ES2383792T3 - Procedimiento y productos intermedios - Google Patents

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ES2383792T3 ES01975197T ES01975197T ES2383792T3 ES 2383792 T3 ES2383792 T3 ES 2383792T3 ES 01975197 T ES01975197 T ES 01975197T ES 01975197 T ES01975197 T ES 01975197T ES 2383792 T3 ES2383792 T3 ES 2383792T3
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Ann M. Eldridge
Johann Hiebl
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Abstract

Un procedimiento para la preparación de los compuestos de Fórmula I en la que L es o en la que 10 R1 es H, metilo o etilo; M es un enlace directo, CH2, a es 0 o un número entero de 1 a 9 cuando M es un enlace directo con la condición de que cuando M es uno o más átomos de carbono a es 0 o un número entero de 1 a 8; d es un número entero de 3 a 8; y 2 es H o SR2, en el que R2 es alquilo lineal, alquilo ramificado, alquilo cíclico, arilo, arilo sustituido o heterocíclico; que comprende las etapas de: (1) la reacción de una sal de un ácido mercaptoalcanoico de Fórmula II en la que L es como se ha definido anteriormente; y los tiolsulfonatos de Fórmula III en la que Q es H, alquilo lineal, alquilo ramificado, alquilo cíclico, arilo, arilo sustituido o heterocíclico, en una reacción de formación de disulfuro en la que la sal sódica de un compuesto de Fórmula II en agua se añade lentamente a un compuesto de Fórmula III en tetrahidrofurano en un intervalo de temperatura entre aproximadamente -15 ºC y aproximadamente -5 ºC para formar los productos intermedios de Fórmula IV en la que L y Q son como se han definido anteriormente; y (2) la reacción de un compuesto de Fórmula IV en una reacción de esterificación con un reactivo de acoplamiento de Fórmula V en la que R3 es H o sal de uronio sustituido de fórmula en la que X- es PF6 - oBF4 -, R7 y R8 son independientemente alquilo, cicloalquilo o (CH2) e, en el que e es un número entero de 3 a 8 con la condición de que cuando R7 es (CH2) e, R8 es un enlace directo o una sal de fosfonio sustituido de fórmula en la que X--es PF6 -o BF4 -, R9 y R10 son independientemente alquilo lineal, alquilo ramificado, cicloalquilo o heterocíclico; y R4 y R5 son independientemente H, alquilo lineal, alquilo ramificado, cicloalquilo, arilo, arilo sustituido o heterocíclico, o R4 y R5 tomados en conjunto forman un enlace, con la condición de que cuando R3 es H, la reacción se lleva a cabo en presencia de un reactivo carbodiimida de Fórmula VI en la que R11 y R12 son independientemente alquilo lineal, alquilo ramificado, cicloalquilo, arilo, arilo sustituido o heterocíclico, o R11 es etilo y R12 es dimetilaminopropilo tal que el reactivo carbodiimida de Fórmula (VI) es hidrocloruro de 1-[3- (dimetilamino) propil]-3-etilcarbodiimida (EDCI.HCl) y adicionalmente con la condición de que si R3 es una sal de uronio o de fosfonio, la reacción se lleva a cabo en presencia de una base, para formar los compuestos de Fórmula VII en la que R4, R5, L y Q son como se han definido anteriormente; y (3) la reacción de los compuestos de Fórmula VII con N-metil-L-alanina (Formula VIII) para formar un compuesto de Fórmula I.

Description

Procedimiento y productos intermedios
Campo de la invención
La presente invención se refiere a un procedimiento para la producción de derivados de N-metil-L-alanina y a un procedimiento novedoso para los productos intermedios.
Antecedentes de la invención
Se han presentado los procedimientos para la preparación de los derivados de N-metil-L-alanina a partir de los productos intermedios del ácido ditioalcanoico y de N-metil-L-alanina en el documento de Patente de los Estados Unidos de América Nº 5.208.020. Los compuestos son útiles para el enlace de los maitansinoides citotóxicos con los agentes aglutinantes celulares tales como los anticuerpos. Los complejos de anticuerpo/maitansinoide son útiles como profármacos activados por los tumores.
Se ha desvelado, por ejemplo, la síntesis en etapas múltiples del N-metil-N-(3-metilditio-propanoíl)-L-alanina. Primero, el ácido 3-metilditiopropanoico se preparó mediante la adición de metanotiosulfonato de metilo en etanol a una disolución de ácido 3-mercaptopropanoico en agua. Después de la extracción, el lavado y la concentración, el ácido 3-metilditiopropanoico se aisló por destilación. Se añadieron cloroformiato de isobutilo y trietilamina al ácido 3-metilditiopropanoico en THF para formar el correspondiente anhídrido mixto como producto intermedio. Posteriormente, se añadió una mezcla de N-metil-L-alanina y trietilamina en agua. Después de la extracción, la concentración y la cromatografía, se obtuvo N-metil-N-(3-metilditio-propanoíl)-L-alanina con un rendimiento del 34%.
