ES2437595T3 - Derivados de tiazol usados como inhibidores de la PI 3 quinasa - Google Patents

Abstract

Un compuesto de fórmula IA **Fórmula** en donde m representa 1; R1 representa 4- piridilo sustituido en la posición 2- por un sustituyente seleccionado del grupo consistente defluoro, cloro, ciano, C1- C4- alquilo, per- deutero C1- C7- alquilo, C3- C6- cicloalquilo, C3- C6- cicloalquilo- C1- C4- alquilo, 1-(C1- C4- alquilo)- C3- C8- cicloalquilo, 1- (halo- C1- C4- alquilo)- C3- C6- cicloalquilo, 1- (per- deutero- C1- C4- alquilo)- C3-C8- cicloalquilo, 1- ciano- C3- C8- cicloalquilo, C1- C4- alquiloxi, hidroxi- C1- C4- alquilo, halo- C1- C4- alquilo, C1- C4-alquiloxi- C1- C4- alquilo, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclopropiloxi, ciclopentiloxi, C1- C4- alquilsulfonilo, C1- C4-alquilsulfanilo, dimetilamino, dietilamino, etil- metil- amino, etil- propil- amino, ciclopropil amino, 2- metoxi- etil- amino, 4-dimetilamino- piperidin- 1- il, metil- (1- metil- piperidin- 4- il)- amino, 4- metil- piperazin- 1- il, 3- dimetilamino- pirrolidin- 1-il, Isopropil- metil- amino, 2- dimetilamino- etil)- metil- amino, 2- azetidin- 1- il, 7- aza- biciclo [2.2.1] hept- 7- il, 3- aza15biciclo [3.2.2] non- 3- il, bencil- etil- amino; 1- (4- C1- C4- alquiloxi- fenilo)- C3- C6- cicloalquilo, (4- C1- C4- alquiloxi- fenilo)-C1- C4- alquilo, 1- fenilo- C3- C8- cicloalquilo, C1- C7- alquilfenilo, C1- C7- alcoxifenilo C1- C7- alquilo, C1- C7- alcoxifenoxi,N, N- dialquilamino alcoxi fenilo, 4- (C1- C7- alquilo)- tetrahidro- pirano- 4- il, bencilo, fenilo o un heterociclo aromático con5 o 6 átomos de anillo el cual bencilo, fenilo o heterociclo aromático es opcionalmente sustituido por uno o dossustituyentes seleccionados del grupo consistente de halógeno, C1- C4- alquilo, C1- C4- alquiloxi, halo- C1- C4- alquilo;R2 representa halo, ciano, nitro, hidroxi, fenilo, C1-C7 alquilo, C1-C7 alcoxi, C1-C7 alquilamino, C1-C7 dialquilamino, C1-C7dialquilamino C1-C7 alquilo, cicloalquilo, cicloalcoxi en donde cada alquilo o cicloalquilo puede ser mono o poli-sustituidopor halo, ciano, nitro, hidroxi, fenilo y en donde cada fenilo puede ser mono o poli-sustituido por halo, ciano, nitro, hidroxi,C1-C7 alquilo; o dos sustituyentes R2 juntos forman un alcandiilo o alquenodiilo, cada uno opcionalmente sustituido por hidroxi o halo,para formar una unidad estructural cíclica; o dos sustituyentes R2 25 forman juntos un enlace para formar un doble enlace;R3 representa hidrógeno, C1-C7 alquilo, mono-, poli- o per-deutero C1-C7 alquilo, halo, halo C1-C7 alquilo, hidroxi C1-C7alquilo, C1-C7 dialquilamino C1-C7 alquilo, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Description

Derivados de tiazol usados como inhibidores de la PI 3 quinasa

La presente invención se relaciona con derivados de 2-carboxamida cicloamino urea, como nuevos compuestos inhibidores de fosfatidilinositol (PI) 3-quinasa, sus sales farmacéuticas aceptables, profármacos de los mismos y 5 procesos para su producción.

Esta invención también se refiere a composiciones de estos compuestos, ya sea solo o en combinación con al menos un agente terapéutico adicional, y opcionalmente en combinación con un vehículo farmacéuticamente aceptable. Esta invención se refiere además a estos compuestos, bien sea solos o en combinación con al menos un agente terapéutico adicional, para uso en la profilaxis o el tratamiento de una serie de enfermedades, en particular, aquellas mediadas por

10 una o más de la actividad anormal de los factores de crecimiento, receptores de tirosina quinasas, proteína serina/heroína quinasas, receptores acoplados a proteínas G y fosfolípidos quinasas y fosfatasas.

Las fosfatidilinositol 3-quinasas (PI3Ks) comprenden una familia de quinasas lipídicas que catalizan la transferencia de fosfato a la posición D-3' de lípidos de inositol para producir fosfoinositol-3 – fosfato (PIP), fosfoinositol- 3, 4- difosfato (PIP2) y fosfoinositol- 3,4,5- trifosfato (PIP3) que, a su vez, actúa como segundos mensajeros en cascadas de 15 señalización por acoplamiento de proteínas que contienen homología de pleckstrina-, FYVE, Phox y otros dominios de unión a fosfolípidos en una variedad de complejos de señalización a menudo en la membrana plasmática ((Vanhaesebroeck et al., Annu. Rev. Biochem 70: 535 (2001); Katso et al., Annu. Rev. Cell Dev. Biol. 17: 615 (2001)). De las dos, Clase 1 PI3Ks, Clase 1A PI3Ks son heterodímeros compuestos de una subunidad catalítica p110 (isoformas a, �, 0) constitutivamente asociada con una subunidad reguladora que puede ser p85a, p55a, p50a, p85� o p55y. La sub20 clase de la Clase 18 tiene un miembro de la familia, un heterodímero compuesto por una subunidad catalítica p110y asociado con una de las dos subunidades reguladoras, p101 o p84 (Fruman et al., Annu Rev. Biochem. 67: 481 (1998); Suire et al., Curr. Biol. 15: 566 (2005)). Los dominios modulares de las subunidades p85/55/50 incluyen los dominios de la Homología Src (SH2) que unen los residuos de fosfotirosina en un contexto de secuencia específica en el receptor activado y tirosina quinasas citoplásmica, resultando en la activación y la localización de la Clase 1A PI3Ks. La Clase 1B 25 PI3K es activada directamente por los receptores acoplados de la proteína G que unen un diverso repertorio de ligandos péptidos y no péptidos (Stephens et al., Cell 89: 105 (1997)); Katso et al., Annu. Rev. Cell Dev. Biol. 17: 615- 675 (2001)). En consecuencia, los productos resultantes de fosfolípidos de la clase I PI3K enlazan receptores corriente arriba con actividades celulares corriente abajo incluyendo la proliferación, la supervivencia, la quimiotaxis, el tráfico celular, la motilidad, el metabolismo, las respuestas inflamatorias y alérgicas, la transcripción y la traducción (Cantley et al., Cell 64:

30 281 (1991); Escobedo and Williams, Nature 335: 85 (1988); Fantl et. al., Cell 89: 413 (1992)).

En muchos casos, la PIP2 y la PIP3 enganchan Akt, el producto del homólogo humano del oncógeno viral v- Akt, a la membrana plasmática donde actúa como un punto nodal para muchas vías de señalización intracelular importantes para el crecimiento y la supervivencia (FantI et al., Cell 69: 413- 423 (1992): Bader et al., Nature Rev. Cancer 5: 921 (2005); Vivanco and Sawyer, Nature Rev. Cancer2: 489 (2002)). La regulación aberrante de la PI3K, la cual a menudo aumenta 35 la supervivencia a través de la activación de Akt, es uno de los eventos más frecuentes en el cáncer humano y se ha demostrado que se produce en múltiples niveles. El gen supresor de tumores PTEN, que desfosforila fosfoinosítidos en la posición 3’ del anillo de inositol y de este modo antagoniza la actividad PI3K, se suprime funcionalmente en una variedad de tumores. En otros tumores, los genes para la isoformas p110a, PIK3CA, y para Akt se amplifican y el aumento de la expresión de la proteína de sus productos de genes se ha demostrado en varios cánceres humanos. 40 Además, se han descrito en cánceres humanos las mutaciones y la translocación de p85a que sirve para regular positivamente el complejo p85-p110. Finalmente, las mutaciones somáticas sin sentido en PIK3CA que activan las vías de señalización corriente arriba han sido descritas en frecuencias significativas en una amplia diversidad de cánceres humanos (Kang at el., Proc. NatI. Acad. Sci. USA 102: 802 (2005); Samuels et al., Science 304: 554 (2004); Samuels et al., Cancer Cell 7: 561-573 (2005)). Estas observaciones muestran que la desregulación de la fosfoinositol-3 quinasa y 45 los componentes corriente arriba y corriente abajo de esta vía de señalización es una de las desregulaciones más

comunes asociados con los cánceres humanos y enfermedades proliferativas (Parsons et al., Nature 436: 792 (2005) ; Hennessey at el., Nature Rev. Drug Disc. 4: 988- 1004 (2005)).

En vista de lo anterior, los inhibidores de las PI3K podrían ser de valor particular en el tratamiento de enfermedades proliferativas y otros desordenes.

La WO2004/096797 divulga ciertos derivados de tiazol como inhibidores de la PI3 quinasa y su uso como productos farmacéuticos.

La WO 2005/021519 también divulga ciertos derivados de tiazol como inhibidores de la PI3 quinasa y su uso como productos farmacéuticos.

La WO2003072557 divulga derivados de tiazol fenil-sustituido como inhibidores de PI3 quinasa y su uso como productos farmacéuticos.

La WO2006051270 divulga derivados 5-heteroaril tiazoles y su uso como inhibidores de PI3K.

La WO2006125805 también divulga ciertos derivados de tiazol como inhibidores de PI3K y su uso como productos farmacéuticos.

La WO2007068473 también divulga derivados de tiazol fenil-sustituidos como inhibidores de PI3K y su uso como productos farmacéuticos.

La WO2007134827 también divulga derivados de tiazol fenil-sustituidos como inhibidores de PI3K y su uso como productos farmacéuticos.

Ahora se ha encontrado que los 2-carboxamida cicloamino urea de la fórmula IA la cual se indica más adelante tiene propiedades farmacológicas ventajosas e inhibe, por ejemplo, las PI3 quinasas (fosfatidilinositol 3-quinasa). En particular, estos compuestos muestran preferiblemente un alto grado de selectividad por la PI3K alfa con respecto a los subtipos beta y/o delta y/o gamma en la bioquímica y/o en el ensayo celular. Por lo tanto, los compuestos de la fórmula I son adecuados, por ejemplo, para ser usados en el tratamiento de enfermedades en función de la PI3 quinasa (en particular la PI3K alfa), especialmente enfermedades proliferativas, tales como enfermedades de tumores, leucemias, policitemia vera, trombocitemia esencial, y mielofibrosis con metaplasia mieloide.

En un primer aspecto, la presente invención proporciona compuestos de la fórmula IA

en donde

m representa 1;

R1 representa 4- piridilo sustituido en la posición 2- por un sustituyente seleccionado del grupo consistente de fluoro, cloro, ciano, C1- C4- alquilo, per- deutero C1- C7- alquilo, C3- C6- cicloalquilo, C3- C6- cicloalquilo- C1- C4- alquilo, 1(C1-C4- alquilo)- C3- C6- cicloalquilo, 1-(halo- C1- C4- alquilo)- C3- C6- cicloalquilo, 1- (per-deutero- C1- C4- alquilo)- C3-C6-cicloalquilo, 1- ciano- C3- C6- cicloalquilo, C1- C4- alquiloxi, hidroxi-C1- C4- alquilo, halo- C1- C4- alquilo, C1- C4

alquiloxi-C1- C4-alquilo, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclopropiloxi, ciclopentiloxi, C1- C4- alquilsulfonilo, C1- C4-alquilsulfanilo, dimetilamino, dietilamino, etilo- metilo- amino, etilo- propilo-amino, ciclopropilo amino, 2- metoxi- etiloamino, 4-dimetilamino- piperidin- 1-il, metilo- (1- metilo- piperidin- 4- il)- amino, 4- metilpiperazina-1- il, 3- dimetilaminopirrolidina- 1- il, isopropilo- metilo- amino, 2- dimetilamino- etilo)- metilamino, 2- azetidina- 1- il, 7- aza-biciclo [2.2.1] hept- 7- il, 3-aza-biciclo [3.2.2] non- 3- il, bencilo- etilo- amino; 1-(4-C1- C4- alquiloxi- fenilo)- C3- C8- cicloalquilo, (4- C1-C4-alquiloxi- fenilo)- C1- C4- alquilo, 1-fenilo- C3- C8- cicloalquilo, C1- C7- alquilfenilo, C1- C7- alcoxifenilo C1- C7- alquilo, C1- C7- alcoxifenoxi, N, N- dialquilamino alcoxi fenilo, 4- (C1- C7- alquilo)- tetrahidro- pirano- 4- il, bencilo, fenilo o un heterociclo aromático con 5 o 6 átomos de anillo el cual bencilo, fenilo o heterociclo aromático es opcionalmente sustituido por uno o dos sustituyentes seleccionados del grupo consistente de halógeno, C1- C4- alquilo, C1- C4- alquiloxi, halo- C1- C4- alquilo;

R2 representa halo, ciano, nitro, hidroxi, fenilo, alquilo C1- C7 alquilo, C1- C7 alcoxi, C1- C7 alquilamino, C1- C7 dialquilamino, C1- C7 dialquilamino C1- C7 alquilo, cicloalquilo, cicloalcoxi en donde cada alquilo o cicloalquilo puede ser mono o polisustituido por halo, ciano, nitro, hidroxi, fenilo y en donde cada fenilo puede ser mono o poli-sustituido por halo, ciano, nitro, hidroxi, C1- C7 alquilo; o dos sustituyentes R2 juntos forman un alcandiilo o alquenodiilo, cada uno opcionalmente sustituido por hidroxi o halo, para formar una unidad estructural cíclica; o dos sustituyentes R2 forman juntos un enlace para formar un doble enlace;

R3 representa hidrógeno, C1- C7 alquilo, mono-, poli- o per- deutero C1- C7 alquilo, halo, halo C1- C7 alquilo, hidroxi C1- C7 alquilo, C1- C7 dialquilamino C1- C7 alquilo,

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

La invención se puede apreciar más plenamente por referencia a la siguiente descripción, incluyendo el siguiente glosario de términos y los ejemplos finales. En interés de la brevedad, se incorporan aquí por referencia las divulgaciones de las publicaciones citadas en esta especificación. Como se usa en este documento, los términos “que incluye”, “que contiene” " y “que comprende” son usados aquí en su sentido abierto, no limitante.

Cualquier fórmula dada en este documento está destinada a representar compuestos que tienen las estructuras descritas por la fórmula estructural así como ciertas variaciones o formas. En particular, los compuestos de cualquier fórmula dada en este documento pueden tener centros asimétricos y por lo tanto existir en diferentes formas enantioméricas. Si al menos un átomo de carbono asimétrico está presente en un compuesto de la fórmula I, un compuesto de este tipo puede existir en forma ópticamente activa o en la forma de una mezcla de isómeros ópticos, por ejemplo, en la forma de una mezcla racémica.

Todos los isómeros ópticos y sus mezclas, incluyendo las mezclas racémicas, forman parte de la presente invención. Por lo tanto, cualquier fórmula dada en este documento está destinada a representar un racemato, una o más formas enantioméricas, una o más formas diastereoméricas, una o más formas atropisoméricas, y mezclas de las mismas. Por otra parte, ciertas estructuras pueden existir como isómeros geométricos (esto es, isómeros cis y trans), como tautómeros, o como atropisómeros

Cualquier fórmula dada en el presente documento está destinado a representar hidratos, solvatos, y polimorfos de tales compuestos, y mezclas de los mismos.

Cualquier fórmula dada en este documento también tiene la intención de representar formas no marcadas así como las formas marcadas isotópicamente de los compuestos. Los compuestos marcados isotópicamente tienen las estructuras representadas por las fórmulas dadas en este documento salvo que uno o más átomos se reemplazan por un átomo que tiene una masa atómica o número másico seleccionado.

Los ejemplos de isótopos que se pueden incorporar en los compuestos de la invención incluyen isótopos de hidrógeno, carbono, nitrógeno, oxígeno, fósforo, flúor, y cloro, tales como, 2H,3H, 11C, 13C, 14C, 15N, 31P, 32P, 18F 35S, 36Cl, 125I respectivamente. Diversos compuestos isotópicamente marcados de la presente invención, por ejemplo aquellos en los

que se incorporan isótopos radioactivos tales como 3H, 13C, y 14C. Tales compuestos marcados isotópicamente son útiles en estudios metabólicos (preferiblemente con 14C), los estudios cinéticos de reacción (con, por ejemplo, 2H o 3H), detección y las técnicas de imagen, como la tomografía por emisión de positrones (PET) o la tomografía computarizada por emisión de fotón único (SPECT) incluyendo ensayos de distribución de fármaco o sustratos en tejidos, o en el tratamiento radiactivo de pacientes. En particular, puede ser particularmente preferido un compuesto 18F o marcado para los estudios de PET o SPECT. Además, la sustitución con isótopos más pesados tales como el deuterio (es decir, 2H) puede proporcionar ciertas ventajas terapéuticas resultantes de una mayor estabilidad metabólica, por ejemplo un incremento de la vida media o requerimientos de dosificación reducidos in vivo. Compuestos marcados isotópicamente de esta invención y profármacos de los mismos pueden prepararse generalmente llevando a cabo los procedimientos descritos en los esquemas o en los ejemplos y en las preparaciones descritas más abajo sustituyendo un reactivo marcado isotópicamente fácilmente disponible por un reactivo no marcado isotópicamente

Además, la sustitución con isótopos más pesados, particularmente deuterio (esto es, 2H o D) puede proporcionar ciertas ventajas terapéuticas resultantes de una mayor estabilidad metabólica, por ejemplo aumento del promedio de vida o requerimientos de dosificación reducidos o una mejora en el índice terapéutico in vivo. Se entiende que el deuterio en este contexto se considera como un sustituyente en el compuesto de la fórmula (I). La concentración de un isótopo más pesado, específicamente deuterio, puede ser definida por el factor de enriquecimiento isotópico. El término "factor de enriquecimiento isotópico" como se usa en el presente documento significa la relación entre la abundancia isotópica y la abundancia natural de un isótopo especificado. Si un sustituyente en un compuesto de esta invención se denota deuterio, dicho compuesto tiene un factor de enriquecimiento isotópico para cada átomo designado de deuterio de al menos 3500 (52.5% de incorporación de deuterio en cada átomo designado de deuterio), al menos 4000 (60% de incorporación de deuterio), al menos 4500 (67.5% de incorporación de deuterio), al menos 5000 (75% de incorporación de deuterio), al menos 5500 (82.5% de incorporación de deuterio), al menos 6000 (90% de incorporación de deuterio), al menos 6333.3 (95% de incorporación de deuterio), al menos 6466.7 (97% de incorporación de deuterio), al menos 6600 (99% de incorporación de deuterio), o al menos 6633.3 (99.5% de incorporación de deuterio). En los compuestos de esta invención, cualquier átomo no designado específicamente como un isótopo particular está destinado a representar cualquier isótopo estable de ese átomo. A menos que se indique otra cosa, cuando una posición se designa específicamente como "H" o "hidrógeno", la posición se entiende que tienen hidrógeno en su composición de abundancia isotópica natural. Por consiguiente, en los compuestos de esta invención cualquier átomo designado específicamente como un deuterio (D) está destinado a representar deuterio, por ejemplo, en los intervalos dados anteriormente.

Cuando se hace referencia a cualquier fórmula dada aquí, la selección de una unidad estructural particular a partir de una lista de posibles especies para una variable especificada no pretende definir la unidad estructural para la variable que aparece en otro lugar. En otras palabras, donde una variable aparece más de una vez, la elección de las especies de una lista especificada es independiente de la elección de las especies para la misma variable en otra parte de la fórmula (donde una o más hasta todas las expresiones más generales en realizaciones caracterizadas como preferidas más arriba o más abajo puede ser reemplazado con una definición más específica, lo que conduce a una forma de realización más preferida de la invención, respectivamente).

Donde es utilizada la forma plural (por ejemplo, compuestos, sales), esto incluye el singular (por ejemplo, un solo compuesto, una única sal). "Un compuesto" no excluye que (por ejemplo, en una formulación farmacéutica) más de un compuesto de la fórmula IA (o una sal del mismo) esté presente.

Las sales de los compuestos de la fórmula IA son preferiblemente sales farmacéuticamente aceptables; tales sales son conocidas en el campo.

Las siguientes definiciones generales se aplicarán en la presente memoria, a menos que se especifique lo contrario:

Halógeno (o halo) significa flúor, bromo, cloro o yodo, en particular flúor, cloro. Grupos de halógeno y unidades estructurales, tales como alquilo sustituido por halógeno (halogenoalquilo) pueden ser mono-, poli-o per-halogenado.

Los hetero átomos son átomos distintos de Carbono e Hidrógeno, preferiblemente nitrógeno (N), oxígeno (O) o sulfuro (S), en particular nitrógeno.

Grupos que contienen carbono, unidades estructurales o moléculas contienen 1 a 7, preferiblemente 1 a 6, más preferiblemente 1 a 4, más preferiblemente 1 o 2, átomos de carbono. Cualquier grupo que contiene carbono no cíclico o unidad estructural con más de 1 átomo de carbono es de cadena recta o ramificada.

El prefijo "inferior" o "C1-C7" denota un radical que tiene hasta e incluyendo un máximo de 7, especialmente hasta e incluyendo un máximo de 4 átomos de carbono, los radicales en cuestión o bien rectos o ramificados con ramificación simple o múltiple.

“Alquilo "se refiere a un grupo alquilo de cadena recta o de cadena ramificada, preferiblemente representa un alquilo C112 de cadena recta o de cadena ramificada, particularmente preferiblemente representa un alquilo C1-7 de cadena recta o de cadena ramificada, por ejemplo, metilo, etilo , n- o iso-propilo, n-, iso-, sec-o tert-butilo, n-pentilo, n-hexilo, n-heptilo, noctilo, n-nonilo, n-decilo, n-undecilo, n- dodecilo, con especial preferencia a metilo, etilo, n-propilo, iso-propilo y n-butilo e iso-butilo. Alquilo puede estar no sustituido o sustituido. Los sustituyentes ejemplares incluyen, pero no se limitan a hidroxi, alcoxi, halógeno y amino. Un ejemplo de un alquilo sustituido es trifluorometilo. Cicloalquilo también puede ser un sustituyente de alquilo. Un ejemplo de tal caso es la unidad estructural cicloalquil (alquilo)-, tal como ciclopropil (alquilo)-

o ciclobutil (alquilo)-, por ejemplo ciclopropil metilo- o ciclobutil metilo. Un ejemplo más específico de una unidad estructural de cicloalquil (alquilo)- incluye tipo germinal del modelo de sustitución, por ejemplo 1- alquilo cicloalquilo, tales como 1- metilo ciclopropilo. Otro ejemplo de cicloalquilo como sustituyente de alquilo es cicloalquilo alcandiilo, tal como ciclopropilo alcandiilo, por ejemplo ciclopropilo -CH2-. Alquilo C1- C7- es preferiblemente alquilo con desde e incluyendo 1 hasta 7 inclusive, preferiblemente desde e incluyendo 1 hasta 4 inclusive, y es recto o ramificado; preferiblemente, alquilo inferior es butilo, tal como n-butilo, sec- butilo, isobutilo, tert-butilo, propilo, tal como n- propilo o isopropilo, etilo o preferiblemente metilo.

Cada parte alquilo de otros grupos como "alcoxi", "alcoxialquilo", "alcoxicarbonilo", "alcoxi-carbonilalquilo", "alquilosulfonilo", "alquilosulfoxilo", "alquiloamino", "halogenoalquilo" tendrán el mismo significado como se describe en la definición mencionada anteriormente de "alquilo".

“Alcandiilo” se refiere a un grupo alcandiilo de cadena recta o de cadena ramificada enlazado por dos átomos diferentes de Carbono a la unidad estructural, que representa preferiblemente un alcandiilo C1-12 de cadena recta o de cadena ramificada, particularmente representa preferentemente un alcandiilo C16 de cadena recta o cadena ramificada, por ejemplo, metandiilo (-CH2-), 1, 2 -etanodiilo (-CH2-CH2-), 1, 1 -etanodiilo ((-CH (CH3) -), 1, 1 -, 1, 2 -, 1, 3 -propanodiilo y 1, 1 -, 1, 2 -, 1, 3-, 1, 4 - butanodiilo, dando particular preferencia a metandiilo, 1, 1 -etanodiilo, 1, 2 -etanodiilo 1, 3 - propanodiilo, 1, 4 - butanodiílo.

"Alquenodiilo" se refiere a un grupo alquendiilo de cadena recta o de cadena ramificada enlazado por dos átomos diferentes de carbono a la molécula, representa preferiblemente una cadena recta o cadena ramificada de alquenodiilo C2-6, por ejemplo, -CH=CH-, -CH=C (CH3) -, -CH=CH- CH2-, - C (CH3) =CH-CH2-, -CH=C (CH3)- CH2-, - CH=CH- C (CH3) H-, -CH=CH- CH=CH-, - C (CH3) =CH- CH=CH-, -CH=C (CH3)- CH=CH-, con especial preferencia a -CH=CH-CH2-, -CH=CH- CH=CH-. El alquenodiilo puede ser sustituido o no sustituido.

"Cicloalquilo" se refiere a un anillo saturado o parcialmente saturado, monocíclico, policíclico fusionado o espiro policíclico, carbocide que tiene de 3 a 12 átomos en el anillo por carbociclo. Ejemplos ilustrativos de grupos cicloalquilo incluyen las siguientes unidades estructurales: ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo y ciclohexilo. El cicloalquilo puede ser no sustituido o sustituido; sustituyentes ejemplares se proporcionan en la definición de alquilo.

"Arilo" se refiere a un sistema de anillos homocíclico aromático con 6 o más átomos de carbono; arilo es preferiblemente una unidad estructural aromática con 6 a 14 átomos de carbono en el anillo, más preferiblemente con 6 a 10 átomos de carbono en el anillo, tales como fenilo o naftilo, preferiblemente fenilo. Arilo puede ser no sustituido o sustituido por uno o más, preferiblemente hasta tres, más preferiblemente hasta dos sustituyentes seleccionados independientemente entre

el grupo que consiste de heterociclilo no sustituido o sustituido como se describe más abajo, especialmente pirrolidinilo, tal como pirrolidino, oxopirrolidinilo, tales como oxo-pirrolidino, alquilpirrolidinilo C1-C7, 2 , 5 - di - ( alquilo C1-C7 ) pirrolidinilo , tales como 2 , 5 - di - ( alquilo C1-C7 ) - pirrolidino , tetrahidrofuranilo, tiofenilo, alquilpirazolidinilo C1 - C7-, piridinilo, alquilpiperidinilo C1- C7, piperidino , piperidino sustituido por amino o N-mono - o N, N- di -[alquilo inferior, fenilo, alcanoilo C1- C7- y/o fenil-alquilo inferior )- amino, no sustituido o N- alquilo inferior sustituido piperidinilo unido a través de un átomo de carbono del anillo, piperazino, alquilpiperazino inferior, morfolino , tiomorfolino, S- oxotiomorfolino o S, S- dioxotiomorfolino; alquilo C1-C7, amino alquilo C1-C7, N- alcanoilamino C1- C7- alquilo C1-C7, Nalcanosulfonilo-amino-C1- C7- alquilo C1- C7, carbamoil- alquilo C1- C7-, [N-mono-o N, N- di- ( alquilo C1- C7)carbamoilo]-alquilo C1- C7, alcanosulfinilo-C1-C7 alquilo-C1- C7-, alcanosulfonilo-C1-C7 alquilo-C1- C7-, fenilo, naftilo , mono- a tri-[alquilo C1- C7, halo y/o ciano]- fenilo o mono- a tri- [alquilo C1- C7, halo y/o ciano]-naftilo; cicloalquilo C3- C8-, mono- a tri- [alquilo C1- C7-y/o hidroxi]-cicloalquilo C3- C8-, halo, hidroxi, alcoxi inferior, alcoxi-inferior- alcoxi- inferior, (alcoxi- inferior )- alcoxi inferior-alcoxi inferior, halo-alcoxi C1- C7, fenoxi, naftiloxi , fenilo- o naftilo- alcoxi inferior; amino alcoxi -C1- C7, alcanoiloxi inferior, benzoiloxi, naftoiloxi , formilo (CHO), amino, N-mono- o N,Ndi-(alquilo C1- C7)- amino, alcanoilamino C1- C7, alcansulfonilamino C1- C7, carboxi, alcoxi inferior carbonilo, por ejemplo, fenilo- o naftilo- alcoxicarbonilo inferior, tal como benciloxicarbonilo; alcanoilo C1- C7, tal como acetilo, benzoilo, naftoilo, carbamoilo, Nmono- o N,N- carbamoilo disustituido, tal como N-mono-o N,N- carbamoilo di-sustituido en donde los sustituyentes son seleccionados de alquilo inferior, (alcoxi inferior)- alquilo inferior e hidroxi alquilo inferior; amidino, guanidino, ureido, mercapto, alquiltio inferior, fenilo o naftiltio, fenilo o naftil alquiltio inferior, alquilfeniltio inferior, alquil-naftiltio inferior, halógeno alquilomercapto inferior, sulfo (-SO3H), alcanosulfonilo inferior, fenilo o naftilo sulfonilo, fenilo-o naftilo- alquilosulfonilo inferior, alquilfenilsulfonilo, halógeno- alquilosulfonilo inferior, tal como trifluorometanosulfonilo; sulfonamido, benzosulfonamido, azido, azido-C1- C7- alquilo, especialmente azidometilo, C1- C7-alcanosulfonilo, sulfamoilo, N- mono- o N, N- di- (C1- C7- alquilo)- sulfamoilo, morfo- linosulfonilo, tiomorfolinosulfonilo, ciano y nitro; donde cada fenilo o naftilo (también en fenoxi o naftoxi) mencionado anteriormente como sustituyente o parte de un sustituyente de sustituyente alquilo (o también de sustituyente arilo, heterociclilo etc. mencionado aquí) es en sí mismo no sustituido o sustituido por uno o más, por ejemplo hasta tres, preferiblemente 1 o 2, sustituyentes independientemente seleccionados de halo, halo alquil inferior, tal como trifluorometilo, hidroxi, alcoxi inferior, azido, amino, N-mono- o N, Ndi-(alquilo inferior y/o C1-C7- alcanolilo)- amino, nitro, carboxi, alcoxicarbonilo inferior, carbamoilo, ciano y/o sulfamoilo.

"Heterociclilo" se refiere a un radical heterocíclico que es insaturado (= llevando el mayor número posible de enlaces dobles conjugados en el anillo (s)), saturado o parcialmente saturado, y es preferiblemente un monocíclico o en un aspecto más amplio de la invención anillo bicíclico, tricíclico o espirocíclico, y tiene 3 a 24, más preferiblemente de 4 a 16, más preferiblemente de 5 a 10 y lo más preferiblemente de 5 o 6 átomos en el anillo; en donde uno o más, preferiblemente de uno a cuatro, especialmente uno o dos átomos del anillo se sustituyen por un heteroátomo, el anillo de unión tiene preferiblemente de 4 a 12, especialmente 5 a 7 átomos en el anillo. El radical heterocíclico (heterociclilo) puede ser no sustituido o sustituido por uno o más, especialmente de 1 a 3, sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste de los sustituyentes definidos anteriormente para alquilo sustituidos y/o de uno o más de los siguientes sustituyentes: oxo (=O), tiocarbonilo (=S), imino (=NH), imino- alquilo inferior. Además, heterociclilo es especialmente un radical heterociclilo seleccionado del grupo consistente de oxiranilo, azirinilo, aziridinilo, 1, 2- oxatiolanilo, tienil (= tiofenilo), furanilo, tetrahidrofurilo, piranilo, tiopiranilo, tiantrenilo, isobenzofuranilo, benzofuranilo, cromenilo, 2H- pirrolilo, pirrolilo, pirrolinilo, pirrolidinilo, imidazolilo, imidazolidinilo, benzimidazolilo, pirazolilo, pirazinilo, pirazolidinilo, tiazolilo, isotiazolilo, ditiazolilo, oxazolilo, isoxazolilo, piridilo, pirazinil; pirimidinilo, piperidinilo, piperazinilo, piridazinilo, morfolinilo, tiomorfolinilo, (S- oxo o S,S- dioxo)-tiomorfolinilo, indolizinilo, azepanilo, diazepanilo, especialmente 1,4-diazepanilo, isoindolilo, 3H-indolilo, indolilo, benzimidazolilo, cumarilo, indazolilo, triazolilo, tetrazolilo, purinilo, 4H- quinolizinilo, isoquinolilo, quinolilo, tetrahidroquinolilo, tetrahidroisoquinolilo, decahidroquinolilo, octahidroisoquinolilo, benzofuranilo, dibenzofuranilo, benzotiofenilo, dibenzotiofenilo, ftalazinilo, naftiridinilo, quinoxalilo, quinazolinilo, quinazolinilo, cinolinilo, pteridinilo, carbazolilo, beta-carbolinilo, fenantridinilo, acridinilo, perimidinilo, fenantrolinilo, furazanilo, fenazinilo, fenotiazinilo, fenoxazinilo, cromenilo, isocromanilo, cromanilo, benzo [1, 3] dioxol-5-ilo y 2,3-dihidro- benzo [1,4] dioxin- 6- ilo, cada uno de estos radicales es no sustituido o sustituido por uno o más, preferiblemente hasta tres, sustituyentes seleccionados de los mencionados anteriormente para arilo sustituido y/o desde uno o más de los siguientes sustituyentes: oxo (=O), tiocarbonilo (=S), imino (=NH), imino- alquilo inferior.

"Arilalquilo" se refiere a un grupo arilo enlazado a la molécula a través de un grupo alquilo, tal como un grupo metilo o etilo, preferiblemente fenetilo o bencilo, en particular bencilo. Del mismo modo, cicloalquiloalquilo y heterociclilo representa un grupo cicloalquilo enlazado a la molécula a través de un grupo alquilo o un grupo heterociclilo enlazado a la molécula a través de un grupo alquilo. En cada caso, arilo, heterociclilo, cicloalquilo y alquilo pueden ser sustituidos como se definió anteriormente.

“Tratamiento" incluye tratamiento profiláctico (preventivo) y terapéutico así como el retraso del avance de una enfermedad o trastorno.

"Enfermedades mediadas por PI3 quinasa " (especialmente enfermedades mediadas por PI3K alfa) son especialmente tales trastornos que responde de una manera beneficiosa (por ejemplo mejora de uno o más síntomas, retraso de la aparición de una enfermedad, hasta curado temporal o completa de una enfermedad) a la inhibición de la PI3 quinasa, especialmente la inhibición de la PI3Kalfa (donde una de las enfermedades a ser tratadas, especialmente enfermedades proliferativas tales como enfermedades tumorales, leucemias, policitemia vera, trombocitemia esencial, y mielofibrosis con metaplasia mieloide pueden ser mencionadas).

"Sales "(las cuales, lo qué se entiende por "o sales del mismo" o "o una sal del mismo"), pueden estar presentes solas o en mezcla con el compuesto libre de la fórmula IA y son preferiblemente sales farmacéuticamente aceptables. Tales sales se forman, por ejemplo, como sales de adición de ácido, preferiblemente con ácidos orgánicos o inorgánicos, a partir de compuestos de fórmula IA con un átomo de nitrógeno básico, especialmente las sales farmacéuticamente aceptables. Ácidos inorgánicos adecuados son, por ejemplo, ácidos de halógeno, tales como ácido clorhídrico, ácido sulfúrico, o ácido fosfórico. Ácidos orgánicos adecuados son, por ejemplo, ácidos carboxílicos o ácidos sulfónicos, tales como ácido fumárico o ácido metanosulfónico. Para propósitos de aislamiento o purificación, también es posible usar sales farmacéuticamente inaceptables, por ejemplo picratos o percloratos. Para uso terapéutico, sólo se emplean sales farmacéuticamente aceptables o compuestos libres (cuando sea aplicable en la forma de preparaciones farmacéuticas), y por lo tanto se prefieren estas. En vista de la estrecha relación entre los nuevos compuestos en forma libre y aquellos en la forma de sus sales, incluso aquellas sales que se pueden usar como intermediarios, por ejemplo en la purificación

o identificación de los nuevos compuestos, cualquier referencia a los compuestos libres aquí anteriormente y en lo sucesivo debe entenderse que se refiere también a las sales correspondientes, según sea apropiado y conveniente

Combinación se refiere a cualquiera de una combinación fija en una forma de dosificación unitaria, o un kit de partes para la administración combinada donde un compuesto de la fórmula IA y un asociado de combinación (por ejemplo, uno de otro fármaco como se explica más adelante, también referido como "agente terapéutico" o "co-agente") se pueden administrar de forma independiente al mismo tiempo o por separado dentro de intervalos de tiempo, especialmente cuando estos intervalos de tiempo permiten que la combinación de asociados muestren una adyuvante, por ejemplo, efecto sinérgico. Los términos "co-administración" o "administración combinada" o similares como son usados en este documento están destinados a abarcar la administración del asociado de la combinación seleccionada a un único sujeto en necesidad del mismo (por ejemplo, un paciente), y están destinados a incluir regímenes de tratamiento en el que los agentes no se administran necesariamente por la misma vía de administración o al mismo tiempo. El término "combinación farmacéutica" como se usa aquí significa un producto que resulta de la mezcla o combinación de más de un ingrediente activo e incluye combinaciones tanto fijas como no fijas de los ingredientes activos. El término "combinación fija" significa que los ingredientes activos, por ejemplo un compuesto de fórmula IA y un asociado de combinación, se administran ambos a un paciente simultáneamente en forma de una sola entidad o dosificación. El término "combinación no fija" significa que los ingredientes activos, por ejemplo un compuesto de la fórmula IA y un asociado de combinación, se administran ambos a un paciente como entidades separadas o simultáneamente, concurrentemente o secuencialmente sin límites de tiempo específicos, en el que dicha administración proporciona niveles terapéuticamente eficaces de los dos compuestos en el cuerpo del paciente. Este último también se aplica a la terapia de cóctel, por ejemplo, la administración de tres o más ingredientes activos.

En formas de realización preferidas, las cuales se prefieren independientemente, colectivamente o en cualquier combinación o sub-combinación, la invención se refiere a un compuesto de la fórmula IA, en forma de base libre o en forma de sal de adición de ácido, en el que los sustituyentes son como se definen aquí.

Las siguientes características preferidas son aplicables a cualquiera de las fórmulas de este documento, en particular, a la formula IA.

R2 representa preferiblemente halo, ciano, nitro, hidroxi, C1- C7- alquilo, C1- C7- alquiloxi, C3- C8- cicloalquilo, C3-C6-cicloalquiloxi, C1- C7- alquilamino, di- C1- C7- alquilamino, di- C1- C7- alquiloamino C1- C7- alquilo, fenilo en donde cada alquilo, cicloalquilo o fenilo puede ser mono o disustituido por fluoro, cloro, ciano, hidroxi, fenilo. En este aspecto en particular R2 representa hidroxi, metilo, fluoro, cloro.

R2 representa preferiblemente, junto con un sustituyente adicional R2, un grupo CH2-; - CH (CH3) -, - C (CH3)2-; -CH2-CH2-, -CH=CH- formando de ese modo una unidad estructural cíclica, y por lo tanto, junto con el anillo que contiene nitrógeno, una unidad estructural bicíclica.

R2 representa preferiblemente, junto con un sustituyente adicional R2, un enlace, particularmente cuando n es 1, para formar un doble enlace. Por lo tanto el anillo que contiene nitrógeno es entonces una unidad estructural insaturada.

El R2 puede ser sustituido en la posición 2 y/o 3- y/o 4 del heterocíclico que contiene nitrógeno al cual está unido (por ejemplo el anillo de pirrolidina de la fórmula IA)). Más preferiblemente, cuando n=1 y m=1, el sustituyente R2 está sustituido en la posición 2 del anillo de pirrolidina, es decir, en el mismo carbono que está sustituido de forma simultánea por el grupo carboxamida.

R3 representa preferentemente hidrógeno, alquilo inferior, mono-, poli- o per-deutero alquilo inferior, halo, fluoro alquilo inferior, hidroxi alquilo inferior, dialquiloamino alquilo inferior.

R3 representa preferentemente hidrógeno, metilo, mono-, di- o tri-deutero metilo, cloro, fluorometilo, hidroximetilo, dimetilamino alquilo inferior, dialquiloamino metilo inferior.

R3 representa más preferiblemente hidrógeno, metilo, d3-metil (que es-CD3), cloro, dimetilamino metilo.

R3 también puede representar metilo, fluorometilo (que es-CH2F), hidroximetil (que es-CH2OH).

La invención se refiere además a metabolitos farmacéuticamente aceptables de un compuesto de formula (IA).

La invención se refiere especialmente a los compuestos de la fórmula (IA) dados en los Ejemplos, así como los métodos de fabricación descritos en el mismo.

La presente invención también se refiere a procesos para la producción de un compuesto de fórmula (IA). En principio todos los procedimientos conocidos que convierten dos aminas diferentes en un derivado de urea correspondiente son adecuados y se pueden aplicar mediante el uso del material partida respectiva.

Por lo tanto, la invención, se refiere en particular a un proceso que comprende hacer reaccionar un compuesto de fórmula II

en donde los sustituyentes son como se han definido anteriormente, o bien con un compuesto de fórmula IIIA

en donde los sustituyentes son como se han definido anteriormente y R3 pueden representar adicionalmente halometilo, por ejemplo, bromometilo o clorometilo, en la presencia de un agente de activación ("método A") o con un compuesto de fórmula IIIB

en donde R1 es como se definió anteriormente; RG representa un grupo reactive (tal como imidazolilcarbonilo) y R3 es como se definió anteriormente y puede representar adicionalmente, halometilo, por ejemplo bromometilo o clorometilo 10 ("método B").

En cada caso opcionalmente en la presencia de un diluyente y opcionalmente en la presencia de un auxiliar de la reacción y recuperando el compuesto resultante de fórmula IA en forma libre o en forma de una sal y, opcionalmente convirtiendo un compuesto de la fórmula IA obtenible de acuerdo con el método A o método B en un compuesto diferente de la fórmula IA, y/o convirtiendo una sal obtenible de un compuesto de la fórmula IA en una sal diferente del

15 mismo, y/o convirtiendo un compuesto libre obtenible de la fórmula IA en una de sus sales, y/o separando un isómero obtenible de un compuesto de la fórmula IA a partir de uno o más diferentes isómeros obtenibles de la fórmula IA.

Condiciones de reacción

El proceso puede llevarse a cabo de acuerdo con métodos conocidos en la técnica, o como se divulga en los Ejemplos a continuación. Por ejemplo un compuesto de fórmula II puede hacerse reaccionar con un compuesto de fórmula III en un 20 solvente, por ejemplo, dimetilformamida, en la presencia de una base, por ejemplo una amina orgánica, por ejemplo trietilamina.

Donde están dadas temperaturas arriba o en lo sucesivo, deben añadirse “aproximadamente”, como pequeñas desviaciones de los valores numéricos dados, por ejemplo son tolerables variaciones de ±10 %.

Todas las reacciones pueden tener lugar en la presencia de uno o más diluyentes y/o solventes. Los materiales de partida pueden ser usados en cantidades equimolares; alternativamente, un compuesto puede ser usado en exceso, por ejemplo para funcionar como un solvente o para cambiar el equilibrio o generalmente para acelerar las velocidades de reacción.

Pueden agregarse en cantidades adecuadas ayudas de reacción, tales como ácidos, bases o catalizadores, como se conoce en el campo, requeridos por una reacción y de acuerdo con los procedimientos generalmente conocidos.

Grupos protectores

Si uno o más de otros grupos funcionales, por ejemplo carboxi, hidroxi, amino, sulfhidrilo o similares son o necesitan ser protegidos en un material de partida tal como se describe en este documento o cualquier otro precursor, ya que no deben tomar parte en la reacción o perturbar la reacción, estos son grupos tales como se utilizan normalmente en la síntesis de compuestos peptídicos, y también de cefalosporinas y penicilinas, así como derivados de ácidos nucleicos y azúcares. Los grupos protectores son esos grupos que ya no están presentes en los compuestos finales, una vez que se retiran, mientras que los grupos que permanecen como sustituyentes no son grupos protectores en el sentido utilizado aquí los cuales son grupos que se añaden a un material de partida o de la etapa intermedia y eliminan para obtener un compuesto final. También en el caso de conversiones de un compuesto de la fórmula (IA) en un compuesto diferente de la fórmula (IA) los grupos protectores pueden ser introducidos y retirados, si es útil o necesario.

Los grupos protectores pueden estar ya presentes en los precursores y deben proteger los grupos funcionales en cuestión contra reacciones secundarias no deseadas, tales como acilaciones, eteri-ficaciones, esterificaciones, oxidaciones, solvólisis, y reacciones similares. Es una característica de los grupos protectores que ellos se prestan fácilmente, es decir, sin reacciones secundarias no deseadas, a la eliminación, típicamente por acetólisis, protonólisis, solvólisis, reducción, fotólisis o también por actividad enzimática, por ejemplo bajo condiciones análogas a las condiciones fisiológicas, y que no están presentes en los productos finales. El especialista sabe, o puede establecer fácilmente, qué grupos protectores son adecuados con las reacciones mencionadas anteriormente y a continuación.

La protección de estos grupos funcionales mediante tales grupos protectores, los propios grupos protectores, y sus reacciones de eliminación se describen por ejemplo en las obras de referencia estándar, tales como J. F. W. McOmie, "Protective Groups in Organic Chemistry", Plenum Press, London and New York 1973, in T. W. Greene, "Protective Groups in Organic Synthesis", Third edition, Wiley, New York 1999, in "The Peptides"; Volume 3 (editors: E. Gross and J. Meienhofer), Academic Press, London and New York 1981, in "Methodoen der organischen Chemie" (Methods of organic chemistry), Houben Weyl, 4th edition, Volume 15/l, Georg Thieme Verlag, Stuttgart 1974, in H.-D. Jakubke and H. Jescheit, "Aminosäuren, Peptide, Proteine" (Amino acids, peptides, proteins), Verlag Chemie, Weinheim, Deerfield Beach, and Basel 1982, y en Jochen Lehmann, "Chemie der Kohlenhydrate: Monosaccharide und Derivate" (Chemistry of carbohydrates: monosaccharides and derivatives), Georg Thleme Verlag, Stuttgart 1974.

Reacciones opcionales y conversiones

Un compuesto de la fórmula (IA) se puede convertir en un compuesto diferente de la fórmula (IA).

En un compuesto de la fórmula (IA) en la que R3 representa fluorometilo o hidroximetilo; tal compuesto se puede obtener mediante la conversión del correspondiente derivado de cloro en el compuesto hidroxi o flúor. Tales reacciones son conocidas y se refiere como reacciones de sustitución. Esta conversión puede tener lugar en la etapa del material de partida de fórmula (IIIA o B) o mediante la conversión de un compuesto correspondiente de fórmula (IA).

En un compuesto de la fórmula (IA) en donde un sustituyente porta un sustituyente amino o amino- C1-C7 alquilo, el amino se puede convertir en acilamino, por ejemplo C1- C7- alcanoilamino o C1- C7- alcanosulfonilamino, por reacción con un correspondiente C1- C7- alcanoilhalogenuro o C1- C7- alcanosulfonilhalogenuro, por ejemplo un cloruro correspondiente, en presencia de una base terciaria de nitrógeno, tal como trietilamina o piridina, en la ausencia o

presencia de un solvente apropiado, tal como cloruro de metileno, por ejemplo a temperaturas en el rango de -20 a 50 ºC, por ejemplo a aproximadamente temperatura ambiente.

En un compuesto de la fórmula (IA) en donde un sustituyente lleva un sustituyente ciano, el ciano se puede convertir en un grupo aminometilo, por ejemplo por hidrogenación en la presencia de un catalizador de metal apropiado, tales como níquel Raney o cobalto Raney, en un solvente apropiado, por ejemplo un alcanol inferior, tal como metanol y/o etanol, por ejemplo a temperaturas en el rango de -20 a 50 ºC, por ejemplo a aproximadamente temperatura ambiente.

