ES2350087T3

ES2350087T3 - Tratamiento o prevención de infecciones virales hemorrágicas con compuestos inmuno-moduladores.

Info

Publication number: ES2350087T3
Application number: ES05813862T
Authority: ES
Inventors: Alfred R. Rudolph; Clarence James Peters; Cynthia W. Tuthill; Eric C. Mossel
Original assignee: Sciclone Pharmaceuticals LLC; University of Texas System
Current assignee: Sciclone Pharmaceuticals LLC; University of Texas System
Priority date: 2004-10-27
Filing date: 2005-10-27
Publication date: 2011-01-18
Anticipated expiration: 2025-10-27
Also published as: BRPI0517401A; SG163601A1; ATE475426T1; EA200700878A1; EP1814566B1; KR20070070202A; IL182710A; AU2005299609A1; EA012342B1; NO20072498L; NZ555322A; JP4874985B2; WO2006047702A3; IL182710A0; US20090143313A1; MX2007005092A; US8193152B2; EP1814566A4; JP2008518031A; UA92727C2

Abstract

Utilización de un compuesto inmunomodulador de fórmula A **(Ver fórmula)**en la que n es 1 o 2, R es un hidrógeno, acilo, alquilo o un fragmento de péptido, y X es un aminoácido aromático o heterocíclico, en la fabricación de un medicamento para tratamiento o prevención de una infección vírica hemorrágica de un sujeto.

Description

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN

Ámbito de la invención

[0001] La presente invención se refiere al tratamiento o la prevención de enfermedades víricas hemorrágicas.

Descripción de la técnica anterior

[0002] Los virus de la fiebre hemorrágica (HFV) son unos virus que se encuentran clasificados en diversas familias taxonómicas. Los HFV causan diversos síndromes con unas características clínicas similares, a los que se denomina como síndromes de fiebre hemorrágica aguda. Las características distintivas de la infección por HFV, desde el punto de vista patofisiológico, son los daños microvasculares y el aumento de la permeabilidad vascular. Los HFV que son virus ARN incluyen los Arenavirus, como el Lassa y las fiebres hemorrágicas sudamericanas, como los virus Junin, Machupo, Guanarito y Sabia, que son los agentes causantes de la Fiebre de Lassa y las Fiebres argentina, boliviana, venezolana y brasileña, respectivamente, el virus Whitewater Arroyo y el virus Flexal; los Filovirus (Virus Ébola, y Marburg); los Bunyavirus; el virus de la fiebre hemorrágica de Crimea-Congo (CCHFV), el virus de la fiebre del valle del Rift, los Hantavirus asociados a la fiebre hemorrágica con síndrome renal, el virus Dobrava (también denominado virus Dobrava-Belgrado) y el virus Puumala, así como los hantavirus asociados al síndrome pulmonar del hantavirus, incluyendo el virus Bayou, el virus Black Creek Canal, el virus New York,

el virus Sin Nombre, el virus de los Andes, el virus de Orán, el virus de Juquitiba, el virus de la Laguna Negra y el virus de las Lechiguanas; y los Flavivirus (dengue, fiebre del dengue, fiebre hemorrágica del dengue, síndrome del shock por dengue, enfermedad de la selva de Kyasanur, fiebre hemorrágica de Omsk, fiebre amarilla. [0003] En condiciones naturales, los seres humanos se infectan a través de la picadura de un artrópodo infectado o mediante el contacto con colonias de animales infectados. Los virus de la fiebre hemorrágica son enormemente contagiosos mediante pulverización; tienen asociada una elevada morbilidad y, en ciertos casos, una gran mortalidad; y se piensa que platean un serio riesgo como armas biológicas. [0004] La patogénesis exacta de los HFV varía en función del agente etiológico. El principal órgano objetivo es el endotelio vascular. Se piensa que los mediadores inmunológicos e inflamatorios desempeñan un importante papel en la patogénesis de los HFV. Todos los HFV pueden producir trombocitopenia, y algunos también provocan disfunciones en las plaquetas. La infección a través de los virus Ébola y Marburg, el virus de la fiebre del valle del Rift y el virus de la fiebre amarilla provocan la destrucción de las células infectadas. La coagulación intravascular diseminada (DIC) es característica de la infección con los Filovirus. Los virus Ébola y Marburg pueden producir una diátesis hemorrágica y necrosis de los tejidos a través de los daños directos sufridos por las células y plaquetas del endotelio vascular, con deterioro de la microcirculación, así como efectos citopáticos en las células parenquimales, con liberación de mediadores inmunológicos e inflamatorios. Los arenavirus, por otra parte, parecen mediar en la hemorragia mediante la estimulación de los mediadores inflamatorios por macrófagos,

trombocitopenia y la inhibición de la acumulación de plaquetas. [0005] El período de incubación de las HFV varía entre 2 y 21 días. Las presentaciones clínicas de estas enfermedades no son específicas y varían, dificultando el diagnóstico. Cabe señalar que no todos los pacientes desarrollarán manifestaciones hemorrágicas. Incluso una porción

significativa: de pacientes infectados por el virus Ébola

pueden no mostrar síntomas clínicos de hemorragia.