Una deficiencia principal de los procedimientos de la técnica anterior es la necesidad de dos etapas de cromatografía para retirar los productos secundarios de los productos de reacción deseados. Adicionalmente, el uso de cloroformiato de isobutilo en el esquema de la reacción permite la racemización lo que conduce a un producto final que contiene el enantiómero D no deseado. De esta manera, es necesario, en la técnica para los procedimientos mejorados, preparar los derivados de N-metil-L-alanina con un exceso enantiomérico (ee) de pureza óptica > 95% en la que los productos intermedios son más estables, dando como resultado menos productos secundarios no deseados.
Sumario de la invención
Un aspecto de la invención se refiere a los procedimientos para la preparación de los derivados de N-metil-L-alanina.
Otro aspecto de la invención se refiere a los productos intermedios novedosos útiles para la preparación de los derivados de N-metil-L-alanina.
Otro aspecto aún de la invención se refiere a la preparación de los complejos de agente aglutinante celular/maitansinoide a partir de los derivados de N-metil-L-alanina o de los productos intermedios novedosos producidos mediante los procedimientos de la invención.
Descripción detallada de la invención
Mediante el término "reactivo de acoplamiento" como se usa en el presente documento y en las reivindicaciones se quiere decir un compuesto o compuestos que son capaces de formar un derivado activado del ácido metilditiopropiónico o de sus homólogos que es estable a la hidrólisis en las condiciones de reacción empleadas y que produce un compuesto de Fórmula I con un ee de pureza óptica > 95% cuando reacciona con N-metil-L-alanina.
La presente invención proporciona un procedimiento para la preparación de los compuestos de Fórmula I
en la que L es
o
en la que R1 es H, metilo o etilo; M es un enlace directo, CH2,
a es 0 o un número entero de 1 a 9 cuando M es un enlace directo con la condición de que cuando M es uno o más átomos de carbono a es 0 o un número entero de 1 a 8; d es un número entero de 3 a 8; y Z es H o SR2, en el que R2 es alquilo lineal, alquilo ramificado, alquilo cíclico, arilo, arilo sustituido o heterocíclico.
10 La presente invención también proporciona los productos intermedios novedosos que son útiles en el procedimiento de la invención.
La presente invención también proporciona la preparación de los complejos de anticuerpo/maitansinoide mediante el procedimiento de la invención.
El procedimiento de la invención comprende las etapas de la reacción de una sal de un ácido mercaptoalcanoico de 15 Fórmula II
en la que L es como se ha definido anteriormente; y los tiolsulfonatos de Fórmula III
20 en la que Q es H, alquilo lineal, alquilo ramificado, alquilo cíclico, arilo, arilo sustituido o heterocíclico, en una reacción de formación de disulfuro en la que la sal sódica de un compuesto de Fórmula II en agua se añade lentamente a un compuesto de Fórmula III en tetrahidrofurano en un intervalo de temperatura entre aproximadamente -15 ºC y aproximadamente -5 ºC para formar los productos intermedios de Fórmula IV
25 en la que L y Q son como se han definido anteriormente; y la reacción de un compuesto de Fórmula IV en una reacción de esterificación con un reactivo de acoplamiento tal como el de Fórmula V
en la que 30 R3 es H o una sal de uronio sustituida de fórmula en la que X- es PF6 -o BF4 -, R7 y R8 son independientemente alquilo lineal, alquilo ramificado, cicloalquilo o (CH2)e en el que e es un número entero de 3 a 8 con la condición de que cuando R7 es (CH2)e, R8 es un enlace directo o una sal de fosfonio sustituida de fórmula
en la que X- es FF6 -oBF4 -, R9 y R10 son independientemente alquilo lineal, alquilo ramificado, cicloalquilo o heterocíclico; y R4 y R5 son independientemente H, alquilo lineal, alquilo ramificado, alquilo cíclico, arilo, arilo sustituido
o heterocíclico o R4 y R5 tomados en conjunto forman un enlace.
Si R3 es H, la reacción se lleva a cabo en presencia de un reactivo de carbodiimida de Fórmula VI
en la que R11 y R12 son independientemente alquilo lineal, alquilo ramificado, alquilo cíclico, arilo, arilo sustituido o heterocíclico o R11 es etilo y R12 es dimetilaminopropilo tal que el reactivo carbodiimida de Fórmula (VI) es hidrocloruro de 1-[3-(dimetilamino)propil]-3-etilcarbodiimida (EDCLHCI). Preferentemente, el reactivo carbodiimida de Fórmula VI es
15 hidrocloruro de 1-[3-(dimetilamino)propil]-3-etilcarbodiimida (EDCI-HCl) en la que R11 es etilo y R12 es dimetilaminopropilo o 1,3-diciclohexilcarbodiimida (DCC) en la que R11 y R12 son ciclohexilo. Se prefiere particularmente EDCI HCl.
Como alternativa, si R3 es una sal de uronio o de fosfonio, la reacción se lleva a cabo en presencia de una base, preferentemente trietilamina o diisopropiletilamina.
