ES2637802T3 - Formulación que comprende un compuesto de benzotiazolona - Google Patents

Abstract

Una composición farmacéutica en una forma de dosificación oral sólida, la cual comprende del 0.01 al 15 % (peso/peso) de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)- ona y uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables, en donde la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan- 2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona está en una forma de sal de acetato.

Description

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DESCRIPCION

Formulacion que comprende un compuesto de benzotiazolona Campo de la invencion

La presente invencion se refiere a composiciones farmaceuticas novedosas que comprenden (R)-7-(2-(1-(4-butoxi- fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona, a metodos para la elaboracion de estas composiciones, y al uso de las mismas en el tratamiento o en la prevencion de enfermedades, tales como distrofia muscular, atrofia relacionada con desuso, caquexia o sarcopenia.

Antecedentes de la Invencion

Los compuestos de benzotiazolona, los cuales son agonistas del adreno-receptor beta-2 se describen en las Publicaciones Internacionales Numeros WO2004/16601 y WO2006/056471. La Publicacion Internacional Numero WO2005/110990 tambien describe heterociclos benzo-condensados como agonistas de beta-2.

Aunque los agonistas de beta-2 han sido conocidos durante mucho tiempo por sus propiedades broncodilatadoras, tambien son conocidos por su capacidad para producir hipertrofia de musculo esqueletico.

Numerosos estudios se han enfocado en las aplicaciones terapeuticas de las propiedades anabolicas de los agonistas de beta-2 para mitigar la consuncion muscular y mejorar la funcion muscular. Sin embargo, esta clase de compuestos tambien se ha asociado con efectos secundarios indeseables, incluyendo un mayor riesgo de eventos adversos relacionados con el sistema cardiovascular. Por consiguiente, el uso de agonistas de beta-2 en las enfermedades de consuncion muscular ha sido limitado hasta ahora por la hipertrofia cardlaca y por los efectos potencialmente perjudiciales sobre la funcion cardiovascular.

Existe una necesidad de proporcionar nuevos agonistas de beta-2 que sean buenos farmacos candidatos. En particular, un nuevo agonista de beta-2 debe enlazarse potentemente al adreno-receptor beta-2, mientras que muestre poca afinidad por otros receptores, tales como, por ejemplo, el adreno-receptor beta-1, el adreno-receptor alfa-1A, o el receptor 5HT2C, y que muestre la actividad funcional como un agonista. Debe ser metabolicamente estable y poseer propiedades farmacocineticas favorables. No debe ser toxico, y debe demostrar pocos efectos secundarios, en particular menos efectos secundarios cardlacos que los agonistas de beta-2 comercializados conocidos, tales como, por ejemplo, el formoterol. Adicionalmente, el farmaco candidato ideal existira en una forma flsica que sea estable, no higroscopica y facilmente formulada.

Resumen de la invencion

Por consiguiente, existe una necesidad de proporcionar un compuesto que tenga cuando menos algunas de las propiedades descritas anteriormente, en donde el compuesto este en una forma flsica que pueda mejorar la eficiencia, biodisponibilidad, estabilidad y/o aceptacion por el paciente.

Se pretende alcanzar estos objetivos proporcionando una composicion como se describe en el presente documento, proporcionando la composicion para su uso en enfermedades, en particular para el tratamiento de distrofia muscular, atrofia por desuso, caquexia o sarcopenia, como se describe en la presente, y proporcionando un proceso para producir la composicion que se describe en el presente documento.

Se describen aqul diversas realizaciones de la invencion.

Dentro de ciertos aspectos, este documento proporciona una composicion farmaceutica en forma de dosificacion oral solida que comprende del 0.01 % al 15 % (peso/peso) de (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)- 1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona y uno o mas excipientes farmaceuticamente aceptables, en donde la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona esta en la forma de sal de acetato.

En otra realizacion, la invencion proporciona un metodo para la elaboracion de dicha composicion farmaceutica.

En otra realizacion, la invencion proporciona un metodo de tratamiento o prevencion de la distrofia muscular, atrofia por desuso, caquexia o sarcopenia, el cual comprende la administracion de dicha composicion farmaceutica.

Declaracion de la Invencion

El compuesto de la invencion es un agonista selectivo de beta-2. En particular, muestra un aumento de afinidad por

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el adreno-receptor beta-2, la cual es mayor que su afinidad por el adreno-receptor beta-1 o el adreno-receptor alfa- 1A, comparandose con los agonistas de beta-2 conocidos, tales como el formoterol. De una manera sorprendente, tambien muestra una afinidad mas baja por el receptor de serotonina (5HT2c), y una potencia funcional mas baja en las celulas que expresan el 5HT2c que su racemato o su enantiomero correspondiente, indicando que no afecta a la actividad locomotora y a la ingestion de alimento que pueda provocar una reduccion del peso corporal, contrarrestando potencialmente la hipertrofia de musculo esqueletico inducida por el agonista de beta-2. Los efectos negativos de los agonistas del receptor 5HT2c sobre la entrada de energla y el peso corporal son descritos por J. Halford y J. Harrold en Handb Exp Pharmacol. 2012; (209) 349-56.

La composicion de la presente invencion que comprende el compuesto de la invencion es, por consiguiente, potencialmente util en el tratamiento de una amplia gama de trastornos, en particular en el tratamiento o en la prevencion de enfermedades de consuncion muscular, tales como distrofia muscular, atrofia relacionada con desuso, caquexia o sarcopenia.

El tratamiento de caquexia tambien es tambien un uso contemplado. Todas las formas de caquexia son potencialmente tratables con la composicion de la presente invencion, incluyendo caquexia por cancer, por ejemplo.

Breve descripcion de las Figuras

La Figura 1 muestra el aumento de la masa de musculo esqueletico y de la masa cardlaca en ratas inyectadas con formoterol contra el compuesto A (compuesto de la invencion) - (los valores se expresan como el promedio ± SEM (n = 5-6); grupo de musculos esqueleticos (gastrocnemio-soleo-tibial) normalizado por el peso corporal inicial; peso del corazon normalizado por el peso del cerebro.

La Figura 2a muestra el aumento de la frecuencia cardlaca en los nodulos sino-auriculares aislados de conejo cuando se utiliza formoterol contra el compuesto A (compuesto de la invencion).

La Figura 2b muestra el aumento de actividad del marcapasos en corazones de conejo aislados cuando se utiliza formoterol contra el compuesto A (compuesto de la invencion).

Las Figuras 3a y 3b muestran el cambio en la frecuencia cardlaca en ratas despues de un bolo subcutaneo a s.c. del compuesto A (compuesto de la invencion) o formoterol, respectivamente.

La Figura 3c compara el cambio en la frecuencia cardlaca promedio en ratas cuando se administra formoterol contra el compuesto A (compuesto de la invencion).

Las Figuras 4a y 4b muestran el cambio en la frecuencia cardlaca en monos Rhesus despues de un bolo subcutaneo del compuesto A (compuesto de la invencion) o formoterol, respectivamente.

La Figura 5 muestra el patron de difraccion en polvo de rayos-X de la sal de acetato cristalina del compuesto A (compuesto de la invencion).

Descripcion detallada

La invencion proporciona una composicion farmaceutica, la cual comprende (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil- propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona y uno o mas excipientes farmaceuticamente aceptables.

En lo siguiente, a menos que se especifique de otra manera, los terminos tienen el siguiente significado.

Una composicion farmaceutica como se utiliza en la presente, es una mezcla que contiene el ingrediente activo para administrarse a un mamlfero, por ejemplo, a un ser humano, con el objeto de prevenir, tratar o controlar una enfermedad o condicion particular que afecte al mamlfero.

El termino “farmaceuticamente aceptable", como se utiliza en la presente, se refiere a los compuestos, materiales, composiciones y/o formas de dosificacion que, dentro del alcance de un buen juicio medico, son adecuados para hacer contacto con los tejidos de los mamlferos, en especial de los seres humanos, sin una toxicidad, irritacion, o respuesta alergica excesiva, y otras complicaciones problematicas, de una manera conmensurada con una proporcion razonable de beneficio/riesgo.

Tlpicamente, el termino “ingrediente activo” se refiere a cualquier compuesto, sustancia, farmaco, medicamento, o ingrediente activo que tiene un efecto terapeutico o farmacologico, y el cual es adecuado para su administracion a un mamlfero, por ejemplo, a un ser humano, en una composicion que es particularmente adecuada para su

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administracion oral.

activo es la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-

de la invention" o "el compuesto de la presente invencion” se refiere a la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi- benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona.

En las composiciones farmaceuticas de la invencion, el ingrediente activo de (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil- propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona se proporciona en la forma de sal de acetato de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona.

Como se utiliza en la presente, la estereoqulmica absoluta se especifica de acuerdo con el sistema R-S de Cahn- lngold-Prelog. Cuando un compuesto es un enantiomero puro, la estereoqulmica en cada atomo de carbono quiral se puede especificar mediante cualquiera de R o S. Los compuestos resueltos cuya configuration absoluta se desconoce, pueden ser designados como (+) o (-) dependiendo de la direction (dextrogira o levogira) en la que rotan la luz polarizada en el plano en la longitud de onda de la llnea de sodio D. Cualquier atomo asimetrico (por ejemplo, carbono, o similares) de un compuesto puede estar presente en una configuracion racemica o enantiomericamente enriquecida, por ejemplo, en la configuracion (R), (S) o (R,S). La mezcla racemica 50:50 de estereoisomeros se designa como (R,S), y las formas enantiomericamente enriquecidas por el exceso enantiomerico de las formas (R) a (S), respectivamente, o de (S) a (R). El exceso enantiomerico es representado usualmente mediante la ecuacion: ee = ((m1 - m2) / (m1 + m2)) * 100%, en donde m1 y m2 representan la masa de las formas enantiomericas R y S respectivas.

El compuesto de la presente invencion contiene un centro asimetrico, el cual se define en terminos de estereoqulmica absoluta como (R). Su enantiomero correspondiente se define como (S), el cual es la forma menos activa.

En ciertas realizaciones de la invencion, el atomo asimetrico tiene un exceso enantiomerico de cuando menos el 95, 98 o 99 % en la configuracion (R).

En una realization de la invencion, se proporciona una composition farmaceutica en una forma de dosificacion oral solida, la cual comprende la sal de acetato de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)- 5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona, y uno o mas excipientes farmaceuticamente aceptables, en donde la sal de acetato de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona esta presente en un exceso enantiomerico de cuando menos el 95 %. En esta realizacion, la composicion de preferencia comprende del 0.01 al 15 % (peso/peso), mas preferiblemente del 0.01 al 10 % (peso/peso), todavla mas preferiblemente del 0.01 al 5 % (peso/peso), todavla mas preferiblemente del 0.01 al 2 % (peso/peso), mas preferiblemente del 0.1 al 1 % (peso/peso) de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)- 5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona.

En una realizacion de la invencion, se proporciona una composicion farmaceutica en una forma de dosificacion oral solida, la cual comprende la sal de acetato de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)- 5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona, y uno o mas excipientes farmaceuticamente aceptables, en donde la sal de acetato de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona esta presente en un exceso enantiomerico de cuando menos el 98 %. En esta realizacion, la composicion de preferencia comprende del 0.01 al 15 % (peso/peso), mas preferiblemente del 0.01 al 10 % (peso/peso), todavla mas preferiblemente del 0.01 al 5 % (peso/peso), todavla mas preferiblemente del 0.01 al 2 % (peso/peso), mas preferiblemente del 0.1 al 1 % (peso/peso) de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)- 5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona.

En una realizacion de la invencion, se proporciona una composicion farmaceutica en una forma de dosificacion oral solida, la cual comprende la sal de acetato de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)- 5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona, y uno o mas excipientes farmaceuticamente aceptables, en donde la sal de acetato de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona esta presente en un exceso enantiomerico de cuando menos el 99 %. En esta realizacion, la composicion de preferencia comprende del 0.01 al 15 % (peso/peso), mas preferiblemente del 0.01 al 10 % (peso/peso), todavla mas preferiblemente del 0.01 al 5 % (peso/peso), todavla mas preferiblemente del 0.01 al 2 % (peso/peso), mas preferiblemente del 0.1 al 1 % (peso/peso) de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)- 5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona.

En la composicion farmaceutica de la presente invencion, el ingrediente metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona.

Como se utiliza en la presente, el termino “compuesto A”, “compuesto

Dependiendo de la election de los materiales de partida y de los procedimientos para la slntesis qulmica, los compuestos pueden estar presentes en la forma de uno de los posibles isomeros o como mezclas de los mismos,

por ejemplo, como los isomeros opticos puros, o como mezclas de isomeros, tales como racematos. Los isomeros (R) y (S) opticamente activos se pueden preparar utilizando sintones quirales o reactivos quirales, o se pueden resolver empleando las tecnicas convencionales. Se pretende que se incluyan todas las formas tautomericas del compuesto de la presente invencion.

5 De conformidad con lo anterior, como se utiliza en la presente, el compuesto de la presente invencion puede estar en la forma de tautomeros o mezclas de los mismos.

Cualesquiera racematos resultantes de los productos finales o intermediarios de slntesis se pueden resolver en los antlpodas opticos mediante los metodos conocidos, por ejemplo, mediante la separacion de las sales diaestereomericas de los mismos, obtenidas con un acido o con una base opticamente activa, y la liberacion del 10 compuesto acido o basico opticamente activo. En particular, por consiguiente, se puede emplear una fraccion basica para resolver el compuesto de la presente invencion en sus antlpodas opticos, por ejemplo, mediante la cristalizacion fraccionaria de una sal formada con un acido opticamente activo, por ejemplo, acido tartarico, acido dibenzoil-tartarico, acido diacetil-tartarico, acido di-O,O'-p-toluoil-tartarico, acido mandelico, acido malico o acido canfor-10-sulfonico. Los productos racemicos o enantiomericamente enriquecidos tambien se pueden resolver 15 mediante cromatografla quiral, por ejemplo, cromatografla de llquidos a alta presion (HPLC), utilizando un adsorbente quiral.

En la presente invencion, la composicion farmaceutica comprende la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il- amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona en una forma de sal de acetato.

Las sales farmaceuticamente aceptables del compuesto utilizado en la presente invencion se pueden sintetizar a 20 partir de una fraccion basica, mediante los metodos qulmicos convencionales. En terminos generales, estas sales se pueden preparar mediante la reaccion de las formas de base libre del compuesto con una cantidad estequiometrica del acido apropiado. Estas reacciones tlpicamente se llevan a cabo en agua o en un solvente organico, o en una mezcla de los dos. En terminos generales, es recomendable el uso de medios no acuosos como eter, acetato de etilo, etanol, isopropanol, o acetonitrilo, cuando sea practicable. Las listas de las sales adecuadas adicionales se 25 pueden encontrar, por ejemplo, en “Remington's Pharmaceutical Sciences”, 20a Edicion, Mack Publishing Company, Easton, Pa., (1985); y en “Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use” por Stahl y Wermuth (Wiley-VCH, Weinheim, Alemania, 2a edicion revisada, 2011).

En un aspecto de la presente invencion, la sal de acetato de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)- 1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona se forma mediante la reaccion de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2- 30 metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona con acido acetico en un solvente adecuado.

En cierto aspecto de la invencion, la sal de acetato de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1- hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona se forma de acuerdo con el procedimiento descrito en el Ejemplo 3.

En cierto aspecto de la invencion, la sal de acetato de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1- 35 hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona se forma de acuerdo con el procedimiento descrito en el Ejemplo 3a.

A menos que se informe de otra manera, la concentracion de ingrediente activo en la composicion farmaceutica de la invencion, se proporciona en porcentaje en peso/peso de la base libre de dicho ingrediente activo.

La composicion farmaceutica de la invencion comprende del 0.01 al 15 % (peso/peso) del ingrediente activo.

En una realizacion, comprende del 0.01 al 10 % (peso/peso) del ingrediente activo.

40 En una realizacion, comprende 0.01 a 5 % (peso/peso) del ingrediente activo.

En una realizacion, comprende del 0.01 al 2 % (peso/peso) del ingrediente activo.

En una realizacion, comprende del 0.1 al 1 % (peso/peso) del ingrediente activo.

Las composiciones de la invencion son adecuadas para su administracion oral.

Adicionalmente, el compuesto utilizado en la presente invencion, incluyendo su sal de acetato, tambien se puede 45 obtener en la forma de sus hidratos, o puede incluir otros solventes utilizados para su cristalizacion. El compuesto de la presente invencion puede formar, inherentemente o por diseno, solvatos con solventes farmaceuticamente aceptables (incluyendo agua); por consiguiente, se pretende que la invencion abarque las formas tanto solvatadas como no solvatadas. El termino "solvato" se refiere a un complejo molecular del compuesto de la presente invencion

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(incluyendo las sales farmaceuticamente aceptables del mismo), con una o mas moleculas de solvente. Estas moleculas de solvente son aquellas comunmente utilizadas en la tecnica farmaceutica, que son conocidas como inocuas para el receptor, por ejemplo, agua, etanol, y similares. El termino "hidrato" se refiere al complejo en donde la molecula de solvente es agua.

Los solvatos farmaceuticamente aceptables de acuerdo con la invencion incluyen aquellos en donde el solvente de cristalizacion puede ser isotopicamente sustituido por ejemplo, D2O, d6-acetona, d6-DMSO.

El compuesto de la presente invencion, incluyendo su sal de acetato, hidratos y solvatos del mismo, puede formar, inherentemente o por diseno, polimorfos.

El termino “amorfo” describe un estado flsico que no es cristalino y se puede verificar mediante difraccion de rayos-X y otros medios, incluyendo, pero no limitandose a, observacion con un microscopio de luz polarizada y calorimetrla de exploration diferencial.

