK2 as a molecular marker in myeloproliferative diseases. Cardiovasc Hematol Agents Med Chem. 5(3):198-203 (2007)（それら各々の内容全体が引用することにより本明細書の一部をなす）を参照されたい。
幾つかの実施形態では、ＲＵＮＸ１活性障害、又はＲＵＮＸ１結合パートナー若しくはＲＵＮＸ１標的遺伝子の活性障害の検出は、ＲＵＮＸ１遺伝子、ＲＵＮＸ１結合パートナーをコードする遺伝子若しくは標的遺伝子における１つ以上の突然変異の有無、及び／又はかかる遺伝子によってコードされる遺伝子産物の発現レベルの増大若しくは減少に関する情報を得ることを含む。かかる方法は、幾つかの実施形態では、ＲＵＮＸ１、ＲＵＮＸ１結合パートナー又はＲＵＮＸ１標的遺伝子のゲノム状態又は発現状態を判定するために被験体から癌細胞を得ることを含み得る。幾つかの実施形態では、かかる方法は、癌細胞を含む被験体から組織又は体液の生検材料、例えば腫瘍生検材料、又は血液若しくは骨髄生検材料を得ることを含む。幾つかの実施形態では、生検サンプル中に含まれる癌細胞を、続いてＲＵＮＸ１、ＲＵＮＸ１結合パートナー又はＲＵＮＸ１標的遺伝子の突然変異又は遺伝子発現レベルの検出に好適なアッセイに供する。幾つかの実施形態では、生検材料は正常細胞又は不要な組織型の細胞を含む場合がある。例えば、末梢血又は骨髄サンプルは、白血病等の血液癌の病理に一般に関与しない細胞を含み得る。幾つかの実施形態では、生検サンプルは癌細胞、若しくは造血幹細胞等の癌病理と関連することが多い細胞について濃縮するか、又は分化細胞等の一般に発癌に関与しない細胞を枯渇するために処理される。このような被験体から得られるサンプルにおける細胞の濃縮及び枯渇の方法は、当業者に既知である。
他の実施形態では、特定の細胞又は細胞型を濃縮又は枯渇することなく生検サンプルを検出アッセイに供する。
当業者は、被験体から生検されたサンプルにおけるＲＵＮＸ１又はＲＵＮＸ１結合パートナー若しくはＲＵＮＸ１標的遺伝子の突然変異及び／又は発現レベルを、かかるサンプルを当該技術分野で既知の好適なアッセイに供することによって検出することが可能である。コード遺伝子における突然変異の検出のために、かかるアッセイは通例、癌細胞からゲノム配列情報を得ることを含む。幾つかの実施形態では、検出方法は、ＲＵＮＸ１又はＲＵＮＸ１結合パートナー若しくはＲＵＮＸ１標的遺伝子をコードする標的配列、例えばゲノム配列を増幅することと、増幅された標的配列をシークエンシングすることと、得られる配列情報を野生型配列と比較し、１つ以上の突然変異が存在するか否かを決定することとを含むアッセイを含む。
「発現レベル」という用語は本明細書で使用される場合、細胞又は組織における１つ以上の遺伝子産物（例えば、ｍＲＮＡ、タンパク質又はそれらの組合せ）のレベルに関する情報を指す。幾つかの実施形態では、１つ以上の遺伝子突然変異、及び／又は本明細書に記載の発現レベルの減少の検出は、例えば遺伝子産物（例えば、ＲＵＮＸ１遺伝子、ＲＵＮＸ１結合パートナー又はＲＵＮＸ１標的遺伝子によってコードされるタンパク質又は核酸転写産物）の存在量を検出する定量的又は半定量的アッセイにより得られるシグナルを反映する１つ以上の測定値又はアッセイ値、例えば単一遺伝子の発現の定量的又は半定量的な値に基づき得る。遺伝子発現産物の検出に好適なアッセイは当業者に既知であり、例えばウエスタンブロット、ＥＬＩＳＡ、ＲＴ−ＰＣＲ（例えば、エンドポイントＲＴ−ＰＣＲ、リアルタイムＰＣＲ又はｑＰＣＲ）、タンパク質又は核酸マイクロアレイ、及び超並列シークエンシングアッセイが含まれる。しかしながら、任意の好適なアッセイをハイブリダイゼーション、特異的結合（例えば、抗体結合）又は任意の他の技法に基づいて用いることができ、本発明の態様はこの点で限定されない。
幾つかの実施形態では、１つ以上の遺伝子突然変異の存在及び／又は本明細書に記載の発現レベルの減少は複数のデータ点、例えば発現の定量的若しくは半定量的な値及び／又は１つ以上の配列若しくは突然変異のデータ点を伴い得る。幾つかの実施形態では、１つ以上の遺伝子突然変異の存在及び／又は本明細書に記載の発現レベルの増大若しくは減少を、生検サンプルにおいて評価することができる。１つ以上の遺伝子突然変異及び／又は本明細書に記載の発現レベルの増大若しくは減少についての検出又はデータ生成の方法は当業者に既知であり、例えばサザンブロット、ウエスタンブロット、ＥＬＩＳＡ、ノーザンブロット、逆ノーザンブロット、ＲＴ−ＰＣＲ（例えばエンドポイント、リアルタイム又はｑＰＣＲ）、ＰＣＲ、ｄｄＰＣＲ（例えば、ドロップレットデジタルＰＣＲ）、マイクロアレイ（タンパク質又は転写産物のいずれかの検出のため）、ＳＮＰ分析、ＰＣＲ、ハイブリダイゼーションアッセイ、シークエンシングアッセイ等、又はそれらの任意の組合せが挙げられる（例示的な検出方法については、例えば、Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Third Edition (3 Volume Set), Cold Spring Harbor Laboratory Press; 3rd edition (January 15, 2001), ISBN-10: 0879695773、Robert Grutzmann (Editor), Christian Pilarsky (Editor), Cancer Gene Profiling: Methods and Protocols (Methods in Molecular Biology), Humana Press; 1st edition (November 6, 2009), ISBN-10: 1934115762（どちらも遺伝子産物の検出及び発現プロファイリング方法の開示について、引用することにより本明細書の一部をなす）を参照されたい）。
幾つかの実施形態では、定量的発現値は出発サンプル、例えば腫瘍細胞又は組織サンプルにおける遺伝子転写産物の存在量を反映する値である。幾つかの実施形態では、半定量的発現値は対照又は参照量、例えば健常細胞又は健常個体から得られる同じタイプの細胞において測定又は予想される量に対した、出発サンプルにおける遺伝子転写産物の存在量を反映する値である。半定量的発現値を算出する方法は当業者に既知である。半定量的発現値の生成に適切な対照又は参照量は当業者に既知であり、例えばハウスキーピング遺伝子（例えば、β−アクチン又はＧＡＰＤＨ）、外部対照（例えば、分析される細胞において通常発現しないスパイクイン（spiked in）ＲＮＡ又はＤＮＡ対照）の発現値、総発現値（例えば、合計した細胞により得られる全発現値）、又は歴史的若しくは経験的値が挙げられる。
幾つかの実施形態では、サンプルについて決定されたＲＵＮＸ１、ＲＵＮＸ１結合パートナー又はＲＵＮＸ１標的遺伝子（例えば、ＲＮＡ及び／又はタンパク質）の発現レベルを、参照発現レベルと比較する。幾つかの実施形態では、参照は正常発現レベルを示す標準である。幾つかの実施形態では、参照は不十分な発現レベルを示す標準である（参照以下の任意の試験レベルは、ＲＵＮＸ１、ＲＵＮＸ１結合パートナー又はＲＵＮＸ１標的遺伝子のそれぞれの活性障害を示し得る）。幾つかの実施形態では、参照レベルは、正常又は健常組織のサンプルにおけるＲＵＮＸ１、ＲＵＮＸ１結合パートナー又はＲＵＮＸ１標的遺伝子の発現レベルを決定することによって得られる。幾つかの実施形態では、参照レベルは、試験サンプルを得た同じ被験体から得られる参照サンプル（例えば、悪性細胞を含有しないサンプル）においてＲＵＮＸ１、ＲＵＮＸ１結合パートナー又はＲＵＮＸ１標的遺伝子をアッセイすることによって決定される。参照サンプルは、同じ組織の異なる領域又は被験体の身体の異なる領域から試験サンプルとして得ることができる。
幾つかの実施形態では、被験体、又は被験体から得られる生検材料若しくは他の生体サンプルを評価して、例えばＲＵＮＸ１をコードする遺伝子、ＲＵＮＸ１結合パートナー若しくはＲＵＮＸ１標的遺伝子における突然変異（例えば、欠失、機能喪失、フレームシフト、逆位、転座又は他の突然変異）、又はＲＵＮＸ１、ＲＵＮＸ１結合パートナー若しくはＲＵＮＸ１標的遺伝子の発現レベルの減少として検出される、ＲＵＮＸ１活性又はＲＵＮＸ１結合パートナー若しくはＲＵＮＸ１標的遺伝子の活性の障害が存在するか否かを決定する。本明細書に記載の遺伝及び／又は発現情報のいずれかを、単独又は組合せで、患者の予後、治療推奨、又は健康、転帰及び／又は治療の他の診断若しくは予測評価の助けとなる付加的な患者情報を用いて又は用いずに用いることができることを理解されたい。
Ｖ． 方法及び医薬組成物
本発明は、初めに患者が本明細書で指定される異常レベルのバイオマーカーを有するか否かを決定することによって腫瘍又は癌治療を必要とする患者を判定することと、続いて結果により正当化される場合に、患者をコルチスタチン又はＣＤＫ８／１９阻害剤療法により治療することとを含む。
コルチスタチン又は他のＣＤＫ８／１９阻害剤は、純化学物質として投与することができるが、より一般に、このような選択された本明細書に記載のコルチスタチン又はＣＤＫ８／１９阻害剤の治療を必要とする宿主、通例ヒトに対しての有効量を含む医薬組成物として投与される。したがって、本開示は、本明細書に記載の使用の全てについて有効量のコルチスタチン又はその薬学的に許容可能な塩を、少なくとも１つの薬学的に許容可能な担体と共に含む医薬組成物を提供する。医薬組成物はコルチスタチンを唯一の活性剤として含有していても、又は代替的な実施形態では、化合物と少なくとも１つの付加的な活性剤とを含有していてもよい。或る特定の実施形態では、医薬組成物は約０．１ｍｇ〜約２０００ｍｇ、約１０ｍｇ〜約１０００ｍｇ、約５ｍｇ〜約２００ｍｇ又は約５ｍｇ〜約１００ｍｇの活性化合物と、任意に適切な投与量の付加的な活性剤とを単位投薬形態中に含有する投薬形態である。例は少なくとも５ｍｇ、１０ｍｇ、１５ｍｇ、２５ｍｇ、５０ｍｇ、７５ｍｇ、１００ｍｇ、２００ｍｇ、２５０ｍｇ、３００ｍｇ、４００ｍｇ、５００ｍｇ、６００ｍｇ、７００ｍｇ又は７５０ｍｇの活性化合物を含む投薬形態である。コルチスタチン又はＣＤＫ８／１９阻害剤は、従来の薬学的に許容可能な担体を含有する投薬単位配合物中、経口で、局所的に、非経口的に、吸入若しくはスプレーにより、舌下に、眼内インプラントを含むインプラントにより、経皮的に、口腔内投与により、直腸内に、点眼液として、注射、静脈内、大動脈内、頭蓋内、真皮下、腹腔内、皮下、経鼻的、舌下若しくは直腸に、又は他の手段により投与することができる。
幾つかの実施形態では、本開示は、ＲＵＮＸ１活性障害を示す癌又は腫瘍を有する被験体に投与される式（Ａ−１）、（Ａ−１’）、（Ａ−１’’）、（Ａ−２’）、（Ａ−２’’）、（Ａ−３’）、（Ａ−３’’）、（Ｄ１’）、（Ｄ１’’）、（Ｄ２’）、（Ｄ２’’）、（Ｅ１’）、（Ｅ１’’）、（Ｅ２’）、（Ｅ２’’）、（Ｇ１’）若しくは（Ｇ１’’）の化合物、又はその薬学的に許容可能な塩、第四級アミン塩若しくはＮ−オキシド等のコルチスタチン又はＣＤＫ８／１９阻害剤を含む組成物を提供する。幾つかの実施形態では、組成物はＣＤＫ８／１９阻害剤を含む。幾つかの実施形態では、組成物はＪａｋ１／２阻害剤を更に含む。
本明細書で提供される医薬組成物の説明は主としてヒトへの投与に好適な医薬組成物を対象とするものであるが、かかる組成物が概して動物への投与にも好適であることが当業者には理解される。必要に応じて、ヒトへの投与に好適な医薬組成物を様々な動物への投与に好適な組成物へと変えるために修飾することが十分理解され、当業者は、もしあれば、単に通常の実験法を用いてかかる修飾を設計し、行うことが可能である。医薬組成物の投与が企図される被験体としては、ヒト及び／又は他の霊長類；哺乳動物、例えばウシ、ブタ、ウマ、ヒツジ、ネコ、イヌ、齧歯類、マウス、ハムスター及び／又はラット；鳥類、例えばニワトリ、カモ、ガチョウ及びシチメンチョウが挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書に記載の医薬組成物の配合物は、薬理学の技術分野で既知であるか又は今後開発される任意の方法によって調製することができる。概して、かかる調製方法は、有効成分と賦形剤及び／又は１つ以上の他の副成分とを合わせる工程、次いで必要及び／又は所望に応じて、生成物を所望の単回又は複数回投与単位へと成形及び／又は包装する工程を含む。
本発明による医薬組成物は、単回単位用量及び／又は複数の単回単位用量として調製、包装及び／又はバルク販売することができる。本明細書で使用される場合、「単位用量」は所定量の有効成分を含む医薬組成物の個々の量である。有効成分の量は概して、被験体へ投与される有効成分の投与量及び／又はかかる投与量の好都合な割合、例えばかかる投与量の半分又は３分の１に等しい。
塩は、無機酸である硫酸、ピロ硫酸、重硫酸、亜硫酸、重亜硫酸、硝酸、リン酸、一水素リン酸、二水素リン酸、メタリン酸、ピロリン酸、塩化物、臭化物、ヨウ化物、例えば塩酸、硝酸、リン酸、硫酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、リン等から調製することができる。代表的な塩としては、臭化水素酸塩、塩酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、硝酸塩、酢酸塩、シュウ酸塩、吉草酸塩、オレイン酸塩、パルミチン酸塩、ステアリン酸塩、ラウリン酸塩、ホウ酸塩、安息香酸塩、乳酸塩、リン酸塩、トシル酸塩、クエン酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、ナフチル酸塩（naphthylate）、メシル酸塩、グルコヘプトン酸塩、ラクトビオン酸塩、ラウリルスルホン酸塩及びイセチオン酸塩等が挙げられる。塩は有機酸、例えば脂肪族モノカルボン酸及びジカルボン酸、フェニル置換アルカン酸、ヒドロキシアルカン酸、アルカンジオール酸（alkanedioic acids）、芳香族酸、脂肪族及び芳香族スルホン酸等から調製することもできる。代表的な塩としては、酢酸塩、プロピオン酸塩、カプリル酸塩、イソ酪酸塩、シュウ酸塩、マロン酸塩、コハク酸塩、スベリン酸塩、セバシン酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、マンデル酸塩、安息香酸塩、クロロ安息香酸塩、メチル安息香酸塩、ジニトロ安息香酸塩、フタル酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、トルエンスルホン酸塩、フェニル酢酸塩、クエン酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、酒石酸塩、メタンスルホン酸塩等が挙げられる。薬学的に許容可能な塩としては、アルカリ及びアルカリ土類金属ベースのカチオン、例えばナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム等、並びにアンモニウム、テトラメチルアンモニウム、テトラエチルアンモニウム、メチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、トリエチルアミン、エチルアミン等を含むが、これらに限定されない非毒性のアンモニウム、第四級アンモニウム及びアミンのカチオンを挙げることができる。アルギニン酸塩、グルコン酸塩、ガラクツロン酸塩等のアミノ酸の塩も企図される。例えば、Berge et al., J. Pharm. Sci., 1977, 66, 1-19（引用することにより本明細書の一部をなす）を参照されたい。
本発明による医薬組成物中の有効成分、薬学的に許容可能な賦形剤及び／又は任意の付加的な成分の相対量は、治療される被験体の独自性（identity：アイデンティティ）、大きさ及び／又は状態に応じて異なり、更に組成物を投与する経路に左右される。例としては、組成物は０．１％〜１００％（ｗ／ｗ）の有効成分、例えばＣＤＫ８／１９阻害剤、又は式（Ａ−１）、（Ａ−１’）、（Ａ−１’’）、（Ａ−２’）、（Ａ−２’’）、（Ａ−３’）、（Ａ−３’’）、（Ｄ１’）、（Ｄ１’’）、（Ｄ２’）、（Ｄ２’’）、（Ｅ１’）、（Ｅ１’’）、（Ｅ２’）、（Ｅ２’’）、（Ｇ１’）若しくは（Ｇ１’’）の化合物、若しくはその薬学的に許容可能な塩、第四級アミン塩若しくはＮ−オキシド等のコルチスタチン若しくはそのコルチスタチン類縁体と、任意に例えばＪＡＫ１／２阻害剤等の任意の付加的な有効成分とを含み得る。幾つかの実施形態では、組成物は０．１％〜１％、１％〜１０％、１０％〜２０％、２０％〜３０％、３０％〜４０％、４０％〜５０％、５０％〜６０％、６０％〜７０％、７０％〜８０％、８０％〜９０％又は９０％〜１００％（ｗ／ｗ）の有効成分、より一般には０．１％〜１００％（ｗ／ｗ）の有効成分を含む。
本明細書で提供される医薬配合物は、本明細書で使用される場合、所望される特定の投薬形態に適したあらゆる溶媒、分散媒、希釈剤又は他の液体ビヒクル、分散又は懸濁助剤、表面活性剤、等張剤、増粘剤又は乳化剤、保存料、固体結合剤、滑沢剤等を含む薬学的に許容可能な賦形剤を付加的に含んでいてもよい。Remington's The Science and Practice of Pharmacy, 21st Edition, A. R. Gennaro (Lippincott, Williams & Wilkins, Baltimore, MD, 2006)（引用することにより本明細書の一部をなす）は、医薬組成物の配合に使用される様々な賦形剤及びその調製のための既知の技法を開示している。任意の従来の賦形剤媒体が物質又はその誘導体と不適合である、例えば任意の望ましくない生物学的効果又はそうでなければ医薬組成物の任意の他の構成要素（複数の場合もある）との有害な相互作用を生じる場合を除き、その使用は本発明の範囲内であることが企図される。
幾つかの実施形態では、賦形剤は、例えばアメリカ食品医薬品局によりヒトへの使用及び動物への使用が既に認可されたものである。幾つかの実施形態では、賦形剤は米国薬局方（ＵＳＰ）、ヨーロッパ薬局方（ＥＰ）、英国薬局方及び／又は国際薬局方の基準を満たす。
医薬組成物の製造に使用される薬学的に許容可能な賦形剤としては、不活性希釈剤、分散剤及び／又は造粒剤、表面活性剤及び／又は乳化剤、崩壊剤、結合剤、保存料、緩衝剤、滑沢剤及び／又は油が挙げられるが、これらに限定されない。かかる賦形剤は任意に医薬配合物に含まれ得る。ココアバター及び坐剤ろう、着色料、コーティング剤、甘味料、香味料及び／又は香料等の賦形剤が配合者の判断に応じて組成物中に存在していてもよい。
希釈剤の例としては、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、リン酸カルシウム、リン酸二カルシウム、硫酸カルシウム、リン酸水素カルシウム、リン酸ナトリウム、ラクトース、スクロース、セルロース、微結晶性セルロース、カオリン、マンニトール、ソルビトール、イノシトール、塩化ナトリウム、乾燥デンプン、コーンスターチ、粉砂糖等、及び／又はそれらの組合せが挙げられるが、これらに限定されない。
造粒及び／又は分散剤の例としては、ジャガイモデンプン、コーンスターチ、タピオカデンプン、デンプングリコール酸ナトリウム、クレイ、アルギン酸、グアーガム、柑橘パルプ、寒天、ベントナイト、セルロース及び木質製品、海綿、カチオン交換樹脂、炭酸カルシウム、シリケート、炭酸ナトリウム、架橋ポリ（ビニル−ピロリドン）（クロスポビドン）、カルボキシメチルデンプンナトリウム（デンプングリコール酸ナトリウム）、カルボキシメチルセルロース、架橋カルボキシメチルセルロースナトリウム（クロスカルメロース）、メチルセルロース、αデンプン（pregelatinized starch）（スターチ１５００）、微結晶性デンプン、水不溶性デンプン、カルボキシメチルセルロースカルシウム、ケイ酸アルミニウムマグネシウム（Ｖｅｅｇｕｍ）、ラウリル硫酸ナトリウム、第四級アンモニウム化合物等、及び／又はそれらの組合せが挙げられるが、これらに限定されない。
表面活性剤及び／又は乳化剤の例としては、天然乳化剤（例えばアカシア、寒天、アルギン酸、アルギン酸ナトリウム、トラガカント、コンドルクス（chondrux）、コレステロール、キサンタン、ペクチン、ゼラチン、卵黄、カゼイン、羊毛脂、コレステロール、ワックス及びレシチン）、コロイド状粘土（例えばベントナイト［ケイ酸アルミニウム］及びＶｅｅｇｕｍ（商標）［ケイ酸マグネシウムアルミニウム］）、長鎖アミノ酸誘導体、高分子量アルコール（例えばステアリルアルコール、セチルアルコール、オレイルアルコール、モノステアリン酸トリアセチン、ジステアリン酸エチレングリコール、モノステアリン酸グリセリル及びモノステアリン酸プロピレングリコール、ポリビニルアルコール）、カルボマー（例えば、カルボキシポリメチレン、ポリアクリル酸、アクリル酸ポリマー及びカルボキシビニルポリマー）、カラギーナン、セルロース誘導体（例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、粉末セルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース）、ソルビタン脂肪酸エステル（例えば、モノラウリン酸ポリオキシエチレンソルビタン［Ｔｗｅｅｎ（商標）２０］、ポリオキシエチレンソルビタン［Ｔｗｅｅｎ（商標）６０］、モノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン［Ｔｗｅｅｎ（商標）８０］、モノパルミチン酸ソルビタン［Ｓｐａｎ（商標）４０］、モノステアリン酸ソルビタン［Ｓｐａｎ（商標）６０］、トリステアリン酸ソルビタン［Ｓｐａｎ（商標）６５］、モノオレイン酸グリセリル、モノパルミチン酸ソルビタン［Ｓｐａｎ（商標）８０］）、ポリオキシエチレンエステル（例えば、モノステアリン酸ポリオキシエチレン［Ｍｙｒｊ（商標）４５］、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリエトキシル化ヒマシ油、ステアリン酸ポリオキシメチレン、及びＳｏｌｕｔｏｌ（商標））、スクロース脂肪酸エステル、ポリエチレングリコール脂肪酸エステル（例えばＣｒｅｍｏｐｈｏｒ（商標））、ポリオキシエチレンエーテル（例えば、ポリオキシエチレンラウリルエーテル［Ｂｒｉｊ（商標）３０］）、ポリ（ビニル−ピロリドン）、モノラウリン酸ジエチレングリコール、オレイン酸トリエタノールアミン、オレイン酸ナトリウム、オレイン酸カリウム、オレイン酸エチル、オレイン酸、ラウリン酸エチル、ラウリル硫酸ナトリウム、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（商標）Ｆ ６８、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ（商標）１８８、臭化セトリモニウム、塩化セチルピリジニウム、塩化ベンザルコニウム、ドキュセートナトリウム等、及び／又はそれらの組合せが挙げられるが、これらに限定されない。
結合剤の例としては、デンプン（例えばコーンスターチ及びデンプンペースト）、ゼラチン、糖（例えばスクロース、グルコース、デキストロース、デキストリン、糖蜜、ラクトース、ラクチトール、マンニトール）、天然及び合成ガム（例えばアカシア、アルギン酸ナトリウム、アイリッシュモスの抽出物、パンワー（panwar）ガム、ガディガム、イサポール皮（isapol husks）の粘液、カルボキシメチルセルロース、メチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、微結晶性セルロース、セルロースアセテート、ポリ（ビニル−ピロリドン）、ケイ酸マグネシウムアルミニウム（Ｖｅｅｇｕｍ（商標））及びカラマツのアラビノガラクタン）、アルギン酸塩、ポリエチレンオキシド、ポリエチレングリコール、無機カルシウム塩、ケイ酸、ポリメタクリレート、ワックス、水、アルコール等、及びそれらの組合せが挙げられるが、これらに限定されない。
