ES2564417T3 - Composiciones de lignosulfonatos que protegen y mejoran los cultivos - Google Patents
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Abstract
Composición para la protección de un cultivo agrícola contra la tensión biótica causada por los microorganismos, particularmente hongos, cuya composición que comprende uno o más lignosulfonatos y natamicina.
Description
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DESCRIPCION
Composiciones de lignosulfonatos que protegen y mejoran los cultivos
La presente invencion se refiere a las composiciones para la proteccion de los cultivos, tales como cereales tipo trigo, mafz, etc., y flores, frutas, etc. contra amenazas externas, particularmente contra patogenos, tales como hongos, para mejorar el rendimiento y/o calidad, en los metodos que usan estas composiciones y para las plantas o partes de las plantas tratadas con la composicion.
Los cultivos agncolas con frecuencia se someten a diversas amenazas bioticas y abioticas, que puede ser inducidas por patogenos, malas hierbas, la temperatura, la seqma, la luz, etc. Estos factores de tension pueden afectar el rendimiento y/o la calidad del producto. Adicionalmente, generalmente, se aprecia por los consumidores comprar productos de alta calidad sin smtomas de tension, tales como el amarillamiento de las hojas, marchitamiento o clorosis.
Las plantas son amenazadas por diversos microorganismos patogenos como los hongos, los virus y las bacterias. Para superar el problema de las infecciones por estos microorganismos, se aplican grandes cantidades de compuestos antimicrobianos (particularmente, los pesticidas sinteticos, tales como fungicidas y bactericidas). A partir del punto de vista del medio ambiente y la salud, se prefiere disminuir la cantidad de productos qmmicos que se aplican a las plantas y el suelo.
Se sabe que ciertos compuestos de origen natural pueden proteger la planta contra los microorganismos patogenos. Los llamados compuestos naturales para la proteccion de los cultivos (NCP) son sustancias organicas derivadas de organismos naturales (por ejemplo, feromonas, extractos de plantas), o compuestos inorganicos que se encuentran en el medio ambiente natural (por ejemplo, fosfatos, azufre). Asf, en comparacion con los (NCP), los pesticidas convencionales son productos qmmicos sinteticos disenados espedficamente para la proteccion de las plantas. El uso de los compuestos naturales para la proteccion de los cultivos (NCP) es cada vez mas preferido ya que los gobiernos de todo el mundo tienen como objetivo la reduccion del uso de compuestos antimicrobianos sinteticos.
Sin embargo, los NCP tienen una utilidad limitada, debido a que generalmente, exhiben solo una actividad modesta. Cuando se usan en altas concentraciones, frecuentemente tienen efectos fitotoxicos. Adicionalmente, la accion de los NCP parece ser bastante impredecible (dependiendo de la planta y las condiciones ambientales). Esto explica por que la aplicacion de los NCP no se ha generalizado, a pesar de sus propiedades toxicologicas y ambientales muy favorables.
Por lo tanto, el primer objetivo de la invencion es mejorar la utilidad de los NCP.
JPS5675417 describe fungicidas de plantas de arroz que comprenden kasugamicina y lignosulfonato de calcio.
En la investigacion que condujo la presente invencion, sorprendentemente, se encontro que todos los problemas identificados anteriormente se pueden resolver con las composiciones que comprenden uno o mas lignosulfonatos y natamicina.
Los lignosulfonatos son un derivado de la lignina y la forma comercialmente disponible de estos. La lignina es un componente de origen natural de las paredes celulares de plantas (por ejemplo en la madera) y uno de los recursos mas abundantes y renovables de la naturaleza. La molecula de lignosulfonato es compleja y puede entrar en muchos tipos de reacciones qmmicas. Esta versatilidad permite que sea modificada en una familia completa de productos qmmicos especiales.
El lignosulfonato (LS) es un subproducto de la fabricacion del papel obtenido a partir del licor de la madera agotado del pulpeo de sulfito. Es una mezcla compleja de polfmeros con grupos sulfonato unidos a las moleculas y puede contener una cantidad sustancial de azucares reductores. Particularmente los grupos sulfonato proporcionan LS con propiedades de intercambio cationico, por ejemplo para los iones de amonio y metal. Debido a que los lignosulfonatos son un producto residual de la industria del papel, generalmente, estan disponibles y se pueden usar en la composicion a un costo relativamente bajo. Adicionalmente, los lignosulfonatos son biodegradables, ecologicos y seguros para su uso en la agricultura.
De acuerdo con el primer aspecto de la invencion se proporciona una composicion antimicrobiana que comprende lignosulfonatos (LS) y natamicina.