Las sales de un compuesto de fórmula (IA) con un grupo formador de sal se pueden preparar de una manera conocida per se. Sales de adición ácida de los compuestos de fórmula (IA) pueden por lo tanto obtenerse por tratamiento con un ácido o con un reactivo de intercambio aniónico adecuado. Una sal con dos moléculas de ácido (por ejemplo, un dihalogenuro de un compuesto de fórmula (IA)) también se puede convertir en una sal con una molécula de ácido por compuesto (por ejemplo un monohalogenuro); esto puede hacerse calentando hasta fusión, o por ejemplo calentando como un sólido bajo un alto vacío a temperatura elevada, por ejemplo de 130 a 170 ºC, una molécula del ácido que está siendo expelido por molécula de un compuesto de fórmula (IA). Las sales usualmente se pueden convertir en compuestos libres, por ejemplo por tratamiento con compuestos básicos adecuados, por ejemplo con carbonatos de metales alcalinos, hidrogenocarbonatos de metales alcalinos, o hidróxidos de metales alcalinos, típicamente carbonato de potasio o hidróxido de sodio.

Mezclas estereoisoméricas, por ejemplo mezclas de diastereómeros, se pueden separar en sus isómeros correspondientes en una forma conocida per se por medio de métodos de separación adecuados. Las mezclas diastereoméricas por ejemplo se pueden separar en sus diastereómeros individuales por medio de cristalización fraccionada, cromatografía, distribución de solvente, y procedimientos similares. Esta separación puede tener lugar ya sea a nivel de un compuesto de partida o en un compuesto de fórmula (IA) en sí misma. Los enantiómeros se pueden separar a través de la formación de sales diastereoméricas, por ejemplo por formación de sales con un ácido quiral de enantiómero puro, o por medio de cromatografía, por ejemplo por HPLC, utilizando sustratos cromatográficos con ligandos quirales

Debe destacarse que las reacciones análogas a las conversiones mencionadas en este capítulo también pueden tener lugar en el nivel de intermediarios apropiados (y por lo tanto son útiles en la preparación de los materiales de partida correspondientes).

Materiales de partida:

Los materiales de partida de las formulas II y III, así como otros material de partida mencionados aquí, por ejemplo más abajo, se pueden preparar de acuerdo con o en analogía a los métodos que son conocidos en la técnica, son conocidos en la técnica y/o están comercialmente disponibles. En la medida en que la producción de los materiales de partida no se describe particularmente, los compuestos son conocidos o pueden prepararse análogamente a métodos conocidos en la técnica, por ejemplo, en el documento WO 05/021519 o WO04/096797, o como se describe de aquí en adelante. Materiales de partida novedosos, así como los procesos para la preparación de los mismos, son también una forma de realización de la presente invención. En las realizaciones preferidas, se utilizan tales materiales de partida y las reacciones elegidas se seleccionan con el fin de obtener los compuestos preferidos.

En los materiales de partida (incluyendo intermedios), que también pueden ser usados y/o obtenidos como sales, donde sea apropiado y conveniente, los sustituyentes son preferiblemente como se define para un compuesto de la fórmula (IA)

Los compuestos de la fórmula (IA) tal como se describen aquí son útiles como productos farmacéuticos. Por consiguiente la invención se refiere en una realización a composiciones para uso humano o veterinario donde está indicada la inhibición de PI3K.

La invención se refiere al tratamiento de enfermedades proliferativas celulares tales como tumores y/o crecimiento de células cancerosas mediado por PI3K. En particular, los compuestos son útiles en el tratamiento de cánceres humanos o

animales (por ejemplo, murina), incluyendo, por ejemplo, pulmón y bronquios; próstata, de seno; páncreas; colon y recto; tiroides; hígado y ducto biliar intrahepático; hepatocelular; gástrica; glioma/glioblastoma; endometrio; melanoma; riñón y pelvis renal; vejiga urinaria; cuerpo uterino; cérvix uterina; ovario; mieloma múltiple; esófago; leucemia mielogenosa aguda; leucemia mielogenosa crónica; leucemia linfocítica; leucemia mieloide; cerebro; cavidad oral y faringe; laringe; intestino delgado; linfoma no Hodgkin; melanoma; y adenoma velloso de colon

En otras realizaciones, la condición o dolencia mediado por PI3K o trastorno se selecciona del grupo que consiste de: asma, COPD, ARDS, síndrome de Loffler, neumonía eosinofílica, infestación parasitaria (en particular metazoarios) (que incluye eosinofilia tropical), aspergilosis broncopulmonar, poliarteritis nodosa (que incluye síndrome de Churg-Strauss), granuloma eosinofílico, trastornos relacionados con eosinófilos que afectan las vías respiratorias ocasionados por reacción a fármacos, psoriasis, dermatitis de contacto, dermatitis atópica, alopecia areata, eritema multiforme, dermatitis herpetiforme, esclerodermia, vitiligo, hipersensibilidad angiitis, urticaria, penfigoide buloso, lupus eritematoso, pénfigo, epidermólisis bulosa adquirida, trastornos hematológicos autoinmunes (por ejemplo, anemia hemolítica, anemia aplástica, anemia pura de glóbulos rojos y trombocitopenia idiopática), lupus eritematoso sistémico, policondritis, esclerodermia, granulomatosis de Wegener, dermatomiositis, hepatitis activa crónica, miastenia gravis, síndrome de Steven-Johnson, esprue idiopático, enfermedad inflamatoria autoinmune del intestino (por ejemplo colitis ulcerativa y enfermedad de Crohn), oftalmopatía endocrina, enfermedad de Grave, sarcoidosis, alveolitis, neumonitis por hipersensibilidad crónica, esclerosis múltiple, cirrosis biliar primaria, uveítis (anterior y posterior), fibrosis pulmonar intersticial, artritis psoriática, glomerulonefritis, enfermedades cardiovasculares, aterosclerosis, hipertensión, trombosis venosa profunda, apoplejía, infarto del miocardio, angina inestable, tromboembolismo, embolismo pulmonar, enfermedades trombolíticas, isquemia arterial aguda, oclusiones trombóticas periféricas, y enfermedad de la arteria coronaria, lesiones por reperfusión, retinopatía, tales como retinopatía diabética o retinopatía hiperbárica inducida por oxígeno, y condiciones caracterizadas por presión intraocular elevada o secreción de humor acuoso ocular, tales como glaucoma.

Para los usos anteriores la dosificación requerida variará por supuesto dependiendo del modo de administración, la condición particular a ser tratada y el efecto deseado. En general, son indicados resultados satisfactorios para ser obtenidos sistémicamente en dosificaciones diarias de aproximadamente 0.03 a 10.0 mg/kg por peso corporal. Una dosificación diaria indicada en el mamífero más grande, por ejemplo, humanos, está en el rango de aproximadamente

0.5 mg a aproximadamente 1 g, administrados convenientemente, por ejemplo, en dosis divididas hasta cuatro veces al día o en forma retardada. Las formas de dosificación unitaria adecuadas para la administración oral comprenden de ca.

0.1 a 500 mg de ingrediente activo.

Los compuestos de fórmula (IA) se pueden administrar por cualquier vía convencional, en particular por vía enteral, por ejemplo oralmente, por ejemplo en la forma de tabletas o cápsulas, o parenteralmente, por ejemplo en forma de soluciones o suspensiones inyectables, por vía tópica, por ejemplo en forma de lociones, geles, ungüentos o cremas, por inhalación, por vía intranasal, o en una forma de supositorio.

Los compuestos de fórmula (IA) se pueden administrar en forma libre o en forma de sal farmacéuticamente aceptable por ejemplo como se indicó anteriormente. Tales sales se pueden preparar de manera convencional y exhiben el mismo orden de actividad que los compuestos libres.

Por consiguiente, la invención también proporciona:

•

un compuesto de fórmula (IA), en forma libre o en forma de sal farmacéuticamente aceptable como un producto farmacéutico, por ejemplo en cualquiera de los métodos como se indica aquí.

•

un compuesto de la fórmula (IA) en forma libre o en forma de sal farmacéuticamente aceptable para su uso como producto farmacéutico, por ejemplo en cualquiera de los métodos como se indica aquí, en particular para el uso en una o más enfermedades mediadas por fosfatidilinositol 3-quinasa.

• el uso de un compuesto de fórmula (IA) en forma libre o en forma de sal farmacéuticamente aceptable para la manufactura de un medicamento para el tratamiento de una o más enfermedades mediadas por fosfatidilinositol 3quinasa.

La PI3K sirve como un segundo nodo de mensajero que integra las rutas de señalización en paralelo, está emergiendo la evidencia de que la combinación de un inhibidor de PI3K con inhibidores de otras rutas será útil en el tratamiento de cáncer y enfermedades proliferativas en los humanos. Aproximadamente 20 - 30% de los cánceres de seno humanos sobre expresan Her-2/neu- ErbB2, el objetivo del fármaco trastuzumab. Aunque trastuzumab ha demostrado respuestas duraderas en algunos pacientes que expresan ErbB2 Her2/neu-, sólo un subconjunto de estos pacientes responden. El trabajo reciente ha indicado que esta rata de respuesta limitada se puede mejorar sustancialmente por la combinación de trastuzumab con inhibidores de PI3K o la ruta PI3K/AKT (Chan et al., Breast Can. Res. Treat. 91: 187 (2005), Woods Ignatoski et al., Brit. J. Cancer 82: 666 (2000), Nagata et al., Cancer Cell 6: 117 (2004)).

Una variedad de tumores malignos humanos expresan mutaciones activadoras o niveles incrementados de HER1/EGFR y un número de anticuerpos e inhibidores de moléculas pequeñas se han desarrollado contra este receptor tirosina quinasa incluyendo tarceva, gefitinib y erbitux. Sin embargo, mientras que los inhibidores de EGFR demuestran actividad antitumor en ciertos tumores humanos (ejemplo, NSCLC), no logran incrementar la supervivencia de los pacientes en general en todos los pacientes con tumores que expresan EGFR. Esto puede ser racionalizada por el hecho de que muchos objetivos corriente abajo de HER1/EGFR están mutados o desregulados a altas frecuencias en una variedad de tumores malignos, incluyendo la ruta PI3K/Akt. Por ejemplo, gefitinib inhibe el crecimiento de una línea celular de adenocarcinoma en ensayos in vitro. No obstante, se pueden seleccionar los sub-clones de estas líneas celulares que son resistentes a gefitinib que demuestran incremento de la activación de la ruta de PI3/Akt. La subregulación o la inhibición de esta ruta hace los subclones resistentes sensibles a gefitinib (Kokubo et al., Brit. J. Cancer 92: 1711 (2005)). Por otra parte, en un modelo in vitro de cáncer de seno con una línea celular que alberga una mutación PTEN y sobre expresa la inhibición del EGFR tanto de la ruta PI3K/Akt y EGFR se produce un efecto sinérgico (She et al., Cancer Cell 8: 287- 297 (2005)). Estos resultados indican que la combinación de inhibidores de la ruta gefitinib PI3K/Akt y sería una atractiva estrategia terapéutica en el cáncer

La combinación de AEE778 (un inhibidor de Her-2/neu/ErbB2, VEGFR y EGFR) y RAD001 (un inhibidor de mTOR, un objetivo corriente debajo de Akt) produce mayor eficacia combinada que cualquier agente solo en un modelo de xenoinjerto de glioblastoma (Goudar et al., Mol. Cancer. Ther. 4:101-112 (2005)).

Los antiestrógenos, tales como tamoxifeno, inhiben el crecimiento del cáncer de seno a través de la inducción de la detención del ciclo celular que requiere la acción del inhibidor del ciclo celular p27kip. Recientemente, se ha demostrado que la activación de la ruta de la quinasa Ras-Raf-MAP altera el estado de fosforilación de p27kip de tal manera que su actividad inhibidora en la detención del ciclo celular se atenúa, contribuyendo de este modo a la resistencia antiestrógeno (Donovan, et al, J. Biol. Chem. 276: 40888, (2001)). Como informó Donovan et al., la inhibición de la señalización de MAPK mediante el tratamiento con inhibidor de MEK invierte el estado de fosforilación aberrante de p27 en líneas celulares de hormonas refractarias de cáncer de seno y al hacerlo restaura la sensibilidad de la hormona. De la misma manera, la fosforilzación de p27Kip por Akt también abroga su papel para detener el ciclo celular (Viglietto et al., Nat Med. 8: 1145 (2002)).

Por consiguiente, en un aspecto adicional, los compuestos de fórmula (IA) se utilizan en el tratamiento de cánceres dependientes de hormonas, tales como cánceres de seno y de próstata. Mediante este uso, está dirigido a revertir la resistencia a la hormona comúnmente vista en estos cánceres con agentes contra el cáncer convencionales.

En cánceres hematológicos, tales como leucemia mielogenosa crónica (CML), la translocación cromosómica es responsable de la BCR-Abl tirosina quinasa constitutivamente activada. Los pacientes afectados son sensibles a imatinib, una pequeña molécula inhibidora de la tirosina quinasa, como resultado de la inhibición de la actividad de quinasa Abl. Sin embargo, muchos pacientes con enfermedad en etapa avanzada responden inicialmente a imatinib, pero entonces recaen más tarde debido a mutaciones que confieren resistencia en el dominio de la quinasa Abl.

Estudios in vitro han demostrado que BCR-Ab1 emplea la ruta de la quinasa Ras-Raf para provocar sus efectos. Además, la inhibición de más de una quinasa en la misma ruta proporciona una protección adicional contra las mutaciones que confieren resistencia.

Por consiguiente, en otro aspecto, los compuestos de fórmula (IA) se utilizan en combinación con al menos un agente adicional seleccionado del grupo de los inhibidores de quinasa, tales como Gleevec®, En el tratamiento de cánceres hematológicos, tales como leucemia mielogenosa crónica (CML). Mediante este uso, se dirige a revertir o prevenir la resistencia a dicho al menos un agente adicional.

Debido a que la activación de la ruta PI3K/Akt impulsa la supervivencia celular, la inhibición de la ruta en combinación con terapias que impulsan la apoptosis en células de cáncer, que incluyen radioterapia y quimioterapia, se traducirá en una mejor reacción. (Ghobrial et al., CA Cancer J. Clin 55:178-194 (2005)). Como un ejemplo, la combinación del inhibidor de PI3 quinasa con carboplatino demostró efectos sinérgicos tanto en la proliferación in vitro y ensayos de apoptosis así como en la eficacia en tumores in vivo en un modelo de xenoinjerto de cáncer de ovario (Westfall and Skinner, Mol. Cancer Ther. 4:1764-1771 (2005)).

Además del cáncer y enfermedades proliferativas, hay evidencia acumulada de que los inhibidores de PI3 quinasa de Clase 1A y 1B sería terapéuticamente útil en otras áreas de la enfermedad. La inhibición de p100 , el producto isoforme PI3K del gen PIK3CB, ha demostrado estar involucrado en la activación de plaquetas inducidas por desgarre (Jackson et al., Nature Medicine 11:507-514 (2005)). Por lo tanto, un inhibidor de PI3K que inhibe p110 puede ser útil como un agente único o en combinación en la terapia anti-trombótica. La isoforma p1100, el producto del gen PIK3CD, es importante en la función de las células B y la diferenciación (Clayton et al., J. Exp. Med. 196:753-763 (2002)), las respuestas de antígenos dependientes e independientes de células T (Jou et al., Mol. Cell. Biol. 22:8580-8590 (2002)) y la diferenciación de los mastocitos (Ali et al., Nature 431:1007-1011 (2004)). Por lo tanto, se espera que los inhibidores de la p1100 sean útiles en el tratamiento de las células B impulsado por enfermedades autoinmunes y asma. Finalmente, la inhibición de la p110y, el producto del gen de la isoforma PI3KCG, los resultados en la reducción de T, pero no de células, la respuesta (Reif et al., J. Immunol. 173:2236-2240 (2004)) y su inhibición demuestra la eficacia en modelos animales de enfermedades autoinmunes (Camps et al., Nature Medicine 11:936-943 (2005), Barber et al., Nature Medicine 11:933-935 (2005)).

La invención proporciona además composiciones farmacéuticas que comprenden al menos un compuesto de fórmula (IA), junto con un excipiente farmacéuticamente aceptable adecuado para la administración a un sujeto humano o animal, ya sea solo o junto con otros agentes anticáncer.

La invención se refiere además a métodos para el tratamiento de sujetos humanos o animales que sufren de una enfermedad proliferativa celular, tal como cáncer. Los métodos de tratamiento de un sujeto humano o animal en necesidad de tal tratamiento, comprenden por lo tanto administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de fórmula (IA) ya sea solo o en combinación con uno o más de otros agentes anticáncer. En particular, las composiciones o bien se pueden formular juntos como una combinación terapéutica o administrarse por separado. Agentes anticáncer adecuados para su uso con un compuesto de fórmula IA incluyen, pero no se limitan a, uno o más compuestos seleccionados del grupo consistente de inhibidores de quinasa, antiestrógenos, antiandrógenos, otros inhibidores, fármacos quimioterapéuticos contra el cáncer, agentes alquilantes, agentes quelantes, modificadores de la respuesta biológica, vacunas contra el cáncer, agentes para la terapia antisentido como se establecen a continuación:

A. Inhibidores de la Quinasa: Inhibidores de la quinasa para uso como agentes anticáncer en conjunto con el compuesto de la fórmula (IA) incluyen inhibidores de quinasas del Receptor del Factor de Crecimiento Epidérmico (EGFR) tales como pequeñas moléculas quinazolinas, por ejemplo gefitinib (US 5457105, US 5616582, y US 5770599), ZD-6474 (WO 01/32651), erlotinib (Tarceva®, US 5, 747, 498 y WO 96/30347), y lapatinib (US 6, 727, 256 y WO 02/02552); inhibidores de quinasa del Receptor del Factor de Crecimiento Vascular Endotelial (VEGFR), que incluyen SU- 11248 (WO 01/60814), SU 5416 (US 5, 883, 113 y WO 99/61422), SU 6668 (US 5, 883, 113 y WO 99/61422), CHIR- 258 (US 6, 605, 617 y US 6, 774, 237), vatalanib o PTK- 787 (US 6, 258, 812), Trampa de VEGF (WO 02/57423), B43- Genistein (WO

09606116), fenretinide (ácido retinoico p-hidroxifenilamina) (US 4, 323, 581), IM- 862 (WO 02/62826), bevacizumab o Avastin® (WO 94/10202), KRN- 951, 3- [5- (metilsulfonilpiperidina metilo)- indolilo]- quinolona, AG- 13736 y AG-13925, pirrolo [2, 1-f] [1, 2, 4] triazinas, ZK-304709, Veglin®, VMDA- 3601, EG-004, CEP-701 (US 5, 621, 100), Cand5 (WO 04/09769); inhibidores de tirosina quinasa Erb2 tal como pertuzumab (WO 01/00245), trastuzumab, y rituximab; inhibidores de la proteína quinasa Akt, tal como RX- 0201; inhibidores de la Proteina Quinasa C (PKC), tal como LY317615 (WO 95/17182), y perifosina (US 2003171303); inhibidores de quinasa Raf/Map/MEK/Ras que incluye sorafenib (BAY 43-9006), ARQ- 350RP, LErafAON, BMS-354825 AMG- 548, y otras divulgadas en WO 03/82272; inhibidores de quinasa del Receptor del Factor de Crecimiento de Fibroblastos (FGFR); inhibidores de Quinasa Dependiente de la Célula (CDK), que incluye CYC-202 o roscovitina (WO 97/20842 y WO 99/02162); inhibidores de quinasa del Receptor del Factor de Crecimiento Derivado de Plaquetas (PDGFR) tal como CHIR- 258, 3G3 mAb, AG- 13736, SU- 11248 y SU6668; e inhibidores de quinasa Bcr- Abl y proteínas de fusión tal como STI- 571 o Gleevec® (imatinib).

B. Antiestrógenos: Agentes con estrógeno como objetivo para uso en terapia anticáncer en conjunción con el compuesto de fórmula (IA) incluyen Moduladores Selectivos del Receptor de Estrógeno (SERMs) que incluyen tamoxifeno, toremifeno, raloxifeno; inhibidores de aromatasa que incluye Arimidex® o anastrozole; Subreguladores del Receptor de Estrógeno (ERDs) que incluyen Faslodex® o fulvestrant.

C. Antiandrógenos: Agentes de andrógenos dirigidos para uso en terapia anticáncer en conjunción con el compuesto de fórmula (IA) incluyen flutamida, bicalutamida, finasteride, aminoglutetamida, cetoconazol, y corticosteroides.

D. Otros inhibidores: Otros inhibidores para su uso como agentes anticáncer en conjunción con el compuesto de fórmula (IA) incluyen inhibidores de la proteína farnesil transferasa que incluyen tipifamib o R- 115777 (US 2003134846 y WO 97/21701), BMS-214662, AZD- 3409, y FTI- 277; inhibidores de topoisomerasa que incluyen merbarone y diflomotecan (BN- 80915); inhibidores de proteína de huso de quinesina mitótica (KSP) que incluyen SB- 743921 y MKI-833; moduladores del tales como bortezomib o Velcade® (US 5, 780, 454), XL- 784; e inhibidores ciclooxigenasa 2 (COX-2) que incluyen fármacos antiinflamatorios no esteroidales (NSAIDs) .

E. Fármacos quimioterapéuticos contra el cáncer: Agentes particulares quimioterapéuticos contra el cáncer para uso como agentes anticáncer en conjunción con el compuesto de fórmula (IA) incluyen anastrozol (Arimidex®), bicalutamida (Casodex®), sulfato de bleomicina (Blenoxane®), busulfano (Myleran®), busulfano en inyecciones (Busulfex®), capecitabina (Xeloda®), N4- pentoxicarbonilo-5- desoxi -5-fluorocitidina, carboplatino (Paraplatin®), carmustina (BiCNU®), clorambucilo (Leukeran®), cisplatino (Platinol®), cladribina (Leustatin®), ciclofosfamida (Cytoxan® o Neosar®), citarabine, citosina arabinósido (Cytosar- U®), inyección de liposomas de citarabina (DepoCyt®), dacarbazina (DTIC- Dome®), dactinomicina (Actinomycin D, Cosmegan), clorhidrato de daunorubicina (Cerubidine®), daunorubicin citrato liposoma inyección (DaunoXome®), dexametasona, docetaxel (Taxotere®, US 2004073044), clorhidrato de doxorrubicina (Adriamycin®, Rubex®), etopósido (Vepesid®), fosfato de fludarabina (Fludara®), 5- fluorouracil (Adrucil®, Efudex®), flutamida (Eulexin®), tezacitibina, Gemcitabina (difluorodeoxycitidine), hidroxiurea (Hydrea®), Idarrubicina (Idamycin®), ifosfamida (IFEX®), irinotecan (Camptosar®), L- asparaginasa (ELSPAR®), leuvocorina calcio, melfalan (Alkeran®), 6- mercaptopurina (Purinethol®), metotrexato (Folex®), mitoxantrona (Novantrone®), mylotarg, paclitaxel (Taxol®), phoenix (Yttrium90/MX-DTPA), pentostatina, polifeprosan 20 con implante de carmustina (Gliadel®), citrato de tamoxifeno (Nolvadex ®), teniposide (Vumon®), 6- thioguanine, thiotepa, tirapazamine (Tirazone®), clorhidrato de topotecan para inyección (Hycamptin®), vinblastina (Velban®), vincristina (Oncovin®), y vinorelbina (Navelbine®).

F. Agentes alquilantes: Agentes alquilantes para uso en conjunción con un compuesto de fórmula (IA) incluyen VNP40101M o cloretizina, oxaliplatino (US 4, 169, 846, WO 03/24978 y WO 03/04505), glufosfamida, mafosfamida, etopofos (US 5, 041, 424), prednimustina; treosulfano; busulfano; irofluven (acilfulveno); penclomedina; pirazoloacridina (PD115934); O6- bencilguanina; decitabina (5- aza- 2 - desoxicitidina); brostallicin; mitomicina C (MitoExtra); TLK- 286 (Telcyta®); temozolomida; trabectedina (US 5, 478, 932); AP- 5280 (Formulación de Platinato de Cisplatino); porfiromicina; y clearazide (mecloretamina) .

G. Agentes quelantes: Agentes quelantes para uso en conjunción con un compuesto de fórmula (IA) incluyen tetratiomolibdato (WO 01/60814); RP- 697; Quimérico T84.66 (cT84.66); gadofosveset (Vasovist®); deferoxamina; y bleomicina opcionalmente en combinación con electroporación (EPT).

H. Modificadores de la respuesta biológica: Modificadores de la respuesta biológica, tales como moduladores inmunes, para uso en conjunción con el compuesto de fórmula (IA) incluyen estaurosporina y análogos macrocíclicos del mismo, que incluyen UCN-01, CEP-701 y midostaurina (véase WO 02/30941, WO 97/07081, WO 89/07105, US 5, 621, 100, WO 93/07153, WO 01/04125, WO 02/30941, WO 93/08809, WO 94/06799, WO 00/27422, WO 96/13508 y WO 88/07045); escualamina (WO 01/79255); DA-9601 (WO 98/04541 y US 6, 025, 387); alemtuzumab; interferones (por ejemplo IFNa, IFN-b etc.); interleucinas, especialmente IL- 2 o aldesleucina así como IL-1, IL- 3, IL-4, IL-5, IL- 6, IL- 7, IL- 8, IL- 9, IL- 10, IL- 11, IL-12, y variantes biológicos activos del mismo que tiene secuencias de aminoácidos mayor que 70% de la secuencia humana natural; altretamina (Hexalen®); SU 101 o leflunomida (WO 04/06834 y US 6, 331, 555); imidazoquinolinas tales como resiquimod e imiquimod (US 4, 689, 338, 5, 389, 640, 5, 268, 376, 4, 929, 624, 5, 266, 575, 5, 352, 784, 5, 494, 916, 5, 482, 936, 5, 346, 905, 5, 395, 937, 5, 238, 944, y 5, 525, 612); y SMIPs, que incluyen benzazoles, antraquinonas, tiosemicarbazones, y triptantrinas (WO 04/87153, WO 04/64759, y WO 04/60308).

I. Vacunas contra el cáncer: Vacunas anticáncer para uso en conjunción con el compuesto de fórmula (IA) incluyen Avicine® (Tetrahedron Lett. 26: 2269- 70 (1974) ); oregovomab (OvaRex®); Theratope® (STn-KLH); Vacunas contra el Melanoma; series GI- 4000 (GI-4014, GI- 4015, y GI-4016), que se dirigen a cinco mutaciones en la proteína Ras; GlioVax-1; MelaVax; Advexin® o INGN- 201 (WO 95/12660); Sig/E7/LAMP-1, codificación HPV- 16 E7; Vacuna MAGE- 3 o M3TK (WO 94/05304); HER- 2VAX; ACTIVE, la cual estimula las células T específicas para tumores; vacuna contra el cáncer GM- CSF; y vacunas basadas en Listeria monocitogenes.

J. Terapia antisentido: Agentes anticáncer para uso en conjunción con el compuesto de fórmula (IA) también incluyen composiciones antisentido, tales como AEG- 35156 (GEM- 640); AP-12009 y AP- 11014 (oligonucleótidos antisentido específicos TGF- beta2-); AVI- 4126; AVI- 4557; AVI- 4472; oblimersen (Genasense®); JFS2; aprinocarsen (WO 97/29780); GTI-2040 (un oligo antisentido de ARNm de R2 ribonucleótido reductasa) (WO 98/05769); GTI-2501 (WO 98/05769); encapsulados en liposomas c-Raf oligodesoxinucleótidos antisentido (LErafAON) (WO 98/43095); y Sima- 027 (ARNm con VEGFR-1 como objetivo terapéutico basado en ARNi).

Un compuesto de fórmula (IA) también se puede combinar en una composición farmacéutica con sustancias fármacos broncodilatadores o antihistamínico. Tales fármacos broncodilatadores incluyen agentes anticolinérgicos o antimuscarínicos, en particular glicopirrolato, bromuro de ipratropio, bromuro de oxitropio, y bromuro de tiotropio, OrM3, aclidinio, CHF5407, GSK233705 y agonistas adrenoreceptores -2- tales como salbutamol, terbutalina, salmeterol, carmoterol, milveterol y, especialmente, indacaterol y formoterol. Sustancias fármacos co-terapéuticas antihistamínico incluyen clorhidrato de cetirizina, fumarato de clemastina, prometazina, loratadina, desloratadina difenhidramina y clorhidrato de fexofenadina.

En un aspecto adicional la invención provee una combinación que comprende un compuesto de fórmula (IA) y uno o más compuestos que son útiles para el tratamiento de una enfermedad trombolítica, enfermedad del corazón, apoplejía, etc. Tales compuestos incluyen aspirina, una estreptoquinasa, un activador del plasminógeno tisular, una uroquinasa, un anticoagulante, fármacos antiplaquetarios (por ejemplo, PLAVIX; bisulfato de clopidogrel), una estatina (por ejemplo, LIPITOR o Atorvastatina cálcica), ZOCOR (Simvastatina, CRESTOR (Rosuvastatina), etc.), un bloqueador Beta (por ejemplo, Atenolol), NORVASC (besilato de amlodipina), y un inhibidor ACE (por ejemplo, lisinopril).

En un aspecto adicional la invención provee una combinación que comprende un compuesto de fórmula (IA) y uno o más compuestos que son útiles para el tratamiento de la antihipertensión. Tales compuestos incluyen inhibidores ACE, agentes reductores de lípidos tales como estatinas, LIPITOR (Atorvastatina calcio), bloqueadores de los canales de calcio tales como NORVASC (besilato de amlodipina).

En un aspecto adicional la invención provee una combinación que comprende un compuesto de fórmula (IA) y uno o más compuestos seleccionados del grupo que consisten de fibratos, bloqueadores beta, inhibidores NEPI, antagonistas del receptor de Angiotensina 2 e inhibidores de la agregación de plaquetas.

En un aspecto adicional la invención provee una combinación que comprende un compuesto de fórmula (IA) y un compuesto adecuado para el tratamiento de enfermedades inflamatorias, que incluyen la artritis reumatoide. Tal compuesto puede ser seleccionado del grupo que consiste de inhibidores TNF-a tales como anticuerpos monoclonales anti- TNF-a (tales como REMICADE, CDP-870) y D2E7 (HUMIRA) y moléculas de fusión de inmunoglobulina del receptor TNF (tal como ENBREL), inhibidores IL- 1, antagonistas de los receptores o IL- 1 Ra soluble (por ejemplo KINERET o inhibidores ICE), agentes antiinflamatorios no esteroides (NSAIDS), piroxicam, diclofenaco, naproxeno, flurbiprofeno, fenoprofeno, ketoprofeno ibuprofeno, fenamatoes, ácido mefenámico, indometacina, sulindac, apazona, pirazolonas, fenilbutazona, aspirina, inhibidores COX- 2 (tales como CELEBREX (celecoxib), PREXIGE (lumiracoxib) ), inhibidores de metaloproteasas (preferiblemente inhibidores selectivos de MMP-13), inhibidores p2x7, inhibidores a2a, NEUROTIN, pregabalina, dosis bajas de metotrexato, leflunomida, hidroxicloroquina, penicilamina d, auranofina u oro parenteral u oral.

En un aspecto adicional la invención provee una combinación que comprende un compuesto de fórmula (IA) y un compuesto adecuado para el tratamiento de osteoartritis. Tal compuesto puede ser seleccionado entre el grupo que consiste de agentes antiinflamatorios no asteroideos estándar (de aquí en adelante NSAID) tales como piroxicam, diclofenaco, ácidos propiónicos, tales como naproxeno, flurbiprofeno, fenoprofenio, cetoprofeno e ibuprofeno, fenamatos tales como ácido mefenámico, indometacina, sulindac, apazona, pirazolonas tales como fenilbutazona, salicilatos tales como aspirina, inhibidores COX-tales como celecoxib, valdecoxib, lumiracoxib y etoricoxib, analgésicos y terapias intraarticulares tales como corticosteroides y ácidos hialurónicos tales como hialgano y synvisc.

En un aspecto adicional la invención provee una combinación que comprende un compuesto de fórmula (IA) y un agente antiviral y/o un compuesto antisepsia. Tal agente antiviral se puede seleccionar del grupo que consiste de Viracept, AZT, aciclovir y famciclovir. Tal compuesto antisepsia se puede seleccionar del grupo que consiste de Valant.

En un aspecto adicional la invención provee una combinación que comprende un compuesto de fórmula (IA) y uno o más agentes seleccionados del grupo que consiste de agentes CNS tales como antidepresivos (sertralina), fármacos anti Parkinson (tales como deprenilo, L- dopa, Requip, Mirapex; inhibidores MAOB (tales como selegina y rasagilina); inhibidores comP (tal como Tasmar); inhibidores A- 2; inhibidores de la retoma de dopamina; antagonistas de NMDA; agonistas de Nicotina; agonistas de Dopamina; y los inhibidores de la óxido nítrico sintasa neuronal).

En un aspecto adicional la invención provee una combinación que comprende un compuesto de fórmula (IA) y uno o más fármacos anti-Alzheimer. Tales fármacos anti-Alzheimer pueden ser seleccionados del grupo que consiste de donepezil, tacrina, inhibidores a20, NEUROTIN, pregabalina, inhibidores COX-2, propentofilina o metrifonato.

En un aspecto adicional la invención provee una combinación que comprende un compuesto de fórmula (IA) y agentes anosteoporosis y/o un agente inmunosupresor. Tales agentes para la osteoporosis se pueden seleccionar del grupo que consiste de EVISTA (clorhidrato de raloxifeno), droloxifeno, lasofoxifeno o fosomax. Tales agentes inmunosupresores se pueden seleccionar del grupo que consiste de FK-506 y rapamicina.

En otro aspecto de las realización preferidas, se proporcionan kits que incluyen uno o más compuestos de fórmula (IA) y un asociado de combinación como se divulga aquí. Kits representativos incluyen un compuesto inhibidor de PI3K (por ejemplo, un compuesto de fórmula (IA)) y un prospecto u otro etiquetado que incluyen instrucciones para el tratamiento de una enfermedad proliferativa celular mediante la administración de una cantidad inhibidora de PI3K del compuesto (s).

En general, los compuestos de fórmula (IA) se administrarán en una cantidad terapéuticamente efectiva por cualquiera de los modos de administración aceptados para agentes que sirven utilidades similares. La cantidad real del compuesto de fórmula (IA), es decir, el ingrediente activo, dependerá de numerosos factores tales como la gravedad de la

enfermedad a ser tratada, la edad y la salud relativa del sujeto, la potencia del compuesto utilizado, la ruta y forma de administración, y otros factores. El fármaco se puede administrar más de una vez al día, preferiblemente una o dos veces al día. Todos estos factores están dentro de la experiencia del médico tratante. Las cantidades terapéuticamente efectivas de los compuestos de fórmula IA pueden variar desde aproximadamente 0.05 a aproximadamente 50 mg por kilogramo de peso corporal del receptor por día, preferiblemente desde aproximadamente 0.1-25 mg/kg/día, más preferiblemente desde aproximadamente 0.5 hasta 10 mg/kg/día. Por lo tanto, para la administración a una persona de 70 kg, el rango de dosificación sería más preferiblemente de aproximadamente 35-70 mg por día.

En general, los compuestos de fórmula (IA) se pueden administrar como composiciones farmacéuticas por cualquiera de las siguientes rutas: administración oral, sistémica (por ejemplo, transdérmica, intranasal o por supositorio), o parenteral (por ejemplo, intramuscular, intravenosa o subcutánea). La manera preferida de administración es la oral utilizando un régimen conveniente de dosificación diaria que puede ajustarse de acuerdo con el grado de aflicción. Las composiciones pueden tomar la forma de comprimidos, píldoras, cápsulas, semisólidos, polvos, formulaciones de liberación sostenida, soluciones, suspensiones, elíxires, aerosoles, o cualquier otra composición apropiadas. Otra manera preferida para la administración de compuestos de la fórmula IA es la inhalación. Este es un método efectivo para suministrar un agente terapéutico directamente en el tracto respiratorio.

La selección de la formulación depende de varios factores tales como el modo de administración del fármaco y biodisponibilidad de la sustancia fármaco. Para la administración a través de inhalación, el compuesto puede ser formulado como solución líquida, suspensiones, propelentes de aerosol o polvo seco y cargado en un dispensador adecuado para la administración. Hay varios tipos de dispositivos de inhalación farmacéuticos -inhaladores nebulizadores, inhaladores de dosis medidas (MDI) y los inhaladores de polvo seco (DPI). Los dispositivos nebulizadores producen un flujo de aire a alta velocidad que hace que los agentes terapéuticos (que se han formulado en forma líquida) se asperjan como una niebla que se lleva en el tracto respiratorio del paciente. Los MDI normalmente son formulaciones envasadas con un gas comprimido. Tras el accionamiento, el dispositivo descarga una cantidad medida de agente terapéutico por gas comprimido, proporcionando así un método confiable de administración de una cantidad fija de agente. El DPI dispensa agentes terapéuticos en forma de un polvo que fluye libremente que puede ser dispersado en la corriente de aire inspiratoria del paciente durante la respiración por el dispositivo. Con el fin de lograr un polvo que fluya libremente, el agente terapéutico se formula con un excipiente tal como lactosa. Una cantidad medida del agente terapéutico es almacenada en una forma de cápsula y se dispensa con cada accionamiento.

Las invenciones también se relacionan a formulaciones en las que el tamaño de partícula de un compuesto de fórmula IA entre 10-1000, preferiblemente 10 - 400 nm. Tales formulaciones farmacéuticas han sido desarrolladas especialmente para fármacos que muestran pobre biodisponibilidad basado en el principio de que la biodisponibilidad se puede aumentar al incrementar el área de superficie, es decir, la disminución del tamaño de partícula. Por ejemplo, la U.S. 4,107,288 describe una formulación farmacéutica que tiene partículas en el rango de tamaño de 10 a 1,000 nm en la que el material activo está soportado sobre una matriz reticulada de macromoléculas. La U.S. 5,145,684 describe la producción de una formulación farmacéutica en la que la sustancia de fármaco se pulveriza a nanopartículas (tamaño medio de partícula de 400 nm) en la presencia de un modificador de superficie y luego se dispersa en un medio líquido para dar una formulación farmacéutica que exhibe una biodisponibilidad notablemente alta. Ambos documentos se incluyen por referencia.

En un aspecto adicional, la invención proporciona composiciones farmacéuticas que comprenden una (cantidad terapéuticamente efectiva) de un compuesto de fórmula (IA), y al menos un excipiente farmacéuticamente aceptable. Los excipientes aceptables son no tóxicos, ayudan en la administración, y no afectan adversamente el beneficio terapéutico del compuesto de fórmula (IA). Tal excipiente puede ser cualquier sólido, líquido, semisólido o en el caso de una composición en aerosol, un excipiente gaseoso que está generalmente disponible para un experto en la técnica. Los excipientes farmacéuticos sólidos incluyen almidón, celulosa, talco, glucosa, lactosa, sacarosa, gelatina, malta, arroz, harina, tiza, sílica gel, estearato de magnesio, estearato de sodio, monoestearato de glicerol, cloruro de sodio, leche desnatada en polvo y similares. Excipientes líquidos y semisólidos pueden ser seleccionados a partir de glicerol, propilen glicol, agua, etanol y diversos aceites, incluyendo los de petróleo, animal, vegetal o de origen sintético, por ejemplo,

aceite de cacahuete, aceite de soja, aceite mineral, aceite de sésamo, etc. Los vehículos líquidos preferidos, particularmente para soluciones inyectables, incluyen agua, solución salina, dextrosa acuosa, y glicoles. Los gases comprimidos se pueden utilizar para dispersar un compuesto de la fórmula IA en forma de aerosol. Los gases inertes adecuados para este propósito son el nitrógeno, dióxido de carbono, etc. Otros excipientes farmacéuticos adecuados y sus formulaciones se describen en Remington’s Pharmaceutical Sciences, editado por E. W. Martin (Mack Publishing Company, 18th ed., 1990). La cantidad del compuesto en una formulación puede variar dentro del rango completo empleado por los expertos en la técnica. Típicamente, la formulación contendrá, en un porcentaje en peso (% en peso) base, desde aproximadamente 0.01-99,99% en peso de un compuesto de fórmula IA basado en la formulación total, siendo el resto uno o más excipientes farmacéuticos adecuados. Preferiblemente, el compuesto está presente a un nivel de alrededor de 1-80% en peso.

La invención se refiere además a composiciones farmacéuticas que comprenden (es decir, que contiene o consiste en) al menos un compuesto de fórmula (IA) y al menos un excipiente farmacéuticamente aceptable.

Composiciones farmacéuticas que comprenden un compuesto de fórmula (IA) en forma libre o en forma de sal farmacéuticamente aceptable en asociación con al menos un excipiente farmacéuticamente aceptable (tal como un vehículo y/o diluyente) se pueden fabricar de manera convencional mezclando los componentes.

Composiciones farmacéuticas combinadas que comprenden un compuesto de fórmula (IA) en forma libre o en forma de sal farmacéuticamente aceptable y que comprenden además un asociado de combinación (ya sea en una forma unitaria de dosificación o como un kit de partes) en asociación con al menos un vehículo farmacéuticamente aceptable y/o diluyente se pueden fabricar de manera convencional mediante la mezcla con un vehículo farmacéuticamente aceptable y/o diluyente con dichos ingredientes activos.

Por consiguiente, la invención proporciona en aspectos adicionales

•

una composición farmacéutica combinada, por ejemplo para su uso en cualquiera de los métodos descritos aquí, que comprende un compuesto de fórmula (IA) en forma libre o forma de sal farmacéuticamente aceptable en asociación con un diluyente farmacéuticamente aceptable y/o vehículo.

•

una composición farmacéutica combinada que comprende un compuesto de fórmula (IA) en forma libre o en forma de sal farmacéuticamente aceptable como ingrediente activo; uno o más materiales portadores farmacéuticamente aceptables y/o diluyentes y opcionalmente una o más sustancias adicionales de fármacos. Tal composición farmacéutica combinada puede estar en forma una unidad de dosificación o como un kit de partes.

•

una composición farmacéutica combinada que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de fórmula (IA) en forma libre o en forma de sal farmacéuticamente aceptable y una segunda sustancia de fármaco, para la administración simultánea o secuencial.

•

una combinación farmacéutica, por ejemplo un kit, que comprende a) un primer agente que es un compuesto de fórmula (IA) como se describe aquí, en forma libre o en forma de sal farmacéuticamente aceptable, y b) al menos un coagente, por ejemplo como se indicó anteriormente; mediante el cual tal kit puede comprender instrucciones para su administración.

Los siguientes ejemplos de compuestos de fórmula (IA) ilustran la invención. Los métodos para preparar tales compuestos se describen en lo sucesivo. Se proporcionan para fines de referencia los compuestos de los ejemplos 1-5, 8-17, 19-39, 52, 59-114, 123, 130-151.

La Tabla 1 se refiere a compuestos de fórmula (IC)

Tabla 1 (continuación) (continuación) (continuación) (continuación)

Ejemplo

R1 R2 m R3 n Quiralidad en la posición 2

1

a-4-hidroxi 1 H 1 S

2

-4-hidroxi 1 H 1 S

3

a-4-hidroxi 1 H 1 S

4

-4-hidroxi 1 H 1 S

5

3,4-deshidro 2 H 1 S

6

a-4-hidroxi 1 H 1 S

Ejemplo

R1 R2 m R3 n Quiralidad en la posición 2

7

-4-hidroxi 1 H 1 S

8

a-4-fluoro 1 H 1 S

9

a-3-hidroxi 1 H 1 S

10

a-3-metilo 1 H 1 S

11

-3,4-metano 2 H 1 S

12

a-2-metilo 1 H 1 S

13

a-3-metilo 1 H 1 S

14

a-3-metilo 1 H 1 S

Ejemplo

R1 R2 m R3 n Quiralidad en la posición 2

15

a-3-metilo 1 H 1 S

16

- 0 H 0 R,S

17

a-2-metilo 1 H 1 S

18

a-2-metilo 1 H 1 S

19

a-2-metilo 1 H 1 S

20

a-3-metilo 1 H 1 S

21

a-3-metilo 1 H 1 S

Ejemplo

R1 R2 m R3 n Quiralidad en la posición 2

22

a-2-metilo 1 H 1 S

23

a-2-metilo 1 H 1 S

24

a-2-metilo 1 H 1 S

25

a-2-metilo 1 H 1 S

26

a-2-metilo 1 H 1 S

27

a-2-metilo 1 H 1 S

28

a-2-metilo 1 H 1 S

Ejemplo

R1 R2 m R3 n Quiralidad en la posición 2

29

a-3-metilo 1 H 1 S

30

a-3-metilo 1 H 1 S

31

a-3-metilo 1 H 1 S

32

a-2-metilo 1 H 1 S

La Tabla 2 se refiere a compuestos de fórmula ID en donde R3 representa metilo, n representa 1, quiralidad en la posición 2 es S

Tabla 2

Ejemplo

R1 R2 m

33

a-4-hidroxi 1

34

-4-hidroxi 1

35

a-3-hidroxi 1

36

a-2-metilo 1

37

a-3- metilo 1

38

a-4-fluoro 1

39

a-2- metilo 1

Tabla 2A

La Tabla 2A se refiere a compuestos adicionales de fórmula (ID) en donde R3 representa metilo, n representa 1, quiralidad en la posición 2 es S

Ejemplo

R1 R2 m

130

a-2--metilo 1

131

a-2--metilo 1

132

a-2--metilo 1

(continuación) (continuación)

Ejemplo

R1 R2 m

133

a-2--metilo 1

134

a-2-metilo 1

135

a-2-metilo 1

136

a-2-metilo 1

137

a-2-metilo 1

138

a-4-hidroxi 1

139

-4-hidroxi 1

140

a-4-N,N-dimetilamino 1

141

a-4-N,N-dimetilamino 1

142

-4-N,N-dimetilamino 1

143

-4-N,N-dimetilamino 1

144

a-2-metilo 1

145

a-2-metilo 1

146

a-2,3-metano 2

147

a-2,3-metano 2

148

a-2-metilo 1

Ejemplo

R1 R2 m

149

a-2,3-metano 2

150

a-2-metilo 1

151

a-2-metilo 1

La Tabla 3 se refiere a compuestos adicionales de fórmula (IC)

Tabla 3

Ejemplo

R1 R2 m R3 n Quiralidad en la posición 2

40

a-2-metilo 1 H 1 S

41

a-2-metilo 1 H 1 S

42

a-2-metilo 1 H 1 S

(continuación) (continuación) (continuación) (continuación) (continuación) (continuación) (continuación) (continuación) (continuación)

Ejemplo

R1 R2 m R3 n Quiralidad en la posición 2

43

a-2-metilo 1 H 1 S

44

a-2-metilo 1 H 1 S

45

a-2-metilo 1 H 1 S

46

a-2-metilo 1 H 1 S

47

a-2-metilo 1 H 1 S

48

a-2-metilo 1 H 1 S

49

a-2-metilo 1 H 1 S

50

a-2-metilo 1 H 1 S

51

a-2-metilo 1 H 1 S

Ejemplo

R1 R2 m R3 n Quiralidad en la posición 2

52

a-2-metilo 1 H 1 S

53

a-2-metilo 1 H 1 S

54

a-2-metilo 1 H 1 S

55

a-2-metilo 1 H 1 S

56

a-2-metilo 1 H 1 S

57

a-2-metilo 1 NMe2 1 S

58

a-2-metilo 1 H 1 S

59

4,4-difluoro 2 H 1 S

Ejemplo

R1 R2 m R3 n Quiralidad en la posición 2

60

a-2-metilo 1 H 1 S

61

a-3-metilo 1 H 1. S

62

a-2-metilo 1 H 1 S

63

a-2-metilo 1 H 1 S

64

a-2-metilo 1 H 1 S

65

a-2-metilo y a-4hidroxi 2 H 1 S

66

-4-fluoro 1 H 1 S

67

a-2-metilo 1 H 1 S

Ejemplo

R1 R2 m R3 n Quiralidad en la posición 2

68

a-2-metilo 1 H 1 S

69

a-2-metilo 1 H 1 S

70

a-4-N,Ndimetilamino 1 H 1 S

71

a-2-metilo 1 H 1 S

72

-4-N,Ndimetilamino 1 H 1 S

73

a-2-metilo 1 H 1 S

74

a-2-metilo 1 H 1 S

75

a-2-metilo 1 H 1 S

Ejemplo

R1 R2 m R3 n Quiralidad en la posición 2

76

a-2-metilo 1 H 1 S

77

a-2-metilo 1 H 1 S

78

a-2-metilo 1 H 1 S

79

a-2-metilo 1 H 1 S

80

a-2-metilo 1 H 1 S

81

a-2-metilo 1 H 1 S

82

a-4-N,Ndimetilamino 1 H 1 S

Ejemplo

R1 R2 m R3 n Quiralidad en la posición 2

83

a-2-metilo 1 H 1 S

84

a-2-metilo 1 H 1 S

85

-4-fluoro 1 H 1 S

86

a-2,3-metano 2 H 1 S

87

a-2,3-metano 2 H 1 S

88

a-2,3-metano 2 H 1 S

89

a-2,3-metano 2 H 1 S

90

a-2,3-metano 2 H 1 S

Ejemplo

R1 R2 m R3 n Quiralidad en la posición 2

91

a-2,3-metano 2 H 1 S

92

a-2-metilo 1 H 1 S

93

-4-hidroxi 1 H 1 S

94

a-4-hidroxi 1 H 1 S

95

-4-fluoro 1 H 1 S

96

a-4-fluoro 1 H 1 S

97

a-2-metilo 1 H 1 S

98

a-2-metilo 1 H 1 S

Ejemplo

R1 R2 m R3 n Quiralidad en la posición 2

99

a-2-metilo 1 H 1 S

100

a-2-metilo 1 H 1 S

101

a-2-metilo 1 H 1 S

102

a-2-metilo 1 H 1 S

103

a-2-metilo 1 H 1 S

104

a-2-metilo 1 H 1 S

105

a-2-metilo 1 H 1 S

106

a-2-bencilo 1 H 1 R

Ejemplo

R1 R2 m R3 n Quiralidad en la posición 2

107

a-2-(N,N-dimetilamino)-metilo 1 H 1 R

108

a-2-metilo 1 H 1 S

109

a-4-ciano 1 H 1 S

110

a-2-metilo 1 H 1 S

111

a-2-metilo 1 H 1 S

112

a-2-metoximetilo 1 H 1 R

113

- 0 H 0 S

114

a-2-difluorometilo 1 H 1 S

La Tabla 4 se refiere a compuestos de fórmula (I’) Tabla 4 (continuación)

Ejemplo

R1 R2 m R3 n

115

a-2-metilo 1 H 1

116

a-2-metilo 1 H 1

117

a-2-metilo 1 H 1

118

a-2-metilo 1 H 1

119

a-2-metilo 1 H 1

120

a-2-metilo 1 H 1

121

a-2-metilo 1 H 1

Ejemplo

R1 R2 m R3 n

122

a-2-metilo 1 H 1

123

a-2-metilo 1 H 1

124

a-2-metilo 1 H 1

125

a-2-metilo 1 H 1

126

a-2-metilo 1 H 1

127

a-2-metilo 1 CD3 1

128

a-2-metilo 1 CD3 1

129

a-2-metilo 1 Cl 1

Las temperaturas son medidas en grados Celsius. A menos que se indique lo contrario, las reacciones tienen lugar a temperatura ambiente. Los métodos de HPLC/MS y MS siguientes se utilizan en la preparación de los Intermedios y Ejemplos:

Método A (HPLC/MS analítica) Instrumento: Hewlett Packard Agilent serie 1100, columna: XBridge™ C18 2.5 microm 3.0 X 30 mm, temperatura: 50 ºC, eluyente, sistema de 2 canales: Canal A acetonitrilo al 5% en agua, Canal B acetonitrilo que contiene ácido fórmico al 0.2%

Tiempo (minutos) canal B % Flujo (ml/minuto)

0 1 0.6

0.5 1 0.6

2.5

30 0.6

3.5

95 0.7

4.0

95 0.7

4.5 95 0.8 detección: Agilent 1100 DAD 210-350 nm y Waters Micromass ZQ 2000 ESI+ y ESI-. 5 Método B (HPLC/MS preparativa) Instrumento: Sistema Gilson HPLC preparativa, columna: Sunfire™ Prep C18 OBD™

5 microm 30 X 100 mm, temperatura: 25 ºC, eluyente: gradiente desde 5 - 100% de acetonitrilo en 0.05% de ácido trifluoroacético acuoso durante 20 minutos, velocidad de flujo: 30 ml/minuto, detección: UV 254 nm. Método C (HPLC/MS analítica) Instrumento: Hewlett Packard Agilent serie 1100, columna: XBridge™ C18 2.5 microm

3.0 X 30 mm, temperatura: 50 ºC, eluyente: sistema de 2 canales: Canal A acetonitrilo al 5% en agua, Canal B 10 acetonitrilo que contiene ácido fórmico al 0.2%

Tiempo (minutos) Canal B % Flujo (ml/minuto)

0 1 0.6

3.5

95 0.7

4.0

95 0.7

4.5 95 0.8

detección: Agilent 1100 DAD 210-350 nm y Waters Micromass ZQ 2000 ESI+ y ESI-.