El termino “cristal” describe una forma del estado solido de la materia, la cual es distinta de una segunda forma - el estado solido amorfo, que existe esencialmente como un solido desorganizado, heterogeneo. Los cristales son matrices tridimensionales regulares de atomos, iones, moleculas o conjuntos moleculares. Los cristales son matrices reticulares de bloques de construction llamados unidades asimetricas (que consisten en la sustancia que se cristalizo) que estan dispuestos de acuerdo con simetrlas bien definidas en celdas unitarias que se repiten en tres dimensiones.

El termino "polimorfo", como se usa en la presente, se refiere a las formas cristalinas que tienen la misma composition qulmica pero diferentes configuraciones espaciales de las moleculas, atomos y/o iones que forman el cristal.

En la presente invencion, el ingrediente activo puede estar en la forma de polimorfos, tales como el polimorfo descrito en el ejemplo 4.

La (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona en la forma de la sal de acetato, usada en la invencion, puede ser capaz de formar co-cristales con formadores de co- cristales adecuados. Estos co-cristales se pueden preparar a partir de la sal de acetato de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi- fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona mediante los procedimientos conocidos de formation de co-cristales. Tales procedimientos incluyen molienda, calentamiento, co-sublimacion, cofusion, o poner en contacto en solution la sal de acetato de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)- 1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona con el formador de co-cristales bajo condiciones de cristalizacion, y aislar los co-cristales as! formados. Los formadores de co-cristales adecuados incluyen los descritos en la Publication Internacional Numero WO 2004/078163. Un co-cristal se refiere a un material cristalino que comprende dos o mas solidos unicos a temperatura ambiente, conteniendo cada uno caracterlsticas flsicas distintivas, tales como estructura, punto de fusion y calores de fusion.

Como se usa en la presente, un vehlculo o portador es una composicion farmaceuticamente aceptable que transporta un farmaco a traves de la membrana biologica o dentro de un fluido biologico.

En una realization de la invencion, se proporciona una composicion farmaceutica en una forma de dosificacion oral solida, la cual comprende la sal de acetato de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)- 5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona en una forma cristalina. En dicha realizacion, la composicion de preferencia comprende del 0.01 al 15 % (peso/peso), mas preferiblemente del 0.01 al 10 % (peso/peso), todavla mas preferiblemente del 0.01 al 5 % (peso/peso), todavla mas preferiblemente del 0.01 al 2 % (peso/peso), mas preferiblemente del 0.1 al 1 % (peso/peso) de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)- 5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona.

En otra realizacion de la invencion, se proporciona una composicion farmaceutica en una forma de dosificacion oral solida, la cual comprende la sal de acetato de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)- 5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona en una forma cristalina sustancialmente pura. En dicha realizacion, la composicion de preferencia comprende del 0.01 al 15 % (peso/peso), mas preferiblemente del 0.01 al 10 % (peso/peso), todavla mas preferiblemente del 0.01 al 5 % (peso/peso), todavla mas preferiblemente del 0.01 al 2 % (peso/peso), mas preferiblemente del 0.1 al 1 % (peso/peso) de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il- amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona.

Como se utiliza en la presente, “sustancialmente pura", cuando se utiliza con referencia a la sal de acetato de la (R)- 7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona cristalina,

significa que tiene una pureza mayor del 90 % en peso, incluyendo mayor del 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, y 99

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La presencia de impurezas de la reaccion y/o impurezas del procesamiento se puede determinar mediante las tecnicas anallticas conocidas en la materia, tales como, por ejemplo, cromatografla, espectroscopla de resonancia magnetica nuclear, espectrometrla de masas, o espectroscopla infrarroja.

En otro aspecto, la invencion se refiere a una composicion farmaceutica en una forma de dosificacion oral solida, la cual comprende una forma cristalina de la sal de acetato de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)- 1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona, la cual tiene un patron de difraccion en polvo de rayos-X con cuando menos uno, dos o tres picos que tiene valores de angulo de refraccion 2 theta (0) seleccionados a partir de 8.8, 11.5, 16.4, 17.6, 18.2, 19.6, 20.1, 20.8, y 21.1°, cuando se miden utilizando radiacion de CuKa, mas particularmente en donde estos valores son mas o menos 0.2° 20.

En una realizacion, la invencion se refiere a una composicion farmaceutica en una forma de dosificacion oral solida, la cual comprende una forma cristalina de la sal de acetato de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il- amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona, la cual tiene un patron de difraccion en polvo de rayos-X con un valor de pico en un angulo de refraccion 20 de 8.8°, cuando se mide utilizando radiacion de CuKa, mas particularmente en donde este valor es mas o menos 0.2° 20.

En una realizacion, la invencion se refiere a una composicion farmaceutica en una forma de dosificacion oral solida, la cual comprende una forma cristalina de la sal de acetato de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il- amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona, la cual tiene un patron de difraccion en polvo de rayos-X con un valor de pico en un angulo de refraccion 20 de 16.4°, cuando se mide utilizando radiacion de CuKa, mas particularmente en donde este valor es mas o menos 0.2° 20.

En una realizacion, la invencion se refiere a una composicion farmaceutica en una forma de dosificacion oral solida, la cual comprende una forma cristalina de la sal de acetato de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il- amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona, la cual tiene un patron de difraccion en polvo de rayos-X con un valor de pico en un angulo de refraccion 20 de 20.8°, cuando se mide utilizando radiacion de CuKa, mas particularmente en donde este valor es mas o menos 0.2° 20.

En una realizacion, la invencion se refiere a una composicion farmaceutica en una forma de dosificacion oral solida, la cual comprende una forma cristalina de la sal de acetato de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il- amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona, la cual tiene un patron de difraccion en polvo de rayos-X sustancialmente igual al patron de difraccion en polvo de rayos-X mostrado en la Figura 5 cuando se mide utilizando radiacion de CuKa. Para los detalles vease el Ejemplo 4.

El termino “sustancialmente igual” con referencia a las posiciones de picos de la difraccion de rayos-X, significa que se toman en cuenta la posicion tlpica del pico y la variabilidad de la intensidad. Por ejemplo, una persona experta en la materia apreciara que las posiciones de picos (20) mostraran alguna variabilidad inter-aparatos, tlpicamente de tanto como 0.2°. Ademas, una persona experta en la materia apreciara que las intensidades relativas de los picos mostraran una variabilidad inter-aparatos, as! como una variabilidad debida al grado de cristalinidad, a la orientacion preferida, a la superficie de muestra preparada, y a otros factores conocidos por los expertos en este campo, y deberan tomarse solamente como medidas cualitativas.

Un experto ordinario en este campo tambien apreciara que se puede obtener un patron de difraccion de rayos-X con un error de medicion que es dependiente de las condiciones de medicion empleadas. En particular, se sabe en general que las intensidades en un patron de difraccion de rayos-X pueden fluctuar dependiendo de las condiciones de medicion empleadas. Se debe entender ademas que las intensidades relativas tambien pueden variar dependiendo de las condiciones experimentales y, de conformidad con lo anterior, no se debe tomar en cuenta el orden exacto de la intensidad. Adicionalmente, un error de medicion del angulo de difraccion para un patron de difraccion de rayos-X convencional es tlpicamente de aproximadamente el 5 % o menos, y ese grado del error de medicion se debe tomar en cuenta como perteneciente a los angulos de difraccion anteriormente mencionados. En consecuencia, se debe entender que las formas de cristal de la sal de acetato de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2- metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona no estan limitadas a la forma de cristal que proporcione un patron de difraccion de rayos-X completamente identico al patron de difraccion de rayos-X ilustrado en la Figura 5 adjunta que se da a conocer en la presente. Cualesquiera formas de cristal que proporcionen patrones de difraccion de rayos-X sustancialmente identicos a aquellos que se dan a conocer en la Figura 5 adjunta, caen dentro del alcance de la presente invencion. La capacidad para aseverar las identidades sustanciales de patrones de difraccion de rayos-X esta dentro del alcance de un experto ordinario en este campo.

Como se utiliza en la presente, el termino "un excipiente farmaceuticamente aceptable" se refiere a un ingrediente

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farmaceuticamente aceptable que se utiliza comunmente en la tecnologla farmaceutica para la preparacion de granulados y/o formulaciones de dosificacion orales solidas. Los ejemplos de las categorlas de excipientes incluyen, pero no se limitan a, aglutinantes, desintegrantes, lubricantes, deslizantes, rellenos y diluyentes. Un experto ordinario en la tecnica puede seleccionar uno o mas de los excipientes mencionados anteriormente con respecto a las propiedades particulares deseadas del granulado y/o forma de dosificacion oral solida mediante experimentation de rutina y sin ninguna dificultad. La cantidad de cada excipiente utilizado puede variar dentro de los rangos convencionales en la tecnica. Las siguientes referencias, que son incorporadas a la presente como referencia, describen las tecnicas y los excipientes usados para formular las formas de dosificacion orales. Vease el “Handbook of Pharmaceutical Excipients”, cuarta edition, Rowe y colaboradores, Editores, American Pharmaceuticals Association (2003); y “Remington: The Science and Practice of Pharmacy”, 20a edicion, Gennaro, Editor, Lippincott Williams & Wilkins (2000).

Los excipientes tlpicos incluyen antioxidantes. Los antioxidantes pueden ser usados para proteger a los ingredientes de la composition de los agentes oxidantes que se incluyen dentro de, o entran en contacto con, la composition. Los ejemplos de los antioxidantes incluyen antioxidantes solubles en agua, tales como acido ascorbico, sulfito de sodio, metabisulfito, miosulfito de sodio, formaldehldo sodico, sulfoxilato, acido isoascorbico, clorhidrato de cistelna, 1,4-diazobiciclo-(2,2,2)-octano, y mezclas de los mismos. Los ejemplos de los antioxidantes solubles en aceite incluyen palmitato de ascorbilo, hidroxi-anisol butilado, hidroxi-tolueno butilado, propil-galato de potasio, octil-galato, dodecil-galato, fenil-a-naftil-amina, y tocoferoles tales como a-tocoferol.

Los ejemplos de los aglutinantes farmaceuticamente aceptable incluyen, pero no se limitan a, almidones; celulosas, y derivados de los mismos; copollmero de 1 -vinil-2-pirrolidona y acetato de vinilo; sacarosa; dextrosa; jarabe de malz; polisacaridos; y gelatina. Los ejemplos de las celulosas y los derivados de las mismas incluyen, por ejemplo, celulosa microcristalina, por ejemplo, AVICEL PH de FMC (Filadelfia, PA), hidroxi-propil-celulosa, hidroxi-etil-celulosa e hidroxi-propil-metil-celulosa, mEtHOCEL de Dow Chemical Corp. (Midland, MI); HP-Celulosa 100 (Klucel LF). El copollmero de 1 -vinil-2-pirrolidona y acetato de vinilo se puede adquirir como Kollidon VA64 en BASF.

En la presente invention, el aglutinante puede estar presente en una cantidad de aproximadamente el 1 % a aproximadamente el 20 % en peso de la composicion.

Los aglutinantes preferidos para la composicion farmaceutica de la invencion incluyen HP-Celulosa 100 (Klucel LF), y copollmero de 1 -vinil-2-pirrolidona y acetato de vinilo.

Se pueden utilizar agentes reguladores del pH para mantener un pH establecido de la composicion. Los ejemplos de los agentes reguladores del pH incluyen citrato de sodio, acetato de calcio, metafosfato de potasio, fosfato de potasio monobasico, y acido tartarico.

Los agentes de volumen son ingredientes que pueden proporcionar volumen a una composicion farmaceutica. Los ejemplos de los agentes de volumen incluyen, sin limitation, PEGs, manitol, trehalosa, lactosa, sacarosa, polivinil- pirrolidona, sacarosa, glicina, ciclodextrinas, dextrano, y derivados y mezclas de los mismos.

Los tensoactivos son agentes utilizados para estabilizar las composiciones de multiples fases, por ejemplo, utilizados como agentes humectantes, agentes antiespumantes, emulsionantes, agentes dispersantes, y penetrantes. Los tensoactivos tambien se pueden utilizar opcionalmente en la composicion farmaceutica de la invencion. Los tensoactivos incluyen, pero no se limitan a, acido graso y sulfonatos de alquilo; cloruro de benzetonio, por ejemplo, HYAMINE 1622 de Lonza, Inc. (Fairlawn, NJ); esteres de acidos grasos de sorbitan de polioxietileno, por ejemplo, la Serie TWEEN de Uniqema (Wilmington, DE); y tensoactivos naturales, tales como acido taurocolico sodico, 1- palmitoil-2-Sn-glicero-3-fosfocolina, lecitina, y otros fosfollpidos. Estos tensoactivos, por ejemplo, minimizan la aglomeracion de las partlculas liofilizadas durante la reconstitution del producto. Los tensoactivos, si estan presentes, se utilizan tlpicamente en una cantidad de aproximadamente el 0.01 % a aproximadamente el 5 % en peso/volumen.

Un co-tensoactivo es un agente de actividad superficial que actua en adicion al tensoactivo mediante la reduction adicional de la energla interfacial, pero que no puede formar aglomerados micelares por si mismo. Los co- tensoactivos, por ejemplo, pueden ser hidrofilos o lipofilos. Los ejemplos de un co-tensoactivo incluyen, pero no se limitan a, alcohol cetllico y alcohol estearllico.

Los ejemplos de los desintegrantes farmaceuticamente aceptables incluyen, pero no se limitan a, almidones, por ejemplo, (almidon de carboxi-metilo de sodio); arcillas; celulosas, por ejemplo, hidroxi-propil-celulosa de baja sustitucion; alginatos; gomas; pollmeros reticulados, por ejemplo, polivinil-pirrolidona reticulada o crospovidona, por ejemplo, POLIPLASDONE XL de International Specialty Products (Wayne, NJ); carboxi-metil-celulosa de sodio reticulada o croscarmelosa de sodio, por ejemplo, AC-DI-SOL de FMC; y carboxi-metil-celulosa de calcio reticulada; polisacaridos de soya; y goma guar. En la presente invencion, el desintegrante puede estar presente en una cantidad de aproximadamente el 1 % a aproximadamente el 20 % en peso de la composicion.

Los desintegrantes preferidos para la composicion farmaceutica de la invencion incluyen almidon de carboxi-metilo de sodio, hidroxi-propil-celulosa de baja sustitucion, carboxi-metil-celulosa de sodio reticulada, o croscarmelosa de sodio (por ejemplo, AC-DI-SOL).

Los ejemplos de los rellenos farmaceuticamente aceptables y diluyentes farmaceuticamente aceptables incluyen, 5 pero no se limitan a, azucar de confiterla, azucar comprimible, dextratos, dextrina, dextrosa, lactosa, manitol, celulosa microcristalina, celulosa en polvo, sorbitol, sacarosa y talco. En la presente invencion, el relleno y/o diluyente puede estar presente en una cantidad de aproximadamente el 15 % a aproximadamente el 90 % en peso de la composicion.

Los rellenos y/o diluyentes preferidos para la composicion farmaceutica de la invencion incluyen celulosa 10 microcristalina (por ejemplo, Avicel PH101), lactosa secada por aspersion, CA-HYD-Fosfato (por ejemplo, Emcompress), manitol DC (por ejemplo, Compressol), almidon pregelatinizado (por ejemplo, STA-RX 1500).

Los ejemplos de los lubricantes farmaceuticamente aceptables y deslizantes farmaceuticamente aceptables incluyen, pero no se limitan a, sllice coloidal, trisilicato de magnesio, almidones, talco, fosfato de calcio tribasico, estearato de magnesio, estearato de aluminio, estearato de calcio, carbonato de magnesio, oxido de magnesio, 15 polietilenglicol, celulosa en polvo, y celulosa microcristalina. Tlpicamente, un lubricante puede estar presente en una cantidad de aproximadamente el 0.1 % a aproximadamente el 5 % en peso de la composicion; mientras que, el deslizante, por ejemplo, puede estar presente en una cantidad de aproximadamente el 0.1 % a aproximadamente el 10 % en peso. En la presente invencion, el lubricante esta de preferencia presente en la composicion en una cantidad del 0.1 al 1 % (peso/peso). En la presente invencion, el deslizante esta de preferencia presente en la 20 composicion en una cantidad del 0.1 al 1 % (peso/peso).

Los deslizantes preferidos de la composicion farmaceutica de la invencion incluyen Aerosil 200 y talco.

Los lubricantes preferidos de la composicion farmaceutica de la invencion incluyen estearato de magnesio.

La invencion proporciona ademas composiciones farmaceuticas que pueden comprender uno o mas agentes que reduzcan la velocidad a la cual se descompondra el compuesto de la presente invencion como un ingrediente activo. 25 Estos agentes, los cuales son referidos en la presente como "estabilizantes", incluyen, pero no se limitan a, antioxidantes, tales como acido ascorbico, reguladores del pH, o reguladores de sales, etc.

Tambien se pueden utilizar conservadores para proteger a la composicion de la degradacion y/o contamination microbiana. Los ejemplos de los conservadores incluyen aceite de liquipar, fenoxi-etanol, metil-parabeno, propil- parabeno, butil-parabeno, isopropil-parabeno, isobutil-parabeno, diazolidinil-urea, imidazolidinil-urea, diazolinidil- 30 urea, cloruro de benzalconio, cloruro de bencetonio, fenol, y mezclas de los mismos (por ejemplo, aceite de liquipar).

En una realization, la invencion se refiere a una composicion farmaceutica en una forma de dosificacion oral solida, la cual comprende:

del 0.01 al 10 % (peso/peso) de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi- benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona;

35 del 15 al 90 % (peso/peso) de cuando menos un agente de relleno; del 1 al 20 % (peso/peso) de un desintegrante; del 0.1 al 1 % (peso/peso) de un deslizante; y del 0.1 al 1 % (peso/peso) de un lubricante.

En dicha realizacion, la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol- 40 2(3H)-ona se proporciona en su forma de sal de acetato.

