EA028921B1 - Феноксиэтилы - Google Patents

Феноксиэтилы Download PDF

Info

Publication number
EA028921B1
EA028921B1 EA201690894A EA201690894A EA028921B1 EA 028921 B1 EA028921 B1 EA 028921B1 EA 201690894 A EA201690894 A EA 201690894A EA 201690894 A EA201690894 A EA 201690894A EA 028921 B1 EA028921 B1 EA 028921B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
methyl
mmol
ethyl
amino
mixture
Prior art date
Application number
EA201690894A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201690894A1 (ru
Inventor
Мэттью Джозеф Фишер
Стивен Ли Каклиш
Питер Рудольф Маннинен
Мэтью Аллен Шиффлер
Алан М. Варшавски
Джереми Шуленбург Йорк
Original Assignee
Эли Лилли Энд Компани
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Эли Лилли Энд Компани filed Critical Эли Лилли Энд Компани
Publication of EA201690894A1 publication Critical patent/EA201690894A1/ru
Publication of EA028921B1 publication Critical patent/EA028921B1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/06—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D211/36—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D211/60—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/438—The ring being spiro-condensed with carbocyclic or heterocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4453—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine only substituted in position 1, e.g. propipocaine, diperodon
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D207/10—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D207/16—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D209/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D209/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with one carbocyclic ring
    • C07D209/52—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with one carbocyclic ring condensed with a ring other than six-membered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/06—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D217/00—Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems
    • C07D217/22—Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to carbon atoms of the nitrogen-containing ring
    • C07D217/26—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D221/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom, not provided for by groups C07D211/00 - C07D219/00
    • C07D221/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom, not provided for by groups C07D211/00 - C07D219/00 condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D221/04—Ortho- or peri-condensed ring systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D221/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom, not provided for by groups C07D211/00 - C07D219/00
    • C07D221/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom, not provided for by groups C07D211/00 - C07D219/00 condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D221/20—Spiro-condensed ring systems

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Hydrogenated Pyridines (AREA)
  • Other In-Based Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Pyrrole Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Abstract

Описывается соединение формулы Iгде X, R, R, R, R, R, R, R, R, Rи Rсоответствуют определениям, приведенным в настоящем тексте, или его фармацевтически приемлемая соль.

