ES2446358T3 - Derivados de imidazo[4,5-c]quinolina como inhibidores de los bromodominios - Google Patents

Abstract

Un compuesto de fórmula (I) o una sal del mismo**Fórmula** en la que: A es un grupo seleccionado de entre los siguientes:**Fórmula** * X representa CH o N; * Y representa CH o N, con la condición de que cuando X es N, Y es CH; * Rx representa O o S; * R1 representa alquilo C1-6, cicloalquilo C3-6, un heterociclilo de 5 o 6 miembros, un grupo aromático o un grupoheteroaromático, en el que el grupo aromático o el grupo heteroaromático está opcionalmente sustituido con unoa tres grupos seleccionados de entre: halógeno, hidroxi, ciano, nitro, alquilo C1-6, alcoxi C1-4, haloalquilo C1-4, haloalcoxi C1-4, hidroxialquilo C1-4,alcoxi C1-4-alquilo C1-4, alcoxicarbonilo C1-4, alquilsulfonilo C1-4, alquilsulfoniloxi C1-4, alquilsulfonil C1-4-alquiloC1-4 y alquilsulfonamido C1-4; * R2 es hidrógeno o alquilo C1-6, * R2a representa: H, alquilo C1-6, haloalquilo C1-6, (CH2)mciano, (CH2)mOH, (CH2)malcoxi C1-6, (CH2)mhaloalcoxi C1-6,(CH2)mhaloalquil C1-6(CH2)mC(O)NRaRb, (CH2)mNRaRb, y (CH2)mC(O)CH3, (CHR6)pfenilo opcionalmentesustituido con alquilo C1-6, alcoxi C1-6, ciano-haloalcoxi C1-4, haloalquilo C1-4, (CHR620 )pheteroaromático,(CHR6)pheterociclilo, en los que Ra representa H, alquilo C1-6 o heterociclilo; Rb representa H o alquilo C1-6 o Ra y Rb , junto con el N al que están unidos, forman un heterociclilo 5 o 6 miembros.

Description

Derivados de imidazo[4,5-c]quinolina como inhibidores de los bromodominios

Campo de la invención

La presente invención se refiere a nuevos compuestos, a composiciones farmacéuticas que contienen dichos compuestos y a su uso en terapia.

Antecedentes de la invención

Los genomas de los organismos eucariotas están muy organizados dentro del núcleo de la célula. Las largas cadenas de ADN dúplex envuelven un octómero de proteínas histonas (que lo más habitual es que comprendan dos copias de las histonas H2A, H2B H3 y H4) para formar un nucleosoma. Esta unidad básica se comprime aún más mediante la agregación y el plegamiento de los nucleosomas para formar una estructura de cromatina muy condensada. Es posible una serie de diferentes estados de condensación, y el grado de compactación de esta estructura varía durante el ciclo celular, siendo más compacta durante el proceso de división celular. La estructura de la cromatina desempeña un papel fundamental en la regulación de la transcripción de los genes, que no se puede producir de manera eficaz a partir de cromatina muy condensada. La estructura de la cromatina es controlada por una serie de modificaciones posteriores a la traducción en las proteínas histonas, en particular, las histonas H3 y H4, y, más comúnmente, dentro de las colas de las histonas que se extienden más allá de la estructura nuclear nucleosómica. Estas modificaciones incluyen acetilación, metilación, fosforilación, ubiquitinilación y SUMOilación. Estas marcas epigenéticas son escritas y borradas por enzimas específicas, que colocan los marcadores en los restos específicos del interior de la cola de la histona, formando con ello un código epigenético que es interpretado posteriormente por la célula para permitir la regulación de genes específicos de la estructura de cromatina y, de este modo, de la transcripción.

La acetilación de la histona se asocia más generalmente con la activación de la transcripción de genes, pues la modificación debilita la interacción del ADN y el octómero de histona, cambiando la electrostática. Además de este cambio físico, determinadas proteínas se unen a restos de lisina acetilados dentro de las histonas para leer el código epigenético. Los bromodominios son distintos dominios pequeños (∼110 aminoácidos) del interior de las proteínas que se unen a restos de lisina acetilados comúnmente, pero no exclusivamente, en el contexto de las histonas. Hay una familia de aproximadamente 50 proteínas conocidas por contener bromodominios, y tienen una amplia selección de funciones dentro de la célula.

La familia BET de proteínas que contienen bromodominios comprende 4 proteínas (BRD2, BRD3, BRD4 y BRD-t) que contienen bromodominios en tándem capaces de unirse a dos restos de lisina acetilados en estrecha proximidad, aumentando la especificidad de la interacción. Se ha publicado que BRD2 y BRD3 se asocian con las histonas a lo largo de los genes transcritos activamente y pueden estar implicadas en la facilitación de la elongación transcripcional (Leroy et al., Mol. Cell. 2008 3 (1): 51-60), mientras que BRD4 parece estar implicada en el reclutamiento del complejo pTEF-β en genes inducibles, lo que resulta en la fosforilación de la ARN polimerasa y el aumento del rendimiento de la transcripción (Hargreaves et al., Cell, 2009 138(1): 129-145). También se ha publicado que BRD4 o BRD3 se pueden fusionar con NUT (proteína nuclear del testículo) formando nuevos oncogenes de fusión, BRD4-NUT o BRD3-NUT, en una forma altamente maligna de neoplasia epitelial (French et al., Cancer Research, 2003, 63, 304-307 y French et al., Journal of Clinical Oncology, 2004, 22(20), 4135-4139). Los datos sugieren que las proteínas de fusión BRD-NUT contribuyen a la carcinogénesis (Oncogene, 2008, 27, 22372242). BRD-t se expresa únicamente en los testículos y en los ovarios. Se ha publicado que todos los miembros de la familia tienen alguna función en el control o la ejecución de los aspectos del ciclo celular, y se ha demostrado que permanecen formando complejos con los cromosomas durante la división celular, lo que sugiere un papel en el mantenimiento de la memoria epigenética. Además, algunos virus hacen uso de estas proteínas para atar sus genomas a la cromatina de la célula huésped como parte del proceso de la replicación viral (You et al., Cell, 2004 117(3): 349-60).

La solicitud de patente japonesa JP2008-156311 desvela un derivado de bencimidazol, que se dice que es un agente de unión al bromodominio BRD2, que tiene utilidad con respecto a la infección/proliferación viral.

La solicitud de patente WO2009084693A1 desvela una serie de derivados de tienotriazolodiazepieno, que se dice que inhiben la unión entre una histona acetilada y una proteína que contiene bromodominios, que se dice que son útiles como agentes contra el cáncer.

El documento WO2007075468 desvela 1H-imidazo[4,5-c]quinolinas y 1H-imidazo[4,5-c][1,5]naftiridinas útiles en el tratamiento de enfermedades que incluyen enfermedades virales y neoplásicas.

Se ha encontrado una nueva clase de compuestos que inhiben la unión de los bromodominios con sus proteínas acetiladas afines, más particularmente una clase de compuestos que inhiben la unión de los bromodominios de la familia BET con los restos de lisina acetilados. En lo que sigue, dichos compuestos se denominarán quot;inhibidores de bromodominiosquot;.

En un primer aspecto de la presente invención, se proporciona un compuesto de fórmula (I) o una sal del mismo, más particularmente un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo:

5 En un segundo aspecto de la presente invención, se proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y uno o más vehículos, diluyentes o excipientes farmacéuticamente aceptables.

En un tercer aspecto de la presente invención, se proporciona un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para su uso en terapia, en particular en el tratamiento de enfermedades o

10 afecciones para las que está indicado un inhibidor de bromodominios.

En un cuarto aspecto de la presente invención, se proporciona el uso de un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de enfermedades

o afecciones para las que está indicado un inhibidor de bromodominios.

Descripción detallada de la invención

15 La presente invención se refiere a compuestos de fórmula (I) o una sal de los mismos:

en la que:

•

A es un grupo seleccionado de entre los siguientes:

•

X representa CH o N;

•

Y representa CH o N, con la condición de que cuando X es N, Y es CH;

•

Rx representa O o S;

•

R1 representa alquilo C1-6, cicloalquilo C3-6, un heterociclilo de 5 o 6 miembros, un grupo aromático o un grupo

5 heteroaromático, en el que el grupo aromático o el grupo heteroaromático está opcionalmente sustituido con uno a tres grupos seleccionados de entre:

halógeno, hidroxi, ciano, nitro, alquilo C1-6, alcoxi C1-4, haloalquilo C1-4, haloalcoxi C1-4, hidroxialquilo C1-4, alcoxi C1-4-alquilo C1-4, alcoxicarbonilo C1-4, alquilsulfonilo C1-4, alquilsulfoniloxi C1-4, alquilsulfonil C1-4-alquilo C1-4 y alquilsulfonamido C1-4;

10 • R2 es hidrógeno o alquilo C1-6, R2a

• representa:

H, alquilo C1-6, haloalquilo C1-6, (CH2)mciano, (CH2)mOH, (CH2)malcoxi C1-6, (CH2)mhaloalcoxi C1-6, (CH2)mhaloalquil C1-6(CH2)mC(O)NRaRb, (CH2)mNRaRb, (CH2)mC(O)CH3, (CHR6)pfenilo opcionalmente sustituido con alquilo C1-6, alcoxi C1-6, ciano-haloalcoxi C1-4, haloalquilo C1-4, (CHR6)pheteroaromático o

15 (CHR6)pheterociclilo, en los que Ra representa H, alquilo C1-6 o heterociclilo; Rb representa H o alquilo C1-6 o Ra y Rb, junto con el N al que están unidos, forman un heterociclilo 5 o 6 miembros;

20 • R2b representa H, alquilo C1-6, (CH2)2alcoxi C1-6, (CH2)2ciano o (CH2)mfenilo, (CH2)2heterociclilo;

•

R3 representa hidrógeno;

•

R4 representa hidrógeno, ciano o alquilo C1-6;

•

Z representa O; o cuando R4 representa hidrógeno y A es un grupo seleccionado de entre (i) o (ii) y en el que Rx

representa O, Z puede representar además NH; 25 • R5 representa hidrógeno o alcoxi C1-6;

•

R6 representa hidrógeno o alquilo C1-6;

•

m representa 1, 2 o 3;

•

n representa 0, 1 o 2; y

•

p representa 0, 1 o 2.

30 Como se usa en el presente documento, la expresión quot;grupo aromáticoquot; se refiere a un grupo aromático monocíclico de 5 a 7 miembros tal como fenilo, o un grupo aromático bicíclico de 8 a 11 miembros tal como naftilo, indenilo o azulenilo.

Como se usa en el presente documento, heterociclilo se refiere a un anillo no aromático, saturado o insaturado de 5

o 6 miembros, que comprende 1, 2 o 3 heteroátomos seleccionados de entre O, N y S. Los ejemplos de 35 heterociclilos incluyen morfolinilo, piperidinilo, tetrahidropiranilo y piperazinilo.

Como se usa en el presente documento, la expresión quot;grupo heteroaromáticoquot; se refiere a un grupo aromático monocíclico de 5 o 6 miembros en el que 1, 2, 3, 4 de los átomos de carbono están sustituidos con un heteroátomo seleccionado de manera independiente de entre O, S y N; o un grupo aromático bicíclico de 8 a 11 miembros en el que 1, 2, 3, 4 o 5 de los átomos de carbono están sustituidos con un heteroátomo seleccionado de manera

40 independiente de entre O, S y N.

Los ejemplos de grupos heteroaromáticos monocíclicos de 5 o 6 miembros incluyen pirrolinilo, furanilo, tienilo, pirrolilo, oxazolilo, tiazolilo, imidazolilo, oxadiazolilo, tiadiazolilo, piridinilo, triazolilo, triazinilo, piridazilo, pirimidinilo, isotiazolilo, isoxazolilo, pirazinilo, pirazolilo y pirimidinilo. Los ejemplos de grupos heteroaromáticos bicíclicos de 8 a 11 miembros incluyen 6H-tien[2,3-b]pirrolilo, imidazo[2,1-b][1,3]tiazolilo, imidazo[5,1-b][1,3]tiazolilo, indolilo,

45 isoindolilo, indazolilo, bencimidazolilo, [1,3]tiazolo[3,2-b][1,2,4]triazolilo, benzoxazolilo, por ejemplo, benzoxazol-2-ilo, bencisoxazolilo, benzotiazolilo, bencisotiazolilo, benzotienilo, benzofuranilo, naftridinilo, quinolilo, quinoxalinilo, quinazolinilo, cinolinilo e isoquinolilo.

Como se usa en el presente documento, el término quot;alquiloquot; se refiere a cadenas de hidrocarburo lineales o ramificadas que contienen el número especificado de átomos de carbono. Por ejemplo, alquilo C1-6 significa un

50 alquilo lineal o ramificado que contiene al menos 1 y, como máximo, 6 átomos de carbono. Los ejemplos de quot;alquiloquot; como se usa en el presente documento incluyen, pero sin limitación, metilo, etilo, n-propilo, n-butilo, n-pentilo, nhexilo, isobutilo, isopropilo, t-butilo y 1,1-dimetilpropilo.

Los ejemplos de cicloalquilos C3-6 incluyen ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo y ciclohexilo.

Como se usa en el presente documento, el término quot;alcoxiquot; se refiere a un grupo alcoxi lineal o ramificado que

55 contiene el número especificado de átomos de carbono. Por ejemplo, alcoxi C1-6 significa un grupo alcoxi lineal o ramificado que contiene al menos 1 y, como máximo, 6 átomos de carbono. Los ejemplos de quot;alcoxiquot; como se usa

en el presente documento incluyen, pero sin limitación, metoxi, etoxi, propoxi, prop-2-oxi, butoxi, but-2-oxi, 2

metilprop-1-oxi, 2-metilprop-2-oxi, pentoxi o hexiloxi. Como se usa en el presente documento, el término quot;halógenoquot; se refiere a los elementos flúor, cloro, bromo y yodo, por ejemplo, flúor, cloro y bromo.

Como se usa en el presente documento, el término quot;sustituidoquot; se refiere a la sustitución con el sustituyente o los sustituyentes nombrados, permitiéndose múltiples grados de sustitución, a menos que se indique lo contrario. Cuando el sustituyente está en un anillo que comprende un heteroátomo, el sustituyente puede estar situado en un carbono o un heteroátomo, si este último es apropiado.

En una realización, X es CH. En una realización Y es CH. En una realización Z es O. En otra realización Z es NH (y, por consiguiente, R4 representa hidrógeno, A es un grupo seleccionado de entre (i) o

(ii) como se ha definido anteriormente, y Rx representa O). En una realización, Rx es O. En una realización, n es 0 o 1, tal como 1. En una realización, A es un grupo de fórmula (i) o (ii) como se ha descrito anteriormente. Los ejemplos representativos de R1 incluyen piridinilo, tal como piridin-2-ilo, fenilo opcionalmente sustituido con 1 o 2

grupos tales como 1 sustituyente, en el que dichos sustituyentes se seleccionan de manera independiente de entre metilo, t-butilo, fluoro, cloro y -OCF3. Los sustituyentes opcionales en el fenilo pueden estar, por ejemplo, en la posición orto o para.

En una realización, R1 es un grupo heteroaromático opcionalmente sustituido con uno o dos grupos seleccionados de entre hidroxi, alquilo C1-3, alcoxi C1-3, hidroxialquilo C1-4 y alcoxi C1-4-alquilo C1-4. En una realización, el grupo heteroaromático es piridilo. En una realización adicional, el grupo heteroaromático se selecciona de entre furanilo, tienilo, isoxazolilo, tiazolilo, pirazolilo, pirazinilo y pirimidinilo.

En una realización, n es 0 y R1 es fenilo sustituido con alquilo C1-6 (tal como fenilo sustituido con t-butilo) o fenilo sustituido con haloalcoxi C1-6 (tal como OCF3).

En una realización n es 1 y R1 es fenilo no sustituido. En una realización n es 1 o 2, tal como 1, y R1 es fenilo opcionalmente sustituido con, por ejemplo, 1 o 2 halógenos tales como cloro y/o flúor.

En una realización, R2 es hidrógeno o metilo. En una realización R2 es H, alquilo C1-3, (CH2)mOH, (CH2)malcoxi C1-3, (CH2)mNRaRb o (CHR6)pheterociclilo, en el que Ra

representa H, alquilo C1-3 o heterociclilo; Rb

representa H o alquilo C1-3 o Ra y Rb junto con el N al que están unidos forman un heterociclilo de 5 o 6 miembros; R6

representa H o alquilo C1-3; m representa 1, 2 o 3; y p representa 0, 1, 2.

En una realización, R2a es hidrógeno, alquilo C1-6 tal como metilo, isopropilo o t-butilo o alcoxi C1-6-alquilo C1-6 tal como -(CH2)2OCH3.

En una realización, R2a es tetrahidropiranilo. En una realización, R2b es hidrógeno. En una realización, R2b es (CH2)2alcoxi C1-6 tal como (CH2)2OMe. En una realización, Ra y Rb, junto con el N al que están unidos, forman un heterociclilo de 5 o 6 miembros tal como

morfolina, piperidina o pirrolidina. En una realización, R4 es hidrógeno. En una realización, R5 es hidrógeno o –OCH3 tal como -OCH3.

En una realización, X es CH, Y es CH y R5 es -OCH3, por ejemplo, en la posición 8. En una realización X es N, Y es CH y R5 es -OCH3, por ejemplo, en la posición 8. En una realización, los compuestos de la presente invención tienen una fórmula (IA):

en la que A y R4 son como se han definido para la fórmula (I). En una realización, los compuestos de la presente invención tienen la fórmula (IB):

en la que R1, R2, R3, R5 y n son como se han definido para los compuestos de fórmula (I). En el presente aspecto de la invención, n puede representar, por ejemplo, 1.

10 En el presente aspecto de la invención, R1 puede representar, por ejemplo, piridinilo tal como piridin-2-ilo o fenilo. En el presente aspecto de la invención, R5 puede representar, por ejemplo, -OCH3. En una realización, los compuestos de la invención tienen la fórmula (IC):

en la que R1, R2, R3, R2a y n se han definido anteriormente para los compuestos de fórmula (I).

Se ha de entender que la presente invención cubre todas las combinaciones de grupos adecuados, convenientes y preferidos descritos anteriormente en el presente documento. Por lo tanto, todas las características y realizaciones de fórmula (I) se pueden aplicar a las fórmulas (IA), (IB) y (IC).

Los compuestos específicos de fórmula (I) incluyen los Ejemplos 1 a 226 como se describe en el presente documento o una sal de los mismos, en particular, una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.

En una realización, se proporciona un compuesto que es 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-[(1R)-1-(2piridinil)etil]-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona o una sal del mismo. En otra realización, se proporciona un compuesto que es 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-[(1R))-1-(2-piridinil)etil]-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5c]quinolin-2-ona o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En otra realización, se proporciona un compuesto que es 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-[(1R))-1-(2-piridinil)etil]-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5c]quinolin-2-ona.

Se apreciará que la presente invención abarca compuestos de fórmula (I) en forma de la base libre y de sales de los mismos, por ejemplo, en forma de una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos. En una realización, la invención se refiere a compuestos de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.

Debido a su posible uso en medicina, es deseable que las sales de los compuestos de fórmula (I) sean farmacéuticamente aceptables. Las sales farmacéuticamente aceptables adecuadas pueden incluir sales de adición de ácido o de base. Como se usa en el presente documento, la expresión quot;sal farmacéuticamente aceptablequot; significa cualquier sal o solvato farmacéuticamente aceptable de un compuesto de fórmula (I) que, tras la administración al receptor, sea capaz de proporcionarse (directa o indirectamente). En una realización, la expresión quot;sal farmacéuticamente aceptablequot; significa cualquier sal farmacéuticamente aceptable de un compuesto de fórmula

(I) que, tras la administración al receptor, sea capaz de proporcionarse (directa o indirectamente). Para una revisión de las sales adecuadas, véase Berge et al., J. Pharm. Sci., 66:1-19, (1977). Por lo general, las sales farmacéuticamente aceptables se pueden preparar fácilmente usando una base o un ácido deseado según sea apropiado. La sal resultante puede precipitar de la solución y recogerse por filtración o puede recuperarse por evaporación del disolvente.

Una sal de adición de base farmacéuticamente aceptable se puede formar mediante la reacción de un compuesto de fórmula (I) con una base orgánica o inorgánica adecuada, (por ejemplo, trietilamina, etanolamina, trietanolamina, colina, arginina, lisina o histidina), opcionalmente en un disolvente adecuado, dando la sal de adición de base que normalmente se aísla, por ejemplo, por cristalización y filtración. Las sales de bases farmacéuticamente aceptables incluyen sales de amonio, sales de metales alcalinos tales como las de sodio y potasio, sales de metales alcalinotérreos tales como las de calcio y magnesio, y sales con bases orgánicas, incluyendo sales de aminas primarias, secundarias y terciarias, tales como isopropilamina, dietilamina, etanolamina, trimetilamina, diciclohexilamina y N-metil-D-glucamina.

Una sal de adición de ácido farmacéuticamente aceptable se puede formar mediante la reacción de un compuesto de fórmula (I) con un ácido orgánico o inorgánico adecuado (tal como ácido bromhídrico, clorhídrico, sulfúrico, nítrico, fosfórico, succínico, maleico, acético, propiónico, fumárico, cítrico , tartárico, láctico, benzoico, salicílico, glutamaico, aspártico, p-toluenosulfónico, bencenosulfónico, metanosulfónico, etanosulfónico, naftalenosulfónico tal como 2-naftalenosulfónico o hexanoico), opcionalmente en un disolvente adecuado tal como un disolvente orgánico, dando la sal que, por lo general, se aísla, por ejemplo, mediante cristalización y filtración. Una sal de adición de ácido farmacéuticamente aceptable de un compuesto de fórmula (I) puede comprender o ser, por ejemplo, una sal de bromhidrato, clorhidrato, sulfato, nitrato, fosfato, succinato, maleato, acetato, propionato, fumarato, citrato, tartrato, lactato, benzoato, salicilato, glutamato, aspartato, p-toluenosulfonato, bencenosulfonato, metanosulfonato, etanosulfonato, naftalenosulfonato (por ejemplo, 2-naftalensulfonato) o hexanoato.

Se pueden usar otras sales no farmacéuticamente aceptables, por ejemplo, formiatos, oxalatos o trifluoroacetatos, por ejemplo, en el aislamiento de los compuestos de fórmula (I), y se incluyen dentro del ámbito de la presente invención.

La invención incluye dentro de su ámbito todas las formas estequiométricas y no estequiométricas posibles de las sales de los compuestos de fórmula (I).

Se apreciará que muchos compuestos orgánicos pueden formar complejos con disolventes en los que se hacen reaccionar, o en los que precipitan o cristalizan. Estos complejos se conocen como quot;solvatosquot;. Por ejemplo, un complejo con agua se conoce como un quot;hidratoquot;. Para formar solvatos, se pueden usar disolventes con altos puntos de ebullición y/o capaces de formar puentes de hidrógeno tales como agua, xileno, N-metil-pirrolidinona, metanol y etanol. Los procedimientos para la identificación de solvatos incluyen, pero sin limitación, RMN y microanálisis. Los solvatos de los compuestos de fórmula (I) están dentro del ámbito de la invención.

La invención incluye dentro de su ámbito todas las formas estequiométricas y no estequiométricas posibles de los solvatos de los compuestos de fórmula (I).

Los compuestos de fórmula (I) pueden estar en forma cristalina o amorfa. Además, algunas de las formas cristalinas de los compuestos de fórmula (I) pueden existir como polimorfos, que se incluyen dentro del ámbito de la presente invención. Las formas polimórficas de los compuestos de fórmula (I) se pueden caracterizar y diferenciar usando una serie de técnicas analíticas convencionales, incluyendo, pero sin limitación, diagramas de difracción de rayos X en polvo (DRXP), espectros infrarrojos (IR), espectros Raman, calorimetría diferencial de barrido (CDB), análisis termogravimétrico (TGA) y resonancia magnética nuclear de estado sólido (RMN de estado sólido).

Ciertos compuestos descritos en el presente documento pueden contener uno o más átomos quirales de manera que se puedan formar isómeros ópticos, por ejemplo, enantiómeros o diastereoisómeros. Por consiguiente, la presente invención abarca todos los isómeros de los compuestos de fórmula (I) ya sea como isómeros individuales aislados que estén sustancialmente libres del otro isómero (es decir, puros) o como mezclas (es decir, racematos y mezclas racémicas). Un isómero individual aislado que está sustancialmente libre del otro isómero (es decir, puro) se puede aislar de manera que esté presente menos del 10 %, particularmente menos del aproximadamente 1 %, por ejemplo, menos del aproximadamente el 0,1 % del otro isómero.

La separación de los isómeros se puede realizar mediante técnicas convencionales conocidas por los expertos en la materia, por ejemplo, por cristalización fraccionada, cromatografía o HPLC.

Pueden existir ciertos compuestos de fórmula (I) en una de varias formas tautoméricas. Se entenderá que la presente invención abarca todos los tautómeros de los compuestos de fórmula (I) ya sea como tautómeros individuales o como mezclas de los mismos.

Se apreciará de lo anteriormente expuesto que, dentro del ámbito de la invención, se incluyen solvatos, isómeros y formas polimórficas de los compuestos de fórmula (I) y sales de los mismos.

Los compuestos de fórmula (I) o sus sales se pueden preparar mediante una variedad de procedimientos, incluyendo la química convencional. Cualquier variable definida previamente seguirá teniendo el significado definido anteriormente, salvo que se indique lo contrario. A continuación, se exponen procedimientos sintéticos generales ilustrativos y, a continuación, en los ejemplos de trabajo, se preparan compuestos específicos de fórmula (I) y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos. Estos procedimientos forman aspectos adicionales de la presente invención.

A lo largo de la memoria descriptiva, las fórmulas generales están designadas por números romanos (I), (II), (III), (IV) etc.

En otro aspecto, la presente invención proporciona un procedimiento para la preparación de un compuesto de fórmula (I), en la que Z representa O; procedimiento que comprende la etapa de hacer reaccionar un compuesto de fórmula (II):

en la que X, Y, R1, R2 y R3 son como se han definido para los compuestos de fórmula (I) con:

a) R2aCOOH, R2aCHO o R2aCOCl, en los que R2a es como se ha definido anteriormente para los compuestos de fórmula (I), o b) (t-butilOCO)2O o c) CS2 o d) NaNO2,

en condiciones apropiadas.

La Etapa a) se puede efectuar por calentamiento a reflujo en un disolvente adecuado tal como ácido acético.

Cuando R2aCOOH es el reactivo, antes de calentar a reflujo en ácido acético, se puede requerir la activación del material de partida con un reactivo tal como HOBT. La reacción de acoplamiento se puede realizar en presencia de un agente de acoplamiento tal como EDCI y una base orgánica tal como trietilamina, en un disolvente adecuado, por ejemplo, un disolvente aprótico polar tal como diclorometano.

5 Cuando se emplea un cloruro de ácido R2aCOCI, antes de calentar a reflujo en ácido acético, se permite que el cloruro de ácido reaccione con el compuesto de fórmula (II) en un disolvente adecuado, por ejemplo, un disolvente aprótico polar tal como diclorometano en presencia de una base orgánica tal como trietilamina.

La Etapa b) se puede realizar a 80 ºC durante un período de aproximadamente 2 h, seguido del tratamiento a una temperatura elevada, por ejemplo, a 180 ºC durante un período de aproximadamente 3 h en un disolvente tal como

10 difeniléter.

La Etapa c) se puede efectuar a temperaturas elevadas, por ejemplo, superiores a 50 ºC, tal como a 80 ºC, en condiciones básicas, por ejemplo, en presencia de trietilamina en un disolvente adecuado, por ejemplo, un alcohol tal como etanol.

La Etapa d) se puede llevar a cabo a baja temperatura, por ejemplo, añadirse nitrito de sodio a 0 ºC, tras lo que se

15 deja calentar la mezcla de reacción hasta la temperatura ambiente y se continúa la reacción durante aproximadamente 18 h.

En los siguientes esquemas X, Y, R1, R2 y R3, n etc. tienen las definiciones que se han dado anteriormente para los compuestos de fórmula (I).

Los compuestos de fórmula (I) en la que R4 representa H o alquilo y A es un derivado de imidazol se pueden 20 preparar como se muestra en el siguiente Esquema 1.

Esquema 1

Los derivados de imidazol de fórmula general (IE) se pueden preparar (Esquema 1) mediante la reacción de los derivados de amino (IIA) con aldehídos (R2CHO) en ácido acético a reflujo, o mediante el acoplamiento de los

25 derivados (IIA) con ácido carboxílico de fórmula general R2CHO con HOBT, EDCI en diclorometano en presencia de trietilamina, seguido de la ciclación en ácido acético a reflujo o del acoplamiento con cloruro de ácido de fórmula general R2COCl en presencia de trietilamina, seguido de la ciclación en ácido acético a reflujo.

Los compuestos de fórmula (I) en la que R4 representa H o alquilo y A representa un imidazolona se pueden preparar como se muestra en el siguiente Esquema 2.

Esquema 2

Los compuestos de imidazolona de fórmula general (IF) se pueden preparar, de acuerdo con el Esquema 2, haciendo reaccionar los compuestos (IIA) con anhídrido de Boc seguido de una ciclación en difeniléter a 180 ºC.

Los compuestos de imidazolona (IF) se pueden preparar usando las condiciones de reordenamiento de tipo Hoffman (Esquema 3). En este caso los compuestos (IIB) se hacen reaccionar con bis(trifluoroacetoxi)yodo]benceno, dando, tras la ciclación interna, los compuestos de imidazolona (IF).

