ES2651858T3 - Derivados de amina cíclica de fenoxietilo y su actividad como moduladores del receptor EP4 - Google Patents

Derivados de amina cíclica de fenoxietilo y su actividad como moduladores del receptor EP4 Download PDF

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ES2651858T3 ES14827907.8T ES14827907T ES2651858T3 ES 2651858 T3 ES2651858 T3 ES 2651858T3 ES 14827907 T ES14827907 T ES 14827907T ES 2651858 T3 ES2651858 T3 ES 2651858T3
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Abstract

Un compuesto de fórmula:**Fórmula** en la que X es:**Fórmula** R es H, metilo, o etilo; R1 es metilo, cuando R2 es H, y R1 es H cuando R2 es metilo; R3 es H o F; R4 es H, F, o metilo; R5 es OH, metilo, metoxi, o F; R6 es H cuando R7 es OH, y R6 es F cuando R7 es F; y R8 y R9 son cada uno independientemente H o F; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Description

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Derivados de amina dclica de fenoxietilo y su actividad como moduladores del receptor EP4
La presente invencion se refiere a ciertos compuestos de fenoxietilo novedosos, a composiciones farmaceuticas que comprenden los compuestos, los compuestos para su uso en el tratamiento de trastornos fisiologicos, y a productos intermedios y procesos utiles en la smtesis de los compuestos.
La presente invencion esta en el campo del tratamiento de afecciones inflamatorias, tales como artritis, que incluye osteoartritis y artritis reumatoide, y que incluye adicionalmente dolor asociado con estas afecciones. La artritis afecta millones de pacientes solo en los Estados Unidos y es la principal causa de discapacidad. Los tratamientos a menudo incluyen NSAID (medicamentos antiinflamatorios no esteroideos) o inhibidores de COX-2, que pueden producir efectos secundarios cardiovasculares adversos. Como tal, los pacientes que tienen un perfil cardiovascular pobre, tal como hipertension, se pueden excluir de usar NSAIS o inhibidores de COX-2. Por lo tanto, subsiste la necesidad de un tratamiento alternativo de osteoartritis y artritis reumatoide, preferiblemente sin los efectos secundarios de los tratamientos actuales.
Se han identificado cuatro subtipos de receptores de prostaglandina E2(PGE2) como los siguientes: EP1, EP2, EP3 y EP4. Se ha descrito que el EP4 es el receptor primario implicado en el dolor inflamatorio de las articulaciones en modelos de roedores con artritis reumatoide y osteoartritis (vease J. Pharmacol. Exp. Ther., 325, 425 (2008)). Por lo tanto, un antagonista de EP4 selectivo puede ser util en el tratamiento de artritis, que incluye dolor artntico. Adicionalmente, se ha sugerido que dado que el antagonismo EP4 no interfiere con la biosmtesis de prostanoides, tales como PGI2 y TxA2, un antagonista selectivo de EP4 puede no poseer los posibles efectos secundarios cardiovasculares observados con los NSAID y los inhibidores de COX-2. (Vease, por ejemplo, Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 21, 484 (2011)).
El documento WO 2013/004290 divulga ciertos derivados de aminas dclicas que tienen actividad antagonista del receptor EP4. El documento WO 2013/004291 divulga ciertos derivados de aminas dclicas que tienen actividad agonista del receptor EP4.
La presente invencion proporciona ciertos compuestos novedosos que son inhibidores de EP4 y ciertos compuestos novedosos que son inhibidores selectivos de EP4 con respecto a EP1, EP2 y EP3. Ademas, la presente invencion proporciona ciertos compuestos novedosos con el potencial de efectos secundarios cardiovasculares o gastrointestinales reducidos en comparacion con los NSAID tradicionales.
De acuerdo con lo anterior, la presente invencion proporciona un compuesto de formula I:
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en la que X es:
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R es H, metilo, o etilo;
R1 es metilo, cuando R2 es H, y R1 es H cuando R2 es metilo;
R3 es H o F;
R4 es H, F, o metilo;
R5 es OH, metilo, metoxi, o F;
R6 es H cuando R7 es OH, y R6 es F cuando R7 es F; y R8 y R9 son cada uno independientemente H o F; o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
La presente invencion tambien proporciona un compuesto de la formula I, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, para su uso en el tratamiento de artritis en un paciente, que comprende administrar a un paciente en necesidad de dicho tratamiento una cantidad efectiva de un compuesto de la formula I, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo. La presente invencion tambien proporciona un compuesto de la formula I, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, para su uso en el tratamiento de osteoartritis en un paciente, que comprende administrar a un paciente en necesidad de dicho tratamiento una cantidad efectiva de un compuesto de la formula I, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo. Adicionalmente, la presente invencion proporciona un compuesto de la formula I, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, para su uso en el tratamiento de artritis reumatoide en un paciente, que comprende administrar a un paciente en necesidad de dicho tratamiento una cantidad efectiva de un compuesto de la formula I, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo. La presente invencion tambien proporciona un compuesto de la formula I, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, para su uso en el tratamiento de dolor asociado con artritis en un paciente, que comprende administrar a un paciente en necesidad de dicho tratamiento una cantidad efectiva de un compuesto de la formula I, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo. La presente invencion proporciona adicionalmente un compuesto de la formula I, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, para su uso en el tratamiento de dolor asociado con osteoartritis o artritis reumatoide en un paciente, que comprende administrar a un paciente en necesidad de dicho tratamiento una cantidad efectiva de un compuesto de la formula I, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
Adicionalmente, la invencion proporciona un compuesto de la formula I, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo para su uso en terapia. Adicionalmente, la invencion proporciona un compuesto de la formula I, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo para su uso en el tratamiento de artritis. Adicionalmente, la invencion proporciona un compuesto de la formula I, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo para su uso en el tratamiento de osteoartritis. Adicionalmente, la invencion proporciona un compuesto de la formula I, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo para su uso en el tratamiento de artritis reumatoide. La invencion tambien
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proporciona un compuesto de la formula I, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo para su uso en el tratamiento de dolor asociado con osteoartritis o artritis reumatoide. La invencion tambien proporciona el uso de un compuesto de la formula I, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, para la fabricacion de un medicamento para el tratamiento de artritis. Adicionalmente, la invencion proporciona el uso de un compuesto de la formula I, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, para la fabricacion de un medicamento para el tratamiento de osteoartritis. La invencion proporciona el uso de un compuesto de la formula I, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, para la fabricacion de un medicamento para el tratamiento de artritis reumatoide. La presente invencion tambien proporciona el uso de un compuesto de la formula I, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, para la fabricacion de un medicamento para el tratamiento de dolor asociado con osteoartritis o artritis reumatoide.
La invencion proporciona adicionalmente una composicion farmaceutica que comprende un compuesto de la formula I, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, con uno o mas vehfculos, diluyentes o excipientes farmaceuticamente aceptables. En una realizacion particular, la composicion comprende adicionalmente uno o mas de otros agentes terapeuticos. Esta invencion tambien abarca productos intermedios y procesos novedosos para la smtesis del compuesto de la formula I, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
Como se utiliza aqrn, los terminos "tratar" o "para tratar" incluye restringir, ralentizar, detener o revertir la progresion de la gravedad de un smtoma o trastorno existente.
Como se utiliza aqrn, el termino "paciente" se refiere a un mairnfero, tal como un raton, conejillo de indias, rata, perro o humano. Se entiende que el paciente preferido es un ser humano.
Como se utiliza aqrn, el termino "cantidad efectiva" se refiere a la cantidad o dosis del compuesto de la invencion, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo que, luego de administracion de dosis unica o multiple al paciente, proporciona el efecto deseado en el paciente bajo diagnostico o tratamiento.
Una cantidad efectiva se puede determinar facilmente por el medico que atiende, ya que un experto en la tecnica, mediante el uso de tecnicas conocidas y al observar los resultados obtenidos en circunstancias analogas. Al determinar la cantidad efectiva para un paciente, la persona que realiza el diagnostico que atiende considera diversos factores, que incluyen, pero no se limitan a: la especie de mamffero; su tamano, edad, y salud general; la enfermedad o trastorno espedfico involucrado; el grado de afectacion de la gravedad de la enfermedad o trastorno; la respuesta del paciente individual; el compuesto particular administrado; el modo de administracion; las caractensticas de biodisponibilidad de la preparacion administrada; el regimen de dosis seleccionado; el uso de medicacion concomitante; y otras circunstancias relevantes.
El compuesto de la formula I, o sal farmaceuticamente aceptable del mismo, son generalmente efectivos en un amplio rango de dosificacion. Por ejemplo, las dosificaciones por dfa normalmente caen dentro del rango de aproximadamente 0,01 a aproximadamente 50 mg/kg de peso corporal. En algunos casos los niveles de dosificacion por debajo del lfmite inferior del rango mencionado anteriormente pueden ser mas que adecuados, mientras que en otros casos se pueden emplear dosis mayores con efectos secundarios aceptables, y por lo tanto el rango de dosificacion anterior no pretende limitar el alcance de la invencion de ninguna manera.
Los compuestos de la invencion preferiblemente se formulan como composiciones farmaceuticas administradas por cualquier ruta que hace el compuesto biodisponible. Aun mas preferiblemente, dichas composiciones dichas composiciones son para administracion oral. Dichas composiciones farmaceuticas y procesos para preparar los mismos son bien conocidos en la tecnica. (Vease, por ejemplo, Remington: The Science and Practice of Pharmacy (D.B. Troy, Editor, 21st Edition, Lippincott, Williams & Wilkins, 2006).
Los compuestos de la formula I son particularmente utiles en los procedimientos de tratamiento de la invencion, pero son preferentes ciertos grupos, sustituyentes y configuraciones. Los siguientes parrafos describen dichos grupos, sustituyentes y configuraciones preferidos. Se entendera que estas preferencias son aplicables tanto a los procedimientos de tratamiento como a los nuevos compuestos de la invencion.
Es preferente que R sea metilo.
Es aun mas preferente que cuando R es metilo, R3 sea H.
Es preferente que cuando R4 es F, R5 sea F.
Es adicionalmente preferente que cuando R4 es metilo, R5 sea metilo.
Es preferente que cuando R8 es F, R9 sea F.
Es preferente que X sea:
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Es aun mas preferente que X sea:
Es aUn mas preferente que cuando R es metilo, R3 sea H y X sea:
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Es mas especialmente preferente que cuando R es metilo, R3 sea H y X sea:
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Son preferentes los compuestos:
acido 4-((1S)-1-(((1S,3R,4R)-2-(2-fenoxietil)-2-azabiciclo[2.2.1]heptan-3-carbonil)amino)etil)benzoico;
acido 4-((1S)-1-(((5R)-6-(2-(4-fluorofenoxi)etil)-6-azaspiro[2.5]octano-5-carbonil)amino)etil)benzoico;
acido 4-((1S)-1-(((5R)-6-(2-fenoxietil)-6-azaspiro[2.5]octano-5-carbonil)amino)etil)benzoico;
acido 4-((1S)-1-(((1S,4R,6S)-3-(2-fenoxietil)-3-azabiciclo[4.1.0]heptano-4-carbonil)amino)etil)benzoico;
acido 4-((1S)-1-(((2R)-1-(2-fenoxietil)-4,4-difluoropiperidin-2-carbonil)amino)etil)benzoico;
acido 4-((1S)-1-(((2S)-1-(2-fenoxietil)-4,4-difluoropiperidin-2-carbonil)amino)etil)benzoico;
acido 4-((1S)-1-(((2R*)-1-(2-fenoxietil)-4,4-dimetilpiperidin-2-carbonil)amino)etil)benzoico;
acido 4-((1S)-1-(((2R)-1-(2-(4-fluorofenoxi)etil)4,4-difluoropirrolidin-2-carbonil)amino)etil)benzoico;
acido 4-((1S)-1-(((1R)-2-(2-fenoxietil)-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-1-carbonil)amino)etil)benzoico;
y las sales farmaceuticamente aceptables de los msimsos.
Especialmenteson preferentes los compuestos:
acido 4-((1S)-1-(((5R)-6-(2-(4-fluorofenoxi)etil)-6-azaspiro[2.5]octano-5-carbonil)amino)etil)benzoico; acido 4-((1S)-1-(((5R)-6-(2-fenoxietil)-6-azaspiro[2.5]octano-5-carbonil)amino)etil)benzoico; acido 4-((1S)-1-(((1S,4R,6S)-3-(2-fenoxietil)-3-azabiciclo[4.1.0]heptano-4-carbonil)amino)etil)benzoico; acido 4-((1S)-1-(((2R)-1-(2-fenoxietil)-4,4-difluoropiperidin-2-carbonil)amino)etil)benzoico; y las sales farmaceuticamente aceptables de los msimsos.