保存料の例としては、抗酸化剤、キレート剤、抗菌保存料、抗真菌保存料、アルコール保存料、酸性保存料及び／又は他の保存料を挙げることができるが、これらに限定されない。抗酸化剤の例としては、αトコフェロール、アスコルビン酸、パルミチン酸アコルビル、ブチル化ヒドロキシアニソール、ブチル化ヒドロキシトルエン、モノチオグリセロール、メタ重亜硫酸カリウム、プロピオン酸、没食子酸プロピル、アスコルビン酸ナトリウム、重亜硫酸ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム及び／又は亜硫酸ナトリウムが挙げられるが、これらに限定されない。例示的なキレート剤としては、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、クエン酸一水和物、エデト酸二ナトリウム、エデト酸二カリウム、エデト酸、フマル酸、リンゴ酸、リン酸、エデト酸ナトリウム、酒石酸及び／又はエデト酸三ナトリウムが挙げられる。抗菌保存料の例としては、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、ベンジルアルコール、ブロノポール、セトリミド、塩化セチルピリジニウム、クロルヘキシジン、クロロブタノール、クロロクレゾール、クロロキシレノール、クレゾール、エチルアルコール、グリセリン、ヘキセチジン、イミド尿素、フェノール、フェノキシエタノール、フェニルエチルアルコール、フェニル水銀ニトレート、プロピレングリコール及び／又はチメロサールが挙げられるが、これらに限定されない。抗真菌保存料の例としては、ブチルパラベン、メチルパラベン、エチルパラベン、プロピルパラベン、安息香酸、ヒドロキシ安息香酸、安息香酸カリウム、ソルビン酸カリウム、安息香酸ナトリウム、プロピオン酸ナトリウム及び／又はソルビン酸が挙げられるが、これらに限定されない。アルコール保存料の例としては、エタノール、ポリエチレングリコール、フェノール、フェノール化合物、ビスフェノール、クロロブタノール、ヒドロキシベンゾエート及び／又はフェニルエチルアルコールが挙げられるが、これらに限定されない。酸性保存料の例としては、ビタミンＡ、ビタミンＣ、ビタミンＥ、β−カロテン、クエン酸、酢酸、デヒドロ酢酸、アスコルビン酸、ソルビン酸及び／又はフィチン酸が挙げられるが、これらに限定されない。他の保存料としては、トコフェロール、酢酸トコフェロール、メシル酸デテロキシム（deteroxime mesylate）、セトリミド、ブチル化ヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、ブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、エチレンジアミン、ラウリル硫酸ナトリウム（ＳＬＳ）、ラウリルエーテル硫酸ナトリウム（ＳＬＥＳ）、重亜硫酸ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、亜硫酸カリウム、メタ重亜硫酸カリウム、Ｇｌｙｄａｎｔ Ｐｌｕｓ（商標）、Ｐｈｅｎｏｎｉｐ（商標）、メチルパラベン、Ｇｅｒｍａｌｌ（商標）１１５、Ｇｅｒｍａｂｅｎ（商標）ＩＩ、Ｎｅｏｌｏｎｅ（商標）、Ｋａｔｈｏｎ（商標）及び／又はＥｕｘｙｌ（商標）が挙げられるが、これらに限定されない。
緩衝剤の例としては、クエン酸緩衝溶液、酢酸緩衝溶液、リン酸緩衝溶液、塩化アンモニウム、炭酸カルシウム、塩化カルシウム、クエン酸カルシウム、グルビオン酸カルシウム、グルセプト酸カルシウム、グルコン酸カルシウム、Ｄ−グルコン酸、グリセロリン酸カルシウム、乳酸カルシウム、プロピオン酸、レブリン酸カルシウム、ペンタン酸、二塩基性リン酸カルシウム、リン酸、三塩基性リン酸カルシウム、リン酸カルシウムヒドロキシド、酢酸カリウム、塩化カリウム、グルコン酸カリウム、カリウム混合物、二塩基性リン酸カリウム、一塩基性リン酸カリウム、リン酸カリウム混合物、酢酸ナトリウム、重炭酸ナトリウム、塩化ナトリウム、クエン酸ナトリウム、乳酸ナトリウム、二塩基性リン酸ナトリウム、一塩基性リン酸ナトリウム、リン酸ナトリウム混合物、トロメタミン、水酸化マグネシウム、水酸化アルミニウム、アルギン酸、発熱物質除去水、等張食塩水、リンガー液、エチルアルコール等、及び／又はそれらの組合せが挙げられるが、これらに限定されない。
滑沢剤の例としては、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸、シリカ、タルク、マルト、ベヘン酸グリセリル、硬化植物油、ポリエチレングリコール、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウム、ロイシン、ラウリル硫酸マグネシウム、ラウリル硫酸ナトリウム等、及びそれらの組合せが挙げられるが、これらに限定されない。
油の例としては、アーモンド、杏仁、アボカド、ババス、ベルガモット、クロフサスグリの種、ルリジサ、カデ、カモミール、セイヨウアブラナ、ヒメウイキョウ、ブラジルロウヤシ、トウゴマ、シナモン、カカオ脂、ココナツ、タラ肝、コーヒー、トウモロコシ、綿の種、エミュー、ユーカリ、マツヨイグサ、魚、亜麻の種、ゲラニオール、ヒョウタン、ブドウの種、ヘーゼルナッツ、ヒソップ、ミリスチン酸イソプロピル、ホホバ、ククイの実、ラバンジン、ラベンダー、レモン、アオモジ、マカダミアナッツ、ゼニアオイ、マンゴーの種、メドウフォームの種、ミンク、ナツメグ、オリーブ、オレンジ、オレンジラフィー、パーム、パーム核、桃仁、ピーナッツ、ケシの種、カボチャの種、菜種、米糠、ローズマリー、ベニバナ、サンダルウッド、サザンカ、セイバリー、シーバックソーン、ゴマ、シアバター、シリコーン、大豆、ヒマワリ、ティーツリー、アザミ、ツバキ、ベチバー、クルミ及び小麦胚芽の油が挙げられるが、これらに限定されない。油の例としては、ステアリン酸ブチル、トリカプリル酸グリセリル、トリカプリン酸グリセリル、シクロメチコン、セバシン酸ジエチル、ジメチコン３６０、ミリスチン酸イソプロピル、鉱油、オクチルデカノール、オレイルアルコール、シリコーン油及び／又はそれらの組合せが挙げられるが、これらに限定されない。
経口及び非経口投与用の液体投薬形態としては、薬学的に許容可能なエマルション、マイクロエマルション、溶液、懸濁液、シロップ及び／又はエリキシルが挙げられるが、これらに限定されない。有効成分に加えて、液体投薬形態は、例えば水又は他の溶媒等の当該技術分野で一般的に使用される不活性希釈剤、可溶化剤、並びにエチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、ジメチルホルムアミド、油（特に綿の種、落花生、トウモロコシ、胚芽、オリーブ、トウゴマ及びゴマの油）、グリセロール、テトラヒドロフルフリルアルコール、ポリエチレングリコール及びソルビタンの脂肪酸エステル等の乳化剤、並びにそれらの混合物を含み得る。不活性希釈剤の他に、経口組成物には、湿潤剤、乳化剤及び懸濁剤、甘味剤、着香剤及び／又は芳香剤等のアジュバントが含まれ得る。非経口投与についての或る特定の実施形態では、組成物を、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ（商標）、アルコール、油、変性油、グリコール、ポリソルベート、シクロデキストリン、ポリマー及び／又はそれらの組合せ等の可溶化剤と混合する。
注射用調製物、例えば滅菌注射用水性又は油性懸濁液は、好適な分散剤、湿潤剤及び／又は懸濁化剤を用いる既知の技術に従って配合することができる。滅菌注射用調製物は非毒性の非経口的に許容可能な希釈剤及び／又は溶媒中の滅菌注射用溶液、懸濁液及び／又はエマルション、例えば１，３−ブタンジオール溶液であり得る。用いることができる許容可能なビヒクル及び溶媒は水、リンガー液（米国薬局方）及び等張塩化ナトリウム溶液である。滅菌固定油が溶媒又は懸濁媒体として慣習的に用いられている。この目的で、合成モノグリセリド又はジグリセリドを含む任意の無菌固定油を用いることができる。オレイン酸等の脂肪酸を注射剤の調製に使用することができる。
注射用配合物は、例えば細菌保持（bacterial-retaining）フィルターを通して濾過するか、及び／又は滅菌水若しくは他の滅菌注射用媒体へと使用前に溶解若しくは分散させることができる滅菌固体組成物の形態で滅菌剤を組み込むことによって滅菌することができる。
有効成分の効果を持続させるために、多くの場合、皮下又は筋肉注射からの有効成分の吸収を遅らせることが望ましい。これは、水溶性に乏しい結晶性又は非晶質材料の液体懸濁液を用いて達成することができる。次いで、薬物の吸収速度はその溶解速度に応じて異なり、その溶解速度は結晶サイズ及び結晶形態に左右され得る。代替的には、非経口的に投与される薬物形態の遅延吸収は、薬物を油ビヒクルに溶解又は懸濁することによって達成される。注射用デポー形態は、ポリラクチド−ポリグリコリド等の生分解性ポリマー中の薬物のマイクロカプセル化マトリックス（microencapsule matrices）を形成することによって作製される。薬物とポリマーとの比率及び用いる特定のポリマーの性質に応じて、薬物放出速度を制御することができる。他の生分解性ポリマーの例としては、ポリ（オルトエステル）及びポリ（無水物）が挙げられる。デポー注射用配合物は、薬物を体組織に適合するリポソーム又はマイクロエマルション中に封入することによって調製される。
直腸又は膣内投与用の組成物は通例、組成物と、常温で固体であるが、体温では液体であり、したがって直腸又は膣腔内で融解し、有効成分を放出するココアバター、ポリエチレングリコール又は坐剤ろう等の好適な非刺激性賦形剤とを混合することによって調製することができる坐剤である。
経口投与用の固体投薬形態には、カプセル、錠剤、丸剤、粉末及び顆粒が含まれる。かかる固体投薬形態では、有効成分をクエン酸ナトリウム又はリン酸二カルシウム等の少なくとも１つの不活性の薬学的に許容可能な賦形剤、及び／又は充填剤若しくは増量剤（例えばデンプン、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトール及びケイ酸）、結合剤（例えばカルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチン、ポリビニルピロリジノン、スクロース及びアラビアゴム）、湿潤剤（例えばグリセロール）、崩壊剤（例えば寒天、炭酸カルシウム、バレイショデンプン又はタピオカデンプン、アルギン酸、或る特定のケイ酸塩及び炭酸ナトリウム）、溶解遅延剤（例えばパラフィン）、吸収促進剤（例えば第四級アンモニウム化合物）、湿潤剤（例えばセチルアルコール及びグリセロールモノステアレート）、吸収剤（例えばカオリン及びベントナイトクレイ）、並びに潤滑剤（例えばタルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウム）及びそれらの混合物と混合する。カプセル、錠剤及び丸剤の場合、投薬形態は緩衝剤を含み得る。
同様のタイプの固体組成物を、ラクトース又は乳糖及び高分子量ポリエチレングリコール等のような賦形剤を使用する軟ゼラチンカプセル及び硬ゼラチンカプセル中の充填剤として用いることができる。錠剤、糖衣錠、カプセル、丸剤及び顆粒の固体投薬形態は、腸溶コーティング及び医薬品配合技術分野で既知の他のコーティング等のコーティング及びシェルを用いて調製することができる。これらの固体投薬形態は乳白剤を任意に含んでいても、腸管の或る特定の部分でのみ又は優先的に有効成分（複数の場合もある）を任意に遅延方式で放出する組成物であってもよい。使用することができる包埋組成物の例としては、高分子物質及びろうが挙げられる。同様のタイプの固体組成物を、ラクトース又は乳糖及び高分子量ポリエチレングリコール等のような賦形剤を使用する軟ゼラチンカプセル及び硬ゼラチンカプセル中の充填剤として用いることができる。
組成物の局所及び／又は経皮投与用の投薬形態としては、軟膏、ペースト、クリーム、ローション、ゲル、粉末、溶液、スプレー、吸入剤及び／又はパッチを挙げることができる。概して、有効成分を滅菌条件下で薬学的に許容可能な賦形剤及び／又は任意の必要な保存料及び／又は必要とされ得る緩衝剤と混ぜる。本発明は付加的に、身体への化合物の制御送達をもたらす追加の利点を有することが多い経皮パッチの使用を企図する。かかる投薬形態は、例えば化合物を適当な媒体に溶解及び／又は分注することによって調製することができる。代替的又は付加的に、律速膜を設ける及び／又は化合物をポリマーマトリックス及び／又はゲルに分散させることによって速度を制御することができる。
本明細書に記載の皮内医薬組成物の送達に使用される好適なデバイスには、米国特許第４，８８６，４９９号、同第５，１９０，５２１号、同第５，３２８，４８３号、同第５，５２７，２８８号、同第４，２７０，５３７号、同第５，０１５，２３５号、同第５，１４１，４９６号及び同第５，４１７，６６２号に記載されるような短針デバイスが含まれる。皮内組成物は、国際公開第９９／３４８５０号に記載されるような皮膚への針の有効侵入長を制限するデバイス、及びその機能的同等物によって投与することができる。液体ジェット式注射器、及び／又は角質層を貫通し、真皮に達する噴流を生じる針によって液体組成物を真皮へと送達するジェット式注射デバイスが好適である。ジェット式注射デバイスは、例えば米国特許第５，４８０，３８１号、同第５，５９９，３０２号、同第５，３３４，１４４号、同第５，９９３，４１２号、同第５，６４９，９１２号、同第５，５６９，１８９号、同第５，７０４，９１１号、同第５，３８３，８５１号、同第５，８９３，３９７号、同第５，４６６，２２０号、同第５，３３９，１６３号、同第５，３１２，３３５号、同第５，５０３，６２７号、同第５，０６４，４１３号、同第５，５２０，６３９、同第４，５９６，５５６号、同第４，７９０，８２４号、同第４，９４１，８８０号、同第４，９４０，４６０号、並びに国際公開第９７／３７７０５号及び国際公開第９７／１３５３７号に記載されている。粉末形態のワクチンを加速して皮膚の外層を通して真皮へと送るために圧縮ガスを用いるバリスティック粉末／粒子送達デバイスが好適である。代替的又は付加的には、従来のシリンジを皮内投与の古典的マントー法に使用することができる。
局所投与に好適な配合物としては、塗布剤、ローション等の液体及び／又は半液体調製物、クリーム、軟膏及び／又はペースト等の水中油型及び／又は油中水型エマルション、及び／又は溶液及び／又は懸濁液が挙げられるが、これらに限定されない。局所投与可能な配合物は、例えば約１％〜約１０％（ｗ／ｗ）の有効成分を含み得るが、有効成分の濃度は溶媒中の有効成分の溶解限度に達していてもよい。局所投与用の配合物は、本明細書に記載の付加的な成分の１つ以上を更に含み得る。
医薬組成物は口腔を介した経肺投与に好適な配合物に調製、包装及び／又は販売することができる。かかる配合物は、有効成分を含み、直径が約０．５ｎｍ〜約７ｎｍ又は約１ｎｍ〜約６ｎｍの範囲の乾燥粒子を含み得る。かかる組成物は、粉末を分散させる噴射剤流を指向することができる乾燥粉末リザーバを備えるデバイスを用いた、及び／又は密閉容器内の低沸点噴射剤に溶解及び／又は懸濁した有効成分を含むデバイス等の自己噴射溶媒／粉末分注容器を用いた投与のための乾燥粉末の形態であるのが好都合である。かかる粉末は少なくとも９８重量％の粒子が０．５ｎｍを超える直径を有し、少なくとも９５数量（by number）％の粒子が７ｎｍ未満の直径を有する粒子を含む。代替的には、少なくとも９５重量％の粒子が１ｎｍを超える直径を有し、少なくとも９０数量％の粒子が６ｎｍ未満の直径を有する。乾燥粉末組成物は糖等の固体微粉末希釈剤を含むことができ、単位投薬形態で都合よく提供される。
低沸点噴射剤は概して、沸点が大気圧で６５°Ｆ未満の液体噴射剤を含む。概して、噴射剤は組成物の５０％〜９９．９％（ｗ／ｗ）を占めてもよく、有効成分は組成物の０．１％〜２０％（ｗ／ｗ）を占めてもよい。噴射剤は、液体非イオン性及び／又は固体アニオン性界面活性剤及び／又は固体希釈剤（有効成分を含む粒子と同程度の粒子サイズを有し得る）等の付加的な成分を更に含み得る。
経肺送達用に配合された医薬組成物は、溶液及び／又は懸濁液の液滴の形態で有効成分を供給することができる。かかる配合物は、有効成分を含む任意に滅菌された水性及び／又は希釈アルコール溶液及び／又は懸濁液として調製、包装及び／又は販売することができ、任意の噴霧化及び／又は微粒化デバイスを用いて都合よく投与され得る。かかる配合物は、サッカリンナトリウム等の着香料、揮発油、緩衝剤、表面活性剤、及び／又はヒドロキシ安息香酸メチル等の保存料を含むが、これらに限定されない１つ以上の付加的な成分を更に含み得る。この投与経路によって供給される液滴は約０．１ｎｍ〜約２００ｎｍの範囲の平均直径を有し得る。
経肺送達に有用であるとして本明細書に記載される配合物は、医薬組成物の鼻腔内送達に有用である。鼻腔内投与に好適な別の配合物は、有効成分を含み、平均粒子サイズが約０．２μｍ〜５００μｍの粗粉末である。かかる配合物は、鼻から吸入されて、すなわち鼻孔の側に保持される粉末の容器からの鼻腔を通した急速吸入によって投与される。
経鼻投与に好適な配合物は、例えば最低で（as little as）約０．１％（ｗ／ｗ）及び最大で（as much as）１００％（ｗ／ｗ）の有効成分を含み、本明細書に記載の付加的な成分の１つ以上を含み得る。幾つかの実施形態では、経鼻投与に好適な配合物は０．１％〜１％、１％〜１０％、１０％〜２０％、２０％〜３０％、３０％〜４０％、４０％〜５０％、５０％〜６０％、６０％〜７０％、７０％〜８０％、８０％〜９０％又は９０％〜１００％（ｗ／ｗ）の有効成分を含む。反対の記述がなければ、経鼻投与に好適な配合物は０．１％〜１００％（ｗ／ｗ）の有効成分を含む。医薬組成物は、口腔内投与に好適な配合物に調製、包装及び／又は販売することができる。かかる配合物は、例えば従来の方法を用いて作製される錠剤及び／又は舐剤の形態であってもよく、例えば０．１％〜２０％（ｗ／ｗ）の有効成分を含有し、その残りは経口で溶解及び／又は崩壊し得る組成物、並びに任意に本明細書に記載の付加的な成分の１つ以上を含んでいてもよい。代わりに、口腔内投与に好適な配合物は、有効成分を含む粉末及び／又はエアロゾル化及び／又は微粒化溶液及び／又は懸濁液を含み得る。かかる粉末化、エアロゾル化及び／又は微粒化配合物は、分散させた場合に約０．１ｎｍ〜約２００ｎｍの範囲の平均粒子及び／又は液滴サイズを有し、本明細書に記載の付加的な成分の１つ以上を更に含み得る。
医薬組成物は、眼内投与に好適な配合物に調製、包装及び／又は販売することができる。かかる配合物は例えば、例えば水性又は油性液体賦形剤中の有効成分の０．１／１．０％（ｗ／ｗ）溶液及び／又は懸濁液を含む点眼剤の形態であり得る。かかる滴剤は緩衝剤、塩、及び／又は本明細書に記載の１つ以上の他の付加的な成分を更に含み得る。他の有用な眼内投与可能な配合物としては、微結晶形態及び／又はリポソーム調製物で有効成分を含む配合物が挙げられる。点耳剤及び／又は点眼剤が本発明の範囲内であることが企図される。
医薬品の配合及び／又は製造の概論は例えば、Remington: The Science and Practice of Pharmacy21st ed., Lippincott Williams & Wilkins, 2005（引用することにより本明細書の一部をなす）に見ることができる。
また、医薬パック及び／又はキットが本発明に更に包含される。提供される医薬パック及び／又はキットは、提供される組成物及び容器（例えばバイアル、アンプル、ボトル、シリンジ及び／又はディスペンサーパッケージ、又は他の好適な容器）を含み得る。幾つかの実施形態では、提供されるキットは、任意に被験体への投与の調製のための提供される組成物の希釈又は懸濁用の好適な水性担体を含む第２の容器を更に含み得る。幾つかの実施形態では、提供される配合容器及び溶媒容器の内容物を合わせて、少なくとも１つの単位投薬形態を形成する。
任意に、単一容器は提供される組成物を含有する１つ以上のコンパートメント、及び／又は懸濁若しくは希釈用の適切な水性担体を含み得る。幾つかの実施形態では、単一容器は変更に適切であり得るために、コンパートメント及び／又は個々のコンパートメントの構成要素の組合せを可能とするような物理的変更を受けることができる。例えば、フォイル又はプラスチックバッグは、シールを破く合図が生じた後に２つの個々のコンパートメントの内容物が合わせられるように破られ得る有孔シールによって分離された２つ以上のコンパートメントを含み得る。このため、医薬パック又はキットは、提供される組成物及び懸濁用の適切な溶媒及び／又は適切な水性担体を含むかかるマルチコンパートメント容器を含み得る。任意に、かかる本発明のキットは使用説明書を付加的に備える。かかる説明書は概して、例えば投与量及び投与の指示を与え得る。他の実施形態では、説明書は特定の投与用の容器及び／又はシステムの特殊な指示に関する付加的な詳細を更に提供し得る。さらに、説明書は付加的な療法と併用した及び／又は組み合わせた使用に関する特殊な指示を提供し得る。
ＶＩ． 組合せ
一態様では、本明細書に記載のバイオマーカー診断により、コルチスタチン又はＣＤＫ８／１９阻害剤で患者が首尾よく治療されることが予測される場合、活性化合物を第２の活性剤と組み合わせて投与することが所望され得る。
一実施形態では、患者から採取されたサンプルは、初めにコルチスタチン又はＣＤＫ８／１９阻害剤を用いた予測される有効な療法について判定され、次いで患者が第２の活性剤の投与からも利益を得るか否かを決定するためにサンプルを第２のアッセイで判定する。別の実施形態では、本明細書で詳細に記載される第１のバイオマーカーアッセイによる結果から、患者が併用療法に応答し得るかも予測される。
したがって、本明細書に記載の選択方法を用い、少なくとも１つの付加的な治療剤と組み合わせた又は代替した本発明の化合物、又はその薬学的に許容可能な組成物、塩、同位体類縁体（重水素化誘導体等）若しくはプロドラッグの投与を含む、治療計画が提供される。本明細書に開示の組合せ及び／又は代替物は、異常細胞増殖性障害の治療における有益な相加又は相乗効果のために投与することができる。
具体的な実施形態では、治療計画は本発明の化合物、又はその薬学的に許容可能な組成物、塩、同位体類縁体若しくはプロドラッグを、少なくとも１つの付加的なキナーゼ阻害剤と組み合わせて又は代替して投与することを含む。一実施形態では、少なくとも１つの付加的なキナーゼ阻害剤はホスホイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤、ブルトン型チロシンキナーゼ（ＢＴＫ）阻害剤、別のサイクリン依存性キナーゼ阻害剤若しくは脾臓チロシンキナーゼ（Ｓｙｋ）阻害剤、又はそれらの組合せから選択される。
一実施形態では、本発明の化合物、又はその薬学的に許容可能な組成物、塩、同位体類縁体若しくはプロドラッグをＰＩｋ３阻害剤と投薬形態で組み合わせる。