Esquema 3

10 Los compuestos de imidazolona (IF) también se pueden preparar usando las condiciones de reordenamiento de Curtius (Esquema 4). En este caso los compuestos de ácido (IIC) se hacen reaccionar con difenilfosforilazida en presencia de trietilamina durante un período de aproximadamente 2 a 18 h, dando los compuestos de imidazolona (IF).

Esquema 4

Los compuestos de fórmula (I) en la que R4 es H, y A es un derivado de imidazol-2-tiona se pueden preparar como se muestra en el siguiente Esquema 5.

Esquema 5

Los derivados de imidazol-2-tiona de fórmula general (IG) se pueden preparar mediante la reacción de los compuestos de fórmula general (IIA) con disulfuro de carbono en presencia de trietilamina en un disolvente tal como etanol a 60-80 ºC durante aproximadamente 18 h.

10 Los compuestos de fórmula (I) en la que R4 es H o alquilo, y A es un derivado de triazol se pueden preparar como se muestra en el siguiente Esquema 6. El derivado de amino (IIA) se hace reaccionar a 0 ºC con nitrito de sodio en agua y ácido acético en un disolvente como DMF. A continuación, se agita la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante aproximadamente 18 h.

Esquema 6

Los compuestos de fórmula (I) en la que R4 es ciano y A es un derivado de imidazol se pueden preparar como se muestra en el siguiente Esquema 7, usando una reacción de Reissert-Henze modificada (Harusawa, S. et al.,

5 Heterocycles, 1981, 15, 981-984). Se hace reaccionar el compuesto (IE) con ácido m-cloroperbenzoico en diclorometano a temperatura ambiente durante aproximadamente 2 h. A continuación, se hace reaccionar el N-óxido intermedio resultante con fosforocianidato de dietilo en presencia de trietilamina en un disolvente aprótico tal como acetonitrilo, y luego se calienta la mezcla de reacción a reflujo durante 4 h.

Esquema 7

El material de partida (IE) del Esquema 7 se puede preparar mediante un procedimiento análogo al descrito anteriormente en el Esquema 1.

Los compuestos de fórmula general (IIA) en la que R4 es hidrógeno y alquilo se pueden preparar de acuerdo con el Esquema 8. Se hacen reaccionar los compuestos (IIIA) con hidróxido de sodio en etanol a reflujo durante 5 h. 15 Después del tratamiento con HCl N, se descarboxilan los compuestos resultantes de fórmula general (VA) en difeniléter a reflujo durante 2 h. Se realiza la nitración de los compuestos (VA) con ácido nítrico en ácido propanoico a temperatura ambiente, seguido del calentamiento de la mezcla de reacción a un intervalo de temperaturas de 100125 ºC durante 1 a 2 h. Se hacen reaccionar los compuestos (VIA) con POCl3 en tolueno a reflujo durante aproximadamente 18 horas. A continuación, se hacen reaccionar los compuestos de cloro (VIIA) con aminas de

20 fórmula general R1 R2R3C)nNH2 en un disolvente tal como acetonitrilo a 60 ºC durante 2 h. Luego se pueden reducir los compuestos resultantes con SnCl2, 2H2O en etanol/HCl o etanol/THF a una temperatura en el intervalo de 40 ºC a la temperatura de reflujo durante aproximadamente 1 a 3 h, dando compuestos de fórmula general (IIA).

Los compuestos de fórmula general (VA) en la que X e Y son CH y R4 es hidrógeno también se pueden preparar de acuerdo con el Esquema 9.

Esquema 9

Se hacen reaccionar los derivados de la 3-yodo-anilina con el ácido de Meldrum en presencia de ortoformiato de metilo a reflujo durante aproximadamente 1 h, seguido de la ciclación en difeniléter hirviendo durante aproximadamente 10 minutos. Los compuestos de fórmula general (VA) en la que R4 es alquilo, por ejemplo metilo,

10 se pueden preparar siguiendo la misma ruta sintética mediante la sustitución del ácido de Meldrum con acetoacetato de etilo.

Los compuestos de fórmula VA en la que R5 está situado en una posición diferente del anillo se pueden preparar mediante un procedimiento análogo al establecido en el Esquema 8, a partir de materiales de partida apropiados.

Los compuestos de fórmula general (IIB) en la que R4 es hidrógeno o alquilo se pueden preparar de acuerdo con el

15 Esquema 10. Se tratan los compuestos (IVA) con POCl3 con DMF a reflujo. A continuación, se hacen reaccionar los derivados de 4-cloro-3-cloroacilo correspondientes con amoniaco (g) a 0-5 ºC en un disolvente tal como dioxano, obteniéndose los compuestos de carboxamida (VIIIA). El acoplamiento con la amina se realizó como se ha descrito previamente para el Esquema 8.

Esquema 10

Los compuestos de fórmula general (IIIA) en la que R4 es hidrógeno se pueden preparar de acuerdo con el Esquema

11.

Esquema 11

El ácido 3,5-dimetilisoxazol-borónico se puede hacer reaccionar con derivados de 3-yodo o 3-bromo usando las condiciones de acoplamiento de Suzuki, dando los compuestos amino correspondientes. Cuando X e Y son CH, la 3-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)anilina se puede hacer reaccionar con etoximetilenmalonato de dietilo a 130 ºC durante un

10 período en el intervalo de 20 minutos a 1 h. El ({[3-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)fenil]amino}metiliden)-propanodioato de dietilo resultante se puede ciclar en difeniléter a reflujo durante aproximadamente 30 minutos a 1 h (de acuerdo con el procedimiento convencional descrito en J . Med. Chem., 1980, 23, 1358). Se puede aplicar el mismo procedimiento a compuestos de aminopiridina para preparar los compuestos de 1,5-o 1,6-naftiridina.

Los compuestos de fórmula (I) en la que R4 es alquilo, por ejemplo, metilo, se pueden preparar mediante

15 procedimientos análogos a los descritos en el Esquema 11, reemplazando el etoximetilenmalonato de dietilo por acetilmalonato de dietilo.

Los compuestos de fórmula general (IIC) en la que R4 es hidrógeno o alquilo se pueden preparar de acuerdo con el Esquema 12.

Esquema 12

Se someten los compuestos (IIIA) a reflujo en POCl3 durante aproximadamente 18 h y, a continuación, se acoplan los compuestos (XA) con aminas de fórmula general R1(R2R3C)nNH2 en un disolvente tal como acetonitrilo o

5 dioxano, a una temperatura en el intervalo de 60 ºC a 110 ºC durante aproximadamente 1 a 4 horas. La saponificación de los compuestos (IID) con NaOH (N) en etanol calentado a reflujo, durante aproximadamente 6 a 24 horas, proporciona los compuestos de fórmula (IIC).

Los compuestos de fórmula (I) en la que Z representa NH (y, por consiguiente, R4 representa hidrógeno, A es un grupo seleccionado de entre (i) o (ii) como se ha definido anteriormente, y Rx representa O) se pueden preparar de

10 acuerdo con procedimientos mostrados en los siguientes Esquemas 13 a 15.

Esquema 13

Esquema 14

Esquema 15

Los expertos en la materia apreciarán que puede ser ventajoso para proteger uno o más grupos funcionales de los compuestos descritos anteriormente. Los ejemplos de grupos protectores y los medios para su eliminación se pueden encontrar en quot;Protective Groups in Organic Synthesisquot; T. W. Greene (IV edición, J. Wiley and Sons, 2006). 10 Los grupos protectores de amina adecuados incluyen acilo (por ejemplo, acetilo, carbamato (por ejemplo, 2',2',2'

tricloroetoxicarbonilo, benciloxicarbonilo o t-butoxicarbonilo) y arilalquilo (por ejemplo, bencil), que se pueden eliminar por hidrólisis (por ejemplo, usando un ácido tal como ácido clorhídrico en dioxano o ácido trifluoroacético en diclorometano) o de forma reductora (por ejemplo, hidrogenolisis de un grupo bencilo o benciloxicarbonilo, o eliminación reductora de un grupo 2',2',2'-tricloroetoxicarbonilo usando cinc en ácido acético) según sea apropiado. Otros grupos protectores de amina adecuados incluyen trifluoroacetilo (-COCF3) que se puede eliminar por hidrólisis catalizada con bases.

Se apreciará que en cualquiera de las rutas descritas anteriormente, se puede variar el orden exacto de las etapas de síntesis mediante las que se introducen los diversos grupos y restos en la molécula. Será competencia del experto en la materia garantizar que los grupos o restos introducidos en una etapa del procedimiento no se vean afectados por transformaciones y reacciones posteriores, y seleccionar en consecuencia el orden de las etapas sintéticas.

Ciertos compuestos intermedios descritos anteriormente se cree que son nuevos y, por lo tanto, forman un aspecto adicional de la invención.

Los compuestos de fórmula (I) y las sales de los mismos son inhibidores de bromodominios y, por lo tanto, se cree que tienen una posible utilidad en el tratamiento de enfermedades o afecciones para las que está indicado un inhibidor de bromodominios.

Así pues, la presente invención proporciona un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para su uso en terapia. En una realización, se proporciona 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-[(1R))-1(2-piridinil)etil]-1,3-dihidro- 2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma para su uso en terapia. El compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo se puede usar en el tratamiento de enfermedades o afecciones para las que está indicado un inhibidor de bromodominios.

Por lo tanto, la presente invención proporciona un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para su uso en el tratamiento de cualquier enfermedad o afección para la que está indicado un inhibidor de bromodominios. En otra realización, se proporciona un compuesto o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para su uso en el tratamiento de afecciones autoinmunes y/o inflamatorias crónicas. En una realización adicional, se proporciona un compuesto o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para su uso en el tratamiento del cáncer.

En una realización, se proporciona 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-[(1R))-1-(2-piridinil)etil]-1,3-dihidro-2Himidazo[4,5-c]quinolin-2-ona o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma para su uso en el tratamiento de enfermedades o afecciones para las que está indicado un inhibidor de bromodominios.

También se proporciona el uso de un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de enfermedades o afecciones para las que está indicado un inhibidor de bromodominios. En una realización, se proporciona 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-[(1R))-1-(2piridinil)etil]-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de enfermedades o afecciones para las que está indicado un inhibidor de bromodominios.

Lo adecuado es que el sujeto que lo necesita sea un mamífero, particularmente un ser humano.

Como se usa en el presente documento, la expresión quot;cantidad eficazquot; significa la cantidad de un fármaco o agente farmacéutico que provocará la respuesta biológica o médica de un tejido, sistema, animal o ser humano que se está buscando, por ejemplo, por parte de un investigador o médico. Además, la expresión quot;cantidad terapéuticamente eficazquot; significa cualquier cantidad que, en comparación con un sujeto correspondiente que no haya recibido dicha cantidad, produce la mejora del tratamiento, la curación, la prevención o la mejoría de una enfermedad, trastorno o efecto secundario, o una disminución de la velocidad de progresión de una enfermedad o un trastorno. La expresión también incluye dentro de su ámbito cantidades eficaces para mejorar la función fisiológica normal.

Se cree que los inhibidores de bromodominios son útiles en el tratamiento de una variedad de enfermedades o afecciones relacionadas con la inflamación sistémica o de tejidos, las respuestas inflamatorias ante una infección o hipoxia, la activación y proliferación celular, el metabolismo de lípidos, la fibrosis, y en la prevención y tratamiento de infecciones virales.

Los inhibidores de bromodominios pueden ser útiles en el tratamiento de una amplia variedad de afecciones autoinmunes e inflamatorias crónicas tales como artritis reumatoide, osteoartritis, gota aguda, psoriasis, lupus eritematoso sistémico, esclerosis múltiple, enfermedad inflamatoria del intestino (enfermedad de Crohn y colitis ulcerosa), asma, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, neumonitis, miocarditis, pericarditis, miositis, eccema, dermatitis, alopecia, vitíligo, enfermedades cutáneas ampollosas, nefritis, vasculitis, aterosclerosis, enfermedad de Alzheimer, depresión, retinitis, uveítis, escleritis, hepatitis, pancreatitis, cirrosis biliar primaria, colangitis esclerosante, enfermedad de Addison, hipofisitis, tiroiditis, diabetes de tipo I y rechazo agudo de órganos trasplantados.

Los inhibidores de bromodominios pueden ser útiles en el tratamiento de una amplia variedad de afecciones inflamatorias agudas tales como gota aguda, arteritis de células gigantes, nefritis incluyendo nefritis por lupus, vasculitis con afectación de órganos tales como glomerulonefritis, vasculitis incluyendo arteritis de células gigantes, granulomatosis de Wegener, poliarteritis nodosa, enfermedad de Behcet, enfermedad de Kawasaki, arteritis de Takayasu, vasculitis con afectación de órganos y rechazo agudo de órganos trasplantados.

Los inhibidores de bromodominios pueden ser útiles en la prevención o el tratamiento de enfermedades o afecciones en las que participan respuestas inflamatorias ante infecciones con bacterias, virus, hongos, parásitos o sus toxinas, tales como sepsis, síndrome de sepsis, choque séptico, endotoxemia, síndrome de respuesta inflamatoria sistémica (SRIS), síndrome de disfunción multiorgánica, síndrome de choque tóxico, lesión pulmonar aguda, SDRA (síndrome de dificultad respiratoria adulta), insuficiencia renal aguda, hepatitis fulminante, quemaduras, pancreatitis aguda, síndromes post-quirúrgicos, sarcoidosis, reacciones de Herxheimer, encefalitis, mielitis, meningitis, malaria y SRIS asociado a infecciones virales tales como gripe, herpes zoster, herpes simple y coronavirus.

Los inhibidores de bromodominios pueden ser útiles en la prevención o el tratamiento de afecciones asociadas a la lesión por isquemia-reperfusión, tales como infarto de miocardio, isquemia cerebrovascular (apoplejía), síndromes coronarios agudos, lesión por reperfusión renal, trasplante de órganos, injerto de derivación coronaria, procedimientos de derivación cardio-pulmonar, y embolia pulmonar, renal, hepática, gastrointestinal o periférica de extremidades.

Los inhibidores de bromodominios pueden ser útiles en el tratamiento de trastornos del metabolismo de lípidos a través de la regulación de APO-A1 tales como la hipercolesterolemia, la aterosclerosis y la enfermedad de Alzheimer.

Los inhibidores de bromodominios pueden ser útiles en el tratamiento de afecciones fibróticas tales como fibrosis pulmonar idiopática, fibrosis renal, estenosis post-operatoria, formación de queloides, esclerodermia y fibrosis cardiaca.

Los inhibidores de bromodominios pueden ser útiles en la prevención y el tratamiento de infecciones virales tales como virus del herpes, virus del papiloma humano, adenovirus y virus de la viruela, y otros virus de ADN.

Los inhibidores de bromodominios pueden ser útiles en el tratamiento del cáncer, incluyendo cánceres hematológicos, epiteliales, incluyendo de pulmón, de mama y carcinomas de colon, carcinomas de la línea media, tumores mesenquimales, hepáticos, renales y neurológicos.

En una realización, la enfermedad o afección para la cual está indicado un inhibidor de bromodominios se selecciona de entre enfermedades asociadas con el síndrome de respuesta inflamatoria sistémica tales como sepsis, quemaduras, pancreatitis, trauma mayor, hemorragia e isquemia. En la presente realización, el inhibidor de bromodominios se administraría en el momento del diagnóstico para reducir la incidencia de: SRIS, la aparición de un shock, síndrome de disfunción multiorgánica, que incluye la aparición de lesión pulmonar aguda, SDRA, lesión renal aguda, hepática, cardiaca y gastrointestinal y la mortalidad. En otra realización, el inhibidor de bromodominios se administra antes de los procedimientos quirúrgicos u otros procedimientos asociados con un alto riesgo de sepsis, hemorragia, daño tisular extenso, SRIS o SDOM (síndrome de disfunción orgánico múltiple). En una realización particular, la enfermedad o afección para la que está indicado un inhibidor de bromodominios es sepsis, síndrome de sepsis, choque séptico y endotoxemia. En otra realización, el inhibidor de bromodominios está indicado para el tratamiento de la pancreatitis aguda o crónica. En otra realización, el bromodominio está indicado para el tratamiento de quemaduras.

En una realización, la enfermedad o afección para la que está indicado un inhibidor de bromodominios se selecciona de entre infecciones y reactivaciones por herpes simplex, herpes labial, infecciones y reactivaciones por herpes zoster, varicela, culebrillas, virus del papiloma humano, cáncer cervicouterino, infecciones por adenovirus, incluyendo la enfermedad respiratoria aguda, infecciones de sífilis tales como viruela vacuna y viruela, y el virus de la peste porcina africana. En una realización particular, un inhibidor de bromodominios está indicado para el tratamiento de infecciones de la piel o del epitelio del cuello uterino por el virus del papiloma humano.

La expresión quot;enfermedades o afecciones para las que un inhibidor de bromodominios está indicadoquot; está concebida para que incluya cada uno de o todos los estados patológicos anteriores.

Si bien es posible administrar, para su uso en terapia, un compuesto de fórmula (I) así como las sales farmacéuticamente aceptables del mismo en forma de producto químico en bruto, es común presentar el principio activo en forma una composición farmacéutica.

Por consiguiente, la presente invención proporciona, en un aspecto adicional, una composición farmacéutica que comprende un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable y uno o más vehículos, diluyentes y/o excipientes farmacéuticamente aceptables. Los compuestos de fórmula (I) y las sales farmacéuticamente aceptables son como se han descrito anteriormente. El/los vehículo/s, diluyente/s o excipiente/s deben ser aceptables en el sentido de ser compatibles con el resto de ingredientes de la composición y no perjudiciales para el receptor de los mismos. De acuerdo con otro aspecto de la invención, también se proporciona un procedimiento para

la preparación de una composición farmacéutica que incluye mezclar un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, con uno o más vehículos, diluyentes o excipientes farmacéuticamente aceptables. La composición farmacéutica se puede usar en el tratamiento de cualquiera de las afecciones descritas en el presente documento.

En una realización, se proporciona una composición farmacéutica que comprende 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8(metiloxi)-1-[(1R))-1-(2-piridinil)etil]-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona o una sal farmacéuticamente aceptable y uno o más o vehículos, diluyentes o excipientes farmacéuticamente aceptables.

Puesto que los compuestos de fórmula (I) están concebidos para su uso en composiciones farmacéuticas, se entenderá fácilmente que preferentemente se proporcionan en forma sustancialmente pura, por ejemplo, con al menos una pureza del 60 %, más adecuadamente al menos una pureza del 75 % y preferentemente al menos una pureza del 85 %, especialmente al menos una pureza del 98 % (% en base a peso por peso).

Las composiciones farmacéuticas se pueden presentar en formas de dosificación unitarias que contienen una cantidad predeterminada de principio activo por unidad de dosis. Las composiciones de dosificación unitarias preferidas son aquellas que contienen una dosis o subdosis diaria, o una fracción apropiada de la misma, de un principio activo. Por lo tanto, dichas dosis unitarias se pueden administrar más de una vez al día. Las composiciones de dosificación unitarias preferidas son aquellas que contienen una dosis o subdosis diaria (para su administración más de una vez al día), como se ha indicado anteriormente en el presente documento, o una fracción apropiada de la misma, de un principio activo.

Las composiciones farmacéuticas se pueden adaptar a su administración por cualquier vía apropiada, por ejemplo, por vía oral (incluyendo bucal o sublingual), rectal, inhalación, intranasal, tópica (incluyendo bucal, sublingual o transdérmica), vaginal o parenteral (incluyendo subcutánea, intramuscular, intravenosa o intradérmica). Dichas composiciones se pueden preparar mediante cualquier procedimiento conocido en la técnica farmacéutica, por ejemplo, mediante la asociación del principio activo con el/los vehículo/s o excipiente/s.

En una realización, la composición farmacéutica está adaptada a la administración parenteral, particularmente la administración intravenosa.

En una realización, la composición farmacéutica está adaptada a la administración oral.

Las composiciones farmacéuticas adaptadas a la administración parenteral incluyen soluciones acuosas y no acuosas estériles de inyección que pueden contener antioxidantes, tampones, bacteriostáticos y solutos que vuelven la composición isotónica con la sangre del receptor previsto, y suspensiones estériles acuosas y no acuosas que pueden incluir agentes de suspensión y agentes espesantes. Las composiciones se pueden presentar en recipientes de una sola dosis o de múltiples dosis, por ejemplo, ampollas y viales sellados, y se pueden almacenar en estado criodesecado (liofilizado) que solo requiere la adición del vehículo líquido estéril, por ejemplo, agua para inyección, inmediatamente antes de su uso. Se pueden preparar soluciones y suspensiones inyectables extemporáneas a partir de polvos estériles, gránulos y comprimidos.

Las composiciones farmacéuticas adaptadas a la administración oral pueden presentarse como unidades diferenciadas tales como cápsulas o comprimidos; polvos o gránulos; soluciones o suspensiones en líquidos acuosos o no acuosos; espumas o batidos comestibles; o emulsiones líquidas de aceite en agua o emulsiones líquidas de agua en aceite.

Por ejemplo, para la administración oral en forma de un comprimido o una cápsula, el componente de fármaco activo se puede combinar con un vehículo inerte farmacéuticamente aceptable no tóxico, oral, tal como etanol, glicerol, agua y similares. Los polvos adecuados para su incorporación en comprimidos o cápsulas se pueden preparar reduciendo el compuesto hasta un tamaño fino adecuado (por ejemplo, por micronización) y mezclando con un vehículo farmacéutico preparado de forma similar tal como un carbohidrato comestible, por ejemplo, almidón o manitol. También puede haber agentes aromatizantes, conservantes, dispersantes y colorantes.

Las cápsulas se pueden fabricar preparando una mezcla en polvo, como se ha descrito anteriormente, y llenando envolturas de gelatina formadas. Se pueden añadir deslizantes y lubricantes tales como sílice coloidal, talco, estearato de magnesio, estearato de calcio o polietilenglicol sólido a la mezcla en polvo antes de la operación de llenado. También se puede añadir un agente disgregante o solubilizante tal como agar-agar, carbonato de calcio o carbonato de sodio para mejorar la disponibilidad del medicamento cuando se ingiera la cápsula.

Por otra parte, cuando se desee o sea necesario, también se pueden incorporar en la mezcla aglutinantes, deslizantes, lubricantes, agentes edulcorantes, aromatizantes, agentes disgregantes y agentes colorantes. Los aglutinantes adecuados incluyen almidón, gelatina, azúcares naturales tales como glucosa o beta-lactosa, edulcorantes de maíz, gomas naturales y sintéticas tales como acacia, tragacanto o alginato sódico, carboximetilcelulosa, polietilenglicol, ceras y similares. Los lubricantes usados en estas formas de dosificación incluyen oleato de sodio, estearato de sodio, estearato de magnesio, benzoato de sodio, acetato de sodio, cloruro de sodio y similares. Los disgregantes incluyen, sin limitación, almidón, metilcelulosa, agar, bentonita, goma de xantano y similares. Los comprimidos se formulan, por ejemplo, preparando una mezcla en polvo, granulando o aplastando,

añadiendo un lubricante y disgregante, y prensando en comprimidos. Las mezclas en polvo se preparan mezclando el compuesto, convenientemente triturado, con un diluyente o una base como se ha descrito anteriormente, y opcionalmente, con un aglutinante tal como carboximetilcelulosa, un alginato, gelatina o polivinilpirrolidona, un retardante de la disolución tal como parafina, un acelerador de la resorción tal como una sal cuaternaria y/o un agente de absorción tal como bentonita, caolín o fosfato dicálcico. La mezcla en polvo se puede granular por humectación con un aglutinante tal como jarabe, pasta de almidón, mucílago de goma arábiga o soluciones de materiales celulósicos o poliméricos, y mediante presión a través de un tamiz. Como alternativa a la granulación, la mezcla en polvo se puede procesar a través de la máquina de comprimidos, produciéndose bloques formados imperfectamente que se rompen en gránulos. Los gránulos se pueden lubricar para evitar que se peguen a los troqueles que forman los comprimidos por medio de la adición de ácido esteárico, una sal estearato, talco o aceite mineral. A continuación, la mezcla lubricada se comprime en comprimidos. Los compuestos de fórmula (I) y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos también se pueden combinar con un vehículo inerte fluido y comprimirse en comprimidos directamente sin pasar por las etapas de granulación o trituración. Se puede proporcionar un recubrimiento protector transparente u opaco que consista en una capa sellante de goma laca, un recubrimiento de azúcar o un material polimérico y un recubrimiento pulido de cera. Se pueden añadir colorantes a estos recubrimientos para distinguir las diferentes dosis unitarias.

Los fluidos orales tales como solución, jarabes y elixires se pueden preparar en forma de dosificación unitaria de manera que una cantidad dada contenga una cantidad predeterminada del compuesto. Los jarabes se pueden preparar disolviendo el compuesto en una solución acuosa convenientemente aromatizada, mientras que los elixires se preparan mediante el uso de un vehículo alcohólico no tóxico. Las suspensiones se pueden formular dispersando el compuesto en un vehículo no tóxico. También se pueden añadir solubilizantes y emulsionantes tales como alcoholes isoestearílicos etoxilados y éteres de polioxietilensorbitol, conservantes, aditivos de sabor tales como aceite de menta o edulcorantes naturales o sacarina u otros edulcorantes artificiales, y similares.

Cuando sea apropiado, las composiciones farmacéuticas unitarias para la administración oral pueden estar microencapsuladas. La formulación también se puede preparar para prolongar o sostener la liberación como, por ejemplo, recubriendo o embebiendo material particulado en polímeros, cera o similares.

Los compuestos de fórmula (I) y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos también se pueden administrar en forma de sistemas de liberación de liposomas tales como pequeñas vesículas unilamelares, grandes vesículas unilamelares y vesículas multilamelares. Los liposomas se pueden formar a partir de una variedad de fosfolípidos tales como colesterol, estearilamina o fosfatidilcolinas.

Las composiciones farmacéuticas adaptadas a la administración tópica se pueden formular como pomadas, cremas, suspensiones, lociones, polvos, soluciones, pastas, geles, pulverizados, aerosoles o aceites.

Para tratamientos del ojo u otros tejidos externos como, por ejemplo, la boca y la piel, las composiciones se aplican preferentemente en forma de una pomada o crema tópica. Cuando se formulan en una pomada, el principio activo se puede emplear bien con una base parafínica o una base de pomada hidromiscible. Como alternativa, el principio activo se puede formular en una crema con una base de crema de aceite en agua o una base de agua en aceite.

Las composiciones farmacéuticas adaptadas a las administraciones tópicas en el ojo incluyen colirios en los que el principio activo está disuelto o suspendido en un vehículo adecuado, especialmente un disolvente acuoso.

Las formas de dosificación para la administración nasal o inhalada se pueden formular convenientemente como aerosoles, soluciones, suspensiones, geles o polvos secos.

Para composiciones adecuadas y/o adaptadas a la administración inhalada, se prefiere que el compuesto de fórmula

(I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo esté en una forma de tamaño de partícula reducido, por ejemplo, obtenida por micronización. El tamaño de partícula preferible del compuesto o de la sal de tamaño reducido (por ejemplo, micronizado) se define por un valor D50 de aproximadamente 0,5 a aproximadamente 10 micrómetros (por ejemplo, medido usando difracción de láser).

Las formulaciones de aerosol, por ejemplo, para la administración inhalada pueden comprender una solución o suspensión fina de la sustancia activa en un disolvente acuoso o no acuoso farmacéuticamente aceptable. Las formulaciones en aerosol se pueden presentar en monodosis o multidosis en forma estéril en un recipiente cerrado herméticamente, que puede adoptar la forma de un cartucho o recambio para su uso con un dispositivo de atomización o un inhalador. Como alternativa, el recipiente cerrado herméticamente puede ser un dispositivo de dispensación unitaria tal como un inhalador nasal monodosis o un dispensador de aerosol dotado de una válvula dosificadora (inhalador de dosis medida) que está destinado a desecharse una vez agotado el contenido del recipiente.

Cuando la forma de dosificación comprende un dispensador de aerosol, este preferentemente contiene un propulsor adecuado a presión tal como aire comprimido, dióxido de carbono o un propulsor orgánico tal como un hidrofluorocarbono (HFC). Los propulsores de HFC adecuados incluyen 1,1,1,2,3,3,3-heptafluoropropano y 1,1,1,2tetrafluoroetano. Las formas de dosificación en aerosol también pueden adoptar la forma de un atomizador de bomba. El aerosol presurizado puede contener una solución o una suspensión del compuesto activo. Esto puede

requerir la incorporación de excipientes adicionales, por ejemplo, codisolventes y/o tensioactivos para mejorar las características de dispersión y la homogeneidad de las formulaciones en suspensión. Las formulaciones en solución también pueden requerir la adición de codisolventes tales como etanol.

Para las composiciones farmacéuticas adecuadas y/o adaptadas a la administración inhalada, la composición farmacéutica puede ser una composición inhalable en polvo seco. Dicha composición puede comprender una base de polvo tal como lactosa, glucosa, trehalosa, manitol o almidón, el compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo (preferentemente, en forma de tamaño de partícula reducido, por ejemplo, en forma micronizada) y opcionalmente un modificador del rendimiento tal como L-leucina u otro aminoácido y/o sales de metales de ácido esteárico tales como estearato de magnesio o de calcio. Preferentemente, la composición inhalable en polvo seco comprende una mezcla en polvo seco de lactosa, por ejemplo, lactosa monohidratada y el compuesto de fórmula (I) o una sal del mismo. Dichas composiciones se pueden administrar al paciente usando un dispositivo adecuado, tal como el dispositivo DISKUS®, comercializado por GlaxoSmithKline que se describe, por ejemplo, en el documento GB 2242134 A.

