DE60221875T2

DE60221875T2 - 4-(6-gliedrige)-heteroaryl-acyl-pyrrolidinderivate als hcv-inhibitoren

Info

Publication number: DE60221875T2
Application number: DE60221875T
Authority: DE
Inventors: Gianpaolo GlaxoSmithKl Stevenage BRAVI; Rossella Care of Glax Stevenage GUIDETTI; David GlaxoSmithKl Stevenage HAIGH; Charles David GlaxoSmithKl Stevenage HARTLEY; Peter David GlaxoSmithKl Stevenage HOWES; Deborah Lynette Care of Glax Stevenage JACKSON; Victoria Lucy Helen Care of Glax Stevenage LOVEGROVE; Pritom GlaxoSmithKl Stevenage SHAH; Martin John GlaxoSmithKl Stevenage SLATER; Katrina Jane GlaxoSmithKl Stevenage WAREING
Original assignee: Glaxo Group Ltd
Current assignee: Glaxo Group Ltd
Priority date: 2001-11-02
Filing date: 2002-10-30
Publication date: 2007-12-20
Anticipated expiration: 2022-10-31
Also published as: US20050043390A1; EP1440069B1; ATE370137T1; AR037182A1; WO2003037895A1; TW200302823A; EP1440069A1; US7259163B2; JP2005515172A; ES2289161T3; DE60221875D1