本発明で使用され得るＰＩ３ｋ阻害剤は既知である。ＰＩ３キナーゼ阻害剤の例としては、ウォルトマンニン、デメトキシビリジン、ペリホシン、イデラリシブ、ピクチリシブ、Ｐａｌｏｍｉｄ ５２９、ＺＳＴＫ４７４、ＰＷＴ３３５９７、ＣＵＤＣ−９０７及びＡＥＺＳ−１３６、デュベリシブ（duvelisib）、ＧＳ−９８２０、ＧＤＣ−００３２（２−［４−［２−（２−イソプロピル−５−メチル−１，２，４−トリアゾール−３−イル）−５，６−ジヒドロイミダゾ［１，２−ｄ］［１，４］ベンゾオキサゼピン−９−イル］ピラゾール−１−イル］−２−メチルプロパンアミド）、ＭＬＮ−１１１７（（２Ｒ）−１−フェノキシ−２−ブタニル水素（Ｓ）−メチルホスホネート；又はメチル（オキソ）｛［（２Ｒ）−１−フェノキシ−２−ブタニル］オキシ｝ホスホニウム）、ＢＹＬ−７１９（（２Ｓ）−Ｎ１−［４−メチル−５−［２−（２，２，２−トリフルオロ−１，１−ジメチルエチル）−４−ピリジニル］−２−チアゾリル］−１，２−ピロリジンジカルボキサミド）、ＧＳＫ２１２６４５８（２，４−ジフルオロ−Ｎ−｛２−（メチルオキシ）−５−［４−（４−ピリダジニル）−６−キノリニル］−３−ピリジニル｝ベンゼンスルホンアミド）、ＴＧＸ−２２１（（±）−７−メチル−２−（モルホリン−４−イル）−９−（１−フェニルアミノエチル）−ピリド［１，２−ａ］−ピリミジン−４−オン）、ＧＳＫ２６３６７７１（２−メチル−１−（２−メチル−３−（トリフルオロメチル）ベンジル）−６−モルホリノ−ｌＨ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−４−カルボン酸ジヒドロクロリド）、ＫＩＮ−１９３（（Ｒ）−２−（（１−（７−メチル−２−モルホリノ−４−オキソ−４Ｈ−ピリド［１，２−ａ］ピリミジン−９−イル）エチル）アミノ）安息香酸）、ＴＧＲ−１２０２／ＲＰ５２６４、ＧＳ−９８２０（（Ｓ）−１−（４−（（２−（２−アミノピリミジン−５−イル）−７−メチル−４−モヒドロキシプロパン（mohydroxypropan）−１−オン）、ＧＳ−１１０１（５−フルオロ−３−フェニル−２−（［Ｓ］−１−［９Ｈ−プリン−６−イルアミノ］−プロピル）−３Ｈ−キナゾリン−４−オン）、ＡＭＧ−３１９、ＧＳＫ−２２６９５５７、ＳＡＲ２４５４０９（Ｎ−（４−（Ｎ−（３−（（３，５−ジメトキシフェニル）アミノ）キノキサリン−２−イル）スルファモイル）フェニル）−３−メトキシ−４メチルベンズアミド）、ＢＡＹ８０−６９４６（２−アミノ−Ｎ−（７−メトキシ−８−（３−モルホリノプロポキシ）−２，３−ジヒドロイミダゾ［１，２−ｃ］キナズ（quinaz））、ＡＳ ２５２４２４（５−［１−［５−（４−フルオロ−２−ヒドロキシ−フェニル）−フラン−２−イル］−メタ−（Ｚ）−イリデン］−チアゾリジン−２，４−ジオン）、ＣＺ ２４８３２（５−（２−アミノ−８−フルオロ−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリジン−６−イル）−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチルピリジン−３−スルホンアミド）、ブパルリシブ（５−［２，６−ジ（４−モルホリニル）−４−ピリミジニル］−４−（トリフルオロメチル）−２−ピリジンアミン）、ＧＤＣ−０９４１（２−（１Ｈ−インダゾール−４−イル）−６−［［４−（メチルスルホニル）−１−ピペラジニル］メチル］−４−（４−モルホリニル）チエノ［３，２−ｄ］ピリミジン）、ＧＤＣ−０９８０（（Ｓ）−１−（４−（（２−（２−アミノピリミジン−５−イル）−７−メチル−４−モルホリノチエノ［３，２−ｄ］ピリミジン−６イル）メチル）ピペラジン−１−イル）−２−ヒドロキシプロパン−１−オン（ＲＧ７４２２としても知られる））、ＳＦ１１２６（（８Ｓ，１４Ｓ，１７Ｓ）−１４−（カルボキシメチル）−８−（３−グアニジノプロピル）−１７−（ヒドロキシメチル）−３，６，９，１２，１５−ペンタオキソ−１−（４−（４−オキソ−８−フェニル−４Ｈ−クロメン−２−イル）モルホリノ−４−イウム）−２−オキサ−７，１０，１３，１６−テトラアザオクタデカン−１８−オエート）、ＰＦ−０５２１２３８４（Ｎ−［４−［［４−（ジメチルアミノ）−１−ピペリジニル］カルボニル］フェニル］−Ｎ’−［４−（４，６−ジ−４−モルホリニル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素）、ＬＹ３０２３４１４、ＢＥＺ２３５（２−メチル−２−｛４−［３−メチル−２−オキソ−８−（キノリン−３−イル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル］フェニル｝プロパンニトリル）、ＸＬ−７６５（Ｎ−（３−（Ｎ−（３−（３，５−ジメトキシフェニルアミノ）キノキサリン−２−イル）スルファモイル）フェニル）−３−メトキシ−４−メチルベンズアミド）及びＧＳＫ１０５９６１５（５−［［４−（４−ピリジニル）−６−キノリニル］メチレン］−２，４−チアゾリデンジオン（thiazolidenedione））、ＰＸ８８６（［（３ａＲ，６Ｅ，９Ｓ，９ａＲ，１０Ｒ，１１ａＳ）−６−［［ビス（プロパ−２−エニル）アミノ］メチリデン］−５−ヒドロキシ−９−（メトキシメチル）−９ａ，１１ａ−ジメチル−１，４，７−トリオキソ−２，３，３ａ，９，１０，１１−ヘキサヒドロインデノ［４，５ｈ］イソクロメン−１０−イル］アセテート（ソノリシブ（sonolisib）としても知られる））が挙げられるが、これらに限定されない。
本発明で使用されるＢＴＫ阻害剤は既知である。ＢＴＫ阻害剤の例としては、イブルチニブ（ＰＣＩ−３２７６５としても知られる）（Ｉｍｂｒｕｖｉｃａ（商標））（１−［（３Ｒ）−３−［４−アミノ−３−（４−フェノキシ−フェニル）ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル］ピペリジン−１−イル］プロパ−２−エン−１−オン）、ジアニリノピリミジン系阻害剤、例えばＡＶＬ−１０１及びＡＶＬ−２９１／２９２（Ｎ−（３−（（５−フルオロ−２−（（４−（２−メトキシエトキシ）フェニル）アミノ）ピリミジン−４−イル）アミノ）フェニル）アクリルアミド）（Avila Therapeutics）（米国特許出願公開第２０１１／０１１７０７３号（その全体が引用することにより本明細書の一部をなす）を参照されたい）、ダサチニブ（Ｎ−（２−クロロ−６−メチルフェニル）−２−（６−（４−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−１−イル）−２−メチルピリミジン−４−イルアミノ）チアゾール−５−カルボキサミド）、ＬＦＭ−Ａ１３（α−シアノ−β−ヒドロキシ−β−メチル−Ｎ−（２，５−ジブロモフェニル）プロペンアミド）、ＧＤＣ−０８３４（Ｒ−Ｎ−（３−（６−（４−（１，４−ジメチル−３−オキソピペラジン−２−イル）フェニルアミノ）−４−メチル−５−オキソ−４，５−ジヒドロピラジン−２−イル）−２−メチルフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボキサミド）、ＣＧＩ−５６０ ４−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｎ−（３−（８−（フェニルアミノ）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−６−イル）フェニル）ベンズアミド、ＣＧＩ−１７４６（４−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｎ−（２−メチル−３−（４−メチル−６−（（４−（モルホリン−４−カルボニル）フェニル）アミノ）−５−オキソ−４，５−ジヒドロピラジン−２−イル）フェニル）ベンズアミド）、ＣＮＸ−７７４（４−（４−（（４−（（３−アクリルアミドフェニル）アミノ）−５−フルオロピリミジン−２−イル）アミノ）フェノキシ）−Ｎ−メチルピコリンアミド）、ＣＴＡ０５６（７−ベンジル−１−（３−（ピペリジン−１−イル）プロピル）−２−（４−（ピリジン−４−イル）フェニル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｇ］キノキサリン−６（５Ｈ）−オン）、ＧＤＣ−０８３４（（Ｒ）−Ｎ−（３−（６−（（４−（１，４−ジメチル−３−オキソピペラジン−２−イル）フェニル）アミノ）−４−メチル−５−オキソ−４，５−ジヒドロピラジン−２−イル）−２−メチルフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボキサミド）、ＧＤＣ−０８３７（（Ｒ）−Ｎ−（３−（６−（（４−（１，４−ジメチル−３−オキソピペラジン−２−イル）フェニル）アミノ）−４−メチル−５−オキソ−４，５−ジヒドロピラジン−２−イル）−２−メチルフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボキサミド）、ＨＭ−７１２２４、ＡＣＰ−１９６、ＯＮＯ−４０５９（Ono Pharmaceuticals）、ＰＲＴ０６２６０７（４−（（３−（２Ｈ−１，２，３−トリアゾール−２−イル）フェニル）アミノ）−２−（（（１Ｒ，２Ｓ）−２−アミノシクロヘキシル）アミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド塩酸塩）、ＱＬ−４７（１−（１−アクリロイルインドリン−６−イル）−９−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ベンゾ［ｈ］［１，６］ナフチリジン−２（１Ｈ）−オン）及びＲＮ４８６（６−シクロプロピル−８−フルオロ−２−（２−ヒドロキシメチル−３−｛１−メチル−５−［５−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−ピリジン−２−イルアミノ］−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリジン−３−イル｝−フェニル）−２Ｈ−イソキノリン−１−オン）、並びにＢＴＫ活性を阻害することが可能な他の分子、例えばAkinleye et ah, Journal of Hematology & Oncology, 2013, 6:59（その全体が引用することにより本明細書の一部をなす）に開示されるＢＴＫ阻害剤が挙げられる。一実施形態では、本発明の化合物、又はその薬学的に許容可能な組成物、塩、同位体類縁体若しくはプロドラッグは、ＢＴＫ阻害剤と投薬形態で組み合わせられる。
一実施形態では、付加的なサイクリン依存性キナーゼ阻害剤は、ＴＨＺ１（Ｎ−［３−［［５−クロロ−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）ピリミジン−２−イル］アミノ］フェニル］−４−［［（Ｅ）−４−（ジメチルアミノ）ブタ−２−エノイル］アミノ］ベンズアミド）等のＣＤＫ７阻害剤である。代替的な実施形態では、付加的なサイクリン依存性キナーゼ阻害剤は、フラボピリドール（アルボシジブ）等のＣＤＫ９阻害剤である。
したがって、一実施形態では、有効量の化合物Ａ又はその薬学的に許容可能な塩を有効量のＳｙｋ阻害剤と組み合わせて又は代替して、それを必要とする宿主に投与することを含む、腫瘍又は癌を治療する方法が提供される。別の実施形態では、本明細書で提供される有効量の化合物Ａの類縁体又はその薬学的に許容可能な塩を有効量のＳｙｋ阻害剤と組み合わせて又は代替して、それを必要とする宿主に投与することを含む、腫瘍又は癌を治療する方法が提供される。
一実施形態では、有効量の化合物Ａ又はその薬学的に許容可能な塩をイマチニブ（Ｇｌｅｅｖｅｃ）と組み合わせて又は代替して、それを必要とする宿主に投与することを含む、腫瘍又は癌を治療する方法が提供される。別の実施形態では、本明細書で提供される有効量の化合物Ａの類縁体又はその薬学的に許容可能な塩をイマチニブ（Ｇｌｅｅｖｅｃ）と組み合わせて又は代替して、それを必要とする宿主に投与することを含む、腫瘍又は癌を治療する方法が提供される。
本発明で使用されるＳｙｋ阻害剤は既知であり、例えばセルデュラチニブ（Cerdulatinib）（４−（シクロプロピルアミノ）−２−（（４−（４−（エチルスルホニル）ピペラジン−１−イル）フェニル）アミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド）、エントスプレチニブ（entospletinib）（６−（１Ｈ−インダゾール−６−イル）−Ｎ−（４−モルホリノフェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミン）、フォスタマチニブ（［６−（｛５−フルオロ−２−［（３，４，５−トリメトキシフェニル）アミノ］−４−ピリミジニル｝アミノ）−２，２−ジメチル−３−オキソ−２，３−ジヒドロ−４Ｈ−ピリド［３，２−ｂ］［１，４］オキサジン−４−イル］メチル二水素ホスフェート）、フォスタマチニブ二ナトリウム塩（ナトリウム（６−（（５−フルオロ−２−（（３，４，５−トリメトキシフェニル）アミノ）ピリミジン−４−イル）アミノ）−２，２−ジメチル−３−オキソ−２Ｈ−ピリド［３，２−ｂ］［１，４］オキサジン−４（３Ｈ）−イル）メチルホスフェート）、ＢＡＹ ６１−３６０６（２−（７−（３，４−ジメトキシフェニル）−イミダゾ［１，２−ｃ］ピリミジン−５−イルアミノ）−ニコチンアミドＨＣｌ）、ＲＯ９０２１（６−［（１Ｒ，２Ｓ）−２−アミノ−シクロヘキシルアミノ］−４−（５，６−ジメチル−ピリジン−２−イルアミノ）−ピリダジン−３−カルボン酸アミド）、イマチニブ（Ｇｌｅｅｖｅｃ；４−［（４−メチルピペラジン−１−イル）メチル］−Ｎ−（４−メチル−３−｛［４−（ピリジン−３−イル）ピリミジン−２−イル］アミノ｝フェニル）ベンズアミド）、スタウロスポリン、ＧＳＫ１４３（２−（（（３Ｒ，４Ｒ）−３−アミノテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）アミノ）−４−（ｐ−トリルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド）、ＰＰ２（１−（ｔｅｒｔ−ブチル）−３−（４−クロロフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−アミン）、ＰＲＴ−０６０３１８（２−（（（１Ｒ，２Ｓ）−２−アミノシクロヘキシル）アミノ）−４−（ｍ−トリルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド）、ＰＲＴ−０６２６０７（４−（（３−（２Ｈ−１，２，３−トリアゾール−２−イル）フェニル）アミノ）−２−（（（１Ｒ，２Ｓ）−２−アミノシクロヘキシル）アミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド塩酸塩）、Ｒ１１２（３，３’−（（５−フルオロピリミジン−２，４−ジイル）ビス（アザンジイル））ジフェノール）、Ｒ３４８（３−エチル−４−メチルピリジン）、Ｒ４０６（６−（（５−フルオロ−２−（（３，４，５−トリメトキシフェニル）アミノ）ピリミジン−４−イル）アミノ）−２，２−ジメチル−２Ｈ−ピリド［３，２−ｂ］［１，４］オキサジン−３（４Ｈ）−オン）、ＹＭ１９３３０６（Singh et al. Discovery and Development of Spleen Tyrosine Kinase (SYK) Inhibitors, J. Med. Chem. 2012, 55, 3614-3643を参照されたい）、７−アザインドール、ピセタノール、ＥＲ−２７３１９（Singh et al. Discovery and Development of Spleen Tyrosine Kinase (SYK) Inhibitors, J. Med. Chem. 2012, 55, 3614-3643（その全体が引用することにより本明細書の一部をなす）を参照されたい）、ＰＲＴ０６０３１８（Singh et al. Discovery and Development of Spleen Tyrosine Kinase (SYK) Inhibitors, J. Med. Chem. 2012, 55, 3614-3643（その全体が引用することにより本明細書の一部をなす）を参照されたい）、ルテオリン（Singh et al. Discovery and Development of Spleen Tyrosine Kinase (SYK) Inhibitors, J. Med. Chem. 2012, 55, 3614-3643（その全体が引用することにより本明細書の一部をなす）を参照されたい）、アピゲニン（Singh et al. Discovery and Development of Spleen Tyrosine Kinase (SYK) Inhibitors, J. Med. Chem. 2012, 55, 3614-3643（その全体が引用することにより本明細書の一部をなす）を参照されたい）、クェルセチン（Singh et al. Discovery and Development of Spleen Tyrosine Kinase (SYK) Inhibitors, J. Med. Chem. 2012, 55, 3614-3643（その全体が引用することにより本明細書の一部をなす）を参照されたい）、フィセチン（Singh et al. Discovery and Development of Spleen Tyrosine Kinase (SYK) Inhibitors, J. Med. Chem. 2012, 55, 3614-3643（その全体が引用することにより本明細書の一部をなす）を参照されたい）、ミリセチン（Singh et al. Discovery and Development of Spleen Tyrosine Kinase (SYK) Inhibitors, J. Med. Chem. 2012, 55, 3614-3643（その全体が引用することにより本明細書の一部をなす）を参照されたい）、モリン（Singh et al. Discovery and Development of Spleen Tyrosine Kinase (SYK) Inhibitors, J. Med. Chem. 2012, 55, 3614-3643（その全体が引用することにより本明細書の一部をなす）を参照されたい）が挙げられる。一実施形態では、本発明の化合物、又はその薬学的に許容可能な組成物、塩、同位体類縁体若しくはプロドラッグはＳｙｋ阻害剤と投薬形態で組み合わせられる。
具体的な実施形態では、提供される治療方法は、本発明の化合物、又はその薬学的に許容可能な組成物、塩、同位体類縁体若しくはプロドラッグを少なくとも１つの付加的な化学療法剤と組み合わせて又は代替して投与することを含む。
一実施形態では、本発明の化合物と組み合わせられる又は代替される少なくとも１つの付加的な化学療法剤は、タンパク質細胞死−１（ＰＤ−１）阻害剤である。ＰＤ−１阻害剤は当該技術分野で既知であり、例えばニボルマブ（BMS）、ペムブロリズマブ（Merck）、ピディリズマブ（CureTech／Teva）、ＡＭＰ−２４４（Amplimmune／GSK）、ＢＭＳ−９３６５５９（BMS）及びＭＥＤＩ４７３６（Roche／Genentech）が挙げられる。一実施形態では、本発明の化合物、又はその薬学的に許容可能な組成物、塩、同位体類縁体若しくはプロドラッグはＰＤ−１阻害剤と投薬形態で組み合わせられる。一実施形態では、ＰＤ−１阻害剤はペムブロリズマブである。
一実施形態では、有効量の化合物Ａ又はその薬学的に許容可能な塩を有効量のＰＤ−１阻害剤と組み合わせて又は代替して、それを必要とする宿主に投与することを含む、腫瘍又は癌を治療する方法が提供される。別の実施形態では、本明細書で提供される有効量の化合物Ａの類縁体又はその薬学的に許容可能な塩を有効量のＰＤ−１阻害剤と組み合わせて又は代替して、それを必要とする宿主に投与することを含む、腫瘍又は癌を治療する方法が提供される。
一実施形態では、有効量の化合物Ａ又はその薬学的に許容可能な塩をペムブロリズマブ（Ｋｅｙｔｒｕｄａ）と組み合わせて又は代替して投与することを含む、腫瘍又は癌を治療する方法が提供される。別の実施形態では、本明細書で提供される有効量の化合物Ａの類縁体又はその薬学的に許容可能な塩をペムブロリズマブ（Ｋｅｙｔｒｕｄａ）と組み合わせて又は代替して投与することを含む、腫瘍又は癌を治療する方法が提供される。
一実施形態では、本発明の化合物と組み合わせられる又は代替される少なくとも１つの付加的な化学療法剤は、ＣＴＬＡ−４阻害剤である。ＣＴＬＡ−４阻害剤は当該技術分野で既知であり、例えばBristol-Myers Squibbにより販売されているイピリムマブ（Ｙｅｒｖｏｙ）及びPfizerにより販売されているトレメリムマブが挙げられる。
一実施形態では、本発明の化合物と組み合わせられる又は代替される少なくとも１つの付加的な化学療法剤は、ＢＥＴ阻害剤である。ＢＥＴ阻害剤は当該技術分野で既知であり、例えばＪＱ１、Ｉ−ＢＥＴ １５１（ＧＳＫ１２１０１５１Ａとしても知られる）、Ｉ−ＢＥＴ ７６２（ＧＳＫ５２５７６２としても知られる）、ＯＴＸ−０１５（ＭＫ−８２６８としても知られる；ＩＵＰＡＣ ６Ｈ−チエノ［３，２−ｆ］［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］［１，４］ジアゼピン−６−アセトアミド、４−（４−クロロフェニル）−Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）−２，３，９−トリチメル−）、ＴＥＮ−０１０、ＣＰＩ−２０３、ＣＰＩ−０６１０、ＲＶＸ−２０８及びＬＹ２９４００２が挙げられる。一実施形態では、腫瘍又は癌の治療のために本発明の化合物と組み合わせて又は代替して使用されるＢＥＴ阻害剤は、ＪＱ１（（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（４−（４−クロロフェニル）−２，３，９−トリチメル−６Ｈ−チエノ［３，２−ｆ］［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］［１，４］ジアゼピン−６−イル）アセテート）である。代替的な実施形態では、腫瘍又は癌の治療のために本発明の化合物と組み合わせて又は代替して使用されるＢＥＴ阻害剤は、Ｉ−ＢＥＴ １５１（２Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン、７−（３，５−ジメチル−４−イソオキサゾリル）−１，３−ジヒドロ−８−メトキシ−１−［（１Ｒ）−１−（２−ピリジニル）エチル］−）である。
一実施形態では、有効量の化合物Ａ又はその薬学的に許容可能な塩を有効量のＢＥＴ阻害剤と組み合わせて又は代替して、それを必要とする宿主に投与することを含む、腫瘍又は癌を治療する方法が提供される。別の実施形態では、本明細書で提供される有効量の化合物Ａの類縁体又はその薬学的に許容可能な塩を有効量のＢＥＴ阻害剤と組み合わせて又は代替して、それを必要とする宿主に投与することを含む、腫瘍又は癌を治療する方法が提供される。
一実施形態では、有効量の化合物Ａ又はその薬学的に許容可能な塩をＪＱ１と組み合わせて又は代替して投与することを含む、腫瘍又は癌を治療する方法が提供される。別の実施形態では、本明細書で提供される有効量の化合物Ａの類縁体又はその薬学的に許容可能な塩をＪＱ１と組み合わせて又は代替して投与することを含む、腫瘍又は癌を治療する方法が提供される。
一実施形態では、有効量の化合物Ａ又はその薬学的に許容可能な塩をＩ−ＢＥＴ １５１と組み合わせて又は代替して投与することを含む、腫瘍又は癌を治療する方法が提供される。別の実施形態では、本明細書で提供される有効量の化合物Ａの類縁体又はその薬学的に許容可能な塩をＩ−ＢＥＴ １５１と組み合わせて又は代替して投与することを含む、腫瘍又は癌を治療する方法が提供される。
一実施形態では、本発明の化合物と組み合わせられる又は代替される少なくとも１つの付加的な化学療法剤はＭＥＫ阻害剤である。本発明で使用されるＭＥＫ阻害剤は既知であり、例えばトラメチニブ／ＧＳＫｌ １２０２１２（Ｎ−（３−｛３−シクロプロピル−５−［（２−フルオロ−４−ヨードフェニル）アミノ］−６，８−ジメチル−２，４，７−トリオキソ−３，４，６，７−テトラヒドロピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−１（２Ｈ）−イル｝フェニル）アセトアミド）、セルメチニブ（６−（４−ブロモ−２−クロロアニリノ）−７−フルオロ−Ｎ−（２−ヒドロキシエトキシ）−３−メチルベンズイミダゾール−５−カルボキサミド）、ピマセルチブ／ＡＳ７０３０２６／ＭＳＣ １９３５３６９（（Ｓ）−Ｎ−（２，３−ジヒドロキシプロピル）−３−（（２−フルオロ−４−ヨードフェニル）アミノ）イソニコチンアミド）、ＸＬ−５１８／ＧＤＣ−０９７３（１−（｛３，４−ジフルオロ−２−［（２−フルオロ−４−ヨードフェニル）アミノ］フェニル｝カルボニル）−３−［（２Ｓ）−ピペリジン−２−イル］アゼチジン−３−オール）、レファメチニブ／ＢＡＹ８６９７６６／ＲＤＥＡ１ １９（Ｎ−（３，４−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）−６−メトキシフェニル）−１−（２，３−ジヒドロキシプロピル）シクロプロパン−１−スルホンアミド）、ＰＤ−０３２５９０１（Ｎ−［（２Ｒ）−２，３−ジヒドロキシプロポキシ］−３，４−ジフルオロ−２−［（２−フルオロ−４−ヨードフェニル）アミノ］−ベンズアミド）、ＴＡＫ７３３（（Ｒ）−３−（２，３−ジヒドロキシプロピル）−６−フルオロ−５−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）−８−メチルピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−４，７（３Ｈ，８Ｈ）−ジオン）、ＭＥＫ１６２／ＡＲＲＹ４３８１６２（５−［（４−ブロモ−２−フルオロフェニル）アミノ］−４−フルオロ−Ｎ−（２−ヒドロキシエトキシ）−１−メチル−１Ｈ−ベンズイミダゾール−６−カルボキサミド）、Ｒ０５１２６７６６（３−［［３−フルオロ−２−（メチルスルファモイルアミノ）−４−ピリジル］メチル］−４−メチル−７−ピリミジン−２−イルオキシクロメン−２−オン）、ＷＸ−５５４、Ｒ０４９８７６５５／ＣＨ４９８７６５５（３，４−ジフルオロ−２−（（２−フルオロ−４−ヨードフェニル）アミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシエトキシ）−５−（（３−オキソ−１，２−オキサジナン−２イル）メチル）ベンズアミド）又はＡＺＤ８３３０（２−（（２−フルオロ−４−ヨードフェニル）アミノ）−Ｎ−（２ヒドロキシエトキシ）−１及び５−ジメチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキサミド）が挙げられる。一実施形態では、本発明の化合物、又はその薬学的に許容可能な組成物、塩、同位体類縁体若しくはプロドラッグは、ＭＥＫ阻害剤と投薬形態で組み合わせられる。
