ES2313065T3 - Composiciones farmaceuticas que comprenden derivados de malonamida para disminuir la produccion de sebo. - Google Patents

Abstract

Uso de un compuesto de la fórmula (Ver fórmula) en la cual R 1 y R 2 cada uno de ellos se representa independientemente mediante hidrógeno, alquilo(C1 - 4), alcoxi (C1 - 6), halógeno, hidroxi, trifluorometilo, trifluorometoxi, ciano, NR 5 R 6 , o SR 7 ; X se representa mediante -CR 8 R 9 -( CH2)n; R 3 se representa mediante hidrógeno, alquilo(C1 - 6), -(CH2)q-Ph, o -(CH2)q-M; p se representa mediante un número entero de 1 a 4; R 4 se representa mediante un sustituyente seleccionado del grupo que consta de hidrógeno, alquilo(C1 - 6), alcoxi(C1 - 6), halógeno, hidroxi, trifluorometilo, trifluorometoxi, ciano, NR 5 R 6 , y SR 7 ; R 5 , R 6 , R 7 , R 8 , y R 9 se representa cada uno de ellos independientemente mediante hidrógeno o alquilo(C1 - 6); Ph se representa mediante un anillo fenilo el cual puede estar sustituido opcionalmente; M se representa mediante un anillo heteroarilo de 5 ó 6 miembros, que contiene 1 heteroátomo seleccionado del grupo N, S, u O; n y q se representa cada uno de ellos independientemente mediante un número entero de 0-4; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de enfermedades asociadas al exceso de producción de sebo.

Description

Composiciones farmacéuticas que comprenden derivados de malonamida para disminuir la producción de sebo.

Campo de la invención

La presente invención se refiere a la aplicación tópica de una clase de inhibidores de ACAT de diamidas. Otros aspectos de la invención se refieren al uso de estas diamidas para tratar trastornos de las glándulas sebáceas y su uso para aliviar la piel grasa.

Antecedentes de la invención

La piel humana se compone de tres capas principales, el estrato córneo, la epidermis, y la dermis. La capa más exterior es el estrato córneo. Su función primaria es servir como una barrera al ambiente externo. Los lípidos se segregan a la superficie del estrato córneo. Estos lípidos disminuyen la permeabilidad al agua del estrato córneo. El sebo constituye típicamente el 95% de estos lípidos. Abramovits y cols., Dermatologic Clinics, vol. 18, número 4, octubre de 2000.

El sebo se produce en las glándulas sebáceas. Estas glándulas están presentes en la mayoría de la superficie del cuerpo. La concentración más alta de estas glándulas ocurre en el cuero cabelludo, la frente y la cara. A pesar del importante papel fisiológico que juega el sebo, muchos individuos experimentan un exceso de producción de sebo, especialmente en el área facial. El exceso de sebo se asocia con una incidencia incrementada de acné. Incluso en individuos sin acné, el sebo puede hacer que la piel parezca grasienta, disminuyendo su atractivo. Abramovits y cols., referencia anterior.

Los tratamientos actuales para el exceso de sebo son subóptimos. Accutane (isotretinoína) reduce la secreción de sebo en hasta un 90%. Sin embargo, la isotretinoína se asocia con un número de efectos secundarios graves. Causa defectos congénitos graves y está contraindicada en mujeres en edad reproductora. Así, la isotretinoína sólo se utiliza para acné grave. Es inapropiado usar este fármaco meramente como una ayuda cosmética.

El documento US 4 299 845 describe el uso de malonamidas y una composición tópica de las mismas para el tratamiento de trastornos dermatológicos.

El documento WO 01/56556 se refiere a inhibidores duales de éster de colesterilo y a la síntesis de ésteres para trastornos de las glándulas sebáceas.

Los inhibidores de acilcoenzima A colesterol aciltransferasa (ACAT) se evaluaron inicialmente para tratar colesterol elevado. La patente de los Estados Unidos Nº. 6.133.326 describe que los inhibidores de ACAT reducen también la secreción de sebo. Aunque la patente '326 es una contribución valiosa a la técnica, tales tratamientos no están comercialmente disponibles en la actualidad. Actualmente, los medios más prácticos de aliviar el exceso de sebo son los lavados frecuentes. Así, existe una necesidad en la técnica de tratamientos nuevos que reduzcan la secreción de sebo por las glándulas sebáceas.

Sumario de la invención

Se ha descubierto un nuevo procedimiento para disminuir la secreción de sebo, por las glándulas sebáceas. Se ha descubierto una clase de inhibidores de ACAT que muestran actividad superior en la inhibición de la secreción de sebo. Estos inhibidores de ACAT se pueden representar mediante la fórmula I:

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en la cual R^{1} y R^{2} cada uno de ellos se representa independientemente mediante hidrógeno, alquilo(C_{1-6}), alcoxi(C_{1-6}), halógeno, hidroxi, trifluorometilo, trifluorometoxi, ciano, NR^{5}R^{6}, o SR^{7}; X se representa mediante -CR^{8}R^{9}-(CH_{2})_{n}; R^{3} se representa mediante hidrógeno, alquilo(C_{1-6}), -(CH_{2})_{q}-Ph, o -(CH_{2})_{q}-M; p se representa mediante un número entero de 1 a 4; R^{4} se representa mediante un sustituyente seleccionado del grupo que consta de hidrógeno, alquilo(C_{1-6}), alcoxi(C_{1-6}), halógeno, hidroxi, trifluorometilo, trifluorometoxi, ciano, NR^{5}R^{6}, y SR^{7}; R^{5}, R^{6}, R^{7}, R^{8}, y R^{9} se representa cada uno de ellos independientemente mediante hidrógeno o alquilo(C_{1-6}); Ph se representa mediante un anillo fenilo el cual puede estar sustituido opcionalmente; M se representa mediante un anillo heteroarilo de 5 ó 6 miembros, que contiene 1 heteroátomo seleccionado del grupo N, S, u O; n y q se representa cada uno de ellos independientemente mediante un número entero de 0-4; una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, o un profármaco de los mismos.

