ES2616042T3 - Pirazolopiridinas sustituidas con bencilo y su uso - Google Patents

Abstract

Compuesto con el nombre sistemático de 2-[5-fluoro-1-(2-fluorobencil)-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3-il]-5-metil-5- (trifluorometil)-4-[(3,3,3-trifluoropropil)amino]-5,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-6-ona y la fórmula estructural (I)**Fórmula** así como sus sales, solvatos y solvatos de las sales.

Description

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DESCRIPCION

Pirazolopiridinas sustituidas con bencilo y su uso

La presente solicitud se refiere a nuevas pirazolopiridinas sustituidas con bencilo, a procedimientos para su preparacion, a su uso solas o en combinaciones para el tratamiento y/o la profilaxis de enfermedades asf como a su uso para la preparacion de farmacos para el tratamiento y/o la profilaxis de enfermedades, en particular para el tratamiento y/o la profilaxis de enfermedades cardiovasculares.

Uno de los sistemas de transmision celular mas importantes en celulas de mairnferos es el guanosm monofosfato cfclico (GMPc). Junto con el monoxido de nitrogeno (NO), que se libera del endotelio y transmite senales hormonales y mecanicas, forma el sistema NO/GMPc. Las guanilato ciclasas catalizan la biosmtesis de GMPc a partir de guanosm trifosfato (GTP). Los representantes hasta ahora conocidos de esta familia pueden dividirse en dos grupos tanto segun las caractensticas estructurales como segun el tipo de ligandos: las guanilato ciclasas individuales que pueden estimularse mediante peptidos natriureticos y las guanilato ciclasas solubles que pueden estimularse mediante NO. Las guanilato ciclasas solubles estan compuestas por dos subunidades y contienen lo mas probablemente un grupo hemo por heterodfmero, que es una parte del centro regulador. Esto tiene un significado esencial para el mecanismo de activacion. NO puede unirse al atomo de hierro del grupo hemo y asf se eleva claramente la actividad de la enzima. Por el contrario, las preparaciones libres de grupo hemo no pueden estimularse mediante NO. Tambien el monoxido de carbono (CO) puede unirse al atomo central de hierro del grupo hemo, siendo claramente mas reducida la estimulacion mediante CO que la mediante NO.

Mediante la formacion de GMPc y la regulacion de las fosfodiesterasas, los canales internos y las protemas cinasas que resulta de ello, la guanilato ciclasa desempena un papel decisivo en distintos procesos fisiologicos, particularmente en la relajacion y la proliferacion de celulas del musculo liso, la adhesion y agregacion plaquetaria, la transmision de senales neuronales asf como en enfermedades que se basan en una alteracion de los procesos mencionados anteriormente. En condiciones fisiopatologicas, el sistema NO/GMPc puede estar suprimido, lo que puede conducir por ejemplo a hipertension, una activacion de plaquetas, un aumento de la proliferacion celular, disfuncion endotelial, arteriosclerosis, angina de pecho, insuficiencia cardiaca, infarto de miocardio, trombosis, apoplejfa y disfuncion sexual.

Una posibilidad de tratamiento independiente de NO, que tenga como meta la influencia de la ruta de senalizacion de GMPc en organismos, para enfermedades de este tipo es un planteamiento prometedor debido a los efectos secundarios bajos y a la alta eficacia que ha de esperarse.

Para la estimulacion terapeutica de la guanilato ciclasa soluble se han usado hasta ahora exclusivamente compuestos tales como nitratos organicos, cuya accion se basa en NO. Este se forma mediante byconversion y activa la guanilato ciclasa soluble mediante el agarre al atomo central de hierro del grupo hemo. Ademas de los efectos secundarios, el desarrollo de tolerancia pertenece a los inconvenientes decisivos de este modo de tratamiento.

En los ultimos anos se han descrito algunas sustancias que estimulan la guanilato ciclasa soluble directamente, es decir sin liberacion previa de NO, tal como por ejemplo 3-(5'-hidroxi-metil-2'-furil)-1-bencilindazol [YC-1; Wu et al., Blood 84 (1994), 4226; Mulsch et al., Brit. J. Pharmacol. 120 (1997), 681]. A los estimuladores mas nuevos de la guanilato ciclasa soluble pertenecen entre otros BAY 41-2272, BAY 41-8543 y Riociguat (BAY 63-2521) (vease por ejemplo Stasch J.-P. et al., Nat. Rev. Drug Disc. 2006; 5: 755-768; Stasch J.-P. et al., ChemMedChem 2009; 4: 853865. Stasch J.-P. et al., Circulation 2011; 123: 2263-2273).

Como estimuladores de la guanilato ciclasa soluble se divulgan en los documentos WO 00/06568 y WO 00/06569 derivados de pirazol condensados y en el documento WO 03/095451 3-pirimidinil-pirazolopiridinas sustituidas con carbamato. Las 3-pirimidinil-pirazolopiridinas con sustituyentes de fenilamida se describen en E. M. Becker et al., BMC Pharmacology 1 (13), 2001. El documento WO 2004/009590 describe pirazolopiridinas con 4-aminopirimidinas sustituidas para el tratamiento de enfermedades del SNC. El documento WO 2010/065275 y el documento WO 2011/149921 divulgan pirrolo- y dihidropirido-pirimidinas sustituidas como activadores de GCs. Como estimuladores de GCs se describen en el documento WO 2012/004259 aminopirimidinas condensadas, en los documentos WO 2012/004258, WO 2013/004785 asf como WO 2013/030288 pirimidinas condensadas y triazinas. El documento WO 2012/28647 divulga pirazolopiridinas con distintos azaheterociclos para el tratamiento de enfermedades cardiovasculares.

El objetivo de la presente invencion era la facilitacion de nuevas sustancias que actuaran como estimuladores de la guanilato ciclasa soluble y presentaran un perfil terapeutico igual o mejorado en comparacion con los compuestos conocidos por el estado de la tecnica, tal como por ejemplo en cuanto a sus propiedades in-vivo, tal como por ejemplo su comportamiento farmacocinetico y farmacodinamico y/o su perfil metabolico y/o su relacion dosis-accion y/o su perfil de efectos secundarios.

Es objeto de la presente invencion el compuesto con el nombre sistematico 2-[5-fluoro-1-(2-fluorobencil)-1H- pirazolo[3,4-b]piridin-3-il]-5-metil-5-(trifluorometil)-4-[(3,3,3-trifluoropropil)amino]-5,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-d]pirimidin- 6-ona y la formula estructural (I)

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asi como sus sales, solvatos y solvatos de las sales. Los compuestos de acuerdo con la invention son los compuestos de formula (I), (I-A) y (I-B) y sus sales, solvatos y solvatos de las sales, los compuestos comprendidos por la formula (I), (I-A) y (I-B) de las formulas mencionadas a continuation y sus sales, solvatos y solvatos de las sales asi como los compuestos comprendidos por la formula (I), (I-A) y (I-B), mencionados a continuacion como ejemplos de realization y sus sales, solvatos y solvatos de las sales, en tanto que en caso de los compuestos mencionados a continuacion, comprendidos por la formula (I), (I-A) y (I-B) no se trate ya de sales, solvatos y solvatos de las sales.

Como sales se prefieren en el contexto de la presente invencion sales fisiologicamente inocuas de los compuestos de acuerdo con la invencion. Estan comprendidas tambien sales que no son adecuadas por si mismas para las aplicaciones farmaceuticas, sin embargo por ejemplo pueden usarse para el aislamiento o la purification de los compuestos de acuerdo con la invencion.

Las sales fisiologicamente inocuas de los compuestos de acuerdo con la invencion comprenden sales de adicion de acido de acidos minerales, acidos carboxilicos y acidos sulfonicos, por ejemplo sales del acido clorhidrico, acido bromhidrico, acido sulfurico, acido fosforico, acido metanosulfonico, acido etanosulfonico, acido toluenosulfonico, acido bencenosulfonico, acido naftalenodisulfonico, acido formico, acido acetico, acido trifluoroacetico, acido propionico, acido lactico, acido tartarico, acido malico, acido titrico, acido fumarico, acido maleico y acido benzoico.

Las sales fisiologicamente inocuas de los compuestos de acuerdo con la invencion comprenden tambien sales de bases habituales, tales como a modo de ejemplo y preferentemente sales de metal alcalino (por ejemplo sales de sodio y potasio), sales alcalinoterreas (por ejemplo sales de calcio y magnesio) y sales de amonio, derivadas de amomaco o aminas organicas con 1 a 16 atomos de C, tal como a modo de ejemplo y preferentemente etilamina, dietilamina, trietilamina, etildiisopropilamina, monoetanolamina, dietanolamina, trietanolamina, diciclohexilamina, dimetilaminoetanol, procama, dibencilamina, N-metilmorfolina, arginina, lisina, etilendiamina y N-metilpiperidina.

Como solvatos se denominan, en el contexto de la invencion, aquellas formas de los compuestos de acuerdo con la invencion que forman un complejo en estado solido o Kquido mediante coordination con moleculas de disolvente. Los hidratos son una forma especial de los solvatos, en los que se realiza la coordinacion con agua. Como solvatos se prefieren, en el contexto de la presente invencion, hidratos.

Los compuestos de acuerdo con la invencion pueden existir en distintas formas estereoisomericas, es decir en forma de isomeros de configuration. La presente invencion comprende, por tanto, los enantiomeros y sus mezclas. De tales mezclas de enantiomeros pueden aislarse de manera conocida las partes constituyentes estereoisomericamente unitarias; preferentemente, para esto se usan procedimientos cromatograficos, en particular la cromatograffa HPLC en fase quiral.

Siempre que los compuestos de acuerdo con la invencion puedan aparecer en formas tautomericas, la presente invencion comprende todas las formas tautomericas.