Asf, la invencion se refiere a la aplicacion de la natamicina en conjunto con uno o mas productos espedficos sostenibles que proporcionan un efecto sinergico o aditivo, y/o protegen a la planta contra la actividad fitotoxica de la NCP . Estos productos sostenibles espedficos son biodegradables y ecologicos. El producto sostenible es lignosulfonato (LS) y los productos derivados de este.
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La composicion puede comprender ademas, compuestos qmmicos antimicrobianos, particularmente pesticidas qmmicos, mas particularmente fungicidas qmmicos. La invencion proporciona asf, la aplicacion combinada de cantidades reducidas de natamicina y uno o mas productos sostenibles que proporcionan un efecto sinergico o aditivo, y/o impiden la actividad fitotoxica de la natamicina contra la planta.
En la presente ademas, el producto sostenible es LS.
Asf, de acuerdo con la invencion se encontro que mediante la combinacion del ingrediente activo con LS la eficacia del ingrediente activo puede mejorarse y/o la planta que se trata puede protegerse de la fitotoxicidad del ingrediente activo.
Fue particularmente sorprendente encontrar que mediante el uso de ellos en conjunto con LS algunos metales que son en sf toxicos a los hongos y levaduras que se pueden usar en cantidades mucho mas bajas para conseguir un efecto comparable.
Los metales que se encontraron que eran particularmente utiles en la invencion son el cobre, zinc, aluminio, titanio, plata, cobalto y manganeso. El metal-LS tiene una actividad particularmente buena contra los hongos y las algas.
En una modalidad particular de la presente invencion se usan los lignosulfonatos de titanio (TiLS) y/o plata (AgLS). El uso del titanio y/o la plata mejora mas aun el efecto antimicrobiano de la composicion. TILS contiene TiO2. El TO2 finamente distribuido cataliza en la irradiacion UV de la formacion de los radicales de oxfgeno que tienen actividad biocida. TO2 no es toxico para los seres humanos (por ejemplo, esta presente en la pasta de dientes). Los lignosulfonatos de plata liberan iones Ag en un medio acuoso. Los iones Ag son toxicos para los microorganismos y por lo tanto, contribuyen a la efectividad de la composicion.
El cobre es conocido por su actividad fungicida. Sin embargo, para ser efectivo se necesitan kilogramos de compuestos de cobre por hectarea tales como el sulfato de cobre o el oxido de cobre. Desde el punto de vista ambiental eso es demasiado y estos compuestos de cobre se prohibieron por lo tanto, como agente de proteccion de cultivos. A partir de los ejemplos se deduce que cuando se combina con lignosulfonato, la cantidad de cobre puede reducirse a decenas de gramos por hectarea permitiendo asf la disponibilidad del cobre otra vez como agente de proteccion de cultivos.
Los compuestos naturales de proteccion de los cultivos son agentes de origen natural y protegen a las plantas o productos vegetales contra organismos o impiden la actividad del organismo; influyen en los procesos vitales de las plantas sin ser fertilizantes; conservan los productos vegetales, exterminan las plantas no deseadas; o destruyen las partes de la planta o impiden o inhiben el crecimiento no deseado de las plantas. Las listas de los NCP se pueden encontrar en
http://www.gewasbescherming.nl/index10i.html.
http://www.gewasbescherming.nl/index10i.html.
En la invencion, el primero de mas compuestos naturales de proteccion de los cultivos es la natamicina.
La natamicina es muy sensible a la luz. La combinacion con lignosulfonatos permite que la natamicina pueda aplicarse a las hojas, mientras que conserva su actividad.
Los lignosulfonatos no solo reducen la fitotoxicidad de los NCP sino que protegen los compuestos antimicrobianos de la composicion contra la degradacion permitiendo asf, su uso en la agricultura. Ademas, los lignosulfonatos proporcionan un efecto sinergico, haciendo las plantas menos susceptibles a los compuestos antimicrobianos y aumentando el efecto de tales compuestos.
"Metal-LS" tal como se usa en esta solicitud se refiere a la combinacion de cualquier o mas metales con LS. El metal puede ser cualquiera unido a LS (por ejemplo como contra-iones) o se pueden utilizar en la misma composicion o al mismo tiempo como LS.
El termino "acido-LS" tal como se usa en esta solicitud se refiere a la combinacion de cualquier o mas acidos con LS. El acido puede ser unido al LS o se pueden utilizar en la misma composicion o al mismo tiempo que LS.
"Al mismo tiempo" en estas definiciones no significa necesariamente que el metal o el acido y el LS deben estar presentes en el mismo penodo de tiempo completo, pero su presencia en o sobre la parte de la planta tambien puede superponerse parcialmente. "En la misma composicion" no significa necesariamente que los dos o mas ingredientes deben estar presentes en una composicion antes de la administracion a la planta o parte de planta, pero que en algun momento durante el tratamiento, los dos o mas ingredientes estan en contacto. Asf, ademas puede significar que un ingrediente se aplica despues de otro.
