ES2289161T3 - Derivados de 4-(heteroaril de 6 miembros)-acil pirrolidina como inhibidores de hcv. - Google Patents

Derivados de 4-(heteroaril de 6 miembros)-acil pirrolidina como inhibidores de hcv. Download PDF

Info

Publication number
ES2289161T3
ES2289161T3 ES02783059T ES02783059T ES2289161T3 ES 2289161 T3 ES2289161 T3 ES 2289161T3 ES 02783059 T ES02783059 T ES 02783059T ES 02783059 T ES02783059 T ES 02783059T ES 2289161 T3 ES2289161 T3 ES 2289161T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
tert
rel
pyrrolidine
isobutyl
pyrazin
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Lifetime
Application number
ES02783059T
Other languages
English (en)
Inventor
Gianpaolo GlaxoSmithKline BRAVI
Rossella Care of GlaxoSmithKline GUIDETTI
David GlaxoSmithKline HAIGH
Charles David GlaxoSmithKline HARTLEY
Peter David GlaxoSmithKline HOWES
Deborah Lynette Care of GlaxoSmithKline JACKSON
Victoria Lucy Helen Care of GlaxoSmithKline LOVEGROVE
Pritom GlaxoSmithKline SHAH
Martin John GlaxoSmithKline SLATER
Katrina Jane GlaxoSmithKline WAREING
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Glaxo Group Ltd
Original Assignee
Glaxo Group Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from GB0126440A external-priority patent/GB0126440D0/en
Priority claimed from GB0203900A external-priority patent/GB0203900D0/en
Priority claimed from GB0219321A external-priority patent/GB0219321D0/en
Application filed by Glaxo Group Ltd filed Critical Glaxo Group Ltd
Application granted granted Critical
Publication of ES2289161T3 publication Critical patent/ES2289161T3/es
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Lifetime legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing three or more hetero rings

Landscapes

  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)

Abstract

Un compuesto de **Fórmula**, en la que: A representa OR1, NR1R2 o R1, donde R1 y R2 se seleccionan independientemente entre el grupo que consiste en hidrógeno, alquilo C1-6, arilo, heteroarilo, arilalquilo y heteroarilalquilo; o R1 y R2 junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos forman un grupo cíclico, saturado, de 5 ó 6 miembros; B representa C(O)R3, donde R3 se selecciona entre el grupo que consiste en arilo y heteroarilo; C representa alquilo C1-6, arilo, heteroarilo o heterociclilo; D representa un anillo heterocíclico de 6 miembros, saturado o insaturado, que comprende tres o más átomos de carbono, pudiendo estar cada uno de ellos opcionalmente sustituido con R4 y R5, y uno a tres heteroátomos seleccionados independientemente entre N, opcionalmente sustituido con hidrógeno, alquilo C1-6, C(O)R3, SO2R3, arilo, heteroarilo, arilalquilo o heteroarilalquilo; O; y S, opcionalmente sustituido con uno o dos átomos de oxígeno; donde el anillo de 6 miembros puede estar unidoen cualquier átomo de carbono endocíclico, y puede estar opcionalmente condensado con un anillo carbocíclico o heterocíclico, de 5 ó 6 miembros, saturado o insaturado, que puede estar opcionalmente sustituido a su vez en un átomo no condensado con alquilo C1-6, halo, OR8, C(O)NR6R7, C(O)R3, CO2H, CO2R3, NR6R7, NHC(O)R3, NHCO2R3, NHC(O)NR1R2, SO2NR1R2, SO2R3, nitro, ciano, oxo, arilo, heteroarilo y heterociclilo.