La presente invencion tambien comprende todas las variantes isotopicas adecuadas de los compuestos de acuerdo con la invencion. Por una variante isotopica de un compuesto de acuerdo con la invencion se entiende a este respecto un compuesto en el que al menos un atomo dentro del compuesto de acuerdo con la invencion esta intercambiado por otro atomo del mismo numero atomico, pero con una masa atomica distinta a la masa atomica habitual o predominantemente presente en la naturaleza. Ejemplos de isotopos que pueden incorporarse en un compuesto de acuerdo con la invencion son aquellos de hidrogeno, carbono, nitrogeno, oxigeno, fosforo, azufre, fluor, cloro, bromo y yodo, tales como 2H (deuterio), 3H (tritio), 13C, 14C, 15N, 17O, 18O, 32P, 33P, 33S, 34S, 35S, 36S, 18F, Cl, Br, I, I, I y I. Determinadas variantes isotopicas de un compuesto de acuerdo con la invencion, tal

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como en particular aquellas en las que estan incorporados uno o varios isotopos radiactivos, pueden ser de utilidad, por ejemplo, para la investigation del mecanismo de action o la distribution de principio activo en el organismo; debido a la capacidad de preparaci0n y de4detecci0n comparativamente fad^ para esto son en particular adecuados compuestos marcados con isotopos H o C. Ademas, la incorporation de isotopos como, por ejemplo, de deuterio, puede conducir a determinadas ventajas terapeuticas como consecuencia de una mayor estabilidad metabolica del compuesto como, por ejemplo, una prolongation de la semivida en el organismo o una reduction de la dosis activa necesaria; por tanto, tales modificaciones de los compuestos de acuerdo con la invention tambien pueden representar eventualmente una forma de realization preferente de la presente invencion. Las variantes isotopicas de los compuestos de acuerdo con la invencion pueden prepararse segun los procedimientos conocidos por el experto, asi, por ejemplo, segun los procedimientos descritos mas adelante y las instrucciones reflejadas en los ejemplos de realizacion, usandose modificaciones isotopicas correspondientes de los reactivos y/o compuestos de partida respectivos.

En el sentido de la presente invencion comprende el termino “tratamiento” o “tratar” una inhibition, retraso, detention, alivio, atenuacion, limitation, reduccion, supresion, contention o curacion de una enfermedad, de una dolencia, de una afeccion, de una lesion o de un trastorno de la salud, del desarrollo, del transcurso o del progreso de tales estados y/o de los sintomas de tales estados. El termino “terapia” se entiende segun esto como sinonimo del termino “tratamiento”.

Los terminos “prevencion”, “profilaxis” o “continencia” se usan en el contexto de la presente invencion de manera sinonima y designan la evitacion o reduccion del riesgo de contraer, padecer, sufrir o tener una enfermedad, una dolencia, una afeccion, una lesion o un trastorno de la salud, un desarrollo o un progreso de tales estados y/o los sintomas de tales estados.

El tratamiento o la prevention de una enfermedad, de una dolencia, de una afeccion, de una lesion o de un trastorno de la salud pueden realizarse de manera parcial o completa.

Se prefiere en el contexto de la presente invencion el enantiomero del compuesto (I) con el nombre sistematico (5R)- 2-[5-fluoro-1-(2-fluorobencil)-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3-il]-5-metil-5-(trifluorometil)-4-[(3,3,3-trifluoropropil)amino]-5,7- dihidro-6H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-6-ona y la formula estructural (I-A)

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asi como sus sales, solvatos y solvatos de las sales.

Se prefiere en el contexto de la presente invencion el enantiomero del compuesto (I) con el nombre sistematico (5S)- 2-[5-fluoro-1-(2-fluorobencil)-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3-il]-5-metil-5-(trifluorometil)-4-[(3,3,3-trifluoropropil)amino]-5,7- dihidro-6H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-6-ona y la formula estructural (I-B)

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asf como sus sales, solvatos y solvatos de las sales.

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Otro objeto de la invencion es un procedimiento para la preparacion de los compuestos de formula (I) de acuerdo con la invencion, caracterizado porque se convierte un compuesto de formula (II)

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en un disolvente inerte con nitrito de iso-pentilo y un equivalente de halogeno en un compuesto de formula (III)

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y este se hace reaccionar a continuation en un disolvente inerte eventualmente en presencia de una base adecuada con un compuesto de formula (IV)

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5 para dar el compuesto de formula (I)

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y eventualmente el compuesto de formula (I) resultante se convierte eventualmente con los correspondientes (i) disolventes y/o (ii) acidos o bases en sus solvatos, sales y/o solvatos de las sales.

La etapa de procedimiento (II) ^ (III) se realiza con o sin disolvente. Como disolventes son adecuados todos los 10 disolventes organicos que son inertes en las condiciones de reaction. El disolvente preferente es dioxano.

La reaccion (II) ^ (III) se realiza en general en un intervalo de temperatura de +20 °C a +100 °C, preferentemente en el intervalo de +50 °C a +100 °C, eventualmente en un microondas. La reaccion puede realizarse a presion normal, elevada o reducida (por ejemplo en el intervalo de 50 kPa a 500 kPa). En general se trabaja a presion normal.

Como fuente de halogeno en la reaccion (II) ^ (III) son adecuados por ejemplo diyodometano, una mezcla de 15 yoduro de cesio, yodo y yoduro de cobre-(I) o bromuro de cobre-(II).

Los disolventes inertes para la etapa de procedimiento (III) + (IV) ^ (I) son por ejemplo eteres tales como dietileter, dioxano, dimetoxietano, tetrahidrofurano, glicoldimetileter o dietilenglicoldimetileter, hidrocarburos tales como benceno, xileno, tolueno, hexano, ciclohexano o fracciones de petroleo u otros disolventes tales como dimetilformamida (DMF), dimetilsulfoxido (DMSO), N,N'-dimetilpropilenurea (DMPU), N-metilpirrolidona (NMP), 5 piridina, acetonitrilo o sulfolano. Tambien es posible usar mezclas de los disolventes mencionados. Se prefiere NMP.

La reaccion (III) + (IV) ^ (I) se realiza en general en un intervalo de temperatura von +20 °C a +200 °C, preferentemente a de +150 °C a +200 °C, preferentemente en un microondas. La reaccion puede realizarse a presion normal, elevada o reducida (por ejemplo de 50 kPa a 500 kPa.

El procedimiento de preparacion descrito puede ilustrarse mediante el siguiente esquema de smtesis (esquema 1):

10 Esquema 1

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[a): diyodometano, nitrito de iso-pentilo; b): NMP, microondas, 150 °C].

Los compuestos de formula (II) pueden prepararse, haciendo reaccionar un compuesto de formula (V)

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en un disolvente inerte en presencia de una base adecuada con un compuesto de formula (VI)

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para dar el compuesto de formula (II)

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5 Los disolventes inertes para la etapa de procedimiento (V) + (VI) ^ (II) son por ejemplo alcoholes tales como metanol, etanol, n-propanol, isopropanol, n-butanol o terc-butanol, eteres tales como dietileter, dioxano, dimetoxietano, tetrahidrofurano, glicoldimetileter o dietilenglicoldimetileter, hidrocarburos tales como benceno, xileno, tolueno, hexano, ciclohexano o fracciones de petroleo u otros disolventes tales como dimetilformamida (DMF), dimetilsulfoxido (DMSO), W,W'-dimetilpropilenurea (DMPU), /V-metilpirrolidona (NMP), piridina, acetonitrilo, sulfolano 10 o tambien agua. Tambien es posible usar mezclas de los disolventes mencionados. Se prefiere terc-butanol.

Las bases adecuadas para la etapa de procedimiento (V) + (VI) ^ (II) son hidroxidos alcalinos tales como por ejemplo hidroxido de litio, sodio o potasio, carbonatos alcalinos tales como carbonato de litio, sodio, potasio o cesio, hidrogenocarbonatos alcalinos tales como hidrogenocarbonato de sodio o potasio, alcoholatos alcalinos tales como metanolato de sodio o de potasio, etanolato de sodio o de potasio o terc-butilato de potasio, o aminas organicas 15 tales como trietilamina, diisopropiletilamina, piridina, 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno (DBU) o 1,5- diazabiciclo[4.3.0]non-5-eno (DBN). Se prefiere terc-butilato de potasio.

La reaccion (V) + (VI) ^ (II) se realiza en general en un intervalo de temperatura de +20 °C a +150 °C, preferentemente a de +75 °C a +100 °C, eventualmente en un microondas. La reaccion puede realizarse a presion normal, elevada o reducida (por ejemplo de 50 kPa a 500 kPa). En general se trabaja a presion normal.

20 El procedimiento de preparation descrito anteriormente puede ilustrarse a modo de ejemplo mediante el siguiente esquema de sintesis (esquema 3):

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Esquema 3

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[a): KOt-Bu, terc-butanol].

El compuesto de formula (VI) puede prepararse, haciendo reaccionar un compuesto de formula (VII)

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en un disolvente inerte con haluro de metilmagnesio.

El compuesto de formula (VII) se conoce en la bibliografia (vease por ejemplo Journal of Fluorine Chemistry, 1991, vol. 51, n.° 3, pag. 323 -334.).

El compuesto de formula (IV) puede obtenerse comercialmente, se conoce en la bibliografia o puede prepararse en analogia a procedimientos conocidos en la bibliografia.

Los compuestos de acuerdo con la invention actuan como potentes estimuladores de la guanilato ciclasa soluble, tienen valiosas propiedades farmacologicas y presentan un perfil terapeutico mejorado, tal como por ejemplo en cuanto a sus propiedades in-vivo y/o su comportamiento farmacocinetico y/o perfil metabolico. Son adecuados, por tanto, para el tratamiento y/o la profilaxis de enfermedades en seres humanos y animales.

Los compuestos de acuerdo con la invencion causan una relajacion vascular y una inhibition de la agregacion de los trombocitos y conducen a una reduction de la presion sangumea asi como a un aumento del flujo sangumeo coronario. Estos efectos estan mediados por una directa estimulacion de la guanilato ciclasa soluble y un aumento intracelular de GMPc. Ademas, el compuesto de acuerdo con la invencion refuerza el efecto de sustancias que aumentan el nivel de GMPc tales como, por ejemplo, EDRF (factor relajante derivado de endotelio), donadores de NO, protoporfirina IX, acido araquidonico o derivados de fenilhidrazina.

Los compuestos de acuerdo con la invencion son adecuados para el tratamiento y/o la profilaxis de enfermedades cardiovasculares, pulmonares, tromboembolicas y fibroticas.

