ES2279257T3 - Peptido del antigeno muc-1 para el desencadenamiento de una reaccion inmune frente a celulas tumorales. - Google Patents

Peptido del antigeno muc-1 para el desencadenamiento de una reaccion inmune frente a celulas tumorales. Download PDF

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Abstract

Uso ex vivo de un ácido nucleico, el cuál codifica para un péptido, que se caracteriza porque deriva del gen MUC-1 y presenta la secuencia SEQ ID-Nº:2: Leu Leu Leu Leu Thr Val Leu Thr Val, y que puede estar contenido en un vector de expresión para la transformación o transfección en el marco de un terapia génica.

Description

Péptido del antígeno MUC-1 para el desencadenamiento de una reacción inmune frente a células tumorales.
La presente invención se refiere a un péptido derivado del gen MUC-1, mediante el cuál se puede desencadenar una reacción inmune HLA-A2 restringida contra células tumorales.
En un resumen de la conferencia realizada en la 40ª Reunión de la American Society of Hematology, 1998, Brossart y col. muestran la posibilidad de derivar un péptido de este tipo del gen MUC-1, aunque sin mencionar la secuencia de un péptido ensayado por ellos o la localización de la secuencia de un péptido que no deriva de la zona de repeticiones en tándem de MUC-1.
Por ejemplo, en la publicación de Finn, O. J., y col., (1995) "MUC-1 Epithelial Tumor Mucin-Based Immunity and Cancer Vaccines", Immunol Rev 145, páginas 61 a 89, se mencionan péptidos para el desencadenamiento de una reacción inmune frente a células tumorales, por supuesto también sin datos de información de las secuencias.
Se entiende como reacción inmune, por ejemplo, la destrucción de células mediante células T tales, que a causa de su capacidad de matar otras células también se pueden denominar células T citotóxicas. Para desencadenar una reacción inmune de este tipo mediante células T citotóxicas, las células T deben presentar proteínas extrañas sobre la superficie celular mediante una molécula MHC, por ejemplo, a consecuencia de una infección vírica.
Estas moléculas MHC son receptores peptídicos, que normalmente se unen a péptidos dentro de la célula para transportarlos a la superficie celular, donde el complejo del péptido y la molécula MHC puede ser reconocido por las células T. En las células normales los péptidos unidos a moléculas MHC derivan de las proteínas usuales propias de las células. Durante su diferenciación en un organismo las células T se vuelven tolerantes frente a complejos de los propios péptidos con las propias moléculas MHC. De este modo cada nuevo péptido que aparece más tarde, por ejemplo uno que sea producido por una célula por la infección con un virus, es reconocido por las células T.
Hay dos clases de moléculas MHC, las que interaccionan con células T citotóxicas pertenecen a la clase I. Las moléculas clase I humanas clásicas son HLA-A, B y C, representando HLA-A2 una subclase de las moléculas HLA-A.
Si la realización de una reacción inmune depende de la existencia de una determinada molécula MHC, por ejemplo, HLA-A2, se habla de una reacción inmune MHC restringida, por ejemplo HLA-A2 restringida. Esporádicamente también hay reacciones de células T que tienen lugar independientemente de las moléculas MHC. Se habla entonces de reacciones inmunes MHC no restringidas.
En la publicación de Finn y col. mencionada al principio, para el tratamiento de un paciente de tumor se propone desencadenar una reacción inmune MHC no restringida frente a una glicoproteína que se codifica mediante el gen MUC-1 y se presenta en la superficie de las células. El objetivo es provocar una respuesta inmune efectiva con inmunidad de por vida.
En los documentos WO 97/11715 A1 y WO 98/50527 también se proponen péptidos derivados de MUC-1 para desencadenar una reacción inmune. Además, en el documento WO 00/06723 A1 se dan a conocer una serie de péptidos derivados de MUC-1, de los cuáles sin embargo sólo unos pocos son apropiados para desencadenar una reacción inmune.
La proteína codificada por el gen MUC-1, que también se denomina MUC-1, es expresada por células epiteliales normales generalmente polarizada, de manera que normalmente no es accesible al sistema inmune, como por ejemplo en el intestino, donde se expresa en el lado apical de las células epiteliales, es decir, hacia el interior del lumen intestinal.