一実施形態では、本発明の化合物と組み合わせられる又は代替される少なくとも１つの付加的な化学療法剤は、Ｒａｆ阻害剤である。本発明で使用されるＲａｆ阻害剤は既知であり、例えばベムラフェニブ（Ｎ−［３−［［５−（４−クロロフェニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］カルボニル］−２，４−ジフルオロフェニル］−１−プロパンスルホンアミド）、トシル酸ソラフェニブ（４−［４−［［４−クロロ−３−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバモイルアミノ］フェノキシ］−Ｎ−メチルピリジン−２−カルボキサミド；４−メチルベンゼンスルホネート）、ＡＺ６２８（３−（２−シアノプロパン−２−イル）−Ｎ−（４−メチル−３−（３−メチル−４−オキソ−３，４−ジヒドロキナゾリン−６−イルアミノ）フェニル）ベンズアミド）、ＮＶＰ−ＢＨＧ７１２（４−メチル−３−（１−メチル−６−（ピリジン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）ベンズアミド）、ＲＡＦ−２６５（１−メチル−５−［２−［５−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル］ピリジン−４−イル］オキシ−Ｎ−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］ベンゾイミダゾール−２−アミン）、２−ブロモアルジシン（２−ブロモ−６，７−ジヒドロ−１Ｈ，５Ｈ−ピロロ［２，３−ｃ］アゼピン−４，８−ジオン）、Ｒａｆキナーゼ阻害剤ＩＶ（２−クロロ−５−（２−フェニル−５−（ピリジン−４−イル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）フェノール）及びソラフェニブＮ−オキシド（４−［４−［［［［４−クロロ−３（トリフルオロメチル）フェニル］アミノ］カルボニル］アミノ］フェノキシ］−Ｎ−メチル−２ピリジンカルボキサミド１−オキシド）が挙げられる。一実施形態では、本発明の化合物、又はその薬学的に許容可能な組成物、塩、同位体類縁体若しくはプロドラッグはＲａｆ阻害剤と投薬形態で組み合わせられる。
一実施形態では、本発明の化合物と組み合わせられる又は代替される少なくとも１つの付加的な化学療法剤は、Ｂ細胞リンパ腫２（Ｂｃｌ−２）タンパク質阻害剤である。ＢＣＬ−２阻害剤は当該技術分野で既知であり、例えばＡＢＴ−１９９（４−［４−［［２−（４−クロロフェニル）−４，４−ジメチルシクロヘキサ−１−エン−１−イル］メチル］ピペラジン−１−イル］−Ｎ−［［３−ニトロ−４−［［（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）メチル］アミノ］フェニル］スルホニル］−２−［（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イル）オキシ］ベンズアミド）、ＡＢＴ−７３７（４−［４−［［２−（４−クロロフェニル）フェニル］メチル］ピペラジン−１−イル］−Ｎ−［４−［［（２Ｒ）−４−（ジメチルアミノ）−１−フェニルスルファニルブタン−２−イル］アミノ］−３−ニトロフェニル］スルホニルベンズアミド）、ＡＢＴ−２６３（（Ｒ）−４−（４−（（４’−クロロ−４，４−ジメチル−３，４，５，６−テトラヒドロ−［１，１’−ビフェニル］−２−イル）メチル）ピペラジン−１−イル）−Ｎ−（（４−（（４−モルホリノ−１−（フェニルチオ）ブタン−２−イル）アミノ）−３（（トリフルオロメチル）スルホニル）フェニル）スルホニル）ベンズアミド）、ＧＸ１５−０７０（メシル酸オバトクラックス、（２Ｚ）−２−［（５Ｚ）−５−［（３，５−ジメチル−１Ｈ−ピロール−２−イル）メチリデン］−４−メトキシピロール−２−イリデン］インドール；メタンスルホン酸）））、２−メトキシ−アンチマイシンＡ３、ＹＣ１３７（４−（４，９−ジオキソ−４，９−ジヒドロナフト［２，３−ｄ］チアゾール−２−イルアミノ）−フェニルエステル）、ポゴシン（pogosin）、エチル２−アミノ−６−ブロモ−４−（１−シアノ−２−エトキシ−２−オキソエチル）−４Ｈ−クロメン−３−カルボキシレート、ニロチニブ−ｄ３、ＴＷ−３７（Ｎ−［４−［［２−（１，１−ジメチルエチル）フェニル］スルホニル］フェニル］−２，３，４−トリヒドロキシ−５−［［２−（１−メチルエチル）フェニル］メチル］ベンズアミド）、アポゴッシポロン（ＡｐｏＧ２）又はＧ３１３９（オブリメルセン）が挙げられる。一実施形態では、本発明の化合物、又はその薬学的に許容可能な組成物、塩、同位体類縁体若しくはプロドラッグは、少なくとも１つのＢＣＬ−２阻害剤と投薬形態で組み合わせられる。一実施形態では、少なくとも１つのＢＣＬ−２阻害剤はＡＢＴ−１９９（ベネトクラックス）である。
一実施形態では、有効量の化合物Ａ又はその薬学的に許容可能な塩を有効量のＢＣＬ−２阻害剤と組み合わせて又は代替して、それを必要とする宿主に投与することを含む、腫瘍又は癌を治療する方法が提供される。別の実施形態では、本明細書で提供される有効量の化合物Ａの類縁体又はその薬学的に許容可能な塩を有効量のＢＣＬ−２阻害剤と組み合わせて又は代替して、それを必要とする宿主に投与することを含む、腫瘍又は癌を治療する方法が提供される。
一実施形態では、有効量の化合物Ａ又はその薬学的に許容可能な塩をＡＢＴ−１９９と組み合わせて又は代替して、それを必要とする宿主に投与することを含む、腫瘍又は癌を治療する方法が提供される。別の実施形態では、本明細書で提供される有効量の化合物Ａの類縁体又はその薬学的に許容可能な塩をＡＢＴ−１９９と組み合わせて又は代替して、それを必要とする宿主に投与することを含む、腫瘍又は癌を治療する方法が提供される。
一実施形態では、治療計画は本発明の化合物、又はその薬学的に許容可能な組成物、塩、同位体類縁体若しくはプロドラッグを、メシル酸イマチニブ（Ｇｌｅｅｖａｃ）、ダサチニブ（Ｓｐｒｙｃｅｌ）、ニロチニブ（Ｔａｓｉｇｎａ）、ボスチニブ（Ｂｏｓｕｌｉｆ）、トラスツズマブ（Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ）、ペルツズマブ（Ｐｅｒｊｅｔａ（商標））、ラパチニブ（Ｔｙｋｅｒｂ）、ゲフィチニブ（Ｉｒｅｓｓａ）、エルロチニブ（Ｔａｒｃｅｖａ）、セツキシマブ（Ｅｒｂｉｔｕｘ）、パニツムマブ（Ｖｅｃｔｉｂｉｘ）、バンデタニブ（Ｃａｐｒｅｌｓａ）、ベムラフェニブ（Ｚｅｌｂｏｒａｆ）、ボリノスタット（Ｚｏｌｉｎｚａ）、ロミデプシン（Ｉｓｔｏｄａｘ）、ベキサロテン（Ｔａｇｒｅｔｉｎ）、アリトレチノイン（Ｐａｎｒｅｔｉｎ）、トレチノイン（Ｖｅｓａｎｏｉｄ）、カルフィルゾミブ（Ｋｙｐｒｏｌｉｓ（商標））、プララトレキサート（Ｆｏｌｏｔｙｎ）、ベバシズマブ（Ａｖａｓｔｉｎ）、Ｚｉｖ−アフリベルセプト（Ｚａｌｔｒａｐ）、ソラフェニブ（Ｎｅｘａｖａｒ）、スニチニブ（Ｓｕｔｅｎｔ）、パゾパニブ（Ｖｏｔｒｉｅｎｔ）、レゴラフェニブ（Ｓｔｉｖａｒｇａ）及びカボザンチニブ（Ｃｏｍｅｔｒｉｑ（商標））から選択されるが、これらに限定されない、少なくとも１つの付加的な化学療法剤と組み合わせて又は代替して投与することを含む。
幾つかの実施形態では、本明細書に記載の医薬組合せ又は組成物は、腫瘍又は癌治療のために組合せで又は他の化学療法剤と更に組み合わせて被験体に投与することができる。都合がよければ、本明細書に記載の医薬組合せ又は組成物は、治療計画を単純化するために別の化学療法剤と同時に投与することができる。幾つかの実施形態では、医薬組合せ又は組成物及び他の化学療法剤は、単一の配合物中で提供することができる。一実施形態では、本明細書に記載の医薬組合せ又は組成物の使用を他の作用物質との治療レジームにおいて組み合わせる。かかる作用物質としては、タモキシフェン、ミダゾラム、レトロゾール、ボルテゾミブ、アナストロゾール、ゴセレリン、ｍＴＯＲ阻害剤、上記のようなＰＩ３キナーゼ阻害剤、二重ｍＴＯＲ−ＰＩ３Ｋ阻害剤、上記のようなＭＥＫ阻害剤、ＲＡＳ阻害剤、ＡＬＫ阻害剤、ＨＳＰ阻害剤（例えば、ＨＳＰ７０及びＨＳＰ９０阻害剤、又はそれらの組合せ）、上記のようなＢＣＬ−２阻害剤、アポトーシス誘導化合物、ＭＫ−２２０６（１，２，４−トリアゾロ［３，４−ｆ］［１，６］ナフチリジン−３（２Ｈ）−オン、８−［４−（１−アミノシクロブチル）フェニル］−９−フェニル−）、ＧＳＫ６９０６９３、ペリホシン（ＫＲＸ−０４０１）、ＧＤＣ−００６８、トリシリビン、ＡＺＤ５３６３、ホノキオール、ＰＦ−０４６９１５０２及びミルテホシンを含むが、これらに限定されないＡＫＴ阻害剤、ニボルマブ、ＣＴ−０１１、ＭＫ−３４７５、ＢＭＳ９３６５５８及びＡＭＰ−５１４を含むが、これらに限定されない、上記のようなＰＤ−１阻害剤、若しくはＰ４０６、ドビチニブ、キザルチニブ（ＡＣ２２０）、アムバチニブ（ＭＰ−４７０）、タンズチニブ（ＭＬＮ５１８）、ＥＮＭＤ−２０７６及びＫＷ−２４４９を含むが、これらに限定されないＦＬＴ−３阻害剤、又はそれらの組合せを挙げることができるが、これらに限定されない。ｍＴＯＲ阻害剤の例としては、ラパマイシン及びその類縁体、エベロリムス（Ａｆｉｎｉｔｏｒ）、テムシロリムス、リダフォロリムス、シロリムス及びデフォロリムスが挙げられるが、これらに限定されない。ＲＡＳ阻害剤の例としては、レオライシン及びｓｉＧ１２Ｄ ＬＯＤＥＲが挙げられるが、これらに限定されない。ＡＬＫ阻害剤の例としては、クリゾチニブ、ＡＰ２６１１３及びＬＤＫ３７８が挙げられるが、これらに限定されない。ＨＳＰ阻害剤としては、ゲルダナマイシン又は１７−Ｎ−アリルアミノ−１７−デメトキシゲルダナマイシン（１７ＡＡＧ）、及びラディシコールが挙げられるが、これらに限定されない。特定の実施形態では、本明細書に記載の化合物をレトロゾール及び／又はタモキシフェンと組み合わせて投与する。本明細書に記載の化合物と組み合わせて使用することができる他の化学療法剤としては、それらの抗腫瘍効果に細胞周期活性を必要としない化学療法剤が挙げられるが、これらに限定されない。
一実施形態では、治療計画は、少なくとも１つの付加的な療法と組み合わせた又は代替した本発明の化合物又はその薬学的に許容可能な組成物、塩、同位体類縁体又はプロドラッグの投与を含み、ここで第２の療法は免疫療法である。
組合せ剤は抗体、放射性剤、又は本明細書に記載の活性化合物を罹患若しくは異常増殖性細胞へと指向する他の標的化剤とコンジュゲートすることができる。別の実施形態では、併用又は相乗アプローチを用いた治療の有効性を増大するために、医薬組合せ又は組成物を別の医薬又は生物学的作用物質（例えば、抗体）と組み合わせて使用する。一実施形態では、本明細書に記載の癌細胞集団を排除するために、医薬組合せ又は組成物を、一般に不活性化自己反応性Ｔ細胞を用いた免疫化を含むＴ細胞ワクチン接種と共に使用することができる。別の実施形態では、医薬組合せ又は組成物を、本明細書に記載の内因性Ｔ細胞及び癌細胞上の特異的抗原に同時に結合し、２つのタイプの細胞を連結するように設計された抗体である二重特異性Ｔ細胞エンゲージャー（ＢｉＴＥ）と組み合わせて使用する。
一実施形態では、付加的な療法はモノクローナル抗体（ＭＡｂ）である。幾つかのＭＡｂは癌細胞を破壊する免疫応答を刺激する。Ｂ細胞により自然に産生される抗体と同様に、これらのＭＡｂは癌細胞表面を「被覆」し、免疫系によるその破壊を誘発する。例えば、ベバシズマブは、腫瘍血管の発生を促進する腫瘍細胞及び腫瘍の微小環境中の他の細胞によって分泌されるタンパク質である血管内皮細胞増殖因子（ＶＥＧＦ）を標的化する。ベバシズマブに結合すると、ＶＥＧＦはその細胞受容体と相互作用することができず、新たな血管の成長をもたらすシグナル伝達が妨げられる。同様に、セツキシマブ及びパニツムマブは上皮増殖因子受容体（ＥＧＦＲ）を標的化し、トラスツズマブはヒト上皮増殖因子受容体２（ＨＥＲ−２）を標的化する。細胞表面成長因子受容体に結合するＭＡｂは、標的化受容体がそれらの正常成長促進シグナルを送るのを妨げる。これらはまた、アポトーシスを誘発し、免疫系を活性化して、腫瘍細胞を破壊し得る。
別の群の癌治療用ＭＡｂはイムノコンジュゲートである。免疫毒素又は抗体−薬物コンジュゲートと呼ばれる場合もあるこれらのＭＡｂは、植物若しくは細菌の毒素、化学療法薬又は放射性分子等の殺細胞物質に付着した抗体からなる。抗体は癌細胞の表面上のその特異的抗原を捕まえ、殺細胞物質が細胞により取り込まれる。このように作用するＦＤＡ認可済みのコンジュゲートＭＡｂとして、細胞増殖を阻害する薬物ＤＭ１を、ＨＥＲ−２を発現する転移性乳癌細胞へと送達するためにＨＥＲ−２分子を標的化するａｄｏ−トラスツズマブエムタンシンが挙げられる。
二重特異性抗体（ｂｓＡｂ）又はキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）により癌細胞を認識するように改変されたＴ細胞を用いた免疫療法は、癌細胞の分裂及び非／遅分裂亜集団の両方を除去する可能性があるアプローチである。
標的抗原を同時に認識し、免疫エフェクター細胞の表面上の受容体を活性化することによる二重特異性抗体は、癌細胞を殺すよう免疫エフェクター細胞を転換する機会をもたらす。別のアプローチは、細胞外抗体を細胞内シグナル伝達ドメインに融合することによるキメラ抗原受容体の生成である。キメラ抗原受容体改変Ｔ細胞は、ＭＨＣとは独立して腫瘍細胞を特異的に殺すことが可能である。
或る特定の態様では、付加的な療法は別の治療剤、例えば抗炎症剤、化学療法剤、放射線療法剤又は免疫抑制剤である。
好適な化学療法剤としては、放射性分子、細胞毒素又は細胞毒性薬とも称される毒素が挙げられるが、これらに限定されず、細胞の生存能力にとって有害な任意の作用物質、及び化学療法化合物を含有するリポソーム又は他のベシクルが含まれる。
付加的な作用物質として投与される一般的な抗癌医薬品としては、ビンクリスチン（Ｏｎｃｏｖｉｎ）又はリポソームビンクリスチン（Ｍａｒｑｉｂｏ）、ダウノルビシン（ダウノマイシン又はＣｅｒｕｂｉｄｉｎｅ）又はドキソルビシン（アドリアマイシン）、シタラビン（シトシンアラビノシド、ａｒａ−Ｃ又はＣｙｔｏｓａｒ）、Ｌ−アスパラギナーゼ（Ｅｌｓｐａｒ）又はＰＥＧ−Ｌ−アスパラギナーゼ（ペグアスパラガーゼ又はＯｎｃａｓｐａｒ）、エトポシド（ＶＰ−１６）、テニポシド（Ｖｕｍｏｎ）、６−メルカプトプリン（６−ＭＰ又はＰｕｒｉｎｅｔｈｏｌ）、メトトレキサート、シクロフォスファミド（Ｃｙｔｏｘａｎ）、プレドニゾン、デキサメサゾン（Ｄｅｃａｄｒｏｎ）、イマチニブ（Novartisにより販売されているＧｌｅｅｖｅｃ）、ダサチニブ（Ｓｐｒｙｃｅｌ）、ニロチニブ（Ｔａｓｉｇｎａ）、ボスチニブ（Ｂｏｓｕｌｉｆ）及びポナチニブ（Ｉｃｌｕｓｉｇ（商標））が挙げられる。付加的な好適な化学療法剤の例としては、１−デヒドロテストステロン、５−フルオロウラシル、ダカルバジン、６−メルカプトプリン、６−チオグアニン、アクチノマイシンＤ、アドリアマイシン、アルデスロイキン、アルキル化剤、アロプリノールナトリウム、アルトレタミン、アミフォスチン、アナストロゾール、アントラマイシン（ＡＭＣ）、抗有糸分裂剤、シス−ジクロロジアミン白金（ＩＩ）（ＤＤＰ）（シスプラチン）、ジアミノジクロロ白金、アントラサイクリン、抗生物質、代謝拮抗物質、アスパラギナーゼ、ＢＣＧ生菌（BCG live）（膀胱内）、ベタメタゾンリン酸ナトリウム及び酢酸ベタメタゾン、ビカルタミド、硫酸ブレオマイシン、ブスルファン、カルシウムロイコボリン、カリケアマイシン、カペシタビン、カルボプラチン、ロムスチン（ＣＣＮＵ）、カルムスチン（ＢＳＮＵ）、クロラムブシル、シスプラチン、クラドリビン、コルヒチン、結合型エストロゲン、シクロフォスファミド、シクロトスファミド（Cyclothosphamide）、シタラビン、シタラビン、サイトカラシンＢ、シトキサン、ダカルバジン、ダクチノマイシン、ダクチノマイシン（以前はアクチノマイシン）、ダウノルビシンＨＣＬ、クエン酸ダウノルビシン、デニロイキンジフチトクス、デキスラゾキサン、ジブロモマンニトール、ジヒドロキシアントラシンジオン（dihydroxy anthracin dione）、ドセタキセル、メシル酸ドラセトロン、ドキソルビシンＨＣＬ、ドロナビノール、大腸菌（E. coli）Ｌ−アスパラギナーゼ、エメチン、エポエチン−α、エルウィニアＬ−アスパラギナーゼ、エステル化エストロゲン、エストラジオール、リン酸エストラムスチンナトリウム、エチジウムブロマイド、エチニルエストラジオール、エチドロネート、エトポシド、シトロボラム因子、リン酸エトポシド、フィルグラスチム、フロクスウリジン、フルコナゾール、リン酸フルダラビン、フルオロウラシル、フルタミド、フォリン酸、ゲムシタビンＨＣＬ、グルココルチコイド、酢酸ゴセレリン、グラミシジンＤ、グラニセトロンＨＣＬ、ヒドロキシウレア、イダルビシンＨＣＬ、イホスファミド、インターフェロンα−２ｂ、イリノテカンＨＣＬ、レトロゾール、ロイコボリンカルシウム、酢酸リュープロレリン、レバミゾールＨＣＬ、リドカイン、ロムスチン、メイタンシノイド、メクロレタミンＨＣＬ、酢酸メドロキシプロゲステロン、酢酸メゲストロール、メルファランＨＣＬ、メルカプトプリン、メスナ、メトトレキサート、メチルテストステロン、ミトラマイシン、マイトマイシンＣ、ミトタン、ミトキサントロン、ニルタミド、酢酸オクトレオチド、オンダンセトロンＨＣＬ、パクリタキセル、パミドロン酸二ナトリウム、ペントスタチン、ピロカルピンＨＣＬ、プリマイシン（plimycin）、ポリフェプロザン２０カルムスチンインプラント、ポルフィマーナトリウム、プロカイン、プロカルバジンＨＣＬ、プロプラノロール、リツキシマブ、サルグラモスチム、ストレプトゾトシン、タモキシフェン、タキソール、テニポシド、テノポシド（tenoposide）、テストラクトン、テトラカイン、チオエパクロラムブシル（thioepa chlorambucil）、チオグアニン、チオテパ、トポテカンＨＣＬ、クエン酸トレミフェン、トラスツズマブ、トレチノイン、バルルビシン、硫酸ビンブラスチン、硫酸ビンクリスチン及び酒石酸ビノレルビンが挙げられるが、これらに限定されない。
好適な免疫抑制剤としては、カルシニューリン阻害剤、例えばシクロスポリン又はアスコマイシン、例えばシクロスポリンＡ（ＮＥＯＲＡＬ）、ＦＫ５０６（タクロリムス）、ピメクロリムス、ｍＴＯＲ阻害剤、例えばラパマイシン又はその誘導体、例えばシロリムス（ＲＡＰＡＭＵＮＥ）、エベロリムス（Ｃｅｒｔｉｃａｎ）、テムシロリムス、ゾタロリムス、バイオリムス−７、バイオリムス−９、ラパログ、例えばリダフォロリムス、アザチオプリン、ｃａｍｐａｔｈ １Ｈ、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーター、例えばフィンゴリモド又はその類縁体、抗ＩＬ−８抗体、ミコフェノール酸又はその塩、例えばナトリウム塩又はそのプロドラッグ、例えばミコフェノール酸モフェチル（ＣＥＬＬＣＥＰＴ）、ＯＫＴ３（ＯＲＴＨＯＣＬＯＮＥ ＯＫＴ３）、プレドニゾン、ＡＴＧＡＭ、ＴＨＹＭＯＧＬＯＢＵＬＩＮ、ブレキナルナトリウム、ＯＫＴ４、Ｔ１０Ｂ９．Ａ−３Ａ、３３Ｂ３．１、１５−デオキシスペルグアリン、トレスペリムス（tresperimus）、レフルノミド（ＡＲＡＶＡ）、ＣＴＬＡＩ−Ｉｇ、抗ＣＤ２５、抗ＩＬ２Ｒ、バシリキシマブ（ＳＩＭＵＬＥＣＴ）、ダクリズマブ（ＺＥＮＡＰＡＸ）、ミゾリビン、メトトレキサート、デキサメサゾン、ＩＳＡｔｘ−２４７、ＳＤＺ ＡＳＭ ９８１（ピメクロリムス、Ｅｌｉｄｅｌ）、ＣＴＬＡ４ｌｇ（アバタセプト）、ベラタセプト、ＬＦＡ３ｌｇ、エタネルセプト（ImmunexによりＥｎｂｒｅｌとして販売される）、アダリムマブ（Ｈｕｍｉｒａ）、インフリキシマブ（Ｒｅｍｉｃａｄｅ）、抗ＬＦＡ−１抗体、ナタリズマブ（Ａｎｔｅｇｒｅｎ）、エンリモマブ、ガビリモマブ（gavilimomab）、抗胸腺細胞免疫グロブリン、シプリズマブ、アレファセプト、エファリズマブ、ペンタサ、メサラジン、アサコール、リン酸コデイン、ベノリレート、フェンブフェン、ナプロシン、ジクロフェナク、エトドラク及びインドメタシン、アスピリン及びイブプロフェンが挙げられるが、これらに限定されない。
或る特定の実施形態では、本明細書に記載の医薬組合せ又は組成物は、別の化学療法剤による治療前、別の化学療法剤による治療中、別の化学療法剤の投与後、又はそれらの組合せで被験体に投与される。
幾つかの実施形態では、他の化学療法剤をより高用量（化学療法剤用量強度の増大）又はより高頻度（化学療法剤用量密度の増大）で投与することができるように、選択的な医薬組合せ又は組成物を被験体に投与することができる。ドースデンス化学療法は、標準的な化学療法治療計画よりも短い治療間隔で薬物を与える化学療法治療計画である。化学療法用量強度は、単位時間当たりに投与される化学療法剤の単位用量を表す。用量強度は投与する用量、投与の時間間隔又はその両方を変化させることで増大又は減少することができる。
本発明の一実施形態では、本明細書に記載の医薬組合せ又は組成物は、非ＤＮＡ損傷性の標的化抗腫瘍薬又は造血成長因子剤等の別の作用物質との協調レジメンで投与することができる。造血成長因子の早過ぎる投与が重大な副作用を有し得ることが近年報告されている。例えば、ＥＰＯファミリーの成長因子の使用は動脈性高血圧、脳痙攣（cerebral convulsions）、高血圧性脳症、血栓塞栓症、鉄欠乏、インフルエンザ様症候群及び静脈血栓症と関連付けられている。Ｇ−ＣＳＦファミリーの成長因子は脾臓の腫大及び破裂、呼吸窮迫症候群、アレルギー反応及び鎌状細胞合併症と関連付けられている。本明細書に記載の医薬組合せ又は組成物の投与を、例えば病的細胞がそれ以上成長停止状態にない時点での造血成長因子の適時投与と組み合わせることで、医療関係者が成長因子の量を減少させ、所望の治療利益を達成した上で望ましくない有害作用を最小限に抑えることが可能となる。そのように、一実施形態では、本明細書に記載の医薬組合せ、組成物又は方法の使用を、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ、例えばＮｅｕｐｏｇｅｎ（フィルグラスチン（filgrastin））、Ｎｅｕｌａｓｔａ（ペグフィルグラスチムとして販売される）又はレノグラスチム）、顆粒球−マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ、例えばモルグラモスチム及びサルグラモスチム（Ｌｅｕｋｉｎｅ）として販売される）、Ｍ−ＣＳＦ（マクロファージコロニー刺激因子）、トロンボポエチン（巨核球増殖分化因子（ＭＧＤＦ）、例えばロミプロスチム及びエルトロンボパグとして販売される）、インターロイキン（ＩＬ）−１２、インターロイキン−３、インターロイキン−１１（脂質生成阻害因子又はオプレルベキン）、ＳＣＦ（幹細胞因子、ｓｔｅｅｌ因子、キット−リガンド又はＫＬ）、並びにエリトロポエチン（ＥＰＯ）及びそれらの誘導体（例えばダルベポエチン、Ｅｐｏｃｅｐｔ、Ｎａｎｏｋｉｎｅ、Ｅｐｏｆｉｔ、Ｅｐｏｇｉｎ、Ｅｐｒｅｘ及びＰｒｏｃｒｉｔとして販売されるエポエチン−α；例えばＮｅｏＲｅｃｏｒｍｏｎ、Ｒｅｃｏｒｍｏｎ及びＭｉｃｅｒａとして販売されるエポエチン−β）、エポエチン−δ（例えばＤｙｎｅｐｏとして販売される）、エポエチン−ω（例えばＥｐｏｍａｘとして販売される）、エポエチンζ（例えばＳｉｌａｐｏ及びＲｅａｃｒｉｔとして販売される）、並びに例えばＥｐｏｃｅｐｔ、ＥＰＯＴｒｕｓｔ、Ｅｒｙｐｒｏ Ｓａｆｅ、Ｒｅｐｏｅｉｔｉｎ、Ｖｉｎｔｏｒ、Ｅｐｏｆｉｔ、Ｅｒｙｋｉｎｅ、Ｗｅｐｏｘ、Ｅｓｐｏｇｅｎ、Ｒｅｌｉｐｏｅｉｔｉｎ、Ｓｈａｎｐｏｉｅｔｉｎ、Ｚｙｒｏｐ及びＥＰＩＡＯ）を含むが、これらに限定されない造血成長因子の使用と組み合わせる。一実施形態では、医薬組合せ又は組成物は造血成長因子の投与前に投与される。一実施形態では、造血成長因子の投与は、ＨＳＰＣに対する医薬組合せ又は組成物の効果が消失するようタイミングが計られる。一実施形態では、成長因子を本明細書に記載の医薬組合せ又は組成物の投与の少なくとも２０時間後に投与する。