En una realizacion, la invencion se refiere a una composicion farmaceutica adecuada para su administration oral, la cual comprende:

del 0.01 al 10 % (peso/peso) de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi- benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona;

45 del 15 al 90 % (peso/peso) de cuando menos un agente de relleno;

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del 1 al 20 % (peso/peso) de un aglutinante; del 1 al 20 % (peso/peso) de un desintegrante; del 0.1 al 1 % (peso/peso) de un deslizante; y del 0.1 al 1 % (peso/peso) de un lubricante.

En esta realizacion, la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol- 2(3H)-ona se proporciona en su forma de sal de acetato.

Como se utiliza en la presente, el termino "una cantidad terapeuticamente efectiva" del compuesto de la presente invention se refiere a una cantidad del compuesto de la presente invention que provocara la respuesta biologica o medica de un sujeto, por ejemplo, la reduction o inhibition de la actividad de una enzima o de una protelna, o que mitigara los slntomas, aliviara las condiciones, hara mas lento o retardara el progreso de la enfermedad, o prevendra una enfermedad, etc. En una realizacion no limitante, el termino “una cantidad terapeuticamente efectiva” se refiere a la cantidad del compuesto de la presente invencion que, cuando se administra a un sujeto, es efectiva para: (1) aliviar, inhibir, prevenir y/o mitigar cuando menos parcialmente una condition, o un trastorno, o una enfermedad asociada con la actividad del adreno-receptor beta-2; o (2) aumentar o promover la actividad de adreno-receptor beta-2.

En otra realizacion no limitante, el termino “una cantidad terapeuticamente efectiva” se refiere a la cantidad del compuesto de la presente invencion que, cuando se administra a una celula, o a un tejido, o a un material biologico no celular, o a un medio, es efectiva para aumentar o promover cuando menos parcialmente la actividad de adrenoreceptor beta-2. El significado del termino “una cantidad terapeuticamente efectiva”, como se ilustra en la realizacion anterior para el adreno-receptor beta-2, tambien se aplica mediante el mismo significado a cualesquiera otras protelnas/peptidos/enzimas relevantes, tales como mimeticos de IGF-1 o bloqueadores de ActRIIB/miostatina, y similares.

Como se utiliza en la presente, el termino “sujeto” se refiere a un animal. Tlpicamente, el animal es un mamlfero. Un sujeto tambien se refiere, por ejemplo, a primates (por ejemplo, a seres humanos, masculinos o femeninos), reses, ovejas, cabras, caballos, perros, gatos, conejos, ratas, ratones, peces, aves y similares. En ciertas realizaciones, el sujeto es un primate. En todavla otras realizaciones, el sujeto es un ser humano.

Como se utiliza en la presente, el termino "inhibir", "inhibicion" o “inhibiendo”, se refiere a la reduccion o supresion de una condicion, slntoma, o trastorno o enfermedad dados, o a una disminucion significativa en la actividad de la llnea base de una actividad o proceso biologico.

Como se utiliza en la presente, el termino "tratar", "tratando" o "tratamiento" de cualquier enfermedad o trastorno, se refiere, en una realizacion, a disminuir la enfermedad o el trastorno (es decir, hacer mas lento o detener o reducir el desarrollo de la enfermedad o cuando menos uno de los slntomas cllnicos de la misma). En otra realizacion, "tratar", "tratando" o "tratamiento" se refiere a aliviar o mitigar cuando menos un parametro flsico, incluyendo aquellos que puedan no ser discernibles por el paciente. En todavla otra realizacion, "tratar", "tratando" o "tratamiento" se refiere a modular la enfermedad o el trastorno, ya sea flsicamente (por ejemplo, la estabilizacion de un slntoma discernible), fisiologicamente (por ejemplo, la estabilizacion de un parametro flsico), o ambos. En todavla otra realizacion, "tratar", "tratando" o "tratamiento" se refiere a prevenir o demorar el establecimiento o desarrollo o progreso de la enfermedad o del trastorno.

Como se utiliza en la presente, un sujeto tiene "necesidad de" tratamiento si este sujeto se beneficiarla biologicamente, medicamente, o en su calidad de vida, a partir de dicho tratamiento.

Como se utilizan en la presente, los terminos "un,” "uno,” "el” y terminos similares utilizados en el contexto de la presente invencion (en especial en el contexto de las reivindicaciones) se deben interpretar para cubrir tanto el singular como el plural, a menos que se indique de otra manera en la presente o que sea claramente contradicho por el contexto.

Todos los metodos descritos en la presente se pueden llevar a cabo en cualquier orden adecuado, a menos que sea indicado de otra manera en la presente, o que sea claramente contradicho de otra manera por el contexto. El uso de cualquiera y todos los ejemplos, o de lenguaje ejemplar (por ejemplo, “tal como”) proporcionado en la presente, pretende meramente ilustrar mejor la invencion, y no presenta una limitation sobre el alcance de la invencion reivindicada de otra manera.

La (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona se puede

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preparar de acuerdo con el esquema proporcionado a continuacion.

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Los pasos del proceso se describen con mas detalles a continuacion.

Paso 1: Un compuesto de la formula (Via), en donde Hal representa halogeno y Ra es un grupo protector, se hace 5 reaccionar con un compuesto de la formula RbOH en donde Rb es un grupo protector, en la presencia de una base adecuada, por ejemplo, trietil-amina, para dar un compuesto de la formula (Va), en donde Hal representa halogeno y Ra y Rb son grupos protectores.

Paso 2: Un compuesto de la formula (Va) se hace reaccionar con una base fuerte adecuada, por ejemplo, terbutil- litio, en un solvente adecuado, por ejemplo, tetrahidrofurano (THF), en la presencia de un agente de carbonilacion 10 adecuado, por ejemplo, una amida adecuada, para dar un compuesto de la formula (IVa), en donde Ra y Rb son grupos protectores, y Rc es hidrogeno o cualquier fraccion derivada a partir del agente de carbonilacion.

Paso 3: Un compuesto de la formula (IVa) se funcionaliza opcionalmente antes de la conversion estereoselectiva para dar un compuesto de la formula (Ilia), en donde Ra y Rb son grupos protectores, y LG es un grupo saliente.

Paso 4: Un compuesto de la formula (Ilia), se trata con una base adecuada, por ejemplo, bicarbonato de sodio, para 15 dar un compuesto de la formula (IIa), en donde Ra y Rb son grupos protectores.

Paso 5: Un compuesto de la formula (IIa) o (IIIa) se hace reaccionar con la 2-(4-butoxi-fenil)-1, 1 -dimetil-etil-amina en un solvente adecuado, por ejemplo, tolueno, opcionalmente en la presencia de una base adecuada, por ejemplo,

carbonato de potasio, seguido por la desproteccion en la presencia de un acido adecuado, por ejemplo, acido clorhldrico, para dar un compuesto de la formula (I).

Las reacciones se pueden efectuar de acuerdo con los metodos convencionales, por ejemplo, como se describe en los Ejemplos. El procesamiento de las mezclas de reaccion y la purificacion de los compuestos que se pueden 5 obtener de esta manera se pueden llevar a cabo de acuerdo con los procedimientos conocidos. Las sales de adicion de acido se pueden producir a partir de las bases libres de una manera conocida, y viceversa. En particular, la sal de acetato de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona se puede preparar como se describe en los Ejemplos 3 y 3a.

La (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona tambien 10 se puede preparar mediante procesos convencionales adicionales, por ejemplo, como se describe en los Ejemplos.

Los materiales de partida utilizados son conocidos o se pueden preparar de acuerdo con los procedimientos convencionales, empezando a partir de los compuestos conocidos, por ejemplo, como se describe en los Ejemplos.

Los presentes procesos se pueden modificar, en donde se utilice un producto intermediario que se pueda obtener en cualquier etapa del mismo como material de partida, y se llevan a cabo los pasos restantes, o en donde los 15 materiales de partida se formen in situ bajo las condiciones de reaccion, o en donde los componentes de la reaccion se utilicen en la forma de sus sales como el material opticamente puro.

El compuesto de la invencion y los intermediarios tambien se pueden convertir unos en otros de acuerdo con los metodos conocidos generalmente por los expertos en este campo.

Las composiciones farmaceuticas de la presente invencion estan en una en una forma de dosificacion oral solida. 20 Las formas de dosificacion orales solidas incluyen, pero no se limitan a, tabletas, capsulas duras o blandas, caplets, grageas, plldoras, mini-tabletas, aglomerados, perlas, granulos (por ejemplo, empacados en bolsitas), o polvos. Las composiciones farmaceuticas se pueden someter a las operaciones farmaceuticas convencionales, tales como esterilizacion y/o pueden contener diluyentes inertes, agentes lubricantes, o agentes reguladores del pH convencionales, as! como adyuvantes, tales como conservadores, estabilizantes, agentes humectantes, 25 emulsionantes y reguladores, etc.

Las composiciones farmaceuticas de la invencion de preferencia se formulan para su administracion oral.

Las composiciones adecuadas para su administracion oral incluyen una cantidad efectiva de un compuesto de la invencion en una forma de sal de acetato en la forma de tabletas, capsulas duras o blandas, caplets, grageas, plldoras, mini-tabletas, aglomerados, perlas, granulos (por ejemplo, empacados en bolsitas), o polvos. Las 30 composiciones destinadas para su uso oral se preparan de acuerdo con cualquier metodo conocido en la materia para la elaboracion de composiciones farmaceuticas, y estas composiciones pueden contener uno o mas agentes seleccionados a partir del grupo que consiste en agentes edulcorantes, agentes saborizantes, agentes colorantes y agentes conservadores, con el objeto de proporcionar preparaciones farmaceuticamente elegantes y de buen sabor. Las tabletas pueden contener al ingrediente activo en mezcla con excipientes farmaceuticamente aceptables no 35 toxicos que sean adecuados para la elaboracion de tabletas. Estos excipientes son, por ejemplo, diluyentes inertes, tales como carbonato de calcio, carbonato de sodio, lactosa, fosfato de calcio o fosfato de sodio; agentes de granulacion y desintegrantes, por ejemplo, almidon de malz, o acido alglnico; agentes aglutinantes, por ejemplo, almidon, gelatina o acacia; y agentes lubricantes, por ejemplo, estearato de magnesio, acido estearico o talco. Las tabletas quedan sin recubrimiento o se recubren mediante las tecnicas conocidas para retardar la desintegracion y 40 absorcion en el tracto gastrointestinal y proporcionar de esta manera una accion sostenida durante un perlodo mas largo. Por ejemplo, se puede emplear un material de retraso de tiempo, tal como monoestearato de glicerilo o diestearato de glicerilo. Las formulaciones para uso oral se pueden presentar como capsulas de gelatina duras en donde el ingrediente activo se mezcla con un diluyente solido inerte, por ejemplo, carbonato de calcio, fosfato de calcio o caolln, o como capsulas de gelatina blanda en donde el ingrediente activo se mezcla con agua o con un 45 medio oleoso, por ejemplo, aceite de cacahuate, parafina llquida o aceite de oliva.

En una realizacion, la composicion farmaceutica de la invencion esta en la forma de una tableta o capsula.

En una realizacion, las composiciones farmaceuticas son tabletas o capsulas de gelatina que comprenden al ingrediente activo en una forma de sal de acetato junto con:

a) diluyentes, por ejemplo, lactosa, dextrosa, sacarosa, manitol, sorbitol, celulosa y/o glicina;

50 b) lubricantes, por ejemplo, sllice, talco, acido estearico, su sal de magnesio o de calcio y/o polietilenglicol; para tabletas tambien,

c) aglutinantes, por ejemplo, silicato de magnesio y aluminio, pasta de almidon, gelatina, tragacanto, metil-celulosa, copollmeros de 1 -vinil-2-pirrolidona y acetato de vinilo, carboxi-metil-celulosa de sodio y/o polivinil-pirrolidona; si se desea,

d) desintegrantes, por ejemplo, almidones, agar, acido alglnico, o su sal sodica, o mezclas efervescentes; celulosas; 5 pollmeros reticulados; y/o

e) absorbentes, colorantes, saborizantes y edulcorantes.

Las tabletas pueden ser ya sea con recubrimiento de pellcula o bien con recubrimiento enterico de acuerdo con los metodos conocidos en la tecnica.

Las tabletas pueden estar opcionalmente recubiertas con un recubrimiento funcional o no funcional como se conoce 10 en la materia. Los ejemplos de las tecnicas de recubrimiento incluyen, pero no se limitan a, recubrimiento de azucar, recubrimiento de pellcula, microencapsulacion y recubrimiento por compresion. Los tipos de recubrimientos incluyen, pero no se limitan a, recubrimientos entericos, recubrimientos de liberacion sostenida, recubrimientos de liberacion controlada.

Tambien se pueden preparar composiciones farmaceuticas y formas de dosificacion anhidras utilizando ingredientes 15 anhidros o con un bajo contenido de humedad y condiciones de baja humedad. Una composition farmaceutica anhidra se puede preparar y almacenar de tal manera que se mantenga su naturaleza anhidra. De conformidad con lo anterior, las composiciones anhidras se empacan utilizando materiales conocidos para prevenir su exposition al agua, de tal manera que se puedan incluir en kits de formulation adecuados. Los ejemplos de los empaques adecuados incluyen, pero no se limitan a, laminas hermeticamente selladas, plasticos, recipientes de dosis unitarias 20 (por ejemplo, frascos), paquetes de burbujas, y paquetes de tiras.

Como se utiliza en la presente, una forma de dosificacion unitaria es una sola forma de dosificacion que tiene la capacidad para administrarse a un sujeto y ser efectiva, y la cual se puede manejar y empacar facilmente, quedando como una dosis unitaria flsicamente y qulmicamente estable que comprende al ingrediente activo.

Las tabletas se pueden elaborar mediante compresion directa o granulation.

25 En el proceso de compresion directa, los materiales en polvo incluidos en la forma de dosificacion solida tlpicamente se comprimen directamente sin modificar su naturaleza flsica. Usualmente, el ingrediente activo, los excipientes tales como un deslizante para mejorar la velocidad de flujo de la granulacion de la tableta, y un lubricante para prevenir la adhesion del material de la tableta hacia la superficie de los dados y perforadoras de la prensa de tabletas, se mezclan en una mezcladora de ejes gemelos o aparato de bajo esfuerzo cortante similar antes de ser comprimidos 30 en tabletas.

La granulacion es un proceso en donde se forman granulados. Estos granulados se someten entonces a compresion directa para formar una tableta, o a encapsulation para formar una capsula. Los granulados se pueden formar mediante granulacion en humedo que incluye:

a) formar una mezcla de polvo del ingrediente activo y cuando menos un excipiente farmaceuticamente

35 aceptable;

b) agregar un llquido de granulacion a la mezcla de polvo con agitation para formar una masa humeda;

c) granular la masa humeda para formar granulados humedos;

d) secar los granulados humedos para formar granulados;

e) tamizar los granulados.

40 De una manera alternativa, los granulados se pueden formar mediante granulacion en lecho fluido que incluye:

a) suspender partlculas de un material (por ejemplo, un material inerte o el ingrediente activo) con, por ejemplo, una corriente de aire ascendente en una columna vertical;

b) atomizar un material granular en la columna;

c) permitir que las partlculas sean recubiertas con el material granular, dando como resultado granulados.

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Otra alternativa para la produccion de granulados incluye la granulacion por fusion. Este proceso incluye:

a) formar una mezcla de un ingrediente activo con cuando menos un retardante de liberacion, por ejemplo, un pollmero de retardante de liberacion, y opcionalmente, un plastificante;

b) granular la mezcla utilizando una extrusora u otro equipo adecuado, por ejemplo un mezclador con camisa de alto esfuerzo cortante, mientras se calienta la mezcla hasta una temperatura por encima de la temperatura de reblandecimiento del retardante de liberacion; como se utiliza en la presente, la "temperatura de reblandecimiento" se refiere a la temperatura a la que el retardante de liberacion experimenta un cambio en la velocidad de disminucion de la viscosidad en funcion de la temperatura; y

c) enfriar los granulos a temperatura ambiente, por ejemplo, a una velocidad controlada.

Otra alternativa para la produccion de granulados incluye la granulacion en seco que puede incluir la compactacion con rodillos o doble compresion. La compactacion con rodillos es un proceso en el que los polvos uniformemente mezclados se comprimen entre dos pares de rodillos contrarrotativos para formar una lamina o liston comprimido que se muele (granula) a continuacion. La doble compresion es un proceso en el que los polvos uniformemente mezclados se comprimen en tabletas grandes que posteriormente son trituradas al tamano deseado.

En una realization preferida del proceso de la invention, los granulados son producidos mediante compactacion con rodillo.

"Capsulas", como se utiliza en la presente, se refiere a una formulation en donde el ingrediente activo en una forma de sal de acetato puede estar encerrado en un contenedor o cubierta soluble dura o blanda, a menudo formada de gelatina.

Una capsula de gelatina dura, tambien conocida como una capsula llenada en seco, esta compuesta de dos secciones, una deslizandose sobre la otra y, por consiguiente, rodeando completamente (encapsulando) la formulacion del farmaco.

Una capsula elastica blanda tiene una cubierta blanda globular, por ejemplo, de gelatina.

En una realizacion, la invencion se refiere a un proceso para la elaboration de una composition farmaceutica adecuada para su administration oral, el cual comprende los pasos de:

a) mezclar la sal de acetato de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo- [d]-tiazol-2(3H)-ona con un agente de relleno y un deslizante para formar una premezcla;

b) mezclar la premezcla obtenida en el paso a) con un agente de relleno adicional y un desintegrante para obtener un polvo;

c) agregar un lubricante al polvo obtenido en el paso b), para obtener una mezcla final; y

d) procesar la mezcla final obtenida en el paso c), en una composicion farmaceutica adecuada para su administracion oral.

