ES2444581T3 - Uso de nifurtimox para el tratamiento de giardiasis - Google Patents

Abstract

Uso de nifurtimox para la preparación de medicamentos para el tratamiento de enfermedades causadas porgiardias

Description

Uso de nifurtimox para el tratamiento de giardiasis

La presente invención se refiere al uso de nifurtimox para el tratamiento de giardiasis, en particular en perros y gatos.

5 La actividad de compuestos nitroheterocíclicos contra enfermedades por protozoos es conocida (1).

Los protozoos incluyen organismos mononucleares cuya estructura básica es una célula eucariota. En la sistemática estricta existen sin embargo grandes diferencias en el modo de vida, la morfología y el metabolismo bioquímico de los diferentes filos, clases, géneros y especies. Por ello, las sustancias químicas, dependiendo de su punto de ataque y su mecanismo de acción, no actúan, generalmente, de forma similar contra todos los protozoos, sino sólo

10 contra grupos especiales de protozoos (2, 3, 4).

Hasta la fecha sólo se ha descrito la actividad del nifurtimox contra especies de protozoos del género Tripanosoma, por ejemplo Trypanosoma brucei y Trypanosoma cruzi (5). Los tripanosomas poseen un flagelo, que surge del cuerpo basal ("cinetosoma") y que conforma junto con el cuerpo base una membrana ondulante. Los parásitos con este tipo básico morfológico pertenecen al orden de los cinetoplástidos en la sistemática de protozoos. Los

15 tripanosomas se reproducen principalmente en el plasma sanguíneo y se transmiten por artrópodos chupadores de sangre. Estos organismos patógenos causan la enfermedad de Chagas ("tripanosomiasis") en los seres humanos. El nifurtimox es actualmente casi el único compuesto que actúa contra este organismo patógeno. Esta actividad se basa probablemente en la inhibición de la tripanotión reductasa, una enzima especial de los tripanosomas. Esta enzima está ausente en otros protozoos patógenos.

20 En una solicitud de patente en trámite paralelo, describimos la actividad del nifurtimox contra los tricomonádidos.

Respecto a la giardiasis, se trata de una enfermedad infecciosa causada por parásitos unicelulares flagelados del género Giardia. Este género pertenece al orden de los diplomonádidos. Un representante importante es Giardia lamblia (sin. Giardia intestinalis, Giardia duodenalis). En el mundo hasta un 50 % de muestras tomadas a perros y gatos dan positivas, en Centroeuropa del 2 al 7 %. Una infección causa, en particular en los animales muy jóvenes

25 de hasta medio año de vida, diarreas prolongadas, y es la causante de deposiciones parcialmente sanguinolientas debidas a la inflamación del duodeno y el yeyuno. Las enfermedades crónicas pueden provocar retrasos prolongados en el crecimiento (6).

Se han descrito más de 7 genotipos (A-G) para aislados de giardias. Para los seres humanos son infecciosos los genotipos A + B, que a su vez también pueden estar presentes en gatos, perros, castores, ovejas, terneros, caballos,

30 cerdos y monos. Por ello, la enfermedad se considera como una "zoonosis": Los seres humanos pueden contagiarse por agua potable contaminada con cisteína procedente de perros y gatos. Las infecciones por giardias se incluyen mundialmente entre las causantes más frecuentes de los denominados "brotes epidémicos de transmisión hídrica" en los seres humanos (7).

La infección tiene lugar la mayor parte de las veces por vía oral, por agua potable contaminada o por heces

35 infecciosas, en forma de quiste. En el intestino salen del quiste los denominados trofozoitos. Un trofozoito mide 1117 x 7-11 !m, tiene dos núcleos y 8 flagelos. A diferencia de otros grupos de parásitos flagelados, los trofozoitos de giardias no penetran intracelularmente en epitelios. Los trofozoitos disponen de una ventosa y usando la misma se anclan en el lumen intestinal de seres humanos, monos, cerdos, perros y gatos, en su lado exterior. Allí se reproducen mediante fisión binaria. Un ataque masivo bloquea y modifica la superficie absorbente del intestino y

40 causa diarreas parcialmente sanguinolientas. En el intestino ciego se forman de nuevo quistes, que con una prepatencia de 5 a 16 días después de la primera infección se excretan de nuevo a través de los excrementos. Los quistes pueden excretarse durante un periodo de 4 a 5 semanas y se mantienen infecciosos durante varias semanas (8, 9).

