ES2540581T3

ES2540581T3 - Composiciones que comprenden S-adenosilmetionina y un éster de ácido gálico

Info

Publication number: ES2540581T3
Application number: ES13834351.2T
Authority: ES
Inventors: Dechi Guan; David I. Macdonald
Original assignee: Methylation Sciences International SRL
Current assignee: Methylation Sciences International SRL
Priority date: 2012-10-17
Filing date: 2013-10-16
Publication date: 2015-07-10
Anticipated expiration: 2033-10-16
Also published as: AU2013332209A1; CA2888302A1; HK1217909A1; CN106074589A; EP2753336B1; KR20150104559A; DK2753336T3; EP2753336A4; EP2949331A1; US20200129537A1; KR20160094451A; CN104884067A; SG11201503048TA; JP2016074725A; CN104884067B; EP2753336A1; IL243585A0; JP2015533367A; US20150164935A1; US8975238B2

Abstract

Una composición que comprende S-adenosilmetionina exógena y al menos un éster de ácido gálico, en donde dicho éster de ácido gálico se selecciona del grupo que consiste en galato de etilo, galato de isoamilo, galato de propilo y galato de octilo.

Description

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revestimiento funcional da como resultado la entrega de SAMe exógena y el éster de ácido gálico al intestino grueso y/o regiones colorrectales.

En ciertas realizaciones, se proporcionan en la presente memoria composiciones que comprenden una forma de dosificación unitaria que comprende un revestimiento funcional. Preferiblemente, dicho revestimiento funcional constituye de 1 a 20% del peso total de la forma de dosificación unitaria. En algunas realizaciones, dicho revestimiento funcional comprende más que una capa de revestimiento. En ciertas realizaciones, dicho revestimiento funcional comprende una capa de sellado y una o más capas de revestimiento adicionales. Preferiblemente, dichas una o más capas de revestimiento adicionales son un revestimiento entérico, de liberación con el tiempo, no dependiente del pH o dependiente del pH. En algunas realizaciones, dichas una o más capas de revestimiento adicionales constituyen al menos 3%, 3,5%, 4%, 4,5%, 5%, o 5,5% del peso total de la forma de dosificación unitaria. Más preferiblemente, dichas una o más capas de revestimiento adicionales son un revestimiento entérico que constituye de 3-5% del peso total de la forma de dosificación unitaria. Lo más preferiblemente, se proporcionan en la presente memoria composiciones que comprenden SAMe y galato de propilo, en donde dichas composiciones comprenden un revestimiento entérico, de liberación con el tiempo, no dependiente del pH o dependiente del pH que constituye al menos 3%, 3,5%, 4%, 4,5%, 5%, o 5,5% del peso total de la forma de dosificación unitaria.

En algunas realizaciones, la composición proporcionada en la presente memoria comprende una forma de dosificación o sistema de entrega oral. Preferiblemente, dicha forma de dosificación o sistema de entrega oral es una cápsula o no cápsula. Lo más preferiblemente, dicha forma de dosificación no cápsula es un comprimido. En otras realizaciones, la composición comprende una forma de dosificación transdérmica, transmucosal o intramuscular. En algunas otras realizaciones, la composición comprende una forma de dosificación para administración intravenosa.

En algunas realizaciones, las composiciones proporcionadas en la presente memoria comprenden un minicomprimido. Los minicomprimidos o "mini-comprimidos" usados en la presente memoria son comprimidos de un tamaño más pequeño, típicamente < 3 mm de diámetro. Los minicomprimidos contienen excipientes similares a los de los comprimidos más grandes. También se preparan típicamente usando métodos similares a los usados para comprimidos más grandes, tales como compresión de comprimidos, revestimiento de sellado y revestimiento entérico. En algunas realizaciones, los minicomprimidos son introducidos en una cápsula o prensados suavemente para formar un comprimido más grande. En algunas realizaciones, los minicomprimidos son introducidos en una cápsula o prensados suavemente para formar un comprimido más grande junto con uno o más moderadores de pH. En algunas realizaciones, los minicomprimidos son introducidos en una cápsula. En algunas realizaciones, los minicomprimidos son prensados hasta un comprimido más grande. En algunas realizaciones, los minicomprimidos son prensados hasta un comprimido de disgregación oral o "ODT". En algunas realizaciones, los minicomprimidos se usan para reducir la retención del comprimido dentro del estómago. En algunas realizaciones, los minicomprimidos se usan para reducir efectos secundarios asociados con contra-ión(es) de SAMe.

En algunas realizaciones, los minicomprimidos se usan para administración bajo condiciones de alimentación. En algunas realizaciones, los minicomprimidos se usan para administración bajo condiciones de ayuno. En algunas realizaciones, la administración de comprimidos más grandes exhibe un aplazamiento en el Tmax de SAMe (u otros fármacos). En algunas realizaciones, la administración de la composición de minicomprimido bajo condiciones de alimentación reduce el aplazamiento del Tmax de SAMe. En algunas realizaciones, la administración de la composición de minicomprimido bajo condiciones de alimentación reduce la retención en el estómago o un retardo en el vaciado gástrico.