En una realizacion, la invencion proporciona un proceso para la elaboracion de una composicion farmaceutica adecuada para su administracion oral en la forma de una capsula, el cual comprende los pasos de:

a) mezclar la sal de acetato de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo- [d]-tiazol-2(3H)-ona con un agente de relleno y un deslizante para formar una premezcla;

b) mezclar la premezcla obtenida en el paso a) con un agente de relleno adicional y un desintegrante para obtener un polvo;

c) agregar un lubricante al polvo obtenido en el paso b), para obtener una mezcla final; y

d) encapsular la mezcla final en una capsula para proporcionar la composicion farmaceutica.

En una realizacion, la invencion proporciona un proceso para la elaboracion de una composicion farmaceutica adecuada para su administracion oral en la forma de una tableta, el cual comprende los pasos de:

a) mezclar la sal de acetato de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo- [d]-tiazol-2(3H)-ona con un agente de relleno y un deslizante para formar una premezcla;

b) mezclar la premezcla obtenida en el paso a) con un agente de relleno adicional y un desintegrante para obtener un polvo;

5 c) agregar un lubricante al polvo obtenido en el paso b), para obtener una mezcla final; y

d) comprimir la mezcla final obtenida en el paso c) para obtener una tableta.

En una realizacion, la invencion proporciona un proceso para la elaboracion de una composition farmaceutica adecuada para su administration oral en la forma de una tableta, el cual comprende los pasos de:

a) mezclar la sal de acetato de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo- 10 [d]-tiazol-2(3H)-ona con un agente de relleno y un deslizante para formar una premezcla;

b) mezclar la premezcla obtenida en el paso a) con un agente de relleno adicional, un aglutinante y un desintegrante para obtener un polvo;

c) agregar un lubricante al polvo obtenido en el paso b), para obtener una mezcla intermedia;

d) compactar la mezcla intermedia y moler el material compactado;

15 e) mezclar el material molido obtenido en el paso d) con una allcuota adicional de deslizante y desintegrante, y agregar una allcuota adicional de lubricante para obtener una mezcla final; y

f) comprimir la mezcla final obtenida en el paso e) para obtener una tableta.

En una realizacion preferida de dicho proceso, la compactacion se lleva a cabo mediante compactacion.

En los procesos de la invencion, todos los pasos de mezcla pueden ser precedidos por un paso de tamizacion.

20 En los procesos de la invencion, la cantidad de sal de acetato de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il- amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona es de preferencia de tal manera que este presente del 0.01 al 15 % (peso/peso), mas preferiblemente del 0.01 al 10 % (peso/peso), todavla mas preferiblemente del 0.01 al 5 % (peso/peso), todavla mas preferiblemente del 0.01 al 2 % (peso/peso), mas preferiblemente del 0.1 al 1 % (peso/peso) de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)- 25 ona en la composicion farmaceutica.

El ingrediente activo en la presente composicion farmaceutica se puede liberar una vez que se administre a un sujeto en formas diferentes.

Los retardantes de liberation son materiales que retardan la liberation de un ingrediente activo a partir de una composicion farmaceutica cuando esta se ingiere por via oral. Se pueden llevar a cabo diferentes sistemas de 30 liberacion sostenida, como es conocido en la tecnica, mediante el uso de un componente de liberacion retardada, por ejemplo, un sistema de difusion, un sistema de disolucion y/o un sistema osmotico.

Por ejemplo, la composicion farmaceutica se puede disenar para su liberacion inmediata, lo cual se refiere a la liberacion rapida de la mayor parte del ingrediente activo, por ejemplo, mayor de aproximadamente el 50 %, de aproximadamente el 60 %, de aproximadamente el 70 %, de aproximadamente el 80 %, o de aproximadamente el 35 90 %, dentro de un tiempo relativamente corto, por ejemplo, dentro de 1 hora, 40 minutos, 30 minutos o 20 minutos

despues de su ingestion oral. Las condiciones particularmente utiles para la liberacion inmediata son la liberacion de por lo menos o igual a aproximadamente el 80 %, por ejemplo, hasta el 99 %, del ingrediente activo, dentro de treinta minutos despues de su ingestion oral. Las condiciones de liberacion inmediata particulares para un ingrediente activo especlfico seran reconocidas o conocidas por un experto ordinario en la materia.

40 De una manera alternativa, una liberacion modificada, tal como la liberacion controlada o retardada del ingrediente activo puede ser deseable. La liberacion controlada se refiere a la liberacion gradual pero sostenida durante un perlodo relativamente prolongado del contenido de ingrediente activo despues de la ingestion oral. La liberacion continuara durante un perlodo de tiempo y puede continuar hasta y despues de que la composicion farmaceutica alcance el intestino.

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Una liberation retardada puede referirse a la liberation del principio activo que no se inicia inmediatamente cuando la composition farmaceutica llega al estomago, pero se retrasa por un perlodo de tiempo, por ejemplo, hasta cuando la composition farmaceutica alcanza el intestino cuando se utiliza el pH creciente para desencadenar la liberation del ingrediente activo de la composition farmaceutica.

Otra alternativa incluye la liberation cronofarmaceutica que se refiere a la liberation de un ingrediente activo a un ritmo o punto de tiempo que coincide con el requerimiento biologico de una terapia de la enfermedad dada.

La (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona en forma libre o en una forma de sal farmaceuticamente aceptable, exhibe valiosas propiedades farmacologicas, por ejemplo, propiedades moduladoras del adreno-receptor beta-2, por ejemplo, como se indica en las pruebas in vitro e in vivo proporcionadas en las siguientes secciones y, por consiguiente, se indica para la terapia o para utilizarse como productos qulmicos de investigation, por ejemplo, como un compuesto de herramienta.

La (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona puede ser util en el tratamiento de una indication seleccionada a partir de: distrofia muscular, atrofia relacionada con desuso, caquexia o sarcopenia.

Por consiguiente, como una realization adicional, la presente invention proporciona la composition farmaceutica como se define en la presente, como un medicamento. En una realization, la presente invention se refiere a la composition farmaceutica como se define en la presente, para utilizarse como un medicamento. En una realization adicional, la presente invention se refiere a la composition farmaceutica como se define en la presente, para utilizarse en el tratamiento o en la prevention de distrofia muscular, atrofia relacionada con desuso, caquexia o sarcopenia.

Por consiguiente, como una realization adicional, la presente invention proporciona el uso de la composition farmaceutica como se define en la presente, en terapia. En una realization adicional, la terapia se selecciona a partir de una enfermedad que se pueda tratar mediante la activation de adreno-receptor beta-2. En otra realization, la enfermedad se selecciona a partir de distrofia muscular, atrofia relacionada con desuso, caquexia o sarcopenia.

En otra realization, la invention proporciona un metodo para el tratamiento de una enfermedad que se trate mediante la activation de adreno-receptor beta-2, el cual comprende la administration de la composition farmaceutica como se define en la presente. En una realization adicional, la enfermedad se selecciona a partir de distrofia muscular, atrofia relacionada con desuso, caquexia o sarcopenia.

Un aspecto adicional de la invention, por consiguiente, se refiere a un metodo para el tratamiento o la prevention de distrofia muscular, atrofia relacionada con desuso, caquexia o sarcopenia, el cual comprende administrar la composition farmaceutica como se define en la presente, a un sujeto que lo necesite.

La utilidad de la composition farmaceutica de la presente invention se puede observar en los estudios cllnicos convencionales, incluyendo las pruebas de biodisponibilidad, por ejemplo, en las indicaciones conocidas de dosis de farmacos que dan niveles en sangre terapeuticamente efectivos del ingrediente activo; por ejemplo, utilizando las dosificaciones en el intervalo de 0.01 a 15 miligramos de ingrediente activo al dla para un mamlfero de 75 kilogramos, por ejemplo, un ser humano adulto, y en los modelos animales estandares.

La composition farmaceutica, por ejemplo, en la forma de una tableta o capsula o en la forma de un polvo adecuado para una formulation de tableta o capsula, puede contener de una manera adecuada, y apropiadamente contiene cuando menos de 0.01 a 15 miligramos del ingrediente activo, de preferencia de 0.5 a 1.5 miligramos del ingrediente activo. En una realization, la forma de dosificacion oral solida contendra aproximadamente 1 miligramo del compuesto del ingrediente activo. Estas formas de dosificacion unitaria son adecuadas para su administration una a dos veces al dla dependiendo del proposito particular de la terapia, de la fase de la terapia, y similares.

La dosificacion terapeuticamente efectiva de un compuesto o de una composition farmaceutica depende de la especie del sujeto, del peso corporal, la edad y la condition individual, del trastorno o de la enfermedad, o de la gravedad de la misma, que sea tratada. Un medico, cllnico, o veterinario de una experiencia ordinaria puede determinar facilmente la cantidad efectiva de cada uno de los ingredientes activos necesarios para prevenir, tratar o inhibir el progreso del trastorno o de la enfermedad.

Las propiedades de dosificacion anteriormente citadas se pueden demostrar en pruebas in vitro e in vivo utilizando convenientemente mamlferos, por ejemplo, ratones, ratas, perros, monos u organos aislados, tejidos y preparaciones de los mismos. El compuesto de la presente invention se puede aplicar in vitro en la forma de soluciones, por ejemplo, soluciones acuosas, e in vivo ya sea enteralmente, parenteralmente, de una manera conveniente subcutaneamente, por ejemplo, como una suspension o en solution acuosa. La dosificacion in vitro

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puede estar en el intervalo de concentraciones de entre aproximadamente 10-3 molar y 10-9 molar. Una cantidad terapeuticamente efectiva in vivo, dependiendo de la via de administracion, puede estar en el intervalo de entre aproximadamente 0.01 y 500 miligramos/kilogramo, o de entre aproximadamente 0.01 y 100 miligramos/kilogramo, o de entre aproximadamente 0.01 y 1 miligramo/kilogramo, o de entre aproximadamente 0.01 y 0.1 miligramo/kilogramo.

La actividad del compuesto de la presente invencion se puede evaluar mediante el siguiente metodo in vitro. Se describen metodos in vivo adicionales en los Ejemplos.

Prueba 1: Ensayo funcional celular in vitro utilizando celulas CHO y celulas de musculo esqueletico

cAMP: Las celulas de musculo esqueletico humanas (skMC) se obtuvieron en Cambrex (catalogo numero CC-2561), y se cultivaron en un Medio Basal Esqueletico (SKBM) obtenido en Cambrex (catalogo numero #CC-3161). Las respuestas de cAMP se midieron utilizando el kit de Ensayo-HTRF a granel dinamico 2 de cAMP obtenido en Cisbio o Cis Competitive Intelligence (catalogo numero 62AM4PEC). Las celulas skMC se cultivaron durante 1 dla en un medio de cultivo celular SKBM complementado con suero fetal de ternera (FCS) al 20 % en placas de 384 pozos a 37°C, con CO2 al 5 %. Al dla siguiente, las celulas se lavaron dos veces con 50 microlitros de suero regulado con fosfato (PBS), y se diferenciaron durante 3 dlas en SKBM sin suero en la presencia de SB431542 1 pM, un Inhibidor de ALK 4/5 obtenido en Sigma (catalogo numero S4317) a 37°C, con CO2 al 7.5 %. En el dla 4, se removio el SKBM sin suero complementado con SB431542 1 pM, las celulas se lavaron dos veces con 50 microlitros de suero regulado con fosfato (PBS), y se diferenciaron adicionalmente durante 1 dla en SKBM sin suero y sin SB431542 (50 microlitros por pozo) a 37°C, con CO2 al 7.5 %. se aislaron celulas skMC y cardiomiocitos de rata a partir de ratas neonatales de una forma convencional, y se trataron como se describe anteriormente. Las celulas de ovario de hamster chino (CHO) establemente transfectadas con adreno-receptores-13 humanos (131 o 132) se produjeron en Novartis Institutes for BioMedical Research, y se cultivaron como se describe anteriormente (J Pharmacol Exp Ther. mayo de 2006; 317(2): 762-70).

Los compuestos se hicieron en regulador de estimulacion a 2 x la concentracion requerida, y se prepararon diluciones en serie 1:10 en regulador de estimulacion, en una placa de 96 pozos (forma en U). El control de sulfoxido de dimetilo (DMSO) se normalizo al contenido de sulfoxido de dimetilo (DMSO) de la dilucion mas alta, por ejemplo, sulfoxido de dimetilo (DMSO) al 0.1 % (2 veces) para una concentracion de 10"5 M (2 veces) de la dilucion del primer compuesto. El ensayo se llevo a cabo en placas de 384 pozos, en un volumen de estimulacion de 20 microlitros, y un volumen final del ensayo de 40 microlitros por pozo. En el dla del experimento, se removio el medio de cultivo a partir de las placas de cultivo celular de 384 pozos invirtiendo y sacudiendo la placa sobre una pila de papel de 2 a 3 veces. Primero se agregaron 10 microlitros del medio de cultivo fresco por pozo a la placa de 384 pozos. Despues de 10 minutos de incubacion a temperatura ambiente, se agregaron 10 microlitros por pozo de las diluciones de los compuestos de procesamiento a las celulas, y se incubaron durante 30 minutos a temperatura ambiente en la oscuridad. Durante este tiempo, se prepararon las soluciones de procesamiento de los reactivos mediante la dilucion de las soluciones de suministro del criptato anti-cAMP y el cAMP-D2 a 1:20 en regulador de lisis, suministrados con el kit. Despues de 30 minutos de incubacion del compuesto, se agregaron en secuencia 10 microlitros de cAMP-D2 y 10 microlitros de criptato anti-cAMP a las placas de ensayo. Despues de un tiempo de incubacion de 1 hora a temperatura ambiente en la oscuridad, se llevo a cabo la medicion con el PheraStar (Longitud de onda de excitacion: 337 nanometros, Longitudes de onda de emision: 620 y 665 nanometros).

Ca2+: La llnea celular CHO-K1 Alpha1A adrenergica humana se adquirio en Perkin Elmer (llnea celular GPCR recombinante estable, catalogo numero ES-036-C, Lote numero M1W-C1, Boston, Massachusetts, EUA). Un dla antes del experimento, las celulas Alfa1A congeladas (10 millones por mililitro, y por frasco) se descongelaron en un bano de agua a 37°C. La suspension celular se centrifugo durante 5 minutos a 1,000 revoluciones por minuto, y el aglomerado celular se volvio a suspender en el medio de cultivo celular. Las celulas se sembraron en placas negras de 384 pozos con fondo transparente a una densidad de 8,000 celulas por pozo en 50 microlitros del medio de cultivo celular. Las placas se incubaron durante aproximadamente 24 horas a 37°C, con CO2 al 5 %. El dla del experimento, el medio se removio utilizando una lavadora de celulas (TECAN PW3). Despues del lavado final, hablan quedado 10 microlitros en los pozos. Se agregaron 40 microlitros de regulador de carga, y las celulas se cargaron durante 60 minutos a 37°C, con CO2 al 5 %. Las placas se lavaron con TECAN PW3 con los 20 microlitros de regulador de ensayo que quedaron, y se incubaron durante cuando menos 20 minutos a temperatura ambiente antes llevar a cabo el experimento FLIPR. Los compuestos se caracterizaron entonces en el modo de agonista y/o antagonista. Para la validation del ensayo, se utilizo el mismo protocolo con las celulas frescas. En este caso, las celulas se desprendieron a partir de un matraz de 150 cm2 utilizando 3 mililitros de Tripsina-EDTA, se centrifugaron, y se volvieron a suspender en el medio de cultivo celular.

Las celulas se estimularon mediante la adicion de 5 microlitros de los compuestos (5 veces), utilizando la cabeza del FLIPR. Los compuestos que actuan como agonistas inducen un aumento transitorio del calcio intracelular. Esto se registro en el sistema FLIPR. Primero se registro una medicion de la llnea base de la senal cada segundo durante 2 minutos antes de la inyeccion de los compuestos. Las mediciones de calcio se llevaron a cabo mediante la

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excitacion de las celulas con el dispositivo de laser de ion de argon a 488 nanometros a una potencia del dispositivo de laser de 0.6 W y registrando la senal de fluorescencia con una camara CCD (abertura de 0.4 segundos) durante 2 minutos. Los controles bajos se determinaron (celulas no estimuladas) con la adicion de 5 microlitros de regulador de ensayo. Los controles altos se determinaron con la adicion de 5 microlitros de un agonista conocido en una alta concentracion EC100 (A-61603 a 1 pM), y tambien se agrego un compuesto agonista de referencia a cada placa.

El compuesto de la invencion exhibe eficacia en el ensayo de prueba 1 con una EC50 de menos de 10 nM. La actividad especlfica se muestra en el Ejemplo 6.

En los Ejemplos 7 a 11 se describen otras actividades especlficas del compuesto de la invencion.

Los siguientes ejemplos pretenden ilustrar la invencion y no deben interpretarse como limitaciones sobre la misma. Las temperaturas se dan en grados Celsius. Si no se menciona de otra manera, todas las evaporaciones se llevan a cabo bajo presion reducida, tlpicamente entre aproximadamente 15 mmHg y 100 mmHg (= de 20 a 133 mbar). La estructura de los productos finales, de los intermediarios, y de los materiales de partida, se confirma mediante los metodos anallticos convencionales, por ejemplo, microanalisis y caracterlsticas espectroscopicas, por ejemplo, MS, IR, RMN. Las abreviaturas empleadas son aquellas convencionales en la materia.

Todos los materiales de partida, bloques de construction, reactivos, acidos, bases, agentes deshidratantes, solventes, y catalizadores utilizados para sintetizar el compuesto de la presente invencion son cualesquiera de aquellos comercialmente disponibles, o se pueden producir mediante los metodos de slntesis organica conocidos por un experto ordinario en este campo (Houben-Weyl 4a Edition 1952, Methods of Organic Synthesis, Thieme, Volumen 21). Ademas, el compuesto de la presente invencion se puede producir mediante los metodos de slntesis organica conocidos por un experto ordinario en este campo, como se muestra en los siguientes ejemplos.