Antimicrobiano, particularmente composiciones fungicidas de la invencion son aun mas eficaces cuando se usan en una formulacion que permite que el ingrediente activo permanezca en contacto con la planta o parte de la planta durante un penodo de tiempo prolongado. Es por ejemplo particularmente util para administrar la composicion de la invencion en
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una forma que impide que la composicion de ondulado de las hojas, etc., para las que se administran. Las composiciones de la invencion pueden comprender mas aun compuestos que facilitan la extension, la efectividad, la estabilidad, etc. de las composiciones. Ejemplos de tales compuestos son los detergentes, amortiguadores, agentes quelantes, agentes de extension, conservantes.
La composicion con funcion antimicrobiana se puede aplicar a las plantas en forma de solido, pero ademas se puede aplicar en solucion. La solucion se puede aplicar sobre las plantas de cultivo utilizando metodos conocidos por una persona con experiencia en la industria, pero se aplica preferentemente por rociado. El rociado permite una distribucion uniforme de la composicion.
Debido a las excelentes caractensticas anti-microbianas de la composicion de la presente invencion, la composicion se puede utilizar para la proteccion de plantas de cultivo en crecimiento, pero ademas puede ser utilizado para la descontaminacion y la posterior conservacion y proteccion de partes de la planta, tales como semillas y bulbos, contra microorganismos patogenos.
La persona experta es muy capaz de disenar la formulacion mas util para una aplicacion particular.
El lignosulfonato esta, en general, unido con el Ca2+, pero ademas puede estar unido con otros cationes organicos e inorganicos.
En una modalidad de la invencion, el componente lignosulfonato de la composicion comprende al menos en parte lignosulfonato de amonio y/o lignosulfonato potasio. Estos dos cationes son nutrientes valiosos para las plantas de cultivo. Debido a que el lignosulfonato es un material de intercambio de iones se puede utilizar para adicionar estos nutrientes al suelo mediante el intercambio de los iones con iones menos deseables presentes en el suelo o sustrato. De esta manera, los nutrientes se pueden adicionar facilmente. Ya que el amonio y el potasio son asf liberados lentamente de la parte superior de la capa de una formulacion de liberacion sostenida se proporciona a las plantas de cultivo en crecimiento.
El metal-LS de la invencion ademas tiene propiedades de liberacion sostenida cuando el metal esta unido al LS. Esta dentro del conocimiento general promedio de la persona experta para preparar el complejo del metal-LS.
Debido a que las funciones de la capa superior como una matriz de liberacion sostenida ademas, otros compuestos se pueden adicionar a la formulacion los que mejoran el crecimiento de las plantas de cultivo como elementos trazas como el cobre, el molibdeno, el boro, el zinc, el manganeso, el cobalto; nutrientes de las plantas, tales como el nitrogeno, el potasio, el magnesio; agentes antimicrobianos como el carvacrol, la azadiractina, y otros NCP como se ha mencionado en esta solicitud.
La invencion se relaciona ademas con metodos para la proteccion de las plantas y partes de las plantas contra patogenos en donde las composiciones de la invencion se aplican al suelo, el substrato, la planta o parte de la planta.
El lignosulfonato es tipicamente una mezcla de mas o menos degradados residuos de lignina de diferentes tamanos. Esta mezcla se puede fraccionar y/o tratar qmmicamente. Cuando se usa en esta aplicacion los terminos "lignosulfonato" y "lignosulfonatos" estan pretendiendo significar tanto crudo, formas no tratadas de lignosulfonato, asf como lignosulfonato mas o menos purificado y/o modificado qmmicamente o fracciones de ellos.
Los lignosulfonatos pueden ser o bien una mezcla o moleculas de lignosulfonato aisladas. Por lo general, se utiliza una mezcla cruda, pero La invencion puede, en algunas aplicaciones, tales como la inmunizacion, beneficiarse de la utilizacion de LS puros Las mezclas de crudo sin embargo contienen de 5 a 10% de azucares reductores que pueden conducir a pegajosidad de partes de la planta, tales como hojas, cuando una solucion del mismo se roda sobre la planta o se aplican a la planta de cualquier otra forma. Las mezclas crudas sin embargo, son mas rentables, ya que no requieren un fraccionamiento posterior para eliminar los azucares. Los lignosulfonatos utilizados segun La invencion son por lo general Ca-lignosulfonatos o NH 4-llignosulfonatos.
Tal como se usa en esta solicitud, el termino "ingrediente activo" pretende significa cualquier ingrediente que contribuye a la funcion de la composicion.