Por el contrario, sobre las células tumorales la proteína MUC-1 no se expresa polarizada, sino cubriendo toda la célula. El nivel de expresión en las células tumorales es mayor que en las células normales, pero en las células tumorales las moléculas se encuentran glicosiladas de forma incompleta, es decir, las cadenas laterales de las moléculas de azúcar presentan una estructura acortada frente a MUC-1, que es producida por las células sanas. La glicosilación incompleta conduce a que los epítopos sobre la porción proteica de MUC-1, que normalmente se encuentran enmascarados por las cadenas laterales del azúcar, estén accesibles al sistema inmune en las células tumorales. De este modo el sistema inmune puede distinguir esta MUC-1 menos glicosilada frente a la MUC-1 normal no glicosilada en defecto.
Además de las cadenas laterales de las moléculas de azúcar, otra característica estructural esencial de MUC-1 son las llamadas repeticiones en tándem. Se trata de seguir respectivamente 20 residuos aminoácido que se repiten de forma idéntica o similar aproximadamente 20 a 125 veces en la molécula MUC-1.
Para desencadenar una reacción inmune efectiva mediante células T sólo son necesarios co-estimuladores, entre los que se cuentan especialmente las llamadas células dendríticas, que absorben desde fuera las proteínas ofrecidas y tras su procesado las pueden presentar como péptidos, de manera que así se pueden activar las células T citotóxicas. Por eso Finn y col. proponen inyectar péptidos sintéticos, que representan las repeticiones en tándem de MUC-1, junto con un adyuvante que atrae células dendríticas. El adyuvante es una sustancia que, al inyectarse junto con un producto contra el cuál se debe desencadenar una reacción inmune, refuerza de forma inespecífica la respuesta del sistema inmune a este producto. Mediante una vacuna de este tipo se debe obtener una reacción MHC no restringida de las células T contra las repeticiones en tándem. Incluso se propone reemplazar por otros los aminoácidos de los péptidos sintéticos que podrían facilitar una unión MHC clase I, para que no se puedan formar células T MHC restringidas a través de una presentación de los péptidos mediante moléculas MHC clase I.
Por un lado, al impedir una respuesta inmune MHC restringida, se puede reducir el problema de una posible auto-inmunidad, por otro lado es un gran inconveniente la baja eficiencia de una respuesta inmune MHC no restringida frente a una MHC restringida. De este modo las posibilidades de hacer desaparecer un tumor con una respuesta inmune MHC no restringida son menores que con una respuesta inmune MHC restringida.
Por eso los inventores de la presente solicitud, con motivo de la conferencia mencionada al principio, han propuesto desencadenar una respuesta inmune MHC restringida frente a células que expresan MUC-1. Indican que para ello se explora la secuencia de aminoácidos de MUC-1 conocida mediante un análisis informático en busca de motivos de unión HLA-A2. Los péptidos con mayor probabilidad de unión se identificaron, se sintetizaron y después se analizó si con la ayuda de células dendríticas podían inducir células T citotóxicas in vitro. Las células T citotóxicas así obtenidas desarrollaron una actividad citotóxica HLA-A2 restringida antígeno-específica frente a las células diana que previamente se incubaron con el péptido correspondiente con el que se activan las células T citotóxicas, o frente a células tumorales que expresan MUC-1.
En este contexto, el objetivo de la presente invención es proporcionar otro péptido y/o ácidos nucleicos que codifican para el péptido, para un uso por el cuál se puede desencadenar una reacción inmune frente a células tumorales.
Este objetivo se alcanza según la invención mediante la preparación del péptido con SEQ ID-nº: 2 del protocolo de secuencia adjuntado y/o de un ácido nucleico que codifica para el péptido, para desencadenar una reacción inmune.
De este modo se cumple totalmente el objetivo en el que se basa la invención.
El documento WO 00/06723 no dado a conocer anteriormente menciona un péptido con la secuencia SEQ ID-nº: 2, aunque no identifica este péptido como apropiado para aplicarlo como desencadenante de una reacción inmune relacionada con una terapia tumoral.
Con ayuda del péptido según la invención se pueden generar células T citotóxicas que desarrollan una actividad citotóxica MHC restringida antígeno-específica contra células tumorales que expresan MUC-1 y las destruyen.
En otra configuración preferible, la invención se refiere al uso ex vivo de un ácido nucleico según la invención en el marco de una terapia génica.