En algunas realizaciones, la composición de minicomprimido comprende aproximadamente 10 a 80% de SAMe. En algunas realizaciones, la composición de minicomprimido comprende aproximadamente 10 a 70% de SAMe. En algunas realizaciones, la composición de minicomprimido comprende aproximadamente 10 a 60% de SAMe. En algunas realizaciones, la composición de minicomprimido comprende aproximadamente 10 a 50% de SAMe. En algunas realizaciones, la composición de minicomprimido comprende aproximadamente 15 a 45% de SAMe.

En algunas realizaciones, las enfermedades y/o trastornos tratables con las formulaciones de SAMe y éster de ácido gálico proporcionadas en la presente memoria se seleccionan del grupo que consiste en, pero no se limitan a, un trastorno mental o psiquiátrico (p.ej. trastornos mentales psicóticos/del estado de ánimo o no psicóticos ejemplificados por depresión y trastornos relacionados con sustancias, respectivamente), una enfermedad/trastorno del sistema nervioso (p.ej. una enfermedad del sistema nervioso central ejemplificada por el Alzheimer), otras enfermedades/trastornos neurológicos (p.ej. dolores de cabeza y trastornos del sueño), afecciones asociadas con lesión en el sistema nervioso central, una enfermedad/trastorno del hígado (p.ej. enfermedad del hígado alcohólico), un cáncer (p.ej. cánceres sólidos y de las células sanguíneas), una enfermedad/trastorno de las articulaciones (p.ej. artritis), una enfermedad/trastorno inflamatorio (p.ej. colitis ulcerosa), una enfermedad/trastorno autoinmune (p.ej. lupus eritematoso sistémico y artritis reumatoide), una enfermedad/trastorno degenerativo (p.ej. Esclerosis Lateral Amiotrófica), una enfermedad/trastorno de los tejidos blandos (p.ej. un trastorno de fibromialgia), una enfermedad/trastorno de dolor, un trastorno genético relacionado con hiper-o hipo-metilación, una enfermedad/trastorno gastrointestinal, una enfermedad/trastorno cardiovascular, aterosclerosis, enfermedad de Lesch-Nyhan, una enfermedad/trastorno metabólico (p.ej. diabetes Tipo 2) y un trastorno inducido en todo o en parte por daño oxidativo o por radicales libres. En realizaciones preferidas, la composición comprende SAMe y uno de

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dicho éster de ácido gálico se selecciona de galato de etilo, galato de isoamilo, galato de propilo o galato de octilo. Lo más preferiblemente dicho éster de ácido gálico es galato de propilo.

Se proporciona en la presente memoria además un método para preparar una formulación para la absorción mejorada de SAMe, en donde dicho método comprende mezclar SAMe exógena y un éster de ácido gálico y formularlos en una cápsula o no cápsula con o sin excipientes adicionales. Preferiblemente dicho éster de ácido gálico se selecciona de galato de etilo, galato de isoamilo, galato de propilo o galato de octilo. Lo más preferiblemente dicho éster de ácido gálico es galato de propilo.

Por tanto, en algunas realizaciones, se proporciona en la presente memoria un método para la absorción mejorada de SAMe, en donde dicho método comprende administrar a dicho sujeto una composición ilustrativa que proporciona una cantidad fisiológicamente eficaz de SAMe exógena en combinación con galato de propilo. También se proporciona en algunas realizaciones un método para preparar una formulación para la absorción mejorada de SAMe, en donde dicho método comprende combinar SAMe exógena y galato de propilo y formularlos en una cápsula o no cápsula con o sin excipientes adicionales. En otras realizaciones, se proporciona un método para administrar una composición que comprende SAMe exógena y galato de propilo, en donde dicho método comprende administrar dicha composición a un paciente que ha ayunado durante al menos 10 horas antes de la administración de dicha composición.

Los detalles de una o más realizaciones se exponen en la siguiente descripción. Serán evidentes otros rasgos, objetos y ventajas a partir de la descripción, los dibujos y las reivindicaciones.

Breve descripción de las figuras

La FIGURA 1 es un gráfico de la concentración máxima en plasma de SAMe (Cmax) media de beagles administrados con una única dosis de 400 mg de ión SAMe de una de diez formulaciones diferentes: (1) una formulación oral de SAMe disponible en el mercado, (2) formulación MSI de SAMe sin galato de propilo ("SAMe de Control"); (3) formulación MSI de SAMe co-administrada con un comprimido independiente de 25 mg de galato de propilo ("SAMe de Control con PG independiente"); (4) formulación MSI de SAMe co-formulada con 25 mg de galato de metilo; (5) formulación MSI de SAMe co-formulada con 25 mg de galato de etilo; (6) formulación MSI de SAMe co-formulada con 25 mg de galato de propilo; (7) formulación MSI de SAMe co-formulada con 25 mg de galato de butilo; (8) formulación MSI de SAMe co-formulada con 25 mg de galato de isobutilo; (9) formulación MSI de SAMe co-formulada con 25 mg de galato de isoamilo; o (10) formulación MSI de SAMe co-formulada con 25 mg de galato de octilo.