Como se utiliza aqm, "h" se refiere a horas; "kPag" se refiere a presion manometrica en kilopascales; "Boc" se refiere a un grupo de proteccion de tert-butoxicarbonilo; "DMEM" se refiere a medio Eagle modsificado de Dulbecco; "ACN" se refiere a acetonitrilo; "DIEA" se refiere a N,N-diisopropiletilamina; "DMAP" se refiere a 4-(N,N- dimetilamino)piridina; "DMSO" se refiere a dimetilsulfoxido; "dMf" se refiere a N,N-dimetilformamida; "EtOH" se refiere a etanol; "THF" se refiere a tetrahidrofurano; "MeOH" se refiere a metanol; "EtOAc" se refiere a acetato de
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etilo; "Et2O" se refiere a eter de dietilo; "TBME" se refiere a eter de tert-butil metilo; "BOP" se refiere a hexafluorofosfato de benzotriazol-1-iloxitris(dimetilamino)fosfonio; "Cbz" se refiere a un grupo de proteccion de carbamato de benciloxi; "mCPBA" se refiere a acido 3-cloroperbenzoico; "KHMDS" se refiere a bis(trimetilsilil) amida de potasio; "PGE2" se refiere a prostaglandina E2; "FBS" se refiere a Suero de bovino fetal; "IBMX" se refiere a (3- isobutil-1-metilxantina); "MES" se refiere a acido (2-(N-morfolino)etanosulfonico; "HEPES" se refiere a (acido 2-[4-(2- hidroxietil)piperazin- 1-il]etanosulfonico); "HTRF" se refiere a tecnolog^a de fluorescencia de resolucion temporal homogenea; "HEK" se refiere al rinon embrionario humano; "HBSS" se refiere a Solucion Salina Equilibrada de Hank; "EC80" se refiere a la concentracion de un agente que produce 80 % de la maxima eficacia posible para ese agente; e "IC50" se refiere a la concentracion de un agente que produce el 50 % de la respuesta inhibidora maxima posible para ese agente. "Ph" se refiere a un grupo fenilo de la siguiente estructura:
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Las sales farmaceuticamente aceptables y la metodologfa comun para prepararlas son bien conocidas en la tecnica. Vease, por ejemplo, Gould, P.L., "Salt selection for basic drugs," International Journal of Pharmaceutics, 33: 201-217 (1986); Bastin, R.J., et al. "Salt Selection and Optimization Procedures for Pharmaceutical New Chemical Entities," Organic Process Research and Development, 4: 427-435 (2000); and Berge, S.M., et al., "Pharmaceutical Salts," Journal of Pharmaceutical Sciences, 66: 1-19, (1977). Un experto en la tecnica de smtesis apreciara que los compuestos de la presente invencion se convierten facilmente y se pueden aislar como una sal farmaceuticamente aceptable, tal como una sal de clorhidrato, utilizando tecnicas y condiciones bien conocidas por los expertos en el arte. Adicionalmente, un experto en la tecnica de la smtesis apreciara que los compuestos de Formula I se convierten facilmente y se pueden aislar como la base libre o acido libre correspondiente de la sal farmaceuticamente aceptable correspondiente.
La presente invencion contempla todos los enantiomeros o diastereomeros individuales, asf como las mezclas de los enantiomeros y diastereomeros de dichos compuestos que incluyen racematos. Los isomeros, enantiomeros o diastereomeros individuales se pueden separar o resolver por un experto habitual en la tecnica en cualquier punto conveniente en la smtesis de compuestos de la presente invencion mediante procedimientos tales como tecnicas de cristalizacion selectiva o cromatograffa quiral (vease, por ejemplo, J. Jacques, y col., "Enantiomeros, Racemates, and Resolutions", John Wiley and Sons, Inc., 1981, and E.L. Eliel and S.H. Wien," Stereochemistry of Organic Compounds", Wiley-Interscience, 1994).
El compuesto de la presente invencion, o sus sales farmaceuticamente aceptables, se pueden preparar mediante una variedad de procedimientos conocidos en la tecnica, algunos de los cuales se ilustran en los esquemas, preparaciones y ejemplos a continuacion. Las etapas sinteticas espedficas para cada una de las rutas descritas se pueden combinar de diferentes maneras, o junto con etapas de diferentes esquemas, para preparar el compuesto de Formula I, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo. Los productos de cada etapa en los esquemas a continuacion se pueden recuperar por procedimientos convencionales, que incluyen extraccion, evaporacion, precipitacion, cromatograffa, filtracion, trituracion y cristalizacion. Los reactivos y materiales de partida estan facilmente disponibles para un experto habitual en la tecnica. Todos los sustituyentes, a menos que se especifique lo contrario, son como se definieron previamente.
Preparacion 1
Smtesis de (2R*,6R*)-6-metil-1-(2-fenoxietil)piperidina-2-carboxilato de etilo (racemica).
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Bajo una atmosfera de nitrogeno, calentar una mezcla de clorhidrato de (2R*,6R*)-6-metilpiperidina-2-carboxilato de etilo (500 mg, 2,41 mmol), DMF (6,0 ml), carbonato de potasio (998 mg, 7,22 mmol), y p-bromofenetol (494 mg, 2,41 mmol) a 100°C con agitacion durante la noche. Permitir a la mezcla de reaccion enfriarse a temperatura ambiente, luego diluir con EtOAc (100 ml). Se lava la mezcla con agua (2 x 50 ml) y luego saturar con solucion de NaCl acuosa (2 x 50 ml), desechar la fase acuosa despues de cada lavado. Secar la fase organica sobre MgSO4, retirar los solidos mediante filtracion, y concentrar el filtrado bajo presion reducida para suministrar un aceite amarillo. Someter el material crudo a cromatograffa flash sobre gel de sflice, eluir con un gradiente de 0 % a 60 % de EtOAc en hexanos, para suministrar el compuesto del tffulo como un aceite incoloro (200 mg, 29 % de rendimiento). Espectro de masa (m/z): 292 (M + H)+.
Preparacion 2
Smtesis de (R)-1-tert-butoxicarbonil-4-oxopiperidina-2-carboxilato de bencilo.
O
COjBn
BOC
A una solucion de acido (R)-1-tert-butoxicarbonil-4-oxopiperidina-2-carbox^lico (7,00 g, 28,8 mmol) en CH2CI2 (100 5 ml) a 0°C, agregar alcohol bendlico (2,98 ml, 28,8 mmol), diciclohexilcarbodiimida (6,60 g, 31,7 mmol), y DMAP (352 mg, 2,88 mmol). Permitir que la mezcla se caliente a temperatura ambiente con agitacion durante la noche. Filtrar la mezcla para eliminar los solidos, y concentrar el filtrado bajo presion reducida para suministrar un material crudo. Someter este material a cromatograffa flash sobre gel de sflice, eluir con un gradiente de 0 % a 20 % de EtOAc en hexanos, para suministrar el compuesto del titulo como un aceite incoloro (6,10 g, 64 % de rendimiento). Espectro 10 de masa (m/z): 234 (M + 2H - Boc), 356 (M + Na)+.
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Esquema 1
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Preparacion 3
Smtesis de (R)-1-tert-butoxicarbonil-4-oxopiperidina-2-carboxilato de metilo.
15
imagen13
Esquema 1, Etapa A: A una solucion a temperatura ambiente de acido (R)-1-tert-butoxicarbonil-4-oxopiperidina-2- carboxflico (1,05 g, 4,32 mmol) en DMF (5,0 ml), agregar carbonato de cesio (1,55 g, 4,75 mmol) y agitar durante 5 min. Luego, agregar yodometano (403 pl, 6,47 mmol) en una forma de gotas durante 15 min. Luego de terminacion de la adicion, agitar la mezcla a temperatura ambiente durante la noche. Luego, agregar agua (25 ml), y extraer la 20 mezcla acuosa con TBME (2 x 75 ml). Secar las fases organicas combinadas sobre Na2SO4, filtrar, y concentrar el filtrado bajo presion reducida para suministrar el compuesto del titulo como un solido blanco (1,10 g, 99 % de rendimiento). Espectro de masa (m/z): 280 (M + Na)+.
Preparacion 4
5
10
15
20
25
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Esquema 1, Etapa B: Bajo una atmosfera de nitrogeno, a una mezcla de 0 °C de bromuro de metiltrifenilfosfonio (3,90 g, 10,92 mmol) y tolueno anhidro (40 ml), agregar KHMDS (solucion de 0,5 M en tolueno, 19 ml, 9,5 mmol) en una forma de gotas durante 15 min. Luego, permitir que la mezcla se caliente a temperatura ambiente, luego agitar durante dos horas. Enfriar la mezcla a 0°C, y agregar una solucion de (R)-1-tert-butoxicarbonil-4-oxopiperidina-2- carboxilato de metilo (1,10 g, 4,28 mmol) en tolueno (40 ml) en una forma de gotas durante 15 min. Permitir que la mezcla se caliente a temperatura ambiente, luego agitar durante seis horas y luego mantener la mezcla a temperatura ambiente durante tres dfas. Agregar una solucion acuosa saturada de NH4Cl (100 ml), y extraer la mezcla con CH2Cl2 (2 x 250 ml). Secar las capas organicas combinadas sobre Na2SO4, filtrar, y concentrar el filtrado bajo presion reducida. Someter el material crudo resultante a cromatograffa flash sobre gel de silice, eluir con un gradiente de 0 % a 40 % de EtOAc en hexanos, para suministrar el compuesto del titulo (920 mg, 84 % de rendimiento). Espectro de masa (m/z): 278 (M + Na)+, 533 (2M + Na)+.
Preparar el siguiente compuesto esencialmente mediante el procedimiento de Preparacion 4, utilizando la cetona apropiada en lugar de (R)-1-tert-butoxicarbonil-4-oxopiperidina-2-carboxilato de metilo:
No.
Nombre quimico Estructura MS (m/z)
5
(R)-1-tert-butoxicarbonil-4-metilenepiperidina-2-carboxilato de bencilo 1 ^N^COjBn BOC 232 (M + 2H -Boc)+, 354 (M + Na)+
Preparacion 6
Smtesis de (R)-6-tert-butoxicarbonil-6-azaspiro[2.5]octano-5-carboxilato de metilo.
CO^CHa
BOC
Esquema 1, Etapa C: A una solucion a 0 °C de (R)-1-tert-butoxicarbonil-4-metilenepiperidina-2-carboxilato de metilo (920 mg, 3,60 mmol) en Et2O (25 ml) bajo una atmosfera de nitrogeno, agregar diazometano (solucion de 0,72 M en Et2O, 25 ml, 18,0 mmol) en una forma de gotas durante 45 minutos. Durante la adicion de diazometano, agregar siete porciones de Pd(OAc)2(25 mg, 0,11 mmol; total 175 mg, 0,77 mmol) en intervalos de seis minutos. Permitir que la mezcla se caliente a temperatura ambiente con agitacion durante la noche. Agregar acido acetico (100 pl, 1,75 mmol), luego retirar los solidos mediante filtracion, enjuagar con CH2Cl2 (10 ml). Concentrar los filtrados combinados bajo presion reducida para suministrar una mezcla que contiene el compuesto del tttulo (1,08 g, 111 % de rendimiento nominal). Espectro de masa (m/z): 292 (M + Na)+.
Preparar el siguiente compuesto esencialmente mediante el procedimiento de Preparacion 6, utilizando el alqueno apropiado en lugar de (R)-1-tert-butoxicarbonil-4-metilenepiperidina-2-carboxilato de metilo:
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No.
Nombre quimico Estructura MS (m/z)
7
(R)-6-tert-butoxicarbonil-6-azaspiro[2.5]octano-5-carboxilato de bencilo V "OCfeBn BOC 246 (M + 2H - Boc)+
5
10
15
20
25
30
Preparacion 8
Smtesis de (1R*,4R,6R*)-3-tert-butoxicarbonil-3-azabiciclo[4.1.0]heptano-4-carboxilato de metilo.
imagen16
Tanda 1, A una solucion a 0 °C de (R)-1-tert-butoxicarbonil-3,6-dihidro-2H-piridina-2-carboxilato de metilo (800 mg,
3.32 mmol) en eter de dietilo (50 ml), agregar diazometano (solucion de 0,72 M en Et2O, 50 ml, 36,0 mmol) en porciones de 1,0-ml durante 15 minutos. Durante la adicion de diazometano, agregar cuatro porciones de Pd(OAc)2 (12,5 mg, 0,055 mmol; total 50 mg, 0,22 mmol) en intervalos de tres minutos. Agitar la mezcla durante 35 min, luego agregar acido acetico (1,0 ml, 17,5 mmol) y EtOAc (100 ml). Lavar la mezcla combinada con NaHCO3 acuoso saturado (100 ml) y NaCl acuoso saturado (100 ml). Secar la fase organica sobre Na2SO4, filtrar, y concentrar el filtrado bajo presion reducida para suministrar un aceite marron crudo (898 mg) como una mezcla 87:13 del compuesto del tftulo y alqueno de partida sin reaccionar.