Description

GEBIET DER ERFINDUNG
Die vorliegende Erfindung betrifft neue Acylpyrrolidinderivate, welche als virushemmende Mittel nützlich sind. Besonders bezieht die vorliegende Erfindung neue HCV-Inhibitoren ein.
HINTERGRUND DER ERFINDUNG
Infektion mit HCV ist eine Hauptursache für eine Erkrankung der menschlichen Leber auf der ganzen Welt. In den Vereinigten Staaten sind geschätzte 4,5 Millionen Amerikaner chronisch mit HCV infiziert. Obwohl nur 30 % der akuten Infektionen eine Symptomatik aufweisen, entwickeln 85 % der infizierten Individuen chronische andauernde Infektion. Die Behandlungskosten für eine HCV-Infektion sind 1997 für die Vereinigten Staaten auf 5,46 Milliarden Dollar geschätzt worden. Weltweit wird geschätzt, dass über 200 Millionen Menschen chronisch infiziert sind. HCV-Infektion ist für 40-60 % aller chronischen Lebererkrankungen und 30 % aller Lebertransplantationen verantwortlich. Chronische HCV-Infektion macht 30 % aller Zirrhosen, Lebererkrankung im Endstadium und Leberkrebs in den Vereinigten Staaten aus. Das CDC schätzt, dass sich die Anzahl von Todesfällen aufgrund von HCV auf mindestens 38.000/Jahr bis zum Jahr 2010 erhöhen wird.
Aufgrund des hohen Grades an Variabilität bei den Virusoberflächenantigenen, der Existenz von mehreren Virusgenotypen und der demonstrierten Spezifität der Immunität ist die Entwicklung einer erfolgreichen Impfung in naher Zukunft unwahrscheinlich. Alpha-Interferon (allein oder in Kombination mit Ribavirin) ist seit seiner Zulassung für die Behandlung von chronischer HCV-Infektion sehr viel verwendet worden. Allerdings werden schädliche Nebenwirkungen gewöhnlich mit dieser Behandlung in Verbindung gebracht: Grippe-ähnliche Symptome, Leukopenie, Thrombocytopenie, Depression durch Interferon, sowie Anämie, die durch Ribavirin induziert wird, (Lindsay, K. L. (1997) Hepatology 26 (Erg. 1): 71S-77S). Diese Therapie bleibt weniger wirksam gegen Infektionen, die durch HCV Genotyp 1 verursacht werden (was ~ 75 % aller HCV-Infektionen in den entwickelten Märkten ausmacht) verglichen mit Infektionen, die durch die anderen 5 HCV-Hauptgenotypen verursacht werden. Leider reagieren nur ~ 50-80 % der Patienten auf diese Behandlung (gemessen durch eine Verringerung der HCV-RNA Spiegel im Serum und Normalisierung von Leberenzymen) und, von jenen behandelten erleiden 50-70 % innerhalb von 6 Monaten nach Beendigung der Behandlung einen Rückfall. Vor kurzem sind mit der Einführung von pegyliertem Interferon sowohl die anfänglichen als auch die nachhaltigen Reaktionsgeschwindigkeiten wesentlich verbessert worden, und eine Kombinationsbehandlung von Peg-IFN mit Ribavirin macht den Goldstandard für die Therapie aus. Allerdings präsentieren die Nebenwirkungen, die mit der Kombinationstherapie in Verbindung gebracht werden, und die beeinträchtigte Reaktion bei Patienten mit Genotyp 1 Möglichkeiten zur Verbesserung beim Management dieser Erkrankung.
Zuerst 1989 durch molekulares Klonieren identifiziert (Choo, Q-L et al (1989) Science 244: 359-362), ist das Hepatitis C Virus (HCV) nun weitgehend als das am meisten verbreitete verursachende Agens für die Non-A-Non-B-Hepatitis (NANBH) nach einer Transfusion (Kuo, G et al. (1989) Science 244: 362-364) anerkannt. Aufgrund seiner Genomstruktur und Sequenzhomologie wurde dieses Virus einer neuen Gattung der Familie der Flaviviridae zugeteilt. Wie andere Mitglieder der Flaviviridae, wie Flaviviren (z. B. Gelbfiebervirus und die Arten 1-4 des Dengue-Virus) und Pestiviren (z. B. bovines virales Diarrhoe Virus, Border Disease Virus und das klassischen Schweinepestvirus) (Choo, Q-L et al (1989) Science 244: 359-3; Miller, R. H. und R. H. Purcell (1990) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87: 2057-2061) ist HCV ein ummanteltes Virus, das ein einzelsträngiges RNA-Molekül mit positiver Polarität enthält. Das Genom von HCV hat ungefähr 9,6 Kilobasen (kb) mit einer langen hoch konservierten noncapped 5' nicht-translatierten Region (NTR) von ungefähr 340 Basen, die als eine interne Ribosomeneintrittsstelle (IRES) fungiert (Wang CY et al. 'An RNA pseudoknot is an essential structural element of the internal ribosome entry site located within the hepatitis C virus 5' noncoding region' [Artikel] RNA-Eine Veröffentlichung der RNA Society. 1 (5): 526-537, 1995 Jul.). Diesem Element folgt eine Region, die einen einzigen langen offenen Leserahmen (ORF) codiert, der ein Polypeptid mit ~ 3000 Aminosäuren codiert, umfassend sowohl die strukturellen als auch die nichtstrukturellen Virusproteine.
Nach Eintritt in das Cytoplasma der Zelle wird diese RNA direkt in ein Polypetpid von ~ 3000 Aminosäuren translatiert, umfassend sowohl die strukturellen als auch nicht strukturellen Virusproteine. Dieses große Polypeptid wird anschließend die einzelnen strukturellen und nicht strukturellen Proteine durch eine Kombination von Wirt- und Virus-codierten Proteinasen prozessiert (Rice, C. M. (1996) in B. N. Fields, D. M. Knipe und P. M. Howley (Hrsg.) Virology 2. Ausgabe, S. 931-960; Raven Press, N.Y.). Nach dem Terminationscodon am Ende des langen ORF's gibt es eine 3' NTR, das aus ungefähr drei Regionen besteht: einer Region mit ~ 40 Basen, die unter verschiedenen Genotypen schwach konserviert ist, einen poly(U)/Polypyrimidintrakt mit variabler Länge und ein hoch konserviertes 98 Basen langes Element, auch "3' X-Schwanz" genannt (Kolykhalov, A. et al (1996) J. Virology 70: 3363-3371; Tanaka, T. et al (1995) Biochem Biophys. Res. Commun. 215:744-749; Tanaka, T. et al (1996) J. Virology 70: 3307-3312; Yamada, N. et al (1996) Virology 223: 255-261). Es wird vorhergesagt, dass die 3' NTR eine stabile sekundäre Struktur bildet, welche für das Wachstum von HCV in Schimpansen entscheidend ist, und man glaubt, dass sie bei der Initiation und Regulation von Virus-RNA-Replikation arbeitet.
Das NS5B Protein (591 Aminosäuren, 65 kDa) von HCV (Behrens, S. E. et al (1996) EMBO J. 15: 12-22), codiert eine RNA-abhängige RNA-Polymerase (RdRp) Aktivität und enthält kanonische Motive, die in anderen RNA-Viruspolymerasen vorliegen. Das NS5B Protein ist sowohl intra-typisch (~ 95-98 % Aminosäure (aa)-Identität quer durch 1b Isolate) als auch inter-typisch (~ 85 % aa-Identität zwischen Isolaten von Genotyp 1a und 1b) ziemlich gut konserviert. Die Notwendigkeit der HCV NS5B RdRp Aktivität für die Generation von infektiösen Virion-Nachkommen ist formal bei Schimpansen bewiesen worden (A. A. Kolykhalov et al. (2000) Journal of Virology, 74 (4), S. 2046-2051). Somit wird von der Inhibition der NS5B RdRp Aktivität (Inhibition der RNA Replikation) vorhergesagt, dass sie eine HCV-Infektion heilen kann.
Auf der Grundlage des Vorangegangenen besteht ein wesentlicher Bedarf zur Identifizierung synthetischer oder biologischer Verbindungen für ihre Fähigkeit, HCV zu inhibieren.
WO 01/28996 A, veröffentlicht am 26. April 2001, offenbart bestimmte substituierte Pyrrolidinverbindungen mit einer inhibierenden Aktivität für Neuraminidase.
WO 99/54299 A, veröffentlicht am 28. Oktober 1999, offenbart bestimmte substituierte Pyrrolidinverbindungen mit einer inhibierenden Aktivität für Neuraminidase.
ZUSAMMENFASSUNG DER ERFINDUNG
Die vorliegende Erfindung umfasst Verbindungen, hier nachstehend dargestellt, Arzneimittel, umfassend derartige Verbindungen und die Verwendung der vorliegenden Verbindungen bei der Behandlung einer Virusinfektion, im Besonderen einer HCV-Infektion.
DETAILLIERTE BESCHREIBUNG DER ERFINDUNG
Die vorliegende Erfindung stellt Verbindungen der Formel (I) bereit:
wobei:
A OR¹, NR¹R² oder R¹ darstellt, wobei R¹ und R² unabhängig aus Wasserstoff, C_1-6-Alkyl, Aryl, Heteroaryl, Arylalkyl und Heteroarylalkyl ausgewählt sind; oder R¹ und R², zusammen mit dem Stickstoffatom, an das sie gebunden sind, einen 5- oder 6-gliedrigen gesättigten cyclischen Rest bilden;
B C(O)R³ darstellt, wobei R³ aus C_1-6-Alkyl, Aryl, Heteroaryl und Heterocyclyl ausgewählt ist;
C C_1-6-Alkyl, Aryl, Heteroaryl oder Heterocyclyl darstellt;
D einen gesättigten oder ungesättigten 6-gliedrigen heterocyclischen Ring darstellt, welcher drei oder mehr Kohlenstoffatome, welche jeweils unabhängig gegebenenfalls mit R⁴ und R⁵ substituiert sein können, und ein bis drei Heteroatome umfasst, welche unabhängig aus N, gegebenenfalls substituiert mit Wasserstoff, C_1-6-Alkyl, C(O)R³, SO₂R³, Aryl, Heteroaryl, Arylalkyl oder Heteroarylalkyl; O; und S, gegebenenfalls substituiert mit einem oder zwei Sauerstoffatomen, ausgewählt sind; wobei der 6-gliedrige Ring an jedes endocyclische Kohlenstoffatom gebunden sein kann und gegebenenfalls an einen gesättigten oder ungesättigten 5- oder 6-gliedrigen carbocyclischen oder heterocyclischen Ring kondensiert sein kann, der selbst gegebenenfalls an einem nicht kondensierten Kohlenstoffatom mit C_1-6-Alkyl, Halogen, OR⁸, C(O)NR⁶R⁷, C(O)R³, CO₂H, CO₂R³, NR⁶R⁷, NHC(O)R³, NHCO₂R³, NHC(O)NR¹R², SO₂NR¹R², SO₂R³, Nitro, Cyano, Oxo, Aryl, Heteroaryl und Heterocyclyl substituiert sein kann;
R⁴ und R⁵ unabhängig aus Wasserstoff, C_1-6-Alkyl, Halogen, OR⁸, C(O)NR⁶R⁷, C(O)R³, CO₂H, CO₂R³, NR⁶R⁷, NHC(O)R³, NHCO₂R³, NHC(O)NR¹R², SO₂NR¹R², SO₂R³, Nitro, Cyano, Oxo, Aryl, Heteroaryl und Heterocyclyl ausgewählt sind;
R⁶ und R⁷ unabhängig aus Wasserstoff, C_1-6-Alkyl, Aryl und Heteroaryl ausgewählt sind; und
R⁸ Wasserstoff, C_1-6-Alkyl, Arylalkyl oder Heteroarylalkyl darstellt;
E Wasserstoff oder C_1-6-Alkyl darstellt;
F Wasserstoff, C_1-6-Alkyl, Aryl oder Heteroaryl darstellt; und
G Wasserstoff, C_1-6-Alkyl, Heterocyclylalkyl, Arylalkyl oder Heteroarylalkyl darstellt; und Salze Solvate und Ester davon, mit der Maßgabe, dass wenn A OR¹ ist, dann R¹ nicht tert-Butyl ist.
Wie hier verwendet, bezeichnet "Alkyl" einen gegebenenfalls substituierten Kohlenwasserstoffrest. Der Alkylkohlenwasserstoffrest kann linear, verzweigt oder cyclisch, gesättigt oder ungesättigt sein. Wenn der Alkylkohlenwasserstoffrest cyclisch ist, ist es selbstverständlich, dass im Rest ein Minimum von 3 Kohlenstoffatomen sein werden. Vorzugsweise ist der Rest gesättigt. Bevorzugte Alkyleinheiten sind C_1-4-Alkyl. Optionale Substituenten schließen C_1-6-Alkyl, Halogen, OR⁸, C(O)NR⁶R⁷, C(O)R³, CO₂H, CO₂R³, NR⁶R⁷, NHC(O)R³, NHCO₂R³, NHC(O)NR¹R², SO₂NR¹R², SR³, SO₂R³, Nitro, Oxo, Cyano und Heterocyclyl ein.
Wie hier verwendet, bezeichnet "Aryl" einen gegebenenfalls substituierten aromatischen Rest mit mindestens einem Ring, welcher ein konjugiertes Pi-Elektronensystem aufweist, welches bis zu zwei konjugierte oder kondensierte Ringsysteme enthält. "Aryl" schließt carbocyclische Aryl- und Biarylreste ein, wobei alle davon gegebenenfalls substituiert sein können. Bevorzugte "Aryl"-Einheiten sind unsubstitutiertes, monosubstitutiertes, disubstitutiertes oder trisubstitutiertes Phenyl. Bevorzugte "Aryl"-Substituenten sind ausgewählt aus C_1-6-Alkyl, Halogen, OR⁸, C(O)NR⁶R⁷, C(O)R³, CO₂H, CO₂R³, NR⁶R⁷, NHC(O)R³, NHCO₂R³, NHC(O)NR¹R², SO₂NR¹R², SO₂R³, Nitro, Oxo, Heterocyclyl, CF₃, Ryridin, Phenyl, Cyano und NO₂.
Wie hier verwendet, bezeichnet "Heteroaryl" einen gegebenenfalls substituierten 5- oder 6-gliedrigen aromatischen Rest, umfassend ein bis vier Heteroatome, ausgewählt aus N, O und S, mit mindestens einem Ring, welcher ein konjugiertes Pi-Elektronensystem aufweist, welches bis zu zwei konjugierte oder kondensierte Ringsysteme enthält. Bevorzugte "Heteroaryl"-Einheiten sind unsubstitutiertes, monosubstitutiertes, disubstitutiertes oder trisubstitutiertes Thienyl und Thiazolyl. Bevorzugte "Heteroaryl"-Substituenten sind ausgewählt aus C_1-6-Alkyl, Halogen, OR⁸, C(O)NR⁶R⁷, C(O)R³, CO₂H, CO₂R³, NR⁶R⁷, NHC(O)R³, NHCO₂R³, NHC(O)NR¹R², SO₂NR¹R², SO₂R³, Nitro, Oxo, Heterocyclyl, CF₃, Pyridin, Phenyl, Cyano und NO₂.
Wie hier verwendet, bezeichnen "heterocyclisch" und "Heterocyclyl" einen gegebenenfalls substituierten 5- oder 6-gliedrigen gesättigten cyclischen Kohlenwasserstoffrest, welcher 1 bis 4, vorzugsweise 1 oder 2 Heteroatome, ausgewählt aus N, gegebenenfalls substituiert mit Wasserstoff, C_1-6-Alkyl, C(O)R³, SO₂R³, Aryl oder Heteroaryl; O und S, gegebenenfalls substituiert mit ein oder zwei Sauerstoffatomen, enthält.
Es ist ersichtlich, dass die erfindungsgemäßen Verbindungen ein oder mehr asymmetrische Kohlenstoffatome enthalten können und in racemischen diastereoisomeren und optisch aktiven Formen existieren können. Alle diese racemischen Verbindungen, Enantiomere und Diastereoisomere werden als innerhalb des Geltungsumfangs der vorliegenden Erfindung liegend betrachtet.
Vorzugsweise ist A OR¹, wenn R¹ Wasserstoff ist, oder ist A NR¹R², wenn sowohl R¹ als auch R² H sind. Stärker bevorzugt ist A OR¹, wenn R¹ Wasserstoff ist.
Vorzugsweise ist, wenn B C(O)R³ darstellt, R³ Aryl oder Heteroaryl; stärker bevorzugt ist R³ Phenyl; besonders bevorzugt ist R³ Phenyl, welches in para-Stellung mit tert-Butyl substituiert ist; am stärksten bevorzugt ist R³ Phenyl, welches in para-Stellung mit tert-Butyl substituiert, und gegebenenfalls ferner substituiert, vorzugsweise meta-substituiert mit Methyl, Ethyl, Methoxy, Ethoxy oder Halogen; stärker bevorzugt Methoxy, ist.
Vorzugsweise ist C ausgewählt aus C_1-6-Alkyl, Aryl und Heteroaryl; stärker bevorzugt ist C Methyl; Isopropyl; Phenyl, das gegebenenfalls mit Phenyl oder NMe₂ substituiert ist; Pyridinyl; 1,3-Thiazinyl, das gegebenenfalls mit Halogen, Phenyl oder NMe₂ substituiert ist; Thienyl oder Benzthiazolyl.
Vorzugsweise ist D aus (i) Pyridyl, Pyranyl, Pyrimidinyl, Pyridazinyl, Pyrazinyl, 2H-1,2-Oxazinyl, 2H-1,3-Oxazinyl, 2H-1,4-Oxazinyl, 2H-1,2-Thiazinyl, 2H-1,3-Thiazinyl, 2H-1,4-Thiazinyl, 1,2,3-Triazinyl, 1,2,4-Triazinyl, 1,3,5-Triazinyl, 2H-1,2,4-Oxadiazinyl, 2H-1,2,5-Oxadiazinyl, 2H-1,3,4-Oxadiazinyl, 2H-1,3,4-Oxadiazinyl, 2H-1,3,5-Oxadiazinyl, 2H-1,2,4-Thiadiazinyl, 2H-1,2,6-Thiadiazinyl, 2H-1,3,4-Thiadiazinyl, 2H-1,3,5-Thiadiazinyl, 1,4,2-Dioxazinyl, 4H-1,3,5-Dithiazinyl, 1,2,4-Dithiazinyl, und teilweise oder vollständig gesättigten Derivaten davon ausgewählt ist; wobei jedes, wenn anwendbar, gegebenenfalls an einem Kohlenstoffatom mit R⁴ und R⁵ substituiert sein kann, an einem Stickstoffatom mit Wasserstoff, C_1-6-Alkyl, C(O)R³, SO₂R³, Aryl, Heteroaryl, Arylalkyl oder Heteroarylalkyl substituiert sein kann und an einem Schwefelatom mit einem oder zwei Sauerstoffatomen substituiert sein kann; und wobei jedes gegebenenfalls über zwei benachbarte Kohlenstoffatome an einen gesättigten oder ungesättigten 5- oder 6-gliedrigen carbocyclischen oder heterocyclischen Ring kondensiert sein kann, der selbst gegebenenfalls an einem nicht kondensierten Kohlenstoffatom mit C_1-6-Alkyl, Halogen, OR⁸, C(O)NR⁶R⁷, C(O)R³, CO₂H, CO₂R³, NR⁶R⁷, NHC(O)R³, NHCO₂R³, NHC(O)NR¹R², SO₂NR¹R², SO₂R³, Nitro, Cyano, Oxo, Aryl, Heteroaryl und Heterocyclyl substituiert sein kann, vorzugsweise mit C_1-6-Alkyl, Halogen, OR⁸, C(O)NR⁶R⁷, CO₂R³, NR⁶R⁷, NHC(O)R³, NHCO₂R³, NHC(O)NR¹R², SO₂NR¹R², SO₂R³, Nitro, Oxo, Aryl, Heteroaryl und Heterocyclyl.
Vorzugsweise ist, wenn D aus (i) ausgewählt ist und einen kondensierten Ring aufweist, der kondensierte Ring ausgewählt aus Benzol, Pyridin, Pyrimidin, Pyridazin und Pyrazin. Stärker bevorzugt ist, wenn D ausgewählt ist aus (i) und einen kondensierten Ring aufweist, D Chinoxalinyl;
Stärker bevorzugt ist D ausgewählt aus gegebenenfalls substituiertem Pyridyl, Pyrimidinyl, Pyrazinyl, Pyridazinyl oder Chinoxalinyl; am meisten bevorzugt ist D ausgewählt aus Pyridyl, das gegebenenfalls mit Trifluormethyl oder Cyano substituiert ist; Pyrimidinyl; Pyrazinyl, das gegebenenfalls mit Methyl substituiert ist; Pyridazinyl, das gegebenenfalls mit Methyl substituiert ist; oder Chinoxalinyl.
Vorzugsweise ist E Wasserstoff.
Vorzugsweise ist F Wasserstoff.
Vorzugsweise ist G ausgewählt aus C_1-6-Alkyl, Arylalkyl und Heteroarylalkyl; stärker bevorzugt ist G C_1-6-Alkyl, Benzyl, Pyridinylmethyl, N-Methylaminocarbonylmethyl oder Aminocarbonylmethyl; am meisten bevorzugt ist G Isobutyl, Pyridin-2-ylmethyl oder Benzyl.
Es soll selbstverständlich sein, dass die vorliegende Erfindung alle Kombinationen von geeigneten, zweckmäßigen und bevorzugten hier beschriebenen Resten abdeckt.
Die vorliegende Erfindung stellt ebenfalls Verbindungen der Formel (Ia) bereit:
wobei:
A OR¹, NR¹R² oder R¹, wobei R¹ und R² unabhängig aus Wasserstoff, C_1-6-Alkyl, Aryl, Heteroaryl, Arylalkyl und Heteroarylalkyl ausgewählt sind; oder R¹ und R² zusammen mit dem Stickstoffatom, an das sie gebunden sind, einen 5- oder 6-gliedrigen gesättigten cyclischen Rest bilden;
B C(O)R³ darstellt, wobei R³ aus C_1-6-Alkyl, Aryl, Heteroaryl, Arylalkyl und Heteroarylalkyl ausgewählt ist;
C C_1-6-Alkyl, Aryl, Heteroaryl oder Heterocyclyl darstellt;
D einen gesättigten oder ungesättigten 6-gliedrigen heterocyclischen Ring darstellt, welcher drei oder mehr Kohlenstoffatome, welche jeweils unabhängig gegebenenfalls mit R⁴ und R⁵ substituiert sein können, und ein bis drei Heteroatome umfasst, welche unabhängig aus N, gegebenenfalls substituiert mit Wasserstoff, C_1-6-Alkyl, C(O)R³, SO₂R³, Aryl, Heteroaryl, Arylalkyl oder Heteroarylalkyl; O und S, gegebenenfalls substituiert mit einem oder zwei Sauerstoffatomen, ausgewählt sind; wobei der 6-gliedrige Ring an jedes endocyclische Kohlenstoffatom gebunden sein kann und gegebenenfalls an einen gesättigten oder ungesättigten 5- oder 6-gliedrigen carbocyclischen oder heterocyclischen Ring kondensiert sein kann, der selbst gegebenenfalls an einem nicht kondensierten Kohlenstoffatom mit C_1-6-Alkyl, Halogen, OR⁸, C(O)NR⁶R⁷, CO₂R³, NR⁶R⁷, NHC(O)R³, NHCO₂R³, NHC(O)NR¹R², SO₂NR¹R², SO₂R³, Nitro, Oxo, Aryl, Heteroaryl und Heterocyclyl substituiert sein kann;
R⁴ und R⁵ unabhängig aus Wasserstoff, C_1-6-Alkyl, Halogen, OR⁸, C(O)NR⁶R⁷, CO₂R³, NR⁶R⁷, NHC(O)R³, NHCO₂R³, NHC(O)NR¹R², SO₂NR¹R², SO₂R³, Nitro, Oxo, Aryl, Heteroaryl und Heterocyclyl ausgewählt sind;
R⁶ und R⁷ unabhängig aus Wasserstoff, C_1-6-Alkyl, Aryl und Heteroaryl ausgewählt sind; und
R⁸ Wasserstoff, C_1-6-Alkyl, Arylalkyl oder Heteroarylalkyl darstellt;
E Wasserstoff oder C_1-6-Alkyl darstellt;
F Wasserstoff, C_1-6-Alkyl, Aryl oder Heteroaryl darstellt; und
G Wasserstoff, C_1-6-Alkyl, Heterocyclylalkyl, Arylalkyl oder Heteroarylalkyl darstellt; und Salze und Solvate davon, mit der Maßgabe, dass wenn A OR¹ ist, dann R¹ nicht tert-Butyl ist.
Bevorzugte Verbindungen, die in der vorliegenden Erfindung nützlich sind, sind ausgewählt aus:
rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure;
rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(5-methylpyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure;
rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyridin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure;
rel-(2S,4R,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyridin-4-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure;
rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrimidin-5-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure;
rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(6-methylpyridazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure;
rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(pyridin-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure;
rel-(2S,4S,5R)-1-(3-Brom-4-tert-butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(pyridin-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure;
rel-(2S,4S,5R)-1-(3-Brom-4-tert-butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure;
rel-(2S,4S,5R)-1-(3-Brom-4-tert-butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(5-methylpyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure;
rel-(2S,4S,5R)-1-(3-Brom-4-tert-butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyridazin-3-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure;
rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-benzothiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure;
rel-(2S,4S,5R)-1-(3-Brom-4-tert-butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-benzothiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure;
rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-chlorbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure;
rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure;
rel-(2S,4S,5R)-1-(3-Brom-4-tert-butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(pyridin-2-yl)pyrrolidin-2-carboxamid;
rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(chinoxalin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure;
rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(4-trifluormethylpyridin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure;
rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure;
rel-(2S,4S,5R)-1-(3-Brom-4-tert-butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carboxamid;
rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(pyridin-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure;
rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(2-chlor-1,3-thiazol-5-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure;
rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-chlorbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(pyridin-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure;
rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(2-chlor-1,3-thiazol-5-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure;
rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(6-methylpyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure;
rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-phenyl-pyrrolidin-2-carbonsäure;
rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-phenyl-pyrrolidin-2-carbonsäure;
rel-(2S,4S,5S)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-methyl-pyrrolidin-2-carbonsäure;
rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(pyridin-3-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure;
rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(thien-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure;
rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-4-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure;
rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(2-dimethylamino-1,3-thiazol-4-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure;
rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(thiazol-4-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure;
rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(pyridin-3-yl)-pyrrolidin-2-carbonsäure;
rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-(pyridin-2-ylmethyl)-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure;
rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-(N-methylaminocarbonylmethyl)-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure;
rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-(aminocarbonylmethyl)-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure;
rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(3-phenylphenyl)-pyrrolidin-2-carbonsäure;
(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carboxamid;
(2S,4R,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carboxamid;
rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-5-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure;
rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(4-dimethylaminophenyl)pyrrolidin-2-carbonsäure;
rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(4-dimethylaminophenyl)pyrrolidin-2-carbonsäure;
rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-(1H-imidazol-4-yl-methyl)-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure;
rel-(2S,4S,5S)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-isopropylpyrrolidin-2-carbonsäure;
rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-(2-(methylthio)ethyl)-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-5-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure;
rel-(2S,4R,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure;
rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-5-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure;
rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(4-cyanopyridin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-5-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure;
rel-(2S,4R,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrimidin-4-yl)-5-(1,3-thiazol-5-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure;
rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrimidin-4-yl)-5-(1,3-thiazol-5-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure;
rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-(2-(methylsulfonyl)ethyl)-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure;
rel-(2S,4R,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure;
rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure;
rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-methyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-5-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure;
rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-chlorbenzoyl)-2-methyl-4-(pyrazin-4-yl)-5-(1,3-thiazol-5-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure;
(2S,4R,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(pyridin-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure;
rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-4-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure;
rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(2-phenyl-1,3-thiazol-4-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure;
rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-ethylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure;
rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-ethoxybenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure; und
rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-(phenylmethyl)-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure;
und Salzen, Solvaten und Estern, und einzelnen Enantiomeren davon.
In einer bevorzugten Ausführungsform stellt die vorliegende Erfindung Verbindungen der Formel (I) bereit, ausgewählt aus den Beispielen 1 bis 25, hier nachstehend definiert, und Salzen, Solvaten und Estern davon, und gegebenenfalls einzelnen Enantiomeren davon. In einer weiteren bevorzugten Ausführungsform stellt die vorliegende Erfindung Verbindungen der Formel (I) bereit, ausgewählt aus den Beispielen 1 bis 2, hier nachstehend definiert, und Salzen, Solvaten und Estern davon, und gegebenenfalls einzelnen Enantiomeren davon.
Ebenfalls in der vorliegenden Erfindung eingeschlossen sind pharmazeutisch verträgliche Salzkomplexe. Die vorliegende Erfindung deckt ebenfalls die physiologisch verträglichen Salze der Verbindungen der Formel (I) ab. Geeignete physiologisch verträgliche Salze der Verbindungen der Formel (I) schließen saure Salze, zum Beispiel Natrium, Kalium, Calcium, Magnesium und Tetraalkylammonium und dergleichen, oder mono- oder di-basische Salze mit der geeigneten Säure, zum Beispiel organische Carbonsäuren, wie Essig-, Milch-, Wein-, Äpfel-, Isethion-, Lactobion- und Bernsteinsäuren; organische Sulfonsäuren, wie Methansulfon-, Ethansulfon-, Benzolsulfon- und p-Toluolsulfonsäuren und anorganische Säuren, wie Salz-, Schwefel-, Phosphor- und Sulfamsäuren und dergleichen, ein.
Die vorliegende Erfindung betrifft ebenfalls Solvate der Verbindungen der Formel (I), zum Beispiel Hydrate.
Die vorliegende Erfindung betrifft ebenfalls pharmazeutisch verträgliche Ester der Verbindungen der Formel (I) und (Ia), zum Beispiel Carbonsäureester -COOR, wobei R aus einer geraden oder verzweigten Alkylkette, zum Beispiel n-Propyl, n-Butyl, Alkoxyalkyl (z. B. Methoxymethyl), Aralkyl (z. B. Benzyl), Aryloxyalkyl (z. B. Phenoxymethyl), Aryl (z. B. Phenyl, das gegebenenfalls mit Halogen, C_1-4-Alkyl oder C_1-4-Alkoxy oder Amino substituiert ist) ausgewählt ist. Wenn nicht anderweitig angegeben, enthält jedwede in derartigen Estern vorliegende Alkyleinheit vorzugsweise 1 bis 18 Kohlenstoffatome, insbesondere 1 bis 4 Kohlenstoffatome. Jedwede in derartigen Estern vorliegende Alkyleinheit umfasst vorzugsweise einen Phenylrest.
Es ist ferner ersichtlich, dass bestimmte erfindungsgemäße Verbindungen in unterschiedlichen tautomeren Formen existieren können. Alle Tautomeren werden als innerhalb des Geltungsumfangs der vorliegenden Erfindung liegend angesehen.
Verbindungen der Formel (I) können aus einer Verbindung der Formel (II)
wobei A, B, C, E, F und G wie vorstehend für Formel (I) definiert sind; W-CHO, -C(O)Me, -CO₂H, -CO₂R⁹, -C(O)NR⁶R⁷, -CN oder -C(O)Hal darstellt; und R⁹ C_1-6-Alkyl oder Arylalkyl darstellt; durch jedwedes geeignete Verfahren zur Umwandlung der Einheit W in die Einheit D von Formel (I) hergestellt werden. Geeignete Verfahren zur Umwandlung von W in D können in der chemischen Literatur, zum Beispiel jene in Comprehensive Heterocyclic Chemistry, herausgegeben von A. R. Katritzky und C. W. Rees, Pergamon 1984; WO 2001/28996 und WO 99/54299 beschriebenen, gefunden werden.
Verbindungen der Formel (II) können durch Umsetzung einer Verbindung der Formel (III)
wobei A, C, E, F und G wie vorstehend für Formel (I) definiert sind; und W wie vorstehend für Formel (II) definiert ist; mit einem geeigneten Acylierungsmittel, zum Beispiel R³C(O)-hal, wobei hal ein Halogenatom, vorzugsweise Chlor oder Brom, ist, hergestellt werden.
Vorzugsweise wird die Umsetzung in einem geeigneten Lösungsmittel, zum Beispiel Dichlormethan, in Gegenwart einer geeigneten Base, zum Beispiel Triethylamin, ausgeführt.
Verbindungen der Formel (III) können durch Umsetzung einer Verbindung der Formel (IV)
wobei A, C und G wie vorstehend für Formel (I) definiert sind; mit einer Verbindung der Formel (V)
wobei E und F wie für Formel (I) definiert sind und W wie vorstehend für Formel (II) definiert ist, hergestellt werden. Vorzugsweise wird die Umsetzung in einem geeigneten Lösungsmittel, zum Beispiel THF oder Acetonitril, gegebenenfalls in Gegenwart eines Lewis-Säurekatalysators, wie Lithiumbromid oder Silberacetat, und einer Base, wie Triethylamin, 1,8-Diazabicyclo[5,4,0]undec-7-en (DBU) oder Tetramethylguanidin, ausgeführt. In einer anderen Ausführungsform wird die Umsetzung in einem geeigneten Lösungsmittel, zum Beispiel THF oder Acetonitril, in Gegenwart einer Säure, wie Essigsäure, ausgeführt oder die Umsetzung kann durch Erhitzen der Verbindungen der Formel (IV) und Formel (V) in einem geeigneten Lösungsmittel, zum Beispiel Toluol, Xylol oder Acetonitril, in Abwesenheit eines Katalysators ausgeführt werden.
Verbindungen der Formel (IV) und (V) sind auf dem Fachgebiet bekannt oder können durch Standardverfahren aus der Literatur hergestellt werden.
Verbindungen der Formel (I) können ebenfalls durch Umsetzung einer Verbindung der Formel (VI)
wobei A, C, D, E, F und G wie vorstehend für Formel (I) definiert sind; mit einem geeigneten Acylierungsmittel, zum Beispiel R³C(O)-hal, wobei hal ein Halogenatom, vorzugsweise Chlor oder Brom, ist, hergestellt werden. Vorzugsweise wird die Umsetzung in einem geeigneten Lösungsmittel, zum Beispiel Dichlormethan, in Gegenwart einer geeigneten Base, zum Beispiel Triethylamin, ausgeführt.
Verbindungen der Formel (VI) können durch Umsetzung einer Verbindung der Formel (VII)
wobei E, D und F wie vorstehend für Formel (I) beschrieben sind; mit einer Verbindung der Formel (IV) hergestellt werden. Vorzugsweise wird die Umsetzung in einem geeigneten Lösungsmittel, zum Beispiel THF oder Acetonitril, gegebenenfalls in Gegenwart eine Lewis-Säurekatalysators, wie Lithiumbromid oder Silberacetat, und einer Base, wie Triethylamin, DBU oder Tetramethylguanidin, ausgeführt. In einer anderen Ausführungsform wird die Umsetzung in einem geeigneten Lösungsmittel, zum Beispiel THF oder Acetonitril, in Gegenwart einer Säure, wie Essigsäure, ausgeführt oder die Umsetzung kann durch Erhitzen der Verbindungen der Formel (VII) und Formel (IV) in einem geeigneten Lösungsmittel, zum Beispiel Toluol, Xylol oder Acetonitril, in Abwesenheit eines Katalysators ausgeführt werden.
Verbindungen der Formel (VII) können aus Verbindungen der Formel (VIII) oder (IX)
wobei D wie vorstehend für Formel (I) definiert ist und hal ein Halogenatom ist, durch auf dem Fachgebiet bekannte Verfahren, zum Beispiel eine Wittig-Umsetzung, eine Peterson-Olefinierung oder eine Julia-Umsetzung, hergestellt werden.
Verbindungen der Formel (VII) können ebenfalls aus Verbindungen der Formel (X)
wobei Z ein Halogenatom oder ein Triflat ist, durch auf dem Fachgebiet bekannte Verfahren hergestellt werden, zum Beispiel Behandlung mit Vinylmagnesiumbromid, Zinkbromid und einem Palladiumkatalysator, wie Tetrakis(triphenylphosphin)palladium(0), oder durch ein Heck-Verfahren mit einem Acetylen, gefolgt von einer Lindlar-Reduktion zum Olefin.
Es ist ersichtlich, dass Verbindungen der Formel (I), (II), (III) und/oder (VI), die als Diastereoisomere existieren, gegebenenfalls durch auf dem Fachgebiet wohlbekannte Techniken, zum Beispiel durch Säulenchromatographie, getrennt werden können.
Es ist ebenfalls ersichtlich, dass die vorliegende Erfindung ein Verfahren zur Umwandlung des rel-(2S,4S,5R)-Diastereoisomers einer Verbindung der Formel (I) oder (II), wobei A nicht Hydroxy ist und E Wasserstoff darstellt, in das rel-(2S,4R,5R)-Diastereoisomer bereitstellt. Zum Beispiel, basenkatalysierte Epimerisierung durch Behandlung des rel-(2S,4S,5R)-Diastereoisomers mit einer geeigneten Base, wie wässriges Natriumhydroxid, in Gegenwart eines geeigneten Lösungsmittels, wie Methanol.
Es ist ersichtlich, dass racemische Verbindungen der Formel (I), (II), (III) und/oder (VI) gegebenenfalls in ihre einzelnen Enantiomere aufgetrennt werden können. Derartige Auftrennungen können zweckmäßigerweise durch auf dem Fachgebiet bekannte Standardverfahren erreicht werden. Zum Beispiel kann eine racemische Verbindung der Formel (I), (II), (III) und/oder (VI) durch chirale präparative HPLC aufgetrennt werden. In einer anderen Ausführungsform können racemische Verbindungen der Formel (I), (II), (III) und/oder (VI) soweit erforderlich durch eine standardmäßige Diastereomerensalzbildung mit einem chiralen Säure- oder Basenreagenz aufgetrennt werden. Derartige Techniken sind auf dem Fachgebiet gut etabliert. Zum Beispiel kann eine racemische Verbindung der Formel (III), wobei W C(O)NR⁶R⁷ und sowohl R⁶ als auch R⁷ Wasserstoff sind, durch Behandlung mit einer chiralen Säure, wie (-)-Di-O,O'-p-tolyl-L-weinsäure, aufgetrennt werden. Zum Beispiel kann eine racemische Verbindung der Formel (VI), wobei D Pyrazin-2-yl ist, durch Behandlung mit einer chiralen Säure, wie (R)-(-)-1,1'-Binaphthyl-2,2'-diylhydrogenphosphat, aufgetrennt werden.
Mit geeigneter Manipulation und dem Schutz jedweder chemischen Funktionalität wird eine Synthese von Verbindungen der Formel (I) durch Verfahren erreicht, die analog zu jenen vorstehenden und zu jenen im Experimentalabschnitt beschriebenen sind. Geeignete Schutzgruppen können gefunden werden, sind aber nicht auf jene in T W Greene und P G M Wuts 'Protective Groups in Organic Synthesis', 3. Aufl. (1999), J Wiley und Sons, gefundenen, beschränkt.
BEISPIELE
Zwischenprodukt 1 2-[N-(1,3-Thiazol-2-ylmethylen)amino]-4-methylpentansäure-tert-butylester
Ein gerührtes Gemisch aus 2-Amino-4-methylpentansäure-tert-butylesterhydrochlorid (5,00 g, 22,34 mmol), 1,3-Thiazol-2-carboxaldehyd (2,53 g, 22,34 mmol) und Triethylamin (3,1 ml, 22,3 mmol) in Dichlormethan (60 ml) wurde unter Rückfluss unter Stickstoff 19 Stunden lang erhitzt. Man ließ das Umsetzungsgemisch auf Raumtemperatur kühlen, wusch zweimal mit Wasser, trocknete über Na₂SO₄ und dampfte ein, um die Titelverbindung als ein Öl zu geben.
¹H NMR (CDCl₃): δ 8,46 (s, 1H), 7,94 (d, 1H), 7,44 (dd, 1H), 4,07 (dd, 1H), 1,89-1,74 (m, 2H), 1,64-1,52 (m, 1H), 1,48 (s, 9H), 0,96 (d, 3H) und 0,90 (d, 3H).
Zwischenprodukt 2 rel-(2S,4S,5R)-2-Isobutyl-4-pyrazin-2-yl-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Zu einer gekühlten (0°C) gerührten Lösung aus Zwischenprodukt 1 (0,202 g, 0,72 mmol) in wasserfreiem THF (3 ml) unter Stickstoff wurde 2-Vinylpyrazin (104 μl, 1,1 mmol), gefolgt von Lithiumbromid (0,131 g, 1,51 mmol) und Triethylamin (153 μl, 1,1 mmol) gegeben. Die Umsetzung wurde in einem Kältebad 5 min lang und dann bei Umgebungstemperatur über Nacht gerührt. Wässriges Ammoniumchlorid (20 ml) wurde zugegeben, und das sich ergebende Gemisch wurde mit Ethylacetat (20 ml) extrahiert. Die Extrakte wurden vereinigt und mit Wasser und Salzlösung gewaschen, dann getrocknet (MgSO₄). Das Lösungsmittel wurde im Vakuum eingedampft, um das Rohprodukt zu geben. Dieses wurde durch Chromatographie auf Silicagel unter Verwendung von Cyclohexan-Ethylacetat (1:1 Vol./Vol.) als Eluierungsmittel gereinigt, um die Titelverbindung als einen Gummi bereitzustellen.
MS berechnet für (C₂₀H₂₈N₄O₂S + H)⁺: 389.
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺= 389.
Zwischenprodukt 3 rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-pyrazin-2-yl-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Zu einer gerührten Lösung aus Zwischenprodukt 2 (86 mg, 0,22 mmol) in wasserfreiem Dichlormethan (3 ml) wurde Triethylamin (38 μl, 0,28 mmol) und 4-tert-Butylbenzoylchlorid (47 μl, 0,24 mmol) gegeben. Dieses Gemisch wurde 16 Stunden lang gerührt und wurde dann mit Dichlormethan verdünnt und mit Wasser gewaschen. Die organische Phase wurde getrocknet (MgSO₄) und im Vakuum eingedampft. Der Rückstand wurde durch Chromatographie auf Silicagel unter Verwendung von Ethylacetat-Cyclohexan (2:3 Vol./Vol.) als Eluierungsmittel gereinigt, um die Titelverbindung als ein Öl bereitzustellen.
MS berechnet für (C₃₁H₄₀N₄O₃S + H)⁺: 549.
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 549.
Zwischenprodukt 4 rel-(2S,4S,5R)-2-Isobutyl-4-(5-methylpyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Die Titelverbindung wurde auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 2 beschriebene Weise hergestellt, wobei 2-Methyl-5-vinylpyrazin für 2-Vinylpyrazin substituiert wurde.
MS berechnet für (C₂₁H₃₀N₄O₂S + H)⁺: 403
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 403
Zwischenprodukt 5 rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(5-methylpyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Die Titelverbindung wurde aus Zwischenprodukt 4 auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 3 beschriebene Weise hergestellt.
MS berechnet für (C₃₂H₄₂N₄O₃S + H)⁺: 563
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 563
Zwischenprodukt 6 rel-(2S,4S,5R)-2-Isobutyl-4-(pyridin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäuretert-butylester
Hergestellt auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 2 beschriebene Weise, wobei 2-Vinylpyrazin mit 2-Vinylpyridin ersetzt wurde. Nach Rühren über Nacht bei Raumtemperatur wurde die Umsetzung unter Rückfluss 9 Stunden lang erhitzt. Das Produkt wurde durch Chromatographie auf Silicagel unter Verwendung von Cyclohexan-Ethylacetat (3:2 Vol./Vol.) als Eluierungsmittel gereinigt, um die Titelverbindung als eine Flüssigkeit bereitzustellen.
MS berechnet für (C₂₁H₂₉N₃O₂S + H)⁺: 388
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 388
Zwischenprodukt 7 rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-pyridin-2-yl-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Die Titelverbindung wurde aus Zwischenprodukt 6 auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 3 beschriebene Weise hergestellt. Das Produkt wurde durch Chromatographie auf Silicagel unter Verwendung von Cyclohexan-Ethylacetat (7:3 Vol./Vol.) als Eluierungsmittel gereinigt, um die Titelverbindung als einen Schaum bereitzustellen.
MS berechnet für (C₃₂H₄₁N₃O₃S + H)⁺: 548
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 548
Zwischenprodukt 8 rel-(2S,4R,5R)-2-Isobutyl-4-(pyridin-4-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Hergestellt, wie zuvor für Zwischenprodukt 2 beschrieben, wobei 4-Vinylpyridin für 2-Vinylpyrazin substituiert wurde. Das Produkt wurde durch Chromatographie auf Silicagel unter Verwendung von Ethylacetat als Eluierungsmittel gereinigt, um die Titelverbindung als eine Flüssigkeit bereitzustellen.
MS berechnet für (C₂₁H₂₉N₃O₂S + H)⁺: 388
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 388
Zwischenprodukt 9 rel-(2S,4R,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-pyridin-2-yl-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Die Titelverbindung wurde aus Zwischenprodukt 8 auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 3 beschriebene Weise hergestellt. Das Produkt wurde durch Chromatographie auf Silicagel unter Verwendung von Cyclohexan-Ethylacetat (3:2 Vol./Vol.) als Eluierungsmittel gereinigt, um die Titelverbindung als einen Gummi bereitzustellen. Die Stereochemie wurde durch NOE-Studien bestätigt.
MS berechnet für (C₃₂H₄₁N₃O₃S + H)⁺: 548
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 548
Zwischenprodukt 10 rel-(2S,4S,5R)-2-Isobutyl-4-(pyrimidin-5-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Hergestellt auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 2 beschriebene Weise, wobei 2-Vinylpyrazin mit 5-Vinylpyrimidin ersetzt wurde. Das Produkt wurde durch Chromatographie auf Silicagel unter Verwendung von Cyclohexan-Ethylacetat (7:3 Vol./Vol.) als Eluierungsmittel gereinigt, um die Titelverbindung als einen Gummi bereitzustellen.
MS berechnet für (C₂₀H₂₈N₄O₂S + H)⁺: 389
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 389
Zwischenprodukt 11 rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrimidin-5-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Die Titelverbindung wurde aus Zwischenprodukt 10 auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 3 beschriebene Weise hergestellt. Das Produkt wurde durch Chromatographie auf Silicagel unter Verwendung von Cyclohexan-Ethylacetat (1:1 Vol./Vol.) als Eluierungsmittel gereinigt, um die Titelverbindung als einen Gummi bereitzustellen.
MS berechnet für (C₃₁H₄₀N₄O₃S + H)⁺: 549
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 549
Zwischenprodukt 12 rel-(2S,4S,5R)-2-Isobutyl-4-(6-methylpyridazin-3-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Hergestellt auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 2 beschriebene Weise, wobei 2-Vinylpyrazin mit 3-Methyl-6-vinylpyridazin ersetzt wurde. Die Titelverbindung wurde nach dem Aufarbeiten ohne weitere Reinigung verwendet und wurde als ein Öl isoliert.
MS berechnet für (C₂₁H₃₀N₄O₂S + H)⁺: 403
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 403
Zwischenprodukt 13 rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(6-methylpyridazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Die Titelverbindung wurde aus Zwischenprodukt 12 auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 3 beschriebene Weise hergestellt. Das Produkt wurde durch Chromatographie auf Silicagel unter Verwendung von Cyclohexan-Ethylacetat (3:1 Vol./Vol.) als Eluierungsmittel gereinigt. Weitere Reinigung durch Umkehrphasen-HPLC auf einer C₁₈-Säule unter Verwendung eine Zwei-Lösungsmittel-Gradienteneluierung mit (A) Wasser, das Ameisensäure (0,1 %) enthält, und (B) Acetonitril-Wasser (95:5 Vol./Vol.), das Ameisensäure (0,05 %) enthält, als die Eluierungsmittel und Analyse der eluierten Fraktionen durch Elektrospray-Massenspektroskopie, stellte die Titelverbindung als einen Feststoff bereit.
MS berechnet für (C₃₂H₄₂N₄O₃S + H)⁺: 563
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 563
Zwischenprodukt 14 2-[N-(Pyridin-2-ylmethylen)amino]-4-methylpentansäure-tert-butylester
Ein gerührtes Gemisch aus 2-Amino-4-methylpentansäure-tert-butylester-hydrochlorid (5,00 g, 22,35 mmol), Pyridin-2-carboxaldehyd (2,12 ml, 22,35 mmol) und Triethylamin (3,11 ml, 22,35 mmol) in Dichlormethan (75 ml) wurde unter Rückfluss unter Stickstoff 2 Stunden lang erhitzt. Man ließ das Umsetzungsgemisch auf Raumtemperatur kühlen, wusch mit Wasser und Salzlösung, trocknete über MgSO₄ und dampfte ein, um die Titelverbindung als ein Öl zu geben.
¹H NMR (CDCl₃): δ 8,65 (ddd, 1H), 8,37 (s, 1H), 8,12 (dt, 1H), 7,75 (ddt, 1H), 7,34 (ddd, 1H), 4,05 (dd, 1H), 1,79-1,85 (m, 2H), 1,58 (m, 1H), 1,47 (s, 9H), 0,95 (d, 3H) und 0,91 (d, 3H).
Zwischenprodukt 15 rel-(2S,4S,5R)-2-Isobutyl-4-pyrazin-2-yl-5-(pyridin-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Hergestellt aus Zwischenprodukt 14 auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 2 beschriebene Weise. Das Produkt wurde durch Chromatographie auf Silicagel unter Verwendung von 5 % Methanol in Chloroform als Eluierungsmittel gereinigt, um die Titelverbindung als einen Feststoff bereitzustellen.
MS berechnet für (C₂₂H₃₀N₄O₂ + H)⁺: 383
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 383
Zwischenprodukt 16 rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-pyrazin-2-yl-5-(pyridin-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Die Titelverbindung wurde aus Zwischenprodukt 15 auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 3 beschriebene Weise hergestellt. Das Produkt wurde durch SPE (Festphasenextraktion auf Silica) unter Verwendung von Cyclohexan-Ethylacetat (1:1 Vol./Vol.) als Eluierungsmittel gereinigt, um die Titelverbindung als einen amorphen Feststoff bereitzustellen.
¹H NMR (CDCl₃): δ 8,20 (1H, s), 8,14 (1H, d), 8,12 (1H, d), 8,08 (1H, d), 7,71 (1H, d), 7,44 (1H, dt), 7,04 (2H, d), 6,92 (2H, d), 6,75 (1H, dd), 5,54 (1H, d), 4,38 (1H, m), 3,17 (1H, t), 2,46 (1H, dd), 2,38 (1H, dd), 2,17 (1H, dd), 2,10 (1H, m), 1,64 (9H, s), 1,14 (9H, s), 1,14 (3H, d), 1,13 (3H, d).
Zwischenprodukt 17 rel-(2S,4S,5R)-1-(3-Brom-4-tert-butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-pyrazin-2-yl-5-(pyridin-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Die Titelverbindung wurde aus Zwischenprodukt 15 auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 3 beschriebene Weise hergestellt, wobei 4-tert-Butylbenzoylchlorid mit 3-Brom-4-tert-butylbenzoylchlorid {synthetisiert aus 3-Brom-4-tert-butylbenzoesäure (Aust. J. Chem. (1990), 43 (5), 807-14)} ersetzt wurde. Das Produkt wurde durch SPE (Silica, wobei mit Cyclohexan/EtOAc als ein Gradient von 80 % bis 30 % Cyclohexan eluiert wurde) gereinigt, um die Titelverbindung als einen Gummi bereitzustellen.
¹H NMR (CDCl₃): δ 8,23 (1H, d), 8,17 (1H, d), 8,14 (1H, m), 8,10 (1H, d), 7,81 (1H, d), 7,53 (1H, dt), 7,18 (1H, d), 6,96 (2H, m), 6,85 (1H, dd), 5,42 (1H, d), 4,37 (1H, m), 3,2 (1H, t), 2,50 (1H, dd), 2,42 (1H, dd), 2,17-2,06 (2H, m), 1,65 (9H, s), 1,35 (9H, s), 1,14 (3H, d), 1,13 (3H, d).
Zwischenprodukt 18 rel-(2S,4S,5R)-1-(3-Brom-4-tert-butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-pyrazin-2-yl-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Die Titelverbindung wurde aus Zwischenprodukt 2 auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 3 beschriebene Weise hergestellt, wobei 4-tert-Butylbenzoylchlorid mit 3-Brom-4-tert-butylbenzoylchlorid ersetzt wurde. Das Produkt wurde durch SPE unter Verwendung von Cyclohexan:Ethylacetat (1:1 Vol./Vol.) als Eluierungsmittel gereinigt und als ein Schaum isoliert.
MS berechnet für (C₃₁H₃₉BrN₄O₃S + H)⁺: 627/629
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 627/629.
Zwischenprodukt 19 rel-(2S,4S,5R)-1-(3-Brom-4-tert-butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(5-methylpyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Die Titelverbindung wurde aus Zwischenprodukt 4 auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 3 beschriebene Weise hergestellt, wobei 4-tert-Butylbenzoylchlorid mit 3-Brom-4-tert-butylbenzoylchlorid ersetzt wurde. Das Produkt wurde durch Chromatographie auf Silicagel unter Verwendung von Cyclohexan-Ethylacetat (7:3 Vol./Vol.) als Eluierungsmittel gereinigt und als ein Schaum isoliert.
MS berechnet für (C₃₂H₄₁BrN₄O₃S + H)⁺: 641/643
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 641/643
Zwischenprodukt 20 Enantiomer A, abgleitet von rel-(2S,4S,5R)-1-(3-Brom-4-tert-butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(5-methylpyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Zwischenprodukt 19 wurde durch präparative HPLC auf einer Chiralpak AD Chromatographiesäule unter Verwendung von Heptan-Isopropanol (70:30 Vol./Vol.) als Eluierungsmittel aufgetrennt, um die einzelnen Enantiomere mit den Retentionszeiten von 4,0 Minuten (Enantiomer A; die Titelverbindung) bzw. 6,9 Minuten (Enantiomer B) zu ergeben. Enantiomer A war laut LCMS identisch mit der für Zwischenprodukt 19 beschriebenen racemischen Verbindung.
MS berechnet für (C₃₂H₄₁BrN₄O₃S + H)⁺: 641/643
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 641/643
Zwischenprodukt 21 Enantiomer A, abgeleitet von rel-(2S,4S,5R)-1-(3-Brom-4-tert-butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Zwischenprodukt 18 wurde durch präparative HPLC auf einer Chiralpak AD Chromatographiesäule unter Verwendung von Heptan-Isopropanol (85:15 Vol./Vol.) als Eluierungsmittel aufgetrennt, um die einzelnen Enantiomere mit den Retentionszeiten von 5,9 Minuten (Enantiomer A; die Titelverbindung) bzw. 10,7 Minuten (Enantiomer B) zu ergeben. Enantiomer A war laut LCMS identisch mit der für Zwischenprodukt 18 beschriebenen racemischen Verbindung.
¹H NMR (CDCl₃): δ 8,26 (3H, m), 7,26 (1H, m), 7,18 (1H, d), 7,13 (1H, d), 7,06 (1H, d), 6,99 (1H, dd), 5,75 (1H, d), 4,33 (1H, m), 3,28 (1H, t), 2,53 (1H, dd), 2,45 (1H, dd), 2,17 (1H, dd), 2,05 (1H, m), 1,61 (9H, s), 1,41 (9H, s), 1,12 (6H, d).
Zwischenprodukt 22 Enantiomer A, abgeleitet von rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-pyrazin-2-yl-5-(pyridin-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Zwischenprodukt 16 wurde durch präparative HPLC auf einer Chiralpak AD Chromatographiesäule unter Verwendung von Heptan-Isopropanol (90:10 Vol./Vol.) als Eluierungsmittel aufgetrennt, um die einzelnen Enantiomere mit den Retentionszeiten von 7,5 Minuten (Enantiomer A; die Titelverbindung) bzw. 10,1 Minuten (Enantiomer B) zu ergeben. Enantiomer A war laut ¹H NMR identisch mit der racemischen Verbindung, welche für Zwischenprodukt 16 beschrieben wurde.
Zwischenprodukt 23 Enantiomer A, abgleitet von rel-(2S,4S,5R)-1-(3-Brom-4-tert-butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-pyrazin-2-yl-5-(pyridin-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Zwischenprodukt 17 wurde durch präparative HPLC auf einer Chiralpak AD Chromatographiesäule unter Verwendung von Heptan-Isopropanol (90:10 Vol./Vol.) als Eluierungsmittel aufgetrennt, um die einzelnen Enantiomere mit den Retentionszeiten von 6,5 Minuten (Enantiomer A; die Titelverbindung) bzw. 10,7 Minuten (Enantiomer B) zu ergeben. Enantiomer A war laut ¹H NMR identisch mit der für Zwischenprodukt 17 beschriebenen racemischen Verbindung.
Zwischenprodukt 24 rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-chlorbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Die Titelverbindung wurde aus Zwischenprodukt 2 auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 3 beschriebene Weise hergestellt, wobei 4-tert-Butyl-benzoylchlorid mit 4-tert-Butyl-3-chlorbenzoylchlorid ersetzt wurde. Das Produkt wurde durch SPE unter Verwendung von Cyclohexan-Ethylacetat (1:1 Vol./Vol.) als Eluierungsmittel gereinigt, um die Titelverbindung als einen Schaum bereitzustellen.
MS berechnet für (C₃₁H₃₉ClN₄O₃S + H)⁺: 583/585
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 583/585
Zwischenprodukt 25 Enantiomer A, abgeleitet von rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-chlorbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Zwischenprodukt 24 wurde durch präparative HPLC auf einer Chiralpak AD Chromatographiesäule unter Verwendung von Heptan-Ethanol (95:5 Vol./Vol.) als Eluierungsmittel gereinigt, um die einzelnen Enantiomere mit den Retentionszeiten von 8,9 Minuten (Enantiomer A; die Titelverbindung) bzw. 13,9 Minuten (Enantiomer B) zu ergeben. Enantiomer A war laut ¹H NMR identisch mit der für Zwischenprodukt 24 beschriebenen racemischen Verbindung.
¹H NMR (CDCl₃): δ 8,26 (3H, m), 7,25 (1H, d), 7,18 (1H, d), 7,05 (1H, d), 6,93 (2H, m), 5,77 (1H, d), 4,34 (1H, m), 3,29 (1H, t), 2,52 (1H, dd), 2,45 (1H, dd), 2,18 (1H, dd), 2,05 (1H, m), 1,60 (9H, s), 1,38 (9H, s), 1,12 (6H, d).
Zwischenprodukt 26 rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Die Titelverbindung wurde aus Zwischenprodukt 2 auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 3 beschriebene Weise hergestellt, wobei 4-tert-Butyl-benzoylchlorid mit 4-tert-Butyl-3-methoxybenzoylchlorid ersetzt wurde. Das Produkt wurde durch SPE unter Verwendung von Cyclohexan-Ethylacetat (1:2 Vol./Vol.) als Eluierungsmittel gereinigt und als ein Schaum isoliert.
¹H NMR (CDCl₃): δ 8,25 (3H, m), 7,18 (1H, d), 7,12 (1H, d), 7,02 (1H, d), 6,71 (1H, dd), 6,38 (1H, d), 5,82 (1H, d), 4,33 (1H, m), 3,54 (3H, s), 3,29 (1H, t), 2,52 (1H, dd), 2,47 (1H, dd), 2,20 (1H, dd), 2,06 (1H, m), 1,60 (9H, s), 1,26 (9H, s), 1,13 (6H, d).
Zwischenprodukt 27 Enantiomer A, abgleitet von rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methogybenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Zwischenprodukt 26 wurde durch präparative HPLC auf einer Chiralpak AD Chromatographiesäule unter Verwendung von Heptan-Isopropanol (85:15 Vol./Vol.) als Eluierungsmittel gereinigt, um die einzelnen Enantiomere mit den Retentionszeiten von 8,5 Minuten (Enantiomer A; die Titelverbindung) bzw. 13,8 Minuten (Enantiomer A) zu ergeben. Enantiomer A war laut ¹H NMR identisch mit der für Zwischenprodukt 26 beschriebenen racemischen Verbindung.
Zwischenprodukt 28 2-[N-(1,3-Benzothiazol-2-ylmethylen)amino]-4-methylpentansäure-tert-butylester
Hergestellt auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 14 beschriebene Weise, wobei Pyridin-2-carboxaldehyd mit 1,3-Benzothiazol-2-carboxaldehyd ersetzt wurde. Die Titelverbindung wurde als ein Öl isoliert.
¹H NMR (CDCl₃): δ 8,56 (s, 1H), 8,10 (d, 1H), 7,93 (d, 1H), 7,54-7,44 (m, 2H), 4,16 (dd, 1H), 1,93-1,78 (m, 2H), 1,66-1,53 (m, 1H), 1,48 (s, 9H), 0,97 (d, 3H) und 0,92 (d, 3H).
Zwischenprodukt 29 rel-(2S,4S,5R)-2-Isobutyl-4-pyrazin-2-yl-5-(1,3-benzothiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Hergestellt auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 2 beschriebene Weise, wobei Zwischenprodukt 1 mit Zwischenprodukt 28 ersetzt wurde. Nach Rühren über Nacht bei Raumtemperatur wurde die Umsetzung unter Rückfluss 9 Stunden lang erhitzt. Das Produkt wurde durch Chromatographie auf Silicagel unter Verwendung von Cyclohexan-Ethylacetat (1: 1 Vol./Vol.) als Eluierungsmittel gereinigt, gefolgt von Verreiben mit Cyclohexan, um die Titelverbindung bereitzustellen.
MS berechnet für (C₂₄H₃₀N₄O₂S + H)⁺: 439
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 439 Zwischenprodukt 30 Enantiomer A, abgleitet von rel-(2S,4S,5R)-1-(3-Brom-4-tert-butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-pyrazin-2-yl-5-(1,3-benzothiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester

Stufe A: Die racemische Verbindung wurde aus Zwischenprodukt 29 auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 3 beschriebene Weise hergestellt, wobei 4-tert-Butylbenzoylchlorid mit 3-Brom-4-tert-butylbenzoylchlorid ersetzt wurde. Die Umsetzung wurde bei 40°C 7 Stunden lang erhitzt und dann über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Das Produkt wurde durch Chromatographie über Silicagel unter Verwendung von Cyclohexan-Ethylacetat (1:1 Vol./Vol.) als Eluierungsmittel gereinigt, um das racemische Produkt bereitzustellen. MS berechnet für (C₃₅H₄₁BrN₄O₃S + H)⁺: 677/679. MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 677/679
Stufe B: Das racemische Material wurde dann durch präparative HPLC auf einer Chiralpak AD Chromatographiesäure unter Verwendung von Heptan-Isopropanol (90:10 Vol./Vol.) als Eluierungsmittel gereinigt, um die einzelnen Enantiomere mit den Retentionszeiten von 6,6 Minuten (Enantiomer A; die Titelverbindung) bzw. 7,9 Minuten (Enantiomer B) zu ergeben. Enantiomer A war laut LCMS identisch mit dem für Zwischenprodukt 24 beschriebenen racemischen Material. MS berechnet für (C₃₅H₄₁BrN₄O₃S + H)⁺: 677/679 MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 677679

Stufe A: Die racemische Verbindung wurde aus Zwischenprodukt 29 auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 3 beschriebene Weise hergestellt. Die Umsetzung wurde bei 40°C 7 Stunden lang erhitzt. Das Produkt wurde durch Chromatographie über Silicagel unter Verwendung von Cyclohexan-Ethylacetat (1:1 Vol./Vol.) als Eluierungsmittel gereinigt, um die racemische Verbindung bereitzustellen. MS berechnet für (C₃₅H₄₂N₄O₃S + H)⁺: 599 MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 599
Stufe B: Das racemische Material wurde dann durch präparative HPLC auf einer Chiralpak AD Chromatographiesäure unter Verwendung von Heptan-Isopropanol (90:10 Vol./Vol.) als Eluierungsmittel gereinigt, um die einzelnen Enantiomere mit den Retentionszeiten von 8 Minuten (Enantiomer A; die Titelverbindung) bzw. 10 Minuten (Enantiomer B) zu ergeben. Enantiomer A war laut LCMS identisch mit dem racemischen Material. MS berechnet für (C₃₅H₄₂N₄O₃S + H)⁺: 599 MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 599