Description

изобретение относится к некоторым новым феноксиэтилам, фармацевтическим композициям, содержащим эти соединения, способам применения этих соединений для лечения физиологических нарушений и к промежуточным соединениям и способам, которые можно применять для синтеза этих соединений.
Настоящее изобретение относится к области лечения воспалительных состояний, таких как артрит, включая остеоартрит и ревматоидный артрит и включая также боль, связанную с этими состояниями. Только в Соединенных Штатах артритом страдают миллионы пациентов, и он является одной из основных причин инвалидизации. Схемы лечения часто включают НСПВП (нестероидные противовоспалительные препараты) или ингибиторы СОХ-2, которые могут вызывать неблагоприятные побочные эффекты в отношении сердечно-сосудистой системы. Соответственно, пациентам с плохими показателями сердечно-сосудистой системы, такими как гипертензия, может быть противопоказано применение НСПВП или ингибиторов СОХ-2. Таким образом, существует потребность в альтернативном средстве лечения остеоартрита и ревматоидного артрита, предпочтительно лишенном побочных эффектов, характерных для существующих средств лечения.
Идентифицировано четыре подтипа рецепторов простагландина Е2 (РОЕ2): ЕР1, ЕР2, ЕР3 и ЕР4. Обнаружено, что ЕР4 является основным рецептором, отвечающим за воспалительную боль в суставах в моделях ревматоидного артрита и остеоартрита на грызунах (см., I. Рйагшасо1. Ехр. Тйег., 325, 425 (2008)). Соответственно, селективный антагонист ЕР4 может быть полезен в лечении артрита, включая боль при артрите. Кроме того, предполагают, что, поскольку антагонизм в отношении ЕР4 не нарушает биосинтез простаноидов, таких как РО42 и ТхА2, селективный антагонист ЕР4 возможно не будет иметь потенциальных побочных эффектов в отношении сердечно-сосудистой системы, которые наблюдаются у НСПВП и ингибиторов СОХ-2 (см., например, Вюогдашс & МеШста1 Сйеш15йу ЕеИег® 21, 484 (2011)).
В ШО 2013/004290 предложены некоторые производные циклических аминов, обладающие антагонистической активностью в отношении рецепторов ЕР4. В ШО 2013/004291 предложены некоторые производные циклических аминов, обладающие агонистической активностью в отношении рецепторов ЕР4.
Согласно настоящему изобретению предложены некоторые новые соединения, которые являются ингибиторами ЕР4, и некоторые новые соединения, которые являются селективными ингибиторами ЕР4 по отношению к ЕР1, ЕР2 и ЕР3. Дополнительно согласно настоящему изобретению предложены некоторые новые соединения, которые характеризуются сниженными, по сравнению с традиционными НСПВП, потенциальными побочными эффектами в отношении сердечно-сосудистой или пищеварительной системы.
Соответственно, согласно настоящему изобретению предложено соединение формулы I
где X представляет собой:
- 1 028921
К представляет собой Н, метил или этил;
К1 представляет собой метил, если К2 представляет собой Н, и К1 представляет собой Н, если К2 представляет собой метил;
К3 представляет собой Н или Р;
К4 представляет собой Н, Р или метил;
К5 представляет собой ОН, метил, метокси или Р;
К6 представляет собой Н, если К7 представляет собой ОН, и К6 представляет собой Р, если К7 представляет собой Р; и
каждый из К8 и К9 независимо представляет собой Н или Р, или его фармацевтически приемлемая соль.
Согласно настоящему изобретению также предложен способ лечения артрита у пациента, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, эффективного количества соединения формулы , или его фармацевтически приемлемой соли. Согласно настоящему изобретению также предложен способ лечения остеоартрита у пациента, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, эффективного количества соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли. Дополнительно согласно настоящему изобретению предложен способ лечения ревматоидного артрита у пациента, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, эффективного количества соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли. Согласно настоящему изобретению также предложен способ лечения боли, связанной с артритом у пациента, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, эффективного количества соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли. Согласно настоящему изобретению также предложен способ лечения боли, связанной с остеоартритом или ревматоидным артритом, у пациента, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, эффективного количества соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли.
Кроме того, согласно настоящему изобретению предложено соединение формулы I или его фармацевтически приемлемая соль для применения в терапии. Дополнительно согласно настоящему изобретению предложено соединение формулы I или его фармацевтически приемлемая соль для применения в лечении артрита. Далее согласно настоящему изобретению предложено соединение формулы I или его фармацевтически приемлемая соль для применения в лечении остеоартрита. Дополнительно согласно настоящему изобретению предложено соединение формулы I или его фармацевтически приемлемая соль для применения в лечении ревматоидного артрита. Также согласно настоящему изобретению предложено соединение формулы I или его фармацевтически приемлемая соль для применения в лечении боли, связанной с остеоартритом или ревматоидным артритом. Также согласно настоящему изобретению предложено применение соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для лечения артрита. Далее согласно настоящему изобретению предложено применение соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для лечения остеоартрита. Согласно настоящему изобретению предложено применение соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для лечения ревматоидного артрита. Согласно настоящему изобретению также предложено применение соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для лечения боли, связанной с остеоартритом или ревматоидным артритом.
Далее согласно настоящему изобретению предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль, с одним или более фармацевтически приемлемых носителей, разбавителей или вспомогательных веществ. В конкретном варианте реализации композиция дополнительно включает один или более других терапевтических агентов. Настоящее изобретение также охватывает новые промежуточные соединения и способы для синтеза соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли.
В настоящем тексте термины "лечение" или "лечить" включают сдерживание, замедление, остановку или обращение прогрессирования или тяжести имеющегося симптома или нарушения.
В настоящем тексте термин "пациент" относится к млекопитающему, такому как мышь, морская свинка, крыса, собака или человек. Понятно, что предпочтительным пациентом является человек.
В настоящем тексте термин "эффективное количество" относится к количеству или дозе соединения согласно настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой соли, которое после введения одной или нескольких доз пациенту обеспечивает желаемый эффект у пациента, проходящего диагностику или лечение.
Эффективное количество может быть легко определено штатным диагностом, как специалистом в данной области, с применением известных методик или путем анализа результатов, полученных в сходных обстоятельствах. При определении эффективного количества для пациентов штатный диагност учитывает ряд факторов, включая следующие, но не ограничиваясь ими: вид животного, его размер, возраст и общее состояние здоровья, конкретное присутствующее заболевание или нарушение, степень, присутствие или тяжесть этого заболевания или состояния, реакцию конкретного пациента, конкретное вводимое соединение, способ введения, параметры биодоступности вводимого препарата, выбранный режим
- 2 028921
дозирования, сопутствующее применение лекарственных средств и другие существенные обстоятельства.
Соединение формулы I или его фармацевтически приемлемая соль в целом эффективны в широком диапазоне доз. Например, дневная дозировка обычно составляет от приблизительно 0,01 до приблизительно 50 мг/кг/день массы тела. В некоторых случаях уровни дозировки ниже нижнего предела приведенного выше диапазона могут быть более чем адекватными, в то время как в других случаях могут применяться еще более высокие дозы при приемлемых побочных эффектах, и, соответственно, приведенный выше диапазон доз никоим образом не подразумевает ограничения настоящего изобретения.
В предпочтительном варианте соединения согласно настоящему изобретению изготавливают в форме фармацевтических композиций, которые вводят любым путем, обеспечивающим биодоступность соединения. В наиболее предпочтительном случае такие композиции предназначены для перорального введения. Такие фармацевтические композиции и способы их получения хорошо известны в данной области (см., например, Кештд1оп: ТНе 8с1епсе апб Ргасйсе о£ РНагшасу (Ώ.Β. Тгоу, Εάίίοτ, 21δί Εάίίίοη, Είρρίποοίί, ^йНашз & ^'Пкпъ, 2006).
Соединения формулы I являются особенно подходящими для применения в способах лечения согласно настоящему изобретению, однако некоторые группы, заместители и конфигурации являются предпочтительными. В нижеследующих параграфах описаны такие предпочтительные группы, заместители и конфигурации. Следует понимать, что эти предпочтения относятся как к способам лечения, так и к новым соединениям согласно настоящему изобретению.
В предпочтительном варианте К представляет собой метил.
Особенно предпочтителен вариант, в котором если К представляет собой метил, то К3 представляет собой Н.
В предпочтительном варианте, если К4 представляет собой Е, то К5 представляет собой Е.
Дополнительно предпочтителен вариант, в котором если К4 представляет собой метил, то К5 представляет собой метил.
В предпочтительном варианте, если К8 представляет собой Е, то К9 представляет собой Е.
В предпочтительном варианте X представляет собой:
В особенно предпочтительном варианте X представляет собой:
- 3 028921
Особенно предпочтителен вариант, в котором если К представляет собой метил, то К3 представляет собой Н и X представляет собой:
Особенно предпочтительным является вариант, в котором если К представляет собой метил, то К3 представляет собой Н и X представляет собой:
Предпочтительными соединениями являются:
4-((15)-1-(((15,37?,47?)-2-(2-феноксиэтил)-2-азабицикло[2,2,1 ] гептан-3
карбонил)амино)этил)бензойная кислота,
4-((1 ό)-1 -(((57?)-6-(2-(4-фторфенокси)этил)-6-азаспиро[2,5 ] октан-5карбонил)амино)этил)бензойная кислота,
4-((15)-1-(((57?)-6-(2-феноксиэтил)-6-азаспиро[2,5]октан-5карбонил)амино)этил)бензойная кислота,
4-((15)-1-(((15,47?, 65)-3-(2-феноксиэтил)-3-азабицикло[4,1,0]гептан-4карбонил)амино)этил)бензойная кислота,
4-(( 15)-1-(((27?)-1-(2-феноксиэтил)-4,4-дифторпипер идин-2карбонил)амино)этил)бензойная кислота,
4-((15)-1 -(((25)-1 -(2-феноксиэтил)-4,4-д ифтор пипер идин-2карбонил)амино)этил)бензойная кислота,
4-((15)-1 -(((27? *)-1 -(2-фенокс иэтил)-4,4-диметилпипер идин-2 карбонил)амино)этил)бензойная кислота,
4-((15)-1 -(((27?)-1 -(2-(4-фторфенокси)этил)4,4-дифторпирролид ин-2карбонил)амино)этил)бензойная кислота,
4-(( 15)-1 -(((17?)-2-(2-феноксиэтил)-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-1 карбонил)амино)этил)бензойная кислота, и их фармацевтически приемлемые соли.
- 4 028921
Особенно предпочтительными соединениями являются:
4-((15)-1 -(((57?)-6-(2-(4-фторфенокси)этил)-6-азаспиро[2,5 ] октан-5карбонил)амино)этил)бензойная кислота,
4-((15)-1-(((57?)-6-(2-феноксиэтил)-6-азаспиро[2,5]октан-5карбонил)амино)этил)бензойная кислота,
4-((15)-1-(((15,47?, 65)-3 -(2-феноксиэтил)-3 -азабицикло[4,1,0]гептан-4карбонил)амино)этил)бензойная кислота,
4-((15)-1-(((277)-1-(2-феноксиэтил)-4,4-дифторпипер идин-2карбонил)амино)этил)бензойная кислота, и их фармацевтически приемлемые соли.
В настоящем описании приняты следующие обозначения и сокращения:
"ч" - час(ы);
"КПа" - давление по манометру в килопаскалях;
"Вое" - трет-бутоксикарбонильная защитная группа;
"ΌΜΕΜ" - модифицированная по Иглу среда Дульбекко;
"ΛΟΝ" - ацетонитрил;
"ΌΙΕΆ" - Ν,Ν-диизопропилэтиламин;
"ΌΜΆΡ" - 4-(\.\-ди\1ети„1а\1ино)пиридин;
"ДМСО" - диметилсульфоксид;
"ДМФА" - Ν,Ν-диметилформамид;
"ΕΐΘΗ" - этанол;
"ТГФ" - тетрагидрофуран;
"МеОН" - метанол;
"ЕЮАс" - этилацетат;
"Е!2О" - диэтиловый эфир;
"ТВМЕ" - трет-бутилметиловый эфир;
"ВОР" - бензотриазол-1-илокси-трис-(диметиламино)фосфония гексафторфосфат;
"Ο6ζ" - бензилокси карбаматная защитная группа;
"тСРВА" - 3-хлорпербензойная кислота;
"ΚΗΜΌ3" - бис-(триметилсилил)амид калия;
"РОЕ2" - простагландин Е2;
"ФБС" - фетальная бычья сыворотка;
"ΙΒΜΧ" - 3-изобутил-1-метилксантин;
"ΜΕ3" - 2-(N-морфолин)этансульфоновая кислота;
"НЕРЕЗ" - 2-[4-(2-гидроксиэтил)пиперазин-1-ил]этансульфоноая кислота;
"НТКЕ" - гомогенная флуоресценция с временной разверткой;
"НЕК" - почка эмбриона человека;
"НВЗЗ" - сбалансированный солевой раствор Хэнка;
"ЕС80" - концентрация агента, которая обеспечивает 80% максимальной эффективности, возможной для этого агента;
"1С80" - концентрация агента, которая обеспечивает 50% максимальной реакции ингибирования, возможной для этого агента;
"Рй" - фенильная группа следующей структуры:
Фармацевтически приемлемые соли и обычные методики их получения известны в данной области. См., например, Оои1б, Р.Ь., "ЗаН зе1есйоп Юг Ъазщ бгидз", 1п1егпа1юпа1 1оигпа1 о£ Рйагтасеийсз, 33; 201217 (1986); Вазйп, К..Т, е! а1. "За1! Зе1есйоп апб Орΐ^т^ζаΐ^оп Ргосебигез Юг Рйагтасеийса1 Ν+ν Сйетта1 Епбйез", Огдашс Ргосезз Кезеагсй апб Иеуе1ортеп1, 4: 427-435 (2000) и Вегде, 3.Μ., е! а1., "Рйагтасеийса1 За1!з", 1оигпа1 о£ Рйагтасеийса1 Зшепсез, 66: 1-19, (1977). Для специалиста в области синтеза понятно, что соединения согласно настоящему изобретению легко преобразуются в фармацевтически приемлемые соли, такие как гидрохлоридная соль, и могут быть выделены в таком виде с использованием методик и условий, хорошо известных среднему специалисту в данной области. Кроме того, для специалиста в области синтеза будет понятно, что соединения формулы Ι легко преобразуются в форму свободного основания или свободной кислоты из соответствующей фармацевтически приемлемой соли и могут быть выделены в этой форме.
Настоящее изобретение предусматривает все отдельные энантиомеры или диастереомеры, а также смеси энантиомеров и диастереомеров указанных соединений, включая рацематы. Отдельные изомеры,
- 5 028921
энантиомеры или диастереомеры могут быть отделены или разделены средним специалистом в данной области на любом удобном этапе синтеза соединений согласно настоящему изобретению такими методами, как методики селективной кристаллизации или хиральная хроматография (см., например, 1. 1асцие8, с1 а1., "Еиайютегк, Касста1с5. аиб КекоМюик", Σοΐιη АПеу аиб §ои8, 1пс., 1981 и Е.Ь. Ейе1 аиб 8.Н. А1еи", §1егеосЬет18Цу οί Огдашс Сотроиибк", АПеу-Шегкаеисе, 1994).