Los compuestos de fórmula I se pueden administrar a un paciente para disminuir la cantidad de sebo segregado por sus glándulas sebáceas. Típicamente, los compuestos se administrarán tópicamente a las áreas que muestran exceso de producción de sebo. Disminuir la secreción de sebo aliviará un número de trastornos dermatológicos y molestias cosméticas, Estas afecciones incluyen piel grasa, cabello graso, piel brillante, acné, y dermatitis seborreica.

Otros aspectos de la invención se refieren al uso de un compuesto de fórmula I en la fabricación de un medicamento para la seborrea.

Descripción detallada de la invención

Los encabezamientos dentro de este documento solo se utilizan para facilitar su revisión por el lector. No deberían considerarse como limitantes de la invención ni de las reivindicaciones en modo alguno.

A) Definiciones y ejemplificación

De la forma en que se usan a lo largo de esta solicitud, incluyendo las reivindicaciones, los siguientes términos tienen los significados definidos más adelante, a menos que se indique específicamente lo contrario. El plural y el singular se tratarán como intercambiables, menos cuando se dé una indicación de número:

a.

"alquilo(C_{1-6})" se refiere a un grupo alquilo de cadena ramificada o lineal que contiene de 1 a 6 átomos de carbono, tales como metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, n-pentilo, isopentilo, n-hexilo, 1,1-dimetilbutilo, 2,3-dimetilbutilo, etc.

b.

"alcoxi(C_{1-6})" se refiere a un grupo alcoxi de cadena lineal o ramificada que contiene de 1 a 6 átomos de carbono, tales como metoxi, etoxi, n-propoxi, isoproxi, n-butoxi, isobutoxi, n-pentoxi, n-hexiloxi, etc.

c.

"halógeno" se refiere a un átomo de cloro, flúor o bromo.

d.

"fenilo opcionalmente sustituido" se refiere a un fenilo (-C_{6}H_{5}) el cual puede estar sustituido con hasta 3 sustituyentes, cada sustituyente se selecciona independientemente del grupo que consta de alquilo(C_{1-6}), alcoxi(C_{1-6}), halógeno, hidroxi, trifluorometilo, trifluorometoxi, ciano, NR^{5}R^{6}, o SR^{7}. Estos sustituyentes pueden ser iguales o diferentes y pueden localizarse en cualquiera de las posiciones orto, meta o para.

e.

"hetetoarilo" se refiere a un anillo aromático que tiene un único heteroátomo seleccionado de oxígeno, nitrógeno y azufre. Más específicamente, se refiere a un anillo de 5 ó 6, miembros que contiene 1 átomo de nitrógeno, 1 átomo de oxígeno, o un átomo de azufre. El anillo de 5 miembros tiene 2 dobles enlaces y el anillo de 6 miembros tiene 3 dobles enlaces. Ejemplos de tales sistemas de anillo heteroarilo incluyen, pero no se limitan a pirrolilo, furanilo, tiofenilo, y piridinilo.

f.

"sales farmacéuticamente aceptables" se quiere referir bien a "sales de adición de ácidos farmacéuticamente aceptables" o bien a "sales de adición de bases farmacéuticamente aceptables" dependiendo de la estructura real del compuesto.

g.

"sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables" se quiere aplicar a cualquier sal de adición de ácido orgánico o inorgánico no tóxica de los compuestos básicos representados por fórmula I o cualquiera de sus intermedios. Los ácidos inorgánicos ilustrativos que forman sales adecuadas incluyen ácido clorhídrico, bromhídrico, sulfúrico, y fosfórico, y las sales ácidas de metales tales como monohidrógeno ortofosfato de sodio, e hidrógenosulfato de potasio. Los ácidos orgánicos ilustrativos que forman sales adecuadas incluyen los ácidos mono, di y tricarboxílicos. Son ilustrativos de tales ácidos, por ejemplo, ácido acético, glicólico, láctico, pirúvico, malónico, succínico, glutárico, fumárico, málico, tartárico, cítrico, ascórbico, maleico, hidroximaleico, benzoico, hidroxibenzoico, fenilacético, cinnámico, salicílico, 2-fenoxibenzoico, p-toluenosulfónico, y ácidos sulfónicos tales como ácido metanosulfónico, y ácido 2-hidroxietanosulfónico. Tales sales pueden existir bien en una forma hidratada o bien en una forma sustancialmente anhidra. En general, las sales de adición de ácido de estos compuestos son solubles en agua y diversos disolventes orgánicos hidrófilos, y las cuales en comparación con sus formas de base libre, generalmente demuestran puntos de fusión más altos.

h.