Tanda 2. A una solucion a 0 °C de (R)-1-tert-butoxicarbonil-3,6-dihidro-2H-piridina-2-carboxilato de metilo (800 mg,
3.32 mmol) en eter de dietilo (50 ml), agregar diazometano (solucion de 0,72 M en Et2O, 50 ml, 36,0 mmol) en porciones de 1,0-ml durante 15 minutos. Durante la adicion de diazometano, agregar cuatro porciones de Pd(OAc)2 (12,5 mg, 0,055 mmol; total 50 mg, 0,22 mmol) en intervalos de tres minutosa. Agitar la mezcla durante 35 min, luego agregar acido acetico (1,0 ml, 17,5 mmol) y EtOAc (100 ml). Lavar la mezcla combinada con NaHCO3 acuoso saturado (100 ml) y NaCl acuoso saturado (100 ml). Secar la fase organica sobre Na2SO4, filtrar, y concentrar el filtrado bajo presion reducida para suministrar un aceite marron crudo (841 mg) como una mezcla 86:14 del compuesto del tftulo y alqueno de partida sin reaccionar.
Disolver el material crudo combinado de la Tanda 1 y 2 (1,74 g) en CH2O2 (18,7 ml) y enfriar a 0°C. Agregar mCPBA (647 mg, 1,87 mmol) y permitir que la mezcla se caliente a temperatura ambiente durante la noche con agitacion. Agregar una segunda porcion de mCPBA (323 mg, 0,88 mmol) y agitar durante unas 5,5 horas adicionales a temperatura ambiente. Agregar Na2SO3 acuoso saturado (8 ml) y agitar de forma vigorosa durante 10 min. Diluir la mezcla con EtOAc (150 ml), y lavar con NaHCO3 acuoso saturado (100 ml) y NaCl acuoso saturado (100 ml). Secar la fase organica sobre Na2SO4, filtrar, y concentrar el filtrado bajo presion reducida. Someter el material crudo resultante a cromatograffa flash sobre gel de silice, eluir con un gradiente de 0 % a 100 % de CH2Cl2 en hexanos luego con un gradiente de 0 % a 10 % de CH3OH en CH2Cl2, para suministrar el compuesto del tftulo como una mezcla de dos diastereomeros (1,39 g, 85 % de rendimiento). Espectro de masa (m/z): 156 (M + 2H -Boc)+.
Esquema 2
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Preparacion 9
imagen18
Esquema 2, Etapa A: Disolver 1-tert-butoxicarbonil-4-oxopiperidina-2-carboxilato de (±)-metilo racemico (5,00 g, 19,4 mmol) en una solucion de HCl en 1,4-dioxano (4,0 M, 48.6 ml, 194 mmol) y agitar la mezcla a temperature ambiente durante la noche. Concentrar la mezcla bajo presion reducida y colocar en un horno de vado a 40 °C durante 2 h 5 para eliminar acido residual. Luego, agregar CH2Cl2 (97 ml), cloroformato de bencilo (3,65 g, 21,38 mmol), y DIEA (7,46 ml, 42,8 mmol), y agitar a temperatura ambiente durante 2 dfas. Agregar acido clorddrico acuoso (1,0 N, 100 ml), y agitar la mezcla de forma vigorosa durante 15 min. Separar la capa organica, secar sobre MgSO4, filtrar, y concentrar bajo presion reducida para suministrar un aceite naranja crudo. Someter el material crudo a cromatograffa flash sobre gel de silice, eluir con un gradiente de 50 % a 100 % de EtOAc en hexanos, para 10 suministrar el compuesto del tftulo como un aceite incoloro, viscoso (2,44 g, 43 % de rendimiento). Espectro de masa (m/z): 292 (M + H)+, 314 (M + Na)+.
Preparacion 10
Srntesis de 1-benciloxicarbonil-4,4-difluoropiperidina-2-carboxilato de (±)-metilo (racemico).
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15 Esquema 2, Etapa B: Enfriar una solucion de 1-benciloxicarbonil-4-oxopiperidina-2-carboxilato de (±)-metilo racemico (2,44 g, 8,38 mmol) en THF (25 ml) a 0°C, luego agregar trifluoruro de dietilaminoazufre (10,1 g, 62,8 mmol) en forma de gotas a dicha tasa de tal manera que la temperatura interna permanece por debajo de 5°C. Agitar la mezcla a 0°C durante 2 h, luego a temperatura ambiente durante la noche. Enfriar la mezcla a 0°C y agregar agua (50 ml) cuidadosamente en una forma de gotas a dicha tasa de tal manera que la temperatura interna permanece 20 por debajo de 20°C. Agregar EtOAc (250 ml), agua (50 ml), y NaHCO3 acuoso saturado (200 ml), luego separar las capas y lavar la capa organica con NaCl acuoso saturado (200 ml), secar sobre MgSO4, filtrar, y concentrar el filtrado bajo presion reducida. Someter el material crudo resultante a cromatograffa flash sobre gel de silice, eluir con un gradiente de 20 % a 70 % de EtOAc en hexanos, para suministrar el compuesto del tftulo como un aceite incoloro, viscoso (1,24 g, 47 %). Espectro de masa (m/z): 314 (M + H)+, 331 (M + NH4)+, 336 (M + Na)+.
25 Esquema 3
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Preparacion 11
5
10
15
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25
30
35
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Esquema 3, Etapa A: A una mezcla agitada de acido (±)-5-oxopiperidina-2-carbox^lico (1,00 g, 6,99 mmol) y CH2CI2 (14,0 ml) a 0°C, agregar di-tert-butildicarbonato (1,60 g, 7,34 mmol) y trietilamina (1,07 ml, 7,68 mmol), y permitir que la mezcla se caliente a temperatura ambiente con agitacion durante la noche. Agregar una solucion acuosa de Hcl (1,0 N) hasta que el pH alcanza 3,0, luego extraer la mezcla con EtOAc (3 x 25 ml). Lavar las fases organicas combinadas con NaCl acuoso saturado (50 ml), secar sobre MgSO4, filtrar, y concentrar el filtrado bajo presion reducida para suministrar el compuesto del titulo como un solido color tostado (1,30 g, 77 % de rendimiento). Espectro de masa (m/z): 144 (M + 2H - Boc)+, 188 (M + 2H -t-Bu)+, 266 (M + Na)+.
Preparacion 12
Smtesis de 1-tert-butoxicarbonil-5-oxopiperidina-2-carboxilato de (±)-metilo (racemico).
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Esquema 3, Etapa B : A una mezcla agitada de acido (±)-1-tert-butoxicarbonil-5-oxopiperidina-2-carboxflico (1,30 g, 5,34 mmol) en tolueno (8 ml) y CH3OH (2 ml) a 0°C, agregar trimetilsilildiazometano (2,94 ml, 5,34 mmol) en forma de gotas, luego permitir que la mezcla se caliente a temperatura ambiente y agitar durante 1 h. Concentrar la mezcla bajo presion reducida para suministrar el compuesto del titulo como un aceite amarillo claro (1,30 g, 95 % de rendimiento). Espectro de masa (m/z): 158 (M + 2H - Boc)+, 202 (M + 2H -t-Bu)+.
Preparacion 13
Smtesis de 1-tert-butoxicarbonil-5,5-difluoropiperidina-2-carboxilato de (±)-metilo (racemico).
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Esquema 3, Etapa C : A una mezcla a temperatura ambiente con agitacion de trifluorhidrato de trietilamina (4,9 ml, 30,3 mmol), CH2Ch (42,9 ml), y trietilamina (1,76 ml, 12,6 mmol), agregar tetrafluoroborato de N,N-Dietilamino-S,S- difluorosulfinio (5,21 g, 22,74 mmol), seguido por una solucion de 1-tert-butoxicarbonil-5-oxopiperidina-2-carboxilato de (±)-metilo (1,30 g, 5,05 mmol) en CH2Cl2 (2,53 ml), luego agitar la mezcla a temperatura ambiente durante la noche. Con agitacion vigorosa, agregar cuidadosamente una solucion acuosa saturada de NaHCO3 (100 ml) (Precaucion! Efervescencia intensa!), luego extraer la mezcla con CH2O2 (2 x 100 ml). Secar las fases organicas combinadas sobre Na2SO4, filtrar, y concentrar el filtrado bajo presion reducida. Someter el material crudo resultante a cromatograffa flash sobre gel de silice, eluir con un gradiente de 5 % a 30 % de EtOAc en hexanos, para suministrar el compuesto del titulo como un aceite incoloro (610 mg, 43 % de rendimiento). Espectro de masa (m/z): 302 (M + Na)+.
Preparacion 14
Smtesis de clorhidrato de acido (2R*,5S*)-1-(2-fenoxietil)-5-hidroxipiperidina-2-carboxflico (racemico).
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Agitar una mezcla de acido (2R*,5S*)-5-hidroxipiperidina-2-carboxflico racemico (150 mg, 1,03 mmol), 2- fenoxiacetaldehfdo (281 mg, 2,07 mmol), acido acetico (59 pl, 1,03 mmol), y 1,2-dicloroetano (5,2 ml) a temperatura ambiente durante 30 min. Agregar triacetoxiborohidruro de sodio (307 mg, 1,45 mmol) y agitar la mezcla a
temperature ambiente durante la noche. Concentrar la mezcla bajo presion reducida, luego agregar 1,4-dioxano (5 ml) y una solucion de HCl en 1,4-dioxano (4,0 M, 3,0 ml, 12,0 mmol). Agitar la suspension resultante durante 10 min, luego retirar los solidos mediante filtracion y concentrar el filtrado bajo presion reducida para suministrar el compuesto del fftulo (320 mg, 100 % de rendimiento). Espectro de masa (m/z): 266 (M + H)+, 288 (M + Na)+.
5 Esquema 4
imagen25
Preparacion 15
Srntesis de (R)-1-tert-butoxicarbonil-4-oxopirrolidina-2-carboxilato de metilo.
O
i
BOC
10 Esquema 4, Etapa A: Agitar una mezcla de ester de metilo de N-tert-butil-cis-4-hidroxi-D-prolina (2,0 g, 7,91 mmol), el peryodinano de Dess-Martin (4,84 g, 11,07 mmol), y CH2Cl2 (10 ml) a temperatura ambiente durante 2 h. Agregar CH2Cl2 (150 ml), NaHCO3 acuoso saturado (75 ml), y agua (75 ml), luego separar las capas y extraer la capa acuosa con CH2Cl2 (100 ml). Combinar las fases organicas, secar sobre MgSO4, filtrar, y concentrar el filtrado bajo presion reducida. Someter el material crudo resultante a cromatograffa flash sobre gel de silice, eluir con un gradiente de 0 15 % a 50 % de EtOAc en hexanos, para suministrar el compuesto del titulo (1,39 g, 72 % de rendimiento). Espectro de
masa (m/z): 144 (M + 2H - Boc)+, 188 (M + 2H -t-Bu)+.
Preparacion 16
Srntesis de (R)-1-tert-butoxicarbonil-4,4-difluoropirrolidina-2-carboxilato de metilo.
imagen26
20 Esquema 4, Etapa B: Bajo una atmosfera de nitrogeno, disolver (R)-1-tert-butoxicarbonil-4-oxopirrolidina- 2- carboxilato de metilo (270 mg, 1,11 mmol) en CH2Cl2 (2,22 ml) y agregar trifloruro de bis(2-metoxietil)aminoazufre (491 mg, 2,22 mmol). Agitar la mezcla a temperatura ambiente durante la noche, luego verter la mezcla sobre una mezcla de hielo (50 ml) y NaHCO3 acuoso saturado (50 ml). Agitar durante 15 minutos, luego extraer con EtOAc (50 ml), y concentrar la fase organica bajo presion reducida. Someter el material crudo resultante a cromatograffa flash 25 sobre gel de sflice, eluir con un gradiente de 10 % a 50 % de EtOAc en hexanos, para suministrar el compuesto del titulo como una mezcla de 53:47 de rotameros de carbamato (206 mg, 70 % de rendimiento). 1H RMN (CDCl3, 400 MHz): 8 4,54 (dd, J = 8,8, 6,0 Hz, 0,47 H), 4,44 (dd, J = 9,1, 4,9 Hz, 0,53 H), 3,90-3,74 (m, 2H), 3,762 (s, 1,59 H), 3,759 (s, 1,41 H), 2,78-2,61 (m, 1H), 2,52-2,39 (m, 1H), 1,47 (s, 4,23 H), 1,42 (s, 4,77 H).