所望に応じて、本明細書に記載の医薬組合せ又は組成物の複数回用量を、被験体に投与することができる。代替的には、本明細書に記載の医薬組合せ又は組成物の単回用量を被験体に与えることができる。
一実施形態では、本明細書に記載の目的での活性化合物の活性は、罹患若しくは異常増殖性細胞を標的化するか、又はそうでなければ活性、送達、薬物動態若しくは他の有益な特性を増強する作用物質との併用によって増大させることができる。
選択される本明細書に記載の化合物は、Ｆｖフラグメントと併用して又は組み合わせて投与することができる。Ｆｖフラグメントは、ＩｇＧ及びＩｇＭクラス抗体の酵素的切断によって作られる最小フラグメントである。ＦｖフラグメントはＶＨ及びＶＣ領域でできた抗原−結合部位を有するが、ＣＨ１及びＣＬ領域を欠いている。ＶＨ及びＶＬ鎖は、Ｆｖフラグメント中で非共有相互作用によって結び付けられる。
一実施形態では、選択される本明細書に記載の化合物はＳｃＦｖ、ドメイン抗体、ダイアボディ（diabody）、トリアボディ（triabody）、テトラボディ（tetrabody）、Ｂｉｓ−ｓｃＦｖ、ミニボディ（minibody）、Ｆａｂ２又はＦａｂ３抗体フラグメントからなる群から選択される抗体フラグメントと組み合わせて投与することができる。一実施形態では、抗体フラグメントはＳｃＦｖである。遺伝子操作法により、フレキシブルペプチドによって連結したＶＨ及びＶＬドメインを含むＦｖ型フラグメントである一本鎖可変フラグメント（ＳｃＦｖ）の生成が可能となる。リンカーが少なくとも１２残基長である場合、ＳｃＦｖフラグメントは本質的にモノマーである。Ｖ−ドメインの配向及びリンカー長の操作により、３残基〜１１残基長の異なる形態のＦｖ分子リンカーが生じ、機能的ＦｖドメインへとフォールディングすることができないｓｃＦｖ分子が得られる。これらの分子は第２のｓｃＦｖ分子と会合し、二価ダイアボディを生じることができる。一実施形態では、選択される本明細書に記載の化合物と組み合わせて投与される抗体フラグメントは二価ダイアボディである。リンカー長が３残基未満である場合、ｓｃＦｖ分子はトリアボディ又はテトラボディへと会合する。一実施形態では、抗体フラグメントはトリアボディである。一実施形態では、抗体フラグメントはテトラボディである。多価ｓｃＦｖは更に２つの標的抗原への結合を有することで、それらの標的抗原に対してそれらの一価対応物よりも大きな機能的結合親和性を有し、抗体フラグメントの解離速度（off-rate）が低減する。一実施形態では、抗体フラグメントはミニボディである。ミニボディは、二価二量体へと集合するｓｃＦｖ−ＣＨ３融合タンパク質である。一実施形態では、抗体フラグメントはＢｉｓ−ｓｃＦｖフラグメントである。Ｂｉｓ−ｓｃＦｖフラグメントは二重特異性である。２つの異なる可変ドメインを有する小型ＳｃＦｖフラグメントを生成することができ、これらのＢｉｓ−ｓｃＦｖ分子が２つの異なるエピトープに同時に結合することが可能となる。
一実施形態では、選択される本明細書に記載の化合物は、二重特異性二量体（Ｆａｂ２）又は三重特異性二量体（Ｆａｂ３）と併用して又は組み合わせて投与される。遺伝学的方法も、二重特異性Ｆａｂ二量体（Ｆａｂ２）及び三重特異性Ｆａｂ三量体（Ｆａｂ３）を作製するために使用される。これらの抗体フラグメントは、２つ（Ｆａｂ２）又は３つ（Ｆａｂ３）の異なる抗原と一度に結合することが可能である。
一実施形態では、選択される本明細書に記載の化合物を、ｒＩｇＧ抗体フラグメントと併用して又は組み合わせて投与する。ｒＩｇＧ抗体フラグメントは、還元型ＩｇＧ（７５０００ダルトン）又は半ＩｇＧを指す。ｒＩｇＧ抗体フラグメントは、単にヒンジ領域ジスルフィド結合のみを選択的に還元した生成物である。幾つかのジスルフィド結合がＩｇＧに生じるが、ヒンジ領域中のものが最もアクセス可能であり、特に２−メルカプトエチルアミン（２−ＭＥＡ）のような穏やかな還元剤による還元が最も容易である。半ＩｇＧは、抗体固定化又は酵素標識化による併用のために標的化され得る露出したヒンジ領域のスルフヒドリル基を標的化する目的で調製されることが多い。
他の実施形態では、選択される本明細書に記載の活性化合物は、有効性を増大するために、当該技術分野で既知の方法を用いて放射性同位体に連結することができる。癌細胞に対して有用な任意の放射性同位体、例えば、限定されるものではないが、１３１Ｉ、１２３Ｉ、１９２Ｉｒ、３２Ｐ、９０Ｓｒ、１９８Ａｕ、２２６Ｒａ、９０Ｙ、２４１Ａｍ、２５２Ｃｆ、６０Ｃｏ又は１３７Ｃｓをコンジュゲートに組み込むことができる。
注目すべきことに、リンカー化学は薬物コンジュゲートの有効性及び忍容性に重要であり得る。チオ−エーテル連結Ｔ−ＤＭ１は、ジスルフィドリンカーバージョンに対する血清安定性を増大し、エンドソーム分解を受けるようであり、細胞毒性薬の細胞内放出をもたらし、それにより有効性及び忍容性を改善する。Barginear, M.F. and Budman, D.R., Trastuzumab-DM1: A review of the novel immune-conjugate for HER2-overexpressing breast cancer, The Open Breast Cancer Journal, 1: 25-30, (2009)を参照されたい。
本発明に使用することができる、薬物、リンカー化学及び製品開発の標的の種類を論考する初期及び近年の抗体−薬物コンジュゲートの例は、Casi, G. and Neri, D., Antibody-drug conjugates: basic concepts, examples and future perspectives, J. Control Release 161(2):422-428, 2012、Chari, R.V., Targeted cancer therapy: conferring specificity to cytotoxic drugs, Acc. Chem. Rev., 41(1):98-107, 2008、Sapra, P. and Shor, B., Monoclonal antibody-based therapies in cancer: advances and challenges, Pharmacol. Ther., 138(3):452-69, 2013、Schliemann, C. and Neri, D., Antibody-based targeting of the tumor vasculature, Biochim. Biophys. Acta., 1776(2):175-92, 2007、Sun, Y., Yu, F., and Sun, B.W., Antibody-drug conjugates as targeted cancer therapeutics, Yao Xue Xue Bao, 44(9):943-52, 2009、Teicher, B.A., and Chari, R.V., Antibody conjugate therapeutics: challenges and potential, Clin. Cancer Res., 17(20):6389-97, 2011、Firer, M.A., and Gellerman, G.J., Targeted drug delivery for cancer therapy: the other side of antibodies,J. Hematol. Oncol., 5:70, 2012、Vlachakis, D. and Kossida, S., Antibody Drug Conjugate bioinformatics: drug delivery through the letterbox, Comput. Math. Methods Med., 2013; 2013:282398, Epub 2013 Jun 19、Lambert, J.M., Drug-conjugated antibodies for the treatment of cancer, Br. J. Clin. Pharmacol., 76(2):248-62, 2013、Concalves, A., Tredan, O., Villanueva, C. and Dumontet, C., Antibody-drug conjugates in oncology: from the concept to trastuzumab emtansine (T-DM1), Bull. Cancer, 99(12):1183-1191, 2012、Newland, A.M., Brentuximab vedotin: a CD-30-directed antibody-cytotoxic drug conjugate, Pharmacotherapy, 33(1):93-104, 2013、Lopus, M., Antibody-DM1 conjugates as cancer therapeutics, Cancer Lett., 307(2):113-118, 2011、Chu, Y.W. and Poison, A., Antibody-drug conjugates for the treatment of B-cell non-Hodgkin’s lymphoma and leukemia, Future Oncol., 9(3):355-368, 2013、Bertholjotti, I., Antibody-drug conjugate a new age for personalized cancer treatment, Chimia, 65(9): 746-748, 2011、Vincent, K.J., and Zurini, M., Current strategies in antibody engineering: Fc engineering and pH - dependent antigen binding, bispecific antibodies and antibody drug conjugates, Biotechnol. J., 7(12):1444-1450, 2012、Haeuw, J.F., Caussanel, V., and Beck, A., Immunoconjugates, drug-armed antibodies to fight against cancer, Med. Sci., 25(12):1046-1052, 2009、及びGovindan, S.V., and Goldenberg, D.M., Designing immunoconjugates for cancer therapy, Expert Opin. Biol. Ther., 12(7):873-890, 2012による概説に見ることができる。
一実施形態では、本明細書に記載の医薬組成物又は組合せを、本明細書に記載の任意の障害の治療に使用することができる。
一態様では、本発明の化合物を有効量のヌクレオシド又はヌクレオシド類縁体との組合せ又は組成物で投薬する。ヌクレオシドの非限定的な例としては、アザシチジン、デシタビン、ジダノシン、ビダラビン、ＢＣＸ４４３０、シタラビン、エムトリシタビン、ラミブジン、ザルシタビン、アバカビル、アシクロビル、エンテカビル、スタブジン、テルビブジン、ジドブジン、イドクスウリジン、トリフルリジン、アプリシタビン、エルブシタビン、アムドキソビル及びラシビルが挙げられる。一実施形態では、本発明の化合物を、ウイルス感染を治療するために有効量のヌクレオシド又はヌクレオシド類縁体との組合せ又は組成物で使用する。代替的な実施形態では、本発明の化合物を、腫瘍又は癌を治療するために有効量のヌクレオシド又はヌクレオシド類縁体との組合せ又は組成物で使用する。一実施形態では、ヌクレオシド類縁体はアザシチジンであり、障害は腫瘍又は癌である。
一実施形態では、化合物Ａ又はその薬学的に許容可能な塩を有効量のヌクレオシド類縁体と組み合わせて又は代替して、それを必要とする宿主に投与することを含む、被験体における腫瘍又は癌を治療する方法が提供される。別の実施形態では、本明細書で提供される化合物Ａの類縁体又はその薬学的に許容可能な塩を有効量のヌクレオシド類縁体と組み合わせて又は代替して、それを必要とする宿主に投与することを含む、被験体における腫瘍又は癌を治療する方法が提供される。
一実施形態では、化合物Ａ又はその薬学的に許容可能な塩をアザシチジンと組み合わせて又は代替して、それを必要とする宿主に投与することを含む、被験体において腫瘍又は癌を治療する方法が提供される。別の実施形態では、本明細書で提供される化合物Ａの類縁体又はその薬学的に許容可能な塩をアザシチジンと組み合わせて又は代替して、それを必要とする宿主に投与することを含む、被験体において腫瘍又は癌を治療する方法が提供される。
ＶＩＩ． 実施例
実施例１：Ｋａｓｕｍｉ−１細胞におけるＲＵＮＸ１−ＲＵＮＸ１Ｔ１に関連する遺伝子の決定
Ｋａｓｕｍｉ−１ ＡＭＬ細胞はＲＵＮＸ１−ＲＵＮＸ１Ｔ１融合を有する。ＲＵＮＸ１−ＲＵＮＸ１Ｔ１のノックダウン時に発現が増大するＫａｓｕｍｉ−１細胞の遺伝子の尺度となる遺伝子セットを得た（Ben-Ami, O. et al. Cell Reports4, 1131-1143 (2013)）。遺伝子セット濃縮分析（Subramanian,A.et. al. Proc. Natl Acad. Sci. USA 102, 15545-15550 (2005)）を用いて、この遺伝子セットをBroadのＭｏｌｅｃｕｌａｒ Ｓｉｇｎａｔｕｒｅｓデータベース（Ｃ２）と共に、２５ｎＭコルチスタチンＡでの３時間の処理時にＭＯＬＭ−１４細胞において差次的に発現される遺伝子と比較した（図２）。
実施例２：遺伝子発現レベルの決定
白血病細胞を５０００００細胞／ｍｌ〜８０００００細胞／ｍｌ、三連でプレーティングし（１２ウェル）、ビヒクル（０．１％ＤＭＳＯ）又はＣＡ（Ｋ５６２、ＭＯＬＭ−１４及びＭＶ４；１１については２５ｎＭで３時間、ＭＯＬＭ−１４については１０ｎＭで２４時間、ＳＥＴ−２については２５ｎＭで４時間、各細胞株についてｎ＝３）の存在下でインキュベートした。次いで、細胞を冷ＰＢＳで２回洗浄し、急速凍結した。ＲＮＡを単離し（ＲＮｅａｓｙ Ｐｌｕｓ Ｍｉｃｒｏｋｉｔ、Qiagen又はＴＲＩｚｏｌ、Life Technologies）、処理し、Ｋ５６２、ＭＯＬＭ−１４及びＭＶ４；１１についてはＨｕｍａｎ Ｕ１３３ Ｐｌｕｓ ２．０マイクロアレイ（Affymetrix）にハイブリダイズさせた。マイクロアレイを、品質対照についてはBioconductorのパッケージａｆｆｙＱＣＲｅｐｏｒｔ、ｒｍａを用いたバックグラウンド補正、集計及び正規化についてはａｆｆｙで処理した。少なくとも１つのサンプル中に存在し（ａｆｆｙ ｍａｓ５ｃａｌｌに基づく）、四分位範囲がｌｏｇ２（１．２）超のプローブセットを更なる分析のために保持した。Bioconductorのｌｉｍｍａパッケージを、ＣＡ処理サンプル対ＤＭＳＯ対照サンプルの差次的発現分析に使用した（Ｐ＜０．０５に調整したＢｅｎｊａｍｉｎｉ−Ｈｏｃｈｂｅｒｇ）。ＳＥＴ−２及びＨＣＴ１１６遺伝子発現をＲＮＡ−ｓｅｑによって測定した。ＳＥＴ−２ ＲＮＡ−ｓｅｑライブラリーを作成し、Ｉｏｎ Ｔｏｒｒｅｎｔワークフローを用いて処理した。リードを、初めにｒｎａＳｔａｒ（ｖ．２．３．０ｅ）、続いてマッピングされない残りのリードについてのＢＷＡ（ｖ．０．７．５ａ）の２回のパス（どちらも規定のパラメーターを用いる）でアラインメントした。マッピングされたリードをマージし、ＨＴＳｅｑ（ｖ．０．５．３ｐ３）を用いて、−ｓ ｙｅｓ −ｍ ｉｎｔｅｒｓｅｃｔｉｏｎ−ｓｔｒｉｃｔでカウントした。BioconductorのパッケージＤＥＳｅｑを、ＤＥ分析（ＦＤＲ＜０．０５及び二倍変化）及び正規化に使用した。ＨＣＴ１１６細胞をおよそ８０％のコンフルエンスまで成長させ、１００ｎＭ ＣＡ又はＤＭＳＯのいずれかで３時間処理した（ｎ＝３）。次いで、細胞を冷ＰＢＳで２回洗浄し、ＴＲＩｚｏｌ試薬（Life Technologies）に掻き取った。ＲＮＡを回収した後、ＲＮｅａｓｙ ｍｉｎｉキット（Qiagen）を用いてオンカラムＤＮａｓｅ Ｉ消化により更に精製した。Ｉｌｌｕｍｉｎａシークエンシングのライブラリーを、IlluminaのＴｒｕＳＥＱ ｓｔｒａｎｄｅｄ ｍＲＮＡ ｐｒｅｐキットにより生成した。サンプルを、シングルリードフローセルを有するIlluminaのＨｉＳＥＱ ２０００シークエンサーの単一レーンで、１×５０ｂｐリード及び６サイクルインデックスリードを用いて泳動した。リードを、Ｔｏｐｈａｔ２ ｖ．２．０．６を用いて、プロトコルの鎖性質を適切に構成する−ｌｉｂｒａｒｙ−ｔｙｐｅ ｆｒ−ｆｉｒｓｔｒａｎｄの設定を含むカスタム設定でｈｇ１９参照ゲノムにマッピングした。ＨＴＳｅｑ ｖ．０．６．１を用い、注釈遺伝子にわたるリードカウントを得て、差次的に発現する遺伝子をＤＥＳｅｑ ｖ．１．１０．１によって０．０１未満のｐａｄｊ値でコールした。カウントを、ｌｉｍｍａ ｖｏｏｍ関数を用いてＧＳＥＡに対して正規化した。Ｉ−ＢＥＴ１５１比較のための発現データはＡｒｒａｙＥｘｐｒｅｓｓ（https://www.ebi.ac.uk/arrayexpress、アクセッションＥ−ＭＴＡＢ−７７４）からダウンロードし、加工済みファイルをそのまま使用した。遺伝子リストを、機能アノテーションのためにＤＡＶＩＤウェブサーバー（http://david.abcc.ncifcrf.gov）に提示した。ＧＳＥＡバージョン２．０９を、天然値に対するシグナル対ノイズを基準値として用いて行った。シグネチャーは、BroadのＭＳｉｇＤＢからダウンロードしたキュレート遺伝子セット（Ｃ２、ｖ．３）、並びに社内及び公開データセットからキュレートしたシグネチャーを含むものであった。
遺伝子発現スクリーニングの結果を下記表２にまとめる。
遺伝子セット濃縮分析を用いると、ＭＯＬＭ−１４細胞又はＳＥＴ−２細胞の処理が、これらのＲＵＮＸ１標的遺伝子の発現を増大することが見出される。キュレートした遺伝子セットを、BroadのＭｏｌｅｃｕｌａｒ Ｓｉｇｎａｔｕｒｅｓデータベース（Ｃ２）を含む４０００個を超えるシグネチャーと共に分析した。
実施例３：研究された細胞の分化を決定する方法
ＳＥＴ−２分化アッセイのために、細胞を３日間にわたって５０ｎＭ ＣＡ、５０ｎｇ／ｍｌ ＰＭＡ（陽性対照）又はビヒクルと共に１５００００細胞／ｍｌ、三連でプレーティングした（６ウェル）。細胞ペレットを４℃で回収し、冷ＰＢＳで３回洗浄し、抗ＣＤ６１−ＰＥ（ａｂ９１１２８）又は抗ＣＤ４１−ＰｅｒＣＰ（ａｂ１３４３７３）で染色し、フローサイトメトリーによって分析した。各実験について、２回の独立実験によるｎ＝３の生物学的反復とし、１つを示す（図３）。
実施例４：細胞増殖アッセイ
全ての懸濁細胞を、試験（ｎ＝３）のために５０００細胞／ウェル〜３００００細胞／ウェル、三連でプレーティングした（９６ウェル）。生存細胞数を３日、７日及び１０日後に１つのビヒクルウェルの生存細胞を計数し、細胞希釈系列を生成し、１ウェル当たり２０ｍｌを二連で３８４ウェルプレートに移し、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（Promega）応答（ＳＰＥＣＴＲＡｍａｘ Ｍ３、Molecular Devices）に対する線形回帰を行うことによって推定した。また、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ測定のために全ウェルからの細胞を培地中で４倍希釈し、二連で移した。３日目及び７日目に、全ウェルについて同量を新鮮培地及び化合物で分割し戻し、ビヒクルウェルについて得られる細胞密度が初期播種密度と一致するようにした。７日目及び１０日目については、推定細胞数は分割調整した理論細胞数を表す。ＨＣＴ１１６を２５０細胞／ウェル、三連でプレーティングした（９６ウェル）。細胞をビヒクル、１μＭパクリタキセル又は化合物の存在下でインキュベートした。７日目に、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｂｌｕｅ（Promega）応答を測定し、値をビヒクル（１００％成長）及びパクリタキセル（０％成長）に対して正規化した。阻害剤を用いた成長アッセイについては、各濃度について２回の独立実験によるｎ＝３とした。
結果を下記表３にまとめ、経時的な増殖の１つのグラフを示す（図４）。
表３から、多くの血液癌細胞株がＣＤＫ８／１９阻害剤コルチスタチンＡによって成長阻害されることが示される。高感受性細胞株には、ＲＵＮＸ１自体に突然変異を有する２つの細胞株（ＳＫＮＯ−１及びＲＥＨ）、及びＲＵＮＸ１レベルが低下する可能性がある他の細胞株（ＲＳ４；１１、ＭＶ４；１１及びＭＯＬＭ−１４；ＭＬＬ融合がＲＵＮＸ１のタンパク質レベルを低下させるという発見に基づく（Zhao, X. et al. Downregulation of RUNX1/CBFβ by MLL fusion proteins enhances hematopoietic stem cell self-renewal. Blood 123, 1729-1738 (2014)）が含まれる。コルチスタチンＡがＲＵＮＸ１転写プログラムを増大することから、付加的な細胞株がコルチスタチンＡに対して感受性があることが予測される。ＲＵＮＸ１が巨核球の分化に必要とされることから、巨核球細胞株ＭＯＬＭ−１６、ＳＥＴ−２、ＭＥＧ−０１及びＣＭＫ−８６（de Bruijn, M. F. & Speck, N. A. Core-binding factors in hematopoiesis and immune function. Oncogene23, 4238-4248 (2004)）、並びにＴＬＸ１を過剰発現したＡＬＬ細胞株ＡＬＬ−ＳＩＬがこれらに含まれる。ＴＬＸ１過剰発現は、ＲＵＮＸ１転写プログラムを制御することが示された（Gatta, Della, G. et al.Reverse engineering of TLX oncogenic transcriptional networks identifies. Nat. Med. 18, 436-440 (2012)）。
コルチスタチンは、多数のＡＭＬ細胞株の増殖を１０ｎＭ未満の５０％成長阻害濃度（ＧＩ５０）で強く阻害する。細胞株の感受性はＲＵＮＸ１転写プログラム依存性と一致した。感受性細胞株としては、ＲＵＮＸ１又はその標的遺伝子の転写を直接阻害する融合を有するもの（ＳＫＮＯ−１、ＭＥ−１、ＭＯＬＭ−１４）、並びに短縮ＧＡＴＡ−１タンパク質ＧＡＴＡ−１ｓを有する巨核芽球性白血病細胞株（ＣＭＫ−８６及びＭＥＧ−０１）が挙げられる。巨核球形成とは異なり、ＲＵＮＸ１発現は赤血球の末端分化中に急速に低下し、ＣＡに対する赤白血病株の不感受性と一致する。例えば、コルチスタチンがＡＭＬ細胞株ＳＥＴ−２、ＭＯＬＭ−１４及びＭＶ４；１１においてＲＵＮＸ１転写プログラムを増大することが決定された。コルチスタチンはＣＥＢＰＡ、ＩＲＦ８及びＮＦＥ２を含むＲＵＮＸ１標的遺伝子を上方調節し、遺伝子セット濃縮分析（ＧＳＥＡ）によると、（ｉ）コルチスタチンが、造血幹細胞におけるＲＵＮＸ１−ＲＵＮＸ１Ｔ１の発現によって抑制されるＳＥＴ−２、ＭＯＬＭ−１４及びＭＶ４；１１細胞株の遺伝子を上方調節すること、（ｉｉ）コルチスタチンが、ＲＵＮＸ１のｓｉＲＮＡ媒介ノックダウン時にＫａｓｕｍｉ−１ ＡＭＬ細胞株における発現が低下するＭＯＬＭ−１４及びＭＶ４；１１細胞の遺伝子を上方調節すること、並びに（ｉｉｉ）コルチスタチンが、Ｋａｓｕｍｉ−１細胞におけるＲＵＮＸ１−ＲＵＮＸ１Ｔ１のｓｉＲＮＡ媒介ノックダウン時に発現が増大するＭＯＬＭ−１４細胞の遺伝子を上方調節することが決定された。ＲＵＮＸ１は、コルチスタチン処理によって上方調節される遺伝子座に動員された。
実施例５：ＳＥＴ−２／ＵＫＥ−１相乗作用アッセイ
ＳＥＴ−２及びＵＫＥ−１細胞を、１対１又は１０対１という一定比のルキソリチニブとＣＡとで、様々な２倍用量希釈の化合物を用いた９６ウェル成長アッセイフォーマットで同時処理した。ＳＥＴ−２及びＵＫＥ−１細胞を、２倍希釈系列のルキソリチニブ単独又はＣＡ単独によっても処理した。５０％成長阻害（Ｆａ＝０．５）でのＣｈｏｕ−Ｔａｌａｌａｙ併用指数値を、ＣａｌｃｕＳｙｎソフトウェアを用いて決定した（Chou, T.C. Cancer Res. 2010 Jan 15;70(2):440-6を参照されたい）（図５）。
実施例６：ｉｎ ｖｉｖｏ異種移植片研究