Morfológica y bioquímicamente existen grandes diferencias respecto al orden de los cinetoplástidos: los

45 diplomonádidos poseen 8 flagelos y dos núcleos, pero no tienen ni mitocondrias ni complejo de Golgi y dentro de su desarrollo no se conoce ningún estadio intracelular. A diferencia de los tripanosomas, las proteínas de superficie de las giardias no poseen ancla GPI (10).

Para perros y gatos se recomienda actualmente una terapia con metronidazol (Clont®, Flagyl®, Elyzol®) con una dosis de 12,5-22 mg/kg de peso corporal, 2 veces al día durante 5 días. (11). El metronidazol y otros 5

50 nitroimidazoles se activan mediante la enzima piruvato-ferredoxin-oxidorreductasa, formando radicales nitro libres que después atacan al metabolismo de ADN del parásito. Por ello, son también adecuados para la terapia contra la giardiasis en perros los iprinidazoles (Ipropan®, 126 mg/l de agua potable durante 7 días) y el tinidazol (Fasigyn® 44 mg/kg de peso corporal durante 3 días) (12,13).

Del grupo de los bencimidazoles se recomiendan mebendazol, albendazol o fenbendazol (vía oral durante 3 días).

55 Los bencimidazoles interfieren con la polimerización de los microtúbulos, uniéndose a la subunidad de la β-tubulina. Los microtúbulos son elementos importantes del citoesqueleto de los parásitos, que estabilizan de un modo particular el disco adhesivo de los trofozoitos.

En seres humanos se usan también antibióticos (por ejemplo paramomicina, 25-35 mg/kg/día en tres dosis durante 7-10 días), quinacrina y furazolidona (100 mg tres veces al día durante 7 días) o nitazoxanida (500 mg dos veces al día durante 3 días) (14).

5 Muchas de estas clases de principios activos se usan desde hace tiempo para el tratamiento de enfermedad por giardias y para la mayor parte pudo demostrarse el desarrollo de resistencia, lo que ha llevado a fracasos terapéuticos documentados. Por lo tanto, el desarrollo de nuevos principios activos y conceptos de tratamiento es absolutamente necesario (15).

Sorprendentemente, ahora hemos descubierto la actividad del nifurtimox contra giardias. Esta actividad no se ha

10 descrito hasta ahora. La actividad se dirige contra estadios de microorganismos patógenos del intestino y previene la formación de quistes.

Por lo tanto, la invención se refiere por consiguiente:

al uso de nifurtimox para la preparación de medicamentos para el tratamiento de enfermedades causadas por giardias.

15 El nifurtimox es el compuesto de la fórmula (I):

Dado el caso también se considera el uso en forma de sales habituales farmacéuticamente aceptables. Además, también se considera, dado el caso, el uso de hidratos o de otros solvatos de los principios activos o, dado el caso, de sus sales.

La aplicación puede realizarse tanto profiláctica como también terapéuticamente. La actividad se dirige contra

20 diferentes estadios de microorganismos patógenos; el nifurtimox actúa en particular contra los estadios de microorganismos patógenos del intestino y previene la formación de quistes.

Entre las giardias tienen una importancia particular Giardia lamblia (sin. Giardia intestinalis, Giardia duodenalis), Giardia bovis y Giardia caprae. Las especies indicadas en el presente documento se mencionan frecuentemente como sinónimos entre ellas y son poco específicas del huésped.

25 Según la invención, se tratan animales (carnívoros y animales silvestres), preferentemente mamíferos, como por ejemplo caballos, cerdos, conejos, en particular perros o gatos.