Para ello la terapia génica se puede realizar en forma de la transformación descrita arriba de células que presentan antígenos, especialmente células dendríticas, cuya o cuyas células precursoras se extrajeron anteriormente del cuerpo de un organismo que tenía que ser tratado, para volverlas a introducir en el cuerpo tras la transformación. Así, como se acaba de explicar, la presentación de duración continua es ventajosa frente al uso de péptidos.
Otra posibilidad consiste en introducir los ácidos nucleicos en el cuerpo, de manera que son absorbidos y expresados de forma selectiva por células que presentan antígenos, especialmente células dendríticas. Este uso tiene la ventaja de que, aparte de la administración, no son necesarias otras condiciones, como por ejemplo el cultivo y multiplicación selectiva de las células dendríticas extraídas o sus células precursoras.
La invención se refiere además al uso de un ácido nucleico según la invención para la transformación o transfección de células in vitro. El empleo de ácidos nucleicos in vitro tiene la ventaja de que se pueden utilizar procedimientos, como por ejemplo la electroporación y/o coadyuvantes, como por ejemplo el fosfato cálcico o el dextrano DEAE, que facilitan y mejoran esencialmente la absorción de los ácidos nucleicos en las células, los cuáles sin embargo no se pueden emplear in vivo.
De este modo, como se ha mencionado anteriormente, se pueden tratar las células que presentan antígenos, especialmente las células dendríticas, cuya o cuyas células precursoras se extrajeron de un paciente y se vuelven a introducir más tarde en él.
Otro aspecto de la presente invención es el uso de al menos un péptido según la invención o un ácido nucleico según la invención para desencadenar una reacción inmune relacionada con una terapia antitumoral o con un tratamiento preventivo contra la aparición de un tumor. Así, resulta ventajoso que la inmunosupresión observada a menudo en una enfermedad tumoral y la tolerancia frente a MUC-1 se pueda invertir mediante el uso de los péptidos o ácidos nucleicos según la invención. Además, la aplicación según la invención se puede emplear adicionalmente a terapias antitumorales establecidas.
Un tratamiento preventivo es ventajoso sobretodo en personas que, por ejemplo, por condicionantes hereditarios o porque padecieron un tumor anteriormente, tienen un riesgo más elevado de enfermar de un tumor.
En una variante tiene lugar el uso de péptidos o ácidos nucleicos según la invención en combinación con un péptido de unión Pan-HLA-DR.
Es ventajoso en el uso de dicho péptido de unión Pan-HLA-DR que se refuerza la actividad citotóxica antígeno-específica de las células T generadas.
En una variante se incuba al menos uno de los péptidos o ácidos nucleicos según la invención junto con células que presentan antígenos, especialmente células dendríticas, y se introducen entonces en un organismo, del que se extrajeron previamente las células que presentan antígenos o sus células precursoras.
La ventaja de este procedimiento consiste en que el éxito al desencadenar la reacción inmune mediante esta forma de proceder está más asegurado y es más controlable que mediante la inyección de un péptido junto con un adyuvante, con el que la reacción inmune se puede producir unas veces más fuerte y otras más débil. Sin embargo, justamente en una terapia antitumoral se debería poder asegurar el éxito al desencadenar una reacción inmune, para no perder un tiempo probablemente valioso con un tratamiento no efectivo.
Se entiende que las características mencionadas anteriormente y las características que aún se tiene que explicar no sólo se pueden aplicar en la combinación indicada correspondientemente, sino también en otras combinaciones o en solitario, sin abandonar el marco de la presente invención.
En la descripción siguiente se representan y explican ejemplos de realización de la invención.
Ejemplo 1 Inducción de células T citotóxicas antígeno-específicas mediante el uso de péptidos y células dendríticas 1.1 Preparación de células dendríticas
Como se describe por ejemplo en Brossart, P., y col., Cancer Res 58 (1998), páginas 732 y siguientes, se aislaron en primer lugar células mono-nucleares de la sangre periférica mediante centrifugación por gradiente de densidad Ficoll/Paque (Gibco-BRL, Grand Island, NY) a partir de preparaciones buffy coat de sangre heparinizada de tres donantes sanos. Las células se sembraron en medio RP10 en placas de cultivo celular. Tras dos horas a 37ºC se eliminaron las células no adheridas y los monocitos sanguíneos adheridos se cultivaron en medio RP10, que contenía la siguiente adición de citoquinas: GM-CSF recombinante humana (Leukomax, Sandoz, 100 ng/ml), IL-4 (Genzyme, 1000 IU/ml) y TNF-\alpha (Genzyme, 10 ng/ml). Tras siete días de cultivo, las células mostraron en el análisis FACS una fuerte expresión del marcador superficial característico del fenotipo de células dendríticas maduras MHC clase I y II, CD83, CD80, CD86, CD40 y CD54 y por tanto se identificaron como células dendríticas.