La FIGURA 2A es un gráfico que muestra la concentración máxima en plasma de SAMe (Cmax) media de beagles administrados con una única cápsula que contenía 100 mg de ión SAMe solo ("SAMe de Control") o co-formulado con 100 mg de uno de los siguientes: hidroxitolueno butilado ("BHT"), propilparabeno o ácido gálico.

La FIGURA 2B es un gráfico que muestra el área bajo la curva en plasma de SAMe (AUC) media de beagles administrados con una única cápsula que contenía 100 mg de ión SAMe solo ("SAME de Control") o co-formulado con 100 mg de uno de los siguientes: hidroxitolueno butilado ("BHT"), propilparabeno o ácido gálico.

La FIGURA 3A es un gráfico que muestra la concentración máxima en plasma de SAMe (Cmax) media de sujetos humanos administrados con una única dosis de 400 mg, 800 mg o 1.600 mg de la Formulación MSI (SAMe y galato de propilo) o bien una dosis de 1.600 mg del producto SAMe comercial.

La FIGURA 3B es un gráfico que muestra el área bajo la curva en plasma de SAMe (AUC) media de sujetos humanos administrados con una única dosis de 400 mg, 800 mg o 1.600 mg de la Formulación MSI (SAMe y galato de propilo) o bien una dosis de 1.600 mg del producto SAMe comercial.

Descripción detallada de la invención

Los presentes investigadores han descubierto, sorprendentemente, que la entrega de SAMe exógena puede ser mejorada significativamente cuando se administra al menos un éster de ácido gálico en combinación con SAMe suministrada de manera exógena. Por tanto, algunas realizaciones se refieren a formulaciones que comprenden SAMe y uno o más ésteres de ácido gálico. Otras realizaciones se refieren a composiciones y métodos que mejoran la absorción de SAMe exógena y métodos que usan la misma, p.ej. para el tratamiento de diversas enfermedades o trastornos en un sujeto y/o que mejoran el estado nutricional de un sujeto. Realizaciones adicionales se refieren a combinaciones de SAMe y uno o más ésteres de ácido gálico con uno o más ingredientes activos que se prescriben

o usan habitualmente para el tratamiento de y/o profilaxis de diversas enfermedades o trastornos en un sujeto. Aunque no se desea estar limitado por ninguna realización específica, se proporciona en la presente memoria un método para aumentar la absorción de SAMe en donde dichos uno o más ésteres de ácido gálico se une a y/o interactúa con dicha SAMe y/o el tracto gastrointestinal de una manera tal que aumenta la absorción de SAMe a través de la pared mucosal o células epiteliales del intestino.

Como se emplea en la presente memoria, el término "SAMe" se refiere a S-adenosil-L-metionina (o, de manera más sencilla, "S-adenosilmetionina") incluyendo todas las diversas sales de SAMe. Cuando se hace referencia a dosis o

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ng/ml y una AUC media de al menos aproximadamente 800 ng·h/ml por cada 100 mg de ión SAMe para dosis de ión SAMe de al menos 100 mg. En algunas otras realizaciones preferidas, la composición, cuando se administra a un grupo de sujetos seleccionados, proporciona en dicho grupo de sujetos seleccionados una Cmax de SAMe media de al menos aproximadamente 130 ng/ml y una AUC media de al menos aproximadamente 800 ng·h/ml por cada 100 mg de ión SAMe para dosis de ión SAMe de al menos 100 mg. En aún otras realizaciones preferidas, la composición, cuando se administra a un grupo de sujetos seleccionados, proporciona en dicho grupo de sujetos seleccionados una Cmax de SAMe media de al menos aproximadamente 12 ng/ml y una AUC media de al menos aproximadamente 80 ng·h/ml por cada 10 mg de ión SAMe para dosis de ión SAMe de al menos 10 mg. En algunas otras realizaciones preferidas, la composición, cuando se administra a un grupo de sujetos seleccionados, proporciona en dicho grupo de sujetos seleccionados una Cmax de SAMe media de al menos aproximadamente 13 ng/ml y una AUC media de al menos aproximadamente 80 ng·h/ml por cada 10 mg de ión SAMe para dosis de ión SAMe de al menos 10 mg. En otras realizaciones preferidas, la composición, cuando se administra a un grupo de sujetos seleccionados, proporciona en dicho grupo de sujetos seleccionados una Cmax de SAMe media de al menos aproximadamente 1,2 ng/ml y/o una AUC media de al menos aproximadamente 8 ng·h/ml por cada 1 mg de ión SAMe. En algunas otras realizaciones preferidas, la composición, cuando se administra a un grupo de sujetos seleccionados, proporciona en dicho grupo de sujetos seleccionados una Cmax de SAMe media de al menos aproximadamente 1,3 ng/ml y/o una AUC media de al menos aproximadamente 8 ng·h/ml por cada 1 mg de ión SAMe. En algunas realizaciones, la dosis de ión SAMe entregada es al menos 10 mg. En realizaciones preferidas, la dosis de ión SAMe entregada es de 10 a 3.600 mg.