[0006]: Los síntomas iniciales del síndrome HFV agudo

pueden incluir fiebre, dolores de cabeza, mialgias, sarpullidos, náuseas, vómitos, diarreas, dolores abdominales, artralgias, mialgias y malestar. Las enfermedades causadas por los virus Ébola, Marburg, el virus de la fiebre del valle del Rift, el virus de la fiebre amarilla, el virus de la fiebre hemorrágica de Omsk y el virus de la Selva de Kyasanur se caracterizan por una abrupta aparición, mientras que la fiebre de Lassa y las enfermedades causadas por los virus Machupo, Junin, Guarinito y Sabia tienen una aparición más insidiosa. Los síntomas iniciales pueden incluir fiebre, taquipnea, bradicardia relativa, hipotensión (que puede evolucionar hasta el shock circulatorio), inyección conjuntival, faringitis y linfadenopatía. Puede producirse encefalitis, con delirio, convulsiones, síntomas cerebelosos, y coma. La mayoría de los HFV provocan sofoco cutáneo o erupciones maculares de la dermis, aunque dicha erupción puede ser difícil de apreciar en personas de piel oscura y varía en función del virus que la haya provocado. Los síntomas hemorrágicos, cuando se producen, se desarrollan con posterioridad en el curso de la enfermedad, e incluyen petequias, púrpuras, sangrado de las membranas mucosas y conjuntivas, hematuria, hematemesis y melenas. La afectación

hepática: suele ser común, y la afectación renal es

proporcional al: compromiso car dio vascu lar.

[0007]: Las anormalidades de laboratorio incluyen

leucopenia (excepto en algunos casos de fiebre de Lassa), anemia o hemoconcentración, y un número elevado de enzimas hepáticas; El DIC y las anormalidades de coagulación asociadas son comunes. La mortalidad varía entre menos de un 1% en el caso de la fiebre del valle del Rift y un 70%/90% en el caso de las infecciones por virus Ébola y Marburg. [0008] La presentación clínica no específica y variable de los HFV presenta un considerable desafío en términos de diagnóstico. Los criterios de diagnóstico clínico basados en las normas de supervisión WHO para el síndrome de fiebre hemorrágica incluyen una temperatura superior a 101º F (38,3º C) o una duración inferior a 3 semanas; malestar agudo y sin factores que predispongan hacia las manifestaciones hemorrágicas; y al menos dos de los siguientes síntomas hemorrágicos; erupción hemorrágica o púrpura, epistaxis, hematemesis, hematuria, hemoptisis, sangre en las heces fecales, u otros síntomas hemorrágicos sin un diagnóstico alternativo. Las técnicas de laboratorio para el diagnóstico de los HFV incluyen la detección de antígenos, la detección del anticuerpo IgM, el aislamiento en cultivos celulares, la visualización mediante microscopía electrónica, técnicas inmunohistoquímicas, y la reacción inversa en cadena de la polimerasa de transcriptasa. [0009] La actual terapia para el HFV es en buena medida conservadora, pero se ha utilizado la ribavirina con algunas ventajas, en función del agente. Los pacientes de HFV tienden a ofrecer una pobre respuesta a las infusiones de fluido, y desarrollan rápidamente edema pulmonar.

[0010] La técnica actual sigue precisando métodos para el tratamiento o la prevención de las infecciones hemorrágicas víricas.

5 RESUMEN DE LA INVENCIÓN

[0011] De acuerdo con la presente invención, una utilización médica para el tratamiento o la prevención de las infecciones víricas hemorrágicas en un sujeto comprende la

10 administración a dicho sujeto de una cantidad eficaz de un compuesto inmunmodulador según la fórmula A:

imagen1

[0012] En la fórmula A, n es 1 o 2, R es hidrógeno, acilo, 15 alquilo o un fragmento de péptido, y X es un aminoácido aromático o heterocíclico. Preferiblemente, X es L-triptófano

o D-triptófano.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN

20 [0013] De acuerdo con una realización, la presente invención se refiere al tratamiento o la prevención de infecciones víricas hemorrágicas mediante la administración de un compuesto inmunomodulador a un sujeto.

25 [0014] Preferiblemente, el sujeto es un mamífero, y preferiblemente, el sujeto es un paciente humano. [0015] La administración preventiva puede realizarse entre personas de alto riesgo, debido al contacto con individuos sospechosos de transmisión de la enfermedad, o con portadores

30 asintomáticos.

[0016] Los compuestos inmunomoduladores de acuerdo con la presente invención comprenden inmunomoduladores según la fórmula A:

imagen1

5

[0017] En la fórmula A, n es 1 o 2, R es hidrógeno, acilo, alquilo o un fragmento de péptido, y X es un aminoácido aromático o heterocíclico. Preferiblemente, X es L-triptófano

o D-triptófano.