20 Estas reacciones forman compuestos de Fórmula VII
en la que R4, R5, L y Q son como se han definido anteriormente. La invención proporciona un compuesto de Fórmula VII
en la que R4 y R5 son independientemente H, alquilo lineal, alquilo ramificado, alquilo cíclico, arilo, arilo sustituido o heterocíclico
o R4 y R5 tomados en conjunto forman un enlace,
L es o
en la que
10 R1 es H, metilo o etilo; M es CH2,
o
15 a es 0 o un número entero de 1 a 8;
d es un número entero de 3 a 8; y
Q es H, alquilo lineal, alquilo ramificado, alquilo cíclico, pirrolilo, furilo o tiofeno.
Los compuestos de Fórmula VII son ésteres activados y son productos intermedios novedosos del procedimiento de la
invención y son estables a la hidrólisis en las condiciones de reacción empleadas y permiten el acoplamiento sin 20 racemización con N-metil-alanina.
Preferentemente, los compuestos son cristalinos.
Los compuestos de Fórmula VII reaccionan posteriormente con N-metil-L-alanina (Fórmula VIII)
para formar un compuesto de Fórmula I.
Adicionalmente, la presente invención también incluye un procedimiento para la preparación de los compuestos de Fórmula I que comprende la reacción de un compuesto de Fórmula VII con N-metil-L-alanina para formar un compuesto de Fórmula I y los compuestos de Fórmula I se preparan mediante el procedimiento.
Los ejemplos de alquilos lineales incluyen metilo, etilo, propilo, butilo, pentilo y hexilo. Los ejemplos de alquilos ramificados incluyen isopropilo, isobutilo, sec-butilo, terc-butilo, isopentilo y 1-etil-propilo. Los ejemplos de alquilos cíclicos incluyen ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo y ciclohexilo.
Los ejemplos de arilos incluyen fenilo y naftilo. Los ejemplos de arilos sustituidos incluyen los arilos sustituidos con alquilo, halógeno (tal como cloro, bromo y yodo), nitro, amino, ácido sulfónico, ácido carboxílico, hidroxi y alcoxi.
Los heteroátomos se seleccionan entre O, N y S. Los ejemplos de heterociclos incluyen pirrolilo, piridilo, furilo y tiofeno.
Los compuestos de Fórmula II y sus sales se pueden preparar mediante los procedimientos conocidos a partir de los materiales de partida fácilmente disponibles como se ha descrito en el documento de Patente de los Estados Unidos de América Nº 5.208.020.
Los compuestos de Fórmula III tales como metanotiolsulfonato de metilo y bencenotiolsulfonato de S-fenilo se pueden adquirir en compañías de suministro químico tales como Aldrich Chemical Co. (Milwaukee, WI) o se pueden preparar a partir de los materiales de partida fácilmente disponibles mediante los procedimientos de oxidación de disulfuro tal como se ha descrito en Xia y col., Synth. Commun. 27, 1301 - 1308 (1997) y Pinnick y col., J Org. Chem. 45, 930-932 (1980) con la condición de que Q no incluya cualquier resto que deje no operativo el procedimiento de la invención.
Los compuestos ejemplo de Fórmula V son:
N-hidroxisuccinimida (Va); tetrafluoroborato de O-(N-succinimidilo)-1,1,3,3-bis(tetrametilen)uronio o su correspondiente hexafluorofosfato (Vb); tetrafluoroborato de O-(N-succinimidilo)-1,1,3,3-tetrametiluronio o su correspondiente hexafluorofosfato (Vc);
Los compuestos de Fórmula V se pueden adquirir en compañías de suministro químico tales como Fluka Chemical Corp. (Milwaukee, WI) o se pueden preparar mediante los procedimientos conocidos a partir de los materiales de partida fácilmente disponibles. Por ejemplo, los compuestos de Fórmula V se pueden preparar mediante el procedimiento de Knorr y col. en Tetrahedron Lett. 30, 1927 - 1930 (1989).
Los compuestos de Fórmula VI se pueden adquirir en compañías de suministro químico tales como Aldrich Chemical Co. (St. Louis, MO) o se pueden preparar mediante los procedimientos conocidos a partir de los materiales de partida fácilmente disponibles.
El compuesto de Fórmula VII (N-metil-L-alanina) se puede adquirir en BACHEM Bioscience Inc. (King of Prussia, PA).
La reacción para convertir los compuestos de Fórmula II en los compuestos de Fórmula IV se lleva a cabo mediante la adición de una disolución acuosa de una sal de un compuesto de Fórmula II a un compuesto de Fórmula III en un disolvente orgánico polar immiscible en agua, preferentemente en un intervalo de temperatura menor que -5 ºC. Más preferentemente, una disolución acuosa de la sal sódica de un compuesto de Fórmula II se añade lentamente a una disolución del compuesto de Fórmula III en tetrahidrofurano en un intervalo de temperatura entre aproximadamente -15 ºC y aproximadamente -5 ºC. Un intervalo de temperatura preferido particularmente es entre aproximadamente -10 ºC y aproximadamente -5 ºC.
Preferentemente, la reacción para convertir los compuestos de Fórmula IV en los ésteres activados de Fórmula VII, cuando R3 en la Fórmula V es H, se lleva a cabo en presencia de un reactivo carbodiimida en un intervalo de temperatura entre aproximadamente 0 ºC y aproximadamente 20 ºC, preferentemente entre aproximadamente 0 ºC y aproximadamente 12 ºC, en un disolvente tal como cloruro de metileno. Cuando R3 en la Fórmula V es una sal de uronio o de fosfonio, la reacción se lleva a cabo en presencia de una base, preferentemente trietilamina o diisopropiletilamina.