Las formulaciones de SAMe ilustrativas que comprenden un éster de ácido gálico también pueden ser configuradas para permitir la liberación extendida de la SAMe formulada. La solicitud de patente de EE.UU. de titularidad conjunta 2009/0088404 proporciona nuevas formulaciones de formulaciones de SAMe de liberación extendida.

En algunas realizaciones preferidas, la composición comprende un sistema de entrega oral, o un sistema de entrega transdérmico o transmucosal. En algunas realizaciones, la composición comprende uno de cápsula o no cápsulas (tales como comprimidos, pastas, gránulos, comprimidos oblongos, pastillas para chupar, pastas, parches y supositorios). En algunas realizaciones, la composición es un suplemento dietético o nutricional. En algunas realizaciones, la composición es un alimento médico.

En algunas realizaciones ilustrativas, la composición está en una forma de dosificación que comprende un revestimiento funcional, y el revestimiento funcional constituye de 1 a 20% del peso total de la forma de dosificación. En ciertas realizaciones, el revestimiento funcional está comprendido de uno o más revestimientos o capas independientes. En algunas realizaciones, el uno o más revestimientos o capas independientes son cada uno un revestimiento entérico, un revestimiento de liberación con el tiempo, un revestimiento dependiente del pH, un revestimiento de sellado u otro, así como combinaciones de estos. En realizaciones preferidas, uno o más revestimientos o capas independientes constituye de 1 a 5%, 2 a 5%, 3 a 5%, o 4 a 5% del peso total de la forma de dosificación. Lo más preferiblemente, una o más capas de revestimiento adicionales son un revestimiento entérico que constituye de 3-5% del peso total de la forma de dosificación unitaria.

Preferiblemente, la SAMe exógena y el éster de ácido gálico se administran al mismo tiempo. Incluso más preferiblemente, la SAMe exógena y el éster de ácido gálico se co-formulan. En algunas realizaciones ilustrativas, la composición comprende SAMe y un éster de ácido gálico, en donde dicha SAMe y éster de ácido gálico están presentes en el núcleo de la formulación. En otras realizaciones, la composición comprende SAMe y un éster de ácido gálico, en donde dicho éster de ácido gálico está presente en una o más capas de revestimiento de la formulación.

También se proporciona en la presente memoria un método para mejorar los parámetros farmacocinéticos de SAMe exógena administrada a un sujeto, comprendiendo dicho método administrar al sujeto una composición no parental que comprende al menos una dosificación fisiológicamente eficaz de SAMe en combinación con al menos un éster de ácido gálico seleccionado para mejorar los parámetros farmacocinéticos de dicha SAMe en un sujeto, siendo dichos parámetros farmacocinéticos mensurables en el sujeto por uno de una Cmax, una AUC, y combinaciones de las mismas en comparación con un grupo de control administrado con la misma o similar formulación de SAMe careciendo sin embargo del éster de ácido gálico. Para mayor claridad, todas las referencias a dosis dentro de esta patente se refieren a dosis como dosis del ión SAMe. Los parámetros farmacocinéticos tales como concentración máxima en plasma media de SAMe (Cmax) se determinan usando un método bioanalítico con sensibilidad, especificidad, robustez, estabilidad y repetibilidad adecuadas (por ejemplo, un método cualificado basado en espectrometría de masas de triple quad y cromatografía líquida acoplado con un método de extracción adecuado para la separación del analito del plasma). Los valores de AUC se calculan preferiblemente de 0-24 horas usando el método del trapezoide, y no están corregidos para niveles de SAME endógenos, de línea de base. Un "grupo de sujetos seleccionados" o "grupo de sujetos no humanos seleccionados" adecuado tiene seis o más sujetos. En algunas realizaciones dicho "grupo de sujetos seleccionados" o "grupo de sujetos no humanos seleccionados" son dosificados en ayunas (preferiblemente todos los sujetos masculinos). Todos los miembros del "grupo de sujetos seleccionados" o "grupo de sujetos no humanos seleccionados" tienen parámetros farmacocinéticos para SAMe que entran dentro de intervalos estadísticamente normales (es decir, sin valores atípicos) y no se incluirá ningún miembro en base a absorción o metabolismo de SAMe no estándar o inusual que puedan o no resultar de un perfil genético diferente. Los valores de Cmax medios se derivan promediando la concentración en cada punto de tiempo

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Excipientes y parámetros de proceso adecuados para el uso en la invención