Entre los mamíferos es preferente, según una forma de realización, el tratamiento de animales silvestres y en particular de carnívoros (perros, gatos).

También se considera a los seres humanos para un tratamiento, ya que pueden infectarse por agua potable 30 contaminada con las especies de giardias patógenas de animales.

La giardiasis aparece sobre todo en animales jóvenes, preferentemente en edades de 3 a 10 semanas y causa diarreas graves y una disminución del aumento de peso.

La aplicación de los principios activos se realiza directamente o en forma de preparaciones adecuadas mediante aplicación enteral, parenteral o dérmica.

35 La aplicación enteral de los principios activos se realiza, por ejemplo, por vía oral en forma de polvos, supositorios, comprimidos, cápsulas, pastas, pociones, gránulos, brebajes, bolos, alimentos medicados o agua potable medicada. La aplicación dérmica se realiza, por ejemplo, en forma de inmersión (sumersión), pulverización (aerosol), baño, lavado, vertido (en el dorso (“pour on”) y en la cruz (“spot-on”)) y espolvoreo. La aplicación parenteral se realiza, por ejemplo, en forma de inyección (intramuscular, subcutánea, intravenosa, intraperitoneal) o mediante implantes.

40 Son preparaciones adecuadas:

Soluciones tales como soluciones para inyección, soluciones orales, concentrados para administración oral tras dilución, soluciones para uso sobre la piel o en las cavidades corporales, formulaciones para verter, geles;

Emulsiones y suspensiones para administración oral o dérmica, tales como inyección, preparaciones semisólidas;

Formulaciones en las que el principio activo se administra en una base de pomada o en una base de emulsión de aceite en agua o de agua en aceite;

5 Preparaciones sólidas tales como polvos, premezclas o concentrados, gránulos, pellas, comprimidos, bolos, cápsulas, aerosoles e inhalados, cuerpos moldeados que contienen el principio activo.

Las soluciones de inyección se administran, por ejemplo, por vía intravenosa, intramuscular y subcutánea.

Las soluciones orales se administran directamente. Los concentrados se administran oralmente después de una dilución previa a la concentración de administración.

10 Las soluciones para aplicar sobre la piel se aplican mediante goteo, unción, frotando, salpicando, pulverizando o se aplican por inmersión (sumersión), baño o lavado.

Los geles se aplican o extienden sobre la piel, o se introducen en cavidades corporales.

Las formulaciones para verter se vierten o se rocían sobre zonas limitadas de la piel; la sustancia activa bien penetra la piel y actúa sistemáticamente o bien se distribuye sobre la superficie corporal.

15 Las emulsiones son bien del tipo de agua en aceite o bien del tipo de aceite en agua y pueden administrarse oralmente, dérmicamente o como inyecciones.

Las suspensiones se pueden administrar oralmente, dérmicamente o como inyecciones.

Las preparaciones semisólidas pueden administrarse oralmente o dérmicamente. Sólo se diferencian de las suspensiones y emulsiones descritas anteriormente por tener una viscosidad más elevada.

20 Para la preparación de preparaciones sólidas se mezclan los principios activos con los vehículos adecuados añadiendo, dado el caso, coadyuvantes, y se aplican en la forma deseada.

La administración oral es particularmente preferente según la invención, siendo los comprimidos particularmente preferentes de entre las formas habituales de administración oral.

Todas las formas farmacéuticas mencionadas anteriormente, los aditivos y coadyuvantes que hay que usar y la 25 preparación de estas formas farmacéuticas son conocidas, en principio, por los expertos.

Los principios activos pueden estar presentes en combinación con sinergistas o con otros principios activos. Pueden mencionarse como principios activos adicionales:

Agentes contra la coccidiosis tales como robenidina o amprolium en combinación, en parte, con antagonistas de ácido fólico (por ejemplo pirimetamina, epiroprim, trimetoprim); antibióticos tales como por ejemplo clindamicina,

30 paramomicina o espiramicina; sulfamidas tales como por ejemplo sulfadimetoxina, sulfadimidina, sulfadiazina; antihelmínticos tales como por ejemplo depsipéptidos cíclicos (por ejemplo emodépsido, PF1022A), derivados de amidina (tribendimidina, amidantel, Bay d 9216), praziquantel o benzoato de bencilo.