Description

Derivados de 4-(heteroaril de 6 miembros)-acil pirrolidina como inhibidores de HCV.
Campo de la invención
La presente invención se refiere a nuevos derivados de acilpirrolidina útiles como agentes antivirales. Específicamente, la presente invención implica nuevos inhibidores de HCV.
Antecedentes de la invención
La infección por HCV es una de las principales causas de enfermedad hepática humana en todo el mundo. En los EE.UU., se estima en 4,5 millones la cifra de americanos infectados crónicamente con HCV. Aunque sólo 30% de las infecciones agudas son sintomáticas, más de 85% de los individuos infectados desarrollan infección persistente crónica. El gasto en tratamientos para la infección por HCV en Estados Unidos se ha estimado en 5.460 millones de dólares en 1997. Se estiman en más de 200 millones las personas que están infectadas crónicamente en todo el mundo. La infección por HCV es responsable de 40-60% de todas las enfermedades hepáticas crónicas y de 30% de todos los trasplantes de hígado. La infección crónica por HCV es responsable de 30% de todas las cirrosis y enfermedades renales en fase terminal, y de cáncer de hígado en los EE.UU. El CDC estima que el número de muertes debidas a HCV aumentará como mínimo hasta 38.000/año para el año 2010.
Debido al elevado grado de variabilidad en los antígenos de la superficie del virus, a la existencia de múltiples genotipos virales y a la demostrada especificidad de la inmunidad, es poco probable el desarrollo de una vacuna eficaz en un futuro cercano. El interferón alfa (solo o junto con ribavirina) se ha usado ampliamente desde su aprobación para el tratamiento de la infección crónica por HCV. Sin embargo, frecuentemente se han asociado efectos secundarios adversos con este tratamiento: síntomas de tipo gripal, leucopenia, trombocitopenia, depresión por el uso de interferón, así como anemia inducida por la ribavirina (Lindsay, K. L. (1997), Hepatology 26 (supl. 1): 71S-77S). Esta terapia sigue siendo menos eficaz contra las infecciones provocadas por HCV de genotipo 1 (que constituye \sim75% de todas las infecciones por HCV en los mercados desarrollados) en comparación con las infecciones provocadas por los otros 5 genotipos principales de HCV. Desafortunadamente, sólo \sim50-80% de los pacientes responden a este tratamiento (medido por una reducción de los niveles en suero de ARN de HCV y la normalización de las enzimas hepáticas) y, de los tratados, 50-70% recaen en los 6 meses posteriores a la suspensión del tratamiento. Recientemente, con la introducción del interferón pegilado, han mejorado sustancialmente los porcentajes de respuesta inicial y sostenida, y el tratamiento de combinación de Peg-IFN con ribavirina constituye el patrón de oro para la terapia. Sin embargo, los efectos secundarios asociados con la terapia de combinación y la peor respuesta en los pacientes infectados con el genotipo 1 presentan oportunidades para mejorar el tratamiento de esta enfermedad.
Actualmente se acepta abiertamente que el virus de hepatitis C (HCV), identificado por primera vez por clonación molecular en 1989 (Choo, Q-L et al. (1989) Science 244: 359-362), es el agente causante más común de la hepatitis no A no B asociada a la transfusión (NANBH) (Ku, G et al. (1989) Science 244: 362-364). Debido a su estructura genómica y a la homología de secuencias, este virus se asignó como un nuevo género de la familia Flaviviridae. Como los otros miembros de la familia Flaviviridae, tales como los flavivirus (por ejemplo, el virus de la fiebre amarilla y el virus Dengue de los tipos 1-4) y los pestivirus (por ejemplo, el virus de la diarrea viral, el virus de la enfermedad de la frontera (border disease) y el virus de la fiebre clásica porcina) (Choo, Q-L et al. (1989) Science 244: 359-3; Miller, R.H. y R.H. Purcell (1990) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87:2057-2061), HCV es un virus con envuelta que contiene una molécula de ARN monocatenaria de polaridad positiva. El genoma de HCV tiene aproximadamente 9,6 kilobases (kb) con una región 5' no traducida (NTR), no protegida terminalmente, larga y muy conservada de aproximadamente 340 bases que funciona como un sitio interno de entrada de ribosomas (IRES) (Wang CY et al "An RNA pseudoknot is an essential structural element of the internal ribosome entry site located within the hepatitis C virus 5' noncoding region" [Article] RNA- A Publication of the RNA Society. 1(5): 526-537, 1995 Jul.). Este elemento va seguido de una región que codifica una sola fase de lectura abierta (ORF) larga que codifica un polipéptido de \sim3000 aminoácidos que comprende tanto las proteínas virales estructurales como las no estructurales.
Tras la entrada en el citoplasma de la célula, este ARN se traduce directamente en un polipéptido de \sim3000 aminoácidos que comprende tanto las proteínas virales estructurales como las no estructurales. Este polipéptido grande posteriormente se procesa en proteínas estructurales y no estructurales individuales por una combinación de proteinasas codificadas por el hospedador y por el virus (Rice, CM. (1996) en B.N. Fields, D.M.Knipe y P.M. Howley (eds) Virology 2ª Edición, p 931-960; Raven Press, N.Y.). Después del codón de terminación en el extremo de la ORF larga, hay una NTR 3' que consiste en líneas generales en tres regiones: una región de \sim40 bases que está poco conservada entre diversos genotipos, un tracto de poli(U)/polipirimidina de longitud variable y un elemento de 98 bases muy conservado también denominado "cola X 3'" (Kolykhalov, A. et al (1996) J. Virology 70:3363-3371; Tanaka, T. et al (1995) Biochem Biophys. Res. Commun. 215:744-749; Tanaka, T. et al (1996) J. Virology 70:3307-3312; Yamada, N. et al (1996) Virology 223:255-261). Es previsible que la NTR 3' forme una estructura secundaria estable que es esencial para el crecimiento de HCV en chimpancés y se cree que funciona en la iniciación y regulación de la replicación del ARN viral.
La proteína NS5B (591 aminoácidos, 65 kDa) de HCV (Behrens, S.E. et al (1996) EMBO J. 15:12-22), codifica una actividad ARN polimerasa dependiente de ARN (RdRp) y contiene motivos canónicos presentes en otras ARN polimerasas virales. La proteína NS5B está bastante bien conservada tanto intratípicamente (identidad de aminoácidos (aa) de \sim95-98% entre los aislados 1b) como intertípicamente (identidad de aa de \sim85% entre aislados del genotipo 1a y 1b). La esencialidad de la actividad RdRp de NS5B de HCV para la generación de una descendencia de viriones infecciosos se ha demostrado formalmente en chimpancés (A. A. Kolykhalov et al. (2000) Journal of Virology, 74(4), p.2046-2051). De esta manera, se prevé que la inhibición de la actividad RdRp de NS5B (inhibición de la replicación de ARN) cure la infección por HCV.
Basándose en lo anterior, existe una necesidad significativa de identificar compuestos biológicos o sintéticos por su capacidad de inhibir HCV.
El documento WO01/28996A publicado el 26 de Abril de 2001, describe ciertos compuestos de pirrolidina sustituidos que tienen actividad inhibidora de neuraminidasa.
El documento WO99/54299A, publicado el 28 de Octubre de 1999, describe ciertos compuestos de pirrolidina sustituidos que tienen actividad inhibidora de neuraminidasa.
Compendio de la invención
La presente invención incluye compuestos que se representan a continuación en este documento, composiciones farmacéuticas que comprenden tales compuestos y el uso de los compuestos de la presente invención en el tratamiento de una infección viral, especialmente infección por HCV.
Descripción detallada de la invención
La presente invención proporciona compuestos de Fórmula (I):
1
en la que:
A representa OR^{1}, NR^{1}R^{2} o R^{1}, donde R^{1} y R^{2} se seleccionan independientemente entre el grupo que consiste en hidrógeno, alquilo C_{1-6}, arilo, heteroarilo, arilalquilo y heteroarilalquilo; o R^{1} y R^{2} junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos forman un grupo cíclico, saturado, de 5 ó 6 miembros;
B representa C(O)R^{3}, donde R^{3} se selecciona entre el grupo que consiste en alquilo C_{1-6}, arilo, heteroarilo, arilalquilo y heteroarilalquilo;
C representa alquilo C_{1-6}, arilo, heteroarilo o heterociclilo;
D representa un anillo heterocíclico de 6 miembros, saturado o insaturado, que comprende tres o más átomos de carbono, pudiendo estar cada uno de ellos opcionalmente sustituido con R^{4} y R^{5}, y uno a tres heteroátomos seleccionados independientemente entre N, opcionalmente sustituido con hidrógeno, alquilo C_{1-6}, C(O)R^{3}, SO_{2}R^{3}, arilo, heteroarilo, arilalquilo o heteroarilalquilo; O; y S, opcionalmente sustituido con uno o dos átomos de oxígeno; donde el anillo de 6 miembros puede estar unido en cualquier átomo de carbono endocíclico, y puede estar opcionalmente condensado con un anillo carbocíclico o heterocíclico, de 5 ó 6 miembros, saturado o insaturado, que puede estar opcionalmente sustituido a su vez en un átomo no condensado con alquilo C_{1-6}, halo, OR^{8}, C(O)NR^{6}R^{7}, C(O)R^{3}, CO_{2}H, CO_{2}R^{3}, NR^{6}R^{7}, NHC(O)R^{3}, NHCO_{2}R^{3}, NHC(O)NR^{1}R^{2}, SO_{2}NR^{1}R^{2}, SO_{2}R^{3}, nitro, ciano, oxo, arilo, heteroarilo y heterociclilo;
R^{4} y R^{5} se seleccionan independientemente entre hidrógeno, alquilo C_{1-6}, halo, OR^{8}, C(O)NR^{6}R^{7}, C(O)R^{3}, CO_{2}H, CO_{2}R^{3}, NR^{6}R^{7}, NHC(O)R^{3}, NHCO_{2}R^{3}, NHC(O)NR^{1}R^{2}, SO_{2}NR^{1}R^{2}, SO_{2}R^{3}, nitro, oxo, arilo, heteroarilo y heterociclilo;
R^{6} y R^{7} se seleccionan independientemente entre hidrógeno, alquilo C_{1-6}, arilo y heteroarilo; y
R^{8} representa hidrógeno, alquilo C_{1-6}, arilalquilo o heteroarilalquilo;
E representa hidrógeno o alquilo C_{1-6};
F representa hidrógeno, alquilo C_{1-6}, arilo o heteroarilo; y
G representa hidrógeno, alquilo C_{1-6}, heterociclilalquilo, arilalquilo o heteroarilalquilo; y sales, solvatos y ésteres de los mismos, con la condición de que cuando A es OR^{1} entonces R^{1} sea distinto de terc-butilo.
Como se usa en este documento, el término "alquilo" se refiere a un grupo de hidrocarburo opcionalmente sustituido. El grupo hidrocarburo alquilo puede ser lineal, ramificado o cíclico, saturado o insaturado. Cuando el grupo hidrocarburo alquilo es cíclico, se entenderá que habrá un mínimo de 3 átomos de carbono en el grupo. Preferentemente, el grupo está saturado. Los restos alquilo preferidos son alquilo C_{1-4}. Los sustituyentes opcionales incluyen alquilo C_{1-6}, halo, OR^{8}, C(O)N^{R}6R^{7}, C(O)R^{3}, CO_{2}H, CO_{2}R^{3}, NR^{6}R^{7}, NHC(O)R^{3}, NHCO_{2}R^{3}, NHC(O)NR^{1}R^{2}, SO_{2}NR^{1}R^{2}, SR^{3}, SO_{2}R^{3}, nitro, oxo, ciano y heterociclilo.
Como se usa en este documento, el término "arilo" se refiere a un grupo aromático opcionalmente sustituido con al menos un anillo que tiene un sistema de electrones pi conjugado, que contiene hasta dos sistemas de anillos conjugados o condensados. El término "arilo" incluye grupos arilo y biarilo carbocíclicos, pudiendo estar todos ellos opcionalmente sustituidos. Los restos "arilo" preferidos son fenilos sin sustituir, monosustituidos, disustituidos o trisustituidos. Los sustituyentes "arilo" preferidos se seleccionan entre el grupo que consiste en alquilo C_{1-6}, halo, OR^{8}, C(O)NR^{6}R^{7}, C(O)R^{3}, CO_{2}H, CO_{2}R^{3}, NR^{6}R^{7}, NHC(O)R^{3}, NHCO_{2}R^{3}, NHC(O)NR^{1}R^{2}, SO_{2}NR^{1}R^{2}, SO_{2}R^{3}, nitro, oxo, heterociclilo, CF_{3}, piridina, fenilo, ciano y NO_{2}.
Como se usa en este documento, el término "heteroarilo" se refiere a un grupo aromático, de 5 ó 6 miembros, opcionalmente sustituido, que comprende de uno a cuatro heteroátomos seleccionados entre N, O y S, donde al menos un anillo tiene un sistema de electrones pi conjugados, conteniendo hasta dos sistemas de anillos conjugados o condensados. Los restos "heteroarilo" preferidos son tienilo y tiazolilo sin sustituir, monosustituidos, disustituidos o trisustituidos. Los sustituyentes "heteroarilo" preferidos se seleccionan entre el grupo que consiste en alquilo C_{1-6}, halo, OR^{8}, C(O)NR^{6}R^{7}, C(O)R^{3}, CO_{2}H, CO_{2}R^{3}, NR^{6}R^{7}, NHC(O)R^{3}, NHCO_{2}R^{3}, NHC(O)NR^{1}R^{2}, SO_{2}NR^{1}R^{2}, SO_{2}R^{3}, nitro, oxo, heterociclilo, CF_{3}, piridina, fenilo, ciano y NO_{2}.
Como se usan en este documento, los términos "heterocíclico" y "heterociclilo" se refieren a un grupo de hidrocarburo saturado, cíclico, de 5 ó 6 miembros, opcionalmente sustituido, que contiene de 1 a 4, preferiblemente 1 ó 2, heteroátomos seleccionados entre N, opcionalmente sustituido con hidrógeno, alquilo C_{1-6}, C(O)R^{3}, SO_{2}R^{3}, arilo o heteroarilo; O; y S, opcionalmente sustituido con uno o dos átomos de oxígeno.
Se apreciará que los compuestos de la presente invención pueden contener uno o más átomos de carbono asimétricos y pueden existir en formas racémica, diastereoisomérica y ópticamente activa. Se considera que todos estos compuestos racémicos, enantiómeros y diastereoisómeros están dentro del alcance de la presente invención.
Preferiblemente, A es OR^{1}, donde R^{1} es hidrógeno, o A es NR^{1}R^{2}, donde R^{1} y R^{2} son los dos H. Más preferiblemente, A es OR^{1}, donde R^{1} es hidrógeno.
Preferiblemente, cuando B representa C(O)R^{3}, R^{3} es arilo o heteroarilo; más preferiblemente, R^{3} es fenilo; se prefiere especialmente que R^{3} represente fenilo sustituido en la posición para con terc-butilo; se prefiere aún más que R^{3} represente fenilo sustituido en la posición para con terc-butilo y opcionalmente adicionalmente sustituido, preferiblemente meta-sustituido, con metilo, etilo, metoxi, etoxi o halo; más preferiblemente metoxi.
Preferiblemente, C se selecciona entre el grupo que consiste en alquilo C_{1-6}, arilo y heteroarilo; más preferiblemente C es metilo; isopropilo; fenilo opcionalmente sustituido con fenilo o NMe_{2}; piridinilo; 1,3-tiazinilo opcionalmente sustituido con halo, fenilo o NMe_{2}; tienilo; o benzotiazolilo.
Preferiblemente, D se selecciona entre el grupo (i) que consiste en piridilo, piranilo, pirimidinilo, piridazinilo, pirazinilo, 2H-1,2-oxazinilo, 2H-1,3- oxazinilo, 2H-1,4- oxazinilo, 2H-1,2-tiazinilo, 2H-1,3-tiazinilo, 2H-1,4-tiazinilo, 1,2,3-triazinilo, 1,2,4-triazinilo, 1,3,5-triazinilo, 2H-1,2,4-oxadiazinilo, 2H-1,2,5-oxadiazinilo, 2H-1,3,4-oxadiazinilo, 2H-1,3,4-oxadiazinilo, 2H-1,3,5-oxadiazinilo, 2H-1,2,4-tiadiazinilo, 2H-1,2,6-tiadiazinilo, 2H-1,3,4-tiadiazinilo, 2H-1,3,5-tiadiazinilo, 1,4,2-dioxazinilo, 4H-1,3,5-ditiazinilo, 1,4,2-ditiazinilo y derivados parcial o totalmente saturados de los mismos; cada uno de los cuales, cuando pueda aplicarse, puede estar opcionalmente sustituido a su vez en un átomo de carbono con R^{4} y R^{5}, en un átomo de nitrógeno con hidrógeno, alquilo C_{1-6}, C(O)R^{3}, SO_{2}R^{3}, arilo, heteroarilo, arilalquilo, o heteroarilalquilo, y en un átomo de azufre con uno o dos átomos de oxígeno; y cada uno de ellos puede estar opcionalmente condensado con dos átomos de carbono adyacentes del anillo con un anillo carbocíclico o heterocíclico, de 5 ó 6 miembros, saturado o insaturado, que puede estar opcionalmente sustituido a su vez en un átomo de carbono no condensado con alquilo C_{1-6}, halo, OR^{8}, C(O)NR^{6}R^{7}, C(O)R^{3}, CO_{2}H, CO_{2}R^{3}, NR^{6}R^{7}, NHC(O)R^{3}, NHCO_{2}R^{3}, NHC(O)NR^{1}R^{2}, SO_{2}NR^{1}R^{2}, SO_{2}R^{3}, nitro, ciano, oxo, arilo, heteroarilo y heterociclilo; más preferiblemente con alquilo C_{1-6}, halo, OR^{8}, C(O)NR^{6}R^{7}, CO_{2}R^{3}, NR^{6}R^{7}, NHC(O)R^{3}, NHCO_{2}R^{3}, NHC(O)NR^{1}R^{2}, SO_{2}NR^{1}R^{2}, SO_{2}R^{3}, nitro, oxo, arilo, heteroarilo y heterociclilo.
Preferiblemente, cuando D se selecciona entre el grupo (i) y tiene un anillo condensado, el anillo condensado se selecciona entre benceno, piridina, pirimidina, piridazina y pirazina. Más preferiblemente, cuando D se selecciona entre el grupo (i) y tiene un anillo condensado, D es quinoxalinilo.
Más preferiblemente, D se selecciona entre piridilo, pirimidinilo, pirazinilo, piridazinilo o quinoxalinilo opcionalmente sustituidos; aún más preferiblemente, D se selecciona entre piridilo opcionalmente sustituido con trifluorometilo o ciano; pirimidinilo; pirazinilo opcionalmente sustituido con metilo; piridazinilo opcionalmente sustituido con metilo; o quinoxalinilo.
Preferiblemente, E es hidrógeno.
Preferiblemente, F es hidrógeno.
Preferiblemente, G se selecciona entre el grupo que consiste en alquilo C_{1-6}, arilalquilo y heteroarilalquilo; más preferiblemente, G es alquilo C_{1-6}, bencilo, piridinilmetilo, N-metilaminocarbonilmetilo o aminocarbonilmetilo; aún más preferiblemente, G es isobutilo, piridin-2-ilmetilo o bencilo.
Hay que entender que la presente invención abarca todas las combinaciones de grupos adecuados, convenientes y preferidos que se describen aquí.
La presente invención también proporciona compuestos de Fórmula (Ia):
\vskip1.000000\baselineskip
2 
\vskip1.000000\baselineskip
en la que:
A representa OR^{1}, NR^{1}R^{2} o R^{1}, donde R^{1} y R^{2} se seleccionan independientemente entre el grupo que consiste en hidrógeno, alquilo C_{1-6}, arilo, heteroarilo, arilalquilo y heteroarilalquilo; o R^{1} y R^{2} junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos forman un grupo cíclico, saturado, de 5 ó 6 miembros;
B representa C(O)R^{3}, donde R^{3} se selecciona entre el grupo que consiste en alquilo C_{1-6}, arilo, heteroarilo, arilalquilo y heteroarilalquilo;
C representa alquilo C_{1-6}, arilo, heteroarilo o heterociclilo;
D representa un anillo heterocíclico de 6 miembros, saturado o insaturado, que comprende tres o más átomos de carbono, pudiendo estar cada uno de ellos opcionalmente sustituido con R^{4} y R^{5}, y uno a tres heteroátomos seleccionados independientemente entre N, opcionalmente sustituido con hidrógeno, alquilo C_{1-6}, C(O)R^{3}, SO_{2}R^{3}, arilo, heteroarilo, arilalquilo o heteroarilalquilo; O; y S, opcionalmente sustituido con uno o dos átomos de oxígeno; donde el anillo de 6 miembros puede estar unido en cualquier átomo de carbono endocíclico y puede estar opcionalmente condensado con un anillo carbocíclico o heterocíclico, de 5 ó 6 miembros, saturado o insaturado, que puede estar opcionalmente sustituido a su vez en un átomo de carbono no condensado con alquilo C_{1-6}, halo, OR^{8}, C(O)NR^{6}R^{7}, CO_{2}R^{3}, NR^{6}R^{7}, NHC(O)R^{3}, NHCO_{2}R^{3}, NHC(O)NR^{1}R^{2}, SO_{2}NR^{1}R^{2}, SO_{2}R^{3}, nitro, oxo, arilo, heteroarilo y heterociclilo;
R^{4} y R^{5} se seleccionan independientemente entre hidrógeno, alquilo C_{1-6}, halo, OR^{8}, C(O)NR^{6}R^{7}, CO_{2}R^{3}, NR^{6}R^{7}, NHC(O)R^{3}, NHCO_{2}R^{3}, NHC(O)NR^{1}R^{2}, SO_{2}NR^{1}R^{2}, SO_{2}R^{3}, nitro, oxo, arilo, heteroarilo y heterociclilo;
R^{6} y R^{7} se seleccionan independientemente entre hidrógeno, alquilo C_{1-6}, arilo y heteroarilo; y
R^{8} representa hidrógeno, alquilo C_{1-6}, arilalquilo o heteroarilalquilo;
E representa hidrógeno o alquilo C_{1-6};
F representa hidrógeno, alquilo C_{1-6}, arilo o heteroarilo; y
G representa hidrógeno, alquilo C_{1-6}, heterociclilalquilo, arilalquilo o heteroarilalquilo; y sales y solvatos de los mismos, con la condición de que cuando A es OR^{1} entonces R^{1} sea distinto de terc-butilo.
\newpage
Los compuestos preferidos útiles en la presente invención se eligen del grupo que consiste en:
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(5-metilpirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(piridin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4R,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(piridin-4-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirimidin-5-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(6-metilpiridazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-
carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(piridin-2-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(3-bromo-4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(piridin-2-il)pirrolidina-2-car-
boxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(3-bromo-4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-
carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(3-bromo-4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(5-metil-pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(3-bromo-4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(piridazin-3-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-benzotiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(3-bromo-4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-benzotiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-clorobenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-
carboxílico;
rel-(2S,4S,5R)-1-(3-bromo-4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(piridin-2-il)pirrolidina-2-carboxamida;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(quinoxalin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(4-trifluorometil-piridin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico;
rel-(2S,4S,5R)-1-(3-bromo-4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxamida;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(piridin-2-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(2-cloro-1,3-tiazol-5-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-clorobenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(piridin-2-il)pirrolidina-2-carboxílico;
\newpage
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(2-cloro-1,3-tiazol-5-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(6-metilpirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-
carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-fenilpirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-fenil-pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,SS)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil) 2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-metilpirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(piridin-3-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(tien-2-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-4-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(2-dimetilamino-1,3-tiazol-4-
il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(tiazol-4-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-3-(piridin-3-il)pirrolidina-2-carboxílico,
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-(piridin-2-ilmetil)-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-(N-metilaminocarbonil-metil)-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-(aminocarbonilmetil)-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)
pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(3-fenilfenil)pirrolidina-2-carboxílico;
(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxamida;
(2S,4R,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(5-trifluorometilpiridin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxamida;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-5-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(4-dimetilaminofenil)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(4-dimetilaminofenil)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-(1H-imidazol-4-ilmetil)-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-
il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5S)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-isopropilpirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-(2-(metiltio)etil)-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-5-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4R,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-5-il)pirrolidina-2-
carboxílico;
\newpage
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(4-cianopiridin-2-il)-5-(1,3-tiazol-5-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4R,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirimidin-4-il)-5-(1,3-tiazol-5-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirimidin-4-il)-5-(1,3-tiazol-5-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-(2-(metilsulfonil)etil)-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)
pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4R,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-
carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-metil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-5-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-clorobenzoil)-2-metil-4-(pirazin-4-il)-5-(1,3-tiazol-5-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido (2S,4R,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(piridin-2-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-4-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(2-fenil-1,3-tiazol-4-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-etilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-car-
boxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-etoxibenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico; y
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-(fenilmetil)-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico;
y sales, solvatos, ésteres y enantiómeros individuales de los mismos.
En un aspecto preferido, la presente invención proporciona compuestos de Fórmula (I) seleccionados entre el grupo que consiste en los Ejemplos 1 a 25 que se definen a continuación en este documento, y sales, solvatos y ésteres, y cuando sea apropiado, enantiómeros individuales de los mismos. En un aspecto preferido adicional, la presente invención proporciona compuestos de Fórmula (I) seleccionados entre el grupo que consiste en los Ejemplos 1 a 2 que se definen a continuación en este documento, y sales, solvatos y ésteres, y cuando sea apropiado, enantiómeros individuales de los mismos.
También se incluyen en la presente invención complejos de sales farmacéuticamente aceptables. La presente invención también incluye las sales fisiológicamente aceptables de los compuestos de fórmula (I). Las sales fisiológicamente aceptables y adecuadas de los compuestos de fórmula (I) incluyen las sales ácidas por ejemplo con sodio, potasio, calcio, magnesio y tetraalquilamonio y similares, o las sales mono- o di-básicas con el ácido apropiado, por ejemplo, ácidos carboxílicos orgánicos tales como los ácidos acético, láctico, tartárico, málico, isetiónico, lactobiónico y succínico; ácidos sulfónicos orgánicos tales como ácidos metanosulfónico, etanosulfónico, bencenosulfónico y p-toluenosulfónico y ácidos inorgánicos tales como ácidos clorhídrico, sulfúrico, fosfórico y sulfámico, y similares.
La presente invención también se refiere a solvatos de los compuestos de Fórmula (I), por ejemplo hidratos.
La presente invención también se refiere a ésteres farmacéuticamente aceptables de los compuestos de Fórmula (I) y (Ia), por ejemplo ésteres de ácido carboxílico -COOR, en los que R se selecciona entre alquilo de cadena lineal o ramificada, por ejemplo n-propilo, n-butilo, alcoxialquilo (por ejemplo, metoximetilo), aralquilo (por ejemplo, bencilo), ariloxialquilo (por ejemplo, fenoximetilo), arilo (por ejemplo, fenilo opcionalmente sustituido con halógeno, alquilo C_{1-4} o alcoxi C_{1-4} o amino). A menos que se especifique otra cosa, cualquier resto alquilo presente en tales ésteres contiene preferiblemente de 1 a 18 átomos de carbono, particularmente de 1 a 4 átomos de carbono. Cualquier resto arílico presente en tales ésteres comprende preferiblemente un grupo fenilo.
Se apreciará además que ciertos compuestos de la presente invención pueden existir en diferentes formas tautoméricas. Todos los tautómeros se incluyen dentro del alcance de la presente invención.
Los compuestos de Fórmula (I) pueden prepararse a partir de un compuesto de Fórmula (II)
3
en la que A, B, C, E, F y G son como se han definido anteriormente para la Fórmula (I); W representa -CHO, -C(O)Me, -CO_{2}H, -CO_{2}R^{9}, -C(O)NR^{6}R^{7}, -CN o -C(O)Hal; y R^{9} representa alquilo C_{1-6} o arilalquilo; por cualquier método adecuado para la conversión del resto W en el resto D de fórmula (I). Los métodos adecuados para la conversión de W en D pueden encontrarse en la bibliografía química, por ejemplo los descritos en Comprehensive Heterociclic Chemistry, Editado por A.R. Katritzky y C.W. Rees, Pergamon 1984; documentos WO 2001/28996 y WO 99/54299.
Los compuestos de Fórmula (II) pueden prepararse por reacción de un compuesto de Fórmula (III)
\vskip1.000000\baselineskip
4
en la que A, C, E, F y G son como se han definido anteriormente para la Fórmula (I); y W es como se ha definido anteriormente para la Fórmula (II); con un agente de acilación adecuado, por ejemplo R^{3}C(O)-hal, donde hal es un átomo de halo, preferiblemente cloro o bromo. Preferiblemente, la reacción se realiza en un disolvente adecuado, por ejemplo diclorometano, en presencia de una base adecuada, por ejemplo trietilamina.
Los compuestos de Fórmula (III) pueden prepararse por reacción de un compuesto de Fórmula (IV)
\vskip1.000000\baselineskip
5
en la que A, C y G son como se han definido para la Fórmula (I) anterior; con un compuesto de fórmula (V)
\vskip1.000000\baselineskip
6
en la que E y F son como se han definido para la Fórmula (I) y W es como se ha definido para la Fórmula (II) anterior. Preferiblemente, la reacción se realiza en un disolvente adecuado, por ejemplo THF o acetonitrilo, opcionalmente en presencia de un catalizador de ácido de Lewis, tal como bromuro de litio o acetato de plata, y una base, tal como trietilamina, 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno (DBU) o tetrametilguanidina. Como alternativa, la reacción se realiza en un disolvente adecuado, por ejemplo THF o acetonitrilo, en presencia de un ácido, tal como ácido acético, o la reacción puede realizarse calentando compuestos de Fórmula (IV) y de Fórmula (V) en un disolvente adecuado, por ejemplo tolueno, xileno o acetonitrilo, en ausencia de un catalizador.
Los compuestos de Fórmula (IV) y (V) son conocidos en la técnica o pueden prepararse por procedimientos bibliográficos convencionales.
Los compuestos de Fórmula (I) también pueden prepararse por reacción de un compuesto de Fórmula (VI)
\vskip1.000000\baselineskip
7
en la que A, C, D, E, F y G son como se han definido anteriormente para la Fórmula (I); con un agente acilante adecuado, por ejemplo R^{3}C(O)-hal, donde hal es un átomo de halo; preferiblemente cloro o bromo. Preferiblemente, la reacción se realiza en un disolvente adecuado, por ejemplo diclorometano, en presencia de una base adecuada, por ejemplo trietilamina.
Los compuestos de Fórmula (VI) pueden prepararse por reacción de un compuesto de Fórmula (VII)
8
en la que E, D y F son como se han descrito para la Fórmula (I) anterior; con un compuesto de Fórmula (IV). Preferiblemente, la reacción se realiza en un disolvente adecuado, por ejemplo THF o acetonitrilo, opcionalmente en presencia de un ácido de catalizador de Lewis, tal como bromuro de litio o acetato de plata, y una base, tal como trietilamina, DBU o tetrametilguanidina. Como alternativa, la reacción se realiza en un disolvente adecuado, por ejemplo THF o acetonitrilo, en presencia de un ácido, tal como ácido acético, o la reacción puede realizarse calentando compuestos de Fórmula (VII) y de Fórmula (IV) en un disolvente adecuado, por ejemplo tolueno, xileno o acetonitrilo, en ausencia de un catalizador.
Los compuestos de Fórmula (VII) pueden prepararse a partir de compuestos de Fórmula (VIII) o (IX)
9
en la que D es como se ha definido para la Fórmula (I) anterior y hal es un halógeno, por métodos conocidos en la técnica, por ejemplo una reacción de Wittig, una olefinación de Peterson o una reacción de Julia.
Los compuestos de Fórmula (VII) también pueden prepararse a partir de compuestos de Fórmula (X)
10
en la que Z es un halógeno o un triflato por métodos conocidos en la técnica, por ejemplo tratamiento con bromuro de vinilmagnesio, bromuro de cinc y un catalizador de paladio tal como tetraquis(trifenilfosfina)paladio (0), o por un procedimiento de Heck con un acetileno seguido de reducción de Lindlar para dar la olefina.
Se apreciará que compuestos de Fórmula (I), (II), (III) y/o (VI) que existen como diaestereoisómeros pueden separarse opcionalmente por técnicas bien conocidas en la técnica, por ejemplo por cromatografía en columna.
También se apreciará que la presente invención proporciona un método para la interconversión del diastereoisómero rel-(2S,4S,5R) de un compuesto de fórmula (I) o (II) en la que A es distinto de hidroxi y E representa hidrógeno, en el diastereoisómero rel-(2S,4R,5R). Por ejemplo, epimerización catalizada con una base por tratamiento del diastereoisómero rel-(2S,4S,5R) con una base adecuada tal como hidróxido sódico acuoso, en presencia de un disolvente adecuado, tal como metanol.
Se apreciará que los compuestos racémicos de Fórmula (I), (II), (III) y/o (VI) pueden resolverse opcionalmente en sus enantiómeros individuales. Tales resoluciones pueden realizarse convenientemente por métodos convencionales conocidos en la técnica. Por ejemplo, un compuesto racémico de Fórmula (I), (II), (III) y/o (VI) puede resolverse por HPLC preparativa quiral. Como alternativa, los compuestos racémicos de Fórmula (I), (II), (III) y/o (VI) pueden resolverse por formación convencional de sales diastereoméricas con un reactivo de ácido o base quiral, según sea apropiado. Tales técnicas son bien conocidas en la técnica. Por ejemplo, un compuesto racémico de Fórmula (III) en la que W es C(O)NR^{6}R^{7} y R^{6} y R^{7} son los dos hidrógeno puede resolverse por tratamiento con un ácido quiral tal como ácido (-)-di-O,O'-p-tolil-L-tartárico. Por ejemplo, un compuesto racémico de Fórmula (VI) en la que D es pirazin-2-ilo puede resolverse por tratamiento con un ácido quiral tal como hidrogenofosfato de (R)-(-)-1,1'-binaftil-2,2'-diilo.
