ES2615521T3 - Composiciones que contienen PUFA y métodos de uso de las mismas - Google Patents
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Abstract
Una composición que comprende: (1) ácido docosahexaenoico; (2) uridina o un uridin-5'-monofosfato; y (3) colina o una sal de colina, para uso en el tratamiento de un sujeto humano con un trastorno seleccionado entre enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Pick, enfermedad de cuerpos de Lewy, enfermedad Huntington y deterioro cognitivo leve (MCI).
Description
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realización, el sujeto es un niño. En otra realización, el sujeto es un niño pequeño. En otra realización, el sujeto es un adulto. En otra realización, el sujeto es un adulto que está envejeciendo. En otra realización, “envejecer” se refiere a cualquiera de las realizaciones enumeradas con anterioridad.
“Bebé” se refiere, en otra realización, a un sujeto tiene menos de 1 año. En otra realización, el término se refiere a un sujeto cuya edad es inferior a 18 meses. En otra realización, el término se refiere a un sujeto cuya edad es inferior a 6 meses, inferior a 7 meses, 8 meses, 9 meses, 10 meses, 11 meses, 13 meses, 14 meses o inferior a 16 meses. En otra realización, el término se refiere a un sujeto cuya edad es inferior a 20 meses o inferior a 2 años. En otra realización, el término se refiere a un sujeto que todavía no ha sido destetado. En otra realización, el término se refiere a un sujeto que ha sido destetado, pero que se encuentra incluido dentro de los intervalos etarios antes citados.
“Niño” se refiere, en otra realización, a un sujeto cuya edad es inferior a 18 años. En otra realización, el término se refiere a un sujeto cuya edad es inferior a 17 años, que tiene una edad inferior a 16 años, 15 años, 14 años, 13 años, 12 años, 11 años, 10 años, 9 años, 8 años, o que tiene una edad inferior a 7 años.
“Niño pequeño” se refiere, en otra realización, a un sujeto cuya edad es inferior a 7 años. En otra realización, el término se refiere a un sujeto cuya edad es inferior a 6 años, o que tiene una edad inferior a 5 años, que tiene una edad inferior a 4 años, que tiene una edad inferior a 3 años y medio, que tiene una edad inferior a 3 años o que tiene una edad inferior a 2 años y medio.
“Adulto” se refiere, en otras realizaciones, a un sujeto que supera una de las edades mencionadas anteriormente como el límite superior para un niño. En otra realización, el término se refiere a un sujeto que supera una de las edades mencionadas anteriormente como el límite superior para un niño pequeño.
En otra realización, la presente invención provee una composición para usar en el tratamiento de un sujeto con enfermedad de Pick, que comprende: (a) uridina o uridin-5’-monofosfato y (b) el ácido graso omega-3 DHA y (c) colina o una sal de colina, por lo cual la composición aumenta un síntesis de un fosfolípido mediante una célula neuronal o célula cerebral del sujeto, tratando así a un sujeto con enfermedad de Pick. En otra realización, la presente invención provee una composición para usar en el tratamiento de un sujeto con enfermedad de cuerpos de Lewy, que comprende: (a) uridina o uridin-5’-monofosfato, y (b) el ácido graso omega-3 DHA y (c) colina o una sal de colina, por lo cual, la composición aumenta un síntesis de un fosfolípido mediante una célula neuronal o célula cerebral del sujeto, tratando así a un sujeto con enfermedad de cuerpos de Lewy. En otra realización, la presente invención provee una composición para usar en el tratamiento de un sujeto con enfermedad Huntington, que comprende: (a) uridina o uridin-5’-monofosfato, y (b) el ácido graso omega-3 DHA y (c) colina o una sal de colina, por lo cual, la composición aumenta un síntesis de un fosfolípido mediante una célula neuronal o célula cerebral del sujeto, tratando así a un sujeto con enfermedad Huntington. En otra realización, la presente invención provee una composición para usar en el tratamiento de un sujeto con un MCI, que comprende: (a) uridina o uridin-5’monofosfato, y (b) el ácido graso omega-3 DHA, y (c) colina o una sal de colina, por lo cual, la composición aumenta un síntesis de un fosfolípido mediante una célula neuronal o célula cerebral del sujeto, tratando así a un sujeto con un MCI.