Método D (MS analítica) Instrumento: Micromass Platform II, eluyente: metanol al 15% en agua que contiene 0.2% de una solución de hidróxido de amonio al 25%

Método E (HPLC/MS analítica) Instrumento: Hewlett Packard Agilent serie 1100, columna: XBridge™ C18 2.5 microm 3.0 15 X 30 mm, temperatura: 50 ºC, eluyente: sistema de 2 canales: Canal A acetonitrilo al 5% en agua, Canal B acetonitrilo que contiene ácido fórmico al 1.0%

Tiempo Canal B % Flujo (minutos) (ml/minuto)

0 5 1.4

3.7

95 1.6

4.4

95 2.4

4.45 95 2.4

detección: Agilent 1100 DAD 210-350 nm y Waters Micromass ZQ 2000 ESI+ y ESI-.

Método F (HPLC analítica) Instrumento: Sistema Shimadzu LC-10AD; detector espectrofluorométrico RF-10; Columna: Nucleosil OD-5-100 C18 (150 x 4.6 mm); detección a 215 nm, rata de flujo 2 mL/min a temperatura ambiente; gradiente 5 Lineal 2 -CH3CN al 100% (TFA al 0.1%) y H2O (TFA al 0.1%) en 4minutos + 2 minutos de CH3CN al 100% (TFA al 0.1%); de nuevo, regreso a -CH3CN al 100% (TFA al 0.1%) en 3 minutos.

Condiciones HPLC analítica:

Sistema 1

Gradiente lineal 20-100% solvente A en 5 minutos + 1.5 minutos 100% solvente A; detección a 215 nm, rata de flujo 1 10 mL/min a 30°C. Columna: Nucleosil 100-3 C18 (70 x 4.0 mm). Solvente A = CH3CN + TFA al 0.1 %; Solvente B = H2O + TFA al 0.1%.

Sistema 2

Gradiente lineal 2-100% CH3CN (0.1%TFA) y H2O (0.1% TFA) en 7 min + 2 min 100% CH3CN (TFA al 0.1%); detección a 215 nm, rata de flujo 1 mUmin a 30 ºC. Columna: Nucleosil 100-3 C18HD (125 x 4mm)

15 Intermediario A Clorhidrato 5-[4-metanosulfonilo-3-(2-propil-imidazol-1-il)-fenilo]-4-metilo-tiazol-2-ilamina

Se agrega (1 ml) de cloruro de trimetilsililo a temperatura ambiente a una suspensión en etanol de N-{5- [4metanesulfonilo-3- (2-propil-imidazol-1-il)- fenilo]- 4-metil-tiazol-2- il} acetamida (0.1 g, se prepara como se describe en WO 03/072557) (5 ml) a temperatura ambiente. La mezcla se mantiene a temperatura ambiente durante 3.5 horas y se calienta entonces a 65 ºC durante 18 horas. Después de que la mezcla se enfría se mantiene a 4 ºC durante 4 horas y el

20 compuesto del título se aísla como un sólido blanco por filtración. HPLC/MS (Método A) Tiempo de Retención 1.62 minutos, M+H 377.1.

Intermediario B Amida del ácido (2S,4R)-4-hidroxi-pirrolidina-2-carboxílico

Se mezcla una solución de bencil éster del ácido (2S,4R)-4-hidroxi-pirrolidina-2-carboxílico (1 g) en 880 amoniaco (5 ml) durante 18 horas luego se evapora y se tritura con dietil para dar el compuesto del título como un sólido blanco. 1H nmr 25 (d6-DMSO, 400 MHz) 9.15 (s, br, 1H), 8.04 (s, 1 H), 7.63 (s, 1 H), 5.56 (s, 1H), 4.40 (s, 1H), 4.27- 4.16 (m, 1H), 3.27 (d, J = 7 Hz, 1H), 3.02 (d, J = 7 Hz, 1H), 2.33- 2.19 (m, 1 H), 1.89- 1.76 (m, 1H).

Intermediario C Amida del ácido (2S,4S)-4-hidroxi-pirrolidina-2-carboxílico

Se mezcla una solución de clorhidrato metil éster del ácido (2S,4S)-4-hidroxi- pirrolidina-2-carboxílico (1 g) en una solución 7M de amoniaco en metanol (10 ml) durante 18 horas luego se evapora y se tritura con dietil éter. El residuo se

disuelve en un volumen mínimo de metanol caliente y se mantiene a 4 ºC durante 4 horas. El compuesto del título se aísla por filtración como un sólido blanco.

Intermediario D ácido imidazol-1-carboxílico [5-(2-tert-butil-piridin-4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida

A una solución de la sal de hidrobromuro de 2-amino-4- metil-5- (2- tert-butil-4- piridilo)- 1, 3- tiazol (2.62 g) en trietilamina (1.07 ml) y DMF (100 ml) a temperatura ambiente se le agrega carbonilo diimidazol (2.38 g) y la mezcla de reacción se calienta a 70 ºC durante 2.5 horas. La mezcla de reacción se enfría, se filtra y se lava con acetonitrilo para dar el compuesto del título.

Intermediario D1 2-amino-4-metil-5-(2-tert-butil-4-piridil)-1,3-tiazol

Se calientan N- [4- metil- 5- (2- tert.butil- 4-piridil)- 1, 3- tiazol- 2- il] acetamida (90 mg) en etanol (4.5 ml) y ácido clorhídrico 6N (0.5 ml) en un microondas personal para química Emrys Optimiser a 100 ºC durante 90 minutos. Se enfría la mezcla de reacción y se filtra para dar el compuesto del título.

Intermediario D2 N-[4-metil-5-(2-tert.butil-4-piridil)-1,3-tiazol-2-il] acetamida

Se calienta una mezcla de 2-acetamido-4- metiltiazol (92 mg), 4- cloro- 2-tert.butilpiridina (83 mg), acetato de paladio

(10.4 mg), tri-tert-butilfosfonio tetrafluoroborato (28.3 mg) y carbonato de cesio (319 mg) en DMF bajo una atmósfera de argón durante 3 horas a 150 ºC. La mezcla de reacción se enfría, se filtra a través de celita, se evapora y se purifica por cromatografía de fase normal y luego reversa para dar el compuesto del título.

Intermediario D3 4-cloro-2-tert-butilpiridina

Oxicloruro de fósforo (21,8 ml) y 2 - tert.butilpiridin4- ona (2.36 g) se calienta a reflujo en cloroformo (15 ml) durante 24 horas y luego se mantiene a temperatura ambiente durante 48 horas antes de verter sobre hielo (100 g). La extracción con CH2Cl2 (250 ml 3 veces) es seguida por el secado de las capas orgánicas combinadas sobre sulfato de magnesio.

Intermediario D4 2-tert-butilpiridin-4-ona

Se calienta 2- tert.butil gama- pirona, (3.02 g, preparado por el procedimiento de Koreeda and Akagi Tetrahedron Letters 1980, 21, 1197-1200.) durante 18 horas a 80 ºC en amoniaco acuoso al 35% (50 ml). La mezcla de reacción se enfría a temperatura ambiente, se somete a partición con CH2Cl2, y la capa orgánica se lava con agua. El secado de la capa orgánica sobre sulfato de magnesio seguido de evaporación da el compuesto del título.

Intermediario E Amida del ácido (2S,4R)-4-fluoro-pirrolidin-2-carboxílico

Se agrega una solución de 1.25 M de HCl en etanol (2.3 ml) a una suspensión de ácido (2S, 4R)-4- fluoro- pirrolidin- 2carboxílica (0.25 g) en etanol (2 ml) a temperatura ambiente y la mezcla se calienta durante 62 horas a 55 ºC. La mezcla de reacción se evapora y se agrega una solución 7 M de amoniaco en metanol (5.6 ml). La mezcla de reacción se mantiene a temperatura ambiente durante 36 horas y luego se evapora, el residuo se tritura con metanol (0.5 ml) y se filtra para dar el compuesto del título como un sólido blanco. 1H nmr (d6- DMSO, 400 MHz) 7.68 (s, 1H), 7.37 (s, 1H),

5.30 (d, J = 50 Hz, 1H), 3.96 (t, J = 8 Hz, 1H), 3.40- 3.12 (m, 2H), 2.48-2.31 (m, 1H), 2.02- 1.81 (m, 1H) .

Intermediario F Amida del ácido (2S,3S)-3-hidroxi-pirrolidina-2-carboxílica

Una solución 4 M de HCl en 1, 4- dioxano (3 ml) se agrega a una suspensión de ácido (2S, 3S)-3- hidroxipirrolidin- 2carboxílico (1 g) en etanol (10 ml) a temperatura ambiente y la mezcla se calienta a reflujo durante 21 horas. La mezcla de reacción se evapora y se agrega una solución 7 M de amoniaco en metanol (10.5 ml). La mezcla de reacción se mantiene a temperatura ambiente durante 2 días y luego se evapora, el residuo se tritura con etanol (2 ml) y se filtra y se lava mezcla fría de 9: 1 de etanol/metanol (2 ml) para dar el compuesto del título como un sólido de color rosa pálido. 1H

nmr (d6- DMSO, 400 MHz) 8.27 (s, 1H), 7.76 (s, 1H), 5.85 (d, J = 4 Hz, 1H), 4.38-4.32 (m, 1H), 3.97 (d, J = 2 Hz, 1H), 3.36- 3.15 (m, 3H), 1.90- 1.80 (m, 2H).

Intermediario G Amida del ácido (2S,3S)-3-metil-pirrolidin-2-carboxílico

Una solución 4 M de HCl en 1, 4- dioxano (1.5 ml) se agrega a una suspensión de ácido (2S, 3S)- 3-metilpirrolidin- 2- carboxílico (0.5 g) en etanol (5 ml) a temperatura ambiente y la mezcla se calienta a reflujo durante 20 horas. La mezcla de reacción se evapora y se agrega una solución 7 M de amoniaco en metanol (5.6 ml). La mezcla de reacción se mantiene a temperatura ambiente durante 6 días y luego se evapora, el residuo se tritura con metanol (0.5 ml) y se filtra y se lava con metanol frío (2 ml) para dar el compuesto del título como un sólido blanco. 1H nmr (d6-DMSO, 400 MHz)

8.06 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 3.60 (d, J = 10 Hz, 1H), 3.25-3.14 (m, 2H), 2.24-2.15 (m, 1H), 2.09- 1.98 (m, 1H), 1.57- 1.45 (m, 1H), 1.13 (d, J = 8 Hz, 3H).

Intermediario H Amida del acido (1R,2S,5S)-3-aza-biciclo[3.1.0]hexano-2-carboxílico amida

Se agrega cloruro de tionilo (0.70 ml) gota a gota durante 1 minuto a una suspensión de ácido (1R, 2S, 5S)- 3- azabiciclo [3.1.0] hexano- 2-carboxílico (0.7 g) en etanol (7 ml) a 60 ºC. Después de la reacción vigorosa inicial se continúa el calentamiento a 60 ºC durante otros 50 minutos y la reacción se enfría luego se somete a partición entre CH2Cl2 y amoniaco acuoso, se extrae dos veces con CH2Cl2, los extractos orgánicos se secan sobre Na2SO4 y se evaporan. El aceite aislado se recoge en una solución 7 M de amoniaco en metanol (8 ml) y se mantiene a temperatura ambiente durante 18horas. La evaporación y la cristalización desde CHCl3/metanol dan el compuesto del título como un sólido blanco. 1H nmr (d6-DMSO, 400 MHz) 7.36 (s, 1H), 6.96 (s, 1H), 3.44 (d, J = 4 Hz, 1H), 2.88 (d, J = 10 Hz, 1H), 2.75 (dd, J = 4 and 10 Hz, 1H), 1.58-1.51 (m, 1 H), 1.36- 1.28 (m, 1H), 0.33- 0.20 (m, 2H).

Intermediario I Amida del ácido (S)-2-metil-pirrolidin-2-carboxílico

Se calienta una solución de butil éster del ácido (S)- 2-metil-pirrolidin- 2-carboxílico (2.3 g) en una solución de amoniaco en metanol (22.2 ml) en una bomba a 70 ºC durante 10 días. La evaporación de la mezcla de reacción y la trituración con hexanos (20 ml) da el compuesto del título en forma de un sólido blancuzco. 1H nmr (d6- DMSO, 400 MHz) 7.40 (s, 1 H), 6.89 (s, 1H), 2.95- 2.84 (m, 1H), 2.72-2.60 (m, 1H), 2.06- 1.95 (m, 1H), 1.66-1.44 (m, 2H), 1.42- 1.30 (m, 1H), 1.22 (s, 3H).

Intermediario I1 Butil éster del ácido (S)-2-metil-pirrolidin-2-carboxílico

HCl concentrado (2 ml) se agrega a una suspensión de ácido (S)- 2-metil- pirrolidin- 2- carboxílico (2 g) en butan-1-ol (50 ml) el cual se calienta a 60 ºC durante 18 horas y luego a reflujo durante 4 días. La mezcla de reacción se evapora, se somete a partición entre NaHCO3 acuoso saturado y CH2Cl2, se extrae CH2Cl2 3X, se seca sobre Na2SO4 y se evapora. El aceite aislado es entonces destilado por Kugelrohr a 10 mbar para dar el compuesto del título como un aceite incoloro transparente de la fracción que destila a una temperatura de horno de 100

Intermediario J N’-[5-((E)-3-dimetilamino-acriloilo)-4-metil-tiazol-2-il]-N,N-dimetil-formamidina

Se calienta una mezcla de 5- acetil- 2- amino- 4-metiltiazol (12.5 g) y N, N- dimetilformamida-dimetilacetal (35.4 ml) durante 15 horas a 100 ºC. Después de enfriar a temperatura ambiente la mezcla de reacción se evapora, se tritura con acetato de etilo, y se filtra para dar el compuesto del título como un sólido naranja. MS (Método D) M+H 267.

Intermediario K ácido imidazol-1-carboxílico {5-[2-(2,6-dicloro-bencil)-pirimidin-4-il]-4-metil-tiazol-2-il}-amida

Se agrega diimidazol carbonilo (0.63 g) a una solución de 5-[2- (2, 6- dicloro-bencil)- pirimidin-4- il]- 4-metiltiazol- 2ilamina (0.68 g) en una mezcla de trietilamina (0.30 ml) y DMF (2 ml) y se calienta a 80 ºC durante 18 horas. La mezcla de reacción se evapora luego a temperatura ambiente, se suspende en CHCl3 y se mantiene a 4 ºC durante 2 horas y después se filtra para dar el compuesto del título como un sólido amarillo.

Intermediario K1 5-[2-(2,6-dicloro-bencil)-pirimidin-4-il]-4-metil-tiazol-2-ilamina

Una mezcla de N’- [5- ((E)-3- dimetilamino- acriloilo)- 4- metil- tiazol- 2-il]-N, N- dimetil- formamidina (1 g), 2, 6- diclorofenilacetamidina (0.90 g) y 2- metoxietanol (3.8 ml) se agita a temperatura ambiente durante 30 minutos. Se agrega NaOH (0.3 g) y la mezcla se agita a 125 ºC durante 1 hora. Después de enfriar a temperatura ambiente se agrega agua y la mezcla se evapora hasta sequedad y luego se purifica por cromatografía en fase normal sobre sílica gel eluyendo con un gradiente de CH2Cl2 para EtOAc para dar el compuesto del título como un sólido beige.

Intermediario L Ácido imidazol-1-carboxílico [5-(2-ciclopropil-pirimidin-4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida

El compuesto del título se prepara de una forma análoga al Intermediario K excepto que se usa ciclopropanocarboxamidina en lugar de 2,6-diclorofenilacetamidina. El compuesto del título se obtiene en forma de un sólido amarillo.

Intermediario M Ácido imidazol-1-carboxílico {5-[2-(2-fluoro-fenil)-pirimidin-4-il]-4-metil-tiazol-2-il}-amida

El compuesto del título se prepara de una forma análoga al Intermediario K excepto que se usa 2-fluoro-benzamidina clorhidrato en lugar de 2,6-diclorofenilacetamidina. El compuesto del título se obtiene en forma de un sólido amarillo.

Intermediario N ácido imidazol-1-carboxílico [4-metil-5-(2-metil-pirimidin-4-il)-tiazol-2-il]-amida

Se agrega diimidazol carbonilo (22 mg) a una solución de 4- metil- 5-(2- metil- pirimidin-4-il)- tiazol- 2-ilamina (24 mg) en DMF (1 ml) a temperatura ambiente. Después de permanecer 18 horas a temperatura ambiente la mezcla de reacción se diluye con CH2Cl2 (2 ml) y el compuesto del título se aísla por filtración como un sólido amorfo marrón.

Intermediario N1 4-metil-5-(2-metil-pirimidin-4-il)-tiazol-2-ilamine

Se agrega trimetilsililcloruro (0.3 ml) a temperatura ambiente a una suspensión de N- [4- metil- 5- (2- metilpirimidin- 4-il)tiazol- 2- il]- acetamida (29 mg, preparado como se describe en WO 04/096797) en etanol (2 ml) a temperatura ambiente. La mezcla se calienta a 50 ºC durante 18 horas, se agrega HCl concentrado (0.2 ml) y se continua el calentamiento a 50 °C por otras 46 horas. Después de enfriar la mezcla se somete a partición entre solución NaHCO3 acuosa saturada y CH2Cl2 que contiene metanol al 10% y se extrae un CH2Cl2 2X adicional. La evaporación de las capas orgánicas da el compuesto del título como un sólido beige. 1H nmr (d4-metanol, 400 MHz) 8.44 (d, J = 7 hz, 1H), 7.33 (d, J = 7 Hz, 1H),

2.58 (s, 3H), 2.51 (s, 3H).

Intermediario O N-(5-yodo-4-metil-tiazol-2-il)-acetamida

Se agrega N- yodosuccinimida (4.75 g) en porciones a una solución de N- (4-metil- tiazol- 2-il)- acetamida (3 g) en acetonitrilo (60 ml) a temperatura ambiente. Después de 5 minutos se forma un precipitado el cual se recoge por filtración y se lava con acetonitrilo frío para dar el compuesto del título en forma de un sólido blanco

Intermediario P Ácido imidazol-1-carboxílico [5-(6-imidazol-1-il-piridin-2-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida

Se agrega diimidazol carbonilo (17 mg) a una solución de 5- (6- imidazol- 1- il- piridin-2- il)- 4- metil-tiazol-2-ilamina (24 mg) en DMF (1 ml) a temperatura ambiente. Después de reposar 18 horas a temperatura ambiente la mezcla de reacción se evapora, se agrega CH2Cl2 (2 ml), y el compuesto del título se aísla por filtración como un sólido blancuzco.

Intermediario P1 5-(6-imidazol-1-il-piridin-2-il)-4-metil-tiazol-2-ilamina

Se agrega HCl (0.3 ml) concentrado a una suspensión de N- [5-(6- imidazol-1- il- piridin- 2-il)-4- metil- tiazol- 2-il]acetomida (30 mg) en etanol (2 ml) a temperatura ambiente. La mezcla se calienta a reflujo durante 7 horas. Después de enfriar la mezcla se somete a partición entre NaHCO3 acuosa saturada y CH2Cl2 que contiene metanol al 10% y se extrae un CH2Cl2 4X adicional que contiene metanol al 10%. La evaporación de las capas orgánicas da el compuesto

del título como un sólido beige. 1H nmr (d4- metanol, 400 MHz) 8.50 (s, 1H), 7.94-7.86 (m, 2H), 7.45- 7.37 (m, 2H), 7.16 (s, 1H), 2.51 (s, 3H).

Intermediario P2 N-[5-(6-imidazol-1-il-piridin-2-il)-4-metil-tiazol-2-il]-acetomida

Una mezcla de ácido N- (5- yodo-4- metil- tiazol- 2-il)- acetomida (312 mg), 6-(imidazol-1- il) piridin- 2- borónico pinacol éster (600 mg), 1, 1’- bis (difenilfosfino) ferroceno- dicloropaladio (II) (45 mg) y carbonato de sodio (594 mg) en DME (3.1 ml) y agua (3.1 ml) se calienta en un microondas personal para química Emrys Optimiser a 85 °C durante 45 minutos. Se agrega agua (5 ml) y la mezcla se extrae con 3X metanol al 10% en CH2Cl2, las capas orgánicas combinadas se evaporan y purifican por cromatografía de fase reversa (Método B) recolectando el componente del minuto 12.8 de tiempo de retención. La evaporación parcial de las fracciones, neutralización con NaHCO3, extracción con metanol al 10% en CH2Cl2 (5X) y la evaporación da un sólido blanco. La purificación adicional de este material por cromatografía de fase normal sobre sílica gel eluyendo con un gradiente de EtOAc al 10% de metanol en EtOAc da el compuesto del título como un sólido blanco. HPLC/MS (Método C) Tiempo de Retención 1.31 minutos, M+H 299.9 y M- H 298.0.

Intermediario Q ácido imidazol-1-carboxílico [5-(2-metoximetil-pirimidin-4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida

El compuesto del título se prepara de una forma análoga al Intermediario K excepto que se usa clorhidrato de 2-metoxiacetamidina en lugar de 2,6-diclorofenilacetamidina. El compuesto del título se obtiene como un sólido beige.

Intermediario R ácido imidazol-1-carboxílico [5-(2-isobutil-pirimidin-4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida

El compuesto del título se prepara de una manera análoga al Intermediario K, excepto que se usa 3-metilbutiramidina en lugar de 2,6-diclorofenilacetamidina. El compuesto del título se obtiene como un sólido beige.

Intermediario S ácido imidazol-1-carboxílico [5-(2-bencil-pirimidin-4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida

El compuesto del título se prepara de una manera análoga al Intermediario K, excepto que se usa acetato de 2-fenil acetamidina en lugar de 2,6-diclorofenilacetamidina. El compuesto del título se obtiene como un sólido amarillo.

Intermediario T ácido imidazol-1-carboxílico [5-(2-etil-pirimidin-4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida

El compuesto del título se prepara de una manera análoga al Intermediario K excepto que se usa propionamidina en lugar de 2,6-diclorofenilacetamidina. El compuesto del título se obtiene como un sólido amarillo.

Intermediario U ácido imidazol-1-carboxílico [5-(2-triflourometil-pirimidin-4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida

El compuesto del título se prepara de una manera análoga al Intermediario K excepto que se usa triflouroacetamidina en lugar de 2,6-diclorofenilacetamidina. El compuesto del título se obtiene como un sólido amarillo.

Intermediario V ácido imidazol-1-carboxílico [5-(3-tert-butil-fenil)-4-metil-tiazol-2-il]-amida

Se agrega diimidazol carbonilo (11 mg) a una solución de 5-(3- tert- butil- fenil)- 4- metil- tiazol- 2-ilamina (20 mg) en CH2Cl2 (1 ml) a temperatura ambiente. Después de reposar 18 horas a temperatura ambiente la mezcla de reacción se filtra, se lava con CH2Cl2 frío (2 ml) para dar para dar el compuesto del título como un sólido blanco.

Intermediario V1 5-(3-tert-butil-fenil)-4-metil-tiazol-2-ilamina

Se agrega trimetilsililcloruro (0.3 ml) a temperatura ambiente a una suspensión de N- [4- metil-5- (2- metilpirimidin- 4-il)tiazol- 2- il]- acetomida (19 mg) en etanol (2 ml) a temperatura ambiente. La mezcla se calienta a 50°C durante 18 horas, se agrega HCl (0.1 ml) concentrado y se continua el calentamiento a 50 °C por 48 horas adicionales. Después de enfriar la mezcla se somete a partición entre NaHCO3 saturada acuosa y CH2Cl2 y se extrae un CH2Cl2 4X adicional. La

evaporación de las capas orgánicas da el compuesto del título como un cristal marrón claro pálido. 1H nmr (d4- metanol, 400 MHz) 7.37- 7.24 (m, 3H), 7.26-7.22 (m, 1H), 2.21 (s, 3H), 1.34 (s, 9H).

Intermediario W ácido Imidazol-1-carboxílico {4-metil-5-[2-(1,1,2-trimetil-propil)-pirimidin-4-il]-tiazol-2-il}-amida

El compuesto del título se prepara de una manera análoga al Intermediario K excepto que se usa 2, 2, 3trimetilbutiramidina en lugar de 2, 6-diclorofenilacetamidina. El compuesto del título se obtiene como un sólido blanco.

Intermediario X ácido Imidazol-1-carboxílico {5-[2-(4-metoxi-fenoximetil)-pirimidin-4-il]-4-metil-tiazol- 2-il}-amida

El compuesto del título se prepara de una manera análoga al Intermediario K excepto que se usa 2- (4- metoxifenoxi)acetamidina en lugar de 2, 6- diclorofenilacetamidina. El compuesto del título se obtiene como un sólido beige.

Intermediario Y ácido Imidazol-1-carboxílico (5-{2-[2-(4-metoxi-fenil)-1,1-dimetil-etil]-pirimidin-4-il}-4-metil-tiazol-2-il)amida

El compuesto del título se prepara de una manera análoga al Intermediario K excepto que se usa 3-(4- metoxifenil)- 2,2dimetilpropionamidina en lugar de 2, 6- diclorofenilacetamidina. El compuesto del título se obtiene como un sólido blanco.

Intermediario Z Amida del ácido (2S,4R)-4-hidroxi-2-metil-pirrolidina-2-carboxílico

Una solución de 1-tert-butil éster 2-metil éster del ácido (2S, 4R)- 4- hidroxi-2- metil- pirrolidin- 1, 2- dicarboxílico (400 mg) en 1.25 M de cloruro de hidrógeno en etanol (2 ml) se mantiene durante 18 horas a temperatura ambiente. La mezcla entonces se evapora y el residuo se toma en metanol (5 ml) y se agrega una solución de amoniaco 7M en metanol (5 ml) y la mezcla se caliente durante 10 días a 65 °C en un recipiente sellado. Después de la evaporación el material aislado se usa directamente en las reacciones siguientes.

Intermediario AA Amida del ácido (2S,4S)-4-Fluoro-pirrolidin-2-carboxílico

Una mezcla de tert butil éster del ácido (2S, 4S)-2- carbamoil- 4-fluoro-pirrolidin-1- carboxílico (1.0 g), ácido clorhídrico concentrado (0.6 ml) y 1- butanol (10 ml) se calienta durante 48 horas a 50 °C. La mezcla de reacción se evapora y se somete a partición entre diclorometano y bicarbonato de sodio acuoso, las capas de diclorometano se secan sobre sulfato de sodio y se evaporan. Se agrega una solución de amoniaco en metanol 7M (10 ml) al residuo y la mezcla se mantiene durante 60 horas a temperatura ambiente en un recipiente sellado. La evaporación y trituración con etanol da el compuesto del título como un sólido blanco

Intermediario AB Ácido Imidazol-1-carboxílico {5-[2-(4-etil-tetrahidro-pirano-4-il)-pirimidin-4-il]-4-metil-tiazol-2-il}-amida

El compuesto del título se prepara de una manera análoga al Intermediario K, excepto que se usa 4- etiltetrahidropirano-4- carboxamidina en lugar de 2, 6-diclorofenilacetamidina.

Intermediario AC Ácido Imidazol-1-carboxílico {4-metil-5-[2-(1-fenil-ciclopentil)-pirimidin-4-il]-tiazol-2-il}-amida

El compuesto del título se prepara de una manera análoga al Intermediario K, excepto que se usa 1-fenilciclopentanocarboxamidina en lugar de 2,6-diclorofenilacetamidina. El compuesto del título se obtiene como un sólido beige.

Intermediario AD Ácido Imidazol-1-carboxílico {5-[2-(1,1-dimetil-2-p-tolil-etil)-pirimidin-4-il]-4-metil-tiazol- 2-il}-amida

El compuesto del título se prepara de una manera análoga al Intermediario K excepto que se usa 2, 2- dimetil- 3- p- tolilpropionamidina en lugar de 2, 6- diclorofenilacetamidina. El compuesto del título se obtiene como un sólido blanco.

Intermediario AE Amida del ácido (2S,4R)-4-Dimetilamino-pirrolidin-2-carboxílico amida

Una solución de metil éster del ácido (2S, 4R)- 4-Dimetilamino-pirrolidin-2- carboxílico (225 mg) y 7M amoniaco en metanol (7 ml) se mantiene durante 18 horas a temperatura ambiente en un recipiente sellado. La evaporación y trituración con dietil éter da el compuesto del título como un sólido blanco

Intermediario AE1 metil éster del ácido (2S,4R)-4-Dimetilamino-pirrolidin-2-carboxílico

Una mezcla de 1- bencil éster 2- metil éster del ácido (2S, 4R)- 4-dimetilamino- pirrolidin- 1, 2- dicarboxílico (420 mg), paladio al 10% sobre carbono (80 mg) y metanol (10 ml) es agitada durante 16 horas bajo una atmósfera de hidrógeno. La filtración y la evaporación dan el compuesto del título el cual se usa sin purificación en las siguientes etapas.

Intermediario AE2 1-benci éster 2-metil éster del ácido (2S,4R)-4-Dimetilamino-pirrolidin-1,2-dicarboxílico

Se agrega cianoborohidruro de sodio (200 mg) a una mezcla de 1- bencil éster 2- metil éster del ácido (2S, 4R)-4amino-pirrolidin-1, 2- dicarboxílico (400 mg), formalina (0.68 ml), ácido acético (0.72 ml), trietilamina (0.2 ml) y metanol (2 ml) y la mezcla se agita durante 2 horas a temperatura ambiente. La mezcla de reacción es entonces sometida a partición entre diclorometano y solución acuosa de bicarbonato de sodio, las capas de diclorometano se evaporan y se purifican por cromatografía en fase normal, eluyente: gradiente de acetato de etilo a etanol al 20% en acetato de etilo, para dar el componente activo predominante UV. El material que se somete a cromatografía se toma con ácido clorhídrico 1 M, lavado 2X con dietil éter, la capa acuosa se basifica con bicarbonato de sodio, se extrae 3X con dietil éter, se seca sobre sulfato de sodio y se evapora para dar el compuesto del título como un aceite amarillo pálido.

Intermediario AF ácido Imidazol-1-carboxílico [5-(2-dietilamino-pirimidin-4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida

Se agrega diimidazol carbonilo (437 mg) a una solución de [4- (2- Amino- 4- metil- tiazol- 5- il)- pirimidin- 2- il]- dietil- amina (355 mg) y trietilamina (207 ml) en DMF (1.4 ml) a temperatura ambiente y luego se calienta durante 18 horas a 80 °C. La mezcla de reacción se evapora y se tritura con cloroformo. El compuesto del título se aísla por filtración.

Intermediario AF1 [4-(2-Amino-4-metil-tiazol-5-il)-pirimidin-2-il]-dietil-amina

Se agrega hidróxido de sodio en polvo (150 mg) a una solución de N’- [5- (3- dimetilamino- acriloil)- 4- metiltiazol- 2-il]-N, N- dimetil-formamidina (0.5 g, se prepara como lo describe S. Wang et al J. Med. Chem. 2004, 47, 1662- 1675.) y 1, 1- dietilguanidina (259 mg) en 2- metoxietanol (1.9 ml) y la mezcla se calienta a 125 °C durante 1 hora con agitación. La mezcla de reacción se concentra bajo vacío y se purifica por cromatografía en fase normal, eluyente; DCM/ EtOAc, para dar el compuesto del título. ESI- MS: M+H 264 y M- H 262.

Intermediario AG Amida del ácido (2S,4S)-4-Dimetilamino-pirrolidin-2-carboxílico

Una solución de butil éster del ácido (2S, 4S)-4- Dimetilamino- pirrolidin- 2- carboxílico (326 mg) y amoniaco 7M en metanol (8 ml) se mantiene durante 18 horas a temperatura ambiente en un recipiente sellado. La filtración, evaporación y trituración con dietil éter/metanol dan el compuesto del título como un sólido beige.

Intermediario AG1 butil éster del ácido (2S,4S)-4-Dimetilamino-pirrolidin-2-carboxílico

Se agrega ácido clorhídrico concentrado (0.3 ml) a una mezcla de diclorhidrato de metil éster del ácido (2S, 4S)-4dimetilaminopirrolidin- 2-carboxílico (400 mg) y 1- butanol (4 ml) y se calienta durante 18 horas a 115°C. Después de enfriar la mezcla de reacción se evapora y se somete a partición entre diclorometano y solución acuosa de bicarbonato de sodio y las capas de diclorometano se secan y se evaporan para dar el compuesto del título como un aceite color marrón el cual se usa sin purificación adicional.

Intermediario AH ácido Imidazol-1-carboxílico {5-[2-isopropil-pirimidin-4-il]-4-metil-tiazol-2-il}-amida

El compuesto del título se prepara de una manera análoga al Intermediario K excepto que se usa 2-metilpropionamidina en lugar de 2,6-diclorofenilacetamidina. El compuesto del título se obtiene como un sólido beige.

Intermediario AI ácido Imidazol-1-carboxílico {4-metil-5-[2-metilsulfanil-pirimidin-4-il]-tiazol-2-il}-amida

Se agrega diimidazol carbonilo (1.77 g) a una solución de 4- metil-5- (2- metilsulfanil- pirimidin- 4- il)- tiazol-2- ilamina

(1.3 g) en trietilamina (0.84 ml) y DMF (5.5 ml) a temperatura ambiente y se agita durante 2 horas a 80°C. Después de enfriar el compuesto del título es aislado por filtración.

Intermediario Al1 4-Metil-5-(2-metilsulfanil-pirimidin-4-il)-tiazol-2-ilamina

Se agrega hidróxido de sodio en polvo (1.09 g) a una solución de N’- [5- (3- dimetilamino-acriloilo)- 4- metiltiazol- 2-il]-N, N-dimetil-formamidina (2.0 g, se prepara como lo describe S. Wang et al J. Med. Chem. 2004, 47, 1662- 1675.) y tiourea (0.57 g) en etanol (25 ml) y la mezcla se calienta a reflujo durante 3 horas con agitación. La mezcla de reacción se enfría a temperatura ambiente y agua luego se agrega yoduro de metilo (0,47 ml). Después de 1 hora a temperatura ambiente el etanol se retira por evaporación y se agrega agua y se ajusta el pH a 7 con ácido clorhídrico acuoso 2N. El compuesto del título se obtiene entonces por filtración. ESI- MS: M+H 239 y M-H 237.

Intermediario ácido AJ (S)-2-Metil-pirrolidin-1,2-dicarboxílico 2-amida 1-{[5-(2-metanosulfinil-pirimidin-4-il)-4-metil-tiazol-2il]-amida}

Ácido meta- Cloroperoxibenzoico (0.78 g) fue agregado a una solución de ácido (S)-2-metil- pirrolidin- 1, 2-dicarboxílico 2-amida 1- {[4- metil-5- (2- metilsulfanil- pirimidin- 4-il)-tiazol-2- il]- amida} (1.7 g) en diclorometano (10 ml) a 0 °C. Después de 10 minutos la mezcla de reacción se evapora y se purifica por cromatografía en fase normal, eluyendo con un gradiente de diclorometano/metanol, para dar el compuesto del título como un sólido naranja. ESI- MS: M+H 409 y M- H 407.

Intermediario AK [5-(2-ciclobutil-pirimidin-4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida del ácido Imidazol-1-carboxílico

El compuesto del título se prepara de una manera análoga al Intermediario K excepto que se usa ciclobutanocarboxamidina en lugar de 2,6-diclorofenilacetamidina. El compuesto del título se obtiene como un sólido beige.

Intermediario AL Amida del ácido (1S,5R)-2-Aza-biciclo[3.1.0]hexano-1-carboxílico

Una mezcla de etil éster del ácido (1S, 5R)- 2- aza- biciclo [3.1.0] hexano- 1- carboxílico (2.5 g, preparado por el procedimiento Hercouet Tetrahedron Assymmetry 1996, 7, 1267- 1268.) y amoniaco 7M en metanol (20 ml) se calientan en un recipiente sellado a 80 °C durante 5 días. La mezcla de reacción se evapora y se tritura con hexanos/diclorometano para dar el compuesto del título como un sólido beige.

Intermediario AM {4-metil-5-[2-(1-metil-ciclopropil)-pirimidin-4-il]-tiazol-2-il}-amida del ácido Imidazol-1-carboxílico

Se agrega diimidazol carbonilo (4.56 g) a una solución de 4- metil- 5- [2- (1- metil- ciclopropil)- pirimidin-4- il]- tiazol-2ilamina (10.5 g) y trietilamina (4.28 ml) en DMF (26 ml) a temperatura ambiente y entonces se calienta durante 2 horas a 80 °C. Después de enfriar el compuesto del título se aísla por filtración.

Intermediario AM1 4-Metil-5-[2-(1-metil-ciclopropil)-pirimidin-4-il]-tiazol-2-ilamina

Se agrega hidróxido de sodio en polvo (5.86 g) a una solución de N’- [5- (3- dimetilamino-acriloilo)- 4- metiltiazol- 2-il]-N, N- dimetil- formamidina (13 g, preparada como se describe por S. Wang et al J. Med. Chem. 2004, 47, 1662-1675.) y clorhidrato de 1- metil- ciclopropanocarboxamidina (7.2 g, preparada como se describe en EP0227415) en 2metoxietanol (98 ml) y la mezcla se caliente a 125 °C durante 1 hora con agitación. La mezcla de reacción se enfría, se agrega agua, y el compuesto del título se aísla por filtración. ESI-MS: M+H 247 y M-H 245.

Intermediario AN Amida del ácido (R)-2-Bencil-pirrolidin-2-carboxílico

Una mezcla de (3R, 7aR)-7a-bencil- 3- triclorometil-tetrahidro-pirrolo [1, 2- c] oxazol- 1ona (1.40 g, preparada como se describe por Wang and Germanas Synlett 1999, 33- 36.) y amoniaco 7M en metanol (15 ml) es calentada a 50°C durante 3 días en un recipiente sellado. La mezcla de reacción enfriada es entonces evaporada y triturada con cloroformo para dar el compuesto del título como un sólido blanco.

Intermediario AO Amida del ácido (R)-2-Dimetilaminometil-pirrolidin-2-carboxílico

Una mezcla de (3R, 7aR)- 7a- dimetilaminometil- 3- triclorometil- tetrahidro- pirrolo [1, 2- c] oxazol- 1- ona (0.26 g) y amoniaco 7M en metanol (4 ml) es calentada a 50 °C durante 3 días en un recipiente sellado. La mezcla de reacción enfriada es entonces evaporada para dar el compuesto del título como un aceite de color marrón es cual es utilizado sin purificación adicional.

Intermediario AO1 (3R,7aR)-7a-Dimetilaminometil-3-triclorometil-tetrahidro-pirrolo[1,2-c]oxazol-1-ona

Se agrega un 1 M de solución de diisopropilamida de litio en una mezcla 3: 5 de hexanos/THF (8.25 ml) gota a gota a (3R, 7aS)- 3-triclorometil- tetrahidro-pirrolo [1, 2- c] oxazol- 1- ona (1.51 g, preparada como se describe por Wang and Germanas Synlett 1999, 33-36.) en THF (5 ml) a -78 °C. Después de agitar 30 minutos a -78 °C se agrega sal de Eschenmoser (2.78 g). La mezcla de reacción se deja entonces calentar a -40 °C con agitación vigorosa durante 1 hora y se mantiene durante 2 horas a -40 °C. Después se agrega agua y la capa acuosa se extrae con diclorometano, las capas orgánicas combinadas se secan sobre sulfato de sodio y se evaporan. El residuo se purifica por cromatografía de fase normal eluyendo con un gradiente de diclorometano a acetato de etilo al 20% en diclorometano para dar el compuesto del título como un aceite amarillo pálido.

Intermediario AP {4-metil-5-[2-(1,1-dimetil-propil)-pirimidin-4-il]-tiazol-2-il}-amida del ácido Imidazol-1-carboxílico

El compuesto del título se prepara de una manera análoga al Intermediario AM excepto que se usa 2.2-dimetilbutiramidina en lugar de 1-metil-ciclopropanocarboxamidina. El compuesto del título se obtiene como un sólido blanco.

Intermediario AQ Amida del ácido (2S,4R)-4-Ciano-pirrolidin-2-carboxílico

Una mezcla de metil éster del ácido (2S, 4R)- 4-ciano-pirrolidin- 2-carboxílico (22 mg) y amoniaco 7M en metanol (0.24 ml) es agitada a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla de reacción es entonces evaporada para dar el compuesto del título que se usa sin purificación adicional. MS (Método D) M+H 140.

Intermediario AR ácido Imidazol-1-carboxílico [5-(2-ciclopropilmetil-pirimidin-4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida

El compuesto del título es preparado en analogía al procedimiento descrito para el Intermediario AM, pero usando 5- (2- ciclopropilmetil- pirimidin- 4-il)- 4-metil- tiazol- 2-ilamina en lugar de 4-metil- 5- [2- (1- metil-ciclopropil)-pirimidin- 4-il]tiazol- 2- ilamina y la reacción es agitada durante 15 horas. Punto de fusión 240-243 °C, ESI-MS [M+H]+ 305.1, TLC: Rf = 0.35 (DCM/ EtOH 95: 5).

Intermediario AR1 5-(2-Ciclopropilmetil-pirimidin-4-il)-4-metil-tiazol-2-ilamina

El compuesto del título es preparado en analogía al procedimiento descrito para el Intermediario AM1, pero usando clorhidrato de 2-ciclopropil-acetamidina en lugar de clorhidrato de 1-metil-ciclopropanocarboxamidina. Punto de fusión 198-200°C, ESI-MS [M+H]+ 247.1, TLC: Rf = 0.25 (DCM/EtOH 95:5).

Intermediario AS [5-(2-d9-tert-butil-pirimidin-4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida del ácido Imidazol-1-carboxílico

Se agrega diimidazol carbonilo (0.77 g) a una solución agitada de 5- (2- d9-tert-butil- pirimidin-4- il)- 4-metiltiazol- 2- ilamina (1.11 g) en DMF (4.3 ml) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se mantiene durante 18 horas a 25°C después de lo cual el compuesto del título es aislado por filtración.

Intermediario AS1 5-(2-d9-tert-Butil-pirimidin-4-il)-4-metil-tiazol-2-ilamina

Se agrega hidróxido de sodio en polvo (3.71 g) a una solución de N’- [5- (3- dimetilamino-acriloilo)- 4- metiltiazol- 2-il]-N, N- dimetil- formamidina (5.51 g) y clorhidrato de d9- 2, 2-dimetil-propionamidina (4.50 g) en 2- metoxietanol (41 ml) y la mezcla se calienta a 125 °C durante 1 hora con agitación. La mezcla de reacción se enfría, se agrega agua, y el producto crudo se aísla por filtración. El producto crudo se purifica por HPLC preparativa y las fracciones que contienen el compuesto del título se someten a partición entre diclorometano y bicarbonato de sodio acuoso. El compuesto del título se obtiene como un sólido amarillo después de la evaporación de las capas de diclorometano secas. HPLC/MS (Método C): tiempo de retención 1.12 minutos, M+H 258.4.

Intermediario AS2 Clorhidrato de d9-2,2-Dimetil-propionamidina

Se agrega una solución A 2M de trimetilaluminio en tolueno (61 ml) gota a gota a una suspensión de cloruro de amonio

(6.53 g) en tolueno (46 ml) enfriada con un baño de hielo. La mezcla de reacción se agita durante 4 horas a temperatura ambiente y se agrega butil éster del ácido d9- 2, 2- dimetil- propiónico (6.3 g). Después de calentar a 80 °C durante 4 días la mezcla de reacción se enfría a 0°C y se agrega metanol (200 ml) gota a gota. Después de agitación y sonicación durante 1 hora a temperatura ambiente la mezcla de reacción se filtra a través de Hyflo, se lava con metanol, y el filtrado se evapora para dar el compuesto del título como un sólido blancuzco.