10 [0018] Las fracciones de acilo o alquilo adecuadas para “R” son: grupos alquilo, ramificados o no, con 1 a 6 átomos de carbono, grupos acilo con 2 a 10 átomos de carbono y grupos de bloqueo como carbobenciloxi y t-butioxicarbonil. Preferiblemente, el carbono del grupo CH mostrado en la

15 fórmula A tiene una configuración estéreo, cuando n es 2, que es diferente de la configuración estéreo de X. [0019] Las realizaciones preferidas utilizan compuestos como γ-D-glutamil-L-triptófano, γ-L-glutamil-L-triptófano, γL-glutamil-Nin-formil-L-triptófano, N-metil-γ-L-glutamil-L

20 triptófano, N-acetil-γ-L-glutamil-L-triptófano, γ-L-glutamilD-triptófano, β-L-aspartil-L-triptófano, y β-D-aspartil-Ltriptófano. Concretamente, las realizaciones preferidas utilizan γ-D-glutamil-L-triptófano, al que a veces se le conoce como SV-07. Estos compuestos, los métodos para la

25 preparación de estos compuestos, las sales farmacológicamente aceptables de estos compuestos y las formulaciones farmacéuticas de los mismos se describen en la patente estadounidense Nº 5916878. [0020] La invención es aplicable a la prevención y/o el

30 tratamiento de las infecciones víricas hemorrágicas,

incluyendo, sin limitación, los arenavirus como el Lassa, así como las fiebres hemorrágicas sudamericanas, como los virus Junin, Machupo, Guanarito y Sabia, que son los agentes causantes de la fiebre de Lassa y las fiebres argentina, boliviana, venezolana y brasileña, respectivamente, el virus Whitewater Arroyo y el virus Flexal; los Filovirus (virus Ébola, y Marburg); los Bunyavirus; el virus de la fiebre hemorrágica de Crimea-Congo (CCHFV), el virus de la fiebre del Valle del Rift, los Hantavirus asociados a la fiebre hemorrágica con síndrome renal, el virus Dobrava (también denominado virus Dobrava-Belgrado) y el virus Puumala, así como los hantavirus asociados al síndrome pulmonar del hantavirus, incluyendo el virus Bayou, el virus Black Creek Canal, el virus New York, el virus Sin Nombre, el virus de los Andes, el virus de Orán, el virus de Juquitiba, el virus de la Laguna Negra y el virus de las Lechiguanas; y los Flavivirus (dengue, fiebre del dengue, fiebre hemorrágica del dengue, síndrome del shock por dengue, enfermedad de la selva de Kyasanur, fiebre hemorrágica de Omsk, fiebre amarilla). [0021] Se utiliza el virus Pichinde como modelo establecido de la fiebre de Lassa. [0022] Los compuestos de la fórmula A pueden administrarse a dosis comprendidas entre 0,001 y 10 mg. Las dosis pueden administrarse una o más veces por semana, preferiblemente a diario, administrándose las dosis una o más veces al día. Las dosis pueden administrarse por vía intramuscular, aunque pueden utilizarse otras formas de inyección e infusión, así como otras vías de administración, como la inhalación oral o nasal o la ingestión por vía oral. [0023] En las realizaciones preferidas, los compuestos de la fórmula A se administran con unas dosis en un margen

comprendido entre 0,001 y 10 mg y más preferiblemente, a una dosis aproximada de entre 0,1 y 1 mg. [0024] Las dosis también pueden medirse en microgramos por kilogramo de peso corporal del sujeto, variando las dosis entre 0,01 y 100 microgramos por kilogramo, y más preferiblemente entre 0,1 y 10 microgramos por kilogramo, y más preferiblemente, en torno a 1 microgramo por kilogramo. [0025] Se incluyen análogos biológicamente activos con porciones sustituidas, anuladas, alargadas, sustituidas o modificadas en otra forma, y que posean una bioactividad sustancialmente similar a la del SCV-07, por ejemplo, un péptido derivado del SCV-07 que disfrute de suficiente homología con SCV-07 de forma que funcione sustancialmente de la misma forma con una actividad sustancialmente idéntica a la del SCV-07. [0026] La administración puede llevarse a cabo mediante cualquier método adecuado, incluyendo por vía oral, mediante inyección, infusión periódica, infusión continua y similares. [0027] En algunas realizaciones, el compuesto de la fórmula A se encuentra presente en un vehículo líquido farmacológicamente aceptable, tal como agua para inyección, solución salina en concentraciones fisiológicas o similares. [0028] Pueden determinarse las cantidades efectivas del compuesto de la fórmula A mediante experimentos rutinarios de titración de la dosis. [0029] El compuesto de la fórmula A también puede administrarse con otros estimulantes de la respuesta inmune o agentes antivirales. [0030] Los arenavirus representan una preocupación para la salud pública, tanto en su faceta de infecciones adquiridas de forma natural como por su utilización como agentes de una bioamenaza. La familia de los Arenavirus está formada por