Los compuestos de fórmula (I) y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos se pueden formular como una formulación líquida para administrarse desde un dispensador de líquido, por ejemplo, un dispensador de líquido que tenga una boquilla o un orificio de dispensación a través del cual se dispense una dosis medida de la formulación líquida tras la aplicación de una fuerza aplicada por el usuario a un mecanismo de bomba del dispensador de líquido. Dichos dispensadores de líquido están generalmente provistos de un depósito de múltiples dosis medidas de la formulación líquida, siendo las dosis dispensadas tras accionamientos secuenciales de la bomba. La boquilla o el orificio dispensador pueden estar configurados para su inserción en los orificios nasales del usuario para la dispensación por pulverización de la formulación líquida en la cavidad nasal. En el documento WO-A2005/044354, se describe e ilustra un dispensador de líquido del tipo mencionado anteriormente.

Una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo dependerá de un número de factores que incluyen, por ejemplo, la edad y el peso del animal, la afección exacta que requiere tratamiento y su gravedad, la naturaleza de la formulación y la vía de administración, y finalmente estará a la discreción del médico o veterinario asistente. En la composición farmacéutica, cada unidad de dosificación para la administración oral o parenteral contiene preferentemente de 0,01 a 3.000 mg, más preferentemente de 0,5 a 1.000 mg, de un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, calculada como la base libre. Cada unidad de dosificación para la administración nasal o inhalada contiene preferentemente de 0,001 a 50 mg, más preferentemente de 0,01 a 5 mg, de un compuesto de la fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, calculada como la base libre.

Los compuestos farmacéuticamente aceptables de fórmula (I) y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos se pueden administrar en una dosis diaria (para un paciente adulto) de, por ejemplo, una dosis oral o parenteral de 0,01 mg a 3.000 mg al día o de 0,5 a 1.000 mg al día, o una dosis nasal o inhalada de 0,001 a 50 mg al día o de 0,01 a 5 mg al día, del compuesto de la fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, calculada como la base libre. Esta cantidad se puede administrar en una sola dosis al día o más habitualmente en un número (tal como dos, tres, cuatro, cinco o seis) de subdosis al día de modo que la dosis diaria total sea la misma. Una cantidad eficaz de una sal del mismo, se puede determinar como una proporción de la cantidad eficaz del compuesto de fórmula (I) per se.

Los compuestos de fórmula (I) y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos se pueden emplear solos o en combinación con otros agentes terapéuticos. Por lo tanto, las terapias de combinación de acuerdo con la presente invención comprenden la administración de al menos un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y el uso de al menos otro agente farmacéuticamente activo. Preferentemente, las terapias de combinación de acuerdo con la presente invención comprenden la administración de al menos un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y al menos otro agente farmacéuticamente activo. El/los compuesto/s de fórmula (I) y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, y el otro/s agente/s farmacéuticamente activo/s se pueden administrar juntos en una única composición farmacéutica o por separado y, cuando se administran por separado, esto puede ocurrir simultánea o secuencialmente en cualquier orden. Las cantidades del/de los compuesto/s de fórmula (I) y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, y el/los otro/s agente/s farmacéuticamente activo/s y los tiempos relativos de administración se seleccionarán con el fin de lograr el efecto terapéutico combinado deseado. Así pues, en un aspecto adicional, se proporciona una combinación que comprende un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y al menos otro agente farmacéuticamente activo.

Por lo tanto, en un aspecto, el compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y las composiciones farmacéuticas que comprenden un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo de acuerdo con la invención se pueden usar en combinación con o incluir uno o más agentes terapéuticos distintos, por ejemplo, seleccionados de entre antibióticos, antivirales, glucocorticoides, antagonistas muscarínicos y agonistas beta-2.

Se apreciará que cuando el compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo se administra en combinación con otros agentes terapéuticos administrados normalmente por inhalación o por vía

intravenosa, oral o intranasal, la composición farmacéutica resultante se puede administrar por las mismas vías. Como alternativa, cada componente de la composición se puede administrar por diferentes vías.

Una realización de la invención engloba combinaciones que comprenden uno o dos otros agentes terapéuticos.

Para cualquier experto en la materia, será evidente que, cuando sea apropiado, el/los otro/s ingredientes/s terapéutico/s se puede/n usar en forma de sales, por ejemplo, sales de metales alcalinos o aminas, o como sales de adición de ácido o profármacos, o como ésteres, por ejemplo, ésteres de alquilo inferior, o como solvatos, por ejemplo, hidratos, para optimizar la actividad y/o la estabilidad y/o las características físicas, tales como la solubilidad, del ingrediente terapéutico. También será evidente que, cuando sea apropiado, los ingredientes terapéuticos se pueden usar en forma ópticamente pura.

Las combinaciones mencionadas anteriormente se pueden presentar convenientemente para su uso en forma de una composición farmacéutica y, por lo tanto, las composiciones farmacéuticas que comprenden una combinación como se ha definido anteriormente junto con un diluyente o un vehículo farmacéuticamente aceptable representan un aspecto adicional de la invención.

Los compuestos de fórmula (I) y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos se pueden preparar mediante los procedimientos descritos a continuación o mediante procedimientos similares. Por lo tanto, los siguientes productos intermedios y ejemplos sirven para ilustrar la preparación de los compuestos de fórmula (I) y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, y no se deben considerar, en ningún modo, como limitantes del ámbito de la invención.

Productos intermedios y ejemplos

Los siguientes ejemplos no limitantes ilustran la presente invención.

Abreviaturas

CCF

- cromatografía en capa fina

AcOH

- ácido acético

DCM

- diclorometano

DME

- 1,2-dimetoxietano

DMF

-N,N-dimetilformamida

HOBT

- 1-(hidroxi)benzotriazol

EDCI

- 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida

dietiléter

- éter dietílico

EtOAc

- acetato de etilo

i-PR2O

- diisopropiléter

Config.

- configuración absoluta

CH3CN

- acetonitrilo

MeOH

- metanol

THF

- tetrahidrofurano

TA

- temperatura ambiente

Tr

- tiempo de retención

DIEA

-N,N-diisopropiletilamina

EM-IQPA

- espectrómetro de masas de cuadrupolo de ionización química a presión atmosférica

CS2

- disulfuro de carbono

Na2CO3

- carbonato de sodio

NaHCO3

- bicarbonato de sodio

NaNO2

- nitrito de sodio

NaOH

- hidróxido de sodio

Na2SO4

- sulfato de sodio

POCl3

- oxicloruro de fósforo (III)

Ba(OH)2•8H2O

- octahidrato de hidróxido de bario

SnCl2•2H2O

- dihidrato de cloruro de estaño (II)

Pd/C

- paladio sobre carbono

mCPBA

- ácido m-cloroperbenzoico

CDCl3

- cloroformo deuterado

DMSO d6

- dimetilsulfóxido deuterado

BOC

-terc-butiloxicarbonilo

N

- 1 normal (concentración)

PEPPSI®

- estabilización e Iniciación de preparaciones con precatalizador mejorado con piridina

La HPLC analítica se llevó a cabo en dos tipos de aparatos:

a) En una columna Supelcosil LCABZ + PLUS (3 μm, DI de 3,3 cm x 4,6 mm) eluyendo con HCO2H al 0,1 % y acetato de amonio 0,01 M en agua (disolvente A) y acetonitrilo al 95 % y HCO2H al 0,05 % en agua (disolvente B), usando el siguiente gradiente de elución: 0 a 0,7 minutos B al 0 %, 0,7 a 4,2 minutos B al 0 →100 %, 4,2 a 5,3 minutos B al 100 %, 5,3 a 5,5 minutos B al 0 →100 % a un caudal de 3 ml/minuto. Los espectros de masas (EM) se registraron en un espectrómetro de masas Fisons VG Platform usando los modos de ionización positiva por electronebulización [(IEN+, dando iones moleculares [M+H]+ y [M+NH4]+] o ionización negativa por electronebulización [(IEN -, dando ión molecular [MH] -]. Los datos analíticos de este aparato se dan con el siguiente formato: [M+H]+ o [M-H] -

b) En una columna Chromolith Performance RP 18 (DI de 100 x 4,6 mm) eluyendo con acetato de amonio 0,01

M. en agua (disolvente A) y acetonitrilo al 100 % (disolvente B), usando el siguiente gradiente de elución: 0 a 4 minutos B al 0 →100 %, 4 a 5 minutos B al 100 % a un caudal de 5 ml/minuto. Los espectros de masas (EM) se registraron en un espectrómetro de masas micromass Platform-LC usando los modos de ionización positiva química a presión atmosférica [PA+, dando iones moleculares MH+] o ionización negativa química a presión atmosférica [(PA -, dando iones moleculares (M-H) -]. Los datos analíticos de este aparato se dan con el siguiente formato: [M+H]+ o [M-H] -precedido de las siglas IQPA para especificar entre ambas fuentes de análisis de espectrometría de masas.

EMAR-CL: La HPLC analítica se llevó a cabo en una columna de Uptisphere-HSC (3 μm, DI de 33 x 3 mm) eluyendo con acetato de amonio 0,01 M en agua (disolvente A) y acetonitrilo al 100 % (disolvente B ), usando el siguiente gradiente de elución: 0 a 0,5 minutos B al 5 %, 0,5 a 3,75 minutos B al 5 →100 %, 3,75 a 4,5 minutos B al 100 %, 4,5 a 5 minutos B al 5 →100 %, 5 a 5,5 minutos B al 5 % a un caudal de 1,3 ml/minuto. Los espectros de masas (EM) se registraron en un espectrómetro de masas Micromass LCT usando los modos de ionización positiva por electronebulización [(IEN+, dando iones moleculares MH+] o ionización negativa por electronebulización [(IEN -, dando iones moleculares (M-H) -].

HPLC de autopurificación de masa objetivo se refiere al procedimiento en el que el material se purificó mediante cromatografía líquida de alto rendimiento en una columna HPLCABZ + 5 μm (DI de 5 cm x 10 mm) con HCO2H al 0,1 % en agua y MeCN al 95 %, agua al 5 %(HCO2H al 0,5 %) usando las siguientes condiciones de elución de gradiente: 0 a 1,0 minutos B al 5 %, 1,0 a 8,0 minutos B al 5 →30 %, 8,0 a 8,9 minutos B al 30 %, 8,9 a 9,0 minutos B al 30 →95 %, 9,0 a 9,9 minutos B al 95 %, 9,9 a 10 minutos B al 95 →0 % a un caudal de 8 ml/minuto. El colector de fracciones Gilson 202 fue activado por un espectrómetro de masas VG Platform al detectar la masa de interés.

CCF (cromatografía en capa fina) se refiere al uso de placas de CCF comercializadas por Merck recubiertas con gel de sílice 60 F254.

Procedimiento de EMCL

La HPLC analítica se realizó en una columna de EM X-Terra C18 (2,5 μm, DI de 30 x 3 mm) eluyendo con acetato de amonio 0,01 M en agua (disolvente A) y acetonitrilo al 100 % (disolvente B), usando el siguiente gradiente de elución: 0 a 4 minutos B al 0 →100 %, 4 a 5 minutos B al 100 % a un caudal de 1,1 ml/minuto. Los espectros de masas (EM) se registraron en un espectrómetro de masas de Platform-LC Micromass usando los modos de ionización química positiva a presión atmosférica [PA+, dando iones moleculares MH+] o ionización química negativa a presión atmosférica [PA -, dando iones moleculares (MH) -].

EMAR-CL: La HPLC analítica se llevó a cabo en una columna de Uptisphere-HSC (3 μm, DI de 33 x 3 mm) eluyendo con acetato de amonio 0,01 M en agua (disolvente A) y acetonitrilo al 100 % (disolvente B ), usando el siguiente gradiente de elución: 0 a 0,5 minutos B al 5 %, 0,5 a 3,75 minutos B al 5 →100 %, 3,75 a 4,5 minutos B al 100 %, 4,5 a 5 minutos B al 100 →5 %, 5 a 5,5 minutos B al 5 % a un caudal de 1,3 ml/minuto. Los espectros de masas (EM) se registraron en un espectrómetro de masas Micromass LCT usando los modos de ionización positiva por electronebulización [(IEN+, dando iones moleculares MH+] o ionización negativa por electronebulización [(IEN -, dando iones moleculares (M-H) -].

EMCL

a) Formato del procedimiento

Condiciones de la CL

El análisis UPLC se realizó en una columna Acquity UPLC BEH C18 (DI de 50 mm x 2,1 mm, DI de empaquetamiento de 1,7 μm) a 40 ºC.

Los disolventes empleados fueron:

A = solución al 0,1 % v/v de ácido fórmico en agua

Tiempo (min)

Caudal (ml/min) % de A % de B

0

1 99 1

1,5

1 3 97

1,9

1 3 97

2,0

1 0 100

La detección UV fue una señal sumada de la longitud de onda de 210 nm a 350 nm. 5 Condiciones de la EM EM : Waters ZQ Modo de ionización : electronebulización positiva y negativa con exploración alterna Intervalo de exploración : 100 a 1.000 AMU Tiempo de exploración : 0,27 segundos

10 Espera entre exploraciones : 0,10 segundos. b) Procedimiento HpH Condiciones de CL El análisis UPLC se realizó en una columna Acquity UPLC BEH C18 (DI de 50 mm x 2,1 mm, DI de

empaquetamiento de 1,7 μm) a 40 ºC. 15 Los disolventes empleados fueron: A = bicarbonato de amonio 10 mM en agua ajustado a pH 10 con solución de amoniaco B = acetonitrilo El gradiente empleado fue:

Tiempo (min)

Caudal (ml/min) % de A % de B

0

1 99 1

1,5

1 3 97

1,9

1 3 97

2,0

1 0 100

20 La detección UV fue una señal sumada de la longitud de onda de 210 nm a 350 nm.

Condiciones de la EM

EM : Waters ZQ Modo de ionización : electronebulización positiva y negativa con exploración alterna Intervalo de exploración : 100 a 1.000 AMU

25 Tiempo de exploración : 0,27 segundos Espera entre exploraciones : 0,10 segundos.

Metodología de MDAP Formato del procedimiento

El análisis HPLC se realizó bien en una columna Sunfire C18 (DI de 100 mm x 19 mm, DI de empaquetamiento de 30 1,5 μm) o en una columna Sunfire C18 (150 mm x 30 mm, DI de empaquetamiento de 1,5 μm) a temperatura ambiente.

Los disolventes empleados fueron: Ejecutado como un gradiente bien durante 15 o 25 minutos (ejecución ampliada) con un caudal de 20 ml/ml (100 mm x 19 mm, DI de empaquetamiento de 5 μm) o 40 ml/min (150 mm x 30 mm, DI de empaquetamiento de 5 μm)

5 Condiciones de la EM

EM : Waters ZQ Modo de ionización : electronebulización positiva y negativa con exploración alterna Intervalo de exploración : 100 a 1.000 AMU Tiempo de exploración : 0,50 segundos

10 Espera entre exploraciones : 0,20 segundos.

En los siguientes procedimientos, después de cada material de partida, por lo general, se proporciona una referencia numérica de un producto intermedio. Esto se proporciona únicamente para ayudar al químico experto. El material de partida puede no haberse preparado necesariamente del lote de referencia.

Cuando se haga referencia al uso de un procedimiento quot;similarquot;, como el experto en la materia apreciará, dicho

15 procedimiento puede implicar una variación mínima, por ejemplo, la temperatura de reacción, la cantidad de reactivo/disolvente, el tiempo de reacción, las condiciones de tratamiento o las condiciones de purificación cromatográfica.

Producto intermedio 1: 4-Yodo-3,5-dimetilisoxazol

20 Se añadió ácido nítrico (13 ml) gota a gota (reacción exotérmica) a una mezcla de 3,5-dimetilisoxazol (31,3 g, 320 mmol) y yodo (37,3 g, 150 mmol) y se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 1 h. Se hidrolizó la mezcla de reacción con una mezcla de hielo y agua, y se extrajo con DCM. Se lavó la fase orgánica con una solución de Na2S2O3, se secó sobre Na2SO4 y se concentró bajo presión reducida, produciendo el compuesto del título en forma de un sólido amarillo (60 g, 83 %). [EM-IQPA]m/z: 224 MH+, Tr: 2,17min.

25 Producto intermedio 2: 3-(3,5-Dimetil-4-isoxazolil)anilina

A una solución de 4-yodo-3,5-dimetilisoxazol (para su preparación, véase el Producto intermedio 1, 142 g, 640 mmol, 1 eq.) y ácido (3-aminofenil)borónico (100 g, 640 mmol, 1 eq.) en DME (600 ml), se añadieron tetraquis(trifenilfosfin)paladio (0) (18,5 g, 16 mol) y una solución de Na2CO3 (203,5 g, 192 mmol, 3 eq.) en agua

30 (750 ml). Se calentó la mezcla a reflujo durante 24 h. Para completar la reacción, se añadieron el Producto intermedio 1 (0,2 eq.) y tetraquis(trifenilfosfin)paladio (0) (5 g) y se sometió la mezcla a reflujo durante una noche. Se vertió la mezcla enfriada en agua y se extrajo con DCM. Se lavó la fase orgánica con agua, se secó sobre Na2SO4 y se filtró. La evaporación del disolvente al vacío dio un aceite bruto que se hizo precipitar con iPr2O, produciendo el compuesto del título en forma de un sólido de color beis (102 g, 85 %). [EM (EN)]m/z: 189 MH+, Tr: 2,20 min.

A una solución de 2-yodo-1-(metoxi)-4-nitrobenceno (2 g, 7,17 mmol, 1 eq.) y ácido (3,5-dimetilisoxazol)borónico (3,03 g, 21,5 mmol, 3 eq.) en DME (44 ml) y agua (7 ml), se añadieron tetraquis(trifenilfosfin)paladio (0) (0,415 g, 5 0,05 eq.) y Ba(OH)2•8H2O (4,52 g, 14,33 mmol, 2 eq.). Se calentó la mezcla hasta 80 ºC durante 16 h. Para completar la reacción, se añadió ácido (3,5-dimetilisoxazol)borónico (1 eq.) y se calentó la mezcla durante 4 h. Se filtró la mezcla enfriada y se extrajo con DCM. Se lavó la fase orgánica con solución acuosa saturada de bocarbonato de sodio y agua, se secó sobre Na2SO4 y se filtró. La evaporación del disolvente al vacío dio un aceite bruto que se hizo precipitar con iPr2O, produciendo el compuesto del título en forma de un óxido sólido (1,735 g,

10 97 %). EMGC m/z: 248.

Producto intermedio 4: 3-(3,5-Dimetil-4-isoxazolil)-4-(metoxi)anilina

A una solución de 3,5-dimetil-4-[2-(metoxi)-5-nitrofenil]isoxazol (para su preparación, véase el Producto intermedio 3, 1,7 g, 6,85 mmol, 1 eq.) en etanol (170 ml), se añadió Pd/C (10 % sobre carbono, 85 mg) y se agitó la reacción bajo

15 hidrógeno durante 4 h. Se añadió AcOH (1,7 ml) y se hidrogenó la reacción durante 20 h. Después de la filtración, se evaporó el disolvente al vacío. Se disolvió el compuesto en bruto en DCM y se lavó con solución acuosa saturada de bocarbonato de sodio, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se evaporó. El compuesto del título se obtuvo en forma de un aceite de color rojo (1,38 g, 88 %). EMCG m/z: 218.

Producto intermedio 5: ({[3-(3,5-Dimetil-4-isoxazolil)fenil]amino}metiliden)-propanodioato de dietilo

Se mezclaron 3-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)anilina (para su preparación, véase el Producto intermedio 2, 80 g, 420 mmol) y etoximetilenmalonato de dietilo (92 g, 425 mmol) y se calentaron hasta 130 ºC durante 20 minutos, liberando etanol, que se evaporó a presión reducida. Se vertió la mezcla de reacción en iPr2O (1 l) y se separó el precipitado producido por filtración y se lavó con iPr2O. Se recristalizó el sólido resultante en acetonitrilo, dando el

25 compuesto del título en forma de un sólido de color marrón (78 g, 52 %). RMN de 1H (300 MHz, DMSO, ppm) δ: 10,8 (d, J = 13,9 Hz, 1H), 8,50 (d, J = 13,9 Hz, 1H), 7,62-7,41 (m, 3H ), 7,26 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 4,3 (c, J = 7,2 Hz, 2H), 4,21 (c, J = 7,2 Hz, 2H), 2,51 (s, 3H), 2,34 (s, 3H), 1,35 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,33 (s, J = 7,2 Hz, 3H).

El siguiente producto intermedio se preparó de una manera análoga al Producto intermedio 5:

Producto intermedio

R4 A partir de EMCL

6

OCH3 Producto intermedio 4 [EM-IQPA]m/z: 420 MH+

Producto intermedio 7: 7-(3,5-Dimetil-4-isoxazolil)-4-hidroxi-3-quinolincarboxilato de etilo

5 Se suspendió ({[3-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)fenil]amino}metiliden)propanodioato de dietilo (para su preparación, véase el Producto intermedio 5,75 g, 210 mmol) en difeniléter hirviendo (1 l) y se calentó a reflujo durante 30 minutos. Se enfrió la mezcla de reacción y se hizo precipitar con iPr2O, dando el compuesto del título en forma de un polvo de color marrón (50 g, 76 %). RMN de 1H (300 MHz, DMSO-d6, ppm) δ: 12,45 (s ancho, 1H), 8,76 (s, 1H), 8,34 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,76 ( s, 1H), 7,59 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 4,36 (c, J = 7,1 Hz, 2H), 2,62 (s, 3H), 2,43 (s, 3H), 1,43 (s , J = 7,1

10 Hz, 3H).

El siguiente producto intermedio se preparó de una manera análoga al Producto intermedio 7:

Producto intermedio

R4 A partir de EMAR/CL (EN+)

8

OCH3 Producto intermedio 6 Masa objetivo para C18H18N2O5: 343,1294 MH+ . Hallada: 343,1283; Tr: 2,02 min

Producto intermedio 9: 7-(3,5-Dimetil-4-isoxazolil)-4-hidroxi-3-quinolincarboxilato

Se calentó una suspensión de acetato de 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-4-hidroxi-3-quinolincarboxilato de etilo (para su preparación, véase el Producto intermedio 7, 5,5 g, 17,6 mmol) en una solución acuosa de hidróxido de sodio 1 N (80 ml) a reflujo durante 5 h. Se trató la mezcla de reacción con HCl 1 N, y se filtró el precipitado blanco resultante y se recogió con MeOH, se concentró a sequedad, dando el compuesto del título en forma de un polvo de color amarillo (4,27 g, 85,3 %). RMN de 1H (300 MHz, DMSO, ppm) δ: 8,81 (s ancho, 1H), 8,22 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,72 (s ancho, 1H), 7,52 (dd, J = 8,5; 1,7 Hz, 1H), 2,36 (s, 3H), 2,16 (s, 3H).

El siguiente producto intermedio se preparó de una manera análoga al Producto intermedio 9:

Producto intermedio

R4 A partir de EMAR/CL (EN+)

10

OCH3 Producto intermedio 8 Masa objetivo para C16H14N2O5: 315,0981 MH+ . Hallada: 315,1002; Tr: 2,01 min

10 Producto intermedio 11: 7-(3,5-Dimetil-4-isoxazolil)-4-quinolinol

Se suspendió 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-4-hidroxi-3-quinolincarboxilato (para su preparación, véase el Producto intermedio 9, 10 g, 35,21 mmol) por pequeñas porciones en difeniléter hirviendo (200 ml) y se dejó a reflujo durante 2 h. Se vertió la mezcla de reacción en hexano (500 ml) a 0 ºC, se filtró el precipitado y se lavó varias veces con

15 hexano, dando el compuesto del título en forma de un sólido blanco (6,8 g, 86 %). [EM-IQPA]m/z: 240 MH+, Tr: 0,89 min. RMN de 1H (300 MHz, CDCl3, ppm) δ: 12,44 (s ancho, 1H), 8,67 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,10 (d, J = 7,2 Hz, 1H) , 7,80 (s, 1H), 7,62-7,55 (m, 1H), 7,25 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,61 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 2,64 (s, 3H ), 2,49 (s, 3H).

Producto intermedio 12: 5-({[3-Yodo-4-(metoxi)fenil]amino}metiliden)-2,2-dimetil-1,3-dioxano-4,6-diona

20 Se calentó una mezcla de 2,2-dimetil-1,3-dioxano-4,6-diona (203 g, 1,4 mol) y trimetoximetano (1,51) a reflujo durante 1 h, a continuación, se añadió 3-yodo-4-metoxi-anilina (349,2 g, 1,402 mol) en porciones. Se agitó la mezcla de reacción reflujo durante 1 h, y después se enfrió hasta la temperatura ambiente. Se separó el precipitado resultante por filtración, se lavó con diisopropiléter y se secó, dando el compuesto del título en forma de un polvo de color beis (485 g, 85,9 %). RMN de 1H (300 MHz, DMSO-d6, ppm) δ 11,2 (d, J = 14,6 Hz, 1H), 8,50-8,39 (m, 1H),

25 8,05 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 7,60 (dd, J = 8,9; 2,7 Hz, 1H), 7,05 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 3,84 (s, 3H), 1,67 (s, 6H).

Se añadió 5-({[3-yodo-4-(metoxi)fenil]amino}metiliden)-2,2-dimetil-1,3-dioxano-4,6-diona (para su preparación, véase el Producto intermedio 12, 200 g, 0,496 mol ) a difeniléter (2 I) a 260 ºC. Se agitó la mezcla de reacción a 260 ºC 5 durante 10 minutos. Después, se enfrió la solución de color negro hasta 100 ºC y se vertió en diisopropiléter (8 I) enfriado previamente hasta 0 ºC. Se separó el precipitado por filtración, se vertió en ciclohexano (1 l) y después se calentó a reflujo durante 1 h. Se separó el sólido por filtración, se vertió en metanol (250 ml) y se calentó hasta 45 ºC durante 15 minutos. Se filtró el sólido y se secó sobre una bomba de paletas, dando el compuesto del título (105 g, 70 %). RMN de 1H (300 MHz, DMSO-d6, ppm) δ RMN de 1H (300 MHz, D6DMSO, ppm) δ: 8,07 (s, 1H), 7,88 (d, J =

10 7,3 Hz, 1H), 7,45 (s, 1H), 6,06 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 3,90 (s, 3H).

Producto intermedio 14: 7-(3,5-Dimetil-4-isoxazolil)-4-quinolinol

Se añadieron ácido 3,5-dimetilisoxazol-4-borónico (49,2 g, 0,349 mol) y Ba(OH)2•8H2O (91,8 g, 0,291 mol, Acros) a una solución del producto intermedio 13 (35 g, 0,116 mol) en una mezcla de agua (180 ml)) y 1,2-dimetoxietano 15 (600 ml). Se puso la reacción en atmósfera de nitrógeno durante 15 minutos y se añadió tetraquis(trifenilfosfin)paladio (0) (4,1 g, 3,55 mmol, Aldrich). Se agitó la mezcla de reacción a 105 ºC durante una noche. Después de enfriar hasta la temperatura ambiente, se vertió la mezcla en agua y se extrajo con acetato de etilo. Se acidificó la capa acuosa a pH 7 con HCl concentrado y se extrajo con acetato de etilo. Se basificó la capa acuosa a pH 10 con hidróxido de sodio 5 N y se extrajo con acetato de etilo. Se combinaron las capas orgánicas, se

20 lavaron con una solución acuosa saturada de NaCl y se secaron. El aceite marrón bruto se purificó mediante cromatografía ultrarrápida sobre sílice eluyendo el gel con DCM/MeOH (9:1), dando el compuesto del título en forma de un sólido de color marrón (31,4 g, 43,9 %). RMN de 1H (300 MHz, DMSO-d6, ppm) δ: 11,72 (s ancho, 1H), 7,88 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 7,61 (s, 1H), 7,42 (s, 1H), 6,03 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 3,86 (s, 3H), 2,31 (s, 1H), 2,1 1 (s, 1H).

Producto intermedio 15: 7-(3,5-Dimetil-4-isoxazolil)-3-nitro-4-quinolinol

A una solución de 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-4-quinolinol (para su preparación, véase el Producto intermedio 11, 8,5 g, 35 mmol) en ácido propanoico (442 ml), se añadió ácido nítrico (7 ml) a temperatura ambiente, seguido del calentamiento de la mezcla de reacción hasta 125 ºC durante 2 h. Tras enfriar, se filtró la mezcla, y se lavó con éter isopropílico, dando el compuesto del título en forma de un sólido de color amarillo (7,5 g, 75 %). [EM-IQPA]m/z: 283

30 [MH] -, Tr: 2,41 min. RMN de 1H (300 MHz, DMSO-d6, ppm) δ: 13,01 (s ancho, 1H), 9,28 (s, 1H), 8,33 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,73 (s, 1H), 7,57 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 2,50 (s, 3H), 2,31 (s, 3H).

Se sometió a reflujo una suspensión de 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-3-nitro-4-quinolinol (para su preparación, véase el Producto intermedio 15, 5 g, 17 mmol) en POCl3 (50 ml) durante una noche. Después de enfriar, se evaporó el

5 disolvente al vacío. Se vertió el residuo resultante sobre solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio, se extrajo con DCM, se lavó con agua, se secó sobre Na2SO4. Se evaporó el disolvente a presión reducida, dando el compuesto del título en forma de un sólido de color marrón claro (4 g, 75 %). RMN de 1H (300 MHz, CDCl3, ppm) δ: 9,23 (s, 1H), 8,45 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 8,04 (d, J = 1,5 Hz, 1H) , 7,67 (dd, J = 8,9; 1,5 Hz, 1H), 2,47 (s, 3H), 2,32 (s, 3H).