Por tanto, los compuestos de acuerdo con la invencion pueden usarse en farmacos para el tratamiento y/o la profilaxis de enfermedades cardiovasculares tales como, por ejemplo, hipertension, hipertension resistente, insuficiencia cardiaca aguda y cronica, cardiopafia coronaria, angina de pecho estable e inestable, enfermedades vasculares perifericas y cardiacas, arritmias, alteraciones del ritmo de las auriculas y los ventnculos asi como bloqueos aunculoventriculares tales como, por ejemplo, bloqueos aunculo-ventriculares de grado I-III (bloqueo AB I- III), taquiarritmia supraventricular, fibrilacion auricular, aleteo auricular, fibrilacion ventricular, aleteo ventricular, taquiarritmia ventricular, taquicardia de Torsade de pointes, extrasistoles de la auricula y del ventnculo, extrasistoles de la union AV, smdrome del seno enfermo, smcopes, taquicardia por reentrada de nodulo AV, smdrome de Wolff- Parkinson-White, smdrome coronario agudo (ACS), cardiopafias autoinmunitarias (pericarditis, endocarditis, valvulitis, aortitis, cardiomiopafias), choque tal como choque cardiogenico, choque septico y choque anafilactico, aneurismas, cardiomiopafia de boxeador (contraccion ventricular prematura, premature ventricular contraction

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(PVC)), para el tratamiento y/o la profilaxis de enfermedades tromboembolicas e isquemias tales como isquemia de miocardio, infarto de miocardio, apop^a, hipertrofia cardiaca, ataques transitorios e isquemicos, preeclampsia, enfermedades cardiovasculares inflamatorias, espasmos de las arterias coronarias y arterias perifericas, formacion de edema tal como, por ejemplo, edema pulmonar, edema cerebral, edema renal o edema debido a insuficiencia cardiaca, alteraciones de la perfusion periferica, danos por reperfusion, trombosis arteriales y venosas, microalbuminuria, insuficiencia cardiaca, disfuncion endotelial, para evitar reestenosis como despues de terapias de trombolisis, angioplastias transluminales percutaneas (PTA), angioplastias coronarias transluminales (PTCA), trasplantes de corazon y operaciones de bypass asf como alteraciones micro y macrovasculares (vasculitis), nivel aumentado de fibrinogeno y LDL de baja densidad asf como un aumento de la concentracion de inhibidor de activador de plasminogeno 1 (PAI-1), as^ como para el tratamiento y/o la profilaxis de disfuncion erectil y disfuncion sexual femenina.

En el sentido de la presente invencion, la expresion insuficiencia cardiaca comprende formas de manifestacion tanto agudas como cronicas de la insuficiencia cardiaca, tal como tambien formas de la enfermedad espedficas o relacionadas, tales como insuficiencia cardiaca descompensada aguda, insuficiencia cardiaca derecha, insuficiencia cardiaca izquierda, insuficiencia global, cardiomiopatfa isquemica, cardiomiopatfa dilatada, cardiomiopatfa hipertrofica, cardiomiopatfa idiopatica, defectos cardiacos congenitos, insuficiencia cardiaca en defectos de las valvulas cardiacas, estenosis de la valvula mitral, insuficiencia de la valvula mitral, estenosis de la valvula aortica, insuficiencia de la valvula aortica, estenosis de la valvula tricuspide, insuficiencia de la valvula tricuspide, estenosis de la valvula pulmonar, insuficiencia de la valvula pulmonar, defectos combinados de las valvulas cardiacas, inflamacion del musculo cardiaco (miocarditis), miocarditis cronica, miocarditis aguda, miocarditis viral, insuficiencia cardiaca diabetica, cardiomiopatfa toxica por alcohol, enfermedades de almacenamiento cardiacas, insuficiencia cardiaca diastolica, asf como insuficiencia cardiaca sistolica y fases agudas del empeoramiento de una insuficiencia cardiaca cronica existente (worsening heart failure).

Ademas, el compuesto de acuerdo con la invencion puede usarse tambien para el tratamiento y/o la profilaxis de arteriosclerosis, alteraciones del metabolismo lipfdico, hipolipoproteinemias, dislipidemias, hipertrigliceridemias, hiperlipidemias, hipercolesterolemias, abetalipoproteinemia, sitosterolemia, xantomatosis, enfermedad de Tangier, adiposis (adiposidad), corpulencia (obesidad) y de hiperlipidemias combinadas asf como del smdrome metabolico.

Ademas, los compuestos de acuerdo con la invencion pueden usarse para el tratamiento y/o la profilaxis de fenomenos primarios y secundarios de Raynaud, de alteraciones de la microcirculacion, claudicacion, neuropatfas perifericas y del sistema autonomo, microangiopatfas diabeticas, retinopatfa diabetica, ulceras diabeticas en las extremidades, gangrena, smdrome de CREST, eritematosis, onicomicosis, enfermedades reumaticas asf como para favorecer la cicatrizacion.

Ademas, los compuestos de acuerdo con la invencion son adecuados para el tratamiento de enfermedades urologicas tales como, por ejemplo, smdrome prostatico benigno (BPS), hiperplasia benigna de prostata (BPH), aumento benigno de prostata (BPE), alteracion del vaciado de la vejiga (BOO), smdrome de vfas urinarias inferiores (LUTS, incluyendo el smdrome urologico felino (FUS)), enfermedades del sistema genitourinario incluyendo vejiga hiperactiva neurogena (OAB) e (IC), incontinencia (UI) tal como, por ejemplo, incontinencia mixta, de urgencia, por esfuerzo o paradojica (MUI, UUI, SUI, OUI), dolores pelvicos, enfermedades benignas y malignas de los organos del sistema genitourinario masculino y femenino.

Ademas, los compuestos de acuerdo con la invencion son adecuados para el tratamiento y/o la profilaxis de enfermedades renales, en particular de insuficiencia renal aguda y cronica, asf como de fallo renal agudo y cronico. En el sentido de la presente invencion, la expresion insuficiencia renal comprende formas tanto agudas como cronicas de manifestacion de la insuficiencia renal, al igual que enfermedades renales subyacentes o relacionadas tales como hipoperfusion renal, hipotorna intradialftica, uropatfa obstructiva, glomerulopatfas, glomerulonefritis, glomerulonefritis aguda, glomeruloesclerosis, enfermedades tubulointersticiales, enfermedades nefropaticas tales como enfermedad renal primaria y congenita, inflamacion renal, enfermedades renales inmunologicas tales como rechazo de trasplante renal, enfermedades renales inducidas por inmunocomplejos, nefropatfa inducida por sustancias toxicas, nefropatfa inducida por medios de contraste, nefropatfa diabetica y no diabetica, pielonefritis, quistes renales, nefroesclerosis, nefroesclerosis hipertensiva y smdrome nefrotico que pueden caracterizarse diagnosticamente, por ejemplo, mediante excrecion reducida de manera anomala de creatinina y/o agua, concentraciones elevadas en sangre de manera anomala de urea, nitrogeno, potasio y/o creatinina, actividad modificada de enzimas renales tales como, por ejemplo, glutamilsintetasa, osmolaridad de orina o cantidad de orina modificadas, microalbuminuria aumentada, macroalbuminuria, lesiones en glomerulos y arteriolas, dilatacion tubular, hiperfosfatemia y/o la necesidad de dialisis. La presente invencion comprende tambien el uso de los compuestos de acuerdo con la invencion para el tratamiento y/o la profilaxis de secuelas de una insuficiencia renal, tales como, por ejemplo, edema pulmonar, insuficiencia cardiaca, uremia, anemia, alteraciones electrolfticas (por ejemplo, hipercalcemia, hiponatremia) y alteraciones en el metabolismo oseo y de los hidratos de carbono.

Ademas, los compuestos de acuerdo con la invencion tambien son adecuados para el tratamiento y/o la profilaxis de enfermedades asmaticas, hipertension arterial pulmonar (PAH) y otras formas de la hipertension pulmonar (PH), que comprenden hipertension pulmonar asociada con enfermedad del ventnculo izquierdo, VIH, anemia de celulas falciformes, tromboembolias (CTEPH), sarcoidosis, EPOC o fibrosis pulmonar, de la enfermedad pulmonar

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obstructiva cronica (EPOC), del smdrome agudo de las vfas respiratorias (ARDS), de la lesion pulmonar aguda (ALI), de la deficiencia de alfa-1-antitripsina (AATD), de la fibrosis pulmonar, del enfisema pulmonar (por ejemplo, enfisema pulmonar inducido por humo de cigarrillos) y de la fibrosis qmstica (FQ).

Los compuestos descritos en la presente invencion representan tambien principios activos para combatir enfermedades en el sistema nervioso central que estan caracterizadas por alteraciones del sistema NO/GMPc. En particular son adecuados para mejorar la percepcion, el rendimiento de concentracion, el rendimiento de aprendizaje o el rendimiento de la memoria despues de alteraciones cognitivas, tales como aparecen en particular en situaciones/enfermedades/smdromes tales como “mild cognitive impairment’’ (alteracion cognitiva leve), alteraciones del aprendizaje y la memoria asociadas a la edad, perdidas de memoria asociadas a la edad, demencia vascular, traumatismo craneoencefalico, apoplejfa, demencia que aparece despues de apoplejfa (“post stroke dementia’’), traumatismo craneoencefalico post-traumatico, alteraciones generales de la concentracion, alteraciones de la concentracion en ninos con problemas de aprendizaje y memoria, enfermedad de Alzheimer, demencia con cuerpos de Lewy, demencia con degeneracion del lobulo frontal incluyendo el smdrome de Pick, enfermedad de Parkinson, paralisis nuclear progresiva, demencia con degeneracion corticobasal, esclerosis lateral amiotrofica (ELA), enfermedad de Huntington, desmielinizacion, esclerosis multiple, degeneracion talamica, demencia de Creutzfeld- Jacob, demencia por VIH, esquizofrenia con demencia o psicosis de Korsakoff. Tambien son adecuados para el tratamiento y/o la profilaxis de enfermedades del sistema nervioso central tales como estados de ansiedad, tension y depresion, disfunciones sexuales debidas al sistema nervioso central y alteraciones del sueno asf como para la regulacion de alteraciones patologicas de la ingestion de alimentos, fruitivos y sustancias adictivas.

Ademas, los compuestos de acuerdo con la invencion tambien son adecuados para la regulacion de la perfusion cerebral y representan agentes eficaces para combatir la migrana. Tambien son adecuados para la profilaxis y para combatir las consecuencias de acontecimientos de infarto cerebral (apoplejfa cerebral) tales como ictus, isquemias cerebrales y de traumatismo craneoencefalico. Asimismo, los compuestos de acuerdo con la invencion pueden usarse para combatir estados de dolor y acufenos.

Ademas, los compuestos de acuerdo con la invencion poseen efecto antiinflamatorio y, por tanto, pueden usarse como agentes antiinflamatorios para el tratamiento y/o la profilaxis de septicemia (SIRS), fallo multiorganico (MODS, MOF), enfermedades inflamatorias del rinon, inflamaciones intestinales cronicas (IBD, enfermedad de Crohn, UC), pancreatitis, peritonitis, enfermedades reumatoides, enfermedades cutaneas inflamatorias asf como enfermedades oculares inflamatorias.