La invencion se ejemplificara mas aun con referencia a las siguientes figuras y ejemplos. Sin embargo debe entenderse que estas figuras y ejemplos no pretenden limitar La invencion de cualquier manera posible.
Las figuras muestran:
Figura 1: Efecto del CaLS y la natamicina en el desarrollo de Botrytis elliptica en las puntas de las hojas de lirio. A la izquierda: control (sin tratamiento); en el medio: el tratamiento con la formulacion; a la derecha: el tratamiento formulado
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con natamicina. La formulacion contema 0.5% (V/V) CaLS, 0.08% de EDTA y 0.007% NU-film-17 (un engomado/esparcidor no ionico; Miller).
Figura 2: Efecto del TiLS, el CaLS y la natamicina en el desarrollo de Botrytis elliptica en las puntas de las hojas de lirio. Panel superior: Efecto del TiLS y el CaLS. Panel inferior: Efecto de (combinaciones de) natamicina y TiLS.
Figura 3: Efecto del titanio-LS en el crecimiento de Botrytis en placas de petri con medio de cultivo caldo nutriente.
Figura 4: Efecto del plata-LS en el crecimiento de Botrytis en placas de petri con medio de cultivo caldo nutriente.
Figura 5: Placas petri que muestran el efecto de diferentes combinaciones de metal -LS y/o conservantes en el crecimiento de Botrytis dnerea.
Figura 5A: Fila superior muestra los efectos despues de 3 dfas de tratamiento con control de agua y tratamiento con bronopol, fila inferior muestra los efectos despues de 3 dfas de tratamiento con control de agua y tratamiento con acido sodiometylparabenzoico.
Figura 5B: De izquierda a derecha: efectos del agua, 1 g/L de cobre-LS (Cu-LS), 1.5 g/L de cobalto-LS (Co-LS) y la combinacion de 1 g/L de Cu-LS y 1.5 g/L de Co-LS despues de 3 dfas.
Figura 5C: De izquierda a derecha: efectos del agua, 5 g/L de cobre-LS (Cu-LS), 5 g/L de zinc-LS (Zn-LS) y la combinacion de 5 g/L de Cu-LS y 5 g/L de Zn-LS despues de 3 dfas.
Figura 5D: De izquierda a derecha: efectos del agua, 5 g/L de cobre-LS (Cu-LS), 5 g/L de acido formico (Formico-LS) y la combinacion de 5 g/L de Cu-LS y 0.5 g/L Formico-LS despues de 3 dfas.
Figura 5E: De izquierda a derecha: efectos del agua, 5 g/L de zinc-LS (Zn-LS), 0.5 g/L de acido formico (Formico-LS) y la combinacion de 5 g/L de Cu-LS y 0.5 g/L Formico-LS despues de 3 dfas.
Figura 5F: El panel superior de izquierda a derecha: efectos del agua, 5 g/L de cobre-LS (Cu-LS), y 5 g/L de zinc-LS (Zn-LS) despues de 7 dfas; fila inferior de izquierda a derecha: efectos de 7.5 g/L de cobalto-LS (Co-LS), la combinacion de 5 g/L de Cu-LS y 7.5 g/L Co-LS, y la combinacion de 5 g/L Zn -LS y 7.5 g/L de Co-LS despues de 7 dfas.
Figura 5G: El panel superior de izquierda a derecha: efectos del agua, 5 g/L de cobre-LS (Cu-LS), y 5 g/L de zinc-LS (Zn-LS) despues de 7 dfas; fila inferior de izquierda a derecha: efectos de 7.5 g/L de aluminio-LS (Al-LS), la combinacion de 5 g/L de Cu-LS y 7.5 g/L de Al-LS, y la combinacion de 5 g/L Zn-LS y 7.5 g/L de Al-LS despues de 7 dfas.
Figura 5H: El panel superior de izquierda a derecha: efectos del agua y 5 g/L de cobre-LS (Cu-LS) despues de 7 dfas; fila inferior de izquierda a derecha: efectos de 0.25 g/L de acido sodiometilparabenzoico (paraben), y la combinacion de 5 g/L de Cu-LS y 0.25 g/L de paraben despues de 7 dfas.
Figura 5I: El panel superior de izquierda a derecha: efectos del agua, 5 g/L de cobre-LS (Cu-LS), 5 g/L de zinc-LS (Zn- LS) y la combinacion de 5 g/L de Cu-LS y 5 g/L Zn-LS despues de 7 dfas; fila inferior de izquierda a derecha: efectos de 0.5 g/L del acido formico (Formico-LS), la combinacion de 0.5 g/L de Formico-LS y 0.5 g/L de Cu-LS, y la combinacion de 5 g/L Zn-LS y 0.5 g/L de Formico-LS despues de 7 dfas.