Las composiciones descritas en este documento son aptas para el tratamiento de un sujeto con demencia vascular, aumentando la síntesis de un fosfolípido mediante una célula neuronal o célula cerebral del sujeto, tratando así a un sujeto que padece demencia vascular.
Las composiciones descritas en este documento son aptas para el tratamiento de un sujeto con un trastorno neurológico relacionado con el envejecimiento aumentando la síntesis de un fosfolípido mediante la célula neuronal
o célula cerebral, tratando así a un sujeto con un trastorno neurológico relacionado con el envejecimiento.
En otra realización de composiciones de la presente invención, el DHA o la composición de la presente invención ejerce uno de los efectos enumerados en este documento, aumentando la síntesis de los fosfolípidos. En otra realización, el efecto se manifiesta sin aumentar la síntesis del fosfolípido.
En una realización, las composiciones de la presente invención pueden comprender una fuente de uridina. El término “fuente” se refiere a un compuesto que aumenta la concentración del compuesto deseado (uridina, colina, etc.) en el torrente sanguíneo o en los tejidos. En otra realización, la “fuente” se refiere a un compuesto que se metaboliza mediante un tejido o enzima del sujeto al compuesto deseado. En otra realización, la “fuente” se refiere a un compuesto que se metaboliza mediante una célula diana al compuesto deseado. En otra realización, la fuente de uridina es citidina, que se convierte en uridina mediante el hígado humano.
En otra realización, la fuente de uridina es una citidin-5’ monofosfato. En otra realización, la fuente de uridina es una citidin-5’ difosfato. En otra realización, la fuente de uridina es una citidin-5’ trifosfato. En otra realización, la fuente de uridina es cualquier otro fosfato de citidina conocido en la técnica. En otra realización, la fuente de uridina es una CDP-colina.
El uridin-fosfato utilizado en las composiciones de la presente invención es uridin-5’-monofosfato.
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En otra realización, la dosificación de DHA es de al menos 400 mg/día. En otra realización, la dosificación es de al menos 500 mg/día. En otra realización, la dosificación es de al menos 600 mg/día. En otra realización, la dosificación es de al menos 700 mg/día. En otra realización, la dosificación es de al menos 800 mg/día. En otra realización, la dosificación es de al menos 900 mg/día. En otra realización, la dosificación es de al menos 1 g/día. En otra realización, la dosificación es de al menos 1200 mg/día. En otra realización, la dosificación es de al menos 1,5 g/día. En otra realización, la dosificación es de al menos 2 g/día.
En otra realización, la dosificación de DHA es de aproximadamente 400 mg/día. En otra realización, la dosificación es de aproximadamente 500 mg/día. En otra realización, la dosificación es de aproximadamente 600 mg/día. En otra realización, la dosificación es de aproximadamente 700 mg/día. En otra realización, la dosificación es de aproximadamente 800 mg/día. En otra realización, la dosificación es de aproximadamente 900 mg/día. En otra realización, la dosificación es de aproximadamente 1 g/día. En otra realización, la dosificación es de aproximadamente 1200 mg/día. En otra realización, la dosificación es de aproximadamente 1,5 g/día. En otra realización, la dosificación es de aproximadamente 2 g/día.
En otra realización, las mujeres embarazadas reciben una dosificación particular para satisfacer sus necesidades. En otra realización, el intervalo es de aproximadamente 200-2000 mg/día. En otra realización, el intervalo es de aproximadamente 400-1700 mg/día. En otra realización, el intervalo es de aproximadamente 600-1500 mg/día. En otra realización, el intervalo es de aproximadamente 800-1300 mg/día. En otra realización, el intervalo es de aproximadamente 200-3000 mg/día. En otra realización, el intervalo es de aproximadamente 400-3000 mg/día. En otra realización, el intervalo es de aproximadamente 600-3000 mg/día. En otra realización, el intervalo es de aproximadamente 800-3000 mg/día. En otra realización, el intervalo es de aproximadamente 1000-3000 mg/día. En otra realización, el intervalo es de aproximadamente 2000-3000 mg/día. En otra realización, la dosificación para las mujeres embarazadas es de aproximadamente 1000 mg/día. En otra realización, la dosificación es de aproximadamente 1500 mg/día. En otra realización, la dosificación es de aproximadamente 2000 mg/día. En otra realización, la dosificación es de aproximadamente 3000 mg/día.