Ademas, los compuestos de acuerdo con la invencion pueden usarse tambien para el tratamiento y/o la profilaxis de enfermedades autoinmunitarias.

Ademas, los compuestos de acuerdo con la invencion son adecuados para el tratamiento y/o la profilaxis de enfermedades fibroticas de los organos internos tales como, por ejemplo, del pulmon, del corazon, del rinon, de la medula osea y en particular del fngado, asf como de fibrosis dermatologicas y enfermedades fibroticas del ojo. En el sentido de la presente invencion, la expresion enfermedades fibroticas comprende en particular las siguientes expresiones fibrosis hepatica, cirrosis hepatica, fibrosis pulmonar, fibrosis endomiocardica, nefropatfa, glomerulonefritis, fibrosis renal intersticial, danos fibroticos como consecuencia de diabetes, fibrosis de la medula osea y enfermedades fibroticas similares, esclerodermia, morfea, queloides, formacion de cicatrices hipertroficas (tambien despues de intervenciones quirurgicas), nevus, retinopatfa diabetica, vitrorretinopatfa proliferativa y enfermedades del tejido conjuntivo (por ejemplo sarcoidosis).

Ademas, los compuestos de acuerdo con la invencion son adecuados para combatir la formacion post-quirurgica de cicatrices, por ejemplo, como consecuencia de operaciones de glaucoma.

Los compuestos de acuerdo con la invencion pueden usarse tambien cosmeticamente en piel que envejece y que cornifica.

Ademas, los compuestos de acuerdo con la invencion son adecuados para el tratamiento y/o la profilaxis de hepatitis, neoplasias, osteoporosis, glaucoma y gastroparesia.

Otro objeto de la presente invencion es el uso de los compuestos de acuerdo con la invencion para el tratamiento y/o la profilaxis de enfermedades, en particular de las enfermedades mencionadas anteriormente.

Otro objeto de la presente invencion son los compuestos de acuerdo con la invencion para su uso en un procedimiento para el tratamiento y/o la profilaxis de insuficiencia cardfaca, angina de pecho, hipertension, hipertension pulmonar, isquemias, enfermedades vasculares, insuficiencia renal, enfermedades tromboembolicas, enfermedades fibroticas y arteriosclerosis.

Otro objeto de la presente invencion es el uso de los compuestos de acuerdo con la invencion para la preparacion de un farmaco para el tratamiento y/o la profilaxis de enfermedades, en particular de las enfermedades mencionadas anteriormente.

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Otro objeto de la presente invencion es el uso de los compuestos de acuerdo con la invencion para la preparacion de un farmaco para el tratamiento y/o la profilaxis de insuficiencia cardfaca, angina de pecho, hipertension, hipertension pulmonar, isquemias, enfermedades vasculares, insuficiencia renal, enfermedades tromboembolicas, enfermedades fibroticas y arteriosclerosis.

Los compuestos de acuerdo con la invencion pueden usarse solos o en caso necesario en combinacion con otros principios activos. Otro objeto de la presente invencion son farmacos que contienen al menos uno de los compuestos de acuerdo con la invencion y uno o varios principios activos adicionales, en particular para el tratamiento y/o la profilaxis de las enfermedades mencionadas anteriormente. Como principios activos de combinacion adecuados se mencionan a modo de ejemplo y preferentemente:

• nitratos organicos y donadores de NO, tal como por ejemplo nitroprusiato de sodio, nitroglicerina, mononitrato de isosorbida, dinitrato de isosorbida, molsidomina o SIN-1, asf como NO inhalatorio;

• compuestos que inhiben la degradacion de guanosm monofosfato dclico (GMPc), tales como por ejemplo inhibidores de las fosfodiesterasas (PDE) 1, 2 y/o 5, particularmente inhibidores de la PDE 5 tales como sildenafilo, vardenafilo y tadalafilo;

• agentes de accion antitrombotica, a modo de ejemplo y preferentemente del grupo de los inhibidores de la agregacion de trombocitos, de los anticoagulantes o de las sustancias profibrinolfticas;

• principios activos que reducen la tension arterial, a modo de ejemplo y preferentemente del grupo de los antagonistas de calcio, antagonistas de angiotensina AII, inhibidores de ACE, antagonistas de endotelina, inhibidores de renina, bloqueadores de receptores alfa, bloqueadores de receptores beta, antagonistas de receptores mineralocorticoides asf como de los diureticos; y/o

• principios activos que modifican el metabolismo lipfdico, a modo de ejemplo y preferentemente del grupo de los agonistas de receptores tiroideos, inhibidores de la smtesis de colesterol tales como a modo de ejemplo y preferentemente inhibidores de la HMG-CoA-reductasa o de la smtesis de escualeno, de los inhibidores de ACAT, inhibidores de CETP, inhibidores de MTP, agonistas de PPAR-alfa, PPAR-gamma y/o PPAR-delta, inhibidores de la absorcion de colesterol, inhibidores de la lipasa, adsorbedores polimericos del acido biliar, inhibidores de la reabsorcion del acido biliar y antagonistas de lipoprotema(a).

Por agentes de accion antitrombotica se entiende preferentemente compuestos del grupo de los inhibidores de la agregacion de trombocitos, de los anticoagulantes o de las sustancias profibrinolfticas.

En una forma de realizacion preferente de la invencion se administran los compuestos de acuerdo con la invencion en combinacion con un inhibidor de la agregacion de trombocitos, tal como a modo de ejemplo y preferentemente aspirina, clopidogrel, ticlopidina o dipiridamol.

En una forma de realizacion preferente de la invencion se administran los compuestos de acuerdo con la invencion en combinacion con un inhibidor de trombina, tal como a modo de ejemplo y preferentemente ximelagatran, dabigatran, melagatran, bivalirudina o Clexane.

En una forma de realizacion preferente de la invencion se administran los compuestos de acuerdo con la invencion en combinacion con un antagonista de GRIib/MIa, tal como a modo de ejemplo y preferentemente tirofiban o abciximab.

En una forma de realizacion preferente de la invencion se administran los compuestos de acuerdo con la invencion en combinacion con un inhibidor del factor Xa, tal como a modo de ejemplo y preferentemente rivaroxaban (BAY 597939), edoxaban (DU-176b), apixaban, otamixaban, fidexaban, razaxaban, fondaparinux, idraparinux, RMD-3112, YM-150, KFA-1982, EMD-503982, MCM-17, MLN-1021, DX 9065a, DRC 906, JTV 803, SSR-126512 o SSR-128428.

En una forma de realizacion preferente de la invencion se administran los compuestos de acuerdo con la invencion en combinacion con heparina o un derivado de heparina de bajo peso molecular (LMW).

En una forma de realizacion preferente de la invencion se administran los compuestos de acuerdo con la invencion en combinacion con un antagonista de vitamina K, tal como, a modo de ejemplo y preferentemente, cumarina.

Ror agentes que reducen la presion sangumea se entiende, preferentemente, compuestos del grupo de los antagonistas de calcio, antagonistas de angiotensina II, inhibidores de ACE, antagonistas de endotelina, inhibidores de renina, bloqueadores de receptores alfa, bloqueadores de receptores beta, antagonistas del receptor de mineralocorticoides asf como de los diureticos.

En una forma de realizacion preferente de la invencion se administran los compuestos de acuerdo con la invencion en combinacion con un antagonista de calcio, tal como a modo de ejemplo y preferentemente nifedipino, amlodipino, verapamilo o diltiazem.

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En una forma de realizacion preferente de la invencion se administran los compuestos de acuerdo con la invencion en combinacion con un bloqueador de receptores alfa-1, tal como a modo de ejemplo y preferentemente prazosina.

En una forma de realizacion preferente de la invencion se administran los compuestos de acuerdo con la invencion en combinacion con un bloqueador de receptores beta, tal como a modo de ejemplo y preferentemente propranolol, atenolol, timolol, pindolol, alprenolol, oxprenolol, penbutolol, bupranolol, metipranolol, nadolol, mepindolol, carazalol, sotalol, metoprolol, betaxolol, celiprolol, bisoprolol, carteolol, esmolol, labetalol, carvedilol, adaprolol, landiolol, nebivolol, epanolol o bucindolol.

En una forma de realizacion preferente de la invencion se administran los compuestos de acuerdo con la invencion en combinacion con un antagonista de angiotensina AII, tal como a modo de ejemplo y preferentemente losartan, candesartan, valsartan, telmisartan o embursatan.

En una forma de realizacion preferente de la invencion se administran los compuestos de acuerdo con la invencion en combinacion con un inhibidor de ACE, tal como a modo de ejemplo y preferentemente enalaprilo, captoprilo, lisinoprilo, ramiprilo, delaprilo, fosinoprilo, quinoprilo, perindoprilo o trandoprilo.

En una forma de realizacion preferente de la invencion se administran los compuestos de acuerdo con la invencion en combinacion con un antagonista de endotelina, tal como a modo de ejemplo y preferentemente bosentan, darusentan, ambrisentan o sitaxsentan.

En una forma de realizacion preferente de la invencion se administran los compuestos de acuerdo con la invencion en combinacion con un inhibidor de renina, tal como a modo de ejemplo y preferentemente aliskiren, SPP-600 o SPP-800.

En una forma de realizacion preferente de la invencion se administran los compuestos de acuerdo con la invencion en combinacion con un antagonista de receptores mineralocorticoides, tal como a modo de ejemplo y preferentemente espironolactona o epleronona.

En una forma de realizacion preferente de la invencion se administran los compuestos de acuerdo con la invencion en combinacion con un diuretico, tal como por ejemplo furosemida, torasemida, bumetanida y piretanida, con diureticos ahorradores de potasio tal como por ejemplo amilorida y triamtereno, con antagonistas de aldosterona, tales como por ejemplo espironolactona, canrenoato de potasio y eplerenona asf como diureticos de tiazida, tal como por ejemplo hidroclorotiazida, clortalidona, xipamida e indapamida.

Por agentes que modifican el metabolismo lipfdico se entiende preferentemente compuestos del grupo de los inhibidores de CETP, agonistas de receptores tiroideos, inhibidores de la smtesis de colesterol tales como inhibidores de la HMG-CoA-reductasa o de la smtesis de escualeno, de los inhibidores de ACAT, inhibidores de MTP, agonistas de PPAR-alfa, PPAR-gamma y/o PPAR-delta, inhibidores de la absorcion de colesterol, adsorbedores polimericos del acido biliar, inhibidores de la reabsorcion del acido biliar, inhibidores de la lipasa asf como de los antagonistas de lipoprotema(a).