virus encapsulados con un genoma de doble sentido bisegmentado. Sus 22 elementos se dividen en 2 serocomplejos. El complejo virus Lassa-virus de la coriomeningitis linfocítica contiene los cinco virus conocidos del “Viejo Mundo”, mientras que el complejo Tacaribe está formado por 17 virus del nuevo mundo, pertenecientes a Norte y Sudamérica. Cada virus está asociado a una única especie de roedor o a una pareja de especies de roedores relacionadas (la posible excepción es el Tacaribe, que sólo se ha aislado a partir de dos especies de murciélagos). Esta estrecha asociación con el roedor de acogida limita el rango geográfico del virus al del reservorio. El LCMV, asociado al extendido Mus musculus es el único arenavirus que se encuentra en todo el mundo. [0031] Los roedores infectados y que no presentan síntomas entran en contacto con seres humanos, que se infectan por inhalación del virus en las excreciones nebulizadas. La mayoría de los arenavirus no se han asociado a la infección humana, y no todos los arenavirus que se sabe que infectan a los seres humanos causan la enfermedad. No obstante, algunos arenavirus causan la enfermedad en seres humanos, y ésta varía entre suave y muy grave. Los más importantes son el LCMV, que causa un síndrome CNS que en escasas ocasiones puede ser mortal, el virus de Lassa, el agente etiológico de la fiebre de Lassa, y los virus de Junin, Machupo, Guanarito y Sabia, los agentes que causan las fiebres hemorrágicas sudamericanas. [0032] La fiebre de Lassa, al igual que el reservorio de la fiebre de Lassa, el Mastomys sp., es endémica en África Occidental. La enfermedad se caracteriza por fiebre, debilidad, malestar, dolores de cabeza y garganta, apareciendo a los 7 a 18 días después de la infección. Otros síntomas comunes incluyen dolores articulares y de espalda,

tos, vómitos, y diarrea. A diferencia de las fiebres hemorrágicas, no existen erupciones dérmicas asociadas, esquimosis o petequias. La mortandad entre los pacientes hospitalizados varía entre el 15% y el 20%, pero entre todas las infecciones por Lassa puede ser de tan sólo un 2 a un 3%. No se ha demostrado que se produzca la transmisión entre personas por nebulización. No obstante, el contacto con las secreciones de una persona infectada es un importante factor de riesgo. [0033] Los virus Junin, Machupo, Guanarito y Sabia son los agentes etiológicos de las fiebres hemorrágicas sudamericanas: las fiebres hemorrágicas argentina, boliviana, venezolana y brasileña, respectivamente. A pesar de ser distintas, todas ellas tienen presentaciones similares, que incluyen fiebre, malestar y mialgia, que comienzan de 1 a 2 semanas tras la infección. A medida que empeora la enfermedad, se desarrollan síntomas adicionales: molestias gastrointestinales, mareos, cefaleas, fotofobia, dolor retroorbital, taquicardia, petequias e inyección conjuntival. La infección por Machupo parece la más propensa a su transmisión de persona a persona, habiéndose documentado la transmisión nosocomial e intrafamiliar. A diferencia del resto de los arenavirus de la fiebre hemorrágica, pero al igual que en el caso de la infección por fiebre de Lassa, se ha observado sordera tras la infección por el virus de Guanarito. La tasa de mortalidad para los virus de la fiebre hemorrágica sudamericana se encuentra en torno al 20%. [0034] Debido a su elevada tasa de mortalidad, la infectividad por nebulización y su potencial para causar una crisis de salud pública, los virus Lassa, Junin, Machupo, Guanarito y Sabia han sido designados por el Centro para el Control de las Enfermedades (CDC) como patógenos de la

categoría A. El trabajo con estos agentes puede realizarse utilizando precauciones de la clase BSL-4. [0035] El virus Pichinde (PIC) es un virus complejo Tacaribe no patogénico. La virulencia del PIC en cobayas aumentó enormemente mediante su paso en serie al bazo en cobayas de la cepa 13. La infección de las cobayas con el virus adaptado produce una enfermedad muy similar a la de la fiebre de Lassa en monos y humanos. Entre las características