10 Producto intermedio 17: 7-(3,5-Dimetil-4-isoxazolil)-6-(metoxi)-3-nitro-4-quinolinol

Se añadió ácido nítrico (10 ml) lentamente a una solución de 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-4-quinolinol (para su preparación, véase el Producto intermedio 14 (28 g, 104 mmol) en ácido propanoico (450 ml) a temperatura ambiente, seguido del calentamiento de la mezcla de reacción hasta 100 ºC durante 1 h. Después de enfriar con un

15 baño de hielo, se separó el precipitado por filtración, y se lavó con pentano, dando el compuesto del título en forma de un polvo de color amarillo (27 g, 82 %). [EM-IQPA]m/z: 314 [M-H] -, Tr: 2,12 min. RMN de 1H (300 MHz, DMSO-d6, ppm) δ: 13,06 (s, 1H), 9,26 (s, 1H), 7,84 (s, 1H), 7,67 (s, 1H) , 3,98 (s, 3H), 2,39 (s, 3H), 2,19 (s, 3H).

Producto intermedio 18: 4-Cloro-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-6-(metoxi)-3-nitroquinolina

20 Se sometió a reflujo una suspensión de 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-6-(metoxi)-3-nitro-4-quinolinol (para su preparación, véase el Producto intermedio 17, 5 g, 16 mmol) en POCl3 (20 ml) durante una noche. Después de enfriar, se evaporó la mezcla a sequedad. Se vertió el residuo resultante sobre solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y se extrajo con DCM. La capa orgánica se lavó con agua y se secó sobre Na2SO4. Se evaporó el disolvente a presión reducida, dando el compuesto del título en forma de un polvo de color marrón claro (5 g,

25 94 %). RMN de 1H (300 MHz, DMSO-d6, ppm) δ: 9,27 (s, 1H), 8,15 (s, 1H), 7,73 (s, 1H), 4,05 (s, 3H), 2,36 (s, 3H), 2,16 (s, 3H).

Se calentó a reflujo una mezcla de 4-cloro-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-3-nitroquinolina (para su preparación, véase el

5 Producto intermedio 16) (2,2 g, 7,2 mmol) y 2-terc-butilanilina (1,2 g, 8 mmol) en CH3CN (20 ml) durante 1 h. Se evaporó el disolvente al vacío y el residuo se trató con una solución acuosa de hidróxido de sodio N, se extrajo con DCM, se lavó con agua y se secó sobre Na2SO4. El residuo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con DCM/MeOH (99:1), dando el compuesto del título en forma de un sólido de color amarillo (2,4 g, 80 %). [EM-IQPA]m/z: 417 MH+, Tr: 3,73 min. RMN de 1H (300 MHz, DMSO-d6, ppm) δ: 9,87 (s ancho, 1H), 8,92 (s,

10 1H), 8,34 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 7,82 (s, 1H ), 7,50 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 7,25-6,91 (m, 4H), 2,32 (s, 3H), 2,15 (s, 3H).

Los siguientes productos intermedios se prepararon de una manera análoga al Producto intermedio 19:

Producto intermedio

R1 EMCL o RMN

20

EM-IQPA: m/z 409 MH+, Tr = 3,34 min

21

EM-IQPA: m/z 375 MH+, Tr = 3,26 min

22

EM-IQPA: m/z 381 MH+, Tr = 3,65 min

23

EM-IQPA: m/z 355 MH+, Tr = 3,40 min

(Continuación)

Producto intermedio

R1 EMCL o RMN

24

RMN (300 MHz, DMSO-d6, ppm) δ: 9,32 (s ancho, 1H), 8,48 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 8,15 (s ancho, 1H), 7,80 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,60 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,55-7,37 (m, 2H), 2,66 (s, 3H), 2,49 (s, 3H).

25

EM-IQPA: m/z 389 MH+, Tr = 3,35 min

26

EM-IQPA: m/z 393 MH+, Tr = 3,26 min

27

EM-IQPA: m/z 376 MH+, Tr = 2,94 min

Producto intermedio 28: 7-(3,5-Dimetil-4-isoxazolil)-N4-(fenilmetil)-3,4-quinolindiamina

5 A una solución de N-[2-(terc-butil)fenil]-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-3-nitro-4-quinolinamina (véase el Producto intermedio 19, 2,4 g, 5,77 mmol) en una mezcla de etanol (60 ml) y THF (20 ml), se añadió SnCl2•2H2O (7,81 g, 34,6 mmol). Se sometió la mezcla de reacción a reflujo durante 3 h y después se concentró a sequedad. Se vertió el residuo resultante en hidróxido de sodio acuoso. Se extrajo la fase orgánica con EtOAc, se lavó con agua, se secó y se concentró, dando el compuesto del título en forma de un sólido de color amarillo (2 g, 71 %). [EM-IQPA]m/z: 387

10 MH+, Tr: 3,37 min.

Los siguientes productos intermedios se prepararon de una manera análoga al Producto intermedio 28 a partir de los derivados nitro correspondientes:

Producto intermedio

R1 EMCL o RMN de 1H

29

EM-IQPA: m/z 379 MH+, Tr = 2,97 min

30

EM-IQPA: m/z 345 MH+, Tr = 2,79 min

31

EM-IQPA: m/z 351 MH+, Tr = 3,16 min

32

EM-IQPA: m/z 325 MH+, Tr = 2,98 min

33

EM-IQPA: m/z 415 MH+, Tr = 3,20 min

34

DMSO-d6 δ: 8,4 (s, 1H), 7,8 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 7,52 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 7,32-7,25 (m, 2H), 7,18 (d, J = 8,9; 1,9 Hz, 1H), 7,14-6,96 (m, 3H), 4,63-4,50 (m, 1H), 2,28 (s, 3H), 2,11 (s, 3H), 1,36 (d, J = 6,6 Hz, 3H).

35

EM-IQPA: m/z 363 MH+, Tr = 2,86 min

36

EM-IQPA: m/z 346 MH+, Tr = 2,44 min

Producto intermedio 37: 7-(3,5-Dimetil-4-isoxazolil)-6-(metoxi)-N4-[(1R)-1-(2-piridinil)etil]-3,4-quinolindiamina

5 Se calentó una mezcla de 4-cloro-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-6-(metoxi)-3-nitroquinolina (para su preparación, véase el Producto intermedio 18, 0,4 g, 1,2 mmol) y (1R)-1-(2-piridinil)etanamina (2 eq, 0,293 g) en CH3CN (20 ml) hasta 60 ºC durante 2 h. Se extrajo la mezcla con DCM. Se lavó la fase orgánica con solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y se secó sobre Na2SO4. Se evaporó el disolvente a presión reducida y se recogió el residuo en dietiléter. Se separó el precipitado por filtración y se secó al vacío, dando 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-6-(metoxi)-3

10 nitro-N-[(1R))-1-(2-piridinil)etil]-4-quinolinamina (0,4 g) que se usó sin purificación en la siguiente etapa. A una solución de este producto intermedio (0,4 g, 0,95 mmol) en una mezcla de etanol (20 ml) y HCl (3,8 ml), se añadió

SnCI2•2H2O (0,89 g, 3,96 mmol). Se calentó la mezcla de reacción hasta 40 ºC durante 1 h, después se hidrolizó con hidróxido de sodio N y se extrajo con DCM. Se lavó la fase orgánica con agua, se secó y se concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice (DCM/MeOH, 95:5), y el compuesto resultante se trituró en éter diisopropíllico, dando el compuesto del título en forma de un polvo de color marrón (0,25 g, 53,5 %). [EM-IQPA]m/z: 390 MH+, Tr: 2,62 min. RMN de 1H (300 MHz, DMSO-d6, ppm) δ: 8,54 (d, J = 4,7 Hz, 1H), 8,30 (s, 1H), 7,73 (dd, J = 7,8; 7,6 Hz , 1 H), 7,52 (s, 1H), 7,52-7,48 (m, 1H), 7,33 (s, 1H), 7,27-7,21 (m, 1H), 5,29-5,10 (m, 3H), 3,81 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,08 (s, 3H), 1,56 (d, J = 6 Hz, 3H).

Producto intermedio 38: 7-(3,5-Dimetil-4-isoxazolil)-6-(metoxi)-N4-(2-piridinilmetil]-3,4-quinolindiamina

Se calentó una mezcla de 4-cloro-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-6-(metoxi)-3-nitroquinolina (para su preparación, véase el Producto intermedio 18, 2,5 g, 7,5 mmol) y 2-aminometilpiridina (2 eq , 1,41 g) en CH3CN (30 ml) a 60 ºC durante 2 h. La mezcla se extrajo con DCM. Se lavó la fase orgánica con solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y se secó sobre Na2SO4. Se evaporó el disolvente a presión reducida y se recogió el residuo en dietiléter. Se separó el precipitado por filtración y se secó al vacío, dando 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-6-(metoxi)-3-nitro-N-(2-piridinilmetil)4-quinolinamina (2,5 g), que se usó sin purificación en la siguiente etapa. A una solución de este producto intermedio de nitro (2,5 g, 24,82 mmol) en una mezcla de etanol (20 ml) y HCl (3,8 ml), se añadió SnCI2•2H2O en porciones (5,6 g, 24,82 mmol). Se calentó la mezcla de reacción hasta 40 ºC durante 1 h, después se hidrolizó con hidróxido de sodio N y se extrajo con DCM. Se lavó la fase orgánica con agua, se secó y se concentró, dando el compuesto del título en forma de un polvo de color marrón (0,5 g, 17,8 %). (EM-IQPA) m/z: 376 MH+, Tr: 2,46 min. RMN de 1H (300 MHz, DMSO-d6, ppm) δ: 8,56 (d, 1H), 8,29 (s, 1 H), 7,77 (dd, J = 7,8; 7,6 Hz, 1H), 7,54 (s, 1H), 7,53-7,51 (m, 1H), 7,31-7,25 (m, 1H), 5,31 (s, 2H), 4,46 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 3,78 (s , 3H), 2,28 (s, 3H), 2,09 (s, 3H).

Producto intermedio 39: 7-(3,5-Dimetil-4-isoxazolil)-6-(metoxi)-N4-[(1R)-1-feniletil]-3,4-quinolindiamina

Se calentó una mezcla de 4-cloro-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-6-(metoxi)-3-nitroquinolina (para su preparación, véase el Producto intermedio 18, 2,5 g, 7,5 mmol) y (R)-(+)-alfa-metilbencilamina (2 eq, 1,82 g, Aldrich) en CH3CN (30 ml) hasta 60 ºC durante 2 h. La mezcla se extrajo con DCM. Se lavó la fase orgánica con solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y se secó sobre Na2SO4. Se evaporó el disolvente a presión reducida y el residuo se recogió en dietiléter. Se separó el precipitado por filtración y se secó al vacío, dando 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-6-(metoxi)-3nitro-N-[-1-feniletilo(1R)]-4-quinolinamina (2,5 g), que se usó sin purificación en la siguiente etapa.

A una solución de este producto intermedio de nitro (2,5 g, 24,82 mmol) en una mezcla de etanol (20 ml) y HCl (3,8 ml), se añadió SnCI2•2H2O en porciones (5,6 g, 24,82 mmol). Se calentó la mezcla de reacción hasta 40 ºC durante 1 h, después se hidrolizó con hidróxido de sodio N y se extrajo con DCM. Se lavó la fase orgánica con agua, se secó y se concentró, dando el compuesto del título en forma de un polvo de color marrón (0,5 g, 17 %). (EM-IQPA) m/z: 389 MH+, Tr: 2,95 min.

Se calentó a reflujo una mezcla de Producto intermedio 10 (27,7 g, 0,079 mol) y 10 gotas de DMF anhidro en POCl3 (250 ml) durante 5 h. A continuación, se concentró la mezcla a sequedad al vacío. Se trató el residuo dos veces con 5 100 ml de tolueno y se evaporó a sequedad para eliminar las últimas trazas de POCl3. Se añadió la espuma seca obtenida en porciones a una solución acuosa de amoniaco (25 %, 300 ml) enfriada hasta 0/5 ºC con un baño de hielo. Una vez finalizada la adición, se mantuvo la agitación vigorosa durante 1 h a esta temperatura. Luego, se separó el material sólido de color marrón por filtración y se lavó respectivamente con agua (3 x 200 ml), diisopropiléter (2 x 200 ml) y pentano (100 ml), dando, tras secar, el producto en bruto. Este material se purificó

10 mediante una cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice (eluyente = CH2Cl2/MeOH, 95/5), dando el compuesto del título (16,8 g, 64,7 %). RMN de 1H (300 MHz, CDCl3, ppm) δ: 8,96 (s, 1H), 7,86 (s, 1H), 7,54 (s, 1H), 3,95 (s, 3H), 2,30 ( s, 3H), 2,15 (s, 3H).

Producto intermedio 41: 7-(3,5-Dimetil-4-isoxazolil)-4-cloro-3-quinolincarboxilato de etilo

15 Se hizo reaccionar 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-4-hidroxi-3-quinolincarboxilato de etilo (para su preparación, véase el Producto intermedio 7, 20 g, 64,04 mmol) con cloruro de tionilo (326 ml) y se calentó a reflujo durante una noche. Se coevaporó el cloruro de tionilo en exceso con tolueno. El producto en bruto se trituró con iPr2O y se filtró, dando el compuesto del título en forma de un polvo de color marrón (20,15 g, 95 %). RMN de 1H (300 MHz, DMSO, ppm) δ: 9 (s, 1H), 8,2 (d, 1H), 8,0 (s, 1H), 7,8 (d, 1H), 4,25 (c, 2H), 2,2 (s, 3H), 2,1 (s, 3H), 1,2 (t, 3H).

20 Producto intermedio 42: 4-Cloro-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-6-(metoxi)-3-quinolincarboxilato de etilo

Se hizo reaccionar el Producto intermedio 8 (5 g, 14,62 mmol) con oxicloruro de fósforo (50 ml) y se calentó a reflujo durante una noche. Se evaporó el exceso de oxicloruro de fósforo con tolueno. El producto en bruto se lavó con solución de hidróxido de sodio 1 N y se extrajo con DCM. Se secó la fase orgánica sobre Na2SO4 y se evaporó a

25 presión reducida, dando el compuesto del título en forma de un sólido de color marrón (5,1 g, 96,9 %). EM-IQPA: m/z 361 MH+, Tr: = 3,31 min.

Se calentó a reflujo una mezcla de 4-cloro-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-6-(metoxi)-3-quinolincarboxilato de etilo (para

5 su preparación, véase el Producto intermedio 42 (3,3 g, 9,2 mmol) y 2-terc-butilanilina (2,7 ml, 18,4 mmol) en dioxano (50 ml) durante 2 días. Tras enfriar, se evaporó la mezcla de reacción a presión reducida y el precipitado se purificó por cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con DCM/MeOH (95/5), dando el compuesto del título en forma de un sólido (1,2 g, 27,7 %). Masa objetivo de la EMAR: 474,2393 MH+. Hallada: 474,2379; Tr: 3,82 min.

Los siguientes productos intermedios se prepararon de una manera análoga al Producto intermedio 43 a partir del 10 Producto intermedio 42:

Producto intermedio

R1 EMCL o RMN de 1H

44

EM-IQPA: m/z 502 MH+, Tr = 3,78 min

45

EM-IQPA: m/z 436 MH+, Tr = 3,53 min

46

EM-IQPA: m/z 431 MH+, Tr = 3,52 min

47

EM-IQPA: m/z 468 MH+, Tr = 3,61 min

48

EM-IQPA: m/z 484 MH+, Tr = 3,77 min

Se calentó a reflujo una mezcla de 4-{[2-(1,1-dimetiletil)fenil]amino}-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolilo)-6-(metoxi)-3

5 quinolincarboxilato de etilo (para su preparación, véase el Producto intermedio 43, 1,2 g, 2,54 mmol) e hidróxido de sodio 1 N (3 ml) en etanol durante 1 día. Se concentró la mezcla de reacción, se recogió en agua y se neutralizó con HCl 1 N. Se filtró el precipitado y se secó, dando el compuesto del título en forma de un polvo de color amarillo (0,96 g, 85 %). Masa objetivo de la EMAR-CL calculada para C26H27N3O4: 446,2080 MH+. Hallada: 446,2038; Tr: 2,39 min.

10 Los siguientes productos intermedios se prepararon de una manera análoga al Producto intermedio 49 a partir de los correspondientes derivados de éster:

Producto intermedio

R1 EMCL, EMAR-CL o RMN de 1H

50

Masa objetivo para C23H18F3N3O5: 474,1277 MH+ . Hallada: 474,1241; Tr: 2,20 min

51

EM-IQPA: m/z 408 MH+, Tr = 2,42 min

52

Masa objetivo para C23H22N3O4: 404,1610 MH+ . Hallada: 404,1578; Tr: 2,16 min

53

EM-IQPA: m/z 440 MH+, Tr = 2,60 min

54

EM-IQPA: m/z 456 MH+, Tr = 2,70 min

Producto intermedio 55: 7-(3,5-Dimetil-4-isoxazolil)-6-(metiloxi)-4-{[(1R))-1-(2-piridinil)etil]amino}-3quinolincarboxamida

Se disolvieron 4-cloro-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-6-(metiloxi)-3-quinolincarboxamida (para su preparación, véase el Producto intermedio 56, 50 g, 151 mmol) y [(1R))-1-(2-piridinil)etil]amina (35,3 g, 181 mmol, NetChem) en N-metil-2pirrolidona (NMP, 250 ml). Se añadió DIPEA (79 ml, 452 mmol), se calentó la solución hasta 120 ºC durante una noche, se enfrió y se diluyó con acetato de etilo (1 l). Se lavó la solución con agua (2 x 1 l), salmuera (500 ml), se secó (sulfato de sodio) y se evaporó el disolvente, dando una goma de color marrón oscuro. Se extrajeron los lavados acuosos con DCM (2 x 600 ml). Se lavaron los extractos combinados con una mezcla de salmuera saturada (300 ml) y agua (1 l), dando una emulsión densa que tardó aproximadamente 2 h a separarse. Se secó la capa orgánica (sulfato de sodio) y se evaporó, dejando un líquido de color marrón. Se disolvió este líquido en acetato de etilo (200 ml), se lavó con agua (2 x 200 ml), se secó (sulfato de sodio) y se evaporó, dando una goma de color marrón. Se combinó este material con la anterior goma de color marrón, se disolvió en DCM (150 ml) y se cargó en una columna de sílice (750 g), que se eluyó con un amoniaco 2 M en gradiente de metanol/DCM (0-12 %), dando, después de la evaporación de los disolventes al vacío, 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-6-(metiloxi)-4-{[(1R))-1-(2piridinil)etil]amino}-3-quinolincarboxamida en forma de una espuma de color beis (45,1 g). Esta se usó en la siguiente etapa (Ejemplo 36) sin purificación adicional. RMN de 1H CDCl3: δH 9,44 (1H, d), 8,71 (1H, s), 8,62 (1H, d), 7,74 (1H, m), 7,68 (1H, s ), 7,65 (1H, d), 7,34 (1H, s), 7,23 (1H, m), 6,06 (2H, b), 5,36 (1H, m), 3,51 (3H, s), 2,32 (3H, s), 2,17 (3H, s), 1,73 (3H, d, parcialmente oscurecido por el agua). Se recogieron y evaporaron las fracciones mixtas de la columna, dando una goma de color marrón. Esta se disolvió en DCM (20 ml) cargado en una columna de sílice (330 g) y se eluyó con un amoniaco 2 M en gradiente de metanol/DCM (0-10 %), dando, después de la evaporación de los disolvente, 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-6-(metiloxi)-4-{[(1R))-1-(2-piridinil)etil]amino}-3-quinolincarboxamida en forma de una goma de color beis (3,4 g). RMN de 1H CDCl3: δH 9,44 (1H, d), 8,71 (1H, s), 8,62 (1H, d), 7,74 (1H, m), 7,68 (1H, s), 7,65 (1H, d), 7,34 (1H, s), 7,23 (1H, m), 6,07 (2H, b), 5,36 (1H, m), 3,51 (3H, s), 2,32 (3H, s), 2,17 (3H, s), 1,73 (3H, d, parcialmente oscurecido por el agua). EMCL (Procedimiento HpH): MH+ 418, Tr: 0,87 min.

Producto intermedio 56: 4-Cloro-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-6-(metiloxi)-3-quinolincarboxamida

Se calentó ácido 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-6-(metiloxi)-4-oxo-1,4-dihidro-3-quinolincarboxílico (para su preparación, véase el Producto intermedio 57, 54 g, 172 mmol) en oxicloruro de fósforo (80 ml, 859 mmol) durante 4 h, después se dejó enfriar hasta la temperatura ambiente y reposar durante una noche. Se redujo la mezcla a sequedad al vacío y se destiló el residuo de color marrón azeotrópicamente con tolueno (2 x 300 ml). La goma de color marrón oscuro resultante se disolvió en THF (300 ml) con calentamiento y ultrasonidos, y se añadió la solución resultante gota a gota a hidróxido de amonio (33 % p/p, 500 ml) con enfriamiento en baño de hielo. Se agitó la mezcla durante 30 min, después se concentró hasta la mitad del volumen, se diluyó con agua (100 ml) y se recogió el sólido marrón oscuro resultante por filtración. Se lavó el sólido con agua (100 ml) y se secó al vacío a 50 ºC durante 3 días, dando 4-cloro7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-6-(metiloxi)-3-quinolincarboxamida en forma de un sólido marrón (50,8 g). RMN de 1H D6-DMSO: δH 8,75 (1H, s), 8,19 (1H, s ancho), 8,01 (1H, s), 7,98 (1H, s ancho), 7,62 (1H , s), 4,00 (3H, s), 2,34 (3H, s), 2,14 (3H, s). EMCL (procedimiento de formiato): MH+ 332/334, Tr: 0,76 min.

Producto intermedio 57: Ácido 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-6-(metiloxi)-4-oxo-1,4-dihidro-3-quinolincarboxílico

Se suspendió 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-4-hidroxi-6-(metiloxi)-3-quinolincarboxilato de etilo (para su preparación, véase el Producto intermedio 58, 70,2 g, 205 mmol) en una mezcla de etanol (200 ml) e hidróxido de sodio (2 M, 308 ml, 615 mmol), y se calentó la mezcla a reflujo durante una noche. Se concentró la reacción hasta 200 ml aproximadamente al vacío, se diluyó con agua (500 ml) y la solución resultante se lavó con acetato de etilo (200 ml). Se acidificó la fase acuosa a pH 4 con ácido clorhídrico (1 M), se agitó vigorosamente la suspensión resultante durante 10 min. Se recogió el sólido por filtración, se lavó con agua (200 ml) y se secó durante una noche a 40 ºC al vacío, dando ácido 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-4-hidroxi-6-(metiloxi)-3-quinolincarboxílico en forma de un sólido de color beis (54,7 g). Este se usó sin purificación adicional. RMN de 1H D6-DMSO: δH 15,51 (1H, s), 13,36 (1H, b), 8,88 (1H, s), 7,77 (1H, s), 7,71 (1H, s), 3,94 (3H, s), 2,33 (3H, s), 2,13 (3H, s). EMCL (procedimiento de formiato): MH+ 315, Tr: 0,80 min.

Producto intermedio 58: 7-(3,5-Dimetil-4-isoxazolil)-4-hidroxi-6-(metiloxi)-3-quinolincarboxilato de etilo

Se añadió ({[3-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-4-(metiloxi)fenil]amino}metiliden)propanodioato de dietilo (para su preparación, véase el Producto intermedio 59, 50 g, 129 mmol) en pequeñas porciones durante 15 min a difeniléter en ebullición (300 ml) (temperatura de aprox. 255 ºC). Se calentó la mezcla durante un 30 min más y se dejó enfriar la mezcla hasta 50 ºC. Se diluyó la reacción con ciclohexano (300 ml) y se enfrió aún más, dando un residuo alquitranado espeso. Se decantó el disolvente sobrenadante y se calentó el residuo a reflujo en acetato de etilo (300 ml) durante 20 min, después se diluyó con ciclohexano (200 ml) y se enfrió a temperatura ambiente. Se recogió el residuo sólido por filtración, se lavó con dietiléter (200 ml) y se secó al vacío a 40 ºC, dando 7-(3,5-dimetil-4isoxazolil)-4-hidroxi-6-(metiloxi)-3-quinolincarboxilato de etilo en forma de un polvo de color marrón (28,1 g). Este se usó sin purificación adicional en la reacción subsiguiente (Producto intermedio 57). RMN de 1H D6-DMSO: δ 12,28 (1H, s), 8,55 (1H, s), 7,69 (1H, s), 7,51 (1H, s), 4,22 (2H, c), 3,88 (3H, s), 2,31 (3H, s), 2,11 (3H, s), 1,29 (3H, t).

Producto intermedio 59: ({[3-(3,5-Dimetil-4-isoxazolil)-4-(metiloxi)fenil]amino}metiliden)propanodioato de dietilo

Se disolvió [3-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-4-(metiloxi)fenil]amina (para su preparación, véase el Producto intermedio 60, 27,4 g, 126 mmol) en [(etiloxi)metiliden]propanodioato de dietilo (27,1 g, 126 mmol) y se calentó hasta 130 ºC. Se calentó la solución durante 1 h, después se enfrió hasta la temperatura ambiente y se redujo a sequedad al vacío, dando ({[3-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-4-(metiloxi)fenil]amino}metiliden)propanodioato de dietilo (50,1 g), que después de reposar durante una noche, se convirtió en un sólido cristalino de color marrón. RMN de 1H CDCl3: δH 11,02 (1H, d), 8,44 (1H, d), 7,16 (1H, dd), 6,98 (1H, d), 6,91 (1H, d), 4,34-4,22 (4H, m), 3,81 (3H, s), 2,32 (3H, s), 2,17 (3H, s), 1,40-1,31 (6H, m) . EMCL (procedimiento de formiato): MH+ 389, Tr: 1,17 min.

Se disolvió 3,5-dimetil-4-[2-(metiloxi)-5-nitrofenil]isoxazol (para su preparación, véase el Producto intermedio 61, 68

g, 274 mmol) en acetato de etilo (1 l) y se lavó la solución con solución de sulfito de sodio (5 %, 500 ml). Se secó la

5 capa orgánica (sulfato de sodio) y se filtró a través de un lecho corto de 3 cm de gel de sílice. Se diluyó el filtrado

con etanol (1 l) y se añadió a Pd/C (tipo E101 NO/W, 10 g) en un matraz de hidrogenación purgado al

vacío/nitrógeno de 5 I al vacío. Se agitó la mezcla durante 24 h. Se purgó la mezcla con ciclos de vacío/nitrógeno (x

3), se filtró a través de Celite en atmósfera de nitrógeno y se evaporó el filtrado al vacío, dando 3-(3,5-dimetil-4

isoxazolil)-4-(metiloxi)anilina de [3-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-4-(metiloxi)fenil]amina (62,3 g). RMN de 1H CDCl3: δH 10 6,82 (1H, d), 6,71 (1H, dd), 6,50 (1H, d), 3,71 (3H, s), 3,46 (2H, b), 2,31 (3H, s), 2,18 (3H, s). EMCL (procedimiento

de formiato): MH+ 219, Tr: 0,48 min.

Producto intermedio 61: 3,5-Dimetil-4-[2-metiloxi)-5-nitrofenil]isoxazol

Se combinaron 3-yodo-4-(metoxi)nitrobenceno (65 g, 233 mmol, Matrix Scientific), ácido (3,5-dimetil-4

15 isoxazolil)borónico (36,1 g, 256 mmol) y carbonato de cesio (152 g, 466 mmol) con DME (80 ml) y agua (40 ml), y la mezcla se desgasificó con nitrógeno durante 10 min, a continuación, se añadió catalizador PEPPSI® (3,96 g, 5,82 mmol) y se calentó la mezcla hasta 90 ºC durante 4 h, después se enfrió y se diluyó con acetato de etilo (800 ml). Se filtró la suspensión resultante a través de Celite y se lavó el filtrado con agua (2 x 500 ml). Se secó el disolvente (sulfato de sodio), se filtró y se evaporó, dando un sólido de color marrón que se trituró con éter (30 ml).

20 El producto sólido se lavó con éter (100 ml), dando 3,5-dimetil-4-[2-(metiloxi)-5-nitrofenil]isoxazol en forma de un sólido de color beis (48,2 g). RMN de 1H CDCl3: δH 8,30 (1H, dd), 8,06 (1H, d), 7,07 (1H, d), 3,94 (3H, s), 2,33 (3H, s), 2,17 (3H, s). EMCL (procedimiento de formiato): MH+ 249, Tr: 1,01 min.

Producto intermedio 62: 7-(3,5-Dimetil-4-isoxazolil)-6-(metiloxi)-4-{[1-(1-metil-1H-pirazol-4-il)etil]amino}-3quinolincarboxamida

Se calentaron 4-cloro-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-6-(metiloxi)-3-quinolincarboxamida (para su preparación, véase el Producto intermedio 56, 200 mg, 0,603 mmol) y [1-(1-metil-1H-pirazol-4-il)etil]amina (113 mg) en una mezcla de DIPEA (0,326 ml, 1,869 mmol) y N-metil-2-pirrolidona (NMP) (15 ml) a 120 ºC durante 4 h. Se enfrió la mezcla de reacción a temperatura ambiente, se diluyó con agua (300 ml) y se extrajo con acetato de etilo (2 x 200 ml). Se 30 lavaron los extractos orgánicos combinados con agua (300 ml) y salmuera (200 ml), se secaron (sulfato de sodio) y

se evaporaron. Se disolvió la goma resultante en DCM (3 ml) se cargó en un cartucho de sílice (100 g), que después se eluyó con un gradiente de amoniaco metanólico 2 M/DCM (0-12 %), dando, después de la evaporación de las fracciones que contenían producto al vacío 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-6-(metiloxi)-4-{[1-(1-metil-1H-pirazol-4il)etil]amino}-3-quinolincarboxamida (110 mg). EMCL (procedimiento de formiato): MH+ 421, Tr: 0,62 min.