En una forma de realizacion preferente de la invencion se administran los compuestos de acuerdo con la invencion en combinacion con un inhibidor de CETP, tal como a modo de ejemplo y preferentemente dalcetrapib, BAY 605521, anacetrapib o vacuna de CETP (CETi-1).

En una forma de realizacion preferente de la invencion se administran los compuestos de acuerdo con la invencion en combinacion con un agonista de receptores tiroideos, tal como a modo de ejemplo y preferentemente D-tiroxina, 3,5,3'-triyodotironina (T3), CGS 23425 o axitirome (CGS 26214).

En una forma de realizacion preferente de la invencion se administran los compuestos de acuerdo con la invencion en combinacion con un inhibidor de la HMG-CoA-reductasa de la clase de las estatinas, tal como a modo de ejemplo y preferentemente lovastatina, simvastatina, pravastatina, fluvastatina, atorvastatina, rosuvastatina o pitavastatina.

En una forma de realizacion preferente de la invencion se administran los compuestos de acuerdo con la invencion en combinacion con un inhibidor de la smtesis de escualeno, tal como a modo de ejemplo y preferentemente BMS- 188494 o TAK-475.

En una forma de realizacion preferente de la invencion se administran los compuestos de acuerdo con la invencion en combinacion con un inhibidor de ACAT, tal como a modo de ejemplo y preferentemente avasimiba, melinamida, pactimiba, eflucimiba o SMP-797.

En una forma de realizacion preferente de la invencion se administran los compuestos de acuerdo con la invencion en combinacion con un inhibidor de MTP, tal como a modo de ejemplo y preferentemente implitapida, BMS-201038, R-103757 o JTT-130.

En una forma de realizacion preferente de la invencion se administran los compuestos de acuerdo con la invencion en combinacion con un agonista de PPAR-gamma, tal como a modo de ejemplo y preferentemente pioglitazona o rosiglitazona.

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En una forma de realizacion preferente de la invencion se administran los compuestos de acuerdo con la invencion en combinacion con un agonista de PPAR-delta, tal como a modo de ejemplo y preferentemente GW 501516 o BAY 68-5042.

En una forma de realizacion preferente de la invencion se administran los compuestos de acuerdo con la invencion en combinacion con un inhibidor de la absorcion de colesterol, tal como a modo de ejemplo y preferentemente ezetimiba, tiquesida o pamaquesida.

En una forma de realizacion preferente de la invencion se administran los compuestos de acuerdo con la invencion en combinacion con un inhibidor de la lipasa, tal como a modo de ejemplo y preferentemente orlistat.

En una forma de realizacion preferente de la invencion se administran los compuestos de acuerdo con la invencion en combinacion con un adsorbedor polimerico del acido biliar, tal como a modo de ejemplo y preferentemente colestiramina, colestipol, colesolvam, colestagel o colestimida.

En una forma de realizacion preferente de la invencion se administran los compuestos de acuerdo con la invencion en combinacion con un inhibidor de la reabsorcion del acido biliar, tal como a modo de ejemplo y preferentemente inhibidores de ASBT (= IBAT), tal como por ejemplo AZD-7806, S-8921, AK-105, BARI-1741, SC-435 o SC-635.

En una forma de realizacion preferente de la invencion se administran los compuestos de acuerdo con la invencion en combinacion con un antagonista de lipoprotema (a), tal como a modo de ejemplo y preferentemente gemcabeno calcico (CI-1027) o acido nicotmico.

Otro objeto de la presente invencion son farmacos que contienen al menos un compuesto de acuerdo con la invencion, habitualmente junto con uno o varios coadyuvantes inertes, no toxicos, farmaceuticamente adecuados, asf como su uso para los fines mencionados anteriormente.

Los compuestos de acuerdo con la invencion pueden actuar sistemica o localmente. Para este fin pueden administrarse de manera adecuada, tal como por ejemplo por via oral, parenteral, pulmonar, nasal, sublingual, lingual, bucal, rectal, dermica, transdermica, conjuntival, otica o como implante o endoprotesis vascular.

Para estas vfas de administracion, los compuestos de acuerdo con la invencion pueden administrarse en formas de administracion adecuadas.

Para la administracion oral son adecuadas formas de administracion que suministran los compuestos de acuerdo con la invencion de manera rapida y/o modificada, que actuan de acuerdo con el estado de la tecnica, que contienen los compuestos de acuerdo con la invencion en forma cristalina y/o amorfa y/o disuelta, tales como por ejemplo comprimidos (comprimidos recubiertos o no recubiertos, por ejemplo con recubrimientos resistentes a los jugos gastricos o que se disuelven de manera retardada o insolubles, que controlan la liberacion del compuesto de acuerdo con la invencion), comprimidos que se disgregan rapidamente en la cavidad bucal o pelfculas/obleas, pelfculas/liofilizados, capsulas (por ejemplo capsulas de gelatina duras o blandas), grajeas, granulos, microgranulos, polvo, emulsiones, suspensiones, aerosoles o soluciones.

La administracion parenteral puede efectuarse evitando una etapa de absorcion (por ejemplo por via intravenosa, intraarterial, intracardiaca, intraespinal o intralumbar) o insertando una absorcion (por ejemplo por via intramuscular, subcutanea, intracutanea, percutanea o intraperitoneal). Para la administracion parenteral son adecuadas como formas de administracion entre otras cosas preparaciones para inyeccion e infusion en forma de soluciones, suspensiones, emulsiones, liofilizados o polvos esteriles.

Para las otras vfas de administracion son adecuadas por ejemplo formas farmaceuticas para inhalacion (entre otros inhaladores de polvo, nebulizadores), pulverizaciones, soluciones o gotas nasales, comprimidos que van a administrarse por via lingual, sublingual o bucal, pelfculas/obleas o capsulas, supositorios, preparaciones oticas u oftalmicas, capsulas vaginales, suspensiones acuosas (lociones, mezclas para agitar), suspensiones lipofilas, pomadas, cremas, sistemas terapeuticos transdermicos (por ejemplo parches), leche, pastas, espumas, polvos dispersables, implantes o endoprotesis vasculares.

Se prefieren la administracion oral o parenteral, en particular la administracion oral.

Los compuestos de acuerdo con la invencion pueden transformarse en las formas de administracion mencionadas. Esto puede efectuarse de manera en sf conocida mediante mezclado con coadyuvantes inertes, no toxicos, farmaceuticamente adecuados. A estos coadyuvantes pertenecen entre otros vehnculos (por ejemplo celulosa microcristalina, lactosa, manitol), disolventes (por ejemplo polietilenglicoles lfquidos), emulsionantes y agentes dispersantes o humectantes (por ejemplo dodecilsulfato de sodio, oleato de polioxisorbitano), aglutinantes (por ejemplo polivinilpirrolidona), polfmeros sinteticos y naturales (por ejemplo albumina), estabilizadores (por ejemplo antioxidantes tales como por ejemplo acido ascorbico), colorantes (por ejemplo pigmentos inorganicos tales como por ejemplo oxidos de hierro) y agentes correctores del sabor y/u olor.

En general ha resultado ventajoso administrar, en caso de administracion parenteral, cantidades de aproximadamente 0,001 mg/kg a 1 mg/kg, preferentemente de aproximadamente 0,01 mg/kg a 0,5 mg/kg de peso corporal para lograr resultados eficaces. En caso de administradon oral, la dosificacion asciende a aproximadamente 0,001 mg/kg a 2 mg/kg, preferentemente de aproximadamente 0,001 mg/kg a 1 mg/kg de peso 5 corporal.

Aun asf puede ser necesario eventualmente desviarse de las cantidades mencionadas, y concretamente dependiendo del peso corporal, via de administradon, comportamiento individual frente al principio activo, tipo de preparacion y momento en o intervalo con el que se realiza la administradon. Asf puede ser suficiente en algunos casos pasar con menos de las cantidades mmimas mencionadas anteriormente, mientras que en otros casos deben 10 superarse los lfmites superiores mencionados. En el caso de la administradon de cantidades superiores puede ser recomendable distribuir estas en varias administraciones individuales a lo largo del dfa.

Los ejemplos de realizacion siguientes explican la invencion.

Los datos de porcentaje en las siguientes pruebas y ejemplos son, siempre que no se indique lo contrario, porcentajes en peso; las partes son partes en peso. Las proporciones de disolventes, proporciones de dilucion y 15 datos de concentracion de soluciones lfquido/lfquido se refieren respectivamente al volumen.

A. Ejemplos

Abreviaturas y acronimos:

DCI ionizacion qmmica directa (en EM)

DMF dimetilformamida

20

DMSO dimetilsulfoxido

d. t. del teorico (en rendimiento)

ESI ionizacion por electropulverizacion (en EM)

h hora(s)

HPLC cromatograffa de lfquidos de alta resolucion, a alta presion

25

CL-EM espectrometna de masas acoplada con cromatograffa de lfquidos

min minuto(s)

EM espectrometna de masas

RMN espectrometna de resonancia nuclear

TA temperatura ambiente

30

Rt tiempo de retencion (en HPLC)

t-Bu terc-butilo

TFA acido trifluoroacetico

THF tetrahidrofurano

UV espectrometna de ultravioleta

35

v/v proporcion volumen a volumen (de una solucion)

Procedimientos de HPLC y CL/EM:

Procedimiento 1 (CL-EM):

Instrumento: Waters ACQUITY SQD UPLC System; columna: Waters Acquity UPLC HSS T3 1,8 |i 50 x 1 mm; eluyente A: 1 l de agua + 0,25 ml de acido formico al 99 %, eluyente B: 1 l de acetonitrilo + 0,25 ml de acido formico 40 al 99 %; gradiente: 0,0 min 90 % de A ^ 1,2 min 5 % de A ^ 2,0 min 5 % de A; horno: 50 °C; flujo: 0,40 ml/min; deteccion UV: 208 - 400 nm.

Cuando en los productos intermedios de smtesis y ejemplos de realizacion de la invencion descritos a continuacion se expone un compuesto en forma de una sal de la correspondiente base o acido, entonces no se conoce por regla general la composicion estequiometrica exacta de una sal de este tipo, tal como se obtiene segun el respectivo 45 procedimiento de preparacion y/o de purificacion. Siempre que no se especifique de manera mas exacta, ha de entenderse por tanto adiciones de nombre y formula estructural tal como por ejemplo “clorhidrato”, “trifluoroacetato”, “sal de sodio” o “x HCl”, “x CF3COOH”, “x Na+” en tales sales no de manera estequiometrica, sino que tienen unicamente caracter descriptivo con respecto a los componentes formadores de sal contenidos.