se: incluye la fiebre, trombocitopenia, disfunción de las

plaquetas,: fugas vasculares, molestias respiratorias,

replicación: del virus en la mayoría de los tejidos

extraneurales, y cambios histológicos mínimos en tejidos infectados. Dado que el Pichinde no es patógeno para los seres humanos, este modelo se ha utilizado ampliamente como un sustituto de poco riesgo para el estudio de la fiebre de Lassa y de la fiebre hemorrágica causada por el arenavirus. [0036] La ribavirina, un análogo de nucleósido, es la principal terapia antivírica para la fiebre de Lassa, y constituye una terapia prometedora para la fiebre hemorrágica causada por el arenavirus. No obstante, aunque la terapia con ribavirina puede prevenir o aliviar la fiebre hemorrágica aguda, su utilización en la infección por arenavirus ha provocado posteriormente enfermedades neurológicas. También se han intentado, sin éxito, diversas modalidades de tratamiento inmunológico en modelos animales de infección por arenavirus y enfermedad. In Vitro, los arenavirus son de 10 a 1000 veces menos sensibles a IFNβ que el virus de la estomatitis vesicular. Esta insensibilidad está respaldada por estudios realizados monos Rhesus infectados por Machupo con el poli ICLC, inductor del interferón. La mortalidad global y el tiempo transcurrido hasta el fallecimiento no mejoraron con la terapia, y en algunos grupos, la viremia aumentó significativamente con el tratamiento. Lucia y otros examinaron la utilización de la IFNα, de la ribavirina, y del medicamento inmunomodulador C246.783 utilizando las cobayas infectadas por PIC. Entre los efectos del C246.783 se encuentran la inducción del IFN y la activación de las células NK y macrófagos. No se observó ninguna mejora significativa entre los animales tratados con IFNα (hasta 1,7 x 105 U) o con C246.783. Se observó en este estudio una mejora en la mortalidad mediante la administración diaria de ribavirina durante 28 días tras la infección; el tiempo transcurrido hasta el fallecimiento se prolongó con 14 días de tratamiento. La insensibilidad relativa de los arenavirus a los IFNs del tipo 1 probablemente contribuyeron significativamente al virtual fracaso de dichos estudios. [0037] A pesar de estos primeros fracasos de la inmunoterapia con los arenavirus, la estimulación de las células T sigue siendo una forma de tratamiento sin explorar. Por lo tanto, se diseñó un estudio piloto para examinar los efectos del medicamento inmunomodulador SCV-07 en cobayas infectadas por PIC. Se sabe que el SCV-07 mejora la respuesta Th1 a los estímulos inmunológicos.

SCV-07

[0038] El SCV-07, o γ-D-glutamil-L-triptófano es un integrante de una clase de medicamentos inmunomoduladores que poseen fracciones de γ-glutamil o β-aspartil, que fue

descubierta: por científicos rusos y cuya eficacia se está

examinando: en los EE.UU., para diversas indicaciones POR

PARTE: DE SciClone Pharmaceuticals, Inc. El SCV-07 posee

diversas actividades inmunomoduladoras en vivo e in Vitro. El SCV-07 incrementa la proliferación de timocitos y linfocitos

inducida por Con-A aumenta la producción de interleucina-2 (IL-2) inducida por Con-A y la expresión del receptor de IL-2 por los linfocitos del bazo, estimulando la expresión de Thy

1.2 en células de la médula ósea. En vivo, el SCV-07 posee un fuerte efecto inmunoestimulante sobre animales inmunosuprimidos con 5-FU y en un modelo de inmunización con glóbulos rojos ovinos. [0039] El mecanismo discreto de la acción del SCV-07 no se ha determinado de forma rigurosa. No obstante, en función de los datos anteriores, se ha sugerido que el SCV-07 actúa mediante su influencia sobre la diferenciación de células madre pluripotentes en timocitos y/o la diferenciación de timocitos en células T. Además, ya que la administración de SCV-07 tiene como resultado un incremento de las citoquinas Th1 IL-2 e IFNγ, pero no de las citoquinas Th2, proponiéndose que el SCV-07 actúa mediante una activación preferencial de las células Th1. [0040] Hay cada vez más pruebas que sugieren que las células CD4 + Th1 y las citoquinas asociadas, incluyendo IL-2 e IFNγ tienen importancia para la generación de una respuesta protectora inmune a la infección micobacteriana. En los estudios realizados sobre un modelo de tuberculosis en ratones, se demostró que el SCV-07 reducía significativamente las lesiones pulmonares. La producción de IFNγ por las células del bazo inducidas por Con-A a partir de animales tratados con SCV-07 fue superior, mientras que la producción de IL-4 fue menor que en el caso de las células procedentes de animales sin tratar. La actividad fagocítica por parte de los macrófagos peritoneales aumentó significativamente en comparación con los animales de control no tratados e infectados. Estos datos preclínicos respaldaron el comienzo de los ensayos clínicos para el uso de SCV-07: Un ensayo

clínico de fase II llevado a cabo en Rusia demostró que la administración del SCV-07 aumentaba la incidencia de cultivos negativos de micobacterias en esputos y tenía un efecto positivo en la curación de la cavidad y los síntomas de la tuberculosis sin que se observasen efectos adversos inducidos por el medicamento. La eficacia del SCV-07 en los casos de tuberculosis humana respalda la hipótesis de su eficacia con otras enfermedades, en las que se ha demostrado que la inmunidad Th1 es elevada, incluyendo la enfermedad por arenavirus. [0041] De acuerdo con cuanto antecede, se han llevado a cabo dos estudios piloto para examinar la eficiencia del SCV07 en el tratamiento de los cobayas infectados con PIC. [0042] La invención se ejemplificará mejor a través de los siguientes ejemplos, que no pretenden ser limitativos.