1.2 Identificación de péptidos apropiados
Para la identificación de péptidos, que con una alta probabilidad se presentarán mediante HLA-A2, en primer lugar se exploró la secuencia de aminoácidos codificados por el gen MUC-1 con ayuda de un programa informático en busca de motivos peptídicos de unión potencial con HLA-A*0201 (un tipo de HLA-A2 determinado), como se describe por ejemplo en Rammensee, H.G., y col., Landes Bioscience, Austin, Texas, USA (1997).
Las secuencias escogidas y las secuencias de control, así como un péptido de unión con HLA-DR se sintetizaron mediante el uso de la química Standard Fmoc en un sintetizador de péptidos.
1.3 Inducción de células T citotóxicas
Se incubaron 5 x 10^{5} células dendríticas de 1.1 durante dos horas con 50 \mug/ml de péptido sintético de 1.2, se lavaron y se incubaron en medio RP10 con 2,5 x 10^{6} autólogas, es decir, células mono-nucleares de sangre periférica procedentes de los mismos donantes. Parte de las células dendríticas se incubaron adicionalmente con los péptidos de control y los péptidos que se unen potencialmente a HLA-A2 con 50 \mug/ml de un péptido de unión con PAN-HLA-DR, que presenta un epítopo T-ayudante.
Tras siete días de cultivo las células se estimularon de nuevo, añadiendo células mono-nucleares autólogas de sangre periférica, preincubadas con el péptido sintético de 1.2. El primer, tercer y quinto día se añadió respectivamente 1 ng/ml de IL-2 recombinante humana (Genzyme). La citoquina IL-2 es necesaria para el cultivo y multiplicación de las células T citotóxicas. En total se estimuló hasta tres veces en el plazo de una semana.
1.4 Prueba de la actividad citotóxica de las células T
Las células T2, que se caracterizan por producir HLA-A2, pero que mediante estas moléculas MHC clase I no pueden presentar péptidos sintetizados por ellas mismas, se pre-incubaron durante dos horas con 50 \mug/ml de péptido sintético de 1.2 y se marcaron durante una hora a 37ºC con [^{51}Cr]-cromato sódico en RP10. Respectivamente 10^{4} de estas células se trasladaron a cada una de las cavidades de una placa de 96 pocillos. Primero se añadieron las células T citotóxicas generadas según 1.3, de manera que se alcanzara respectivamente un volumen final de 200 \mul por pocillo. A continuación se incubaron durante cuatro horas a 37ºC. Cuando las células T citotóxicas mataron a las células marcadas previamente con ^{51}Cr, éstas células se rompieron liberando el ^{51}Cr contenido en ellas. La radioactividad liberada se determina al final del ensayo en los restos celulares recogidos mediante la lectura en un contador \beta. Con esto se obtiene una medida de la actividad citotóxica de las células T.
1.5 Péptidos que desencadenan una respuesta inmune HLA-A2 restringida
En el procedimiento descrito anteriormente, dos de los péptidos sintetizados derivados de la secuencias del gen MUC-1 fueron capaces de inducir in vitro células T citotóxicas con ayuda de células dendríticas. Se trata de los dos péptidos con las secuencias SEQ ID-Nº: 2 y SEQ ID-Nº: 1 del protocolo de secuencia. Las células T citotóxicas que se indujeron mediante el uso del péptido con la secuencia SEQ ID-Nº: 1 pudieron matar específicamente células T2 que previamente fueron tratadas exactamente con este péptido, mientras que no fueron capaces de matar células T2 que fueron tratadas previamente con otros péptidos. Por el contrario, las células T citotóxicas que se indujeron mediante el uso de otros péptidos, no fueron capaces de matar células T2 que se trataron previamente con el péptido con la secuencia SEQ ID-Nº: 1. El comportamiento fue análogo con células T citotóxicas que se indujeron mediante el uso del péptido con la secuencia SEQ ID-Nº: 2. Estas células sólo pudieron matar células T2 que fueron tratadas previamente con el péptido con la secuencia SEQ ID-Nº: 2.