Cuando son apropiadas la manipulación y la protección de cualquier funcionalidad química, la síntesis de los compuestos de Fórmula (I) se realiza por métodos análogos a los anteriores y a los que se describen en la sección Experimental. Pueden encontrarse grupos protectores adecuados, pero sin restricción, en T W Greene y P G M Wuts "Protective Groups in Organic Synthesis", 3ª Ed (1999), J Wiley y Sons.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplos
Intermedio 1
Ácido 2-[N-(1,3-tiazol-2-ilmetileno)amino]-4-metilpentanoico, éster terc-butílico 
\vskip1.000000\baselineskip
11 
\vskip1.000000\baselineskip
Una mezcla agitada de hidrocloruro de éster terc-butílico del ácido 2-amino-4-metilpentanoico (5,00 g, 22,34 mmol), 1,3-tiazol-2-carboxaldehído (2,53 g, 22,34 mmol) y trietilamina (3,1 ml, 22,3 mmol) en diclorometano (60 ml) se calentó a reflujo en una atmósfera de nitrógeno durante 19 horas. La mezcla de reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente, se lavó dos veces con agua, se secó sobre Na_{2}SO_{4} y se evaporó para dar el compuesto del título en forma de un aceite.
^{1}H RMN (CDCl_{3}): \delta 8,46 (s, 1H), 7,94 (d, 1H), 7,44 (dd, 1H), 4,07 (dd, 1H), 1,89-1,74 (m, 2H), 1,64-1,52 (m, 1H), 1,48 (s, 9H), 0,96 (d, 3H) y 0,90 (d, 3H).
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio 2
Ácido rel-(2S,4S,5R)-2-isobutil-4-pirazin-2-il-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico 
\vskip1.000000\baselineskip
12 
\vskip1.000000\baselineskip
A una solución agitada y enfriada (0ºC) del Intermedio 1 (0,202 g, 0,72 mmol) en THF anhidro (3 ml) en una atmósfera de nitrógeno, se le añadió 2-vinilpirazina (104 \mul, 1,1 mmol) seguido de bromuro de litio (0,131 g, 1,51 mmol) y trietilamina (153 \mul, 1,1 mmol). La reacción se agitó en un baño de refrigeración durante 5 min y después a temperatura ambiente durante una noche. Se añadió cloruro de amonio acuoso (20 ml) y la mezcla resultante se extrajo con acetato de etilo (20 ml). Los extractos se combinaron, se lavaron con agua y salmuera y después se secaron (MgSO_{4}). El disolvente se evaporó al vacío para dar el producto bruto. Éste se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando ciclohexano-acetato de etilo (1:1 v/v) como eluyente para proporcionar el compuesto del título en forma de una goma.
MS calc. para (C_{20}H_{28}N_{4}O_{2}S + H)^{+}: 389.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 389.
\newpage
Intermedio 3
Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-pirazin-2-il-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico
13
A una solución agitada del Intermedio 2 (86 mg, 0,22 mmol) en diclorometano anhidro (3 ml) se le añadieron trietilamina (38 \mul, 0,28 mmol) y cloruro de 4-terc-butilbenzoílo (47 \mul, 0,24 mmol). Esta mezcla se agitó durante 16 horas y después se diluyó con diclorometano y se lavó con agua. La fase orgánica se secó (MgSO_{4}) y se evaporó al vacío. El residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando acetato de etilo-ciclohexano (2:3 v/v) como eluyente para proporcionar el compuesto del título en forma de un aceite.
MS calc. para (C_{31}H_{40}N_{40}O_{3}S + H)^{+}: 549.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+}= 549.
Intermedio 4
Ácido rel-(2S,4S,5R)-2-isobutil-4-(5-metilpirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico
14
El compuesto del título se preparó de una manera similar a la descrita para el Intermedio 2, sustituyendo 2-vinilpirazina por 2-metil-5-vinilpirazina.
MS calc. para (C_{21}H_{30}N_{4}O_{2}S + H)^{+}: 403.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 403.
Intermedio 5
Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(5-metilpirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico
15
El compuesto del título se preparó a partir del Intermedio 4 de una manera similar a la descrita para el Intermedio 3.
MS calc. para (C_{32}H_{42}N_{4}O_{3}S + H)^{+}: 563.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 563.
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio 6
Ácido rel-(2S,4S,5R)-2-isobutil-4-(piridin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico 
\vskip1.000000\baselineskip
16 
\vskip1.000000\baselineskip
Se preparó de una manera similar a la descrita para el Intermedio 2, reemplazando 2-vinilpirazina por 2-vinilpiridina. Después de agitar durante una noche a temperatura ambiente, la reacción se calentó a reflujo durante 9 horas. El producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando ciclohexano-acetato de etilo (3:2 v/v) como eluyente para proporcionar el compuesto del título en forma de un líquido.
MS calc. para (C_{21}H_{29}N_{3}O_{2}S + H)^{+}: 388.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 388.
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio 7
Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-piridin-2-il-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico 
\vskip1.000000\baselineskip
17 
\vskip1.000000\baselineskip
El compuesto del título se preparó a partir del Intermedio 6 de una manera similar a la descrita para el Intermedio 3. El producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando ciclohexano-acetato de etilo (7:3 v/v) como eluyente para proporcionar el compuesto del título en forma de una espuma.
MS calc. para (C_{32}H_{41}N_{3}O_{3}S + H)^{+}: 548.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 548.
\newpage
Intermedio 8
Ácido rel-(2S,4R,5R)-2-isobutil-4-(piridin-4-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico
18
Se preparó como se ha descrito previamente para el Intermedio 2, sustituyendo 2-vinilpirazina por 4-vinilpiridina. El producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando acetato de etilo como eluyente para proporcionar el compuesto del título en forma de un líquido.
MS calc. para (C_{21}H_{29}N_{3}O_{2}S + H)^{+}: 388.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 388.
Intermedio 9
Ácido rel-(2S,4R,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-piridin-2-il-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico
19
El compuesto del título se preparó a partir del Intermedio 8 de una manera similar a la descrita para el Intermedio 3. El producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando ciclohexano-acetato de etilo (3:2 v/v) como eluyente para proporcionar el compuesto del título en forma de una goma. La estereoquímica se confirmó por estudios nOe.
MS calc. para (C_{32}H_{41}N_{3}O_{3}S + H)^{+}: 548.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 548.
Intermedio 10
Ácido rel-(2S,4S,5R)-2-isobutil-4-(pirimidin-5-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico
20
Se preparó de una manera similar a la descrita para el Intermedio 2, reemplazando 2-vinilpirazina por 5-vinilpirimidina*. El producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando ciclohexano-acetato de etilo (7:3 v/v) como eluyente para proporcionar el compuesto del título en forma de una goma.
*{Se sintetizó 5-vinilpirimidina a partir de pirimidina-5-carboxaldehído (Peakdale Fine Chemicals) por una reacción de Wittig. Al aldehído (2,72 g, 25,2 mmol) en dioxano (25 ml) y agua (0,378 ml) se le añadieron bromuro de (metil)trifenilfosfonio (9 g, 25,2 mmol) y carbonato potásico (4,35 g, 31,5 mmol). La mezcla se calentó a reflujo durante 6 horas. El producto puede purificarse por destilación al vacío o por cromatografía en columna sobre gel de sílice después del tratamiento}.
MS calc. para (C_{20}H_{25}N_{4}O_{2}S + H)^{+}: 389.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 389.
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio 11
Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirimidin-5-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico 
\vskip1.000000\baselineskip
21 
\vskip1.000000\baselineskip
El compuesto del título se preparó a partir del Intermedio 10 de una manera similar a la descrita para el Intermedio 3. El producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando ciclohexano-acetato de etilo (1:1 v/v) como eluyente para proporcionar el compuesto del título en forma de una goma.
MS calc. para (C_{31}H_{40}N_{4}O_{3}S + H)^{+}: 549.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 549.
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio 12
Ácido rel-(2S,4S,5R)-2-isobutil-4-(6-metilpiridazin-3-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butí-lico 
\vskip1.000000\baselineskip
22 
\vskip1.000000\baselineskip
Se preparó de una manera similar a la descrita para el Intermedio 2 reemplazando 2-vinilpirazina por 3-metil-6-vinilpiridazina*. El compuesto del título se usó sin purificación adicional después del tratamiento y se aisló en forma de un aceite.
*{Se sintetizó 3-metil-6-vinilpiradizina en dos etapas a partir de 6-metil-3(2H)-piridazinona de acuerdo con los procedimientos descritos en Heterocycles, (1994) 38(6), 1273-1286}.
MS calc. para (C_{21}H_{30}N_{4}O_{2}S + H)^{+}: 403.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 403.
\newpage
Intermedio 13
Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(6-metilpiridazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico
23
El compuesto del título se preparó a partir del Intermedio 12 de una manera similar a la descrita para el Intermedio 3. El producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando ciclohexano-acetato de etilo (3:1 v/v) como eluyente. La purificación adicional por HPLC de fase inversa sobre una columna C_{18} usando un gradiente de elución de dos disolventes con (A) agua que contenía ácido fórmico (al 0,1%) y (B) acetonitrilo-agua (95:5 v/v) que contenía ácido fórmico (al 0,05%) como eluyentes, y el análisis de las fracciones eluidas por espectroscopía de masas por electronebulización, proporcionaron el compuesto del título en forma de un sólido.
MS calc. para (C_{32}H_{42}N_{4}O_{3}S +H)^{+}: 563.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 563.
Intermedio 14
Ácido 2-[N-(piridin-2-ilmetileno)amino]-4-metilpentanoico, éster terc-butílico
24
Una mezcla agitada de hidrocloruro de éster terc-butílico del ácido 2-amino-4-metilpentanoico (5,00 g, 22,35 mmol), piridina-2-carboxaldehído (2,12 ml, 22,35 mmol) y trietilamina (3,11 ml, 22,35 mmol) en diclorometano (75 ml) se calentó a reflujo en una atmósfera de nitrógeno durante 2 horas. La mezcla de reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente, se lavó con agua y salmuera, se secó sobre MgSO_{4} y se evaporó para dar el compuesto del título en forma de un aceite.
^{1}H RMN (CDCl_{3}): \delta 8,65 (ddd, 1H), 8,37 (s, 1H), 8,12 (dt, 1H), 7,75 (ddt, 1H), 7,34 (ddd,1H), 4,05 (dd, 1H), 1,79-1,85 (m, 2H), 1,58 (m, 1H), 1,47 (s, 9H), 0,95 (d, 3H) y 0,91 (d, 3H).
Intermedio 15
Ácido rel-(2S,4S,5R)-2-isobutil-4-pirazin-2-il-5-(piridin-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico
25
Se preparó a partir del Intermedio 14 de una manera similar a la descrita para el Intermedio 2. El producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando metanol al 5% en cloroformo como eluyente para proporcionar el compuesto del título en forma de un sólido.
MS calc. para (C_{22}H_{30}N_{4}O_{2} + H)^{+}: 383.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 383.
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio 16
Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-pirazin-2-il-5-(piridin-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico 
\vskip1.000000\baselineskip
26 
\vskip1.000000\baselineskip
El compuesto del título se preparó a partir del Intermedio 15 de una manera similar a la descrita para el Intermedio 3. El producto se purificó por SPE (extracción en fase sólida sobre sílice) usando ciclohexano-acetato de etilo (1:1 v/v) como eluyente para proporcionar el compuesto del título en forma de un sólido amorfo.
^{1}H RMN (CDCl_{3}): \delta 8,20 (1H, s), 8,14 (1H, d), 8,12 (1H, d), 8,08 (1H, d), 7,71 (1H, d), 7,44 (1H, dt), 7,04 (2H, d), 6,92 (2H, d), 6,75 (1H, dd), 5,54 (1H, d), 4,38 (1H, m), 3,17 (1H, t), 2,46 (1H, dd), 2,38 (1H, dd), 2,17 (1H, dd), 2,10 (1H, m), 1,64 (9H, s), 1,14 (9H, s), 1,14 (3H, d), 1,13 (3H, d).
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio 17
Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(3-bromo-4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-pirazin-2-il-5-(piridin-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico 
\vskip1.000000\baselineskip
27 
\vskip1.000000\baselineskip
El compuesto del título se preparó a partir del Intermedio 15 de una manera similar a la descrita para el Intermedio 3 reemplazando cloruro de 4-terc-butilbenzoílo por cloruro de 3-bromo-4-terc-butilbenzoílo {sintetizado a partir de ácido 3-bromo-4-terc-butilbenzoico (Aust J.Chem. (1990), 43(5), 807-14)}. El producto se purificó por SPE (sílice, eluyendo con ciclohexano/EtOAc, en forma de un gradiente de 80% a 30% de ciclohexano) para proporcionar el compuesto del título en forma de una goma.
^{1}H RMN (CDCl_{3}): \delta 8,23 (1H, d), 8,17 (1H, d), 8,14 (1H, m), 8,10 (1H, d), 7,81 (1H, d), 7,53 (1H, dt), 7,18 (1H, d), 6,96 (2H, m), 6,85 (1H, dd), 5,42 (1H, d), 4,37 (1H, m), 3,2 (1H, t), 2,50 (1H, dd), 2,42 (1H, dd), 2,17-2,06 (2H, m), 1,65 (9H, s), 1,35 (9H, s), 1,14 (3H, d), 1,13 (3H, d).
\newpage
Intermedio 18
Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(3-bromo-4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-pirazin-2-il-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico
28
El compuesto del título se preparó a partir del Intermedio 2 de una manera similar a la descrita para el Intermedio 3 reemplazando cloruro de 4-terc-butilbenzoílo por cloruro de 3-bromo-4-terc-butilbenzoílo. El producto se purificó por SPE usando ciclohexano:acetato de etilo (1:1 v/v) como eluyente y se aisló en forma de una espuma.
MS calc. para (C_{31}H_{39}BrN_{4}O_{3}S +H)^{+}: 627/629.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 627/629.
Intermedio 19
Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(3-bromo-4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(5-metilpirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico
29
El compuesto del título se preparó a partir del Intermedio 4 de una manera similar a la descrita para el Intermedio 3 reemplazando cloruro de 4-terc-butilbenzoílo por cloruro de 3-bromo-4-terc-butilbenzoílo. El producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando ciclohexano-acetato de etilo (7:3 v/v) como eluyente y se aisló en forma de una espuma.
MS calc. para (C_{32}H_{41}BrN_{4}O_{3}S + H)^{+}: 641/643.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 641/643.
Intermedio 20
Enantiómero A obtenido a partir de ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(3-bromo-4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(5-metilpirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico
30
El Intermedio 19 se resolvió por HPLC preparativa sobre una columna de cromatografía Chiralpak AD usando heptano-isopropanol (70:30 v/v) como eluyente para producir los enantiómeros individuales con tiempos de retención de 4,0 minutos (Enantiómero A; el compuesto del título) y 6,9 minutos (Enantiómero B) respectivamente. El Enantiómero A era idéntico según mostró el análisis por LCMS al compuesto racémico descrito para el Intermedio 19.
MS calc. para (C_{32}H_{41}BrN_{4}O_{3}S + H)^{+}: 641/643.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 641/643.
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio 21
Enantiómero A obtenido a partir de ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(3-bromo-4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico 
\vskip1.000000\baselineskip
31 
\vskip1.000000\baselineskip
El Intermedio 18 se resolvió por HPLC preparativa sobre una columna de cromatografía Chiralpak AD usando heptano-isopropanol (85:15 v/v) como eluyente para producir los enantiómeros individuales con tiempos de retención de 5,9 minutos (Enantiómero A; el compuesto del título) y 10,7 minutos (Enantiómero B) respectivamente. El Enantiómero A era idéntico según mostró el análisis por LCMS al compuesto racémico descrito para el Intermedio 18.
^{1}H RMN (CDCl_{3}): \delta 8,26 (3H, m), 7,26 (1H, m), 7,18 (1H, d), 7,13 (1H, d), 7,06 (1H, d), 6,99 (1H, dd), 5,75 (1H, d), 4,33 (1H, m), 3,28 (1H, t), 2,53 (1H, dd), 2,45 (1H, dd), 2,17 (1H, dd), 2,05 (1H, m), 1,61 (9H, s), 1,41 (9H, s), 1,12 (6H, d).
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio 22
Enantiómero A obtenido a partir de ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil-2-isobutil-4-pirazin-2-il-5-(piridin-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico 
\vskip1.000000\baselineskip
32 
\vskip1.000000\baselineskip
El Intermedio 16 se resolvió por HPLC preparativa sobre una columna de cromatografía Chiralpak AD usando heptano-isopropanol (90:10 v/v) como eluyente para producir los enantiómeros individuales con tiempos de retención de 7,5 minutos (Enantiómero A; el compuesto del título) y 10,1 minutos (Enantiómero B) respectivamente. El Enantiómero A era idéntico según mostró el análisis por ^{1}H RMN al compuesto racémico descrito para el Intermedio 16.
\newpage
Intermedio 23
Enantiómero A obtenido a partir de ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(3-bromo-4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-pirazin-2-il-5-(piridin-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico
33
El Intermedio 17 se resolvió por HPLC preparativa sobre una columna de cromatografía Chiralpak AD usando heptano-isopropanol (90:10 v/v) como eluyente para producir los enantiómeros individuales con tiempos de retención de 6,5 minutos (Enantiómero A; el compuesto del título) y 10,7 minutos (Enantiómero B) respectivamente. El Enantiómero A era idéntico según mostró el análisis por ^{1}H RMN al compuesto racémico descrito para el Intermedio 17.
Intermedio 24
Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-clorobenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico
34
El compuesto del título se preparó a partir del Intermedio 2 de una manera similar a la descrita para el Intermedio 3 reemplazando cloruro de 4-terc-butil-benzoílo por cloruro de 4-terc-butil-3-clorobenzoílo*. El producto se purificó por SPE usando ciclohexano-acetato de etilo (1:1 v/v) como eluyente para proporcionar el compuesto del título en forma de una espuma.
*{Se sintetizó cloruro de 4-terc-butil-3-clorobenzoílo a partir de ácido 4-terc-butil-3-clorobenzoico (J. Org. Chem. 30, 1965, 1581-1588)}.
MS calc. para (C_{31}H_{39}ClN_{4}O_{3}S + H)^{+}: 583/585.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 583/585.
Intermedio 25
Enantiómero A obtenido a partir de ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-clorobenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico
35
El Intermedio 24 se resolvió por HPLC preparativa sobre una columna de cromatografía Chiralpak AD usando heptano-etanol (95:5 v/v) como eluyente para producir los enantiómeros individuales con tiempos de retención de 8,9 minutos (Enantiómero A, el compuesto del título) y 13,9 minutos (Enantiómero B) respectivamente. El Enantiómero A era idéntico según mostró el análisis por ^{1}H RMN al compuesto racémico descrito para el Intermedio 24.
^{1}H RMN (CDCl_{3}): \delta 8,26 (3H, m), 7,25 (1H, d), 7,18 (1H, d), 7,05 (1H, d), 6,93 (2H, m), 5,77 (1H, d), 4,34 (1H, m), 3,29 (1H, t), 2,52 (1H, dd), 2,45 (1H, dd), 2,18 (1H, dd), 2,05 (1H, m),1,60 (9H, s), 1,38 (9H, s), 1,12 (6H, d).
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio 26
Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-car-boxílico, éster terc-butílico 
\vskip1.000000\baselineskip
36 
\vskip1.000000\baselineskip
El compuesto del título se preparó a partir del Intermedio 2 de una manera similar a la descrita para el Intermedio 3 reemplazando cloruro de 4-terc-butilbenzoílo por cloruro de 4-terc-butil-3-metoxibenzoílo*. El producto se purificó por SPE usando ciclohexano:acetato de etilo (1:2 v/v) como eluyente y se aisló en forma de una espuma.
*{Se sintetizó a partir de ácido 4-terc-butil-3-metoxibenzoico (J. Org. Chem, 26, 1961,1732-1737)}
^{1}H RMN (CDCl_{3}): \delta 8,25 (3H, m), 7,18 (1H, d), 7,12 (1H, d), 7,02 (1H, d), 6,71 (1H, dd), 6,38 (1H, d), 5,82 (1H, d), 4,33 (1H, m), 3,54 (3H, s), 3,29 (1H, t), 2,52 (1H, dd), 2,47 (1H, dd), 2,20 (1H, dd), 2,06 (1H, m), 1,60 (9H, s), 1,26 (9H, s), 1,13 (6H, d).
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio 27
Enantiómero A obtenido a partir de ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico 
\vskip1.000000\baselineskip
37 
\vskip1.000000\baselineskip
El Intermedio 26 se resolvió por HPLC preparativa sobre una columna de cromatografía Chiralpak AD usando heptano-isopropanol (85:15 v/v) como eluyente para producir los enantiómeros individuales con tiempos de retención de 8,5 minutos (Enantiómero A; el compuesto del título) y 13,8 minutos (Enantiómero A) respectivamente. El Enantiómero A era idéntico según mostró el análisis por ^{1}H RMN al compuesto racémico descrito para el Intermedio 26.
\newpage
Intermedio 28
Ácido 2-[N-(1,3-benzotiazol-2-ilmetileno)amino]-4-metilpentanoico, éster terc-butílico
38
Se preparó de una manera similar a la descrita para el Intermedio 14 reemplazando piridina-2-carboxaldehído por 1,3-benzotiazol-2-carboxaldehído. El compuesto del título se aisló en forma de un aceite.
^{1}H RMN (CDCl_{3}): \delta 8,56 (s, 1H), 8,10 (d,1H), 7,93 (d, 1H), 7,54-7,44 (m, 2H), 4,16 (dd, 1H), 1,93-1,78 (m, 2H), 1,66-1,53 (m, 1H), 1,48 (s, 9H), 0,97 (d, 3H) y 0,92 (d, 3H).
Intermedio 29
Ácido rel-(2S,4S,5R)-2-isobutil-4-pirazin-2-il-5-(1,3-benzotiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico
39
Se preparó de una manera similar a la descrita para el Intermedio 2, reemplazando el Intermedio 1 por el Intermedio 28. Después de agitar durante una noche a temperatura ambiente, la reacción se calentó a reflujo durante 9 horas. El producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando ciclohexano-acetato de etilo (1:1 v/v) como eluyente seguido de trituración con ciclohexano para proporcionar el compuesto del título.
MS calc. para (C_{24}H_{30}N_{4}O_{2}S + H)^{+}: 439.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 439.
Intermedio 30
Enantiómero A obtenido a partir de ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(3-bromo-4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-pirazin-2-il-5-(1,3-benzotiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico
40
Etapa A
El compuesto racémico se preparó a partir del Intermedio 29 de una manera similar a la descrita para el Intermedio 3 reemplazando cloruro de 4-terc-butilbenzoílo por cloruro de 3-bromo-4-terc-butilbenzoílo. La reacción se calentó a 40ºC durante 7 horas y después se agitó a temperatura ambiente durante una noche. El producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando ciclohexano-acetato de etilo (1:1 v/v) como eluyente para proporcionar el producto racémico.
MS calc. para (C_{35}H_{41}BrN_{4}O_{3}S + H)^{+}: 677/679, MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 677/679.
Etapa B
Después, el material racémico se resolvió por HPLC preparativa sobre una columna de cromatografía Chiralpak AD usando heptano-isopropanol (90:10 v/v) como eluyente para producir los enantiómeros individuales con tiempos de retención de 6,6 minutos (Enantiómero A, el compuesto del título) y 7,9 minutos (Enantiómero B) respectivamente. El Enantiómero A era idéntico según mostró el análisis por LCMS al material racémico.
MS calc. para (C_{35}H_{41}BrN_{4}O_{3}S + H)^{+}: 677/679.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 677679.
Intermedio 31
Enantiómero A obtenido a partir de ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-pirazin-2-il-5-(1,3-benzotiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico 
\vskip1.000000\baselineskip
41
Etapa A
El compuesto racémico se preparó a partir del Intermedio 29 de una manera similar a la descrita para el Intermedio 3. La reacción se calentó a 40ºC durante 7 horas. El producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando ciclohexano-acetato de etilo (1:1 v/v) como eluyente para proporcionar el compuesto racémico.
MS calc. para (C_{35}H_{42}N_{4}O_{3}S + H)^{+}; 599.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 599.
Etapa B
Después, el material racémico se resolvió por HPLC preparativa sobre una columna de cromatografía Chiralpak AD usando heptano-isopropanol (90:10 v/v) como eluyente para producir los enantiómeros individuales con tiempos de retención de 8 minutos (Enantiómero A; el compuesto del título) y 10 minutos (Enantiómero B) respectivamente. El Enantiómero A era idéntico según mostró el análisis por LCMS al material racémico.
MS calc. para (C_{35}H_{42}N_{4}O_{3}S + H)^{+}: 599.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 599.
Intermedio 32
Ácido rel-(2S,4S,5R)-2-isobutil-4-piridazin-3-il-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico 
\vskip1.000000\baselineskip
42
Se preparó de una manera similar a la descrita para el Intermedio 2, reemplazando 2-vinilpirazina por 3-vinilpiridazina*. El producto se purificó por SPE eluyendo con diclorometano, después con un gradiente de metanol al 1-10% en diclorometano-metanol y después con metanol, para proporcionar el compuesto del título en forma de un aceite.
*{Se sintetizó 3-vinilpiridazina en dos etapas a partir de 3-(2H)-piridazinona de acuerdo con los procedimientos de Heterocycles (1994) 38(6), 1273-1286}.
MS calc. para (C_{20}H_{28}N_{4}O_{2}S + H)^{+}: 389.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 389.
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio 33
Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-piridazin-3-il-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico 
\vskip1.000000\baselineskip
43 
\vskip1.000000\baselineskip
Éste se preparó a partir del Intermedio 32 de una manera similar a la descrita para el Intermedio 3. El producto se purificó por HPLC de fase inversa sobre una columna C_{18} usando un gradiente de elución de dos disolventes con (A) agua que contenía ácido fórmico (al 0,1%) y (B) acetonitrilo-agua (95:5 v/v) que contenía ácido fórmico (al 0,05%) como eluyentes, y se siguió por análisis de las fracciones eluidas por espectroscopía de masas por electronebulización. Esto proporcionó el compuesto del título en forma de un sólido.
MS calc. para (C_{31}H_{40}C_{4}O_{3}S + H)^{+}: 549.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 549.
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio 34
Ácido rel-(2S,4S,5R)-2-isobutil-4-quinoxalin-2-il-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico 
\vskip1.000000\baselineskip
44 
\vskip1.000000\baselineskip
Se preparó de una manera similar a la descrita para el Intermedio 2, reemplazando 2-vinilpirazina por 2-vinilquinoxalina*. El producto se purificó por SPE usando ciclohexano:acetato de etilo (2:1 v/v) como eluyente para proporcionar el compuesto del título en forma de un aceite.
*{Se sintetizó 2-vinilquinoxalina a partir de quinoxalina-2-carboxaldehído usando el procedimiento descrito en el Intermedio 10 para dar 5-vinilpirimidina}.
MS calc. para (C_{24}H_{30}N_{4}O_{2}S + H)^{+}: 439.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 439.
\newpage
Intermedio 35
Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-quinoxalin-2-il-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico
45
Éste se preparó a partir del Intermedio 34 de una manera similar a la descrita para el Intermedio 3. El producto se purificó por SPE usando ciclohexano-acetato de etilo (9:1 v/v) como eluyente para proporcionar el compuesto del título en forma de una espuma.
MS calc. para (C_{35}H_{42}N_{4}O_{2}S + H)^{+}: 599.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 599.
Intermedio 36
Ácido rel-(2S,4S,5R)-2-isobutil-4-(4-trifluorometilpiridin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico
46
Se preparó de una manera similar a la descrita para el Intermedio 2, reemplazando 2-vinilpirazina por 2-vinil-4-(trifluorometil)piridina*. El producto se purificó por SPE usando éter dietílico como eluyente para proporcionar el compuesto del título en forma de un aceite.
*{Se sintetizó 2-vinil-4-(trifluorometil)piridina a partir de 2-cloro-4-(trifluorometil)piridina de acuerdo con el procedimiento de Heterocycles (1994) 38(6), 1273-1286}.
MS calc. para (C_{22}H_{28}F_{3}N_{3}O_{2}S + H)^{+}: 456.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 456.
Intermedio 37
Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(4-trifluorometilpiridin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico
47
Éste se preparó a partir del Intermedio 36 de una manera similar a la descrita para el Intermedio 3. El producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando ciclohexano:acetato de etilo (9:1 v/v) como eluyente para proporcionar el compuesto del título en forma de una goma.
MS calc. para (C_{33}H_{40}F_{3}N_{3}O_{3}S + H)^{+}: 616.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 616.
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio 38
Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico
48
Éste se preparó a partir del Intermedio 2 de una manera similar a la descrita para el Intermedio 3 reemplazando cloruro de 4-terc-butilbenzoílo por cloruro de 4-terc-butil-3-metilbenzoílo (preparado a partir del Intermedio 39). La reacción se calentó a 40ºC durante 6 horas. El producto se purificó por SPE usando un gradiente de ciclohexano-acetato de etilo (95:5-50:50 v/v) como eluyente para proporcionar el compuesto del título en forma de una goma.
MS calc. para (C_{32}H_{42}N_{4}O_{3}S + H)^{+}: 563.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 563.
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio 39
Ácido 4-terc-butil-3-metilbenzoico
49
A ácido 3-bromo-4-terc-butilbenzoico (500 mg, 1,94 mmol) (Aust. J. Chem. (1990), 43(5), 807-14) en tolueno (10 ml) se le añadió N,N-dimetilformamida-di-terc-butilacetal (1,86 ml, 7,76 mmol). La mezcla se calentó a 110ºC durante 24 horas. Se añadió más N,N-dimetilformamida-di-terc-butilacetal (2 ml, 8,38 mmol) y la reacción se calentó a reflujo durante 24 horas más. El disolvente se evaporó al vacío y el residuo se purificó por SPE (sílice, eluyendo con un gradiente de éter en ciclohexano, de 1% a 3%) para dar un aceite incoloro (89%). El aceite se disolvió en THF anhidro (4 ml) y se enfrió a -78ºC en una atmósfera de nitrógeno. Se añadió gota a gota terc-butil-litio (1,7 M en pentano, 0,55 ml, 0,94 mmol), manteniendo la temperatura a -70ºC. Después de 15 min, se añadió gota a gota yoduro de metilo (0,53 ml, 8,45 mmol), manteniendo la temperatura por debajo de -70ºC. Se dejó que la mezcla de reacción alcanzara la temperatura ambiente durante 3 horas. Se añadió una solución saturada de cloruro de amonio y la mezcla se extrajo con éter dietílico. El extracto orgánico se secó (MgSO_{4}) y el disolvente se evaporó al vacío para dar un aceite pardo. Éste se purificó por HPLC de fase inversa sobre una columna C_{18} usando un gradiente de elución de dos disolventes con (A) agua que contenía ácido fórmico (al 0,1%) y (B) acetonitrilo-agua (95:5 v/v) que contenía ácido fórmico (al 0,05%) como eluyentes, y se siguió por análisis de las fracciones por espectroscopía de masas por electronebulización, para dar un aceite incoloro (38%). Después, este aceite (80 mg, 0,32 mmol) se trató con ácido trifluoroacético (5 ml) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. El disolvente se evaporó al vacío y el residuo se destiló azeotrópicamente con tolueno para dar el compuesto del título en forma de un sólido.
MS calc. para (C_{12}H_{16}O_{2} + H)^{+}: 191.
MS encontrado (electronebulización): (M-H)^{+} = 191.
Intermedio 40
Ácido 2-[N-(2-cloro-1,3-tiazol-5-ilmetileno)amino]-4-metilpentanoico, éster terc-butílico
50
Se preparó de una manera similar a la descrita para el Intermedio 1, reemplazando 1,3-tiazol-2-carboxaldehído por 2-cloro-1,3-tiazol-5-carboxaldehído.
^{1}H RMN (CDCl_{3}): \delta 8,31 (s, 1H), 7,74 (d, 1H), 3,96 (dd, 1H), 1,78-1,74 (m, 2H), 1,61-1,58 (m, 1H), 1,46 (s, 9H), 0,94 (d, 3H) y 0,89 (d, 3H).
Intermedio 41
Ácido rel-(2S,4S,5R)-2-isobutil-4-pirazin-2-il-5-(2-cloro-1,3-tiazol-5-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico
51
Se preparó de una manera similar a la descrita para el Intermedio 2, reemplazando el Intermedio 1 por el Intermedio 40.
MS calc. para (C_{20}H_{21}ClN_{4}O_{2}S + H)^{+}: 423/425.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 423/425.
Intermedio 42
2-Vinil-6-metilpirazina
52
A una solución de 2,6-dimetilpirazina (5,0 g, 46,2 mmol) en tetracloruro de carbono (150 ml) se le añadieron N-clorosuccinimida (6,17 g, 46,2 mmol) y AIBN (152 mg) y la mezcla se agitó a 85ºC en una atmósfera de nitrógeno durante 6 horas. La mezcla se enfrió en un baño de hielo, el sólido se retiró por filtración y se lavó con tetracloruro de carbono frío. Los filtrados combinados se evaporaron al vacío y el residuo se purificó por cromatografía sobre sílice usando un cartucho Biotage, eluyendo con ciclohexano/acetato de etilo (1:1 v/v). Las fracciones que contenían 2-clorometil-6-metilpirazina se combinaron y se purificaron adicionalmente con una segunda columna de sílice eluyendo con diclorometano/acetato de etilo (9:1 v/v). A 2-clorometil-6-metilpirazina (1,81 g, 12,6 mmol) en DMF seca (100 ml) se le añadió trifenilfosfina (3,97 g, 15,1 mmol) y la mezcla se calentó a 70ºC durante 6 horas. Después de un periodo de reposo a temperatura ambiente durante 3 días, el precipitado resultante se aisló por filtración, se disolvió en metanol, se evaporó y se trituró con éter para producir cloruro de 2-trifenilfosfoniometil-6-metilpirazina. A cloruro de 2-trifenilfosfoniometil-6-metilpirazina (2,16 g, 5,3 mmol) y paraformaldehído (1,6 g, 53 mmol) en metanol seco (100 ml) se le añadió trietilamina (1,85 ml, 13,3 mmol) y la mezcla se calentó a reflujo durante 5,5 horas. Después de un periodo de refrigeración, el disolvente se retiró al vacío y el residuo se recogió en acetato de etilo (80 ml) y se lavó con agua (3 x 80 ml). El residuo se purificó por cromatografía en columna de sílice, eluyendo con ciclohexano/acetato de etilo (1:1) para dar el compuesto del título en forma de un aceite