Ejemplo 1:

[0043] Se dividieron 20 cobayas Hartley macho (400-450g) en grupos de cinco.

El grupo 0 no recibió SCV-07

El grupo 1 recibió 1 µg/kg de SCV-07 por vía intraperitoneal durante cada uno de los cinco días anteriores a la infección.

El grupo 2 recibió 1 µg/kg de SCV-07 por vía intraperitoneal una sola vez el mismo día de la infección.

El: grupo 3 recibió 1 µg/kg de SCV-07 por vía

intraperitoneal: una sola vez al día siguiente de la

infección.

[0044] Infecciones: Los animales fueron inoculados por vía intraperitoneal con 100 pfu de PIC adaptado al cobaya.

[0045] Se midieron el peso corporal y la temperatura, así como los marcadores sustitutos del avance de la enfermedad, al menos tres veces por semana. Obviamente, los animales enfermos fueron observados con mayor frecuencia. Los trabajos anteriores demostraron que una pérdida de peso del 25% representaba un animal enfermo en fase terminal. No obstante, el IACUC de la University of Texas Medical Branch exigía que una pérdida de peso del 20% implicase la clasificación del animal como terminal y su sacrificio. [0046] Los animales del grupo 0 se agruparon a partir de dos experimentos independientes: el descrito aquí para los grupos tratados 1 a 3 y el descrito más adelante con los grupos tratados 4 a 6. [0047] Aunque se aprecia una tendencia a la eficacia, como lo demuestra la reducción de la mortalidad en los grupos tratados, el análisis de supervivencia de Kaplan-Meier por el método estadístico de rango registrado apoya la noción visual de que ninguna de las curvas de supervivencia de los animales tratados sea significativamente diferente de la curva de supervivencia de los animales de control (p = 0,66, 0,77 y 0,40 para los grupos 1, 2 y 3, respectivamente). El aumento de peso durante los 11 días posteriores a la infección (dpi) entre los animales tratados fue mayor en el grupo 1 (tabla 1), pero ningún grupo mostró un aumento de peso diferente del de los controles. Tampoco hubo diferencias de temperatura, medida a los 11 dpi, entre los animales tratados y los animales de control (tabla 2). No se aprecia, en las tablas 1 y 2, el hecho de que el único superviviente del grupo de control procediese del segundo grupo de control. Este animal hizo que se desviase notablemente la temperatura del grupo de control (hacia abajo) y el aumento de peso (hacia arriba). Por lo tanto, los resultados del estudio inicial sugirieron

una mayor eficacia de la que se aprecia en los datos agrupados.

Tabla 1: Promedio porcentual de aumento de peso en los cobayas infectados por PIC a los 10-11 dpi

Grupo: Media ± Desv. Estándar Valor de P*

0: 1,79 ± 13,50

1: 0,59 ± 10,71 0,48

2: -3,75 ± 12,48 0,92

3: -1,15 ± 12,26 0,65

4: -0,35 ± 20,07 0,64

5: 6,73 ± 19,02 0,21

6: 5,62 ± 16,78 0,23

*Comparación de la prueba t de Student del grupo tratado con el grupo 0.

10 Tabla 2: Promedio de temperatura (ºC) de los cobayas infectados por PIC a los 10-11 dpi

Grupo: Media ± Desv. Estándar Valor de P*

0: 40,35 ± 0,63

1: 40,40 ± 1,00 0,72

2: 40,48 ± 0,72 0,82

3: 40,40 ± 0,69 0,68

4: 40,03 ± 0,59 0,23

5: 39,38 ± 0,75 0,17

6: 40,28 ± 0,63 0,46

*Comparación de la prueba t de Student del grupo tratado con el grupo 0.

[0048] Aunque no es significativo, el primer ensayo era lo suficientemente sugerente como para iniciar un segundo estudio.

Ejemplo 2:

[0049] Una vez más, se dividieron 20 animales en 4 grupos de cinco.

El grupo 0 no recibió SCV-07

El grupo 4 recibió 1 µg/kg de SCV-07 por vía intraperitoneal durante cada uno de los primeros cinco días posteriores a la infección.

El grupo 5 recibió 10 µg/kg de SCV-07 por vía intraperitoneal durante cada uno de los primeros cinco días posteriores a la infección.

El grupo 6 recibió 100 µg/kg de SCV-07 por vía intraperitoneal durante cada uno de los primeros cinco días posteriores a la infección. [0050] Infecciones: Los animales fueron inoculados por vía intraperitoneal con 100 pfu de PIC adaptado al cobaya. [0051] Se midieron el peso corporal y la temperatura, así como los marcadores sustitutos del avance de la enfermedad, como se ha descrito anteriormente. [0052] La mortalidad disminuyó en los grupos 5 y 6, pero tan sólo el grupo 5 presentaba una curva de supervivencia significativamente diferente de la del grupo 0 (p = 0,77 0,03 y 0,27 para los grupos 4, 5 y 6, respectivamente). El aumento de peso durante los 11 días posteriores a la infección fue mayor entre los animales tratados de los grupos 5 y 6 con respecto a los animales de control, pero la diferencia no era importante (tabla 1). La temperatura corporal fue inferior en los tres grupos tratados que en el caso de los de control,

pero las diferencias tampoco eran significativas (tabla 2). Se recogió suero de los animales en ambos experimentos. El análisis de estas muestras es continuo, pero los resultados preliminares sugieren una viremia indetectable hasta unas 48