ＭＶ４；１１異種移植片モデルを以前に記載のように行った（Etchin, J. et al. Antileukemic activity of nuclear export inhibitors that spare normal hematopoietic cells. Leukemia 27, 66-74 (2013)）。２００万個のＭＶ４；１１−ｍＣＬＰ細胞を、７週齢雌性非肥満糖尿病−重症複合免疫不全（ＮＯＤ−ＳＣＩＤ）Ｉｌ２ｒｇ−／−（ＮＳＧ）マウス（The Jackson Laboratory）の尾静脈に注射し、腫瘍負荷を、ＩＶＩＳ Ｓｐｅｃｔｒｕｍシステム（Caliper Life Sciences）を用いた生物発光イメージング（ＢＬＩ）によって判定した。注射の７日後に、白血病の発生をＢＬＩによって記録し、マウスを同様の平均ＢＬＩが達成されるように群に割り当て、ビヒクル（２０％ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン）又はＣＡで１日１回、１５日間腹腔内処理した。３０日後に、血球数を得て（Ｈｅｍａｖｅｔ ９５０ Ｆ、Drew Scientific）、１群当たり最高、最低及び中央のＢＬＩ値を有する３匹のマウスから脾臓、大腿骨及び末梢血細胞を回収し、フローサイトメトリー（LSR Fortessa、BD Biosciences）によって分析した。体腔を切開し、内臓器官を露出させた後に脾臓及びマウスを秤量し（図６）、脾臓の一部をブアン中で保存した。次いで、全器官のサンプルを解剖し、マウス１匹当たり９つのカセットに入れた。組織をパラフィン包埋し、６μｍの薄片にし、ヘマトキシリン及びエオシンで染色した。生存を療法開始から瀕死状態までの時間として測定した。統計分析を、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ ６．０を用いて行った。ｐ値決定のために、二元配置又は一元配置ＡＮＯＶＡをダネットの多重比較検定及びｐ値調整と共に用いた。
実施例７：ネイティブ及び組換えキナーゼプロファイリング
ネイティブキノームプロファイリングを、ＭＯＬＭ−１４細胞溶解物を用い、ActivX BiosciencesによるＫｉＮａｔｉｖ法に従って行った。定量化した各ペプチドについて、対照サンプルのシグナルに対する処理サンプルの質量分析シグナルの変化を阻害率として表した。結果は、各コルチスタチンＡ（ＣＡ）濃度についての二連実験の１つに対応する。報告した質量分析シグナルの変化率は統計的に有意である（スチューデントのｔ検定のスコア＜０．０４）（図７Ａ及び図７Ｂ）。
組換えキノームワイド選択性プロファイリング。放射測定タンパク質キナーゼアッセイ（ＰａｎＱｉｎａｓｅ活性アッセイ；ProQinase GmbHにより行われる）を記載のように用いた（Hutterer, C. et al. Antimicrob. Agents Chemother. 59, 2062-2071 (2015)）。
実施例８． ｉｎ ｖｉｔｒｏ放射測定タンパク質キナーゼアッセイ
放射測定タンパク質キナーゼアッセイ（ＰａｎＱｉｎａｓｅ活性アッセイ；ProQinase GmbHにより行われる）を記載のように用いた（Hutterer, C. et al. Antimicrob. Agents Chemother. 59, 2062-2071 (2015)）。ＣＤＫ８−ＣＣＮＣ（８．３ｎＭ；１．０μＭ ＡＴＰ及び１．０μｇ／５０ｍｌの基質ＲＢＥＲ−ＩＲＳｔｉｄｅを含む）についてのＩＣ５０決定は二連測定として行い、ＩＣ５０をＰｒｉｓｍ ５．０４を用いて算出し、最小二乗フィッティングによりＳ字型応答の最高値を１００％、最低値を０％に定めた（図８）。
実施例９：薬物耐性対立遺伝子のスクリーニング
５’−Ｆｌａｇタグ付きＣＤＫ８及びＣＤＫ１９を、ｐＢａｂｅ．ｐｕｒｏ．ＣＤＫ８．ｆｌａｇ（Addgeneの１９７５８）及びＦ−ＣＤＫ８Ｌ（Addgeneの２４７６２）からｐＬＶＸ−ＥＦ１α−ＩＲＥＳ−ｍＣｈｅｒｒｙ及びｐＬＶＸ−ＥＦ１α−ＩＲＥＳ−ＺｓＧｒｅｅｎ（Clontech）へとクローニングし、大腸菌（Ｏｎｅ Ｓｈｏｔ Ｓｔｂｌ３、Invitrogen）に形質転換した。点突然変異を、全プラスミドＰＣＲ（ＱｕｉｋＣｈａｎｇｅ ＩＩ ＸＬ Ｓｉｔｅ−Ｄｉｒｅｃｔｅｄ Ｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓ Ｋｉｔ、Agilent）によって導入した。ｐＬＶＸレンチウイルスベクターを、２９３Ｔ細胞にｐｓＰＡＳｘ及びｐＭＤ２．Ｇ（Addgene）と共に同時トランスフェクトした。４８時間後に、ウイルス上清を回収し、０．４５μｍフィルター（Millipore）に通した。形質導入のために、２４ウェルプレートを５００μｌの２０μｇ／ｍｌ ＲｅｔｒｏＮｅｃｔｉｎ（Clontech）を用いて４℃で一晩コーティングし、２％ＢＳＡで３０分間ブロッキングし、ＰＢＳで洗浄し、３００μｌ〜５００μｌのウイルス上清を添加した。プレートを遠心分離した後（２０００ｇ、１．５時間）、インキュベーター内に置いた。２時間後に、ウイルス上清を除去し、５００μｌ／ウェルの１ｍｌ当たり２０００００個の細胞を添加した。１日〜３日後に、細胞を展開し、ＦＡＣＳによって単離した。
薬物耐性対立遺伝子により、ＡＭＬ細胞成長がＣＤＫ８／１９キナーゼ活性を必要とすることが確認される。このことから、ＣＤＫ８／１９阻害剤コルチスタチンＡがＣＤＫ８／１９を阻害することによってＭＯＬＭ−１４細胞の増殖を阻害することが示される。ＣＤＫ８及びＣＤＫ１９におけるトリプトファン１０５の突然変異（Ｗ１０５）は、コルチスタチンＡ耐性をＣＤＫ８及びＣＤＫ１９に付与する。したがって、ＭＯＬＭ−１４細胞は、ＣＤＫ８ Ｗ１０５Ｍ又はＣＤＫ１９ Ｗ１０５Ｍの発現時にコルチスタチンＡの存在下で増殖することが可能である。
実施例１０：ＣＤＫ８／１９阻害はｉｎ ｖｉｖｏで白血病細胞成長を停止させる
ＭＶ４；１１異種移植片モデルを以前に記載のように行った（Etchin, J. et al. Antileukemic activity of nuclear export inhibitors that spare normal hematopoietic cells. Leukemia 27, 66-74 (2013)）。２００万個のＭＶ４；１１−ｍＣＬＰ細胞を、７週齢雌性非肥満糖尿病−重症複合免疫不全（ＮＯＤ−ＳＣＩＤ）Ｉｌ２ｒｇ−／−（ＮＳＧ）マウス（The Jackson Laboratory）の尾静脈に注射し、腫瘍負荷を、ＩＶＩＳ Ｓｐｅｃｔｒｕｍシステム（Caliper Life Sciences）を用いた生物発光イメージング（ＢＬＩ）によって判定した。注射の７日後に、白血病の発生をＢＬＩによって記録し、マウスを同様の平均ＢＬＩが達成されるように群に割り当て、ビヒクル（２０％ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン）又はＣＡで１日１回、１５日間腹腔内処理した。３０日後に、血球数を得て（Ｈｅｍａｖｅｔ ９５０ Ｆ、Drew Scientific）、１群当たり最高、最低及び中央のＢＬＩ値を有する３匹のマウスから脾臓、大腿骨及び末梢血細胞を回収し、フローサイトメトリー（LSR Fortessa、BD Biosciences）によって分析した。体腔を切開し、内臓器官を露出させた後に脾臓及びマウスを秤量し（図６）、脾臓の一部をブアン中で保存した。次いで、全器官のサンプルを解剖し、マウス１匹当たり９つのカセットに入れた。組織をパラフィン包埋し、６μｍの薄片にし、ヘマトキシリン及びエオシンで染色した。生存を療法開始から瀕死状態までの時間として測定した。統計分析を、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ ６．０を用いて行った。ｐ値決定のために、二元配置又は一元配置ＡＮＯＶＡをダネットの多重比較検定及びｐ値調整と共に用いた。
３０日目のＭＶ４；１１ ＡＭＬマウスの分析から、ＣＤＫ８／１９阻害剤コルチスタチンＡによる処理が、ヘマトキシリン及びエオシン染色によって測定されるように肺において白血病細胞を減少させることが示される（図１０）。
実施例１１：ＣＤＫ８／１９阻害は、ＡＭＬ／巨核球細胞株においてＲＵＮＸ１標的遺伝子の発現及び特定のゲノム遺伝子座へのＲＵＮＸ１の動員を増大する
ＣＡがＣＡ感受性細胞株ＳＥＴ−２、ＭＯＬＭ−１４及びＭＶ４；１１においてＲＵＮＸ１転写プログラムを増大することが決定された。ＣＡはＣＥＢＰＡ、ＩＲＦ８及びＮＦＥ２を含むＲＵＮＸ１標的遺伝子を上方調節し、遺伝子セット濃縮分析（ＧＳＥＡ）により、以下のことが決定された：
１． ＣＡは、造血幹細胞（ＨＳＣ）におけるＲＵＮＸ１−ＲＵＮＸ１Ｔ１の発現によって抑制されるＳＥＴ−２、ＭＯＬＭ−１４及びＭＶ４；１１細胞株の遺伝子を上方調節した（図２）。ＲＵＮＸ１−ＲＵＮＸ１Ｔ１融合は、大半がＲＵＮＸ１標的遺伝子の転写を抑制するように作用する。
２． ＣＡは、ＲＵＮＸ１のｓｉＲＮＡ媒介ノックダウン時にＫａｓｕｍｉ−１ ＡＭＬ細胞株における発現が低下するＭＯＬＭ−１４及びＭＶ４；１１細胞の遺伝子を上方調節した。
３． ＣＡは、Ｋａｓｕｍｉ−１細胞におけるＲＵＮＸ１−ＲＵＮＸ１Ｔ１のｓｉＲＮＡ媒介ノックダウン時に発現が増大するＭＯＬＭ−１４細胞の遺伝子を上方調節した。
機構的に、ＲＵＮＸ１がＣＡ処理により上方調節される遺伝子座に動員されることが観察され（図１１）、ＣＤＫ８／１９キナーゼ活性が標的遺伝子座からＲＵＮＸ１を制限し、ＲＵＮＸ１標的遺伝子の発現の増大が妨げられることが示唆された。
実施例１２：ＣＤＫ８／１９阻害剤療法の予測バイオマーカーとしてのＲＵＮＸ１変化及び関連突然変異
コルチスタチンＡ（ＣＡ）又はその類縁体の一次患者サンプルにおける抗増殖活性及び分化に対する効果を測定することができる。ＲＵＮＸ１にＲＵＮＸ１−ＲＵＮＸ１Ｔ１及び単一対立遺伝子性機能喪失ＲＵＮＸ１点突然変異体を含む突然変異又は転座を有することが特徴付けられた患者サンプル（２０〜４０）を得る。ＲＵＮＸ１標的遺伝子をＲＵＮＸ１と共に変調する転写調節因子にＧＡＴＡ１エクソン２の突然変異、ＣＢＦｂ−ＭＹＨ１１転座、ＦＵＳ−ＥＲＧ転座及び機能喪失ＣＥＢＰＡ ｉｎｄｅｌ突然変異体を含む突然変異を有する１０〜３０の付加的な患者サンプルも得る。ＣＡ又はその類縁体に対する感受性を判定するために、患者に由来する非分画及びＣＤ３４＋白血病細胞に対する３日間の液体培養及びクローン形成アッセイの両方を行う。クローン形成アッセイのために、１ウェル当たり１０００個〜２０００個の細胞を、ヒトサイトカイン（ｒｈＳＣＦ、ｒｈＧ−ＣＳＦ、ｒｈＧＭ−ＣＳＦ、ｒｈＩＬ−３、ｒｈＩＬ−６、ｒｈＥｐｏ）を添加したＭｅｔｈｏｃｕｌｔ（Stem Cell Tech、Ｈ４４３５）にビヒクル、ＣＡ又はＣＡ類縁体（１００ｎＭ、２０ｎＭ及び４ｎＭ）の存在下、二連でプレーティングした。３７℃で１４日間のインキュベーション後に、各プレート上の全コロニーを計数する。並行して、ＣＤ３４＋細胞をビヒクル、ＣＡ又はＣＡ類縁体によりサイトカインの存在下で５日間処理した後、フローサイトメトリーによる分化分析のために骨髄マーカーで標識した。各患者サンプルが有限な制限された供給源であることを考慮し、初期試験時にＣＤＫ８／１９阻害剤及びビヒクルでの処理を受けた細胞を遺伝子発現研究等の追跡ゲノム分析のために回収する。これらのサンプルは、ＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓ９スクリーニングからのヒットを検証する上で有用である。
上記の方法を用いて、ＤＮＭＴ３Ａ、ＮＰＭ１、ＷＴ１、コヒーシン複合体構成要素及びＦＬＴ３の突然変異を含むＡＭＬ７の共通遺伝子変化の大半を表す一連の広範な原発性ＡＭＬ患者サンプルを評価する。
実施例１３：ＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓ９。ＭＯＬＭ−１４細胞におけるＣａｓ９検証及び初期スクリーニング
ヒト化化膿レンサ球菌（S. pyogenes）Ｃａｓ９をＣＡ感受性ＡＭＬ細胞株ＭＯＬＭ−１４で発現させ、２つの遺伝子：ＺｓＧＲＥＥＮ（緑色蛍光タンパク質をコードするレンチウイルス統合遺伝子）及びＢＣＬ２Ｌ１１（アポトーシス促進性タンパク質Ｂｉｍをコードする内因性遺伝子）をノックアウトするその能力を検証する（図１２及び図１３）。
ＣＤＫ８／１９阻害に対する耐性を付与するノックアウト遺伝子を特定する、ＭＯＬＭ−１４細胞におけるＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓ９修飾因子スクリーニングを行った。ＭＯＬＭ−１４細胞を、ヒトゲノムにおける１８０００個の遺伝子に対する８００００個のｓｇＲＮＡをコードするBroadのレンチウイルスライブラリーを用い、三連で形質導入し（４個のｓｇＲＮＡ／遺伝子＋対照ｓｇＲＮＡ）、ピューロマイシン耐性マーカーと共に同時発現させた。Ｃａｓ９及びｓｇＲＮＡの両方を発現する細胞を、７日間にわたってブラストサイジン及びピューロマイシンに対して選択した後、スクリーニングを開始した。ワークフローを図１４に記載する。０日目から１４日目までのｓｇＲＮＡ分布の変化を、ビヒクル処理群とＣＡ処理群とで比較した。ＣＡ群では濃縮されるが、ビヒクル群では濃縮されないガイドをＣＡ感受性の陽性調節因子とする。遺伝子を、２つの治療群間の倍率変化の差異だけでなく、反復試験間の再現性及び重複ｓｇＲＮＡ間の効果の類似性も考慮するＲＩＧＥＲスコアに基づいてランク付けする。ＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓ９を用いて遺伝子を個別にノックアウトし、ウエスタンブロット又はｑＰＣＲを用いてノックアウトを確認し、ＣＡに対する耐性を測定することによって上位ヒットを検証する。
実施例１４：ｉｎ ｖｉｔｒｏ及びマウス異種移植片モデルでのＣＤＫ８／１９阻害に対する原発性小児患者ＡＭＫＬ細胞の感受性の決定
原発性患者ＡＭＫＬサンプルにおいてコルチスタチンＡ（ＣＡ）又はその類縁体の抗増殖活性及び分化に対する効果を決定することができる。初めに、遺伝子病変がＧＡＴＡ１状態、並びに非ＤＳ−ＡＭＫＬにおける共通転座、例えばＭＬＬ転位、ＲＢＭ１５−ＭＫＬ１、ＣＢＦＡ２Ｔ３−ＧＬＩＳ２及びＮＵＰ９８−ＫＤＭ５Ａの存在等で特徴付けられた、小児ＤＳ−ＡＭＫＬ及び小児非ＤＳ−ＡＭＫＬの両方を含む１０〜３０の患者サンプルを回収する。次いで、亜致死的に照射を受けたＮＯＤ．Ｃｇ−Ｐｒｋｄｃ Ｉｌ２ｒｇｌ／ＳｚＪ（ＮＳＧ）マウスにおいて展開したサンプルを初めに優先することで、ｉｎ ｖｉｔｒｏのマウス異種移植片モデルで感受性である場合に、その後の試験を行うことができる。ｉｎ ｖｉｖｏで展開しない患者サンプルについては、ＮＳＧマウスにおける移植及び展開の最初の試みを行う。
ｉｎ ｖｉｔｒｏ試験については、ＡＭＫＬ細胞をＣＡ、その類縁体又はビヒクルと共に３日〜５日間培養する。次いで、細胞数を経時的に測定し、細胞効果を（１）巨核球特異的マーカーＣＤ４１及びＣＤ４２の変化、（２）倍数性の変化、並びに（３）アポトーシスの誘導について、フローサイトメトリーを用いて特徴化する。これらのｉｎ ｖｉｔｒｏ実験は、オーロラキナーゼＡ阻害剤ＭＬＮ８２３７について以前に記載されている。ｉｎ ｖｉｖｏ異種移植片モデルを、続いてＣＤＫ８／１９阻害に対してｉｎ ｖｉｔｒｏで感受性があり、ＮＳＧマウスにおいて既に移植及び展開した最大５つの患者サンプルについて、ＭＬＮ８２３７の試験について記載した手順に従って試験した。具体的には、一次、二次又は三次レシピエントマウスに由来する患者の白血病性芽球を、亜致死的に照射を受けたＮＳＧマウス（１治療群当たり７匹）に大腿骨内注射する。約１０日間の生着期間後に、マウスをＣＡ、その類縁体又はビヒクルで１５日間にわたって処理し、続いて骨髄（２７日目及び７０日目）及び末梢血（５５日目）のサンプリングにより疾患負荷及び分化についてモニタリングする。ヒトＣＤ４５発現による疾患負荷を、フローサイトメトリーによって全時点で測定してヒト細胞の存在についてアッセイし、処理の３日後に分化をヒトＣＤ４２発現によって測定する。サンプリングに加えて、マウスを後肢麻痺及び生存についてモニタリングする。
実施例１５：ＣＤＫ８／１９阻害がＡＭＫＬにおけるＲＵＮＸ１転写プログラムを回復させるか否かの決定
実施例１４に記載の３つ〜５つのＣＡ感受性患者白血病性芽球について、ＣＡ、その類縁体又はビヒクルでの処理時の遺伝子発現及びＲＵＮＸ１占有率を測定する。ＲＵＮＸ１占有率を、クロマチン免疫沈降に続くシークエンシング（ＣｈＩＰ−ｓｅｑ）によって測定する。これらの実験はＳＥＴ−２巨核球細胞株を用いて行った実験と並行し、（１）ＣＡ又はその類縁体が、これらの患者の白血病細胞においてＲＵＮＸ１転写プログラムを刺激し、（２）転写的にも上方調節される特定のゲノム遺伝子座へのＲＵＮＸ１動員の阻止を緩和することによって作用することの検証が可能となる。加えて、最大３つのＣＡ耐性ＡＭＫＬ患者サンプルにおける遺伝子発現を測定し、ＲＵＮＸ１転写プログラムの変調が感受性細胞において選択的に観察されるか否かを決定する。感受性及び非感受性ＡＭＫＬ患者における基本的な遺伝子発現パターンを比較することで、或る特定の遺伝子発現プログラムが感受性と相関するか否かの決定が可能となる。
実施例１６：ＣＤＫ８／１９阻害剤療法についての予測バイオマーカーを特定するゲノムワイドＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓ９修飾因子スクリーニング
ゲノムワイドＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓ９修飾因子スクリーニングを行い、感受性を予測することができるＡＭＬの遺伝子変化を特定する。スクリーニングを、コルチスタチンＡ（ＣＡ）感受性ＡＭＬ細胞株（１００ｎＭ ＣＡで５０％を超える成長阻害）及びＣＡ非感受性ＡＭＬ細胞株（１００ｎＭ ＣＡで５０％未満の成長阻害）において行う。ＣＡ感受性細胞株を用い、ノックアウトした場合にＣＡ耐性を付与する遺伝子を特定し、同様にＣＡ非感受性細胞株において、ノックアウトした場合にＣＡ感受性を付与する遺伝子を特定する。複数の細胞株を試験することにより、細胞株特異的な遺伝子変化を除外することができ、ＣＡ感受性及びＣＡ非感受性細胞株の両方を試験することにより、ＣＡ又はＣＡ類縁体に対する感受性を予測することができる遺伝子変化のパターンが決定される。このスクリーニングの結果を用いて、ＣＤＫ８／１９阻害剤感受性について評価したＡＭＬ患者サンプルにおける遺伝子の発現レベルを評価することができる。
実施例１７：コルチスタチンＡに対する感受性についての様々なバイオマーカーを用いた６２個の細胞のスクリーニング
６２個の細胞株について、９６ウェル懸濁細胞培養プレートを作製した。１００μＬの軟寒天底層（完全培地中の最終濃度０．６％）を注入し、静置して固化させた。次いで、対応する細胞及び細胞数を有する５０μＬの軟寒天最上層（０．４％最終濃度）を上部に添加し、固化させ、３７℃、１０％ＣＯ２でインキュベートした。軟寒天が固化した後、試験項目をプレートの内側ウェルに指定の最終濃度で添加した。続いて、アッセイを細胞培養インキュベーター内で８日〜１４日間インキュベートした。最後に、Ａｌａｍａｒ Ｂｌｕｅを用いてアッセイを発色させ、３７℃でのインキュベーションの１時間〜５時間後に蛍光強度を決定した（励起：５６０ｎｍ；発光：５９０ｎｍ）。低対照として、細胞を１Ｅ−０５Ｍスタウロスポリン（６倍値）で処理した。高対照として、細胞を０．１％ＤＭＳＯ（溶媒対照、６倍値）で処理した。
生データを、それぞれ１００％及び０％に設定した高対照（溶媒０．１％ＤＭＳＯ）及び低対照（１Ｅ−０５Ｍスタウロスポリン）に対する軟寒天成長パーセントへと変換した。結果を図１５Ａ、図１５Ｂ及び図１５Ｃ、並びに下記表４に示す。
実施例１８：骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）の治療のためのコルチスタチン
コルチスタチンＡは、ＭＤＳ患者に由来するＭＯＬＭ−１４細胞株を含むＡＭＬ細胞株におけるＣＥＢＰＡ、ＩＲＦ８及びＮＦＥ２を含む多くのＲＵＮＸ１標的遺伝子の発現を顕著に増大する（図２、実施例１）。さらに、ＲＵＮＸ１は１０％〜２０％のＭＤＳ患者において突然変異することが知られており、ＭＤＳにおいて最も頻繁に突然変異する遺伝子である。したがって、コルチスタチン及びその類縁体は、ＲＵＮＸ１遺伝子の発現を増大することによるＭＤＳの効果的な治療となり得る。以下の実験結果により更なる確証が与えられる：１）ＣＡがＣＡ処理により上方調節される遺伝子座へのＲＵＮＸ１の動員を誘導し、ＣＤＫ８／１９キナーゼ活性が標的遺伝子座でのＲＵＮＸ１の蓄積を阻止することが示唆されること（実施例１１）、及び２）ＣＡの抗増殖活性が、ＲＵＮＸ１突然変異を有するものを含むＲＵＮＸ１標的遺伝子発現障害を有する細胞株と正に相関すること。
実施例１９：巨核球細胞株はＣＤＫ８／１９阻害剤コルチスタチンＡ（ＣＡ）に対する感受性が高く、ＣＡ抗増殖活性はＲＵＮＸ１転写プログラムの刺激と一致する
コルチスタチンＡ（ＣＡ）が、試験した５つの巨核球細胞株のうち５つの増殖を１０ｎＭ未満の５０％成長阻害濃度（ＧＩ５０）で強く阻害することが見出された（表５）。試験した細胞株には、ＧＡＴＡ１ｓ短縮タンパク質を有し、小児ＤＳ−ＡＭＫＬ患者に由来するＣＭＫ−８６が含まれていた。
白血病細胞株全体にわたるＣＡの抗増殖活性は、それらの予想されるＲＵＮＸ１転写プログラムの調節異常に対する依存性と一致していた。巨核芽球性細胞株に加えて、ＣＡは、ＲＵＮＸ１−ＲＵＮＸ１Ｔ１融合を有する細胞株及びＭＬＬ融合を有する細胞株を含む、ＲＵＮＸ１又はその標的遺伝子の転写を直接阻害するキメラタンパク質（融合）を有する細胞株の増殖を強く阻害した（表５）。付加的に、赤白血病細胞株はＣＡに対して感受性を有さず、赤血球分化におけるＲＵＮＸ１発現の低下と一致する（赤血球の末端分化におけるＲＵＮＸ１依存性の欠如）。ＣＡに対する細胞株の強い系統依存性感受性が、同じ突然変異（ＢＣＲ−Ａｂｌ又はＪＡＫ２Ｖ６１７Ｆ）を有する巨核球及び赤白血病細胞株の感受性が１００倍超異なる（Ｋ５６２及びＨＥＬとＭＥＧ−０１及びＳＥＴ−２との比較）という結果において特に明らかである。
本明細書は本発明の実施形態を参照して記載されている。しかしながら、下記の特許請求の範囲に記載されるような本発明の範囲を逸脱することなく、様々な修飾及び変更を行うことができることが当業者には理解される。したがって、本明細書は限定的意味ではなく例示的意味で考えられ、全てのかかる修飾が本発明の範囲に含まれることが意図される。

Claims (79)

  1. 腫瘍又は癌を有する患者を標的化選択及び治療する方法であって、（ｉ）前記患者がＲＵＮＸ１経路障害を有するか否かを決定することと、そうであれば（ｉｉ）任意に薬学的に許容可能な組成物中の有効量のコルチスタチン、又はその薬学的に許容可能な塩若しくはオキシドを投与することとを含む、方法。
  2. 患者においてＲＵＮＸ１障害腫瘍又は癌を治療する方法であって、有効量のコルチスタチンを、ＲＵＮＸ１によって通常転写されるタンパク質の十分な上方調節をもたらし、細胞がより正常な、より低毒性の、より成熟した、又は成長停止若しくはアポトーシスしたものとなるような前記腫瘍又は癌の分化を引き起こす方法及び投与量で投与することを含む、方法。
  3. 前記患者がコルチスタチン療法に首尾よく応答するか否かを決定するキットを使用することを更に含み、該キットがバイオマーカー若しくはバイオマーカーの組合せのポリヌクレオチドとストリンジェントな条件下でアニールするプローブ、又はバイオマーカータンパク質に結合する抗体を含む、請求項１又は２に記載の方法。
  4. コルチスタチンによる治療に対する腫瘍又は癌を有する患者の応答を予測する方法であって、
    ｉ． 前記患者から前記腫瘍又は癌のサンプルを得ることと、