^{1}H RMN (CDCl_{3}): \delta 8,40 (s, 1H), 8,31 (s, 1H), 6,80 (dd, 1H), 6,33 (d, 1H), 5,59 (d, 1H), 2,56 (s, 3H).
Intermedio 43
Ácido rel-(2S,4S,5R)-2-isobutil-4-(6-metilpirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico 
\vskip1.000000\baselineskip
53
Se preparó de una manera similar a la descrita para el Intermedio 2, reemplazando 2-vinilpirazina por 2-vinil-6-metilpirazina.
MS calc. para (C_{21}H_{30}N_{4}O_{2}S + H)^{+}: 403.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 403.
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio 44
Ácido 2-[N-(fenilmetileno)amino]-4-metilpentanoico, éster terc-butílico 
\vskip1.000000\baselineskip
54
Se preparó de una manera similar a la descrita para el Intermedio 1, reemplazando 1,3-tiazol-2-carboxaldehído por benzaldehído.
^{1}H RMN (CDCl_{3}): \delta 8,29 (s, 1H), 7,83-7,72 (m, 2H), 7,48-7,32 (m, 3H), 4,00-3,88 (m, 1H), 1,88-1,73 (m, 2H), 1,68-1,53 (m, 1H), 1,48 (s, 9H), 0,95 (d, 3H) y 0,90 (d, 3H).
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio 45
Ácido rel-(2S,4S,5R)-2-isobutil-4-pirazin-2-il-5-fenilpirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico 
\vskip1.000000\baselineskip
55
Se preparó de una manera similar a la descrita para el Intermedio 2, reemplazando el Intermedio 1 por el Intermedio 44.
MS calc. para (C_{23}H_{31}N_{3}O_{2} +H)^{+}: 382.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 382.
\newpage
Intermedio 46
Ácido 2-[N-(metilmetileno)amino]-4-metilpentanoico, éster terc-butílico 
\vskip1.000000\baselineskip
56 
\vskip1.000000\baselineskip
Una solución de éster terc-butílico de leucina (2,0 g, 8,9 mmol) y acetaldehído (999 \mul, 17,9 mmol) se agitó a temperatura ambiente durante 5 minutos. Se añadió sulfato sódico anhidro y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. El sólido se retiró por filtración y el disolvente se evaporó al vacío para producir el compuesto del título en forma de un aceite.
^{1}H RMN (CDCl_{3}): \delta 7,72 (c, 1H), 3,70 (dd, 1H), 2,02 (d, 3H), 1,71-1,64 (m, 2H), 1,46 (m, 10H), 0,93 (d, 3H) y 0,85 (d, 3H).
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio 47
Ácido rel-(2S,4S,5S)-2-isobutil-4-pirazin-2-il-5-metilpirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico 
\vskip1.000000\baselineskip
57 
\vskip1.000000\baselineskip
Se preparó de una manera similar a la descrita para el Intermedio 2, reemplazando trietilamina por 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno (DBU) y el Intermedio 1 por el Intermedio 46.
MS calc. para (C_{18}H_{29}N_{3}O_{2} + H)^{+}: 320.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 320.
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio 48
Ácido 2-[N-(piridin-3-ilmetileno)amino]-4-metilpentanoico, éster terc-butílico 
\vskip1.000000\baselineskip
58 
\vskip1.000000\baselineskip
Se preparó de una manera similar a la descrita para el Intermedio 1, reemplazando 1,3-tiazol-2-carboxaldehído por 3-piridinacarboxaldehído.
^{1}H RMN (CDCl_{3}): \delta 8,88 (d, 1H), 8,66 (dd, 1H), 8,33 (s, 1H), 8,19 (dt, 1H), 7,35 (dd, 1H), 4,00 (dd, 1H), 1,85-1,78 (m, 2H), 1,64-1:52 (m, 1H), 1,48 (s, 9H), 0,96 (d, 3H) y 0,91 (d, 3H).
\newpage
Intermedio 49
Ácido rel-(2S,4S,5R)-2-isobutil-4-pirazin-2-il-5-(piridin-3-il)-pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico 
\vskip1.000000\baselineskip
59 
\vskip1.000000\baselineskip
Se preparó de una manera similar a la descrita para el Intermedio 2, reemplazando el Intermedio 1 por el Intermedio 48.
MS calc. para (C_{22}H_{30}N_{4}O_{2} + H)^{+}: 383.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 383.
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio 50
Ácido 2-[N-(tiofen-2-ilmetileno)amino]-4-metilpentanoico, éster terc-butílico 
\vskip1.000000\baselineskip
60 
\vskip1.000000\baselineskip
Se preparó de una manera similar a la descrita para el Intermedio 1, reemplazando 1,3-tiazol-2-carboxaldehído por 2-tiofenocarboxaldehído.
^{1}H RMN (CDCl_{3}): \delta 8,38 (s, 1H), 7,42 (d, 1H), 7,35 (d,1H), 7,08 (dd, 1H), 3,94 (dd, 1H), 1,86-1,71 (m, 2H), 1,64-1,55 (m, 1H), 1,46 (s, 9H), 0,94 (d, 3H) y 0,89 (d, 3H).
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio 51
Ácido rel-(2S,4S,5R)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(tien-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico 
\vskip1.000000\baselineskip
61 
\vskip1.000000\baselineskip
Se preparó de una manera similar a la descrita para el Intermedio 2, reemplazando el Intermedio 1 por el Intermedio 50.
MS calc. para (C_{21}H_{29}N_{3}O_{2}S + H)^{+}: 388.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 388.
\newpage
Intermedio 52
Ácido 2-[N-(1,3-tiazol-4-ilmetileno)amino]-4-metilpentanoico, éster terc-butílico
62
Se preparó de una manera similar a la descrita para el Intermedio 1, reemplazando 1,3-tiazol-2-carboxaldehído por 1,3-tiazol-4-carboxaldehído (Intermedio 57).
^{1}H RMN (CDCl_{3}): \delta 8,84 (s, 1H), 8,49 (d, 1H), 8,01 (s, 1H), 4,00 (dd, 1H), 1,90-1,70 (m, 2H), 1,64-1,56 (m, 1H), 1,47 (s, 9H), 0,96 (d, 3H) y 0,91 (d, 3H).
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio 53
Ácido rel-(2S,4S,5R)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-4-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico
63
Se preparó de una manera similar a la descrita para el Intermedio 2, reemplazando el Intermedio 1 por el Intermedio 52.
MS calc. para (C_{20}H_{28}N_{4}O_{2}S + H)^{+}: 389.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 389.
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio 54
2-Dimetilamino-1,3-tiazol-4-carboxaldehído
64
A una solución de 2-aminotiazol (30 g, 0,3 mmol) en ácido clorhídrico conc. (150 ml) a 0ºC se le añadió gota a gota una solución saturada de nitrito sódico (20,7 g) en agua. Después de 75 minutos a 0ºC, se añadió en porciones cloruro de cobre (29,7 g) y la mezcla se agitó a 0ºC durante 150 minutos más. La mezcla se neutralizó con una solución conc. de hidróxido sódico y se repartió entre éter dietílico y agua. La fase orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato sódico y se evaporó al vacío para producir 2-clorotiazol en forma de un aceite. A una solución de 2-clorotiazol (15,9 g, 133 mmol) en THF (200 ml) a -74ºC se le añadió n-BuLi (1,6 M en hexano, 90 ml). Después de 10 minutos, se añadió una solución de DMF (14 ml) en THF (90 ml) y se dejó que la mezcla alcanzara la temperatura ambiente durante 2 horas. Después, la mezcla se vertió lentamente en ácido clorhídrico (2 M, 400 ml), se basificó con hidróxido de amonio y se extrajo con diclorometano (2 x 300 ml). Las fracciones orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato sódico y se evaporaron al vacío para producir 2-clorotiazol-4-carboxaldehído en forma de un sólido. Se combinaron una mezcla de 2-clorotiazol-4-carboxaldehído (20 g) en THF acuoso al 2,5% (400 ml) y dimetilamina (13 g, 2,5 equiv.) en THF (150 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. El disolvente se evaporó al vacío, el residuo se repartió entre agua y diclorometano y la capa orgánica se secó sobre sulfato sódico. La evaporación del disolvente produjo el compuesto del título en forma de un sólido.
^{1}H RMN (CDCl_{3}): \delta 9,75 (s, 1H), 7,9 (s, 1H), 3,3 (s, 6H).
\newpage
Intermedio 55
Ácido 2-[N-(2-dimetilamino)-1,3-tiazol-4-ilmetileno)amino]-4-metilpentanoico, éster terc-butílico 
\vskip1.000000\baselineskip
65 
\vskip1.000000\baselineskip
Se preparó de una manera similar a la descrita para el Intermedio 1, reemplazando 1,3-tiazol-2-carboxaldehído por 2-dimetilamino-1,3-tiazol 4-carboxaldehído (Intermedio 54).
^{1}H RMN (CDCl_{3}): \delta 8,21 (s, 1H), 7,43 (s, 1H), 3,87 (t, 1H), 3,21 (s, 3H), 3,13 (s, 3H), 1,80-1,70 (m, 2H), 1,64-1,52 (m, 1H), 1,46 (s, 9H), 0,94 (d, 3H) y 0,88 (d, 3H).
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio 56
Ácido rel-(2S,4S,5R)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(2-dimetilamino-1,3-tiazol-4-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico 
\vskip1.000000\baselineskip
66 
\vskip1.000000\baselineskip
Se preparó de una manera similar a la descrita para el Intermedio 2, reemplazando el Intermedio 1 por el Intermedio 55.
MS calc. para (C_{22}H_{33}N_{5}O_{2}S + H)^{+}: 432.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 432.
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio 57
1,3-Tiazol-4-carboxaldehído 
\vskip1.000000\baselineskip
67
Una mezcla agitada de 4-clorometiltiazol (1 g, 5,88 mmol) y hexamina (1,64 g, 11,76 mmol, 2 equiv.) en ácido acético al 50% (10 ml) se calentó a reflujo durante 3 horas. La mezcla de reacción se dejó enfriar durante cinco minutos y después se añadió ácido clorhídrico concentrado (2,5 ml). La mezcla de reacción resultante se calentó a reflujo durante cinco minutos más antes de la dilución de la mezcla de reacción con agua (50 ml). La mezcla de reacción resultante se extrajo con diclorometano (6 x 50 ml). Los extractos se combinaron y se lavaron una vez con bicarbonato sódico (50 ml), se secaron sobre Na_{2}SO_{4} y se evaporaron para dar el compuesto del título en forma de una goma.
^{1}H RMN (CDCl_{3}): \delta 10,14 (s, 1H), 8,93 (s, 1H), 8,28 (s, 1H).
\newpage
Intermedio 58
Ácido 2-[N-(1,3-tiazol-2-ilmetileno)amino]succínico, éster 1-terc-butílico, éster 4-bencílico
68
Se preparó de una manera similar a la descrita para el Intermedio 1, reemplazando hidrocloruro de éster terc-butílico del ácido 2-amino-4-metil-pentanoico por ácido 2-aminosuccínico, éster 1-terc-butílico, éster 4-bencílico.
^{1}H RMN (CDCl_{3}): \delta 8,51 (s, 1H), 7,95 (d, 1H), 7,44 (d, 1H), 7,35-7,29 (m, 5H), 5,12 (s, 2H), 4,47 (dd, 1H), 3,15 (dd, 1H), 2,92 (dd, 1H), 1,43 (s, 9H).
Intermedio 59
Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-(2-benciloxicarbonilmetil)-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico
69
Se preparó de una manera similar a la descrita para el Intermedio 3. reemplazando el Intermedio 2 por el Intermedio 66 y cloruro de 4-terc-butilbenzoílo por cloruro de 3-terc-butil-4-metoxibenzoílo.
MS calc. para (C_{37}H_{42}N_{4}O_{6}S + H)^{+}: 671.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 671.
Intermedio 60
Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-(carboximetil)-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico
70
A una solución del Intermedio 59 (0,696 mg, 1,04 mmol) en etanol (45 ml) se le añadió catalizador de paladio al 10% sobre carbono (100 mg) seguido de una solución de formiato amónico (2 g) en etanol (40 ml). La mezcla se calentó a reflujo durante 2 horas. El catalizador se retiró por filtración y se lavó con etanol. El filtrado se evaporó a sequedad y se repartió entre agua y acetato de etilo. La fase orgánica se secó sobre sulfato sódico y se evaporó para producir el compuesto del título en forma de un sólido.
MS calc. para (C_{30}H_{36}N_{4}O_{6}S + H)^{+}: 581.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 581.
Intermedio 61
Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-(aminocarbonilmetil)-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico
71
El compuesto del título se preparó en forma de un sólido a partir del Intermedio 60 de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 20. El producto bruto se purificó por repartición entre acetato de etilo y agua, evaporación de la fracción orgánica y después por cromatografía SPE sobre sílice con metanol/acetato de etilo (1:10) como eluyente.
MS calc. para (C_{30}H_{37}N_{5}O_{5}S + H)^{+}: 580.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 580.
Intermedio 62
Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-(N-metilaminocarbonil-metil)-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico
72
El compuesto del título se preparó en forma de un sólido a partir del Intermedio 60 e hidrocloruro de metilamina de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 20. El producto bruto se purificó por repartición entre acetato de etilo y agua, evaporación de la fracción orgánica y después por cromatografía SPE sobre sílice con metanol/acetato de etilo (1:20) como eluyente.
MS calc. para (C_{31}H_{39}N_{5}O_{5}S +H)^{+}: 594.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 594.
Intermedio 63
Enantiómero A de ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-clorobenzoil)-2-isobutil-4-pirazin-2-il-5-(piridin-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico
73
Etapa A
El Intermedio 15 se hizo reaccionar con cloruro de 4-terc-butil-3-clorobenzoílo de una manera similar a la descrita en la preparación del Intermedio 3 para producir ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-clorobenzoil)-2-isobutil-4-pirazin-2-il-5-(piridin-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico.
MS calc. para (C_{29}H_{33}CIN_{4}O_{3}S + H)^{+}: 521/523, MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 521/523.
Etapa B
El racemato de la Etapa A se resolvió usando una columna chiralpak AD y heptano-isopropanol (85:15 v/v) como eluyente. El primer enantiómero en eluir (enantiómero A) era el compuesto del título, que tenía una LCMS idéntica al racemato.
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio 64
Ácido 2-[N-(3-fenilfenil)metilenoamino]-4-metilpentanoico, éster terc-butílico
74
Se preparó de una manera similar a la descrita para el Intermedio 1, reemplazando 1,3-tiazol-2-carboxaldehído por 3-fenilbenzaldehído.
^{1}H RMN (CDCl_{3}): \delta 8,35 (s, 1H), 8,01 (s, 1H), 7,76 (d, 1H), 7,67-7,59 (m, 3H), 7,50-7,42 (m, 3H), 7,37-7,33 (m, 1H), 3,99 (dd, 1H), 1,90-1,76 (m, 2H), 1,66-1,56 (m, 1H), 1,47 (s, 9H), 0,96 (d, 3H) y 0,91 (d, 3H).
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio 65
Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-pirazin-2-il-5-(3-fenilfenil)-pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico
75
Etapa A
Se preparó ácido rel-(2S,4S,5R)-2-isobutil-4-pirazin-2-il-5-(3-fenilfenil)-pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butí-
lico de una manera similar a la descrita para el Intermedio 2, reemplazando el Intermedio 1 por el Intermedio 64.
MS calc. para (C_{29}H_{35}N_{3}O_{2} + H)^{+}: 458, MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 458.
Etapa B
El éster de la Etapa A se aciló con cloruro de 4-terc-butilbenzoílo de una manera similar a la descrita en el Intermedio 3 para producir ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-pirazin-2-il-5-(3-fenilfenil)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico.
MS calc. para (C_{40}H_{47}N_{3}O_{3} + H)^{+}: 618 MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 618.
\newpage
Intermedio 66
Ácido rel-(2S,4S,5R)-2-(2-benciloxicarbonilmetil)-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico
76
Se preparó de una manera similar a la descrita para el Intermedio 2, reemplazando el Intermedio 1 por el Intermedio 58.
MS calc. para (C_{25}H_{28}N_{4}O_{4}S + H)^{+}: 481.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 481.
Intermedio 67
2-Vinil-5-trifluorometilpiridina
77
A una solución de bromuro de vinilmagnesio en THF (1 M, 7,38 ml, 7,38 mmol) en THF (29 ml) se le añadió bromuro de cinc anhidro (1,66 g, 7,38 mmol) a -78ºC. Después de una hora a esta temperatura, la mezcla se calentó a temperatura ambiente. Después de una hora, se añadieron tetraquis(trifenilfosfina)paladio (0) (147 mg) y 2-bromo-5-trifluorometilpiridina (1 g, 4,42 mmol) y la mezcla se calentó a 50ºC durante 5,25 horas. La mezcla se diluyó con una solución de cloruro de amonio (al 10%, 29 ml) y se extrajo con acetato de etilo (70 ml x 2). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de magnesio, se evaporaron y se purificaron por cromatografía en columna (columna SPE, sílice), eluyendo con ciclohexano, seguido de ciclohexano/acetato de etilo (95:5 v/v) y después (9:1 v/v). Esto produjo el compuesto del título.
^{1}H RMN (CDCl_{3}): \delta 8,85 (s, 1H), 7,90 (d, 1H), 7,46 (d, 1H), 6,88 (dd, 1H), 6,36 (d, 1H), 5,65 (d, 1H).
Intermedio 68
Ácido (2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(5-trifluorometilpiridin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico
78
Etapa A
Se preparó ácido (2S,4S,5R)-2-isobutil-4-(5-trifluorometilpiridin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico de una manera similar a la descrita para el Intermedio 2, reemplazando 2-vinilpirazina por el Intermedio 67.
MS calc. para (C_{22}H_{28}F_{3}N_{3}O_{2}S + H)^{+}: 456.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 456.
Etapa B
El compuesto del título se preparó de una manera similar a la descrita para el Intermedio 3. reemplazando el Intermedio 2 por el compuesto descrito en la Etapa A.
MS calc. para (C_{33}H_{40}F_{3}N_{3}O_{3}S + H)^{+}: 616.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 616.
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio 69
Ácido (2S,4R,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(5-trifluorometilpiridin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico 
\vskip1.000000\baselineskip
79 
\vskip1.000000\baselineskip
Una solución del Intermedio 68 (111 mg, 0,18 mmol) se añadió a una solución de NaOH en metanol (0,1N, 1,8 ml) y la solución se puso durante 3 días a temperatura ambiente. El disolvente se retiró al vacío y el residuo se neutralizó mediante la adición de ácido clorhídrico (2 N, 90 \mul). Se añadieron agua (5 ml) y diclorometano (5 ml). La fase acuosa se extrajo adicionalmente con diclorometano (5 ml) y las fracciones orgánicas se combinaron, se secaron sobre sulfato sódico y se evaporaron. El producto se purificó por TLC preparativa, eluyendo con ciclohexano/acetato de etilo (4:1 v/v). La banda de elución más rápida se extrajo con acetato de etilo para producir el compuesto del título. La estereoquímica se confirmó por estudios nOe.
MS calc. para (C_{33}H_{40}F_{3}N_{3}O_{3}S + H)^{+}: 616.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 616.
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio 70
Ácido rel-(2S,4S,5R)-2-isobutil-4-pirazin-2-il-5-(4-dimetilaminofenil)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico 
\vskip1.000000\baselineskip
80 
\vskip1.000000\baselineskip
Se preparó de una manera similar a la descrita para el Intermedio 1, reemplazando 1,3-tiazol-2-carboxaldehído por 4-dimetilaminobenzaldehído.
MS calc. para (C_{25}H_{36}N_{4}O_{2} + H)^{+}: 425.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 425.
\newpage
Intermedio 71
Ácido 2-[N-(1,3-tiazol-2-ilmetileno)amino]-3-(1-trifenilmetil-1H-imidazol-4-il)propiónico, éster terc-butílico
81
Se preparó de una manera similar a la descrita para el Intermedio 1, reemplazando hidrocloruro de éster terc-butílico del ácido 2-amino-4-metilpentanoico por hidrocloruro de éster terc-butílico del ácido 2-amino 3-(1-trifenilmetil-1H-imidazol-5-il)propiónico.
^{1}H RMN (CDCl_{3}): \delta 8,20 (s, 1H), 7,95 (d, 1H), 7,42 (d, 1H), 7,33 (s, 1H), 7,28-7,18 (m, 9H), 7,05-6,99 (m, 6H), 6,51 (s, 1H), 4,37 (dd, 1H), 3,30 (dd, 1H), 3,03 (dd, 1H), 1,45 (s, 9H).
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio 72
Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-(1-trifenilmetil)-1H-imidazol-4-il-metil)-4-pirazin-2-il-5-(1,3-tiazol-2-il)-pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico
82
Se preparó de una manera similar a la descrita para el Intermedio 2, reemplazando el Intermedio 1 por el Intermedio 71.
MS calc. para (C_{51}H_{52}N_{6}O_{4}S + H)^{+}: 846.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 846.
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio 73
Ácido 2-[N-(2-metilpropileno)amino]-4-metilpentanoico, éster terc-butílico
83
Se preparó de una manera similar a la descrita para el Intermedio 46, reemplazando acetaldehído por 2-metilpropionaldehído.
^{1}H RMN (CDCl_{3}): \delta 7,50 (d, 1H), 3,66 (dd, 1H), 2,56-2,41 (m, 1H), 1,78-1,61 (m, 2H), 1,56-1,45 (s + m, 10H), 1,08 (d, 6H), 0,92 (d, 3H), 0,84 (d, 3H).
\newpage
Intermedio 74
Ácido rel-(2S,4S,5S)-2-isobutil-4-pirazin-2-il-5-isopropilpirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico 
\vskip1.000000\baselineskip
84
Se preparó de una manera similar a la descrita para el Intermedio 2, reemplazando trietilamina por 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno (DBU) y el Intermedio 1 por el Intermedio 73.
MS calc. para (C_{20}H_{33}N_{3}O_{2} + H)^{+}: 348.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 348.
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio 75
Ácido 2-[N-(1,3-tiazol-2-ilmetileno)amino]-4-(metiltio)-butanoico, éster terc-butílico 
\vskip1.000000\baselineskip
85
Se preparó de una manera similar a la descrita para el Intermedio 1, reemplazando hidrocloruro de éster terc-butílico del ácido 2-amino-4-metilpentanoico por hidrocloruro de éster terc-butílico de metionina.
^{1}H RMN (CDCl_{3}): \delta 8,49 (s, 1H), 7,95 (d, 1H), 7,45 (d, 1H), 4,18 (dd, 1H), 2,63-2,55 (m, 1H), 2,51-2,42 (m, 1H), 2,29-2,19 (m, 2H), 2,09 (s, 3H), 1,47 (s, 9H).
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio 76
Ácido rel-(2S,4S,5R)-2-(2-(metiltio)etil)-4-pirazin-2-il-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico 
\vskip1.000000\baselineskip
86
Se preparó de una manera similar a la descrita para el Intermedio 2, reemplazando el Intermedio 1 por el Intermedio 75.
MS calc. para (C_{19}H_{26}N_{4}O_{2}S_{2} + H)^{+}: 407.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 407.
\newpage
Intermedio 77
Ácido rel-(2S,4R,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-pirazin-2-il-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico
87
Se preparó de una manera similar a la descrita para el Intermedio 69, reemplazando el Intermedio 68 por el Intermedio 3. La reacción se calentó a 55ºC durante 5 días y la purificación se realizó por TLC preparativa eluyendo con acetato de etilo.
MS calc. para (C_{31}H_{40}N_{4}O_{3}S+ H)^{+}: 549.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+}= 549.
Intermedio 78
4-Ciano-2-vinilpiridina
88
Etapa A
Se calentó una mezcla de 4-cianopiridina (5,08 g, 48,8 mmol), persulfato de amonio (22,9 g, 100 mmol), metanol (75 ml), agua (35 ml) y ácido sulfúrico conc. (2,7 ml) a 62ºC durante 20 horas. El metanol se retiró al vacío, seguido de la adición de una solución de hidróxido sódico (2 M, 60 ml) y cloroformo (70 ml). La fase acuosa se extrajo adicionalmente 3 veces con cloroformo y después con acetato de etilo. Las fracciones orgánicas se combinaron, se secaron sobre sulfato de magnesio y se evaporaron. El producto se purificó por cromatografía en columna de sílice usando un cartucho Biotage (90 g), eluyendo con (2:1 v/v) y después (1:1 v/v) de ciclohexano/acetato de etilo. Esto produjo 4-ciano-2-hidroximetilpiridina en forma de un sólido.
Etapa B
A 4-ciano-2-hidroximetilpiridina (1,1 g, 8,2 mmol) de la Etapa A en DMSO seco (18 ml) se le añadieron N,N-diciclohexilcarbodiimida (5,08 g, 24,6 mmol) y ácido fosfórico (0,4 g, 4,1 mmol). La mezcla se agitó durante una noche a temperatura ambiente. El sólido se retiró por filtración y se lavó con éter y agua. El filtrado y los lavados se combinaron y la capa orgánica se separó. La capa acuosa se extrajo adicionalmente 4 veces con éter y los extractos orgánicos se combinaron, se secaron sobre sulfato de magnesio y se evaporaron. El residuo se purificó por cromatografía SPE en columna de sílice, eluyendo con diclorometano, después con cloroformo y después con éter dietílico. La evaporación de las fracciones apropiadas produjo 4-cianopiridina-2-carboxaldehído en forma de un sólido.
Etapa C
Una mezcla de 4-cianopiridina-2-carboxaldehído (0,916 g, 6,93 mmol), bromuro de metiltrifenilfosfonio (2,48 g, 6,93 mmol), carbonato potásico (1,2 g, 8,66 mmol), 1,4 dioxano (9,5 ml) y agua (0,13 ml) se calentó a reflujo durante 5 horas. La mezcla se diluyó con agua (30 ml) y acetato de etilo (70 ml) y la capa orgánica se separó. La fase acuosa se extrajo adicionalmente con acetato de etilo (2 x 40 ml) y las fracciones orgánicas se combinaron y se secaron sobre sulfato de magnesio. Después de retirar el disolvente, el residuo se purificó por cromatografía en columna de sílice usando un cartucho Biotage y eluyendo con (7:3 v/v) y después (1:1 v/v) de ciclohexano/acetato de etilo. Esto dio el compuesto del título en forma de un aceite.
^{1}H RMN (CDCl_{3}): \delta 8,74 (d, 1H), 7,54 (s, 1H), 7,38 (d, 1H), 6,83 (dd, 1H), 6,33 (d, 1H), 5,64 (d, 1H).
Intermedio 79
Ácido rel-(2S,4S,5R)-2-isobutil-4-(4-cianopiridin-2-il)-5-(1,3-tiazol-5-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico
89
Se preparó de una manera similar a la descrita para el Intermedio 2 reemplazando 2-vinilpirazina por 4-ciano-2-vinilpiridina.
MS calc. para (C_{22}H_{28}N_{4}O_{2}S + H)^{+}: 413.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 413.
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio 80
4-(2-Hidroxietil)pirimidina
90
Una mezcla de 4-metilpirimidina (10 g, 106 mmol) y para-formaldehído (3 g) se agitó en un recipiente a presión cerrado herméticamente con una capacidad de 50 ml a 165ºC durante 3,5 horas. Después de un periodo de refrigeración, se añadió éter y los disolventes se evaporaron para producir un aceite. Éste se purificó por cromatografía en columna de sílice usando un sistema Flashmaster, eluyendo con diclorometano, después con cloroformo y éter y finalmente con acetato de etilo. Las fracciones de acetato de etilo se evaporaron para producir el compuesto del título en forma de un aceite.
^{1}H RMN (CDCl_{3}): \delta 9,13 (s, 1H), 8,64 (d, 1H), 7,23 (d, 1H), 4,07-4,05 (m, 2H), 3,48 (t a, 1H), 3,04-3,01 (m, 2H).
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio 81
Ácido rel-(2S,4S,5R)-2-isobutil-4-(pirimidin-4-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico
91
A 4-(2-hidroxietil)pirimidina, Intermedio 80, (0,605 g, 4,87 mmol) en diclorometano seco (12 ml) a 0ºC, se le añadieron trietilamina (1,02 ml, 7,3 mmol) y cloruro de metanosulfonilo (0,57 ml, 7,3 mmol). Después de 10 minutos a esta temperatura, se dejó que la mezcla alcanzara la temperatura ambiente y se agitó durante 16 horas. La mezcla se enfrió a 0ºC. Se añadió el Intermedio 1 (1,37 g, 4,85 mmol) en THF seco (12 ml), seguido de bromuro de litio (0,846 g, 9,74 mmol) y trietilamina (1,02 ml, 7,3 mmol). Después de agitar a temperatura ambiente durante 2 días, el tratamiento y la purificación como se ha descriton previamente para el Intermedio 2 produjeron el compuesto del título en forma de una goma.
MS calc. para (C_{20}H_{28}N_{4}O_{2}S+ H)^{+}: 389.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 389.
Intermedio 82
Ácido 2-[N-(1,3-tiazol-2-ilmetileno)amino]-4-metilsulfonilbutanoico, éster terc-butílico 
\vskip1.000000\baselineskip
92 
\vskip1.000000\baselineskip
Se preparó de una manera similar a la descrita para el Intermedio 1, reemplazando hidrocloruro de éster terc-butílico del ácido 2-amino-4-metilpentanoico por metionina-sulfona.
^{1}H RMN (CDCl_{3}): \delta 8,52 (s, 1H), 7,97 (d, 1H), 7,48 (d, 1H), 4,20 (t, 1H), 3,17 (dd, 2H), 2,95 (s, 3H), 2,51-2,46 (m, 2H), 1,47 (s, 9H).
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio 83
Ácido rel-(2S,4S,5R)-2-(2-(metilsulfonil)etil)-4-pirazin-2-il-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-bu-tílico 
\vskip1.000000\baselineskip
93 
\vskip1.000000\baselineskip
Se preparó de una manera similar a la descrita para el Intermedio 2, reemplazando el Intermedio 1 por el Intermedio 82.
MS calc. para (C_{30}H_{38}N_{4}O_{5}S_{2} + H)^{+}: 599.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 599.
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio 84
Ácido 2-[N-(1,3-tiazol-2-ilmetileno)amino]propiónico, éster terc-butílico 
\vskip1.000000\baselineskip
94 
\vskip1.000000\baselineskip
Se preparó de una manera similar a la descrita para el Intermedio 1, reemplazando hidrocloruro de éster terc-butílico del ácido 2-amino-4-metilpentanoico por hidrocloruro de éster terc-butílico de alanina.
RMN (CDCl_{3}); \delta 8,5 (d, 1H), 7,9 (d, 1H), 7,4 (d, 1H), 4,15 (c, 1H), 1,6 (s, 3H), 1,45 (s, 9H).
\newpage
Intermedio 85
Ácido rel-(2S,4S,5R)-2-metil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-5-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico 
\vskip1.000000\baselineskip
95 
\vskip1.000000\baselineskip
Se preparó de una manera similar a la descrita para el Intermedio 2, reemplazando el Intermedio 1 por el Intermedio 84.
MS calc. para (C_{17}H_{22}N_{4}O_{2}S + H)^{+}: 347.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 347.
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio 86
Ácido 2-[N-(2-fenil-1,3-tiazol-4-ilmetileno)amino]propiónico, éster terc-butílico 
\vskip1.000000\baselineskip
96 
\vskip1.000000\baselineskip
Se preparó de una manera similar a la descrita para el Intermedio 1, reemplazando 1,3-tiazol-2-carboxaldehído por 2-fenil-1,3-tiazol-4-carboxaldehído.
RMN (CDCl_{3}); \delta 8,5 (s, 1H), 8,2 (s, 1H), 8,0 (m, 3H), 7,45 (m, 3H), 4,0 (c, 1H), 1,8 (m, 2H), 1,6 (m, 1H), 1,5 (s, 9H) 0,94 (m, 6H).
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio 87
Ácido rel-(2S,4S,5R)-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(2-fenil-1,3-tiazol-4-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico 
\vskip1.000000\baselineskip
97 
\vskip1.000000\baselineskip
Se preparó de una manera similar a la descrita para el Intermedio 2, reemplazando el Intermedio 1 por el Intermedio 86.
MS calc. para (C_{26}H_{32}N_{4}O_{2}S + H)^{+}: 465.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 465.
\newpage
Intermedio 88
Ácido 2-[N-(1,3-tiazol-4-ilmetileno)amino]-3-(piridin-2-il)propiónico, éster terc-butílico
98
Se preparó de una manera similar a la descrita para el Intermedio 1, reemplazando hidrocloruro de éster terc-butílico del ácido 2-amino-4-metilpentanoico por éster terc-butílico del ácido 2-amino-3-(2-piridil)propiónico.
RMN (CDCl_{3}); \delta 8,5 (d, 1H), 8,2 (s, 1H), 7,9 (d, 1H), 7,5 (t, 1H), 7,4 (d, 1H), 7,15 (d, 1H), 7,10 (t, 1H), 4,6 (c, 1H), 3,5 (dd, 1H), 3,3 (dd, 1H), 1,4 (s, 9H).
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio 89
Ácido rel-(2S,4S,5R)-2-(2-piridin-2-ilmetil)-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-bu-tílico
99
Se preparó de una manera similar a la descrita para el Intermedio 2, reemplazando el Intermedio 1 por el Intermedio 88 y reemplazando trietilamina por DBU.
MS calc. para (C_{22}H_{35}N_{5}O_{2}S + H)^{+}: 424.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 424.
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio 90
Ácido 4-terc-butil-3-etilbenzoico
100
Una solución de n-butil-litio (1,6 M en hexano, 2,67 ml, 4,27 mmol) se añadió gota a gota a una solución de ácido 4-terc-butil-3-bromobenzoico (500 mg, 1,94 mmol) en THF a -78ºC mientras se mantenía la temperatura por debajo de -70ºC. Después de 40 minutos, se añadió gota a gota yoduro de etilo (1,55, ml, 19,4 mmol) mientras se mantenía la temperatura por debajo de -65ºC. Después de una hora a -70ºC, se dejó que la mezcla alcanzara la temperatura ambiente y se agitó durante una noche. La mezcla se inactivó mediante la adición de una solución saturada de cloruro de amonio (30 ml) y se extrajo con éter (30 ml). La fracción orgánica se secó sobre sulfato de magnesio y se evaporó. La purificación se consiguió por HPLC de fase inversa sobre una columna C_{18} usando un gradiente de elución de dos disolventes con (A) agua que contenía ácido fórmico (al 0,1%) y (B) acetonitrilo-agua (95:5 v/v) que contenía ácido fórmico (al 0,05%) como eluyentes, y se siguió por análisis de las fracciones por espectroscopía de masas por electronebulización. Esto produjo el compuesto del título en forma de un sólido.
MS calc. para (C_{13}H_{18}O_{2} - H)^{-}: 205.
MS encontrado (electronebulización): (M-H)^{-} = 205.
Intermedio 91
Ácido 4-terc-butil-3-etoxibenzoico 
\vskip1.000000\baselineskip
101 
\vskip1.000000\baselineskip
Se preparó de una manera similar a la descrita para ácido 4-terc-butil-3-metoxibenzoico (J. Org. Chem. (1961) 26, 1732), reemplazando yoduro de metilo por yoduro de etilo.
MS calc. para (C_{13}H_{18}O_{3} - H)^{-}: 221.
MS encontrado (electronebulización): (M-H)^{-} = 221.
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio 92
Enantiómero A de ácido rel-(2S,4S,5R)-2-isobutil-4-pirazin-2-il-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico 
\vskip1.000000\baselineskip
102 
\vskip1.000000\baselineskip
El Intermedio 2 (7,0 g) se disolvió en heptano (700 ml) y se inyectaron alícuotas de aprox. 10 ml en una columna de HPLC preparativa (50 mm de di) cargada con una fase estacionaria Chiralpac AD. Cada inyección se eluyó con etanol al 5% v/v en heptano a un caudal de 80 ml/min. El producto de cada inyección se analizó en tiempo real usando detección visible de UV a una longitud de onda de 270 nm y se recogieron fracciones para cada enantiómero. Después de inyecciones repetidas, todas las fracciones que contenían el segundo enantiómero eluido se combinaron y se evaporaron al vacío para producir el compuesto del título en forma de un sólido. Este enantiómero era idéntico según mostró el análisis por LC-MS al compuesto racémico.
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio 93
Ácido 2-[N-(1,3-tiazol-4-ilmetileno)amino]-3-(fenil)propiónico, éster terc-butílico 
\vskip1.000000\baselineskip
103 
\vskip1.000000\baselineskip
Se preparó de una manera similar a la descrita para el Intermedio 1, reemplazando hidrocloruro de éster terc-butílico del ácido 2-amino-4-metilpentanoico por hidrocloruro de éster terc-butílico del ácido 2-amino-3-(2-fenil)propiónico.
RMN (CDCl_{3}): \delta 8,1 (s, 1H), 8,2 (s, 1H), 7,9 (d, 1H), 7,4 (d, 1H), 7,2 (m, 5H), 7,10 (t, 1H), 4,2 (c, 1H), 3,3 (dd, 1H), 3,1 (dd, 1H), 1,4 (s, 9H).
\newpage
Intermedio 94
Ácido rel-(2S,4S,5R)-2-fenilmetil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico
104