"sales de adición de bases farmacéuticamente aceptables" se quiere aplicar a cualquier sal de adición de base orgánica o inorgánica no tóxica de los compuestos representados por la fórmula I, o cualquiera de sus intermedios. Las bases ilustrativas que forman sales adecuadas incluyen hidróxidos de metales alcalinos o alcalinotérreos tales como hidróxidos de sodio, potasio, calcio, magnesio o bario; amoníaco, y aminas orgánicas alifáticas, alicíclicas, o aromáticas tales como metilamina, dimetilamina, trimetilamina, y picolina.

i.

"profármaco" se refiere a compuestos que son rápidamente transformados in vivo para producir el compuesto progenitor de las fórmulas anteriormente mencionadas, por ejemplo, mediante hidrólisis en sangre. Se proporciona una discusión minuciosa en T. Higuchi y V. Stella, "Pro-drugs as Novel Delivery Systems", vol. 14 de la A.C.S. Symposium Series, y en "Bioreversible Carriers in Drug Design", ed. Edward B. Roche, American Pharmaceutical Association y Pergamon Press, 1987, ambas de las cuales se incorporan en el presente documento mediante referencia.

j.

"compuesto de fórmula I", "compuestos de la invención" y "compuestos" se usan indistintamente a lo largo de toda la solicitud y deberían tratarse como sinónimos.

k.

"paciente" se refiere a animales de sangre caliente tales como, por ejemplo, conejillos de indias, ratones, ratas, gerbos, gatos, conejos, perros, monos, chimpancés, y seres humanos.

l.

"tratar" se refiere a la capacidad de los compuestos bien para disipar, aliviar, o ralentizar la progresión de la enfermedad (o afección) del paciente o cualquier tejido dañado asociado con la enfermedad.

Algunos de los compuestos de fórmula I existirán como isómeros ópticos. Cualquier referencia en esta solicitud a uno de los compuestos representados por la fórmula I se supone que abarca tanto un isómero óptico específico como una mezcla de isómeros ópticos (a menos que se excluya expresamente). Los isómeros ópticos específicos se pueden separar y recuperar mediante técnicas conocidas en la técnica tales como cromatografía sobre fases quirales estacionarias o resolución por medio de formación de sales quirales y separación subsiguiente mediante cristalización selectiva. De forma alternativa, la utilización de un isómero óptico específico como material de partida producirá el isómero correspondiente como producto final.

Además, los compuestos de la presente invención pueden existir en formas no solvatadas igual que en formas solvatadas con disolventes farmacéuticamente aceptables, tales como agua, etanol, y similares. En general, las formas solvatadas se consideran equivalentes a las formas no solvatadas para los propósitos de la presente invención.

Cualquier referencia en esta solicitud a un compuesto de fórmula I, se pretende que cubra los compuestos individualmente, en forma de mezclas, en forma de sales, en forma de solvatos o cualquier combinación de los mismos.

Todos los compuestos de fórmula I tienen al menos dos anillos fenilo, como se representa inmediatamente a continuación:

2

El anillo A puede estar insustituido, o puede estar sustituido con uno o dos sustituyentes como se define mediante R^{1} y R^{2}. R^{1} y R^{2} pueden representarse mediante sustituyentes idénticos, o sustituyentes diferentes. En una realización, R^{1} y R^{2} cada uno de ellos se representas por restos isopropilo y ambos se localizan en las posiciones orto del anillo fenilo.

El anillo B puede también sustituirse opcionalmente, como se enumera para R^{4}. R^{4} puede representar hasta 3 sustituyentes, distintos de hidrógeno, como se describe anteriormente. Estos sustituyentes se pueden localizar en cualquiera de las posiciones orto, meta o para.

R^{3} se puede representar también por un anillo fenilo o un resto fenilalquileno. Cualquiera de tales anillos fenilo puede estar sustituido también con hasta 3 sustituyentes, como se describe anteriormente. Se pueden localizar en cualquiera de las posiciones orto, meta o para.

R^{3} se puede representar también por un anillo heteroarilo o por un resto heteroarilalquileno. El anillo heteroarilo se puede anclar al átomo de nitrógeno indicado mediante cualquier átomo de carbono del anillo heteroarilo. Asimismo, si q es 1, 2, 3 ó 4, entonces el anillo heteroarilo se puede enlazar al resto alquileno por medio de cualquiera de sus átomos de carbono.

En una realización adicional de la invención, la fórmula IA ejemplifica un subgénero de fórmula I, particularmente útil para aplicación tópica.

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En la fórmula IA, R^{1} y R^{2} son cada uno de ellos isopropilo (orto), p es 1 y X es metileno, como se ejemplificó anteriormente; R^{3} se representa mediante alquilo(C_{1-6}) o heteroarilo, (más típicamente isopropilo, o piridilo) y R^{4} es como se define en fórmula I.

Ejemplos más específicos de compuestos de fórmula Ia incluyen:

a)

N-bencil-N'-(2,6-diisopropil-fenil)-N-isopropil-malonamida;

b)

N'-[2,6-bis(1-metiletil)fenil]-N-(1-metiletil)-N-[[4-(metiltio)fenil]metil]-propanodiamida y;

c)

N-[2,6-bis-(1-metiletil)fenil]-\beta-[[(4-metoxifenil)metil](2-piridinil)amino]-\beta-oxo-propanamida.