Ejemplos

Lista de Abreviaturas:

1M

APCI

aq

AR

atm

br

cm

d

dd

ddd

uno molar

ionization qulmica a presion atmosferica acuoso

adreno-receptor

atmosfera

amplio

centlmetros

doblete

doble doblete

doble doble doblete

(DHDQ)2PHAL

DMAC

DMSO

DSC

ee

equiv

1,4-ftalazin-di-il-dieter de hidro-quinidina

dimetil-acetamida

sulfoxido de dimetilo

calorimetrla de exploration diferencial

exceso enantiomerico

equivalentes

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30

ES

aspersion de electrones

g

gramos

h

horas

HPLC

cromatografla de llquidos de alto rendimiento

HRMS

espectroscopla de masas de alta resolucion

m

multiplete

MC

metil-celulosa

mbar

milibar

MeOH

metanol

min

minutos

ml

mililitros

MS

espectroscopla de masas

MTBE

metil-terbutil-eter

nm

nanometros

RMN

resonancia magnetica nuclear

RT r.t. temperatura ambiente

tiempo de retencion

s sat. saturado

singulete

sept

septeto

t

triplete

TFA

acido trifluoro-acetico

pm

micras

w/v

peso/volumen

XRPD

difraccion en polvo de rayos-X

A menos que se indique de otra manera, los espectros de HPLC/MS se registraron en un Agilent Serie 1100 LC / Cuadrupolo Agilent MS 6210. Se utilizo una columna Waters Symmetry C8 (3.5 micras; 2.1 x 50 millmetros) (WAT200624). Se aplico el siguiente metodo de gradiente (% = % por volumen): A = agua + acido trifluoro-acetico (TFA) al 0.1 % / B = acetonitrilo + acido trifluoro-acetico (TfA) al 0.1 %; de 0.0 a 2.0 minutos con 90A:10B - 5A:95B; de 2.0 a 3.0 minutos con 5A:95B; de 3.0 a 3.3 minutos con 5A:95B - 90A:10B; flujo de 1.0 mililitro/minuto; temperatura de la columna de 50°C. Todos los compuestos se ionizaron en el modo APCI.

Los espectros de 1H-RMN se registraron en una maquina Varian Mercury (400 MHz) o Bruker Advance (600 MHz).

La rotacion optica se midio en un Polarlmetro Perkin Elmer 341.

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Condiciones de LCMS para los Ejemplos 2b, 2c, 2d, 2e, 2g:

Estacion de espectros de masas: LC/MS con Cuadrupolo Agilent 6130 con HPLC Agilent 1200; Columna: Agilent Zorbax SB-C18 (resolucion rapida), 2.1 x 30millmetros, 3.5 micras; Fases moviles: B: acido formico al 0.1 % en agua; C: acido formico al 0.1 % en MeCN; de 1.0 minuto a 6.0 minutos, del 95 % de B al 5 % de B, y del 5 % de C al 95 % de C; de 6.0 minutos a 9.0 minutos, 5 % de B y 95 % de C; tiempo posterior: 2.0 minutos; velocidad de flujo: 0.8 mililitros / minuto; temperatura de la columna: 30°C; deteccion UV: 210 nanometros y 254 nanometros; Ms exploracion positiva y negativa: 80-1000; Metodo de ionizacion: API-ES.

Condiciones de HRMS para el Ejemplo 2f:

Instrumento: Waters Acquity UPLC acoplado con Synapt Q-TOF MS; Columna: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 millmetros, 1.7 micras; Fase movil: A: acido formico al 0.1 % en agua, B: acido formico al 0.1 % en acetonitrilo; Temperatura de la columna: a temperatura ambiente; deteccion UV: exploracion de 190 nanometros a 400 nanometros; Velocidad de flujo: 0.5 mililitros / minuto;

Condicion de gradiente:

Tiempo [min.]

Fase B [%]

0

5

1

5 Inicio de adquisicion

9

95

11

95 Final de adquisicion

11.10

5

14

5 Siguiente inyeccion

Metodo de ionizacion: ESI+; MS rango de exploracion: 100-1,000 m/z.

Intermediario A: 2-(4-butoxi-fenil)-1, 1 -dimetil-etil-amina

a) 4-(2-metil-2-nitro-propil)-fenol

Una mezcla de 4-(hidroxi-metil)-fenol (20 gramos), KOtBu (27.1 gramos), y DMAC (200 mililitros) se agito con un agitador magnetico. Se agrego lentamente 2-nitro-propano (21.5 gramos), dentro de 20 minutos. La mezcla se calento a 140°C durante 5 horas antes de enfriarse hasta la temperatura ambiente. La mezcla se agrego lentamente para enfriar la solucion acuosa de HCl (3.0 %, 600 mililitros), entonces se extrajo con metil-terbutil-eter (MTBE) (300 mililitros, 1 vez, 200 mililitros, 1 vez). Las capas organicas se combinaron, se lavaron con agua (300 mililitros, 2 veces), y una solucion acuosa saturada de NaCl (50 mililitros, 1 vez), entonces se secaron con Na2SO4 anhidro. La mezcla se filtro y se concentro al vaclo, para dar un solido amarillo claro (28.5 gramos), el cual se utilizo para el siguiente paso sin mayor purification.

[M-1]+ =194.2; RT = 5.3 minutos.

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1H-RMN (400 MHz, CDCI3) ppm 6.96 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 6.75 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 3.11 (s, 2H), 1.56 (s, 6H).

b) 1-butoxi-4-(2-metil-2-nitro-propil)-benceno

La mezcla de 4-(2-metil-2-nitro-propil)-fenol (20.4 gramos), 1-bromo-butano (28.7 gramos), DMAC (200 mililitros), K2CO3 (21.6 gramos), y yoduro de tetrabutil-amonio (38.7 gramos), se agito con un agitador magnetico, y se calento a 85°C durante 17 horas. La mezcla se enfrio hasta 0-10°C y se agrego agua (700 mililitros). La mezcla se extrajo con metil-terbutil-eter (MTBE) (300 mililitros, 1 vez, 200 mililitros, 1 vez). Las fases organicas combinadas se lavaron con agua (250 mililitros, 2 veces), y entonces se concentraron al vaclo, para dar un aceite color rojo-cafe (27.8 gramos), el cual se utilizo en el siguiente paso sin mayor purificacion.

iH-RMN (400 MHz, CDCH) ppm 7.0 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.81 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 3.93 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 3.12 (s, 2H), 1.74 (m, 2H), 1.56 (s, 6H), 1.48 (m, 2H), 0.97 (t, 3H).

c) 2-(4-butoxi-fenil)-1, 1 -dimetil-etil-amina

En un reactor de hidrogenacion (1 litro), se agrego una solucion de 1-butoxi-4-(2-metil-2-nitro-propil) benceno (27.8 gramos) en AcOH (270 mililitros), seguida por Nlquel de Raney humedo (7.0 gramos). La mezcla se purgo con H2 por 3 veces, entonces se calento hasta 60°C, y se mantuvo agitandose bajo 5.0 atmosferas durante 16 horas. La mezcla se filtro, y el filtrado total se concentro al vaclo. El residuo resultante se diluyo con agua (150 mililitros)/ heptano normal (80 mililitros), la capa acuosa se lavo con heptano normal (80 mililitros) nuevamente. La capa acuosa se ajusto con NaOH (aproximadamente 20 %), a un pH de aproximadamente 11, entonces se extrajo con metil-terbutil-eter (MTBE) (100 mililitros, 1 vez), y EtOAc (150 mililitros, 2 veces). La capa del medio se desecho. Todas las capas superiores se combinaron y se lavaron con NaHCO3 saturado (100 mililitros), y NaCl saturado (100 mililitros) antes de secarse con Na2SO4 anhidro. Despues de la filtracion, la mezcla se concentro. El residuo resultante se agito, y se agrego una solucion de HCl en alcohol isopropllico (2M, 40 mililitros). La pasta acuosa se calento a 60°C, y se agrego heptano normal (120 mililitros). La mezcla se enfrio hasta 20°C, entonces se filtro, la torta se lavo con algo de heptano normal. El solido blanco se seco en aire durante 2 dlas para dar 10 gramos de la sal pura de HCl del producto. Rendimiento: 35.2 %.

[MH]+ =222.2; RT = 5.0 minutos.

iH-RMN (400 MHz, d-DMSO) ppm 8.13 (s, 3H), 7.12 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 6.88 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 3.93 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 2.80 (s, 2H), 1.67 (m, 2H), 1.42 (m, 2H), 1.18 (s, 6H), 0.92 (t, 3H).

Ejemplo 1: (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona

HN

HO

HO

imagen2

S

>=O

N

H

a) 1-terbutoxi-3-fluoro-5-isotiocianato-benceno

Se agregan por goteo tiofosgeno (33.6 gramos) en CHCl3 (250 mililitros), y K2CO3 (64.7 gramos) en H2O (450 mililitros), por separado y de una manera simultanea, a una solucion de 3-terbutoxi-5-fluoro-fenil-amina (42.9 gramos) en CHCH (350 mililitros) a 0°C. La mezcla de reaccion se calienta a temperatura ambiente durante la noche. Los materiales organicos se separan y se lavan con agua (3 veces), salmuera (1 vez), se secan sobre MgSO4, se filtran, y el solvente se remueve al vaclo. Se obtiene el compuesto del tltulo mediante cromatografla en columna por evaporacion instantanea (sllice, eluyente de dicloro-metano (DCM) / iso-hexano, 1:3).

iH RMN (CDCla, 400 MHz); 6.70 (m, 3H), 1.40 (s, 9H).

b) O-isopropil-ester del acido (3-terbutoxi-5-fluoro-fenil)-tiocarbamico

El 1-terbutoxi-3-fluoro-5-isotiocianato-benceno (24.0 gramos) y trietil-amina (10.9 gramos) se disuelven en

21

5

10

15

20

25

30

35

40

45

isopropanol (150 mili-litros). La mezcla de reaccion se pone a reflujo durante 18 horas, y el solvente se remueve al vaclo. El producto crudo se disuelve en hexano : dietil-eter (19:1). El dietil-eter se remueve al vaclo, y la solucion se enfrla a 0°C durante 3 horas. La solucion se filtra, para dar el compuesto del tltulo.

1H RMN (CDCl3, 400 MHz); 8.10 (br s, 1H), 6.65 (br s, 2H), 6.45 (ddd, 1H) 5.60 (septeto, 1H), 1.35 (d, 6H), 1.30 (s, 9H).

c) 5-terbutoxi-2-isopropoxi-benzotiazol-7-carbaldehldo

El O-isopropil-ester del acido (3-terbutoxi-5-fluoro-fenil)-tiocarbamico (2.2 gramos) se disuelve en tetrahidrofurano (THF) seco (20 mililitros). La mezcla de reaccion se enfrla a -78°C, y se agrega terbutil-litio (15.2 mililitros, de 1.5 M solucion) durante 20 minutos. La mezcla de reaccion entonces se calienta a -10°C durante 75 minutos. La mezcla de reaccion entonces se vuelve a enfriar hasta -78°C, se agrega N,N-dimetil-formamida (1.5 gramos), y la mezcla de reaccion se calienta lentamente a temperatura ambiente, y entonces se agita a -10°C durante 1 hora. La mezcla de reaccion se apaga con HCl (acuoso) (5 mililitros, de una solucion 2 M), los materiales organicos se separan entre acetato de etilo/agua, y se remueven al vaclo. Se obtiene el compuesto del tltulo mediante cromatografla en columna por evaporacion instantanea (sllice, eluyente: acetato de etilo/isohexano, 1:9).

MS (ES+) m/e 294 (MH+).

d) 5-terbutoxi-2-isopropoxi-7-vinil-benzotiazol

El Ph3PMe.Br (5.0 gramos) se disuelve en tetrahidrofurano (THF) seco (100 mililitros), bajo argon. Se agrega n-butil- litio (8.8 mililitros, de una solucion 1.6 M) a temperatura ambiente durante 10 minutos, y la mezcla de reaccion se agita durante 30 minutos adicionales. Se agrega por goteo una solucion de 5-terbutoxi-2-isopropoxi-benzotiazol-7- carbaldehldo (1.25 gramos) en dicloro-metano (DCM) (40 mililitros) a la mezcla de reaccion, y la mezcla de reaccion se agita durante 4.5 horas a temperatura ambiente. El solvente se remueve al vaclo, se vuelve a disolver en acetato de etilo, se lava con agua (3 veces), salmuera (1 vez), se seca sobre MgSO4, se filtra, y el solvente se remueve al vaclo. Se obtiene el compuesto del tltulo mediante cromatografla en columna por evaporacion instantanea (sllice, eluyente de acetato de etilo / isohexano, 1:9).

MS (ES+) m/e 292 (MH+).

e) (R)-1-(5-terbutoxi-2-isopropoxi-benzotiazol-7-il)-etano-1.2-diol

Se disuelven K3Fe(CN)6 (1.2 gramos), K2CO3 (0.5 gramos), (DHQD)2PHAl (19 miligramos) en terbutanol/agua (15 mililitros, mezcla de 1:1), bajo argon, y se agitan durante 15 minutos. La mezcla de reaccion se enfrla a 0°C, y se agrega OSO4 (3.1 miligramos), seguido por 5-terbutoxi-2-isopropoxi-7-vinil-benzotiazol (0.35 gramos). La mezcla de reaccion se agita durante la noche a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se apaga con meta-bisulfato de sodio (1 gramo), y se agita durante 1.5 horas. Se agrega acetato de etilo, los materiales organicos se separan, se lavan con agua (2 veces), salmuera (1 vez), se secan sobre MgSO4, se filtran, y el solvente se remueve al vaclo. Se obtiene el compuesto del tltulo mediante cromatografla en columna por evaporacion instantanea (sllice, eluyente de acetato de etilo/isohexano, 2:5).

MS (ES+) m/e 326 (MH+).

f) 4-metil-bencen-sulfonato de (R)-2-(5-terbutoxi-2-isopropoxi-benzo-[d]-tiazol-7-il)-2-hidroxi-etilo

En un matraz de fondo redondo, de 3 cuellos, de 500 mililitros, purgado y mantenido con una atmosfera inerte de nitrogeno, se coloco una solucion de (R)-1-(5-terbutoxi-2-isopropoxi-benzo-[d]-tiazol-7-il)-etano-1,2-diol (20 gramos, 59.05 milimoles) en piridina (240 mililitros), y tamices moleculares de 4 Angstroms (5 gramos). Esto fue seguido por la adicion por goteo de una solucion de cloruro de acido toluen-sulfonico (cloruro de tosilo) (15.3 gramos, 79.73 milimoles) en piridina (60 mililitros) con agitacion a 0°C. La solucion resultante se agito durante 4 horas a temperatura ambiente. La reaccion entonces se apago mediante la adicion de 1,000 mililitros de cloruro de hidrogeno 1M. La solucion resultante se extrajo con 2 x 300 mililitros de acetato de etilo, y las capas organicas se combinaron. La fase organica se lavo con 1 x 500 mililitros de cloruro de hidrogeno 1M, 1 x 500 mililitros de bicarbonato de sodio al 10 % y 300 mililitros de salmuera. La mezcla se seco sobre sulfato de sodio anhidro, y se concentro al vaclo. El residuo se aplico sobre una columna de gel de sllice con acetato de etilo/eter de petroleo (1:10). Esto dio como resultado 26 gramos (87 %) del 4-metil-bencen-sulfonato de (R)-2-(5-terbutoxi-2-isopropoxi-benzo-[d]-tiazol-7-il)-2-hidroxi-etilo como un aceite amarillo.

LC/MS Rt = 2.47 minutos; (m/z): 480 [M+H]+.

5

10

15

20

25

30

35

40

1H-RMN: (400 MHz, DMSO-de): 5 (ppm) 7.57 (d, 2H); 7.36 (d, 2H); 7.17 (d, 1H); 6.79 (d, 1H); 6.32 (d, 1H); 5.37-5.26 (m, 1H); 4.97-4.90 (m, 1H); 4.12-4.00 (m, 2H); 2.40 (s, 3H); 1.45-1.38 (m, 6H); 1.32 (s, 9H).

g) (R)-1-(5-terbutoxi-2-isopropoxi-benzo-[d]-tiazol-7-il)-2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-etanol

En un matraz de fondo redondo, de 4 cuellos, de 1,000 mililitros, se coloco una solucion del 4-metil-bencen-sulfonato de (R)-2-(5-terbutoxi-2-isopropoxi-benzo-[d]-tiazol-7-il)-2-hidroxi-etilo (26 gramos, 51.55 milimoles, 1.00 equivalentes) en tolueno (320 mili-litros), y 2-(4-butoxi-fenil)-1, 1 -dimetil-etil-amina (intermediario A) (22 gramos, 99.47 milimoles, 1.93 equivalentes). La solucion se agito durante 24 horas a 90°C en un bano de aceite. La mezcla resultante se concentro al vaclo. El residuo es aplico sobre una columna de gel de sllice con acetato de etilo/eter de petroleo (1:8). Esto dio como resultado 16 gramos (58 %) del (R)-1-(5-terbutoxi-2-isopropoxi-benzo-[d]-tiazol-7-il)-2-(1-(4-butoxi- fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-etanol como un aceite amarillo claro.

LC/MS: Rt = 2.24 minutos (m/z): 529 [M+H]+.