Intermediario AS3 Butil éster del ácido d9-2,2-Dimetil-propiónico

Es agregada porción a porción d9- tert- Butilcloruro (5.0 g) a una suspensión de magnesio (1.50 g) en tetrahidrofurano (20 ml), activado con una cantidad catalítica de yodo, más de 1 hora con calentamiento según sea necesario para mantener un reflujo constante. La mezcla de reacción es entonces calentada durante una hora adicional para asegurar la formación completa de Grignard. La solución Grignard anterior es agregada entonces gota a gota a una solución de butil éster del ácido imidazol- 1-carboxílico (7.5 g, preparada como se describe por T. Wemer and A.G.M. Barrett J. Org. Chem. 2006, 71, 4302- 4304.) en tetrahidrofurano (40 ml) enfriada en un baño de hielo. La mezcla de reacción es agitada durante 18 horas a temperatura ambiente, es agregada agua (200 ml), la mezcla es filtrada a través de Hyflo, el filtrado es extraído con dietil éter y las capas de dietil éter son secadas sobre sulfato de sodio y evaporadas para dar el compuesto del título.

Intermediario AT Amida del ácido (R)-2-Metoximetil-pirrolidin-2-carboxílico

Una mezcla de (3R, 7aR)- 7a- metoximetil- 3- triclorometil-tetrahidro- pirrolo [1, 2- c] oxazol- 1-ona (0.6 g) y amoniaco 7M en metanol (6 ml) es mantenida a temperatura ambiente durante 2 días en un recipiente sellado. La mezcla de reacción es entonces evaporada para dar el compuesto del título como un aceite de color amarillo pálido el cual es usado sin purificación adicional.

Intermediario AT1 (3R,7aR)-7a-Metoximetil-3-triclorometil-tetrahidro-pirrolo[1,2-c]oxazol-1-ona

Se agrega gota a gota una solución 1 M de litio diisopropilamida en una mezcla 3: 5 de hexanos/THF (8.25 ml) a (3R, 7aS)- 3- triclorometil- tetrahidro- pirrolo [1, 2- c] oxazol- 1- ona (1.51 g, preparada como se describe por Wang and Germanas Synlett 1999, 33- 36.) en THF (5 ml) a -78 °C. Después de agitar 30 minutos a -78 °C se agrega cloruro de metoximetilo (1.14 ml). La mezcla de reacción se deja entonces calentar hasta -30 °C durante 3 horas y se agrega agua. La capa acuosa se extrae con diclorometano, las capas orgánicas combinadas se evaporan y el residuo se purifica a continuación por cromatografía en fase normal, eluyendo con diclorometano, para dar el compuesto del título como un aceite amarillo pálido.

Intermediario AU Amida del ácido (S)-Azetidin-2-carboxílico

Una mezcla de bencil éster del ácido (S)-2- carbamoil-azetidin-1-carboxílico (1.8 g), paladio al 10% sobre carbono (0.2 g) y metanol (25 ml) fue agitada bajo una atmósfera de hidrógeno a temperatura ambiente durante 5 horas. La filtración y la evaporación dan el compuesto del título el cual se usa sin purificación adicional.

Intermediario AU1 Bencil éster del ácido (S)-2-Carbamoil-azetidin-1-carboxílico

Una mezcla de 1-bencil éster 2- metil éster del ácido (S)- azetidin-1, 2- dicarboxílico (2.5 g) y amoniaco 7M en metanol (10 ml) es mantenida a temperatura ambiente durante 18 horas en un recipiente sellado. La mezcla de reacción es entonces evaporada para dar el compuesto del título como un sólido blanco el cual es usado sin purificación adicional. MS M+H 235.1 y M- H 233.1.

Intermediario AV Amida del ácido (S)-2-Difluorometil-pirrolidin-2-carboxílico

Una mezcla de (3R, 7aS)- 7a-difluorometil-3-triclorometil- tetrahidro- pirrolo [1, 2- c] oxazol-1- ona (0.19 g) y amoniaco 7M en metanol (4 ml) es mantenida a temperatura ambiente durante 3 días en un recipiente sellado. La mezcla de reacción es entonces filtrada y evaporada para dar el compuesto del título como un aceite de color marrón pálido el cual es usado sin purificación adicional. MS (Método D) M+H 165.

Intermediario AV1 (3R,7aS)-7a-Difluorometil-3-triclorometil-tetrahidro-pirrolo[1,2-c]oxazol-1-ona

Se adiciona DAST (0.36 ml) gota a gota a una solución de 3R, 7aR)-1-oxo- 3- triclorometil- dihidro- pirrolo [1, 2-c] oxazol- 7a-carbaldehído (0.25 g, preparada como se describe por Davis et al J. Org. Chem. 1993, 58, 6843- 6850.) en diclorometano (1 ml) a 0 °C. La mezcla de reacción se agita durante 18 horas a temperatura ambiente, se somete a partición entre solución de bicarbonato de sodio acuoso y diclorometano y los extractos de diclorometano se evaporan. El residuo se purifica entonces por cromatografía en fase normal, eluyendo con un gradiente de diclorometano a acetato de etilo al 20% en diclorometano para dar el compuesto del título como un aceite amarillo pálido.

Intermediario AW Amida del ácido (R)-Tiazolidin4-carboxílico

Se agrega gota a gota cloroformiato de etilo (2.26 ml) a una mezcla de ácido (S)- N- (tert.butoxicarbonilo)- tiazolidin- 4carboxílico (5 g), trietilamina (3.14 ml) y THF (75 ml) enfriado a -15 °C. Después de 15 minutos se agrega solución de hidróxido de amonio al 25% (7.5 ml) y la mezcla se agita durante 2 horas a 0 °C. Se agrega entonces cloruro de amonio saturado acuoso, se extrae con THF, las capas orgánicas combinadas se secan sobre sulfato de magnesio y se evaporan. El residuo es triturado con dietil éter para eliminar un sólido blanco y la solución se evapora. Se agrega ácido clorhídrico 4M en dioxano a temperatura ambiente. Después de 1 hora la mezcla de reacción se evapora para dar el compuesto del título el cual se usa sin purificación adicional.

Intermediario AX (2-tert-butil-4’-metil-[4,5’]bitiazolil-2’-il)-amida del ácido imidazol-1-carboxílico

Se agrega diimidazol carbonilo (337 mg) a una solución de 2-tert-butil-4’-metil- [4, 5’] bitiazolil- 2’- ilamina (480 mg) en trietilamina (0.66 ml) y CH2Cl2 (19 ml) a temperatura ambiente. Después de permanecer durante 7 horas a temperatura ambiente la mezcla de reacción se filtra para dar el compuesto del título como agujas blancas.

Intermediario AX1 2-tert-butil-4’-metil-[4,5’]bitiazolil-2’-ilamina

Una mezcla de 1- (2- amino- 4-metil- tiazol- 5- il)- 2- bromo- etanona (7.0 g, preparada como se describe en WO 2006/125805), 2, 2- dimetilpropantioamida (2.25 g, preparada como se describe por Boys and Downs in Synthetic Communications 2006, 36, 295- 298.), trietilamina (7.2 ml) y etanol (173 ml) se calienta a reflujo durante 3.5 horas. Después de enfriar a temperatura ambiente se filtra la mezcla de reacción, el filtrado se evapora y se somete a partición entre NaHCO3 acuoso y CH2Cl2, extrayendo CH2Cl2 3X. Las capas orgánicas se secan y se evaporan luego trituradas con 4X dietil éter (50 ml), las capas de dietil éter se combinan y se extraen con HCl 1 M (100 ml). La capa de HCl se lava entonces con 3X dietil éter, se basifica con NaOH acuoso y se extrae 4X dietil éter y 2X CH2Cl2. Las capas orgánicas se

secan sobre Na2SO4 y se evaporan para dar el compuesto del título como un sólido rojo. HPLC/MS (Método B) Tiempo de Retención 1.95 minutos, M+H 253.9.

Intermediario AY (2,4"-dimetil-[4,2’;4’,5"]tertiazol-2"-il)-amida del ácido Imidazol-1-carboxílico

El compuesto del título es preparado como se describe para el Intermediario BO usando 2- metil- 1, 3- tiazol- 4carboniltiamida en lugar de 3- piridiltiourea. Compuesto del título: HPLC (Método F) Tiempo de Retención 5.86 minutos; MS (Método D) M+H 389.0.

Intermediario AZ [4’-metil-2-(2-metil-1H-imidazol-4-il)-[4,5’]bitiazolil-2’-il]-amida del ácido Imidazol-1-carboxílico

El compuesto del título es preparado como se describe para el Intermediario BO usando 2- metil-1H-imidazol-4-carboniltioamida en lugar de 3- piridiltiourea. Compuesto del título: HPLC (Método F) Tiempo de Retención 3.55 minutos; MS (Método D) M+H 372.1 y M- H 370.1.

Intermediario BA (2-ciclopropilamino-4’-metil-[4,5’]bitiazolil-2’-il)-amida del ácido Imidazol-1-carboxílico

El compuesto del título es preparado como se describe para el Intermediario BO usando ciclopropil-tiourea en lugar de 3piridiltiourea. Compuesto del título: HPLC: (Método F) Tiempo de Retención 4.13 minutos; MS (Método D) M+H 347.1

Intermediario BB (2-dimetilamino-4’-metil-[4,5]bitiazolil-2’-il)-amida del ácido Imidazol-1-carboxílico

El compuesto del título es preparado como se describe para el Intermediario BO usando 1, 1- dimetil- tiourea en lugar de 3-piridiltiourea. Compuesto del título: HPLC (Método F) Tiempo de Retención 4.20 minutos; MS (Método D) muestra preparada en metanol conduce a la detección solamente del uretano correspondiente solamente (NH-CO- OCH3): M+H

299.1.

Intermediario BC [2-(3-aza-biciclo[3.2.2]non-3-il)-4’-metil-[4,5’]bitiazolil-2’-il]-amida del ácido Imidazol-1-carboxílico

El compuesto del título es preparado como se describe para el Intermediario BO usando amida del ácido 3-aza- biciclo

[3.2.2] nonano- 3-carbotioico en lugar de 3- piridiltiourea. Compuesto del título: HPLC (Método F) Tiempo de Retención

5.43 minutos; MS (Método D) muestra preparada en metanol conduce a la detección del uretano correspondiente solamente (NH-CO- OCH3) : M+H 379.1.

Intermediario BD (2-etil-4’-metil-[4,5’]bitiazolil-2’-il)-amida del ácido Imidazol-1-carboxílico

El compuesto del título es preparado como se describe para el Intermediario BO usando N- (2- etil- 4’-metil- [4, 5’] bitiazolil- 2’- il)- acetomida en lugar de N- [4’-metil- 2-(piridin 3-ilamino)- [4, 5’] bitiazolil- 2’- il]- acetomida. Compuesto del título: HPLC (Método F) Tiempo de Retención 5.05 minutos; MS (Método D) muestra preparada en metanol conduce a la detección del uretano correspondiente solamente (NH- CO- OCH3) : M+H 283.8.

Intermediario BD1 N-(2-Etil-4’-metil-[4,5’]bitiazolil-2’-il)-acetomida

N- [5- (2- Bromo- acetilo)- 4- metil- tiazol- 2- il]- acetomida (71.6 mg) (preparado por el procedimiento de WO 2005/068444) se disuelve en CH3OH (5 mL) a temperatura ambiente, seguido por la adición de tiopropionamida (21.4 mg) y fosfomolibdato de amonio x H2O (37.5 mg). Después de la terminación de la reacción, se agrega agua (25 mL) y el precipitado se separa por filtración para obtener el compuesto del título como un polvo verde oscuro. Compuesto del título: HPLC (Método F) Tiempo de Retención 4.86 minutos; MS (Método D) M+H 268.2 y M- H 266.2.

Intermediario BE (4’-metil-2-piridin3-il-[4,5’]bitiazolil-2’-il)-amida del ácido Imidazol-1-carboxílico

El compuesto del título es preparado como se describe para el Intermediario BO usando tionicotinamida en lugar de 3- piridiltiourea. Compuesto del título: HPLC (Método F) Tiempo de Retención 4.13 minutos; MS (Método D) muestra preparada en metanol conduce a la detección del uretano correspondiente solamente (NH- CO-OCH3) : M+H 382.8.

Intermediario BF [4’-metil-2-(1-metil-ciclopropil)-[4,5’]bitiazolil-2’-il]-amida del ácido Imidazol-1-carboxílico

El compuesto del título es preparado como se describe para el Intermediario BD usando amida del ácido 1- metilciclopropanocarbotioico en lugar de tiopropionamida. Compuesto del título: HPLC (Método F) Tiempo de Retención 5.80 minutos; MS (Método D) muestra preparada en metanol conduce a la detección del uretano correspondiente solamente (NH- CO- OCH3) : M+H 309.8.

Intermediario BG Amida del ácido (2S,4R)- 4-Dimetilamino-pirrolidin-2-carboxílico

Una solución de metil éster del ácido (2S, 4R)- 4-Dimetilamino-pirrolidin-2- carboxílico (225 mg) y amoniaco 7M en metanol (7 ml) es mantenida durante 18 horas a temperatura ambiente en un recipiente sellado. La evaporación y trituración con dietil éter da el compuesto del título como un sólido blanco.

Intermediario BG1 Metil éster del ácido (2S,4R)-4-Dimetilamino-pirrolidin-2-carboxílico

Una mezcla de 1- bencil éster 2- metil éster del ácido (2S, 4R)- 4-dimetilamino- pirrolidin- 1, 2- dicarboxílico (420 mg), paladio al 10% sobre carbono (80 mg) y metanol (10 ml) se agita durante 16 horas bajo una atmósfera de hidrógeno. La filtración y la evaporación dan el compuesto del título que se utiliza sin purificación en las siguientes etapas.

Intermediario BG2 1-bencil éster 2-metil éster del ácido (2S,4R)-4-Dimetilamino-pirrolidin-1,2-dicarboxílico

Se agrega cianoborohidruro de sodio (200 mg) a una mezcla de 1- bencil éster 2- metil éster del ácido (2S, 4R)-4amino-pirrolidin-1, 2- dicarboxílico (400 mg), formalina (0.68 ml), ácido acético (0.72 ml), trietilamina (0.2 ml) y metanol (2 ml) y la mezcla se agita durante 2 horas a temperatura ambiente. La mezcla de reacción es entonces sometida a partición entre diclorometano y solución de bicarbonato de sodio acuoso, las capas de diclorometano se evaporan y se purifican por cromatografía en fase normal, eluyente; gradiente de acetato de etilo a etanol al 20% en acetato de etilo, para dar el componente activo UV predominante. El material sometido a cromatografía se toma con ácido clorhídrico 1 M, lavado 2X con dietil éter, la capa acuosa se basifica con bicarbonato de sodio, se extrae 3X con dietil éter, se seca sobre sulfato de sodio y se evapora para dar el compuesto del título como un aceite de color amarillo, pálido.

Intermediario BH Amida del ácido (2S,4S)- 4-Dimetilamino-pirrolidin-2-carboxílico

Una solución de butil éster del ácido (2S, 4S)-4- Dimetilamino- pirrolidin- 2- carboxílico (326 mg) y amoniaco 7M en metanol (8 ml) se mantiene durante 18 horas a temperatura ambiente en un recipiente sellado. La filtración, evaporación y trituración con dietil éter/metanol dan el compuesto del título como un sólido beige.

Intermediario BH1 Butil éster del ácido (2S,4S)-4-Dimetilamino-pirrolidin-2-carboxílico

Ácido clorhídrico concentrado (0.3 ml) se agrega a una mezcla de metil éster diclorohidrato del ácido (2S, 4S)-4-dimetilamino-pirrolidin-2- carboxílico (400 mg) y 1- butanol (4 ml) y se calienta durante 18 horas a 115°C. Después de enfriar la mezcla de reacción se evapora luego se somete a partición entre diclorometano y solución de bicarbonato de sodio acuoso y las capas de diclorometano se secan y se evaporan para dar el compuesto del título como un aceite de color marrón el cual se usa sin purificación adicional.

Intermediario BI (2-ciclobutil-4’-metil-[4,5’]bitiazolil-2’-il)-amida del ácido Imidazol-1-carboxílico

El compuesto del título es preparado como se describe para el Intermediario BD usando amida del ácido ciclobutanocarbotioico en lugar de tiopropionamida. Compuesto del título: HPLC (Método F) Tiempo de Retención 5.58

minutos; MS (Método D) muestra preparada en metanol conduce a la detección del uretano correspondiente solamente (NH- CO- OCH3) : M+H 310.1 y M-H 308.1.

Intermediario BJ [4’-metil-2-(1-trifluorometil-ciclopropil)-[4,5’]bitiazolil-2’-il]-amida del ácido Imidazol-1-carboxílico

El compuesto del título es preparado como se describe para el Intermediario BD usando amida del ácido 1- trifluorometilciclopropanocarbotioico en lugar de tiopropionamida. Compuesto del título: HPLC (Método F) Tiempo de Retención

3.533 minutos; MS (Método D) muestra preparada en metanol conduce a la detección del uretano correspondiente solamente (NH-CO- OCH3) : M+H 364.0 y M-H 362.1.

Intermediario BK Amida del ácido (1S,5R)-2-Aza-biciclo[3.1.0]hexano-1-carboxílico

Una mezcla de etil éster del ácido (1 S, 5R)-2- aza-biciclo [3.1.0] hexano- 1- carboxílico (2.5 g, preparado por el procedimiento de Hercouet Tetrahedron Assymmetry 1996, 7, 1267- 1268.) y amoniaco 7M en metanol (20 ml) son calentados en un recipiente sellado a 80 °C durante 5 días. La mezcla de reacción enfriada es evaporada y triturada con hexanos/diclorometano para dar el compuesto del título como un sólido beige.

Intermediario BL [2-(1-etil-propil)-4’-metil-[4,5’]bitiazolil-2’-il]-amida ácido Imidazol-1-carboxílico

El compuesto del título es preparado como se describe para el Intermediario BD usando 2- etil- tiobutiramida en lugar de tiopropionamida. HPLC (Método F) Tiempo de Retención 5.892 minutos; MS (Método D) muestra preparada en metanol conduce a la detección del uretano correspondiente solamente (NH- CO- OCH3): M+H 326.1 y M-H 324.2.

Intermediario BM (2-dimetilaminometil-4’-metil-[4,5’]bitiazolil-2’-il)-amida del ácido Imidazol-1-carboxílico

El compuesto del título es preparado como se describe para el Intermediario BD usando 2- etil- tiobutiramida en lugar de tiopropionamida. HPLC (Método F) Tiempo de Retención 3.433 minutos; MS (Método D) muestra preparada en metanol conduce a la detección del uretano correspondiente solamente (NH- CO- OCH3) : M+H 313.1 y M- H 311.2.

Intermediario BN (2-ciclopropilmetil-4’-metil-[4,5’]bitiazolil-2’-il)-amida del ácido Imidazol-1-carboxílico

El compuesto del título es preparado como se describe para el Intermediario BD usando 2-ciclopropantanotioamida en lugar de tiopropionamida. Compuesto del título: HPLC: (Método F) Tiempo de Retención 5.17 minutos; MS (Método D) M+H 294.2 y M-H 292.2.

Intermediario BO [4’-metil-2-(piridin3-ilamino)-[4,5’]bitiazolil-2’-il]-amida del ácido imidazol-1-carboxílico

Se agrega diimidazol carbonilo (506 mg) a 4’- metil-N*2*-piridin 3- il- [4, 5’] bitiazolil- 2, 2’- diamina (740 mg) en DMF (10 ml) a temperatura ambiente. Después de permanecer durante 18 horas a temperatura ambiente la mezcla de reacción se filtra y el sólido se lava con CH2Cl2 para dar el compuesto del título como un polvo gris.

Intermediario BO1 4’-metil-N*2*-piridin3-il-[4,5’]bitiazolil-2,2’-diamina

Se somete a reflujo N- [4’- Metil-2- (piridin 3- ilamino)-[4, 5’] bitiazolil-2’-il]- acetomida (0.9 g) en una mezcla de etanol (30 ml) y ácido clorhídrico concentrado (3 ml) durante 18 horas luego se agrega ácido clorhídrico adicional (1.5 ml). Después de 24 horas adicionales a reflujo la mezcla de reacción se enfría y el pH ajustado a 8- 9 por adición de NaHCO3 acuoso al 5%. El compuesto del título se recoge por filtración, se lava con agua y se seca para dar un sólido de color marrón claro.

Intermediario BO2 N-[4’-metil-2-(piridin3-ilamino)-[4,5’]bitiazolil-2’-il]-acetomida

Se agrega 3- Piridiltiourea (0.62 g) a N- [5-(2-bromo-acetil)- 4-metil- tiazol- 2-il]- acetomida (1.1 g, preparado como se describe en WO 2005/068444) y trietilamina (1.68 ml) en etanol (10 ml) a -10 °C. Después de 30 minutos de agitación a

temperatura ambiente se agrega agua (50 ml) y el compuesto del título se recoge por filtración, se lava con agua y se seca para dar un sólido naranja.

Ejemplo 1 2-amida 1-({5-[4-methanesulfonilo-3-(2-propil-imidazol-1-il)-fenil]-4-metil-tiazol-2-il}-amida) triflouroacetato del ácido (2S,4R)-4-hidroxi-pirrolidin-1,2-dicarboxílico

Se agrega carbonildiimidazol (35 mg) a una solución del Intermediario A (80 mg) en una mezcla de trietilamina (0.054 ml) y DMF (3 ml) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se deja reposar durante la noche a temperatura ambiente y luego se agrega un tercio en volumen a una mezcla de trietilamina (0.01 ml) y amida del ácido (2S, 4R)- 4-hidroxipirrolidin- 2- carboxílico (10 mg) a temperatura ambiente. Después de permanecer 18 horas a temperatura ambiente la mezcla de reacción se evapora luego se absorbe sobre sílica gel y se purifica por cromatografía instantánea de columna eluyendo con un gradiente de CH2Cl2 a metanol al 12% en CH2Cl2. La fracción que contiene el componente UV-activo predominante (254 nm) luego se purifica adicionalmente por cromatografía de fase reversa (Método B) para dar el compuesto del título como una espuma blanca. HPLC/MS (Método C) Tiempo de Retención 1.18 minutos, M+H 533.2.

Ejemplo 2 2-amida 1-({5-[4-metanosulfonilo-3-(2-propil-imidazol- 1-il)-fenil]-4-metil-tiazol-2-il}-amida) trifluoroacetato del ácido (2S,4S)-4-hidroxi-pirrolidin-1,2-dicarboxílico

El compuesto del título se prepara de una manera análoga al Ejemplo 1, excepto que se usa amida del ácido (2S, 4S)- 4hidroxi- pirrolidin- 2-carboxílico en lugar de amida del ácido (2S, 4R)-4- hidroxi- pirrolidin- 2-carboxílico. El compuesto del título se obtiene como un vidrio incoloro. HPLC/MS (Método C) Tiempo de Retención 1.28 minutos, M+H 533.2 y M-H 531.3.

Ejemplo 3 2-amida 1-{[5-(2-tert-butil)-pirimidin4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida} trifluoroacetato del ácido (2S,4R)-4-hidroxipirrolidin-1,2-dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol- 1- carboxílico [5- (2- tert- butil- pirimidin- 4- il)- 4- metiltiazol- 2- il]- amida (100 mg, preparado como se describe en WO 04/096797), amida del ácido (2S, 4R)-4- hidroxi- pirrolidin- 2-carboxílico (49 mg) y trietilamina (0.049 ml) en DMF (1 ml) se deja en reposo a temperatura ambiente durante 18 horas. Después de la evaporación de la purificación de la mezcla de reacción por cromatografía de fase reversa (Método B) dan el compuesto del título como un sólido amarillo. HPLC/MS (Método C) Tiempo de Retención 1.68 minutos, M+H 405.1 y M- H 403.3.

Ejemplo 4 2-amida 1-{[5-(2-tert-butil-pirimidin-4-il)-4-metil-tiazol- 2-il]-amida} trifluoroacetato del ácido (2S,4S)-4-hidroxipirrolidin-1,2-dicarboxílico

El compuesto del título se prepara de una manera análoga al Ejemplo 3 excepto que se usa la amida del ácido (2S, 4S)4- hidroxi- pirrolidin- 2- carboxílico en lugar de la amida del ácido (2S, 4R)-4- hidroxi- pirrolidin- 2- carboxílico. El compuesto del título se obtiene como un vidrio incoloro. HPLC/MS (Método C) Tiempo de Retención 1.82 minutos, M+H

405.2 y M- H 403.4.

Ejemplo 5 2-amida 1-{[5-(2-tert-butil-pirimidin-4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida} del ácido (S)-2,5-dihidro-pirrol-1,2dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol- 1- carboxílico [5-(2-tert-butil-pirimidin- 4-il)-4-metiltiazol- 2- il]- amida (100 mg), amida del ácido (S)-2, 5-dihidro-1H-pirrol- 2-carboxílico (43 mg) y trietilamina (0.049 ml) en DMF (1 ml) se deja en reposo a temperatura ambiente durante 18 horas. Después de la evaporación de la purificación de la mezcla de reacción por recristalización a partir de metanol acuoso dan el compuesto del título como un sólido blanco. HPLC/MS (Método C) Tiempo de Retención 1.99 minutos, M+H 386.9 y M- H 385.1.

Ejemplo 6 2-amida 1-{[5-(2-tert-butil-piridin4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida} del ácido (2S,4R)-4-hidroxi-pirrolidin-1,2dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol- 1- carboxílico [5- (2- tert- butil- piridin 4-il)- 4-metil- tiazol- 2- il]- amida (50 mg), amida del ácido (2S, 4R)- 4- hidroxi- pirrolidin- 2-carboxílico (27 mg) y trietilamina (0.051 ml) en DMA (3 ml) se deja en reposo a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla de reacción se somete a partición entre agua/CH2Cl2, se extrae CH2Cl2 2X, se seca sobre Na2SO4, y se evapora. La purificación del material aislado por cromatografía de fase reversa (Método B) con la neutralización de las fracciones con NaHCO3 antes de la evaporación dan un residuo que se recoge en DMF, se filtra y el filtrado se evapora para dar el compuesto del título como un sólido blanco. MS (Método D) M+H 404 y M- H 402.

Ejemplo 7 2-amida 1-{[5-(2-tert-butil-piridin4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida} del ácido (2S,4S)-4-hidroxi-pirrolidin-1,2dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol- 1- carboxílico [5- (2- tert- butil- piridin 4-il)- 4-metil- tiazol- 2- il]- amida (55 mg), amida del ácido (2S, 4S)- 4- hidroxi- pirrolidin- 2-carboxílico (30 mg) y trietilamina (0.056 ml) en DMA (3 ml) se deja en reposo a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla de reacción se evapora y se purifica por cromatografía en fase normal sobre sílica gel eluyendo con un gradiente de CH2Cl2 a 70: 24: 6 CH2Cl2/EtOAc/CH3OH para dar el compuesto del título como un sólido blanco. MS (Método D) M+H 404 y M-H 402.

Ejemplo 8 2-amida 1-{[5-(2-tert-butil-pirimidin-4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida} del ácido (2S,4R)-4-fluoro-pirrolidin-1,2dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol- 1-carboxílico [5- (2- tert- butil- pirimidin- 4- il)- 4-metiltiazol- 2- il]- amida (45 mg), amida del ácido (2S, 4R)-4-fluoro- pirrolidin- 2- carboxílico (19 mg) y trietilamina (0.022 ml) en DMF (1 ml) se deja en reposo a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla de reacción se filtra a través de un filtro de membrana de PTFE Acrodisc™ de 0.45 microm, se evapora y luego la purificación por recristalización a partir de metanol acuoso dan el compuesto del título como un sólido blanco. HPLC/MS (Método C) Tiempo de Retención 2.01 minutos, M+H 407.1 y M-H 405.3.

Ejemplo 9 2-amida 1-{[5-(2-tert-butil-pirimidin-4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida} triflouroacetato del ácido (2S,3S)-3-hidroxipirrolidin-1,2-dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol- 1-carboxílico [5- (2- tert- butil- pirimidin- 4- il)- 4-metiltiazol- 2- il]- amida (50 mg), amida del ácido (2S, 3S)-3- hidroxi-pirrolidin- 2- carboxílico (19 mg) y trietilamina (0.025 ml) en DMF (1 ml) se deja en reposo a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla de reacción se filtra a través de un filtro de membrana de PTFE Acrodisc™ de 0.45 microm, se evapora y luego la purificación por cromatografía en fase reversa (Método B) dan el compuesto del título como un sólido amarillo. HPLC/MS (Método C) Tiempo de Retención 1.76 minutos, M+H 405.2 y M-H 403.3.

Ejemplo 10 2-amida 1-{[5-(2-tert-butil-pirimidin-4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida} del ácido (2S,3S)-3-metil-pirrolidin-1,2dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol- 1-carboxílico [5- (2- tert- butil- pirimidin- 4- il)- 4-metiltiazol- 2- il]- amida (50 mg), amida del ácido (2S, 3S)-3- metil- pirrolidin- 2-carboxílico (19 mg) y trietilamina (0.025 ml) en DMF (1 ml) se deja en reposo a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla de reacción se filtra a través de un filtro de membrana de PTFE Acrodisc™ de 0.45 microm, se evapora y luego la purificación por recristalización de metanol acuoso dan el compuesto del título como un sólido blanco. HPLC/MS (Método C) Tiempo de Retención 2.07 minutos, M+H 403.2 y M- H 401.3.

Ejemplo 11 2-amida 3-{[5-(2-tert-butil-pirimidin-4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida} del ácido (1R,2S,5S)-3-azabiciclo[3.1.0]hexano-2,3-dicarboxílico

Una mezcla de ácido mixture of imidazol- 1-carboxílico [5- (2- tert- butil- pirimidin- 4-il)-4- metiltiazol- 2- il]-amida (37 mg), amida del ácido (1R, 2S, 5S)-3- aza-biciclo [3.1.0] hexano- 2- carboxílico (15 mg) y trietilamina (0.018 ml) en DMF (1 ml) se deja en reposo a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla de reacción se evapora y después de

purificación por recristalización a partir de metanol acuoso dan el compuesto del título como un sólido blanco. HPLC/MS (Método C) Tiempo de Retención 1.93 minutos, M+H 401.2 y M- H 399.4.

Ejemplo 12 2-amida 1-{[5-(2-tert-butil-pirimidin-4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida} del ácido (S)-2-metil-pirrolidin-1,2dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol- 1-carboxílico [5- (2- tert- butil- pirimidin- 4- il)- 4-metiltiazol- 2- il]- amida (45 mg), amida del ácido (S)- 2- metil-pirrolidin- 2- carboxílico (19 mg) y trietilamina (0.022 ml) en DMF (1 ml) se deja en reposo a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla de reacción se filtra a través de un filtro de membrana de PTFE Acrodisc™ de 0.45 microm, se evapora y después de purificación por recristalización a partir de metanol acuoso dan el compuesto del título como un sólido blanco. HPLC/MS (Método C) Tiempo de Retención 2.09 minutos, M+H 403.0 y M-H 401.1.

Ejemplo 13 2-amida 1-({5-[2-(2,6-dichloro-bencil)-pirimidin-4-il]-4-metil-tiazol-2-il}-amida) del ácido 13 (2S,3S)-3-metilpirrolidin-1,2-dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol- 1-carboxílico {5-[2-(2, 6- dicloro- bencil)- pirimidin- 4-il]-4-metil- tiazol- 2-il}-amida (50 mg), amida del ácido (2S, 3S)- 3- metil- pirrolidin- 2- carboxílico (15 mg) y trietilamina (0.011 ml) en DMF (0.10 ml) se hace rotar formando remolino a 40 °C durante 18 horas. La mezcla de reacción se evapora y después de purificación por recristalización a partir de etanol acuoso dan el compuesto del título como un sólido de color beige. MS (Método D): M+H 505/507 y M- H 503/505.

Ejemplo 14 2-amida 1-{[5-(2-ciclopropil-pirimidin-4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida} del ácido (2S,3S)-3-metil-pirrolidin-1,2dicarboxílico

Una mezcla de ácido Imidazol- 1- carboxílico [5- (2-ciclopropil- pirimidin- 4-il)-4- metil- tiazol- 2-il]-amida (50 mg), amida del ácido (2S, 3S)- 3- metil- pirrolidin- 2-carboxílico (16 mg) y trietilamina (0.019 ml) en DMF (0.11 ml) se hace rotar formando remolino a 40 °C durante 18 horas. La mezcla de reacción se evapora y después de purificación por recristalización a partir de metanol acuoso da el compuesto del título como un sólido de color beige.

Ejemplo 15 2-amida 1-({5-[2-(2-fluoro-fenil)-pirimidin-4-il]-4-metil-tiazol-2-il}-amida) del ácido (2S,3S)-3-metil-pirrolidin1,2-dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol- 1- carboxílico {5-[2-(2-fluoro- fenil)-pirimidin- 4-il]- 4-metil- tiazol- 2- il}- amida (50 mg), amida del ácido (2S, 3S)- 3- metil- pirrolidin- 2-carboxílico (19 mg) y trietilamina (0.016 ml) en DMF (0.13 ml) se hace rotar formando remolino a 40 °C durante 18 horas. La mezcla de reacción se evapora y después de purificación por recristalización a partir de metanol acuoso da el compuesto del título como un sólido beige. MS (Método D) M+H 441 y M- H 439.

Ejemplo 16 2-amida 1-{[5-(2-tert-butil-pirimidin-4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida} del ácido azetidin-1,2-dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol- 1-carboxílico [5- (2- tert- butil- pirimidin- 4- il)- 4-metiltiazol- 2- il]- amida (75 mg), amida del ácido azetidin- 2- carboxílico (24 mg) y trietilamina (0.037 ml) en DMF (2 ml) se deja en reposo a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla de reacción se evapora y después de purificación por recristalización a partir de metanol acuoso da el compuesto del título como un sólido blanco. HPLC/MS (Método C) Tiempo de Retención 1.90 minutos, M+H 375.2 y M- H 373.3.

Ejemplo 17 2-amida 1-{[4-metil-5-(2-metil-pirimidin-4-il)-tiazol-2-il]-amida} del ácido (S)-2-metil-pirrolidin-1,2-dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol- 1-carboxílico [4-metil- 5- (2- metil- pirimidin-4-il)- tiazol-2- il]- amida (27 mg), amida del ácido (S)- 2- metil- pirrolidin- 2- carboxílico (13 mg) y trietilamina (0.031 ml) en DMF (1 ml) se deja en reposo a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla de reacción se evapora y después de purificación por recristalización

a partir de metanol acuoso da el compuesto del título como un sólido blancuzco. HPLC/MS (Método E) Tiempo de Retención 0.73 minutos, M+H 360.9 y M- H 359.0.

Ejemplo 18 2-amida 1-{[5-(2-tert-butil-piridin4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida} del ácido (S)-2-metil-pirrolidin-1,2-dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol- 1- carboxílico [5- (2- tert- butil- piridin 4-il)-4- metil-tiazol- 2- il]- amida (100 mg), amida del ácido (S)- 2- metil-pirrolidin- 2- carboxílico (42 mg) y trietilamina (0.102 ml) en DMF (2 ml) se deja en reposo a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla de reacción se evapora y después de purificación por recristalización a partir de metanol acuoso da el compuesto del título como un sólido blanco. HPLC/MS (Método E) Tiempo de Retención

0.98 minutos, M+H 401.9 y M- H 400.1.

Ejemplo 19 2-amida 1-{[5-(6-imidazol-1-il-piridin2-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida} del ácido (S)-2-metil-pirrolidin-1,2dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol- 1-carboxílico [5- (6- imidazol- 1-il- piridin 2- il)- 4- metil- tiazol- 2-il]-amida (27 mg), amida del ácido (S)-2- metil-pirrolidin- 2-carboxílico (11 mg) y trietilamina (0.027 ml) en DMF (1 ml) se deja en reposo a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla de reacción se evapora y después de purificación por recristalización a partir de metanol acuoso da el compuesto del título como un sólido blanco. HPLC/MS (Método E) Tiempo de Retención

0.83 minutos, M+H 411.9 y M- H 409.9.

Ejemplo 20 2-amida 1-{[5-(2-metoximetil-pirimidin-4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida} del ácido (2S,3S)-3-metil-pirrolidin-1,2dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol- 1-carboxílico [5- (2- metoximetil- pirimidin- 4- il)- 4-metil- tiazol- 2-il]-amida (25 mg), amida del ácido (2S, 3S)- 3- metil- pirrolidin- 2-carboxílico (11 mg) y trietilamina (0.013 ml) en DMF (0.08 ml) se hace rotar formando remolino a 40 °C durante 18 horas. La mezcla de reacción se evapora y después se purifica por cromatografía de fase reversa (Método B), las fracciones se pasan a través de un cartucho Varian Bond Elut® SCX 300 mg SPE seguido por elución con amoniaco 7 M en metanol. La evaporación de los lavados de amoniaco metanólico da el compuesto del título como un sólido amarillo. MS (Método D) M+H 391 y M-H 389.

Ejemplo 21 2-amida 1-{[5-(2-isobutil-pirimidin-4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida} del ácido (2S,3S)-3-metil-pirrolidin-1,2dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol-1- carboxílico [5- (2- isobutil- pirimidin-4- il) 4- metil-tiazol-2- il]- amida (30 mg), amida del ácido (2S, 3S)- 3-metil- pirrolidin- 2- carboxílico (12 mg) y trietilamina (0.015 ml) en DMF (0.09 ml) se hace rotar formando remolino a 40 °C durante 18 horas. La mezcla de reacción se evapora y después se purifica por cromatografía de fase reversa (Método B), las fracciones se pasan a través de un cartucho Varian Bond Elut® SCX 300 mg SPE seguido por elución con amoniaco 7 M en metanol. La evaporación de los lavados de amoniaco metanólico da el compuesto del título como un sólido amarillo. MS (Método D) M+H 403 y M- H 401.

Ejemplo 22 2-amida 1-{[5-(2-bencil-pirimidin-4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida} del ácido (S)-2-metil-pirrolidin-1,2dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol-1- carboxílico [5- (2-bencil-pirimidin- 4- il)- 4- metil- tiazol- 2- il]-amida (30 mg), amida del ácido (S)- 2-metil- pirrolidin- 2- carboxílico (11 mg) y trietilamina (0.013 ml) en DMF (0.08 ml) se hace rotar formando remolino a 40 °C durante 18 horas. La mezcla de reacción se evapora y después se purifica por cromatografía de fase reversa (Método B), las fracciones se pasan a través de un cartucho Varian Bond Elut® SCX 300 mg SPE seguido por elución con amoniaco 7 M en metanol. La evaporación de los lavados de amoniaco metanólico da el compuesto del título como un sólido amarillo. MS (Método D) M+H 437 y M- H 435.

Ejemplo 23 2-amida 1-{[5-(2-etil-pirimidin-4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida} del ácido (S)-2-metil-pirrolidin-1,2-dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol- 1- carboxílico [5- (2- etil- pirimidin- 4- il)- 4-metil- tiazol- 2- il]-amida (25 mg), amida del ácido (S)-2- metil-pirrolidin-2- carboxílico (11 mg) y trietilamina (0.013 ml) en DMF (0.08 ml) se hace rotar formando remolino a 40 °C durante 18 horas. La mezcla de reacción se evapora y después se purifica por cromatografía de fase reversa (Método B), las fracciones se pasan a través de un cartucho Varian Bond Elut® SCX 300 mg SPE seguido por elución con amoniaco 7 M en metanol. La evaporación de los lavados de amoniaco metanólico da el compuesto del título como un sólido beige. MS (Método D) M+H 375 y M- H 373.

Ejemplo 24 2-amida 1-{[5-(2-ciclopropil-pirimidin-4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida} del ácido (S)-2-metil-pirrolidin-1,2dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol- 1-carboxílico [5- (2-ciclopropil- pirimidin- 4- il)-4- metil- tiazol- 2-il]-amida (30 mg), amida del ácido (S)- 2-metil-pirrolidin- 2-carboxílico (13 mg) y trietilamina (0.015 ml) en DMF (0.09 ml) se hace rotar formando remolino a 40 °C durante 18 horas. La mezcla de reacción se evapora y después se purifica por cromatografía de fase reversa (Método B), las fracciones se pasan a través de un cartucho Varian Bond Elut® SCX 300 mg SPE seguido por elución con amoniaco 7 M en metanol. La evaporación de los lavados de amoniaco metanólico da el compuesto del título como un sólido beige. MS (Método D) M+H 387 y M-H 385.

Ejemplo 25 2-amida 1-{[5-(2-metoximetil-pirimidin-4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida} del ácido (S)-2-metil-pirrolidin-1,2dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol- 1-carboxílico [5- (2- metoximetil- pirimidin- 4- il)- 4-metil- tiazol- 2-il]-amida (30 mg), amida del ácido (S)- 2-metil-pirrolidin- 2-carboxílico (13 mg) y trietilamina (0.015 ml) en DMF (0.09 ml) se hace rotar formando remolino a 40 °C durante 18 horas. La mezcla de reacción se evapora y después se purifica por cromatografía de fase reversa (Método B), las fracciones se pasan a través de un cartucho Varian Bond Elut® SCX 300 mg SPE seguido por elución con amoniaco 7 M en metanol. La evaporación de los lavados de amoniaco metanólico da el compuesto del título como un sólido beige. MS (Método D) M+H 391 y M-H 389.

Ejemplo 26 2-amida 1-({5-[2-(2-fluoro-fenil)-pirimidin-4-il]-4-metiltiazol-2-il}-amida) del ácido (S)-2-metil-pirrolidin-1,2dicarboxílico

Una mezcla de ácido Imidazol- 1-carboxílico {5- [2- (2- fluoro- fenil)-pirimidin-4- il]-4- metil-tiazol-2-il}-amida (30 mg), amida del ácido (S)- 2-metil-pirrolidin- 2-carboxílico (11 mg) y trietilamina (0.013 ml) en DMF (0.08 ml) se hace rotar formando remolino a 40 °C durante 18 horas. La mezcla de reacción se evapora y después se purifica por cromatografía de fase reversa (Método B), las fracciones se pasan a través de un cartucho Varian Bond Elut® SCX 300 mg SPE seguido por elución con amoniaco 7 M en metanol. La evaporación de los lavados de amoniaco metanólico da el compuesto del título como un sólido beige. MS (Método D) M+H 441 y M-H 439.

Ejemplo 27 2-amida 1-({5-[2-(2,6-dichloro-bencil)-pirimidin-4-il]-4-metil-tiazol-2-il}-amida) del ácido (S)-2-metil-pirrolidin1,2-dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol- 1- carboxílico {5-[2-(2, 6-dicloro- bencil)- pirimidin-4- il]-4- metil-tiazol-2-il}-amida (30 mg), amida del ácido (S)- 2- metil- pirrolidin- 2- carboxílico (10 mg) y trietilamina (0.011 ml) en DMF (0.07 ml) se hace rotar formando remolino a 40 °C durante 18 horas. La mezcla de reacción se evapora y después se purifica por cromatografía de fase reversa (Método B), las fracciones se pasan a través de un cartucho Varian Bond Elut® SCX 300 mg SPE seguido por elución con amoniaco 7 M en metanol. La evaporación de los lavados de amoniaco metanólico da el compuesto del título como un sólido beige. MS (Método D) M+H 505 y M- H 503.

Ejemplo 28 2-amida 1-{[5-(2-isobutil-pirimidin-4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida} del ácido (S)-2-metil-pirrolidin-1,2dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol- 1- carboxílico [5- (2- isobutil-pirimidin- 4- il)-4- metil-tiazol-2- il]- amida (30 mg), amida del ácido (S)- 2-metil- pirrolidin- 2- carboxílico (10 mg) y trietilamina (0.015 ml) en DMF (0.09 ml) se hace rotar formando

remolino a 40 °C durante 18 horas. La mezcla de reacción se evapora y después se purifica por cromatografía de fase reversa (Método B), las fracciones se pasan a través de un cartucho Varian Bond Elut® SCX 300 mg SPE seguido por elución con amoniaco 7 M en metanol. La evaporación de los lavados de amoniaco metanólico da el compuesto del título como un sólido beige. MS (Método D) M+H 403 y M- H 401.

Ejemplo 29 2-amida 1-{[5-(2-bencil-pirimidin-4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida} del ácido (2S,3S)-3-metil-pirrolidin-1,2dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol-1- carboxílico [5- (2-bencil-pirimidin- 4- il)- 4- metil- tiazol- 2- il]-amida (30 mg), amida del ácido (2S, 3S)- 3-metil- pirrolidin- 2- carboxílico (11 mg) y trietilamina (0.013 ml) en DMF (0.08 ml) se hace rotar formando remolino a 40 °C durante 18 horas. La mezcla de reacción se evapora y después se purifica por cromatografía de fase reversa (Método B), las fracciones se pasan a través de un cartucho Varian Bond Elut® SCX 300 mg SPE seguido por elución con amoniaco 7 M en metanol. La evaporación de los lavados de amoniaco metanólico da el compuesto del título como un sólido amarillo. MS (Método D) M+H 437 y M- H 435.

Ejemplo 30 2-amida 1-{[5-(2-etil-pirimidin-4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida} del ácido (2S,3S)-3-metil-pirrolidin-1,2dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol- 1- carboxílico [5- (2- etil- pirimidin- 4- il)- 4-metil- tiazol- 2- il]-amida (30 mg), amida del ácido (2S, 3S)- 3- metil- pirrolidin- 2- carboxílico (13 mg) y trietilamina (0.016 ml) en DMF (0.10 ml) se hace rotar formando remolino a 40 °C durante 18 horas. La mezcla de reacción se evapora y después se purifica por cromatografía de fase reversa (Método B), las fracciones se pasan a través de un cartucho Varian Bond Elut® SCX 300 mg SPE seguido por elución con amoniaco 7 M en metanol. La evaporación de los lavados de amoniaco metanólico da el compuesto del título como un sólido amarillo. MS (Método D) M+H 375 y M- H 373.

Ejemplo 31 2-amida 1-{[4-metil-5-(2-trifluorometil-pirimidin-4-il)-tiazol-2-il]-amida} del ácido (2S,3S)-3-metil-pirrolidin-1,2dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol-1- carboxílico [5-(2-trifluorometil- pirimidin- 4- il)- 4-metil- tiazol- 2-il]- amida (25 mg), amida del ácido (2S, 3S)- 3- metil- pirrolidin- 2-carboxílico (10 mg) y trietilamina (0.012 ml) en DMF (0.07 ml) se hace rotar formando remolino a 40 °C durante 18 horas. La mezcla de reacción se evapora y después se purifica por cromatografía de fase reversa (Método B), las fracciones se pasan a través de un cartucho Varian Bond Elut® SCX 300 mg SPE seguido por elución con amoniaco 7 M en metanol. La evaporación de los lavados de amoniaco metanólico da el compuesto del título como un sólido amarillo. MS (Método D) M+H 415 y M-H 413.

Ejemplo 32 2-amida 1-{[5-(3-tert-butilfenil)-4-metil-tiazol-2-il]-amida} y ácido (S)-2-metil-pirrolidin-1,2-dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol- 1- carboxílico [5- (3- tert-butil- fenil)- 4- metil-tiazol-2-il]- amida (13 mg), amida del ácido (S)- 2- metil- pirrolidin- 2- carboxílico (5 mg) y trietilamina (0.013 ml) en DMF (1.0 ml) es mantenida a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla de reacción se evapora y después se purifica por cromatografía de fase reversa (Método B), la evaporación parcial de las fracciones que contienen el componente de tiempo de retención 15.0 minutos, se neutralizan con NaHCO3, se extraen con CH2Cl2 (5X) y se evaporan dando el compuesto del título como un vidrio incoloro. MS (Método E) Tiempo de Retención 2.11 minutos, M+H 401.0 y M- H 399.0.

Ejemplo 33 2-amida 1-[(2-tert-butil-4’-metil-[4,5’]bitiazolil-2’-il)-amida] del ácido (2S,4R)-4-hidroxi-pirrolidin-1,2dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol-1- carboxílico (2- tert- butil- 4’- metil- [4, 5’] bitiazolil- 2’- il)-amida (139 mg), amida del ácido (2S, 4R)-4- hidroxi- pirrolidin- 2- carboxílico (73 mg) y trietilamina (0.14 ml) en DMF (2 ml) se deja en reposo a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla de reacción se evapora y el residuo se purifica por cromatografía de fase reversa (Método A). Las fracciones que contienen el componente de retención 12.3 minutos se evaporan, se agrega NaHCO3 acuoso, y el sólido formado se recoge por filtración lavando con CH2Cl2 y agua. La cristalización a partir de

etanol acuoso da el compuesto del título como un sólido blancuzco. HPLC/MS (Método E) Tiempo de Retención 1.59 minutos, M+H 409.8 y M- H 408.0.