Además, las células T citotóxicas que se indujeron en presencia del péptido de unión con PAN-HLA-DR, mostraron una actividad citotóxica mayor que los que se indujeron en ausencia de este péptido.
Ejemplo 2 Lisis de células tumorales mediante células T citotóxicas específicas del péptido MUC-1
Diferentes líneas de células tumorales que, como se demuestra mediante análisis FACS, expresan o bien tanto HLA-A2 como MUC-1 o bien respectivamente sólo una de ambas moléculas de la superficie celular, se marcaron con ^{51}Cr, como se describió en 1.4 para las células T2. A continuación, las células que también se describen en 1.4 se incubaron con células T citotóxicas que se indujeron como se describe en 1.3.
Las células T que se activaron mediante el uso del péptido con la secuencia SEQ ID-Nº: 1 o la secuencia SEQ ID-Nº: 2, fueron capaces de romper células tumorales de las líneas MCF-7 (células de cáncer de mama), A-498 (células de carcinoma de células renales) y MZ1774-RCC (células de carcinoma de células renales), que expresan HLA-A2 y MUC-1. Sin embargo, no pudieron romper células de las líneas celulares Croft (células B inmortalizadas por EBV), que no expresan MUC-1, ni Caki-2 (células de carcinoma de células renales), SK-OV-3 (células de cáncer de ovario) y K562 (células proeritroblásticas), que no expresan HLA-A2.
Las células T citotóxicas activadas mediante el uso de péptidos con las secuencias SEQ ID-Nº: 1 y SEQ ID-Nº: 2 tampoco pudieron romper las células de carcinoma de células renales de la línea MZ1774-RCC que expresan HLA-A2 y MUC-1 cuando las células de carcinoma de células renales se incubaron previamente durante 30 minutos con 10 \mug/ml de un anticuerpo monoclonal dirigido contra HLA-A2 (BB7.2, Coulter-Immunotech).
Estos resultados muestran que las células T citotóxicas generadas mediante el uso de los péptidos según la invención sólo matan células tumorales que expresan tanto HLA-A2 como MUC-1.
Además, los péptidos según la invención son apropiados para, también en el marco de una terapia, desencadenar una reacción inmune frente a determinadas células tumorales.
Están a punto de finalizar los primeros estudios en los que se ha aplicado una terapia de este tipo en dos pacientes con cáncer de mama y en los que las pacientes han respondido a la terapia inmune.
<110> Immatics Biotechnologies GmbH
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<120> Péptido del antígeno MUC-1 para desencadenar una reacción inmune frente a células tumorales.
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<130> 4648P108EP
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<140>
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<141>
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<160> 2
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<170> PatentIn Ver. 2.1
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<210> 1
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<211> 9
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<212> PRT
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<213> Secuencia sintética
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<220>
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<223> Descripción de la secuencia sintética: fragmento de la proteína humana codificada por el gen MUC-1
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Claims (4)

1. Uso ex vivo de un ácido nucleico, el cuál codifica para un péptido, que se caracteriza porque deriva del gen MUC-1 y presenta la secuencia SEQ ID-Nº: 2:
Leu Leu Leu Leu Thr Val Leu Thr Val,
y que puede estar contenido en un vector de expresión para la transformación o transfección en el marco de un terapia génica.
2. Uso de un ácido nucleico según la reivindicación 1 para la transformación o transfección de células in vitro.
3. Uso según la reivindicación 1 ó 2 de un péptido o un ácido nucleico según la reivindicación 1 para la preparación de un medicamento para desencadenar una reacción inmune en relación con una terapia antitumoral o en relación con un tratamiento preventivo contra la aparición de un tumor en combinación con un péptido de unión con Pan-HLA-DR.
4. Uso de un péptido o de un ácido nucleico según la reivindicación 1 para la preparación de un medicamento para desencadenar una reacción inmune en relación con una terapia antitumoral o en relación con un tratamiento preventivo contra la aparición de un tumor o el uso según la reivindicación 3, caracterizado porque al menos uno de los péptidos o uno de los ácidos nucleicos se incuban junto con células que presentan antígenos, especialmente células dendríticas.