Para un efecto en el tratamiento a largo plazo es recomendable desinfectar regularmente los lugares de tenencia de los animales.

35 Los antihelmínticos, en particular los octadepsipéptidos cíclicos tales como PF1022A o emodépsido son adecuados para la lucha contra las infecciones causadas por nematodos en seres humanos y animales (16). A este respecto, se destruyen todos los nematodos con importancia económica en el conducto gastrointestinal, entre otros, también en perros. También se sabe que en caso de no tratamiento de los animales, la respuesta inmunitaria del GALT (= tejido linfoide asociado al aparato intestinal) está dirigida contra los gusanos (17). Se habla, a este respecto, de una

40 respuesta Th2 del sistema inmunitario. Normalmente, en caso de no infección, la respuesta inmunitaria está equilibrada, es decir, el oponente de la respuesta Th2, es decir la respuesta Th1, que está dirigida contra protozoos, virus y bacterias, es tan alta como la respuesta Th2.

Si en el animal de referencia, por ejemplo en el perro, existe infección por nematodos, por ejemplo infección por anquilostomas, ascárides o tricocéfalos, el equilibrio se altera, lo que conduce, de forma exagerada, a una infección 45 por protozoos en el intestino, causada, por ejemplo, por giardias. Si se cura ahora la infección por nematodos usando el antihelmíntico adecuado, se potencia indirectamente la defensa contra giardias, lo que provoca que la respuesta Th1 contra estos protozoos cobre importancia. En la combinación de nifurtimox con antihelmíntico, el nifurtimox puede entonces combatir la infección por giardias más fácilmente, ya que ésta, parcialmente, se mantiene dentro de los límites por la respuesta Th1, aumentada indirectamente por la lucha contra los nematodos, es decir, el

50 número de parásitos en el intestino ya ha disminuido.

Según una forma de realización preferente, el nifurtimox se usa en combinación con antihelmínticos.

Los antihelmínticos que se usan con preferencia son ciclodepsipéptidos (ciclooctadepsipéptidos). Se pueden mencionar como tales: Compuestos de la fórmula (IIa)

en la que Z representa hidrógeno, N-morfolinilo, NH2, mono-o dimetilamino. Además, se pueden mencionar compuestos de la fórmula (lIb) siguiente:

en la que

R1, R2, R3, R4, independientemente unos de otros, representan hidrógeno, alquilo C1-C10 o arilo, en particular fenilo, 10 que dado el caso están sustituidos con hidroxilo, alcoxi C1-C10 o halógeno.

Los compuestos de la fórmula general (IIb) son conocidos y pueden obtenerse según los procedimientos descritos en los documentos EP-A-382 173, DE-A 4 317 432, DE-A 4 317 457, DE-A 4 317 458, EP-A-634 408, EP-A-718 293, EP-A-872 481, EP-A-685 469, EP-A-626 375, EP-A-664 297, EP-A-669 343, EP-A-787 141, EP-A-865 498, EP-A903 347.

15 Entre los depsipéptidos cíclicos con 24 átomos anulares se encuentran también compuestos de la fórmula general (IIc)

en la que

R1a, R2a, R11a y R12a, independientemente unos de otros, representan alquilo C1-C8, halogenoalquilo C1-C8, cicloalquilo C3-C6, aralquilo, arilo,

R3a, R5a, R7a, R9a, independientemente unos de otros, representan hidrógeno o alquilo C1-C8 de cadena lineal o

5 ramificado, que dado el caso puede estar sustituido con hidroxilo, alcoxi C1-C4, carboxi, -C(=O)-OH, carboxamida, O-C(=O)-NH2, imidazolilo, indolilo, guanidino, -SH o alquil C1-C4-tio y además representan arilo o aralquilo, que pueden estar sustituidos con halógeno, hidroxilo, alquilo C1-C4, alcoxi C1-C4,

R4a, R6a, R8a, R10a, independientemente unos de otros, representan hidrógeno, alquilo C1-C5 de cadena lineal, alquenilo C2-C6, cicloalquilo C3-C7, que dado el caso pueden estar sustituidos con hidroxilo, alcoxi C1-C4, carboxi,

10 carboxamida, imidazolilo, indolilo, guanidino, SH o alquil C1-C4-tio, así como arilo o aralquilo que pueden estar sustituidos con halógeno, hidroxilo, alquilo C1-C4, alcoxi C1-C4, así como sus isómeros ópticos y racematos.