Preparacion 17
5
10
15
20
25
imagen27
A una mezcla agitada de acido (±)-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolina-1-carbox^lico (150 mg, 0,85 mmol) y CH2CI2 (1,69 ml) a 0°C, agregar di-tert-butildicarbonato (185 mg, 0,85 mmol) y trietilamina (177 pl, 1,27 mmol). Permitir que la mezcla se caliente a temperatura ambiente con agitacion durante la noche. Agregar una solucion acuosa de HCl (1,0 N) hasta que el pH alcanza 3,0, luego extraer la mezcla con EtOAc (3 x 25 ml). Lavar las fases organicas combinadas con NaCl acuoso saturado (50 ml), secar sobre MgSO4, filtrar, y concentrar el filtrado bajo presion reducida para suministrar el compuesto del tftulo (235 mg, 100 % de rendimiento). Espectro de masa (m/z): 222 (M + 2H - t-Bu)+, 300 (M + Na)+, 577 (2M + Na)+.
Preparacion 18
Smtesis de (2R*,6R*)-6-metil-1-(2-fenoxietil)piperidina-2-carboxilato de sodio (racemico).
CpzNa
OPh
Disolver (2R*,6R*)-6-metil-1-(2-fenoxietil)piperidina-2-carboxilato de etilo (200 mg, 0,69 mmol) en una mezcla de THF (1,0 ml) y CH3OH (1,0 ml), luego agregar una solucion acuosa de NaOH (5,0 N, 275 pl, 1,37 mmol) y agitar la mezcla a temperatura ambiente durante la noche. Concentrar la mezcla bajo presion reducida para suministrar el compuesto del tftulo (196,5 mg, 100 % de rendimiento). Espectro de masa (m/z): 264 (M + H)+, 549 (2M + Na)+.
Preparacion 19
Smtesis de acido (R)-6-tert-butoxicarbonil-6-azaspiro[2,5]octano-5-carboxflico.
imagen28
imagen29
Disolver (R)-6-tert-butoxicarbonil-6-azaspiro[2.5]octano-5-carboxilato de metilo (1,08 g, 4,01 mmol) en una mezcla de THF (20 ml) y CH3OH (10 ml), luego agregar una solucion acuosa de NaOH (2,0 N, 10 ml, 20 mmol) y agitar la mezcla a temperatura ambiente durante 1,5 h. Agregar una solucion acuosa de HCl (1,0 N) hasta que el pH alcanza 1,0, luego extraer la mezcla con EtOAc (3 x 50 ml). Lavar las capas organicas combinadas con una solucion de NaCl acuosa saturada (50 ml), separar las capas, secar la capa organica sobre Na2SO4, filtrar, y concentrar el filtrado bajo presion reducida para suministrar una mezcla que contiene el compuesto del tftulo (850 mg, 83 % de rendimiento). Espectro de masa (m/z): 156 (M + 2H - Boc)+, 278 (M + Na)+.
Preparar los siguientes compuestos esencialmente mediante el procedimiento de Preparacion 19, utilizando los esteres apropiados en lugar de (R)-6-tert-butoxicarbonil-6-azaspiro[2.5]octano-5-carboxilato de metilo:
No.
Nombre quimico Estructura MS (m/z) RMN
20
acido (1R*,4R,6R*)-3-tert-butoxicarbonil- 3-azabiciclo[4.1.0]heptano-4-carboxflico b "CCbH BOC 142 (M + 2H -Boc)+, 186 (M + 2H -f-Bu)+, 264 (M + Na)+
No.
Nombre quimico Estructura MS (m/z) RMN
21
acido (±)-1-benciloxicarbonil-4,4- difluoropiperidina-2-carboxflico F F V" 6bz 317 (M + NH4)+, 322 (M + Na)+
22
acido (±)-1-tert-butoxicarbonil- 5,5-difluoropiperidina-2- carboxflico in ^N^COjH BOC 288 (M + Na)+
23
Acido (2R,4S)-1-tert- butoxicarbonil-4- hidroxipiperidina-2-carboxflico OH Cr^'cojH BOC (CDCla, 400 MHz) 8 4,87-4,78 (m, 0,6H), 4,71-4,64 (m, 0,4H), 4,20-4,15 (m, 1H), 3,94-3,85 (m, 0,4H), 3,85-3,73 (m, 0,6H), 3,45-3,27 (m, 1H), 2,46-2,42 (m, 0,4H), 2,42-2,37 (m, 0,6H), 1,94 (dd, J = 6,9, 2,4 Hz, 0,6H), 1,90 (dd, J = 6,8, 2,4 Hz, 0,4H), 1,77-1,61 (m, 4H), 1,47 (s, 9H)
24
Acido (R)-1-tert-butoxicarbonil- 4,4-difluoropirrolidina-2- carboxflico F ! BOC (CD3OD, 400 MHz) 8 4,48 (dd, J = 9,2, 4,8 Hz, 0,35H), 4,44 (dd, J = 9,2,4,8 Hz, 0,65H), 3,83-3,68 (m, 2H), 2,90-2,74 (m, 1H), 2,53-2,41 (m, 1H), 1,46 (s, 3,15H), 1,42 (s, 5,85H)
Preparacion 25
Smtesis de acido (±)-1-tert-butoxicarbonil-4,4-dimetilpiperidina-2-carbox^lico
5
imagen30
En un agitador Parr, presurizar una mezcla de (R)-6-tert-butoxicarbonil-6-azaspiro[2.5]octano-5-carboxilato de bencilo (600 mg, 1,74 mmol), acido acetico glacial (10 ml), y 5 % de paladio sobre carbono (100 mg, 0,047 mmol) a 413,7 kPag con hidrogeno. Agitar a temperatura ambiente durante una hora, luego liberar la presion y retirar los solidos mediante filtracion, enjuagar con acido acetico (10 ml). Colocar el filtrado en un recipiente a presion y 10 agregar oxido de platino (V) (225 mg, 0,99 mmol). Presurizar el recipiente a 1724 kPag con hidrogeno, y agitar a 100°C durante la noche. Enfriar el recipiente a temperatura ambiente y liberar la presion. Retirar los solidos mediante filtracion, enjuagar con acido acetico. Concentrar el filtrado bajo presion reducida. Agregar tolueno (10 ml), y de nuevo concentrar bajo presion reducida para suministrar una pelfcula cruda, incolora (329 mg).
A este material crudo, agregar una solucion acuosa de hidroxido de sodio (2,0 N, 6,3 ml, 12,5 mmol). Luego, agregar 15 una solucion de di-tert-butildicarbonato (300 mg, 1,7 mmol) en 1,4-dioxano (3,4 ml) y agitar la mezcla a temperatura ambiente durante la noche. Agregar di-tert-butildicarbonato (152 mg, 0,70 mmol) y agitar a temperatura ambiente durante 6 h. Neutralizar la mezcla a pH 7 con HCl acuoso 1,0 N, luego agregar EtOAc (15 ml). Acidificar la capa acuosa a pH 3 con HCl 1,0 N, luego extraer la capa acuosa con EtOAc (3 x 15 ml) y CH2O2 (3 x 15 ml). Acidificar adicionalmente la capa acuosa a pH 2 con HCl acuoso 1,0 N, luego extraer con EtOAc (5 x 15 ml). Combinar la capa 20 organicas, secar sobre Na2SO4, retirar los solidos mediante filtracion, y concentrar el filtrado bajo presion reducida para suministrar el compuesto del titulo como una pelfcula incolora (85,5 mg, 22 % de rendimiento). Espectro de masa (m/z): 158 (M + H)+.
Preparacion 26
Smtesis de 4-((1S)-1-(((2R*)-1-tert-butoxicarbonil-2-metilpiperidin-2-carbonil)amino)etil)benzoato de metilo.
imagen31
Agregar acido (±)-1-tert-butoxicarbonil-2-metilpiperidina-2-carbox^lico (200 mg, 0,82 mmol) y clorhidrato de 4-((S)-1- 5 aminoetil)benzoato de metilo (177 mg, 0,82 mmol) a DMF (1,6 ml), luego agregar trietilamina (401 ml, 2,9 mmol), seguido por BOP (472 mg, 1,07 mmol). Agitar la mezcla a temperatura ambiente durante la noche. Diluir la mezcla con EtoAc (25 ml) y lavar con NaCl acuoso saturado (2 x 25 ml). Secar la capa organica sobre MgSO4, filtrar para eliminar los solidos, y concentrar el filtrado bajo presion reducida. Someter el material crudo a cromatograffa flash sobre gel de silice, eluir con un gradiente de 20 % a 100 % de EtOAc en hexanos, para suministrar el compuesto del 10 tttulo como un aceite incoloro (158 mg, 48 % de rendimiento). Espectro de masa (m/z): 305 (M + 2H - Boc)+.
Preparar los siguientes compuestos esencialmente mediante el procedimiento de Preparacion 26, utilizando los acidos carboxflicos apropiados en lugar de acido 1-tert-butoxicarbonil-2-metilpiperidina-2-carboxflico:
No.
Nombre quimico
Estructura
MS (m/z)
27
4-((1S)-1-((2R*,6R*)-(1-(2-fenoxietil)-6-
metilpiperidin-2-
carbonil)amino)etil)benzoato de metilo
imagen32
425 (M + H)+
28
4-((1S)-1-(((2R*)-1-benciloxicarbonil-4,4-
difluoropiperidin-2-
carbonil)amino)etil)benzoato de metilo
imagen33
461 (M + H)+, 483 (M + Na)+
29
4-((1S)-1-(((2R*)-1-tert-butoxicarbonil- 5,5-difluoropiperidin-2- carbonil)amino)etil)benzoato de metilo
imagen34
327 (M + 2H - Boc)+, 449 (M + Na)+
30
4-((1S)-1-((2R*,5S*)-(1-(2-fenoxietil)-5-
hidroxipiperidin-2-
carbonil)amino)etil)benzoato de metilo
imagen35
427 (M + H)+, 465 (M + K)+
31
Absoluto
4-((1S)-1-(((2R)-1-tert- butoxicarbonilpirrolidin -2- carbonil)amino)etil)benzoato de metilo
imagen36
277 (M + 2H - Boc)+, 321 (M + 2H -t-Bu)+, 377 (M + H)+, 399 (M + Na)+
Absoluto
4-((1S)-1-(((2R)-1-tert-butoxicarbonil-4,4-
difluoropirrolidin-2-
carbonil)amino)etil)benzoato de metilo
imagen37
313(M + 2H - Boc)+, 357 (M + 2H -t-Bu)+, 435 (M + Na)+, 451 (M + K)+
No.
Nombre quimico Estructura MS (m/z)
33
4-((1S)-1-(((1R*)-2-terf-butoxicarbonil- 1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-1- carbonil)amino)etil)benzoato de de metilo BOCQ : 339 (M + 2H - Boc)+, 383 (M + 2H -t-Bu)+, 439 (M + H)+, 461 (M + Na)+
Preparacion 34
Smtesis de 4-(((1S,3R,4R)-2-tert-butoxicarbonil-2-azabiciclo[2.2.1]heptan-3-carbonil)aminometil)benzoato de metilo.
5
Agitar una mezcla de acido (1S,3R,4R)-2-tert-butoxicarbonil-2-azabiciclo[2.2.1]l^eptano-3-carbox^lico (253 mg, 1,05 mmol), clorhidrato de 4-(aminometil)benzoato de metilo (260 mg, 1,29 mmol), hidrato de 1-hidroxibenzotriazol (60 mg, 0,39 mmol), trietilamina (600 pl, 4,30 mmol), EDC (300 mg, 1,56 mmol), y CH2Cl2 (20 ml) a temperatura ambiente durante dos d^as. Lavar la mezcla con una solucion acuosa de acido clorhndrico (1,0 N, 25 ml), seguido por 10 una solucion acuosa saturada de NaHCO3 (50 ml) y una solucion acuosa saturada de NaCl (50 ml). Secar la fase organica sobre MgSO4, filtrar, y concentrar bajo presion reducida para suministrar un aceite vftreo que contiene aproximadamente 85 % del compuesto del titulo en masa (450 mg, 94 % de rendimiento). Espectro de masa (m/z): 289 (M + 2H - Boc)+, 333 (M + 2H - t-Bu)+, 411 (M + Na)+.