En otra realización, los sujetos con niveles elevados de colesterol reciben una dosificación particular para satisfacer sus necesidades. En otra realización, la dosificación para los sujetos con niveles elevados de colesterol se ubica en el intervalo de aproximadamente 200-4000 mg/día. En otra realización, la dosificación para los sujetos con niveles elevados de colesterol se ubica en el intervalo de aproximadamente 400-3500 mg/día. En otra realización, la dosificación para los sujetos con niveles elevados de colesterol se ubica en el intervalo de aproximadamente 6003000 mg/día. En otra realización, la dosificación para los sujetos con niveles elevados de colesterol se ubica en el intervalo de aproximadamente 1000-2500 mg/día. En otra realización, la dosificación para los sujetos con niveles elevados de colesterol se ubica en el intervalo de aproximadamente 1500-2300 mg/día. En otra realización, la dosificación para los sujetos con niveles elevados de colesterol es de aproximadamente 2000 mg/día.
En las composiciones de la presente invención, el DHA se incluye en una de las dosis anteriores. En otra realización, la dosificación de DHA es 1-50 mg/kg/día. En otra realización, la dosificación de DHA es 400-1000 mg/día. En otra realización, el EPA se incluye, además, en una de las dosis anteriores. En otra realización, la dosificación de EPA es 1-50 mg/kg/día. En otra realización, la dosificación de EPA es de 400-1000 mg/día. Cada dosificación representa una realización separada de la presente invención.
En otra realización, el ácido eicosahexaenoico (EPA) se administra en forma conjunta con el DHA o además de este. En otra realización, el EPA se añade en una dosificación de aproximadamente 200 mg/día. En otra realización, la dosificación es de 100-300 mg/día. En otra realización, el intervalo es de 150-250 mg/día. En otra realización, el intervalo es de 170-230 mg/día. En otra realización, el intervalo es de 100-1000 mg/día. En otra realización, el intervalo es de 150-800 mg/día. En otra realización, el intervalo es de 200-600 mg/día. En otra realización, el intervalo es de 300-500 mg/día. En otra realización, la dosificación es de aproximadamente 300 mg/día. En otra realización, la dosificación es de aproximadamente 400 mg/día. En otra realización, la dosificación es de aproximadamente 500 mg/día. En otra realización, la dosificación es de aproximadamente 600 mg/día. En otra realización, la dosificación es de aproximadamente 800 mg/día. En otra realización, la dosificación es de aproximadamente 1000 mg/día.
En otra realización, las mujeres embarazadas reciben una dosis mayor de EPA. En otra realización, la dosificación es de aproximadamente 1200 mg/día. En otra realización, la dosificación es de aproximadamente 1500 mg/día. En otra realización, la dosificación es de aproximadamente 1800 mg/día. En otra realización, la dosificación es de aproximadamente 2000 mg/día. En otra realización, la dosificación es de aproximadamente 2500 mg/día. En otra realización, la dosificación es de aproximadamente 3000 mg/día. En otra realización, la dosificación es de 500-3000 mg/día. En otra realización, la dosificación es de 800-3000 mg/día. En otra realización, la dosificación es de 10003000 mg/día. En otra realización, la dosificación es de 1500-3000 mg/día. En otra realización, la dosificación es de 2000-3000 mg/día. En otra realización, la dosificación es de 500-2000 mg/día. En otra realización, la dosificación es de 800-2000 mg/día. En otra realización, la dosificación es de 1000-2000 mg/día. En otra realización, la dosificación es de 1500-2000 mg/día.
La dosis de uridina incluida en las composiciones de la presente invención, en otra realización, varía entre 10 y 500 mg/día (inclusive). En otra realización, la dosis es de 20-500 mg/día. En otra realización, la dosis es de 30-500
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clases de fosfolípidos individuales (PC, PE, SM, PS y PI) se rasparon para separarlas de las placas y se extrajeron en 1 ml de metanol; se secaron al vacío y se sometieron a ensayo para determinar el contenido de fósforo. El fósforo total se determinó por comparación con las curvas estándar, usando una tanda de KH2PO4 con cada ensayo. A cada muestra se le añadieron 0,5 ml de HClO4 al 4,5 %/H2SO4 al 27 % y los tubos se calentaron a 180 °C durante 3 h. Después de enfriar a temperatura ambiente, se añadieron 5 ml del reactivo de color (una dilución de 10:1 de unas soluciones que contenían 2,5 mg/ml de molibdato de amonio, 8,2 mg/ml de acetato de sodio y 100 mg/ml de ácido ascórbico respectivamente), y los tubos se incubaron durante 2 horas, a 37 °C. La absorbancia se midió por espectrofotometría a 820 nm. La masa de fosfolípidos se determinó multiplicando el contenido de fosforo por 25.