Ejemplo 34 2-amida 1-[(2-tert-butil-4’-metil-[4,5’]bitiazolil-2’-il)-amida] del ácido (2S,4S)-4-hidroxi-pirrolidin-1,2dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol-1- carboxílico (2- tert- butil- 4’- metil- [4, 5’] bitiazolil- 2’- il)-amida (139 mg), amida del ácido (2S, 4S)- 4- hidroxi- pirrolidin- 2- carboxílico (73 mg) y trietilamina (0.14 ml) en DMF (2 ml) se deja en reposo a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla de reacción se evapora y el residuo se purifica por cromatografía de fase reversa (Método A). Las fracciones que contienen el componente de retención del minuto 12.9 se evaporan, se someten a partición entre NaHCO3 acuoso y CH2Cl2, se extrae 4X CH2Cl2, la capa orgánica combinada se evapora y se cristaliza a partir de etanol acuoso para dar el compuesto del título como un sólido blanco. HPLC/MS (Método E) Tiempo de Retención 1.65 minutos, M+H 409.8 y M- H 408.0.

Ejemplo 35 2-amida 1-[(2-tert-butil-4’-metil-[4,5’]bitiazolil-2’-il)-amida] triflouroacetato del ácido (2S,3S)-3-hidroxipirrolidin-1,2-dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol- 1-carboxílico (2- tert-butil-4’-metil- [4, 5’] bitiazolil- 2’-il)- amida (37 mg), amida del ácido (2S, 3S)- 3-hidroxi- pirrolidin- 2-carboxílico (15 mg) y trietilamina (0.037 ml) en DMF (1 ml) se deja en reposo a temperatura ambiente durante 18 horas. Después de la filtración y la evaporación de la purificación de la mezcla de reacción por cristalización desde metanol acuoso da el compuesto del título como un sólido beige. HPLC/MS (Método C) Tiempo de Retención 2.21 minutos, M+H 409.9 y M- H 408.1.

Ejemplo 36 2-amida 1-[(2-tert-butil-4’-metil-[4,5’]bitiazolil-2’-il)-amida] del ácido (S)-2-metil-pirrolidin-1,2-dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol- 1-carboxílico (2- tert-butil-4’-metil- [4, 5’] bitiazolil- 2’-il)- amida (70 mg), amida del ácido (S)- 2- metil- pirrolidin- 2- carboxílico (28 mg) y trietilamina (0.07 ml) en DMF (1 ml) se deja en reposo a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla de reacción se evapora y el residuo se purifica por cristalización a partir de metanol acuoso para dar el compuesto del título como un sólido blanco. HPLC/MS (Método C) Tiempo de Retención 2.57 minutos, M+H 407.9 y M- H 406.0.

Ejemplo 37 2-amida 1-[(2-tert-butil-4’-metil-[4,5’]bitiazolil-2’-il)-amida] del ácido (2S,3S)-3-metil-pirrolidin-1,2-dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol- 1-carboxílico (2- tert-butil-4’-metil- [4, 5’] bitiazolil- 2’-il)- amida (60 mg), amida del ácido (2S, 3S)-3- metil- pirrolidin- 2-carboxílico (24 mg) y trietilamina (0.06 ml) en DMF (1 ml) se deja en reposo a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla de reacción se filtra y se evapora y el residuo se purifica por cromatografía en fase reversa (Método A). Las fracciones que contienen el componente de retención 15.3 minutos se evaporan, se someten a partición ente NaHCO3 acuoso y CH2Cl2, se extrae 4X CH2Cl2, la capa orgánica combinada se evapora y se cristaliza a partir de metanol acuoso para dar el compuesto del título como un sólido blanco. HPLC/MS (Método C) Tiempo de Retención 2.48 minutos, M+H 407.9 y M- H 406.0.

Ejemplo 38 2-amida 1-[(2-tert-butil-4’-metil-[4,5’]bitiazolil-2’-il)-amida] del ácido (2S,4R)-4-fluoro-pirrolidin-1,2dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol- 1-carboxílico (2- tert-butil-4’-metil- [4, 5’] bitiazolil- 2’-il)- amida (60 mg), amida del ácido (2S, 4R)-4-fluoro- pirrolidin-2- carboxílico (25 mg) y trietilamina (0.06 ml) en DMF (1 ml) se deja en reposo a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla de reacción se filtra y se evapora y el residuo se purifica por cromatografía de fase reversa (Método A). Las fracciones que contienen el componente de retención 15.2 minutos se evaporan, se someten a partición entre NaHCO3 acuoso y CH2Cl2, se extrae 3X CH2Cl2, la capa orgánica combinada se evapora y se cristaliza en metanol acuoso con una filtración caliente para dar el compuesto del título como un sólido blanco. HPLC/MS (Método C) Tiempo de Retención 2.42 minutos, M+H 411.8 y M- H 410.0.

Ejemplo 39 2-amida 1-{[4’-metil-2-(piridin3-ilamino)-[4,5’]bitiazolil-2’-il]-amida} del ácido (S)-2-metil-pirrolidin-1,2dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol- 1-carboxílico [4’-metil- 2-(piridin 3- ilamino)- [4, 5’] bitiazolil- 2’-il]- amida (115 mg), amida del ácido (S)-2- metil- pirrolidin- 2- carboxílico (42 mg) y trietilamina (0.10 ml) en DMF (1.5 ml) es agitada a temperatura ambiente durante 3.5 horas. La mezcla de reacción es entonces evaporada y el compuesto del título precipitado de metanol y agua para dar un polvo gris. MS (Método D) M+H 444.1 y M- H 442.2.

Ejemplo 40 2-amida 1-({4-metil-5-[2-(1-metil-ciclopropil)-piridin4-il]-tiazol-2-il}-amida) del ácido (S)-2-Metil-pirrolidin-1,2dicarboxílico

Se agrega Et3N (0.117 mL, 0.84 mmol, 3 eq) a una solución de ácido imidazol-1- carboxílico {4-metil- 5-[2-(1- metilciclopropil)- 1, 2- dihidro-piridin 4- il]- tiazol-2-il} amida (Etapa 40.1) (94 mg, 0.28 mmol) y amida del ácido (S)- 2metilpirrolidin-2- carboxílico (Intermediario I) (54 mg, 4.8 mmol, 1.5 eq) en DMF (2 mL), bajo una atmósfera de argón. La mezcla de reacción se agita durante 6 horas a temperatura ambiente, se detiene mediante la adición de una solución saturada de NaHCO3 y se extrae con EtOAc. La fase orgánica se lava con una solución saturada de NaHCO3, se seca (Na2SO4), se filtra y concentra. El residuo se purifica mediante cromatografía de columna de sílica gel (DCM/ MeOH, 1: 0

-

94: 6), seguido por trituración en Et2O para producir 73 mg del compuesto del título como un sólido blanco: ESI-MS:

400.1 [M+H]+; TLC: Rf = 0.45 (DCM/ MeOH, 9: 1).

Etapa 40.1: {4-metil-5-[2-(1-metil-ciclopropil)piridin4-il]-tiazol-2-il}-amida del ácido Imidazol-1-carboxílico

Una mezcla de 4-metil- 5-[2-(1-metil- ciclopropil)- piridin 4- il]- tiazol- 2- ilamina (Etapa 40.2) (211 mg, 0.86 mmol) y 1, 1’- carbonilodiimidazol (210 mg, 1.3 mmol, 1.5 eq) en DCM (10 mL) se agita durante 14 horas a reflujo y se deja enfriar. El precipitado resultante se recoge por filtración para proveer 275 mg del compuesto del título como un sólido blanco: ESI- MS: 338.2 [M- H]-.

Etapa 40.2: 4-Metil-5-[2-(1-metil-ciclopropil)-piridin4-il]-tiazol-2-ilamina

Una mezcla de N- {4-metil- 5-[2- (1- metil-ciclopropil)-piridin 4- il]- tiazol- 2-il}-acetomida (Etapa 401.3) (565 mg, 7 mmol), una solución acuosa 6N de HCl (3 mL) y EtOH (15 mL) se agita durante 3.5 horas a 85°C, se deja enfriar, se detiene por adición de una solución saturada de NaHCO3 y se extrae con DCM. La fase orgánica se lava con una solución saturada de NaHCO3, se seca (Na2SO4), se filtra y concentra. El residuo se purifica mediante cromatografía en columna de sílica gel (DCM/ MeOH, 1: 0 -98: 2) para producir 366 mg de el compuesto del título como un sólido amarillo: ESI- MS: 246.1 [M+H]+; TLC: Rf = 0.40 (DCM/ MeOH, 9: 1).

Etapa 40.3: N-{4-Metil-5-[2-(1-metil-ciclopropil)-piridin4-il]-tiazol-2-il}-acetomida

Una mezcla de 2-acetamido- 4- metiltiazol (405 mg, 2.6 mmol, 1.1 eq), carbonato de cesio (1.54 g, 4.72 mmol, 2 eq), tritert- butilfosfinio tetrafluoroborato (137 mg, 0.47 mmol, 0.2 eq), paladio (II) acetato (51 mg, 0.24 mmol, 0.1 eq) y 4- bromo- 2-(1-metil- ciclopropil)- piridina (Etapa 40.4) (500 mg, 2.36 mmol) en DMF (10 mL) se agita durante 3.5 horas a 100°C bajo una atmósfera de argón, se deja enfriar, se detiene por adición de una solución saturada de NaHCO3 y se filtra a través de una almohadilla de celita. El filtrado se extrae con EtOAc. La fase orgánica se lava con una solución saturada de NaHCO3, se seca (Na2SO4), se filtra y concentra. El residuo se purifica mediante cromatografía en columna de sílica gel (DCM/ MeOH, 1: 0 - 99: 1) para producir 569 mg del compuesto del título como un sólido amarillo: ESI- MS: 288.1 [M+H]+; TLC: Rf = 0.40 (DCM/ MeOH, 9: 1).

Etapa 40.4: 4-Bromo-2-(1-metil-ciclopropil)-piridina

Una mezcla de 2- (1- metil- ciclopropil) I- 1H- piridin 4-ona (Etapa 40.5) (330 mg, 2.21 mmol) y POBr3 (700 mg, 2.44 mmol, 1.1 eq) es calentada a 120°C, agitada durante 15 minutos, se deja enfriar, detenida por adición de una solución saturada de NaHCO3 y extraída con DCM/ MeOH (9: 1, v/v). La fase orgánica es lavada con una solución saturada de NaHCO3, secada (Na2SO4), filtrada y concentrada. El residuo es purificado mediante cromatografía en columna de sílica gel (Hex/ EtOAc, 95: 5) para producir 335 mg de el compuesto del título como un aceite de color amarillo: ESI- MS: 212.0/214.0 [M+H]+; tR= 2.39 min (Sistema 1); TLC: Rf = 0.23 (Hex/ EtOAc, 9: 1).

Etapa 40.5: 2-(1-Metil-ciclopropil)-1H-piridin4-ona

Una mezcla de 2-(1-metil- ciclopropil)- pirano- 4-ona (Etapa 40.6) (440 mg, 2.93 mmol) y una solución acuosa al 30% de hidróxido de amonio (100 mL) es agitada durante 1 hora a reflujo, se deja enfriar y se concentra. El residuo es purificado mediante cromatografía en columna de sílica gel (DCM/ MeOH/NH3aq, 94: 5: 1 - 92: 7: 1) para producir 333 mg de el compuesto del título como un sólido amarillo: ESI- MS: 150.0 [M+H]+; tR= 1.25 min (Sistema 1).

Etapa 40.6: 2-(1-Metil-ciclopropil)-pirano-4-ona

Una mezcla de 1-hidroxi-5-metoxi- 1- (1- metil- ciclopropil)- penta- 1, 4- dien- 3- ona (Etapa 40.7) (1.07 g, 5.9 mmol) y TFA (0.9 mL, 11.7 mmol, 2 eq) en tolueno (50 mL) es agitada durante 14 horas a temperatura ambiente y concentrada. La purificación del residuo por cromatografía en columna de sílica gel (Hex/ EtOAc, 1: 0 - 3: 7) provee 442 mg del compuesto del título como un rojo sólido: ESI- MS: 151.1 [M+H]+; tR= 2.89 min (Sistema 1) ; TLC: Rf = 0.19 (Hex/ EtOAc,

1: 1).

Etapa 40.7: 1-Hidroxi-5-metoxi-1-(1-metil-ciclopropil)-penta-1,4-dien-3-ona

Se agrega gota a gota LiHMDS (1M en THF, 88 mL, 2 eq) a una solución fría (- 78°C) de 4- metoxi- 3-buten- 2-ona (8.8 mL, 88 mmol, 2 eq) en THF (300 mL). Después de 30 minutos de agitación a -78°C, se agrega una solución de cloruro de 1- metil- ciclopropanocarbonilo (Etapa 40.8) (5.19 g, 44 mmol) en THF (100 mL). La mezcla resultante se deja calentar a temperatura ambiente durante 2 horas y se detiene por adición de una solución saturada de NH4Cl. El THF se elimina bajo vacío. La mezcla concentrada se extrae con Et2O. La capa orgánica se lava con salmuera (2 x 150 mL), secada (Na2SO4), se filtra y se concentra. El residuo se purifica mediante cromatografía en columna de sílica gel (Hex/ EtOAc, 1: 0 -95: 5) para producir 5.68 g del compuesto del título como un aceite color amarillo: ESI- MS: 183.1 [M+H]+; TLC: Rf = 0.32 (Hex/ EtOAc, 9: 1).

Etapa 40.8: Cloruro de 1-Metil-ciclopropanocarbonilo

Una mezcla de ácido 1-metil-ciclopropanocarboxílico (10 g, 100 mmol) y cloruro de oxalilo (10.49 ml, 120 mmol, 1.2 eq) en CHCl3 (80 ml) es agitada durante 4 horas a 70 °C. La mezcla de reacción es concentrada para producir 11.8 g de el compuesto del título como un aceite color amarillo el cual se usa sin purificación adicional.

Ejemplo 41 2-amida 1-{[5-(2-ciclopropil-piridin4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida} del ácido (S)-2-Metil-pirrolidin-1,2dicarboxílico

El compuesto del título es preparado de forma análoga al procedimiento descrito en el Ejemplo 40 pero con las siguientes modificaciones. En el Ejemplo 40, la mezcla de reacción es agitada durante 14 horas a temperatura ambiente. En la Etapa 40.1, la mezcla de reacción es agitada durante 4 horas a reflujo. En la Etapa 1.2, la mezcla de reacción es

5 agitada durante 2 horas a 85°C. En la Etapa 1.3, es usado 4- cloro-2- (1-metil- ciclopropil)- piridina (Etapa 41.1) y la mezcla de reacción es agitada durante 2 horas a 150°C. Compuesto del título: ESI- MS: 386.1 [M+H]+; TLC: Rf = 0.33 (DCM/ MeOH, 9: 1).

Etapa 41.1: 4-Cloro-2-ciclopropil-piridina

El compuesto del título es preparado de acuerdo con una modificación de un procedimiento descrito en la literatura 10 [Comins, D. L.; Mantlo, N. B., Journal of Organic Chemistry, (1985), 50, 4410-4411].

Se agrega bromuro de ciclopropilmagnesio (0.5M in THF, 100 mL, 50 mmol, 2.2 eq) en una porción de una suspensión fría (-78°C) de 4-cloropiridina clorhidrato (3.4 g, 22 mmol) en THF (68 mL). Después de 10 minutos de agitación a -78°C, se agrega gota a gota fenil cloroformiato (2.76 mL, 22 mmol). La mezcla de reacción se agita a -78°C durante 15 minutos, se deja calentar hasta temperatura ambiente, se detiene mediante la adición de solución acuosa al 20% de 15 NH4Cl y se extrae con Et2O (2 x 100 mL). La fase orgánica se lava con solución saturada de NaHCO3 (50 mL), se seca (Na2SO4), se filtra y concentra. Al residuo disuelto en tolueno (100 mL), se agrega una solución de o-cloranilo (6 g, 24.2 mmol, 1.1 eq) en AcOH glacial (50 mL). La mezcla de reacción se agita durante 14 horas a temperatura ambiente, se enfría a 0°C, se basifica mediante la adición de una solución acuosa al 10% de NaOH y se filtra a través de una almohadilla de celita. La capa orgánica del filtrado se lava con H2O (20 mL) y se extrae con una solución acuosa al 10%

20 HCl (3 x 25 mL). Las capas ácidas combinadas se basifican por adición de solución acuosa al 20% de NaOH y se extraen con DCM (3 x 25 mL). La fase orgánica se lava con H2O (50 mL), se seca (Na2SO4), se filtra y concentra. El residuo se purifica mediante cromatografía en columna de sílica gel (DCM/MeOH, 1:0 -99:1) para producir 0.951 g del título del compuesto como un aceite incoloro: ESI-MS: 154.1 [M+H]+; tR= 1.41 min (Sistema 1); TLC: Rf = 0.85 (DCM/MeOH, 9:1).

25 Ejemplo 42 2-amida 1-({5-[2-(2-fluoro-fenil)-piridin4-il]-4-metil-tiazol-2-il}-amida) del ácido (S)-2-Metil-pirrolidin-1,2dicarboxílico

El compuesto del título es preparado en analogía con el procedimiento descrito en el Ejemplo 40 pero con las siguientes modificaciones. En el Ejemplo 40, la mezcla de reacción es agitada durante 2 horas a temperatura ambiente. En la Etapa 30 40.1, la mezcla de reacción es agitada durante 3 horas a reflujo. En la Etapa 40.3, se usa 4- cloro-2- (2- fluorofenilo)

piridina (Etapa 42.1) y la mezcla de reacción es agitada durante 2 horas a 150°C. Compuesto del título: ESI-MS: 440.1 [M+H]+; tR= 2.85 min (Sistema 1); TLC: Rf = 0.36 (DCM/ MeOH, 9: 1).

Etapa 42.1: 4-Cloro-2-(2-fluoro-fenil)-piridina

Una mezcla de ácido 2- fluorofenilborónico (141 mg, 1 mmol, 1.2 eq) en EtOH (1 mL) es agrega una mezcla de 4-cloro5 2-yodo- piridina [Choppin, S.; Gros, P.; Fort, Y., European Journal of Organic Chemistry (2001), (3), 603- 606] (200 mg,

0.84 mmol), PdCl2 (dppf) (18 mg, 0.025 mmol, 0.03 equiv) y Na2CO3 (solución 2 M en H2O, 1.68 mL, 3.36 mmol, 4 equiv) en tolueno (2 mL) a 105°C, bajo una atmósfera de argón. La mezcla de reacción se agita a 105 °C durante 1 hora, se deja enfriar a temperatura ambiente, se detiene por adición de una solución saturada de NaHCO3 y se extrae con EtOAc. La fase orgánica se lava con una solución saturada de NaHCO3, se seca (Na2SO4), se filtra y concentra. El

10 residuo se purifica mediante cromatografía en columna de sílica gel (Hex/ EtOAc, 1: 0 - 97: 3) para producir 127 mg del compuesto del título como un sólido blanco: ESI- MS: 208.1 [M+H]+; tR= 4.66 min (Sistema 1) ; TLC: Rf = 0.27 (Hex/ EtOAc. 9: 1).

Ejemplo 43 2-amida 1-{[5-(2-ciclobutil-piridin4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida} del ácido (S)-2-Metil-pirrolidin-1,2dicarboxílico

El compuesto del título es preparado en analogía con el procedimiento descrito en el Ejemplo 40 pero con las siguientes modificaciones. En el Ejemplo 40, la mezcla de reacción es agitada durante 18 horas a temperatura ambiente, diluida con EtOAc y H2O, y extraída con EtOAc. En la Etapa 40.3, la mezcla de reacción es agitada durante 2 horas a 120°C, enfriada, diluida con EtOAc y H2O, filtrada a través de una almohadilla de celita y extraída con EtOAc. Después de

20 secada y concentración de la fase orgánica, el residuo es purificado por trituración en Et2O. En la Etapa 40.5, la mezcla de reacción es agitada durante 1 hora a 80°C. En la Etapa 40.7, 4- metoxi- 3-buten- 2- ona en THF es agregada a una solución fría (-78°C) de LiHMDS en THF. Después de 30 minutos, es agregado cloruro de ciclobutilcarbonilo en THF y se deja que la mezcla de reacción alcance la temperatura ambiente durante 18 horas.

Compuesto del título: ESI- MS: 400.1 [M+H]+; tR= 2.55 min (Sistema 1); TLC: Rf = 0.37 (DCM/ MeOH/NH3aq, 89: 10: 1).

25 Ejemplo 44 2-amida 1-({4-metil-5-[2-(1-metil-ciclobutil)-piridin4-il]-tiazol-2-il}-amida) del ácido (S)-2-Metil-pirrolidin-1,2dicarboxílico

El compuesto del título es preparado en analogía con el procedimiento descrito en el Ejemplo 40 pero con las siguientes modificaciones. En el Ejemplo 40, la mezcla de reacción es agitada durante 18 horas a temperatura ambiente, se detiene por dilución con EtOAc y H2O, y extraída con EtOAc. En la Etapa 40.1, la mezcla de reacción es agitada durante 4 horas a reflujo. En la Etapa 40.2, la mezcla de reacción es agitada durante 2 horas a 100°C. En la Etapa 40.3, la mezcla de 5 reacción es agitada durante 3 horas a 100°C, diluida con EtOAc/H2O, y extraída con EtOAc. Después de secada y concentración de la fase orgánica, el residuo es purificado mediante cromatografía en columna de sílica gel (Hex/ EtOAc,

1: 4). En la Etapa 40.5, la mezcla de reacción es agitada durante 2 horas a 80°C. En la Etapa 40.7, 4- metoxi-3-buten- 2ona (50 mmol) en THF (100 mL) es agregado a una solución fría (-78°C) de LiHMDS (1M en THF, 100 mL) en THF (200 mL). Después de 30 minutos, es agregado cloruro de 1- metil- ciclobutano (Etapa 44.1) y se deja que la mezcla de

10 reacción alcance la temperatura ambiente durante 18 horas.

Compuesto del título: ESI- MS: 414.1 [M+H]+; tR= 2.72 min (Sistema 1) ; TLC: Rf = 0.13 (DCM/ MeOH/NH3aq, 94: 5: 1).

Etapa 44.1: Cloruro de 1-Metil-ciclobutanocarbonilo

El compuesto del título es preparado en analogía con el procedimiento descrito en la Etapa 40.8 pero usando ácido 1metil-ciclobutanocarboxílico [Cowling, S. J.; Goodby, J. W., Chemical Communications, (2006), (39), 4107-4109].

15 Ejemplo 45 2-amida 1-{[5-(2-isopropil-piridin4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida} del ácido (S)-2-Metil-pirrolidin-1,2-dicarboxílico

El compuesto del título es preparado en analogía con el procedimiento descrito en el Ejemplo 40 pero con las siguientes modificaciones. En el Ejemplo 40, la mezcla de reacción es agitada durante 16 horas a temperatura ambiente, detenida por dilución con EtOAc/H2O, y extraída con EtOAc. En la Etapa 40.1, la mezcla de reacción es agitada durante 4 horas a

20 reflujo. En la Etapa 40.2, la mezcla de reacción es agitada durante 2 horas a 100°C. En la Etapa 1.3, es usado 4- cloro2-isopropil- piridina (Etapa 45.1). La mezcla de reacción es agitada durante 3 horas a 150°C, diluida con EtOAc/H2O, y extraída con EtOAc. Después de secado y concentración de la fase orgánica, el residuo es purificado mediante cromatografía en columna de sílica gel (Hex/ EtOAc, 25: 75).

Compuesto del título: ESI- MS: 388.1 [M+H]+; tR= 2.39 min (Sistema 1); TLC: Rf = 0.15 (DCM/ MeOH/NH3aq, 94: 5: 1).

25 Etapa 45.1: 4-Cloro-2-isopropil-piridina

El compuesto del título es preparado en analogía con el procedimiento descrito en la Etapa 41.1 pero usando cloruro de cloruro de isopropilmagnesio (2M en THF): ESI-MS: 156.0 [M+H]+; TLC: Rf = 0.32 (DCM).

Ejemplo 46 2-amida 1-({4-metil-5-[2-(1-trifluorometil-ciclopropil)-piridin4-il]-tiazol-2-il}-amida) del ácido (S)-2-Metilpirrolidin-1,2-dicarboxílico

El compuesto del título es preparado en analogía con el procedimiento descrito en el Ejemplo 40 pero con las siguientes modificaciones. En el Ejemplo 40, la mezcla de reacción es agitada durante 14 horas a temperatura ambiente. En la Etapa 40.2, la mezcla de reacción es agitada durante 1 hora a 85°C y extraída con EtOAc después de ser detenida. En 5 la Etapa 40.3, la mezcla de reacción es agitada durante 2 horas a 120°C. En la Etapa 40.4, es usado 1, 2- dicloroetano

(2.55 mL per mmol of piridin 4- ona) como el solvente. La mezcla de reacción es agitada durante 1 hora a 83°C y extraída con EtOAc después de ser detenida. En la Etapa 40.5, la mezcla de reacción es agitada durante 1 hora a 65°C. En la Etapa 40.7, es usado cloruro de 1- trifluorometil- ciclopropanocarbonilo (Etapa 46.1). Compuesto del título: ESI- MS: 453.9 [M+H]+; tR= 2.89 min (Sistema 1) ; TLC: Rf = 0.30 (DCM/ MeOH, 9: 1).

10 Etapa 46.1: Cloruro de 1-Trifluorometil-ciclopropanocarbonilo

El compuesto del título es preparado en analogía con el procedimiento descrito en la Etapa 40.8 pero usando ácido 1trifluorometilciclopropanocarboxílico.

Ejemplo 47 2-amida 1-({4-metil-5-[2-(2,2,2-trifluoro-1,1-dimetiloetil)-piridin4-il]-tiazol-2-il}-amida) del ácido (S)-2-Metilpirrolidin-1,2-dicarboxílico

El compuesto del título es preparado en analogía con el procedimiento descrito en el Ejemplo 40 pero con las siguientes modificaciones. En el Ejemplo 40, la mezcla de reacción es agitada durante 14 horas a temperatura ambiente. En la Etapa 40.2, la mezcla de reacción es agitada durante 1 hora a 85°C y extraída con EtOAc después de ser detenida. En la Etapa 40.3, se usa N- tiazol-2- il- acetomida. La mezcla de reacción es agitada durante 2.5 horas a 120°C. En la

20 Etapa 40.4, la mezcla de reacción es agitada durante 1 hora a 83°C y extraída con EtOAc después de ser detenida. En la Etapa 40.5, la mezcla de reacción es agitada durante 1 hora a 65°C. En la Etapa 40.6, el producto crudo no se purifica. En la Etapa 40.7, es usado cloruro de 3, 3, 3- trifluoro- 2, 2-dimetil-propionilo (Etapa 47.1).

Compuesto del título: ESI- MS: 456.1 [M+H]+; tR= 3.25 min (Sistema 1) ; TLC: Rf = 0.31 (DCM/ MeOH, 9: 1).

Etapa 47.1: Cloruro de 3,3,3-Trifluoro-2,2-dimetil-propionilo

25 El compuesto del título es preparado en analogía con el procedimiento descrito en la Etapa 40.8 pero usando ácido 3, 3, 3-trifluoro-2, 2- dimetil- propiónico.

Ejemplo 48 2-amida 1-({4-metil-5-[2-(1-trifluorometil-ciclobutil)-piridin4-il]-tiazol-2-il}-amida) del ácido (S)-2-Metilpirrolidin-1,2-dicarboxílico

El compuesto del título es preparado en analogía con el procedimiento descrito en el Ejemplo 40 pero con las siguientes

5 modificaciones. En el Ejemplo 40, la mezcla de reacción es agitada durante 18 horas a temperatura ambiente, detenido por dilución con DCM/H2O y extraída con DCM. En la Etapa 40.1, la mezcla de reacción es agitada durante 1 hora a reflujo. En la Etapa 40.2, la mezcla de reacción es agitada durante 2 horas a 100°C y extraída con DCM después de ser detenida. En la Etapa 40.3, la mezcla de reacción es agitada durante 6 horas a 120°C, detenida por dilución con EtOAc/H2O, filtrada a través de una almohadilla de celita y extraída con EtOAc. En la Etapa 40.4, es usado 1, 2

10 diclorometano (2.26 mL por mmol de piridin 4-ona) como solvente. La mezcla de reacción es agitada durante 1 hora a reflujo y extraída con DCM después de ser detenida. En la Etapa 40.5, la mezcla de reacción es agitada durante 1 hora a temperatura ambiente. En la Etapa 40.6, la mezcla de reacción es agitada durante 18 horas a temperatura ambiente. En la Etapa 1.7, 4-metoxi-3- buten- 2-ona en THF es agregado a una solución fría (- 78°C) de LiHMDS en THF. Después de 30 minutos, es agregado cloruro de 1- trifluorometil- ciclobutanocarbonilo (Etapa 48.1) en THF y se deja que la

15 mezcla de reacción alcance la temperatura ambiente durante 18 horas y extraída con EtOAc después de ser detenida.

Compuesto del título: ESI- MS: 468.1 [M+H]+; tR= 3.16 min (Sistema 1) ; TLC: Rf = 0.21 (DCM/ MeOH/ NH3aq, 91.5: 7.5: 1).

Etapa 48.1: Cloruro de 1-Trifluorometil-ciclobutanocarbonilo

El compuesto del título es preparado en analogía con el procedimiento descrito en la Etapa 1.8 pero usando ácido 120 trifluorometilciclobutanocarboxílico and agitando la mezcla de reacción durante 2 horas a reflujo.

Ejemplo 49 2-amida 1-({5-[2-(1-ciano-ciclopropil)-piridin4-il]-4-metiltiazol-2-il}-amida) del ácido (S)-2-Metil-pirrolidin-1,2dicarboxílico

El compuesto del título es preparado en analogía con el procedimiento descrito en el Ejemplo 40 pero con las siguientes

25 modificaciones. En el Ejemplo 40, la mezcla de reacción es agitada durante 18 horas a temperatura ambiente, detenida por dilución con EtOAc/H2O, y extraída con EtOAc. En la Etapa 40.1, es usado 1-[4-(2- amino-4- metil- tiazol- 5- il)piridin 2- il]-ciclopropanocarbonitrilo (Etapa 49.1) y la mezcla de reacción es agitada durante 2 horas a reflujo.

Compuesto del título: ESI- MS: 411.1 [M+H]+; tR= 3.16 min (Sistema 1); TLC: Rf = 0.14 (DCM/ MeOH/NH3aq, 94: 5: 1).

Etapa 49.1: 1-[4-(2-Amino-4-metil-tiazol-5-il)-piridin2-il]-ciclopropanocarbonitrilo

Una mezcla de tert- butil éster del ácido {5- [2- (1- ciano- ciclopropil)- piridin 4- il]- 4- metil-tiazol-2-il}- carbámico (Etapa 49.2) (295 mg), DCM (4 mL) y TFA (1 mL) es agitada durante 2 horas a temperatura ambiente y luego concentrada. El residuo es purificado mediante cromatografía en columna de sílica gel (DCM/ MeOH/NH3aq, 94: 5: 1) para producir 182 mg del compuesto del título: ESIMS: 257.1 [M+H]+; tR= 2.54 min (Sistema 1); TLC: Rf = 0.30 ((DCM/ MeOH/NH3aq, 94: 5: 1).

Etapa 49.2: tert-butil éster del ácido {5-[2-(1-Ciano-ciclopropil)-piridin4-il]-4-metil-tiazol-2-il}-carbámico

El compuesto del título es preparado en analogía con el procedimiento descrito en la Etapa 40.3, pero usando 1- (4bromopiridin 2- il)- ciclopropanocarbonitrilo (Etapa 49.3) y tert- butil éster del ácido (4- metil- tiazol- 2- il)- carbámico (Etapa 49.4). La mezcla de reacción es agitada durante 2 horas a 100°C, detenida por dilución con EtOAc/H2O, y extraída con EtOAc. El producto crudo es purificado por cromatografía en columna de sílica gel (Hex/ EtOAc, 1: 1) para producir 122 mg del título del compuesto como un sólido blanco: ESI- MS: 357.1 [M+H]+; tR= 4.86 min (Sistema 1); TLC: Rf = 0.29 (Hex/ EtOAc, 1: 1).

Etapa 49.3: 1-(4-Bromo-piridin2-il)-ciclopropanocarbonitrilo

Se agrega gota a gota LiHMDS (1M en tolueno, 17.6 mL, 17.6 mmol, 3.1 eq) a una mezcla fría (-5°C) de 4-bromo-2fluoro- piridina [Marsais, F. et al, Journal of Organic Chemistry, (1992), 57, 565- 573] (1 g, 5.7 mmol), ciclopropanocarbonitrilo (1.25 mL, 17 mmol, 3 eq), tamices moleculares 4 A y tolueno (20 mL). La mezcla de reacción se deja calentar a temperatura ambiente, se agita durante 16 horas, se vierte en H2O y se filtra. El filtrado se diluye con EtOAc/H2O y se extrae con EtOAc. La fase orgánica se lava con H2O y salmuera, se seca (Na2SO4), se filtra y concentra. El residuo se purifica mediante cromatografía en columna de sílica gel (Hex/ EtOAc, 9: 1), para producir 620 mg del compuesto del título como un sólido blanco: ESI-MS: 223.1/225.1 [M+H]+; tR= 4.22 min (Sistema 1); TLC: Rf = 0.25 (Hex/ EtOAc, 9: 1).

Etapa 49.4: tert-butil éster del ácido (4-Metil-tiazol-2-il)-carbámico

Una solución de di-tert- butil- dicarbonato (21 g, 96.5 mmol, 1.1 eq) en t- BuOH (50 mL) es agregada a una solución de 4- metil-2- aminotiazol (10 g, 87.7 mmol) y DMAP (1.1 g, 8.8 mmol, 0.1 eq) en t- BuOH (50 mL). La mezcla de reacción es agitada durante 72 horas a temperatura ambiente y concentrada. El residuo es diluido con EtOAc/H2O y extraído con EtOAc. La fase orgánica es lavada con H2O y salmuera, secada (Na2SO4), filtrada y concentrada. El residuo es purificado mediante cromatografía en columna de sílica gel (DCM/ MeOH, 98: 2), para producir 15.2 g del compuesto del título como un sólido blanco: ESI-MS: 215.1 [M+H]+; tR= 3.43 min (Sistema 1); TLC: Rf = 0.30 (DCM/ MeOH, 98: 2).

Ejemplo 50: 2-amida 1-({5-[2-(1-ciano-ciclobutil)-piridin4-il]-4-metiltiazol-2-il}-amida) del ácido (S)-2-Metil-pirrolidin-1,2dicarboxílico

El compuesto del título es preparado en analogía con el procedimiento descrito en el Ejemplo 40 pero con las siguientes modificaciones. En la Etapa 40. Es utilizado 1, 1- [4- (2-amino- 4-metil-tiazol- 5- il)- piridin 2-il]- ciclobutanocarbonitrilo (Etapa 50.1) y la mezcla de reacción es agitada durante 3 horas a reflujo.

Compuesto del título: ESI- MS: 425.1 [M+H]+; TLC: Rf = 0.35 (DCM/ MeOH, 9: 1).

Etapa 50.1: 1-[4-(2-Amino-4-metil-tiazol-5-il)-piridin2-il]-ciclobutanocarbonitrilo

Una mezcla de tert- butil éster del ácido {5- [2- (1- ciano-ciclobutil)- piridin 4-il]- 4- metil- tiazol- 2-il}-carbámico (Etapa 50.2) (300 mg), DCM (5 mL) y TFA (1 mL) es agitada durante 4 horas a temperatura ambiente, detenida por adición de una solución saturada de NaHCO3, y extraída con DCM. La fase orgánica es lavada con una solución saturada de NaHCO3, secada (Na2SO4), filtrada y concentrada. El residuo es purificado mediante cromatografía en columna de sílica gel (DCM/ MeOH, 1: 0 - 96: 4) para producir 181 mg del compuesto del título como un sólido amarillo: ESI- MS: 271.1 [M+H]+; tR= 2.48 min (Sistema 1) ; TLC: Rf = 0.45 (DCM/ MeOH, 9: 1) .

Etapa 50.2: tert-butil éster del ácido {5-[2-(1-Ciano-ciclobutil)-piridin4-il]-4-metil-tiazol-2-il}-carbámico

El compuesto del título es preparado en analogía con el procedimiento descrito en la Etapa 40.3, pero usando 1- (4bromopiridin 2- il)-ciclobutanocarbonitrilo (Etapa 50.3) y tert-butil éster del ácido (4-metil- tiazol- 2- il)- carbámico (Etapa 17.4). La mezcla de reacción es agitada durante 3 horas a 100°C. Compuesto del título: ESI-MS: 371.1 [M+H]+; tR= 4.86 min (Sistema 1); TLC: Rf = 0.66 (Hex/ EtOAc, 1: 1).

Etapa 50.3: 1-(4-Bromo-piridin2-il)-ciclobutanocarbonitrilo

Se agrega gota a gota LiHMDS (1M en tolueno, 17.7 mL, 17.7 mmol, 3.1 eq) a una solución fría (- 5°C) de 4- bromo- 2fluoro- piridin [Marsais, F. et al, Journal of Organic Chemistry, (1992), 57, 565- 573] (1 g, 5.7 mmol) y ciclobutanocarbonitrilo (1.39 g, 17.1 mmol, 3 eq) en tolueno (20 mL). La mezcla de reacción se deja en calentamiento hasta temperatura ambiente, se agita durante 5 horas, se detiene por adición de una solución saturada de NaHCO3 y se filtra a través de una almohadilla de celita. El filtrado se extrae con EtOAc. La fase orgánica se lava con una solución saturada de NaHCO3, se seca (Na2SO4), se filtra y concentra. El residuo se purifica mediante cromatografía en columna de sílica gel (Hex/ EtOAc, 1: 0 - 95: 5) para producir 933 mg del compuesto del título como un aceite color amarillo: ESI- MS: 237.0/239.0 [M+H]+; tR= 4.27 min (Sistema 1); TLC: Rf = 0.30 (Hex/ EtOAc, 9: 1).

Ejemplo 51 2-amida 1-{[5-(2-dietilamino-piridin4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida} del ácido (S)-2-Metil-pirrolidin-1,2dicarboxílico

El compuesto del título es preparado en analogía con el procedimiento descrito en el Ejemplo 40 pero con las siguientes modificaciones. En el Ejemplo 40, la mezcla de reacción es agitada durante 18 horas a temperatura ambiente, detenida por dilución con DCM/H2O y extraída con DCM. En la Etapa 40.1, la mezcla de reacción es agitada durante 1 hora a reflujo. En la Etapa 40.2, la mezcla de reacción es agitada durante 1 hora a 100°C y extraída con DCM después de ser detenida. En la Etapa 40.3, se usa dietil-(4-yodo- piridin 2-il)-amina (Etapa 51.1). La mezcla de reacción se agita durante 16 horas a 120°C, detenida por dilución con EtOAc/H2O, filtrada a través de una almohadilla de celita y extraída con EtOAc.

Compuesto del título: ESI- MS: 417.2 [M+H]+; tR= 2.66 min (Sistema 1); TLC: Rf = 0.30 (DCM/ MeOH/NH3aq, 91.5: 7.5: 1).

Etapa 51.1: Dietil-(4-yodo-piridin2-il)-amina

Una mezcla de 2- fluoro-4- yodopiridina (2 g, 8.97 mmol), dietil amino (2.77 ml, 26.9 mmol, 3 eq) y K2CO3 (2.48 g, 17.94 mmol, 2 eq) en DMF (20 mL) es agitada durante 18 horas a 100°C, se deja enfriar hasta temperatura ambiente, se diluye con EtOAc/H2O y se extrae con EtOAc. La fase orgánica es lavada con H2O y salmuera, secada (Na2SO4), filtrada y concentrada. El residuo es purificado mediante cromatografía en columna de sílica gel (Hex/Et2O, 98: 2) para producir

2.3 g del compuesto del título como un sólido color amarillo: ESI- MS: 277.1 [M+H]+; TLC: Rf = 0.52 (Hex/Et2O, 98: 2) .

Ejemplo 52 2-amida 1-{[5-(3-etil-3H-benzoimidazol-5-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida} del ácido (S)-2-Metil-pirrolidin-1,2dicarboxílico

El compuesto del título es preparado en analogía con el procedimiento descrito en el Ejemplo 40 pero con las siguientes modificaciones. En el Ejemplo 40, la mezcla de reacción es agitada durante 14 horas a temperatura ambiente. En la Etapa 40.1, la mezcla de reacción es agitada durante 15 horas a reflujo. En la Etapa 40.2, la mezcla de reacción es agitada durante 3 horas a 85°C y extraída con EtOAc después de ser detenida. En la Etapa 40.3, 6- bromo-1-etil- 1Hbenzoimidazol (Etapa 52.1) y la mezcla de reacción es agitada durante 14 horas a 120°C.

Compuesto del título: ESI- MS: 413.1 [M+H]+; tR= 2.23 min (Sistema 1); TLC: Rf = 0.28 (DCM/ MeOH, 9: 1) .

Etapa 52.1: 6-Bromo-1-etil-1H-benzoimidazol

Una mezcla de 4-bromo- N*2*-etil-benceno- 1, 2-diamina (Etapa 52.2) (2 g, 9.3 mmol) y trietilortoformiato (15.5 mL, 93 mmol, 10 eq) es agitada durante 1 hora a 148°C, se deja enfriar y concentrada. El residuo es purificado mediante cromatografía en columna de sílica gel (DCM/ MeOH, 1: 0 - 98: 2) para producir 2.05 g del compuesto del título como un sólido blanco: ESIMS: 225.1/227.1 [M+H]+; tR= 2.31 min (Sistema 1); TLC: Rf = 0.58 (DCM/ MeOH, 9: 1).

Etapa 52.2: 4-Bromo-N*2*-etil-benceno-1,2-diamina

Una suspensión de (5- bromo- 2- nitro- fenil)- etil- amina (Etapa 52.3) (6 g, 24.48 mmol) y níquel Raney (2 g) en MeOH/THF (1: 1 v/v, 600 mL) es agitada durante 9 horas a temperatura ambiente, bajo una atmósfera de hidrógeno. La mezcla de reacción es filtrada a través de una almohadilla de celita y se concentra. El residuo es purificado mediante cromatografía en columna de sílica gel (Hex/ EtOAc, 95: 5 - 85: 15) para producir 4.51 g del compuesto del título como un aceite negro: ESI-MS: 213.1/215.1 [M- H]-; tR= 2.53 min (Sistema 1); TLC: Rf = 0.57 (Hex/ EtOAc, 1: 1).

Etapa 52.3: (5-Bromo-2-nitro-fenil)-etil-amina

Una mezcla de 4- bromo- 2- fluoro-nitrobenceno (6 g, 27.3 mmol), metilamina (2M en MeOH, 34.1 mL, 68.2 mmol, 2.5 eq) y EtOH (80 mL) es agitada durante 15 horas a 85°C, se deja enfriar y se concentra. El residuo es purificado por trituración para producir 6 g del compuesto del título como un sólido amarillo: tR= 5.13 min (Sistema 1).

Ejemplo 53 2-amida 1-[(5-{2-[1-(4-metoxi-fenil)-1-metil-etil]-piridin4-il}-4-metil-tiazol-2-il)-amida] del ácido (S)-2-Metilpirrolidin-1,2-dicarboxílico

El compuesto del título es preparado en analogía con el procedimiento descrito en el Ejemplo 40 pero con las siguientes modificaciones. En el Ejemplo 40, la mezcla de reacción es agitada durante 24 horas a temperatura ambiente, detenida por solución con EtOAc/H2O. En la Etapa 40.1, la mezcla de reacción es agitada durante 4 horas a reflujo. En la Etapa 5 40.2, la mezcla de reacción es agitada durante 2 horas a 100°C. En la Etapa 40.3, la mezcla de reacción es agitada durante 3 horas a 100°C, detenida por dilución con EtOAc/H2O y extraída con EtOAc. En la Etapa 40.4, es usado 1, 2dicloroetano (4.3 mL por mmol de piridin 4-ona) como un solvente. La mezcla de reacción es agitada durante 1 hora a reflujo y extraída con DCM después de ser detenida. En la Etapa 40.5, la mezcla de reacción es agitada durante 23 horas a 80°C. En la Etapa 40.6, la mezcla de reacción es agitada durante 21 horas a temperatura ambiente. En la Etapa

10 40.7, 4-metoxi- 3- buten- 2- ona en THF es agregada a una solución fría (- 78°C) de LiHMDS en THF. Después de 30 minutos, es agregado cloruro de 2- (4- metoxi- fenil)- 2-metil- propionil (Etapa 53.1) en THF y se deja que la mezcla de reacción alcance la temperatura ambiente durante 18 horas.

Compuesto del título: ESI- MS: 494.1 [M+H]+; tR= 3.32 min (Sistema 1); TLC: Rf = 0.18 (DCM/ MeOH/ NH3aq, 94: 5: 1).

Etapa 53.1: Cloruro de 2-(4-Metoxi-fenil)-2-metil-propionil

15 El compuesto del título es preparado en analogía con el procedimiento descrito en la Etapa 40.8 pero usando ácido 2- (4- metoxifenil)-2- metil- propiónico y agitando la mezcla de reacción durante 3 horas a reflujo.

Ejemplo 54 2-amida 1-[(5-{2-[1-(4-metoxi-fenil)-ciclopropilo]-piridin4-il}-4-metil-tiazol-2-il)-amida] del ácido (S)-2-Metilpirrolidin-1,2-dicarboxílico

20 El compuesto del título es preparado en analogía con el procedimiento descrito en el Ejemplo 40 pero con las siguientes modificaciones. En el Ejemplo 40, la mezcla de reacción es agitada durante 21 horas a temperatura ambiente, detenida por dilución con EtOAc/H2O. En la Etapa 40.1, la mezcla de reacción es agitada durante 5 horas a reflujo. En la Etapa 40.2, la mezcla de reacción es agitada durante 3 horas a 100°C. En la Etapa 40.3, la mezcla de reacción es agitada durante 6 horas a 100°C, detenida por dilución con EtOAc/H2O y extraída con EtOAc. En la Etapa 40.4, se usa 1, 2

25 dicloroetano (4.3 mL por mmol de piridin 4- ona) como solvente. La mezcla de reacción es agitada durante 1 hora a reflujo, es vertida en una solución saturada de NaHCO3 y extraída con DCM. En la Etapa 40.5, la mezcla de reacción es agitada durante 18 horas a 80°C. En la Etapa 40.6, la mezcla de reacción es agitada durante 18 horas a temperatura ambiente. En la Etapa 40.7, 4-metoxi- 3- buten-2- ona en THF es agregado a una solución fría (- 78°C) de LiHMDS en THF. Después de 30 minutos, es agregado cloruro de 1- (4- metoxi- fenil)-ciclopropanocarbonilo (Etapa 54.1) en THF y

30 se deja que la mezcla de reacción alcance la temperatura ambiente durante 16 horas.

Compuesto del título: ESI- MS: 492.1 [M+H]+; tR= 3.21 min (Sistema 1); TLC: Rf = 0.24 (DCM/ MeOH/ NH3aq, 94: 5: 1). Etapa 54.1: Cloruro de 1-(4-Metoxi-fenil)-ciclopropanocarbonilo El compuesto del título es preparado en analogía con el procedimiento descrito en el Etapa 40.8 pero utilizando ácido 1

(4- metoxifenilo)- ciclopropilcarboxílico y agitando la mezcla de reacción durante 3 horas a reflujo. Ejemplo 55 2-amida 1-{[5-(2-{1-[4-(3-dimetilamino-propoxi)-fenil]-1-metil-etil}-piridin4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida} del ácido (S)-2-Metil-pirrolidin-1,2-dicarboxílico

El compuesto del título es preparado en analogía con el procedimiento descrito en el Ejemplo 40 pero con las siguientes modificaciones. En el Ejemplo 40, la mezcla de reacción es agitada durante 18 horas a temperatura ambiente, detenida por dilución con EtOAc/H2O. En la Etapa 40.1, la mezcla de reacción es agitada durante 4.5 horas a reflujo. En la Etapa 40.2, la mezcla de reacción es agitada durante 7 horas a 100°C. En la Etapa 40.3, es utilizado (3-{4- [1- (4-bromopiridin 2- il)-1- metil-etil]- fenoxi}- propil)- dimetil- amina (Etapa 55.1). La mezcla de reacción es agitada durante 2 horas a 120°C, detenida por dilución con EtOAc/H2O y extraída con EtOAc.