Figura 6: Efectos de diferentes tratamientos de Phytophthora infestansinfeccion en hojas (expresado como porcentaje de hojas totales) en la papa. Tres dfas despues del rociado con los diferentes compuestos-LS de las plantas de la papa se inocularon con Phytophthora. Una semana despues de la inoculacion se monitorearon los efectos. El panel superior muestra los efectos de diferentes compuestos de metal-LS en comparacion con el efecto de una concentracion suboptima del fungicida sintetico Shirlan®. El panel inferior muestra el efecto de tres concentraciones de cobre-LS (CuLS) en conjunto con tres concentraciones de Shirlan®.
Figura 7: Efectos del formulado de natamicina (diversas combinaciones) y el subproducto obstaculo (vease el texto del ejemplo 11) en bulbos de tulipan infectados con Fusarium (vease el Ejemplo 10 para el procedimiento de inoculacion) en comparacion con el efecto del control (sin tratamiento) y de los tratamientos con formaldetndo al 0.5%.
Ejemplos
EJEMPLO 1 (ejemplo comparativo, que no forma parte de la invencion)
Proteccion de Solanum niger las plantas a partir de la tension inducida por dosis bajas de herbicidas
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En un experimento Solanum niger las plantas se cultivaron durante 6 semanas despues de la siembra. Las plantas se rociaron despues con un nivel suboptimo del herbicida (ya sea con el 6% de la dosificacion recomendada de resumen, que contiene el compuesto activo glifosato, o con el 10% de la dosificacion recomendada en la etiqueta de 2,4 P, respectivamente). Los grupos de plantas se pulverizaron con una mezcla de la baja dosificacion del herbicida y diferentes concentraciones y tipos de LS (ver Tabla).
Los resultados a partir de la Tabla 1 muestran que el LS induce la tolerancia a la tension a las dosificaciones bajas de herbicidas.
Tabla 1
- Tratamiento
- Resumen (glifosato) 2,4-D Incremento porcentual en peso seco en comparacion con la aplicacion baja de herbicidas
- Peso seco (g) 6 semanas despues del tratamiento
- Resumen 2,4-D
- control sin tratamiento
- 2.4 g 2.4 g
- dosificacion normal del herbicida
- plantas muertas plantas muertas
- dosificacion baja del herbicida
- 1.15 g 1.05 g
- dosificacion baja del herbicida + 2g/L calcio-LS
- 1.9 g 1.85 g 65% 76%
- dosificacion baja del herbicida + 10g/L calcio-LS
- 1.6 1.3 39% 24%
- dosificacion baja del herbicida + 25g/L calcio-LS
- 2.35 1.1 104% 5%
- dosificacion baja del herbicida + 10 g/L hierro-LS
- 2.05 1.25 78% 19%
EJEMPLO 2 (ejemplo comparativo, que no forma parte de la invencion)
Efecto del NH4-LS y un NCP, carvacrol, sobre la infeccion (lesiones) de Botrytis elliptica en las puntas de las hojas de lirio
En todas las incubaciones la cantidad de NH4-LS fue de 5 g/L (la cantidad de carvacrol se brinda en la tabla).
En un sistema de prueba, se usaron las puntas de las hojas de lirio. Para la infeccion con patogenos, las puntas de las hojas se colocaron en bandejas de plastico cuadradas especiales (10 cm x 10 cm x 2 cm) que se dividieron en 25 secciones pequenas de 2 x 2 cm (ver la Figura 1). En el inicio de los experimentos, las bandejas se llenaron con agua (4 mL por seccion pequena). Despues las puntas de las hojas se colocaron en las bandejas y, finalmente, las puntas de las hojas se rociaron con las diferentes combinaciones de LS-NCP. En la tabla se brinda la combinacion de LS con carvacrol en una formulacion de di-1-P-menteno y EDTA.
Veinticuatro horas despues del tratamiento las puntas de las hojas en las bandejas se infectaron con 2 ?L de la suspension de esporas de Botrytis elliptica (aproximadamente 500 esporas /?L, ver mas abajo).
Posteriormente, las bandejas de plastico se pusieron en un envase transparente con alta humedad. Este envase se coloco en un invernadero con temperatura y humedad controladas (12 horas de luz, 20°C, y 400-600 ppm de CO2). Cada bandeja contema 15 puntas de las hojas y todos los experimentos se realizaron por triplicado.