    ｉｉ． 患者に由来する生体サンプルにおける１つ以上のバイオマーカーの発現レベル又は量を決定することであって、該バイオマーカーがＡＣＳＬ１、ＡＤＯＲＡ２Ｂ、ＡＤＲＢ１、ＡＭＰＤ３、ＡＲＲＤＣ４、ＢＣＬ２、ＢＣＬ２Ａ１、ＣＢＦβ、ＣＣＮＡ１、ＣＤ２４４、ＣＤ４４、ＣＤＣ４２ＥＰ３、Ｃ／ＥＢＰα、ＣＥＣＲ６、ＣＦＬＡＲ、ＣＩＳＨ、ＣＳＦ１、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＲ４、ＣＹＴＩＰ、ＤＵＳＰ１０、Ｅ２Ｆ８、ＥＭＢ、ＥＭＲ２、ＥＴＳ１、ＥＴＳ２、ＦＡＭ１０７Ｂ、ＦＡＭ４６Ａ、ＦＣＥＲ１Ａ、ＦＣＧＲ１Ｂ、ＦＬＩ１、ＦＯＧ１、ＦＯＳＬ２、ＧＡＢ２、ＧＡＳ７、ＧＡＴＡ１、ＧＡＴＡ２、ＧＦＩ１Ｂ、ＧＭＰＲ、ＧＰＲ１８、ＧＰＲ１８３、ＨＢＢＰ１、ＨＥＢ、ＨＬＸ、ＨＭＧＣＳ１、ＩＧＦＢＰ４、ＩＧＦＢＰ５、ＩＬ１７ＲＡ、ＩＬ１ＲＡＰ、ＩＰＣＥＦ１、ＩＲＦ１、ＩＲＦ８、ＩＴＧＡ６、ＪＡＧ１、ＬＣＰ２、ＬＤＬＲ、ＬＩＭＡ１、ＬＭＯ２、ＬＲＲＣ３３、ＬＴＢ、ＭＢＰ、ＭＩＣＡＬ２、ＭＹＣＮ、ＭＹＯ１Ｇ、ＮＦＥ２、ＮＯＴＣＨ２、ＮＲＰ１、Ｐ２ＲＹ２、ＰＡＧ１、ＰＬＡＣ８、ＰＬＥＫ、ＰＬＸＮＣ１、ＰＭＰ２２、ＰＴＰＲＥ、ＰＵ．１、ＰＸＫ、ＲＡＢ２７Ａ、ＲＡＳＡ３、ＲＧＳ１６、ＲＨＯＨ、ＲＮＦ２４、ＲＸＲＡ、ＳＥＬＰＬＧ、ＳＬＡ、ＳＬＣ７Ａ１１、ＳＬＣ７Ａ５、ＳＯＣＳ１、ＳＴ３ＧＡＬ４、ＳＴＫ１７Ｂ、ＴＡＬ１、ＴＩＭＰ３、ＴＭＥＭ１０４、ＴＮＦ、ＴＳＣ２２Ｄ１、ＴＳＣ２２Ｄ３、ＺＢＴＢ１６及びＺＣＣＨＣ５からなる群から選択されることと、
    ｉｉｉ． 工程（ｉｉ）において判定された前記発現レベル又は量が対応する正常細胞の範囲外である、例えば対応する正常細胞において見られるものを上回る若しくは下回る、又は患者に対する臨床的利益の増大若しくは減少と関連する或る特定の量を上回る若しくは下回るか否かを決定することと、
    ｉｖ． 任意に、前記患者を任意にその薬学的に許容可能な組成物中の有効量のコルチスタチン、又はその薬学的に許容可能な塩若しくはオキシドで治療することと、
    を含む、方法。
  5. コルチスタチンによる治療に対して腫瘍又は癌を有する患者を選択する方法であって、
    ｉ． 前記患者の腫瘍又は癌のサンプルを得ることと、
    ｉｉ． 前記患者に由来する生体サンプルにおける１つ以上のバイオマーカーの発現レベル又は量を検出することであって、該バイオマーカーがＡＣＳＬ１、ＡＤＯＲＡ２Ｂ、ＡＤＲＢ１、ＡＭＰＤ３、ＡＲＲＤＣ４、ＢＣＬ２、ＢＣＬ２Ａ１、ＣＢＦβ、ＣＣＮＡ１、ＣＤ２４４、ＣＤ４４、ＣＤＣ４２ＥＰ３、Ｃ／ＥＢＰα、ＣＥＣＲ６、ＣＦＬＡＲ、ＣＩＳＨ、ＣＳＦ１、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＲ４、ＣＹＴＩＰ、ＤＵＳＰ１０、Ｅ２Ｆ８、ＥＭＢ、ＥＭＲ２、ＥＴＳ１、ＥＴＳ２、ＦＡＭ１０７Ｂ、ＦＡＭ４６Ａ、ＦＣＥＲ１Ａ、ＦＣＧＲ１Ｂ、ＦＬＩ１、ＦＯＧ１、ＦＯＳＬ２、ＧＡＢ２、ＧＡＳ７、ＧＡＴＡ１、ＧＡＴＡ２、ＧＦＩ１Ｂ、ＧＭＰＲ、ＧＰＲ１８、ＧＰＲ１８３、ＨＢＢＰ１、ＨＥＢ、ＨＬＸ、ＨＭＧＣＳ１、ＩＧＦＢＰ４、ＩＧＦＢＰ５、ＩＬ１７ＲＡ、ＩＬ１ＲＡＰ、ＩＰＣＥＦ１、ＩＲＦ１、ＩＲＦ８、ＩＴＧＡ６、ＪＡＧ１、ＬＣＰ２、ＬＤＬＲ、ＬＩＭＡ１、ＬＭＯ２、ＬＲＲＣ３３、ＬＴＢ、ＭＢＰ、ＭＩＣＡＬ２、ＭＹＣＮ、ＭＹＯ１Ｇ、ＮＦＥ２、ＮＯＴＣＨ２、ＮＲＰ１、Ｐ２ＲＹ２、ＰＡＧ１、ＰＬＡＣ８、ＰＬＥＫ、ＰＬＸＮＣ１、ＰＭＰ２２、ＰＴＰＲＥ、ＰＵ．１、ＰＸＫ、ＲＡＢ２７Ａ、ＲＡＳＡ３、ＲＧＳ１６、ＲＨＯＨ、ＲＮＦ２４、ＲＸＲＡ、ＳＥＬＰＬＧ、ＳＬＡ、ＳＬＣ７Ａ１１、ＳＬＣ７Ａ５、ＳＯＣＳ１、ＳＴ３ＧＡＬ４、ＳＴＫ１７Ｂ、ＴＡＬ１、ＴＩＭＰ３、ＴＭＥＭ１０４、ＴＮＦ、ＴＳＣ２２Ｄ１、ＴＳＣ２２Ｄ３、ＺＢＴＢ１６及びＺＣＣＨＣ５からなる群から選択されることと、
    ｉｉｉ． 工程（ｉｉ）において決定される発現と、コルチスタチンに対する応答を示す代表数の患者又は予測動物モデル及びコルチスタチンに対する応答を示さない又は応答が不良な代表数の患者を含む対照サンプルセットにおける同じ遺伝子の発現とを比較して、前記患者がコルチスタチン療法に応答するかを決定することと、
    ｉｖ． 前記患者が前記療法に応答することが決定された場合に、任意にその薬学的に許容可能な組成物中の有効量のコルチスタチン、又はその薬学的に許容可能な塩若しくはオキシドを投与することと、
    を含む、方法。
  6. ＲＵＮＸ１経路障害の診断用の選択される前記遺伝子（複数の場合もある）の発現レベルを判定するキットを更に含み、該キットが該遺伝子によって特異的にコードされるＲＮＡに相補的なＤＮＡを増幅するプライマー、及び任意に熱安定性ＤＮＡポリメラーゼを含む、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
  7. 前記プライマーが各々、選択される前記遺伝子（複数の場合もある）によってコードされるＲＮＡ又はその相補体に標準のストリンジェントな条件下でハイブリダイズする、請求項６に記載の方法。
  8. 選択される前記バイオマーカーがＧＡＴＡ１、ＧＡＴＡ２、Ｃ／ＥＢＰα、ＦＬＩ１、ＦＯＧ１、ＥＴＳ１、ＰＵ．１、ＲＵＮＸ１及びＣＢＦαの１つ又は組合せである、請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。
  9. 選択される前記バイオマーカーがＢＣＬ２、ＣＣＮＡ１、ＣＤ４４、Ｃ／ＥＢＰα、ＣＢＦβ、ＣＳＦ１、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＲ４、ＥＴＳ１、ＥＴＳ２、ＦＬＩ１、ＦＯＧ１、ＦＣＥＲ１Ａ、ＧＡＴＡ１、ＧＡＴＡ２、ＧＦＩ１Ｂ、ＨＥＢ、ＩＲＦ１、ＩＲＦ８、ＪＡＧ１、ＬＭＯ２、ＬＴＢ、ＮＦＥ２、ＮＯＴＣＨ２、ＰＵ．１、ＳＬＡ、ＳＯＣＳ１、ＴＡＬ１及びＴＮＦの１つ又は組合せである、請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。
  10. 選択される前記バイオマーカーが構成的ＳＴＡＴ１−ｐＳ７２７、ＷＴ１突然変異、ＴＥＴ２突然変異、ＩＤＨ１突然変異、ＩＤＨ２突然変異、ＭＬＬ転位、Ｃ／ＥＢＰα突然変異、ＣＢＦβ転位、ＰＵ．１突然変異、ＧＡＴＡ １又は２突然変異、ＥＲＧ転座、ＴＬＸ１過剰発現及びＴＬＸ３活性化の１つ又は組合せである、請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。
  11. 請求項４、８、９及び１０のいずれか一項に記載のリストから独立して選択される少なくとも２つのバイオマーカーを使用することを更に含む、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の方法。
  12. 請求項４、８、９及び１０のいずれか一項に記載のリストから独立して選択される少なくとも３つのバイオマーカーを使用することを更に含む、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の方法。
  13. 請求項４、８、９及び１０のいずれか一項に記載のリストから独立して選択される少なくとも４つのバイオマーカーを使用することを更に含む、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の方法。
  14. 前記腫瘍又は癌が造血系のものである、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の方法。
  15. 前記造血系腫瘍若しくは癌が急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ芽球性白血病（ＣＬＬ）、Ｂ細胞急性リンパ芽球性白血病（Ｂ−ＡＬＬ）、小児Ｂ−ＡＬＬ、慢性骨髄性白血病、急性単球性白血病、急性巨核芽球性白血病、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、バーキットリンパ腫、ＡＩＤＳ関連リンパ腫、慢性骨髄増殖性障害、原発性中枢神経系リンパ腫、Ｔ細胞リンパ腫、有毛細胞白血病及び多発性骨髄腫（ＭＭ）から選択されるか、又は前記細胞が骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）に見られるような造血器腫瘍若しくは癌の前駆体細胞である、請求項１４に記載の方法。
  16. 前記腫瘍又は癌が非造血系のものである、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の方法。
  17. 前記腫瘍又は癌が乳癌、卵巣癌、類内膜癌、扁平上皮癌、血管肉腫、結腸癌、胃腸腫瘍、転移傾向性固形腫瘍、明細胞癌、腎細胞癌又は食道癌である、請求項１６に記載の方法。
  18. 前記患者に投与されるコルチスタチンが式（Ａ−１）、（Ａ−１’）、（Ａ−１’’）、（Ａ−２’）、（Ａ−２’’）、（Ａ−３’）、（Ａ−３’’）、（Ｄ１’）、（Ｄ１’’）、（Ｄ２’）、（Ｄ２’’）、（Ｅ１’）、（Ｅ１’’）、（Ｅ２’）、（Ｅ２’’）、（Ｇ１’）又は（Ｇ１’’）の化合物から選択される、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の方法。
  19. 前記患者に投与されるコルチスタチンが、
    である、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の方法。
  20. 前記患者に投与されるコルチスタチンが天然コルチスタチンである、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の方法。
  21. 前記患者に投与されるコルチスタチンが、薬学的に許容可能な既知のコルチスタチン誘導体から選択される、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の方法。
  22. 前記ＲＵＮＸ１障害がＲＵＮＸ１点突然変異、ＲＵＮＸ１遺伝子が関与する染色体転座、又はＲＵＮＸ１タンパク質の不安定化若しくは分解の増大をもたらす突然変異の結果である、請求項１〜２１のいずれか一項に記載の方法。
  23. ＲＵＮＸ１転写因子障害が、ＲＵＮＸ１の制御下の遺伝子の発現の減少をもたらす、請求項１〜２２のいずれか一項に記載の方法。
  24. コルチスタチン療法に応答する患者を標的化選択及び治療する方法であって、（ｉ）前記患者がＥＲ陽性、ＶＨＬ突然変異の機能喪失（ＶＨＬ陰性）、ＨＥＲ２過剰発現、ＥＧＦＲ突然変異、ＭＥＴ突然変異、神経芽細胞腫のバイオマーカー；ＥＷＳ−ＦＬＩ１、ＳＴＡＴ１−ｐＳ７２７、ＳＴＡＴ１、又はＥＴＶ１、ＦＬＩ１、ＳＭＣ３、ＳＭＣ１Ａ、ＲＡＤ２１若しくはＳＴＡＧ２における不活性化突然変異から選択されるバイオマーカーの１つ又は組合せを有するか否かを決定することと、そうであれば（ｉｉ）任意に薬学的に許容可能な組成物中の有効量のコルチスタチン又はその薬学的に許容可能な塩若しくはオキシドを投与することとを含む、方法。
  25. コルチスタチンによる治療に対する腫瘍又は癌を有する患者の応答を予測する方法であって、
    ｉ． 前記患者から前記腫瘍又は癌のサンプルを得ることと、
    ｉｉ． 患者に由来する生体サンプルにおける１つ以上のバイオマーカーの発現レベル又は量を決定することであって、該バイオマーカーがＥＲ陽性、ＶＨＬ突然変異の機能喪失（ＶＨＬ陰性）、ＨＥＲ２過剰発現、ＥＧＦＲ突然変異、ＭＥＴ突然変異、神経芽細胞腫のバイオマーカー；ＥＷＳ−ＦＬＩ１、ＳＴＡＴ１−ｐＳ７２７、ＳＴＡＴ１、又はＥＴＶ１、ＦＬＩ１、ＳＭＣ３、ＳＭＣ１Ａ、ＲＡＤ２１若しくはＳＴＡＧ２における不活性化突然変異からなる群から選択されることと、
    ｉｉｉ． 工程（ｉｉ）において判定された前記発現レベル又は量が対応する正常細胞の範囲外である、例えば対応する正常細胞において見られるものを上回る若しくは下回る、又は患者に対する臨床的利益の増大若しくは減少と関連する或る特定の量を上回る若しくは下回るか否かを決定することと、
    ｉｖ． 任意に、前記患者を任意にその薬学的に許容可能な組成物中の有効量のコルチスタチン、又はその薬学的に許容可能な塩若しくはオキシドで治療することと、
    を含む、方法。
  26. コルチスタチンによる治療に応答する患者を選択する方法であって、
    ｉ． 前記患者の腫瘍又は癌のサンプルを得ることと、
    ｉｉ． 前記患者に由来する生体サンプルにおける１つ以上のバイオマーカーの発現レベル又は量を検出することであって、該バイオマーカーがＥＲ陽性、ＶＨＬ突然変異の機能喪失（ＶＨＬ陰性）、ＨＥＲ２過剰発現、ＥＧＦＲ突然変異、ＭＥＴ突然変異、神経芽細胞腫のバイオマーカー；ＳＴＡＴ１−ｐＳ７２７、ＳＴＡＴ１、ＥＷＳ−ＦＬＩ１、又はＥＴＶ１、ＦＬＩ１、ＳＭＣ３、ＳＭＣ１Ａ、ＲＡＤ２１若しくはＳＴＡＧ２における不活性化突然変異からなる群から選択されることと、
    ｉｉｉ． 工程（ｉｉ）において決定される発現と、コルチスタチンに対する応答を示す代表数の患者又は予測動物モデル及びコルチスタチンに対する応答を示さない又は応答が不良な代表数の患者を含む対照サンプルセットにおける同じ遺伝子の発現とを比較して、前記患者がコルチスタチン療法に応答するかを決定することと、
    ｉｖ． 前記患者が前記療法に応答することが決定された場合に、任意にその薬学的に許容可能な組成物中の有効量のコルチスタチン、又はその薬学的に許容可能な塩若しくはオキシドを投与することと、
    を含む、方法。
  27. 患者がコルチスタチン療法に首尾よく応答するか否かを決定するキットを使用することを更に含み、該キットがバイオマーカー若しくはバイオマーカーの組合せのポリヌクレオチドとストリンジェントな条件下でアニールするプローブ、又はバイオマーカータンパク質に結合する抗体を含む、請求項２４〜２６のいずれか一項に記載の方法。
  28. 選択される前記遺伝子の診断用のキットを更に含み、該診断用のキットが、該遺伝子によって特異的にコードされるＲＮＡに相補的なＤＮＡを増幅するプライマー及び任意に熱安定性ＤＮＡポリメラーゼを含む、請求項２４〜２７のいずれか一項に記載の方法。
  29. キットを更に含み、プライマーが各々、前記遺伝子によってコードされるＲＮＡ又はその相補体に標準のストリンジェントな条件下でハイブリダイズする、請求項２４〜２７のいずれか一項に記載の方法。
  30. 前記腫瘍又は癌が造血系のものである、請求項２４〜２７のいずれか一項に記載の方法。
  31. 前記造血系腫瘍若しくは癌が急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、Ｂ細胞急性リンパ芽球性白血病（Ｂ−ＡＬＬ）、小児Ｂ−ＡＬＬ、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ芽球性白血病（ＣＬＬ）、Ｂ細胞急性リンパ芽球性白血病（Ｂ−ＡＬＬ）、小児Ｂ−ＡＬＬ、慢性骨髄性白血病、急性単球性白血病、急性巨核芽球性白血病、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、バーキットリンパ腫、ＡＩＤＳ関連リンパ腫、慢性骨髄増殖性障害、原発性中枢神経系リンパ腫、Ｔ細胞リンパ腫、有毛細胞白血病及び多発性骨髄腫（ＭＭ）から選択されるか、又は前記細胞が骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）に見られるような造血器腫瘍又は癌の前駆体細胞である、請求項３０に記載の方法。
  32. 前記腫瘍又は癌が非造血系のものである、請求項２２〜２７のいずれか一項に記載の方法。
  33. 前記腫瘍又は癌が乳癌、卵巣癌、類内膜癌、扁平上皮癌、血管肉腫、結腸癌、胃腸腫瘍、転移傾向性固形腫瘍、明細胞癌、腎細胞癌又は食道癌である、請求項３２に記載の方法。
  34. 抗ＣＤＫ８／１９療法に応答する腫瘍又は癌を有する患者を標的化選択及び治療する方法であって、（ｉ）前記患者がＲＵＮＸ１経路障害を有するか否かを決定することと、そうであれば（ｉｉ）任意に薬学的に許容可能な組成物中の有効量のＣＤＫ８／１９阻害剤、又はその薬学的に許容可能な塩若しくはオキシドを投与することとを含む、方法。
  35. 患者においてＲＵＮＸ１障害腫瘍又は癌を治療する方法であって、有効量のＣＤＫ８／１９阻害剤を、ＲＵＮＸ１によって転写されるタンパク質の十分な上方調節をもたらし、細胞がより正常な、より低毒性の、より成熟した、又は細胞成長停止若しくはアポトーシスしたものとなるような前記腫瘍又は癌の分化を引き起こす方法及び投与量で投与することを含む、方法。
  36. ＣＤＫ８／１９阻害剤による治療に対する腫瘍又は癌を有する患者の応答を予測する方法であって、
    ｉ． 前記患者から前記腫瘍又は癌のサンプルを得ることと、
    ｉｉ． 患者に由来する生体サンプルにおける１つ以上のバイオマーカーの発現レベル又は量を決定することであって、該バイオマーカーがＡＣＳＬ１、ＡＤＯＲＡ２Ｂ、ＡＤＲＢ１、ＡＭＰＤ３、ＡＲＲＤＣ４、ＢＣＬ２、ＢＣＬ２Ａ１、ＣＢＦβ、ＣＣＮＡ１、ＣＤ２４４、ＣＤ４４、ＣＤＣ４２ＥＰ３、Ｃ／ＥＢＰα、ＣＥＣＲ６、ＣＦＬＡＲ、ＣＩＳＨ、ＣＳＦ１、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＲ４、ＣＹＴＩＰ、ＤＵＳＰ１０、Ｅ２Ｆ８、ＥＭＢ、ＥＭＲ２、ＥＴＳ１、ＥＴＳ２、ＦＡＭ１０７Ｂ、ＦＡＭ４６Ａ、ＦＣＥＲ１Ａ、ＦＣＧＲ１Ｂ、ＦＬＩ１、ＦＯＧ１、ＦＯＳＬ２、ＧＡＢ２、ＧＡＳ７、ＧＡＴＡ１、ＧＡＴＡ２、ＧＦＩ１Ｂ、ＧＭＰＲ、ＧＰＲ１８、ＧＰＲ１８３、ＨＢＢＰ１、ＨＥＢ、ＨＬＸ、ＨＭＧＣＳ１、ＩＧＦＢＰ４、ＩＧＦＢＰ５、ＩＬ１７ＲＡ、ＩＬ１ＲＡＰ、ＩＰＣＥＦ１、ＩＲＦ１、ＩＲＦ８、ＩＴＧＡ６、ＪＡＧ１、ＬＣＰ２、ＬＤＬＲ、ＬＩＭＡ１、ＬＭＯ２、ＬＲＲＣ３３、ＬＴＢ、ＭＢＰ、ＭＩＣＡＬ２、ＭＹＣＮ、ＭＹＯ１Ｇ、ＮＦＥ２、ＮＯＴＣＨ２、ＮＲＰ１、Ｐ２ＲＹ２、ＰＡＧ１、ＰＬＡＣ８、ＰＬＥＫ、ＰＬＸＮＣ１、ＰＭＰ２２、ＰＴＰＲＥ、ＰＵ．１、ＰＸＫ、ＲＡＢ２７Ａ、ＲＡＳＡ３、ＲＧＳ１６、ＲＨＯＨ、ＲＮＦ２４、ＲＸＲＡ、ＳＥＬＰＬＧ、ＳＬＡ、ＳＬＣ７Ａ１１、ＳＬＣ７Ａ５、ＳＯＣＳ１、ＳＴ３ＧＡＬ４、ＳＴＫ１７Ｂ、ＴＡＬ１、ＴＩＭＰ３、ＴＭＥＭ１０４、ＴＮＦ、ＴＳＣ２２Ｄ１、ＴＳＣ２２Ｄ３、ＺＢＴＢ１６及びＺＣＣＨＣ５からなる群から選択されることと、
    ｉｉｉ． 工程（ｉｉ）において判定された発現レベル又は量が、対応する正常細胞の範囲外である、例えば対応する正常細胞において見られるものを上回る若しくは下回る、又は患者に対する臨床的利益の増大若しくは減少と関連する或る特定の量を上回る若しくは下回るか否かを決定することと、
    ｉｖ． 任意に、前記患者を任意にその薬学的に許容可能な組成物中の有効量のＣＤＫ８／１９阻害剤、又はその薬学的に許容可能な塩若しくはオキシドで治療することと、
    を含む、方法。
  37. ＣＤＫ８／１９阻害剤による治療に対して腫瘍又は癌を有する患者を選択する方法であって、
    ｉ． 前記患者の腫瘍又は癌のサンプルを得ることと、
    ｉｉ． 前記患者に由来する生体サンプルにおける１つ以上のバイオマーカーの発現レベル又は量を検出することであって、該バイオマーカーがＡＣＳＬ１、ＡＤＯＲＡ２Ｂ、ＡＤＲＢ１、ＡＭＰＤ３、ＡＲＲＤＣ４、ＢＣＬ２、ＢＣＬ２Ａ１、ＣＢＦβ、ＣＣＮＡ１、ＣＤ２４４、ＣＤ４４、ＣＤＣ４２ＥＰ３、Ｃ／ＥＢＰα、ＣＥＣＲ６、ＣＦＬＡＲ、ＣＩＳＨ、ＣＳＦ１、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＲ４、ＣＹＴＩＰ、ＤＵＳＰ１０、Ｅ２Ｆ８、ＥＭＢ、ＥＭＲ２、ＥＴＳ１、ＥＴＳ２、ＦＡＭ１０７Ｂ、ＦＡＭ４６Ａ、ＦＣＥＲ１Ａ、ＦＣＧＲ１Ｂ、ＦＬＩ１、ＦＯＧ１、ＦＯＳＬ２、ＧＡＢ２、ＧＡＳ７、ＧＡＴＡ１、ＧＡＴＡ２、ＧＦＩ１Ｂ、ＧＭＰＲ、ＧＰＲ１８、ＧＰＲ１８３、ＨＢＢＰ１、ＨＥＢ、ＨＬＸ、ＨＭＧＣＳ１、ＩＧＦＢＰ４、ＩＧＦＢＰ５、ＩＬ１７ＲＡ、ＩＬ１ＲＡＰ、ＩＰＣＥＦ１、ＩＲＦ１、ＩＲＦ８、ＩＴＧＡ６、ＪＡＧ１、ＬＣＰ２、ＬＤＬＲ、ＬＩＭＡ１、ＬＭＯ２、ＬＲＲＣ３３、ＬＴＢ、ＭＢＰ、ＭＩＣＡＬ２、ＭＹＣＮ、ＭＹＯ１Ｇ、ＮＦＥ２、ＮＯＴＣＨ２、ＮＲＰ１、Ｐ２ＲＹ２、ＰＡＧ１、ＰＬＡＣ８、ＰＬＥＫ、ＰＬＸＮＣ１、ＰＭＰ２２、ＰＴＰＲＥ、ＰＵ．１、ＰＸＫ、ＲＡＢ２７Ａ、ＲＡＳＡ３、ＲＧＳ１６、ＲＨＯＨ、ＲＮＦ２４、ＲＸＲＡ、ＳＥＬＰＬＧ、ＳＬＡ、ＳＬＣ７Ａ１１、ＳＬＣ７Ａ５、ＳＯＣＳ１、ＳＴ３ＧＡＬ４、ＳＴＫ１７Ｂ、ＴＡＬ１、ＴＩＭＰ３、ＴＭＥＭ１０４、ＴＮＦ、ＴＳＣ２２Ｄ１、ＴＳＣ２２Ｄ３、ＺＢＴＢ１６及びＺＣＣＨＣ５からなる群から選択されることと、
    ｉｉｉ． 工程（ｉｉ）において決定される発現と、ＣＤＫ８／１９阻害剤に対する応答を示す代表数の患者又は予測動物モデル及びＣＤＫ８／１９阻害剤に対する応答を示さない又は応答が不良な代表数の患者を含む対照サンプルセットにおける同じ遺伝子の発現とを比較して、前記患者が抗ＣＤＫ８／１９療法に応答するかを決定することと、
    ｉｖ． 前記患者が前記療法に応答することが決定された場合に、任意にその薬学的に許容可能な組成物中の有効量のＣＤＫ８／１９阻害剤、又はその薬学的に許容可能な塩若しくはオキシドを投与することと、
    を含む、方法。
  38. 患者が抗ＣＤＫ８／１９療法に首尾よく応答するか否かを決定するキットを使用することを更に含み、該キットがバイオマーカー若しくはバイオマーカーの組合せのポリヌクレオチドとストリンジェントな条件下でアニールするプローブ、又はバイオマーカータンパク質に結合する抗体を含む、請求項３４〜３７のいずれか一項に記載の方法。
  39. ＲＵＮＸ１経路障害の診断用の選択される遺伝子のセット、該遺伝子によって特異的にコードされるＲＮＡに相補的なＤＮＡを増幅するプライマー、及び任意に熱安定性ＤＮＡポリメラーゼを含むキットを更に含む、請求項３４〜３８のいずれか一項に記載の方法。
  40. ＲＵＮＸ１経路障害の診断用の選択される遺伝子セットの各遺伝子について、該遺伝子によって特異的にコードされるＲＮＡに相補的なＤＮＡを増幅するプライマーからなるプライマーセットを含むキットを更に含み、前記プライマーが各々、前記遺伝子によってコードされるＲＮＡ又はその相補体に標準のストリンジェントな条件下でハイブリダイズする、請求項３４〜３８のいずれか一項に記載の方法。
  41. 選択される前記バイオマーカーがＧＡＴＡ１、ＧＡＴＡ２、Ｃ／ＥＢＰα、ＦＬＩ１、ＦＯＧ１、ＥＴＳ１、ＰＵ．１及びＣＢＦαの１つ又は組合せである、請求項３４〜４０のいずれか一項に記載の方法。
  42. 選択される前記バイオマーカーがＢＣＬ２、ＣＣＮＡ１、ＣＤ４４、Ｃ／ＥＢＰα、ＣＢＦβ、ＣＳＦ１、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＲ４、ＥＴＳ１、ＥＴＳ２、ＦＬＩ１、ＦＯＧ１、ＦＣＥＲ１Ａ、ＧＡＴＡ１、ＧＡＴＡ２、ＧＦＩ１Ｂ、ＨＥＢ、ＩＲＦ１、ＩＲＦ８、ＪＡＧ１、ＬＭＯ２、ＬＴＢ、ＮＦＥ２、ＮＯＴＣＨ２、ＰＵ．１、ＳＬＡ、ＳＯＣＳ１、ＴＡＬ１及びＴＮＦの１つ又は組合せである、請求項３４〜４０のいずれか一項に記載の方法。
  43. 選択される前記バイオマーカーが構成的ＳＴＡＴ１−ｐＳ７２７、ＷＴ１突然変異、ＴＥＴ２突然変異、ＩＤＨ１突然変異、ＩＤＨ２突然変異、ＭＬＬ転位、Ｃ／ＥＢＰα突然変異、ＣＢＦβ転位、ＰＵ．１突然変異、ＧＡＴＡ １又は２突然変異、ＥＲＧ転座、ＴＬＸ１過剰発現及びＴＬＸ３活性化の１つ以上である、請求項３４〜４０のいずれか一項に記載の方法。
  44. 請求項３７、４１及び４２のいずれか一項に記載のリストから独立して選択される少なくとも２つのバイオマーカーを使用することを更に含む、請求項３４〜４０のいずれか一項に記載の方法。
  45. 請求項３７、４１及び４２のいずれか一項に記載のリストから独立して選択される少なくとも３つのバイオマーカーを使用することを更に含む、請求項３４〜４３のいずれか一項に記載の方法。
  46. 請求項３７、４１及び４２のいずれか一項に記載のリストから独立して選択される少なくとも４つのバイオマーカーを使用することを更に含む、請求項３４〜４３のいずれか一項に記載の方法。
  47. 患者がＣＤＫ８／１９療法に首尾よく応答するか否かを決定するキットを使用することを更に含み、該キットがバイオマーカー若しくはバイオマーカーの組合せのポリヌクレオチドとストリンジェントな条件下でアニールするプローブ、又はバイオマーカータンパク質に結合する抗体を含む、請求項３４〜４６のいずれか一項に記載の方法。
  48. ＣＤＫ８／１９阻害剤による治療に対する腫瘍又は癌を有する患者の応答を予測する方法であって、
    ｉ． 前記患者から前記腫瘍又は癌のサンプルを得ることと、
    ｉｉ． 患者に由来する生体サンプルにおける１つ以上のバイオマーカーの発現レベル又は量を決定することであって、該バイオマーカーがＥＲ陽性、ＶＨＬ突然変異の機能喪失（ＶＨＬ陰性）、ＨＥＲ２過剰発現、ＥＧＦＲ突然変異、ＭＥＴ突然変異、神経芽細胞腫のバイオマーカー；ＥＷＳ−ＦＬＩ１、ＳＴＡＴ１−ｐＳ７２７、ＳＴＡＴ１、又はＥＴＶ１、ＦＬＩ１、ＳＭＣ３、ＳＭＣ１Ａ、ＲＡＤ２１若しくはＳＴＡＧ２における不活性化突然変異からなる群から選択されることと、