Preferentemente, la reacción para convertir los compuestos de Fórmula VII en los compuestos de Fórmula I se lleva a cabo a temperatura ambiente en un disolvente polar tal como etanol/trietilamina acuosos.
Los reactivos, las condiciones y los productos intermedios usados en la presente invención proporcionan altos rendimientos de los compuestos deseados de Fórmula I haciendo al procedimiento adecuado para su utilización a escala industrial. Adicionalmente, el procedimiento de la invención tiene otras ventajas sobre los procedimientos desvelados en el documento de Patente de los Estados Unidos de América Nº. 5.208.020. Específicamente, el 5 procedimiento reivindicado convierte los compuestos de Fórmula II en los compuestos de Fórmula IV sin la formación de los productos secundarios no deseados de disulfuros simétricos o de ácido tiopropriónico o de sus homólogos. En consecuencia, no se necesita la etapa de aislamiento para los compuestos de Fórmula IV y se puede usar un procedimiento de una sola etapa para convertir los compuestos de Fórmula II en los productos intermedios novedosos de Fórmula VII, que se pueden aislar. Como alternativa, el producto intermedio de Fórmula VII no se aísla y se puede 10 usar un procedimiento de una sola etapa para convertir los compuestos de Fórmula II en los compuestos de Fórmula I.
Adicionalmente, el procedimiento reivindicado produce los ésteres activados de Fórmula VII que son cristalinos y estables a la hidrólisis. En consecuencia, los compuestos de Fórmula I producidos mediante la reacción de N-metil-L-alanina con los compuestos de Fórmula VII son esencialmente los isómeros L ópticamente puros.
Más preferentemente, el procedimiento de la presente invención se usa para la preparación de un compuesto de 15 Fórmula Ia que es N-metil-N-(3-metilditiopropanoíl)-L-alanina.
El procedimiento preferido se muestra de manera esquemática a continuación.
El procedimiento de la invención se puede usar para preparar los complejos de agente aglutinante 20 celular/maitansinoide que son útiles como profármacos activados por los tumores. Los compuestos de Fórmula VII se pueden convertir en un complejo de agente aglutinante celular/maitansinoide. Adicionalmente, los compuestos de
Fórmula I producidos mediante el procedimiento de la invención se usan como se ha descrito en el documento de Patente de los Estados Unidos de América Nº 5.208.020 para producir N-metil-L-alanina que contiene los derivados de maitansinoide. Estos derivados se conjugan después con los agentes aglutinantes celulares, preferentemente con los anticuerpos, mediante diversos engarces. Preferentemente, el engarce es un enlace disulfuro.
Se puede preparar un complejo ejemplo de agente aglutinante celular/maitansinoide mediante un procedimiento que comprende las siguientes etapas:
(1)
la esterificación de maitansinol con un compuesto de Fórmula I preparado mediante el procedimiento de la invención para formar un éster maitansinoide que contiene disulfuro;
(2)
la reducción del éster maitansinoide que contiene disulfuro preparado mediante la etapa (1) a un maitansinoide que contiene tiol;
(3)
la introducción de grupos ditiopiridilo en un agente aglutinante celular; y
(4)
el enlace del maitansinoide que contiene tiol producido en la etapa (2) con el agente aglutinante celular de ditiopiridilo de la etapa (3) mediante un enlace disulfuro.
La presente invención se describirá ahora con referencia al siguiente ejemplo específico, no limitante.
Ejemplo
Preparación de N-metil-N-(3-metilditiopropanoíl)-L-alanina (Ia)
Todos los reactivos utilizados en el presente documento fueron obtenidos por primera vez como se ha descrito a continuación.