Las características de producto o forma de dosificación que resultan de los métodos de proceso y/o parámetros para generar formulaciones tales como comprimidos incluyen, pero no se limitan a, dureza, grosor, contenido de agua, friabilidad, disgregación, perfil(es) de disolución, forma, tamaño, peso, uniformidad y composición. Estas características de producto pueden ser moduladas de diversas maneras, y afectan al rendimiento final in vitro y/o in vivo de las formulaciones. Como ejemplo, los comprimidos generados por procedimientos de compresión o moldeo pueden tener grados variables de grosor o dureza dependiendo de los parámetros de proceso bajo los que fueron preparados. Las características de producto o forma de dosificación pueden ser consecuencia de la selección de los excipientes, composición de los excipientes, métodos de fabricación aplicados o una combinación de cualquiera de estos. La combinación de excipientes, así como las características de producto (incluyendo métodos de proceso o parámetros de proceso) de la forma de dosificación final determinarán en última instancia el perfil farmacocinético del ingrediente activo in vivo. Las formulaciones de SAMe de la invención pueden ser procesadas o fabricadas bajo condiciones específicas tales como, por ejemplo, métodos de mezcla (que incluyen tamaño de tamiz, rpm y molienda), tiempo de secado, condiciones de prensado, parámetros ambientales (p.ej. temperatura y humedad) y combinaciones de los mismos. Para comparar cuantitativamente un comprimido con otro, es habitual medir varias de estas características de producto o forma de dosificación. Esto es necesario también cuando se intenta duplicar lotes múltiples.

Los excipientes se agrupan habitualmente por su función, tales como: disgregantes, diluyentes, aglutinantes, lubricantes, fluidificantes, revestimientos, agentes colorantes o agentes aromatizantes, y se puede usar el mismo excipiente para más que una función en una formulación oral dada. Los excipientes farmacéuticamente aceptables usados habitualmente incluyen agua, estearato de magnesio, almidón, lactosa, celulosa microcristalina, ácido esteárico, sacarosa, talco, dióxido de silicio, gelatina, goma arábiga y fosfato dibásico de calcio (Baldrick, P. (2000) Regul. Toxicol. Pharmacol. Oct. 32(2):210). Los excipientes se combinan con ingredientes activos por ejemplo para mejorar la apariencia, mejorar la estabilidad, ayudar al procesamiento o ayudar a la disgregación después de la administración, pero se conocen en la técnica muchas otras funciones de los excipientes que se pueden aplicar a las formas de dosificación oral de SAMe. Clases de excipientes que se usan a menudo y son adecuadas para el uso en la presente invención incluyen, pero no se limitan a, mono-, oligo-o polisacáridos naturales, naturales modificados o sintéticos, donde los oligo-y polisacáridos pueden o no estar reticulados físicamente o químicamente; mono-, oligoy polipéptidos o proteínas naturales, naturales modificados o sintéticos, donde los oligo-y polipéptidos y proteínas pueden o no estar reticulados físicamente o químicamente; oligómeros y polímeros sintéticos que pueden o no estar reticulados físicamente o químicamente; moléculas orgánicas monoméricas, hidrófobas, hidrófilas o anfóteras; sales inorgánicas o metales; y combinaciones de los mismos.

Disgregantes

Se añaden disgregantes a las formulaciones no parenterales para inducir la rotura del producto o forma de dosificación (es decir, comprimido o cápsula) cuando entra en contacto con fluido acuoso para ayudar a liberar el fármaco. Los objetivos detrás de la adición de disgregantes son aumentar el área de superficie de los fragmentos del producto y vencer las fuerzas cohesivas que mantienen estas partículas juntas en una formulación. Hacen esto promoviendo la humectación e hinchamiento de la forma de dosificación para que se rompa en el tracto gastrointestinal. Algunos aglutinantes tales como almidón y celulosa también actúan como disgregantes. Otros disgregantes son arcillas, derivados de celulosa, alginas, gomas y polímeros reticulados. Se utiliza a menudo otro grupo de disgregantes llamados "superdisgregantes". Estos materiales son eficaces a concentraciones bajas (2-5%). "Superdisgregantes" que pueden ser adecuados para el uso en la presente invención incluyen, pero no se limitan a, glicolato de almidón sódico (SSG), croscarmelosa sódica o crosprovidona.

En algunas realizaciones, las composiciones proporcionadas en la presente memoria comprenden SAMe y uno o más ésteres de ácido gálico, así como uno o más disgregantes o "superdisgregantes" que mejoran el perfil farmacocinético de la SAMe in vivo.

Aglutinantes

El material aglutinante qua mantiene la masa del producto unida y ayuda también a mantener el producto en una forma deseada se conoce como "aglutinante" o "granulador". Los aglutinantes adecuados para el uso en la presente invención son ilustrados por, pero no se limitan a, azúcares, gelatina, gomas, celulosa microcristalina y celulosas modificadas, ceras o polímeros sintéticos como polietilenglicol o polivinilpirrolidona. Algunas realizaciones pueden incluir composiciones de farmacocinética mejorada que comprenden SAMe y uno o más ésteres de ácido gálico así como uno o más aglutinantes.