Соединение согласно настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемые соли могут быть получены с использованием различных процедур, известных в данной области, некоторые из которых проиллюстрированы в схемах, синтезах и примерах ниже. Конкретные этапы синтеза для каждого из описанных путей могут быть объединены различными способами или в сочетании с этапами из других схем для получения соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли. Продукты каждого этапа в приведенных ниже схемах могут быть выделены обычными способами, включая экстракцию, выпаривание, преципитацию, хроматографию, фильтрацию и кристаллизацию. Реагенты и исходные материалы легко доступны для среднего специалиста в данной области. Все заместители, если не указано иначе, соответствуют приведенным ранее определениям. Следует понимать, что схемы, синтезы и примеры никоим образом не предназначены для ограничения объема и изобретения.
Синтез 1.
Синтез этил-(2К*,6К*)-6-метил-1-(2-феноксиэтил)пиперидин-2-карбоксилата (рацемического).
ОРМ
В атмосфере азота нагрейте смесь этил-(2К*,6К*)-6-метилпиперидин-2-карбоксилата гидрохлорида (500 мг, 2,41 ммоль), ДМФА (6,0 мл), карбоната калия (998 мг, 7,22 ммоль) и β-бромфенетола (494 мг, 2,41 ммоль) до 100°С с перемешиванием в течение ночи. Дайте реакционной смеси остыть до комнатной температуры, затем разбавьте этилацетатом (100 мл). Промойте эту смесь водой (2x50 мл), а затем насыщенным водным раствором ЫаС1 (2x50 мл), удаляя водную фазу после каждой промывки. Высушите органическую фазу над Мд§О4, удалите твердые вещества фильтрацией и подвергните фильтрат концентрированию при пониженном давлении с получением желтого масла. Осуществите флэш-хроматографию неочищенного материала на силикагеле, используя для элюирования градиент от 0 до 60% ЕЮАс в гексанах, в результате чего получите указанное в заголовке соединение в виде бесцветного масла (200 мг, выход 29%).
Масс-спектр (т/ζ): 292 (М+Н)+.
Синтез 2.
Синтез бензил-(К)-1-трет-бутоксикарбонил-4-оксопиперидин-2-карбоксилата.
о
''СО2Вп
вое
К раствору (К)-1-трет-бутоксикарбонил-4-оксопиперидин-2-карбоновой кислоты (7,00 г, 28,8 ммоль) в СН2С12 (100 мл) при 0°С добавьте бензиловый спирт (2,98 мл, 28,8 ммоль), дициклогексилкарбодиимид (6,60 г, 31,7 ммоль) и ΌΜΑΡ (352 мг, 2,88 ммоль). Дайте этой смеси нагреться до комнатной температуры с перемешиванием в течение ночи. Профильтруйте эту смесь для удаления твердых веществ и подвергните фильтрат концентрированию при пониженном давлении, в результате чего получите неочищенный материал. Подвергните этот неочищенный материал флэш-хроматографии на силикагеле, используя для элюирования градиент от 0 до 20% ЕЮАс в гексанах, в результате чего получите указанное в заголовке соединение в виде бесцветного масла (6,10 г, выход 64%).
Масс-спектр (т/ζ): 234 (М+2Н-Вос), 356 (М+Ыа)+.
- 6 028921
Синтез 3.
Синтез метил-(К)-1 -трет-бутоксикарбонил-4-оксопиперидин-2-карбоксилата.
о
V
' СО2СН3 вое
Схема 1, этап А.
К имеющему комнатную температуру раствору (К)-1-трет-бутоксикарбонил-4-оксопиперидин-2карбоновой кислоты (1,05 г, 4,32 ммоль) в ДМФА (5,0 мл) добавьте карбонат цезия (1,55 г, 4,75 ммоль) и перемешивайте в течение 5 мин. Затем по каплям в течение 15 мин добавьте йодометан (403 мкл, 6,47 ммоль). После завершения добавления перемешивайте эту смесь при комнатной температуре в течение ночи. Затем добавьте воду (25 мл) и экстрагируйте водную смесь метил-трет-бутиловым эфиром (ТВМЕ) (2x75 мл). Высушите объединенные органические фазы над №28О4, профильтруйте и подвергните фильтрат концентрированию при пониженном давлении, в результате чего получите указанное в заголовке соединение в форме белого твердого вещества (1,10 г, выход 99%).
Масс-спектр (т/ζ): 280 (М+№)+.
Синтез 4.
Синтез метил-(К)-1 -трет-бутоксикарбонил-4-метиленпиперидин-2-карбоксилата.
ΙΝ 'СО2СН3
вое
Схема 1, этап В.
В атмосфере азота к имеющей температуру 0°С смеси метилтрифенилфосфония бромида (3,90 г, 10,92 ммоль) и безводного толуола (40 мл) по каплям добавьте ΚΗΜΌ8 (0,5 М раствор в толуоле, 19 мл, 9,5 ммоль) в течение 15 мин. Затем дайте этой смеси нагреться до комнатной температуры, после чего перемешивайте в течение 2 ч. Охладите эту смесь до 0°С и по каплям добавьте раствор метил-(К)-1-третбутоксикарбонил-4-оксопиперидин-2-карбоксилата (1,10 г, 4,28 ммоль) в толуоле (40 мл) в течение 15 мин. Дайте этой смеси нагреться до комнатной температуры, затем перемешивайте в течение 6 ч, после чего выдержите эту смесь при комнатной температуре в течение трех дней. Добавьте насыщенный водный раствор \Н4С1 (100 мл) и экстрагируйте эту смесь дихлорметаном - СН2С12 (2x250 мл). Высушите объединенные органические слои над №28О4, профильтруйте и подвергните фильтрат концентрированию при пониженном давлении. Подвергните полученный неочищенный материал флэшхроматографии на силикагеле, используя для элюирования градиент от 0 до 40% ЕЮАс в гексанах, в результате чего получите указанное в заголовке соединение (920 мг, выход 84%).
Масс-спектр (т/ζ): 278 (М+№)+, 533 (2М+№)+.
Приведенные ниже соединения получают, по существу, в соответствии со способом синтеза 4, используя подходящий кетон вместо метил-(К)-1-трет-бутоксикарбонил-4-оксопиперидин-2-карбоксилата:
Химическое название Структура МС (т/ζ)
бензил-(А)-1 -третбутоксикарбонил-4метиленпиперидин-2-карбоксилат д ''СО2Вп вое 232 (Μ + 2Н - Вос)+, 354 (Μ +
- 7 028921
Синтез 6.
Синтез метил-(К)-6-трет-бутоксикарбонил-6-азаспиро[2,5]октан-5-карбоксилата.
Схема 1, этап С.
К имеющему температуру 0°С раствору метил-(К)-1-трет-бутоксикарбонил-4-метиленпиперидин-2карбоксилата (920 мг, 3,60 ммоль) в Εΐ2Ο (25 мл) в атмосфере азота по каплям добавьте диазометан (0,72 М раствор в Εΐ2Ο, 25 мл, 18,0 ммоль) в течение 45 мин. В процессе добавления диазометана добавьте семь порций Рб(ОАе)2 (25 мг, 0,11 ммоль; всего 175 мг, 0,77 ммоль) с шестиминутными интервалами. Дайте этой смеси нагреться до комнатной температуры с перемешиванием в течение ночи. Добавьте уксусную кислоту (100 мкл, 1,75 ммоль), затем удалите твердые вещества фильтрацией, используя для промывания через фильтр СН2С12 (10 мл). Осуществите концентрирование объединенных фильтратов при пониженном давлении, в результате чего получите смесь, содержащую указанное в названии соединение (1,08 г, номинальный выход 111%).
Масс-спектр (т/ζ): 292 (Μ+Να)+.
Приведенные ниже соединения получают, по существу, в соответствии со способом синтеза 6, используя соответствующий алкен вместо метил-(К)-1-трет-бутоксикарбонил-4-метиленпиперидин-2карбоксилата:
№ Химическое название Структура МС (т/ζ)
бензил-(7?)-6-да/?едабутоксикарбонил-6азаспиро[2,5]октан-5-карбоксилат V X "ΌΟ,Βη ВОС 246 (Μ + 2Н - Вос)+
Синтез 8.
Синтез метил-(1К*,4К_,6К*)-3-трет-бутоксикарбонил-3-азабицикло[4,1,0]гептан-4-карбоксилата.
Партия 1. К имеющему температуру 0°С раствору метил-(К)-1-трет-бутоксикарбонил-3,6-дигидро2Н-пиридин-2-карбоксилата (800 мг, 3,32 ммоль) в диэтиловом эфире (50 мл) порциями по 1,0 мл в течение 15 мин добавьте диазометан (0,72 М раствор в Εΐ2Ο, 50 мл, 36,0 ммоль). В процессе добавления диазометана добавьте четыре порции Рб(ОАе)2 (12,5 мг, 0,055 ммоль; всего 50 мг, 0,22 ммоль) с трехминутными интервалами. Перемешивайте эту смесь в течение 35 мин, затем добавьте уксусную кислоту (1,0 мл, 17,5 ммоль) и ЕЮАс (100 мл). Промойте объединенную смесь насыщенным водным NаНСΟз (100 мл) и насыщенным водным ХаС1 (100 мл). Высушите органическую фазу над Να28Ο4, профильтруйте и подвергните фильтрат концентрированию при пониженном давлении, в результате чего получите неочищенное коричневое масло (898 мг) в виде смеси 87:13 указанного в заголовке соединения и непрореагировавшего исходного алкена.
Партия 2. К имеющему температуру 0°С раствору метил-(К)-1-трет-бутоксикарбонил-3,6-дигидро2Н-пиридин-2-карбоксилата (800 мг, 3,32 ммоль) в диэтиловом эфире (50 мл) порциями по 1,0 мл в течение 15 мин добавьте диазометан (0,72 М раствор в Εΐ2Ο, 50 мл, 36,0 ммоль). В процессе добавления диазометана добавьте четыре порции РбЩАсД (12,5 мг, 0,055 ммоль; всего 50 мг, 0,22 ммоль) с трехминутными интервалами. Перемешивайте эту смесь в течение 35 мин, затем добавьте уксусную кислоту (1,0 мл, 17,5 ммоль) и ΕΐΟΑс (100 мл). Промойте объединенную смесь насыщенным водным NаНСΟз (100 мл) и насыщенным водным ХаС1 (100 мл). Высушите органическую фазу над Να28Ο4, профильтруйте и подвергните фильтрат концентрированию при пониженном давлении, в результате чего получите неочищенное коричневое масло (841 мг) в виде смеси 86:14 указанного в заголовке соединения и непрореагировавшего исходного алкена.
Растворите объединенный неочищенный материал партии 1 и 2 (1,74 г) в СН2С12 (18,7 мл) и охладите до 0°С. Добавьте мета-хлорпероксибензойную кислоту (тСРВА) (647 мг, 1,87 ммоль) и дайте этой смеси нагреться до комнатной температуры в течение ночи с перемешиванием. Добавьте вторую порцию тСРВА (323 мг, 0,88 ммоль) и перемешивайте в течение еще 5,5 ч при комнатной температуре. Добавьте насыщенный водный Να28Ο3 (8 мл) и перемешивайте интенсивно в течение 10 мин. Разбавьте эту смесь этилацетатом (150 мл) и промойте насыщенным водным NаНСΟз (100 мл) и насыщенным водным ХаС1
- 8 028921
(100 мл). Высушите органическую фазу над ХаХО.,. профильтруйте и подвергните фильтрат концентрированию при пониженном давлении. Подвергните полученный неочищенный материал флэшхроматографии на силикагеле, используя для элюирования градиент от 0 до 100% СН2С12 в гексанах, затем градиент от 0 до 10% СН3ОН в СН2С12, в результате чего получите указанное в заголовке соединение в виде смеси двух диастереомеров (1,39 г, выход 85%).
Масс-спектр (т/ζ): 156 (М+2Н-Вос)+.
Синтез 9.
Синтез (±)-метил-1-бензилоксикарбонил-4-оксопиперидин-2-карбоксилата (рецемического).
Схема 2, этап А.
Растворите рацемический (±)-метил-1 -трет-бутоксикарбонил-4-оксопиперидин-2-карбоксилат (5,00 г, 19,4 ммоль) в растворе НС1 в 1,4-диоксане (4,0 М, 48,6 мл, 194 ммоль) и перемешивали эту смесь при комнатной температуре в течение ночи. Осуществите концентрирование этой смеси при пониженном давлении и поместите в вакуумную печь при 40°С на 2 ч для удаления остаточной кислоты. Затем добавьте СН2С12 (97 мл), бензилхлорформиат (3,65 г, 21,38 ммоль) и ΌΙΕΑ (7,46 мл, 42,8 ммоль) и перемешивайте при комнатной температуре в течение 2 дней. Добавьте водный раствор хлороводородной кислоты (1,0н., 100 мл) и перемешивайте эту смесь интенсивно в течение 15 мин. Оделите органический слой, высушите над Мд§О4, профильтруйте и подвергните концентрированию при пониженном давлении, в результате чего получите неочищенное оранжевое масло. Осуществите флэш-хроматографию неочищенного материала на силикагеле, используя для элюирования градиент от 50 до 100% ЕЮАс в гексанах, в результате чего получите указанное в заголовке соединение в виде бесцветного, вязкого масла (2,44 г, выход 43%).
Масс-спектр (т/ζ): 292 (М+Н)+, 314 (М+Ха)+.
Синтез 10.
Синтез (±)-метил-1-бензилоксикарбонил-4,4-дифторпиперидин-2-карбоксилата (рацемического).
Схема 2, этап В.
Охладите раствор рацемического (±)-метил-1-бензилоксикарбонил-4-оксопиперидин-2карбоксилата (2,44 г, 8,38 ммоль) в ТГФ (25 мл) до 0°С, затем по каплям добавьте диэтиламиносеры трифторид (10,1 г, 62,8 ммоль) с такой скоростью, чтобы внутренняя температура оставалась ниже 5°С. Перемешивайте эту смесь при 0°С в течение 2 ч, затем при комнатной температуре в течение ночи. Охладите эту смесь до 0°С и осторожно по каплям добавьте воду (50 мл) с такой скоростью, чтобы внутренняя температура оставалась ниже 20°С. Добавьте ЕЮАс (250 мл), воду (50 мл) и насыщенный водный ХаНСО3 (200 мл), затем разделите слои и промойте органический слой насыщенным водным ХаС1 (200 мл), высушите над Мд§О4, профильтруйте и подвергните фильтрат концентрированию при пониженном давлении. Подвергните полученный неочищенный материал флэш-хроматографии на силикагеле, используя для элюирования градиент от 20 до 70% ЕЮАс в гексанах, в результате чего получите указанное в заголовке соединение в виде бесцветного, вязкого масла (1,24 г, 47%).
- 9 028921
Масс-спектр (т/ζ): 314 (М+Н)+, 331 (Μ+ΝΗ4)+, 336 (М+Ха)+.
Синтез 11.
Синтез (±)-1-трет-бутоксикарбонил-5-оксопиперидин-2-карбоновой кислоты (рацемической).
вое
Схема 3, этап А.
К перемешиваемой смеси рацемической (±)-5-оксопиперидин-2-карбоновой кислоты (1,00 г, 6,99 ммоль) и СН2С12 (14,0 мл) при 0°С добавьте ди-трет-бутилдикарбонат (1,60 г, 7,34 ммоль) и триэтиламин (1,07 мл, 7,68 ммоль) и дайте этой смеси нагреться до комнатной температуры с перемешиванием в течение ночи. Добавьте водный раствор НС1 (1,0н.) до достижения рН 3,0, затем экстрагируйте смесь этилацетатом (3x25 мл). Промойте объединенные органические фазы насыщенным водным \аС1 (50 мл), высушите над М§804, профильтруйте и подвергните фильтрат концентрированию при пониженном давлении, в результате чего получите указанное в заголовке соединение в виде темно-коричневого твердого вещества (1,30 г, выход 77%).
Масс-спектр (т/ζ): 144 (М+2Н-Вос)+, 188 (М+2Н-!-Ви)+, 266 (М+№)+.
Синтез 12.
Синтез (±)-метил-1-трет-бутоксикарбонил-5-оксопиперидин-2-карбоксилата (рацемического).
вое
Схема 3, этап В.
К перемешиваемой смеси (±)-1-трет-бутоксикарбонил-5-оксопиперидин-2-карбоновой кислоты (1,30 г, 5,34 ммоль) в толуоле (8 мл) и СН30Н (2 мл) при 0°С по каплям добавьте триметилсилилдиазометан (2,94 мл, 5,34 ммоль), затем дайте этой смеси нагреться до комнатной температуры и перемешивайте в течение 1 ч. Осуществите концентрирование этой смеси при пониженном давлении, в результате чего получите указанное в заголовке соединение в виде светло-желтого масла (1,30 г, выход 95%).
Масс-спектр (т/ζ): 158 (М+2Н-Вос)+, 202 (М+2Н-1-Ви)+.
Синтез 13.
Синтез (±)-метил-1-трет-бутоксикарбонил-5,5-дифторпиперидин-2-карбоксилата (рацемического).
вое
Схема 3, этап С.
К перемешиваемой, имеющей комнатную температуру смеси триэтиламина тригидрофторида (4,9 мл, 30,3 ммоль), СН2С12 (42,9 мл) и триэтиламина (1,76 мл, 12,6 ммоль) добавьте Ν,Ν-диэтиламино8,8-дифторсульфиния тетрафторборат (5,21 г, 22,74 ммоль), а затем раствор (±)-метил-1-третбутоксикарбонил-5-оксопиперидин-2-карбоксилата (1,30 г, 5,05 ммоль) в СН2С12 (2,53 мл), затем перемешивайте эту смесь при комнатной температуре в течение ночи. Интенсивно перемешивая, осторожно добавьте насыщенный водный раствор \а11С03 (100 мл) (Осторожно! Интенсивное пенообразование!), затем экстрагируйте эту смесь дихлорметаном - СН2С12 (2x100 мл). Высушите объединенные органические фазы над Ν2804, профильтруйте и подвергните фильтрат концентрированию при пониженном давлении. Подвергните полученный неочищенный материал флэш-хроматографии на силикагеле, используя для элюирования градиент от 5 до 30% ЕЮАс в гексанах, в результате чего получите указанное в заго- 10 028921
ловке соединение в виде бесцветного масла (610 мг, выход 43%).
Масс-спектр (т/ζ): 302 (М+Ыа)+.
Синтез 14.
Синтез (2К*,58*)-1-(2-феноксиэтил)-5-гидроксипиперидин-2-карбоновой
(рацемической).
кислоты гидрохлорид