5 horas antes de la fase aguda de la enfermedad y la muerte del animal. [0053] Estos resultados sugieren que la administración del SCV-07 tiene carácter terapéutico en los cobayas infectados por PIC, como lo muestra la tendencia a una menor mortalidad

10 en varios grupos de tratamiento, y a una mortalidad muy inferior a una dosis de 10µg/kg por vía intraperitoneal durante los 5 días siguientes a la infección.

REFERENCIAS CITADAS EN LA DESCRIPCIÓN

La lista de referencias citada por el solicitante lo es solamente para utilidad del lector, no formando parte de los documentos de patente europeos. Aún cuando las referencias han sido cuidadosamente recopiladas, no pueden excluirse errores u omisiones y la OEP rechaza toda responsabilidad a este respecto.

Documentos de patente citados en la descripción

• US 5916878 A [0019]

Claims

Reivindicaciones

1. Utilización de un compuesto inmunomodulador de fórmula A

imagen1

en la que n es 1 o 2, R es un hidrógeno, acilo, alquilo

o un fragmento de péptido, y X es un aminoácido aromático o heterocíclico, en la fabricación de un medicamento para tratamiento o prevención de una infección vírica hemorrágica de un sujeto.
2.

Utilización de acuerdo con la reivindicación 1, en la que X es L-triptófano o D-triptófano.
3.

Utilización según las reivindicaciones 1 o 2, en la que dicho compuesto es cualquiera de los siguientes: γ-Dglutamil-L-triptófano, γ-L-glutamil-L-triptófano, γ-Lglutamil-Nin-formil-L-triptófano, N-metil-γ-L-glutamil-Ltriptófano, N-acetil-γ-L-glutamil-L-triptófano, γ-L-glutamilD-triptófano, β-L-aspartil-L-triptófano, y β-D-aspartil-Ltriptófano.
4.

Utilización de acuerdo con la reivindicación 3, en la que dicho compuesto es SCV-07.
5.

Utilización de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en la que dicho compuesto debe administrarse a una dosis en un margen comprendido entre 0,1 y 10 mg.
6.

Utilización de acuerdo con la reivindicación 5, en la que dicho compuesto debe administrarse a una dosis en un margen comprendido entre 0,1 y 1 mg.
7.

Utilización de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en la que dicho compuesto debe administrarse a una dosis comprendida en un margen entre 0,01 y 100 microgramos por kilogramo de peso corporal del sujeto.
8.

Utilización de acuerdo con la reivindicación 7, en la que dicho compuesto debe administrarse a una dosis

comprendida

en un margen entre 0,1 y 10 microgramos por

kilogramo de peso corporal del sujeto.
9.

Utilización de acuerdo con cualquiera de las

reivindicaciones 1 a 8 para tratamiento o prevención de la infección por arenavirus, incluyendo el virus de la fiebre Lassa, el virus Junin, el virus Machupo, el virus Guanarito, el virus Sabia, el virus Whitewater Arroyo o el virus Flexal; los Filovirus, incluyendo el virus Ébola o el virus Marburg; los Bunyavirus, incluyendo el virus de la fiebre hemorrágica de Crimea-Congo (CCHFV), el virus de la fiebre del valle del Rift, los Hantavirus asociados a la fiebre hemorrágica con síndrome renal, incluyendo el virus Hantaan, el virus de Seúl, el virus Dobrava (también denominado virus Dobrava- Belgrado) y el virus Puumala, así como los hantavirus asociados al síndrome pulmonar del hantavirus, incluyendo el virus Bayou, el virus Black Creek, el virus Canal, el virus New York, el virus Sin Nombre, el virus de los Andes, el Virus de Orán, el virus de Juquitiba, el virus de la Laguna Negra y el virus de las Lechiguanas; y los Flavivirus, incluyendo el virus del dengue, el virus de la enfermedad de la selva de Kyasanur, el virus de la fiebre hemorrágica de Omsk, o el virus de la fiebre amarilla.
10. Utilización de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8 para tratamiento o prevención de la fiebre de Lassa, las fiebres hemorrágicas sudamericanas, incluyendo la fiebre hemorrágica argentina, la fiebre