B) Síntesis

Los compuestos de fórmula I se han descrito previamente en la bibliografía. La atención de los lectores se dirige a la solicitud de patente europea Nº. 0 433 662, la cual se incorpora en el presente documento mediante referencia. La solicitud '662 describe que los compuestos de fórmula I tienen actividad inhibidora de la acil-coenzima A colesterol aciltransferasa (ACAT). La solicitud '662 describe que estos compuestos se pueden usar para reducir niveles elevados de colesterol y para tratar aterosclerosis. La solicitud '662 no describe que esos compuestos se pueden usar para disminuir la secreción de sebo.

La solicitud '662 describe cómo preparar los compuestos de la fórmula I. La atención del lector se dirige a las páginas 7-20 donde se describen procedimientos para sintetizar estos compuestos. Los procedimientos para preparar sales farmacéuticamente aceptables de estos compuestos se describen en la página 6 de la memoria descriptiva.

C) Usos médicos y cosméticos

La inhibición de la acil-coenzima A colesterol aciltransferasa (ACAT) bloquea la esterificación del colesterol libre a éster de colesterol. Los ésteres de colesterol son la forma principal de transporte y almacenamiento de colesterol en animales. En los intestinos, los inhibidores de ACAT han mostrado inhibir la absorción de colesterol del intestino. En el hígado, la inhibición de ACAT ha mostrado disminuir la formación y secreción de lipoproteínas que contienen colesterol disminuyendo la masa de ésteres de colesterol del núcleo de la lipoproteína. Por estas razones, los inhibidores de ACAT se han evaluado previamente como medio para disminuir los niveles de colesterol en suero.

Las glándulas sebáceas dérmicas son glándulas holocrinas que segregan una mezcla de lípidos conocidos como sebo. El sebo se compone de triglicéridos, cera, ésteres de esteroles y escualeno. Hay variación considerable en la composición del sebo humano debido a variables individuales tales como edad, sexo, dieta, y enfermedad. El sebo se produce en las células acinares de las glándulas sebáceas, se acumula a medida que esas células maduran y migran hacia el centro de la glándula. En la maduración, las células acinares se lisan y liberan suero en el conducto lumenal, del cual se segrega el sebo.

La formación del sebo se regula mediante una variedad de hormonas que actúan primariamente para regular la tasa de metabolismo de lípidos. Las ceras y los esteroles se convierten, en las células acinares, en una forma éster estable para almacenamiento por medio de la actividad de una variedad de aciltransferasas y transferasas de ácidos grasos. Estos ésteres se almacenan después en gotitas de lípidos dentro de las células acinares antes de liberarse.

Los compuestos de fórmula I bloquean la conversión del colesterol libre en éster de colesterol, conduciendo a niveles aumentados de colesterol libre en las células acinares. Aunque el mecanismo celular no se conoce totalmente en la actualidad, las células acinares producen menos sebo cuando contactan con un inhibidor ACAT.

Así, los compuestos de fórmula I inhiben la secreción de sebo y reducen así la cantidad de sebo en la superficie de la piel. Los compuestos pueden usarse para tratar una variedad de enfermedades dérmicas tales como acné o dermatitis seborreica.

Además de tratar enfermedades asociadas con exceso de producción de sebo, los compuestos se pueden usar también para conseguir un efecto cosmético. Algunos consumidores creen que están aquejados de glándulas sebáceas hiperactivas. Ellos sienten que su piel es grasa y de este modo no atractiva. Estos individuos pueden utilizar los compuestos de fórmula I para disminuir la cantidad de sebo en su piel. Disminuir la secreción del sebo aliviará las pieles grasas en individuos aquejados con tales afecciones.

Con el fin de mostrar los efectos biológicos descritos anteriormente, los compuestos necesitan administrarse en una cantidad suficiente para inhibir producción y/o secreción de sebo por las glándulas sebáceas y las células acinares. Esta cantidad puede variar dependiendo de la enfermedad/afección particular que se trate, la gravedad de la enfermedad/afección del paciente, el paciente, el compuesto particular que se administra, la vía de administración, y la presencia de otros estados morbosos subyacentes en el paciente, etc. Cuando se administran sistémicamente, los compuestos típicamente muestran su efecto a un intervalo de dosificación de aproximadamente 0,1 mg/kg/día a aproximadamente 100 mg/kg/día para cualquiera de las enfermedades o afecciones enumeradas anteriormente. La administración repetida diaria puede ser deseable y variará de acuerdo con las afecciones señaladas anteriormente.

Los compuestos de la presente invención se pueden administrar mediante una variedad de vías. Son eficaces si se administran oralmente. Los compuestos también se pueden administrar parenteralmente (es decir subcutáneamente, intravenosamente, intramuscularmente, intraperitonealmente, o intratecalmente), rectalmente o tópicamente.

En una realización típica, los compuestos se administran tópicamente. La administración tópica es especialmente apropiada para acné y para indicaciones cosméticas. Los compuestos se aplicarán a aquellas áreas de la piel aquejadas con exceso de producción de sebo. La dosis variará, pero como una directriz general, el compuesto estará presente en un vehículo dermatológicamente aceptable en una cantidad desde 0,01 hasta 10% p/p y la preparación dermatológica se aplicará al área afectada de 1 a 4 veces diariamente. "Dermatológicamente aceptable" se refiere a un vehículo el cual podrá aplicarse a la piel, pelo o cuero cabelludo, y el cual permitirá al fármaco difundirse al sitio de acción (es decir, las glándulas sebáceas y/o las células acinares).