Etapa 1: Preparación de ácido metilditiopropiónico (IVa)
Un matraz de fondo redondo con tres bocas, de 3 l, equipado con un agitador de varilla y un termómetro, se cargó con ácido 3-mercaptopropiónico (416,6 g, 3,93 moles, 1 eq, Aldrich Chemical Co., St. Louis, MO) y agua (calidad de HPLC, 1,36 l, 1,36 kg, Burdick & Jackson, Muskegon, MI). Se añadió bicarbonato sódico sólido (362,5 g, 4,31 moles, 1,1 equiv, Mallinckrodt, Phillipsburg, NJ) a una cantidad para controlar la formación de espuma por la desgasificación del dióxido de carbono. La adición fue endotérmica y tardó 1 hora, disminuyendo la temperatura de 20 ºC a 10 ºC. Un matraz de fondo redondo con tres bocas, de 12 l, equipado con un agitador de varilla, un embudo de adición de 2 l, un termómetro y una entrada de nitrógeno se cargó con metanotiolsulfonato de metilo (540,0 g, 441,5 ml, 4,28 moles, 1,09 equiv, Aldrich Chemical Co.) y tetrahidrofurano (3,25 l, 2,89 kg, Burdick & Jackson) y la disolución se enfrió en un baño de etilenglicol/hielo seco entre -8 y -10 ºC y se colocó en una atmósfera de nitrógeno. La disolución acuosa de mercaptopropionato sódico preparada se transfirió al embudo de adición y se añadió a la mezcla de reacción en una cantidad para mantener la temperatura de reacción menor o igual que -5 ºC. En esta escala, la adición tardó 2 horas y el intervalo de temperatura fue entre -10 y -5 ºC. La agitación se continuó en el mismo intervalo de temperatura y después de 15 minutos, un ensayo para el control del procedimiento mediante HPLC mostró la desaparición del ácido 3-mercaptopropiónico. Después de agitar durante 40 minutos, se añadió ácido clorhídrico acuoso (3 N, 500 ml, EM Science, Gibbstown, NJ) a la mezcla de reacción hasta que el pH registró entre 3,0 y 3,5 mediante las tiras indicadoras ColorpHast (intervalo de pH entre 0 y 6). La mezcla de reacción se transfirió a un embudo de decantación de 6 l, se permitió la separación durante 10 minutos y se aisló la fase orgánica superior. La fase acuosa se devolvió al matraz de reacción de 12 l y se añadió cloruro de metileno (1,6 l, 2,18 kg, J.T. Baker, Phillipsburg, NJ). Después de agitar durante 10 minutos, las fases se transfirieron a un embudo de decantación de 6 l y se separó la fase orgánica inferior. Las fases orgánicas se combinaron y se transfirieron a un matraz con tres bocas de 12 l, equipado con un agitador de varilla. Se añadió sulfato de magnesio (1,33 kg) y después de la agitación durante 0,5 horas, la mezcla se filtró a través de un embudo Buchner. El residuo sólido se aclaró con cloruro de metileno (1,6 l, 2,18 kg). Un ensayo de Karl-Fisher del filtrado combinado y aclarado mostró un 0,35% de agua. El filtrado se almacenó durante una noche a 15 ºC. Un perfil de impurezas del procedimiento mediante HPLC para el filtrado mostró un 97% de ácido metilditiopropiónico mediante el porcentaje del área con la presencia del disulfuro del ácido 3-mercaptopropiónico no simétrico.
Etapa 2: Preparación de 3-metilditiopropionato de succinimidilo (VIIa)
El filtrado del ácido metilditiopropiónico se transfirió a un matraz de fondo redondo con tres bocas, de 22 l, y se enfrió a 0 ºC en un baño de hielo y sal. Se añadió hidrocloruro de 1-[3-(dimetilamino)propil]-3-etilcarbodiimida (1,28 kg, 6,68 moles, 1,7 equiv, Aldrich Chemical Co.) durante 40 minutos a través de un embudo para transferencia de polvo y se observó un aumento de temperatura de 10 ºC. Se añadió N-hidroxisuccinimida (525 g, 4,56 moles, 1,16 equiv, Aldrich Chemical Co.) y se añadió durante 8 minutos a través de un embudo y se observó un aumento de temperatura de 2 ºC. Después de agitar durante 1 hora entre 8 y 10 ºC, un ensayo del procedimiento mediante HPLC mostró una conversión en 3-metilditiopropionato de succinimidilo del 66,7% mediante un porcentaje del área; después de 2 horas, el ensayo mostró una conversión del 98,4%. La reacción se interrumpió después de 2,5 horas y la mezcla de reacción se concentró con un aspirador de agua a presión. El jarabe resultante se transfirió a un matraz de fondo redondo con tres bocas, de 22 l, y se añadió agua (8,3 l, 8,3 kg, Burdick & Jackson) mientras que la mezcla se agitó vigorosamente. Después de agitar durante 0,5 horas a temperatura ambiente, el sólido blanco que se formó se filtró usando un embudo de vidrio sinterizado. La torta húmeda de 1201 g se lavó con agua (2,1 l, 2,1 kg, Burdick & Jackson) y se secó durante 94 horas entre 20 y 25 ºC a aproximadamente 2 torr hasta pesada constante en un horno de vacío GMP. El secado
produjo 927 g del producto 3-metilditiopropionato de succinimidilo (94,7% de rendimiento en bruto) en forma de un sólido de color blanco con un perfil de impurezas mediante HPLC mostrando un 94,6% mediante el porcentaje del área
y un espectro RMN que fue el mismo que el de la referencia de trabajo.