Перемешивайте смесь рацемической (2К*,58*)-5-гидроксипиперидин-2-карбоновой кислоты (150 мг, 1,03 ммоль), 2-феноксиацетальдегида (281 мг, 2,07 ммоль), уксусной кислоты (59 мкл, 1,03 ммоль) и 1,2-дихлорэтана (5,2 мл) при комнатной температуре в течение 30 мин. Добавьте триацетоксиборогидрид натрия (307 мг, 1,45 ммоль) и перемешивайте эту смесь при комнатной температуре в течение ночи. Осуществите концентрирование этой смеси при пониженном давлении, затем добавьте 1,4-диоксан (5 мл) и раствор НС1 в 1,4-диоксане (4,0 М, 3,0 мл, 12,0 ммоль). Перемешивайте полученную суспензию в течение 10 мин, затем удалите твердые вещества фильтрацией и осуществите концентрирование фильтрата при пониженном давлении, в результате чего получите указанное в заголовке соединение (320 мг, выход 100%).
Масс-спектр (т/ζ): 266 (М+Н)+, 288 (М+№)+.
Синтез 15.
Синтез метил-(К)-1-трет-бутоксикарбонил-4-оксопирролидин-2-карбоксилата.
О
'0'" со2сн3
I
вое
Схема 4, этап А.
Перемешивайте смесь Х-трет-бутил-цис-4-гидрокси-Э-пролин-метилового эфира (2,0 г, 7,91 ммоль), перйодинана Десса-Мартина (4,84 г, 11,07 ммоль) и СН2С12 (10 мл) при комнатной температуре в течение 2 ч. Добавьте СН2С12 (150 мл), насыщенный водный №НСО3 (75 мл) и воду (75 мл), затем разделите слои и экстрагируйте водный слой дихлорметаном (СН2С12) (100 мл). Объедините органические фазы, высушите над Мд8О4, профильтруйте и подвергните фильтрат концентрированию при пониженном давлении. Подвергните полученный неочищенный материал флэш-хроматографии на силикагеле, используя для элюирования градиент от 0 до 50% ЕЮАс в гексанах, в результате чего получите указанное в заголовке соединение (1,39 г, выход 72%).
Масс-спектр (т/ζ): 144 (М+2Н-Вос)+, 188 (М+2Н-1-Би)+.
Синтез 16.
Синтез метил-(К)-1-трет-бутоксикарбонил-4,4-дифторпирролидин-2-карбоксилата.
Схема 4, этап В.
В атмосфере азота растворите метил-(К)-1-трет-бутоксикарбонил-4-оксопирролидин-2-карбоксилат (270 мг, 1,11 ммоль) в СН2С12 (2,22 мл) и добавьте бис-(2-метоксиэтил)аминосеры трифторид (491 мг, 2,22 ммоль). Перемешивайте эту смесь при комнатной температуре в течение ночи, затем вылейте смесь
- 11 028921
на лед (50 мл) и насыщенный водный №НСО3 (50 мл). Перемешивайте полученную двухфазную смесь в течение 15 минут, затем экстрагируйте этилацетатом (50 мл) и подвергните концентрированию органическую фазу при пониженном давлении. Подвергните полученный неочищенный материал флэшхроматографии на силикагеле, используя для элюирования градиент от 10 до 50% ЕЮАс в гексанах, в результате чего получите указанное в заголовке соединение в виде смеси 53:47 ротамеров карбамата (206 мг, выход 70%).
1Н-ЯМР (СПС13, 400 МГц): δ 4,54 (44, 1=8,8, 6,0 Гц, 0,47Н), 4,44 (44, 1=9,1, 4,9 Гц, 0,53Н), 3,90-3,74 (т, 2Н), 3,762 (5, 1,59Н), 3,759 (5, 1,41Н), 2,78-2,61 (т, 1Н), 2,52-2,39 (т, 1Н), 1,47 (5, 4,23Н), 1,42 (5, 4,77Н).
Синтез 17.
Синтез (±)-2-трет-бутоксикарбонил-1,2,3,4-тетрагидроизохинолинил-1-карбоновой кислоты (рецемической).
вое
К перемешиваемой смеси (±)-1,2,3,4-тетрагидроизохинолинил-1-карбоновой кислоты (150 мг, 0,85 ммоль) и СН2С12 (1,69 мл) при 0°С добавьте ди-трет-бутилдикарбонат (185 мг, 0,85 ммоль) и триэтиламин (177 мкл, 1,27 ммоль). Дайте этой смеси нагреться до комнатной температуры с перемешиванием в течение ночи. Добавьте водный раствор НС1 (1,0н.) до достижения рН 3,0, затем экстрагируйте эту смесь этилацетатом (3x25 мл). Промойте объединенные органические фазы насыщенным водным ЫаС1 (50 мл), высушите над М§§О4, профильтруйте и подвергните фильтрат концентрированию при пониженном давлении, в результате чего получите указанное в заголовке соединение (235 мг, выход 100%).
Масс-спектр (т/ζ): 222 (М+2Н-1-Би)+, 300 (М+Ыа)+, 577 (2М+Ыа)+.
Синтез 18.
Синтез (2К*,6§*)-6-метил-1-(2-феноксиэтил)пиперидин-2-карбоксилата натрия (рецемического).
ОРИ
Растворите этил-(2К*,6§*)-6-метил-1-(2-феноксиэтил)пиперидин-2-карбоксилат (200 мг, 0,69 ммоль) в смеси ТГФ (1,0 мл) и СН3ОН (1,0 мл), затем добавьте водный раствор ЫаОН (5,0н., 275 мкл, 1,37 ммоль) и перемешивайте эту смесь при комнатной температуре в течение ночи. Осуществите концентрирование этой смеси при пониженном давлении, в результате чего получите указанное в заголовке соединение (196,5 мг, выход 100%).
Масс-спектр (т/ζ): 264 (М+Н)+, 549 (2М+Ыа)+.
Синтез 19.
Синтез (К)-6-трет-бутоксикарбонил-6-азаспиро[2,5]октан-5-карбоновой кислоты.
'Ν' "'со2н
Растворите метил-(К)-6-трет-бутоксикарбонил-6-азаспиро[2,5]октан-5-карбоксилат (1,08 г, 4,01 ммоль) в смеси ТГФ (20 мл) и СН3ОН (10 мл), затем добавьте водный раствор ЫаОН (2,0н., 10 мл, 20 ммоль) и перемешивайте эту смесь при комнатной температуре в течение 1,5 ч. Добавьте водный раствор НС1 (1,0н.) до достижения рН 1,0, затем экстрагируйте эту смесь этилацетатом (3x50 мл). Промойте объединенные органические слои насыщенным водным раствором ЫаС1 (50 мл), разделите слои, высушите органический слой над Ыа28О4, профильтруйте и подвергните фильтрат концентрированию при пониженном давлении, в результате чего получите смесь, содержащую указанное в названии соединение (850 мг, выход 83%).
Масс-спектр (т/ζ): 156 (М+2Н-Вос)+, 278 (М+Ыа)+.
- 12 028921
Приведенные ниже соединения получают, по существу, в соответствии со способом синтеза 19, используя соответствующие сложные эфиры вместо метил-(К)-6-трет-бутоксикарбонил-6азаспиро[2,5]октан-5-карбоксилата:
№ Химическое название Структура МС (да/ζ) ЯМР
0 (17*,47,67*)-3третбутоксикарбонил-3 азабицикло[4,1,0]геп тан-4-карбоновая кислота ό N 'СО2Н вое 142 (Μ + 2Н Вос)+, 186 (М + 2Н - 7-Ви)+, 264 (М + Иа)+
1 (±)-1бензилоксикарбонил -4,4дифторпиперидин-2карбоновая кислота Р Р \/ ^Ν^ΟΟ,Η 1 СЬг 317 (Μ + ΝΗ4)+, 322 (М + Иа)+
2 (±)-\-третбутоксикарбонил5,5дифторпиперидин-2карбоновая кислота Ά ГГ %О2Н вое 288 (М + Иа)+
3 (27,45')-1 -третбутоксикарбонил-4гидроксипиперидин2-карбоновая кислота он Сг^'''со2н вое (СОС13, 400 МГц) δ 4,87-4,78 (ш, 0,6Н), 4,71-4,64 (ш, 0,4Н), 4,204,15 (ш, 1Н), 3,94-3,85 (ш, 0,4Н), 3,85-3,73 (ш, 0,6Н), 3,45-3,27 (ш, 1Н), 2,46-2,42 (ш, 0,4Н), 2,422,37 (ш, 0,6Н), 1,94 (άά, 7 = 6,9, 2,4 Гц, 0,6Н), 1,90 (άά, 7= 6,8, 2,4 Гц, 0,4Н), 1,77-1,61 (ш, 4Н), 1,47 (з, 9Н)
4 (КрА-третбутоксикарбонил4,4дифторпирролидин2-карбоновая кислота Р рЭ_ %А-со2н вое (СО30О, 400 МГц) δ 4,48 (άά, 7 = 9,2, 4,8 Гц, 0,35Н), 4,44 (άά, 7 = 9,2, 4,8 Гц, 0,65Н), 3,83-3,68 (ш, 2Н), 2,90-2,74 (ш, 1Н), 2,53-2,41 (ш, 1Н), 1,46 (з, 3,15Н), 1,42 (з, 5,85Н)
Синтез 25.
Синтез (±)-1 -трет-бутоксикарбонил-4,4-диметилпиперидин-2-карбоновой кислоты.
вое
В шейкере Парра обработайте смесь бензил-(К)-6-трет-бутоксикарбонил-6-азаспиро[2,5]октан-5карбоксилата (600 мг, 1,74 ммоль), кристаллической уксусной кислоты (10 мл) и 5% палладия на угле (100 мг, 0,047 ммоль) повышенным до 413,7 кПа по манометру давлением водорода. Встряхивайте при
- 13 028921
комнатной температуре в течение 1 ч, затем спустите давление и удалите твердые вещества фильтрацией, промывая через фильтр уксусной кислотой (10 мл). Поместите фильтрат в сосуд высокого давления и добавьте оксид платины(1У) (225 мг, 0,99 ммоль). Повысьте давление водорода в сосуде до 1724 кПа по манометру и перемешивайте при 100°С в течение ночи. Охладите сосуд до комнатной температуры и спустите давление. Удалите твердые вещества фильтрацией, промывая через фильтр уксусной кислотой. Сконцентрируйте фильтрат при пониженном давлении. Добавьте толуол (10 мл) и снова сконцентрируйте при пониженном давлении, в результате чего получите неочищенную бесцветную пленку (329 мг).
К этому неочищенному материалу добавьте водный раствор гидроксида натрия (2,0н., 6,3 мл, 12,5 ммоль). Затем добавьте раствор ди-трет-бутилдикарбоната (300 мг, 1,7 ммоль) в 1,4-диоксане (3,4 мл) и перемешивайте эту смесь при комнатной температуре в течение ночи. Добавьте ди-трет-бутилдикарбонат (152 мг, 0,70 ммоль) и перемешивайте при комнатной температуре в течение 6 ч. Нейтрализуйте эту смесь до рН 7 1,0н. водным раствором НС1, затем добавьте ЕЮАс (15 мл). Подкислите водный слой до рН 3 1,0н. раствором НС1, затем экстрагируйте водный слой этилацетатом (3x15 мл) и СН2С12 (3x15 мл). Далее подкислите водный слой до рН 2 1,0н. раствором НС1, затем экстрагируйте этилацетатом (5x15 мл). Объедините органические слои, высушите над Ж28О4, удалите твердые вещества фильтрацией и подвергните фильтрат концентрированию при пониженном давлении, в результате чего получите указанное в заголовке соединение в виде бесцветной пленки (85,5 мг, выход 22%).
Масс-спектр (т/ζ): 158 (М+Н)+.
Синтез 26.
Синтез метил-4-(( 18)-1 -(((2К*)-1 -трет-бутоксикарбонил-2-метилпиперидин-2-карбонил)амино)этил)бензоата.
СО2СН3
Добавьте (±)-1-трет-бутоксикарбонил-2-метилпиперидин-2-карбоновую кислоту (200 мг, 0,82 ммоль) и метил-4-((8)-1-аминоэтил)бензоата гидрохлорид (177 мг, 0,82 ммоль) в ДМФА (1,6 мл), затем добавьте триэтиламин (401 мкл, 2,9 ммоль), а затем (бензотриазол-1-илокси)-трис(диметиламино)фосфония гексафторфосфонат (ВОР) (472 мг, 1,07 ммоль). Перемешивайте эту смесь при комнатной температуре в течение ночи. Разбавьте эту смесь этилацетатом (25 мл) и промойте насыщенным водным ХаС1 (2x25 мл). Высушите органический слой над Мд8О4, профильтруйте для удаления твердых веществ и подвергните фильтрат концентрированию при пониженном давлении. Осуществите флэш-хроматографию неочищенного материала на силикагеле, используя для элюирования градиент от 20 до 100% ЕЮАс в гексанах, в результате чего получите указанное в заголовке соединение в виде бесцветного масла (158 мг, выход 48%).
Масс-спектр (т/ζ): 305 (М+2Н-Вос)+.
Приведенные ниже соединения получают, по существу, в соответствии со способом синтеза 26, используя соответствующие карбоновые кислоты вместо 1-трет-бутоксикарбонил-2-метилпиперидин-2карбоновой кислоты:
№ Химическое название Структура МС {т/г)
7 метил-4-((15)-1((2Д*,6Л*)-(1-(2феноксиэтил)-6метилпиперидин-2карбонил)амино)этил)б ензоат ХГСНз У ° 1 ОРМ 425 (М + Н)+
- 14 028921
8 метил-4-(( 15)-1 -(((27?*)1 -бензилоксикарбонил4,4-дифторпиперидин2карбонил)амино)этил)б ензоат Л9 ^/СО2СН3 СЬг О - 461 (М + Н)+, 483 (Μ + Νβ)+
9 метил-4-(( 15)-1 -(((27?*)\-третбутоксикарбонил-5,5 дифторпиперидин-2карбонил)амино)этил)б ензоат Р-Ц/Х, ^.СО2СН3 ХД-МОг вое О ; 327 (Μ + 2Н Вос)+, 449 (М + Νβ)+
0 метил-4-((15)-1((27?*,55* )-(1-(2феноксиэтил)-5гидроксипиперидин-2карбонил)амино)этил)б ензоат Г7 1 ί ОРИ 427 (М + Н)+, 465 (М + К)+
1 метил-4-(( 15)-1 -(((27?)\-третбутоксикарбонилпирро лидин-2карбонил)амино)этил)б ензоат абс. со2сн3 О 277 (Μ + 2Н Вос)+, 321 (М + 2Н - /-Ви), 377 (М + Н)+, 399(Μ + Νβ)+
2 метил-4-(( 15)-1 -(((27?)1 -третбутоксикарбонил-4,4дифторпирролидин-2карбонил)амино)этил)б ензоат абс. Ή н гтс°!“! О 313 (Μ + 2Н Вос)+, 357 (М + 2Н - /-Ви)+, 435 (М + №)7 451 (М + К)+
3 метил-4-(( 15)-1 -(((17?*)2-третбутоксикарбонил1,2,3,4тетрагидроизохинолин1карбонил)амино)этил)б ензоат Οζ-Μυ ВОС О Ξ 339 (Μ + 2Н Вос)+, 383 (М + 2Н - /-Ви)+, 439 (М + Н)+, 461 (Μ + Νβ)+
Синтез 34.
Синтез метил-4-(((18,3К,4К)-2-трет-бутоксикарбонил-2-азабицикло[2,2,1]гептан-3карбонил)аминометил)бензоата.
- 15 028921
Перемешивайте смесь (18,3К,4К)-2-трет-бутоксикарбонил-2-азабицикло[2,2,1]гептан-3-карбоновой кислоты (253 мг, 1,05 ммоль), метил-4-(аминометил)бензоата гидрохлорида (260 мг, 1,29 ммоль), 1-гидроксибензотриазола гидрата (60 мг, 0,39 ммоль), триэтиламина (600 мкл, 4,30 ммоль), ЭДХ (300 мг, 1,56 ммоль) и СН2С12 (20 мл) при комнатной температуре в течение двух дней. Промойте эту смесь водным раствором хлороводородной кислоты (1,0н., 25 мл), а затем насыщенный водным раствором ХаНСО; (50 мл) и насыщенным водным раствором ХаС1 (50 мл). Высушите органическую фазу над М§804, профильтруйте и сконцентрируйте при пониженном давлении, в результате чего получите гладкое масло, содержащее приблизительно 85 мас.% указанного в заголовке соединения (450 мг, выход 94%).
Масс-спектр (т/ζ): 289 (М+2Н-Вос)+, 333 (М+2Н-1-Ви)+, 411 (М+Ха)+.
Приведенные ниже соединения получают, по существу, в соответствии со способом синтеза 34, используя соответствующие карбоновые кислоты вместо (18,3К,4К)-2-трет-бутоксикарбонил-2азабицикло[2,2,1]гептан-3-карбоновой кислоты и используя метил-4-((8)-1-аминоэтил)бензоат или метил-4-((8)-1-аминоэтил)бензоат гидрохлорид вместо метил-4-(аминометил)бензоата гидрохлорида:
№ Химическое название Структура МС (т/ζ) Приме чание
35 метил-4-(( 15)-1 (((15,ЗА,4/?)-2третбутоксикарбонил -2азабицикло[2,2,1 ] гептан-3карбонил)амино) этил)бензоат ^^/СО2СН3 СуЛТ вое о - 303 (Μ + 2Н Вос)+, 347 (М + 2Н - /-Ви), 403 (М + Н)+, 425 (Μ + Να)+
36 метил-4-(( 15)-1 (((7>К)-6-третбутоксикарбонил -6азаспиро[2,5]окта н-5карбонил)амино) этил)бензоат 5Ф ХЧ^со2сн3 вое о - 317 (Μ + 2Н Вос)+, 361 (М + 2Н - /-Ви), 439 (Μ + Να)+ а
- 16 028921
37 метил-4-(( 15)-1 (((17?*,47?,67?*)-3третбутоксикарбонил -3азабицикло[4,1,0] гептан-4карбонил)амино) этил)бензоат |\ ^^С°2СН3 вое О 303 (Μ + 2Н Вос)+, 347 (М + 2Н - /-Ви), 403 (М + Н)+, 425 (Μ + Νβ)+ ь
38 метил-4-(( 15)-1(((2К*)-\-третбутоксикарбонил -4,4диметилпипериди н-2карбонил)амино) этил)бензоат вое о - 319 (Μ + 2Н Вос)+, 441 (М + №)+ ь
39 метил-4-(( 15)-1 (((2К)-\-третбутоксикарбонил -4оксопиперидин2карбонил)амино) этил)бензоат о А ^ЛО2СН3 вое о - 305 (Μ + 2Н Вос)+, 349 (М + 2Н - /-Ви)+, 427 (Μ + Νβ)+ ь
40 метил-4-(( 15)-1 (((27?, 45)-1 -третбутоксикарбонил -4гидроксипиперид ин-2карбонил)амино) этил)бензоат он А ^ЮО2СН3 отю вое о - 307 (Μ + 2Н Вос)+, 351 (М + 2Н - /-Ви)+, 407 (М + Н)+, 429 (Μ + Νβ)+ ь
a) Очистите продукт обращенно-фазовой хроматографией на силикагеле С18, используя для элюирования 0,1% муравьиную кислоту в градиенте вода/ацетонитрил.
b) Очистите продукт флэш-хроматографией на силикагеле, используя для элюирования градиент ЕЮАс/гексаны.
Синтез 41.
Синтез метил-4-(( 18)-1 -(((2К,48)-1 -трет-бутоксикарбонил-4-метоксипиперидин-2карбонил)амино)этил)бензоата.
Охладите смесь метил-4-(( 18)-1 -(((2К,48)-1 -трет-бутоксикарбонил-4-гидроксипиперидин-2карбонил)амино)этил)бензоата (440 мг, 1,08 ммоль), ТГФ (5,0 мл) и йодометана (67 мкл, 1,08 ммоль) до 0°С, затем добавьте гидрид натрия (60% дисперсия в минеральном масле, 43,3 мг, 1,08 ммоль) и переме- 17 028921
шивайте в течение 2 ч при 0°С. Добавьте вторую порцию гидрида натрия (60% дисперсия в минеральном масле, 43,3 мг, 1,08 ммоль), перемешивайте при 0°С в течение 3 ч, затем дайте нагреться с перемешиванием в течение ночи. Добавьте насыщенный водный раствор N114С1 (5 мл), затем экстрагируйте эту смесь этилацетатом (10 мл). Промойте объединенные органические слои насыщенным водным раствором Ναί'Ί (10 мл), затем высушите над Να28Ο4. удалите твердые вещества фильтрацией и подвергните фильтрат концентрированию при пониженном давлении. Осуществите флэш-хроматографию неочищенного материала на силикагеле, используя для элюирования градиент от 0 до 40% ЕЮАс в гексанах, в результате чего получите указанное в заголовке соединение в виде бесцветного прозрачного масла (128 мг, выход 28%).
Масс-спектр (т/ζ): 365 (М+2Н-1-Ви)+, 421 (М+Н)+.
Синтез 42.
Синтез метил-4-(( 18)-1 -(((2К*)-2-метилпиперидин-2-карбонил)амино)этил)бензоат гидрохлорида.