Lubricantes

Excipientes adicionales utilizados a menudo en formulaciones de productos son los lubricantes. Estos son sustancias que ayudan en el proceso de fabricación, ya que ayudan a minimizar la aglomeración de los productos y ayudan también a liberarlos de la maquinaria de fabricación. El lubricante más común usado para formulaciones orales es el estearato de magnesio; sin embargo, otros lubricantes de producto usados habitualmente incluyen talco,

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estearato de calcio, ácido esteárico (estearina), aceites vegetales hidrogenados, benzoato de sodio, leucina, carbowax 4000 y estearilfumarato de sodio, todos los cuales pueden ser adecuados para el uso en la presente invención. Realizaciones ilustrativas adicionales se refieren también a composiciones de farmacocinética mejorada que comprenden SAMe y uno o más ésteres de ácido gálico y uno o más lubricantes.

Fluidificantes

Los fluidificantes también se denominan "auxiliares de flujo", ayudan a mantener el polvo que constituye los productos fluyendo mientras están siendo preparados los productos, impidiendo que formen grumos. Ejemplos de fluidificantes usados habitualmente que pueden ser adecuados para el uso en la presente invención incluyen dióxido de silicio coloidal, talco, silicato de calcio y silicato de magnesio. Realizaciones ilustrativas adicionales se refieren a composiciones de farmacocinética mejorada que comprenden SAMe y uno o más ésteres de ácido gálico y uno o más fluidificantes.

La idoneidad de un excipiente particular, tal como, por ejemplo, un "material matriz", "disgregante", "superdisgregante", "aglutinante", "lubricante", "fluidificante", o "revestimiento" puede ser identificada analizando la farmacocinética in vivo de las formulaciones que contienen el excipiente, éster de ácido gálico y SAMe. Alternativamente, se puede usar un análisis in vitro de uno o más excipientes usando una serie de técnicas in vitro estándar que son bien conocidas en la técnica para pre-cribar excipientes y proporcionar en última instancia un medio para predecir perfiles farmacocinéticos in vivo. Además, el uso de referencias en la técnica también puede proporcionar una nueva percepción de excipientes farmacéuticamente o nutricionalmente aceptables potencialmente adecuados (tales como un "material matriz", "disgregante", "superdisgregante", "aglutinante", "lubricante", "fluidificante", o "revestimiento”) para el uso en la presente invención. Preferiblemente, se pueden usar análisis in vitro de uno o más excipientes usando estudios de disolución realizados con un tampón de pH 6,8 o menos para pre-cribar excipientes y proporcionar en última instancia un medio para predecir perfiles farmacocinéticos in vivo.

Métodos y parámetros de proceso

Los métodos y/o parámetros de proceso que se pueden modificar para mejorar el perfil farmacocinético y/o cambiar el perfil de disolución de formulaciones de SAMe-éster de ácido gálico incluyen, pero no se limitan a: humedad relativa, temperatura, tiempo de secado y otros parámetros ambientales.

Las presentes realizaciones se describen adicionalmente mediante los siguientes ejemplos. Estos ejemplos, aunque ilustran ciertos aspectos específicos de las presentes realizaciones, no deben ser considerados como que limitan o circunscriben el alcance de las realizaciones descritas.

Ejemplos

Ejemplo 1

El galato de propilo aumenta significativamente los niveles en plasma de SAMe administrada de manera exógena

Se generaron comprimidos que comprendían SAMe y diversos galatos de alquilo de diferente estructura química mezclando SAMe bien con galato de metilo, galato de etilo, galato de butilo, galato de isobutilo, galato de isoamilo o galato de octilo (véanse las estructuras a continuación). Después los comprimidos fueron administrados a perros Beagle y se extrajeron muestras de sangre a lo largo del tiempo. Se usó un análisis de las concentraciones de SAMe en plasma para comparar los efectos de estos ésteres de ácido gálico sobre la absorción de SAMe administrada por vía oral en la sangre.

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propilo son antioxidantes de calidad alimentaria que se han usado a menudo en combinación. Estos agentes son estructuralmente similares, como se ve aquí:

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Se formularon cápsulas que comprendían 100 mg de hidroxitolueno butilado, propilparabeno, ácido gálico o galato de propilo usando cápsulas de gelatina de tamaño nº #000, que contenían cada una 100 mg de ión SAMe. Las cápsulas también contenían excipientes adicionales (celulosa microcristalina, glicolato de almidón sódico, dióxido de silicio coloidal y estearato de magnesio). Las cápsulas se llenaron manualmente y en algunas realizaciones, se aplicó una capa de sellado comercial a las cápsulas usando una revestidora de lecho fluido.

Los perros Beagle fueron administrados con una única dosis entregada por vía oral como se describió anteriormente. Las cápsulas de control de SAMe contenían 100 mg de ión SAMe y no contenían galato de propilo.

Los gráficos en las Figuras 2A y 2B muestran la Cmax y AUC de SAMe en plasma, respectivamente, de cada formulación, y presentan claramente la superior y sorprendente capacidad del galato de propilo de aumentar la absorción de SAMe en la sangre en comparación con los estructuralmente similares hidroxitolueno butilado (BHT), propilparabeno y ácido gálico.