Preparar los siguientes compuestos esencialmente mediante el procedimiento de Preparacion 34, utilizando los 15 acidos carboxflicos apropiados en lugar de acido (1S,3R,4R)2-tert-butoxicarbonil-2-azabiciclo[2.2.1]heptano-3- carboxflico, y utilizando clorhidrato de 4-((S)- 1-aminoetil)benzoato o metil 4-((S)-1-aminoetil)benzoato de metilo en lugar de clorhidrato de 4-(aminometil)benzoato de metilo:
imagen38
No.
Nombre qufmico Estructura MS (m/z) NOT a
35
4-((1S)-1-(((1S,3R,4R)-2-ferf-butoxicarbonil-2-azabiciclo[2.2.1]heptan-3- carbonil)amino)etil)benzoato de metilo [ $-yk jj BOC O 303 (M + 2H -Boc)+, 347 (M + 2H -f-Bu)+, 403 (M + H)+, 425 (M + Na)+
36
4-((1S)-1-(((5f?)-6-ferf-butoxicarbonil-6-azaspiro[2.5]octano-5- carbonil)amino)etil)benzoato de metilo BOC 0 317 (M + 2H -Boc)+, 361 (M + 2H -f-Bu)+, 439 (M + Na)+ a
37
4-((1S)-1-(((1R*,4P?,6P?*)-3-fe/f-butoxicarbonil-3-azabiciclo[4.1.0]heptano- 4-carbonil)amino)etil)benzoato de metilo X Q-r*JJ BOCO 303 (M + 2H -Boc)+, 347 (M + 2H -f-Bu)+, 403 (M + H)+, 425 (M + Na)+ b
38
4-((1S)-1-(((2R*)-1-ferf-butoxicarbonil-4,4-dimetilpiperidin-2- carbonil)amino)etil)benzoato de metilo X Xx BOC O 319 (M+2H-Boc)+, 441 (M + Na)+ b
39
4-((1S)-1-(((2f?)-1-ferf-butoxicarbonil-4-oxopiperidin-2- carbonil)amino)etil)benzoato de metilo 6yvC^ BOCO = 305 (M + 2H -Boc)+, 349 (M + 2H -f-Bu)+, 427 (M + Na)+ b
40
4-((1S)-1-(((2P?,4S)-1-fe/f-butoxicarbonil-4-hidroxipiperidin-2- carbonil)amino)etil)benzoato de metilo I OH pvvCr BOC 0 307 (M + 2H -Boc)+, 351 (M + 2H -f-Bu)+, 407 (M + H)+, 429 (M + Na)+ b
a) Purificar el producto mediante cromatograffa de fase inversa sobre gel de silice C18, eluir con 0,1 % de acido formico en un gradiente de agua/acetonitrilo. b) Purificar el producto mediante cromatograffa flash sobre gel de silice, eluir con un gradiante de EtOAc/hexanos.
Preparacion 41
Smtesis de 4-((1S)-1-(((2R,4S)-1-tert-butoxocarbonil-4-metoxipiperidin-2-carbonil)amino)etil)benzoato de metilo.
imagen39
Enfriar una mezcla de 4-((1S)-1-(((2R,4S)-1-tert-butoxicarbonil-4-hidroxipiperidin-2-carbonil)amino) etil)benzoato de 5 metilo (440 mg, 1,08 mmol), THF (5,0 ml), y yodometano (67 ml, 1,08 mmol) a 0°C, luego agregar hidruro de sodio (60 % de dispersion en aceite mineral, 43,3 mg, 1,08 mmol) y agitar durante 2 h a 0°C. Agregar una segunda porcion de hidruro de sodio (60 % de dispersion en aceite mineral, 43,3 mg, 1,08 mmol), agitar a 0°C durante 3 h, luego permitir calentar a temperatura con agitacion durante la noche. Agregar una solucion acuosa saturada de NH4Cl (5 ml), luego extraer la mezcla con EtOAc (10 ml). Lavar las capas organicas combinadas con una solucion acuosa 10 saturada de NaCl (10 ml), luego secar sobre Na2SO4, retirar los solidos mediante filtracion, y concentrar el filtrado bajo presion reducida. Someter el material crudo a cromatograffa flash sobre gel de sflice, eluir con un gradiente de 0 % a 40 % de EtOAc en hexanos, para suministrar el compuesto del tftulo como un aceite incoloro, claro (128 mg, 28 % de rendimiento). Espectro de masa (m/z): 365 (M + 2H -t-Bu)+, 421 (M + H)+.
Preparacion 42
15 Smtesis de clorhidrato de 4-((1S)-1-(((2R*)-2-metilpiperidin-2-carbonil)amino)etil)benzoato de metilo.
imagen40
Tratar 4-((1S)-1-(((2R*)-1-tert-butoxicarbonil-2-metilpiperidin-2-carbonil)amino)etil)benzoato de metilo (158 mg, 0,39 mmol) con una solucion 4,0 M de cloruro de hidrogeno en dioxano (2,0 ml, 8,0 mmol) y agitar durante una hora a temperatura ambiente. Concentrar la mezcla bajo presion reducida para suministrar el compuesto del tftulo como un 20 solido blanco (133 mg, 100 % de rendimiento). Espectro de masa (m/z): 305 (M + H)+.
Preparar los siguientes compuestos esencialmente mediante el procedimiento de Preparacion 42, utilizando los carbamatos de tert-butilo apropiados en lugar de 4-((1S)-1-(((2R*)-1-tert-butoxicarbonil-2-metilpiperidin-2- carbonil)amino)etil)benzoato de metilo:
No.
Nombre quimico Estructura MS (m/z) Nota
43
Clorhidrato de 4-(((1S,3R,4R)-2- azabiciclo[2.2.1]hepta n-3- carbonil)aminometil )benzoato de metilo H 0 HCI 289 (M + H)+, 599 (2M + Na)+ a,b
No.
Nombre quimico
Estructura
MS (m/z)
Nota
44
Clorhidrato de 4-((1 S)-1- (((1S,3R,4R)-2- azabiciclo[2.2.1]hepta n-3- carbonil)amino)etil) benzoato de metilo
imagen41
303 (M + H)+, 605 (2M + H)+, 627 (2M + Na)+
a,c
45
Clorhidrato de 4-((1S)-1-(((2R*)-5,5- difluoropiperidin-2- carbonil)amino)etil) benzoato de metilo
imagen42
327 (M + H)+, 653 (2M + H)+, 675 (2M + Na)+
46
Clorhidrato de 4-((1S)-1-(((2R)- pirrolidin-2-carbonil)amino)etil) benzoato de metilo
imagen43
277 (M + H)+, 553 (2M + H)+, 575 (2M + Na)+
47
Clorhidrato de 4-((1S)-1-(((2R)-4,4- difluoropirrolidin-2- carbonil)amino)etil) benzoato de metilo
imagen44
313 (M + H)+, 625 (2M + H)+, 647 (2M + Na)+
48
Clorhidrato de 4-((1S)-1-(((1R*)- 1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-1- carbonil)amino)etil) benzoato de metilo
imagen45
339 (M + H)+, 677 (2M + H)+, 699 (2M + Na)+
d
d
a) utilizar CH3OH (20 ml/mmol de sustrato) como un cosolvente.
b) agitar durante tres dfas a temperatura ambiente en lugar de una hora.
c) agitar durante tres horas a temperatura ambiente, luego agregar una segunda porcion de HCl en 1,4- dioxano (igual al primero), y
agitar durante dos mas horas a temperatura ambiente, en lugar de simplemente agitar durante una hora a temperatura ambiente.
d) Utilizar CH2O2 (1 ml/mmol de sustrato) como un cosolvente.
Preparacion 49
Smtesis de 4-((1S)-1-(((5R)-6-azaspiro[2.5]octano-5-carbonil)amino)etil)benzoato de metilo.
5
Disolver 4-((1S)-1-(((5R)-6-tert-butoxicarbonil-6-azaspiro[2.5]octano-5-carbonil)amino)etil)benzoato de metilo (60 mg, 0,14 mmol) en CH2Cl2 (2,0 ml) y agregar acido trifluoroacetico (1,0 ml, 13,23 mmol). Agitar la mezcla a temperatura ambiente durante 90 minutos, luego agregar agua (7,0 ml) y una solucion acuosa de carbonato de sodio al 10 % (20 ml). Extraer la mezcla con EtOAc (3 x 50 ml), y lavar las capas organicas combinadas con una solucion acuosa 10 saturada de NaCl (5 ml). Secar la fase organica sobre Na2SO4, filtrar, y concentrar el filtrado bajo presion reducida para suministrar una mezcla que contiene ca. 84 % del compuesto del tttulo en masa (53 mg, 97 % de rendimiento corregido). Espectro de masa (m/z): 317 (M + H)+, 633 (2M + H)+, 655 (2M + Na)+.
Preparar los siguientes compuestos esencialmente mediante el procedimiento de Preparacion 49, utilizando los carbamatos de tert-butilo apropiados en lugar de 4-((1S)-1-(((5R)-6-tert-butoxicarbonil-6-azaspiro[2.5]octano-5- 15 carbonil)amino) etil)benzoato de metilo:
imagen46
No.
Nombre quimico
Estructura
50
4-((1S)-1-(((1R*,4R,6R*)-3-azabiciclo[4.1.0]heptano- 4-carbonil)amino)etil)benzoato de metilo (2:1 mezcla de diastereomeros)
imagen47
MS (m/z)
CC^C
303 (M + H)+, 605 (2M + H)+, 627 (2M + Na)+
4-((1S)-1-(((2R*)-4,4-dimetilpiperidin-2- carbonil)amino)etil)benzoato de metilo
4-((1S)-1-(((2R)-4-oxopiperidin-2- carbonil)amino)etil)benzoato de metilo
imagen48
imagen49
319 (M + H)+, 637 (2M + H)+
305 (M + H)+
5
10
15
20
25
No.
Nombre quimico Estructura MS (m/z)
53
4-((1S)-1-(((2R,4S)-4-hidroxipiperidin-2- carbonil)amino)etil)benzoato de metilo OH H ^ i 307 (M + H)+, 613 (2M + H)+, 635 (2M + Na)+
54
4-((1S)-1-(((2R,4S)-4-metoxipiperidin-2- carbonil)amino)etil)benzoato de metilo OC^s 0-rtjy™ h 0 k 321 (M + H)+, 343 (M + Na)+, 641 (2M + H)+, 663 (2M + Na)+
Preparacion 55 Smtesis de 4-((1S)-1-(((2R*)- 4,4-difluoropiperidin-2-carbonil)amino)etil)benzoato de metilo.
imagen50
Disolver 4-((1S)-1-(((2R*)-1-benciloxicarbonil-4,4-difluoropiperidin-2-carbonil)amino)etil)benzoato de metilo (540 mg, 1,17 mmol) en CH3OH (4,7 ml) y agregar 10 % de paladio sobre carbono (125 mg, 0,12 mmol). Agitar a temperatura ambiente bajo una atmosfera de hidrogeno durante tres dfas. Filtrar a traves de un tapon de tierra diatomacea, enjuagar con CH3OH (10 ml). Concentrar el filtrado bajo presion reducida para suministrar el compuesto del titulo como un solido blanco (280 mg, 73 % de rendimiento). Espectro de masa (m/z): 327 (M + H)+, 653 (2M + H)+, 675 (2M + Na)+.
Preparacion 56
Smtesis de 4-((1S)-1-(((2R*)-1-(2-fenoxietil)-2-metilpiperidin-2-carbonil)amino)etil)benzoato de metilo.
imagen51
Agitar una mezcla de clorhidrato de 4-((1S)-1-(((2R*)-2-metilpiperidin-2-carbonil)amino)etil)benzoato de metilo (130 mg, 0,38 mmol) y 2-fenoxiacetaldehffdo (104 mg, 0,76 mmol) en 1,2-dicloroetano (1,9 ml) a temperatura ambiente durante 30 minutos, luego agregar triacetoxiborohidruro de sodio (113 mg, 0,53 mmol) y agitar a temperatura ambiente durante 3 h. Enfriar la mezcla a 0°C y agregar una solucion acuosa saturada de NaHCO3 (25 ml). Extraer la mezcla con EtOAc (2 x 25 ml), y lavar las capas organicas combinadas con una solucion acuosa saturada de NaCl (25 ml). Separar la capa organica y secar sobre MgSO4, filtrar, y concentrar el filtrado bajo presion reducida. Someter el material crudo a cromatograffa flash sobre gel de silice, eluir con un gradiente de 0 % a 100 % de EtOAc en hexanos, para suministrar 130 mg de material. Someter este material a cromatograffa de fase inversa sobre gel de silice C18, eluir con 0,1 % de acido formico en un gradiente de agua/CH3CN. Extraer las fracciones que contienen el compuesto del titulo con EtOAc (2 x 50 ml)), y lavar las capas organicas combinadas con una solucion acuosa saturada de NaCl (25 ml). Separar la capa organica y secar sobre MgSO4, filtrar, y concentrar el filtrado bajo presion reducida para suministrar el compuesto del titulo como un aceite incoloro (75 mg, 46 % de rendimiento). Espectro de masa (m/z): 425 (M + H)+.