Обработайте метил-4-((18)-1-(((2К*)-1-трет-бутоксикарбонил-2-метилпиперидин-2карбонил)амино)этил)бензоат (158 мг, 0,39 ммоль) 4,0 М раствором хлористого водорода в диоксане (2,0 мл, 8,0 ммоль) и перемешивайте в течение 1 ч при комнатной температуре. Осуществите концентрирование этой смеси при пониженном давлении, в результате чего получите указанное в заголовке соединение в форме белого твердого вещества (133 мг, выход 100%).
Масс-спектр (т/ζ): 305 (М+Н)+.
Приведенные ниже соединения получают, по существу, в соответствии со способом синтеза 42 с использованием соответствующих трет-бутилкарбаматов вместо метил-4-((18)-1-(((2К*)-1-третбутоксикарбонил-2-метилпиперидин-2-карбонил)амино)этил)бензоата:
- 18 028921
№ Химическое название Структура МС (да/ζ) Примеч ание
43 метил-4(((15,3/?,4/?)-2азабицикло[2,2,1 ]геп тан-3карбонил)аминомети л)бензоат гидрохлорид ,Х5^/СО2СН3 н (Ϊ НС1 289 (М + Н)+, 599 (2М + 1Ча)+ а,Ь
44 метил-4-((15)-1(((15,3/?,4/?)-2азабицикло[2,2,1 ]геп тан-3карбонил)амино)эти л)бензоат гидрохлорид н ; НС1 303 (М + Н)+, 605 (2М + Н)+, 627 (2М + Να)+ а, с
45 метил-4-((15)-1(((2Д*)-5,5дифторпиперидин-2карбонил)амино)эти л)бензоат гидрохлорид ρ-4χ\, ^ч,со2сн3 СмХг н о = НС1 327 (М + Н)+, 653 (2М + Н)+, 675 (2М + Να)+
46 метил-4-((15)-1(((2/?)-пирролидин2карбонил)амино)эти л)бензоат гидрохлорид О..... Η ί ί НС1 277 (М + Н)+, 553 (2М + Н)+, 575 (2М + Να)+ а
47 метил-4-((15)-1(((27?)-4,4дифторпирролидин2карбонил)амино)эти л)бензоат гидрохлорид Р р-М ^.со2сн3 н И ξ о НС1 313 (М + Н)+, 625 (2М + Н)+, 647 (2М + Να)+ а
48 метил-4-((15)-1(((1Д*)-1,2,3,4тетрагидроизохинол ин-1карбонил)амино)эти л)бензоат гидрохлорид ^ч_СО2СН3 н 5 НС1 339 (М + Н)+, 677 (2М + Н)+, 699 (2М + Να)+
- 19 028921
a) Используйте СНзΟН (20 мл/ммоль субстрата) в качестве сорастворителя.
b) Перемешивайте в течение трех дней при комнатной температуре вместо 1 ч.
c) Перемешивайте в течение 3 ч при комнатной температуре, затем добавьте вторую порцию НС1 в 1,4-диоксане (равную первой) и перемешивайте еще 2 ч при комнатной температуре вместо простого перемешивания в течение 1 ч при комнатной температуре.
ά) Используйте СН2С12 (1 мл/ммоль субстрата) в качестве сорастворителя.
Синтез 49.
Синтез метил-4-((18)-1-(((5К)-6-азаспиро[2,5]октан-5-карбонил)амино)этил)бензоата.
Растворите метил-4-((18)-1-(((5К)-6-трет-бутоксикарбонил-6-азаспиро[2,5]октан-5-карбонил)амино)этил)бензоат (60 мг, 0,14 ммоль) в СН2С12 (2,0 мл) и добавьте трифторуксусную кислоту (1,0 мл,
13,23 ммоль). Перемешивайте эту смесь при комнатной температуре в течение 90 мин, затем добавьте воду (7,0 мл) и 10% водный раствор карбоната натрия (20 мл). Экстрагируйте эту смесь этилацетатом (3x50 мл) и промойте объединенные органические слои насыщенным водным раствором \аС1 (5 мл). Высушите органическую фазу над Να28Ο4, профильтруйте и подвергните фильтрат концентрированию при пониженном давлении, в результате чего получите смесь, содержащую приблизительно 84% указанного в заголовке соединения по массе (53 мг, скорректированный выход 97%).
Масс-спектр (т/ζ): 317 (М+Н)+, 633 (2М+Н)+, 655 (2М+№)+.
Приведенные ниже соединения получают, по существу, в соответствии со способом синтеза 49, используя соответствующие трет-бутилкарбаматы вместо метил-4-((18)-1-(((5К)-6-трет-бутоксикарбонил6-азаспиро[2,5]октан-5-карбонил)амино)этил)бензоата:
№ Химическое название Структура МС (т/ζ)
50 метил-4-((15)-1 (((17?*,47?,67?*)-3азабицикло[4,1,0]гептан4-карбонил)амино)этил)бен зоат (2:1 смесь диастереомеров) н (Ϊ 303 (М + Н)+, 605 (2М + Н)+, 627 (2М + №)+
51 метил-4-((15)-1-(((27?*)4,4-диметилпиперидин-2карбонил)амино)этил)бензо ат Ж гхЧ^СО2СН3 Схми н о Ξ 319 (М + Н)+, 637 (2М + Н)+
52 метил-4-((15)-1 -(((27?)- 4оксопиперидин-2карбонил)амино)этил)бензо ат О А, /^ЮО2СН3 О-А® н (5 305 (М + Н)+
- 20 028921
53 метил-4-((15)-1-(((27?, 45)-4гидроксипиперидин-2карбонил)амино)этил)бензо ат он А. '/^СОзСНз н <5 307 (М + Н)+, 613 (2М + Н)+, 635 (2М + Νη)+
54 метил-4-(( 15)-1-(((27?, 45)-4метоксипиперидин-2карбонил)амино)этил)бензо ат ОСН3 н о 321 (М + Н)+, 343 (М + Νη)+, 641 (2М + Н)+, 663 (2М + Νη)+
Синтез 55.
Синтез метил-4-((18)-1-(((2К*)-4,4-дифторпиперидин-2-карбонил)амино)этил)бензоата.
Растворите метил-4-(( 18)-1 -(((2К*)-1 -бензилоксикарбонил-4,4-дифторпиперидин-2-карбонил)амино)этил)бензоат (540 мг, 1,17 ммоль) в СН3ОН (4,7 мл) и добавьте 10% палладий на угле (125 мг, 0,12 ммоль). Перемешивайте при комнатной температуре в атмосфере водорода в течение трех дней. Профильтруйте через слой диатомовой земли, промывая через фильтр СН3ОН (10 мл). Сконцентрируйте фильтрат при пониженном давлении, в результате чего получите указанное в заголовке соединение в форме белого твердого вещества (280 мг, выход 73%).
Масс-спектр (т/ζ): 327 (М+Н)+, 653 (2М+Н)+, 675 (2М+Ыа)+.
Синтез 56.
Синтез метил-4-((18)-1 -(((2К*)-1 -(2-феноксиэтил)-2-метилпиперидин-2-карбонил)амино)этил)бензоата.
Перемешивайте смесь метил-4-((18)-1 -(((2К*)-2-метилпиперидин-2-карбонил)амино)этил)бензоата гидрохлорида (130 мг, 0,38 ммоль) и 2-феноксиацетальдегида (104 мг, 0,76 ммоль) в 1,2-дихлорэтане (1,9 мл) при комнатной температуре в течение 30 мин, затем добавьте триацетоксиборогидрид натрия (113 мг, 0,53 ммоль) и перемешивайте при комнатной температуре в течение 3 ч. Охладите эту смесь до 0°С и добавьте насыщенный водный раствор ЫаНСО3 (25 мл). Экстрагируйте эту смесь этилацетатом (2x25 мл) и промойте объединенные органические слои насыщенным водным раствором ЫаС1 (25 мл). Отделите органический слой и высушите над М§8О4, профильтруйте и подвергните фильтрат концентрированию при пониженном давлении. Осуществите флэш-хроматографию неочищенного материала на силикагеле, используя для элюирования градиент от 0 до 100% ЕЮАс в гексанах, в результате чего получите 130 мг материала. Подвергните этот материал обращенно-фазовой хроматографии на силикагеле С18, используя для элюирования 0,1% муравьиную кислоту в градиенте вода/СН3СЫ. Экстрагируйте фракции, содержащие указанное в заголовке соединение, этилацетатом (2x50 мл) и промойте объединенные органические слои насыщенным водным раствором ЫаС1 (25 мл). Отделите органический слой и высушите над М§8О4, профильтруйте и подвергните фильтрат концентрированию при пониженном давлении, в результате чего получите указанное в заголовке соединение в виде бесцветного масла (75 мг, выход 46%).
Масс-спектр (т/ζ): 425 (М+Н)+.
- 21 028921
Приведенные ниже соединения получают, по существу, в соответствии со способом синтеза 56, используя соответствующие гидрохлориды аминов вместо метил-4-((13)-1-(((2К*)-2-метилпиперидин-2карбонил)амино)этил)бензоата гидрохлорида и/или соответствующие альдегиды вместо 2-феноксиацетальдегид:
Ко Химическое название Структура МС (т/ζ) Приме чание
57 метил-4-((15)-1(((27?)-1-(2-(4фтор ф енокс и)эти л )-5,5дифторпиперидин -2карбонил)амино)э тил)бензоат КИч /\ХСО2СН3 суду °= 465 (М +Н)+, 487 (М +Иа)+ а
58 метил-4-((15)-1(((17?*)-2-(2ф енокс иэтил)1,2,3,4тетрагидроизохин олин-1карбонил)амино)э тил)бензоат Ю^ХСО2СН3 Су» У ‘ ОРИ 459 (М +Н)+, 481 (М +Иа)+ Ь
a) Очистите флэш-хроматографией на силикагеле, используя для элюирования градиент от 10 до 90% ЕЮАс в гексанах. Указанное в заголовке соединение - это диастереомер, элюируемый вторым. Не обращенно-фазовая хроматография.
b) Очистите флэш-хроматографией на силикагеле, используя для элюирования градиент от 0 до 80% ЕЮАс в гексанах. Не обращенно-фазовая хроматография.
Синтез 59.
Синтез метил-4-(((13,3К,4К)-2-(2-феноксиэтил)-2-азабицикло[2,2,1]гептан-3-карбонил)аминометил)бензоата.
Растворите метил-4-(((13,3К,4К)-2-азабицикло[2,2,1]гептан-3-карбонил)аминометил)бензоат гидрохлорид (300 мг, 0,92 ммоль) и 2-феноксиацетальдегид (140 мг, 1,03 ммоль) в СН3ОН (5 мл) при комнатной температуре и добавьте уксусную кислоту (200 мкл, 3,49 ммоль) цианоборогидрид натрия (300 мг, 4,77 ммоль). Перемешивайте эту смесь при комнатной температуре в течение ночи. Осуществите концентрирование этой смеси при пониженном давлении и добавьте ЕЮАс (20 мл) и насыщенный водный ЫаНСО3 (20 мл). Разделите слои и промойте органический слой насыщенным водным раствором ЫаС1 (20 мл). Сконцентрируйте органический слой при пониженном давлении, затем подвергните неочищенный материал флэш-хроматографии на силикагеле, используя для элюирования градиент от 100% ЕЮАс до 5% (7,0 М N113 в СН3ОН) в ЕЮАс, в результате чего получите указанное в заголовке соединение в виде стекловидного масла (240 мг, выход 64%).
Масс-спектр (т/ζ): 409 (М+Н)+, 431 (М+Ж)+.
- 22 028921
Приведенные ниже соединения получают, по существу, в соответствии со способом синтеза 59, используя соответствующие гидрохлориды аминов вместо метил-4-(((18,3К,4К)-2-азабицикло[2,2,1]гептан3-карбонил)аминометил)бензоата гидрохлорида:
Химическое название Структура МС (т/ζ) Приме чание
0 метил-4-(( 15)-1(((15,37?,47?)-2-(2феноксиэтил)-2азабицикло[2,2,1 ]гептан -3карбонил)амино)этил)бе нзоат Х«^хСО2СН3 г* 0 = ОРК 423 (М + Н)+
1 метил-4-(( 15)-1-(((27?)1 -(2-феноксиэтил)-4,4дифторпиперидин-2карбонил)амино)этил)бе нзоат Р Р >< ,со,сн: 0« О = ОРК 447 (М +Н)+, 469 (М +№)+ а,Ь
2 метил-4-(( 15)-1 -(((25)-1 (2-феноксиэтил)-4,4дифторпиперидин-2карбонил)амино)этил)бе нзоат Р Р ^д^/С°2СНз ОРК 447 (М +Н)+, 469 (М +Ш)+ а,Ь
a) Без флэш-хроматографии с нормальными фазами.
b) Синтезы 61 и 62 начинаются с одного и того же исходного материала, не являющегося чистым диастереомером. Разделите диастереомеры обращенно-фазовой хроматографией на силикагеле С18, используя для элюирования 0,1% муравьиную кислоту в градиенте С1 ЬСХ/вода.
Синтез 63.
Синтез метил-4-((18)-1-(((5К)-6-(2-(4-фторфенокси)этил)-6-азаспиро[2,5]октан-5-карбонил)амино)этил)бензоата.
Растворите метил-4-((18)-1-(((5К)-6-азаспиро[2,5]октан-5-карбонил)амино)этил)бензоат (44 мг, 0,14 ммоль) в ДМФА (1,5 мл) при комнатной температуре, затем добавьте ΏΙΕΑ (73 мкл, 0,42 ммоль), 1-(2-бромэтокси)-4-фторбензол (46 мг, 0,21 ммоль) и ΝαΙ (10,5 мг, 0,07 ммоль). Нагрейте эту смесь до 110°С в течение 2 ч с перемешиванием. Разбавьте эту смесь метил-трет-бутиловым эфиром (с ТВМЕ) (25 мл) и промойте 5% водным раствором ЫС1 (25 мл), а затем насыщенным водным раствором №С1 (25 мл). Высушите органический слой над Να28Ο4, профильтруйте и подвергните концентрированию при пониженном давлении. Осуществите флэш-хроматографию неочищенного материала на силикагеле, используя для элюирования градиент от 0 до 100% ЕЮАс в гексанах, в результате чего получите указанное в заголовке соединение в форме белого твердого вещества (38 мг, выход 60%).
Масс-спектр (т/ζ): 455 (М+Н)+.
- 23 028921
Приведенные ниже соединения получают, по существу, в соответствии со способом синтеза 63, используя соответствующие амины вместо метил-4-((1З)-1-(((5К)-6-азаспиро[2,5]октан-5карбонил)амино)этил)бензоата и/или соответствующие алкилбромиды вместо 1-(2-бромэтокси)-4фторбензола:
Химическое название Структура МС (т/ζ) Примеч ание
4 метил-4-(( 15)-1 -(((57?)6-(2-феноксиэтил)-6азаспиро[2,5]октан-5карбонил)амино)этил)бе нзоат X. ^/СО2СН3 О+Хг / 0 = ОРИ 437 (М + Н)+
5 метил-4-((15)-1 (((15,47?,65)-3-(2феноксиэтил)-3азабицикло[4,1,0]гептан -4карбонил)амино)этил)бе нзоат х+^С02СНз ОдДА / 0 ‘ ОРК 423 (М + Н)+ а
6 метил-4-((15)-1 -(((27?)1 -(2-феноксиэтил)-4,4диметилпиперидин-2карбонил)амино)этил)бе нзоат Νζ /++^с°2сн3 ОдДД / 0 ‘ ОРМ 439 (М + Н)+
7 метил-4-((15)-1 -(((27?)1 -(2-феноксиэтил)-4оксопиперидин-2карбонил)амино)этил)бе нзоат о А. /з^СОгСНз ОдДД / 0 ‘ ОРМ 425 (М + Н)+, 447 (М + Иа)+
8 метил-4-(( 15)-1 (((27?,45)-1-(2феноксиэтил)-4гидроксипиперидин-2карбонил)амино)этил)бе нзоат ОН .^.СО2СН3 ОдДД / 0 ‘ ОРМ 427 (М + Н)+, 449 (М + Иа)+
9 метил-4-(( 15)-1 (((27?,45)-1-(2феноксиэтил)-4метоксипиперидин-2карбонил)амино)этил)бе нзоат ОСН3 -<^.СО2СН3 ОдДД 0 ; ОРМ 441 (М + Н)+
а) Очистите флэш-хроматографией на силикагеле, используя для элюирования градиент от 0 до 70% ЕЮАс/гексаны, в результате чего получите смесь диастереомеров. Затем очистите флэш-хроматографией на силикагеле, используя для элюирования 52% ЕЮАс в гексанах для разделения диастереомеров. Указанное в заголовке соединение - это диастереомер, элюирующийся первым.
- 24 028921
Синтез 70.
Синтез метил-4-((15)-1-(((2К)-1-(2-(4-фторфенокси)этил)пирролидин-2-карбонил)амино)этил)бензоата.
Растворите метил-4-((15)-1-(((2К)-пирролидин-2-карбонил)амино)этил)бензоата гидрохлорид (1,00 г, 3,2 ммоль) в ДМФА (8,0 мл) при комнатной температуре, затем добавьте К2СО3 (1,33 г, 9,6 ммоль) и 1-(2-бромэтокси)-4-фторбензол (715 мг, 3,2 ммоль), затем нагрейте эту смесь до 100°С с перемешиванием в течение ночи. Разбавьте эту смесь этилацетатом (100 мл) и промойте насыщенным водным раствором ЫаС1 (2x75 мл). Отбросьте водные слои и высушите органический слой над ΜβδΟ4, профильтруйте и сконцентрируйте при пониженном давлении до объема приблизительно 10 мл. Добавьте гексаны (100 мл, затем соберите полученный преципитат фильтрацией, промойте гексанами (25 мл) и высушите на воздухе, в результате чего получите указанное в заголовке соединение в форме белого твердого вещества (750 мг, выход 57%).
Масс-спектр (т/ζ): 415 (Μ+Η)+.
Приведенные ниже соединения получают, по существу, в соответствии со способом синтеза 70, используя метил-4-(( 1 δ)-1 -(((2К)-4,4-дифторпирролидин-2-карбонил)амино)этил)бензоата гидрохлорид вместо метил-4-((^)-1-(((2К)-пирролидин-2-карбонил)амино)этил)бензоата гидрохлорида:
Химическое название Структура МС (т/ζ) Приме чание
1 метил-4-(( 15)-1 (((27?)-1-(2-(4фторфенокси)этил)4, 4дифторпирролидин2карбонил)амино)эти л)бензоат Р р-М ^.созснз ДуО г7 ° ; ДУ 451 (М + Н)+, 473 (Μ + Νη)+ а, Ь
a) После нагревание в течение ночи добавьте 1 экв. Ыа1 и один дополнительный эквивалент алкилбромида.
b) Очистите флэш-хроматографией на силикагеле, используя для элюирования градиент от 10 до 100% ЕЮАс/гексаны.
Пример 1.
Синтез 4-(( 1 δ)-1 -(((2К*)-1 -(2-феноксиэтил)-2-метилпиперидин-2-карбонил)амино)этил)бензойной
кислоты гидрохлорида.
Растворите метил-4-(( 1 δ)-1 -(((2К*)-1 -(2-феноксиэтил)-2-метилпиперидин-2-карбонил)амино)этил)бензоат (70 мг, 0,16 ммоль) в смеси ТГФ (1,0 мл) и СН3ОН (1,0 мл). Добавьте 1,0н. водный раствор гидроксида натрия (330 мкл, 0,33 ммоль) и перемешивайте эту смесь при комнатной температуре в течение ночи. Осуществите концентрирование этой смеси при пониженном давлении, в результате чего получите твердое вещество, затем добавьте 4,0 М раствор хлористого водорода в 1,4-диоксане (2,0 мл, 8,0 ммоль) и перемешивайте при комнатной температуре в течение 10 мин. Удалите твердые вещества фильтрацией, используя для промывания через фильтр ТГФ (2 мл). Сконцентрируйте фильтрат при пониженном давлении, в результате чего получите указанное в заголовке соединение в виде беловатого твердого вещества (52 мг, выход 71%).
Масс-спектр (т/ζ): 411 (Μ+Η)+.
- 25 028921
Получите следующие соединения, по существу, в соответствии со способом из примера 1, используя соответствующие сложные метиловые эфиры вместо метил-4-((18)-1-(((2К*)-1-(2-феноксиэтил)-2метилпиперидин-2-карбонил)амино)этил)бензоата:
Пример Химическое название Структура МС (т/ζ) Примечай ие
2 4-((15)-1-((27?*,67?*)(1 -(2-феноксиэтил)-6метилпиперидин-2карбонил)амино)этил) бензойной кислоты гидрохлорид / ° НС| 411 (М+Н)+