C, H, N Análisis: Calculado: C 38,54; H 4,45; N 5,62; Encontrado: C 38,20; H 4,48; N 5,58; RMN 13C (75 MHz, CDCl3) : δ 169,0, 167,1, 31,5, 31,1, 25,6, 23,2
S 25,67 S 25,44
Etapa 3: Preparación de N-metil-N-(3-metilditiopropanol)-L-alanina (Ia)
Un matraz de fondo redondo con tres bocas, de 22 l, equipado con un agitador de varilla, un embudo de adición de 2 l, un termómetro y una entrada de nitrógeno se cargó con 3-metilditiopropionato de succinimidilo (920 g, 3,69 moles, 1 equiv.) y etanol (graduación del 100%, 11,0 l, 8,69 kg, Aaper, Shelbyville, KY). Se añadieron N-metil-L-alanina (496,8 g, 4,82 moles, 1,3 equiv, BACHEM Bioscience Corp., King of Prussia, PA) y agua (1,1 l, 1,1 kg, Burdick & Jackson) a temperatura ambiente. El lodo blanco resultante se puso en nitrógeno y trietilamina (1,0 l, 0,73 kg, 7,21 moles, 1,96 equiv, Aldrich Chemical Co.) y después se añadió una cantidad tal que la temperatura no superó los 27 ºC. La adición de trietilamina en esta escala duró 4,25 horas. Un ensayo para el control del procedimiento mediante HPLC después de 1,75 horas de la adición de trietilamina mostró una conversión en N-metil-N-(3-metilditiopropanoíl)-L-alanina al 80,8%. Los ensayos posteriores después de 3 horas de la adición mostraron una conversión al 96,1% y una conversión al 99% después de 4,25 horas.
La mezcla de reacción se concentró durante 16 horas usando una bomba de diafragma de 35 a 40 ºC. El HPLC del concentrado mostró un pico de desarrollo tardío que se supuso que correspondía al éster etílico del producto. Se añadió acetato de etilo (7,0 l, 6,3 kg, J.T. Baker) y la mezcla se enfrió en un baño de hielo a 15 ºC. Se añadió agua (3,0 l, 3,0 kg, Burdick & Jackson) y se observó una exotermia de 2 ºC. El pH, medido con papel indicador ColorpHast, se ajustó de 6,5 a 3 usando ácido clorhídrico acuoso (3 N, 1,4 l, EM Science). La mezcla total de reacción se transfirió a un embudo de decantación de 12 l y se aisló la fase orgánica superior. La fase acuosa se devolvió al matraz de reacción y se extrajo dos veces con acetato de etilo (2 x 3,0 l, en total 5,52 kg, J.T. Baker). Las fases orgánicas combinadas se lavaron dos veces con agua (2 x 2,0 l, en total 4,0 kg, Burdick & Jackson) y se transfirieron a un matraz de fondo redondo con tres bocas, de 22 l, equipado con una varilla agitadora y un termómetro. La disolución se enfrió en un baño de hielo a 15 ºC y se añadió sulfato de magnesio (1,25 kg, Mallinckrodt) y se anotó una exoterma de 10 ºC. Después de agitar durante 30 minutos, la mezcla se filtró a través de un embudo de vidrio sinterizado de 2 l y el residuo se lavó con acetato de etilo (1,0 l, 0,92 kg, J.T. Baker). El filtrado se concentró al vacío de 30 a 35 ºC a presión de aspiración de agua. El concentrado se suspendió en hexano (3,1 l, 2,04 kg, J.T. Baker), se agitó durante 2 horas y se filtró a través de un embudo Buchner. Los sólidos se aclararon con hexano (1,0 l, 0,70 kg, J.T. Baker) y se secaron hasta pesada constante en un horno de vacío GMP a 25 ºC durante 26 horas para producir N-metil-N-(3-metilditio-propanoíl)-L-alanina en forma de un sólido de color blanco, 585,5 g (rendimiento sin corregir del 66,9%). Un ensayo quiral del producto con HPLC mostró un isómero L al 99,75% y un perfil de impureza mostró N-metil-N-(3-metilditiopropanoil)-L-alanina al 99,13%.
C, H, N Análisis: Calculado: C 40,49; H 6,37; N 5,90; S 26,97 Encontrado: C 40,60; H 6,20; N 5,73; S 26,81
La presente invención se puede incluir en otras formas específicas sin apartarse del espíritu o de los atributos esenciales de la misma y, en consecuencia, se debería hacer referencia a las reivindicaciones adjuntas, más que a la especificación anterior, como se indica dentro del alcance de la invención.