De manera analoga se aplica lo mismo para el caso de que los productos intermedios de smtesis o ejemplos de 50 realizacion o sales de los mismos se obtuvieran segun los procedimientos de preparacion y/o de purificacion descritos en forma de solvatos, tal como por ejemplo hidratos, cuya composicion estequiometrica (siempre de modo definido) no se conoce.

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Compuestos de partida y productos intermedios:

Ejemplos 1A

Clorhidrato de 5-fluoro-1-(2-fluorobencil)-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3-carboximidamida

imagen14

Se suspendieron 406,0 g (1,50 mol) de 5-fluoro-1-(2-fluorobencil)-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3-carbonitrilo (la preparacion del compuesto se describe en el documento WO2012/028645, ejemplo 3, pag. 10) en 2,08 l de etanol. A continuacion se anadieron 54,1 g (0,30 mol) de metanolato de sodio en metanol (al 30 %) y se agito durante la noche a temperatura ambiente. Se anadieron 88,4 g (1,65 mol) de cloruro de amonio, se calento hasta 65 °C y se agito durante 3,5 h a 65 °C. Los disolventes se separaron a vado y se agito el residuo con 1,6 l de acetato de etilo durante la noche. El solido precipitado se separo por filtracion, se lavo dos veces con en cada caso 140 ml de acetato de etilo y se seco en el armario de secado a vado a 50 °C con ligero flujo de nitrogeno. Se obtuvieron 441,4 g (90,7 % d. t.) del compuesto del trtulo.

EM (ESIpos): m/z = 288 (M+H)+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 5,90 (s, 2H), 7,15 -7,20 (m, 1H), 7,22 - 7,28 (m, 1H), 7,29 - 7,35 (m, 1H), 7,36 - 7,43 (m, 1H), 8,48 (dd, 1H), 8,86 (dd, 1H), 9,35 (br. s, 3H).

Ejemplo 2A

3,3-Diciano-2-(trifluorometil)acrilato de metilo

imagen15

F O

La smtesis de este compuesto se describe en Journal of Fluorine Chemistry, 1991, vol. 51, n.° 3, pag. 323 - 334.

Ejemplo 3A

2-(Dicianometil)-3,3,3-triftuoro-2-metilpropanoato de metilo

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Se disolvieron 3,00 g (14,698 mmol) del ejemplo 2A en tetrahidrofurano (30 ml) y se enfrio hasta 0 °C. A continuacion se anadieron gota a gota 7,35 ml (22,047 mmol) de cloruro de metilmagnesio (3 M en THF) de modo que la temperatura no superara 5 °C. Tras completar la adicion se agito posteriormente durante 10 min. La mezcla de reaccion se mezclo entonces con acido clorddrico acuoso 1 N y a continuacion se extrajo con acetato de etilo. Las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo aun dos veces con acetato de etilo. Las fases organicas combinadas se lavaron con solucion acuosa saturada de cloruro de sodio, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron. El producto en bruto se cromatografio a continuacion a traves de gel de sflice (eluyente: ciclohexano, despues ciclohexano:acetato de etilo 9:1 (v:v). Tras la concentracion se obtuvieron 3,24 g (63 % d. t.) del compuesto del trtulo.

1H-RMN (400 MHz, CDCls): 5 [ppm] = 1,81 (s, 3H), 3,95 (s, 3H), 4,48 (s, 1H).

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Ejemplo 4A

4-Amino-2-[5-fluoro-1-(2-fluorobencil)-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3-il]-5-metil-5-(trifluorometil)-5,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-

d]pirimidin-6-ona

imagen17

Se mezclaron 1,348 g (4,164 mmol) del ejemplo 1A en terc-butanol (23 ml) con 700 mg (6,246 mmol) de terc-butilato de potasio. A continuacion se anadieron 1,100 g (4,997 mmol) del ejemplo 3A en terc-butanol (5 ml) y la mezcla se calento durante la noche a reflujo. Tras enfriar se mezclo la mezcla de reaccion con agua y acetato de etilo. Las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo aun dos veces con acetato de etilo. Las fases organicas combinadas se lavaron a continuacion con solucion acuosa saturada de cloruro de sodio, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, se concentraron a vado y se secaron a alto vado. Se obtuvieron 1,98 g del compuesto del trtulo (99 % d. t.).

CL-EM (Metodo 1): Rt = 1,08 min; EM (ESIpos): m/z = 476 [M+H]+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 1,72 (s, 3H), 5,83 (s, 2H), 7,0,5-7,25 (m, 5H), 7,35-7,40 (m, 1H), 8,72 (s br, 1H), 8,88 (dd, 1H), 11,63 (br s, 1H).

Ejemplo 5A

2-[5-Fluoro-1-(2-fluorobencil)-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3-il]-4-yodo-5-metil-5-(trifluorometil)-5,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-

d]pirimidin-6-ona

imagen18

Se dispusieron 1,980 g (4,165 mmol) del ejemplo 4A en dioxano (38 ml) y se mezclaron con 2,804 ml (20,825 mmol) de nitrito de iso-pentilo y 1,007 ml (12,495 mmol) de diyodometano y se calento durante la noche hasta 85 °C. Tras el enfriamiento se concentro hasta sequedad, se suspendio el residuo con diclorometano, se mezclo con tierra de diatomeas y a continuacion se concentro a vado. El compuesto bruto fijado en tierra de diatomeas se cromatografio a continuacion a traves de gel de sflice (eluyente: gradiente de diclorometano:metanol). Tras concentrar se suspendio de nuevo con diclorometano, se mezclo con tierra de diatomeas y a continuacion se concentro a vado. El compuesto purificado previamente fijado en tierra de diatomeas se cromatografio a continuacion a traves de gel de sflice (eluyente: gradiente de ciclohexano:acetato de etilo). Tras concentrar se obtuvieron 1,04 g (42 % d. t.) del compuesto del tUulo.

CL-EM (Metodo 1): Rt = 1,30 min; EM (ESIpos): m/z = 587 [M+H]+

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 1,81 (s, 3H), 5,89 (s, 2H), 7,16 (t, 1H), 7,22-7,26 (m, 2H), 7,35-7,41 (m,

5

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35

1H), 8,47 (dd, 1H), 8,47 (dd, 1H), 8,80 (dd, 1H), 12,42 (br s, 1H).

Ejemplos de realizacion:

Ejemplo 1

2-[5-Fluoro-1-(2-fluorobencil)-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3-il]-5-metil-5-(trifluorometil)-4-[(3,3,3-trifluoropropil)amino]-5,7-

dihidro-6H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-6-ona

imagen19

Se disolvieron 1,037 g (1,769 mmol) del ejemplo 5A en un recipiente de reaccion adecuado para microondas en 1- metil-2-pirrolidona (10 ml) y se mezclaron con 484 |l (5,395 mmol) de 3,3,3-trifluoropropiM-amina. A continuation se cerro con un septo y se calento durante 3 h a 150 °C en un microondas. Tras enfriar se vertio la mezcla de reaccion en agua. Se formo un solido que se separo por filtration. A continuacion se disolvio el solido en acetato de etilo, se seco con sulfato de sodio, se filtro y se concentro a vatio. El residuo se suspendio en 3 ml de acetonitrilo, se mezclo con agua y se trato brevemente en el bano de ultrasonido. Se separo por filtracion otra vez, se lavo con mucha agua y a continuacion se seco a alto vatio. Se obtuvieron 980 mg del compuesto del trtulo (97 % d. t.).

CL-EM (Metodo 1): Rt = 1,29 min; EM (Elpos): m/z = 572 [M+H]+.

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 [ppm] = 1,73 (s, 3H), 2,64-2,71 (m, 2H), 3,79-3,93 (m, 2H), 5,85 (s, 2H), 6,93 (t, 1H), 7,16 (t, 1H), 7,19-7,28 (m, 2H), 7,35-7,40 (m, 1H), 8,46 (dd, 1H), 8,75 (s br, 1H), 11,75(br s, 1H).

Separacion en enantiomeros:

Se separaron 980 mg de racemato por medio de SFC preparativa (eluyente: (CO2/etanol 70/30, flujo: 100 ml/min, temperatura: 40 °C, presion: 80 bar, longitud de onda: 210 nM) en fase quiral (Daicel Chiralpak AZ-H, 5 |M 250 x 30 mm) en los enantiomeros.

Ejemplo 1-1 (enantiomero 1)

Rendimiento: 310 mg

Rt = 3,794 min; ee > 99 %, pureza > 97 % (SFC analUica (eluyente: (CO2/metanol 80/20, flujo: 3 ml/min) en fase quiral (Daicel Chiralpak AZ-H, 5 |M 250 x 4,6 mm).

Ejemplo 1-2 (enantiomero 2)

Rendimiento: 145 mg

Rt = 5,875 min; ee > 99 %, pureza > 99 % (SFC analrtica (eluyente: (CO2/metanol 80/20, flujo: 3 ml/min) en fase quiral (Daicel Chiralpak AZ-H, 5 |M 250 x 4,6 mm).

B. Evaluation de la actividad farmacologica

A continuacion se usan las siguientes abreviaturas mencionadas a continuacion:

BSA albumina de suero bovino

EDTA acido etilendiamintetraacetico

|Ci Micro Curie

Tris tris(hidroximetil)-aminometano

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La accion farmacologica de los compuestos de acuerdo con la invencion puede mostrarse en los siguientes ensayos: B-1. Accion en lrnea celular indicadora de guanilato ciclasa recombinante

Se determina la accion celular de los compuestos de acuerdo con la invencion en una lrnea celular indicadora de guanilato ciclasa recombinante, tal como se describe en F. Wunder et al., Anal. Biochem. 339, 104-112 (2005).

En la siguiente tabla (tabla 1) estan reproducidos valores representativos (CEM = concentracion eficaz minima) para los compuestos de acuerdo con la invencion:

Tabla 1:

Ejemplo

CEM [^M]

1-1

0,1

1-2

0,3

B-2. Medicion radiotelemetrica de la presion sangumea en ratas espontaneamente hipertensas, despiertas

Para la medicion de la presion sanguinea descrita a continuacion en ratas despiertas se usa un sistema de telemetna que puede obtenerse en el mercado de la empresa DATA SCIENCES INTERNATIONAL DSI, EE.UU.

El sistema esta compuesto de 3 componentes principales:

- emisores implantables (transmisor de telemetna Physiotel®)

- receptores (receptor Physiotel®), que estan unidos a traves de un multiplexor (DSI Data Exhange Matrix) con un

- ordenador de adquisicion de datos

La instalacion de telemetna posibilita un registro continuo de presion sanguinea, frecuencia cardiaca y movimiento corporal en animales despiertos en su habitat habitual.