D) Co-administración

En una realización adicional de la invención, los compuestos de fórmula I se pueden coadministrar con otros compuestos para potenciar adicionalmente su actividad, o para minimizar efectos secundarios potenciales. Por ejemplo, se ha usado antibióticos, tales como tetraciclina y clindamicina, para aliviar acné. Los antibióticos erradican el microorganismo, Propionbacterium acnes, conduciendo a una reducción en el acné de los pacientes. Los compuestos de fórmula I pueden coadministrarse con cualquier antibiótico adecuado para el tratamiento de acné.

Los retinoides, tales como isotretinoína, han mostrado disminuir la producción de sebo y se usan para tratar acné. Estos retinoides se pueden coadministrar con un compuesto de fórmula I con el fin de disminuir la producción de sebo y/o de tratar acné.

El estrógeno y la progesterona han mostrado cada uno disminuir la producción de sebo. Estos compuestos, o cualquier agonista sintético del receptor del estrógeno o la progesterona, se pueden coadministrar con un compuesto de fórmula I con el fin de disminuir la producción de sebo.

Los antiandrógenos han mostrado disminuir la secreción de sebo. Los antiandrógenos pueden trabajar con un número de mecanismos diferentes. Por ejemplo, algunos compuestos bloquean la conversión de testosterona a 5-\alpha-dihidrotestosterona, la cual es responsable del efecto biológico en muchos tejidos. Los inhibidores de 5-alfa-reductasa, tales como finasterida, han mostrado disminuir la producción de sebo. Finasterida está comercialmente disponible a partir de Merck bajo el nombre comercial de Propecia®. Ejemplos de otros inhibidores de 5-\alpha-reductasa incluyen dutasterida (Glaxo Smithkline). Otros antiandrógenos son antagonistas del receptor de andrógenos. Por ejemplo, los antagonistas de andrógenos, tales como flutamida, han demostrado disminuir la producción de sebo. Tales compuestos se pueden coadministrar con los compuestos de fórmula I para disminuir la producción de sebo.

Como se usa en esta solicitud, co-administrado se refiere a administrar un compuesto de fórmula I con una segunda sustancia medicinal, que típicamente tiene un mecanismo de acción diferente, usando una pauta de dosificación que promueve el resultado deseado. Esto se puede referir a dosificación simultánea, dosificación a tiempos diferentes durante un único día, o incluso dosificación en días diferentes. Los compuestos se pueden administrar separadamente o se pueden combinar en una formulación individual. Las técnicas para preparar tales formulaciones se describen más adelante.

E. Formulaciones farmacéuticas y cosméticas

Si se desea, los compuestos se pueden administrar directamente sin ningún vehículo. Sin embargo, para facilitar la administración, típicamente se formularán en vehículos farmacéuticos.

Para la administración oral, los compuestos se pueden formular en preparaciones sólidas o líquidas tales como cápsulas, píldoras, comprimidos, pastillas, fusiones, polvos, suspensiones, o emulsiones. Las formas unitarias sólidas de dosificación pueden ser cápsulas del tipo ordinario de gelatina que contienen, por ejemplo, tensioactivos, lubricantes y cargas inertes tales como lactosa, sacarosa, y almidón de maíz o pueden ser preparaciones de liberación mantenida.

En otra realización, los compuestos se pueden disponer en comprimidos con bases convencionales de comprimido tales como lactosa, sacarosa, y almidón de maíz en combinación con aglutinantes, tales como goma arábiga, almidón de maíz, o gelatina, agentes disgregantes tales como almidón de patata o ácido algínico, y un lubricante tal como ácido esteárico o estearato de magnesio. Las preparaciones líquidas se preparan disolviendo el ingrediente activo en un disolvente farmacéuticamente aceptable acuoso o no acuoso, el cual puede contener también agentes de suspensión, agentes edulcorantes, agentes aromatizantes, y agentes conservantes de la forma en que se conoce en la técnica.

Para la administración parenteral los compuestos se pueden disolver en un vehículo farmacéutico fisiológicamente aceptable y administrarse bien como una disolución o bien como una suspensión. Ilustrativos de vehículos farmacéuticos adecuados son agua, disolución salina, disoluciones de dextrosa, disoluciones de fructosa, etanol, o aceites de origen animal, vegetal, o sintético. El vehículo farmacéutico puede contener también conservantes, tampones, etc., conforme se conocen en la técnica. Cuando los compuestos se administran intratecalmente, pueden también disolverse en el fluído cerebroespinal conforme se conoce en la técnica.

Típicamente, sin embargo, los compuestos se incorporarán en formulaciones adecuadas para administración tópica. Se puede usar cualquiera de las formulaciones tópicas conocidas en la técnica. Los ejemplos de tales formulaciones tópicas incluyen lociones, pulverizaciones, cremas, ungüentos, pomadas, geles, etc. Los procedimientos reales para preparar las formulaciones tópicas se conocen o son evidentes para aquellos expertos en la técnica, y se describen en detalle en Remington's Pharmaceutical Sciences, 1990 (referencia anterior); y Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, 6ª edición, Williams & Wilkins (1995).

En una realización adicional, las formulaciones anteriormente descritas se pueden empaquetar para su distribución en la venta al por menor (es decir, un kit o artículo de fabricación). El paquete contendrá instrucciones aconsejando al paciente cómo usar el producto para aliviar afecciones tales como acné, piel grasa, etc. Tales instrucciones se pueden imprimir en la caja, pueden ser un folleto separado o imprimirse sobre el lado del recipiente que lleva la formulación, etc.