Zwischenprodukt 32 rel-(2S,4S,5R)-2-Isobutyl-4-pyridazin-3-yl-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Hergestellt auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 2 beschriebene Weise, wobei 2-Vinylpyrazin mit 3-Vinylpyridazin ersetzt wurde. Das Produkt wurde durch SPE gereinigt, wobei mit Dichlormethan, dann mit einem Gradienten von 1-10 % Methanol in Dichlormethan-Methanol, dann Methanol eluiert wurde, um die Titelverbindung als ein Öl bereitzustellen.
MS berechnet für (C₂₀H₂₈N₄O₂S + H)⁺: 389
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 389
Zwischenprodukt 33 rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-pyridazin-3-yl-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Dieses wurde aus Zwischenprodukt 32 auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 3 beschriebene Weise hergestellt. Das Produkt wurde durch Umkehrphasen-HPLC auf einer C₁₈-Säule unter Verwendung einer Zwei-Lösungsmittel-Gradienteneluierung mit (A) Wasser, das Ameisensäure enthält (0,1 %), und (B) Acetonitril-Wasser (95:5 Vol./Vol.), das Ameisensäure (0,05 %) enthält, als die Eluierungsmittel und Analyse der eluierten Fraktionen durch Elektrospraymassenspektroskopie gereinigt. Dies stellte die Titelverbindung als einen Feststoff bereit.
MS berechnet für (C₃₁H₄₀N₄O₃S + H)⁺: 549
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 549
Zwischenprodukt 34 rel-(2S,4S,5R)-2-Isobutyl-4-chinogalin-2-yl-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Hergestellt auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 2 beschriebene Weise, wobei 2-Vinylpyrazin mit 2-Vinylchinoxalin ersetzt wurde. Das Produkt wurde durch SPE unter Verwendung von Cyclohexan:Ethylacetat (2:1 Vol./Vol.) als Eluierungsmittel gereinigt, um die Titelverbindung als ein Öl bereitzustellen.
MS berechnet für (C₂₄H₃₀N₄O₂S + H)⁺: 439
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 439
Zwischenprodukt 35 rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-chinoxalin-2-yl-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Dieses wurde aus Zwischenprodukt 34 auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 3 beschriebene Weise hergestellt. Das Produkt wurde durch SPE unter Verwendung von Cyclohexan-Ethylacetat (9:1 Vol./Vol.) als Eluierungsmittel gereinigt, um die Titelverbindung als einen Schaum bereitzustellen.
MS berechnet für (C₃₅H₄₂N₄O₃S + H)⁺: 599
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 599
Zwischenprodukt 36 rel-(2S,4S,5R)-2-Isobutyl-4-(4-trifluormethylpyridin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Hergestellt auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 2 beschriebene Weise, wobei 2-Vinylpyrazin mit 2-Vinyl-4-(trifluormethyl)pyridin ersetzt wurde. Das Produkt wurde mit SPE unter Verwendung von Diethylether als Eluierungsmittel gereinigt, um die Titelverbindung als ein Öl bereitzustellen.
MS berechnet für (C₂₂H₂₈F₃N₃O₂S + H)⁺: 456
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 456
Zwischenprodukt 37 rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(4-trifluormethylpyridin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Dieses wurde aus Zwischenprodukt 36 auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 3 beschriebene Weise hergestellt. Das Produkt wurde durch Chromatographie auf Silicagel unter Verwendung von Cyclohexan:Ethylacetat (9:1 Vol./Vol.) als Eluierungsmittel gereinigt, um die Titelverbindung als einen Gummi bereitzustellen.
MS berechnet für (C₃₃H₄₀F₃N₃O₃S + H)⁺: 616
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 616
Zwischenprodukt 38 rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Dieses wurde aus Zwischenprodukt 2 auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 3 beschriebene Weise hergestellt, wobei 4-tert-Butylbenzoylchlorid mit 4-tert-Butyl-3-methylbenzoylchlorid (hergestellt aus Zwischenprodukt 39) ersetzt wurde. Die Umsetzung wurde bei 40°C 6 Stunden lang erhitzt. Das Produkt wurde durch SPE unter Verwendung eines Gradienten aus Cyclohexan-Ethylacetat (95:5-50:50 Vol./Vol.) als Eluierungsmittel gereinigt, um die Titelverbindung als einen Gummi bereitzustellen.
MS berechnet für (C₃₂H₄₂N₄O₃S + H)⁺: 563.
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 563.
Zwischenprodukt 39 4-tert-Butyl-3-methylbenzoesäure
Zu 3-Brom-4-tert-butylbenzoesäure (500 mg, 1,94 mmol) (Aust. J. Chem. (1990), 43(5), 807-14) in Toluol (10 ml) wurde N,N-Dimethylformamid-di-tert-butylacetal (1,86 ml, 7,76 mmol) gegeben. Das Gemisch wurde bei 110°C 24 Stunden lang erhitzt. Mehr N,N-Dimethylformamid-di-tert-butylacetal (2 ml, 8,38 mmol) wurde zugegeben, und die Umsetzung wurde weitere 24 Stunden lang unter Rückfluss erhitzt. Das Lösungsmittel wurde im Vakuum eingedampft, und der Rückstand wurde durch SPE (Silica, wobei mit einem Gradienten aus Ether in Cyclohexan, 1 % bis 3 % eluiert wurde) gereinigt, um ein farbloses Öl (89 %) zu geben. Das Öl wurde in wasserfreiem THF (4 ml) gelöst und unter Stickstoff auf –78°C gekühlt. tert-Butyllithium (1,7 M in Pentan, 0,55 ml, 0,94 mmol) wurde tropfenweise zugegeben, wobei die Temperatur auf –70°C gehalten wurde. Nach 15 min wurde Methyliodid (0,53 ml, 8,45 mmol) tropfenweise zugegeben, wobei die Temperatur unter –70°C gehaltert wurde. Man ließ die Umsetzung über 3 Stunden hinweg Raumtemperatur erreichen. Eine gesättigte Ammoniumchloridlösung wurde zugegeben und das Gemisch mit Diethylether extrahiert. Der organische Extrakt wurde getrocknet (MgSO₄), und das Lösungsmittel wurde im Vakuum eingedampft, um ein braunes Öl zu geben. Dieses wurde durch Umkehrphasen-HPLC auf einer C₁₈-Säule unter Verwendung einer Zwei-Lösungsmittel-Gradienteneluierung mit (A) Wasser, das Ameisensäure enthält (0,1 %), und (B) Acetonitril-Wasser (95:5 Vol./Vol.), das Ameisensäure (0,05 %) enthält, als die Eluierungsmittel und Analyse der Fraktionen durch Elektrospraymassenspektroskopie gereinigt, um ein farbloses Öl (38 %) zu geben. Dieses Öl (80 mg, 0,32 mmol) wurde anschließend mit Trifluoressigsäure (5 ml) behandelt, und man ließ die Umsetzung bei Raumtemperatur 18 Stunden lang rühren. Das Lösungsmittel wurde im Vakuum eingedampft, und der Rückstand wurde mit Toluol azeotropiert, um die Titelverbindung als einen Feststoff zu geben.
MS berechnet für (C₁₂H₁₆O₂ + H)⁺: 191
MS gemessen (Elektrospray): (M-H)⁺ = 191.
Zwischenprodukt 40 2-[N-(2-Chlor-1,3-thiazol-5-ylmethylen)amino]-4-methylpentansäure-tert-butylester
Hergestellt auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 1 beschriebene Weise, wobei 1,3-Thiazol-2-carboxaldehyd mit 2-Chlor-1,3-thiazol-5-carboxaldehyd ersetzt wurde.
¹H NMR (CDCl₃): δ 8,31 (s, 1H), 7,74 (d, 1H), 3,96 (dd, 1H), 1,78-1,74 (m, 2H), 1,61-1,58 (m, 1H), 1,46 (s, 9H), 0,94 (d, 3H) und 0,89 (d, 3H).
Zwischenprodukt 41 rel-(2S,4S,5R)-2-Isobutyl-4-pyrazin-2-yl-5-(2-chlor-1,3-thiazol-5-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Hergestellt auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 2 beschriebene Weise, wobei Zwischenprodukt 1 mit Zwischenprodukt 40 ersetzt wurde.
MS berechnet für (C₂₀H₂₇ClN₄O₂S + H)⁺: 423/425
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 423/425.
Zwischenprodukt 42 2-Vinyl-6-methylpyrazin
Zu einer Lösung aus 2,6-Dimethylpyrazin (5,0g, 46,2 mmol) in Tetrachlorkohlenstoff (150 ml) wurden N-Chlorsuccinimid (6,17g, 46,2 mmol) und AIBN (152 mg) gegeben und das Gemisch bei 85°C unter Stickstoff 6 Stunden lang gerührt. Das Gemisch wurde in einem Eisbad gekühlt, der Feststoff abfiltriert und mit kaltem Tetrachlorkohlenstoff gewaschen. Die vereinigten Filtrate wurden im Vakuum eingedampft und der Rückstand durch Silicachromatographie unter Verwendung einer Biotagekartusche gereinigt, wobei mit Cyclohexan/Ethylacetat (1:1 Vol./Vol.) eluiert wurde. 2-Chlormethyl-6-methylpyrazin enthaltende Fraktionen wurden vereinigt und wurden ferner über eine zweite Silicagelsäule gereinigt, wobei mit Dichlormethan/Ethylacetat (9:1 Vol./Vol.) eluiert wurde. Zu 2-Chlormethyl-6-methylpyrazin (1,81 g, 12,6 mmol) in trockenem DMF (100 ml) wurde Triphenylphosphin (3,97 g, 15,1 mmol) gegeben und das Gemisch bei 70°C 6 Stunden lang erhitzt. Nach 3 Tage langem Stehen bei Raumtemperatur wurde der sich ergebende Niederschlag durch Filtration isoliert, in Methanol gelöst, eingedampft und mit Ether verrieben, um 2-Triphenylphosphoniummethyl-6-methylpyrazinchlorid zu ergeben. Zu 2-Triphenylphosphoniummethyl-6-methylpyrazinchlorid (2,16 g, 5,3 mmol) und Paraformaldehyd (1,6 g, 53 mmol) in trockenem Methanol (100 ml) wurde Triethylamin (1,85 ml, 13,3 mmol) gegeben und das Gemisch unter Rückfluss 5,5 Stunden lang erhitzt. Nach dem Kühlen wurde das Lösungsmittel im Vakuum entfernt, der Rückstand in Ethylacetat (80 ml) aufgenommen und mit Wasser gewaschen (3 × 80 ml). Der Rückstand wurde durch Silicasäulenchromatographie gereinigt, wobei mit Cyclohexan/Ethylacetat (1:1) eluiert wurde, um die Titelverbindung als ein Öl zu geben.
¹H NMR (CDCl₃): δ 8,40 (s, 1H), 8,31 (s, 1H), 6,80 (dd, 1H), 6,33 (d, 1H), 5,59 (d, 1H), 2,56 (s, 3H).
Zwischenprodukt 43 rel-(2S,4S,5R)-2-Isobutyl-4-(6-methylpyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Hergestellt auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 2 beschriebene Weise, wobei 2-Vinylpyrazin mit 2-Vinyl-6-methylpyrazin ersetzt wurde.
MS berechnet für (C₂₁H₃₀N₄O₂S + H)⁺: 403
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 403
Zwischenprodukt 44 2-[N-(Phenylmethylen)amino]-4-methylpentansäure-tert-butylester
Hergestellt auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 1 beschriebene Weise, wobei 1,3-Thiazol-2-carboxaldehyd mit Benzaldehyd ersetzt wurde.
¹H NMR (CDCl₃): δ 8,29 (s, 1H), 7,83-7,72 (m, 2H), 7,48-7,32 (m, 3H), 4,00-3,88 (m, 1H), 1,88-1,73 (m, 2H), 1,68-1,53 (m, 1H), 1,48 (s, 9H), 0,95 (d, 3H) und 0,90 (d, 3H).
Zwischenprodukt 45 rel-(2S,4S,5R)-2-Isobutyl-4-pyrazin-2-yl-5-phenyl-pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Hergestellt auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 2 beschriebene Weise, wobei Zwischenprodukt 1 mit Zwischenprodukt 44 ersetzt wurde.
MS berechnet für (C₂₃H₃₁N₃O₂ + H)⁺: 382
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 382.
Zwischenprodukt 46 2-[N-(Methylmethylen)amino]-4-methylpentansäure-tert-butylester
Eine Lösung aus Leucin-tert-butylester (2,0 g, 8,9 mmol) und Acetaldehyd (999 μl, 17,9 mmol) wurde bei Raumtemperatur 5 Minuten lang gerührt. Wasserfreies Natriumsulfat wurde zugegeben und das Gemisch bei Raumtemperatur 18 Stunden lang gerührt. Der Feststoff wurde durch Filtration entfernt und das Lösungsmittel im Vakuum eingedampft, um die Titelverbindung als ein Öl zu ergeben.
¹H NMR (CDCl₃): δ 7,72 (q, 1H), 3,70 (dd, 1H), 2,02 (d, 3H), 1,71-1,64 (m, 2H), 1,46 (m, 10H), 0,93 (d, 3H) und 0,85 (d, 3H).
Zwischenprodukt 47 rel-(2S,4S,5S)-2-Isobutyl-4-pyrazin-2-yl-5-methylpyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Hergestellt auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 2 beschriebene Weise, wobei Triethylamin mit 1,8-Diazabicyclo[5,4,0]undec-7-en (DBU) und Zwischenprodukt 1 mit Zwischenprodukt 46 ersetzt wurde.
MS berechnet für (C₁₈H₂₉N₃O₂ + H)⁺: 320.
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 320
Zwischenprodukt 48 2-[N-(Pyridin-3-ylmethylen)amino]-4-methylpentansäure-tert-butylester
Hergestellt auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 1 beschriebene Weise, wobei 1,3-Thiazol-2-carboxaldehyd mit 3-Pyridincarboxaldehyd ersetzt wurde.
¹H NMR (CDCl₃): δ 8,88 (d, 1H), 8,66 (dd, 1H), 8,33 (s, 1H), 8,19 (dt, 1H), 7,35 (dd, 1H), 4,00 (dd, 1H), 1,85-1,78 (m, 2H), 1,64-1,52 (m, 1H), 1,48 (s, 9H), 0,96 (d, 3H) und 0,91 (d, 3H).
Zwischenprodukt 49 rel-(2S,4S,5R)-2-Isobutyl-4-pyrazin-2-yl-5-(pyridin-3-yl)-pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Hergestellt auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 2 beschriebene Weise, wobei Zwischenprodukt 1 mit Zwischenprodukt 48 ersetzt wurde.
MS berechnet für (C₂₂H₃₀N₄O₂ + H)⁺: 383
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 383
Zwischenprodukt 50 2-[N-(Thiophen-2-ylmethylen)amino]-4-methylpentansäure-tert-butylester
Hergestellt auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 1 beschriebene Weise, wobei 1,3-Thiazol-2-carboxaldehyd mit 2-Thiophencarboxaldehyd ersetzt wurde.
¹H NMR (CDCl₃): δ 8,38 (s, 1H), 7,42 (d, 1H), 7,35 (d, 1H), 7,08 (dd, 1H), 3,94 (dd, 1H), 1,86- 1,71 (m, 2H), 1,64-1,55 (m, 1H), 1,46 (s, 9H), 0,94 (d, 3H) und 0,89 (d, 3H).
Zwischenprodukt 51 rel-(2S,4S,5R)-2-Isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(thien-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Hergestellt auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 2 beschriebene Weise, wobei Zwischenprodukt 1 mit Zwischenprodukt 50 ersetzt wurde.
MS berechnet für (C₂₁H₂₉N₃O₂S + H)⁺: 388
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 388
Zwischenprodukt 52 2-[N-(1,3-Thiazol-4-ylmethylen)amino]-4-methylpentansäure-tert-butylester
Hergestellt auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 1 beschriebene Weise, wobei 1,3-Thiazol-2-carboxaldehyd mit 1,3-Thiazol-4-carboxaldehyd (Zwischenprodukt 57) ersetzt wurde.
¹H NMR (CDCl₃): δ 8,84 (s, 1H), 8,49 (d, 1H), 8,01 (s, 1H), 4,00 (dd, 1H), 1,90-1,70 (m, 2H), 1,64-1,56 (m, 1H), 1,47 (s, 9H), 0,96 (d, 3H) und 0,91 (d, 3H).
Zwischenprodukt 53 rel-(2S,4S,5R)-2-Isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-4-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Hergestellt auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 2 beschriebene Weise, wobei Zwischenprodukt 1 mit Zwischenprodukt 52 ersetzt wurde.
MS berechnet für (C₂₀H₂₈N₄O₂S + H)⁺: 389
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 389
Zwischenprodukt 54 2-Dimethylamino-1,3-thiazol-4-carbogaldehyd
Zu einer Lösung aus 2-Aminothiazol (30 g, 0,3 mmol) in konz. Salzsäure (150 ml) bei 0°C wurde tropfenweise eine gesättigte Lösung aus Natriumnitrit (20,7 g) in Wasser gegeben. Nach 75 Minuten bei 0°C wurde Kupferchlorid (29,7 g) portionsweise zugegeben und das Gemisch bei 0°C weitere 150 Minuten lang gerührt. Das Gemisch wurde mit konz.
Natriumhydroxidlösung neutralisiert und zwischen Diethylether und Wasser aufgeteilt. Die organische Phase wurde mit Salzlösung gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und im Vakuum eingedampft, um 2-Chlorthiazol als ein Öl ergeben. Zu einer Lösung aus 2-Chlorthiazol (15,9 g, 133 mmol) in THF (200 ml) bei –74°C wurde n-BuLi (1,6 M in Hexan, 90 ml) gegeben. Nach 10 Minuten wurde eine Lösung aus DMF (14 ml) in THF (90 ml) zugegeben, und man ließ das Gemisch über 2 Stunden hinweg Raumtemperatur erreichen. Das Gemisch wurde dann langsam in Salzsäure (2 M, 400 ml) gegossen, mit Ammoniumhydroxid basisch gemacht und mit Dichlormethan (2 × 300 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Fraktionen wurden über Natriumsulfat getrocknet und im Vakuum eingedampft, um 2-Chlor-thiazol-4-carboxaldehyd als einen Feststoff zu ergeben. Ein Gemisch aus 2-Chlorthiazol-4-carboxaldehyd (20 g) in 2,5 % wässrigem THF (400 ml) und Dimethylamin (13g, 2,5 äquiv.) in THF (150 ml) wurden vereinigt und bei Raumtemperatur 16 Stunden lang gerührt. Das Lösungsmittel wurde im Vakuum eingedampft, der Rückstand zwischen Wasser und Dichlormethan aufgeteilt und die organische Schicht über Natriumsulfat getrocknet. Eindampfen des Lösungsmittels ergab die Titelverbindung als einen Feststoff.
¹H NMR (CDCl₃): δ 9,75 (s, 1H), 7,9 (s, 1H), 3,3 (s, 6H).
Zwischenprodukt 55 2-[N-(2-Dimethylamino)-1,3-thiazol-4-ylmethylen)amino]-4-methylpentansäure-tert-butylester
Hergestellt auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 1 beschriebene Weise, wobei 1,3-Thiazol-2-carboxaldehyd mit 2-Dimethylamino-1,3-thiazol-4-carboxaldehyd (Zwischenprodukt-54) ersetzt wurde.
¹H NMR (CDCl₃): δ 8,21 (s, 1H), 7,43 (s, 1H), 3,87 (t, 1H), 3,21 (s, 3H), 3,13 (s, 3H), 1,80-1,70 (m, 2H), 1,64-1,52 (m, 1H), 1,46 (s, 9H), 0,94 (d, 3H) und 0,88 (d, 3H).
Zwischenprodukt 56 rel-(2S,4S,5R)-2-Isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(2-dimethylamino-1,3-thiazol-4-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Hergestellt auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 2 beschriebene Weise, wobei Zwischenprodukt 1 mit Zwischenprodukt 55 ersetzt wurde.
MS berechnet für (C₂₂H₃₃N₅O₂S + H)⁺: 432
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 432
Zwischenprodukt 57 1,3-Thiazol-4-carboxaldehyd
Ein gerührtes Gemisch aus 4-Chlormethylthiazol (1 g, 5,88 mmol) und Hexamin (1,64 g, 11,76 mmol, 2 äq in 50 % Essigsäure (10 ml) wurde unter Rückfluss 3 Stunden lang erhitzt. Man ließ das Gemisch fünf Minuten lang kühlen und dann wurde konzentrierte Salzsäure (2,5 ml) zugegeben. Das sich ergebende Umsetzungsgemisch wurde vor der Verdünnung des Umsetzungsgemisches mit Wasser (50 ml) unter Rückfluss weitere fünf Minuten lang erhitzt. Das sich ergebende Umsetzungsgemisch wurde mit Dichlormethan (6 × 50 ml) extrahiert. Die Extrakte wurden vereinigt und einmal mit Natriumbicarbonat (50 ml) gewaschen, über Na₂SO₄ getrocknet und eingedampft, um die Titelverbindung als einen Gummi zu geben.
¹H NMR (CDCl₃): δ 10,14 (s, 1H), 8,93 (s, 1H), 8,28 (s, 1H).
Zwischenprodukt 58 2-[N-(1,3-Thiazol-2-ylmethylen)amino]bernsteinsäue-1-tert-butylester-4-benzylester.
Hergestellt auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 1 beschriebene Weise, wobei 2-Amino-4-methylpentansäure-tert-butylester-hydrochlorid mit 2-Aminobernsteinsäure-1-tert-butylester-4-benzylester ersetzt wurde.
¹H NMR (CDCl₃): δ 8,51 (s, 1H), 7,95 (d, 1H), 7,44 (d, 1H), 7,35-7,29 (m, 5H), 5,12 (s, 2H), 4,47 (dd, 1H), 3,15 (dd, 1H), 2,92 (dd, 1H), 1,43 (s, 9H).
Zwischenprodukt 59 rel-(25,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-(2-benzyloxycarbonylmethyl)-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Hergestellt auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 3 beschriebene Weise, wobei Zwischenprodukt 2 mit Zwischenprodukt 66 und 4-tert-Butylbenzoylchlorid mit 3-tert-Butyl-4-methoxybenzoylchlorid ersetzt wurde.
MS berechnet für (C₃₇H₄₂N₄O₆S + H)⁺: 671
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 671.
Zwischenprodukt 60 rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-(carboxymethyl)-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Zu einer Lösung aus Zwischenprodukt 59 (0,696 mg, 1,04 mmol) in Ethanol (45 ml) wurde der Katalysator 10 % Palladium auf Kohlenstoff (100 mg) gegeben, gefolgt von einer Lösung aus Ammoniumformiat (2 g) in Ethanol (40 ml). Das Gemisch wurde unter Rückfluss 2 Stunden lang erhitzt. Der Katalysator wurde durch Filtration entfernt und mit Ethanol gewaschen. Das Filtrat wurde zur Trockene eingedampft und zwischen Wasser und Ethylacetat aufgeteilt. Die organische Phase wurde über Natriumsulfat getrocknet und eingedampft, um die Titelverbindung als einen Feststoff zu ergeben.
MS berechnet für (C₃₀H₃₆N₄O₆S + H)⁺: 581
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 581
Zwischenprodukt 61 rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-(aminocarbonylmethyl)-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Die Titelverbindung wurde als ein Feststoff aus Zwischenprodukt 60 auf eine ähnliche wie jene in Beispiel 20 beschriebene Weise hergestellt. Das Rohprodukt wurde durch Aufteilen zwischen Ethylacetat und Wasser, Eindampfen der organischen Fraktion und dann durch SPR-Chromatographie über Silica mit Methanol/Ethylacetat (1:10) als Eluierungsmittel gereinigt.
MS berechnet für (C₃₀H₃₇N₅O₅S + H)⁺: 580
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 580.
Zwischenprodukt 62 rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methozybenzoyl)-2-(N-methylaminocarbonylmethyl)-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Die Titelverbindung wurde als ein Feststoff aus Zwischenprodukt 60 und Methylaminhydrochlorid auf eine ähnliche wie jene in Beispiel 20 beschriebene Weise hergestellt. Das Rohprodukt wurde durch Aufteilen zwischen Ethylacetat und Wasser, Eindampfen der organischen Fraktion und dann durch SPE-Chromatographie über Silica mit Methanol/Ethylacetat (1:20) als Eluierungsmittel gereinigt.
MS berechnet für (C₃₁H₃₉N₅O₅S + H)⁺: 594
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 594 Zwischenprodukt 63 Enantiomer A von rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-chlorbenzoyl)-2-isobutyl-4-pyrazin-2-yl-5-(pyridin-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester

Stufe A: Zwischenprodukt 15 wurde mit 4-tert-Butyl-3-chlorbenzoylchlorid auf eine ähnliche wie jene bei der Herstellung von Zwischenprodukt 3 beschriebene Weise umgesetzt, um rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-chlorbenzoyl)-2-isobutyl-4-pyrazin-2-yl-5-(pyridin-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester zu ergeben. MS berechnet für (C₂₉H₃₃ClN₄O₃S + H)⁺: 521/523. MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 521/523.
Stufe B: Das Racemat aus Stufe A wurde unter Verwendung einer Chiralpak AD-Säule und Heptan-Isopropanol (85:15 Vol./Vol.) als Eluierungsmittel aufgetrennt. Das zuerst eluierende Enantiomer (Enantiomer A) war die Titelverbindung mit einem identischen LCMS mit dem Racemat.

Zwischenprodukt 64 2-[N-(3-Phenylphenyl)methylenamino]-4-methylpentansäure-tert-butylester
Hergestellt auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 1 beschriebene Weise, wobei 1,3-Thiazol-2-carboxaldehyd mit 3-Phenylbenzaldehyd ersetzt wurde.
¹H NMR (CDCl₃): δ 8,35 (s, 1H), 8,01 (s, 1H), 7,76 (d, 1H), 7,67-7,59 (m, 3H), 7,50-7,42 (m, 3H), 7,37-7,33 (m, 1H), 3,99 (dd, 1H), 1,90-1,76 (m, 2H), 1,66-1,56 (m, 1H), 1,47 (s, 9H), 0,96 (d, 3H) und 0,91 (d, 3H). Zwischenprodukt 65 rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-pyrazin-2-yl-5-(3-phenylphenyl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester

Stufe A: rel-(2S,4S,5R)-2-Isobutyl-4-pyrazin-2-yl-5-(3-phenylphenyl)pyrrolidin-2-carbon-säuretert-butylester wurde auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 2 beschriebene Weise hergestellt, wobei Zwischenprodukt 1 mit Zwischenprodukt 64 ersetzt wurde. MS berechnet für (C₂₉H₃₅N₃O₂ + H)⁺: 458. MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 458.
Stufe B: Der Ester aus Stufe A wurde mit 4-tert-Butylbenzoylchlorid auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 3 beschriebene Weise acyliert, um rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-pyrazin-2-yl-5-(3-phenylphenyl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester zu ergeben. MS berechnet für (C₄₀H₄₇N₃O₃ + H)⁺: 618 MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 618.

Zwischenprodukt 66 rel-(2S,4S,5R)-2-(2-Benzylozycarbonylmethyl)-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Hergestellt auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 2 beschriebene Weise, wobei Zwischenprodukt 1 mit Zwischenprodukt 58 ersetzt wurde.
MS berechnet für (C₂₅H₂₈N₄O₄S + H)⁺: 481
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 481.
Zwischenprodukt 67 2-Vinyl-5-trifluormethylpyridin
Zu einer Lösung aus Vinylmagnesiumbromid in THF (1 M, 7,38 ml, 7,38 mmol) in THF (29 ml) wurde wasserfreies Zinkbromid (1,66 g, 7,38 mmol) bei –78°C gegeben. Nach einer Stunde bei dieser Temperatur wurde das Gemisch auf Raumtemperatur gewärmt. Nach einer Stunde wurden Tetrakis(triphenylphosphin)palladium(0) (147 mg) und 2-Brom-S-trifluormethylpyridin (1 g, 4,42 mmol) zugegeben und das Gemisch bei 50°C 5,25 Stunden lang erhitzt. Das Gemisch wurde mit einer Ammoniumchloridlösung (10 %, 29 ml) verdünnt und mit Ethylacetat (70 ml × 2) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Natriumsulfat getrocknet, eingedampft und über Säulenchromatographie (SPE-Säule, Silica) gereinigt, wobei mit Cyclohexan, gefolgt von Cyclohexan/Ethylacetat (95:5 Vol./Vol.), dann (9:1 Vol./Vol.) eluiert wurde. Dies ergab die Titelverbindung.
¹H NMR (CDCl₃): δ 8,85 (s, 1H), 7,90 (d, 1H), 7,46 (d, 1H), 6,88 (dd, 1H), 6,36 (d, 1H), 5,65 (d, 1H). Zwischenprodukt 68 (2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester

Stufe A: (2S,4S,5R)-2-Isobutyl-4-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester wurde auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 2 beschriebene Weise hergestellt, wobei 2-Vinylpyrazin mit Zwischenprodukt 67 ersetzt wurde. MS berechnet für (C₂₂H₂₈F₃N₃O₂S + H)⁺: 456. MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 456.
Stufe B: Die Titelverbindung wurde auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 3 beschriebene Weise hergestellt, wobei Zwischenprodukt 2 mit der in Stufe A beschriebenen Verbindung ersetzt wurde. MS berechnet für (C₃₃H₄₀F₃N₃O₃S + H)⁺: 616. MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 616.