hemorrágica boliviana, la fiebre hemorrágica venezolana o la fiebre hemorrágica brasileña, la fiebre del virus Whitewater Arroyo, la fiebre del virus Flexal; la fiebre hemorrágica del virus Ébola, la fiebre hemorrágica del Marburg, la fiebre hemorrágica de Crimea-Congo la fiebre del valle del Rift, las fiebres hemorrágicas con síndrome renal, incluyendo la fiebre hemorrágica del virus Hantaan, la fiebre hemorrágica del virus de Seúl, la fiebre hemorrágica del virus de Dobrava, la fiebre hemorrágica del virus Puumala, las fiebres hemorrágicas asociadas al síndrome pulmonar del hantavirus, incluyendo la fiebre hemorrágica del virus Bayou, la fiebre hemorrágica del virus Black Creek Canal, la fiebre hemorrágica del virus New York, la fiebre hemorrágica del virus Sin Nombre, la fiebre hemorrágica del virus de los Andes, la fiebre hemorrágica del Virus de Orán, la fiebre hemorrágica del virus de Juquitiba, la fiebre hemorrágica del virus de la Laguna Negra, la fiebre hemorrágica del virus de las Lechiguanas, la fiebre hemorrágica del dengue, síndrome del shock por dengue, enfermedad de la selva de Kyasanur, la fiebre hemorrágica de Omsk o la fiebre amarilla).
11. Compuesto inmunomodulador con fórmula A

imagen1

en la que n es 1 o 2, R es un hidrógeno, acilo, alquilo

o un fragmento de péptido, y X es un aminoácido aromático o heterocíclico, para su utilización en el tratamiento o la prevención de una infección vírica hemorrágica en un sujeto.
12.

Compuesto para su utilización de acuerdo con la reivindicación 11, en la que X es L-triptófano o Dtriptófano.
13.

Compuesto para su utilización de acuerdo con las reivindicaciones 11 o 12, en la que dicho compuesto es cualquiera de los siguientes: γ-D-glutamil-L-triptófano, γ-Lglutamil-L-triptófano, γ-L-glutamil-Nin-formil-L-triptófano, N-metil-γ-L-glutamil-L-triptófano, N-acetil-γ-L-glutamil-Ltriptófano, γ-L-glutamil-D-triptófano, β-L-aspartil-Ltriptófano, y β-D-aspartil-L-triptófano.
14.

Compuesto para su utilización de acuerdo con la reivindicación 13, en la que dicho compuesto es SCV-07.
15.

Compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 11 o 12, utilizado para tratamiento o prevención de la infección por arenavirus, incluyendo el virus de la fiebre Lassa, el virus Junin, el virus Machupo, el virus Guanarito, el virus Sabia, el virus Whitewater Arroyo o el virus Flexal; los Filovirus, incluyendo el virus Ébola o el virus Marburg; los Bunyavirus, incluyendo el virus de la fiebre hemorrágica de Crimea-Congo (CCHFV), el virus de la fiebre del valle del Rift, los Hantavirus asociados a la fiebre hemorrágica con síndrome renal, incluyendo el virus Hantaan, el virus de Seúl, el virus Dobrava (también denominado virus Dobrava-Belgrado) y el virus Puumala, así como los hantavirus asociados al síndrome pulmonar del hantavirus, incluyendo el virus Bayou, el virus Black Creek Canal, el virus New York, el virus Sin Nombre, el virus de los Andes, el virus de Orán, el virus de Juquitiba, el virus de la Laguna Negra y el virus de las Lechiguanas; y los Flavivirus, incluyendo el virus del dengue, el virus de la enfermedad de la selva de Kyasanur, el virus de la fiebre hemorrágica de Omsk, o el virus de la fiebre amarilla.
16.

Compuesto para su utilización de acuerdo con las reivindicaciones 11 a 14, para tratamiento o prevención de la fiebre de Lassa, las fiebres hemorrágicas sudamericanas, incluyendo la fiebre hemorrágica argentina, la fiebre

5 hemorrágica boliviana, la fiebre hemorrágica venezolana o la fiebre hemorrágica brasileña, la fiebre del virus Whitewater Arroyo, la fiebre del virus Flexal; la fiebre hemorrágica del virus Ébola, la fiebre hemorrágica del Marburg, la fiebre hemorrágica de Crimea-Congo la fiebre del valle del Rift, las

10 fiebres hemorrágicas con síndrome renal, incluyendo la fiebre hemorrágica del virus Hantaan, la fiebre hemorrágica del virus de Seúl, la fiebre hemorrágica del virus de Dobrava, la fiebre hemorrágica del virus Puumala, las fiebres hemorrágicas asociadas al síndrome pulmonar del hantavirus,

15 incluyendo la fiebre hemorrágica del virus Bayou, la fiebre hemorrágica del virus Black Creek Canal, la fiebre hemorrágica del virus New York, la fiebre hemorrágica del virus Sin Nombre, la fiebre hemorrágica del virus de los Andes, la fiebre hemorrágica del virus de Orán, la fiebre

20 hemorrágica del virus de Juquitiba, la fiebre hemorrágica del virus de la Laguna Negra, la fiebre hemorrágica del virus de las Lechiguanas, la fiebre hemorrágica del dengue, síndrome del shock por dengue, enfermedad de la selva de Kyasanur, la fiebre hemorrágica de Omsk o la fiebre amarilla.