Los compuestos de la fórmula I se pueden mezclar también con cualquier vehículo inerte y utilizarse en ensayos de laboratorio con el fin de determinar la concentración de los compuestos en el suero, orina, etc., del paciente como se conoce en la técnica. Los compuestos se pueden usar también como una herramienta de investigación.

Aunque la invención se ha descrito en conexión con realizaciones específicas de la misma, se entenderá que es capaz de modificaciones adicionales y esta solicitud pretende cubrir cualesquiera variaciones, usos o adaptaciones de la invención, que sigan, en general, los principios de la invención e incluyendo tales desviaciones de la presente discusión que forman parte de la práctica conocida o de rutina en la técnica de la invención. Los siguientes ejemplos y datos biológicos se presentan con el fin de ilustrar adicionalmente la invención. Esta discusión no se debería considerar de forma que limite la invención en modo alguno.

Ejemplo 1

Luderschmidt y cols. describen un modelo animal para probar si los compuestos son capaces de modular la secreción de sebo. Arch. Derm. Res. 258, 185-191 (1977). Este modelo usa hámsters de raza Siria, cuyas orejas contienen glándulas sebáceas. Los compuestos se pueden administrar a estos animales para determinar si un agente de prueba es capaz de modular la producción de sebo.

Una serie de compuestos conocidos por inhibir ACAT se tamizaron usando procedimientos análogos a aquellos de Luderschmidt y cols. La tabla IA muestra los resultados obtenidos con diamidas seleccionadas abarcadas por la fórmula I anteriormente mencionada. La tabla IB muestra los resultados obtenidos con una serie de diamidas no abarcadas por la fórmula I. La fórmula IC muestra los resultados obtenidos con otros potentes inhibidores de ACAT que no son diamidas.

Las tablas IA-IC también recogen la actividad del compuesto para ACAT de rata, medida en términos de CI_{50}. Estos valores se determinaron midiendo la transferencia mediada por ACAT del ácido oléico tritiado de acil-CoA a colesterol para dar oleato de colesterilo marcado. La fuente de la actividad de ACAT fueron homogenados de tejido intestinal de rata. Las concentraciones predeterminadas de: 1) homogenado intestinal que contiene colesterol endógeno, 2) compuesto de prueba, y 3) [1-^{14}C]oleoil-CoA se pusieron en contacto durante un tiempo predeterminado. La reacción se inactivó y los resultados se determinaron mediante cromatografía en capa fina. Se ha descrito ensayos análogos usando intestino de conejo en Roth y cols., en J. Med. Chem. 35:1609-1617 (1992).

El ensayo para inhibición de sebo se llevará a cabo de la siguiente manera. Hámsters machos de raza siria de 9 a 10 semanas de edad se introdujeron en el ambiente de laboratorio y se aclimataron durante 2 semanas previas a su uso en el estudio. Cada grupo constó de 5 animales y se procesaron en paralelo con vehículo y controles positivos. Antes de su administración, se disolvieron 10 mg de cada compuesto en 1 ml de disolvente Universal (etanol/propilenglicol (70/30% v/v)) para lograr una concentración final de 1% p/v.

Se administró tópicamente una dosis a los animales dos veces al día, cinco días a la semana, durante 4 semanas. Cada dosis consistió en 25 microlitros de vehículo control o fármaco. La dosis se aplicó a las superficies ventrales tanto de la oreja izquierda como de la derecha. Todos los animales se sacrificaron aproximadamente 18-24 horas después de la dosis final. Se recogieron las orejas derechas de cada animal y se usaron para el análisis de sebo.

Las orejas se prepararon para los análisis por HPLC de la siguiente manera. Se tomó una biopsia por trepanación distal de 8 mm, justo sobre la marca anatómica "V" en la oreja para normalizar el área de muestra. El troquelado se separó. La superficie ventral de la biopsia (el área donde la dosis tópica se aplicó directamente a las glándulas sebáceas) se retuvo para el ensayo y la superficie dorsal de la punción de la biopsia se desechó.

Las muestras de tejido se inundaron con gas N_{2} y se almacenaron a -80ºC bajo atmósfera de nitrógeno hasta los análisis por HPLC. Además de las muestras de la oreja se almacenó también una alícuota de cada fármaco y vehículo (al menos 250 \mul) a -80ºC para incluirla en el análisis por HPLC.

Los análisis por HPLC se llevaron a cabo sobre un extracto de la muestra de tejido. Las muestras de tejido se pusieron en contacto con 3 ml de disolvente (una mezcla 4:1 de 2,2,4-trimetilpentano y alcohol isopropílico). La mezcla se agitó durante 15 minutos y se almacenó durante toda una noche a temperatura ambiente, protegida de la luz. La mañana siguiente se añadió 1 ml de agua a la muestra, y se agitó durante 15 minutos. La muestra se centrifugó después a aproximadamente 1500 rpm durante 15 minutos. Se transfirieron dos ml de la fase orgánica (capa superior) a un vial de vidrio, se secaron a 37ºC, bajo atmósfera de nitrógeno, durante aproximadamente 1 hora, y después se liofilizaron durante aproximadamente 48 horas. Las muestras se retiraron entonces del liofilizador y cada vial se reconstituyó con 600 \mul de disolvente A (trimetilpentano/tetrahidrofurano (99:1)). Después las muestras se volvieron a tapar y se agitaron con vórtex durante 5 minutos.