Compuesto del título: ESI- MS: 565.1 [M+H]+; tR= 2.55 min (Sistema 1); TLC: Rf = 0.08 (DCM/ MeOH/ NH3aq, 94: 5: 1).

Etapa 55.1: (3-{4-[1-(4-Bromo-piridin2-il)-1-metil-etil]-fenoxi}-propil)-dimetil-amina

Se agrega hidróxido de sodio (los gránulos son molidos finamente, 0.488 g, 12.2 mmol, 5 eq) a una solución de 4- [1- (4bromo- piridin 2- il)- 1-metil- etil]- fenol (Etapa 55.2) (0.714 g, 2.44 mmol) en DMF (5 mL). La mezcla se agita durante 20 minutos a temperatura ambiente. Se agrega clorhidrato de 3- Dimetilamino- 1- propilcloruro (0.611 g, 3.87 mmol, 1.6 eq). La mezcla de reacción se calienta a 90°C, se agita durante 10 horas, se deja enfriar, se diluye con EtOAc/H2O y se extrae con EtOAc. La fase orgánica se lava con H2O y salmuera, se seca (Na2SO4), se filtra y se concentra. El residuo se purifica por cromatografía en columna de sílica gel (DCM/ MeOH/ NH3aq, 94: 5: 1) para producir 0.398 g del compuesto del título como un aceite impuro de color marrón el cual se usa sin purificación adicional: ESI-MS: 377.1/379.0 [M+H]+; TLC: Rf = 0.22 (DCM/ MeOH/ NH3aq, 94: 5: 1).

Etapa 55.2: 4-[1-(4-Bromo-piridin2-il)-1-metil-etil]-fenol

Se agrega gota a gota BBr3 (1 M en DCM, 23 mmol, 8 eq) a una solución fría (0°C) de 4- bromo- 2-[1-(4- metoxifenil)- 1-metil- etil]-piridina (Etapa 55.3) (0.878 g, 2.87 mmol) en DCM (42 mL), bajo una atmósfera de argón. La mezcla de reacción se agita durante 1 hora a 0°C, se deja calentar hasta temperatura ambiente, se agita durante 18 horas, se enfría a 0°C y se detiene por adición de MeOH anhidro. La mezcla se concentra, se diluye con una solución acuosa 6M de HCl, se agita durante 1 hora, se neutraliza a pH 7 y se extrae con DCM. La fase orgánica se seca (Na2SO4), se filtra y se concentra. El residuo se usa sin purificación.

Etapa 55.3: 4-Bromo-2-[1-(4-metoxi-fenil)-1-metil-etil]-piridina

El compuesto del título es preparado en analogía con el procedimiento descrito en las Etapas 40.4 a 40.7 pero con las siguientes modificaciones. En la Etapa 40.4, es utilizado 1, 2- dicloroetano (4.3 mL por mmol de piridin 4- ona) como solvente. La mezcla de reacción es agitada durante 1 hora a reflujo, vertida en una solución saturada acuosa de NaHCO3 y extraída con DCM. En la Etapa 40.5, la mezcla de reacción es agitada durante 23 horas a 80°C. En la Etapa 40.6, la mezcla de reacción es agitada durante 21 horas a temperatura ambiente. En la Etapa 40.7, es adicionado 4metoxi- 3-buten- 2- ona en THF a una solución fría (- 78°C) de LiHMDS en THF. Después de 30 minutos, es agregado cloruro de 2- (4- metoxi-fenil)- 2- metil- propionilo (Etapa 53.1) en THF y se deja que la mezcla de reacción alcance la temperatura ambiente durante 16 horas.

Compuesto del título: ESI- MS: 306.0/308.0 [M+H]+; tR= 3.94 min (Sistema 1); TLC: Rf = 0.55 (Hex/ EtOAc, 7: 3).

Ejemplo 56 2-amida 1-({4-metil-5-[2-(1-d3-metil-ciclobutil)-piridin4-il]-tiazol-2-il}-amida) del ácido (S)-2-Metil-pirrolidin-1,2dicarboxílico

El compuesto del título es preparado en analogía con el procedimiento descrito en el Ejemplo 40 pero con las siguientes modificaciones. En el Ejemplo 40, la mezcla de reacción es agitada durante 18 horas a temperatura ambiente, detenida por dilución con DCM/H2O, y extraída con DCM. En la Etapa 40.1, la mezcla de reacción es agitada durante 1 hora a reflujo. En la Etapa 40.2, la mezcla de reacción es agitada durante 1 hora a 100°C. En la Etapa 40.3, el catalizador de 15 paladio es agregado a la mezcla calentada de los reactivos restantes y la mezcla resultante es agitada durante 1 hora a 120°C, diluida con EtOAc/H2O y extraída con EtOAc. Después del secado y concentración de la fase orgánica, el residuo es purificado mediante cromatografía en columna de sílica gel (Hex/ EtOAc, 1: 4). En la Etapa 40.4, la mezcla de reacción es agitada durante 30 minutos a 120°C. En la Etapa 40.5, la mezcla de reacción es agitada durante 3 horas a 80°C. En la Etapa 40.7, es agregado 4-metoxi- 3- buten-2- ona en THF a una solución fría (- 78°C) de LiHMDS en THF.

20 Después de 30 minutos, es agregado cloruro de 1-d3- metil- ciclobutano (Etapa 56.1) en THF y se deja que la mezcla de reacción alcance la temperatura ambiente durante 16 horas.

Compuesto del título: ESI- MS: 417.2 [M+H]+; tR= 2.72 min (Sistema 1); TLC: Rf = 0.21 (DCM/ MeOH/NH3aq, 91.5: 7.5: 1).

Etapa 56.1: Cloruro de 1-d3-Metil-ciclobutanocarbonilo

El compuesto del título es preparado en analogía con el procedimiento descrito en la Etapa 40.8 pero usando ácido 125 d3- metilciclobutanocarboxílico que es preparado de acuerdo con un procedimiento descrito [Cowling, S. J.; Goodby, J. W., Chemical Communications, (2006), (39), 4107- 4109] pero usando d3- metil-yoduro.

Ejemplo 57 2-amida 1-({4-dimetilaminometil-5-[2-(1-d3-metil-ciclobutil)-piridin4-il]-tiazol-2-il}-amida) del ácido (S)-2-Metilpirrolidin-1,2-dicarboxílico

El compuesto del título es preparado en analogía con el procedimiento descrito en el Ejemplo 40 pero con las siguientes modificaciones. En el Ejemplo 40, la mezcla de reacción es agitada durante 18 horas a temperatura ambiente, es detenida por dilución con DCM/H2O y extraída con DCM. En la Etapa 40.1, la mezcla de reacción es agitada durante 2 horas a reflujo. En la Etapa 40.2, es usado N- {4- dimetilaminometil- 5- [2- (1- d3- metil-ciclobutil)- piridin 4- il]-tiazol-2il}-acetomida (Etapa 57.1). La mezcla de reacción es agitada durante 1 hora a 100°C.

Compuesto del título: ESI- MS: 460.1 [M+H]+; TLC: Rf = 0.15 (DCM/ MeOH/NH3aq, 89: 10: 1).

Etapa 57.1: N-{4-Dimetilaminometil-5-[2-(1-d3-metil-ciclobutil)-piridin4-il]-tiazol-2-il}-acetomida

Una mezcla de N- {4- bromometil-5- [2- (1- d3-metil- ciclobutil)- piridin 4-il]- tiazol- 2-il}- acetomida (Etapa 57.2) (150 mg, 0.391 mmol), clorhidrato de dimetilamina (38.3 mg, 0.470 mmol, 1.2 eq) y carbonato de cesio (293 mg, 0.900 mmol,

2.3 eq) en DMF (2 mL) es agitada durante 2 horas a temperatura ambiente, diluida con EtOAc/H2O, y extraída con EtOAc. La fase orgánica es lavada con H2O y salmuera, secada (Na2SO4), filtrada y concentrada. El residuo es purificado por trituración Et2O para producir 89 mg del compuesto del título como un sólido blanco: ESI- MS: 348.2 [M+H]+.

Etapa 57.2: N-{4-Bromometil-5-[2-(1-d3-metil-ciclobutil)-piridin4-il]-tiazol-2-il}-acetomida

Se agrega NBS (554 mg, 3.06 mmol, 1.1 eq) a una solución de N- {4- metil- 5- [2- (1-d3-metil- ciclobutil)- piridin 4-il]tiazol- 2- il}- acetomida (Etapa 57.3) (846 mg, 2.78 mmol) en CCl4 (20 mL) y CHCl3 (16 mL). La mezcla de reacción se agita durante 1 hora a temperatura ambiente, se lava con H2O y salmuera, se seca (Na2SO4), se filtra y se concentra. El residuo se purifica mediante cromatografía en columna de sílica gel (Hex/ EtOAc, 1: 4) para producir 572 mg del compuesto del título como un sólido amarillo pálido: ESI- MS: 383.0/ 385.0 [M+H]+; tR= 3.12 min (Sistema 1); TLC: Rf =

0.45 (Hex/ EtOAc, 1: 4) .

Etapa 57.3: N-{4-Metil-5-[2-(1:d3-metil-ciclobutil)-piridin4-il]-tiazol-2-il}-acetomida

El compuesto del título es preparado en analogía con el procedimiento descrito en Las Etapas 40.3 a 40.7 pero con las siguientes modificaciones. En la Etapa 40.3, la mezcla de reacción es agitada durante 1 hora a 120°C y detenida por dilución con EtOAc/H2O. En la Etapa 40.5, la mezcla de reacción es agitada durante 3 horas a 80°C y no se realiza la trituración en MeOH. En la Etapa 40.7, es agregado 4- metoxi- 3- buten- 2-ona en THF a una solución fría (-78°C) de LiHMDS en THF. Después de 30 minutos, es agregado cloruro de 1- d3-metilciclobutano (Etapa 56.1) en THF y se deja que la mezcla de reacción alcance la temperatura ambiente durante 16 horas.

Compuesto del título: ESI- MS: 305.2 [M+H]+; TLC: Rf = 0.24 (Hex/ EtOAc, 1: 4).

Ejemplo 58 2-amida 1-({5-[2-(2-fluoro-1.1-dimetil-etil)-piridin4-il]-4-metil-tiazol-2-il}-amida) del ácido (S)-2-metil-pirrrolidin1,2-dicarboxílico

El compuesto del título es preparado en analogía con el procedimiento descrito en el Ejemplo 40 pero con las siguientes modificaciones. En la Etapa 40.2, la mezcla de reacción es agitada durante 1 hora at 100°C y extraída con EtOAc después de ser detenida. En la Etapa 40.3, la mezcla de reacción es agitada durante 4 horas a 120°C. En la Etapa 40.4, la mezcla de reacción es agitada durante 30 minutos a 85°C y extraída con EtOAc después de ser detenida. En la Etapa 40.5, la mezcla de reacción es agitada durante 1 hora a 70°C. En la Etapa 40.6, el producto crudo no es purificado. En la Etapa 40.7, es usado cloruro de 3- fluoro- 2, 2- dimetil- propionilo (Etapa 58.1).

Compuesto del título: ESI- MS: 420.1 [M+H]+; tR= 2.50 minutos (Sistema 1); TLC: Rf = 0.31 (DCM/ MeOH, 9: 1).

Etapa 58.1: Cloruro de 3-Fluoro-2,2-dimetil-propionilo

El compuesto del título es preparado en analogía con el procedimiento descrito en el Etapa 44.1 pero usando ácido 3fluoro-2,2-dimetil- propiónico (Etapa 58.2).

Etapa 58.2: Ácido 3-Fluoro-2,2-dimetil-propiónico

Una solución de metil éster del ácido 6.9 g (38.6 mmol) 3- fluoro- 2, 2-dimetil-propiónico en 30 mL de metanol es tratada con 38.6 mL (77 mmol) 2N NaOH y la mezcla calentada a reflujo durante 3 horas. La mezcla es enfriada a temperatura ambiente y el solvente evaporado. El residuo es sometido a partición entre agua y DCM. La fase acuosa es acidificada mediante la adición de 50 mL de HCl 2N y extraída con acetato de etilo. La fase orgánica es lavada con salmuera, secada con sulfato de sodio y evaporada. El residuo incoloro es agitado con hexanos, el material insoluble es eliminado por filtración y el filtrado es evaporado para dar el compuesto del título como un sólido incoloro. ESI-MS: 119.0 [M-H]-.

Etapa 58.3: Metil éster del ácido 3-Fluoro-2,2-dimetil-propiónico

27 mL de una solución 1 M de fluoruro de tetrabutilamonio en THF es agregada lentamente y bajo enfriamiento con hielo a una solución de 7.25 g (27.4 mmol) de metil éster del ácido 2, 2- dimetil- 3- trifluorometanosulfoniloxi- propiónico en 150 mL de THF. La solución resultante es agitada 6 horas a 0 °C y luego 10 horas a temperatura ambiente. El solvente es evaporado cuidadosamente y el residuo sometido a partición entre DCM y salmuera. La fase orgánica es lavada con salmuera, secada con sulfato de sodio y evaporada cuidadosamente. El aceite de color marrón es destilado en un horno Kugelrohr (temperatura del horno de 120 a 150 °C) para dar el compuesto del título como un líquido incoloro.

Etapa 58.4: Metil éster del ácido 2,2-Dimetil-3-trifluorometanosulfoniloxi-propiónico

A una solución de metil éster del ácido 3- hidroxi- 2, 2- dimetil- propiónico 3.64 g (27.5 mmol) y (4.82 mL, 41.3 mmol) 2, 6-lutidina en 50 mL de DCM seco es agregado lentamente anhídrido del ácido trifluorometanosulfónico (5.12 mL, 30.3 mmol) a -70°C y bajo nitrógeno. La solución amarilla es agitada 5 minutos a -70 °C luego el baño de enfriamiento es retirado y la mezcla es agitada 3 horas a temperatura ambiente. El color cambia de amarillo a naranja a marrón. Es agregado DCM (50 mL) y la solución es lavada dos veces con HCl 2 N, secada con sulfato de sodio y evaporada hasta sequedad. El residuo marrón es secado bajo vacío y el compuesto del título usado sin purificación adicional. TLC: Rf =

0.72 (EtOAc/ hexanos 1: 2).

Ejemplo 59 2-amida 1-({4-metil-5-[2-(1-metil-ciclopropil)-piridin4-il]-tiazol-2-il}-amida) del ácido (S)-4,4-Difluoro-pirrolidin1,2-dicarboxílico

El compuesto del título es preparado en analogía con el procedimiento descrito en el Ejemplo 40 pero usando amida del ácido (S)- 4, 4-Difluoropirrolidin-2- carboxílico. Compuesto del título: polvo amarillo; ESI- MS: 422.0 [M+H]+; tR 4.26 min (Sistema 2); TLC: Rf = 0.26 (EtOAc) .

Ejemplo 60 2-amida 1-{[5-(6-imidazol-1-il-piridin2-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida} del ácido (S)-2-Metil-pirrolidin-1,2dicarboxílico

10 Una mezcla de ácido imidazol- 1-carboxílico [5- (6- imidazol- 1-il- piridin 2- il)- 4- metil- tiazol- 2-il]-amida (28 mg), amida del ácido (S)-2- metil-pirrolidin- 2-carboxílico (11 mg) y trietilamina (0.027 ml) en DMF (1 ml) se deja en reposo a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla de reacción se evapora y después de purificación por recristalización a partir de metanol acuoso da el compuesto del título como un sólido blanco. HPLC/MS (Método B) Tiempo de Retención

2.09 minutos, M+H 411.9 y M- H 409.9.

15 Etapa 60.1: Ácido Imidazol-1-carboxílico [5-(6-imidazol-1-il-piridin2-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida

Es agregado diimidazol carbonilo (17 mg) a una solución de 5- (6- imidazol-1- il-piridin 2- il)- 4-metil- tiazol-2-ilamina (26 mg) en DMF (1 ml) y agitado a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla de reacción es entonces filtrada para dar el compuesto del título como un sólido blanco.

Etapa 60.2: 5-(6-Imidazol-1-il-piridin2-il)-4-metil-tiazol-2-ilamina

20 Es agregado ácido clorhídrico concentrado (0.3 ml) a N- [5- (6- imidazo)- 1- il- piridin 2- il)-4-metil- tiazol- 2-il]- acetomida (30 mg) en etanol (2 ml) y calentado a reflujo durante 3 horas y luego dejado durante 18 horas a temperatura ambiente. La mezcla de reacción es evaporada y sometida a partición entre solución de bicarbonato de sodio acuoso y metanol al 10% en diclorometano, extrayendo un 4X adicional con metanol al 10% en diclorometano. La evaporación de las capas orgánicas combinadas da el compuesto del título el cual es usado en la Etapa. 60.1 sin purificación adicional.

25 Etapa 60.3: N-[5-(6-Imidazol-1-il-piridin2-il)-4-metil-tiazol-2-il]-acetomida

Se burbujea argón a través de una mezcla de 5- yodo- 2- acetilamino- 4-metiltiazol (312 mg), ácido 6- imidazol-1-il) piridina-2- borónico (600 mg), 1, 1’- bis (difenilfosfino) ferrocenodicloro paladio (II) diclorometano (45 mg), carbonato de sodio (594 mg), agua (3.1 ml) y dimetoxietano (3.1 ml) a temperatura ambiente durante 5 minutos antes de calentar durante 45 minutos a 85 °C en un aparato microondas Biotage Initiator™. La mezcla de reacción se evapora y se somete 5 a partición entre solución de bicarbonato de sodio acuoso y metanol al 10% en diclorometano, extrayendo un 2X adicional con metanol al 10% en diclorometano. Las capas orgánicas combinadas se evaporan, se purifican por cromatografía preparativa de fase reversa y las fracciones que contienen el componente de 12.8 minutos se combinan y se evaporan. La partición entre solución de bicarbonato de sodio acuoso y metanol al 10% en diclorometano, extrayendo un 2X adicional con metanol al 10% en diclorometano es seguido por cromatografía en fase normal, eluyente: 4: 1

10 acetato de etilo: metanol, que da el compuesto del título como un sólido blanco. HPLC/MS (Método A) Tiempo de Retención 1.39 minutos, M+H 300.

Ejemplo 61 2-amida 1-({4-metil-5-[2-(1,1,2-trimetil-propil)-pirimidin-4-il]-tiazol-2-il}-amida) del ácido (2S,3S)-3-Metilpirrolidin-1,2-dicarboxílico

15 Una mezcla de ácido imidazol- 1- carboxílico {4- metil-5- [2- (1, 1, 2-trimetil- propil)- pirimidin-4- il]- tiazol- 2- il}-amida (30 mg), amida del ácido (2S, 3S)- 3-metil- pirrolidin- 2- carboxílico (11 mg) y trietilamina (0.014 ml) en DMF (0.08 ml) se hace rotar formando remolino a 40 °C durante 18 horas. La mezcla de reacción se evapora y después se purifica por cromatografía de fase reversa (Método B), las fracciones se pasan a través de un cartucho Varian Bond Elut® SCX 300 mg SPE seguido por elución con amoniaco 7 M en metanol. La evaporación de los lavados de amoniaco metanólico da

20 el compuesto del título como un sólido amarillo. MS (Método D) M+H 431 y M-H 429.

Ejemplo 62 2-amida 1-({5-[2-(4-metoxi-fenoximetil)-pirimidin-4-il]-4-metil-tiazol-2-il}-amida) del ácido (S)-2-Metil-pirrolidin1,2-dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol-1- carboxílico {5-[2-(4- metoxi- fenoximetil)-pirimidin-4-il]- 4- metiltiazol-2-il}- amida 25 (30 mg), amida del ácido (2S)-2- metil- pirrolidin- 2- carboxílico (10 mg) y trietilamina (0.012 ml) en DMF (0.07 ml) se hace rotar formando remolino a 40 °C durante 18 horas. La mezcla de reacción se evapora y después se purifica por

cromatografía de fase reversa (Método B), las fracciones se pasan a través de un cartucho Varian Bond Elut® SCX 300 mg SPE seguido por elución con amoniaco 7 M en metanol. La evaporación de los lavados de amoniaco metanólico da el compuesto del título como un sólido beige. MS (Método D) M+H 483 y M- H 481.

Ejemplo 63 2-amida 1-[(5-{2-[2-(4-metoxi-fenil)-1,1-dimetiloetil]-pirimidin-4-il}-4-metil-tiazol-2-il)-amida] del ácido (S)-2Metil-pirrolidin-1,2-dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol- 1- carboxílico (5- {2- [2- (4- metoxi- fenil)- 1, 1-dimetil-etil]-pirimidin-4-il}-4- metil- tiazol2-il)- amida (30 mg), amida del ácido (2S)- 2-metil- pirrolidin- 2-carboxílico (9.4 mg) y trietilamina (0.011 ml) en DMF

(0.07 ml) se hace rotar formando remolino a 40 °C durante 18 horas. La mezcla de reacción se evapora y después se

10 purifica por cromatografía de fase reversa (Método B), las fracciones se pasan a través de un cartucho Varian Bond Elut® SCX 300 mg SPE seguido por elución con amoniaco 7 M en metanol. La evaporación de los lavados de amoniaco metanólico da el compuesto del título como un sólido beige. MS (Método D) M+H 509 y M-H 507.

Ejemplo 64 2-amida 1-({4-metil-5-[2-(1,1,2-trimetil-propil)-pirimidin-4-il]-tiazol-2-il}-amida) del ácido (2S)-2-Metil-pirrolidin1,2-dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol- 1- carboxílico {4- metil-5- [2- (1, 1, 2-trimetil- propil)- pirimidin-4- il]- tiazol- 2- il}-amida (30 mg), amida del ácido (2S)-2- metil- pirrolidin- 2- carboxílico (11 mg) y trietilamina (0.014 ml) en DMF (0.08 ml) se hace rotar formando remolino a 40 °C durante 18 horas. La mezcla de reacción se evapora y después se purifica por cromatografía de fase reversa (Método B), las fracciones se pasan a través de un cartucho Varian Bond Elut® SCX 300

20 mg SPE seguido por elución con amoniaco 7 M en metanol. La evaporación de los lavados de amoniaco metanólico da el compuesto del título como un sólido beige. MS (Método D) M+H 431 y M- H 429.

Ejemplo 65 2-amida 1-{[5-(2-tert-butil-pirimidin-4 il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida} del ácido (2S,4R)-4-Hidroxi-2-metilpirrolidin-1,2-dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol- 1-carboxílico {4- metil- 5-[2- tert- butil- pirimidin- 4- il]-tiazol- 2- il}- amida (153 mg), amida del ácido (2S, 4R)-4- hidroxi- 2-metil- pirrolidin- 2-carboxílico (71 mg) y trietilamina (0.156 ml) en DMF (2 ml) es mantenida a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla de reacción es evaporada y luego purificada por cromatografía de fase normal eluyendo con un gradiente de acetato de etilo a etanol al 10% en acetato de etilo y el compuesto del título es obtenido como un sólido blanco después de una etapa adicional de cristalización desde metanol acuoso. HPLC/MS (Método C) Tiempo de Retención 1.13 minutos, M+H 418.9 y M- H 417.1.

Ejemplo 66 2-amida 1-{[5-(2-tert-butil-pirimidin-4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida}) del ácido (2S,4S)-4-Fluoro-pirrolidin-1,2dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol- 1- carboxílico {4-metil- 5- [2- tert-butil- pirimidin- 4- il]- tiazol- 2- il}- amida (34 mg), amida del ácido (2S, 4S)- 4- fluoro- 2- metil-pirrolidin- 2- carboxílico (14 mg) y trietilamina (0.035 ml) en DMF (1 ml) es mantenida a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla de reacción es evaporada y la cristalización de metanol acuoso da el compuesto del título como un sólido amarillo/blanco. HPLC/MS (Método C) Tiempo de Retención 1.21

15 minutos, M+H 406.9 and MH 404.9.

Ejemplo 67 2-amida 1-({5-[2-(4-etil-tetrahidro-pirano-4-il)-pirimidin-4-il]-4-metil-tiazol-2-il}-amida) del ácido (S)-2-Metilpirrolidin-1,2-dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol- 1- carboxílico {5- [2- (4- etil- tetrahidro- pirano- 4- il)- pirimidin- 4-il]- 4-metiltiazol- 2- il}amida (50 mg), amida del ácido (2S)- 2- metil-pirrolidin-2- carboxílico (18 mg) y trietilamina (0.021 ml) en DMF (0.13 ml) se hace rotar formando remolino a 40 °C durante 18 horas. La mezcla de reacción se evapora y después se purifica por cromatografía de fase reversa (Método B), las fracciones se pasan a través de un cartucho Varian Bond Elut® SCX 300 mg SPE seguido por elución con amoniaco 7 M en metanol. La evaporación de los lavados de amoniaco metanólico da el compuesto del título como un sólido beige. MS (Método D) M+H 459 y M- H 457.

Ejemplo 68 2-amida 1-({4-metil-5-[2-(1-fenil-ciclopentilo)-pirimidin-4-il]-tiazol-2-il}-amida) del ácido (S)-2-Metil-pirrolidin1,2-dicarboxílico

10 Una mezcla de ácido imidazol- 1- carboxílico {4-metil- 5- [2- (1- fenil- ciclopentilo)- pirimidin-4- il]-tiazol-2- il}-amida (60 mg), amida del ácido (2S)- 2-metil-pirrolidin-2-carboxílico (13 mg) y trietilamina (0.015 ml) en DMF (0.13 ml) se hace rotar formando remolino a 40 °C durante 18 horas. La mezcla de reacción se evapora y después se purifica por cromatografía de fase reversa (Método B), las fracciones se pasan a través de un cartucho Varian Bond Elut® SCX 300 mg SPE seguido por elución con amoniaco 7 M en metanol. La evaporación de los lavados de amoniaco metanólico da

15 el compuesto del título como un sólido. MS (Método D) M+H 491 y M- H 489.

Ejemplo 69 2-amida 1-({5-[2-(1,1-dimetil-2-p-tolil-etil)-pirimidin-4-il]-4-metil-tiazol-2-il}-amida) del ácido (S)-2-Metilpirrolidin-1,2-dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol- 1-carboxílico {5- [2- (1, 1-dimetil- 2- p- tolil- etil)- pirimidin- 4- il]- 4- metiltiazol- 2- il}

20 amida (40 mg), amida del ácido (2S)-2- metil-pirrolidin- 2-carboxílico (13 mg) y trietilamina (0.015 ml) en DMF (0.09ml) se hace rotar formando remolino a 40 °C durante 4 horas. La mezcla de reacción se evapora y después se purifica por cromatografía de fase reversa (Método B), las fracciones se pasan a través de un cartucho Varian Bond Elut® SCX 300 mg SPE seguido por elución con amoniaco 7 M en metanol. La evaporación de los lavados de amoniaco metanólico da el compuesto del título como un sólido. MS (Método D) M+H 493 y M- H 491.

25 Ejemplo 70 2-amida 1-{[5-(2-tert-butil-pirimidin-4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida} del ácido (2S,4R)-4-Dimetilamino-pirrolidin1.2-dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol- 1- carboxílico {4-metil- 5- [2- tert-butil- pirimidin- 4- il]- tiazol- 2- il}- amida (50 mg), amida del ácido (2S, 4R)- 4-dimetilamino- pirrolidin- 2- carboxílico (25 mg) y trietilamina (0.051 ml) en DMF (1 ml) es mantenida a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla de reacción es evaporada y la cristalización de metanol acuoso da el compuesto del título como un sólido amarillo/blanco. HPLC/MS (Método C) Tiempo de Retención 0.90 minutos, M+H

432.1 y MH 430.3.

Ejemplo 71 2-amida 1-{[5-(2-dietilamino-pirimidin-4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida} del ácido (S)-2-Metil-pirrolidin-1.2dicarboxílico

10 Una mezcla de ácido imidazol- 1-carboxílico [5- (2- dietilamino- pirimidin- 4- il)- 4- metil- tiazol- 2- il]-amida (40 mg), amida del ácido (2S, 4R)-4- dimetilamino-pirrolidin- 2-carboxílico (16 mg) y trietilamina (0.019 ml) en DMF (0.11 ml) se agita a 40 °C durante 2 horas. La mezcla de reacción se evapora y después se purifica por cromatografía de fase reversa (Método B), las fracciones se pasan a través de un cartucho Varian Bond Elut® SCX 300 mg SPE seguido por elución con amoniaco 7 M en metanol. La evaporación de los lavados de amoniaco metanólico da el compuesto del título

15 como un sólido amarillo. MS (Método D) M+H 418 y M- H 416.

Ejemplo 72 2-amida 1-{[5-(2-tert-butil-pirimidin-4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida} del ácido (2S,4S)-4-Dimetilamino-pirrolidin1,2-dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol- 1- carboxílico {4-metil- 5- [2- tert-butil- pirimidin- 4- il]- tiazol- 2- il}- amida (50 mg), amida del ácido (2S, 4S)-4-dimetilamino- pirrolidin- 2-carboxílico (25 mg) y trietilamina (0.051 ml) en DMF (1 ml) se mantiene a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla de reacción se evapora y después se purifica por cromatografía de fase reversa (Método B), las fracciones se pasan a través de un cartucho Varian Bond Elut® SCX 300 mg SPE seguido por elución con amoniaco 7 M en metanol. La evaporación de los lavados de amoniaco metanólico da el compuesto del título como un sólido amarillo/ blanco. HPLC/MS (Método C) Tiempo de Retención 0.93 minutos, M+H 432.1 y M-H

430.2.

Ejemplo 73 2-amida 1-{[5-(2-isopropil-pirimidin-4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida} del ácido (S)-2-Metil-pirrolidin-1,2dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol- 1- carboxílico {4-metil- 5-[2-isopropil- pirimidin- 4- il]- tiazol- 2- il}- amida (40 mg), amida del ácido (2S)- 2- metil- pirrolidin- 2- carboxílico (17 mg) y trietilamina (0.015 ml) en DMF (0.12 ml) se hace rotar formando remolino a 40 °C durante 18 horas. La mezcla de reacción se evapora y después se purifica por cromatografía de fase reversa (Método B), las fracciones se pasan a través de un cartucho Varian Bond Elut® SCX 300 mg SPE

15 seguido por elución con amoniaco 7 M en metanol. La evaporación de los lavados de amoniaco metanólico da el compuesto del título como un sólido amarillo. MS (Método D) M+H 389 y M- H 387.

Ejemplo 74 2-amida 1-{[4-metil-5-(2-metilosulfanil-pirimidin-4-il)-tiazol-2-il]-amida} del ácido (S)-2-Metil-pirrolidin-1,2dicarboxílico

20 Una mezcla de ácido imidazol-1- carboxílico {4- metil- 5- [2-metilosulfanil- pirimidin- 4-il]-tiazol-2-il}- amida (1.41 g), amida del ácido (2S)- 2- metil-pirrolidin-2- carboxílico (0.59 g) y trietilamina (0.71 ml) en DMF (4.2 ml) se hace rotar formando remolino a 40 °C durante 3 horas. La mezcla de reacción se evapora y luego se somete a partición entre agua y metanol al 5% en diclorometano, las capas orgánicas se secan sobre sulfato de sodio y se evaporan para dar el compuesto del título como un sólido naranja el cual se usa sin purificación adicional. MS (Método D) M+H 393 y M- H

25 391.

Ejemplo 75 2-amida 1-({5-[2-(4-dimetilamino-piperidin-1-il)-pirimidin-4-il]-4-metil-tiazol-2-il}-amida) del ácido (S)-2-Metilpirrolidin-1,2-dicarboxílico

Una mezcla de 2- amida 1- { [5- (2- metanosulfanilo- pirimidin- 4- il)- 4- metil- tiazol- 2- il]- amida} (50 mg), 4-(dimetilamino)- piperidina del ácido (S)- 2- metil- pirrolidin-1, 2-dicarboxílico (78 mg) y 1, 4- dioxano es calentada a 80° C durante 5 horas. La mezcla de reacción enfriada es entonces purificada por cromatografía en fase reversa (Método B), las fracciones son pasadas a través de un cartucho Varian Bond Elut® SCX 300 mg SPE seguido por elución con amoniaco 7 M en metanol. La evaporación de los lavados de amoniaco metanólico da el compuesto del título. MS (Método D) M+H 473 y M-H 471.

Ejemplo 76 2-amida 1-[(4-metil-5-{2-[metil-(1-metil-piperidin-4-il)-amino]-pirimidin-4-il}-tiazol-2-il)-amida] del ácido (S)-2Metil-pirrolidin-1,2-dicarboxílico

El compuesto del título es preparado de una manera análoga al Ejemplo 75 excepto que es utilizado 1- metil-4-(metilamino)-piperidin en lugar de 4- (dimetilamino)- piperidin. El compuesto del título se obtiene como un sólido. MS (Método D) M+H 473.

Ejemplo 77 2-amida 1-({4-metil-5-[2-(4-metil-piperazin-1-il)-pirimidin-4-il]-tiazol-2-il}-amida) del ácido (S)-2-Metil15 pirrolidin-1,2-dicarboxílico

El compuesto del título es preparado de una manera análoga al Ejemplo 75 excepto que es utilizado N- metilpiperazina en lugar de 4- (dimetilamino)- piperidin. El compuesto del título es obtenido como un sólido. MS (Método D) M+H 445 y M- H 443.

Ejemplo 78 2-amida 1-({5-[2-((R)-3-dimetilamino-pirrolidin-1-il)-pirimidin-4-il]-4-metil-tiazol-2-il}-amida) del ácido (S)-2Metil-pirrolidin-1,2-dicarboxílico

El compuesto del título se prepara de una manera análoga al Ejemplo 75 excepto que se usa (R)- (+)- 3-(dimetilamino)pirrolidin en lugar de 4- (dimetilamino)- piperidin. El compuesto del título se obtiene como un sólido. MS (Método D) M+H 459 y M- H 457.

10 Ejemplo 79 2-amida 1-({5-[2-(isopropil-metil-amino)-pirimidin-4-il]-4-metil-tiazol-2-il}-amida) del ácido (S)-2-Metilpirrolidin-1,2-dicarboxílico

El compuesto del título se prepara de una manera análoga al Ejemplo 75 excepto que se usa (R)- (+)- 3-(dimetilamino)pirrolidina en lugar de 4- (dimetilamino)- piperidina. El compuesto del título se obtiene como un sólido amarillo. MS 15 (Método D) M+H 418 y M-H 416.

Ejemplo 80 2-amida 1-[(5-{2-[(2-dimetilamino-etil)-metil-amino]-pirimidin-4-il}-4-metil-tiazol-2-il)-amida] del ácido (S)-2Metil-pirrolidin-1,2-dicarboxílico

El compuesto del título se prepara de una manera análoga al Ejemplo 75 excepto que se usa (R)- (+)- 3-(dimetilamino)pirrolidina en lugar de 4- (dimetilamino)- piperidin. El compuesto del título se obtiene como un sólido amarillo. MS (Método D) M+H 447.

5 Ejemplo 81 2-amida 1-{[5-(2-ciclobutil-pirimidin-4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida} del ácido (S)-2-Metil-pirrolidin-1,2dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol- 1- carboxílico {4-metil- 5-[2- ciclobutil- pirimidin- 4- il]- tiazol- 2- il}- amida (42 mg), amida del ácido (2S)- 2- metil- pirrolidin- 2- carboxílico (17 mg) y trietilamina (0.020 ml) en DMF (0.12 ml) se hace rotar

10 formando remolino a 40 °C durante 18 horas. La mezcla de reacción se evapora y después se purifica por cromatografía de fase reversa (Método B), las fracciones se pasan a través de un cartucho Varian Bond Elut® SCX 300 mg SPE seguido por elución con amoniaco 7 M en metanol. La evaporación de los lavados de amoniaco metanólico da el compuesto del título como un sólido amarillo. MS (Método D) M+H 401 y M- H 399.

Ejemplo 82 2-amida 1{[5-(2-isopropil-pirimidin-4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida} del ácido (2S,4R)-4-Dimetilamino-pirrolidin15 1,2-dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol- 1- carboxílico {4-metil- 5-[2-isopropil- pirimidin- 4- il]- tiazol- 2- il}- amida (40 mg), amida del ácido (2S, 4R)-4- dimetilamino- pirrolidin-2- carboxílico (21 mg) y trietilamina (0.020 ml) en DMF (0.12 ml) se hace rotar formando remolino a 40 °C durante 18 horas. La mezcla de reacción se evapora y después se purifica por cromatografía de fase reversa (Método B), las fracciones se pasan a través de un cartucho Varian Bond Elut® SCX 300 mg SPE seguido por elución con amoniaco 7 M en metanol. La evaporación de los lavados de amoniaco metanólico da el compuesto del título como un sólido amarillo. MS (Método D) M+H 418 y M-H 416.

Ejemplo 83 2-amida 1-({5-[2-((S)-3-dimetilamino-pirrolidin-1-il)-pirimidin-4-il]-4-metil-tiazol-2-il}-amida) del ácido (S)-2Metil-pirrolidin-1,2-dicarboxílico

10 El compuesto del título se prepara de una manera análoga al Ejemplo 75 excepto que se usa (S)- (+)- 3-(dimetilamino)pirrolidina en lugar de 4- (dimetilamino)- piperidina. El compuesto del título se obtiene como un sólido. MS (Método D) M+H 459 y M- H 457.

Ejemplo 84 2-amida 1-{[5-(2-azetidin-1-il-pirimidin-4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida} del ácido (S)-2-Metil-pirrolidin-1,2dicarboxílico

El compuesto del título se prepara de una manera análoga al Ejemplo 75 excepto que se usa azetidina en lugar de 4(dimetilamino)- piperidina. El compuesto del título se obtiene como un sólido. MS (Método D) M+H 402.

Ejemplo 85 2-amida 1-{[5-(2-isopropil-pirrimidin-4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida} del ácido (2S,4S)-4-Fluoro-pirrolidin-1,2dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol- 1- carboxílico {4-metil- 5-[2-isopropil- pirimidin- 4- il]- tiazol- 2- il}- amida (50 mg), amida del ácido (2S, 4S)- 4- fluoro- pirrolidin- 2- carboxílico (25 mg) y trietilamina (0.026 ml) en DMF (0.15 ml) se hace rotar formando remolino a 40 °C durante 2 horas. La mezcla de reacción se evapora y después se purifica por cromatografía de fase reversa (Método B), las fracciones se pasan a través de un cartucho Varian Bond Elut® SCX 300 mg SPE seguido por elución con amoniaco 7 M en metanol. La evaporación de los lavados de amoniaco metanólico da el compuesto del título como un sólido. MS (Método D) M+H 393 y M- H 391.

Ejemplo 86 1-amida 2-{[5-(2-tert-butil-pirimidin-4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida} del ácido (1S,5R)-2-Azabiciclo[3.1.0]hexano-1,2-dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol- 1- carboxílico {4-metil- 5- [2- tert-butil- pirimidin- 4- il]- tiazol- 2- il}- amida (50 mg), amida del ácido (1S, 5R)- 2- aza- biciclo [3.1.0] hexano- 1-carboxílico (20 mg) y trietilamina (0.051 ml) en DMF (1 ml) se mantiene a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla de reacción se evapora y la cristalización del metanol acuoso da el compuesto del título como un sólido amarillo/blanco. HPLC/MS (Método C) Tiempo de Retención 1.36

15 minutos, M+H 401.0 y MH 399.2.

Ejemplo 87 1-amida 2-{[5-(2-isopropil-pirimidin-4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida} del ácido (1S,5R)-2-Azabiciclo[3.1.0]hexano-1,2-dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol- 1- carboxílico (4-metil- 5-[2-isopropil- pirimidin- 4- il]- tiazol- 2- il}- amida (40 mg), amida

20 del ácido (1S, 5R)- 2-aza- biciclo [3.1.0] hexano- 1- carboxílico (17 mg) y trietilamina (0.020 ml) en DMF (0.12 ml) se mantiene a 40 °C durante 1 hora. La mezcla de reacción se evapora y después se purifica por cromatografía de fase reversa (Método B), las fracciones se pasan a través de un cartucho Varian Bond Elut® SCX 300 mg SPE seguido por elución con amoniaco 7 M en metanol. La evaporación de los lavados de amoniaco metanólico da el compuesto del título como un sólido beige. MS (Método D) M+H 387 y M- H 385.

Ejemplo 88 1-amida 2-{[5-(2-dietilamino-pirimidin-4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida} del ácido (1S,5R)-2-Azabiciclo[3.1.0]hexano-1,2-dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol- 1-carboxílico [5- (2- dietilamino- pirimidin- 4- il)- 4- metil- tiazol- 2- il]-amida (40 mg), amida del ácido (1S, 5R)-2- aza- biciclo [3.1.0] hexano-1- carboxílico (16 mg) y trietilamina (0.019 ml) en DMF (0.11 ml) se mantiene a 40 °C durante 1 hora. La mezcla de reacción se evapora y después se purifica por cromatografía de fase reversa (Método B), las fracciones se pasan a través de un cartucho Varian Bond Elut® SCX 300 mg SPE seguido por

10 elución con amoniaco 7 M en metanol. La evaporación de los lavados de amoniaco metanólico da el compuesto del título como un sólido beige. MS (Método D) M+H 416 y M- H 414.

Ejemplo 89 1-amida 2-{[5-(2-isobutil-pirimidin-4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida} del ácido (1S,5R)-2-Azabiciclo[3.1.0]hexano-1,2-dicarboxílico

15 Una mezcla de ácido imidazol- 1- carboxílico {4- metil-5- [2- isobutil-pirimidin- 4- il]-tiazol-2- il}- amida (40 mg), amida del ácido (1S, 5R)- 2-aza- biciclo [3.1.0] hexano- 1- carboxílico (16 mg) y trietilamina (0.020 ml) en DMF (0.12 ml) se mantiene a 40 ºC durante 1 hora. La mezcla de reacción se evapora y después se purifica por cromatografía de fase reversa (Método B), las fracciones se pasan a través de un cartucho Varian Bond Elut® SCX 300 mg SPE seguido por elución con amoniaco 7 M en metanol. La evaporación de los lavados de amoniaco metanólico da el compuesto del título

20 como un sólido amarillo/beige. MS (Método D) M+H 401 y M- H 399.

Ejemplo 90 1-amida 2-({4-metil-5-[2-(1,1,2-trimetil-propil)-pirimidin-4-il]-tiazol-2-il}-amida) del ácido (1S,5R)-2-Azabiciclo[3.1.0]hexano-1,2-dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol-1- carboxílico {4- metil- 5- [2- (1, 1, 2- trimetil-propil)- pirimidin- 4-il]-tiazol-2- il}- amida (40 mg), amida del ácido (1 S, 5R)- 2-aza- biciclo [3.1.0] hexano- 1-carboxílico (15 mg) y trietilamina (0.018 ml) en DMF

(0.11 ml) se mantiene a 40 ºC durante 1 hora. La mezcla de reacción se evapora y después se purifica por cromatografía de fase reversa (Método B), las fracciones se pasan a través de un cartucho Varian Bond Elut® SCX 300 mg SPE seguido por elución con amoniaco 7 M en metanol. La evaporación de los lavados de amoniaco metanólico da el compuesto del título como un sólido blanco. MS (Método D) M+H 429 y M- H 427.

Ejemplo 91 1-amida 2-{[5-(2-ciclopropil-pirimidin-4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida} del ácido (1S.5R)-2-Azabiciclo[3.1.0]hexano-1,2-dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol- 1-carboxílico {4- metil- 5-[2- ciclopropil- pirimidin- 4- il]- tiazol- 2- il}-amida (40 mg), amida del ácido (1S, 5R)-2- aza- biciclo [3.1.0] hexano-1- carboxílico (17 mg) y trietilamina (0.020 ml) en DMF (1 ml) se mantiene a 40 ºC durante 1 hora. La mezcla de reacción se evapora y después se purifica por cromatografía de fase reversa (Método B), las fracciones se pasan a través de un cartucho Varian Bond Elut® SCX 300 mg SPE seguido por

15 elución con amoniaco 7 M en metanol. La evaporación de los lavados de amoniaco metanólico da el compuesto del título como un sólido blanco. MS (Método D) M+H 385 y M- H 383.

Ejemplo 92 2-amida 1-({5-[2-(7-aza-biciclo[2.2.1]hept-7-il)-pirimidin-4-il]-4-metil-tiazol-2-il}-amida) del ácido (S)-2-Metilpirrolidin-1,2-dicarboxílico

El compuesto del título se prepara de una manera análoga al Ejemplo 75 excepto que se usa 7- azabiciclo [2.2.1] heptano en lugar de 4- (dimetilamino)- piperidina. El compuesto del título se obtiene como un sólido blanco. MS (Método D) M+H 442.

Ejemplo 93 2-amida 1-{[5-(2-dietilamino-pirimidin-4-il)-4-metiltiazol-2-il]-amida} del ácido (2S,4S)-4-Hidroxi-pirrolidin-1,2dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol- 1-carboxílico {4- metil- 5- [2-dietilamino-pirimidin- 4- il]- tiazol- 2-il}-amida (40 mg), amida del ácido (2S, 4S)- 4- hidroxi- pirrolidin- 2- carboxílico (21 mg) y trietilamina (0.019 ml) en DMF (0.11 ml) se mantiene a 40 ºC durante 1 hora. La mezcla de reacción se evapora y después se purifica por cromatografía de fase

10 reversa (Método B), las fracciones se pasan a través de un cartucho Varian Bond Elut® SCX 300 mg SPE seguido por elución con amoniaco 7 M en metanol. La evaporación de los lavados de amoniaco metanólico da el compuesto del título como un sólido amarillo. MS (Método D) M+H 420 y M- H 418.

Ejemplo 94 2-amida 1-{[5-(2-dietilamino-pirimidin-4-il)-4-metiltiazol-2-il]-amida} del ácido (2S,4R)-4-Hidroxi-pirrolidin-1,2dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol- 1-carboxílico {4- metil- 5- [2-dietilamino-pirimidin- 4- il]- tiazol- 2-il}-amida (40 mg), amida del ácido (2S, 4R)- 4- hidroxi- pirrolidin- 2- carboxílico (21 mg) y trietilamina (0.019 ml) en DMF (0.11 ml) se mantiene a 40 ºC durante 1 hora. La mezcla de reacción se evapora y después se purifica por cromatografía de fase reversa (Método B), las fracciones se pasan a través de un cartucho Varian Bond Elut® SCX 300 mg SPE seguido por

20 elución con amoniaco 7 M en metanol. La evaporación de los lavados de amoniaco metanólico da el compuesto del título como un sólido amarillo. MS (Método D) M+H 420 y M- H 418.

Ejemplo 95 2-amida 1-{[5-(2-dietilamino-pirimidin-4-il)-4-metiltiazol-2-il]-amida} del ácido (2S,4S)-4-Fluoro-pirrolidin-1,2dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol- 1-carboxílico {4- metil- 5- [2-dietilamino-pirimidin- 4- il]- tiazol- 2-il}-amida (40 mg), amida del ácido (2S, 4S)- 4-fluoro- pirrolidin- 2- carboxílico (16 mg) y trietilamina (0.019 ml) en DMF (0.11 ml) se mantiene a 40 ºC durante 1 hora. La mezcla de reacción se evapora y después se purifica por cromatografía de fase reversa (Método B), las fracciones se pasan a través de un cartucho Varian Bond Elut® SCX 300 mg SPE seguido por elución con amoniaco 7 M en metanol. La evaporación de los lavados de amoniaco metanólico da el compuesto del título como un sólido amarillo.

Ejemplo 96 2-amida 1-{[5-(2-dietilamino-pirimidin-4-il)-4-metiltiazol-2-il]-amida} del ácido (2S,4R)-4-Fluoro-pirrolidin-1,2dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol- 1-carboxílico {4- metil- 5- [2-dietilamino-pirimidin- 4- il]- tiazol- 2-il}-amida (40 mg), amida del ácido (2S, 4R)- 4- fluoro- pirrolidin- 2- carboxílico (16 mg) y trietilamina (0.019 ml) en DMF (0.11 ml) se mantiene a 40 ºC durante 1 hora. La mezcla de reacción se evapora y después se purifica por cromatografía de fase reversa (Método B), las fracciones se pasan a través de un cartucho Varian Bond Elut® SCX 300 mg SPE seguido por

15 elución con amoniaco 7 M en metanol. La evaporación de los lavados de amoniaco metanólico da el compuesto del título como un sólido blanco. MS (Método D) M+H 422 y M- H 420.