Preparar los siguientes compuestos esencialmente mediante el procedimiento de Preparacion 56, utilizando las sales de clorhidrato de amina apropiadas en lugar de clorhidrato de 4-((1S)-1-(((2R*)-2-metilpiperidin-2- carbonil)amino)etil)benzoato de metilo y/o los aldehffdos apropiados en lugar de 2-fenoxiacetaldehfdo:
No.
Nombre quimico Estructura MS (m/z) Nota
57
4-((1S)-1-(((2R)-1-(2-(4-fluorofenoxi)etil)-5,5- difluoropiperidin-2-carbonil)amino)etil)benzoato de metilo r1 j 1 xr 465 (M +H)+, 487 (M +Na)+ a
58
4-((1S)-1-(((1R*)-2-(2-fenoxietil)-1,2,3,4- tetrahidroisoquinol in-1- carbonil)amino)etil)benzoato de metilo ? °£ OPh 459 (M +H)+, 481 (M +Na)+ b
a) Purificar mediante cromatograffa flash sobre gel de silice, eluir con un gradiente de 10 % a 90 % de EtOAc en hexanos. El compuesto del fftulo es el segundo diastereomero para eluir. Sin cromatograffa de fase inversa. b) Purificar mediante cromatograffa flash sobre gel de silice, eluir con un gradiente de 0 % a 80 % de EtOAc en hexanos. Sin cromatograffa de fase inversa.
Preparacion 59 Smtesis de 4-(((1S,3R,4R)-2-(2-fenoxietil)-2-azabiciclo[2.2.1]heptan-3-carbonil)aminometil)benzoato 5 de metilo.
imagen52
Disolver clorhidrato de 4-(((1S,3R,4R)-2-azabiciclo[2.2.1]heptan-3-carbonil)aminometil)benzoato de metilo (300 mg, 0,92 mmol) y 2-fenoxiacetaldelffdo (140 mg, 1,03 mmol) en CH3OH (5 ml) a temperatura ambiente, y agregar acido acetico (200 pl, 3,49 mmol) y cianoborohidruro de sodio (300 mg, 4,77 mmol). Agitar la mezcla a temperatura 10 ambiente durante la noche. Concentrar la mezcla bajo presion reducida, y agregar EtOAc (20 ml) y NaHCO3 acuoso saturado (20 ml). Separar las capas, y lavar la capa organica con una solucion acuosa saturada de NaCl (20 ml). Concentrar la capa organica bajo presion reducida, luego someter el material crudo a cromatograffa flash sobre gel de sflice, eluir con un gradiente de 100 % de EtOAc a 5 % (7,0 M NH3 en CH3OH) en EtOAc, para suministrar el compuesto del titulo como un aceite vftreo (240 mg, 64 % de rendimiento). Espectro de masa (m/z): 409 (M + H)+, 15 431 (M + Na)+.
Preparar los siguientes compuestos esencialmente mediante el procedimiento de Preparacion 59, utilizando las sales de clorhidrato de amina apropiadas en lugar de clorhidrato de 4-(((1S,3R,4R)-2-azabiciclo[2.2.1]heptan-3- carbonil)aminometil)benzoato de metilo:
No.
Nombre qmmico Estructura MS (m/z) Nota
60
4-((1 S)-1-(((1 S,3R,4R)-2-(2-fenoxietil)-2- azabiciclo[2.2.1]heptan-3- carbonil)amino)etil)benzoato de metilo eguCr™ r ° ! DPfi 423 (M + H)+
No.
Nombre quimico Estructura MS (m/z) Nota
61
4-((1S)-1-(((2R)-1-(2-fenoxietil)-4,4- difluoropiperidin-2- carbonil)amino)etil)benzoato de metilo F F cxor* s °: OP hi 447 (M +H)+, 469 (M +Na)+ a,b
62
4-((1S)-1-(((2S)-1-(2-fenoxietil)-4,4- difluoropiperidin-2- carbonil)amino)etil)benzoato de metilo F F r7 • 1 OPh 447 (M +H)+, 469 (M +Na)+ a,b
a) Sin cromatograffa flash de fase normal. b) Las preparaciones 61 y 62 se emanan desde el mismo material impuro diasteomericamente impuro. Separar los diastereomeros mediante cromatograffa de fase inversa sobre gel de sflice C18, eluir con 0,1 % de acido formico en un gradiente de CHaCN/agua.
Preparacion 63
Smtesis de 4-((1S)-1-(((5R)-6-(2-(4-fluorofenoxi)etil)-6-azaspiro[2.5]octano-5-carbonil)amino)etil)benzoato de metilo.
5
imagen53
Disolver 4-((1S)-1-(((5R)-6-azaspiro[2.5]octano-5-carbonil)amino)etil)benzoato de metilo (44 mg, 0,14 mmol) en DMF (1,5 ml) a temperatura ambiente, luego agregar DIEA (73 pl, 0,42 mmol), 1-(2-bromoetoxi)-4-fluorobenceno (46 mg, 0,21 mmol), y Nal (10,5 mg, 0,07 mmol). Calentar la mezcla a 110°C durante 2 h con agitacion. Diluir la mezcla con TBME (25 ml) y lavar con una solucion acuosa al 5 % de LiCl (25 ml), seguido por una solucion acuosa saturada de 10 NaCl (25 ml). Secar la capa organica sobre Na2SO4, filtrar, y concentrar bajo presion reducida. Someter el material crudo a cromatograffa flash sobre gel de silice, eluir con un gradiente de 0 % a 100 % de EtOAc en hexanos, para suministrar el compuesto del titulo como un solido blanco (38 mg, 60 % de rendimiento). Espectro de masa (m/z): 455 (M + H)+.
Preparar los siguientes compuestos esencialmente mediante el procedimiento de Preparacion 63, utilizando las 15 aminas apropiadas en lugar de 4-((1S)-1-(((5R)-6-azaspiro[2.5]octano-5-carbonil)amino)etil)benzoato de metilo y/o los bromuros de alquilo apropiados en lugar de 1-(2-bromoetoxi)-4-fluorobenceno:
No.
Nombre quimico Estructura MS (m/z) Nota
64
4-((1S)-1-(((5R)-6-(2-fenoxietil)-6- azaspiro[2.5]octano-5- carbonil)amino)etil)benzoato de metilo ? ° ! OPh 437 (M + H)+
65
4-((1 S)-1-(((1 S,4R,6S)-3-(2-fenoxietil)-3- azabiciclo[4.1.0]heptano-4- carbonil)amino)etil)benzoato de metilo ^ t ■■ OPh 423 (M + H)+ a
66
4-((1S)-1-(((2R)-1-(2-fenoxietil)-4,4- dimetilpiperidin-2- carbonil)amino)etil)benzoato de metilo c\=jcr" fj 0 ■ OPh 439 (M + H)+
67
4-((1S)-1-(((2R)-1-(2-fenoxietil)-4- oxopiperidin-2-carbonil)amino)etil)benzoato de metilo 0 cXur~ s •1 OPTl 425 (M + H)+, 447 (M + Na)+
68
4-((1S)-1-(((2R,4S)-1-(2-fenoxietil)-4- hidroxipiperidin-2- carbonil)amino)etil)benzoato de metilo OH bjAT* ? ° 5 OPTl 427 (M + H)+, 449 (M + Na)+
69
4-((1S)-1-(((2R,4S)-1-(2-fenoxietil)-4- metoxipiperidin-2- carbonil)amino)etil)benzoato de metilo OCH, 0Yaja^ fj 0 ■ OPh 441 (M + H)+
a) Purificar mediante cromatograffa de columna flash sobre gel de s^lice, eluir con un 0 % a 70 % de gradiante de EtOAc/hexanos para obtener una mezcla de diastereomeros. Luego, purificar mediante cromatograffa de columna flash sobre gel de s^lice, eluir con 52 % de EtOAc en hexanos, para separar los diastereomeros. El compuesto del fftulo es el primer diastereomero para eluir.
Preparacion 70
Smtesis de 4-((1S)-1-(((2R)-1-(2-(4-fluorofenoxi)etil)pirrolidin-2-carbonil)amino)etil)benzoato de metilo.
imagen54
Disolver clorhidrato de 4-((1S)-1-(((2R)-pirrolidin-2-carbonil)amino)etil)benzoato de metilo (1,00 g, 3,2 mmol) en DMF (8,0 ml) a temperatura ambiente, luego agregar K2CO3 (1,33 g, 9.6 mmol) y 1-(2-bromoetoxi)-4-fluorobenceno (715 mg, 3,2 mmol), luego calentar la mezcla a 100°C con agitacion durante la noche. Diluir la mezcla con EtOAc (100 5 ml), y lavar con una solucion acuosa saturada de NaCl (2 X 75 ml). Descartar la capa acuosas, y secar la capa organica sobre MgSO4, filtrar, y concentrar bajo presion reducida a un volumen de ca. 10 ml. Agregar hexanos (100 ml, luego recolectar el precipitado resultante mediante filtracion y enjuagar con hexanos (25 ml) y secar al aire para suministrar el compuesto del tttulo como un solido blanco (750 mg, 57 % de rendimiento). Espectro de masa (m/z): 415 (M + H)+.
10 Preparar el siguiente compuesto esencialmente mediante el procedimiento de Preparacion 70, utilizando clorhidrato de 4-((1S)-1-(((2R)- 4,4-difluoropirrolidin-2-carbonil)amino)etil)benzoato de metilo en lugar de clorhidrato de 4-((1S)- 1-(((2R)-pirrolidin-2- carbonil)amino)etil)benzoato de metilo:
ro
No.
Nombre quimico Estructura MS (m/z) Nota
71
4-((1S)-1-(((2R)-1-(2-(4-fluorofenoxi)etil)4 ,4-difluoropirrolidin-2-carbonil)amino)etil) benzoato de metilo ,<r 451 (M + H)+, 473 (M + Na)+ a, b
a) despues de calentar durante la noche, agregar un equivalente de Nal y un equivalente adicional de bromuro de alquilo. b) Purificar mediante cromatografia de columna flash sobre gel de silice, eluir con un 10 % a 100 % de gradiante de EtOAc/hexanos.
Ejemplo 1
Smtesis de clorhidrato de acido 4-((1S)-1-(((2R*)-1-(2-fenoxietil)-2-metilpiperidin-2-carbonil)amino)etil)benzoico.
imagen55
Disolver 4-((1S)-1-(((2R*)-1-(2-fenoxietil)-2-metilpiperidin-2-carbonil)amino)etil)benzoato de metilo (70 mg, 0,16 5 mmol) en una mezcla de THF (1,0 ml) y CH3OH (1,0 ml). Agregar a 1,0 N solucion acuosa de hidroxido de sodio (330 |jl, 0,33 mmol), y agitar la mezcla a temperatura ambiente durante la noche. Concentrar la mezcla bajo presion reducida para suministrar un solido, luego agregar una solucion 4,0 M de cloruro de hidrogeno en 1,4-dioxano (2,0 ml, 8,0 mmol) y agitar a temperatura ambiente durante 10 min. Retirar los solidos mediante filtracion, enjuagar con THF (2 ml). Concentrar el filtrado bajo presion reducida para suministrar el compuesto del titulo como un solido 10 blancuzco (52 mg, 71 % de rendimiento). Espectro de masa (m/z): 411 (M + H)+.
Preparar los siguientes compuestos esencialmente mediante el procedimiento de Ejemplo 1, utilizando los esteres de metilo apropiados en lugar de 4-((1S)-1-(((2R*)-1-(2-fenoxietil)-2-metilpiperidin-2-carbonil)amino)etil)benzoato de metilo:
Ej.
Nombre quimico Estructura MS (m/z) Nota
2
Clorhidrato de acido 4-((1S)-1-((2R*,6R*)-(1 -(2-fenoxietil)-6- metilpiperidin-2-carbonil)amino)etil) benzoico a° HCI 411 (M+H)+
3
Acido 4-(((1S,3R,4f?)-2-(2-fenoxietil)-2-azabiciclo[2.2.1]hept an-3- carbonil)aminometil)benzoico OMT" 2 0 O'” 395 (M+H)+ a,b
4
Acido 4-((1S)-1-(((1S,3R,4R)-2-(2-fenoxietil)-2- azabiciclo[2.2.1]heptan-3-carbonil)amino)etil) benzoico ^ °s a0 409 (M+H)+ a,b,c
5
Acido 4-((1S)-1-(((5R)-6-(2-(4-fluorofenoxi)etil)-6- azaspiro[2.5]octano-5-carbonil)amino)etil) benzoico r ? 0 5 Fxx° 441 (M+H)+ d
Ej.