Zwischenprodukt 69 (2S,4R,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Eine Lösung aus Zwischenprodukt 68 (111 mg, 0,18 mmol) wurde zu einer Lösung aus NaOH in Methanol (0,1 N, 1,8 ml) gegeben und die Lösung 3 Tage lang bei Raumtemperatur stehen gelassen. Das Lösungsmittel wurde im Vakuum entfernt und der Rückstand durch die Zugabe von Salzsäure (2 N, 90 μl) neutralisiert. Wasser (5 ml) und Dichlormethan (5 ml) wurden zugegeben. Die wässrige Phase wurde weiter mit Dichlormethan (5 ml) extrahiert, die organischen Fraktionen wurden vereinigt, über Natriumsulfat getrocknet und eingedampft. Das Produkt wurde durch präparative DC gereinigt, wobei mit Cyclohexan/Ethylacetat (4:1 Vol./Vol.) eluiert wurde. Die schneller laufende Bande wurde mit Ethylacetat extrahiert, um die Titelverbindung zu ergeben. Die Stereochemie wurde durch NOE-Studien bestätigt.
MS berechnet für (C₃₃H₄₀F₃N₃O₃S + H)⁺: 616
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 616
Zwischenprodukt 70 rel-(2S,4S,5R)-2-Isobutyl-4-pyrazin-2-yl-5-(4-dimethylaminophenyl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Hergestellt auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 1 beschriebene Weise, wobei 1,3-Thiazol-2-carboxaldehyd mit 4-Dimethylaminobenzaldehyd ersetzt wurde.
MS berechnet für (C₂₅H₃₆N₄O₂ + H)⁺: 425.
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 425.
Zwischenprodukt 71 2-[N-(1,3-Thiazol-3-ylmethylen)amino]-3-(1-triphenylmethyl-1H-imidazol-4-yl)-propionsäure-tert-butylester
Hergestellt auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 1 beschriebene Weise, wobei 2-Amino-4-methylpentansäure-tert-butylester-hydrochlorid mit 2-Amino-3-(1-triphenylmethyl-1H-imidazol-5-yl)propionsäure-tert-butylester-hydrochlorid ersetzt wurde.
¹H NMR (CDCl₃): δ 8,20 (s, 1H), 7,95 (d, 1H), 7,42 (d, 1H), 7,33 (s, 1H), 7,28-7,18 (m, 9H), 7,05-6,99 (m, 6H), 6,51 (s, 1H), 4,37 (dd, 1H), 3,30 (dd, 1H), 3,03 (dd, 1H), 1,45 (s, 9H).
Zwischenprodukt 72 rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-(1-triphenylmethyl-1H-imidazol-4-yl-methyl)-4-pyrazin-2-yl-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Hergestellt auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 2 beschriebene Weise, wobei Zwischenprodukt 1 mit Zwischenprodukt 71 ersetzt wurde.
MS berechnet für (C₅₁H₅₂N₆O₄S + H)⁺: 846.
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 846.
Zwischenprodukt 73 2-[N-(2-Methylpropylen)amino]-4-methylpentansäure-tert-butylester
Hergestellt auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 46 beschriebene Weise, wobei Acetaldehyd mit 2-Methylpropionaldehyd ersetzt wurde.
¹H NMR (CDCl₃): δ 7,50 (d, 1H), 3,66 (dd, 1H), 2,56-2,41 (m, 1H), 1,78-1,61 (m, 2H), 1,56-1,45 (s + m, 10H), 1,08 (d, 6H), 0,92 (d, 3H), 0,84 (d, 3H).
Zwischenprodukt 74 rel-(2S,4S,5S)-2-Isobutyl-4-pyrazin-2-yl-5-isopropylpyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Hergestellt auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 2 beschriebene Weise, wobei Triethylamin mit 1,8-Diazabicyclo[5,4,0]undec-7-en (DBU) und Zwischenprodukt 1 mit Zwischenprodukt 73 ersetzt wurde.
MS berechnet für (C₂₀H₃₃N₃O₂ + H)⁺: 348
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 348.
Zwischenprodukt 75 2-[N-(1,3-Thiazol-2-ylmethylen)amino]-4-(methylthio)butansäure-tert-butylester
Hergestellt auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 1 beschriebene Weise, wobei 2-Amino-4-methylpentansäure-tert-butylester-hydrochlorid mit Methionin-tert-butylester-hydrochlorid ersetzt wurde.
¹H NMR (CDCl₃): δ 8,49 (s, 1H), 7,95 (d, 1H), 7,45 (d, 1H), 4,18 (dd, 1H), 2,63-2,55 (m, 1H), 2,51-2,42 (m, 1H), 2,29-2,19 (m, 2H), 2,09 (s, 3H), 1,47 (s, 9H).
Zwischenprodukt 76 rel-(2S,4S,5R)-2-(2-(Methylthio)ethyl)-4-pyrazin-2-yl-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Hergestellt auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 2 beschriebene Weise, wobei Zwischenprodukt 1 mit Zwischenprodukt 75 ersetzt wurde.
MS berechnet für (C₁₉H₂₆N₄O₄S₂ + H)⁺: 407.
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 407.
Zwischenprodukt 77 rel-(2S,4R,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-pyrazin-2-yl-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Hergestellt auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 69 beschriebene Weise, wobei Zwischenprodukt 68 mit Zwischenprodukt 3 ersetzt wurde. Die Umsetzung wurde bei 55°C 5 Tage lang erhitzt und eine Reinigung erfolgte durch präparative DC, wobei mit Ethylacetat eluiert wurde.
MS berechnet für (C₃₁H₄₀N₄O₃S + H)⁺: 549.
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 549. Zwischenprodukt 78 4-Cyano-2-vinylpyridin

Stufe A: Ein Gemisch aus 4-Cyanopyridin (5,08 g, 48,8 mmol), Ammoniumpersulfat (22,9 g, 100 mmol), Methanol (75 ml), Wasser (35 ml) und konz. Schwefelsäure (2,7 ml) wurde bei 62 °C 20 Stunden lang erhitzt. Das Methanol wurde im Vakuum entfernt, gefolgt von der Zugabe einer Natriumhydroxidlösung (2 M, 60 ml) und Chloroform (70 ml). Die wässrige Phase wurde weiter 3 Mal mit Chloroform, dann mit Ethylacetat extrahiert. Die organischen Fraktionen wurden vereinigt, über Magnesiumsulfat getrocknet und eingedampft. Das Produkt wurde durch Silicasäulenchromatographie unter Verwendung einer Biotagekartusche (90 g) gereinigt, wobei mit Cyclohexan/Ethylacetat (2:1 Vol./Vol.), dann (1:1 Vol./Vol.) eluiert wurde. Dies ergab 4-Cyano-2-hydroxymethylpyridin als einen Feststoff.
Stufe B: Zu 4-Cyano-2-hydroxymethylpyridin (1,1 g, 8,2 mmol) aus Stufe A in trockenem DMSO (18 ml) wurden N,N-Dicyclohexylcarbodiimid (5,08 g, 24,6 mmol) und Phosphorsäure (0,4 g, 4,1 mmol) gegeben. Das Gemisch wurde über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Der Feststoff wurde durch Filtration entfernt und mit Ether und Wasser gewaschen. Das Filtrat und die Waschungen wurden vereinigt und die organische Schicht abgetrennt. Die wässrige Schicht wurde weiter 4 Mal mit Ether extrahiert, die organischen Verbindungen vereinigt, über Magnesiumsulfat getrocknet und eingedampft. Der Rückstand wurde durch SPE-Silicasäulenchromatographie gereinigt, wobei mit Dichlormethan, dann Chloroform, dann Diethylether eluiert wurde. Eindampfen der geeigneten Fraktionen ergab 4-Cyanopyridin-2-carboxaldehyd als einen Feststoff.
Stufe C: Ein Gemisch aus 4-Cyanopyridin-2-carboxaldehyd (0,916 g, 6,93 mmol), Methyltriphenylphosphoniumbromid (2,48 g, 6,93 mmol), Kaliumcarbonat (1,2 g, 8,66 mmol), 1,4-Dioxan (9,5 ml) und Wasser (0,13 ml) wurde unter Rückfluss 5 Stunden lang erhitzt. Das Gemisch wurde mit Wasser (30 ml) und Ethylacetat (70 ml) verdünnt und die organische Schicht abgetrennt. Die wässrige Phase wurde weiter mit Ethylacetat (2 × 40 ml) extrahiert, die organischen Fraktionen vereinigt und über Magnesiumsulfat getrocknet. Nach dem Entfernen des Lösungsmittels wurde der Rückstand durch Silicasäulenchromatographie unter Verwendung einer Biotagekartusche und Eluieren mit Cyclohexan/Ethylacetat (7:3 Vol./Vol.), dann (1:1 Vol./Vol.) gereinigt. Dies gab die Titelverbindung als ein Öl. ¹H NMR (CDCl₃): δ 8,74 (d, 1H), 7,54 (s, 1H), 7,38 (d, 1H), 6,83 (dd, 1H), 6,33 (d, 1H), 5,64 (d, 1H).

Zwischenprodukt 79 rel-(2S,4S,5R)-2-Isobutyl-4-(4-cyanopyridin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-5-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Hergestellt auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 2 beschriebene Weise, wobei 2-Vinylpyrazin mit 4-Cyano-2-vinylpyridin ersetzt wurde.
MS berechnet für (C₂₂H₂₈N₄O₂S + H)⁺: 413.
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 413.
Zwischenprodukt 80 4-(2-Hydroxyethyl)pyrimidin
Ein Gemisch aus 4-Methylpyrimidin (10 g, 106 mmol) und Paraformaldehyd (3 g) wurde in einem verschlossenen 50 ml Kapazitätsdruckgefäß bei 165°C 3,5 Stunden lang gerührt. Nach dem Kühlen wurde Ether zugegeben und die Lösungsmittel eingedampft, um ein Öl zu ergeben. Dieses wurde über Silicasäulenchromatographie unter Verwendung eines Flashmastersystems gereinigt, wobei mit Dichlormethan, dann Chloroform, Ether und schließlich Ethylacetat eluiert wurde. Die Ethylacetatfraktionen wurden eingedampft, um die Titelverbindung als ein Öl zu ergeben.
¹H NMR (CDCl₃): δ 9,13 (s, 1H), 8,64 (d, 1H), 7,23 (d, 1H), 4,07-4,05 (m, 2H), 3,48 (brt, 1H), 3,04-3,01 (m, 2H).
Zwischenprodukt 81 rel-(2S,4S,5R)-2-Isobutyl-4-(pyrimidin-4-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Zu 4-(2-Hydroxyethyl)pyrimidin, Zwischenprodukt 80, (0,605 g, 4,87 mmol) in trockenem Dichlormethan (12 ml) bei 0°C wurde Triethylamin (1,02 ml, 7,3 mmol) und Methansulfonylchlorid (0,57 ml, 7,3 mmol) gegeben. Nach 10 Minuten bei dieser Temperatur ließ man das Gemisch Raumtemperatur erreichen und rührte 16 Stunden lang. Das Gemisch wurde auf 0°C gekühlt. Zwischenprodukt 1 (1,37g, 4,85 mmol) in trockenem THF (12 ml) wurde zugegeben, gefolgt von Lithiumbromid (0,846 g, 9,74 mmol) und Triethylamin (1,02 ml, 7,3 mmol). Nach 2 Tage langem Rühren bei Raumtemperatur ergaben Aufarbeiten und Reinigen, wie zuvor für Zwischenprodukt 2 beschrieben, die Titelverbindung als einen Gummi.
MS berechnet für (C₂₀H₂₈N₄O₂S + H)⁺: 389.
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 389.
Zwischenprodukt 82 2-[N-(1,3-Thiazol-2-ylmethylen)amino]-4-methylsulfonylbutansäure-tert-butylester
Hergestellt auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 1 beschriebene Weise, wobei 2-Amino-4-methylpentansäure-tert-butylesterhydrochlorid mit 2 Methioninsulfon-tert-butylester ersetzt wurde.
¹H NMR (CDCl₃): δ 8,52 (s, 1H), 7,97 (d, 1H), 7,48 (d, 1H), 4,20 (t, 1H), 3,17 (dd, 2H), 2,95 (s, 3H), 2,51-2,46 (m, 2H), 1,47 (s, 9H).
Zwischenprodukt 83 rel-(2S,4S,5R)-2-(2-(Methylsulfonyl)ethyl)-4-pyrazin-2-yl-5-(1,3-thiazol-2-yl)-pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Hergestellt auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 2 beschriebene Weise, wobei Zwischenprodukt 1 mit Zwischenprodukt 82 ersetzt wurde.
MS berechnet für (C₃₀H₃₈N₄O₅S₂ + H)⁺: 599.
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 599.
Zwischenprodukt 84 2-[N-(1,3-Thiazol-2-ylmethylen)amino]propionsäure-tert-butylester
Hergestellt auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 1 beschriebene Weise, wobei 2-Amino-4-methylpentansäure-tert-butylesterhydrochlorid mit Alanin-tert-butylester-hydrochlorid ersetzt wurde.
NMR (CDCl₃); δ 8,5 (d, 1H), 7,9 (d, 1H), 7,4 (d, 1H), 4,15 (q, 1H), 1,6 (s, 3H), 1,45 (s, 9H).
Zwischenprodukt 85 rel-(2S,4S,5R)-2-Methyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-5-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Hergestellt auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 2 beschriebene Weise, wobei Zwischenprodukt 1 mit Zwischenprodukt 84 ersetzt wurde.
MS berechnet für (C₁₇H₂₂N₄O₂S + H)⁺: 347.
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 347.
Zwischenprodukt 86 2-[N-(2-Phenyl-1,3-thiazol-4-ylmethylen)amino]propionsäure-tert-butylester
Hergestellt auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 1 beschriebene Weise, wobei 1,3-Thiazol-2-carboxaldehyd mit 2-Phenyl-1,3-thiazol-4-carboxaldehyd ersetzt wurde.
NMR (CDCl₃); δ 8,5 (s, 1H), 8,2 (s, 1H), 8,0 (m, 3H), 7,45 (m, 3H), 4,0 (q, 1H), 1,8 (m, 2H), 1,6 (m, 1H), 1,5 (s, 9H), 0,94 (m, 6H).
Zwischenprodukt 87 rel-(2S,4S,5R)-2-Isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(2-phenyl-1,3-thiazol-4-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Hergestellt auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 2 beschriebene Weise, wobei Zwischenprodukt 1 mit Zwischenprodukt 86 ersetzt wurde.
MS berechnet für (C₂₆H₃₂N₄O₂S + H)⁺: 465.
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 465.
Zwischenprodukt 88 2-[N-(1,3-Thiazol-4-ylmethylen)amino]-3-(pyridin-2-yl)propionsäure-tert-butylester
Hergestellt auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 1 beschriebene Weise, wobei 2-Amino-4-methylpentansäure-tert-butylesterhydrochlorid mit 2-Amino-3-(2-pyridyl)propionsäure-tert-butylester ersetzt wurde.
NMR (CDCl₃); δ 8,5 (d, 1H), 8,2 (s, 1H), 7,9 (d, 1H), 7,5 (t, 1H), 7,4 (d, 1H), 7,15 (d, 1H), 7,10 (t, 1H), 4,6 (q, 1H), 3,5 (dd, 1H), 3,3 (dd, 1H), 1,4 (s, 9H).
Zwischenprodukt 89 rel-(2S,4S,5R)-2-(2-Pyridin-2-ylmethyl)-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Hergestellt auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 2 beschriebene Weise, wobei Zwischenprodukt 1 mit Zwischenprodukt 88 ersetzt wurde und wobei Triethylamin mit DBU ersetzt wurde.
MS berechnet für (C₂₂H₃₅N₅O₂S + H)⁺: 424.
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 424.
Zwischenprodukt 90 4-tert-Butyl-3-ethylbenzoesäure
Eine Lösung aus n-Butyllithium (1,6 M in Hexan, 2,67 ml, 4,27 mmol) wurde tropfenweise zu einer Lösung aus 4-tert-Butyl-3-brombenzoesäure (500 mg, 1,94 mmol) in THF bei –78°C gegeben, während die Temperatur unter –70°C gehalten wurde. Nach 40 Minuten wurde Ethyliodid (1,55 ml, 19,4 mmol) tropfenweise zugegeben, während die Temperatur unter –65°C gehalten wurde. Nach einer Stunde bei –70°C ließ man das Gemisch Raumtemperatur erreichen und rührte über Nacht. Das Gemisch wurde durch die Zugabe von gesättigter Ammoniumchloridlösung (30 ml) gequencht und mit Ether (30 ml) extrahiert. Die organische Fraktion wurde über Magnesiumsulfat getrocknet und eingedampft. Eine Reinigung wurde durch Umkehrphasen-HPLC auf einer C₁₈-Säule unter Verwendung einer Zwei-Lösungsmittel-Gradienteneluierung mit (A) Wasser, das Ameisensäure enthält (0,1 %), und (B) Acetonitril-Wasser (95:5 Vol./Vol.), das Ameisensäure enthält (0,05 %), als die Eluierungsmittel und Analyse der Fraktionen durch Elektrospraymassenspektroskopie erreicht. Dies ergab die Titelverbindung als einen Feststoff.
MS berechnet für (C₁₃H₁₈O₂ – H)^–: 205.
MS gemessen (Elektrospray): (M-H)^– = 205.
Zwischenprodukt 91 4-tert-Butyl-3-ethoxybenzoesäure
Hergestellt auf eine ähnliche wie jene für 4-tert-Butyl-3-methoxybenzoesäure (J. Org. Chem. (1961) 26, 1732) beschriebene Weise, wobei Methyliodid mit Ethyliodid ersetzt wurde.
MS berechnet für (C₁₃H₁₈O₃ – H)^–: 221.
MS gemessen (Elektrospray): (M-H)^– = 221.
Zwischenprodukt 92 Enantiomer A von rel-(2S,4S,5R)-2-Isobutyl-4-pyrazin-2-yl-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Zwischenprodukt 2 (7,0 g) wurde in Heptan (700 ml) gelöst, und Aliquote von ca. 10 ml wurden auf eine präparative HPLC-Säule (50 mm Innendurchmesser), die mit Chiralpac AD-stationäre Phase gepackt ist, injiziert. Jede Injektion wurde mit 5 % Vol./Vol. Ethanol in Heptan bei einer Fließgeschwindigkeit von 80 ml/min eluiert. Das Produkt aus jeder Injektion wurde in Echtzeit unter Verwendung einer UV-Sichtbar-Detektion bei einer Wellenlänge von 270 nm und Fraktionen, die für jedes Enantiomer genommen wurde, analysiert. Nach Wiederholungsinjektionen wurden alle Fraktionen, welche das als zweites eluierende Enantiomer enthielten, vereinigt und im Vakuum eingedampft, um die Titelverbindung als einen Feststoff zu erbringen. Dieses Enantiomer war laut LC-MS mit der racemischen Verbindung identisch.
Zwischenprodukt 93 2-[N-(1,3-Thiazol-4-ylmethylen)amino]-3-(phenyl)propionsäure-tert-butylester
Hergestellt auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 1 beschriebene Weise, wobei 2-Amino-4-methylpentansäure-tert-butylesterhydrochlorid mit 2-Amino-3-(2-phenyl)-propionsäure-tert-butylesterhydrochlorid ersetzt wurde.
NMR (CDCl₃): δ 8,1 (s, 1H), 8,2 (s, 1H), 7,9 (d, 1H), 7,4 (d, 1H), 7,2 (m, 5H), 7,10 (t, 1H), 4,2 (q, 1H), 3,3 (dd, 1H), 3,1 (dd, 1H), 1,4 (s, 9H).
Zwischenprodukt 94 rel-(2S,4S,5R)-2-Phenylmethyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester
Hergestellt auf eine ähnliche wie jene für Zwischenprodukt 2 beschriebene Weise, wobei Zwischenprodukt 1 mit Zwischenprodukt 93 ersetzt wurde.
MS berechnet für (C₂₃H₂₆N₄O₂S + H)⁺: 423.
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 423.
Beispiel 1 rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure
Zwischenprodukt 3 (88 mg, 0,16 mmol) wurde in Trifluoressigsäure (5 ml) gelöst. Die Umsetzung wurde bei Raumtemperatur 6 Stunden lang gerührt. Das Lösungsmittel wurde dann im Vakuum eingedampft, und der Rückstand wurde mit Diethylether verrieben. Der sich ergebende Feststoff wurde durch Filtration gesammelt und im Vakuum getrocknet, um die Titelverbindung zu geben.
MS berechnet für (C₂₇H₃₂N₄O₃S + H)⁺: 493.
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 493.
Beispiel 2 rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(5-methylpyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure
Die Titelverbindung wurde aus Zwischenprodukt 5 auf eine ähnliche wie jene für Beispiel 1 beschriebene Weise hergestellt.
MS berechnet für (C₂₈H₃₄N₄O₃S + H)⁺: 507.
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 507.
Beispiel 3 rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyridin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure
Die Titelverbindung wurde aus Zwischenprodukt 7 auf eine ähnliche wie jene für Beispiel 1 beschriebene Weise hergestellt.
MS berechnet für (C₂₈H₃₃N₃O₃S + H)⁺: 492.
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 492.
Beispiel 4 rel-(2S,4R,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyridin-4-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure
Die Titelverbindung wurde aus Zwischenprodukt 9 auf eine ähnliche wie jene für Beispiel 1 beschriebene Weise hergestellt. Protonen-NMR-NOE-Studien bestätigten, dass die Stereochemie 2S,4R,5R ist.
MS berechnet für (C₂₈H₃₃N₃O₃S + H)⁺: 492.
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 492.
Beispiel 5 rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrimidin-5-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure
Die Titelverbindung wurde aus Zwischenprodukt 11 auf eine ähnliche wie jene für Beispiel 1 beschriebene Weise hergestellt.
MS berechnet für (C₂₇H₃₂N₄O₃S + H)⁺: 493.
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 493.
Beispiel 6 rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(6-methylpyridazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure
Die Titelverbindung wurde aus Zwischenprodukt 13 auf eine ähnliche wie jene für Beispiel 1 beschriebene Weise hergestellt.
MS berechnet für (C₂₈H₃₄N₄O₃S + H)⁺: 507.
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 507.
Beispiel 7 rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(pyridin-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure
Die Titelverbindung wurde aus Zwischenprodukt 16 auf eine ähnliche wie jene für Beispiel 1 beschriebene Weise hergestellt.
MS berechnet für (C₂₉H₃₄N₄O₃ + H)⁺: 487
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 487
Beispiel 8 rel-(2S,4S,5R)-1-(3-Brom-4-tert-butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(pyridin-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure
Die Titelverbindung wurde aus Zwischenprodukt 17 auf eine ähnliche wie jene für Beispiel 1 beschriebene Weise hergestellt.
MS berechnet für (C₂₉H₃₃BrN₄O₃ + H)⁺: 56/567.
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 565/567.
Beispiel 9 rel-(2S,4S,5R)-1-(3-Brom-4-tert-butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure
Die Titelverbindung wurde aus Zwischenprodukt 18 auf eine ähnliche wie jene für Beispiel 1 beschriebene Weise hergestellt.
MS berechnet für (C₂₇H₃₁BrN₄O₃S + H)⁺: 571/573.
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 571/573.
Beispiel 10 rel-(2S,4S,5R)-1-(3-Brom-4-tert-butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(5-methylpyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure
Die Titelverbindung wurde aus Zwischenprodukt 19 auf eine ähnliche wie jene für Beispiel 1 beschriebene Weise hergestellt.
MS berechnet für (C₂₈H₃₃BrN₄O₃S + H)⁺: 585/587.
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 585/587.
Beispiel 11 rel-(2S,4S,5R)-1-(3-Brom-4-tert-butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyradazin-3-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure
Dies wurde aus Zwischenprodukt 33 auf eine ähnliche wie jene für Beispiel 1 beschriebene Weise hergestellt. Eine Reinigung wurde durch Umkehrphasen-HPLC auf einer C₁₈-Säule unter Verwendung einer Zwei-Lösungsmittel-Gradienteneluierung mit (A) Wasser, das Ameisensäure enthält (0,1 %), und (B) Acetonitril-Wasser (95:5 Vol./Vol.), das Ameisensäure (0,05 %) enthält, als die Eluierungsmittel und Analyse der Fraktionen durch Elektrospraymassenspektroskopie erreicht. Dies ergab die Titelverbindung als einen Feststoff.
MS berechnet für (C₂₇H₃₂N₄O₃S + H)⁺: 493
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 493 Beispiel 12 Als 2. eluierendes Isomer von rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure
rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-pyrazin-2-yl-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure (Beispiel 1) wurde durch präparative HPLC auf einer Chiralpak AD Chromatographiesäule unter Verwendung von Heptan-Ethanol (70:30 Vol./Vol.), welches 0,1 % Trifluoressigsäure als Eluierungsmittel enthält, gereinigt, um die einzelnen Enantiomere mit Retentionszeiten von 5 Minuten (als erstes eluierendes Enantiomer) bzw. 6 Minuten (als zweites eluierendes Enantiomer, die Titelverbindung) zu ergeben. Das als zweites eluierende Enantiomer war laut LCMS mit der für Beispiel 1 beschriebenen racemischen Verbindung identisch.
¹H NMR (CD₃OD): δ 8,44 (1H, s), 8,21 (1H, d), 8,16 (1H, d), 7,54 (1H, d), 7,18 (3H, m), 6,94 (2H, d), 5,94 (1H, d), 4,51-4,44 (1H, m), 3,17 (1H, t), 2,41 (1H, dd), 2,31-2,19 (2H, m), 2,12 2,02 (1H, m), 1,13 (9H, s), 1,10 (3H, d), 1,05 (3H, d).
Beispiel 13 Enantiomer A von rel-(2S,4S,5R)-1-(3-Brom-4-tert-butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure
Die Titelverbindung wurde aus Zwischenprodukt 21 (Enantiomer A) auf eine ähnliche wie jene für Beispiel 1 beschriebene Weise hergestellt.
MS berechnet für (C₂₇H₃₁BrN₄O₃S + H)⁺: 571/573
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 571/573
Beispiel 14 Enantiomer A von rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(pyridin-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure
Die Titelverbindung wurde aus Zwischenprodukt 22 (Enantiomer A) auf eine ähnliche wie jene für Beispiel 1 beschriebene Weise hergestellt.
MS berechnet für (C₂₉H₃₄N₄O₃ + H)⁺: 487
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 487
Beispiel 15 Enantiomer A von rel-(2S,4S,5R)-1-(3-Brom-4-tert-butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(pyridin-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure
Die Titelverbindung wurde aus Zwischenprodukt 23 (Enantiomer A) auf eine ähnliche wie jene für Beispiel 1 beschriebene Weise hergestellt.
MS berechnet für (C₂₉H₃₃BrN₄O₃S + H)⁺: 565/567
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 565/567
Beispiel 16 Enantiomer A von rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-benzothiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure
Die Titelverbindung wurde aus Zwischenprodukt 31 (Enantiomer A) auf eine ähnliche wie jene für Beispiel 1 beschriebene Weise hergestellt. Sie wurde über SPE (C₁₈) gereinigt, wobei die Probe in Wasser beladen und mit Wasser, gefolgt von Methanol, eluiert wurde. Eine weitere Reinigung wurde durch Umkehrphasen-HPLC auf einer C₁₈-Säule unter Verwendung einer Zwei-Lösungsmittel-Gradienteneluierung mit (A) Wasser, das Ameisensäure enthält (0,1 %), und (B) Acetonitril-Wasser (95:5 Vol./Vol.), das Ameisensäure (0,05 %) enthält, als die Eluierungsmittel und Analyse der Fraktionen durch Elektrospraymassenspektroskopie erreicht.
MS berechnet für (C₃₁H₃₄N₄O₃S + H)⁺: 543
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 543
Beispiel 17 Enantiomer A von rel-(2S,4S,5R)-1-(3-Brom-4-tert-butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-benzothiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure
Die Titelverbindung wurde aus Zwischenprodukt 30 (Enantiomer A) auf eine ähnliche wie jene für Beispiel 1 beschriebene Weise hergestellt. Die Titelverbindung wurde über SPE (C₁₈) gereinigt, wobei die Probe in Wasser beladen und mit Wasser, gefolgt von Methanol eluiert wurde:
MS berechnet für (C₃₁H₃₃BrN₄O₃S + H)⁺: 621/623
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 621/623
Beispiel 18 Enantiomer A von rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-chlorbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure
Die Titelverbindung wurde aus Zwischenprodukt 25 (Enantiomer A) auf eine ähnliche wie jene für Beispiel 1 beschriebene Weise hergestellt.
MS berechnet für (C₂₇H₃₁ClN₄O₃S + H)⁺: 527/529
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 527/529
Beispiel 19 Enantiomer A von rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure
Die Titelverbindung wurde aus Zwischenprodukt 27 (Enantiomer A) auf eine ähnliche wie jene für Beispiel 1 beschriebene Weise hergestellt.
MS berechnet für (C₂₈H₃₄N₄O₄S + H)⁺: 523
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 523
Beispiel 20 Enantiomer A von rel-(2S,4S,5R)-1-(3-Brom-4-tert-butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(pyridin-2-yl)pyrrolidin-2-carboxamid
Zu einer Lösung aus Beispiel 15 (28,2 mg, 0,05 mmol) und Ammoniumchlorid (10 mg, 0,19 mmol) in DMF (1 ml) wurde Disopropylethylamin (20 μl, 0,11 mmol) und HATU (O-(7-Azabenzotriazol-1-yl)-N,N,N',N'-tetramethyluroniumhexafluorphosphat) (25 mg, 0,07 mmol) gegeben. Die sich ergebende Lösung wurde unter Stickstoff bei Raumtemperatur über Nacht gerührt. Die Umsetzung war unvollständig, so wurden mehr Ammoniumchlorid (1,0 mg, 0,19 mmol), DIPEA (20 μl, 0,11 mmol) und HATU (25 mg, 0,07 mmol) zugegeben, und das Gemisch wurde unter Stickstoff weitere 24 Stunden lang gerührt. Das Lösungsmittel wurde im Vakuum eingedampft, und das Produkt wurde durch präparative DC gereinigt, wobei mit Ethylacetat eluiert wurde, um die Titelverbindung zu geben.
¹H NMR (CDCl₃): δ 10,19 (1H, brs), 8,46 (1H, d), 8,27-8,24 (2H, m), 8,10 (1H, d), 7,17 (1H, d), 7,12-7,01 (2H, m), 6,88 (1H, m), 6,80 (1H, m), 6,00 (1H, d), 5,46 (1H, brs), 5,34 (1H, d), 4,45-4,34 (1H, m), 3,31 (1H, t), 2,56-2,48 (2H, m), 2,42 (1H, dd), 2,12-1,99 (1H, m), 1,37 (9H, s), 1,19 (3H, d), 1,15 (3H, d).
Beispiel 21 Enantiomer A von rel-(2S,4S,5R)-1-(3-Brom-4-tert-butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(5-methyl-pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure
Die Titelverbindung wurde aus Zwischenprodukt 20 (Enantiomer A) auf eine ähnliche wie jene für Beispiel 1 beschriebene Weise hergestellt.
MS berechnet für (C₂₈H₃₃BrN₄O₃S + H)⁺: 585/587
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 585/587
Beispiel 22 rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(chinoxalin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure
Dies wurde aus Zwischenprodukt 35 auf eine ähnliche wie jene für Beispiel 1 beschriebene Weise hergestellt. Eine Reinigung wurde durch Umkehrphasen-HPLC auf einer C₁₈-Säule unter Verwendung einer Zwei-Lösungsmittel-Gradienteneluierung mit (A) Wasser, das Ameisensäure enthält (0,1 %), und (B) Acetonitril-Wasser (95:5 Vol./Vol.), das Ameisensäure (0,05 %) enthält, als die Eluierungsmittel und Analyse der Fraktionen durch Elektrospraymassenspektroskopie erreicht. Dies stellte die Titelverbindung als einen Feststoff bereit.
MS berechnet für (C₃₁H₃₄N₄O₃S + H)⁺: 543
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 543.
Beispiel 23 rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(4-trifluormethylpyridin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure
Die Titelverbindung wurde als ein Feststoff aus Zwischenprodukt 37 auf eine ähnliche wie jene für Beispiel 1 beschriebene Weise hergestellt.
MS berechnet für (C₂₉H₃₂F₃N₃O₃S + H)⁺: 560
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 560
Beispiel 24 rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure
Die Titelverbindung wurde als ein Feststoff aus Zwischenprodukt 38 auf eine ähnliche wie jene für Beispiel 1 beschriebene Weise hergestellt. Eine Reinigung wurde durch Umkehrphasen-HPLC auf einer C₁₈-Säule unter Verwendung einer Zwei-Lösungsmittel-Gradienteneluierung mit (A) Wasser, das Ameisensäure enthält (0,1 %), und (B) Acetonitril-Wasser (95:5 Vol./Vol.), das Ameisensäure enthält (0,05 %), als die Eluierungsmittel und Analyse der Fraktionen durch Elektrospraymassenspektroskopie erreicht.
MS berechnet für (C₂₈H₃₄N₄O₃S + H)⁺: 507
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 507.
Beispiel 25 Enantiomer A von rel-(2S,4S,5R)-1-(3-Brom-4-tert-butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carboxamid
Die Titelverbindung wurde als ein Feststoff aus Beispiel 13, auf eine ähnliche wie jene in Beispiel 20 beschriebene Weise hergestellt.
MS berechnet für (C₂₇H₃₂BrN₅O₂S + H)⁺: 570/572
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 570/572 Beispiel 26 Enantiomer A von rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(pyridin-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure

Stufe A: Zwischenprodukt 15 wurde mit 4-tert-Butyl-3-methoxybenzoylchlorid auf eine ähnliche wie jene in Zwischenprodukt 3 beschriebene Weise umgesetzt, um rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-isobutyl-4-pyrazin-2-yl-5-(pyridin-2-yl)pyrrolidin-2- carbonsäure-tert-butylester zu ergeben. MS berechnet für (C₃₄H₄₄N₄O₄ + H)⁺: 573. MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 573
Stufe B: Das Racemat aus Stufe A wurde durch präparative HPLC auf einer Chiralpack AD Chromatographiesäule unter Verwendung von Heptan-Isopropanol (90/10, Vol./Vol.) aufgetrennt. Eindampfen der die als zweites eluierende Komponente enthaltenden Fraktionen ergab die Titelverbindung als einen Schaum. MS berechnet für (C₃₀H₃₆N₄O₄ + H)⁺: 517 MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 517

Stufe A: Zwischenprodukt 41 wurde mit 4-tert-Butylbenzoylchlorid auf eine ähnliche wie jene in Zwischenprodukt 3 beschriebene Weise umgesetzt, um rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-pyrazin-2-yl-5-(2-chlor-1,3-thiazol-5-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester zu ergeben. MS berechnet für (C₃₁H₃₉ClN₄O₃S + H)⁺: 583/585. MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 583/585.
Stufe B: Der tert-Butylester aus Stufe A wurde mit TFA auf eine ähnliche wie jene für Beispiel 1 beschriebene Weise entschützt, um die Titelverbindung als einen Feststoff zu ergeben. MS berechnet für (C₂₇H₃₁ClN₄O₃S + H)⁺: 527/529 MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 527/529.

Beispiel 28 Enantiomer A von rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-chlorbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(pyridin-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure
Die Titelverbindung wurde als ein Feststoff aus Zwischenprodukt 63 auf eine ähnliche wie jene für Beispiel 1 beschriebene Weise hergestellt.
MS berechnet für (C₂₉H₃₃ClN₄O₃ + H)⁺: 521/523
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 521/523 Beispiel 29 rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(2-chlor-1,3-thiazol-5-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure

Stufe A: Zwischenprodukt 41 wurde mit 4-tert-Butyl-3-methoxybenzoylchlorid auf eine ähnliche wie jene in Zwischenprodukt 3 beschriebene Weise umgesetzt, um rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-isobutyl-4-pyrazin-2-yl-5-(2-chlor-1,3-thiazol-5-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester zu ergeben. MS berechnet für (C₃₁H₃₉ClN₄O₃S + H)⁺: 583/585. MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 583/585.
Stufe B: Der tert-Butylester aus Stufe A wurde mit TFA auf eine ähnliche wie jene für Beispiel 1 beschriebene Weise entschützt, um die Titelverbindung als einen Feststoff zu ergeben. MS berechnet für (C₂₈H₃₃ClN₄O₄S + H)⁺: 557/559 MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 557/559

Stufe A: Zwischenprodukt 43 wurde mit 4-tert-Butylbenzoylchlorid auf eine ähnliche wie jene in Zwischenprodukt 3 beschriebene Weise umgesetzt, um rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(6-methylpyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester zu ergeben. MS berechnet für (C₃₂H₄₂N₄O₃S + H)⁺: 563. MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 563.
Stufe B: Der tert-Butylester aus Stufe A wurde mit TFA auf eine ähnliche wie jene für Beispiel 1 beschriebene Weise entschützt, um die Titelverbindung als einen Feststoff zu ergeben. MS berechnet für (C₂₈H₃₄N₄O₃S + H)⁺: 507 MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 507

Stufe A: Zwischenprodukt 45 wurde mit 4-tert-Butyl-3-methoxybenzoylchlorid auf eine ähnliche wie jene in Zwischenprodukt 3 beschriebene Weise umgesetzt, um rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-isobutyl-4-pyrazin-2-yl-5-phenyl-pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester zu ergeben. MS berechnet für (C₃₅H₄₅N₃O₄ + H)⁺: 572. MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 572.
Stufe B: Der tert-Butylester aus Stufe A wurde mit TFA auf eine ähnliche wie jene für Beispiel 1 beschriebene Weise entschützt, um die Titelverbindung als einen Feststoff zu ergeben. MS berechnet für (C₃₁H₃₇N₃O₄ + H)⁺: 516 MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 516.

Stufe A: Zwischenprodukt 45 wurde mit 4-tert-Butyl-3-benzoylchlorid auf eine ähnliche wie jene in Zwischenprodukt 3 beschriebene Weise umgesetzt, um rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-pyrazin-2-yl-5-phenyl-pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester zu ergeben: MS berechnet für (C₃₄H₄₃N₃O₃ + H)⁺: 542. MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 542
Stufe B: Der tert-Butylester aus Stufe A wurde mit TFA auf eine ähnliche wie jene für Beispiel 1 beschriebene Weise entschützt, um die Titelverbindung als einen Feststoff zu ergeben. MS berechnet für (C₃₀H₃₅N₃O₃ + H)⁺: 486 MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 486

Stufe A: Zwischenprodukt 47 wurde mit 4-tert-Butyl-3-methoxybenzoylchlorid auf eine ähnliche wie jene in Zwischenprodukt 3 beschriebene Weise umgesetzt, um rel-(2S,4S,5S)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-isobutyl-4-pyrazin-2-yl-5-methylpyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester zu ergeben. MS berechnet für (C₃₀H₄₃N₃O₄ + H)⁺: 510. MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 510
Stufe B: Der tert-Butylester aus Stufe A wurde mit TFA auf eine ähnliche wie jene für Beispiel 1 beschriebene Weise entschützt, um die Titelverbindung als einen Feststoff zu ergeben. MS berechnet für (C₂₆H₃₅N₃O₄ + H)⁺: 454 MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 454

Stufe A: Zwischenprodukt 49 wurde mit 4-tert-Butyl-3-methoxybenzoylchlorid auf eine ähnliche wie jene in Zwischenprodukt 3 beschriebene Weise umgesetzt, um rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-isobutyl-4-pyrazin-2-yl-5-(pyridin-3-yl)-pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-Butylester zu ergeben. MS berechnet für (C₃₄H₄₄N₄O₄ + H)⁺: 573. MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 573.
Stufe B: Der tert-Butylester aus Stufe A wurde mit TFA auf eine ähnliche wie jene für Beispiel 1 beschriebene Weise entschützt, um die Titelverbindung als einen Feststoff zu ergeben. MS berechnet für (C₃₀H₃₆N₄O₄ + H)⁺: 517 MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 517

Stufe A: Zwischenprodukt 51 wurde mit 4-tert-Butyl-3-methoxybenzoylchlorid auf eine ähnliche wie jene in Zwischenprodukt 3 beschriebene Weise umgesetzt, um rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(thiophen-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-Butylester zu ergeben. MS berechnet für (C₃₃H₄₃N₃O₄ + H)⁺: 578. MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 578
Stufe B: Der tert-Butylester aus Stufe A wurde mit TFA auf eine ähnliche wie jene für Beispiel 1 beschriebene Weise entschützt, um die Titelverbindung als einen Feststoff zu ergeben. MS berechnet für (C₂₉H₃₅N₃O₄S + H)⁺: 522 MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 522

Stufe A: Zwischenprodukt 53 wurde mit 4-tert-Butylbenzoylchlorid auf eine ähnliche wie jene in Zwischenprodukt 3 beschriebene Weise umgesetzt, um rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-4-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester zu ergeben. MS berechnet für (C₃₁H₄₀N₄O₃ + H)⁺: 549. MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 549
Stufe B: Der tert-Butylester aus Stufe A wurde mit TFA auf eine ähnliche wie jene für Beispiel 1 beschriebene Weise entschützt, um die Titelverbindung als einen Feststoff zu ergeben. MS berechnet für (C₂₇H₃₂N₄O₃S + H)⁺: 493 MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 493

Stufe A: Zwischenprodukt 56 wurde mit 4-tert-Butyl-3-methoxybenzoylchlorid auf eine ähnliche wie jene in Zwischenprodukt 3 beschriebene Weise umgesetzt, um rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(2-dimethylamino-1,3-thiazol-4-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester zu ergeben. MS berechnet für (C₃₄H₄₇N₅O₄S + H)⁺: 622 MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 622.
Stufe B: Der tert-Butylester aus Stufe A wurde mit TFA auf eine ähnliche wie jene für Beispiel 1 beschriebene Weise entschützt, um die Titelverbindung als einen Feststoff zu ergeben. MS berechnet für (C₃₀H₃₉N₅O₄S + H)⁺: 566 MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 566.

Stufe A: Zwischenprodukt 53 wurde mit 4-tert-Butyl-3-methoxybenzoylchlorid auf eine ähnliche wie jene in Zwischenprodukt 3 beschriebene Weise umgesetzt, um rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(thiazol-4-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester zu ergeben. MS berechnet für (C₃₂H₄₂N₄O₄S + H)⁺: 579. MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 579.
Stufe B: Der tert-Butylester aus Stufe A wurde mit TFA auf eine ähnliche wie jene für Beispiel 1 beschriebene Weise entschützt, um die Titelverbindung als einen Feststoff zu ergeben. MS berechnet für (C₂₈H₃₄N₄O₄S + H)⁺: 523. MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 523.

Stufe A: Zwischenprodukt 49 wurde mit 4-tert-Butylbenzoylchlorid auf eine ähnliche wie jene in Zwischenprodukt 3 beschriebene Weise umgesetzt, um rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-benzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(thiazol-4-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester zu ergeben. MS berechnet für (C₃₃H₄₂N₄O₃ + H)⁺: 543. MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 543.
Stufe B: Der tert-Butylester aus Stufe A wurde mit TFA auf eine ähnliche wie jene für Beispiel 1 beschriebene Weise entschützt, um die Titelverbindung als einen Feststoff zu ergeben. MS berechnet für (C₂₉H₃₄N₄O₃ + H)⁺: 487 MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 487.

Stufe A: Zwischenprodukt 89 wurde mit 4-tert-Butyl-3-methoxybenzoylchlorid auf eine ähnliche wie jene in Zwischenprodukt 3 beschriebene Weise umgesetzt, um rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-(pyridin-2-ylmethyl)-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester zu ergeben. MS berechnet für (C₃₄H₃₉N₅O₄S + H)⁺: 614. MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 614.
Stufe B: Der tert-Butylester aus Stufe A wurde mit TFA auf eine ähnliche wie jene für Beispiel 1 beschriebene Weise entschützt, um die Titelverbindung als einen Feststoff zu ergeben. MS berechnet für (C₃₀H₃₁N₅O₄S + H)⁺: 558 MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 558

Beispiel 41 rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-(N-methylaminocarbonylmethyl)-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure
Die Titelverbindung wurde als ein Feststoff aus Zwischenprodukt 62 auf eine ähnliche wie jene für Beispiel 1 beschriebene Weise hergestellt.
MS berechnet für (C₂₇H₃₁N₅O₅S + H)⁺: 538
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 538
Beispiel 42 rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-(aminocarbonylmethyl)-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure
Die Titelverbindung wurde als ein Feststoff aus Zwischenprodukt 61 auf eine ähnliche wie jene für Beispiel 1 beschriebene Weise hergestellt.
MS berechnet für (C₂₆H₂₉N₅O₅S + H)⁺: 524
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 524 Beispiel 43 rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(3-phenylphenyl)-pyrrolidin-2-carbonsäure

Stufe A: Zwischenprodukt 65 wurde mit 4-tert-Butylbenzoylchlorid auf eine ähnliche wie jene in Zwischenprodukt 3 beschriebene Weise umgesetzt, um rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-pyrazin-2-yl-5-(3-phenylphenyl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester zu ergeben. MS berechnet für (C₄₀H₄₇N₃O₃ + H)⁺: 618. MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 618
Stufe B: Der tert-Butylester aus Stufe A wurde mit TFA auf eine ähnliche wie jene für Beispiel 1 beschriebene Weise entschützt, um die Titelverbindung als einen Feststoff zu ergeben. MS berechnet für (C₃₆H₃₉N₃O₃ + H)⁺: 562 MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 562

Beispiel 44 (2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carboxamid
Die Titelverbindung wurde aus Beispiel 19 auf eine ähnliche wie jene in Beispiel 20 beschriebene Weise hergestellt.
MS berechnet für (C₂₈H₃₅N₅O₃S + H)⁺: 522
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 522
Beispiel 45 (2S,4R,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure
Die Titelverbindung wurde aus Zwischenprodukt 69 auf eine ähnliche wie jene für Beispiel 1 beschriebene Weise hergestellt.
MS berechnet für (C₂₉H₃₂F₃N₃O₃S + H)⁺: 560
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 560
Beispiel 46 rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-5-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure
Ein Gemisch aus Beispiel 27 (40 mg, 0,076 mmol) und dem Katalysator 10 % Palladium auf Kohlenstoff (40 mg) in Ethanol (5 ml) wurde über 5 Tage hinweg hydriert. Der Katalysator wurde durch Filtration entfernt und mit Ethanol gewaschen. Nach Eindampfen des Lösungsmittels wurde die Titelverbindung über Umkehrphasen-HPLC auf einer C₁₈-Säule unter Verwendung einer Zwei-Lösungsmittel-Gradienteneluierung mit (A) Wasser, das Ameisensäure enthält (0,1 %), und (B) Acetonitril-Wasser (95:5 Vol./Vol.), das Ameisensäure (0,05 %) enthält, als die Eluierungsmittel und Analyse der Fraktionen durch Elektrospraymassenspektroskopie gereinigt.
MS berechnet für (C₂₇H₃₂N₄O₃S + H)⁺: 493
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 493 Beispiel 47 rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(4-dimethylaminophenyl)pyrrolidin-2-carbonsäure

Stufe A: Zwischenprodukt 70 wurde mit 4-tert-Butyl-3-methoxybenzoylchlorid auf eine ähnliche wie jene in Zwischenprodukt 3 beschriebene Weise umgesetzt, um rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-isobutyl-4-pyrazin-2-yl-5-(4-dimethylaminophenyl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester zu ergeben. MS berechnet für (C₃₇H₅₀N₄O₄ + H)⁺: 615. MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 615.
Stufe B: Der tert-Butylester aus Stufe A wurde mit TFA auf eine ähnliche wie jene für Beispiel 1 beschriebene Weise entschützt, um die Titelverbindung als einen Feststoff zu ergeben. MS berechnet für (C₃₃H₄₂N₄O₄ + H)⁺: 559 MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 559

Stufe A: Zwischenprodukt 70 wurde mit 4-tert-Butylbenzoylchlorid auf eine ähnliche wie jene in Zwischenprodukt 3 beschriebene Weise umgesetzt, um rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-pyrazin-2-yl-5-(4-dimethylaminophenyl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester zu ergeben. MS berechnet für (C₃₆H₄₈N₄O₃ + H)⁺: 585. MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 585.
Stufe B: Der tert-Butylester aus Stufe A wurde mit TFA auf eine ähnliche wie jene für Beispiel 1 beschriebene Weise entschützt, um die Titelverbindung als einen Feststoff zu ergeben. MS berechnet für (C₃₂H₄₀N₄O₃ + H)⁺: 529 MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 529

Stufe A: Zwischenprodukt 72 wurde mit 4-tert-Butyl-3-methoxybenzoylchlorid auf eine ähnliche wie jene in Zwischenprodukt 3 beschriebene Weise umgesetzt, um rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-(1H-1-triphenylmethyl-imidazol-4-yl-methyl)-4-pyrazin-2-yl-5-(1,3-thiazol-2-yl)-pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester zu ergeben. MS berechnet für (C₅₁H₅₂N₆O₄S + H)⁺: 845. MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 845.
Stufe B: Der tert-Butylester aus Stufe A wurde mit TFA auf eine ähnliche wie jene für Beispiel 1 beschriebene Weise entschützt. Eine Reinigung wurde durch Umkehrphasen-HPLC auf einer C₁₈-Säule unter Verwendung einer Zwei-Lösungsmittel-Gradienteneluierung mit (A) Wasser, das Ameisensäure enthält (0,1 %), und (B) Acetonitril-Wasser (95:5 Vol./Vol.), das Ameisensäure (0,05 %) enthält, als die Eluierungsmittel und Analyse der Fraktionen durch Elektrospraymassenspektroskopie erreicht. Dies ergab die Titelverbindung als einen Feststoff. MS berechnet für (C₂₈H₃₀N₆O₄S + H)⁺: 547 MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 547