1H-RMN: (600 MHz, DMSO-de): 5 (ppm) 7.12 (s, 1H); 6.83 (d, 2H); 6.77 (s, 1H); 6.63 (d, 2H); 5.80 (br. s, 1H); 5.385.30 (m, 1H); 4.70-4.66 (m, 1H); 3.90 (t, 2H); 2.81-2.61 (m, 2H); 2.50 a 2.39 (m, 2H); 1.71-1.62 (m, 2H); 1.47-1.41 (m, 2H); 1.41 (d, 6H); 1.22 (s, 9H); 0.91 (q, 3H); 0.88 (s, 3H); 0.83 (s, 3H).

h) (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona

Una solucion del (R)-1-(5-terbutoxi-2-isopropoxi-benzo-[d]-tiazol-7-il)-2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)- etanol (3.5 gramos) en acido formico (40 mililitros), se agito durante 68 horas a temperatura ambiente. Se agregaron 50 mililitros de agua, y la mezcla resultante se evaporo a sequedad (evaporador giratorio, 15 mbar, 40°C), para dar 3.8 gramos del producto crudo. Este material se dividio entre bicarbonato de sodio acuoso saturado (50 mililitros), y acetato de etilo (50 mililitros), con el objeto de remover el acido formico. La capa acuosa se extrajo 3 veces con acetato de etilo (30 mililitros cada una). Los extractos organicos combinados se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, y se concentraron, para dar 3 gramos de la base libre cruda. Este material se paso por cromatografla por evaporacion instantanea (gel de sllice; gradiente del 0 al 60 % de metanol en dicloro-metano (DCM)). Las fracciones puras se recolectaron y se evaporaron a sequedad, para dar 1.74 gramos de un semisolido amorfo.

Este material se sometio a cromatografla de preparacion quiral [columna: Chiralpak IC (20 micras) 7.65 x 37.5 centlmetros; eluyente: heptano normal/dicloro-metano (DCM)/etanol/dietil-amina, 50:30:20 (+0.05 dietil-amina); velocidad de flujo = 70 mililitros / minuto; concentracion: 2.5 gramos / 50 mililitros de eluyente; deteccion: UV, 220 nanometros], para dar el enantiomero puro (100 % de exceso enantiomerico (ee)).

Este material se disolvio en 45 mililitros de acetonitrilo a 60°C. La solucion se dejo enfriar a temperatura ambiente durante 18 horas, despues de lo cual, se presento la precipitacion. La mezcla se diluyo con 5 mililitros de acetonitrilo frlo (4°C), y se filtro a traves de un embudo Buchner. La torta del filtro se lavo dos veces con acetonitrilo frlo. Entonces el solido humedo se recolecto y se seco al vaclo (0.2 mbar), a temperatura ambiente durante la noche, para dar 1.42 gramos de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]- tiazol-2(3H)-ona como un polvo incoloro.

LC/MS: Rt = 1.81 minutos (m/z): 431 [M+H]+.

1H-RMN: (600 MHz, DMSO-de): 5 (ppm) 11.5 (br. s, 1H); 9.57 (br. s, 1H); 6.99 (d, 2H); 6.76 (d, 2H); 6.52 (s, 1H); 6.47 (s, 1H); 5.63 (br. s, 1H); 4.53-4.48 (m, 1H); 3.90 (t, 2H); 2.74-2.63 (m, 2H); 2.54-2.45 (m, 2H); 1.71-1.62 (m, 2H); 1.49-1.40 (m, 2H); 0.93 (q, 3H); 0.89 (s, 6H).

Rotacion optica: [a]o22 = -43° (c = 1.0 gramo/100 mililitros de MeOH).

Ejemplo 2: Ruta alternativa para la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi- benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona

imagen3

a) 1-terbutoxi-3-fluoro-5-isotiocianato-benceno

El 1, 1 '-tiocarbonil-di-imidazol (423 gramos, 2.37 moles) se disolvio en dicloro-metano (DCM) (3200 mililitros). La mezcla se agito bajo una atmosfera de N2 mientras se agregaba lentamente una solucion de 3-terbutoxi-5-fluoro- 5 anilina (435 gramos, 2.37 moles) en dicloro-metano (DCM) (800 mililitros) dentro de 2 horas. Entonces la mezcla se mantuvo agitando a 20°C durante 16 horas. La mezcla se diluyo con agua (3000 mililitros). La fase de dicloro- metano (DCM) separada se lavo nuevamente con agua (3,000 mililitros) antes de secarse con Na2SO4 anhidro durante 2 horas. La mezcla se filtro, y el filtrado se concentro al vaclo para remover el solvente, para dar el 1- terbutoxi-3-fluoro-5-isotiocianato-benceno (499 gramos).

10 1H-RMN (400 MHz, CDCla): 6.63-6.68 (m, 3 H), 1.37 (s, 9H).

b) O-isopropil-ester del acido (3-terbutoxi-5-fluoro-fenil)-tiocarbamico

A una solucion del 1-terbutoxi-3-fluoro-5-isotiocianato-benceno (460 gramos, 2.04 moles) en alcohol isopropllico anhidro (3250 mililitros), se le agrego trietil-amina (315 gramos, 3.06 moles). La mezcla se calento a reflujo bajo una atmosfera de N2 durante 16 horas, y la temperatura se enfrio hasta 40-50°C. Despues de la concentracion, el residuo 15 oscuro resultante se diluyo con heptano normal (1,000 mililitros), y se calento a 60°C. La mezcla se enfrio lentamente a 25°C, al mismo tiempo que se agregaba la siembra. Se observo una pasta acuosa y se agito a 25°C durante 16 horas antes de enfriarse lentamente hasta 0-10°C dentro de 2 horas. Despues de la filtracion y del lavado con heptano normal (200 mililitros), el solido recolectado se seco en un horno al vaclo a 40-45°C durante 18 horas, para dar el O-isopropil-ester del acido (3-terbutoxi-5-fluoro-fenil)-tiocarbamico (453.1 gramos).

20 LCMS: [M+H]+ = 286.1; RT = 7.2 minutos.

iH-RMN (400 MHz, CDCla): 8.18 (s, 1H), 6.81 (m, 2H), 6.51 (dt, J = 10.2 Hz, 1H), 5.66 (hepteto, J = 6.3 Hz, 1H), 1.42 (d, J = 6.2 Hz, 6H), 1.37 (s, 9H).

c) 1-(5-terbutoxi-2-isopropoxi-benzotiazol-7-il)-2-cloro-etanona

Bajo una atmosfera de nitrogeno, se agrego por goteo una solucion de terbutil-litio (481 mililitros, 737.6 milimoles, 25 1.6 M) a una solucion del O-isopropil-ester del acido (3-terbutoxi-5-fluoro-fenil)-tiocarbamico (200 gramos, 700.83

milimoles) en 2-Me-THF (1,600 mililitros), a una temperatura por debajo de -65°C. La temperatura de la reaccion se calento a -35°C, y se agrego lentamente una segunda porcion de terbutil-litio (388 mililitros, 737.6 milimoles, 1.9 M), mientras que se mantenla la temperatura por debajo de -35°C. La mezcla de reaccion se agito luego a esta temperatura durante 3 horas, y se enfrio hasta -70°C. Se agrego una solucion de N-metil-N-metoxi-cloro-acetamida 30 (96.4 gramos, 700.83 milimoles) en 2-MeTHF (300 mililitros) a la mezcla de reaccion, mientras que se mantenla la

temperatura por debajo de -70°C. La mezcla se calento entonces a -30°C, y se agito durante 45 minutos. La mezcla de reaccion frla se apago mediante la adicion por goteo de HCl al 30 % en isopropanol (240 gramos), seguida por la adicion de 1,500 mililitros de agua. La capa organica se lavo en secuencia con 1,000 mililitros de agua, 1,500 mililitros de NaHCO3 acuoso saturado, y 1,500 mililitros de salmuera. Despues de la concentracion, el residuo color 35 cafe claro resultante se agrego a isopropanol (135 mili-litros). La mezcla se calento a 50°C, y se enfrio lentamente hasta 25°C. Se agrego por goteo heptano normal (135 mililitros) a la solucion, y la mezcla se agito durante la noche. La pasta acuosa se filtro, y la torta del filtro se lavo con heptano normal (40 mililitros), seguido por otra porcion de heptano normal (20 mililitros). La torta se seco al vaclo, para proporcionar la 1-(5-terbutoxi-2-isopropoxi-benzotiazol- 7-il)-2-cloro-etanona como un polvo grisaceo (42.8 gramos, 17.9 % de rendimiento).

40 iH RMN (400 MHz, CDCh): 7.60 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.45 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 5.40 (hepteto, J = 6.3 Hz, 1H), 4.77 (s, 2H), 1.47 (d, J = 6.3 Hz, 6H), 1.40 (s, 9H).

LCMS: [M+H]+ = 342.1, RT = 7.29 minutos.

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

d) (R)-1-(5-terbutoxi-2-isopropoxi-benzotiazol-7-il)-2-cloro-etanol

Una suspension de la 1-(5-terbutoxi-2-isopropoxi-benzo-[d]-tiazol-7-il)-2-cloro-etanona (70 gramos, 204.8 milimoles), y RuCl(p-cimeno)[(S,S)-Ts-DPEN] (1.954 gramos, 3.07 milimoles) en metanol (MeOH)/N,N-dimetil-formamida (DMF) (1,330 mililitros/70 mililitros) se desgasifico y se relleno con N2 tres veces. Se agrego lentamente una mezcla preformada desgasificada de acido formico (28.3 gramos) en Et3N (124.3 gramos), mientras que se mantenla la temperatura interna entre 15°C y 20°C. La suspension amarilla resultante se calento hasta 30°C. Despues de 2 horas, la mezcla de reaccion se enfrio hasta 25°C, entonces se agrego agua (750 mililitros) a la mezcla de reaccion, seguida por la adicion de acido acetico (56 mililitros) en una porcion. La mezcla se concentro, y entonces se diluyo con el terbutil-metil-eter (TBME) (1,000 mililitros). La fase acuosa se separo y se extrajo con el terbutil-metil-eter (TBME) (1,000 mililitros). La fase organica combinada se lavo en secuencia con agua y salmuera, y entonces se seco con Na2SO4 y se concentro al vaclo, para dar el (R)-1-(5-terbutoxi-2-isopropoxi-benzotiazol-7-il)-2-cloro-etanol (72 gramos).

LCMS (metodo A): [M+H]+ = 343.1, RT = 5.67 minutos.

1H RMN (400 MHz, CDCla): 7.29 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.83 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 5.37 (hepteto, J = 6.3 Hz, 1H), 4.96 (m, 1H), 3.74 (m, 2H), 3.01 (s, 1H), 1.46 (d, J = 6.2 Hz, 6H), 1.36 (s, 9H).

e) (R)-5-terbutoxi-2-isopropoxi-7-oxiranil-benzotiazol

A una solucion del (R)-1-(5-terbutoxi-2-isopropoxi-benzo-[d]-tiazol-7-il)-2-cloro-etanol (140 gramos, 407.1 milimoles) en terbutil-metil-eter (TBME) (420 mililitros), se le agrego por goteo una solucion acuosa de NaOH (2M, 420 mililitros), seguida por yoduro de tetrabutil-amonio (7.52 gramos, 20.36 milimoles) agregado en una porcion. Despues de 4 horas a 26°C, se agregaron 400 mililitros de terbutil-metil-eter (TBME), y la capa organica se separo. La capa acuosa se extrajo con el terbutil-metil-eter (TBME) (400 mililitros). Las capas organicas combinadas se lavaron con agua (400 mililitros), y salmuera (400 mililitros), para dar el (R)-5-terbutoxi-2-isopropoxi-7-oxiranil- benzotiazol (122 gramos).

LCMS: [M+H]+ = 308.0, RT = 6.80 minutos.

iH RMN (400 MHz, CDCla) ppm 7.28 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.85 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 5.38 (m, 1H), 3.96 (m, 1H), 3.15 (dd, J =4.3, 5.5 Hz, 1H), 2.94 (dd, J =4.3, 5.5 Hz, 1H), 1.45 (d, J = Hz, 6H), 1.37 (s, 9H).

f) (R)-1-(5-terbutoxi-2-isopropoxi-benzo-[d]-tiazol-7-il)-2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-etanol

El (R)-5-terbutoxi-2-isopropoxi-7-oxiranil-benzotiazol (145 gramos, 471.7 milimoles), y la 2-(4-butoxi-fenil)-1, 1 -dimetil- etil-amina (114.8 gramos, 518.9 milimoles) se disolvieron en sulfoxido de dimetilo (DMSO) (850 mililitros). La mezcla de reaccion se calento a 80°C, y se agito durante 27 horas. La mezcla entonces se enfrio hasta 25°C y, se agrego a una mezcla agitada de agua (1,500 mililitros), y terbutil-metil-eter (TBME) (1,500 mililitros). La capa acuosa se separo y se extrajo con el terbutil-metil-eter (TBME) (1,000 mililitros). Las capas organicas combinadas se lavaron en secuencia con agua (1,500 mililitros), y salmuera (1,000 mililitros), y se secaron con Na2SO4 anhidro. Despues de la concentracion, el residuo se purifico mediante cromatografla en columna (eluyendo con EtOAc al 10 % en heptano normal hasta EtOAc al 33 % en heptano normal). Se obtuvo el producto solido de (R)-1-(5-terbutoxi-2-isopropoxi- benzo-[d]-tiazol-7-il)-2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-etanol (140 gramos) como un solido grisaceo.

HRMS: [M+1] 529.2996.

iH RMN (400 MHz, CDCb): 7.26 (m, 1H), 7.01 (m, 1H), 6.99 (m, 1H), 6.78-6.80 (m, 3H), 5.39 (m, 1H), 4.65 (dd, J = 3.8, 8.8Hz, 1H), 3.83 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 2.96 (dd, J = 3.8, 12 Hz, 1H), 2.74 (dd, J = 8.8, 12 Hz, 1H), 2.60 (dd, J = 13.6, 17.6 Hz, 2H), 1.72-1.79 (m, 2H), 1.50 (m, 2H), 1.46 (d, J = 2.0 Hz, 3H), 1.45 (d, J = 2.0 Hz, 3H), 1.35 (s, 9H), 1.06 (s, 3H), 1.04 (s, 3H), 0.98 (t, J = 7.2 Hz, 3H).

g) (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona

Al (R)-1-(5-terbutoxi-2-isopropoxi-benzo-[d]-tiazol-7-il)-2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-etanol (7.5

gramos) en iso-propanol (30 mililitros), y agua (25 mililitros), se le agrego una solucion acuosa de HCl 1M (43 mililitros). La mezcla de reaccion entonces se calento a 60°C, y se agito durante 2.5 horas. La mezcla se enfrio hasta 50°C, y entonces se agrego lentamente una solucion acuosa de NaOH 2M (18 mililitros), para ajustar el pH entre 8.2 y 8.4. La mezcla de reaccion entonces se enfrio hasta 30°C, seguido por extraccion con el terbutil-metil-eter (TBME) (la primera vez con 40 mililitros, la segunda vez con 25 mililitros). Las dos capas organicas se combinaron y se lavaron con agua (38 mililitros por dos veces) antes de secarse con Na2SO4 anhidro. Despues de la filtracion, el filtrado se concentro, y entonces se disolvio en MeCN (145 mili-litros). La solucion se trato con carbon activado (0.6

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

gramos), y se calento a 60°C. Despues de una segunda filtracion, la torta se lavo con MeCN (10 mililitros por dos veces), y el filtrado se cristalizo a 60°C para obtener la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1- hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona (3.8 gramos). Exceso enantiomerico (e.e.) = 97.6 %.

LCMS (metodo A): [M+H]+ =431.2.

1H RMN (400 MHz, DMSO- ds): 9.5 (br. s, 1H), 6.81 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 6.57 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 6.33 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 6.30 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 4.43 (br. s, 1H), 3.69 (t, J = 6.4Hz, 2H), 2.58-2.59 (m, 2H), 2.24-2.31 (m, 2H), 1.41-1.48 (m, 2H), 1.15-1.25 (m, 2H), 0.78 (s, 6H), 0.70 (t, J = 7.4Hz, 3H).

Ejemplo 3: Sal de acetato de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo- [d]-tiazol-2(3H)-ona

500 miligramos (1.161 milimoles) de la base libre de (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi- etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona se suspendieron en 10.0 mililitros de acetonitrilo y 0.25 mililitros de agua, en un matraz de cuatro cuellos de 50 mililitros, y se agitaron con aspas a temperatura ambiente. La suspension se calento a una temperatura interna de 50°C (temperatura de la camisa de 75°C), y se agregaron 72 miligramos de acido acetico (1.161 milimoles) (se formo una solucion amarilla transparente). La solucion se enfrio durante 30 minutos a temperatura ambiente, y se agregaron 0.15 mililitros de agua.

La solucion entonces se sembro con acetato de (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)- 5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona, y se agito durante la noche (16 horas), a temperatura ambiente. La suspension entonces se filtro a temperatura ambiente a traves de un filtro de vidrio, y se lavo tres veces con 1 mililitro de acetonitrilo. Se secaron 510 miligramos de la torta del filtro humeda en un horno de secado durante la noche (16 horas) a temperatura ambiente a sequedad. Rendimiento: 508 miligramos de un polvo blanco (89.1 %)

Preparacion de la siembra de acetato de (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5- hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona

57.0 miligramos (0.132 milimoles) de la base libre de (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi- etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona y 8.03 miligramos (0.132 milimoles) de acido acetico se disolvieron en 1.0 mililitro de acetonitrilo y 0.05 mililitros de agua. La solucion se agito a temperatura ambiente con un agitador magnetico. La precipitation tuvo lugar durante la noche. La solucion entonces se filtro a temperatura ambiente a traves de un filtro de vidrio, y se lavo tres veces con 0.5 mililitros de acetonitrilo. La torta del filtro humeda se seco en un horno de secado durante la noche (16 horas) a temperatura ambiente a sequedad. Rendimiento: 57 miligramos de un polvo blanco

Ejemplo 3a: Procedimiento alternativo para la formation de la sal de acetato de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil- propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona

El (R)-1-(5-terbutoxi-2-isopropoxi-benzo-[d]-tiazol-7-il)-2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-etanol (1

equivalente) se suspendio en isopropanol. De 50°C a 60°C, se agrego una solucion acuosa de acido clorhldrico 1M (3 equivalentes), dentro de aproximadamente 30 a 60 minutos. Despues de completarse la reaction (aproximadamente 2.5 horas a 60°C), la solucion se enfrio hasta 20°C, y se agrego gradualmente hidroxido de sodio 2M (3 equivalentes) a esta temperatura. Despues de la adicion completa, la base libre de (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)- 2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona emulsionada se extrajo en acetato de etilo, y la capa organica se lavo con agua. La capa organica se trato con carbon activado, y se filtro utilizando celulosa microcristalina como un auxiliar de filtro. La torta del filtro se lavo con acetato de etilo. El filtrado, que contenla la base libre de (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]- tiazol-2(3H)-ona, se concentro cuidadosamente hasta obtener un volumen residual definido mediante destilacion a una temperatura de la camisa de 55°C bajo presion reducida. Entonces se agrego acetato de isopropilo, y se removio parcialmente mediante destilacion hasta obtener un volumen residual definido a una temperatura de la camisa de 55°C bajo presion reducida. Se agregaron acetato de isopropilo y la solucion del acido acetico en acetato de isopropilo adicionales al residuo caliente de la destilacion a 50-55°C. Durante la adicion del acido acetico, el lote se sembro con la sal de acetato de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi- benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona para iniciar temprano la cristalizacion controlada de la sal de acetato a 50-55°C. Despues de enfriarse gradualmente hasta 0°C, la suspension del producto se filtro y se lavo dos veces con acetato de isopropilo frlo. La torta del filtro se seco de 50°C a 90°C bajo presion reducida hasta tener un peso constante, para dar la sal de acetato de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]- tiazol-2(3H)-ona cristalina en un rendimiento tlpico de aproximadamente el 80 %.