3 4-(((15,37?, 47?)-2-(2феноксиэтил)-2азабицикло[2,2,1 ]гепт ан-3карбонил)аминометил )бензойная кислота еудг' г-1 ” о° 395 (М+Н)+ а,Ь
4 4-((15)-1(((15,37?,47?)-2-(2феноксиэтил)-2азабицикло[2,2,1 ]гепт ан-3карбонил)амино)этил) бензойная кислота г-1 ° ‘ ст° 409 (М+Н)+ а,Ь,с
- 26 028921
5 4-((15)-1-(((5^)-6-(2(4фторфенокси)этил)-6азаспиро[2,5 ] октан-5 карбонил)амино)этил) бензойная кислота Ον'ΧΤ д ° = 441 (М+Н)+ а
6 4-((15)-1-(((5/?)-6-(2феноксиэтил)-6азаспиро[2,5 ] октан-5 карбонил)амино)этил) бензойная кислота σ° 423 (М+Н)+ а
7 4-((15)-1-(((15,47?,65)3 -(2-феноксиэтил)-3 азабицикло[4,1,0]гепт ан-4карбонил)амино)этил) бензойная кислота σ° 409 (М+Н)+ е
8 4-((15)-1-(((2/?)-1-(2феноксиэтил)-4,4дифторпиперидин-2карбонил)амино)этил) бензойной кислоты гидрохлорид 433 (М+Н)+
9 4-((15)-1-(((25)-1-(2феноксиэтил)-4,4дифторпиперидин-2карбонил)амино)этил) бензойной кислоты гидрохлорид А' г9 о ; НС| 433 (М+Н)+, 455 (М+Иа)+
- 27 028921
10 4-(( 15)-1-(((27?)-1-(2(4фторфенокси)этил)5,5дифторпиперидин-2карбонил)амино)этил) бензойная кислота трифторацетат Η Ι,ν02" 2 ° = но\ г |Г СРз О 451 (М+Н)+ Сё
11 4-((15)-1-(((27?*)-1-(2феноксиэтил)-4,4диметилпиперидин-2карбонил)амино)этил) бензойная кислота СуХХ" 0 Ξ σ° 425 (М+Н)+ с
12 4-((15)-1-(((27?)-1-(2феноксиэтил)-4оксопиперидин-2карбонил)амино)этил) бензойная кислота трифторацетат 3 ί Г НО СР3 Н 0 411 (М+Н)+ 4ё
13 4-((15)-1-(((27?, 45)-1(2-феноксиэтил)-4гидроксипиперидин2карбонил)амино)этил) бензойная кислота σ° 413 (М+Н)+ а
- 28 028921
14 4-((15)-1-(((27?, 45)-1(2-феноксиэтил)-4метоксипиперидин-2карбонил)амино)этил) бензойная кислота ОСН3 г1 ° ' σ° 427 (М+Н)+ а
15 4-((15)-1-((27?*,55*)(1-(2-феноксиэтил)-5гидроксипиперидин2карбонил)амино)этил) бензойной кислоты гидрохлорид / У σ 413 (М+Н)+, 435 (Μ+Να)+
16 4-((15)-1-(((27?)-1-(2(4фторфенокси)этил)пи рролидин-2карбонил)амино)этил) бензойной кислоты гидрохлорид П н »СОгН у ° = НС1 401 (М+Н)+ ь
17 4-((15)-1-(((27?)-1-(2(4фторфенокси)этил)4,4 -дифторпирролидин2карбонил)амино)этил) бензойная кислота У н г» Хг° 437 (М+Н)+ ΐ
18 4-((15)-1-(((17?)-2-(2феноксиэтил)-1,2,3,4тетрагидроизохиноли н-1карбонил)амино)этил) бензойной кислоты гидрохлорид /Ύ н ιίΎ°°2Η 0 = ^^0 НС' 445 (М+Н)+ §
a) Вместо подкисления смесью НС1/1,4-диоксан нейтрализуйте реакционную смесь 5,0н. водным раствором НС1, сконцентрируйте при пониженном давлении, разотрите материал с этилацетатом и слейте фазу раствора, затем удалите растворитель, в результате чего получите продукт.
b) Перемешивайте реакционную смесь при 70°С в течение 2 ч, а не при комнатной температуре в течение ночи.
c) Очистите флэш-хроматографией на силикагеле, используя для элюирования градиент от 0 до 10% СН3ОН/ЕЮАс.
4) Вместо подкисления смесью НС1/1,4-диоксан нейтрализуйте реакционную смесь до рН 7,0 1,0н. водным раствором НС1, затем экстрагируйте этилацетатом, промойте насыщенным водным NаС1, высушите органическую фазу над Nа2δО4, профильтруйте и подвергните концентрированию при пониженном давлении, в результате чего получите продукт.
- 29 028921
е) Вместо подкисления смесью НС1/1,4-диоксан нейтрализуйте реакционную смесь до рН 7,0 1,0н. раствором НС1, затем сконцентрируйте при пониженном давлении, разотрите материал со смесью 1:1 этанол/СН3С^ обработайте ультразвуком и удалите твердые вещества фильтрацией через фильтровальный диск из ПТФЭ. Сконцентрируйте фильтрат при пониженном давлении, в результате чего получите продукт.
1) Вместо подкисления смесью НС1/1,4-диоксан сконцентрируйте реакционную смесь при пониженном давлении.
д) Обработайте неочищенный материал обращенно-фазовой хроматографией на силикагеле С18, используя для элюирования 0,1% ТФУК в градиенте С1 ЕС\/вода, в результате чего получите продукт в виде единственного диастереомера.
Ιί) Вместо подкисления смесью НС1/1,4-диоксан сконцентрируйте при пониженном давлении, чтобы удалить органические растворители, подкислите реакционную смесь до рН 1,0 5,0н. водным раствором НС1 и выделите полученный белый преципитат фильтрацией, в результате чего получите продукт.
ΐ) Вместо подкисления смесью НС1/1,4-диоксан сконцентрируйте при пониженном давлении, чтобы удалить органические растворители, подкислите реакционную смесь до рН 4,0 5,0н. водным раствором НС1 и выделите полученный белый преципитат фильтрацией, в результате чего получите продукт.
Пример 19.
Синтез 4-((18)-1-(((2К)-1-(2-феноксиэтил)-5,5-дифторпиперидин-2-карбонил)амино)этил)бензойной кислоты гидрохлорида.
Перемешивайте смесь метил-4-((18)-1-(((2К*)-5,5-дифторпиперидин-2-карбонил)амино)этил)бензоата гидрохлорида (200 мг, 0,55 ммоль), β-бромфенетола (113 мг, 0,55 ммоль), карбоната калия (229 мг, 1,65 ммоль), ΟΗ3ΟΝ (1,38 мл) и воды (по меньшей мере 9,9 мг, 0,55 ммоль, но не более 29,7 мг, 1,65 ммоль) при 70°С в течение двух дней, затем при 82°С в течение трех дней. Осуществите концентрирование этой смеси при пониженном давлении, в результате чего получите твердое вещество. Перемешивайте это твердое вещество в кипящем этаноле, профильтруйте и подвергните фильтрат концентрированию при пониженном давлении. Обработайте неочищенный материал обращенно-фазовой хроматографией на силикагеле С18, используя для элюирования 0,1% муравьиную кислоту в градиенте СН3СЖвода, в результате чего получите 161 мг смеси диастереомеров указанного в заголовке соединения. Подвергните 125 мг этой смеси препаративной сверхкритической хроматографии на 5 мкМ колонке СЫга1се1 ΟΙ-Н, используя для элюирования 0,2% изопропиламин в смеси 3:1 сверхкритического СΟ2 в СΗзΟΗ. Выделите изомер, элюируемый вторым, и подвергните концентрированию при пониженном давлении. Обработайте материал 4,0 М раствором НС1 в 1,4-диоксане (5 мл) и перемешивайте в течение 10 минут. Сконцентрируйте при пониженном давлении, в результате чего получите указанное в заголовке соединение в форме белого твердого вещества (54 мг, выход 27%).
Масс-спектр (т/ζ): 433 (М+Н)+, 455 (М-\а)'.
Связывание ΐη νΐίΓΟ с ЕР1, ЕР2, ЕР3 и ЕР4 человека.
Мембраны с ΗΕΡ1 и 1ιΕΡ4 получают с использованием рекомбинантных клеток ΠΕΚ293, стабильно экспрессирующих рецепторы ЕР1 (номер доступа в ОепЬапк АУ275470) или ЕР4 (номер доступа в ОепЬапк АУ429109) человека. Мембраны с 1ιΕΡ2 и 1ιΕΡ3 получают с использованием клеток ΗΕΚ293, временно трансфицированных плазмидами с рецепторами ЕР2 (номер доступа в ОепЬапк АУ275471) или ЕР3 (изоформа VI: номер доступа в ОепЬапк АУ429108). Замороженные осадки клеток гомогенизируют в буфере для гомогенизации с использованием тефлоново-стеклянного гомогенизатора. Отбирают аликвоту мембранного белка и быстро замораживают в сухом льду, а затем хранят при -80°С. Буфер для гомогенизации содержит 10 мМ Тг1§-НС1, рН 7,4, 250 мМ сахарозу, 1 мМ ЭДТА, 0,3 мМ индометацин и р1и§ Сотр1е1е™, с ЭДТА, полученный в Коске Мо1еси1аг Вюскеткак (кат. номер 1697498).
Значения Κά для связывания [3Η]-ΡΘΕ2 с каждым рецептором определяют посредством исследований связывания с насыщением или гомологичной конкуренции. Соединения тестируют в 96-луночном планшете с использованием трехкратных серийных разведений, на основании полученных результатов строят кривую по 10 точкам. Разведенное соединение инкубируют с мембранами с 20 мкг/лунку ЕР1, 10 мкг/лунку ЕР2, 1 мкг/лунку ЕР3 или от 10 до 20 мкг/лунку ЕР4 в течение 90 мин при 25°С в присутствии от 0,3 до 0,5 нМ [3Η]-ΡΘΕ2 (Ρе^к^ηΕ1те^, от 118 до 180 СЕммоль). Реакцию связывания проводят в 200 мкл буфера МΕ8 (10 мМ МΕ8 рН 6,0 с ΚΟ^ 10 мМ МдС12 и 1 мМ ЭДТА) с использованием 0,5 мл полистирольных 96-луночных планшетов с глубокими лунками. Неспецифическое связывание рассчитывают путем сравнения связывания в присутствии и в отсутствие 2 мкМ ΡΘΕ2. Мембраны выделяют филь- 30 028921
трацией (ТотТек Еагуез1ег), промывают 4 раза холодным буфером (10 мМ МЕ8 рН 6,0 с КОН, 10 мМ МдС12), сушат в сушильном шкафу при 60°С и подсчитывают радиоактивность в количестве распадов в минуту (СРМ) с использованием детектора ТорСоип!. Процент специфического связывания вычисляют в виде процента связывания в отсутствие каких-либо ингибиторов по отношению к связыванию в присутствии 2 мкМ РОЕ2. Данные анализируют с использованием следующего 4-параметрического нелинейного логистического уравнения (АВазе ЕциаЕоп 205): у = (А+((В-А)/(1+((С/х)ЛО)))), где у = % специфического ингибирования, А = нижняя точка кривой; В = верхняя точка кривой; С = относительная 1С50-концентрация, вызывающая 50% ингибирование, на основании диапазона данных между верхней и нижней точками; I) = максимум функции, 81оре = наклон кривой. Превращение К; рассчитывают по значениям 1С50 (К; = 1С50/(1+[Ь]/Ка), где [Ь] - концентрация лиганда). Результаты представлены в виде среднее геометрическое ± стандартное отклонение; п = количество независимых измерений. Стандартное отклонение рассчитывают дельта-методом: 8О1одК; х среднее геометрическое х 1п(10).
Соединения из примеров 1-19 настоящего описания исследуют, как описано выше, и они демонстрируют значение К; для ЕЕР4 ниже примерно 2 мкМ.
Таблица 1
Связывание т уйго соединения из примера 8 с ЕР1, ЕР2, ЕР3 и ЕР4 человека
Иссле НЕР1, НЕР2, Κι ИЕРЗ, Κι НЕР4, Κί
дуемое Κί (нМ) (нМ) (нМ) (нМ)
соединение
Приме >12500 956 >14800 3,68+3,32
р8 (п=1) (п=1) (п=1) (п=6)
Данные в табл. 1 демонстрируют, что соединение из примера 8 связывается с ЕЕР4 более сильно, чем с ЕЕР1, ЕЕР2 и ЕЕР3, что свидетельствует о селективности в отношении рецептора ЕЕР4.
Функциональная антагонистическая активность в отношении ЕР4 человека т уйго.
Исследование проводят в рекомбинантных клетках НЕК293, стабильно экспрессирующих рецептор ЕР4 человека. Линии клеток поддерживают культивированием в среде 1)\1Е\1 с высоким содержанием глюкозы и пиридоксин гидрохлорида (1пу11годеп), содержащей 10% фетальной бычьей сыворотки (ФБС), 1 мМ пирувата натрия, 10 мМ НЕРЕ8, 500 мкг/мл генетицина и 2 мМ Б-глютамина. Конфлюэнтные культуры выращивают при 37°С в атмосфере, содержащей 5% СО2.
Клетки собирают с использованием 2,5% трипсин-ЭДТА, суспендируют в свежей среде (ФБС с 6% ДМСО) при 107 клеток/мл и аликвоты хранят в жидком азоте. Непосредственно перед исследованием клетки размораживают в ОМЕМ, центрифугируют и ресуспендируют в буфере цАМФ.
Ингибирование продукции цАМФ, стимулированной РОЕ2, антагонистами ЕР4 измеряют с использованием НТКЕ; (С1зЫо, кат. номер 62АМ4РЕВ). Аликвоту, эквивалентную 4000 клеток, инкубируют с 50 мкл буфера для анализа цАМФ, содержащего ЕС80 РОЕ2 (0,188 нМ РОЕ2 от 81дта, кат. номер Р5640 10 мг) и антагонисты, при комнатной температуре в течение 20 мин. Буфер для анализа цАМФ содержит 500 мл НВ88 (сбалансированный солевой раствор Хэнка), 0,1% БСА, 20 мМ НЕРЕ8 и 200 мкМ 1ВМХ (81дта 15879). С.1-042794 (4-{(18)-1-[({5-хлор-2-[(4-фторфенил)окси]фенил}карбонил)амино] этил}бензойная кислота) используют в качестве положительного контроля (см. Мигазе, А. и др., ПЕе 8с1епсез, 82:226-232 (2008)). Для измерения уровней цАМФ инкубируют конъюгат цАМФ-42 и антиконъюгат цАМФ-криптат в буфере для лизиса и обработанные клетки при комнатной температуре в течение 1 ч. Сигнал НТКЕ детектируют с использованием планшетного ридера ЕпУ1зюп® (Регкт-Е1тег) и подсчитывают отношение значений флуоресценции при 665 и 620 нм. Полученные данные преобразуют в количество цАМФ (пмоль на лунку) с использованием стандартной кривой цАМФ, полученной для каждого эксперимента. Данные анализируют с использованием следующего 4-параметрического нелинейного логистического уравнения (АВазе ЕциаЕоп 205): у = (А+((В-А)/(1+((С/х)лО)))), где у = % специфического ингибирования, А = нижняя тока кривой; В = верхняя точка кривой; С = относительная 1С50концентрация, вызывающая 50% ингибирование, на основании диапазона данных между верхней и нижней точками; I) = максимум функции, 81оре = наклон кривой. Результаты представлены в виде среднее геометрическое ± стандартное отклонение; п = количество независимых измерений. Стандартное отклонение рассчитывают дельта-методом: 81)1одК| х среднее геометрическое х 1п(10).
В результате проведения процедуры, описанной выше, установлено, что соединение из примера 8 имеет 1С50, равную 1,76 ±1,51 нМ (п=6), измеренную для ЕР4 человека. Эти данные демонстрируют, что соединение из примера 8 представляет собой антагонист ЕР4 человека т уйго.
Антагонистическая активность т уйго в цельной крови человека.
Считается, что ингибирующее влияние РОЕ2 на индуцированную БР8 продукцию ФНОа макрофагами/моноцитами опосредуются рецепторами ЕР4 (см. Мигазе, А. и др., ПЕе 8с1епсез, 82:226-232 (2008)). Способность соединения из примера 8 обращать ингибирующее влияние РОЕ2 на продукцию, индуцированную БР8 продукцию ФНОа в цельной крови человека является показателем функциональной актив- 31 028921
ности.
Кровь от здоровых доноров-волонтеров собирают в пробирки Уаси1атег с гепарином натрия. Донорны не получают ни НСПВП, ни целекоксиб в течение 48 ч и не получают глюкокортикоиды в течение двух недель перед сбором крови. Содержимое всех пробирок объединяют в 50 мл конические пробирки Та1соп для центрифугирования и вносят 98 мкл/лунку в 96-луночные планшеты для тканевых культур (Та1соп 3072). Соединения разбавляют в ДМСО до 100-кратной конечной концентрации и добавляют 1 мкл/лунку с кровью в трех повторах, в результате чего получают кривые по 7 значениям концентрации. Кровь предварительно обрабатывают соединениями при 37°С во влажной атмосфере 5% СО2 в течение 30 мин, после чего добавляют 1 мкл/лунку раствора 1 мг/мл липополисахарида (ЬР8) (81дша 0111:В4) в 0,2 мг/мл бычьем сывороточном альбумине (БСА)/ФБР ± 1 мМ РОЕ2 (Саутап 14010), в результате чего получают конечную концентрацию 1.Р8. равную 10 мкг/мл ± 10 нМ РОЕ2. Планшеты инкубируют в течение 20-24 ч при 37°С во влажной атмосфере 5% СО2. Планшеты центрифугируют при 1800х§ в течение 10 мин при 22°С в центрифуге ЕррепбогГ 5810К. Плазму отделяют от слоя клеток и переносят в полипропиленовые планшеты с ν-образным дном. Уровни ФНОа в 2 мкл плазмы измеряют с помощью коммерчески доступного иммуноферментной тест-системы (Κ&Ό 8у§1ет8 ΌΥ210) с использованием планшетов 1тти1оп 4 НВХ (Тйегто 3855) и субстрата 3,3',5,5'-тетраметилбифенил-4,4'-диамина (КРЬ 50-76-03). Измерения в планшетах при А450-А650 проводят с использованием планшетного ридера (Мо1еси1аг ^еν^сеδ Уегзатах) с использованием программного обеспечения ЗОТТтахРКО (ν. 4.3.1). Значения 1С50 рассчитывают с использованием нелинейной регрессии Огарйраб Рпзт (ν. 4) аппроксимацией сигмоидной кривой зависимости от дозы. Результаты представлены в виде среднее геометрическое ± стандартное отклонение; п = количество независимых измерений. Стандартное отклонение рассчитывают дельта-методом: !БО1о&К1 х среднее геометрическое х 1п(10).
В результате процедуры, описанной выше, установлено, что соединение из примера 8 имеет 1С50, равную 0,0782±0,061 мкМ (п=6), измеренную на ЕР4 человека. Эти данные демонстрируют, что соединение из примера 8 представляет собой антагонист ЕР4 человека в тесте индукции ФНОа с использованием крови человека.