Claims (10)

  1. REIVINDICACIONES
    1. Un procedimiento para la preparación de los compuestos de Fórmula I
    en la que 5 L es
    o
    en la que 10 R1 es H, metilo o etilo; M es un enlace directo, CH2,
    a es 0 o un número entero de 1 a 9 cuando M es un enlace directo con la condición de que cuando M es uno o más átomos de carbono a es 0 o un número entero de 1 a 8;
    15 d es un número entero de 3 a 8; y 2 es H o SR2, en el que R2 es alquilo lineal, alquilo ramificado, alquilo cíclico, arilo, arilo sustituido o heterocíclico; que comprende las etapas de:
    (1) la reacción de una sal de un ácido mercaptoalcanoico de Fórmula II
    en la que L es como se ha definido anteriormente; y los tiolsulfonatos de Fórmula III
    en la que Q es H, alquilo lineal, alquilo ramificado, alquilo cíclico, arilo, arilo sustituido o heterocíclico, en una reacción de formación de disulfuro en la que la sal sódica de un compuesto de Fórmula II en agua se añade lentamente a un compuesto de Fórmula III en tetrahidrofurano en un intervalo de temperatura entre aproximadamente -15 ºC y aproximadamente -5 ºC para formar los productos intermedios de Fórmula IV
    en la que L y Q son como se han definido anteriormente; y
    (2) la reacción de un compuesto de Fórmula IV en una reacción de esterificación con un reactivo de acoplamiento de Fórmula V
    en la que R3 es H o sal de uronio sustituido de fórmula
    en la que X- es PF6 - oBF4 -, R7 y R8 son independientemente alquilo, cicloalquilo o (CH2)e, en el que e es un número entero de 3 a 8 con la condición de que cuando R7 es (CH2)e, R8 es un enlace directo o una sal de fosfonio sustituido de fórmula
    en la que X--es PF6 -o BF4 -, R9 y R10 son independientemente alquilo lineal, alquilo ramificado, cicloalquilo o heterocíclico; y R4 y R5 son independientemente H, alquilo lineal, alquilo ramificado, cicloalquilo, arilo, arilo sustituido o heterocíclico, o R4 y R5 tomados en conjunto forman un enlace, con la condición de que cuando R3 es H, la reacción se lleva a cabo en presencia de un reactivo carbodiimida de Fórmula VI
    en la que
    R11 y R12 son independientemente alquilo lineal, alquilo ramificado, cicloalquilo, arilo, arilo sustituido o heterocíclico, o R11 es etilo y R12 es dimetilaminopropilo tal que el reactivo carbodiimida de Fórmula (VI) es hidrocloruro de 1-[3-(dimetilamino)propil]-3-etilcarbodiimida (EDCI.HCl) y adicionalmente con la condición de que si R3 es una sal de uronio o de fosfonio, la reacción se lleva a cabo en presencia de una base, para formar los compuestos de Fórmula VII en la que R4, R5, L y Q son como se han definido anteriormente; y
    (3) la reacción de los compuestos de Fórmula VII con N-metil-L-alanina (Formula VIII)
    para formar un compuesto de Fórmula I.
  2. 2. El procedimiento de la reivindicación 1 en la que compuesto de Fórmula II tiene la estructura
    el compuesto de Fórmula III tiene la estructura
    10 el compuesto de Fórmula IV tiene la estructura
    el compuesto de Fórmula V tiene la estructura
    el compuesto de Fórmula VI tiene la estructura
    el compuesto de Fórmula VII tiene la estructura
    y el compuesto de Fórmula I tiene la estructura
  3. 3.
    El procedimiento de la reivindicación 1 en la que el reactivo carbodiimida de Fórmula VI es hidrocloruro de 1-[3-(dimetilamino)propil]-3-etilcarbodiimida (EDCI-HCl) o dimetilaminopropilo o 1,3-diciclohexilcarbodiimida (DCC).
  4. 4.
    El procedimiento de la reivindicación 3 en la que el reactivo carbodiimida de Fórmula VI es EDCIHCl.
  5. 5.
    Un compuesto de Fórmula VII
    en la que 10 R4 y R5 son independientemente H, alquilo lineal, alquilo ramificado, alquilo cíclico, arilo, arilo sustituido o heterocíclico,
    o R4 y R5 tomados en conjunto forman un enlace
    L es o
    en el que R1 es H, metilo o etilo; M es CH2,
    20 o
    a es 0 o un número entero de 1 a 8;
    d es un número entero de 3 a 8; y Q es H, alquilo lineal, alquilo ramificado, alquilo cíclico, pirrolilo, furilo o tiofeno.
  6. 6. El compuesto de la reivindicación 5 que tiene la estructura
    5 7. Un procedimiento para la preparación de los compuestos de Fórmula I que tienen la estructura desvelada en la reivindicación 1 que comprende la reacción de un compuesto de Fórmula VII que tiene la estructura desvelada en la reivindicación 1 con N-metil-L-alanina para formar un compuesto de Fórmula I.
  7. 8. Un procedimiento para la preparación de un complejo de agente aglutinante celular/maitansinoide que comprende las siguientes etapas:
    10 (1) la preparación de un compuesto de Fórmula I mediante el procedimiento de la reivindicación 1 o de la reivindicación 7 y la esterificación del maitansinol con el compuesto de Fórmula I preparado de esta manera para formar un éster maitansinoide que contiene disulfuro;
    (2) la reducción del éster maitansinoide que contiene disulfuro preparado en la etapa (1) a un maitansinoide
    que contiene tiol; 15 (3) la introducción de grupos ditiopiridilo en un agente aglutinante celular; y
    (4) el enlace del maitansinoide que contiene tiol producido en la etapa (2) con el agente aglutinante celular de ditiopiridilo de la etapa (3) mediante un enlace disulfuro.
  8. 9.
    El procedimiento de la reivindicación 8, en la que el agente aglutinante celular es un anticuerpo.
  9. 10.
    Un procedimiento para la preparación de un complejo de agente aglutinante celular/maitansinoide que comprende
    20 la preparación de un compuesto de Fórmula I mediante el procedimiento de la reivindicación 7, usando dicho compuesto de Fórmula I para producir N-metil-L-alanina que contienen un derivado maitansinoide mediante la condensación del maitansinol con el compuesto recién preparado de Fórmula I y la conjugación de dicho derivado con un agente aglutinante celular.
  10. 11. El procedimiento de la reivindicación 10, en la que el agente aglutinante celular es un anticuerpo.