Ejemplo 97 2-amida 1-({5-[2-(etil-metil-amino)-pirimidin-4-il]-4-metil-tiazol-2-il}-amida) del ácido (S)-2-Metil-pirrolidin-1,2dicarboxílico

El compuesto del título se prepara de una manera análoga al Ejemplo 75 excepto que se usa N-etilmetilamina en lugar de 4- (dimetilamino)- piperidina. El compuesto del título se obtiene como un sólido. MS (Método D) M+H 404.

Ejemplo 98 2-amida 1-({5-[2-(bencil-etil-amino)-pirimidin-4-il]-4-metil-tiazol-2-il}-amida)) del ácido (S)-2-Metil-pirrrolidina1,2-dicarboxílico

El compuesto del título se prepara de una manera análoga al Ejemplo 75 excepto que se usa N-etilbencilamina en lugar de 4- (dimetilamino)- piperidina. El compuesto del título se obtiene como un sólido.

Ejemplo 99 2-amida 1-{[5-(2-imidazol-1-il-pirimidin-4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida} del ácido (S)-2-Metil-pirrolidin-1,2dicarboxílico

Una mezcla de 2- amida 1- {[5- (2- metanosulfonilo-pirimidin-4- il)- 4-metil- tiazol- 2-il]-amida} del ácido (S)- 2-metilpirrolidin- 1, 2-dicarboxílico (20 mg), imidazol (17 mg) y 1, 4- dioxano (0.5 ml) es calentada a 100° C durante 10 minutos en un aparato microondas Emrys Optimizer. La mezcla de reacción enfriada es entonces purificada por cromatografía en fase reversa (Método B), las fracciones son pasadas a través de un cartucho Varian Bond Elut® SCX 300 mg SPE

15 seguido por elución con amoniaco 7 M en metanol. La evaporación de los lavados de amoniaco metanólico da el compuesto del título como un sólido blanco. MS (Método D) M+H 413 y M- H 411.

Ejemplo 100 2-amida 1-({5-[2-(etil-propil-amino)-pirimidin-4-il]-4-metil-tiazol-2-il}-amida) del ácido (S)-2-Metil-pirrolidin1,2-dicarboxílico

El compuesto del título se prepara de una manera análoga al Ejemplo 75 excepto que se usa N- etil-N- propilamina en lugar de 4- (dimetilamino)- piperidina. El compuesto del título se obtiene como un sólido.

Ejemplo 101 2-amida 1-[(5-{2-[etil-(2-metoxi-etil)-amino]-pirimidin-4-il}-4-metil-tiazol-2-il)-amida] del ácido (S)-2-Metilpirrolidin-1,2-dicarboxílico

El compuesto del título se prepara de una manera análoga al Ejemplo 75 excepto que se usa N- (2- metoxietil)-etilamina en lugar de 4- (dimetilamino)-piperidina. El compuesto del título se obtiene como un sólido amarillo. MS (Método D) M+H 448 y M- H 446.

Ejemplo 102 2-amida 1-({4-metil-5-[2-(2-metil-imidazol-1-il)-pirimidin-4-il]-tiazol-2-il}-amida) del ácido (S)-2-Metil10 pirrolidin-1,2-dicarboxílico

Una mezcla de 2- amida 1-{[5- (2-metanosulfonilo- pirimidin-4-il) 4- metil- tiazol- 2-il]-amida} del ácido (S)- 2-metilpirrolidin- 1, 2-dicarboxílico (50 mg), 2- metilimidazol (50 mg) y 1, 4- dioxano (0.2 ml) es calentada a 100° C durante 1 hora en un aparato microondas Emrys Optimizer. La mezcla de reacción enfriada es entonces purificada por

15 cromatografía en fase reversa (Método B), las fracciones son pasadas a través de un cartucho Varian Bond Elut® SCX 300 mg SPE seguido por elución con amoniaco 7 M en metanol. La evaporación de los lavados de amoniaco metanólico da el compuesto del título como un sólido blanco. MS (Método D) M+H 427 y M-H 425.

Ejemplo 103 2-amida 1-({4-metil-5-[2-(1-metil-ciclopropil)-pirimidin-4-il]-tiazol-2-il}-amida) del ácido (S)-2-Metil-pirrolidin1,2-dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol-1-carboxílico {4- metil-5- [2- (1- metil-ciclopropil)-pirimidin- 4-il]- tiazol- 2-il}- amida (80 mg), amida del ácido (2S)- 2-metil-pirrolidin-2-carboxílico (33 mg) y trietilamina (0.039 ml) en DMF (0.24 ml) se hace rotar formando remolino a 40 °C durante 1 hora. La mezcla de reacción se evapora y después se purifica por

5 cromatografía de fase reversa (Método B), las fracciones se pasan a través de un cartucho Varian Bond Elut® SCX 300 mg SPE seguido por elución con amoniaco 7 M en metanol. La evaporación de los lavados de amoniaco metanólico da el compuesto del título como un sólido amarillo. MS (Método D) M+H 401 y M-H 399.

Ejemplos 104 2-amida 1-({4-metil-5-[2-(cis-2-metil-ciclopropil)-pirimidin-4-il]-tiazol-2-il}-amida) del ácido (S)-2-Metilpirrolidin-1,2-dicarboxílico y Ejemplo 105 2-amida 1-({4-metil-5-[2-(trans-2-metil-ciclopropil)-pirimidin-4-il]-tiazol-2-il}

10 amida) del ácido (S)-2-Metil-pirrolidin-1,2-dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol-1-carboxílico {4- metil-5- [2- (2- metil-ciclopropil)-pirimidin- 4-il]- tiazol- 2-il}- amida (50 mg), amida del ácido (2S)- 2-metil-pirrolidin-2-carboxílico (21 mg) y trietilamina (0.025 ml) en DMF (0.15 ml) se hace rotar formando remolino a 40 °C durante 2 horas. La mezcla de reacción se evapora y después se purifica por

15 cromatografía de fase reversa para dar dos componentes, las fracciones que contiene cada componente se pasan a través de un cartucho Varian Bond Elut® SCX 300 mg SPE seguidos por elución con amoniaco 7 M en metanol. La evaporación de los lavados de amoniaco metanólico da el compuesto del título como una mezcla de cis-ciclopropil diastereoisómeros del primer componente de elución y como una mezcla de trans-ciclopropil diastereoisómeros del segundo componente de elución. MS (Método D) M+H 401 y M-H 399.

20 Ejemplo 106 2-amida 1-{[5-(2-tert-butil-pirimidin-4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida} del ácido (R)-2-Bencil-pirrolidin-1,2dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol- 1- carboxílico {4-metil- 5- [2- tert-butil- pirimidin- 4- il]- tiazol- 2- il}- amida (50 mg), amida del ácido (R)- 2- bencil- pirrolidin- 2- carboxílico (33 mg) y trietilamina (0.051 ml) en DMF (1 ml) se mantiene a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla de reacción se evapora y después se purifica por cromatografía de fase reversa (Método B), las fracciones se pasan a través de un cartucho Varian Bond Elut® SCX 300 mg SPE seguido 5 por elución con amoniaco 7 M en metanol. La evaporación de los lavados de amoniaco metanólico da el compuesto del título como un sólido amarillo/blanco. HPLC/MS (Método C) Tiempo de Retención 1.94 minutos, M+H 479.1 y M-H

477.2.

Ejemplo 107 2-amida 1-{[5-(2-tert-butil-pirimidin-4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida} del ácido (R)-2-Dimetilaminometilpirrolidin-1.2-dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol- 1- carboxílico {4-metil- 5- [2- tert-butil- pirimidin- 4- il]- tiazol- 2- il}- amida (50 mg), amida del ácido (R)- 2-dimetilaminometil- pirrolidin- 2- carboxílico (28 mg) y trietilamina (0.051 ml) en DMF (1 ml) se mantiene a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla de reacción se evapora y después se purifica por cromatografía de fase reversa (Método B), las fracciones se pasan a través de un cartucho Varian Bond Elut® SCX 300 mg SPE seguido 15 por elución con amoniaco 7 M en metanol. La evaporación de los lavados de amoniaco metanólico da el compuesto del título como un sólido amarillo/blanco. HPLC/MS (Método C) Tiempo de Retención 1.94 minutos, M+H 446.1 y M-H

444.2.

Ejemplo 108 2-amida 1-({5-[2-(1,1-dimetilpropil)-pirimidin-4-il]-4-metil-tiazol-2-il}-amida) del ácido (S)-2-Metil-pirrolidin1,2-dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol- 1- carboxílico {4- metil-5- [2- (1, 1-dimetil-propil)- pirimidin- 4-il]- tiazol- 2-il}- amida (50 mg), amida del ácido (2S)- 2- metil- pirrolidin- 2-carboxílico (20 mg) y trietilamina (0.024 ml) en DMF (0.1 ml) se hace rotar formando remolino a 40 °C durante 2 horas. La mezcla de reacción se evapora y después se purifica por cromatografía de fase reversa (Método B), las fracciones se pasan a través de un cartucho Varian Bond Elut® SCX 300

25 mg SPE seguido por elución con amoniaco 7 M en metanol. La evaporación de los lavados de amoniaco metanólico da el compuesto del título como un sólido beige. MS (Método D) M- H 415.

Ejemplo 109 2-amida 1-{[5-(2-tert-butil-pirimidin-4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida} del ácido (2S,4R)-4-Ciano-pirrolidin-1,2dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol- 1- carboxílico {4-metil- 5- [2- tert-butil- pirimidin- 4- il]- tiazol- 2- il}- amida (40 mg), amida del ácido (2S, 4R)-4- ciano- pirrolidin- 2- carboxílico (18 mg) y trietilamina (0.016 ml) en DMF (0.2 ml) se mantiene a 40 ºC durante 2 horas. La mezcla de reacción se evapora y después se purifica por cromatografía de fase reversa (Método B), las fracciones se pasan a través de un cartucho Varian Bond Elut® SCX 300 mg SPE seguido por elución con amoniaco 7 M en metanol. La evaporación de los lavados de amoniaco metanólico da el compuesto del título como un sólido.

Ejemplo 110 2-amida 1-{[5-(2-ciclopropilmetil-pirimidin-4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida} del ácido (S)-2-Metil-pirrolidin-1,2dicarboxílico

El compuesto del título es preparado en analogía al procedimiento descrito para el Ejemplo 40, pero usando ácido imidazol-1- carboxílico [5- (2- ciclopropilmetil-pirimidin-4- il)- 4- metil-tiazol-2-il]- amida en lugar de ácido imidazol- 1carboxílico {4- metil-5- [2- (1- metil- ciclopropil)- piridin 4- il]-tiazol- 2- il}- amida. Punto de fusión 168-170°C.

Ejemplo 111 2-amida 1-{[5-(2-d9-tert-butil-pirimidin-4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida} del ácido (S)-2-metil-pirrolidin-1,215 dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol- 1- carboxílico [5- (2- d9- tert- butil- pirimidin- 4- il)- 4-metil- tiazol- 2-il]-amida (176 mg), amida del ácido (2S)- 2- metil-pirrolidin-2- carboxílico (71 mg) y trietilamina (0.17 ml) en DMF (2 ml) es mantenida a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla de reacción es evaporada y la cristalización del metanol acuoso da el compuesto del título como un sólido amarillo/blanco. HPLC/MS (Método C) Tiempo de Retención 1.44 minutos, M+H

412.2 y M- H 410.3.

Ejemplo 112 2-amida 1-{[5-(2-tert-butil-pirimidin-4-il)-4-metiltiazol-2-il]-amida} del ácido (R)-2-Metoximetil-pirrolidin-1,2dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol- 1-carboxílico {4- metil- 5-[2- tert- butil- pirimidin- 4- il]-tiazol- 2- il}- amida (100 mg), amida del ácido (R)- 2- metoximetil-pirrolidin-2- carboxílico (51 mg) y trietilamina (0.102 ml) en DMF (1 ml) se mantiene a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla de reacción se evapora y después se purifica por cromatografía de fase reversa (Método B), las fracciones se pasan a través de un cartucho Varian Bond Elut® SCX 300 mg SPE seguido 10 por elución con amoniaco 7 M en metanol. La evaporación de los lavados de amoniaco metanólico da el compuesto del título como un sólido amarillo/blanco. HPLC/MS (Método C) Tiempo de Retención 1.56 minutos, M+H 433.2 y M-H

431.3.

Ejemplo 113 2-amida 1-{[5-(2-tert-butil-pirimidin-4-il)-4-metil-tiazol-2-il]-amida} del ácido (S)-Azetidin-1,2-dicarboxílico

15 Una mezcla de ácido imidazol- 1-carboxílico [5- (2- tert- butil- pirimidin- 4- il)- 4- metil-tiazol- 2-il]- amida (300 mg), amida del ácido (S)- azetidin- 2-carboxílico (96 mg) y trietilamina (0.31 ml) en DMF (2.5 ml) se mantiene a temperatura ambiente durante 17 horas. La mezcla de reacción se evapora y la cristalización de metanol da el compuesto del título como un sólido amarillo. MS M+H 375.1 y M- H 373.2.

Ejemplo 114 2-amida 1-{[5-(2-tert-butil-pirimidin-4-il)-4-metiltiazol-2-il]-amida} del ácido (S)-2-Difluorometil-pirrolidin-1,220 dicarboxílico

Una mezcla de ácido imidazol- 1-carboxílico {4- metil- 5-[2- tert- butil- pirimidin- 4- il]-tiazol- 2- il}- amida (156 mg), amida del ácido (S)- 2- difluorometil- pirrolidin- 2- carboxílico (100 mg) y trietilamina (0.159 ml) en DMF (1 ml) se mantiene a temperatura ambiente durante 36 horas. La mezcla de reacción se evapora y después se purifica por cromatografía de fase reversa (Método B), las fracciones se pasan a través de un cartucho Varian Bond Elut® SCX 300 mg SPE seguido por elución con amoniaco 7 M en metanol. La evaporación de los lavados de amoniaco metanólico da el compuesto del título como un sólido amarillo/blanco. HPLC/MS (Método C) Tiempo de Retención 1.71 minutos, M+H

439.1 y M- H 437.2.

Ejemplo 115 2-amida 1-{[5-(2-tert-butil-piridin4-il)-tiazol-2-il]-amida} del ácido (S)-2-Metil-pirrolidin-1.2-dicarboxílico

El compuesto del título es preparado en analogía con el procedimiento descrito en el Ejemplo 40 con las siguientes modificaciones. En el Ejemplo 40, la mezcla de reacción es agitada durante 3 horas a temperatura ambiente, detenida por dilución con EtOAc/H2O, y extraída con EtOAc. En la Etapa 40.1, la mezcla de reacción es agitada durante 2 horas a reflujo. En la Etapa 40.2, la mezcla de reacción es agitada durante 1 hora a 100°C. En la Etapa 1.3, es usado N- tiazol

15 2- il-acetomida. La mezcla de reacción es agitada durante 2 horas a 120°C, diluida con EtOAc/H2O y extraída con EtOAc. Después de secado y concentración de la fase orgánica, el residuo es purificado mediante cromatografía en columna de sílica gel (Hex/ EtOAc, 1: 1), seguido por trituración en Et2O. En la Etapa 40.7, es usado cloruro de pivaloilo.

Compuesto del título: ESI- MS: 388.1 [M+H]+; tR= 2.48 min (Sistema 1); TLC: Rf = 0.15 (DCM/ MeOH/NH3aq, 94: 5: 1).

Ejemplo 116 2-amida 1-{[5-(2-ciclobutil-piridin4-il)-tiazol-2-il]-amida} del ácido (S)-2-Metil-pirrolidin-1,2-dicarboxílico

con DCM/H2O y extraída con DCM. En la Etapa 40.1, la mezcla de reacción es agitada durante 4 horas a reflujo. En la Etapa 40.2, la mezcla de reacción es agitada durante 2 horas a 100°C y el producto crudo no es purificado. En la Etapa 40.3, es usado N-tiazol- 2- il- acetomida. La mezcla de reacción es agitada durante 3 horas a 120°C, detenida por dilución con EtOAc/H2O, y extraída con EtOAc. Después de secado y concentración de la fase orgánica, el residuo es 5 purificado mediante cromatografía en columna de sílica gel (Hex/ EtOAc, 2: 3). En la Etapa 40.5, la mezcla de reacción es agitada durante 1 hora a 80°C. En la Etapa 40.7, 4- metoxi- 3-buten- 2- ona (50 mmol) en THF (100 mL) es agregado a una solución fría (-78°C) de LiHMDS (1M en THF, 100 mL) en THF (200 mL). Después de 30 minutos, es agregado cloruro de ciclobutilcarbonilo y se deja que la mezcla de reacción alcance la temperatura ambiente durante 18 horas. Compuesto del título: ESI-MS: 386.1 [M+H]+; tR= 2.42 min (Sistema 1); TLC: Rf = 0.22 (DCM/ MeOH/ NH3aq, 91.5: 7.5:

10 1).

Ejemplo 117 2-amida 1-({5-[2-(1-metil-ciclopropil)-piridin4-il]-tiazol-2-il}-amida) del ácido (S)-2-Metil-pirrolidin-1,2dicarboxílico

El compuesto del título es preparado en analogía con el procedimiento descrito en el Ejemplo 40 pero con las siguientes

15 modificaciones. En el Ejemplo 40, la mezcla de reacción es agitada durante 14 horas a temperatura ambiente. En la Etapa 40.2, la mezcla de reacción es agitada durante 1 hora a 85°C. En la Etapa 1.3, es usado N-tiazol- 2- il-acetomida y la mezcla de reacción es agitada durante 4 horas a 120°C.

Compuesto del título: ESI- MS: 386.1 [M+H]+; tR 2.35 min (Sistema 1); TLC: Rf = 0.28 (DCM/ MeOH, 9: 1) .

Ejemplo 118 2-amida 1-({5-[2-(1-trifluorometil-ciclopropil)-piridin4-il]-tiazol-2-il}-amida) del ácido (S)-2-Metil-pirrolidin-1,220 dicarboxílico

El compuesto del título es preparado en analogía con el procedimiento descrito en el Ejemplo 40 pero con las siguientes modificaciones. En el Ejemplo 40, la mezcla de reacción es agitada durante 14 horas a temperatura ambiente. En la Etapa 40.2, la mezcla de reacción es agitada durante 2 horas a 85°C y extraída con EtOAc después de ser detenida. En

25 la Etapa 40.3, es usado N-tiazol-2- il-acetomida. La mezcla de reacción es agitada durante 2 horas a 120°C. En la Etapa 40.4, es usado 1, 2- dicloroetano (2.55 mL por mmol de piridin 4-ona) como solvente. La mezcla de reacción es agitada durante 1 hora a 83°C y extraída con EtOAc después de ser detenida. En la Etapa 40.5, la mezcla de reacción es agitada durante 1 hora a 65°C. En la Etapa 40.7, es usado cloruro de 1- trifluorometil-ciclopropanocarbonilo (Etapa 118.1).

Compuesto del título: ESI- MS: 440.0 [M+H]+; tR 2.61 min (Sistema 1); TLC: Rf = 0.50 (DCM/ MeOH, 9: 1) . Etapa 118.1: Cloruro de 1-Trifluorometil-ciclopropanocarbonilo El compuesto del título es preparado en analogía con el procedimiento descrito en la Etapa 40.8 pero usando ácido 1

trifluorometilciclopropanocarboxílico. Ejemplo 119 2-amida 1-({5-[2-(2,2,2-trifluoro-1,1-dimetil-etil)-piridin4-il]-tiazol-2-il}-amida) del ácido (S)-2-Metil-pirrolidin1,2-dicarboxílico

El compuesto del título es preparado en analogía con el procedimiento descrito en el Ejemplo 40 pero con las siguientes modificaciones. En el Ejemplo 40, la mezcla de reacción es agitada durante 5 horas a temperatura ambiente. En la Etapa

10 40.2, la mezcla de reacción es agitada durante 1 hora a 85°C y extraída con EtOAc después de ser detenida. En la Etapa 40.3, es usado N- tiazol- 2- il- acetomida. La mezcla de reacción es agitada durante 2.5 horas a 120°C. En la Etapa 40.4, la mezcla de reacción es agitada durante 1 hora a 83°C y extraída con EtOAc después de ser detenida. En la Etapa 40.5, la mezcla de reacción es agitada durante 1 hora a 65°C. En la Etapa 40.6, el producto crudo no es purificado. En la Etapa 40.7, es usado cloruro de 3, 3, 3-trifluoro-2, 2- dimetil- propionilo (Etapa 119.1).

15 Compuesto del título: ESI- MS: 442.0 [M+H]+; tR= 2.98 min (Sistema 1); TLC: Rf = 0.47 (DCM/ MeOH, 9: 1).

Etapa 119.1: Cloruro de 3,3,3-Trifluoro-2,2-dimetil-propionilo

El compuesto del título es preparado en analogía con el procedimiento descrito en el Etapa 40.8 pero usando ácido 3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil- propiónico.

Ejemplo 120 2-amida 1-({5-[2-(1-trifluorometil-ciclobutil)-piridin4-il] tiazol-2-il}-amida) del ácido (S)-2-Metil-pirrolidin-1,220 dicarboxílico

El compuesto del título es preparado en analogía con el procedimiento descrito en el Ejemplo 40 pero con las siguientes modificaciones. En el Ejemplo 40, la mezcla de reacción es agitada durante 18 horas a temperatura ambiente, detenida por dilución con DCM/H2O y extraída con DCM. En la Etapa 40.1, la mezcla de reacción es agitada durante 1 hora a 25 reflujo. En la Etapa 40.2, la mezcla de reacción es agitada durante 1 hora a 100°C y extraída con DCM después de ser detenida. En la Etapa 40.3, se usa N- tiazol- 2- il-acetomida. La mezcla de reacción es agitada durante 5 horas a 120°C, detenida por dilución con EtOAc/H2O y extraída con EtOAc. En la Etapa 40.4, es usado 1, 2- dicloroetano (2.26 mL por mmol de piridin 4- ona) como solvente. La mezcla de reacción es agitada durante 1 hora a reflujo y extraída con DCM

después de ser detenida. En la Etapa 40.5, la mezcla de reacción es agitada durante 1 hora a temperatura ambiente. En la Etapa 40.6, la mezcla de reacción es agitada durante 18 horas a temperatura ambiente. En la Etapa 1.7, es agregada 4-metoxi- 3- buten- 2- ona en THF a una solución fría (- 78°C) de LiHMDS en THF. Después de 30 minutos, es agregado cloruro de 1- trifluorometil- ciclobutanocarbonilo (Etapa 120.1) en THF. La mezcla de reacción se deja alcanzar

5 la temperatura ambiente durante 18 horas y extraída con EtOAc después de ser detenida.

Compuesto del título: ESI-MS: 454.1 [M+H]+; tR= 2.90 min (Sistema 1); TLC: Rf = 0.18 (DCM/ MeOH/ NH3aq, 91.5: 7.5: 1).

Etapa 120.1: Cloruro de 1-Trifluorometil-ciclobutanocarbonilo

El compuesto del título es preparado en analogía con el procedimiento descrito en el Etapa 40.8 pero usando ácido 110 trifluorometilciclobutanocarboxílico y agitando la mezcla de reacción durante 2 horas a reflujo.

Ejemplo 121 2-amida 1-({5-[2-(1-metilociclobutil)-piridin4-il]-tiazol- 2-il}-amida) del ácido (S)-2-Metil-pirrolidin-1,2dicarboxílico

El compuesto del título es preparado en analogía con el procedimiento descrito en el Ejemplo 40 pero con las siguientes

15 modificaciones. En el Ejemplo 40, la mezcla de reacción es agitada durante 24 horas a temperatura ambiente, detenida por dilución con EtOAc/H2O, y extraída con EtOAc. En la Etapa 40.1, la mezcla de reacción es agitada durante 4 horas a reflujo. En la Etapa 40.2, la mezcla de reacción es agitada durante 2 horas a 100°C y extraída con DCM después de ser detenida. En la Etapa 40.3, es usado N- tiazol- 2-il- acetomida. La mezcla de reacción es agitada durante 3 horas a 100°C, diluida con EtOAc/H2O, y extraída con EtOAc. Después de secado y concentración de la fase orgánica, el residuo

20 es purificado mediante cromatografía en columna de sílica gel (Hex/ EtOAc, 25: 75). En la Etapa 40.5, la mezcla de reacción es agitada durante 2 horas a 80°C. En la Etapa 40.7, es agregado 4- metoxi- 3- buten- 2- ona en THF a una solución fría (-78°C) de LiHMDS en THF. Después de 30 minutos, es agregado cloruro de 1- metil- ciclobutano (Etapa 44.1) en THF y se deja que la mezcla de reacción alcance la temperatura ambiente durante 18 horas.

Compuesto del título: ESI- MS: 400.1 [M+H]+; tR= 2.60 min (Sistema 1); TLC: Rf = 0.08 (DCM/ MeOH/NH3aq, 94: 5: 1).

25 Ejemplo 122 2-amida 1-{[5-(2-dietilamino-piridin4-il)-tiazol-2-il]-amida} del ácido (S)-2-Metil-pirrolidin-1,2-dicarboxílico

El compuesto del título es preparado en analogía con el procedimiento descrito en el Ejemplo 40 pero con las siguientes modificaciones. En el Ejemplo 40, la mezcla de reacción es agitada durante 18 horas a temperatura ambiente, detenida por dilución con DCM/H2O y extraída con DCM. En la Etapa 40.1, la mezcla de reacción es agitada durante 1 hora a reflujo. En la Etapa 40.2, la mezcla de reacción es agitada durante 1 hora a 100°C y extraída con DCM después de ser detenida. En la Etapa 40.3, son usados dietil-(4-yodo-piridin 2- il)- amina (Etapa 51.1) y N- tiazol- 2-il- acetomida. La mezcla de reacción es agitada durante 5 horas a 120°C, detenida por dilución con EtOAc/H2O, filtrada a través de una almohadilla de celita y extraída con EtOAc.

Compuesto del título: ESI- MS: 403.2 [M+H]+; tR=2.60 min (Sistema 1); TLC: Rf = 0.37 (DCM/ MeOH/NH3aq, 91.5: 7.5: 1).

Ejemplo 123 2-amida 1-{[5-(3-tert-butil-3H-benzoimidazol-5-il)-tiazol-2-il]-amida} del ácido (S)-2-Metil-pirrolidin-1,2dicarboxílico

El compuesto del título es preparado en analogía con el procedimiento descrito en el Ejemplo 40 pero con las siguientes modificaciones. En el Ejemplo 40, la mezcla de reacción es agitada durante 5 horas a temperatura ambiente. En la Etapa 40.2, la mezcla de reacción es agitada durante 1 hora a 85°C y extraída con EtOAc después de ser detenida. En la Etapa 1.3, son usados 6- bromo-1-tert- butil- 1H- benzoimidazol (Etapa 123.1) y N- tiazol- 2- il-acetomida. La mezcla de reacción es agitada durante 7 horas a 120°C. Compuesto del título: ESI- MS: 427.1 [M+H]+; tR= 2.56 min (Sistema 1); TLC: Rf = 0.39 (DCM/ MeOH, 9: 1).

Etapa 123.1: 6-Bromo-1-tert-butil-1H-benzoimidazol

Una mezcla de 4-bromo-N*2*- tert- butil- benceno- 1, 2-diamina (Etapa 123.2) (2.14 g, 8.80 mmol) y trietilortoformiato

(14.7 mL, 88 mmol) es agitada durante 1 hora a 148°C, se deja enfriar y se concentró. El residuo se purificó por cromatografía en columna de sílica gel (DCM/ MeOH, 1: 0 - 99: 1) para producir 1.74 g del compuesto del título como un sólido blanco: ESI- MS: 253.0/ 255.0 [M+H]+; tR= 2.88 min (Sistema 1); TLC: Rf = 0.54 (DCM/ MeOH, 9: 1).

Etapa 123.2: 4-Bromo-N*2*-tert-butil-benceno-1,2-diamina

Una suspensión de (5- bromo- 2-nitro- fenil)- tert- butil- amina (Etapa 123.3) (6 g, 21.97 mmol) y níquel Raney (2 g) en MeOH/THF (1: 1 v/v, 600 mL) es agitada durante 9 horas a temperatura ambiente, bajo una atmósfera de hidrógeno. La mezcla de reacción es filtrada a través de una almohadilla de celita y concentrada. El residuo es purificado por cromatografía en columna de sílica gel (Hex/ EtOAc, 97: 3 -3: 1) para producir 4.4 g del compuesto del título como un aceite negro: ESI-MS: 243.0/ 245.0 [M+H]+; tR= 2.75 min (Sistema 1); TLC: Rf = 0.89 (Hex/ EtOAc, 1: 1).

Etapa 123.3: (5-Bromo-2-nitro-fenil)-tert-butil-amina

Una mezcla de 4- bromo- 2-fluoro- nitrobenceno (4 g, 18.2 mmol) y tert- butilamina (4.78 mL, 45.5 mmol, 2.5 eq) en EtOH (80 mL) se agita durante 15 horas a 85°C, se deja enfriar y se concentra. El residuo se purifica por cromatografía en columna de sílica gel (Hex/ EtOAc, 1: 0 -99: 1) para producir 4.8 g del compuesto del título como un sólido naranja: ESI- MS: 273.0/ 275.0 [M+H]+; tR= 5.68 min (Sistema 1); TLC: Rf = 0.49 (Hex/ EtOAc, 9: 1).

Ejemplo 124: 2-amida 1-[(5-{2-[1-(4-metoxi-fenil)-1-metil-etil]-piridin4-il}-tiazol-2-il)-amida] del ácido (S)-2-Metil-pirrolidin1,2-dicarboxílico

El compuesto del título es preparado en analogía con el procedimiento descrito en el Ejemplo 40 pero con las siguientes

5 modificaciones. En el Ejemplo 40, la mezcla de reacción es agitada durante 16 horas a temperatura ambiente, detenida por dilución con EtOAc/H2O. En la Etapa 40.1, la mezcla de reacción es agitada durante 4 horas a reflujo. En la Etapa 40.2, la mezcla de reacción es agitada durante 2 horas a 100°C. En la Etapa 40.3, es usado N- tiazol- 2-il- acetomida. La mezcla de reacción es agitada durante 5 horas a 100°C, detenida por dilución con EtOAc/H2O y extraída con EtOAc. En la Etapa 1.4, es usado 1, 2- dicloroetano (4.3 mL por mmol de piridin 4- ona) como solvente. La mezcla de reacción

10 es agitada durante 1 hora a reflujo, vertida en una solución saturada de NaHCO3 y extraída con DCM. En la Etapa 40.5, la mezcla de reacción es agitada durante 23 horas a 80°C. En la Etapa 40.6, la mezcla de reacción es agitada durante 21 horas a temperatura ambiente. En la Etapa 40.7, 4-metoxi- 3- buten-2- ona en THF es agregada a una solución fría (- 78°C) de LiHMDS en THF. Después de 30 minutos, es agregado cloruro de 2-(4- metoxi- fenil)- 2- metil- propionilo (Etapa 53.1) en THF y se deja que la mezcla de reacción alcance la temperatura ambiente durante 16 horas.

15 Compuesto del título: ESI- MS: 480.0 [M+H]+; tR= 3.10 min (Sistema 1); TLC: Rf = 0.06 (DCM/ MeOH/ NH3aq, 94: 5: 1).

Ejemplo 125 2-amida 1-[(5-{2-[1-(4-metoxifenil)-ciclopropilo]-piridin4-il}-tiazol-2-il)-amida] del ácido (S)-2-Metil-pirrolidin1,2-dicarboxílico

El compuesto del título es preparado en analogía con el procedimiento descrito en el Ejemplo 40 pero con las siguientes

20 modificaciones. En el Ejemplo 40, la mezcla de reacción, es agitada durante 16 horas a temperatura ambiente, detenida por dilución con EtOAc/H2O. En la Etapa 40.1, la mezcla de reacción es agitada durante 4.5 horas a reflujo. En la Etapa 40.2, la mezcla de reacción es agitada durante 3 horas a 100°C y extraída con DCM después de ser detenida. En la Etapa 40.3, es usada N- tiazol- 2- il-acetomida. La mezcla de reacción es agitada durante 28 horas a 100°C, detenida por dilución con EtOAc/H2O y extraída con EtOAc. En la Etapa 40.4, es usado 1, 2- dicloroetano (4.3 mL per mmol de

25 piridin 4- ona) como solvente. La mezcla de reacción es agitada durante 1 hora a reflujo, vertida en una solución saturada de NaHCO3 y extraída con DCM. En la Etapa 40.5, la mezcla de reacción es agitada durante 18 horas a 80°C. En la Etapa 40.6, la mezcla de reacción es agitada durante 18 horas a temperatura ambiente. En la Etapa 1.7, es agregado 4-metoxi- 3- buten-2- ona en THF a una solución fría (- 78°C) de LiHMDS en THF. Después de 30 minutos, es agregado cloruro de 1- (4- metoxi- fenil)-ciclopropanocarbonilo (Etapa 54.1) en THF y se deja que la mezcla de

30 reacción alcance la temperatura ambiente durante 16 horas.

Compuesto del título: ESI- MS: 478.1 [M+H]+; tR= 3.11 min (Sistema 1); TLC: Rf = 0.08 (DCM/ MeOH/ NH3aq, 94: 5: 1).

Ejemplo 126 2-amida 1-({5-[2-(1-d3-metilociclobutil)-piridin4-il]-tiazol-2-il}-amida) del ácido (S)-2-Metil-pirrolidin-1,2dicarboxílico

5 El compuesto del título es preparado en analogía con el procedimiento descrito en el Ejemplo 40 pero con las siguientes modificaciones. En el Ejemplo 40, la mezcla de reacción es agitada durante 18 horas a temperatura ambiente, detenida por dilución con DCM/H2O y extraída con DCM. En la Etapa 40.1, la mezcla de reacción es agitada durante 1 hora a reflujo. En la Etapa 40.2, la mezcla de reacción es agitada durante 1 hora a 100°C. En la Etapa 40.3, es usado N-tiazol- 2-il- acetomida. El catalizador de paladio es agregado a la mezcla calentada de los reactivos restantes. La mezcla

10 resultante es agitada durante 7 horas a 120°C, diluida con EtOAc/H2O, filtrada a través de una almohadilla de celita y extraída con EtOAc. Después de secado y concentración de la fase orgánica, el residuo es purificado mediante cromatografía en columna de sílica gel (Hex/ EtOAc, 1: 4) . En la Etapa 40.5, la mezcla de reacción es agitada durante 3 horas a 80°C. En la Etapa 40.7, es agregada 4- metoxi- 3-buten-2- ona en THF a una solución fría (-78°C) de LiHMDS en THF. Después de 30 minutos, es agregado cloruro de 1-d3-metil- ciclobutano (Etapa 56.1) en THF y se deja que la

15 mezcla de reacción alcance la temperatura ambiente durante 16 horas.

Compuesto del título: ESI- MS: 403.2 [M+H]+; tR= 2.60 min (Sistema 1); TLC: Rf = 0.20 (DCM/ MeOH/NH3aq, 91.5: 7.5: 1).

Ejemplo 127 2-amida 1-({4-d3-metil-5-[2-(1-metil-ciclopropil)-piridin4-il]-tiazol-2-il}-amida) del ácido (S)-2-Metil-pirrolidin1,2-dicarboxílico

20 El compuesto del título es preparado en analogía con el procedimiento descrito en el Ejemplo 40 pero con las siguientes modificaciones. En el Ejemplo 40, la mezcla de reacción es agitada durante 14 horas a temperatura ambiente. En la Etapa 40.1, la mezcla de reacción es agitada durante 8 horas a reflujo. En la Etapa 40.2, la mezcla de reacción es agitada durante 1 hora a 85°C y extraída con EtOAc después de ser detenida. En la Etapa 40.3, es usado 2-acetamido4-d3-metil- tiazol (Etapa 127.1). La mezcla de reacción es agitada durante 2 horas a 120°C.

25 Compuesto del título: ESI- MS: 403.2 [M+H]+; tR= 2.40 min (Sistema 1); TLC: Rf = 0.25 (DCM/ MeOH, 9: 1).

Etapa 127.1: 2-Acetamido-4-d3-metil-tiazol Una mezcla de 1- bromo- propan- 2- ona- d5 [Challacombe, K. et al, Journal of the Chemical Society Perkin Trans. I, (1988), 2213- 2218] (1.25 g, 8.8 mmol) y 1- acetil- 2- tiourea (1 g, 8.8 mmol) en EtOH (20 mL) es agitada durante 2 horas a 85°C, se deja enfriar y se concentra. El residuo es purificado mediante cromatografía en columna de sílica gel (Hex/ EtOAc, 85: 15 - 1: 1) provee 1.08 g del compuesto del título como un sólido naranja: ESI- MS: 160.0 [M+H]+; TLC: Rf =

0.25 (Hex/EtOAc, 1: 1) .

Ejemplo 128 2-amida 1-({4-d3-metil-5-[2-(2,2,2-trifluoro-1,1-dimetiletil)-pirridin-4-il]-tiazol-2-il}-amida) del ácido (S)-2Metil-pirrolidin-1,2-dicarboxílico

El compuesto del título es preparado en analogía con el procedimiento descrito en el Ejemplo 40 pero con las siguientes

10 modificaciones. En el Ejemplo 40, la mezcla de reacción es agitada durante 14 horas a temperatura ambiente. En la Etapa 40.1, la mezcla de reacción es agitada durante 8 horas a reflujo. En la Etapa 40.2, la mezcla de reacción es agitada durante 1 hora a 85°C y extraída con EtOAc después de ser detenida. En la Etapa 40.3, es usado 2-acetamido4-d3-metil- tiazol (Etapa 127.1). La mezcla de reacción es agitada durante 2 horas a 120°C. En la Etapa 40.4, la mezcla de reacción es agitada durante 1 hora a 83°C y extraída con EtOAc después de ser detenida. En la Etapa 40.5, la

15 mezcla de reacción es agitada durante 1 hora a 65°C. En la Etapa 40.6, el producto crudo no es purificado. En la Etapa 40.7, es usado cloruro de 3, 3, 3- trifluoro-2, 2- dimetil- propionilo (Etapa 119.1).

Compuesto del título: ESI- MS: 459.0 [M+H]+; tR= 3.21 min (Sistema 1); TLC: Rf = 0.55 (DCM/ MeOH, 9: 1).

Ejemplo 129 2-amida 1-({4-chloro-5-[2-(1-metil-ciclopropil)-piridin4-il]-tiazol-2-il}-amida) del ácido (S)-2-Metil-pirrolidin1,2-dicarboxílico

El compuesto del título es preparado en analogía con el procedimiento descrito en el Ejemplo 40 pero con las siguientes modificaciones. En el Ejemplo 40, la mezcla de reacción es agitada durante 72 horas a temperatura ambiente. En la Etapa 40.1, DCM/DMF (3: 1, v/v) es usado como el solvente del sistema. La mezcla de reacción es agitada durante 28 horas a reflujo y se concentra. Tal residuo es usado sin purificación. En la Etapa 40.2, la mezcla de reacción es agitada

25 durante 4 horas a 85°C y extraída con EtOAc después de ser detenida. En la Etapa 40.3, es usado N-(4- cloro- tiazol- 2il)-acetomida (Etapa 129.1). La mezcla de reacción es agitada durante 2 horas a 120°C.

Compuesto del título: ESI- MS: 420.0 [M+H]+; tR= 2.60 min (Sistema 1); TLC: Rf = 0.39 (DCM/ MeOH, 9: 1).

Etapa 129.1: N-(4-Cloro-tiazol-2-il)-acetomida

Una mezcla de N-(4-oxo- 4, 5-dihidro- tiazol-2- il)- acetomida (Etapa 129.2) (14.8 g, 94 mmol) y POCl3 (175 mL, 20 eq) es calentada a 105°C, agitada durante 15 minutos, se deja enfriar y se concentra. El residuo es vertido en hielo - H2O y extraído con EtOAc (2 x 100 mL). La fase orgánica es lavada con una solución saturada de NaHCO3 (2 x 100 mL), secada (Na2SO4), filtrada y concentrada. El residuo es purificado mediante cromatografía en columna de sílica gel 5 (DCM/MeOH, 99: 1) para producir 13.9 g del compuesto del título como un sólido blanco: ESI- MS: 177.0 [M+H]+; tR=

2.74 min (Sistema 1); TLC: Rf = 0.66 (DCM/ MeOH, 9: 1).

Etapa 129.2: N-(4-Oxo-4.5-dihidro-tiazol-2il)-acetomida

Una mezcla de seudotiohidantoína (16 g, 138 mmol) y anhídrido acético (16.9 mL, 179 mmol, 1.3 eq) en piridina (150 mL) es calentado a 115°C, agitado durante 1 hora y dejado enfriar. El precipitado resultante es recogido por filtración 10 para proveer 12.64 g del compuesto del título como un sólido marrón: ESI-MS: 159.0 [M+H]+.

Ejemplo 130 2-amida 1-[(2,4"-dimetilo [4,2’;4’,5"]terthiazol-2"-il)-amida] del ácido (S)-2-Metil-pirrolidin-1,2-dicarboxílico

Ácido Imidazol- 1- carboxílico (2, 4"- dimetil- [4, 2’; 4’, 5"] tertiazol- 2"- il)- amida (25 mg) es suspendido en DMF (1 mL), seguido por la adición de amida del ácido (S)- 2- metil- pirrolidin- 2- carboxílico (9.1 mg) y trietilamina (0.022 ml) a

15 temperatura ambiente. La mezcla de reacción es agitada hasta la finalización de la reacción (30 minutos) Es agregado EtOAc (50 mL) y la mezcla es lavada con agua (2x). La capa es liberado de solvente bajo presión reducida y el residuo es recogido en dioxano y liofilizado. El compuesto del título es obtenido como un polvo blanco; HPLC (Método F) Tiempo de Retención 4.65 minutos; MS (Método D) M+H 449.0 y M-H 447.1.

Ejemplo 131 2-amida 1-{[4’-metil-2 -(2-metil-1H-imidazol-4-il)-[4,5’]bitiazolil-2’-il]-amida} del ácido (S)-2-Metil-pirrolidin20 1,2-dicarboxílico

El compuesto del título es preparado como se describe como en el Ejemplo 130, usando ácido imidazol-1- carboxílico [4’-metil-2- (2- metil-1H-imidazol- 4- il)-[4, 5’] bitiazolil- 2’- il]- amida en lugar de ácido imidazol- 1- carboxílico (2, 4"dimetil-[4, 2’; 4’, 5"] tertiazol- 2"- il)- amida y amida del ácido (S)-2- metil-pirrolidin-2- carboxílico. Compuesto del título:

25 HPLC (Método F) Tiempo de Retención 3.73 minutos; MS (Método D) M+H 432.1 y M-H 430.2

Ejemplo 132 2-amida 1-[(2-ciclopropilo amino-4’-metil-[4.5’]bitiazolil-2’-il)-amida] del ácido (S)-2-Metil-pirrolidin-1,2dicarboxílico

El compuesto del título es preparado como se describe como en el Ejemplo 130, usando ácido imidazol-1- carboxílico (2- ciclopropilamino-4’- metil-[4, 5’] bitiazolil- 2’- il)- amida en lugar de ácido imidazol- 1- carboxílico (2, 4"-dimetil-[4, 2’, 4’, 5’] tertiazol- 2"- il)- amida. Compuesto del título: HPLC (Método F) Tiempo de Retención 3.90 minutos; MS (Método D) M+H 407.1 y MH 405.2.

Ejemplo 133 2-amida 1-[(2-dimetilamino-4’-metil-[4,5’]bitiazolil-2’-il)-amida] del ácido (S)-2-Metil-pirrolidin-1,2dicarboxílico

El compuesto del título es preparado como se describe como en el Ejemplo 130, usando ácido imidazol-1- carboxílico (2- dimetilamino-4’-metil- [4, 5’] bitiazolil- 2’- il)- amida en lugar de ácido imidazol- 1-carboxílico (2, 4"- dimetil- [4, 2’; 4’, 5"] tertiazol- 2"-il)-amida. Compuesto del título: HPLC: (Método F) Tiempo de Retención 3.87 minutos; MS (Método D) M+H 395.1 y MH 393.2.

15 Ejemplo 134 2-amida 1-{[2-(3-aza-biciclo[3.2.2]non-3-il)-4’-metil-[4,5’]bitiazolil-7-il]-amida} del ácido (S)-2-Metil-pirrolidin1,2-dicarboxílico

El compuesto del título es preparado como se describe como en el Ejemplo 16, usando ácido imidazol-1- carboxílico [2- (3- azabiciclo [3.2.2] non-3- il)- 4’- metil-[4, 5’] bitiazolil- 2’- il]- amida en lugar de ácido imidazol- 1- carboxílico (2, 4"-

dimetil- [4, 2’; 4’, 5"] tertiazol-2"-il)-amida. Compuesto del título: HPLC: (Método F) Tiempo de Retención 4.78 minutos; MS (Método D) M+H 474.9.

Ejemplo 135 2-amida 1-[(2-etil-4’-metil-[4,5’]bitiazolil-2’-il)-amida] del ácido (S)-2-Metil-pirrolidin-1,2-dicarboxílico

El compuesto del título es preparado como se describe como en el Ejemplo 130, usando ácido imidazol-1- carboxílico (2- etil-4’-metil- [4, 5’] bitiazolil- 2’-il)- amida en lugar de ácido imidazol- 1- carboxílico (2, 4"- dimetil- [4, 2; 4’, 5"] tertiazol-2"- il)- amida y amida del ácido (S)- 2-metil- pirrolidin- 2-carboxílico. Compuesto del título: HPLC (Método F) Tiempo de Retención 4.27 minutos; MS (Método D) M+H 379.8.

Ejemplo 136 2-amida 1-[(4’-metil-2 -piridin3-il-[4,5’]bitiazolil-2’-il)-amida] del ácido (S)-2-Metil-pirrolidin-1,2-dicarboxílico

El compuesto del título es preparado como se describe como en el Example16, usando ácido imidazol- 1-carboxílico (4’metil-2- piridin 3-il- [4, 5’] bitiazolil- 2’-il)- amida en lugar de ácido imidazol- 1- carboxílico (2, 4"-dimetil-[4, 2’; 4’, 5"] tertiazol- 2"- il)- amida. Compuesto del título: HPLC: (Método F) Tiempo de Retención 3.78 minutos; MS (Método D) M+H

428.8.

15 Ejemplo 137 2-amida 1-{[4’-metil-2 -(1-metil-ciclopropil)-[4,5’]bitiazolil-2’-il]-amida} del ácido (S)-2-Metil-pirrolidin-1,2dicarboxílico

El compuesto del título es preparado como se describe como en el Ejemplo 130, usando ácido imidazol-1- carboxílico [4’- metil-2- (1- metil-ciclopropil)-[4, 5’] bitiazolil- 2’-il]- amida en lugar de ácido imidazol- 1- carboxílico (2, 4"- dimetil- [4, 20 2’; 4’, 5"] tertiazol- 2"- il)-amida. Compuesto del título: HPLC: (Método F) Tiempo de Retención 4.83 minutos; MS (Método D) M+H 405.8.

Ejemplo 138 2-amida 1-{[4’-metil-2-(1-metil-ciclopropil)-[4,5’]bitiazolil-2’-il]-amida} del ácido (2S,4R)-4-Hidroxi-pirrolidin1,2-dicarboxílico

El compuesto del título es preparado como se describe como en el Ejemplo 137, usando amida del ácido (2S, 4R)- 4hidroxi- pirrolidin- 2-carboxílico en lugar de amida del ácido (S)-2- metil-pirrolidin- 2- carboxílico. Compuesto del título: HPLC (Método F) Tiempo de Retención 4.21 minutos; MS (Método D) M+H 407.8.

Ejemplo 139 2-amida 1-{[4’-metil-2-(1-metil-ciclopropil)-[4,5’]bitiazolil-2’-il]-amida} del ácido (2S,4S)-4-Hidroxi-pirrolidin1,2-dicarboxílico

10 El compuesto del título es preparado como se describe como en el Ejemplo 137, usando amida del ácido (2S, 4S)- 4hidroxi- pirrolidin- 2-carboxílico en lugar de amida del ácido (S)-2- metil-pirrolidin- 2- carboxílico. Compuesto del título: HPLC: (Método F) Tiempo de Retención 4.35 minutos; MS (Método D) M+H 407.8.