Para la produccion de esporas de Botrytis, el hongo se cultivo en 25 ml de medio solido esteril que contiene caldo de
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cultivo Kquido. Las esporas se aplicaron a las hojas en medio Gamborg B5 (Gamborg 3.16 g/L, Na-fosfato de Na 10 mM, pH=6.5, sacarosa 10 Mm. Despues de 3, 5 y 7 dfas de incubacion el tamano (mm) de las lesiones de Botrytis se midio.
La Tabla 2 muestra los resultados.
Tabla 2
- Tratamiento
- Tamano de las lesiones (mm) despues de 3 dfas Tamano de las lesiones (mm) despues de 5 dfas Tamano de las lesiones (mm) despues de 7 dias
- Control sin tratamiento
- 6.8 8.6 14.2
- formulacion del control
- 5.3 7.5 12.5
- 5 g/L NH4-LS/ 0.2% carvacrol
- 0.9 1.8 2.7
- 5 g/L NH4-LS/ 0.8% carvacrol
- 0.2 0.3 0.3
- 5 g/L NH4-LS/ 1.6% carvacrol
- 0.1 0.5 1.2
EJEMPLO 3
Efecto de LS y natamicina en el desarrollo deBotrytis en las puntas de las hojas de lirio.
El mismo metodo se uso como en el Ejemplo 2.Las puntas de las hojas en la bandeja izquierda se trataron con agua, las puntas de las hojas en en el medio se trataron con la formulacion LS sin natamicina y las puntas de las hojas en la incubadora se trataron con la combinacion LS-natamicina.
La Figura 1 muestra que la natamicina formulada con LS protege muy bien contra Botrytis. La natamicina-LS ademas protege contra otros hongos. El tratamiento con natamicina sola proporciono una proteccion adecuada, pero ademas produjo algunos danos en las hojas. La combinacion con LS es por lo tanto mejor.
EJEMPLO 4
El efecto del Titanium-LS en el crecimiento deBotrytis en las puntas de lirio
El experimento se realizo como se describio en el Ejemplo 2 con la natamicina (2 g/L) y el titanio-LS (0.2 g/L y 1 g/L). Los resultados se muestran en la Figura 2. La combinacion de la natamicina y el titanio-LS en una cantidad de 1 g/L conduce a una ausencia completa de las lesiones.
EJEMPLO 5 (ejemplo comparativo, que no forma parte de la invencion)
Efecto del titanio-LS en el crecimiento de Botrytis en placas de Petri con medio de cultivo de caldo nutriente
Las esporas de Botrytis se incubaron en medio de cultivo esterilizado que contiene diferentes concentraciones de Ti-LS Las esporas se colocaron en el medio de la placa de Petri y se midio el tamano de la infeccion (diametro de la colonia deBotrytis) despues de 5 dfas. La Figura 3 muestra los resultados.
El resultado del experimento fue que a una concentracion inferior a 1.6 g/L de Ti-LS el desarrollo de Botrytis ya estuvo completamente bloqueado.
EJEMPLO 6 (ejemplo comparativo, que no forma parte de la invencion)
Efecto de la plata-LS en el crecimiento de Botrytis en placas de Petri con medio de cultivo caldo nutriente
Las esporas de Botrytis se incubaron en el medio de cultivo esterilizado que contiene diferentes concentraciones de Ag- LS Las esporas se colocaron en el medio de la placa de Petri y se midio el tamano de la infeccion (diametro de la colonia de Botrytis) despues de 5 dfas.
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La Figura 4 muestra que a una concentracion inferior a 1 g/L de Ag-LS el desarrollo de Botrytis se bloqueo completamente.
EJEMPLO 7 (ejemplo comparativo, que no forma parte de la invencion)
Efecto de metal-lignosulfonatos sobre el crecimiento de Botrytis en placas de Petri
Se probo el efecto de diferentes compuestos de lignosulfonatos sobre el desarrollo de las esporas de Botrytis cinerea y Botrytis elliptica incubadas en medio de cultivo que contiene extracto de malta in vitro. El extracto de malta fue de la comparMa Oxoid B.V. (Haarlem, Pafses Bajos) y el metodo usado estuvo de acuerdo con las instrucciones del fabricante.
Las placas de Petri se incubaron a 20°C durante 3 dfas en la oscuridad. Por placa Petri 700 esporas de Botrytis cinerea y 600 esporas de Botrytis elliptica se incubaron. El diametro de la colonia del hongo en la placa de Petri se da en la tabla 3.