Se transfirieron 200 \mul de cada muestra entonces a un vial premarcado de HPLC de 200 \mul con insertos de vidrio de 200 \mul. Los viales de HPLC se sitúan en la bandeja del dispositivo de automuestreo para la unidad de HPLC de Agilent serie 1100. El sistema de HPLC Agilent 1100 consiste en un dispositivo de automuestreo termostatizado, una bomba cuaternaria, un calentador de columna, y un módulo de interfaz A/D. Todos los componentes se controlaron mediante el software Agilent ChemStation. Una columna analítica Waters Spherisorb SW3 de 4,6 x 100 mm se mantuvo a 30ºC mediante la unidad calentadora de columna Agilent. El dispositivo de automuestreo de HPLC se programó para mantener la temperatura de la muestra a 20ºC a través del proceso.

Se inyectaron 10 \mul de cada muestra por triplicado en la columna. Se usaron dos disolventes para el gradiente de disolvente. El disolvente A era una mezcla de trimetilpentano y tetrahidrofurano (99:1). El disolvente B era acetato de etilo. El gradiente utilizado se describe en la tabla a continuación:

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El Detector Evaporativo por Dispersión Luminosa (ELSD) Sedex 75 se hizo funcionar a 45ºC con un aumento de 5, y la presión de N_{2} se mantuvo a 3,1 bares (310 KPa). Una señal análoga obtenida por el instrumento se envió al módulo de la interfaz A/D del Agilent donde se convierte en un dato de salida digital. La conversión se basó en un punto objetivo de 10000 mAU/voltio y la tasa de datos se ajustó a 10 Hz (0,03 minutos). El dato de salida digital resultante se alimentó después al software Agilent ChemStation para la integración del área del pico.

Los resultados del análisis por HPLC se comunican más adelante en las tablas IA-C. Los resultados se dan en términos de la reducción en la producción de éster de colesterol (EC) y éster de cera (WE), cuando se comparan con el vehículo de control. Un número negativo indica que el inhibidor de ACAT en realidad incrementa la producción de sebo.

TABLA IA Compuestos de la Invención

5

TABLA IB Ejemplos Comparativos

6

TABLA IC

7

8

9

10

Las tablas IA, IB, y IC resumen los resultados obtenidos en los experimentos descritos anteriormente. La tabla IA muestra los resultados obtenidos con compuestos abarcados por la fórmula I (es decir la invención). Las tablas IB y IC se incluyen para propósitos comparativos e incluyen compuestos no descritos por la fórmula I. La tabla IB muestra diamidas estructuralmente relacionadas son las de fórmula I. La tabla IC muestra los resultados obtenidos con inhibidores de ACAT conocidos, no relacionados estructuralmente con las diamidas, pero que tienen una CI_{50} de 50 nm, o menos, cuando se mide en el ensayo de ACAT descrito anteriormente.

Para facilitar esta comparación se usó un formato común en las tres tablas. A cada compuesto se le asignó un número de compuesto arbitrario, el cual se muestra en la columna de la izquierda (es decir, en la columna n.º 1). La segunda columna muestra la estructura del compuesto probado y la tercera columna muestra su eficacia como un inhibidor de ACAT en el ensayo anterior.

Las columnas de la 4 a la 6 muestran los resultados que los compuestos tuvieron sobre la secreción de sebo. Los resultados se expresan en términos de la diferencia con respecto al control. Un número positivo refleja una disminución en la producción del componente del sebo que se mide, es decir éster de colesterol (CE) o éster de cera (WE). Un número negativo indica que el compuesto incrementa la producción de EC o WE.

La columna 4 muestra la capacidad de los compuestos para reducir la cantidad de éster de colesterol en la muestra de sebo. La inhibición del éster de colesterol es importante porque ACAT es responsable de la conversión del colesterol al éster de colesterol. Estos resultados reflejan la capacidad de los compuestos, o la falta de la misma, para modular ACAT en el tejido diana (glándulas sebáceas de hámsters).

La columna 5 muestra el efecto que el compuesto tuvo sobre la generación de éster de cera. Los ésteres de cera son marcadores específicos de las glándulas sebáceas y no se detectan apreciablemente en ninguna otra capa de la piel. La reducción del éster de cera refleja una disminución de la secreción de sebo. La columna 6 es una suma de los resultados expresados en las columnas 4 y 5 (y se incluye para dilucidar adicionalmente diferencias relativas en actividad).

Como se muestra en la tabla IA, las diamidas de fórmula I disminuyeron significativamente la secreción de éster de colesterol, indicando que ACAT se estaba inhibiendo en el tejido diana. El éster de cera disminuyó también indicando que la secreción de sebo total se redujo comparada con el control. Por ejemplo el compuesto n.º 1 disminuyó el EC en un 95% y el WE en un 80%. Los compuestos 2 y 3 produjeron resultados comparables.

Una comparación con la tabla IB mostró diferencias significativas. A pesar de la similitud estructural, estas diamidas tienen significativamente menos impacto en la secreción de EC y WE.

Una comparación con los compuestos de la tabla IC también es ilustrativa. Estos compuestos son todos inhibidores potentes de ACAT. Todos tuvieron valores de CI_{50} de 50 nm, o menos. A pesar de esta eficacia, como grupo, tuvieron significativamente menos efecto en la secreción de sebo que el compuesto de fórmula I. Tales resultados fueron inesperados.