Producto intermedio 63: 7-(3,5-Dimetilisoxazol-4-il)-6-metoxi-N4-(piridin-2-ilmetil) quinolina-3,4-diamina

Se calentaron una solución de 4-cloro-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-6-(metoxi)-3-nitroquinolina (para su preparación,

véase el Producto intermedio 18, 2,5 g,) y (2-piridinilmetil)amina (1,41 g) en acetonitrilo (30 ml) hasta 80 ºC durante

2 h. Se extrajo la mezcla con DCM y se lavó la fase orgánica con una solución saturada de bicarbonato de sodio, se 10 secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró a sequedad. Se recogió el residuo en dietiléter, se filtró y se secó al

vacío. Se disolvió el residuo en etanol (20 ml) y HCl (3,8 ml, conc.). A continuación, se añadió dihidrato de cloruro de

estaño (II) (5,6 g) en cuatro porciones y se agitó la mezcla de reacción durante 1 h a 40 ºC. Se hidrolizó la mezcla

usando hidróxido de sodio (1 N), se extrajo con DCM y se secó la fase orgánica sobre Na2SO4. Se filtró la mezcla a

través de Celite y se concentró a sequedad. El producto en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice 15 eluyendo con DCM/metanol (56,5/3,5), dando 7-(3,5-dimetilisoxazol-4-il)-6-metoxi-N4-(piridin-2-ilmetil)quinolin-3,4

diamina (500 mg) en forma de una espuma de color marrón claro.

Producto intermedio 64:7-(3,5-Dimetil-4-isoxazol)-6-(metiloxi)-N4-[(1R)-1-(2-piridinil)etil]-3,4-quinolindiamina

Se calentó una solución de 4-cloro-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-6-(metoxi)-3-nitroquinolina (para su preparación, véase

20 el Producto intermedio 18, 400 mg) y (R)-1-(piridin-2-il)etanamina (293 mg) en acetonitrilo (30 ml) hasta 60 ºC durante 2 h. Se extrajo la mezcla de reacción con DCM y se lavó con una solución saturada de bicarbonato de sodio. Se secó la fase orgánica sobre Na2SO4, se filtró y se concentró a sequedad. Se recogió el compuesto resultante en éter, se filtró y se secó al vacío. Se disolvió el residuo en etanol (20 ml) y HCl (3,8 ml). A continuación, se añadió dihidrato de cloruro de estaño (II) (0,89 g) en cuatro porciones y se agitó la mezcla de reacción durante 1 h a 40 ºC.

25 Se hidrolizó la mezcla de reacción con una solución de hidróxido de sodio (1 N). Se extrajo la mezcla con DCM, se secó la fase orgánica sobre Na2SO4, se filtró sobre Celite y se concentró a sequedad. Se purificó el producto en bruto mediante cromatografía en columna ultrarrápida sobre gel de sílice eluyendo con DCM/MeOH (95/5) y se recogió el producto obtenido en diisopropiléter, dando 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-6-(metiloxi)-N4-[(1R))-1-(2piridinil)etil]-3,4-quinolindiamina (250 mg) en forma de un polvo de color marrón. EMCL: Tr = 2,62 min.

Producto intermedio 65: 7-(3,5-Dimetil-4-isoxazolil)-4-{[(2,4-dimetil-1,3-tiazol-5-il)metil]amino}-6-(metiloxi)-3quinolinacarboxamida

A una solución de 4-cloro-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-6-(metiloxi)-3-quinolincarboxamida (para su preparación, véase

5 el Producto intermedio 56, 0,5 g) en acetonitrilo (50 ml), se añadió una solución de [(2,4-dimetil-1,3-tiazol-5il)metil]amina (0,64 g, diclorhidrato disponible de Matrix Scientific) en acetonitrilo (10 ml). Se calentó la mezcla de reacción a reflujo durante 3 h, tras lo que se añadió otra porción de amina (0,5 g). Se sometió la mezcla de reacción a reflujo durante una noche y luego se vertió en agua. Se extrajo la fase de mezcla con DCM y se secó la fase orgánica sobre Na2SO4 y se concentró a sequedad, dando un sólido pegajoso de color amarillo. Este último se

10 recristaliza en acetonitrilo, dando 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-4-{[(2,4-dimetil-1,3-tiazol-5-il)metil]amino}-6-(metiloxi)-3quinolincarboxamida (0,33 g) en forma de cristales blancos. EMCL: MH+ 438,06, [M-H] - 436,13.

Producto intermedio 66: 7-(3,5-Dimetil-4-isoxazolil)-6-(metiloxi)-N4-[1-(2-piridinil)etil]-3,4-quinolindiamina

Se calentó una solución de 4-cloro-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-6-(metoxi)-3-nitroquinolina (para su preparación, véase

15 el Producto intermedio 18, 1 g) y (2-piridinilmetil)amina ( 810 mg) en acetonitrilo (30 ml) hasta 80 ºC durante 2 h. Se extrajo la mezcla con DCM, se lavó con una solución saturada de bicarbonato de sodio, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró a sequedad. Se recogió el compuesto en bruto en dietiléter, se filtró y se secó el filtrado al vacío. Se disolvió el sólido en etanol (20 ml) y ácido clorhídrico (3,8 ml, conc). Se añadió dihidrato de cloruro de estaño (II) (5,6 g) en 4 porciones y se calentó la reacción hasta 40 ºC durante 1 h. Se hidrolizó la reacción con hidróxido de

20 sodio (1 N) y se extrajo con DCM. Se secó la fase orgánica sobre Na2SO4, se filtró a través de Celite y se evaporó a sequedad. El residuo que se purificó por cromatografía en gel de sílice, eluyendo con DCM/metanol (95:5), dando 7(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-6-(metiloxi)-N4-[1-(2-piridinil)etil]-3,4-quinolindiamina (600 mg) en forma de un aceite de color naranja.

Producto intermedio 67: 7-(3,5-Dimetil-4-isoxazolil)-4-{[(5-metil-3-isoxazolil)metil]amino}-6-(metiloxi)-3quinolincarboxamida

Se calentó una solución de 4-cloro-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-6-(metiloxi)-3-quinolincarboxamida (para su preparación, véase el Producto intermedio 56, 331 mg) y [(5-metil-3-isoxazolil)metil]amina (2,5 eq) en butanol (20 ml) hasta 110 ºC durante 4 h. Se evaporó la mezcla de reacción a sequedad y se hidrolizó con agua. Se extrajo la mezcla con DCM y se secó la fase orgánica sobre Na2SO4, se filtró y se concentró a sequedad (280 mg). Esto se usó sin purificación en la reacción subsiguiente (Ejemplo 52).

Producto intermedio 68: 7-(3,5-Dimetil-4-isoxazolil)-6-(metiloxi)-N4-(2-tienilmetil)-3,4-quinolindiamina

A una solución agitada magnéticamente de 4-cloro-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-6-(metiloxi)-3-quinolincarboxamida (para su preparación, véase el Producto intermedio 56, 1,5 g) en acetonitrilo (10 ml) en un tubo Shlenk, se añadió (2tienilmetil)amina (1,53 g). Se cerró herméticamente al tubo Shlenk y se calentó la mezcla de reacción hasta 80 ºC durante 24 h. Se añadió agua a la reacción seguida de una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio. Se

15 extrajo la mezcla con DCM y se secó la fase orgánica sobre Na2SO4, se filtró y se concentró a sequedad. Se purificó el compuesto en bruto resultante por cromatografía sobre gel de sílice (25 g) eluyendo con DCM/metanol (95:5), dando 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-6-(metiloxi)-N4-(2-tienilmetil)-3,4-quinolindiamina (1,493 g) en forma de un polvo de color crema. EMCL: MH+ 409,12, [M-H] - 407,17, Tr: 2,70 min.

Producto intermedio 69: 7-(3,5-Dimetil-4-isoxazolil)-N-[(2,4-dimetil-1,3-tiazol-5-il)metil]-6-(metiloxi)-3-nitro-4quinolinamina

A una solución de 4-cloro-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-6-(metiloxi)-3-nitroquinolina (para su preparación, véase el

5 Producto intermedio 18, 1,5 g) en acetonitrilo, se añadió [(2,4-dimetil-1,3-tiazol-5-il)metil]amina (1,6 g) y se agitó la mezcla resultante durante una noche a 80 ºC. Se añadió otra porción de amina (0,64 g) y se agitó la mezcla a 80 ºC durante 6 h. Se diluyó la mezcla de reacción con agua, se extrajo con DCM y se secó la fase orgánica sobre Na2SO4 y se concentró a sequedad, dando un aceite de color rojo oscuro. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, eluyendo con DCM/metanol (99:1 después, 95:5), dando 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-N

10 [(2,4-dimetil-1,3-tiazol-5-il)metil]-6-(metiloxi)-3-nitro-4-quinolinamina (1,13 g) en forma de un aceite de color naranja. EMCL: MH+ 440,05, [M-H] - 438,11.

Producto intermedio 70: 7-(3,5-Dimetil-4-isoxazolil)-N4-[(2,4-dimetil-1,3-tiazol-5-il)metil]-6-(metiloxi)-3,4quinolindiamina

15 A una solución de 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-N-[(2,4-dimetil-1,3-tiazol-5-il)metil]-6-(metiloxi)-3-nitro-4-quinolinamina (para su preparación, véase el Producto intermedio 69, 1,13 g) en etanol, se añadió ácido clorhídrico (2 ml, conc.). Se añadió dihidrato de cloruro de estaño (II) (2,32 g) y se agitó la mezcla a 40 ºC durante 1 h. Se enfrió la mezcla de reacción, se diluyó con agua y se basificó usando solución de hidróxido de sodio (1 N). Se filtró el precipitado formado a través de Celite y se enjuagó con DCM. Se lavó el filtrado con agua y se secó la fase orgánica sobre

20 Na2SO4 y se evaporó a sequedad. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice eluyendo con DCM/metanol (98:2, a continuación, 93:7), dando 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-N4-[(2,4-dimetil-1,3-tiazol5-il)metil]-6-(metiloxi)-3,4-quinolindiamina (0,6 g) en forma de una espuma de color beis. EMCL: MH+ 410,10, [M-H] 408,18.

Producto intermedio 71: N-[7-(3,5-Dimetil-4-isoxazolil)-4-{[(2,4-dimetil-1,3-tiazol-5-il)metil]amino}-6-(metiloxi)3-quinolinil]tetrahidro-2H-piran-4-carboxamida

A una solución de ácido tetrahidro-2H-piran-4-carboxílico (0,381 g, producto intermedio 69) en DCM (60 ml), se

5 añadieron sucesivamente trietilamina (0,41 ml) y después HATU (1,115 g), y se agitó la mezcla resultante durante 20 minutos a temperatura ambiente. Se añadió 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-N4-[(2,4-dimetil-1,3-tiazol-5-il)metil]-6(metiloxi)-3,4-quinolindiamina (0,6 g, Producto intermedio 69) y se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante una noche. Se vertió la mezcla de reacción en agua y se extrajo con DCM. Se lavó la fase orgánica con una solución diluida de hidróxido de sodio y luego con agua. Se secó la fase orgánica sobre Na2SO4 y se concentró a sequedad.

10 El residuo bruto se purificó por cromatografía ultrarrápida en gel de sílice eluyendo de DCM/metanol (99:1, después, 95:5), dando el producto deseado en forma de un sólido pegajoso de color beis (0,71 g). Se trituró el sólido con diisopropiléter caliente, dando N-[7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-4-{[(2,4-dimetil-1,3-tiazol-5-il)metil]amino}-6-(metiloxi)-3quinolinil]tetrahidro-2H-piran-4-carboxamida (0,6 g) en forma de cristales de color crema. Masa exacta calculada de la EMAR-CL: EN+ para C27H32N5O4S1: 522,2175 MH+, hallada: 522,2225.

15 Producto intermedio 72: 7-(3,5-Dimetil-4-isoxazolil)-4-{[(5-metil-2-furanil)metil]amino}-6-(metiloxi)-3quinolincarboxamida

Se calentó a reflujo una mezcla de 4-cloro-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-6-(metiloxi)-3-quinolincarboxamida (para su preparación, véase el Producto intermedio 56, 200 mg) y [(5-metil-2-furanil)metil]amina (200 mg) en 1,4-dioxano

20 durante una noche. Se evaporó la mezcla de reacción a sequedad, y se recogió el residuo en DCM y se lavó con una solución saturada de bicarbonato de sodio. Se secó la fase orgánica sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El residuo se purificó por cromatografía, dando 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-4-{[(5-metil-2-furanil)metil]amino}-6-(metiloxi)3-quinolincarboxamida (177 mg) en forma de un polvo de color beis. EMCL: Tr: 2,75, MH+ 406,99, [M-H] - 405,05.

Se calentó una mezcla de 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-N4-(fenilmetil)-3,4-quinolindiamina (para su preparación, véase el Producto intermedio 28, 0,2 g, 0,52 mmol), anhídrido de Boc (2g, 9,17 mmol) y trietilamina (0,1 g) hasta 80 ºC 5 durante 2 h. A continuación, se añadió difeniléter (3 g) y se calentó la mezcla de reacción hasta 180 ºC durante 3 h. Después de enfriar, se trató la mezcla con hidróxido de sodio acuoso y se lavó con DCM. Se acidificó la fase acuosa con ácido acético y se extrajo con DCM, se lavó con agua, se secó sobre Na2SO4 y se concentró. El residuo resultante se hizo precipitar con una mezcla de DCM/hexano, dando el compuesto del título (0,044 g, 20 %). RMN de 1H (300 MHz, CDCl3, ppm) δ: 10,47 (s ancho, 1H), 8,85 (s, 1H), 7,93 (s, 1H), 7,78 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,58 (dd, J

10 = 8,3; 7,4 Hz, 1H), 7,39 (dd, J = 7,7; 7,4 Hz, 1H), 7,17 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 7,05 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 6,82 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 2,37 (s, 3H), 2,24 (s, 3H), 1,24 (s, 9H). (EM-IQPA) m/z 413 MH+, Tr: 2,92 min. Masa exacta calculada de la EMAR-CL (EN)+ para C25H24N4O2: 413,1978 MH+, hallada: 413,2018, Tr: 2,67 min.

Los siguientes ejemplos se prepararon de una manera análoga a la del Ejemplo 1:

Ej.

R1 Producto intermedio EMAR-CL RMN de 1H (300 MHz)

2

29 Masa objetivo para C22H17N4O2Cl: 405,1118 MH+ . Hallada: 405,1132; Tr = 3,06 min CDCl3, δ: 9,81 (s, 1H), 8,08 (s ancho, 1H), 7,69 (d, J = 8,9Hz, 1H), 7,48 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 7,35-7,20 (m, 2H), 7,10 (dd, J = 7,7; 7,3 Hz, 1H), 6,84 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 5,61 (s , 2H), 2,40 (s, 3H), 2,26 (s, 3H).

3

30 Masa objetivo para C22H18N4O2: 371,1508 MH+ Hallada: 371,1507; Tr = 2,37 min CDCl3, δ: 8,86 (s, 1H), 7,97 (s, 1H), 7,92 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,35-7,31 (m, 6H), 5,58 (s, 2H), 2,38 (s, 3H), 2,24 (s, 3H).

4

31 Masa objetivo para C22H24N4O2: 377,1978 MH+ Hallada: 377,1996; Tr = 2,66 min CDCl3, δ: 11,04 (s ancho, 1H), 8,84 (s, 1H), 8,07 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 8,02 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 7,47 (dd, J = 7,7; 7,4 Hz, 1H), 4,18 (d, J = 7,5 Hz, 2H), 2,45 (s, 3H), 2,32 (s, 3H), 2,03-1,08 (m, 11H).

(Continuación)

Ej.

R1 Producto intermedio EMAR-CL RMN de 1H (300 MHz)

5

32 Masa objetivo para C20H22N4O2: 351,1821MH+ Hallada: 351,1797; Tr = 2,43 min CDCl3, δ: 10,92 (s ancho, 1H), 9,02 (s, 1H), 8,52 (d, J = 9 Hz, 1H), 8,20 (s, 1H), 7,62 (dd, J = 8,9; 1,7Hz, 1H), 4,49 (s, 2H), 2,66 (s, 3H), 2,52 (s, 3H), 1,29 (s, 9H).

6

33 Masa objetivo para C22H15F3N4O3: 441,1174 MH+ Hallada: 441,1259; Tr = 2,47 min DMSO-d6, δ: 11,68 (s ancho, 1H), 8,62 (s, 1H), 7,80 (s, 1H), 7,70 (dd, J = 7,7; 1,7Hz, 1H), 7,66-7,46 (m, 3H), 6,81 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 2,21 (s, 3H), 2,03 (s, 3H).

7

34 Masa objetivo para C23H20N4O2 385,1664MH+ Hallada: 385,1690; Tr = 2,48 min DMSO-d6, δ: 11,7 (s ancho, 1H), 8,66 (s, 1H), 7,84 (d, J = 1,7 Hz ,1H), 7,37-7,09 (m, 7H), 6,15 (c, J = 7 Hz, 1H), 2,30 (s, 3H), 2,12 (s,3H), 1,86 (d, J = 7,2 Hz, 3H).

8

35 Masa objetivo para C22H17FN4O2: 389,1414 MH+ Hallada: 389,1379; Tr = 2,40 min CDCl3, δ: 8,88 (s, 1H), 7,98 (d, J = 1,5 Hz ,1H), 7,89 (d, J = 8,9 Hz 1H), 7,31-7,27 (dd, J = 8,1; 1,7 Hz 1H), 7,26-7,21 (m, 3H), 7,00 (t, J = 8,5 Hz, 2H), 5,55 (s, 2H), 2,40 (s, 3H), 2,26 (s, 3H).

9

36 Masa objetivo para C21H17N5O2: 372,1460 MH+ Hallada: 372,1472; Tr = 2,06 min DMSO-d6, δ: 8,80 (s, 1H), 8,51 (m, 1H), 8,08 (d, J = 8,8 Hz 1H), 7,99 (d, J = 1,7 Hz ,1H), 7,81 (dd, J = 7,8; 1,9 Hz ,1H), 7,48 (dd, J = 8,7; 1,7 Hz , 1H), 7,38 (d, J = 7,9 Hz 1H), 7,33 (m, 1H), 5,66 (s, 2H), 2,46 (s, 3H), 2,28 (s, 3H).

Ejemplo 10: 7-(3,5-Dimetil-4-isoxazolil)-8-(metoxi)-1-(2-piridinilmetil)-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2ona

Se hizo reaccionar la mezcla de 4-cloro-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-6-(metoxi)-3-quinolincarboxamida (para su preparación, véase el Producto intermedio 40, 6 g, 18 mmol) con 2-aminometilpiridina (2,5 eq, 4,23 g, 45 mmol) en CH3CN (100 ml), y se agitó a 110 ºC durante 4 h. Se concentró la mezcla de reacción al vacío. Se repartió el residuo entre agua y DCM. Se secó la capa orgánica sobre Na2SO4 y se concentró a sequedad, dando 7-(3,5-dimetil-4

10 isoxazolil)-6-(metoxi)-4-[(2-piridinilmetil)amino]-3-quinolin-carboxamida (5,84 g), que se usó en la siguiente etapa sin purificación.

Se añadió un exceso de [bis(trifluoroacetoxi)yodo]benceno (19,35g, 45 mmol) a una solución de la anterior carboxamida intermedia (5,84 g, 15 mmol). Se agitó la mezcla a 50 ºC durante 12 h y después se concentró. Se repartió el residuo entre DCM y agua, se secó la capa orgánica sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío. El producto en bruto se purificó por cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice (DCM/MeOH, 95:5), y después se trituró con dietiléter, dando el compuesto del título en forma de un polvo de color beis (3,9 g, 53,7 %). Masa exacta calculada de la EMAR-CL EN+ para C22H19N5O3: 402,1566 MH+. Hallada 402,1574, Tr: = 2,14 min. (EM-IQPA) m/z 402,10 MH+, Tr: 2,39 min.

5 Ejemplo 11: 7-(3,5-Dimetil-4-isoxazolil)-8-(metoxi)-1-[(1R)-1-(2-piridinil)etil]-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5c]quinolin-2-ona

Se hizo reaccionar la mezcla de 4-cloro-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-6-(metoxi)-3-quinolincarboxamida (para su preparación, véase el Producto intermedio 40 (6 g, 18 mmol) con (1R)-1-(2-piridinil)etanamina (2 eq., 4,43 g, 10 36 mmol) en CH3CN (100 ml) y se agitó a 110 ºC durante 4 h. Se concentró la mezcla de reacción al vacío. Se repartió el residuo entre agua y DCM. Se secó la capa orgánica sobre Na2SO4 y se concentró a sequedad, dando 7(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-6-(metoxi)-4-{[(1R)-1-(2-piridinil)etil]-amino}-3-quinolincarboxamida, que se usó en la siguiente etapa sin purificación. Se trató la carboxamida intermedia (6 g) con un exceso de [bis(trifluoroacetoxi)yodo]benceno (19,35 g, 45 mmol) en CH3CN (100 ml), y se agitó la mezcla a temperatura

15 ambiente durante una noche. Se concentró la mezcla de reacción al vacío, se disolvió el residuo resultante en DCM y se lavó con agua. El producto en bruto se purificó por cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice (DCM/MeOH, 95:5), se disolvió el compuesto resultante en DCM y se hizo precipitar en dietiléter, dando el compuesto del título en forma de un polvo de color blanco (2,5 g, 33 %). Masa exacta calculada de la EMAR-CL EN+ para C23H21N5O3: 416,1722 MH+. Hallada 416,1736, Tr: = 2,22 min. (EM-IQPA) m/z 415,97 MH+, Tr: 2,5 min.

20 Para una preparación alternativa de este compuesto, véase el Ejemplo 36.

Ejemplo 12: 7-(3,5-Dimetil-4-isoxazolil)-8-(metoxi)-1-{2-[(trifluorometil)oxi]fenil}-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5c]quinolin-2-ona

Se calentó una mezcla de compuesto intermedio 50 (0,1 g, 0,2 mmol) y difenilfosforilazida (0,065 g, 0,24 mmol) en

25 DMF (10 ml) hasta 110 ºC durante 2 h. Se concentró la mezcla de reacción a sequedad. El producto en bruto se purificó por cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice eluyendo con DCM/MeOH (98:2), se hizo recristalizar el compuesto resultante en diisopropiléter, dando el compuesto del título en forma de un sólido de color amarillo (0,02, %). RMN de 1H (300 MHz, DMSO-d6, ppm) δ: 8,74 (s, 1H), 7,99 (dd, J = 1,5; 7,7 Hz, 1H), 7,92 (s, 1H), 7,89 (m, 2H), 7,84-7,77 (m, 1H), 6,33 (s, 1H), 3,37 (s, 3H), 2,33 (s, 3H), 2,12 (s, 3H). Masa objetivo de la EMAR-CL calculada

30 para C23H17F3N4O4: 471,1280 MH+. Hallada: 471,1250; Tr: 2,47 min.

Los siguientes ejemplos se prepararon de una manera análoga al Ejemplo 12:

Ej.

R1 Producto intermedio EMAR-CL RMN de 1H (300 MHz)

13

49 Masa objetivo para C26H26N4O3: 443,2083 MH+ . Hallada : 443,2067; Tr = 2,63 min DMSO-d6, δ: 8,66 (s, 1H), 7,85 (s, 1H), 7,82 (s, 1H), 7,62 (dd, J = 7,07,0 Hz, 1H), 7,47 (dd, J = 7,1-7,1 Hz, 1H), 7,35 (d, J = 7,0, 1H), 6,06 (s, 1H), 3,24 (s, 3H), 2,26 (s, 3H), 2,04 (s, 3H), 1,23 (s, 9H).

14

51 Masa objetivo para C22H17FN4O3: 405,1363 MH+ . Hallada : 405,1377; Tr = 2,32 min DMSO-d6, δ: 8,54 (s, 1H), 7,73 (s ancho, 2H), 7,63-7,60 (m, 1H), 7,537,50 (m, 1H), 7,40-7,41 (m, 1H), 6,23 (s, 1H), 3,21 (s, 3H), 2,41 (s, 3H), 1,93 (s, 3H).

15

52 Masa objetivo para C23H20N4O3: 401,1613 MH+ . Hallada : 401,1595; Tr = 2,39 min DMSO-d6, δ: 8,42 (s, 1H), 7,60 (s, 1H), 7,20-7,09 (m, 5H), 6,98 (s, 1H), 5,40 (s, 2H), 3,40 (s, 3H), 2,05 (s, 3H), 1,85 (s, 3H).

16

53 Masa objetivo para C23H18F2N4O3: 437,1425 MH+ . Hallada : 437,1373; Tr = 2,47 min DMSO-d6, δ: 8,56 (s, 1H), 7,76 (s, 1H), 7,34 (dd, J = 9,3; 9,3 Hz, 1H), 7,15-6,87 (m, 3H), 5,53 (s, 2H), 3,60 (s, 3H), 2,20 (s, 3H), 2,00 (s, 3H).

17

54 Masa objetivo para C23H18ClFN4O3: 453,1129 MH+ . Hallada : 453,1119; Tr = 2,62 min CDCl3, δ: 8,76 (s, 1H), 7,81 (s, 1H), 7,22 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 6,85 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 6,79 (s, 1H), 5,60 (s, 2H), 3,51 (s, 3H), 2,22 (s, 3H), 2,07 (s, 3H).

Ejemplo 18: 1-[2-(terc-Butil)fenil]-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-1H-imidazo[4,5-c]quinolina

5 A una solución de 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-N4-(fenilmetil)-3,4-quinolindiamina (para su preparación, véase el producto intermedio 28, 0,2 g, 0,52 mmol) en DCM (10 ml), se añadieron HOBT (0,081 g, 0,62 mmol), EDCI (0,118 g, 0,62 mmol), Et3N (0,062 g, 0,62 mmol) y ácido fórmico (0,025 g, 0,52 mmol). Se agitó la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante una noche, después se vertió en agua y se extrajo con DCM. Se lavó la fase orgánica con agua, se secó sobre Na2SO4 y se concentró. Se hizo recristalizar el sólido en bruto en EtOAc,

10 dando el compuesto del título en forma de cristales de color blanco (0,1 g, 48 %). P.f.: 216 ºC RMN de 1H (300 MHz, CDCl3, ppm) δ: 9,36 (s, 1H), 8,06 (s, 1H), 8,01 (s, 1H), 7,73 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,56 (dd, J = 8,1; 8,1 Hz, 1H), 7,34 (dd, J = 7,7; 7,7 Hz, 1H), 7,15-7,6 (m, 2H), 2,36 (s, 3H), 2,23 (s, 3H), 1,07 (s, 9H). Masa exacta calculada de EMAR-

CL: EN+ para C25H24N4O: 397,2028 MH+, hallada: 397,2021; Tr = 3,03 min.

Los siguientes ejemplos se prepararon de una manera análoga a la del Ejemplo 18 a partir de los productos intermedios correspondientes:

Ej.

R1 R2 Producto intermedio EM-tiempo de vuelo (TOF) RMN de 1H (300 MHz)

19

CH3 28 Masa exacta calculada para C26H26N4O: 411,2 185 MH+ Hallada: 411,2154, Tr = 3,08 min CDCl3, δ: 9,33 (s, 1H), 8,13 (s ancho, 1H), 7,83 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,65 (dd, J = 8,3, 7,4 Hz, 1H), 7,44 (dd, J = 7,7, 7,5 Hz, 1H), 7,16 (dd, J = 8,7, 1,7 Hz, 1H), 7,09 (dd, J = 7,7, 1,3 Hz, 1H), 7,00 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 2,48 (s, 3H), 2,43 (s, 3H), 2,29 (s, 3H), 1,08 (s, 9H).

20

-(CH2)2OCH3 28 Masa exacta calculada para C28H30N4O2: 455,2447 MH+ . Hallada: 455,2455; Tr = 3,04 min CDCl3, δ: 9,22 (s, 1H), 7,94 (s ancho, 1H), 7,66 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,49 (dd, J = 7,4, 7,2 Hz, 1H), 7,28 (dd, J = 7,4, 7,2 Hz, 1H), 6,99 (dd, J = 7,4, 7,2 Hz, 2H), 6,82 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 3,86-3,70 (m, 2H), 3,19 (s, 3H), 2,98-2,68 (m, 2H), 2,27 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 0,91 (s, 9H).

21

28 Masa exacta calculada para C32H30N4O: 487,2498 MH+ . Hallada: 487,2532; Tr = 3,46 min CDCl3, δ: 9,48 (s, 1H), 8,17 (s ancho, 1H), 7,92 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,70 (dd, J = 8,3, 8,3 Hz, 1H), 7,39-7,26 (m, 4H), 7,25-7,15 (m, 3H), 7,05 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 6,88 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 4,39 (d, J = 15,4 Hz, 1H), 4,00 (d, J = 15,4 Hz, 1H), 2,50 (s, 3H), 2,37 (s, 3H), 1,17 (s, 9H).

(Continuación) A una solución de 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-6-(metoxi)-N4-(2-piridinilmetil)-3,4-quinolindiamina (para su preparación,

Ej.

R1 R2 Producto intermedio EM-tiempo de vuelo (TOF) RMN de 1H (300 MHz)

22

isopropilo 28 Masa exacta calculada para C28H30N4O: 439,2498 MH+ . Hallada: 439,2526; Tr = 3,36 min CDCl3, δ: 9,34 (s, 1H), 8,08 (s ancho, 1H), 7,80 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,61 (dd, J = 7,2, 7,2 Hz, 1H), 7,39 (dd, J = 7,2, 7,2 Hz, 1H), 7,15-7,06 (m, 2H), 6,89 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 2,86 (c, J = 7 Hz, 1H), 2,38 (s, 3H), 2,24 (s, 3H), 1,51 (d, J = 7 Hz, 3H), 1,20 (d, J = 7 Hz, 3H).