Ejemplo 4: Analisis de XRPD y DSC de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5- hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona cristalina en su forma de sal de acetato

El analisis de difraccion en polvo de rayos-X (XRPD) de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1- hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona cristalina en su forma de sal de acetato se llevo a cabo bajo las siguientes condiciones experimentales:

Metodo de XRPD

Instrumento

Bruker D8 Advance (reflexion)

Irradiacion

CuKa (40 kV, 30 mA)

Paso

0.017 grd

Tipo de exploracion

Exploracion continua

Tiempo de exploracion

107.1 segundos

Rango de exploracion

2°-40° (valor 2-Theta)

5 El analisis de calorimetrla de exploracion diferencial (DSC) se llevo a cabo bajo las siguientes condiciones experimentales:

Metodo de DSC

Instrumento

Perkin Elmer Diamond

Intervalo de temperatura

30°C - 300°C

Masa de muestra

2 a 3 miligramos

Bandeja de muestra

Aluminio cerrada

Flujo de nitrogeno

20-50 K / minuto

Analisis de XRPD de la sal de acetato de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5- hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona cristalina

10 La sal de acetato de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol- 2(3H)-ona cristalina se analizo mediante difraccion en polvo de rayos-X (XRPD), y los picos caracterlsticos se muestran en la siguiente tabla (vease tambien la Figura 6). De estos, los picos en 8.8, 11.5, 16.4, 17.6, 18.2, 19.6, 20.1,20.8, y 21.1° 2-Theta son los mas caracterlsticos.

Angulo (2-Theta °)

Intensidad Angulo (2-Theta °) Intensidad

8.8

alta 19.1 baja

10.0

baja 19.6 media

11.5

alta 20.1 alta

14.2

baja 20.8 alta

14.6

baja 21.1 media

15.7

baja 23.3 media

16.4

alta 26.2 baja

17.6

media 26.6 media

18.2

alta 27.1 media

La sal de acetato de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol- 2(3H)-ona cristalina se analizo mediante calorimetrla de exploracion diferencial (DSC), y se encontro que tiene una amplia endotermia alrededor de 170°C.

5 Ejemplo 5: Solubilidades comparativas de las formas de base libre, de sal de acetato, y de sal de glicolato del compuesto A

Se analizaron las solubilidades relativas de la forma de base libre de las formas de sal de acetato y glicolato del compuesto A, y los resultados se muestran en la siguiente Tabla. Las soluciones se titularon con la adicion de HCl o NaOH para el ajuste del pH. Las solubilidades acuosas mejoradas de las formas de sal de acetato y glicolato en 10 relacion con la forma de base libre del compuesto A hacen que las sales de acetato y glicolato del compuesto sean mas adecuadas para inyeccion subcutanea o infusion.

Solubilidad de la base libre del

Solubilidad de sal de acetato del Solubilidad de sal de glicolato del

Compuesto A en H2O

Compuesto A en H2O

Compuesto A en H2O

pH

Conc. en mg/mL pH Conc. en mg/mL pH Conc. en mg/mL

6.2

0.27 5.9 1.33 5.1 13.1

7.0

0.05 6.0 1.11 5.3 6.39

7.3

<0.01 6.1 1.10 5.4 4.47

7.8

<0.01 6.2 0.55

Ejemplo 6: Perfiles celulares in vitro del compuesto de la invencion (Compuesto A), su enantiomero (Compuesto B), su racemato (Compuesto A/B), y formoterol

El compuesto de la invencion (Compuesto A) muestra los siguientes valores EC50 en la Prueba 1 como se describe 5 anteriormente en la presente.

Celulas CHO# EC50 (Emax%) Celulas primarias; respuesta cAMP, EC50 (Emax%)

Compuestos

132 AR 31 AR a1A AR skMC de Humano skMC de Rata Cardio- miocitos de Rata

0.7 nM 85 nM

Formoterol

(99%**) (86%**) 190 nM 0.2 nM 0.9 nM 2.9 nM

5.6 nM 560 nM 0.7 nM 3.4 nM 5.7 nM

Compuesto A (R)

> 10 pM

(88% ) (32% ) (96%) (98% ) (71% )

950 nM 280 nM

Compuesto B (S)

> 10 pM > 30 pM n.d. n.d.

(83% ) (100%)

11 nM 684 nM 0.63 nM

Compuesto A/B

(87%**) (38%**) n.d. (100%*) n.d. n.d.

5

10

15

20

25

30

Compuestos

Celulas CHO# EC50 (Emax%) Celulas primarias; respuesta cAMP, EC50 (Emax%)

32 AR

31 AR a1A AR skMC de Humano skMC de Rata Cardio- miocitos de Rata

Sal de acetato del Compuesto A (R)

2.5 nM (91%**) n.d. n.d. 1.7 nM (93%**) n.d. n.d.

skMC: miotubos esqueleticos diferenciados; *: comparandose con formoterol; **: comparandose con isoprenalina; #: AMP para 131 y 132, Ca2+ para a1A; n.d.: no determinado.

El compuesto de la invencion (Compuesto A) es un agonista de 32 AR potente y selectivo con una eficacia intrlnseca muy baja sobre 31 AR y ninguna actividad sobre a1A AR. Su enantiomero, el Compuesto B, es muy debil sobre 32 AR con una EC50 de 950 nM.

Ejemplo 7: Efectos del Formoterol y el Compuesto A sobre el peso del musculo esqueletico y del corazon in vivo

Las ratas Wistar Han IGS machos (International Genetic Standard) (Crl:WI(Han)) con un peso de 350 a 400 gramos, se adquirieron en Charles River Laboratories. Las ratas se aclimataron a la instalacion durante 7 dlas. Los animales se alojaron en grupos de 3 animales a 25°C con un ciclo de luz-oscuridad de 12:12 horas. Se alimentaron con una dieta de laboratorio estandar conteniendo el 18.2 % de protelna y el 3.0 % de grasa con un contenido de energla de 15.8 MJ/kilogramo (NAFAG 3890, Kliba, Basilea, Suiza). Se proporcionaron alimento y agua ad libitum. El Formoterol o el Compuesto A se disolvio en el vehlculo indicado mas adelante, para alcanzar un intervalo de dosis de 0.003 a 0.03 miligramos/kilogramo/dla para el Formoterol, y de 0.01 a 0.1 miligramos/kilogramo/dla para el Compuesto A, con el modelo "ML4 de Alzet, durante 28 dlas. Las bombas se llenaron con la solucion, y se mantuvieron durante varias horas a 37°C en suero regulado con fosfato hasta la implantacion quirurgica. Las ratas se trataron subcutaneamente con Temgesic en una dosis de 0.02 miligramos/ kilogramo con un volumen de 1 mililitro/kilogramo cuando menos 30 minutos antes de la cirugla, y entonces las bombas llenadas con la solucion indicada anteriormente se implantaron subcutaneamente en el lomo de las ratas bajo anestesia con isoflurano en una concentracion del 3 %. El Temgesic se administro subcutaneamente a las ratas 24 horas y 48 horas despues de la cirugla. Los pesos corporales se midieron dos veces por semana. Los clips se removieron 10 dlas despues de la cirugla bajo anestesia. Cuatro semanas despues del tratamiento, las ratas se sometieron a eutanasia con CO2, y se disectaron y se pesaron los musculos tibial anterior, gastrocnemio y soleo, el corazon y el cerebro. El peso del cerebro se utilizo para la normalizacion de los pesos de los organos. Los resultados se expresan como el promedio +/- SEM. El analisis estadlstico se llevo a cabo utilizando la prueba de comparacion multiple de Dunnett en seguida del analisis de variacion de una via, para comparar los grupos de tratamiento con el grupo de control con vehlculo. Las diferencias se consideraron como significativas cuando el valor de probabilidad fue < 0.05: *: Los analisis estadlsticos se llevaron a cabo mediante el GraphPad Prism version 5.0 (GraphPad Software, Inc., la Jolla, CA). El peso del musculo se normalizo al peso corporal en el dla 0 (el peso corporal inicial), y el peso del corazon se normalizo mediante el peso del cerebro.

Estudio 1: Formoterol

Grupo

Tratamiento Dosis (mg/kg) Via Regimen

Grupo

Tratamiento Dosis (mg/kg) Via Regimen

1

Vehiculo’ 0 s.c. Minibomba Alzet 2ML4 durante 4 semanas

2

Formoterol 0.003

3

Formoterol 0.01

4

Formoterol 0.03

’ Vehiculo: 20% 1:2 Cremophor:Etanol en solucion salina (NaCl al 0.9 %).

Estudio 2: Compuesto A

Grupo

Tratamiento Dosis (mg/kg) Via Regimen

1

Vehiculo’ 0

2

Compuesto A 0.01 Minibomba Alzet

3

Compuesto A 0.03 s.c. 2ML4 durante 4 semanas

4

Compuesto A 0.1

’ Vehiculo: 20 % 1:2 Cremophor:Etanol en solucion salina (NaCl al 0.9 %).

La Figura 1 muestra que el formoterol induce tanto hipertrofia del musculo esqueletico como un incremento de la 5 masa cardlaca hasta el mismo grado, mientras que el compuesto A induce hipertrofia del musculo esqueletico con un impacto mlnimo sobre la masa cardlaca, indicando que el compuesto A exhibe un efecto selectivo en el musculo esqueletico sobre el musculo cardlaco. El compuesto A induce significativamente hipertrofia del musculo esqueletico por el 11 % a 0.01 miligramos/kilogramo/dla con una concentracion en plasma de estado continuo de aproximadamente 0.2 nM, mientras que no hubo hallazgos en la histopatologla del corazon incluso a 0.1 10 miligramos/kilogramo/dla con una concentracion de estado continuo de aproximadamente 2 nM.

Ejemplo 8: Efectos del Formoterol y del Compuesto A sobre la funcion de los organos aislados (contraccion de auricula izquierda, frecuencia de latido del nodulo sino-auricular, y automaticidad del corazon entero)

Metodo

Contraccion de auricula izquierda: El ensayo de contraccion de la auricula izquierda se llevo a cabo en Ricerca

5

10

15

20

25

30

Biosciences, LLC (catalogo numero 407,500 Adrenergic betal), utilizando la auricula izquierda del Cobayo Dunkin Hartley con un peso corporal de 600 +/-80 gramos (Arch. Int. Pharmacodyn. 1971: 191: 133-141.).

Frecuencia de latido del nodulo sino-auricular: Los conejos Nueva Zelanda hembras blancos se sacrificaron mediante exsanguinacion despues de una anestesia profunda utilizando una mezcla de quetamina/xilazina, intravenosamente (i.v.). Se removio rapidamente el corazon y se coloco en una solucion de Tyrode. Esta solucion se gasifico continuamente con O2 al 95 %, CO2 al 5 %, y previamente se calento hasta aproximadamente 36°C ± 0.5°C. La auricula derecha se separo del resto del corazon. Las preparaciones se montaron en un bano de tejido y se mantuvieron a 37°C ± 0.5°C durante cuando menos una hora para la estabilizacion. Los potenciales de accion (AP) se registraron intracelularmente con un microelectrodo de vidrio estandar llenado con KCl 3M, conectado a un amplificador neutralizante de impedancia de entrada alta (amplificador de microelectrodo VF-180, Bio-Logic). Los potenciales de accion (AP) se exhibieron en un osciloscopio digital (osciloscopio HM-407, HAMEG), y se analizaron por medio de un sistema de adquisicion de datos de alta resolucion (software Notocord hem 4.2, Notocord SA, Croissy, Francia). Despues de una hora de estabilizacion, los compuestos se agregaron a la solucion de Tyrode en concentraciones crecientes, manteniendose cada concentracion durante 30 minutos. No hubo deslavado entre dos concentraciones. Las mediciones electrofisiologicas se hicieron mediante el analisis de los potenciales de accion durante el protocolo experimental al final del perlodo de perfusion de 30 minutos. La frecuencia espontanea del nodulo sino-auricular (SA) se evaluo contando el numero de latidos cada 10 segundos con el fin de expresar los resultados en numero de latidos por minuto (bpm). Los datos se expresaron como el promedio ± SEM.

Automaticidad: Se investigo la automaticidad en los corazones de conejos perfundidos Langendorff aislados, conducida por Hondeghem Pharmaceuticals Consulting N.V., B-8400 Oostende, Belgica. Las pruebas se ejecutaron en corazones de conejos albinos hembras con un peso de aproximadamente 2.5 kilogramos, y que tenlan una edad de aproximadamente 3 meses. Los efectos de los compuestos se midieron en un modelo completamente automatizado utilizando el corazon de conejo aislado perfundido de acuerdo con la tecnica de Langendorff. El corazon que late espontaneamente se perfunde retrogradualmente con concentraciones crecientes del artlculo de prueba. Se coloca cuidadosamente un electrodo en la auricula izquierda con el objeto de registrar la duracion del ciclo de la automaticidad del nodulo del seno.

Las Figuras 2a y 2b muestran los resultados obtenidos cuando se comparo el formoterol con el compuesto de la invencion (Compuesto A).

El compuesto A no muestra efectos sobre la contraccion de la auricula izquierda con hasta 10 pM, y muestra efectos menos directos sobre la actividad del marcapasos, comparandose con el formoterol.

Formoterol Compuesto A

Contraccion de auricula izquierda EC50 (n=2)

17 nM > 10 pM

Frecuencia de latido del nodulo sino-auricular, incremento maximo (n=6)

+45% +6.2%

Automaticidad, incremento maximo (n=3)

+46% + 17%

Los valores en las Figuras 2a y 2b se expresan como el promedio ± SEM; Nodulo sino-auricular (n = 6), corazon aislado (n = 3).

5

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15

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35

Ejemplo 9: Efectos del Formoterol y del Compuesto A sobre la frecuencia cardlaca in vivo

Las ratas Wistar Han (W-H) IGS (International Genetic Standard) (Crl:WI(Han)) se adquirieron en Charles River Laboratories. Se implantaron cronicamente cateteres venosos y arteriales femorales, y se exteriorizaron a traves de un sistema de cabeza giratoria cautiva de resorte, y se alojaron en caulas especializadas. El cateter arterial se conecto a un transductor de presion para medir continuamente la presion del pulso, la presion arterial media, y la frecuencia cardlaca, que se derivo a partir de la senal de la presion sangulnea, por medio de un sistema de adquisicion de datos digitales. Los compuestos se administraron por medio de un cateter subcutaneo (s.c.) implantado a traves de la piel. Los valores se expresan como el promedio ± SEM (n = 3).

El compuesto A muestra menos incrementos en la frecuencia cardlaca comparandose con el formoterol cuando se administra con un bolo subcutaneo (s.c.) de hasta 0.3 miligramos/kilogramo, como se muestra en las Figuras 3a, 3b y 3c.

Ejemplo 10: Efectos del Formoterol y del Compuesto A sobre la frecuencia cardlaca in vivo

Los monos Rhesus, 24 hembras con un peso corporal de alrededor de 4 a 8 kilogramos, se seleccionaron aleatoriamente en 4 grupos de n = 6. Los animales se restringieron en una silla hasta 4 horas despues de una sola administracion subcutanea de los compuestos, y entonces se regresaron a sus corrales. Las frecuencias cardlacas se midieron utilizando un dispositivo Surgivet V3304. Los valores se expresan como el promedio ± SEM (n = 6).

El compuesto A muestra un menor incremento de la frecuencia cardlaca comparandose con el formoterol cuando se administra como un bolo subcutaneo (s.c.) de hasta 0.03 miligramos/kilogramo, como se muestra en las Figuras 4a y 4b.

Ejemplo 11: Efecto del Compuesto A, su enantiomero (Compuesto B), y su racemato (Compuesto A/B) sobre el receptor de Serotonina 5-HT2C

Se utilizan membranas celulares de CHO de hr5-HT2C recombinantes humanas (Biosignal Packard, EUA), y 3H- Mesulergina (NEN Life Science Products, EUA, 1 nM) para medir la afinidad de enlace de los compuestos con el receptor 5-HT2C humano. El enlace no especlfico se evalua en la presencia de Mesulergina 1 pM. Se incuban cincuenta microlitros de cada uno de la membrana, el ligando, y el compuesto, en un volumen total de 250 microlitros, en placas de 96 pozos durante 60 minutos a 22°C, en un regulador que contiene Tris 50 mM, acido ascorbico al 0.1 %, Pargilina 10 pM, pH de 7.7. Las placas se filtran, se lavan 3 veces en Tris 50 mM helado, se secan, y se miden en el Topcount.