Claims (15)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Соединение формулы
    где X представляет собой:
    - 32 028921
    К представляет собой Н, метил или этил;
    К1 представляет собой метил, если К2 представляет собой Н, и К1 представляет собой Н, если К2 представляет собой метил;
    К3 представляет собой Н или Р;
    К4 представляет собой Н, Р или метил;
    К5 представляет собой ОН, метил, метокси или Р;
    К6 представляет собой Н, если К7 представляет собой ОН, и К6 представляет собой Р, если К7 представляет собой Р; и
    каждый из К8 и К9 10 независимо представляет собой Н или Р, или его фармацевтически приемлемая соль.
  2. 2. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п.1, отличающееся тем, что К представляет собой метил.
  3. 3. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по любому из пп.1 или 2, отличающееся тем, что К4 представляет собой Р и К5 представляет собой Р.
  4. 4. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по любому из пп.1 или 2, отличающееся тем, что К4 представляет собой метил и К5 представляет собой метил.
  5. 5. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по любому из пп.1-4, отличающееся тем, что К8 представляет собой Р и К9 представляет собой Р.
  6. 6. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по любому из пп.1-5, отличающееся тем, что X представляет собой:
  7. 7. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по любому из пп.1-5, отличающееся тем, что X представляет собой:
  8. 8. Способ лечения остеоартрита у пациента, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, эффективного количества соединения или его фармацевтически приемлемой соли по пп.17.
  9. 9. Способ лечения ревматоидного артрита у пациента, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, эффективного количества соединения или его фармацевтически приемлемой соли по пп.1-7.
  10. 10. Способ лечения боли, связанной с остеоартритом или ревматоидным артритом, у пациента, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, эффективного количества соединения или его фармацевтически приемлемой соли по пп.1-7.
    - 33 028921
  11. 11. Применение соединения или его фармацевтически приемлемой соли по пп.1-7 в терапии воспалительных состояний и боли, связанной с этими состояниями.
  12. 12. Применение соединения или его фармацевтически приемлемой соли по пп.1-7 для лечения остеоартрита.
  13. 13. Применение соединения или его фармацевтически приемлемой соли по пп.1-7 для лечения ревматоидного артрита.
  14. 14. Применение соединения или его фармацевтически приемлемой соли по пп.1-7 для лечения боли, связанной с остеоартритом или ревматоидным артритом.
  15. 15. Фармацевтическая композиция для лечения воспалительных состояний и боли, связанной с этими состояниями, содержащая соединение или его фармацевтически приемлемую соль по пп. 1 -7 совместно с одним или более фармацевтически приемлемым носителем, разбавителем или вспомогательным веществом.
EA201690894A 2013-12-17 2014-12-11 Феноксиэтилы EA028921B1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201361916827P 2013-12-17 2013-12-17
PCT/US2014/069743 WO2015094902A1 (en) 2013-12-17 2014-12-11 Phenoxyethyl cyclic amine derivatives and their activity as ep4 receptor modulators