    ｉｉｉ． 工程（ｉｉ）において判定された発現レベル又は量が、対応する正常細胞において見られるものを上回る又は下回る、例えば患者に対する臨床的利益の増大又は減少と関連する或る特定の量を上回る又は下回るか否かを決定することと、
    ｉｖ． 任意に、前記患者を任意にその薬学的に許容可能な組成物中の有効量のＣＤＫ８／１９阻害剤、又はその薬学的に許容可能な塩若しくはオキシドで治療することと、
    を含む、方法。
  49. ＣＤＫ８／１９阻害剤による治療に応答する腫瘍又は癌を有する患者を選択する方法であって、
    ｉ． 前記患者の腫瘍又は癌のサンプルを得ることと、
    ｉｉ． 前記患者に由来する生体サンプルにおける１つ以上のバイオマーカーの発現レベル又は量を検出することであって、該バイオマーカーがＥＲ陽性、ＶＨＬ突然変異の機能喪失（ＶＨＬ陰性）、ＨＥＲ２過剰発現、ＥＧＦＲ突然変異、ＭＥＴ突然変異、神経芽細胞腫のバイオマーカー；ＥＷＳ−ＦＬＩ１、ＳＴＡＴ１−ｐＳ７２７、ＳＴＡＴ１、又はＥＴＶ１、ＦＬＩ１、ＳＭＣ３、ＳＭＣ１Ａ、ＲＡＤ２１若しくはＳＴＡＧ２における不活性化突然変異からなる群から選択されることと、
    ｉｉｉ． 工程（ｉｉ）において決定される発現と、ＣＤＫ８／１９阻害剤に対する応答を示す代表数の患者又は予測動物モデル及びＣＤＫ８／１９阻害剤に対する応答を示さない又は応答が不良な代表数の患者を含む対照サンプルセットにおける同じ遺伝子の発現とを比較して、前記患者がコルチスタチン療法に応答するかを決定することと、
    ｉｖ． 前記患者が前記療法に応答することが決定された場合に、任意にその薬学的に許容可能な組成物中の有効量のＣＤＫ８／１９阻害剤、又はその薬学的に許容可能な塩若しくはオキシドを投与することと、
    を含む、方法。
  50. 選択される前記遺伝子の診断用のキットを更に含み、該診断用のキットが該遺伝子によって特異的にコードされるＲＮＡに相補的なＤＮＡを増幅するプライマー及び任意に熱安定性ＤＮＡポリメラーゼを含む、請求項４８又は４９に記載の方法。
  51. 選択される遺伝子セットの各遺伝子について、該遺伝子によって特異的にコードされるＲＮＡに相補的なＤＮＡを増幅するプライマーからなるプライマーセットを含むキットを更に含み、該プライマーが各々、前記遺伝子によってコードされるＲＮＡ又はその相補体に標準のストリンジェントな条件下でハイブリダイズする、請求項４８又は４９に記載の方法。
  52. 前記腫瘍又は癌が造血系のものである、請求項４８〜５１のいずれか一項に記載の方法。
  53. 前記造血系腫瘍若しくは癌が急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ芽球性白血病（ＣＬＬ）、Ｂ細胞急性リンパ芽球性白血病（Ｂ−ＡＬＬ）、小児Ｂ−ＡＬＬ、慢性骨髄性白血病、急性単球性白血病、急性巨核芽球性白血病、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、バーキットリンパ腫、ＡＩＤＳ関連リンパ腫、慢性骨髄増殖性障害、原発性中枢神経系リンパ腫、Ｔ細胞リンパ腫、有毛細胞白血病及び多発性骨髄腫（ＭＭ）から選択されるか、又は前記細胞が骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）に見られるような造血器腫瘍若しくは癌の前駆体細胞である、請求項５２に記載の方法。
  54. 前記腫瘍又は癌が非造血系のものである、請求項４８〜５１のいずれか一項に記載の方法。
  55. 前記腫瘍又は癌が乳癌、卵巣癌、類内膜癌、扁平上皮癌、血管肉腫、結腸癌、胃腸腫瘍、転移傾向性固形腫瘍、明細胞癌、腎細胞癌又は食道癌である、請求項５４に記載の方法。
  56. 前記患者を第２の活性剤で治療することを更に含む、請求項１〜５５のいずれか一項に記載の方法。
  57. 前記患者を第２の活性剤で治療することを更に含み、該第２の活性剤がＢＥＴ阻害剤、ＰＩ３Ｋ阻害剤、Ｒａｆ阻害剤、ＢＴＫ阻害剤、Ｂｃｌ−２阻害剤、ＣＤＫ７阻害剤、ＭＥＫ阻害剤又はＳｙｋ阻害剤から選択される、請求項１〜５５のいずれか一項に記載の方法。
  58. 前記患者を第２の活性剤で治療することを更に含み、該第２の活性剤がニボルマブ（BMS）、ペムブロリズマブ（Merck）、ピディリズマブ（CureTech／Teva）、ＡＭＰ−２４４（Amplimmune／GSK）、ＢＭＳ−９３６５５９（BMS）及びＭＥＤＩ４７３６（Roche／Genentech）から選択されるＰＤ−１阻害剤である、請求項１〜５５のいずれか一項に記載の方法。
  59. 前記患者を少なくとも１つの付加的な活性剤で治療することを更に含み、第２の活性剤がＪＱ１、Ｉ−ＢＥＴ １５１（ＧＳＫ１２１０１５１Ａとしても知られる）、Ｉ−ＢＥＴ ７６２（ＧＳＫ５２５７６２としても知られる）、ＯＴＸ−０１５（ＭＫ−８２６８としても知られる、ＩＵＰＡＣ ６Ｈ−チエノ［３，２−ｆ］［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］［１，４］ジアゼピン−６−アセトアミド、４−（４−クロロフェニル）−Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）−２，３，９−トリチメル−）、ＴＥＮ−０１０、ＣＰＩ−２０３、ＣＰＩ−０６１０、ＲＶＸ−２０８及びＬＹ２９４００２から選択されるＢＥＴ阻害剤である、請求項１〜５５のいずれか一項に記載の方法。
  60. 前記患者を第２の活性剤で治療することを更に含み、付加的な活性剤が免疫調節剤である、請求項１〜５５のいずれか一項に記載の方法。
  61. 付加的な活性剤が抗ＰＤ１抗体である、請求項１〜５５のいずれか一項に記載の方法。
  62. 付加的な活性剤がイピリムマブ（Yervoy）又はトレメリムマブ等の抗ＣＴＬＡ−４化合物である、請求項１〜５５のいずれか一項に記載の方法。
  63. 前記患者が腫瘍を有する、請求項１〜５５のいずれか一項に記載の方法。
  64. 前記患者が癌を有する、請求項１〜５５のいずれか一項に記載の方法。
  65. 上記実施形態のいずれかに記載のキット。
  66. コルチスタチンと少なくとも１つの他の活性剤との組み合わせ投薬形態であって、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の方法を患者選択に用いる診断と組み合わせて使用される、組み合わせ投薬形態。
  67. コルチスタチン療法に応答する腫瘍又は癌を有する患者を標的化選択及び治療する方法に使用される、任意にその薬学的に許容可能な組成物中のコルチスタチン、又はその薬学的に許容可能な塩若しくはオキシドであって、前記方法が（ｉ）前記患者がＲＵＮＸ１経路障害を有するか否かを決定することと、そうであれば（ｉｉ）有効量の化合物を投与することとを含む、コルチスタチン、又はその薬学的に許容可能な塩若しくはオキシド。
  68. 患者においてＲＵＮＸ１障害腫瘍又は癌を治療する方法に使用されるコルチスタチンであって、前記方法が、有効量の化合物を、ＲＵＮＸ１によって通常転写されるタンパク質の十分な上方調節をもたらし、細胞がより正常な、より低毒性の、より成熟した、又は成長停止若しくはアポトーシスしたものとなるような前記腫瘍又は癌の分化を引き起こす方法及び投与量で投与することを含む、コルチスタチン。
  69. 化合物による治療に対する腫瘍又は癌を有する患者の応答を予測する方法に使用される、任意にその薬学的に許容可能な組成物中のコルチスタチン、又はその薬学的に許容可能な塩若しくはオキシドであって、前記方法が、
    ｉ． 前記患者から前記腫瘍又は癌のサンプルを得ることと、
    ｉｉ． 患者に由来する生体サンプルにおける１つ以上のバイオマーカーの発現レベル又は量を決定することであって、該バイオマーカーがＡＣＳＬ１、ＡＤＯＲＡ２Ｂ、ＡＤＲＢ１、ＡＭＰＤ３、ＡＲＲＤＣ４、ＢＣＬ２、ＢＣＬ２Ａ１、ＣＢＦβ、ＣＣＮＡ１、ＣＤ２４４、ＣＤ４４、ＣＤＣ４２ＥＰ３、Ｃ／ＥＢＰα、ＣＥＣＲ６、ＣＦＬＡＲ、ＣＩＳＨ、ＣＳＦ１、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＲ４、ＣＹＴＩＰ、ＤＵＳＰ１０、Ｅ２Ｆ８、ＥＭＢ、ＥＭＲ２、ＥＴＳ１、ＥＴＳ２、ＦＡＭ１０７Ｂ、ＦＡＭ４６Ａ、ＦＣＥＲ１Ａ、ＦＣＧＲ１Ｂ、ＦＬＩ１、ＦＯＧ１、ＦＯＳＬ２、ＧＡＢ２、ＧＡＳ７、ＧＡＴＡ１、ＧＡＴＡ２、ＧＦＩ１Ｂ、ＧＭＰＲ、ＧＰＲ１８、ＧＰＲ１８３、ＨＢＢＰ１、ＨＥＢ、ＨＬＸ、ＨＭＧＣＳ１、ＩＧＦＢＰ４、ＩＧＦＢＰ５、ＩＬ１７ＲＡ、ＩＬ１ＲＡＰ、ＩＰＣＥＦ１、ＩＲＦ１、ＩＲＦ８、ＩＴＧＡ６、ＪＡＧ１、ＬＣＰ２、ＬＤＬＲ、ＬＩＭＡ１、ＬＭＯ２、ＬＲＲＣ３３、ＬＴＢ、ＭＢＰ、ＭＩＣＡＬ２、ＭＹＣＮ、ＭＹＯ１Ｇ、ＮＦＥ２、ＮＯＴＣＨ２、ＮＲＰ１、Ｐ２ＲＹ２、ＰＡＧ１、ＰＬＡＣ８、ＰＬＥＫ、ＰＬＸＮＣ１、ＰＭＰ２２、ＰＴＰＲＥ、ＰＵ．１、ＰＸＫ、ＲＡＢ２７Ａ、ＲＡＳＡ３、ＲＧＳ１６、ＲＨＯＨ、ＲＮＦ２４、ＲＸＲＡ、ＳＥＬＰＬＧ、ＳＬＡ、ＳＬＣ７Ａ１１、ＳＬＣ７Ａ５、ＳＯＣＳ１、ＳＴ３ＧＡＬ４、ＳＴＫ１７Ｂ、ＴＡＬ１、ＴＩＭＰ３、ＴＭＥＭ１０４、ＴＮＦ、ＴＳＣ２２Ｄ１、ＴＳＣ２２Ｄ３、ＺＢＴＢ１６及びＺＣＣＨＣ５からなる群から選択されることと、
    ｉｉｉ． 工程（ｉｉ）において判定された発現レベル又は量が、対応する正常細胞の範囲外である、例えば対応する正常細胞において見られるものを上回る若しくは下回る、又は患者に対する臨床的利益の増大若しくは減少と関連する或る特定の量を上回る若しくは下回るか否かを決定することと、
    ｉｖ． 任意に、前記患者を有効量の化合物で治療することと、
    を含む、コルチスタチン、又はその薬学的に許容可能な塩若しくはオキシド。
  70. コルチスタチンによる治療に対して腫瘍又は癌を有する患者を選択する方法に使用される、任意にその薬学的に許容可能な組成物中のコルチスタチン、又はその薬学的に許容可能な塩若しくはオキシドであって、前記方法が、
    ｉ． 前記患者の腫瘍又は癌のサンプルを得ることと、
    ｉｉ． 前記患者に由来する生体サンプルにおける１つ以上のバイオマーカーの発現レベル又は量を検出することであって、該バイオマーカーがＡＣＳＬ１、ＡＤＯＲＡ２Ｂ、ＡＤＲＢ１、ＡＭＰＤ３、ＡＲＲＤＣ４、ＢＣＬ２、ＢＣＬ２Ａ１、ＣＢＦβ、ＣＣＮＡ１、ＣＤ２４４、ＣＤ４４、ＣＤＣ４２ＥＰ３、Ｃ／ＥＢＰα、ＣＥＣＲ６、ＣＦＬＡＲ、ＣＩＳＨ、ＣＳＦ１、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＲ４、ＣＹＴＩＰ、ＤＵＳＰ１０、Ｅ２Ｆ８、ＥＭＢ、ＥＭＲ２、ＥＴＳ１、ＥＴＳ２、ＦＡＭ１０７Ｂ、ＦＡＭ４６Ａ、ＦＣＥＲ１Ａ、ＦＣＧＲ１Ｂ、ＦＬＩ１、ＦＯＧ１、ＦＯＳＬ２、ＧＡＢ２、ＧＡＳ７、ＧＡＴＡ１、ＧＡＴＡ２、ＧＦＩ１Ｂ、ＧＭＰＲ、ＧＰＲ１８、ＧＰＲ１８３、ＨＢＢＰ１、ＨＥＢ、ＨＬＸ、ＨＭＧＣＳ１、ＩＧＦＢＰ４、ＩＧＦＢＰ５、ＩＬ１７ＲＡ、ＩＬ１ＲＡＰ、ＩＰＣＥＦ１、ＩＲＦ１、ＩＲＦ８、ＩＴＧＡ６、ＪＡＧ１、ＬＣＰ２、ＬＤＬＲ、ＬＩＭＡ１、ＬＭＯ２、ＬＲＲＣ３３、ＬＴＢ、ＭＢＰ、ＭＩＣＡＬ２、ＭＹＣＮ、ＭＹＯ１Ｇ、ＮＦＥ２、ＮＯＴＣＨ２、ＮＲＰ１、Ｐ２ＲＹ２、ＰＡＧ１、ＰＬＡＣ８、ＰＬＥＫ、ＰＬＸＮＣ１、ＰＭＰ２２、ＰＴＰＲＥ、ＰＵ．１、ＰＸＫ、ＲＡＢ２７Ａ、ＲＡＳＡ３、ＲＧＳ１６、ＲＨＯＨ、ＲＮＦ２４、ＲＸＲＡ、ＳＥＬＰＬＧ、ＳＬＡ、ＳＬＣ７Ａ１１、ＳＬＣ７Ａ５、ＳＯＣＳ１、ＳＴ３ＧＡＬ４、ＳＴＫ１７Ｂ、ＴＡＬ１、ＴＩＭＰ３、ＴＭＥＭ１０４、ＴＮＦ、ＴＳＣ２２Ｄ１、ＴＳＣ２２Ｄ３、ＺＢＴＢ１６及びＺＣＣＨＣ５からなる群から選択されることと、
    ｉｉｉ． 工程（ｉｉ）において決定される発現と、コルチスタチンに対する応答を示す代表数の患者又は予測動物モデル及びコルチスタチンに対する応答を示さない又は応答が不良な代表数の患者を含む対照サンプルセットにおける同じ遺伝子の発現とを比較して、前記患者がコルチスタチン療法に応答するかを決定することと、
    ｉｖ． 前記患者が前記療法に応答することが決定された場合に、有効量の化合物を投与することと、
    を含む、コルチスタチン、又はその薬学的に許容可能な塩若しくはオキシド。
  71. コルチスタチン療法に応答する患者を標的化選択及び治療する方法に使用される、任意にその薬学的に許容可能な組成物中のコルチスタチン、又はその薬学的に許容可能な塩若しくはオキシドであって、前記方法が、（ｉ）前記患者がＥＲ陽性、ＶＨＬ突然変異の機能喪失（ＶＨＬ陰性）、ＨＥＲ２過剰発現、ＥＧＦＲ突然変異、ＭＥＴ突然変異、神経芽細胞腫のバイオマーカー；ＥＷＳ−ＦＬＩ１、ＳＴＡＴ１−ｐＳ７２７、ＳＴＡＴ１、又はＥＴＶ１、ＦＬＩ１、ＳＭＣ３、ＳＭＣ１Ａ、ＲＡＤ２１若しくはＳＴＡＧ２における不活性化突然変異から選択されるバイオマーカーの１つ又は組合せを有するか否かを決定することと、そうであれば（ｉｉ）有効量の化合物を投与することとを含む、コルチスタチン、又はその薬学的に許容可能な塩若しくはオキシド。
  72. コルチスタチンによる治療に対する腫瘍又は癌を有する患者の応答を予測する方法に使用される、任意にその薬学的に許容可能な組成物中のコルチスタチン、又はその薬学的に許容可能な塩若しくはオキシドであって、前記方法が、
    ｉ． 前記患者から前記腫瘍又は癌のサンプルを得ることと、
    ｉｉ． 患者に由来する生体サンプルにおける１つ以上のバイオマーカーの発現レベル又は量を決定することであって、該バイオマーカーがＥＲ陽性、ＶＨＬ突然変異の機能喪失（ＶＨＬ陰性）、ＨＥＲ２過剰発現、ＥＧＦＲ突然変異、ＭＥＴ突然変異、神経芽細胞腫のバイオマーカー；ＥＷＳ−ＦＬＩ１、ＳＴＡＴ１−ｐＳ７２７、ＳＴＡＴ１、又はＥＴＶ１、ＦＬＩ１、ＳＭＣ３、ＳＭＣ１Ａ、ＲＡＤ２１若しくはＳＴＡＧ２における不活性化突然変異からなる群から選択されることと、
    ｉｉｉ． 工程（ｉｉ）において判定された発現レベル又は量が対応する正常細胞の範囲外である、例えば対応する正常細胞において見られるものを上回る若しくは下回る、又は患者に対する臨床的利益の増大若しくは減少と関連する或る特定の量を上回る若しくは下回るか否かを決定することと、
    ｉｖ． 任意に、前記患者を有効量の化合物で治療することと、
    を含む、コルチスタチン、又はその薬学的に許容可能な塩若しくはオキシド。
  73. コルチスタチンによる治療に応答する患者を選択する方法に使用される、任意にその薬学的に許容可能な組成物中のコルチスタチン、又はその薬学的に許容可能な塩若しくはオキシドであって、前記方法が、
    ｉ． 前記患者の腫瘍又は癌のサンプルを得ることと、
    ｉｉ． 前記患者に由来する生体サンプルにおける１つ以上のバイオマーカーの発現レベル又は量を検出することであって、該バイオマーカーがＥＲ陽性、ＶＨＬ突然変異の機能喪失（ＶＨＬ陰性）、ＨＥＲ２過剰発現、ＥＧＦＲ突然変異、ＭＥＴ突然変異、神経芽細胞腫のバイオマーカー；ＳＴＡＴ１−ｐＳ７２７、ＳＴＡＴ１、ＥＷＳ−ＦＬＩ１、又はＥＴＶ１、ＦＬＩ１、ＳＭＣ３、ＳＭＣ１Ａ、ＲＡＤ２１若しくはＳＴＡＧ２における不活性化突然変異からなる群から選択されることと、
    ｉｉｉ． 工程（ｉｉ）において決定される発現と、コルチスタチンに対する応答を示す代表数の患者又は予測動物モデル及びコルチスタチンに対する応答を示さない又は応答が不良な代表数の患者を含む対照サンプルセットにおける同じ遺伝子の発現とを比較して、前記患者がコルチスタチン療法に応答するかを決定することと、
    ｉｖ． 前記患者が前記療法に応答することが決定された場合に、有効量の化合物を投与することと、
    を含む、コルチスタチン、又はその薬学的に許容可能な塩若しくはオキシド。
  74. 抗ＣＤＫ８／１９療法に応答する腫瘍又は癌を有する患者を標的化選択及び治療する方法に使用される、任意にその薬学的に許容可能な組成物中のＣＤＫ８／１９阻害剤、又はその薬学的に許容可能な塩若しくはオキシドであって、前記方法が、（ｉ）該患者がＲＵＮＸ１経路障害を有するか否かを決定することと、そうであれば（ｉｉ）有効量の化合物を投与することとを含む、ＣＤＫ８／１９阻害剤、又はその薬学的に許容可能な塩若しくはオキシド。
  75. 患者においてＲＵＮＸ１障害腫瘍又は癌を治療する方法に使用されるＣＤＫ８／１９阻害剤であって、前記方法が、有効量の化合物を、ＲＵＮＸ１によって転写されるタンパク質の十分な上方調節をもたらし、細胞がより正常な、より低毒性の、より成熟した、又は細胞成長停止若しくはアポトーシスしたものとなるような前記腫瘍又は癌の分化を引き起こす方法及び投与量で投与することを含む、ＣＤＫ８／１９阻害剤。
  76. ＣＤＫ８／１９阻害剤による治療に対する腫瘍又は癌を有する患者の応答を予測する方法に使用される、任意にその薬学的に許容可能な組成物中のＣＤＫ８／１９阻害剤、又はその薬学的に許容可能な塩若しくはオキシドであって、前記方法が、
    ｉ． 前記患者から前記腫瘍又は癌のサンプルを得ることと、
    ｉｉ． 患者に由来する生体サンプルにおける１つ以上のバイオマーカーの発現レベル又は量を決定することであって、該バイオマーカーがＡＣＳＬ１、ＡＤＯＲＡ２Ｂ、ＡＤＲＢ１、ＡＭＰＤ３、ＡＲＲＤＣ４、ＢＣＬ２、ＢＣＬ２Ａ１、ＣＢＦβ、ＣＣＮＡ１、ＣＤ２４４、ＣＤ４４、ＣＤＣ４２ＥＰ３、Ｃ／ＥＢＰα、ＣＥＣＲ６、ＣＦＬＡＲ、ＣＩＳＨ、ＣＳＦ１、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＲ４、ＣＹＴＩＰ、ＤＵＳＰ１０、Ｅ２Ｆ８、ＥＭＢ、ＥＭＲ２、ＥＴＳ１、ＥＴＳ２、ＦＡＭ１０７Ｂ、ＦＡＭ４６Ａ、ＦＣＥＲ１Ａ、ＦＣＧＲ１Ｂ、ＦＬＩ１、ＦＯＧ１、ＦＯＳＬ２、ＧＡＢ２、ＧＡＳ７、ＧＡＴＡ１、ＧＡＴＡ２、ＧＦＩ１Ｂ、ＧＭＰＲ、ＧＰＲ１８、ＧＰＲ１８３、ＨＢＢＰ１、ＨＥＢ、ＨＬＸ、ＨＭＧＣＳ１、ＩＧＦＢＰ４、ＩＧＦＢＰ５、ＩＬ１７ＲＡ、ＩＬ１ＲＡＰ、ＩＰＣＥＦ１、ＩＲＦ１、ＩＲＦ８、ＩＴＧＡ６、ＪＡＧ１、ＬＣＰ２、ＬＤＬＲ、ＬＩＭＡ１、ＬＭＯ２、ＬＲＲＣ３３、ＬＴＢ、ＭＢＰ、ＭＩＣＡＬ２、ＭＹＣＮ、ＭＹＯ１Ｇ、ＮＦＥ２、ＮＯＴＣＨ２、ＮＲＰ１、Ｐ２ＲＹ２、ＰＡＧ１、ＰＬＡＣ８、ＰＬＥＫ、ＰＬＸＮＣ１、ＰＭＰ２２、ＰＴＰＲＥ、ＰＵ．１、ＰＸＫ、ＲＡＢ２７Ａ、ＲＡＳＡ３、ＲＧＳ１６、ＲＨＯＨ、ＲＮＦ２４、ＲＸＲＡ、ＳＥＬＰＬＧ、ＳＬＡ、ＳＬＣ７Ａ１１、ＳＬＣ７Ａ５、ＳＯＣＳ１、ＳＴ３ＧＡＬ４、ＳＴＫ１７Ｂ、ＴＡＬ１、ＴＩＭＰ３、ＴＭＥＭ１０４、ＴＮＦ、ＴＳＣ２２Ｄ１、ＴＳＣ２２Ｄ３、ＺＢＴＢ１６及びＺＣＣＨＣ５からなる群から選択されることと、
    ｉｉｉ． 工程（ｉｉ）において判定された発現レベル又は量が対応する正常細胞の範囲外である、例えば対応する正常細胞において見られるものを上回る若しくは下回る、又は患者に対する臨床的利益の増大若しくは減少と関連する或る特定の量を上回る若しくは下回るか否かを決定することと、
    ｉｖ． 任意に、前記患者を有効量の化合物で治療することと、
    を含む、ＣＤＫ８／１９阻害剤、又はその薬学的に許容可能な塩若しくはオキシド。
  77. ＣＤＫ８／１９阻害剤による治療に対して腫瘍又は癌を有する患者を選択する方法に使用される、任意にその薬学的に許容可能な組成物中のＣＤＫ８／１９阻害剤、又はその薬学的に許容可能な塩若しくはオキシドであって、前記方法が、
    ｉ． 前記患者の腫瘍又は癌のサンプルを得ることと、
    ｉｉ． 前記患者に由来する生体サンプルにおける１つ以上のバイオマーカーの発現レベル又は量を検出することであって、該バイオマーカーがＡＣＳＬ１、ＡＤＯＲＡ２Ｂ、ＡＤＲＢ１、ＡＭＰＤ３、ＡＲＲＤＣ４、ＢＣＬ２、ＢＣＬ２Ａ１、ＣＢＦβ、ＣＣＮＡ１、ＣＤ２４４、ＣＤ４４、ＣＤＣ４２ＥＰ３、Ｃ／ＥＢＰα、ＣＥＣＲ６、ＣＦＬＡＲ、ＣＩＳＨ、ＣＳＦ１、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＲ４、ＣＹＴＩＰ、ＤＵＳＰ１０、Ｅ２Ｆ８、ＥＭＢ、ＥＭＲ２、ＥＴＳ１、ＥＴＳ２、ＦＡＭ１０７Ｂ、ＦＡＭ４６Ａ、ＦＣＥＲ１Ａ、ＦＣＧＲ１Ｂ、ＦＬＩ１、ＦＯＧ１、ＦＯＳＬ２、ＧＡＢ２、ＧＡＳ７、ＧＡＴＡ１、ＧＡＴＡ２、ＧＦＩ１Ｂ、ＧＭＰＲ、ＧＰＲ１８、ＧＰＲ１８３、ＨＢＢＰ１、ＨＥＢ、ＨＬＸ、ＨＭＧＣＳ１、ＩＧＦＢＰ４、ＩＧＦＢＰ５、ＩＬ１７ＲＡ、ＩＬ１ＲＡＰ、ＩＰＣＥＦ１、ＩＲＦ１、ＩＲＦ８、ＩＴＧＡ６、ＪＡＧ１、ＬＣＰ２、ＬＤＬＲ、ＬＩＭＡ１、ＬＭＯ２、ＬＲＲＣ３３、ＬＴＢ、ＭＢＰ、ＭＩＣＡＬ２、ＭＹＣＮ、ＭＹＯ１Ｇ、ＮＦＥ２、ＮＯＴＣＨ２、ＮＲＰ１、Ｐ２ＲＹ２、ＰＡＧ１、ＰＬＡＣ８、ＰＬＥＫ、ＰＬＸＮＣ１、ＰＭＰ２２、ＰＴＰＲＥ、ＰＵ．１、ＰＸＫ、ＲＡＢ２７Ａ、ＲＡＳＡ３、ＲＧＳ１６、ＲＨＯＨ、ＲＮＦ２４、ＲＸＲＡ、ＳＥＬＰＬＧ、ＳＬＡ、ＳＬＣ７Ａ１１、ＳＬＣ７Ａ５、ＳＯＣＳ１、ＳＴ３ＧＡＬ４、ＳＴＫ１７Ｂ、ＴＡＬ１、ＴＩＭＰ３、ＴＭＥＭ１０４、ＴＮＦ、ＴＳＣ２２Ｄ１、ＴＳＣ２２Ｄ３、ＺＢＴＢ１６及びＺＣＣＨＣ５からなる群から選択されることと、
    ｉｉｉ． 工程（ｉｉ）において決定される発現と、ＣＤＫ８／１９阻害剤に対する応答を示す代表数の患者又は予測動物モデル及びＣＤＫ８／１９阻害剤に対する応答を示さない又は応答が不良な代表数の患者を含む対照サンプルセットにおける同じ遺伝子の発現とを比較して、前記患者が抗ＣＤＫ８／１９療法に応答するかを決定することと、
    ｉｖ． 前記患者が前記療法に応答することが決定された場合に、有効量の化合物を投与することと、
    を含む、ＣＤＫ８／１９阻害剤、又はその薬学的に許容可能な塩若しくはオキシド。
  78. ＣＤＫ８／１９阻害剤による治療に対する腫瘍又は癌を有する患者の応答を予測する方法に使用される、任意にその薬学的に許容可能な組成物中のＣＤＫ８／１９阻害剤、又はその薬学的に許容可能な塩若しくはオキシドであって、前記方法が、
    ｉ． 前記患者から前記腫瘍又は癌のサンプルを得ることと、
    ｉｉ． 患者に由来する生体サンプルにおける１つ以上のバイオマーカーの発現レベル又は量を決定することであって、該バイオマーカーがＥＲ陽性、ＶＨＬ突然変異の機能喪失（ＶＨＬ陰性）、ＨＥＲ２過剰発現、ＥＧＦＲ突然変異、ＭＥＴ突然変異、神経芽細胞腫のバイオマーカー；ＥＷＳ−ＦＬＩ１、ＳＴＡＴ１−ｐＳ７２７、ＳＴＡＴ１、又はＥＴＶ１、ＦＬＩ１、ＳＭＣ３、ＳＭＣ１Ａ、ＲＡＤ２１若しくはＳＴＡＧ２における不活性化突然変異からなる群から選択されることと、
    ｉｉｉ． 工程（ｉｉ）において判定された発現レベル又は量が対応する正常細胞において見られるものを上回る若しくは下回る、例えば患者に対する臨床的利益の増大若しくは減少と関連する或る特定の量を上回る若しくは下回るか否かを決定することと、
    ｉｖ． 任意に、前記患者を有効量の化合物で治療することと、
    を含む、ＣＤＫ８／１９阻害剤、又はその薬学的に許容可能な塩若しくはオキシド。
  79. ＣＤＫ８／１９阻害剤による治療に応答する腫瘍又は癌を有する患者を選択する方法に使用される、任意にその薬学的に許容可能な組成物中のＣＤＫ８／１９阻害剤、又はその薬学的に許容可能な塩若しくはオキシドであって、前記方法が、
    ｉ． 前記患者の腫瘍又は癌のサンプルを得ることと、
    ｉｉ． 前記患者に由来する生体サンプルにおける１つ以上のバイオマーカーの発現レベル又は量を検出することであって、該バイオマーカーがＥＲ陽性、ＶＨＬ突然変異の機能喪失（ＶＨＬ陰性）、ＨＥＲ２過剰発現、ＥＧＦＲ突然変異、ＭＥＴ突然変異、神経芽細胞腫のバイオマーカー；ＥＷＳ−ＦＬＩ１、ＳＴＡＴ１−ｐＳ７２７、ＳＴＡＴ１、又はＥＴＶ１、ＦＬＩ１、ＳＭＣ３、ＳＭＣ１Ａ、ＲＡＤ２１若しくはＳＴＡＧ２における不活性化突然変異からなる群から選択されることと、
    ｉｉｉ． 工程（ｉｉ）において決定される発現と、ＣＤＫ８／１９阻害剤に対する応答を示す代表数の患者又は予測動物モデル及びＣＤＫ８／１９阻害剤に対する応答を示さない又は応答が不良な代表数の患者を含む対照サンプルセットにおける同じ遺伝子の発現とを比較して、該患者がコルチスタチン療法に応答するかを決定することと、
    ｉｖ． 前記患者が前記療法に応答することが決定された場合に、有効量の化合物を投与することと、
    を含む、ＣＤＫ８／１９阻害剤、又はその薬学的に許容可能な塩若しくはオキシド。
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