Nombre quimico Estructura MS (m/z) Nota
6
acido 4-((1S)-1-(((5R)-6-(2-fenoxietil)-6-azaspiro[2.5]octano-5- carbonil)amino)etil) benzoico 6 vOT" rJ f ■ Cr° 423 (M+H)+ d
7
acido 4-(( 1 S)-1 -(((1 S,4R,6S)-3-(2-fenoxietil)-3- azabiciclo[4.1.0]hept ane-4-carbonil)amino)etil) benzoico DyUT' r1 0 ' Cr° 409 (M+H)+ e
8
Clorhidrato de acido 4-((1S)-1-(((2R)-1-(2-fenoxietil)-4,4- difluoropiperidin-2-carbonil)amino)etil) benzoico a 433 (M+H)+
Ej.
Nombre quimico Estructura MS (m/z) Nota
9
Clorhidrato de acido 4-((1S)-1-(((2S)-1-(2-fenoxietil)- 4,4-difluoropiperidin-2-carbonil)amino)etil) benzoico F F j I * 433 (M+H)+ , 455 (M+Na )+
rv° HCI
10
Trifluoroacetato de acido 4-((1S)-1-(((2R)-1-(2-(4- fluorofenoxi)etil)-5,5-difluoropiperidin-2- carbonil)amino)etil) benzoico ,/J h h rr^ ? ° 2 o o 451 (M+H)+ f,g
11
acido 4-((1S)-1-(((2R*)-1-(2-fenoxietil)-4,4- dimetilpiperidin-2-carbonil)amino)etil) benzoico \ a°r K „ fX rVV^ J O ’ 425 (M+H)+ C
Ej.
Nombre quimico Estructura MS (m/z) Nota
12
Trifluoroacetato de acido 4-((1S)-1-(((2R)- 1-(2-fenoxietil)-4-oxopiperidin-2- carbonil)amino)etil) benzoico ho%3 a° T 411 (M+H)+ d,g
13
acido 4-((1S)-1-(((2R,4S)-1-(2-fenoxietil)-4- hidroxipiperidin-2-carbonil)amino)etil) benzoico 6^cr °■ o° 413 (M+H)+ d
14
acido 4-((1S)-1-(((2R,4S)-1-(2-fenoxietil)-4- metoxipiperidin-2-carbonil)amino)etil) benzoico OCHg ^ ° ■ a° 427 (M+H)+ d
Ej.
Nombre quimico Estructura MS (m/z) Nota
15
Clorhidrato de acido 4-((1S)- 1-((2R*,5S*)-(1 -(2-fenoxietil)- 5-hidroxipiperidin-2- carbonil)amino)etil) benzoico s ° -! a 413 (M+H)+ , 435 (M+Na )+
16
Clorhidrato de acido 4-((1S)- 1-(((2R)-1-(2-(4- fluorofenoxi)etil)pirrolidin-2- carbonil)amino)etil) benzoico ^ S° 1 F ~XJ° HCI 401 (M+H)+ h
17
acido 4-((1S)-1-(((2R)-1-(2-(4- fluorofenoxi)etil)4 ,4- difluoropirrolidin-2- carbonil)amino)etil) benzoico 'h^jcr ^ r' * 1 .-O'0 437 (M+H)+ i
CO
Ej.
Nombre quimico
Estructura
MS (m/z)
Nota
18
Clorhidrato de acido 4-((1S)1- (((1 R)-2-(2-fenoxietil)-1,2,3,4- tetrahidroisoquinolin-1- carbonil)amino)etil) benzoico
a
imagen56
CC^H
445 (M+H)+
a) En lugar de acidificar con HCI/1,4-dioxano, neutralizar la mezcla de reaccion con HCI acuoso 5,0 N, concentrar bajo presion reducida, triturar el material con EtOAc, y decantar la fase de solucion, luego retirar el solvente para obtener el producto.
b) Agitar la mezcla de reaccion a 70°C durante dos horas en lugar de a temperatura ambiente durante la noche.
c) Purificar mediante cromatografia de columna flash sobre gel de silice, eluir con un 0 % a 10 % de gradiente de ChbOH/EtOAc.
d) En lugar de acidificar con HCI/1,4-dioxano, neutralizar la mezcla de reaccion a pH 7,0 con HCI acuoso 1,0 N, luego extraer con EtOAc, lavar con NaCI acuoso saturado, secar la fase organica sobre Na2S04, filtrar, y concentrar bajo presion reducida para obtener el producto.
e) En lugar de acidificar con HCI/1,4-dioxano, neutralizar la mezcla de reaccion a pH 7,0 con HCI acuoso 1,0 N, luego concentrar bajo presion reducida, triturar el material con 1:1 etanol/CHsCN, someter a sonificacion, y retirar los solidos mediante filtracion a traves de un disco de filtro PTFE. Concentrar el filtrado bajo presion reducida para obtener el producto.
f) En lugar de acidificar con HCI/1,4-dioxano, concentrar la mezcla de reaccion bajo presion reducida.
g) Someter el material crudo a cromatografia de fase inversa sobre gel de silice C18, eluir con 0,1 % de TFA en un gradiente de CHsCN/agua para obtener el producto como un diastereomero unico.
h) En lugar de acidificar con HCI/1,4-dioxano, concentrar bajo presion reducida para eliminar los solventes orqanicos, acidificar la
5
10
15
20
25
30
35
40
45
Ejemplo 19 Smtesis de clorhidrato de acido 4-((1S)-1-(((2R)-1 -(2-fenoxietil)-5,5-difluoropiperidin-2- carbonil)amino)etil)benzoico.
imagen57
Agitar una mezcla de clorhidrato de 4-((1S)-1-(((2R*)-5,5-difluoropiperidin-2-carbonil)amino)etil)benzoato de metilo (200 mg, 0,55 mmol), p-bromofenetol (113 mg, 0,55 mmol), carbonato de potasio (229 mg, 1,65 mmol), CH3CN (1.38 ml), y agua (por lo menos 9.9 mg, 0,55 mmol pero no mas de 29.7 mg, 1,65 mmol) a 70°C durante dos dfas, luego a 82°C durante tres dfas. Concentrar la mezcla bajo presion reducida para suministrar un solido. Agitar este solido en etanol en ebullicion, filtrar, y concentrar el filtrado bajo presion reducida. Someter el material crudo a cromatograffa de fase inversa sobre gel de sflice C18, eluir con 0,1 % de acido formico en un gradiente de CH3CN/agua, para suministrar 161 mg de una mezcla de diastereomeros del compuesto del fftulo. Someter 125 mg de esta mezcla a cromatograffa de fluido supercfftico preparatorio sobre una columna Chiralcel OJ-H 5 pM, eluir con 0,2 % de isopropilamina en a 3:1 mezcla de CO2 supercfftico a CH3OH. Aislar el segundo isomero para eluir, y concentrar bajo presion reducida. Tratar el material con una solucion 4,0 M de HCl en 1,4-dioxano (5 ml) y agitar durante 10 minutos. Concentrar bajo presion reducida para suministrar el compuesto del titulo como un solido blanco (54 mg, 27 % de rendimiento). Espectro de masa (m/z): 433 (M + H)+, 455 (M + Na)+.
Union in vitro a EP1, EP2, EP3 y EP4 humanos
Las membranas de hEP1 y hEP4 se preparan a partir de celulas HEK293 recombinantes que expresan establemente receptores de EP1 humano (numero de acceso de Genbank AY275470) o EP4 (numero de acceso de Genbank AY429109). Las membranas de hEP2 y hEP3 se preparan a partir de celulas HEK293 transfectadas transitoriamente con plasmidos de receptor EP2 (Numero de acceso de Genbank AY275471) o EP3 (isoforma VI: Numero de acceso de Genbank AY429108). Los granulos celulares congelados se homogeneizan en regulador de homogeneizacion utilizando un homogeneizador de Teflon/vidrio. La protema de membrana se divide en alfcuotas y se congela rapidamente sobre hielo seco antes de almacenamiento a -80 °C. El regulador de homogeneizacion contiene Tris-Hcl 10 mM, pH 7,4, sacarosa 250 mM, EDTA 1 mM, indometacina 0,3 mM y Complete™ plus, con EDTA, obtenido de Roche Molecular Biochemicals (numero de catalogo 1 697 498).
Los valores de Kd para union de [3H]-PGE2 a cada receptor se determinan mediante estudios de union de saturacion o competicion homologa. Los compuestos se prueban en un formato de 96 pocillos utilizando una serie de dilucion de tres veces para generar una curva de 10 puntos. El compuesto diluido se incuba con 20 pg/pocillo de EP1, 10 pg/pocillo de EP2, 1 pg/pocillo de EP3 o 10 a 20 pg/pocillo de membrana EP4 durante 90 minutos a 25 °C en presencia de [3H]-PGE2 0,3 a 0,5 nM (Perkin Elmer, 118 a 180 Ci/mmol). La reaccion de union se realiza en 200 pl de regulador MES (MES 10 mM pH 6,0 con KOH, de MgCh 10 mM y EDTA 1 mM) utilizando placas de pocillo profundo de 96 pocillos de poliestireno de 0,5 ml. La union no espedfica se calcula al comparar la union en presencia y ausencia de PGE2 2 pM. Las membranas se recolectan por filtracion (cosechador TomTek), se lavan 4 veces con regulador fffo (MES 10 mM pH 6,0 con KOH, MgCh 10 mM), se secan en un horno a 60 °C y la radioactividad se cuantifica como conteos por minuto (CPM) utilizando un detector TopCount. El porcentaje de union espedfica se calcula como el porcentaje de la union en ausencia de cualquier inhibidor, corregida para la union en presencia de 2 uM de PGE2. Los datos se analizan utilizando una ecuacion logfstica no lineal de 4 parametros (Ecuacion de ABase 205) como se muestra: y= (A+((B-A)/(1+((C/x)AD)))) en el que, y = % de inhibicion espedfica , A = parte inferior de la curva; B = parte superior de la curva; C = IC50 relativa = concentracion que causa un 50 % de inhibicion en funcion del rango de los datos de arriba a abajo; D = Hill, Pendiente = pendiente de la curva. Conversion de Ki a partir de valores IC50 (Ki = IC50/(1 +[L]/Kd) en la que [L] es la concentracion del ligando). Los resultados se expresan como la media geometrica ± desviacion estandar; n = numero de determinaciones independientes. La desviacion estandar se calcula mediante el procedimiento delta, que es SDlogKiX media geometrica x ln (10).
Los compuestos de los Ejemplos 1-19 de la presente invencion se prueban esencialmente como se describio anteriormente y muestran un valor Ki para hEP4 inferior a aproximadamente 2 pM.
Tabla 1: Union in vitro del Ejemplo 8 a EP1, EP2, EP3 y EP4 humanos
Compuesto de prueba
hEP1, Ki (nM) hEP2, Ki (nM) hEP3, Ki (nM) hEP4, Ki (nM)
Ejemplo 8
>12500 (n=1) 956(n=1) >14800 (n=1) 3.68±3.32 (n=6)
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
Los datos en la Tabla 1 demuestran que el compuesto del Ejemplo 8 se une a hEP4 mas fuertemente que a hEP1, hEP2 y hEP3 indicando selectividad para el receptor hEP4.
Actividad de antagonistas funcionales de EP4 humano in vitro
Los ensayos se llevan a cabo en celulas recombinantes HEK293 que expresan establemente el receptor EP4 humano. Las estirpes celulares se mantienen cultivando en DMEM con alto contenido de glucosa e clorhidrato de piridoxina (Invitrogen) suplementado con suero bovino fetal al 10 % (FBS), piruvato de sodio 1 mM, HEPES 10 mM, 500 |jg/ml de geneticina y L-glutamina 2 mM. Los cultivos confluentes se cultivan a 37°C en una atmosfera que contiene 5 % de CO2. Las celulas se recogen utilizando Tripsina-EDTA al 2,5 %, se suspenden en medio de congelacion (FBS con DMSO al 6 %) a 107 celulas/ml y se almacenan alfcuotas en nitrogeno lfquido. Justo antes del ensayo, las celulas se descongelan en DMEM, se centrifugan y se resuspenden en regulador cAMP.