Ejemplo 140 2-amida 1-[( 2-tert-butil-4’-metil-[4,5’]bitiazolil-2’-il)-amida] del ácido (2S,4R)-4-Dimetilamino-pirrolidin-1,2dicarboxílico

El compuesto del título es preparado como se describe como en el Ejemplo 37, usando amida del ácido (2S, 4R)-4dimetilamino- pirrolidin- 2- carboxílico en lugar de amida del ácido (2S, 3S)- 3- metil- pirrolidin- 2- carboxílico. La purificación es realizada por cromatografía sobre sílica gel, eluyendo con CH2Cl2/ CH3OH (82/18%). Compuesto del título: HPLC (Método F) Tiempo de Retención 4.20 minutos; MS (Método D) M+H 437.1 y M- H 435.2.

Ejemplo 141 2-amida 1-{[4’-metil-2-(1-metil-ciclopropil)-[4,5’]bitiazoil-2’-il]-amida} del ácido (2S,4R)-4-Dimetilaminopirrolidin-1,2-dicarboxílico

El compuesto del título es preparado como se describe como en el Ejemplo 137, usando amida del ácido (2S, 4R)- 4dimetilamino-pirrolidin-2- carboxílico en lugar de amida del ácido (S)- 2- metil- pirrolidin- 2- carboxílico. Compuesto del título: HPLC: (Método F) Tiempo de Retención 4.13 minutos; MS (Método D) M+H 435.1 y M- H 433.1.

Ejemplo 142 2-amida 1-[(2-tert-butil-4’-metil-[4,5’]bitiazolil-2’-il)-amida] del ácido (2S,4S)-4-Dimetilamino-pirrolidin-1,2dicarboxílico

10 El compuesto del título es preparado como se describe como en el Ejemplo 37, usando amida del ácido (2S, 4S)- 4dimetilamino- pirrolidin- 2- carboxílico en lugar de amida del ácido (2S, 3S)- 3-metil- pirrolidin- 2- carboxílico. Compuesto del título: HPLC: (Método F) Tiempo de Retención 4.23 minutos; MS (Método D) M+H 437.2 y M-H 435.2.

Ejemplo 143 2-amida 1-{[4’-metil-2-(1-metil-ciclopropil)-[4,5’]bitiazolil-2’-il]-amida} del ácido (2S,4S)-4-Dimetilaminopirrolidin-1,2-dicarboxílico

El compuesto del título es preparado como se describe como en el Ejemplo 137, usando amida del ácido (2S, 4S)- 4dimetilamino-pirrolidin 2- carboxílico en lugar de amida del ácido (S)-2- metil- pirrolidin-2- carboxílico. Compuesto del título: HPLC: (Método F) Tiempo de Retención 4.17 minutos; MS (Método D) M+H 435.2 y M- H 433.2.

Ejemplo 144 2-amida 1-[(2-ciclobutil-4’-metil-[4,5’]bitiazolil-2’-il)-amida] del ácido (S)-2-Metil-pirrolidin-1,2-dicarboxílico El compuesto del título es preparado como se describe como en el Ejemplo 130, usando ácido imidazol-1- carboxílico (2- ciclobutil- 4’- metil-[4, 5’] bitiazolil-2’- il)- amida en lugar de ácido imidazol- 1-carboxílico (2, 4"- dimetil- [4, 2’; 4’, 5’] tertiazol- 2"- il)- amida. Compuesto del título: HPLC: (Método F) Tiempo de Retención 4.71 minutos; MS (Método D) M+H

406.1 y M- H 404.2.

Ejemplo 145 2-amida 1-{[4’-metil-2 -(1-trifluorometil-ciclopropil)-[4,5’] bitiazolil-2’-il]-amida} del ácido (S)-2-Metil-pirrolidin1,2-dicarboxílico

El compuesto del título es preparado como se describe como en el Ejemplo 130, usando ácido imidazol-1- carboxílico

10 [4’-metil- 2-(1-trifluorometil- ciclopropil)- [4, 5’] bitiazolil- 2’- il]- amida en lugar de ácido imidazol- 1- carboxílico (2, 4"- dimetil- [4, 2’; 4’, 5"] tertiazol-2"-il)-amida. Compuesto del título: HPLC: (Método F) Tiempo de Retención 4.88 minutos; MS (Método D) M+H 460.0 y M- H 458.0.

Ejemplo 146 1-amida 2-[(2 -tert-butil-4’-metil-[4,5’]bitiazolil-2’-il)-amida] del ácido (1S,5R)-2-Aza-biciclo[3.1.0]hexano-1,2dicarboxílico

El compuesto del título es preparado como se describe como en el Ejemplo 37, usando amida del ácido (1S, 5R)-2-aza- biciclo [3.1.0] hexano- 1-carboxílico en lugar de amida del ácido (2S, 3S)- 3- metil- pirrolidin- 2-carboxílico. Compuesto del título: HPLC: (Método F) Tiempo de Retención 4.90 minutos; MS (Método D) M+H 406.1 y M-H 404.1.

Ejemplo 147 1-amida 2-[(2 -ciclobutil-4’-metil-[4,5’]bitiazolil-2’-il)-amida] del ácido (1S,5R)-2-Aza-biciclo[3.1.0]hexano20 1.2-dicarboxílico

El compuesto del título es preparado como se describe como en el Ejemplo 130, usando ácido imidazol-1- carboxílico (2- ciclobutil- 4’- metil- [4, 5’] bitiazolil- 2’-il)- amida y amida del ácido (1S, 5R)- 2- aza- biciclo [3.1.0] hexano- 1carboxílico en lugar de ácido imidazol- 1- carboxílico (2, 4"- dimetil-[4, 2’; 4’, 5"] tertiazol- 2"- il)- amida y amida del ácido (S)- 2-metilpirrolidin- 2- carboxílico. Compuesto del título: HPLC: (Método F) Tiempo de Retención 4.68 minutos; MS (Método D) M+H 404.1 y M- H 402.1.

Ejemplo 148 2-amida 1-{[2-(1-etilpropil)-4’-metil-[4,5’]bitiazolil-2’-il]-amida} del ácido (S)-2-Metil-pirrolidin-1,2-dicarboxílico

El compuesto del título es preparado como se describe como en el Ejemplo 16, usando ácido imidazol-1- carboxílico [2-

10 (1- etilpropil)- 4’- metil- [4, 5’] bitiazolil- 2’- il]- amida en lugar de ácido imidazol- 1-carboxílico (2, 4"- dimetil- [4, 2’; 4’, 5"] tertiazol- 2"- il)- amida. Compuesto del título: HPLC: (Método F) Tiempo de Retención 5.05 minutos; MS (Método D) M+H

422.1 y M- H 420.2.

Ejemplo 149 1-amida 2-{[2 -(1-etil-propil)-4’-metil-[4,5’]bitiazolil-2’-il]-amida} del ácido (1S,5R)-2-Azabiciclo[3.1.0]hexano-1,2-dicarboxílico

El compuesto del título es preparado como se describe como en el Ejemplo 130, usando ácido imidazol-1- carboxílico [2- (1- etil- propil)- 4’- metil- [4, 5’] bitiazolil- 2’-il]- amida y amida del ácido (1S, 5R)- 2-aza- biciclo [3.1.0] hexano- 1carboxílico en lugar de ácido imidazol- 1- carboxílico (2, 4"- dimetil-[4, 2’; 4’, 5"] tertiazol- 2"- il)- amida y amida del ácido (S)- 2- metilpirrolidin-2- carboxílico. Compuesto del título: HPLC: (Método F) Tiempo de Retención 5.00 minutos; MS

20 (Método D) M+H 420.1 y M- H 418.1.

Ejemplo 150 2-amida 1-[(2-dimetilaminometil-4’-metil-[4,5’]bitiazolil-2’-il)-amida] del ácido (S)-2-Metil-pirrolidin-1,2dicarboxílico

El compuesto del título es preparado como se describe como en el Ejemplo 130, usando ácido Imidazol- 1- carboxílico (2- dimetilaminometil-4’-metil- [4, 5’] bitiazolil- 2’- il)- amida en lugar de ácido imidazol-1- carboxílico (2, 4"- dimetil- [4, 2’; 4’, 5"] tertiazol- 2"- il)- amida. Compuesto del título: HPLC: (Método F) Tiempo de Retención 3.54 minutos; MS (Método D) M+H 409.1 y M- H 407.2.

Ejemplo 151 2-amida 1-[(2-ciclopropilmetil-4’-metil-[4,5’]bitiazolil-2’-il)-amida] del ácido (S)-2-Metil-pirrolidin-1,2dicarboxílico

El compuesto del título es preparado como se describe como en el Ejemplo 130, usando ácido imidazol-1- carboxílico

10 (2- ciclopropilmetil-4’- metil- [4, 5’] bitiazolil- 2’- il)-amida en lugar de ácido imidazol- 1- carboxílico (2, 4"-dimetil- [4, 2’; 4’, 5"] tertiazol- 2"- il)- amida. Compuesto del título: HPLC: (Método F) Tiempo de Retención 4.59 minutos; MS (Método D) M+H 406.1 y M- H 404.2.

Ejemplo A: Eficiencia como inhibidores de la PI3 quinasa

Prueba con PI3K KinaseGlo: Se dispensaron 50 nL de diluciones de compuesto en placas negras de 384 pozos de bajo

15 volumen NonBinding Styrene (NBS) (Costar Cat. No. NBS#3676). Se transfirió l-a-fosfatidilinositol (PI), provisto como una solución de 10 mg/ml en metanol, a un tubo de vidrio y se secó bajo un haz de nitrógeno. Se resuspendió en OctilGlucósido al 3% (OG) por sometimiento a vortex y se almacenó a 4 ºC. El KinaseGlo Luminescent Kinase Assay (Promega, Madison/WI, USA) es un método de HTS homogéneo para medir la actividad de quinasa cuantificando la cantidad de ATP que permanece en solución después de una reacción con quinasa.

20 Se agregaron 5 µL de una mezcla de PI/OG con el subtipo de PI3K (Tabla 1). Las reacciones con quinasa fueron iniciadas mediante la adición de 5 µl de una mezcla de ATP que contiene en un volumen final de 10 µL TRIS-HCl 10 mM pH 7.5, MgCl2 3mM, NaCl 50 mM, CHAPS al 0.05%,DTT 1mM y ATP 1 µM, y sucedió a temperatura ambiente. Las reacciones se detuvieron con 10 µl de KinaseGlo y las placas fueron leídas10 minutos después en un lector Synergy2 utilizando un tiempo de integración de 0.1 segundos por pozo. Se agregó 2.5 µM de un inhibidor panclass1 PI3 de

25 quinasa (estándar) a las placas de ensayo para generar el 100% de inhibición de la reacción de la quinasa, y el 0% de inhibición fue dado por el vehículo solvente (DMSO al 90% en agua). El estándar fue utilizado como compuesto de referencia e incluido en todas las placas de ensayo en la forma de 16 puntos de dilución en duplicado.

Tabla 1 PI3Ks por KinaseGlo: condiciones de ensayo y protocolo de reactivos

Vol. (10 µL)

Enzima (nM) ATP (µM) PI/OG (µM/ µg/ml) NaCl (mM) Mg2+ (mM) CHAPS (%) DTT (mM) Tiempo (minutos)

PI3Ka

10 1 11/10 50 3 0.05 1 30

PI3K

25 1 11/10 50 3 0.05 1 30

PI3Ky

150 1 22/20 50 3 0.05 1 90

PI3Kd

10 1 11/10 50 3 0.05 1 30

Clonación de PI3Ks

Los constructos de PI3Ka, PI3K y PI3K0 son fusión del dominio p85a iSH2 y las respectivas isoformas p110.El

5 fragmento p85a y los genes de isoformas p110 fueron generados por PCR a partir de una primera cadena ADNc generada por RT-PCR a partir de ARN comercial de placenta, testículos y cerebro como se describe más abajo. El constructo de PI3Ky fue obtenido de RogerWilliams lab, MRC Laboratory of Molecular Biology, Cambridge, UK (November, 2003) y está descrito (Pacold, MichaelE.; Suire, Sabine; Perisic, Olga; Lara-Gonzalez, Samuel; Davis, Colin T.; Walker, Edward H.; Hawkins, Phillip T.;Stephens, Len; Eccleston, John F.; Williams, Roger L. Crystal structure y

10 functional analysis of Ras binding to its effector phosphoinositide 3-kinase gamma. Cell (2000), 103(6), 931-943).

Constructos y proteínas de PI3Ka

BV1075: el constructo para Baculovirus HV-1075 fue generado por una ligación en tres partes consistente de un

15 fragmento p85 y un fragmento p110a clonado en el vector pBlueBac4.5. El fragmento p85 fue derivado del plásmido p1661-2digerido con Nhe/Spe. El fragmento p110a derivado de este clon fue verificado por secuenciación y utilizado en un LR410 como un fragmento SpeI/HindIII. Para la generación del vector de expresión LR410 del baculovirus se utilizó la reacción LR de compuerta para transferir el inserto en el pBlueBac4.5 adaptada Gateway (Invitrogen) vector. El vector de clonación pBlueBac4.5 (Invitrogen) fue digerido con el Nhe/HindIII. Esto dio como resultado el constructo PED 153.8. El

20 componente p85 (iSH2) fue generado por PCR utilizando ORF 318 (descrito más arriba) como plantilla y un cebador de avance KAC1028 (5’- GCTAGCATGCGAGAATATGATAGAT-TATATGAAG- AATATACC) y dos cebadores reversos, KAC1029 (5’-GCCTCCACCAC- CTCCGCCTG-GTTTAATGCTGTTCATACGTTTGTC) y KAC1039 (5’- TACTAGTC- CGCCTCCAC- CACCTCCGCCTCCACCACCTCCGCC) Los dos cebadores reversos se superponen e incorporan el enlazante 12x Gly y la secuencia terminal N- en el gen p110a en el sitio Spel. El enlazante 12x Gly reemplaza el

25 enlazante individual Gly en el constructo BV1052. El fragmento de PCR fue clonado en pCR2.1 TOPO (Invitrogen). De los clones resultantes, se determinó que el p1661-2 era correcto por secuenciación. Este plásmido fue digerido con Nhe y SpeI y el fragmento resultante fue aislado en gel y purificado para subclonación.

El fragmento de clonación p110a fue generado por digestión enzimática del clonLR410 (véase más arriba) con Spe I y HindIII. El sitio SpeI es la región de codificación del gen p110a. El fragmento resultante fue aislado en gel y purificado 30 por subclonación. El vector de clonación, pBlueBac4.5 (Invitrogen) fue preparado por digestión enzimática con el Nhe y

HindIII. El vector de corte fue purificado con una columna Qiagen y luego desfosforilado con fosfatasa alcalina de intestino de ternera (CIP) (BioLabs). Después de terminar la reacción del CIP el vector de corte fue purificado de nuevo en columna para generar el vector final. Se llevó a cabo una ligación en tres partes utilizando ligasa Roche Rapid y las especificaciones del proveedor. El plásmido final fue verificado por secuenciación.

Dominio de quinasa.

Secuencia de proteína de BV 1075:

Constructos y proteínas de PI3K

10 BV949: Los productos PCR para el dominio inter SH2 (iSH2) de las subunidades p85 PI3Ka, PI3K y PI3K0 y para la subunidad p110 de longitud completa fueron generados y fusionados por superposición de PCR. El producto iSH2 PCR fue obtenido a partir de una primera cadena de ADNc generada por RT-PCR a partir de ARN humano comercial de placenta, testículos y cerebro (Clontech), inicialmente utilizando los cebadores gwG130- p01 (5’-CGAGAATATGATAGATTATATGAAGAAT- 3’) y gwG130-p02 (5’- TGGTTT- AATGCTGTTCATACGTTTGTCAAT-3’).

15 Subsecuentemente, en una reacción de PCR secundaria se agregaron sitios y secuencias enlazantes AttB1 de recombinación Gateway en el extremo 5’ y en el extremo 3’ del fragmento p85 iSH2 respectivamente, utilizando cebadores gwG130-p03 (5’- GGGACAAGTT-TGTACAAAAAAGCAGGCTACGAAGGAGATATACATATGCGAGAATATGATAGATT ATATGAAGAAT-3’) y gwG130p05 (5’- ACTGAAGCATCCTCCTC- CTCCTCCT- CCTGGTTTAATGCTGTTCATACGTTTGTC-3’). El fragmento p110 fue obtenido por PCR utilizando como plantilla un clon p110 (de fuente desconocida cuya secuencia fue verificada) utilizando cebadores gwG130- p04 (5’- ATTAAACCAGGAGGAGGAGGAGGAGGATGCTT- CAGTTTCATAATGCCTCCTGCT-3’) el cual contiene secuencias enlazantes y el extremo 5’ de p110 y gwG130- p06

5 (5’- AGCTCCGT- GATGGTGATGGTGATGTGCTCCAGATC- TGTAGTCTTTCCGAA- CTGTGTG- 3’) el cual contiene secuencias del extremo 3’ de p110-fusionado a una etiqueta de Histidina. La proteína de fusión p85- iSH2/ p110 fue ensamblada por una superposición de PCR una reacción de los enlazantes en el extremo 3’ del fragmento iSH2 y el extremo 5’ del fragmento p110 , utilizando el cebador gwG130- p03 mencionado anteriormente y un cebador que contiene una etiqueta de Histidina superpuesta y las secuencias de recombinación de Attb2 (5’

10 GGGACCACTTTGTACAAGAAAGCTGGGTTTAAGCTCCGTGATGGTGATGGTGAT GTGCTCC- 3’). Este producto final fue recombinado en una reacción OR Gateway (Invitrogen) en el vector donante pDONR201 (Invitrogen) para generar el clon de entrada ORF253. Este clon fue verificado por secuenciación y utilizado en una reacción LR Gateway (Invitrogen) para transferir el inserto en el vector adaptado Gateway pBlueBac4.5 (Invitrogen) para generación del vector de expresión de baculovirus LR280. Este LR280 tiene una mutación de aminoácido en la secuencia p85.

15 Dominio de quinasa.

Secuencia de proteína de BV949:

Dominio de quinasa Constructo de PI3Ky y proteína

PI3Ky

BV950 p110y(L143-[Met144-1102] )-His

El constructo obtenido del laboratorio Roger Williams, MRC Laboratory of Molecular Biology, Cambridge, UK (November, 2003). Descripción del constructo en (Pacold, Michael E.; Suire, Sabine; Perisic, Olga; Lara-Gonzalez, Samuel; Davis, Colin T.; Walker, Edward H.; Hawkins, Phillip T.; Stephens, Len; Eccleston, John F.; Williams, Roger L. Crystal structure and functional analysis of Ras binding to its effector phosphoinositide 3-kinase gamma. Cell (2000), 103(6), 931-943). Los constructos carecen del 144 aa terminal N.

Secuencia de proteína de BV950:

Constructo y proteína de PI3K0

10 BV1060: Los productos de PCR para el dominio inter SH2 (iSH2) de la subunidad p85 y para la subunidad p1100 de longitud completa se generaron y fusionaron por superposición por PCR. El producto iSH2 PCR fue generado utilizando como plantilla el ORF318 (véase anteriormente) y los cebadores gwG130-p03 (5’- GGGACAAG-TTTGTACAAAAAAGCAGGCTACGAAGGAGATATACATATGC-GAGAATATGATAGATTATATGAAGAAT-3’) y gwG154p04 (5’- TCCTCCTCCT- CCTCCTCCTGGTTTAATGCTGTTCATACGTTTGTC-3’). El fragmento p1100 fue obtenido a

15 partir de la primera cadena de ADNc generada por RT-PCR a partir de ARN humano comercial de placenta, testículos y cerebro (Clontech), utilizando inicialmente los cebadores gwG154- p01 (5’-ATGCCCCCTGGGGTGGACTGCCCCAT-3’) y gwG154- p02 (5’-CTACTGCCTGT-TGTCTTTGGACACGT- 3’). En una reacción de PCR subsecuente se agregaron las secuencias enlazantes y una etiqueta de Histidina al extremo 5’ y extreme 3’ del fragmento p1100 respectivamente, utilizando cebadores gw154-p03 (5’- ATTAAACCAGGAGGAGGAGGAGGAGGACCCCCTGGGGTGGAC

20 TGCCCCATGGA-3’) y gwG154-p06 (5’-AGCTCCGTGATGGTGATGGTGAT- GTGCT-CCCTGCCTGTTGTCTTTGGACACGTTGT-3’). La proteína de fusión p85- iSH2/ p1100 fue ensamblada en una tercera reacción de PCR por enlazantes de superposición en el extremo 3’ del fragmento iSH2 y el extremo 5’ del fragmento p1100, utilizando el cebador antes mencionado gwG130-p03 y un cebador que contiene una etiqueta de Histidina superpuesta y las secuencias de recombinación AttB2 Gateway (Invitrogen) (5’-GGGACCACTTTGTACAAGAAAGCTGGGTTTAA-GCTCCGTGATGGTGATGGTGAGTGCTCC- 3’). Este producto final fue recombinado en una reacción OR Gateway en el vector donador pDONR201 (Invitrogen) para generar el clon de entrada ORF319. Este clon fue verificado por secuenciación y utilizado en una reacción LR Gateway (Invitrogen) para transferir el inserto en el vector adaptado pBlueBac4.5 Gateway (Invitrogen) para la generación del vector de expresión de baculovirus LR415.

Secuencia de proteína de BV1060:

Purificación de los constructos de PI3Ka, PI3K y PI3Ky

10 PI3Ka, PI3K y PI3Ky fueron purificados en dos etapas cromatográficas: cromatografía de afinidad inmovilizada de metal (IMAC) en una resina de sefarosa Ni (GE Healthcare) y filtración por gel utilizando una columna Superdex 200 26/60 (GE Healthcare). Todos los reguladores fueron enfriados a 4°C y se llevó a cabo la lisis con enfriamiento sobre hielo. El fraccionamiento por columna fue realizado a temperatura ambiente. Todos los reguladores usados para purificar PI3K contenían 0.05% de Triton X100 además de lo que se describe más adelante.

15 Típicamente se resuspendieron células congeladas a partir de 10 L de cultivo de células Tn5 en "Regulador de Lisis " Tris-Cl 20 mM, pH 7.5, NaCl 500 mM, glicerol al 5%, imidazol 5 mM, NaF 1 mM, ácido ocadaico (OAA) 0.1 ug/mL, BME 5 mM, 1 x cóctel inhibidor de proteasa completo - libre de EDTA (20 tabletas/1 Litro de regulador, Roche Applied Sciences), benzonasa (regulador 25U/mL, EMD Biosciences) a una relación de 1:6 v/v en pellas a relación de Regulador de Lisis, y se sometieron a lisis mecánicamente 20 impactos utilizando una mano de mortero. El lisado fue centrifugado a

20 45,000 g durante 30 minutos, y el sobrenadante fue cargado sobre una columna IMAC preequilibrada (3 mL de resina/100 mL de lisado). La columna fue lavada con 3-5 volúmenes de Regulador de Lisis, seguido por un segundo lavado de 3-5 volúmenes de columna con Tris-Cl 20 mM, pH 7.5, NaCl 500 mM, glicerol al 5%, imidazol 45 mM, NaF 1 mM, OAA 0.1 Ig/mL, BME 5 mM, 1x cóctel inhibidor de proteasa completo – libre de EDTA. La proteína fue eluida con Tris-Cl 20 mM, pH 7.5, NaCl 0.5 M, glicerol al 5%, imidazol 250 mM, NaF 1 mM, OAA0.1 Ig/mL, BME 5 mM, 1x cóctel inhibidor de proteasa completo – libre de EDTA. Las fracciones pertinentes fueron analizadas por SDS-PAGE y reunidas concordantemente. La proteína fue purificada adicionalmente por filtración por gel sobre una columna Superdex 200 26/60 equilibrada en Tris-Cl 20 mM, pH 7.5, NaCl 0.5 M, glicerol al 5%, NaF 1 mM, DTT 5 mM, 1x cóctel inhibidor de proteasa completo – libre de EDTA. Las fracciones pertinentes fueron analizadas por SDS-PAGE y reunidas concordantemente. Se agregó un volumen igual de Regulador de Diálisis (Tris-Cl 20 mM, pH 7.5, NaCl 500 mM, glicerol al 50%, NaF 5 mM, DTT 5 mM) al conjunto y luego se dializó contra el Regulador de Diálisis en dos cambios (un cambio durante la noche). La proteína fue almacenada a -20°C.

Purificación de PI3K0

El PI3K0 fue purificado en tres etapas cromatográficas: cromatografía de afinidad inmovilizada con metal sobre una resina de Sefarosa Ni (GE Healthcare), filtración por gel utilizando una columna Superdex 200 26/60 (GE Healthcare), y finalmente una etapa de intercambio iónico sobre una columna Q-HP (GE Healthcare). Todos los reguladores fueron enfriados a 4 ºC y la lisis se llevó a cabo enfriada sobre hielo. El fraccionamiento de la columna fue ejecutado a temperatura ambiente.

Se resuspendieron típicamente células congeladas a partir de 10 L de un cultivo de células Tn5 en “Regulador de Lisis” Tris-Cl 20 mM, pH 7.5, NaCl 500 mM, glicerol al 5%, imidazol 5 mM, NaF 1 mM, 0.1 µg/mL de ácido okadaico (OAA), BME 5 mM, 1 x cóctel inhibidor de proteasa completo – libre de EDTA (20 tabletas/1 L de regulador, Roche Applied Sciences), benzonasa (25U/mL de regulador de lisis, EMD Biosciences) a una relación de 1:10 v/v en pellas a la relación de Regulador de Lisis, y se sometieron a lisis mecánicamente 20 impactos utilizando una mano de mortero. El lisado fue centrifugado a 45,000 g durante 30 minutos, y el sobrenadante fue cargado sobre una columna IMAC preequilibrada (5 mL de resina/100 mL de lisado). La columna fue lavada con 3-5 volúmenes de columna de Regulador de Lisis, seguida por un segundo lavado de 3-5 volúmenes de columna con 20 mM Tris-Cl, pH 7.5, NaCl 500 mM, glicerol al 5%, imidazol 40 mM, NaF 1 mM, OAA 0.1ug/mL, BME 5 mM, 1 x cóctel de inhibidor de proteasa completo –libre de EDTA. La proteína fue eluida con Tris-Cl 20 mM, pH 7.5, NaCl 500 mM, glicerol al 5%, imidazol 250 mM, NaF 1 mM, OAA 0.1 Ig/mL, BME 5 mM, 1 x cóctel inhibidor de proteasa completo - libre de EDTA. Las fracciones pertinentes fueron analizadas por SDS-PAGE y reunidas concordantemente. La proteína fue purificada adicionalmente por filtración por gel sobre una Superdex 200 equilibrada en Tris-Cl 20 mM, pH 7.5,NaCl 500 mM, glicerol al 5%, NaF 1 mM, OAA 0.1 ug/mL, DTT 5 mM, 1 x cóctel inhibidor de proteasa completo - libre de Edítalas fracciones pertinentes fueron analizadas por SDS-PAGE y reunidas concordantemente. Estas fracciones fueron diluidas 1:10 v/v de volumen de reserva a una relación de regulador con "Regulador A" Tris-Cl 20 mM, pH 8.2, glicerol al 5%, NaF 1 mM, 0.1 µg/mL OAA, DTT5 mM y cargadas en una columna Q-HP preparada. Después de que la carga de la muestra se completó se lavó con Regulador A y "Regulador B" al 5% Tris-Cl 20 mM, pH 8.2, NaCl 1 M, glicerol al 5%, NaF 1 mM, OAA 0.1 ug/mL, DTT 5 mM con 3-5 volúmenes de columna. Se eluyó la proteína utilizando un gradiente 5%-30% de Regulador B. Típicamente la proteína eluye en NaCl aproximadamente 200 mM. Las fracciones pertinentes fueron analizadas por SDS-PAGE y reunidas concordantemente. Se agregó un volumen igual de Regulador de Diálisis (Tris-Cl 20 mM, pH 7.5, NaCl 500 mM, glicerol al 50%, NaF 1 mM, OAA 0.1 µg/mL, DTT 5 mM) a la reserva y luego se dializó contra Regulador de Diálisis con dos cambios (un cambio durante la noche). La proteína fue almacenada a -20 ºC

Los siguientes resultados se obtuvieron utilizando los ensayos descritos anteriormente.

Ejemplo #

PI3Kalfa IC50 [IM]

117

0.026

124

0.028

107

0.044

88

0.076

122

0.050

46

0.009

47

0.040

102

0.21

48

0.005

119

0.008

40

0.037

49

0.017

65

0.031

80

0.25

110

0.071

114

0.13

74

0.13

54

0.19

98

0.14

111

0.052

112

0.049

129

0.024

101

0.099

11

0.048

(continuación)

Ejemplo #

PI3Kalfa IC50 [IM]

66

0.040

1

0.17

7

0.015

3

0.013

59

0.071

Los siguientes resultados adicionales se obtuvieron utilizando los ensayos descritos anteriormente.

Ejemplo No.

PI3Kalfa/ IC50 [umol I-1] PI3Kdelta/ IC50 [umol I-1] Selectividad PI3Kalfa vs. PI3Kdelta

Ejemplo 133 WO 2004/096797

0.011 0.099 9-veces

9

0.012 452 38-veces

12

0.015 0.974 65-veces

35

0.024 1.739 72-veces

66

0.040 1.273 32-veces

70

0.014 3.450 246-veces

Los siguientes resultados adicionales también fueron obtenidos utilizando los ensayos descritos anteriormente.

Ejemplo No.

PI3Kalfa/ IC50 [umol I-1] PI3Kbeta/ IC50 [umol I-1] PI3Kgamma/ IC50 [umol I-1] PI3Kdelta/ IC50 [umol I-1]

34

0.083 > 9.1 1.98 2.15

35

0.024 7.15 2.32 1.74

37

0.022 7.10 1.70 0.494

151

0.078 0.885 0.928 1.26

Lista de secuencias

<110> Novartis AG

<120> Compuestos Orgánicos

<130> 52407-WO-PCT

<150> EP 07150228.0

<151> 2007-12-20

<160> 20

<170> PatentIn version 3.3

<210> 1

<211> 42

<212> ADN

<213> Artificial

<220>

<223> Cebador para PCR

<400> 1

gctagcatgc gagaatatga tagattatat gaagaatata cc

42

<210> 2

<211> 45

<212> ADN

<213> Artificial

<220>

<223> Cebador para PCR

<400> 2

gcctccacca cctccgcctg gtttaatgct gttcatacgt ttgtc

45

<210> 3

<211> 42

<212> ADN

<213> Artificial

<220>

<223> Cebador para PCR

<400> 3

tactagtccg cctccaccac ctccgcctcc accacctccg cc

42

5

<210> 4

<211> 1180

<212> PRT

<213> Artificial

<220>

10

<223> constructo de PI3K quinasa

<400> 4

<210> 5

<211> 28

<212> ADN

<213> Artificial

<220>

<223> Cebador para PCR

<400> 5

cgagaatatg atagattata tgaagaat

28

<210> 6

<211> 30

<212> ADN

<213> Artificial

<220>

<223> Cebador para PCR

<400> 6

tggtttaatg ctgttcatac gtttgtcaat

30

<210> 7

<211> 76

<212> ADN

<213> Artificial

<220>

<223> Cebador para PCR

<400> 7

<210> 8

<211> 54

<212> ADN

<213> Artificial

<220>

<223> Cebador para PCR

<400> 8

actgaagcat cctcctcctc ctcctcctgg tttaatgctg ttcatacgtt tgtc 54

<210> 9

<211> 54

<212> ADN

<213> Artificial

<220>

<223> Cebador para PCR

<400> 9

attaaaccag gaggaggagg aggaggatgc ttcagtttca taatgcctcc tgct

54

<210> 10

<211> 57

<212> ADN

<213> Artificial

<220>

<223> Cebador para PCR

<400> 10

agctccgtga tggtgatggt gatgtgctcc agatctgtag tctttccgaa ctgtgtg

57

<210> 11

<211> 61

<212> ADN

<213> Artificial

<220>

<223> Cebador para PCR

<400> 11

<210> 12

<211> 1194

<212> PRT

<213> Artificial

<220>

<223> Constructo de PI3K quinasa

<400> 12

<210> 13

<211> 966

<212> PRT

<213> Artificial

<220>

<223> Constructo de PI3K quinasa

<400> 13

<210> 14

<211> 45

<212> ADN

5

<213> Artificial

<220>

<223> Cebador para PCR

<400> 14

tcctcctcct cctcctcctg gtttaatgct gttcatacgt ttgtc

45

10

<210> 15

<211> 26

<212> ADN

<213> Artificial

<220>

<223> Cebador para PCR

<400> 15 atgccccctg gggtggactg ccccat 26

<210> 16

<211> 26

<212> ADN

<213> Artificial

<220>

<223> Cebador para PCR

<400> 16 ctactgcctg ttgtctttgg acacgt 26

<210> 17

<211> 53

<212> ADN

<213> Artificial

<220>

<223> Cebador para PCR

<400> 17 attaaaccag gaggaggagg aggaggaccc cctggggtgg actgccccat gga

<210> 18

<211> 56

<212> ADN

<213> Artificial

<220>

<223> Cebador para PCR

<400> 18

agctccgtga tggtgatggt gatgtgctcc ctgcctgttg tctttggaca cgttgt

56

<210> 19

5

<211> 60

<212> ADN

<213> Artificial

<220>

<223> Cebador para PCR

10

<400> 19

gggaccactt tgtacaagaa agctgggttt aagctccgtg atggtgatgg tgagtgctcc

60

<210> 20

<211> 1169

<212> PRT

15

<213> Artificial

<220>

<223> Constructo de PI3K quinasa

<400> 20

Claims (11)

1. REIVINDICACIONES

   1. Un compuesto de fórmula IA

   5 en donde

   m representa 1;

   R1 representa 4- piridilo sustituido en la posición 2- por un sustituyente seleccionado del grupo consistente de

   fluoro, cloro, ciano, C1- C4- alquilo, per- deutero C1- C7- alquilo, C3- C6- cicloalquilo, C3- C6- cicloalquilo- C1- C4- alquilo, 1(C1- C4- alquilo)- C3- C8- cicloalquilo, 1-(halo- C1- C4- alquilo)-C3- C6-cicloalquilo, 1- (per- deutero- C1- C4- alquilo)-C3-10 C8-cicloalquilo, 1- ciano- C3- C8- cicloalquilo, C1- C4- alquiloxi, hidroxi-C1- C4-alquilo, halo-C1- C4- alquilo, C1- C4-alquiloxi-C1- C4-alquilo, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclopropiloxi, ciclopentiloxi, C1- C4- alquilsulfonilo, C1- C4-alquilsulfanilo, dimetilamino, dietilamino, etil- metil-amino, etil- propil- amino, ciclopropil amino, 2-metoxi- etil- amino, 4- dimetilamino-piperidin- 1-il, metil- (1- metil- piperidin-4- il)- amino, 4- metil- piperazin-1- il, 3-dimetilamino- pirrolidin- 1il, Isopropil-metil- amino, 2- dimetilamino-etil)- metil- amino, 2- azetidin-1-il, 7- aza-biciclo [2.2.1] hept-7- il, 3-aza

   15 biciclo [3.2.2] non-3- il, bencil-etil-amino; 1-(4-C1- C4- alquiloxi- fenilo)- C3- C6- cicloalquilo, (4- C1- C4- alquiloxi-fenilo)-C1- C4- alquilo, 1- fenilo-C3- C8- cicloalquilo, C1- C7- alquilfenilo, C1- C7- alcoxifenilo C1- C7- alquilo, C1- C7- alcoxifenoxi, N, N- dialquilamino alcoxi fenilo, 4-(C1- C7- alquilo)-tetrahidro-pirano- 4-il, bencilo, fenilo o un heterociclo aromático con 5 o 6 átomos de anillo el cual bencilo, fenilo o heterociclo aromático es opcionalmente sustituido por uno o dos sustituyentes seleccionados del grupo consistente de halógeno, C1- C4- alquilo, C1- C4-alquiloxi, halo- C1- C4- alquilo;

   20 R2 representa halo, ciano, nitro, hidroxi, fenilo, C1-C7 alquilo, C1-C7 alcoxi, C1-C7 alquilamino, C1-C7 dialquilamino, C1-C7 dialquilamino C1-C7 alquilo, cicloalquilo, cicloalcoxi en donde cada alquilo o cicloalquilo puede ser mono o poli-sustituido por halo, ciano, nitro, hidroxi, fenilo y en donde cada fenilo puede ser mono o poli-sustituido por halo, ciano, nitro, hidroxi, C1-C7 alquilo; o

   dos sustituyentes R2 juntos forman un alcandiilo o alquenodiilo, cada uno opcionalmente sustituido por hidroxi o halo, 25 para formar una unidad estructural cíclica; o dos sustituyentes R2 forman juntos un enlace para formar un doble enlace;

   R3 representa hidrógeno, C1-C7 alquilo, mono-, poli-o per-deutero C1-C7 alquilo, halo, halo C1-C7 alquilo, hidroxi C1-C7 alquilo, C1-C7 dialquilamino C1-C7 alquilo,

   o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
2. 2. Un compuesto, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, de acuerdo con la reivindicación 1,

   30 en donde R3 representa hidrógeno, metilo, dimetilo, cloro, dimetilamino metilo.

3. 3.

   Un compuesto, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, de acuerdo con la reivindicación 1 o reivindicación 2, en donde R2 representa hidroxi, metilo, fluoro o cloro

4. 4.

   Un compuesto, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, de acuerdo con cualquier reivindicación precedente, en donde el sustituyente R2 está en la posición 2 del anillo de pirrolidina.

5. 5.

   Un compuesto de fórmula I de la reivindicación 1, seleccionado de,

   2-amida 1- { [5- (2- tert-butil- piridin 4-il)-4- metiltiazol-2- il]- amida) del ácido (2S, 4R)- 4- hidroxi- pirrolidin- 1, 2dicarboxílico, 2-amida 1- { [5- (2- tert- butil- piridin 4-il)-4- metiltiazol-2- il]- amida} del ácido (2S, 4S)- 4- hidroxi- pirrolidin- 1, 2

   dicarboxílico,

   2- amida 1- { [5- (2- tert- butil- piridin 4- il)- 4- metil-tiazol- 2- il]- amida} del ácido (S)- 2- metil- pirrolidin- 1, 2- dicarboxílico, 2-amida 1- ( {4- metil-5- [2- (1- metilociclopropil)- piridin 4-il]- tiazol- 2-il}-amida) del ácido (S)- 2- Metil-pirrolidin- 1, 2-

   dicarboxílico,

   2- amida 1- { [5- (2-ciclopropil- piridin 4- il)- 4- metiltiazol- 2- il]- amida} del ácido (S)- 2-Metil-pirrolidin- 1, 2dicarboxílico, 2-amida 1-( {5- [2-(2-fluoro- fenil)- piridin 4- il]- 4- metiltiazol- 2- il} amida) del ácido (S)- 2- Metil- pirrolidin- 1, 2-

   dicarboxílico, 2- amida 1- {[5- (2- ciclobutil-piridin 4- il)-4- metiltiazol- 2-il]- amida} del ácido (S)- 2-Metil- pirrolidin- 1, 2-dicarboxílico, 2- amida 1-( {4- metil-5- [2- (1- metilociclobutil)- piridin 4-il]- tiazol- 2-il}-amida) del ácido (S)- 2-Metil- pirrolidin- 1, 2

   dicarboxílico, 2-amida 1-{[5- (2- isopropil- piridin 4- il)- 4- metil-tiazol-2- il]-amida} del ácido (S)- 2- Metil-pirrolidin- 1, 2- dicarboxílico, 2-amida 1-( {4- metil- 5- [2- (1- trifluorometil- ciclopropil)- piridin 4-il]- tiazol- 2-il}- amida) del ácido (S)- 2- Metil

   pirrolidin- 1, 2-dicarboxílico,

   2-amida 1- ( {4- metil-5- [2- (2, 2, 2-trifluoro-1, 1- dimetiloetilo)- piridin 4- il]- tiazol- 2- il}- amida) del ácido (S)- 2-Metilpirrolidin- 1, 2-dicarboxílico, 2- amida 1- ( {4-metil- 5-[2- (1- trifluorometil-ciclobutil)- piridin 4- il]- tiazol-2-il}- amida) del ácido (S)- 2-Metil- pirrolidin

   1, 2-dicarboxílico,

   2-amida 1- ( {5- [2- (1- ciano-ciclopropil)- piridin 4- il]- 4- metil-tiazol-2- il}-amida) del ácido (S)- 2- Metil- pirrolidin- 1, 2dicarboxílico, 2-amida 1- ( {5- [2- (1- ciano-ciclobutil)- piridin 4-il]- 4-metil- tiazol- 2-il}- amida) del ácido (S)- 2- Metil-pirrolidin- 1, 2

   dicarboxílico,

   2- amida 1- { [5- (2- dietilamino- piridin 4- il)- 4- metiltiazol- 2- il]- amida} del ácido (S)- 2- Metil- pirrolidin- 1, 2dicarboxílico, 2-amida 1- [(5- {2- [1- (4- metoxi- fenil)- 1-metil- etil]-piridin 4- il}- 4-metil- tiazol- 2- il)-amida] del ácido (S)- 2- Metil

   pirrolidin- 1, 2-dicarboxílico,

   2-amida 1- [(5- {2- [1- (4- metoxi-fenil)- ciclopropilo]- piridin 4- il}- 4- metil- tiazol- 2-il)- amida] del ácido (S)- 2-Metil

   pirrolidin- 1, 2-dicarboxílico, 2-amida 1- { [5-(2-{1- [4- (3- dimetilamino-propoxi)- fenil]- 1- metil-etil}- piridin 4- il)- 4- metil- tiazol- 2- il]- amida} del ácido (S)-2- Metil-pirrolidin- 1, 2- dicarboxílico,

   2-amida 1- ( {4- metil-5- [2- (1-d3- metilciclobutil)-piridin 4- il]-tiazol-2- il}-amida) del ácido (S)- 2- Metil- pirrolidin-1, 2

   dicarboxílico, 2-amida 1- ( {4-dimetilaminometil- 5- [2- (1-d3- metilciclobutil)- piridin 4-il]- tiazol- 2- il}-amida) del ácido (S)- 2- Metilpirrolidin- 1, 2-dicarboxílico,

   2-amida 1- ( {5- [2- (2- fluoro- 1, 1- dimetiletil)- piridin 4-il]- 4-metil- tiazol- 2- il}- amida) del ácido (S)-2- Metil- pirrolidin-

   1, 2-dicarboxílico, 2- amida 1-( {4- metil-5- [2- (1- metilciclopropil)- piridin 4-il]- tiazol- 2-il}-amida) del ácido (S)- 4, 4-Difluoro- pirrolidin1, 2-dicarboxílico,

   2- amida 1- { [5-(2-tert-butil- piridin 4-il)-tiazol- 2-il]- amida} del ácido (S)-2- Metil- pirrolidin- 1, 2-dicarboxílico, 2- amida 1- { [5-(2-ciclobutil- piridin 4-il)- tiazol- 2-il]- amida} del ácido (S)- 2-Metil- pirrolidin- 1, 2-dicarboxílico, 2- amida 1- ( {5- [2- (1- metil- ciclopropil)- piridin4- il]- tiazol- 2-il}- amida) del ácido (S)- 2- Metil- pirrolidin- 1, 2

   dicarboxílico,

   2-amida 1- ( {5- [2-(1-trifluorometil- ciclopropil)- piridin 4- il]- tiazol- 2-il} amida) del ácido (S)-2-Metil-pirrolidin- 1, 2dicarboxílico, 2-amida 1- ( {5- [2- (2, 2, 2- trifluoro-1, 1- dimetil-etil)- piridin 4- il]- tiazol- 2- il}- amida) del ácido (S)-2- Metil- pirrolidin-

   1, 2-dicarboxílico,

   2-amida 1- ( {5-[2-(1- trifluorometil- ciclobutil)- piridin 4- il]- tiazol- 2- il}-amida) del ácido (S)- 2-Metil-pirrolidin- 1, 2- dicarboxílico, 2- amida 1-( {5- [2- (1- metil- ciclobutil)- piridin 4- il]- tiazol- 2- il}- amida) del ácido (S)- 2-Metil- pirrolidin- 1, 2

   dicarboxílico, 2- amida 1- { [5-(2-dietilamino- piridin 4-il)- tiazol- 2-il]- amida} del ácido (S)- 2-Metil- pirrolidin- 1, 2- dicarboxílico, 2-amida 1-[(5- {2-[1- (4- metoxi-fenil)- 1- metil- etil]- piridin 4-il}- tiazol- 2-il)- amida] del ácido (S)-2- Metil- pirrolidin- 1,

   2- dicarboxílico,

   2-amida 1- [(5-{2-[1- (4-metoxi-fenil)- ciclopropilo]- piridin 4- il}- tiazol- 2- il)- amida] del ácido (S)- 2-Metil- pirrolidin- 1, 2- dicarboxílico, 2-amida 1- ( {5- [2- (1-d3-metil- ciclobutil)- piridin 4-il]-tiazol- 2- il}- amida) del ácido (S)- 2- Metil- pirrolidin- 1, 2-

   dicarboxílico,

   2- amida 1-( {4- d3-metil-5- [2- (1- metilociclopropil)- piridin 4-il]- tiazol- 2- il}- amida) del ácido (S)-2- Metil- pirrolidin- 1, 2- dicarboxílico, 2- amida 1-( {4-d3-metil-5-[2- (2, 2, 2- trifluoro- 1, 1- dimetil- etil)- piridin 4-il]- tiazol-2- il}- amida) del ácido (S)-2-

   Metil- pirrolidin- 1, 2-dicarboxílico,

   2-amida 1- ({4- cloro- 5- [2-(1- metilociclopropil)- piridin 4- il]- tiazol- 2-il}- amida) del ácido (S)- 2- Metil-pirrolidin- 1, 2dicarboxílico.
6. 6. Un compuesto de la fórmula I de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en forma libre o en forma de sal farmacéuticamente aceptable, como un producto farmacéutico.

   5 7. Un compuesto de la fórmula I de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en forma libre o en forma de sal farmacéuticamente aceptable, para uso en el tratamiento del cáncer.

7. 8.

   Uso de un compuesto de fórmula I de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en forma libre o en forma de sal farmacéuticamente aceptable, para la manufactura de un medicamento para el tratamiento del cáncer.

8. 9.

   Una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de fórmula I

   10 de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en forma libre o en forma de sal farmacéuticamente aceptable, como ingrediente activo; uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables.
9. 10. Una composición farmacéutica combinada, adaptado para la administración simultánea o secuencial, que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de fórmula I de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 en forma libre o en forma de sal farmacéuticamente aceptable; cantidad(s) terapéuticamente

   15 efectiva de uno o más asociados de la combinación, uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables.

10. 11.

    Una composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 9 o una composición farmacéutica combinada de acuerdo con la reivindicación 10 para uso en el tratamiento del cáncer

11. 12.

    Un procedimiento para la manufactura de un compuesto de la fórmula I, de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 que comprende hacer reaccionar un compuesto de fórmula II

    en donde los sustituyentes son como se define en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, bien con un compuesto de fórmula IIIA

    en donde los sustituyentes son como se define en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 y R3 puede representar 25 adicionalmente Cloro, en la presencia de un agente de activación ("método A") o con un compuesto de fórmula IIIB

    en donde R1 es como se define en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5; RG representa un grupo reactivo (tal como imidazolilcarbonilo) y

    R3 es como se define en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 y puede representar adicionalmente Cloro, 5 ("método B"),

    en cada caso opcionalmente en la presencia de un diluyente y opcionalmente en la presencia de un auxiliar de reacción y

    recuperar opcionalmente el compuesto resultante de fórmula I en forma libre o en forma de una sal y,

    convertir opcionalmente un compuesto de la fórmula I obtenible de acuerdo con el método A o método B en un

    10 compuesto diferente de la fórmula I, y/o convertir una sal obtenible de un compuesto de la fórmula I en una sal diferente del mismo, y/o convertir un compuesto libre obtenible de la fórmula I en una sal del mismo, y/o separar un isómero obtenible de un compuesto de la fórmula I a partir de uno o más isómeros obtenibles diferentes de la fórmula I.