Tabla 3
- Compuesto
- Diametro (mm)
- B. cinerea B. elliptica
- agua (referencia)
- 21 13
- CaCl2* (g/L) (referencia)
- 0.006
- 21 14
- 0.028
- 20 13
- 0.138
- 21 12
- 0.686
- 21 12
- 1.375
- 21 12
- Cu-LS (g/L)
- 0.04
- 22 14
- 0.2
- 20 15
- 1
- 18 12
- 5
- 13 7
- 10
- 4 0
- Co-LS (g/L)
- 0.04
- 20 13
- 0.2
- 20 13
- 1
- 13 10
- 5
- 0 2
- 10
- 0 1
- Al-LS (g/L)
- 0.04
- 22 13
- 0.2
- 20 13
- 1
- 19 12
- 5
- 16 10
- 10
- 0 1
5
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- Acido formico/acido propionico-LS(g/L)
- 0.04
- 20 13
- 0.2
- 17 12
- 1
- 0 0
- 5
- 0 0
- 10
- 0 0
- Na-metil-paraben (g/L) (referencia)
- 1
- 0 0
- 5
- 0 0
- 25
- 0 0
- Bronopol (mg/L) (referencia)
- 2
- 20 12
- 10
- 20 12
- 50
- 14 10
- *La concentracion de Ca en CaCh es igual a la concentracion de Ca en Ca-LS: la proporcion de calcio en Ca-LS fue aproximadamente 5%. Ca-LS = lignosulfonato de calcio; CaCh = cloruro calcico; Zn-LS = lignosulfonato de zinc; Cu-LS = lignosulfonato de cobre; Co-LS = lignosulfonato de cobalto; Al-LS = lignosulfonato de aluminio; acido formico/acido propionico LS = 34% acido formico + 7% acido propionico + 30% lignosulfonato + 29% agua; Na-metilparaben = acido metilparabenzoico de sodio; Bronopol = 2-bromo-2-nitro-1,3-propanodiol.
Los resultados muestran que los compuestos de metal-LS inhiben el crecimiento tanto de Botrytis cinerea como de Botrytis elliptica.
EJEMPLO 8 (ejemplo comparativo, que no forma parte de la invencion)
Efecto de las combinaciones de metal-lianosulfonatos sobre el crecimiento de Botrytis en placas de Petri
El mismo experimento como se describio en el Ejemplo 7 se llevo a cabo con combinaciones de metales u acido- lignosulfonatos entre sf o con fungicidas conocidos. La Figura 5 muestra los resultados despues de 3 dfas (Figuras 5A- E) y 7 dfas (Figuras 5F-1).
Se deduce a partir de esta figura que las combinaciones de dos metal-LS o un metal-LS con un fungicida conocido o con un acido-LS puede abolir completamente el crecimiento de Botrytis cinerea in vitro.
EJEMPLO 9 (ejemplo comparativo, que no forma parte de la invencion)
Lignosulfonato metalico para controlar Phytophthora infestans en la papa
Cinco plantas de papa se trataron con las siguientes soluciones de lignosulfonato en agua:
1) 1 g/L lignosulfonato de calcio (CaLS) (referencia);
2) 1 g/L lignosulfonato de aluminio (AlLS) ;
3) 1 g/L lignosulfonato de cobre (CuLS);
3a) 2.5 g/L lignosulfonato de cobre (CuLS);
4) 1 g/L lignosulfonato de titanio (TiLS);
Tres dfas despues del tratamiento, las 5-10 hojas de cada planta se inocularon en cinco lugares con Phytophthora infestans. Una semana despues se evaluaron las plantas. Los resultados se presentan en la Tabla 4.
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Tabls 4
- num.
- metal-LS (g/L) % de infeccion
- Control
- - 98.8
- 1 (referencia)
- CaLS (1) 98.8
- 2
- AlLS (1) 81.3
- 3
- CuLS (1) 12.5
- 3a
- CuLS (2.5) 5.6
- 4
- TiLS (1) 100
Se deduce que CuLS solo reduce significativamente la infeccion y asf, es activo por sf mismo como fungicida.
El efecto de estos lignosulfonatos sobre la actividad del fungicida comercial Shirlan® (ademas conocido como fluazinam o 2,6-dinitroanilina, o 3-cloro-N- [3-cloro-2,6-dinitro-4-(trifluorometil)fenil]-5-(trifluorometM)-2-piridinamina; obtenido a partir de Syngenta) se probo tambien. El experimento se realizo como se describio anteriormente con los mismos lignosulfonatos metalicos, en la misma concentracion y adicionalmente 0.0032 L/ha o 0.016 L/ha de Shirlan®. Los resultados se muestran en la tabla 5 y la Figura 6.
Tabla 5
- num.