La inhibicion de la produccion de cAMP estimulada por PGE2 por antagonistas de EP4 se mide utilizando HTRF; (Catalogo de Cisbio # 62AM4PEB). Se incuba una alfcuota equivalente a 4000 celulas con 50 jl de regulador de ensayo de cAMP que contiene ECs0 de PGE2 (PIGE2 0,188 nM de Sigma, catalogo N° P5640-10 mg) y antagonistas a temperatura ambiente durante 20 minutos. El regulador de ensayo cAMP contiene 500 ml de HBSS (solucion salina equilibrada de Hank), BSA al 0,1 %, HEPES 20 mM y IBMX 200 pM (Sigma I5879). El acido CJ-042794 (acido 4-{(1S)-1-[({5-cloro-2-[(4-fluorofenil)oxi]fenil}carbonil)amino]etil}benzoico) sirve como control positivo (Vease Murase, A., et al., Life Sciences, 82: 226 - 232 (2008)). Para medir los niveles de cAMP, el conjugado de cAMP-d2 y el conjugado anti-cAMP-criptato en el regulador de lisis se incuban con las celulas tratadas a temperatura ambiente durante 1 hora. La senal de HTRF se detecta utilizando un lector de placas EnVision® (Perkin-Elmer) para calcular la relacion de fluorescencia a 665 nm a 620 nm. Los datos brutos se convierten en cantidad de AMPc (pmol/pocillo) utilizando una curva estandar de AMPc generada para cada experimento. Los datos se analizan utilizando una ecuacion logfstica no lineal de 4 parametros (Ecuacion 205 de ABase) como se muestra: y =(A+((BA)/(1+((C/x)AD)))) en la que, y = % de inhibicion espedfica , A = Parte inferior de la curva, B = Parte superior de la curva, C = IC50 relativa = concentracion que causa 50 % de inhibicion en funcion del rango de los datos de arriba a abajo, D = Hill, Pendiente, Pendiente = pendiente de la curva. Los resultados se expresan como la media geometrica ± desviacion estandar 6; n = numero de determinaciones independientes. La desviacion estandar se calcula mediante el procedimiento delta, que es SDlogKi x media geometrica x ln(10).
Siguiendo los procedimientos esencialmente como se describio anteriormente, el compuesto del Ejemplo 8 tiene una IC50 de 1,76±1,51 nM (n = 6) medida en EP4 humana. Esto demuestra que el compuesto del Ejemplo 8 es un antagonista de EP4 humana in vitro.
Actividad antagonista in vitro en sangre humana entera
Se considera que los efectos inhibidores de PGE2 sobre la produccion de TNFa inducido por LPS a partir de macrofagos/monocitos estan mediados por receptores EP4 (Vease Murase, A., et al., Life Sciences, 82:226-232 (2008)). La capacidad del compuesto del Ejemplo 8 para invertir el efecto inhibidor de PGE2 sobre la produccion de TNFa inducida por LPS en sangre completa humana es un indicador de actividad funcional.
Se recolecta sangre de donantes voluntarios normales en tubos vacutainer de heparina de sodio. Los donantes no han tomado NSAID ni celecoxib en 48 horas ni glucocorticoides dentro de dos semanas posteriores a la donacion. Todos los tubos/donante se agrupan en tubos de centnfuga conicos Falcon de 50 ml y se distribuyen en 98 jl/pocillo en placas de cultivo tisular de 96 pocillos (Falcon 3072). Los compuestos se diluyen en DMSO a 100 X final y se agrega 1 jl/pocillo por triplicado a la sangre para dar curvas de respuesta de concentracion de 7 puntos. La sangre se pretrata con los compuestos a 37 °C, en una atmosfera humidificada con 5 % de CO2, durante 30 minutos, despues de lo cual se agrega 1 jl/pocillo de una solucion de 1 mg/ml de lipopolisacarido (LPS) (Sigma 0111: B4) en 0,2 mg/ml de albumina de suero bovino (BSA)/PBS +/- PGE21 mM (Cayman 14010) para dar una concentracion de LPS final de PGE2 10 jg/ml de +/- 10 nM. Las placas se incuban durante 20 a 24 horas a 37 °C en una atmosfera humidificada con CO2 al 5 %. Las placas se centrifugan a 1800 x g, 10 minutos a 22 °C, en una centnfuga Eppendorf 5810R. El plasma se elimina de la capa celular y se transfiere a placas de polipropileno de fondo en V. Los niveles de TNFa en 2 jl de plasma se cuantifican mediante un inmunoensayo enzimatico disponible comercialmente (R & D Systems DY210), utilizando placas Immulon 4 HBX (Thermo 3855) y sustrato de 3,3',5,5'-tetrametilbifenil-4,4'- diamina (KPL 50-76-03). Las placas se leen en A450-A650 en un lector de placas (Molecular Devices Versamax) utilizando el software SOFTmaxPRO (v. 4.3.1). Los IC50 se calculan utilizando regresion no lineal Graphpad Prism (v. 4), ajuste sigmoidal de curva de respuesta a la dosis. Los resultados se expresan como la media geometrica ± desviacion estandar; se calcula el n = numero de determinaciones independientes la desviacion estandar mediante el procedimiento delta, que es SDlogKi x media geometrica x ln (10).
Siguiendo los procedimientos esencialmente como se describio anteriormente, el compuesto del Ejemplo 8 tiene una IC50 de 0,0782 ± 0,061 uM (n = 6) medida en EP4 humana. Esto demuestra que el compuesto del Ejemplo 8 es un antagonista de EP4 en el ensayo de induccion de TNFa en sangre humana.

Claims (11)

  1. REIVINDICACIONES
    5
    1. Un compuesto de formula:
    imagen1
    en la que X es:
    imagen2
    imagen3
    R es H, metilo, o etilo;
    R1 es metilo, cuando R2 es H, y R1 es H cuando R2 es metilo; 10 R3 es H o F;
    R4 es H, F, o metilo;
    R5 es OH, metilo, metoxi, o F;
    R6 es H cuando R7 es OH, y R6 es F cuando R7 es F; y
    10
    R8 y R9 son cada uno independientemente H o F; o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
  2. 2. El compuesto o sal de acuerdo con la reivindicacion 1, en el que R es metilo.
  3. 3. El compuesto o sal de acuerdo con cualquiera de la reivindicacion 1 o reivindicacion 2, en el que R4 es F y R5 es
    F.
  4. 4. El compuesto o sal de acuerdo con cualquiera de la reivindicacion 1 o reivindicacion 2, en el que R4 es metilo y R5 es metilo.
  5. 5. El compuesto o sal de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-4, en el que R8 es F y R9 es F.
  6. 6. El compuesto o sal de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en el que X es:
    imagen4
    imagen5
    imagen6
  7. 7. El compuesto o sal de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en el que X es:
  8. 8. Un compuesto o sal farmaceuticamente aceptable del mismo de acuerdo con reivindicaciones 1 a 7, para su uso
    en terapia.
  9. 9. Un compuesto o sal farmaceuticamente aceptable del mismo de acuerdo con reivindicaciones 1 a 7, para su uso en el tratamiento de osteoartritis.
  10. 10. Un compuesto o sal farmaceuticamente aceptable del mismo de acuerdo con reivindicaciones 1 a 7, para su uso en el tratamiento de artritis reumatoide.
    5 11. Un compuesto o sal farmaceuticamente aceptable del mismo de acuerdo con reivindicaciones 1 a 7, para su uso
    en el tratamiento de dolor asociado con osteoartritis o artritis reumatoide.
  11. 12. Una composicion farmaceutica, que comprende un compuesto o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo de acuerdo con reivindicaciones 1 a 7, con uno o mas vehfculos, diluyentes o excipientes farmaceuticamente aceptables.
ES14827907.8T 2013-12-17 2014-12-11 Derivados de amina cíclica de fenoxietilo y su actividad como moduladores del receptor EP4 Active ES2651858T3 (es)

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Families Citing this family (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CR20180323A (es) 2015-11-20 2018-08-06 Idorsia Pharmaceuticals Ltd Derivados de indol n-sustituídos como moduladores de los receptores de pge2
CA3060394A1 (en) 2017-05-18 2018-11-22 Idorsia Pharmaceuticals Ltd Pyrimidine derivatives as pge2 receptor modulators
WO2018210987A1 (en) 2017-05-18 2018-11-22 Idorsia Pharmaceuticals Ltd Benzofurane and benzothiophene derivatives as pge2 receptor modulators
US11446298B2 (en) 2017-05-18 2022-09-20 Idorsia Pharmaceuticals Ltd Pyrimidine derivatives
EP3625224B1 (en) 2017-05-18 2021-08-04 Idorsia Pharmaceuticals Ltd N-substituted indole derivatives
HUE056080T2 (hu) 2017-05-18 2022-01-28 Idorsia Pharmaceuticals Ltd Fenilszármazékok mint PGE2 receptor modulátorok
CN109970625B (zh) * 2017-12-28 2021-02-26 新发药业有限公司 一种5r-苄氧氨基哌啶-2s-甲酸或其衍生物的制备方法
WO2020251957A1 (en) * 2019-06-11 2020-12-17 Teon Therapeutics, Inc. Prostaglandin e2 receptor 4 antagonists and uses thereof
EP3885339A1 (en) 2020-03-27 2021-09-29 Rottapharm Biotech S.r.l. Process for the preparation of (r)-4-(1-(6-(4-(trifluoromethyl)benzyl)-6-azaspiro[2.5]octane-5-carboxamido)-cyclopropyl) benzoic acid or a salt thereof
JPWO2022102731A1 (es) 2020-11-13 2022-05-19
CN112608271A (zh) * 2020-11-26 2021-04-06 安润医药科技（苏州）有限公司 酰胺衍生物及其在制备ep4受体拮抗剂中的应用

Family Cites Families (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE2500157C2 (de) 1975-01-03 1983-09-15 Hoechst Ag, 6230 Frankfurt N-Acyl-4-(2-aminoäthyl)-benzoesäuren, deren Salze und Ester, Verfahren zu deren Herstellung und deren Verwendung
MXPA04005555A (es) 2002-03-18 2005-05-16 Pfizer Prod Inc Procedimientos de tratamiento con agonistas selectivos del receptor ep4.
BRPI0412345A (pt) * 2003-07-28 2006-10-03 Janssen Pharmaceutica Nv derivados de benzimidazol, benzotiazol e benzoxazol e seu uso como moduladores de lta4h
KR100747401B1 (ko) 2003-09-03 2007-08-08 화이자 인코포레이티드 프로스타글란딘 ｅ2 길항제로서의 페닐 또는 피리딜 아미드 화합물
EA200601830A1 (ru) * 2004-05-04 2007-04-27 Пфайзер Инк. Ортозамещённые арильные или гетероарильные амидные соединения
JP4054368B2 (ja) 2004-05-04 2008-02-27 ファイザー株式会社 置換メチルアリール又はヘテロアリールアミド化合物
CA2648729A1 (en) 2006-04-24 2007-11-01 Merck Frosst Canada Ltd. Indole amide derivatives as ep4 receptor antagonists
CA2654811A1 (en) 2006-06-12 2007-12-21 Merck Frosst Canada Ltd. Indoline amide derivatives as ep4 receptor ligands
EP2460787A1 (en) * 2007-07-03 2012-06-06 Astellas Pharma Inc. Amide compounds and their use as PGE2 antagonists.
PT2565191E (pt) * 2008-05-14 2014-12-04 Astellas Pharma Inc Derivados do ácido 4-(indol-7- ilcarbonilaminometil)ciclo-hexanocarboxílico como antagonistas de receptores ep4, úteis no tratamento de insuficiência renal crónica ou de nefropatia diabética
JP5536773B2 (ja) 2008-08-14 2014-07-02 ベータ・ファーマ・カナダ・インコーポレイテッド Ｅｐ４受容体アンタゴニストとしてのヘテロ環式アミド誘導体
CA2789665C (en) 2010-02-22 2020-06-16 Raqualia Pharma Inc. Use of ep4 receptor antagonists in the treatment of il-23 mediated diseases
WO2013004291A1 (en) 2011-07-04 2013-01-10 Rottapharm S.P.A. Cyclic amine derivatives as ep4 receptor agonists
IN2014CN00719A (es) * 2011-07-04 2015-04-03 Rottapharm Spa
AR091429A1 (es) 2012-06-29 2015-02-04 Lilly Co Eli Compuestos de fenoxietil piperidina
TW201443004A (zh) 2013-02-15 2014-11-16 Lilly Co Eli 苯氧基乙氧基化合物
TWI636046B (zh) * 2013-05-17 2018-09-21 美國禮來大藥廠 苯氧基乙基二氫－１ｈ－異喹啉化合物

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