Se preparó de una manera similar a la descrita para el Intermedio 2, reemplazando el Intermedio 1 por el Intermedio 93.
MS calc. para (C_{23}H_{26}N_{4}O_{2}S + H)^{+}: 423.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 423.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 1 Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico
105
El Intermedio 3 (88 mg, 0,16 mmol) se disolvió en ácido trifluoroacético (5 ml). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 6 horas. Después, el disolvente se evaporó al vacío y el residuo se trituró con éter dietílico. El sólido resultante se recogió por filtración y se secó al vacío para dar el compuesto del título.
MS calc. para (C_{27}H_{32}N_{4}O_{3}S + H^{+}): 493.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 493.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 2
Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(5-metilpirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico
106
El compuesto del título se preparó a partir del Intermedio 5 de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1.
MS calc. para (C_{28}H_{34}N_{4}O_{3}S + H)^{+}: 507.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 507.
Ejemplo 3 Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(piridin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico
107
El compuesto del título se preparó a partir del Intermedio 7 de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1.
MS calc. para (C_{28}H_{33}N_{3}O_{3}S + H)^{+}: 492.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 492.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 4 Ácido rel-(2S,4R,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(piridin-4-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico
108
El compuesto del título se preparó a partir del Intermedio 9 de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1. Los estudios de nOe por RMN de protones confirmaron que la estereoquímica era 2S,4R,5R.
MS calc. para (C_{28}H_{33}N_{3}O_{3}S + H)^{+}: 492.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 492.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 5 Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirimidin-5-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico
109
El compuesto del título se preparó a partir del Intermedio 11 de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1.
MS calc. para (C_{27}H_{32}N_{4}O_{3}S + H)^{+}: 493.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 493.
Ejemplo 6 Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(6-metilpiridazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico
110
El compuesto del título se preparó a partir del Intermedio 13 de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1.
MS calc. para (C_{28}H_{34}N_{4}O_{3}S + H)^{+}: 507.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 507.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 7 Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(piridin-2-il)pirrolidina-2-carboxílico
111
El compuesto del título se preparó a partir del Intermedio 16 de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1.
MS calc. para (C_{29}H_{34}N_{4}O_{3} + H)^{+}: 487.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 487.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 8 Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(3-bromo-4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(piridin-2-il)pirrolidina-2-carboxílico
112
El compuesto del título se preparó a partir del Intermedio 17 de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1.
MS calc. para (C_{29}H_{33}BrN_{4}O_{3} + H)^{+}: 565/567.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 565/567.
Ejemplo 9 Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(3-bromo-4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-car-boxílico
113
El compuesto del título se preparó a partir del Intermedio 18 de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1.
MS calc. para (C_{27}H_{31}BrN_{4}O_{3}S + H)^{+}: 571/573.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 571/573.
Ejemplo 10 Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(3-bromo-4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(5-metilpirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico
114
El compuesto del título se preparó a partir del Intermedio 19 de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1.
MS calc. para (C_{28}H_{33}BrN_{4}O_{3}S + H)^{+}: 585/587.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 585/587.
Ejemplo 11 Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(3-bromo-4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(piridazin-3-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico
115
Éste se preparó a partir del Intermedio 33 de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1. La purificación se consiguió por HPLC de fase inversa sobre una columna C_{18} usando un gradiente de elución de dos disolventes con (A) agua que contenía ácido fórmico (al 0,1%) y (B) acetonitrilo-agua (95:5 v/v) que contenía ácido fórmico (al 0,05%) como eluyentes, y se siguió por análisis de las fracciones por espectroscopía de masas por electronebulización. Esto produjo el compuesto del título en forma de un sólido.
MS calc. para (C_{27}H_{32}N_{4}O_{3}S + H)^{+}: 493.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 493.
Ejemplo 12 2º Isómero de elución del ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico
116
Se resolvió ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-pirazin-2-il-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico (Ejemplo 1) por HPLC preparativa sobre una columna de cromatografía Chiralpak AD usando heptano-etanol (70:30 v/v) que contenía ácido trifluoroacético al 0,1% como eluyente para producir los enantiómeros individuales con tiempos de retención de 5 minutos (1^{er} enantiómero de elución) y 6 minutos (2º enantiómero de elución, el compuesto del título) respectivamente. El 2º enantiómero de elución era idéntico según mostró el análisis por LCMS al compuesto racémico descrito para el Ejemplo 1.
^{1}H RMN (CD_{3}OD): \delta 8,44 (1H, s), 8,21 (1H, d), 8,16 (1H, d), 7,54 (1H, d), 7,18 (3H, m), 6,94 (2H, d), 5,94 (1H, d), 4,51-4,44 (1H, m), 3,17 (1H, t), 2,41 (1H, dd), 2,31-2,19 (2H, m), 2,12-2,02 (1H, m), 1,13 (9H, s), 1,10 (3H, d), 1,05 (3H, d).
Ejemplo 13 Enantiómero A de ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(3-bromo-4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico
117
El compuesto del título se preparó a partir del Intermedio 21 (Enantiómero A) de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1.
MS calc. para (C_{27}H_{31}BrN_{4}O_{3}S + H)^{+}: 571/573.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 571/573.
Ejemplo 14 Enantiómero A de ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(piridin-2-il)pirrolidina-2-carboxílico
118
El compuesto del título se preparó a partir del Intermedio 22 (Enantiómero A) de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1.
MS calc. para (C_{29}H_{34}N_{4}O_{3}^{+} H)^{+}: 487.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 487.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 15 Enantiómero A de ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(3-bromo-4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(piridin-2-il)pi-rrolidina-2-carboxílico 
\vskip1.000000\baselineskip
119 
\vskip1.000000\baselineskip
El compuesto del título se preparó a partir del Intermedio 23 (Enantiómero A) de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1.
MS calc. para (C_{29}H_{33}BrN_{4}O_{3}S + H)^{+}: 565/567.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 565/567.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 16 Enantiómero A de ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-benzotiazol-2-il)pi-rrolidina-2-carboxílico 
\vskip1.000000\baselineskip
120 
\vskip1.000000\baselineskip
El compuesto del título se preparó a partir del Intermedio 31 (Enantiómero A) de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1. Se purificó por SPE (C_{18}), cargando la muestra en agua y eluyendo con agua seguido de metanol. La purificación adicional se consiguió por HPLC de fase inversa sobre una columna C_{18} usando un gradiente de elución de dos disolventes con (A) agua que contenía ácido fórmico (al 0,1%) y (B) acetonitrilo-agua (95:5 v/v) que contenía ácido fórmico (al 0,05%) como eluyentes, y se siguió por análisis de las fracciones por espectroscopía de masas por electronebulización.
MS calc. para (C_{31}H_{34}N_{4}O_{3}S + H)^{+}: 543.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 543.
Ejemplo 17 Enantiómero A de ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(3-bromo-4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-benzotiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico
121
El compuesto del título se preparó a partir del Intermedio 30 (Enantiómero A) de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1. El compuesto del título se purificó por SPE (C_{18}), cargando la muestra en agua y eluyendo con agua seguido de metanol.
MS calc. para (C_{31}H_{33}BrN_{4}O_{3}S + H)^{+}: 621/623.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 621/623.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 18 Enantiómero A de ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-clorobenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico
122
El compuesto del título se preparó a partir del Intermedio 25 (Enantiómero A) de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1.
MS calc. para (C_{7}H_{31}ClN_{4}O_{3}S +H)^{+}: 527/529.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 527/529.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 19 Enantiómero A de ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico
123
El compuesto del título se preparó a partir del Intermedio 27 (Enantiómero A) de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1.
MS calc. para (C_{28}H_{34}N_{4}O_{4}S + H)^{+}: 523.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 523.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 20 Enantiómero A de rel-(2S,4S,5R)-1-(3-bromo-4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(piridin-2-il)pirrolidina-2-carboxamida 
\vskip1.000000\baselineskip
124 
\vskip1.000000\baselineskip
A una solución del Ejemplo 15 (28,2 mg, 0,05 mmol) y cloruro de amonio (10 mg, 0,19 mmol) en DMF (1 ml) se le añadieron diisopropiletilamina (20 \mul, 0,11 mmol) y HATU (hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio) (25 mg, 0,07 mmol). La solución resultante se agitó en una atmósfera de nitrógeno a temperatura ambiente durante una noche. La reacción no se había completado, por lo que se añadieron más cantidad de cloruro de amonio (10 mg, 0,19 mmol), DIPEA (20 \mul, 0,11 mmol) y HATU (25 mg, 0,07 mmol) y la mezcla se agitó en una atmósfera de nitrógeno durante 24 horas más. El disolvente se evaporó al vacío y el producto se purificó por TLC preparativa, eluyendo con acetato de etilo para dar el compuesto del título.
^{1}H RMN (CDCl_{3}): \delta 10,19 (1H, s a), 8,46 (1H, d), 8,27-8,24 (2H, m), 8,10 (1H, d), 7,17 (1H, d), 7,12-7,01 (2H, m), 6,88 (1H, m), 6,80 (1H, m), 6,00 (1H, d), 5,46 (1H, s a), 5,34 (1H, d), 4,45-4,34 (1H, m), 3,31 (1H, t), 2,56-2,48 (2H, m), 2,42 (1H, dd), 2,12-1,99 (1H, m), 1,37 (9H, s), 1,19 (3H, d), 1,15 (3H, d).
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 21 Enantiómero A de ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(3-bromo-4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(5-metilpirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico 
\vskip1.000000\baselineskip
125 
\vskip1.000000\baselineskip
El compuesto del título se preparó a partir del Intermedio 20 (Enantiómero A) de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1.
MS calc. para (C_{28}H_{33}BrN_{4}O_{3}S + H)^{+}: 585/587.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 585/587.
Ejemplo 22 Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(quinoxalin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico
126
Éste se preparó a partir del Intermedio 35 de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1. La purificación se consiguió por HPLC de fase inversa sobre una columna C_{18} usando un gradiente de elución de dos disolventes con (A) agua que contenía ácido fórmico (al 0,1%) y (B) acetonitrilo-agua (95:5 v/v) que contenía ácido fórmico (al 0,05%) como eluyentes, y se siguió por análisis de las fracciones por espectroscopía de masas por electronebulización. Esto proporcionó el compuesto del título en forma de un sólido.
MS calc. para (C_{31}H_{34}N_{4}O_{3}S + H)^{+}: 543.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 543.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 23 Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(4-trifluorometilpiridin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico
127
El compuesto del título se preparó en forma de un sólido a partir del Intermedio 37 de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1.
MS calc. para (C_{29}H_{32}F_{3}N_{3}O_{3}S + H)^{+}: 560.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 560.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 24 Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico
128
El compuesto del título se preparó en forma de un sólido a partir del Intermedio 38 de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1. La purificación se consiguió por HPLC de fase inversa sobre una columna C_{18} usando un gradiente de elución de dos disolventes con (A) agua que contenía ácido fórmico (al 0,1%) y (B) acetonitrilo-agua (95:5 v/v) que contenía ácido fórmico (al 0,05%) como eluyentes, y se siguió por análisis de las fracciones por espectroscopía de masas por electronebulización.
MS calc. para (C_{28}H_{34}N_{4}O_{3}S + H)^{+}: 507.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 507.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 25 Enantiómero A de rel-(2S,4S,5R)-1-(3-bromo-4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxamida 
\vskip1.000000\baselineskip
129 
\vskip1.000000\baselineskip
El compuesto del título se preparó en forma de un sólido a partir del Ejemplo 13 de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 20.
MS calc. para (C_{27}H_{32}BrN_{5}O_{2}S + H)^{+}: 570/572.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 570/572.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 26 Enantiómero A de ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(piridin-2-il)pi-rrolidina-2-carboxílico 
\vskip1.000000\baselineskip
130 
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa A
El Intermedio 15 se hizo reaccionar con cloruro de 4-terc-butil-3-metoxibenzoílo de una manera similar a la descrita en el Intermedio 3 para producir ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-pirazin-2-il-5-(piridin-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico.
MS calc. para (C_{34}H_{44}N_{4}O_{4} + H)^{+}: 573.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 573.
\newpage
Etapa B
El racemato de la Etapa A se resolvió por HPLC preparativa sobre una columna de cromatografía Chiralpack AD usando heptano-isopropanol (90/10, v/v). La evaporación de las fracciones que contenían el segundo componente en eluir produjo el compuesto del título en forma de una espuma.
MS calc. para (C_{30}H_{36}N_{4}O_{4} + H)^{+}: 517.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 517.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 27 Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(2-cloro-1,3-tiazol-5-il)pirrolidina-2-carboxílico 
\vskip1.000000\baselineskip
131 
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa A
El Intermedio 41 se hizo reaccionar con cloruro de 4-terc-butilbenzoílo de una manera similar a la descrita en el Intermedio 3 para producir ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-pirazin-2-il-5-(2-cloro-1,3-tiazol-5-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico.
MS calc. para (C_{31}H_{39}ClN_{4}O_{3}S + H)^{+}: 583/585.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 583/585.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa B
El éster terc-butílico de la Etapa A se desprotegió con TFA de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1 para producir el compuesto del título en forma de un sólido.
MS calc. para (C_{27}H_{31}CIN_{4}O_{3}S + H)^{+}: 527/529.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 527/529.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 28 Enantiómero A de ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-clorobenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(piridin-2-il)pirrolidina-2-carboxílico
132
El compuesto del título se preparó en forma de un sólido a partir del Intermedio 63 de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1.
MS calc. para (C_{29}H_{33}ClN_{4}O_{3} + H)^{+}: 521/523.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 321/523.
Ejemplo 29 Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(2-cloro-1,3-tiazol-5-il)pirrolidina-2-carboxílico
133
Etapa A
El Intermedio 41 se hizo reaccionar con cloruro de 4-terc-butil-3-metoxibenzoílo de una manera similar a la descrita en el Intermedio 3 para producir ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-pirazin-2-il-5-(2-cloro-1,3-tiazol-5-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico.
MS calc. para (C_{31}H_{39}ClN_{4}O_{3}S + H)^{+}: 583/585, MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 583/585.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa B
El éster terc-butílico de la Etapa A se desprotegió con TFA de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1 para producir el compuesto del título en forma de un sólido.
MS calc. para (C_{28}H_{33}ClN_{4}O_{4}S + H)^{+}: 557/559.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 557/559.
Ejemplo 30 Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(6-metilpirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico
134
Etapa A
El Intermedio 43 se hizo reaccionar con cloruro de 4-terc-butilbenzoílo de una manera similar a la descrita en el Intermedio 3 para producir ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(6-metilpirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico.
MS calc. para (C_{32}H_{42}N_{4}O_{3}S + H)^{+}: 563.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 563.
Etapa B
El éster terc-butílico de la Etapa A se desprotegió con TFA de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1 para producir el compuesto del título en forma de un sólido.
MS calc. para (C_{28}H_{34}N_{4}O_{3}S + H)^{+}: 507.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 507.
Ejemplo 31 Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-fenilpirrolidina-2-carboxílico
135
Etapa A
El Intermedio 45 se hizo reaccionar con cloruro de 4-terc-butil-3-metoxibenzoílo de una manera similar a la descrita en el Intermedio 3 para producir ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-pirazin-2-il-5-fenil-pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico.
MS calc. para (C_{35}H_{45}N_{3}O_{4} + H)^{+}: 572.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 572.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa B
El éster terc-butílico de la Etapa A se desprotegió con TFA de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1 para producir el compuesto del título en forma de un sólido.
MS calc. para (C_{31}H_{37}N_{3}O_{4} + H)^{+}: 516.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 516.
Ejemplo 32 Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-fenil-pirrolidina-2-carboxílico
136
Etapa A
El Intermedio 45 se hizo reaccionar con cloruro de 4-terc-butil-3-benzoílo de una manera similar a la descrita en el Intermedio 3 para producir ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-pirazin-2-il-5-fenilpirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico.
MS calc. para (C_{34}H_{43}N_{3}O_{3} + H)^{+}: 542.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 542.
Etapa B
El éster terc-butílico de la Etapa A se desprotegió con TFA de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1 para producir el compuesto del título en forma de un sólido.
MS calc. para (C_{30}H_{35}N_{3}O_{3} + H)^{+}: 486.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 486.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 33 Ácido rel-(2S,4S,5S)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-2-(pirazin-2-il)-5-metilpirrolidina-2-carboxílico 
\vskip1.000000\baselineskip
137 
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa A
El Intermedio 47 se hizo reaccionar con cloruro de 4-terc-butil-3-metoxibenzoílo de una manera similar a la descrita en el Intermedio 3 para producir ácido rel-(2S,4S,SS)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-pirazin-2-il-5-metil-pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico.
MS calc. para (C_{30}H_{43}N_{3}O_{4} + H)^{+}: 510.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 510.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa B
El éster terc-butílico de la Etapa A se desprotegió con TFA de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1 para producir el compuesto del título en forma de un sólido.
MS calc. para (C_{26}H_{35}N_{3}O_{4} + H)^{+}: 454.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 454.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 34 Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(piridin-3-il)pirrolidina-2-carboxílico, trifluoroacetato 
\vskip1.000000\baselineskip
138
Etapa A
El Intermedio 49 se hizo reaccionar con cloruro de 4-terc-butil-3-metoxibenzoílo de una manera similar a la descrita en el Intermedio 3 para producir ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-pirazin-2-il-5-(piridin-3-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico.
MS calc. para (C_{34}H_{44}N_{4}O_{4} + H)^{+}: 573.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 573.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa B
El éster terc-butílico de la Etapa A se desprotegió con TFA de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1 para producir el compuesto del título en forma de un sólido.
MS calc. para (C_{30}H_{36}N_{4}O_{4} + H)^{+}: 517.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 517.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 35 Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(tien-2-il)pirrolidina-2-carboxílico 
\vskip1.000000\baselineskip
139 
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa A
El Intermedio 51 se hizo reaccionar con cloruro de 4-terc-butil-3-metoxibenzoílo de una manera similar a la descrita en el Intermedio 3 para producir ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(tiofen-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico.
MS calc. para (C_{33}H_{43}N_{3}O_{4} + H)^{+}: 578.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 578.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa B
El éster terc-butílico de la Etapa A se desprotegió con TFA de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1 para producir el compuesto del título en forma de un sólido.
MS calc. para (C_{29}H_{35}N_{3}O_{4}S + H)^{+}: 522.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 522.
Ejemplo 36 Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-4-il)pirrolidina-2-carboxílico 
\vskip1.000000\baselineskip
140 
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa A
El Intermedio 53 se hizo reaccionar con cloruro de 4-terc-butilbenzoílo una manera similar a la descrita en el Intermedio 3 para producir ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-4-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico.
MS calc. para (C_{31}H_{40}N_{4}O_{3} + H)^{+}: 549.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 549.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa B
El éster terc-butílico de la Etapa A se desprotegió con TFA de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1 para producir el compuesto del título en forma de un sólido.
MS calc. para (C_{27}H_{32}N_{4}O_{3}S + H)^{+}: 493.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 493.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 37 Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(2-dimetilamino-1,3-tiazol-4-il)pi-rrolidina-2-carboxílico 
\vskip1.000000\baselineskip
141 
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa A
El Intermedio 56 se hizo reaccionar con cloruro de 4-terc-butil-3-metoxibenzoílo de una manera similar a la descrita en el Intermedio 3 para producir ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(2-dimetilamino-1,3-tiazol-4-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico.
MS calc. para (C_{34}H_{47}N_{5}O_{4}S + H)^{+}: 622.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 622.
Etapa B
El éster terc-butílico de la Etapa A se desprotegió con TFA de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1 para producir el compuesto del título en forma de un sólido.
MS calc. para (C_{30}H_{39}N_{5}O_{4}S + H)^{+}: 566.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 566.
Ejemplo 38 Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(tiazol-4-il)pirrolidina-2-carboxílico
142
Etapa A
El Intermedio 53 se hizo reaccionar con cloruro de 4-terc-butil-3-metoxibenzoílo de una manera similar a la descrita en el Intermedio 3 para producir ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(tiazol-4-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico.
MS calc. para (C_{32}H_{42}N_{4}O_{4}S + H)^{+}: 579.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 579.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa B
El éster terc-butílico de la Etapa A se desprotegió con TFA de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1 para producir el compuesto del título en forma de un sólido.
MS calc. para (C_{28}H_{34}N_{4}O_{4}S + H)^{+}: 523.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 523.
Ejemplo 39 Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(piridin-3-il)pirrolidina-2-carboxílico, sal trifluoroacetato
143
Etapa A
El Intermedio 49 se hizo reaccionar con cloruro de 4-terc-butilbenzoílo de una manera similar a la descrita en el Intermedio 3 para producir ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-benzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(tiazol-4-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico.
MS calc. para (C_{33}H_{42}N_{4}O_{3} + H)^{+}: 543.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 543.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa B
El éster terc-butílico de la Etapa A se desprotegió con TFA de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1 para producir el compuesto del título en forma de un sólido.
MS calc. para (C_{29}H_{34}N_{4}O_{3} + H)^{+}: 487.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 487.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 40 Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-(piridin-2-ilmetil)-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico
144
Etapa A
El Intermedio 89 se hizo reaccionar con cloruro de 4-terc-butil-3-metoxibenzoílo de una manera similar a la descrita en el Intermedio 3 para producir ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-(piridin-2-ilmetil)-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico.
MS calc. para (C_{34}H_{39}N_{5}O_{4}S + H)^{+}: 614.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 614.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa B
El éster terc-butílico de la Etapa A se desprotegió con TFA de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1 para producir el compuesto del título en forma de un sólido.
MS calc. para (C_{30}H_{31}N_{5}O_{4}S + H)^{+}: 558.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 558.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 41 Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-(N-metilaminocarbonil-metil)-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico
145
El compuesto del título se preparó en forma de un sólido a partir del Intermedio 62 de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1.
MS calc. para (C_{27}H_{31}N_{5}O_{5}S + H)^{+}: 538.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 538.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 42 Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-(aminocarbonilmetil)-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico
146
El compuesto del título se preparó en forma de un sólido a partir del Intermedio 61 de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1.
MS calc. para (C_{26}H_{29}N_{5}O_{5}S + H)^{+}: 524.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 524.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 43 Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(3-fenilfenil)pirrolidina-2-carboxílico
147
Etapa A
El Intermedio 65 se hizo reaccionar con cloruro de 4-terc-butilbenzoílo de una manera similar a la descrita en el Intermedio 3 para producir ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-pirazin-2-il-5-(3-fenilfenil)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico.
MS calc. para (C_{40}H_{47}N_{3}O_{3} + H)^{+}: 618.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 618.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa B
El éster terc-butílico de la Etapa A se desprotegió con TFA de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1 para producir el compuesto del título en forma de un sólido.
MS calc. para (C_{36}H_{39}N_{3}O_{3} + H)^{+}: 562.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 562.
Ejemplo 44 (2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxamida
148
El compuesto del título se preparó a partir de Ejemplo 19 de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 20.
MS calc. para (C_{28}H_{35}N_{5}O_{3}S+ H)^{+}: 522.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 522.
Ejemplo 45 Ácido (2S,4R,5R)-1-(4-terc-3-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(5-trifluorometilpiridin-2-il)-5-(1-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico
149
El compuesto del título se preparó a partir del Intermedio 69 de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1.
MS calc. para (C_{29}H_{32}F_{3}N_{3}O_{3}S + H)^{+}: 560.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 560.
Ejemplo 46 Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-5-il)pirrolidina-2-carboxílico
150
Una mezcla del Ejemplo 27 (40 mg, 0,076 mmol) y catalizador de paladio al 10% sobre carbono (40 mg) en etanol (5 ml) se hidrogenó durante 5 días. El catalizador se retiró por filtración y se lavó con etanol. Después de la evaporación del disolvente, el compuesto del título se purificó por HPLC de fase inversa sobre una columna C_{18} usando un gradiente de elución de dos disolventes con (A) agua que contenía ácido fórmico (al 0,1%) y (B) acetonitrilo-agua (95:5 v/v) que contenía ácido fórmico (al 0,05%) como eluyentes, y se siguió por análisis de las fracciones por espectroscopía de masas por electronebulización.
MS calc. para (C_{27}H_{32}N_{4}O_{3}S +H)^{+}: 493.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 493.
Ejemplo 47 Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(4-dimetilaminofenil)pirrolidina-2-carboxílico
151
Etapa A
El Intermedio 70 se hizo reaccionar con cloruro de 4-terc-butil-3-metoxibenzoílo de una manera similar a la descrita en el Intermedio 3 para producir ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-pirazin-2-il-5-(4-dimetilaminofenil)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico.
MS calc. para (C_{37}H_{50}N_{4}O_{4} + H)^{+}: 615.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} =615.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa B
El éster terc-butílico de la Etapa A se desprotegió con TFA de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1 para producir el compuesto del título en forma de un sólido.
MS calc. para (C_{33}H_{42}N_{4}O_{4} + H)^{+}: 559.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 559.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 48 Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(4-dimetilaminofenil)pirrolidina-2-carboxílico
152
Etapa A
El Intermedio 70 se hizo reaccionar con cloruro de 4-terc-butilbenzoílo de una manera similar a la descrita en el Intermedio 3 para producir ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-pirazin-2-il-5-(4-dimetilaminofenil)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico.
MS calc. para (C_{36}H_{48}N_{4}O_{3} + H)^{+}: 585.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 585.
Etapa B
El éster terc-butílico de la Etapa A se desprotegió con TFA de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1 para producir el compuesto del título en forma de un sólido.
MS calc. para (C_{32}H_{40}N_{4}O_{3} + H)^{+}: 529.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 529.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 49 Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-(1H-imidazol-4-ilmetil)-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pi-rrolidina-2-carboxílico 
\vskip1.000000\baselineskip
153
Etapa A
El Intermedio 72 se hizo reaccionar con cloruro de 4-terc-butil-3-metoxibenzoílo de una manera similar a la descrita en el Intermedio 3 para producir ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-(1H-1-trifenilmetilimidazol-4-ilmetil)-4-pirazin-2-il-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico.
MS calc. para (C_{51}H_{52}N_{6}O_{4}S + H)^{+}: 845.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 845.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa B
El éster terc-butílico de la Etapa A se desprotegió con TFA de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1. La purificación se consiguió por HPLC de fase inversa sobre una columna C_{18} usando un gradiente de elución de dos disolventes con (A) agua que contenía ácido fórmico (al 0,1%) y (B) acetonitrilo-agua (95:5 v/v) que contenía ácido fórmico (al 0,05%) como eluyentes, y se siguió por análisis de las fracciones por espectroscopía de masas por electronebulización. Esto produjo el compuesto del título en forma de un sólido.