Son compuestos preferentes de la fórmula (IIc) aquellos en los que

R1a, R2a, R11a y R12a, independientemente unos de otros, representan metilo, etilo, propilo, isopropilo, n-. s-, t-butilo o fenilo, que dado el caso está sustituido con halógeno, alquilo C1-C4, OH, alcoxi C1-C4, así como representan bencilo

15 o feniletilo, que dado el caso pueden estar sustituidos con los restos indicados para el fenilo;

R3a a R10a tienen el significado indicado anteriormente.

Son compuestos particularmente preferentes de la fórmula (IIc) aquellos en los que

R1a,R2a, R11a y R12a, independientemente unos de otros, representan metilo, etilo propilo, isopropilo o n-, s-, t-butilo,

R3a, R5a, R7a, R9a representan hidrógeno, alquilo C1-C8 de cadena lineal o ramificado, en particular metilo, etilo,

20 propilo, i-propilo, n-, s-, t-butilo, que dado el caso pueden estar sustituidos con alcoxi C1-C4, en particular metoxi, etoxi, imidazolilo, indolilo o alquil C1-C4-tio, en particular metiltio, etiltio, además representan fenilo, bencilo o fenetilo, que dado el caso pueden estar sustituidos con halógeno, en particular con cloro.

R4a, R6a, R8a, R10a, independientemente unos de otros, representan hidrógeno, metilo, etilo, n-propilo, n-butilo, vinilo, ciclohexilo, que dado el caso pueden estar sustituidos con metoxi, etoxi, imidazolilo, indolilo, metiltio, etiltio, así como

25 representan isopropilo, s-butilo, y representan además fenilo, bencilo o feniletilo dado el caso sustituidos con halógeno.

Los compuestos de la fórmula (IIc) pueden obtenerse también según los procedimientos descritos en los documentos EP-A-382 173, DE-A 4 317 432, DE-A 4 317 457, DE-A 4 317 458, EP-A-634 408, EP-A-718 293, EP-A872 481, EP-A-685 469, EP-A-626 375, EP-A-664 297, EP-A-669 343, EP-A-787 141, EP-A-865 498, EP-A-903

30 347.

Como depsipéptido muy particularmente preferente se tiene el compuesto PF 1022, conocido por el documento EP-OS 382 173; se trata de un compuesto de la fórmula (IIa) en la que ambos sustituyentes Z representan hidrógeno. Por lo tanto, el PF 1022 tiene la fórmula (IId) siguiente:

Otros depsipéptidospreferidos son compuestos conocidos por la solicitud PCT WO 93/19053 y, concretamente, compuestos de la fórmula (IIa),

en la que

Z representa N-morfolinilo, NH2, mono-o dimetilamino.

De entre estos compuestos es muy particularmente preferente el depsipéptido emodépsido (PF 1022-221). Se trata de un compuesto de la fórmula (IIa) en la que ambos restos Z representan el resto morfolinilo. La DCI emodépsido la representa el compuesto con el nombre sistemático: Ciclo[(R)-lactoil-N-metil-L-leucil-(R)-3-(p-morfolinofenil)lactoil-Nmetil-L-leucil-(R)-lactoil-N-metil-L-leucil-(R)-3-(p-morfolino-fenil)lactoil-N-metil-L-leucilo. El emodépsido se describe en el documento WO 93/19053 y tiene la fórmula siguiente:

10 Los principios activos adecuados para combinación mencionados anteriormente pueden, dependiendo de su estructura, estar presentes en formas estereoisómeras o como mezclas de estereoisómeros, por ejemplo como enantiómeros o racematos. Tanto las mezclas de estereoisómeros como también los estereoisómeros puros pueden usarse según la invención.