ES04013790T 1999-04-16 2000-03-28 Peptido del antigeno muc-1 para el desencadenamiento de una reaccion inmune frente a celulas tumorales. Expired - Lifetime ES2279257T3 (es)

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Families Citing this family (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7919467B2 (en) * 2000-12-04 2011-04-05 Immunotope, Inc. Cytotoxic T-lymphocyte-inducing immunogens for prevention, treatment, and diagnosis of cancer
AU2007203335B2 (en) * 2001-01-31 2011-07-07 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Use of post-transcriptional gene silencing for identifying nucleic acid sequences that modulate the function of a cell
DE10313819A1 (de) * 2003-03-24 2004-10-07 Immatics Biotechnologies Gmbh An MHC-Moleküle bindende Tumor-assoziierte Peptide
DE602005016112D1 (de) 2005-09-05 2009-10-01 Immatics Biotechnologies Gmbh Tumorassoziierte Peptide, die HLA Klasse I oder II-Moleküle binden, und anti-Tumor Impfstoffe
US20070248628A1 (en) * 2005-12-06 2007-10-25 Keller Lorraine H Immunogens in cancer stem cells
US20080107668A1 (en) * 2006-08-30 2008-05-08 Immunotope, Inc. Cytotoxic t-lymphocyte-inducing immunogens for prevention, treatment, and diagnosis of cancer
US9487574B2 (en) 2006-09-21 2016-11-08 Vaxil Biotherapeutics Ltd. Antigen specific multi epitope vaccines
CN101155012B (zh) * 2006-09-28 2013-05-01 中兴通讯股份有限公司 一种基于终端的多天线模式控制方法
US20090004213A1 (en) * 2007-03-26 2009-01-01 Immatics Biotechnologies Gmbh Combination therapy using active immunotherapy
PT2113253E (pt) 2008-04-30 2010-06-15 Immatics Biotechnologies Gmbh Formulações novas de peptídeos associados a tumores que se ligam a moléculas de classe i ou ii do antígeno leucocitário humano (hla) para vacinas
TW201034641A (en) * 2009-02-28 2010-10-01 Charles Knezevich Apparatus, system, and method for creating immunologically enhanced spaces in-vivo
JP6096111B2 (ja) 2010-05-10 2017-03-15 アセンド・バイオファーマシューティカルズ・リミテッド 免疫刺激組成物及びワクチン組成物
FR3087448B1 (fr) 2018-10-23 2023-10-13 Pdc Line Pharma Lignee pdc modifiee pour secreter une cytokine

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ATE160361T1 (de) * 1987-01-07 1997-12-15 Imp Cancer Res Tech Humane polymorphe epitheliale mucin polypeptide zur verwendung in therapie und diagnose
FR2668064B1 (fr) * 1990-10-23 1994-12-16 Transgene Sa Composition pharmaceutique pour le traitement ou la prevention d'une tumeur maligne.
IL110464A0 (en) * 1994-07-26 1994-10-21 Univ Ramot Novel proteins for the diagnosis, imaging, and therapy of human cancer
DE19516673A1 (de) * 1995-04-28 1996-10-31 Gabriele Dr Pecher Vakzine gegen Tumorerkrankungen
AUPN568095A0 (en) * 1995-09-27 1995-10-26 Austin Research Institute, The Anti-Galalpha(1,3)Gal antibody binding peptides
WO1998003502A1 (en) * 1996-07-24 1998-01-29 Celgene Corporation Substituted 2(2,6-dioxopiperidin-3-yl)phthalimides and -1-oxoisoindolines and method of reducing tnf-alpha levels
EP1012276A2 (en) * 1997-02-24 2000-06-28 Therion Biologics Corporation Recombinant pox virus for immunization against muc1 tumor-associated antigen
EP1634949B1 (en) * 1997-05-08 2010-12-15 Oncothyreon Inc. Method for generating activated T-cells and antigen-pulsed antigen-presenting cells
IL125608A0 (en) * 1998-07-30 1999-03-12 Yeda Res & Dev Tumor associated antigen peptides and use of same as anti-tumor vaccines

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