MS calc. para (C_{28}H_{30}N_{6}O_{4}S + H)^{+}: 547.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 547.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 50 Ácido rel-(2S,4S,5S)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-isopropilpirrolidina-2-carboxílico 
\vskip1.000000\baselineskip
154
Etapa A
El Intermedio 74 se hizo reaccionar con cloruro de 4-terc-butil-3-metoxibenzoílo de una manera similar a la descrita en el Intermedio 3 para producir ácido rel-(2S,4S,5S)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-pirazin-2-il-5-isopropilpirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico.
MS calc. para (C_{32}H_{47}N_{3}O_{4} + H)^{+}: 538.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 538.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa B
El éster terc-butílico de la Etapa A se desprotegió con TFA de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1. La purificación se consiguió por HPLC de fase inversa sobre una columna C_{18} usando un gradiente de elución de dos disolventes con (A) agua que contenía ácido fórmico (al 0,1%) y (B) acetonitrilo-agua (95:5 v/v) que contenía ácido fórmico (al 0,05%) como eluyentes, y se siguió por análisis de las fracciones por espectroscopía de masas por electronebulización. Esto produjo el compuesto del título en forma de un sólido.
MS calc. para (C_{28}H_{39}N_{3}O_{4} + H)^{+}: 482.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 482.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 51 Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-(2-(metiltio)etil)-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-5-il)pirrolidi-na-2-carboxílico 
\vskip1.000000\baselineskip
155 
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa A
El Intermedio 76 se hizo reaccionar con cloruro de 4-terc-butil-3-metoxibenzoílo de una manera similar a la descrita en el Intermedio 3 para producir ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-(2-(metiltio)etil)-4-pirazin-2-il-5-(1,3-tiazol-5-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico.
MS calc. para (C_{31}H_{40}N_{4}O_{4}S_{2} + H)^{+}: 597.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 597.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa B
El éster terc-butílico de la Etapa A se desprotegió con TFA de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1. La purificación se consiguió por HPLC de fase inversa sobre una columna C_{18} usando un gradiente de elución de dos disolventes con (A) agua que contenía ácido fórmico (al 0,1%) y (B) acetonitrilo-agua (95:5 v/v) que contenía ácido fórmico (al 0,05%) como eluyentes, y se siguió por análisis de las fracciones por espectroscopía de masas por electronebulización. Esto produjo el compuesto del título en forma de un sólido.
MS calc. para (C_{27}H_{32}N_{4}O_{4}S_{2} + H)^{+}: 541.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 541.
Ejemplo 52 Ácido rel-(2S,4R,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-3-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico
156
El compuesto del título se preparó en forma de un sólido a partir del Intermedio 77 de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1.
MS calc. para (C_{27}H_{32}N_{4}O_{3}S + H)^{+}: 493.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 493.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 53 Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-5-il)pirrolidina-2-car-boxílico 
\vskip1.000000\baselineskip
157 
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa A
El Intermedio 41 se hizo reaccionar con cloruro de 4-terc-butil-3-metoxibenzoílo de una manera similar a la descrita en el Intermedio 3 para producir éster terc-butílico del ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-pirazin-2-il-5-(2-cloro-1,3-tiazol-5-il)pirrolidina-2-carboxílico.
MS calc. para (C_{32}H_{41}CIN_{4}O_{4}S + H)^{+}: 613/615.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 613/615.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa B
El éster terc-butílico de la Etapa A se desprotegió con TFA de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1. La purificación se consiguió por HPLC de fase inversa sobre una columna C_{18} usando un gradiente de elución de dos disolventes con (A) agua que contenía ácido fórmico (al 0,1%) y (B) acetonitrilo-agua (95:5 v/v) que contenía ácido fórmico (al 0,05%) como eluyentes, y se siguió por análisis de las fracciones por espectroscopía de masas por electronebulización. Esto produjo el compuesto del título en forma de un sólido.
MS calc. para (C_{28}H_{33}ClN_{4}O_{4}S + H)^{+}: 557/559.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 557/559.
\newpage
Etapa C
El ácido de la Etapa A se hidrogenó de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 46. La purificación se consiguió por HPLC de fase inversa sobre una columna C_{18} usando un gradiente de elución de dos disolventes con (A) agua que contenía ácido fórmico (al 0,1%) y (B) acetonitrilo-agua (95:5 v/v) que contenía ácido fórmico (al 0,05%) como eluyentes, y se siguió por análisis de las fracciones por espectroscopía de masas por electronebulización. Esto produjo el compuesto del título en forma de un sólido.
MS calc. para (C_{28}H_{34}N_{4}O_{4}S + H)^{+}: 523.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 523.
Ejemplo 54 Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(4-cianopiridin-2-il)-5-(1,3-tiazol-5-il)pirrolidina-2-carboxílico
158
Etapa A
El Intermedio 79 se hizo reaccionar con cloruro de 4-terc-butilbenzoílo de una manera similar a la descrita en el Intermedio 3 para producir éster terc-butílico del ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(4-cianopiridin-2-il)-5-(1,3-tiazol-5-il)pirrolidina-2-carboxílico.
MS calc. para (C_{33}H_{40}N_{4}O_{3}S + H)^{+}: 573.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 573.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa B
El éster terc-butílico de la Etapa A se desprotegió con TFA de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1. La purificación se consiguió por HPLC de fase inversa sobre una columna C_{18} usando un gradiente de elución de dos disolventes con (A) agua que contenía ácido fórmico (al 0,1%) y (B) acetonitrilo-agua (95:5 v/v) que contenía ácido fórmico (al 0,05%) como eluyentes, y se siguió por análisis de las fracciones por espectroscopía de masas por electronebulización. Esto produjo el compuesto del título en forma de un sólido.
MS calc. para (C_{29}H_{32}N_{4}O_{3}S+ H)^{+}: 517.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 517.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 55 Ácido rel-(2S,4R,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirimidin-4-il)-5-(1,3-tiazol-5-il)pirrolidina-2-carboxílico
159
Etapa A
El Intermedio 81 se hizo reaccionar con cloruro de 4-terc-butilbenzoílo de una manera similar a la descrita en el Intermedio 3 para producir ácido rel-(2S,4R,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirimidin-4-il)-5-(1,3-tiazol-5-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico.
MS calc. para (C_{31}H_{40}N_{4}O_{3}S + H)^{+}: 549.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 549.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa B
El éster terc-butílico de la Etapa A se desprotegió con TFA de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1. La purificación se consiguió por HPLC de fase inversa sobre una columna Supelco ABZ plus usando un gradiente de acetonitrilo al 45-50%/agua como eluyente y análisis de las fracciones por espectroscopía de masas por electronebulización. El segundo componente en eluir se recogió y se confirmó por estudios nOe que era el compuesto del título, aislado en forma de un sólido. El primer componente eluido era el epímero 4-\alpha (Ejemplo 56).
MS calc. para (C_{27}H_{32}N_{4}O_{3}S + H)^{+}: 493.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 493.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 56 Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirimidin-4-il)-5-(1,3-tiazol-5-il)pirrolidina-2-carboxílico 
\vskip1.000000\baselineskip
160 
\vskip1.000000\baselineskip
El primer componente en eluir del Ejemplo 55, Etapa B, se recogió y se confirmó por estudios nOe que era el compuesto del título, aislado en forma de un sólido.
MS calc. para (C_{27}H_{32}N_{4}O_{3}S + H)^{+}: 493.
MS encontrado (electronebulización): (M-H)^{+} = 493.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 57 Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-(2-(metilsulfonil)etil)-4-pirazin-2-il-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico 
\vskip1.000000\baselineskip
161 
\newpage
Etapa A
El Intermedio 83 se hizo reaccionar con cloruro de 4-terc-butil-3-metoxibenzoílo de una manera similar a la descrita en el Intermedio 3 para producir ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-(2-(metilsulfonil)etil)-4-pirazin-2-il-3-(4-dimetilaminofenil)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico.
MS calc. para (C_{31}H_{40}N_{4}O_{6}S_{2} + H)^{+}: 629.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 629.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa B
El éster terc-butílico de la Etapa A se desprotegió con TFA de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1 para producir el compuesto del título en forma de un sólido.
MS calc. para (C_{27}H_{32}N_{4}O_{6}S_{2} + H)^{+}: 573.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 573.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 58 Enantiómero de ácido rel-(2S,4R,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pi-rrolidina-2-carboxílico 
\vskip1.000000\baselineskip
162 
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa A
El Intermedio 27 se epimerizó en la posición C4 usando hidróxido sódico metanólico de una manera similar a la descrita en el Intermedio 77. La purificación se realizó por TLC preparativa, eluyendo con ciclohexano/acetato de etilo (1:1, v/v), produciendo el enantiómero de ácido rel-(2S,4R,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico en forma de un sólido.
MS calc. para (C_{32}H_{42}N_{4}O_{4}S + H)^{+}: 579.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 579.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa B
El éster terc-butílico de la Etapa A se desprotegió con TFA de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1 para producir el compuesto del título en forma de un sólido.
MS calc. para (C_{28}H_{34}N_{4}O_{4}S + H)^{+}: 523.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 523.
Ejemplo 59 Enantiómero A de ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico 
\vskip1.000000\baselineskip
163
Etapa A
El Intermedio 92 se hizo reaccionar con cloruro de 4-terc-butil-3-metilbenzoílo de una manera similar a la descrita en el Intermedio 3 para producir el enantiómero A de ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico.
MS calc. para (C_{32}H_{42}N_{4}O_{3}S + H)^{+}: 563.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 563.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa B
El éster terc-butílico de la Etapa A se desprotegió con TFA de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1. El compuesto se purificó por SPE (C_{18}) eluyendo con agua seguido de acetonitrilo para producir el compuesto del título en forma de un sólido.
MS calc. para (C_{28}H_{34}N_{4}O_{3}S + H)^{+}: 507.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 507.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 60 Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-metil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-5-il)pirrolidina-2-carboxílico 
\vskip1.000000\baselineskip
164
Etapa A
El Intermedio 85 se hizo reaccionar con cloruro de 4-terc-butil-3-metoxibenzoílo de una manera similar a la descrita en el Intermedio 3 para producir ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-metil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-5-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico.
MS calc. para (C_{29}H_{36}N_{4}O_{4}S + H)^{+}: 537.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 537.
\newpage
Etapa B
El éster terc-butílico de la Etapa A se desprotegió con TFA de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1 para producir el compuesto del título en forma de un sólido.
MS calc. para (C_{25}H_{28}N_{4}O_{4}S + H)^{+}: 481.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 481.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 61 Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-clorobenzoil)-2-metil-4-(pirazin-4-il)-3-(1,3-tiazol-5-il)pirrolidina-2-carboxílico 
\vskip1.000000\baselineskip
165 
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa A
El Intermedio 85 se hizo reaccionar con cloruro de 4-terc-butil-3-clorobenzoílo de una manera similar a la descrita en el Intermedio 3 para producir ácido rel-(2S,4S,3R)-1-(4-terc-butil-3-clorobenzoil)-2-metil-4-(pirazin-4-il)-5-(1,3-tiazol-5-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico.
MS calc. para (C_{28}H_{33}CIN_{4}O_{3}S + H)^{+}: 541/543.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 541/543.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa B
El éster terc-butílico de la Etapa A se desprotegió con TFA de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1 para producir el compuesto del título en forma de un sólido.
MS calc. para (C_{24}H_{25}ClN_{4}O_{3}S + H)^{+}: 485/487.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 485/487.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 62 Ácido (2S,4R,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(piridin-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, sal sódica 
\vskip1.000000\baselineskip
166 
\newpage
Etapa A
Se epimerizó ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-pirazin-2-il-5-(piridin-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico, del Ejemplo 26, Etapa A, en la posición C4 usando hidróxido sódico metanólico de una manera similar a la descrita en el Intermedio 77. La reacción se calentó durante 8 días a 55ºC. Después de la extracción y la evaporación de la fase orgánica, no se requirió purificación adicional, produciendo de esta manera ácido (2S,4R,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(piridin-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico en forma de un sólido.
MS calc. para (C_{34}H_{43}N_{4}O_{4}+ H)^{+}: 573.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 573.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa B
El éster terc-butílico de la Etapa A se desprotegió con TFA de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1. Después de la retirada del TFA al vacío, el residuo se disolvió en THF (6 ml) y se trató con una solución de hidróxido sódico (0,1 N, 1,9 ml). El THF se retiró al vacío y el residuo se disolvió en agua y se liofilizó para producir el compuesto del título en forma de un sólido.
MS calc. para (C_{30}H_{35}N_{4}O_{4}+ H)^{+}: 517.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 517.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 63 Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-4-il)pirrolidina-2-carboxílico 
\vskip1.000000\baselineskip
167 
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa A
El Intermedio 53 se hizo reaccionar con cloruro de 4-terc-butil-3-metilbenzoílo de una manera similar a la descrita en el Intermedio 3 para producir ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metilbenzoil)-2-isobutil-4-pirazin-2-il-5-(1,3-tiazol-4-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico.
MS calc. para (C_{32}H_{42}N_{2}O_{3}S + H)^{+}: 563.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 563.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa B
El éster terc-butílico de la Etapa A se desprotegió con TFA de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1. El compuesto se purificó por SPE (C_{18}) eluyendo con agua seguido de acetonitrilo para producir el compuesto del título en forma de un sólido.
MS calc. para (C_{28}H_{34}N_{4}O_{3}S + H)^{+}: 507.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 507.
Ejemplo 64 Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(2-fenil-1,3-tiazol-4-il)pirrolidina-2-carboxílico 
\vskip1.000000\baselineskip
168
Etapa A
El Intermedio 86 se hizo reaccionar con cloruro de 4-terc-butilbenzoílo de una manera similar a la descrita en el Intermedio 3 para producir ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-pirazin-2-il-5-(2-fenil-1,3-tiazol-4-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico.
MS calc. para (C_{37}H_{44}N_{4}O_{3}S + H)^{+}: 625.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 625.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa B
El éster terc-butílico de la Etapa A se desprotegió con TFA de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1 y se purificó por HPLC de fase inversa para producir el compuesto del título en forma de un sólido.
MS calc. para (C_{33}H_{36}N_{4}O_{3}S + H)^{+}: 569.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 569.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 65 Enantiómero A de ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-etilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pi-rrolidina-2-carboxílico 
\vskip1.000000\baselineskip
169
Etapa A
El Intermedio 92 se hizo reaccionar con cloruro de 4-terc-butil-3-etilbenzoílo (preparado a partir de ácido 4-terc-butil-3-etilbenzoico, Intermedio 90) de una manera similar a la descrita en el Intermedio 3 para producir el enantiómero A de ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-etilbenzoil)-2-isobutil-4-pirazin-2-il-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico.
MS calc. para (C_{33}H_{4}N_{4}O_{3}S + H)^{+}: 577.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 577.
\newpage
Etapa B
El éster terc-butílico de la Etapa A se desprotegió con TFA de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1 para producir el compuesto del título en forma de un sólido.
MS calc. para (C_{29}H_{36}N_{4}O_{3}S + H)^{+}: 521.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 521.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 66 Enantiómero A de ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-etoxibenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico 
\vskip1.000000\baselineskip
170 
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa A
El Intermedio 92 se hizo reaccionar con cloruro de 4-terc-butil-3-etoxibenzoílo (preparado a partir de ácido 4-terc-butil-3-etoxilbenzoico, Intermedio 91) de una manera similar a la descrita en el Intermedio 3 para producir el enantiómero A de ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-etoxibenzoil)-2-isobutil-4-pirazin-2-il-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico.
MS calc. para (C_{33}H_{44}N_{4}O_{4}S + H)^{+}: 593.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 593.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa B
El éster terc-butílico de la Etapa A se desprotegió con TFA de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1 para producir el compuesto del título en forma de un sólido.
MS calc. para (C_{29}H_{36}N_{4}O_{4}S + H)^{+}: 537.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 537.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 67 Ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-(fenilmetil)-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico 
\vskip1.000000\baselineskip
171
Etapa A
El Intermedio 94 se hizo reaccionar con cloruro de 4-terc-butil-3-metoxibenzoílo de una manera similar a la descrita en el Intermedio 3 para producir ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-(fenilmetil)-4-pirazin-2-il-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico, éster terc-butílico.
MS calc. para (C_{35}H_{40}N_{4}O_{4}S + H)^{+}: 613.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 613.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa B
El éster terc-butílico de la etapa A se desprotegió con TFA de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1 para producir el compuesto del título en forma de un sólido.
MS calc. para (C_{31}H_{32}N_{4}O_{4}S + H)^{+}: 557.
MS encontrado (electronebulización): (M+H)^{+} = 557.
\vskip1.000000\baselineskip
Los compuestos de acuerdo con la invención pueden formularse para administración por cualquier vía conveniente, y por lo tanto la invención también incluye dentro de su alcance composiciones farmacéuticas para uso en terapia, que comprenden un compuesto de fórmula (I) o una sal fisiológicamente aceptable o solvato del mismo en mezcla con uno o más diluyentes o vehículos fisiológicamente aceptables.
Los compuestos de la presente invención pueden administrarse por diferentes vías que incluyen la administración intravenosa, intraperitoneal, subcutánea, intramuscular, oral, tópica, transdérmica o transmucosa. Para la administración sistémica, se prefiere la administración oral. Para la administración oral, por ejemplo, los compuestos pueden formularse en formas de dosificación orales convencionales tales como cápsulas, comprimidos y preparaciones líquidas tales como jarabes, elixires y gotas concentradas.
Como alternativa, puede usarse la inyección (administración por vía parenteral), por ejemplo, intramuscular, intravenosa, intraperitoneal y subcutánea. Para inyección, los compuestos de la invención se formulan en soluciones líquidas, preferiblemente en tampones o soluciones fisiológicamente compatibles, tales como solución salina, solución de Hank o solución de Ringer. Además, los compuestos pueden formularse en forma sólida y redisolverse o suspenderse inmediatamente antes del uso. También pueden producirse formas liofilizadas.
La administración sistémica también puede realizarse a través de la mucosa o por medios transdérmicos. Para la administración transmucosa o transdérmica, en la formulación se usan penetrantes apropiados para la barrera a atravesar. Tales penetrantes se conocen generalmente en la técnica, e incluyen, por ejemplo, para la administración transmucosa, sales biliares y derivados de ácido fusídico. Además, pueden usarse detergentes para facilitar la penetración. La administración transmucosa, por ejemplo, puede realizarse a través de pulverizadores nasales, supositorios rectales o supositorios vaginales.
Para la administración tópica, los compuestos de la invención pueden formularse en pomadas, ungüentos, geles o cremas, como se conoce generalmente en la técnica.
Las cantidades de los diversos compuestos a administrar pueden determinarse mediante procedimientos convencionales que tienen en cuenta factores tales como la potencia del compuesto (CI_{50}), la eficacia (CE_{50}) y la vida media biológica (del compuesto), la edad, tamaño y peso del paciente, y la enfermedad o trastorno asociado con el paciente. La importancia de estos y otros factores a considerar se conoce por los especialistas en la técnica.
Las cantidades administradas también dependen de las vías de administración y del grado de biodisponibilidad oral. Por ejemplo, para los compuestos con baja biodisponibilidad oral, habrá que administrar dosis relativamente superiores. La administración oral es el método de administración preferido para los compuestos de la presente invención.
Preferiblemente, la composición está en una forma de dosificación unitaria. Para aplicación oral, por ejemplo, puede administrarse un comprimido o cápsula, para aplicación nasal, puede administrarse una dosis de aerosol medida, para aplicación transdérmica, puede administrarse una formulación tópica o parche y para liberación transmucosa, puede administrarse un parche bucal. En cualquier caso, la dosificación es tal que el paciente puede administrarse una sola dosis.
Cada unidad de dosificación para administración oral contiene adecuadamente de 0,01 a 500 mg/kg, y preferiblemente de 0,1 a 50 mg/kg, de un compuesto de Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, calculada como la base libre. La dosificación diaria para las vías parenteral, nasal, inhalación oral, transmucosa o transdérmica contiene adecuadamente de 0,01 mg a 100 mg/kg, de un compuesto de Fórmula (I). Una formulación tópica contiene adecuadamente de 0,01 a 5,0% de un compuesto de Fórmula (I). El ingrediente activo puede administrarse de 1 a 6 veces al día, preferiblemente una vez, suficiente para mostrar la actividad deseada, como resulta obvio para un especialista en la técnica.
Las composiciones de Fórmula (I) y sus sales farmacéuticamente aceptables que son activas cuando se administran por vía oral pueden formularse en forma de jarabes, comprimidos, cápsulas y pastillas. Una formulación en forma de jarabe consistirá generalmente en una suspensión o solución del compuesto o sal en un vehículo líquido, por ejemplo, etanol, aceite de cacahuete, aceite de oliva, glicerina o agua con un agente aromatizante o colorante. Cuando la composición está en forma de un comprimido, puede usarse cualquier vehículo farmacéutico usado habitualmente para preparar formulaciones sólidas. Los ejemplos de tales vehículos incluyen estearato de magnesio, terra alba, talco, gelatina, goma arábiga, ácido esteárico, almidón, lactosa y sacarosa. Cuando la composición está en forma de una cápsula, cualquier encapsulación convencional es adecuada, por ejemplo usando los vehículos mencionados anteriormente en una envuelta de cápsula de gelatina dura. Cuando la composición está en forma de una cápsula con envuelta de gelatina blanda, puede considerarse cualquier vehículo farmacéutico usado habitualmente para preparar dispersiones o suspensiones, por ejemplo, gomas acuosas, celulosas, silicatos o aceites, y se incorporan en una envuelta de cápsula de gelatina blanda.
Las composiciones parenterales típicas consisten en una solución o suspensión de un compuesto o sal en un vehículo acuoso o no acuoso, estéril, que contiene opcionalmente un aceite parenteralmente aceptable, por ejemplo, polietilenglicol, polivinilpirrolidona, lecitina, aceite de cacahuete o aceite de sésamo.
Las composiciones típicas para inhalación están en forma de una solución, suspensión o emulsión que puede administrarse en forma de un polvo seco o en forma de un aerosol usando un propulsor convencional tal como diclorodifluorometano o triclorofluorometano.
Una formulación de supositorio típica comprende un compuesto de Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo que es activa cuando se administra de esta manera, con un agente aglutinante y/o lubricante, por ejemplo, glicoles poliméricos, gelatinas, manteca de cacao u otras ceras vegetales o grasas con bajo punto de fusión o sus análogos sintéticos.
Las formulaciones dérmicas y transdérmicas típicas comprenden un vehículo acuoso o no acuoso convencional, por ejemplo, una crema, pomada, loción o pasta, o están en forma de un esparadrapo, parche o membrana medicados.
No se esperan efectos toxicológicos inaceptables cuando los compuestos de la presente invención se administran de acuerdo este documento.
\vskip1.000000\baselineskip
Ensayo
El potencial de los compuestos de la invención para inhibir la actividad polimerasa de NS5B de HCV de tipo silvestre puede demostrarse, por ejemplo, usando el siguiente ensayo in vitro:
\vskip1.000000\baselineskip
Detección in vitro de inhibidores de la actividad ARN Polimerasa dependiente de ARN de HCV
La incorporación de [^{3}H]-UMP en el ARN se siguió por la absorción del polímero de ARN en un filtro de fibra de vidrio DEAE. Como sustrato de homopolímero se usó una plantilla sintética consistente en oligoU de 16 unidades hibridado con polirA (10:1 p/p).
Las condiciones de reacción fueron [^{3}H]-UTP 22 \muM (0,75 Ci/mMol), Ditiotreitol 1 mM, MgCl_{2} 3,2 mM, Tris-HCl 20 mM, pH 7,0, 10 \mug/ml de poliA-oligoU y NaCl 90 mM. Debe tenerse en cuenta que se añade NaCl 50 mM con la enzima.
Se diluyó ARN polimerasa de HCV (NS5B de longitud completa recombinante (Lohmann et al, J. Virol. 71 (11), 1997, 8416 "Biochemical properties of hepatitis C virus NS5B RNA-dependent RNA polimerase and identification of amino acid sequence motifs essential for enzymatic activity") expresada en baculovirus y purificada hasta la homogeneidad) a aproximadamente 50 \mug proteína/ml (dependiendo de la actividad específica) en Hepes 50 mM, pH 7,0, NaCl 0,5 M, glicerol al 20%, Triton X-100 al 0,05%, Ditiotreitol 5 mM, EDTA 0,1 mM.
Se preparó mezcla de tampón concentrado 5x usando Tris-HCl 1 M (pH 7,0, 1 ml), MgCl_{2} 1 M (0,16 ml), Ditiotreitol 1 M (0,05 ml), NaCl 5 M (0,4 ml) y agua (8,4 ml), Total 10 ml.
Se preparó mezcla de sustrato usando mezcla de tampón concentrado 5x (12 \mul), [^{3}H]-UTP (1 \muCi/\mul; 21,7 \muM, 1 \mul), UTP 22 \muM (100 \muM, 13,2 \mul), 10 \mug/ml de poliA-oligoU (100 \mug/ml, 6 \mul) y agua (12,8 \mul), Total 45 \mul.
El ensayo se preparó usando mezcla de sustrato (45 \mul), compuesto (10 \mul) y enzima diluida (añadida en último lugar para empezar la reacción) (5 \mul), Total 60 \mul.
La reacción se realizó en una placa de 96 pocillos, transparente, de fondo en U. La reacción se mezcló en un agitador de placas, después de la adición de la enzima, y se incubó durante 2 h a 22ºC. Después de este periodo de tiempo, la reacción se detuvo mediante la adición de 25 \mul de EDTA 100 mM.
Un Filtermat DEAE (Parte Nº 1205-405 de Pharmacia) se prelavó en agua y alcohol y se secó. Se salpicaron 2 x 20 \mul de la mezcla de ensayo inactivada en un cuadrado del Filtermat DEAE. El Filtermat DEAE se lavó 2 veces durante 15 min en tampón SSC (NaCl 0,3 M, citrato-Na 30 mM) seguido de 2 lavados de 2 min en agua y 1 lavado de 1 min en alcohol. El Filtermat se secó y se cerró en una bolsa junto con 10 ml de líquido de centelleo OptiScint HiSafe. La radiactividad presente en el filtermat se detectó por recuento de centelleo en un contador Wallac 1205 Betaplate. Después de restar los niveles de fondo sin enzima, cualquier reducción en la cantidad de radiactividad incorporada en presencia de un compuesto, en comparación con la observada en ausencia del compuesto, se consideró una medida del nivel de inhibición. Se ensayaron diez concentraciones de compuestos en diluciones de dos o tres veces. A partir de los recuentos, se calculó el porcentaje de inhibición a la máxima concentración ensayada o los valores de CI_{50} para los compuestos usando los paquetes de software Grafit3 o Grafit4.
Todos los compuestos ejemplificados tuvieron un valor de CI_{50} de <50 \muM en el ensayo descrito anteriormente. Por consiguiente, los compuestos de la invención tienen un efecto terapéutico beneficioso potencial en el tratamiento y profilaxis del HCV. Los compuestos preferidos tenían un valor de CI_{50} de <0,3 \muM.
De esta manera, como un aspecto adicional de la presente invención se proporciona un compuesto de fórmula (I) o una sal o solvato fisiológicamente aceptable del mismo para uso en terapia médica humana o veterinaria, particularmente en el tratamiento y/o profilaxis de una infección viral, particularmente una infección por VIH.
Se apreciará que la referencia en este documento al tratamiento incluye, pero sin limitación, la prevención, retraso, profilaxis, terapia y cura de la enfermedad. Se apreciará además que las referencias de este documento a tratamiento o profilaxis de una infección por HCV incluyen tratamiento o profilaxis de enfermedades asociadas a HCV tales como fibrosis hepática, cirrosis y carcinoma hepatocelular.
De acuerdo con otro aspecto de la invención, se proporciona el uso de un compuesto de Fórmula (I) o una sal fisiológicamente aceptable o solvato del mismo, para la preparación de un medicamento para el tratamiento y/o profilaxis de infecciones virales, particularmente la infección por HCV.
En un aspecto adicional o alternativo, se proporciona un método para el tratamiento de un ser humano o animal con infección viral, particularmente infección por HCV, comprendiendo dicho método administrar a dicho sujeto humano o animal una cantidad eficaz de un compuesto de la Fórmula (I) o una sal fisiológicamente aceptable o solvato del mismo.
Las composiciones farmacéuticas de acuerdo con la invención también pueden usarse en combinación con otros agentes terapéuticos, por ejemplo, terapias inmunes (por ejemplo, interferón), vacunas terapéuticas, agentes antifibróticos, agentes antiinflamatorios tales como corticosteroides o AINE, broncodilatadores tales como agonistas beta-2 adrenérgicos y xantinas (por ejemplo, teofilina), agentes mucolíticos, antimuscarínicos, antileucotrienos, inhibidores de la adhesión celular (por ejemplo, antagonistas de ICAM), antioxidantes (por ejemplo, N-acetilcisteína), agonistas de citoquinas, antagonistas de citoquinas, surfactantes pulmonares y/o agentes antimicrobianos y antivirales (por ejemplo, ribavirina y amantidina). Las composiciones de acuerdo con la invención también pueden usarse en combinación con una terapia de reemplazo de genes.
De esta manera, la invención proporciona, en un aspecto adicional, una combinación que comprende un compuesto de Fórmula (I) o una sal fisiológicamente aceptable o solvato del mismo junto con otro agente terapéuticamente activo.
Las combinaciones mencionadas anteriormente se pueden presentar convenientemente para uso en forma de una formulación farmacéutica, así que las formulaciones farmacéuticas que comprenden una combinación como se ha definido antes junto con un diluyente o vehículo farmacéuticamente aceptable para el mismo representan un aspecto adicional de la invención.
Los componentes individuales de tales combinaciones pueden administrarse secuencial o simultáneamente en formulaciones farmacéuticas separadas o combinadas. Los especialistas en la técnica apreciarán fácilmente las dosis apropiadas de agentes terapéuticos conocidos.