Además, dado el caso, pueden usarse: sales de principios activos con ácidos o bases farmacéuticamente 15 aceptables y también solvatos, en particular hidratos, de los principios activos o de sus sales.

La aplicación en combinación significa que el nifurtimox y el segundo principio activo, en particular un ciclodepsipéptido, pueden aplicarse bien por separado o bien de forma temporalmente escalonada. En este caso el nifurtimox y el segundo principio activo se formulan en cada caso como medicamentos separados.

También es posible una aplicación simultánea. Según una forma de realización adecuada para este caso, los 20 principios activos de la combinación se formulan conjuntamente en un agente.

Las preparaciones listas para su uso contienen el principio activo correspondiente, habitualmente, en concentraciones de 10 ppm al 20 % en peso, preferentemente del 0,1 al 10 % en peso.

Las preparaciones que se diluyen antes de la aplicación contienen el principio activo correspondiente en concentraciones del 0,5 al 90 % en peso, preferentemente del 5 al 50 % en peso. En soluciones concentradas para 5 dosificar en agua potable, el principio activo correspondiente está presente, por ejemplo, en concentraciones del 0,5 al 20 % en peso, preferentemente del 1 al 15 % en peso, de modo particularmente preferente del 2 al 10 % en peso.

En general, se ha demostrado que es ventajoso administrar cantidades de aproximadamente 0,05 a aproximadamente 400 mg, preferentemente de 0,1 a 200 mg, de principio activo por kg de peso corporal por día para obtener resultados eficaces.

10 En la mezcla con otros agentes contra la coccidiosis, antibióticos o antihelmínticos, los principios activos según la invención están presentes en una relación de 1 a 0,01-50 hasta 1 a 1-50.

Los principios activos también pueden administrarse junto con el pienso o el agua potable de los animales.

Los alimentos y el pienso contienen de 0,005 a 1.000 ppm, preferentemente de 0,05 a 500 ppm, de principio activo en combinación con un material comestible adecuado.

15 Dichos alimentos y piensos pueden usarse tanto con fines curativos como también con fines profilácticos.

Como complemento del tratamiento con nifurtimox puede usarse un agente desinfectante. Con el agente desinfectante se desinfectan los sitios de alojamiento de los animales (o de los seres humanos) durante el tratamiento. El agente desinfectante se encarga preferentemente de la destrucción de las formas de quiste excretadas para una eliminación de los estadios parasitarios de larga duración e impide, con ello, una reinfección

20 después de finalizar el tratamiento. Por lo tanto, el desinfectante puede usarse ya antes del tratamiento con nifurtimox, pero es mejor, por regla general, usarlo simultáneamente al tratamiento con nifurtimox o al menos antes de finalizarlo.

Los desinfectantes son, por ejemplo, los basados en fenoles biocidas y/o derivados de fenol. Por fenoles biocidas se entiende los compuestos de fenol que portan un grupo OH libre y que presentan una actividad biocida. Estos fenoles

25 pueden portar otros sustituyentes anulares como, por ejemplo, halógenos, en particular cloro, alquilo C1-C6, cicloalquilo C3-C6, fenilo, clorofenilo, bencilo y/o clorofenilo.

Fenoles biocidas no clorados son, por ejemplo: 2-metilfenol, 3-metilfenol, 4-metilfenol, 4-etilfenol, 2,4-dimetilfenol, 2,5-dimetilfenol, 3,4-dimetilfenol, 2,6-dimetilfenol, 4-n-propilfenol, 4-n-butilfenol, 4-n-amilfenol, 4-n-hexilfenol, timol (5metil-2-isopropilfenol), 2-fenilfenol, 4-fenilfenol, 2-bencilfenol. Preferentemente, como fenol biocida no clorado se usa

30 2-fenilfenol.