Ejemplo 3

Efectos de la dosis de galato de propilo sobre la absorción de SAMe en el transporte de células Caco-2

Se realizaron experimentos in vitro sobre la permeabilidad de la SAMe a través de monocapas de células Caco-2 tratadas con galato de propilo para identificar los niveles de galato de propilo que aumentan la cantidad de SAMe absorbida por las células Caco-2 en comparación con monocapas de células Caco-2 no tratadas. La línea celular Caco-2 es derivada de un carcinoma colorrectal humano, y se usa ampliamente para modelos de cultivo celular in vitro para el estudio de absorción de fármacos gastrointestinales (Stewart, B., (1995) Pharm. Res. 12:693). En estos modelos, se cultivan líneas celulares puras sobre una membrana semipermeable. Las formulaciones del fármaco se colocan en el lado apical o basolateral de la monocapa celular y se determina el transporte por medio de la medición de concentraciones de fármaco en el otro lado de la membrana.

La línea celular Caco-2 utilizada aquí era de la Colección Americana de Cultivos Tipo (ATCC, por sus siglas en inglés). Las células Caco-2 se cultivan en medio Eagle modificado con Dulbecco (DMEM, Gibco) suplementado con FBS al 20% (suero bovino fetal, Gibco), 100 uM de aminoácidos no esenciales (NEAA, Gibco) y L-glutamina 2 mM (Gibco). Se usó un kit de sistema de ensayo Beckton Dickinson BIOCOAT® HTS Caco-2, dando como resultado 6,6 x 105 células/cm2 de densidad de siembra (BIOCOAT es una marca registrada de Collaborative Biomedical Products, Inc., Bedford, Massachusetts, EE.UU.). Las células usadas en los estudios de transporte fueron cultivadas durante 3 días antes de los experimentos. Las condiciones de cultivo fueron 37ºC en una atmósfera de 5% de CO2 y 100% de humedad.

Para la permeabilidad a través de monocapas de células Caco-2, el medio de transporte usado fue Solución Salina Tamponada de Hank (HBSS; adquirida a Gibco) que contenía D-glucosa, y HEPES de pH ajustado a 7,4. Se añadió una disolución acuosa 2 mM de disulfato tosilato de SAMe sobre el lado apical o basolateral según el procedimiento del fabricante para el kit de Caco-2. Las muestras se midieron después de una incubación de 120 minutos por cromatografía líquida-espectrometría de masas (LC/MS). La integridad de las monocapas fue seguida usando un ensayo Lucifer Yellow.

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La permeabilidad (Papp) de la SAMe se calcula usando la siguiente fórmula:

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Donde dQ/dt es la velocidad de permeación, C0 es la concentración inicial de agente de ensayo, y A es el área de la monocapa.

La absorción de SAMe en células Caco-2 se midió para dos sales de SAMe usadas habitualmente. La absorción fue baja para ambas sales de SAMe (disulfato tosilato de SAMe; 1,4-butanodisulfonato de SAMe) como evidencian unos bajos coeficientes de permeabilidad aparente (Papp = 0,41 x 10-6 y 0,50 x 10-6 cm s-1, respectivamente, en las direcciones apical a basolateral y basolateral a apical, respectivamente para el disulfato tosilato de SAMe; y Papp = 0,50 x 10-6 y 0,60 x 10-6 cm s-1 en las direcciones apical a basolateral y basolateral a apical, respectivamente para el 1,4-butanodisulfonato de SAMe. Los resultados en la Tabla 1 a continuación muestran la absorción de disulfato tosilato de SAMe en presencia de diversas concentraciones de galato de propilo.

Tabla 1: Permeabilidad de SAMe en presencia de galato de propilo (modelo celular Caco-2)

Artículo de ensayo: Excipiente Coeficiente de Permeabilidad Medio (x10-4 cm/s) Apical→Basolateral Coeficiente de Permeabilidad Medio (x10-4cm/s)Basolateral→Apical Resistencia TEER Media 19 h después del ensayo (ohmios)

SAMe2 mM: Galato de propilo 0 mM 0,016 0,017 6.200

SAMe2 mM: Galato de propilo 0,2 mM 0,016 No determinado 5.350

SAMe2 mM: Galato de propilo 2 mM 0,43 No determinado 3.250

Como se muestra en la Tabla 1, el galato de propilo aumenta el transporte de SAMe en células Caco-2 con buena recuperación TEER a la concentración aumentada.

Ejemplo 4

Efectos del galato de propilo sobre el transporte de SAMe usando el modelo PAMPA

Usando un modelo PAMPA (ensayo de permeabilidad en membrana artificial paralela, por sus siglas en inglés), se midió la permeabilidad de la SAMe en presencia y ausencia de galato de propilo. Los modelos PAMPA se han desarrollado para exhibir un alto grado de correlación con la permeación a través de diversas barreras, incluyendo el tracto gastrointestinal. Son importantes aquí porque estas membranas no comprenden uniones fuertes, en contraste con la monocapa de células Caco-2, y por tanto no permiten el transporte paracelular.