Las celulas CHO-K1 que co-expresaban la apoecuorina mitocondrial, el 5-HT2Cne de serotonina recombinante, y la protelna-G promiscua Ga16, cultivadas hasta la fase mid-log en el medio de cultivo sin antibioticos, se desprendieron con PBS-EDTA, se centrifugaron, y se volvieron a suspender en el regulador de ensayo (DMEM/F12 de HAM con HEPES, sin rojo de fenol + albumina de suero bovino (BSA) al 0.1 % sin proteasa), en una concentracion de 1 x 106 celulas/mililitro. Las celulas se incubaron a temperatura ambiente durante cuando menos 4 horas con coelenterazina h. El agonista de referencia fue el a-metil-5-HT. Para la prueba del agonista, se mezclaron 50 microlitros de la suspension celular con 50 microlitros del agonista de prueba o de referencia en una placa de 96 pozos. La emision de luz resultante se registra utilizando un luminometro del sistema de rastreo de farmacos funcional Hamamatsu Functional Drug Screening System 6,000 (FDSS 6000). La actividad agonista del compuesto de prueba se expreso como un porcentaje de la actividad del agonista de referencia en su concentracion EC100.

5-HT2C de Serotonina

Enlace CHO EC50 (Emax%)

5-HT

n.d. 0.24 nM

Compuesto A (R)

11 pM 280 nM (83%)

Compuesto B (S)

0.8 micras 19.7 nM (99%)

5-HT2C de Serotonina

Enlace CHO EC50 (Emax%)

Compuesto A/B

1.7 micras 25 nM (113%)

El Compuesto A es 50 veces menos activo sobre 5-HT2C cuando se compara con la actividad del agonista 132 AR (5.6 nM), mientras que su enantiomero, el Compuesto B, es muy debil sobre 32 AR con una EC50 de 950 nM pero mucho mas potente sobre 5-HT2C con una EC50 de 19.7 nM, mostrando una selectividad inversa sobre el objetivo.

5 El Compuesto A tambien es mas de 10 veces menos activo sobre 5-HT2C cuando se compara con el racemato o el enantiomero (S), sugiriendo que es conveniente el perfil de efectos secundarios de este compuesto.

Ejemplo 12: Capsulas Duras

Tabla 1 - Composicion de capsulas duras de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-

hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona

Ingrediente para el relleno de la capsula

% (peso/peso) para capsulas de 0.5 mg % (peso/peso) para capsulas de 5 mg % (peso/peso) para capsulas de 10 mg

Sal de acetato de (R)-7-(2-(1-(4- butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il- amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi- benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona

0.60 5.95 11.90

Avicel PH101

71.90 66.55 60.60

Lactosa secada por aspersion

20.00 20.00 20.00

Ac-di-Sol

6.00 6.00 6.00

Aerosil 200

0.50 0.50 0.50

Estearato de magnesio

1.00 1.00 1.00

10

Se pueden preparar capsulas de gelatina dura, cada una comprendiendo, como ingrediente activo, 0.5, 5 o 10 miligramos de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)- ona (equivalentes a 0.60, 5.95 y 11.90 miligramos, respectivamente, de la sal de acetato de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi- fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona) con la composicion enlistada en 15 la Tabla 1, como sigue:

Preparacion de premezcla:

La sal de acetato de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol- 2(3H)-ona con una porcion de Avicel PH101 y Aerosil 200, se pasaron a traves de un tamiz adecuado, y se mezclaron en una mezcladora de tambor (de aproximadamente 100 a 300 rotaciones).

20 Preparacion de la mezcla final:

La premezcla anterior y la cantidad restante de Avicel PH101, lactosa secada por aspersion, y Ac-di-Sol, se pasaron a traves de un tamiz adecuado, y se mezclaron en una mezcladora de tambor (de aproximadamente 100 a 300 rotaciones).

Esta mezcla se paso entonces a traves de un tamiz de un tamano de malla de aproximadamente 0.5 a 1.0 millmetro, 5 y se mezclo nuevamente (de aproximadamente 100 a 300 rotaciones).

De una manera similar, se agrego la cantidad requerida de estearato de magnesio tamizado al polvo a granel, y entonces se mezclo en el mismo recipiente de mezcla a aproximadamente 30 a 150 rotaciones.

Llenado:

Esta mezcla final se encapsula en capsulas utilizando un equipo automatizado. La proporcion en peso del relleno de 10 la capsula a las cubiertas de la capsula vacla es de 2:1.

Ejemplo 13: Capsulas Duras

Tabla 2 - Composicion de capsulas duras de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-

hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona

Ingrediente para el relleno de la capsula

% (peso/peso) para capsulas de 0.5 mg % (peso/peso) para capsulas de 5 mg % (peso/peso) para capsulas de 10 mg

Sal de acetato de (R)-7-(2-(1-(4- butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il- amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi- benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona

0.60 5.95 11.90

CA-HYD-Fosfato

71.90 66.55 60.60

Avicel PH101

20.00 20.00 20.00

Almidon de carboxi-metilo de sodio

6.00 6.00 6.00

Aerosil 200

0.50 0.50 0.50

Estearato de magnesio

1.00 1.00 1.00

15 Las capsulas con la composicion mostrada en la Tabla 2 se pueden preparar siguiendo el proceso descrito en el Ejemplo 12.

Ejemplo 14: Capsulas Duras

Tabla 3- Composicion de capsulas de gelatina duras de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-

hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona

Ingrediente para el relleno de la

% (peso/peso) para % (peso/peso) para % (peso/peso) para

capsula

capsulas de 0.5 mg capsulas de 5 mg capsulas de 10 mg

5

10

15

20

25

Ingrediente para el relleno de la capsula

% (peso/peso) para capsulas de 0.5 mg % (peso/peso) para capsulas de 5 mg % (peso/peso) para capsulas de 10 mg

Sal de acetato de (R)-7-(2-(1-(4- butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il- amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi- benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona

0.60 5.95 11.90

Manitol DC

64.40 59.05 53.10

STA-RX 1500

23.00 23.00 23.00

Hidroxi-propil-celulosa de baja sustitucion

10.00 10.00 10.00

Talco

1.00 1.00 1.00

Estearato de magnesio

1.00 1.00 1.00

Las capsulas con la composicion mostrada en la Tabla 3 se pueden preparar siguiendo el proceso descrito en el Ejemplo 12.

Ejemplo 15: Tabletas

Las formulaciones enlistadas en el Ejemplo 14 (Tabla 3) tambien se pueden convertir en tabletas con concentraciones de dosificacion de 0.5 miligramos, 5 miligramos y 10 miligramos, siguiendo el proceso descrito a continuacion.

Preparacion de premezcla:

La sal de acetato de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol- 2(3H)-ona con una porcion de Manitol DC y el Talco, se pasan a traves de un tamiz adecuado, y se mezclan en una mezcladora de tambor (de aproximadamente 100 a 300 rotaciones).

Preparacion de la mezcla final:

La premezcla anterior y la cantidad restante de Manitol DC, STA-RX 1,500, e hidroxi-propil-celulosa de baja sustitucion, se pasan a traves de un tamiz adecuado, y se mezclan en una mezcladora de tambor (de aproximadamente 100 a 300 rotaciones). Esta mezcla entonces se tamiza a traves de un tamiz de un tamano de malla de aproximadamente 0.5 a 1.0 millmetro, y se mezcla nuevamente (de aproximadamente 100 a 300 rotaciones). Finalmente, el estearato de magnesio tamizado a traves de un tamiz manual hasta un tamano de malla de aproximadamente 0.5 a 1.0 millmetro, se mezcla con la mezcla anterior en una mezcladora de tambor (de aproximadamente 30 a 150 rotaciones).

Compresion:

La mezcla final anterior se comprime hasta obtener un nucleo de tableta de aproximadamente 100 miligramos, utilizando la herramienta especlfica de la dosificacion (por ejemplo, de aproximadamente 6 millmetros, redonda, curva).

Ejemplo 16: Tabletas

Tabla 4 - Composicion de tabletas de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-

benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona

Ingrediente para nucleos de tabletas

% (peso/peso) para capsulas de 0.5 mg % (peso/peso) para capsulas de 5 mg % (peso/peso) para capsulas de 10 mg

Sal de acetato de (R)-7-(2-(1-(4- butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il- amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi- benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona

0.60 5.95 11.90

Avicel PH101

65.40 60.05 54.10

Lactosa secada por aspersion

20.00 20.00 20.00

HP-Celulosa 100

4.00 4.00 4.00

Ac-di-Sol

8.00 8.00 8.00

Aerosil 200

1.00 1.00 1.00

Estearato de magnesio

1.00 1.00 1.00

Se pueden preparar tabletas, cada una comprendiendo, como ingrediente activo, 0.5, 5 o 10 miligramos de la (R)-7- (2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona (equivalente a 5 0.60, 5.95 y 11.90 miligramos, respectivamente, de la sal de acetato de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-

2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona) con la composicion enlistada en la Tabla 4, como sigue:

Preparacion de premezcla:

La sal de acetato de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol- 10 2(3H)-ona con una porcion de lactosa secada por aspersion y Aerosil 200 (por ejemplo, aproximadamente al 0.5 %),

se pasan a traves de un tamiz adecuado, y se mezclan en una mezcladora de tambor (de aproximadamente 100 a 300 rotaciones).

La premezcla anterior y la cantidad restante de lactosa secada por aspersion, Avicel PH101, HP-Celulosa 100 y Ac- di-Sol (por ejemplo, aproximadamente al 4.0 %), se pasan a traves de un tamiz adecuado, y se mezclan en una 15 mezcladora de tambor (de aproximadamente 100 a 300 rotaciones).

Esta mezcla se pasa a traves de un tamiz de un tamano de malla de aproximadamente 0.5 a 1.0 millmetro, y se mezcla nuevamente (de aproximadamente 100 a 300 rotaciones).

De una manera similar, se agrega la cantidad requerida de estearato de magnesio tamizado (por ejemplo, aproximadamente al 0.5 %) al polvo a granel, y entonces se mezcla en la misma mezcladora de tambor (de 20 aproximadamente 30 a 150 rotaciones).

Compactacion con Rodillos:

La mezcla anterior se compacta con rodillos utilizando un equipo de compactacion. El material compactado se muele a traves de un tamiz de un tamano de malla de aproximadamente 0.5 a 1.0 millmetro utilizando un equipo de molienda.

Preparacion de la mezcla final:

La premezcla anterior y la cantidad de Ac-di-Sol (por ejemplo, aproximadamente al 4.0 %), y Aerosil 200 (por ejemplo, aproximadamente al 0.5 %), se pasan a traves de un tamiz adecuado mezclandose en una mezcladora de tambor (de aproximadamente 100 a 300 rotaciones).

5 El estearato de magnesio restante tamizado a traves de un tamiz manual de un tamano de malla de

aproximadamente 0.5 a 1.0 millmetro, se mezcla con la mezcla final en una mezcladora de tambor (de aproximadamente 30 a 150 rotaciones).

Compresion:

La mezcla final anterior se comprime en una prensa giratoria hasta obtener los nucleos del peso apropiado (por 10 ejemplo, de 100 miligramos), utilizando la herramienta especlfica de la dosificacion (por ejemplo, de

aproximadamente 6 millmetros, redondos, curvos).

Ejemplo 17: Tabletas

Tabla 5 - Composicion de tabletas de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-

benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona

Ingrediente para nucleos de tabletas

% (peso/peso) para capsulas de 0.5 mg % (peso/peso) para capsulas de 5 mg % (peso/peso) para capsulas de 10 mg

Sal de acetato de (R)-7-(2-(1-(4- butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il- amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi- benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona

0.60 5.95 11.90

Manitol DC

58.40 53.05 47.10

STA-RX 1500

23.00 23.00 23.00

HP-Celulosa de baja sustitucion

10.00 10.00 10.00

Kollidon VA64

6.00 6.00 6.00

Talco

1.00 1.00 1.00

Estearato de magnesio

1.00 1.00 1.00

5

10

15

20

25

30

Proceso de preparacion:

Preparacion de premezcla:

La sal de acetato de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol- 2(3H)-ona con una porcion de Manitol DC y Talco (por ejemplo, aproximadamente al 0.5 %), se pasan a traves de un tamiz adecuado, y se mezclan en una mezcladora de tambor (de aproximadamente 100 a 300 rotaciones).

La premezcla anterior y la cantidad restante de Manitol DC, STA-RX 1,500, Kollidon VA64, y una porcion de HP- Celulosa de baja sustitucion (por ejemplo, aproximadamente al 5.0 %), se pasan a traves de un tamiz adecuado, y se mezclan en una mezcladora de tambor (de aproximadamente 100 a 300 rotaciones).

Esta mezcla se pasa a traves de un tamiz de un tamano de malla de aproximadamente 0.5 a 1.0 millmetro, y se mezcla nuevamente (de aproximadamente 100 a 300 rotaciones).

De una manera similar, se agrega la cantidad requerida de estearato de magnesio tamizado (por ejemplo, aproximadamente al 0.5 %) al polvo a granel, y entonces se mezcla en la misma mezcladora de tambor (de aproximadamente 30 a 150 rotaciones).

Compactacion con rodillos:

La mezcla anterior se compacta con rodillos utilizando un equipo de compactacion. El material compactado se muele a traves de un tamiz de un tamano de malla de aproximadamente 0.5 a 1.0 millmetro, utilizando un equipo de molienda.

Preparacion de la mezcla final:

La premezcla anterior y la cantidad restante de hidroxi-propil-celulosa de baja sustitucion (por ejemplo, aproximadamente al 5.0 %), y talco (por ejemplo, aproximadamente al 0.5 %), se pasan a traves de un tamiz adecuado con mezcla en una mezcladora de tambor (de aproximadamente 100 a 300 rotaciones).

El estearato de magnesio restante tamizado a traves de un tamiz manual de un tamano de malla de aproximadamente 0.5 a 1.0 millmetro, se mezcla con la mezcla final en una mezcladora de tambor (de aproximadamente 30 a 150 rotaciones).

Compresion:

La mezcla final anterior se comprime en una prensa giratoria hasta obtener los nucleos del peso apropiado (por ejemplo, de 100 miligramos), utilizando la herramienta especifica de la dosificacion (por ejemplo, de aproximadamente 6 milimetros, redondos, curvos).

Claims (14)

1. 5

   10

   15

   20

   25

   30

   35

   40

   REIVINDICACIONES

   1. Una composicion farmaceutica en una forma de dosificacion oral solida, la cual comprende del 0.01 al 15 % (peso/peso) de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)- ona y uno o mas excipientes farmaceuticamente aceptables, en donde la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan- 2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona esta en una forma de sal de acetato.
2. 2. Una composicion farmaceutica de acuerdo con la reivindicacion 1, la cual comprende del 0.01 al 5 % (peso/peso) de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona.
3. 3. Una composicion farmaceutica de acuerdo con la reivindicacion 1 o 2, la cual comprende del 0.1 al 1 % (peso/peso) de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)- ona.
4. 4. Una composicion farmaceutica de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, la cual esta en la forma de una tableta o de una capsula.
5. 5. Composicion farmaceutica de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde el uno o mas excipientes se selecciona a partir de un agente de relleno, lubricante, deslizante, desintegrante y aglutinante.
6. 6. Composicion farmaceutica de acuerdo con la reivindicacion 5, en donde el agente de relleno esta presente en una cantidad del 15 al 90 % (peso/peso).
7. 7. Composicion farmaceutica de acuerdo con la reivindicacion 5 o 6, en donde el lubricante esta presente en una cantidad del 0.1 al 1 % (peso/peso).
8. 8. Composicion farmaceutica de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 5 a 7, en donde el deslizante esta presente en una cantidad del 0.1 al 1 % (peso/peso).
9. 9. Composicion farmaceutica de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 5 a 8, en donde el aglutinante esta presente en una cantidad del 1 al 20 % (peso/peso).
10. 10. Composicion farmaceutica de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 5 a 9, en donde el desintegrante esta presente en una cantidad del 1 al 20 % (peso/peso).
11. 11. Un metodo para la elaboracion de una composicion farmaceutica adecuada para su administracion oral que comprende la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)- ona, el cual comprende los pasos de:

    a) mezclar la sal de acetato de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo- [d]-tiazol-2(3H)-ona con un agente de relleno y un deslizante para formar una premezcla;

    b) mezclar la premezcla obtenida en el paso a) con un agente de relleno adicional y un desintegrante para obtener un polvo;

    c) agregar un lubricante al polvo obtenido en el paso b), para obtener una mezcla final; y

    d) procesar la mezcla final obtenida en el paso c), en una composicion farmaceutica adecuada para su administracion oral.
12. 12. Un metodo de acuerdo con la reivindicacion 11, en donde la sal de acetato de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2- metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona se utiliza en una cantidad suficiente para proporcionar del 0.01 al 15 % (peso/peso) de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5- hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona en la composicion farmaceutica.
13. 13. Una composicion farmaceutica en una forma de dosificacion oral solida, la cual comprende del 0.01 al 15 % (peso/peso) de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)- ona y uno o mas excipientes farmaceuticamente aceptables, en donde la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan- 2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona esta en una forma de sal de acetato, para utilizarse como un medicamento.
14. 14. Una composicion farmaceutica en una forma de dosificacion oral solida, la cual comprende del 0.01 al 15 %

    (peso/peso) de la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan-2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)- ona y uno o mas excipientes farmaceuticamente aceptables, en donde la (R)-7-(2-(1-(4-butoxi-fenil)-2-metil-propan- 2-il-amino)-1-hidroxi-etil)-5-hidroxi-benzo-[d]-tiazol-2(3H)-ona esta en una forma de sal de acetato, para utilizarse en el tratamiento o en la prevencion de enfermedades de consuncion muscular

    5 15. Una composicion farmaceutica en una forma de dosificacion oral solida de acuerdo con la reivindicacion 14, para

    su uso en el tratamiento o prevencion de distrofia muscular, atrofia relacionada con desuso, caquexia o sarcopenia.