Stufe A: Zwischenprodukt 74 wurde mit 4-tert-Butyl-3-Methoxybenzoylchlorid auf eine ähnliche wie jene in Zwischenprodukt 3 beschriebene Weise umgesetzt, um rel-(2S,4S,5S)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-isobutyl-4-pyrazin-2-yl-5-isopropyl-pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-Butylester zu ergeben. MS berechnet für (C₃₂H₄₇N₃O₄ + H)⁺: 538. MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 538.
Stufe B: Der tert-Butylester aus Stufe A wurde mit TFA auf eine ähnliche wie jene für Beispiel 1 beschriebene Weise entschützt. Eine Reinigung wurde durch Umkehrphasen-HPLC auf einer C₁₈-Säule unter Verwendung einer Zwei-Lösungsmittel-Gradienteneluierung mit (A) Wasser, das Ameisensäure enthält (0,1 %), und (B) Acetonitril-Wasser (95:5 Vol./Vol.), das Ameisensäure (0,05 %) enthält, als die Eluierungsmittel und Analyse der Fraktionen durch Elektrospraymassenspektroskopie erreicht. Dies ergab die Titelverbindung als einen Feststoff. MS berechnet für (C₂₈H₃₉N₃O₄ + H)⁺: 482 MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 482

Stufe A: Zwischenprodukt 76 wurde mit 4-tert-Butyl-3-methoxybenzoylchlorid auf eine ähnliche wie jene in Zwischenprodukt 3 beschriebene Weise umgesetzt, um rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-(2-(methylthio)ethyl)-4-pyrazin-2-yl-5-(1,3-thiazol-5-yl)-pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-Butylester zu ergeben. MS berechnet für (C₃₁H₄₀N₄O₄S₂ + H)⁺: 597. MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 597.
Stufe B: Der tert-Butylester aus Stufe A wurde mit TFA auf eine ähnliche wie jene für Beispiel 1 beschriebene Weise entschützt. Eine Reinigung wurde durch Umkehrphasen-HPLC auf einer C₁₈-Säule unter Verwendung einer Zwei-Lösungsmittel-Gradienteneluierung mit (A) Wasser, das Ameisensäure enthält (0,1 %), und (B) Acetonitril-Wasser (95:5 Vol./Vol.), das Ameisensäure (0,05 %) enthält, als die Eluierungsmittel und Analyse der Fraktionen durch Elektrospraymassenspektroskopie erreicht. Dies ergab die Titelverbindung als einen Feststoff. MS berechnet für (C₂₇H₃₂N₄O₄S₂ + H)⁺: 541 MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 541

Beispiel 52 rel-(2S,4R,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure
Die Titelverbindung wurde als ein Feststoff aus Zwischenprodukt 77 auf eine ähnliche wie jene in Beispiel 1 beschriebene Weise hergestellt.
MS berechnet für (C₂₇H₃₂N₄O₃S + H)⁺: 493
MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 493 Beispiel 53 rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-5-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure

Stufe A: Zwischenprodukt 41 wurde mit 4-tert-Butyl-3-methoxybenzoylchlorid auf eine ähnliche wie jene in Zwischenprodukt 3 beschriebene Weise umgesetzt, um rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-isobutyl-4-pyrazin-2-yl-5-(2-chlor-1,3-thiazol-5-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester zu ergeben. MS berechnet für (C₃₂H₄₁ClN₄O₄S + H)⁺: 613/615. MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 613/615
Stufe B: Der tert-Butylester aus Stufe A wurde mit TFA auf eine ähnliche wie jene für Beispiel 1 beschriebene Weise entschützt. Eine Reinigung wurde durch Umkehrphasen-HPLC auf einer C₁₈-Säule unter Verwendung einer Zwei-Lösungsmittel-Gradienteneluierung mit (A) Wasser, das Ameisensäure enthält (0,1 %), und (B) Acetonitril-Wasser (95:5 Vol./Vol.), das Ameisensäure (0,05 %) enthält, als die Eluierungsmittel und Analyse der Fraktionen durch Elektrospraymassenspektroskopie erreicht. Dies ergab die Titelverbindung als einen Feststoff. MS berechnet für (C₂₈H₃₃ClN₄O₄S + H)⁺: 557/559. MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 557/559.
Stufe C: Die Säure aus Stufe A wurde auf eine ähnliche wie jene in Beispiel 46 beschriebene Weise hydriert. Eine Reinigung wurde durch Umkehrphasen-HPLC auf einer C₁₈-Säule unter Verwendung einer Zwei-Lösungsmittel-Gradienteneluierung mit (A) Wasser, das Ameisensäure enthält (0,1 %), und (B) Acetonitril-Wasser (95:5 Vol./Vol.), das Ameisensäure (0,05 %) enthält, als die Eluierungsmittel und Analyse der Fraktionen durch Elektrospraymassenspektroskopie erreicht. Dies ergab die Titelverbindung als einen Feststoff. MS berechnet für (C₂₈H₃₄N₄O₄S + H)⁺: 523 MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 523

Stufe A: Zwischenprodukt 79 wurde mit 4-tert-Butylbenzoylchlorid auf eine ähnliche wie jene in Zwischenprodukt 3 beschriebene Weise umgesetzt, um rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(4-cyanopyridin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-5-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester zu ergeben. MS berechnet für (C₃₃H₄₀N₄O₃S + H)⁺: 573. MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 573.
Stufe B: Der tert-Butylester aus Stufe A wurde mit TFA auf eine ähnliche wie jene für Beispiel 1 beschriebene Weise entschützt. Eine Reinigung wurde durch Umkehrphasen-HPLC auf einer C₁₈-Säule unter Verwendung einer Zwei-Lösungsmittel-Gradienteneluierung mit (A) Wasser, das Ameisensäure enthält (0,1 %), und (B) Acetonitril-Wasser (95:5 Vol./Vol.), das Ameisensäure (0,05 %) enthält, als die Eluierungsmittel und Analyse der Fraktionen durch Elektrospraymassenspektroskopie erreicht. Dies ergab die Titelverbindung als einen Feststoff. MS berechnet für (C₂₉H₃₂N₄O₃S + H)⁺: 517 MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 517

Stufe A: Zwischenprodukt 81 wurde mit 4-tert-Butylbenzoylchlorid auf eine ähnliche wie jene in Zwischenprodukt 3 beschriebene Weise umgesetzt, um rel-(2S,4R,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrimidin-4-yl)-5-(1,3-thiazol-5-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester zu ergeben. MS berechnet für (C₃₁H₄₀N₄O₃S + H)⁺: 549. MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 549.
Stufe B: Der tert-Butylester aus Stufe A wurde mit TFA auf eine ähnliche wie jene für Beispiel 1 beschriebene Weise entschützt. Eine Reinigung wurde durch Umkehrphasen-HPLC auf einer Supelco ABZ-plus Säule unter Verwendung eines Gradienten aus 45-50 % Acetonitril/Wasser als das Eluierungsmittel und Analyse der Fraktionen durch Elektrospraymassenspektroskopie erreicht. Die als zweites eluierende Komponente wurde gesammelt und durch NOE-Studien wurde bestätigt, dass diese die Titelverbindung ist, welche als ein Feststoff isoliert wurde. Die als erste eluierende Komponente was das 4-α-Epimer (Beispiel 56). MS berechnet für (C₂₇H₃₂N₄O₃S + H)⁺: 493 MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 493

Beispiel 56 rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrimidin-4-yl)-5-(1,3-thiazol-5-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure
Die als erstes eluierende Komponente aus Beispiel 55, Stufe B, wurde gesammelt und durch NOE-Studien wurde bestätigt, dass diese die Titelverbindung ist, welche als ein Feststoff isoliert wurde.
MS berechnet für (C₂₇H₃₂N₄O₃S + H)⁺: 493
MS gemessen (Elektrospray): (M-H)⁺ = 493. Beispiel 57 rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-(2-(methylsulfonyl)ethyl)-4-pyrazin-2-yl-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure

Stufe A: Zwischenprodukt 83 wurde mit 4-tert-Butyl-3-methoxybenzoylchlorid auf eine ähnliche wie jene in Zwischenprodukt 3 beschriebene Weise umgesetzt, um rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-(2-(methylsulfonyl)ethyl)-4-pyrazin-2-yl-5-(4-dimethylaminophenyl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester zu ergeben. MS berechnet für (C₃₁H₄₀N₄O₆S₂ + H)⁺: 629. MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 629.
Stufe B: Der tert-Butylester aus Stufe A wurde mit TFA auf eine ähnliche wie jene in Beispiel 1 beschriebene Weise entschützt, um die Titelverbindung als einen Feststoff zu ergeben. MS berechnet für (C₂₇H₃₂N₄O₆S₂ + H)⁺: 573 MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 573

Stufe A: Zwischenprodukt 27 wurde an der C4-Position unter Verwendung von methanolischem Natriumhydroxid auf eine ähnliche wie jene in Zwischenprodukt 77 beschriebene Weise epimerisiert. Eine Reinigung erfolgte durch präparative DC, wobei mit Cyclohexan/Ethylactat (1 1, Vol./Vol.) eluiert wurde, was das Enantiomer von rel-(2S,4R,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester als einen Feststoff ergab. MS berechnet für (C₃₂H₄₂N₄O₄S + H)⁺: 579. MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 579.
Stufe B: Der tert-Butylester aus Stufe A wurde mit TFA auf eine ähnliche wie jene für Beispiel 1 beschriebene Weise entschützt, um die Titeiverbindung als einen Feststoff zu ergeben. MS berechnet für (C₂₈H₃₄N₄O₄S + H)⁺: 523 MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 523

Stufe A: Zwischenprodukt 92 wurde mit 4-tert-Butyl-3-methylbenzoylchlorid auf eine ähnliche wie jene in Zwischenprodukt 3 beschriebene Weise umgesetzt, um Enantiomer A von rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-Butylester zu ergeben. MS berechnet für (C₃₂H₄₂N₄O₃S + H)⁺: 563. MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 563.
Stufe B: Der tert-Butylester aus Stufe A würde mit TFA auf eine ähnliche wie jene für Beispiel 1 beschriebene Weise entschützt. Die Verbindung wurde über SPE (C₁₈) gereinigt, wobei mit Wasser, gefolgt von Acetonitril eluiert wurde, um die Titelverbindung als einen Feststoff zu ergeben. MS berechnet für (C₂₈H₃₄N₄O₃S + H)⁺: 507 MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 507

Stufe A: Zwischenprodukt 85 wurde mit 4-tert-Butyl-3-methoxybenzoylchlorid auf eine ähnliche wie jene in Zwischenprodukt 3 beschriebene Weise umgesetzt, um rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-methyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-5-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester zu ergeben. MS berechnet für (C₂₉H₃₆N₄O₄S + H)⁺: 537. MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 537.
Stufe B: Der tert-Butylester aus Stufe A wurde mit TFA auf eine ähnliche wie jene in Beispiel 1 beschriebene Weise entschützt, um die Titelverbindung als einen Feststoff zu ergeben. MS berechnet für (C₂₅H₂₈N₄O₄S + H)⁺: 481 MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 481

Stufe A: Zwischenprodukt 85 wurde mit 4-tert-Butyl-3-chlorbenzoylchlorid auf eine ähnliche wie jene in Zwischenprodukt 3 beschriebene Weise umgesetzt, um rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-chlorbenzoyl)-2-methyl-4-(pyrazin-4-yl)-5-(1,3-thiazol-5-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester zu ergeben. MS berechnet für (C₂₈H₃₃ClN₄O₃S + H)⁺: 541/543. MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 541/543
Stufe B: Der tert-Butylester aus Stufe A wurde mit TFA auf eine ähnliche wie jene in Beispiel 1 beschriebene Weise entschützt, um die Titelverbindung als einen Feststoff zu ergeben. MS berechnet für (C₂₄H₂₅ClN₄O₃S + H)⁺: 485/487 MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 485/487

Stufe A: rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-isobutyl-4-pyrazin-2-yl-5-(pyridin-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester aus Beispiel 26, Stufe A, wurde an der C4-Position unter Verwendung von methanolischem Natriumhydroxid auf eine ähnliche wie jene in Zwischenprodukt 77 beschriebene Weise, epimerisiert. Die Umsetzung wurde 8 Tage lang bei 55°C erhitzt. Nach der Extraktion und dem Eindampfen der organischen Phase war keine weitere Reinigung erforderlich, somit ergab sich (2S,4R,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(pyridin-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester als ein Feststoff. MS berechnet für (C₃₄H₄₃N₄O₄ + H)⁺: 573. MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 573.
Stufe B: Der tert-Butylester aus Stufe A wurde mit TFA auf eine ähnliche wie jene für Beispiel 1 beschriebene Weise entschützt. Nach Entfernen des TFA im Vakuum wurde der Rückstand in THF (6 ml) gelöst und mit Natriumhydroxidlösung (0,1 N, 1,9 ml) behandelt. Das THF wurde im Vakuum entfernt, der Rückstand in Wasser gelöst und gefriergetrocknet, um die Titelverbindung als einen Feststoff zu ergeben. MS berechnet für (C₃₀H₃₅N₄O₄ + H)⁺: 517 MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 517

Stufe A: Zwischenprodukt 53 wurde mit 4-tert-Butyl-3-methylbenzoylchlorid auf eine ähnliche wie jene in Zwischenprodukt 3 beschriebene Weise umgesetzt, um rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methylbenzoyl)-2-isobutyl-4-pyrazin-2-yl-5-(1,3-thiazol-4-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester zu ergeben. MS berechnet für (C₃₂H₄₂N₄O₃S + H)⁺: 563. MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 563.
Stufe B: Der tert-Butylester aus Stufe A wurde mit TFA auf eine ähnliche wie jene für Beispiel 1 beschriebene Weise entschützt. Die Verbindung wurde über SPE (C₁₈) gereinigt, wobei mit Wasser, gefolgt von Acetonitril eluiert wurde, um die Titelverbindung als einen Feststoff zu ergeben. MS berechnet für (C₂₈H₃₄N₄O₃S + H)⁺: 507 MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 507

Stufe A: Zwischenprodukt 86 wurde mit 4-tert-Butylbenzoylchlorid auf eine ähnliche wie jene in Zwischenprodukt 3 beschriebene Weise umgesetzt, um rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-pyrazin-2-yl-5-(2-phenyl-1,3-thiazol-4-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester zu ergeben. MS berechnet für (C₃₇H₄₄N₄O₃S + H)⁺: 625. MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 625.
Stufe B: Der tert-Butylester aus Stufe A wurde mit TFA auf eine ähnliche wie jene in Beispiel 1 beschriebene Weise entschützt und über Umkehrphasen-HPLC gereinigt, um die Titelverbindung als einen Feststoff zu ergeben. MS berechnet für (C₃₃H₃₆N₄O₃S + H)⁺: 569 MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 569

Stufe A: Zwischenprodukt 92 wurde mit 4-tert-Butyl-3-ethylbenzoylchlorid (hergestellt aus 4-tert-Butyl-3-ethylbenzoesäure, Zwischenprodukt 90) auf eine ähnliche wie jene in Zwischenprodukt 3 beschriebene Weise umgesetzt, um Enantiomer A von rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-ethylbenzoyl)-2-isobutyl-4-pyrazin-2-yl-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester zu ergeben. MS berechnet für (C₃₃H₄N₄O₃S + H)⁺: 577. MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 577.
Stufe B: Der tert-Butylester aus Stufe A wurde mit TFA auf eine ähnliche wie jene in Beispiel 1 beschriebene Weise entschützt, um die Titelverbindung als einen Feststoff zu ergeben. MS berechnet für (C₂₉H₃₆N₄O₃S + H)⁺: 521 MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 521

Stufe A: Zwischenprodukt 92 wurde mit 4-tert-Butyl-3-ethoxybenzoylchlorid (hergestellt aus 4-tert-Butyl-3-ethoxylbenzoesäure, Zwischenprodukt 91) auf eine ähnliche wie jene in Zwischenprodukt 3 beschriebene Weise umgesetzt, um Enantiomer A von rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-ethoxybenzoyl)-2-isobutyl-4-pyrazin-2-yl-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-Butylester zu ergeben. MS berechnet für (C₃₃H₄₄N₄O₄S + H)⁺: 593. MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 593.
Stufe B: Der tert-Butylester aus Stufe A wurde mit TFA auf eine ähnliche wie jene in Beispiel 1 beschriebene Weise entschützt, um die Titelverbindung als einen Feststoff zu ergeben. MS berechnet für (C₂₉H₃₆N₄O₄S + H)⁺: 537. MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 537.

Stufe A: Zwischenprodukt 94 wurde mit 4-tert-Butyl-3-methoxybenzoylchlorid auf eine ähnliche wie jene in Zwischenprodukt 3 beschriebene Weise umgesetzt, um rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-(phenylmethyl)-4-pyrazin-2-yl-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure-tert-butylester zu ergeben. MS berechnet für (C₃₅H₄₀N₄O₄S + H)⁺: 613. MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 613.
Stufe B: Der tert-Butylester aus Stufe A wurde mit TFA auf eine ähnliche wie jene für Beispiel 1 beschriebene Weise entschützt, um die Titelverbindung als einen Feststoff zu ergeben. MS berechnet für (C₃₁H₃₂N₄O₄S + H)⁺: 557 MS gemessen (Elektrospray): (M+H)⁺ = 557