Análisis estadístico
Los datos se analizaron por ANOVA unilateral (análisis de varianza) y luego por la prueba de Student.
Resultados
Para evaluar el efecto de los ácidos grasos omega-3 en la síntesis de los fosfolípidos, las células PC-12 se incubaron con colina marcada con 14C, después de una preincubación de 18 horas con o sin DHA. Después se midió la incorporación del marcaje en los fosfolípidos. Se usaron ácido oleico y ácido palmítico, que no son ácidos grasos omega-3, como controles negativos. La síntesis de fosfatidilcolina (PC) aumentó significativamente por la preincubación con DHA, pero no con el ácido oleico o con el ácido palmítico, tal como se evidencia por la mayor incorporación de marcaje en PC (figura 1). De este modo, el tratamiento con ácidos grasos omega-3 aumenta la síntesis celular de los fosfolípidos.
Ejemplo 2
Los ácidos grasos omega-3 aumentan la síntesis de un número de fosfolípidos de un modo dependiente de la dosis
Para caracterizar aún más la estimulación de síntesis de los fosfolípidos por los ácidos grasos omega-3, las células PC-12 se trataron previamente con diferentes dosis de DHA y se expusieron a colina marcada, tal como se describe en el ejemplo 1 y luego se midió la incorporación de la etiqueta 14C en los fosfolípidos. El tratamiento previo con DHA aumentó la síntesis de los fosfolípidos (figura 2). El aumento de la síntesis dependió de la dosis. Así, los ácidos grasos omega-3 estimulan la síntesis de los fosfolípidos de un modo dependiente de la dosis.
Ejemplo comparativo 3
El tratamiento de las células SHSY-5Y con ácidos grasos omega-6 aumenta la síntesis de los fosfolípidos
Materiales y métodos experimentales
Cultivo celular
Las células SHSY-5Y se cultivaron hasta casi la confluencia en DMEM + FBS al 10 % en placas de 35 mm. Las células se incubaron durante 18 h en DMEM sin suero + FBS al 1 % que contenía 30 µM de colina +/-10 µM de DHA, ácido araquidónico o ácido palmítico. Luego las células se marcaron, y los fosfolípidos marcados se cuantificaron como se describe en el ejemplo 1.
Preparación del complejo DHA-BSA
El DHA se disolvió en etanol a una concentración de 100 micromolares y se congeló en alícuotas de 10 microlitros a -80 °C. Para cada experimento, se diluyó una alícuota en etanol a 10 micromolares; el volumen con el que se obtenía la solución final deseada en el medio de incubación se mezcló con un volumen igual de solución de BSA (1 gm/ml).
Resultados
El efecto de los ácidos grasos omega-6 en la síntesis de los fosfolípidos se examinó luego en las células SHSY-5Y, sobre una línea celular de neuroblastoma humano. En este caso, la síntesis de los fosfolípidos se optimizó por el ácido araquidónico, un ácido graso omega-6, pero no así por el DHA o el ácido palmítico (figura 3A).
Ejemplo comparativo 4
Los ácidos grasos omega-6 aumentan la síntesis de un número de fosfolípidos de un modo dependiente de la dosis
El efecto del ácido araquidónico sobre la síntesis de los fosfolípidos en las células SHSY-5Y se caracterizó de un modo más detallado, tal como se describe para todos los ácidos grasos omega-3 y las células PC-12 en el ejemplo
2. El ácido araquidónico aumentó la síntesis de los fosfolípidos totales, de la PC y de la fosfatidiletanolamina en diversas posologías, de un modo dependiente de la dosis, tal como se observa por el DHA (figura 3B). De este modo, los ácidos grasos omega-6 estimulan la síntesis de una variedad de fosfolípidos de un modo dependiente de la dosis.
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