Claims (14)

1. Un compuesto de Fórmula (I)
172
en la que:
A representa OR^{1}, NR^{1}R^{2} o R^{1}, donde R^{1} y R^{2} se seleccionan independientemente entre el grupo que consiste en hidrógeno, alquilo C_{1-6}, arilo, heteroarilo, arilalquilo y heteroarilalquilo; o R^{1} y R^{2} junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos forman un grupo cíclico, saturado, de 5 ó 6 miembros;
B representa C(O)R^{3}, donde R^{3} se selecciona entre el grupo que consiste en arilo y heteroarilo;
C representa alquilo C_{1-6}, arilo, heteroarilo o heterociclilo;
D representa un anillo heterocíclico de 6 miembros, saturado o insaturado, que comprende tres o más átomos de carbono, pudiendo estar cada uno de ellos opcionalmente sustituido con R^{4} y R^{5}, y uno a tres heteroátomos seleccionados independientemente entre N, opcionalmente sustituido con hidrógeno, alquilo C_{1-6}, C(O)R^{3}, SO_{2}R^{3}, arilo, heteroarilo, arilalquilo o heteroarilalquilo; O; y S, opcionalmente sustituido con uno o dos átomos de oxígeno; donde el anillo de 6 miembros puede estar unido en cualquier átomo de carbono endocíclico, y puede estar opcionalmente condensado con un anillo carbocíclico o heterocíclico, de 5 ó 6 miembros, saturado o insaturado, que puede estar opcionalmente sustituido a su vez en un átomo no condensado con alquilo C_{1-6}, halo, OR^{8}, C(O)NR^{6}R^{7}, C(O)R^{3}, CO_{2}H, CO_{2}R^{3}, NR^{6}R^{7}, NHC(O)R^{3}, NHCO_{2}R^{3}, NHC(O)NR^{1}R^{2}, SO_{2}NR^{1}R^{2}, SO_{2}R^{3}, nitro, ciano, oxo, arilo, heteroarilo y heterociclilo;
R^{4} y R^{5} se seleccionan independientemente entre hidrógeno, alquilo C_{1-6}, halo, OR^{8}, C(O)NR^{6}R^{7}, C(O)R^{3}, CO_{2}H, CO_{2}R^{3}, NR^{6}R^{7}, NHC(O)R^{3}, NHCO_{2}R^{3}, NHC(O)NR^{1}R^{2}, SO_{2}NR^{1}R^{2}, SO_{2}R^{3}, nitro, oxo, arilo, heteroarilo y heterociclilo;
R^{6} y R^{7} se seleccionan independientemente entre hidrógeno, alquilo C_{1-6}, arilo y heteroarilo; y
R^{8} representa hidrógeno, alquilo C_{1-6}, arilalquilo o heteroarilalquilo;
E representa hidrógeno o alquilo C_{1-6};
F representa hidrógeno, alquilo C_{1-6}, arilo o heteroarilo; y
G representa hidrógeno, alquilo C_{1-6}, heterociclilalquilo, arilalquilo o heteroarilalquilo;
donde, a menos que se indique otra cosa,
el término "alquilo" se refiere a un grupo de hidrocarburo saturado o insaturado, lineal, ramificado o cíclico, opcionalmente sustituido con alquilo C_{1-6}, halo, OR^{8}, C(O)NR^{6}R^{7}, C(O)R^{3}, CO_{2}H, CO_{2}R^{3}, NR^{6}R^{7}, NHC(O)R^{3}, NHCO_{2}R^{3}, NHC(O)NR^{1}R^{2}, SO_{2}NR^{1}R^{2}, SR^{3}, SO_{2}R^{3}, nitro, oxo, ciano y heterociclilo;
el término "arilo" se refiere a un grupo aromático en el que al menos un anillo tiene un sistema de electrones pi conjugado, que contiene hasta dos sistemas de anillos conjugados o condensados y que está opcionalmente sustituido con alquilo C_{1-6}, halo, OR^{8}, C(O)NR^{6}R^{7}, C(O)R^{3}, CO_{2H}, CO_{2}R^{3}, NR^{6}R^{7}, NHC(O)R^{3}, NHCO_{2}R^{3}, NHC(O)NR^{1}R^{2}, SO_{2}NR^{1}R^{2}, SO_{2}R^{3}, nitro, oxo, heterociclilo, CF_{3}, piridina, fenilo, ciano y NO_{2};
el término "heteroarilo" se refiere a un grupo aromático de 5 ó 6 miembros que comprende de uno a cuatro heteroátomos seleccionados entre N, O y S, donde al menos un anillo tiene un sistema de electrones pi conjugado, que contiene hasta dos sistemas de anillos conjugados o condensados, y que está opcionalmente sustituido con alquilo C_{1-6}, halo, OR^{8}, C(O)NR^{6}R^{7}, C(O)R^{3}, CO_{2}H, CO_{2}R^{3}, NR^{6}R^{7}, NHC(O)R^{3}, NHCO_{2}R^{3}, NHC(O)NR^{1}R^{2}, SO_{2}NR^{1}R^{2}, SO_{2}R^{3}, nitro, oxo, heterociclilo, CF_{3}, piridina, fenilo, ciano y NO_{2}; y
los términos "heterocíclico" y "heterociclilo" se refieren a un grupo de hidrocarburo cíclico, saturado, de 5 ó 6 miembros, opcionalmente sustituido, que contiene de 1 a 4 heteroátomos seleccionados entre N, opcionalmente sustituido con hidrógeno, alquilo C_{1-6}, C(O)R^{3}, SO_{2}R^{3}, arilo o heteroarilo; O; y S, opcionalmente sustituido con uno o dos átomos de oxígeno;
y sales, solvatos y ésteres de los mismos, con la condición de que cuando A es OR^{1} entonces R^{1} sea distinto de terc-butilo.
2. Un compuesto de Fórmula (I) de acuerdo con la reivindicación 1, en el que B representa C(O)R^{3}, y R^{3} es fenilo sustituido en la posición para con terc-butilo y opcionalmente sustituido adicionalmente con metilo, etilo, metoxi, etoxi o halo.
3. Un compuesto de Fórmula (I) de acuerdo con la reivindicación 1 ó 2, en el que B representa C(O)R^{3}, y R^{3} representa fenilo sustituido en la posición para con terc-butilo y opcionalmente sustituido adicionalmente en la posición meta con metilo, etilo, metoxi, etoxi o halo.
4. Un compuesto de Fórmula (I) de acuerdo con cualquier reivindicación anterior, en el que C se selecciona entre el grupo que consiste en alquilo C_{1-6}, arilo y heteroarilo.
5. Un compuesto de Fórmula (I) de acuerdo con cualquier reivindicación anterior, en el que D se selecciona entre el grupo (i) que consiste en piridilo, piranilo, pirimidinilo, piridazinilo, pirazinilo, 2H-1,2-oxazinilo, 2H-1,3- oxazinilo, 2H-1,4- oxazinilo, 2H-1,2-tiazinilo, 2H-1,3-tiazinilo, 2H-1,4-tiazinilo, 1,2,3-triazinilo, 1,2,4-triazinilo, 1,3,5-triazinilo, 2H-1,2,4-oxadiazinilo, 2H-1,2,5-oxadiazinilo, 2H-1,3,4-oxadiazinilo, 2H-1,3,4-oxadiazinilo, 2H-1,3,5-oxadiazinilo, 2H-1,2,4-tiadiazinilo, 2H-1,2,6-tiadiazinilo, 2H-1,3,4-tiadiazinilo, 2H-1,3,5-tiadiazinilo, 1,4,2-dioxazinilo, 4H-1,3,5-ditiazinilo, 1,4,2-ditiazinilo, y derivados parcial o totalmente saturados de los mismos; cada uno de los cuales, cuando pueda aplicarse, puede estar opcionalmente sustituido a su vez en un átomo de carbono con R^{4} y R^{5}, en un átomo de nitrógeno con hidrógeno, alquilo C_{1-6}, C(O)R^{3}, SO_{2}R^{3}, arilo, heteroarilo, arilalquilo, o heteroarilalquilo, y en un átomo de azufre con uno o dos átomos de oxígeno; y cada uno de ellos puede estar opcionalmente condensado con dos átomos de carbono adyacentes del anillo con un anillo carbocíclico o heterocíclico, de 5 ó 6 miembros, saturado o insaturado, que puede estar opcionalmente sustituido a su vez en un átomo de carbono no condensado con alquilo C_{1-6}, halo, OR^{8}, C(O)NR^{6}R^{7}, C(O)R^{3}, CO_{2}H, CO_{2}R^{3}, NR^{6}R^{7}, NHC(O)R^{3}, NHCO_{2}R^{3}, NHC(O)NR^{1}R^{2}, SO_{2}NR^{1}R^{2}, SO_{2}R^{3}, nitro, ciano, oxo, arilo, heteroarilo y heterociclilo;
6. Un compuesto de Fórmula (I) de acuerdo con cualquier reivindicación anterior, en el que D se selecciona entre piridilo opcionalmente sustituido con trifluorometilo o ciano; pirimidinilo; pirazinilo opcionalmente sustituido con metilo; piridazinilo opcionalmente sustituido con metilo; o quinoxalinilo.
7. Un compuesto de Fórmula (I) de acuerdo con cualquier reivindicación anterior, en el que G es alquilo C_{1-6}, bencilo, piridinilmetilo, N-metilaminocarbonil-metilo o aminocarbonilmetilo.
8. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 seleccionado entre el grupo que consiste en:
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(5-metilpirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(piridin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4R,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(piridin-4-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,45,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirimidin-5-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(6-metilpiridazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-
carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(piridin-2-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(3-bromo-4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(piridin-2-il)pirrolidina-2-car-
boxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(3-bromo-4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-
carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(3-bromo-4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(5-metil-pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(3-bromo-4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(piridazin-3-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-benzotiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(3-bromo-4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-benzotiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-clorobenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-
carboxílico;
rel-(25,4S,5R)-1-(3-bromo-4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(piridin-2-il)pirrolidina-2-carboxamida;
ácido rel-(25,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(quinoxalin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(4-trifluorometil-piridin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico;
rel-(2S,4S,5R)-1-(3-bromo-4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxamida;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(piridin-2-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(2-cloro-1,3-tiazol-5-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-clorobenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(piridin-2-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(2-cloro-1,3-tiazol-5-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(6-metilpirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-fenilpirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-fenil-pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5S)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-metilpirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(piridin-3-il)-pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(tien-2-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-4-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(2-dimetilamino-1,3-tiazol-4-
il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(tiazol-4-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(piridin-3-il)pirrolidina-2-carboxílico,
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-(piridin-2-ilmetil)-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico;
\newpage
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-(N-metilaminocarbonil-etil)-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-(aminocarbonilmetil)-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)
pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(3-fenilfenil)pirrolidina-2-carboxílico;
(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxamida;
(2S,4R,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(5-trifluorometilpiridin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxamida;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-5-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(4-dimetilaminofenil)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(4-dimetilaminofenil)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-(1H-imidazol-4-ilmetil)-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-
il)-pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5S)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-isopropilpirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-(2-(metiltio)etil)-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-5-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(25,4R,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-5-il)pirrolidina-2-
carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(4-cianopiridin-2-il)-5-(1,3-tiazol-5-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4R,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirimidin-4-il)-5-(1,3-tiazol-5-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirimidin-4-il)-5-(1,3-tiazol-5-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-(2-(metilsulfonil)etil)-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)
pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4R,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-
carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-metil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-5-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-clorobenzoil)-2-metil-4-(pirazin-4-il)-5-(1,3-tiazol-5-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido (2S,4R,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(piridin-2-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-4-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(2-fenil-1,3-tiazol-4-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-etilbenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico;
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-etoxibenzoil)-2-isobutil-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico; y
ácido rel-(2S,4S,5R)-1-(4-terc-butil-3-metoxibenzoil)-2-(fenilmetil)-4-(pirazin-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-il)pirrolidina-2-carboxílico;
y sales, solvatos, ésteres y enantiómeros individuales de los mismos.
9. Una formulación farmacéutica que comprende un compuesto de Fórmula (I) de acuerdo con cualquier reivindicación anterior junto con un diluyente o vehículo farmacéuticamente aceptable del mismo.
10. Una formulación farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 9, presentada en una forma de dosificación oral.
11. Un compuesto de Fórmula (I) de acuerdo con la reivindicación 1 para uso en terapia médica.
12. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 11, en el que la terapia médica es el tratamiento de infección por HCV.
13. Uso de un compuesto de Fórmula (I) de acuerdo con la reivindicación 1 en la preparación de un medicamento para el tratamiento de infección por HCV.
14. Un proceso para la preparación de compuestos de Fórmula (I) de acuerdo con la reivindicación 1, que comprende reacción de un compuesto de Fórmula (VI)
173
en la que A, C, D, E, F y G son como se han definido anteriormente para la Fórmula (I) y donde A es OR^{1} y R^{1} es hidrógeno, opcionalmente A se desprotege con un grupo protector de hidroxi adecuado; con un agente de acilación adecuado, por ejemplo R^{3}C(O)-hal, donde hal es un átomo de halo y donde A es hidroxi protegido, seguido de una etapa de desprotección.
ES02783059T 2001-11-02 2002-10-30 Derivados de 4-(heteroaril de 6 miembros)-acil pirrolidina como inhibidores de hcv. Expired - Lifetime ES2289161T3 (es)