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Families Citing this family (23)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20100056762A1 (en) 2001-05-11 2010-03-04 Old Lloyd J Specific binding proteins and uses thereof
CA2447139C (en) 2001-05-11 2013-11-19 Ludwig Institute For Cancer Research Specific binding proteins and uses thereof
US7276497B2 (en) * 2003-05-20 2007-10-02 Immunogen Inc. Cytotoxic agents comprising new maytansinoids
BRPI0510883B8 (pt) * 2004-06-01 2021-05-25 Genentech Inc composto conjugado de droga e anticorpo, composição farmacêutica, método de fabricação de composto conjugado de droga e anticorpo e usos de uma formulação, de um conjugado de droga e anticorpo e um agente quimioterapêutico e de uma combinação
CA2580141C (en) 2004-09-23 2013-12-10 Genentech, Inc. Cysteine engineered antibodies and conjugates
ES2539126T3 (es) * 2004-12-09 2015-06-26 Janssen Biotech, Inc. Inmunoconjugados anti integrina, métodos para su producción y su uso
CN104013956B (zh) 2007-01-25 2018-12-18 达娜-法勃肿瘤研究所公司 抗egfr抗体在治疗egfr突变体介导的疾病中的用途
JP5618549B2 (ja) 2007-03-15 2014-11-05 ルードヴィッヒ インスティテュート フォー キャンサーリサーチ リミテッド Ｅｇｆｒ抗体及びｓｒｃ阻害剤を用いる治療方法及び関連製剤
ES2609915T3 (es) 2007-08-14 2017-04-25 Ludwig Institute For Cancer Research Ltd. Anticuerpo monoclonal 175 direccionado al receptor de EGF y derivados y usos del mismo
PL2896404T3 (pl) 2009-06-04 2017-12-29 Novartis Ag Sposoby identyfikacji miejsc koniugacji IgG
JP2012531212A (ja) 2009-07-03 2012-12-10 アビペップ ピーティーワイ リミテッド イムノコンジュゲート及びその作製方法
RU2580038C2 (ru) 2009-12-04 2016-04-10 Дженентек, Инк. Мультиспецифические антитела, аналоги антител, композиции и способы
KR101961495B1 (ko) 2009-12-23 2019-03-22 아비펩 피티와이 리미티트 면역-컨쥬게이트 및 그 제조방법 ２
CN105001334A (zh) 2010-02-10 2015-10-28 伊缪诺金公司 Cd20抗体及其用途
RU2626537C2 (ru) 2010-06-08 2017-07-28 Дженентек, Инк. Полученные с помощью генной инженерии антитела с цистеиновыми заменами и их конъюгаты
US20140105915A1 (en) 2011-05-27 2014-04-17 Glaxo Group Limited Bcma (cd269/tnfrsf17) - binding proteins
WO2013130093A1 (en) 2012-03-02 2013-09-06 Genentech, Inc. Biomarkers for treatment with anti-tubulin chemotherapeutic compounds
US10239951B2 (en) 2013-05-08 2019-03-26 Zymeworks Inc. Bispecific HER2 and HER3 antigen binding constructs
WO2015073721A1 (en) 2013-11-13 2015-05-21 Zymeworks Inc. Monovalent antigen binding constructs targeting egfr and/or her2 and uses thereof
KR20170052600A (ko) 2014-09-12 2017-05-12 제넨테크, 인크. 시스테인 가공된 항체 및 콘주게이트
PL3956332T3 (pl) * 2019-04-18 2023-05-29 Indena S.P.A. Diastereoselektywny sposób wytwarzania estrów majtanzynoidowych zawierających tiol lub dwusiarczek i ich produkty pośrednie
WO2022248870A1 (en) 2021-05-28 2022-12-01 Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited Combination therapies for treating cancer
WO2023057893A1 (en) 2021-10-05 2023-04-13 Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited Combination therapies for treating cancer

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SE430062B (sv) * 1977-03-04 1983-10-17 Pharmacia Fine Chemicals Ab Kopplings- eller tioleringsreagens
JPS61112042A (ja) * 1985-07-31 1986-05-30 Wakunaga Seiyaku Kk 架橋試薬として適当な化合物
US5208020A (en) * 1989-10-25 1993-05-04 Immunogen Inc. Cytotoxic agents comprising maytansinoids and their therapeutic use
CA2026147C (en) * 1989-10-25 2006-02-07 Ravi J. Chari Cytotoxic agents comprising maytansinoids and their therapeutic use
JP3408158B2 (ja) * 1998-07-17 2003-05-19 大日本製薬株式会社 スルトプリド誘導体及び抗スルトプリド抗体
US6573074B2 (en) * 2000-04-12 2003-06-03 Smithkline Beecham Plc Methods for ansamitocin production
US6333410B1 (en) * 2000-08-18 2001-12-25 Immunogen, Inc. Process for the preparation and purification of thiol-containing maytansinoids
US6441163B1 (en) * 2001-05-31 2002-08-27 Immunogen, Inc. Methods for preparation of cytotoxic conjugates of maytansinoids and cell binding agents

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US20040014980A1 (en) 2004-01-22

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