Fenoles biocidas clorados son, por ejemplo, 4-cloro-3-metilfenol (PCMC, p-cloro-m-cresol), 4-cloro-3-etilfenol, 2-namil-4-clorofenol, 2-n-hexil-4-clorofenol, 2-ciclohexil-4-clorofenol, 4-cloro-3,5-xilenol (PCMX, p-cloro-m-xilenol), 2,4dicloro-3,5-xilenol (DCMX, dicloro-p-xilenol), 4-cloro-2-fenilfenol, 2-bencil-4-clorofenol, bencil-4-cloro-m-cresol, 4clorobencil-dicloro-m-cresol. Fenoles biocidas clorados preferentes son 2-bencil-4-clorofenol, 4-cloro-3,5-xilenol, 2,4

35 dicloro-3,5-xilenol y, en particular, 4-cloro-3-metilfenol.

Por derivados de fenol se entiende en el presente documento los compuestos derivados de fenol cuyo grupo OH está derivatizado, de modo que no contienen ningún grupo OH libre. Son preferentes los éteres fenólicos, en particular con alcoholes alifáticos con 1 a 6 átomos de carbono. Como ejemplo preferente se puede mencionar el fenoxietanol.

40 Se usan preferentemente los desinfectantes descritos en el documento WO 2007/009606, que contienen biocidas y un compuesto queratolítico. En el documento WO 2007/009606 se describen con detalle biocidas o combinaciones de biocidas y compuestos queratolíticos adecuados, que se indican expresamente en este documento.

Ejemplos

Ejemplos de formulación

45 Ejemplo 1 (formulación líquida):

Suspensiones en 100 ml de glicerinformal/glicerina-ricinoleato de polietilenglicol (Cremophor® EL)/agua en una relación de mezcla de 1 : 10 con:

•

500 mg de nifurtimox

•

1.000 mg de nifurtimox

50 Ejemplo 2 (formulación líquida):

Suspensiones en 100 ml de Cremophor® EL/agua en una relación de mezcla de 1 : 5 con:

•

500 mg de nifurtimox

•

1.000 mg de nifurtimox

5 Ejemplo 3 (formulación sólida)

Se llena una cápsula de gelatina con los principios activos en forma de polvo en las cantidades que se indican a continuación:

• 250 mg de nifurtimox

Ejemplo 4 (comprimido)

10 Los comprimidos de nifurtimox son conocidos y pueden obtenerse como medicamento, por ejemplo, con la denominación comercial Lampit®.

Ejemplos biológicos

Ejemplo 1

Cachorros Beagle de 10-11 semanas de edad, que antes de la infección pudieron aclimatarse al centro de animales

15 durante 11 días, se infectaron por vía oral con 50.000 quistes de Giardia duodenalis. Los quistes para la infección se obtuvieron de excrementos de perros con quistes de giardias usando un gradiente de sacarosa y se almacenaron en medio de bacto-casitona durante no más de 2 semanas a 4 grados Celsius. A partir del día 10 después de la infección, los cachorros se mantuvieron en jaulas individuales para recoger los excrementos totales diarios individualmente. La determinación cuantitativa de la excreción de quistes se realizó en los 4 días anteriores al

20 tratamiento (día -3 a 0) y los cachorros se distribuyeron en dos grupos aleatoriamente mediante sus excreciones de quistes. El día 0 se realizó el tratamiento de 7 cachorros del grupo de tratamiento con una toma oral única de 50 mg/kg de nifurtimox (Lampit®), mientras que los 6 perros del grupo de control se mantuvieron sin tratamiento. Del día 1 al día 8 después del tratamiento, se determinó de nuevo cuantitativamente la excreción de quistes.

Resultados: La actividad se calculó con la fórmula siguiente:

La actividad calculada para una única toma de nifurtimox fue del 90,4 % (véase la tabla 1).