Se usaron métodos PAMPA para determinar la permeabilidad de sustancias desde un compartimento donador, a través de una membrana artificial infundida con lípidos hacia un compartimento aceptor. Se usó una placa de microtitulación multipocillos para el donador, y se coloca un compartimento de membrana/aceptor por encima. En el comienzo del ensayo, se añadió disulfato tosilato de SAMe (con o sin diferentes concentraciones de galato de propilo como se indica en la Tabla 2 más adelante) al compartimento del donador, y el compartimento del aceptor permaneció exento de fármacos. Después de un periodo de incubación, los compartimentos fueron separados y se midió la cantidad de SAMe en cada compartimento. El balance de masas permite el cálculo de la SAMe que queda en la membrana.

Como se ve en la Tabla 2, la SAMe no mostró esencialmente transporte a través de la membrana PAMPA y la presencia de galato de propilo a 2,0 mM no tuvo efecto sobre el transporte de SAMe. Esto es opuesto al efecto del galato de propilo sobre el SAMe usando el modelo de transporte celular Caco-2.

La membrana PAMPA artificial es una bicapa lípida no celular configurada como una barrera, y los experimentos que implican PAMPAs miden el transporte pasivo de moléculas a través de esta barrera, de un lado a otro. El hecho de que el galato de propilo no mejore la permeabilidad de la SAMe a través de la membrana PAMPA significa que el mecanismo de mejora no es mediante transporte intracelular pasivo. Es más probable por lo tanto que el mecanismo

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Tabla 3. Permeabilidad de ranitidina y metformina en presencia de galato de propilo

Artículo de ensayo: Concentración de ensayo (µM) Duración del ensayo (h) Permeabilidad Efectiva Media (x 10-6 cm/s)

Metformina (2,0 mM): 2.000 2 0,18

Metformina (2,0 mM) + galato de propilo (0,2 mM): 2.000 2 0,22

Metformina (2,0 mM) + galato de propilo (2,0 mM): 2.000 2 0,26

Ranitidina (2,0 mM): 2.000 2 0,34

Ranitidina (2,0 mM) + galato de propilo (0,2 mM): 2.000 2 0,28

Ranitidina (2,0 mM) + galato de propilo (2,0 mM): 2.000 2 0,25

Ejemplo 6

Los niveles de SAMe en plasma de Beagle son aumentados en presencia de diversas dosis de galato de propilo

Se generaron comprimidos que comprendían SAMe y diversas cantidades de galato de propilo mezclando gránulos de disulfato tosilato de S-adenosil-L-metionina (equivalentes a 400 mg de ión SAMe) con las diversas cantidades de galato de propilo enumeradas en la Tabla 4 más adelante. Cada mezcla fue prensada hasta un comprimido y revestida, seguido de perfilado de disolución y análisis farmacocinético in vivo usando perros beagle.

El perfilado de disolución se realizó según estándares de USP con tampones de pH 6,0 o bien pH 6,8 para asegurar la adecuada disolución del comprimido antes de la administración a perros.

El método de ensayo de disolución usado es típicamente como sigue:

 USP Aparato II funcionando a 100 RPM,

 Fase de Fluido: 1L USP de Fluido Gástrico Simulado sin enzima, pH 1,2, 37º C,

 Fase de Tampón Acuoso -1 L USP de Fluido Intestinal Simulado sin enzima, pH 6,8 o pH 6,0, 37º C,

 Los comprimidos son expuestos a la fase ácida durante dos horas, después transferidos a la Fase de Tampón,

 Se extraen alícuotas después de la exposición a la fase ácida durante 2 horas, después a intervalos prescritos mientras están en la fase de tampón,

 Las muestras se diluyen 1 → 10 con n/10 HCL, y

 La concentración de fármaco se determina espectrofotométricamente a 258mm.

Para los estudios in vivo, se usaron perros beagle macho (7-10 kg) en ayunas como se describió anteriormente. Cada grupo (6 perros para SAMe/galato de propilo y 6 perros para el control de SAMe que carece de galato de propilo) fue dosificado con un único comprimido de revestimiento entérico administrado por vía oral, bajo condiciones de ayuno, seguido de 5 ml de agua purificada por vía oral con una jeringuilla para facilitar la deglución. Se recogieron muestras de sangre farmacocinéticas (2 ml cada una) para el análisis de SAMe de la vena yugular usando los siguientes puntos de tiempo: pre-dosis, 20 y 40 minutos, 1, 1,5, 2, 3, 4, 6, y 8 horas después del tratamiento. Las muestras de sangre de la venipunción fueron recogidas en tubos que contenían el anticoagulante K2-EDTA, y almacenadas en hielo húmedo pendientes de procesamiento. Después de la recogida, las muestras fueron centrifugadas (a 4ºC) para separar la fracción de plasma de las células sanguíneas. La fracción de plasma resultante se recuperó y se almacenó congelada (a -80ºC) usando tubos de polipropileno pendientes de análisis bioanalítico.

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Claims

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