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201690894A1 EA201690894A1 (ru) 2016-10-31
EA028921B1 true EA028921B1 (ru) 2018-01-31

Family

ID=52355185

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201690894A EA028921B1 (ru) 2013-12-17 2014-12-11 Феноксиэтилы

Country Status (23)

Country Link
US (1) US9776964B2 (ru)
EP (1) EP3083562B1 (ru)
JP (1) JP6212644B2 (ru)
KR (1) KR101807981B1 (ru)
CN (1) CN105793242B (ru)
AU (1) AU2014366361B2 (ru)
BR (1) BR112016011016A8 (ru)
CA (1) CA2928593A1 (ru)
CY (1) CY1119583T1 (ru)
DK (1) DK3083562T3 (ru)
EA (1) EA028921B1 (ru)
ES (1) ES2651858T3 (ru)
HR (1) HRP20171850T1 (ru)
HU (1) HUE035698T2 (ru)
LT (1) LT3083562T (ru)
ME (1) ME02896B (ru)
MX (1) MX2016007566A (ru)
NO (1) NO3221486T3 (ru)
PL (1) PL3083562T3 (ru)
PT (1) PT3083562T (ru)
RS (1) RS56615B1 (ru)
SI (1) SI3083562T1 (ru)
WO (1) WO2015094902A1 (ru)

Families Citing this family (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CR20180323A (es) 2015-11-20 2018-08-06 Idorsia Pharmaceuticals Ltd Derivados de indol n-sustituídos como moduladores de los receptores de pge2
WO2018210992A1 (en) 2017-05-18 2018-11-22 Idorsia Pharmaceuticals Ltd Pyrimidine derivatives
PT3625224T (pt) 2017-05-18 2021-10-06 Idorsia Pharmaceuticals Ltd Derivados de indol n-substituídos
CN110621671A (zh) 2017-05-18 2019-12-27 爱杜西亚药品有限公司 作为pge2受体调节剂的苯并呋喃及苯并噻吩衍生物
KR102626982B1 (ko) 2017-05-18 2024-01-18 이도르시아 파마슈티컬스 리미티드 Pge2 수용체 조절제로서의 피리미딘 유도체
AU2018269666B2 (en) 2017-05-18 2022-02-03 Idorsia Pharmaceuticals Ltd Phenyl derivatives as PGE2 receptor modulators
CN109970625B (zh) * 2017-12-28 2021-02-26 新发药业有限公司 一种5r-苄氧氨基哌啶-2s-甲酸或其衍生物的制备方法
CN114206866A (zh) * 2019-06-11 2022-03-18 泰昂治疗公司 前列腺素e2受体4拮抗剂及其用途
EP3885339A1 (en) * 2020-03-27 2021-09-29 Rottapharm Biotech S.r.l. Process for the preparation of (r)-4-(1-(6-(4-(trifluoromethyl)benzyl)-6-azaspiro[2.5]octane-5-carboxamido)-cyclopropyl) benzoic acid or a salt thereof
WO2022102731A1 (ja) 2020-11-13 2022-05-19 小野薬品工業株式会社 Ｅｐ４拮抗薬と免疫チェックポイント阻害物質との併用によるがん治療
CN112608271A (zh) * 2020-11-26 2021-04-06 安润医药科技（苏州）有限公司 酰胺衍生物及其在制备ep4受体拮抗剂中的应用

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2013004290A1 (en) * 2011-07-04 2013-01-10 Rottapharm S.P.A. Cyclic amine derivatives as ep4 receptor antagonists
WO2014004229A1 (en) * 2012-06-29 2014-01-03 Eli Lilly And Company Phenoxyethyl piperidine compounds

Family Cites Families (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE2500157C2 (de) 1975-01-03 1983-09-15 Hoechst Ag, 6230 Frankfurt N-Acyl-4-(2-aminoäthyl)-benzoesäuren, deren Salze und Ester, Verfahren zu deren Herstellung und deren Verwendung
DE60307607T2 (de) 2002-03-18 2007-08-09 Pfizer Products Inc., Groton Verwendung von selektiven ep4 rezeptor agonisten zur behandlung von krankheiten
EP1660491B1 (en) * 2003-07-28 2008-08-06 Janssen Pharmaceutica N.V. Benzimidazole, benzthiazole and benzoxazole derivatives and their use as lta4h modulators
BRPI0414130B8 (pt) 2003-09-03 2021-05-25 Askat Inc compostos de fenilamida ou piridilamida, seu uso e composições farmacêuticas que os compreendem.
WO2005105733A1 (en) 2004-05-04 2005-11-10 Pfizer Japan Inc. Ortho substituted aryl or heteroaryl amide compounds
AU2005238291A1 (en) * 2004-05-04 2005-11-10 Pfizer Inc. Substituted methyl aryl or heteroaryl amide compounds
AU2007242018B2 (en) * 2006-04-24 2012-07-19 Merck Canada Inc. Indole amide derivatives as EP4 receptor antagonists
US7705035B2 (en) 2006-06-12 2010-04-27 Merck Frosst Canada Ltd. Indoline amide derivatives as EP4 receptor ligands
US20110028463A1 (en) * 2007-07-03 2011-02-03 Astellas Pharma Inc. Amide compounds
EP2565191B1 (en) * 2008-05-14 2014-10-08 Astellas Pharma Inc. 4-(Indol-7-ylcarbonylaminomethyl)cyclohexanecarboxylic acid derivatives as EP4 receptor antagonists useful for the treatment of chronic renal failure or diabetic nephropathy
CA2733247C (en) 2008-08-14 2018-04-03 Beta Pharma Canada Inc. Heterocyclic amide derivatives as ep4 receptor antagonists
EP2538978B1 (en) 2010-02-22 2016-09-07 RaQualia Pharma Inc. Use of an ep4 receptor antagonist in the treatment of allergic contact dermatitis and psoriasis
US9120824B2 (en) * 2011-07-04 2015-09-01 Rottapharm Biotech S.R.L. Cyclic amine derivatives as EP4 receptor agonists
TW201443004A (zh) 2013-02-15 2014-11-16 Lilly Co Eli 苯氧基乙氧基化合物
TWI636046B (zh) * 2013-05-17 2018-09-21 美國禮來大藥廠 苯氧基乙基二氫－１ｈ－異喹啉化合物

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2013004290A1 (en) * 2011-07-04 2013-01-10 Rottapharm S.P.A. Cyclic amine derivatives as ep4 receptor antagonists
WO2014004229A1 (en) * 2012-06-29 2014-01-03 Eli Lilly And Company Phenoxyethyl piperidine compounds

Also Published As

Publication number Publication date
ES2651858T3 (es) 2018-01-30
JP2016540007A (ja) 2016-12-22
KR101807981B1 (ko) 2017-12-11
CA2928593A1 (en) 2015-06-25
WO2015094902A1 (en) 2015-06-25
DK3083562T3 (da) 2017-11-13
CN105793242B (zh) 2018-02-16
LT3083562T (lt) 2018-01-10
ME02896B (me) 2018-04-20
JP6212644B2 (ja) 2017-10-11
NO3221486T3 (ru) 2018-09-08
US20160272585A1 (en) 2016-09-22
SI3083562T1 (sl) 2017-11-30
EP3083562B1 (en) 2017-09-27
AU2014366361A1 (en) 2016-05-19
HRP20171850T1 (hr) 2018-01-12
MX2016007566A (es) 2016-10-03
CN105793242A (zh) 2016-07-20
EA201690894A1 (ru) 2016-10-31
RS56615B1 (sr) 2018-02-28
AU2014366361B2 (en) 2017-04-20
HUE035698T2 (en) 2018-05-28
PT3083562T (pt) 2017-12-13
EP3083562A1 (en) 2016-10-26
CY1119583T1 (el) 2018-03-07
KR20160084467A (ko) 2016-07-13
US9776964B2 (en) 2017-10-03
PL3083562T3 (pl) 2018-02-28
BR112016011016A8 (pt) 2018-01-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA028921B1 (ru) Феноксиэтилы
JP7193460B2 (ja) Ｃｄｋ８調節およびその適応症のための化合物および方法
US5545644A (en) Indole derivatives
US5578612A (en) Indole derivatives
KR101991327B1 (ko) 오피오이드 수용체 리간드와 그 용도 및 제조방법
US20040132800A1 (en) N-(2-arylethyl) benzylamines as antagonists of the 5-ht6 receptor
US5607951A (en) Indole derivatives
AU767009B2 (en) Selective 5-HT6 receptor ligands
EA001323B1 (ru) 4-замещенные аналоги пиперидина и их использование в качестве подтип-селективных антагонистов рецепторов nmda
JP2010519260A (ja) Ｅｐ４受容体アンタゴニストとしてのインドール及びインドリンシクロプロピルアミド誘導体
JPH08225568A (ja) ３−〈１，２，３，６−テトラヒドロ−〈１−アルキレンアリール〉−４−ピリジニル〉−および３−〈１−アルキレンアリール〉−４−ピペリジニル−１ｈ−インドール類：新規５−ｈｔ１ｆ作動薬
JP2002513387A (ja) 選択的β▲下３▼アドレナリン作動性アゴニスト
DE60103375T2 (de) 1,3-dihydro-2h-indol-2-on derivate und deren verwendung als liganden der arginin-vasopressin-rezeptoren v1b oder v1b und v1a
EP3843711A1 (en) Methods of treating cancer with small molecule pd-l1 inhibitors
JP2009516712A (ja) 依存性イオンチャネルを調節するための組成物および方法
US10106523B2 (en) Amide compound
TW200400192A (en) Chemical compounds
IL223515A (en) Triazaspiroodecanyl compounds and their uses
US5559129A (en) Indole derivatives
KR101556318B1 (ko) 칼슘이온 채널 조절제로서 유효한 6-피라졸일아미도-3-치환된 아자바이사이클로[3.1.0]헥산 유도체
US6403808B1 (en) Selective 5-HT6 receptor ligands
JP2022535744A (ja) てんかんを治療するための方法および組成物
WO2019163956A1 (ja) ピラゾロ［１，５－ａ］ピリミジン化合物の塩およびその結晶
US5559246A (en) Indole derivatives
US9018231B2 (en) Sulfone compounds as 5-HT6 receptor ligands

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG TJ TM RU