Claims (13)

1. Uso de un compuesto de la fórmula

11

en la cual R^{1} y R^{2} cada uno de ellos se representa independientemente mediante hidrógeno, alquilo(C_{1-4}), alcoxi(C_{1-6}), halógeno, hidroxi, trifluorometilo, trifluorometoxi, ciano, NR^{5}R^{6}, o SR^{7}; X se representa mediante -CR^{8}R^{9}-(CH_{2})_{n}; R^{3} se representa mediante hidrógeno, alquilo(C_{1-6}), -(CH_{2})_{q}-Ph, o -(CH_{2})_{q}-M; p se representa mediante un número entero de 1 a 4; R^{4} se representa mediante un sustituyente seleccionado del grupo que consta de hidrógeno, alquilo(C_{1-6}), alcoxi(C_{1-6}), halógeno, hidroxi, trifluorometilo, trifluorometoxi, ciano, NR^{5}R^{6}, y SR^{7}; R^{5}, R^{6}, R^{7}, R^{8}, y R^{9} se representa cada uno de ellos independientemente mediante hidrógeno o alquilo(C_{1-6}); Ph se representa mediante un anillo fenilo el cual puede estar sustituido opcionalmente; M se representa mediante un anillo heteroarilo de 5 ó 6 miembros, que contiene 1 heteroátomo seleccionado del grupo N, S, u O; n y q se representa cada uno de ellos independientemente mediante un número entero de 0-4; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de enfermedades asociadas al exceso de producción de sebo.

2. Uso de acuerdo con la reivindicación 1, en el que dicha enfermedad es acné.

3. Uso de acuerdo con la reivindicación 1, en el que dicha enfermedad es dermatitis seborreica.

4. Uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el cual dicho compuesto se selecciona del grupo que consta de N-bencil-N'-(2,6-diisopropilfenil)-N-isopropil-malonamida, N'-[2,6-bis(1-metiletil)fenil]-N-(1-metiletil)-N-[[4-(metiltio)fenil]metil]-propanodiamida, y N-[2,6-bis(1-metiletil)fenil]-\beta-[[(4-metoxifenil)metil](2-piridinil)amino]-\beta-oxo-propanamida.

5. Uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que dicho compuesto es N-bencil-N'-(2,6-diisopropil-fenil)-N-isopropil-malonamida.

6. Un compuesto de la fórmula

12

en la que R^{1}, R^{2}, R^{3}, R^{4}, X y p son tal como se describe para la reivindicación 1, para usar en un procedimiento de tratamiento de enfermedades asociadas al exceso de producción de sebo.

7. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 6, en el que dicha enfermedad es acné.

8. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 6, en el que dicha enfermedad es dermatitis seborreica.

9. Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 6 a 8, en el cual dicho compuesto se selecciona del grupo que consta de N-bencil-N'-(2,6-diisopropilfenil)-N-isopropil-malonamida, N'-[2,6-bis(1-metiletil)fenil]-N-(1-metiletil)-N-[[4-(metiltio)fenil]metil]-propanodiamida, y N-[2,6-bis(1-metiletil)fenil]-\beta-[[(4-metoxifenil)metil](2-piridinil)amino]-\beta-oxo-propanamida.

10. Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 6 a 8, en el que dicho compuesto es N-bencil-N'-(2,6-diisopropil-fenil)-N-isopropil-malonamida.

11. Uso cosmético de un compuesto de la fórmula,

13

en la cual R^{1} y R^{2} cada uno de ellos se representa independientemente mediante hidrógeno, alquilo(C_{1-6}), alcoxi(C_{1-6}), halógeno, hidroxi, trifluorometilo, trifluorometoxi, ciano, NR^{5}R^{6}, o SR^{7}; X se representa mediante -CR^{8}R^{9}-(CH_{2})_{n}; R^{3} se representa mediante hidrógeno, alquilo(C_{1-6}), -(CH_{2})_{q}-Ph, o -(CH_{2})_{q}-M; p se representa mediante un número entero de 1 a 4; R^{4} se representa mediante un sustituyente seleccionado del grupo que consta de hidrógeno, alquilo(C_{1-6}), alcoxi(C_{1-6}), halógeno, hidroxi, trifluorometilo, trifluorometoxi, ciano, NR^{5}R^{6}, y SR^{7}; R^{5}, R^{6}, R^{7}, R^{8}, y R^{9} se representa cada uno de ellos independientemente mediante hidrógeno o alquilo(C_{1-6}); Ph se representa mediante un anillo fenilo el cual puede estar sustituido opcionalmente; M se representa mediante un anillo heteroarilo de 5 ó 6 miembros, que contiene 1 heteroátomo seleccionado del grupo N, S, u O; n y q se representa cada uno de ellos independientemente mediante un número entero de 0-4; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para aliviar la piel grasa.

12. Un uso cosmético de acuerdo con la reivindicación 11, en el cual dicho compuesto se selecciona del grupo que consta de N-bencil-N'-(2,6-diisopropilfenil)-N-isopropil-malonamida, N'-[2,6-bis(1-metiletil)fenil]-N-(1-metiletil)-N-[[4-(metiltio)fenil]metil]-propanodiamida, y N-[2,6-bis(1-metiletil)fenil]-\beta-[[(4-metoxifenil)metil](2-piridinil)amino]-\beta-oxo-propanamida.

13. Un uso cosmético de acuerdo con la reivindicación 11, en el que dicho compuesto es N-bencil-N'-(2,6-diisopropil-fenil)-N-isopropil-malonamida.