23

CH3 30 Masa exacta calculada para C23H20N4O: 369,1715 MH+ . Hallada: 369,1679; Tr = 2,55 min. CDCl3, δ: 9,28 (s, 1H), 8,09 (s ancho, 1H), 7,94 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 7,35-7,24 (m, 4H), 7,02 (d, J = 7,9 Hz, 2H), 5,76 (s, 2H), 2,65 (s, 3H), 2,40 (s, 3H), 2,26 (s, 3H).

24

isopropilo 30 Masa exacta calculada para C25H24N4O: 397,2028 MH+ . Hallada: 397,2035; Tr = 2,77 min CDCl3, δ: 9,33 (s, 1H), 8,22 (s ancho, 1H), 7,92 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,34-7,24 (m, 4H), 6,99 (d, J = 7,9 Hz, 2H), 5,81 (s, 2H), 3,23 (c, J = 7 Hz, 1H), 2,40 (s, 3H), 2,26 (s, 3H), 1,41 (d, J = 7 Hz, 6H).

25

Terc-butilo 30 Masa exacta calculada para C26H26N4O: 411,2185 MH+ . Hallada: 411,2146; Tr = 2,93 min CDCl3, δ: 9,24 (s, 1H), 8,15 (s ancho, 1H), 7,73 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 7,25-7,12 (m, 4H), 6,86 (J = 7,4 Hz, 2H), 5,94 (s, 2H), 2,30 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 1,44 (s, 9H).

26

-(CH2)2OCH3 30 Masa exacta calculada para C25H24N4O2, 413,1978 MH+ . Hallada: 413,1940; Tr = 2,59 min DMSO-d6, δ: 9,35 (s, 1H), 8,29 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 8,21 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 7,64 (dd, J = 8,7; 1,7 Hz, 1H), 7,497,28 (m, 2H), 7,17 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,13 (s, 2H), 3,93 (t, J = 6,6 Hz, 2H), 3,35 (t, J = 6,6 Hz, 2H), 2,55 (s, 3H), 2,37 (s, 3H).

Ejemplo 27: 7-(3,5-Dimetil-4-isoxazolil)-8-(metoxi)-1-(2-piridinilmetil)-2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-1H-imizo[4,5c]quinolina

véase el Producto intermedio 38, 0,5 g, 1,33 mmol) en DCM (20 ml), se añadió cloruro de tetrahidro-2H-piran-4

carbonilo (1,1 eq., 1,46 mmol, 0,15 g, Apollo Scientific) a 0 ºC, y se agitó la mezcla a 0 ºC durante 30 minutos. Se

hidrolizó la mezcla de reacción con solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y se extrajo con DCM. Se

5 secó la fase orgánica sobre Na2SO4 y se concentró, dando el producto en bruto que se usó en la siguiente etapa sin

purificación. Se añadió AcOH (5 ml) al producto en bruto y se agitó la mezcla a 100 ºC durante una noche. Se

concentró la mezcla de reacción a presión reducida, se hidrolizó con hidróxido de sodio 1 N y se extrajo con DCM.

Se secó la fase orgánica sobre Na2SO4 y se evaporó a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía

ultrarrápida sobre gel de sílice (DCM/MeOH, 95:5) y el compuesto se recristalizó en acetonitrilo, dando el compuesto 10 del título en forma de un polvo de color blanco (0,13 g, 21 %) Masa exacta calculada de la EMAR-CL: EN+ para

C27H27N5O3: 470,2192 (MH +). Hallada: 470,2153, Tr: = 2,18 min. (EM-IQPA) m/z: 471,01 MH+, Tr: = 2,51 min.

Los siguientes ejemplos se prepararon de una manera análoga a la del Ejemplo 27:

Ej.

R1 R2a EMAR-CL RMN de 1H (300 MHz) o EMCL

28

Masa exacta calculada para C28H28N4O3: 469,2240 MH+. Hallada: 469,2265, Tr = 2,54 min. DMSO-d6, δ: 9,12 (s, 1H), 7,92 (s, 1H), 7,45-7,23 (m, 4H), 7,12 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 6,11 (s, 2H), 4,02-3,87 (m, 2H), 3,59 (s, 3H), 3,58-3,45 (m, 2H), 2,26 (s, 3H), 2,06 (s, 3H), 2,041,92 (m, 2H), 1,91-1,80 (m, 2H).

29

Masa exacta calculada para C29H30N4O3 483,2396 MH+. Hallada: 483,2368 Tr = 2,62, (EM-IQPA) m/z: 482,93 (M+H)+, Tr = 2,62 min (EM-IQPA) m/z: 482,93 (M+H)+, Tr = 2,92 min.

30

-CH2OCH3 Masa exacta calculada para C26H26N4O3: 443,2083 MH+. Hallada: 443,2109, Tr = 2,71, EMCL PA+ Hallada: 442,94, Tr = 2,93 min. DMSO-d6, δ: 9,16 (s, 1H), 7,93 (s, 1H), 7,49-7,21 (m, 5H), 6,77 (s ancho, 1H), 6,52-6,34 (m, 1H), 5,054,79 (m, 2H), 3,36 (s, 6H), 2,26 (s, 3H), 2,08 (d, J = 7 Hz, 3H), 2,05 (s, 3H).

15 Ejemplo 31: 7-(3,5-Dimetil-4-isoxazolil)-8-(metoxi)-1-[(1R)-1-feniletil]-2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-1Himidazo[4,5-c]quinolina

A una solución del Producto intermedio 39 (0,5 g, 1,28 mmol) en DCM (25 ml) a 0 ºC, se añadió cloruro de tetrahidro-2H-piran-4-carbonilo (1,05 eq., 1,4 mmol, 0,15 g, Apolo Scientific), y luego se agitó la mezcla a 0 ºC durante 15 minutos. Se hidrolizó la mezcla de reacción con solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y se extrajo con DCM. Se secó la fase orgánica sobre Na2SO4 y se concentró, dando el producto en bruto que se usó en 5 la siguiente etapa sin purificación. Se añadió AcOH al producto en bruto y se agitó la mezcla a 100 ºC durante una noche. Se concentró la mezcla de reacción a presión reducida, se hidrolizó con hidróxido de sodio 1 N y se extrajo con DCM. Se secó la fase orgánica sobre Na2SO4, y se evaporó a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice (DCM/MeOH, 95:5), dando el compuesto del título en forma de un polvo blanco (0,16 g, 26 %). (EM-IQPA) m/z 483 MH+, Tr: 2,93 min. [α]D20 = -38,7 º (c = 0,8005 g/100 ml, CHCl3).

10 RMN de 1H (300 M Hz, DMSO-d6, ppm)δ: 9,13 (s, 1H), 7,90 (s, 1H), 7,51-7,21 (m, 5H), 6,73 (s ancho, 1H), 6,51 (s, 1H), 4,09-3,85 (m, 2H), 3,69-3,45 (m, 2H), 3,31 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,07 (d, J = 7 Hz, 3H), 2,06 (s, 3H), 2,04-1,92 (m, 2H), 1 0,91-1,80 (m, 2H).

Ejemplo 32: 7-(3,5-Dimetil-4-isoxazolil)-8-(metoxi)-1-[((1R)-1-feniletil]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-c]quinolina

15 A una solución de 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-6-(metoxi)-N4-[(1R)-1-feniletil]-3,4-quinolindiamina (para su preparación, véase el Producto intermedio 39, 0,2 g, 0,515 mmol) en DCM (10 ml) enfriada a 0 ºC, se añadieron AcOH (0,5 ml) y una solución de nitrito de sodio (0,07 g) en agua (1 ml). Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante una noche. Se trató la mezcla de reacción con solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y se extrajo con DCM. Se secó la fase orgánica sobre Na2SO4, y se evaporó a presión reducida. El residuo se purificó mediante

20 cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice (DCM/MeOH, 95:5). Se trituró el sólido en diisopropiléter, dando el compuesto del título en forma de un polvo de color verde (0,18 g, 87,5 %). Masa exacta calculada de la EMAR-CL: EN+ para C23H21N5O2: 400,1773 MH+. Hallada: 400,1785, Tr: = 3,04 min. (EM-IQPA) m/z: 400 MH+, Tr: 3,15 min.

Los siguientes ejemplos se prepararon de una manera análoga al Ejemplo 32: Se agitó una mezcla del Producto intermedio 30 (0,5 g, 1 0,45 mmol), CS2 (1,6 ml) y trietilamina (0,3 ml) en etanol (10 ml) a 60 ºC durante una noche. Se hidrolizó la mezcla de reacción con agua y se extrajo con CH2Cl2. Se secó la

Ejemplo

R1 Producto intermedio EMAR-CL EMCL

33

30 Masa exacta calculada para C22H19N5O2: 388,1617 MH+. Hallada: 388,1645, Tr = 2,83 min. m/z: 400 (M+H)+, Tr = 3,04 min.

5 capa orgánica sobre Na2SO4 y se concentró. El sólido en bruto se purificó por cromatografía en gel de sílice eluyendo con CH2Cl2/MeOH (95/5), dando el compuesto del título en forma de un polvo de color marrón (0,1 g, 17,9 %). RMN de 1H (300 M Hz, DMSO-d6, ppm) δ: 13,93 (s, 1H), 9,01 (s, 1H), 8,22 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 8,15 ( d, J = 1 0,7 Hz, 1H), 7,66 (dd, J = 8,7; 1,7 Hz, 1H), 7,48-7,27 (m, 5H), 6,17 (s, 2H), 2,52 (s, 3H) , 2,34 (s, 3H). Masa exacta calculada de la EM-tiempo de vuelo (EN)+ para C22H18N4OS: 387,1280 MH+, Hallada: 387,1308; Tr: 2,59 min.

10 El siguiente ejemplo se preparó de una manera análoga a la del Ejemplo 34:

Ej.

R1 Producto intermedio EM-tiempo de vuelo (TOF) RMN de 1H (300 MHz)

35

33 Masa exacta calculada para C22H15F3N4O2S: 457,0946 MH+ . Hallada: 457,0914; Tr = 2,59 min DMSO-d6, δ: 13,77 (s, 1H), 8,89 (s, 1H), 8,03 (s, 1H), 7,91-7,62 (m, 5H), 7,43 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 6,92 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 6,17 (s, 2H), 2,37 (s, 3H), 2,19 (s,3H).

Los siguientes ejemplos se prepararon a partir de los compuestos intermedios apropiados mediante un procedimiento análogo a los descritos anteriormente:

Ejemplo 36: 7-(3,5-Dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-[(1R))-1-(2-piridinil)etil]-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5c]quinolin-2-ona

Se disolvió 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-6-(metiloxi)-4-{[(1R))-1-(2-piridinil)etil]amino}-3-quinolincarboxamida (para su

5 preparación, véase el Producto intermedio 55, 45 g, 102 mmol) en metanol (500 ml) e hidróxido de potasio (7,47 g, 133 mmol). Se agitó la mezcla en un baño de hielo, después se añadió diacetato de yodobenceno (39,6 g, 123 mmol) en pequeñas porciones durante 20 minutos y se agitó la mezcla durante 1 h más. Se evaporó el disolvente al vacío, el residuo se diluyó con agua (1 l) y se extrajo la suspensión gomosa resultante con DCM (2 x 300 ml). Se secó el disolvente (sulfato de sodio) y se cargó directamente en una columna de sílice (750 g), que

10 después se eluyó con un gradiente de amoniaco 2 M en metanol/DCM (0-10 %). Tras la evaporación de los disolventes al vacío, se obtuvo 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-[(1R))-1-(2-piridinil)etil]-1,3-dihidro-2Himidazo[4,5-c]quinolin-2-ona (32,7 g) en forma de un sólido de color beis. RMN de 1H CDCl3: δH 11,02 (1 H, s ancho), 8,80 (1H, s), 8,70 (1H, d), 7,85 (1H, s), 7,67 (1H, m), 7,36 (1H, b), 7,29-7,26 (1H, m, parcialmente oscurecido por cloroformo), 6,84 (1H, b), 6,52 (1H, m), 3,55 (3H, s ancho), 2,32 (3H, s), 2,22 (3H, d), 2,16 (3H, s). EMCL

15 (Procedimiento HpH): MH+ 416, Tr: 0,85 min.

Ejemplo 37: 7-(3,5-Dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-3-[2-(metiloxi)etil]-1-[(1R))-1-(2-piridinil)etil]-1,3-dihidro-2Himidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

Se trató 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-[(1R))-1-(2-piridinil)etil]-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

20 (para su preparación, véase el Ejemplo 36, 100 mg) en DMF (5 ml) con 2-terc-butilimino-2-dietilamino-1,3dimetilperhidro-1,3,2-diazafosforina, unida a polímero (300 mg) y una solución de 2-bromoetilmetiléter (40 mg) en DMF (0,5 ml). Se agitó la reacción a temperatura ambiente, atmósfera de aire durante ~3 h y después se dejó a temperatura ambiente durante una noche. Se filtró la reacción y se lavó la resina con metanol. Se evaporaron los disolventes bajo una corriente de nitrógeno, dejando una goma amarilla que se disolvió en DMSO (1 ml) y se purificó

25 por MDAP (procedimiento de formiato). Se combinaron las fracciones de producto y se redujeron a sequedad al vacío, dando 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-3-[2-(metiloxi)etil]-1-[(1R)-1-(2-piridinil)etil]-1,3-dihidro-2Himidazo[4,5-c]quinolin-2-ona en forma de una goma de color amarillo pálido (56 mg) EMCL (procedimiento de formiato): MH+ 474, Tr = 0,80 min.

Ejemplo 38: 7-(3,5-Dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-[1-(2-piridinil)etil]-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin2-ona

Se disolvió 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-6-(metiloxi)-4-{[1-(2-piridinil)etil]amino}-3-quinolincarboxamida (0,39 g,

5 0,794 mmol) en metanol (10 ml) y se añadió hidróxido de potasio (0,089 g, 1 0,588 mmol), se agitó la mezcla en un baño de hielo, se añadido bis(acetiloxi)(fenil)-L3-yodano (0,307 g, 0,953 mmol) en pequeñas porciones durante 20 minutos y se agitó la mezcla durante 1 h más. Se acidificó la mezcla con ácido acético (0,2 ml), se evaporó al vacío y el residuo se repartió entre acetato de etilo (20 ml) y agua (20 ml). Se secó el disolvente (sulfato de sodio) y se evaporó, y se disolvió el residuo en DCM (5 ml), se aplicó a un cartucho de sílice (50 g), que se eluyó con un

10 gradiente de metanol/acetato de etilo (0-20 %). Se redujeron las fracciones apropiadas a sequedad al vacío, dando un sólido de color beis. Se trituró este sólido con acetato de etilo caliente (5 ml) y se enfrió, y el sólido se recogió por filtración, dando 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-[1-(2-piridinil)etil]-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2ona en forma de polvo de color crema pálido (0,20 g). RMN de 1H CDCl3: δH 8,82 (1H, s), 8,70 (1H, d), 7,87 (1H, s), 7,67 (1H, m), 7,36 (1H, b) , 7,29-7,26 (1H, m, parcialmente oscurecido por cloroformo), 6,87 (1H, b), 6,51 (1H, m),

15 3,56 (3H, s), 2,32 (3H, s), 2,22 (3H, d), 2,16 (3H, s). EMCL (procedimiento de formiato): MH+ 416, Tr: 0,69 min.

Ejemplo 39: 7-(3,5-Dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-[(1S)-1-(2-piridinil)etil]-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5c]quinolin-2-ona

Se disolvió 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-[1-(2-piridinil)etil]-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

20 (para su preparación, véase el Ejemplo 38, ~50 mg) en 3 ml de etanol (3 ml) y heptanos (3 ml) con calentamiento (x 3). Se purificaron las soluciones mediante HPLC quiral usando 6 inyecciones (3 ml) de la solución anterior en una columna Chiralpak IA (20 um, 5 cm x 25 cm) y la elución con etanol/heptanos (30 %, caudal de 50ml/min, 215 nm de longitud de onda). Se redujeron las fracciones mixtas a sequedad al vacío y se volvieron a procesar como se describe en el procedimiento anterior. Se redujeron las fracciones voluminizadas del primer enantiómero en eluir a

25 sequedad al vacío, dando 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-[(1S)-1-(2-piridinil)etil]-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5c]quinolin-2-ona (61 mg). RMN de 1H CDCl3: δH 8,86 (1H, s), 8,68 (1H, d), 7,91 (1H, s), 7,67 (1H, m), 7,37 (1H, b), 7,29-7,26 (1H, m, parcialmente oscurecido por cloroformo), 6,90 (1H, b), 6,49 (1H, m), 3,58 (3H, s), 2,32 (3H, s), 2,20 (3H, d), 2,16 (3H, s). EMCL (procedimiento de formiato): MH+ 416, Tr: 0,71 min.

Ejemplo 40: 7-(3,5-Dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-[1-(1-metil-1H-pirazol-4-il)etil]-1,3-dihidro-2Himidazo[4,5-c]quinolin-2-ona (

Se disolvió 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-6-(metiloxi)-4-{[1-(1-metil-1H-pirazol-4-il)etil]amino}-3-quinolincarboxamida (110 mg, 0,262 mmol, Producto intermedio 61) en metanol (10 ml) y se enfrió hasta 0 ºC en un baño de hielo, se añadió hidróxido de potasio (19 mg, 0,340 mmol) y la solución se agitó durante 10 min. Se añadió diacetato de yodobenceno (110 mg, 0,340 mmol) y se agitó la mezcla durante 2 h más. Se diluyó la solución con acetato de etilo (50 ml), se lavó con agua, se secó (sulfato de sodio) y se evaporó. Se disolvió el residuo en DCM (4 ml), se aplicó a un cartucho de sílice (25 g) y se eluyó el cartucho con un gradiente de amoniaco 2 M en metanol/DCM (0-10 %), dando, tras la evaporación al vacío de la fracciones que contenían el producto, 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8(metiloxi)-1-[1-(1-metil-1H-pirazol-4-il)etil]-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona en forma de sólido de color beis (46 mg). EMCL (procedimiento de formiato): MH+ 419, Tr: 0,62 min.

Ejemplo 41: 7-(3,5-Dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-(2-piridinilmetil)-2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-1Himidazo[4,5-c]quinolina

A una solución de 4-cloro-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-6-(metoxi)-3-nitroquinolina (para su preparación, véase el Producto intermedio 18, 7 g) en acetonitrilo (100 ml), se añadió (2-piridinilmetil)amina (6,8 g), y la mezcla resultante se calentó a 60 ºC durante 1 h. Se hidrolizó la mezcla de reacción, se extrajo con DCM y se secaron las fases orgánicas combinadas (Na2SO4), se filtraron y se evaporaron a sequedad. Se disolvió una porción de este material (2 g) en etanol (80 ml) y HCl (1 ml, conc.). A continuación, se añadió dihidrato de cloruro de estaño (II) (1 g) en dos porciones y se agitó la mezcla de reacción durante 2 h a temperatura ambiente. Se hidrolizó la mezcla de reacción usando una solución saturada de bicarbonato de sodio. Luego, se extrajo con DCM y se filtraron las capas orgánicas combinadas a través de Celite. Se secó el filtrado (Na2SO4), se filtró y se concentró a sequedad, dando, después de la cromatografía, 3 g de material. Se disolvió este último en DCM (100 ml) y a esta mezcla se añadieron HATU (3,65 g) y ácido tetrahidro-2H-piran-4-carboxílico (1,25 g). Se agitó la mezcla de reacción resultante durante una noche a temperatura ambiente y se hidrolizó mediante la adición de una solución de bicarbonato de sodio. Se extrajo la mezcla de reacción con DCM, se secó (Na2SO4), se filtró y se concentró a sequedad, dando el producto intermedio bruto (2,9 g). Se disolvió este en ácido acético (30 ml) y se calentó la mezcla resultante hasta 90 ºC durante 6 h. Se concentró la mezcla de reacción a sequedad. Se añadió una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y se extrajo la mezcla con DCM, se secó (Na2SO4), se filtró y se concentró a sequedad. El compuesto en bruto se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice, eluyendo con DCM/metanol (95:5), y a continuación, se recristalizó en etanol y se secó al vacío, dando 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-(2piridinilmetil)-2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-1H-imidazo[4,5-c]quinolina en forma de un polvo de color beis (1,88 g). Masa exacta calculada de la EMAR-CL: EN+ para C27H28N5O3: 470,2192 MH+, hallada: 470,2115, Tr = 2,25 min.

Ejemplo 43: 4-(8-Metoxi-2-(metoximetil)-1-(piridin-2-ilmetil)-1H-imidazo[4,5-c]quinolin-7-il)-3,5-dimetilisoxazol

Se disolvió 7-(3,5-dimetilisoxazol-4-il)-6-metoxi-N4-(piridin-2-ilmetil)quinolina-3,4-diamina (para su preparación, véase el Producto intermedio 63, 500 mg) en DCM (20 ml), y se enfrió la mezcla de reacción hasta 0 ºC. Se añadió cloruro 5 de 2-metoxiacetilo (1,1 eq) gota a gota y se agitó la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 30 min. Se hidrolizó la mezcla con una solución de bicarbonato de sodio y se extrajo con DCM. Se secó la fase orgánica sobre Na2SO4, se filtró y se concentró a sequedad. Se disolvió el residuo obtenido n ácido acético (5 ml) y se calentó la mezcla de reacción hasta 130 ºC durante 16 h. Se trató la mezcla de reacción con hidróxido de sodio (1 M) y se extrajo con DCM. Se secó la fase orgánica sobre Na2SO4, se filtró y se concentró a sequedad. El residuo se purificó

10 mediante cromatografía en gel de sílice, eluyendo con DCM/metanol (95:5). El compuesto resultante se recristalizó en acetonitrilo y se secó al vacío, dando 4-(8-metoxi-2-(metoximetil)-1-(piridin-2-ilmetil)-1H-imidazo[4,5-c]quinolin-7il)-3,5-dimetilisoxazol (50 mg) en forma de un polvo de color crema. Masa exacta calculada de la EMAR-CL: EN+ para C22H19N5O3 430,1879 MH+, hallada: 430,1833, Tr: 2,23 min.

Ejemplo 44: 7-(3,5-Dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-[1-(2-piridinil)etil]-2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-1H15 imidazo[4,5-c]quinolina

A una solución de 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-6-(metiloxi)-N4-3,4-quinolindiamina (para su preparación, véase el Producto intermedio 64, 380 mg) en DCM (20 ml), se añadió ácido tetrahidro-2H-piran-4-carboxílico (240 mg) seguido de HATU (1,2 equiv) y trietilamina (1,5 equiv). Se agitó la mezcla de reacción a temperatura ambiente 20 durante 1 h, y después se hidrolizó usando una solución saturada de bicarbonato de sodio. Se extrajo la mezcla con DCM y se secó la fase orgánica sobre Na2SO4, se filtró y se concentró a sequedad. Se diluyó el producto en bruto resultante en ácido acético (5 ml) y se calentó hasta 100 ºC durante una noche. Se recogió la mezcla de reacción en una mezcla 1:1 de hidróxido de sodio (1 N) y agua (100 ml en total), se extrajo con DCM y se purificó el producto en bruto resultante por cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con DCM/metanol (95:5). Se recogió el producto

25 resultante en dietiléter y se secó al vacío, dando ácido 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-[1-(2-piridinil)etil]-2(tetrahidro-2H-piran-4-il)-1H-imidazo[4,5-c]quinolina (400 mg) en forma de un polvo de color gris. Masa exacta calculada de la EMAR-CL: EN+ para C28H30N5O3 484,2349 MH+, hallada: 484,2382, Tr: 2,30 min.

Ejemplo 46: 7-(3,5-Dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-[(1S)-1-(2-piridinil)etil]-2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-1Himidazo[4,5-c]quinolina

Se separó la mezcla racémica de 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-[1-(2-piridinil)etil]-2-(tetrahidro-2H-piran-4il)-1H-imidazo[4,5-c]quinolina (400 mg) usando una columna semi-preparativa: Chiracel OD, 250 x 20 nm. 10 μm, eluyendo con hexano/etanol (85:15) [Caudal: 18ml/min, TA, detección UV: 254 nm; volumen de inyección de 900 μl], dando:

10 -Isómero 1: 7-(3,5-Dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-[(1R*)-1-(2-piridinil)etil]-2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-1Himidazo[4,5-c]quinolina (55 mg) en forma de un polvo blanco. Masa exacta calculada de la EMAR-CL: EN+ para C28H30N5O3: 484,2349 MH+, hallada: 484,2393, Tr: 2,46 min. HPLC analítica (columna Chiracel OD, 250 x 4,6 nm 10 μm, eluyendo con hexano/etanol (60/40): Tr = 7,868.

-

Isómero 2: 7-(3,5-Dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-[(1S*)-1-(2-piridinil)etil]-2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-1H

15 imidazo[4,5-c]quinolina (55 mg) en forma de un polvo de color blanco. Masa exacta calculada de la EMAR-CL: EN+ para C28H30N5O3 484,2349 MH+, hallada: 484,2394, Tr: 2,43 min. Columna de HPLC analítica (Chiracel OD, 250 x 4,6 nm 110 μm, eluyendo con hexano/etanol (60:40): Tr = 9,377.

Ejemplo 47: 7-(3,5-Dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-(2-pirimidinilmetil)-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5c]quinolin-2-ona

En un matraz de 100 ml, se calentó una mezcla de 4-cloro-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-6-(metiloxi)-3quinolincarboxamida (para su preparación, véase el Producto intermedio 56, 331 mg) y (2-pirimidinilmetil)amina (273 mg) en acetonitrilo hasta 100 ºC durante 2 h. Se hidrolizó la mezcla de reacción con una solución de bicarbonato de sodio, se extrajo con DCM y se secó la fase orgánica sobre Na2SO4, se filtró y se concentró a 25 sequedad, dando 350 mg del producto intermedio bruto. Se disolvió el residuo en acetonitrilo (15 ml), se añadió bis(trifluoroacetoxi)yodo]benceno (0,5 g) y se agitó la mezcla de reacción durante 3 h a temperatura ambiente. Se lavó la mezcla de reacción con agua, se extrajo con DCM y se secó la fase orgánica sobre Na2SO4, se filtró y se concentró a sequedad. Se purificó compuesto en bruto resultante se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con DCM/metanol (95:5), y se recristalizó el residuo resultante en acetonitrilo y se secó al vacío, 30 dando 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-(2-pirimidinilmetil)-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona (70

Ejemplo 48: 7-(3,5-Dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-(2-pirazinilmetil)-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2ona

En un matraz de 100 ml, se calentó una mezcla de 4-cloro-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-6-(metiloxi)-3quinolincarboxamida (para su preparación, véase el Producto intermedio 56, 331 mg) y (2-pirazinilmetil)amina (2,5 eq) en acetonitrilo hasta 100 ºC durante 2 h. Se hidrolizó la mezcla de reacción con una solución de bicarbonato de sodio, se extrajo con DCM y se secó la fase orgánica sobre Na2SO4, se filtró y se concentró a sequedad, dando el 10 producto intermedio bruto. Se disolvió el residuo en acetonitrilo (15 ml), se añadió bis(trifluoroacetoxi)yodo]benceno (0,5 g) y se agitó la mezcla de reacción durante 3 h a temperatura ambiente. Se lavó la mezcla de reacción con agua, se extrajo con DCM y se secó la fase orgánica sobre Na2SO4, se filtró y se concentró a sequedad. Se purificó el compuesto en bruto resultante mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con DCM/metanol (95:5), y se recristalizó el residuo resultante en acetonitrilo y se secó al vacío, dando 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-(2

15 pirimidinilmetil)-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona (100 mg) en forma de un polvo de color beis. Masa exacta calculada de la EMAR-CL: EN+ para C21H19N6O3 403,1519 MH+, hallada: 403,1550, Tr = 2,06 min.

Ejemplo 49: 7-(3,5-Dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-(3-piridinilmetil)-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2ona

20 Se calentó una solución de 4-cloro-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-6-(metiloxi)-3-quinolincarboxamida (para su preparación, véase el Producto intermedio 56, 332 mg) y (3-piridinilmetil)amina (2,5 equiv) en acetonitrilo durante 4 h. A continuación, se concentró la mezcla de reacción a sequedad y se hidrolizó con agua. Se extrajo la mezcla con DCM y se secó la fase orgánica sobre Na2SO4, se filtró y se concentró a sequedad, dando el producto intermedio bruto. Se disolvió el residuo parcialmente en acetonitrilo (30 ml), y se añadió

25 bis(trifluoroacetoxi)yodo]benceno (800 mg). Se agitó la mezcla resultante a temperatura ambiente durante 24 h. Se concentró la mezcla de reacción a sequedad y se hidrolizó con agua. Se extrajo la mezcla con DCM y se secó la fase orgánica sobre Na2SO4, se filtró y se concentró a sequedad. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice, eluyendo con DCM/metanol (95/5). Se recogió el residuo purificado en dietiléter, dando 7-(3,5-dimetil-4isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-(3-piridinilmetil)-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona (70 mg) en forma de un polvo

30 de color marrón. Masa exacta calculada de la EMAR-CL: EN+ para C22H20N5O3 402,1566 MH+, hallada: 402,1576, Tr = 1,96 min.