Material animal

Las investigaciones se realizan en ratas espontaneamente hipertensas hembras adultas (SHR Okamoto) con un peso corporal de >200 g. SHR/NCrl de Okamoto Kyoto School of Medicine, 1963, se cruzaron a partir de ratas Wistar Kyoto macho con presion sanguinea muy elevada y hembra con presion sanguinea ligeramente elevada y se cedieron en la F13 a los Institutos Nacionales de Salud de los Estados Unidos.

Los animales de experimentacion se mantienen despues de la implantacion de los emisores individualmente en jaulas de Makrolon de tipo 3. Tienen acceso libre a pienso convencional y agua.

El ritmo dfa-noche en el laboratorio de ensayo se cambia mediante iluminacion de la sala a las 6:00 horas de la manana y a las 19:00 horas por la tarde.

Implantacion de los emisores

Los emisores de telemetna TA11PA - C40 usados se implantan a los animales de experimentacion al menos 14 dfas antes de la primera intervencion de ensayo quirurgicamente en condiciones asepticas. Los animales asf instrumentalizados pueden usarse reiteradamente despues de la curacion de la herida y el arraigo del implante.

Introduccion de gas de narcosis O2 + N2O 30:50 con un 5 % de isofluran en un recipiente de flujo.

Tras la introduccion de la narcosis se conecta el animal en una placa calefactora a la mascara de narcosis y recibe para el mantenimiento de la narcosis un 1,8 % de isofluran. Se anestesia y se rasura y desinfecta ampliamente en el lado abdominal. Despues de abrir la cavidad abdominal a lo largo de la lrnea alba se introduce el cateter de medicion cargado con lfquido del sistema por encima de la bifurcacion cranealmente hacia la aorta descendente y se fija con adhesivo tisular (VetBonD TM, 3M). La carcasa del emisor se fija intraperitonealmente en la musculatura de la pared abdominal y se cierra capa a capa la herida.

Post-quirurgicamente, para la profilaxis frente a infecciones se administra un antibiotico (Oxytetracyclin® 10 %, 60 mg/kg s.c., 0,06 ml/100 g de peso corporal, Beta-Pharma GmbH & Co, Germany) asf como un analgesico (Rimadyl®, 4 mg/kg s.c., Pfizer, Alemania).

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Sustancias y soluciones

Si no se describe de otro modo, las sustancias que van a examinarse se administran por via oral mediante sonda esofagica respectivamente a un grupo de animales (n = 6). De forma correspondiente a un volumen de administracion de 2 ml/kg de peso corporal se disuelven las sustancias de prueba en mezclas adecuadas de disolventes o se suspenden en tilosa al 0,5 %.

Como control se usa un grupo de animales tratado con disolvente.

Desarrollo del ensayo

El equipo de medicion de telemetna existente esta configurado para 24 animales. Cada ensayo se registra con un numero de ensayo (V ano mes dfa).

A las ratas instrumentalizadas que viven en la instalacion esta asignada respectivamente una antena de recepcion propia (1010 Receiver, DSI).

Los emisores implantados pueden activarse desde el exterior a traves de un conmutador magnetico instalado. Se conmutan a emision durante el transcurso del ensayo. Las senales irradiadas pueden registrarse en lmea mediante un sistema de adquisicion de datos (Dataquest TM A.R.T. for WINDOWS, DSI) y pueden tratarse correspondientemente. El archivo de los datos se realiza respectivamente en una carpeta abierta para esto, que lleva el numero del ensayo.

Durante el transcurso convencional se miden a lo largo de en cada caso 10 segundos de duracion:

- presion sangumea sistolica (SBP)

- presion sangumea diastolica (DBP)

- presion media arterial (MAP)

- frecuencia cardiaca (HR)

- actividad (ACT).

El registro de los valores de medicion se repite a intervalos de 5 minutos de forma controlada por ordenador. Los datos fuente obtenidos como valor absoluto se corrigen en el diagrama con la presion barometrica medida actualmente (Ambient Pressure Reference Monitor; APR-1) y se archivan en datos individuales. Se pueden obtener otros detalles tecnicos de la exhaustiva documentacion de la empresa fabricante (DSI).

Si no se describe de otro modo, la administracion de las sustancias de prueba se realiza el dfa del ensayo a las 9:00 horas. Despues de la administracion se miden los parametros que se han descrito anteriormente durante 24 horas.

Evaluacion

Despues de finalizar el ensayo, los datos individuales obtenidos se clasifican con el software de analisis (DATAQUEST TM A.R.T. TM ANALYSIS). Como valor vacm en este caso se asumen 2 horas antes de la administracion, de tal manera que el conjunto de datos seleccionado abarca el intervalo de tiempo de 7:00 horas el dfa del ensayo a 9:00 horas al dfa siguiente.

Los datos se alisan a lo largo de un tiempo preajustable mediante la determinacion del valor medio (30 minutos de promedio) y se transfieren a un soporte de datos como archivo de texto. Los valores de medicion preclasificados y comprimidos asf se transfieren a plantillas de Excel y se representan de forma tabulada. El archivo de los datos obtenidos se realiza por dfa de ensayo en una carpeta propia que lleva el numero de ensayo. Los resultados y protocolos de ensayo se archivan clasificados por numeros en carpetas.

En la siguiente tabla (tabla 2) estan reproducidos valores representativos para los compuestos de acuerdo con la invencion:

Tabla 2:

Ejemplo 1-1

Vehiculo 2 ml/kg Dosis: 0,3 mg/kg p.o. Dosis: 0,03 mg/kg

Horas tras la administracion de sustancia

Presion sangumea promedio (mmHg) Presion sangumea promedio (mmHg) Presion sangumea promedio (mmHg)

0

147,0 144,2 140,3

1

141,8 128,5 124,4

2

140,2 116,7 125,2

3

149,5 112,8 120,6

4

143,5 114,3 124,2

5

147,7 109,3 119,2

6

146,5 110,2 122,4

7

151,2 113,5 124,8

8

153,0 114,2 129,0

9

152,5 114,5 132,2

10

151,3 109,5 126,0

11

149,8 118,2 119,8

12

151,8 110,5 134,4

13

153,3 115,5 130,0

14

154,0 117,8 131,4

15

144,7 114,5 133,6

16

152,8 118,2 120,6

17

153,8 122,7 135,4

18

157,2 127,8 131,6

19

145,5 121,0 123,2

20

149,5 110,5 123,4

21

148,7 113,3 125,4

22

146,7 116,7 134,2

23

154,5 115,7 132,0

24

161,8 123,7 126,8

Bibliografia

Klaus Witte, Kai Hu, Johanna Swiatek, Claudia Mussig, Georg Ertl and Bjorn Lemmer: Experimental heart failure in 5 rats: effects on cardiovascular circadian rhythms and on myocardial p-adrenergic signaling. Cardiovasc Res 47 (2): 203-405, 2000; Kozo Okamoto: Spontaneous hypertension in rats. Int Rev Exp Pathol 7: 227- 270, 1969; Maarten van den Buuse: Circadian Rhythms of Blood Pressure, Heart Rate, and Locomotor Activity in Spontaneously Hypertensive Rats as Measured With Radio-Telemetry. Physiology & Behavior 55(4): 783-787, 1994

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B-3. Determinacion de parametros farmacocineticos tras administracion intravenosa y oral

Los parametros farmacocineticos de los compuestos de formula (I) de acuerdo con la invencion se determinan en ratones CD-1 machos, ratas Wister machos y perros Beagle hembras. La administracion intravenosa se realiza en ratones y ratas por medio de una formulacion de plasma/DMSO espedfica de la especie y en perros por medio de una formulacion de agua/PEG400/etanol. La administracion oral de la sustancia disuelta por medio de sonda esofagica se realiza en todas las especies basandose en una formulacion de agua/PEG400/etanol. A las ratas se les coloca un cateter de silicona en la vena yugular externa derecha para simplificar la extraccion de sangre antes de la administracion de sustancia. La operacion se realiza al menos un dfa antes del ensayo con anestesia de isoflurano y con administracion de un analgesico (atropina/Rimadyl (3/1) 0,1 ml s.c.). La extraccion de sangre (por regla general mas de 10 momentos) se realiza en un intervalo de tiempo que incluye momentos terminales de al menos 24 a como maximo 72 horas tras administracion de sustancias. La sangre se conduce a tubos con heparina durante la extraccion. Asf entonces se obtiene el plasma sangumeo por medio de centrifugacion y eventualmente se almacena a -20 °C hasta el procesamiento posterior.

A las muestras de los compuestos de formula (I) de acuerdo con la invencion, muestras de calibracion y cualificadores se anade un patron interno (este puede ser tambien una sustancia qmmicamente no relacionada) y le sigue una precipitacion de protemas por medio de acetonitrilo en exceso. Tras adicion de una solucion tampon, que esta adaptada a las condiciones de Cl, y agitacion en vortex siguiente se centrifuga a 1000 g. El sobrenadante se mide por medio de CL-EM/EM usando columnas de fase inversa C18 y mezclas de eluyentes variables. La cuantificacion de las sustancias se realiza por medio de las alturas o superficies de pico de cromatogramas de iones extrafdos de experimentos espedficos de monitorizacion de iones seleccionados, selected ion monitoring.

A partir de los desarrollos de concentracion en plasma-tiempo determinados se calculan los parametros farmacocineticos, tales como AUC (Area Under the Curve), Cmax, ti/2 (tiempo de vida medio terminal), F (biodisponibilidad), MRT (Mean Residence Time, tiempo de residencia medio) y CL (aclaramiento) por medio de un programa informatico farmacocinetico validado.

Dado que se realiza la cuantificacion de sustancia en plasma, debe determinarse la distribucion de sangre/plasma de la sustancia para poder adaptar los parametros farmacocineticos de manera correspondiente. Para ello se incuba una cantidad definida de sustancia en sangre completa con heparina de la correspondiente especie durante 20 min en una mezcladora de rodillos de movimiento asimetrico. Tras centrifugacion a 1000 g se mide la concentracion en el plasma (por medio de CL-EM/EM; vease anteriormente) y mediante formacion de cocientes se proporciona el

valor Csangre/Cplasma.