- metal-LS (g/L) % de infeccion
- 0 L/ha Shirlan®
- 0.0032 1/ha Shirlan® 0.016 L/ha Shirlan®
- Control
- - 98.1 93.1 64.5
- 1 (referencia)
- CaLS (1) 98.8 98.8 62.9
- 2
- AlLS (1) 81.3 66.3 32.5
- 3
- CuLS (1) 12.5 13.8 3.8
- 3a
- CuLS (2.5) 5.6 6.3 2.5
- 4
- TiLS 100.0 85.0 40.0
Se deduce de la Tabla 5 y la Figura 6 que el metal-LS mejora significativamente la actividad fungicida de Shirlan®, que es un claro efecto sinergico.
EJEMPLO 10 (ejemplo comparativo, que no forma parte de la invencion)
Uso del acido-LS en la proteccion contra Fusarium en bulbos de tulipan
La composicion contiene 30% de acido formico, 6% de acido propionico, 20% de LS y 44% de agua para el tratamiento de los bulbos de tulipan infectados con Fusarium.
Cinco macetas se llenaron con tierra de maceta y 10 bulbos de tulipan cultivar Prominence, tamano 12/13. Los bulbos se inocularon con Fusarium sumergiendolos 15 minutos en una solucion altamente infectada con Fusarium.
Los resultados de la prueba se resumen en la Tabla 6.
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Tabla 6
- Composicion
- infeccion estado de la planta despues de 1 mes* % efloramiento despues de 6 semanas % Fusarium en el bulbo
- infeccion pesada
- infeccion ligera Total
- sin tratamiento
- no infestado 7.2 78 30 54 84**
- sin tratamiento
- infestado 3.4 0 100 0 100
- 0.5% formaldehndo (referencia)
- infestado 10 100 0 22 22
- 1% composicion de la invencion
- infestado 9.4 96 8 42 50
* el estado de la planta vana a partir de 0 (mal) a 10 (bien) La infeccion con **Fusarium puede ser de origen natural o inducida sumergiendo el bulbo en la solucion de Fusarium
No se encontraron smtomas fitotoxicos durante el cultivo. La composicion de la invencion es muy eficaz en el tratamiento del Fusarium.
Ejemplo 11
Uso de Cu-LS en conjunto con natamicina en la proteccion contra Fusarium en bulbos de tulipanes
El experimento se realizo como se describio en el Ejemplo 10 pero con diferentes tratamientos que se resumen en la tabla 7.
Tabla 7
- Numero
- Tratamiento
- 1 (control)
- Agua
- 2 (referencia)
- 55 ppm natamicina en la formulacion
- 3 (referencia)
- 110 ppm natamicina en la formulacion
- 4 (referencia)
- 220 ppm natamicina en la formulacion
- 6
- 55 ppm natamicina en la formulacion + 50% obstaculo*
- 7
- 110 ppm natamicina en la formulacion + 50% obstaculo*
- 8
- 220 ppm natamicina en la formulacion + 50% obstaculo*
- 11
- 110 ppm natamicina en la formulacion + 100% obstaculo*
- 15
- *100% obstaculo = Cu-LS (5g LS + 0.25 g de Cu por litro) + 15 pl/L 5-cloro-2-metil-4- isotiazolin-3-ona/2-metil-4-isotiazolin-3-ona (CIT/MIT en una relacion 3:1) + 50 mg/L de bronosol.
Los resultados se muestran en la Figura 7. Los tulipanes que se trataron solo con natamicina muestran algunas manchas amarillas en las hojas y a lo largo de los bordes de las hojas, lo que indica que los bulbos estan infectados. Las hojas de tulipanes tratadas con natamicina y Cu-LS no mostraron tales manchas.
Claims (5)
- REIVINDICACIONES1. Composicion para la proteccion de un cultivo agncola contra la tension biotica causada por los microorganismos, particularmente hongos, cuya composicion que comprende uno o mas lignosulfonatos y natamicina.5
- 2. Composicion de acuerdo con la reivindicacion 1, en donde uno o mas lignosulfonatos son lignosulfonatos metalicos.
- 3.10Composicion de acuerdo con la reivindicacion 2, en donde los lignosulfonatos metalicos se seleccionan del grupo que consiste de lignosulfonatos de titanio, lignosulfonatos de cobre, lignosulfonatos de cobalto, lignosulfonatos de zinc, lignosulfonatos de aluminio, lignosulfonatos de manganeso y lignosulfonatos de plata.
- 4. Composicion de acuerdo con las reivindicaciones 2 a 3, en donde os lignosulfonatos metalicos son lignosulfonato de cobre.15 5. Composicion de acuerdo a cualquiera de las reivindicaciones 1-4, en donde la composicion esta en una formasolida, particularmente en polvo, hojuelas, granulos, partfculas, polvo humectante.
- 6. Metodo para proteger las plantas o partes de las plantas contra tension biotica que comprende aplicar la composicion de acuerdo con las reivindicaciones 1-5 para las plantas o partes de la planta.20
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