Ejemplo 50: 7-(3,5-Dimetil-4-isoxazolil)-1-[(2,4-dimetil-1,3-tiazol-5-il)metil]-8-(metiloxi)-1,3-dihidro-2Himidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

A una solución de 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-4-{[(2,4-dimetil-1,3-tiazol-5-il)metil]amino}-6-(metiloxi)-3

5 quinolincarboxamida (para su preparación, véase el Producto intermedio 65, 0,3 g) en acetonitrilo (50 ml), se añadió bis(trifluoroacetoxi)yodo]benceno (0,443 g) y se agitó la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante una noche. Se vertió la mezcla de reacción en agua y se extrajo con DCM. Se secó la fase orgánica sobre Na2SO4 y se concentró a sequedad, dando un aceite de color naranja. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice eluyendo con DCM/metanol (98:2 luego 97:3) dando un sólido pegajoso de color amarillo pálido, que

10 se trituró en diisopropiléter caliente, dando 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-1-[(2,4-dimetil-1,3-tiazol-5-il)metil]-8-(metiloxi)1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona (0,21 g) en forma de un sólido de color crema. EMCL: MH+ 436,06 [MH] 434,12

Ejemplo 51: 7-(3,5-Dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-2-[(metiloxi)metil]-1-[1-(2-piridinil)etil]-1H-imidazo[4,5c]quinolina

A una solución de 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-6-(metiloxi)-N4-[1-(2-piridinil)etil]-3,4-quinolindiamina (para su preparación, véase el Producto intermedio 65, 250 mg) en DCM (20 ml), se añadió ácido (metiloxi)acético (116 mg) seguido de HATU (1,2 equiv) y trietilamina (1,5 equiv). Se agitó la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 1 h, y después se hidrolizó con una solución saturada de bicarbonato de sodio. Se extrajo la mezcla con 20 DCM y se secó la fase orgánica sobre Na2SO4, se filtró y se concentró a sequedad. Se disolvió el producto resultante en etanol (60 ml) y se añadió una solución de hidróxido de sodio (1 N, 15 ml). Se calentó la mezcla de reacción hasta 90 ºC durante 16 h y después se dejó enfriar hasta la temperatura ambiente. Se añadieron DCM (150 ml) y agua (100 ml). Se separaron las fases y se secó la fase orgánica sobre Na2SO4, se filtró y se evaporó a sequedad. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con DCM/metanol (95:5). Se

25 recogió el residuo resultante en acetonitrilo, se lavó con dietiléter y se secó al vacío, dando 7-(3,5-dimetil-4isoxazolil)-8-(metiloxi)-2-[(metiloxi)metil]-1-[1-(2-piridinil)etil]-1H-imidazo[4,5-c]quinolina (90 mg) en forma de un polvo de color beis. Masa exacta calculada de la EMAR-CL: EN+ para C28H30N5O3 444,2036 MH+, hallada: 444,2072, Tr = 2,39 min.

Se disolvió parcialmente 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-4-{[(5-metil-3-isoxazolil)metil]amino}-6-(metiloxi)-3

5 quinolincarboxamida (para su preparación, véase el Producto intermedio 67, 280 mg) en acetonitrilo (30 ml), y se añadió bis(trifluoroacetoxi)yodo]benceno (800 mg). Se agitó la mezcla de reacción a 50 ºC durante 12 h y luego se concentró a sequedad. Se recogió el producto en bruto en agua y se extrajo con DCM. Se secó la fase orgánica sobre Na2SO4, se filtró y se evaporó a sequedad. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice eluyendo con DCM/metanol (95:5) y después se recogió el producto obtenido en dietiléter, dando 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-1

10 [(5-metil-3-isoxazolil)metil]-8-(metiloxi)-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona (200 mg). EMCL: Tr = 2,52 min.

Ejemplo 53: 7-(3,5-Dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-(2-tienilmetil)-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2ona

A una solución agitada magnéticamente de 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-6-(metiloxi)-N4-(2-tienilmetil)-3,4

15 quinolindiamina (para su preparación, véase el Producto intermedio 68, 1,5 g) en acetonitrilo (50 ml) en un matraz de 250 ml dotado de un condensador de reflujo, se añadió bis(trifluoroacetoxi)yodo]benceno (2,37 g). Se agitó la mezcla de reacción a 20 ºC durante 2 h, después se calentó a 50 ºC durante 1 h. Se añadió agua a la reacción y la mezcla se extrajo con DCM. Se secó la fase orgánica sobre Na2SO4, se filtró y se concentró a sequedad. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (25 g, sílice BP-SUP) eluyendo con DCM y DCM/metanol (95:5). Se

20 trituró el residuo resultante en éter isopropílico caliente, se filtró y se secó, dando 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8(metiloxi)-1-(2-tienilmetil)-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona en 2 lotes (1,114 g en total) en forma de un polvo de color marrón. Masa exacta calculada de la EMAR-CL: EN+ para C21H18N4O3S: 407,1178 MH+; hallada: 407,1215; Tr = 2,38 min.

Se agitó una solución de N-[7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-4-{[(2,4-dimetil-1,3-tiazol-5-il)metil]amino}-6-(metiloxi)-3

5 quinolinil]tetrahidro-2H-piran-4-carboxamida (para su preparación, véase el Producto intermedio 71, 0,37 g) en ácido acético durante 2 horas a 100 ºC. Se evaporó la mezcla de reacción a sequedad y después se recogió el residuo en una solución saturada de bicarbonato de sodio. Se extrajo la mezcla con DCM y se secó la fase orgánica sobre Na2SO4 y se evaporó a sequedad. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, eluyendo con DCM/metanol ((8:2, luego 94:6), dando un sólido pegajoso de color beis (0,3 g). Se trituró este último

10 con diisopropiléter caliente, dando 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-1-[(2,4-dimetil-1,3-tiazol-5-il)metil]-8-(metiloxi)-2(tetrahidro-2H-piran-4-il)-1H-imidazo[4,5-c]quinolina (0,22 g) en forma de un sólido blanco. Masa exacta calculada de la EMAR-CL: EN+ para C27H30N5O3S1: 504,2069 MH+, hallada: 504,2021.

Ejemplo 55: 7-(3,5-Dimetil-4-isoxazolil)-1-[(5-metil-2-furanil)metil]-8-(metiloxi)-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5c]quinolin-2-ona

Se agitó una mezcla de 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-4-{[(5-metil-2-furanil)metil]amino}-6-(metiloxi)-3quinolincarboxamida (para su preparación, véase el Producto intermedio 72, 177 mg) y bis(trifluoroacetoxi)yodo]benceno (375 mg) en acetonitrilo (10 ml) durante una noche a temperatura ambiente. Se evaporó la mezcla de reacción a sequedad, se recogió el residuo en agua y se extrajo con DCM. Se secó la fase

20 orgánica sobre Na2SO4, se filtró y se evaporó, dando 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-1-[(5-metil-2-furanil)metil]-8(metiloxi)-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona (10 mg) en forma de un polvo de color beis. Masa exacta calculada de la EMAR-CL: EN+ para C22H21N4O4: 405,1563 MH+, hallada: 405,1626; Tr = 2,39.

Ejemplo

Estructura Nombre

56

3-[7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-2-oxo-1-(2tienilmetil)-1,2-dihidro-3H-imidazo[4,5-c]quinolin-3il]propanonitrilo

Ejemplo

Estructura Nombre

57

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-1-(2-tienilmetil)-1,3-dihidro-2Himidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

58

1-[(5-cloro-2-tienil)metil]-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8(metiloxi)-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

59

3-[1-[(5-cloro-2-tienil)metil]-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8(metiloxi)-2-oxo-1,2-dihidro-3H-imidazo[4,5-c]quinolin-3il]propanonitrilo

60

1-[(5-cloro-2-tienil)metil]-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8(metiloxi)-2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-1H-imidazo[4,5c]quinolina

Ejemplo

Estructura Nombre

61

1-[(5-cloro-2-piridinil)metil]-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8(metiloxi)-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

62

1-[(5,6-dicloro-2-piridinil)metil]-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8(metiloxi)-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

63

3-[7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-2-oxo-1-(3tienilmetil)-1,2-dihidro-3H-imidazo[4,5-c]quinolin-3il]propanonitrilo

64

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-(2-piridinilmetil)-1H[1,2,3]triazolo[4,5-c]quinolina

Ejemplo

Estructura Nombre

65

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-[(1R)-1-(2piridinil)etil]-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-c]quinolina

66

{7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-[(1R)-1-feniletil]1H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-il}acetonitrilo

67

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-[(1R)-1-feniletil]-2[2-(3-piridinil)etil]-1H-imidazo[4,5-c]quinolina

68

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-2-(tetrahidro-2Hpiran-4-il)-1-{[3-(trifluorometil)fenil]metil}-1H-imidazo[4,5c]quinolina

69

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-(fenilmetil)-2(tetrahidro-2H-piran-4-ilmetil)-1H-imidazo[4,5-c]quinolina

Ejemplo

Estructura Nombre

70

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-2-[2-(4-morfolinil)etil]1-(fenilmetil)-1H-imidazo[4,5-c]quinolina

71

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-2-[(metiloxi)metil]-1(fenilmetil)-1H-imidazo[4,5-c]quinolina

72

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-[(1R)-1-feniletil]1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

73

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-3-[2-(metiloxi)etil]-1[(1R)-1-feniletil]-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

74

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-1-[(1R)-1-(4-fluorofenil)etil]-8(metiloxi)-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

Ejemplo

Estructura Nombre

75

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-2-metil-8-(metiloxi)-1-[(1R)-1feniletil]-1H-imidazo[4,5-c]quinolina

76

1-[(3,5-diclorofenil)metil]-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8(metiloxi)-2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-1H-imidazo[4,5c]quinolina

77

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-1-[(1R)-1-feniletil]-2-(tetrahidro2H-piran-4-il)-1H-imidazo[4,5-c]quinolina

78

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-2-(1-metiletil)-1-(1-feniletil)-1Himidazo[4,5-c]quinolina

79

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-(fenilmetil)-1,3dihidro-2H-imidazo[4,5-c]-1,5-naftiridin-2-ona

Ejemplo

Estructura Nombre

80

1-(ciclohexilmetil)-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]-1,5-naftiridin-2-ona

81

2-(1,1-dimetiletil)-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1(fenilmetil)-1H-imidazo[4,5-c]quinolina

82

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-(fenilmetil)-2-propil1H-imidazo[4,5-c]quinolina

83

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-2-(tetrahidro-2Hpiran-4-il)-1-{2-[(trifluorometil)oxi]fenil}-1H-imidazo[4,5c]quinolina

84

1-[(2-clorofenil)metil]-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

Ejemplo

Estructura Nombre

85

1-[(4-clorofenil)metil]-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)2-[2-(metiloxi)etil]-1H-imidazo[4,5-c]quinolina

86

1-[(2-cloro-4-fluorofenil)metil]-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8(metiloxi)-2-[(metiloxi)metil]-1H-imidazo[4,5-c]quinolina

87

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-2-[(metiloxi)metil]-1(1-feniletil)-1H-imidazo[4,5-c]quinolina

88

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-2-[(metiloxi)metil]-1[(1R)-1-feniletil]-1H-imidazo[4,5-c]quinolin-4-carbonitrilo

89

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-[(1R)-1-feniletil]-2(2-piridinilmetil)-1H-imidazo[4,5-c]quinolina

Ejemplo

Estructura Nombre

90

7-(3,5-d metil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-[(1R)-1-feniletil]-2(3-piridinilmetil)-1H-imidazo[4,5-c]quinolina

91

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-2-(2-furanilmetil)-8-(metiloxi)-1[(1S)-1-feniletil]-1H-imidazo[4,5-c]quinolina

92

1-[(3,4-diclorofenil)metil]-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8(metiloxi)-2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-1H-imidazo[4,5c]quinolina

93

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-2-(tetrahidro-2Hpiran-4-il)-1-({3-[(trifluorometil)oxi]fenil}metil)-1Himidazo[4,5-c]quinolina

Ejemplo

Estructura Nombre

94

1-(ciclohexilmetil)-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

95

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-2-[2-(metiloxi)etil]-1{2-[(trifluorometil)oxi]fenil}-1H-imidazo[4,5-c]-1,5-naftiridina

96

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-{[2(metiloxi)fenil]metil}-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2ona

97

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-3-(3-metilbutil)-8-(metiloxi)-1(fenilmetil)-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

98

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-3-[2-(metiloxi)etil]-1(fenilmetil)-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

Ejemplo

Estructura Nombre

99

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-3-metil-8-(metiloxi)-1-(fenilmetil)1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

100

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-(fenilmetil)-2(tetrahidro-2H-piran-4-il)-1H-imidazo[4,5-c]quinolina-4carbonitrilo

101

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-1-[(2-fluorofenil)metil]-8(metiloxi)-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

102

1-[(4-clorofenil)metil]-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)2-[(metiloxi)metil]-1H-imidazo[4,5-c]quinolina

Ejemplo

Estructura Nombre

103

1-[(2,4-difluorofenil)metil]-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8(metiloxi)-2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-1H-imidazo[4,5c]quinolina

104

3-[1-[(4-clorofenil)metil]-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8(metiloxi)-1H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-il]propanonitrilo

107

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-{[4(metiloxi)fenil]metil}-2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-1Himidazo[4,5-c]quinolina

106

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-2-(tetrahidro-2Hpiran-4-il)-1-{[4-(trifluorometil)fenil]metil}-1H-imidazo[4,5c]quinolina

Ejemplo

Estructura Nombre

107

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-1-{[3-fluoro-5(trifluorometil)fenil]metil}-8-(metiloxi)-2-(tetrahidro-2H-piran4-il)-1H-imidazo[4,5-c]quinolina

108

7-(3,5-dimetil-1H-pirazol-4-il)-8-(metiloxi)-1-[(1R)-1-feniletil]2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-1H-imidazo[4,5-c]quinolina

109

1-[2-(1,1-dimetiletil)fenil]-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8(metiloxi)-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]-1,5-naftiridin-2-ona

110

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-1-[(4-fluorofenil)metil]-8(metiloxi)-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

Ejemplo

Estructura Nombre

111

3-[7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-2-oxo-1(fenilmetil)-1,2-dihidro-3H-imidazo[4,5-c]quinolin-3il]propanonitrilo

112

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-2-fenil-1-(fenilmetil)1H-imidazo[4,5-c]quinolina

113

1-[(3-clorofenil)metil]-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

114

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-(1-feniletil)-1,3dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

Ejemplo

Estructura Nombre

115

1-{4-cloro-2-[(trifluorometil)oxi]fenil}-7-(3,5-dimetil-4isoxazolil)-8-(metiloxi)-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin2-ona

116

3-[1-[(4-clorofenil)metil]-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8(metiloxi)-2-oxo-1,2-dihidro-3H-imidazo[4,5-c]quinolin-3il]propanonitrilo

117

1-[(2,4-difluorofenil)metil]-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8(metiloxi)-2-[(metiloxi)metil]-1H-imidazo[4,5-c]quinolina

118

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-[(1R)-1-fenilpropil]1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

Ejemplo

Estructura Nombre

119

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-[(1R)-1-(4metilfenil)etil]-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

120

1-[(4-cloro-3-fluorofenil)metil]-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8(metiloxi)-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

121

1-[(1R)-1-(4-clorofenil)etil]-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8(metiloxi)-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

122

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-2-(tetrahidro-2Hpiran-4-il)-1-({4-[(trifluorometil)oxi]fenil}metil)-1Himidazo[4,5-c]quinolina

Ejemplo

Estructura Nombre

123

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-{[4(metilsulfonil)fenil]metil}-2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-1Himidazo[4,5-c]quinolina

124

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-[(1R)-1-feniletil]1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolina-2-tiona

125

7-(3,5-dimetil-1H-pirazol-4-il)-8-(metiloxi)-1-[(1R)-1fenilpropil]-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

126

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-{2[(trifluorometil)oxi]fenil}-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]-1,5naftiridin-2-ona

Ejemplo

Estructura Nombre

127

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-3-[2-(metiloxi)etil]-1-(fenilmetil)1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

128

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-(2-feniletil)-1,3dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

129

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-2-propil-1-{2[(trifluorometil)oxi]fenil}-1H-imidazo[4,5-c]quinolina

130

1-[(4-clorofenil)metil]-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)3-[2-(metiloxi)etil]-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2ona

Ejemplo

Estructura Nombre

131

1-[(3,4-diclorofenil)metil]-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8(metiloxi)-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

132

1-[1-(4-clorofenil)etil]-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

133

1-[(2-cloro-4-fluorofenil)metil]-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8(metiloxi)-2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-1H-imidazo[4,5c]quinolina

134

1-[(4-cloro-2-metilfenil)metil]-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8(metiloxi)-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

Ejemplo

Estructura Nombre

135

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-{[2(trifluorometil)fenil]metil}-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5c]quinolin-2-ona

136

7-(3,5-dimetil-1H-pirazol-4-il)-8-(metiloxi)-1-[(1R)-1-feniletil]1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

137

1-[2-(1,1-dimetiletil)fenil]-7-(3,5-dimetil-1H-pirazol-4-il)-8(metiloxi)-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

138

1-[(4-clorofenil)metil]-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-3-etil-8(metiloxil)-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

Ejemplo

Estructura Nombre

139

1-[(4-clorofenil)metil]-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-3-metil-8(metiloxi)-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

140

1-[(4-cloro-2-fluorofenil)metil]-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8(metiloxi)-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

141

1-[(3,5-diclorofenil)metil]-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8(metiloxi)-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-c]quinolina

142

7-(3,5-dimetil-1H-pirazol-4-il)-1-[(1R)-1-feniletil]-2(tetrahidro-2H-piran-4-il)-1H-imidazo[4,5-c]quinolina

Ejemplo

Estructura Nombre

143

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-2-(1-feniletil)-1-(fenilmetil)-1Himidazo[4,5-c]quinolina

144

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-1-(2,2-dimetilpropil)-2-(1-feniletil)1H-imidazo[4,5-c]quinolina

145

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-[2-(metiloxi)fenil]1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

146

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-{[4(metiloxi)fenil]metil}-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2ona

Ejemplo

Estructura Nombre

147

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-({2[(trifluorometil)oxi]fenil}metil)-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5c]quinolin-2-ona

148

1-[(2,4-diclorofenil)metil]-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8(metiloxi)-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

149

1-[(4-clorofenil)metil]-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)3-(2-metilpropil)-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

150

1-[(4-clorofenil)metil]-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-1H-imidazo[4,5-c]quinolina

Ejemplo

Estructura Nombre

151

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-4-metil-1-(fenilmetil)-1,3-dihidro2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

152

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-1-[(3-fluorofenil)metil]-1,3-dihidro2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

153

3-[7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-2-oxo-1-(fenilmetil)-1,2-dihidro3H-imidazo[4,5-c]quinolin-3-il]propanonitrilo

154

1-[(4-clorofenil)metil]-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

Ejemplo

Estructura Nombre

155

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-[(1S)-1-feniletil]-1,3dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

156

1-{[4-(1,1-dimetiletil)fenil]metil}-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8(metiloxi)-2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-1H-imidazo[4,5c]quinolina

157

1-[2-(1,1-dimetiletil)fenil]-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-2-fenil1H-imidazo[4,5-c]quinolina

158

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-1-(fenilmetil)-1H[1,2,3]triazolo[4,5-c]quinolina

Ejemplo

Estructura Nombre

159

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-1-(2-feniletil)-1,3-dihidro-2Himidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

160

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-2-(1-metiletil)-1-(2-metilfenil)-1Himidazo[4,5-c]quinolina

161

1-(ciclohexilmetil)-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-2-(1-feniletil)1H-imidazo[4,5-c]quinolina

162

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-3-metil-1-(fenilmetil)-1,3-dihidro2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

Ejemplo

Estructura Nombre

163

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-1-[2-(metiloxi)fenil]-1,3-dihidro2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

164

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-1-[(2-fluorofenil)metil]-1,3-dihidro2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

165

1-[(3-clorofenil)metil]-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-1,3-dihidro2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

166

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-1-metil-8-(metiloxi)-2-fenil-1Himidazo[4,5-c]quinolina

Ejemplo

Estructura Nombre

167

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-1-metil-8-(metiloxi)-2-{2[(trifluorometil)oxi]fenil}-1H-imidazo[4,5-c]quinolina

168

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-{(1R)-1-[4(metiloxi)fenil]etil}-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2ona

169

4-{[7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-2-oxo-2,3-dihidro1H-imidazo[4,5-c]quinolin-1-il]metil}benzonitrilo

170

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-{[4(trifluorometil)fenil]metil}-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5c]quinolin-2-ona

Ejemplo

Estructura Nombre

171

1-[(1R)-1-(4-clorofenil)etil]-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8(metiloxi)-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-c]quinolina

172

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-({4[(trifluorometil)oxi]fenil}metil)-1H-[1,2,3]triazolo[4,5c]quinolina

173

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-1-{[2-(metiloxi)fenil]metil}-1,3dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

174

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-1-(2,6-dimetilfenil)-1,3-dihidro-2Himidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

Ejemplo

Estructura Nombre

175

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-1-(3-piridinilmetil)-1,3-dihidro-2Himidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

176

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-1-[(5-metil-2-furanil)metil]-1,3dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

177

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-1-{[3-(metiloxi)fenil]metil}-1,3dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

178

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-(8-quinolinil)-1,3dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

Ejemplo

Estructura Nombre

179

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-1-metil-8-(metiloxi)-2-(fenilmetil)1H-imidazo[4,5-c]quinolina

180

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-1-(4-fluoro-2-metilfenil)-8(metiloxi)-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

181

1-{[2,4-bis(metiloxi)fenil]metil}-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8(metiloxi)-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

182

1-[2-(1,1-dimetiletil)fenil]-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-1H[1,2,3]triazolo[4,5-c]quinolina

Ejemplo

Estructura Nombre

183

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-1-{2-[(trifluorometil)oxi]fenil}-1H[1,2,3]triazolo[4,5-c]quinolina

184

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-1-[(3-metilfenil)metil]-1,3-dihidro2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

185

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-1-(2-fluorofenil)-8-(metiloxi)-1,3dihidro-2H-imidazo[4,5-c]-1,5-naftiridin-2-ona

186

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-1-[2-(tnfluorometil)fenil]-1,3dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

Ejemplo

Estructura Nombre

187

7-(3,5-dimetil-1H-pirazol-4-il)-1-[(1R)-1-(4-fluorofenil)etil]-2(tetrahidro-2H-piran-4-il)-1H-imidazo[4,5-c]quinolina

188

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-2-metil-1-fenil-1H-imidazo[4,5c]quinolina

189

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-1-(2-metilfenil)-1,3-dihidro-2Himidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

190

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-1-[2-(metiloxi)-4-nitrofenil]-1,3dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

Ejemplo

Estructura Nombre

191

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-1-({3[(trifluorometil)oxi]fenil}metil)-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5c]quinolin-2-ona

192

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-1-({2[(trifluorometil)oxi]fenil}metil)-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5c]quinolin-2-ona

193

1-(3-clorofenil)-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-1,3-dihidro-2Himidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

194

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-1-(2-fluorofenil)-1,3-dihidro-2Himidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

Ejemplo

Estructura Nombre

195

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-1-(2-fluorofenil)-2-(1-metiletil)-1Himidazo[4,5-c]quinolina

196

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-1-(tetrahidro-2-furanilmetil)-1,3dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

197

1-(ciclohexilmetil)-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-1,3-dihidro-2Himidazo[4,5-c]-1,6-naftiridin-2-ona

198

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-1-[2-(metiloxi)-5-nitrofenil]-1,3dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

Ejemplo

Estructura Nombre

199

1-(3-clorofenil)-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-2-metil-1Himidazo[4,5-c]quinolina

200

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-1-{[2-(trifluorometil)fenil]metil}1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

201

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-1-fenil-1,3-dihidro-2Himidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

202

1-(5-cloro-2-fluorofenil)-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-1,3dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

Ejemplo

Estructura Nombre

203

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-1-{3-[(trifluorometil)oxi]fenil}-1,3dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

204

1-(ciclopropilmetil)-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-1,3-dihidro2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

205

7-(3,5-dimetil-1 H-pirazol-4-il)-8-(metiloxi)-1-[(1R)-1-(2piridil)etil]-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

206

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-(2-piridinil)-1,3dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

Ejemplo

Estructura Nombre

207

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-1-(fenilmetil)-1,3-dihidro-2Himidazo[4,5-c]-1,6-naftiridin-2-ona

208

1-ciclohexil-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-1,3-dihidro-2Himidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

209

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-1-(2-fluorofenil)-1,3-dihidro-2Himidazo[4,5-c]-1,6-naftiridin-2-ona

210

1-[2-(1,1-dimetiletil)fenil]-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-1,3dihidro-2H-imidazo[4,5-c]-1,6-naftiridin-2-ona

Ejemplo

Estructura Nombre

211

1-[2-(1,1-dimetiletil)fenil]-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8(metiloxi)-1H-imidazo[4,5-c]quinolina

212

4-[7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-2-oxo-2,3-dihidro-1Himidazo[4,5-c]quinolin-1-il]benzonitrilo

213

1-[4-(1,1-dimetiletil)fenil]-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-1,3dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

214

1-ciclopropil-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-1,3-dihidro-2Himidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

Ejemplo

Estructura Nombre

215

[7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-(fenilmetil)-1Himidazo[4,5-c]quinolin-2-il]metanol

216

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-2-[2-(metiloxi)etil]-1(fenilmetil)-1H-imidazo[4,5-c]quinolina

217

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-(fenilmetil)-2-(4piridinil)-1H-imidazo[4,5-c]quinolina

218

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-(fenilmetil)-2-(1piperidinilmetil)-1H-imidazo[4,5-c]quinolina

219

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-2-(4-morfolinilmetil)1-(fenilmetil)-1H-imidazo[4,5-c]quinolina

Ejemplo

Estructura Nombre

220

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-2-[2-(metiloxi)etil]-1{2-[(trifluorometil)oxi]fenil}-1H-imidazo[4,5-c]quinolina

221

1-{4-cloro-2-[(trifluorometil)oxi]fenil}-7-(3,5-dimetil-4isoxazolil)-8-(metiloxi)-2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-1Himidazo[4,5-c]quinolina

222

4-{[7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-2-oxo-2,3-dihidro1H-imidazo[4,5-c]quinolin-1-il]metil}benzoato de metilo

223

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-1-[1-(4-fluorofenil)etil]-8(metiloxi)-2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-1H-imidazo[4,5c]quinolina

Ejemplo

Estructura Nombre

224

1-[1-(4-clorofenil)etil]-7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-1H-imidazo[4,5-c]quinolina

225

7-(3,5-dimetil-1H-pirazol-4-il)-1-[(1R)-1-(4-fluorofenil)etil]-8(metiloxi)-2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-1H-imidazo[4,5c]quinolina

226

7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-(2-metil-3-piridinil)1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

Compuestos de referencia

Los datos experimentales de los procedimientos de EMCL D y F a los que se hace referencia en los compuestos de 5 referencia que figuran a continuación son los siguientes:

La EMCL (Procedimiento D) se realizó en una columna Supelcosil LCABZ + PLUS (3 μm, DI de 3,3 cm x 4,6 mm) eluyendo con HCO2H al 0,1 % y acetato de amonio 0,01 M en agua (disolvente A) y acetonitrilo al 95 % y HCO2H al 0,05 % en agua (disolvente B), usando el siguiente gradiente de elución: 0 a 0,7 minutos B al 0 %, 0,7 a 4,2 minutos B al 0 →100 %, 4,2 a 5,3 minutos B al 100 %, 5,3 a 5,5 minutos B al 0 →100 % a un caudal de 3 ml/minuto. Los

10 espectros de masas (EM) se registraron en un espectrómetro de masas Fisons VG Platform usando los modos de ionización positiva por electronebulización [(IEN+, dando iones moleculares [M+H]+ y [M+NH4]+] o ionización negativa por electronebulización [(IEN -, dando ión molecular [MH] -]. Los datos analíticos de este aparato se dan con el siguiente formato: [M+H]+ o [M-H] -

La EMCL (Procedimiento F) se realizó en una columna Sunfire C18 (DI de 30 mm x 4,6 mm, diámetro de

15 empaquetamiento de 3,5 μm) a 30 grados centígrados, eluyendo con solución de ácido trifluoroacético al 0,1 % v/v en agua (disolvente A) y solución de ácido trifluoroacético al 0,1 % v/v en acetonitrilo (disolvente B) usando el siguiente gradiente de elución: 0 a 0,1 min de B al 3 %, 0,1 a 4,2 min de B al 3-100 %, 4,2 a 4,8 min de B al 100 %, 4,8 a 4,9 min de B al 100-3 %, 4,9 a 5,0 min de B al 3 % a un caudal de 3 ml/min. La detección UV fue un promedio de la señal de longitud de onda de 210 nm a 350 nm, y los espectros de masas se registraron en un espectrómetro

20 de masas usando ionización por electronebulización positiva. Los datos de ionización están redondeados al número entero más cercano.

EMAR-CL: La HPLC analítica se llevó a cabo en una columna de Uptisphere-HSC (3 μm, DI de 33 x 3 mm) eluyendo con acetato de amonio 0,01 M en agua (disolvente A) y acetonitrilo al 100 % (disolvente B ), usando el siguiente gradiente de elución: 0 a 0,5 minutos B al 5 %, 0,5 a 3,75 minutos B al 5 →100 %, 3,75 a 4,5 minutos B al 100 %, 4,5 a 5 minutos B al 5 →100 %, 5 a 5,5 minutos B al 5 % a un caudal de 1,3 ml/minuto. Los espectros de masas (EM) se

5 registraron en un espectrómetro de masas Micromass LCT usando los modos de ionización positiva por electronebulización [(IEN+, dando iones moleculares MH+] o ionización negativa por electronebulización [(IEN -, dando iones moleculares (M-H) -].

CCF (cromatografía en capa fina) se refiere al uso de placas de CCF comercializadas por Merck recubiertas con gel de sílice 60 F254.