La tabla 3 muestra datos de compuestos representativos de la presente invencion tras administracion intravenosa de 0,3 mg/kg asf como administracion peroral de 1 mg/kg en ratas:

Tabla 3:

Ejemplo

1-1

AUC norm [kg-h/l]

0,83

CLsangre [l/h/kg]

1,42

MRT [h]

6,4

t1/2 [h]

7,8

F [%]

39,0

B-4. Estudio del metabolismo

Para la determinacion del perfil de metabolismo de los compuestos de acuerdo con la invencion se incuban estos con enzimas de citocromo humano recombinante P450 (CYP), microsomas hepaticos o con hepatocitos frescos primarios de distintas especies de animal (por ejemplo rata, perro) como tambien de origen humano, para obtener y comparar informacion sobre un metabolismo de fase I y fase II hepatico a ser posible completo asf como sobre las enzimas participates en el metabolismo.

Los compuestos de acuerdo con la invencion se incubaron con una concentracion de aproximadamente 0,1-10 |iM. Para ello se prepararon soluciones madre de los compuestos de acuerdo con la invencion con una concentracion de 0,01-1 mM en acetonitrilo, y entonces se pipetearon con una dilucion 1:100 en la mezcla de reaccion de incubacion. Los microsomas hepaticos y las enzimas recombinantes se incubaron en tampon fosfato de potasio 50 mM pH 7,4 con y sin sistema de generacion de NADPH, que esta compuesto de NADP+ 1 mM, glucosa-6-fosfato 10 mM y 1 unidad de glucosa-6-fosfato deshidrogenasa, a 37 °C. Los hepatocitos primarios se incubaron en suspension en

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medio Williams E igualmente a 37 °C. Tras un tiempo de incubacion de 0 - 4 h se detienen las mezclas de reaccion de incubacion con acetonitrilo (concentracion final de aproximadamente el 30 %) y se separa por centrifugacion la protema a aproximadamente 15000 x g. Las muestras as^ detenidas o bien se analizan directamente o se almacenan a -20 °C hasta el analisis.

El analisis se realiza por medio de cromatograffa de lfquidos de alta resolucion con deteccion mediante espectrometna de ultravioleta y de masas (HPLC-UV-EM/EM). Para ello se cromatograffan los sobrenadantes de las muestras de incubacion con columnas de fase inversa C18 adecuadas y mezclas de eluyentes variables de acetonitrilo y solucion acuosa 10 mM de formiato de amonio o un 0,05 % de acido formico. Los cromatogramas de UV en union con datos de espectrometna de masas sirven para la identificacion, el esclarecimiento de la estructura y la estimacion cuantitativa de los metabolitos y la reduccion metabolica cuantitativa del compuesto de acuerdo con la invencion en las mezclas de reaccion de incubacion.

B-5. Determinacion de las acciones protectoras de organo en el ensayo a largo plazo en ratas.

Las acciones protectoras de organos de los estimuladores de GCs se mostraron en un modelo de hipertension de “low nitric oxide (NO) /high renin, bajo contenido en oxido mtrico (NO) / alto contenido en renina” terapeuticamente relevante en las ratas. El estudio se realizo conforme a la publicacion recientemente publicada (Sharkovska Y, Kalk P, Lawrenz B, Godes M, Hoffmann LS, Wellkisch K, Geschka S, Relle K, Hocher B, Stasch JP. NOindependent stimulation of soluble guanylate cyclase reduces target organ damage in low and high-renin models of hypertension. J. Hypertension. 2010; 28: 1666-1675). A este respecto se trataron ratas transgenicas de renina (TGR(mRen2)27), a las que se administro el inhibidor de NO-sintasa L-NAME por medio del agua de beber, simultaneamente con un estimulador de GCs o vehnculo durante varias semanas. Se determinaron parametros hemodinamicos y renales durante el espacio de tiempo de tratamiento. Al final del estudio a largo plazo se mostro la proteccion de organos (rinon, pulmon, corazon, aorta) mediante estudios histopatologicos, biomarcadores, analisis de expresion y parametros de plasma cardiovasculares.

C. Ejemplos de realizacion para composiciones farmaceuticas

Los compuestos de acuerdo con la invencion pueden convertirse de la siguiente manera en preparaciones farmaceuticas:

Comprimido:

Composicion:

100 mg del compuesto de acuerdo con la invencion, 50 mg de lactosa (monohidratada), 50 mg de almidon de mafz (nativo), 10 mg de polivinilpirrolidona (PVP 25) (empresa BASF, Ludwigshafen, Alemania) y 2 mg de estearato de magnesio.

Peso del comprimido 212 mg. Diametro 8 mm, radio de convexidad 12 mm.

Preparacion:

La mezcla del compuesto de acuerdo con la invencion, lactosa y almidon se granula con una solucion al 5 % (p/p) de PVP en agua. El granulado se mezcla despues del secado con el estearato de magnesio durante 5 minutos. Esta mezcla se comprime con una maquina prensadora de comprimidos habitual (vease anteriormente el formato del comprimido). Como norma para la operacion de prensado se usa una fuerza de prensado de 15 kN.

Suspension administrable por via oral:

Composicion:

1000 mg del compuesto de acuerdo con la invencion, 1000 mg de etanol (96 %), 400 mg de Rhodigel® (goma xantana de la empresa FMC, Pennsylvania, EE.UU.) y 99 g de agua.

Una dosis individual de 100 mg del compuesto de acuerdo con la invencion corresponde a 10 ml de suspension oral. Preparacion:

Se suspende el Rhodigel en etanol, se anade el compuesto de acuerdo con la invencion a la suspension. Con agitacion se realiza la adicion de agua. Se agita durante aproximadamente 6 h hasta que termina el hinchamiento de Rhodigel.

Solucion administrable por via oral:

Composicion:

500 mg del compuesto de acuerdo con la invencion, 2,5 g de polisorbato y 97 g de polietilenglicol 400. Una dosis individual de 100 mg del compuesto de acuerdo con la invencion corresponde a 20 g de solucion oral.

Preparacion:

El compuesto de acuerdo con la invencion se suspende en la mezcla de polietilenglicol y polisorbato con agitacion. El procedimiento de agitacion se continua hasta la disolucion completa del compuesto de acuerdo con la invencion.

Solucion i.v.:

5 El compuesto de acuerdo con la invencion se disuelve en una concentracion por debajo de la solubilidad de saturacion en un disolvente fisiologicamente compatible (por ejemplo solucion de cloruro de sodio isotonica, solucion de glucosa al 5 % y/o solucion de PEG 400 al 30 %). La solucion se esteriliza por filtracion y se envasa en recipientes para inyeccion esteriles y libres de pirogenos.

Claims (11)

1. REIVINDICACIONES

   1. Compuesto con el nombre sistematico de 2-[5-fluoro-1-(2-fluorobencil)-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3-il]-5-metil-5- (trifluorometil)-4-[(3,3,3-trifluoropropil)amino]-5,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-6-ona y la formula estructural (I)

   imagen1

   5 asi como sus sales, solvatos y solvatos de las sales.
2. 2. Enantiomero del compuesto (I) con el nombre sistematico de (5R)-2-[5-fluoro-1-(2-fluorobencil)-1H-pirazolo[3,4- b]piridin-3-il]-5-metil-5-(trifluorometil)-4-[(3,3,3-trifluoropropil)amino]-5,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-6-ona y la formula estructural (I-A)

   imagen2

   10 asi como sus sales, solvatos y solvatos de las sales.
3. 3. Enantiomero del compuesto (I) con el nombre sistematico de (5S)-2-[5-fluoro-1-(2-fluorobencil)-1H-pirazolo[3,4- b]piridin-3-il]-5-metil-5-(trifluorometil)-4-[(3,3,3-trifluoropropil)amino]-5,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-6-ona y la formula estructural (I-B)

   imagen3

   asi como sus sales, solvatos y solvatos de las sales.

   5
4. 4. Procedimiento para la preparation del compuesto de formula (I), tal como se define en la revindication 1, caracterizado porque se convierte un compuesto de formula (II)

   imagen4

   en un disolvente inerte con nitrito de iso-pentilo y un equivalente de halogeno en un compuesto de formula (III)

   imagen5

   y este se hace reaccionar a continuation en un disolvente inerte, dado el caso en presencia de una base adecuada, con un compuesto de formula (IV)

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   imagen6

   para dar el compuesto de formula (I)

   imagen7

   y dado el caso el compuesto de formula (I) resultante se convierte dado el caso con los correspondientes (i) disolventes y/o (ii) acidos o bases en sus solvatos, sales y/o solvatos de las sales.
5. 5. Procedimiento de acuerdo con la reivindicacion 4, caracterizado porque el compuesto de formula (I) se separa en sus enantiomeros.
6. 6. Compuesto de formula (I), (I-A) o (I-B), tal como se define en las reivindicaciones 1,2 o 3, para el tratamiento y/o la profilaxis de enfermedades.
7. 7. Uso de un compuesto de formula (I), (I-A) o (I-B), tal como se define en las reivindicaciones 1, 2 o 3, para la preparation de un farmaco para el tratamiento y/o la profilaxis de insuficiencia cardiaca, angina de pecho, hipertension, hipertension pulmonar, isquemias, enfermedades vasculares, insuficiencia renal, enfermedades tromboembolicas, enfermedades fibroticas y arteriosclerosis.
8. 8. Compuesto de formula (I), (I-A) o (I-B), tal como se define en las reivindicaciones 1, 2 o 3, para su uso en un procedimiento para el tratamiento y/o la profilaxis de insuficiencia cardiaca, angina de pecho, hipertension, hipertension pulmonar, isquemias, enfermedades vasculares, insuficiencia renal, enfermedades tromboembolicas, enfermedades fibroticas y arteriosclerosis.
9. 9. Farmaco que contiene un compuesto de formula (I), (I-A) o (I-B), tal como se define en las reivindicaciones 1,2 o 3, en combination con un coadyuvante inerte, no toxico y farmaceuticamente adecuado.
10. 10. Farmaco que contiene un compuesto de formula (I), (I-A) o (I-B), tal como se define en las reivindicaciones 1,2 o 3, en combinacion con otro principio activo seleccionado del grupo que esta constituido por nitratos organicos, donadores de NO, inhibidores de GMPc-PDE, agentes de action antitrombotica, agentes que reducen la tension arterial asi como agentes que modifican el metabolismo lipidico.
11. 11. Farmaco segun las reivindicaciones 9 o 10 para el tratamiento y/o la profilaxis de insuficiencia cardiaca, angina de pecho, hipertension, hipertension pulmonar, isquemias, enfermedades vasculares, insuficiencia renal, enfermedades tromboembolicas, enfermedades fibroticas y arteriosclerosis.