Applications Claiming Priority (6)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GB0126440 2001-11-02
GB0126440A GB0126440D0 (en) 2001-11-02 2001-11-02 Compounds
GB0203900A GB0203900D0 (en) 2002-02-19 2002-02-19 Compounds
GB0203900 2002-02-19
GB0219321A GB0219321D0 (en) 2002-08-19 2002-08-19 Compounds
GB0219321 2002-08-19

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ES2289161T3 true ES2289161T3 (es) 2008-02-01

Family

ID=27256312

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES02783059T Expired - Lifetime ES2289161T3 (es) 2001-11-02 2002-10-30 Derivados de 4-(heteroaril de 6 miembros)-acil pirrolidina como inhibidores de hcv.

Country Status (9)

Country Link
US (1) US7259163B2 (es)
EP (1) EP1440069B1 (es)
JP (1) JP2005515172A (es)
AR (1) AR037182A1 (es)
AT (1) ATE370137T1 (es)
DE (1) DE60221875T2 (es)
ES (1) ES2289161T3 (es)
TW (1) TW200302823A (es)
WO (1) WO2003037895A1 (es)

Families Citing this family (48)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB0211418D0 (en) * 2002-05-17 2002-06-26 Glaxo Group Ltd Compounds
EP1629000B1 (en) 2003-04-16 2009-02-18 Bristol-Myers Squibb Company Macrocyclic isoquinoline peptide inhibitors of hepatitis c virus
TWI368507B (en) 2004-02-20 2012-07-21 Boehringer Ingelheim Int Viral polymerase inhibitors
ATE372323T1 (de) * 2004-03-26 2007-09-15 Smithkline Beecham Corp Als antivirale mittel geeignete 4- carboxypyrazolderivate
GB0423672D0 (en) * 2004-10-25 2004-11-24 Glaxo Group Ltd Compounds
WO2007039146A1 (en) * 2005-09-23 2007-04-12 Smithkline Beecham Corporation 4-carboxy pyrazole derivatives as anti-viral agents
GB0519486D0 (en) * 2005-09-23 2005-11-02 Glaxo Group Ltd Compounds
GB0519478D0 (en) * 2005-09-23 2005-11-02 Glaxo Group Ltd Compounds
GB0519485D0 (en) * 2005-09-23 2005-11-02 Glaxo Group Ltd Compounds
US7964580B2 (en) 2007-03-30 2011-06-21 Pharmasset, Inc. Nucleoside phosphoramidate prodrugs
WO2009003009A1 (en) * 2007-06-26 2008-12-31 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Substituted pyrrolidine as anti-infectives
US8173621B2 (en) 2008-06-11 2012-05-08 Gilead Pharmasset Llc Nucleoside cyclicphosphates
BRPI0922364A2 (pt) 2008-12-03 2017-08-29 Presidio Pharmaceuticals Inc Composto, composição farmacêutica e uso de um composto
KR101784830B1 (ko) 2008-12-03 2017-10-16 프레시디오 파마슈티칼스, 인코포레이티드 Ｈｃｖ ｎｓ5ａ의 억제제
EP2376515A1 (en) 2008-12-23 2011-10-19 Pharmasset, Inc. Synthesis of purine nucleosides
US8551973B2 (en) 2008-12-23 2013-10-08 Gilead Pharmasset Llc Nucleoside analogs
CA2748057C (en) 2008-12-23 2018-07-03 Pharmasset, Inc. Nucleoside phosphoramidates
PE20120773A1 (es) 2009-03-27 2012-07-19 Presidio Pharmaceuticals Inc Anillos triciclicos fusionados sustituidos como inhibidores del virus de hepatitis c
US8618076B2 (en) 2009-05-20 2013-12-31 Gilead Pharmasset Llc Nucleoside phosphoramidates
TWI598358B (zh) 2009-05-20 2017-09-11 基利法瑪席特有限責任公司 核苷磷醯胺
SMT201800004T1 (it) 2009-12-18 2018-03-08 Ogeda Sa Derivati di acido pirrolidin carbossilico come agonisti del recettore accoppiato a proteina g 43 (gpr43), composizione farmaceutica e metodi per l'uso nel trattamento di disturbi metabolici
UY33312A (es) 2010-03-31 2011-10-31 Pharmasset Inc Fosforamidato de nucleosido de purina
CL2011000718A1 (es) 2010-03-31 2012-04-09 Gilead Pharmasset Llc Proceso para la preparacion de compuestos fosforados enantiomericos.
EP2575866A4 (en) 2010-05-24 2013-10-16 Presidio Pharmaceuticals Inc HCV NS5A INHIBITORS
WO2012020036A1 (en) 2010-08-13 2012-02-16 F. Hoffmann-La Roche Ag Hepatitis c virus inhibitors
US20130302282A1 (en) 2010-10-26 2013-11-14 Presidio Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of Hepatitis C Virus
PT3042910T (pt) 2010-11-30 2019-04-16 Gilead Pharmasset Llc 2'-espiro-nucleósidos para utilização na terapia da hepatite c
WO2012123298A1 (en) 2011-03-11 2012-09-20 F. Hoffmann-La Roche Ag Antiviral compounds
US20120328565A1 (en) 2011-06-24 2012-12-27 Brinkman John A Antiviral compounds
AU2012308295B2 (en) 2011-09-16 2017-10-26 Gilead Sciences, Inc. Methods for treating HCV
WO2013053657A1 (en) 2011-10-10 2013-04-18 F. Hoffmann-La Roche Ag Antiviral compounds
US8889159B2 (en) 2011-11-29 2014-11-18 Gilead Pharmasset Llc Compositions and methods for treating hepatitis C virus
US9133170B2 (en) 2011-12-16 2015-09-15 Hoffmann-La Roche Inc. Inhibitors of HCV NS5A
EA024297B1 (ru) 2011-12-20 2016-09-30 Рибосайенс Ллк 2',4'-дифтор-2'-метилзамещенные нуклеозидные производные в качестве ингибиторов репликации рнк вируса гепатита с
SG11201403086YA (en) 2011-12-20 2014-07-30 Hoffmann La Roche 4'-azido, 3'-fluoro substituted nucleoside derivatives as inhibitors of hcv rna replication
BR112014015582A8 (pt) 2012-02-24 2017-07-04 Hoffmann La Roche compostos antivirais
US20140010783A1 (en) 2012-07-06 2014-01-09 Hoffmann-La Roche Inc. Antiviral compounds
MX2015009176A (es) 2013-01-23 2015-11-09 Hoffmann La Roche Derivados de triazola antivirales.
MY172166A (en) 2013-01-31 2019-11-15 Gilead Pharmasset Llc Combination formulation of two antiviral compounds
WO2014135422A1 (en) 2013-03-05 2014-09-12 F. Hoffmann-La Roche Ag Antiviral compounds
MY186547A (en) 2013-05-16 2021-07-26 Riboscience Llc 4?-fluoro-2?-methyl substituted nucleoside derivatives
US20180200280A1 (en) 2013-05-16 2018-07-19 Riboscience Llc 4'-Fluoro-2'-Methyl Substituted Nucleoside Derivatives as Inhibitors of HCV RNA Replication
EA201592185A1 (ru) 2013-05-16 2016-05-31 Рибосайенс Ллк 4'-азидо, 3'-дезокси-3'-фторзамещенные нуклеозидные производные
EP3650014B1 (en) 2013-08-27 2021-10-06 Gilead Pharmasset LLC Combination formulation of two antiviral compounds
CA2929436C (en) 2013-11-27 2021-06-15 Euroscreen Sa Compounds, pharmaceutical composition and methods for use in treating inflammatory diseases
WO2019060740A1 (en) 2017-09-21 2019-03-28 Riboscience Llc 4'-FLUORO-2'-METHYL SUBSTITUTED NUCLEOSIDE DERIVATIVES AS INHIBITORS OF HCV RNA REPLICATION
CN109678814B (zh) * 2018-12-28 2021-03-23 浙江外国语学院 一种制备2-氯-1, 3-噻唑-5-甲醛的方法
BR112022024729A2 (pt) 2020-06-05 2023-02-28 Kinnate Biopharma Inc Inibidores de quinases do receptor do fator de crescimento de fibroblastos

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AT395007B (de) * 1990-03-29 1992-08-25 Noe Christian Modifizierte cyclische aminosaeuren und aus diesen synthetisierte dipeptide und verfahren zu ihrer herstellung
JPH07504673A (ja) 1992-03-20 1995-05-25 ザ・ウエルカム・ファウンデーション・リミテッド 抗ウイルス活性を有するインドール誘導体
US6455571B1 (en) * 1998-04-23 2002-09-24 Abbott Laboratories Inhibitors of neuraminidases
IL138601A0 (en) 1998-04-23 2001-10-31 Abbott Lab Pyrrolidines as inhibitors of neuraminidases

Also Published As

Publication number Publication date
JP2005515172A (ja) 2005-05-26
ATE370137T1 (de) 2007-09-15
AR037182A1 (es) 2004-10-27
EP1440069B1 (en) 2007-08-15
DE60221875T2 (de) 2007-12-20
US20050043390A1 (en) 2005-02-24
WO2003037895A1 (en) 2003-05-08
TW200302823A (en) 2003-08-16
US7259163B2 (en) 2007-08-21
EP1440069A1 (en) 2004-07-28
DE60221875D1 (de) 2007-09-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2289161T3 (es) Derivados de 4-(heteroaril de 6 miembros)-acil pirrolidina como inhibidores de hcv.
EP1301487B1 (en) Viral polymerase inhibitors
RS67201B1 (sr) Funkcionalizovani peptidi koji sadrže dva pirolidinska prstena kao antikoronavirusni agensi
US20090047247A1 (en) Pyrrolidine Derivatives
US20100074863A1 (en) Anti-infective pyrrolidine derivatives and analogs
WO2009003009A1 (en) Substituted pyrrolidine as anti-infectives
US20090060874A1 (en) Bicyclic pyrrolidine derivatives
MXPA05004435A (es) Derivados de 1-acil-pirrolidina para el tratamiento de infecciones virales.
JP2005511572A (ja) Ｈｃｖ阻害剤としてのアシルジヒドロピロール誘導体
JP2014534206A (ja) Ｃ型肝炎ウイルス阻害剤
US20090053175A1 (en) Substitute pyrrolidine derivatives
JP2008517968A (ja) Ｃ型肝炎ウイルス阻害薬としての４−メトキシメチル−ピロリジン−２−カルボン酸化合物およびその誘導体
US20090233972A1 (en) Substituted heterocycles as anti-infectives
JP2007533693A (ja) Ｈｃｖ阻害剤としてのアシルジヒドロピロール誘導体
ES2292126T3 (es) Derivados de 4-carboxipirazol utiles como agentes antivirales.
WO2007039145A1 (en) C (2) -heteroarylmethyl-c (4) -pyrazinyl-2-yl acyl pyrrolidine compounds and their use for treating viral infections, especially hepatitis c virus
US20090326019A1 (en) 3,4-bicyclic pyrrolidine antivirals
US20090022689A1 (en) C4-spiro-pyrrolidine antivirals
JP2005530802A (ja) ピロールのアシル二環式誘導体
US20100135960A1 (en) Antiviral acylsulfonamide derivatives
WO2005079799A1 (en) 4-acyl-piperazines as anti-viral agents
JP2008517969A (ja) Ｃ型肝炎ウイルス阻害薬としての４−（ピラジン−２−イル）−ピロリジン−２−カルボン酸化合物およびその誘導体
WO2004009543A2 (en) 1-carbonyl-4-cyano-pyrrolidine-2-carboxylic acid derivatives as hepatitis c virus inhibitors
US20090324544A1 (en) Substituted cyclic pyrrolidine derivatives
WO2004076415A1 (en) 1- (hetero)aroyl-pyrrolidine-2-carboxylic acid derivatives useful as anti.viral agents