10 Compuesto de referencia A: 2-metil-6-(metiloxi)-4H-3,1-benzoxazin-4-ona

Se calentó una solución de ácido 5-metoxiantranílico (Lancaster) (41,8 g, 0,25 mol) a reflujo en anhídrido acético (230 ml) durante 3,5 h antes de concentrarla a presión reducida. Se concentró dos veces el compuesto en bruto en presencia de tolueno antes filtrarlo y se lavó dos veces con éter, dando el compuesto del título (33,7 g, rendimiento

15 del 71 %) en forma de un sólido marrón; EMCL (Procedimiento D): m/z 192 [M + H]+, Tr = 1,69 min.

Compuesto de referencia B: [2-amino-5-(metiloxi)fenil](4-clorofenil)metanona

A una solución de 2-metil-6-(metiloxi)-4H-3,1-benzoxazin-4-ona (para su preparación, véase el compuesto de referencia A) (40,0 g, 0,21 mol) en una mezcla de tolueno/éter (2/1) (760 ml) a 0 ºC, se añadió gota a gota una 20 solución de bromuro de 4-clorofenilmagnesio (170 ml, 1 M en dietiléter, 0,17 mol). Se dejó calentar la mezcla de reacción hasta la temperatura ambiente y se agitó durante 1 h antes de inactivarla con HCl 1 N (200 ml). Se extrajo la capa acuosa con EtOAc (3 x 150 ml) y se lavaron las fases orgánicas combinadas con salmuera (100 ml), se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron a presión reducida. Se disolvió el compuesto en bruto en etanol (400 ml) y se añadió HCl 6 N (160 ml). Se calentó la mezcla de reacción a reflujo durante 2 h antes de

25 concentrarla hasta un tercio del volumen. Se filtró el sólido resultante y se lavó dos veces con éter antes de suspenderlo en EtOAc, y se neutralizó con hidróxido de sodio 1 N. Se extrajo la capa acuosa con EtOAc (3 x 150 ml) y se lavaron las fases orgánicas combinadas con salmuera (150 ml), se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El compuesto del título se obtuvo en forma de un sólido de color amarillo (39 g, rendimiento del 88 %); EMCL (Procedimiento D): m/z 262 [M + H]+, Tr = 2,57 min.

30 Se disolvió cloruro de N-{[(9H-fluoren-9-ilmetil)oxi]carbonil}-L-α-aspartil-metilo (Int. J. Peptide Protein Res. 1992, 40,

5 13-18) en CHCl3 (270 ml), y se añadió [2-amino-5-(metiloxi)fenil](4-clorofenil)metanona (para su preparación, véase el Compuesto de referencia B) (53 g, 0,2 mol). Se agitó la mezcla resultante a 60 ºC durante 1 h antes de enfriarla y concentrarla hasta un 60 % en volumen. Se añadió éter a 0 ºC, y se filtró y desechó el precipitado resultante. Se concentró el filtrado a presión reducida y se usó sin purificación adicional.

Compuesto de referencia D: [(3S)-5-(4-clorofenil)-7-(metiloxi)-2-oxo-2,3-dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-310 il]acetato de metilo

A una solución de N1-[2-[(4-clorofenil)carbonil]-4-(metiloxi)fenil]-N2-{[(9H-fluoren-9-ilmetil)oxi]carbonil}-L-αasparaginato de metilo (para su preparación, véase el Compuesto de referencia C) (supuestamente, 0,2 mol) en DCM (500 ml), se añadió Et3N (500 ml, 3,65 mol), y se calentó la mezcla resultante a reflujo durante 24 h antes de 15 concentrarla. Se disolvió la amina en bruto resultante en 1,2-DCE (1,5 l), y se añadió cuidadosamente AcOH (104 ml, 1,8 mol). A continuación, se agitó la mezcla de reacción a 60 ºC durante 2 h antes de concentrarla al vacío y disolverla en DCM. Se lavó la capa orgánica con HCl 1 N y se extrajo la capa acuosa con DCM (x 3). Se lavaron las capas orgánicas combinadas dos veces con agua y salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron a presión reducida. Se recristalizó el sólido en bruto en MeCN, conduciendo al compuesto del título

20 (51 g) en forma de un sólido de color amarillo pálido. Se pudo concentrar el filtrado y se recristalizó en MeCN, dando otros 10 g del producto deseado Rf = 0,34 (DCM/MeOH: 95/5). EMAR MH+ calculada para C19H1835CIN2O4 373,0955; hallada 373,0957.

Se agitó una suspensión de P4S10 (36,1 g, 81,1 mmol) y Na2CO3 (8,6 g, 81,1 mmol) en 1,2-DCE (700 ml) a

5 temperatura ambiente durante 2 h antes de añadir [(3S)-5-(4-clorofenil)-7-(metiloxi)-2-oxo-2,3-dihidro-1H-1,4benzodiazepin-3-il]acetato de metilo (para su preparación, véase el Compuesto de referencia D) (16,8 g, 45,1 mmol). Se agitó la mezcla resultante a 70 ºC durante 2 h antes de enfriarla y filtrarla. Se lavó el sólido dos veces con DCM y se lavó el filtrado con solución saturada de bicarbonato de sodio y salmuera. Se secó la capa orgánica sobre Na2SO4, se filtró y se concentró a presión reducida. El producto en bruto se purificó por cromatografía ultrarrápida en

10 gel de sílice (DCM/MeOH: 99/1), dando el compuesto del título (17,2 g, rendimiento del 98 %) en forma de un sólido amarillento. EMCL (Procedimiento D): m/z 389 [M(35Cl) + H]+, Tr = 2,64 min. EMAR MH+ calculada para C19H1835CIN2O3S: 389,0727; hallada: 389,0714.

Compuesto de referencia F: [(3S)-2-[(1Z)-2-acetilhidrazin]-5-(4-clorofenil)-7-(metiloxi)-3H-1,4-benzodiazepin-3il]acetato de metilo

A una suspensión de [(3S)-5-(4-clorofenil)-7-(metiloxi)-2-tioxo-2,3-dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-3-il]acetato de metilo (por su preparación, véase el compuesto de referencia E (9,0 g, 23,2 mmol) en THF (300 ml) a 0 ºC, se añadió monohidrato de hidrazina (3,4 ml, 69,6 mmol) gota a gota. Se agitó la mezcla de reacción durante 5 h entre 5 ºC y 15 ºC antes de enfriarla hasta 0 ºC. A continuación, se añadió Et3N (9,7ml, 69,6 mmol) lentamente, y se añadió

20 cloruro de acetilo (7,95 ml, 69,6 mmol) gota a gota. Se dejó calentar la mezcla hasta la temperatura ambiente durante 16 h antes de concentrarla a presión reducida. Se disolvió el producto en bruto en DCM y se lavó con agua. Se secó la capa orgánica sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío, dando el compuesto del título en bruto (9,7 g, rendimiento del 98 %) que se usó sin purificación adicional. Rf = 0,49 (DCM/MeOH: 90/10).

Se suspendió el [(3S)-2-[(1Z)-2-acetilhidrazin]-5-(4-clorofenil)-7-(metiloxi)-3H-1,4-benzodiazepin-3-il]acetato de metilo

5 en bruto (para su preparación, véase el Compuesto de referencia F) (supuestamente, 9,7 g) en THF (100 ml), y se añadió AcOH (60 ml) a temperatura ambiente. Se agitó la mezcla de reacción a esta temperatura durante 2 días antes de concentrarla a presión reducida. Se trituró el sólido en bruto en i-PR2O y se filtró, dando el compuesto del título (8,7 g, 91 % en 3 etapas) en forma de un sólido de color blanquecino. EMAR MH+ calculada para C21H20CIN4O3: 411,1229; hallada: 411,1245.

10 Compuesto de referencia H: Ácido [(4S)-6-(4-clorofenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1,2,4]triazolo[4,3a][1,4]benzodiazepin-4-il]acético

A una solución de [(4S)-6-(4-clorofenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1,2,4]triazolo[4,3-a][1,4]benzodiazepin-4-il]acetato de metilo (para su preparación, véase la Compuesto de referencia G) (7,4 g, 18,1 mmol) en THF (130 ml) a temperatura

15 ambiente, se añadió hidróxido de sodio 1 N (36,2 ml, 36,2 mmol). Se agitó la mezcla de reacción a esta temperatura durante 5 h antes de inactivarla con HCl 1 N (36,2 ml) y concentrarla al vacío. A continuación, se añadió agua y se extrajo la capa acuosa con DCM (x 3), y se secaron las capas orgánicas combinadas sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron a presión reducida, dando el compuesto del título (7 g, rendimiento del 98 %) en forma de un sólido de color amarillo pálido.

20 Compuesto de referencia H: [5-({[(4S)-6-(4-clorofenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1,2,4]triazolo[4,3a][1,4]benzodiazepin-4-il]acetil}amino)pentil]carbamato de 1,1-dimetiletilo

Se agitó una mezcla de ácido [(4S)-6-(4-clorofenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1,2,4]triazolo[4,3-a][1,4]benzodiazepin-4il]acético (para su preparación, véase el Compuesto de Referencia G) (1,0 g, 2,5 mmol), HATU (1 0,9 g, 5 mmol ) y DIPEA (0,88ml, 5 mmol) durante 80 minutos a temperatura ambiente, y a esto se añadió (4-aminobutil)carbamato de 1,1-dimetiletilo (1 ml, 5,0 mmol, disponible en Aldrich). Se agitó la mezcla de reacción a temperatura ambiente

5 durante 2 h antes de concentrarla. Se recogió el residuo en diclorometano y se lavó con HCl 1 N. Se extrajo la capa acuosa con diclorometano dos veces. Se lavó la capa orgánica con hidróxido de sodio 1 N, seguido de una solución saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio y se concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida sobre sílice usando diclorometano/metanol 95/5, dando el compuesto del título en forma de un sólido amarillo (1,2 g). EMCL (Procedimiento D): Tr = 3,04 min.

10 Compuesto de Referencia J: Trifluoroacetato de N-(5-aminopentil)-2-[(4S)-6-(4-clorofenil)-1-metil-8-(metiloxi)4H-[1,2,4]triazolo[4,3-a][1,4]benzodiazepin-4-il]acetamida

A una solución de [5-({[(4S)-6-(4-clorofenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1,2,4]triazolo[4,3-a][1,4]benzodiazepin-4il]acetil}amino)pentil]carbamato de 1,1-dimetiletilo (para su preparación, véase el Compuesto de Referencia H)

15 (0,2 g, 0,34 mmol ) en diclorometano (3 ml), se añadió ácido trifluoroacético (0,053 ml, 0,68 mmol) gota a gota a 0 ºC. Se agitó la mezcla de reacción durante 3 h de 0 ºC hasta la temperatura ambiente. Se concentró la mezcla de reacción a sequedad, produciendo el compuesto del título en forma de un aceite higroscópico de color amarillo (200 mg). EMCL (Procedimiento D): Tr = 2,33 min. EMAR MH+ calculada para C25H29CIN6O2: 481,2119; hallada: 481,2162.

20 Compuesto de referencia K: Mezcla de los isómeros 5 y 6 de Alexa Fluor 488-N-(5-aminopentil)-2-[(4S)-6-(4clorofenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1,2,4]triazolo[4,3-a][1,4]benzodiazepin-4-il]acetamida

Se disolvió trifluoroacetato de N-(5-aminopentil)-2-[(4S)-6-(4-clorofenil)-1-metil-8-(metiloxi)-4H-[1,2,4]triazolo[4,3a][1,4]benzodiazepin-4-il]acetamida (para su preparación, véase el Compuesto de referencia J) (7,65 mg, 25 0,013 mmol) en N,N-dimetilformamida (DMF) (300 μl), y se añadió a succinimidiléster de ácido carboxílico-Alexa Fluor 488 (5 mg, 7,77 μmol, mezcla de isómeros 5 y 6, disponible en Invitrogen, número de producto A-20100) en un tubo de centrifugación Eppendorf. Se añadió base de Hunig (7,0 μl, 0,040 mmol) y se mezcló la mezcla con movimientos vorticiales durante una noche. Después de 18 h, se evaporó la mezcla de reacción a sequedad y se volvió a disolver el residuo en DMSO/agua (50 %, lt; 1 ml en total), se aplicó a una columna preparativa Phenomenex 30 Jupiter C18 y se eluyó con un gradiente de A al 95 %:B al 5 % a B al 100 % (A = ácido trifluoroacético al 0,1 % en

agua; B = TFA al 0,1 %/acetonitrilo al 90 %/agua al 10 %) a un caudal de 10ml/min durante 150 minutos. Se combinaron las fracciones impuras y se volvieron a purificar usando el mismo sistema. Se combinaron las fracciones y se evaporaron, produciendo el producto del título (2,8 mg) en forma de una mezcla de los 2 regioisómeros mostrados. EMCL (Procedimiento F): MH+ = 999; Tr = 0,88 min.

Procedimientos de ensayos biológicos

Ensayo de unión con anisotropía de fluorescencia

La unión de los compuestos de fórmula (I) con los bromodominios BRD2, BRD3 y BRD4 se evaluó mediante un ensayo de unión con anisotropía de fluorescencia.

Se incubaron la proteína bromodominio, el ligando fluorescente (Compuesto de referencia K, véase más arriba) y una concentración variable de compuesto de ensayo juntos hasta alcanzar el equilibrio termodinámico en condiciones tales que, en ausencia del compuesto de ensayo, el ligando fluorescente se une significativamente (gt; 50 %) y, en presencia de una concentración suficiente de un potente inhibidor, la anisotropía del ligando fluorescente no unido es mensurablemente diferente al valor unido.

Todos los datos se normalizaron con respecto a la media de 16 pocillos de control altos y 16 bajos por placa. A continuación, se aplicó un ajuste de curva de cuatro parámetros de la siguiente forma

en la que “a” es el mínimo, “b” es la pendiente de Hill, “c” es la pCI50 y “d” es el máximo.

Se expresaron los bromodominios humanos recombinantes (Bromodominio BRD2 (1-473), bromodominio BRD3 (1435) y bromodominio BRD4 (1-477)) en células de E. coli (en vector pET15b) con un marcador de 6 His en el extremo N. Se extrajo el bromodominio marcado con His de células de E. coli usando 0,1 mg/ml de lisozima y ultrasonidos. A continuación, se purificó el bromodominio mediante cromatografía de afinidad en una columna HisTRAP HP, eluyendo con un gradiente lineal de imidazol 10-500 mM durante 20 Cv. Se completó una purificación adicional con columna de exclusión por tamaño de calidad Superdex 200 preparativa. La proteína purificada se almacenó a -80 ºC en HEPES 20 mM, pH 7,5 y NaCl 100 mM.

Protocolo para el bromodominio BRD2: Se disolvieron todos los componentes en tampón de composición HEPES 50 mM, pH 7,4, NaCl 150 mM y CHAPS 0,5 mM con concentraciones finales de bromodominio 2 de 75 nM y ligando fluorescente de 5 nM. Se añadieron 10 μl de esta mezcla de reacción usando un Multidrop micro a pocillos que contenían 100 nl de diversas concentraciones de compuesto de ensayo o vehículo de DMSO (1 % final) en placa de microtitulación de bajo volumen negra de 384 pocillos Greiner y se equilibró durante 60 minutos a oscuras a temperatura ambiente. La anisotropía de fluorescencia se leyó en Envision (λex = 485 nm, λem = 530 nm; dicroico -505 nm).

Protocolo para el bromodominio BRD3: Se disolvieron todos los componentes en tampón de composición HEPES 50 mM, pH 7,4, NaCl 150 mM y CHAPS 0,5 mM con concentraciones finales de bromodominio 3 de 75 nM y ligando fluorescente de 5 nM. Se añadieron 10 μl de esta mezcla de reacción usando un Multidrop micro a pocillos que contenían 100 nl de diversas concentraciones de compuesto de ensayo o vehículo de DMSO (1 % final) en placa de microtitulación de bajo volumen negra de 384 pocillos Greiner y se equilibró durante 60 minutos a oscuras a temperatura ambiente. La anisotropía de fluorescencia se leyó en Envision (λex = 485 nm, λem = 530 nm; dicroico -505 nm).

Protocolo para el bromodominio BRD4: Se disolvieron todos los componentes en tampón de composición HEPES 50 mM, pH 7,4, NaCl 150 mM y CHAPS 0,5 mM con concentraciones finales de bromodominio 4 de 75 nM y ligando fluorescente de 5 nM. Se añadieron 10 μl de esta mezcla de reacción usando un Multidrop micro a pocillos que contenían 100 nl de diversas concentraciones de compuesto de ensayo o vehículo de DMSO (1 % final) en placa de microtitulación de bajo volumen negra de 384 pocillos Greiner y se equilibró durante 60 minutos a oscuras a temperatura ambiente. La anisotropía de fluorescencia se leyó en Envision (λex = 485 nm, λem = 530 nm; dicroico -505 nm).

Todos los ejemplos (a excepción de los Ejemplos 22, 38 y 210-225) se analizaron en los ensayos descritos anteriormente. Todos los compuestos ensayados resultaron tener una pCI50 ≥ 5,0 en uno o más de los ensayos de BRD2, BRD3 y BRD4 descritos anteriormente. Los Ejemplos 1, 3-8, 10-21, 23-31, 33-37, 39-43, 45-61, 63-158, 160, 162-170, 172, 173, 176-181, 183-185 y 187 resultaron tener una pCI50 ≥ 6,0 en uno o más de los ensayos BRD2, BRD3 y BRD4 descritos anteriormente.

La activación de células monocíticas por agonistas de los receptores de tipo toll tales como lipopolisacárido bacteriano (LPS) se traduce en la producción de mediadores inflamatorios clave, incluyendo el TNFα. Dichas vías se consideran en general fundamentales para la fisiopatología de una serie de trastornos autoinmunes e inflamatorios.

Se diluyen los compuestos de ensayo, dando un intervalo de concentraciones apropiadas, y se añade 1 ul de las soluciones madre diluidas a los pocillos de una placa de 96 pocillos. Tras la adición, se incuban las placas de sangre entera (130 ul) a 37 grados (CO2 al 5 %) durante 30 min antes de la adición de 10 ul de LPSa 2,8 ug/ml, diluidos en RPMI 1640 completo (concentración final = 200 ng/ml), dando un volumen total de 140 ul por pocillo. Después de una incubación adicional durante 24 horas a 37 grados, se añaden 140 ul de PBS a cada pocillo. Se tapan herméticamente las placas, se agitan durante 10 minutos y después se centrifugan (2.500 rpm x 10 min). Se retiran 100 ul del sobrenadante y se analizan los niveles de TNFα mediante inmunoensayo (por lo general, mediante tecnología MesoScale Discovery) bien inmediatamente o después de un almacenamiento a -20 grados. Se generan curvas de respuesta a la dosis para cada compuesto a partir de los datos, y se calcula un valor de CI50.

En el ensayo anterior, se analizaron los Ejemplos 11, 12, 15, 27, 31,33, 36, 108 y 126, y se descubrió que tenían una pCI50 ≥ 5,5.

Medición de secreción de IL-6 inducida por LPS en sangre entera

La activación de células monocíticas por agonistas de los receptores de tipo toll tales como lipopolisacárido bacteriano (LPS) se traduce en la producción de mediadores inflamatorios clave, incluyendo el IL-6. Dichas vías se consideran en general fundamentales para la fisiopatología de una serie de trastornos autoinmunes e inflamatorios.

Se diluyen los compuestos de ensayo, dando un intervalo de concentraciones apropiadas, y se añade 1 ul de las soluciones madre diluidas a los pocillos de una placa de 96 pocillos. Tras la adición, se incuban las placas de sangre entera (130 ul) a 37 grados (CO2 al 5 %) durante 30 min antes de la adición de 10 ul de LPSa 2,8 ug/ml, diluidos en RPMI 1640 completo (concentración final = 200 ng/ml), dando un volumen total de 140 ul por pocillo. Después de una incubación adicional durante 24 horas a 37 grados, se añaden 140 ul de PBS a cada pocillo. Se tapan herméticamente las placas, se agitan durante 10 minutos y después se centrifugan (2.500 rpm x 10 min). Se retiran 100 ul del sobrenadante y se analizan los niveles de IL-6 mediante inmunoensayo (por lo general, mediante tecnología MesoScale Discovery) bien inmediatamente o después de un almacenamiento a -20 grados. Se generan curvas de respuesta a la dosis para cada compuesto a partir de los datos, y se calcula un valor de CI50.

En el ensayo anterior, se analizaron los Ejemplos 11, 36-37, 39-40, 45 y 51, y se descubrió que tenían una pCI50 ≥ 5,5.

Estos datos demuestran que los inhibidores de bromodominios analizados en los dos ensayos de sangre completa anteriores inhibieron la producción de los mediadores inflamatorios clave TNFα y/o IL-6.

Modelo murino de endotoxemia in vivo

Las altas dosis de endotoxina (lipopolisacárido bacteriano) administradas a los animales producen un síndrome de shock profundo incluyendo una fuerte respuesta inflamatoria, la desregulación de la función cardiovascular, la insuficiencia orgánica y, en última instancia, la muerte. Este patrón de respuesta es muy similar a la sepsis y al choque séptico que se producen en los seres humanos, donde la respuesta del cuerpo a una infección bacteriana significativa puede ser igualmente peligrosa.

Para probar los compuestos para su uso en los grupos de la invención de ocho ratones Balb/c macho, se les administró una dosis letal de 15 mg/kg de LPS mediante inyección intraperitoneal. Noventa minutos más tarde, los animales recibieron por vía intravenosa vehículo (ciclodextrina al 20 %, etanol al 1 % en agua apirógena) o compuesto (10 mg/kg). Se controló la supervivencia de los animales a los 4 días.

Número de animales supervivientes a los 4 días (sumado a través de múltiples experimentos repetidos)

Vehículo 4/66 (6 %) Compuesto del Ejemplo 11 55/66 (83 %) Compuesto del Ejemplo 31 9/24 (38 %)

Estos datos demuestran que los inhibidores de bromodominios analizados en el modelo anterior dieron lugar a un efecto significativo en la supervivencia de los animales tras la administración intravenosa.

Ensayo oncológico de crecimiento celular

Se cultivaron líneas celulares humanas (n = 33, que comprendían 15 líneas celulares hemo, 14 líneas celulares de mama y otras 4 líneas celulares) en RPMI-1640 que contenía suero bovino fetal al 10 %, se sembraron 1 000 células viables por pocillo en placas negras de poliestireno de fondo plano de 384 pozos (Greiner Nº 781086) en 48 μl de medios de cultivo. Se colocaron todas las placas en condiciones de CO2 al 5 % y 37 ºC durante una noche. Al día siguiente, se cosechó una placa con CellTiter-Glo (CTG, Promega Nº G7573) durante un tiempo igual a la medición 0 (T0) y se añadió el compuesto (20 puntos de valoración de 14,7 uM a 7 pM) a las placas restantes. La concentración final de DMSO en todos los pocillos fue del 0,15 %. Se incubaron las células durante 72 horas o el

5 tiempo indicado y se reveló cada placa con reactivo CellTiter-Glo usando un volumen equivalente al volumen de cultivo celular de los pocillos. Se agitaron las placas durante aproximadamente 2 minutos y se leyó la señal quimioluminiscente en el Analyst GT (Molecular Devices) o Lector de Placas EnVision (Perkin Elmer).

Los resultados se expresaron como un porcentaje de T0 y se representaron frente a la concentración del compuesto. El valor T0 se normalizó con respecto al 100 %, representando el número de células en el momento de la adición del

10 compuesto, y los datos de concentración-respuesta se ajustaron con un ajuste de curva de 4 parámetros usando el programa informático XLfit (modelo 205). La concentración que inhibió el crecimiento celular en un 50 % (gCI50) es el punto medio de la quot;ventana de crecimiento” (entre T0 y el control de DMSO). El valor de Ymín-T0 se determina restando el valor T0 (100 %) al valor Ymín (%) determinado a partir del ajuste de la curva de respuesta a la concentración. Los valores de los pocillos sin células se restaron de todas las muestras para la corrección de fondo.

15 Con el ensayo anterior, se analizó el compuesto de los Ejemplos 11 y 36, y se descubrió que tienen una gCI50 en el intervalo de 18 a 11.100 nM en todas las líneas celulares, más específicamente en el intervalo de 118 a 1.036 nM para las líneas celulares hemo y de 432 a 11.100 nM para las líneas celulares de mama.

Estos datos demuestran que el inhibidor de bromodominios analizado en el ensayo anterior inhibió el crecimiento celular en un grupo de líneas celulares de oncología.

Claims (12)

1. REIVINDICACIONES

   20 1. Un compuesto de fórmula (I) o una sal del mismo

   en la que: A es un grupo seleccionado de entre los siguientes:

   •

   X representa CH o N;

   •

   Y representa CH o N, con la condición de que cuando X es N, Y es CH;

   •

   Rx representa O o S;

   10 • R1 representa alquilo C1-6, cicloalquilo C3-6, un heterociclilo de 5 o 6 miembros, un grupo aromático o un grupo heteroaromático, en el que el grupo aromático o el grupo heteroaromático está opcionalmente sustituido con uno a tres grupos seleccionados de entre:

   halógeno, hidroxi, ciano, nitro, alquilo C1-6, alcoxi C1-4, haloalquilo C1-4, haloalcoxi C1-4, hidroxialquilo C1-4, alcoxi C1-4-alquilo C1-4, alcoxicarbonilo C1-4, alquilsulfonilo C1-4, alquilsulfoniloxi C1-4, alquilsulfonil C1-4-alquilo 15 C1-4 y alquilsulfonamido C1-4;

   •

   R2 es hidrógeno o alquilo C1-6, R2a

   •

   representa:

   H, alquilo C1-6, haloalquilo C1-6, (CH2)mciano, (CH2)mOH, (CH2)malcoxi C1-6, (CH2)mhaloalcoxi C1-6, (CH2)mhaloalquil C1-6(CH2)mC(O)NRaRb, (CH2)mNRaRb, y (CH2)mC(O)CH3, (CHR6)pfenilo opcionalmente

   20 sustituido con alquilo C1-6, alcoxi C1-6, ciano-haloalcoxi C1-4, haloalquilo C1-4, (CHR6)pheteroaromático, (CHR6)pheterociclilo, en los que Ra representa H, alquilo C1-6 o heterociclilo; Rb representa H o alquilo C1-6 o

   25 Ra y Rb, junto con el N al que están unidos, forman un heterociclilo 5 o 6 miembros;

   •

   R2b representa H, alquilo C1-6, (CH2)2alcoxi C1-6, (CH2)2ciano o (CH2)mfenilo, (CH2)2heterociclilo;

   •

   R3 representa hidrógeno;

   •

   R4 representa hidrógeno, ciano o alquilo C1-6;

   • Z representa O; o cuando R4 representa hidrógeno y A es un grupo seleccionado de entre (i) o (ii) y en el que 30 Rx representa O, Z puede representar además NH;

   •

   R5 representa hidrógeno o alcoxi C1-6;

   •

   R6 representa hidrógeno o alquilo C1-6;

   •

   m representa 1, 2 o 3;

   •

   n representa 0, 1 o 2; y

   •

   p representa 0, 1 o 2.

2. 2. Un compuesto o una sal del mismo de acuerdo con la reivindicación 1, que es un compuesto de fórmula (1B)

   en la que R1, R2, R3 y n son como se han definido para los compuestos de fórmula (I) and R5 es -OCH3.
3. 3. Un compuesto o una sal del mismo de acuerdo con la reivindicación 1, que es un compuesto de fórmula (1C)

   en la que R1, R2, R3, R2a y n se han definido anteriormente para los compuestos de fórmula (I).
4. 4. Un compuesto o una sal del mismo de acuerdo con la reivindicación 3, en el que R2a representa H, alquilo C1-3,

   10 (CH2)mOH, (CH2)m-alcoxi C1-3, (CH2)mNRaRb o (CHR6)pheterociclilo, en los que Ra representa H, alquilo C1-3 o heterociclilo; Rb representa H o alquilo C1-3, o Ra y Rb, junto con el N al que están unidos, forman un heterociclilo 5 o 6 miembros;

   15 R6 representa H o alquilo C1-3; m representa 1, 2 o 3; y p representa 0, 1, 2.

5. 5.

   Un compuesto o una sal del mismo de acuerdo con la reivindicación 3, en el que R2a es tetrahidropiranilo.

6. 6.

   Un compuesto o una sal del mismo de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-5, en el que n es 1.

   20 7. Un compuesto o una sal del mismo de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-6, en el que R2 es hidrógeno o metilo.

7. 8.

   Un compuesto o una sal del mismo de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-7, en el que R1 representa un grupo heteroaromático opcionalmente sustituido con uno o dos grupos seleccionados de entre hidroxi,

8. 9.

   Un compuesto o una sal del mismo de acuerdo con la reivindicación 8, en el que el grupo heteroaromático se selecciona de entre piridilo, furanilo, tienilo, isoxazolilo, tiazolilo, pirazolilo, pirazinilo y pirimidinilo.

9. 10.

   Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, que es 7-(3,5-dimetil-4-isoxazolil)-8-(metiloxi)-1-[(1R)-1-(2piridinil)etil]-1,3-dihidro-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona

   o una sal del mismo.
10. 11. Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-10 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

    10 12. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo según lo definido en la reivindicación 11 y uno o más vehículos, diluyentes o excipientes farmacéuticamente aceptables.
11. 13. Un compuesto o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo según lo definido en la reivindicación 11 para su uso en terapia.

    15 14. Un compuesto o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo según lo definido en la reivindicación 11 para su uso en el tratamiento de una afección autoinmune y/o inflamatoria crónica.
12. 15. Un compuesto o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo según lo definido en la reivindicación 11 para su uso en el tratamiento del cáncer.