Die erfindungsgemäßen Verbindungen können zur Verabreichung auf jedem zweckmäßigen Weg formuliert werden, und daher schließt die Erfindung in ihren Geltungsumfang ebenfalls Arzneimittel zur Verwendung bei der Therapie ein, umfassend eine Verbindung der Formel (I) oder ein physiologisch verträgliches Salz oder Solvat davon in Beimengung mit einem oder mehreren physiologisch verträglichen Verdünnungsmitteln oder Trägern.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen können auf unterschiedliche Weisen, einschließlich intravenöser, intraperitonealer, subcutaner, intramuskulärer, oraler, topischer, transdermaler oder transmukosaler Verabreichung verabreicht werden. Für die systemische Verabreichung wird die orale Verabreichung bevorzugt. Für zum Beispiel eine orale Verabreichung können die Verbindungen in herkömmliche orale Dosierungsformen, wie Kapseln, Tabletten und flüssige Herstellungen, wie Sirupe, Elixiere und konzentrierte Tropfen, formuliert werden.
In einer anderen Ausführungsform kann eine Injektion (parenterale Verabreichung) verwendet werden, z. B. intramuskuläre, intravenöse, intraperitoneale und subcutane. Zur Injektion werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in flüssigen Lösungen, vorzugsweise in physiologisch verträglichen Puffern oder Lösungen, wie Kochsalzlösung, Hank-Lösung oder Ringer-Lösung, formuliert. Zusätzlich können die Verbindungen in fester Form formuliert werden und unmittelbar vor der Verwendung erneut gelöst oder suspendiert werden. Lyophilisierte Formen können ebenfalls erzeugt werden.
Systemische Verabreichung kann ebenfalls durch transmukosale oder transdermale Mittel erfolgen. Für die transmukosale oder transdermale Verabreichung werden Durchdringungsmittel, die geeignet sind, die Barriere zu durchdringen, in der Formulierung verwendet. Derartige Durchdringungsmittel sind auf dem Fachgebiet allgemein bekannt und schließen zum Beispiel für die transmukosale Verabreichung Gallensalze und Fusidinsäurederivate ein. Zusätzlich können Detergenzien verwendet werden, um die Durchdringung zu erleichtern. Transmukosale Verabreichung kann zum Beispiel durch Nasensprays, Rektalzäpfchen oder Vaginalzäpfchen erfolgen.
Für die topische Verabreichung können die erfindungsgemäßen Verbindungen in Salben, Wundsalben, Gelen oder Cremes formuliert werden, wie auf dem Fachgebiet allgemein bekannt ist.
Die Mengen der verschiedenen zu verabreichenden Verbindungen können durch Standardverfahren bestimmt werden, die Faktoren, wie die Verbindungs-(IC₅₀) stärke, (EC₅₀)-wirksamkeit und biologische Halbwertszeit (der Verbindung), das Alter, die Größe und das Gewicht des Patienten und die Erkrankung oder Störung, die mit dem Patienten in Verbindung gebracht wird, in Betracht ziehen. Die Wichtigkeit dieser und anderer zu betrachtenden Faktoren ist Fachleuten bekannt.
Die verabreichten Mengen hängen ebenfalls von den Verabreichungsweisen und dem Grad der oralen Bioverfügbarkeit ab. Zum Beispiel werden für Verbindungen mit einer niedrigen oralen Bioverfügbarkeit relativ höhere Dosen zu verabreichen sein. Orale Verabreichung ist ein bevorzugtes Verabreichungsverfahren der vorliegenden Verbindungen.
Vorzugsweise ist die Zusammensetzung in einer Einheitsdosierungsform. Für die orale Anwendung kann zum Beispiel eine Tablette oder Kapsel verabreicht werden, für die nasale Anwendung kann eine festgelegte Aerosoldosis angewendet werden, für die transdermale Anwendung kann eine topische Formulierung oder ein Pflaster angewendet werden und für die transmukosale Abgabe kann ein Buccalpflaster verabreicht werden. In jedem Fall ist das Dosieren so, dass der Patient eine Einzeldosis verabreichen kann.
Jede Dosierung für die orale Verabreichung enthält geeigneterweise von 0,01 bis 500 mg/kg und vorzugsweise von 0,1 bis 50 mg/kg einer Verbindung der Formel (I) oder eines pharmazeutisch verträglichen Salzes davon, berechnet als die freie Base. Die tägliche Dosierung für parenterale, nasale, orale Inhalierung, transmukosale oder transdermale Weisen enthält geeigneterweise von 0,01 mg bis 100 mg/kg einer Verbindung der Formel (I). Eine topische Formulierung enthält geeigneterweise 0,01 bis 5,0 % einer Verbindung der Formel (I). Der Wirkstoff kann 1 bis 6 Mal pro Tag verabreicht werden, vorzugsweise einmal, ausreichend, um die gewünschte Aktivität zu zeigen, wie für einen Fachmann leicht ersichtlich ist.
Eine Zusammensetzung der Formel (I) und ihre pharmazeutisch verträglichen Salze, die aktiv sind, wenn sie oral gegeben werden, können als Sirupe, Tabletten, Kapseln und Lutschtabletten formuliert werden. Eine Sirupformulierung wird im Allgemeinen aus einer Suspension oder Lösung der Verbindung oder eines Salzes in einem flüssigen Träger, zum Beispiel Ethanol, Erdnussöl, Olivenöl, Glycerol oder Wasser, mit einem Aroma- oder Farbstoff bestehen. Wenn die Zusammensetzung in Form einer Tablette ist, kann jedweder routinemäßig zur Herstellung fester Formulierungen verwendete pharmazeutische Träger verwendet werden. Beispiele für derartige Träger schließen Magnesiumstearat, Terra alba, Talk, Gelatine, Gummi arabicum, Stearinsäure, Stärke, Lactose und Saccharose ein. Wenn die Zusammensetzung in Form einer Kapsel ist, ist jedwede Routineeinkapselung geeignet, zum Beispiel unter Verwendung der zuvor erwähnten Träger in einer Hartgelatinekapselhülse. Wenn die Zusammensetzung in Form einer Weichgelatinekaspselhülse ist, kann jedweder routinemäßig für die Herstellung von Dispersionen oder Suspensionen verwendete Träger in Betracht gezogen werden, zum Beispiel wässrige Gummis, Cellulosen, Silicate oder Öle, und in eine Weichgelatinekapselhülse aufgenommen werden.
Typische parenterale Zusammensetzungen bestehen aus einer Lösung oder Suspension einer Verbindung oder eines Salzes in einem sterilen wässrigen oder nicht wässrigen Träger, der gegebenenfalls ein parenteral verträgliches Öl enthält, zum Beispiel Polyethylenglycol, Polyvinylpyrrolidon, Lecithin, Erdnussöl oder Sesamöl.
Typische Zusammensetzungen für die Inhalation sind in Form einer Lösung, Suspension oder Emulsion, die als ein Trockenpulver oder in Form eines Aerosols unter Verwendung eines herkömmlichen Treibmittels, wie Dichlordifluormethan oder Trichlorfluormethan, verabreicht werden können.
Eine typische Zäpfchenformulierung umfasst eine Verbindung der Formel (I) oder ein pharmazeutisch verträgliches Salz davon, welches aktiv ist, wenn sie auf diesem Weg verabreicht wird, mit einem Binde- und/oder Gleitmittel, zum Beispiel polymere Glycole, Gelatinen, Kakaobutter oder Speisewachse oder -fette oder ihre synthetischen Analoga mit niedrigem Schmelzpunkt.
Typische dermale und transdermale Formulierungen umfassen ein herkömmliches wässriges oder nicht wässriges Vehikel, zum Beispiel eine Creme, Salbe, Lotion oder Paste oder sind in Form eines medizinischen Heftpflasters, Pflasters oder einer Membran.
Es werden keine unverträglichen toxikologischen Wirkungen erwartet, wenn erfindungsgemäße Verbindungen in Übereinstimmung mit der vorliegenden Erfindung verabreicht werden.
ASSAY
Das Potential für erfindungsgemäße Verbindungen, die Wildtyp-HCV-NS5B-Polymeraseaktivität zu inhibieren, kann zum Beispiel unter Verwendung des folgenden in vitro-Assays demonstriert werden:
In Vitro Nachweis von Inhibitoren der HCV RNA-abhängigen RNA-Polymeraseaktivität
Dem Einbau von [³H]-UMP in RNA wurde durch Absorption des RNA-Polymers auf ein DEAE-Glasfaserfilter gefolgt. Eine synthetische Matrize, die aus einem 16mer oligoU, das an polyrA (10:1 Gew./Gew.) hybridisiert ist, wurde als ein Homopolymersubstrat verwendet.
Die Umsetzungsbedingungen waren 22 μM [³H]-UTP (0,75 Ci/mMol), 1 mM-Dithiothreitol, 3,2 mM-MgCl₂, 20 mM-Tris-HCl, pH 7,0, 10 μg/ml polyA-oligoU und 90 mM-NaCl. Man beachte, dass 50 mM-NaCl mit dem Enzym zugegeben wird.
HCV RNA-Polymerase (Rekombinante NS5B in voller Länger (Lohmann et al, J. Virol. 71 (11), 1997, 8416 'Biochemical properties of hepatitis C virus NS5B RNA-dependent RNA polymerase and identification of amino acid sequence motifs essential for enzymatic activity'), die in Baculovirus exprimiert und zur Homogenität gereinigt wurde, wurde auf etwa 50 μg Protein/ml (abhängig von der spezifischen Aktivität) in 50 mM-Hepes, pH 7,0, 0,5M-NaCl, 20 %-Glycerol, 0,05 %-Triton X-100, 5 mM-Dithiothreitol, 0,1 mM-EDTA verdünnt. 5 x konzentriertes Puffergemisch wurde unter Verwendung von 1 M-Tris-HCl (pH 7,0, 1 ml), 1 M-MgCl₂ (0,16 ml), 1 M-Dithiothreitol (0,05 ml), 5 M-NaCl (0,4 ml) und Wasser (8,4 ml), Gesamt 10 ml, hergestellt.
Das Substratgemisch wurde unter Verwendung von 5 x konzentriertem Puffergemisch (12 μl), [³H]-UTP (1 μCi/μl; 21,7 μM, 1 μl), 22 μM-UTP (100 μM, 13,2 μl), 10 μg/ml polyA-oligoU (100 μg/ml, 6 μl) und Wasser (12,8 μl), Gesamt 45 μl, hergestellt.
Der Assay wurde unter Verwendung von Substratgemisch (45 μl), Verbindung (10 μl) und verdünntem Enzym (zuletzt zugegeben, um die Umsetzung zu starten) (5 μl), Gesamt 60 μl, aufgebaut.
Die Umsetzung wurde in einer durchsichtigen Platte mit 96 Vertiefungen und U-förmigem Boden durchgeführt. Die Umsetzung wurde nach der Zugabe des Enzyms auf einem Plattenschüttelgerät gemischt und 2 Std. lang bei 22°C inkubiert. Nach dieser Zeit wurde die Umsetzung durch Zugabe von 25 μl 100mM-EDTA gestoppt.
Eine DEAE Filtermatte (Teil Nr. 1205-405 von Pharmacia) wurde in Wasser und Alkohol vorgewaschen und getrocknet. 2 × 20 μl des gestoppten Assaygemisches wurde auf ein Quadrat der DEAE Filtematte getupft. Die DEAE Filtermatte wurde 2 × 15 min lang in SSC-Puffer (0,3 M-NaCl, 30 mM-NaCitrat), gefolgt von 2 × 2 min in Wasser und 1 × 1 min in Alkohol gewaschen. Die Filtermatte wurde getrocknet und in eine Tasche zusammen mit 10 ml OptiScint HiSafe Szintillationsflüssigkeit verschlossen. Die auf der Filtermatte vorliegende Radioaktivität wurde durch Zählen auf einem Wallac 1205 Betaplate Zählgerät nachgewiesen. Nach Abziehen des Hintergrundspiegels ohne Enzym wurde jede Verringerung der Menge von Radioaktivität, die in Gegenwart einer Verbindung im Vergleich zur Abwesenheit eingebaut wurde, als ein Maß für den Inhibitionsgrad genommen. Zehn Verbindungskonzentrationen wurde in zwei- oder dreifachen Verdünnungen getestet. Aus diesen Zählungen wurde der Prozentsatz der Inhibition bei der höchsten getesteten Konzentration oder die IC₅₀-Werte für die Verbindungen unter Verwendung von Grafit3 oder Grafit4 Softwarepaketen berechnet.
Die beispielhaft erläuterten Verbindungen wiesen im vorstehend beschriebenen Assay alle einen IC₅₀-Wert von < 50 μM auf. Demgemäß sind die erfindungsgemäßen Verbindungen bei der Behandlung und Vorbeugung von HCV von möglichem therapeutischen Nutzen. Bevorzugte Verbindungen wiesen einen IC₅₀-Wert von < 0,3 μM auf.
Daher wird als eine weitere erfindungsgemäße Ausführungsform eine Verbindung der Formel (I) oder ein physiologisch verträgliches Salz oder Solvat davon zur Verwendung bei der medizinischen Human- oder Veterinärtherapie, insbesondere bei der Behandlung und/oder Vorbeugung einer Virusinfektion, insbesondere einer HCV-Infektion, bereitgestellt.
Es ist ersichtlich, dass hier eine Bezugnahme auf Behandlung Vermeidung, Verzögerung Vorbeugung, Therapie und Heilung der Erkrankung einschließt, aber nicht darauf beschränkt ist. Es ist ferner ersichtlich, dass hier Bezugnahmen auf Behandlung oder Vorbeugung einer HCV-Infektion die Behandlung oder Vorbeugung von einer mit HCV in Verbindung gebrachten Erkrankung, wie Leberfibrose, Zirrhose und hepatocelluläres Karzinom, einschließt.
Gemäß einer anderen erfindungsgemäßen Ausführungsform wird die Verwendung einer Verbindung der Formel (I) oder eines physiologisch verträglichen Salzes oder Solvats davon zur Herstellung eines Medikaments für die Behandlung und/oder Vorbeugung einer Virusinfektion, insbesondere einer HCV-Infektion, bereitgestellt.
In einer weiteren oder alternativen Ausführungsform wird ein Verfahren für die Behandlung eines menschlichen oder eines tierischen Patienten mit einer Virusinfektion, insbesondere einer HCV-Infektion, bereitgestellt, wobei das Verfahren das Verabreichen einer wirksamen Menge einer Verbindung der Formel (I) oder eines physiologisch verträglichen Salzes oder Solvats davon an den menschlichen oder tierischen Patienten umfasst.
Die erfindungsgemäßen Arzneimittel können ebenfalls in Kombination mit anderen Therapeutika, zum Beispiel Immuntherapien (z. B. Interferon), therapeutischen Impfstoffen, antifibrotischen Mitteln, entzündungshemmenden Mitteln, wie Corticosteroide oder NSAIDs, bronchienerweiternden Mitteln, wie beta-2-adrenerge Agonisten und Xanthine (z. B. Theophyllin), Mukolytika, Antimuskarinika, anti-Leukotrienen, Zelladhäsionsinhibitoren (z. B. ICAM-Antagonisten), Antioxidantien (z. B. N-Acetylcystein), Cytokinagonisten, Cytokinantagonisten, in Lungen oberflächenaktiven Mitteln und/oder antimikrobiellen und virushemmenden Mitteln (z. B. Ribavirin und Amantidin) verwendet werden. Die erfindungsgemäßen Zusammensetzungen können ebenfalls in Kombination mit einer Gen- Ersatztherapie verwendet werden.
Die Erfindung stellt somit in einer weiteren Ausführungsform eine Kombination, umfassend eine Verbindung der Formel (I) oder ein physiologisch verträgliches Salz oder Solvat davon, zusammen mit einem anderen wirksamen Therapeutikum, bereit.
Die vorstehend bezeichneten Kombinationen können zweckmäßigerweise zur Verwendung in Form einer pharmazeutischen Formulierung vorgelegt werden, und daher stellen pharmazeutische Formulierungen, umfassend eine wie vorstehend definierte Kombination zusammen mit einem pharmazeutisch verträglichen Träger davon, eine weitere erfindungsgemäße Ausführungsform dar.
Die einzelnen Komponenten derartiger Kombinationen können entweder aufeinander folgend oder gleichzeitig in getrennten oder vereinigten pharmazeutischen Formulierungen verabreicht werden. Geeignete Dosen von bekannten Therapeutika werden Fachleuten leicht ersichtlich sein.

Claims

Verbindung der Formel (I)
wobei: A OR¹, NR¹R² oder R¹ darstellt, wobei R¹ und R² unabhängig aus Wasserstoff, C_1-6-Alkyl, Aryl, Heteroaryl, Arylalkyl und Heteroarylalkyl ausgewählt sind; oder R¹ und R², zusammen mit dem Stickstoffatom, an das sie gebunden sind, einen 5- oder 6-gliedrigen gesättigten cyclischen Rest bilden; B C(O)R³ darstellt, wobei R³ aus Aryl und Heteroaryl ausgewählt ist; C C_1-6-Alkyl, Aryl, Heteroaryl oder Heterocyclyl darstellt; D einen gesättigten oder ungesättigten 6-gliedrigen heterocyclischen Ring darstellt, welcher drei oder mehr Kohlenstoffatome, welche jeweils unabhängig gegebenenfalls mit R⁴ und R⁵ substituiert sein können, und ein bis drei Heteroatome umfasst, welche unabhängig aus N, gegebenenfalls substituiert mit Wasserstoff, C_1-6-Alkyl, C(O)R³, SO₂R³, Aryl, Heteroaryl, Arylalkyl oder Heteroarylalkyl; O; und S, gegebenenfalls substituiert mit einem oder zwei Sauerstoffatomen ausgewählt sind; wobei der 6-gliedrige Ring an jedes endocyclische Kohlenstoffatom gebunden sein kann und gegebenenfalls an einen gesättigten oder ungesättigten 5- oder 6-gliedrigen carbocyclischen oder heterocyclischen Ring kondensiert sein kann, der selbst gegebenenfalls an einem nicht kondensierten Kohlenstoffatom mit C_1-6-Alkyl, Halogen, OR⁸, C(O)NR⁶R⁷, C(O)R³, CO₂H, CO₂R³, NR⁶R⁷, NHC(O)R³, NHCO₂R³, NHC(O)NR¹R², SO₂NR¹R², SO₂R³, Nitro, Cyano, Oxo, Aryl, Heteroaryl und Heterocyclyl substituiert sein kann; R⁴ und R⁵ unabhängig aus Wasserstoff, C_1-6-Alkyl, Halogen, OR⁸, C(O)NR⁶R⁷, C(O)R³, CO₂H, CO₂R³, NR⁶R⁷, NHC(O)R³, NHCO₂R³, NHC(O)NR¹R², SO₂NR¹R², SO₂R³, Nitro, Oxo, Aryl, Heteroaryl und Heterocyclyl ausgewählt sind; R⁶ und R⁷ unabhängig aus Wasserstoff, C_1-6-Alkyl, Aryl und Heteroaryl ausgewählt sind; und R⁸ Wasserstoff, C_1-6-Alkyl, Arylalkyl oder Heteroarylalkyl darstellt; E Wasserstoff oder C_1-6-Alkyl darstellt; F Wasserstoff, C_1-6-Alkyl, Aryl oder Heteroaryl darstellt; und G Wasserstoff, C_1-6-Alkyl, Heterocyclylalkyl, Arylalkyl oder Heteroarylalkyl darstellt; wobei, falls nicht anders angegeben, „Alkyl" sich auf einen geradkettigen, verzweigten oder cyclischen, gesättigten oder ungesättigten Kohlenwasserstoffrest, gegebenenfalls substituiert mit C_1-6-Alkyl, Halogen, OR⁸, C(O)NR⁶R⁷, C(O)R³, CO₂H, CO₂R³, NR⁶R⁷, NHC(O)R³, NHCO₂R³, NHC(O)NR¹R², SO₂NR¹R², SR³, SO₂R³, Nitro, Oxo, Cyano und Heterocyclyl, bezieht; „Aryl" sich auf einen aromatischen Rest mit mindestens einem Ring, welcher ein konjugiertes Pi-Elektronensystem aufweist, welches bis zu zwei konjugierte oder kondensierte Ringsysteme enthält, und welcher gegebenenfalls mit C_1-6-Alkyl, Halogen, OR⁸, C(O)NR⁶R⁷, C(O)R³, CO₂H, CO₂R³, NR⁶R⁷, NHC(O)R³, NHCO₂R³, NHC(O)NR¹R², SO₂NR¹R², SO₂R³, Nitro, Oxo, Heterocyclyl, CF₃, Pyridin, Phenyl, Cyano und NO₂ substituiert ist, bezieht; „Heteroaryl" sich auf einen 5- oder 6-gliedrigen aromatischen Rest, umfassend ein bis vier Heteroatome, ausgewählt aus N, O und S, mit mindestens einem Ring, welcher ein konjugiertes Pi-Elektronensystem aufweist, welches bis zu zwei konjugierte oder kondensierte Ringsysteme enthält, und welcher gegebenenfalls mit C_1-6-Alkyl, Halogen, OR⁸, C(O)NR⁶R⁷, C(O)R³, CO₂H, CO₂R³, NR⁶R⁷, NHC(O)R³, NHCO₂R³, NHC(O)NR¹R², SO₂NR¹R², SO₂R³, Nitro, Oxo, Heterocyclyl, CF₃, Pyridin, Phenyl, Cyano und NO₂ substituiert ist, bezieht; und „Heterocyclisch" und „Heterocyclyl" sich auf einen gegebenenfalls substituierten 5- oder 6-gliedrigen gesättigten cyclischen Kohlenwasserstoffrest, welcher 1 bis 4 Heteroatome enthält, welche aus N, gegebenenfalls substituiert mit Wasserstoff, C_1-6-Alkyl, C(O)R³, SO₂R³, Aryl oder Heteroaryl; O; und S, gegebenenfalls substituiert mit zwei Sauerstoffatomen, ausgewählt sind, beziehen; und Salze, Solvate und Ester davon, mit der Maßgabe, dass wenn A OR¹ ist, dann R¹ nicht tert-Butyl ist.
Verbindung der Formel (I) gemäß Anspruch 1, wobei B C(O)R³ darstellt und R³ Phenyl ist, das in para-Stellung mit tert-Butyl substituiert und gegebenenfalls ferner mit Methyl, Ethyl, Methoxy, Ethoxy oder Halogen substituiert ist.
Verbindung der Formel (I) gemäß Anspruch 1 oder 2, wobei B C(O)R³ darstellt und R³ Phenyl ist, das in para-Stellung mit tert-Butyl substituiert und gegebenenfalls ferner in meta-Stellung mit Methyl, Ethyl, Methoxy, Ethoxy oder Halogen substituiert ist.
Verbindung der Formel (I) gemäß einem der vorstehenden Ansprüche, wobei C aus C_1-6-Alkyl, Aryl und Heteroaryl ausgewählt ist.
Verbindung der Formel (I) gemäß einem der vorstehenden Ansprüche, in welcher D aus (i) Pyridyl, Pyranyl, Pyrimidinyl, Pyridazinyl, Pyrazinyl, 2H-1,2-Oxazinyl, 2H-1,3-Oxazinyl, 2H-1,4-Oxazinyl, 2H-1,2-Thiazinyl, 2H-1,3-Thiazinyl, 2H-1,4-Thiazinyl, 1,2,3-Triazinyl, 1,2,4-Triazinyl, 1,3,5-Triazinyl, 2H-1,2,4-Oxadiazinyl, 2H-1,2,5-Oxadiazinyl, 2H-1,3,4-Oxadiazinyl, 2H-1,3,4-Oxadiazinyl, 2H-1,3,5-Oxadiazinyl, 2H-1,2,4-Thiadiazinyl, 2H-1,2,6-Thiadiazinyl, 2H-1,3,4-Thiadiazinyl, 2H-1,3,5-Thiadiazinyl, 1,4,2-Dioxazinyl, 4H-1,3,5-Dithiazinyl, 1,2,4-Dithiazinyl, und teilweise oder vollständig gesättigten Derivaten davon ausgewählt ist; wobei jedes, wenn anwendbar, gegebenenfalls an einem Kohlenstoffatom mit R⁴ und R⁵ substituiert sein kann, an einem Stickstoffatom mit Wasserstoff, C_1-6-Alkyl, C(O)R³, SO₂R³, Aryl, Heteroaryl, Arylalkyl oder Heteroarylalkyl substituiert sein kann und an einem Schwefelatom mit einem oder zwei Sauerstoffatomen substituiert sein kann; und wobei jedes gegebenenfalls über zwei benachbarte Kohlenstoffatome an einen gesättigten oder ungesättigten 5- oder 6-gliedrigen carbocyclischen oder heterocyclischen Ring kondensiert sein kann, der selbst gegebenenfalls an einem nicht kondensierten Kohlenstoffatom mit C_1-6-Alkyl, Halogen, OR⁸, C(O)NR⁶R⁷, C(O)R³, CO₂H, CO₂R³, NR⁶R⁷, NHC(O)R³, NHCO₂R³, NHC(O)NR¹R², SO₂NR¹R², SO₂R³, Nitro, Cyano, Oxo, Aryl, Heteroaryl und Heterocyclyl substituiert sein kann.
Verbindung der Formel (I) gemäß einem der vorstehenden Ansprüche, wobei D aus Pyridyl, das gegebenenfalls mit Trifluormethyl oder Cyano substituiert ist; Pyrimidinyl; Pyrazinyl, das gegebenenfalls mit Methyl substituiert ist; Pyridazinyl, das gegebenenfalls mit Methyl substituiert ist; oder Chinoxalinyl ausgewählt ist.
Verbindung der Formel (I) gemäß einem der vorstehenden Ansprüche, wobei G C_1-6-Alkyl, Benzyl, Pyridinylmethyl, N-Methylaminocarbonylmethyl oder Aminocarbonylmethyl ist.
Verbindung gemäß Anspruch 1, ausgewählt aus: rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)-pyrrolidin-2-carbonsäure; rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(5-methylpyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure; rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyridin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)-pyrrolidin-2-carbonsäure; rel-(2S,4R,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyridin-4-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)-pyrrolidin-2-carbonsäure; rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrimidin-5-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure; rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(6-methylpyridazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure; rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(pyridin-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure; rel-(2S,4S,5R)-1-(3-Brom-4-tert-butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(pyridin-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure; rel-(2S,4S,5R)-1-(3-Brom-4-tert-butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure; rel-(2S,4S,5R)-1-(3-Brom-4-tert-butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(5-methylpyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure; rel-(2S,4S,5R)-1-(3-Brom-4-tert-butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyridazin-3-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure; rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-benzothiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure; rel-(2S,4S,5R)-1-(3-Brom-4-tert-butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-benzothiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure; rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-chlorbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure; rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure; rel-(2S,4S,5R)-1-(3-Brom-4-tert-butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(pyridin-2-yl)pyrrolidin-2-carboxamid; rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(chinoxalin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure; rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(4-trifluormethylpyridin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure; rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-butyl-3-methylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure; rel-(2S,4S,5R)-1-(3-Brom-4-tert-butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carboxamid; rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(pyridin-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure; rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(2-chlor-1,3-thiazol-5-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure; rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-chlorbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(pyridin-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure; rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(2-chlor-1,3-thiazol-5-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure; rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(6-methylpyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure; rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-phenyl-pyrrolidin-2-carbonsäure; rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-phenyl-pyrrolidin-2-carbonsäure; rel-(2S,4S,5S)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-methyl-pyrrolidin-2-carbonsäure; rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(pyridin-3-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure; rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(thien-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure; rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-4-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure; rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(2-dimethylamino-1,3-thiazol-4-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure; rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(thiazol-4-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure; rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(pyridin-3-yl)-pyrrolidin-2-carbonsäure, rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-(pyridin-2-ylmethyl)-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure; rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-(N-methylaminocarbonylmethyl)-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure; rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-(aminocarbonylmethyl)-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure; rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(3-phenylphenyl)-pyrrolidin-2-carbonsäure; (2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carboxamid; (2S,4R,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carboxamid; rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-5-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure; rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(4-dimethylaminophenyl)pyrrolidin-2-carbonsäure; rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(4-dimethylaminophenyl)pyrrolidin-2-carbonsäure; rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-(1H-imidazol-4-yl-methyl)-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure; rel-(2S,4S,5S)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-isopropylpyrrolidin-2-carbonsäure; rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-(2-(methylthio)ethyl)-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-5-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure; rel-(2S,4R,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure; rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-5-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure; rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(4-cyanopyridin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-5-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure; rel-(2S,4R,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrimidin-4-yl)-5-(1,3-thiazol-5-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure; rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrimidin-4-yl)-5-(1,3-thiazol-5-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure; rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-(2-(methylsulfonyl)ethyl)-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure; rel-(2S,4R,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure; rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure; rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-methyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-5-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure; rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-chlorbenzoyl)-2-methyl-4-(pyrazin-4-yl)-5-(1,3-thiazol-5-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure; (2S,4R,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(pyridin-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure; rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-butyl-3-methylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-4-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure; rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(2-phenyl-1,3-thiazol-4yl)pyrrolidin-2-carbonsäure; rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-ethylbenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure; rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-ethoxybenzoyl)-2-isobutyl-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure; und rel-(2S,4S,5R)-1-(4-tert-Butyl-3-methoxybenzoyl)-2-(phenylmethyl)-4-(pyrazin-2-yl)-5-(1,3-thiazol-2-yl)pyrrolidin-2-carbonsäure; und Salze, Solvate und Ester, und einzelne Enantiomere davon.
Pharmazeutische Formulierung, umfassend eine Verbindung der Formel (I) gemäß einem der vorstehenden Ansprüche in Verbindung mit einem pharmazeutisch verträglichen Diluenten oder Träger dafür.
Pharmazeutische Formulierung gemäß Anspruch 9 in einer oralen Dosierungsform.
Verbindung der Formel (I) gemäß Anspruch 1 zur Verwendung in der medizinischen Therapie.
Verbindung gemäß Anspruch 11, wobei die medizinische Therapie die Behandlung einer HCV-Infektion ist.
Verwendung einer Verbindung der Formel (I) gemäß Anspruch 1 zur Herstellung eines Medikaments zur Behandlung einer HCV-Infektion.
Verfahren zur Herstellung von Verbindungen der Formel (I) gemäß Anspruch 1, umfassend die Umsetzung einer Verbindung der Formel (VI)
wobei A, C, D, E, F und G wie vorstehend für die Formel (I) definiert sind und wobei A OR¹ ist und R¹ Wasserstoff ist, A gegebenenfalls mit einer geeigneten Hydroxyschutzgruppe, mit einem geeignetem Acylierungsmittel, zum Beispiel R³C(O)-hal, geschützt ist, wobei hal ein Halogenatom ist und wobei A geschütztes Hydroxy ist, gefolgt von einem Entschützungsschritt.