Procedimiento: La determinación cuantitativa de la excreción de quistes se realizó según una versión modificada de Hewlett (18): Se disolvieron 4 g de excrementos en 100 ml de agua, se filtraron y se dejaron sedimentar. El sedimento se estratificó en un gradiente de sacarosa 1 M (peso específico 1,13) y los quistes, que se enriquecieron

30 tras centrifugación en la capa de separación de sacarosa-agua, se extrajeron con pipeta. Tras una etapa de lavado con centrifugación posterior, se contaron los quistes en el sedimento. Para ello, se hizo un recuento de una parte alicuota del sedimento al microscopio y se calculó la cantidad de quistes por g de excremento.

Tratamiento

Excreción de quistes de giardias Actividad

Día -3 a 0

Día 1 a 8

50 mg/kg de nifurtimox

24302 1341 90,4 %

Controles infectados no tratados

15147 13963

Ejemplo 2

Cachorros Beagle de 11-15 semanas de edad, que antes de la infección pudieron aclimatarse al centro de animales durante dos semanas, se infectaron por vía oral, antes del comienzo del estudio, con 50.000 quistes de Giardia 5 duodenalis. Los quistes para la infección se obtuvieron de excrementos de perros con quistes de giardias usando un gradiente de sacarosa y se almacenaron en medio de bacto-casitona durante no más de 2 semanas a 4 grados Celsius. Se incluyeron en el estudio 18 cachorros que excretaban quistes de giardias y se mantuvieron en jaulas individuales, para recoger el excremento diario total. La determinación cuantitativa de la excreción de quistes se realizó como en el ensayo 145.717, con la modificación de que la parte alícuota del sedimento se contó usando la 10 cámara de recuento Fuchs-Rosenthal bajo el microscopio. La determinación cuantitativa de la excreción de quistes se realizó durante 4 días antes del tratamiento (día -3 a 0) y los cachorros se distribuyeron en tres grupos aleatoriamente mediante sus excreciones de quistes. En tres días sucesivos siguientes (día 0, 1 y 2) se realizó el tratamiento de los seis cachorros del grupo de tratamiento 1 por la mañana con una toma oral de 50 mg/kg de nifurtimox (Lampit®), mientras que los 6 perros del grupo de tratamiento 2 se trataron en estos tres días por la

15 mañana con una toma oral de 50 mg/kg de fenbendazol (comprimidos de fenbendazol). Los 6 perros del grupo de control se mantuvieron sin tratamiento. Del día 1 al día 8 después del tratamiento se determinó cuantitativamente de nuevo la excreción de quistes.

Resultados: La actividad calculada de nifurtimox fue del 98,6 %, mientras que la actividad del fenbendazol fue del 48,3 % (véase la tabla 2).

Tratamiento

∀ Excreción de quistes de giardias Actividad

Día -3 a 0

Día 3 a 8

50 mg/kg de nifurtimox

44154 261 98,6 %

50 mg/kg de fenbendazol

32871 9578 48,3 %

Controles infectados no tratados

36044 18523

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Claims (8)

1. REIVINDICACIONES

   1.

   Uso de nifurtimox para la preparación de medicamentos para el tratamiento de enfermedades causadas por giardias.

2. 2.

   Uso según la reivindicación 1 para el tratamiento de enfermedades causadas por Giardia lamblia.

   5 3. Uso según una de la reivindicaciones1 o 2 para el tratamiento de gatos o perros.

3. 4.

   Nifurtimox para uso para el tratamiento de enfermedades causadas por giardias.

4. 5.

   Nifurtimox para el uso según la reivindicación 4 para el tratamiento de enfermedades causadas por Giardia lamblia.

5. 6.

   Nifurtimox para el uso según una de las reivindicaciones 4 o 5 en perros o gatos.

   10 7. Agente que contiene nifurtimox y un antihelmíntico.

6. 8.

   Agente que contiene nifurtimox y un ciclooctadepsipéptido antihelmíntico.

7. 9.

   Agente según la reivindicación 8 que contiene PF 1022 como ciclooctadepsipéptido antihelmíntico.

8. 10.

   Agente según la reivindicación 8 que contiene emodépsido como ciclooctadepsipéptido antihelmíntico.